WO2013136871A1 - 過硫酸化コンドロイチン組成物 - Google Patents

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WO2013136871A1
WO2013136871A1 PCT/JP2013/052519 JP2013052519W WO2013136871A1 WO 2013136871 A1 WO2013136871 A1 WO 2013136871A1 JP 2013052519 W JP2013052519 W JP 2013052519W WO 2013136871 A1 WO2013136871 A1 WO 2013136871A1
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WO
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weight
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chondroitin
production
chondroitin sulfate
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PCT/JP2013/052519
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一二三 大石
聡福 土部
隆史 服部
吉広 川端
谷　久典
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研光通商株式会社
ハイドロックス株式会社
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Definitions

  • the present invention generally comprises squid cartilage extract as a component, contains chondroitin sulfates in a total amount of at least 60% by weight of the composition, and chondroitin sulfate E (CS-E) is 40% by weight of the total chondroitin sulfates. And chondroitin sulfate compositions comprising chondroitin sulfate A and C (CS-A and CS-C) in an amount of less than 20% by weight of the total chondroitin sulfates.
  • the invention also relates to the use of the composition.
  • the molecular weight of the squid cartilage extract is, for example, 18 kDa to 34 kDa.
  • the squid cartilage extract is derived from an extract of the American giant squid, such as Inca Cartilago (registered trademark). Said ratio can be calculated
  • the electrophoresis is cellulose acetate membrane electrophoresis and is performed under conditions of 0.25 M calcium acetate as electrolyte, 15 mA / cm 2 , and 2.5 hours.
  • the chondroitin sulfates are derived from American giant squid.
  • the composition is useful as a drug, health food, health supplement, and nutritional supplement, and for hair care.
  • Chondroitin sulfate is a kind of glycosaminoglycan, that is, “GAG” (mucopolysaccharide), and functions by becoming a molecule that is enlarged by metabolism and constitutes a proteoglycan (a macromolecule formed from GAG).
  • GAG glycosaminoglycan
  • Proteoglycans are most abundant in connective tissues such as cartilage, tendon, skin, vessel wall, sclera, cornea, and intervertebral disc.
  • Chondroitin sulfate has been used as a health supplement to prevent connective tissue-related discomfort and, more recently, to treat it. It has been suggested that chondroitin may be used as an alternative therapy for osteoarthritis or degenerative joint disease, and is now believed to help form healthy connective tissue.
  • Chondroitin sulfate consists of a disaccharide repeating structure of D-glucuronic acid and sulfated N-acetylgalactosamine, and there are various isomers depending on the sulfation of the hydroxyl group of the sugar component.
  • Sulfatable sites include hydroxyl groups at the 2- and 3-positions of glucuronic acid, hydroxyl groups at the 2-position of iduronic acid, and hydroxyl groups at the 4- and 6-positions of N-acetylgalactosamine It is.
  • a chondroitin sulfate chain is a linear polysaccharide having a molecular weight of 10 4 to 10 5 , and generally exists as a proteoglycan covalently bonded to a core protein.
  • chondroitin sulfates The four types are chondroitin sulfate A, C, D, and E.
  • Chondroitin sulfate A (CS-A) has a sulfation site at the 4-position carbon of N-acetylgalactosamine sugar.
  • Chondroitin sulfate C (CS-C) has a sulfation site at the 6-position carbon of N-acetylgalactosamine sugar
  • chondroitin D CS-D
  • Carbon has a sulfation site.
  • Chondroitin sulfate E (CS-E) has sulfation sites at the 4th and 6th carbons of the N-acetylgalactosamine sugar.
  • the present invention provides a unique composition rich in chondroitin sulfate E (CS-E), methods of use, and methods of preparing chondroitin sulfates in a totally unexpected manner.
  • CS-E chondroitin sulfate E
  • the presence of CS-E in the composition improves joint health and joint pain (collagen and hyaluronic acid production) , Anti-inflammatory by binding to midkine), bone growth (osteoblast growth and mineralization, bone morphogenetic protein and osteocalcin production), metabolic syndrome improvement (insulin secretion), sexual function improvement (muscle strengthening, development Hair, testosterone production) and improved skin condition (collagen and hyaluronic acid production) have been found to be beneficial in treating various disease states and symptoms.
  • the composition is for health foods, nutritional supplements, pharmaceuticals and health supplements, and hair care.
  • the present invention further provides a composition for hair care and a composition for health food, the composition comprising (a) a squid cartilage extract such as IncaCartilago (registered trademark), and (b) an eggshell membrane protein. Contains ingredients.
  • the weight percent ratio of (a) to (b) is such that (a) is 90% or more, while (b) is 0.5-10%, The sum of the proportions of (b) is 100%.
  • the composition is for hair care, health food, nutritional supplements, pharmaceuticals, and health supplements.
  • the present invention further provides a composition for health food, wherein the composition is 70-90% by weight dextrin (s) as excipients, and (a) squid cartilage extract such as IncaCartilago®, and At least one component selected from the group consisting of: (C) one or more components that improve osteoarthritis, such as other chondroitin, glucosamine, hyaluronic acid, collagen, yeast, devil's claw, and hops, (d) rough and / or dry skin, One or more components that improve hair growth, such as hyaluronic acid, collagen, elastin, and placenta, (e) components having sex hormone-like activity, such as pomegranate, soy protein and isoflavones, zinc, and the like (F) Constituents having an insulin secreting action, such as vanadium, chromium, gymnema, garcinia extract, banaba extract, corosolic acid, and fossilized fossil.
  • the composition is 70
  • the present invention further provides a health food composition
  • a health food composition comprising 70-90% by weight of dextrin (s) as an excipient, and (a) IncaCartilago®, (b) eggshell membrane protein.
  • the present composition comprises at least one component selected from the group consisting of the above (c) to (f) with respect to the total amount of (a) and (b). It is contained in an amount of 0.01 to 10% by weight as a proportion, or in an amount of 0.01 to 10% by weight as a proportion in each component.
  • the composition is for health foods, health supplements, and dietary supplements.
  • the composition of the present invention is useful for treating various disease states and symptoms.
  • the composition of the present invention improves joint health and joint pain (collagen and hyaluronic acid production, anti-inflammatory by binding to midkine), bone growth (osteoblast growth and mineralization, bone formation) Protein and osteocalcin production), metabolic syndrome improvement (insulin secretion), sexual function improvement (muscle strengthening, hair growth, testosterone production), skin condition improvement (collagen and hyaluronic acid production), and health care (hair care, etc.) ) Etc.
  • the structural formulas of chondroitin sulfates A, C, and E are shown.
  • generation of the bone morphogenetic protein (BMP) in Example 1 is shown.
  • the production of osteocalcin in Example 2 is shown.
  • bonding with the midkine in Example 3 is shown.
  • the improvement of the bone density in Example 4 is shown.
  • the improvement of the joint pain (back pain, knee osteoarthritis) in Example 4 is shown.
  • the improvement of the body fat and body muscle in Example 6 is shown.
  • the improvement of the blood glucose in Example 7 is shown.
  • Figure 9 shows the improvement of hair condition by the combination of the present invention in Example 8.
  • the production of testosterone in Example 9 is shown.
  • the production of hyaluronic acid in Example 10 is shown.
  • the proliferation of the osteoblast in Example 11 is shown.
  • Example 14 The acceleration
  • the production of collagen in Example 13 is shown.
  • the evaluation result of the bone density in Example 14 is shown.
  • Placebolace means a group administered with placebo
  • IncaCartilago means a group administered with a capsule containing Inca Carterago (registered trademark).
  • V1 means visit vis1, that is, day 0 (the day when the capsule containing Inca Carterago (registered trademark) was administered (start date of the test)), and V4 represents visit 4, that is, day 90. (90 days from the test start date), and
  • Z ⁇ ⁇ Score Increase (Bone Density) on the vertical axis of the graph means an increase in Z score (bone density).
  • Placebolace means a group administered with placebo
  • IncaCartilago means a group administered with a capsule containing Inca Carterago (registered trademark).
  • V1 is visit 1, that is, day 0 (day when the capsule containing Inca Carterago (registered trademark) was administered (test start date))
  • V2 is visit 2, that is, day 30 (start of test). 30 days from the day)
  • V3 means visit 3, that is, the 60th day (60 days from the start date of the test)
  • V4 means visit 4, ie, 90 days (the 90th day from the start date of the test). ) Respectively.
  • VAS fluctuation Average
  • variation of WOMAC pain in Example 14 The evaluation result in the fluctuation
  • Placebolace means a group administered with placebo
  • IncaCartilago means a group administered with a capsule containing Inca Carterago (registered trademark).
  • V1 is visit 1, that is, day 0 (day when the capsule containing Inca Carterago (registered trademark) was administered (test start date)
  • V2 is visit 2, that is, day 30 (start of test).
  • V3 means visit 3, that is, the 60th day (60 days from the start date of the test)
  • V4 means visit 4, ie, 90 days (the 90th day from the start date of the test)
  • “Change” of “WOMAC” (Pain) on the vertical axis of the graph means fluctuation (pain) of WOMAC.
  • variation in Lequesne Index "standard stairs climb” in Example 14 is shown.
  • Placebolace means a group administered with placebo
  • IncaCartilago means a group administered with a capsule containing Inca Carterago (registered trademark).
  • V1 is visit 1, that is, day 0 (day when the capsule containing Inca Carterago (registered trademark) was administered (test start date))
  • V2 is visit 2, that is, day 30 (start of test). 30 days from the day)
  • V3 means visit 3, that is, the 60th day (60 days from the start date of the test)
  • V4 means visit 4, ie, 90 days (the 90th day from the start date of the test).
  • Change of Lequesne ⁇ ⁇ Index means the change in Lequesne Index in “Standard Stairs (SFS)”. It is a list
  • Index is a list
  • chondroitin sulfate A refers to a molecule consisting of one or more repeating units of the CS-A structure provided in FIG.
  • chondroitin sulfate C or “CS-C” indicates a molecule composed of one or more repeating units of the CS-C structure provided in FIG.
  • chondroitin sulfate E or “CS-E” refers to a molecule composed of one or more repeating units of the CS-E structure provided in FIG.
  • the term “effective amount” refers to the amount of a compound described herein that is sufficient to achieve the intended use, including but not limited to disease treatment as described below.
  • the therapeutically effective amount depends on the intended use (in vitro or in vivo) or subject and disease state being treated (eg, subject weight and age, severity of disease state, mode of administration, etc.). And can be easily determined by those skilled in the art.
  • This term also applies to doses that induce a specific response (eg, axonal growth) in the target cells. The specific dose will vary depending on the specific compound chosen, the dosage regimen to be followed, whether it is administered in combination with other compounds, the timing of administration, the tissue to be administered, or the body delivery system to which the compound is delivered. .
  • Test animal refers to animals such as mammals, for example, humans. The methods described herein can be useful for both human treatment and livestock applications.
  • the patient can be a mammal or a human.
  • osteoarthritis eg joint pain, low back pain
  • fractures are an important key to reducing the ever-increasing medical costs.
  • older people In order for older people to support themselves, they basically need to be able to move. Then, the elderly can talk with others and / or enjoy social life.
  • Squid cartilage extracts containing chondroitins (eg, chondroitin sulfates), according to the information provided herein, have a unique physiology that differs from chondroitins derived from pigs, cows, chickens, sharks, and salmon. It has now been found to have an action and a strong biological activity.
  • chondroitins eg, chondroitin sulfates
  • chondroitin A, C, and E chondroitin A, C, and E
  • CS-A, CS-C chondroitin A, C, and E
  • CS-E chondroitin sulfate
  • the 4th and 6th positions of glucuronic acid-acetylgalactosamine are sulfated.
  • those derived from cows, pigs, chickens (CS-A), or sharks, salmon (CS-C) are sulfated only in one place (see, for example, FIG. 1).
  • the present invention utilizes the innovative use of two-dimensional electrophoresis to consistently identify and quantify both chondroitin types in IncaCartilago® (the chondroitin sulfate composition described herein). It's what you do and it's truly technological. IncaCartilago® is the only raw material that reveals the full volume of persulfated CS-E, as shown in the analysis.
  • IncaCartilago® is the most prominent in the market and contains a total of at least 60% by weight of chondroitin sulfate, more than 40% by weight of chondroitin sulfate E (CS-E), and chondroitin sulfate A and C (CS -A and CS-C) in a proportion of less than 20% by weight.
  • Such high content provides consumers with the best protective effects of each type of chondroitin sulfate, improving joint health and joint pain (collagen and hyaluronic acid production, binding to midkine) Anti-inflammatory), bone growth (osteoblast growth and mineralization, bone morphogenetic protein and osteocalcin production), metabolic syndrome improvement (insulin secretion), sexual function improvement (muscle strengthening, hair growth, testosterone production), skin Effectively support the improvement of condition (production of collagen and hyaluronic acid).
  • MC3T3-E1 is a mouse osteoblast cell line.
  • Example 1 Production of BMP (bone morphogenetic protein) ( Figure 2) MC3T3-E1 was cultured in the medium for 4 days, after which IncaCartilago®, CS-A, CS-C, CS-E, and N-GlcAc were separately added to each medium and further cultured for 4 days. .
  • the amount of BMP in the medium was measured by the BIAcore method.
  • IncaCartilago® produced BMP and showed statistical significance compared to the control (* P ⁇ 0.05).
  • Example 2 Production of osteocalcin (OCN) ( Figure 3) MC3T3-E1 was cultured in the medium for 4 days, after which IncaCartilago®, CS-A, CS-C, CS-E, and N-GlcAc were separately added to each medium and further cultured for 12 days. .
  • the amount of OCN in the medium was measured by the BIAcore method.
  • IncaCartilago® produced OCN and showed statistical significance compared to the control (* P ⁇ 0.05).
  • Example 3 Binding to midkine (MK) ( Figure 4)
  • MK was immobilized on the sensor chip according to the BIAcore instructions, and then the IncaCartilago®, CS-A, CS-C, CS-E, and proteoglycans from American blue squid and salmon were detected according to the BIAcore instructions. Reacted with MK on the chip. The reaction of MK is indicated by RU (reaction unit). IncaCartilago® and proteoglycans from American giant squid showed strong binding to MK.
  • Example 4 Clinical trial of IncaCartilago® Study design A randomized controlled trial was conducted for 60 days to confirm improvement in bone density or joint pain (knee pain). The 50 subjects were divided into two groups, group 1 (25 subjects) and group 2 (25 subjects). Group 1 was administered a placebo capsule containing dextrin and a trace amount of Ca (50 mg) as a control. Group 2 was administered a test capsule containing Inca Cartilago® (150 mg) and a trace amount of Ca (50 mg) as a study.
  • Bone density was measured with an AOS-10 bone densitometer manufactured by Hitachi Aloka Medical Co., Ltd. This device is designed to measure bone density by irradiating the heel of the right foot with ultrasound. Bone density is calculated from ultrasonic velocity and transmission index (K. Ishitani, T. Esashi, et al. Osteoporosis Vol. 8 No. 2. 2004).
  • VAS Japanese Visual Analog Scale
  • Exclusion criteria 1) Those who have acute inflammatory arthritis, rheumatism, or gout. 2) A person who has been diagnosed with osteoporosis and / or osteoarthritis and is prescribed to take one or more of the following prescription drugs, OTC drugs or health supplements. Examples: Diphosphate, calcitonin, calcium supplement food, VD3 (vitamin D 3 ), analgesics, anti-inflammatory agents, steroids, hyaluronic acid supplement food, other chondroitin supplement food, glucosamine supplement food Collagen supplement food, MSM, Devil's Claw, etc. 3) Those who have recently undergone surgery for liver disease, kidney disease, heart disease, and diabetes or who are about to undergo similar surgery in the near future.
  • FIG. 6 shows the evaluation result of joint pain.
  • VAS visual analog scale
  • the squid cartilage extract is effective in improving joint pain.
  • Example 5 Production of IncaCartilago® (squid cartilage extract) IncaCartilago®, see Kawai et al (Kawai Y., et al., J. Biochem., 60, 317-321, 1966) ) And obtained from squid head cartilage. Detailed explanation is given below.
  • the frozen American giant squid was thawed to obtain 1 kg of head cartilage, which was ground with mincer to form minced cartilage. 3 L (liter) of 2% NaOH aqueous solution was added to the ground cartilage, and the resulting mixture was continuously stirred at 10 ° C. or lower for 48 hours. Insoluble matters were removed from the mixture by centrifugation to obtain a mixed solution.
  • the pH of the mixture was adjusted to 4.0 to 4.5 with citric acid. Insoluble matter was removed and the pH of the mixture was adjusted to 7.5 to 8.0, and then the protein in the mixture was decomposed with protease.
  • the squid cartilage extract (about 25 g) was obtained by removing the degraded proteins, salts, and minerals with an ultrafiltration device equipped with a module having an exclusion limit of 12 kDa. This squid cartilage extract was used as Inca Cartilago®.
  • the molecular weight of the squid cartilage extract was determined by gel column chromatography (TOSO 40SW). Synthetic dextran sulfate was used as the molecular weight standard.
  • CS is present in animal tissues in the form of proteoglycan (PG), in which glycosaminoglycan is covalently bound to the core protein.
  • PG proteoglycan
  • CS in squid cartilage is also present in the form of PG.
  • the molecular weight of IncaCartilago® is 18-34 kDa, and the protein reaction is observed in the high molecular weight fraction. That is, a part of the squid cartilage extract seems to be in the form of peptidoglycan formed by the peptide formation reaction of the core protein.
  • Example 6 Improvement of body fat and body muscle IncaCartilago® was administered to three persons aged 30, 36 and 40 at a dose of 300 mg to 600 mg per day for 8 weeks. The improvement in the proportion of body fat and body muscle is shown in FIG.
  • the 30-year-old man was a company employee who had been doing muscle strengthening so far.
  • the man was a weightlifting athlete when he was a student and had a body fat percentage of 8%.
  • I took IncaCartilago® and eggshell membranes in the proper amount one month later, the muscles increased by 2% and body fat decreased by 4%.
  • Example 7 Improvement of blood sugar.
  • IncaCartilago® was administered to three volunteers, 62 and 55 year old men and 63 year old women, with water at a dose of 400 mg for 8 weeks.
  • the improvement in fasting blood glucose and blood HbA1c values is shown in FIG. 8 below.
  • Fasting blood glucose concentration was clearly reduced from 140 mg / dl to 105 mg / dl. (FIG. 8 (1)).
  • the HbA1c rate also decreased from 6.6% to 6.2% (FIG. 8 (2)).
  • Example 8 Improvement of hair condition by a combination of IncaCartilago® and eggshell membranes.
  • Table 1 and FIG. 9 Powder formulations containing squid cartilage extract (10 parts), eggshell protein (1 part), and dextrin (89 parts) produced in Example 5 were used in subjects in their 40s (5 people) and subjects in their 50s (5 people). , And each of 60 subjects (5 people) was administered in an amount of 1 g per day. The results are shown in the table below.
  • IncaCartilago registered trademark
  • Example 9 Production of testosterone.
  • MC3T3-E1 was cultured in the medium for 4 days, and then physiological saline, IncaCartilago®, CS-A, CS-C, and CS-E were separately added to each medium and further cultured for 4 days. .
  • Each culture supernatant was added to the mouse Leydig cell medium.
  • OCN manufactured by Wako Junyaku Kogyou was used as a standard.
  • Testosterone produced by OCN was measured by the BIAcore method.
  • IncaCartilago® produced testosterone and showed statistical significance compared to the control (* P ⁇ 0.05), and its production rate (%) was as high as OCN itself.
  • Example 10 Production of hyaluronic acid (Figure 11) MC3T3-E1 is cultured in the medium for 4 days, and then saline, IncaCartilago®, CS-A, CS-C, and CS-E, separately, containing the fibroblasts contained in the container. It was added to the solution and further cultured for 4 days. Hyaluronic acid production was measured by the enzyme antibody method. IncaCartilago increased hyaluronic acid production at a concentration of 20 ⁇ g.
  • Example 11 Osteoblast proliferation ( Figure 12) MC3T3-E1 cells were cultured in growth medium in 48-well plates for 24 hours, after which the medium was replaced with fresh differentiation medium.
  • the differentiation medium was with or without IncaCartilago®, CS-A, CS-C, and CS-E at various concentrations. After the exchange, the cells were cultured for 4 to 24 days. The DNA content of each well was determined with Picogreen reagent. Only IncaCartilago® promoted DNA production with statistically significant differences compared to controls (P ⁇ 0.05).
  • Example 12 Promotion of calcification of osteoblasts (Fig. 13) MC3T3-E1 cells were cultured for 13 days in growth medium in 48-well plates. The medium contained or did not contain IncaCartilago®, CS-A, CS-C, and CS-E at various concentrations. Cell mineralization was assessed by absorbance at 415 nm stained with alizarin red. Only IncaCartilago® promoted calcium production, with statistically significant differences compared to controls (P ⁇ 0.05).
  • Example 13 Production of collagen ( Figure 14) MC3T3-E1 cells were cultured for 24 hours in growth medium in plates. Thereafter, the medium was replaced with a new differentiation medium.
  • the differentiation medium contained or did not contain IncaCartilago®, CS-A, CS-C, and CS-E. After the exchange, the cells were cultured for 12 days.
  • the hydroxyproline (Pro-OH) content of cells cultured with these substances for 12 days was determined. Only IncaCartilago® deposited collagen, with statistically significant differences compared to controls (P ⁇ 0.05).
  • squid cartilage extract improves joint health and joint pain, bone growth (osteoblast growth and mineralization, bone morphogenetic protein and osteocalcin production, collagen production, hyaluronic acid production, midkine and Anti-inflammation due to the binding of vitamins, improvement of metabolic syndrome (insulin secretion), improvement of sexual function (muscle strengthening, hair growth, testosterone production), improvement of skin condition (collagen production, hyaluronic acid production) Useful for treating conditions and symptoms.
  • the composition is for health foods, nutritional supplements, drugs, and health supplements.
  • Example 14 Randomized placebo controlled double-blind study using Inca Cartilago (Inca Carterago®) Test plan A randomized, placebo-controlled, double-blind study was conducted for 90 days to further confirm improvement in joint pain and bone density. 45 subjects (of which 16 were black and 29 were white) were placed in the placebo group (Placebo (control) group, 22 (of which 8 were black and 14 were white)), and the Inca Carterago group ( The IncaCartelago group was divided into 23 cases (of which 8 were black and 15 were white).
  • Inca Carterago group 200 mg test capsules containing 125 mg of Inca Carterago (registered trademark) and dextrin as a clinical trial were administered once a day.
  • Bone density was measured using the DEXA SCAN before the start of the test and between the spinal columns L1-L4 on the 90th day.
  • the joint pain was evaluated by VAS (Visual Analog Scale), WOMAC (The Western Ontario and Mcmaster Universities Arthritis Index), Lequesne Index, and the like. II. Included criteria 1) The subjects are men and women aged 40 to 80 years. 2) BMI is 18.0 kg / m 2 to 35.9 kg / m 2 . 3) Mild to moderate knee pain with a VAS score of 0 to 100 mm and 30 to 70 mm. 4) American Rheumatism Association knee osteoarthritis criteria, (1) 50 years of age or older, (2) Stiffness within 30 minutes, (3) Joint friction noise, (4) Bone tenderness, (5) Bone swelling, ( 6) There is no obvious feeling of heat, and at least three of the symptoms continue for more than 3 months. III.
  • Exclusion criteria 1) Patients with acute inflammatory arthritis, rheumatism, or gout. 2) Those who have been diagnosed with osteoporosis and / or osteoarthritis and are prescribed to take one or more of the following prescription drugs, OTC drugs or health supplements. Examples: Diphosphate, calcitonin, calcium supplement food, VD3 (vitamin D 3 ), analgesics, anti-inflammatory agents, steroids, hyaluronic acid supplement food, other chondroitin supplement food, glucosamine supplement food Collagen supplement food, MSM, Devil's Claw, etc. 3) Those who have recently undergone surgery for liver disease, kidney disease, heart disease, and diabetes or who are about to undergo similar surgery in the near future. IV. Evaluation of bone density The evaluation results of bone density are shown in FIG.
  • the Z score with age was taken as the reference 0 on the 0th day (the day when the capsule containing Inca Carterago (registered trademark) was administered (the start date of the test)).
  • the Carterago group was 0.010 and the placebo group was -0.224.
  • This difference is obtained by using the Z score obtained by comparing the bone density of the subject by comparing the average bone density of the same age with the control.
  • V. Evaluation of Joint Pain 1 The evaluation result in the VAS average fluctuation is shown in FIG.
  • the evaluation items by VAS are as shown in FIG.
  • the 0th day (the day when the capsule containing Inca Carterago (registered trademark) was administered (the start date of the test)) was set as the standard 0, and on the 30th, 60th, and 90th days. When compared, it was 9.305 (P ⁇ 0.05), 18.494 (P ⁇ 0.001), 21.458 (P ⁇ 0.001), and a statistically significant difference was recognized.
  • the 30th, 60th, and 90th days were 0.424 (P ⁇ 0.05), 7.262, 8.967 (P ⁇ 0.05), and the 30th day. A statistically significant difference was observed between eyes and 90 days.
  • FIG. 17 shows the evaluation results in the variation of WOMAC pain.
  • the evaluation items by WOMAC are as shown in FIG.
  • the 0th day (the day when the capsule containing Inca Carterago (registered trademark) was administered (the start date of the test)) was set as the standard 0, and on the 30th, 60th, and 90th days. When compared, it was 7.595 (P ⁇ 0.05), 10.445 (P ⁇ 0.05), 16.076 (p ⁇ 0.001), and a statistically significant difference was recognized.
  • the fluctuation values on the 30th, 60th and 90th days were 2.624, 3.582 and 3.582, and no statistically significant difference was observed.
  • the 0th day (before administration) is set as the reference 0, and when compared with the 30th, 60th, and 90th days, 0.205, 0.325 (P ⁇ 0.001), It was 0.333 (P ⁇ 0.05), and a statistically significant difference was recognized between the 60th day and the 90th day.
  • the fluctuation values on the 30th, 60th, and 90th days were 0.023, 0.0294, and 0.0294, and no significant difference was observed.
  • the squid cartilage extract is effective in improving bone density and joint pain.
  • the unique chondroitin sulfate compositions of the present invention generally contain at least 60% by weight of the total chondroitin sulfates, greater than 40% by weight of chondroitin sulfate E (CS-E), and less than 20% by weight of chondroitin sulfate A and C. Relates to materials comprising (CS-A and CS-C).
  • the composition is derived from an American giant squid extract such as IncaCartilago®.
  • peptidoglycan E or chondroitin sulfate E in an amount greater than 40% by weight of total peptidoglycan or total chondroitin sulfate, and peptidoglycan A and C or chondroitin sulfate A and C (CS -A and CS-C) comprising squid cartilage extract comprising less than 20% by weight of all peptidoglycans, ie all chondroitin sulfates.
  • IncaCartilago registered trademark
  • IncaCartilago is an example of squid cartilage extract derived from American giant squid.
  • Excipients such as dextrin in an amount of 70-90% by weight of the composition, and (a) a molecular weight of 18 kDa to 34 kDa, peptidoglycan E, ie chondroitin sulfate E (CS-E), all peptidoglycans, ie all chondroitin sulfates Squid cartilage extract comprising greater than 40% by weight of peptidoglycan A and C, ie chondroitin sulfate A and C (CS-A and CS-C), in less than 20% by weight of total peptidoglycan, ie total chondroitin sulfate And (c) one or more components that improve arthralgia (osteoarthritis, arthralgia, back pain), such as other chondroitin, glucosamine, hyaluronic acid, collagen, yeast, devil's claw, and Hops, etc.
  • arthralgia oste
  • composition comprising, for example, at least one component selected from the group consisting of vanadium, chromium, gymnema, garcinia extract, banaba extract, corosolic acid, fossil fossil and the like.
  • Excipients such as dextrin in an amount of 70-90% by weight of the composition and (a) IncaCartilago® or a molecular weight of 18 kDa-34 kDa and peptidoglycan E, ie chondroitin sulfate E (CS-E), In amounts greater than 40% by weight of total chondroitin sulfate and peptidoglycan A and C, ie chondroitin sulfate A and C (CS-A and CS-C), in less than 20% by weight of total peptidoglycan, ie total chondroitin sulfate A squid cartilage extract containing, (b) a component consisting of eggshell membrane protein, and the following: (c) one or more components that improve osteoarthritis, such as other chondroitin, glucosamine, hyaluronic acid, Collagen, yeast, devil's claw, o And (d) one or more components that improve rough and /
  • At least one component selected from the group consisting of the above (c) to (f) is 0.01 to 10% by weight as a total component Item 6.
  • a molecular weight of 18 kDa to 34 kDa and peptidoglycan E or chondroitin sulfate E (CS- E) in an amount of more than 40% by weight of the total peptidoglycan or total chondroitin sulfate, and peptidoglycan A and C or chondroitin sulfate A and C (CS-A and CS-C) in total peptidoglycan or total chondroitin sulfate.
  • chondroitin sulfate composition containing squid cartilage extract containing less than 20% by weight and (b) a component consisting of eggshell membrane protein, Includes instructions for delivery to reduce joint pain and promote bone growth Joint pain (osteoarthritis, joint pain, low back pain) packaged dietary supplement for promoting and / or bone growth to reduce.
  • IncaCartilago registered trademark
  • squid cartilage extract derived from American giant squid.
  • excipients such as dextrin (s) in an amount of 70-90% by weight of the composition (A) a molecular weight of 18 kDa to 34 kDa, peptidoglycan E or chondroitin sulfate E (CS-E) in an amount greater than 40% by weight of total peptidoglycan or total chondroitin sulfate, and peptidoglycan A and C or chondroitin sulfate Squid cartilage extract containing A and C (CS-A and CS-C) in less than 20% by weight of all peptidoglycans, ie all chondroitin sulfates, and the following: (c) one or more to improve osteoarthritis Components such as other chondroitin, glucosamine, hyaluronic acid, collagen, yeast
  • Administering an effective amount of a chondroitin sulfate composition comprising at least one component selected from the group, and delivering an effective amount of the chondroitin sulfate composition to an individual to reduce joint pain and promote bone growth Including joint instructions (arthritis, osteoarthritis, joint pain, low back pain) Packaged dietary supplement for promoting decreasing and / or bone growth and.
  • IncaCartilago registered trademark is an example of squid cartilage extract derived from American giant squid.
  • excipients such as dextrin (s) in an amount of 70-90% by weight of the composition (A) a molecular weight of 18 kDa to 34 kDa, peptidoglycan E or chondroitin sulfate E (CS-E) in an amount greater than 40% by weight of total peptidoglycan or total chondroitin sulfate, and peptidoglycan A and C or chondroitin sulfate Squid cartilage extract containing A and C (CS-A and CS-C) in less than 20% by weight of all peptidoglycans, ie all chondroitin sulfates, (b) a component consisting of eggshell membrane protein, and the following: c) one or more components that improve osteoarthritis, such as other chondroitin, glucos
  • components having sex hormone-like activity such as pomegranate, soy protein and isoflavone
  • components having insulin secretion activity such as vanadium, chromium, gymnema, garcinia extract, banaba extract
  • Delivering an effective amount of a chondroitin sulfate composition to an individual comprising administering an effective amount of a chondroitin sulfate composition comprising at least one component selected from the group consisting of: corosolic acid, and fossil fossil Instructions for reducing joint pain and promoting bone growth Including, joint pain (osteoarthritis, joint pain, low back pain) packaged dietary supplement for promoting and / or bone growth to reduce.
  • IncaCartilago registered trademark
  • At least one component selected from the group consisting of the above (c) to (f) is 0.01 to 10% by weight as a total component 12.
  • a method for improving osteoblast proliferation by BMP and / or OCN comprising a step of administering an effective amount of a chondroitin sulfate composition containing squid cartilage extract.
  • the molecular weight is 18 kDa to 34 kDa and peptidoglycan E or chondroitin sulfate E (CS-E) is converted to all peptidoglycans or all chondroitin sulfates so that osteoblast production is improved.
  • CS-E chondroitin sulfate E
  • Squid cartilage extract containing in excess of 40% by weight and peptidoglycan A and C, ie chondroitin sulfate A and C (CS-A and CS-C), in less than 20% by weight of all peptidoglycans, ie all chondroitin sulfates, A packaged dietary supplement for improving osteoblast proliferation by BMP and / or OCN comprising administering an effective amount of a chondroitin sulfate composition.
  • IncaCartilago registered trademark
  • the molecular weight is 18 kDa to 34 kDa and peptidoglycan E or chondroitin so that individuals who need to increase the production of BMP (bone morphogenetic protein) and OCN (osteocalcin) have increased bone morphogenetic protein and osteocalcin production Sulfate E (CS-E) in an amount of more than 40% by weight of all peptidoglycans, ie all chondroitin sulfates, and peptidoglycan A and C, ie chondroitin sulfate A and C (CS-A and CS-C), all peptidoglycans,
  • a method of increasing production of BMP (bone morphogenetic protein) and OCN (osteocalcin) comprising administering an effective amount of chondroitin sulfate composition comprising squid cartilage extract comprising less than 20% by weight of total chondroitin sulfates.
  • IncaCartilago registered trademark
  • peptidoglycan E or chondroitin sulfate E in an amount greater than 40% by weight of total peptidoglycan or total chondroitin sulfate
  • peptidoglycan A and C or chondroitin sulfate A and C are delivered in an effective amount of chondroitin sulfate composition comprising squid cartilage extract containing less than 20% by weight of all peptidoglycans, ie, all chondroitin sulfates, and an effective amount of chondroitin sulfate composition to an individual Packaged dietary supplements for increasing osteocalcin production, including instructions for increasing osteocalcin production.
  • peptidoglycan E or chondroitin sulfate E in an amount greater than 40% by weight of the total peptidoglycan or total chondroitin sulfate, and peptidoglycan A and C or chondroitin sulfate A and C (CS -A and CS-C) production of bone morphogenetic protein (BMP) comprising an effective amount of chondroitin sulfate composition comprising squid cartilage extract containing less than 20% by weight of all peptidoglycans, ie all chondroitin sulfates (FIG. 2 ), Osteocalcin production (FIG.
  • BMP bone morphogenetic protein
  • An extract (b) a component composed of eggshell membrane protein, and the following: (c) one or more components that improve osteoarthritis, such as other chondroitin, glucosamine, hyaluronic acid, collagen, yeast Fungi, Devil's Claw, Hops, etc.
  • Rough skin One or more components that improve dry and / or dry skin, such as hyaluronic acid, collagen, elastin, and placenta, (e) components having sex hormone-like activity, such as pomegranate, soy protein, and isoflavones And (f) at least one component selected from the group consisting of components having insulin secretion activity, such as vanadium, chromium, gymnema, garcinia extract, banaba extract, corosolic acid, and fossil fossil Calcification, collagen production, hyaluronic acid, including instructions for delivering an effective amount of chondroitin sulfate composition to the individual to improve osteoblast production by delivering an effective amount of chondroitin sulfate composition to the individual Production, binding to midkine, anti-inflammatory, testosterone production, or Valid packaged nutritional supplement to Nshurin secretion.
  • components having insulin secretion activity such as vanadium, chromium, gymnema, garcinia extract, banaba extract, coros
  • At least one component selected from the group consisting of the above (c) to (f) is 0.01 to 10% by weight as a total component Item 22.
  • the packaged dietary supplement according to item 21, comprising in an amount or in an amount of 0.01 to 10% by weight as a proportion of each component.
  • the composition of the present invention improves joint health and joint pain, bone growth (osteoblast growth and mineralization, bone morphogenetic protein and osteocalcin production, collagen and hyaluronic acid production, midkine binding Anti-inflammatory), improved metabolic syndrome (insulin secretion), improved sexual function (muscle strengthening, hair growth, testosterone production), improved skin condition (collagen and hyaluronic acid production), and health care (hair care etc.) Useful for treating various disease states and symptoms. Therefore, the composition can be used in various technical fields such as pharmaceutical and medical fields, health food fields, nutritional supplement fields, health supplement fields, and health care (hair care, etc.) fields. Be expected.

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Abstract

　本発明の目的は、医薬および医療の分野、健康食品分野、機能性食品の分野、栄養補助食品の分野、ならびにヘルスケア（ヘアケアなど）の分野など、様々な技術分野で利用される、イカ軟骨抽出物を含む独自のコンドロイチン硫酸組成物を提供することである。本目的は、例えば、コンドロイチン硫酸類を合計で少なくとも６０重量％の量で含有し、コンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）を全コンドロイチン硫酸類の４０重量％超の量で、コンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を全コンドロイチン硫酸類の２０重量％未満の量で含む組成物により達成することができる。　本発明の組成物は、関節の健常性と関節痛の改善（コラーゲンおよびヒアルロン酸の産生、ミッドカインとの結合による抗炎症）、骨成長（骨芽細胞の成長および石灰化、骨形成タンパク質およびオステオカルシンの産生）、メタボリックシンドロームの改善（インシュリン分泌）、性機能の改善（筋肉強化、発毛、テストステロン産生）、皮膚状態の改善（コラーゲンおよびヒアルロン酸の産生）、およびヘルスケア（ヘアケアなど）のおかげで、様々な疾患の状態や症状を治療するのに有益である。

Description

過硫酸化コンドロイチン組成物
 本発明は、概して、イカ軟骨抽出物を成分とし、コンドロイチン硫酸類を合計で少なくとも組成物の６０重量％の量で含有し、コンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）を該全コンドロイチン硫酸類の４０重量％超の量で、ならびにコンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を該全コンドロイチン硫酸類の２０重量％未満の量で含むコンドロイチン硫酸組成物に関するものである。本発明は、本組成物の使用法にも関する。イカ軟骨抽出物の分子量は、例えば、１８ｋＤａ～３４ｋＤａである。
　詳細には、イカ軟骨抽出物とは、例えば、ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（インカ・カルテラーゴ）（登録商標）などのアメリカオオアカイカ抽出物由来のものである。上記の比率は、電気泳動による定量で求めることができる。１つの実施形態において、電気泳動は、酢酸セルロース膜電気泳動であり、電解液としての０．２５Ｍの酢酸カルシウム、１５ｍＡ／ｃｍ２、および２．５時間という条件下で行われるものである。１つの態様において、コンドロイチン硫酸類は、アメリカオオアカイカに由来する。本組成物は、薬剤、健康食品、健康補助食品、および栄養補助食品として、ならびにヘアケアに有用である。
 コンドロイチン硫酸は、グリコサミノグリカン、すなわち「ＧＡＧ」（ムコ多糖類）の１種であり、代謝により巨大化してプロテオグリカン（ＧＡＧから形成される巨大分子）を構成する分子になることで機能する。プロテオグリカンは、結合組織（軟骨、腱、皮膚、血管壁、強膜、角膜、および椎間板など）に最も豊富に存在する。
　コンドロイチン硫酸は、結合組織関連の不快症状を予防するための、また最近ではこれを治療するための健康補助食品として用いられてきた。コンドロイチンは、変形性関節炎または変性関節疾患の代替療法として利用できる可能性があることが示唆されており、さらに現在では健康な結合組織の形成を助けると考えられている。
　コンドロイチン硫酸は、Ｄ‐グルクロン酸と硫酸化Ｎ‐アセチルガラクトサミンの二糖反復構造からなり、構成要素である糖のヒドロキシル基の硫酸化に依存して様々な異性体が存在する。
　硫酸化可能な部位は、グルクロン酸の２‐位および３‐位にあるヒドロキシル基、イズロン酸の２‐位にあるヒドロキシル基、ならびにＮ‐アセチルガラクトサミンの４‐位および６‐位にあるヒドロキシル基である。コンドロイチン硫酸鎖は、分子量が１０４～１０５の直鎖多糖であり、一般にコアタンパク質と共有結合したプロテオグリカンとして存在する。
　最近の文献では、４種の主要なコンドロイチン硫酸（ＣＳ）にまず関心が集まっている。その４種とは、コンドロイチン硫酸Ａ、Ｃ、Ｄ、およびＥである。コンドロイチン硫酸Ａ（ＣＳ‐Ａ）は、Ｎ‐アセチルガラクトサミン糖の４位炭素に硫酸化部位がある。コンドロイチン硫酸Ｃ（ＣＳ‐Ｃ）は、Ｎ‐アセチルガラクトサミン糖の６位炭素に硫酸化部位があり、コンドロイチンＤ（ＣＳ‐Ｄ）は、グルクロン酸の２位炭素およびＮ‐アセチルガラクトサミン糖の６位炭素に硫酸化部位がある。コンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）は、Ｎ‐アセチルガラクトサミン糖の４位炭素および６位炭素に硫酸化部位がある。
　ＣＳ類を単離する方法は多数知られているが、しかしながら、それらの方法は、例えばＣＳ‐Ａなどの一種類の硫酸化物のみを提供する傾向があり、ＣＳ‐Ａ、ＣＳ‐Ｃ、またはＣＳ‐Ｄにばかり注目が集まっている。ＣＳ‐Ｅの単離および使用にはそれほど関心が寄せられてこなかった。
　したがって、上記のこれまでの欠点の１つ以上を克服する組成物および方法に対する需要が存在する。
 本発明は、まったく予期しない形で、コンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）が豊富な独自の組成物、使用法、およびコンドロイチン硫酸類の調製法を提供する。組成物にＣＳ‐Ｅが存在すること（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃの典型的なコンドロイチン硫酸含有組成物と比較して）は、関節の健常性と関節痛の改善（コラーゲンおよびヒアルロン酸の産生、ミッドカインとの結合による抗炎症）、骨成長（骨芽細胞の成長および石灰化、骨形成タンパク質およびオステオカルシンの産生）、メタボリックシンドロームの改善（インシュリン分泌）、性機能の改善（筋肉強化、発毛、テストステロン産生）、皮膚状態の改善（コラーゲンおよびヒアルロン酸の産生）のおかげで、様々な疾患の状態や症状を治療するのに有益であることが見いだされた。１つの実施形態において、本組成物は、健康食品、栄養補助食品、薬剤、および健康補助食品、ならびにヘアケア用のものである。
　本発明はさらに、ヘアケア用組成物および健康食品用組成物を提供し、これらの組成物は、（ａ）ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）などのイカ軟骨抽出物、および（ｂ）卵殻膜タンパク質からなる構成成分を含む。１つの態様において、（ａ）と（ｂ）の重量パーセント比は、（ａ）が９０％以上であるのに対して（ｂ）が０．５～１０％であり、（ａ）の割合と（ｂ）の割合の合計は１００％である。１つの実施形態において、本組成物は、ヘアケア、健康食品、栄養補助食品、薬剤、および健康補助食品用のものである。
　本発明はさらに、健康食品用組成物を提供し、この組成物は賦形剤として７０～９０重量％のデキストリン（類）、および
（ａ）ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）などのイカ軟骨抽出物、ならびに以下からなる群より選択される少なくとも１種の成分を含む：
（ｃ）変形性関節症を改善する１種以上の構成成分、例えば、その他のコンドロイチン、グルコサミン、ヒアルロン酸、コラーゲン、酵母菌、デビルズクロー、およびホップなど、（ｄ）肌荒れおよび／または乾燥肌、発毛を改善する１種以上の構成成分、例えば、ヒアルロン酸、コラーゲン、エラスチン、およびプラセンタなど、（ｅ）性ホルモン様活性を有する構成成分、例えば、ザクロ、大豆タンパク質およびイソフラボン、亜鉛など、ならびに（ｆ）インシュリン分泌作用を有する構成成分、例えば、バナジウム、クロム、ギムネマ、ガルシニア抽出物、バナバ抽出物、コロソリン酸、および化石化珊瑚など。１つの実施形態において、本組成物は、健康食品および栄養補助食品用のものである。
　本発明はさらに、健康食品用組成物を提供し、この組成物は賦形剤として７０～９０重量％のデキストリン（類）、および（ａ）ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）、（ｂ）卵殻膜タンパク質からなる構成成分、ならびに以下からなる群より選択される少なくとも１種の成分を含む：
（ｃ）変形性関節症を改善する１種以上の構成成分、例えば、その他のコンドロイチン、グルコサミン、ヒアルロン酸、コラーゲン、酵母菌、デビルズクロー、およびホップなど、（ｄ）肌荒れおよび／または乾燥肌、抜け毛を改善する１種以上の構成成分、例えば、ヒアルロン酸、コラーゲン、エラスチン、およびプラセンタなど、（ｅ）性ホルモン様活性を有する構成成分、例えば、ザクロ、大豆タンパク質およびイソフラボン、亜鉛など、ならびに（ｆ）インシュリン分泌活性を有する構成成分、例えば、バナジウム、クロム、ギムネマ、ガルシニア抽出物、バナバ抽出物、コロソリン酸、および化石化珊瑚など。１つの態様において、本組成物は、（ａ）と（ｂ）の合計量に対して、上記（ｃ）～（ｆ）からなる群より選択される少なくとも１種の成分を、成分合計での割合として０．０１～１０重量％の量で、または各成分での割合として０．０１～１０重量％の量で含む。１つの実施形態において、本組成物は、健康食品、健康補助食品、および栄養補助食品用のものである。
　複数の実施態様が開示されるものの、以下の詳細な説明から本発明のさらに他の実施形態が当業者に明らかとなるだろう。これにより、本発明は様々な明白な態様において修飾可能であり、それらはすべて本発明の精神および範囲から逸脱しない。したがって、詳細な説明は、本質的に例示とみなされるべきであり制限とみなされるべきではない。
　本発明の組成物は、様々な疾患の状態や症状を治療するのに有益である。例えば、本発明の組成物は、関節の健常性と関節痛の改善（コラーゲンおよびヒアルロン酸の産生、ミッドカインとの結合による抗炎症）、骨成長（骨芽細胞の成長および石灰化、骨形成タンパク質およびオステオカルシンの産生）、メタボリックシンドロームの改善（インシュリン分泌）、性機能の改善（筋肉強化、発毛、テストステロン産生）、皮膚状態の改善（コラーゲンおよびヒアルロン酸の産生）、およびヘルスケア（ヘアケアなど）等に有用である。
コンドロイチン硫酸Ａ、Ｃ、およびＥの構造式を示す。 実施例１における骨形成タンパク質（ＢＭＰ）の産生を示す。 実施例２におけるオステオカルシンの産生を示す。 実施例３におけるミッドカインとの強固な結合を示す。 実施例４における骨密度の改善を示す。 実施例４における関節痛（腰痛、膝の変形性関節症）の改善を示す。 実施例６における体脂肪および体筋の改善を示す。 実施例７における血糖の改善を示す。 実施例８における本発明の組み合わせ物による髪の状態の改善を示す。 実施例９におけるテストステロンの産生を示す。 実施例１０におけるヒアルロン酸の産生を示す。 実施例１１における骨芽細胞の増殖を示す。 実施例１２における骨芽細胞の石灰化の促進を示す。 実施例１３におけるコラーゲンの産生を示す。 実施例１４における骨密度の評価結果を示す。図中、Placebo はプラセボを投与した群、IncaCartilago はインカ・カルテラーゴ（登録商標）を含むカプセル剤を投与した群を意味する。また、Ｖ１は、visit 1、即ち、０日目（インカ・カルテラーゴ（登録商標）を含むカプセル剤を投与した日（試験開始日））を意味し、Ｖ４は、visit 4、即ち、９０日目（試験開始日から９０日目）を意味し、グラフの縦軸のZ Score Increase (Bone Density) は、Ｚスコア増加（骨密度）を意味する。 実施例１４におけるＶＡＳ平均変動における評価結果を示す。図中、Placebo はプラセボを投与した群、IncaCartilago はインカ・カルテラーゴ（登録商標）を含むカプセル剤を投与した群を意味する。また、Ｖ１は、visit 1、即ち、０日目（インカ・カルテラーゴ（登録商標）を含むカプセル剤を投与した日（試験開始日））、Ｖ２は、visit 2、即ち、３０日目（試験開始日から３０日目）、Ｖ３は、visit 3、即ち、６０日目（試験開始日から６０日目）を意味し、Ｖ４は、visit 4、即ち、９０日目（試験開始日から９０日目）をそれぞれ意味する。グラフの縦軸の Change of VAS (Average) は、ＶＡＳの変動（平均）を意味する。 実施例１４におけるＷＯＭＡＣ痛みの変動における評価結果を示す。図中、Placebo はプラセボを投与した群、IncaCartilago はインカ・カルテラーゴ（登録商標）を含むカプセル剤を投与した群を意味する。また、Ｖ１は、visit 1、即ち、０日目（インカ・カルテラーゴ（登録商標）を含むカプセル剤を投与した日（試験開始日））、Ｖ２は、visit 2、即ち、３０日目（試験開始日から３０日目）、Ｖ３は、visit 3、即ち、６０日目（試験開始日から６０日目）を意味し、Ｖ４は、visit 4、即ち、９０日目（試験開始日から９０日目）をそれぞれ意味する。グラフの縦軸の Change of WOMAC (Pain) は、ＷＯＭＡＣの変動（痛み）を意味する。 実施例１４におけるＬｅｑｕｅｓｎｅ Ｉｎｄｅｘ「標準的階段の登り」における変動の評価結果を示す。図中、Placebo はプラセボを投与した群、IncaCartilago はインカ・カルテラーゴ（登録商標）を含むカプセル剤を投与した群を意味する。また、Ｖ１は、visit 1、即ち、０日目（インカ・カルテラーゴ（登録商標）を含むカプセル剤を投与した日（試験開始日））、Ｖ２は、visit 2、即ち、３０日目（試験開始日から３０日目）、Ｖ３は、visit 3、即ち、６０日目（試験開始日から６０日目）を意味し、Ｖ４は、visit 4、即ち、９０日目（試験開始日から９０日目）をそれぞれ意味する。グラフの縦軸の Change of Lequesne Index (SFS) は、Lequesne Index の「標準的階段の登り（SFS: Standard Flight of Stairs）」における変動を意味する。 ＶＡＳによる評価項目を示すリストである。 ＷＯＭＡＣによる評価項目を示すリストである。 Ｌｅｑｕｅｓｎｅ Ｉｎｄｅｘによる評価項目を示すリストである。
 「コンドロイチン硫酸Ａ」または「ＣＳ‐Ａ」という用語は、図１に提供するＣＳ‐Ａ構造の繰り返し単位１個以上からなる分子を示す。また、「コンドロイチン硫酸Ｃ」または「ＣＳ‐Ｃ」という用語は、図１に提供するＣＳ‐Ｃ構造の繰り返し単位１個以上からなる分子を示す。同じく、「コンドロイチン硫酸Ｅ」または「ＣＳ‐Ｅ」という用語は、図１に提供するＣＳ‐Ｅ構造の繰り返し単位１個以上からなる分子を示す。
　「有効量」という用語は、以下に記載するとおりの疾患治療に限らないがこれらをはじめとする意図する用途を実現するのに十分な、本明細書中記載される化合物の量を示す。治療上有効量は、意図する用途（インビトロまたはインビボで）、または治療される被検体および疾患の状態（例えば、被検体の体重および年齢、疾患の状態の重篤度、投与様式など）に依存して変わり得るものであり、当業者により容易に決定できるものである。この用語は、標的細胞で特定の反応（例えば軸索成長）を誘導する用量にも適用される。特定の用量は、選択した特定化合物、従うべき投与処方、他の化合物と組み合わせて投与されるかどうか、投与のタイミング、投与される組織、または化合物が運ばれる身体の送達系に依存して変わる。
　「被験動物」は、哺乳類などの動物、例えば、ヒトを示す。本明細書中記載される方法は、ヒトの治療にも家畜に対する用途にも有用となり得る。実施形態によっては、患者は哺乳類のこともあるし、ヒトの場合もある。
　ほとんどの先進国で見られる高齢化社会において、変形性関節症（例えば、関節痛、腰痛）および骨折の治療と予防は、増え続ける医療費を減らすための重要な鍵である。高齢者が自分自身を支えるためには、動けることを基本的に必要とする。そうすれば高齢者は他人と会話でき、および／または社会生活を楽しめる。
　コンドロイチン類（例えば、コンドロイチン硫酸類）を含むイカ軟骨抽出物は、本明細書中提供される情報によれば、ブタ、ウシ、ニワトリ、サメ、およびサケに由来するコンドロイチン類とは異なる独自の生理作用と強力な生物活性を有することが、今回見いだされたのである。
　イカ由来コンドロイチン類（例えば、アメリカオオアカイカ由来コンドロイチン類）を精力的に研究および開発していくなかで、本発明者らは、コンドロイチンＡ、Ｃ、およびＥ（ＣＳ‐Ａ、ＣＳ‐Ｃ、およびＣＳ‐Ｅ）の間での差別化について、硫酸化が起こる部位を除いては、詳細な研究がなされていないことに気がついた。アメリカオオアカイカ由来コンドロイチン硫酸（ＣＳ‐Ｅ）は、グルクロン酸‐アセチルガラクトサミンの４位および６位が硫酸化される。一方、ウシ、ブタ、ニワトリ（ＣＳ‐Ａ）、またはサメ、サケ（ＣＳ‐Ｃ）由来のものは、１カ所しか硫酸化されていない（例えば、図１を参照）。
　本発明は、二次元電気泳動の革新的な使い方を利用してＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）（本明細書中記載されるコンドロイチン硫酸組成物）中のコンドロイチンの種類の同定と定量の両方を一貫して行うものであり、まさに画期的なものである。ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）は、分析で示されるとおり、過硫酸化されたCS-Eの全容が明らかになっている唯一の原料である。ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）は、市場で最も有力であり、コンドロイチン硫酸が合計で少なくとも６０重量％含まれており、コンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）を４０重量％超、ならびにコンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を２０重量％未満の割合で含む。そのような高含有率は、消費者に、それぞれの種類のコンドロイチン硫酸が持つ最高の保護効果をもたらし、関節の健常性と関節痛の改善（コラーゲンおよびヒアルロン酸の産生、ミッドカインとの結合による抗炎症）、骨成長（骨芽細胞の成長および石灰化、骨形成タンパク質およびオステオカルシンの産生）、メタボリックシンドロームの改善（インシュリン分泌）、性機能の改善（筋肉強化、発毛、テストステロン産生）、皮膚状態の改善（コラーゲンおよびヒアルロン酸の産生）を効果的に支持する。
　以下の非制限的実施例を参照して本発明をさらに説明する。記載される実施形態は、本発明の範囲から逸脱することなく、多くの変更がなされ得ることが当業者には明らかであるだろう。したがって、本発明の範囲は、本明細書に記載される実施形態に制限されるのではなく、特許請求の範囲の文言により記載される実施形態およびそれらの等価物によってのみ制限されるべきである。他に記載がない限り、全ての百分率は重量百分率である。ＭＣ３Ｔ３‐Ｅ１はマウス骨芽細胞株である。
　実施例１：ＢＭＰ（骨形成タンパク質）の産生（図２）
　ＭＣ３Ｔ３‐Ｅ１を培地中で４日間培養し、その後、ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）、ＣＳ‐Ａ、ＣＳ‐Ｃ、ＣＳ‐Ｅ、およびＮ‐ＧｌｃＡｃを別々に各培地に添加してさらに４日間培養した。培地中のＢＭＰの量をＢＩＡｃｏｒｅ法で測定した。ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）は、ＢＭＰを産生させ、しかも対照と比較して統計的有意差を示した（＊Ｐ＜０．０５）。
　実施例２：オステオカルシン（ＯＣＮ）の産生（図３）
　ＭＣ３Ｔ３‐Ｅ１を培地中で４日間培養し、その後、ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）、ＣＳ‐Ａ、ＣＳ‐Ｃ、ＣＳ‐Ｅ、およびＮ‐ＧｌｃＡｃを別々に各培地に添加してさらに１２日間培養した。培地中のＯＣＮの量をＢＩＡｃｏｒｅ法で測定した。ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）は、ＯＣＮを産生させ、しかも対照と比較して統計的有意差を示した（＊Ｐ＜０．０５）。
　実施例３：ミッドカイン（ＭＫ）との結合（図４）
　ＢＩＡｃｏｒｅの説明書に従ってＭＫをセンサーチップに固定し、その後、ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）、ＣＳ‐Ａ、ＣＳ‐Ｃ、ＣＳ‐Ｅ、ならびにアメリカオオアカイカおよびサケ由来のプロテオグリカンを、ＢＩＡｃｏｒｅの説明書に従ってセンサーチップ上のＭＫと反応させた。ＭＫの反応はＲＵ（反応単位）で示される。ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）およびアメリカオオアカイカ由来のプロテオグリカンは、ＭＫとの強固な結合を示した。
　実施例４：ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）の臨床試験
　Ｉ．試験計画
　無作為化比較試験を６０日間行い、骨密度または関節痛（膝の痛み）の改善を確かめた。５０人の被験者を２つのグループ、グループ１（２５人の被験者）とグループ２（２５人の被験者）に分けた。
グループ１には、対照物として、デキストリンおよび微量のＣａ（５０ｍｇ）を含む偽薬カプセル剤を投与した。
グループ２には、治験物として、ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）（１５０ｍｇ）および微量のＣａ（５０ｍｇ）を含む試験カプセル剤を投与した。
　骨密度は、日立アロカメディカル株式会社製のＡＯＳ‐１０骨密度測定器で測定した。この装置は、右足のかかとに超音波を照射することで骨密度を測定するように設計されている。骨密度は、超音波速度と透過指数から計算される（K. Ishitani, T. Esashi, et al. Osteoporosis Vol. 8 No. 2. 2004）。
　関節痛の評価は、ＶＡＳ（日本視覚的アナログ尺度）（5th Edition Ministry of Health Labor and Welfare (1995) (USA) US National Academy of Science）を用いて行った。
　ＩＩ．算入基準
　１）対象は、３０歳から８０歳の男性および女性
　２）骨密度に懸念（不安）のある者および／または９０日以上膝関節にある程度の痛みを感じていて医師により変形性関節症と診断された者。
　ＩＩＩ．除外基準
　１）急性炎症性関節炎、リウマチ、または痛風を患っている者。２）骨粗鬆症および／または変形性関節症であると診断されていて以下の処方薬またはＯＴＣ薬または健康補助食品の１種以上を摂取するよう処方されている者。例：二リン酸塩（Diphosphate）、カルシトニン、カルシウム補充用食品、ＶＤ３（ビタミンＤ３）、鎮痛剤、抗炎症剤、ステロイド、ヒアルロン酸補充用食品、その他のコンドロイチン補充用食品、グルコサミン補充用食品、コラーゲン補充用食品、ＭＳＭ、デビルズクローなど。３）肝疾患、腎疾患、心疾患、および糖尿病の手術を最近受けた者または近い将来同様な手術を受けようしている者。
　骨密度の結果を図５に示す。
　０日目、３０日目、６０日目の時点での骨密度は、グループ２が２．６７、２．７７、２．８０、グループ１が２．６４、２．５８、２．５８であった。グループ２では、３０日目（ｐ＝０．０２２９）および６０日目（ｐ＝０．００３１）で有意差が認められたが、グループ１では有意差は認められなかった。
　また、グループ１とグループ２の間でも、３０日目（ｐ＝０．０１１６）および６０日目（ｐ＝０．００１９）で有意差が認められた。
　ＩＶ．関節痛の評価
　関節痛の評価結果を図６に示す。
　グループ２で０日目と１５日目を比較すると、視覚的アナログ尺度（ＶＡＳ）の変動は、－１．０４（ｐ＝０．００２７）であり、３０日目では－１．６７（ｐ＜０．０００１）であり、６０日目では－３．１１（ｐ＜０．０００１）であった。これら３つの時点（１５日目、３０日目、および６０日目）において、ＶＡＳには有意な変化があった。
　一方、グループ１で０日目と１５日目を比較すると、変動は－０．８４（ｐ＝０．０２２５）であり、３０日目では－０．８８（ｐ＝０．０１７１）であり、６０日目では－１．０５（ｐ＝０．０４８）であった。これら３つの時点（１５日目、３０日目、および６０日目）において、ＶＡＳには有意な変化があった。
　グループ２とグループ１との比較では、１５日目でのＶＡＳの変動は－０．２０であり、統計上の有意差はなかった（ｐ＝０．６８３１）が、３０日目では変動が－０．８３で統計上有意差があり（ｐ＝０．０４７３）、４５日目では、ＶＡＳの変動は－１．４９（Ｐ＜０．００３４）、６０日目ではＶＡＳの変動は－２．０６（ｐ＜０．０００１）であった。
　結果として、イカ軟骨抽出物は、関節痛を改善するのに有効であることが示された。
　これらを全て考慮すると、本明細書中に提供される臨床結果は、イカ軟骨抽出物で行われた基礎実験の結果を実証している、すなわち、１）骨および軟骨向上効果、ならびに２）強力な抗炎症効果が、臨床試験に反映された。
　実施例５：ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）（イカ軟骨抽出物質）の製造
　ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）は、Kawai et al（Kawai Y., et al., J. Biochem., 60, 317‐321, 1966を参照）の方法に従って、イカの頭部軟骨から得た。詳細な説明を以下に示す。冷凍アメリカオオアカイカを解凍して１ｋｇの頭部軟骨を調達し、これをミンサーで挽いてミンチ状の軟骨にした。挽き軟骨に２％ＮａＯＨ水溶液３Ｌ（リットル）を加え、得られる混合物を１０℃以下で４８時間撹拌し続けた。混合物から不溶物を遠心分離で除去し、混合液とした。クエン酸で混合液のｐＨを４．０～４．５に調整した。不溶物を除去して、混合液のｐＨを７．５～８．０に調整してから、混合液中のタンパク質をプロテアーゼで分解した。分解されたタンパク質、塩類、および無機物を、排除限界が１２ｋＤａであるモジュールを備えた限外濾過装置で除去することにより、イカ軟骨抽出物（約２５ｇ）を得た。このイカ軟骨抽出物をＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）として使用した。イカ軟骨抽出物の分子量は、ゲルカラムクロマトグラフィー（ＴＯＳＯ　４０ＳＷ）で求めた。合成硫酸デキストランを分子量標準に用いた。
　ＣＳは、動物の組織にプロテオグリカン（ＰＧ）の形で存在し、この形においてグリコサミノグリカンはコアタンパク質と共有結合している。イカ軟骨中のＣＳも、ＰＧの形で存在する。ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）の分子量は、１８～３４ｋＤａであり、タンパク質の反応は、高分子量領域の画分で認められる。つまり、イカ軟骨抽出物の一部は、コアタンパク質のペプチド形成反応により形成されたペプチドグリカンの形をしていると思われる。
　実施例６：体脂肪および体筋の改善
　ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）を、３０歳、３６歳、および４０歳の３人の人物に、１日あたり３００ｍｇ～６００ｍｇの用量で８週間投与した。体脂肪および体筋の割合の改善を図７に示す。
　ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）と卵殻膜を組み合わせた物でも同様な結果が得られた。
　３０歳の男性は、会社員で、これまで筋肉増強を行っていた。その男性は、学生時代、ウェイトリフティングの選手で、体脂肪率を８％にしていた。卒業してから長い間、増強した筋肉を維持するために、アミノ酸、クレアチン、ビタミン、およびミネラルを摂取していたが、筋肉が目立って増加することはなく、むしろ、最近は筋肉が減少して体脂肪が増加してきていた。この男性が、ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）と卵殻膜を適切な量で摂取し続けたところ、１ヶ月後、筋肉は２％増加し、体脂肪は４％減少した。
　実施例７：血糖の改善。（図８）
　ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）を、３人のボランティア、６２歳および５５歳の男性と６３歳の女性に、４００ｍｇの用量で水と共に８週間投与した。空腹時血糖および血中ＨｂＡ１ｃ値の改善を以下の図８に示す。空腹時血糖の濃度は、１４０ｍｇ／ｄｌから１０５ｍｇ／ｄｌにはっきりと低下した。（図８（１））。ＨｂＡ１ｃ率も、６．６％から６．２％に低下した（図８（２））。
　実施例８：ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）と卵殻膜を組み合わせた物による髪の状態の改善。（表１および図９）
　実施例5で製造したイカ軟骨抽出物（１０部）、卵殻タンパク質（１部）、およびデキストリン（８９部）を含む粉末配合物を、４０代被験者（５人）、５０代被験者（５人）、および６０代被験者（５人）の各人に１日あたり１ｇの量で投与した。結果を以下の表に示す。
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　ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）と卵殻膜を組み合わせた物を、３５歳、６９歳、および７０歳の３人の女性のボランティアに、活性成分としてＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）３００ｍｇおよび卵殻膜８ｍｇの用量で１ヶ月間投与した。髪のボリューム、コシ、ツヤの改善が観察された（図９）。
　５９歳の男性会社員は、起床時の膝のこわばりが悪化していることから、ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）粉末を摂取した。２ヶ月後、朝の膝のこわばりはなくなり、この男性の髪は少し増えたように見えた。現在、膝のこわばりはもうなくなったものの、この男性は発毛のためこの粉末を摂取し続けており、彼の髪はボリュームが増し続け、頭がより黒々としてきている。
　実施例９：テストステロンの産生。（図１０）
　ＭＣ３Ｔ３‐Ｅ１を培地中で４日間培養し、その後、生理食塩水、ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）、ＣＳ‐Ａ、ＣＳ‐Ｃ、およびＣＳ‐Ｅを別々に各培地に添加してさらに４日間培養した。各培養上清を、マウスライディッヒ細胞の培地に添加した。Wako Junyaku Kogyou製のＯＣＮを標準として使用した。ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）の刺激により産生されたＯＣＮは、マウスライディッヒ細胞のテストステロン産生を誘導した。ＯＣＮにより産生されたテストステロンをＢＩＡｃｏｒｅ法で測定した。ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）は、テストステロンを産生させ、しかも対照と比較して統計的有意差を示し（＊Ｐ＜０．０５）、その産生率（％）はＯＣＮ自身と同じぐらい高かった。
　実施例１０：ヒアルロン酸の産生（図１１）
　ＭＣ３Ｔ３‐Ｅ１を培地中で４日間培養し、その後、生理食塩水、ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）、ＣＳ‐Ａ、ＣＳ‐Ｃ、およびＣＳ‐Ｅを別々に、容器に入った線維芽細胞を含む滑液に添加してさらに４日間培養した。ヒアルロン酸産生量を酵素抗体法で測定した。ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏは、２０μｇの濃度でヒアルロン酸産生を増加させた。
　実施例１１：骨芽細胞の増殖（図１２）
　ＭＣ３Ｔ３‐Ｅ１細胞を４８穴プレートに入れた増殖培地中で２４時間培養し、その後、培地を新しい分化培地に交換した。分化培地は、様々な濃度で、ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）、ＣＳ‐Ａ、ＣＳ‐Ｃ、およびＣＳ‐Ｅを含有、または含有しないものであった。交換後、細胞を４日間～２４日間培養した。各ウェルのＤＮＡ含量を、Ｐｉｃｏｇｒｅｅｎ試薬で求めた。ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）だけがＤＮＡ産生を促進し、対照と比較して統計的有意差が見られた（Ｐ＜０．０５）。
　実施例１２：骨芽細胞の石灰化促進（図１３）
　ＭＣ３Ｔ３‐Ｅ１細胞を４８穴プレートに入れた増殖培地中で１３日間培養した。培地は、様々な濃度で、ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）、ＣＳ‐Ａ、ＣＳ‐Ｃ、およびＣＳ‐Ｅを含有、または含有しないものであった。細胞の石灰化は、アリザリンレッドで染色して４１５ｎｍの吸収で評価した。ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）だけがカルシウムの産生を促進し、対照と比較して統計的有意差が見られた（Ｐ＜０．０５）。
　実施例１３：コラーゲンの産生（図１４）
　ＭＣ３Ｔ３‐Ｅ１細胞をプレートに入れた増殖培地中で２４時間培養した。その後、培地を新しい分化培地に交換した。分化培地は、ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）、ＣＳ‐Ａ、ＣＳ‐Ｃ、およびＣＳ‐Ｅを含有、または含有しないものであった。交換後、１２日間培養した。これらの物質とともに１２日間培養した細胞のヒドロキシプロリン（Ｐｒｏ‐ＯＨ）含量を求めた。ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）だけがコラーゲンを沈着させ、対照と比較して統計的有意差が見られた（Ｐ＜０．０５）。
　上記のとおり、イカ軟骨抽出物は、関節の健常性と関節痛の改善、骨成長（骨芽細胞の成長および石灰化、骨形成タンパク質およびオステオカルシンの産生、コラーゲン産生、ヒアルロン酸産生、ミッドカインとの結合による抗炎症）、メタボリックシンドロームの改善（インシュリン分泌）、性機能の改善（筋肉強化、発毛、テストステロン産生）、皮膚状態の改善（コラーゲン産生、ヒアルロン酸の産生）など、様々な疾患の状態や症状を治療するのに有益である。１つの実施形態において、本組成物は、健康食品、栄養補助食品、薬剤、および健康補助食品用のものである。
　イカ軟骨抽出物を卵殻膜と併用した場合、特に毛髪および皮膚の状態に対するイカ軟骨抽出物の効果が大幅に高まることが確認された。
　実施例１４：ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（インカ・カルテラーゴ：登録商標）を用いた無作為化プラセボ対照二重盲検試験
Ｉ．試験計画 
　無作為化プラセボ対照二重盲検試験を９０日間行い、関節痛及び骨密度の改善を更に確かめた。４５人の被験者（うち、１６人が黒人、２９人が白人）をプラセボ群（Placebo（対照）群、２２例（うち、８人が黒人、１４人が白人））、およびインカ・カルテラーゴ群（IncaCartelago 群、２３例（うち、８人が黒人、１５人が白人））に分けた。
　対照群には、対照物としてデキストリン２００ｍｇを含有する偽薬カプセル剤１日１回２カプセルを投与した。
　インカ・カルテラーゴ群には、治験物としてインカ・カルテラーゴ（登録商標）１２５ｍｇとデキストリンを含有した２００ｍｇ試験カプセル剤を１日１回２カプセル投与した。
　骨密度は、ＤＥＸＡ ＳＣＡＮを使用し試験開始前と９０日目の脊柱Ｌ１－Ｌ４間の骨密度を測定した。 
　関節痛についてはＶＡＳ（Visual Analog Scale）、ＷＯＭＡＣ（The Western Ontario and Mcmaster Universities Arthritis Index）及びLequesne Indexなどで評価した。
ＩＩ．算入基準
１）対象は、４０歳から８０歳の男性および女性。
２）ＢＭＩが１８．０ｋｇ／ｍ２～３５．９ｋｇ／ｍ２。
３）軽度から中等度の膝痛があり、０～１００ｍｍのＶＡＳスコアで３０ｍｍ～７０ｍｍのもの。
４）米国リュウマチ協会の変形性膝関節症の基準、（１）５０歳以上、（２）こわばり３０分以内、（３）関節摩擦音、（４）骨の圧痛，（５）骨の腫脹、（６）明らかな熱感はない、の内少なくとも３つに該当する症状が３ヵ月以上継続しているもの。
ＩＩＩ．除外基準
１）急性炎症性関節炎、リウマチ、または痛風を患っているもの。
２）骨粗鬆症および／または変形性関節症であると診断されていて以下の処方薬またはＯＴＣ薬または健康補助食品の１種以上を摂取するよう処方されているもの。
例：二リン酸塩（Diphosphate）、カルシトニン、カルシウム補充用食品、ＶＤ３（ビタミンＤ３）、鎮痛剤、抗炎症剤、ステロイド、ヒアルロン酸補充用食品、その他のコンドロイチン補充用食品、グルコサミン補充用食品、コラーゲン補充用食品、ＭＳＭ、デビルズクローなど。
３）肝疾患、腎疾患、心疾患、および糖尿病の手術を最近受けた者または近い将来同様な手術を受けようしているもの。
ＩＶ．骨密度の評価 
　骨密度の評価結果を図１５に示した。
　骨密度について、年齢を加味したＺスコアで、０日目（インカ・カルテラーゴ（登録商標）を含むカプセル剤を投与した日（試験開始日））を基準０とした時、９０日目のインカ・カルテラーゴ群は０．０１０、プラセボ群は－０．２２４であった。プラセボ群とインカ・カルテラーゴ群の間に統計学上有意差が認められた（ｐ＝０．０３９）。この差は、被験者の骨密度を同年齢の平均骨密度を対照に比較して求めたＺスコアを使用して求めたものである。
Ｖ．関節痛の評価
１）ＶＡＳ平均変動における評価結果を図１６に示した。なお、ＶＡＳによる評価項目は図１９に示す通りである。
　インカ・カルテラーゴ群において、０日目（インカ・カルテラーゴ（登録商標）を含むカプセル剤を投与した日（試験開始日））を基準０として、これと３０日目、６０日目、９０日目を比較すると、９．３０５（Ｐ＜０．０５）、１８．４９４（Ｐ＜０．００１）、２１．４５８（Ｐ＜０．００１）であり統計上有意差が認められた。
　一方、プラセボ群においても、３０日目、６０日目、９０日目が、０．４２４（Ｐ＜０．０５）、７．２６２、８．９６７（Ｐ＜０．０５）であり、３０日目と９０日目に統計上有意差が認められた。
　インカ・カルテラーゴ群とプラセボ群間では、６０日目（Ｐ＜０．０５）と９０日目（Ｐ＜０．０５）で統計上有意差が認められた。
２）ＷＯＭＡＣ痛みの変動における評価結果を図１７に示した。なお、ＷＯＭＡＣによる評価項目は図２０に示す通りである。
　インカ・カルテラーゴ群において、０日目（インカ・カルテラーゴ（登録商標）を含むカプセル剤を投与した日（試験開始日））を基準０として、これと３０日目、６０日目、９０日目を比較すると、７．５９５（Ｐ＜０．０５）、１０．４４５（Ｐ＜０．０５）、１６．０７６（ｐ＜０．００１）であり統計上有意差が認められた。
　一方、プラセボ群においては、３０日目、６０日目、９０日目の変動値が２．６２４、３．５８２、３．５８２であり、統計上の有意差は認められなかった。
　インカ・カルテラーゴ群とプラセボ群間では、９０日目（Ｐ＜０．０５）に統計上の有意差が認められた。
３）Ｌｅｑｕｅｓｎｅ Ｉｎｄｅｘ「標準的階段の登り」における変動の評価結果を図１８に示した。なお、ＬｅｑｕｅｓｎｅＩｎｄｅｘによる評価項目は図２１に示す通りである。
　インカ・カルテラーゴ群において、０日目(投与前）を基準０として、これと３０日目、６０日目、９０日目を比較すると、０．２０５、０．３２５（Ｐ＜０．００１）、０．３３３（Ｐ＜０．０５）であり、６０日目と９０日目で統計上有意差が認められた。
　一方、プラセボ群においては、３０日目、６０日目、９０日目の変動値が、０．０２３、０．０２９４、０．０２９４であり何れも有意差は認められなかった。
　インカ・カルテラーゴ群とプラセボ群間では、６０日目（Ｐ＜０．０５）と９０日目（Ｐ＜０．０５）で統計上有意差が認められた。
　結果として、イカ軟骨抽出物は、骨密度の改善及び関節痛の改善に有効であることが示された。
　上記結果を全て考慮すると、本明細書中に提供される臨床結果は、イカ軟骨抽出物で行われた基礎実験の結果を実証している、すなわち、（１）骨および軟骨の改善効果、ならびに（２）強力な抗炎症効果が臨床試験に反映されたものと思われる。
　以下の項目１から２２は、本発明の様々な態様を提供する。
　１．本発明独自のコンドロイチン硫酸組成物は、概して、コンドロイチン硫酸類を合計で少なくとも６０重量％含有し、４０重量％超のコンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）、ならびに２０重量％未満のコンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を含む材料に関する。詳細には、この組成物は、ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）などのアメリカオオアカイカ抽出物に由来するものである。
　分子量が１８ｋＤａ～３４ｋＤａであり、ペプチドグリカンＥすなわちコンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の４０重量％超の量で、ならびにペプチドグリカンＡおよびＣすなわちコンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の２０重量％未満で含むイカ軟骨抽出物を含む組成物。
　２．（ａ）分子量が１８ｋＤａ～３４ｋＤａであり、ペプチドグリカンＥすなわちコンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の４０重量％超の量で、ならびにペプチドグリカンＡおよびＣすなわちコンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の２０重量％未満で含むイカ軟骨抽出物、を含む組成物。ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）は、アメリカオオアカイカ由来のイカ軟骨抽出物の一例である。
　３．デキストリンなどの賦形剤を組成物の７０～９０重量％の量で含有し、（ａ）と（ｂ）の重量パーセント比は、（ａ）が９０％以上であるのに対して（ｂ）が０．５～１０％であり、（ａ）の割合と（ｂ）の割合の合計は１００％である、項目２に記載の組成物。
　４．組成物の７０～９０重量％の量のデキストリンなどの賦形剤と、（ａ）分子量が１８ｋＤａ～３４ｋＤａであり、ペプチドグリカンＥすなわちコンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の４０重量％超の量で、ならびにペプチドグリカンＡおよびＣすなわちコンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の２０重量％未満で含むイカ軟骨抽出物と、ならびに以下：（ｃ）関節痛（変形性関節症、関節痛、腰痛）を改善する１種以上の構成成分、例えば、その他のコンドロイチン、グルコサミン、ヒアルロン酸、コラーゲン、酵母菌、デビルズクロー、およびホップなど、（ｄ）肌荒れおよび／または乾燥肌、抜け毛を改善する１種以上の構成成分、例えば、ヒアルロン酸、コラーゲン、エラスチン、およびプラセンタなど、（ｅ）性ホルモン様活性を有する構成成分、例えば、ザクロ、大豆タンパク質およびイソフラボンなど、ならびに（ｆ）インシュリン分泌活性を有する構成成分、例えば、バナジウム、クロム、ギムネマ、ガルシニア抽出物、バナバ抽出物、コロソリン酸、および化石化珊瑚など、からなる群より選択される少なくとも１種の成分、を含む組成物。
　５．組成物の７０～９０重量％の量のデキストリンなどの賦形剤と、（ａ）ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）または分子量が１８ｋＤａ-３４ｋＤａであり、ペプチドグリカンＥすなわちコンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の４０重量％超の量で、ならびにペプチドグリカンＡおよびＣすなわちコンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の２０重量％未満で含むイカ軟骨抽出物と、（ｂ）卵殻膜タンパク質からなる構成成分と、ならびに以下：（ｃ）変形性関節症を改善する１種以上の構成成分、例えば、その他のコンドロイチン、グルコサミン、ヒアルロン酸、コラーゲン、酵母菌、デビルズクロー、およびホップなど、（ｄ）肌荒れおよび／または乾燥肌、抜け毛を改善する１種以上の構成成分、例えば、ヒアルロン酸、コラーゲン、エラスチン、およびプラセンタなど、（ｅ）性ホルモン様活性を有する構成成分、例えば、ザクロ、大豆タンパク質およびイソフラボンなど、ならびに（ｆ）インシュリン分泌活性を有する構成成分、例えば、バナジウム、クロム、ギムネマ、ガルシニア抽出物、バナバ抽出物、コロソリン酸、および化石化珊瑚など、からなる群より選択される少なくとも１種の成分、を含む組成物。
　６．（ａ）と（ｂ）の合計量に対して、上記（ｃ）～（ｆ）からなる群より選択される少なくとも１種の成分を、成分合計での割合として０．０１～１０重量％の量で、または各成分での割合として０．０１～１０重量％の量で含む、項目５に記載の組成物。
　７．ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）または分子量が１８ｋＤａ～３４ｋＤａであり、ペプチドグリカンＥすなわちコンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の４０重量％超の量で、ならびにペプチドグリカンＡおよびＣすなわちコンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の２０重量％未満で含むイカ軟骨抽出物を含む有効量のコンドロイチン硫酸組成物、ならびに個体に有効量のコンドロイチン硫酸組成物を送達して関節痛を減少させ骨成長を促進するための使用説明書を含む、関節痛（変形性関節症、関節痛、腰痛）を減少するおよび／または骨成長を促進するための包装された栄養補助食品。
　８．関節痛（変形性関節症、関節痛、腰痛）を減少するおよび／または骨成長を促進する必要がある個体に、（ａ）分子量が１８ｋＤａ～３４ｋＤａであり、ペプチドグリカンＥすなわちコンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の４０重量％超の量で、ならびにペプチドグリカンＡおよびＣすなわちコンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の２０重量％未満で含むイカ軟骨抽出物と、および（ｂ）卵殻膜タンパク質からなる構成成分、を含む有効量のコンドロイチン硫酸組成物を投与する工程を含み、個体に有効量のコンドロイチン硫酸組成物を送達して関節痛を減少させ骨成長を促進するための使用説明書を含む、関節痛（変形性関節症、関節痛、腰痛）を減少するおよび／または骨成長を促進するための包装された栄養補助食品。ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）は、アメリカオオアカイカ由来のイカ軟骨抽出物の一例である。
　９．デキストリン（類）などの賦形剤を栄養補助食品の７０～９０重量％の量で含有し、（ａ）と（ｂ）の重量パーセント比は、（ａ）が９０％以上であるのに対して（ｂ）が０．５～１０％であり、（ａ）の割合と（ｂ）の割合の合計は１００％である、項目８に記載の包装された栄養補助食品。
　１０．関節痛（変形性関節症、関節痛、腰痛）を減少するおよび／または骨成長を促進する必要がある個体に、組成物の７０～９０重量％の量のデキストリン（類）などの賦形剤と、（ａ）分子量が１８ｋＤａ～３４ｋＤａであり、ペプチドグリカンＥすなわちコンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の４０重量％超の量で、ならびにペプチドグリカンＡおよびＣすなわちコンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の２０重量％未満で含むイカ軟骨抽出物と、ならびに以下：（ｃ）変形性関節症を改善する１種以上の構成成分、例えば、その他のコンドロイチン、グルコサミン、ヒアルロン酸、コラーゲン、酵母菌、デビルズクロー、およびホップなど、（ｄ）肌荒れおよび／または乾燥肌、抜け毛を改善する１種以上の構成成分、例えば、ヒアルロン酸、コラーゲン、エラスチン、およびプラセンタなど、（ｅ）性ホルモン様活性を有する構成成分、例えば、ザクロ、大豆タンパク質およびイソフラボンなど、ならびに（ｆ）インシュリン分泌活性を有する構成成分、例えば、バナジウム、クロム、ギムネマ、ガルシニア抽出物、バナバ抽出物、コロソリン酸、および化石化珊瑚など、からなる群より選択される少なくとも１種の成分、を含む有効量のコンドロイチン硫酸組成物を投与する工程を含み、個体に有効量のコンドロイチン硫酸組成物を送達して関節痛を減少させ骨成長を促進するための使用説明書を含む、関節痛（変形性関節症、関節痛、腰痛）を減少するおよび／または骨成長を促進するための包装された栄養補助食品。ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）は、アメリカオオアカイカ由来のイカ軟骨抽出物の一例である。
　１１．関節痛（変形性関節症、関節痛、腰痛）を減少するおよび／または骨成長を促進する必要がある個体に、組成物の７０～９０重量％の量のデキストリン（類）などの賦形剤と、（ａ）分子量が１８ｋＤａ～３４ｋＤａであり、ペプチドグリカンＥすなわちコンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の４０重量％超の量で、ならびにペプチドグリカンＡおよびＣすなわちコンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の２０重量％未満で含むイカ軟骨抽出物と、（ｂ）卵殻膜タンパク質からなる構成成分と、ならびに以下：（ｃ）変形性関節症を改善する１種以上の構成成分、例えば、その他のコンドロイチン、グルコサミン、ヒアルロン酸、コラーゲン、酵母菌、デビルズクロー、およびホップなど、（ｄ）肌荒れおよび／または乾燥肌、抜け毛を改善する１種以上の構成成分、例えば、ヒアルロン酸、コラーゲン、エラスチン、およびプラセンタなど、（ｅ）性ホルモン様活性を有する構成成分、例えば、ザクロ、大豆タンパク質およびイソフラボンなど、ならびに（ｆ）インシュリン分泌活性を有する構成成分、例えば、バナジウム、クロム、ギムネマ、ガルシニア抽出物、バナバ抽出物、コロソリン酸、および化石化珊瑚など、からなる群より選択される少なくとも１種の成分、を含む有効量のコンドロイチン硫酸組成物を投与する工程を含み、個体に有効量のコンドロイチン硫酸組成物を送達して関節痛を減少させ骨成長を促進するための使用説明書を含む、関節痛（変形性関節症、関節痛、腰痛）を減少するおよび／または骨成長を促進するための包装された栄養補助食品。ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）は、アメリカオオアカイカ由来のイカ軟骨抽出物の一例である。
　１２．（ａ）と（ｂ）の合計量に対して、上記（ｃ）～（ｆ）からなる群より選択される少なくとも１種の成分を、成分合計での割合として０．０１～１０重量％の量で、または各成分での割合として０．０１～１０重量％の量で含む、項目１１に記載の包装された栄養補助食品。
　１３．骨芽細胞増殖を必要としている個体に、骨芽細胞産生が向上するように、ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）または分子量が１８ｋＤａ～３４ｋＤａであり、ペプチドグリカンＥすなわちコンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の４０重量％超の量で、ならびにペプチドグリカンＡおよびＣすなわちコンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の２０重量％未満で含むイカ軟骨抽出物、を含む有効量のコンドロイチン硫酸組成物を投与する工程を含む、ＢＭＰおよび／またはＯＣＮによる骨芽細胞増殖を向上させる方法。
　１４．骨芽細胞増殖を必要としている個体に、骨芽細胞産生が向上するように、分子量が１８ｋＤａ～３４ｋＤａであり、ペプチドグリカンＥすなわちコンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の４０重量％超の量で、ならびにペプチドグリカンＡおよびＣすなわちコンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の２０重量％未満で含むイカ軟骨抽出物、を含む有効量のコンドロイチン硫酸組成物を投与する工程を含む、ＢＭＰおよび／またはＯＣＮによる骨芽細胞増殖を向上させるための包装された栄養補助食品。ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）は、アメリカオオアカイカ由来のイカ軟骨抽出物の一例である。
　１５．ＢＭＰ（骨形成タンパク質）およびＯＣＮ（オステオカルシン）の産生を増加させる必要がある個体に、骨形成タンパク質およびオステオカルシンの産生が増加するように、（ａ）分子量が１８ｋＤａ～３４ｋＤａであり、ペプチドグリカンＥすなわちコンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の４０重量％超の量で、ならびにペプチドグリカンＡおよびＣすなわちコンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の２０重量％未満で含むイカ軟骨抽出物、を含む有効量のコンドロイチン硫酸組成物を投与する工程を含む、ＢＭＰ（骨形成タンパク質）およびＯＣＮ（オステオカルシン）の産生を増加させる方法。ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）は、アメリカオオアカイカ由来のイカ軟骨抽出物の一例である。
　１６．分子量が１８ｋＤａ～３４ｋＤａであり、ペプチドグリカンＥすなわちコンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の４０重量％超の量で、ならびにペプチドグリカンＡおよびＣすなわちコンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の２０重量％未満で含むイカ軟骨抽出物を含む有効量のコンドロイチン硫酸組成物、ならびに個体に有効量のコンドロイチン硫酸組成物を送達してオステオカルシン産生を増加させるための使用説明書を含む、オステオカルシン産生を増加させるための包装された栄養補助食品。
　１７．分子量が１８ｋＤａ～３４ｋＤａであり、ペプチドグリカンＥすなわちコンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の４０重量％超の量で、ならびにペプチドグリカンＡおよびＣすなわちコンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の２０重量％未満で含むイカ軟骨抽出物を含む有効量のコンドロイチン硫酸組成物を含む、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）の産生（図２）、オステオカルシンの産生（図３）、ミッドカインとの強固な結合（図４）、骨密度の改善（図５）、関節痛の改善（図６）、体脂肪および体筋の改善（図７）、血糖の改善（図８）、組み合わせた産物による髪の状態の改善（図９）、テストステロンの産生（図１０）、ヒアルロン酸の産生（図１１）、骨芽細胞の増殖（図１２）、骨芽細胞の石灰化（図１３）、ならびにコラーゲンの産生（図１４）用の包装された栄養補助食品。ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）は、アメリカオオアカイカ由来のイカ軟骨抽出物の一例である。
　１８．（ａ）分子量が１８ｋＤａ～３４ｋＤａであり、ペプチドグリカンＥすなわちコンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の４０重量％超の量で、ならびにペプチドグリカンＡおよびＣすなわちコンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の２０重量％未満で含むイカ軟骨抽出物と、および（ｂ）卵殻膜タンパク質からなる構成成分とを含む有効量のコンドロイチン硫酸組成物、ならびに個体に有効量のコンドロイチン硫酸組成物を送達して骨芽細胞増殖を向上させるための使用説明書を含む、石灰化、コラーゲン産生、ヒアルロン酸産生、ミッドカインとの結合、抗炎症、テストステロン産生、またはインシュリン分泌に有効な包装された栄養補助食品。
　１９．デキストリン（類）を賦形剤として栄養補助食品の７０～９０重量％の量で含有し、（ａ）と（ｂ）の重量パーセント比は、（ａ）が９０％以上であるのに対して（ｂ）が０．５～１０％であり、（ａ）の割合と（ｂ）の割合の合計は１００％である、項目１８に記載の包装された栄養補助食品。
　２０．栄養補助食品の７０～９０重量％の量の賦形剤としてデキストリン（類）と、（ａ）分子量が１８ｋＤａ～３４ｋＤａであり、ペプチドグリカンＥすなわちコンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の４０重量％超の量で、ならびにペプチドグリカンＡおよびＣすなわちコンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の２０重量％未満で含むイカ軟骨抽出物と、ならびに以下：（ｃ）変形性関節症を改善する１種以上の構成成分、例えば、その他のコンドロイチン、グルコサミン、ヒアルロン酸、コラーゲン、酵母菌、デビルズクロー、およびホップなど、（ｄ）肌荒れおよび／または乾燥肌、抜け毛を改善する１種以上の構成成分、例えば、ヒアルロン酸、コラーゲン、エラスチン、およびプラセンタなど、（ｅ）性ホルモン様活性を有する構成成分、例えば、ザクロ、大豆タンパク質およびイソフラボンなど、ならびに（ｆ）インシュリン分泌活性を有する構成成分、例えば、バナジウム、クロム、ギムネマ、ガルシニア抽出物、バナバ抽出物、コロソリン酸、および化石化珊瑚など、からなる群より選択される少なくとも１種の成分とを含む、有効量のコンドロイチン硫酸組成物、ならびに個体に有効量のコンドロイチン硫酸組成物を送達して骨芽細胞産生を向上させるための使用説明書を含む、石灰化、コラーゲン産生、ヒアルロン酸産生、ミッドカインとの結合、抗炎症、テストステロン産生、またはインシュリン分泌に有効な包装された栄養補助食品。
　２１．栄養補助食品の７０～９０重量％の量の賦形剤としてデキストリン（類）と、（ａ）分子量が１８ｋＤａ～３４ｋＤａであり、ペプチドグリカンＥすなわちコンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の４０重量％超の量で、ならびにペプチドグリカンＡおよびＣすなわちコンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を全ペプチドグリカン類すなわち全コンドロイチン硫酸類の２０重量％未満で含むイカ軟骨抽出物と、（ｂ）卵殻膜タンパク質からなる構成成分と、ならびに以下：（ｃ）変形性関節症を改善する１種以上の構成成分、例えば、その他のコンドロイチン、グルコサミン、ヒアルロン酸、コラーゲン、酵母菌、デビルズクロー、およびホップなど、（ｄ）肌荒れおよび／または乾燥肌、抜け毛を改善する１種以上の構成成分、例えば、ヒアルロン酸、コラーゲン、エラスチン、およびプラセンタなど、（ｅ）性ホルモン様活性を有する構成成分、例えば、ザクロ、大豆タンパク質およびイソフラボンなど、ならびに（ｆ）インシュリン分泌活性を有する構成成分、例えば、バナジウム、クロム、ギムネマ、ガルシニア抽出物、バナバ抽出物、コロソリン酸、および化石化珊瑚など、からなる群より選択される少なくとも１種の成分とを含む、有効量のコンドロイチン硫酸組成物、ならびに個体に有効量のコンドロイチン硫酸組成物を送達して骨芽細胞産生を向上させるための使用説明書を含む、石灰化、コラーゲン産生、ヒアルロン酸産生、ミッドカインとの結合、抗炎症、テストステロン産生、またはインシュリン分泌に有効な包装された栄養補助食品。
　２２．（ａ）と（ｂ）の合計量に対して、上記（ｃ）～（ｆ）からなる群より選択される少なくとも１種の成分を、成分合計での割合として０．０１～１０重量％の量で、または各成分での割合として０．０１～１０重量％の量で含む、項目２１に記載の包装された栄養補助食品。
　好適な実施形態を参照して本発明を説明してきたが、本発明の精神および範囲から逸脱することなく形状および詳細に変更を加え得ることに当業者は気付くだろう。本明細書全体を通じて記載された参照は全て、発明の背景に記載されたものも含めて、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。当業者は、本明細書中具体的に記載される本発明の特定の実施形態に対する多くの等価物に気付くだろうし、通常の実験方法にすぎないものによってそれらを確かめることができる。そのような等価物は、請求の範囲に包含されるものとする。
　本発明の組成物は、関節の健常性と関節痛の改善、骨成長（骨芽細胞の成長および石灰化、骨形成タンパク質およびオステオカルシンの産生、コラーゲンおよびヒアルロン酸の産生、ミッドカインとの結合による消炎）、代謝症候群の改善（インシュリン分泌）、性機能の改善（筋肉強化、発毛、テストステロン産生）、皮膚状態の改善（コラーゲンおよびヒアルロン酸の産生）、ならびにヘルスケア（ヘアケアなど）により、様々な疾患の状態や症状を治療するのに有益である。したがって、本組成物は、医薬および医療の分野、健康食品分野、栄養補助食品の分野、健康補助食品の分野、ならびにヘルスケア（ヘアケアなど）の分野など、様々な技術分野で利用可能であると期待される。

Claims (11)

  1. 　コンドロイチン硫酸類を合計で少なくとも組成物の６０重量％の量で含有し、コンドロイチン硫酸Ｅ（ＣＳ‐Ｅ）を該全コンドロイチン硫酸類の４０重量％超の量で、ならびにコンドロイチン硫酸ＡおよびＣ（ＣＳ‐ＡおよびＣＳ‐Ｃ）を該全コンドロイチン硫酸類の２０重量％未満の量で含む組成物。
  2. 　イカ軟骨抽出物を含む、請求項１に記載の組成物。
  3. 　該イカ軟骨抽出物は、アメリカオオアカイカに由来するものである、請求項２に記載の組成物。
  4. 　該イカ軟骨抽出物は、ＩｎｃａＣａｒｔｉｌａｇｏ（登録商標）である、請求項３に記載の組成物。
  5. 　薬剤、健康食品、機能性食品、もしくは栄養補助食品として、またはヘアケアに用いられる、請求項１から４のいずれか１項に記載の組成物        。
  6. 　さらに卵殻膜タンパク質を組成物の０．５～１０重量％の量で含む、請求項１から５のいずれか１項に記載の組成物。
  7. 　骨形成タンパク質（ＢＭＰ）またはオステオカルシン（ＯＣＮ）を産生させるために用いられる、請求項１から６のいずれか１項に記載の組成物。
  8. 　ミッドカインと結合させるために用いられる、請求項１から６のいずれか１項に記載の組成物。
  9. 　テストステロンもしくはヒアルロン酸もしくはコラーゲンを産生させるため、骨芽細胞を増殖させるため、または骨芽細胞の石灰化を促進するために用いられる、請求項１から６のいずれか１項に記載の組成物。
  10. 　骨密度を上昇させるため、関節痛を軽減するため、体脂肪および体筋を改善させるため、あるいは血糖を改善させるために用いられる、請求項１から６のいずれか１項に記載の組成物。
  11. 　髪の状態を改善させるために用いられる、請求項１から６のいずれか１項に記載の組成物。
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Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105924544A (zh) * 2016-05-16 2016-09-07 山东大学 一种高硫酸化硫酸软骨素及其制备方法与应用
JP2018064494A (ja) * 2016-10-19 2018-04-26 ハイドロックス株式会社 グリコサミノグリカンおよびシアル酸含有食品
CN110548003A (zh) * 2019-10-18 2019-12-10 吉林大学 一种硫酸软骨素外用纳米组合物及其制备方法和应用
JP2021035350A (ja) * 2019-08-21 2021-03-04 国安 王 骨強化、骨膜修復、骨折治癒、及び髪色黒化促進食品
JP2022037274A (ja) * 2020-08-25 2022-03-09 国立大学法人弘前大学 発毛促進剤
WO2023074895A1 (ja) * 2021-11-01 2023-05-04 小林製薬株式会社 経口組成物
WO2023074896A1 (ja) * 2021-11-01 2023-05-04 小林製薬株式会社 医薬又は食品組成物

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006137684A (ja) * 2004-11-10 2006-06-01 Nippon Fine Chem Co Ltd リポソーム前駆体の製造方法
JP2009161564A (ja) * 2009-04-23 2009-07-23 Tokiwa Yakuhin Kogyo Kk アトピー性皮膚炎治療用組成物
JP2010037216A (ja) * 2008-07-31 2010-02-18 Kao Corp 粉体化粧料

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH09188607A (ja) * 1996-01-08 1997-07-22 Pola Chem Ind Inc 発毛促進剤
JP4032246B2 (ja) * 2003-04-17 2008-01-16 ライオン株式会社 白髪防止・改善剤
JP4963630B2 (ja) * 2007-06-04 2012-06-27 ホーユー株式会社 毛髪処理用組成物

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006137684A (ja) * 2004-11-10 2006-06-01 Nippon Fine Chem Co Ltd リポソーム前駆体の製造方法
JP2010037216A (ja) * 2008-07-31 2010-02-18 Kao Corp 粉体化粧料
JP2009161564A (ja) * 2009-04-23 2009-07-23 Tokiwa Yakuhin Kogyo Kk アトピー性皮膚炎治療用組成物

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HISANORI TANI: "Chondroitin Ryusan no Kotsutaisha eno Yukosei", FOOD PROCESSING AND INGREDIENTS, vol. 45, no. 6, 2010, pages 60 - 61 *
SATOMI TSUCHIBE ET AL.: "The effects of squid cartilage extract containing E-type chondroitin as major ingredient on bone density and osteoarthritis pain", FOOD PROCESSING AND INGREDIENTS, vol. 46, no. 7, 2011, pages 70 - 72 *
SHUJI NUMATA ET AL.: "`Kansetsu no Total Care' o Yakusoku suru E-gata Chondroitin", JAPAN FOOD SCIENCE, vol. 51, no. 2, 5 February 2012 (2012-02-05), pages 9 - 20 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105924544A (zh) * 2016-05-16 2016-09-07 山东大学 一种高硫酸化硫酸软骨素及其制备方法与应用
JP2018064494A (ja) * 2016-10-19 2018-04-26 ハイドロックス株式会社 グリコサミノグリカンおよびシアル酸含有食品
JP2021035350A (ja) * 2019-08-21 2021-03-04 国安 王 骨強化、骨膜修復、骨折治癒、及び髪色黒化促進食品
CN110548003A (zh) * 2019-10-18 2019-12-10 吉林大学 一种硫酸软骨素外用纳米组合物及其制备方法和应用
JP2022037274A (ja) * 2020-08-25 2022-03-09 国立大学法人弘前大学 発毛促進剤
WO2023074895A1 (ja) * 2021-11-01 2023-05-04 小林製薬株式会社 経口組成物
WO2023074896A1 (ja) * 2021-11-01 2023-05-04 小林製薬株式会社 医薬又は食品組成物

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