UA72732C2 - Preparation of cells for production of biological objects. - Google Patents
Preparation of cells for production of biological objects. Download PDFInfo
- Publication number
- UA72732C2 UA72732C2 UA2000074455A UA2000074455A UA72732C2 UA 72732 C2 UA72732 C2 UA 72732C2 UA 2000074455 A UA2000074455 A UA 2000074455A UA 2000074455 A UA2000074455 A UA 2000074455A UA 72732 C2 UA72732 C2 UA 72732C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- cells
- production
- production batch
- batch
- bioreactor
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 65
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 118
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 32
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims abstract description 10
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 6
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 15
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 claims description 9
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 9
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims description 7
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 abstract 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 18
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 7
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 7
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 6
- DJXHAOJEKJPRBN-JDZGAICCSA-N 2-[(4s,5r)-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-6,6-dimethyl-5,7-dihydro-1h-indol-4-one Chemical compound C=1C=2C(=O)CC(C)(C)CC=2NC=1C1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 DJXHAOJEKJPRBN-JDZGAICCSA-N 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 4
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 4
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 2
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000012510 hollow fiber Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 description 1
- 241001316062 Labeo victorianus Species 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010923 batch production Methods 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000010924 continuous production Methods 0.000 description 1
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 1
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 229940124642 endogenous agent Drugs 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 238000012804 iterative process Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000012261 overproduction Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M3/00—Tissue, human, animal or plant cell, or virus culture apparatus
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Virology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Description
Опис винаходу
Винахід стосується способу приготування клітин для використання у виробництві біологічних об'єктів.
Для виробництва біологічних об'єктів, наприклад, клітинних ліній, тобто колоній клітин, що походять від одного спільного предка, необхідно приготування клітин у великих обсягах з використанням масштабування у біореакторах.
У патенті СІЛА Мо 5017490 описана така методика масштабування, яка зокрема має перевагу в тому, що ймовірність забруднення при перенесенні мала. Втім, цей спосіб непридатний для мембранозалежних клітин 70 (отже, для клітин, що ростуть лише, якщо прикріплені до підложки), або для клітин, закладених до підложки (наприклад, у пористі носії).
У патенті США Мо 4644912 описано спосіб приготування мембранозалежних клітин для виробництва біологічних об'єктів (наприклад, вірусів), згідно з яким спочатку роблять посів клітини, а потім послідовними проходами нарощують обсяги біореакторів на 1 л, 5 л, 25 л, 150 л і, накінець, завершують процес у біореакторі 72 на 1000 л або у кількох по 150 л. У проміжках цих проходів клітини відокремлюють від носіїв розбавленим розчином протеази. На завершальному проході здійснюють інокуляцію вірусом.
Приймаючи середній клітинний цикл у 20-24 години, проміжки між проходами становлять біля 3-5 діб. Отже, аби виростити досить великі культури з РБКВ (робочого банку клітин виготовлювача), процедура масштабування потребує до кількох тижнів залежно від обсягу кінцевого біореактору.
У відомих способах приготування клітин кожна кінцева продукційна партія має походити з РБКВ. Для одержання біологічних об'єктів у великих кількостях необхідно задіяти кілька паралельних ліній вирощування культур аж до найбільших обсягів апаратів. Отже, такий спосіб займає надто багато часу й потребує дуже великої кількості біореакторів як для приготування клітин, так і для напрацювання біологічних об'єктів.
Завдання цього винаходу полягає у прискореному приготуванні клітин для одержання біологічних об'єктів. с
Згідно з цим винахід стосується способу приготування клітин ссавців для застосування у виробництві Ге) вірусів шляхом вирощування клітинних культур до потрібного обсягу передпродукційної партії, де у повторюваному періодичному процесі: а) частину клітин передпродукційної партії використовують для виробництва принаймні одної продукційної партії, с б) решту клітин передпродукційної партії використовують як затравку для приготування принаймні одної со наступної передпродукційної партії.
Зокрема, винахід стосується способу приготування клітин ссавців для застосування у виробництві вірусів в шляхом вирощування клітинних культур до потрібного обсягу передпродукційної партії, де у повторюваному Га періодичному процесі: 3о а) частину клітин передпродукційної партії переносять для використання у виробництві принаймні одної в продукційної партії, б) решту клітин перепродукційної партії переносять для використання в ролі затравки у приготуванні принаймні одної наступної передпродукційної партії. «
У найприйнятнішому варіанті здійснення цього винаходу першу передпродукційну партію готують з матеріалу З 50 робочої затравки у принаймні один прохід. с В іншому найприйнятнішому варіанті здійснення винаходу клітини, що готуються, є мембранозалежними. В з» останньому випадку такі клітини необхідно вирощувати на підложці. Отже, рекомендується у повторюваному процесі кожного разу, коли частину партії використовують для приготування наступної партії, додавати свіжу підложку. У найприйнятнішому варіанті використання кожного разу перед додаванням підложки принаймні частину клітин спочатку відокремлюють від попередньої підложки. і У цьому контексті "продукційна партія" означає культуру клітин, що використовується для виробництва ка біологічних об'єктів. "Передпродукційна партія" означає культуру клітин, яка використовується у способі за винаходом для і одержання принаймні одної продукційної партії (як визначено вище) та одної наступної передпродукційної партії. со 20 "Біологічний об'єкт" тут означає будь-яку речовину або організм, що їх можна одержати з клітинної культури. Як приклади біологічних об'єктів можна навести віруси або білки, зокрема ферменти. із "Робоча затравка" означає деяку кількість певного виду клітин відомого походження, що їх витримують як затравку, з якої вирощують усі культури того самого виду клітин.
Термін "мембранозалежні клітини" означає клітини, які для їх належного росту та/або відтворення мають 29 бути прикріплені до підложки.
ГФ) "Підложка" - будь-яка речовина, яку використовують для прикріплення клітин. "Прохід" - послідовність операцій у розмноженні та виробництві клітин, що включає принаймні закладення о достатньої кількості клітин та достатньої кількості культурного середовища до продукційного апарату, інкубацію апарата за умов, придатних для росту та розмноження клітин протягом часу, достатнього для 60 ефективного росту та розмноження клітин. Крім того, прохід може включати відокремлення клітин від культурного середовища та/або від підложки після часу, достатнього для ефективного росту та розмноження клітин.
Спеціалістам зрозуміло, що спосіб за цим винаходом суттєво відрізняється від відомих способів, за якими клітини одержують у безперервному процесі, а не у періодичному, як за винаходом. Згідно з Європейською бо заявкою 0417531 та заявкою РСТ 89/08701, безперервні культурні системи можуть використовуватися також для вироблення вірусів. Клітини спочатку вирощують у першому біореакторі, а коли вони досягнуть певної густини, безперервно переносять із зазначеного першого біореактору до другого біореактору. У другому біореакторі на клітинах вирощують віруси, що їх безперервно відбирають з другого біореактору.
Спосіб за винаходом грунтується на використанні материнського біореактору, з якого живлять клітинами продукційний біореактор (біореактори). Якщо клітини мембранозалежні, то після кожного проходу їх необхідно відокремлювати від підложок.
Для цього створено процедуру трипсінізації великих біореакторів.
Продукційні клітини визначають аж до необхідної кількості проходів для так званого РЕК (розширеного банку 7/0 Клітин). Запропонований спосіб забезпечує високу продуктивність завдяки значному скороченню шляху масштабування від РБК до продукційних клітин та кількості біореакторів, бо паралельні виробничі лінії тут не потрібні.
Різні варіанти здійснення винаходу зображені на Фіг.1.
У найприйнятнішому варіанті здійснення винаходу клітини розмножують з однієї ампули РБКВ аж до рівня /5 першої передпродукційної партії за один чи кілька проходів. Робочий обсяг біореактору, що використовується для такої передпродукційної партії може становити від кількох літрів до кількох сотень літрів. Потім частину, наприклад, 10-2095 клітин, розмножених таким чином (наприклад, прохід Х) використовують для репопуляції наступної передпродукційної партії (прохід Х-1), тимчасом як решту клітин переносять (прохід Х або Ха1) до більшого біореактору з метою почати безпосереднє вироблення або спочатку заселити, а потім розпочинати вироблення.
У класичному серійному виробництві число подвоєння клітин, що походять від РЕБКВ, на момент збору відомо у певному ступені заздалегідь. Максимально припустиме число генерацій закладають до продукційної системи з самого початку.
У способі за винаходом максимальна кількість проходів клітин може визначатися РБК. Отже, кількість сч продукційних проходів (кількість проходів, що передують виробленню біологічного об'єкту) у межах, визначених
РЕК, не відіграє ролі. Внаслідок цього треба дотримуватися лише цієї максимальної кількості проходів. Завдяки і) цьому кожна партія кінцевого біологічного продукту одержується шляхом прямого масштабування.
Аби впевнитися, що характеристики клітин на стадії РБК подібні до ВБК (вихідного банку клітин), треба провести відповідну перевірку щодо характеристик зростання, приблукалих, сторонніх та ендогенних агентів на су зо різних стадіях, каріологічний аналіз ізоензимів та ін. Після повної характеристики такого РЕК можна дозволити вироблення продукту з клітин за будь-яку кількість проходів між ВБК та РБК, бо можна бути певним, що о параметри клітин не змінилися. Завдяки цьому випробування РБКВ можна обмежити лише перевіркою М стерильності. У цьому полягає особлива перевага способу за винаходом.
При максимальній завданій кількості проходів клітини можна використовувати на будь-якій проміжній стадії. с
Аби звести до мінімуму час, потрібний для розмноження клітин від РБКВ до біореактору, доцільно дозволити ї- масовий запуск клітин. Цього можна досягти одним з кількох способів:
Клітини можна витримувати на певному проході довший час за температури середовища (17-322С), а потім запустити логарифмічне зростання за рахунок підвищення температури та зміни культурного середовища; або
Клітини можна заморозити у масі до температури нижче за -802С та відтаяти, після чого перенести їх до « біореактору певного обсягу, що значно скорочує необхідність масштабування. - с Спосіб за винаходом придатний для культур тваринних клітин, зокрема для мембранозалежних клітин. Це ц можуть бути хом'ячі (СНО, ВНК-1), мавпячі (Мего), бичачі (МОВК), собачі (МОСК), людські (СаСо, А431) або "» курячі (СЕР) клітини.
Біореактором згідно з винаходом може бути єдиний апарат або кілька апаратів, наприклад, ферментери з мішалкою, ферментери з нерухомим шаром, ферментери з подачею повітря або реактори з системою -І порожнистих волокон.
Клітини зазначених видів можна, а деякі навіть треба культивувати прикріпленими до твердої підложки типу о мікроносіїв або макроносіїв у суспензії, наприклад, у нерухомому шарі, киплячому шарі або суспензії, або у -І вигляді порожнистих волокон. Клітини можна також вміщувати до реактору (наприклад, пористі носії).
У способі за винаходом, зокрема з використанням твердої підложки, клітини треба відокремлювати від такої
Мамі твердої підложки. Це можна здійснювати будь-яким відомим чином. Доцільно використовувати для цього розчин
ІЗ протеолітичного ензиму. Перед відокремленням за допомогою ензиму можливі підготовчі операції, наприклад, обробка ПБС та/або ЕДТО з метою посилення протеолітичної активності тал"або зменшення споживання протеолітичного ензиму.
ПРИКЛАД 1
Відчеплення та відокремлювання клітин від носіїв перед переносом до наступного біореактору о Мембранозалежні клітини лінії МОСК (собачої нирки Мадін Дарбі) культивують при З 7 С на мікроносіях іме) Цитодекс-3 фірми Фармація (Упсала, Швеція) (5г носіїв/л) у 4-літровому біореакторі з мішалкою ("материнському біореакторі") на середовищі ЕпіСьорф фірми Лайф текнолоджіз (Пейслі, Шотландія). Зростання продовжують до 60 максимуму 5 х 102 клітин/мл культури.
Клітини відчіпляють від носіїв трипсінізацією у розчині трипсін-ЄЕДТО фірми Лайф текнолоджіз (Пейслі,
Шотландія).
Після зсідання носіїв 8095 відчеплених клітин переносять до З інших біореакторів такої самої місткості. У ці "продукційні" біореактори носії (клітинні підложки) вже закладені заздалегідь. Клітинам дають репопулювати 65 носії, після чого використовують для виробництва у цих продукційних біореакторах.
Решті клітин у материнському біореакторі дають репопулювати носії Цитодекс-3, що залишилися, та культивують до завданої густини клітин.
ПРИКЛАД 2
Відчеплення клітин без відокремлення від носіїв перед перенесенням до наступного біореактору
Клітини культивують, як описано у прикладі 1, але після трипсінізації 8090 відчеплених клітин разом з носіями переносять до З продукційних біореакторів. До всіх біореакторів додають нові придатні носії.
ПРИКЛАД З
Відчеплення клітин без відокремлення від носіїв після перенесення до наступного біореактору
Клітини культивують, як у прикладі 1, втім, 8095 ще прикріплених клітин передають до біореактору такої 7/о бамої місткості, який після цього використовується безпосередньо як продукційний.
Решту клітин на мікроносіях у материнському ферментері відчіпляють шляхом трипсінізації, потім додають нові носії, а клітинам дають репопулювати підложки.
ПРИКЛАД 4 Запуск із замороженої клітинної маси
У цьому експерименті частину культури використовують для поповнення материнського ферментеру та /5 деяких дочірніх ферментерів, а частину культури використовують для заморожування клітинної маси.
Заморожену клітинну масу (разом 14,4 Х 109 клітин) інокулюють у вихідній культурі у З-літровому материнському ферментері, який містить 5 г/л Цитодексу та середовище ЕпіСьорф, після чого провадять інкубацію при 372С. Решту кріоконсервів видаляють при зміні середовища першого дня.
На другий день здійснюють трипсінізацію, 5095 клітин заморожують у масі, а решту клітин інокулюють до мікроносіїв у наступному ферментері.
З таблиці 1 можна побачити, що другого та третього дня клітини продовжують зростання у нормальному темпі.
Четвертого дня вміст материнського ферментеру відчіплюють трипсіном та прикріплюють до нових мікроносіїв (10 г/л) у двох інших ферментерах услід материнському. Ге
На п'ятий день виявляється, що ефективність культивування становить біля 85905. о 7 100оамехююоюви 00 Катмех бором Каїн х рою сч а рнемаєданхо/11111111111 й нини нн пн по ПО о нн линининннншшшшшш т- в во с зв ї-
ПРИКЛАД 5
Перенесення з малого материнського ферментеру до великого продукціиного ферментеру «
Клітини масштабують до великої партії у ферментерах місткістю 65 літрів та 550 літрів (робочий обсяг 8 с відповідно 50 та 250 літрів) за густини мікроносіїв Цитодекс Б5г/л. Як видно з таблиці 2, 9095 загальної й кількості клітин переносять до великого ферментеру з 50-літрового ферментеру, де вирощено культуру густиною и"? 800.000 клітин/мл, з них 6995 життєздатні.
У 50-літровому материнському ферментері до 6995 повторно вирощуваних клітин теле виявилися життєздатними. -І Спосіб здійснювався наступним чином:
Нульового дня носіям дали осісти у 50-літровій культурі, потім надосадову рідину (культурне середовище) о видалили й замінили на ПБС. Вміст ферментера перемішували 5-15 хвилин. Після відстоювання носіїв -І надосадову рідину видалили. За потреби цю операцію можна повторювати.
Далі цю стадію повторили з ПБС/ЕДТО (0,4г ЕДТО/л ПБС). Культуру знову перемішували 5-15 хвилин, дали о носіям осісти, видалили надосадову рідину й повторювали операцію з ПБС/ЕДТО, аж доки клітини не
Кз округлилися й зробилися готові до відчеплеїі-шя трипсіном.
Тоді до ПБС/ЕДТО додали трипсін (0,02595 кінцевої концентрації) та інкубували 5-15 хвилин. Після цього переносили або надосадову рідину з вмістом клітин (після відстоювати! "оголених" носіїв), як у прикладі 9, або суміш клітин з носіями (8095 загального обсягу суміші).
Після перенесення клітин до 550-літрового ферментеру решті клітин (тобто 1095 кількості життєздатних іФ) клітин) дали репопулювати носії, які ще залишилися у ферментері після поповнення 50-літрового ферментеру ко культурним середовищем.
До 7095 клітин виявилися життєздатними. 60 хатнхююоюми | Клтмех рою (0. (В (вазом клітин 400 х 108) 11 (2075 х 106 життєздатних клітин) дв в 2 2,9 вм вв во
ПРИКЛАД 6
Подібно до прикладу 5, але 8095 культури прив'язаних до носіїв клітин передали з материнського біореактору до продукційного біореактору. Вироблення почалося з додаванням вірусу. 2090 клітин та носії, що залишилися у материнському біореакторі, піддали трипсінізації й розщепленню, а 70 після додавання нової підложки до материнського біореактору дали репопулювати материнський біореактор, поки у фізично відокремленому продукційному біореакторі йшло вироблення продукту.
ПРИКЛАД 7
Запуск повномасштабної культури із замороженої клітинної маси
Заморожену клітинну масу відтаяли та інокулювали у ферментері робочим обсягом 10 л (густина носія
Цитодекс 4г/л; культурне середовище ЕпіСьорф) за густини інокуляції 1 х 10 бклітин/мл. Після причеплення культурне середовище змінили з метою видалення залишкових кріозахисників.
Після дня 1 кількість життєздатних клітин, причеплених до носіїв, становила 0,45 х 10 бклітин/мл; з цього моменту почалося зростання. За густини 2,8 х 10Уклітин/мл клітини відчепили шляхом трипсінізації й перенесли 8095 до ферментеру робочим обсягом 50 л (вміст носіїв 5 г/л).
Як можна підрахувати з таблиці 3, першого дня кількість життєздатних клітин після розморожування клітинної маси становила біля 45965.
Із загальної кількості перенесених клітин життєздатними після відчеплення трипсіном виявилися 71,4905.
Таблиця З с
День Густина клин обу о
МО-літровому ферментері (5О-літровому ферментері юю
У нингУ ЗИ ПОП з7730001 сч зо 51000000 : (зе) 6 абеюмовюто 11 в 0,6 (разом 60 х 108) 0,28 (140х108) ї- 11111177 омосоюхлов) сч
Зо Переклад надписів на кресленнях Фіг. 1 - 1 атрше - ампула, 2 зсаіе ир - масштабування,
З рик - маса, « 4 дігесі - безпосереднє перенесення, - 5 тоїПпег Тегтепіег - материнський ферментер, с 6 10-20965 (Штгпв оп їзенй-10-2095 повертаються до циклу, "з 7 дацдніегз Тегпгпепіегв асіопв апа саїгтієге - дочірні ферментери: дії та носії, п . . 8 сеїЇ ргорадайоп - розмноження клітин, 9 дігесі ргодисіоп - безпосереднє вироблення, 10 сеїЇ ргорадайоп ада пем/ сагтіете - розмноження клітин з додаванням нових носіїв. -і іме) -і (95)
Ко) іме) 60 б5
І ЕівувЕ 1
Орацопіег Тегтепівго асцоп: впо сагтісго 880-909, Я се|Ї ргораданоп тої пег Геппепівг пило оа че бр атрчіе 0 всех -- о, -80-90 с р 80-90 . 190-205 дігесі ргодисноп рок те оп нина и с щі 6) сей) ргорадайоп ада пеж сатівге Га
Зо со
Claims (5)
1. Спосіб приготування клітин ссавців для застосування у виробництві вірусів шляхом розмноження клітин до потрібного об'єму передпродукційної партії, у якому у повторюваному періодичному процесі: в. а) частину клітин передпродукційної партії використовують для виробництва принаймні одної продукційної партії, б) решту клітин передпродукційної партії використовують як затравку для приготування принаймні одної « наступної передпродукційної партії.
2. Спосіб за п.1, у якому у повторюваному періодичному процесі: т с а) частину клітин передпродукційної партії переносять для використання у виробництві принаймні одної "» продукційної партії, " б) решту клітин передпродукційної партії переносять для використання у ролі затравки для приготування принаймні одної наступної передпродукційної партії.
3. Спосіб за пп. 1 або 2, який відрізняється тим, що першу передпродукційну партію готують з робочої маси - за принаймні один прохід. г)
4. Спосіб за пп.1-3, який відрізняється тим, що клітини є мембранозалежними.
5. Спосіб за п.2, який відрізняється тим, що клітини є мембранозалежними, їх вирощують на підкладці й - перед кожною стадією перенесення відокремлюють клітини від підкладок. о) 70 Офіційний бюлетень "Промислоава власність". Книга 1 "Винаходи, корисні моделі, топографії інтегральних кі» мікросхем", 2005, М 4, 15.04.2005. Державний департамент інтелектуальної власності Міністерства освіти і науки України. іме) 60 б5
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP97204110 | 1997-12-24 | ||
| PCT/EP1998/008522 WO1999033955A1 (en) | 1997-12-24 | 1998-12-17 | Preparation of cells for production of biologicals |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA72732C2 true UA72732C2 (en) | 2005-04-15 |
Family
ID=8229133
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA2000074455A UA72732C2 (en) | 1997-12-24 | 1998-12-17 | Preparation of cells for production of biological objects. |
Country Status (26)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20070148753A1 (uk) |
| EP (2) | EP1801201B1 (uk) |
| JP (1) | JP4478328B2 (uk) |
| KR (1) | KR100683429B1 (uk) |
| CN (1) | CN1185339C (uk) |
| AT (2) | ATE507284T1 (uk) |
| AU (1) | AU758209B2 (uk) |
| BR (1) | BR9814490A (uk) |
| CA (1) | CA2316739C (uk) |
| CZ (1) | CZ299719B6 (uk) |
| DE (2) | DE69837287T3 (uk) |
| DK (2) | DK1801201T3 (uk) |
| ES (2) | ES2281148T5 (uk) |
| HK (1) | HK1030628A1 (uk) |
| HU (1) | HUP0100538A3 (uk) |
| ID (1) | ID26784A (uk) |
| IL (1) | IL136736A (uk) |
| NO (1) | NO329385B1 (uk) |
| NZ (1) | NZ505371A (uk) |
| PL (1) | PL196042B1 (uk) |
| PT (2) | PT1060241E (uk) |
| RU (1) | RU2230784C2 (uk) |
| SK (1) | SK285971B6 (uk) |
| TR (1) | TR200001960T2 (uk) |
| UA (1) | UA72732C2 (uk) |
| WO (1) | WO1999033955A1 (uk) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2011077035A1 (fr) | 2009-12-23 | 2011-06-30 | Sanofi Pasteur | Procede de culture de cellules adherentes |
| WO2019139891A1 (en) | 2018-01-09 | 2019-07-18 | Synthetic Biologics, Inc. | Alkaline phosphatase agents for treatment of neurodevelopmental disorders |
| EP3773686B1 (en) | 2018-03-20 | 2023-06-07 | Theriva Biologics, Inc. | Alkaline phosphatase agents for treatment of radiation disorders |
| EP3768302A4 (en) | 2018-03-20 | 2021-12-15 | Synthetic Biologics, Inc. | INTESTINAL ALKALINE PHOSPHATASE FORMULATIONS |
| US20190367858A1 (en) * | 2018-06-01 | 2019-12-05 | Lonza Ltd. | Midscale Model For Organic Growth and Phasing |
| US20220259554A1 (en) * | 2019-07-16 | 2022-08-18 | Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. | Cell culture method and application thereof based on high-density and continuous inoculation |
| EP4339274A1 (en) | 2022-09-13 | 2024-03-20 | Sartorius Stedim Biotech GmbH | Method for operating a bioprocess installation for production of a bioproduct |
Family Cites Families (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60151458A (ja) | 1984-01-20 | 1985-08-09 | Nippon Piston Ring Co Ltd | カムシヤフト |
| US4664912A (en) * | 1984-10-01 | 1987-05-12 | Wiktor Tadeusz J | Process for the large scale production of rabies vaccine |
| DE3833925A1 (de) * | 1988-03-11 | 1989-09-21 | Inst Angewandte Biotechnologie | Verfahren und herstellung von virus und viralem antigen und vorrichtung hierzu |
| US5017490A (en) | 1989-03-10 | 1991-05-21 | Baxter International Inc. | Method for in vitro reproduction and growth of cells in culture medium |
| DE3930140A1 (de) * | 1989-09-09 | 1991-03-21 | Bayer Ag | Verfahren zur herstellung von biologischen materialien in zellkulturen und vorrichtungen |
| WO1992010564A1 (en) * | 1990-12-13 | 1992-06-25 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, U.S. Department Of Commerce | Sustained and continuous production of high titers of recombinant viral vectors and transduced target cells for use in gene therapy |
| DE19612966B4 (de) | 1996-04-01 | 2009-12-10 | Novartis Vaccines And Diagnostics Gmbh & Co. Kg | MDCK-Zellen und Verfahren zur Vermehrung von Influenzaviren |
| US8188315B2 (en) * | 2004-04-02 | 2012-05-29 | Samsung Mobile Display Co., Ltd. | Organic light emitting device and flat panel display device comprising the same |
| KR100573137B1 (ko) * | 2004-04-02 | 2006-04-24 | 삼성에스디아이 주식회사 | 플루오렌계 화합물 및 이를 이용한 유기 전계 발광 소자 |
| KR100787425B1 (ko) * | 2004-11-29 | 2007-12-26 | 삼성에스디아이 주식회사 | 페닐카바졸계 화합물 및 이를 이용한 유기 전계 발광 소자 |
| KR100669716B1 (ko) * | 2004-07-14 | 2007-01-16 | 삼성에스디아이 주식회사 | 페닐카르바졸 화합물 및 이를 이용한 유기 전계 발광 소자 |
| JP4184332B2 (ja) * | 2004-11-22 | 2008-11-19 | 本田技研工業株式会社 | 可変気筒式内燃機関の制御装置 |
-
1998
- 1998-12-17 IL IL13673698A patent/IL136736A/en not_active IP Right Cessation
- 1998-12-17 PT PT98966693T patent/PT1060241E/pt unknown
- 1998-12-17 DE DE69837287T patent/DE69837287T3/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-12-17 HU HU0100538A patent/HUP0100538A3/hu not_active Application Discontinuation
- 1998-12-17 AT AT07103139T patent/ATE507284T1/de active
- 1998-12-17 UA UA2000074455A patent/UA72732C2/uk unknown
- 1998-12-17 CZ CZ20002343A patent/CZ299719B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1998-12-17 ES ES98966693T patent/ES2281148T5/es not_active Expired - Lifetime
- 1998-12-17 CA CA2316739A patent/CA2316739C/en not_active Expired - Fee Related
- 1998-12-17 KR KR1020007007068A patent/KR100683429B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1998-12-17 SK SK965-2000A patent/SK285971B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1998-12-17 DK DK07103139.7T patent/DK1801201T3/da active
- 1998-12-17 TR TR2000/01960T patent/TR200001960T2/xx unknown
- 1998-12-17 ID IDW20001431A patent/ID26784A/id unknown
- 1998-12-17 PL PL98341401A patent/PL196042B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1998-12-17 PT PT07103139T patent/PT1801201E/pt unknown
- 1998-12-17 AU AU24179/99A patent/AU758209B2/en not_active Ceased
- 1998-12-17 AT AT98966693T patent/ATE356197T1/de active
- 1998-12-17 EP EP07103139A patent/EP1801201B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-12-17 WO PCT/EP1998/008522 patent/WO1999033955A1/en active IP Right Grant
- 1998-12-17 RU RU2000119783/13A patent/RU2230784C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1998-12-17 BR BR9814490-1A patent/BR9814490A/pt not_active IP Right Cessation
- 1998-12-17 JP JP2000526613A patent/JP4478328B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1998-12-17 DE DE69842245T patent/DE69842245D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-12-17 ES ES07103139T patent/ES2365631T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1998-12-17 DK DK98966693.8T patent/DK1060241T4/da active
- 1998-12-17 NZ NZ505371A patent/NZ505371A/en not_active IP Right Cessation
- 1998-12-17 CN CNB988126354A patent/CN1185339C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1998-12-17 EP EP98966693A patent/EP1060241B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2000
- 2000-06-21 NO NO20003215A patent/NO329385B1/no not_active IP Right Cessation
-
2001
- 2001-03-06 HK HK01101591A patent/HK1030628A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2007
- 2007-01-18 US US11/654,556 patent/US20070148753A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Schimmer | [52] Adrenocortical Y1 cells | |
| US11629338B2 (en) | Method for acclimating and suspending Vero and second order production process for virus | |
| Wang et al. | Bead-to-bead transfer of Vero cells in microcarrier culture | |
| US20070148753A1 (en) | Preparation of cells for production of biologicals | |
| Rahat et al. | Cultivation of bacteria-free Hydra viridis: missing budding factor in nonsymbiotic hydra | |
| CN102782121A (zh) | 用于培养贴壁细胞的方法 | |
| Birch et al. | Selecting and designing cell lines for improved physiological characteristics | |
| Bhatia et al. | Introduction to animal tissue culture science | |
| Lee et al. | Growth limiting factors influencing high density culture of insect cells in Grace's medium | |
| CN101886059A (zh) | 用于胚胎体外生产的培养液以及牛胚胎体外生产的方法 | |
| Weichselbaum et al. | A technique for developing established cell lines from human osteosarcomas | |
| SU1470765A1 (ru) | Способ получени субкультуры клеток человека и животных | |
| GB942554A (en) | Process for the production of pituitary hormones and the products thereof | |
| Zheng | Cell Types for Cultured Meat Production: Current Challenges and Recent Advances | |
| KR19990047907A (ko) | 노보바이오신을 첨가한 배지를 사용하여 재조합 단백질의 생산량을 증가시키는 배양방법 | |
| CN102776149A (zh) | 昆虫细胞系的建立方法 | |
| Schröder et al. | Differentiation of bone marrow cells immobilized on microcarriers in a fluidized bed reactor | |
| Shirai et al. | Change in monoclonal antibody productivity in immobilized hybridoma cells at low dissolved oxygen concentrations | |
| Bansode | Culture of Animal Cell | |
| Ringpfeil | Acta MoMMhiia | |
| GIRARD et al. | FM WURM EPFL, Center of Biotechnology, LBTC, 1015 Lausanne, Switzerland | |
| MXPA00006339A (en) | Preparation of cells for production of biologicals |