WO2010128889A1 - Фармацевтическая композиция, включающая арбидол в составе фосфолипидных наночастиц - Google Patents

Фармацевтическая композиция, включающая арбидол в составе фосфолипидных наночастиц Download PDF

Info

Publication number
WO2010128889A1
WO2010128889A1 PCT/RU2010/000163 RU2010000163W WO2010128889A1 WO 2010128889 A1 WO2010128889 A1 WO 2010128889A1 RU 2010000163 W RU2010000163 W RU 2010000163W WO 2010128889 A1 WO2010128889 A1 WO 2010128889A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
arbidol
phospholipid
nanoparticles
drug
particles
Prior art date
Application number
PCT/RU2010/000163
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Александр Иванович АРЧАКОВ
Мария Кирилловна ГУСЕВА
Василий Федорович УЧАЙКИН
Ольга Михайловна ИПАТОВА
Юрий Федорович ДОЩИЦИН
Елена Георгиевна ТИХОНОВА
Наталья Велориковна МЕДВЕДЕВА
Владимир Николаевич ПРОЗОРОВСКИЙ
Оксана Сергеевна СТРЕКАЛОВА
Александр Владимирович ШИРОНИН
Original Assignee
Общество С Ограниченной Ответственностью "Экoбиoфapм"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество С Ограниченной Ответственностью "Экoбиoфapм" filed Critical Общество С Ограниченной Ответственностью "Экoбиoфapм"
Priority to CN2010800200614A priority Critical patent/CN102413829A/zh
Priority to US13/266,843 priority patent/US20120052099A1/en
Priority to EP10772313.2A priority patent/EP2431038A4/en
Publication of WO2010128889A1 publication Critical patent/WO2010128889A1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/107—Emulsions ; Emulsion preconcentrates; Micelles
    • A61K9/1075—Microemulsions or submicron emulsions; Preconcentrates or solids thereof; Micelles, e.g. made of phospholipids or block copolymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses

Definitions

  • composition comprising arbidol in the composition of phospholipid nanoparticles
  • the invention relates to medicine and pharmacology, and relates to a storage-stable composition consisting of plant-based phospholipids nanoparticles, including the antiviral drug arbidol.
  • phospholipid nanoparticles have a great advantage, the effectiveness of which is significantly contributed by the sizes of 15–25 nm.
  • Phospholipid nanoparticles liposomes, micelles
  • phospholipid nanoparticles as colloidal drug carriers is determined mainly by their small size - optimally 15-25 nm, which provides a large "working surface)) of the particle and, therefore, high capacity.
  • phospholipid nanoparticles Due to its chemical structure, phospholipid nanoparticles are capable of serving as carriers for both soluble and insoluble (hydrophobic) drugs in biological fluids.
  • the incorporation of drug compounds into the lipid matrix of nanoparticles allows one to obtain new nanoforms of drugs with high efficiency, bioavailability and reduced side effects.
  • nanoscale creates optimal conditions for the interaction of such particles with the cell.
  • nanoscale creates a unique opportunity for the introduction of particles in the region of gap intercellular junctions, the width of which in some areas can be 30-50 nm. This makes it possible to deliver therapeutic agents to inaccessible for other dosage forms, areas affected by, for example, inflamed tissue.
  • phospholipid nanoparticles and lipoproteins also create optimal conditions for their interaction with each other.
  • phospholipid particles carrying the drug are included in the blood plasma lipoprotein system, with the participation of lipid transport proteins, as a result of which the lipophilic drug molecules together with phospholipids can be transported to the lipoprotein particles.
  • Dispersible phospholipid-stabilized microparticles are known from the state of the art, which are a fast-dispersible solid dosage form consisting of a water-insoluble compound in the form of nanoscale or micromeric solid particles, the surface of which is stabilized by surface modifiers, for example a phospholipid, and the particles are dispersed in a volume-creating matrix (patent RF 2233654).
  • the size of the resulting particles is 0.66-10.6 microns (660-10 000 nm).
  • EP 0 556 394 Al describes a method for preparing a lyophilized preparation for the delivery of drug substances based on refined soybean oil and refined egg phosphatidylcholine.
  • the drug is easily soluble in water with the formation of particles with a size of 10-100 nm and is a fat emulsion.
  • Arbidol is widely known - an antiviral drug with the chemical name 6-bromo-5-hydroxy-1-methyl-4-dimethylaminomethyl-methyl-2-phenylthiomethylindin-3-carboxylic acid hydrochloride monohydrate, chemical formula: C 22 H 25 BG N 2 3 S • HCl (Russian Medicines Register. Encyclopedia of Medicines. 7th edition, 2000, p.95).
  • Arbidol is a crystalline powder from white with a greenish tint to light yellow with a greenish tint. It is practically insoluble in water.
  • Arbidol specifically inhibits influenza A and B viruses.
  • the antiviral effect is due to the suppression of the fusion of the lipid membrane of the virus with cell membranes upon contact of the virus with the cell.
  • Therapeutic efficacy in influenza is expressed in reducing the symptoms of intoxication, the severity of catarrhal phenomena, shortening the period of fever and the overall duration of the disease. It prevents the development of post-influenza complications, reduces the frequency of exacerbations of chronic diseases, and normalizes immunological parameters. When taken orally, it is absorbed from the digestive tract and distributed to organs and tissues. C max in the blood at a dose of 50 mg is reached after 1.2 hours, at a dose of 100 mg - after 1.5 hours. TU2 - about 17 hours. It is excreted unchanged in urine and feces.
  • the objective of the present invention is to develop a non-greasy phospholipid composition of arbidol with an average diameter of liposomal micellar particles of 8-25 nm, having low toxicity, able to withstand long-term storage and transport of the drug in the body with high bioavailability.
  • the problem is solved by the phospholipid composition of arbidol in the form of phospholipid nanoparticles with a size of 8-25 nm, including phosphatidylcholine, maltose and arbidol in the following ratio of components, May. %: phosphatidylcholine 20-43 maltose 55-78 arbidol 2-8
  • Used phosphatidylcholine is the main component of highly purified plant soybean phospholipid, the content of phosphatidylcholine in which is not less
  • the composition contains maltose to obtain lyophilisate, capable of completely recovering its structure after dissolution in water (in particular, particle size).
  • the proposed composition allows to obtain a pharmaceutical preparation with greater bioavailability of arbidol compared to the original drug.
  • Fig.l Pharmacokinetics of arbidol in the composition of phospholipid nanoparticles (NF-arbidol) and arbidol after oral administration of drugs (dose of 25 mg / kg) in experiments on rats.
  • Figure 2 The average life expectancy of animals in the control group and groups of mice that took arbidol and NF-arbidol daily at a dose of 25 and 40 mg / kg of arbidol.
  • Fig. 3 (a, b).
  • the mortality protection rate,%, at 6 (a) and 15 (b) days (the ratio of the number of surviving animals at the moment to their number in the group).
  • Figure 4 Change in the average group weight of animals from time to time after infection.
  • a coarse emulsion is passed through a homogenizer (Mipi-Lab 7.3 VH, Rappie, Denmark) at a pressure of 800 bar.
  • the resulting particles are micelles.
  • 1 ⁇ l of the drug NF-Arbidol contains 2.5 ⁇ g
  • arbidol ( ⁇ 5%) arbidol, i.e. embedding of arbidol in phospholipid nanoparticles is almost 100%. It should be noted that since Arbidol is not soluble in water, it is fully included in phospholipid micelles.
  • the nature of the particle size distribution (the predominance of particles is not more than 9 nm) and the size of the main particle size fraction does not change: more than 96% of the particles have a size (9.0 ⁇ 1.0) nm
  • the particle size was maintained.
  • Blood is collected in a tube with EDTA to a final concentration of EDTA of 1 mg per lml of blood.
  • NF-arbidol unlike NF-arbidol, free arbidol when added to whole blood causes hemolysis. So thus, NF-arbidol can be used for intravenous injection.
  • Rats are orally administered with 1 ml of solution A and B.
  • Table 3 and FIG. 1 show the results of a study of the pharmacokinentics of arbidol and NF-arbidol. Table 3
  • the figure shows that treatment with arbidol NF-arbidol increases the average life expectancy of animals compared with the control group. Moreover more effective treatment with NF-arbidol. A characteristic of the effectiveness of arbidol-containing drugs is also an indicator of protection against mortality, shown in Fig.Z.
  • the third criterion for the antiviral effectiveness of the studied drugs is the change in weight in the experimental groups of animals (Fig.Z) in relation to the control (weight loss indicates the severity of the disease).

Abstract

Изобретение относится к медицине и фармакологии и касается стабильной при хранении композиции, состоящей из наночастиц на основе растительных фосфолипидов, включающих антивирусный препарат арбидол. Задачей настоящего изобретения является разработка нежировой фосфолипидной композиции арбидола со средним диаметром липосомально-мицеллярных частиц 8-25 нм, обладающей низкой токсичностью, способной выдерживать длительное хранение и осуществлять транспорт лекарственного средства в организме с обеспечением его высокой биодоступности. Задача решается фосфолипидной композицией арбидола в виде фосфолипидных наночастиц размером 8-25 нм, включающей фосфатидилхолин, мальтозу и арбидол при следующем соотношении компонентов, мас. %: фосфатидилхолин 20-43 мальтоза 55-78 арбидол 2-8.

Description

Фармацевтическая композиция, включающая арбидол в составе фосфолипидных наночастиц
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Изобретение относится к медицине и фармакологии и касается стабильной при хранении композиции, состоящей из наночастиц на основе растительных фосфолипидов, включающих антивирусный препарат арбидол.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Одной из наиболее актуальных проблем современной фармакологии является создание лекарственных форм, которые при введении в организм обладают достаточной биодоступностью, чтобы достигать области поражения. Биодоступность лекарств определяется среди многих факторов их растворимостью.
Около 60% фармацевтических препаратов, находящихся в стадии разработки, и многие из широко используемых лекарственных препаратов относятся к плохо растворимым соединениям.
Известно, что большинство лекарственных препаратов, в том числе и арбидол, ограниченно и медленно проникают в клетки через естественный барьер - биологическую мембрану. Для преодоления этого барьера лекарственное соединение должно обладать определенной степенью липофильности.
В последнее десятилетие исследователи уделяют существенное внимание не только поиску новых биологически активных веществ, но и повышению эффективности уже созданных лекарств путем конструирования систем для их транспорта в организме, повышению биодоступности и эффективности специфического действия. В этом отношении большим преимуществом обладают фосфолипидные наночастицы, в эффективность которых существенный вклад вносят размеры - 15-25 нм. Фосфолипидные наночастицы (липосомы, мицеллы) биодеградируемы, биологически инертны, не вызывают аллергических, антигенных или пирогенных реакций. Поверхность липидных наночастиц, в сравнении с другими частицами, легко модифицируется для обеспечения направленности доставки.
Эффективность фосфолипидных наночастиц как коллоидальных переносчиков лекарств определяется в основном их малыми размерами - оптимально 15-25 нм, что обеспечивает большую «paбoчyю поверхность)) частицы и за счет этого высокую ёмкость.
Фосфолипидные наночастицы благодаря своей химической структуре, способны служить переносчиками как для растворимых, так и для нерастворимых в биологических жидкостях (гидрофобных) лекарственных препаратов. Встраивание лекарственных соединений в липидную матрицу наночастиц позволяет получить новые наноформы лекарственных препаратов с высокой эффективностью, биодоступностью и сниженными побочными действиями.
Высокая общая площадь поверхности, в сочетании с наноразмерами, создает оптимальные условия для взаимодействия таких частиц с клеткой. Кроме того, наноразмер создает уникальную возможность внедрения частиц в области щелевых межклеточных контактов, ширина которых в некоторых участках может составлять 30-50 нм. Благодаря этому появляется возможность доставки терапевтических агентов к недоступным для других лекарственных форм участкам поражённой например, воспаленной, ткани.
Близкие размеры, наряду с общим характером поверхности, фосфолипидных наночастиц и липопротеинов создают также оптимальные условия для их взаимодействия друг с другом. При этом фосфолипидные частицы, несущие лекарство, включаются в систему липопротеинов плазмы крови, с участием липид- транспортных белков, в результате чего молекулы липофильного лекарства вместе с фосфолипидами могут транспортироваться к частицам липопротеинов.
Из существующего уровня техники известны диспергируемые стабилизированные фосфолипидом микрочастицы, представляющие собой быстродиспергируемую твердую дозированную форму, состоящую из нерастворимого в воде соединения в виде наномерных или микромерных твердых частиц, поверхность которых стабилизирована поверхностными модификаторами, например фосфолипидом, при этом частицы диспергированы в создающей объем матрице (патент РФ 2233654). Размер получаемых частиц составляет 0,66-10,6 мкм (660-10 000 нм).
Известен также способ получения субмикронных частиц водонерастворимого или плохо растворимого органического фармацевтически активного соединения, включающий стадии растворения этого соединения в смешиваемом с водой первом растворителе, смешивания этого раствора со вторым растворителем, в который может быть добавлен фосфатидилхолин, и гомогенизации, или гомогенизации в противотоке полученной предсуспензии или воздействия на нее ультразвуком (патент РФ 2272616). Размер получаемых частиц составляет 0,1-2,46 мкм (100- 2500 нм).
В Европейском патенте EP 0556394 Al описан способ получения лиофилизированного препарата для доставки лекарственных субстанций, на основе рафинированного соевого масла и рафинированного яичного фосфатидилхолина. Препарат легко растворяется в воде с образованием частиц с размером 10-100 нм и представляет собой жировую эмульсию.
Широко известен арбидол - антивирусный препарат, имеющий химическое название этиловый эфир 6-бpoм-5-гидpoкcи- 1 -мeтил-4- димeтилaминoмeтил-2-фeнилтиoмeтилиндoл-З - карбоновой кислоты гидрохлорид моногидрат, химическая формула: C22H25BГ N2O3S • HCl (Регистр лекарственных средств России. Энциклопедия лекарств. 7 издание, 2000, cтp.95). Арбидол представляет собой кристаллический порошок от белого с зеленоватым оттенком до светло-желтого с зеленоватым оттенком цвета. Практически нерастворим в воде.
Арбидол специфически ингибирует вирусы гриппа А и В. Противовирусное действие обусловлено подавлением слияния липидной оболочки вируса с клеточными мембранами при контакте вируса с клеткой. Терапевтическая эффективность при гриппе выражается в уменьшении симптомов интоксикации, выраженности катаральных явлений, укорочении периода лихорадки и общей продолжительности заболевания. Предупреждает развитие постгриппозных осложнений, снижает частоту обострений хронических заболеваний, нормализует иммунологические показатели. При приеме внутрь всасывается из ЖКТ и распределяется по органам и тканям. Cmax в крови при дозе 50 мг достигается через 1,2 ч, при дозе 100 мг — через 1,5 ч. TУ2 — примерно 17 ч. Выделяется в неизмененном виде с мочой и фекалиями. СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Задачей настоящего изобретения является разработка нежировой фосфолипидной композиции арбидола со средним диаметром липосомально-мицеллярных частиц 8-25 нм, обладающей низкой токсичностью, способной выдерживать длительное хранение и осуществлять транспорт лекарственного средства в организме с обеспечением его высокой биодоступности.
Поставленная задача решается фосфолипидной композицией арбидола в виде фосфолипидных наночастиц размером 8-25 нм, включающей фосфатидилхолин, мальтозу и арбидол при следующем соотношении компонентов, мае. %: фосфатидилхолин 20-43 мальтоза 55-78 арбидол 2-8
Используемый фосфатидилхолин является основным компонентом высокоочищенного растительного соевого фосфолипида, содержание фосфатидилхолина в котором не менее
73-95 % масс. Другие фосфолипидные компоненты могут содержаться в количествах, не превышающих допустимые
(лизофосфатидилхолина до 4 % масс, следовые количества других фосфолипидов).
В качестве вспомогательных фармакологически приемлемых веществ композиция содержит мальтозу для возможности получения лиофилизата, способного после растворения в воде полностью восстанавливать свою структуру (в частности, размер частиц).
Согласно изобретению, предложенная композиция позволяет получать фармацевтический препарат с большей биодоступностью арбидола по сравнению с исходным лекарством.
ПЕРЕЧЕНЬ ЧЕРТЕЖЕЙ
Фиг.l. Фармакокинетика арбидола в составе фосфолипидных наночастиц (НФ-арбидол) и арбидола после перорального введения препаратов (доза 25 мг/кг) в экспериментах на крысах.
Фиг.2. Средняя продолжительность жизни животных в контрольной группе и группах мышей, принимавших арбидол и НФ-арбидол ежедневно в дозе по арбидолу 25 и 40 мг/кг веса.
Фиг.З (а, б). Показатель защиты от смертности, %, на 6 (а) и 15 (б) сутки (отношение числа выживших животных на данный момент к их числу в группе).
Фиг.4. Изменение среднего по группам веса животных от времени после инфицирования.
ПРИМЕР ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ Способ получения фосфолипидной композиции арбидола осуществляется следующим образом. Материалы и методы В работе использовались следующие материалы:
1. Соевый фосфолипид фирмы Липоид ГмбХ, Германия с содержанием фосфатидилхолина 73-95 %.
2. Мальтозы моногидрат фирмы MERCK, Германия.
3. Вода для инъекций (по ФС JVb 42-4587-95).
4. Арбидол, субстанция (по ФС 42-3151-95).
ЗАМЕНЯЮЩИЙ ЛИСТ (ПРАВИЛО 26) 1. Получение арбидола в составе фосфолипидных наночастиц (НФ-арбидол):
А. Получение грубой эмульсии.
1. 25 г мальтозы растворяют в 200 мл воды с температурой 45 0C (до полного растворения).
2. В полученный раствор мальтозы добавляют 625 мг арбидола и 6,25 г фосфолипида.
3. С помощью бытового блендера проводят гомогенизацию полученной смеси и ее объем доводили до 250 мл. Б. Получение НФ-арбидола.
1. Грубую эмульсию пропускают через гомогенизатор (Мiпi-Lаb 7.3 VH, Rаппiе, Дания) при давлении 800 бар.
2. Регистрируют светопропускание при 660 нм.
3. Фильтруют препарат через фильтр 0,45 микрон. 4. Повторно регистрируют светопропускание при 660 нм.
5. Определяют размер частиц в препарате.
6. Анализируют содержание арбидола в полученном препарате с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). 7. Разливают препарат во флаконы по 10 мл и лиофильно высушивают.
8. Растворяют содержимое флакона в 10 мл и определяют размер частиц после растворения лиофильно высушенного порошка препарата. 9. Проводят определение размера частиц через сутки, двое и неделю хранения растворенного препарата при температуре 4° С. Результаты:
Анализ размера частиц с помощью прибора Вескmап N5 (см. табл. 1) свидетельствует о том, что более 96% частиц имеют размер
(9,1 ± 1,0) нм. Исходя из размера молекулы фосфолипида (длины жирнокислотных хвостов), полученные частиц представляют собой мицеллы.
Таблица 1
Распределение частиц по размеру в препарате арбидол в составе нанофосфолипидных частиц
Figure imgf000010_0001
По данным ВЭЖХ 1 мкл препарата НФ-Арбидол содержит 2,5 мкг
(± 5%) арбидола, т.е. встраивание арбидола в фосфолипидные наночастицы составляет практически 100%. Следует отметить, что т.к. арбидол не растворим в воде, он полностью входит в состав фосфолипидных мицелл.
После растворения лиофильно высушенного препарата НФ- арбидол характер распределения частиц по размеру (преобладание частиц не более 9 нм) и размер основной по размеру фракции частиц не изменяется: более 96% частиц имеют размер (9,0 ± 1,0) нм. При хранении растворенного препарата при 4° С в течение 7 суток размер частиц сохранялся.
Распределение частиц по размеру в растворе препарата арбидол в составе нанофосфолипидных частиц в момент выпуска и через 7 дней хранения
Таблица 2
Figure imgf000011_0001
2. Определение арбидола и НФ-арбидола в растворе, в цельной крови и плазме в экспериментах iп vitrо (колибровка метода определения с помощью ВЭЖХ, валидация метода - полнота экстракции при выбранном способе предобработки биологических жидкостей - кровь, плазма).
Определение арбидола в свободной форме и в составе фосфолипидных наночастиц:
2.1 Анализ свободного арбидола из метанольного раствора (в воде арбидол не растворим, в этаноле малорастворим) проводят методом ВЭЖХ в системе вода с 0,1% ТФУ - ацетонитрил. В колонку вносят 20 мкл анализируемого раствора в метаноле. Условия хроматографирования: 0-5 минут градиент ацетонитрила 5- 60%, 5-10 минут ацетонитрил 60%. Чувствительность метода не менее 0,5 мкг/мл, метод имеет линейную зависимость в интервале 0-1000 нг арбидола.
2.2 К 10 мкл раствора НФ-арбидола добавляем 90 мкл метанола, интенсивно перемешивают. Полученный раствор наносят на колонку как в пункте 2.1
2.3 Расчет концентрации арбидола основан на полученном из калибровочного графика значении: 1 мкг арбидола соответствует площади пика на хроматограмме 2032 ед.
Определение арбидола в цельной крови и плазме крови в экспериментах iп vitrо
1. Кровь отбирают в пробирку с ЭДТА до конечной концентрации ЭДТА 1 мг на lмл крови.
2. Лиофильно высушенный Нф-арбидол растворяют в 5 мл воды (5мг/мл по арбидолу).
3. Готовят суспензию арбидола на воде 5 мг/мл 4. А. К 950 мкл цельной крови добавляют 50 мкл раствора НФ-арбидола (по арбидолу 5 мг/мл).
Б. К 950 мкл цельной крови добавляют 50 мкл водной суспензии арбидола. 5. Смеси А и Б тщательно перемешивают и инкубируют 20 минут при 37°C.
6. Отбирают аликвоту 100 мкл растворов А и Б в эппендорфы (V > 1.5 мл), добавляют 900 мкл метанола, интенсивно перемешивают в течение 3-5 минут, центрифугируют в течение 10 минут при 600Og для осаждения белков, надосадочную жидкость анализируют на содержание арбидола с помощью ВЭЖХ.
7. Цельную кровь с арбидолом (растворы А и Б) центрифугируют для получения плазмы (10 минут, 600Og).
8. К 100 мкл плазмы добавляют 900 мкл метанола, интенсивно перемешивают в течение 3-5 минут, центрифугируют в течение 10 минут при 6000 g, надосадочную жидкость анализируют на содержание арбидола с помощью ВЭЖХ
1. Сравнивают результаты, полученные при экстракции метанолом цельной крови и плазмы. В качестве контроля для анализа полноты экстракции используют вместо цельной крови физиологический раствор.
Результаты и выводы:
1. Выбранный способ предобработки цельной крови и плазмы - обработка 9-ти кратным избытком метанола - позволяет полностью экстрагировать арбидол из цельной крови и плазмы.
2. Следует отметить, что в отличие от НФ-арбидола свободный арбидол при добавлении в цельную кровь вызывает гемолиз. Таким образом, НФ-арбидол может быть использован для внутривенных инъекций. В настоящее время существует лекарственная форма арбидола только в виде капсул и таблеток.
3. Предполагаем более тщательно проверить дозозависимое влияние арбидола и НФ-арбидола на гемолиз крови в экспериментах iп vitrо.
Сравнение биодоступности арбидола и НФ-арбидола при пероральном введении в экспериментах на животных.
Описание эксперимента: 1. Содержимое флакона НФ-Арбидол растворяют в 5 мл. (А)
2. Готовят раствор арбидола в концентрации 5 мг/мл (суспензия в воде). (Б)
3. У животных за 24 часа до эксперимента убирают корм, оставляют только воду, в день эксперимента животных взвешивают. 4. Крысам перорально вводят по 1 мл раствора А и Б.
5. Забор крови через 5, 10, 15, 30, 45 минут в эппендорфы с ЭДТА. После набора крови эппендорф интенсивно встряхивают.
6. Обработка крови: к 100 мкл крови добавляют 900 мкл метанола при интенсивном перемешивании в течении 3-5 минут. Центрифугируют для осаждения белков. Далее анализируют с помощью ВЭЖХ на наличие арбидола в образцах. Результаты:
Вводимая доза составляла 25 мг/кг. В таблице 3 и на фиг.l приведены результаты по исследованию фармакокинентики арбидола и НФ-арбидола. Таблица 3
Figure imgf000015_0001
Сравнение противовирусной активности арбидола и НФ- арбидола на модели гриппозной пневмонии мышей.
Схема эксперимента: в предварительно проведенных экспериментах было определено значение LD50 для выбора дозы инфицирования. В дальнейшем заражение производили дозой вируса с множественностью 10 LD50. Лечение проводили при пероральном приеме ежедневно в двух дозах (по арбидолу 25 и 40 мг/кг), контрольная группа не получала никакого лечения. В качестве показателей активности исследованных препаратов при заражении животных (мышей) вирусом AAии/2/69 были выбраны изменение веса животных, показатель защиты от смертности и средняя продолжительность жизни (дни) при ежедневном приеме арбидол-содержащих препаратов. На фиг.2 приведены сравнительные данные по средней продолжительности жизни животных.
Из рисунка видно, что лечение арбидолом НФ-арбидолом способствует увеличению средней продолжительности жизни животных по сравнению с контрольной группой. Причем эффективнее лечение НФ-арбидолом. Характеристикой эффективности арбидол-содержащих препаратов является также показатель защиты от смертности, приведенный на фиг.З.
Третьим критерием противовирусной эффективности изучаемых препаратов является изменение веса в экспериментальных группах животных (фиг.З) по отношению к контролю (снижение веса свидетельствует о тяжести протекания заболевания).
Из графика на фиг.4 видно, что максимальная потеря в весе наблюдалась в контрольной группе на 5 день. В группах мышей, получавших НФ-арбидол в дозе 40 мг/кг, потери веса не происходило. Таким образом лечение НФ-арбидолом, т.е. арбидолом в составе фосфолипидных наночастиц, было более эффективно по сравнению со свободным лекарством.

Claims

Формула изобретения
Фармацевтическая композиция арбидола в форме фосфолипидных наночастиц размером 8-25 нм, включающая фосфатидилхолин растительного происхождения 78-95 %-ный, мальтозу и арбидол при следующем соотношении компонентов, мае. %: фосфатидилхолин 20 - 43 мальтоза 55 - 78 арбидол 2 - 8
PCT/RU2010/000163 2009-05-05 2010-04-07 Фармацевтическая композиция, включающая арбидол в составе фосфолипидных наночастиц WO2010128889A1 (ru)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2010800200614A CN102413829A (zh) 2009-05-05 2010-04-07 含有磷脂纳米颗粒形式阿比朵尔的药物组合物
US13/266,843 US20120052099A1 (en) 2009-05-05 2010-04-07 Pharmaceutical composition containing arbidol in the form of phospholipid nanoparticles
EP10772313.2A EP2431038A4 (en) 2009-05-05 2010-04-07 PHARMACEUTICAL COMPOSITION WITH ARBIDOL IN THE FORM OF PHOSPHOLIPID NANOPARTICLES

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2009116832/15A RU2411942C2 (ru) 2009-05-05 2009-05-05 Фармацевтическая композиция, включающая арбидол в составе фосфолипидных наночастиц
RU2009116832 2009-05-05

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2010128889A1 true WO2010128889A1 (ru) 2010-11-11

Family

ID=43050248

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2010/000163 WO2010128889A1 (ru) 2009-05-05 2010-04-07 Фармацевтическая композиция, включающая арбидол в составе фосфолипидных наночастиц

Country Status (5)

Country Link
US (1) US20120052099A1 (ru)
EP (1) EP2431038A4 (ru)
CN (1) CN102413829A (ru)
RU (1) RU2411942C2 (ru)
WO (1) WO2010128889A1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20140341999A1 (en) * 2011-12-06 2014-11-20 Obschestvo S Ogranichennoy Onvetstvennostyu ''ibmkh-Ekobiofarm' Antitubercular composition and method for producing same

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102786461B (zh) * 2011-05-18 2016-08-31 中国医学科学院药物研究所 阿比朵尔盐酸盐晶e型及制法与在药品和保健品中应用
CN102836134A (zh) * 2012-08-31 2012-12-26 石家庄中硕药业集团有限公司 一种甲磺酸阿比朵尔冻干粉针制剂的制备方法
CN105879009A (zh) * 2016-04-18 2016-08-24 丹诺医药(苏州）有限公司 一种用于治疗革兰氏阴性菌感染的抗菌药物组合物
CN111743868B (zh) * 2020-06-24 2021-04-06 江苏吴中医药集团有限公司 一种包载盐酸阿比多尔的聚合物胶束的冻干制剂及其制备方法
CN112098549B (zh) * 2020-09-03 2022-11-15 长沙创新药物工业技术研究院有限公司 一种测定盐酸阿比多尔溶液中杂质含量的方法
CN112933043B (zh) * 2021-02-24 2022-07-12 石家庄四药有限公司 一种盐酸阿比多尔注射乳剂及其制备方法
CN113842370B (zh) * 2021-11-01 2023-05-05 石家庄四药有限公司 一种盐酸阿比多尔片及其制备方法
CN114392234B (zh) * 2022-01-18 2023-04-07 成都市第五人民医院 一种脂质组合物及其制备方法和使用方法
CN114983946A (zh) * 2022-06-13 2022-09-02 江苏涟水制药有限公司 一种盐酸阿比多尔颗粒组合物及其制备方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0556394A1 (en) 1990-11-06 1993-08-25 Nippon Shinyaku Company, Limited Lyophilized preparation and production thereof
RU2233654C2 (ru) 1998-11-20 2004-08-10 Ртп Фарма Инк. Диспергируемые стабилизированные фосфолипидом микрочастицы
RU2240784C1 (ru) * 2003-09-02 2004-11-27 Открытое акционерное общество "Щелковский витаминный завод" Лекарственное средство на основе арбидола
RU2272616C2 (ru) 2000-12-22 2006-03-27 Бакстер Интернэшнл Инк. Способ получения суспензий субмикронных частиц
RU2330664C2 (ru) * 2006-04-26 2008-08-10 Александр Иванович Арчаков Лекарственный препарат и способ лечения ревматических заболеваний
CN101249076A (zh) * 2008-04-03 2008-08-27 徐向兵 一种阿比多尔颗粒制剂及其流化床包衣制备方法

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100344283C (zh) * 2003-04-08 2007-10-24 石药集团中奇制药技术（石家庄）有限公司 阿比朵尔包合物
RU2304431C2 (ru) * 2005-08-12 2007-08-20 Александр Иванович Арчаков Способ получения капсулированной лекарственной формы фосфолипидного препарата "фосфоглив" для лечения и профилактики острых и хронических заболеваний печени
CN1742720A (zh) * 2005-09-20 2006-03-08 江苏吴中苏药医药开发有限责任公司 一种阿比多尔制剂及其制备方法
EP1970061A4 (en) * 2005-12-28 2009-04-08 Zakrytoe Aktsionernoe Obschest MEDICINE PRODUCT FOR THE TREATMENT OF VIRUS INFECTIONS

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0556394A1 (en) 1990-11-06 1993-08-25 Nippon Shinyaku Company, Limited Lyophilized preparation and production thereof
RU2233654C2 (ru) 1998-11-20 2004-08-10 Ртп Фарма Инк. Диспергируемые стабилизированные фосфолипидом микрочастицы
RU2272616C2 (ru) 2000-12-22 2006-03-27 Бакстер Интернэшнл Инк. Способ получения суспензий субмикронных частиц
RU2240784C1 (ru) * 2003-09-02 2004-11-27 Открытое акционерное общество "Щелковский витаминный завод" Лекарственное средство на основе арбидола
RU2330664C2 (ru) * 2006-04-26 2008-08-10 Александр Иванович Арчаков Лекарственный препарат и способ лечения ревматических заболеваний
CN101249076A (zh) * 2008-04-03 2008-08-27 徐向兵 一种阿比多尔颗粒制剂及其流化床包衣制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"Russian Drug Register. Encyclopedia of Medicines, 7th edition,", 2000, pages: 95
See also references of EP2431038A4 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20140341999A1 (en) * 2011-12-06 2014-11-20 Obschestvo S Ogranichennoy Onvetstvennostyu ''ibmkh-Ekobiofarm' Antitubercular composition and method for producing same

Also Published As

Publication number Publication date
RU2411942C2 (ru) 2011-02-20
CN102413829A (zh) 2012-04-11
EP2431038A1 (en) 2012-03-21
US20120052099A1 (en) 2012-03-01
RU2009116832A (ru) 2010-11-10
EP2431038A4 (en) 2014-01-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2411942C2 (ru) Фармацевтическая композиция, включающая арбидол в составе фосфолипидных наночастиц
ES2292782T3 (es) Nueva composicion farmaceutica.
Parveen et al. Oil based nanocarrier for improved oral delivery of silymarin: in vitro and in vivo studies
AU598958B2 (en) Improved amphotericin b liposome preparation
US6592894B1 (en) Hydrogel-isolated cochleate formulations, process of preparation and their use for the delivery of biologically relevant molecules
AT410896B (de) Teilchen enthaltend biologisch aktives peptid
CN101744763B (zh) 一种恩诺沙星纳米乳液及其制备方法
RU2391966C1 (ru) Наносистема на основе растительных фосфолипидов для включения биологически активных соединений и способ ее получения (варианты)
BRPI1014278B1 (pt) método para produzir uma forma de dosagem compreendendo metaxolona, forma de dosagem, composição farmacêutica compreendendo a referida forma de dosagem e uso da mesma
BRPI0619565A2 (pt) composições lipossÈmicas
EP1176984B1 (de) Arzneistoffträger zur kontrollierten wirkstoffapplikation hergestellt aus lipidmatrix-arzneistoff-konjugaten (lak-partikel)
KR20040074052A (ko) 증가된 용해도를 갖는 플라바노리그난 제제
CN101955505B (zh) 一种免疫抑制剂及其组合物
RU2411935C1 (ru) Фармацевтическая композиция на основе доксорубицина и фосфолипидных наночастиц для лечения онкологических заболеваний
JP2007504256A (ja) 生物活性剤の送達のための組成物及び方法
CN102048702B (zh) 一种联苯双酯纳米结晶制剂及其制备方法
Bonepally et al. Fabrication and investigations on hepatoprotective activity of sustained release biodegradable piperine microspheres
RU2330664C2 (ru) Лекарственный препарат и способ лечения ревматических заболеваний
RU2740553C2 (ru) Способ получения липосомальной формы бетулина, обладающей гепатопротекторной активностью
RU2730488C1 (ru) Фармацевтическая композиция на основе глюкокортикостероида будесонида и фосфатидилхолина для сухой ингаляции
CA2437168A1 (en) Retinoid hepatitis therapy
HD PREPARATION AND CHARACTERIZATION OF NIMODIPINE LOADED PRONIOSOMES FOR ENHANCED SOLUBILITY
Sharma et al. Pharmacosomes as Unique and Potential Drug Delivery System
Mantry et al. Emerging Implementation of Nano-Suspension Technology for Delivery of Poorly Soluble Drug for the Treatment of Helminths Disease
Khayatan et al. Marketed antiparasitic nanotechnology-based products and drawbacks

Legal Events

Date Code Title Description
WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 201080020061.4

Country of ref document: CN

121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 10772313

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 13266843

Country of ref document: US

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

REEP Request for entry into the european phase

Ref document number: 2010772313

Country of ref document: EP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2010772313

Country of ref document: EP