WO2010081262A1 - 一种治疗糖尿病肾病的药物组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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methoxycoumarin
hydroxycoumarin
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diabetic nephropathy
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朱荃
石兴华
汤丹
郑兆广
何宝
段婷婷
顾斐
程慧荃
黄晓玲
黄艳霞
王汝上
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Definitions

  • the present invention relates to the field of traditional Chinese medicine and, in particular, to a pharmaceutical composition for treating diabetic nephropathy, and a preparation method and application thereof. Background technique
  • Diabetic nephropathy is one of the major complications of diabetes and has become the leading cause of end-stage renal failure in Western countries.
  • Cortex Mori is the dry root bark of the mulberry plant sangori/s alba L., which is sweet and cold. It has the functions of relieving lung and relieving asthma, diminishing water and swelling, and treating lung heat and cough, edema and fullness of urine. Less, facial edema, recent pharmacological studies have shown that mulberry bark has the effects of lowering blood sugar, blood pressure, diuresis, antitussive and antiasthmatic, anti-HIV and anti-tumor activity. Since the 1970s, some scholars have isolated and confirmed the hypoglycemic component 1-deoxynojirimycin from mulberry bark.
  • An object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for treating diabetic nephropathy and a preparation method thereof, wherein the active ingredient of the pharmaceutical composition is a coumarin substance.
  • a pharmaceutical composition for treating diabetic nephropathy comprising at least one of 7-hydroxycoumarin and 7-hydroxy-6-methoxycoumarin as an active ingredient, and a conventional pharmaceutical carrier, said activity
  • the weight percentage of the ingredients is
  • the active ingredient is present in an amount of from 5 to 70% by weight.
  • the pharmaceutical composition consists of 7-hydroxycoumarin and 7-hydroxy-6-methoxycoumarin as active ingredients, and a conventional pharmaceutical carrier, 7-hydroxycoumarin: 7-hydroxyl
  • the weight ratio of 6-methoxycoumarin is 1:4-4:1.
  • the pharmaceutical carrier of the present invention refers to a conventional pharmaceutical carrier in the pharmaceutical field, such as a diluent, an excipient such as water, a filler such as starch, lactose or sucrose, etc.; a binder such as a cellulose derivative , alginate, gelatin and polyvinylpyrrolidone; wetting agents such as glycerin; disintegrants such as agar, calcium carbonate and sodium hydrogencarbonate; absorption enhancers such as quaternary ammonium compounds; surfactants such as hexadecanol; adsorption carriers such as kaolin And soap clay; lubricants such as talc, calcium and magnesium stearate, and polyethylene glycol. It is also possible to add other adjuvants such as flavoring agents, sweeteners and the like to the composition.
  • a diluent such as a diluent, an excipient such as water, a filler such as starch, lactose or suc
  • the pharmaceutical composition of the present invention can be prepared into a conventional dosage form by a conventional preparation method, and the conventional preparation forms are mainly oral preparations, including tablets, capsules, granules, dropping pills, oral liquids and the like.
  • the dosage of the pharmaceutical composition of the present invention may be adjusted depending on the particular mode of administration, the severity of the condition, and the like. 'In general, the reference dose for clinical oral use is 10 to 70 mg/d.
  • a method for preparing a pharmaceutical composition for treating diabetic nephropathy wherein at least one of 7-hydroxycoumarin or 7-hydroxy-6-methoxycoumarin as an active ingredient is mixed with a conventional pharmaceutical carrier, That is.
  • the pharmaceutical composition of the present invention can be produced according to a conventional production method in the field of pharmacy.
  • the active ingredient is mixed with a plurality of carriers and then formulated into the desired dosage form.
  • the present invention also provides the use of 7-hydroxycoumarin and/or 7-hydroxy-6-methoxycoumarin for the preparation of a medicament for the treatment of diabetic nephropathy.
  • the present invention proves for the first time that the coumarin substance extracted from mulberry bark has the function of lowering blood sugar, and provides a new therapeutic candidate drug for patients with diabetes and its complications.
  • the pharmaceutical composition of the invention has better therapeutic effect on diabetic nephropathy than the water extract of mulberry white skin, and the active ingredient is clear, the quality is easy to control, and the traditional Chinese medicine has unclear active ingredients, difficult quality control, and certain Disadvantages such as toxic side effects.
  • the pharmaceutical composition of the present invention is rich in raw materials and can be processed into oral dosage forms such as dropping pills, granules, tablets, etc., and is convenient to use.
  • the pharmaceutical composition of the present invention has a remarkable effect of treating and preventing glomerular damage in diabetes, because it can significantly prevent the increase of serum creatinine in diabetes, significantly reduce the urine volume and urine protein of diabetic rats, and lower the renal index. It shows that it has a significant preventive effect on diabetic nephropathy.
  • Figure 1 shows the hypertrophic changes of rat mesangial cells under high glucose culture with 7-hydroxycoumarin and 7-hydroxy-6-methoxycoumarin (HE, 200X);
  • A normal control group
  • B glucose (25mm 0 l/L) group
  • C mulberry white water extract (0. lg/L)
  • D 7-hydroxycoumarin ( ⁇ /L)
  • E 7-hydroxycoumarin (0. mol/L)
  • F 7-hydroxycoumarin (0. ⁇ /L)
  • G 7-hydroxy-6-methoxycoumarin ( ⁇ /L)
  • H 7-hydroxy-6-methoxycoumarin (0.
  • Figure 2 is the extracellular matrix proliferation of rat mesangial cells cultured in high glucose culture with 7-hydroxycoumarin and 7-hydroxy-6-methoxycoumarin (PAS, 200X);
  • A normal control group
  • B glucose (25mmol/L) group
  • C mulberry white water extract (0. lg/L)
  • D 7-hydroxycoumarin ( ⁇ mol/L)
  • E 7-hydroxycoumarin (0. ⁇ /L)
  • F 7-hydroxycoumarin (0. ⁇ /L)
  • G 7-hydroxy-6-methoxycoumarin (1Hmol/L)
  • H 7-hydroxy-6-methoxycoumarin (0.
  • Figure 3 is a rat glomerular mesangial cell cultured in high glucose by 7-hydroxycoumarin and 7-hydroxy-6-methoxycoumarin The effect of CTGF expression (CTGF, 200X);
  • A normal control group
  • B glucose (25mmol/L) group
  • C negative control (without CTGF antibody);
  • 0 mulberry white water extract (O.lg/L);
  • E 7-hydroxy scent Bean ( ⁇ /L);
  • F 7-hydroxycoumarin (0. ⁇ /L);
  • G 7-hydroxycoumarin ( ⁇ . ⁇ );
  • ⁇ 7-hydroxy-6-methoxy Beans ( ⁇ /L);
  • I 7-hydroxy-6-methoxycoumarin (0.
  • the coumarin compounds for the preparation of a medicament for treating diabetic nephropathy according to the present invention are 7-hydroxycoumarin ( ⁇ ) and 7-hydroxy-6-methoxycoumarin ( ⁇ ), and their chemical structures are as follows:
  • Example 3 Preparation of the pharmaceutical composition capsule of the present invention (active ingredient is 7-hydroxy-6-methoxycoumarin) The steps are as follows:
  • Example 4 Preparation of the pharmaceutical composition dropping pill of the present invention (active ingredient is 7-hydroxycoumarin)
  • Example 5 Preparation of a pharmaceutical composition tablet of the invention (active ingredient is 7-hydroxycoumarin or 7-hydroxy-6-methoxycoumarin)
  • Each tablet contains the following ingredients -
  • Preparation method the active ingredient, lactose and starch are mixed, moistened with water, the wetted mixture is sieved and dried, sieved, magnesium stearate is added, and then the mixture is compressed, each tablet weighs 240 mg, active ingredient The content is 12 mg.
  • the tablet is useful for the treatment of hyperurinopathy and diabetic nephropathy.
  • Example 6 Preparation of Dispersible Tablets of Pharmaceutical Compositions of the Invention (The active ingredients are 7-hydroxycoumarin and 7-hydroxy-6-methoxycoumarin)
  • Preparation method 7-hydroxycoumarin in the active ingredient is 14g, and 7-hydroxy-6-methoxycoumarin is 56g, the active ingredient and the microcrystalline cellulose are mixed, and the water is wetted to form a soft material.
  • the wetted mixture was granulated, passed through a 20 mesh sieve, dried at 80 ° C, sieved, and then the mixture was compressed, each tablet weighing 70.4 mg, and the active ingredient content was 70 mg.
  • This product is used orally for the treatment of diabetic nephropathy and has a good effect.
  • the present invention evaluates the effects of 7-hydroxycoumarin and/or 7-hydroxy-6-methoxycoumarin on rat mesangial cells cultured in high glucose and db
  • Test example 1
  • a specific symptom of diabetic nephropathy is an increase in extracellular matrix in the mesangial area resulting in mesangial matrix sclerosis.
  • Mesangial cells are the main components of the glomerular mesangial membrane. They have multiple functions of contraction, endocrine, division and proliferation, immunity and phagocytosis, and play an important role in mediating the physiological function of glomeruli. Therefore, mesangial cells in a high-concentration glucose culture environment are useful models for studying the matrix of diabetic glomerulosclerosis.
  • mulberry white (Cotex Mori), chopped and ground into powder, add 10 times water and reflux for three times, each time for 2 hours, combine the extracts, concentrate under reduced pressure to a certain volume, and set aside.
  • Rat glomerular mesangial cells in logarithmic growth phase were prepared as single cell suspension (5 ⁇ 10 4 cells/ml) in DMEM medium containing 5% newborn calf serum, and 1 ml/well was inoculated in advance. The 24-well plate of the slide, the number of cells is 5 X 10 4 /well. After incubating for 24 h at 37 ° C in a 5% CO 2 incubator, the serum-free DMEM medium was used and cultured for 24 h (synchronized).
  • the cell supernatant was discarded, and each well was added with DMF medium 900 ⁇ 1 and ⁇ different concentrations of glucose containing 5% newborn calf serum, and each concentration was set to 3 replicates, and cultured in an incubator for 24h, 48h, 72h, 96h, respectively.
  • HE staining and PAS staining were used to observe the modeling. The results showed that 25 mM glucose was the best when cultured for 48 h, which was used as the modeling condition of this experiment.
  • the normal control group was supplemented with 1 ml of DEME medium, and the high glucose group was supplemented with 900 ⁇ l of DMEM medium and ⁇ glucose (final concentration of 25 mmol/L).
  • Three replicates were set in each group, and then incubated for 48 hours at 37 ° C in a 5% CO 2 incubator. After the cells were covered with slides, the cells were removed and fixed, and stained and immunohistochemical stained.
  • CTGF staining procedure was as follows: 4% paraformaldehyde fixed cell slides for 30 min; new endogenous horseradish peroxidase was inactivated with methanol solution containing 3% 0 2 for 10 min, washed with distilled water for 3 times; 5% BSA blocked non-specific The antigen was added for 20 minutes; CTGF-anti (1:500) was added dropwise, 4° ⁇ overnight, PBS ( P H7.4) was washed 3 times for 2 min each time; biotinylated goat anti-mouse antibody (secondary antibody) was added dropwise. Leave at 37 ° C for 30 min, wash PBS (pH 7. 4) 3 times, each time 2 min; add reagent SABC, 37.
  • the hypertrophic changes, extracellular matrix proliferation and CTGF expression of rat mesangial cells were observed under microscope.
  • rat glomerular mesangial cells are obviously hypertrophied in high glucose (25mmol/L) culture; water extract of mulberry bark, single use and combination of 7-hydroxycoumarin and 7-light base -6-methoxycoumarin can significantly inhibit the hypertrophy of glomerular mesangial cells induced by high glucose culture, and the effect of monomeric compounds is significantly better than that of total aqueous extracts, and the combined effect is better than single use or equivalent.
  • Db mice B6 mice (provided by the Experimental Animal Center of Southern Medical University); Accu-Chek Advantage blood glucose meter (Roche Diagnostics, USA); SPECTRA maxl90 (American AD); creatinine assay kit, Coomassie brilliant blue assay Kit (Nanjing Institute of Bioengineering). 2. Experimental method
  • mice were kept in a laminar flow cabinet, free to eat, water, daily water replacement, litter, keep the cage clean and dry, and fix the water, feed, and litter weight, alternate lighting for 12 hours. All utensils and food are disinfected daily.
  • mice of 8 weeks old were randomly divided into 11 groups, 10 in each group: model group, mulberry white water extract group (dose 2000mg crude drug/kg), 7-hydroxycoumarin group (dose) 0.5, 1.0, 2. Omg/kg) and 7-hydroxy-6-methoxycoumarin group (dose 0.5, 1.0, 2. Omg/kg, respectively); 7-hydroxycoumarin and 7- Hydroxy-6-methoxycoumarin combination (dose 0.6:0.3, 0.5:0.5, 0.3:0.6rag/kg, respectively) o
  • Each group was given the same drug or saline 0.4 ml for 5 weeks for the same time.
  • db diabetic nephropathy mice increased after 5 weeks; water extract of mulberry bark, single use and combination of 7-hydroxycoumarin and 7-hydroxy-6-methoxy
  • the coumarin can significantly reduce the kidney weight and kidney index of db
  • the combined effect is slightly better than single use.
  • Table 4 Effects of 7-hydroxycoumarin and 7-hydroxy-6-methoxycoumarin on kidney weight and renal index in db
  • db diabetic nephropathy mice ( ⁇ soil S;, n 10)
  • Kidney weight g
  • Kidney index %.
  • Normal control group 0.26 ⁇ 0.04* 7.0 ⁇ 1.2**

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Description

一种治疗糖尿病肾病的药物组合物及其制备方法和应用 技术领域
本发明涉及中药制药领域，具体地说，涉及一种治疗糖尿病肾病的药物组合物及其制 备方法和应用。 背景技术
糖尿病及其慢性并发症已严重影响人类健康和生活质量。近年来， 糖尿病发病人数呈 上升趋势。 全世界各年龄组的糖尿病发病率， 在 2000年约为 2. 8%， 到 2030年预计为 4. 4%。 患糖尿病人数将从 2000年的 1. 71亿增加到 2030年 3. 33亿。中国每年糖尿病的发病率在不断 上升， 患病人数仅次于印度， 居世界第二位。糖尿病及其慢性并发症的防治是当今面临的 重要课题。 糖尿病肾病（diabetic nephropathy, DN)是糖尿病的重要并发症之一， 在西方 国家已成为导致终末期肾衰竭的首位疾病。 2003年世界卫生组织资料显示， 如果不控制血 糖， 大约有 30%的 1型糖尿病患者和 25%〜40%的 2型糖尿病患者发展成为糖尿病肾病。 糖尿 病肾病发病隐匿， 早期不易被发现， 出现症状时肾脏的病变已经不可逆转。长年糖尿病导 致肾脏的滤过功能被破坏， 最初表现为微量白蛋白尿。 随着病程延长， 尿蛋白增加， 肾脏 排除血中毒素的能力逐渐减退， 最终发展为终末期肾病 (ESRD)， 只能依靠血液透析或肾移 植来维持生命。因此迫切需要深入阐明糖尿病肾病的发病机制，丰富和完善 DN的防治措施。
桑白皮 (Cortex Mori)为桑科植物桑 ori/s alba L. 的干燥根皮， 性甘、 寒， 具有泻 肺平喘、 利水消肿的功能， 主治肺热喘咳、 水肿胀满尿少、 面目肌肤浮肿， 近年的药理学 研究表明桑白皮具有降血糖血压、 利尿、 镇咳平喘、 抗 HIV抗肿瘤等方面的活性。 自 20世 纪 70年代有学者从桑白皮中分离并证实了降血糖成分 1-脱氧野尻霉素
(1 - deoxynoj irimycin)和桑糖苷元 (Moran A)以来， 越来越多的学者投身于从桑白皮中寻 找新的降血糖成分， 从而开发出新的治疗糖尿病药物。桑白皮主要活性成分有黄酮、 生物 碱、 多糖和香豆素 (伞形花内酯、 东莨菪素)等， 有研究证明桑白皮中的黄酮、 生物碱和多 糖都具有一定的降血糖作用，其中生物碱的作用最强， 而桑白皮中的香豆素成分主要用作 利尿镇咳平喘， 目前尚没有将其用作糖尿病肾病的治疗的文献报道， 而据国内近年的研究 报道表明香豆素具有抗 HIV、 抗癌、 降压、 抗心律失常、 抗骨质疏松、 镇痛、 平喘及抗菌 等多方面生物学活性， 将香豆素用于糖尿病肾病的治疗是香豆素用于医药领域的新用途。 确认本 发明内容
本发明的目的在于提供一种治疗糖尿病肾病的药物组合物及其制备方法，该药物组合 物的活性成分是香豆素类物质。
解决上述问题的技术方案如下：
—种治疗糖尿病肾病的药物组合物， 由作为活性成分的 7-羟基香豆素和 7-羟基 -6-甲 氧基香豆素中的至少一种， 以及常规的药物载体组成， 所述活性成分的重量百分比含量为
0. 1-99. 5%
优选地， 所述活性成分的重量百分比含量为 5-70%。
优选的，所述药物组合物由作为活性成分的 7-羟基香豆素和 7-羟基 -6-甲氧基香豆素， 以及常规的药物载体组成， 7-羟基香豆素： 7-羟基- 6-甲氧基香豆素的重量比为 1 : 4-4 : 1。
本发明药物组合物所述常规的药用载体是指药学领域常规的药物载体，例如：稀释剂、 赋形剂如水等， 填充剂如淀粉、乳糖或蔗糖等； 粘合剂如纤维素衍生物、藻酸盐、 明胶和 聚乙烯吡咯烷酮； 湿润剂如甘油； 崩解剂如琼脂、碳酸钙和碳酸氢钠； 吸收促进剂如季铵 化合物； 表面活性剂如十六垸醇； 吸附载体如高岭土和皂粘土； 润滑剂如滑石粉、硬脂酸 钙和镁、 和聚乙二醇等。 另外还可以在组合物中加入其它辅剂如香味剂、 甜味剂等。
本发明药物组合物可以通过常规制剂方法制备成常规的剂型，常规剂型主要为口服制 剂， 包括片剂、 胶囊剂、 颗粒剂、 滴丸、 口服液等。
本发明所述药物组合物的使用剂量可随特定的给药方式、病症的严重程度等而相应调 整。'一般情况下， 临床口服使用的参考剂量是 10〜70mg/d。
本发明的另一目的的实现技术方案为：
一种制备治疗糖尿病肾病的药物组合物的方法， 将作为活性成分的 7-羟基香豆素或 7-羟基 -6-甲氧基香豆素中的至少一种与常规的药物载体相互混合， 即得。
本发明药物组合物可以按照药学领域的常规生产方法制备。例如活性成分与多种载体 混合， 然后将其制成所需的剂型。
本发明还提供了 7-羟基香豆素和 /或 7-羟基- 6-甲氧基香豆素在制备治疗糖尿病肾病 的药物中的应用。
本发明具有以下有益效果：
1. 本发明首次证明了从桑白皮中提取的香豆素类物质具有降血糖的功能， 为糖尿病及其 并发症患者提供了新的治疗候选药物。 2.本发明的药物组合物对糖尿病肾病的治疗效果明显优于桑白皮水提物， 并且活性成分 明确， 质量易于控制， 克服了传统中药中有效成分不明确、 质量控制难、 有一定的毒 副作用等缺点。
3. 本发明的药物组合物原料来源丰富， 可加工成口服剂型如滴丸、 冲剂、 片剂等， 使用 方便。
4. 本发明的药物组合物具有显著治疗和预防糖尿病时肾小球损害的作用， 由于可显著预 防糖尿病时血肌酐的升高、 显著降低糖尿病大鼠的尿量和尿蛋白， 降低肾指数， 表明 对糖尿病肾病有显著的防治作用。 附图说明
图 1是 7-羟基香豆素和 7-羟基- 6-甲氧基香豆素对高糖培养下的大鼠肾小球系膜细胞 肥大性改变 (HE， 200X);
其中 A: 正常对照组； B: 葡萄糖 (25mm0l/L) 组； C: 桑白皮水提物（0. lg/L) ; D: 7- 羟基香豆素 (Ιμπιοΐ/L)； E: 7 -羟基香豆素 (0. mol/L); F: 7-羟基香豆素（0. Οΐμιηοΐ/L)； G: 7-羟基 - 6_甲氧基香豆素（Ιμπιοΐ/L); H: 7-羟基 -6-甲氧基香豆素（0. Ιμπιοΐ/L) ; I： 7- 羟基- 6-甲氧基香豆素（O.OUtaol/L); J: 7-羟基香豆素与 7-羟基- 6-甲氧基香豆素合用 ( 0.06:0.03μιηοΐΑ) ； Κ： 7-羟基香豆素与 7-羟基- 6 -甲氧基香豆素合用 (0.05:0.05μαιο1/ί)； L: 7-羟基香豆素与 7-羟基- 6-甲氧基香豆素合用 （0.03: 0.06μηιο1/υ；
图 2是 7-羟基香豆素和 7-羟基- 6-甲氧基香豆素对高糖培养下的大鼠肾小球系膜细胞 细胞外基质增生 (PAS， 200X);
其中 A: 正常对照组； B: 葡萄糖 (25mmol/L) 组； C: 桑白皮水提物（0. lg/L) ; D: 7- 羟基香豆素 (^mol/L)； E: 7-羟基香豆素（0. Ιμπιοΐ/L); F: 7 -羟基香豆素（0. Οΐμιηοΐ/L)； G: 7-羟基- 6-甲氧基香豆素（lHmol/L); H: 7-羟基- 6-甲氧基香豆素（0. Ιμιηοΐ/L) ; I： 7- 羟基 -6-甲氧基香豆素（Ο.ΟΐμιηοΙ/υ; J: 7-羟基香豆素与 7 -羟基 -6-甲氧基香豆素合用 ( 0.06:0.034mol/L) ； K： 7-羟基香豆素与 7-羟基- 6-甲氧基香豆素合用 (0.05:0.05μηιο1/υ； L: 7 羟基香豆素与 7_羟基- 6-甲氧基香豆素合用 （0.03: 0.06μιηο1/ϋ；
图 3是 7-羟基香豆素和 7-羟基- 6-甲氧基香豆素对高糖培养下的大鼠肾小球系膜细胞 CTGF表达的影响（CTGF， 200X);
其中 A: 正常对照组； B: 葡萄糖 (25mmol/L) 组； C: 阴性对照 (未加 CTGF抗体）； 0： 桑白皮水提物（O.lg/L); E: 7 -羟基香豆素（Ιμπιοΐ/L); F: 7 -羟基香豆素（0. Ιμηιοΐ/L)； G: 7 -羟基香豆素（Ο.ΟΐμηιοΐΛ); Η: 7-羟基 -6-甲氧基香豆素（Ιμπιοΐ/L)； I： 7-羟基- 6-甲氧 基香豆素（0. lPfflol/L); J: 7-羟基- 6-甲氧基香豆素（0.0lMmol/L); K: 7-羟基香豆素与 7-羟基 -6-甲氧基香豆素合用 （0.06:0.03μιηο1/ϋ; L: 7_羟基香豆素与 7-羟基- 6-甲氧基 香豆素合用（0.05:0.054mol/L); M: 7_羟基香豆素与 7-羟基- 6-甲氧基香豆素合用（0.03: 0.06μπιο1/υ。 具体实施方式
本发明提出的用于制备治疗糖尿病肾病药物的香豆素类化合物为 7-羟基香豆素 (Α) 和 7-羟基 - 6_甲氧基香豆素 (Β)， 其化学结构如下：
Figure imgf000006_0001
这两种香豆素类成分广泛分布在植物界许多植物中， 也可以用化学合成方法获得。 以下通过具体实施例进一步说明本发明。
实施例 1: 7-羟基香豆素的制备
取桑白皮（Cotex Mori) 10kg, 切碎磨成粉， 加 100L水回流提取三次， 每次 2小时， 合并提取液， 减压浓缩至一定的体积， 至 D101大孔树脂中， 先用水洗脱， 再用 95%乙醇 洗脱， 收集醇洗脱液， 减压浓缩得浸膏。浸膏以硅胶层析柱分离， 分别以石油醚、石油醚 -乙酸乙酯 100: 1， 石油醚 -乙酸乙酯 50: 1和石油醚-乙酸乙酯 20: 1洗脱， 石油醚-乙 酸乙酯 20: 1洗脱部分有淡黄色粉末析出， 经丙酮多次重结晶得纯品， 经红外、 紫外、核 磁共振和质谱等分析确定其结构为 7-羟基香豆素（7-Hydroxycoumarin), 即伞形花内酯 (Umbel 1 if erone), 分子式： C9H603， 分子量： 162， HPLC测定其含量〉 99%， 其化学结构如 下：
Figure imgf000007_0001
实施例 2: 7-羟基 -6-甲氧基香豆素的制备
取桑白皮 (Cotex Mori) 10kg, 切碎磨成粉， 加 100L水回流提取三次， 每次 2小时， 合并提取液， 减压浓缩至一定的体积， 至 D101大孔树脂中， 先用水洗脱， 再用 95%乙醇 洗脱， 收集醇洗脱液， 减压浓缩得浸膏。分别以石油醚、石油醚 -乙酸乙酯 100: 1和石油 醚-乙酸乙酯 50: 1洗脱， 石油醚 -乙酸乙酯 50: 1洗脱部分有淡黄色粉末析出， 经丙酮、 甲醇多次重结晶得纯品， 经红外、 紫外、 核磁共振和质谱等分析确定其结构为 7-羟基- 6- 甲氧基香豆素（7- hydroxy - 6- methoxycoumarin)， 即东莨菪内酯（scopoletin)， 分子式： C10H804, 分子量： 192， HPLC测定其含量〉 99%， 其化学结构如下：
Figure imgf000007_0002
实施例 3: 本发明药物组合物胶囊的制备 (活性成分为 7-羟基 -6-甲氧基香豆素） 步骤如下：
A. 取蜂蜡 4. 2g， 加月见草油 125g， 80°C水浴下熔融混匀， 冷却至室温 (25°C)后加 入叔丁基对羟基茴香醚和枸椽酸适量， 充分混匀；
B. 加入过 100目筛的 7-羟基- 6-甲氧基香豆素 0. 25g、卵磷脂 5g，加月见草油至 250 g， 充分混匀， 作为囊心液， 压制成 1000粒胶囊。
本实施例所得胶囊用于治疗高血糖症、 糖尿病肾病等具有良好的效果。 实施例 4: 本发明药物组合物滴丸的制备 (活性成分为 7-羟基香豆素）
取 7-羟基香豆素 15g，经超微粉碎过 200目筛后得细粉，加入至熔融的 15g聚乙二醇 6000基质中， 搅匀， 以二甲苯硅油为冷却剂， 滴制法制丸， 干燥， 即制得 7 -羟基香豆素 滴丸。 该滴丸用于血肌酐增多尿肌酐排出减少症、 糖尿病肾病的治疗有着良好的效果。 实施例 5: 本发明药物组合物片剂的制备 (活性成分为 7-羟基香豆素或 7-羟基- 6-甲 氧基香豆素）
每片含有下述成分-
7-羟基香豆素或 7-羟基- 6-甲氧基香豆素 12mg
乳糖 175mg
玉米淀粉 50mg
硬脂酸镁 3mg
制备方法： 将活性成分、乳糖和淀粉混合， 用水均勾湿润， 把湿润后的混合物过筛并 干燥，再过筛，加入硬脂酸镁，然后将混合物压片，每片重 240mg，活性成分含量为 12mg。 该片剂用于高尿蛋白症、 糖尿病肾病的治疗， 具有良好的效果。 实施例 6: 本发明药物组合物分散片的制备 (活性成分为 7-羟基香豆素和 7-羟基 -6 - 甲氧基香豆素）
精密称取处方量的 7-羟基香豆素 95g和 7-羟基 -6-甲氧基香豆素 190g、乳糖 40g、微 晶纤维素 70g、 交联聚维酮 5. 25g、 阿斯巴甜 2. 5g、 聚维酮 6g、 碳酸氢钠 4g， 按等量递 加法将主药混合物与各种辅料先手工混合均匀。 过 80目筛两遍。 混匀后的物料置适当容 器中， 加入含 15% ( g/100ml )聚乙二醇 6000的 75%乙醇溶液适量， 制软材。 20目挤压过 筛制湿颗粒。湿颗粒平摊于搪瓷盘中， 置鼓风恒温干燥箱中， 7CTC干燥 2小时。精确称量 干燥颗粒的重量， 加入 2. 25g剩余交联聚维酮， 按 1%的量加入十二垸基硫酸钠 （SDS ) , 混匀后， 7mm圆形冲模压制成 1000片。 即得 7-羟基香豆素和 7-羟基 -6 -甲氧基香豆素分 散片 1000片。 用于治疗糖尿病肾病及并发病， 具有良好的效果。 实施例 . 本发明药物组合物片剂的制备 (活性成分为 7-轻基香豆素和 7-羟基- 6- 活性成分： 70g
微晶纤维素 0. 4g
制成 1000片 制备方法： 活性成分中 7-羟基香豆素为 56g， 7-羟基 -6-甲氧基香豆素为 14g， 将活 性成分和微晶纤维素混合，用水均匀湿润制成软材，把湿润后的混合物制粒，过 20目筛， 80°C烘干， 过筛， 然后将混合物压片， 每片重 70. 4mg， 活性成分含量为 70mg。 本品口服 用于治疗糖尿病肾病及并发病， 具有良好的效果。 实施例 8： 本发明药物组合物片剂的制备 (活性成分为 7-羟基香豆素和 7-轻基 -6- 甲氧基香豆素）
活性成分： 70g
微晶纤维素 0. 4g
制成 1000片
制备方法： 活性成分中 7-羟基香豆素为 14g， 7-羟基- 6-甲氧基香豆素为 56g， 将活 性成分和微晶纤维素混合，用水均勾湿润制成软材，把湿润后的混合物制粒，过 20目筛， 80°C烘干， 过筛， 然后将混合物压片， 每片重 70. 4mg， 活性成分含量为 70mg。 本品口服 用于治疗糖尿病肾病及并发病， 具有良好的效果。
本发明对 7-羟基香豆素和 /或 7-羟基 -6-甲氧基香豆素进行了高糖培养大鼠肾脏系膜 细胞的影响的评价实验和对 db | db糖尿病肾病小鼠的治疗作用实验。
试验例 1 :
7-羟基香豆素和 /或 7-羟基- 6-甲氧基香豆素对高糖培养下的肾小球系膜细胞肥大和 细胞外基质增生的影响
糖尿病肾病的特定病征为系膜区细胞外基质增多而引起肾小球系膜基质硬化。系膜细 胞是肾小球系膜的主要成分， 具有收缩、 内分泌、 分裂增殖、 免疫及吞噬作用多种功能， 对肾小球生理功能的调解起着重要作用。所以高浓度葡萄糖培养环境中的系膜细胞是研究 糖尿病性肾小球硬化症发生基质的具有使用价值的模型。
1. 材料和试剂
大鼠肾小球系膜细胞株 HBZY- 1 ; DMEM培养基 (GIBC0) ; 新生牛血清 (杭州四季青血清 厂）； CTGF (Canta Cruz产品）； 二抗（晶美生物工程有限公司）； 即用型 SABC免疫组化染 色试剂盒（博士德公司）； DAB显色系统（Gene Tech Biotechnology Company Limited)。 C02培养箱（NAPC05410, PERCISION SCIENTIFIC)； XSZ- D2倒置显微镜（重庆光学仪器 厂）； 超净工作台（苏州百神科技网络系统有限公司， 苏州市洁净技术研究所）； 医用离心 机 (LDZ5- 2， 北京医用离心机厂）； 免疫组化湿盒 (福州迈新生物技术开发公司）。
2. 实验方法
2.1桑白皮水提物的制备
取桑白皮 (Cotex Mori)适量， 切碎磨成粉， 加 10倍量水回流提取三次， 每次 2小时， 合并提取液， 减压浓縮至一定的体积， 备用。
2.2 模型建立及细胞培养
取对数生长期大鼠肾小球系膜细胞， 以含 5%新生牛血清的 DMEM培养基制成单细胞悬 液 (5 X 104细胞 /ml) , 1ml/孔接种于预先放有盖玻片的 24孔板， 细胞数 5 X 104/孔。 37°C， 5%C02培养箱培养 24h后， 改用不含血清的 DMEM培养基， 培养 24h (同步化）。 弃细胞上清 液， 每孔均加入含 5%新生牛血清的 DMEM培养基 900μ1和 ΙΟθμΙ不同浓度的葡萄糖， 每个 浓度设置 3个重复， 分别于培养箱中培养 24h、 48h、 72h、 96h， HE染色和 PAS染色观察 造模情况。 结果表明， 25mM葡萄糖培养 48h时效果最好， 作为本实验造模条件。
取 24孔板培养的同步化处理的大鼠肾小球系膜细胞， 弃细胞上清液， 各药物组每孔 均加入 DMEM培养基 800μ1和 ΙΟθμΙ葡萄糖（终浓度为 25mmol/L)，再分别向孔内加入 ΙΟΟμΙ 的桑白皮水提物 （终浓度为 0. lg/L) 、 各浓度的 7-羟基香豆素 (终浓度分别为 1、 0. 1、 0. Οΐμπιοΐ/L)、 7-羟基 -6-甲氧基香豆素（终浓度分别为 1、 0. 1、 0. Οΐμπιοΐ/L) 和 7-羟基香 豆素与 7-羟基- 6-甲氧基香豆素混合物 （终浓度分别为 0. 06 : 0. 03, 0. 05 : 0. 05, 0. 03： 0. 064mol/L)溶液。正常对照组加 lmlDEME培养基， 高糖组加 900μ1 DMEM培养基和 ΙΟθμΙ 葡萄糖 （终浓度为 25mmol/L) 。 各组均设置 3个重复， 于 37°C， 5%C02培养箱中再孵育 48h， 细胞铺满玻片后， 取出细胞爬片， 固定， 留作染色和细胞免疫组化染色。
2.3 染色
常规 HE染色， 常规 PAS染色， CTGF染色。
CTGF染色流程如下： 4%多聚甲醛固定细胞爬片 30min; 新配含 3% 02的甲醇溶液灭活内 源性辣根过氧化物酶 10min， 蒸馏水洗 3次； 5%BSA封闭非特异性抗原 20分钟； 滴加 CTGF— 抗（1 : 500)， 4°〇过夜， PBS (PH7. 4)洗 3次，每次 2min;滴加生物素化山羊抗小鼠抗体 (二抗）， 37°C放置 30 min， PBS (pH 7. 4) 洗 3次， 每次 2min; 滴加试剂 SABC， 37 。C 放置 30 min, PBS (pH 7. 4)洗 4次， 每次 5 min; 加 50 1显色剂（显色剂八、 B、 C各 1滴加入到 lml蒸馏 水中， 混匀）， 室温显色 15 rain, 蒸馏水充分洗涤； 苏木素轻度复染 lmin, 水洗； 脱水、 透明， 中性树胶封片， 显微镜下观察染色阳性情况。
3 结果与分析
分别于显微镜下观测大鼠肾小球系膜细胞肥大性改变、 细胞外基质增生和 CTGF表迖 情况。
3. 1 7-羟基香豆素和 /或 7-羟基 6-甲氧基香豆素对抗高糖培养下的大鼠肾小球系膜细 胞肥大性改变
由图 1可以看出， 高糖 (25mmol/L)培养下，大鼠肾小球系膜细胞明显肥大； 桑白皮水 提物、单用及合用 7-羟基香豆素和 7-轻基 -6-甲氧基香豆素能显著抑制高糖培养引起的肾 小球系膜细胞的肥大， 单体化合物效果明显优于总水提物， 且合用效果优于单用或相当。
3. 2 7-羟基香豆素和 /或 7-羟基 -6-甲氧基香豆素对抗高糖培养下的大鼠肾小球系膜细 胞细胞外基质增生
由图 2可以看出， 高糖 (25mmol/L)培养 48h， 肾小球系膜细胞外基质明显增多 (PAS 染色区面积及色度增加）； 桑白皮水提物， 单用及合用 7-羟基香豆素和 7-羟基 -6-甲氧基 香豆素均能减少高糖引起的肾小球系膜细胞外基质增加，而单体化合物比总水提物作用更 为显著， 且合用效果优于单用。
3. 3 7-羟基香豆素和 /或 7-羟基- 6-甲氧基香豆素对高糖培养下的大鼠肾小球系膜细胞 CTGF表达的影响
由图 3可以看出， 高糖 (25mraol/L)培养 48h， 系膜细胞的 CTGF表达增加； 桑白皮水 提物、单用及合用 7-羟基香豆素和 7-羟基- 6-甲氧基香豆素均能降低高糖培养引起的肾小 球系膜细胞 CTGF表达的增加，单体化合物效果明显优于总水提物，合用效果略优于单用。 试验例 2:
7-羟基香豆素和 /或 7-羟基- 6-甲氧基香豆素对 db I db糖尿病肾病小鼠的治疗作用。
1. 材料和试剂
db | db小鼠、 B6小鼠（由南方医科大学实验动物中心提供）； Accu-Chek Advantage血 糖仪 (美国罗氏诊断公司）； SPECTRA maxl90 (美国 AD公司）； 肌酐测定试剂盒， 考马斯亮 兰测定试剂盒 (南京建成生物工程研究所)。 2. 实验方法
2.1 桑白皮水提物的制备
取桑白皮 (CotexMori)适量， 切碎磨成粉， 加 10倍量水回流提取三次， 每次 2小时， 合并提取液， 减压浓缩至一定的体积， 备用。
2.2 实验期间动物管理和给药
实验期间， 各组小鼠在层流柜中饲养， 自由进食、 进水， 每日更换水， 垫料， 保持笼 内清洁干燥， 并固定水、 饲料、 垫料重， 12h交替照明。 所有器具及食物均每日消毒。
八周龄 db|db小鼠 110只，随机分为 11组，每组 10只：模型组、桑白皮水提物组 (剂 量为 2000mg生药 /kg)、 7 -羟基香豆素组（剂量分别为 0.5， 1.0， 2. Omg/kg)和 7-羟基- 6- 甲氧基香豆素组 (剂量分别为 0.5， 1.0， 2. Omg/kg)； 7-羟基香豆素和 7-羟基- 6-甲氧基香 豆素合用组（剂量分别为 0.6:0.3， 0.5:0.5， 0.3:0.6rag/kg)o
八周齢 B6鼠 10只为正常对照组。
各组同体积不同浓度灌胃给予相应药物或生理盐水 0.4ml, 连续 5周。
3. 统计与分析
各组每日测定进食量、 饮水量； 每周称体重 1次； 每周取血测定血糖值 1次。 给药结 束后， 收集 24小时尿液， 计算尿量， 测定尿总蛋白、 肌酐含量。 小鼠处死后， 取双肾称 重， 计算肾脏指数 RI: 1?1(%。)=肾重/体重 1000。
所有测定结果用 士 s表示， 采用组间 ί检验进行统计学分析。
4. 实验结果
4.1 7-羟基香豆素和 /或 7-轻基 -6-甲氧基香豆素对 db I db糖尿病肾病小鼠体重的影响 从表 1可以看出，桑白皮水提物、单用及合用 7-羟基香豆素和 7-羟基 -6-甲氧基香豆 素可抑制 db| db糖尿病肾病小鼠的体重的增加 (P<0.05)， 单用及合用 7-羟基香豆素和 7 - 羟基- 6-甲氧基香豆素效果优于桑白皮水提物或相当， 合用效果略优于单用。 表 1 7 -羟基香豆素和 7-羟基- 6-甲氧基香豆素对 db|db糖尿病肾病小鼠体重的影响（ 土 s， n=10) 体重（g)
(mg/kg)
Figure imgf000013_0001
1周 2周 3周 4周 5周 正常对照组 10 - 18.9±0.4 20.5±0.6* 21.2±0· 7** 22.1±1.2** 23.0±2.0** 23.5±1.6**
10 - 23.8±0.3 29.4±1. 1 37.1±1· 7 43.4±2.5 47.5±3· 9 49.8±4.1 桑白皮水提物 10 2000 23·5±0·4 28.6±0. 9 34.6 ±1.3* 38.2±1.6* 42.9±3.2 46.1±3·4* 动物数只
10 0.5 24.5±0·5 31.5±1. 5 35.8 +1.8 39.4±2·0 43·9±3.1 46.4±4.6
7 -羟基香豆素 10 1.0 23·4±0·5 30.2土1. 4 34.6±1·4* 40.0±2.7 43.1±2.8 45.2±4.1*
10 10 2.0 23·7±0·6 30.3±0. 5 35.5±1.7 38.6 ±1.9* 42· 3 ±2.8* 46.1±5.3
10 0.5 23·2±0.6 30·6±1. 2 36.4 ±1.5 40.1±2·5 43.0±2· 1 47·0±3.9
7—羟基- 6 -甲
10 1.0 24.1±0.5 31·8±1· 0 33.7 ±1.4** 38·8±1·4* 42.5±2.5* 45.8±3.0* 10 2.0 23.9±0·5 32·0±1, 3 34.3±1.9* 39.5±1·8 44.0±3·2 45.7 ±4.5*
10 0.6:0.3 24.3±0.6 31.3±1. 0 36.1 士 1.4 38.9±2.0* 42.8±2.2* 46.2士 3.6 和 7-羟基- 6- 10 0.5:0.5 23.1±0·4 31.0±1. 4 34·5±1.6* 38.2±1.2* 43.1±2·4 45.1±3· 3*
10 0.3:0.6 23.2±0.6 30.2 + 1. 3 33.5±1·7** 37·6±1·7* 42.7±2· 9* 41.5+4.4** 和模型组比较： * Ρ〈0.05， ** Ρ<0.01
4· 2 7-羟基香豆素和 /或 7-羟基- 6-甲氧基香豆素对 db I db糖尿病肾病小鼠血糖的影响 从表 2可以看出，给药末期单用及合用 7-羟基香豆素和 7-羟基- 6-甲氧基香豆素均可 明显降低 db|db糖尿病肾病小鼠血糖 (P〈0.05)。效果明显优于桑白皮水提物， 且合用效果 优于单用。
表 2 7-羟基香豆素和 7-羟基- 6-甲氧基香豆素对 db I db糖尿病肾病小鼠血糖的影响
(ϊ土 s' n=10)
动物数 剂量 血糖值 （mmol/L)
(只） (mg, /kg) 1周 2周 3周 4周 5周 正常对照组 10 7.0±1.5** 6.9±1.1** 6.6±0.7** 7.1±0.9 4.4 + 1.2** 模型组 10 13·7±2· 8 13. 5 + 3. 0 12. 4±3. 6 14.1±4.3 13.2±3.1 桑白皮水提物 10 2000 13.9±3. 4 14. 0±3· 1 12. 8±2· 5 10.9±2.8* 11·3±3·8
10 0. 5 13.7±4. 1 13. 6土 2. 9 12. 9±2. 9 11.2±4.0 12.1±1·9
7 -羟基香豆素 10 1. 0 13.4±4. 6 13. 4±2. 6 13. 9±4· 3 11.2±4.4 10.3 ±2.0*
10 2. 0 13·0±3· 6 13. 1±5. 1 13. 7±5. 1 10.1±2.4* 10·6±3.0
10 0. 5 13·3±4. 5 13. 4±2· 7 13. 5±3. 2 12.1±3.6 13.0±2.2
7 -羟基 -6-甲氧
10 1. 0 13·5±4. 0 13. 0±3. 2 12. 6±4. 8 10·8±2· 5* 10.4±2· 5* 基香豆素
10 2. 0 13.8±4. 7 13. 3±2. 7 13. 1±4. 7 10.4±3.9* 11·3±4.4
7 -轻基香豆素 10 0.6 :0.3 13.5±4. 3 13. 2±2. 5 12. 8±3. 8 10.3±3.3* 11.3±2.8 和 7-羟基- 6 -甲 10 0.5: :0.5 13.6±4. 8 13. 3±2· 9 12. 1±2. 7 11.5±2·7· 10.1±2.2* 氧基香豆素 10 0.3: ;0.6 13.2±4. 1 13. 0±2. 4 11. 5±4· 5 10.2±3.3* 9.9±3.7* 和模型组比较： * Ρ<0.05 ** Ρ<0.01
4.3 7-羟基香豆素和 /或 7-羟基 -6-甲氧基香豆素对 db I db糖尿病肾病小鼠 24h尿量， 尿总蛋白， 尿肌酐的影响
从表 3可以看出， 桑白皮水提物、单用及合用 7-羟基香豆素和 7-轻基- 6-甲氧基香豆素 明显降低 db|db糖尿病肾病小鼠 24小时尿量、 尿总蛋白， 提高尿液中尿肌酐含量 (P<0.05, P<0.01), 肌酐排出增加， 其中单用 7-羟基- 6-甲氧基香豆素效果优于桑白皮水 提物和单用 7-羟基香豆素 （P〈0.05， P〈0.01)， 合用效果明显优于单用。 表 3 7-轻基香豆素和 7-羟基 -6-甲氧基香豆素对 db|db糖尿病肾病小鼠 24h尿量， 尿总 蛋白， 尿肌酐的影响（i土
动物
剂量 尿肌酐 尿量 （ml) 尿总蛋白 （mg)
(mg/kg) (mmol/L) (只）
正常对照组 10 - 0.12 ±0.06** 0.135±0.07** 12·4±2.59** 模型组 10 - 1.18±0.40 1.614±0.64 1.56±0· 50 桑白皮水提物 10 2000 0·84±0.34* 1.126±0.468* 2.23±0.57*
10 0.5 1.03±0.28 1·205±0· 541 2.06±0· 65
7 -羟基香豆素 10 1.0 0.72±0.30* W 0.996±0.338* 2.30±0.71*
II
10 2.0 0.74±0.33* 1.147±0.305* 2.79 ±0.54**
10 0.5 0.95±0.34 1.398±0.372 1.85±0, 56
7 -羟基 -6-甲
10 1.0 0.75 ±0.25* 1.102 ±0.249** 3.20 ±0.85**s 10 2.0 0.78±0.31* 0·878±0.352**## 2.81±0.76**
7-羟基香豆 10 0.6:0.3 0.90±0.35 1.163±0· 335** 2.35±0.64* 素和 7-羟基 10 0.5:0.5 0.79 ±0.25* 1.109±0.318** 3.34±0.79***
- 6-甲氧基香
10 0.3:0.6 0.74±0.22* 0.905±0.320*" 3.35±0.81**" 豆素
与模型组比较： * P<0.05 ， ** P<0.01; 与桑白皮组比较： # p<0.05, ## p<0.01
4.4 7-羟基香豆素和 /或 7-羟基- 6-甲氧基香豆素对 db|db糖尿病肾病小鼠肾脏重量、 肾指数的影响
从表 4可以看出， 5周后 db|db糖尿病肾病小鼠肾脏重量、 肾指数增高； 桑白皮水提 物、单用及合用 7-羟基香豆素和 7-羟基- 6-甲氧基香豆素可明显降低 db|db糖尿病肾病小 鼠肾脏重量和肾指数， 效果均优于桑白皮水提物， 合用效果略优于单用。 表 4 7-羟基香豆素和 7-羟基- 6-甲氧基香豆素对 db|db糖尿病肾病小鼠肾脏重量、 肾指 数的影响 (^土 S ；, n=10)
剂量 (mg/kg) 肾脏重量 (g) 肾指数 (％。） 正常对照组 一 0.26 ±0.04* 7.0±1.2** 模型组 - 0.30±0.04 13.1±1· 7 桑白皮水提物 2000 0.26±0.04* 11.2±1·5
0.5 0.28 ±0.04 11.8±1·5
7- 基香豆素 1.0 0.26±0.03* 8.5. ±0.8**
2.0 0.27±0.02* 9.4±0.3*
0.5 0.29±0.02 12.6±1· 0 -羟基 -6-甲氧基香豆素 1.0 0.25±0.03* 9.3. ±1.2*
2.0 0.24 ±0.04* 9.1±1·7*
0.6:0.3 0.25±0.03* 10.7±1.5* -羟基香豆素和 7-羟基
0.5:0.5 0.26±0.05* 9.9. ±1.4* - 6-甲氧基香豆素
0.3:0.6 0.24±0.03* 9.1±1.7*

Claims

权 利 要 求
1. 一种治疗糖尿病肾病的药物组合物， 其特征在于： 该药物组合物由作为活性成分的 7- 羟基香豆素和 7-羟基- 6-甲氧基香豆素中的至少一种， 以及常规的药物载体组成， 所 述活性成分的重量百分比含量为 0. 1-99. 5%。
2. 根据权利要求 1所述的治疗糖尿病肾病的药物组合物， 其特征在于： 所述活性成分的 重量百分比含量为 5- 70%。
3. 根据权利要求 2所述的治疗糖尿病肾病的药物组合物， 其特征在于： 该药物组合物由 作为活性成分的 7-经基香豆素和 7-羟基 -6-甲氧基香豆素， 以及常规的药物载体组成， 7-羟基香豆素： 7-羟基 -6-甲氧基香豆素的重量比为 1： 4- 4： 1。
4. 根据权利要求 1-3任一项所述的治疗糖尿病肾病的药物组合物， 其特征在于： 所述常 规的药物载体包括稀释剂、 赋形剂、 填充剂、粘合剂、润滑剂、 崩解剂、 吸收促进剂、 表面活性剂、 吸附载体以及香味剂、 甜味剂中的任意一种或一种以上， 其中赋形剂为 水， 填充剂为淀粉、 蔗糖或乳糖； 粘合剂选自纤维素衍生物、 藻酸盐、 明胶或聚乙烯 吡咯烷酮中的至少一种； 湿润剂为甘油； 崩解剂为琼脂、 碳酸钙或碳酸氢钠中的任意 一种； 吸收促进剂为季铵化合物； 表面活性剂为十六垸醇； 吸附载体为高岭土或皂粘 土； 润滑剂为滑石粉、 硬脂酸钙、 硬脂酸镁或聚乙二醇。
5. 根据权利要求 4所述的治疗糖尿病肾病的药物组合物， 其特征在于： 该药物组合物可 以制备临床上可以接受的片剂、 胶囊剂、 颗粒剂、 滴丸或口服液。
6. 一种制备如权利要求 1所述的治疗糖尿病肾病的药物组合物的方法， 其特征在于： 将 作为活性成分的 7-羟基香豆素或 7-羟基- 6-甲氧基香豆素中的至少一种与常规的药物 载体相互混合， 按照一定的制剂工艺制备， 即得。
7. 7-羟基香豆素和 /或 7-羟基 -6-甲氧基香豆素在制备治疗糖尿病肾病的药物中的应用。
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