UA71554C2 - Agonists of apolipoprotein a-i and their use for treatment of disorders associated with dyslipidemia - Google Patents

Description

Опис винаходу 1. Вступ 2 Даний винахід стосується композицій агоністів аполіпопротеїну А-ІЇ (АроА-Ї) для лікування захворювань, пов'язаних із дисліпопротеїнемією, включаючи гіперхолестеринемію, серцево-судинні захворювання, атеросклероз, рестеноз і інші захворювання, такі як септичний шок. 2. Передумови для винаходу

Холестерин, що циркулює в організмі, переноситься плазматичними ліпопротеїнами - комплексними 70 частками, що складаються з білку і ліпіду, що забезпечують транспорт ліпідів у крові. Низькомолекулярні ліпопротеїни (01) і високомолекулярні ліпопротеїни (НОЇ) є основними переносниками холестерину.

Вважається, що І ОЇ відповідають за доставку холестерину з печінки (де він синтезується або з'являється з харчових джерел) до "позапечінкові" тканин тіла. Термін "оборотний транспорт холестерину" характеризує транспорт холестерину з "позапечінкових" тканин назад в печінку, де він катаболізується і елімінується. 72 Вважається, що частки плазматичних НОЇ. грають визначальну роль у процесі оборотного транспорту, діючи по типу "прибиральника" тканинного холестерину.

Доказів зв'язку між підвищенням рівня сироваткового холестерину з ішемічною хворобою серця безліч.

Наприклад, атеросклероз є повільно прогресуючим захворюванням, що характеризується накопиченням холестерину в стінках артерії. Зіставлення наявних доказів підтверджує концепцію, відповідно до якої ліпіди, що відкладаються в атеросклеротичних бляшках, є первинними продуктами плазматичних 01; це пояснює популярне позначення ОЇ як "поганий холестерин". З іншого боку, рівень сироваткових НОЇ зворотно пропорційно корелює із ішемічною хворобою серця - дійсно, високий рівень сироваткових НОЇ. розглядається як її негативний фактор ризику. Передбачається, що високий рівень плазматичного НОЇ є не тільки чинником захисту від ішемічної хвороби серця, але і ще може обумовлювати розсмоктування атеросклеротичних бляшок с 29 (наприклад, див. Вадітоп еї аїЇ., 1992, Сігсцшіайоп, 86, зиррі. І, 86-94). Таким чином, традиційно НОЇ. Ге) називають "добрим холестерином". 2.1. Транспортування холестерину

Система транспортування жирів може бути підрозділена на дві підсистеми (механізму): екзогенний механізм, призначений для холестерину і тригліцеридів, що всмоктуються через стінки кишечнику, і ендогенний механізм, М призначений для холестерину і тригліцеридів, що потрапляють у кров'яне русло з печінки та інших ю "позапечінкових" тканин.

При екзогенному механізмі харчові жири упаковуються в ліпопротеїнові частки, які називаються о хіломікронами, що потрапляють у кров'яне русло і переносять тригліцериди, що містяться в них, у жирову «-- тканину (для накопичення) і до м'язів (для окислювання з виділенням енергії). Залишки хіломікронів, що містять ефіри холестерину, віддаляються з крові за рахунок | активності специфічних рецепторів, що в знаходяться на поверхні гепатоцитів. Такий холестерин потім стає доступним знову для клітинного метаболізму або для повторного переносу до "позапечінкових" тканин у вигляді плазматичних ліпопротеїнів.

При ендогенному механізмі печінка секретує значну частку екстранизькомолекулярного ліпопротеїна (МІ І) у « кров'яне русло. Основу часток МІ ОЇ складають в основному тригліцериди, синтезовані в печінці при наявності З 70 невеликої кількості ефірів холестерину (або синтезованих у печінці, або поновлених із хіломікронів). Двома с переважними білками, що знаходяться на поверхні часток МІ ОЇ, є апопротеїн В-100 і апопротеїн Е. Коли МІ 0.

Із» досягає капілярів жирової тканини або м'язів, тригліцериди що містяться в ньому, екстрагуються з утворенням нового типу часток, які характеризуються зменшеним розміром і збагачені ефірами холестерину, але які зберігають обидва "своїх" апопротеїна, - ці частки називають протеїнами із середньою щільністю (ІСІ).

У людини приблизно половина часток ІІ. швидко виводиться з циркулюючої крові (протягом 2-6 годин після і їх утворення), оскільки вони тісно зв'язуються з клітинами печінки, які екстрагують холестерин, з утворенням - нових МІ 0. і жовчних кислот. Частки ІС, що не відбираються печінкою, залишаються в кров'яному руслі довше.

У цей час апопротеїн Е відщеплюється від часток, що циркулюють, перетворюючи їх у тип часток І ОЇ. до складу і-й яких входить єдиний білок - апопротеїн В-100. сл 20 У першу чергу, печінка відбирає і розщеплює більшу частину холестерину в жовчні кислоти, які є кінцевими продуктами в метаболізмі холестерину. Поглинання часток, що містять холестерин, опосередковується

Т» ЇОІ -рецепторами, які присутні на поверхні гепатоцитів у великій кількості. Рецептор /0ОЇ зв'язує обидва апопротеїна - Е та В-100, - і відповідає за зв'язування і вилучення як ІОЇ, так і ГО із кровообігу. Проте, афінність апопротеїна Е по відношенню до Іі -рецептора вища у порівнянні з афінністю апопротеїна В-100. 22 Отже, частки 01. характеризуються більшою тривалістю життя в циркулюючій крові у порівнянні з частками І. -

ГФ) ГО. знаходяться в ній у середньому 2,5 дня перед зв'язуванням на І 0 -рецепторах у печінці та інших тканинах.

Високій рівень сироваткового І 0. ("поганий холестерин") "позитивно пов'язаний" із ішемічною хворобою серця. о Наприклад, при атеросклерозі холестерин похідний від циркулюючих І 0. накопичується в стінках артерій, що призводить до утворення великих за розміром бляшок, які порушують протік крові до утворення тромбів 60 включно, внаслідок чого просвіт артерії закривається, що обумовлює інфаркт або інсульт.

Зрештою кількість внутрішньоклітинного холестерину, що визволяється з ОЇ, є чинником контролю метаболізму клітинного холестерину. Накопичення клітинного холестерину, похідного від часток МІОІ і 101, контролює три процеси: по-перше, воно обумовлює зниження синтезу клітинного холестерину за рахунок "вимикання" синтезу НМО-КоА-редуктази, що є ключовим ферментом у біосинтезі холестерину. По-друге, приток бо похідного від 101 -часток холестерину стимулює накопичення холестерину за участю активуючої АСАТ -

клітинного ферменту, що перетворює холестерин на ефіри холестерину, які і відкладаються у вигляді жирових крапель. По-третє, накопичення холестерину в клітинах забезпечує роботу механізму по типу зворотного зв'язку, що придушує клітинний синтез нових І 0 -рецепторів. Отже, клітини контролюють кількість своїх І 0 -рецепторів

На такому рівні, щоб кількість холестерину була достатньою для покриття потреб метаболізму, але без його перевантаження (огляд, див. Вгом/п б: (зоїЇавівїп, 1990, п "Тпе РІагтасоїодіса! Вавзів ої Тпегареціїсв", 8-й ейд., едв. боодтап 8. Сіїтап, Регдатоп Ргезз, МУ, Сп. 36, рр.874-896). 2.2. Зворотній транспорт холестерину

У цілому, периферичні (непечінкові) клітини одержують холестерин за рахунок сполучення місцевого синтезу 7/0 | поглинання преформованого стеролу з МО ії ГО. З іншого боку зворотній транспорт холестерину (ЗТХ) є механізмом, за яким холестерин периферичних клітин може бути повернутий у печінку для повторного переносу до "позапечінкових" тканин або екскреції до кишечнику у вигляді жовчі, як у модифікованій формі, так і в окисленій формі у вигляді жовчних кислот. Механізм ЗТХ надає єдиний спосіб видалення холестерину з більшості "позапечінкових" тканин і є основним для підтримки структури і функцій більшості клітин тіла.

Механізм ЗТХ включає три базових етапи: (1) вихід холестерину, тобто вихідне виділення холестерину з різноманітних груп периферичних клітин; (2) етерифікація холестерину в результаті активності ферменту лецитин/холестеринацилтрансферази (САТ), що запобігає попаданню холестерину, що вийшов, назад в клітини; і (3) поглинання і доставка НОЇ -асоційованого ефіру холестерину в гепатоцити. Механізм ЗТХ опосередковується частками НОЇ. Термін "НОЇ" позначає ліпопротеїнові частки, які характеризуються високою щільністю. Основними ліпідними компонентами НОЇ -комплексів є різноманітні фосфоліпіди, холестерин (ефір) і тригліцериди. Основними аполіпопротеїновими компонентами є А-І| і А-Ї, що визначають функціональні характеристики НОЇ; також є невелика кількість аполіпопротеїнів С-І, С-И, С-П, О, Е, У та ін. Розміри НОЇ. можуть суттєво варіюватися і характеризуватися різноманітним складом згаданих вище компонентів, що залежить від характеру участі в метаболічному каскаді процесу ЗТХ. сч

Ключовим ферментом, який залучений до механізму ЗТХ, є фермент І САТ. І САТ в основному виробляється в печінці і циркулює в плазмі крові разом із фракцією НОЇ. Фермент І САТ перетворює клітинний холестерин в і) ефіри холестерину, які опиняються в НОЇ, що призначені для видалення. Внесок у подальше перетворення популяції НОЇ, що циркулюють, вносять білки СЕТР (білок-переносник ефірів холестерину) і РІТР (білок-переносник фосфоліпідів). СЕТР може переносити ефіри холестерину, утворені в результаті активності «г зо САТ, в інші ліпопротеїнові комплекси, зокрема в АроВ-містячі ліпопротеїни, такі як МОГ ії СО.

Білок РІ ТР забезпечує НОЇ лецитином. Тригліцериди, що входять до складу НОЇ, можуть катаболізуватися о за участю позаклітинної печінкової тригліцеридліпази, а холестерин, що входить до складу ліпопротеїнів У знищується в печінці по кількох механізмах.

Кожна частка НОЇ містить принаймні одну копію (а звичайно від двох до чотирьох копій) Арод-І. АродД-! (ж7

Зв синтезується печінкою і тонким кишечником у вигляді препроаполіпопротеїну, що секретується у вигляді ї- пропротеїна, який швидко розщеплюється з утворенням зрілого поліпептиду, що складається з 243 амінокислотних залишків. АроА-І| як правило містить від Є до 8 різноманітних 22-амінокислотних залишків, які розділені лінкерними складовими, в ролі яких часто виступає пролін, а в деяких випадках містять своєрідний мотив, складений декількома залишками. АроА-І разом із ліпідами утворює три базових типи комплексів: « невеликі комплекси з низьким вмістом ліпідів, що позначаються як "пре- Д1-НОЇ", сплощені дископодібні частки, пт») с що включають полярні ліпіди (фосфоліпіди і холестерин), що позначаються як "пре- Д2-НОЇ"; і сферичні частки, ц що включають полярні і неполярні ліпіди, що позначаються як сферичні або зрілі НОЇ. (НОЇ. з і НО»). Більшість "» НОЇ у популяції, що циркулює, включають АроА-! і АроА-І!Ї (другий основний білок НОЇ): у даному тексті для них прийняте позначення "фракції АЇ/АШП-НОЇ" у загальній популяції НОЇ. Проте, фракція НОЇ, у складі яких є тільки АроА-І| (у даному тексті позначається як "фракція АІ-НОЇ"), очевидно, є більш ефективною з точки зору -І механізму ЗТХ. Деякі епідеміологічні дослідження підтверджують гіпотезу, відповідно до якої фракція АІ-НОЇ. є -3з "антиатерогенною" (Раїта еї а!., 1992, Агіегіозсіеговів 5 Тпготровів, 12, 701-707; Юесовзвіп еї аі., 1997, Еиг. 4).

Сіїп. Іпмеві., 27, 299-307). с Хоча механізм переносу холестерину з клітинної поверхні (тобто "вихід холестерину з клітин") невідомий, вважається, що комплекс із низьким вмістом ліпідів, тобто "пре-Д1-НОГ", є кращим акцептором для холестерину, о який переноситься від периферичних тканин у механізмі ЗТХ (див. Юамідзоп еї аї., 1994, 3. Віої. Спет., 269, с» 22975-22982; Віеїїскі еї аї., 1992, 9. Іірій Кевз., 33, 1699-1709; КоїщштБіай еї а. 1992, 9. Іірій Кез., 33, 1091-1097; Камжапо сеї аїЇ., 1993, Віоспетівігу, 32, 5025-5028; Камжапо сеї аїЇ.,, 1997, Віоспетівігу, 36, 9816-9825). У ході процесу вилучення холестерину з клітинної поверхні пре- Д1-НОЇ-частки швидко перетворюються в частки пре-р2-НОЇ.. Білок РІГТР може збільшувати швидкість утворення дископодібних часток

Ге! пре-дД2-НОЇ, проте дані про роль РІГТР в ЗТХ відсутні. Фермент САТ переважно активний у відношенні дископодібних і сферичних НОЇ, переносячи 2-ацильну групу лецитина або інших фосфоліпідів на вільний о гідроксильний залишок у молекули холестерину з утворенням складних ефірів холестерину (що залишаються в складі НОЇ) і лізолецитина. У реакції, контрольованої | САТ, у якості активатора необхідна участь АроА-Ї: 60 тобто АродА-І є природним кофактором ферменту І! САТ. Перетворення холестерину в його складний ефір, що залишається в НОЇ, запобігає зворотному потраплянню холестерину в клітини, у результаті чого ефіри холестерину призначаються до видалення. Ефіри холестерину в зрілих частках НОЇ у фракції АІ-НОЇ (тобто, що включають АроА-Ї, але не мають АроА-ІІ) видаляються печінкою і процесуються в жовч більш ефективно, ніж матеріал, отриманий із НОЇ, що включає АроА-І і АроА-ЇЇ (фракція АПАПІ-НОЇ). Це, принаймні почасти, може бо пояснюватися більш ефективним зв'язуванням часток АІ-НОЇ на мембранах гепатоцитів. Раніше вже передбачалося існування НОЇ -рецептора, і нещодавно рецептор- прибиральник" ЗК-ВІ був ідентифікований як такий НОЇ - рецептор (Асіоп еї аїЇ.,, 1996, Зсіепсе, 271, 518-520; Хи еї аїЇ., 1997, 9. рій Кез., 38, 1289-1298). Рецептор ЗК-ВІ у найбільшій кількості експресований у стероїдогенних тканинах (наприклад, у надниркових) і в печінці (ІГапазпці: ей аїЇ., 1996, 9. Сііп. Іпмевзі,, 98, 984-995; Кідоні еї аї., 1996, 3.

Віої. Снет, 271, 33545-33549).

Виявилося, що білок-переносник СЕТР не грає істотної ролі в процесі ЗТХ, але при цьому залучений у метаболізм ліпідів, похідних від МІ ОІ і ГО. Проте, зміни активності СЕТР або його акцепторів - МОЇ! Її 101 - відіграє роль у процесах перетворення популяції НОЇ. Наприклад, у відсутність СЕТР частки НОЇ. перетворюються в збільшені частки, що не виводяться (див. огляди по ЗТХ і НОЇ: Ріеідіпу 4. Ріеідіпо, 1995, 3. 70 Мрій Кев., 36, 211-228; Ватапе еї аіЇ., 1996, Віоспет. Віорпуз. Ада, 1300, 73-85; Нігапо еї аї., 1997,

Апегіозсіеговів, Тпготбровів 8: Мазсшіаг Віо!., 17, 1053-1059). 2.3. Сучасні засоби лікування дисліпопротеїнемій

В даний час доступними є ряд засобів лікування, націлених на зниження рівнів сироваткових холестерину і тригліцеридів (див., наприклад. Вгомуп 85: Соїдвівіїп, цит. вище). Проте, для кожного з цих засобів характерні "свої" обмеження і складності з погляду їхньої ефективності, виникнення побічних ефектів і придатності для конкретної групи пацієнтів.

Полімери, що зв'язують жовчну кислоту, представляють клас лікарських засобів, що переривають повторну циркуляцію жовчних кислот із тонкого кишечнику в печінку - наприклад, холестирамін (Оцевігап Гідно,

ВгівіоІ-Муегв Зацівь) і холестипола гідрохлорид (Соіевій, Те Ор допп Со.). При пероральному застосуванні ці 2о полімери, що характеризуються позитивним зарядом, зв'язуються в кишечнику з негативно зарядженими жовчними кислотами. Оскільки такі полімери не можуть усмоктуватися з просвітку кишечнику, то вони виводяться з організму разом із зав'язаними на них жовчними кислотами. Проте, використання таких полімерів у кращому випадку знижує рівень сироваткового холестерину приблизно на 2095 і при цьому асоціюється з виникненням побічних ефектів у стравоварильному тракті, включаючи запори і виникнення дефіциту по деяких сч ов Вітамінах. Більше того, оскільки ці полімери зв'язують і інші лікарські препарати, інші перорально ввідні медикаменти повинні вводитися не менше ніж за 1 годину або ж через 4-6 годин після введення такого полімеру: і) таким чином, ускладнюється режим прийому ліків пацієнтами-сердечниками.

Знижуючими рівень холестерину засобами є статини: ці сполуки блокують синтез холестерину внаслідок придушення активності НМО-КоА-редуктази - ключового ферменту в біосинтетичному механізмі холестерину. «г зо Статини, наприклад, ловастатин (Мемасоге, Мегок 8 З. Іпс.) Її правастатин (Ргамасноїб, ВгізіоІ-Муегв Зацїрр

Со.), іноді використовуються в сполученні з полімерами, що зв'язують жовчні кислоти. Статини істотною мірою о знижують рівень сироваткового холестерину і рівень ГО у сироватці крові, забезпечуючи зниження прогресії ю коронарного атеросклерозу. Проте, рівень сироваткового НОЇ холестерину збільшується лише середньою мірою. У механізмі ефекту зниження ОЇ може бути задіяне зниження концентрації МІ 0. і індукція експресії -- клітинами І ОІ -рецептора, у результаті чого знижується вироблення і (або) посилюється катаболізм ГО. З ї- використанням цих лікарських засобів пов'язані такі побічні ефекти, як дисфункція печінки і нирок (Рпузісіапе

Оезк Кеї., Мед. Есопотісв Со. Іпс., МопімаІе, М), 1997). Нещодавно ЕОА дозволило препарат аторвастатин (інгібітор НМО-КоА-редуктази, розроблений фірмою Рагке-Оамів, У/агпег І атбрегі), призначений для лікування рідкісних, але потребуючих інтенсивного втручання випадків сімейної гіперхолестеринемії (1995, Зсгір, 20 « 40. 119), 10). в с Нікотинова кислота (ніацин) є водорозчинним В-вітамінним комплексом, використовуваним у якості харчової добавки й антигіперліпідемічного засобу. Ніацин обумовлює придушення вироблення МІ ОЇ і ефективний у ;» зниженні І ОЇ. У деяких випадках він застосовується разом із полімерами, що зв'язують жовчні кислоти. Ніацин при використанні його в адекватних дозах може збільшувати вміст НОЇ, проте його застосування обмежується серйозними побічними ефектами при використанні таких високих доз. -І Фібрати являють собою клас лікарських засобів, що забезпечують зниження рівня ліпідів, призначених для лікування різноманітних форм гіперліпідемій (тобто випадків підвищення рівня сироваткових тригліцеридів), що - також можуть бути асоційовані з гіперхолестеринемією. Вважається, що фібрати обумовлюють зниження вмісту с фракції МО і істотне підвищення НОЇ - проте, вплив цих препаратів на рівень сироваткового холестерину 5р Змінюється. У Сполучених Штатах Америки фібрати дозволені для використання в якості антиліпідемічних о засобів, проте, як засоби проти гіперхолестеринемії, вони не сертифіковані. Наприклад, клофібрат (Акготіа Ф, ї» УууангАуегві ІГар.) є антиліпідемічним засобом, що обумовлює (по не встановленому механізмі) зниження сироваткових тригліцеридів за рахунок придушення фракції МІ 0. Хоча рівень сироваткового холестерину може бути знижений у деяких груп пацієнтів, біохімічна реакція на цей препарат виявляється різноманітною, і при цьому не завжди можна визначити, хто з пацієнтів досягне найбільш ефективних результатів.

Як було показано, препарат Агготій-59 не виявляє ефективності щодо ішемічної хвороби серця. Споріднений

Ф) по хімічних і фармакологічних властивостях лікарський засіб - гемфіброзил (ІГоріа Ф, Рагке-Оамів) - є ка препаратом, що регулює вміст ліпідів, що у середньому ступені знижує рівень сироваткових тригліцеридів і пов'язаного з МОЇ холестерину й у середньому ступені збільшує пов'язаний із НОЇ холестерин - тобто во збільшується вміст фракцій НОЇ 5» і НОЇ з, так само як і фракції, що включає й АроА-Ї, і АроА-ЇЇ (тобто фракції

АМАП-НОЇ). Проте, "ліпідна відповідь" виявляється різноманітним, особливо при порівнянні різних груп пацієнтів. Більше того, оскільки профілактика ішемічної хвороби серця була досягнута в популяції чоловіків у віці 40-55 років, в яких ішемічної хвороби не було ні в аналізі, ні по симптоматиці, те незрозуміло, якою мірою можна екстраполювати ці дані на інші групи пацієнтів (наприклад, на жінок і чоловіків молодшого і 65 старшого віку). Дійсно, не спостерігалося скільки-небудь значимого ефекту стосовно групи пацієнтів із наявною ішемічною хворобою серця. Застосування фібратів супроводжується серйозними побічними ефектами

-наприклад, токсичністю, що веде до злоякісних новоутворень (особливо до раку шлунково-кишкового тракту), захворюваннями жовчного пухиря і збільшенням рівня смертності від причин, не пов'язаних із коронарними порушеннями. Ці лікарські засоби не призначені для лікування пацієнтів, в яких єдиною аномалією метаболізму ліпідів є підвищений вміст ЇОЇ або знижений вміст НОЇ (РНузісіапз ЮОевзК Кеї., Мед. Есопотісв Со. Іпс.,

Мопімаїе, МУ, 1997).

Терапія на основі перорального заміщення естрогенів може бути застосована у випадках гіперхолестеринемії середнього ступеня в жінок у постклімактеричний період. Проте, збільшення вмісту НОЇ. може супроводжуватися збільшенням рівня тригліцеридів. Лікування естрогенами, звичайно, обмежено конкретною групою пацієнтів 7/0 (жінки після клімаксу) Її пов'язане з проявом серйозних побічних ефектів, включаючи індукцію злоякісних новотворів, захворювання жовчного пухиря, тромбоемболію, аденому печінки, підвищений кров'яний тиск, непереносимість до глюкози і гіперкальціємію.

Таким чином, є необхідність у розробці більш безпечних лікарських засобів, які б були ефективні в зниженні рівня сироваткового холестерину, збільшенні вмісту НОЇ у сироватці крові, профілактиці ішемічної хвороби серця і (або) лікуванні вже наявної такої хвороби, а особливо атеросклерозу. 2.4. АроА-Ї, як мішень

Жоден з доступних у даний час лікарських засобів, призначених для зниження рівня холестерину, не забезпечує безпечного підвищення рівня НОЇ і стимулювання ЗТХ - більшість із них впливає на механізм транспорту холестерину, модулюючи усмоктування їжі, повторне циркулювання, синтез холестерину й 2о утворення популяції МІ-О1..

Оскільки бажаним є створити лікарські засоби, які б стимулювали вихід холестерину і його виведення, а також через наявність декількох можливих мішеней у системі ЗТХ - таких як І САТ, НОЇ. і їхніх різноманітних компонентів (АроА-Ї, АроА-ІІ і фосфоліпіди), РГТР і СЕТР, то невідомо, яка з цих мішеней буде найбільш ефективною з погляду досягнення бажаного складу ліпопротеїнів і захисного ефекту. Зміна будь-якого одного сч об Компонента в механізмі ЗТХ неминуче призведе до зміни складу ліпопротеїнів, що циркулюють, і, відповідно, вплине на ефективність ЗТХ. і)

Деякі доказові дані, що засновуються на моделях іп мімо, указують на НОЇ і на його основні білкові компоненти, яким є АроА-І, як на чинники запобігання атеросклеротичних ушкоджень і потенційного розсмоктування бляшок, тобто роблять їх привабливими мішенями для терапевтичного втручання. По-перше, є «Е зо зворотна кореляційна залежність між концентрацією в сироватці АроА-І (НОЇ) і процесами атерогенеза в чоловіків (СбСогдоп 8: КИКіпа, 1989, Мем Епдіапа У. Мед., 321, 1311-1316; бСогдаоп еї аї., 1989, Сігсшіацйоп, 79, що) 8-15). Дійсно, був встановлений взаємозв'язок між окремими варіантами НОЇ і зниженим ризиком розвитку ю атеросклерозу в людини (МіПег, 1987, Атег. Неагії, 113, 589-597; Спецпд еї аїЇ.,, 1991, Іірій Кезв., 32, 383-394; Егиспагі 8 Айпаца, 1992, Сіп, Спет., 38, 79). --

По-друге, дослідження на тваринних моделях підтверджують захисну роль АроА-! (НО). Лікування кроликів, ї- раціон яких включав холестерин, шляхом введення АроА-Ї або НОЇ призводило в таких тварин до придушення розвитку і прогресування бляшок (жирових нашарувань) (Коігиті еї аІ., 1988, 9. Іірій Кез., 29, 1405-1415;

Вадітоп еї аї., 1989, ар. Іпмеві, 60, 455-461; Вадітоп еї аї., 1990, 9. Сііп. Іпмеві, 85, 1234-1241). Проте, ефективність такого лікування варіювалася в залежності від джерела НОЇ (Веїї»: еї аі., 1992, Рговіадіапаїпв, «

Ї енкоїгіепез 8 Еззепііа! Рацу Асіавз, 47, 149-152; Магдоиг еї аї., 1995, Агпегозсіеговів, 113, 237-246). з с По-третє, прямий доказ ролі АроА-І було отримано в експериментах на трансгенних тваринах. Експресія

Й людського гена, що кодують АроА-І, перенесеного мишам, генетично схильним до індукованого харчовими и? компонентами атеросклерозу, забезпечувала захист від ушкоджень аорти (Кибіп еї аіЇ., 1991, Маїцйге, 353, 265-267). Трансген АроА-І також, як було показано, придушує атеросклероз у мишей, що характеризуються дефіцитом апопротеїна Е, і в мишей, трансгенних за Арно(а) (Разлу еї аїЇ.,, 1994, 9. Сііп. Іпмеві., 94, -І 899-903; Ріштр еї аїЇ.,, 1994, Ргос. Май. Асай. Зсі. ОБА, 91, 9607-9611; (іш еї аїЇ.,, 1994, 9. Іірій Кев., З5, 2263-2266). Подібні результати були отримані при вивченні трансгенних кроликів, що експресують АроА-Ї - людини (Юимегдег, 1996, Сігсціайоп, 94, 713-717; Юимегдег еї аї., 1996, Агпегіозсіеговіз, Тийготр. Мазсшаг с Віоі., 16, 1424-1429), і трансгенних пацюків, в яких підвищені рівні людського АроА-| забезпечували захист

Від атеросклерозу і придушення рестеноза внаслідок балонної ангеопластики (Вигкеу еї аї!., 1992, Сігсшайоп, 1 зиррі. І, 86, 1-472, Арвіг. 1876; Вигкеу еї аї., 1995, 9. І іріа Кев., 36, 1463-1473). ї» У механізмі ЗТХ більш ефективним вважається АІ-НОЇ у порівнянні з фракцією А1/АЇІ-НОЇ. Дослідження, проведені на трансгенних мишах, що несуть гени АроА-І або АроА-ІнАроА-Ї! (АЇІ/АїЇЇ) людини, показали, що білковий склад НОЇ. істотною мірою впливає на його прояви - при цьому більш істотний антиатерогенний ефект був характерний для А!І-НОЇ у порівнянні з АЇ/АПІ-НОЇ. (Зспий еї аІ., 1993, Майшге, 365, 762-764). Паралельні дослідження з використанням трансгенних мишей, що експресують ген | САТ людини, показали, що деяке

Ф) зростання активності І САТ у значній мірі змінює рівні пов'язаного з ліпопротеїнами холестерину і що І САТ має ка відчутну перевагу над фракцією НОЇ, що включає АроА-І (Егапсопе еї аїЇ., 1995, 9. Сііп. Іпмеві., 96, 1440-1448; Вегага еї аї., 1997, Маїшге Меса, З Г71, 744-749). У той час як ці дані підтверджують важливу роль бо АроА-Ї в активації ГСАТ і стимуляції механізму ЗТХ, додаткові дослідження вказують на наявність більш складного сценарію: основними компонентами, що забезпечують зміну виходу клітинного холестерину, є фосфоліпіди (Роишгпіег еї а!., 1996, у. І іІріа Кев, 37, 1704-1711).

З точки зору ймовірної ролі НОЇ, тобто АродА-І, і асоційованого з ним фосфоліпіда, у захисті від атеросклерозу, були здійснені клінічні іспити на людині з використанням рекомбінантного АродА-І, що були 65 припинені і потім відновлені компанією ОСВ (Бельгія) (Ріпагта-рго|есів, 27 жовтня 1995 р.; ІМ КО Росив, 30 червня 1997р.; ЮОгид (айв Орааїе, 1997, АгПегозсіеговів, 2(6), 261-265; також див. М. Егікезоп, "пе Коїе ої

НОЇ іп "Оізеазе Ргемепійоп", Конгрес, 7-9 листопада, 1996, Рог ММопй; Гаско 5 МіПег, 1997, 9. ІІрій Кезв., 38, 1267-1273; і міжнародна патентна заявка УУО94/13819), а також проводилися і були потім припинені Віо-Тесп (Рпагта рго|есів, 7 квітня 1989р.). Також починалися іспити, у яких АроА-І використовували для лікування бептичного шоку (Ораї., "Кесопзійшей НОЇ аз а Тгеайтепі Зігаїеду ог Зервзів", ІВС5 7 Іпіегп. Сопі. оп

Зерзів, Аргії 28-30, 1997, МУазпіпдіоп, О.С.; Соцпі ей аїЇ, 1993, у. Іірій Кев., 94, 139-146; Іеміпе, міжнародна патентна заявка М/096/04916). Проте, все це пов'язане з існуванням різноманітних "пасток", пов'язаних з одержанням і застосуванням АроА-І, що не роблять його, неідеальним лікарським засобом: наприклад, АроА-Ї є великим білком, одержання якого трудомістке і недешеве; при виробництві і відновленні 7/0 повинні бути вирішені проблеми, пов'язані з можливістю тривалого збереження, доставкою активного компонента і часом на півжиття іп мімо.

Беручи до уваги ці проблеми, були початі спроби для одержання пептидів, які б імітували активність

АродА-Ї. Оскільки ключовим для прояву активності АроА-! є наявність множинних повторів унікальної вторинної організації цього білку - амфіпатичної о-спіралі А-класу (Зедгеві 1974, РЕВ5 Іей., 38, 247-253), - то 75 основні зусилля при конструюванні пептидів, які б імітували активність АроА-І, були зосереджені на конструюванні пептидів, які б і утворювали такі амфіпатичні о-спіралі А-класу.

Амфіпатичні о-спіралі А-класу є унікальними в тому, що залишки позитивно заряджених амінокислот кластеризовані в зоні гідрофобно-гідрофільного "інтерфейсу" (тобто зіткнення двох типів поверхонь білку), а залишки негативно заряджених амінокислот сконцентровані на поверхні гідрофільного сегмента. Далі, пептиди що мають о-спіралі А-класу характеризуються розміром гідрофобного кута, меншого за 180" (Зедгеві еї аї., 1990, Ргоїеіпв: Бігисішге, ЕРипсіоп 5: Сепеїйісв, 8, 103-117). Вихідні нові стратегії конструювання |імітаторів

АродА-| засновувалися не на первинних амінокислотних послідовностях аполіпопротеїнів, що природно зустрічається, а на включення цих унікальних спіралей А-класу до складу послідовності пептидних аналогів, так само як і деяких інших властивостях доменів, наявних у складі АроА-І! (див., наприклад, Юаміадвоп еї аї., 1996, са

Рос. Май. Асай. Зсі. ОБА, 93, 13605-13610; Кодеге еї аЇ.,, 1997, Віоспетівігу, 36, 288-300; І іпв еї аї., (5) 1993, Віоспіт. Віорпуз. Асіа, Ббіотетрбгапев, 1151, 137-142; ді 5 Оопавз, 1995, 9. Віої. Спет., 270, 11290-11297;

Сопеї! еї а!., 1997, 9. ої І іріа Кез., 38, 634-644; Зрагом/ 5 боНо, 1980, Апп. МУ Асада. Зсі., 348, 187-211; Зарітом 5 боцно, 1982, СКС Ст Кем. Віоспет., 13, 87-107; Богсі-Гпо-таз ей аїЇ., 1993, У. ВіоЇ Спет., 268, 21403-21409; УУапд еї аї., 1996, Віоспіт. Віорпуз. Асіа, 174-184; Міппісп еї аї., 1992, 9. Віої. Спет., 267, «І 16553-16560; Ноїмоеї еї аЇ., 1995, Віоспетівігу, 34, 13334-13342; Богсі-Тпотав еї аї., 1997, 9. Віої. Спет., ю 272(11)7278-7284; Ргапк еї а!., 1997, Віоспетівігу, 36, 1798-1806).

В одному з досліджень Фукусіма із співавт. (Гикивзпіта еї а.) синтезували 22-амінокислотний пептид, що 3 цілком складається з залишків Сіш, Їуз і Їеи, взаєморозташованих таким чином, щоб утворювати - амфіпатичну о-спіраль із рівними гідрофільною і гідрофобною поверхнями (тобто "ЕЇ К-пептид") (ГиКкизпіта еї а, 1979, У. Атег. Спет. бос, 101(13) 3703-3704; Еикивзпіта єї аї., 1980, У. Віої. Спет., 255, 10651-10657). /ї-

ЕК-пептид характеризується 4190-о0ю гомологією із ділянкою амінокислот 198-219 у складі АроА-Ї. При проведенні аналізу методом кількісної ультрафільтрації, гель-хроматографії і кругового дихроїзму для цих

ЕІ К-пептидів було продемонстровано ефективне асоціювання з фосфоліпідами і забезпечення імітації деяких « фізичних і хімічних властивостей АроА-І (Каїзег еї аЇ.,, 1983, Ргос. Май. Асад. Зсі. ОБА, 80, 1137-1140;

Каївег еї а -, 1984, Зсіепсе, 223, 249-255; ЕиКкизпіта еї аїЇ., 1980, цит. вище; МаКадама еї аї., 1985, 3. о, с Атег. Спет. Зос, 107, 7087-7092). За результатами такого аналізу Йокояма із співавт. дійшли висновку, що "» основним чинником забезпечення активності ферменту САТ є проста присутність великої амфіпатичної " структури (ХоКоуата еї аї., 1980, 9. Віої. Спет., 255(15), 7333-7339). Пізніше було виявлено, що димер такого 22-амінокислотного пептиду в більшій мірі імітує властивості АроА-| у порівнянні з відповідним мономером: базуючись на отриманих даних було підтверджено, що такий 44-мерний пептид, що переривається у своїй - середині "руйнівником" спіралі (або гліцином, або проліном), являє собою мінімальний функціональний домен - білка Арод-Ї (Макадама еї аї!., 1985, цит. вище).

В інших дослідженнях у якості моделі використовували амфіпатичні пептиди, названі "| АР-пептидами" о (Ромупай еї аїЇ., 1980, Ргос. Май. Асай. Зсі. ОБА, 11(6), 3154-3158; Зрагтом/ еї аїЇ.,, 1981, Іп "Рерііаев: с 20 Бупіпевівз-Зігисіиге-Бипсійоп", ейв. Косий 8 ОСгов8в, Ріегсе Спет. Со., Коскіога, І, рр.253-256). Базуючись на параметрах зв'язування ліпідів із фрагментами нативних аполіпопротеїнів, були сконструйовані декілька їз» | АР-пептидів, позначених І АР-16, І АР-20 і І АР-24 (включають, відповідно, 16, 20 і 24 амінокислотних залишки).

Ці модельні амфіпатичні пептиди не виявляють подібності послідовності з аполіпопротеїнами і були сконструйовані так, щоб мати гідрофільні поверхні, організовані відмінно від таких поверхонь, наявних у го складі амфіпатичних спіралей А-класу в аполіпопротеїнів (Зедгеві еї аЇ., 1992, 9. Іірій Кев., 33, 141-166).

ГФ! Виходячи з даних цих досліджень, автори роботи дійшли висновку, що наявність 20 амінокислот є мінімально необхідним для забезпечення властивостей по зв'язуванню з ліпідами при моделюванні амфіпатичних пептидів. о Дослідження, проведені на матеріалі мутантних варіантів (АР2О, в яких залишок проліну займав в амінокислотній послідовності різноманітні положення, показали, що є прямий взаємозв'язок між зв'язуванням 60 ліпідів і активацією САТ, але при цьому ще і те, що сам по собі спіральний потенціал такого пептиду не викликає активації ферменту САТ (Ропвзіп еї аї., 1986, 9. Віої. Спет., 261(20) 9202-9205). Більше того, присутність такого "руйнівника" спіралі (пролін) поблизу від середини даного пептиду знижує його афінність стосовно фосфоліпідів, так само як і спроможність активувати І САТ. При тому, що деякі І АР-пептиди, як було показано, зв'язуються з фосфоліпідами (Зраїтому еї аі., цит. вище), проте залишається спірним питання про той бо ступінь, із яким ГАР-пептиди зберігають спіральну організацію в присутності ліпідів (ВисикКоО еї аї., 1996, .).

Вісі. Спет., 271(6),3039-3045; 7попо еї аї., 1994, Рерііде Кез., 7(2), 99-106).

Сегре із співавт. (Зедгеві еї аІ) синтезували пептиди, що складаються з 18-24 амінокислот, що не виявляють гомології зі спіральними ділянками АроА-Ї (Каппеїїв еї аї., 1980, 9. Віої Спет, 255(5), 11464-11472; Зедгеві еї аїЇ., 1983, у. Віої Спет, 258, 2290-2295). Конкретні послідовності були сконструйовані таким чином, щоб імітувати амфіпатичні спіральні домени А-класу аполіпопротеїнів по таких параметрах, як гідрофобний момент (Еізепрего еї аї., 1982, Майшге, 299, 371-374) і розподіл заряду (Зедгеві еї аІ,, 1990, Ргоїеіпз, 8, 103-117; патент США Мо4643988). Один із 18-амінокислотних пептидів, позначений як "пептид-18А", був сконструйований у якості моделі о-спіралі А-класу (Зедгевзі еї аїЇ., 1990, цит. вище).

Дослідження на матеріалі таких пептидів і інших пептидів, що характеризуються протилежним розподілом 7/0 заряду, таких як "пептид-18К", чітко показали, що розподіл заряду є критичним для функціональності параметром: пептиди з ревертованим розподілом заряду виявляють знижену ліпідну афінність порівнянну з імітаторами 18А А-класу і меншу спіральну складову в присутності ліпідів (Капеїйв еї аї., 1980, 9. Віо|.

Спет., 25, 11464-11473; Апапіпагатаїйан еї аї., 1985, 9. Віої. Спет, 260, 10248-10255; Спипд еї аї., 1985, ..

Віої. Спет, 260, 10256-10262; Ерапа еї аї., 1987, 9. Віої. Спет, 262, 9389-9396; Апапіпагатаїйанй еї аї., 1991, 7/5 Адм. Ехр. Меа. Віої, 285, 131-140).

Інші синтетичні пептиди, що не мають подібності з послідовністю аполіпопротеїнів, що були подані як такі, що мають обмежену ефективність, включають димери і тримери пептиду 18А (Апапіпагатаїйан еї аї., 1986,

Ргоїеїіпз Віої. Ріцідв, 34, 63-66), пептиди СА А і ЕАГА (З!Трбвагао еї а!., 1988, Ргоїеіпе: Бігисішге, Рипсіоп б Сепеї,

З, 187-198) і пептиди ІО (І арешг еї аї., 1997, Агегіозсіеговів, Тпготровзів 5 Мазсшціаг Віої, 17, 580-588) і пептид 18АМА (Вгаззеиг еї а!., 1993, Віоспіт. Віорпуз. Асіа, 1170, 1-7).

Також на базі послідовності спіралей АроА-І людини був сконструйований "консенсусний" пептид, що складається з 22 амінокислот (Апапіпагатаїйап еї аї., 1980, Апегіозсіеговіз, 1001: 95-105; МепКайасна|арайні еї а, 1991, Мої. Сопіогт, апа Віої. Іпіегасі па. Асай. Зсі.,, взег. В, 585-596). Послідовність була сконструйована шляхом впливу найбільш кращого залишку по кожному положенню гіпотетичних спіралей у с складі АроА-І людини. Як і у випадку з описаними вище пептидами, спіраль, утворена даним пептидом, характеризується наявністю кластера позитивно заряджених амінокислот на гідрофільно-гідрофобній поверхні і о негативно заряджених амінокислот по центру гідрофільної поверхні і розміром гідрофобного кута менше 180".

При тому, що димер такого пептиду до деякої міри ефективний по активації І! САТ, що відповідає мономер виявляє слабкі властивості по зв'язуванню ліпідів (МепКайаспа|араїйні еї а/!., 1991, цит. вище). «І

Базуючись у першу чергу на дослідженнях іп міго, проведених на матеріалі описаних вище пептидів, були сформульовані деякі "правила" конструювання пептидів, які б імітували функції білку АроА-Ї. Істотним є те, що о наявність амфіпатичної о-спіралі, що має позитивно заряджені залишки, кластеризовані в області ю гідрофобно-гідрофільної поверхні, і негативно заряджені амінокислоти, кластеризовані по центру гідрофільної поверхні, необхідно для прояву ліпідної афінності й активації І/САТ (МепКаїасна|Іараїйні еї аї., 1991, цит. - вище). Також Анантарамайях із співавт. (Апапіпагатаїйан еї аї) встановили, що негативно заряджені залишки ч- глутамінової кислоти в 13-м положенні в складі консенсусного 22-амінокислотного пептиду, що знаходиться в межах гідрофобної поверхні о-спіралі, грає важливу роль в активації І! САТ (Апапіпагатаїйанй еї аї., 1991, цит. вище). Більш того, Брассер (Вгаззеиг) показав, що гідрофобний кут (кут "рпо") менше 180" є необхідною умовою « для оптимальної стабільності ліпіда і аполіпопротеїна, а також для утворення дископодібних часток, в яких 470 пептиди розташовані навколо краю ліпідного бішару (Вгаззецйг, 1991, 9). Віої. Спет., 66(24) 16120-16127). - с Россено із співавт. (Коззепеи еї аІ.) також продемонстрували, що гідрофобний кут менше 180" необхідний для а активації ферменту І САТ (заявка МУМО93/25581). "» Проте, незважаючи на ці "правила", нікому не вдалося сконструювати і виробити пептид, що був би настільки ж активний, як і АроА-І - у найкращому варіанті була відзначена менше чим 4095-а від нативного АроА-Ї активність, що було визначено в описаному в даній заявці тесті на активацію | САТ. Жодний з описаних у -і науковій літературі пептидних "імітаторів" не підходив для застосування його в якості лікарського засобу. - З урахуванням викладеного вище, є необхідність розробки стабільного агоніста АроА-Ї, який би імітував активність АроА-Ї і який би міг бути вироблений за допомогою відносно простої і недорогої процедури. Проте, (9) "правила" конструювання ефективних імітаторів АроА-І не були встановлені, а також залишилися невідомими сл 50 принципи конструювання органічних молекул, що володіють функціями АроА-Ї. 3. Резюме винаходу

ЧТ» Даний винахід стосується агоністів АроА-Ї, спроможних утворювати амфіпатичні о-спіралі, що забезпечують імітацію активності АроА-І, при тому, щоб конкретні рівні активності, наприклад, одиниці активності (обумовлені відношенням активації | САТ до одиниці молекулярної маси) відповідали або перевищували такі показники нативної молекули. Зокрема, агоністами АроА-Ї по даному винаходу є пептиди або пептидні аналоги, о які: утворюють амфіпатичні спіралі (в присутності ліпідів), зв'язують ліпіди, утворюють пре- р-подібні або

НОЇ подібні комплекси, активують І САТ, обумовлюють підвищення сироваткових рівнів фракцій НОЇ і сприяють де виходові холестерину з клітин.

Даний винахід засновується, зокрема, на виконаних заявниками дослідженнях і відкриттях пептидів, які 60 імітують функції АроА-І. Пептиди по даному винаходу були сконструйовані на основі передбачуваної спіральної структури й амфіпатичних параметрів 22-амінокислотної консенсусної послідовності, що є похідною від спіральних повторів у складі АроА-Ї. До подиву, пептиди по даному винаходу мають специфічну активність, що перевершує активність похідних від АроА-ІЇ пептидів, описаних у науковій літературі. Дійсно, деякі варіанти по даному винаходу забезпечують 100905 активності нативного АроА-Ї, при тому, що деякі суперагоністи, подані тут, б5 перевершують специфічну активність нативного АроА-Ї.

Один з аспектів даного винаходу також частково грунтується на виявленні заявниками того, що амінокислотні залишки 14-17 у складі консенсусної 22-мерної послідовності Сегре можуть бути делетовані без втрати спроможності до активування ферменту І САТ. У деяких випадках делетування цих амінокислот призводить до посилення активації І САТ. В іншому аспекті даного винаходу інші залишки в складі консенсусної послідовності

Можуть бути також делетовані з посиленням активності. Крім того, у деяких варіантах делетування може бути застосоване спільно зі змінами амінокислотних залишків. У деяких переважних варіантах делетування чотирьох залишків із складу консенсусного 22-мерного пептиду Сегре використовується в сполученні з замінами залишків 5, 9 і 13 на гідрофобні залишки лейцину.

Даний винахід проілюстрований експериментальними прикладами, в яких описана структура, готування і /о застосування конкретних амфіпатичних пептидів, що утворюють спіралі (в присутності ліпідів), зв'язують ліпіди, утворюють комплекси і підвищують активність | САТ. Базуючись на структурі й активності наведених у прикладах варіантів, заявники розробили "звід правил", що може бути використаний для конструювання змінених або мутованих форм, що також входять в обсяг даного винаходу.

Також даний винахід стосується фармацевтичних композицій, що містять такі агоністи АроА-!Ї (або у вигляді /5 вамих пептидів, або у вигляді ліпопротеїнових комплексів) у якості активного компонента, так само як і засобів одержання таких композицій і їхнього застосування для лікування захворювань, асоційованих із дисліпопротеїнемією (наприклад, із серцево-судинними захворюваннями, атеросклерозом, метаболічним синдромом), рестенозом або появою в крові ендотоксинів (наприклад, як при септичному шоці). 3.1. Скорочення такі стандартні скорочення для генетично детермінованих І -амінокислот: дян 00011155 см щі о опаратновакилот 01000000 А ув 11117919 - зо ю ю зелено 11771116 - зв м дю 00018001 ч 4 З с . г»

Скорочення, використовувані для позначення О-енантіомерів генетично детермінованих амінокислот, є -І рядковими аналогами однолітерних позначень. Наприклад, позначення "К" відповідає І -аргініну, а позначення "г" - О-аргініну. - 3.2. Визначення г По використанню в даному тексті такі терміни повинні прийматися в таких значеннях: "Алкіл": означає насичений розгалужений, нерозгалужений або циклічний вуглеводневий радикал. Типовими о алкільними групами, тим самим не обмежуючись, є метил, етил, пропіл, ізопропіл, бутил, ізобутил, трет-бутил, ї» пентил, ізопентил, гексил і подібне. У переважних варіантах алкільною групою є С.-Сфв-алкіл. "Алкеніл": означає ненасичений розгалужений, нерозгалужений або циклічний вуглеводневий радикал, у складі якого є, принаймні, один міжвуглецевий подвійний зв'язок. Цей радикал може характеризуватися або цис-, 5Б або транс-конформацією щодо подвійного(подвійних) зв'язку (зв'язків). Типовими алкенільними групами, тим самим не обмежуючись, є етеніл, пропеніл, ізопропеніл, бутеніл, ізобутеніл, трет-бутеніл, пентеніл, гексеніл (Ф) і подібне. У переважних варіантах алькенільною групою є С.--Св-алкеніл. ко "Алкініл": означає ненасичений розгалужений, нерозгалужений або циклічний вуглеводневий радикал, у складі якого є принаймні один міжвуглецевий потрійний зв'язок. Типовими алкінільними групами, тим самим не 60 обмежуючись, є етиніл, пропініл, бутиніл, ізобутиніл, пентиніл, гексиніл і подібне. У переважних варіантах алькінільною групою є С.і-Св-алкініл. "Арил": означає ненасичений циклічний вуглеводневий радикал, що характеризується кон'югованою електронною П-системою. Типовими арильними групами, тим самим не обмежуючись, є пента-2,4-дієн, феніл, нафтил, антрацил, азуленіл, хризеніл, короненіл, флуорантеніл, індаценіл, іденіл, оваленіл, периленіл, 65 феналеніл, фенантреніл, піценіл, плейаденіл, піреніл, пірантреніл, рубіценіл і подібне. У переважних варіантах арильною групою є С5-Соо-арил, а більш переважним є Св-С:іо-арил.

"Алкарил": означає алкільну, алкенільную або алкінільную групи з нерозгалуженим ланцюгом, у котрої один з атомів водню, приєднаних до. кінцевого атому вуглецю, заміщений арильною складовою. Типовими алкарильними групами є, тим самим не вичерпуючись, бензил, бензилиден, бензилидин, бензолбензил, нафтенбензил і подібне У переважних варіантах алкарильною групою є Себ-Совалкарил, тобто алкільною, алкенільною або алкінільною складовою алкарильної групи є Сі-Св-алкіл, а арильною складовою є Св-Сор-арил.

В особливо переважних варіантах алкарильною групою є (Се-Сіз3)алкарил, тобто алкільною, алкенільною або алкінільною складовою алкарильної групи є (С4-Сз)алкініл, а арильною складовою є (Св-Сід)арил. "Гетероарил": позначає арильную складову, при тому, що один або декілька атомів вуглецю заміщені іншим /о атомом, таким як М, Р, 0, 5, Ав, Зе, 5і, Те і т.п. Типовими гетероарильними групами є, тим самим не обмежуючись, акридарсин, акридин, арсантридин, арсиндол, арсиндолин, карбазол, р-карболін, хромен, цинолін, фуран, імідазол, індазол, індол, індолізин, ізоарсиндол, ізоарсинолін, ізобензофуран, ізохромен, ізоіїндол, ізофосфоіндол, ізофосфінолін, ізохінолін, ізотіазол, ізоксазол, нафтиридин, перимідин, фенантридин, фенантролин, феназин, фосфоіндол, фосфінолін, фталазин, птеридин, пурин, піран, піразин, піразол, піридазин, 75 Піридин, піримідин, пірол, піролізин, хіназолін, хінолін, хінолізин, хіноксалин, селенофен, телурофен, тіофен і ксантен. У переважних варіантах гетероарильною групою є 5-20-атомний гетероарил, а більш переважним є 5-10-атомний гетероарил. "Алкгетероарил": позначає алкільну, алкенільну або алкінільну групи з нерозгалуженим ланцюгом, в якій один з атомів водню, приєднаних до кінцевого атому вуглецю, заміщений гетероарильною складовою. У переважних варіантах алкгетероарильна група подана 6-26-атомним алкгетероарилом, тобто в його складі алкільна, алкенільна або алкінільна складова алкгетероарила є С.і-Св-групою, а гетероарил є 5-20-атомним гетероарилом. У конкретних переважних варіантах алкгетероарилом є 6-13-атомний алкгетероарил, тобто алкільна, алкенільна або алкінільна складова представляє собою 5-10-атомний гетероарил. "Заміщені алкіл, алкеніл, алкініл, арил, алкарил, гетероарил або алкгетероарил": позначає алкільну, с алкенільну, алкінільну, арильну, алкарильну, гетероарильну або алкгетероарильну групу, в якій один або декілька атомів водню заміщені іншим заступником. Переважними заступниками є групи -ОК, -ЗК, -МКК, -МО», і) -СМ, галоген, -С(О)К, -С(О)ОК і -С(О)МК, де кожний К представлений Н, алкілом, алкенілом, алкінілом, арилом, алкарилом, гетероарилом або алкгетероарилом. 4. Стислий опис креслень «І

На Фігурі ЛА показана кругова схема структури спіралі Шиффера-Едмундсона ідеалізованої амфіпатичної о-спіралі, в якої незафарбовані кільця позначають гідрофільні амінокислотні залишки, а затінені юю кільця представляють гідрофобні амінокислотні залишки. юю

На Фігурі 18 показана схема ідеалізованої амфіпатичної спіралі Фіг.1А у вигляді спіральної решітки.

На Фігурі 1С показана схема ідеалізованої амфіпатичної спіралі Фіг.1А у вигляді спірального циліндра. -

На Фігурі 2А кругова схема структури спіралі Шиффера-Едмундсона для базового пептиду зі структурою (І), ї- що ілюструє амфіпатичні властивості спіралі (незафарбовані кільця позначають гідрофільні амінокислотні залишки, затінені кільця представляють гідрофобні амінокислотні залишки, а кільця з похилим штрихуванням позначають або гідрофільні, або гідрофобні амінокислотні залишки). «

На Фігурі 28 показана схема у вигляді спіральної решітки для базового пептиду зі структурою (І), що 470 ілюструє гідрофобну поверхню спіралі. - с На Фігурі 2С показана схема у вигляді спіральної решітки для базового пептиду формули (І), що ілюструє а гідрофільну поверхню спіралі. "» На Фігурі ЗА показана схема у вигляді спіральної решітки, що відображає гідрофільну поверхню пептиду 18А

Сегре (БУМ КАРМОКМАЕКІ КЕАЕ; ЗЕО ІЮ МО 244).

На Фігурі ЗВ показана схема у вигляді спіральної решітки, що відображає гідрофільну поверхню взятого в -і якості прикладу базового пептиду 210 (РМІ ОЇ ЕКЕГГ ЕЕЇ КОКІ К; 5ЕО ІЮ МО 210). - На Фігурі ЗС показана схема у вигляді спіральної решітки, що ілюструє гідрофільну поверхню консенсусного 22-амінокислотного пептиду Сегре (РМ ОЕРКЕКІ МЕЕГЕАЇ КОКІ К; ЗЕО ІЮ МО 75). (9) На Фігурі 4А показана схема у вигляді спіральної решітки, що відображає гідрофобну поверхню пептиду 18А с 50 Сегре (ЗЕО ІО МО 244).

На Фігурі 48 показана схема у вигляді спіральної решітки, що відображає гідрофобну поверхню взятого в т» якості прикладу базового пептиду 210 (ЗЕО ІЮО МО 210).

На Фігурі 4С показана схема у вигляді спіральної решітки, що ілюструє гідрофобну поверхню консенсусного 22- амінокислотного пептиду Сегре (ЗЕО ІЮ МО 75).

На Фігурі БА показана схема у вигляді кругової спіралі по Шифферу-Едмундсону для пептиду 18А Сегре (ЗЕО

ІО МО 244). о На Фігурі 5В показана схема у вигляді кругової спіралі по Шифферу-Едмундсону для обраного в якості іме) прикладу 210 (5ЕО ІО МО 210).

На Фігурі бА показана схема даного винаходу з розгалуженнями третього порядку. 60 На Фігурі 68 показана схема даного винаходу з розгалуженнями четвертого порядку.

На Фігурі 6С показана схема даного винаходу з розгалуженнями змішаних порядків.

На Фігурі 60 показаний приклад схеми даного винаходу з розгалуженнями по залишках лізину.

На Фігурі 7А приведений графік, що відображає розходження між виявленим хімічним зсувом Н с і хімічним зсувом Но, табульованим для випадкових спіралей, виявлених для пептиду 210 (ЗЕО ІЮ МО 210) і для 65 консенсусного 22-амінокислотного пептиду Сегре (5ЕО ІО МО 75).

На Фігурі 7В приведений графік, що відображає розходження між виявленим хімічним зсувом для протона в складі аміду і хімічний зсув для протона в складі аміду, табульованим для випадкових спіралей, виявлених для пептиду 210 (5ЕО ІО МО 210) і для консенсусного 22-амінокислотного пептиду Сегре (ЗЕО ІЮО МО 75).

На Фігурі ВА показана схема, що відображає різноманітні стани агрегації і ліпопептидні комплекси, що

Можуть бути отримані з використанням агоністів АроА-І по даному винаходу. Зліва: процес мультимеризації пептидів, що обумовлюється взаємодією декількох пептидних спіралей і призводить до утворення олігомерів в умовах встановлюваних концентрації пептиду, рН і іонної, сили розчину. У центрі: взаємодія пептидів (у будь-якому стані агрегації) із ліпідним компонентом (таким як ЗОМ), що призводить до реорганізації ліпідів.

Справа: шляхом зміни молярного відношення ліпіда і пептиду можуть бути отримані різноманітні типи 70 ліпопептидних комплексів - від ліпопептидних коміцел при низькому співвідношенні "ліпід/пептид' до дископодібних часток і нарешті до значних мультимерних комплексів при збільшенні співвідношення "ліпід/пептид".

На Фігурі 88 показана базова модель дископодібних ліпопептидних комплексів, що утворюються при точно встановлених співвідношеннях "ліпід/лпептид". Кожний пептид, що оточує край диска, знаходиться в тісному контакті з двома його найближчими сусідами. 5. Докладний опис винаходу

Агоністи АроА-І! по даному винаходу імітують функціонування й активність АроА-І. Вони утворять амфіпатичні спіралі (в присутності ліпідів), зв'язують ліпіди, утворюють пре- Д-подібні або НОЇ -подібні комплекси, активують фермент І САТ, обумовлюють підвищення концентрації сироваткового НОЇ і сприяють виходові холестерину з

Клітин. Біологічна функція пептидів корелює з їхньою спіральною структурою або з перетворенням у спіральні структури в присутності ліпідів.

Агоністи АроА-І по даному винаходу можуть бути отримані у вигляді стабільних нерозфасованих або стандартних доз, наприклад, у вигляді ліофілізованих продуктів, що можуть бути знову реконституйовані перед безпосереднім застосуванням іп мімо або включені до складу нового препарату. Даний винахід включає с фармацевтичні композиції і застосування таких композицій для лікування гіперліпідемії, гіперхолестеринемії, ішемічної хвороби серця, атеросклерозу й інших станів, таких як поява ендогенних токсинів, що обумовлюється о септичним шоком.

Даний винахід проілюстрований робочими прикладами, в яких показано, що агоністи АроА-І по даному винаходу є винятково ефективними по активації ферменту |САТ., що тим самим стимулює процес ЗТХ. «І зо Застосування агоністів АроА-і по даному винаходу в тваринних моделях іп мімо обумовлює підвищення концентрації сироваткового НОЇ. о

Більш докладно даний винахід описаний в окремих розділах нижче, включаючи: склад і структуру пептидних (У агоністів АроА-Ї, структурні і функціональні характеристики, засоби одержання нерозфасованих і стандартних доз і засоби застосування. -- 5.1. Структура і функція пептиду ї-

Агоністи АроА-ІЇ по даному винаходу звичайно є пептидами або їхніми аналогами, що спроможні утворювати амфіпатичні о-спіралі в присутності ліпідів і які імітують активність АроА-І. Агоністи включають в якості своїх основних компонентів базовий ("серцеподібний") пептид, що складається з 15-22 амінокислотних залишків, « переважно з 18 амінокислотних залишків, або вони є аналогами таких пептидів, при тому, що, принаймні, один 70 амідний зв'язок в пептиді замінений на заміщений амід, на ізостери аміду або міметики аміду. - с Агоністи АроА-| по даному винаходу почасти засновані на результатах досліджень, що проводилися ц заявниками, які встановили, що зміна і (або) видалення (делетування) визначених амінокислотних залишків у "» первинній послідовності 22-мерного консенсусного пептиду, визначеної в роботах МепкКаїасна|Іараїйні еї аї., 1991, Мої. Сопіогт. 5 Вісі. ІпФегасііопв, Іпа. Асад. з5сі., зег. В, 585-596 (РМ ОЕРКЕКІ МЕЕГЕАЇ КОКІ К; 5ЕО ІЮ МО 75; тут і далі вона позначається як "консенсусна 22-мерна послідовність Сегре" або "консенсусний 22-мерний -І пептид"), що здогадно є істотним для прояву активності синтетичних пептидів, забезпечує синтетичним -3з пептидам активність, рівну, а в деяких експериментах і перевищуючу активність нативного АроА-Ї. В одному з аспектів даного винаходу чотири амінокислотних залишки консенсусного 22-мерного пептиду, такі як залишки с 14-17, делетують з утворенням 18-мерних пептидів, спроможних активувати І САТ. В інших додаткових варіантах делетують чотири інших залишки. В деяких варіантах три заряджених амінокислотних залишки, що здогадно є і-й істотними для прояву активності ((1ІШ-5, І уг-9 і сІш-13) заміняють на гідрофобний залишок, такий як залишок «з» лейцину.

Поза зв'язком із будь-якими теоретичними побудовами вважається, що спіраль, утворена агоністами АроА-! по даному винаходу, у більш вираженому ступені імітує структурні і функціональні властивості ділянки амфіпатичної спіралі в складі нативного АродА-Ї, що дуже важливо з точки зору ефективного зв'язування ліпідів, виходу холестерину з клітин і активації І САТ, у порівнянні з тим, що характерно для о-спіралей, утворених о пептидами-міметиками АроА-ІЇ, раніше описаними в науковій літературі, тим самим визначаючи в результаті іме) пептиди, які характеризуються істотно більш високою АроА-І-подібною активністю в порівнянні з цими раніше охарактеризованими пептидами. Дійсно, при тому, що більшість агоністів АроА-І по даному винаходу виявляють 60 рівну, а в деяких варіантах навіть перевищуючу активність нативного АроА-І, кращі по характеристиках з описаних в літературі міметиків АроА-Ї - пептид 1З8АМА (ЕМ/ЛІ ЕАЕМККМІ ЕК-І КЕГЕ; 5ЕО ІЮ МО 246) (Согіп|іп еї аї., 1993, Віоспіт. Віорпуз. Асіа, 1170, 8-16; І арециг еї аїЇ., жовт., 1994, Агіегіозсіеговів: Арвігасів 186 5 187) і

М-ацетильований С-амідований пептид 18АМА4 (5ЕО ІЮО МО 239) (Вгаззеиг, 1993, Віоспіт. Віорпуз. Асіа, 1170, 1-7) - виявляють менше ніж 4905 і 1195 активності, відповідно, від активності АроА-ЇІ, на що вказують дані 65 вимірів у тесті на активацію ферменту І САТ, описаному в даній заявці.

В одному з ілюстративних прикладів даного винаходу базові пептиди (або їхні аналоги), що складають агоністи Арод-!| згідно з даним винаходом, характеризуються такою структурною формулою (1): хІ-Х2-Х3-ХА-х5-Х6-Х7-Х8-Ха-хХ10-- (і) -Х14-Х12-Х13-Х14-Х15-Х16-Х17--Х18, де

Хі представлений проліном (Р), аланіном (А), гліцином (С), аспарагіном (М), глутаміном (С) або ЮО-проліном (р);

Хо представлений аліфатичною амінокислотою; 70 Ха представлений лейцином (І);

Ху представлений кислою амінокислотою;

Хв представлений лейцином (І) або фенілаланіном (Р);

Хе представлений лейцином (І) або фенілаланіном (Р);

Х7 представлений основною амінокислотою;

Хв представлений кислою амінокислотою;

Хо представлений лейцином (І) або триптофаном (М);

Хо представлений лейцином (І) або триптофаном (М);

Х.1 представлений кислою амінокислотою або аспарагіном (М);

Хі представлений кислою амінокислотою;

Хіз представлений лейцином (І), триптофаном (МУ) або фенілаланіном (Б);

Х14 представлений основною амінокислотою або лейцином (І);

Хі5 представлений глутаміном (С) або аспарагіном (М);

Хв представлений основною амінокислотою;

Х.17 представлений лейцином (І); і с

Хв представлений основною амінокислотою. Ге)

Базові пептиди, що мають формулу (1)р почасти визначені не конкретними амінокислотами, а їхніми класами.

Характеристики різноманітних класів подані в даному тексті в зв'язку з описом мутантних і змінених варіантів формули (1).

У базових пептидах формули (І), символ "-" між амінокислотними залишками Х, у цілому означає функцію в послідовного зв'язку осьової структури пептиду. Отже, символ "-" відповідає пептидному зв'язку або амідному ю зв'язку (-С(О)МН-). Повинно бути, проте, зрозуміло, що даний винахід представляє пептидні аналоги, в яких один або декілька амідних зв'язків необов'язково може бути замінена на інший ніж з амідом зв'язок, переважно о на зв'язок з ізостерами аміду або з заміщеним амідом. Отже, при тому, що різноманітні залишки Ху У формулі "пе (І) відповідають амінокислотам, а переважні варіанти даного винаходу подані пептидами, для спеціаліста в даній області техніки буде зрозуміло, що у варіантах із неамідними зв'язками термін "амінокислота" або - "залишок" по використанню в даному тексті позначає інші біфункціональні складові, що включають групи, подібні за структурою бічним ланцюгам амінокислот.

Заміщені аміди в цілому включають, тим самим не вичерпуючись, групи формули -С(О)МК-, в якій К « представлений С.--Св-алкілом, заміщеним С.і-Св-алкілом, С.--Св-алкенілом, заміщеним С.-Св-алкенілом, сС.-Св-алкінілом, заміщеним С.-Св-алкінілом, Св-Сод-арилом, заміщеним Св-Соро-арилом, Св-Сов-алкарилом, но) с заміщеним Се-Сов-алкарилом, 5-20-атомним гетероарилом, заміщеним 5-20-атомним гетероарилом, "» 6-26-атомним алкгетероарилом і заміщеним 6-26-атомним алкгетероарилом. " Ізостери аміду в цілому включають, тим самим не обмежуючись, групи -СНОМН-, -СН»5-, -СНоСН»-, -СНАСН- (цис- і транс-), -У К(Ч«О)СН»о-, -СН(ОНІ)СН»- і -СНЬ5БО-. Сполуки, що мають такі неамідні зв'язки, і засоби одержання таких сполук добре відомі в даній області техніки (див., наприклад, Зраїсіа, Магспй 1983, Меда Оаїа Мої. 1, ш- Іввце 3; Зрайіа, 1983, "Реріїде ВасКропе Модіїїісайопв", Іп "СНнетівігу апа Віоспетівігу ої Атіпо Асідз, Реріідез 5 - Ргоїеіпв", ей. МУеіпвівїп, МагсеІ ЮОекКег, Мем Могк, р.267 (депега! геміемжм); Могпеу, 1980, Тгтепаз РІагт. зсоі., 1, 463-468; Нидзоп еї аї., 1979, Іпіегп. У. Ргої. Кев., 14, 177-185 (-СНОМН- і -СНЬСН»-).; Зраюїа еї аї., 1986, о Ійе Зсі.,, 38, 1243-1249 (-СНьЬ5Б-): Напп, 1982, 9. Спет. 5ос. Регкіп Тгапв., 1.1, 307-314 (-СНАСН- -цис- і с 20 транс-); АІтаціві еї аї., 1980, у. Мед. Спет., 23, 1392-1398 (-СОСН»-); деппіпудз-УУпйе еї аї., Тейгапеагоп

Гек, 23, 2533 (-СОСН»-); європейська патентна заявка ЕР4А5664(1982)САЗ7, 39405 (-СН(ОНСН 5-); НоїІадау еї т» а!., 1983, Теггапеагоп Гек. 24, 4401-4404 (-СН(ОН)СН»-); та Нгибу, 1982, | Ме Зсі, 31, 189-199 (-СН»о-5-).

Крім того, один або декілька амідних зв'язків можуть бути замінені імітуючими пептид або імітуючими амід складовими, що у скільки-небудь істотному ступені не порушують структуру або активність пептидів. Придатними 59 амідоміметиками є ті, що описані, наприклад, Олсоном із співавт. (ОІвоп еї аіЇ., 1993, 9). Мед. Спет, 36,

ГФ) 3039-3049).

Істотною властивістю базових пептидів формули (І), є їхня спроможність утворювати в присутності ліпідів о амфіпатичну о-спіраль. Під поняттям "амфіпатична" розуміється те, що така о-спіраль характеризується наявністю спрямованих у різні сторони гідрофільної і гідрофобної поверхонь, орієнтованих уздовж їхньої довгої 60 обі: тобто одна поверхня такої спіралі складена в основному гідрофільними бічними ланцюгами амінокислот, у той час як протилежна поверхня складена в основному гідрофобними бічними ланцюгами. На ФіглА і 18 показані дві схематичні версії протилежних гідрофобної і гідрофільної поверхонь у взятій в якості прикладу ідеалізованої амфіпатичної у-спіралі На Фіг1А показана кругова схема спіралі по Шифферу-Едмундсону (Зспійег 5 Едтипазоп, 1967, Віорпув. 9., 1, 121-135). У цьому "колі" довга вісь спіралі перпендикулярна бо площині аркушу паперу. Починаючи з М-кінця, наступні амінокислотні залишки (подані у вигляді кільців)

розподілені по периметру окружності з інтервалом приблизно в 1007. Таким чином, амінокислотний залишок "а-1" відхилений від залишку "п" на 100", залишок "пі2" відхилений на 1007 від залишку "пя-1" і т.д. Показник у 1007 відповідає наявності 3,6 залишків амінокислот з розрахунку на один виток, що звичайно для ідеалізованих (о-спіралей. На Фіг1А протилежні гідрофільна і гідрофобна поверхні спіралі виразно видні: гідрофільні амінокислоти показані у вигляді незафарбованих кільців, а гідрофобні залишки амінокислот показані у вигляді затінених кільців.

На Фігурі 18 показана схема ідеалізованої амфіпатичної спіральної решітки, зображеної і на ФігА, (Гіт, 1978, РЕВЗ5 І ейї., 89, 10-14). На звичайній схемі у вигляді спіральної решітки о-спіраль зображується у вигляді 70 циліндра, що зрізаний уздовж центральної осі своєї гідрофільної поверхні і сплощений. Таким чином, центральна частина гідрофобної поверхні, визначена за розміром гідрофобного моменту спіралі (Еізепрего еї аї., 1982,

Маїшиге, 299, 371-374), знаходиться в центрі схеми й орієнтована таким чином, щоб як би підніматися над поверхнею сторінки. Схема циліндра спіралі до "розрізування й сплощення" показана на Фіг.1С. При перетинах циліндра різними площинами можуть бути отримані різноманітні плани однієї і тієї ж амфіпатичної спіралі: 75 Відповідно, може бути отримана різноманітна інформація про властивості отриманої спіралі.

Амфіпатична природа осо-спіралі, утвореної в присутності ліпідів базовими пептидами формули (1), продемонстрована на Фіг.2. На Фіг.2А показана кругова схема по Шифферу-Едмундсону, а на Фіг.2В8 показана схема у вигляді спіральної решітки, що ілюструє гідрофобну поверхню і на Фіг.2С показана схема у вигляді спіральної решітки, що ілюструє гідрофільну поверхню. На кожній із Фіг.2А, 2В і 2С гідрофільні залишки подані незафарбованими кільцями, а гідрофобні залишки - затіненими кільцями, а залишки, що можуть бути гідрофільними або гідрофобними, - частково затіненими кільцями. Як буде обговорюватися більш докладно нижче при розгляді змінених або мутованих форм пептидів формули (І), деякі амінокислотні залишки можуть бути замінені іншими амінокислотними залишками таким чином, що гідрофільна і гідрофобна поверхні спіралі, утвореної конкретним пептидом, можуть і не складатися цілком із, відповідно, гідрофільних і гідрофобних Ге амінокислот. Таким чином, повинно бути зрозуміло, що при описі амфіпатичної о-спіралі, утвореної базовими о пептидами по даному винаходу, вираз "гідрофільна поверхня вказує на ту поверхню цієї спіралі, що характеризується сумарною гідрофільністю. Вираз "гідрофобна поверхня" означає те, що поверхня пептиду характеризується сумарною гідрофобністю.

Не торкаючись конкретних теоретичних побудов, можна вважати, що деякі структурні і (або) фізичні « властивості амфіпатичної спіралі, утвореної базовими пептидами формули (І), є важливими для прояву ю активності. Ці властивості включають рівень амфіпатичності, загальний рівень гідрофобності, середній розмір гідрофобності, гідрофобний і гідрофільний кути, гідрофобний момент, середній розмір гідрофобного моментуі М сумарний заряд о-спіралі. -

При тому, що зображена на Фіг2А кругова схема представляє стандартний підхід до відображення амфіпатичної природи базових пептидів формули (І), рівень амфіпатичности (суть ступінь асиметрії ї- гідрофобності) може бути стандартним шляхом обчислена шляхом визначення гідрофобного моменту ( уд) спіралі. Засоби обчислення цу для конкретної пептидної послідовності добре відомі в даній області техніки й описані, наприклад Ейзенбергом (Еізепрегдо, 1984, Апп. Кем. Віоспет., 53, 595-623). Реальний розмір рн, « обчислений для конкретного пептиду, буде залежати від загального числа амінокислотних залишків, що З складають даний пептид. Отже, у принципі не є інформативним порівняння показників цу для пептидів с неоднакової довжини. "з Амфіпатичність пептидів неоднакової довжини може бути піддана прямому порівнянню за ознакою усередненого гідрофобного моменту («цу»). Середній гідрофобний момент може бути визначений співвіднесенням розміру цн до загального числа амінокислот у складі спіралі (тобто «цу»:Нн/М). У цілому, -1 що базові пептиди, що характеризуються розміром «цу» у межах від 0,55 до 0,65 з урахуванням оцінки цього показника на основі нормалізованої шкали гідрофобності за Ейзенбергом (Еізепрего, 1984, 9. Мої. Віої., 179, - 125-142), розглядаються як такі, що потрапляють в обсяг даного винаходу, при тому, що переважним діапазоном сл розмірів «ун» є діапазон 0,58-0,62.

Загальний або повний рівень гідрофобності (Но) пептиду може бути стандартним шляхом обчислена як о алгебраїчна сума розмірів гідрофобності кожного з амінокислотних залишків у складі даного пептиду ї» м де М - число амінокислотних залишків у пептиді, а Н; - розмір гідрофобності 1і-ого (те На -Зн ї- амінокислотного залишку). Середня гідрофобність ( «Но») - це гідрофобність, співвіднесена до числа 22 амінокислотних залишків (тобто «Но»-Но/М). У цілому, базові пептиди, що характеризуються середнім розміром

ГФ) гідрофобності в межах від -0,150 до -0,070 з урахуванням оцінки цього показника на основі нормалізованої юю консенсусної шкали гідрофобності за Ейзенбергом (Еізепрего, 1984, 9. Мої. Віої., 179, 125-142), розглядаються як такі, що потрапляють в обсяг даного винаходу, при тому, що переважним діапазоном розмірів середньої гідрофобності є діапазон від -0,130 до -0,050. бо рпо

Загальна гідрофобність гідрофобної поверхні (НО ) амфіпатичної спіралі може бути визначена як сума розмірів гідрофобностей гідрофобних амінокислотних залишків, що потрапляють усередину гідрофобного кута відповідно до визначеного нижче б5 т» Набе -Зн ї-і де

МН - число гідрофобних амінокислотних залишків у складі гідрофобної поверхні, а Н; визначений вище).

Середня гідрофобність гідрофобної поверхні («НО») - це відношення но мн в якому Мн визначений вище. У цілому, базові пептиди, що характеризуються розміром «НО» у межах від 0,90 до 1,20 з урахуванням оцінки цього показника на основі нормалізованої шкали гідрофобності за Ейзенбергом (Еізепрего, 1984, цит. вище;

Еізепрего еї аї., 1982, цит. вище), розглядаються як такі, що потрапляють в обсяг даного винаходу, при тому, що переважним діапазоном розмірів «НО» є діапазон від 0,950 до 1,10.

Гідрофобний кут (кут "рпо") звичайно визначається як кут або дуга, утворена найбільше тривалою ланкою, 75 гідрофобних амінокислотних залишків у випадку, коли такий пептид зображений у вигляді кругової спіралі за

Шиффером-Едмундсоном (тобто число розташованих підряд гідрофобних залишків у такій схемі множиться на 207). Гідрофільний кут (кут "рі" є різницею між 360" і кутом "рпо" (тобто кут 3607 мінус "рпо"). Для спеціаліста в даній області техніки буде зрозуміло, що розмір кутів "рпо" і "рпї" буде частково залежати від числа амінокислотних залишків у пептиді. Наприклад, беручи до уваги зображене на Фіг.5А і 5В, можна бачити, що в одній круговій спіралі схеми Шиффера-Едмундсона знаходиться тільки 18 амінокислот. Зменшення числа амінокислот призводить до утворення розриву в колі, а більша кількість амінокислот призведе до того, що окремі положення кола будуть зайняті більш ніж одним амінокислотним залишком.

У тому випадку, коли пептиди складаються більш ніж із 18 амінокислотних залишків, поняття "безупинна ланка", складене гідрофобними амінокислотними залишками, означає те, що принаймні одна амінокислота в с ов положеннях по периметру окружності, що включають більш однієї амінокислоти, є гідрофобною амінокислотою.

Звичайно базові пептиди, що складаються з 18 або меншого числа амінокислот, що характеризуються кутом о "рпо" у межах від 120" до 160", розглядаються як такі, що входять в обсяг даного винаходу, при тому, що значення кута "рпо" у діапазоні 1307 -1507 є переважними. Варіанти, що складаються більш ніж із 18 амінокислот, звичайно характеризуються кутом "ро" у діапазоні від 160" до 220", при тому, що переважними є « зо значення кута "рпо" у діапазоні 1807 -2007.

Деякі структурні і (або) фізичні характеристики базових пептидів формули (І) проілюстровані на Фіг.З і 4. о

На Фігурі ЗВ показана схема у вигляді спіральної решітки обраного як приклад базового пептиду по даному ю винаходу - пептиду 210 (РМІОЇ ЕКЕ ТЕБЕ! КОКІК; ЗЕ ІО МО 210): вона показує розподіл заряду уздовж гідрофільної поверхні спіралі. На Фіг.3В спіральний циліндр був розсічений уздовж центральної осі гідрофобної (87

Зз5 поверхні і сплощений. Три гідрофобних залишки лейцину (І), що заміняють залишки консенсусного 22-мерного че пептиду Сегре (залишки 5, 9 і 13) (Фіг.3С), затінені. Як очевидно з показаного на Фіг.3В, позитивно заряджені амінокислотні залишки кластеризовані на останньому С-кінцевому витку спіралі (С-кінцева частина орієнтована к верху малюнка). Не прив'язуючись до якоїсь конкретної теорії, можна вважати, що кластер основних залишків у

С-кінцевій частині (залишки 14, 16 і 18) стабілізує спіраль за рахунок електростатичних взаємодій у « к зарядженому (МН 3)-спіральному диполі. Також передбачається, що стабілізація має місце за рахунок З с гідрофобних взаємодій між бічними ланцюгами лізину і серцеподібною частиною спіралі (див. СгоеркКе еї аї., "» 1996, Ргос. Май). Асай. 5сі. ОБА, 93, 4025-4029; Еврозіюо еї аї., 1997, Віороїутегв, 41, 27-35). " За винятком С-кінцевої частини, у якій кластеризований позитивний заряд (залишки 14, 16 і 18), по іншій частині гідрофільної поверхні розподілені негативні заряди при наявності, принаймні, одного негативно зарядженого (кислого) амінокислотного залишку в розрахунку на виток, в результаті чого утвориться безупинна - ланка негативних зарядів по гідрофільній поверхні спіралі. - На Фіг4АВ показана схема спіральної решітки, що ілюструє гідрофобну поверхню амфіпатичної спіралі, утвореної обраним в якості прикладу базовим пептидом 210 (ЗЕО ІЮО МО 210). На Фіг.48 циліндр розсічений о уздовж центральної осі гідрофільної поверхні і сплощений. Гідрофобна поверхня базового пептиду включає по г 20 два гідрофобних залишку на 1 оборот спіралі, за винятком останнього С-кінцевого витка, в якому переважають основні залишки. Аналіз методом ядерного магнітного резонансу показує, що амінокислотні залишки З, 6, 9 і 10

Т» аналогічного 22-мерного пептиду (РМІ ОГЕКЕГІ МЕП ЕАГКОКІ К; ЗЕО І МО 4) формують гідрофобний кластер поблизу від М-кінцевої частини спіралі. У центрі цього кластера знаходиться залишок фенілаланіна, що займає б-е положення: вважається, що він грає важливу роль у стабілізації гідрофобного кластера. 59 Не залучаючи будь-яку конкретну теорію, можна вважати, що гідрофобний кластер, утворений залишками 3,

Ф! 6, 9 їі 10, є істотним з точки зору забезпечення ефективного зв'язування ліпідів і активації ферменту І САТ.

Амфіпатичні пептиди, як очікується, зв'язують фосфоліпіди шляхом розміщення гідрофобних поверхонь у о відношенні алкільних ланцюгів у складі ліпідних складових. Отже, вважається, що даний високогідрофобний кластер забезпечує високий рівень афінності стосовно ліпідів, характерний для базових пептидів за даним 60 винаходом. Оскільки зв'язування ліпідів є умовою для активації І САТ, можна вважати, що даний гідрофобний кластер також є істотним з точки зору активації І САТ.

Ароматичні амінокислоти часто розглядаються, як важливі чинники прикріплення пептидів і білків до ліпідів (Ое Кгийй, 1990, Віовсі. Кер., 10, 127-130; О'Меї 5 ЮОе Сгадо, 1990, Зсіепсе, 250, 645-551; Віопаейе еї аї., 1993, Віоспіт. Віорпуз. Асіа, 1202, 331-336). Таким чином, далі можна вважати, що залишок фенілаланіна-б, що бо знаходиться в центрі гідрофобного кластера, також може грати ключову роль у прикріпленні базових пептидів формули (І) до ліпідів.

Взаємодії між базовими пептидами по даному винаходу і ліпідами призводять до утворення пептидноліпідних комплексів. Як показано на Фіг.8А, характер такого комплексу, що утворився, (коміцели, дископодібні структури, пузиркоподібні структури і багатошарові утворення) залежить від молярного відношення в парі "ліпід/пептид", при тому, що коміцели в цілому утворюються при низькому молярному відношенні в комплексі "ліпід/пептид", а три інших типи комплексів утворюються при послідовному зростанні молярних відношень у комплексів "ліпід/пептид". Цей параметр був охарактеризований для амфіпатичних пептидів (Ерапа, "Те

Атрпіраййіс Неїїх", 1993) і для апопротеїна АроА-І (допев, 1992, "Бігисішге апа Рипсіоп ої Ароїіроргоїеїпв",

Сп.8, рр.217-250). Молярне відношення в комплексі "ліпід/пептид" також є чинником, що визначає розмір і склад /0 таких комплексів (див. далі розділ 5.3.1).

Довга вісь о-спіралі, утвореної базовими пептидами формули (І), в цілому має викривлену форму. Для типових амфіпатичних спіралей було встановлено, що довжина водневих зв'язків на гідрофільній і гідрофобній поверхнях варіюється таким чином, що гідрофобна сторона спіралі є увігнутою (Вагом/ 8 Тпогпіоп, 1988, 9.

Мої. ВіоіЇ., 201, 601-619; 7пои еї аї., 1992, 9). Атег. СПпет. ЗБос, 33, 11174-11183; СезеїЇ еї аї., 1997, 4. 75 Віотої. ММК, 9, 127-135). Поза зв'язком із якоюсь конкретною теорією, можна вважати, що загальне викривлення гідрофобної поверхні в спіралі може бути важливим чинником у процесі зв'язування дископодібних комплексів - викривлена спіраль дозволяє пептиду краще "приладжуватися" до країв дископодібних часток, тим самим збільшуючи стабільність пептидно-дископодібного комплексу .

У принципі в складі прийнятої структурної моделі АроА-І амфіпатичні оу-спіралі упаковуються навколо країв дископодібних НОЇ (див. Фіг.88В). У цій моделі спіралі, як вважається, укладаються так, щоб їхні гідрофобні поверхні розташовувалися навпроти ацильних ланцюгів ліпідів (Вгаззецг еї аї., 1990, Віоспіт. Віорпувз. Асіа, 1043, 245-252). Спіралі організовані в антипаралельній орієнтації а кооперована дія таких спіралей розглядається як важливий чинник стабільності дископодібних комплексів НОЇ (Вгаззеицйг еї аїЇ., цит. вище).

Передбачається, що одним із чинників, що забезпечують стабільність дископодібних комплексів НОЇ, є існування Га іонних взаємодій між кислими й основними залишками, у результаті чого утворюються межмолекулярні сольові "містки" або водневі зв'язки між залишками на сусідніх антипаралельних спіралях. У такій моделі пептиди о розглядаються не як окремі елементи, а як чинники взаємодії принаймні двох пептидних молекул, що знаходяться поряд (Фіг.88В).

Також у принципі можна вважати прийнятим, що утворення межмолекулярного водневого зв'язку або «І сольового "містку" між кислим і основним залишками, відповідно, за положеннями поліпептидної спіралі "ї" та "ї-З" стабілізує цю спіральну структуру (Магдизеє еї аїЇ., 1985, Ргос. Май. Асад. Зсі. О5БА, 84, 8898-8902). юю

Один позитивний заряд співвідносять із 7-им залишком, який здогадно бере участь у забезпеченні стабільності юю спіралі за рахунок утворення сольового "містка" із кислим залишком в сусідньому витку спіралі.

Таким чином, додаткові ключові параметри базових пептидів формули (І) пов'язані з їхньою спроможністю - утворювати межмолекулярні водневі зв'язки один з одним, коли вони взаємо розташовуються в антипаралельній /- ча орієнтації, при тому, що їхні гідрофобні поверхні орієнтуються в тому самому напрямку, тобто так, як це повинно відбуватися при зв'язуванні пептидів із ліпідами, а також із їхньою спроможністю утворювати межмолекулярні водневі зв'язки або сольові "містки" поруч із М- і С-кінцневими ділянками спіралі. Вважається, « що спроможність базових пептидів формули (І) щільно упаковуватися і взаємодіяти за іонним типом з утворенням внутрішньо- і (або) межмолекулярних сольових "містків" і (або) водневих зв'язків у процесі - с зв'язування з ліпідами в антипаралельній орієнтації є важливою властивістю базових пептидів за даним ц винаходом. "» Спроможність базових пептидів здійснювати кращі межмолекулярні пептидпептидні взаємодії також розглядається як важливий чинник у відсутності ліпідів. Базові пептиди по даному винаходу можуть самоасоціюватися, зокрема, через високі значення їх «рн», «Но» і гідрофобного рогу (див. табл.1). Явище -і самоасоційованості залежить від таких параметрів як рН, концентрація пептиду й іонної сили розчину і може - призводити до утворення декількох типів зв'язків - від мономерних до декількох мультимерних форм (Фіг.10А).

Гідрофобна серцевина пептидної агрегації сприяє гідрофобним взаємодіям із ліпідами. Спроможність пептидів (9) агрегуватися навіть за дуже низьких концентрацій може сприяти їхньому зв'язуванню з ліпідами. сл 50 Передбачається, що в серцевинній частині агрегації пептидів межпептидні взаємодії також мають місце і можуть конкурувати з пептидно-ліпідними взаємодіями. с» На додаток до описаних вище властивостей, інші параметри, як можна припустити, важливі з погляду активності, включаючи такі властивості як загальне число гідрофобних залишків, загальне число заряджених залишків і кумулятивний заряд пептидів.

Узагальнення переважних фізичних і структурних властивостей базових пептидів формули (І) подані нижче в о таблиці 1. ю 60 АроА-І формули (І) 65 «нн" О,55-0,65 0,58-0,62

000 бумернийтаяд 00000000 вд 00000010 70 Властивості амфіпатичних о-спіралей, утворених базовими пептидами за даним винаходом, істотною мірою відрізняються від властивостей амфіпатичних о-спіралей А-класу, зокрема, від д-спіралей А-класу, 18А Сегре і від 22-мерного консенсусного пептиду. Ці розходження проілюстровані за допомогою обраного в якості прикладу базового пептиду 210 (5ЕО ІЮО МО 210) на Фіг.3-5.

Звертаючись до Фіг.4А-4С, можна побачити, що гідрофобна поверхня пептиду 210 характеризується більш 75 потужними гідрофобними властивостями в порівнянні з гідрофобною поверхнею пептиду 18А Сегре і 22-мерного консенсусного пептиду. Зокрема, залишки 9 і 13 (затінені на Фіг.48) є в послідовності пептиду 210 (5ЕО ІЮ МО 210) гідрофобними залишками лейцина (І) у порівнянні із зарядженими залишками, наявними в пептиді ІЗА (ЗЕ

ІО МО 244) і консенсусному 22-мерному пептиді (ЗЕО ІЮО МО 75). Заміна цих двох заряджених залишків у пептиді 18А Сегре й у консенсусномі 22-мерному пептиді на гідрофобні залишки лейцина (І) призводить до прояву істотних розходжень по параметрах амфіпатичності, гідрофобності, розміру кута "рпо" та іншим характеристикам даної спіралі.

Порівняння фізичних і структурних властивостей пептиду 210 (ЗЕО ІЮО МО 210), пептиду 18А Сегре (ЗЕО І

МО 244) і консенсусного 22-мерного пептиду (ЗЕО ІЮ МО 75) подано нижче в таблиці 2. с о 22-мерним пептидом (ЗЕО ІО МО 75) і пептидом 18А (ЗЕО 1ОМО 244) Сегре -

Зепідрофільнихамноюєтт 10010939 зо Мепдрофобниєамноюєтт 11110081109000001009 ю ю й з з

Ме нестивно заряджених змноюелт 12011164 «

Сумарнийзаряд 11110111 - с Ці розходження у властивостях обумовлює істотне розходження їхніх активностей. При тому, що пептид 18А ч Сегре (ЗЕО ІЮ МО 244)і консенсусний 22-мерний пептид (ЗЕО ІЮО МО 75) виявляє, відповідно, тільки 595-у і 1095-у я активацію І САТ у порівнянні з нативним АроА-! у тесті, описаному в даній заявці, пептиди 210 (ЗЕО ІЮ МО 210) виявляють 4659б-і рівні активації І САТ, відповідно, у порівнянні з нативним АроА-Ї, що оцінювалися в тому ж самому тесті. Пептид 193 (ЗЕО ІЮО МО 193), що є ацетільованим за М-кінцем й амідованим за С-кінцем варіантом - пептиду 210, виявляє 9695-у активацію І САТ, оцінювану в тому ж самому тесті. - Деякі амінокислотні залишки в складі базових пептидів формули (І) можуть бути замінені іншими амінокислотними залишками без істотного негативного впливу, а в багатьох випадках і з посиленням активності 1 цих пептидів. Отже, даним винаходом також рекомендуються змінені або мутовані форми базових пептидів сл 50 формули (І), при тому, що принаймні один визначений амінокислотний залишок у структурі заміняється іншим амінокислотним залишком. Оскільки одна з істотних властивостей, що впливають на активність базових пептидів ї» за даним винаходом, розглядається як спроможність утворювати в присутності ліпідів А-спіралі, що виявляють амфіпатичні й інші властивості, описані вище, те повинно бути зрозуміло, що в переважних варіантах даного винаходу амінокислотні заміни є консервативними, тобто амінокислотні залишки, що заміняють, характеризуються фізичними і хімічними властивостями, подібними до таких в замінних амінокислотних о залишків.

Для цілей визначення консервативних амінокислотних замін амінокислоти можуть бути стандартною чином іме) класифіковані на дві базові категорії - гідрофільні і гідрофобні: в першу чергу, поділ залежить від фізико-хімічних характеристик бічних ланцюгів амінокислот. Ці дві основні категорії можуть бути далі 60 класифіковані на підгрупи, що більш детально характеризують властивості бічних ланцюгів амінокислот.

Наприклад, категорія гідрофильних амінокислот може бути далі підрозділена на кислі, основні і полярні амінокислоти. Категорія гідрофобних амінокислот може бути далі підрозділена на неполярні й ароматичні амінокислоти. Визначення різноманітних категорій амінокислот, що визначають склад формули (І), такі.

Термін "гідрофільна амінокислота" означає амінокислоту, що виявляє властивість гідрофобності нижче 0 у 65 відповідності до стандартної шкали гідрофобності за Ейзенбергом (Еізепрего еї аі., 1984, 9). Мої. Віої., 179, 125-142). Генетично кодовані гідрофільні амінокислоти включають треонін (Т), серин (5), гістидин (Н),

глутамінову кислоту (Е), аспарагін (М), глутамін (С), аспарагінову кислоту (0), лізин (К) і аргінін (К).

Термін "кисла амінокислота" означає гідрофільну амінокислоту, в якої бічний ланцюг характеризується значенням рК, меншим за 7. Кислі амінокислоти звичайно мають негативно заряджені бічні ланцюги при фізіологічних значеннях рН через втрату іона водню. Генетично кодованими кислими амінокислотами є глутамінова кислота (Е) і аспарагінова кислота (0).

Термін "основна амінокислота" означає гідрофільну амінокислоту, в якої бічний ланцюг характеризується значенням рК, більшим за 7. Основні амінокислоти звичайно мають позитивно заряджені бічні ланцюги при фізіологічних значеннях рН через втрату іона гідроксонію. Генетично кодованими основними амінокислотами є 7/0 пістидин (Н), аргінін (К) і лізин (К).

Термін "полярна амінокислота" означає гідрофільну амінокислоту з незарядженим бічним ланцюгом при фізіологічних значеннях рН, але в який є принаймні один зв'язок, в якому пара електронів, спільна для двох атомів, знаходиться ближче до одного з цих атомів. Генетично кодованими полярними амінокислотами є аспарагін (М), глутамін (0), серин (5) і треонін (Т).

Термін "гідрофобна амінокислота" означає амінокислоту, що виявляє властивість гідрофобності вище 0 у відповідності до стандартної шкали гідрофобності за Ейзенбергом (Еізепрего еї а!., 1984, 9. Мої. Віо.1., 179, 125-142). Генетично кодовані гідрофобні амінокислоти включають пролін (Р), ізолейцин (І), фенілаланін (Р), валін (М), лейцин (І), триптофан (Му), метіонин (М), аланін (А), гліцин (С) і тирозин (ХУ).

Термін "ароматична амінокислота" означає гідрофобну амінокислоту, у бічному ланцюзі якої є, принаймні, 2о одне ароматичне або гетероциклічне кільце. Ароматичне або гетероциклічне кільце може включати один або більше число заступників, таких як -ОН, -ЗН, -СМ, -Р, -СІ, -Вг, -І, -МО», -МО, -МН», -МНК, -МКК, -С(О)К, -ФООН, -Ф(ФООК, -Ф(О)МН», -С(О)МНК, -С(О)МКК і подібне, де кожний із К незалежно представлений С.--Св-алкілом, заміщеним С.і-Св-алкілом, Сі-Св-алкенілом, заміщеним С.і-Св-алкенілом, С.4-Св-алкінілом, заміщеним

С1-Св-алкінілом, Св-Сор-арилом, заміщеним С5-Соо-арилом, Се-Сов-алкарилом, заміщеним Св-Сов-алкарилом, сч ов З-20-атомним гетероарилом, заміщеним 5-20-атомним гетероарилом, 6-26-атомним алкгетероарилом |і заміщеним 6-26-атомним алкгетероарилом. Генетично кодованими ароматичними амінокислотами є фенілаланін і) (Р), тирозин (ХУ) і триптофан (МУ).

Термін "неполярна амінокислота" означає гідрофобну амінокислоту, що характеризується незарядженим бічним ланцюгом при фізіологічних значеннях рН і такою, що має зв'язки, в яких пара електронів, що є «г зо загальними для двох атомів, знаходяться на рівній відстані від кожного з цих атомів (тобто бічний ланцюг не є полярним). Генетично кодованими неполярними амінокислотами є лейцин (І), валін (М), ізолейцин (І), метіонин о (М), гліцин (С) і аланін (А). ю

Термін "аліфатична амінокислота" означає гідрофобну амінокислоту, що характеризується наявністю аліфатичного вуглеводневого бічного ланцюга. Генетично кодованими аліфатичними амінокислотами є аланін 87 з5 (А), валін (М), лейцин (І) і ізолейцин (1). ча

Амінокислотний залишок цистеїна (С) незвичний у тому, що він може утворювати дисульфідні містки з іншими залишками (С) або іншими амінокислотами, що містять сульфонільну групу. Спроможність залишків цистеїна (С) (як і інших амінокислот, що мають групу -ЗН у якості бічного ланцюга) існувати як у відновленій формі -5Н, так і в окисленому стані у вигляді дисульфідного "містка впливає на внесок цистеїна (С) у розмір « гідрофобності/гідрофільності пептиду. Якщо цистеїн (С) характеризується розміром гідрофобності 0,29 з с відповідно до нормалізованої шкали за Ейзенбергом (Еізепрего, 1984, цит. вище), то повинно бути зрозуміло, . що, виходячи з цілей даного винаходу, цей залишок (С) класифікується як полярна гідрофільна амінокислота, и?» незалежно від загальних установок для описаної вище класифікації.

Як повинно бути зрозуміло спеціалісту в даній області техніки, визначені вище категорії не є взаємовиключними. Отже, амінокислоти, що характеризуються бічними ланцюгами, що виявляють два і більше -І типи фізико-хімічних властивостей, можуть бути віднесені до "множинних категорій". Наприклад, бічні ланцюги амінокислот, що включають ароматичні складові, що, крім того, заміщені полярними заступниками, такі як - тирозин (У), можуть виявляти й ароматичні гідрофобні властивості, і полярні або гідрофільні властивості, с тобто, відповідно, можуть бути включені в категорії й ароматичних, і полярних амінокислот. Конкретна класифікація будь-якої амінокислоти буде очевидної для спеціаліста в даній області техніки, особливо, у 1 світлі докладних описів, включених у даний текст. ї» Деякі амінокислотні залишки, що позначаються як "розриваючі спіраль амінокислоти", мають властивість розривати структуру о-спіралей тоді, коли вони знаходяться у внутрішніх положеннях такої спіралі.

Амінокислотні залишки, що виявляють такі властивості розривання спіралей, добре відомі в даній області техніки (див., наприклад, Спо 8: Разтап, Апп. Кеу. Віоспет., 47, 251-276) і включають пролін (Р), гліцин (5) і потенційно всі ЮО-амінокислоти (тоді, коли вони знаходяться в І-пептиді; і навпаки, І1-амінокислоти іФ) розривають спіральні структури в складі ЮО-пептиду). Хоча ці "амінокислоти, що розривають спіраль", і ко потрапляють у позначені вище категорії, ці залишки не повинні використовуватися для заміни амінокислотних залишків у внутрішніх положеннях у межах спіралі - тобто вони можуть бути використані тільки для заміни 1-3 бо амінокислотних залишків у складі М-кінцевої частини і (або) С-кінцевої частини конкретного пептиду.

При тому, що в якості прикладів в описаних вище категоріях були приведені генетично кодовані амінокислоти, проте немає необхідності, а в деяких конкретних варіантах і переважно немає необхідності в замінах, що обмежуються генетично кодованими амінокислотами. Дійсно, багато з переважних пептидів формули (І) включають генетично не кодовані амінокислоти. Отже, на додаток до таких, що зустрічаються у б5 живій природі генетично кодованих амінокислот, амінокислоти базових пептидів формули (І) можуть бути заміщені з використанням таких, що зустрічаються у природі, але генетично некодованих амінокислот, а також синтетичних амінокислот.

Деякі звичайно розглядувані амінокислоти, які представляють перспективний об'єкт для замін до складу базових пептидів формули (І), включають, тим самим не обмежуючись, В-аланін (В-Аїа) і інші о-амінокислоти, такі як З-амінопропіонова кислота, 2,3-диамінопропіонова кислота (Орг), 4-амінобутирова кислота і т.д.; о-аміноїзобутирову кислоту (АБ), є-аміногексаноїву кислоту (Айпа), 6-аміновалеріанову кислоту (Ама),

М-метилгліцин або саркозин (Месіу), орнитин (Огп), цитрулин (Сі), трет-бутилаланін (І1-ВиА), трет-бутилгліцин (Вис), М-метилізолейцин (Мегїе), фенілгліцин (Рід), циклогексилаланін (Спа), норлейцин (Міе), нафтилаланін (ма), 4-хлорфенілаланін (Рпе-4-СІ), 2-фторфенілаланін (РПе-2-Р), З-фторфенілаланін (РПе-3-Р), 70 4-фторфенілаланін (РІПе-4-Е), пенициламин (Реп), 1,2,3,4-тетрагід роізохінолін-3-карбонову кислоту (Тіс),

В-2-тієнілаланін (Тип), метіонинсульфоксид (М5О), гомоаргінін (пАго), М-ацетилізин (Асі уз), 2,4-диамінобутирова кислота (Ори), 2,3-диамінобутирова кислота (ЮОабр), р-амінофенілаланін (РПе-рМН2),

М-метилвалін (Мемаї), гомоцистеїн (пСувз), гомофенілаланін (пРе) і гомосерин (пзЗег), гідроксипролін (Нур), гомопролін (пРго), М-метильовані амінокислоти і пептоїди (М-заміщені гліцини).

Класифікації генетично кодованих і звичайних некодованих амінокислот відповідно до категорій, визначених вище, підсумовані нижче в табл.3. Повинно бути зрозуміло, що табл.3 приведена тільки в якості ілюстративного матеріалу і не покликана служити вичерпним списком амінокислот, які б могли бути використані для замін до складу базових пептидів, що подаються даним винаходом. Інші, конкретно не обумовлені в даному тексті, амінокислоти легко можуть бути класифіковані на основі їх фізичних і хімічних властивостей у світлі характеристик, описаних у даному тексті. сч о « зо ша 01 вє 1 й ю -

При тому, що в більшості прикладів амінокислоти базових пептидів формули (І) заміщають із використанням /-урча

І -енантіомерних амінокислот, заміни не обмежуються І -енантіомерними амінокислотами. Отже, також у поняття "змінені" або "мутовані" форми входять ті форми, що утворені в результаті заміни І -амінокислоти на ідентичну

О-амінокислоту (наприклад, І-аргінін -» Ю-аргінін) або на О-амінокислоту тієї ж категорії або підгрупи « (наприклад, І -аргінін -» ЮО-лізин), і навпаки. Дійсно, у деяких переважних варіантах, що є такими в зв'язку з пероральним введенням пацієнтам-ссавцям, доцільним є входження до складу пептиду, що вводиться - с принаймні однієї О-енантіомерної амінокислоти. Пептиди, що включають такі О-амінокислоти, як вважається, ч більш стійкі до руйнації чинниками ротової порожнини, кишечнику або сироватки в порівнянні з пептидами, що я складаються винятково з І -амінокислот.

Як відзначалося вище, Ю-амінокислоти характеризуються тенденцією до руйнації о-спіралей у випадку заняття ними внутрішніх положень в о-спіралі, утвореної І-пептидом. Отже, ЮО-амінокислоти не повинні - використовуватися для заміни І-амінокислот, що знаходяться у внутрішніх положеннях: заміни на - О-амінокислоти повинні обмежуватися 1-3 амінокислотними залишками в М-кінцевий і (або) С-кінцевій частинах пептиду. Переважно тільки одна амінокислота з М- і (або) С-кінця заміняється на О-амінокислоту. о З використанням класифікації амінокислотних залишків, поданої вище, у сполученні з круговою схемою за г 20 Шиффером-Едмундсоном і схемою у вигляді спіральної решітки, застосовуваних для базових пептидів формули (І), а також докладного опису бажаних властивостей, можуть бути легко отримані змінені або мутовані форми

Т» базових пептидів формули (І), що істотною мірою зберігають амфіпатичні й інші властивості спіралі і котрі, отже, потрапляють в обсяг даного винаходу.

У переважному варіанті за даним винаходом змінені або мутовані форми базових пептидів формули (1) 22 одержують шляхом фіксації гідрофільних або гідрофобних залишків відповідно до формули (І) і заміни,

ГФ! принаймні, одного нефіксованого залишку на іншу амінокислоту, переважно по консервативному типу, тобто на іншу амінокислоту з тієї ж категорії або підгрупи. Залишки, що складають основний і (або) гідрофобні о кластери, також можуть бути фіксовані, відповідно до формули (І), а принаймні один нефіксований залишок - замінений, переважно консервативно. 60 В іншому переважному варіанті змінені або мутовані форми базових пептидів формули (І) одержують шляхом фіксації гідрофільних амінокислотних залишків, розташованих на гідрофільній поверхні спіралі відповідно до формули (І) і заміни, принаймні, одного з нефіксованих амінокислотних залишків на іншу амінокислоту, переважно на іншу амінокислоту зі складу тієї ж самої категорії або підгрупи. Звертаючись до Фіг.2А, можна бачити, що залишки 1, 4, 7, 8, 11, 12, 14, 15 і 18 розташовані на гідрофільній поверхні амфіпатичної спіралі, бо утвореної базовими пептидами формули (І). Серед цих залишків усі є гідрофільними, за винятком 1-го залишку, що може бути або гідрофільним, або гідрофобним. Отже, в однім із переважних варіантів залишки 4, 7, 8, 11,

12, 14, 15 ї 18 є фіксованими відповідно до формули (І) і, принаймні, один із залишків 1, 2, З, 5, 6, 9, 10, 13, 16 ії 17 замінений на іншу амінокислоту тієї ж самої категорії, переважно на іншу амінокислоту тієї ж самої підгрупи. З іншого боку, 1-й залишок також є фіксованим відповідно до формули (І) і принаймні один із залишків 2, З, 5, 6, 9, 10, 13, 16 і 17 замінений відповідно до описаного.

У конкретному переважному варіанті С-кінцевий основний кластер (залишки 14, 16 і 18) також є фіксованим відповідно до формули (І) і тільки залишки 2, 3, 5, 6, 9, 10, 13 і (або) 17 можуть бути замінені.

В іншому конкретному переважному варіанті гідрофобний кластер (залишки 3, 6, 9 і 10) також фіксується відповідно до формули (І) і тільки залишки 2, 5, 13, 16 і (або) 17 можуть бути замінені. 70 Ще в одному конкретному переважному варіанті й основний, і гідрофобний кластери фіксуються і тільки залишки 2, 5, 13 і (або) 17 можуть бути замінені.

В іншому переважному варіанті даного винаходу змінені або мутовані форми базових пептидів даного винаходу одержують шляхом фіксування гідрофобних амінокислотних залишків, розташованих на гідрофобній поверхні спіралі і заміни, принаймні, одного нефіксованого амінокислотного залишку на інший амінокислотний /5 Залишок, переважно на інший залишок із тієї ж категорії або підгрупи амінокислот.

Звертаючись до Фіг.2А, можна бачити, що залишки 2, З, 5, 6, 9, 10, 13, 16 і 17 розташовані в межах гідрофобної поверхні. З них всі амінокислоти є гідрофобними, за винятком гідрофільного 16-го залишку. Отже, в однім із переважних варіантів залишки 2, З, 5, 6, 9, 10, 13 ії 17 є фіксованими відповідно до формули (І) і, принаймні, один із залишків 1, 4, 7, 8, 11, 12, 14, 15, 16 і 18 замінений на інший амінокислотний залишок, 2о переважно на інший амінокислотний залишок із тієї ж самої категорії або підгрупи.

У конкретному переважному варіанті С-кінцевий основний кластер (залишки 14, 16 і 18) також фіксують, і тільки залишки 1, 4, 7, 8, 11, 12 і (або) 15 замінені.

В іншому варіанті змінені або мутовані форми пептидів формули (І) одержують шляхом фіксації всіх амінокислотних залишків, що знаходяться в межах гідрофобної або гідрофільної поверхонь даної спіралі, і сч ов Заміни, переважно по консервативній схемі, принаймні, одного амінокислотного залишку, що знаходиться на протилежній поверхні, на інший амінокислотний залишок. Залишки, що включають гідрофобний кластер і (або) і) основний кластер, також можуть бути необов'язково фіксованими відповідно до формули (І) відповідно до обговорюваних вище.

В іншому варіанті даного винаходу змінені або мутовані форми формули (І) одержують шляхом заміни, «г зо принаймні, однієї амінокислоти на іншу амінокислоту по неконсервативній схемі. Для спеціаліста в даній області техніки буде зрозуміло, що подібні заміни не будуть істотною мірою змінювати амфіпатичні і (або) о структурні властивості спіралі, що розглядалися вище. Отже, у деяких випадках бажаною може бути заміна ю однієї або декількох пар амінокислот таким чином, щоб зберегти сумарні властивості всієї спіралі. Додаткові вказівки на вибір придатних амінокислотних замін представлені послідовностями пептидів, приведеними в -- табл.10 (див. далі розділ 8.3). ї-

Ще в одному варіанті даного винаходу перші 1-4 амінокислотних залишка по М- і (або) С-кінцю базових пептидів формули (І) заміняють на один або декілька амінокислотних залишків або на один або декілька пептидних сегментів, для яких відомі властивості по забезпеченню стабільності ділянок повторної структури, що утворюють о-спіраль (залишки або сегменти т.зв. "кінцевих кепов", або сегменти "кепування"). Такі "що « 70 Кепують" залишки і сегменти добре відомі в даній області техніки (див., наприклад, Кіспагазоп 5 Кіснагавоп, пе) с 1988, Зсіепсе, 240, 1648-1652; Нагрег еї аїЇ., 1993, Віоспетізігу, 32(30), 7605-7609; ЮОаздиріа 5 ВеїЇ, 1993, й Іпіегп. 9. Рерііїде Ргоївеіп Кев., 41, 499-511; беаіе еї аїЇ.,, 1994, Ргоївіп Зсі., З, 1741-1745; ЮОоїд еї аї., и? 1994, Віоспетівігу, 33, 3396-3403; 2пои еї аі., 1994, Ргоїеіп5в, 18, 1-7; Ооіїд « Ваїйм'іп, 1995, Ргоїеіп Зсі., 4, 1325-1336; Оааетй еї аїЇ., 1995, Віоспетівігу, 34, 12820-12829; РейткКром еї аї., 1996, Віоспетівігу, З5, 387-397; Ооїд сеї а, Ргоїейпй зЗсі., б, 147-155). З іншого боку, перші 1-4 М-кінцеві і (або) С-кінцеві -і амінокислотні залишки формули (І) можуть бути замінені пептидо-імітуючими складовими, що імітують структуру і (або) властивості залишків, що кепують, або сегментів. Придатні міметики-кепи добре відомі в даній області - техніки й описані, наприклад, у Кіспагазоп 4: Кіспагазоп, 1988, Зсіепсе, 240, 1648-1652; Нагрег еї аї., 1993, с Віоспетівігу, 32(30) 7605-7609; Юаздиріа 85 ВеїЇ, 1993, Іпіегп. 9. Рерііїде Ргоїеіп Кев., 41, 499-511; Зеаіеє еї 5о а, 1994, Ргоїеіп Зсі., З, 1741-1745; Ооїд еї аї,, 1994, Віоспетівігу, З3, 3396-3403; по еї аї., 1994, о Ргоїеіпв, 18, 1-7; ЮОоіїд 5 Ваїйм'іп, 1995, Ргоїеіп зЗсі, 4, 1325-1336; Одаетгі еї аїЇ., 1995, Віоспетівігу, 34,

Та» 12820-12829; РеїгиКкном еї а/!., 1996, Віоспетівігу, 35, 387-397; Боїд еї аї., Ргоїеіп сі, 6, 147-155.

При тому, що формула (І) включає 18 амінокислотних залишків у конкретних положеннях повинно бути зрозуміло, що базові пептиди за даним винаходом можуть включати менше 18 амінокислотних залишків. Дійсно, укорочені або делетовані по внутрішніх положеннях варіанти формули (І), що включають 14-15 амінокислотних залишків, що істотною мірою зберігають основні характеристики і властивості амфіпатичної спіралі, утвореної іФ) базовими пептидами формули (І), розглядаються як вхідні в обсяг даного винаходу. ко Укорочені форми пептидів формули (І) одержують шляхом делетування однієї або більшого числа амінокислот із М- і (або) С-кінців формули (І). Делетовані по внутрішніх ділянках варіанти формули (1) бо одержують шляхом делетування однієї або більшого числа амінокислот із внутрішніх положень пептиду формули (І). Делетовані внутрішні амінокислотні залишки можуть розташовуватися, а можуть і не розташовуватися підряд.

Для спеціалістів у даній області техніки буде зрозуміло, що делетування внутрішнього амінокислотного залишку з базового пептиду формули (І) повинно обумовити розгортання площинної гідрофильно-гідрофобної 65 взаємодії спіралі на 1007 у точці делеції. Оскільки таке обертання може призвести до істотних змін амфіпатичних властивостей спіралі, що утвориться в результаті, то в переважному варіанті даного винаходу амінокислотні залишки делетують таким чином, щоб істотною мірою зберегти розташування площини гідрофильно-гідрофобної взаємодії уздовж усієї довгої осі даної спіралі.

Зручніше за все цього можна досягти шляхом делетування достатнього числа розташованих або Нерозташованих підряд амінокислотних залишків таким чином, щоб у результаті був видалений повний виток спіралі. Ідеалізована І -спіраль містить 3,6 залишків на виток. Отже, у переважному варіанті делетують групи з 3-4 послідовно розташованих або нерозташованих підряд амінокислот. Буде делетуватися З амінокислоти, або 4 амінокислоти, буде залежати від положення в межах спіралі першого із залишків, що делетуються. Визначення реального числа розташованих або нерозташованих підряд амінокислотних залишків, що складають один 70 повний виток спіралі, починаючи з будь-якої конкретної початкової точки в межах амфіпатичної спіралі, є достатньо простою задачею для спеціаліста в даній області техніки.

Через передбачувану важливість основного кластера, що знаходиться на С-кінці базових пептидів формули (І) у забезпеченні стабілізації спіралі і важливості гідрофобного кластера в забезпеченні ефективності зв'язування ліпідів і активації І САТ, у переважних варіантах даного винаходу залишки, що складають основний і гідрофобний кластери, не делетують. Отже, у переважних варіантах залишки 14, 16 і 18 (основний кластер) і залишки 3, 6, 9 і 10 (гідрофобний кластер) не делетують.

Базові пептиди формули (І) також можуть бути подовжені по одному зі своїх кінців або добудовані по внутрішніх положеннях із використанням додаткових амінокислотних залишків, що істотною мірою не порушували б, а в деяких варіантах навіть посилювали б структурні і (або) функціональні параметри пептидів.

Дійсно, подовження базових пептидів до 19, 20, 21, 22 і навіть більшого числа амінокислотних залишків потрапляє в обсяг даного винаходу. Переважно, щоб такі подовжені пептиди істотною мірою зберігали загальні параметри амфіпатичності й інші властивості пептидів формули (І). Звичайно, повинно бути зрозуміло, що додавання амінокислот усередині пептида призведе до розгортання площини гідрофобно-гідрофільної взаємодії в точки вбудовування за тим же типом, як це відбувається в описаних вище випадках внутрішнього делетування. с

Отже, висновки, зроблені вище при описі внутрішніх розподілів, в однаковій мірі застосовні і для внутрішніх о вставок.

В одному з варіантів базові пептиди подовжують по М- і (або) С-кінцю, принаймні, на один виток спіралі.

Переважно, щоб такі добудування обумовлювали стабілізацію повторної спіральної структури в присутності ліпідів тією ж мірою, що й описані вище кеповані амінокислотами і сегментами пептиди. «г зо У конкретному переважному варіанті базові пептиди формули (І) добудовують по С-кінцю одним амінокислотним залишком, переважно лізином (К). о

Також в обсяг даного винаходу входять "заблоковані" форми агоніста АроА-Ї, тобто такі варіанти агоністів ю

АроА-Ї, у яких М- і (або) С-кінець блокуються складовими, спроможними реагувати з М-кінцевою групою -МН 25 або із С-кінцевою групою -С(О)ОН. Було встановлено, що видалення М- і (або) С-кінцевого заряду в агоністів --

АроА-Ї по даному винаходу, що складаються з 18 або меншого числа амінокислотних залишків (шляхлм синтезу ї-

М-ацильованих пептидних амідов/ефірів/гідразидів/спиртів і їхніх заступників) обумовлює утворення агоністів, що зберігають і в деяких варіантах навіть перевершують активність незаблокованого варіанта конкретного агоніста. Наприклад, при тому, що пептид 210 (5ЕО ІС МО 210) виявляє 4695-у активацію І САТ у порівнянні з нативним АроА-І, заблокиована по М-ії С-кіндям форма цього пептиду - пептид 193 (5ЕО ІЮО МО 193) - забезпечує « 470 В тому ж тесті активацію ІГСАТ на рівні 9695. У деяких варіантах при наявності 22 амінокислотних залишків М- шщ с або С-кінцеве блокування обумовлює одержання агоністів АроА-Ї, що виявляють меншу активність у порівнянні з незаблокованими варіантами. Проте, блокування обох кінців (М і С) агоністів АроА-Ї, що складаються з 22 з амінокислот, як очікується, призведе до відновлення активності. Отже, у переважному варіанті по даному винаходу або М- і (або) С-кінец (переважно обидва кінці) базових пептидів, що складаються з 18 або меншого дв числа амінокислот, заблоковані, у той час як М- і С-кінці пептидів, що складаються з більш ніж 18 -І амінокислот, або обидва заблоковані, або обидва не заблоковані. Звичайно М-кінцеві групи, що блокують, включають групу КС(0)- де КК представлений -Н, С.--Св-алкілом, С.--Св-алкенілом, С.-Св-алкінілом, - Св-Сод-арилом, Сев-Сов-алкарилом, 5-20-атомними гетероарилом або 6-26-атомними алкгетероарилом. с Переважними М-кінцевими групами, що блокують, є ацетил, форміл і дансил. Звичайні С-кінцеві групи, що блокують, включають групи -С(О)МКК і -С(СО)ОК, де К незалежно визначаються відповідно до зазначеного вище. о Переважними С-кінцевими групами, що блокують, є ті, у яких група К незалежно представлена метилом. Не ї» торкаючись якоїсь конкретної теорії, можна вважати, що такі кінцеві групи, що блокують, стабілізують о-спіраль у присутності ліпідів (див., наприклад, МепКаїаспеїарайні еї а!., 1993, Ргоїеіпв: Зсігисі, Рипсі. 5 Сепеї, 15, 349-359).

Нативная структура АроА-| включає вісім спіральних одиниць, що, як вважається, діють відповідно до процесу зв'язування ліпідів (МаКадамжа еї аіІ., 1985, 9. Атег. Спет. зос, 107, 7087-7092; Апапінагатаїйан еї аІ, 1985, 9. Віої. Спет., 260, 10248-10262; Мапіоо еї аїЇ.,, 1991, 9. Ірій Кев., 32, 1253-1264; Мепде; еї (Ф, аі., 1994, у. Сп. Іпмеві,, 94, 1698-1705; РаїЇдипагі ей аї.,, 1996, Апгпегіозсіеговіз, Тпготровіз Магзисіаг ко Віоі., 16, 328-338; Юетоог еї аІ., 1996, Еиг. У. Віоспет., 239, 74-84). Отже, також в обсяг даного винаходу входять агоністи АроА-Ї, що є димерами, тримерами, тетрамерами і навіть полімерами більш високого порядку бо Смультимери") базових пептидів, описаних у даній заявці. Такі мультимери можуть бути влаштовані у вигляді тандемних повторів, розгалужених конструкцій або сполучати їх. Базові пептиди можуть бути безпосередньо приєднані один до іншого або розділені одним або декількома лінкерами.

Базовими пептидами, що утворюють мультимери, можуть бути пептиди формули (І), аналоги формули (1), мутовані варіанти формули (І), укорочені або делетовані по внутрішніх положеннях варіанти формули (1), 65 добудовані варіанти формули (І) і (або) їхні сполучення. Базові пептиди можуть бути сполучені по типу "голова-до-хвоста" (тобто М-кінець до С-кінця), "голова-до--олови" (тобто М-кінець до М-кінця),

"хвіст-до-хвоста" (тобто С-кінец до С-кінця) або шляхом сполучень цих орієнтацій.

В одному з варіантів даного винаходу мультимери організовані у вигляді тандемних повторів, що складаються з двох, трьох, чотирьох і аж до десятьох базових пептидів. Переважними є мультимери, складені тандемними повторами від двох до восьми базових пептидів. Отже, в одному з варіантів агоністи АроА-Ї за даним винаходом включають мультимери, що характеризуються такою структурною формулою:

НАФ я-НН)Асся-НН (1) де: - й й й й й кожний показник т незалежно один від одного є цілим числом від 0 до 1, переважно дорівнює 1; п є цілим числом від 0 до 10, переважно від 0 до 8; кожний "НН" незалежно представляє базовий пептид або пептидний аналог формули (І) або її мутовану, скорочену, делетовану по внутрішньому положенню або добудовану форму відповідно до описаного в даній заявці; т кожний "ІІ" незалежно представляє лінкер; і кожний знак '"-" незалежно означає ковалентний зв'язок.

У формулі (ІІ) лінкер ЇЇ може бути представлений будь-якою біфункціональною молекулою, спроможною забезпечувати ковалентній зв'язок одного пептида з іншим. Отже, придатні лінкери - це біфункціональні молекули, в яких функціональні групи спроможні утворювати ковалентний зв'язок із М- і (або) С-кінцем пептиду.

Функціональні групи, придатні для приєднання до М- або С-кінця пептидів, добре відомі в даній області техніки, так само як і відомі придатні хімічні прийоми для забезпечення ефективного утворення таких зв'язків.

Лінкер може мати гнучку, жорстку або напівжорстку структуру, що залежить від бажаних властивостей конкретного мультимера. Придатні лінкери включають, наприклад, амінокислотні залишки, такі як пролін або гліцин, або пептидні сегменти, що включають від приблизно 2 до приблизно 5, 10, 15 або 20, або навіть с більшого числа амінокислот, біфункціональні органічні сполуки, такі як НОМ(СНоО) СОН, де п є цілим числом від Го) 1 до 12, і подібне. Приклади таких лінкерів, так само як і засоби одержання таких лінкерів і пептидів, що включають такі лінкери, добре відомі в даній області техніки (див., наприклад, Нипід еї аї., 1974, Спет.

Вег., 100, 3039-3044; Вагзак еї а!., 1994, Віосопіцд. Спет, 5(4) 301-305). «

В переважному варіанті даного винаходу тандемні повтори у внутрішніх своїх ділянках перериваються одиночними залишками проліна. У цьому сенсі в таких варіантах, де базові пептиди закінчуються на М- або І в)

С-кінці проліном, таких як, наприклад, де Х/ представлений у формулі (І), є проліном (Р) або О-проліном (р), ю то т у формулі (ІІ) переважно дорівнює 0. У тих варіантах, в яких на М- або С-кінці пептиду немає залишку проліна, лінкером переважно є пролін (Р) або О-пролін (р), а т переважно дорівнює 1. -

У деяких варіантах даного винаходу бажаним може бути використовувати розщеплювані лінкери, за м допомогою яких можна відокремлювати один або декілька спіральних сегментів (НН) за конкретних умов.

Придатними розщеплюваними лінкерами є пептиди, що характеризуються амінокислотними послідовностями, що розпізнаються протеазами, олігонуклеотиди, що розщеплюються ендонуклеазами, і органічні сполуки, що можуть бути розщеплені хімічним шляхом, наприклад, в умовах кислого або лужного середовища, або в інших « дю умовах. Переважно, умови розщеплення повинні бути достатньо м'якими, щоб не обумовлювати денатурацію з або які-небудь інші порушення спіральних сегментів і (або) непризначених до ррозщеплення лінкерів у складі с мультимерних агоністів АроА-Ї. :з» Пептидні й олігонуклеотидні лінкери, що можуть бути вибірним чином розщеплені, а також засоби розщеплення лінкерів добре відомі і легко доступні спеціалістам у даній області техніки. Придатні лінкери у вигляді органічних сполук, що можуть бути вибірним чином розщеплені, будуть очевидні для спеціалістів у даній - 395 області техніки і включають те, що, наприклад, було описано в міжнародній заявці УУО94А/08051 і в матеріалах, що цитуються в ній. - У переважному варіанті використовуваними лінкерами є пептиди, що служать субстратами для ендогенних сл ферментів, що циркулюють, що тим самим забезпечує мультимерним агоністам АроА-І спроможність вибірково розщеплюватися іп мімо. Ендогенним ферментом, що підходить для розщеплення таких лінкерів, є, наприклад, 1 20 пропептидаза проаполіпопротеїна А-І. Придатні ферменти, а також пептидні сегменти, які служать субстратами

ГТ» для таких ферментів, добре відомі в даній області техніки (див., наприклад, Едеївівїп еї аї., 1983, 9. Віо).

Спет., 258, 11430-11433; 7апів, 1983, Ргос. Май. Асай. Зсі. ОА, 80, 2574-2578).

Як обговорювалося вище, ключовою властивістю базових пептидів по даному винаходу є їхня спроможність утворювати міжмолекулярні водневі зв'язки або сольові "містки" при будуванні в антипаралельній орієнтації. 59 Отже, у переважному переважному варіанті даного винаходу лінкери достатньої довжини і гнучкості

ГФ) використовуються таким чином, щоб забезпечувати спіральним сегментам (НН) формули (Ії) можливість

ГФ вишиковуватися в антипаралельній орієнтації і в присутності ліпідів утворювати міжмолекулярні водневі зв'язки або сольові "містки".

Лінкери достатньої довжини і гнучкості включають, тим самим не обмежуючись, пролін (Р), гліцин (5), бо Сув-Сув, НоїМ- (СН) -С(О)ОН, де п дорівнює від 1 до 12, переважно від 4 до 6; НоМ-арил-С(О)ОН і вуглеводи.

З іншого боку, оскільки нативні аполіпопротеїни забезпечують зв'язування між розташованими антипаралельно спіральними сегментами, пептидні лінкери, що відповідають по своїй амінокислотній послідовності пептидньіїм сегментам, пов'язаним із спіралями нативних аполіпопротеїнів, включаючи, наприклад,

АроА-І, АроА-ІІ, АроА-ІМ, Арос-Ї, АросС-ІІ, АроС-П, АроО, АроЕ і Аро), можуть бути стандартним чином бо використані для зв'язування базових пептидів. Такі послідовності добре відомі в даній області техніки (див.,

наприклад, Коззепеи еї аїЇ.,, 1992, "Апаїувів ої (Ше ргітагу апа ої (Ше зесопдагу вігисіцге ої (Ше ароїїроргоїеїпв", Іп "Зігисіцге 5 Рипсейоп ої І іроргоїеіпв", СП.б, рр.159-183, СКС Ргезз Іпс.).

Іншими лінкерами, що забезпечують утворення міжмолекулярних водневих зв'язків або сольових "містків" між тандемними повторами антипаралельно орієнтованих спіральних сегментів, є обернені пептидні витки, такі як

В-вигини й у-вигини, так само як і органічні молекули, що імітують структури пептидних (В-вигинів і (або) у-вигинів. У цілому, обернені витки - це сегменти пептидів, що розвертають напрямок поліпептидного ланцюжка таким чином, щоб забезпечити одинарному поліпептидному ланцюжку можливість пристосувати такі свої ділянки, як антипаралельна В-площина або оу-спіраль, В-вигин у цілому складений чотирма амінокислотними 70 залишками, а у-вигин звичайно складений трьома амінокислотними залишками.

Конформації і послідовності багатьох пептидних В-вигинів добре відомі в даній області техніки і включають, тим самим не обмежуючись, названі в якості прикладів тип-іІ, тип-Г, тип-Ї, тип-І", тип-ІП, тип-ПГ, тип-ЇМ, тип-М, тип-М', тип-Міа, тип-МІБ, тип-МИ і тип-МІИШ (див. Кіспагазоп, 1981, Аду. Ргоїеіп

Спет., 34, 167-339; Козе еї аіЇ.,, 1985, Айм. Ргоївїп Спет, 37, 1-109; ММітої еї а!., 1988, 9. Мої. Віої, 203, 75 221-232; Зірапда еї аїЇ.,, 1989, 9. Мої. Віої, 206, 759-777; Тгатопіапо еї аїЇ., 1989, Ргоївіпв: Зігисі, Еипсі.

Сепеї, 6, 382-394).

Зігнутість конкретних конформацій коротких пептидів з утворенням В-вигіну в першу чергу залежить від розташування деяких амінокислотних залишків у вигині (звичайно Су, Азп або Рго). Звичайно В-вигин типу-і сумісний із будь-яким амінокислотним залишком у положенні від 1-го до 4-го, за винятком того, що пролін не 20 повинний займати З-е положення. У складі типу-! і типу-ІЇ у положенні 4 переважає гліцин, а в положенні 2 переважає пролін. У положенні 1 часто знаходяться залишки Азр, Авп, Зег і Сув, при тому, що їхні бічні ланцюги часто утворюють водневі зв'язки з МН у складі 3-го залишку.

У вигинах типу-ЇІЇ залишки гліцину й аспарагіну найбільш часто знаходяться в З-му положенні, тому що вони найбільш легко забезпечують пристосовування необхідних кутів у вуглецевому ланцюзі. В ідеальній ситуації Ге 25 вигини типу-Г мають залишки гліцину в положеннях 2 і 3, а у вигині типу-ІЇ гліцин знаходиться в положенні (5) 2. У вигині типу-ПШ можуть знаходитися більшість амінокислотних залишків, у той час як у типі-ПГ, як правило, у 2-му і З-му положеннях потрібна присутність гліцина. У вигинах типу-Міа і типу-МІЮБ звичайно є цис-пептидний зв'язок і є присутнім залишок проліна у внутрішньому положенні. Для ознайомлення з оглядом, що описує різноманітні типи і послідовності В-вигинів у білках і пептидах, читач може ознайомитися з роботою « 30 Мітої еї а!., 1988, 9. Мої. Віо!., 203, 221-232. ю

Конформація і послідовності багатьох пептидних у-вигинів також добре відомі в даній області техніки (див., наприклад. Козе еї аЇІ., 1985, Айм. Ргоїеїй Спет., 37, 1-109; МУйтег-МУпне еї а, 1987, Тгтепіаз

Віоспет. Зсі., 12, 189-192; ММітої еї аїЇ., 1988, 9. Мої. ВіоІ. 203, 221-232; Зірапда еї аї., 1989, 9. Мої. «-

ВіоІ., 206, 759-777; Тгатопіапо еї аї., 1989, Ргоїеіпев: Бігисі. Бипа. Сепеї., б, 382-394). Всі дані типи В-вигинів

Зо та у-вигинів і відповідні ним послідовності, так само як і пізніше описані структури і послідовності о пептидних В-вигинів і у-вигинів конкретним чином представляються даним винаходом.

З іншого боку, лінкер (1) може включати органічну молекулу або складову, що імітує структуру пептидного

В-вигина або у-вигина. Такі складові, що імітують В-вигини і (або) у-вигини, так само як і засоби синтезу « пептидів, що включають такі складові, добре відомі в даній області техніки і включають, крім іншого, те, що З7З 70 описано в роботах Сіаппіз 5: КоМег, 1993, Апдему. Спет. Іпі. Ед. Епо., 32, 1244-1267; Канп еї аї., 1988, 9. с Мої. Кесодпікоп, 1, 75-79; Капп еї а!., 1987, Темгапеагоп І ек., 28, 1623-1626. "з Ще в одному варіанті даного винаходу мультимери мають форму розгалуженої структури (див., наприклад,

Фіг.7). Такі структури стандартним чином одержують із використанням багатофункціональних зв'язуючих складових, що забезпечують приєднання до простої зв'язуючої складової більш ніж двох спіральних одиниць.

Отже, розгалужені структури засновані на молекулах, що мають три, чотири або навіть більші числа - функціональних груп, що спроможні ковалентно приєднуватися до М- і (або) С-кінцю пептиду. Придатні зв'язуючі - складові, наприклад, включають амінокислотні залишки, що характеризуються бічними ланцюгами, які несуть гідроксильні, сульфанільні, аміно, карбоксильні, амідні і (або) ефірні функціональні групи, такі як, о наприклад, Зег (5), ТАг (7), Суз (С), Туг (У), Авп (М), Сіп (0), Гуз (К), Ага (К), От, Авр (0) та Сім (Є) с 20 або інші органічні молекули, що включають такі функціональні групи.

І» Спіральні сегменти, приєднані до однієї зв'язуючої складової, не обов'язково повинні бути приєднані подібними кінцями. Дійсно, у деяких варіантах спіральні сегменти приєднані до однієї зв'язуючої складової таким чином, щоб забезпечити антипаралельну орієнтацію, і при цьому деякі спіралі приєднані по своїх

М-кінцях, а інші - по своїх С-кінцях. 99 Спіральні сегменти можуть бути приєднані безпосередньо до зв'язуючої складової, або можуть бути у

ГФ) відділені від зв'язуючої складової за допомогою одного або декількох біфункціональних лінкерів (І) т відповідно до описаного вище.

Звертаючись до Фіг.7А і 7В, можна бачити, що розгалужена структура може бути описана в термінах числа "вузлів розгалуження", що складають таку структуру, де вузол являє собою багатофункцьюональну зв'язуючу 60 складову. На Фіг.7А і 7В спіральні сегменти (наприклад, базові пептиди за даним винаходом) зображені у вигляді циліндрів, а багатофункціональні зв'язуючі складові (або "вузли") позначені кільцями ( ее), де число ліній, що виходять з кільчя, означає "порядок" (або число функціональних груп) для багатофункціональної зв'язуючої складової.

Число "вузлів розгалуження" у даній структурі в цілому залежить від загальної бажаної кількості бо спіральних сегментів і звичайно складає від 1 до 2. Безумовно, повинно бути зрозуміло, що для даного числа бажаних спіральних сегментів структури, що базуються на зв'язуючих складових більш високого порядку, зможуть включати менше число "вузлів". Наприклад, звертаючись до Фіг.7А і 7В, структура 3-го порядку (тобто структура, що включає З-функціональні зв'язуючі складові) для семи спіральних одиниць має три "вузли" (Фіг.7А), у той час як структура 4-го порядку (тобто структура, що включає 4-функціональні зв'язуючі складові) для семи спіральних одиниць має тільки два "вузли" (Фіг.7В).

Структури можуть характеризуватися однотипними порядками: тобто в таких структурах усі "вузли" є, наприклад, З-функціональними або 4-функціональними зв'язуючими складовими, або ж можуть мати змішані по порядку "вузли розгалуження", наприклад, при одночасній наявності З-функціональних і 4-функціональних /о зв'язуючих складових. Звичайно, повинно бути зрозуміло, що навіть у структурах із розгалуженнями одного порядку зв'язуючі складові не повинні бути ідентичними. У структурі з розгалуженнями третього порядку можуть використовуватися, наприклад, дві, три, чотири або навіть більше різноманітних трифункціональних зв'язуючих складових.

Як і лінійні мультимери, спіральні сегменти, що входять до складу розгалужених структур, можуть бути, а /5 Можуть і не бути ідентичними.

Приклад такої структури зі змішаними порядками розгалуження показаний на Фіг.7С. На Фіг.7С спіральні сегменти (тобто базові пептиди за даним винаходом) показані у вигляді циліндрів, а багатофункціональні зв'язуючі складові показані у вигляді кільців ( е), де число ліній, що виходять з кільця, відповідає "порядку" (або числу функціональних груп) багатофункціональної зв'язуючої складової. Лінії що зв'язують спіральні сегменти, подають біфункціональні лінкери ЇЇ відповідно до раніше описаного. Спіральні сегменти, що складають розгалужені структури, можуть бути тандемними повторами базових пептидів відповідно до раніше описаного.

В одному з ілюстративних варіантів розгалужені структури за даним винаходом описуються такою формулою: Га щі Х-Муа-Х(уа-1)-(Мув-Х(ув-1))р. (1) і) де кожний Х незалежно представлений, НН-( І Х- - НН -)-4 і - -НН ; «т зо кожний НН незалежно представлений базовим пептидом формули (І) або його аналогом, або мутованим, укороченим, делетованим по внутрішньому положенню або добудованому варіанту відповідно до описаного в КЗ даному тексті; ю кожний І. незалежно представлений біфункціональним лінкером; кожний т незалежно є цілим числом від 0 до 1; - кожний п незалежно є цілим числом від 0 до 8; чн

Муа і Муь незалежно один від іншого є багатофункціональною зв'язуючою складової, де Уа й ур представляють число функціональних груп, відповідно, У Муа і Мур; кожний уд або ур незалежно є цілим числом від З до 8; р є цілим числом від 0 до 7; і « 20 кожний знак '"-" незалежно означає ковалентний зв'язок. з с У переважному варіанті розгалужена структура включає "лізинове дерево", тобто є структурою, в якої багатофункціональна зв'язуюча складова є одиночним або серією залишків лізина (К) (див., наприклад, Фіг.703). :з» В одному ілюстративному варіанті "лізинове дерево" в розгалуженій структурі по даному винаходу описується такою формулою:

Х или х -і ню о нео - е н ? о о 1 В с, в сб К х й ї о 7 4 (9! о

Т» ор о, иМН о МИ ! оту х х (м

І І

(Ф) де

ГФ кожний Х незалежно представлений НН-( ІА --НІ -)-йГ І - -НН ; кожний НН незалежно представлений базовим пептидом формули (І) або його аналогом, або мутованим, укороченим, делетованим по внутрішньому положенню або добудованому варіанту відповідно до описаного в бо даному тексті; кожний І. незалежно представлений біфункціональним лінкером; кожний п незалежно є цілим числом від 0 до 8; кожний т незалежно є цілим числом від 0 до 1;

К; є -ОК або -МЕЕ; і 65 кожний К незалежно представлений -Н, С4-Св-алкілом, Сі-Св-алкенілом, Сі-Св-алкінілом, Св-Сод-арилом,

Сев-Сов-алкарилом, 5-20-атомним гетероарилом або 6-26-атомним алкгетероарилом. 5.1.1. Аналіз структури і функцій

Структура і функції базових пептидів або пептидних аналогів по даному винаходу, так само як і агоністи

АродА-І, складені такими базовими пептидами, включаючи мультимерні форми, описані вище, можуть бути протестовані з метою вибору активних агоністів або миметиків АроА-Ї. Наприклад, базові пептиди або пептидні аналоги можуть бути протестовані по їхній спроможності утворювати о-спіралі в присутності ліпідів, зв'язуватися з ліпідами, утворювати комплекси з ліпідами, активувати І САТ, сприяти виходові холестерину 3. клітин і т.п. 70 Методи і тести, призначені для аналізу структури і (або) функцій пептидів, добре відомі в даній області техніки. Переважні методи охарактеризовані в прикладах, описаних у даному тексті. Наприклад, тести на основі кругового дихроїзма (КД) і ядерного магнітного резонансу (ЯМР), описані тут у розділі 7, можуть бути використані для аналізу структури пептидів або пептидних аналогів -зокрема, для визначення "ступеня спіральності" в присутності ліпідів. Спроможність зв'язуватися з ліпідами може бути визначена з використанням 75 флуоресцентної спектроскопії, тест на основі якої описаний тут у розділі 7. Спроможність пептидів і (або) пептидних аналогів активувати фермент І САТ може бути легко визначена з використанням тесту на активацію

ІЇСАТ, описаного тут у розділі 8. Тести іп мійго та іп мімо, описані тут у розділах 9, 10 і 11, можуть бути використані для оцінки часу полужиття, розподілу, інтенсивності виходу холестерину і впливи на ЗТХ.

У цілому, базові пептиди і (або) пептидние аналоги по даному винаходу, що виявляють властивості, підсумовані в табл.4, розглядаються як активні. ; діапазон -60--- : --- - : - я я 5; короткі пептиди) «т

Зв'язування ліпідів (в присутності ЗОМ) 0,5-10мкМ пептиду "ДИНИ нн сс нн в НИ їй -

Як ілюструється в робочих прикладах даної заявки, базові пептиди, що виявляють високий ступінь активації

ІСАТ (53895), звичайно виявляють наявність істотно ступеня А-спіральності в присутності невеликих - одношарових жирових пухирців (ЗОМ) (6090 спіральних структур у випадку з незаблокованими пептидами, що складаються з 22 або більшого числа амінокислотних залишків і заблокованих пептидів, що складаються з 18 або меншого числа амінокислотних залишків; 24095 спіральності у випадку незаблокованих пептидів, що « 70 складаються з 18 або меншого числа амінокислот), у той час як пептиди, що виявляють низьку активність в -о с активації І САТ або позбавлені її зовсім, характеризуються слабкою о-спіральністю. Проте, у деяких випадках й пептиди, що характеризуються високою інтенсивністю утворення спіралі в присутності ліпідів, не були ефективні «» в активації І САТ.

Подібним чином, при тому, що базові пептиди, що забезпечують істотну активацію І САТ, звичайно зв'язують ліпіди, у деяких варіантах пептиди, що виявляють зв'язування ліпідів, не обумовлюють скільки-небудь істотної -І активації І САТ. а Як наслідок, для спеціалістів у даній області техніки повинно бути зрозуміло, що, при тому, що спроможність базових пептидів, описаних у даному тексті, утворювати о-спіралі (в присутності ліпідів) і ос зв'язувати ліпіди є істотною для їхньої активності, у багатьох варіантах ці властивості можуть бути недостатніми. Отже, у переважному варіанті базові пептиди по даному винаходу є об'єктами серії тестів, і-й націлених на вибір базових пептидів, що виявляють виразну фармакологічну активність.

Чл» На першому етапі базовий пептид тестують по його спроможності утворювати о-спіраль в присутності ліпідів із використанням КД-теста, описаного тут у розділі 7. Ті пептиди, що характеризуються принаймні 40965-ою "спіральністю" (для незаблокованих пептидів, що складаються з 18 або меншого числа амінокислот) або б090-ою спіральністю (для заблокованих пептидів, що складаються з 18 або меншого числа амінокислот, а також для незаблокованих пептидів, що складаються з 22 або більшого числа амінокислот) в присутності ліпідів (у

ІФ) концентрації приблизно мк і молярному відношенні "ліпід/лептид'" приблизно 30), потім тестують по їхній ко спроможності зв'язувати ліпіди з використанням тесту на флуоресценцію, описаного тут у розділі 7. Зрозуміло, що тільки ті базові пептиди, що несуть флуоресціюючі залишки триптофана (МУ) або Маї., тестують на 60 зв'язування ліпідів у тесті на флуоресценцію. Проте, у випадку пептидів, що не несуть флуоресціюючих амінокислотних залишків, зв'язування ліпідів очевидно при збільшенні спіральності в присутності ліпідів.

Базові пептиди, що виявляють зв'язування ліпідів при ЗОМ (0,5-10мк пептиди; молярне відношення "ліпід/пептид" у діапазоні від 1 до 50), потім піддають скринінгу на фармакологічну активність. Зрозуміло, що фармакологічна активність, на яку проводиться скринінг, буде залежати від пропонованого використання 65 конкретних агоністів АроА-І. У переважному варіанті базові пептиди сканують на їхню спроможність активувати фермент І САТ, тому що пептиди, спроможні активувати І САТ, є конкретно застосовними в описаних в даному тексті способах. Базові пептиди, що виявляють принаймні 3895-у активацію І САТ у порівнянні з нативним АроА-Ї людини (відповідно до оцінки в тесті на активацію І САТ, описаним тут у розділі 8), є переважними, при тому, що найбільш переажними є базові пептиди, що виявляють активацію на рівні 5095, 6095, 7095, 8095 або навіть

Зоо. 5.1.2. Переважні варіанти

Агоністи АроА-Ї по даному винаходу далі можуть бути визначені шляхом позначення переважних варіантів.

В одному із переважних варіантів агоністами АроА-!| є пептиди, що складаються з 18 амінокислотних залишків відповідно до формули (І), або їх ацильовані по М-кінцю і (або) амідовані по С-кінцю, або етерифіковані форми. 70 В іншому переважному варіанті агоністами АроА-Ї є пептиди, що складаються з 18 амінокислотних залишків відповідно до формули (І), або їх ацильовані по М-кінцю і (або) амідовані по С-кінцю, або етерифіковані форми, в яких:

Хо представлений аланіном (А), валіном (М) або лейцином (І);

Ху представлений аспарагіновою кислотою (0) або глутаміновою кислотою (Е);

Х» представлений аргініном (К), лізином (ДО) або орнитином;

Хв представлений аспарагіновою кислотою (0) або глутаміновою кислотою (Е);

Х.1 представлений глутаміновою кислотою (Е) або аспарагіном (М);

Хі представлений глутаміновою кислотою (Е);

Х.14 представлений аргініном (К), лізином («К), орнитином або лейцином (І);

Хв представлений аргініном (К), лізином (ДО) або орнитином; і (або)

Хв представлений аргініном (К), лізином (К) або орнитином, а

Хі, Хз, Хв, Хв, Хо, Х10, Х13; Хв і Хі7 відповідають раніше визначеному для формули (1).

В іншому переважному варіанті агоністами АроА-Ї є пептиди, що складаються з 18 амінокислотних залишків відповідно до формули (І), або їх ацильовані по М-кінцю і (або) амідовані по С-кінцю, або етерифіковані сч ов форми, в яких Х 44 представлений аспарагіном (М), Хі4 представлений лейцином (І), а, коли Хі не є аспарагіном (М), то Хі4 не є лейцином (І). Конкретними переважними варіантами в даному аспекті даного і) винаходу є такі пептиди або їх ацильовані по М-кінцю і (або) амідовані по С-кінцю, або етерифіковані форми, в яких різноманітні залишки Ха у формулі (І) визначаються так само, як описано в попередньому абзаці. Існуючим прикладом конкретних переважних варіантів відповідно до даного аспекту даного винаходу є пептид 209 «г зо ХРМІСІРКЕПМЕШОКІК: 5ЕО ІО МО 209) і його ацильовані по М-кінцю і (або) амідовані по С-кінцю, або етерифіковані форми. о

Ще в одному переважному варіанті агоністами АроА-!| є змінені або мутовані форми пептидів формули (І) або ю їх ацильовані по М-кінцю і (або) амідовані по С-кінцю, або етерифіковані форми, в яких:

Ху не є аспарагіновою кислотою (0); --

Хо не є гліцином (С); ї-

Хо не є гліцином (5);

Хі» не є лейцином (І); і

Х.із не є гліцином (5).

Ще в одному переважному варіанті агоністи АроА-! вибирають із групи пептидів, перерахованих нижче: « - пептид 191 РМІОГІ ВЕ ЕЕ КОКІ КК". (ЗЕО І МО 191); с пептид 192 РМІГОЇ ЕКЕП ЕЕ КОКІ К". (ЗЕО І МО 192); :з» пептид 193 РМІОЇ РЕВЕ ЕЕ КОКІ КК". (ЗЕО І МО 193); пептид 194 РМІЕГЕКЕЇ ЕЕ КОКІ К". (ЗЕО І МО 194); пептид 195 РМІ БІ ЕКЕІ ЕЕГ КОКІ КК" (ЗЕО І МО 195); -1 пептид 196 РМІОЇ РЕВЕ ЕБЇ КМКІ КК" (ЗЕО І МО 196); пептид 197 РІГ ОГЕВЕ ІЕЕ КОКІ КК" (ЗЕО І МО 197); - пептид 198 СМІОГ ЕВЕП ЕЕ! КОКІ КУ. (ЗЕО І МО 198); с пептид 199 РМІ.ОІ ЕВЕПЛМУЕЕГ КОКІ К" (ЗЕО І МО 199); сл 50 пептид 200 ММІОГЕКЕ ЕЕГ КОКІ КК". (ЗЕО І МО 200); пептид 201 РІГ ОЇ ЕКЕП ЕЕ КОКІ КО (ЗЕО І МО 201);

Та» пептид 202 РАІ ЕГЕКОІ І ЕБІГ/ВОКІ В". (ЗЕО І МО 202); пептид 203 АМІ ОЇ РЕВЕ ЕЕ КОКІ КК". (ЗЕО І МО 203); пептид 204 РМ ОРЕКЕЦ ЕЕГ КОКІ КК". (ЗЕО І МО 204); пептид 205 РМІ-ОІ ЕВЕМ/І ЕЕГ КОКІ К" (ЗЕО І МО 205); пептид 206 РІГЕПІ КЕ ЕБІ КОКІ КО (ЗЕО І МО 206); о пептид 207 РМ ЕПІКЕП ЕЕ КОКІК" (ЗЕО І МО 207); іме) пептид 208 РАІ! ЕГ ЕКО ЕБГВОВІ КК". (ЗЕО І МО 208); пептид 209 РМ ОГЕКЕ І МЕ ОКІК (ЗЕО І МО 209); 60 пептид 210 РМІОЇ РЕВЕ ЕЕ КОКІК /(ЗЕО І МО 210); пептид 211 РМІГ ОЇ ЕВЕП ЕЕГ ОО О" (ЗЕО І МО 211); пептид 212 РМІ ОЇ РОБ ЕЕГОСОЇ К" (ЗЕО І МО 212); пептид 213 РАГЕІ ЕКОП'ЕЕЕВОВІ К". (ЗЕО І МО 213); пептид 214 РМІОЇ РЕВЕ ЕЕ КОКІ КК". (ЗЕО І МО 214); бо пептид 215 РМІОІЕВЕП ЕЕМУКОКІ К" (ЗЕО І МО 215);

пептид 229 РМІЕГРЕВІ ТЕГ ОККІК (ЗЕ О МО 229); пептид 230 РМІОГ РЕВЕ ЕКГ ЕОКІК (ЗЕ 0 МО 230); пептид 231 РІГЕГРКЕІ ЕЕ КОКІК" (ЗЕО ІО МО 231); й й й або в заблокованих по М-кінцю і (або) С-кінцю, або в незаблокованих по них формах.

Ще в одному переважному варіанті агоністи АроА-! вибирають із групи пептидів, перерахованих нижче: пептид 191 РМІОІІ ВЕ ЕЕГ КОКІК". (ЗЕО 0 МО 191); пептид 192 РМІОЇЕКЕП ЕЕГ КОКІК". (ЗЕО 0 МО 192); то пептид 193 РМІГОГ РЕВЕ ЕЕ КОКІК". (ЗЕО ІО МО 193); пептид 194 РМІЕГЕВЕ І ЕЕГ КОКІК". (ЗЕО 0 МО 194); пептид 195 РМ ЕГРКЕІ ЕЕ КОКІ КК" (ЗЕО 0 МО 195); пептид 196 РМІОГ РЕВЕ ЕЕ КМКІ КК" (ЗЕО 0 МО 196); 75 пептид 197 РІГОГЕВЕ ЕЕ КОКІК" (ЗЕО 0 МО 197); пептид 198 СМІОГЕВЕП ЕЕ КОКІ К". (ЗЕО ІО МО 198); пептид 199 РМІ ОЇ РЕВЕ М/'ЕЕЇІ КОКІ К" (ЗЕО ІО МО 199); пептид 200 ММІ ОГЕВЕІ ЕЕ КОКІ КК". (ЗЕО 10 МО 200); пептид 201 РІГОГРКЕП ЕЕГ КОКІ КК" (ЗЕО 0 МО 201); пептид 202 РАГЕГЕРКОПІ ЕЕ ВОКІ В". (ЗЕО 10 МО 202); пептид 203 АМІОІЕВЕЦП ЕЕ КОКІ К". (ЗЕО 10 МО 203); пептид 204 РМОРЕВЕ ЕЕ КОКІ КК". (ЗЕО 10 МО 204); пептид 205 РМІ ОЇ ЕКЕМІ ЕЕ! КОКІ К" (ЗЕО 10 МО 205); пептид 206 РІГЕПІКЕПЕБІКОКІК" (ЗЕО 0 МО 206); с пептид 207 РМ ЕІ КЕ ЕЕ КОКІК" (ЗЕО 0 МО 207); пептид 208 РАГЕГРКОПІ ЕЕ КОВІ КК". (ЗЕО 10 МО 208); і9) пептид 209 РМІОГЕВЕГ І МЕП ОКІК ОО (ЗЕО 0 МО 209); пептид 210 РМІОГ РЕВЕ ЕБІКОКІК (ЗЕ О МО 210); пептид 211 РМІОЇЕВЕЦП ЕЕГОСОГО" (ЗЕО ІО МО 211); чЕ пептид 212 РМІ.ОІ РОБ ЕЕГОООІ К" (ЗЕО 10 МО 212); пептид 213 РАІ ЕІ ЕКОП-ЕЕРВОВІ К". (ЗЕО 10 МО 213); й пептид 214 РУГОГ РЕВЕ ЕЕ КОКІ К". (ЗЕО 10 МО 214); Іо) пептид 215 РМІ ОЇ ЕВЕЦІ ЕЕМУКОКІ К" (ЗЕО 10 МО 215). - або в заблокованих по М-кінцю і (або) С-кінцю, або в незаблокованих по них формах. ча

Ще в одному переважному варіанті агоністами АроА-І є мультимерні форми відповідно до формул Ії, ПП і (або) М, в яких кожний НН незалежно один від іншого подані пептидами формули (І) або їх адильованими по

МІ-кінці і (або) амідованими по С-кінцю, або етерифікованими формами, або будь-яким з переважних пептидів формули (І), описаним у даному розділі. «

В іншому переважному варіанті базові пептиди, що представляють агоністи АроА-І, не є будь-яким з - с перерахованих нижче пептидів: з пептид 75 РУОЕРВЕКІМЕБІ ЕАІКОКІК ОО (ЗЕО 0 МО 75); пептид 94 РМІОЕРВЕКІ МЕАГЕАІКОКІК ОО (ЗЕО О МО 94); пептид 109 РМІ.ОЕЕВЕКІ МЕВІ ЕАІ КОКІ К (5ЕО ІО МО 109); -І пептид 237 ГО0Г ОКУУАЕАЕМО І КК (ЗЕ ІО МО 237); пептид 238 ЕУМІ КАЕМЕКМІ ЕКІ КЕ Е" (ВЕС І МО 238); - пептид 241 ОМ/'ЕКАЕМОКУРЕКЕКЕРЕ (ВЕС І МО 241); с пептид 242 СІККЕІ С5М/КРІКАРУС (ВЕС І МО 242); пептид 243 СМУЕКАРУОКУАЕКЕКЕАЕ (ВЕС І МО 243);

Мн пептид 244 ОМ КАРМОКУАЕКІ КЕАЄ (ВЕС І МО 244); с» пептид 245 СУМІ КАЕМОКУРЕКЕКЕЕЕ (ВЕС ІО МО 245); пептид 246 ЕУМІ ЕАЕУККМІ ЕКІ КЕ! ГЕ (ВЕС І МО 246); пептид 247 ОМ/'ЕКАЕМОКЕРЕКЕКЕЕЕ (ВЕС І МО 247); пептид 248 ЕУМІ КАЕМЕКМІ ЕКІ КЕ! ГЕ (ВЕС І МО 248); о пептид 249 ЕУМІ КАЕМЕКМЕЕКІ КЕ Е" (ВЕС ІЮ МО 249) пептид 250 ЕМ КАЕМЕКМІ ЕКІ КЕ Е" (ВЕС ІЮ МО 250) іме) пептид 251 ЕМ КАЕРУККМІ ЕКІ КЕ Е" (ВЕС І МО 251) 60 Нарешті, в найбільш переважному варіанті агоністи АроА-І не є будь-яким з пептидів, перерахованих в табл.10 (розділ 8.3 даного тексту), що виявляють ефективністьактивації ферменту І САТ на рівні меншем 3895 у порівнянні з нативним АроА-Ї людини. 5.2. Синтез і очищення пептидних агоністів Арод-Ї

Базові пептиди за даним винаходом можуть бути отримані з використанням по суті будь-якої з методик, 65 відомих в даній області техніки, спрямованих на отримання пептидів. Наприклад, пептиди можуть бути отримані з використанням стандартного покрокового синтезу пептидів в розчині чі твердій фазі, або з використанням методик рекомбінантної ДНК. 5.2.1. Хімічний синтез

Базові пептиди можуть бути отримані з використанням стандартної процедури покрокового синтезу в розчині або в твердій фазі (див., наприклад, "Спетіса! Арргоаспез о (Ше Зупіпевзіз ої Реріїдез апа Ргоїеїпе", едв.

УУШіатве еї аі., 1997, СКС Ргевзв, Воса Кап, РІ і цитовані там праці; "Бод Ріразе Рерііде бупіпевів: А

Ргасііса! Арргоасі", едв. Аїпегпіоп 5: ЗПперага, 1989, ІК. Ргезз, Охіога, Еподіапа і цитовані там праці).

З іншого боку, пептиди згідно з даним винаходом можуть бути отримані шляхом сегментної конденсації згідно з описаним, наприклад, у їі еї аіЇ., 1996, Темйапедгоп Ген, 37(7), 933-936; Васа еї аїЇ.,, 1995, 9. Атег. 70 Спет. 5ос, 117, 1881-1887; Тапп еї аї., 1995, Іпіегп. У). Рерііде Ргоївіп Кез., 45, 209-216; ЗсппоЇгег б Кепі, 1992,

Зсіепсе, 256, 221-225; (іш « Та, 1994, 9). Атег. Спет. Бос, 116, 4149-4153; (іш 5 Татп., 1994, Ргос. Ма).

Асай. Зсі. ОБА, 91, 6584-6588; Матавзпіго 5 1, 1988, Іпіегп. 9. Рерііде Ргоїеіп Кев., 31, 322-334). Метод конденсації сегментів є особливо переважним методом синтезу варіантів, усередині яких знаходяться залишки гліцина. Інші методи, які застосовують для синтезу пептидів по даному винаходу, описані в МаКадама еї аї., 75...1985, У. Атег. Спет. Зос., 107, 7087-7092.

Агоністи АроА-І, що включають М- і (або) С-кінцеві блокуючі групи, можуть бути отримані з використанням стандартних методик органічної хімії. Наприклад, методи ацилювання по М-кінцю пептиду або амідування або етерифікування по С-кінцю пептиду добре відомі в даній області техніки. Шляхи внесення інших модифікацій по

М- ії (або) С-кінцю будуть зрозумілі спеціалістам у даній області техніки, як шляхи захисту будь-якої функціональної групи в складі бічних ланцюгів, подібні до необхідності приєднання кінцевих блокуючих груп.

Фармацевтично прийнятні солі (протиїони) можуть бути стандартним чином отримані за допомогою іон-обмінної хроматографії або за допомогою інших методів, добре відомих у даній області техніки.

Сполуки по даному винаходу, що знаходяться у вигляді тандемно улаштованих мультимеров, можуть бути синтезовані стандартним чином шляхом додавання лінкера (лінкерів) до пептидного ланцюжка на прийнятному с об етапі синтезу. З іншого боку, можуть бути синтезовані спіральні сегменти з реагуванням кожного з таких сегментів із лінкером. Зрозуміло, що конкретний метод синтезу буде залежати від складу лінкера. Придатні і) схеми захисту і хімічних реакцій добре відомі і будуть ясні для спеціалістів у даній області техніки.

Сполуки по даному винаходу, що знаходяться у вигляді розгалужених структур, можуть бути стандартним чином синтезовані з використанням тримерних і тетрамерних полімерів і хімічних реакцій, описаних у Тат, «г зо 1988, Ргос. Май. Асай. сі. ОБА, 85, 5409-5413 і ЮМОетоог еї аїЇ.,, 1996, Еиг. У. Віоспет., 239, 74-84.

Модифікування синтетичних полімерів і стратегії синтезу розгалужених структур вищих або нижчих порядків або о структур, що сполучать у своєму складі спіральні сегменти різноманітних базових пептидів, цілком доступні для ю спеціалістів в області хімії пептидів і (або) органічної хімії.

Утворення дисульфідних зв'язків, якщо це є бажаним, звичайно здійснюють в присутності несильних -- окислювачів. Можуть бути використані хімічні окислювачі або ж сполуки можуть просто бути піддані впливу ї- атмосферного кисню з метою досягнення утворення таких зв'язків. Різноманітні методи відомі в даній області техніки, включаючи ті, що описані в Тат еї аї., 1979, Бупіпезіз, 955-957; Зіемжмагй еї аі., 1984, "Борйй РНазе

Реріїде Зупіпезвів" 24 ей. Рієгсе Спега. Со., Боскіога, ПП; Айтей єї аї., 1975, У. Віої. Спет., 250, « 8477-8482, - і Реппіпдіоп еї аї., 1991, Реріідез, 1990, 164-166, едв». Сігаі( 5 Апагеш, ЕЗСОМ І еідеп, Нідерланди. 70 Інші підходи описані в Катбег еї аї., 1980, Нем. Спіт. Асіа, 63, 899-915. Спосіб, здійснюваний на твердих 8 с підложках, описаний у АЇбегісіо, 1985, Іпіегп. у). Реріїде Ргоїєвіїп Кевз., 26, 92-97. Будь-який з цих методів й може бути використаний для утворення дисульфідних зв'язків у пептидах по даному винаходу. "» 5.2.2. Рекомбінантний синтез

Якщо конкретний пептид складається винятково з генетично кодованих амінокислот або в такий спосіб складена його частина, то такий пептид або його відповідний фрагмент можуть бути синтезовані з -І використанням рекомбінантних методологій, традиційних для генної інженерії. з Для рекомбінантного синтезу полінуклеотидну послідовність, що кодує конкретний пептид, вносять у придатну експресуючу систему, тобто у вектор, у складі якого є елементи, необхідні для здійснення ос транскрипції і трансляції вмонтованої кодованої послідовності, або ж, у випадку з вектором на основі

РНК-вмісного вірусу, є елементи, необхідні для здійснення реплікації і трансляції. Експресуючу систему потім, і-й вносять у придатну клітину-мішень, що буде експресувати даний пептид. У залежності від обраної експресуючої

Чл» системи, пептид, що експресують потім вигляділяють із застосуванням добре відомих у даній області техніки процедур. Методи одержання рекомбінантних білків і пептидів добре відомі (див., наприклад, Затьгоок еї аї., 1989, "МоІесшіаг Сіопіпд:. А І арогаїогу Мапиа!", Соїй Зргіпд Нагрог ар. ММ; А!йзибреї еї аї., 1989, "Сштепі РиоїосоіЇїв іп Моїесціаг Віоіоду, Сгеепе Рирі. Аввос. 85 ММУПеу Іпіегвесі, ММ - обидва керівництва включені в повному своєму обсязі для довідки у вигляді бібліографічних посилань). о Для підвищення ефективності одержання полінуклеотид може бути сконструйований таким чином, щоб ко кодувати множинні одиниці того самого пептиду, розділені сайтами-мішенями для каталітичного розщеплення - за допомогою такого підходу можуть бути сконструйовані або гомополімери (повторювані пептидні одиниці), або бо гетерополімери (з'єднані разом різні пептиди). Отриманий у результаті поліпептид може бути розщеплений (наприклад, шляхом опрацювання придатним ферментом) із метою виділення пептидних одиниць. Це може призвести до посилення виходу пептидів, пов'язаних із єдиним промотором. В переважному варіанті поліцистронний полінуклеотид може бути сконструйований так, щоб транскрибувалася єдина мРНК, що кодує безліч пептидів (тобто гомополімери або гетерополімери), при тому, що кожна ділянка, що кодує, функціонально 65 сполучена із кеп-незалежною послідовністю контролю трансляції: наприклад, внутрішнього сайта входу в рибосому (ІКЕ5). У випадку використання придатної вірусної експресуючої системи, трансляція кожного пептиду,

кодованого конкретною мРНК, контролюється внутрішніми чинниками транскрипта - наприклад, елементом ІКЕ5.

Отже, поліцистронна конструкція контролює транскрипцію єдиної значної поліцистронної мРНК, що, у свою чергу, забезпечує трансляцію безлічі окремих пептидів. Такий підхід дозволяє виключити етапи одержання і каталітичного розщеплення поліпротеїнів і може істотною мірою підвищувати вихід пептиду з використанням єдиного промотора.

Для експресії описаних у даній заявці пептидів можуть бути використані різноманітні системи "хазяїн-експресучий вектор". Вони включають, тим самим не вичерпуючись, мікроорганізми, такі як бактерії, що трансформуються реком-бінантною фаговою ДНК або плазмідною ДНК експресуючих векторів, що включають 7/0 придатну послідовність, що кодиує; дріжджи або нітчаті гриби, що трансформуються рекомбінантними дріжджовими або грибковими експресуючими векторами, що включають придатну послідовність, що кодує; клітини комах, інфікує рекомбінантними вірусними екпресуючими векторами, (наприклад, бакуловірусними), що включають придатну послідовність, що кодиує, системи клітин рослин, інфікує рекомбінантними вірусними експерсуючими векторами, (наприклад, вірусом мозаїки кольорової капусти або вірусом тютюнової мозаїки) або 7/5 що трансформуються рекомбінантними плазмідними експресуючими векторами, (наприклад, Ті-плазмідою), що включають придатну послідовність, що кодує; або системи клітин тварин.

Пов'язані з забезпеченням експресії елементи в складі експресуючих систем, варіюються по своїй силі і специфічності. У залежності від використовуваної системи "вектор-хазяїн" будь-які з придатних регуляторів транскрипції і трансляції, включаючи конститутивні і індуцибельні промотори, можуть бути використані для 2о Включення до складу експресуючого вектора. Наприклад, у випадку клонування в бактеріальну систему, можуть бути використані індуцибельні промотори, такі як промотор рі бактеріофага 75, промотори ріас, рігр, ріас (гібридний промотор рігр-Іас) і подібні; у випадку клонування в системи клітин комах можуть бути використані такі промотори, як промотор полігедрозного бакуловіруса; у випадку клонування в системи рослинних клітин можуть бути використані промотори, похідні від геномів клітин рослин (наприклад, промотори генів теплового с шоку, промотор гена малої субодиниці фотосинтетичного ферменту Кибівсо, промотор гена зв'язуючого білку, хлорофіла-а/5) або похідні від рослинних вірусів (наприклад, промотор 355-РНК вірусу Саму, промотор гена о капсидного білка вірусу ТММ); у випадку клонування в системи клітин ссавців можуть бути використані промотори, похідні від генома клітин ссавців (наприклад, промотор гена металотіонеїна) або від вірусів ссавців (наприклад, промотор пізнього гена аденовірусу або промотор гена 7,5К вірусу коров'ячої віспи); у «І зо випадку створення клітинних ліній, які б несли множинні копії продукту, що експресується, можуть бути використані вектори на базі вірусів 5М40, ВРУ і ЕВМУ, що включають придатний селективний маркер. о

У випадку використання рослинних експресуючих векторів, експресія послідовностей, що кодують пептиди по МКУ даному винаходу, може бути поставлена під контроль будь-якого з широкого кола промоторів. Наприклад, можуть бути використані вірусні промотори, такі як промотори 355-РНК і 195-РНК вірусу мозаїки кольорової -

Зз5 капусти (СаМУ) (Вгізвоп еї аї., 1984, Маїште, 310, 511-514) або промотор гена капсидного білка вірусу ТММ Кк (Такатаїзи еї аЇ.,, 1987, ЕМВО )3., 6, 307-311); з іншого боку, можуть бути використані рослинні промотори, такі як, промотор гена малої субодиниці Кибрізсо (Согиг7і еї аі., 1984, ЕМВО .., З, 1671-1680; Вгодіїе еї аї., 1984, Зсіепсе, 224, 838-843) або промотори генів теплового шоку, наприклад, генів пзр17,5-Е або Нзр17,3-В сої (Сипеу еї аї., 1986, Мої. Сей. ВіоіІ., б, 559-565) . Такі конструкції можуть бути внесені в рослинні клітини « 70 З використанням Ті-плазмид, Кі-плазмид, векторів на основі рослинних вірусів, прямої ДНК-трансформації, шщ с мікроін'єкцій, електропорації і т.п. Для ознйомлення з оглядами таких методів див., наприклад, МУеіззрасп 5 й УУеіззрасі, 1988, "Меїпод3з Тог РіІапі Моіесшціаг Віоіоду", Асад. Ргевзв, ММ, Зесі. МІ, рр.421-463,-и ОСгіеггоп 5 Согеу, и? 1988, "РІапі МоіІесшіаг Віоіоду", 24 еа., ВіІаскКіє, І опаоп, Сп.7-9.

Однією з експресуючих систем у клітинах комах, призначених для виробітки пептидів по даному винаходу,

Може бути система клітин Аціодгарна саїйогпіса, в яких для експресії чужорідних генів використовується вірус -і полігедроза (поліедроза) ядер АпМРУ. Цей вірус росте і в клітинах совки Зродоріега Ігидірегаа. Послідовність, що кодує, може бути клонована в несуттєву по репликації ділянку генома вірусу (наприклад, у ділянку гена - полігедрина) і приміщена під контроль промотора АСсМРМУ (наприклад, промотор гена полігедрина). Успішне с вбудовування послідовності, що кодує, повинно призвести до інактивації гена полігедрина і виробленню 5ор "роздягненого" рекомбінантного вірусу (тобто вірусу, що втратив білковий капсид, кодований полігедриновим іні геном). Такі рекомбінантні віруси потім використовуються для зараження клітин Зродоріега Ігидірегда, у яких

Та» вмонтований ген експресується (див., наприклад. Зтій еї аїЇ., 1983, 9. Міго!ї, 46, 584; Зтійфй, патент США

Мо4215051). Подальші приклади такої експресуючої системи, можуть бути знайдені в керівництві "Сигепі

Ргоїосоїв іп МоїІесціаг Віоіоду", Мо!.2, едз. А!изирбвеї еї аі., сгеепе Рибі. Аззос. 5 УМіїеу Іпіегзсі., 1989.

При використанні систем клітин ссавців може бути використане широке коло експресуючих систем, на основі вірусів. У випадках, коли в якості експресуючого вектора, використовується аденовірус, послідовність що кодує іФ) може бути лігована до складу комплексу транскрипційно-трансляціонного контролю аденовірусного генома - ко наприклад, промотора пізнього гена і З-сегментної лідерної послідовності. Такий хімерний ген може бути потім умонтований в аденовірусний геном методами рекомбінації іп мійго або іп мімо. Внесення в несуттєву по бо репликації ділянку вірусного генома (наприклад, сегмент ЕЇї або ЕЗ) призведе в результаті до утворення рекомбінантного вірусу, що буде життєздатним і який буде експресувати пептид в інфікованих організмах-хазяїнах (див., наприклад, одап 45 ЗПпепкК, 1984, Ргос. Май. Асай. Зсі. ОБА, 81, 3655-3659). З іншого боку, може бути використаний промотор гена 7,5-К вірусу коров'ячої віспи (див., наприклад, МаскКей еї аІ., 1982, Ргос. Май. Асай. сі. ОБА, 79, 7415-7419; МасКен еї аї.,, 1984, 9. МігоІ,, 49, 857-864; Рапісаїї 65 еГаї., 1982, Ргос. Май). Асад. зсі. ОА, 79, 4927-4931).

Інші експресуючі системи, призначені для одержання пептидів по даному винаходу, також можуть бути очевидні для спеціалістів у даній області техніки. 5.2.3. Очищення пептидів

Пептиди по даному винаходу можуть бути очищені за допомогою відомих методів очищення, таких як хроматографія із зворотною фазою, ВОЖХ, іон-обмінна хроматографія, гель-електрофорез, афінна хроматографія і подібне. Конкретні умови, що використовуються при очищенні конкретного пептида будуть залежати, зокрема, від застосованої стратегії синтезу і таких чинників, як розмір сумарного заряду, рівень гідрофобності, рівень гідрофільності й ін., що буде цілком очевидно для спеціалістів у даній області техніки.

Мультимерні розгалужені пептиди можуть бути очищені, наприклад, за допомогою іон-обмінної хроматографії 70 або гель-фільтрації. Для очищення з застосуванням афнної хроматографії може бути використане будь-яке антитіло, що специфічно зв'язує пептид. Для одержання антитіл різноманітні тварини-реципієнти, включаючи, але тим самим не обмежуючись, кроликів, мишей, пацюків і т.п., можуть бути іммунізовані шляхом ін'єкції пептида. Цей пептид може бути сполученим із придатним носієм, таким як бичачий сироватковий альбумін із використанням функціональних груп у складі бічних ланцюгів або лінкерів, приєднаних до функціональної групи бічного ланцюга. Можуть бути використані різноманітні ад'юванти, що забезпечать посилення імунної відповіді, що, у залежності від використовуваного виду реципієнта, включають, тим самим не обмежуючись, ад'ювант

Фройнда (повний або неповний), мінеральні гелі, такі як кремнезем, поверхнево-активні речовини, такі як лізолецитин, поліспирти, поліаніони, пептиди, масляні емульсії, гемоцианін слизня, динітрофенол і потенційно застосовні людські ад'юванти, такі як ВСО (палички Кальметта-Жерена) і бактерії Согуперасіегішт рагит.

Моноклональні антитіла до пептиду можуть бути отримані з використанням методики, що забезпечує вироблення молекул антитіл безупинними клітинними лініями, що культивуються. Ці методи включають, тим самим не вичерпуючись, методику гібридом, вперше описану Кьолером і Мильштейном (КоПпіег 5 Міївіеїп, 1975, Майшге, 256, 495-497; КаргмовкКі, патент США Мо4376110 - включений для довідки у вигляді бібліографічного посилання), методика гібридом із В-лімфоцитами людини (Козрбог еї а!., 1983, Іттипої. Тодау, 4, 72; Соіе еї сч сов а. 1983, Ргос. Май. Асад. Зсі. ОЗА, 80, 2026-2030) і методика гібридом із трансформацією вірусом

Епштейна-Барр (ЕВМ) (Соїе еї аї., 1985, "Мопосіопа! Апіїродіез апа Сапсег Тнпегару", А.К. ізв Іпс., рр.7 7-96). і)

Крім того, можуть бути застосовані методики, розроблені для одержання хімерних антитіл (Могтізоп еї аї., 1984, Ргос. Май. Асад. Зсі. ОБА, 81, 6851-6855; Мецйбрегдег еї аіЇ., 1984, Маїшге, 312, 604-608; ТаКеда еї аї., 1985, Майшге, 314, 452-454; Вовзв, патент США Мо4816397; Сарійу, патент США Мо4816567 - включені для довідки « зо як бібліографічні посилання), в яких провадиться сплайсінг генів миші, що кодують антитіла з придатною антигенною специфічністю, і генів людини, що кодують антитіла з конкретною біологічною активністю. Або ж о можуть бути отримані "гуманізовані" антитіла (див., наприклад, Оцееп, патент США Мо5585089 - включений для ю довідки у вигляді бібліографічного посилання). З іншого боку, методики, описані в зв'язку з виробленням одноланцюжкових антитіл (патент США Мо4946778), також можуть бути адаптовані для одержання -- пептид-специфічних одноланцюжкових антитіл. ї-

Фрагменти антитіл, що містять делеції сайтів специфічного зв'язування, можуть бути сформовані за допомогою відомих методик. Наприклад, такі фрагменти включають, тим самим не обмежуючись, фрагменти

Каб)», які можуть бути отримані шляхом розщеплення пепсином молекул антитіл, або фрагменти Рар, що можуть бути отримані шляхом відновлення дисульфідних "містків" у фрагментах К(аб') ». З іншого боку, можуть « бути сконструйовані Рар-експресуючі бібліотеки (Низе еї аї., 1989, Зсіепсе, 246, 1275-1281), що забезпечить /7- с прискорення і спрощення ідентифікації моноклональних Рар-фрагментів, що мають бажану специфічність у . відношенні пептида, що представляє інтерес. и?» Антитіло або фрагмент антитіла, специфічні у відношенні бажаного пептида, можуть бути приєднані, наприклад, до агарози, а такий комплекс "антитіло-агароза" може бути використаний для іммунохроматографічного очищення пептидів по даному винаходу: див., наприклад. Зсорев, 1984, "Ргоїеіп -І Ригійсаййоп: Ргіпсіріев апа Ркгасіїсе", Зргіпдег-Мегад, Мем Могк, Іпс., ММ; Ііміповіопе, 1974, "Меййодз5 іп

Епгутоіоду: Іттипоайніпіу Спготайдгарпу ої Ргоїеіпв", 34, 723-731). - 5.3. Фармацевтичні композиції і засоби лікування с Агоністи АроА-І по даному винаходу можуть бути застосовані для лікування будь-якого захворювання у 5ор тварин, особливо у ссавців, включаючи людину, при яких бажаним є підвищення сироваткового рівня НОЇ, о активація І САТ, стимулювання виходу холестерину з клітин і індукція ЗТХ. Такі стани включають, тим самим не ї» вичерпуючись, гіперліпідемію, і особливо гіперхолестеринемію, серцево-судинні захворювання, такі як атеросклероз (включаючи лікування і профілактику атеросклерозу), рестеноз (наприклад, профілактику або лікування атеросклеротичних бляшок, що розвиваються внаслідок терапевтичних процедур, таких як балонна ангіопластика) і інші захворювання, такі як вихід ендотоксинів, що часто призводить до септичного шоку.

Агоністи АроА-І можуть бути застосовані самі по собі або в сполученні з іншими лікарськими засобами, що (Ф, застосовуються для лікування вищезгаданих станів. Такі засоби лікування включають, тим самим не ка обмежуючись, одночасне або послідовне введення лікарських засобів, що застосовуються.

Наприклад, при лікуванні гіперхолестеринемії або атеросклерозу препарати з агоністами АроА-Ї можуть бути бр введені спільно з одним або декількома застосовуваними в даний час препаратами, призначеними для зниження рівня холестерину, - наприклад, жовчно кислотними полімерами, ніацином і (або) статинами. Такий комбінований підхід може обумовлювати істотне підвищення ефективності лікування завдяки тому, що кожен з лікарських засобів діє на різноманітну мішень у системі синтезу і транспорту холестерину: тобто жовчнокислотні полімери порушують повторне циркулювання холестерину, утворення хіломікрона і І 0; ніацин у першу чергу придушує 65 популяції МІ ОЇ ії 0; статини придушують синтез холестерину, знижують вміст І (і, можливо, збільшують експресію рецепторів І 01); у той час як агоністи АроА-Ї по даному винаходу придушують ЗТХ, збільшують рівень

НОЇ, збільшують активність І САТ і сприяють виходові холестерину з клітин.

В іншому варіанті агоністи АроА-І можуть бути застосовані в сполученні з фібратами для лікування гіперліпідемії, гіперхолестеринемії і (або)серцево-судинних захворювань, таких як атеросклероз.

Ще в одному варіанті агоністи АроА-і по даному винаходу можуть бути використані в сполученні з протимікробними і протизапальними засобами, звичайно використовуваними для лікування септичного шоку, індукованого виходом ендотоксинів.

Агоністи АроА-І по даному винаходу можуть бути включені в композицію у вигляді пептидів або у вигляді пептидно-ліпідних комплексів, що можуть бути введені пацієнтам різноманітними засобами так, щоб забезпечити /о залучення агоністів АроА-І до циркуляції. Нижче будуть описані приклади фармацевтичних композицій і режимів лікування. 5.3.1. Агоністи АроА-!| і пептидно-ліпідні комплекси в якості активних компонентів

Пептиди-агоністи АроА-І! можуть бути синтезовані або зроблені з використанням будь-якої методики, описаної в розділі 5.2 і його підрозділів. Стабільні препарати, що мають тривалий період зберігання, можуть бути 7/5 Отримані шляхом ліофілізаці пептидів: або з метою одержання нерозфасованої лікарської речовини для наступного дозування, або для одержання окремих аліквот або стандартних доз, що можуть бути реконституйовані шляхом замочування стерильною водою або придатним стерильним забуференим розчином перед введенням пацієнту.

В деяких варіантах переважним може бути одержання і введення агоніста АроА-| у вигляді 2о пептидно-ліпідного комплексу. Такий підхід має ряд переваг, оскільки такий комплекс буде характеризуватися збільшеним часом на півжиття циркулювання, особливо, у випадку, коли такий комплекс має розмір і щільність, подібні до розміру і щільності НОЇ, і особливо з параметрами фракцій НОЇ. пре-В-1 і пре-Д-2. Пептидно-ліпідні комплекси можуть бути отримані стандартними засобами з застосуванням будь-якого з описаних нижче методів.

Стабільні препарати, що мають тривалий період зберігання, можуть бути отримані шляхом ліофілизації - при с цьому переважним підходом є описаний нижче процес коліофілизації. Ліофілизовані пептидно-ліпідні комплекси можуть бути використані для отримання матеріалу для одержання нерозфасованої лікарської речовини з о наступним дозуванням фармацевтичних композицій або для одержання окремих аліквот або стандартних доз, що можуть бути реконституйовані шляхом замочування стерильною водою або придатним стерильним забуференим розчином перед введенням пацієнту. «І

Для одержання пептидно-ліпідних пухирців або комплексів може бути застосований ряд методів, відомих спеціалістам у даній області техніки. У цьому відношенні може бути використаний ряд методів готування ліпосом о або протео-ліпосом. Наприклад, пептид може бути опромінений ультразвуком (із використанням випромінювачів юку різноманітної конструкції) разом із придатними ліпідами з утворенням комплексів. З іншого боку, пептид може бути сполучений з попередньо сформованим ліпідним пухирцем, у результаті чого буде відбуватися спонтанне (7 утворення пептидно-ліпідних комплексів. Ще в одному альтернативному підході пептидно-ліпідні комплекси ї- можуть бути сформовані за допомогою методу детергентного діаліза: наприклад, суміш пептида, ліпіда і детергента діалізують із метою видалення детергента, у результаті чого відбувається відновлення або формування пептидно-ліпідних комплексів (див., наприклад, допаз еї аї., 1986, Меїйодз Епгутої., 128, 553-582).

При тому, що вищеописані засоби є здійсненними, кожний із цих підходів характеризується "власним" « набором проблем, пов'язаних із вартістю, виходом, відновлювальністю і безпекою. Заявники розробили простий с засіб одержання пептидно- або білково-фосфоліпідних комплексів, що мають параметри, подібні до таких в НОЇ. й Цей підхід може бути використаний для одержання пептидно-ліпідних комплексів АроА-! і він характеризується «» такими перевагами: (1) використовувані інгредієнти в більшій свій частині або цілком використовуються для утворення бажаних комплексів, тим самим дозволяючи уникати втрат вихідних матеріалів, що є звичайним для інших аналогічних засобів. (2) Одержують ліофілізовані сполуки, що характеризуються високим рівнем -і стабільності при зберіганні. Отримані в результаті комплекси можуть бути реконституйовані безпосередньо перед їхнім застосуванням. (3) Отримані в результаті комплекси звичайно не потребують додаткового очищення - після готування композицій і перед застосуванням. (4) Токсичні сполуки, включаючи такі детергенти як холат, «сл виключаються. Більш того, спосіб приготування може легко бути промасштабований і є придатним для 50р ОМР-виробництва (тобто в середовищі без ендотоксинів). о Відповідно до переважного способу, пептид і ліпід об'єднуються в розчиннику, що солюбілізує кожний із

Та» компонентів і може бути цілком видаленим при ліофілизації. У цьому відношенні можуть бути старанно підібрані пари розчинників, що забезпечать одночасну розчинність амфіпатичного пептида і ліпіда. В одному із варіантів білок (білки) або пептид (пептиди), призначені для включення до складу частки, можуть бути розчинені у

Водяному або органічному розчиннику, або в суміші розчинників (розчинник 1). (Фосфо)ліпідний компонент розчиняють у водяному або органічному розчиннику або суміші розчинників (розчинник 2), який може іФ) сполучатися з розчинником 1, і після цього два розчини змішують. З іншого боку, пептид і ліпід можуть бути ко внесені в систему для одночасного їхнього розчинення -наприклад, у суміш розчинників, що сполучаться.

Придатна пропорція пептида (білка) і ліпідів спочатку визначається емпіричним шляхом таким чином, щоб бо одержувані в результаті комплекси виявляли необхідні фізичні і хімічні властивості; тобто звичайно (але необов'язково) подібність по розміру з НОЇ. Отриману в результаті суміш заморожують і ліофілизують до повного висихання. Іноді до даної суміші може бути доданий додатковий розчинник для полегшення ліофілизації.

Отриманий ліофілизований продукт може зберігатися протягом тривалого часу, залишаючись при цьому стабільним. 65 В експериментальних прикладах, описаних у даній заявці, пептид 210 (ЗЕО ІЮ МО 210) ії фосфоліпіди розчиняли окремо в метанолі, об'єднували і перемішували в ксилені перед ліофілизацією. Кожний із компонентів

- пептид і ліпід - може бути доданий до суміші двох розчинників. З іншого боку, розчин пептида, розчиненого в метанолі, може бути змішаний із розчином ліпіда, розчиненого в ксилені. Необхідна старанність у видаленні солей із розчинників із метою недопущення висалювання пептида. Отриманий у результаті розчин, що містить пептид і ліпід, спільно розчинені в метанолі-ксилені, ліофілизують з утворенням порошку.

Ліофілизований продукт може бути реконституйований із метою одержання розчину або суспензії пептидно-ліпідного комплексу. У цьому відношенні ліофілизований порошок замочують водяним розчинником придатного об'єму (часто 5мг пептида на їмл, що є стандартною дозою для внутрішньовенних ін'єкцій). У переважному варіанті ліофілизований порошок замочують фосфатно-сольовим буфером або фізіологічним 7/0 розчином. Для полегшення замочування суміш може бути піддана струшуванню або перемішуванню, а в багатьох випадках етап реконституції проводять при температурі, рівній або трохи вищій за температуру фазового переходу ліпідного компонента даних комплексів. В результаті протягом декількох хвилин одержують чистий препарат реконституйованого ліпід-протеїнових комплексів.

Аліквота отриманого в результаті реконституйованого препарату може бути охарактеризована для 7/5 Підтвердження того, що комплекси в отриманих препаратах мають бажаний діапазон розмірів: тобто він відповідає розподілу розмірів НОЇ. У цьому випадку може бути застосований метод гель-фільтрації. В описаних у даній заявці робочих прикладах використовувалася гель-хроматографія на колонках Зирегозе-б6 ЕРІС (Рпаг» тасіа). Буфер, що використовувався, містив 150м Масі у 50м фосфатного буфера, рН-7,4. Типовий об'єм зразка складає від 20 до 200 мікролітрів комплексу, що містить 5мкг пептида на Тмол. Швидкість потоку на 2о Колонку складає О0,5мл/хв. В якості стандартів для калібрування колонки використовують білки відомої молекулярної маси і діаметра Стокса, а також НОЇ людини. Білки і ліпопротеїнові комплекси тестували по розміру поглинання або розсіювання світла при довжинах хвиль 254 або 28Онм.

Агоністи АроА-ІЇ по даному винаходу можуть бути включені в комплекси з різноманітними ліпідами, включаючи насичені, ненасичені, природні і синтетичні ліпіди і (або) фосфоліпіди. Придатні ліпіди включають, тим самим сч ов не вичерпуючись, фосфоліпіди з невеликим алкільним ланцюжком, яєчний фосфатіділхолин, фосфатіділхолин

СОЇ, дипальмітоїл-фосфатіділхолин, димиристоїлфосфатіділхолин, дистеароїл-фосфатіділхолин, (8) 1-миристоїл-2-пальмітоїлфосфатіділхолин, 1-пальмітоїл-2-миристоїлфосфатіділхолин, 1-пальмітоїл-2-стеароїлфосфатіділхолин, 1-стеароїл-2-пальмітоїлфосфатіділхолин, диолеоілфосфатіділхолин, диолеофосфатіділетаноламин, дилауроїлфосфатіділгліцерин, фосфатіділхолин, фосфатіділсерин, «г зо фосфатіділетаноламін, фосфатіділинозитол, сфинго-мієлин, сфинголіпіди, фосфатіділгліцерин, дифосфатіділ-гліцерин, димиристоїлфосфатіділгліцерин, дипальмітоїлфосфатіділгліцерин, о дистеароїлфосфатіділгліцерин, диолеоїлфосфатіділгліцерин, димиристоїлфосфатидну кислоту, (аз дипальмітоїлфосфатидну кислоту, димиристоїлфосфатіділетаноламін, дипальмітоїлфосфатіділетаноламін, димиристоїлфосфатіділсерин, дипальмітоїлфосфатіділсерин, фосфатіділсерин головного мозку, сфингомієлин (87

Зв ГОЛОВНОГО мозку, дипальмітоїлефингомієлин, дистеароїлсефингомієлин, фосфатидну кислоту, р. галактоцереброзид, гангліозиди, цереброзиди, дилаурилфосфатіділ-холин, (1,3)-0О-маннозил-(1,3)-дигліцерид, амінофенілгл ікозид, З-холестерил-6б'-(глікозилтіо)гексиловий ефір, гліко-ліпіди, а також холестерин і його похідні.

Заявники встановили, що, коли агоністи АроА-Ї по даному винаходу утворюють комплекси зі сфингомієліном, то всі частки пре-д-подібної фракції НОЇ. елімінуються. Відповідно, у переважному варіанті даного винаходу « 0 агоністи АроА-І| вводять у комплексі зі сфингомієліном. шщ с 5.3.2. Засоби лікування й Пептидні агоністи АроА-ІЇ або пептидно-ліпідні комплекси по даному винаходу можуть бути введені будь-яким "» придатним шляхом так, щоб забезпечити біодоступність для включення в циркулювання. З найбільшою ефективністю це може бути досягнуто шляхом парентерального введення, включаючи внутрішньовенні (в.в.),

Внутрим'язові (в.м.), внутришкірні, підшкірні (п.ш.) і внутричеревні (в.ч.) ін'єкції. Проте, можуть бути -І використані й інші шляхи введення. Наприклад, всмоктування через шлунково-кишковий тракт може бути досягнуто шляхом перорального введення (включаючи, але тим самим не обмежуючись, шляхи введення - шляхом ковтання, "за щоку" і "під язик): при цьому придатні препарати (наприклад, кишкові капсули) с використовуються з метою недопущення або мінімізації руйнації активного компонента - наприклад, у жорсткому 5р середовищі слизистих ротової порожнини, шлунка і (або) тонкого кишечника. З іншого боку, введення через і-й слизисту, наприклад, вагинальне або ректальне введення, можуть бути застосовані з метою недопущення або

Та» мінімізації руйнації в шлунково-кишковому тракті. Ще в одному альтернативному варіанті препарати по даному винаходу можуть бути введені через шкіру (тобто трансдермально) або шляхом інгаляції. Повинно бути зрозуміло, що вибір переважного шляху введення може варіюватися в залежності від стана, віку і режиму

Лікування реципієнта.

Конкретна доза агоністів АроА-ІЇ або пептидно-ліпідного комплексу буде варіюватися в залежності від засобу іФ) введення і повинна визначатися таким чином, щоб забезпечити концентрацію засобу, що циркулює, у плазмі ко крові від 1ООмг/л до 2г/л. Дані, отримані на тваринних моделях, описаних у даній заявці, показують, що агоністи АроА-І по даному винаходу зв'язуються з НОЇ -компонентом і характеризуються часом напівжиття в бо організмі людини приблизно 5 днів. Отже, в однім із варіантів агоністи АроА-і можуть бути введені шляхом ін'єкції дозою від 0,бмг/кг до 1ООмг/кг із розрахунку 1 раз на тиждень. В іншому варіанті бажані сироваткові рівні можуть підтримуватися постійною інфузією або переривчастими інфузіями на рівні приблизно від 0О,5мг/кг до 1ООмг/кг на годину.

Токсичність і терапевтична ефективність різноманітних агоністів АроА-І можуть бути визначені з б5 використанням стандартних фармацевтичних процедур в клітинних культурах або в лабораторних тварин шляхом визначення показника ЛДрео (летальна доза 5095 популяції) або показника ЕДео (терапевтично ефективна доза 5095 популяції). Співвідношення доз по їх токсичному і терапевтичному прояву визначається як терапевтичний індекс: його виражають відношенням ЛДсоу/ЕДво. Переважними є ті пептидні агоністи АроА-Ї, що забезпечують високі значення терапевтичного індексу. 5.3.3. Фармацевтичні композиції

Фармацевтична композиція по даному винаходу містить пептидний агоніст АроА-І або пептидно-ліпідний комплекс в якості активного компонента у фармацевтично прийнятному носії, придатному для введення і доставки іп мімо. Оскільки пептиди можуть включати кислі і (або) основні кінці і (або) бічні ланцюги, то такі пептиди можуть бути включені в композиції або у формі вільних кислот або основ, або у формі фармацевтично 7/0 прийнятних солей.

Композиції для ін'єкцій містять стерильні суспензії, розчини або емульсії активного компонента у водяному або масляному наповнювачі. Композиції також можуть містити спеціальні компоненти, такі як суспендуючи, стабілізуючі і (або) диспергуючі компоненти. Композиції для ін'єкцій можуть бути виконані у вигляді стандартних доз, наприклад в ампулах або контейнерах для серії доз, а також до них можуть бути додані 7/5 Консерванти.

З іншого боку, композиції для ін'єкцій можуть бути виготовлені у вигляді порошку, призначеного для реконституювання придатним наповнювачем, включаючи, але тим самим не вичерпуючись, стерильну безпірогенну воду, буфер, розчин декстрози і т.п., що здійснюється перед застосуванням. В цьому відношенні агоніст АроА-І може бути ліофілизований, або може бути отриманий співліофілизований пептидно-ліпідний

Комплекс. Композиції для зберігання можуть являти собою стандартні дози, які реконституюють безпосередньо перед вживанням іп міїго.

Для подовженої доставки активний компонент препарату може бути виготовлений у вигляді "депо"-препарату, призначеного для введення шляхом імплантування: наприклад підшкірно, внутришкірно, або внутрим'язово. Отже, активний компонент може бути включений, наприклад, в композицію разом з придатним с доб полімерним чи гідрофобним матеріалом (наприклад, у вигляді емульсії в придатному маслі) або іон-обмінною смолою, або у вигляді повільнорозчинюваних похіжних: наприклад, у вигляді повільнорозчинюваних солей і) агоніста АроА-Ї.

З іншого боку, можуть бути застосовані тарнсдермальні системи доставки, виконані у вигляді клейких дисків чи капсул, які повільно виділяють активний компонент, який при цьому всмоктується внутришкірно. У цьому «Е зо випадку можуть бути використані підсилювачі проникності, що полегшують внутришкірне проникнення активного компонента. Конкретні переваги можуть бути досягнуті шляхом включення агоністів АроА-І| по даному винаходу о або пептидно-ліпідного комплекса в нітрогліцеринові капсули, застосовувані пацієнтами з ішемічною хворобою ю серця і гіперхолестеринемією.

Для перорального введення фармацевтичні композиції можуть мати, наприклад, форму таблеток або капсул, -- з5 отриманих за допомогою стандартних методик із фармацевтично прийнятними носіями, такими як компоненти, ча що зв'язують, (наприклад, попередньо желатинизований кукурудзяний крохмаль, полівинілпіролідон або гідроксипропілметилцелюлоза), наповнювачі (наприклад, лактоза, мікрокристалічна целюлоза або кислий фосфат кальцію), компоненти, що змащують (наприклад, стеарат магнію, тальк або кремнезем), дезінтегранти (наприклад, картопляний крохмаль або натрієвий крохмальгліколат) або компоненти, що змочують, (наприклад, « лаурилсульфат натрію). Таблетки можуть бути покриті з використанням методів, відомих у даній області техніки. пе) с Рідкі композиції для перорального введення можуть мати форми, наприклад, розчинів, сиропів або суспензій,

Й або ж вони можуть бути сухим продуктом, призначеним для реконституювання водою або іншими придатними и?» носіями перед використанням. Такі рідкі препарати можуть бути отримані з застосуванням стандартних засобів і можуть включати додатково прийнятні агенти, що суспендують, (наприклад, сорбітольний сироп, похідні целюлози або гідрогеновані харчові жири), що емульгують компоненти (наприклад, лецитин або аравійська -І камедь), неводні носії (наприклад, мигдалева олія, оліїсті ефіри, етиловий спирт або ректифіковані рослинні олії) і консерванти (наприклад, метил- або пропіл-р-гідроксибензоати або сорбінова кислота). Композиції також - можуть містити придатні сольові буфери, ароматизатори, барвники і компоненти, що підсолоджують. Композиції с для перорального введення можуть бути приготовлені таким чином, щоб забезпечувати контрольований вихід активного компонента. о Для трансбукального введення фармацевтичні композиції можуть бути стандартним чином приготовлені у ї» формі таблеток або коржиків. Для ректального і вагинального введення активний компонент може бути введений у вигляді розчинів (для утримуючих клизм), суппозиторіїв або мазей.

Для введення шляхом інгаляції активний компонент може бути стандартним чином приготовлений у вигляді аерозольних спреїв, таких як герметичні упаковки або пульверизатори, із використанням придатного засобу, що розпорошує, наприклад, дихлордифторметана, трихлорфторметана, дихлортетрафторетана, двоокису вуглецю (Ф, або іншого придатного газу. У випадку герметичної аерозольної упаковки стандартна доза може бути визначена ка шляхом установки спеціального клапана, що відміряє визначену кількість вмісту. Капсули і картриджи, наприклад, желатин, для використання в інгаляторі або порошковдувачі можуть бути приготовлені так, щоб бо Містити порошок, що є сумішшю даної сполуки і придатного матеріалу, що утоврює порошок, такого як лактоза або крохмаль.

Композиції, якщо це бажано, можуть бути подані в упаковці або диспенсорі, в якому може знаходитися одна або декілька стандартних доз, що включають активний компонент. Упаковка, наприклад, може бути виготовлена з металевої або пластмасової фольги, наприклад, у вигляді облаток. До упаковки або диспенсору може 65 додаватися інструкція для застосування. 5.4. Інші застосування

Агоністи АроА-| по даному винаходу можуть бути використані в тестах іп мйго, націлених на вимір сироваткового НОЇ, наприклад, для діагностичних цілей. Оскільки агоністи АроА-| зв'язуються з

НОЇ -компонентом сироватки, ці агоністи можуть бути використані в якості "маркерів" популяції часток НОЇ.

Більш того, ці агоністи можуть бути використані в якості маркерів тієї субпопуляції НОЇ, що ефективна в системі ЗТХ. У цьому випадку агоніст може бути доданий до зразка сироватки пацієнта або змішаний із нею: після придатного часу інкубації НОЇ -компонент може бути протестований шляхом виявлення включенного агоніста АроА-І. Цього можна досягти використовуючи мічені агоністи (наприклад, радіоактивні мітки, флуоресцентні мітки, ферментні мітки, барвники і т.п.) або в іммунологічних тестах із використанням антитіл 70 (або фрагментів антитіл), специфічних у відношенні конкретного агоніста.

З іншого боку, позначений агоніст може бути використаний у процедурах, що візуализують, (наприклад, у методах САТ-сканування, МКІ-сканування) для візуалізації в системах, що циркулюють, або для моніторингу

ЗТХ, або для візуалізації накопичення НОЇ. у жирових відкладеннях, атеросклеротичних бляшках і т.п. (де НОЇ. повинні бути активні по виході холестерину з клітин). 6. Приклад: синтез пептидних агоністів АродА-Ї

Пептиди, описані в табл.10 (розділ 8.3), були синтезовані і охарактеризовані відповідно до описаного в нижченаведених підрозділах. Пептиди також були проаналізовані по структурних і функціональних параметрах відповідно до описаного тут у розділах 7 і 8. 6.1. Синтез базових пептидів

Пептиди були синтезовані у твердій фазі відповідно до методу Меррифілда (Мег!тійеїд9, 1969, 9. Атег. Спет. ос, 85, 2149-2154) із використанням 0,25ммоль полі-р-алюксибензилового спирту (смола НМР) (Ууапа, 1973, 9.

Атег. Спет. Зос, 95, 1328-1333) і Етос-хімії. Всі реакції синтезу були здійснені з застосуванням автоматичного пептидного синтезатора Арріїей Віозувіетв АВІ моделі 4З30А (Регкіп-ЕІтег, Ровіег СПУ, СА).

Тривалість сольватації й активації для кожного циклу сполучення показані нижче в табл.5. сч щі о циклу активації) перенесення" х

НОВІММР ю аїтс 32 Аг (Рітс), СіІп (п), Аїр -0,вмл ОСМ, -1,2МПММР, -1,Омл |-З2хв. -Б1хВ. 1-6Осек.

Пн ПО м виш ПИ В ю аїтс 33 Аа, Авр (ОЇВи), Сі (ОЇВи), Су, Пе, Гец,|- О4мл ОСМ, -0,Вмл ММР, -0,1мл)| х4хв. -36,5Бхв. 1-38сек.

Пе си Имя ник Пн В - » ;

НОВУММР 2-2т7сек. 2г-перенесення з активатора на картридж 5 вОС - трет-бутилоксикарбоніл;

НОВІ - 1-гідроксибензотриазол; ММР - М-метилпіролідон; їй - тритил; - с Рітс - пентаметилхроман-6б-сульфоніл; ОїВи - трет-бутиловий ефір :з» Смоли промивали М-метилпіролідоном на кожному етапі реакції сполучення. Протокол одного циклу синтезу показаний нижче в табл.б. 5 -і : - сл

Фо щ : : й У й

Всі амінокислоти, за винятком Етос-р-(1-нафтил)аланина, піддавали сполученню в такий спосіб. Сполучення

ГФ) Етос-р-(1-нафтил)аланіна здійснювали "вручну" Для сполучення "вручну" їммоль Етос- р-(1-нафтил)аланіна і з 1моль 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетра-метилуронійтетрафторбората (ТВТО) розчиняли в бмл ММР і змішували з комплексом пептид-смола.

Після цього добавляли 2ммоль М-етилдиізопропіламіна, суміш струшували протягом 2 годин і комплекс бо "пептид-смола" промивали 6 разів у ТОмл ММР. Ефективність реакції сполучення контролювали з використанням тесту Кайзера (Каїзег, 1970, Апа!Ї. Віоспет., 34, 59577) і при необхідності реакцію сполучення повторювали.

Після сполучення нафтил-аланіна реакції синтезу, що залишилися, проводили автоматично відповідно до описаного вище. 6.2. Синтез пептидних амідів бо Як визначено в табл.10 (розділ 8.3 даної заявки), пептидні аміди синтезували з використанням амідної смоли Ринка, що містить індуктор ЕГтос-аміда Ринка - 4-(2'4"-диметилфеніл)-ЕРтос-феноксиметил (Кіпк, 1987,

Теганпеагоп Гек, 28, 3787-3790), і застосуванням протоколів синтезу, описаних вище в розділі 6.1. 6.3. Синтез пептидів, ацильованих по М-кінцю

Як визначається в табл.10 (розділ 8.3 даної заявки), ацильовані по М-кінцкю форми пептидів були отримані шляхом опрацювання пов'язаних на смолі пептидів, отриманих відповідно до описаного тут у розділах 6.1 і 6.2, ацилюючим агентом що підходить.

Для ацетильованих по М-кінцю пептидів ї5мл розчину оцтового ангідрида (1095 о/о у ММР) добавляли до кожного Тр пов'язаного на смолі пептида, суміш перемішували протягом 5 хвилин і смолу виділяли 7/0 фільтруванням. Виділену смолу промивали тричі ММР (15мл) і тричі етанолом (15мл). 6.4. Відщіплення і звільнення від захисту

Після синтезу пептиди, описані тут у розділах 6.1, 6.2 і 6.3, відокремлювали від смоли (полімерної підкладки) і звільняли від захисту з використанням розчину, що відщеплює, що містить 92,595 трифтороцтової кислоти (ТЕА), 3,7595 анізола і 3,7590 додекантіола(0о/0/0). Для досягнення відщіплення 1Омл розчину, що відщеплює, добавляли до 0,25ммоль комплексу пептид-смола і перемішували протягом 1,5 годин при кімнатній температурі. Смолу видаляли шляхом відфільтровування і відщеплений/звільнений від захисту пептид осаджували диетиловим ефіром, промивали ефіром і висушували у вакуумі.

Суміш, що відщеплює, для пептидів, що включають триптофан (М/), так само як і для пептидних амідів, містила 86,5905 ТЕА, 4,595 води, 4,590 1,2-етандитіола, 4,595 анізол а і З9о фенолу. 6.5. Очищення

Неочищені, відщеплені пептиди, описані в розділі 6.4, піддавали очищенню за допомогою ВЕРХ із зворотною фазою. Чистоту кожного пептида підтверджували за допомогою різноманітних аналітичних процедур (аналітична

ВЕРХ, електрофорез у капілярах). Електрофорез у капілярах проводили на спаяних силікагелевих капілярах довжиною 7Осм, їхній внутрішній діаметр складав 75мкм (Тпегто Зерагайоп Ргодисів). Поділ проводили при сч ов 25" С, напрузі 15КВ, часу протоку 35 хвилин, із використанням двох буферних систем: буфер 1 (20м Ма2»В./О» - р-9,2) і буфер 2 (10м Ма»НРО, - р-2,5). Хроматографічний поділ здійснювали на кремнеземних колонках і)

Мисіеозії-7С18 або Мисіеовії-7С4 (Маспегеу 45 Мадеї, Німеччина) розміром 250х21мм при швидкості протоку

Змл/хв. Елюційний градієнт готували з використанням суміші 0,195 ТЕА у воді (розчинник А) і 0,195 ТРА в ацетонітрилі (розчинник В). Градієнти, що використовувалися, доводили з урахуванням потреб кожного з «г зо пептидів. 6.6. Характеристика о

Визначення молекулярної маси й аналіз амінокислотного складу в очищених пептидах, описаних у розділі ю 6.5, здійснювали з методами мас-спектрометрії й аналізу амінокислот, відповідно, так, як це описано нижче.

Метод деградації по Едману використовували для секвенування. -- 6.6.1. Мас-спектроскопія ї-

Для визначення молекулярної маси використовували доступний на комерційній основі З-стадійний квадрупольний мас-спектрометр моделі 750-700 (Ріппідап МАТ, Зап дозе, СА, США). Для внесення зразка в іонізаційну камеру омас-спектрометра при атмосферному тиску використовували пневматичний електророзпилюючій інтерфейс. Розпилювач-інтерфейс-розпорошувач працював при позитивній напрузі 4,5кВ. «

Температура сталевого капіляра підтримувалася на рівні 200"С, при тому, що температура колектора іонів з с складала 70"С. Позитивні іони, що утворилися в даному процесі "випарювання іонів", потрапляли в аналізатор мас-спектрометра. Помножувач доводили до 10008. Аналізаторний пристрій мас-спектрометра знаходився в ;» положенні 4Е-6. Всі визначення проводили при розрізнюванні «тод.

Пептиди аналізували шляхом прямого вприску очищених пептидів із використанням мікроканальної системи

АВІ (Арріїей Віозузіетв), обладнаної шприцевим насосом (модель 1408), УФ-детектором (модель 785А) і -І "піччю-інжектором"' (модель 112А). Система розчинників складалася з води (розчинник А) і ацетонітрила (розчинник В): у кожному розчиннику містилося 0,195 ТРА. Пептиди впорскували з використанням або градієнту, - або ізократиних умов і елюювали з аквапорової С18 колонки. Швидкість потоку звичайно складала ЗООмкл/хв. с Концентрація кожного пептида складала приблизно 0,0Змг/мл, впорскували по 20мкл кожного з них (наприклад, 5р ЗОпкмоль). о Експерименти по мас-спектроскопії з повним скануванням здійснювали шляхом сканування квадруполі 1 у ї» межах пт/2 5000-1500 при 45. Дані одержували з використанням установки АІрпа-ЮОЕС і опрацьовували з використанням комп'ютерного пакета, розробленого фірмою Ріппідап МАТ (Віо-жогкзв). 6.6.2. Аналіз амінокислотного складу

Аналіз амінокислотного складу проводили з використанням амінокислотного аналізатора моделі АВІ 420 (Арріїеа Віозувіетв). Ця система складається з трьох модулів: гідролізатора-дериватизатора, пристрою для

Ф) ВЕРХ із зворотною фазою й аналізатора даних. Пептидний зразок вміщували (вибираючи в трьох повторностях) ка на платівки з пористого скла і піддавали гідролизу під газовою фазою (155"7С, 90 хвилин). Після видалення НС. отримані в результаті амінокислоти перетворювали вв РТСОС-АА (фенілтіокарбамоїл-амінокислоти) із бо використанням РІТС (фенілізотіоцианата). Після переносу на НРС-контур для зразків отримані суміші фракціонували на аквапорових С18 колонках із використанням режиму градієнту (розчинник А: 5Оммоль ацетата амонію МНААс - рН.-5,4, у воді; розчинник В: З2ммоль ацетата натрію МадОАс у водяному ацетонітрилі) в умовах контрольованої температури. Дані ВЕРХ опрацьовували з використанням комп'ютерної програми, наданої фірмою Арріїейд Віозувзіетв. Кількісний аналіз здійснювали стосовно пептидного стандарту, також отриманого від 65 Арріїей Віозувіетв. 6.7. Синтез розгалужених структур

Тетрамер-пептидильні і тример-пептидильні базові полімери синтезують відповідно до описаного в Оетоог еї а, 1996, Еицг. 9. Віоспет., 239, 74-84. Тетрамерні і тримерні базові матриці, все ще пов'язані з полі-4-метил-бензгідриламіном, потім використовували в якості вихідних пептидилполімерів в автоматичному синтезі базових пептидів відповідно до раніше описаного.

Розгалужені структури, що включають спіральні сегменти різноманітного амінокислотного складу, можуть бути синтезовані з використанням ортогонального синтезу і захисних стратегій, добре відомих у даній області техніки. 7. Приклад: структурний аналіз і аналіз зв'язування ліпідів пептидами АроА-! 70 Аналіз структурних характеристик і зв'язування з ліпідами в очищених пептидів, синтезованих відповідно до описаного вище в розділі б, проводили за допомогою методів кругового дихроїзма (КД), флуоресцентної спектроскопії і ядерного магнітного резонансу (ЯМР). 7.1. Круговий дихроїзм

Даний приклад описує переважний метод визначення ступеня спіральності базових пептидів по даному /5 винаходу як у вільному стані в буфері, так і в присутності ліпідів. 7.1.1. Експериментальний протокол

Спектри кругового дихроїзма в короткохвильовому ультрафіолеті реєстрували в діапазоні між 190 і 260нм (при кроку 0,5 або 0,2нм) із використанням спектрометра АМІМ620О5 (АМІМ Авзвос, І аКемжмооа, МУ, США), обладнаного термоелектричним тримачем осередків і устроєм для заміни зразків. Для калібрування приладу 2о використовували (5)-10-камфорну кислоту. Для кожного зразка проводили від одного до трьох сканувань, використовуючи осередки з кварцевого скла ЗиргавзіЇ із довжиною проходження 10, 5, 1 і 0,1см, відповідно для концентрацій пептида від 10-7М до 107М. Фіксована ширина смуги складала 1,5нм, а швидкість сканування складала 1 крок по довжинах хвиль за 1 секунду. Подані дані є середніми величинами, визначеними принаймні по 2 або З незалежним вимірам. Га

Після вирахування розміру фона спектральні характеристики перетворювали у величину молярної еліптичності (0) залишку, виражену у град см'-дмоль- Концентрацію пептида визначали шляхом о амінокислотного аналізу, а також за допомогою абсорбціометри на спектрофотометрі Регкіп-ЕІтег І атраа 17

ОМЛ/івівіе у випадках, коли до складу пептида входив хромофор (триптофан, дансил, нафтилаланін).

Спектри КД були отримані для вільного, незв'язаного пептида (5мк у 5м фосфатного буфера - рН-7,4), для Й комплексів пептидз із ЗОМ (20:11 ЕРС:холестерин, Кі-50), для комплексу пептиду з ліпідною міцелою (1-миристоїл-2-гідрокси-зп-гліцеро-3-фосфатіділхолин, Кі-100) і для вільного незв'язаного пептида при й 2,2,2-трифторетанола (ТЕЕ) (5мк пептида, 9095 про. ТРЕ). Іо)

ЗИМ були отримані шляхом диспергування ліпідів (1Ом, 20:11 ЕРС:холестерин, Амапії Роїаг І іріаз, А) у фосфатному буфері (5м - рН-7,4) "азотом, що бурлить" протягом 5 хвилин із наступним опроміненням -- ультразвуком (1,5 години) в ультразвуковій лазні. Для оцінки гомогенності препарату застосовували ї- високорозрізнюючу рідинну хроматографію (ЕРІ С).

Міцели були отримані шляхом диспергування ліпіда (бм 1-миристоїл-2-гідрокси-зп-гліцеро-3-фосфатіділхолина, Амапії Роїаг Іірід5, А) у фосфатному буфері (5м - « рн-7,4) при азотному барботажі протягом 5 хвилин із наступним перемішуванням.

Для одержання комплексів пептид-ЗОМ до пептиду додавали БОМ (5мк у 5м фосфатного буфера - рН-7,4) - с при молярному відношенні фосфоліпіда і пептида (Кі-100). а Для одержання комплексів пептид-міцела до пептиду додавали міцели (бмк у 5м фосфатного буфера - "» рн-7,) при Ві-100.

Всі спектри реєстрували при 37"С. Стабільність пептида 210 (ЗЕО ІЮ МО 210), як функцію від температури (як без буфера, так і без міцели), визначали шляхом реєстрації спектрів у серіях різноманітних температур. -і Крім того, визначали ступінь спіральності пептида 210 (ЗЕО ІЮ МО 210), як функцію його концентрації. - 7.1.2. Визначення спіральності

Ступінь спіральності пептидів у різноманітних умовах визначали по середньому розміру еліптичності залишку 1 на рівні 222нм (Спеп еї аї., 1974, Віоспетівігу, 13, 3350-3359) або шляхом порівняння КД-спектрів, отриманих сл 50 по відношенню до контрольних спектрів, доступним у базах даних (16 контрольних спіральних спектрів, наданих

Ргомепспег 8: СіІосКпег, 1981, Віоспетівігу, 20, 33-37, і контрольних спектрів денатурованих білків, поданих чз» Мепуатіпом еї аї., 1993, Апа!. Віоспет., 214, 17-24) із використанням програми побудови кривих СОМТІМ, версія 20ОР, пакет СО-1 (серпень 1982) (Ргомепснег, 1982, Сотриї. Рпуз. Соттип., 27, 213-227, 229-242). Прийнятний розмір визначали з використанням статистичного аналізу, що входить в алгоритм програми СОМТІМ. Помилка у всіх методах склала 590 від загального рівня спіральності. 7.1.5. Результати о Дані за рівнем спіральності (90) вільних, незв'язаних пептидів, комплексів "пептид-ЗЮМ", комплексів іме) "пептид-міцела" і розчину "пептид-ТЕРЕ" включені в табл.10, приведену нижче в розділі 8.3.

Пептид 210 (5ЕО ІО МО 210) містить велику кількість І-спіральних структур (63905 спіральності) у міцелах. 60 Більш того, д-спіральна структура виявляється цілком стабільною в температурному діапазоні 5-457С (дані не включені). Спіральність пептиду 210 (5ЕО ІЮ МО 210) також зростає в присутності ТЕРЕ, що є розчинником, що, завдяки дуже низькій діелектричній константі ( є-26,7) у порівнянні з водою ( є-78,4), стабілізує о-спіралі і внутрипептидні водневі зв'язки при концентраціях у межах 5-9090 (0/0).

Звертаючись до табл.10 у розділі 8.3 заявки (нижче), можна бачити, що ті пептиди, що виявляють високий 65 рівень активації САТ (53895), у цілому виявляють і істотну активність по утворенню о-спіралі в присутності ліпідів (6095 спіральності у випадку незаблокованих пептидів, що складаються з 22 і більшого числа амінокислот або заблокованих пептидів, що складаються з 18 або меншого числа амінокислот; 24095 спіральності в випадку незаблокованих пептидів, що складаються з 18 або меншого числа амінокислот), у той час як пептиди, що слабо обумовлюють активацію | САТ або не обумовлюють її зовсім, характеризуються низьким вмістом о-спіральних структур. Проте, у ряді варіантів пептиди, що характеризуються інтенсивним утворенням о-спіралі в присутності ліпідів, не обумовлюють істотної активації ІСАТ. Як наслідок, спроможність базових пептидів по даному винаходу адаптувати свою о-спіральну структуру в присутності ліпідів розглядається як ключова властивість базових пептидів по даному винаходу, тому що спроможність 70 утворювати о-спіраль в присутності ліпідів є первинним чинником (передумовою) для І САТ активування. 7.2. Флуоресцентна спектроскопія

Властивості зв'язувати ліпіди в пептидів, синтезованих відповідно до описаного вище в розділі 6, тестували шляхом виміру рівня флуоресценції в позначених пептидів, для чого в даному випадку використовувалися триптофан (МУ) або нафтил-аланін (Ма). Флуоресцентні спектри реєстрували на приладі 75 Рісоготах (Зрех, Щдорбіп-Умоп), обладнаному ксеноновою лампою потужністю 150Вт, двома монохроматорами (збудження й емісії), фотопомножувачем К-928, призначеним для забезпечення чутливості детекції в червоній області спектра до 85Онм, і термоелектричним тримачем для кювет із магнітною мішалкою. Кювети з кварцевого скла Зиргазі! використовували для вимірів на рівні мікромолярних концентрацій. Прилад, що має щілини перемінної ширини (від 0,4 до 5нм), забезпечує модулювання падаючих і емітованих інтенсивностей відповідно до концентрації аналізованого пептиду. Подані в результатах значення, як правило, були середніми величинами, визначеними по 2-4 спектрах. Концентрацію пептидів визначали за допомогою абсорбціометри на приладі РпПіїїрз

РИ-8800 із використанням смуг поглинання триптофана ( єово-нм555ОМ см" у Трис-буфері) або Маї (єго нм -92770М см" у метанолі). сч

Флуоресцентні спектри пептидів реєстрували в діапазоні довжин хвиль 290-450нм у буфері Трис-НСЇІ (20м, рнН-7,5) в присутності й у відсутність жирових пухирців. Невеличкі моношарові жирові пухирці утворювалися о після регідратації в буфері ліофілизованих фосфоліпідів, їх диспергування й ультразвукової обробки в потоку азоту. В якості ліпідів використовували яєчний фосфатіділхолин РС/Спої. (20:11), а також РОРС/Сної. (20:1).

Спектри реєстрували при концентрації пептиду 2мк і при температурі 37"С. У випадку з триптофаном в якості «Е зо Контролю використовували М-ацетилтриптофаніламид (МАТА).

Аналіз зв'язування ліпідів проводили при поступовому додаванні жирових пухирців до пептиду в розчині при що) концентрації 2мк (світлові щілини: бнм при збудженні і 1,5нм при емісії). Ефект розведення був взятий до ю уваги при визначенні інтенсивності флуоресценції. Концентрації ліпідів варіювалися від 10 до бООмк і молярне відношення "ліпід/лептид' (Кі) варіювалося від 5 до 300. | для триптофана, і для Ма довжина хвилі -- збуджуючого світла складала 28Онм. ча 7.2.1. Флуоресцентний спектральний аналіз

Безпосередньо записані дані піддавали комп'ютерній обробці на персональній ЕОМ, підключеній до спектрофлуориметру з використанням пакета ОМЗОООЕ фірми 5Зрех. Спектри коректували шляхом вирахування фона (розчину) і застосування коефіцієнта, запропонованого розроблювачем для обліку зміни чутливості « фотопомножувача в залежності від довжини хвилі. -о с Спектри флуоресценції пептидів характеризували за довжиною хвилі в точці максимальної флуоресцентної емісії і по квантовому виході в порівнянні з еталоном (МАТА) у випадку, коли пептиди були позначені :з» триптофаном. Процес зв'язування ліпідів аналізували шляхом обчислення зсуву в довжині хвилі в точці максимальної флуоресцентної емісії (Хгах) і варіації відносної інтенсивності флуоресценції стосовно

Концентрації ліпідів. Відносну інтенсивність флуоресценції визначали по такому відношенню: (1-10) Хлах/О Хтах" -І Розміри І і Іо визначали при ах; Відповідному вихідному вільному стану пептидів,тобто без ліпідів. Розмір І -з -інтенсивність при визначеному відношенні "ліпід/лептид', а Іо - той самий параметр, що визначається у відсутність ліпідів. Відсутність цих варіацій відповідає відсутності взаємодій пептидів із ліпідами. 1 7.2.2. Результати й обговорення

У табл.7 подані властивості зв'язування ліпідів для пептиду 199 (5ЕО ІЮ МО 199), що подібний за первинною послідовністю до пептиду 210 (ЗЕО ІО МО 210), за винятком того, що він включає залишок триптофана (М) у «з» 10-му положенні. й (ЗЕО І МО 199) з жировими пухирцями

ГФ) згідно з вимірами флуоресценції ю нини во нини исти ю1р8|вю в вв

У буфері при концентрації 2мк максимум флуоресцентної емісії триптофана (пах) для пептида 199 (ЗЕО І

МО 199) складає З48нм. Це відповідає триптофану, що піддається відносному впливу водяного середовища у порівнянні з МАТА (Х,лах-З9Онм) Пептид 199 (ЗЕО ІЮ МО 199) високоефективно зв'язується з тими, що містять ЕРС/Стої. (20:11) маленькими одношаровими пухирцями (ЗОМ), на що вказує затінення триптофана(довжина хвилі максимальної триптофанової флуоресцентної емісії зрушується з З48нм до 325нм) і значне наростання інтенсивності флуоресценції (див. табл.7). Максимальне затінення залишку триптофана спостерігається в молярному відношенні "ліпід/пептид" (Кі), приблизно рівному 100. Інші пептиди, що виявляють високий рівень спіральності в присутності ліпідів (260905 спіральності у випадку незаблокованих пептидів, що складаються 522 70 амінокислот або заблокованих пептидів, із «18 амінокислот; 54095 незаблокованих пептидів, що складаються з «18 амінокислот), на що вказують дані тесту на круговий дихроїзм, описаний вище в розділі 7.1, також виявляють гарні властивості по зв'язуванню ліпідів. Зрозуміло, що всі пептиди, що були відібрані для тестування на круговий дихроїзм, були такими пептидами, що могли бути протестовані на зв'язування ліпідів у флуоресцентному тесті. 7.3. Ядерний магнітний резонанс (ЯМР)

Даний приклад описує метод ЯМР, призначений для аналізу структури базових пептидів по даному винаходу. 7.3.1. Одержання зразків для ЯМР

Зразки одержували шляхом розчинення 5мг пептиду в суміші 9095 Н 20 і 1095 020, що містить следові кількості 2,2-диметил-2-сила-5-пентансульфоната (055), взятого в якості внутрішнього стандарту для визначення розмірів хімічного зсуву. Деякі зі зразків містили трифторетанол (ТЕЕ) (зазначені в об'ємних 905).

Загальний об'єм зразка складав 500 мкл при концентрації пептиду в ньому 5м. 7.3.2. Спектроскопія ЯМР

ІН спектри ЯМР одержували при частоті Х00МГЦц із використанням спектрометра Вгикег ОЕХ5О00, оснащеного пристроєм В-МТ2000 для контролю температури. Одно- і двомірні експерименти записували з використанням с стандартної послідовності пульсів ("Тио-Оітепвіопаї ММЕ Зресігозсору", едз. М/.Б.Стгоазтип 8 ЕМК.Сагізоп, г) 1994, МСН Рибі., ММ, США). Водосупресії досягали шляхом попереднього 2-секундного насичення при низькій потужності. Експерименти в двомірному масштабі проводили у фазочутливому режимі з використанням пропорційного часу збільшення фази і ширини спектра бкГц в обох вимірах. Звичайно проводили 40 сканувань, що сумуються для збільшень 400 ї 5 з одержанням 2048 показників. Отримані дані опрацьовували з - використанням програми ЕЕ! ІХО5 (Моїіесшаг Зітшайопев) на ЕОМ ІМОІСОЗ2 (Зіїїсоп Огарпісв). Дані доповнювали ю нульовими значеннями, щоб одержати матрицю даних 2КХ2К і подавали у вигляді зміщеної на 45" квадратичної синусоїдальної функції. о 7.3.3. Проведення ЯМР «-

Параметри повного протонного резонансу були отримані шляхом застосування методики послідовного 3о зіставлення параметрів, отриманих у спектрах ООБЄСО5У, ТОС5У і МОЕЗУ відповідно до описаного в літературі ї-

Ууційгісн, 1986 "ММК ої Ргоїеіпз апа Мисівїс Асіав", У. ММІеу 5 Зопв,ММ ОА. Повторні хімічні зсуви обчисляли для протонів НМ і Но шляхом вирахування наявних у таблицях розмірів випадкового хімічного зсуву (МуУізйагй «є зуКез, 1994, Меїйодз Епгутої., 239, 363-392) із відповідних експериментальних значень. « 7.3.4. Результати й обговорення

Загальні положення. Амфіпатичні утворюючі спіраль пептиди мають тенденцію до агрегування у водяних не) с розчинах при високих концентраціях, які необхідні для проведення ЯМР-спектроскопії, що робить ускладненим з» одержання спектрів із високим розрізненням. Відомо, що ТЕЕ розчиняє пептиди, а крім того стабілізує спіральні конформації пептидів, що характеризуються схильністю до спіральності. Дані ЯМР-спектроскопії були отримані для пептиду 210 (5ЕО ІЮ МО 210), взятого в якості репрезентативного приклада. Для порівняння досліджували консенсусну 22-амінокислотну послідовність Сегре (ЗЕО ІЮО МО 75).

Ше Повторні хімічні зсуви. Протонні хімічні зсуви амінокислот залежать і від самого залишку, і від локальної - властивості повторної структури пептида або білка (57Іадуі), 1995, Ргодг. іп Мисі. Мадпеїйїс Кезопапсе

Зресігозсору, 27, 325-443). Отже, ідентифікація регулярних повторних структур є можливою шляхом порівняння і-й експериментальних зсувів із табульованими значеннями для випадкових конформацій витків. с 20 Утворення о-спіралі звичайно призводить до зсуву в більш сильне поле (негативні розміри 5) для резонансу Но. Виявлення зсувів Н ж в більш сильне поле для декількох розташованих підряд амінокислотних ї» ! . є. . . залишків є підтвердженням наявності спіральної структури. Повторні зсуви Но, для пептиду 210 (5ЕО ІЮО МО 210) у 2596 ТЕРЕ при 295 К вказують на істотний негативний зсув для залишків від 4-го до 15-го (Фіг.7А), що підтверджує наявність сильноспіралізованої конформації. Лише невеликі відмінності в порівнянні з пептидом 210 (ЗЕО ІЮО МО 210) були виявлені для розмірів хімічного зсуву Но, для консенсусного 22-мера (ЗЕО ІЮО МО 75). (Ф; Розміри хімічного зсуву протонів у складі амідів амінокислотних залишків у ділниці о-спіралі також зсунуті в ко більш сильне поле в порівнянні з хімічними зсувами, відомими у випадковій спіралі. Крім того, може бути виявлена періодичність зсувів НМ - і вона буде відбивати період витка даної спіралі. Амплітуда мінливості во зсувів за довжиною послідовності залежить від параметрів амфіпатичності спірального пептиду. Наявність високого значення гідрофобного моменту призводить до більш виражених значень коливань (7пои еї аї., 1992, 3.

Атег. Спет. ос, 114, 4320-4326). Повторні зсуви для НМ пептиду 210 (ЗЕО ІЮО МО 210) у 2595 розчині ТЕРЕ при 295К демонструють таке коливальне поводження, що узгоджується з амфіпатичною природою даної спіралі (Фіг.7В). 65 Амінокислотні заміни призводять до більш вираженої періодичності уздовж повнорозмірної послідовності (Фіг.78). Цей параметр чітко відбиває більш сильну амфіпатичну природу пептиду 210 (ЗЕО ІЮО МО 210) у порівнянні з консенсусним 22-мерним пептидом Сегре (ЗЕО ІЮ МО 75). Може бути підтверджена наявність 4-5 витків спіралі.

Повторний зсув амідного протона залежить від довжини водневого зв'язку з карбонільним атомом кисню, що

Знаходиться |в сусідньому витку даної спіралі Отже, періодичність значень хімічного зсуву, що спостерігається, відображає наявність довжин водневих зв'язків, що варіюються. Це розходження пов'язане з загальним характером скривлення осьового ланцюга даної спіралі. Гідрофобні залишки розташовуються на увігнутих ділянках. Параметри повторних зсувів у пептиду 210 (ЗЕ І МО 210) вказують на викривлений характер даної о-спіральної конформації. 70 8. Приклад: тест на активацію І САТ

Пептиди, синтезовані відповідно до описаного вище в розділі 6, були проаналізовані в моделі іп міго по їхній спроможності активувати фермент САТ. У даному ІСАТ-тесті пухирці, що є субстратом (невеличкі одношарові пухирці -8ОМУ, складені яєчним фосфатіділхолином (ЕРС) або 1-пальмітоїл-2-олеилфосфатіділхолином (РОРС) і радіоактивно позначений холестерин преінкубують з 7/5 еквівалентною кількістю або пептиду, або АроА-!| (виділеного з плазми людини). Реакцію ініціювали додаванням

ІЇ САТ (виділена й очищена з плазми людини). Нативний АроА-І, що використовувався в якості позитивного контролю, представляв 10095-у ефективність активації. "Специфічна активність" (тобто число одиниць активності активованого І САТ, співвіднесене до числа одиниць молекулярної маси) пептидів може бути розраховано, як концентрація пептиду, що обумовлює максимальний рівень активації САТ. Наприклад, серія концентрацій 2о пептиду (наприклад, обмежуюче розведенння) може бути протестована з метою визначення "специфічної активності" конкретного пептиду - суть концентрації, що забезпечує максимальну активацію І САТ (тобто відсоток перетворення холестерину в ефір холестерину) у конкретний момент часу в даному тесті (наприклад, протягом 1 години). Шляхом співвіднесення на графіку відсотка перетворення холестерину, наприклад, за 1 годину, із концентрацією тестованого пептиду "специфічна активність" може бути визначена як концентрація пептиду, с утворююча плато на графіку. 8.1. Одержання пухирців-субстратів о

Пухирцями, що використовувалися у ІСАТ-тесті, були ліпідні пухирці ЗИМ, утворені яєчним фосфатіділхолином (ЕРС) або 1-пальмітоїл-2-олеилфосфатіділхолином (РОРС) і холестерином при молярному відношенні 20:1. Для одержання пухирців запасний розчин, достатній для проведення 40 тестів, 7,7мг ЕРС (або «І 7,бМг РОРС; 10мкмоль), 78мкг (0,2мкмоль) 4- "С-холестерина, 116мкг холестерину (0,3мкмоль) розчиняли в 5мл ксилена і ліофілизовали. Після цього 4мл тест-буфера добавляли до сухого порошку й опрацьовували о ультразвуком в атмосфері азоту при 4"С. Умови впливу ультразвука: ультразвук Вгапзоп-250 із 10-ММ юю наконечником, бх5 хвилин; тест-буфер - 10м Трис, 0,14М Масі, їм ЕОТА, рН-7,4). Оброблену ультразвуком суміш центрифугували 6 разів протягом 5 хвилин при 14000об/хв (160009) із метою видалення часток титана. -

Отриманий прозорий розчин використовували у ферментативному тесті. - 8.2. Очищення І САТ

Для очищення І САТ застосовують опрацювання плазми крові людини декстрансульфатом з іонами магнію з метою одержання дефіцитної по ліпопротеїнам сироватки (РОБ), яку потім піддавали послідовної « хроматографічній обробці на фенілсефарозі, АйПідеІріце, сефарозі з конканаваліном-А і методом афінної до

АроА-І хроматографії, параметри якої приведені нижче в табл.9. - с ' ї» во пема 00010500 00000066 - шов 17711вю 1 17мовю171111111вю11111111ев1ля а с сі Афінністьдо роді! 01201360 ББОЮ 18109

Та» 8.2.1. Одержання І РОБ

Для одержання РОЗ 500мл плазми добавляють до 5О0мл розчину декстрансульфата (мол.маса-500000).

Перемішують 20 хвилин. Центрифугують протягом ЗО хвилин при ЗО0О0Обоб/хв (160009) при 4"С. Надосадкову фракцію (РОБ) використовують для подальшого очищення («500мл). 8.2.2. Хроматографія з фенілсефарозою о Наступні матеріали й умови аналізу були застосовані для хроматографії з фенілсефарозою. ко Тверда фаза: швидкоплинна фенілсефароза, вхч, Рпаптасіа.

Колонка: ХК26/40, висота гелевого прошарку - ЗЗсм, об'єм «175мол. 60 Швидкість потоку: 200мл/год (зразок).

Промивання: 200мл/год (буфер).

Елюція: вОмл/год (дистильована вода).

Буфер: 1ОММ Трис, 140ММ масі, м ЕОТА - рн--7,4, 0,0195 азіду натрію.

Врівноважують колонку Трис-буфером, добавляють 29г Масі до 50Омл І РОБ і завантажують на колонку. 65 Промивають декількома об'ємами Трис-буфера до того моменту, як поглинання при довжині хвилі 280нм досягне приблизно фонового рівня, і починають елюцію дистильованою водою. Фракції, що містять білок, об'єднують у пули (розмір пула 18Омл) і використовують для хроматографії в Апіде!річце. 8.2.3. Хроматографія з АпПіде!ріце

Фенілсефарозний пул диалізують протягом ночі при 4"С проти 20м Трис-НСІ (рН-7,4), 0,0195 азіду натрію.

Об'єм пула скорочують шляхом ультрафільтрації (Атісоп УМ30) до 50-6ббмл і завантажують на колонку з

Атіде!ріше.

Тверда фаза: АйПідеїІріце (Віогад), колонка 153-7301, ХК26/20, висота гелевого прошарку - 1Зсм, об'єм колонки - приблизно 7Омол.

Швидкість потоку: при завантаженні - 15мл/год, при промиванні - 5Омл/год. 70 Врівноважують колонку Трис-буфером. Завантажують фенілсефарозний пул на колонку. Починають рівнобіжний добір фракцій. Промивають Трис-буфером. Пулові фракції (17О0мл) використовують для хроматографії з конканаваліном-А (Соп). 8.2.4. Хроматографія з Соп

АнНіІде!ріше-пул, скорочують шляхом ультрафільтрації (Аті-сосп УМЗ30) до 30-40мл і диалізують проти 75. СопА-стартового буфера (Ім Трис-НСЇІ - рН-7,4; 1м Мосі», їм Мисі», їм Сасі», 0,0195 азіду натрію) протягом ночі при 470.

Тверда фаза: Сефароза-Соп (РПагтасіа).

Колонка: ХК26/20, висота гелевого прошарку -14см (75мл).

Швидкість потоку: при завантаженні - 4Омл/год, при промиванні (стартовим буфером) - 9Омл/год; при елюції (0,2М метил-5-О-манозида в 1м Трис - рН- 7,4) - ХОмл/год.

Білкові фракції, отримані в результаті елюції манозидом, збирають (110мл) і зменшують до 44мл шляхом ультрафільтрації (УМ30). СопА-пул розділяли на аліквоти по 2мл, які зберігали при -2076. 8.2.5. Афінна хроматографія до Арод-Ї

Афнну хроматографію до АроА-І здійснювали з використанням матеріалу АйідеІ-Н7 (Віогад), до якого с

Ковалентним чином приєднували антитіла до АроА-!Ї.

Колонка: ХК16/20 об'ємом 1бмол. Колонку врівноважували фосфатно-сольовим буфером (рнН-7,4). По 2мл о

СопА-пула диалізували проти фосфатно-сольового буфера протягом 2 годин із наступним завантаженням на колонку.

Швидкість потоку: при завантаженні - 15мл/год, при промиванні (ФСБ) - 4Омл/год. «І

Пулові білкові фракції (об'єм 14мл) використовували в І САТ-тесті.

Колонку відновлювали з використанням 0,1М цитратного буфера (рН-4,5), що забезпечує елюцію зв'язаного о

АроА-І (10Омл), і негайно після цієї процедури врівноважували фосфатно-сольовим буфером. ю 8.3. Результати

Результати, отримані в тесті на активацію І САТ, подані нижче в табл.10. - і -

Пеяд| 000000 | Амноюелота послідовність. Активність СА! (6) |Не (5) вільний не Ск) міцели не (5) 50У5| Не (5) ТЕЕ 1 (бваіюмогу вміжєввилевдкоюх ж 0вв0ввю000С я 00078 вваюмог) сміаєввикеавмкоюхкі ой 00001010 є з (вваіюмоз) вМіжєввилвивмкоюю о ев000090196000008000195 . я (вваюмоє рМмоаєввилвивлкоюко е3600000в000096000970к » Бовваюмов) риатеіеваюює 00101091 5 (ввоаіюмоє МіжєввимехівАІКОКІХ ово 5701088000000159 яв 0071 (вваюмот рмохлкванвивлікоюх | веж 00100701 3 - в (вваіюмов) вміжєввимесівлКоОЮК о в8з0000200000800610193 а в вваюмов) міаєввоМЕивАКОЮЄ 83600001 ло (ввсімоло) РМІОСРАЕИ МЕН ЕАЯКОКІК теж 11160187 то т, о (вваюмого) вмієквиовівкоюко ж соб о000012 (бваюмотг) рміонввиквшвлококіх 05010001 оз (ввоаіюмогз) емівнвимееівлькокх 6010000

І» а вваомотю) РМІЖЕВвИ Ме ЕАовюю 00600000 в (ввоіюмосв) РМІЕВЕОМКвОЕлІКОЮІКО вб600560000006006168 в вватюмотв) Мі явИ МЕ вАКОЮХ 59000001

Бо (вватюмогт вмопекваовивакююкоЇ ож 001 о в (вваткотю емтввимеивлкоюх 560100 в вваіомотв) РМР МесівАІКОЮЄ 56000011 з сю (ввоаіюмого) рМіжеввеічвівАКоОМІКО 50100 о вватюмоги) РМР Ме ЕАКОЮК 56001011 00000799 іввоїомого) РМжевВИ МЕП ве коЮКо 560001 оз (вваіюмогз) вивів овіхвкокію 5010 ж вваюмогю РМІаРввИ Ме ЕАЮюЮК 56000011 зв (ввоіюмоов) рМІовЕввИ МЕхівАІКОКІХ б004600000820000001093 зв (вваюмогв) рМіжеввИ Ме вхоюКо я бо 27. |(ЗЕОІ0 МО27) ІРМІОГЕВЕ І МЕГ7ЕАІ КОКІК 4495 72 92 82 81

31 | (ЗЕОІО МО:31) |РМІ ОІРСЕГІ МЕХІГ ЕАСКОКХК ЗА 43

За (вЕОІОМОЗЯ) РМІОЛЕВЕИМЕШЕАЦКОКІЄ /заю15в1167001680162 39 (вЕОІ0МО8е) РМІВСЕВЕЦЕВИКАІЖККІК бю 01661696 25151 (вЕО1О МОВІ) ІРМ.ОСРМЕШИМЕХІЕАКОКІК о в. 63 (вЕОІОМОв3) РМІОРЕВЕКІМЕХІЕАЬКОКІ 66111 ви (вваомовю РмоєРНЕКІМЕківАКоКх 50000001 . г» ев (во Мовв) РМІОЕЕВЕЦКЕХЕАЬКОКІ ме 11111111 751) (ЗЕСО1ІО МО:75) ІРМІ ОЕРКЕКІ МЕЕГЕАГКОКІ К 1095 18 28 23 55 ст вв (во Мове) РМІОКЕВЕИМЕХЕАЬКОКІХ 791111

ЩІ) консенсусний 22-мерний Сегре (Апапінагатаїан еї! аї., 1990741. піовсівговів, 10(1), 95-105). 92 |((ЗЕОІО МО:92) ІРМОЕРКЕЇ! ММЕХІ ЕАГКОКІК Б з |ввотомовх РУсєтнЕкічЕхкА КОМ 55001111 з (всаюмов Риствшмхемкоюк 85501016 610 5. вв (ввоюмовю) риатеіехеаююю 0000 8500005200000в60вв0в вт (ввотомово вмфвнвшнШЕ як 100010 зв (ввоюмовв РМсінЦМЕввАКОЮХ 25000000 ве (вЕотоМове) кІхОКІАЕЦЕМОЕВАОМР 0 2ж00031007200100088001000 80 оо (ввотомооориатеюеаю 0010002ж00880092000000098 тю ло ввохолоуРИвИ АНА 20001001 оо (вЕотоМоо РИН М ЕХ 00250060 лоз (ввотомотозурмоеввимеЕкоК 00000000 т 017305 ввоомоловуРИЕнЕКІчЕвАКОККО 1050000 от (всотомоот Ккакаеіетете 00105606 зов (ввотомоовуРміеницЕхЕкоюк ож00002в0055600001 20 по бваокопормоєвнеачеххвкоює | ож зоіввотоМот РМ оЕЕВЕКОМЕХнЕАКОМХ 0501 з (вЕотоМо п РоЕЕВЕКІМЕхеЕАКоКІх 0501 оз (ввомопзуРмоЕвЕКІМЕРівАКоКІх 00000050 до (мо бваокопаурмєтнеаехмкоюх! 06000001 ов іввоюмоперковєнЕкІМЕхвАКОЮХ 05001010 в (вЕотоМо перен КоМХ 0501 то вваюмомтураоєтнЕкічЕхвАКОЮХ 0501 во (ввомопеуРиоєвЕкІМЕхівАвОКІх 05000001 тю 0009 вою РИОЕЕНЕКІ МЕМ 0500 зо (ввотомоумоєвЕКІМЕвІвХКоЮх 00500001 зо (вОтоМо о РМОЕЕВЕКІМЕВІВАОНОКІК 0501 ю 12 (ввотомооРмоєвЕКІМЕвІвМкоКІК 05000000 зв (ввотомоооміяввилЕивАКОЮХ 000001 зво 0000 (ввохотюрРиовиввАЮЯю м зов (ввомоовуми ниві вАКОКХ 00000001 зв (ввотомовури сни ово 00000101 зт (всатмоттРиотшншвакаюх 056 яю лзв ввоюхотоюриієввилвшвякоМІК 00000001 с зе (ваткосгуРМвоявивАЮКХ 0 зо (ввотомозу мною 00000000 і Слово ткозо РИ КвИМшоМяоюК 1 зво (ввотомоза Р нцЕМІЕАОККС 00000000 «5000013 (ввохотРИВЕНШЕВШОАЛКХ 000 - зм (ввотомою РЕНО вка 000 з зав (ввотомотзюомснвилЕцвАКОМХ 00000000 зав (вЕотоМотз РАВ Кров вАКОКХ 00001

Фі зв, (ввотомотзл Р ЕнвиМЕеівАЖОКХ 00000000

Фі 52000035 (воло истввимеевмкоюх 01 зе (вом зримо вАкоюК 1 те зо (ввотомомо Рено вАосою 00000000 зи (вОбмолмо РИФЕЕНЕИЛЕСВАКОКХ ме (ввоомомРитнвИмемноюк 00000000 ма (ввотюмомурРИФвВИЛЕЯавАКОЮК 0 о зм (всаюмозюрмвЕМмаєниолкюх п 00310086000800110956 ю м (ввоомомсмівІРЕМІЕНИОАЮККХ ож 000560000500000058 др ввоомоту РЕМ вВАЦЮКХ 60000000 зав (вЕотоМо яри тЕМОЕВіорАЦоЖІК т5000000000000007600105000080 ме (ввоомомеуРмітЕМОмЕномоюік вв зво (ввотомотв РО вІРЕМЛЕнИякюх 5000010 зві (вотомотв РИ тЕМоЕв ово 5001 дво 0000лв0 (ввоомовоРевіЕМіЕВИАЦЮКХ 50000000 зва (ввотоМот Ам тЕМО ВОВК 901 ше01008010в15 в 155 |(ЗЕО1ІО МО:155) РМ ЕГРМІ М/ЕКССОАГОККІК зв вв |вотомотве ри німяни якіх 1 501111

Бу (вотоМотв РУЕЕЕЕМІЕВИ ТАЖ 0301 зва (ввотомотву РМ міЕнІомокік о 30000000 5135 (вЕоюхотвюРИИРЕМЛЕНИОАкюх ав зві (вотоМотв РИТМ ЕВЕАЮХ 2000010 его (всотомотед Ринок 20168008 8 зва (ввотомотв РМ іРЕМЕННоАЦКх 26ж000027008800000000055 тю з ввоховюРИВЕМІЕИАЖОКХ 2601008700006600 68 зв (ввотомотвю РМ ітЕМІввИсИокх 20000000 вв (ввотомотвв РИ ВМЕки АК 21 вт (всатомотел Ритм вомокх 6501 зва (ввотомотв РМ тоЕКИОАЮКХ 00000000 т 1389 ввоховРИВЕМІЕКИ АХ 760 ою (ввотомотт мем воіояоою 0000 зло іввотоМотто Ритм вКцоДШоюх 7660 2 (ввотомотту РМ вМіЕнорюкх 60000000 тв (вЕотоМоттРиоміони рик 5 20 (зм (вабкотмуриететак 01791 ово іввомоттю тм ввИЕШМККХ 85500000 в (вЕотоМотт РИМІ ЕНО ОКХ от іввотомоттусмівія мі ввшовоккхо ою ув (ввотомотт РИ томівкЕАоЮА 005501 25 (ваомогвумніомієніояоюах 6600011 о зво (ввотомотву м томіокиояюя 80000000 зві (вотомотв Ритм ЕНоМох 8501 зво (ввотомотвуРмтЕМІвкцвАЮКИХ 00000000 зва (ввотомотву Ро віРЕМиЕки ях 065001 300 зва ввохотвюРИВАМіЕНОШОЮНОКЯ я6000000101ю вв (ввотоМотвю РТМ ЕВ овооо 5501 вв (ввотомотве Рв тоЕНІ АК 0000111 ю зв, (ввотомотвуРмітЕМоввИоКХ 0000000000011ж зва (ввотомотвю Ритми 0001 300005 ввоюмовурмівінвмавниомакіх 00000000 во (ввотомотеоРиЕРНсМ око 1 леї (всатомоте РИ ояЕиввкоює 100

Ел ее ЗНИК УНН НИЄ ЗНННЯ ПОН ПО НО КО б з є звх (ввотомотеюрМ вв ввІкоює 000в000зв6000950000000005 вв (ввотоМотю РИ кЕИЕвКОКЄ 10086000 г» вв (всотомоте РИ онецЕакм 100851 зв, (ввотомотет осів ЕвІКОКОЄ 00080039 зв лев (ввохотеюмяво кою 31006100 - зве (ввотомотевуРмЕнЕОмЕІКоКЄ 00060006 оо (ввотомогою ми снЕннокює 10056010 щ зо (ввоомого и іяквиевкокиє 00000000 с ооо (ввотоМогод РАВ тКОІЕВІяоКІЯ 10001 я 000205 (вого линяє 1006601

Фі зо (ввомогоюиоввнЕвоКє 00050000 їх зов (вом РИ нЕиЕвкоКє 100501 зов (ввоомогов ви виквиввкоЮє 00050000 зо, (ввотомогог РИ виквЕвКоКЮЄ 100501 яв 000205 (всоохогормвкодЕннонє 00661 о ю очоіввомогту РМ нЕшЕвовоюх 00060000 з (ввотомогі РИ овиЕносоє 11 00000 з (всотомогту РА вкооЕЕОВє 10004601 зм (ввоюмогмуринцЕВКОЮЄ 003000 сів (вЕотоМогтю РИ нЕЕЕНКОКЮЄ 10 3550002800000085500155000 68 в (ввоюмогіуРивткЕИвКОКХ 00035600 вив (ввоомогіуРи нм 00000000 43 221 (ЗЕ МО221) ОМ ОГЕКЕ ЕЕГ КОКІ К 1295 заз (вватомогагурмірдєнви Аа | 8010111 вм (ввотмооРМіеввсмвнкоМК я 6000002 (вва мооовРМіАявіАЕАЯКО 00000100 вв (ввоіомооову РМ Аенв аа 00010 ват (вваомогатрміа ка ввікоКє 00096111 о 2гв (ві МоговуРМІОСЕВЕССЕВІКОКИЄ ої зе (ввоаімооо Мини ввокоює 0000000 1 000вю іввотМмоохюуРМвІРЕнИврЮюК 10000011 зм (ввоатмоозоРМяєявИЕКВЮМХ 00000001 вза (ввамоззаРивіРкЕІввкоКє 01000011 зга вва ооо оон АРМацКє 00000006 зав (вва Моз нкАРУЕЕКІКЕ 0000 900010009000000720000060000055 50 зев (всаткогз вмеАеюмЕКнаР 10 001000010090010000001в6 | »хо |вОіЮмоояо)ОМКАРУОКУАЄКІКЕАЄЄ |0лож177116 1776856 ви (вваюмоги) омєкАЄУркМеЕкиКЕРЕ я б воно ок сякикАтя 00006000 газ (ВОЮ МОЯ ОМРКАРУОКУАЕКРКЕАЄ Б 11016411 и оо МАЕ КУА 00855009 о се вва оон сАРУЮ ЕВ 00004506

ЕЕ НИЄ НН ПОН ПОН НО НОЯ

РЕ Вел теле ТІ НИНННЕ: ННІ НОМИС ННЯ ПОН НОСИ НО КАН ю мета юмо утиску 00000000

РЕВЕ ол сп ННЯ НОЯ НОЯ НО НО КАН. ю - й » « свиз(вваохоавивмкаркмЕНЕМ | 00000101 20000 зва (вва моовуРМОРКВИВОЮКИ 00000000 - зва (ввамоовуРМРКВІЕВКОК 10000011 хз» ові (ват МмоовРМФІРНЕЦЕКОКОЄ 77771111 зв (вватмоов РМ ЕввИЕКОЮ 00000001 зв (ввамоовеуРМіяРкЕІЕАКОЮ 00000011 щ зві (вватмоовл Мем внКОЮ 0111 зва (вватомооввурмія яви макою 10000011 -

В табл.10 "Ж" означає пептиди, які ацетильовані по М-кінцю і амідовані по С-кінцю; значок "ТТ" означає 1 пептиди, дансильовані по М-кінцю; значок "зр" означає пептиди, в яких є проблеми з розчинністю в прийнятих

Т» умовах експерименту; Х-АЇБ; 2-Маї; Охорнитин; Не (95) означає 95 спіральності; значок "-" означає делетовані амінокислоти. 9. Приклад: фармакокинетика агоністів АроА-І | Наступні експерименти показують, що агоністи АроА-Ї стабільні в циркулюванні і зв'язуються НОЇ -компонентом плазми. 9.1. Синтез радіоактивно помічених пептидів Радіоактивно помічені пептиди синтезують шляхом

Ф, поєднання 14С-поміченої амінокислоти як М-кінцевої амінокислоти. Синтез здійснюють у відповідності з 1. ко І араівапів, 1983, 5упіпезів, 671-673. Коротко, 250мкМ непоміченої М-кінцевої амінокислоти розчиняють в 225мМкл 9906 розчину Ма»СО» і додають до розчину (995 Ма»СО»з) 9,25МБк (250мкМ) Непоміченої М-кінцевої амінокислоти. бо Розчин охолоджують до 0"С, змішують з ббООмкМ (202мг) 9-флуоренил-метил-М-сукцинимідилкарбоната (Гтос-О5и) в 0,75мл ОМЕ і перемішують при кімнатній температурі протягом 4 годин. Після цього реакційну суміш екстрагують діетиловим ефіром (2х5мл) і хлороформом (1х5мл), водну фазу, що залишилася, підкисляють

ЗОуо-ою соляною кислотою і екстрагують хлороформом (5хд8мл). Органічну фазу висушують над Ма 550,4, відфільтровують і об'єм зменшують в потоці азоту при бмл. Чистоту оцінюють методом тонкошарової 65 хроматографії (елюент СНСІз: МеонН:Нас - 9:1:0,1: о/о/о, стаціонарна фаза - силікагель-6О для ВЕРХ: Мегек,

Німеччина).

Розчин хлороформу, що містить ""С-помічену Етос-амінокислоту, використали напряму для пептидного синтезу. Комплекс пептиду і полімеру, що містить амінокислоти 2-22, синтезують в автоматичному режимі відповідно до описаного в розділі 6. Послідовність пептиду визначали із застосуванням методу деградації за

Едманом. Реакцію поєднання проводили відповідно до описаного в розділі 6.1. 9.2. Фармакокинетика у мишей

У кожному експерименті 2,5мг/кг радіоактивно поміченого пептиду ін'єкують внутрішньочеревно мишам, яких вигодовували звичайним для них кормом або ж атерогенним модифікованим за Томасом-Харкрофтом раціоном (внаслідок чого спостерігається різке підвищення рівнів холестерину МІСІЇ і ІБ). Проби крові беруть з 70 різночасовими інтервалами з метою оцінки радіоактивності плазми. 9.3. Стабільність в сироватці людини

Стабільність агоністів АроА-і по даному винаходу в сироватці крові людини виявляють відповідно до описаного нижче. 9.3.1. Експериментальні методи 100мкг. ""С-поміченого пептиду, отриманого відповідно до описаного вище в розділі 9.1, змішують з 2мл свіжої проби плазми людини (при 377"С) і знежирюють або негайно (контрольний зразок), або через 8 днів інкубації при 37"С (зразок, що тестується ). Знежирення проводять шляхом екстракції ліпідів рівним об'ємом суміші хлороформу і метанолу (2:21, 0/0).

Зразки завантажують на колонку Сів в ВЕРХ із зверненою фазою і елююють в лінійному градієнті (25-5890 протягом 33 хвилин) ацетонітрила (що містить 0,196 ТЕА). Профілі елюції потім аналізують на поглинання при 22Онм і радіоактивність. 9.4. Утворення пре-р-подібних часток

Здатність агоністів АроА-І по даному винаходу утворювати пре-р-подібні частки виявляють відповідно до описаного нижче. с 9.4.1. Експериментальний метод о

Частки НОЇ. людини виділяють шляхом ультрацентрифугування в градієнті щільності броміду калію при щільності 1,21г/мл з отриманням топ-фракції з подальшою гель-фільтрацією на сефарозі-б, що дозволяє відділити НОЇ від інших ліпопротеїнів. Виділені НОЇ доводять до кінцевої концентрації 1,0мг/мл в фізіологічному розчині: для визначення змісту білка використовують білковий тест Бредфорда. Аліквоту ЗООмкл - відбирають з виділеного препарату НОЇ і інкубують її разом з 100мкл ""С-поміченого пептиду протягом 2 годин ю при 37"С. Аналізують п'ять різних варіантів інкубацій, один з яких була пустою, що включала 10Омкл фізіологічного розчину, а інші представляють чотири різні розведення Непоміченого пептиду: (і) 0,20мкг/мкл юю пептиду: НОЇ при співвідношенні 1:15; (ії) О,ЗОмкг/мкл пептиду: НОЇ при співвідношенні 1:10; (ій) "п

О,бОмкг/мкл пептиду:НОЇ при співвідношенні 1:5; (ім) 1,0О0мкг/мкл пептида: НОЇ при співвідношенні 1:3. Після

Зо 2-годинної інкубації 200-мкл аліквоту зразка (загальний об'єм 40Омкл) завантажують на суперозну-6 - фільтраційну колонку для розділення ліпопротеїнів і їх аналізу, а 100мкл зразки використовують для визначення загальної завантаженої на колонку радіоактивності. 9.5. Скріплення агоністів АроА-ІЇ з ліпопротеїнами людини « 9.5.1. Експериментальні методи

Здатність агоністів АроА-І по даному винаходу зв'язуватися з фракціями ліпопротеїнів людини визначають З с шляхом інкубування ""С-поміченого пептиду з кожним з типів ліпопротеїнів (НОЇ, І 01 і МІ ОО) і сумішшю різних "з типів ліпопротеїнів.

Фракції НОЇ, ГО ї МІ ОЇ. виділяють із застосуванням методу ультрацентрифугування в градієнті щільності броміду калію при щільності -1,21г/мл і очищають методом рідинної хроматографії на суперозних-6В колонках для гель-фільтрації (хроматографію здійснюють при швидкості протоку 0,7мл/хв і з буфером, що містить 10ММ

В. Трис |рН 8), 115мМ Масі, 2МмМ ЕОТА і 0,0195 МаМ3з). ""С-помічений пептид інкубують разом з НОЇ, 1 01. і МІ 0. при - співвідношенні "пептид/фосфоліпід" 1:5 (вагове відношення) протягом 2 годин при 37"С. Необхідну кількість сл ліпопротеїна (об'єми, необхідні для виходу 100Омкг) змішують з О0,2мл базового розчину пептиду (1мг/мл) і отриманий розчин доводять для об'єму 2,2мл з використанням 0,9965-ого розчину Масі. 1 20 Після інкубації протягом 2 годин при 377"С аліквоту (0,1мл) відбирають для рідинного сцинтиляційного

ГТ» аналізу з метою визначення загальної радіоактивності, а щільність інкубаційної суміші, що залишилася доводять до 1,21г/мг з використанням КВг, і зразки центрифугують при 100000боб/хв (3000009) протягом 24 годин при 4"С в роторі ТА 100.3, встановленому в настільну ультрацентрифугу ВесКтап. Отриману надосадкову фракцію фракціонують шляхом відбору аліквот по 0,Змл зверху кожного зразка всього на 5 фракцій, і по О,О5мл кожній 59 фракції використовують для рідинного сцинтиляційного аналізу. Дві вищі фракції містять поверхневі

ГФ) ліпопротеїни, а інші фракції (3-5) відповідають білкам/пептидам в розчині.

ГФ 9.6. Виборче скріплення агоністами АроА-!Ї по даному винаходу з НОЇ -ліпідами в плазмі людини 9.6.1. Експериментальний метод во З метою продемонструвати те, що агоністи АроА-І по даному винаходу виборче зв'язуються з НОЇ -білками в плазмі людини, по 2мл плазми людини інкубують разом з 20, 40, 60, 80 і 100мкг 14б-поміченого пептиду протягом 2 годин при 377С. Ліпопротеїни відділяють доведенням щільності до 1,21г/мл і центрифугуванням в роторі ПА 100.3 при 100000об/хв (3000009) протягом 36 годин при 4"С. Для аналізу відбирають верхні 9ООмкл (у фракції по

ЗООмкл). По 5Омкл з кожної фракції, по ЗООмкл, використовують для підрахунку радіоактивності і 200мкл з 65 кожної фракції аналізують методом рідинної хроматографії ЕРІС (поєднання колонок з суперози-б і суперози-12).

10. Приклад: прискорення виходу холестерину з клітин агоністами АроА-Ї

З метою продемонструвати те, що агоністи АроА-І по даному винаходу стимулюють вихід холестерину з клітин, лінію гепатомних клітин Нерб2 висівають на б-лункові культуральні планшети і вирощують до стадії злиття. Клітини позначають ЗН-холестерином шляхом висушування холестерину, потім додання 195 бичачого сироваткового альбуміну (БСА) в фосфатно-сольовому буфері (ФСБ), обробки розчину ультразвуком і додання

О,2мл цього поміченого розчину і 1,9мл поживної середи до клітин: в результаті кожна лунка містить 2мкКи радіоактивності. Клітини інкубують протягом 24 годин в поміченому культуральному середовищі.

Комплекси пептиду (або білка) з ОМРС отримують при співвідношенні пептиду (або білка) і ОМРС на рівні 1:2 70. (в/о). Для отримання цих комплексів пептид або нативний АроА-І людини додають до розчину ОМРС в ФСБ і інкубують при кімнатній температурі протягом ночі, і протягом цього часу розчин повинен стати прозорим. У кінцевому розчині концентрація пептиду або білка становить 1 мг/мл. Помічену культуральну середу видаляють з клітин і клітини промивають фосфатно-сольовим буфером з подальшим доданням комплексів. У кожну лунку додають по 1,6бмл культуральної середи і після цього додають комплекс пептиду (або білка) з ОМРС і ту 75 Кількість ФСБ, якої досить для отримання кінцевого об'єму 2мл на 1 лунка. Кінцеві концентрації пептиду або

АроА-І становлять 1, 2,5, 5, 7,5 і 25мкг на їмл культуральної середи. Після 24 годин інкубації при 377С культуральну середу видаляють і клітини промивають 2мл 190 БСА/ФСБ з подальшою 2-кратною промивкою в 2мл (кожний раз) ФСБ. Кількість ЗН-холестерину, що виходить в культуральну середу, визначають шляхом рідинно-сцинтиляційного підрахунку. 11. Приклад: застосування агоністів АроА-І в системах тваринної моделі

Ефективність агоністів АроА-І по даному винаходу була показана у кроликів із застосуванням описаної нижче методики. 11.1. Отримання комплексів фосфоліпідів і пептиду

Невеликі дископодібні частки, що складаються з фосфоліпіду (ОРРС) і пептиду, отримують із застосуванням методу холатного діалізу. Фосфоліпід розчиняють в хлороформі і висушують в потоці азоту. Пептид розчиняють СМ в буфері (сольовому) в концентрації 1-2 мг/мл. Ліпідну плівку знову розчиняють в буфері, що містить холат о (43"С), і додають розчин пептиду при ваговому відношенні фосфоліпіду і пептиду 3:1. Суміш інкубують протягом ночі при 43"С і потім діалізують при 437 (24 години), при кімнатній температурі (24 години) і при 4"С (24 години) з трьома змінами буфера (великі об'єми) в "точках' зміни температури. Комплекси стерилізують фільтруванням (0,22мкМ) для подальших ін'єкцій і зберігання при 47С. Й 11.2. Виділення і характеристика часток пептида/фосфоліпіда

Частки розділяють на колонці для гель-фільтрації (швидкоплинна супероза-б). Положення піків, що й відображають присутність часток, визначають шляхом вимірювання концентрації фосфоліпідів в кожній з ІС о) фракцій. По величині об'єму елюції може бути визначений радіус Стокса. Концентрацію пептиду в комплексі визначають шляхом вимірювання змісту фенілаланіна (з допомогою ВЕРХ) після 16-часового кислотного -- гідролізу. ї- 11.3. Ін'єкції кроликам

Самцям кроликів новозеландської білої породи (вагою 2,5-Зкг) внутрішньовенно ін'єкують дозу комплексу фосфоліпіда/лпептида (мг/кг ваги тіла пептиду або 1Омг/кг ваги тіла АроА-Ї (контроль)) експресованої у « вигляді пептидного або білкового вмісту у вигляді однократної болюсної ін'єкції що не перевищує 10-15мл.

Перед проведенням аналізу тварин седатують введенням слабого заспокійливого. Проби крові (що відбиралися - с в ЕОТА) беруть до і через 5, 15, 30, 60, 240 ії 1440 хвилин після ін'єкції. Для кожного зразка визначають а гематокрит (Неб). Проби розділяють на аліквоти і зберігають при -207С для подальшого аналізу. "» 11.4. Аналіз кролячих сироваток

Плазматичні ліпіди. Загальний холестерин плазми, рівні плазматичних тригліцеридів. і плазматичних фосфоліпідів визначають каталітично з використанням доступних комерційних тестів відповідно до рекомендацій -і їх виробників (Воейгіпдег Мапппеїт, Маппйеїт, Німеччина і Віотегігеих, Е-69280, Магсу-Гефюїе, Франція). - Профілі ліпопротеїнів. Профілі плазматичних ліпопротеїнів у фракціях, отриманих після розділення зразків плазми на її ліпопротеїнові фракції, визначають шляхом центрифугування в градієнті щільності сахарози. 1 Фракції відбирають і в кожній окремій фракції каталітичним шляхом визначають зміст фосфоліпідів і сл 50 холестерину. 12. Приклад: отримання комплексу "пептид-ліпід" з допомогою спільної ліофілизації

Я» Для отримання пептидно-ліпідних комплексів був застосований наступний протокол. 1мг пептиду 210 (ЗЕО І МО 210) розчиняли в 250мкл метанолу (чистий для ВЕРХ) (Регкіп ЕІтег) в чистій 1-мл пробірці з кришкою (УУ/аїегз МоуУУАТО25054). Розчинення пептиду іноді інтенсифікували шляхом перемішування протягом 10 хвилин при кімнатній температурі. До отриманої суміші додавали аліквоту, що містить Змг дипальмітоїлфосфатіділхолина (ОРРС; Амапії Роїаг І іріаз, чистота -99965, Мо по каталогу 850355),

ІФ) взятого з 100кг/мл запасеного розчину в метанолі. Об'єм реакційної суміші доводили до 400мкл доданням іме) метанолу і отриману суміш далі перемішували переривчастим чином протягом 10 хвилин при кімнатній температурі. У кожну пробірку додавали по 200мкл ксилену (Зідта-Аїагіси, чистота 9995, чистий для ВЕРХ) і 60 кожну пробірку обертали протягом 10 секунд. У верхній частині кожної пробірки проробляли два маленьких отвори, використовуючи голку Мо20 для шприца, потім пробірки заморожували на 15 секунд в рідкому азоті і пробірки ліофілизовали протягом ночі у вакуумі. До кожної пробірки додавали по 200мл 0,995 розчину Масі.

Пробірки інтенсивно перемішували протягом. 20 секунд. На цьому етапі розчини, що знаходяться в пробірках виглядали схожими на молоко. Потім пробірки інкубували на водяній бані протягом 30 хвилин при 417С. Розчини 65 у всіх пробірках ставали прозорими (тобто на зовнішній вигляд схожими на воду) через декілька хвилин інкубування при 417С.

12.1. Характеристика комплексів методом гель-фільтрації на суперозі-б6 Пептидно-фосфоліпідні комплекси, що містять пептид 210 (5ЕО ІЮ МО 210), отримували шляхом одночасної ліофілизації відповідно до описаного в даному тексті. Отримані препарати містили по вазі Імг пептиду і Змг ОРРС. Після ре-конституювання комплексів

В 200мкл 0,995 Масі, 20мкл (100мкг пептиду 210) комплексів завантажували на суперозну-б колонку (Рпагтасіа) з використанням 0,9906-ного розчину МасСі в якості рідкої фази при швидкості потоку О,5мл/хв. Хроматографію контролювали по поглинанню або розсіюванню світла при довжині хвилі 280нм. Відбирали по їмл фракцій.

Аліквоти, що містять 20мкл фракцій, тестували за вмістом фосфоліпідів з використанням набору реактивів

БіомМегігих РІіозрПоїїрідез Епгутаййдце РАР 15ОКії (Мо по каталогу 61491) відповідно до інструкцій, виданих 70 виробником. Переважна кількість фосфоліпідів і УФ-поглинання відновлювалися в деяких фракціях при наявності піків на рівні приблизно 15,1мл. Такий об'єм елюції відповідає діаметру Стокса в 106А.

Для порівняння окрема хроматограма для 20мкл НОЇ. 5 людини була отримана в тих же умовах і на тій же колонці, що і у випадку з комплексами, що включають пептид 210 (ЗЕО ІО МО 210). НОЇ» отримували таким чином: по ЗОбмл замороженої плазми людини (Маппйпеїт ВіцізрепагепігаІе, Мо по каталогу 1185190) розтавали, 7/5 доводили до щільності 1,25 з використанням твердого броміду калію і центрифугували протягом 45 годин при 40000об/хв з використанням бекмановської центрифуги Ті45 (ВесКтап) при 20"С. Плаваючий шар відбирали, діалізували проти дистильованої води, доводили до щільності 1,07 з використанням твердого броміду калію і центрифугували відповідно до описаного вище протягом 70 годин. Донний шар (на рівні 1см від дна пробірки) відбирали, переносили в 0,0195 азид натрію і зберігали при 4"С 4 дні до хроматографії. Колонковий елюент Контролювали по поглинанню або розсіюванню світла при довжині хвилі 254нм. У якості стандартів використали набір білків, для яких відомі молекулярна маса і діаметр Стокса, а отримані по них дані використали для калібрування колонки з метою пристосування її для розрахунку діаметрів Стокса у часток, що досліджуються (Рпаптасіа Се! Рійгайоп Саїргайоп Кі РНнаптасіа Іарогаїогу Зерагайоп, Різсаїамжшау, Му; затверджена в квітні 1985р.). Встановлено, що частки НОЇ», елюйовані з об'ємом втримання 14,8мл, відповідають діаметру сч

Стокса, рівному 108нм. 13. Приклад: отримання антитіл і)

З метою отримання антитіл до агоністів АроА-І| по даному винаходу пептид з'єднують з гемоцианіном слизня (КІН: мг пептиду і 1Омг КІН). Кон'югат з КІ Н суспендують в повному ад'юванті Фройнда і використовують для інекування кроликів в момент часу, що визначається як 0-й, а бустинг-ін'єкцію (дозою 0,25мг) проводять на «г зо 4-у тижні ії ще раз на 5-у тижні. Проби крові до ін'єкцій і через б тижнів після ін'єкції тестують із застосуванням методу ТИФА (твердофазний іммуноферментний аналіз) на титр антитіл, специфічних відносно о автентичного антигенна. ю

Проби крові об'єднують в один пул від двох кроликів. Антитіла, специфічні виключно у відношенні пептидних антигенів, виділяли таким чином: -- 1. Вільний пептид приєднують з сефарозою-4В, активованою цианогенбромідом (РІагтасіа), відповідно до ї- протоколу, запропонованого виробником. 2. Антисироватки преабсорбують на колонці зі сторонніми пептидами і на колонках зі сторонніми білками миші і людини. 3. Преабсорбовану антисироватку пропускають через відповідну пептидну колонку, (див. етап 1). « 4. Колонки промивають 0,1М боратним сольовим буфером (рН-8,2) і пов'язані антитіла елююють з з с використанням градієнтом з рН, поетапно від рН-4,0 до рН-З,0 і до рН-2,0 (0,1М гліциновий буфер) і нарешті з

О,1М соляної кислоти. ;» 5. Елюйований матеріал нейтралізують надлишком боратного сольового буфера, концентрують шляхом ультрафільтрації (Атісоп, УМЗ0) і діалізують проти боратного сольового буфера. 6. Концентрацію білка визначають по величині поглинання при довжині хвилі 28Онм. -І Отримані в результаті антитіла тестують на видоспецифічність з використанням очищеної АроА-І людини або очищеного АроА-!Ї миші в прямому тесті на скріплення в ТИФА. - Даний винахід не обмежується масштабом конкретних варіантів, описаних в даному тексті, які покликані с тільки проілюструвати окремі аспекти даного винаходу: відповідно, функціонально еквівалентні методи і 5р Компоненти знаходяться в обсязі даного винаходу. Дійсно, різні модифікації даного винаходу, в доповнення до о того, що було описано і показане тут, будуть ясні для фахівців в даній області техніки на основі попереднього ї» опису і прикладених креслень. Такі модифікації повинні попасти в обсяг нижченаведеної формули винаходу.

Всі цитовані в даному тексті матеріали включені в заявку у всіх випадках для довідки лише як бібліографічні посилання

Список послідовностей (1) ЗАГАЛЬНА ІНФОРМАЦІЯ (Ф) () ЗАЯВНИК: Раззеих, Уеап-І оціз Зекиі, Кепабе ВичЧпег, Кіаиз Согпиї, ІзареПе Меїг, Сипіпег ка (ї) НАЗВА ВИНАХОДУ: Агоністи аполіпопротеїна А-!1 і їх застосування для лікування захворювань, пов'язаних з дисліпідемією 60 (її) КІЛЬКІСТЬ ПОСЛІДОВНОСТЕЙ: 254 (м) АДРЕСА ДЛЯ ЛИСТУВАННЯ: (А) АДРЕСА: Реппіє 85 Едтопазі | Р (В) ВУЛИЦЯ: 1155 Аме. ої пе Атегісав (С) МІСТО: Мем Хогк 65 (Б) ШТАТ: МУ (Є) КРАЇНА: США (РЕ) ПОШТОВИЙ ІНДЕКС: 10036-2811

(М) ФОРМА, ПРИДАТНА ДЛЯ КОМП'ЮТЕРА: (А) ТИП НОСІЯ: дискета (В) КОМП'ЮТЕР: ІВМ-сумісний (С) ОПЕРАЦІЙНА СИСТЕМА: 0О5 (0) ПРОГРАМА: РавізЕО Версія 2.0 (мі) ПОТОЧНІ ПАРАМЕТРИ ЗАЯВКИ: (А) НОМЕР ЗАЯВКИ: РСТ/О598/20328 (В) ДАТА ПОДАЧІ: 28 вересня 1998р. 70 (С) КЛАСИФІКАЦІЯ: (мії) ДАНІ ПРІОРИТЕТУ ЗАЯВКИ: (А) НОМЕР ЗАЯВКИ: 08/940093 (В) ДАТА ПОДАЧІ: 29 вересня 1997р. (мії) ІНФОРМАЦІЯ ПРО ПАТЕНТНОГО ПОВІРЕНОГО: (А) ІМ'Я: ГА. Согицдлі (В) РЕЄСТРАЦІЙНИЙ НОМЕР: 30742 (С) РЕЄСТРОВИЙ НОМЕР: 009196-0004-228 (хх) ТЕЛЕКОМУНІКАЦІЙНА ІНФОРМАЦІЯ: (А) ТЕЛЕФОН: (1-650)493-4935 (В) ФАКС: (1-650)493-5556 (С) ТЕЛЕКС: 66141 РЕММІЕ (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 1: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти сч (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один і) (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: «г зо (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 16 юю (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-нафтилаланін ю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІО МО 1:

Рхо Уа1! Пец Авр Без Рре Агуд біц Бей їецп Авп бій цей Тед бій -- 1 5 10 15 | -

Хаа еп Буз б1іп Тув Пен Гуз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 2: « дю () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: з (А) ДОВЖИНА: 23 амінокислоти с (В) ТИП: амінокислота :з» (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає - 15 (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІО МО 2: сіу Уаї рез Азр Ге Рле Акд бі Пец їеч Авп сій Теш цем бій - 1 5 19 15 1 Аїа ех був біп Пув без Туз Був с 50 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 3: ї» () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один

ГФ) (0) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає о (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІО МО 3:

Ркго Уаї бецй Авр Бей Рпе Аку сі їй бец Авп бій Ббец Те б1ц 60 1 5 10 15

Тгр пен був Сіп був Пец Туз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 4: 65 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти

(В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 4:

Рко Маї Пец Авр пес Рпе Агуд сії Пе Бен Азп біц Бей бец сі 1 5 10 15

Віа без цШуз біп Ппуз Теч бує (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 5: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 23 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота т (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше 20 (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:О-пролін (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІО МО 5:

Хаа уаї еп Азр Пеп Ре Акд бій Тец Що Авп бій Бец без бі с 1 5 1 15

Аїа ей пузв б1п Був йец Ппуз Був і) 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 6: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: - (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти ю (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один о (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна «- (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає 3о (хх) ВЛАСТИВОСТІ: - (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр « (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 6;

Рго Уа! йец Азр Пец Рпе Акад бій Бей рей Азп бій Хаа Гео бій - с 1 5 10 15 :з» Віа цеч Буз Сіп Пуз Те Гуз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 7: -і () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: - (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота 1 (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один сл 50 (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає їз» (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 7:

Рто Уа1! їецй Азр Пец Ре пуб бій ей Тео Ап Сі без бе бій 1 5 10 15

Віа без Був біп Був бец ув і) го о (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 8: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: 6о (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає б5 (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІО МО 8:

Рхто Уаії цей Азр Бечм Рбе Аку біш Ге Те Авп біб С1іу їец бій 1 5 10 15

Віа без уз біп Був Бей Був 2 | 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 9: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота то (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІО МО 9:

Рго уаї Пец Авр Пеп Ріе Аху Сіш Тїей біу Авп Сій Пеб Ббец бій 1 З . 10 15

А1їа цей був біп Бубз Тец Гуз (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 10: 20 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна с (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає г) (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 17 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-нафтилаланін - (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 10: ю

Рго Маі рец Авр Шеш Рпе Акуд Сі) Бецп Пец Авп бій Ге Бец 01 1 5 10 15 ю

Віа Хва уз біп уз Тец Був ьо 20 і - (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 11: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти « (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один - с (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна а (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає ,» (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 11:

Рко Маії Іей Азр Бей РіБе Гуз бій Бей йеи б1іп бій їйвец Пес бій 1 5 . 10 15 -І

А1а Пец буз біп був Геп Пув -й 20 с (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 12: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: о (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти ї» (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО І МО 12:

Ф) Рго Уаї Гей Авр Іешп Рпе Акуд Сіц Гей рем Авп бі Пе бе бій 1 5 10 15 ко Віа сіу Гуз сіп пув Бей Муз 20 во (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 13: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один 65 (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає -Б50-

(хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО І МО 13: б1іу Маї беш Азр Бецш Рпе Акд біш Пец Пец Азп бій Сіу Беш сій 1 5 10 15

Віа це пуз б1іп Пув беч уз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 14: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: 70 (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 18 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:хорнитин (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 20 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:хорнитин (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 22 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:хорнитин сч (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 14:

Рго Уаї бец Двр Пец Рре Агд біц Гей пйеч Авп бій Гез Тез С1й і) 1 5 10 15

Віа без Хаа біп Хаа їеи Хаа « зо 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 15: ю () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: ів) (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти - (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один ї- (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО І МО 15: «

Рко Маї Пе Азр Гей Рпе Акд бій Пец Тур Авп бій Пец Грей бій 1 З 10 15 но) с А1і1а їез пув біп був Пец Був ;з» 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 16: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: -І (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота - (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один с (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає о (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО І МО 16:

Чл» Рко Уаі це Азр Пен Бей Агуд бій їви Те Азп обі Тео їеш бій 1 5 10 15

Аза пе буз сіп Був Гей Був 29 20

ГФ) (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 17: 7 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота 60 (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 17: б5

Рго Маії Тем біц Пе Рне Туз біц їєп Гей біп бій Пеш Гео б)и 1 5 10 15

А1їа пей Пцув біп уз Те Тув 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 18: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота то (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО І МО 18: біу Уа1ї те) Авр Бей Рбе Агд бій їей Тец Аво б30 Теч Геч біш 1 5 10 15

Віа цей пуз біп пув Пец Пув 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 19: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один сч (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає і) (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1 «г зо (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:О-пролін (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО І МО 19: о

Хаа уаї Те Азр Тец Рбе Аго бій Пемч Гецш Азп бій б1у їйеч бі

Іо) 1 5 10 15 -

Віа бец Буз біп був Гей Буз 20 і - (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 20: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти « (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один З с (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна "» (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає " (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 20:

Рго Уаї Тец Азр Пец Рпе Аку Сіц Сіу Печ Азп бій Бей Гем сій - 35 1 5 10 15

А1їа цей був біп Був Пен туз - 20 1 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 21: сл 50 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти чз» (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: о (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше іме) (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:О-пролін 60 (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 21:

Хаа уаї еп Авр Пец Рпе Акгуд бі Бей Пец Азп бій Гей Гей бі 1 5 10 15

А1а пеп Туз Сіп Цуз Те Гуз 65 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 22:

() ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 22:

Рко Маї Пец Авр Пей Рпе Акуд бій ем Ген Азп біз Пеш Гец бій 1 5 10 15 сіу ен Туз Сіп Був Гей Був (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 23: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: т (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає 20 (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 23:

Рго реп Пец Сі Пец Рбе Був бій Тез теп біп Сі Тео бецп Сі 1 5 10 15

Віа тей цуз Сіп Був Тецш Туз се 20 о (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 24: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота Й (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна ю (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає ів) (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 24: -

Рго Маї! Те Авр Бей Рпе Акд бій Пйей Тецп Авп бід Геш пе сід 325 1 5 10 15 -

А1іа без біп буз Був реп Гуз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 25: « () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: з с (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти . (В) ТИП: амінокислота и? (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає -І (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше - (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 с (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 25: о Рго Уаі Тїецш Азр Ріе Рре Агд Сіш Тем» гейш Азп бій Хаа їви 61 «г» 1 5 10 15

Віа їез Буз біп був Тез Гуз 20 (2)ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 26:

ГФ) () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: 7 (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один 60 (0) ТОПОЛОГЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: - немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 26: б5

Рхо Маї Те Азр Пею Рпе Агуд сій Бем Гей Авп біб без Бец б1 1 5 10 15 їеп гей Буз б1п Був Бей Був с 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 27: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота то (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше т (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 14 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-нафтилаланін (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 27:

Рсо Уаї це Авр Гей Рве Аход бій Бем Тез Авп Сі Бей Хаа Сі 1 5 10 15

Кіа пе цув біп Буз їец уз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 28: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: с (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти о (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає - (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 28: ю

Ркго Уаї йцед Азр Пец Рпе Агуд 01 Ген Пем Авп 610 Гей Тер бу ю 1 З 10 15

Аїа пе Був біп був Пец Був - 20 - (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 29: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти « (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один З с (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна "» (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає " (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 29:

А1а уаї Пец Авр Бей Рпе Ак бі Цец Бей Азп бі Без їеч бій -1 15 1 5 10 15

Аза Пец Ббуз біп Був Те Гуз - 20 1 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 30: сл 50 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти чз» (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: о (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше іме) (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...22 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: дансильований по М-кінцю пептид 60 (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО І МО 30:

Рхо Уа! пей Азр Бей Рре Аху сій Пем Пец Авп Сі Гей Пей сій 1 5 10 15

Аїа пйей Був біп Пуз цей Цуз 20 б5 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 31:

() ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше 70 (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО І МО 31:

Рго Маї Гец Азр Теш Рпе Пец Сі Тем еп Авп С10 Хаа реп 631 1 5 10 15

Аїа цей пуз біп о Пув бем Був (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 32: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти 20 (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: сч 29. (АУЇМ'ЯКЛЮЧ: інше о (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 32: «

Хаа Ммаї цей Авр Пец Рбе Акуд січ Пеп бец Ап Сій Гец печ бій 1 5 10 15 ІФ)

Аїа тес цуз Сіп Був їеп Був І 20 - (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 33: 3о () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: - (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один « (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає З с (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІО МО 33: :з» Ркго уаї бец Авр Геш Рпе Агу бійш Пуз Бей Авпобім Тец Тех с) 1 5 10 15

А1їа рей їуз б1іп Ппуз Пец Пуз - і 20 - (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 34: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: о (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти ся 70 (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один ї» (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше

ГФ) (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 5 (ПРО) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-нафтилаланін о (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 34:

Рко Уа1і їеш А5р Хаа Рйе Агд Січ Те Пец Азп бій рей Бей 630 60 1 5 КТ 15

А1їа еп буз біп був еп Був 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 35: 65 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти

(В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІО МО 35:

Рко Уаї Без А5р Тгр Рпе Агу бій Бей Бей Азп біц рей Геч бі 1 5 10 15

Аза тей пув біп Туз тей Гуз . 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 36: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 36:

Рко Гей реп бі Бец пе Буз б1ц Пец Бе біп бій Тем Ге Сіц 1 5 10 ' 15

А1а йецш цуз біп ШЦув Гей пуб 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 37: сч () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: Го) (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна ч 3о (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає ю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО І МО 37: ою

Рхто Уаії Пец Азр їец Рпе Ахуд біц Тгтр цей Авп Січ Тей Гец сіц 1 5 10 15 -

Аїа тей руз біп Пув пез Був ч- 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 38: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: « (А) ДОВЖИНА: 22. амінокислоти (В) ТИП: амінокислота З с (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один "» (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна " (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше - (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 - (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 38: і-й Рко Уа! цей Азр Пец Рпе Агуд бішп Бецш рей Авп сі Хаа пе сій о 1 5 10 15

Я» Аїа Ткр Був Сіп Буз Гей Буз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 39: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ:

ГФ) (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота о (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна 60 (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІО МО 39:

Рко Маї реп Авр Гей Рпе Акд Січ Печ Печ бій бій Гей Без Був 1 5 10 15 65 Аза йеш пув Гуз Буз Бей їув 20

(2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 40: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22. амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 40: 70 Рго Уаї Пец Авр Гей Рпе Азп сі Пец Пе Ага бій Пец Пец бій 1 5 10 15

А1їа тей біп Був був Пен Був (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 41: 19 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна 20 (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр с (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 41: г)

Рго Уаі Пец д8вр Пе Тгр Акд бі Бец Тен Азп біз Хаа Пец Сій 1 5 10 15

А1а пец Був біп Пуз Гец Був «г зо 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 42: й () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: ів) (А) ДОВЖИНА: 22. амінокислоти - (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один ї- (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: « (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 - с (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр а (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 42: ,» Рго Уаї рем Ар біш Рпе Акд бій Пуз тей Авп бій Хаа Тгр бій 1 5 10 15 -І 35 А1їа пцец цуз біп був Бей Буз 20 - (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 43: с () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти о (В) ТИП: амінокислота ї» (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (Ф, (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 ка (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 43: во Рго Уаї Печ Азр біш Рпе Аг бі Був Пец Тгр сій Хаа Гец бій 1 5 10 15

Аіа цез Бруз біп цув Пви Був 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 44: 65 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ:

(А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (р) топологія: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (їх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...22 70 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: всі амінокислоти, що генетично кодуються мають О-конфігурацію (їх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (Б) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 44:

Рго уаї їез Азр бій Рпе Акд бій Пцув Пец Авп сіз Хаа їемз 614 1 З 10 15

Аіїа цеч ув біп пув бе уз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 45: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один сч 29. (0) ТОПОЛОГІЯ: лінійна о (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (їх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 ч 3о (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЬ ю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО І МО 45: ою

Рго Уа! рез Азр біз Рбе Агу біз Туз Пеш Авп бій Хаа цез б1ї 1 5 10 15 --

Аза рец пув Сіп Буз Без ув - 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 46: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: « (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти з с, (В) ТИП: амінокислота с (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один :з» (0) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (їх) ВЛАСТИВОСТІ: - 15 (А) ІМ'ЯЖЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 -й (Б) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:-АїЇр сл (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО І МО 46:

Рко Уаї Бец Авр Пецз РБе Акад сі бує Пец Авп бі Хаа Ге б1и і-й 1 5 10 15 ї» А1а Темп цЦув б1іп бує Бей Був 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО І МО 47: 59 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ:

ГФ) (А) ДОВЖИНА: 21 амінокислота 7 (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна 60 (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 47:

Уаї Пем Ар Пе Рпе Акд бій Пед Пец Азп бій біу Пей січ А123 1 5 10 15 б5 цем рув біп Був реп пуб 20

(2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 48: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: 70 (А) ІМ'ЯКЛЮЧ інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:О-пролін (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 2 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-О-валін (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 48:

Хаа Хаз їей Азр Гей Рпе Акд біц Бец їез Аєп бій Тей без біМ 1 5 10 15

Віа їеп буз біп Ббуз Безп Був 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 49: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота сч 29. (с) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один о (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 49: «

Рко Ма1 Пец Азр Пец Рпе Агд Азп Ге ей бій Був Бец тей бі 1 5 10 15 о

А1а йем біп біп Був їец ув І 20 «- (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 50: 3о () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: - (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один « (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає З с (хх) ВЛАСТИВОСТІ: "» (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше " (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 50: їм Рго УМаї ей Азр Пе Рпе Акд біц Пец Гец Тер бій Хаа Бей 01 - 1 5 10 15 1 Аза гей Буз біп Пуз Гей Гуз с 50 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 51: ї» () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один

ГФ) (0) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає о (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше 60 (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 51: б5

Рко Уаії цеч Азр Пец Рре Тгр бі Тез Пец Азп бі Хаа Гец 014 1 5 10 15

Аїа еп уз біп Ббуз Бей ГПув 95 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮО МО 52: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота то (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше т (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 52:

Рко Уаі Ттр Азр бій Рпе Акд Сі Був Пей Авп Сі Хаа Гей бій 1 5 10 15

А1а ви був біп Був Пец Туз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 53: сч () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА:.22 амінокислоти і) (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна «г зо (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 53: о

Уаї Уаї рез Авр Пей РБе Акд бій Геп Пец Авп бій Тед Тем бій юю 1 5 10 15 -

Аїа пей пуз біп Бубз печ цув 20 і - (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 54: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти « (В) ТИП: амінокислота з с (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один . (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна а (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 54:

Рко Маї Пеш Аєр їец Рпе Акад Сій Пец цей Авп Січ Тур без біч - 1 5 10 15 - А1а пес буз біп Пув бец Буз 4! 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 55: о () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: ї» (А) ДОВЖИНА: 19 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (Ф, (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 55: ке Рго Пец Ре Ату біц Геш Пец Аво Сі) Пеп Гей бі Аїа Пей Гу 1 2 10 15 во віп уз Беч цу5 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 56: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота 65 (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна

(ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 56:

Рго Уа1ї їец Авзр Бец Рпе Аку бій цей Тец Авоп бій Пвч Гез бій 1 5 10 15

А1їа це цув Сіп був був Гув 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 57: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає 19 (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО І МО 57:

Рго уаї їей Агр цей Рпе Акд Авп Гей Пес бій бі бец Тей Був 1 5 10 15

Віа цей б1іц біп Буз ви цуз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 58: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 21 амінокислота (В) ТИП: амінокислота с (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один о (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше «І (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр ю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 58: ів)

Рко Маі Пец Авр Сіш Рпе Акд Сіш Пув Пеп Авп сій Хаа Пеп Січ «-- 1 5 10 15 і -

А1їа їви Туз біп Був Ге 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 59: « () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти З с (В) ТИП: амінокислота "» (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один " (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 59:

Ше Ве Уаі ей Авр оТец Рбре Аг біи Пец пеп Азп бій Пец Бей б1и - 1 5 10 15 ос А1а Гей цув біп Був Бей Бу5 29 п (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 60: т» () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 19 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна о (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає ко (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО І МО 60:

Рко Ма! бей Азр ем РБе Акд біш Тео Тей Авп бій Без Гей Сід 60 1 5 1 15

Віа Тез цув біп (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 61: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: 65 (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота

(С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (0) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ії) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:АЇБ (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 61: 170 Рко Уаї цец Азр бій Рпе Агу Тгр Пуз Те Авп бі Хаа теп сій 1 5 10 15

А1їа цей пув біп Буз Брец цу (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 62: т () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (0) ТОПОЛОГІЯ: лінійна 20 (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:АЇБ с 29 (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО І МО 62: Го)

Рко Уаї Тїец Авр біш Тгр Аго бід Ту цецш Азп бі Хаз Тен Си 1 5 КІ) 15

А1ї1а Тез Буз іп ув Тєц Гуз З 20 І в) (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮО МО 63: М ю () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти -- (В) ТИП: амінокислота ї- (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (0) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ії) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: « (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше шщ с (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 й (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:АЇБ и? (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО І МО 63:

Рго Уаї Пеи Авр Рпе Рпе Агуд С1ц Був Тен Авп біо Хва Теп сій -І 45 1 5 10 15

Аїа Пец Був біп Пуз Гей Гу - 20 1 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 64: сл 50 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти чз» (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (0) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: о (А) ІМ'ЯКЛЮЧ : інше ко (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:АЇБ 60 (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮО МО 64:

Рго Тер Пец Авр біш Рпе Агд бій Був Пец Авп б) Хаа їєц С1и 1 5 10 15

Аза їец уз біп уз цец Був 20 65 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 65:

() ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 21 амінокислота (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: Інше 70 (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 12 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 65:

Уаї бен Авр Сіш Рре Аку біц Пйуз Бес Азп бій Хаа Бей 01) Аіа 1 5 10 15 йеп пуз Сіп Був Гео Був (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 66: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти 20 (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 66: сч

Рго Уаї реп Азр Пеш Рпе Акд Авп Беш Пец біш бій Гей Гей бій о 1 5 10 15

Азїа тей біп Буз Буз Тец Буз 20 «І (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 67: ю () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 21. амінокислота о (В) ТИП: амінокислота «- (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один 3о (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна - (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 67: уаї Пец Авр Пен Ре Агу Сі) Беш Те Азп бій Гей пей бій Аїта « 1 5 10 15 -о с їв Туз біп Туз Пец Був ч 20 ,» (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 68: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти -і (В) ТИП: амінокислота - (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна 1 (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає сл 50 (їх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ інше т» (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 68:

Рго Уаї Тен Авр бій Ре Акд бій їей Те Туз С10 Хаа Бей 01

ГФ) 1 5 10 15 г Віа пе пув біп цЦув рей Був 20 во (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 69: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один 65 (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає

(хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 69:

Рго уаії тей Азр б1й Рре Ах Буз Пув їез Авп о бій Хаа Без бі 1 5 10 15

А1їа тец тує біп Був їви Туз 20 710 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 70: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО І МО 70:

Рто Ма! Тез Авр сій Рпе Аку Сію» Пей Тец Тук біз Хаа Пец 01) 1 5 10 15

А1ї1а цей туз біп буз тей уз см 20 і) (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 71: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти «г зо (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один юю (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна ю (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: -- (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше М (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 14 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 71:

Рго Маії їец Авр бій РБе Акд бід Пу5 їец Авпобіц Бей Хаа б12 « 1 5 10 15 - с Аїа їєю уз біп Був Тез Буз . з» 70 " (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 72: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти ш- (В) ТИП: амінокислота - (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна о (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає «сл 50 (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше ї» (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО І МО 72:

Вго Маї Бей Авр Пей Рпе Акд сій Тей Бе Авп бій Хаа Гей Тер

ГФ) 1 5 10 15 ко Аїа Тец пуз біп Був пе Буз 20 60 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 73: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один 65 (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає

(хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО І МО 73:

Рго Маі Пец Авр бій Рпе Тер сі Плув Гей Авп Сій Хаа їеч б1ц 1 5 10 15

А1іа печ пцуз біп Пуз Пец Був (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 74: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота т (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше 20 (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 74:

Рго Уаі! Пеп Авр Був Рбе Аку бід цув Гец Авп бі) Хаа Пец 010 с 5 10 1 15 о

Аїа теп Пуз біп Був реп Туз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 75: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: - (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти ю (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один о (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна «- (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає 3о (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО І МО 75: -

Рго Уаї Пец Авр біц Рпе Акд бі Муз Бей Авп біз бій цец сій 1 5 10 15

А1їа пей буз сіп буз Пец Буз « 20 - с (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 76: а () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: "» (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один -і (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна - (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: 1 (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше сл 50 (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр їз» (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО І МО 76:

Рго Уаї Пец Авр біц Ре Агуд бій Пец їеч Рпе біц Хаа Бец бі 1 5 10 15

Аїа Тез уз біп Пуз Пе Туз

Ф) 20 ка (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 77: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: во (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає 65 (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше

(В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 77:

Рхо Уаї Цец Азр Сіп Рпе Агуд бій Буз Бей Авп Гуз Хаа Пец сій 1 5 10 15

А1їа цеч Буз біп Пув Бем Гув 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 78: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна 19 (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІО МО 78:

Рто Уаії пе Авр бій Рре Акгд Авр Пуз Бей Авп бій Хаа цей С1у 1 5 10 15

А1а Гей був біп уз Бец Гу см 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 79: о () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота Й (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна ю (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає ів) (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 79:

Рко Ма1 ле Азр бій Рбе Аху бій Пец бен Азп Сі) Гей Бей січ -- 1 5 10 15 -

А1їа еп пуз біп Пуз Печ уз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 80: « дю () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: з (А) ДОВЖИНА: 22. Амінокислоти с (В) ТИП: амінокислота :з» (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає - 15 (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 80:

Тко Чаї Пец Авр пез Рпе Сі Агд Пей пей Азп біо Пе Тез бій - 1 5 10 15 1 Аза пе сСіп Буз Був БГец Гу сл 50 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 81: ї» () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один

ГФ) (0) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає о (їх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше 60 (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 81: б5

Рко Ма! Пец Азр бій Рпе Акд біц Туз Гей Азп ТІр Хаа Ге б1ц 1 5 10 15

Аїа цей був сіп був Гїем Був с 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 82: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 20. Амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше 19 (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 11 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 82:

Гео Авробіц Рбе Акд бій Тув Беп Аєп Сі Хаа Бей бі) Аїа Пец 1 5 10 15

Вуз біп Буз Пец Був 29 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 83: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: с (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти о (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає «І (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше ю (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 ів) (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр - (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 83:

ЗБ Рхто Уаі Геп Авр бій Рпе Акуд сії. Був Бен Азп бій Хав цеп 63 че 1 5 10 15

А1їа реч Ткр біп уз Пец пу 20 « (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 84: з с () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: . (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти и?» (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна -І (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 84: - Рко Уаї реп Авр бі Рпе Ага біц Туз цем Азп Сій Геч Бец бій 1 1 5 10 15 1 50 Аза преп цув біп Ппув Пец уз

ГТ» 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 85: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 21 амінокислота (В) ТИП: амінокислота (Ф, (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один ка (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає во (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 85:

Рхо Пец Авр Гей Ре Ак бій Геш ГПецш Азп бій Бей лей бід Аїа 1 5 10 15

Тїеи пуз біп цуз Іеи Гу5 20 бо (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 86:

() ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (0) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО І МО 86:

Рго Уаі бец бій цем Рпе бі Ако Тец Пей Азвр біц Бей Бед Азп 1 5 10 15

Аїа Бей біп Ббуз Ббуз Пец Гуз (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 87: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: т (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (0) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (їх) ВЛАСТИВОСТІ: 20 (А) ІМ'ЯЖЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ :1...22 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: всі амінокислоти мають О-конфігурацію. (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮО МО 87: сч

Рго Пец Теп бін Гей Бец Ббуз бій без Тем біп бій Бей пе 010 1 5 10 15 і)

А1їа пецп туз біп Дуз ем Був 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 88: « () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: ю (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота о (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один «- (0) ТОПОЛОГІЯ: лінійна

Зо (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає ї- (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ : інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 « (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:АЇБ (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО І МО 88: в) с Рко Уа! Пемп Авр Був Рпе Агд Сіц Тем Пе Азп Сі Хаа Тем бій з 1 5 10 15

Аіа рей цуз біп туз Пец Туз 20 - і (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 89: - () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти 1 (В) ТИП: амінокислота сл 50 (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (0) ТОПОЛОГІЯ: лінійна «з» (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:АЇБ о (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО І МО 89: ко Рго Уа1! цей Авр Сі Рбе Акд бій ув їец АБп бій Хаа Теий Тгр 1 5 1 15 60 А1а тез груз бів Пув їви Ту 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 90: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: 65 (А) ДОВЖИНА: 19 амінокислот (В) ТИП: амінокислота

(С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 10 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 90:

Авр о біц Ре Акд біш Був Геш Авп Сі Хаа їец бі Азїа Тем Пцуз 1 5 10 15 біп Був беч Туз (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 91: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: т (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (2) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 91: сч

Рго Уаї ем Азр бі» Ре Агуд бій Гей Темй Азп бій Хаа Гей сі1ц Ге) 1 5 10 15

А1і1а Пец Туз б1іп Буз без Туз 20 «І (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 92: ю () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти о (В) ТИП: амінокислота «- (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один 3о (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна - (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше « (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр З с (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО І МО 92: "» Рго Уаї їез Авр біц Ре Акд бій їец Тукг Авп бі Хаа пей бій " 1 5 10 15

Аїа теп пуз біп Тув беч Був -І 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 93: - () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: с (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота о (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один ї» (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (Ф, (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр ка (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 93:

Рто Маї тей Азр Сій Ре Акд сій уз Теи Ап Сіц Хаа реп цув бо 1 5 10 15

А1а печ руз біп пуз цей цуз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 94: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: бо (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти

(В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 94:

Рго Уа1ї Пей Авр бІ1ш Рпбе Ага бій Туз Геш Азп бій Аза ївз 01 1 З 10 15

Аїа пе цпув біп Був беп пуб 70 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 95: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: Інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 95:

Рго Уаї реш Азр Геш Рпе Акуд біц Цез Бей Азп Те Хаа Те 6010 1 5 10 15 Ге

Віа цей Буз біп був Те Буз ге) 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО І МО 96: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти З 3о (В) ТИП: амінокислота ІС о) (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна ю (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає -- (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯЖЛЮЧ: інше - (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1... 22 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: всі амінокислоти, що генетично кодуються мають О-конфігурацію (А) ІМ'ЯЖЛЮЧ: інше « дю (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 з (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр с (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 96: :з» Рко Уаї ем Авр Пей Рпе Агд біц Пей Пец Азп бі Хаа Тец сім 1 5 10 15

А1їа це Буз біп Був Тей Туз -і 20 - (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 97: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: о (А) ДОВЖИНА: 15 амінокислот ся 70 (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один ї» (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 97: 52 Рго Уаї цей Ар Пец Ріе Агд б)й Тей БГец Авп Сіш Гео бейп С1й

ГФ) 1 5 10 15 7 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 98: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти 60 (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає в (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 98:

Рхо Уаі реп Авр Пей Рбе Ак бій Пец Тем Авп бій Сі) Гей С1іш 1 З 10 15

А1їа ей пуз біп цПуз Теч Був 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 99: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти 70 (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 99:

Туз печ Буз біп Туз ем Аза Сі їеч ей бій Авп Бей Гео 610 1 5 10 15 вка Рпе Тез Авр цем Уа1ї Рко 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 100: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один сч (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає і) (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1... 22 «г зо (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: всі амінокислоти мають Ю-конфігурацію (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 100: юю

Рго Уаї Гей Авр тей Рпе Агд бі Гей Пйец Авп бі Гей Гей 01ц ою 1 5 10 15 -

Аїа пе був Сіп Був Гей ув 20 і - (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 101: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти « дю (В) ТИП: амінокислота з (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один с (6) ТОПОЛОГІЯ, лінійна :з» (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше - 15 (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр - (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 101: «сл Рко Маї Пец Азр Те Рпе Агд бій Пец Гей Авп Тко Хаа Пеп бій с 50 1 5 10 15

Аїа пез пу біп Пув Пей Був їз го (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮО МО 102: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: 59 (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти

ГФ) (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один о (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає 60 (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 102: б5

Рко Уаї бе Авр Гей Рпе ДАку Сі їец Пец АБп бе Хаа Гей с1ц 1 5 10 15

Аїа ей був бі цуз Пец Був 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 103: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота то (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 103:

Рго Уаї цей Авр біш Рпе Акд бі рец Пеш Авп бід бі Тец бій 1 5 10 15

Аза Тецп пуз біл Буз Пец Був (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 104: 20 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 15 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна с (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає г) (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 104:

Рго Г.еч І.єи Ап ОЇ Гей Т.еи Ох Аа Ге Суб ОЇ Був Ге ух 1 5 І0 15 « (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 105: юю () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: ю (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота -- (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один ї- (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 105:

Рхо А1а Аїа Ар Аза Рпе Зку бій Аза Аїа дД5п б1іш Аза Аїа сій « 1 5 10 15 - с А1а Віа цув Ссіп Гуз А1а цув :з» 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 106: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: - 15 (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота - (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один сл (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає 1 20 (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 106:

Їх» Рго Уаї теп Азр Тєш Рре Акд Сіц Був Те Авп о біш біз їей б10 1 5 10 15

Міа йез пуз бі Туз ей Гув 20

ГФ) (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 107: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: де (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота 60 (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше б5 (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1... 22

(0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: всі амінокислоти мають Ю-конфігурацію (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 107:

Вуз Пец був біп Пуз рец Аїа бій Геш Тей бій Авп Бей Теп сій 1 5 10 15

Акд Рпе пей Азвр Пес Маї Рко 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 108: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає 19 (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 108:

Рго Маі Пен Авр Пецп Рре Акгу Тгр цем Пец Авп бій Хаа Те с1и 1 5 10 15

А1а без цуз біп був Бей Був 20 сі (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 109: о () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один «І (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає ю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 109: ів)

Ркго уаї Пец Авр бій Рпе Акуд Сі Туз без Азп бі Агд Ббеп бій - 1 5 10 15

Зо А1а Беп Буз біп Буз Гвц Був - 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 110: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: « (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти з с (В) ТИП: амінокислота . (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один а (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: -І (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 - (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр с (А) ІМ'ЯКЛЮЧ інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 14 о (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр ї» (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 110:

Рко Уаі1і Гей Авр бі РБе Агд бій Гуз йеш Азп бій Хаа Хаа Сіц 1 З 10 15

Аіа ем був Сіп цув Тей Був

ГФ) 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 111: о () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти 6о (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: б5 (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше

(В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО І МО 111:

Рко Уаї Пец Авр Сі Рпе Агд Сі Пув Ппей Тгр біз Хаа Тгр сій 1 5 10 15

А1а Теш цу біп Був Те був 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 112: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна 19 (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 112:

Рго Уаі Гей Авр Сі Ре Агуд бі Пуз Бпем Авп б1ш Хаа бег Сс1ч 1 5 10 15

А1із цен Пув сіп Пув Тем Туз сч 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 113: о () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота Й (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна ю (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає ів) (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 113: -

Рго Уаії Бей Авр бі Рпе Ак бі Був Геп Азп о бі) ВБго бе бій 1 Е 10 15 -

А1а цец пув Сіп цув Гем уз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 114: « дю () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: з (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти с (В) ТИП: амінокислота :з» (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає - 15 (2) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше - (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 сл (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 114: о Рко Уаї Пец Авр Сіш Рре Ахд біш Пув Пец Авп бій Хаа Меє бі

Я» 1 5 10 15

Аїа Геп Був Сій Був Гей Гуз 20 (2)ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО І МО 115:

ГФ) () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: 7 (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один 60 (0) ТОПОЛОГЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 бо (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АЇЬ

(хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 115:

Рко Буз Ген Авр бі) Рре Аку бій Пуз Пеш Авп бій Хаа Пец б1ц 1 5 10 15 діа цем цувз біп Цув Теий Гуз (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 116: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти то (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: т (А) ІМ'ЯЖЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 116: 20 Рго Ніз Бен Авр бій Рпе Акд бі Був Гей Азп бій Хаа Пец сій 1 5 10 15

Віа рей пуз сіп Був Бе гув 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 117: с () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: г) (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна - (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає ю (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯЖЛЮЧ: інше о (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 «- (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр 3о (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО І МО 117: -

Рко бій Гез Авр обі Рбе Агуд бій Гуз Пем Авп обіц Хав їеч 61 1 5 10 15 діа цей цуз біп Був їн Був « 20 - с (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 118: а () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: "» (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один -і (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна - (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: 1 (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше сл 50 (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 13 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр їз» (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО І МО 118:

Рго УМа1ї цем Азр Сі Рпе Агд бій Був Пец Авп бі Хаа Тїеч біц 1 5 10 15 99 Віа без біш біп був цеш Буз

Ф) го ка (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 119: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: во (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає 65 (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше

(В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 17 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 119:

Ркго Уаї цеш Авр бій Рпе Агд бій Був гео Авп біз біз Пейп бій 1 5 10 15

А1їа Хаа Був біп Буз Тец Був (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 120: то () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна т (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 16 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-АїЇр 20 (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 120:

Рко Уаії Пем Авр січ Ре Агу бій Буз пемш Азп с10 біц ред бій 1 5 10 15

Хаа реп був біп був еп Іув 20 с (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 121: г) () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один - (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна ю (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 121: о

Рко Уаї йец Авр бій РВе Атд бій Був Тез Двп о бії біз Без СІ ч- 1 5 10 15 М

А1а Тез Тур біп Пув Ге) Був 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 122: « () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22. Амінокислоти - с (В) ТИП: амінокислота а (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один ,» (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО І МО 122: і Рго Чаї бецй Авр бій Рпе Акд Сі) Ппує їецшп Азп о біц бій Бей би - і 5 10 15 с Тер ей пцув біп Був Теч Буг 20 п (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 123: т» () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна о (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає ко (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО І МО 123: біп Уаї їей Азр Гей Рпе АкЯа бій Тем пйец Або бій це Те 010 601 5 зо 15

Аїа їви Шуз біп Гуз теп Гуз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 124: 65 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти

(В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 18 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:хорнитин 70 (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 20 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа -- орнитин (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 22 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:хорнитин (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 124:

Ркго Уа! Бец Азр Бей Ре Хаа бі Тец Пец Авп бі Бе Бем сій 1 5 10 15

Аїа пей Хаа с1іп Хаа Гєип Хаа 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 125: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота сч 29. (с) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один о (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 125: «

ВАвп Уаї йец Авр Гей Рне Акд Сій Тец реп Ап бій Сей Бей бій 1 5 10 15 що)

Аїа ей був біп уз Гео ув ІС о) 20 - (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 126: 3о () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: - (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один « (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає З с (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 126: и » Рго Уа! Тени Авр Г.еи Рне Ате Сів Тем Т.еи Авп Он Гей Су Сі 1 5 10 І5 -1 35 АїаТ ен Гуз Сіп І.ув Теи Був - 20 с (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 127: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: о (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти ї» (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 127:

ГФ) Рго Уа1ї цец Авр Пеш Ре Агд Сіш Те рец Ап бі Тен гей січ ко 1 5 й 10 15

Тем тей Пуз біп Був Гец Був 60 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 128: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота 65 (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна

(ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 128:

Рго Уаії Пейш Азр Пей Рпе Вхд біц еп ем Азп біч Пец Теч бі 1 5 10 15

Рпе це був б1п був Геч Бу5 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 129: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: то (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає т5 (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 129:

Рко Маі їеш бій Пец Рре Азп Азр Тез Теч Аго 613 Гей тез біо 1 5 10 15

Аза цец біп цуз Був Ппем Був 20 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 130: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота с (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один г) (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 130:

Рго Уа1ї Пец біц Пец Ре Азп Азр Пеп їеп Ахо біз Гей Ппей бій «І 1 5 10 15 ІС

Аїа цей пуз б1іп Цуз Пец Гу5 ю 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 131: -- () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: - (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один « (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає - с (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІОМО 131: т Рго Уаї їеш біш Бей Рпе Буз бій Гей Тем Азп бій Гей Сем Авр я 1 5 10 15

А1а теп АгЯя бСіп був Пе Був -І 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 132: - () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: с (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота о (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один ї» (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮО МО 132:

Рко Уаі Пцец Авр Бей Рпе Акуд С1и Тем Бец б1ім Азп Пец Бей б1ц 1 5 10 15 о А1а еп біп Буз Ббуз Гем був, іме) 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 133: бо () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна бо (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає

(хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 133:

Ро Ма! Гей Сн Сеп Реве ОЇш Агр Бей Гей Сп Авр Гей Гей іп 1 5 юю 15

Аа Меп Авп Гуз Гуз Бей Гуз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 134: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна 19 (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 134:

Рко Маі їви Сі Пеш РБе бій Аку Пе їєй бій Авр Гео тей був 1 5 10 15

Аїа Тїеп Авзп біл Тув Те Був 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 135: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти сч (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один і) (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 135: «г

Азое чаї Пезч Авропез Рпе Аку бій Бей Без Азп бій Бе Пец бід 1 5 10 15 ІС в)

Аза ви бує б1іп Був Пец гу юю 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 136: -- () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: ї- (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна « (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає з с (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 136: и Ркго Аа цеш бі Пец Рае Тує Авроїем Пей Сіп Сі Пеш тей сій " » 1 5 10 15

Аїа пе Був біп Ппуз еп Був 20 їм (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 137: - () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: сл (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота с 70 (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один

ГТ» (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 17

ГФ) (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-нафтилаланін 7 (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 137:

Рко Уа! Пец Авр Пец Ре Акуд біо Беш ГПем Авп бій б1у Тен бій во 1 5 10 15

Азїа Хаа був біп цуз Печ Гуз 20 х (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 138: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: бо (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти

(В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 138:

Рго Ма1і Пес Авр Тїво Ре Ак Сі Пец їец Аза 030 б51у Пец 610 1 5 10 15

Ттр Геч Пув біп Пув Тем Був (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 139: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота т (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 139:

Рто уМаї Іеи Авр Пей Райс Агу бій Пец Тер Авп сі б1у ей бі 20 1 5 10 15

Віа пей Тув біп пуз Бе Був 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 140: с () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: о (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна «І (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: ю (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше ів) (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 18 - (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:хорнитин (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше ї- (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 20 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:хорнитин (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше « (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 22 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:хорнитин - с (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 140: ч Рко Маї рей Авр рей РБе Агд біц Ге Гей Авп біо біу лец б1ц и? 1 5 10 15

Аа їеч Хаа біп Хаа Пе Хаа -І 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 141: - () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: с (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота о (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один ї» (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 141:

Рго Маії пей Авр Рпе Рпе Агд віч Тви Без Азп бій біу еп сід 1 5 10 15 о А1а Те Був біп цув йец Був іме) 20 , (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 142: бо () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна бо (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає

(хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 142:

Рхко Уа1 Пец бій Пе Рпе Акд бій Тей Ппей Абп бій б1у Геий бій 1 З 10 15

А1їа цей пуз б10 Був Гей Гуз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 143: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: 19 (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1... 22 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 143:

Рго уаї цес Авр Бей Рпе Агд біц Ге Гей Ап бі б1у Геч бій 1 5 10 15

Віа ей Буг біп Був Теч уз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 144: с () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: о (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна «І (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: ю (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше ів) (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1 - (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:О-пролін (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 144: ї-

Хаа уаї цес біц Пед Ре бій А5п Пе бе біс Агд Тео тез Авр 1 5 10 15

Віа цецп біп пув був Бей Був « 20 20 ш-в с (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 145: . () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: и?» (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один -І (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає - (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 145: о біу Уаї цем бій Пеш Рпе Сіш Азп Пец Пеш бі Акд Тей Тем АБр сп а 5 10 15 ї» Аїа цец сіп уз Ббуз Бем Пцув 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 146: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти

Ф) (В) ТИП: амінокислота ка (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна во (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 146:

Рго Маї цей бій Те Рпе бій Азп Бей Без с1з Агд Теза Тез Авр 1 5 10 15

Віз Бей біп Пуз Був Бе Був бо 20

(2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 147: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 147:

Рго Маї Пец бій Фей Рре бін Авп пе Ппей бій Акгу ГПеш РБе Агр 1 5 10 15

Віа цей біп цуз Був їеп Буз (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 148: т5 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна 20 (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 148:

Рго Уаі1 рей сій Пец Рпе бій Авп Бей еп Сі) Ак без біу Авр 1 5 10 15 се

Віа Пец біп цуз уз ем цуб 20 о (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 149: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти З 3о (В) ТИП: амінокислота ІС о) (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна ю (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає -- (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 149:

Рго Уаі Пец біч Гец Рпе бі Авп о рец Тер бій Акуд Гей пей Ар - 1 5 10 15

Аза цец біп Був Ппув Бей цуз 20 « (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮО МО 150: - с () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: а (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти "» (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна -і (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає - (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 150:

Рго рей це бід Пец Рпе сі АДвзоп Ше Ге С1іш Акд Теш ївч Авр 1 1 З 10 15 с 50

Аза їй біп пуз Буз ем Гуз

Т» 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 151: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: 59 (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти

ГФ) (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один о (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає 60 (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІОЮ МО 151:

Рго Ма! цей сій Пец Ре Сі Ап Гей б1у Сіш Акд Без Пед ДАвр 1 5 10 15

Аїа їей біп уз Був Те Туз б5 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 152:

() ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 152:

Ркго Уаії Ре бій Пец Рпе бій Азп бео Гей бій Аг Бей Гецд Ар 1 5 10 15

Аїа гей біп Був Ппуз Бец Був (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 153: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: т (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ії) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 153: 20 Ма Маї Тем бій Пе Рбе Сіш Азп Пец Пес бій Акд бе) Бей А5р 1 5 10 15

А1а цец сіп Пуз Пуз Тем Був 20 с (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 154: г) () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один - (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна ю (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 154: о

Рто Маї Грем біц ІТєц Рпе бій Азп Тец Пец січ Акуд біу пеп Авр «-- 1 5 10 15 м

Аїа пеп сіп був йуб5 Ппеп Був 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 155: « () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти - с (В) ТИП: амінокислота а (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один ,» (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО І МО 155: - Рхо Уаї Бецп б1іц Пец Рпе ем Азп Гец Тур бій Ахд Без Бей Авр тд 1 5 10 15 ос дДіа цей бій Гуз Пуз Пец Був 20 п (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 156: т» () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна о (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає ко (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 156:

Рко Уа1! Пе бі Пейш Рре Пей Авзп їєц Бецп бій Аху Пец Бей Ар 60 1 5 10 15

Віа беч біп був ув Бей Буз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 157: 65 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти

(В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 157:

Вхо Уаї Ген біц Рпе Ре бі Азп рей Бей бів Акго Тео Гей Азр 1 З 10 15

А1а їео біп був Був Беч Був то (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 158: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один т (0) ТОПОЛОПЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 158:

Рго Маї ей бій Тео Рпе Цей Авп Гео Гец біз Ах Тей Тед Авр 20 1 5 10 15

Тгр пцец біп був Був Геч уз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 159: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: с (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти о (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає - (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 159: ю

Рхо Уаї Пец Авр Пец Рпе бій Азл Пем Пес біц Ах їеч ГПей Авр 1 5 10 15 що

А1ї1а Тен біп Пуз ГПув еп Був «- 20 - (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 160: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти « (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один - с (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна а (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає ,» (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 160:

Рко Уаї1ї цей Сбіш Пец Рпе Сіш Авп о тїей Пец біш Агд бец цем Азвр 1 5 10 15 ш- Тгр цез біп пув Пуз Бйем Був - 20 с (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 161: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: о (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти ї» (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 161: (Ф; Ркго Маії реп біш Пе Рпе бій А5п Бей ем бі Аку йеч Пем біц ко 1 5 10 15

А1їа пцец біп Був Туз Пец Був бо 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 162: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота б5 (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один

(6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 162:

Рго Ма І.ец Си Те Рпе Си Авп Тгр Гей Сів Аге Гей Гей Авр 1 5 10 15

Ав Гей Сіп Був Гу еп Гуз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 163: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 163:

Рго Маії Тїеш бій Беш Рпе Сіц Авп Ббец Тез бій Ася цей Тер Авр 1 5 10 15

Аїа теп біп Був Був тей Був 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 164: сч () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти і) (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна «г зо (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 164: юю

Рго уаї цем бі Тїеп Рпе біц Ап Пец рец Сіш Агд Бец Пем Авр юю 1 5 10 15 «--

Аїа Тер біп їув Був Геч Був 20 і - (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 165: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти « дю (В) ТИП: амінокислота з (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один с (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна :з» (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 165:

Рго уаї йеш бій пец Рпе біц Авп Бец Гей біо Агуд Пей Бецп Азр -І 1 5 10 15 - Пей печ біп Був Пцув беч буз 20 о (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 166: с 50 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти

Т» (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає

ГФ) (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 166: з Рго Уа! рей бій пейп Рье Пец Азп Гей Тесей бу Ббуз ПЦец Теч Авр 1 З 10 15 60 Віа Бей біп Був був Тец Був 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 167: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти 65 (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один

(6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 167:

Рхо Уаї Пей бі Тен Рпе бі Авп о сіу Бен 61 Агу Бей Теч Азр і 5 10 15

А1їа їєц сіп Туз Був їви Гув (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 168: то () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна т (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 168:

Ргто Уаї1 Пейп бій Тец Рбе бі біп їви Пеш бі був Пей Гей Авр 1 5 10 15 20 Аїа цей біп Пуз Пцув пец Був 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 169: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти с (В) ТИП: амінокислота о (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 169: -

Рго Уа! Бец біц Пеп Рбе Сіш Азп Гей пе б10 ГЦує Ппей Пец Авр юю 1 5 10 15 ю

А1а цеп Сіп Був Буз Пец Був 20 - (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 170: - () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота « (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна - с (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає а (хх) ВЛАСТИВОСТІ: » (А) ІМ'ЯЖЛЮЧ: Інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 12 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:хорнитин - (А) ІМ'ЯЖЛЮЧ: інше - (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 19 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:хорнитин о (А) ІМ'ЯЖЛЮЧ: інше сл 50 (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 20 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:хорнитин ї» (А) ІМ'ЯЖЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 22 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:хорнитин (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІО МО 170: (Ф) Рго Уа! І ви СІпТеи Рає Сі Авл Гео Гей Со Суб Гей Гей Авр о | 5 10 15 во Аа Гей Сів Був Гуз Гей Гу 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 171: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: 65 (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота

(С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО І МО 171:

Рго Уаі Бей бій Тец Рпе біц Авп Пец Пец бій Був Пей рей Авр 1 5 10 15

Тез пей біп уз Гуз Гей Був 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 172: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один 19 (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІОЮ МО 172:

Рко Уа! Гечп бій Пей Рбе Тем Ап Тец Ге Сі Аг Тез С1у Авр 1 5 10 15

Віа Ппез біп Гуз уз Тез Гув 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 173: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: с (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти о (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає - (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 173: ю

Рго Уа1 Пец Авр Тей Рпе Авр Азп їеч Те Авр Акд реч Пец Авр і 5 10 15 ІФ) їеп беп Азп о Буз Ппуз Гей Гуз ч: 70 - (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 174: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22. Амінокислоти (В) ТИП: амінокислота « (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один шщ с (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна . (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає и? (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...22 -І (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: всі амінокислоти мають Ю-конфігурацію (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 174: - Ріо Уа1! Тец січ Гей Рбе бін АБп Іїеш цей сі Ахд Тейп Гей Авзр 1 3 10 15 1 А1іа пе Сіп їуз Був без Був сл 50 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 175: т» () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна о (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає ко (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 175:

Рго Уа! Ге ОТи Гей Ре СТи Авп Гео Гей Ой Агро Гей Гей С бо 1 5 10 15

Теч Ген Або Гуз Туз Тен ув 20 б5 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 176:

() ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22. Амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 176:

Рго Уа! І .еп СТ І.еи Тер Сі Авп Гео Гей Ой Агр; Ге Ген Авр 1 5 10 15

Аза Сео Сп Гуз Гуз Те Гуз 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 177: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО І МО 177:

Сіу уаї Пец Сіц Пец Ре Тен Авп Печй Пес бій Акоа Гей Бей Азр 1 5 10 15 с

Аїа цеч біп Ппув Пув реп Гу Ге) 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 178: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: «г зо (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота о (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один ю (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає -- (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 178: ї-

Ркго уУаї йецш бій Пеш Рпе Дер Авоп Іеш Теш біз ПЦуб пей Бей 1 1 5 10 15

А1а беч біп Був уз еп уз « 20 ш-в 70 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 179: с () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: :з» (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один - 15 (0) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає - (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 179:

Рко Ммаї цез бій Беч Рпе Авр Авп Гей рей С1ч Ато Тей цен Авр і-й 1 З 10 15 1 50 А1ї1а це біп бує Був пев цуз

Та» 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 180: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (Ф, (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один ка (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає во (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 180:

Рхо Маї Тец біш Пей Рре А5р Авп Бей Гей Азр о Буз Темп Ти Ар 1 5 10 15

Аїа без біп Буз Буз рем, Ах 20 бо (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 181:

() ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 181:

Рхо Уаії Гей біш Пец Рбе біз Азп Тец Бей б10 Аго Тер Бец Азр 1 5 10 15

Аїа пцеч біп Гуз Пуз Пец Був 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 182: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 182:

Рхо Уаї Тем Сіп Пец Ре Сі Азп Тец їеи бій Був Тез Тецй бій 1 5 10 15

Аїа теп біп Буз Буз Пец Гуз с 20 о (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 183: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22, амінокислоти «г зо (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один юю (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна ю (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 183: --

ЗБ Рко Тец Гей сій рем Рпе бій Авп Бей Пец бі Пбуз ей Геч Азр у 1 5 10 15

А1а теп с1п був був Тен Гуз 20 « дю (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 184: з () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: с (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти :з» (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна - 15 (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО І МО 184: тд Рго Уаї Пец Сі Цей Ре Пес Ап Тїєї Бец бій Агу пей реп Авр (9) 1 5 10 15 сл 50 Аіа Тхр біп Був Шув ем був 20 ї» (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 185: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти 59 (В) ТИП: амінокислота

ГФ) (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна о (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: 60 (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 19 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:хорнитин (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 20 бо (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа-орнитин

(А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 22 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:хорнитин (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 185:

Рго Уаї Пец Сі Тед РБе Сіц Авл Твц Пец бін АКд Тео Тез Авр 1 о 10 15

Аїа цей біп Хаа Хаа Гец Хаа 20 70 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 186: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 186:

Рго уаї ем Сі ем Рпе Сіш Сіп Тей йей б1й Агу Гей Бей Азр 1 З 10 15

А1з йецп біп Був Туз Пец Був. 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 187: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: с (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти о (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає «І (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО І МО 187: ою

Рхо Маї бец бій цей Рре біц Авп Пец Бей б1ц Агд Бей пецш Авр 1 5 10 15 о

Аза Пцец Авп Пуз Був Пец Був ьо 20 і - (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 188: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти « (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один - с (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна а (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає ,» (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 188:

Ркго Уаї Пец бій Без Рпе б1іц Авп Без Пец Авр Акд Бей Бей Авр 1 5 10 15 -І

А1їа пе біп Пуз Пуз Пез Був - 20 1 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 189: сл 50 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти чз» (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 189:

Ф, Авр Маї їем сій Пейп Рпе с1и Авп Гей їви бій Агу їей Ген Авр іме) 1 5 10 15

Аїа їеп біп Гуз Пцуз Бей Був 60 20 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 190: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 22 амінокислоти 65 (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один

(6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 190:

Рко Маі Пец бій Рпе Тхр Авр Азп Тїви Бей Авр був Бей пей Ар 1 5 10 15

Аїа цей біп Бу Фуз Без Аг 20 70 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 191: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 191:

Рко Маї Гей Авр Пем ем Ак бій Тез лем С1іа бі) їво Був біп 1 5 10 15 уз реч Гуз се (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 192: г) () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один - (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна ю (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: о (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше «- (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18

Зо (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю ї- (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 192:

Рго Уаї Пец Авр Бен Ре уз Сб1іц Те Пе Сі бій пес Був б1іп 1 5 10 15 «

Був йеч Був з 70 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 193: с () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: :з» (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один - 15 (0) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає - (хх) ВЛАСТИВОСТІ: сл (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 1 20 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю

ГТ» (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 193:

Рго Уаї йем Авр Пец Ре Аку бій Пе» Пес бій біц реп уз Ссіп 1 5 10 15 цув йеч Буз (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 194:

ГФ) () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот де (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один 60 (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 бо (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю

(хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 194:

Рго Уа! Пец біб Гей Рбе Акд бій Пе пей Сі бій Гей Був б1іп 1 З 10 15 с цув без Був (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 195: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота то (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше т (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 195:

Рго Маії Пец бій Те Рбпе ув біц Пец Пец бі сії Пец пув біп 1 5 10 15

Гуз цес Гуз (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 196: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот с (В) ТИП: амінокислота о (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: «І (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 ю (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю ІС о) (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 196: -

Рго Уаї Теш Авр їец Рне Агу Сі Пец Ге бій біб Тео Гув Авг 1 5 10 15 ї- пуз Теч Буз (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 197: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: « (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот з с, (В) ТИП: амінокислота с (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один :з» (0) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: - 15 (А) ІМ'ЯЖЛЮЧ: Інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 - (03 ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю сл (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 197:

Рко рей Пец Авр Геш Рпе Акд бій Пец ПДеш Сі» бі Бец Буз с10 о 20 1 З 10 15

Я» шцув це Муз (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 198: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота о (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один іме) (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає 60 (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 198: б5 біу уаї Пец Авр Пец Рпє Аку бій Пец пец бі бій рей ув біп 1 5 10 15

ГПув пецй Був (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 199: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один то (0) ТОПОЛОПЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 т (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 199:

Ро Уаї це Авр Пец Рбе Аго бі Пед Ттр біш бій Пе уз біп 1 ЕЇ 10 15

Туз Тед Гуз (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 200: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота сч (с) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один о (0) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше «г зо (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідиований по С-кінцю о (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 200: ю

Азп о уаї цер Авр Пе Рбе Агу сій тей Пец бій бій Тїец Гуз б1п 1 З 10 15 -

Туз Ге Буз і - (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 201: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот « (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один З с (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна "» (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає " (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 ш- (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю - (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 201:

Рко Гей реп Авр Пец Ріе пуз бій Те Тем бій бій Пбеч був біп 1 1 5 10 15 1 50 пув пе Був ї» (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 202: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (Ф, (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна ка (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: во (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 202: б5

Рко А1їа Пецп сі пем Рпе Пуз АБр Пец цей біц бій реп Агу біп 1 5 10 15 цуз Ге Акад (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 203: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один то (0) ТОПОЛОПЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (їх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 т (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 203:

Аза Уа1ї Пец Авр Пе Рре Ахуд бій Теш Тео Сід бі Пей Був біп 1 5 10 15

Буз цеч цув (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 204: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота с (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один о (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше «І (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю й (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 204: ів)

Рхо Уаї Гей Азр Рпе Рпе Агуд сі єп Пец С1й бій Те Буз біп - 1 8 10 15

Зо Буз реп туз в. (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 205: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот « (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один З с (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна "» (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає " (їх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 ш- (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідрований по С-кінцю - (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 205:

Рко уа1 Ієм Авр Пейп Ре Агу бій Тхр Гей бій С10 Тео Був біб о 1 5 10 15 1 20 цпув їеч Іув

ГТ» (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 206: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота 55. (с) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один

ГФ) (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна 7 (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМЖЛЮЧ: інше 60 (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 206:

Рго їеп Бей бій Гей бец Був бій Тем пец бі бій Пцез Гуз біп 65 1 5 10 15 цу Гей буз

(2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 207: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: 70 (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: Інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 207:

Ркго Уаї Пец бі Гей пец Був біо рен бец бій бі рей Ббуз б1п 1 5 10 15

Туз ем Був (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 208: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: сч 29. (АУЇМ'ЯКЛЮЧ: інше о (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 208: «

Рко Аіа Пец Авр Пец Рпе уз Ар їй їей бій Сбіц Те Агуд сіп 1 5 10 15 юю

Ага Тез Був ІС в) (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 209: «- () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ:

Зо (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот ї- (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна « (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 209: З с Рко Уа1ї Песш Авр Тец Рбе Агу бій тей реп Азп Сі Бей Тез біп :з» 1 5 10 15

Буб їв Гуз (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 210: -і () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: - (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота 1 (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один сл 50 (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає їз» (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІО МО 210:

Рко Уаїі цей АвБр Тец Рпе Акд бій їеш Гей бі бій Гей Пцув біп 1 5 10 15 59 тув їеи Гу

ГФ) (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 211: 7 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота 60 (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (їх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ інше бо (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18

(0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 14 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:хорнитин (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 16 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:хорнитин (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше 70 (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 18 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:хорнитин (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 211:

Рко Уаї Ге Авр Тез Рпе Акд Сі Ге Гео бі б1ї Теч Хаа б1іп 1 9 10 15

Хаа їец Хаа (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 212: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯЖЛЮЧ: інше с (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 г) (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 7 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:хорнитин - (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше ю (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 14 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа:хорнитин о (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше «- (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 16

Зо (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: Хаа - орнитин ї- (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 212:

Рго уаї цеш Азр Гей Ре Хаа Сіз Пец Пец Сіцш біо Гей Хаа Сіп 1 5 юю 15 « 406 Хаа Ге Бу - с (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 213: . () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: и?» (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один -І (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає - (хх) ВЛАСТИВОСТІ: с (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 о (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю ї» (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 213:

Рго А1їа Гей біз Теш Рпе пуз Азр Гей Тем бід бій РБе Агуд бій 1 5 10 15 59 Ака Геч Був

ГФ) (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 214: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: де (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота 60 (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше б5 (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18

(0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: О-пролін (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 214:

Рго Маї Тец Азр Тез Рпе Агдф біц їеп Тени бім бі Лей Буз б)п 1 5 10 15

Тув їєц Був (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 215: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один 19 (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 215:

Рго Уаї рей Авр цец Рпе Акд біц Тец Гей С1ій бі) ТкЕр Був Сіп 1 5 10 15 цуз пе цув с (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 216: о () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота Й (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна ю (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає ів) (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 216: -

Рко уаї цец біц Пеш Рпе Був бій Ієц Гец біо бій Тец пуз біп

Зо 1 5 10 15 в. їув Гей Був (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 217: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: « (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот з с (В) ТИП: амінокислота . (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один а (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 217: -І Рго Уаї Бен Авр Печ Ре Аха Сі Гем Тей бі Темп Ппеп ув сіп - 1 5 10 15

Вуз Тез Гуз о . (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 218: 1 20 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ:

ГТ» (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає

ГФ) (хх) ВЛАСТИВОСТІ: 7 (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю бо (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 218:

Рго уаї Пейп Азр Пец Рбе Агд Сіш Теєи Гей Авп бі) Гечш ей біп 1 5 10 15 туз Те Був (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 219: 65 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ:

(А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 219:

Рко Уа1! цем Азр о Пез Рае Аку Сі Пец Тео Азп Сі Бе Тер біл 1 З 10 15 цув їв Був (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 220: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота 19 (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 220:

Рго Уаі! беш Азр Пейш Ре Агд Сі Теш Геч бій бій Пем біп Був 1 5 10 15

Був рей уз (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 221: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: сч (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот о (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає «г зо (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯЖКЛЮЧ: інше о (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 ю (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 221: --

З5 ВАвр Маї бецш Азр Пеп Ре Акд біц Ппеш ївц Сіш біо Те Туз біп у 1 в 10 15

Буз Гез Гуз (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 222: « дю () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: з (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот с (В) ТИП: амінокислота :з» (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає - 15 (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 222:

Рго Уа! Гей Авр А1а Рпе Атд бій цей їец бі Аза реч їем біп - 1 5 10 15 1 Тен Гув Гув с 50 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 223: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ:

Т» (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна

ГФ) (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 223: де Рго Уаї їем Авр Аїа Рпе Аг Сійш Пез Тез Сі Аза Ге Аїа сіп 1 5 10 15 60 їз Цув Пуз (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 224: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота бо (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один

(6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 224:

Еко Уаї Пец Азр Пе Рбе Акд Сіш б'у Ткр Сій Сі Ген бує Сіп 1 5 о 15

Муз це туз (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 225: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: 70 (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІО МО 225:

Рко Уаї Беп Авр А1а Рие Акуд біз Тен А1а б1ц А1а Геш Аза Ссіп 1 5 10 15 цес ув Був (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 226: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна сч 29. (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає о (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 226:

Рго Уаії теп Азр Аза Рне Аку бій ей біу б10 АТа Пец Беш біп 1 5 10 15 «Її

Бей Був Гу (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 227: ю () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: ів) (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот - (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один ї- (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: « (А) 5ЕО ІЮО МО: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 - с (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю а (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 227: п » Рго Уаї Пец Авр Гей Ре Акд С1й Гей б1іу бій бій Гец Був сіп 1 5 10 15

Був реч Гу - (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 228: - () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот о (В) ТИП: амінокислота с 50 (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна ї» (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18

ГФ) (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 228: дк Рко Уаі Тем Авр Пец Рпе Ага Сіц С1у Пец С1Ч 51 Ге пу біп во 1 5 10 15

Туз Іеч Був (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 229: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот 65 (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один

(6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (ХІ) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 229:

Рго Уа1ї їв Авр Тем Рпе Агуд бі їей цем біш біш С1у Був біп 1 5 10 15

Буз Пец Був (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 230: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот т (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 230:

Рро уаї рез бій їєц Рбе бій Агу Цей цеш Сі Аор Тей Сіп Був 1 З 10 15

Туз цец уз (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 231: сч () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот і) (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна «г зо (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 231: юю

Рко Уаї їец А5р Бей Ре Акуд бій реп їей бій Пуз пей біц сіп ю 1 5 10 15 - тпуз Бец Буз (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 232: - () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота « (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна - с (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає а (хх) ВЛАСТИВОСТІ: "» (А) ІМ'ЯЖКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю -і (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 232:

Рго Бец їеи бій Пец Рпе був бій еп їец біц бій Фей Був біп - їі 5 10 15 і-й Тув Ге Туз о (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 233: ї» () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: (в) ТИП: (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: (6) Топологія: (Ф, (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: ка (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 233:

Ця послідовність пропущена навмисно во (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 234: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: (в) ТИП: (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: 65 (6) Топологія: й (ї) МОЛЕКУЛЯРНИИЙ ТИП:

(хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 234:

Ця послідовність пропущена навмисно (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 235: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: (в) ТИП: (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: (6) Топологія: 70 (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО 235

Ця послідовність пропущена навмисно (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 236: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: (в) ТИП: (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: (6) Топологія: (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 236:

Ця послідовність пропущена навмисно (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 237: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот сч (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один і) (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 237: «Е

Тец Азр Азр їв Бен біл уз Ткр Віа бій йіа Рпе Авппобіп Теш ою і 5 10 15

Тео пуз Гув ІС о) (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 238: -- () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: ї- (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна « (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає з с (хх) ВЛАСТИВОСТІ: . (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше и? (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 238: -І Сіш Тер Гео Був Аза Рпе Тут Сіш пуб Ма1і Те б)и уз Бен Гув 1 5 10 ' 15 - біз гей Ре сл (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 239: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: с 70 (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот

ГТ» (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (їх) ВЛАСТИВОСТІ:

ГФ) (А) ІМ'ЯКЛЮЧ інше 7 (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 239: 60 бій Ткр Ге сій діа Рпе Тук Ппуз пПув Ма1 Пец бій уз тей Гуз 1 5 10 15 віч ем Ре (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 240: б5 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ:

(А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 70 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 240:

Авр Тур Пец Пуз Аіа Ре Туг Азр Пуз Хаї Аіа бій Пув їєй Буз 1 5 10 15 бід Аза Рпе 19 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 241: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 241:

ВАвр Ткр Рпе уз Аїа Рпе Тут Авр цуз Уа1 Рпе бій Гуз Рпе Буз 1 5 10 15 с 29 бі Впе Ріє Ге) (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 242: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота З 3о (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один ю (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає ю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 242: «- с1у ІІе Пуз цуз Рпе Пец біу Бех Ізїе Тгр Пув Рпе І1е був Аза М 1 5 10 15

Рре Уа1 6б1у (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 243: « () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот З с (В) ТИП: амінокислота "» (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один " (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 243: - Авр Тер Рпе Гуз Аза Рпе Тут Авзр Був Уа Аза бій Туз Рпе Гуз шк 1 5 10 15 с бій А1а Рпе (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 244: о () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: ї» (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (Ф, (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 244: ко Авзр Тер Бе цуз Аза Ре Туг Ар пу5 Уаї Аза бі Ббуз тей Буз 1 5 10 15 во біц Аїа Ррпе (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 245: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота 65 (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна

(ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 245:

Авр Тхр без Пуз Аїа Рпе Тух Авр Пує Уаї Рпе біч Гуз Рпе Був 1 5 10 15 бій Ре Ре (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 246: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот то (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 246: бій Ткр Цеп біш Аза Рре Тук Цув Пує Уаї Гей Сію Пує Тем Ду 1 5 10 15 біз ге Рре (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 247: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна сч (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 247: і)

Авр Тгр Рпе Був А1ї1а Рре Тук Азр Гуз Рпе Рпе біч Гуз РбБе Був 1 5 10 15 бій Рпе Рпе « (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 248: ю () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот о (В) ТИП: амінокислота «- (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один 3о (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна - (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 248: біз Тер тей пуб А1а Рпе Туг біз був Ма1ї Пец біз Був пе Був « 1 З 10 18 50 січ рез РБе - с (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 249: "» () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: " (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один - (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна - (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: о (А) ІМ'ЯЖЛЮЧ: інше с 50 (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю ї» (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 249: бій тер пез пув Аза біш Туг бій руз Ха! біо бій Був Тец Був 1 5 10 15 сія Бги Ре

ГФ) (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 250: 7 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот (В) ТИП: амінокислота 60 (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше бо (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18

(0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 250: бічш Тер пей Пув Аза біз Тук бій Був Уаї Гви біо Туз Гей Тув 1 5 10 15 бій гей Рре (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 251: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 18 амінокислот то (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: т (А) ІМ'ЯЖЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...18 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 251: біц Тгр без туз Аїа Ре Тук Тув Був уві Гей сій Тув їво Був 1 5 10 15 б1іш Гец Рпе (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 252: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 15 амінокислот сч (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один і) (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: «г зо (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...15 юю (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю ю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 252:

Рго Уаї ей Авр Пец Рре Акуд бій Тей Гей бі біп Був Тец Був - 1 5 10 15 - (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 253: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: « (А) ДОВЖИНА: 16 амінокислот (В) ТИП: амінокислота - с (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один а (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна ,» (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше -і (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...16 - (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 253: 1 Рго Маї рей Авр Пец Рпе Акд біц Гей без сій бій ем Гуз біп 1 20 1 5 10 15

Т» Туз (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 254: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 16 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (Ф, (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один ка (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає во (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...16 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 254: 65 Рго уаї цеу А5р Бей Рпе Аго біз Тео Фей бід уз Бей уз біп Бу5 1 З 10 15

(2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 255: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 15 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: 70 (А) ІМ'ЯКЛЮЧ інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...15 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 255:

Рго Уаї Пец А5р Пес Рпе Акд бій ТІеш Бец 10 був Тез біп був 1 5 10 15 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 256: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 16 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше сч (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...16 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид,, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю і) (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 256:

Рго Уаі рем Азр Гей Рпе Агд бій Без їец бій діа рез уз біб уз 1 5 10 15 «г (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 257: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: ю (А) ДОВЖИНА: 16 амінокислот ІС о) (В) ТИП: амінокислота - (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один (0) ТОПОЛОГІЯ: лінійна ї- (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙ ТИП: немає (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше « (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...16 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю - с (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 257: ч Рко Ма1 Ццеш Азр Бей Рпе бій Азп Бей пей Сі Асд Бецп їув біп був ня 1 5 10 15 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ ЗЕО ІО МО 258: -і () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: - (А) ДОВЖИНА: 16 амінокислот (В) ТИП: амінокислота 1 (С) ЧИСЛО ЛАНЦЮГІВ: один сл 50 (б) ТОпПОолЛОПпЯ: лінійна (ї) МОЛЕКУЛЯРНИЙИ ТИП: немає їз» (хх) ВЛАСТИВОСТІ: (А) ІМ'ЯКЛЮЧ: інше (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 1...16 (0) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: пептид, ацетильований по М-кінцю і амідований по С-кінцю о (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 258:

Рко Уаї Пец Азр є Ріє Агу б12 Бей Цец Азп бій Бей руз біл був ке 1 в 10 15 60 б5 анфіпатична а - спіраль гідрофобний залишок

І) гідрофільний залишок 0.

С коО

ОА АНО

70 о іх Ко є), ве ресор а еле спіральне коло

Фіг. ІА анфіпатична о, - спіраль тідрофобний залишок

ІФ) тідрофільний залишок , «НН одичо су сч з т с Су о обо! су 5 т шенні й ! : Іс) спіральна сітка

Фіг. ІВ - ї- авфіпатична о - спіраль тідрофобний залишок ; гідрофільний залишок « 6 з с о " З й - о- т н-

ОО о сні й і ральний цилидр і-й Фіг. 1С «з» (Ф, ко 60 б5 о формула (І) гідрофільний сг пілрофобний о гідрофобний або гідрофільний ер. сиг акв ю с) Мо

М Хо (з (хо) С рей, пон и с

НИЙ спральна сітка

Фіг. 2А о формула (1) гідрофільний гідрофобний 122 гідрофобний або гідрофільний пу (хі) сч

Ах (хо) («і о ща сислу ві з 65) С) ю а | о тілрофобна поверхня - у центрі ч-

Фіг. 28 в. о формула (1) гідрофільний тідрофобний « 22 гідрофобний або гідрофільний -в дет с путі св ;» (хі) (хв) в щі - Св) в

С») - ху є т и З щи тав гідрофільна поверхня - у центрі «з»

Фіг. 2С (Ф, ко 60 б5 гідрофільна поверхня -- у центрі пептид 18А Сегре

ДЯ

Сх) туго о, о то 5 ре (ю су 3 од в (лев

Яд

Фіг. ЗА гідрофільна поверхня -- у центрі пептид 210 о

ЛИН з ол і алу

У

(в) кВ -

Сг (о) дщдщ- У Іс)

Фіг. ЗВ ч-

ЗБ гідрофільна поверхня ТУ центрі че консенсусний 22-мір Сегре -

Ну 23 пу « (кю) п

У с ту

І» в СЕ су

А (х) СЮ -І а", Газ 20 --- 1

Т» Фіг. 3С (Ф, ко 60 б5 гідрофобна поверхня -- у центрі пептид 18А Сегре рве онов духи суто (у- (2, 15

Фіг. 4А тідрофобна поверхня - у центрі 20 пентих 210

ЩО у

Ге Ай й 25 що «3 (є) о ов й о « що зо |Фу ю

ІС о)

Фіг. 48 «- з5 гідрофобна поверхня, - у центрі че консенсусний 22-мір Сегре од і « фу 40 ст З о, с (є) не "з (в) (є)

І се, сер 4. в (в) -І ї чай с 50

Т» Фіг. 4С (Ф, ко 60 б5 спіральне коло пептид 18А Сегре 1 15 в "и ! ! " ОКУ» (КК ее) ! ОС "7 5 шк їх»; 70 М й "ож МО

З чо о юю " в із

Фіг. з3А спіральне коло пептид 210 4 15 8 " !

ФО в) "

Шо ми я сч я що) 5 , в в: їй зо | ю 10 . 2 17 6 15 І

Фіг.5В т м- « т с . ;» -І -ь Фіг. бА 1 с 50 «з» (Ф, ко 6о

ФібВ б5

Фіг. 6С 0 р 0 ю- Ше й 0 нн о. . с 2 о рі н- Іо) о

Іо)

Он 0 н 5-2 «- во КУ т КУ 0 Н 0 ча оби й би й 70 (Й ЇЇ Фіг. 60 не) с 02: п хімічні зсуви По, "» да -е-- консенсусний 22-мір 02 А --- 0 потях2ІП д 4,

ЕЕ св Ф, дх Ф -І Я -2 ) а пу ще

Е М ши -1 й. хо - а х 1 -06 1 1,2. 54556 7 8 9101112 1314 151617 1819 20 2122 їз» «Фіг. 7А

А хімічні зсуви протопу амілу 04 З -- кансенсусний 22-мір А

М - 3 псотид 210 (Ф; Е 00 ЛЬ / Р-Я -04 У " ф 60 -0,8 4. ртреттуттттрттттттттттттттт 1.2 345 56 7 8 910 1121514 1516 17 18 19 20 2122

Фіг. 78 65

Й я ії 5 в -

В «о, зв'язуваяня реоргянізація Щі великий ва" ге - 57 ЩО

З МрюеннйУ пелтид ще ліпідні пухирці ЗУ Фь нереникий пептид Фіг. ВА (пептял), іонна сятя, рН. ди». к-т во в сви ИН а (САТАНИ : ліпідні ака. не тео менту отв пит ум Мелекулн Іони мон Я ОУ У ож я ніна ве ни он ису а и ин кс ек т

ЗОБІ фс) фр у Я». дес пептидні б реа Му фс

Осн р ши Я

МКК й, Кохан, Мен ад, спіралі

Вс вн а сншйско ие ан оажезн, рнінеся - с щі 6)

Фіг. 88

Claims (1)

1. Формула винаходу « Зо ю

   1. Агоніст аполіпопротеїну А-І (АроА-Ї), що включає (Ї) пептид із 14-22 залишків або пептидний аналог, який утворює амфіпатичну с -спіраль в присутності юю ліпідів і який має формулу (1): -- зе 24-Х1-Х2-Хз-Ху-Хв-Хе-Х-Хв-Хо-Х10-Х11-Х12-Х 13-Х 14-Х 15-Х 16-Х 17-Х1в, Де м Хі представлений проліном (Р), аланіном (А), гліцином (С), аспарагіном (М), глутаміном (С) або ЮО-проліном (р); Хо представлений аліфатичною амінокислотою; Хз представлений лейцином (І); « Ху представлений кислою амінокислотою; - т0 Хв представлений лейцином (І) або фенілаланіном (Р); с Хв представлений лейцином (І) або фенілаланіном (Р); "» Х7 представлений основною амінокислотою; " К-4 . Хв представлений кислою амінокислотою; Хо представлений лейцином (І) або триптофаном (М); - 45 Хо представлений лейцином (І) або триптофаном (М);

   Х.1 представлений кислою амінокислотою або аспарагіном (М); - Хі представлений кислою амінокислотою; сл Хіз представлений лейцином (І), триптофаном (МУ) або фенілаланіном (Б); Х14 представлений основною амінокислотою або лейцином (І); 1 20 Хі5 представлений глутаміном (С) або аспарагіном (М); Їх Хв представлений основною амінокислотою;

   Х.17 представлений лейцином (І); Хв представлений основною амінокислотою; 74 представлений НьМ- або ЕС(ОМН-; 72 представлений -С(О)МЕК, -С(О)ОК або -С(О)ОН, або відповідною сіллю; ГФ) кожний К незалежно один від одного представлений -Н, С.-Св-алкілом, Сі-Св-алкенілом, С.--Св-алкінілом, юю Св-Сод-арилом, Св-Сов-алкарилом, 5-20-атомним гетероарилом, 6-26-атомним алкгетероарилом або 1-4-амінокислотним пептидом або пептидним аналогом; кожний знак "-" між залишками Ху, незалежно один від одного означає амідний зв'язок, заміщений амідний 60 зв'язок, ізостер аміду або міметик аміду; або ії) делетован орму структурної формули (І), в якій принаймні один і аж до восьми залишків з Х., Хо, Хз, У форму структур рму. р 15 Ко, Аз Ху, Хв, Хв, Ху, Хв, Хо, Хо, Хі, Хо, Хі1з, Ха, Хв, Хв, Хі17 і Хів делетовані; або (ії) змінену форму структурної формули (І), в якій принаймні один із залишків Х., Хо, Хз, Ху, Хв, Хв, Х7, Хв, Хо, Хіо, Хі4, Х12, Х13, Ха, Хв; Хів, Хі7 або Хв по консервативному типу замінений на інший залишок. бо 2. Агоніст АроА-І за п. 1, який виявляє принаймні 3895-у активність по активації ферменту ІСАТ в р р У ц р У порівнянні з АроА-Ї людини.

   З. Агоніст АроА-! за п. 1, який є зміненою формою структурної формули (1).

   4. Агоніст АроА-І за п. З, в складі якого гідрофобні залишки зафіксовані відповідно до структурної формули (І), а принаймні один нефіксований залишок замінений по консервативному типу на інший залишок.

   5. Агоніст АроА-! за п. 4, в якому: Хі представлений проліном (Р), О-проліном (р), гліцином (5), аспарагіном (М) або аланіном (А); Хо представлений аланіном (А), лейцином (І) або валіном (М); Хз представлений лейцином (І); 70 Хв представлений лейцином (І) або фенілаланіном (Р); Хе представлений лейцином (І) або фенілаланіном (Р); Хо представлений лейцином (І) або триптофаном (М); Хо представлений лейцином (І) або триптофаном (М);

   Х.із представлений лейцином (І), триптофаном (МУ) або фенілаланіном (Р);

   Х.17 представлений лейцином (І); і принаймні один із залишків Ху, Х7, Хв, Х/4, Хі, Ха, Хів, Хв і Хів замінений по консервативному типу на інший залишок.

   6. Агоніст АроА-! за п. З, в якому гідрофільні залишки фіксовані у відповідності зі структурною формулою (І), а принаймні один нефіксований залишок замінений по консервативному типу на інший залишок.

   7. Агоніст АроА-! за п. 6, в якому: Ху представлений аспарагіновою кислотою (0) або глутаміновою кислотою (Е); Х» представлений аргініном (К), лізином (К) або орнітином; Хв представлений аспарагіновою кислотою (0) або глутаміновою кислотою (Е);

   Х.1 представлений аспарагіном (М) або глутаміновою кислотою (Е); сч Хі представлений глутаміновою кислотою (Е);

   Х.14 представлений лізином (К), аргініном (К) або орнітином; і) Х15 представлений глутаміном (С) або аспарагіном (М); Хв представлений лізином (К), аргініном (К) або орнітином; Хв представлений аспарагіном (М) або глутаміном (0); і принаймні, один із залишків Ху, Хо, Хз, Хв, Хв, Хо, «Е

   30. Хо, Хіз і Хі7 замінений по консервативному типу на інший залишок.

   8. Агоніст АроА-! за п. 6, в складі якого Хз представлений лейцином (І), Хо представлений фенілаланіном (Р), о Хо представлений лейцином (І) або триптофаном (МУ), Хо представлений лейцином (І) або триптофаном (ММ)і (З принаймні один із залишків Х., Хо, Хв, Хіз і Х-7 замінений по консервативному типу на інший залишок.

   9. Агоніст АроА-Ї за пп. 5 або 7, в складі якого замінюючий залишок класифікується в ту ж підгрупу, що і -- з5 Залишок, що замінюється. ча

   10. Агоніст АроА-!І за п. 1, що є делетованою формою формули (1).

   11. Агоніст АродА-! за п. 10, в складі якого один виток спіралі пептиду або пептидного аналога делетований.

   12. Агоніст АроА-| за п. 17, що є пептидом, що складається з 18 амінокислот або пептидним аналогом структурної формули (1). «

   13. Агоніст АроА-! за п. 12, в складі якого: з с знак "-" між залишками означає групу -ФЧО)МН-; 714 представлений НоМ-; і з 72 представлений -С(О)ОН або відповідною сіллю.

   14. Агоніст АроА-! за п. 13, в якому: Хі представлений проліном (Р), аланіном (А), гліцином (С), аспарагіном (М) або Ю-проліном (р); -І Хо представлений аланіном (А), валіном (М) або лейцином (І), Хз представлений лейцином (І); - Ху представлений аспарагіновою кислотою (0) або глутаміновою кислотою (Е); с Хв представлений лейцином (І) або фенілаланіном (Р); Хе представлений лейцином (І) або фенілаланіном (Р); о Х» представлений аргініном (К), лізином (К) або орнітином; ї» Хв представлений аспарагіновою кислотою (0) або глутаміновою кислотою (Е); Хо представлений лейцином (І) або триптофаном (М); Хо представлений лейцином (І) або триптофаном (М);

   Х.1 представлений глутаміновою кислотою (Е) або аспарагіном (М); Хі представлений глутаміновою кислотою (Е); Ф) Х.із представлений лейцином (І), триптофаном (МУ) або фенілаланіном (Р); ка Х.14 представлений аргініном (К), лізином (К) або орнітином; Хі5 представлений глутаміном (С) або аспарагіном (М); во Хв представлений аргініном (К), лізином (К) або орнітином;

   Х.17 представлений лейцином (І); і Хв представлений аргініном (К), лізином (К) або орнітином.

   15. Агоніст АроА-! за п. 1, який вибирають з групи, що включає: б5 пептид 191 РУМІПІІ1КЕГІЕБІКОКІК (5ЕО ІО МО 191); й пептид 192 РУГОГЕКЕІТЕБІКОКІЖК /(5БО Ю МО 192); пептид 193 РУМОГЕКЕІТЕБІКОКІ КУ (5ЕО 10 МО 193); пептид 194 РУЇЕІЕКБІТЕБІКОКІ КУ (5ЕО ІЮ МО 194); 70 пептид 195 РУБЕГЕКЕІТЕБІКОКІ КУ (5ЕО І МО 195); пептид 196 РУГОГЕКЕІТЕБІКМКІКУ (5ЕО ІЮ МО 196); у5 пептид 197 РІЛОГЕКЕІТЕБІКОКІ КУ (5ЕО ІЮ МО 197); пептид 198 ОУМГОГЕКЕ ПЕБІКОКІЖК (560 ІЮ МО 198); пептид 199 РУГОГЕКЕГМЕБІКОКІК (5ЄГО І МО 199); пептид 200 МУГОІЕКЕІТЕБІКОКІК /(5ЕО І МО 200); пептид 201 РІПОГЕКЕВІТЕБІКОКІК я (5ЕО ІО МО 201); сч пептид 202 РАТГЕТГЕКОІІЕБІКОКІ ЖК (5БЕО І МО 202); о пептид 203 АМІРІЕКЕІТЕБІКОКІЖЖ /(5ЕО І МО 203); , « пептид 204 РУОЕЕКЕП ЕВ КОКІК (5ЕО ІЮ МО 204); ІС) пептид 205 РУМІОГЕКЕМІ ЕЕ КОКІК" (5ЕО ІЮ МО 205); ІС) пептид 206 РІЛЕІІКЕІТЕБІКОКІ КУ (5ЕО І МО 206); - ч- пептид 207 РУ? ЕБІТКЕП ЕЕГ КОКІ КУ (5ЕО ІЮ МО 207); пептид 208 РАГЕГЕКОПІТЕБІКОКІК Є (5ЕО І МО 208); « пептид 209 РМГОГЕВКЕІІ МЕ ОКІК. (5ЕО І МО 209); но)

   с . ни пептид 210 РУГОГЕКЕІЛЕБІКОКІК (5ЕБО ІО МО 210); -і пептид 211 РУГОГЕКБІТЕЕГОООГОХ /(5БО1І0 МО211); що пептид 212 РМ ЛІ БОБІЛЕЕГОООТ КУ (5ЕО І МО 212); 1 с 50 пептид 213 РАГЕГЕКОІІТЕБЕКОКІК (5ЕО І МО 213); с» пептид 214 РУГОГЕКЕП ЕВ КОКІК (5ЕО 10 МО 214); пептид 215 РМІІЛЕКЕІГЕЕМКОКІК /(5ЕО І МО 215); Ф) юю пептид 229 РУБЕГЕЕКІТЕПІОККІК (5ЕО ІЮ МО 229); 60 пептид 230 РУГОГЕКЕІЛЕКІВОКІК (5ЕО І МО 230); пептид 231 РІЛЕГЕКЕІТЕБІКОКІ КУ (5БЕО І МО 231); або в заблокованих за М-кінцем і (або) С-кінцем, або в незаблокованих по них формах. 65 16. Мультимірний агоніст АроА-І, який виявляє принаймні 38905-у активність по активації ферменту І САТ в порівнянні з АроА-ІЇ людини і який характеризується структурною формулою (І): НнНн-у-ННІ-АС.М-НН, (1) або його фармацевтично прийнятна сіль, де: кожний показник т незалежно один від одного є цілим числом від 0 до 1, п є цілим числом від 0 до 10; кожний НН незалежно представляє пептид або пептидний аналог за п. 1; кожний І. незалежно представляє біфункціональний лінкер; і кожний знак "-" незалежно означає ковалентний зв'язок.

   17. Мультимірний агоніст АроА-! за п. 16, в складі якого біфункціональний лінкер є таким, що розщеплюється. 70 18. Мультимірний агоніст АроА-! за п. 16, в якому п дорівнює 0.

   19. Мультимірний агоніст АроА-! за п. 18, в якому т дорівнює 0.

   20. Мультимірний агоніст АроА-| за п. 16, в якому кожний НН незалежно один від одного є пептидом за п. 13.

   21. Мультимірний агоніст АроА-! за п. 16, в якому кожний НН незалежно один від одного є пептидом за п. 14.

   22. Мультимірний агоніст АроА-| за п. 16, в якому кожний НН незалежно один від одного є пептидом за п. 15.

   23. Мультимірний агоніст АроА-Ї, який виявляє принаймні 3890-у активність по активації ферменту І САТ в порівнянні з АроА-ІЇ людини і який характеризується структурною формулою (ІІІ): Х-Муа-Хуалу (Муь-Хув- ур (11) або його фармацевтично прийнятна сіль, де: кожний Х незалежно представлений НН-( І АНН)-и І -НН, де кожний НН незалежно представлений базовим пептидом формули (І) або його аналогом, або мутованим, укороченим, делетованим по внутрішньому положенню або добудованим варіантом відповідно до описаного в даному тексті; кожний І. незалежно представлений біфункціональним лінкером; кожний т незалежно є цілим числом від 0 до 1; сч кожний п незалежно є цілим числом від 0 до 8; Муа і Му» незалежно є багатофункціональною зв'язуючою складовою, де у а і Ур представляють число і) функціональних груп, відповідно, в Муа і Мур; кожний уд або ур незалежно є цілим числом від З до 8; р є цілим числом від 0 до 7; і «г зо кожний знак "-" незалежно означає ковалентний зв'язок.

   24. Мультимірний агоніст АроА-! за п. 23, в складі якого біфункціональний лінкер є таким, що розщеплюється. о

   25. Мультимірний агоніст АроА-! за п. 23, в якому п дорівнює 0. ю

   26. Мультимірний агоніст АроА-! за п. 25, в якому т дорівнює 0.

   27. Мультимірний агоніст АроА-!| за п. 23, в якому кожний НН незалежно один від одного є пептидом за п. 13. --

   28. Мультимірний агоніст АроА-!| за п. 23, в якому кожний НН незалежно один від одного є пептидом за п. 14. ї-

   29. Мультимірний агоніст АроА-!| за п. 23, в якому кожний НН незалежно один від одного є пептидом за п. 15.

   30. Мультимірний агоніст АроА-Ї, який виявляє принаймні 3895-у активність по активації ферменту І САТ в порівнянні з АроА-ІЇ людини і який характеризується формулою (ІМ) або (М): х ІМ « А о с НМ (в) ;» о в) е о

   - в. М х Нн - о 1 о АФ їх м х або Ф) іме) 60 б5 х У нео щу (9) я іо) н М М х В М в Ї (9) / Ге! (в) Мн о) Мн о ви х х або його фармацевтично прийнятна сіль, де: кожний Х незалежно представлений НН-( Ця -НН)-И І -НН, де кожний НН незалежно представлений пептидом або пептидним аналогом за п. 1; кожний І. незалежно представлений біфункціональним лінкером; кожний п незалежно є цілим числом від 0 до 1; кожний т незалежно є цілим числом від 0 до 8; Кі є -ОК або -МЕЕ; і кожний К незалежно представлений Н, С.-Св-алкілом, Сі-Св-алкенілом, Сі-Св-алкінілом, Св-Соо-арилом, єс Св-Сов-алкарилом, 5-20-атомним гетероарилом або 6-26-атомним алкгетероарилом.

   31. Мультимірний агоніст АроА-! за п. ЗО, в складі якого біфункціональний лінкер є таким, що розщеплюється. і9)

   32. Мультимірний агоніст АроА-! за п. ЗО, в якому п дорівнює 0.

   33. Мультимірний агоніст АроА-! за п. 32, в якому т дорівнює 0.

   34. Мультимірний агоніст АроА-! за п. 30, в якому кожний НН незалежно один від одного є пептидом за п. 13. «І

   35. Мультимірний агоніст АроА-! за п. 30, в якому кожний НН незалежно один від одного є пептидом за п. 14.

   36. Мультимірний агоніст АроА-! за п. 30, в якому кожний НН незалежно один від одного є пептидом за п. 15. о

   37. Комплекс агоніста АроА-Ї і ліпіду, що включає агоніст АроА-Ї і ліпід, при тому, що агоніст АроА-і є пептидом або пептидним аналогом за п. 1, мультимірним агоністом АроА-Ї за п. 16, мультимірним агоністом АроА-! за п. 23 або мультимірним агоністом АроА-! за п. 30. --

   38. Комплекс агоніста АроА-! і ліпіду за п. 37, в якому агоніст АроА-!| є пептидом за п. 12. -

   39. Комплекс агоніста АроА-! і ліпіду за п. 37, в якому агоніст АроА-!| є пептидом за п. 13.

   40. Комплекс агоніста АроА-! і ліпіду за п. 37, в якому агоніст АродА-| є пептидом за п. 14.

   41. Комплекс агоніста АроА-! і ліпіду за п. 37, в якому агоніст АродА-| є пептидом за п. 15. «

   42. Комплекс агоніста АроА-! і ліпіду за п. 37, в якому ліпідом є сфінгомієлин.

   43. Комплекс агоніста АроА-! і ліпіду за п. 37, який знаходиться в формі ліофілізованого порошку. - с 44. Комплекс агоніста АроА-! і ліпіду за п. 37, який знаходиться в формі розчину. ц 45. Фармацевтична композиція, що містить агоніст АроА-І і фармацевтично прийнятний носій, наповнювач "» або розчинник, при тому, що агоніст АроА-І є пептидом або пептидним аналогом за п. 1, мультимірним агоністом АроА-! за п. 16, мультимірним агоністом АроА-! за п. 23 або мультимірним агоністом АроА-! за п. 30.

   46. Фармацевтична композиція за п. 45, в якій агоніст АроА-!| є пептидом за п. 12. -І 47. Фармацевтична композиція за п. 45, в якій агоніст АроА-!| є пептидом за п. 13. з 48. Фармацевтична композиція за п. 45, в якій агоніст АроА-!| є пептидом за п. 14.

   49. Фармацевтична композиція за п. 45, в якій агоніст АроА-!| є пептидом за п. 15. ос 50. Фармацевтична композиція за будь-яким з пп. 45 - 49, в якій агоніст АроА-І знаходиться в формі Комплексу з ліпідом, при тому, що згаданий комплекс складається з агоніста АроА-! і ліпіду. і-й 51. Фармацевтична композиція за п. 50, в якій комплекс агоніста АроА-ІЇ і ліпіду знаходиться в формі Чл» ліофілизованого порошку.

   52. Спосіб лікування суб'єкта, що страждає на захворювання, пов'язане з дисліпідемією, який відрізняється тим, що згаданий спосіб включає етап введення такому пацієнту ефективної кількості агоніста АроА-! за п. 1.

   53. Спосіб за п. 52, який відрізняється тим, що згаданим суб'єктом є людина.

   54. Спосіб за п. 52, який відрізняється тим, що згаданому суб'єкту вводять від приблизно 0,5 мг/кг до Ф, приблизно 100 мг/кг агоніста АродА-Ї. ко 55. Спосіб за п. 52, який відрізняється тим, що агоніст АроА-І знаходиться в формі фармацевтичної композиції, при тому, що згадана композиція містить агоніст АроА-І і фармацевтично прийнятний носій, бо наповнювач або розчинник.

   56. Спосіб за п. 52, який відрізняється тим, що агоніст АроА-І знаходиться в формі комплексу агоніста АроА-! і ліпіду, при тому, що згаданий комплекс складається з агоніста АроА-! і ліпіду.

   57. Спосіб за п. 52, який відрізняється тим, що пов'язаним з дисліпідемією захворюванням є гіперхолестеринемія. 65 58. Спосіб за п. 52, який відрізняється тим, що пов'язаним з дисліпідемією захворюванням є серцево-судинне захворювання.

   59. Спосіб за п. 52, який відрізняється тим, що пов'язаним з дисліпідемією захворюванням є атеросклероз.

   60. Спосіб за п. 52, який відрізняється тим, що пов'язаним з дисліпідемією захворюванням є рестеноз.

   61. Спосіб за п. 52, який відрізняється тим, що пов'язаним з дисліпідемією захворюванням є дефіцит НОЇ або Арод-Ї.

   62. Спосіб за п. 52, який відрізняється тим, що пов'язаним з дисліпідемією захворюванням є гіпертригліцеридемія.

   63. Спосіб за п. 52, який відрізняється тим, що пов'язаним з дисліпідемією захворюванням є метаболічний синдром. 70 64. Спосіб лікування пацієнта, що страждає від септичного шоку, який відрізняється тим, що згаданий спосіб включає етап введення такому суб'єкту ефективної кількості агоніста АроА-! за п. 1.

   65. Спосіб за п. 64, який відрізняється тим, що згаданим суб'єктом є людина.

   66. Спосіб за п. 64, який відрізняється тим, що згаданому суб'єкту вводять від приблизно 0,5 мг/кг до приблизно 100 мг/кг агоніста АродА-Ї.

   0. й й й 0. Офіційний бюлетень "Промислоава власність". Книга 1 "Винаходи, корисні моделі, топографії інтегральних мікросхем", 2004, М 12, 15.12.2004. Державний департамент інтелектуальної власності Міністерства освіти і науки України. се що о «І І в) І в) «-

   м. -

   с . а -І - 1 1 ГТ» ко бо б5