WO1988000048A1

WO1988000048A1 - Drug for prophylaxis and treatment of hepatopathy

Info

Publication number: WO1988000048A1
Application number: PCT/JP1987/000460
Authority: WO
Inventors: Tetsuya Inagaki; Eijiro Tagashira; Masahiro Takaya; Yasuhiro Nishimura
Original assignee: Zeria Pharmaceutical Co., Ltd.; Hamari Chemicals, Ltd.
Priority date: 1986-07-03
Filing date: 1987-07-02
Publication date: 1988-01-14
Also published as: US4927817A; EP0313654B1; JPH0462299B2; EP0313654A1; JPS6314728A; EP0313654A4

Description

肝障害の予防、治療剤技術分野

本発明は、肝障害の新しい予防、治療剤に関するも

αμノ月

ので、特にアルコール性肝障害、ウィルス性肝炎や薬物、毒物、放射線などによって生じる肝障害の予防、治療に有用なものである。

背景技術

体内で最も大きい臓器である肝臓は、栄養物質の代謝と貯留、種々の物質の解毒作用などの璣能においてち最大の臓器である。さらに肝臓は全身循環と肺循環に次ぐ循環系として循環動態を正常に維持している。従って、肝臓を通過する毒物、薬物、アルコール、ゥィルスや栄養不良、放射線、胆汁の鬱滞などの原因により急性的にまたは慢性的に肝細胞が何らかの障害をうけると、全身に悪影響を及ぼす。

肝障害では臨床的、生化学的および組織学的に、特徴的な変化が観察される。

肝障害では、血液中におけるグルタミン酸—ピルビン酸卜ランスアミナ一ゼ（以下 G P Tと記す〉、グルタミン酸—才キザ口酢酸卜ランスアミナーゼ（以下 G Ο Τと記す〉、アルカリフォスファターゼ（以下 A L 一 Pと記す〉、ソルビ卜ールデヒドロゲナーゼ（以下

S D Hと記す）など肝鯖の酵素の増加や血清ビリルビ

ンの上昇が観られる。

これら血液中における肝臓の酵素活性、ビリルビン

値の測定は、肝障害の特徴や程度の判断に利用されて

おり、臨床検査においても一般的に用いられている方

法である。例え.ば血清 A L— Pの活性上昇は、肝外胆

管の物理的閉塞、肝硬変の初期 ¾現、あるいは薬物に

よる胆汁分泌の停止を示唆する。血清 G P丁、 G O T

および S D Hの活性上昇は、肝障害すべてに共通して

おり、肝細胞の損傷を示す（Me rk Manu a l , 13版， 8章

836 頁 1 977年）。

肝障害は肝細胞の壊死を伴い、壊死は組織学的に判

定でき、肝障害の程度をす優れた指標となる。

従って肝障害の程度は、血液中の肝藏酵素、血清ビ

リルビン値、肝細胞の壊死の状態によつて判断するこ

とができるので、肝障害の予防、治療剤の検索に当つ

ては、これらの指標を活用して行われているのが通常

である。実験的に肝障害を検討するために多くの肝炎

のモデルが開発されている。これらモデルのうち実際 V のウィルス性肝炎、薬物、毒物などによる肝炎に最も

似ているのは、 D—ガラク卜サミンや四塩化炭素など

の肝毒物による肝障害である。

四塩化炭素による肝障害は、肝贜において四塩化炭素がチ卜クローム P— 45ひで切断され毒性の強いフリ一ラジカル（ ♦ CC i 3 ) を生じ、このフリーラジカルが肝細胞膜蛋白質のチオール基と結合したり細胞膜の脂質過酸化反応を促進し肝細胞に障害を起こすと考えられている（Biochei Pharmacol. , 25巻， 2163頁 197δ年および Bioche . phar acoし， 21巻， 49頁 1972 年）。この結果、生化学的には肝臓における蛋白質合成の抑制、血液中への GPT、 GOTおよび SDHなど肝臓酵素の逸脱を起こす。また、組織学的には肝細胞の凝固壊死、水腫変性、脂肪化などを起こす。

四塩化炭素および D—ガラク卜サミンによるモデルは、慢性のアルコール摂取による肝障害に類似していると言われている。四塩化炭素によるモデルについては Amer. J. Path. , 79巻 ^79頁 1975年、 Virchowa Arch. B. Celに Path. , 26巻 331頁 1978年、および

Semirars in Liver Disease. , 1巻 143頁 1981年に記載されており、実際のウィルス、薬物、毒物などによる肝障害に最も似ているとされている。

肝障害には、急性肝炎、慢性肝炎、肝硬変、脂肪肝などがあり、原因も毒物、薬物、アルコール、ウィルスゃ栄養不良、放射線、胆汁の鬱滞など様々な様態がある。これらの肝障害に対して多くの肝障害の予防、治療薬が用いられてきたが、それらの薬物の多くは肝細胞が障害された場合、二次的に起こる代謝異常を予 A

防、治療する薬物であり、ウィルスなど特異的な原因によっておこる肝障害の治療効果は弱いという問題点 09る。

本発明は、多様な肝障害に対して有効な予防および治療剤を提供するものである。

発明の開示

本発明者らは、四塩化炭素による実験的肝炎のモデル動物を用いカルノシン亜鉛塩を肝障害が起きる前に投与しておくと、血液中における肝臓酵素の増加を効果的に予防することができ、肝障害を未然に防止するのに有効であること、さらにカルノシン亜鉛塩を肝障害が起った後に投与しても前期の予防効果と同様の有意の結果を得、力ノシン亜鉛塩は、肝障害の予防および治療に効果があることを見出した。

すなわち、本発明はカルノシン亜鉛塩を有効成分とする肝障害の予防、治療剤にかかるちのであり、カルノシン亜鉛塩が、肝障害を改善することは、血液中におげる G P丁、 G O Tの増加を有意に減少し、肝細胞の壊死の程度を減少することから示唆される。

本発明の化合物であるカルノシン亜铂塭は、公知の消化性瀆癢治療薬であり、その用途と製造法は特開昭 59- 33270号公報に開示されている。

すなわち、 L—カルノシン 7g を純水 1 に溶解し、これに純水 1 77a?に塩化亜鉛 83. 6g を溶解した水溶液を加えたのち、攛拌下、 4規定の水酸化ナ卜リゥム水溶液 325 を約 3ひ分間にて滴下すると反応は終了する。反応後、析出沈殿物を収し、洗液が中性になるまで十分に水洗する。 40°Cで 2日間乾燥すると L —力ルノシン亜鉛塩の無色粉末 5g が得られる。

本品の分析結果は次の通りである。

乾燥減量（ Ί 9 、 60°Cで 3時間減圧乾燥） 7.63¾ 亜鉛含有量（重量分析） 23.20¾

カルノシン含有量（重量分析〉 76.

融点 300°C以上

I . R , スペクトル（ ΚΒΓ, cm-¹ )

3280, 1620, 1480, 1385, 1260, 1120,

105ひ， 1000, 980

くラッ卜における実験的肝障害の予防 >

実験方法

検体としてカルノシン亜鉛塩 60^ / 、 20^ となるように 0.5 カルボキシメチルセルロースナ卜リウム（以下 CMC Ϊ2す〉液に懸濁し、用量は 300¾ノ kg、 100ffl ZKgとなるよう 0.5 i?Z1Q0gの割合で、 8 日間毎日経口投与した。対照群には 0.5¾CMC を同容量投与した。

四塩化炭素による肝障害モデル動物はカルノシン亜鉛塩または、 0.5¾CMCの最終投与 Ί 時間後に四塩化炭素を 10¾(V/V)才リーア油混液とし、 4 »?ZKg (四塩化炭素として 0.4¾?Ζ½〉の割合で経口投与し作成した, 四塩化炭素投与 24時間後にペン卜バルビタール腹腔内注射による麻酔下で預動脈から採血を行った。血液は

3000rpraで 15分間遠心し血清を分画し、（30丁および G P丁を測定した（Reは man Frankel 百瀕変法〉。

摘出した肝贜は常法に従いパラフィン切片標本を作成し、 H— E染色を施し病理耝耩学的観察を行った。

実験には、雄性ウィスター（W 'I s t a r〉系ラッ卜を用い、 1群 10匹として、四塩化炭素（ C C i * と記す》と 0.5 CHC のみを投与した群（CC ₄ +CHC), 四塩化炭素とカルノシン亜鉛塩 300^ZKgまたは 100 ^ZKgを投与した群（CC 4 +カルノシン亜鉛塩）、 0.5¾CMC のみを投与した群（0MC)の 3群について実験を行った。 ―

その結果は、次表のとおりである。

r

注〉 C A Zはカルノシ亜鉛塩を示す

KUは KARMEN単位。本実験結果は、カルノシン亜鉛塩が四塩化炭素による実験的肝障害を予防する効果を示している。

なお、急性毒性試験は体重 150〜200gのウィスター系雌雄ラッ卜を各 Ί 群 10匹として、カルノシン亜鉛塩を各 10 gZ Kgづっ経口投与し、 7日間観察したが、いずれも死亡例は認められず、本化合物の毒性は極めて弱いものであった。

発明を実施するための最良の形態カルノシン亜鉛塩の投与方法は、経口投与が適当である。剤型は、懸濁剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、粉剤のいずれの形でもよい。カルノシン亜 §a塩の投与量は、肝機能障害の予防または、肝機能障害の治療対象において肝藏障害の程度によりことなるが、有効一日量は 0.3^〜30^ZKg、好ましくは 1,5^〜15^ZKg でめる o

産業上の利用可能 ¾

以上述べたように、本発明のカルノシン亜鉛塩はその投与群において、用量に応じ血液中における G P T GOTの増加を抑制し、 30Q/i¾PZKg投与群では Ί %の危険率で有意に減少させている。

また、病理組織学的観察においても本発明のカルノシン亜鉛塩の投与群では IF細胞の壊死、脂肪化の抑制が観察された。

更に、本発明のカルノシン亜鉛塩の急性毒性は極めて弱いことが確認された。

従って、本発明のカルノシン亜鉛塩剤が四塩化炭素肝障害モデル動物に有効であることは明らかであり、この四塩化炭素肝障害モデル動物は、実際のウィルス薬物、毒物などによる肝障害のモデルとして評価されていることから、経口投与による肝障害の予防、治療剤として極めて有用である。

Claims

求の

1) カルノシン亜鉛塩を有効成分とする肝障害の予防治療剤。

2) 経口投与による請求の範囲第 1)項記載の肝障害の予防、治療剤。

3) ウィルス性肝炎に有効な請求の範囲第 1)項記載の肝障害の予防、治療剤。

4) 薬物、毒物、放射線により生ずる肝障害に有効な請求の範囲第 1)項記載の肝障害の予防、治療剤。

5) アルコール性肝障害に有効な請求の範囲第 1)項記載の肝障害の予防、治療剤。