WO1994013209A1

WO1994013209A1 - Plaster for testing and method of testing

Info

Publication number: WO1994013209A1
Application number: PCT/JP1993/001737
Authority: WO
Inventors: Masaru Saita; Yuji Shimozono; Shigeo Ohta; Keishi Yonemura; Mizue Mukai; Akira Okayama; Shuhei Imayama
Original assignee: Hisamitsu Pharmaceutical Co., Inc.
Priority date: 1992-12-07
Filing date: 1993-11-29
Publication date: 1994-06-23
Also published as: JP3129738B2; KR0163647B1; AU5575294A; EP0737442A1; CN1099482A; KR950703893A; CA2151144A1; EP0737442A4; US6063029A

Description

検査用貼付剤および検査方法

[技術分野]

本発明は、各種機能を兼ね備え、特に乳癌またはアトピー性皮膚炎検査用に好適に用いられる検査用貼付剤および該貼付剤を用いた乳癌またはァ卜ピー性皮膚炎検査方法に関する。

[背景技術]

従来、病気の検査または診断法には種々の方法が使用されている。例えば生化学および生物学的な検査では、侵襲性に採血し、血液成分、各種検査マーカー、細胞等で診断し、病理検査においては侵襲性に癌組織等の生検や細胞レベルの異常の有無を検討し、また、その他、尿、便、唾液等では採尿、採便、蓄尿等により検査されている。これらの方法は、医師、看護婦、臨床検査技師が注射器で血液等採取したり、鋭利なメスにて生体組織（患部）を切り取ったり、また特殊容器等に検査または診断対象物を医師が患者の協力を得て採取しているのが現状である。

特に乳癌は増加傾向にある主要な癌の一つでありながら、早期発見の難しい癌として知られている。乳癌検査においては、医師による内診、触診、マンモグラフィ（X線）、腫瘍マーカー [癌胎児性抗原（C E A ) 、 α -胎児性蛋白 (A F P ) 、癌抗原（C A 1 5 - 3 ) 、各種糖鎖抗原] 、超音波等が使用されているが、その検査効率は必ずしも高くない。例えば無腫瘤性の癌においては、病気の初期の痛みはなく、自覚症状も殆どないため、患者そのものが異常に気づかないケースが多い。また、 C E A、 C A 1 5— 3や A F Pに代表される腫瘍マーカーは、現在、放射線免疫検定法（R I A法）や酵素免疫測定法（E I A法）により血中濃度を測定しているのが現状である。しかし、血中での腫瘍マーカーの測定はかなり進行した癌やリンパ節転移した癌等の予後や治療効果の指標に用、られているが、早期癌での陽性率は極めて低いため、原発性の乳癌の早期診断のためには極めて困難である。

そのため、発見時には癌が進行していたり、リンパ節等に転移を起こしている症例が多く、やむをえず乳房切除等の治療を必要とする場合が多かった。

従って、乳癌の早期診断には腫瘍マーカーの血中濃度測定は殆ど使われず、もつばら触診や問診に頼っている。また、 X線（例えばマンモグラフィ）はかなり強い線量であり、またその判読にはかなりの経験と技術が要求される。また、細胞診を実施するには疑わしき部位を限定する必要があるが、現在の技術においては簡便に極微小の疾患部位を早期診断することは難しい。

さらに、血清、血液、生検サンプル等に含まれる特異的物質の測定法は、通常物理化学的方法、生化学的方法、免疫測定法、病理組織検査法等を用いて測定されている。従って、上記生体サンプルは、一般に医療現場では測定できず、検査設備のある施設に依頼したり、特殊技術者のもとに検査委託するため、測定結果が判明するまで日数がかかり、緊急を要する場合等は特に問題がある。

一方、近年ァトビー性皮慮炎疾患は、生活環境の変化、生体側の対応力の減少、免疫力の低下等により増加の一途にあり、社会的にも大きな問題となりつつある。特に、アトピー性疾患は、我が国において総患者数または潜在患者数は 1 0人に 1人とも 2人ともいわれる程多い疾患である。し力、し、この原因は充分解明されておらず、その検査または治療は医師の肉眼的または経験的な感に頼つているところが多い。

患者側からみた問題点として、採血や生検は注射針、注射器、鋭利なメスまたは放射線等を使用するため、大なり小なりの恐怖心や痛みを与え、適切な施設に出向く必要がある。また、尿や便等の検査では、尿や便を採取する場所や行動が限定される欠点がある。

一方、従来技術における貼付剤として、 ①サリチル酸系の消炎鎮痛剤やニトログリセリン等の狭心症治療剤等の医薬品を含有する医療用貼付剤、刺激性試験のためのパッチテストゃアレルギー性皮膚炎等の感作物質を特定するためのアレルゲン検出用貼付剤（いずれも貼付剤より薬物やその他の物質を放出するシステム）、 ②ガーゼ、傷用パッド、または生理用ナプキン等の生体から分泌する血液、浸出液等の止血、捕獲の目的や傷等の抗菌を目的とするパッド類は、存在していたが、皮膚または粘膜等から浸出する物質や液体を効率的にトラップし、同一貼付剤の同一平面上で検査する検査用貼付剤は全く存在しなかつた。ことに皮膚ゃ乳頭を含む乳房に直接貼付し、同一貼付剤上で検査をするという概念は知られていなかった。 .

また、従来、皮膚または粘膜から生体成分のあらゆるものが分泌されるらしいということは解っていたが、通常皮膚から分泌する測定目的物質が極微量であることや、従来の測定法では分泌液として一旦ピぺット等に採取して次の測定法に移る操作であるため、現実的には皮膚上で液体を採取するのが難しく、的確に定性的にまたは定量的にこれを測定する方法がなかった。

乳頭においても、乳頭分泌異常症のように、分泌液や分泌物が出ているらしいことは知られていたが、分泌液の採取測定に問題があった。稲治等の [医学の歩み、 1 3 4、 5 7 5、 1 9 8 5 ] において、乳頭分泌液をピぺッ卜にて採取し、その分泌液中の C E A量を、免疫測定法により測定した結果、 C E Aが癌の検査に有用であることを報告している。

—方、持田等は、特開平 1 一 2 5 0 0 6 9号公報、特開平 2— 1 7 6 4 6 6号公報、特開平 2 - 2 8 0 0 6 1号公報にて、微量の乳頭分泌液を採取し、 C E A 等の腫瘍関連抗原に対する特異的な抗体を固相化した液体不透過性のシート上に分泌液を滴下すると、 C E A等が半定性、定量できることを報告している。しかし、これは乳頭分泌液をピぺット等で一旦採取し、液体不透過性のシート状固相に塗布する必要があり、そのために少なくとも乳頭分泌液が 0 . 2〜5 0 // 1程度ある乳頭分泌異常症の患者しか検査できない等の問題がある。また、これらの公報には、 C E A特異的な抗体を固相化したシート状固相に乳頭を接触させて C E Aを検出するという漠然とした概念はあるものの、これを具体的に解決するための技術手段または方法においては何ら具体的に示唆されておらず、しかも、検査用貼付剤における液体透過性の吸着担体および吸水吸着部材を用いた検査用貼付剤を貼付することにより、少なくとも肉眼的に液として検知できない分泌液をも補足して C E A等の目的物質を固相化し、検出するという概念は全く示唆されていない。 [発明の開示]

本発明の目的は、これら従来技術の課題を解決するもので、短時間かつ簡便に、非侵襲性に、検査場所を限定することなく、特に乳癌またはアトピー性皮膚炎を検査することができる検査用貼付剤およびその検査方法を提供することを目的とする。

すなわち、この目的をさらに詳述すると次の通りである。

( 1 ) 患者の体内に侵入することなく、また体液の場合には特殊なピぺット等を使わずに検査サンプルを採取することにより、患者に対して恐怖心、痛み、不快感を与えず、かつ大量のサンプルを検査判断できる乳癌またはアトピー性皮膚炎検査用貼付剤を提供すること。

( 2 ) 検査用貼付剤は、貼付したり剥離したりする場所は限定されず、測定者および測定場所も限定されず、さらに、測定結果は短時間に明示され、医師や看護婦等がその医療現場で直接判定または検査できる迅速で簡便な乳癌またはァトピー性皮廣炎検査方法を提供すること。

( 3 ) 検査用貼付剤を用いることにより、乳頭由来の分泌物質、特に腫瘍マー力一を特異的に測定でき、無腫瘤性または腫瘤性の乳癌を検査する補助手段としての乳癌検査方法を提供すること。

( 4 ) 検査用貼付剤を用いることにより、皮虜由来の s I g Aを測定でき、検査する補助手段としてのァトピー性皮膚炎検査方法を提供すること。

上記目的は、液体透過性の吸着担体を少なくとも有する検査用貼付剤を作製することにより達成される。

さらに少なくとも肉眼的に液体として認識できない液量（当然ピぺッ卜等で採取できない液量）以上の液量中に含まれる極微量の検査上有用な乳頭分泌物質を当該検査用貼付剤を用いて、吸着固定し、測定することにより、乳癌の検査が達成される。

また、少なくとも肉眼的に液体として認識できない液量（当然ピぺット等で採取できない液量）以上の液量中に含まれる極微量の皮膚から分泌する分泌型免疫グロブリン A分泌物を当該検査用貼付剤を用いて、吸着固定し、免疫学的に測定することにより、アトピー性皮膚炎の検査が達成される。 — δ — すなわち、本発明の検査用貼付剤は、生体内から分泌する分泌物質（乳癌検査の場合は、乳頭から分泌する乳頭分泌物質、アトピー性皮膚炎の場合は、皮膚から分泌する微量の分泌型免疫グロプリン Α分泌物）を吸着する吸着担体とを少なくとも有することを特徴とし、特に乳癌またはアトピー性皮膚炎検査用に好適に用いられる。さらに、本発明の検査方法は、上記検査用貼付剤を用いて、目的とする診断上有用な生体内から分泌する分泌物質を測定することを特徴とする。以下、本発明の検査用貼付剤を詳細に説明する。

本発明に用いられる支持体としては、紙、布、ポリエステル樹脂、シリコン樹脂、ウレタン樹脂、ポリエチレン樹脂、エチレン一酢酸ビニル共重合体、軟質ポリ塩化ビニル等の各種樹脂からなる非伸縮性または伸縮性のフィル厶、アルミ二ゥム萡等の単独もしくはそれらの複合体が挙げられる。その中でも特に半透明または透明の支持体が貼付時における正確な貼付位置や患部の確認および検査時の検査手段の簡便性等の点で望ましい。

また、粘着剤としては、人体に貼付するうえで皮慮に影響のない粘着性または接着性を有する物質であり、検査用貼付剤の貼付剥離後の一連の検査手段は同一貼付剤上で通常実施するため、他の固定器具への再付着性機能を有する物質であること、粘着剤により目的とする特定物質の吸着担体への吸着が阻害されないこと、最終検査や反応中での阻害がない素材であること、また、検査用貼付剤の貼付部位の確認のため支持体との組み合わせは半透明または透明の素材であることが望ましく、通常、粘着剤成分と粘着付与剤、軟化剤等の各添加剤を配合したものとして用いられる。なお、粘着剤は支持体の表面の全部または一部分あるいは部分的において展延される。以下に粘着剤を構成する各成分のの具体例を挙げる力、これらは一例に過ぎずこれらに特定されるものではない。

まず粘着剤成分としては、天然ゴム、ポリイソプチレンゴム、ポリブタジエンゴム、シリコンゴム、ポリイソプレンゴム、スチレン一イソプロピレンースチレンブロック共重合体（以下、 S I Sと略記する）、アクリル酸エステル共重合体樹脂等の天然または合成樹脂等が挙げられる。また、これらの粘着剤成分を 1種または 2種以上用いることができる。配合量としては、粘着剤中、 1 0〜5 0重量％、好ましくは 1 5〜4 5重量％、より好ましくは 2 0〜 4 0重量％の範囲において使用される。

また、粘着性の調整のため粘着剤成分の粘着付与剤としてロジン、水添ロジンおよびそのエステル、ポリテルペン樹脂、石油樹脂、エステルガム等を 1種または 2種以上用いることができる。配合量としては、粘着剤中、 4 0重量％以下、好ましくは 5〜3 5重量％、より好ましくは 1 5 ~ 3 0重量％の範囲において使用される。

また、流動パラフィン、ポリブテン、液状ポリイソプチレン、動植物油等の軟化剤を 1種または 2種以上用いることができる。配合量としては、粘着剤中、 5 〜6 0重量％、好ましくは 1 0〜5 0重量％、より好ましくは 2 5〜4 5重量％の範囲において使用される。

また、必要に応じて二酸化チタン、合成ゲイ酸アルミニウム、酸化亜鉛、炭酸カルシウム、アクリル酸デンプン、シリカ類等の充填剤を 1種または 2種以上用いることができる。配合量としては、粘着剤中、 5重量％以下、好ましくは 0 . 1〜4重量％、より好ましくは 1〜3重量％の範囲において使用される。

また、粘着剤中には吸水性およびカブレ防止等の目的で、ポリアクリル酸塩、デンプン -ァクリル酸グラフト共重合体等の吸収性高分子が 1種以上配合され、具体的にはサンゥヱッ卜 I M— 3 0 0、 I M— 1 0 0 0、 I M— 1 0 0 0 M P S 等（三洋化成製、商品名）、アクアキープ 4 S、 4 S H (製鉄化学製、商品名）、スミカゲル S P— 5 2 0、 N— 1 0 0等（住友化学製、商品名）、ァラソープ 8 0 0、 8 0 0 F等（荒川化学製、商品名）が用いられる。

また、シブチルヒドロキシトルエン等の酸化防止剤を必要に応じて粘着剤中に 3重量％以下の割合で適量配合される。

さらに、かぶれ防止等の目的で抗ヒスタミン剤または抗アレルギー剤等の薬物を粘着剤中に必要に応じて適量配合できる。

これら表面に粘着剤を展延された支持体（以下、粘着テープという）は、皮膚との高、密着性を有し、検査用貼付剤は皮腐に確実に貼付される。

次に本発明でいう吸着担体とは、構造的には上記した粘着剤上に直接貼着もしくは粘着剤中に粉末状として配合、または吸水吸着部材に接着剤を介して接着させ間接的に粘着剤に貼着されるものであり、機能的には生体、待に皮膚、粘膜および乳頭等から分泌する液体中の分泌物質を効率的に吸着できるものである。従つて、吸着担体の素材は実質的には液体透過性の素材の 1種または 2種類以上から構成されるものである。なお、粘着剤中またはその上に 1種配合または貼着された場合には、この吸着担体は以下にいう吸水、保水機能を有することが必要でめる。

吸着担体は、セルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース塩、ヒドロキシェチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ェチルセノレロース、カノレボキシメチルェチルセノレロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ェチルヒドロキシェチルセルロース、酢酸セルロース、硝酸セルロース、酢酸フタル酸セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート等のセルロース誘導体、またはポリメタクリル酸 2—ヒドロキシェチル、ポリアクリル酸およびポリビニルアルコール一ポリアクリル酸複合体等の多孔質ゲル、またはポリウレタン、ポリエステル、ポリエチレン、ポリ塩化ビニル、ポリフッ化ビニリデン、ナイ口ン等の繊維マ卜リックス、または紙（例えば不織紙、濾紙）、布（例えばスフ、綿、絹、合成繊維）またはシリ力、アルミナ、チタニア、ジルコニァ、セリア等の多孔質セラミック等が 1種または 2種以上の組み合わせでもつて使用されるが、上記機能を有するものであればこの限りでない。なお、好ましくは前記したセルロース誘導体が吸着担体として望ましい。

この吸着担体の現実的な使い方は、通常の皮膚等のように少なくとも肉眼的に液体として分泌液が認識できない場合、発汗時や乳頭分泌異常症の乳頭等のように小量の液体として認識できる場合、尿や出血時の様に比較的多量の液体として認識できる場合がそれぞれあり、このいずれにも検査用貼付剤として対応できる必要があることから、実質的には液体透過性であることが好ましい。

また、吸着担体は上記の種々条件下でもできるだけ全部の目的とする分泌物質を吸着する必要があるが、これを達成するにはポア（空孔もしくは空隙）をもつ素材またはマトリックス状の素材（以下、ポアをもつものと総称する）が良い。すなわち、実質的には吸着担体の表面積が大きいものであるほうが好ましい。また、一旦吸着した目的とする分泌物質は検査過程において離脱しないことも必要である。

さらに、吸着担体のポアの大きさは、検査用貼付剤を貼付時の分泌物質の吸着能力、分泌液体の透過性および検査の評価判定に影響を及ぼすが、そのポアサイズは 0 . 0 1〜 1 0 0 mで、好ましくは 0 . 0 1〜5 0〃m、より好ましくは 0 . 0 1 ~ 3 0 / mである。すなわち、ポアサイズが、非常に小さい場合には吸着担体の目詰まりが発生し、非常に大きい場合には吸着量が少なかったり、判定時の困難さを伴うようになるため、ポアサイズは本発明の検査用貼付剤にとって大変重要な因子の一つである。上記した吸着担体の中でセルロース誘導体におけるポアサイズは 0 . 0 1〜5 0 m、好ましくは 0 . 0 1〜3 0 mの範囲内にあることが特に望ましい。

また、本発明でいう吸水吸着部材とは、構造的には上記した粘着剤中に粉末状として配合されるか、直接粘着剤上に貼着されるか、または吸着担体に接着剤を介して接着させ直接粘着剤上に貼着されるもので、機能的には上記吸着担体により目的とする分泌物質が吸着された後の余分な（検査上不必要な）分泌液あるいは分泌物質の吸水および吸着、貼付剤型の安定性の維持、通気性をもたせ皮膚剌激の緩和、染色性の安定化、外層における吸着担体（例えば一部のセルロース誘導体系担体を使用する場合）がコヮレ易い場合の破砕防止機能を有する等の目的として重要である。

この吸水吸着部材の現実的な使い方は、通常の皮廣等のように少なくとも肉眼的に液体として分泌液が認識採取できない場合には吸引的な原動力となり、微量〜多量の液体として認識できる場合には余分の液体や測定目的以外の物質の処理に用いることから、実質的には吸水性、保水性を有し、かつ物質吸着性を有するものであることが好ましい。

吸水吸着部材は実質的には吸水保水機能および Zまたは吸着機能を有する部材から構成されるものであり、上記液体透過性の吸着担体に加えて、高吸水性樹脂が挙げられる。具体的には、ポリアクリル酸またはその塩、イソブチレン—マレイン酸共重合体系、デンプンーアクリル酸グラフト共重合体系、ポリエチレンォキサイド系、酢酸ビニルー不飽和ジカルボン酸系モノマー共重合体ゲン化物、力ルポキシメチルセルロース系、デンプンーァクリル酸グラフト共重合体ゲン化物、アルギネート系等の吸収性高分子、セルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース塩、ヒドロキシェチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ェチルセルロース、カルボキシメチルェチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ェチルヒドロキシェチルセルロース、酢酸セルロース、硝酸セルロース、酢酸フタル酸セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート等のセルロース誘導体、またはポリメタクリル酸 2—ヒドロキシェチル、ポリアクリル酸およびポリビニルァルコ一ルーポリアクリル酸複合体等の多孔質ゲル、またはポリウレタン、ポリエステル、ポリエチレン、ポリ塩化ビニル等の繊維マトリックスまたは濾紙、または布が 1種以上選択されるが、本機能を有するものであればこの限りではない。また、吸着担体と吸水吸着部材が同一素材から構成される場合には、その量、ポアサイズ、厚みや前処理施工を適宜組み合わせることによっても可能である。また、接着剤は吸着担体と吸水吸着部材を別々のシート状素材として検査用貼付剤を作成する場合に、その両シート間に介在するもので、それらの全面的な接着あるいは部分的接着からなるものである。この接着剤に関しては、接着性を有する物質であり、判定に影響を及ぼさないものであれば特に限定されない。特に好ましいのは親水性を有する物質であり、例えばカルボキシメチルセルロース、メチノレセノレロース、ヒドロキシェチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等の水溶性セルロース誘導体、アルギン酸、グァーガム、アラビアガム、トラガントガム、タマリンド種子等の多糖類、ゼラチン、ポリアクリル酸、ポリアクリル酸塩、ポリビニルアルコール、ポリェチレンォキシド、ィソブチレンー無水マレイン酸共重合体、メ卜キシエチレン—無水マレイン酸共重合体、水溶性エポキシ樹脂、水溶性アクリル樹脂、水溶性ポリエステル等の天然または合成高分子等が挙げられる。この親水性接着剤を用いることは吸着担体にて吸着された余分の水分をさらに吸水吸着部材に吸水する上で、また製造上からも好ましいものである。

また、剥離被覆材としては吸着担体層を保護可能なものであれば特に限定されないが、好ましいものとしては剥離処理を施した剥離紙、セロファン、ポリェチレン、ポリプロプレン、ポリエステル、ポリエチレンテレフタレート等の高分子フィルム等が挙げられる。

本発明の検査用貼付剤の形態としては、長方形、丸形、楕円形、正方形、ト形、ヒシ形等が挙げられるが、実用性に伴う形であれば特に限定されない。また、大きさおよび色等においても実用性に伴うものであれば特に限定されない。異常部位の限定の目的には、本発明の検査用貼付剤は、粘着テープとして半透明または透明であり、かつ支持体に識別用表示が施されていることが望ましい。ここでいう識別用表示とは、例えば左右の乳房または皮廐の上下を識別するために、貼付剤表面の支持体に上下左右の表示または記号を印刷または刻印または着色することである。

このような本発明の検査用貼付剤の類型（形状および構成）の概略断面図を図

1 ( a ) （d ) に示す。同図において、 1は支持体、 2は粘着剤、 3は吸水吸着部材、 4は接着剤、 5は吸着担体、 6は剥離被覆材をそれぞれ示す。同図において、 ( a ) および（b ) は二層構造、（c ) は一層構造、（d ) は配合構造である。ここでいう 2層構造とは、吸着担体 5が粘着剤 2上に設けられ、さらにその上に吸水吸着部材 3を有するものである。この二層構造は、吸着担体 5と吸水吸着部材 3の間に接着剤 4を介在させる接着型（同図（a ) ) と吸着担体 5と吸水吸着部材 3の間に接着剤を介在させない分離型（同図（b ) ) に大別される。また、一層構造とは、吸着担体 5が粘着剤 2上に設けられものをいう。さらに、配合構造とは、粘着剤 2中に微粉状の吸着担体 5を含有するものをいう。

次に、本発明による乳癌またはアトピー性皮廣炎検査方法について説明する。まず本発明の乳癌検査方法は、上記した乳癌検査用貼付剤を、人体の乳頭を含む乳房に貼付し、乳頭分泌物質を吸着担体にて吸着ならびに固相化し、該乳頭分泌物質を測定することを特徴とする。

例えば、本発明の乳癌検査用貼付剤の特徴は、貼付以外の接触方法に比較し、患部に所望する時間確実に接触固定される、少なくとも肉眼的に分泌液量がなくても検出できる、早期乳癌（特に無腫瘤性）の場合原発部位の予測ができることが挙げられる。

本発明では、乳癌検査用貼付剤は人体の乳頭に吸着担体が中心となるように一定時間貼付する。そして、乳頭より極微量分泌する乳頭分泌物質を、貼付剤の吸着担体にて吸着ならびに固相化する。ここでいう乳頭分泌物質とは、上述したように乳頭から分泌する特定物質または蛋白またはその構成べプチドである。この固相化された乳頭分泌物質について、種々の腫瘍関連抗原または腫瘍マーカーが選択される。例えば、癌胎児性抗原（Ca r c i n o emb r y on i c 抗原以下 CEA) 、メラノーマ細胞、メラノーママーカー（NK IZC 3) 、メラノーママーカー（P A L— M l ) 、神経芽腫（C E 7 ) 、神経芽腫

(AD 2) 、マリグニン、な—胎児性蛋白（a— f e t op r o t e i n) 、ぺプシノ一ゲン、塩基性胎児蛋白（B a s i c f e t o p r o t e i n) 、滕癌胎児性抗原、胎児性ブレアルブミン、炭水化物抗原（C a rb o hyd r a t e An t i g e n CA 1 9— 9) 、滕癌関連抗原（C A 5 0) 、癌抗原

(CSLEX- 1) 、膝癌関連抗原（シリアル S SEA— 1 S LX) 、膝癌関連抗原（Du - p an— 2) 、癌抗原（e r bB2) 、癌抗原（NCC - ST - 439) 、炭水化物抗原（シリアル Tn STN) 、癌抗原（CA72— 4) 、癌抗原（KM - 0 1 ) 、脖癌関連抗原（S p a n - 1 ) 、炭水化物抗原

(C A 125) 、癌抗原（CA15— 3) 、偏平細胞癌 (SCC) 、セミノプロティン（ァー Sn) 、前立腺特異抗原（PA) 、フヱリチン、組織ポリペプチド抗原（TPA) 、免疫酸性蛋白（I AP) 、免疫抑制酸性蛋白、前立腺酸性蛋白

(PAP) 、二ユウロン特異エノラーゼ（NS E) または血液、酵素（特に P〇D、 ALP) およびアミノ酸（特に A 1 a、 G 1 u) 、粘液物質、その他各種ホルモン等が挙げられる。

そして、本発明では、これらの腫瘍関連抗原または腫瘍マーカーを、特異的な抗体を用いた抗原抗体反応、化学反応または酵素反応等により定量、半定量または定性的に測定できる。

腫瘍関連抗原または腫瘍マーカーの中で、例えば CE Aを代表例として説明する。 CE Aは 668個のアミノ酸で約 50%の糖を含む糖蛋白である力^ 臨床上有用な癌胎児性腫瘍関連抗原の一つである。血中 CEAは、大腸癌やその他の癌において高くなり、癌の進行度に対応するといわれている。しカヽし、 CEAが癌組織から血中に移行するときには、癌はかなり進行していて術後の経過や薬物の治療効果を確認することが従来においては主であった。そこで、癌組織由来の C E Aが血中ゃリンパに移行する前や血中 C E Aの測定限界以下の段階（いわゆる無腫瘤性で早期癌）で、癌局所の C E A値を測定できるならば臨床的意義は大きいと考えられる。他のマーカーにおいても同様なことが考えられる。そこで、本発明は前述した乳癌検査用貼付剤を乳頭部分に貼付し、 C E Aを測定するものである。

C E Aの測定は、特異性や感度を考慮し、抗 C E Aモノクローナル抗体やポリクロ一ナル抗体を用いることができる。この抗体は、 C E Aに対して感度および特異性の高い抗体であれば良い。患部に貼付し一定時間後に剥離した乳癌検査用貼付剤は、この抗体を用いて、 E I A法、免疫クロマト法、ラテックス結合抗体を用いた免疫測定法、金コロイド結合抗体を用いた免疫測定法および蛍光または発光免疫測定法により測定できる。その結果、乳頭より分泌する C E Aは、癌の原発部位に対応した部分にドット（スポット）状やびまん状に濃い染色像として検出できる。

判定は、染色された濃さ、大きさ、部位により、疾病の進行度、範囲、どの乳腺由来のものかが、肉眼、顕微鏡、デンシトグラフ等により、定性、半定量および定量的に行うことができる。

次に、本発明のアトピー性皮膚炎検査方法について説明する。

本発明のァトピー性皮膚炎検査方法は、上記したァトピー性皮膚炎検査用貼付剤を、人体の皮膚、粘膜または疾患部に貼付し、分泌物を吸着担体にて吸着ならびに固相化し、 s I g A分泌物を免疫測定法により測定することを特徵とする。本発明では、アトピー性皮膚炎検査用貼付剤を、人体の皮膚、粘膜または疾患部に一定時間、例えば 1分〜 3 0時間貼付する。そして、分泌物を貼付剤の吸着担体にて吸着ならびに固相化する。ここでいう分泌物とは、汗腺に沿って分泌する肉眼的に液として認識できない液体量または認識できる液体量を指し、その中に含まれる s I g Aを包含するものである。そして、本発明では、この s I g A 分泌物を免疫測定法により選択的に測定する。結果は、皮膚の汗腺に相当すると思われる部位にドット状に強い染色像が認められる。

[図面の簡単な説明] 図 1は、本発明の検査用貼付剤における形状および構成を具体的に示す概略断面図。 -

[発明を実施するための最良形態]

以下、実施例等に基づき本発明を具体的に説明する。

但し、以下より、最終的な形態を検査用貼付剤、支持体と粘着剤よりなる形態を粘着テープ、吸着担体および吸水吸着部材が接着されているものを二層性の吸着担体（接着型）、吸着担体および吸水吸着部材が分離して接触しているものを二層性の吸着担体（分離型）、吸着担体が直接粘着剤に貼着されているものを一層性の吸着担体、粘着剤中に少なくとも粉末状の吸着担体が配合されているものを吸着担体配合と定義する。また、表 1中の粘着剤の各成分の配合数値（部）は、重量基準である。

実施例 1 二層性の吸着担体（接着型）からなる検査用貼付剤

支持体として伸縮性钦質ポリ塩化ビニルフィルム、および粘着剤として

S I S、ポリイソブチレン、エステルガム、流動パラフィン（配合比 2 0重量部： 1 0重量部： 3 5重量部： 3 5重量部）を配合したものを展延し、 3 c m x

4 c mの楕円形の粘着テープを作製した。

吸水吸着部材にセルロースエステルのマイクロポーラスポリマー（ポアサイズ： 0 . 6 πι ミリポア製）と吸着担体に硝酸セルロース Z酢酸セルロース (ポアサイズ： 0 . 4 5 / m ミリポア製）をポリアクリル酸エステル共重合体により接着し、二層性吸着担体を作製した。それを、直径 1 . 5 c mの円形に切断し、吸水吸着部材を介して粘着テープに貼着し、吸着担体側をポリエチレンテレフタレ一トフイルムにより被覆し、検査用貼付剤を作製した。

実施例 2 二層性の吸着担体（分離型）からなる検査用貼付剤

支持体として伸縮性軟質ポリ塩化ビニルフィルム、および粘着剤として

5 I S、ポリイソブチレン、エステルガム、流動パラフィン（配合比 2 0重量部： 1 0重量部： 3 5重量部： 3 5重量部）を配合したものを展延し、直径 3 c mの円形の粘着テープを作製した。

粘着テープ上に吸水吸着部材として 1 . 5 c m x 1 . 8 c mの長方形のセルロースエステルのマイクロポ一ラスポリマー（ポアサイズ： 0. 6 m ミリポァ製）を貼着し、さらにその上に吸着担体として 1. 8 cmx l. 8 cmの正方形の硝酸セルロース/酢酸セルロース（ポアサイズ： 0. 45 zm ミリポア製）を貼着した。最上部をポリエチレンテレフタレートフィルムにより被覆し、検査用貼付剤を作製した。

実施例 3 一層性の吸着担体からなる検査用貼付剤

支持体として伸縮性軟質ポリ塩化ビニルフィルムおよび粘着剤として S I S、ポリイソプチレン、エステルガム、流動パラフィン、アクリル酸デンプン（配合比 22重量部： 8重量部： 33重量部： 35部： 2重量部）を配合したものを展延し、直径 4 cmの円形粘着テープを作製した。

次に、粘着テープ上に吸着担体として、直径 2 cmの円形の硝酸セルロース Z 酢酸セルロース（ポアサイズ： l / m ミリポア製）を貼着し、ポリエチレンテレフタレ一トフイルムにより被覆した。

実施例 4 粘着剤に吸着担体を配合した検査用貼付剤

支持体として、直径 2 cm円形の伸縮性軟質ポリ塩化ビニルフィルムに、 S I S、エステルガム、流動パラフィン、ゲイ酸アルミニウムおよび粉状のセルロース粉末（配合比 24重量部： 35重量部： 35重量部： 2重量部： 4重量部）を配合した粘着剤を展延し、吸着能力をもつ粘着テープを作製した。粘着テープをポリエチレンテレフタレ一トイルムにより被覆し、検査用貼付剤を作製レ o

実施例 5〜 35

表 1に示す各成分（支持体、粘着剤、吸水吸着部材、吸着担体、接着剤、剥離被覆材）を用い、実施例 1〜4と同様にして検査用貼付剤を作成した。性吸表 1

伸縮性軟質ホ S I S 20部セルロースのマイクロポーラス _Λ 硝酸セル Π-ス /酢酸セルロ- アクリル酸メチル /了ク

ボリエチレンテレフタレ-トフ

5 リ塩化ピニルフィルエス ίルカ'ム 35部ボアサイズ： 0. 6 ス、ポアサイズ：0. 25 m リル酸- 2-ェチルへキ

イルム

ム流動パラフィン 35部 (ミリボ了社製） (ミリボ了社製) シル共重合体

伸縮性軟質ポ SIS 18部セル口-スのマイクロポーラス、硝酸セル D-ス /酢酸セルロ- +' I 7I 4" | }レノ y 1 V V kノ

6 リ塩化 E ルフィルロジンエステル 25部ポアサイズ： 0. 6 jum ス、ボアサイズ : 0. l / m ボリビニル了ルコ—ル

イルム

ム流動パラフィン 57部 (ミリボア社製） (ミリ†:了社製)

SI S 18部硝酸セル Π-ス /酢酸セルロ- 伸縮性ウレタンフデンプン /アクリルグラフト共ボリエチレンテレフタレートフ

7 τルペン樹脂 45部ス、ポアサイズ : l z m ポリピニルアルコール

イルム重合体イルム

流動バラ 7イン 37部 (ミリボ了社製)

SI S 25部

伸縮性ボリエチレ硝酸セル Π-ス /酢酸セルロ- メトキシエチレン/無

エスルカ'ム 30部デンプン /アクリルグラフト共ボリエチレンテレフタレートフ

8 ン Ϊレフタレ-ト繊ス、ボアサイズ : 5 m 水マレイン酸共重

流動バラ 7イン 30部重合体、 J イルム

維の織布 (；リホ了社製）

ボリイ、〃チレン 15部合体

SIS 25部硝酸セル D-ス /酢酸セルロ- 伸縮性ウレタンフデンプン /アクリルグラ 7ト共ボリエチレンテレフタレ-トフ

9 αジンエステル 20部ス、ボアサイズ：8 m ボリビニルアルコール

担着里ム口！^

流動パラフィン 55部 (ミリポ了社製)

体 SI S 20部

親水性ボリ沸化ビニリデン、

伸縮性ウレタンエステル 30部カルボキシメチルセルロ-ス架ボリエチレン ίレフ夕レ-トフ

10 ボアサイズ : 0. l /z m ボリビニル了ルコ—ル

繊維の不織布流動パラフィン 35部橋重合体イルム

(ミリボ了社製）

ボリイソブチレン 15部

SIS 17部

セル D-ス架親水リ沸化ヒ'ニリデン、イソプチレン/無水マ

伸縮性ポリエチレカルボキシメチル性ボ

ポリエチレン ίレフタレ-トフ

11 ロジンエステル 28部ボアサイズ : 0. 45 レイン酸共重合

ン繊維の織布橋重合体 •ίルム

流動パラフィン 55部 (ミリボ了社製) 体

表 1 (続き）

性吸

SIS 20部

セルロースエステルのマイクロ

Λ π に土、' τ 4· 1/ iif

ポ -ラス

流動ポリエチレンテレフタレ-ト 7

12 伸縮性ウレ夕ンフ

パラフィン 35部

イルム水マ

ポアサイズ： 0.6 〃m Mン酸共重イルム

ケィ酸了ルミニゥム 2部

合体

(ミリポ了社製)

アクリル酸デンプン 3部

SIS 15部

ボリ沸化ピニリデンアクリル酸メチル /ァク

伸縮性ウレタノフ πゾノエスアル 22p|S ί'クリル ¾合体ナトリボリエチレンテレフタレートフ

13 ボアサイズ :0.22 zm リル酸- 2-工チルへキ

イルム流動パラフィン 53部ゥム塩イルム

(ミリポア社製）シル共

ボリアクリル酸塩 10部重合体

l 1 口 |¾

伸縮性 Iチレン/ ロジン： ϊル 22部ボリ沸化リデンアクリル酸/アクリル

接アクリル酸重合体ナトリポリエチレンテレフタレートフ

14 酢酸ル共重流動パラ 7イン 53部ポアサイズ :0.22 /im 酸ォクチルエステル共

ゥム塩イルム

合体 7イルムデンプン酸！^リル酸グラ 7 (ミリポア社製) 重合体

ト共重合体 10部

SIS 20部セルロースエステルのマイクロポーラアクリル酸/アクリル

型伸縮性ウレタン 7 アクリル酸重合体ナトリポリエチレン ίレフタレ-トフ

15 テルベン樹脂 42部ス、ボアサイズ :0.2 zm 酸才クチル Iステル共

イルム塩 ^ム

流動パラ 7イン 38部 (ミリポ了社製）重合体

担 SIS 20部セルロースエステルのマ■{クロボーラ

伸縮性ポリプ αピアクリル酸

16 重合体ナトリボリエチレン ίレフタレ-トフ

ίルベン樹脂 42部ス、ポ了サイズ :0.6 /m ポリビニル了ルコール

レンフィルムゥム塩イルム

体流動パラフィン 38部 (ミリボア社製）

1

伸縮性エチレン/ 硝酸セルロ-スアクリル酸- 2-ェチル

エステル 37部アクリル酸重合体ナトリポリエチレン ίレフタレ -トフ

17 酢酸ヒル共重ポアサイズ :0.01 /im へキシル /ヒ' ルビ口リト'

流動パラフィン 33部ゥム塩ルム

合体 7イルム (ザルトリウス社製）

ボリイソブチレン 10部ン共重合体

SIS 15部

硝酸セル口-スアクリル酸- 2-ェチル

伸縮性ボリエチレテルベン樹脂 42部ポリエチレンテレフタレ-トフ

18 ボリアクリル酸ゾーダボアサイズ :0.45 zm へキシル /ビュルリト'

ンフィルム流動パラフィン 35部イルム

(ザルトリウス社製）

ボリアクリル酸塩 3部ン共重合体

表 1 (続き） bib 17邵

。ジンエステル 20部硝酸セルロ-スアクリル酸 n-ブチル /

伸縮性塩化ビニホ'リエチレンテレフタレ-トフ

19 流動パラフィン 55部ポリ了クリル酸ゾ-ダボアサイズ :3^m

ノレフィソレムメタアクリル酸共重

イルム

デンプン酸アクリル酸グラフ (ザルトリウス社製）合体

ト: it重合休¹ 8都 |J

SIS 18部硝酸セルロ-ス

伸縮性ウレタンフデンプン /アクリルグラフト共ポリエチレン ίレフ夕レ-トフ

20 ロジンエステル 29部ポアサイズ：0.2 /m ボリビニルアルコ-ル

イルム重合体イルム

流動パラフィン 53部 (ザルトリりス社製)

SIS 21部

H S ^ '^u 1 Γ· ±すノ τ羊アレンソ/ / 4？ΗΪ

伸縮性ポリエチレエス ϊルカ'ム 34部デンプン /アクリルグラフト共ポリエチレンテレフタレ-トフ

21 ポ了サイズ ·Λ.2μια 水マレイン酸共重

性ン不織布流動パラフィン 30部重合体イルム

(ザルトリウス社製）合体

ポリイソプチレン 15部

吸天然ゴム 20部

セルロ-スィ'ノブチレン/無水マ

ウレタノ 7 ホリノアン 20部綿の不線布ポリエチレンテレフ夕レートフ

22 ポアサイズ: 3/zm

イルムレイン酸共重合

エステル 35部ポ了サイズ :100 //m イルム

(了ト 'パンテ 7ク社製）体

酸化亜鉛 15部

担 SIS 15部

伸縮性软質ポセルロ-スィ、ノブチレン/無水マ

ロジンエステル 55部ナイロン繊維の不織布

23 リ塩化ヒ'ニル7ィルボアサイズ： 3 zm レイン酸共重合

ム動パラフィン 25部ボ了サイズ :80 /m 剥離紙体流

(了 Fパンテ 7ク社製）

ボリアクリル酸塩 5部

SIS 20部

伸縮性¹)レタン 7 カルボキシ fチルセル α-ス架ナイロン繊維の不織布了クリル酸/ ίクチル工

24 エス ίルカ'ム 55部

イルム橋重合体ボアサイズ :100 /m 剥離紙

流動パラフィン 25部ステル共重合体

伸縮性ボリ酢 SIS 50部ボリプロピレンフィル夕- カルボキシメチルセル口-ス架アクリル酸/ォクチルェ

25 酸エチレンビニル共アクリル酸デンプン 3部ポアサイズ :0.6/ m 剥離紙重合体ルム橋重合体ステル共重合体

流動パラフィン 47部 (ミリポ了社製）

表 1 (続き）

SIS 15部

ポリプ αビレンフィル夕- 伸縮性软質ポエステル力'ム 55部アクリル酸重合体ナトリ

26 ポアサイズ :0.6 ポリビニルアルコ-ル剥離紙リ塩化 ^ルム流動パラフィン 25部ゥム塩

(ミリボア社製）

ボリアクリル酸塩 5部

SIS 20部

伸縮性软質ボアクリル酸重合体ナトリポリピレン繊維織布ポリエチレン iレフタレ-トフ

27 エステル力'ム 55部アルギン酸

リ塩化 7イルムゥム塩ポアサイズ :100 /zm

型流動パラフィン 25部

SIS 15都

性伸縮性ボリプロビエステル力'ム 55部アクリル酸重合体ナトリポリプロピレン繊維織布ボリエチレン Ϊレフタレ -トフ

28 グァ-ガム

レン

吸 7イルム流動バラン 25部クム塩ボ了サイズ：1.5 μηι イルム

ボリアクリル酸塩 5部

担 SIS 20部

セルロースのマイク αポーラスゝ硝酸セル α-ス /酢酸セル α- 体伸縮性钦質ポエス ίルガム 35部

29 ボアサイズ： 0.6 μια ス、ポアサイズ :0.25 im ― ボリエチレンテレフ夕レ-トフリ塩化フィルム流動バラフイン 35部、 l| イルム

分 (；リボ了社製） (；リホア社製)

ポリイソプチレン 10部

伸縮性ボリエチレ SIS 18部硝酸セル D-ス /酢酸セルロ- 離アクリル酸重合体ナトリボリエチレン ίレフタレ-トフ

30 ンテレフ夕レートフィル Dジンエステル 25部ス、ボアサイズ :l m

ゥム塩イルム

A 流動バラン

型 57部 (ミリポ了社製）

SIS 18部セルロースエステルのマイクロボーラ

伸縮性ウレタン 7 デンプン /アクリルグラフト共

31 ボリエチレンテレフ夕レートフテルベン樹脂 45部ス、ボ了サイズ :0.45 zm

重合体イルム

流動バラフイン 37部 (ミリポ了社製）

表 1 (続き）

SIS 17部

'J Ί , 1 υ D

32 伸縮性钦質ボリ塩

流動パラン 27部ボアサイズ :0.45 /m 一

化ビニルフィルム剥離紙

エステル力'ム 30部 (ミリポ了社製)

ボリアクリル酸塩 13部

性 S1S 15部

吸テルベン樹脂 40部ニトロセルロース

非伸縮性酢酸ヒ'二

33 流動パラフィン 30部ポアサイズ :l /m ―

ルフィルム剥離紙

デンプン酸アクリル酸グラフ (アト'バン ί 社製）

担

ト共重合体 15部

体

SIS 18部超極細繊維

非伸縮性ポリ Iチレン

34 エステル 55部 (商品名:ベリ-マ X、鐘紡社製）

フィルム剥離紙流動バラフイン 27部

吸 SIS 16部

ボリイソプチレン 32部配合

担伸縮性軟質ボリ塩

35 流動パラ 7イン 32部

化ビュルフィルム剥離紙体粉状硝酸セル D -ス '酢酸セル D -ス 10部

配

ボリアクリル酸塩 10部

実施例 3 6 貼付部位の確定

実施例 1で作製した検査用貼付剤（粘着テープは 3 c m x 4 c mの楕円、吸着担体は直径 1 . 5 c mの円形）の 2枚にそれぞれ " L" 、 " R" を印字した。その印字された検査用貼付剤を、健常女性 1 0人に各自で乳頭に貼付させたところ、全ての人が " L" と印刷された検査用貼付剤を左に、 "R" と印刷された検査用貼付剤を右に貼付した。

また、実施例 1で作製した検査用貼付剤に、上下の区別をするために "上" 、 "下" を印字した。健常人男性 1 0人の上腕内側に各自で貼付させたところ全ての人が、 "上" を上向きに "下" を下向きに貼付した。

以上のことより、検査用貼付剤の印字により貼付部位の確定ができることが証明された。

実施例 3 7 粘着テープの着色

支持体に、肌色に着色した軟質ポリ塩化ビニル、半透明および透明の軟質ポリ塩化ビニルを用いて実施例 4で示した材料で、検査用貼付剤を作製した。健常人男性 1 0人の上腕内側に印をつけ、それを目標に各自で上腕内側に貼付させたところ、半透明または透明のほうがより正しく目標部位に貼付することができた。このことより、半透明または透明の支持体の方がより正確に貼付できることが証明された。

実験例 1

実施例 1〜3 5で作製した検査用貼付剤（粘着テープは直径 3 c mの円、吸着担体は直径 1 . 2 c mの円形に統一）について以下の項目を評価した。その結果を表 2に示す。

親水性： 1気圧、 2 5 °Cにおいて、吸着担体を水に 1分間浸漬させ濡れ性を評価した。

(評価基準） + 而た

+ わずかに濡れた

全く濡れなかった

吸着量：濃度が異なるゥシ血清アルブミン（B S A) を吸着担体に滴下、乾燥し固相化した。抗 BS A抗体を用い免疫染色を行い、吸着担体の吸着量について評価した c

(評価基準） ++ ： 100 / gZcm²以上

+ : 50〜100 g/cm²

土： 0〜 50 / c m'

一： 0

非特異性

バックグランド：上記記載の吸着量の実験と同時に、蛋白以外の非特異的な発色についても評価した。

皮脂の影響：健常人男性 1 0人の上腕内側に検査用貼付剤を 24時間貼付させ、剥離後検査用貼付剤を抗 s I g A抗体を用いた免疫染色に供した。

(評価基準） + + ：発色あり

+ ：軽度の発色あり

ごく軽度の発色あり

発色なし

刺激性：健常人男性 10人の上腕内側に、検査用貼付剤を 24時間貼付した。剥離後、検査用貼付剤の刺激性について評価した。

(評価基準） + 軽度の紅斑あり

+ ごく軽度の紅斑あり

紅斑なし

2 各種検査用貼付剤の性能評価結果

审非特異性バック

夭 ¾ ΙΓ&5例リ $积@フノ J(<ゝ杜 1土 τ· 制 ^リ激 ί¾ i-^.

グランド

1 + + + 一一

2 + + + 一

3 + + + _

4 + + + _

5 + + +

6 + + + _ 一

7 + + + _ _

8 + + +

9 + + + _

1 0 + _

1 1 +

1 2 + ±

1 Q

u + 4-

1 A + 4- *J + + 4- u

1 Ί

1 o +

1 Q +

？ π 4-

4 (- +

2 2 + 土

2 3 + + + 土

2 4 土 + +

2 5 ± 土 ―

2 6 ± 一

2 7 + ± ±

2 8 ± 土

2 9 + + +

3 0 + + +

3 1 + + +

3 2 + + +

3 3 + + + 土

3 4 +

3 5 + + + 表 2に示されるように、蛋白吸着量とポアサイズの関係と、蛋白吸着量と液体透過性の関係を評価した。

検査用貼付剤の蛋白吸着量とポアサイズの関係は、ポアサイズが一般的に小さい程良いが、あまり小さいと BS Aや液の目詰まりをおこし、また、大きいと免疫染色の発色がルーズとなり肉眼的判定は弱かった。従って、ポアサイズとして 0. 01〜 100 mが使用可能であり、特に 0. 01〜50 zmの範囲内のものが好ましてい結果を得た。

検査用貼付剤の蛋白吸着量と液体透過性の関係を調べた結果、吸着担体として完全な液体不透過性のポリエステルペーパー（商品名：プアリー 2025 FL、阿波製紙社製）を用いた貼付剤（比較として作製）は BS Aを吸着できず、染色性は認められなかった。一方、軽度（土）から（+ ) での液体透過性の吸着担体は、 BS A吸着量および免疫染色性も良かった。従って、検査用貼付剤の吸着担体としては、液体透過性を有することが好ましい。

この表 2の結果から、以下のことが判明した。

粘着剤は、人体に影響ないもの、反応系を阻害しないもの、再付着性があるものが望ましい。

吸水吸着部材には、吸水保水性および吸着機能を有するものが望ましい。吸着担体は、吸着機能が高く、ポア（表面積を大きくする）を有するもので、液体透過性のものが好ましい。

接着剤には、水分透過性のものが好ましい。

実験例 2 定性および半定量的測定について

(方法）

実施例 1〜3、 5、 7、 15、 22、 31で得られた検査用貼付剤（粘着テープ：直径 5 cm、吸着担体；直径 2 cmの円形に統一）について 0〜 1 Q /i gZ m 1の C E Aを 1 1ずつ滴下した。乳蛋白質でブロッキングした後、抗 CEA 抗体を反応させた。次にピオチン標識抗マウス I g、パーォキシダーゼ標識アビジン溶液を反応させた後、ジァミノべンジジン、過酸化水素で発色させた。発色は 2モル硫酸で停止した。発色した CEAは肉眼的（定性、半定量）、デンシトグラフ（定量）により測定した。結果を表 3に示す。表 3 定性および半定量的測定について

表 3の結果から C E Aは濃度依存的な発色を示した。また、その観察は定性、半定量および定量的にも行えることが確認できた。

実験例 3 健常人の染色結果

(方法）

実施例 6 (粘着テープ： 3 c m x 4 c m 楕円形、吸着担体：直径 2 c m、円形）の検査用貼付剤を健康成人既婚女性（3 2、 4 0才） 2名の両乳頭に貼付し、 5分、 1時間、 2 4時間および 4 8時間後に剥離した。剥離した貼付剤を実験例 2により定性、半定量的に測定した。結果を表 4に示す。

表 4 健常人の染色結果

表 4に示されるように、 2人の健康成人女性には、乳頭分泌由来の C E Aは検出できなかった。

実験例 4 乳癌患者の染色結果

(方法）

右側の乳房が乳癌であると診断された患者 A ( 4 9才）の両乳頭に実施例 1で得られた検査用貼付剤を 2 4時間貼付した。 2 4時間後に剥離した検体および検量線として C E Aを固相化した検査用貼付剤を、乳蛋白質でブロッキングした後、抗 C E A抗体を反応させた。次にパーォキシダーゼ標識抗マウス I gを反応させた後、ジァミノべンジジン、過酸化水素で発色させた。発色は 2 M硫酸で停止した。染色した検体を定性、半定量および定量により観察した。結果を表 5に示す。表 5 乳癌患者の染色結果

表 5に示されるように、右側の乳頭に貼付した検査用貼付剤はびまん状の濃、茶色に発色した。一方、左側に貼付した乳癌検査用貼付剤は全く発色しなかつた。

実験例 5 健康成人、乳腺症および乳癌患者における評価

(方法）

健常人 9人および患者 8人に、実施例 3 1で作製した検査用貼付剤を左右乳頭上に 2 4時間貼付した。剥離後、実験例 2の方法で染色した。結果は染色性の強さで表示し、表 6に示した。

表 6 健常人、乳腺症および乳癌患者における評価

表 6の結果より、乳癌では患部において中〜強陽性反応が確認され、乳腺症においても軽度な陽性例が散見された。

実験例 6 ラテックス標識免疫測定法

(方法）

2%ブル一ラテックス（粒径 0. 2 m) を抗ヒ卜 C E Aモノクローナル抗体 (マウス I gG l) 溶液中に添加し、 37^eCで反応させ、ブルーラテックス標識抗ヒト CEAモノクローナル抗体を作製した。健康成人女性（36才）および無腫瘤性の乳癌患者（左乳癌、 45才） 1名に本発明実施例 7の検査用貼付剤を 24時間乳頭に貼付して得たサンプルをこのラテックス標識抗 CEAモノクロ一ナル抗体溶液に直接浸透させた。結果を表 7に示す。表 7 ラテックス免疫測定法を用、て測定した C E A量の測定

表 7の結果から、サンプルを抗体溶液に浸してから約 1分後から、乳癌患者の検査用貼付剤の左側のみにブルーのドット状のスポッ卜が認められた。

実験例 7 金コロイド標識免疫測定法

(方法）

2 O n mの金コロイド 1 O m lに至適抗ヒト C E Aモノクローナル抗体を 1時間反応させた。 1 %牛血清アルブミンでブ口ッキングした後、 8 0 0 0 g、 1時間遠心分離操作により、抗体感作金コロイド粒子を得た。緩衝液により O D 5 3 0 n mで 3. 0の感作コロイド液に調製した。

本コロイド液を用いて、実施例 2 3で作製し、実験例 6で実施した患者を用いて評価した。結果を表 8に示す。

表 8 金コロイド標識免疫測定法を用い測定した CE Aの測定

表 8の結果より、 Bの患者は左乳房外側部に癌が認められるが、本検査用貼付剤の貼付により、左乳房外側部に限局して 3個のスポッ卜が認められた。これは臨床症状と合致するものであった。以上のことより、本方法は有用であること力く確認された。

実験例 8 その他のマーカーによる検出

(方法）

実施例 1で得られた検査用貼付剤（粘着テープ： 3 cmx 4 cmの楕円形、吸着担体；直径 1. 5 cmの円形）を健康成人既婚女性（40才、 A) と乳癌患者 (左乳癌 45才、 B) の両乳頭に 24時間貼付し、剥離した後、以下のマーカーによる観察を行った。結果を表 9に示す。

• AFP、 CA 15— 3、 e r b B 2に対するモノクローナル抗体を用いた抗原抗体反応

•ニンヒドリン反応によるアミノ酸の検出

•グアヤック法による潜血反応（ヘモグロビンの検出）

•酵素反応によるパーォキシダーゼ（POD) およびアルカリフォスファタ一ゼ（ALP) の検出表 9 その他のマーカーによる検出

表 9の結果から明らかなように、本検査用貼付剤の使用により、種々の有用なマーカーが検出できることが判明した。

実験例 9 検査用貼付剤の有用性

(方法）

実施例 1の検査用貼付剤を乳頭分泌液を伴う乳癌患者（4 0才、左：乳癌）の左の乳頭と乳頭分泌液を伴わない乳癌患者（4 5才、左；乳癌）の左の乳頭に各自で 2 4時間を目標に貼付させた。さらに、上記同患者に同様にして抗 C E A抗体を固相化した液体不透化性シート（マンモテック）を各自で 2 4時間を目標に接触させた。

評価は、貼付または接触時間および免疫染色を用いた C E Aの検出を行なつた。結果を表 1 0に示した。

表 1 0 検査用貼付剤の有用性

(同表中、 1分または 2分とは患部にずれないように接触できた時間）表 1 0の結果から、検査用貼付剤は、貼付位置がずれないように 2 4時間の貼付が可能であり、癌が存在すると思われる乳腺の位置の予測が可能であった。また、長時間（2 4時間）の貼付が可能であったため、乳頭分泌液を伴わない乳癌患者でも C E Aの検出が可能であつた。

これに対し、液体不透過性シートは、 2 4時間の接触は不可能であり、 2人の乳癌患者とも 1 もしくは 2分以内に接触位置がずれた。また、乳頭分泌液を伴う乳癌患者の C E Aの検出は可能であつたが、乳頭分泌液を伴わない乳癌患者の C E Aの検出は不可能であつた。

実験例 1 0 貼付方法

(方法）

実施例 1で示した検査用貼付剤を、健康成人男女 5名の額、胸、上腕内側、手掌に貼付し、 1 0分、 6時間および 2 4時間後に剥離した。剥離したサンプルを酵素標識免疫測定法で定性的に測定した。なお、貼付面積は部位により各種用いた。結果を表 1 1に示す。表 1 1 貼付方法および分泌された s I g A量

表 1 1の結果から、何れの貼付部位および時間においても、 s I g Aの分泌が認められた。また、吸着担体の貼付面積は数 mm²から 10 cm²においても十分測定でき、面積および貼付時間に限定されないことが判明した。

実験例 1 1 定性的測定法 -酵素標識免疫測定法

(方法）

健康成人男子に貼付した実施例 2の検査用貼付剤サンプルに、抗ヒト s I gA モノクローナル抗体（マウス I gG l) を 20時間反応させた。次に牛血清アルブミンでブロッキング後、パーォキシダーゼ標識抗マウス I gG抗体（ゥサギ）を反応させた。発色は、 0. 2 SmgZm 1のジァミノベンチジン溶液および 0. 0125%の過酸化水素溶液を 1 : 1 (vo lZvo l) に混合して添加した。 3分後に 2モルの硫酸溶液を添加し反応を停止した。

その結果、汗腺に沿って分泌されたと思われる茶色のドット状スポッ卜が認められた。

実験例 12 定量的測定法 -酵素標識免疫測定法

(方法）

健康成人男子 4名に貼付した実施例 1の検査用貼付剤サンプルに、抗ヒト s I _g Aモノクローナル抗体（マウス I gG l) を 2時間反応させた。次に牛血清アルブミンでブロッキング後、パーォキシダーゼ標識抗マウス I gG抗体（ゥサギ）を反応させた。発色は、 1. 5 m g/m 1のオルトフヱ二レンジアミン溶液および 1 %の過酸化水素溶液を 1 ： 1 (v o lZv o l ) に混合して添加した。 3分後に 1 %硫酸溶液を添加し反応を停止させ、分光光度計により 490 nmの吸収を定量的に測定した。標準 s I g Aの検量線を表 12に健康成人男子の皮膚 s I g A分泌量を表 13に示す。

表 12 s i g Aの検量線

表 13 健常人の s i g分泌量

表 12の検量線から、本発明貼付剤の s I gAの定量化が可能になった c

実験例 1 3 定性的測定法—ラテックス免疫測定法

(方法） 2 %ブルーラテックス（粒径 0 . 2 μ ιη) を抗ヒ卜 s I g Aモノクローナル抗体（マウス I g G l ) 溶液中に添加し、 3 7 °Cで反応させ、ブルーラテックス標識抗ヒ卜 s I g Aモノクローナル抗体を作製した。健康成人 2名およびァ卜ピー皮膚炎患者並びに感染症患者各 1名に本発明の実施例 1の検査用貼付剤（粘着テープ；直径 3 c m、吸着担体 1 . 5 c m正方形）を 5分間胸部に貼付して得たサンプルをこのラテックス標識抗 s I g Aモノクローナル抗体溶液に直接浸透させた。結果を表 1 4に示す。

表 1 4 ラテックス免疫測定法を用い測定した s I g A量の測定

表 1 4の結果から、サンプルを抗体溶液に浸してから約 1分後から吸着担体上に、ブルーのドット状のスポッ卜が認められた。この結果は実験例 1 1で認められたスポッ卜と同様であり再現性が認められた。

実験例 1 4 測定法一ラテックス免疫クロマトグラフィ法

(方法）

予め 1 %牛血清アルブミンでブロッキングした二トロセルロース膜の一部に、実験例 1 3で作製したブルーラテックス標識抗ヒト s I g Aモノクローナル抗体を固相化した。その上からさらにブロッキングした。抗体固相化部位のみをテープで保持し、さらにその上から、ニトロセルロース膜全部を保持用テープで保持し、診断用貼付剤を作製した。本貼付剤を 2 0分間実験例 1 3の健常人および患者の胸部に貼付した。貼付剤剥離後、抗体標識部を下にし、生理食塩水に付けた。結果を表 1 5に示す。表 1 5 ブル一ラテックス免疫クロマトグラフィ法を用い測定した s I g A: の測定

表 1 5の結果から、 2分後からブルーのスポッ卜が出現し、結果は実験例 1 3 とほぼ同等であった。

実験例 1 5 健常人およびアトピー皮膚炎患者における評価

(方法）

健常人 1 9人およびァトビー性皮廣炎患者 1 9人に、本発明の実施例 2の検査用貼付剤を前腕内側に 2 4時間貼付した。剥離後、実験例 1 2の方法で染色した。結果を表 1 6に示す。

表 1 6 アトピー性皮膚炎患者の s I A分泌量

( * ： p < 0 . 0 5 ) (平均値土 S . E. 、単位はユニット）表 1 6の結果から、ァトビー患者は健常人に対して、明らかに s I g Aの分泌量は少ないことが判明した。従って、本方法により、皮膚における s I g A量の測定によりァ卜ピー性皮膚炎の検査が出来るようになった。

[産業上の利用性]

以上のような本発明においては、下記に示す効果を奏する。

( 1 ) 本発明の検査用貼付剤は、非侵襲性に、短時間にまた簡便に場所を限定せず貼付できる。また、皮膚に対する長時間貼付において、刺激性またはかぶれ等の副作用も少なく、極めて安全性の高い貼付剤である。

( 2 ) 本発明の検査用貼付剤は _;、従来、液として採取できなかった乳頭から分泌する極微量の腫瘍マ一カーをトラップできる。トラップされたマーカーは特異的にかつ簡便に定量または定性的に測定できることから、多項目測定ができる。

C E Aを代表例とする定性的測定においては貼付剤の剥離から数分で目視により判定できるようになることから、医療現場において迅速にまた簡便に測定できる。また、 C E Aまたは腫瘍マーカーの測定は、乳癌の検査に有用であり、特に無腫瘤性で早期乳癌のマススクリーニングや集団検診が可能となる。さらに、貼付剤の位置により、乳癌の原発巣の予測が可能となる。この結果、乳癌の検査効率の上昇が見込める。

( 3 ) 本発明の検査用貼付剤は、従来液として採取できなかった皮膚から分泌する s I g A量を特異的に、かつ簡便に定量または定性的に測定できる。特に s I g Aの定性的測定においては貼付剤の剥離から数分で目視により判定できるようになることから、医療現場において迅速にまた簡便に測定できる。この結果、本発明のァトピー性皮膚炎検査用貼付剤を用いた s I g Aの測定はァトピー性皮膚炎の検査に有用である。

従って、本発明の乳癌またはアトピー性皮膚炎検査用貼付剤および検査方法は乳癌またはァトピー性皮膚炎の検査に際して好適に用いられる。

Claims

請求の範囲

1 . 生体内から分泌する分泌物質を吸着する吸着担体を少なくとも有することを特徴とする検査用貼付剤。

2 . 乳癌検査用に用いられる請求項 1に記載の検査用貼付剤。

3 . アトピー性皮膚炎検査用に用いられる請求項 1に記載の検査用貼付剤。

4 . 前記吸着担体が液体透過性である請求項 1、 2または 3に記載の検査用貼付剤。

5 . 前記分泌物質が乳頭から分泌する乳頭分泌物質である請求項 2または 4に記載の乳癌検査用貼付剤。

6 . 前記分泌物質が分泌型免疫グロプリン A分泌物である請求項 3または 4記載のァトピー性皮虜炎検査用貼付剤。 ·

7 . 支持体と、その表面に展延された粘着剤と、該粘着剤上に貼着され、生体内から分泌する分泌物質を吸着する吸着担体とを少なくとも有する請求項 1〜 6 のいずれかに記載の検査用貼付剤。

8 . 支持体と、その表面に展延された粘着剤と、該粘着剤中に配合され、生体内から分泌する分泌物質を吸着する吸着担体とを少なくとも有する請求項 1〜 6 のいずれかに記載の検査用貼付剤。

9 . 支持体と、その表面に展延された粘着剤と、該粘着剤上に貼着された吸水吸着部材、該吸水吸着部材層上に付着した接着剤、該接着剤上に接着された生体内から分泌する分泌物質を吸着する吸着担体とを少なくとも有する請求項 1〜 6 のいずれかに記載の検査用貼付剤。

1 0 . 支持体と、その表面に展延された粘着剤と、該粘着剤上に貼着された吸水吸着部材、該吸水吸着部材層上に積層された生体内から分泌する分泌物質を吸着する吸着担体とを少なくとも有する請求項 1〜6のいずれかに記載の検査用貼付剤。

1 1 . 前記吸着担体のポアサイズが 0 . 0 1〜 1 0 0 ^ mである請求項 1 ~ 1 0のいずれかに記載の検査用貼付剤。

1 2 . 前記吸着担体または吸水吸着部材が液体透過性または保水性を有する請求項 1 ~ 1 0のいずれかに記載の検査用貼付剤。

1 3 . 前記粘着剤上または粘着剤中に吸水保水機能およびノまたは吸着機能を有する部材を有する請求項 1〜 1 0のいずれかに記載の検査用貼付剤。

1 4 . 前記吸着担体がセルロース誘導体、多孔質ゲル、繊維マトリックス、紙、布、セラミックから 1種または 2種以上選択される請求項 1〜1 0のいずれかに記載の検査用貼付剤

1 5. 前記吸着担体のセルロース誘導体が、セルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース塩、ヒドロキシェチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ェチルセルロース、カルボキンメチルェチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ェチルヒドロキシェチルセルロース、酢酸セルロース、硝酸セルロース、酢酸フタル酸セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレー卜から選択される 1種または 2種以上混合してなる請求項 1 4に記載の検査用貼付剤。

1 6. 前記支持体が半透明または透明であり、かつ識別用表示が施されている請求項 1〜 1 0のいずれかに記載の検査用貼付剤。

1 7. 前記支持体が、紙、布、ポリエステル樹脂、シリコン樹脂、ウレタン樹脂、ポリエチレン樹脂、エチレン一齚酸ビニル共重合体、軟質ポリ塩化ビニルから選択される非伸縮性または伸縮性のフィルムまたはアルミニウム箔から選択される請求項 1〜 1 0のいずれかに記載の検査用貼付剤。

1 8 ：剥離被覆材を有する請求項 1〜 1 0のいずれかに記載の検査用貼付剤。 1 9. 請求項 1〜2、 4〜5、 7〜1 8のいずれかに記載の検査用貼付剤を、人体の乳頭を含む乳房に貼付し、乳頭分泌物質を吸着担体にて吸着ならびに固相化し、該乳頭分泌物質を測定することを特徵とする乳癌検査方法。

2 0. 前記乳頭分泌物質が腫瘍関連抗原または腫瘍マーカーであり、該腫瘍関連抗原または腫瘍マーカーが、癌胎児性抗原、メラノーマ細胞、メラノーママ一カー、神経芽腫、マリグニン、ひ—胎児性蛋白、ぺプシノーゲン、塩基性胎児蛋白、胎児性ブレアルブミン、炭水化物抗原、滕癌関連抗原、癌抗原、偏平細胞癌、セミノプロテイン、前立腺特異抗原、フヱリチン、組織ポリペプチド抗原、免疫酸性蛋白、免疫抑制酸性蛋白、前立腺酸性蛋白、二ユウロン特異エノラーゼ、または血液、酵素、アミノ酸およびムコ多糖を含む粘液からなる群から選ばれる請求項 1 9に記載の乳癌検査方法。

2 1 . 前記腫瘍関連抗原または腫瘍マーカーを、特異的な抗体を用いた抗原抗体反応、化学反応または酵素反応により定量、半定量または定性的に測定する請求項 2 0に記載の乳癌検査方法。

2 1 . 請求項 1、 3〜4、 6〜1 8に記載の検査用貼付剤を、人体の皮膚、粘膜または疾患部に貼付し、分泌物を吸着担体にて吸着ならびに固相化し、該分泌物中の分泌型免疫グロブリン A分泌物を免疫測定法により測定することを特徴とするアトピー性皮慮炎検査方法。