WO2004021066A1 - 顕微鏡観察用培養器 - Google Patents

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WO2004021066A1
WO2004021066A1 PCT/JP2003/003704 JP0303704W WO2004021066A1 WO 2004021066 A1 WO2004021066 A1 WO 2004021066A1 JP 0303704 W JP0303704 W JP 0303704W WO 2004021066 A1 WO2004021066 A1 WO 2004021066A1
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incubator
microscopic observation
water tank
lid
container
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PCT/JP2003/003704
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Hideharu Tsuchiya
Original Assignee
Tokai Hit Co., Ltd.
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Definitions

  • the present invention relates to a microscope incubator, and more particularly to a microscope incubator capable of observing an observation sample while being mounted on a microscope stage while culturing the sample.
  • microscopic observation while culturing a living body such as a cell bacterium usually involves subjecting the target observation sample to temperature or humidity or a specified gas concentration. It is necessary to place the cells in an atmosphere where the culture conditions such as the degree are controlled.
  • the incubator containing the observation sample is housed in a separate incubator away from the microscope, and the observation sample is cultured. On stage.
  • This incubator is equipped with a thin box-shaped container that is large enough to fit on the microscope stage and that can be opened and closed up and down with a hinge on one side. Both the bottom and the top of this container are connected to transparent glass heaters, an evaporating dish for humidification is placed inside the container, and a gas fume orifice for supplying carbon dioxide gas into the container. Is provided.
  • the inside of the container is humidified by the evaporation of water from the evaporating dish, heated by the heat generated by the transparent glass heater, and carbon dioxide gas is supplied from the gas blowing port.
  • carbon dioxide gas is supplied from the gas blowing port.
  • the incubator must be opened to perform operations such as adding chemicals to the sample being cultured in the incubator, and the culture conditions will be disrupted.
  • the evaporating dish is placed on a transparent glass heater and heated to evaporate the water in the evaporating dish.
  • the transparent glass heater uses an extremely thin transparent conductive film with a thickness on the order of microns. Since the heat is generated, the calorific value is so small that a sufficient amount of steam may not be generated.
  • the present invention has been made in view of the above-described conventional problems, and allows culturing and observation of an observation sample while being placed on a stage of a microscope, and an atmosphere under set culture conditions.
  • An object of the present invention is to provide a novel incubator for microscopic observation that can easily perform treatment on an observation sample without breaking.
  • the incubator for microscopic observation described in claim 1 has an opening at an upper surface, and a container housing portion for detachably storing a sample container such as a dish at a center portion, and the container.
  • a water tank unit provided with a reservoir located outside the storage unit, and a top surface of the water tank unit is closed;
  • the center of each of the aquarium unit and the lid is a translucent part that allows light to pass vertically.
  • the incubator for microscopic observation described in claim 2 is characterized in that, in the incubator for microscopic observation described in claim 1, water supply means for supplying water to the reservoir from outside the tank tub is provided. It is characterized by
  • the incubator for microscopic observation described in claim 3 is the incubator for microscopic observation described in claim 1 or 2, wherein the heater is a plate type and heats the sample container from below.
  • the heater is provided with a light transmitting portion at a position corresponding to the light transmitting portion of the water tank unit and the lid.
  • the incubator for microscopic observation described in claim 4 is the incubator for microscopic observation described in claim 3, wherein the heater is located between the upper plate and the lower plate and between them. And a top plate disposed above the upper plate via a space, and a frame holding the laminate and the top plate. It is characterized by having.
  • the incubator for microscopic observation described in claim 5 is the incubator for microscopic observation described in any one of claims 1 to 4, wherein the attached sample container is provided outside the water tank unit. And a culture solution supply means for supplying a culture solution from the apparatus.
  • the incubator for microscopic observation according to claim 6 is the incubator for microscopic observation according to claim 5, wherein the culture solution supply means is water. It is characterized by a structure that can replenish the culture solution in the sample container without opening the lid of the tank unit.
  • the incubator for microscopic observation according to claim 7 is the incubator for microscopic observation according to any one of claims 1 to 6, wherein the container accommodating part is a central part of the aquarium tub. And a pair of container holders that face each other and that can adjust the distance between the facing containers.
  • the incubator for microscopic observation described in claim 8 is the incubator for microscopic observation described in any one of claims 1 to 7, wherein the water tank unit is mounted on the upper surface of the stage of the microscope.
  • the water tank unit and the heater are provided so as not to be in contact with the plate-shaped heater at intervals, and the water tank unit and the heater are separable.
  • the incubator for microscopic observation described in claim 9 is the incubator for microscopic observation described in claim 8, wherein a stator for fixing the position of the water tank unit is provided on the upper surface of the stage of the microscope. It is characterized by having.
  • the incubator for microscopic observation described in claim 10 is the sample container contained in the container housing in the incubator for microscopic observation according to any one of claims 1 to 9. And a sample container position changing means capable of changing the horizontal position of the sample tank from outside the water tank unit.
  • the incubator for microscopic observation according to claim 11 is the incubator for microscopic observation according to any one of claims 1 to 10, wherein the sample container is placed in the container housing part.
  • An opening that can be put in and out is formed on the side of the aquarium tub, and a side lid that can close and open the opening is provided. It is characterized by that.
  • the incubator for microscopic observation described in claim 12 is the incubator for microscopic observation described in claim 11, wherein the heater is used by being fitted into a tool fitting hole formed in the stage.
  • the sample container mounting portion for mounting the sample container of the heater and the portion between the sample container mounting portion and the stage are:
  • the feature is that the structure is at the same height position as the stage.
  • the incubator for microscopic observation described in claim 13 closes the upper surface of the aquarium tub in the incubator for microscopic observation according to any one of claims 1 to 12.
  • An operation hole for performing an operation on the sample is formed in the lid, the operation hole is provided at a position deviated from an area of the container housing portion where the sample container is provided, and the lid is the water tank unit.
  • the operation hole can be made to face the region of the container housing portion where the sample container is provided by sliding while the opening on the upper surface of the kit is kept closed. .
  • the incubator for microscopic observation according to claim 14 is the incubator for microscopic observation according to any one of claims 1 to 13, wherein the opening at the upper surface of the aquarium tub is provided.
  • a lid-side hole is formed in a lid that closes the lid, and the lid-side hole is provided corresponding to an area of the container accommodating portion where the sample container is provided, and is placed on the lid and relatively to an upper surface of the lid.
  • a force par which can slide in a predetermined range while the lid side hole is closed is provided, and the force bar is formed with a lens insertion hole through which an objective lens of a microscope is inserted. It is assumed that.
  • the incubator for microscopic observation described in claim 15 is the incubator for microscopic observation described in any one of claims 1 to 14. And an incubator for microscopic observation, comprising a water tank heater on the bottom of the water tank.
  • the incubator for microscopic observation according to claim 16 is the incubator for microscopic observation according to any one of claims 3 to 15 in which the sample container and the water tank unit are provided.
  • the heater for heating has a container mounting portion on which a sample container is mounted, and the container mounting portion is provided with a heat generating portion made of a transparent conductive film.
  • the incubator for microscopic observation described in claim 17 is the incubator for microscopic observation described in any one of claims 1 to 16 that closes the upper surface of the aquarium tub.
  • the light-transmitting portion of the lid is provided with a heat-generating portion made of a transparent conductive film.
  • the incubator for microscopic observation described in claim 18 is the incubator for microscopic observation according to any one of claims 1 to 17, wherein the objective lens of the microscope and the sample container are provided. And a sample container fixing means for fixing the sample container by applying a force in the direction of the objective lens when performing oil immersion or water immersion with oil or water interposed therebetween. is there.
  • the first microscopic observation incubator set includes a microscopic observation incubator according to any one of claims 9 to 17 and a stator of the microscopic observation incubator at a desired position.
  • a centering member that is used to fix the center of the aquarium tub to the center of the tool insertion hole of the stage, and the centering member aligns the center of the aquarium unit with the center of the stage hole.
  • an outer fitting member for positioning the stator by abutting the stator in a state of being fitted to the outer periphery of the water tank cut, and a jig for mounting the stator.
  • the second incubator set for microscopic observation is defined by claims 1 to 17
  • the projection is formed integrally with the lid, and the hose connection projection has a sample container having a hose insertion hole extending from the outer surface to the bottom of the lid.
  • the third incubator set for microscopic observation is used for the incubator for microscopic observation according to claim 11 or 12, and for transferring a sample container to and from the incubator for microscopic observation.
  • a pair of arms made of an elastically deformable material, wherein the rear ends of the pair of arms are connected to each other;
  • a gripper for the sample container in which a pressure contact portion for regulating pressure is formed.
  • the fourth incubator set for microscopic observation may be a jig for attaching a stator according to claim 18, a sample container according to claim 19, and a claim 20. And at least two of the sample container gripping tools described in claim 21.
  • FIG. 1 is a perspective view showing a microscope observation incubator according to a first embodiment of the present invention mounted on a stage of a microscope.
  • FIG. 2 is a plan view of the incubator for microscopic observation according to the first embodiment.
  • FIG. 3 is an enlarged sectional view taken along line AA of FIG.
  • FIG. 4 is an exploded perspective view of the incubator for microscopic observation according to the first embodiment.
  • FIG. 5 is a partially omitted enlarged sectional view taken along the line BB of FIG.
  • FIG. 6 is an enlarged sectional view of an essential part taken along the line C-C in FIG.
  • FIG. 7 is an enlarged sectional view of an essential part taken along the line DD in FIG.
  • FIG. 8 is a perspective view for explaining an operation of mounting a stator using a stator mounting jig.
  • FIG. 9 is a perspective view for explaining an operation of attaching a stator using a stator attaching jig. .
  • FIG. 10 is a perspective view showing an example of a dish used in the microscope incubator according to the first embodiment.
  • FIG. 11 is a perspective view showing the dish shown in FIG. 10 separated into a container body and a lid.
  • FIG. 12 is an enlarged sectional view of an essential part taken along line DD in FIG.
  • FIG. 13 is a perspective view showing a microscopic observation incubator according to the second embodiment of the present invention mounted on a stage of a microscope.
  • FIG. 14 is a perspective view for explaining an operation of mounting the incubator for microscopic observation according to the second embodiment on a stage of a microscope.
  • FIG. 15 is a perspective view for explaining an operation of mounting the incubator for microscopic observation according to the second embodiment on a stage of a microscope.
  • FIG. 16 shows a microscopy incubator according to the second embodiment.
  • FIG. 2 is an exploded perspective view of the water tank unit.
  • FIG. 17 is a plan view of the incubator for microscopic observation according to the second embodiment.
  • FIG. 18 is a schematic bottom view of an aquarium unit of the incubator for microscopic observation according to the second embodiment.
  • FIG. 19 is a cross-sectional view taken along the line E_E in FIG.
  • FIG. 20 is a partially enlarged view of FIG.
  • FIG. 21 is a perspective view for explaining the structure and use of the dish gripper.
  • FIG. 22 is a perspective view for explaining the structure and use of the dish gripper.
  • FIG. 23 is a perspective view for explaining the structure and use of the dish gripper.
  • FIG. 24 is a perspective view for explaining an operation of taking a dish into and out of the culture vessel for microscopic observation according to the second embodiment using a gripper.
  • FIG. 25 is a cross-sectional view for explaining the operation of taking a dish into and out of the incubator for microscopic observation according to the second embodiment using a gripper.
  • FIG. 26 is a perspective view for explaining an operation for processing and operating a sample in a dish in a culture vessel for microscopic observation according to the second embodiment.
  • FIG. 27 is a perspective view showing the incubator for microscopic observation according to the third embodiment mounted on a stage of a microscope.
  • FIG. 28 is a cross-sectional view taken along the line EE of FIG. Fig. 29 shows a dish and a dish for oil or water immersion.
  • FIG. 3 is a perspective view of a weight to be placed on the ash.
  • a microscopic observation incubator 201 according to a first embodiment of the present invention will be described with reference to the drawings of FIGS.
  • Microscope observation incubator 201 is used for an inverted microscope.
  • the incubator 201 for microscopic observation includes an aquarium tube 203 to which a dish 220 is detachably mounted, a lid 233 for closing the upper surface of the aquarium unit 203, and an aquarium unit 203.
  • the dish 220 is made of transparent plastic and is composed of a slightly deep dish-shaped dish main body 2 21 and a lid 2 2 3 placed on the dish main body 2 1. 3 has a hose connection projection 2 25 protruding from the upper surface thereof formed in a body.
  • the e ⁇ "scan connecting spigot 2 2 5 have the Kaba ⁇ , across the center of the lid 2 2 3 located opposite one another, the hose ⁇ hole 2 2 7 is formed
  • the hose insertion hole 2 27 is bent in an L-shape such that one end is opened on one end surface of the hose connection projection 2 25 and the other end is opened on the bottom surface of the lid 222. (See Fig. 12.) One end of each through hole 227 opens toward the opposite side.
  • a culture solution supply hose 2 229 and a culture solution suction hose 2 31 are separately passed through the hose inlet holes 2 27, and the ends of the hoses extend from the bottom of the lid 2 23. Pulled down.
  • the dish 220 may be made of transparent glass.
  • the dish 220 and the microscopic observation incubator 201 constitute a microscopic observation incubator set.
  • the aquarium tub 203 includes an aquarium 205, a container holder 207 for holding the dish 220, a water supply pipe 213, a gas supply pipe 213, and a hose holder 291. It is composed of
  • the water tank 205 includes a member formed by integrally forming a circular bottom plate 205 a and an outer peripheral wall 205 b rising from an outer peripheral edge of the bottom plate 205 a, and a hole formed in the bottom plate 205 a. It consists of a cylindrical inner peripheral wall 205d attached to stand up from the edge of 205c. The outer annular groove from the inner peripheral wall 205d is a reservoir 205e, and the inner side of the inner peripheral wall 205d is a container accommodating portion 205g.
  • a wave returning portion 205i projecting toward the reservoir 205e side.
  • the wave returning portion 205 i prevents the wave from climbing over the inner peripheral wall 205 d even if the water in the reservoir 205 e shakes and a little wave rises.
  • the outer peripheral wall 205b has four pipe holes 205f (see FIGS. 6 and 7) arranged in the circumferential direction at a height near the upper end thereof.
  • Two holder mounting seats 206 are adhered to the inner peripheral surface of the inner peripheral wall 205 d in directions facing each other across the center line of the inner peripheral wall 205 d.
  • These holder mounting seats 206 have a substantially crescent shape in a plan view, and a wide and shallow groove 206 a extending in a direction facing each other is formed at an intermediate position on the upper surface thereof.
  • a screw hole 206 b is formed on the bottom surface of 6a.
  • FIG. 2 07 indicates a container holder, this container holder 2 07 When viewed from the perspective, it is bent almost in the shape of a crank.
  • a long hole 207a is formed at the top of the container holder 207, and the bottom edge 207b of the lower part has a rectangular shape with its center recessed. It has become.
  • the upper part of the container holder 207 is slidably fitted in the groove 206 a of the holder mounting seat 206, and the screw 209 that has passed through the long hole 207 a from above is the screw hole. It is crimped to the holder mounting seat 206 by being screwed into 206 b. In this state, the lower end edges 207b are opposed to each other, and the distance between the opposed edges is changed by loosening the screw 208 and moving the container holder 207.
  • Two hose holders 209 for a culture solution supply hose 229 and a culture solution suction hose 231 are attached to the outer peripheral surface of the outer peripheral wall 205b.
  • the two hose holders 209 are provided at positions facing each other with the water tank 205 therebetween.
  • the hose holder 209 is composed of a base block 210 fixed to the outer peripheral wall, and a press plate 2 122 press-fitted to the upper surface of the base block 210 with a press screw 211.
  • a holding groove 210a is formed on the upper surface of the base block 210 (see FIG. 6).
  • FIG. 6 shows only the culture solution suction hose 231 side of the hose holder 209, but the culture solution supply hose 229 side has the same structure.
  • the holding groove 210a is continuous with two pipe holes 205f formed in the outer peripheral wall 205b of the water tank 205, respectively.
  • a culture solution supply hose 2229 and a culture solution suction hose 231 of a dish 220 are separately passed through the two pipe holes 205f. Then, the portion of the culture solution supply hose 2 2 9 and the culture solution suction hose 2 3 1 that goes out from the piping hole 2 0 5 ⁇ is provided in the holding groove 2 10 a of the hose holder 2 0 9. Base block 2 1 0 by holding plate 2 1 2 It is crimped on and stopped.
  • the culture solution supply hose 231 is connected to a culture solution tank (not shown) via a sterilization filter (not shown).
  • the culture solution supply means is composed of a culture solution supply hose 229, a culture solution suction hose 231, and a culture solution tank.
  • the culture solution supply hose 222 was connected to a syringe pump containing the culture solution, and the plunger was pushed to advance the culture solution.
  • the culture solution was extruded, and the culture solution was fed to the dish 220 via the culture solution hose 229. It may be configured to supply.
  • the hose holder 291 On the outer peripheral surface of the outer peripheral wall 205 b, two hose holders 291 for a water supply hose 217 and a gas hose 218 are attached.
  • the two hose holders 29 1 are arranged side by side at a certain interval.
  • the hose holder 291 has a base block 293 fixed to the outer peripheral wall.
  • the base block 293 has a horizontal hole 295 extending in the horizontal direction.
  • the horizontal hole 295 of the base block 293 is connected to two pipe holes 205 f formed in the outer peripheral wall 205 b of the water tank 205, respectively.
  • a screw hole 297 is formed in the base block 293, and the screw hole 297 communicates with the upper surface of the base block 293 and the lateral hole 295.
  • the water supply pipe 2 13 is operably connected to the side hole 2 95 5 and the piping hole 2 0 5 f of the base block 29 3, and the water supply pipe 2 13 is provided with a screw hole 2 9 It is fixed by the end of the cap screw 296 attached to 7 abutting (see Fig. 7).
  • FIG. 7 shows only the water supply hose 217 side of the hose holder 209 and the gas hose 218 side has the same structure.
  • the gas supply pipe 2 14 is operably connected to the gas supply pipe 2 14, and the tip of the cap screw 2 96 attached to the screw hole 2 97 like the water supply pipe 203 is also connected to the gas supply pipe 2 14. It is fixed by contact.
  • the portion of the water supply pipe 2 13 that protrudes into the water tank 205 is bent downward, and the tip end 13 a of the reservoir is slightly lower than the upper end of the inner peripheral wall 205 d.
  • the water supply means is composed of a water supply pipe 2 13, a water supply tank 2 16 and a water supply hose 2 17.
  • the portion of the gas supply pipe 214 that protrudes into the water tank 205 is bent downward, and the tip of the gas supply pipe 214 extends to a point in contact with the bottom surface of the reservoir 205 e.
  • the rear end of the gas supply pipe 218 projects from a horizontal hole 295 of the hose holder 209, and one end of the gas hose 218 is connected to this projection.
  • the other end of the hose 2 1 8, C 0 2 eyes water in the reservoir 2 0 5 e the supply when stopping is to prevent backflow valve (or clamps), flow meter and adjusting the gas flow rate It is connected to a CO 2 cylinder via a regulating valve.
  • the gas supply means is composed of a gas supply pipe 2 14, a gas hose 2 18, a regulating valve and a CO 2 cylinder.
  • the lid 233 is based on a relatively thick disk-shaped lid 237, and a large circular window 239 is formed in the lid 237.
  • a fitting convex portion 241 extending endlessly through a position slightly inside from the outer peripheral edge is formed.
  • a transparent glass heater 243 as a heater is attached to the lower surface of the lid plate 237 to close the window 239. It is attached.
  • the transparent glass heater 243 is formed by laminating two glass plates 244, 246, and a transparent conductive film is formed on the lower surface of the upper glass plate 244. As a result, heat is generated.
  • a temperature sensor 2 57 is provided below the transparent glass heater 24 3. Based on the detection information of the temperature sensor 2 57, energization of the transparent conductive film is controlled so that the heat generation temperature falls within a predetermined range. Is adjusted to
  • the transparent glass heater 243 has a circular working port 245 at a position deviated to one side of the window 239, and two small hose through holes 250. . If the culture is to be performed with the dish 220 open without using the lid 220 of the dish 220, the culture solution supply hose 222 and the culture medium supply hose 250 should be inserted into the hose through hole 250.
  • the culture medium B is exchanged by passing the culture medium supply hose 229 and the culture medium suction hose 231 into the dish 220 through the culture medium suction hose 231.
  • the working port 245 is closed by the lid 249, and the hose passage hole 250 is closed by the stopper 251.
  • the lid 249 has a disk shape slightly larger than the working port 245, and an adhesive ring 253 made of silicone rubber is attached to an outer peripheral portion of a lower surface thereof.
  • the work hole is closed by placing the lid 249 so that the adhesive ring 253 surrounds the opening edge of the work port 2445.
  • a small work hole 255 is formed in the lid 2 49, and this work hole 255 is also closed by the plug 25 1.
  • the plug 25 1 is made of silicone rubber, and is formed in a disk shape slightly larger than the hose through hole 250 and the working hole 255.
  • a signal line extending from the temperature sensor 257 is connected to a temperature controller (not shown).
  • the heater plate 259 is based on a plastic ring-shaped frame 261, and the outer diameter of the frame 261 is slightly smaller than the inner diameter of the water tank cut 203. It has become.
  • An annular annular projection 263 projecting downward from the center half of the bottom surface of the frame 261 is formed, and an inner flange 265 projects from near the upper end of the inner peripheral surface.
  • the outer diameter of the annular convex part 263 is set according to the diameter of the tool fitting hole 269 provided on the stage 267 of the microscope.
  • a transparent gas top plate 27 1 is set on the inner flange 26 5.
  • a space 272 is interposed between the top plate 27 1 and the upper plate 27 5.
  • the top plate 27 1 is slightly thicker than the space above the inner flange 2 65 of the frame 26 1, and has a circular hole 2 73 formed in the center.
  • the inner space below the inner flange 2 65 of the frame 26 1 is composed of an aluminum upper plate 27 5 and a lower plate 27 7, and a nichrome wire located between them.
  • a heating element 279 and a laminated body bonded to each other are provided.
  • the upper plate 275 is attached to the lower surface of the inner flange 265 by bonding. Therefore, the laminated body of the upper plate 275, the lower plate 277, and the heating element 279 is attached to the inner flange 265 in a suspended state, so to speak.
  • the upper plate 275 and the lower plate 277 have a disk shape and are anodized.
  • the upper plate 2 7 5 and the lower plate 2 7 7 have circular holes 2 7 5 a and 2 7 7 a, which are slightly larger than the holes 2 7 3 of the top plate 2 7 1. Each is formed.
  • the translucent part was formed in these holes 2775a and 2777a, the hole 2773 of the top plate 271, the window of the lid plate 2337, and the bottom plate 205a of the water tank 205. It consists of holes 205c.
  • a space for wiring is formed in the frame 261, and a tip of a connection cord extending from a controller (not shown) is crawled into the space for wiring, and the connection cord has Heating element at the tip 2
  • the stators 281, 283 have a thick plate-like shape with a slightly elongated rectangular cross section and bent in an arc with a curvature almost the same as that of the outer peripheral surface of the water tank 205. Adhesive tape is stuck. Two screw holes 2 8 4 are formed in the stator 2 8 1 and 2 8 3.
  • a stator mounting jig used to fix the stators 281, 283 at desired positions on the microscope stage 2667 will be described.
  • the stator mounting jig includes a centering member 290 and an outer fitting member 294.
  • the centering member 290 has a disk shape having a circular hole 292 in the center, and has a diameter substantially the same as that of the dish 220.
  • the hole 292 is formed in the same size as the hole 275a of the upper plate 275.
  • the outer fitting member 294 has a ring shape large enough to fit tightly around the outer periphery of the water tank 205, and has a concave portion 298 for fitting the stators 281 and 283 around the outer periphery. I have.
  • the width dimension of the portion of the outer fitting member 294 where the concave portion 298 is formed is 5 mm.
  • the jig for mounting the stator and the incubator for microscopic observation 201 constitute a microscopic observation incubator set.
  • the heater plate 25 9 is placed on the stage 26 7 of the microscope, and the annular convex portion 26 3 of the frame 26 1 is fitted to the tool of the stage 26 7.
  • the outer fitting member 294 is placed on the stage 267 in accordance with the position of the frame 261 fitted to the tool.
  • the outer fitting member 2 9 4 fits into the outer peripheral portion of the water tub 2 0 5.
  • the centering member 290 is placed on the top plate 271 so as to be located at the center of the container accommodating portion 205 g, and the leading edge 207 b of the container holder 207 is centered on the centering member 2.
  • the outer peripheral surface of 90 is abutted.
  • the screw 208 is tightened, the container holder 207 is fixed, and the centering member 290 is held by the container holder 207.
  • the water tank 205 is moved on the stage 267 so that the holes 292 of the centering member 290 and the holes 275a of the upper plate 275 are aligned.
  • the outer fitting member 294 is rotated so that the concave portion 298 is adjusted to the position where the stators 281 and 283 are fixed.
  • the tip of the set screw 208 enters the screw hole and does not protrude from the surface of the stators 281, 283 facing the water tank 205. Keep it. Then, the stators 28 1, 28 3 are fitted into the recesses 298 for positioning, and are stuck and fixed on the stage 267. Next, the centering member 290 is removed.
  • the water tank 205 After fixing the stators 281, 283 on the stage 267, the water tank 205 is once lifted, and the outer fitting member 294 is removed. Then, when the water tank 205 is returned to its original position and installed on the stage 2667, the stators 281, 28 Reference numeral 3 is arranged at a distance of 5 mm (the width of a portion where the turning portion 298 of the outer fitting member 294 is formed) from the outer peripheral surface of the water tank 205. Then, turn the set screw 208 in the screw-in direction, project the tip of the set screw 208 from the stators 281, 283, and make contact with the outer peripheral surface of the water tank 205. . As a result, the tank unit 203 is fixed on the stage 267. If the push screw 208 is inserted into the screw hole, the aquarium tub 203 can be moved within 5 mm toward the stator 281 and within 5 mm toward the stator 283. It is possible to change the observation part facing the objective lens T.
  • the screw 208 Loosen the screw 208, place the dish 220 in the container holder 205 of the water tank 205 and place it on the top plate 271, and then place the container holder 210 To make the leading edge 207 b of the container holder 207 abut on the outer peripheral surface of the dish body 221 of the dish 220. In this state, tighten the screw 209 that has passed through the elongated hole 207a and is attached to the screw hole 206b, fix the container holder 207, and remove the dish 220. Hold. Further, as described above, the culture solution supply hose 2 29 and the culture solution suction hose 2 31 provided in the dish 220 are separately passed through the piping holes 205 f, and these culture solution supply hoses 222 are provided. Then, the middle part of the culture solution suction hose 2 3 1 is provided in the holding groove 2 10 a of the hose holder 2 09, and is pressed against the base block 2 10 by the holding plate 2 12 to prevent the hose from coming off.
  • a sample such as cells to be observed is put in the dish 220 together with the culture solution.
  • the water level of the reservoir 205 e is kept constant, and a constant amount of water W is always stored in the reservoir 205 e.
  • the water supply to the reservoir 205e may be performed by using a syringe pump in view of the amount of water in the reservoir 205e or periodically, in addition to the above-described method.
  • the window 239 is formed in a circular shape, the water supply pipe 213 can be seen from the outside through the transparent glass heater 243. Therefore, the water level of the reservoir 205e can be checked at a glance without opening the cover plate 237.
  • the dish 220 and the water tank 205 are heated, and the water in the reservoir 205 e is also discharged. Heat to evaporate. Therefore, the culture space 235 is filled with steam, and the dish 220 held in the container holder 207 is also exposed to the steam. This steam keeps the culture space 235 at 90-95% relative humidity and generates heat from the transparent glass heater ⁇ "24 3 and the heater plate 25 9 It is kept at a temperature corresponding to the degree.
  • the dish 220 is located at the center of the culture space 235, and the reservoir 205e is located so as to surround it, so that the humidity inside the dish 220 is even and uniform. Will be kept.
  • the control valve connected to the 5% concentration CO 2 gas cylinder is opened, and this CO 2 gas is supplied to the culture space 235 via the gas hose 218.
  • C 0 2 gas supplied to the culture space 2 3 although leakage from a gap or the like between the tub 2 0 5 and the lid 2 3 3 microscopic observation incubator 2 0 1 to incubator 2 0 1 outside, CO Since the two gases are continuously supplied, the culture space 235 is filled with a 5% concentration of CO 2 gas, and the CO 2 concentration is maintained at 5%.
  • Another is a method of keeping the C 0 2 concentration to a predetermined value of the above methods, a sensor for measuring the CO 2 concentration in preparation for the culture space 2 3 5, based on the detection information of the sensor, the culture space 2 3 5 is a method intermittently supplying a high concentration of CO 2 so as to have a predetermined C 0 2 concentration.
  • the gas supplied to the culture space 235 is not limited to CO 2 , but may be N 2 (nitrogen), O 2 (oxygen), or the like.
  • the observation sample (bacterial cells) placed in the dish 220 is cultured, and The culture solution B is exchanged without opening the lid 23 or the lid 23 of the dish 220. That is, the culture medium B is sucked out from the culture medium suction hose 231, and a new culture medium B having an amount not exceeding the sucked amount is supplied from the culture medium supply hose 229 to the dish 2.
  • the amount of the culture solution B in the dish 220 is maintained so as not to be lower than a predetermined value.
  • the culture solution supply hose 2 29 and the culture solution suction hose 2 3 1 can be freely inserted and removed from the hose ⁇ inlet hole 2 27, and the height of the tip opening of the culture solution suction hose 2 3 1 (dish) (Distance from the bottom of 220) can be adjusted, so that the amount of culture solution B can be adjusted. That is, by increasing the height of the tip opening of the culture medium suction hose 231, the liquid surface of the culture solution B can be raised and the amount of liquid can be reduced, and the height of the tip opening of the culture solution suction hose 231 can be reduced. If the level is lowered, the liquid level of the culture solution B drops, and the liquid volume can be reduced.
  • Microscopic observation is performed while culturing the observation sample in the dish 220 as described above. That is, light is emitted from the condenser C, and this light passes through the hole 277 of the top plate 271, the hole 275a of the upper plate 275, and the hole 277a of the lower plate 277. Incident on the objective lens T. Then, the sample placed in the dish 220 is observed under a microscope. While culturing the observation sample in the dish 220, continuous changes over time can be observed and video recording can be performed.
  • the heater plate 259 is arranged at a distance from the water tank unit 203, the effect of the weight change of the water tank unit 203 (due to the change in the amount of water in the reservoir 205e, etc.) is not affected. Therefore, the distance between the dish 222 and the objective lens T can be prevented from changing, and the observed image can be prevented from being blurred.
  • a top plate 271 is arranged with a space above the upper plate 275 of the heater plate 259, and a dish 220 is placed on the top plate 271.
  • the glass top plate 27 1 has a lower coefficient of thermal expansion than the aluminum heater plate 25 9, which is smaller than the case where the dish 220 is placed directly on the upper plate 27 5.
  • the temperature due to heating of the heater plate 259 It is hardly affected by the expansion and deformation of the upper plate 275 and the like due to the change, and it is possible to more effectively prevent the observation image from being blurred due to a change in the distance between the objective lens T and the observation sample.
  • the laminate of the upper plate 275, the lower plate 277 and the heating element 279 is attached to the inner flange 265 in a suspended state, so In this case, the laminated body composed of the upper plate 275 and the like is deformed downward. Therefore, it is possible to minimize the influence of the deformation of the laminate composed of the upper plate 275 and the like on the dish 220, and it is possible to effectively prevent the observed image from being blurred.
  • the deformation of the upper plate 275 is not transmitted to the dish 224, and the observation is performed with the objective lens T.
  • the effect of preventing the observation image from being blurred due to a change in the distance to the sample can be further enhanced.
  • the objective lens T and the bottom of the dish 220 are formed as necessary. It is also possible to use oil immersion or water immersion in which microscopic observation is performed with oil or water interposed between the two.
  • the incubator 201 for microscopic observation can also be used to remove the aquarium unit 203, place slide glass, etc. on the top plate 271, heat the sample, and observe the microscope. It is.
  • the microscopic observation incubator 311 is used for an upright microscope.
  • the microscopic observation incubator 311 has the same components as the microscopic observation incubator 201 according to the first embodiment.
  • the same reference numerals as in the first embodiment denote the same, and a description thereof will be omitted.
  • the incubator 311 for microscopic observation includes a water tank cut 347 on which the dish 313 is detachably mounted, a lid 431 for closing the upper surface of the water tank cut 347, and It is composed of a heater plate 317 as a heater for heating the water tank unit 347 and the dish 313.
  • the incubator 311 for microscopic observation is mounted on a drive stage 319 provided in the microscope.
  • the drive stage has two drive plates 3 2 1 and 3 2 3 arranged one above the other, with the upper drive plate 3 2 1 in the left-right direction (hereinafter A-B direction). ), And the lower drive plate 3 23 and the upper drive plate 3 2 1 are driven horizontally in the front-rear direction (hereinafter, referred to as C-D direction) in the drawing. Therefore, the incubator 311 for microscope observation provided on the upper driving plate 3 21 operates in the AB direction and the C-D direction. A circular tool fitting hole 269 is formed in the upper driving plate 3 21.
  • the configuration of the heater plate 317 will be described.
  • Reference numeral 325 denotes a frame, and the frame 325 is based on an aluminum alloy ring-shaped frame, and the outer diameter of the frame is smaller than the inner diameter of the water tank cut 347 described later. The dimensions are small.
  • An inner flange 327 projecting inward is formed on the inner peripheral surface of the frame 325.
  • On the upper surface of the inner flange 327 the lower surface of the outer peripheral portion of the transparent glass top plate 328 is placed and supported.
  • a central portion of the upper surface of the top plate 3288 serves as a sample container mounting portion 330, on which the dish 313 is mounted.
  • the transparent glass heater 329 as a laminated body is attached and fixed to the lower surface of the inner flange 327.
  • the transparent glass heater 3 2 9 is a stack of two transparent glass plates (the upper glass plate 3 3 3. It is composed of a lower glass plate 3 3 1) and a transparent conductive film 3 3 5 composed of an ITO film formed on the upper surface of the lower glass plate 3 3 1.
  • a pair of electrodes (not shown) is provided on the transparent conductive film 335, and the pair of electrodes are arranged to face each other with an interval.
  • An outer flange 337 is formed on the outer peripheral surface of the frame 325, and a step 339 is provided on the outer flange 337. Accordingly, the outer peripheral surface of the frame 325 has a different diameter dimension depending on the portion. Therefore, the heater plate 317 can be fitted in correspondence with two types of tool fitting holes having different diameters.
  • a ridge 341 is formed on the outer periphery of the upper surface of the frame 325.
  • a part of the ridge 34 1 is missing.
  • the missing portion 1 345 of the ridge 34 1 the upper surface of the frame 3 25 and the sample container of the transparent glass heater 3 229 are placed.
  • Section 330 is the same height.
  • the aquarium unit 347 consists of the unit body 3488, the aquarium 361, the container holder 351, which holds the dish 313, the water supply pipe 213, and the gas supply pipe 214.
  • the unit body 348 is made of plastic and has an opening 355 communicating with the upper and lower surfaces in the center thereof.
  • an entrance / recess recess 359 serving as an opening is formed in the peripheral wall 357 of the unit main body 348, and the depth of the entrance / recess recess 359 is close to the lower end of the peripheral wall 357. Therefore, the portion of the peripheral wall 357 where the ingress / recess reces 359 is formed has a thin plate shape.
  • Water tank 361 has a ring-shaped part with a missing part 365 ⁇ Shallow C-shaped '' It has a container shape, and is composed of a bottom plate 36 2, an inner peripheral wall 36 6, an outer peripheral wall 36 64, an inner peripheral wall 36 66, and a closing plate 36 8 connected to the outer peripheral wall 36 64. ing. The area surrounded by the inner peripheral wall 366, the outer peripheral wall 364 and the closing plate 368 is a reservoir 390.
  • the water tank 36 1 is housed in the opening 3 55 of the unit body 3 48, and the outer peripheral end of the bottom surface 3 62 of the water tank 36 1 is formed on the support unit formed on the unit body 3 48. And the outer peripheral wall 364 is in contact with the inner peripheral surface of the cut body 348. Then, the area surrounded by the inner peripheral wall 366 becomes a container housing section 392 for housing the dish 313.
  • a water tank heater 358 composed of an insulation-coated Utah wire is routed.
  • the aquarium heater 358 is covered by a plastic heater cover 360.
  • the sample container position changing means is composed of a pair of a left mechanism section 350 and a right mechanism section 32, and since the left mechanism section 350 and the right mechanism section 32 have a symmetrical structure. Only the structure of the left mechanical section 350 will be described, and the right mechanical section 3502 will be assigned the same reference numerals as those of the left mechanical section 350, and description thereof will be omitted.
  • the outer surface of the upper surface of the peripheral wall 357 is formed with a step portion 340 lower than the upper surface by a step, and a guide recess 324 long in the AB direction is formed on the upper surface of the step 340. (See Figure 20).
  • a long hole 367 is formed in a portion connected to the guide recess 342 of the peripheral wall 3.57, and the long hole 367 penetrates the peripheral wall 3.57.
  • Reference numeral 3 7 1 indicates a slider, and this slider 3 7 1 is a slider. It is composed of one main body 373 and a mounting portion 375 protruding from the front surface of the slider main body 373 (see FIG. 19).
  • the mounting portion 375 has sliding projections 377 and 379 projecting vertically.
  • a push screw 385 is attached to this screw hole 383.
  • a shaft 387 is movably inserted into the shaft penetration hole 391 of the slider 371.
  • the vertical portion 391 of the “L-shaped” operating member 389 as viewed from the side of the shaft 387 is fixed.
  • the distal end of the horizontal portion 393 of the operation member 389 is inserted into the housing recess 369 of the peripheral wall 365.
  • a container holder 351 is fixed to the tip of the shaft 387.
  • the container holder 351 is bent substantially in a crank shape when viewed from the side, and the lower edge 395 of the lower portion of the container holder 351 has a rectangular shape with its center recessed. .
  • Reference numeral 397 denotes a pressing member, and a guide recess 399 that is long in the CD direction is formed on the lower surface of the pressing member 397. At the center of the holding member 397, there is formed a screw hole 401 communicating with the guide portion 399, and a push screw 402 is attached to the screw hole 401.
  • the sliding convex portion 3799 on the lower side of the slider 371 is fitted into a guide concave portion 342 formed on the upper surface of the step portion 340. Then, the pressing member 397 is fixed to the upper surface of the peripheral wall 3557 by a mounting screw 400, and the guide concave portion 399 of the pressing member 397 has a sliding convex portion 397 on the upper side of the slider. Fit in 7.
  • the slider 371 can operate in the C-D direction with the sliding projections 377 and 379 guided by the guide recesses 342 and 399, respectively.
  • the container holder 351 is located in the container storage section 392 which is a region surrounded by the inner peripheral wall 3666 of the water tank 361.
  • the sample container position changing means is configured as described above.
  • the left and right outer portions of the water tank unit 347 are provided with a total of six hose holders 353, three left and right.
  • the hose holder 353 includes a base block 405 fixed to the outer peripheral wall, this base block 405 and a push screw 407.
  • the base block 405 has a hose insertion hole 409 penetrating in the A-B direction, and further has a screw hole 411 communicating from the upper surface to the hose insertion hole 409.
  • a push screw 4 07 is attached to the screw hole 4 1 1.
  • the pipe body 348 has six piping holes 413 connected to the hose insertion hole 409.
  • Two of the pipe holes 4 1 3 have a metal water supply pipe 2 1 3 and a gas supply pipe 2 1 4 inserted, and the water supply pipe 2 1 3 and the gas supply pipe 2 1 4 are curved.
  • the tip is located in the reservoir 390, the hose inlet hole 409 of the base block 405 has a water supply hose 217, a gas hose 218, and a culture solution supply hose 229 A culture solution suction hose 231, and a temperature sensor 415 are inserted respectively.
  • the water supply hose 217 and the gas hose 218 are connected to the water supply pipe 213 and the gas supply pipe 218, respectively.
  • the water supply hose 2 17, the gas hose 2 18 and the temperature sensor 4 15 pass through the piping hole 2 14 of the unit body 3 4 8 and the water supply hose 2 17, the gas hose 2 18 and the temperature sensor 4
  • the distal end of each of 15 is located in the container accommodation section 392.
  • the remaining one unused hose holder 3 5 3 is reserved.
  • a thin plate-shaped magnet 416, 417 is provided on the front surface of the hut body 348.
  • Reference numeral 4 19 denotes a side cover, and the side cover 4 19 It is composed of a fitting portion 4 21 to be fitted and a knob 4 4 3 having a larger width than the fitting portion 4 2 1.
  • a pair of rectangular recesses 4 25 are provided on the front surface of the knob 4 23. Further, thin iron plates 427 and 429 are fixed to the surface of the knob 423 on the side of the fitting part 421.
  • Reference numeral 433 denotes a cover plate. Both sides in the AB direction of the cover plate 433 are parallel and formed on a flat surface, and both sides in the C-D direction are formed on an arc-shaped surface. (See Figure 15).
  • the dimension in the AB direction of the cover plate 433 is slightly smaller than the distance between the pair of holding members 397 provided in the water tank cutout 347.
  • a large circular window 4 35 is formed on the cover plate 4 3 3, and a fixed convex portion 4 3 extending endlessly through a position slightly inside from the outer peripheral edge is formed on the lower surface of the cover plate 4 3 3. 7 is formed.
  • a transparent glass heater 439 serving as a heater for closing the window 435 is attached to the lower surface of the fixed convex portion 347.
  • the upper surface of the transparent glass heater 439 forms a part of the upper surface of the lid 431.
  • the transparent glass heater 439 is formed by laminating two transparent plate glasses 441 and 443, and a transparent conductive film 445 composed of an ITO film is formed on the upper surface of the lower plate glass 441.
  • the transparent conductive film 445 is formed and generates heat when energized.
  • the transparent glass heater 439 is provided with a temperature sensor 447, and based on detection information of the temperature sensor 447, the energization of the transparent conductive film 445 is controlled so that the heat generation temperature is within a predetermined range. Is adjusted to
  • a circular lid side hole 449 is formed at the center of the transparent glass heater 439. Further, a pair of operation holes 451 is formed at a position ′ of the transparent glass heater 439 in the direction D, and the operation holes 451 are elongated holes in the AB direction.
  • the cover 453 is made of a thin disk of transparent glass, and has a lens insertion hole 455 in the center. The cover 453 is placed on the transparent glass heater 439, and covers the lid side hole 449.
  • the pair of operation holes 451 is covered by a closing lid 457 disposed on the transparent glass heater 439.
  • the lid 431 is provided with an electric code 459, through which electric current to the transparent conductive film 445 is transmitted to a controller (not shown) from the temperature sensor 447. I do.
  • the dish grabber 4 61 shown in FIGS. 21 to 23 will be described.
  • the gripper 461 has a pair of arms 463, and the pair of arms 463 is made of stainless steel as an elastically deformable material.
  • the rear ends 462 of the pair of arms 463 are connected to each other, and the middle portions intersect with each other to form an intersection 465.
  • a pressure contact portion 467 facing each other and pressed by the elastic force of the arm 463 is formed.
  • the distal end portions are bent away from each other from the press contact portions 467, and further, the intermediate portions are bent so that the distal end portions become parallel.
  • the holding portions 469 are constituted by the parallel portions of the tips of the pair of arms 463, and the pair of holding portions 469 are provided with non-slip synthetic rubber caps 471. Is mounted.
  • the press-contact portions 467 are pressed against each other to restrict the closing of the pair of holding portions 469, so that a constant interval is maintained.
  • the dish gripper 4 61 and the microscopic observation incubator 3 1 1 constitute a microscopic observation incubator set.
  • the method of use and operation of the microscope observation incubator 311 according to the second embodiment will be described. First, an operation for mounting the microscope observation incubator 311 on the drive stage 319 will be described.
  • the heater plate 3 17 is fitted into the tool fitting hole 2 69 formed in the upper drive plate 3 21 of the drive stage 3 19.
  • the upper surface of the top plate 3 2 8 of the heater plate 3 17 and the missing portion 3 4 5 of the ridge of the frame 3 25 and the upper surface of the upper drive plate 3 2 1 of the drive stage 3 19 are at the same height.
  • a dish 313 stored in a container storing portion 392 of a water tank unit 347 described later is mounted on the sample container mounting portion 330.
  • the water tank unit 347 is placed on the upper driving plate 321, and the container housing section 392 and the sample container mounting section 3330 are arranged so as to correspond to each other.
  • the lid 431 is placed on the water tank unit 347 to cover the upper opening of the water tank unit 347.
  • the cover side hole 449 of the transparent glass heater 439 is covered with a cover 453, and the pair of operation holes 451 are closed with a closing cover 457.
  • the access recess 359 is closed by the side cover 419. Since the iron plates 4 2 7 and 4 2 9 of the side cover 4 19 are attracted to the magnets 4 16 and 4 17 of the unit body 3 4 8-the side cover 4 19 is a cut body 3 4 8, the access recesses 3 5 9 are securely closed.
  • the microscopic observation incubator 311 is mounted on the drive stage 319, and the space defined by the aquarium unit 347 and the lid 431 becomes the culture space 320.
  • Water is supplied from the water supply hose 217 and the water supply tank to the reservoir 390 via the water supply pipe 213 to be stored. Moreover, subjected to a C 0 2 from the cylinder via the Gasuho over scan 2 1 8 and the gas supply pipe 2 1 4 CO 2 culture space 3 2 0 Paid.
  • the water in the reservoir 390 evaporates due to the heat of the heaters 329, 358, 439.
  • the water in the reservoir 390 is directly heated by the water tank heater 358, sufficient steam can be generated quickly.
  • the entire bottom of the dish 3 13 is heated by the transparent glass heater 3 29 of the heater plate 3 17, so that the entire sample in the dish 3 13 can be heated uniformly.
  • the lid 4 3 1 of transparency glass heater 4 3 9 can prevent the transparent glass heater 4 3 9 fogging by condensation.
  • the dish 313 may be accommodated in the container accommodating section 392 with the lid 431 opened or before the lid 431 is attached.
  • the gripper 461 When the gripper 461 is pressed by hand on both sides behind the intersection 465 of the pair of arms 463, the holding portion 469 is opened. Take the gripper 4 6 1 so that the dish 3 13 comes between the pair of holding portions 4 6 9 opened in this way, and when you loosen your hands, the pair of holding portions 4 6 9 It is closed by the elastic force of the arm 463, and the dish 313 is held.
  • the side cover 419 is attached to the hut body 348, and the access recess 359 is closed.
  • the knob 4 23 is picked up with a finger, but the pair of rectangular holes 4 25 prevents the finger from slipping.
  • the work of taking out the dish 3 13 from the container accommodating section 3 92 is also performed by opening the side cover 4 19 and using the gripper 4 61 from the in / out concave section 3 59. Therefore, the dish 3 13 can be taken in and out of the container storage section 3 92 without opening the lid 4 3 1, so that the culture conditions such as the temperature, humidity, and CO 2 concentration of the culture space 3 20 are not disrupted. Therefore, it is possible to prevent adverse effects on the culture of the sample.
  • the upper surface of the top plate 3 2 8 of the heater plate 3 17, the missing portion 3 4 5 of the ridge of the frame 3 25, and the upper surface of the upper drive plate 3 2 1 of the drive stage 3 19 are connected. There is no step because it is at the same height. Therefore, when the dish 313 is put in and taken out of the container accommodating section 392, there is no portion where the dish 313 hits, and the dish 313 can be put in and taken out smoothly.
  • the left-hand mechanism 350 and the right-hand mechanism 35 Loosen the set screw 3 8 5 2, t and ready to operate the shafts preparative 3 8 7, by pulling the vertical portion 3 9 1 of the operating member 3 8 9, Stuffer preparative 3 8 7 are both container holder 3 5 Move 1 in the A-B direction and press the dish 3 1 3 with the container holder 3 5 1 to change its position in the A-B direction.
  • the position of the dish 3 13 in the A-B direction is determined in this way, tighten the setscrew 3 8 5 so that the tip 3 holds the shaft 3 8 7 so that it does not move. Fix the container holder 3 5 1.
  • the tissue 3 13 is held by being sandwiched between the rectangularly-shaped distal ends 3 95 of the pair of container holders 3 51.
  • the objective lens T of the microscope is inserted through the lens insertion hole 455 of the cover 453, and the sample such as cells placed in the dish 313 is observed.
  • the drive stage 3 19 is moved within a range where the outer periphery of the cover 4 53 does not cover the hole 4 49 on the lid side,
  • the observation point can be changed while the lid side hole 449 is covered by -4553.
  • the culture conditions such as the temperature, humidity, and CO 2 concentration of the culture space 320 are not broken.
  • the objective lens T is retracted and the lens insertion hole 4 5 5 Pull out from.
  • the cover 4 5 3 is replaced with a closure cover 4 7 3 without a hole, and the lid side hole 4 49 is completely closed.
  • the lid 431 is guided to the holding member 397, and is slid in the C direction, and the operation hole 451 is opposed to the dish 313.
  • the conditions such as the temperature of the culture space 320 are not broken.
  • a microscopic observation incubator 511 according to a third embodiment of the present invention will be described with reference to the drawings of FIGS. 27 to 29.
  • Microscope observation incubator 5 1 1 is used for an inverted microscope.
  • the incubator 511 for microscopy has the same components as the incubator 311 for microscopy according to the second embodiment, so the same components are the same as those in the second embodiment.
  • the reference numerals are attached and the description is omitted.
  • the lid-side hole is not formed in the transparent glass heater 5 13 of the lid 5 110 of the incubator 5 11 for microscope observation.
  • the transparent glass heater 5 17 of the heater plate 5 15 has a lens insertion hole 5 19.
  • Reference numeral 5 21 denotes a stainless steel weight as a sample fixing means, and the weight 5 21 is a ring slightly larger in diameter than the dish 3 13. It is formed in the shape of a ring.
  • This weight 5 21 prevents the dish 3 13 from lifting when performing oil immersion or water immersion in which liquid oil or water is interposed between the objective lens T and the bottom of the dish 3 13 It is for doing.
  • the weight 5 21 and the incubator 511 for microscopic observation constitute a set of incubator for microscopic observation.
  • the weight 5 21 is placed on the dish 3 13 stored in the container storage section 3 92. After the oil is dropped on the tip of the objective lens T, the objective lens T is brought close to the dish 3 13, and oil is interposed between the objective lens T and the bottom of the dish 3 13. Then, a sample such as cells placed in the dish 3 13 is observed.
  • the dish can be read from the outside of the water tank suite 3 4 7 without opening the lid 5 10.
  • the position of 3 13 can be changed, and the observation position of the sample in the dish 3 13 can be changed.
  • the transparent glass heater 329 of the heater plate 317 is attached to the lower surface of the inner flange 327, and is held in a suspended state. Therefore, expansion and deformation due to a temperature change such as heat generation of the transparent glass heater 329 are generated not toward the upper surface side but toward the lower surface side of the transparent glass heater 329. Further, since there is a space between the transparent glass plate 329 and the top plate 328, expansion and deformation of the transparent glass plate 329 are not transmitted to the top plate 328.
  • the dish 2 Although the one with the sample was used, the observation sample may be put in the dish 220 and attached to the container accommodating part 205 g without the cover 222. In this case, in order to inject chemicals and the like into the observation sample, remove the lid 23 and insert the instrument from the working port 2445 of the transparent glass heater 243 to perform the work. Since the lid 223 is simply removed, the operation can be performed with almost no change in the temperature and the like of the culture space 235.
  • the culture medium is sucked out from the culture medium suction hose 231, and the sucked amount of the culture medium is supplied from the culture medium supply hose 229 to perform the reflux culture.
  • the present invention is not limited to this. Static culture without replacing the culture solution can be performed using a normal dish without the culture solution supply hose 229 and the culture solution suction hose 231. Of course.
  • water supply means such as water supply pipes 2 13 and water supply tanks 2 16 are not provided, so that water is initially used only in the reservoir 205 e without water supply. It is also possible. Even if water is not supplied in this way, it can be used if it is cultured for about 48 hours.
  • the window 239 of the lid plate 237 may be formed in a rectangular shape instead of a circular shape.
  • a hole is provided at the center of the heater plate 259.
  • the upper plate 275 made of aluminum or the like is used.
  • the present invention is not limited to this. It is also possible to use a heater of a type in which a film is formed by means such as vapor deposition or the like, and heat is generated by energizing the transparent conductive film.
  • the dish 220 is placed on the top plate 27 1 Although placed on the top, it is also possible to remove the top plate 271, and to place the dish 220 directly on the upper plate 275.
  • the sample container position changing means is composed of the left mechanism section 350 and the right mechanism section 352, the left mechanism section 350 is required to move the dish 313. It is necessary to operate both the right and left mechanisms 3 5 2, but one of the right or left mechanisms is provided, and this one mechanism can hold one dish 3 13
  • the configuration may be such that the holder is cantilevered and provided. In this way, the position of the dish 3 13 can be changed by operating one mechanism.
  • the weight 52 1 is shown as the sample container fixing means.
  • the present invention is not limited to this, and the sample container (dish) can be fixed to prevent the sample container from floating.
  • the sample container fixing means may be constituted by something other than the weight, for example, a panel for holding the sample container.
  • the top plates 271, 328 may be made of brass instead of glass, and in this case, a hole for transmitting light is formed in the central portion of the top plate.
  • the frame 261 of the heater plate 259 and the frame 525 of the heater plate 317 may be made of brass.
  • the transparent glass heater Heater plates 3 17 and 5 15 are shown, but those using other heat generation means such as dichrome wire as heater plate 25 9 shown in the first embodiment are applied. May be.
  • the microscopic observation incubator set includes a combination of the dish 220 and the microscopic observation incubator 201, and a stator mounting jig and a microscopic observation incubator 2.
  • 0 dish gripper 4 6 1 and microscopy incubator 3 1 1, weight 5 2 1 and microscopy incubator 5 1 1
  • the incubator set for observation is not limited to the above combination, but the incubator for microscope observation 201, the incubator for microscope observation 311 that constitutes the incubator set for microscope observation, the incubator for microscope observation 5 1 Combination of 1 with dish 2 20, stator mounting jig, dish gripper 4 6 1, weight 5 2 1 can be arbitrarily selected.
  • the incubator set for microscopy was one of microscopy incubator 201, microscopy incubator 311, microscopy incubator 511, dish 220, and fixed. Not only one of the jig for mounting the child, the gripper for the date 461 and the weight 5221 but also a combination of two or more can be configured.
  • the shape of the outer fitting member 294, etc. should be changed to the water tank unit. The shape should fit the slot 3 4 7.
  • the observation sample can be cultured and observed while being mounted on the microscope stage.
  • the observation location of the observation data in the sample container can be changed without destroying the atmosphere under the set culture conditions.
  • a sufficient amount of steam can be quickly generated in the culture space.

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Abstract

ディッシュ220内の観察試料を培養しながら、顕微鏡観察を行う。すなわち、コンデンサーCから光が照射され、この光はトッププレート271の穴273、上側プレート275の穴275a、下側プレート277の穴277aを通り、対物レンズTに入射する。そして、ディッシュ220に入れられた試料を顕微鏡観察する。さらにディッシュ220内の観察試料を培養しながら、経時的な変化を連続して観察したり、ビデオ録画することができる。

Description

明 細 書
顕微鏡観察用培養器 技 分野
本発明は、 顕微鏡観察用培養器に係り、 特に、 顕微鏡のステージに 載せた状態で観察試料を培養しながら観察することができる顕微鏡 観察用培養器に関するものである。 背景技術
例えば、 生命工学や生物工学といったバイオテクノロジー分野とか 病理学分野において、 細胞ゃ菌などの生体を培養しながら顕微鏡観察 するには、 通常、 目的の観察試料を温度や湿度もしく は所定のガス濃 度などの培養条件が管理された雰囲気下に置く ことが必要になる。
このよ うな条件での顕微鏡観察を行う場合、 従来は、 観察試料を入 れた培養器を顕微鏡から離れた別置きのィンキュベータ一に収容し て観察試料を培養し、 それを随時取り出しては顕微鏡のステージに載 せるといった方法が採られている。
ところが、 従来の方法では、 観察に手間が掛かるだけで無く、 培養 条件下においたままで観察試料を観察したり撮影したりすることが 不可能であると共に、 その観察や撮影は培養条件が管理されない状態 で行われることになるため、 正確な観察が行えないという問題がある, そこで本発明者は、 先に、 顕微鏡のステージに載せた状態で観察試 料を培養しながら観察するこ とができる顕微鏡用透明恒温培養器を 提案した （特開平 1 0 — 2 8 5 7 6号公報に記載） 。
この培養器は、 顕微鏡のステージにちよ うど載る程度の大きさを有 し一側部のヒ ンジで上下開閉自在にした薄い箱形の容器を備えてお り、 この容器の底面部と天面部はいずれも透明ガラスヒーターになつ ていて、 容器内には加湿用の蒸発皿が置かれ、 容器内に炭酸ガスを供 給するためのガス噴気口などが設けられている。
このような構造の培養器によれば、 容器内は、 蒸発皿からの水分蒸 発により加湿し、 透明ガラスヒーターの発熱によって加温され、 ガス 噴気口からは炭酸ガスが供給されるので、 この炭酸ガスの供給量や透 明ガラスヒーターの発熱量等を制御することで所望の培養条件に調 節される。 そして、 容器の底面部と天面部は透明であるから、 上下方 向へ光を通すことができる。 従って、 この容器を顕微鏡のステージに 載せたまま、 その中で菌ゃ細胞などの試料を所望の培養条件下におい たまま顕微鏡観察することができる。 発明の開示
しかしながら、 上記の培養器は、 次に示す問題がある。
( 1 ) 容器内にはディ ッシュ等の試料容器が収納されるので、 加湿手 段である蒸発皿と して大きな容量のものを用いることは不可能であ り、 その貯水量には自ずと限度がある。 このため、 加湿下での観察を 行う場合は、 蒸発皿の貯水量以上での連続観察が不可能になり、 これ に水を加える際も、 容器を完全に開放してしまうため、 培養条件が崩 れてしまうことになる。
( 2 ) 試料容器と しては通常深皿状のディ ッシュが用いられるため、 そのディ ッシュの中に器具を差し入れるには、 容器をほぼ完全に開放 しなければならない。 この開放によって、 湿度や温度、 ガス濃度等の 培養条件が完全に崩されてしまうことになる。
( 3 ) 試料容器内の観察資料の観察箇所を変えるためには、 対物レン ズに対する試料容器の位置を変更する必要があるが、 試料容器の位置 を変更するために培養容器を開放すると、 培養条件が崩れてしまう。 ( 4 ) 上記従来の培養器は試料容器を出し入れするためには、 開放し なくてはならならず、 培養条件が崩れてしまう。
( 5 ) 培養器内で培養中の試料に対して薬品を添加する等の操作を行 うためにも培養器を開放しなくてはならならず、 培養条件が崩れてし まう。
( 6 ) 顕微鏡観察を行う場合に高倍率になればなる程、 対物レンズを 試料に近づける必要があり、 そのためには培養器の蓋 （透明ガラスヒ 一ター） に穴を形成し、 この穴から対物レンズを揷入できるようにし なくてはならない。 しかし、 観察箇所の変更を可能にするためには、 穴の直径を対物レンズ （鏡筒） の直径よりかなり大きく しなくてはな らない。 そのため、 対物レンズと穴の縁との間にかなり大きな隙間で きてしまい、 培養器内の培養条件を保つことができなくなってしまう：
( 7 ) 従来の培養器では、 蒸発皿を透明ガラスヒーターに載せて加温 し、 蒸発皿内の水を蒸発させているが、 透明ガラスヒーターは厚さが ミクロンオーダーの極薄い透明導電膜を発熱させているため、 発熱量 が小さく十分な量の蒸気を発生させることができないおそれがある。 本発明は前記した従来の問題点に鑑みて為されたものであり、 顕微 鏡のステージに載せた状態のまま観察試料の培養と観察を行う こと ができると共に、 設定された培養条件による雰囲気を崩さないで観察 試料に対する処置を容易に行う ことができる新規な顕微鏡観察用培 養器を提供することを目的とする。
この目的を達成するために、 請求の範囲第 1項に記載した顕微鏡観 察用培養器は、 上面が開口し、 中央部でディ ッシュなどの試料容器を 着脱自在に収める容器収容部と前記容器収容部の外側に位置した貯 水池とが設けられた水槽ュニッ トと、 前記水槽ュニッ トの上面を塞ぐ 蓋と、 前記試料容器及び水槽ユエッ トを加温するヒーターと、 前記水 槽ュニッ ト と蓋とで画成される培養空間に所定のガスを供給するた めのガス供給手段とを備えており、 水槽ユエッ トと蓋はいずれもその 中央部が上下方向へ光を通す透光部になっていることを特徴とする ものである。
請求の範囲第 2項に記載した顕微鏡観察用培養器は、 請求の範囲第 1項に記載した顕微鏡観察用培養器において、 貯水池に水槽ュュッ ト の外から水を供給する給水手段を備えたことを特徴とするものであ る。
請求の範囲第 3項に記載した顕微鏡観察用培養器は、 請求の範囲第 1項または第 2項に記載した顕微鏡観察用培養器において、 ヒーター はプレート形で試料容器を下から加温するものであり、 前記ヒーター には水槽ュニッ トと蓋の透光部に対応する位置に透光部が設けられ ていることを特徴とするものである。
請求の範囲第 4項に記載した顕微鏡観察用培養器は、 請求の範囲第 3項に記載した顕微鏡観察用培養器において、 ヒーターは、 上側プレ ー ト及び下側プレー ト とこれらの間に位置した発熱体とが互いに接 着された積層体と、 前記上側プレー トの上に空間を介して配置された トッププレートと、 前記積層体及び前記トッププレー トを保持するフ レームとで構成されていることを特徴とするものである。
請求の範囲第 5項に記載した顕微鏡観察用培養器は、 請求の範囲第 1項から第 4項のいずれかに記載した顕微鏡観察用培養器において、 装着された試料容器に水槽ュニッ トの外から培養液を供給する培養 液供給手段を備えたことを特徴とするものである。
請求の範囲第 6項に記載した顕微鏡観察用培養器は、 請求の範囲第 5項に記載した顕微鏡観察用培養器において、 培養液供給手段は、 水 槽ュニッ トの蓋を開けることなく試料容器内の培養液を補給できる 構造のものであることを特徴とするものである。
請求の範囲第 7項に記載した顕微鏡観察用培養器は、 請求の範囲第 1項から第 6項のいずれかに記載した顕微鏡観察用培養器において、 容器収容部は、 水槽ュュッ トの中央部を挟んで対向し且つその対向し 合う間隔を調節自在と した一対の容器ホルダーを備えたことを特徴 とするものである。
請求の範囲第 8項に記載した顕微鏡観察用培養器は、 請求の範囲第 1項から第 7項のいずれかに記載した顕微鏡観察用培養器において、 水槽ュニッ トは顕微鏡のステージ上面に載置され、 プレート形のヒー ターに対し間隔をあけて接触しない状態に備えられるものであって、 前記水槽ュニッ トと前記ヒーターとは分離可能であることを特徴と するものである。
請求の範囲第 9項に記載した顕微鏡観察用培養器は、 請求の範囲第 8項に記載した顕微鏡観察用培養器において、 顕微鏡のステージ上面 に水槽ユニッ トの位置を固定するための固定子を備えたことを特徴 とするものである。
請求の範囲第 1 0項に記載した顕微鏡観察用培養器は、 請求の範囲 第 1項から第 9項のいずれかに記載した顕微鏡観察用培養器におい て、 容器収容部に収められた試料容器の水平方向の位置を水槽ュニッ トの外から変更できる試料容器位置変更手段を具備したことを特徴 とするものである。
請求の範囲第 1 1項に記載した顕微鏡観察用培養器は、 請求の範囲 第 1項から第 1 0項のいずれかに記載した顕微鏡観察用培養器にお いて、 試料容器を容器収容部へ入れたり出したりできる開口を水槽ュ ュッ トの側部に形成し、 前記開口を閉鎖及び開放できる側部蓋とを備 えたことを特徴とするものである。
請求の範囲第 1 2項に記載した顕微鏡観察用培養器は、 請求の範囲 第 1 1項に記載した顕微鏡観察用培養器において、 ヒーターはステー ジに形成されたツール嵌め込み穴に嵌め込んで使用するものであり、 前記ヒ一ターをツール嵌め込み穴に嵌め込むと ヒ一ターの試料容器 を載置する試料容器載置部及ぴ前記試料容器載置部とステージと の 間の部分は、 前記ステージと同じ高さ位置となる構造であることを特 徴とするものである。
請求の範囲第 1 3項に記載した顕微鏡観察用培養器は、 請求の範囲 第 1項から第 1 2項のいずれかに記載した顕微鏡観察用培養器にお いて、 水槽ュュッ トの上面を塞ぐ蓋に試料に対する操作を行うための 操作用穴を形成し、 前記操作用穴は容器収容部の試料容器が備えられ る領域からずれた位置に設けられており、 且つ前記蓋は前記水槽ュニ ッ トの上面の開口を閉鎖したままの状態でスラィ ドして前記操作用 穴を容器収容部の試料容器が備えられる領域に対向させることがで きるものであることを特徴とするものである。
請求の範囲第 1 4項に記載した顕微鏡観察用培養器は、 請求の範囲 第 1項から第 1 3項のいずれかに記載した顕微鏡観察用培養器にお いて、 水槽ュュッ トの上面の開口を塞ぐ蓋に蓋側穴を形成し、 前記蓋 側穴は容器収容部の試料容器が備えられる領域に対応して設けられ ており、 前記蓋上に載置されて蓋上面に対し相対的に所定範囲におい て前記蓋側穴を閉鎖したままの状態で摺動できる力パーを設け、 前記 力バーには顕微鏡の対物レンズが揷入されるレンズ揷入穴が形成さ れていることを特徴とするものである。
請求の範囲第 1 5項に記載した顕微鏡観察用培養器は、 請求の範囲 第 1項から第 1 4項のいずれかに記載した顕微鏡観察用培養器にお いて、 水槽の底面に水槽ヒーターを備えたことを特徴とする顕微鏡観 察用培養器である。
請求の範囲第 1 6項に記載した顕微鏡観察用培養器は、 請求の範囲 第 3項から第 1 5項のいずれかに記載した顕微鏡観察用培養器にお いて、 試料容器及び水槽ュニッ トを加温するヒーターは試料容器が載 置される容器載置部を有し、 前記容器載置部には透明導電膜によって 構成される発熱部が設けられていることを特徴とするものである。 請求の範囲第 1 7項に記載した顕微鏡観察用培養器は、 請求の範囲 第 1項から第 1 6項のいずれかに記載した顕微鏡観察用培養器にお いて、 水槽ュュッ トの上面を塞ぐ蓋の透光部には透明導電膜によって 構成される発熱部が設けられていることを特徴とするものである。 請求の範囲第 1 8項に記載した顕微鏡観察用培養器は、 請求の範囲 第 1項から第 1 7項のいずれかに記載した顕微鏡観察用培養器にお いて、 顕微鏡の対物レンズと試料容器との間に油または水を介在させ て油浸または水浸を実施する際に、 前記試料容器を対物レンズの方向 へ力を加えて固定する試料容器固定手段を有することを特徴とする ものである。
第 1の顕微鏡観察用培養器セッ トは、 請求の範囲第 9項から第 1 7 項のいずれかに記載した顕微鏡観察用培養器と、 前記顕微鏡観察用培 養器の固定子を所望の位置に固定するために用い、 水槽ュュッ トの中 心とステージのツール嵌め込み穴の中心とを一致させる芯出し部材 と、 前記芯出し部材によって水槽ュニッ トの中心とステージの穴の中 心とを一致させ水槽ュ-ッ トの外周部に嵌めた状態で固定子を当接 させて位置決めする外嵌め部材とから成る固定子取り付け用治具と を有することを特徴とするものである。
第 2の顕微鏡観察用培養器セッ トは、 請求の範囲第 1'項から第 1 7 項のいずれかに記載した顕微鏡観察用培養器と、 前記顕微鏡観察用培 養器に収容され、 上面が開口した本体とその上面を塞ぐ蓋とを備えて. 前記蓋の上面から突出したホース接続凸部を前記蓋と一体に形成し、 ホース接続凸部にはその外面から蓋底面に達するホース揷入穴を形 成した試料容器とを有することを特徴とするものである。
第 3の顕微鏡観察用培養器セッ トは、 請求の範囲第 1 1項または第 1 2項に記載した顕微鏡観察用培養器と、 前記顕微鏡観察用培養器に 対し試料容器を出し入れするのに用い、 弾性変形可能な材料から成る 一対のアームによって構成されており、 前記一対のアームの後端部は 連結され、 前記アームの途中部分には互いに交差する交差部が設けら れ、 先端部には試料容器を前記アームの弾性力によって閉じる方向へ 付勢された挟持部を有し、 しかも前記交差部と前記挟持部との間に互 いに圧接して前記挟持部が所定位置よ り閉じるのを規制する圧接部 が形成されている試料容器の掴み具とを有することを特徴とするも のである。
第 4の顕微鏡観察用培養器セッ トは、 請求の範囲第 1 8項に記載し た固定子取り付け用治具、 請求の範囲第 1 9項に記載した試料容器、 請求の範囲第 2 0項に記載した試料容器固定手段、 請求の範囲第 2 1 項に記載した試料容器の掴み用具のう ちの少なく と も 2つを含むこ とを特徴とするものである。 図面の簡単な説明
第 1図は、 本発明の第 1の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養器を 顕微鏡のステージに載せた状態で示す斜視図である。
第 2図は、 第 1の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養器の平面図で ある。 第 3図は、 第 1図の A— A線に沿って切断した拡大断面図である。 第 4図は、 第 1実施の形態に係る顕微鏡観察用培養器の分解斜視図 である。
第 5図は、 第 2図の B— B線に沿って切断した一部省略拡大断面図 である。
第 6図は、 第 2図の C一 C線に沿って切断した要部拡大断面図であ る。
第 7図は、 第 2図の D— D線に沿って切断した要部拡大断面図であ る。
第 8図は、 固定子取り付け用治具を用いて固定子を取り付ける作業 を説明するための斜視図である。
第 9図は、 固定子取り付け用治具を用いて固定子を取り付ける作業 を説明するための斜視図である。 ，
第 1 0図は、 第 1実施の形態に係る顕微鏡観察用培養器に使用する ディ ッシュの一例を示す斜視図である。
第 1 1図は、 第 1 0図に示すディ ッシュを容器本体と蓋とに分離し て示す斜視図である。
第 1 2図は、 第 1 0図の D— D線に沿って切断した要部拡大断面図 である。
第 1 3図は、 本発明の第 2の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養器 を顕微鏡のステージに載せた状態で示す斜視図である。
第 1 4図は、 第 2の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養器を顕微鏡 のステージに装着する作業を説明するための斜視図である。
第 1 5図は、 第 2の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養器を顕微鏡 のステージに装着する作業を説明するための斜視図である。
第 1 6図は、 第 2の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養器を構成す る水槽ュニッ トの分解斜視図である。
第 1 7図は、 第 2の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養器の平面図 である。
第 1 8図は、 第 2の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養器の水槽ュ ニッ トの概略底面図である。
第 1 9図は、 第 1 3図の E _ E線に沿って切断した断面図である。 第 2 0図は、 第 1 9図の一部拡大図である。
第 2 1図は、 ディ ッシュの掴み具の構造及ぴ使用方法を説明するた めの斜視図である。
第 2 2図は、 ディ ッシュの掴み具の構造及び使用方法を説明するた めの斜視図である。
第 2 3図は、 ディ ッシュの掴み具の構造及び使用方法を説明するた めの斜視図である。
第 2 4図は、 掴み具を用いてディ ッシュを第 2の実施の形態に係る 顕微鏡観察用培養器に出し入れする作業を説明するための斜視図で ある。
第 2 5図は、 掴み具を用いてディ ッシュを第 2の実施の形態に係る 顕微鏡観察用培養器に出し入れする作業を説明するための断面図で め 。
第 2 6図は、 第 2の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養器内のディ ッシュ内の試料に処理、 操作をするための作業を説明するための斜視 図である。
第 2 7図は、 第 3の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養器を顕微鏡 のステージに載せた状態で示す斜視図である。
第 2 8図は、 第 2 7図の E— E線に沿って切断した断面図である。 第 2 9図は、 ディ ッシュ及び油浸または水浸を実施する場合にディ ッシュに乗せる錘の斜視図である。 発明を実施するための最良の形態
本発明の第 1 の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養器 2 0 1を第 1図から第 1 2図の図面に従って説明する。 顕微鏡観察用培養器 2 0 1は倒立顕微鏡に用いるものである。
この顕微鏡観察用培養器 2 0 1は、 ディ ッシュ 2 2 0が着脱自在に 装着される水槽ュュッ ト 2 0 3 と、 この水槽ユエッ ト 2 0 3の上面を 塞ぐ蓋 2 3 3 と、 水槽ュ-ッ ト 2 0 3やディ ッシュ 2 2 0を加温する ためのヒータープレート 2 5 9 と、 水槽ユエッ ト 2 0 3を顕微鏡のス テージ 2 6 7上で位置固定するための位置固定子 2 8 1、 2 8 3等で 構成される。
最初に、 第 1 0図から第 1 2図によって顕微鏡観察用培養器 2 0 1 で使用するディ ッシュ 2 2 0を説明する。
このディ ッシュ 2 2 0は、 透明なプラスチック製のもので、 やや深 めの円形皿状をしたディ ッシュ本体 2 2 1 と、 これに被せるフタ 2 2 3 とで構成されており、 フタ 2 2 3には、 その上面から突出したホー ス接続凸部 2 2 5がー体に形成されている。 このホ^ "ス接続凸部 2 2 5は、 蒲鋅形をしていて、 フタ 2 2 3の中心を挟んで互いに反対側に 位置しており、 ホース揷入穴 2 2 7が形成されている。 このホース揷 入穴 2 2 7は、 その一端がホース接続凸部 2 2 5の一端面に開口し他 端がフタ 2 2 3の底面に開口するように L字形に屈曲している （第 1 2図参照） 。 各通し穴 2 2 7の一端口は互いに反対側に向かって開口 している。
このホース揷入穴 2 2 7には培養液供給ホース 2 2 9 と培養液吸 出しホース 2 3 1が各別に通され、 その先端はフタ 2 2 3の底面より 下へ引き出される。
なお、 ディッシュ 2 2 0は透明ガラスによつて構成してもよい。 上記ディ ッシュ 2 2 0 と顕微鏡観察用培養器 2 0 1 とによって顕 微鏡観察用培養器セッ トが構成される。
水槽ュュッ ト 2 0 3は、 水槽 2 0 5 と、 ディ ッシュ 2 2 0を保持す る容器ホルダー 2 0 7と、 給水管 2 1 3 と、 ガス供給管 2 1 4と、 ホ ースホルダー 2 9 1 とで構成されている。
水槽 2 0 5は、 円形をした底板 2 0 5 a と、 底板 2 0 5 a の外周縁 から立ち上がった外周壁 2 0 5 b とが一体に形成した部材と、 底板 2 0 5 aにその穴 2 0 5 cの縁から立ち上がるよ うに取り付けられた 筒形の内周壁 2 0 5 dとで構成されている。 この内周壁 2 0 5 dから 外側の環状溝が貯水池 2 0 5 eになっていて、 内周壁 2 0 5 dの内側 が容器収容部 2 0 5 gになっている。
また内周壁 2 0 5 dの上端部には貯水池 2 0 5 e側へ張り 出す波 返し部 2 0 5 i が設けられている。 この波返し部 2 0 5 i は貯水池 2 0 5 e内の水が揺れて多少波が立っても、 この波が内周壁 2 0 5 dを 乗り越えるのを防止するためのものである。
外周壁 2 0 5 bには、 その上端寄りの高さ位置で周方向へ配列され た 4つの配管穴 2 0 5 f (第 6図、 第 7図参照） が形成されている。 内周壁 2 0 5 dの内周面にはホルダー取付け座 2 0 6が 2つ、 内周 壁 2 0 5 dの中心線を挟んで互いに対向する向きで接着されている。 これらホルダー取付け座 2 0 6は、 平面視ほぼ三日月形をしており、 その上面における中間位置には互いに対向する方向へ延びる幅広で 浅い溝 2 0 6 aが形成されていて、 この溝 2 0 6 aの底面にネジ穴 2 0 6 bが形成されている。
2 0 7は容器ホルダーを示し、 この容器ホルダー 2 0 7は、 側方か ら見てほぼクランク形に屈曲しており、 容器ホルダー 2 0 7の上部に は長穴 2 0 7 aが形成され、 下部の先端縁 2 0 7 bは、 その中央が矩 形に凹んだ形状になっている。 容器ホルダー 2 0 7は、 その上部がホ ルダー取付け座 2 0 6の溝 2 0 6 aに摺動自在に収まると共に、 長穴 2 0 7 a を上から通されたネジ 2 0 8がネジ穴 2 0 6 bにねじ込ま れることでホルダー取付け座 2 0 6に圧着される。 この状態で、 下部 の先端縁 2 0 7 b どう しが互いに対向し、 その対向間隔は、 ネジ 2 0 8を緩めて容器ホルダー 2 0 7を移動させることで変更される。
外周壁 2 0 5 b の外周面には、 培養液供給ホース 2 2 9及び培養液 吸出しホース 2 3 1用のホースホルダー 2 0 9が 2つ取り付けられ ている。 2つのホースホルダー 2 0 9は水槽 2 0 5を挟んで互いに対 向する位置に備えられている。 ホースホルダー 2 0 9は外周壁に固定 されたベースブロック 2 1 0 と、 このベースブロック 2 1 0 の上面に 押さえネジ 2 1 1で圧着される押さえ板 2 1 2 とで構成されている。 ベースプロ ック 2 1 0 の上面には保持溝 2 1 0 aが形成されている (第 6図参照） 。 なお、 第 6図には、 ホースホルダー 2 0 9の培養液 吸出しホース 2 3 1側のみを示してあるが、 培養液供給ホース 2 2 9 側についても同じ構造となっている。
ホースホルダー 2 0 9は、 その保持溝 2 1 0 aが、 水槽 2 0 5の外 周壁 2 0 5 bに形成されている 2つの配管穴 2 0 5 f に各別に連続 している。
2つの配管穴 2 0 5 f には、 ディ ッシュ 2 2 0 の培養液供給ホース 2 2 9及び培養液吸出しホース 2 3 1が各別に通されている。 そして. 培養液供給ホース 2 2 9 と培養液吸出しホース 2 3 1 の配管穴 2 0 5 ί から外へ出た部分がホースホルダー 2 0 9 の保持溝 2 1 0 a に 備えられ、 この部分が押さえ板 2 1 2によってベースプロック 2 1 0 に圧着されて抜止めされる。
培養液供給ホース 2 3 1は、 図示しない除菌フィルターを介して図 示しない培養液タンクに連結されている。
培養液供給手段は、 培養液供給ホース 2 2 9、 培養液吸出しホース 2 3 1及ぴ培養液タンクによって構成されている。
なお、 培養液供給ホース 2 2 9に培養液を入れたシリンジポンプに 接続しておき、 プランジャーを押して進行させ、 培養液を押し出して 培養液ホース 2 2 9を介してディ ッシュ 2 2 0に供給する構成と し てもよい。
外周壁 2 0 5 b の外周面には、 給水ホース 2 1 7及びガスホース 2 1 8用のホースホルダー 2 9 1が 2つ取り付けられている。 2つホー スホルダー 2 9 1はある程度の間隔をあけて並んで配置されている。 ホースホルダー 2 9 1は外周壁に固定されたベースブロ ック 2 9 3 を有し、 このベースプロ ック 2 9 3には水平方向へ延びる横穴 2 9 5 が形成されている。 ベースプロック 2 9 3 の横穴 2 9 5は水槽 2 0 5 の外周壁 2 0 5 bに形成されている 2つの配管穴 2 0 5 f に各別に 連続している。 さらにベースブロック 2 9 3にはネジ穴 2 9 7が形成 され、 このネジ穴 2 9 7はベースプロック 2 9 3 の上面と横穴 2 9 5 とに連通している。
—方のベースブロ ック 2 9 3の横穴 2 9 5及び配管穴 2 0 5 f に は給水管 2 1 3が動作自在に揷通されており、 この給水管 2 1 3はネ ジ穴 2 9 7に取り付けられた押さえネジ 2 9 6 の先端が当接するこ とによって固定される （第 7図参照） 。 なお、 第 7図には、 ホースホ ルダー 2 0 9の給水ホース 2 1 7側のみを示してあるカ 、 ガスホース 2 1 8側についても同じ構造となっている。
他方のベースブロ ック 2 9 3の横穴 2 9 5及ぴ配管穴 2 0 5 f に はガス供給管 2 1 4が動作自在に揷通されており、 このガス供給管 2 1 4も給水管 2 0 3 と同様にネジ穴 2 9 7に取り付けられた押さえ ネジ 2 9 6の先端が当接することによって固定される。
給水管 2 1 3の水槽 2 0 5内に突出した部分は下向きに屈曲し、 そ の先端口 1 3 aは、 内周壁 2 0 5 dの上端よりやや低い高さで貯水池
2 0 5 eに臨むように設けられる。 給水管 2 1 3の後端部は、 ホース ホルダー 2 0 9の横穴 2 9 5から突出しており、 この突出部分に給水 ホース 2 1 7の一端が連結され、 給水ホース 2 1 7の他端は給水タン ク 2 1 6に連結される。
給水手段は、 給水管 2 1 3、 給水タンク 2 1 6及ぴ給水ホース 2 1 7によって構成されている。
ガス供給管 2 1 4の水槽 2 0 5内に突出した部分は下向きに屈曲 しており、 ガス供給管 2 1 4の先端は貯水池 2 0 5 eの底面に接する 辺りまで延びている。 ガス供給管 2 1 4の後端部は、 ホースホルダー 2 0 9の横穴 2 9 5から突出しており、 この突出部分にガスホース 2 1 8の一端が連結されている。 ガスホース 2 1 8の他端は、 C 02供 給を停止した際に貯水池 2 0 5 e内の水が逆流するのを防止するた めのバルブ (またはクランプ) 、 流量計及びガス流量を調整する調整 弁を介して C O 2ボンベに連結されている。
ガス供給手段は、 ガス供給管 2 1 4、 ガスホース 2 1 8、 調整弁及 び C O 2ボンベによって構成されている。
蓋 2 3 3は、 比較的厚い円板形の蓋板 2 3 7をベースと しており、 この蓋板 2 3 7には円形の大きな窓 2 3 9が形成されている。 蓋板 2
3 7の下面には、 その外周縁よりやや内側の位置を通って無端状に延 びる嵌合凸部 2 4 1が形成されている。 また蓋板 2 3 7の下面には、 窓 2 3 9を塞ぐ、 ヒーターと しての透明ガラスヒーター 2 4 3が貼り 付けられている。
透明ガラスヒーター 2 4 3は 2枚の板ガラス 2 4 4、 2 4 6が貼り 合わされて構成されており、 上側の板ガラス 2 4 4の下面に透明導電 膜が形成され、 この透明導電膜に通電することによって発熱するよう になっている。 透明ガラスヒーター 2 4 3の下側には温度センサー 2 5 7が備えられ、 この温度センサー 2 5 7の検知情報に基づいて前記 透明導電膜に対する通電が制御され、 発熱温度が所定範囲になるよう に調節される。
透明ガラスヒーター 2 4 3には、 窓 2 3 9の一側面寄りに偏寄した 位置に円形の作業口 2 4 5が形成されると共に、 小さなホース通し穴 2 5 0が 2つ形成されている。 ディ ッシュ 2 2 0のフタ 2 2 3を用い ないで、 ディ ッシュ 2 2 0を開放したままで培養を行う場合には、 こ のホース通し穴 2 5 0に培養液供給ホース 2 2 9及ぴ培養液吸出し ホース 2 3 1を通し、 培養液供給ホース 2 2 9及び培養液吸出しホー ス 2 3 1 の先端部をディ ッシュ 2 2 0内に配置して培養液 Bの交換 を行う。
作業口 2 4 5はフタ 2 4 9によって閉鎖され、 ホース通し穴 2 5 0 は栓 2 5 1によって閉鎖される。
フタ 2 4 9は作業口 2 4 5より多少大きい円板形をしており、 その 下面の外周部にシリ コーンゴム製の粘着リ ング 2 5 3が貼り付けら れている。 この粘着リ ング 2 5 3が作業口 2 4 5の開口縁を囲うよう にフタ 2 4 9を置く ことで作業穴が塞がれる。 そして、 このフタ 2 4 9にも小さな作業穴 2 5 5が形成されていて、 この作業穴 2 5 5も栓 2 5 1によって塞がれる。
栓 2 5 1は、 シリ コーンゴムによって構成され、 ホース通し穴 2 5 0や作業穴 2 5 5より一回り大きい円盤状に形成されている。 温度センサー 2 5 7から延びた信号線は図示しない温度コント口 一ラーに接続される。
ヒータープレート 2 5 9は、 プラスチック製のリング形を為すフレ ーム 2 6 1 をベースと しており、 フレーム 2 6 1の外径は水槽ュ-ッ ト 2 0 3の内径より一回り小さい寸法になっている。 フレーム 2 6 1 の底面の中心側半部から下へ突出した環状の環状凸部 2 6 3が形成 されると共に、 その内周面の上端近くから内フランジ 2 6 5が突出し ている。 環状凸部 2 6 3の外径は、 顕微鏡のステージ 2 6 7に設けら れているツール嵌め込み穴 2 6 9の径に合わせて設定される。
フレーム 2 6 1の内フランジ 2 6 5から上の空間には、 透明ガ ス 製の トッププレー ト 2 7 1が内フランジ 2 6 5に載せられてセッ ト される。 トッププレート 2 7 1 と上側プレート 2 7 5 との間には空間 2 7 2が介在している。 この トツププレー ト 2 7 1はフレーム 2 6 1 の内フランジ 2 6 5から上の空間の寸法より多少厚く、 中央部には円 形の穴 2 7 3が形成されている。
フレーム 2 6 1の内フランジ 2 6 5から下の内側空間には、 アルミ 二ゥム製の上側プレート 2 7 5及び下側プレート 2 7 7 と、 これらの 間に位置したニクロム線によって構成される発熱体 2 7 9 とが互い に接着された積層体とが備えられている。 上側プレー ト 2 7 5は内フ ランジ 2 6 5の下面に接着されて取り付けられている。 従って上側プ レート 2 7 5、 下側プレート 2 7 7及ぴ発熱体 2 7 9の積層体は、 言 わば吊り下げられた状態で内フランジ 2 6 5に取り付けられている。 上側プレート 2 7 5 と下側プレート 2 7 7は円板形をしており、 アル マイ ト処理が施されている。
上側プレート 2 7 5 と下側プレート 2 7 7には、 トッププレート 2 7 1の穴 2 7 3 より多少大きい円形をした穴 2 7 5 a、 2 7 7 aがそ れぞれ形成されている。
透光部は、 これら穴 2 7 5 a 、 2 7 7 a , トッププレート 2 7 1の 穴 2 7 3、 蓋板 2 3 7の窓及び水槽 2 0 5の底板 2 0 5 aに形成され た穴 2 0 5 cによつて構成されている。
図示は省略してあるが、 フレーム 2 6 1には配線用の空間が形成さ れていて、 この配線用の空間に図示しないコントローラーから延びた 接続コードの先端部が這わされ、 その接続コードの先端部が発熱体 2
7 9に接続されている。
固定子 2 8 1 、 2 8 3は、 横断面がやや縦長矩形で水槽 2 0 5の外 周面の啤率とほぼ同じ曲率の円弧状に屈曲した厚い板状をして、 その 底面に両面粘着テープが貼り付けられている。 固定子 2 8 1 、 2 8 3 には 2つのネジ穴 2 8 4が形成され、 このネジ穴 2 8 4に押しネジ 2
8 5が取り付けられている。
顕微鏡のステージ 2 6 7上の所望する位置に固定子 2 8 1 、 2 8 3 を固定するのに用いる固定子取り付け用治具について説明する。
固定子取り付け用治具は芯出し部材 2 9 0 と外嵌め部材 2 9 4 と によつて構成されている。 芯出し部材 2 9 0は中央部に円形の穴 2 9 2を有する円盤状で、 その直径はディ ッシュ 2 2 0 とほぼ同じ寸法と なっている。 穴 2 9 2は上側プレート 2 7 5の穴 2 7 5 a と同じ大き さに形成されている。 外嵌め部材 2 9 4は水槽 2 0 5の外周部にピッ タリ嵌る大きさのリング状で、 外周部には固定子 2 8 1 、 2 8 3を嵌 める凹部 2 9 8が形成されている。 外嵌め部材 2 9 4の凹部 2 9 8が 形成されている部分の幅寸法 5 m mになっている。
上記固定子取り付け用治具と顕微鏡観察用培養器 2 0 1 とによつ て顕微鏡観察用培養器セッ トが構成される。
次に、 顕微鏡観察用培養器 2 0 1 の使用方法等を説明する。 第 8図、 第 9図を参照しつつ固定子取り付け用治具を用いて固定子 2 8 1、 2 8 3を顕微鏡のステージ 2 6 7に固定する作業について説 明する。
先ず、 ヒータープレー ト 2 5 9を顕微鏡のステージ 2 6 7に載せ、 フ レーム 2 6 1 の環状凸部 2 6 3をステージ 2 6 7のツールに嵌め る。 次に、 外嵌め部材 2 9 4をツールに嵌めてあるフ レーム 2 6 1の 位置に合わせてステージ 2 6 7に載せる。 そして、 水槽 2 0 5をヒー タープレート 2 5 9に被せるようにステージ 2 6 7に載せると、 水槽 2 0 5の外周部に外嵌め部材 2 9 4が嵌り込む。
次いで、 容器収容部 2 0 5 gの中心に位置するように芯出し部材 2 9 0をトッププレート 2 7 1上に置いて、 容器ホルダー 2 0 7の先端 縁 2 0 7 bを芯出し部材 2 9 0の外周面に当接させる。 この状態でネ ジ 2 0 8を締めて、 容器ホルダー 2 0 7を固定して芯出し部材 2 9 0 を容器ホルダー 2 0 7に保持させる。 そして、 水槽 2 0 5をステージ 2 6 7上で動かして、 芯出し部材 2 9 0の穴 2 9 2 と上側プレート 2 7 5の穴 2 7 5 aがー致するように位置を合わせる。
次に、 外嵌め部材 2 9 4を回動させて凹部 2 9 8が固定子 2 8 1、 2 8 3を固定する位置にく るように調節する。
一方、 固定子 2 8 1、 2 8 3は、 押しネジ 2 0 8の先端部がネジ穴 内に入り込み、 固定子 2 8 1、 2 8 3 の水槽 2 0 5に対向する面から 突出しない状態にしておく。 そして、 固定子 2 8 1、 2 8 3を凹部 2 9 8に嵌めて位置決めし、 ステージ 2 6 7上に貼り付けて固定する。 次いで、 芯出し部材 2 9 0を取り外す。
固定子 2 8 1、 2 8 3をステージ 2 6 7上に固定した後、 水槽 2 0 5を一旦持ち上げて、 外嵌め部材 2 9 4を取り去る。 そして、 水槽 2 0 5を元の戻してステージ 2 6 7に設置すると、 固定子 2 8 1、 2 8 3は水槽 2 0 5の外周面から 5 m m (外嵌め部材 2 9 4の回部 2 9 8 が形成されている部分の幅寸法） 離間して配置されることになる。 そ して、 押しネジ 2 0 8をねじ込み方向へ回して、 固定子 2 8 1、 2 8 3から押しネジ 2 0 8の先端部を突出させて、 水槽 2 0 5の外周面に 当接させる。 これによつて、 水槽ユニッ ト 2 0 3がステージ 2 6 7上 で固定される。 なお、 押しネジ 2 0 8をネジ穴内に入り込んだ状態と すれば、 水槽ュュッ ト 2 0 3を固定子 2 8 1側へ 5 m m、 固定子 2 8 3側へ 5 m mの範囲で動かすことが可能であり、 対物レンズ Tに対向 する観察部分の変更を行う ことができる。
ディッシュ 2 2 0を装着する作業について説明する。
ネジ 2 0 8を緩めておき、 ディ ッシュ 2 2 0を水槽 2 0 5 の容器収 容部 2 0 5 gに収容すると共に トッププレー ト 2 7 1上に載せてか ら、 容器ホルダー 2 0 7を前進させ、 容器ホルダー 2 0 7の先端縁 2 0 7 bをディ ッシュ 2 2 0 のディ ッシュ本体 2 2 1 の外周面に当接 させる。 この状態で長穴 2 0 7 aを貫通してネジ穴 2 0 6 bに取り付 けられているネジ 2 0 8を締めて、 容器ホルダー 2 0 7を固定してデ イ ツシュ 2 2 0を保持させる。 さらに前述したように、 ディ ッシュ 2 2 0に備えられた培養液供給ホース 2 2 9 と培養液吸出しホース 2 3 1を配管穴 2 0 5 f に各別に通し、 これら培養液供給ホース 2 2 9 と培養液吸出しホース 2 3 1 の途中部分をホースホルダー 2 0 9 の 保持溝 2 1 0 aに備えて、 押さえ板 2 1 2によつてベースプロック 2 1 0に圧着させて抜止めする。
なお、 ディ ッシュ 2 2 0には観察対象とする細胞などの試料を培養 液と共に入れておく。
次に、 顕微鏡観察用培養器 2 0 1への給水と蒸気の発生、 C 0 2ガ スの供給について説明する。 給水タンク 2 1 6に水を入れて、 適宜なハンガーに掛けることで、 水槽ュュッ ト 2 0 3より高い位置に置く。 すると、 給水タンク 2 1 6 内の水は、 自重で給水ホース 2 1 7から給水管 2 1 3を経て、 水槽ュ ニッ ト 2 0 3の貯水池 2 0 5 eに流れ落ちて行き、 この貯水池 2 0 5 eに溜まる。 そして、 貯水池 2 0 5 e に溜まった水の水面が給水管 2 1 3の先端口 1 3 aの口に達する と貯水池 2 0 5 eへの水の供給が 停止する。 蒸発などによってこの水面が下がると、 給水管 2 1 3の口 から給水タンク 2 1 6に空気が入って、 それと入れ替わりに給水管 2 1 3内の水が貯水池 2 0 5 eに落ちる。 これを繰り返すことで貯水池 2 0 5 eの水面が一定に保持されて、 貯水池 2 0 5 e には常時一定量 の水 Wが蓄えられる。 なお、 貯水池 2 0 5 eへの給水は上記した方法 の他、シリンジポンプを用い、貯水池 2 0 5 eの水量をみて行ったり、 或いは定期的に行うようにしてもよい。
また、 顕微鏡観察用培養器 2 0 1では、 窓 2 3 9が円形に形成され ているので、 給水管 2 1 3が透明ガラスヒーター 2 4 3を透して外部 から見ることができる。 このため蓋板 2 3 7を開けることなく、 貯水 池 2 0 5 eの水位を一目で確認することができる。
第 1の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養器 2 0 1 の動作につい て説明する。
図示しないコン トローラーを操作して透明ガラスヒーター 2 4 3 とヒータープレー ト 2 5 9を駆動させると、 ディ ッシュ 2 2 0、 水槽 2 0 5内を加熱し、 更に貯水池 2 0 5 eの水が加熱されて蒸発させら れせる。 従って、 培養空間 2 3 5が蒸気で満たされ、 容器ホルダー 2 0 7に保持されたディ ッシュ 2 2 0の中もこの蒸気に晒される。 この 蒸気によって、 培養空間 2 3 5は、 相対湿度 9 0〜 9 5 %に保たれる と共に、 透明ガラスヒータ ^ " 2 4 3 とヒータープレー ト 2 5 9の発熱 度に応じた温度に保持される。 この場合、 ディ ッシュ 2 2 0は培養空 間 2 3 5の中央部に位置し、 それを囲うように貯水池 2 0 5 eが位置 するので、 ディ ッシュ 2 2 0内の湿度はムラ無く均一に保たれる。
また、 5 %濃度の C O 2ガスのボンベに連結された調整弁を開き、 この C O 2ガスをガスホース 2 1 8 を介して培養空間 2 3 5へ供給す る。 培養空間 2 3 5へ供給された C 02ガスは、 顕微鏡観察用培養器 2 0 1 の水槽 2 0 5 と蓋 2 3 3 との隙間等から培養器 2 0 1外へ漏 れるが、 C O 2ガスは供給され続けられるので培養空間 2 3 5は 5 % 濃度の C O 2ガスに満たされる状態となり、 C O 2濃度が 5 %に保たれ る。
C 0 2濃度を所定の値に保つ方法と しては上記の方法の他、 C O 2 濃度を計測するセンサーを培養空間 2 3 5に備えて、 このセンサーの 検知情報に基づいて、 培養空間 2 3 5が所定の C 02濃度になるよう に高濃度の C O 2を断続的に供給する方法もある。
また、培養空間 2 3 5へ供給するガスは C O 2に限らず、 N 2 (窒素）、 O 2 (酸素） 等でもよい。
上記のように培養空間 2 3 5が所定の温度、 湿度及び C O 2ガスに 保たれた状態で、ディ ッシュ 2 2 0に入れられた観察試料（菌ゃ細胞） の培養が行われて適宜、 蓋 2 3 3やディ ッシュ 2 2 0のフタ 2 2 3を 開けることなく培養液 Bの交換が行われる。 すなわち培養液吸出しホ ース 2 3 1から培養液 Bが吸い出され、 この吸い出された量を超えな い程度の量の新しい培養液 Bが培養液供給ホース 2 2 9からディ ッ シュ 2 2 0へ供給されて、 ディ ッシュ 2 2 0内の培養液 Bの量は一定 以下にならないように保たれる。 このよ うに顕微鏡観察用培養器 2 0 1 とディ ッシュ 2 2 0とを使用することによって、 培養液を交換して 培養を行う環流培養を行うことができる。 なお、 培養液供給ホース 2 2 9 と培養液吸出しホース 2 3 1はホー ス揷入穴 2 2 7に対して抜き差し自在であり、 培養液吸出しホース 2 3 1の先端開口の高さ （ディ ッシュ 2 2 0の底面からの距離） を調節 できるので、 培養液 Bの量を調節できる。 すなわち、 培養液吸出しホ ース 2 3 1の先端開口の高さを上げれば、 培養液 Bの液面が上がり液 量を增やすことができ、 培養液吸出しホース 2 3 1の先端開口の高さ を下げれば、 培養液 Bの液面が下がり液量を減らすことができる。 上記のよ うにしてディ ッシュ 2 2 0内の観察試料を培養しながら、 顕微鏡観察を行う。 すなわち、 コンデンサー Cから光が照射され、 こ の光はトッププレート 2 7 1の穴 2 7 3、 上側プレート 2 7 5の穴 2 7 5 a、 下側プレート 2 7 7の穴 2 7 7 aを通り、 対物レンズ Tに入 射する。 そして、 ディ ッシュ 2 2 0に入れられた試料を顕微鏡観察す る。 ディ ッシュ 2 2 0内の観察試料を培養しながら、 経時的な変化を 連続して観察したり、 ビデオ録画することができる。
ヒータープレー ト 2 5 9は水槽ユニッ ト 2 0 3 に対し間隔を開け て配置されているので、 水槽ュュッ ト 2 0 3の重量変化 （貯水池 2 0 5 e内の水量変化等による） の影響を受けず、 ディ ッシュ 2 2 0 と対 物レンズ Tとの距離が変化するの防ぐことができ、 観察画像がぼける のを防止できる。
さらに、 ヒータープレー ト 2 5 9の上側プレート 2 7 5の上方に空 間を開けて トッププレート 2 7 1が配置され、 このトッププレート 2 7 1上にディ ッシュ 2 2 0が載せられているので、 観察像がぼけるの を防止する効果をより高めることができる。 すなわち、 ガラス製の ト ッププレー ト 2 7 1 はアルミニウム製のヒータープレー ト 2 5 9 よ り も熱膨張率が小さく、 ディッシュ 2 2 0を上側プレート 2 7 5に直 接に載せた場合に比べて、 ヒータープレート 2 5 9の加熱による温度 変化に起因する上側プレート 2 7 5等の膨張、 変形の影響を殆ど受け ず、 対物レンズ Tと観察試料との距離が変化して観察像がぼけるのを より効果的に防止できる。
また、 前述したように上側プレート 2 7 5、 下側プレート 2 7 7及 ぴ発熱体 2 7 9の積層体は、 言わば吊り下げられた状態で内フランジ 2 6 5に取り付けられているので、 加熱された場合において上側プレ ート 2 7 5等から成る積層体は下方側へ変形することになる。 従って、 上側プレー ト 2 7 5等から成る積層体の変形がディ ッシュ 2 2 0へ 影響するのを極力抑えることができ、 観察画像がぼけるのをよる効果 的に防止することができる。
更に、 トッププレート 2 7 1 と上側プレート 2 7 5 との間に空間 2 7 2が設けられているので、 上側プレート 2 7 5の変形がディ ッシュ 2 2 0に伝わらず、 対物レンズ Tと観察試料との距離が変化して観察 像がぼけてしま うのを防止する効果をより一層高めることができる。
また、 この顕微鏡観察用培養器 2 0 1では、 穴 2 7 3、 2 7 5 a、 2 7 7 aが形成されているので、 必要に応じて対物レンズ Tとディ ッ シュ 2 2 0の底面との間に油または水を介在させて顕微鏡観察を行 う油浸または水浸を用いることも可能である。
なお、 本顕微鏡観察用培養器 2 0 1は、 水槽ュニッ ト 2 0 3を外し て、 スライ ドガラス等を トッププレート 2 7 1に載せて、 試料を加温 して顕微鏡観察を行う使用法も可能である。
本発明の第 2の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養器 3 1 1及び 駆動ステージ 3 1 9を第 1 3図から第 2 6図の図面に従って説明す る。 顕微鏡観察用培養器 3 1 1は正立顕微鏡に用いるものである。 顕微鏡観察用培養器 3 1 1 は第 1 の実施の形態に係る顕微鏡観察 用培養器 2 0 1 と同様の構成部分を有するので、 同様の構成部分につ いては第 1の実施の形態と同じ符号を付して、 その説明を省略する。 この顕微鏡観察用培養器 3 1 1は、 ディ ッシュ 3 1 3が着脱自在に 装着される水槽ュ-ッ ト 3 4 7 と、 この水槽ュュッ ト 3 4 7の上面を 塞ぐ蓋 4 3 1 と、 水槽ュニッ ト 3 4 7やディ ッシュ 3 1 3を加温する ためのヒーターと してのヒータープレート 3 1 7等で構成される。 顕 微鏡観察用培養器 3 1 1は顕微鏡に備えられる駆動ステージ 3 1 9 に装着される。
駆動ステ >~ジ 3 1 9は、 上下に重なって配置された二枚の駆動板 3 2 1、 3 2 3を備えており、 上側駆動板 3 2 1が左右方向 （以下、 A 一 B方向という。 ） へ水平駆動し、 また下側駆動板 3 2 3が上側駆動 板 3 2 1 と共に図面において前後方向 （以下、 C一 D方向という。 ） へ水平駆動する。 従って、 上側駆動板 3 2 1に備えられた顕微鏡観察 用培養器 3 1 1は、 A— B方向と C一 D方向へ動作する。 上側駆動板 3 2 1には円形のツール嵌め込み穴 2 6 9が形成されている。
ヒータープレー ト 3 1 7の構成について説明する。
符号 3 2 5はフレームを示し、 このフレーム 3 2 5はアルミニウム 合金のリング形を為すフレームをベースと しており、 フレームの外径 は後述する水槽ュ-ッ ト 3 4 7の内径よ り一回り小さい寸法になつ ている。 フレーム 3 2 5の内周面には内側へ向かって突出する内フラ ンジ 3 2 7が形成されている。 内フランジ 3 2 7の上面には、 透明ガ ラス製の ト ッププレー ト 3 2 8の外周部下面が載せられ支持されて いる。 このトッププレート 3 2 8の上面の中央部分が試料容器載置部 3 3 0になり、 ディ ッシュ 3 1 3が載置される。
また、 内フランジ 3 2 7の下面には、 積層体と しての透明ガラスヒ 一ター 3 2 9が貼り付けられて固定されている。 透明ガラスヒーター 3 2 9は重ね合わされた 2枚の透明なガラス板 （上側のガラス板 3 3 3、 下側のガラス板 3 3 1 ) と、 下側のガラス板 3 3 1の上面に形成 された I T O膜から成る透明導電膜 3 3 5によって構成されている。 透明導電膜 3 3 5上には図示しない一対の電極が設けられ、 一対の電 極は間隔を開け互いに対向して配置されている。
透明ガラスヒーター 3 2 9の上面と トッププレー ト 3 2 8の下面 との間には、 隙間が開いている。
フレーム 3 2 5 の外周面には、 外フランジ 3 3 7が形成されており、 この外フランジ 3 3 7には段差部 3 3 9が設けられている。 従って、 フレーム 3 2 5 の外周面は部位によつて径寸法が異なっている。 従つ て、 ヒータープレート 3 1 7は径寸法の異なる 2種類のツール嵌め込 み穴に対応して嵌め込むことができる。
第 1 4図に示すように、 フ レーム 3 2 5の上面の外周部には凸条 3 4 1が形成されている。 この凸条 3 4 1は一部が欠落しており、 この 凸条 3 4 1 の欠落部分 1 3 4 5においては、 フ レーム 3 2 5 の上面と 透明ガラスヒーター 3 2 9 の試料容器載置部 3 3 0 とが同じ高さ と なっている。
水槽ュ-ッ ト 3 4 7の構成について説明する。
水槽ユエッ ト 3 4 7は、 ユニッ ト本体 3 4 8、 水槽 3 6 1 と、 ディ ッシュ 3 1 3を保持する容器ホルダー 3 5 1 と、 給水管 2 1 3 と、 ガ ス供給管 2 1 4 と、 ホースホルダー 3 5 3等によって構成されている, ュニッ ト本体 3 4 8はプラスチック製で、 その中央に上下面に連通 する開口 3 5 5が形成されている。 また、 ュニッ ト本体 3 4 8 の周壁 3 5 7には、 開口と しての出入凹部 3 5 9が形成され、 この出入凹部 3 5 9 の深さは周壁 3 5 7の下端近く まである。 従って、 周壁 3 5 7 の出入凹部 3 5 9が形成された部分は薄板状になっている。
水槽 3 6 1はリ ング状の一部に欠落部 3 6 5がある 「C形」 の浅い 容器状をしており、 底板 3 6 2、 内周壁 3 6 6、 外周壁 3 6 4及び内 周壁 3 6 6、 外周壁 3 6 4 とに連続する閉鎖板 3 6 8 とによつて構成 されている。 これら内周壁 3 6 6、 外周壁 3 6 4及び閉鎖板 3 6 8に よって囲まれた領域が貯水池 3 9 0になっている。
水槽 3 6 1はユニッ ト本体 3 4 8の開口 3 5 5に収容されており、 この水槽 3 6 1 の底面 3 6 2の外周側端部がュニッ ト本体 3 4 8に 形成された支持部に支持され、 外周壁 3 6 4がュ-ッ ト本体 3 4 8の 内周面に当接している。 そして、 内周壁 3 6 6に囲まれた領域がディ ッシュ 3 1 3を収容する容器収容部 3 9 2になる。
第 1 8図に示すように、 水槽 3 6 1 の下面には絶縁被覆されたユタ 口ム線から成る水槽ヒーター 3 5 8が引き回されて配置されている。 水槽ヒーター 3 5 8 はプラスチック製のヒーターカバー 3 6 0によ つて覆われている。
試料容器位置変更手段の構成について説明する。
試料容器位置変更手段は左側機構部 3 5 0 と右側機構部 3 5 2を 一対と して構成され、 この左側機構部 3 5 0と右側機構部 3 5 2は対 称構造となっているので、 左側機構部 3 5 0の構造についてのみ説明 し、 右側機構部 3 5 2については左側機構部 3 5 0の構成部と同じ符 号を付して、 その説明を省略する。
周壁 3 5 7の上面外側部は上面よ り一段低い段部 3 4 0が形成さ れており、 この段部 3 4 0の上面には A— B方向へ長いガイ ド凹部 3 4 2が形成されている （第 2 0図参照） 。 周壁 3 5 7のガイ ド凹部 3 4 2に連なる部分には長穴 3 6 7が形成されており、 長穴 3 6 7は周 壁 3 5 7を貫通しているまた、 周壁 3 5 7の段部 3 4 0の下側には A 一 B方向へ長い収容凹部 3 6 9が形成されている。
符号 3 7 1はスライダーを示し、 このスライダー 3 7 1はスライダ 一本体 3 7 3 とスライダー本体 3 7 3の前面から突出して形成され た取付部 3 7 5 とによつて構成されている （第 1 9図参照） 。 取付部 3 7 5には上下方向へ突出する摺動凸部 3 7 7、 3 7 9が形成されて いる。 また、 スライダー 3 7 1には C一 D方向へ貫通するシャフ ト貫 入穴 3 8 1が形成され、 さ らにスライダー本体 3 7 3の上面からシャ フ ト貫入穴 3 8 1に連通するネジ穴 3 8 3が形成されている。 このネ ジ穴 3 8 3には押し.ネジ 3 8 5が取り付けられる。
スライダー 3 7 1のシャフ ト貫入穴 3 9 1には、 シャフ ト 3 8 7が 動作自在に貫入されている。 このシャフ ト 3 8 7の側面から見て 「L 形」 の操作部材 3 8 9の垂直部 3 9 1が固定されている。 この操作部 材 3 8 9の水平部 3 9 3 の先端は周壁 3 5 7の収容凹部 3 6 9へ入 り込んでいる。 シャフ ト 3 8 7の先端部には容器ホルダー 3 5 1が固 定されている。 この容器ホルダー 3 5 1は、 側方から見てほぼクラン ク形に屈曲しており、 容器ホルダー 3 5 1の下部の先端縁 3 9 5は、 その中央が矩形に凹んだ形状になっている。
符号 3 9 7は押さえ部材を示し、 この押さえ部材 3 9 7の下面には C—D方向へ長いガイ ド凹部 3 9 9が形成されている。 押さえ部材 3 9 7の中央には、 ガイ ド囬部 3 9 9に連通するネジ穴 4 0 1が形成さ れており、 このネジ穴 4 0 1には押しネジ 4 0 2が取り付けられてい る
スライダー 3 7 1の下側の摺動凸部 3 7 9は段部 3 4 0の上面に 形成されたガイ ド凹部 3 4 2に嵌められる。 そして、 押さぇ部材 3 9 7が周壁 3 5 7の上面に取付ネジ 4 0 3によって固定されて、 この押 さえ部材 3 9 7のガイ ド凹部 3 9 9がスライダー上側の摺動凸部 3 7 7に嵌る。 スライダー 3 7 1は、 摺動凸部 3 7 7， 3 7 9がガイ ド 凹部 3 4 2， 3 9 9にガイ ドされて C一 D方向へ動作できる。 また、 容器ホルダー 3 5 1 は水槽 3 6 1の内周壁 3 6 6に囲まれた領域で ある容器収容部 3 9 2に位置している。
試料容器位置変更手段は以上のように構成されている。
水槽ュニッ ト 3 4 7の左右の外側部には左右 3つずつ合計 6つの ホースホルダー 3 5 3が備えられている。 ホースホルダー 3 5 3は外 周壁に固定されたベースプロック 4 0 5 と、 このベースブロック 4 0 5 と押しネジ 4 0 7 とで構成されている。 ベースプロック 4 0 5には A— B方向へ貫通するホース揷入穴 4 0 9が形成され、 さらに上面か らホース揷入穴 4 0 9に連通するネジ穴 4 1 1が形成されている。 こ のネジ穴 4 1 1に押しネジ 4 0 7が取り付けられている。 ュ-ッ ト本 体 3 4 8 にはホース挿入穴 4 0 9に連続する 6つの配管穴 4 1 3が 形成されている。 配管穴 4 1 3のうちの 2つには金属製の給水管 2 1 3、 ガス供給管 2 1 4が挿入されており、 給水管 2 1 3、 ガス供給管 2 1 4は湾曲しており、 その先端部は貯水池 3 9 0内に位置している, ベースブロック 4 0 5 のホース揷入穴 4 0 9には、 給水ホース 2 1 7、 ガスホース 2 1 8、 培養液供給ホース 2 2 9、 培養液吸出しホー ス 2 3 1及ぴ温度センサー 4 1 5がそれぞれ挿入されている。 給水ホ ース 2 1 7 とガスホース 2 1 8は、 給水管 2 1 3、 ガス供給管 2 1 4 にそれぞれ連結されている。 また、 給水ホース 2 1 7、 ガスホース 2 1 8及ぴ温度センサー 4 1 5は、 ュニッ ト本体 3 4 8の配管穴 2 1 4 を通り、 給水ホース 2 1 7、 ガスホース 2 1 8及び温度センサー 4 1 5の各々の先端部は容器収容部 3 9 2に位置している。 なお、 使用さ れない残り 1つのホースホルダー 3 5 3は予備である。
ュュッ ト本体 3 4 8の前面には薄板状のマグネッ ト 4 1 6、 4 1 7 が設けられている。
符号 4 1 9は側部蓋を示し、 この側部蓋 4 1 9は出入凹部 3 5 9に 嵌り込む嵌合部 4 2 1 と嵌合部 4 2 1 よ り幅寸法が大きい摘み部 4 2 3 とによって構成されている。 摘み部 4 2 3の前面には一対の矩形 凹部 4 2 5が設けられている。 また、 摘み部 4 2 3の嵌合部 4 2 1側 の面には薄い鉄板 4 2 7、 4 2 9が固定されている。
蓋 4 3 1の構成について説明する。
符号 4 3 3は蓋板を示し、 この蓋板 4 3 3の A— B方向の両側部は 平行で、 平坦面に形成され、 また C一 D方向の両側部は円弧状の面に 形成されている （第 1 5図参照） 。 蓋板 4 3 3の A— B方向の寸法は 水槽ュ-ッ ト 3 4 7に備えられた一対の押さえ部材 3 9 7間の距離 より も僅かに小さい寸法となっている。 蓋板 4 3 3には円形の大きな 窓 4 3 5が形成されており、 蓋板 4 3 3の下面には、 その外周縁より やや内側の位置を通って無端状に延びる固定凸部 4 3 7が形成され ている。 固定凸部 4 3 7の下面には、 窓 4 3 5を塞ぐ、 ヒーターと し ての透明ガラスヒーター 4 3 9が貼り付けられている。 従って、 透明 ガラスヒーター 4 3 9の上面が蓋 4 3 1の上面の一部を構成する。 透明ガラスヒーター 4 3 9は 2枚の透明な板ガラス 4 4 1、 4 4 3 が貼り合わされて構成されており、 下側の板ガラス 4 4 1の上面に I T O膜から成る透明導電膜 4 4 5が形成され、 この透明導電膜 4 4 5 に通電することによって発熱するようになつている。 透明ガラスヒー ター 4 3 9には温度センサー 4 4 7が備えられ、 この温度センサー 4 4 7の検知情報に基づいて透明導電膜 4 4 5 に対する通電が制御さ れ、 発熱温度が所定範囲になるように調節される。
透明ガラスヒーター 4 3 9の中央には、 円形の蓋側穴 4 4 9が形成 されている。 また、 透明ガラスヒーター 4 3 9の D方向に寄った位置 'には一対の操作用穴 4 5 1が形成されており、 操作用穴 4 5 1は A— B方向に長い長穴である。 カバー 4 5 3は透明ガラスの薄い円板によって構成され、 中央にレ ンズ揷入穴 4 5 5が形成されている。 カバー 4 5 3は透明ガラスヒ一 ター 4 3 9上に載置され、 蓋側穴 4 4 9を覆う。 一対の操作用穴 4 5 1は、 透明ガラスヒーター 4 3 9上に载置される閉鎖蓋 4 5 7によつ て覆われる。
蓋 4 3 1には電気コード 4 5 9が備えられており、 この電気コード 4 5 9を介して、 透明導電膜 4 4 5に対する通電ゃ温度センサー 4 4 7からの信号を図示しないコントローラーに伝達する。
第 2 1図から第 2 3図に示すディ ッシュの掴み具 4 6 1 について 説明する。
掴み具 4 6 1は一対のアーム 4 6 3を有しており、 この一対のァー ム 4 6 3は弾性変形可能な材料と してのステンレススチールによつ て構成されている。 一対のアーム 4 6 3の後端部 4 6 2は連結されて おり、 途中部分は互いに交差し交差部 4 6 5が設けられている。 交差 部 4 6 5より先端側の部分には、 互いに対向しアーム 4 6 3の弾性力 によって圧接する圧接部 4 6 7が形成されている。 この圧接部 4 6 7 より先端部分は互いに離れる方向へ曲げられ、 さらに先端部が平行に なるように途中部分が曲げられている。 一対のアーム 4 6 3の先端部 の平行になっている部分によって挟持部 4 6 9が構成されており、 一 対の挟持部 4 6 9には、 滑り止めの合成ゴム製のキャップ 4 7 1が装 着されている。 圧接部 4 6 7 どう しが互いに圧接することによって一 対の挟持部 4 6 9が閉じるのを規制し、 一定の間隔が保たれている。
上記ディ ッシュの掴み具 4 6 1 と顕微鏡観察用培養器 3 1 1 とに よって顕微鏡観察用培養器セッ トが構成される。
第 2の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養器 3 1 1の使用方法、 動 作について説明する。 まず、 顕微鏡観察用培養器 3 1 1を駆動ステージ 3 1 9に装着する 作業について説明する。
第 1 4図に示すように、 駆動ステージ 3 1 9の上側駆動板 3 2 1に 形成されたツール嵌め込み穴 2 6 9 にヒータープレート 3 1 7を嵌 める。 この状態でヒータープレート 3 1 7の トツププレート 3 2 8の 上面並びにフレーム 3 2 5の凸条の欠落部分 3 4 5 と駆動ステージ 3 1 9の上側駆動板 3 2 1の上面とが同じ高さ位置となる。 試料容器 載置部 3 3 0には、 後述する水槽ュニッ ト 3 4 7の容器収容部 3 9 2 に収容されるディッシュ 3 1 3が載置される。
次に、 水槽ュニッ ト 3 4 7を上側駆動板 3 2 1に載せ、 容器収容部 3 9 2 と試料容器載置部 3 3 0 とが対応するように配置する。 そして、 第 1 5図に示すように水槽ュニッ ト 3 4 7に蓋 4 3 1 を載せて、 水槽 ュニッ ト 3 4 7の上面開口を覆う。 なお、 透明ガラスヒーター 4 3 9 の蓋側穴 4 4 9はカバー 4 5 3によつて覆い、 一対の操作用穴 4 5 1 は閉鎖蓋 4 5 7によって閉鎖しておく。 また、 出入凹部 3 5 9は側部 蓋 4 1 9によって閉鎖しておく。 側部蓋 4 1 9の鉄板 4 2 7 , 4 2 9 はユニッ ト本体 3 4 8のマグネッ ト 4 1 6、 4 1 7に吸着されるので- 側部蓋 4 1 9はュュッ ト本体 3 4 8に固定されて、 出入凹部 3 5 9は 確実に閉鎖される。
以上により、 顕微鏡観察用培養器 3 1 1が駆動ステージ 3 1 9に装 着され、 水槽ユニッ ト 3 4 7 と蓋 4 3 1 とで画成される空間が培養空 間 3 2 0 となる。
次いで、 コントローラーの電源スィ ッチを入れる。
給水ホース 2 1 7 と給水タンクから給水管 2 1 3を介して貯水池 3 9 0に水が供給されて貯留される。 また、 C 02ボンベからガスホ ース 2 1 8 とガス供給管 2 1 4を介して C O 2が培養空間 3 2 0に供 給される。
また、 ヒータープレート 3 1 7の透明ガラスヒーター 3 2 9の透明 導電膜 3 3 5に電極を介して通電され発熱する。 また、 水槽ヒーター 3 5 8に通電されて発熱し、 水槽 3 6 1が直接加温される。 さらに、 蓋 4 3 1 の透明ガラスヒーター 4 3 9の透明導電膜 3 3 5に電極を 介して通電され発熱する。 なお、 透明ガラスヒーター 3 2 9、 水槽ヒ 一ター 3 5 8に対する通電は温度センサー 4 1 5の検知情報、 透明ガ ラスヒータ ^" 4 3 9に対する通電は温度センサー 4 4 7の検知情報 に基づいて制御される。
ヒーター 3 2 9、 3 5 8、 4 3 9力 らの熱によって貯水池 3 9 0の 水が蒸発する。 特に水槽ヒ一ター 3 5 8によって貯水池 3 9 0内の水 が直接に加温されるので、 迅速に十分な蒸気を発生させることができ る。 また、 ディ ッシュ 3 1 3の底全体がヒータープレート 3 1 7の透 明ガラスヒーター 3 2 9によって加温されるので、 ディ ッシュ 3 1 3 内の試料全体を均一に加温することができる。 さらに、 蓋 4 3 1の透 明ガラスヒーター 4 3 9は、 結露により透明ガラスヒーター4 3 9が 曇るのを防止できる。
培養空間 3 2 0が所定の温度、 湿度、 C O 2濃度に到達した後、 側 部蓋 4 1 9を開けて、 第 2 1図から第 2 3図に示すように掴み具 4 6 1を用いてディ ッシュ 3 1 3を掴み、 このディ ッシュ 3 1 3を出入凹 部 3 5 9から容器収容部 3 9 2へ入れて、 試料容器載置部 3 3 0に載 置する （第 2 5図参照） 。 ディッシュ 3 1 3には観察対象とする細胞 などの試料を培養液と共に入れておく。
なお、 培養する試料の種類によっては、 蓋 4 3 1を開けて或いは蓋 4 3 1 を装着する前にディ ッシュ 3 1 3を容器収容部 3 9 2に収容 してもよい。 掴み具 4 6 1は一対のアーム 4 6 3の交差部 4 6 5 よ り後方の部 分の両側を手で押さえると、 挟持部 4 6 9が開く。 このよ うにして開 いた一対の挟持部 4 6 9の間にディ ッシュ 3 1 3が来るよ う に掴み 具 4 6 1を持っていき、 手を緩めると、 一対の挟持部 4 6 9はアーム 4 6 3の弾性力によって閉じ、 ディッシュ 3 1 3が保持される。 この ディ ッシュ 3 1 3 を保持した状態で掴み具 4 6 1 の交差部 4 6 5を 出入凹部 3 5 9に差し入れ、 ディ ッシュ 3 1 3を容器収容部 3 9 2に 位置させて、 アーム 4 6 3の交差部 4 6 5 より後方の部分を両側から 手で押さえて一対の挟持部 4 6 9を開いて、 ディ ッシュ 3 1 3を試料 容器載置部 3 3 0に載置させる。
そして、 側部蓋 4 1 9をュュッ ト本体 3 4 8に装着し、 出入凹部 3 5 9を閉鎖する。 側部蓋 4 1 9を着脱する際には、 摘み部 4 2 3を指 で摘むようにするが、 一対の矩形穴 4 2 5は指が滑るのを防止する。
なお、 ディ ッシュ 3 1 3を容器収容部 3 9 2から出す作業も、 側部 蓋 4 1 9を開けて出入凹部 3 5 9から掴み具 4 6 1を用いて行う。 従 つて、 蓋 4 3 1を開けることなく、 ディ ッシュ 3 1 3を容器収容部 3 9 2から出し入れできるので、 培養空間 3 2 0の温度、 湿度、 C O 2 濃度等の培養条件を崩すことはなく、 試料の培養に悪影響を及ぼすの を防止することができる。
前記したよ うに、 ヒータープレート 3 1 7のトッププレート 3 2 8 の上面並びにフレーム 3 2 5の凸条の欠落部分 3 4 5 と駆動ステー ジ 3 1 9の上側駆動板 3 2 1 の上面とが同じ高さ位置となっている ので段差がない。 従って、 ディ ッシュ 3 1 3を容器収容部 3 9 2から 出し入れする際に、 ディ ッシュ 3 1 3が当たる部分がなく、 ディ ッシ ュ 3 1 3の出し入れをスムーズに行うことができる。
次に、 試料容器位置変更手段の左側機構部 3 5 0 と右側機構部 3 5 2の押しネジ 3 8 5を緩め、 シャフ ト 3 8 7を動作できる状態にする t そして、 操作部材 3 8 9の垂直部 3 9 1を摘んで、 シャブ ト 3 8 7 と 共に容器ホルダー 3 5 1 を A— B方向へ動かし容器ホルダー 3 5 1 によってディ ッシュ 3 1 3を押して、 その A— B方向の位置を変更す る。 このよ うにして、 ディ ッシュ 3 1 3の A— B方向の位置が決まつ たら、 押しネジ 3 8 5を締めて、 その先端部によってシャフ ト 3 8 7 を押さえて動かないようにして、 容器ホルダー 3 5 1を固定する。 デ イ ツシュ 3 1 3は一対の容器ホルダー 3 5 1の矩形に凹んだ先端縁 3 9 5に挟持されて保持される。
そして、 蓋 4 3 1を押さぇ部材 3 9 9にガイ ドさせ C方向ヘスライ ドさせて、 操作穴 4 5 1をディ ッシュ 3 1 3に対応させ、 閉鎖蓋 4 5 7を開けてピンセッ ト等を用い、 培養液供給ホース 2 2 9と培養液吸 出しホース 2 3 1をディ ッシュ 3 1 3へ入れる。
次に、 顕微鏡の対物レンズ Tをカバー 4 5 3のレンズ揷入穴 4 5 5 から挿入して、 ディ ッシュ 3 1 3に入れられた細胞等の試料の観察を 行う。
観察箇所、 即ちディ ッシュ 3 1 3内の試料の対物レンズ Tに対向す る箇所を変更する場合には、 対物レンズ Tをカバー 4 5 3のレンズ揷 入穴 4 5 5から挿入したままの状態で駆動ステージ 3 1 9を A— B 方向及び C— D方向へ適宜動かす。 駆動ステージ 3 1 9が動く と、 顕 微鏡観察用培養器 3 1 1 のカバー 4 5 3を除いた部分が駆動ステー ジ 3 1 9 と共に動作する。 即ち、 レンズ揷入穴 4 5 5には対物レンズ Tが揷入され、 レンズ揷入穴 4 5 5 の内周縁と当接しているので、 駆 動ステージ 3 1 9が動く と、 カバー 4 5 3の下面に対し透明ガラスヒ 一ター 4 3 9の上面が摺動する。 従って、 カバー 4 5 3 の外周部が蓋 側穴 4 4 9にかからない範囲で駆動ステージ 3 1 9を動かせば、 カバ - 4 5 3によって蓋側穴 4 4 9が覆われたままの状態で、 観察箇所を 変更することができる。 このように、 蓋側穴 4 4 9がカバー 4 5 3に よって覆われたままなので、 培養空間 3 2 0の温度、 湿度、 C O 2濃 度等の培養条件を崩すことはない。
ディ ッシュ 3 1 3内の試料に対し薬品を添加する等の操作を行う 場合には、 第 2 6図に示すように、 対物レンズ Tを後退させてカバー 4 5 3のレンズ挿入穴 4 5 5から抜く。 そして、 カバー 4 5 3を穴の ない閉鎖カバー 4 7 3に交換し、 蓋側穴 4 4 9を完全に閉鎖する。 そ して、 蓋 4 3 1を押さえ部材 3 9 7にガイ ドさせて C方向ヘスライ ド させ、 操作穴 4 5 1をディ ッシュ 3 1 3に対向させる。 そして、 スポ イ ト Sを操作穴 4 5 1から挿入して、 薬品をディ ッシュ 3 1 3内へ注 入する。 このよ うに、 蓋 4 3 1 を開けることなく、 試料に対する操作 を行うことができるので、 培養空間 3 2 0の温度等の条件を崩すこと はない。
本発明の第 3の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養器 5 1 1を第 2 7図から第 2 9図の図面に従って説明する。 顕微鏡観察用培養器 5 1 1は倒立顕微鏡に用いるものである。
顕微鏡観察用培養器 5 1 1は第 2の実施の形態に係る顕微鏡観察 用培養器 3 1 1 と同様の構成部分を有するので、 同様の構成部分につ いては第 2の実施の形態と同じ符号を付して、 その説明を省略する。 顕微鏡観察用培養器 5 1 1 の蓋 5 1 0 の透明ガラスヒーター 5 1 3には蓋側穴は形成されていない。 また、 ヒータープレート 5 1 5の 透明ガラスヒーター 5 1 7にはレンズ揷入穴 5 1 9が形成されてい る。
符号 5 2 1は、 試料固定手段としてのステンレススチール製の錘を 示し、 この錘 5 2 1はディ ッシュ 3 1 3より直径が僅かに大きいリ ン グ状に形成されている。
この錘 5 2 1は対物レンズ Tとディ ッシュ 3 1 3の底面との間に 液状の油または水を介在させる油浸または水浸を実施する際に、 ディ ッシュ 3 1 3が浮き上がるのを防止するためのものである。
上記錘 5 2 1 と顕微鏡観察用培養器 5 1 1 とによって顕微鏡観察 用培養器セッ トが構成される。
この顕微鏡観察用培養器 5 1 1の使用方法について説明する。
容器収容部 3 9 2に収容したディ ッシュ 3 1 3に錘 5 2 1 を乗せ ておく。 また、 対物レンズ Tの先端には油を滴下してから、 対物レン ズ Tをディ ッシュ 3 1 3に近づけて対物レンズ Tとディ ッシュ 3 1 3の底との間に油を介在させる。 そして、 ディ ッシュ 3 1 3に入れら れた細胞等の試料の観察を行う。
ディ ッシュ 3 1 3内の試料の観察箇所を変更するため、 ディ ッシュ 3 1 3を動かす操作について説明する。
ディ ッシュ 3 1 3の A— B方向の位置を変更するには、 試料容器位 置変更手段の左側機構部 3 5 0 と右側機構部 3 5 2の押しネジ 3 8 5を緩め、 シャフ ト 3 8 7を動作できる状態にする。 そして、 操作部 材 3 8 9の垂直部 3 9 1を摘んで、 シャフ ト 3 8 7と共に容器ホルダ 一 3 5 1 を A— B方向へ動かし容器ホルダー 3 5 1 によってデイ ツ シュ 3 1 3を A方向または B方向へ押して移動させる。
また、 ディ ッシュ 3 1 3の C—D方向の位置を変更するには、 押し ネジ 3 8 5を締めてディ ッシュ 3 1 3を一対の容器ホルダー 3 5 1 に保持させた状態とする。 そして、 押しネジ 4 0 2を緩めて押しネジ 4 0 2の先端部を摺動凸部 3 7 7から離間させて、 スライダー 3 7 1 を C— D方向へ動作できる状態にする。 次いで、 左側機構部 3 5 0と 右側機構部 3 5 2の操作部材 3 8 9を持って C—D方向へ動かし、 ス ラィダー.3 7 1 、 シャフ ト 3 8 7及び容器ホルダー 3 5 1 と共にディ ッシュ 3 1 3を C方向または D方向へ移動させる。
このように、 対物レンズ Tがディ ッシュ 3 1 3の下側から臨む倒立 顕微鏡を用いて観察を行う場合でも、 蓋 5 1 0を開けることなく、 水 槽ュエツ ト 3 4 7の外からディ ッシュ 3 1 3の位置を変更すること が可能となり、 ディ ッシュ 3 1 3内の試料の観察位置を変更すること ができる。
蓋 5 1 0の透明ガラスヒーター 5 1 3の発熱により、 蒸気発生に伴 う結露を防ぐことができ、 透光部である透明ガラスヒーター 5 1 3が 曇るのを防止できる。 従って、 常に良好な状態で観察を行うことがで きる。
また、 ヒータープレート 3 1 7の透明ガラスヒーター 3 2 9は内フ ランジ 3 2 7の下面に貼り付けられており、 言わば吊り下げられた状 態に保持されている。 従って、 透明ガラスヒーター 3 2 9が発熱する 等の温度変化に伴う膨張、 変形は、 透明ガラスヒーター 3 2 9の上面 側ではなく、 下面側に向かって発生することになる。 さらに、 透明ガ ラスプレー ト 3 2 9 と トッププレー ト 3 2 8 との間には空間がある ので、 透明ガラスプレート 3 2 9 の膨張、 変形が、 トッププレート 3 2 8に伝わることはない。
従って、 試料が入れられたディ ッシュ 3 1 3が対物レンズ Tの光軸 方向へ動くのを防止でき、 対物レンズ Tと観察試料との距離が変化し て、 観察画像がぼけるのを防ぐことができる。
以上、 本発明の実施の形態を説明したが、 本発明の具体的構成がこ の実施の形態に限定されるものでは無く、 本発明の要旨から外れない 範囲での設計変更等があつても本発明に含まれる。
第 1の実施の形態においては、 ディ ッシュ 2 2 0 と してフタ 2 2 3 付きのものを使用したが、 ディ ッシュ 2 2 0に観察試料を入れてフタ 2 2 3なしで容器収容部 2 0 5 gに装着するようにしてもよい。 この 場合、 観察試料に薬品等を注入するには、 フタ 2 2 3を外して、 透明 ガラスヒーター 2 4 3 の作業口 2 4 5から器具を差し入れて作業を 行う。 フタ 2 2 3を外すだけなので、 培養空間 2 3 5の温度等を殆ど 変化させることなく、 作業を行うことができる。
また、 第 1の実施の形態では、 培養液吸出しホース 2 3 1から培養 液を吸出し、 この吸い出した量の培養液を培養液供給ホース 2 2 9か ら供給する環流培養を行う例を示したが、 本発明はこれに限定されず. 培養液供給ホース 2 2 9及び培養液吸出しホース 2 3 1を備えない 普通のディ ッシュを用いて、 培養液を交換しない静置培養を行うこと ができるのは勿論である。
さらに、 給水管 2 1 3や給水タンク 2 1 6等の給水手段を設けない 構成と して、 最初に貯水池 2 0 5 eに水を入れただけで、 その後の給 水を行わないで使用することも可能である。 このよ うに給水を行わな くても、 4 8時間程度の培養であれば使用することが可能である。 また、 蓋板 2 3 7の窓 2 3 9は円形ではなく、 矩形に形成してもよ い
第 1の実施の形態では、 ヒータープレート 2 5 9を中心に穴を有し. アルミユウム製の上側プレート 2 7 5等によって構成したが、 本発明 はこれに限られず、 ガラス板の表面に透明導電膜を蒸着等の手段で形 成し、 この透明導電膜に通電することにより発熱するタイプのヒータ 一を用いることも可能である。
また、 透明ガラスヒーター 2 4 3に作業口 2 4 5を設けない構成と することも可能である。
第 1の実施の形態では、 ディ ッシュ 2 2 0をトッププレート 2 7 1 上に載置したが、 トッププレー ト 2 7 1を外して、 上側プレート 2 7 5上にディ ッシュ 2 2 0を直接に載置することも可能である。
なお、 観察中において対物レンズ Tを介してヒータープレート 2 5 9の熱が奪われることよって、 上側プレート 2 7 5や下側プレート 2 7 7がミ ク ロ ン単位で変形し、 観察画像がぼけるのを防止するため、 対物レンズ Tの鏡筒に卷き付けて加温するレンズヒーターを用いて もよい。
第 2及ぴ第 3の実施の形態において、 試料容器位置変更手段は左側 機構部 3 5 0 と右側機構部 3 5 2から成るので、 ディ ッシュ 3 1 3を 動かすのに左側機構部 3 5 0 と右側機構部 3 5 2 の両方を操作する 必要があるが、 右側または左側のいずれか一つの機構部を設け、 この 一つの機構部に 1つでディ ッシュ 3 1 3を保持できる形状の容器ホ ルダーを、 片持ち支持させて備えた構成と してもよい。 このようにす れば、 1つの機構部を操作して、 ディ ッシュ 3 1 3 の位置を変更する ことができる。
上記第 3の実施の形態において、 試料容器固定手段と して錘 5 2 1 を示したが、 本発明はこれに限定されず、 試料容器 （ディ ッシュ） を 固定して、 浮き上がるのを防止できるものであれば錘以外のもの、 例 えば試料容器を押さえるパネ等によつて試料容器固定手段を構成し てもよい。
また、 トッププレー ト 2 7 1、 3 2 8はガラスではなく、 真鍮によ つて構成してもよく、 この場合にはトッププレートの中央部分に光を 透過させるための穴を形成する。 さらに、 ヒータープレート 2 5 9の フレーム 2 6 1 、 ヒータープレー ト 3 1 7のフレーム 5 2 5を真鍮に よって構成してもよい。
さらに、 第 2及び第 3の実施の形態において、 透明ガラスヒーター を用いたヒータープレート 3 1 7、 5 1 5を示したが、 第 1の実施の 形態に示したヒータープレート 2 5 9のように二クロム線等、 他の発 熱手段を使用するものを適用してもよい。
また、 上記実施の形態では、 顕微鏡観察用培養器セッ トは、 デイ ツ シュ 2 2 0と顕微鏡観察用培養器 2 0 1 との組み合わせ、 固定子取り 付け用治具と顕微鏡観察用培養器 2 0 1 との組み合わせ、 ディ ッシュ の掴み具 4 6 1 と顕微鏡観察用培養器 3 1 1 との組み合わせ、 錘 5 2 1 と顕微鏡観察用培養器 5 1 1 との組み合わせを示したが、 顕微鏡観 察用培養器セッ トは、 上記の組み合わせに限らず、 顕微鏡観察用培養 器セッ トを構成する顕微鏡観察用培養器 2 0 1、 顕微鏡観察用培養器 3 1 1、 顕微鏡観察用培養器 5 1 1 とディ ッシュ 2 2 0、 固定子取り 付け用治具、 ディ ッシュの掴み具 4 6 1、 錘 5 2 1 との組み合わせは 任意に選択できる。 また、 顕微鏡観察用培養器セッ トは、 顕微鏡観察 用培養器 2 0 1、 顕微鏡観察用培養器 3 1 1、 顕微鏡観察用培養器 5 1 1 のうちの 1つと、 ディ ッシュ 2 2 0、 固定子取り付け用治具、 デ イ ツシュの掴み具 4 6 1、 錘 5 2 1のうちの 1つだけでなく、 2っ以 上を組み合わせて構成することもできる。 なお、 固定子取り付け用治 具と顕微鏡観察用培養器 2 0 1以外の顕微鏡観察用培養器 3 1 1、 5 1 1 と組み合わせる場合には、 外嵌め部材 2 9 4等の形状を水槽ュニ ッ ト 3 4 7に合う形状とする。 産業上の利用可能性
以上のように、 本発明によれば、 次の効果を奏する。
顕微鏡のステージに載せた状態のまま観察試料の培養と観察を行 うことができるようになる。
設定された培養条件による雰囲気を崩さないで観察試料に対する 処置、 操作を容易に行うことができるようになる。
設定された培養条件による雰囲気を崩さないで試料容器内の観察 資料の観察箇所を変えることができるようになる。
培養空間に迅速に十分な量の蒸気を発生させることがでるよ うに なる。

Claims

a* on 求 の 範 囲
1 . 上面が開口 し、 中央部でディ ッシュなどの試料容器を着脱自在に 収める容器収容部と前記容器収容部の外側に位置した貯水池とが設 けられた水槽ユエッ トと、 前記水槽ュュッ トの上面を塞ぐ蓋と、 前記 試料容器及び水槽ュニッ トを加温するヒーターと、 前記水槽ュニッ ト と蓋とで画成される培養空間に所定のガスを供給するためのガス供 給手段とを備えており、 水槽ュニッ トと蓋はいずれもその中央部が上 下方向へ光を通す透光部になっていることを特徴とする顕微鏡観察 用培養器。
2 . 請求の範囲第 1項に記載した顕微鏡観察用培養器において、 貯水 池に水槽ュニッ トの外から水を供給する給水手段を備えたことを特 徴とする顕微鏡観察用培養器。
3 . 請求の範囲第 1項または第 2項に記載した顕微鏡観察用培養器に おいて、 ヒーターはプレート形で試料容器を下から加温するものであ り、 前記ヒーターには水槽ュ-ッ トと蓋の透光部に対応する位置に透 光部が設けられていることを特徴とする顕微鏡観察用培養器。
4 . 請求の範囲第 3項に記載した顕微鏡観察用培養器において、 ヒー ターは、 上側プレート及び下側プレートとこれらの間に位置した発熱 体とが互いに接着された積層体と、 前記上側プレー トの上に空間を介 して配置された トッププレートと、 前記積層体及び前記トッププレー トを保持するフ レームとで構成されていることを特徴とする顕微鏡 観察用培養器。
5 . 請求の範囲第 1項から第 4項のいずれかに記載した顕微鏡観察用 培養器において、 装着された試料容器に水槽ュ-ッ トの外から培養液 を供給する培養液供給手段を備えたことを特徴とする顕微鏡観察用
6 . 請求の範囲第 5項に記載した顕微鏡観察用培養器において、 培養 液供給手段は、 水槽ュニッ トの蓋を開けることなく試料容器内の培養 液を補給できる構造のものであることを特徴とする顕微鏡観察用培
7 . 請求の範囲第 1項から第 6項のいずれかに記載した顕微鏡観察用 培養器において、 容器収容部は、 水槽ュニッ トの中央部を挟んで対向 し且つその対向し合う間隔を調節自在と した一対の容器ホルダーを 備えたことを特徴とする顕微鏡観察用培養器。
8 . 請求の範囲第 1項から第 7項のいずれかに記載した顕微鏡観察用 培養器において、 水槽ュ-ッ トは顕微鏡のステージ上面に載置され、 プレー ト形のヒーターに対し間隔をあけて接触しない状態に備えら れるものであって、 前記水槽ュニッ トと前記ヒーターとは分離可能で あることを特徴とする顕微鏡観察用培養器。
9 . 請求の範囲第 8項に記載した顕微鏡観察用培養器において、 顕微 鏡のステージ上面に水槽ユニッ トの位置を固定するための固定子を 備えたことを特徴とする顕微鏡観察用培養器。
1 0 . 請求の範囲第 1項から第 9項のいずれかに記載した顕微鏡観察 用培養器において、 容器収容部に収められた試料容器の水平方向の位 置を水槽ュュッ トの外から変更できる試料容器位置変更手段を具備 したことを特徴とする顕微鏡観察用培養器。
1 1 . 請求の範囲第 1項から第 1 0項のいずれかに記載した顕微鏡観 察用培養器において、 試料容器を容器収容部へ入れたり出したりでき る開口を水槽ュニッ トの側部に形成し、 前記開口を閉鎖及び開放でき る側部蓋とを備えたことを特徴とする顕微鏡観察用培養器。
1 2 . 請求の範囲第 1 1項に記載した顕微鏡観察用培養器において、 ヒーターはステージに形成されたツール嵌め込み穴に嵌め込んで使 用するものであり、 前記ヒーターをツール嵌め込み穴に嵌め込むと ヒ 一ターの試料容器を載置する試料容器載置部及ぴ前記試料容器載置 部とステージとの間の部分は、 前記ステージと同じ高さ位置となる構 造であることを特徴とする顕微鏡観察用培養器。
1 3 . 請求の範囲第 1項から第 1 2項のいずれかに記載した顕微鏡観 察用培養器において、 水槽ュニッ トの上面を塞ぐ蓋に試料に対する操 作を行うための操作用穴を形成し、 前記操作用穴は容器収容部の試料 容器が備えられる領域からずれた位置に設けられており、 且つ前記蓋 は前記水槽ユエッ トの上面の開口を閉鎖したままの状態でスライ ド して前記操作用穴を容器収容部の試料容器が備えられる領域に対向 させることができるものであることを特徴とする顕微鏡観察用培養 ¾?。
1 4 . 請求の範囲第 1項から第 1 3項のいずれかに記載した顕微鏡観 察用培養器において、 水槽ュ-ッ トの上面の開口を塞ぐ蓋に蓋側穴を 形成し、 前記蓋側穴は容器収容部の試料容器が備えられる領域に対応 して設けられており、 前記蓋上に載置されて蓋上面に対し相対的に所 定範囲において前記蓋側穴を閉鎖したままの状態で摺動できるカバ 一を設け、 前記カバーには顕微鏡の対物レンズが揷入されるレンズ揷 入穴が形成されていることを特徴とする顕微鏡観察用培養器。
1 5 . 請求の範囲第 1項から第 1 4項のいずれかに記載した顕微鏡観 察用培養器において、 水槽の底面に水槽ヒーターを備えたことを特徴 とする顕微鏡観察用培養器。
1 6 . 請求の範囲第 3項から第 1 5項のいずれかに記載した顕微鏡観 察用培養器において、 試料容器及び水槽ュニッ トを加温するヒーター は試料容器が載置される容器載置部を有し、 前記容器載置部には透明 導電膜によって構成される発熱部が設けられていることを特徴とす る顕微鏡観察用培養器。
1 7 . 請求の範囲第 1項から第 1 6項のいずれかに記載した顕微鏡観 察用培養器において、 水槽ュ-ッ トの上面を塞ぐ蓋の透光部には透明 導電膜によって構成される発熱部が設けられていることを特徴とす る顕微鏡観察用培養器。
1 8 . 請求の範囲第 1項から第 1 7項のいずれかに記載した顕微鏡観 察用培養器において、 顕微鏡の対物レンズと試料容器との間に油また は水を介在させて油浸または水浸を実施する際に、 前記試料容器を対 物レンズの方向へ力を加えて固定する試料容器固定手段を有するこ とを特徴とする顕微鏡観察用培養器。
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