WO2018030688A1 - 케모카인을 유효성분으로 포함하는 피부개선용 조성물 - Google Patents

케모카인을 유효성분으로 포함하는 피부개선용 조성물 Download PDF

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WO2018030688A1
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skin
teck
blc
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전세화
김윤희
신은정
문현아
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테고사이언스 (주)
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Definitions

  • the present invention is at least at least one selected from the group consisting of BLC (B lymphocyte chemoattractant; B cell attracting chemokine 1 (BCA1); CXC13 (CXC motif ligand 13)) and TECK (thymus expressed chemokine; CCL25 (CC motif ligand 25)) as chemokines It relates to a composition for improving skin comprising one as an active ingredient.
  • BLC B lymphocyte chemoattractant
  • BCA1 B cell attracting chemokine 1
  • CXC13 CXC motif ligand 13
  • TECK thymus expressed chemokine
  • CCL25 CC motif ligand 25
  • Skin consists of three layers: epidermis, dermis, and subcutis. It protects the internal environment and protects the body by buffering physical shocks and chemical changes from the outside. It is a tissue that functions as a barrier of a living body.
  • the epidermal layer is the outermost layer of skin and 95% of the epidermis is composed of keratinocytes. Keratin cells act as a defense against bacteria and chemicals that penetrate the skin, and secrete various cytokines to participate in skin inflammatory and immune responses. In addition, proliferation and migration of keratinocytes induce the synthesis of collagen IV and laminin to promote skin elasticity, regeneration and wound healing.
  • the proliferation and migration of keratinocytes with reduced physiological activity and collagen IV synthesis and secretion due to skin aging, wounds and skin lesions according to various causes can induce skin elasticity, regeneration and wound healing. Material development is required.
  • the present inventors have found that the chemokine BLC (B lymphocyte chemoattractant; B cell attracting chemokine 1 (BCA1); CXCL13 (CXC motif ligand 13)) or TECK (thymus expressed chemokine; CCL25 (CC motif ligand 25)) transfers keratinocytes.
  • BCA1 B cell attracting chemokine 1
  • TECK thymus expressed chemokine
  • CCL25 CC motif ligand 25
  • An object of the present invention is to improve skin comprising at least one selected from the group consisting of BLC (B lymphocyte chemoattractant; CXCL13 (CXC motif ligand 13)) and TECK (thymus expressed chemokine; CCL25 (CC motif ligand 25)) It is to provide a cosmetic composition for.
  • BLC B lymphocyte chemoattractant
  • CXCL13 CXC motif ligand 13
  • TECK thymus expressed chemokine
  • CCL25 CC motif ligand 25
  • a cosmetic composition comprising at least one active ingredient selected from the group consisting of BLC (B lymphocyte chemoattractant; CXC13 (CXC motif ligand 13)) and TECK (thymus expressed chemokine; CCL25 (CC motif ligand 25)) It is to provide a skin improvement method comprising the step.
  • BLC B lymphocyte chemoattractant
  • CXC13 CXC motif ligand 13
  • TECK thymus expressed chemokine
  • CCL25 CC motif ligand 25
  • Still another object of the present invention is to provide a BLC (B lymphocyte chemoattractant; CXCL13 (C-X-C motif ligand 13)) and TECK (thymus expressed chemokine; CCL25 (C-C motif ligand 25)) for skin improvement.
  • BLC B lymphocyte chemoattractant
  • CXCL13 C-X-C motif ligand 13
  • TECK thymus expressed chemokine
  • CCL25 C-C motif ligand 25
  • the present invention provides a skin improvement comprising at least one selected from the group consisting of BLC (B lymphocyte chemoattractant; CXCL13 (CXC motif ligand 13)) and TECK (thymus expressed chemokine; CCL25 (CC motif ligand 25)) which are chemokines It provides a cosmetic composition for.
  • BLC B lymphocyte chemoattractant
  • CXCL13 CXC motif ligand 13
  • TECK thymus expressed chemokine
  • CCL25 CC motif ligand 25
  • the present invention also for skin improvement
  • a cosmetic composition comprising at least one active ingredient selected from the group consisting of BLC (B lymphocyte chemoattractant; CXC13 (CXC motif ligand 13)) and TECK (thymus expressed chemokine; CCL25 (CC motif ligand 25)) It provides a skin improvement method comprising the step.
  • BLC B lymphocyte chemoattractant
  • CXC13 CXC motif ligand 13
  • TECK thymus expressed chemokine
  • CCL25 CC motif ligand 25
  • the present invention also provides the use of B lymphocyte chemoattractant (BLC) (C-X-C motif ligand 13) and TECK (thymus expressed chemokine; CCL25 (C-C motif ligand 25)) for skin improvement.
  • BLC B lymphocyte chemoattractant
  • TECK thymus expressed chemokine
  • CCL25 C-C motif ligand 25
  • BLC B lymphocyte chemoattractant; B cell attracting chemokine 1 (BCA1); CXCL13 (CXC motif ligand 13)) or TECK (thymus expressed chemokine; CCL25 (CC motif ligand 25)
  • BCA1 B cell attracting chemokine 1
  • CXCL13 CXC motif ligand 13
  • TECK thymus expressed chemokine
  • CCL25 CC motif ligand 25
  • FIG. 1 is a diagram showing the results of the chemotactic performance analysis of keratinocytes (BLC) (CXCL13) or TECK (CCL25); Control (Negative control): no treatment, SDF-1 ⁇ : positive control.
  • Figure 2 is a diagram showing the results of induction of re-epithelialization by treating BLC (CXCL13) or TECK (CCL25) in wounds induced in the three-dimensional culture skin model; Negative control: no treatment, SDF-1 ⁇ : positive control.
  • FIG. 3 shows Ki-67 marker expression following BLC (CXCL13) or TECK (CCL25) treatment; Negative control: no treatment, Ascorbic acid: positive control.
  • Figure 5 shows Ki-67 marker expression following BLC (CXCL13) or TECK (CCL25) treatment with alginate (AL); Negative Control: Untreated.
  • Figure 6 shows the melanin reduction rate following BLC (CXCL13) or TECK (CCL25) treatment containing alginate (AL); Negative control: no treatment, Arbutin: positive control.
  • Keratin cells isolated from normal skin tissues were treated with DMEM / F12 medium (Invitrogen, USA) containing 10% fetal bovine serum (FBS) with 3T3 feeder cells (37 ° C, 10%). Co-culture was in a humid environment of CO 2 . When cultured cells were grown 70-80%, 3T3 feeder cells were removed, and only keratinocytes were isolated using trypsin-EDTA.
  • DMEM / F12 medium Invitrogen, USA
  • FBS fetal bovine serum
  • the cells were cultured using a transwell insert of 8 ⁇ m-pore size (Falcon, Germany) and then inserted into the insert membrane. Cells that passed through the micropores toward chemokines were counted by counting. Specifically, 100, 500 ng / ml of chemokine BLC (CXCL13) or TECK (CCL25) were respectively treated in a lower chamber, and 1 ⁇ 10 4 cells were injected into each insert well. After 6 hours of incubation at 37 ° C. and 10% CO 2 , the insert membrane was stained with hematoxylin and the number of cells moved was measured.
  • Neoderm-ED (Tegoscience, Inc., Korea), which includes a dermal layer composed of collagen and fibroblasts and an epidermal layer containing keratinocytes, was prepared.
  • Neoderm-ED was wounded using a 4mm biopsy punch and then treated with 500 ng / ml of chemokine BLC (CXCL13) or TECK (CCL25), respectively, in a humid environment of 37 ° C and 10% CO 2 . Incubated for 5 days. Cultured Neoderm tissue was separated from insert wells and stained with hematoxylin and eosin (H & E staining). The stained tissue was placed on a slide glass, photographed under a microscope, and the re-epithelialized length was measured from the photographed image using an image analysis program (ImagePro TM) (Hitachi, Japan).
  • ImagePro TM image analysis program
  • Neoderm-ED was treated with chemokine BLC (CXCL13) or TECK (CCL25) 100 ng / ml, respectively, and cultured for 48 hours in a humid environment of 37 ° C and 10% CO 2 .
  • chemokine BLC CXCL13
  • TECK CCL25
  • each primary antibody that binds to the growth marker factor (Ki-67) and collagen IV (collagen IV) was reacted, and then the secondary antibody to which the fluorescent material was bound was reacted.
  • the nuclei of the cells were stained with DAPI (4,6-diamidino-2-phenylindole).
  • Neoderm-ME (TEGOSCI Co., Ltd., Korea) was treated with 500 ng / ml of chemokine BLC (CXCL13) or TECK (CCL25), respectively, at 37 ° C and 10% CO 2 in a humid environment. Time incubation. A lysis buffer was added to Neoderm-ME and reacted at 95 ° C. for 45 minutes to dissolve the tissue to elute melanin. The eluate was measured for absorbance at 405 nm and melanin was quantified using melanin standard curve (1.56 ⁇ 100 ⁇ g / ml).
  • the increase rate of skin elasticity by the skin meter is the average value of the skin R5 value after use to the R5 value before use of the cream.
  • Chemokines contain Cosmetic Sensory test on skin elasticity increasing effect
  • the cosmetic compositions of Preparation Example 10, Preparation Example 11, Preparation Example 12 and Comparative Example 4 were prepared and subjected to a sensory test for increasing skin elasticity. Specifically, a total of 45 women and men under 30 years old and under 60 years old (15 in their 30s, 15 in their 40s and 15 in their 50s and 60s) are divided into 32 groups (5 in their 30s and 40 in their 30s). 5 people, 5 people in their 50's and 60's). In group 1, Comparative Example 4 (control group) was placed around the left eye area or the left lip where the wrinkles were distributed, and Preparation Example 10 (test group) was continued around the face of the right eye area or the right lip once a day for 2 weeks.
  • Comparative Example 4 control group
  • Preparation Example 11 test group
  • Preparation Example 11 test group
  • Group 3 was allowed to continuously use Comparative Example 4 (control group) on the same site on the left side of the face with a lot of wrinkles
  • Preparation Example 12 test group on the same site on the right side once a day for 2 weeks.
  • the evaluation was based on wrinkles unfolding around the eyes or lips, and the skin elasticity maintenance days were evaluated by the same method for the skin elasticity maintaining effect. In the same way as for the skin irritation, the sensory test was performed on the itch, stinging and erythema of the skin. Evaluation criteria were performed based on the five-point method criteria of very good (5 points), good (4 points), moderate (3 points), bad (2 points) and very bad (1 point).
  • Preparation Example 10 Preparation Example 11 and Preparation Example 12 containing the BLC (CXCL13) or TECK (CCL25) of the present invention as an active ingredient improves skin wrinkles and maintain skin elasticity compared to Comparative Example 4 It was confirmed that the effect on.
  • BLC (CXCL13), TECK (CCL25), or BLC (CXCL13) and TECK (CCL25) were added as active ingredients, respectively, and the skins of Preparation Example 1, Preparation Example 2 and Preparation Example 3 were prepared using the ingredients and contents shown in Table 3 below. Was prepared. Also, without adding BLC (CXCL13) or TECK (CCL25) as an active ingredient, the skin of Comparative Example 1 was prepared with the ingredients and contents shown in Table 3 below.
  • BLC (CXCL13), TECK (CCL25), or BLC (CXCL13) and TECK (CCL25) were added as active ingredients, respectively, and the essences of Preparation Example 4, Preparation Example 5 and Preparation Example 6 were prepared using the ingredients and contents shown in Table 4 below. Was prepared. In addition, without adding BLC (CXCL13) or TECK (CCL25) as an active ingredient, the essence of Comparative Example 2 was prepared with the ingredients and contents shown in Table 4 below.
  • BLC (CXCL13), TECK (CCL25), or BLC (CXCL13) and TECK (CCL25) were added as active ingredients, respectively, and the lotions of Preparation Example 7, Preparation Example 8 and Preparation Example 9 were prepared using the ingredients and contents shown in Table 5 below. Was prepared. Also, without adding BLC (CXCL13) or TECK (CCL25) as an active ingredient, the lotion of Comparative Example 3 was prepared with the ingredients and contents shown in Table 5 below.
  • BLC (CXCL13), TECK (CCL25), or BLC (CXCL13) and TECK (CCL25) were added as an active ingredient, respectively, and the creams of Preparation Example 10, Preparation Example 11 and Preparation Example 12 in the amounts and ingredients shown in Table 6 below.
  • the cream of Comparative Example 4 was prepared with the ingredients and contents shown in Table 6 below.
  • the present invention provides a skin improvement comprising at least one selected from the group consisting of BLC (B lymphocyte chemoattractant; CXCL13 (CXC motif ligand 13)) and TECK (thymus expressed chemokine; CCL25 (CC motif ligand 25)) which are chemokines It provides a cosmetic composition for.
  • BLC B lymphocyte chemoattractant
  • CXCL13 CXC motif ligand 13
  • TECK thymus expressed chemokine
  • CCL25 CC motif ligand 25
  • chemokine means a basic heparin binding small molecule protein that acts as a leukocytosis, activating.
  • cysteine residues There are four cysteine residues in the chemokine molecule, classified into four subclasses of CXC (CXCL), CC (CCL), CX3C (CX3CL), and C (XCL) according to the format of the presence of cysteine residues in the first two molecules.
  • CXCL CXC
  • CCL CX3C
  • XCL CX3C
  • the active ingredient according to the present invention is B lymphocyte chemoattractant (BLC) chemokine; CXC13 ligand (CXCL13), TECK (thymus expressed chemokine; CCL25 (CC motif ligand 25)), or BLC (B lymphocyte chemoattractant); CXCL13 ligand 13)) and TECK (thymus expressed chemokine; CCL25 (CC motif ligand 25)).
  • BLC B lymphocyte chemoattractant
  • CXCL13 CXC13 ligand
  • TECK thymus expressed chemokine
  • CCL25 CC motif ligand 25
  • BLC B lymphocyte chemoattractant
  • TECK thymus expressed chemokine
  • CCL25 CC motif ligand 25
  • skin improvement is to be interpreted to mean the effect of skin regeneration, skin elasticity improvement, wrinkle prevention or improvement, skin moisturizing, whitening, anti-inflammatory, etc., which can be induced by applying the active ingredient of the present invention to the skin. Can be.
  • the BLC or TECK may be used in admixture with at least one polymer selected from the group consisting of alginate, collagen, hyaluronic acid and gelatin, but is not limited thereto.
  • Ki-67 markers was increased compared to the untreated group by BLC containing alginate or TECK containing alginate (FIG. 5), and the melanin reduction rate was also increased (FIG. 6). .
  • the BLC or TECK may be included in an amount of 0.0000001 to 10 parts by weight (1 ng / ml to 100 mg / ml) based on 100 parts by weight of the total cosmetic composition, but is not limited thereto.
  • the cosmetic composition may be a fatty substance, an organic solvent, a dissolving agent, a thickening agent, a gelling agent, a softening agent, an antioxidant, a suspending agent, a stabilizer, a foaming agent, a fragrance, a surfactant, water, an ionic or nonionic emulsifier, Cosmetics or skin, such as fillers, metal ion sequestrants, chelating agents, preservatives, vitamins, blockers, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, lipid vesicles or any other ingredients commonly used in cosmetics It may contain adjuvants commonly used in the scientific field. Such adjuvants are introduced in amounts generally used in the cosmetic or dermatological arts.
  • the appearance of the cosmetic composition contains a cosmetically or dermatologically acceptable medium or base.
  • a cosmetically or dermatologically acceptable medium or base are all formulations suitable for topical application, for example, emulsions, suspensions, microemulsions, microcapsules, microgranules or ionic (liposomes) obtained by dispersing the oil phase in solutions, gels, solids, pasty anhydrous products, aqueous phases, and It may be provided in the form of a nonionic vesicle dispersant or in the form of a cream, skin, lotion, powder, ointment, spray or cone stick.
  • These compositions can be prepared according to conventional methods in the art.
  • the composition according to the invention can also be used in the form of a foam or in the form of an aerosol composition further containing a compressed propellant.
  • the cosmetic composition comprising the active ingredient according to the present invention is not particularly limited in the formulation, for example, supple cosmetics, astringent cosmetics, nourishing cosmetics, nutrition cream, massage cream, essence, eye cream, eye essence, cleansing It may be formulated into cosmetics such as creams, cleansing foams, cleansing water, packs, powders, body lotions, body creams, body oils and body essences.
  • a formulation that can be applied to the skin can be prepared by using a composition in the form of an absorbent gel, pad, patch, sponge and mask pack, but is not limited thereto.
  • the skin, essence, lotion, cream of Preparation Examples 1 to 12 containing BLC (CXCL13), TECK (CCL25), or BLC (CXCL13) and TECK (CCL25), which are the active ingredients of the present invention Prepared.
  • BLC CXCL13
  • TECK CCL25
  • BLC CXCL13
  • TECK CCL25
  • both of the BLC (CXCL13) and TECK (CCL25) to find the optimal blending ratio can be prepared by the cosmetic composition.
  • the cosmetic composition as described above may be applied in the form applied to the skin, or may be applied in the form absorbed into the skin using a microneedle or the like.
  • the cosmetic composition for skin improvement may be for skin regeneration.
  • keratinocyte migration by BLC (CXCL13) or TECK (CCL25), which is an active ingredient of the present invention is the untreated and negative control cytokine SDF-1 ⁇ (stromal cell-derivated factor). 1 ⁇ ) significantly increased (FIG. 1), and the expression of proliferation marker (Ki-67) (FIG. 3) and collagen IV (FIG. 4) was significantly higher than that of the untreated and positive controls cytokine SDF-1 ⁇ . Increased, it was confirmed that the active ingredient of the present invention BLC (CXCL13) or TECK (CCL25) has an excellent effect on skin regeneration.
  • the cosmetic composition for skin improvement may be for improving skin elasticity.
  • Preparation Examples 1 to 3 Preparation Examples 4 to 6, Preparation Examples 7 to 9, and Preparation Examples 10 to 12 containing BLC (CXCL13) or TECK (CCL25) which are the active ingredients of the present invention.
  • BLC CXCL13
  • TECK CCL25
  • the cosmetic composition for skin improvement may be for preventing or improving wrinkles.
  • the cosmetic composition for skin improvement may be for skin moisturizing.
  • the cosmetic composition for skin improvement may be for whitening.
  • the melanin reduction rate by the BLC (CXCL13) or TECK (CCL25) containing the alginate as the active ingredient of the present invention increased by more than 20% compared to the non-treated group negative control, the effective of the present invention It was confirmed that the component BLC (CXCL13) or TECK (CCL25) has an excellent effect on the whitening (Fig. 6).
  • the cosmetic composition for skin improvement may be for anti-inflammatory.
  • a cosmetic composition comprising at least one active ingredient selected from the group consisting of BLC (B lymphocyte chemoattractant; CXC13 (CXC motif ligand 13)) and TECK (thymus expressed chemokine; CCL25 (CC motif ligand 25)) It provides a skin improvement method comprising the step.
  • BLC B lymphocyte chemoattractant
  • CXC13 CXC motif ligand 13
  • TECK thymus expressed chemokine
  • CCL25 CC motif ligand 25
  • the present invention provides the use of B lymphocyte chemoattractant (BLC) (C-X-C motif ligand 13) and TECK (thymus expressed chemokine; CCL25 (C-C motif ligand 25)) for skin improvement.
  • BLC B lymphocyte chemoattractant
  • TECK thymus expressed chemokine
  • CCL25 C-C motif ligand 25
  • the active ingredient BLC (B lymphocyte chemoattractant) according to the present invention (CXCL13 (CXC motif ligand 13)) or TECK (thymus expressed chemokine; CCL25 (CC motif ligand 25)) keratinocytes play a key role in wound healing and skin regeneration Increased expression of growth marker factor (Ki-67) and collagen IV, which are proteins involved in skin regeneration and elasticity, and excellent wound healing effect, and can also move keratin cells. It was confirmed that the present chemical performance.
  • CXCL13 CXC motif ligand 13
  • TECK thymus expressed chemokine
  • CCL25 CC motif ligand 25
  • B lymphocyte chemoattractant CXCL13
  • TECK thymus expressed chemokine
  • CCL25 CC motif ligand 25
  • BLC B lymphocyte chemoattractant; B cell attracting chemokine 1 (BCA1); CXCL13 (CXC motif ligand 13)) or TECK (thymus expressed chemokine; CCL25 (CC motif ligand 25)
  • BCA1 B cell attracting chemokine 1
  • CXCL13 CXC motif ligand 13
  • TECK thymus expressed chemokine
  • CCL25 CC motif ligand 25

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Abstract

본 발명은 케모카인으로서 BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나를 유효성분으로 포함하는 피부개선용 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따른 BLC(B lymphocyte chemoattractant; B cell attracting chemokine 1(BCA1); CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 또는 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))는 피부재생과 탄력에 관여하는 단백질인 증식표식인자(Ki-67), 콜라겐 IV(collagen IV) 발현을 증가시키고, 멜라닌 감소 및 상처치유 효과가 우수할 뿐만 아니라 케라틴세포를 이동시킬 수 있는 화학주성능을 나타내므로, 피부개선용 화장료 조성물로 적용할 수 있다.

Description

케모카인을 유효성분으로 포함하는 피부개선용 조성물
본 발명은 케모카인으로서 BLC(B lymphocyte chemoattractant; B cell attracting chemokine 1(BCA1); CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나를 유효성분으로 포함하는 피부개선용 조성물에 관한 것이다.
피부(skin)는 표피(epidermis)와 진피(dermis), 피하지방층(subcutis)의 3개의 층으로 구성되어 있으며, 외부로부터의 물리적 충격과 화학적 변화를 완충시켜 인체 내부 환경을 유지하고 몸을 보호하는 생체의 장벽기능을 하는 조직이다.
표피층은 피부의 가장 바깥층에 위치하고 있는 층으로 표피의 95%는 케라틴세포(keratinocyte)로 구성되어 있다. 케라틴세포는 피부에 침투하는 세균, 화학 물질 등에 대하여 방어 역할을 하고 다양한 사이토카인을 분비하여 피부의 염증반응과 면역반응에 관여한다. 또한, 케라틴세포의 증식과 이동은 콜라겐 IV(collagen IV)와 라미닌(laminin) 등의 합성을 유도하여 피부의 탄력유지와 재생 및 상처치유를 촉진한다.
이에 따라, 다양한 원인에 따른 피부 노화, 상처 및 피부 병변으로 인하여 생리활성이 저하된 케라틴세포의 증식과 이동 및 콜라겐 IV 합성과 분비를 유도하여 피부의 탄력유지, 재생 및 상처치유를 유도할 수 있는 소재 개발이 요구된다.
이에, 본 발명자들은 케모카인인 BLC(B lymphocyte chemoattractant; B cell attracting chemokine 1(BCA1); CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 또는 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))가 케라틴세포를 이동시킬 수 있는 화학주성능이 있음을 확인하고, 피부재생과 탄력에 관여하는 단백질 발현을 증가시키며 미백 효과 및 상처치유 효과가 우수함을 확인하고, 이를 유효성분으로 포함하는 피부개선용 화장료 조성물을 개발함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나를 유효성분으로 포함하는 피부개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명은, 피부 개선을 위해서,
BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나 이상의 유효성분을 포함하는 화장료 조성물을 피부에 도포하는 단계를 포함하는, 피부 개선 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 피부개선을 위한 BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))의 용도를 제공하는 것이다.
본 발명은 케모카인인 BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나를 유효성분으로 포함하는 피부개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명은 또한, 피부 개선을 위해서,
BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나 이상의 유효성분을 포함하는 화장료 조성물을 피부에 도포하는 단계를 포함하는, 피부 개선 방법을 제공한다.
본 발명은 또한 피부개선을 위한 BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))의 용도를 제공한다.
본 발명에 따른 BLC(B lymphocyte chemoattractant; B cell attracting chemokine 1(BCA1); CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 또는 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))는 케라틴세포 유래의 세포분비물질들 중 피부재생과 탄력에 관여하는 단백질인 증식표식인자(Ki-67), 콜라겐 IV(collagen IV) 발현을 증가시키고, 멜라닌 감소 및 상처치유 효과가 우수할 뿐만 아니라 케라틴세포를 이동시킬 수 있는 화학주성능을 나타내므로, 피부개선용 화장료 조성물로 적용할 수 있다.
도 1은 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)에 대한 케라틴세포(keratinocyte)의 화학주성능 분석 결과를 나타낸 도이다; Control(Negative control): 무처리군, SDF-1α: 양성대조군.
도 2는 삼차원 배양피부모델에 유발된 상처에 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 처리하여 재상피화를 유도한 결과를 나타낸 도이다; 음성대조군: 무처리군, SDF-1α: 양성대조군.
도 3은 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25) 처리에 따른 Ki-67 마커 발현을 나타낸 도이다; 음성대조군: 무처리군, Ascorbic acid: 양성대조군.
도 4는 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25) 처리에 따른 콜라겐 IV 마커 발현을 나타낸 도이다; 음성대조군: 무처리군, Ascorbic acid: 양성대조군.
도 5는 알지네이트(AL)를 함유한 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25) 처리에 따른 Ki-67 마커 발현을 나타낸 도이다; 음성대조군: 무처리군.
도 6은 알지네이트(AL)를 함유한 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25) 처리에 따른 멜라닌 감소율을 나타낸 도이다; 음성대조군: 무처리군, Arbutin: 양성대조군.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 다만 하기의 실시예는 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 실시예는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
< 실시예 1> 케라틴세포(keratinocyte)의 배양
정상피부조직으로부터 분리한 케라틴세포를 10% 소태아혈청(fetal bovine serum, FBS)이 포함된 DMEM/F12 배지(Invitrogen, 미국)를 이용하여 3T3 피더 세포(feeder cell)와 함께 37℃, 10% CO2의 습윤 환경에서 공배양하였다. 배양한 세포가 70~80% 자랐을 때 3T3 피더 세포를 제거한 뒤 트립신(Trypsin)-EDTA를 이용하여 케라틴세포만을 분리하였다.
< 실험예 1> 케라틴세포의 화학주성능 분석
BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)에 대한 케라틴세포의 화학주성을 분석하기 위하여, 8 ㎛-구멍 크기의 트랜스웰 인서트(Falcon, 독일)를 이용하여 세포를 배양한 후, 인서트(insert) 막 내 마이크로포어를 통과하여 케모카인을 향해 이동한 세포를 카운팅하여 평가하였다. 구체적으로, 하부 챔버(Lower chamber)에 케모카인 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 각각 100, 500 ng/ml 처리한 후 세포를 각 인서트 웰(insert well)에 1×104개씩 주입하였다. 37℃, 10% CO2의 습윤 환경에서 6시간 배양 후 인서트 막을 헤마톡실린(hematoxylin)으로 염색한 뒤 이동한 세포 수를 측정하였다.
그 결과, BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)에 의한 케라틴세포 이동이 음성대조군인 무처리군 대비 증가되었음을 확인하였으며, 사이토카인인 SDF-1α(stromal cell-derivated factor 1α)에 의해 이동한 세포 수보다 5배 이상 세포 이동이 되었음을 확인하였다(도 1).
< 실험예 2> 삼차원 배양피부모델을 이용한 케모카인의 상처치유 효과 검정
콜라겐과 섬유아세포로 이루어진 진피층과 케라틴세포를 포함하는 표피층을 포함하고 있는 Neoderm-ED(테고사이언스㈜, 한국)를 준비하였다. 4mm 바이옵시 펀치(biopsy punch)를 이용하여 Neoderm-ED에 상처를 유발시킨 후, 케모카인 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25) 각각 500 ng/ml를 처리하여 37℃, 10% CO2의 습윤 환경에서 5일간 배양하였다. 배양한 Neoderm 조직을 인서트 웰로부터 분리하여 헤마톡실린 및 에오신으로 염색하였다(H&E 염색). 염색된 조직을 슬라이드 글라스에 올려놓고 현미경에서 사진을 촬영한 후 이미지 분석 프로그램(ImagePro™)(Hitachi, 일본)을 이용하여 촬영한 이미지로부터 재상피화된 길이를 측정하였다.
그 결과, BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25) 처리에 의해 재상피화(re-epithelialization)된 길이가 음성대조군인 무처리군 대비 현저히 증가되었음을 확인하였으며, SDF-1α(stromal cell-derivated factor 1α) 처리에 의해 재상피화된 길이보다 3배 이상 증가한을 확인하였다(도 2).
< 실험예 3> 삼차원 배양피부모델을 이용한 케모카인의 피부재생, 탄력 및 미백능 증가 효과 검정
피부재생 및 탄력능 증가 효과를 검정하기 위하여, Neoderm-ED에 케모카인 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 각각 100 ng/ml 처리하여 37℃, 10% CO2의 습윤 환경에서 48시간 배양하였다. 피부재생 및 탄력능을 확인하기 위한 마커로 증식표식인자(Ki-67)와 콜라겐 IV(collagen IV)에 결합하는 각각의 1차 항체를 반응시킨 후, 형광물질이 결합한 2차 항체를 반응시켰다. 세포의 핵은 DAPI(4,6-diamidino-2-phenylindole)로 염색하였다.
미백능 증가 효과를 검정하기 위하여, Neoderm-ME(테고사이언스㈜, 한국)에 케모카인 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 각각 500 ng/ml 처리하여 37℃, 10 % CO2의 습윤 환경에서 48시간 배양하였다. Neoderm-ME에 용해 버퍼(lysis buffer)를 첨가하여 95℃에서 45분간 반응시켜 조직을 용해시켜 멜라닌을 용출하였다. 용출액은 405nm에서 흡광도를 측정하였으며 멜라닌 값은 멜라닌표준곡선(1.56~100 μg/ml)을 이용하여 정량하였다.
그 결과, BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)에 의한 각 마커들의 발현이 음성대조군인 무처리군 대비 증가되었음을 확인하였으며, 사이토카인인 SDF-1α(stromal cell-derivated factor 1α)보다 증식표식인자(Ki-67)(도 3, 도 5) 및 콜라겐 IV(도 4)의 발현이 모두 월등히 증가하였음을 확인하였다.
또한, BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)에 의한 멜라닌 감소율이 음성대조군인 무처리군 대비 모두 20%이상 증가하였음을 확인하였다(도 6).
< 실험예 4> 케모카인 함유 화장료의 피부탄력도 개선 검정
피부표면에 음압을 주었을 때 피부의 형태변화를 통해 탄력을 측정할 수 있는 피부측정기(Cutometer, C&K)를 이용하여 하기 제조예 1~3, 제조예 4~6, 제조예 7~9, 제조예 10~12 및 비교예 1~4의 탄력 개선 효과를 평가하였다. 구체적으로 35~55세의 건강한 여성 50명을 대상으로 제조예 1~3, 제조예 4~6, 제조예 7~9, 제조예 10~12와 비교예 1~4을 각각 양쪽 안면부에 1일 2회씩 2개월간 도포하도록 하였다. 실험이 시작되기 전, 안면 부위에서 피부측정기(Cutometer)를 이용하여 피부의 탄력도(R5, net elasticity)를 측정하고, 실험이 종료된 직후 안면의 동일 부위에서 피부의 탄력도(R5, net elasticity)를 측정하였다.　피부측정기에 의한 피부탄력의 증가율은 크림의 사용 전 R5 값에 대한 사용 후 피부 R5 값을 평균한 값이다.
케모카인 함유 화장료의 피부탄력도 측정 결과는 하기 표 1과 같다.
구분 피부탄력도(R5) 증가율(%)
실시예 1 35.1
실시예 2 36.5
실시예 3 38.9
비교예 1 2.0
실시예 4 39.7
실시예 5 42.3
실시예 6 43.5
비교예 2 2.5
실시예 7 41.1
실시예 8 43.4
실시예 9 44.9
비교예 3 3.3
실시예 10 43.5
실시예 11 45.8
실시예 12 47.1
비교예 4 3.9
상기 피부탄력도 측정 결과를 통해, 본 발명의 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 포함한 제조예 1~3, 제조예 4~6, 제조예 7~9, 제조예 10~12의 화장료를 사용한 경우, BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 포함하지 않은 비교예 1~4의 화장료를 사용한 경우보다 피부탄력 개선 효과가 우수함을 확인하였다.
< 실험예 5> 케모카인 함유 화장료의 피부탄력증가 효과에 대한 관능시험
하기 제조예 10, 제조예 11, 제조예 12와 비교예 4의 화장료 조성물을 제조하여 피부탄력증가 효과에 대해 관능시험을 실시하였다. 구체적으로는, 30세 이상 60세 미만의 여성과 남성 총 45명(30대 15명, 40대 15명, 50~60대 15명)을 연령대별로 32개의 군(군당 30대 5명, 40대 5명, 50~60대 5명)으로 구분하였다. 1군은 주름이 많이 분포하는 안면 왼쪽 눈가 부분 혹은 왼쪽 입술 주변에는 비교예 4(대조군)를, 안면 오른쪽 눈가 부분 혹은 오른쪽 입술 주변에는 제조예 10(시험군)를 1일 1회 2주간 지속적으로 사용하게 하고, 2군은 주름이 많이 분포하는 안면 왼쪽 동일한 부위에 비교예 4(대조군)를, 안면 오른쪽 동일한 부위에 제조예 11(시험군)을 1일 1회 2주간 지속적으로 사용하게 하였다. 3군은 주름이 많이 분포하는 안면 왼쪽 동일한 부위에 비교예 4(대조군)를, 안면 오른쪽 동일한 부위에 제조예 12(시험군)을 1일 1회 2주간 지속적으로 사용하게 하였다. 평가는 눈 혹은 입술 주위 부분의 주름 펴짐 현상을 기준으로 하였으며, 피부탄력 유지 효과에 대해서도 동일한 방법으로 피부탄력 유지 일수를 평가하였다. 피부 자극 항목에 대해서도 동일한 방법으로 피부의 가려움, 따가움 및 홍반 현상 등에 관하여 관능시험을 실시하였다. 평가 기준은 매우 우수(5점), 우수(4점), 보통(3점), 나쁨(2점) 및 매우 나쁨(1점)의 오점법 기준에 의거하여 수행하였다.
케모카인 함유 화장료의 피부재생 및 탄력증가 효과에 대한 관능시험 결과는 하기 표 2와 같다.
번호 관능시험 결과
피부탄력증가 피부탄력유지 피부자극
제조예 10 제조예 11 제조예 12 비교예 4 제조예 10 제조예 11 제조예 12 비교예 4 제조예 10 제조예 11 제조예 12
30대 1 4 3 5 3 5
2 3 3 3 3 5
3 5 4 4 2 5
4 3 2 4 2 4
5 4 3 4 3 4
6 5 2 4 2 4
7 4 2 4 3 5
8 5 3 5 4 5
9 4 4 3 2 4
10 4 4 4 3 3
11 4 3 4 4 4
12 5 3 5 3 5
13 5 2 4 3 4
14 5 3 4 2 4
15 4 3 5 2 4
40대 11 3 3 3 2 3
12 4 3 4 4 4
13 4 2 5 4 5
14 5 3 5 3 5
15 5 4 4 3 4
16 4 4 5 3 5
17 5 3 5 3 4
18 4 3 4 4 4
19 5 4 4 3 3
20 5 3 4 3 5
21 5 3 5 3 4
22 5 4 4 3 5
23 4 2 5 4 5
24 4 3 5 2 4
25 5 3 4 3 3
50~60대 21 4 3 3 2 4
22 4 3 3 2 4
23 3 3 4 2 4
24 3 3 4 3 5
25 4 4 5 3 4
26 3 2 4 3 5
27 4 3 4 2 4
28 4 3 5 4 4
29 4 2 3 3 4
30 4 2 3 2 3
31 4 3 4 3 5
32 4 3 5 3 4
33 5 3 5 4 4
34 4 4 4 3 4
35 3 3 3 3 5
평균 3.9 4.3 4.4 3 4 4.1 4.4 2.9 4.3 4.1 4.3
상기의 관능시험 결과를 통해, 본 발명의 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 유효성분으로 포함하는 제조예 10, 제조예 11 및 제조예 12가 비교예 4에 비해 피부 주름 개선 및 피부탄력 유지에 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
< 제조예 1, 제조예 2, 제조예 3 및 비교예 1> 케모카인 함유 스킨 제조
BLC(CXCL13), TECK(CCL25), 또는 BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25)를 각각 유효성분으로 첨가하고, 하기 표 3에 기재된 성분과 함량으로 제조예 1, 제조예 2 및 제조예 3의 스킨을 제조하였다. 또한, BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 유효성분으로 첨가하지 않고, 하기 표 3에 기재된 성분과 함량으로 비교예 1의 스킨을 제조하였다.
성분 제조예 1(중량%)BLC(CXCL13)(500 ng/ml) 제조예 2(중량%)TECK(CCL25)(500 ng/ml) 제조예 3(중량%)BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25)(500 ng/ml) 비교예 1(중량%)
BLC(CXCL13), TECK(CCL25), 또는 BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25) 0.01 0.01 0.01 -
아미노산 스탁(stock) 0.1 0.1 0.1 0.1
미네랄 혼합물 0.0007 0.0007 0.0007 0.0007
정제수 잔량 잔량 잔량 잔량
< 제조예 4, 제조예 5, 제조예 6 및 비교예 2> 케모카인 함유 에센스 제조
BLC(CXCL13), TECK(CCL25), 또는 BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25)를 각각 유효성분으로 첨가하고, 하기 표 4에 기재된 성분과 함량으로 제조예 4, 제조예 5 및 제조예 6의 에센스를 제조하였다. 또한, BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 유효성분으로 첨가하지 않고, 하기 표 4에 기재된 성분과 함량으로 비교예 2의 에센스를 제조하였다.
성분 제조예 4(중량%)BLC(CXCL13)(500 ng/ml) 제조예 5(중량%)TECK(CCL25)(500 ng/ml) 제조예 6(중량%)BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25)(500 ng/ml) 비교예 2(중량%)
BLC(CXCL13), TECK(CCL25), 또는 BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25) 0.01 0.01 0.01 -
아미노산 스탁(stock) 0.05 0.05 0.05 0.05
미네랄 혼합물 0.0007 0.0007 0.0007 0.0007
글리세롤 5 5 5 5
1,3-부틸렌글리콜 10 10 10 10
카보폴 940 0.3 0.3 0.3 0.3
정제수 잔량 잔량 잔량 잔량
< 제조예 7, 제조예 8, 제조예 9 및 비교예 3> 케모카인 함유 로션 제조
BLC(CXCL13), TECK(CCL25), 또는 BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25)를 각각 유효성분으로 첨가하고, 하기 표 5에 기재된 성분과 함량으로 제조예 7, 제조예 8 및 제조예 9의 로션을 제조하였다. 또한, BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 유효성분으로 첨가하지 않고, 하기 표 5에 기재된 성분과 함량으로 비교예 3의 로션을 제조하였다.
성분 제조예 7(중량%)BLC(CXCL13)(500 ng/ml) 제조예 8(중량%)TECK(CCL25)(500 ng/ml) 제조예 9(중량%)BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25)(500 ng/ml) 비교예 3(중량%)
BLC(CXCL13), TECK(CCL25), 또는 BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25) 0.01 0.01 0.01 -
아미노산 스탁(stock) 0.05 0.05 0.05 0.05
미네랄 혼합물 0.0007 0.0007 0.0007 0.0007
글리세롤 3 3 3 3
1,3-부틸렌글리콜 10 10 10 10
미네랄 오일 5 5 5 5
세틸알코올 2 2 2 2
잔탄검 0.5 0.5 0.5 0.5
정제수 잔량 잔량 잔량 잔량
< 제조예 10, 제조예 11, 제조예 12 및 비교예 4> 케모카인 함유 크림 제조
BLC(CXCL13), TECK(CCL25), 또는 BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25)를 각각 유효성분으로 첨가하고, 하기 표 6에 기재된 성분과 함량으로 제조예 10, 제조예 11 및 제조예 12의 크림을 제조하였다. 또한, BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 유효성분으로 첨가하지 않고, 하기 표 6에 기재된 성분과 함량으로 비교예 4의 크림을 제조하였다.
성분 제조예 10(중량%)BLC(CXCL13)(500 ng/ml) 제조예 11(중량%)TECK(CCL25)(500 ng/ml) 제조예 12(중량%)BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25)(500 ng/ml) 비교예 4(중량%)
BLC(CXCL13), TECK(CCL25), 또는 BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25) 0.01 0.01 0.01 -
아미노산 스탁(stock) 0.05 0.05 0.05 0.05
미네랄 혼합물 0.0007 0.0007 0.0007 0.0007
글리세롤 2 2 2 2
미네랄 오일 10 10 10 10
올리브 유화 왁스 3 3 3 3
세틸알코올 2 2 2 2
정제수 잔량 잔량 잔량 잔량
본 발명은 케모카인인 BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나를 유효성분으로 포함하는 피부개선용 화장료 조성물을 제공한다.
용어 "케모카인"이란, 백혈구유주작용, 활성화작용을 하는 염기성헤파린 결합성 저분자 단백질을 의미한다. 케모카인 분자 내에는 4개의 시스테인 잔기가 존재하며, 최초 2개의 분자 내 시스테인 잔기의 존재 형식에 따라 CXC(CXCL), CC(CCL), CX3C(CX3CL), C(XCL)의 4개의 아과로 분류하여 현재 40종 이상 동정하고 있다.
본 발명에 따른 유효성분은 케모카인 중 BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)), TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25)), 또는 BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))임을 특징으로 한다.
용어 "피부개선"이란, 본 발명의 유효성분을 피부에 도포함으로써 유도될 수 있는, 피부재생, 피부탄력 개선, 주름 방지 또는 개선, 피부보습, 미백, 항염증 등의 효과를 의미하는 것으로 해석될 수 있다.
상기 BLC 또는 TECK는 알지네이트, 콜라겐, 히아루론산 및 젤라틴으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 고분자와 혼합되어 이용되는 것일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 일실시예에서, 알지네이트를 함유한 BLC 또는 알지네이트를 함유한 TECK에 의해 Ki-67 마커의 발현이 무처리구 대비 증가한 것을 확인하였으며(도 5), 멜라닌 감소율 또한 증가한 것을 확인하였다(도 6).
상기 BLC 또는 TECK는 화장료 조성물 전체 중량 100 중량부에 대하여 0.0000001 내지 10중량부(1ng/ml ~ 100mg/ml)로 포함하는 것일 수 있으나 이에 한정되지 않는다.
상기 화장료 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다.
상기 화장료 조성물의 외형은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유한다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는, 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다. 본 발명에 따른 조성물은 또한 포말(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 유효성분을 포함하는 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 바디로션, 바디크림, 바디오일 및 바디에센스 등의 화장품으로 제형화될 수 있다.
또한, 피부에 도포할 수 있는 제형으로서 흡수성 젤, 패드, 패치, 스폰지 및 마스크팩 형태의 조성물로 제조하여 사용할 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 일제조예에서, 본 발명의 유효성분인 BLC(CXCL13), TECK(CCL25), 또는 BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25)를 함유하는 제조예 1~12의 스킨, 에센스, 로션, 크림을 제조하였다. 화장료 조성물 제조 시, 두 유효성분인 BLC(CXCL13), TECK(CCL25)를 모두 함유하는 경우, BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25)에 대하여 최적의 배합비를 찾아 조합함으로써 화장료 조성물을 제조할 수 있다.
상술한 바와 같은 화장료 조성물은 피부에 바르는 형태로 적용될 수도 있고, 마이크로 니들 등을 이용하여 피부 내부로 흡수되는 형태로 적용될 수도 있다.
상기 피부개선용 화장료 조성물은 피부재생용인 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에서, 본 발명의 유효성분인 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)에 의한 케라틴세포 이동이 음성대조군인 무처리군 및 양성대조군인 사이토카인 SDF-1α(stromal cell-derivated factor 1α) 대비 현저히 증가되었고(도 1), 증식표식인자(Ki-67)(도 3) 및 콜라겐 IV(도 4)의 발현이 음성대조군인 무처리군 및 양성대조군인 사이토카인 SDF-1α 대비 월등히 증가되어, 본 발명의 유효성분인 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)이 피부재생에 우수한 효과가 있음을 확인하였다.
상기 피부개선용 화장료 조성물은 피부탄력 개선용인 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에서, 본 발명의 유효성분인 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 함유하는 제조예 1~3, 제조예 4~6, 제조예 7~9, 제조예 10~12의 화장료를 사용한 경우, 이를 함유하지 않은 비교예 1~4의 화장료를 사용한 경우보다 피부탄력도 측정 시 피부탄력이 개선되어, 본 발명의 유효성분인 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)이 피부탄력 개선에 우수한 효과가 있음을 확인하였다.
상기 피부개선용 화장료 조성물은 주름 방지 또는 개선용인 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에서, 본 발명의 유효성분인 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 함유하는 제조예 10 및 제조예 11에 대한 관능시험을 실시한 결과, 함유하지 않은 비교예 4의 화장료를 사용한 경우보다 피부주름 개선 및 피부탄력 유지에 효과가 있음을 확인하였다.
상기 피부개선용 화장료 조성물은 피부보습용인 것일 수 있다.
상기 피부개선용 화장료 조성물은 미백용인 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에서, 본 발명의 유효성분인 알지네이트를 함유한 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)에 의한 멜라닌 감소율이 음성대조군인 무처리군 대비 모두 20%이상 증가하여, 본 발명의 유효성분인 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)이 미백에 우수한 효과가 있음을 확인하였다(도 6).
상기 피부개선용 화장료 조성물은 항염증용인 것일 수 있다.
또한, 본 발명은, 피부 개선을 위해서,
BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나 이상의 유효성분을 포함하는 화장료 조성물을 피부에 도포하는 단계를 포함하는, 피부 개선 방법을 제공한다.
본 발명은 피부개선을 위한 BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))의 용도를 제공한다.
본 발명에 따른 유효성분인 BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 또는 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))는 상처치유 및 피부재생에 핵심적인 역할을 하는 케라틴세포 유래의 세포분비물질들 중 피부재생과 탄력에 관여하는 단백질인 증식표식인자(Ki-67), 콜라겐 IV(collagen IV) 발현을 증가시키고, 상처치유 효과가 우수할 뿐만 아니라 케라틴세포를 이동시킬 수 있는 화학주성능을 나타내는 것을 확인하였다. BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 또는 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))에 의한 이러한 효능은 상처치유 효과가 있는 것으로 알려진 사이토카인인 SDF-1α 보다 월등히 우수하여, 지속적인 피부개선용 화장료 조성물로 개발이 가능하다.
본 발명에 따른 BLC(B lymphocyte chemoattractant; B cell attracting chemokine 1(BCA1); CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 또는 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))는 케라틴세포 유래의 세포분비물질들 중 피부재생과 탄력에 관여하는 단백질인 증식표식인자(Ki-67), 콜라겐 IV(collagen IV) 발현을 증가시키고, 멜라닌 감소 및 상처치유 효과가 우수할 뿐만 아니라 케라틴세포를 이동시킬 수 있는 화학주성능을 나타내므로, 피부개선용 화장료 조성물로 적용할 수 있다.

Claims (11)

  1. BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나를 유효성분으로 포함하는 피부개선용 화장료 조성물.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 BLC 또는 TECK는 알지네이트, 콜라겐, 히아루론산 및 젤라틴으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 고분자와 혼합되어 이용되는 것을 특징으로 하는 피부개선용 화장료 조성물.
  3. 제 1항에 있어서, 상기 BLC 또는 TECK는 화장료 조성물 전체 중량 100 중량부에 대하여 0.0000001 내지 10 중량부로 포함하는 것을 특징으로 하는 피부개선용 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 피부개선용 화장료 조성물은 피부재생용인 것을 특징으로 하는 피부개선용 화장료 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 피부개선용 화장료 조성물은 피부탄력 개선용인 것을 특징으로 하는 피부개선용 화장료 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 피부개선용 화장료 조성물은 주름 방지 또는 개선용인 것을 특징으로 하는 피부개선용 화장료 조성물.
  7. 제1항에 있어서, 상기 피부개선용 화장료 조성물은 피부보습용인 것을 특징으로 하는 피부개선용 화장료 조성물.
  8. 제1항에 있어서, 상기 피부개선용 화장료 조성물은 미백용인 것을 특징으로 하는 피부개선용 화장료 조성물.
  9. 제1항에 있어서, 상기 피부개선용 화장료 조성물은 항염증용인 것을 특징으로 하는 피부개선용 화장료 조성물.
  10. 피부 개선을 위해서,
    BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나 이상의 유효성분을 포함하는 화장료 조성물을 피부에 도포하는 단계를 포함하는, 피부 개선 방법.
  11. 피부개선을 위한 BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))의 용도.
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