CN105079028A - 一种改善骨关节的保健品及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及保健品技术领域，具体提供一种改善骨关节的保健品及其制备方法。所述保健品主要由以下重量份数的原料制成：其有效成分包括：碳酸钙10-40份，盐酸氨基葡萄糖15-40份，硫酸软骨素10-30份，所述辅料按包括萄糖香精0.1-1份，薄膜包衣剂1-5份。该改善骨关节的保健品的制备方法，包括制粉、混合、制粒、混料压片、包衣5个步骤。本发明提供的保健品钙含量高，效果好，吸收好，通过补钙和促进成骨细胞增殖来发挥增加骨密度的功能，以达到更好的预防和改善骨质疏松的作用，提高中老年人的生活水平，并且成本低，适宜于广泛推广使用。本发明提供的保健品的制备方法简单、高效，且有效成分利用率高，适于工业化推广。

Description

一种改善骨关节的保健品及其制备方法

技术领域

本发明涉及保健品技术领域，具体涉及一种改善骨关节的保健品及其制备方法。

背景技术

骨质疏松症是一种以骨量减少，骨组织微细结构破坏导致骨骼脆性增加和骨折危险性增加为特征的一种系统性全身性骨骼疾病。骨关节炎是以关节软骨破坏、软骨下骨坏死和关节间隙变窄为特征的一种非特异性关节炎症，是一种提示衰老和渐进性慢性疾病。骨质疏松能够加速骨关节的病变，而骨关节炎也能够加速骨质疏松的进程，二者呈现出相辅相成的正相关关系。

根据骨密度缺少产生原因和作用机理的不同，在进行保健食品配方设计时可选择不同原料。目前，市场上经常使用的原料有：

1、钙剂：市场上经常使用的钙剂的种类有无机钙和有机钙等，适当的补充钙剂，能有效防治骨丢失；

2、维生素D：维生素D是钙吸收的主要调节因素，可以帮助人体吸收钙，有效地提高人体骨密度；

3、大豆异黄酮：大豆异黄酮可与破骨细胞上的雌激素受体结合，降低其活性，还能增强机体对钙的利用，增加骨密度；

4、蛋白质：蛋白质是构成骨基质的重要原料，适当补充蛋白质，能促进骨基质合成，促进新骨形成；

5、补肾中药类：如淫羊藿、补骨脂、骨碎补等；

6、其他类：如锌，铜等微量矿物质，以及其他营养物质。

钙是人体矿物质中含量最多的元素，是整个生命期重建过程中骨质形成所必需的元素。对骨质的形成，维持神经与肌肉的正常兴奋性，降低毛细血管和细胞膜的通透性等具有重要作用。在体内99％的钙存在于骨骼和牙齿中，1％的钙存在于软组织及细胞外液中，血清钙含量为9-11mg/100ml，在甲状旁腺激素、降钙素和维生素D等的调节下，其含量保持相对稳定。若长期低钙饮食，从食物中摄取不到足够的钙，血液中的钙浓度就会下降，体内甲状旁腺激素就会使骨骼及牙齿析出钙供使用，以维持血液中一定的钙浓度。骨骼和牙齿中的钙就会逐渐流失，使骨质减少，造成骨质疏松症和牙齿松动。

补充钙剂是骨质疏松的一个基础治疗。其机理主要是降低骨转换，抑制甲状旁腺激素的过度分泌，对骨密度有保护作用，并可促进骨的形成和保持骨骼强度。另外，由于钙可抑制甲状旁腺激素的分泌，所以有抗骨吸收作用。循环中甲状旁腺激素水平呈季节性变化，在冬季适度上升，且与同期血清骨钙素(骨质更新的标志物)呈正相关。但当循环中甲状旁腺激素的升高超过正常范围时，则发生骨皮质的骨质丢失。而钙摄入量的变化在正常范围内时，可引起血液甲状旁腺激素水平的适度改变，因此可用补充钙剂以抑制甲状旁腺激素水平，从而起到稳定骨皮质和骨质量的作用。

而市场上有很多补钙制剂，多采用如磷酸氨钙、乳酸钙、枸缘酸钙、活性钙、有机钙等，但这些钙制剂往往存在一定缺陷。

磷酸氨钙，这是日本常用的一种补钙制剂，含钙量相对较高，为23.3％，但是这类钙质吸收难，含磷量也高，对肾功能障碍者有害。

乳酸钙，也是我国传统的补钙制剂的一种，溶解快，但是含钙量低，葡萄糖酸钙是这类钙的一种，其含钙量是9％，而成年人每日需要的补充钙是一千毫克，明显含钙较低，不符合人群的需求。

枸缘酸钙，水溶性好，钙含量为21.1％，生物利用也较磷酸钙好，其吸收不依赖胃酸，比较适合老年人服用。

活性钙，是生物钙高温煅烧而形成的钙混合物，钙含量高，但其水溶液是强碱性，对胃肠刺激性大，不适合老年胃酸缺乏者。与食物同食可减少胃肠刺激。

由此可知，目前市场上的改善骨骼类保健品，存在钙含量偏低、难吸收、成本高、适用范围窄等缺陷，不能很好地满足人们的需求。

发明内容

本发明的目的是提供一种改善骨关节的保健品，该保健品钙含量高，效果好，吸收好，通过补钙和促进成骨细胞增殖来发挥增加骨密度的功能，以达到更好的预防和改善骨质疏松的作用，提高中老年人的生活水平，并且成本低，适宜于广泛推广使用。

本发明的目的还在于提供一种改善骨关节的保健品的制备方法，该制备方法简单、高效，且有效成分利用率高，适于工业化推广。

为了实现以上目的，本发明采用如下技术方案：

一种改善骨关节的保健品，主要由以下重量份数的原料制成：碳酸钙10-40份，盐酸氨基葡萄糖15-40份，硫酸软骨素10-30份、萄糖香精0.1-1份。

所述保健品其原料还包括薄膜包衣剂1-5份。

所述保健品的原料还包括微晶纤维素、羧甲淀粉钠、聚维酮K30、羟丙甲纤维素、硬脂酸镁。

所述保健品由以下重量份数的原辅料制成：

碳酸钙10-40份，盐酸氨基葡萄糖15-40份，硫酸软骨素10-30份，微晶纤维素5-15份，羧甲淀粉钠1-10份，聚维酮K300.1-1份，羟丙甲基纤维0.1-1份，硬脂酸镁0.5-1.5份，萄糖香精0.1-1份，薄膜包衣剂1-5份。

所述保健品由以下重量份数的原辅料制成：

碳酸钙25份，盐酸氨基葡萄糖28份，硫酸软骨素20份，微晶纤维素9份，羧甲淀粉钠6份，聚维酮K300.5份，羟丙甲基纤维0.6份，硬脂酸镁1份，萄糖香精0.6份，薄膜包衣剂3份。

一种上述的改善骨关节的保健品的制备方法，包括以下步骤：

(1)制粉：按重量份称取所需原料，并将碳酸钙、盐酸氨基葡萄糖、羧甲淀粉钠、硬脂酸镁、硫酸软骨素、微晶纤维素分别过筛，得粉状原料；

(2)混合：将步骤(1)制得的碳酸钙粉与一半的羧甲淀粉钠粉混合，得混合粉A；将步骤(1)制得的硫酸软骨素粉、微晶纤维素粉和剩余的羧甲淀粉钠粉混合，得混合粉B；

(3)制粒：将称取好的聚维酮K30用水溶解，搅拌均匀，配制成聚维酮K30溶液，备用；将称取好的羟丙甲纤维素用水溶解，搅拌均匀，配制成羟丙甲纤维素溶液，备用；

将步骤(2)得到的混合粉A与羟丙甲纤维素溶液混合，得软材C，再过20目筛进行制粒，得湿颗粒C；

将步骤(1)得到的盐酸氨基葡萄糖粉与聚维酮K30溶液混合，得软材D，再过20目筛进行制粒，制得湿颗粒D；

(4)混料压片：将湿颗粒C、湿颗粒D干燥，得到干颗粒C、干颗粒D，然后将干颗粒C、干颗粒D、混合粉B、硬脂酸镁粉混合均匀，然后将进行压片，片芯；

(5)包衣：将称取好的葡萄香精、薄膜包衣剂用水溶解，搅拌均匀，得包衣液；然后用所述包衣液给步骤(4)得到的片芯包薄膜衣，得包衣片。

步骤(1)中，所述过筛为将碳酸钙、盐酸氨基葡萄糖、羧甲淀粉钠分别过80目筛，得碳酸钙细粉、盐酸氨基葡萄糖细粉、羧甲淀粉钠细粉；硬脂酸镁过100目筛，得硬脂酸镁细粉；将硫酸软骨素、微晶纤维素分别过60目筛，得硫酸软骨素中粉、微晶纤维素中粉。

步骤(3)中所述聚维酮K30溶液浓度为8wt％，所述羟丙甲纤维素溶液浓度为4wt％。

步骤(4)中所述干燥的干燥温度为60-70℃，步骤(4)中湿颗粒C、湿颗粒D干燥后分别过20目筛进行整粒。

步骤(4)中片芯重0.7275g/片，步骤(5)中包衣片重0.75g/片。

产品主要原料介绍

碳酸钙：是众多补钙制剂中的一种。很多人认为碳酸钙是第一代补钙产品，进而对其产生进行贬低，其实这并不科学。中国保健协会专家表示航天员所吃的补钙产品主要成分就是碳酸钙，现在市场上的碳酸钙也占据了很大的份额。碳酸钙，其含钙量高达40％，副作用小，价格也相对比较便宜，吸收率较高，可以达到与牛奶相似，是全国人民易于接受而广泛应用的一种钙制剂。碳酸钙是列入国家药典的钙剂，是中国营养学会首推补钙剂，也是国际上普遍认可的钙制剂。

由于钙制剂很多，导致人们在补钙的时候，眼花缭乱，不知道该选什么好，选钙有“三高一低”四个原则，即“含钙量高，生物利用度高，肠道吸收度高，重金属含量低”。碳酸钙虽然是第一代补钙制剂，但是，却符合了人们选钙的原则。事实上，我们说的补钙，是人体需要补充钙质，补充的不是制剂本身，而是钙制剂中的钙元素，那些所谓的制剂只是钙的承载体，选择补钙的制剂，主要还是看含钙量，碳酸钙含钙量高达40％，是众多补钙制剂中的佼佼者。

补充碳酸钙，能帮助形成强健的体质和牙齿，还可以减低骨质的流失，有助于神经系统的正常运作，补钙，还能帮助女性减少经前易怒以及烦躁的情况。此外还可以帮助心肌收缩和扩张，帮助调节心跳，起到保护心脏的作用。

盐酸氨基葡萄糖：氨基葡萄糖是一种天然的氨基单糖，是软骨基质和滑液中聚氨基葡萄糖的成分，可以刺激软骨细胞合成蛋白多糖，补充软骨基质的丢失，抑制损伤软骨的酶如胶原酶和磷脂酶A2，并可防止损伤软骨细胞的超氧化自由基的产生，从而促进软骨基质的修复和重建，改善关节活动，缓解疼痛。成骨细胞作为参与骨代谢的重要角色，它的分化成熟、功能活动以及凋亡决定了代谢过程中骨的形成与矿化程度。近年来的研究表明，氨基葡萄糖具有提高成骨细胞活性、促进成骨细胞增殖的作用。氨基葡萄糖在体外一般以硫酸、盐酸、N-乙酰化物的形式存在，它们在胃酸中完全解离，在小肠中以氨基葡萄糖原形吸收，一旦被吸收就与最初的酸根无关，表现出相同的活性。通过刺激粘多糖的生化合成及增加骨骼钙质的摄取，提高骨与软骨组织的代谢功能与营养，亦能改善及增强滑膜液的粘稠度，增加滑膜液合成，提供关节润滑功能，可阻断骨关节炎的病理过程，防治疾病进展，改善关节活动功能，缓解关节疼痛，抑制及消退关节变性病变形成。

盐酸氨基葡萄糖的主要功能如下：

1、舒缓因关节炎引起的疼痛、僵硬和肿胀：骨质疏松症使软骨耗损，最终导致碎裂剥落，关节少了软骨的缓冲，易产生痛苦的僵硬和发炎。而盐酸氨基葡萄糖有助于修复受损软骨，刺激新软骨的生成，改善发炎症状，舒缓关节疼痛、僵硬及肿胀。

2、强化软骨结构，预防关节功能失效：随着身体老化，关节组织会严重磨损，盐酸氨基葡萄糖可以保护并强化软骨结构，预防因关节老化而产生的关节功能失效。

3、润滑关节及维持关节功能：盐酸氨基葡萄糖可制造蛋白多糖润滑关节，防止骨关节摩擦疼痛，使关节活动自如。

硫酸软骨素：是共价连接在蛋白质上形成蛋白聚糖的一类糖胺聚糖。硫酸软骨素广泛分布于动物组织的细胞外基质和细胞表面，糖链由交替的葡萄糖醛酸和N-乙酰半乳糖胺(又称N-乙酰氨基半乳糖)二糖单位组成，通过一个似糖链接区连接到核心蛋白的丝氨酸残基上。硫酸软骨素是广泛存在于人和动物软骨组织中的一类黏多糖，主要由动物喉骨、鼻中隔、气管等软骨组织分离纯化而得的一类酸性黏多糖，硫酸软骨素的结构是由D-葡糖醛酸与N-2酰-D氨基半乳糖酸硫酸酯组成。其成分约含50-70个双糖基本单位，分子量为1-5万。根据其分子结构中糖醛酸种类和硫酸酯位置的差异，主要分为三种类型：硫酸软骨素A、硫酸软骨素B、硫酸软骨素C等。硫酸软骨素作为结缔组织中天然存在成分，能够结合水分子用于润滑和支撑关节，使关节活动自如，并具有促进成骨细胞增殖，促进骨钙沉积，诱导新骨形成，保护软骨，抗炎，降血脂等多种生物活性。近年来，硫酸软骨素作为一种新型活性成分，逐渐受到人们的重视和欢迎。

硫酸软骨素的作用：

1、在医学上主要的应用途径是作为治疗关节疾病的药品，与氨基葡萄糖配合使用，具有止痛，促进软骨再生的功效，可以从根本改善关节问题。提供垫衬作用，缓和行动时的冲击和摩擦，能将水分吸入蛋白多糖分子内，使软骨变厚，并增加关节内的滑液量。软骨素的重要功能之一就是作为输送管道，把重要的氧供和营养素输送至关节，帮助清除关节内的废物，同时把二氧化碳和废物加以排除。由于关节软骨并无血液供应，因此所有的充氧、滋养及润滑作用皆来自滑液。

2、硫酸软骨素对角膜胶原纤维具有保护作用，能促进基质中纤维的增长，增强通透性，改善血液循环，加速新陈代谢，促进渗透液的吸收及炎症的消除；其聚阴离子具有强的保水性，能改善眼角膜组织的水分代谢，对角膜有较强的亲和力，能在角膜表面形成一层透气保水膜，改善眼部干燥症状。通过促进基质的生成，为细胞的迁移提供构架，有利于角膜上皮细胞的迁移，从而促进角膜创伤的愈合、渗出液的吸收及炎症的消除。

3、通过高科技深加工，可以治疗神经性头疼、三叉神经痛、冠心病、心绞痛、心肌缺氧、心脑血管疾病、关节痛、动脉粥样硬化及肝炎等症，其中硫酸软骨素还具有抗凝和抗血栓形成的作用，也可用于因链霉素引起的听觉障碍和肝脏功能受损的辅助治疗以及高血脂的辅助治疗。

4、可以作为保健品、食品中的添加剂，具有增强人体体质及抗病菌、美容、抗衰老等作用。改善听力和肌肤干燥。在体内可抑制小肠对脂质和葡萄糖的吸收以达到减肥作用。

5、硫酸软骨素还可以抑制破坏软骨的酵素(例如胶原酶、弹性蛋白酶和组织蛋白酶)，以免软骨被分解或溶解。能从问题的根源处着手，抑制COX-2的活性，以制止关节发炎。

另外，樊洪等在研究硫酸软骨素A对成骨细胞生长的影响中发现，与未吸附硫酸软骨素A的钛组相比，吸附硫酸软骨素A的钛片上的细胞数量明显增多，成骨细胞碱性磷酸酶活性显著增高，细胞层内聚集的钙明显增多，说明钛片在吸附硫酸软骨素A后能促进成骨细胞的增殖、促进细胞的分化以及促进成骨细胞的矿化。

羟丙甲纤维素是一种最为常用的薄膜衣材料，因其溶于冷水成为粘性溶液，故亦常用其2％-5％的溶液作为粘合剂使用。用羟丙甲纤维素作粘合剂时可大大减少药物的接触角，使药物易于润湿，提高片剂的溶出速率。其作粘合剂制粒操作简便、颗粒成粒性好，压片时不易发生外观质量问题。本产品配制4％羟丙甲纤维素的水溶液作为粘合剂使用。

本发明采用碳酸钙、盐酸氨基葡萄糖和硫酸软骨素为主要成分，制备成一种改善骨骼的保健品。由于动物骨的形成是在胶原蛋白等有机物形成的纤维上沉积钙、磷等无机盐而形成的，在钙的沉积过程中硫酸软骨素起着积极的作用，骨中的钙经常是边溶出边沉积的，即钙一面从骨中溶解出来，一面吸收血液中的钙并沉积而形成新骨，使骨骼始终处于一种动态平衡过程中。若硫酸软骨素不足，血液中的钙在骨上的沉积就会受到一定的影响。本申请将采用碳酸钙和硫酸软骨素配合，使钙和硫酸软骨素一起摄取，可以在一定程度上使骨质结实而有效地抑制骨病的发生。同时，通过增加硫酸软骨素的供应，机体自身调节机制得到抑制，骨骼硬化减少，紧实柔韧的骨骼比脆弱的骨骼体积减少10％，强度大大增强。尤其是面部轮廓，不易于变形或者扩张加剧，组织粘附力提高。轮廓骨骼程缩减趋势，恢复年轻状态。另外，软骨素能促进盐酸氨基葡萄糖渗入关节的过程，盐酸氨基葡萄糖和软骨素能更有效地保护、逆转损坏及促进修复关节软骨和膜化骨，使本发明提供的保健品更易于吸收、效果更好。本发明以碳酸钙、盐酸氨基葡萄糖和硫酸软骨素为主要原料，碳酸钙是常用的钙源，通过补钙有效防止骨钙流失，增加骨钙沉积、增加骨量，对防止和延缓骨质疏松有重要作用；盐酸氨基葡萄糖和硫酸软骨素能促进成骨细胞增殖、提高成骨细胞活性，最终达到增加骨密度的功能。三种主要原料相辅相成，更加有效减少骨质疏松的发生。

本发明提供的保健品钙含量高，效果好，吸收好，通过补钙和促进成骨细胞增殖来发挥增加骨密度的功能，以达到更好的预防和改善骨质疏松的作用，提高中老年人的生活水平，并且成本低，适宜于广泛推广使用。同时，本发明还在配方中加入葡萄香精，制备的保健品具有葡萄的酸甜、清香的口感，使人们食用起来更加愉悦、舒适，其酸甜口感也能更加吸引儿童。另外，本发明将该保健品并进行包衣，制成包衣片剂，使产品外表美观、质量稳定、生物利用度好。

具体实施方式

实施例1

一种改善骨关节的保健品，按重量份由以下原辅料制备而成：

碳酸钙10份，盐酸氨基葡萄糖25份，硫酸软骨素30份，微晶纤维素15份，羧甲淀粉钠10份，聚维酮K300.4份，羟丙甲基纤维1份，硬脂酸镁0.5份，萄糖香精0.5份，薄膜包衣剂5份。

上述的改善骨关节的保健品的制备方法，包括以下步骤：

(1)制粉：按重量份称取所需原料，并将碳酸钙、盐酸氨基葡萄糖、羧甲淀粉钠、硬脂酸镁、硫酸软骨素、微晶纤维素分别过筛，得粉状原料；

(2)混合：将步骤(1)制得的碳酸钙粉与一半的羧甲淀粉钠粉混合，得混合粉A；将步骤(1)制得的硫酸软骨素粉、微晶纤维素粉和剩余的羧甲淀粉钠粉混合，得混合粉B；

(3)制粒：将称取好的聚维酮K30用水溶解，搅拌均匀，配制成8％聚维酮K30溶液，备用；将称取好的羟丙甲纤维素用水溶解，搅拌均匀，配制成4％羟丙甲纤维素溶液，备用；

将步骤(2)得到的混合粉A与羟丙甲纤维素溶液混合，得软材C，再过20目筛进行制粒，得湿颗粒C；

将步骤(1)得到的盐酸氨基葡萄糖粉与聚维酮K30溶液混合，得软材D，再过20目筛进行制粒，制得湿颗粒D；

(4)混料压片：将湿颗粒C、湿颗粒D干燥，得到干颗粒C、干颗粒D，然后将干颗粒C、干颗粒D、混合粉B、硬脂酸镁粉混合均匀，然后将进行压片，片芯；

(5)包衣：将称取好的葡萄香精、薄膜包衣剂用水溶解，搅拌均匀，得包衣液；然后用所述包衣液给步骤(4)得到的片芯包薄膜衣，得包衣片。

其中，步骤(1)中，所述过筛为将碳酸钙、盐酸氨基葡萄糖、羧甲淀粉钠分别过80目筛，得碳酸钙细粉、盐酸氨基葡萄糖细粉、羧甲淀粉钠细粉，硬脂酸镁过100目筛，得硬脂酸镁细粉；将硫酸软骨素、微晶纤维素分别过60目筛，得硫酸软骨素中粉、微晶纤维素中粉。步骤(4)中所述干燥其干燥温度为65℃。步骤(4)中湿颗粒C、湿颗粒D干燥后分别过20目筛进行整粒。步骤(4)中片芯重0.7275g/片，步骤(5)中包衣片重0.75g/片。

实施例2

一种改善骨关节的保健品，按重量份由以下原辅料制备而成：

碳酸钙40份，盐酸氨基葡萄糖15份，硫酸软骨素10份，微晶纤维素9份，羧甲淀粉钠6份，聚维酮K300.1份，羟丙甲基纤维0.6份，硬脂酸镁1.1份，萄糖香精0.1份，薄膜包衣剂3份。

上述改善骨关节的保健品其制备方法中，步骤(4)中干燥温度为70℃，其余同实施例1。

实施例3

一种改善骨关节的保健品，按重量份由以下原辅料制备而成：

碳酸钙25份，盐酸氨基葡萄糖40份，硫酸软骨素20份，微晶纤维素5份，羧甲淀粉钠1份，聚维酮K301份，羟丙甲基纤维0.1份，硬脂酸镁1.5份，萄糖香精1份，薄膜包衣剂5份。

上述改善骨关节的保健品其制备方法中，步骤(4)中干燥温度为60℃，其余同实施例1。

安全毒理试验

1、急性毒性试验(MTD法)

SD大鼠(体重180g-220g)20只，雌雄各半。设15/kg.bw一个剂量组。称取实施例1提供的保健品30g，加蒸馏水至80ml，混匀，按2ml/100g.bw于动物空腹状态下分2次经口灌胃，间隔4小时，灌胃后观察俩周内死亡动物数及一般健康情况，根据最大耐受量判断受试物的急性毒性。

实验结果

由表1所示数据可知：实施例1提供的保健品15g/kg.bw剂量经口染毒后，两周内未见动物死亡，亦无明显的中毒症状或不良反应，结果见表1。即实施例1提供的保健品对雌、雄性SD大鼠的急性经口MTD均大于15g/kg.bw，属无毒类。其他实施例结果与实施例1结果相同。

表1.实施例1对SD大鼠的经口急性毒性

2、遗传毒性试验

小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验：昆明种小鼠(体重25g-30g)随机分为5组，每组10只，雌雄各半，设2.5、5.0和10.0g/kg.bw样品试验组(分别称取本发明实施例1提供的保健品2.5g、5.0g和10.0g，各加蒸馏水至20ml混悬)，另设阴性对照(蒸馏水)、阳性对照(环磷酰胺40mg/kg.bw)组。动物分别于第0小时和第24小时按2ml/100g.bw经口灌胃，末次染毒后6小时处死动物，按程序制片。每只动物计数1000个嗜多染红细胞(PCE)，观察含有微核的嗜多染红细胞数，计算微核率(‰)，同时观察200个红细胞中PCE和NCE所占数目，并计算PCE/NCE比值。

小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果：

阳性对照组雌、雄动物的微核率均显著高于对照组(P＜0.05)，实施例1各组的微核率与阴性对照组比较均无显著性差异(P＞0.05)，表明实施例1提供的保健品样品在小鼠骨髓细胞微核实验中为阴性结果，具体见表2。本发明其他实施例提供的保健品其遗传毒性试验与实施例1结果相同。

表2.小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果

注：剂量“0”为阴性对照；与阴性对照比较^*P＜0.05。

3、大鼠30天喂养试验

断乳SD大鼠适应性喂养一周后，按体重随机分为四组，每组20只，雌雄各半，试验期间动物单笼饲养。试验设一个阴性对照组和2.5、5.83和8.33g/kg.bw三个受试物剂量组(分别相当于人体推荐摄入量得30、70和100倍)。按动物体重得10％计算拌食量，各剂量饲料组重受试物浓度分别为25.0g/kg、58.3g/kg和83.3g/kg(饲料)，加工成颗粒饲料喂饲动物，由于中、高剂量组受试物掺入饲料的量超过5％，故通过干酪素调节使各组蛋白质含量基本一致。动物自由摄食，连续30天。每周称一次动物体重、两次给食量和剩食量，并计算摄食量，连续饲养30天后处死动物(处死动物前禁食)，进行血液学测定。所选受试物为实施例1提供的保健品。

实验结果：

阴性对照组和3个剂量组动物在30天喂养期间，摄食、饮水、大小便正常，生长发育情况和一般表现良好，未观察到明显行为改变和中毒表现。

3.1对体重的影响：

受试物各剂量组的动物周摄食量和周增量与阴性对照组比较均无显著性差异(P＞0.05)。表明本发明实施例1提供的保健品对机体生长发育无不良影响。结果见表3。

表3.实施例1对大鼠体重的影响

3.2末期血液学检验结果：

表4显示试验末期的常规血液学指标(红细胞、血红蛋白、白细胞及分类)测定结果。从表可见受试物各剂量组雌、雄鼠的测定指标与阴性对照组比较均无显著性差异(P＞0.05)。

表4.实施例1对大鼠血液学指标的影响

注：RBC为红细胞，Hb为血红蛋白，WBC为白细胞，GR为中性粒细胞，LY为淋巴细胞。

剂量“0”为阴性对照。

上述各项指标的检查结果表明，在大鼠30天喂养实验中，最高剂量为人体推荐摄入量100倍，样品未引起大鼠整体健康状况和生理指标的异常变化，据此初步估计该产品得最大无作用剂量大于8.33g/kg.bw(人体推荐摄入量的100倍)。本发明其他实施例的该项试验检测结果与实施例1相同。

样品对小鼠得急性经口MTD大于15g/kg.bw，判属无毒类。小鼠骨髓细胞微核试验为阴性结果，表明该受试物无致突变作用。在大鼠30天喂养实验中未见动物健康状况和血液学指标异常变化，据此初步估计该产品得最大无作用剂量大于8.33g/kg.bw(人体推荐摄入量的100倍)。

下面对本发明提供的保健品进行功能学试验：

1、材料和方法

1.1实验动物及饲养：SPF级雌性SD大鼠68只，由成都达硕生物科技有限公司提供。动物饲养：动物在屏障级(IVC)动物房内饲养。整个实验过程中，动物自由摄食和饮用去离子水，室温20-26℃，相对湿度40-70％。

1.2饲料：低钙饲料。饲料配方(g％)：酪蛋白10.0，黄豆粉15.0，小麦粉54.0，花生油4.0，纤维素2.0，AIN-76混合盐2.6，AIN-76混合维生素1.0，氯化胆碱0.2，DL-蛋氨酸0.2，淀粉11.0，实测每公斤饲料含钙量为789.5mg，加入CaCO₃使饲料钙含量达到实测150mg/100g，作为低钙饲料。

1.3主要仪器和试剂：原子吸收分光光度计、DPX-L双能X线骨密度仪、电子天秤。

1.4实验方法：大鼠用基础饲料适应性喂饲七天后，根据体重，随机分为下列五组：低钙对照组，高剂量碳酸钙组，样品三个剂量组：417mg/kg.bw组，833mg/kg.bw组和1667mg/kg.bw组(分别相当于人体摄入量83.33mg/kg.bw的5、10、20倍)，样品选用实施例1得到的保健品。低钙对照组，高剂量碳酸钙组，样品高剂量组每组动物14只，样品低、中剂量组每组动物13只。五组动物均用低钙饲料喂饲。低钙对照组以蒸馏水灌胃；三个剂量组以配制的样品液灌胃(灌胃液的配制：分别取样品4.17g、8.33g、16.67g，加蒸馏水定容至100ml，配制成417mg/kg.bw、833mg/kg.bw、1667mg/kg.bw组的灌胃液)；高剂量碳酸钙对照组经口灌入358mg/kg.bw，该剂量相当于样品高剂量组该水平(样品钙含量为86钙/1000g样品，高剂量组1667mg/kg.bw中，含钙为143mg/kg.bw，换算成碳酸钙：358mg/kg.bw。灌胃液配制：取碳酸钙3.58g加蒸馏水定容至100ml)。所有动物灌胃量均为10ml/kg.bw，每天一次，连续灌胃90天，每周称体重并按体重调整灌胃量。实验末股动脉放血处死动物，取出右侧股骨，于105℃烘箱中，烤至恒重、称量骨重。采用DPX-L双能X线骨密度仪测定左股骨骨密度(g/cm²)，其具体的测定方法是用DPX-L双能X线骨密度仪扫描整个左股骨，以骨的平均骨密度代表该骨骨密度。采用原子吸收分光光度法测定右股骨钙含量。

2、结果

2.1样品对大鼠体重、骨重的影响，见表5。

表5.样品对大鼠体重、骨重的影响

^*，与低钙对照组比较P＜0.05，^**，与低钙对照组比较P＜0.01

由表5可见，各组实验体重无显著性差异(P＞0.05)；试验后，样品三个剂量组和高剂量组碳酸钙组的体重显著高于低钙对照组(P＜0.01)，样品中、高剂量组和高剂量组碳酸钙组的右股骨骨重显著高于低钙对照组(P＜0.05，P＜0.01)。

2.2样品对大鼠骨密度及骨钙含量的影响，见表6。

表6.样品对大鼠骨密度及骨钙含量的影响

组别

动物数(只)

左股骨骨密度(g/cm2)

右股骨骨钙含量(mg/g)

低钙对照组	14	0.1670±0.0089	212.35±27.65
				417mg/kg组	13	0.1758±0.0075*	219.97±22.64
833mg/kg组	13	0.1893±0.0126**	220.95±24.80
				1667mg/kg组	14	0.1996±0.0104**	241.21±25.50*
高剂量碳酸钙组	14	0.1961±0.0091**	243.55±27.68*

^*，与低钙对照组比较P＜0.05，^**，与低钙对照组比较P＜0.01

由表6可见，样品各剂量组和高剂量碳酸钙组的左股骨骨密度显著高于低钙对照组(P＜0.05，P＜0.01)，且高剂量组左股骨骨密度与高剂量碳酸钙对照组之间无显著差异(P＞0.05)。样品高剂量组和高剂量碳酸钙对照组的右股骨钙含量显著高于低钙对照组(P＜0.05)，且高剂量组右股骨钙含量与高剂量碳酸钙对照组之间无显著差异(P＞0.05)。

3、小结

实施例1各剂量组左股骨骨密度和高剂量组右股骨骨钙含量显著高于低钙对照组，且对动物生长无不良影响。按评价标准：本发明实施例1具有增加骨密度功能。本发明其他实施例提供的保健品其效果与实施例1相同。

Claims (10)

1.一种改善骨关节的保健品，其特征在于，主要由以下重量份数的原料制成：碳酸钙10-40份，盐酸氨基葡萄糖15-40份，硫酸软骨素10-30份、萄糖香精0.1-1份。

2.根据权利要求1所述的改善骨关节的保健品，其特征在于，所述保健品其原料还包括薄膜包衣剂1-5份。

3.根据权利要求1所述的改善骨关节的保健品，其特征在于，所述保健品的原料还包括微晶纤维素、羧甲淀粉钠、聚维酮K30、羟丙甲纤维素、硬脂酸镁。

4.根据权利要求3所述的改善骨关节的保健品，其特征在于，所述保健品由以下重量份数的原辅料制成：

碳酸钙10-40份，盐酸氨基葡萄糖15-40份，硫酸软骨素10-30份，微晶纤维素5-15份，羧甲淀粉钠1-10份，聚维酮K300.1-1份，羟丙甲基纤维0.1-1份，硬脂酸镁0.5-1.5份，萄糖香精0.1-1份，薄膜包衣剂1-5份。

5.根据权利要求4所述的改善骨关节的保健品，其特征在于，所述保健品由以下重量份数的原辅料制成：

碳酸钙25份，盐酸氨基葡萄糖28份，硫酸软骨素20份，微晶纤维素9份，羧甲淀粉钠6份，聚维酮K300.5份，羟丙甲基纤维0.6份，硬脂酸镁1份，萄糖香精0.6份，薄膜包衣剂3份。

6.一种权利要求4或5所述的改善骨关节的保健品的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)制粉：按重量份称取所需原料，并将碳酸钙、盐酸氨基葡萄糖、羧甲淀粉钠、硬脂酸镁、硫酸软骨素、微晶纤维素分别过筛，得粉状原料；

(2)混合：将步骤(1)制得的碳酸钙粉与一半的羧甲淀粉钠粉混合，得混合粉A；将步骤(1)制得的硫酸软骨素粉、微晶纤维素粉和剩余的羧甲淀粉钠粉混合，得混合粉B；

(3)制粒：将称取好的聚维酮K30用水溶解，搅拌均匀，配制成聚维酮K30溶液，备用；将称取好的羟丙甲纤维素用水溶解，搅拌均匀，配制成羟丙甲纤维素溶液，备用；

将步骤(2)得到的混合粉A与羟丙甲纤维素溶液混合，得软材C，再过筛进行制粒，得湿颗粒C；

将步骤(1)得到的盐酸氨基葡萄糖粉与聚维酮K30溶液混合，得软材D，再过20目筛进行制粒，制得湿颗粒D；

(4)混料压片：将湿颗粒C、湿颗粒D干燥，得到干颗粒C、干颗粒D，然后将干颗粒C、干颗粒D、混合粉B、硬脂酸镁粉混合均匀，然后将进行压片，片芯；

(5)包衣：将称取好的葡萄香精、薄膜包衣剂用水溶解，搅拌均匀，得包衣液；然后用所述包衣液给步骤(4)得到的片芯包薄膜衣，得包衣片。

7.根据权利要求6所述的改善骨关节的保健品的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述过筛为将碳酸钙、盐酸氨基葡萄糖、羧甲淀粉钠分别过80目筛，得碳酸钙细粉、盐酸氨基葡萄糖细粉、羧甲淀粉钠细粉；硬脂酸镁过100目筛，得硬脂酸镁细粉；将硫酸软骨素、微晶纤维素分别过60目筛，得硫酸软骨素中粉、微晶纤维素中粉。

8.根据权利要求6所述的改善骨关节的保健品的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述聚维酮K30溶液浓度为8wt％，所述羟丙甲纤维素溶液浓度为4wt％。

9.根据权利要求6所述的改善骨关节的保健品的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述干燥的干燥温度为60-70℃，步骤(4)中湿颗粒C、湿颗粒D干燥后分别过20目筛进行整粒。

10.根据权利要求6所述的改善骨关节的保健品的制备方法，其特征在于，步骤(4)中片芯重0.7275g/片，步骤(5)中包衣片重0.75g/片。