WO2001022971A1

WO2001022971A1 - Inhibiteurs de la production de sebum

Info

Publication number: WO2001022971A1
Application number: PCT/JP2000/006638
Authority: WO
Inventors: Nobuaki Yatsuka; Nobuyuki Sato; Masazumi Nishikawa; Tadakazu Tamai; Shigeru Moriyama
Original assignee: Maruha Corporation
Priority date: 1999-09-27
Filing date: 2000-09-27
Publication date: 2001-04-05
Also published as: EP1219296A1; EP1219296A4; JP2001097867A; AU7445100A; TWI253931B; CA2385493A1; JP4450456B2; US6894034B1

Description

明細書

皮脂産生抑制剤技術分野

本発明は、グルクロン酸誘導体およびダルコサミン誘導体を構造中に有する化合物を有効成分とする「皮脂産生抑制剤」に関する。背景技術

皮膚は表皮表面に薄い皮脂膜を形成している。皮脂膜は外界からの異物進入の防御、様々な物質の刺激からの皮虜の保護、皮虜表面の潤滑化、水分蒸発の抑制などの役割を果たしている。しかし、過剰な皮脂は、二キビゃフケといった脂漏性疾患の原因となることが知られている。また、紫外線などによって皮脂から皮虜刺激の原因となる過酸化物質が生成することも知られている。

二キビは主として思春期に発現する皮膚疾患で病名を尋常性座瘡といい、代表的な脂漏性疾患である。臨床的には「毛嚢脂腺系を中心に起こる慢性の炎症変化」と定義されている。二キビの原因はまだ明らかでなく、種々の要因が複雑に絡み合って発症する皮慮疾患であるとされているが、一般には皮脂産生過剰、毛嚢角化、毛嚢内細菌が重要な役割を果たしていると考えられている（例えば、山本綾子： "今日の治療指針、 1994年版 (Vo l ume 36) "、 pp. 632、医学書院、東京（1994) )。したがって、二キビ治療薬としては各種要因に対応して、皮脂産生抑制剤、角質溶解剤、抗菌剤およびリパーゼ阻害剤等を配合した外用剤などが汎用されている。しかしながら、既存の有効成分を配合した二キビ治療薬には種々の欠点がある。例えば、皮脂産生抑制作用のある女性ホルモンは表皮の成長を抑制し、皮脂の産生を減少させるが、ホルモン剤が引き起こす副作用は好ましいものではない。また、角質溶解剤の代表例である硫黄および二硫化セレン等の硫黄化合物は、ホルモン様の副作用はないが、連用することにより皮膚刺激、皮膚のかさつき等を起こすことが多い。さらにへキサクロ口フエノン、トリクロロカルバニド、およびベンザルコニゥムクロライド等の抗菌剤は皮膚の常在のニキビ菌であるプロピオニバクテリゥム 'ァクネス（Prop i on i bac t er i um acnes) に対して試験管内ではきわめて高い抗菌力を発揮するが、実際にクリーム、軟膏等に配合して二キビ治療に用いた場合には期待したほどの効果を発揮しないことが多い。また、リパーゼ阻害作用を有するィブプロフェンピコールゃシャクャク、ォォレンといった生薬等は単独でクリームや軟膏等に配合しても二キビ治療の効果が充分ではなかつた。

頭皮における代表的な脂漏性疾患としては、フケの増加をあげることができる。また、過剰な皮脂は脱毛の原因にもなるとされている（原田昭太郎： " 今日の治療指針"、 1994年版（Vo l ume 36) "、 pp. 633、医学書院、東京（1994) ；渡辺靖ほか： " ヘルスサイエンス毛髪診断一覧表"、 pp. K 日本毛髪科学協会、東京（199 3) )。フケの増加や過剰な皮脂が原因で起こる脱毛は皮脂の産生を抑制することによって治療または予防できると考えらる。

皮脂の産生過剰は肌荒れ，肌のテカリ，肌や髪のベタツキなどの美容上のトラブルの原因となることも知られている。

ヒトの加齢とともに増加するといわれているにおい、いわゆる加齢臭の原因物質も皮脂由来であることが知られている（朝日新聞（朝刊）： 1999年 8月 30日、 2 5頁）。皮脂産生を抑制する物質は加齢臭の発生をも抑制する可能性がある。

本発明者らは、特願平 10-120425号（特開平 n - 310588号）において本発明の化合物が血小板粘着凝集抑制作用を有すること、特願平 10- 273895号（特開 2000 - 10 3738号）において血管内皮細胞増殖促進作用を有すること、さらに特願平 10- 372 864号（特開 2000- 191538号）において白血球-血管内皮細胞接着抑制作用を有することを示した。しかし、皮脂産生抑制作用については開示していない。

上記の記述から明らかなように、優れた皮脂産生抑制剤の提供は医療上および美容上の重要な課題である。発明の開示

本発明者らは、かかる問題を解決をするために鋭意研究を重ねてきた結果、一般式（1 ) で表される化合物またはその薬理学的に許容される塩が優れた皮脂産生抑制作用を有することを見いだして本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明は、一般式（1 ) で表されるグルクロン酸誘導体およびダルコサミン誘導体を構造中に有する化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含む皮脂産生抑制を提供する。

本発明の皮脂産生抑制剤は、皮脂の産生過剰が発症原因にかかわる疾患の治療薬または予防薬として有用である。また、皮脂の産生過剰が原因にかかわる美容上の問題を解決するための化粧料としても有用である。さらに、加齢臭抑制剤としても有用である。発明を実施するための最良の形態

本発明の皮脂産生抑制剤に使用する化合物は、下記一般式（1) に表されるグルクロン酸誘導体およびダルコサミン誘導体を構造中に有する化合物またはその薬理学的に許容される塩である。

式（1)

[式（1) 中、 R'は保護基または下記式（2) 〜（5) を表す。式（2) 〜（5) 中、 R¹"は水素原子、保護基または下記式（6) 〜（8) を表し、 R"は水素原子または保護基を表す。ただし、および R が水素原子または保護基である場合、 R¹ は C00R⁴に対してトランス結合あるいはシス結合のどちらであってもよい。

式（2)

-OR¹⁰

式（3)

-NHR"

式（4)

一 CM¹¹

式（5) -SR"

式 (6)

式 (7)

式（8)

また、 R '。が式（6) 〜（8) である場合、式（6) 〜（8) 中、 R'³、 R¹⁷および R" を除く R'²〜！²⁸は同一または異なって水素原子または保護基を表し、 R^l3、 R¹⁷および

R"はアジド基または下記式（9) を表す。

式（9)

一 _nr29R3O 式（9) 中、 R²⁹および R³°は、同一または異なって水素原子または保護基を表す。式（1) 中、 R²〜R⁸は同一または異なって水素原子または保護基を表す。

式（1) 中、 R⁹は、水素原子、保護基または下記式（10) または下記式（11) を表す。

式 (10)

R³³

式 (11)

式（10) および（11) 中、 R³'〜R "は同一または異なって水素原子または保護基を表す。

式（1) 中、 nは 0〜25の整数を表す。（ただし、 nが 0のときは、 R¹は式（2)、 ITは式（8) で表される基であり、 R⁹は式（10) または式（11) で表される基である。)

式（1)、式（6) 〜（8) および式（10), (11) 中、保護基は互いに同一または異なり、置換されていてもよい炭素原子数 1〜8の直鎖または分枝鎖のアルキル、置換されていてもよい炭素原子数 2〜8の直鎖または分枝鎖のアルケニル、置換されていてもよい炭素原子数 1〜 8のァシル、置換されていてもよい芳香族ァシル、または置換されていてもよい芳香族アルキルである。 R'³、 R¹'および R "を除く R²〜R "の任意の保護基 2つが一緒になつて、置換されていてもよい炭素原子数 3〜 8のアルキリデン、置換されていてもよい炭素原子数 3〜 8の環状アルキリデン、置換されていてもよいべンジリデン、または、置換されていてもよいフ夕ロイルを形成していてもよい。また、 nが 2以上の場合、 R²〜R⁸は、繰り返し単位ごとに同一であっても異なっていてもよい。]

すなわち、本発明の皮脂産生抑制剤に有効成分として含まれる式（1) の化合物は、下記式（12) で表される D-ダルコサミン誘導体と式（13) で表される！) -グルク口ン酸誘導体が結合した構造を有する。

式（12)

[式（12) 中、 R³ は水素原子または保護基を表す。] 式 (13)

[式（13) 中、 R⁴⁴は水酸基または保護基を表し、 R^4S〜R⁴⁸は水素原子または保護基を表す。]

式（1 ) において、 nは 0〜 2 5の整数を表すが、 nが 0のとき R 'は式（8) で表される基であり、 R³は式（10) または（U) で表される基である。すなわち、式（1) の化合物は下記式（14) または（15) で表される化合物である。

式 (14)

式（15)

本発明でいう保護基とは、 Theodra W. Green著の "Productive Groups in Org anic synthesis"；第 2版； 1991年刊に表されている各種の保護基を含むものである。

上記式（1) 〜（11) 中で示される保護基は置換されていてもよい炭素原子数 1〜8の直鎖または分枝鎖のアルキルとしては例えば、メチル、ェチル、プロピル、イソプロピル、プチル、第三級プチル、ペンチル、ォクチル、メトキシメチル、第三級プチルチオメチル、卜エトキシェチル、シロキシメチルまたは 2-メトキシェトキシメチルなどを表し、置換されていてもよい炭素原子数 2〜 8の直鎖または分枝鎖のアルケニルとしては、例えば、ェテニル、卜プロべニル、 2-プ口べニル、ブテニルまたはォクテニルなどを表し、置換されていてもよい 1〜8 の直鎖または分枝鎖のァシルとしては、ホルミル、ァセチル、プロピオニル、ブチリル、バレリルまたはビバロイル、または八ロゲン化ァシルなどを表し、八口ゲン化ァシルとしては例えば、クロロアセチル、ジクロロアセチル、トリクロ口ァセチル、トリフルォロアセチルなどを表し、置換されていてもよい芳香族ァシルとしては例えば、ベンゾィル、パラクロロベンゾィルなどを表し、置換されていてもよい芳香族アルキルとしては、例えば置換されていてもよいベンジル、置換されていてもよいジフエ二ルメチル、または、置換されていてもよいトリフエニルメチルなどを表し、置換されていてもよいべンジルとしては、例えば 4-メトキシベンジルなどを表す。さらに、式（1 ) ~ (U ) 中で示される保護基は、 R^l3、 R¹⁷および R^2Sを除く R²〜！³⁷の任意の保護基 2つが一緒になつて、 1つの保護基を表してもよく、すなわち保護基は、置換されていてもよい炭素原子数 3〜8のアルキリデンとしては、例えば、プロピリデン、ブチリデンまたはォクチリデンなどを表し、置換されていてもよい炭素原子数 3〜 8の環状アルキリデンとしては例えば、シクロペンチリデン、シクロへキシリデンまたはシクロへプチリデンなどを表し、さらに、置換されていてもよいべンジリデンまたは置換されていてもよいフタロイルなどを表す。水酸基の保護基としては、置換されていてもよい炭素原子数 1〜 8の直鎖または分枝鎖ァシル、置換されていてもよい芳香族アルキル、置換されていてもよい炭素原子数 2以上の直鎖または分枝鎖のアルケニルまたは置換されていてもよいべンジリデンなどが好ましく、さらに好ましくは、ァセチル、ベンジル、卜プロぺニルまたはべンジリデンなどを表し、ァミノ基の保護基としては、置換されていてもよい炭素原子数 1〜 8の直鎖または分枝鎖のァシルまたは置換されていてもよいフタロイルなどが好ましく、さらに好ましくは、ァセチルまたはフタロイルなどを表し、カルボキシル基の保護基としては、置換されていてもよい炭素原子数 1〜8の直鎖または分枝鎖のアルキルまたは置換されていてもよい芳香族アルキルなどが好ましく、さらに好ましくは、メトキシル、メチル、ェチル、プロピル、イソプロピル、プチル、イソプチル、ペンチル、ィソペンチルまたはジフエ二ルメチルなどを表す。上記の保護基は、同一の化合物中で互いに同一でも異なっていてもよく、任意に選ばれる。式（1) 中の nは 0〜25の整数であり、好ましくは 0~10、特に好ましくは 0 〜5、さらに好ましくは 2〜4である。

R⁹は上記の記載に合致するものであればよいが、特に、前記式（11) であること、すなわち、式（1) の化合物が下記式（16) であることが好ましい。

式 (16)

さらにこのとき、式（11) において、 R'が前記式（6) 〜（8) であること, すなわち、下記式（17) 〜 (19) であることがより好ましい。

式 (17)

また、さらに前記式（17) 〜（19) において、 R'³、 R'⁷、 R²ⁱが前記式（9 ) であることが特に好ましい。

本発明における薬理学的に許容される塩とは、本発明の化合物を治療や予防などに必要な量を投与する場合に、生体に対して悪影響を及ぼさない、あるいは、本発明の化合物の有効な薬理学的な性質を塩としたことで損なわない塩であることを意味する。具体例としては、ナトリウム塩、カリウム塩またはカルシウム塩などのアルカリ金属またはアルカリ土類金属の塩；フッ化水素酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩などのハロゲン化水素酸塩；メタンスルホン酸塩、トリフルォロメ夕ンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩などの低級アルキルスルホン酸塩；ベンゼンスルホン酸塩、 P-トルエンスルホン酸塩などのァリルスルホン酸塩；フマル酸塩、コハク酸、クェン酸塩、酒石酸塩、シユウ酸塩、マレイン酸塩などの有機酸塩；およびグルタミン酸塩、ァスパラギン酸塩などのアミノ酸塩をあげることができる。またさらに、式（1 ) の化合物およびその塩は、薬理学的に許容される各種の溶媒、例えば水、有機溶媒、緩衝液などとの溶媒和物や結晶多形のものなども含まれる。

式（1 ) の化合物は置換基の種類によって不斉炭素原子を有し、不斉中心の存在に基づく光学異性体が存在する場合がある。本発明の化合物には、各々の異性体、および、それらの混合物のすべてが含まれる。例えば、ある光学異性体とその鏡像異性体（ェナンチォマー）との混合物、特に、等量混合物であるラセミ体、また、あるいは、ある光学異性体とそのジァステレオマーとの混合物も含まれる。

[式（1 ) の化合物の製造法]

当然のことであるが、本発明の皮脂産生抑制剤に使用する化合物は種々の方法

9 によって得ることができる。例えば、グルクロン酸誘導体ゃグルコサミン誘導体などを原料にして有機化学的手法によって中間体あるいは目的化合物を合成 ·修飾する方法や多糖などを酸やアルカリなどを用いて分解して中間体あるいは目的化合物を得る方法などの有機化学的手法、グルクロン酸や N-ァセチルグルコサミンなどを原料にして転移酵素や分解酵素の逆反応などを利用して中間体あるいは目的化合物を合成 ·修飾する方法や多糖などを酵素を用いて分解して中間体あるいは目的化合物を得る方法などの生化学的手法、あるいは、微生物や細胞に酵素の遺伝子を導入して原料、中間体あるいは目的化合物、または合成 '修飾に用いる酵素を得るなどの遺伝子工学的手法などを、単独あるいは組み合わせて用いる方法をあげることができる。

式（1 ) の化合物の好ましい製造法は前記の特願平 10- 120425号（特開平 1 1 -31 0588号）に詳しく記載されている。

[本発明の皮脂産生抑制剤、および、その投与方法、投与量および'剤形] 本発明の皮脂産生抑制剤は、式（1 ) の化合物、その薬理学的に許容される塩の少なくともひとつを有効成分として含む。

本発明の皮脂産生抑制剤を医薬品または化粧料として使用する場合、通常、全身的または局所的に、経口的または非経口的に投与される。投与量は、疾患の種類、症状の程度、投与対象の年齢や体重などの条件をもとに総合的に判断し、最適な量を適宜決定するべきであり、特に限定されない。しかし、通常、成人では 1日当たり経口投与の場合 0. 01〜100mg/kg、非経口投与の場合 0. 001〜10mg/kgである。投与は必要に応じて 1日 1回ないし複数回に分けて行われる。

本発明の化合物の投与は、固体組成物、液体組成物およびその他の組成物の経口投与、注射剤、外用剤、坐剤などの非経口投与のいずれの形態であってもよく、必要に応じて最適な方法が選択される。本発明の化合物およびその薬理学的に許容される塩の少なくともひとつを有効成分として含有する医薬組成物は、通常の製剤化に用いられる担体、賦形剤、その他の添加剤を用いて調製することができる。製剤用の担体ゃ賦形剤としては、例えば、乳糖、ステアリン酸マグネシウム、デンプン、タルク、ゼラチン、寒天、ぺクチン、アラビアゴム、オリ一ブ油、ゴマ油、カカオバター、エチレングリコールなどやその他常用されるものをあげることができる。

経口投与のための固体組成物としては、錠剤，丸剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤などが用いられる。このような固体組成物においては、少なくともひとつの活性物質（有効成分）が少なくともひとつの不活性な希釈剤、例えば、乳糖、マン二トール、ブドウ糖、ヒドロキシプロピルセルロース、微結晶性セルロース、デンプン、ポリビニルピロリドン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウムなどと混合される。組成物は、常法にしたがって不活性な希釈剤以外の添加物、例えば、ステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤、繊維素グリコール酸カルシウムのような崩壊剤、グルタミン酸またはァスパラギン酸のような溶解補助剤を含んでいてもよい。錠剤または丸剤は、必要によりショ糖、ゼラチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートなどの糖衣や胃溶性または腸溶性物質のフィルムで被覆してもよいし、 2つ以上の層で被覆してもよい。さらに、ゼラチンのような吸収されうる物質のカプセルも含まれる。

経口投与のための液体組成物は、薬剤的に許容される乳濁剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤などを含み、一般的に用いられる不活性な希釈剤、例えば精製水、エタノールなどを含んでいてもよい。この組成物は、不活性な希釈剤以外に湿潤剤、懸濁剤のような補助剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、防腐剤などを含んでいてもよい。

非経口投与のための注射剤としては、無菌の水性または非水性の溶液剤、懸濁剤、乳濁剤が含まれる。水性の溶液剤、懸濁剤としては、例えば、注射用水および注射用生理食塩液が含まれる。非水性の溶液剤、懸濁剤としては、例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリ一ブ油のような植物油、ェ夕ノールのようなアルコール類、ポリソルベート 80 (登録商標）などが含まれる。このような組成物は、さらに防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤（例えば、乳糖）、溶解補助剤（例えば、グルタミン酸、ァスパラギン酸）のような補助剤を含んでいてもよい。これらは、例えば、精密ろ過膜によるろ過滅菌、高圧蒸気滅菌のような加熱滅菌、あるいは、殺菌剤の配合などの通常の滅菌方法によつて無菌化することが可能である。これらはまた無菌の固体組成物を製造し、使用前に無菌水または無菌の注射用溶媒に溶解して使用することもできる。非経口投与のための医薬組成物や化粧料は、本発明の化合物の少なくともひとつを有効成分として含み、常法によって処方される外用液剤、軟膏剤、塗布剤、坐剤、経皮剤、点眼剤などが含まれる。あぶらとり紙やあぶらとりフィルムなどの形態にして用いることもできる。種々の形態の化粧料の処方および製造方法については公知の文献に記載されており、例えば最新化粧品科学（化粧品科学研究会編、薬事日報社、 1 9 8 0年）を参照されたい。

[式（1) の化合物の皮脂合成抑制作用]

本発明の化合物（化合物例 1〜10) の皮脂産生抑制作用を、八ムスター耳介部皮脂腺を含む皮膚組織片を用いて評価した。その結果、本発明の化合物は優れた皮脂産生抑制作用を示した。産業上の利用可能性

式（1) の化合物およびその薬理学的に許容される塩は、優れた皮脂合成抑制作用を有し、これらの作用に基づく治療薬および予防薬として有用である。具体的には、二キビ，フケ，脱毛などの治療薬および予防薬として有用である。また、化粧料の成分としても有用である。具体的には、肌荒れ，肌のテカリ，肌や髪のベタツキ，加齢臭などを防止する化粧料として有用である。実施例

以下の実施例において、化合物製造例、皮脂産生抑制作用試験例および製剤 · 化粧料の製造例をあげて本発明をさら詳しく説明する。なお、当然のことではあるが、本発明は以下の実施例に記載された物質および処方に限定されるものではなく、特許の請求の範囲に含まれるすべての物質および処方を含むものである。実施例 1 ：化合物製造例 1

4-デォキシ- -L-スレオ-へキサ- 4-ェンピランゥロノシル- (1→3) -0-2-ァセトァミド- 2-デォキシ -/3- D-ダルコピラノシル -（1→4)- 3- 0-/3- D -ダルコピランゥロノシル -(1→3)-0- 2-ァセトアミド -2-デォキシ-; 3-D-ダルコビラノース [ΔΗβχΑ j31- 3G1CNAC β l→4GlcAj3 l→3GlcNAc (化合物例 1)]、 4-デォキシ -α-L-スレォ-へキサ- 4-ェンピランゥロノシル-（1→3)-0-2-ァセトアミド- 2-デォキシ- 3- D-ダルコビラノシル -(1→4)- 3- 0-|3- D-グルコピランゥロノシル -（1—3) -0-2 -ァセトアミド - 2 -デォキシ- β -D-グルコピラノシル -( 1→4) -3-0- β -D-ダルコビランゥロノシル -(1→3)-0-2-ァセトアミド -2-デォキシ -/3-D-グルコビラノース [△HexA 3 l→3GlcNAc 3 l→4GlcA 3 l- 3GlcNAci3 l→4GlcA 3 l→3GlcNAc (化合物例 2)]、 4 -デォキシ- α-L-スレオ-へキサ- 4-ェンピランゥロノシル - (1—3) -0 - 2 -ァセトアミド - 2 -デォキシ- β -D-ダルコピラノシル -(1→4) -3-0- β - D-ダルコピランゥロノシル - (1→3) -0-2-ァセトアミド - 2 -デォキシ- β - D-グルコピラノシル -(l→4)-3-0-)3-D-ダルコピランゥロノシル -(1→3)- 0-2-ァセトアミド -2-デォキシ- β -D-ダルコピラノシル-（1→4) - 3-0- ]3 -D-ダルコピランゥロノシル- (1—3) -0-2-ァセトアミド- 2-デォキシ-) 3-D-グルコビラノース [AHexA/3 l→3GlcNAc β l→4GlcA 3 l→3GlcNAc β l→4GlcA 3 l→3GlcNAc β l→4GlcA l→3GlcNAc (化合物例 3 ) ] および 4-デォキシ -ひ -L-スレォ-へキサ -4-ェンピランゥロノシル-（1 →3) -0-2-ァセトァミド - 2 -デォキシ- β -D-ダルコピラノシル - (1—4) -3-0- β -D- ダルコピランゥロノシル - (1→3) -0-2-ァセトアミド- 2 -デォキシ- β -D-グルコピラノシル -（l→4)-3-0-)3-D -ダルコピランゥロノシル -(1→3)- 0-2-ァセトアミド- 2 -デォキシ- 13 -D-ダルコピラノシル- (1→4) -3-0- 3 -D-ダルコピランゥロノシル -(1→3)-0 - 2 -ァセトアミド -2-デォキシ -3-D-ダルコビラノシル -(1→4)- 3-0-/3 -D-ダルコピランゥロノシル-（1→3) -0-2-ァセトアミド - 2 -デォキシ - 3 -D-ダルコピラノース [ΔΗεχΑ/3 l→3GlcNAc 3 l→4GlcAj3 l→3GlcNAc /3 l→4GlcA01→3G1 cNAc jS l→4GlcA/3 l-→3GlcNAc β l→4GlcA/31- 3G1CNAC (化合物例 4)] の製造ヒアルロン酸ナトリウム（紀文フードケミファ製；商品名「ヒアルロン酸 FCHJ) 30 gを蒸留水 3 Lに溶解し、 40 となるように加温した。 0.1M水酸化ナトリウム水溶液で溶液の pHを 6.0に調整した後、 Streptomyces iya ro y /ci/s由来のヒアルロニダーゼ（天野製薬製；商品名「ヒアル口ニダーゼ "ァマノ"」）をヒアルロン酸ナトリウム 1 mgあたり 0.5濁度減少単位となるように添加し、 40でで 100時間反応を行った。反応後、公称分画分子量 10kの親水性ポリエーテルスルフォン製の限外ろ過（ミリポア製）によって溶液中から酵素を除去した。凍結乾燥することによって溶媒を除去し、分解物（27.4g) を得た。

分解物を陰イオン交換クロマトグラフ法（カラム： YMC- Pack IEC-AX, 溶離液： A;水， B:0.4M NaCl:リニアグラジェント（30分），検出： UV(232mn) ) によって分画し（化合物例 1、 2、 3、 4の順に溶出）、化合物例 1〜4を含む画分を得た。各画分をゲルろ過法（担体：セフアデックス G-10, 溶離液：水）によって脱塩後、凍結乾燥して化合物例 1〜4 (白色粉末）を得た。収量は、それぞれ、化合物例 1 :1.7g,化合物例 2： 5.9g,化合物例 3： 3.4g,化合物例 4： 2.2gであった。各化合物はナトリウム塩として得られた。

化合物例 1〜4は式（20) で表される化合物である。式（20) において、 πは 1 〜4の整数を示し、 IIが 1のとき化合物例 1、 2のとき化合物例 2、 3のとき化合物例 3、 4のとき化合物例 4を示す。

式 (20)

高速液体クロマトグラフ法（カラム： TSKgel DEAE-5PW, 溶離液： A:水， B:0.3M NaCl;リニアグラジェント（20分），検出： UV(232nm)：面積百分率法）によって測定した各化合物の純度は 97%以上であった。各化合物のゥロン酸含量をダルク口ノラクトンを標準品として Bitterと Muirの方法（Bi t ter, T. , Muir, H. fla . ^ od? ein. , i, 330 (1962). ) によって、へキソサミン含量を 3N塩酸中 100でで 16時間加水分解後ダルコサミン塩酸塩を標準品として Boasの方法（ただし、樹脂処理なし； Boas, N. , F. :/. Biol. Chem. , 204, 553(1953). ) によって分析したところ、各化合物の分析値はほぼ理論値通りであつた。

実施例 2 ：化合物製造例 2

4-デォキシ- a -L-スレオ-へキサ -4-ェンピランゥロノシル-（1→3) -0-2-ァセトァミド- 2 -デォキシ- β - D-グルコピラノシル -(1→4)-3-0- /3 - D -ダルコピランゥロノシル -(1→3)-0-2-ァセトアミド- 2-デォキシ -iS-D-ダルコビラノース [AHexA l-→3GlcNAc l→4GlcA/3 l→3GlcNAc (化合物例 1)]、 4-デォキシ-ひ- L-スレォ-へキサ -4-ェンピランゥロノシル-（1→3) -0-2-ァセトアミド - 2 -デォキシ- β - D-ダルコピラノシル -(1→4)-3- 0-]3- D-ダルコピランゥロノシル-（1→3)-0-2-ァセトアミド - 2 -デォキシ- j3 -D-グルコピラノシル-（1→4) -3-0- β -D-グルコピランゥロノシル -(1→3)- 0- 2-ァセトアミド- 2-デォキシ - 3-D-グルコピラノース [ΔΗεχΑ/3 l→3GlcNAci3 l→4GlcAj3 l→3GlcNAc ]3 l→4GlcA/3 l→3GlcNAc (化合物例 2)] の製造

ヒアルロン酸ナトリウム（紀文フードケミファ製；商品名「ヒアルロン酸 FCH」） 60gを蒸留水 3Lに溶解し、 4(T となるように加温した。 0.1M水酸化ナトリウム水溶液で溶液の pHを 6.0に調整した後、 Streptomyces Aya/i/ro/y〃c 由来のヒアルロニダ一ゼ（天野製薬製；商品名「ヒアル口ニダ一ゼ "ァマノ"」）をヒアルロン酸ナトリゥム lmgあたり 1濁度減少単位となるように添加し、 40でで 100時間反応を行った。反応後、公称分画分子量 10kの親水性ポリエーテルスルフォン製の限外ろ過（ミリポア製）によって溶液中から酵素を除去した。凍結乾燥することによって溶媒を除去し、分解物（53.7g) を得た。

分解物を陰イオン交換クロマトグラフ法（カラム： TSKgel DEAE-5PW, 溶離液： A:水， B:0.5M 酢酸ナトリウム水溶液：リニアグラジェント（A/B(90/10)→A/B(6 0/40) ; 40分），検出： UV(232nni)) によって分画し（化合物例 1、 2の順に溶出）、化合物例 1および 2を含む画分を得た。各画分から凍結乾燥することによって水を除去した。凍結乾燥した各画分をエタノールで洗浄して塩を除去し、化合物例 1、 2 (白色粉末）を得た。収量は、それぞれ、化合物例 1 :18. lg,化合物例 2 : 29.5gであった。各化合物はナトリウム塩として得られた。

高速液体クロマトグラフ法（カラム： TSKgel Amide-80, 溶離液：ァセトニトリル /水/酢酸/卜リエチルァミン（65/35/2/1， v/v)，流速： l. OmL/分，カラム温度： 80 , 検出： UV(232nm):面積百分率法）によって測定した各化合物の純度は 97% 以上であった。ゥロン酸含量とへキソサミン含量を実施例 1に示した方法によつて分析したところ、値はほぼ理論値通りであった。

実施例 3 ：化合物製造例 3

4-デォキシ- a -L-スレオ-へキサ -4-ェンピランゥロノシル-（1→3) -0-2-ァセトァミド -2-デォキシ- ]3 -D-ダルコビラノシル -(1—4) -3- 0- 3- D -ダルコピランゥロノシル - (1→3) -0-2-ァセトアミド - 2 -デォキシ- β -D-ダルコピラ二] ^一ル [ Δ He xA/3 l→3GlcNAc 3 l→4GlcA^ 1→3G1CNAC0H (化合物例 5)]、 4-デォキシ- α-L- スレオ-へキサ -4-ェンピランゥロノシル- (1→3)-0- 2-ァセトアミド- 2 -デォキシ - /3 -D-グルコピラノシル-（ 1→4) -3-0- 3 -D-ダルコピランゥロノシル- (1→3) - 0-2 -ァセトアミド - 2 -デォキシ- β -D -ダルコピラノシル- (1→4) -3-0- β - D -ダルコピランゥロノシル - (1→3) -0-2-ァセトアミド - 2 -デォキシ- /3 -D -ダルコビラニト一ル [ΔΗΘΧΑ/3 l→3GlcNAc 3 l→4GlcA 3 l→3GlcNAc 3 l→4GlcA/31→3G1CNAC0H (化合物例 6)] の製造

50mgの化合物例 1を 50mLの 3mg/inL水素化ホウ素ナトリゥム水溶液に溶解し、室温で 1時間処理した。 5 mLの 6 M酢酸を加えて反応を停止し、 50mLのメタノ一ルを加えた後、エバポレー夕一を用いて乾固した。さらに、 50mLのメタノールの添加および乾固を 2回繰り返した。乾固によって残った固形物を 5 mLの水に溶解し、実施例 1と同様にゲルろ過法によって脱塩後、凍結乾燥して化合物例 5 (白色粉末： 44.7mg) を得た。

同様の方法で化合物例 2を原料として用いて化合物例 6を得た。

化合物例 5および 6は式（21) で表される化合物である。式（21) において、 nは 1〜2の整数を示し、 nが 1のとき化合物例 5、 2のとき化合物例 6を示す。式（21)

化合物例 5および 6の純度を実施例 2に示した方法によって測定したところ、 98%以上であった。ゥロン酸含量とへキソサミン含量を実施例 1に示した方法によって分析したところ、分析値はほぼ理論値通りであった。

実施例 4 ：化合物製造例 4

4-デォキシ- a -L-スレオ-へキサ- 4-ェンピランゥロノシル-（1→3) -0-2-ァセトァミド- 2 -デォキシ - /3 -D-ダルコピラノシル- ( 1→4) -3-0 - /3 -D-グルコピランゥロン酸 [AHexA/31— 3GlcNAc/3 l→4GlcA (化合物例 7)]、 4-デォキシ - α -L-スレォ-へキサ- 4 -ェンピランゥロノシル-（1→3)- 0-2-ァセトアミド- 2-デォキシ- 3- D-ダルコピラノシル -（1— 4) -3-0- /3 -D -ダルコピランゥロノシル-（1→3) -0-2-ァセトアミド- 2 -デォキシ- β - D-グルコピラノシル-（ 1→4) -3-0- β -D-グルコピランゥロン酸 [AHexA/3I→3GlcNAc/31→4GlcA/31→3GlcNAc01→4GlcA (化合物例 8)] の製造

化合物例 1を Reissigらの方法（Reissig, J. , L. , Strominger, J. L. , Leloir, L. , F. J. Biol. C em.,2n, 959(1953). ) に準じて pH9のホウ酸緩衝液中で加熱した。反応液中のホウ酸を実施例 3と同様にホウ酸メチルとして除去し、実施例 1と同様にゲルろ過法によって脱塩後、凍結乾燥して化合物例 7 (白色粉末）を得た。 50 ragの化合物例 1を原料としたとき、 43. lmgの化合物例 7を得た。

同様に、 50mgの化合物例 2を原料としたとき、 44.8mgの化合物例 8 (白色粉末）を得た。

化合物例 7および 8は式（22) で表される化合物である。式（22) において、 nは 0〜 1の整数を示し、 nが 0のとき化合物例 7、 1のとき化合物例 8を表す。式 (22)

化合物例 7および 8の純度を実施例 2に示した方法によつて測定したところ、 98%以上であった。ゥロン酸含量とへキソサミン含量を実施例 1に示した方法によって分析したところ、値はほぼ理論値通りであった。

実施例 5 ：化合物製造例 5

4-デォキシ- a -L-スレオ-へキサ -4-ェンピランゥロノシル - (1→3) -0-2-ァセトァミド - 2 -デォキシ- β - D-ダルコピラノシル-（1—4) -3-0- β - D-グルコピランゥロ二トール [Δ¾χΑ/31— 3GlcNAc]3 l→4GlcA0H (化合物例 9)]、 4-デォキシ- α-L -スレオ-へキサ -4-ェンピランゥロノシル -(1→3)-0- 2-ァセトアミド- 2-デォキシ- -D-ダルコビラノシル - ( 1→4) -3-0- /3 -D -ダルコピランゥロノシル-（ 1→3) -0 -2-ァセトアミド - 2 -デォキシ- β -D-ダルコピラノシル - (1→4) -3-0- β -D-グルコピランゥロニトール [AHexA/3 l→3GlcNAc /3 l-*4GlcA/3 l→3GlcNAc β l→4GlcA0H (化合物例 10)] の製造

化合物例 7を実施例 3と同様の方法で処理して化合物例 9 (白色粉末）を得た。 20mgの化合物例 7を原料としたとき、 15.9mgの化合物例 9を得た。

同様に、 20mgの化合物例 8を原料としたとき、 17.8mgの化合物例 10 (白色粉末）を得た。

化合物例 9および 10は式（23) で表される化合物である。式（23) において、 nは 0〜1の整数を示し、 nが 0のとき化合物例 9、 1のとき化合物例 10を表す。式 (23)

H

化合物例 9および 10の純度を実施例 2に示した方法によって柳定したところ、 98%以上であった。ゥロン酸含量とへキソサミン含量を実施例 1に示した方法によって分析したところ、値はほぼ理論値通りであった。

実施例 6 ：式（1) の化合物の皮脂産生抑制作用

Hallらの方法 (Hall, D. , W. , R. , Van den Hoven, W. , E. , Noordzi j-Karaermans, N. , J. , Jaitly, K. , D. , Arch. Dermatol. Res. , 275， 1 (1983). ) に準じて試験を行った。すなわち、雄八ムスターの耳介部皮脂腺を含む皮膚組織片（直径 3麵）を放射標識酢酸ナトリゥムを含む Krebs-Ringerリン酸緩衝液中で 3時間培養後、組織を加水分解、へキサン抽出を行った。へキサン中の放射標識脂質量を液体シンチレ一ションカウン夕一で測定することにより皮脂腺での脂質産生抑制量を求めた。同 —ハムスターの右耳介より得られた皮廣組織は本発明の化合物（化合物例 1〜 10) を 0 . 0 1 %又は 0 . 0 5 %含む Krebs-Ri ngerリン酸緩衝液中（化合物添加系）で培養を行い、左耳介から得られた皮膚組織は本発明の化合物を含まない Krebs- Ringerリン酸緩衝液中（化合物未添加系）で培養を行った。得られた試験データから下記式により皮脂産生阻害率を算出した。

皮脂産生阻害率（％) =

(化合物未添加系での皮脂産生量一化合物添加系での皮脂産生量） /化合物未添加系での皮脂産生量 X 100

結果を表 1に示す。皮脂産生阻害率（％)

化合物例培地中の化合物の濃度（％)

0. 01 0. 05

1 15. 7 17. 8

2 28. 6 50. 1

3 48. 5 47. 7

4 53. 4 51. 0

5 16. 2 18. 1

6 30. 8 55. 7

7 14. 2 15. 9

8 30. 7 56. 6

9 13. 9 20. 0

10 39. 8 55. 1 表 1に示されたように、化合物例 1〜10はいずれも皮脂腺を含む皮膚組織片からの脂質の産生を有意に抑制し、優れた皮脂産生抑制作用をもつことが示された。実施例 7 ：本発明の化合物の急性毒性

本発明の化合物の代表例（化合物例 1〜10) について、ラット（体重 300〜400 g， Wi s t ar系，ォス）を用いて急性毒性試験を行ってところ、 LD₅。は 500mg/kg以上であった。

実施例 8 ：製剤および化粧料の製造例

錠剤の製造 1

化合物例 1 10 g ポリエチレングリコール 6000 10 g

ラウリル硫酸ナトリウム 1. 5 g

トウモロコシデンプン 3 g

乳糖 25 _g

ステアリン酸マグネシウム 0, 5 g

上記成分を秤量する。ポリエチレングリコール 6000を 70~8(TCに加熱し、そこに化合物例 1、ラウリル硫酸ナトリウム、トウモロコシデンプンおよび乳糖を混合した後、冷却する。固化した混合物を粉砕器にかけ造粒し、顆粒を得る。顆粒をステアリン酸マグネシウムと混合後、圧縮打錠して重量 250mgの錠剤とする。錠剤の製造 2

化合物例 2 30 g

乳糖 55 g

ジャガイモデンプン 12 g

ポリビニルアルコール 1. 5 g

ステアリン酸マグネシウム 1. 5 g

上記の成分を秤量する。化合物例 2、乳糖、ジャガイモデンプンを均一に混合する。混合物にポリビニルアルコールの水溶液を加え、湿式顆粒造粒法により顆粒を調製する。顆粒を乾燥し、ステアリン酸マグネシウムを混合後、圧縮打錠して重量 200mgの錠剤とする。

カプセル剤の製造

化合物例 3 10 g

乳糖 25 g

トウモロコシデンプン 5 g

微結晶セルロース 9. 5 g

ステアリン酸マグネシウム . 0. 5 g

上記の成分を秤量する。ステアリン酸マグネシウム以外の 4成分を均一に混合する。ステアリン酸マグネシウムを加えた後、さらに数分間混合する。混合物を

No. 1のハードカプセルに 200mgずつ充填し、カプセル剤とする。

散剤の製造化合物例 4 20 g

乳糖 79 _g

ステアリン酸マグネシウム l g

上記成分を秤量する。すべての成分を均一に混合して 20 %散剤とする。

坐剤の製造

化合物例 5 10 g

ポリエチレングリコール 1500 18 g

ポリエチレングリコール 4000 72 g

化合物例 2を乳鉢でよく研磨して微細な粉末とした後、熔融法によって 1 gの直腸坐剤とする。

注射剤の製造

化合物例 6 0. l g

塩化ナトリウム 0. 9 g

水酸化ナトリウム適量

注射用水 l OOmL

上記成分を抨量する。 3成分を注射用水に溶解、ろ過滅菌後、 10mLアンプルに 5 mLずつ分注し、熔封して注射剤とする。

クリームの製造

化合物例 7 5g セトステアリルアルコール 3. 5g

2-ォクチルドデシルアルコール 3g スクヮラン 40g ミツロウ 3g 還元ラノリン 5g ェチルパラベン 0. 3g ポリエキシエチレン（20)ソルビ夕ンモノパルミチン酸エステル 2g ステアリン酸モノグリセリド 2g 香料 0. 03g

1, 3-ブチレングリコール 5g グリセリン 5g 精製水 26. 2g 上記成分を抨量し、常法によりクリームを製造した

乳液の製造

化合物例 8 lg

流動パラフィン 5g

ステアリン酸 1. 5g

セチルアルコール 0. 5g

ミツロウ 2g

ミリスチン酸イソプロピル 3g

ポリオキシエチレン（10)モノォレイン酸エステル l g

グリセリンモノステアリン酸エステル lg

プロピレングリコール 5g

エタノール 3g

ェチルパラベン 0. 3g

香料 0. 03g

精製水 76. 7g

上記成分を秤量し、常法により乳液を製造した。

軟膏の製造

化合物例 9 0. lg

ステアリルアルコール 15g

モクロウ 20g

ポリオキシエチレン（10)モノォレイン酸エステル 0. 25g

グリセリンモノステアリン酸エステル 0. 25g

ワセリン 40g

精製水 24. 4g

上記成分を秤量し、常法により軟膏を製造した。

パックの製造

化合物例 10 7g ポリビニルアルコール 15g ジプロピレングリコール 5g ポリエチレングリコール 3g エタノール 10g メチルパラベン 0. 05g 香料 0. 05g 精製水 59. 9g 上記成分を抨量し、常法によりパックを製造した。

固形白粉の製造

化合物例 2 lg タルク 85. 4g ステアリン酸 1. 5g ラノリン 5g スクヮラン 5g ソルビ夕ンセスキォレイン酸エステル 2g トリエタノールァミン l g 顔料適量香料適量上記成分を秤量し、常法により固形白粉を製造した。

ヘアトニックの製造

化合物例 3 l g エタノール 55g ニッコール HCO-60 l g 香料適量精製水 42g グリセリン l g 色素適量上記成分を秤量し、常法によりへアトニックを製造した。

Claims

請求の範囲

1. 下記一般式（1) で表されるグルクロン酸誘導体およびグルコサミン誘導体を構造中に有する化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする皮脂産生抑制剤。

式（1)

[式（1) 中、 R'は保護基または下記式（2) ~ (5) を表す。式（2) 〜（5) 中、 ITは水素原子、保護基または下記式（6) 〜（8) を表し、 R"は水素原子または保護基を表す。ただし、 R'°および R¹'が水素原子または保護基である場合、 R¹ は COOIVに対してトランス結合あるいはシス結合のどちらであってもよい。

式（2)

— OR"

式（3)

-NHR"

式（4)

一 C "

式（5)

-SR"

式（6)

R ¹

式 (7)

式 (8) 2OR

また、 ITが式（6) 〜（8) である場合、式（6) ~ (8) 中、 R¹³、 R'⁷および R" を除く R¹²〜R²⁸は同一または異なって水素原子または保護基を表し、 R'³、 R'⁷および R"はアジド基または下記式（9) を表す。

式（9)

-NR²⁹R³⁰

式（9) 中、 R"および R^Mは、同一または異なって水素原子または保護基を表す。式（1) 中、 R²〜R⁸は同一または異なって水素原子または保護基を表す。

式 (10)

式（11)

式（10) および（1 1 ) 中、 R³ '〜！³⁷は同一または異なって水素原子または保護基を表す。

式（1 ) 中、 nは 0〜25の整数を表す。（ただし、 nが 0のときは、 R'は式（2 )、 R'¹¹は式（8 ) で表される基であり、 R⁹は式（10〉または式（1 1 ) で表される基である。）

式（1 )、式（6 ) 〜（8 ) および式（10)， (1 1 ) 中、保護基は互いに同一または異なり、置換されていてもよい炭素原子数 1〜 8の直鎖または分枝鎖のアルキル、置換されていてもよい炭素原子数 2〜 8の直鎖または分枝鎖のアルケニル、置換されていてもよい炭素原子数 1〜 8のァシル、置換されていてもよい芳香族ァシル、または置換されていてもよい芳香族アルキルである。 R¹³、 Rⁿおよび R^2Sを除く R²〜R³⁷の任意の保護基 2つが一緒になつて、置換されていてもよい炭素原子数 3〜 8のアルキリデン、置換されていてもよい炭素原子数 3〜 8の環状アルキリデン、置換されていてもよいべンジリデン、または、置換されていてもよいフ夕ロイルを形成していてもよい。また、 nが 2以上の場合、 R²〜^は、繰り返し単位ごとに同一であっても異なっていてもよい。]

2 . 皮脂産生過剰が発症原因にかかわる疾患の治療薬または予防薬として使用する請求項 1記載の皮脂産生抑制剤。

3 . 尋常性座瘡（二キビ）の治療薬または予防薬である請求項 2記載の皮脂産生抑制剤。

4 . フケの治療薬または予防薬である請求項 2記載の皮脂産生抑制剤。

5 . 脱毛の治療薬または予防薬である請求項 2記載の皮脂産生抑制剤。

6 . 皮脂産生過剰が原因にかかわる美容上の問題を解決するための化粧料として使用する請求項 1記載の皮脂産生抑制剤。

7 . 加齢臭抑制剤として使用する請求項 1記載の皮脂産生抑制剤。