KR101698447B1 - 케모카인을 유효성분으로 포함하는 피부개선용 조성물 - Google Patents

케모카인을 유효성분으로 포함하는 피부개선용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 케모카인으로서 BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나를 유효성분으로 포함하는 피부개선용 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따른 BLC(B lymphocyte chemoattractant; B cell attracting chemokine 1(BCA1); CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 또는 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))는 피부재생과 탄력에 관여하는 단백질인 증식표식인자(Ki-67), 콜라겐 IV(collagen IV) 발현을 증가시키고, 미백능 및 상처치유 효과가 우수할 뿐만 아니라 케라틴세포를 이동시킬 수 있는 화학주성능을 나타내므로, 피부개선용 화장료 조성물로 적용할 수 있다.

Description

케모카인을 유효성분으로 포함하는 피부개선용 조성물{Composition for improving skin condition comprising chemokines}
본 발명은 케모카인으로서 BLC(B lymphocyte chemoattractant; B cell attracting chemokine 1(BCA1); CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))으로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나를 유효성분으로 포함하는 피부개선용 조성물에 관한 것이다.
피부(skin)는 표피(epidermis)와 진피(dermis), 피하지방층(subcutis)의 3개의 층으로 구성되어 있으며, 외부로부터의 물리적 충격과 화학적 변화를 완충시켜 인체 내부 환경을 유지하고 몸을 보호하는 생체의 장벽기능을 하는 조직이다.
표피층은 피부의 가장 바깥층에 위치하고 있는 층으로 표피의 95%는 케라틴세포(keratinocyte)로 구성되어 있다. 케라틴세포는 피부에 침투하는 세균, 화학 물질 등에 대하여 방어 역할을 하고 다양한 사이토카인을 분비하여 피부의 염증반응과 면역반응에 관여한다. 또한, 케라틴세포의 증식과 이동은 콜라겐 IV(collagen IV)와 라미닌(laminin) 등의 합성을 유도하여 피부의 탄력유지와 재생 및 상처치유를 촉진한다.
이에 따라, 다양한 원인에 따른 피부 노화, 상처 및 피부 병변으로 인하여 생리활성이 저하된 케라틴세포의 증식과 이동 및 콜라겐 IV 합성과 분비를 유도하여 피부의 탄력유지, 재생 및 상처치유를 유도할 수 있는 소재 개발이 요구된다.
이에, 본 발명자들은 케모카인인 BLC(B lymphocyte chemoattractant; B cell attracting chemokine 1(BCA1); CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 또는 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))가 케라틴세포를 이동시킬 수 있는 화학주성능이 있음을 확인하고, 피부재생과 탄력에 관여하는 단백질 발현을 증가시키며 미백 효과 및 상처치유 효과가 우수함을 확인하고, 이를 유효성분으로 포함하는 피부개선용 화장료 조성물을 개발함으로써 본 발명을 완성하였다.
한국 특허 공개 제2016-0015745호 (2016.02.15) 한국 특허 등록 제1547996호 (2015.08.21)
본 발명의 목적은 BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나를 유효성분으로 포함하는 피부개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명은 케모카인인 BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나를 유효성분으로 포함하는 피부개선용 화장료 조성물을 제공한다.
용어 "케모카인"이란, 백혈구유주작용, 활성화작용을 하는 염기성헤파린 결합성 저분자 단백질을 의미한다. 케모카인 분자 내에는 4개의 시스테인 잔기가 존재하며, 최초 2개의 분자 내 시스테인 잔기의 존재 형식에 따라 CXC(CXCL), CC(CCL), CX3C(CX3CL), C(XCL)의 4개의 아과로 분류하여 현재 40종 이상 동정하고 있다.
본 발명에 따른 유효성분은 케모카인 중 BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)), TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25)), 또는 BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))임을 특징으로 한다.
용어 "피부개선"이란, 본 발명의 유효성분을 피부에 도포함으로써 유도될 수 있는, 피부재생, 피부탄력 개선, 주름 방지 또는 개선, 피부보습, 미백, 항염증 등의 효과를 의미하는 것으로 해석될 수 있다.
상기 BLC 또는 TECK는 알지네이트, 콜라겐, 히아루론산 및 젤라틴으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 고분자와 혼합되어 이용되는 것일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 일실시예에서, 알지네이트를 함유한 BLC 또는 알지네이트를 함유한 TECK에 의해 Ki-67 마커의 발현이 무처리구 대비 증가한 것을 확인하였으며(도 5), 미백능 또한 증가한 것을 확인하였다(도 6).
상기 BLC 또는 TECK는 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.0000001 내지 10중량부(1ng/ml ~ 100mg/ml)로 포함하는 것일 수 있으나 이에 한정되지 않는다.
상기 화장료 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다.
상기 화장료 조성물의 외형은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유한다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는, 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다. 본 발명에 따른 조성물은 또한 포말(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 유효성분을 포함하는 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 바디로션, 바디크림, 바디오일 및 바디에센스 등의 화장품으로 제형화될 수 있다.
또한, 피부에 도포할 수 있는 제형으로서 흡수성 젤, 패드, 패치, 스폰지 및 마스크팩 형태의 조성물로 제조하여 사용할 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 일제조예에서, 본 발명의 유효성분인 BLC(CXCL13), TECK(CCL25), 또는 BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25)를 함유하는 제조예 1~12의 스킨, 에센스, 로션, 크림을 제조하였다. 화장료 조성물 제조 시, 두 유효성분인 BLC(CXCL13), TECK(CCL25)를 모두 함유하는 경우, BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25)에 대하여 최적의 배합비를 찾아 조합함으로써 화장료 조성물을 제조할 수 있다.
상술한 바와 같은 화장료 조성물은 피부에 바르는 형태로 적용될 수도 있고, 마이크로 니들 등을 이용하여 피부 내부로 흡수되는 형태로 적용될 수도 있다.
상기 피부개선용 화장료 조성물은 피부재생용인 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에서, 본 발명의 유효성분인 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)에 의한 케라틴세포 이동이 음성대조군인 무처리군 및 양성대조군인 사이토카인 SDF-1α(stromal cell-derivated factor 1α) 대비 현저히 증가되었고(도 1), 증식표식인자(Ki-67)(도 3) 및 콜라겐 IV(도 4)의 발현이 음성대조군인 무처리군 및 양성대조군인 사이토카인 SDF-1α 대비 월등히 증가되어, 본 발명의 유효성분인 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)이 피부재생에 우수한 효과가 있음을 확인하였다.
상기 피부개선용 화장료 조성물은 피부탄력 개선용인 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에서, 본 발명의 유효성분인 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 함유하는 제조예 1~3, 제조예 4~6, 제조예 7~9, 제조예 10~12의 화장료를 사용한 경우, 이를 함유하지 않은 비교예 1~4의 화장료를 사용한 경우보다 피부탄력도 측정 시 피부탄력이 개선되어, 본 발명의 유효성분인 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)이 피부탄력 개선에 우수한 효과가 있음을 확인하였다.
상기 피부개선용 화장료 조성물은 주름 방지 또는 개선용인 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에서, 본 발명의 유효성분인 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 함유하는 제조예 10 및 제조예 11에 대한 관능시험을 실시한 결과, 함유하지 않은 비교예 4의 화장료를 사용한 경우보다 피부주름 개선 및 피부탄력 유지에 효과가 있음을 확인하였다.
상기 피부개선용 화장료 조성물은 피부보습용인 것일 수 있다.
상기 피부개선용 화장료 조성물은 미백용인 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에서, 본 발명의 유효성분인 알지네이트를 함유한 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)에 의한 미백능이 음성대조군인 무처리군 대비 알부틴과 유사한 정도로 효과적임을 확인하였다(도 6).
상기 피부개선용 화장료 조성물은 항염증용인 것일 수 있다.
본 발명에 따른 유효성분인 BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 또는 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))는 상처치유 및 피부재생에 핵심적인 역할을 하는 케라틴세포 유래의 세포분비물질들 중 피부재생과 탄력에 관여하는 단백질인 증식표식인자(Ki-67), 콜라겐 IV(collagen IV) 발현을 증가시키고, 상처치유 효과가 우수할 뿐만 아니라 케라틴세포를 이동시킬 수 있는 화학주성능을 나타내는 것을 확인하였다. BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 또는 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))에 의한 이러한 효능은 상처치유 효과가 있는 것으로 알려진 사이토카인인 SDF-1α 보다 월등히 우수하여, 지속적인 피부개선용 화장료 조성물로 개발이 가능하다.
본 발명에 따른 BLC(B lymphocyte chemoattractant; B cell attracting chemokine 1(BCA1); CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 또는 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))는 케라틴세포 유래의 세포분비물질들 중 피부재생과 탄력에 관여하는 단백질인 증식표식인자(Ki-67), 콜라겐 IV(collagen IV) 발현을 증가시키고, 미백능 및 상처치유 효과가 우수할 뿐만 아니라 케라틴세포를 이동시킬 수 있는 화학주성능을 나타내므로, 피부개선용 화장료 조성물로 적용할 수 있다.
도 1은 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)에 대한 케라틴세포(keratinocyte)의 화학주성능 분석 결과를 나타낸 도이다; Control(Negative control): 무처리군, SDF-1α: 양성대조군.
도 2는 삼차원 배양피부모델에 유발된 상처에 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 처리하여 재상피화를 유도한 결과를 나타낸 도이다; 음성대조군: 무처리군, SDF-1α: 양성대조군.
도 3은 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25) 처리에 따른 Ki-67 마커 발현을 나타낸 도이다; 음성대조군: 무처리군, Ascorbic acid: 양성대조군.
도 4는 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25) 처리에 따른 콜라겐 IV 마커 발현을 나타낸 도이다; 음성대조군: 무처리군, Ascorbic acid: 양성대조군.
도 5는 알지네이트(AL)를 함유한 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25) 처리에 따른 Ki-67 마커 발현을 나타낸 도이다; 음성대조군: 무처리군.
도 6은 알지네이트(AL)를 함유한 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25) 처리에 따른 미백능을 나타낸 도이다; 음성대조군: 무처리군, Arbutin: 양성대조군.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 다만 하기의 실시예는 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 실시예는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
< 실시예 1> 케라틴세포( keratinocyte )의 배양
정상피부조직으로부터 분리한 케라틴세포를 10% 소태아혈청(fetal bovine serum, FBS)이 포함된 DMEM/F12 배지(Invitrogen, 미국)를 이용하여 3T3 피더 세포(feeder cell)와 함께 37℃, 10% CO2의 습윤 환경에서 공배양하였다. 배양한 세포가 70~80% 자랐을 때 3T3 피더 세포를 제거한 뒤 트립신(Trypsin)-EDTA를 이용하여 케라틴세포만을 분리하였다.
< 실험예 1> 케라틴세포의 화학주성능 분석
BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)에 대한 케라틴세포의 화학주성을 분석하기 위하여, 8 ㎛-구멍 크기의 트랜스웰 인서트(Falcon, 독일)를 이용하여 세포를 배양한 후, 인서트(insert) 막 내 마이크로포어를 통과하여 케모카인을 향해 이동한 세포를 카운팅하여 평가하였다. 구체적으로, 하부 챔버(Lower chamber)에 케모카인 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 각각 100, 500 ng/ml 처리한 후 세포를 각 인서트 웰(insert well)에 1×104개씩 주입하였다. 37℃, 10% CO2의 습윤 환경에서 6시간 배양 후 인서트 막을 헤마톡실린(hematoxylin)으로 염색한 뒤 이동한 세포 수를 측정하였다.
그 결과, BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)에 의한 케라틴세포 이동이 음성대조군인 무처리군 대비 증가되었음을 확인하였으며, 사이토카인인 SDF-1α(stromal cell-derivated factor 1α)에 의해 이동한 세포 수보다 5배 이상 세포 이동이 되었음을 확인하였다(도 1).
< 실험예 2> 삼차원 배양피부모델을 이용한 케모카인의 상처치유 효과 검정
콜라겐과 섬유아세포로 이루어진 진피층과 케라틴세포를 포함하는 표피층을 포함하고 있는 Neoderm-ED(테고사이언스㈜, 한국)를 준비하였다. 4mm 바이옵시 펀치(biopsy punch)를 이용하여 Neoderm-ED에 상처를 유발시킨 후, 케모카인 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25) 각각 500 ng/ml를 처리하여 37℃, 10% CO2의 습윤 환경에서 5일간 배양하였다. 배양한 Neoderm 조직을 인서트 웰로부터 분리하여 헤마톡실린 및 에오신으로 염색하였다(H&E 염색). 염색된 조직을 슬라이드 글라스에 올려놓고 현미경에서 사진을 촬영한 후 이미지 분석 프로그램(ImagePro™)(Hitachi, 일본)을 이용하여 촬영한 이미지로부터 재상피화된 길이를 측정하였다.
그 결과, BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25) 처리에 의해 재상피화(re-epithelialization)된 길이가 음성대조군인 무처리군 대비 현저히 증가되었음을 확인하였으며, SDF-1α(stromal cell-derivated factor 1α) 처리에 의해 재상피화된 길이보다 3배 이상 증가한을 확인하였다(도 2).
< 실험예 3> 삼차원 배양피부모델을 이용한 케모카인의 피부재생, 탄력 및 미백능 증가 효과 검정
피부재생 및 탄력능 증가 효과를 검정하기 위하여, Neoderm-ED에 케모카인 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 각각 100 ng/ml 처리하여 37℃, 10% CO2의 습윤 환경에서 48시간 배양하였다. 피부재생 및 탄력능을 확인하기 위한 마커로 증식표식인자(Ki-67)와 콜라겐 IV(collagen IV)에 결합하는 각각의 1차 항체를 반응시킨 후, 형광물질이 결합한 2차 항체를 반응시켰다. 세포의 핵은 DAPI(4,6-diamidino-2-phenylindole)로 염색하였다.
미백능 증가 효과를 검정하기 위하여, Neoderm-ME(테고사이언스㈜, 한국)에 케모카인 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 각각 500 ng/ml 처리하여 37℃에서 48시간 배양 후 사진 촬영하였다. 미백능은 육안으로 관찰하였다.
그 결과, BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)에 의한 각 마커들의 발현이 음성대조군인 무처리군 대비 증가되었음을 확인하였으며, 사이토카인인 SDF-1α(stromal cell-derivated factor 1α)보다 증식표식인자(Ki-67)(도 3, 도 5) 및 콜라겐 IV(도 4)의 발현이 모두 월등히 증가하였음을 확인하였다.
또한, BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)에 의한 의한 미백능이 음성대조군인 무처리군 대비 알부틴과 유사한 정도로 효과적임을 확인하였다(도 6).
< 실험예 4> 케모카인 함유 화장료의 피부탄력도 개선 검정
피부표면에 음압을 주었을 때 피부의 형태변화를 통해 탄력을 측정할 수 있는 피부측정기(Cutometer, C&K)를 이용하여 하기 제조예 1~3, 제조예 4~6, 제조예 7~9, 제조예 10~12 및 비교예 1~4의 탄력 개선 효과를 평가하였다. 구체적으로 35~55세의 건강한 여성 50명을 대상으로 제조예 1~3, 제조예 4~6, 제조예 7~9, 제조예 10~12와 비교예 1~4을 각각 양쪽 안면부에 1일 2회씩 2개월간 도포하도록 하였다. 실험이 시작되기 전, 안면 부위에서 피부측정기(Cutometer)를 이용하여 피부의 탄력도(R5, net elasticity)를 측정하고, 실험이 종료된 직후 안면의 동일 부위에서 피부의 탄력도(R5, net elasticity)를 측정하였다. 피부측정기에 의한 피부탄력의 증가율은 크림의 사용 전 R5 값에 대한 사용 후 피부 R5 값을 평균한 값이다.
케모카인 함유 화장료의 피부탄력도 측정 결과는 하기 표 1과 같다.
구분 피부탄력도(R5) 증가율(%)
실시예 1 35.1
실시예 2 36.5
실시예 3 38.9
비교예 1 2.0
실시예 4 39.7
실시예 5 42.3
실시예 6 43.5
비교예 2 2.5
실시예 7 41.1
실시예 8 43.4
실시예 9 44.9
비교예 3 3.3
실시예 10 43.5
실시예 11 45.8
실시예 12 47.1
비교예 4 3.9
상기 피부탄력도 측정 결과를 통해, 본 발명의 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 포함한 제조예 1~3, 제조예 4~6, 제조예 7~9, 제조예 10~12의 화장료를 사용한 경우, BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 포함하지 않은 비교예 1~4의 화장료를 사용한 경우보다 피부탄력 개선 효과가 우수함을 확인하였다.
< 실험예 5> 케모카인 함유 화장료의 피부탄력증가 효과에 대한 관능시험
하기 제조예 10, 제조예 11, 제조예 12와 비교예 4의 화장료 조성물을 제조하여 피부탄력증가 효과에 대해 관능시험을 실시하였다. 구체적으로는, 30세 이상 60세 미만의 여성과 남성 총 45명(30대 15명, 40대 15명, 50~60대 15명)을 연령대별로 32개의 군(군당 30대 5명, 40대 5명, 50~60대 5명)으로 구분하였다. 1군은 주름이 많이 분포하는 안면 왼쪽 눈가 부분 혹은 왼쪽 입술 주변에는 비교예 4(대조군)를, 안면 오른쪽 눈가 부분 혹은 오른쪽 입술 주변에는 제조예 10(시험군)를 1일 1회 2주간 지속적으로 사용하게 하고, 2군은 주름이 많이 분포하는 안면 왼쪽 동일한 부위에 비교예 4(대조군)를, 안면 오른쪽 동일한 부위에 제조예 11(시험군)을 1일 1회 2주간 지속적으로 사용하게 하였다. 3군은 주름이 많이 분포하는 안면 왼쪽 동일한 부위에 비교예 4(대조군)를, 안면 오른쪽 동일한 부위에 제조예 12(시험군)을 1일 1회 2주간 지속적으로 사용하게 하였다. 평가는 눈 혹은 입술 주위 부분의 주름 펴짐 현상을 기준으로 하였으며, 피부탄력 유지 효과에 대해서도 동일한 방법으로 피부탄력 유지 일수를 평가하였다. 피부 자극 항목에 대해서도 동일한 방법으로 피부의 가려움, 따가움 및 홍반 현상 등에 관하여 관능시험을 실시하였다. 평가 기준은 매우 우수(5점), 우수(4점), 보통(3점), 나쁨(2점) 및 매우 나쁨(1점)의 오점법 기준에 의거하여 수행하였다.
케모카인 함유 화장료의 피부재생 및 탄력증가 효과에 대한 관능시험 결과는 하기 표 2와 같다.
번호
관능시험 결과
피부탄력증가 피부탄력유지 피부자극
제조예 10 제조예 11 제조예 12 비교예 4 제조예 10 제조예 11 제조예 12 비교예 4 제조예 10 제조예 11 제조예 12
30대








1 4 3 5 3 5
2 3 3 3 3 5
3 5 4 4 2 5
4 3 2 4 2 4
5 4 3 4 3 4
6 5 2 4 2 4
7 4 2 4 3 5
8 5 3 5 4 5
9 4 4 3 2 4
10 4 4 4 3 3
11 4 3 4 4 4
12 5 3 5 3 5
13 5 2 4 3 4
14 5 3 4 2 4
15 4 3 5 2 4
40대








11 3 3 3 2 3
12 4 3 4 4 4
13 4 2 5 4 5
14 5 3 5 3 5
15 5 4 4 3 4
16 4 4 5 3 5
17 5 3 5 3 4
18 4 3 4 4 4
19 5 4 4 3 3
20 5 3 4 3 5
21 5 3 5 3 4
22 5 4 4 3 5
23 4 2 5 4 5
24 4 3 5 2 4
25 5 3 4 3 3
50~60대











21 4 3 3 2 4
22 4 3 3 2 4
23 3 3 4 2 4
24 3 3 4 3 5
25 4 4 5 3 4
26 3 2 4 3 5
27 4 3 4 2 4
28 4 3 5 4 4
29 4 2 3 3 4
30 4 2 3 2 3
31 4 3 4 3 5
32 4 3 5 3 4
33 5 3 5 4 4
34 4 4 4 3 4
35 3 3 3 3 5
평균 3.9 4.3 4.4 3 4 4.1 4.4 2.9 4.3 4.1 4.3
상기의 관능시험 결과를 통해, 본 발명의 BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 유효성분으로 포함하는 제조예 10, 제조예 11 및 제조예 12가 비교예 4에 비해 피부 주름 개선 및 피부탄력 유지에 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
< 제조예 1, 제조예 2, 제조예 3 및 비교예 1> 케모카인 함유 스킨 제조
BLC(CXCL13), TECK(CCL25), 또는 BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25)를 각각 유효성분으로 첨가하고, 하기 표 3에 기재된 성분과 함량으로 제조예 1, 제조예 2 및 제조예 3의 스킨을 제조하였다. 또한, BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 유효성분으로 첨가하지 않고, 하기 표 3에 기재된 성분과 함량으로 비교예 1의 스킨을 제조하였다.
성분 제조예 1(중량%)
BLC(CXCL13)(100 ng/ml)
제조예 2(중량%)
TECK(CCL25)(100 ng/ml)
제조예 3(중량%)
BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25)(100 ng/ml)
비교예 1(중량%)
BLC(CXCL13), TECK(CCL25), 또는 BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25) 0.01 0.01 0.01 -
아미노산 스탁(stock) 0.1 0.1 0.1 0.1
미네랄 혼합물 0.0007 0.0007 0.0007 0.0007
정제수 잔량 잔량 잔량 잔량
< 제조예 4, 제조예 5, 제조예 6 및 비교예 2> 케모카인 함유 에센스 제조
BLC(CXCL13), TECK(CCL25), 또는 BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25)를 각각 유효성분으로 첨가하고, 하기 표 4에 기재된 성분과 함량으로 제조예 4, 제조예 5 및 제조예 6의 에센스를 제조하였다. 또한, BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 유효성분으로 첨가하지 않고, 하기 표 4에 기재된 성분과 함량으로 비교예 2의 에센스를 제조하였다.
성분 제조예 4(중량%)
BLC(CXCL13)(100 ng/ml)
제조예 5(중량%)
TECK(CCL25)(100 ng/ml)
제조예 6(중량%)
BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25)(100 ng/ml)
비교예 2(중량%)
BLC(CXCL13), TECK(CCL25), 또는 BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25) 0.01 0.01 0.01 -
아미노산 스탁(stock) 0.05 0.05 0.05 0.05
미네랄 혼합물 0.0007 0.0007 0.0007 0.0007
글리세롤 5 5 5 5
1,3-부틸렌글리콜 10 10 10 10
카보폴 940 0.3 0.3 0.3 0.3
정제수 잔량 잔량 잔량 잔량
< 제조예 7, 제조예 8, 제조예 9 및 비교예 3> 케모카인 함유 로션 제조
BLC(CXCL13), TECK(CCL25), 또는 BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25)를 각각 유효성분으로 첨가하고, 하기 표 5에 기재된 성분과 함량으로 제조예 7, 제조예 8 및 제조예 9의 로션을 제조하였다. 또한, BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 유효성분으로 첨가하지 않고, 하기 표 5에 기재된 성분과 함량으로 비교예 3의 로션을 제조하였다.
성분 제조예 7(중량%)
BLC(CXCL13)(100 ng/ml)
제조예 8(중량%)
TECK(CCL25)(100 ng/ml)
제조예 9(중량%)
BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25)(100 ng/ml)
비교예 3(중량%)
BLC(CXCL13), TECK(CCL25), 또는 BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25) 0.01 0.01 0.01 -
아미노산 스탁(stock) 0.05 0.05 0.05 0.05
미네랄 혼합물 0.0007 0.0007 0.0007 0.0007
글리세롤 3 3 3 3
1,3-부틸렌글리콜 10 10 10 10
미네랄 오일 5 5 5 5
세틸알코올 2 2 2 2
잔탄검 0.5 0.5 0.5 0.5
정제수 잔량 잔량 잔량 잔량
< 제조예 10, 제조예 11, 제조예 12 및 비교예 4> 케모카인 함유 크림 제조
BLC(CXCL13), TECK(CCL25), 또는 BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25)를 각각 유효성분으로 첨가하고, 하기 표 6에 기재된 성분과 함량으로 제조예 10, 제조예 11 및 제조예 12의 크림을 제조하였다. 또한, BLC(CXCL13) 또는 TECK(CCL25)를 유효성분으로 첨가하지 않고, 하기 표 6에 기재된 성분과 함량으로 비교예 4의 크림을 제조하였다.
성분 제조예 10(중량%)
BLC(CXCL13)(100 ng/ml)
제조예 11(중량%)
TECK(CCL25)(100 ng/ml)
제조예 12(중량%)
BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25)(100 ng/ml)
비교예 4(중량%)
BLC(CXCL13), TECK(CCL25), 또는 BLC(CXCL13) 및 TECK(CCL25) 0.01 0.01 0.01 -
아미노산 스탁(stock) 0.05 0.05 0.05 0.05
미네랄 혼합물 0.0007 0.0007 0.0007 0.0007
글리세롤 2 2 2 2
미네랄 오일 10 10 10 10
올리브 유화 왁스 3 3 3 3
세틸알코올 2 2 2 2
정제수 잔량 잔량 잔량 잔량

Claims (9)

  1. BLC(B lymphocyte chemoattractant; CXCL13(C-X-C motif ligand 13)) 및 TECK(thymus expressed chemokine; CCL25(C-C motif ligand 25))으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나를 유효성분으로 포함하는 피부개선용 화장료 조성물.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 BLC 또는 TECK는 알지네이트, 콜라겐, 히아루론산 및 젤라틴으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 고분자와 혼합되어 이용되는 것을 특징으로 하는 피부개선용 화장료 조성물.
  3. 제 1항에 있어서, 상기 BLC 또는 TECK는 화장료 조성물 전체 중량 100 중량부에 대하여 0.0000001 내지 10 중량부로 포함하는 것을 특징으로 하는 피부개선용 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 피부개선용 화장료 조성물은 피부재생용인 것을 특징으로 하는 피부개선용 화장료 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 피부개선용 화장료 조성물은 피부탄력 개선용인 것을 특징으로 하는 피부개선용 화장료 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 피부개선용 화장료 조성물은 주름 방지 또는 개선용인 것을 특징으로 하는 피부개선용 화장료 조성물.
  7. 삭제
  8. 제1항에 있어서, 상기 피부개선용 화장료 조성물은 미백용인 것을 특징으로 하는 피부개선용 화장료 조성물.
  9. 삭제
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018030688A1 (ko) * 2016-08-10 2018-02-15 테고사이언스 (주) 케모카인을 유효성분으로 포함하는 피부개선용 조성물

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20100032099A (ko) * 2008-09-17 2010-03-25 주식회사 에스티씨라이프 줄기세포 배양액을 포함하는 화장료 조성물
KR20110057222A (ko) * 2008-09-10 2011-05-31 아이티에이치 임뮨 세라피 홀딩스 에이비 염증 증상의 치료 방법
KR101547996B1 (ko) 2014-06-30 2015-08-27 제주대학교 산학협력단 상처 치료, 상처 회복 또는 흉터 생성 억제용 피부 외용제 조성물
JP2015531380A (ja) * 2012-10-01 2015-11-02 ナチュラ コスメティコス ソシエダッド アノニマ 角質物質の機能を調節するための植物脂質組成物、前記の機能を調節するための方法および前記の植物脂質の使用
CN105250994A (zh) * 2015-10-29 2016-01-20 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 一种促进皮肤伤口愈合的制剂及其制备方法和应用
KR20160015745A (ko) 2014-07-31 2016-02-15 (주)아모레퍼시픽 케모카인을 함유하는 피부 미백용 조성물

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012121451A1 (ko) * 2011-03-08 2012-09-13 연세대학교 산학협력단 줄기세포의 인 비보 이동 유도방법
KR101698447B1 (ko) 2016-08-10 2017-01-20 테고사이언스 (주) 케모카인을 유효성분으로 포함하는 피부개선용 조성물

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20110057222A (ko) * 2008-09-10 2011-05-31 아이티에이치 임뮨 세라피 홀딩스 에이비 염증 증상의 치료 방법
KR20100032099A (ko) * 2008-09-17 2010-03-25 주식회사 에스티씨라이프 줄기세포 배양액을 포함하는 화장료 조성물
JP2015531380A (ja) * 2012-10-01 2015-11-02 ナチュラ コスメティコス ソシエダッド アノニマ 角質物質の機能を調節するための植物脂質組成物、前記の機能を調節するための方法および前記の植物脂質の使用
KR101547996B1 (ko) 2014-06-30 2015-08-27 제주대학교 산학협력단 상처 치료, 상처 회복 또는 흉터 생성 억제용 피부 외용제 조성물
KR20160015745A (ko) 2014-07-31 2016-02-15 (주)아모레퍼시픽 케모카인을 함유하는 피부 미백용 조성물
CN105250994A (zh) * 2015-10-29 2016-01-20 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 一种促进皮肤伤口愈合的制剂及其制备方法和应用

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018030688A1 (ko) * 2016-08-10 2018-02-15 테고사이언스 (주) 케모카인을 유효성분으로 포함하는 피부개선용 조성물
US11026876B2 (en) 2016-08-10 2021-06-08 Tego Science Inc. Composition for improving skin condition comprising chemokines

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