UA71551C2 - Formation of peptide/lipid vesicles and complexes through co-lyophilization of peptides - Google Patents
Formation of peptide/lipid vesicles and complexes through co-lyophilization of peptides Download PDFInfo
- Publication number
- UA71551C2 UA71551C2 UA2000042492A UA2000042492A UA71551C2 UA 71551 C2 UA71551 C2 UA 71551C2 UA 2000042492 A UA2000042492 A UA 2000042492A UA 2000042492 A UA2000042492 A UA 2000042492A UA 71551 C2 UA71551 C2 UA 71551C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- lipid
- peptide
- item
- specified
- solution
- Prior art date
Links
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 title claims abstract description 184
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 171
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 30
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 title claims abstract description 29
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 title claims abstract description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 46
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 239000003599 detergent Substances 0.000 claims abstract description 15
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 106
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 54
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 51
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 claims description 43
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 claims description 32
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 claims description 32
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 22
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 20
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 12
- 101800002011 Amphipathic peptide Proteins 0.000 claims description 11
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 11
- 239000008096 xylene Substances 0.000 claims description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical group CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 claims description 9
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 claims description 9
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 claims description 7
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- -1 hexyl ester Chemical class 0.000 claims description 7
- 102000019758 lipid binding proteins Human genes 0.000 claims description 7
- 101710129138 ATP synthase subunit 9, mitochondrial Proteins 0.000 claims description 6
- 101710168506 ATP synthase subunit C, plastid Proteins 0.000 claims description 6
- 101710114069 ATP synthase subunit c Proteins 0.000 claims description 6
- 101710197943 ATP synthase subunit c, chloroplastic Proteins 0.000 claims description 6
- 101710187091 ATP synthase subunit c, sodium ion specific Proteins 0.000 claims description 6
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims description 6
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 claims description 6
- CITHEXJVPOWHKC-UUWRZZSWSA-N 1,2-di-O-myristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC CITHEXJVPOWHKC-UUWRZZSWSA-N 0.000 claims description 4
- PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 0.000 claims description 4
- NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 0.000 claims description 4
- IJFVSSZAOYLHEE-UHFFFAOYSA-N 2,3-di(dodecanoyloxy)propyl 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCC IJFVSSZAOYLHEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 102000013918 Apolipoproteins E Human genes 0.000 claims description 4
- 108010025628 Apolipoproteins E Proteins 0.000 claims description 4
- LEBBDRXHHNYZIA-LDUWYPJVSA-N [(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl] n-[(z)-1,3-dihydroxyoctadec-4-en-2-yl]carbamate Chemical compound CCCCCCCCCCCCC\C=C/C(O)C(CO)NC(=O)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LEBBDRXHHNYZIA-LDUWYPJVSA-N 0.000 claims description 4
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 claims description 4
- 229930183167 cerebroside Natural products 0.000 claims description 4
- 150000001784 cerebrosides Chemical class 0.000 claims description 4
- 229960003724 dimyristoylphosphatidylcholine Drugs 0.000 claims description 4
- 150000002270 gangliosides Chemical class 0.000 claims description 4
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000036571 hydration Effects 0.000 claims description 2
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 claims description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims 5
- RFVFQQWKPSOBED-PSXMRANNSA-N 1-myristoyl-2-palmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)COC(=O)CCCCCCCCCCCCC RFVFQQWKPSOBED-PSXMRANNSA-N 0.000 claims 3
- HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 3-[3-[3,5-dihydroxy-6-methyl-4-(3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]oxydecanoyloxy]decanoic acid;hydrate Chemical compound O.OC1C(OC(CC(=O)OC(CCCCCCC)CC(O)=O)CCCCCCC)OC(C)C(O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C)O1 HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 102000009081 Apolipoprotein A-II Human genes 0.000 claims 3
- 108010087614 Apolipoprotein A-II Proteins 0.000 claims 3
- JLPULHDHAOZNQI-JLOPVYAASA-N [(2r)-3-hexadecanoyloxy-2-[(9e,12e)-octadeca-9,12-dienoyl]oxypropyl] 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC JLPULHDHAOZNQI-JLOPVYAASA-N 0.000 claims 3
- 150000001841 cholesterols Chemical class 0.000 claims 3
- 150000008105 phosphatidylcholines Chemical class 0.000 claims 3
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 claims 3
- 229940067605 phosphatidylethanolamines Drugs 0.000 claims 3
- 150000003905 phosphatidylinositols Chemical class 0.000 claims 3
- 229940067626 phosphatidylinositols Drugs 0.000 claims 3
- 150000008106 phosphatidylserines Chemical class 0.000 claims 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims 3
- 150000003408 sphingolipids Chemical class 0.000 claims 3
- BPIUIOXAFBGMNB-UHFFFAOYSA-N 1-hexoxyhexane Chemical compound CCCCCCOCCCCCC BPIUIOXAFBGMNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims 2
- 239000003791 organic solvent mixture Substances 0.000 claims 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims 2
- PZNPLUBHRSSFHT-RRHRGVEJSA-N 1-hexadecanoyl-2-octadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PZNPLUBHRSSFHT-RRHRGVEJSA-N 0.000 claims 1
- ASWBNKHCZGQVJV-HSZRJFAPSA-N 1-hexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C ASWBNKHCZGQVJV-HSZRJFAPSA-N 0.000 claims 1
- 102100039998 Apolipoprotein C-II Human genes 0.000 claims 1
- 108010024284 Apolipoprotein C-II Proteins 0.000 claims 1
- ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N Boron Chemical compound [B] ZOXJGFHDIHLPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229910052796 boron Inorganic materials 0.000 claims 1
- 230000004576 lipid-binding Effects 0.000 claims 1
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 53
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 26
- OBMZMSLWNNWEJA-XNCRXQDQSA-N C1=CC=2C(C[C@@H]3NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](NC(=O)N(CC#CCN(CCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](CC4=CC=CC=C4)NC3=O)C(=O)N)CC=C)NC(=O)[C@@H](N)C)CC3=CNC4=C3C=CC=C4)C)=CNC=2C=C1 Chemical compound C1=CC=2C(C[C@@H]3NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](NC(=O)N(CC#CCN(CCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](CC4=CC=CC=C4)NC3=O)C(=O)N)CC=C)NC(=O)[C@@H](N)C)CC3=CNC4=C3C=CC=C4)C)=CNC=2C=C1 OBMZMSLWNNWEJA-XNCRXQDQSA-N 0.000 description 24
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 20
- 101710176384 Peptide 1 Proteins 0.000 description 18
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 18
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 18
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 16
- 102100021546 60S ribosomal protein L10 Human genes 0.000 description 11
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 11
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 10
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- 239000000232 Lipid Bilayer Substances 0.000 description 9
- KNQLISSGRPNPCR-UHFFFAOYSA-N n-(dipyridin-2-ylmethylideneamino)furan-2-carboxamide Chemical compound C=1C=COC=1C(=O)NN=C(C=1N=CC=CC=1)C1=CC=CC=N1 KNQLISSGRPNPCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 6
- 102000005666 Apolipoprotein A-I Human genes 0.000 description 5
- 108010059886 Apolipoprotein A-I Proteins 0.000 description 5
- 102000007592 Apolipoproteins Human genes 0.000 description 5
- 108010071619 Apolipoproteins Proteins 0.000 description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 5
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 5
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 5
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 5
- 239000002691 unilamellar liposome Substances 0.000 description 5
- 102000006410 Apoproteins Human genes 0.000 description 4
- 108010083590 Apoproteins Proteins 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 4
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 239000012907 medicinal substance Substances 0.000 description 4
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 4
- 208000032928 Dyslipidaemia Diseases 0.000 description 3
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 3
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 3
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 3
- 238000001641 gel filtration chromatography Methods 0.000 description 3
- 208000006575 hypertriglyceridemia Diseases 0.000 description 3
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC KILNVBDSWZSGLL-KXQOOQHDSA-N 0.000 description 2
- FTOAOBMCPZCFFF-UHFFFAOYSA-N 5,5-diethylbarbituric acid Chemical compound CCC1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O FTOAOBMCPZCFFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000018619 Apolipoproteins A Human genes 0.000 description 2
- 108010027004 Apolipoproteins A Proteins 0.000 description 2
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 2
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 2
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 2
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 241000714177 Murine leukemia virus Species 0.000 description 2
- 101100379247 Salmo trutta apoa1 gene Proteins 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 229940099352 cholate Drugs 0.000 description 2
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 description 2
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 2
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 2
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 2
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 2
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 2
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 2
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 2
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 2
- WKJDWDLHIOUPPL-JSOSNVBQSA-N (2s)-2-amino-3-({[(2r)-2,3-bis(tetradecanoyloxy)propoxy](hydroxy)phosphoryl}oxy)propanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC WKJDWDLHIOUPPL-JSOSNVBQSA-N 0.000 description 1
- TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC TZCPCKNHXULUIY-RGULYWFUSA-N 0.000 description 1
- OZSITQMWYBNPMW-GDLZYMKVSA-N 1,2-ditetradecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC OZSITQMWYBNPMW-GDLZYMKVSA-N 0.000 description 1
- BIABMEZBCHDPBV-MPQUPPDSSA-N 1,2-palmitoyl-sn-glycero-3-phospho-(1'-sn-glycerol) Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@@H](O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC BIABMEZBCHDPBV-MPQUPPDSSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXFQFBNBSPQBJW-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-methylpropane-1,3-diol Chemical compound OCC(N)(C)CO UXFQFBNBSPQBJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IVLXQGJVBGMLRR-UHFFFAOYSA-N 2-aminoacetic acid;hydron;chloride Chemical compound Cl.NCC(O)=O IVLXQGJVBGMLRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NEZDNQCXEZDCBI-UHFFFAOYSA-N 2-azaniumylethyl 2,3-di(tetradecanoyloxy)propyl phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC NEZDNQCXEZDCBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- KLFKZIQAIPDJCW-HTIIIDOHSA-N Dipalmitoylphosphatidylserine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC KLFKZIQAIPDJCW-HTIIIDOHSA-N 0.000 description 1
- 241000402754 Erythranthe moschata Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylserin Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(=O)OCC(O)CO ZWZWYGMENQVNFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- FVJZSBGHRPJMMA-IOLBBIBUSA-N PG(18:0/18:0) Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@@H](O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC FVJZSBGHRPJMMA-IOLBBIBUSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010080283 Pre-beta High-Density Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 206010039424 Salivary hypersecretion Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- DSNRWDQKZIEDDB-GCMPNPAFSA-N [(2r)-3-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-2-[(z)-octadec-9-enoyl]oxypropyl] (z)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC DSNRWDQKZIEDDB-GCMPNPAFSA-N 0.000 description 1
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 description 1
- YAWNFGAHEUCLNJ-UHFFFAOYSA-N [B].OB(O)O Chemical compound [B].OB(O)O YAWNFGAHEUCLNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 208000011454 apolipoprotein A-I deficiency Diseases 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 229960002319 barbital Drugs 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 229940088623 biologically active substance Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000011278 co-treatment Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 239000012611 container material Substances 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940009976 deoxycholate Drugs 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 1
- OGGXGZAMXPVRFZ-UHFFFAOYSA-M dimethylarsinate Chemical compound C[As](C)([O-])=O OGGXGZAMXPVRFZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960005160 dimyristoylphosphatidylglycerol Drugs 0.000 description 1
- FRKBLBQTSTUKOV-UHFFFAOYSA-N diphosphatidyl glycerol Natural products OP(O)(=O)OCC(OP(O)(O)=O)COP(O)(O)=O FRKBLBQTSTUKOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- BPHQZTVXXXJVHI-AJQTZOPKSA-N ditetradecanoyl phosphatidylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@@H](O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC BPHQZTVXXXJVHI-AJQTZOPKSA-N 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001952 enzyme assay Methods 0.000 description 1
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 1
- 150000002190 fatty acyls Chemical group 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000007792 gaseous phase Substances 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000002433 hydrophilic molecules Chemical class 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 108091016323 lipid binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 239000012454 non-polar solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 208000026451 salivation Diseases 0.000 description 1
- 238000005185 salting out Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012798 spherical particle Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000008227 sterile water for injection Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003325 tomography Methods 0.000 description 1
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 239000012855 volatile organic compound Substances 0.000 description 1
- 210000004916 vomit Anatomy 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
- A61K9/1275—Lipoproteins; Chylomicrons; Artificial HDL, LDL, VLDL, protein-free species thereof; Precursors thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
- A61K9/1277—Processes for preparing; Proliposomes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/775—Apolipopeptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/107—Emulsions ; Emulsion preconcentrates; Micelles
- A61K9/1075—Microemulsions or submicron emulsions; Preconcentrates or solids thereof; Micelles, e.g. made of phospholipids or block copolymers
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Obesity (AREA)
- Hematology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
Опис винаходу
Цей винахід стосується утворення пептид/ліпідних везикул і комплексів за допомогою спільної ліофілізації 2 пептидів, переважно тих, які здатні приймати амфіпатичну конформацію альфа-спіралі, і одного або більше ліпідів. Можна ліофілізувати єдиний розчин, який солюбілізує як пептиди, так і ліпіди, або два окремих розчини. Використовують способи отримання стабільних пептид/ліпідних везикул і комплексів, включаючи, але не обмежуючись ними, міцелярні, сферичні і дископодібні комплекси в препаратах великої маси і меншого розміру, що може бути застосовано для дозованих форм. 70 Ліпосоми являють собою везикули, утворені, щонайменше, однією ліпідною двошаровою мембраною, що містять в собі водне ядро. Звичайно фосфоліпіди входять в склад ліпідного бішару, але бішар може бути утворений і іншими ліпідуми. Водний розчин в ліпосомі називається "захопленим об'ємом".
Ліпосоми, серед інших способів застосування, були розроблені як носії для доставки лікарських речовин, косметичні препарати, біологічно активні речовини. Ліпідний бішар інкапсулює лікарську речовину, косметичний 12 препарат, біологічно активну сполуку і тому подібне в захопленому об'ємі ліпосоми, і лікарська речовина викидається з ліпосомного ядра, коли ліпідний бішар приходить в контакт з мембраною поверхні клітини.
Ліпосома виділяє свій вміст в клітку за допомогою ліпідного обміну, злиття, ендоцитоза або адсорбції. О8іго ебї аі,, 1989, Ат. У. Новзр. РІапт. 46: 1576. Альтернативно, лікарська речовина, косметична речовина, біологічно активна речовина і тому подібне можуть бути пов'язані з ліпідним бішаром мембрани або включені в ліпідну бішарову мембрану везикули.
У доповнення до везикул, комплекси, що містять ліпід були використані для доставки речовин в дисперсній формі. Наприклад, багато які дослідники виявили, що корисно виготовляти частки або комплекси що відтворюються, схожі на ліпопротеїн, які мають схожий розмір і щільність, як у часток ліпопротеїну високої щільності (ЛИВЩ). Ці комплекси, що відтворюються звичайно складаються з очищених апопротеїнів (звичайно с апопротеїну А-Ї) і фосфоліпідів, таких як фосфатіділхолін. Іноді також включається неетерифікований Ге) холестерин. Найбільш загальноприйнятими способами отримання цих часток є: (1) спільна обробка складових ультразвуком, або в ультразвуковій бані або за допомогою ультразвукового зонда, (2) спонтанна взаємодія білкової складової із заздалегідь сформованими ліпідними везикулами, (3) опосередковане детергентом відтворення з подальшим видаленням детергенту шляхом діалізу. Щдопаз, 1986, Мей. іп Епгутої. 128: 553-582, - | |пвеї а!., 1993, Віоспітіса еї Віорпузіса Асіа, 1151: 137-142; ВгоціПеце 8 Апапіпагатаійан, 1995, Віоспітіса ех о
Віорпузіса Асіа, 1256: 103-129; допавз, 1992, Бігисішге 5 ЕРипсіоп ої Ароргоїеіпв, Спаріег 8:217-250. Схожі комплекси були також сформовані шляхом заміни апопротеїнових компонентів амфіпатичними утворюючими о спіраль пептидами. На жаль, кожний з цих способів представляє серйозні проблеми для утворення великих «-- кількостей чистих комплексів на основі помірної ціни і ефективності. Крім того, ні в одній з цих публікацій 39 не описана спільна ліофілізація (соліофілізація) пептидів/ або пептидних аналогів, які здатні приймати в конформацію амфіпатичної альфа-спіралі, і ліпіду.
Відомий ряд технологій отримання ліпідних везикул і комплексів. Везикули, або ліпосоми, були отримані при використанні ряду методик з утворенням різних типів везикул. Різні типи ліпосом включають: багатошарові « везикули, невеликі одношарові везикули і великі одношарові везикули. З 50 Гідратування фосфоліпідів (або інших ліпідів) водним розчином може також приводити до диспергування с ліпідів і спонтанному утворенню багатошарових везикул (МОСВ"). МОСВ є ліпосомою з багатьма ліпідними
Із» бішарами, що оточують центральне водне ядро. Ліпосоми цих типів більше, ніж невеликі одношарові везикули (НОВ) і можуть бути діаметром 350-400нм. МОСВ були спочатку отримані шляхом солюбілізації ліпідів в хлороформі в круглодонній колбі і випаровування хлороформу доти, доки не утворювався тонкий шар на стінці колби. Додавали водний розчин, і ліпідному шару давали регідратуватися. Коли рідину в колбі примушували і обертатися або струшували, утворювалися везикули. ЮОеатег еї аї!., 1983, іп ІГірозотез (Овіго, ед,.), Магсеї - ОекККег, Іпс. Мем Могк (сйіпд Ваподпат еї аї., 1965, 9. Мої. Віої. 13:238). доппвоп еї аїЇ. потім повідомили, що цей спосіб дозволяє отримати також і одношарові везикули. доппзоп еї аї., 1971, Віоспіт. Віорпуз. Асіа
Мн 233: 820. сл 20 Невеликі одношарові везикули (НОВ) являють собою ліпосоми з одним ліпідним бішаром, який оточує водне ядро. У залежності від способу, використаного для отримання НОВ, вони можуть мінятися по розміру від 25 до та 110нм по діаметру. Перші НОВ були отримані шляхом висушування фосфоліпідного препарату в хлороформі в атмосфері азоту, додання водного шару до отримання концентрації ліпіду мілімолярного порядку і обробки розчину ультразвуком при 457С до прозорості. Оеатег еї аї., 1983, іп І ірозотевз (Овіго, ед.). Магсе! Оеккег, 22 |пс. Мем/ МогК. НОВ, отримані таким чином, представляли ліпосоми діаметром в інтервалі 25-5О0нм.
ГФ) Іншим способом виготовлення НОВ є швидка інжекція етанол/ліпідного розчину у водний розчин, який повинен інкапсулюватися. Юеапег еї аї., 1983, іп Іірозотез (Овіго, ед.), Магсе! ЮОекКег, Іпс. Мем/ ХогКк (сйпа о Ваїлті еї аі., 1973, Віоспіт. Віорпуз. Асіа 298:1015). НОВ, отримані цим способом, мають розміри в інтервалі 30-110нм по діаметру. 60 НОВ можуть бути також отримані шляхом пропущення багатошарових везикул через Егепсп прес чотири рази при 1,38.10Зн/м2 (20000фунт/дюйм?). НОВ, що отримуються будуть мати розміри в інтервалі від ЗО до БОнм по діаметру. ЮОеатег еї аї.,, 1983, іп Іірозотевз (Овіго, ейд.), МагсеІ ЮОекККег, Іпс. Мем МЖогКк (сйіпуд Вагепроі2 еїгаї., 1979, РЕВ5 І еЧЦегз 99:210).
Багатошарові і одношарові фосфоліпідні везикули можуть бути також сформовані шляхом екструзії водних бо препаратів фосфоліпідів при високому тиску через дрібнопористі мембрани (Норе еї аї!., 1996, Спетізігу апа
Рпувзісв ої І іріав, 40: 89-107).
Великі одношарові везикули (ВОВ) схожі на НОВ тим, що вони мають один ліпідний бішар, який оточує центральне водне ядро, але ВОВ значно більше НОВ. У залежності від складаючих їх частин і способу,
Використаного для їх отримання, ВОВ можуть мінятися по розміру від 50 до 100Онм в діаметрі. Огеатег еї аї., 1983, іп І ірозотез (Озіго, ейд.). Магсе! ОеккКег, Іпс. Мем/ МХогк. ВОВ звичайно отримують, використовуючи один з трьох способів: розбавлення детергентом, випаровування із звертанням фази, та інфузії.
При методиці розбавлення детергентом, використовуються розчини детергентів, таких як холат, дезоксихолат, октилглікозид, гептилглікозид і тритон Х-100, для формування міцел з ліпідного препарату. 70 Розчин потім діалізують для видалення детергенту, що дає в результаті утворення ліпосом, Оеатег еї а!., 1983, іп Пірозотез (Овіго, ей.). Магсе! ЮОеккКег, Іпс. Мем Могк. Цей спосіб вимагає великих витрат часу, і видалення детергенту звичайно є неповним. Присутність детергенту в кінцевому препараті може приводити до деякої токсичності ліпосомного препарату і/або модифікації фізико-хімічних властивостей ліпосомного препарату.
По методиці випаровування із звертанням фази ліпід солюбілізують у водних-неполярних розчинах з 7/5 формуванням звернених міцел. Неполярний розчинник випаровують, і міцели доводять до утворення ВОВ. Цей спосіб звичайно вимагає великої кількості ліпіду.
За інфузійним методом солюбілізований в неполярному розчині ліпід інжектують у водний розчин, який треба інкапсулювати. По мірі того, як неполярний розчин випаровується, ліпіди збираються на поверхні розділу газоподібної і водної фаз. Ліпідні плівки утворять ВОВ і оліголамелярні ліпосоми у вигляді газових пухирців 2о по водному розчину. Розмір ліпосом створюється фільтруванням. Оватег еї аї., 1983, іп Прозотев (Овіго, еад.).
Магсе! ЮОекККег, Іпс. Мем МогкК (цитування Юеатег еї аї., 1976, Віоспіт. Віорпуз. Асіа 443:629 і Зспіегеп еї аІ., 1978, Віоспіт. Віорпуз. Асіа 542:137). Інфузіонні процедури вимагають досить високої температури для інфузії і можуть давати відносно низьку ефективність інкапсулювання. ЮОеатег еї аї., 1983, іп І ірозотев (Овіго, ед.), Магсеї ОеккКег, Іпс. Мем/ Могк. сч
Метою досліджень по ліпосомам була розробка ліпосомних препаратів, які можна зберігати протягом великих періодів часу до використання. Наприклад, в патенті США Мо4229360, Зсппеїдег еї а!., розкривається спосіб о дегідратування ліпосом шляхом додання гідрофільної сполуки до колоїдної дисперсії ліпосом у водній рідині і дегідратування розчину, переважно шляхом ліофілізації. Прикладами гідрофільних сполук є гідрофільні полімери з високою молекулярною вагою або сполуки з низькою молекулярною вагою, такі як сахароза. «- зо У патенті США Мо4411894, Зспгапк еї аІ., розкривається застосування високих концентрацій сахарози в препаратах ліпосом, що обробляються ультразвуком. Ліпосоми містять розчинні в жирі продукти в захопленому юю об'ємі, хоча препарати можуть бути ліофілізовані, за цим способом не можна було запобігти втратам значної ю кількості вмісту, що захоплюється, незважаючи на високі концентрації сахарози.
Стожме еї аіЇ., в патенті США. Мо4857319 розкрив застосування дисахаридів, таких як сахароза, мальтоза, -
Зв лактоза і трегалоза, для стабілізації ліпосом, коли ліпосоми заморожують і сушать. Кількість дисахариду по ї- відношенню до змісту ліпідного компонента (вага/вага) знаходиться в інтервалі від 0,111 до 4:11. Стожме досяг більшого успіху в збереженні цілісності ліпосом, використовуючи цей спосіб, ніж отриманий за способом, описаному ЗспгапкК в патенті США Мо4441894.
Уапоїй еї аі., в патенті США Мо4880635 розкриває спосіб дегідратування ліпосом, за якого ліпосоми « Ліофілізують в присутності захищаючих цукрів, таких як трегалоза і сахароза, переважно, як із зовнішньої, так з с і з внутрішньої сторони ліпідного бішару. По методу Уапоїй еї а). залишається досить води, так що регідратація висушених ліпосом дає ліпосоми з істотним структурним збереженням. ;» Однак в техніці існує потреба в простому і ефективному по вартості способі отримання ліофілізованих пептид/ліпідних комплексів, які можуть бути потім регідратовані. Спосіб даного винаходу дає пептид/ліпідні буміші в стабільному ліофілізованому порошку, які можна зберігати, використовувати у вигляді порошку, або -І використати після регідратації для формування пептид/ліпідних комплексів.
Цей винахід представляє спосіб отримання пептид- або протеїн-(фосфо)ліпідних комплексів або везикул, які - можуть мати властивості, схожі з властивостями ліпопротеїнів високої щільності (ЛІИВЩ). При цьому способі с використовується система розчинників, в якій, щонайменше, один пептид солюбілізується в одному розчині, і, щонайменше, один ліпід солюбілізується в іншому розчині. Два розчини вибираються так, що вони є такими, що о змішуються один з одним. Потім розчини з'єднують і отриманий розчин ліофілізують.
Кк Цей спосіб може бути також здійснений за допомогою другого типу системи розчинників, що складається з розчину, в якому можуть бути солюбілізовані як білок або пептид, так і ліпід. Цей розчин може бути єдиним розчином, або може бути композитним розчином, отриманим шляхом об'єднання двох або більше розчинів ов перед доданням пептидів і ліпідів. Пептиди і ліпіди солюбілізують в розчині або композитному розчині і потім пептид/ліпідний розчин ліофілізують.
Ф) Переважно, пептиди даного винаходу є пептидами, які здатні приймати конформацію амфіпатичної спіралі. В ка одному з конкретних втілень цього винаходу пептид є білком, зв'язуючим ліпід. В іншому втіленні використовуються пептидні аналоги АроА-Ї, АроА-ЙЇИ, АроА-ІМ, Арос-І, Арос-|І, Арос-І, АроЕ, інші бо аполіпопротеїнові аналоги і тому подібне замість або в поєднанні з пептидами. В іншому конкретному втіленні цей спосіб використовується для отримання АроА! аналога/фосфо)ліпідних комплексів, схожих на ЛПЗП.
АроА|/ліпідні комплекси застосовні для лікування порушень, пов'язаних з дисліпопротеїнеміями, включаючи, але не обмежуючись ними, гіперхолестеринемію, гіпертригліцеридемію, низький рівень ЛПВЩ і дефіцит аполіпопротеїну А-І, септичного шоку, для діагностичних досліджень іп міго як маркери для популяцій з ЛИВЩ і 65 для використання при технологіях з отриманням оптичного зображення.
Спосіб цього винаходу робить можливим отримання пептид/ліпідних комплексів для парентерального введення, включаючи, але не обмежуючись цим, внутрішньовенні, внутрішньочеревні, підшкірні, внутрішньом'язові і болюсні ін'єкції тваринам і людям. Крім того, пептид/ліпідні комплекси можуть бути також виготовлені у вигляді лікарських форм для перорального, ректального введення, введення через слизову оболонку (наприклад, в порожнині рота) або місцевого застосування у тварин і людей, або для експериментів іп міго.
Спосіб може використовуватися для великомасштабного виробництва комплексів амфіпатичного пептида/фосфоліпіду, комплексів зв'язуючого ліпід білка/фосфоліпіду і/або комплексів пептидного аналога
АроАї/фосфоліпіду. Ліофілізований матеріал може бути отриманий для об'ємних препаратів або, альтернативно, 7/0 Змішаний пептид/ліпідний розчин може бути розділений по невеликих контейнерах (наприклад, для одиничних доз) перед ліофілізацією, і такі препарати з невеликою кількістю можуть бути отримані у вигляді стерильних одиничних дозованих лікарських форм.
Ліофілізований порошок, отриманий за способом цього винаходу, може бути регідратований до вільного від часток стерильного розчину безпосередньо перед ін'єкцією, або альтернативно, з ліофілізованого порошку може 7/5 бути виготовлена тверда дозована лікарська форма, і застосовуватися безпосередньо.
Цей спосіб може бути також придатний для зберігання сполук, які в іншому випадку можуть бути нестабільні або нерозчинні у відсутність ліпідів.
Спосіб можна використати для отримання лікарських форм продуктів для лікування або профілактики захворювань у людей, включаючи таке застосування, як спільну присутність антигенів у вакцинах, лікування або го профілактику дисліпопротеїнемі, включаючи, але не обмежуючись ними, гіперхолестеринемію, гіпертригліцеридемію, низький рівень ЛПВЩ і дефіцит аполіпопротеїну А-ЇІ, серцево-судинні захворювання, такі як атеросклероз, септичний шок або інфекційні захворювання.
Спосіб може використовуватися для отримання комплексів, які могли б використовуватися як носії для ліків, як переносників (для доставки ліків, ДНК, генів), наприклад, в печінку або екстрапечінкові клітини, або як сч засоби для захоплення і виведення токсинів (наприклад, пестицидів, ЛПС і т.д.).
Так, як використано тут, "система розчинників" стосується одного або більше розчинників, які здатні до (8) солюбілізації пептидів і/або ліпідів і, якщо їх більше за один, які змішуються один з одним.
Так, як використано тут, під "пептид/ліпідними комплексами" мається на увазі агрегація ліпідних фрагментів і пептидів, утворюючих частки в межах розмірів ліпопротеїнів високої щільності (ЛПВЩ). «- зо Так, як використано тут, "спільно ліофілізований" стосується ліофілізації, висушуванню із замороженого стану або вакуумного висушування більш, ніж однієї сполуки (наприклад, пептиду, білка, ліпіду, фосфоліпіду) в о розчині в одній і тій же судині. Наприклад, ліпідний розчин може бути об'єднаний з пептидним розчином в одній ю і тій же судині, і отриману комбінацію розчинів ліофілізують разом, тим самим ліофілізуючі пептиди і ліпіди одночасно. --
Так, як використано тут, "амфіпатичний пептид" або "амфіпатичні альфа-спіральні пептиди" означає пептиди, ї- які здатні приймати амфіпатичну або амфіпатичну спіральну конформацію, відповідно. Амфіпатична альфа спіраль є вторинним структурним типом у біологічно активних пептидів і білків, що часто зустрічається. Див.
Атрпіраїйіс Ппеїїх тої: сіаззез апа ргорегпієз ру деге Р. бедгеві, Напз де І сої, дап б. ЮопІтап, СпНгівЦе о.
ВгоціШене, апа О.М. Апапіпагатайай. РКОТЕЇМ5: Бігисіге Рипсіопв апа Сепеїйсв 8: 103-117 (1990). « Амфіпатична альфа-спіраль є альфа-спіраллю з протилежними полярними і неполярними поверхнями, з с орієнтованими вздовж довгої осі спіралі. Специфічний розподіл заряджених залишків відбувається, очевидно, по полярній поверхні. Амфіпатичні спіралі, за визначенням, є комплементарними до полярно-неполярної поверхні з контакту гідратованого об'ємного фосфоліпіду; ці пов'язані з ліпідом домени, як було встановлено, взаємодіють з фосфоліпідом за допомогою свого часткового занурення на стику між жирними ацильними ланцюгами і полярними головними групами. деге Р. Зедгезі. Герзв ІеНег: 1976, 69 (1): 111-114, -І Термін "пептид" і "протеїн" (білок) можуть використовуватися тут взаємозамінно. Крім того, пептидні аналоги цього винаходу можуть бути пептидами, білками або непептидами, тобто пептидоміметиками. Однак всі - аналоги, переважно, є біологічно активними молекулами. с Термін "ліпід' як він використаний тут, включає, але не обмежується цим, природні і синтетичні 5о фосфоліпіди. Крім того, терміни "ліпід" ії "фосфоліпід" можуть використовуватися тут взаємозамінно. о Фігура 1: ЗБурегозе 6 хроматографія ЛПВЩ, отриманого шляхом ультрацентрифугування по щільності з шк 200мкл людської сироватки.
Фігура 2 (низ): Зурегозе б хроматографія (ОРРС: пептид 1) (РМІОГ ЕКЕГ І МЕ Г ЕАГКОКІ К; ЕС ІЮ Мо:1) комплексів, отриманих при відношенні 1:1 (вага:вага).
Фігура 2 (верх): Зурегозе 6 хроматографія (ОРРС: пептид 1) комплексів, отриманих при відношенні 2:1 (вага:вага).
Ф) Фігура З (низ): Зирегозе б хроматографія (ОРРС: пептид 1) комплексів, отриманих при відношенні 3:1 ка (вага:вага).
Фігура З (верх): Зурегозе 6 хроматографія (ОРРС: пептид 1) комплексів, отриманих при відношенні 4:1 бо (вага:вага).
Фігура 4 (низ): Зирегозе б хроматографія (ОРРС: пептид 1) комплексів, отриманих при відношенні 5:1 (вага:вага).
Фігура 4 (верх): Зирегозе 6 хроматографія (ОРРС: пептид 1) комплексів, отриманих при відношенні 7,5:1 (вага:вага). 65 Фігура 5: З,урегозе 6 хроматографія (ОРРС: пептид 1) комплексів, отриманих при відношенні 10:1 (вага:вага).
Фігура 6: Зирегозе 6 хроматографія ""С-мічених комплексів пептиду 1 при Ві-3:1.
Фігура 7: Зирегове 6 хроматографія ""С-мічених комплексів пептиду 1 при Ві-4:1.
Фігура 8: Зирегозе 6 хроматографія ""С-мічених комплексів пептиду 1 при Ві-5:1
Амфіпатичні альфа-спіральні пептиди або білки, зв'язуючі ліпід білки, пептиди-агоністи АроА-1, аналоги апопротеїнів і тому подібне, які застосовні в даному винаході, можуть бути синтезовані або вироблені з використанням будь-якої відомої фахівцям методики. Стабільні препарати пептидів, які мають тривалі терміни зберігання, можуть бути отримані шляхом ліофілізації пептидів - або з отриманням маси для подальшого виготовлення лікарської форми, або з отриманням окремих препаратів певних кількостей або одиничних доз, які можуть бути відтворені шляхом регідратації стерильною водою або відповідного стерильного буферного розчину 70 перед введенням суб'єкту.
Наскільки відомо автору винаходу, цей винахід є першим прикладом способу спільної ліофілізації амфіпатичного альфа-спірального пептиду або аналога пептиду з ліпідом для утворення суміші, яка може відтворюватися в стерильний пептид/ліпідний комплекс.
У деяких втіленнях може бути переважним виготовляти і вводити аналоги АроА-Ї, включаючи, але не 75 обмежуючись ними, агоністи АроА-І, у вигляді пептид-ліпідного комплексу. Цей підхід має декілька переваг, оскільки комплекс повинен володіти збільшеним напівперіодом присутності в кровообігу, особливо коли комплекс має розмір і щільність, схожий з цими показниками у білків класу ЛПВЩ, особливо у популяцій пре-бета-ЛПВЩ. Клас ліпопротеїнів ЛЛВЩ може бути розділений на ряд підкласів на основі таких характеристик, як розмір, щільність і електрофоретична рухливість. Деякими прикладами в порядку збільшення розміру є міцелярні пре-бета-ЛПВЩ діаметром від 50 до 60 Ангстрем, дископодібні ЛЛВЩ проміжного розміру, тобто з масою б5кДа (приблизно 70 Ангстрем), сферичними ЛПВЩ» або ЛПВЩ». діаметром від 90 до 120 Ангстрем. (3.
Капе, 1996 іп М. Ризіег, К. Козе апа Е. Торо! Гедв.| Агїпегозсіеговіз апа Согопагу Апегу Оізеазе, р.99; А.
ТаїЇ апа 9. Вгевіому, іБіа., р.106; Вагтапз еї аї.,, Віоспетіса еї Віорпузіса Асіа 1300, р.73-855 апа Ріеідіпд еї а. 1995, 9. ІПіріайа гез. 36, р.211-228). Однак пептид/ліпідні комплекси меншого або більшого розміру, ніж єм
ЛПВЩ також можуть формуватися по цьому винаходу. о
Пептид-ліпідні комплекси даного винаходу можна зручно отримувати у вигляді стабільних препаратів, що мають тривалий термін зберігання, шляхом процедури спільної ліофілізації, описаної нижче. Ліофілізовані пептид-ліпідні комплекси можуть використовуватися для виготовлення маси лікарської речовини, для фармацевтичної переробки в лікарські форми або для отримання окремих кількостей або дозованих одиниць, які ж можуть відтворюватися шляхом регідратації стерильною водою або відповідним буферним розчином перед введенням суб'єкту. ю
Розроблений простий спосіб отримання пептиду або протеїн-(фосфо)ліпідних комплексів, які володіють ІС о) характеристиками, подібними характеристикам ЛПВЩ. Цей спосіб може бути використаний для отримання
АроА-1 пептид-ліпідних комплексів і має наступні переваги: (1) Більшість або всі з інгредієнтів, що -- включаються використовуються для утворення намічених комплексів, і таким чином виключається втрата - початкового матеріалу, яка являє собою загальне явище при інших способах. (2) Утворюються ліофілізовані сполуки, які дуже стабільні при зберіганні. Отримані комплекси можуть відтворюватися безпосередньо перед використанням. (3) Отримані комплекси звичайно не вимагають додаткового очищення перед виготовленням « лікарських форм або перед використанням. (4) Виключаються токсичні сполуки, включаючи детергенти, такі як холат. Крім того, за цим способом отримання може бути легко збільшений масштаб виробництва і він зручний - с для СМР виробництва (тобто в середовищі без ендотоксинів). а За переважним способом пептид і ліпід з'єднують в системі розчинників, яка співрозчиняє кожний "» інгредієнт. Для цієї мети повинні бути ретельно вибрані пари розчинників, щоб забезпечити спільне розчинення як амфіпатичного пептиду так і гідрофобного ліпіду.
В одному втіленні білок(ки) або пептид(и), які треба взяти в частки, можуть бути розчинені у водному або -і органічному розчиннику або суміші розчинників (розчинник 1). (Фосфо)ліпідний компонент розчиняють у водному - або органічному розчиннику або суміші розчинників (розчинник 2), який змішується з розчинником 1, і два розчинники об'єднують. Альтернативно, (фосфо)ліпідний компонент розчиняють безпосередньо в розчині 1 пептиду (білка). Або ж пептид і ліпід можуть бути включені в систему співрозчинників, тобто суміш здатних сл 50 змішуватися розчинників. Досвідчені фахівці зрозуміють, що в залежності від здатності пептиду або білка зв'язуватися з ліпідуми може бути необхідна посилена або навіть повна солюбілізація (і/або посилене -. й перемішування) перед ліофілізацією; таким чином, можуть бути відповідно вибрані розчинники.
Відповідне відношення пептиду (білка) до ліпідів спочатку визначається емпірично, так що отримані комплекси володіють відповідними фізичними і хімічними властивостями, звичайно, але не завжди, такими, що означають схожість по розміру з ЛЛВЩ»о або ЛПВЩ». Молярне відношення ліпіду до білка/пептиду повинне бути в інтервалі від приблизно 2 до приблизно 200, і переважно, від 5 до 50, в залежності від бажаного типу
ІФ) комплексів. Приклади таких класів по розміру пептид/ліпідних або протеїн/ліпідних комплексів включають, але іме) не обмежуються ними, міцелярні або дископодібні частки (звичайно менші, ніж ЛПВЩ з або ЛПВЩ»), сферичні частки розміру, схожого з ЛПВЩ». або ЛІВІЩ3, і великі комплекси, які білоше ЛПВЩ 5. ЛПВЩ, що 60 використовуються як стандарт при хроматографії (фігура 1), є, в основному, сферичними зрілими ЛІИВЩ »5.
Пре-В1 ЛІВЩ є міцелярними комплексами аполіпопротеїну і декількох молекул фосфоліпідів. Пре-82 ЛПВЩ є дископодібними комплексами аполіпопротеїну і молекул фосфоліпідів. Чим більше включено ліпідів (тригліцеридів, холестерину, фосфоліпідів), тим більшого розміру буде ЛІИВЩ, і його форма змінюється. (Пре- Д1
ЛПВЩ (міцелярний комплекс) - Пре-р2 ЛІПВЩ (дископодібний комплекс) -» ЛПВЩ» (сферичний комплекс) - бо ЛПВЩ» (сферичний комплекс).
Коли розчинник вибраний і пептид і ліпід включені, отриману суміш заморожують і ліофілізують до сухого залишку. Іноді до суміші для полегшення ліофілізації додають додатковий розчинник. Цей ліофілізований продукт можна зберігати протягом тривалих термінів, і він буде залишатися стабільним.
В робочих прикладах, описаних нижче, пептид РМІ ОЇ ЕКЕГ І МЕ І ЕАЇ КОКІК (ЗЕО ІЮ Мо:1) і (фосфо/ліпід розчиняли окремо в метанолі, з'єднували, потім змішували з ксилолом перед ліофілізацією. Пептид і ліпід, обидва можуть бути додані в суміш двох розчинників. Альтернативно, розчин пептиду в метанолі може бути змішаний з розчином ліпіду в ксилолі. Необхідно бути обережними, щоб уникнути висалювання пептиду.
Отриманий розчин, що містить пептид і ліпід, спільно розчинені в метанолі/ксилолі, ліофілізують з утворенням 7/0 порошку.
Ліофілізований продукт може бути відтворений з отриманням розчину або суспензії пептид-ліпідного комплексу. З цією метою ліофілізований порошок повторно гідратують водним розчином до відповідного об'єму (часто до приблизно 5мг пептида/мл, що зручно для внутрішньовенної ін'єкції). При переважному втіленні ліофілізований порошок повторно гідратують фосфатно-буферним фізіологічним розчином або фізіологічним 7/5 розчином солі. Суміш, можливо, треба буде збовтувати, або струшувати для полегшення повторного гідратування і, в більшості випадків, стадія відтворення повинна проводитися при температурі, рівній температурі фазового переходу ліпідного компонента комплексів, або більшої за неї (Тт). Протягом декількох хвилин виходить розчин відтворених ліпідно-протеїнових комплексів (прозорий розчин, коли комплекси невеликі).
В аліквотного зразка, отриманого відновленого препарату, можна визначити властивості для підтвердження того, що комплекси в препараті мають бажаний розподіл по розмірах, наприклад, розмірний розподіл ЛЛВЩ. З цією метою може застосовуватися гель-фільтраційна хроматографія. У робочих прикладах, описаних нижче, використали систему для гель-фільтраційної хроматографії рідинної експрес-хроматографії білків (РЕХБ; ЕРІ С)
Ріпагтасіа З!урегозе 6. Елюент, що використовується містить 150мМ Масі в деіонізованій воді. Звичайний об'єм сч ов Зразка рівний 20-200Омікролітрам розчину комплексів, що містить 5мг пептиду/мл. Швидкість потоку через колонку рівна О,5мл/хв. Як стандарти для калібрування колонки використовуються серії білків з відомою молекулярною і) вагою і діаметром Стокса, а також людський ЛІПВЩ. Білки і ліпопротеїнові комплекси контролюють по поглинанню або розсіюванню світла при довжині хвилі 254 або 28Онм.
Розчинники, які можуть використовуватися за способом даного винаходу, включають, але не обмежуються «-
Зо Ними, неполярні, полярні, апротонні і протонні органічні розчинники і тому подібне, такі як: етанол, метанол, циклогексан, 1-бутанол, ізопропіловий спирт, ксилол, ТГФ, ефір, дихлорметан, бензол і хлороформ. Винахід о також включає використання сумішей розчинників, так само як одного розчинника. Крім того, перед ю використанням в даних способах органічні розчинники можуть бути осушені для видалення води; однак, для деяких ліпідів, пептидів або білків можуть використовуватися гідратовані розчинники або вода. Іншими словами, -- відповідним розчинником може бути вода, або можна використати гідратовані розчинники або суміші органічного ї- розчинника/води, однак, якщо використовується вода, вона повинна бути вільна від детергенту. Як згадано вище, розчинники, переважно, повинні бути найвищої чистоти (щоб уникнути концентрування домішок після ліофілізації), і розчинники повинні бути вільні від солей і часток. Однак немає необхідності в тому, щоб розчинники були стерильними, оскільки отриманий продукт може бути простерилізований перед або після « ліофілізації відомими в фармації методами, такими, як способи, описані в Кетіпдіоп'є Рпагтасеціїса! Зсіепсев, з с 161 апа 181й еаз.,, Маск Рибіїзпіпд Со., Еавіоп, Реппзуїмапіа (1980 і 1990), включених сюди у вигляді посилання повністю, і в Фармакопеї США /Майопа! Рогтиагу (О5Р/МЕ)ХМІЇ, включених сюди у вигляді посилання ;» повністю.
Ліпіди, які можуть використовуватися за способом отримання даної композиції, включають, але не обмежуються ними, природними і синтезованими (синтетичні) ліпіди і фосфоліпіди, включаючи фосфоліпіди з -І невеликими алкільними ланцюгами, яєчний фосфатіділхолін, фосфатіділхолін з соєвих бобів, дипальмітоїлфосфатіділхолін, димиристоїлфосфатіділхолін, дистеароїлфосфатіділхолін, - 1-миристоїл-2-пальмітоїлфосфатіділхолін, 1-пальмітоїл-2-миристоїлфосфатіділхолін, с 1-пальмітоїл-2-стеароїлфосфатіділхолін, 1-стеароїл-2-пальмітоїлфосфатіділхолін, диолеоїлфосфатіділхолін, 5ор діолеоїлфосфатіділетаноламін, дилауроїлфосфатіділгліцеринфосфатіділхолін, фосфатіділсерин, о фосфатіділетаноламін, фосфатіділінозит, сфингомієлінсфинголіпіди, фосфатіділгліцерин, дифосфатіділгліцерин, як димиристоїлфосфатіділгліцерин, дипальмітоїлфосфатіділгліцерин, дистеароїлфосфатіділгліцерин, діолеоїлфосфатіділгліцерин, димиристоїлфосфатидна кислота, дипальмітоїлфосфатидна кислота, димиристоїлфосфатіділетаноламін, дипальмітоїлфосфатіділетаноламін, димиристоїлфосфатіділсерин, дв дипальмітоїлфосфатіділсерин, фосфатіділсерин головного мозку, сфингомієлін головного мозку, дипальмітоїлеофингомієлін, дистеароїлефингомієлін, фосфатидна кислота, галактоцереброзид, гангліозиди,
Ф) цереброзиди, дилаурилфосфатіділхолін, (1,3)-О-манозіл (1,3)дигліцерид, амінофенілглікозид, ка З-холестерил--6'-(гликозілтіо)гексилефирні гліколіпіди і холестерин і його похідні.
Пептиди, які придатні для використання в даному винаході, включають, але не обмежуються ними, ті, які бо описані в трьох заявках, що одночасно розглядаються Ісерійні МоМо, визначені по МоМо реєстру повіреного 9196-0004-999, 9196-0005-999 і 9196-0006-999), кожна з яких включена сюди у вигляді посилання повністю.
Переважно, хоч в цьому немає необхідності в кожному випадку, то, що осадки повинні бути розчинені або видалені перед змішуванням або перемішуванням розчином ліпіду і пептиду або перед ліофілізацією.
Спосіб може використовуватися для великомасштабного виробництва пептид/ліпідних комплексів, 65 амфіпатичних пептид/«фосфо/ліпідних комплексів, зв'язуючий ліпід білок/фосфо/)ліпідних комплексів і/або АроАЇ пептидний аналог//(фосфо)ліпідних комплексів. Ліофілізований матеріал може бути отриманий у вигляді об'ємного препарату, або ж змішаний пептид/ліпідний розчин може бути розділений на порції в невеликі контейнери (наприклад, на дози для одного введення) перед ліофілізацією, і такі невеликі порції можуть бути виготовлені у вигляді стерильних одиничних дозованих форм.
Композиції даного винаходу, висушені під вакуумом, можуть бути представлені в одиничній дозі або у вигляді контейнера для багаторазового введення дози шляхом асептичного заповнення відповідних контейнерів стерильним розчином перед вакуумною сушкою до передбаченого змісту, приготування бажаних для вакуумної сушки композицій і потім герметичного закупорювання контейнера з одиничною дозою або контейнера для багаторазового введення дози. Передбачається, що буде можливість швидкого розчинення сухої композиції при /о Відтворенні відповідними стерильними розчинниками в цих заповнених контейнерах іп зйи з отриманням відповідного стерильного розчину бажаної для введення концентрації. Як він використаний тут, термін "відповідні контейнери" означає контейнер, здатний до збереження стерильної середи, такий як судина, в яку можна вміщувати висушений під вакуумом продукт, що герметично запечатується корком. Крім того, "відповідні контейнери" має на увазі відповідність розміру, враховуючи об'єм розчину, який він повинен вмістити при 7/5 Відтворенні висушеної під вакуумом композиції; і відповідність матеріалу контейнера, звичайно скло типу |.
Повинно бути зрозуміло, що корки, що використовуються, наприклад, стерильні гумові корки або рівноцінні ним, повинні бути такими, які забезпечують вищеназване закупорювання, але які також дають можливість проникнення з метою введення розчинника, наприклад, стерильної води для ін'єкцій, ОР, нормального фізіологічного розчину, О5Р, або 595 декстрози у воді, ОР, для відтворення бажаного розчину. Ці і інші 2о аспекти придатності контейнерів для фармацевтичних продуктів, таких як продукти винаходу, що розглядається, добре відомі фахівцям, досвідченим в практичній роботі в області фармації. При конкретному втіленні розміри одиничних доз продукту можуть бути в інтервалі від приблизно 1Омг до 2г пептиду, переважно, в інтервалі від приблизно 10О0Омг до г, і з концентрацією після відтворення від приблизно 1 до приблизно 5Омг/мл, переважно, від приблизно 2 до 25мг/мл. сч
Спосіб цього винаходу робить можливим отримання білково- або пептид/ліпідних комплексів для парентерального введення, включаючи внутрішньовенні, внутрішньочеревні, підшкірні, внутрішньом'язові і і) болісні ін'єкції тваринам і людям, або для перорального, ректального введення або для введення через слизову (наприклад, в порожнині рота) і місцевого застосування у тварин і людей, або для експериментів іп міго.
Ліофілізований порошок, отриманий за способом цього винаходу може бути регідратований безпосередньо («ур зо перед ін'єкцією або, альтернативно, може вводитися сам ліофілізований порошок, безпосередньо.
Ліофілізований порошок включає, але не обмежується цим, ліпіди і пептиди, які здатні утворювати комплекси у о вигляді везикул, ліпосом, часток, включаючи сферичні або дископодібні частки, міцели і тому подібне. Щоб ю відтворити або регідратувати ліофілізований порошок, розчин вибирається в залежності від бажаного кінцевого застосування. Для фармацевтичного застосування може бути використаний будь-який стерильний розчин. Крім -- з5 Того, для деяких випадків застосування переважні буферні розчини, і ці розчини включають, але не обмежуються ча ними, фосфат, цитрат, трис, барбітал, ацетат, гліцин-НСІ, сукцинат, какодилат, борну кислоту-буру, аммедіол і карбонат.
Ліофілізований порошок даного винаходу може бути сформований із застосуванням будь-якого способу ліофілізації, відомого фахівцям, включаючи, але не обмежуючись цим, сушку із замороженого стану, при якій « утримуючий пептид/ліпід розчин піддають заморожуванню з подальшим випаровуванням при зниженому тиску. в с Спосіб може також бути відповідним для зберігання сполук, які, в іншому випадку, можуть бути нестабільні або нерозчинні у відсутність ліпідів. ;» Цей спосіб може застосовуватися для виготовлення продуктів для лікування або профілактики захворювань людини, включаючи таке застосування, як спільне представлення антигенів у вакцинах, лікування або профілактику дисліпопротеїнемій, включаючи, але не обмежуючись ними, гіперхолестеринемію, -І гіпертригліцеридемію, низький рівень ЛПВЩ, дефіцит аполіпопротеїну А-І, серцево-судинних захворювань, таких як атеросклероз, септичного шоку, або інфекційних захворювань. - Спосіб можна застосовувати для отримання комплексів, які могли б використовуватися як носії для с лікарських речовин, таких як переносники (вектори) (для доставки лікарських речовин, ДНК, генів), наприклад, 5о В печінку або екстрапечінкові клітини, або як засоби для захоплення і виведення токсинів (наприклад, 1 пестицидів, ЛПС і т.д.) Або ж, спосіб може бути використаний для отримання комплексів для систем шк дослідження іп міїго або для використання в технології отримання зображень.
При конкретних втіленнях спосіб може використовуватися для отримання комплексів аналогів АроА-Ї (включаючи агоністи, але не обмежуючись ними), які можуть використовуватися при діагностичних дослідженнях дво помйго ії як маркери для популяцій і субпопуляцій ЛІПВН. В інших конкретних втіленнях комплекси агоністів
АроА-І можуть використовуватися для іммунодосліджень або для технології отримання зображень (наприклад, (Ф) дослідження КАТ, і ЯМР-томографією). ка Наступні приклади призначені для ілюстрації даного винаходу і не повинні жодним образом тлумачитися як його обмеження. 60 ПРИКЛАД: ОТРИМАННЯ ПЕПТИД-ЛІПІДНОГО КОМПЛЕКСУ ШЛЯХОМ СПІЛЬНОЇ ЛЮФІЛІЗАЦІЇ
Для отримання пептид/ліпідних комплексів використовується наступна методика.
Пептид 1 (РМОГ І РКЕГІ МЕ ЕАГКОКІ К; ЗЕО ІЮ Мо:1) (22,4мг) розчиняли в метанолі до концентрації З,5мг/мл шляхом інкубації протягом декількох хвилин і перемішування шляхом періодичного струшування. До цього розчину додавали дипальмітоїлфосфатіділхолін (ДПФХ) в метанолі (основний розчин 10Омг/мл), так що кінцеве 65 відношення ДПФХ/пептид становило 2,5:1 (вага/вага). Цей розчин перемішують струшуванням. До розчину додавали ксилол до кінцевої концентрації, рівної 3695. Відбирають зразки отриманого розчину для подальшого аналізу з допомогою гель-фільтраційнії хроматографії. Розчини заморожують в рідкому азоті і ліофілізують до сухого залишку під вакуумом. Зразок, що містить 20мг пептиду 1 (ЗЕО ІЮО Мо:/1) і бомг ДПФХ розчиняли в стерильному фізіологічному розчині солі (0,995 Масі), перемішували і нагрівали до 4173 протягом декількох
Хвилин до отримання прозорого розчину відтворених отриманих пептид/фосфоліпідних комплексів.
ПРИКЛАД: ГЕЛЬ-ФІЛЬТРАЦІЯ ВИКОРИСТАННЯ ФОСФОЛІПІДУ
З метою визначення умов отримання комплексів часто зручно отримати невеликі кількості комплексів для вивчення властивостей. Ці препарати містили один мг пептиду і були отримані таким чином. Один мг пептиду 1 (ЗЕО ІЮО Мо:1) розчиняли в 250мкл метанолу марки для ВЕРХ (Регкіп ЕІтег) в 1,О0мл прозорій скляній судині з 7/0 кришкою (У/аіеге ЩУАТО25054). Розчиненню пептиду сприяє періодичне струшування протягом 10 хвилин при кімнатній температурі. Після цього часу ще можна було побачити невелику кількість нерозчинених часток речовини, але це не надавало несприятливого впливу на результати. До цієї суміші додавали зразок основного розчину 100мг/мл в метанолі, що містить одну з кількостей 1, 2, 3, 4, 5, 7,5, 10 або 15мг ДПФХ (Амапіу Роїаг
Пріаз, 9995 чистоти, продукт 25850355). Об'єм суміші доводять до 400мкл доданням метанолу, і суміш додатково 7/5 періодично перемішують струшуванням протягом 10 хвилин при кімнатній температурі. У цей час в пробірках можна було бачити дуже невелику кількість нерозчиненого матеріалу. У кожну пробірку додавали 20Омкл ксилолу (Зідта-Аїагіспи 9995 чистоти, марки для ВЕРХ), і пробірки струшували протягом 10 секунд кожну. Вгорі кожної пробірки пробивали два маленьких отвори голкою для шприца 20), пробірки заморожували протягом 15 секунд кожну в рідкому азоті, і пробірки ліофілізували протягом ночі під зниженим тиском. У кожну пробірку 2о додавали 200мкл 0,995 розчину Масі. Пробірки струшували протягом 20 секунд кожну. У цей час розчини в пробірках ставали на вигляд молочними. Потім пробірки інкубували на водяній бані протягом ЗО хвилин при 41"7С. Розчини у всіх пробірках ставали прозорими (тобто на вигляд схожими на воду), за винятком розчину в пробірці, що містить 15мг ДПФХ, який залишався молочним.
Щоб визначити, чи всі фосфоліпіди, які використали в комплексних препаратах, дійсно з'явилися у фракціях сч об З КОЛОНКИ, відповідних пікам поглинання на хроматограмі, елюат з колонки з відтворених пептид/ліпідних комплексів збирали у фракціях по 1 або 2мл, і фракції піддавали ферментативному дослідженню на вміст і) фосфоліпіду за допомогою набору ВіоМегігих РіПозрПоїїрідез Епгутаїйдце РАР 150 (861491) у відповідності до інструкцій, прикладених виробником.
Препарати комплексів можуть бути також виготовлені у великому масштабі. Приклад одного такого - ди зо препарату описаний вище. Ці комплекси використали для експериментів іп мімо.
Фігура 1: Бурегозе 6 хроматографія зрілих НОЇ 5», отриманих шляхом ультрацентрифугування з 20Омкл о людської сироватки. Хроматограф показує поглинання при 254нм. Об'єм елюювання -14,8мл, який відповідає ю діаметру по Стоксу, рівному 108 Ангстрем (див. таблицю 1).
Фігура 2 (низ): Зирегозе б хроматографія комплексів ДПФХ:пептид 1, отриманих при відношенні в -- інкубаційній суміші (Кі, що визначається як відношення всієї кількості фосфоліпіду до всієї кількості пептиду ї- в початковій суміші), рівному 1:1 (вага/вага), як описано вище (невеликий об'єм препарату). Об'єми елюювання піків поглинання -16,2мл і 18,1мл, які відповідають часткам з діаметрами Стокса, рівним 74 і 82 Ангстрем, які були меншим, ніж у ЛЛВЩ. 8795 фосфоліпіду, нанесеного на колонку, знаходили у фракціях, відповідних пікам поглинання (див. таблицю 1). «
Фігура 2 (верх): Зирегозе 6 хроматографія комплексів ДПФХ:пептид 1, отриманих при Кі, рівному 2:1 з с (вага/вага), як описано вище. Об'єм елюювання піка поглинання -16,4мл (77 Ангстрем), що відповідає часткам меншим, ніж ЛІПВЩ. 7095 фосфоліпіду, нанесеного на колонку, знаходили у фракціях, відповідних піку ;» поглинання (див. таблицю 1).
Фігура З (низ): Зйурегозве б хроматографія комплексів ДПФХ:пептид 1, отриманих при Кі, рівному 31 (вага/вага), як описано вище. Об'єм елюювання піка поглинання -16,Омл (80 Ангстрем), відповідаючи часткам -і меншим, ніж ЛІПВЩ. 7995 фосфоліпіду, нанесеного на колонку, знаходили у фракціях, відповідних піку поглинання (див. таблицю 1). - Фігура З (верх): Зирегозе 6 хроматографія комплексів ДПФХ:пептид 1, отриманих при Кі, рівному 4:1 с (вага/вага), як описано вище. Об'єм елюювання піка поглинання -15,7мл, (90 Ангстрем), відповідаючи часткам 5о меншим, ніж ЛІПВЩ. 10695 фосфоліпіду, нанесеного на колонку, знаходили у фракціях, відповідних піку о поглинання (див. таблицю 1). як Фігура 4 (низ): Зйурегозве б хроматографія комплексів ДПФХ:пептид 1, отриманих при Кі, рівному 5:11 (вага/вага), як описано вище. Об'єм елюювання піка поглинання -15,1мл, (104 Ангстрем), відповідаючи часткам меншим, ніж ЛІВЩ. 10395 фосфоліпіду, нанесеного на колонку, знаходили у фракціях, відповідних піку в Поглинання (див. таблицю 1).
Фігура 4 (верх): Зуирегозе 6 хроматографія комплексів ДПФХ:пептид 1, отриманих при Кі, рівному 7,5:1 (Ф) (вага/вага), як описано вище. Об'єм елюювання піка поглинання -13,бмл, (134 Ангстрем), відповідаючи часткам ка більшим, ніж ЛІПВЩ. 9295 фосфоліпіду, нанесеного на колонку, знаходили у фракціях, відповідних піку поглинання (див. таблицю 1). во Фігура 5: Зурегозе 6 хроматографія комплексів ДПФХ:пептид 1, отриманих при Кі, рівному 10:1 (вага/вага), як описано вище. Об'єм елюювання піка поглинання -13,4мл, (138 Ангстрем), знову відповідаючи часткам більшим, ніж ЛІПВЩ. 10395 фосфоліпіду, нанесеного на колонку, знаходили у фракціях, відповідних піку поглинання (див. таблицю 1).
Зразок, що містить комплекси з 15:11 ДПФХ:пептид 1 (вага/вага) не піддавався Зирегозе 6 хроматографії, 65 оскільки він був каламутним, що передбачає присутність великих часток.
Для кожного з вищенаведених експериментів не спостерігалося значної кількості фосфоліпіду в якій-небудь інший з фракцій, крім фракцій, що містять матеріал, елюйований відповідно до піків поглинання (див. фіг.2-8).
Це свідчить про те, що фактично всі фосфоліпіди (в межах помилки експерименту при дослідженні) були включені в комплекси. Цей експеримент показує, що шляхом зміни первинного відношення фосфоліпідів до пептидів, можна формувати гомогенні комплекси різних розмірів (менших або великих ЛПВЩ).
ВИЗНАЧЕННЯ ХАРАКТЕРИСТИК КОМПЛЕКСІВ З ВИКОРИСТАННЯМ МІЧЕНОГО "С ПЕПТИДА 1
Пептидофосфоліпідні комплекси, що містять ""С-мічений пептид 1 (специфічна активність 15900Ороз./хв/мг пептиду по вазі, приймаючи зміст пептиду, рівний 5095) отримували шляхом спільної ліофілізації, як описано вище. Препарати, кожний, містили Тмг пептиду і 3, 4 або 5мг ДПФХ по вазі. Після відтворення комплексів в 70 200мкл 0,995 Масі, 20мкл (100мкг) комплексів наносили на колонку Рпагтасіа Зирегозе 6, використовуючи 0,990 масі в якості рідкої фази при швидкості потоку, рівної О,бмл/хв. Після витримки з 5мл (вільний об'єм колонки -7,7мл) збирали їмл фракції. Зразки, що містять 2Омкл фракцій, досліджували на зміст фосфоліпідів, використовуючи ферментативне дослідження ВіоМегігих. Залишок кожної фракції досліджували протягом З хвилин в рідинному сцинтиляційному лічильнику УМаїЇїаспи 1410 (Ріпаптасіа), використовуючи програму Еазу 75 Соцпі. Результати цих аналізів показані на фіг.6-8. Можна побачити, що переважаюча більшість як фосфоліпіду, так і пептида виявляються разом в декількох фракціях з піками в приблизно 16, 16 і 15мл для комплексів, що отримуються при відношенні ДПФХ:пептиду, рівного З3:1, 4:1 і 5:11, відповідно. Характеристики УФ поглинання для цих зразків показують, що комплекси елююються з колонки в об'ємах 15,1, 14,7 і 14,4мл для комплексів, отриманих з відношеннями ДПФХ:пептид, рівними 3:1, 4:1 ії 5:11, відповідно (мертвий об'єм трубопроводу між 20 колектором фракцій і проточним осередком для реєстрації УФ поглинання рівний 1,3мл, що пояснює легку невідповідність між об'ємами елюювання, які виміряні за допомогою дослідження радіоактивності/фосфоліпіду і
УФ поглинання). Об'єми елюювання відповідають діаметрам Стокса, рівним 106, 114 і 120 Ангстрем для комплексів з Кі 3:1, 421 і 5:1, відповідно. с 25 о в Гме - зо о ю - з м
Даний винахід не обмежується об'ємом описаних конкретних втілень, які призначені тільки в якості « 470 ілюстрації окремих аспектів цього винаходу, і функціонально еквівалентні методи і компоненти входять в об'єм - с цього винаходу. Безумовно, різні модифікації цього винаходу в доповнення до представлених і описаних тут, а стануть очевидними досвідченим фахівцям з попереднього опису і супроводжуючих малюнків. Мається на увазі, "» що такі модифікації попадають в об'єм 90 45 -І 80 -й 70 1 сл 50 що ще ЗО й 50 55 з І
Ф) т 2 60 о ФІГ б5
14 мл й я .
Віз2:1 (вв) й "ет рт ст тв пр оо трон пайка щ
Ібімл 184 мл й й не (в:в) 8 . б іб 20 ю
ОБСЯГ БЛЮЮВАННЯ (мл)
ФІГ. 15.7 мл
І х КІН (вів) І - х се
В | 16.0 мл о / о п Він (в:в) - зо 1 Її гулі ! Ї Г 1 І в)
ОБСЯГ ЕЛЮЮВАННЯ : (МЛ) що
ФІГ.З т 15,8 мл - і Кей в | їх
Й : - с с 151 мл Й 5 - .. " в о - неви ща -І зі сі сс і Іб 20 У шк ОБСЯГ ЕЛІОЮВАННЯ (мл) 1 ФІГ 1 -З
З 500134 мл
Яся 1
Ф) ЕЕ т в
З в во Веб я 1 1 І р б 16 20 30
ОБСЯГ СЛЮЮВАННЯ 254 нм 65 ФІГ.5
100 Й во - 0 ФОСФОЛІПІД
Е т---- ПЕКТИД 1
БО г)
Зх 70 Б и 0 каль каль 12345567 89 1011121514 15161718 19202122 2524 25 26 27 26 29 3031 52 55 34 35
ФРАКЦІЯ (мл) 15 Фіге 12 З 10 з пкт ФОСФОЛІЛІД сн ПЕПТИД 1 - В о
Я
- в
Ея х з ! с в (8) 0 . люжджаниДляснї од нитай тити нія А пні В т 1234567 89 10101213 1615161718192021 22 2324 45 25272829 0 У 255 М 5
ФРАКЦІЯ (мл) . Фіг ч- то .
ІФ) 150 мо т) їю - - 0 ФОосФОЛІПІД ч --- ПЕПТИД 1 з5 М 5 во - 60 ю | « й ші о с 12.34 5567 89 10121314 516171819202122 25245 25262728 29 М 31 32 У 3 35 . ФРАКЦІЯ (мл) и т ФІГ8.
Claims (1)
- Формула винаходу -і- 1. Спосіб одержання ліофілізованого пептид/ліпідного продукту, що включає ліофілізацію одного або більше сл пептидів або аналогів пептиду, що здатні приймати амфіпатичну конформацію, і одного або більше ліпідів у системі розчинників з утворенням пептид/ліпідного продукту, причому зазначений продукт може бути 1 регідратований з утворенням пептид/ліпідного комплексу, Її де зазначена система розчинників є органічним кч розчинником або сумішшю водного/органічного розчинника.2. Спосіб за пунктом 1, де зазначений пептид є білком.3. Спосіб за пунктом 1, де зазначений пептид є білком, що зв'язує ліпід.4. Спосіб за пунктом 1, де зазначений аналог пептиду є аналогом АроА-Ї, АроА-ЇЇ, АроА-ІМ, Арос-ї, Арос-їІЇ, Арос-ІІЇ або АроЕ. (Ф) 5. Спосіб за пунктом 1, який додатково включає відбір аліквот зазначеного розчину пептиду/ліпіду в окремі ГІ контейнери перед ліофілізацією з одержанням лікарської форми, що містить одиницю дози.б. Спосіб за пунктом 1, який далі включає стерилізацію зазначеного продукту перед, під час або після во ліофілізації.7. Спосіб за пунктом 1, де вказаний ліпід є насиченим ліпідом, ненасиченим ліпідом або їх сумішами.8. Спосіб за пунктом 7, де вказаний ліпід є природним ліпідом, синтетичним ліпідом або їх сумішами.9. Спосіб за пунктом 8, де зазначений ліпід вибирається з групи, що складається з простих ефірів фосфоліпідів, фосфоліпідів з короткими ланцюгами, холестерину, похідних холестерину, фосфатидилхолінів, 65 фосфатидилетаноламінів, фосфатидилсеринів, фосфатидилінозитів, сфінголіпідів, фосфатидилгліцеринів, гангліозидів і цереброзидів.10. Спосіб за пунктом 9, де зазначений ліпід вибирається з групи, що складається з яєчного фосфатидилхоліну, фосфатидилхоліну із соєвих бобів, дипальмітоїлфосфатидилхіноліну, диміристоїлфосфатидилхоліну, дистеароїлфосфатидилхоліну, 1-міристоїл-2-пальмітоїлфосфатидилхоліну, 1-пальмітоїл-2-міристоїлфосфатидилхоліну, 1-пальмітоїл-2-стеароїлфосфатидилхоліну, 1-стеароїл-2-пальмітоїлфосфатидилхоліну, діолеоїлфосфатидилхоліну, діолеоїлфосфатидилетаноламіну, дилауроїлфосфатидилгліцерину, дифосфатидилгліцерину, диміристоїлфосфатидилгліцерину, дипальмітоїлфосфатидилгліцерину, дистеароїлфосфатидилгліцерину, діолеоїлфосфатидилгліцерину, диміристоїлфосфатидної кислоти, дипальмітоїлфосфатидної кислоти, диміристоїлфосфатидилетаноламіну, 7/0 дипальмітоїлфосфатидилетаноламіну, диміристоїлфосфатидилсерину, дипальмітоїлфосфатидилсерину, сфінгомієліну, дипальмітоїлофінгомієліну, дистеароїлофінгомієліну, фосфатидної кислоти, галактоцереброзиду, дилаурилфосфатидилхоліну, (1,3)-О-манозил-(1,3)дигліцериду, амінофенілглікозиду, З-холестерил-6'-(глікозилтіо)гексилефірних гліколіпідів і їх сумішей.11. Спосіб за пунктом 10, у якому зазначений ліпід являє собою З3-холестерил-6б'-(глікозилтіо)угексилефірний гліколіпід.12. Спосіб за пунктом 1, у якому молярне відношення пептид:ліпід або молярне відношення аналог пептиду:ліпід складає приблизно від 2:1 приблизно до 200:1.13. Спосіб за пунктом 12, у якому молярне відношення пептид:ліпід або молярне відношення аналог пептиду:ліпід складає приблизно від 2:1 приблизно до 50:1.14. Спосіб за п. 13, у якому молярне відношення пептид'ліпід або молярне відношення аналог пептиду:ліпід складає приблизно від 5:1 приблизно до 50:1.15. Спосіб за пунктом 1, де розчинник є неполярним, полярним, апротонним або протонним.16. Спосіб за пунктом 1, де розчинником є етанол, метанол, циклогексан, 1-бутанол, ізопропанол, ксилол, ТГФ, діетиловий ефір, метиленхлорид, бензол або хлороформ. с17. Спосіб за пунктом 1, де розчинником є суміш, що містить етанол, метанол, циклогексан, 1-бутанол, ізопропанол, ксилол, ТГФ, діетиловий ефір, метиленхлорид, бензол або хлороформ і воду. (8)18. Спосіб одержання ліофілізованого пептид/ліпідного продукту, що може бути регідратований з утворенням пептид/ліпідного комплексу, зазначений спосіб включає: (Ї) солюбілізацію щонайменше одного амфіпатичного пептиду або амфіпатичного аналога пептиду в першому -« зо розчиннику з утворенням першого розчину, (ї) солюбілізацію щонайменше одного ліпіду в другому розчиннику без застосування детергенту з утворенням о другого розчину, причому зазначений другий розчин є таким, що змішується з зазначеним першим розчином, ю (ії) об'єднання зазначеного першого розчину з зазначеним другим розчином з утворенням пептид/ліпідного розчину і -- (ім) ліофілізацію зазначеного пептид/ліпідного розчину так, що утворюється ліофілізований пептид/ліпідний ї- продукт.19. Спосіб за пунктом 18, у якому перший розчинник і другий розчинник є органічним розчинником або сумішшю водного/органічного розчинника.20. Спосіб за пунктом 18, у якому зазначений пептид є білком. «21. Спосіб за пунктом 18, у якому зазначений пептид є білком, що зв'язує ліпід. з с 22. Спосіб за пунктом 18, де зазначений аналог пептиду є аналогом АроА-Ї, АроА-ІІ, АроА-ІМ, Арос-Ї, Арос-їІЇ, Арос-ІІЇ або АроЕ. ;» 23. Спосіб за пунктом 18, у якому перший і другий розчинники однакові.24. Спосіб за пунктом 18, який далі включає відбір аліквот зазначеного розчину пептиду/ліпіду в окремі контейнери перед ліофілізацією з одержанням лікарської форми, що містить одиницю дози. -І 25. Спосіб за пунктом 18, який далі включає стерилізацію зазначеного продукту перед, під час або після ліофілізації. - 26. Спосіб за пунктом 18, де зазначений ліпід є насиченим ліпідом, ненасиченим ліпідом або їх сумішами. с 27. Спосіб за пунктом 26, де зазначений ліпід є природним ліпідом, синтетичним ліпідом або їх сумішшю.28. Спосіб за пунктом 27, де зазначений ліпід вибирається з групи, що складається з простих ефірів о фосфоліпідів, фосфоліпідів з короткими ланцюгами, холестерину, похідних холестерину, фосфатидилхолінів, як фосфатидилетаноламінів, фосфатидилсеринів, фосфатидилінозитів, сфінголіпідів, фосфатидилгліцеринів, гангліозидів і цереброзидів.29. Спосіб за пунктом 28, де зазначений ліпід вибирається з групи, що складається з яєчного дв фосфатидилухоліну, фосфатидилхоліну із соєвих бобів, дипальмітоїлфосфатидилхіноліну, диміристоїлфосфатидилхоліну, дистеароїлфосфатидилхоліну, 1-міристоїл-2-пальмітоїлфосфатидилхоліну, Ф) 1-пальмітоїл-2-міристоїлфосфатидилхоліну, 1-пальмітоїл-2-стеароїлфосфатидилхоліну, ка 1-стеароїл-2-пальмітоїлфосфатидилхоліну, діолеоїлфосфатидилхоліну, діолеоїлфосфатидилетаноламіну, дилауроїлфосфатидилгліцерину, дифосфатидилгліцерину, диміристоїлфосфатидилгліцерину, бо дипальмітоїлфосфатидилгліцерину, дистеароїлфосфатидилгліцерину, діолеоїлфосфатидилгліцерину, диміристоїлфосфатидної кислоти, дипальмітоїлфосфатидної кислоти, диміристоїлфосфатидилетаноламіну, дипальмітоїлфосфатидилетаноламіну, диміристоїлфосфатидилсерину, дипальмітоїлфосфатидилсерину, сфінгомієліну, дипальмітоїлофінгомієліну, дистеароїлофінгомієліну, фосфатидної кислоти, галактоцереброзиду, дилаурилфосфатидилхоліну, (1,3)-О-манозил-(1,3)дигліцериду, амінофенілглікозиду, 65 З-холестерил-6'-(глікозилтіо)гексилефірних гліколіпідів і їх сумішей.30. Спосіб за пунктом 29, у якому зазначений ліпід являє собою З-холестерил-6'-(глікозилтіо)гексилефірний гліколіпід.31. Спосіб за пунктом 18, у якому молярне відношення пептид:ліпід або молярне відношення аналог пептиду:ліпід складає приблизно від 2:1 приблизно до 200:1.32. Спосіб за пунктом 31, у якому молярне відношення пептид:ліпід або молярне відношення аналог пептиду:ліпід складає приблизно від 2:1 приблизно до 50:1.33. Спосіб за пунктом 32, у якому молярне відношення пептид:ліпід або молярне відношення аналог пептиду:ліпід складає приблизно від 5:1 приблизно до 50:1.34. Спосіб за пунктом 18, де зазначений перший розчинник вибирається з групи, що складається з води, /о метанолу, 1-бутанолу і їх сумішей.35. Спосіб за пунктом 18, де зазначений другий розчинник вибирається з групи, що складається з ксилолу, бензолу, метанолу, хлороформу і їх сумішей.36. Пептид/ліпідний комплекс, одержаний способом, що включає: () солюбілізацію одного або більше амфіпатичних пептидів або амфіпатичних аналогів пептидів і щонайменше одного ліпіду в системі розчинників без застосування детергенту з утворенням пептид/ліпідного розчину, (її) ліофілізацію зазначеного пептид/ліпідного розчину з утворенням дегідратованого пептид/ліпідного продукту і (її) регідратацію зазначеного дегідратованого пептид/ліпідного продукту з утворенням зазначеного пептид/ліпідного комплексу.37. Пептид/ліпідний комплекс за пунктом З6, де зазначений пептид є білком, що зв'язує ліпід.38. Пептид/ліпідний комплекс за пунктом 36, де зазначений пептид є аналогом АроА-Ї.39. Пептид/ліпідний комплекс за пунктом 36, який має діаметр приблизно від 50 приблизно до 120 ангстрем.40. Пептид/ліпідний комплекс за пунктом 36, де в зазначеному способі використовується система сч ов розчинників, що складається з єдиного розчинника.41. Пептид/ліпідний комплекс за пунктом 36, який практично дорівнює за розміром ліпопротеїнам високої і) щільності.42. Пептид/ліпідний комплекс за пунктом 36, де зазначений комплекс є стерильним.43. Пептид/ліпідний комплекс за пунктом 36, де зазначений комплекс сформований у вигляді стерильної «- зо форми, що містить одиницю дози.44. Пептид/ліпідний комплекс за пунктом 36, де зазначений ліпід є насиченим ліпідом ненасиченим ліпідом, що) або їх сумішами. ю45. Пептид/ліпідний комплекс за пунктом 44, де зазначений ліпід є природним ліпідом, синтетичним ліпідом або їх сумішшю. --46. Пептид/ліпідний комплекс за пунктом 45, де зазначений ліпід вибирається з групи, що складається з ї- простих ефірів фосфоліпідів, фосфоліпідів з короткими ланцюгами, холестерину, похідних холестерину, фосфатидилхолінів, фосфатидилетаноламінів, фосфатидилсеринів, фосфатидилінозитів, сфінголіпідів, фосфатидилгліцеринів, гангліозидів і цереброзидів.47. Пептид/ліпідний комплекс за пунктом 46, де зазначений ліпід вибирається з групи, що складається з « яєчного фосфатидилхоліну, фосфатидилхоліну із соєвих бобів, дипальмітоїлфосфатидилухіноліну, з с диміристоїлфосфатидилхоліну, дистеароїлфосфатидилхоліну, 1-міристоїл-2-пальмітоїлфосфатидилхоліну, . 1-пальмітоїл-2-міристоїлфосфатидилхоліну, 1-пальмітоїл-2-стеароїлфосфатидилхоліну, и?» 1-стеароїл-2-пальмітоїлфосфатидилхоліну, діолеоїлфосфатидилхоліну, діолеоїлфосфатидилетаноламіну, дилауроїлфосфатидилгліцерину, дифосфатидилгліцерину, диміристоїлфосфатидилгліцерину, дипальмітоїлфосфатидилгліцерину, дистеароїлфосфатидилгліцерину, діолеоїлфосфатидилгліцерину, -І диміристоїлфосфатидної кислоти, дипальмітоїлфосфатидної кислоти, диміристоїлфосфатидилетаноламіну, дипальмітоїлфосфатидилетаноламіну, диміристоїлфосфатидилсерину, дипальмітоїлфосфатидилсерину, - сфінгомієліну, дипальмітоїлофінгомієліну, дистеароїлофінгомієліну, фосфатидної кислоти, галактоцереброзиду, с дилаурилфосфатидилхоліну, (1,3)-О-манозил-(1,3)дигліцериду, амінофенілглікозиду, бор З-холестерил-б'-(глікозилтіо)гексилефірних гліколіпідів і їх сумішей. 1 48. Пептид/ліпідний комплекс за пунктом 47, де зазначений ліпід являє собою як З-холестерил-6'-(глікозилтіо)гексилефірний гліколіпід.49. Ліофілізована композиція, одержана способом, що включає: () солюбілізацію амфіпатичного пептиду або амфіпатичного аналога пептиду і ліпіду в системі розчинників без застосування детергенту з утворенням пептид/ліпідного розчину, і (ї) ліофілізацію зазначеного солюбілізованого пептид/ліпідного розчину з утворенням зазначеної Ф) ліофілізованої композиції. ка 50. Ліофілізована композиція за пунктом 49, що є стерильною.51. Ліофілізована композиція за пунктом 49, де пептид є пептидом, що зв'язує ліпід, або аналогом АроА-Ї, бо /АроА-ІЇ, АроА-ІМ, Арос-ї, Арос-ІІї, АроС-ІЇ або АроЕ.52. Ліофілізована композиція за пунктом 49, де зазначений амфіпатичний пептид або амфіпатичний аналог пептиду здатний приймати конформацію "З -спіралі.53. Ліофілізована композиція за пунктом 49, де в зазначеному способі використовують систему розчинників, що включає єдиний розчинник. 65 54. Спосіб одержання ліофілізованої пептид/ліпідної композиції, зазначений спосіб включає: (Ї) солюбілізацію щонайменше одного амфіпатичного пептиду або амфіпатичного аналога пептиду в першому розчиннику з утворенням першого розчину, (ї) солюбілізацію щонайменше одного ліпіду в другому розчиннику без застосування детергенту з утворенням другого розчину, причому зазначений другий розчин є таким, що змішується з зазначеним першим розчином, (ії) об'єднання зазначеного першого розчину з зазначеним другим розчином з утворенням пептид/ліпідного розчину і (ім) ліофілізацію зазначеного пептид/ліпідного розчину з утворенням дегідратованої пептид/ліпідної композиції.55. Спосіб за пунктом 54, у якому молярне відношення пептид:ліпід або молярне відношення аналог 70 пептиду:ліпід складає приблизно від 2:1 приблизно до 200:1.56. Спосіб за пунктом 54, у якому молярне відношення пептид:ліпід або молярне відношення аналог пептиду:ліпід складає приблизно від 2:1 приблизно до 50:1.57. Спосіб за пунктом 54, де зазначений перший розчинник вибирається з групи, що складається з води, метанолу, 1-бутанолу і їх сумішей.58. Спосіб за пунктом 54, де зазначений другий розчинник вибирається з групи, що складається з ксилолу, бензолу, метанолу, хлороформу і їх сумішей.59. Спосіб одержання пептид/ліпідного комплексу, зазначений спосіб включає: (Ї) солюбілізацію щонайменше одного амфіпатичного пептиду або амфіпатичного аналога пептиду в першому розчиннику з утворенням першого розчину, (ї) солюбілізацію щонайменше одного ліпіду в другому розчиннику без застосування детергенту з утворенням другого розчину, причому зазначений другий розчин є таким, що змішується з зазначеним першим розчином, (ії) об'єднання зазначеного першого розчину з зазначеним другим розчином з утворенням пептид/ліпідного розчину і (ім) ліофілізацію зазначеного пептид/ліпідного розчину з одержанням дегідратованої пептид/ліпідної сч Композиції, і (м) гідратацію висушеної пептид/ліпідної композиції з одержанням пептид/ліпідного комплексу. і)60. Спосіб за пунктом 59, у якому молярне відношення пептид:ліпід або молярне відношення аналог пептиду:ліпід складає приблизно від 2:1 приблизно до 200:1.61. Спосіб за пунктом 59, де зазначений перший розчинник вибирається з групи, що складається з води, «- зо метанолу, 1-бутанолу і їх сумішей.62. Спосіб за пунктом 59, де зазначений другий розчинник вибирається з групи, що складається з ксилолу, о бензолу, метанолу, хлороформу і їх сумішей. ю63. Лікарська форма, що містить одиницю дози, яка включає ліофілізований пептид/ліпідний продукт, одержаний за одним із пунктів 1, 2 або 6. --64. Фармацевтична композиція, що містить одиницю дози, яка включає стійкий ліофілізований ї- пептид/ліпідний продукт, одержаний за пунктом 18.65. Фармацевтична композиція, що містить одиницю дози, яка включає стійкий ліофілізований пептид/ліпідний продукт, одержаний за пунктом 36 або 43.66. Фармацевтична композиція, що містить одиницю дози, яка включає стійкий ліофілізований « пептид/ліпідний продукт, одержаний за пунктом 49. з с 67. Фармацевтична композиція, що містить одиницю дози, яка включає стійкий ліофілізований пептид/ліпідний продукт, одержаний за пунктом 56. ;» 68. Фармацевтична композиція, що містить одиницю дози, яка включає стійкий ліофілізований пептид/ліпідний продукт, одержаний за пунктом 59. -І Офіційний бюлетень "Промислоава власність". Книга 1 "Винаходи, корисні моделі, топографії інтегральних мікросхем", 2004, М 12, 15.12.2004. Державний департамент інтелектуальної власності Міністерства освіти і - науки України. 1 с 50 - Ф) іме) 60 б5
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/942,597 US6287590B1 (en) | 1997-10-02 | 1997-10-02 | Peptide/lipid complex formation by co-lyophilization |
| PCT/US1998/020330 WO1999017740A1 (en) | 1997-10-02 | 1998-09-28 | Peptide/lipid complex formation by co-lyophilization |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA71551C2 true UA71551C2 (en) | 2004-12-15 |
Family
ID=25478329
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA2000042492A UA71551C2 (en) | 1997-10-02 | 1998-09-28 | Formation of peptide/lipid vesicles and complexes through co-lyophilization of peptides |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (4) | US6287590B1 (uk) |
| EP (2) | EP1019025B1 (uk) |
| JP (1) | JP2001522781A (uk) |
| KR (1) | KR100588241B1 (uk) |
| CN (1) | CN100415210C (uk) |
| AT (1) | ATE260644T1 (uk) |
| AU (2) | AU749344B2 (uk) |
| CA (1) | CA2305704C (uk) |
| DE (1) | DE69822176T2 (uk) |
| DK (1) | DK1019025T3 (uk) |
| ES (1) | ES2217591T3 (uk) |
| HU (1) | HUP0003930A3 (uk) |
| IL (1) | IL135322A (uk) |
| NO (1) | NO329155B1 (uk) |
| NZ (1) | NZ503721A (uk) |
| PL (1) | PL196579B1 (uk) |
| PT (1) | PT1019025E (uk) |
| RU (1) | RU2224506C2 (uk) |
| UA (1) | UA71551C2 (uk) |
| WO (1) | WO1999017740A1 (uk) |
Families Citing this family (71)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5746223A (en) * | 1996-10-11 | 1998-05-05 | Williams; Kevin Jon | Method of forcing the reverse transport of cholesterol from a body part to the liver while avoiding harmful disruptions of hepatic cholesterol homeostasis |
| US6004925A (en) * | 1997-09-29 | 1999-12-21 | J. L. Dasseux | Apolipoprotein A-I agonists and their use to treat dyslipidemic disorders |
| US6287590B1 (en) | 1997-10-02 | 2001-09-11 | Esperion Therapeutics, Inc. | Peptide/lipid complex formation by co-lyophilization |
| DE19954843C2 (de) * | 1999-11-09 | 2003-11-20 | Novosom Ag | Verfahren zur Verkapselung von Proteinen oder Peptiden in Liposomen, mit dem Verfahren hergestellte Liposomen und deren Verwendung |
| US6514523B1 (en) | 2000-02-14 | 2003-02-04 | Ottawa Heart Institute Research Corporation | Carrier particles for drug delivery and process for preparation |
| GB0121171D0 (en) * | 2001-08-31 | 2001-10-24 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vaccine |
| US7148197B2 (en) * | 2000-08-24 | 2006-12-12 | The Regents Of The University Of California | Orally administered small peptides synergize statin activity |
| US6664230B1 (en) * | 2000-08-24 | 2003-12-16 | The Regents Of The University Of California | Orally administered peptides to ameliorate atherosclerosis |
| US7144862B2 (en) * | 2000-08-24 | 2006-12-05 | The Regents Of The University Of California | Orally administered peptides to ameliorate atherosclerosis |
| US7166578B2 (en) | 2000-08-24 | 2007-01-23 | The Regents Of The University Of California | Orally administered peptides synergize statin activity |
| US8568766B2 (en) | 2000-08-24 | 2013-10-29 | Gattadahalli M. Anantharamaiah | Peptides and peptide mimetics to treat pathologies associated with eye disease |
| US7199102B2 (en) | 2000-08-24 | 2007-04-03 | The Regents Of The University Of California | Orally administered peptides synergize statin activity |
| US7723303B2 (en) * | 2000-08-24 | 2010-05-25 | The Regents Of The University Of California | Peptides and peptide mimetics to treat pathologies characterized by an inflammatory response |
| PT1427436E (pt) | 2001-08-23 | 2008-09-08 | Westgate Biolog Ltd | Utilização de apoproteínas do soro do leite na profilaxia ou tratamento de infecção microbiana ou viral |
| US20030229062A1 (en) * | 2001-12-07 | 2003-12-11 | The Regents Of The University Of California | Treatments for age-related macular degeneration (AMD) |
| WO2003049685A2 (en) * | 2001-12-07 | 2003-06-19 | The Regents Of The University Of California | Treatment for age-related macular degeneration |
| US7470659B2 (en) | 2001-12-07 | 2008-12-30 | The Regents Of The University Of California | Methods to increase reverse cholesterol transport in the retinal pigment epithelium (RPE) and Bruch's membrane (BM) |
| US20040009216A1 (en) * | 2002-04-05 | 2004-01-15 | Rodrigueza Wendi V. | Compositions and methods for dosing liposomes of certain sizes to treat or prevent disease |
| US6930085B2 (en) | 2002-04-05 | 2005-08-16 | The Regents Of The University Of California | G-type peptides to ameliorate atherosclerosis |
| NL1020962C2 (nl) * | 2002-06-28 | 2003-12-30 | Tno | Therapie en prognose/monitoring bij sepsis en septische shock. |
| US20060051407A1 (en) * | 2003-06-27 | 2006-03-09 | Yoram Richter | Method of treating ischemia-reperfusion injury |
| US10517883B2 (en) | 2003-06-27 | 2019-12-31 | Zuli Holdings Ltd. | Method of treating acute myocardial infarction |
| PE20050438A1 (es) * | 2003-10-20 | 2005-06-14 | Esperion Therapeutics Inc | Formulas farmaceuticas, metodos y regimenes de dosificacion para el tratamiento y la prevencion de sindromes coronarios agudos |
| US20060019870A1 (en) * | 2004-01-28 | 2006-01-26 | O'donnell Francis E Jr | Apoprotein cochleate compositions |
| JP4617458B2 (ja) * | 2004-02-10 | 2011-01-26 | 財団法人ヒューマンサイエンス振興財団 | 中空糸透析カラムを利用したリポソームの製造方法 |
| SE0401942D0 (sv) * | 2004-07-28 | 2004-07-28 | Lipopeptide Ab | New antimicrobial peptide complexes |
| RU2448977C2 (ru) * | 2004-09-16 | 2012-04-27 | Зе Риджентс Оф Зи Юнивесити Оф Кэлифонье | Обладающий способностью облегчать по меньшей мере один симптом воспалительного состояния пептид, содержащая его фармацевтическая композиция и способ лечения атеросклероза с их помощью |
| US7582312B2 (en) * | 2004-11-15 | 2009-09-01 | Discovery Laboratories, Inc. | Methods to produce lung surfactant formulations via lyophilization and formulations and uses thereof |
| US7464012B2 (en) * | 2004-12-10 | 2008-12-09 | L'air Liquide, Societe Anonyme A Directoire Et Conseil De Surveillance Pour L'etude Et L'exploitation Des Procedes Georges Claude | Simplified process simulator |
| AU2005314043A1 (en) | 2004-12-06 | 2006-06-15 | The Regents Of The University Of California | Methods for improving the structure and function of arterioles |
| KR20070112289A (ko) * | 2005-03-16 | 2007-11-22 | 프로사이트 코포레이션 | 노화 또는 광손상된 피부를 예방하고 치료하기 위한 방법및 조성물 |
| US8206750B2 (en) | 2005-03-24 | 2012-06-26 | Cerenis Therapeutics Holding S.A. | Charged lipoprotein complexes and their uses |
| EP2269623A1 (en) | 2005-04-29 | 2011-01-05 | The Regents of The University of California | Peptides and peptide mimetics to treat pathologies characterized by an inflammatory response |
| US20080293639A1 (en) * | 2005-04-29 | 2008-11-27 | The Regents Of The University Of California | Peptides and peptide mimetics to treat pathologies characterized by an inflammatory response |
| US20070254832A1 (en) * | 2006-02-17 | 2007-11-01 | Pressler Milton L | Methods for the treatment of macular degeneration and related eye conditions |
| CN101489577B (zh) * | 2006-06-01 | 2013-10-16 | 蒙特利尔心脏病学研究所 | 治疗心瓣膜病的方法和化合物 |
| EP2041174A2 (en) * | 2006-06-16 | 2009-04-01 | Lipid Sciences, Inc. | Novel peptides that promote lipid efflux |
| US20080227686A1 (en) * | 2006-06-16 | 2008-09-18 | Lipid Sciences, Inc. | Novel Peptides that Promote Lipid Efflux |
| US20080206142A1 (en) * | 2006-06-16 | 2008-08-28 | Lipid Sciences, Inc. | Novel Peptides That Promote Lipid Efflux |
| CA2659655A1 (en) | 2006-08-08 | 2008-02-21 | Alan M. Fogelman | Salicylanilides enhance oral delivery of therapeutic peptides |
| US20080138284A1 (en) * | 2006-09-26 | 2008-06-12 | Lipid Sciences, Inc. | Novel Peptides That Promote Lipid Efflux |
| EP2086507B1 (en) * | 2006-10-06 | 2018-11-07 | BioNet Pharma GmbH | A spinal nucleus pulposus implant |
| KR100817024B1 (ko) | 2006-11-09 | 2008-03-26 | 재단법인 목암생명공학연구소 | 핵산 또는 약물을 간에 특이적으로 전달하는 복합체 및이를 포함하는 약학적 조성물 |
| JP5568008B2 (ja) * | 2007-06-27 | 2014-08-06 | ザ ボード オブ トラスティーズ オブ ザ レランド スタンフォード ジュニア ユニバーシティー | ペプチドチロシナーゼインヒビターおよびその使用 |
| CN104083752B (zh) * | 2007-06-27 | 2018-04-10 | 里兰斯坦福初级大学理事会 | 寡肽酪氨酸酶抑制剂及其应用 |
| US8557767B2 (en) | 2007-08-28 | 2013-10-15 | Uab Research Foundation | Synthetic apolipoprotein E mimicking polypeptides and methods of use |
| DK2195331T3 (da) | 2007-08-28 | 2014-02-03 | Uab Research Foundation | Syntetiske polypeptider, der efterligner apolipoprotein e, og anvendelsesmetoder |
| WO2010083611A1 (en) | 2009-01-23 | 2010-07-29 | Institut De Cardiologie De Montreal | Method for the prevention and treatment of diastolic dysfunction employing an apolipoproteina1 (apoa1) mimetic peptide/phospholipid complex |
| SI2396017T1 (sl) | 2009-02-16 | 2015-12-31 | Cerenis Therapeutics Holding Sa | Mimika apolipoproteina A-1 |
| WO2010095912A2 (ko) * | 2009-02-23 | 2010-08-26 | 성균관대학교 산학협력단 | 난용성 약물 나노복합체의 제조방법 |
| WO2011002258A2 (ko) * | 2009-07-02 | 2011-01-06 | 한양대학교 산학협력단 | 아르기닌 기제 양친성 펩티드 마이셀 |
| WO2011143362A1 (en) | 2010-05-11 | 2011-11-17 | Esperion Therapeutics, Inc. | Dimeric oxidation-resistant apolipoprotein a1 variants |
| RU2013111678A (ru) | 2010-08-30 | 2014-10-10 | Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг | Способ получения тетранектин-аполипопротеин а-i частицы, полученная таким образом липидная частица и ее применение |
| CN103443123B (zh) | 2011-02-07 | 2020-05-29 | 塞勒尼斯医疗控股公司 | 脂蛋白复合物及其制备和用途 |
| RU2457864C1 (ru) * | 2011-07-28 | 2012-08-10 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная компания "ФАРМАСОФТ" (ООО "НПК "ФАРМАСОФТ") | Гель, обладающий противовоспалительным, иммунотропным, противоаллергическим и ранозаживляющим действием |
| US10894098B2 (en) | 2012-04-09 | 2021-01-19 | Signablok, Inc. | Methods and compositions for targeted imaging |
| US9993427B2 (en) | 2013-03-14 | 2018-06-12 | Biorest Ltd. | Liposome formulation and manufacture |
| US10017551B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-07-10 | The Regents Of The University Of California | Peptides having reduced toxicity that stimulate cholesterol efflux |
| CN103860470A (zh) * | 2014-03-05 | 2014-06-18 | 贵州中泰生物科技有限公司 | 一种口服高密度脂蛋白脂质体的制备方法 |
| RU2016144908A (ru) | 2014-05-02 | 2018-06-05 | Серени Терапеутикс Холдинг Са | Маркеры hdl-терапии |
| EP3189069A4 (en) | 2014-07-31 | 2018-03-07 | UAB Research Foundation | Apoe mimetic peptides and higher potency to clear plasma cholesterol |
| US9855345B2 (en) * | 2014-10-30 | 2018-01-02 | Delta-Fly Pharma, Inc. | Method for producing lipoplex for topical administration and antitumor agent using such lipoplex |
| WO2016154542A2 (en) | 2015-03-25 | 2016-09-29 | The Regents Of The University Of Michigan | Compositions and methods for treating cardiovascular related disorders |
| US20160346221A1 (en) | 2015-06-01 | 2016-12-01 | Autotelic Llc | Phospholipid-coated therapeutic agent nanoparticles and related methods |
| EP3319980B8 (en) | 2015-07-10 | 2021-11-03 | Peptinovo Biopharma Inc. | Formulations for improving the efficacy of hydrophobic drugs |
| CA3032229A1 (en) | 2016-07-27 | 2018-02-01 | Hartis-Pharma Sa | Therapeutic combinations to treat red blood cell disorders |
| WO2018042576A1 (ja) * | 2016-08-31 | 2018-03-08 | キユーピー株式会社 | 卵黄リン脂質組成物およびその製造方法、ならびに該卵黄リン脂質組成物を用いた脂肪乳剤およびリポ化製剤 |
| KR102039661B1 (ko) | 2017-07-28 | 2019-11-01 | 경북대학교 산학협력단 | HDL-ApoM-S1P를 유효성분으로 포함하는 퇴행성뇌질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
| WO2019030574A1 (en) * | 2017-08-10 | 2019-02-14 | Cerenis Therapeutics Holding | CARGOMÈRES |
| CN111249451B (zh) * | 2020-01-20 | 2022-11-04 | 成都医学院 | 一种糖脂类抗原注射液及其制备方法 |
| CN112034175A (zh) * | 2020-04-03 | 2020-12-04 | 苏州艾可瑞斯生物科技有限公司 | 一种ApoA-II、ApoC-II检测混合质控品及其制备方法 |
Family Cites Families (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CH621479A5 (uk) | 1977-08-05 | 1981-02-13 | Battelle Memorial Institute | |
| CA1173360A (en) | 1979-06-22 | 1984-08-28 | Jurg Schrank | Pharmaceutical preparations |
| FR2521565B1 (fr) | 1982-02-17 | 1985-07-05 | Dior Sa Parfums Christian | Melange pulverulent de constituants lipidiques et de constituants hydrophobes, procede pour le preparer, phases lamellaires lipidiques hydratees et procede de fabrication, compositions pharmaceutiques ou cosmetiques comportant des phases lamellaires lipidiques hydratees |
| US4880635B1 (en) | 1984-08-08 | 1996-07-02 | Liposome Company | Dehydrated liposomes |
| US4857319A (en) | 1985-01-11 | 1989-08-15 | The Regents Of The University Of California | Method for preserving liposomes |
| US5178875A (en) * | 1991-01-14 | 1993-01-12 | The Board Of Regents, The University Of Texas System | Liposomal-polyene preliposomal powder and method for its preparation |
| CA1335077C (en) * | 1988-02-08 | 1995-04-04 | Henri Isliker | Process for the manufacture of apolipoproteins from human blood plasma or serum |
| US5077057A (en) * | 1989-04-05 | 1991-12-31 | The Regents Of The University Of California | Preparation of liposome and lipid complex compositions |
| US5753258A (en) * | 1990-10-19 | 1998-05-19 | University Of Florida | Artificial viral envelopes |
| US5733879A (en) * | 1992-06-12 | 1998-03-31 | N.V. Innogenetics, S.A. | Peptides and proteins, process for their preparation and their use as cholesterol acceptors |
| US5785984A (en) * | 1993-02-05 | 1998-07-28 | Kao Corporation | Taste-modifying method and bitterness-decreasing method |
| US5534241A (en) * | 1993-07-23 | 1996-07-09 | Torchilin; Vladimir P. | Amphipathic polychelating compounds and methods of use |
| US5652339A (en) * | 1993-12-31 | 1997-07-29 | Rotkreuzstiftung Zentrallaboratorium | Method of producing reconstituted lipoproteins |
| DE4416166C2 (de) * | 1994-05-06 | 1997-11-20 | Immuno Ag | Stabiles Präparat zur Behandlung von Blutgerinnungsstörungen |
| US5948756A (en) * | 1995-08-31 | 1999-09-07 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem | Therapeutic lipoprotein compositions |
| US6004925A (en) * | 1997-09-29 | 1999-12-21 | J. L. Dasseux | Apolipoprotein A-I agonists and their use to treat dyslipidemic disorders |
| US6287590B1 (en) | 1997-10-02 | 2001-09-11 | Esperion Therapeutics, Inc. | Peptide/lipid complex formation by co-lyophilization |
-
1997
- 1997-10-02 US US08/942,597 patent/US6287590B1/en not_active Expired - Fee Related
-
1998
- 1998-09-28 PL PL339654A patent/PL196579B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1998-09-28 KR KR1020007003586A patent/KR100588241B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1998-09-28 NZ NZ503721A patent/NZ503721A/en not_active IP Right Cessation
- 1998-09-28 AU AU96715/98A patent/AU749344B2/en not_active Ceased
- 1998-09-28 ES ES98950743T patent/ES2217591T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1998-09-28 JP JP2000514617A patent/JP2001522781A/ja not_active Withdrawn
- 1998-09-28 EP EP98950743A patent/EP1019025B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-09-28 UA UA2000042492A patent/UA71551C2/uk unknown
- 1998-09-28 EP EP03015963A patent/EP1358874A1/en not_active Withdrawn
- 1998-09-28 IL IL13532298A patent/IL135322A/xx not_active IP Right Cessation
- 1998-09-28 RU RU2000111523/15A patent/RU2224506C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1998-09-28 CA CA002305704A patent/CA2305704C/en not_active Expired - Fee Related
- 1998-09-28 CN CNB988118181A patent/CN100415210C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1998-09-28 AT AT98950743T patent/ATE260644T1/de not_active IP Right Cessation
- 1998-09-28 DE DE69822176T patent/DE69822176T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-09-28 WO PCT/US1998/020330 patent/WO1999017740A1/en active IP Right Grant
- 1998-09-28 PT PT98950743T patent/PT1019025E/pt unknown
- 1998-09-28 DK DK98950743T patent/DK1019025T3/da active
- 1998-09-28 HU HU0003930A patent/HUP0003930A3/hu unknown
-
2000
- 2000-03-31 NO NO20001683A patent/NO329155B1/no not_active IP Right Cessation
- 2000-08-21 US US09/642,363 patent/US6455088B1/en not_active Expired - Fee Related
-
2002
- 2002-08-12 AU AU2002300504A patent/AU2002300504B2/en not_active Ceased
- 2002-09-23 US US10/252,940 patent/US7189411B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2007
- 2007-03-08 US US11/683,784 patent/US20070167351A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| UA71551C2 (en) | Formation of peptide/lipid vesicles and complexes through co-lyophilization of peptides | |
| FI86371C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av farmaceutiska liposomkompositioner. | |
| FI63856B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av liposom-precursorer | |
| EP0555229B1 (en) | Accumulation of amino acids and peptides into liposomes | |
| RU2000111523A (ru) | Образование пептид/липидного комплекса путем совместной лиофилизации | |
| ES2236919T3 (es) | Metodo para preparar composiciones farmaceuticas de particulas lipidicas que comprenden un agente lipidico y una proteina. | |
| CA2221310A1 (en) | Improved liposomal formulation | |
| WO1991004019A1 (en) | Therapeutic peptides and proteins | |
| IE911231A1 (en) | Long-acting liposome peptide pharmaceutical products and¹processes for the preparation thereof | |
| Cserhåti et al. | Interaction of phospholipids with proteins and peptides. New advances IV | |
| JPS6362490B2 (uk) | ||
| MXPA00003132A (en) | Peptide/lipid complex formation by co-lyophilization | |
| JP2660341B2 (ja) | リポソーム製剤およびその製造法 |