UA127099C2 - БІОТЕХНОЛОГІЧНЕ ОДЕРЖАННЯ <font face="Symbol">w</font>-ФУНКЦІОНАЛІЗОВАНИХ КАРБОНОВИХ КИСЛОТ І ЇХНІХ ЕСТЕРІВ - Google Patents

БІОТЕХНОЛОГІЧНЕ ОДЕРЖАННЯ <font face="Symbol">w</font>-ФУНКЦІОНАЛІЗОВАНИХ КАРБОНОВИХ КИСЛОТ І ЇХНІХ ЕСТЕРІВ Download PDF

Info

Publication number
UA127099C2
UA127099C2 UAA201611957A UAA201611957A UA127099C2 UA 127099 C2 UA127099 C2 UA 127099C2 UA A201611957 A UAA201611957 A UA A201611957A UA A201611957 A UAA201611957 A UA A201611957A UA 127099 C2 UA127099 C2 UA 127099C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
ester
acid
cell
enzyme
mai
Prior art date
Application number
UAA201611957A
Other languages
English (en)
Inventor
Штеффен ШАФФЕР
Томас ХАС
Вільгельм Брюггінг
Ральф Майєр
Original Assignee
Евонік Оперейшнс Гмбх
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Евонік Оперейшнс Гмбх filed Critical Евонік Оперейшнс Гмбх
Publication of UA127099C2 publication Critical patent/UA127099C2/uk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/001—Amines; Imines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/62—Carboxylic acid esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/52—Genes encoding for enzymes or proenzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/0006—Oxidoreductases (1.) acting on CH-OH groups as donors (1.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
    • C12N9/0071—Oxidoreductases (1.) acting on paired donors with incorporation of molecular oxygen (1.14)
    • C12N9/0077—Oxidoreductases (1.) acting on paired donors with incorporation of molecular oxygen (1.14) with a reduced iron-sulfur protein as one donor (1.14.15)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/10—Transferases (2.)
    • C12N9/1025—Acyltransferases (2.3)
    • C12N9/1029—Acyltransferases (2.3) transferring groups other than amino-acyl groups (2.3.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/10—Transferases (2.)
    • C12N9/1096—Transferases (2.) transferring nitrogenous groups (2.6)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/02—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/24—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carbonyl group
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6436—Fatty acid esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6436—Fatty acid esters
    • C12P7/649—Biodiesel, i.e. fatty acid alkyl esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y101/00—Oxidoreductases acting on the CH-OH group of donors (1.1)
    • C12Y101/01—Oxidoreductases acting on the CH-OH group of donors (1.1) with NAD+ or NADP+ as acceptor (1.1.1)
    • C12Y101/01001—Alcohol dehydrogenase (1.1.1.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y101/00—Oxidoreductases acting on the CH-OH group of donors (1.1)
    • C12Y101/01—Oxidoreductases acting on the CH-OH group of donors (1.1) with NAD+ or NADP+ as acceptor (1.1.1)
    • C12Y101/01002—Alcohol dehydrogenase (NADP+) (1.1.1.2), i.e. aldehyde reductase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y101/00—Oxidoreductases acting on the CH-OH group of donors (1.1)
    • C12Y101/03—Oxidoreductases acting on the CH-OH group of donors (1.1) with a oxygen as acceptor (1.1.3)
    • C12Y101/0302—Long-chain-alcohol oxidase (1.1.3.20)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y114/00—Oxidoreductases acting on paired donors, with incorporation or reduction of molecular oxygen (1.14)
    • C12Y114/15—Oxidoreductases acting on paired donors, with incorporation or reduction of molecular oxygen (1.14) with reduced iron-sulfur protein as one donor, and incorporation of one atom of oxygen (1.14.15)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y114/00—Oxidoreductases acting on paired donors, with incorporation or reduction of molecular oxygen (1.14)
    • C12Y114/15—Oxidoreductases acting on paired donors, with incorporation or reduction of molecular oxygen (1.14) with reduced iron-sulfur protein as one donor, and incorporation of one atom of oxygen (1.14.15)
    • C12Y114/15003—Alkane 1-monooxygenase (1.14.15.3)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y203/00—Acyltransferases (2.3)
    • C12Y203/01—Acyltransferases (2.3) transferring groups other than amino-acyl groups (2.3.1)
    • C12Y203/01075—Long-chain-alcohol O-fatty-acyltransferase (2.3.1.75)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y203/00—Acyltransferases (2.3)
    • C12Y203/01—Acyltransferases (2.3) transferring groups other than amino-acyl groups (2.3.1)
    • C12Y203/01084—Alcohol O-acetyltransferase (2.3.1.84)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y206/00—Transferases transferring nitrogenous groups (2.6)
    • C12Y206/01—Transaminases (2.6.1)
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
    • Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
    • Y02E50/10—Biofuels, e.g. bio-diesel

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

Винахід стосується клітини мікроорганізму для одержання естеру ɷ-функціоналізованої карбонової кислоти з ундекану й/або додекану, де клітина є генетично модифікованою для збільшення експресії відносно клітини дикого типу AlkB-алкангідроксилази й синтази воску-естеру, де АlkВ-алкангідроксилаза має амінокислотну послідовність SEQ ID NO:1 і синтаза воску-естеру має амінокислотну послідовність SEQ ID NO:2, де клітина генетично модифікована для збільшення експресії відносно клітини дикого типу ферменту, здатного до перетворення естеру ɷ-оксоалканової кислоти на відповідний естер ɷ-аміноалканової кислоти, де вказаний фермент являє собою ɷ-трансаміназу під EC 2.6.1; і де клітина не містить вже існуючої генетичної модифікації, яка збільшує експресію відносно клітини дикого типу одного з наступних ферментів, вибраних із групи, що включає: ацил-АСР-тіоестеразу під EC 3.1.2.14 або EC 3.1.2.22, ацил-КоА-тіоестеразу під EC 3.1.2.2, EC 3.1.2.18, EC 3.1.2.19, EC 3.1.2.20 або EC 3.1.2.22, ацил-КоА:АСР-трансацилазу, полікетидсинтазу й синтазу гексанової кислоти. Також винахід належить до способу одержання естеру о-функціоналізованої карбонової кислоти, де спосіб включає стадію приведення заявленої клітини контакт з ундеканом й/або додеканом. 2

Description

винахід належить до способу одержання естеру о-функціоналізованої карбонової кислоти, де спосіб включає стадію приведення заявленої клітини контакт з ундеканом й/або додеканом.
Даний винахід стосується біотехнологічного способу одержання естерів /0- функціоналізованих карбонових кислот. Зокрема, у способі може застосовуватися алкан як вихідний матеріал і генетично модифікована клітина для перетворення алкану на відповідний естер ю-функціоналізованої карбонової кислоти.
ПЕРЕДУМОВИ СТВОРЕННЯ ВИНАХОДУ ош-Функціоналізовані карбонові кислоти та відповідні естери, включаючи амінокарбонові кислоти та їхні відповідні лактами, такі як 0-амінолауринова кислота, о-аміноундеканова кислота, лауролактам тощо, являють собою важливі мономери для одержання високоякісних поліамідів. Деякі з існуючих хімічних технологій, які застосовували для одержання цих мономерів із нафтохімічної або відновлюваної сировини, включають: ї) одержання о-амінолауринової кислоти з метилового естеру лауринової кислоти, фракції біодизеля, який одержують із пальмоядрової або кокосової олії; і) одержання 0-аміноундеканової кислоти з рицинолеїнової кислоти, яку одержують із рицинової олії; ії) одержання лауролактаму з бутадієну.
Хоча всі ці три способи одержання залишаються конкурентоспроможними, їхня конкурентоспроможність у вказаному місцерозташуванні та моменті часу залежить від ряду факторів, включаючи вартість сировинних матеріалів і затрати енергії на виконання способів.
З рівня техніки відомо декілька біотехнологічних засобів для одержання /о- функціоналізованих карбонових кислот і/або їхніх естерів. Наприклад, генетично модифіковані клітини, які здатні виробляти 0-функціоналізовані карбонові кислоти з карбонової кислоти, яка застосовується як субстрат, були описані раніше щонайменше в М/О2009077461 і ЕР2322598.
Подібна процедура із застосуванням клітин Сапдіда описана в УМО2011008232, де в клітинах був блокований шлях В-окиснення, та Ф-функціоналізовані карбонові кислоти одержували з жирної кислоти, яку застосовували як субстрат. Ці способи мають недолік застосування жирних кислот як вихідного матеріалу. Це зумовлено тим, що застосовувані жирні кислоти та їхні похідні переважно одержують виключно з олій або жирів рослинного та тваринного походження. Жири тваринного походження як сировинні матеріали все ще є не дуже прийнятними для клієнтів, а олії рослинного походження, які містять жирні кислоти з ланцюгом малої та середньої довжини, або складно одержувати, або їх одержують лише у тропічних районах (що є наслідком знищення дощових лісів). Крім того, конкретні сировинні матеріали з олій або жирів рослинного й тваринного походження мають специфічні, але визначені профілі жирних кислот, що призводить до сполученого одержання.
У МО2013024114 розкритий спосіб одержання о-функціоналізованих карбонових кислот і/або їхніх естерів з простих джерел вуглецю, таких як глюкоза, сахароза, арабіноза, ксилоза, лактоза, фруктоза, мальтоза, меласа, крохмаль, целюлоза та геміцелюлоза, але також гліцерин або дуже прості органічні молекули, такі як СО», СО або синтез-газ. Одержання цих прості цукрів, зокрема глюкози, звичайно є більш затратним. Спосіб одержання ю-функціоналізованих карбонових кислот і/або їхніх естерів із простих джерел вуглецю також може вважатися складним, оскільки клітини, які застосовують у цьому способі, спочатку потрібно піддати генетичній модифікації для збільшення одержання карбонових кислот із цих простих джерел вуглецю. Це, таким чином, збільшує витрати на одержання.
Отже, в галузі техніки існує потреба в способі одержання естерів Ф0-функціоналізованих карбонових кислот з іншого джерела сировинного матеріалу, який міг би забезпечити ефективне та продуктивне одержання.
ОПИС ВИНАХОДУ
Даний винахід намагається вирішити вищезгадані проблеми шляхом забезпечення щонайменше однієї генетично модифікованої клітини мікроорганізму, яка здатна продукувати щонайменше один естер Ф-функціоналізованої карбонової кислоти із щонайменше одного алкану. Естер ш-функціоналізованої карбонової кислоти може бути вибраним із групи, що включає естери о-гідрокси-, 0-оксо-, дш-карбокси- та д-амінокарбонових кислот. Застосування цих генетично модифікованих клітин у способі одержання естерів Ф-функціоналізованих карбонових кислот може додавати гнучкості в одержанні цих сполук шляхом забезпечення можливості застосування більш доступного альтернативного нафтохімічного сировинного матеріалу для їх одержання. Також застосування цільноклітинних біокаталізаторів, здатних поєднувати всі засоби для перетворення алканів на естери жирних кислот та їхні відповідні (0- функціоналізовані похідні в їхніх межах, робить процес перетворення простішим, оскільки в перетворенні задіяна лише невелика кількість стадій процесу. Також ліквідується залежність від жирних кислот і простих джерел вуглецю як вуглецевого субстрату. бо Згідно з першим аспектом даного винаходу передбачена клітина мікроорганізму для одержання щонайменше одного оестеру Ф-функціоналізованої карбонової кислоти із щонайменше одного алкану, де клітина має генетичну модифікацію для збільшення експресії відносно клітини дикого типу: () ферменту Е1, здатного до перетворення алкану на відповідний 1-алканол; (і) ферменту Е2, здатного до перетворення 1-алканолу з (ї) на відповідний 1-алканаль; (ії) ферменту ЕЗ, здатного до перетворення 1-алканалю з (ії) на відповідну алканову кислоту; (мі) ферменту Е4, здатного до перетворення алканової кислоти з (ії) на відповідний естер алканової кислоти; та (м) ферменту Е5, здатного до перетворення естеру алканової кислоти з (ім) на відповідний естер о-гідроксіалканової кислоти.
Клітина мікроорганізму згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу стосується клітини, у якої відсутня вже існуюча/попередня модифікація для збільшення утворення карбонової кислоти або карбоксилатного естеру із щонайменше одного простого джерела вуглецю.
Вважається, що термін "просте джерело вуглецю" означає джерела вуглецю, в яких у вуглецевому кістяку щонайменше один зв'язок С-С був зруйнований. Зокрема, прості джерела вуглецю можуть являти собою щонайменше один вуглевод, такий як, наприклад, глюкоза, сахароза, арабіноза, ксилоза, лактоза, фруктоза, мальтоза, меласа, крохмаль, целюлоза та геміцелюлоза, джерела вуглецю також можуть включати гліцерин або дуже прості органічні молекули, такі як СО», СО або синтез-газ. Більш конкретно, клітина мікроорганізму згідно з будь- яким із аспектів даного винаходу може не бути генетично модифікованою для збільшення експресії відносно клітини дикого типу щонайменше одного з наступних ферментів: - Еоацил-АСР-тіоестерази під ЕС 3.1.2.14 або ЕС 3.1.2.22, - Е»гі ацил-КоА-тіоестерази під ЕС 3.1.2.2, ЕС 3.1.2.18, ЕС 3.1.2.19, ЕС 3.1.2.20 або ЕС
ДЦ 31.2.22, - Ег2 ацил-КоА:АСР-трансацилази, - Егз полікетидсинтази, яка каталізує реакцію, що задіяна в синтезі карбонових кислот та карбоксилатних естерів, і - Еггсинтази гексанової кислоти.
В одному прикладі клітина згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу може містити додаткову генетичну модифікацію для збільшення експресії відносно клітини дикого типу: (м) ферменту Евє, здатного до перетворення естеру о-гідроксіалканової кислоти з (м) на відповідний естер д-оксоалканової кислоти; й (мі) ферменту Е7, здатного до перетворення естеру Ф-оксоалканової кислоти з (мі) на відповідний естер д-аміноалканової кислоти.
В іншому прикладі клітина згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу може містити додаткову генетичну модифікацію для збільшення експресії відносно клітини дикого типу: (м) ферменту Евє, здатного до перетворення естеру о-гідроксіалканової кислоти з (м) на відповідний естер Ф-оксоалканової кислоти; (мі) ферменту Еїз, здатного до перетворення естеру ш-оксоалканової кислоти з (мі) на відповідний естер д0-карбоксіалканової кислоти, й (мії) ферменту Е:4, здатного до перетворення естеру од-карбоксіалканової кислоти з (мі) на відповідний діестер о-карбоксіалканової кислоти.
Клітини згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу можна застосовувати для одержання естеру ю-функціоналізованої карбонової кислоти з усіх алканів з високим виходом продукту на один прохід за одиницю часу, високим виходом вуглецю та високою концентрацією в культуральному супернатанті. Внаслідок цих переваг полегшується ефективна обробка.
Вираз "дикого типу", застосовуваний в даному документі стосовно клітини або мікроорганізму, може означати клітину зі структурою геному, яка має форму, що зустрічається в природних умовах у дикій природі. Термін можна застосовувати як до клітини у цілому, такі до індивідуальних генів. Термін "дикого типу" також може включати клітини, які були генетично модифіковані в інших аспектах (тобто с точки зору одного або більше генів), але не стосовно генів, що становлять інтерес. Отже, термін "дикого типу" не включає такі клітини, в яких генні послідовності специфічних генів, що становлять інтерес, були змінені щонайменше частково людиною із застосуванням рекомбінантних способів. Таким чином, клітина дикого типу згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу стосується клітини, яка не містить генетичної мутації стосовно геному в цілому й/або конкретного гена. Отже, в одному прикладі клітина дикого типу стосовно ферменту Еї може означати клітину, яка характеризується природною/незміненою експресією ферменту Е;: в клітині. Клітину дикого типу стосовно ферменту Е», Ез, Ел, Е5, Ев, Е?, 60 Ев, Е», Его, Еч1ї, Еї2, Еїз, Еї4, ЕїБ тощо можна тлумачити так само, та це може стосуватися клітини, яка характеризується природною/незміненою експресією ферменту Е»г, Ез, Ел, Е5, Ев, Е7,
Ев, Ев, Его, Ен, Еї2, Езз, Ет4, Еї5 тощо, відповідно, у клітині.
Будь-які ферменти, які застосовують згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу, можуть являти собою виділений фермент. Зокрема, ферменти, які застосовують згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу, можна застосовувати в активному стані та за наявності всіх кофакторів, субстратів, допоміжних і/або активуючих поліпептидів або факторів, необхідних для їхньої активності. Застосовуваний у даному документі термін "виділений" означає, що фермент, що становить інтерес, є збагаченим відносно клітини, в якій він зустрічається в природних умовах. Фермент може бути збагаченим за результатами електрофорезу в поліакриламідному гелі з додаванням 505 і/або аналізів активності. Наприклад, фермент, що становить інтерес, може становити більше 5, 10, 20, 50, 75, 80, 85, 90, 95 або 99 процентів від усіх поліпептидів, які присутні в препараті, на основі з візуального контролю поліакриламідного гелю після фарбування барвником Кумассі синій.
Фермент, застосовуваний згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу, може бути рекомбінантним. Застосовуваний в даному документі термін "рекомбінантний" стосується молекули або продукту, який кодується такою молекулою, зокрема, поліпептиду або нуклеїнової кислоти, які, самі по собі, не зустрічаються в природних умовах, але є результатом генної інженерії, або стосується клітини, яка містить рекомбінантну молекулу. Наприклад, молекула нуклеїнової кислоти є рекомбінантною, якщо вона містить промотор, функціонально пов'язаний із послідовністю, яка кодує каталітично активний поліпептид, і промотор був сконструйований таким чином, щоб каталітично активний поліпептид піддавався надекспресії відносно рівня поліпептиду у відповідній клітині дикого типу, яка містить вихідну незмінену молекулу нуклеїнової кислоти.
Фахівець у даній галузі зможе застосувати будь-який спосіб, відомий з рівня техніки, для генетичної модифікації клітини або мікроорганізму. Згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу генетично модифікована клітина може бути генетично модифікована таким чином, що за визначений інтервал часу, в межах 2 годин, зокрема, в межах 8 годин або 24 годин, вона утворює щонайменше в декілька разів, переважно щонайменше в 10 разів, щонайменше в 100 разів, щонайменше в 1000 разів або щонайменше в 10000 разів більше естеру оФ- функціоналізованої карбонової кислоти, ніж клітина дикого типу. Збільшення утворення продукту можна визначити, наприклад, шляхом культивування клітини згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу та клітини дикого типу, кожної окремо, за однакових умов (однакова щільність клітин, однакове поживне середовище, однакові умови культивування) протягом визначеного інтервалу часу в придатному поживному середовищі та потім визначення кількості цільового продукту (естер ф-функціоналізованої карбонової кислоти) в поживному середовищі.
Генетично модифікована клітина або мікроорганізм може генетично відрізнятися від клітини або мікроорганізму дикого типу. Генетична відмінність між генетично модифікованим мікроорганізмом згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу та мікроорганізмом дикого типу може полягати в наявності повного гена, амінокислоти, нуклеотиду тощо в генетично модифікованому мікроорганізмі, які можуть бути відсутні в мікроорганізмі дикого типу. В одному прикладі генетично модифікований мікроорганізм згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу може містити ферменти, які забезпечують можливість мікроорганізму продукувати більшу кількість 1-алканолів, 1-алканалів, алканових кислот, естерів алканових кислот, естерів омега- гідроксіалканових кислот тощо відносно клітин дикого типу. Мікроорганізм дикого типу порівняно з генетично модифікованим мікроорганізмом за даним винаходом не має активності або в нього відсутня виявна активність ферментів, які забезпечують можливість генетично модифікованого мікроорганізму продукувати 1-алканоли, 1-алканалі, алканові кислоти, естери алканових кислот, естери омега-гідроксіалканових кислот тощо. Застосовуваний у даному документі термін "генетично модифікований мікроорганізм" може застосовуватися взаємозамінно з терміном "генетично модифікована клітина". Генетичну модифікацію згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу здійснюють у клітині мікроорганізму.
Клітини згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу є генетично трансформованими згідно з будь-яким із способів, відомих з рівня техніки. Зокрема, клітини можна одержувати згідно зі способом, розкритим у М/О2013024114.
Застосовуваний в даному документі вираз "генетично модифікована клітина характеризується збільшеною активністю, порівняно з клітиною дикого типу, у ферментів" стосується активності відповідного ферменту, яка збільшена щонайменше в 2 рази, зокрема щонайменше в 10 разів, більш конкретно щонайменше в 100 разів, ще більш конкретно щонайменше в 1000 разів і навіть більш конкретно щонайменше в 10000 разів. бо Застосовуваний в даному документі вираз "збільшена активність ферменту" слід розуміти як збільшену внутрішньоклітинну активність. По суті, збілошення ферментативної активності можна досягти шляхом збільшення числа копій генної послідовності або генних послідовностей, які кодують фермент, застосування сильного промотору або використання гена або алеля, які кодують відповідний фермент зі збільшеною активністю, зміни генів згідно з частотою використання кодонів, підвищення періоду напівжиття МРНК або ферменту різними способами, модифікації регуляції експресії гена та необов'язково шляхом комбінування цих засобів.
Генетично модифіковані клітини, які застосовують згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу, одержують, наприклад, шляхом трансформації, трансдукції, кон'югації або комбінування цих способів із застосуванням вектора, який містить потрібний ген, алель цього гена або його частини, та вектора, який робить можливою експресію даного гена. Зокрема, гетерологічної експресії досягають шляхом інтеграції гена або алелів у хромосому клітини або за допомогою вектора, що реплікується поза хромосомами.
В тому ж контексті вираз "знижена активність ферменту Ех, застосовуваний із посиланням на будь-який з аспектів даного винаходу, можна розуміти як такий, що позначає активність, яка знижена щонайменше в 0,5 разу, зокрема, щонайменше в 0,1 разу, більш конкретно щонайменше в 0,01 разу, ще більш конкретно щонайменше в 0,001 разу та найбільш конкретно щонайменше в 0,0001 разу. Вираз "знижена активність" також припускає відсутність виявної активності ("нульова активність". Зниження активності визначеного ферменту можна здійснювати, наприклад, шляхом селективної мутації або за допомогою інших засобів зниження активності визначеного ферменту, відомих фахівцю в даній галузі. Зокрема, фахівець в даній галузі знайде інструкції з модифікації та зниження експресії білка та супутнього зменшення ферментативної активності шляхом порушення специфічних генів, наприклад, щонайменше в бибеаици еї аІ. 2009. Біпопй 5 Кбпт. 2008., Ї ее еї аІ., 2009 тощо. Зниження ферментативної активності в клітині згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу можна досягати шляхом модифікації гена, що містить одну з послідовностей нуклеїнових кислот, де модифікація вибрана з групи, що містить, включає вставку чужорідної ДНК в ген, делецію щонайменше частин гена, точкові мутації в генній послідовності, РНК-інтерференцію (зікМА), антисенсову
РНК або модифікацію (вставку, делецію або точкові мутації) регуляторних послідовностей, таких як, наприклад, промотори й термінатори, або сайтів зв'язування рибосом, які фланкують даний ген.
У зв'язку з цим чужорідну ДНК слід розуміти як таку, що має на увазі будь-яку послідовність
ДНК, яка є "чужорідною" для гена (а не для організму), тобто через це ендогенні послідовності
ДНК можуть також грати роль "чужорідної ДНК". У зв'язку з цим особливо переважним є те, щоб порушення гена здійснювали шляхом вставки гена селективного маркера, таким чином чужорідна ДНК являє собою ген селективного маркера, при цьому вставку переважно здійснюють шляхом гомологічної рекомбінації в генному локусі.
Експресію ферментів і генів, згаданих вище та всіх згаданих нижче, можна визначати за допомогою 1- та 2-мірного розділення білків в гелі з подальшою оптичною ідентифікацією концентрації білка в гелі за допомогою придатного програмного забезпечення для оцінки.
Якщо збільшення ферментативної активності базується виключно на збільшенні експресії відповідного гена, то кількісну оцінку збільшення ферментативної активності можна проводити просто шляхом порівняння результатів 1- та/або 2-мірного розділення білків у гелі в клітині дикого типу та генетично модифікованій клітині. Загальноприйнятним способом для одержання гелів з білками бактерій і для ідентифікації білків є процедура, описана Негтапп еї аї. (ЕіесіторНогевів, 22: 1712-23 (2001). Концентрацію білка також можна аналізувати за допомогою вестерн-блот-гібридизації з антитілом, специфічним щодо білка, що підлягає визначенню (Затбгоок еї аї., МоіІесціаг Сіопіпд: а Іабогаїогу тапиаї, 2па Еа. Соїд Зрігіпд Нагог І арогаюгу
Ргезв5, Соїд 5ргіпд Нагброг, М.М. О5А, 1989), з подальшою оптичною оцінкою із застосуванням придатного програмного забезпечення для визначення концентрації (І ойаи5 апа Меуег (1989)
ВіозреКігит, 5: 32-39; І онереїсн (1999), Апдєеулапаїє Спетіє 111: 2630-2647). Даний спосіб можна обирати завжди, коли продукти реакції, яка каталізується ферментативною активністю, що підлягає визначенню, можуть швидко метаболізуватися в мікроорганізмі або ж активність у дикого типу сама по собі є надто низькою, щоб існувала можливість задовільного визначення ферментативної активності, що підлягає визначенню, на основі утворення продукту.
Зокрема, - фермент Е: може бути вибраним із групи, що включає Р450-алкангідроксилази (Еа-) й АІКВ- алкангідроксилази (Еь) під ЕС 1.14.15.3; - фермент Ег може бути вибраним із групи, що включає Р450-алкангідроксилази (Еаз), АІКВ- алкангідроксилази (Еь) під ЕС 1.14.15.3, алкогольоксидази (Ес) під ЕС 1.1.3.20 і бо алкогольдегідрогенази (Евд);
- фермент Ез вибирають із групи, що включає Р450-алкангідроксилази (Ез) під ЕС 1.14.15.3-,
АЇКкВ-алкангідроксилази (Еь) під ЕС 1.14.15.3, альдегіддегідрогенази (Еге), біфункціональні алкогольоксидази (Ес) під ЕС 1.1.3.20, біфункціональні АЇїЇК.)-алкогольдегідрогенази (Ей) і біфункціональні алкогольдегідрогенази (Еавї) під ЕС 1.1.1.1 або ЕС 1.1.1.2, де Ес, Еазі й Евї здатні до окиснення 1-алканолу через 1-алканаль безпосередньо у відповідну алканову кислоту; - фермент Ех може бути вибраним із групи, що включає синтази воску-естеру (Ех) і алкоголь-
О-ацилтрансферази (Е»б); - фермент Е5 може бути вибраним із групи, що включає Р450-алкангідроксилази (Ез) й АІКВ- алкангідроксилази (Еь) під ЕС 1.14.15.3; - фермент Еє може бути вибраним із групи, що включає Р450-алкангідроксилази (Ез), АІКВ- алкангідроксилази (Еь) під ЕС 1.14.15.3, алкогольоксидази (Ес) і алкогольдегідрогенази (Ед); - фермент Е7 може являти собою о-трансаміназу (Ен).
В одному прикладі кожний з ферментів Ен, Е», Ез і Е5 може являти собою відмінний фермент, який може бути здатним здійснювати свою активність. Наприклад, Е: може являти собою АЇКВ- алкангідроксилази (Еь), Ег може являти собою алкогольоксидазу (Ес), Ез може являти собою біфункціональну АЇКО-алкогольдегідрогеназу, а Еє може являти собою АїЇКкКВ-алкангідроксилазу (Ею). В іншому прикладі Е: може являти собою Р4і50-алкангідроксилазу (Ез), Ег може являти собою алкогольдегідрогеназу (Ес), Ез може являти собою альдегіддегідрогеназу (Еге), а ЕБ може являти собою Р450-алкангідроксилазу. Зокрема, будь-яка комбінація ферментів з Ен, Е2, Ез і Е5 може застосовуватися для здійснення їхніх специфічних функцій. У додатковому прикладі Ен, Ег,
Ез і Е5 можуть являти собою один і той самий фермент. В цьому прикладі Ен, Е», Ез і Е5 можуть бути вибрані з групи, що включає Рі450-алкангідроксилази (Ез) й АІКкКВ-алкангідроксилази (Ев). В одному прикладі Еї, Е2, Ез і Еє можуть являти собою Р4і50-алкангідроксилази (Ез). В цьому прикладі клітина згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу характеризується збільшеною експресією відносно клітини дикого типу Р450-алкангідроксилаз (Ез), що відповідає функції ферментів Еї, Ег2, Ез і Е5. В іншому прикладі Е:ї, Е», Ез і Ехє можуть являти собою АЇКВ- алкангідроксилазу (Еь). В цьому прикладі клітина згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу характеризується збільшеною експресією відносно клітини дикого типу АІКВ-алкангідроксилази (Ев), що відповідає функції ферментів Ен, Е», Ез і Ев5.
Ферменти Е--Ен можуть містити поліпептидну послідовність, у якій до 60 95, переважно до 25 95, конкретно до 15 95, зокрема до 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 або 1 95 амінокислотних залишків модифіковані порівняно з наведеними нижче еталонними послідовностями (номерами доступу) за рахунок делеції, вставки, заміни або їх комбінації, і яка все ще володіє щонайменше 50 95, переважно 6595, особливо переважно 8095, зокрема більш ніж 90 95 активністю білка з відповідною наведеною нижче еталонною послідовністю, де мається на увазі, що 100 95 активність еталонного білка означає збільшення активності клітин, які застосовують як біокаталізатор, тобто кількості речовини, що перетворюється за одиницю часу, базуючись на застосовуваній кількості клітин (одиниці на грам сухої речовини клітин (Од/г СОМ), порівняно з активністю біокаталізатора за відсутності еталонного білка.
Фахівцям у даній галузі відомі модифікації амінокислотних залишків вказаної поліпептидної послідовності, які не ведуть до значних модифікацій властивостей і функції вказаного поліпептиду. Таким чином, наприклад, багато амінокислот часто без проблем можна заміняти одна на іншу; прикладами таких придатних амінокислотних замін є: Аа на Зег; Агу на Гуз; Авп на Сіп або Ні; Ар на Сім; Су на 5ег; СіІп на Авп; Сім на Ар; Су на Рго; Ні на Азп або Сіп; Пе на Г ем або Маї; І еи на Меї або Маї; Гу на Аго, або Сіп, або Сіи; Меї на Г ем або Іе; Рпе на Меї, або І ем, або Туг; бег на Тпг; Тпиг на 5ег; Тгр на Туг; Туг на Тгтр або Ре; Маї на Іе або І еи. Також відомо, що модифікації, зокрема, за М- або С-кінцем поліпептиду, у формі, наприклад, амінокислотних вставок або делецій, часто не спричиняють значного впливу на функцію поліпептиду.
Номери доступу, які викладені у зв'язку з даним винаходом, які згадуються протягом усього даного опису, відповідають записам у базі даних МСВІ РгоївіпВапк на дату 26.07.2011; як правило, номер версії запису позначають у даному документі за допомогою "цифри", наприклад «1.
Всі згадані процентні вмісти (95) являють собою, якщо не вказано інше, масовий процент.
Згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу клітина мікроорганізму може бути вибрана з видів бактерій з групи, що включає АБіоїгорпіа, Асагуоспіогіх, Асситциірасіег, Асеїїмібгіо,
Асеїорасієї, Асеїопаіюбрішт, Асеїопета, АсПпготобасіє!, Асідатіпососсив5, Асідітісторішт,
Асідірпійшт, Асіййпіорасійи5, Асідобасієгит, Асідоїептив5, Асідомогах, Асіпейобасівєг,
Асіїіпорасійй5, Асііпотусе5, Асііповуппета, Аегососсив, Аеготісторішт, Аеготопав, АЇїріа, бО Адагедаїйбасієг, Адгобасієйцт, АНгепвіа, АККеппапвіа, АІсапімогах, АїІпсусіїрпішв5, АїІпсусіобасійсв5,
Аїїмівгіо, АїКаїйїтпісоїа, АКкаїїрпіив5, АПоспготаїйшт, АПеготопада!ев, АПеготопазв,
Атіпорасієгтішт, Атіпотопабх, Аттопіїех, Атусоіарвіх, Атусоїісісосси5, Апабраєпа,
Апаегорасиійт, Апаегососсив, Апаегоїибії5, Апаеєгоїпєеа, Апаеготухобасіє!ї, Апаеєговіїрев,
Апаегоїипси5, Апаріазєта, Апохубрасійй5, Адиїїех, Агсапобвасієгішт, Агсобасієї, Аготаю|єит,
АпПпгобрасієї, АпПгозріга, Авііїссасаціїв, Аїоробрішт, А!гапітопа5, Алоагсив, А?гогппі2гоБіит,
А?озріпшт, Агоїобрасієї, Васіїйш5, ВапопеЇйа, Вабзхіпа, Вайтаппіа, ВавеїІомірпо, Веддіаїса,
Веї|епіпсКіа, ВептапеМПа, Вешепрегдіа, Війдобасієгйт, Вірна, Віавіорігейшіа, Віашіа,
Віосптаппіа, Вогаеєїеїа, ВоітеїЇа, Вгаспубрасієегіцшт, Вгаспузріга, Вгадугпіг2обішт, ВгемірасіїШв5,
Вгемібасієгішт, Вгемипаійтопах, ВгисеМа, Висппега, ВиПеїдіа, ВиКпоїЇдегіа, Вшугімібгіо,
СаїадаїКаїїбасіїи5, СаїІдапаєгобасівг, СаїаісеїІміовікиріог, Са!іайетімібгіо, Сатіпірасіег,
Сатруобрасієї, Сагрохуадіргаспішт, Сагрохудоїйенптив, Сагаіобрасієгшт, Сагтобасівелт,
СагзопеїІа, Саїепірасієтішт, Саїепиіізрога, СаїюпеПйа, Саціобасієї, СеїПШіотопав, Сеїмірто,
Сепіїреда, СПеїаймогапе, СпПіогоПйехи5, СпПготобрасієййт, СНготопНаобасієї, Спопіобасіеєг,
СіїгеісеМа, Спгобасієг, Спгтотісгоріит, Сіамірбасієг, Сіоасатопав, Сіозійаішт, СоїїпзеїІа, СоїмеїГа,
Сотатопа5, Сопехірасієї, Сопагедібасієї, Соргобасіїйш5, Соргососсив, Соргоїпептобасівг,
СогаІїотагодагтйа, Сопобасієгійт, сотодепв, Согуперасієтійт, Сохівійа, СтосозрНнаєта, Стопобасієег,
Стуріобасієгцт, Сиргіамідиєх, Суапобішт, Суапоїйесе, СуїЇіпагозрепторзіх, Юеспіоготопав,
Оеїетірасієї, ЮОеПаІососсоіїде5, ЮОепаіодепітопах, ЮОеєіпососси5, ОеїШЩа, Оепітгоміргіо,
Оептасоссих, ЮОебвтозрога, ЮОезиГатгсцив5, ЮезиїрНаївїрасіїшт, Оезинййобасієгійт, ОезиПобасса,
Резинобасієтійт, РезиноБиїрив, РезиПососсив, Резинопаїіобіит, РезиНотістобіит,
Резиопаїгопозріга, Оезиогиаі5, ОезиПоїаієа, ОезийоЮютасиїшт, Юезиїпомірто, ОезиПигізрійПит,
ОезиНигобасієгшт, ОЮезиПШтотопах, ОеїПіобасієї, ОеїпіозиМомібтіо, Оіаїїєїег, БісНеІобасіег,
ОРісКеуа, Оісіуодіотив, Оієїгіа, Оіпогозеорасієї, Юогеа, ЕдмжагазівНа, ЕНпісніа, ЕїКепеїа,
ЕІнвітістобішт, Епаогійіа, Еппуагобасієї, Епіегорасієї, Епіегососсив, Ериорібзсійт, Епміпіа,
Егузіре!оїйтїх, ЕгушШгорасієї, Еб5сПегпспіа, ЕШапоїїдепеп5, Еибрасієтйт, Еибасіейт,
Ехіднобасієгішт, Раесаїїрасіепййт, Еепітопав5, Регмідобасієгит, Рібгобасієг, Ріпедоїдіа,
Ріехівіїре5, ЕгапсівеМйа, ЕгапКіа, Егисіобрасійй5, Риїмітагпа, Ривобрасієгішт, Саїбасієтіт,
СайПопейа, СагапегеМйа, СетеПйа, Сеттаїа, Сетртаїйтопа5, Сіеобасіїй5, Сеобасієг,
Сеодептаїйорніїив, СПІасієсоїа, СПоеобасієг, Сіоввіпа, Ссіисопасеїобасієг, Сюгдопіа, Стапиїїрасієг,
З0 СмгапиїїсаїеНа, Спітопіа, Наеторпніш5, Напеїа, Наїапаєгобіштп5, Наїапдіит, НаїЇотопазв,
НаІюотодозріга, НаїоїШеттоїйгіх, Наїпюїпіобасій5, НатіпопегІа, Неїїсобасіє!, Неїобасіепит,
Негбахрійнит, Нептіпіїтопав5, Негреїозірпоп, Нірреа, Ніг5спіа, Нізіорпійш5, НоадкКіпіа, Ноеїйва,
Ноідетапіа, Нуагодепімігда, Нудгодепобасишт, НуІетопеПа, Нурпотістобішт, Нурпотопав,
Ідіотатпа, Пуобасієг, Іпігазрогапдіит, Ізорієгісоїа, Ізозрпаєга, 9Уапірасієї, Чапіпіпобасієгіит, допевіа, щдопдиєїеїйа, Кападієїа, Кеїодиопісідепішт, Кіпеососсив, КіпдеПа, КіервзієїПа, Косипа,
Когірасієгї, Козтоїода, КтірбеїІа, Кієдопобасівг, Куїососсив, І абгепгіа, І асіобасі 5, І асіососсив,
І апгірасієї, І ашгоріа, Іамжвопіа, І едіопеїІа, І еїйвопіа, І епіїзрпаєга, І еріоїупабуа, Іеріозріга,
Іеріоїйгіх, Іеріоміснпіа, І еисоповіос, І ірегпібасієї, Іітпобасіеєг!, І ібіепа, ІоКіапеПМа, І шіейПа,
Гупдбуа, ГГувзіпірасіїй5, Масгтососси5, Мадпеїососси5, Мадпеїозріпшт, МапНеїа, МаппНеітіа,
Магісаціїв, Магіпійептивє, Магіпобрасієї, Магіпотопаб5, Маггіргоїшпдиб5, Маїтйтібвасієг,
Магуіпргуапіа, Медазрпаєта, Меіоїйпептив5, Меїїб5ососсив5, МезогПпігобішт, МеїПуїасіаірпішт,
Меїпуїїрішт, Меїпуіобасійй5, Меїпуїобасієї, МеїПпуіобасієгішт, МеїПпуіососсив5, МеїпПпуїіосузвіїв,
МеїНпуіотістобішт, Меїпуіорпада, МеїйпуїорпіаІез, Меїпуїозіпих5, МеїНпуіомегзайів, МеїНуіомогив,
Місторасієгійт, Містососсив, Містосоїєи5, Містосувії5, Містоїипагшв5, Місготопозрога, МіїзнокКеїа,
Мобішпсиб5, МоогеМйа, Могахейа, МогіеМПйа, Мусобасієпййт, Мухососси5, МаКатитгега,
Маїгапаєтобріи5, Меїівб5егпа, МеогісКейвіа, Мерішипіїбасієї, Мигайтасіог, Мигайиріог, Мигобасіег,
Мікососси5, Мігозотопав, Міго5оз5ріга, Мігозріга, Мосагаіа, Мосагаїіоіде5, Мосагаіорзів, Модшиагна,
Мозіос, Момозрпіпдобішт, Осеапіршцрив, Осеапісаціїв, Осеапісоїа, Осеапійегтив, Осеапорасійсв,
Оспгобасігит, Осіадесабасієг, ОдуззеїІа, Оіїдоїорна, ОіІзепеїїІа, Орішив, Огібасієгішт, Огієпійа,
Отійіпірасійи5, Об5сіПаюгіа, Овзсіїйоспіогіх, Охаїобасієг, Раепірасійй5, Рапіоєа, Рагасоссив,
Рагазсагдоміа, РагазинегеПа, Рагуірбасцшит, Рагмиітопа5, Раг/цшіагсціа, РабвівшигеїЇа, Равівша,
Ресіорасієтіит, Редіососсив, Редозрпаєга, Реїадібаса, Реїадібасієг, РеІобасієг, Реюїотасишт,
Реріопірнпійш5, Реріозігеріососси5, РегзерпопеїІа, Рейгоїода, Рпаеобасієгї, Рпазсоіагсіобасієтіит,
Рпепуіобасіетіит, Рпоїобасієтит, РігеЇПшІа, Ріапсіотусев, Ріапососсив, РіІезіосувіїв, Роїіаготопав,
Роїаготопав5, Роїтутогрпит, Роїуписіеобасієг, Рогібасієгіа, Ргоспіогососсив5, Ргоріопібасієтіит,
Ргоїви5, Ргомідепсіа, Реепдоапйеготопав, Рзепйдойамопіїгасіої, Рзепдотопавх, Рзепйдопосагаїйа,
Рзепйдогатівасіег, Рзейдомірто, Рзейдохапіпотопав, Рзуспгобасіег, Рзуспгтотопав,
РипісеїврійНит, РивзШтопавх, Ругатідобрасієї, Наппеїа, Раїбіопіа, Рарпіадіорзі5, Недієвїа,
ВеіпеКеа, Непірасієеглцт, НПігобішт, Аподобасієї, Нподососсив5, НПподоїегах, Нподотісгобіит, бо АПодорігеїїша, Аподорзейдотопав, НПодозрігнйшт, НісКейвіа, НісКейвбвієЇПа, Віезіа, Нозебритгіа, б
Возеїрішт, Нозейехив, Нозеобасієгї, Нозеотопав, Нозеомагіив5, Ноїпіа, Вибгімімах, Ниргобасіег,
Виедегтіа, Витіпососси5, ВшШйіа, бЗасспаготопозрога, бЗасспагорнадив, зЗасспагороїузрога, задійца, Заїїпізрога, ЗаІтопеїІа, Запдиїрасіє, Зсагдоміа, ЗебраїдеПа, Зеодпіїрагив, Зеієпотопав,
Зетаїйа, ЗпемапеїІа, Зпідейа, зпишШемопніа, Зідетохудапв, 5іїсірасієг, бітопвівЇа, бБіпогтпігобійт, іасКіа,Й Бодаїїв, Боїїрасієї, Боіобрасієгйт, Зогапдішт, Зрпаєгобрасієї, Зрпіпдобішт, зЗрпіпдотопав, Зрпіпдорухів, Зрігоспаєїа, Зрогозагсіпа, 5іасКебгапайіа, єгарпуіососсив, Загкеуа,
Зіепоїгорпотопав, 5іїдтаїйейПа, б5ігеріобасійи5, Зіеріососсив, Знеріотусев, Зперіозрогапаійт, зЗибраоіїдгапиішт, взибБмібгіоіїде5, Зиссіпайтопа5, БЗ!ИйШОорасієї, З!ЇиМоБасійй5, ЗиПМигситмит, зЗиПигпіпуагодепірішт, ЗиЇПийтопав5, ЗиПйиговрігйшт, еЗиИиМигомит, ЗиШегеїМйа, зутріобвасієгійт,
БЗупесНосузіїзх, Зупігорпорасієї, БЗупіторпобоїшив, бЗупіторпотопаз, бупіторпоїпеттив,
Зупігорпив, їаімжапепвіх, ТауогеПНйа, Тегедіпірасієї, Тепідіори5, ТНаїіазвіорішт, ТНнацега,
Тпептаєгобасієгї, Тнептапаєгоміргіо, ТПнегтіпсоїа, ТПнептоапаеєгобасієї, Гпептоапаєгобасієгіит,
Тпептобрасшишт, Тпегторбіїаа, Тпептобізрога, Тпептостіпів, ТпегтодезиїірНаїєацог,
Тпептодезинобасіегіит, Тпегтодезиїобіит, Тпептодезийоміргіо, Тпептотістобіит,
Тнептотоповзрога, ПГнпептозеадаітіпірасієї, ТПпептовіпиб5, ТНептовірпо, Тептозупеспососсив,
Тпептоїода, Тпептомірго, ТПептив, ТНіоаїІКаїйтісктобішт, ТНіоаїКаїїмірно, ТніобасіПсв,
ТАіотістовріга, ПГпіотопа5, ТГоІштопа5, Ттеропета, Шбросогит, Тиісподебвтішт, ГТорпегута,
Тииерега, Теикатитгеїа, Гигісібасієг, Магіомогах, МейопеїІа, Мегтіпернгобасієг, Мегтисотісторіт,
Мегтисозізрога, Мебвісотуовзосійив, Мірпо, Мібгпопа|ев, МісіїмаНе, МУвївзейа, УміддіезуопнНіа,
МоіІрасніа, УоїїпеПа, Хапіпобасієї, Хапіпотопав5, Хепопарадив, Хуїапітопав, ХуїеїПа, Мегзіпіа, гіпаденпа і 7Хутотопав.
Зокрема, клітина мікроорганізму може походити з Е. соїї, Реендотопаз 5р., Рзеендотопав
Погебзсеп5, Резепдотопа5 ршиїйда, Рзепдотопаб5 в5іцї2егі, Асіпегобасієї 5р., ВикЖПоїдепа 5зр.,
ВиКпоїЇдетіа ІНайапаепвзіз, СуапобакКіегієп, Кіерзієйа звр., КіервзієЇа охуїоса, ЗаіІтопейа 5зр.,
Впі2орішт зр. і Впі2обішт теїйоїї, Васіїи5 5р., Васіїйи5 вибіййв5, Сіовійайшт вр., Согупебрасівгчт 5р., Согуперасієтішт аіІшатісит, Вгемірасієгішт 5р., СПіогеїа 5р. і Мовіос 5р. Більш конкретно, клітина мікроорганізму може походити з Е. соїї.
Алкани являють собою насичені вуглеводні, які мають різне застосування залежно від кількості атомів вуглецю і від структури алкану (тобто розгалужений, лінійний, циклічний тощо).
Алкани (власно кажучи, завжди ациклічні сполуки або сполуки з відкритим ланцюгом) мають загальну хімічну формулу СяНгп. Алкан, застосовуваний згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу, може містити щонайменше 6 атомів С.
Зокрема, алкан, застосовуваний згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу, може містити 6-22, 6-20, 6-18, 6-17, 6-16, 6-15, 6-14, 6-13, 6-12, 6-11, 6-10, 8-20, 8-19, 8-18, 8-16, 8-15, 8-12, 8-10 атомів вуглецю (включно). Алкани можуть бути вибрані з групи, що включає гексан, гептан, октан, нонан, декан, ундекан, додекан, тридекан, тетрадекан, пентадекан, гексадекан та ікозан. Зокрема, застосовуваний алкан може являти собою декан, ундекан або додекан.
Фермент Еі
Фермент Е: може бути здатним до перетворення щонайменше одного алкану на відповідний 1-алканол. Зокрема, Еї може являти собою щонайменше одну Р450-алкангідроксилазу (Ез) під
ЕС 1.14.15.1 або АІКкКВ-алкангідроксилазу (Еь) під ЕС 1.14.15.3. Р450-алкангідроксилаза (Ез) є компонентом реакційної системи, що містить - два ферментативних компоненти: цитохром Р450-алкангідроксилазу й МАС(Р)Н-цитохром
Р450-оксидоредуктазу під ЕС 1.6.2.4, або - три ферментативних компоненти: цитохром Р.і50-алкангідроксилазу типу СУР153, фередоксин МАД(Р)- редуктази під ЕС 1.18.1.2 або ЕС 1.18.1.3 і фередоксин.
АІКкВ-алкангідроксилаза (Ель) є компонентом реакційної системи, що містить - АІКВ-алкангідроксилази під ЕС 1.14.15.3, які є компонентом реакційної системи, що містить три ферментативних компоненти: АІКкКВ-алкангідроксилазу під ЕС 1.14.15.3, АІКТ-рубредоксин-
МАВД(Р) редуктазу під ЕС 1.18.1.1 або під ЕС 1.18.1.4 і рубредоксин АЇКО.
Зокрема, ЄЕї може являти собою АїЇКВ-алкангідроксилазу (Ев), також відому як алканмонооксигеназа. Більш конкретно, Еї може характеризуватися щонайменше 50 95 ідентичністю послідовності з алканмонооксигеназою з Рзепдотопах риїда СРО, що кодується акваст. Ще більш конкретно, Еї може характеризуватися щонайменше 50 95 ідентичністю послідовності з поліпептидом УР 001185946.1. Більш конкретно, Еї: може містити поліпептид, який характеризується щонайменше 50, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 91, 94, 95, 98 або 100 95 ідентичністю послідовності з поліпептидом УР 001185946.1.
Фермент Еа
Зокрема, фермент Еї може являти собою щонайменше одну з Р450-алкангідроксилаз (Еаз), бо вибраних із групи, що включає
ААО73954.1, ААО73953.1, ХР 002546279.1, АААЗ4А353.2, РЗОбО7.1, ХР 0024216271,
ХР 718670.1, СААЗУОЗ66.1, ХР 001527524.1, ААО73955.1, ААО73956.1, ХР 002546278.1,
ЕЕО43157.1, ХР 7186691, АААЗ4354.1, РІО615.3, ХР 002421628.1, 226487, Р16141.3,
СААЗ9367.1, 09У757.2, ХР 001485567.1, ААО73958.1, ХР 001383506.2, ХР 4601112,
ААО73959.1, 012586.1, ХР 4601122, ААО73960.1, О012589.1, ААО7З3961.1, ХР 4601102,
ЕЕО43763.1, ХР 7101741, ЕОКА1572.2, ХР 001482650.1, САА75058.1, ХР 002548818.1,
О12588.1, ХР 002422222.1, ХР 001383636.2, ХР 001525381.1, ХР 002548823.1, РЗО610.1,
ААО73952.1, ХР 002548428.1, СААЗб6197.1, ХР 002421126.1, АААЗ4320.1, РІ6496.3, РЗО6О8.1,
Р2г4458.1, ХР 7179991, ХР 001383817.1, 09У758.1, ХР 001482092.1, ХР 001383710.2,
РЗОбОЗЛ1, ААВ2г4479.1, ХР 4577921, ХР 001524144.1, ХР 4577272, ХР 001525578.1,
ХР 002616743.1, ХР 002614836.1, ХР 001525577.1, ААО73957.1, 012585.1, ХР 001386440.2,
ХР 002616857.1, ХР 001483276.1, ХР 5004021, ЕОКЗ39907.2, ХР 500560.1, ХР. 001211376.1,
ХР 002560027.1, ХР 504857.1, ХР 500855.1, ХР 504406.1, ВААЗІ433.1, ХР 5008561,
ХР 5011481, ХР 7465671, ХР 001262425.1, ХР 001274843.1, ХР 002840588.1,
ХР 002377641.1, ХР 001825995.1, ХР 001400739.1, ХР 718066.1, СААЗ5593.1, ХР 6647351,
ХР 002150795.1, ХР 500097.1, ХР 002483325.1, ХР 5043111, ХР 500273.1, ХР. 002548817 1,
ЕОРБ54484.1, ХР 755288.1, ХР 001260447.1, ЕРМ97851.1, АСО75398.1, АОКЗ6660.1,
ХР 001213081.1, ХР 002377989.1, ХР 001826299.1, ХР 001554811.1, ХР 5016671,
ХР 002148942.1, АОКЗ6662.1, ХР 002565827.1, РЗОб611.1, ХР 001267871.1, ХР 002372373.1,
ЕРУ84686.1, Р43083.1, ХР 001263094.1, ХР 002148355.1, ХР 002568429.1, ХР 001817314.1,
О12587.1, ХР 001396435.1, ХР 001938589.1, ХР 001388497.2, ХР 663661.1, ХР. 003295335.1,
ХР 002152088.1, ХР 001212071.1, О12573.1, ХР 002379858.1, ХР 00182159241,
ХР 002844341.1, ХР 001394678.1, АСО75400.1, ВАКОЗ594.1, ХР 003170343.1,
ХР 001265480.1, ХР 002550661.1, ЕОРББ55141, ХР 001528842.1, ХР 74991941,
ХР 001593058.1, РЗОб12.1, ЕссС48494.1, ЕЕНО4ї429.1, ХР 001585586.1, ХР 0032361821,
ХР 001400199.1, ЕЄО46951.1, ХР 721410.1, ЕСРВ7У864.1, ХР 002380808.1, ХР 0017927711,
ХР 001208515.1, ХР 001216161.1, ХР 003071804.1, ЕРМ/16963.1, ХР 00254211841,
ХР 001936677.1, Є2095268.1, ХР 003015678.1, ХР 5017481, ХР 003169562.1, ЕЕМ964921,
ХР 682653.1, ХР 002421356.1, САК43439.1, ЕРМО93677.1, ХР 7477671, ХР 00124495841,
З0 ХР 003019635.1, ХР 002847463.1, ЕсСРВЗ273.1, Баньга87.1, ХР 002622526.1,
ХР 002563618.1, СВХ99718.1, ХР 001552081.1, ХР 003066638.1, ХР 0031760491,
АСО75402.1, ВААОБ145.1, ХР 002482834.1, ХР 001257501.1, ХР 001934574.1,
ХР 001269972.1, ХР 001587438.1, ХР 001215856.1, ХР 002149824.1, ХР 001550556.1,
ХР 003011982.1, ХР 001827121.1, ХР 003233566.1, ХР 003022481.1, Ббаня7то441,
ЕРОЗ4695.1, ХР 003170005.1, вВАСИО9241.1, ХР 002796370.1, ХР 003019300.1,
ХР 002563873.1, САК40654.1, ЕЕЄНІТ9741.1, ХР 003012518.1, Е2О95716.1, ХР 003239409.1,
ВАШО4-363.1, ХР 001537012.1, ВАЕб6393.1, БЕСРВ5214.1, ХР 002487227.1, ААМб66104.1,
ЕСЕО7669.1, ХР 3629432, ХР 003016806.1, ЕРО27388.1, ХР 002384360.1, ХР 002836323.1,
ХР 001274959.1, ЕР2О3093.1, ХР 661521.1, ХР 002849803.1, ХР 001589398.1, ААНЗУ9З4741,
ХР 0031894271, ХР 001823699.1, ХР 36411141, ХР 001262753.1, ЕРУ86805.1,
ХР 001390153.2, ХР 002384738.1, ХР 001941811.1, ХР 001220831.1, ХР 003296981.1,
ХР 002480829.1, ВАО83681.1, ХР 001827526.2, ХР 369556.1, САКЗ8224.1, ЕРО2г6532.1,
ХР 002562328.1, ХР 00190454041, Еш.О52476.1, ХР 002382002.1, ХР 001225874.1,
ХР 9580302, ХР 002540883.1, ХР 001908957.1, ХР 001559255.1, ХР 364102.1, ЕОР4А8064.1,
ХР 365075.1, ХР 381460.1, СВХ95930.1, ХР 003054099.1, ХР 3613472, ХР 002846867.1,
ХР 001214985.1, ЕРОЗ5175.1, ХР 002479062.1, ХР 001908613.1, ХР 0033453801,
ЕСштАБО5б67.1, ХР 002479350.1, ХР 001394417.2, ХР 001394159.2, ХР 002146776.1,
ЕСРВБ6Б783.1, ЕРЕХО2953.1, САКА5889.1, ХР 003006887.1, ХР 002541427.1, ХР 7507351,
ХР 001257962.1, ЕВОБ51720.1, ХР 003005336.1, ЕаРВЗ197.1, ХР 002149832.1,
ХР 003052680.1, ХР 365851.1, ХР 001799910.1, ХР 0033471751, ХР 002565258.1,
ЕСшнт4і8918.1, ЕсН52524.1, ХР 9646532, ХР 002147083.1, ХР 002843935.1, ЕЕНІТ9393.1,
САС10088.1, ЕЕН47609.1, ЕЄО92528.1, ХР 001246560.1, ХР 002626168.1, ХР 003024880.1,
ХР 003169255.1, ХР 003013780.1, ХР 003235691.1, ХР 7468161, Е,аревав83.1,
ХР 001389925.2, ХР 002842817.1, ХР 002797278.1, АЮОКЗб6бб.1, ХР 003305469.1, 55: ХР 001548471.1, ХР 001806478.1, ЕРОЗ4989.1, ХР 001552987.1, САС24473.1,
ХР 002541530.1, ЕЕБОВ89262.1, ХР 0012473321, ХР 003066043.1, ЕОРА7672.1,
ХР 002628451.1, ХР 001910644.1, Бані45101, ЕРОЗ6733.1, ХР 0030524721,
ХР 001393445.2, ХР 001522438.1, Є24О004179.1, ХР 001397944.2, САК4А9049.1, ЕРОЗ0О1091,
ХР 001585052.1, Е2ОЗ30123.1, ХР 3884961, ХР 003173913.1, СВЕР76609.1, ХР 003028593.1, 60 БгСйО04180.1, САКА6976.1, ХР 3704761, ХР 002145942.1, ХР 003004457.1, АОКЗ6663.1,
ХР 003040708.1, ХР 003351473.1, ЕРУ84692.1, ХР 748328.2, ХР 003190325.1,
ХР 002378813.1, Є2НА6513.1, ХР 003033448.1, ХР 002145326.1, ХР 6624621, ХР 7474691,
ХР 001935085.1, Е20Н45892.1, ЕЄ2О01601.1, ЕСРВО995.1, ХР 001222615.1, ХР 001224356.1,
ЕшмМО93507.1, ХР 001934479.1, ВАКО9З464.1, ЕСОЗ30124.1, ХР 001267956.1, АОКЗ6661 1,
ЕБМ978451, ХР 001834501.1, ЕЄС2О03790.1, ХР 001884320.1, ХР 003028899.1, ААР798791,
ЕЕРУ84206.1, ВАКОЗ467.1, ХР 003030469.1, ХР 001412594.1, ХР 001834508.1, ХР, 001839436.2,
ХР 002583529.1, ХР 001886288.1, ХР 002843371.1, ХР. 001587730.1, ВАКОЗ9418.1, ВАКО9442 1,
ЕшФО28830.1, БЕСБО3365.1, ЕР201428.1, ЕСОО03065.1, ХР 001558890.1, ХР 002487181.1,
ЕшФО29652.1, ААХ4-9400.1, ЕРМУ92529.1, ХР 002380252.1, ХР 001884460.1, ВАКОЗ93871,
ХР 001839366.2, ХР 003031835.1, ЕРМ99978.1, ААІ 67906.1, ВАСО9240.1, ХР 002381768.1,
ХР 001800031.1, ХР 001825073.2, ВАЕб63940.1, ХР, 003028894.1, ААІ 67905.1, ХР. 002910303.1,
ЕшВОг22856.1, ХР 003028896.1, ХР 681680.1, ХР 002486603.1, ХР 001838945.2, БСА5БОО64.1,
ХР 001884349.1, ХР 001883816.1, САКЗ7996.1, САО9У1865.1, ХР 0030312271,
ХР 001258702.1, ХР 001586739.1, ХР 001560806.1, СвВЕ69707.1, АОмМ43682.1,
ХР 001593179.1, ХР 001886909.1, ХР 001934479.1, ХР 001587730.1, ХР 001886909.1,
ХР 001831709.2, ХР 001392650.1, ХР 3667162, САЇ 69594.1, ХР 001269140.1,
ХР 002566307.1, ХР 001555473.1, ХР 663925.1, ХР 001598033.1, ХР 001835239.2,
ЕшмМо97256.1, ХР 001554305.1, МР 1820751, ХР 001560475.1, ЕРОЗ2286.1, ХР 001216788.1,
ХР 002483975.1, ААСЗ1835.1, МР 8504271, ХР 002143660.1, ХР 003327130.1, ВА.ШУВ287 1,
ХР 002880182.1, АСВ59278.1, ЕРОЗ6688.1, ВАШУВ285.1, ВАШУВ286.1, ХР 001798699.41,
ЕЕН4Я4101.1, вА.7В288.1, вА78284.1, бацсогаг5.1, басозо111, АААЗ4334.1,
МР 001189747.1, Ессб2601.1, ХР 002978645.1, Есшса11203.1, ХР 7626101, ХР 76262041,
ХР 001545581.1, САВ44684.1, САМ80536.1, ААМО5337.1, МР 001049423.1, ХР 001791898.1,
МР 001031814.1, ХР 002279531.1, АВК9У4777.1, ААЙ39646.1, ХР 002880183.1, АВСб68403.1,
ХР 002839066.1, Е2с03014.1, ХР 002320074.1, МР 001182854.1, СВІЗ8795.3, ХР. 002310605.1,
МР 196442.2, ХР 002270594.1, АВ280830.1, ХР 002275905.1, СВІЗ8796.3, ХР 002476978.1,
САВОЗ726.1, ЕСсОЗ624.1, ЕС(Об6527.1, МР 197710.1, ХР 001768338.1, ХР 002270673.1,
ВАуВб6572.1, ХР 002275806.1, СВІЗ8797.3, ХР 002320072.1, САМбО0О189.1, ХР 002986290.1,
ХР 002465888.1, САМ80040.1, ХР 002336104.1, ХР 002988354.1, ХР 0022642771, гар7гв898.1, ХР 002866853.1, ЕАУ95236.1, ХР 002979701.1, ХР 002988762.1,
ХР 002304502.1, ХР 002873349.1, ХР 003192947.1, САМ63571.1, МР 001053615.1,
МР 176558.1, Є24С49561.1, ЕСС509027.1, ХР 002314581.1, ХР 002446966.1, ХР 002320802.1,
АВС59095.1, ХР 003323121.1, ХР 002974639.1, ХР 002395587.1, ХР 00286685241,
ХР 002319770.1, МР 001146262.1, МР 001169224.1, ААМб5207.1, ХР 002529058.1,
ХР 002886391.1, ХР 002320071.1, ХР 002446967.1, ХР 7578701, ЕАУЗ951471,
ХР 002899664.1, ЕЄЕНО5830.1, ХР 002874114.1, А0О24345.1, ВА)88802.1, ВААОБ146.1,
ХР 002963351.1, ЕАМ88475.1, МР 195658.3, ХР 002976944.1, АВС59093.1, ХР 0022751141,
ХР 003328407.1, САМ75428.1, ВА.ВбА71.1, ХР 002981144.1, ХР 002277006.1, ЕАЙ261101,
АСМ41008.1, ХР 002899542.1, ХР 001781614.1, ЕАМ76187.1, ВАКОб6758.1, ХР 002511745.1,
ХР 002982626.1, ХР 002963763.1, МР 001065111.1, АВР93892.1, ХР. 002314117.1, ВАКОб287 1,
ХР 001745327.1, МР 001047674.1, ХР 002878665.1, ХР 002974847.1, МР 17989941,
САМ80156.1, МР 001053543.1, АВС59094.1, ХР 002328165.1, ХР 002270628.1,
ХР 002275115.1, ХР 002980688.1, ХР 002465039.1, ААЇ 9115541, МР 19591041,
ХР 002509820.1, МР 200694.1, СААб2082.1, ААЇ 759031, ХР 002468241.1, ХР 002883546.1,
ХР 002862636.1, ХР 002312905.1, ЕАМ79269.1, ААМ12494.1, ХР 002875027.1, ХР 7580101,
ХР 002509524.1, ААРБА7О07.2, ХР 002869292.1, МР 001143079.1, АСЕВ82946.1,
ХР 002270497.1, ХР 002979685.1, ХР 002465041.1, ХР 002533544.1, ААСІ74701,
ХР 002985393.1, МР 1919461, ХР 002525608.1, АА/39642.1, ХР 002270428.1,
ХР 002529227.1, СВІ24485.3, ХР 001763206.1, ЕСС02922.1, ХР 002974848.1, МР. 0011414671,
СВІ27149.3, МР 001130907.1, ХР 002982474.1, МР 001048917.1, ХР. 002465889.1, АВ280831.1,
ХР 002464461.1, ЕАУ88476.1, ВАШУОО714.1, ХР 002893825.1, АСМ28568.1, ХР 0024527821,
ХР 002280004.1, ХР 001764611.1, МР 001183394.1, ВАШВО9570.1, СВІ24484.3, ВА.В88401,
АСОазЗз8359.1, САМ77648.1, ВАШОТ452.1, МР 001141345.1, ХР 002282185.1, ХР 002980994.1,
ХР 002299820.1, ВАШВ7982.1, ВАШО1Т842.1, ХР 003325270.1, ХР 001760399.1, СВІЗ4058.3,
АООазЗза4845.1, ХР 002523775.1, БЕН21852.1, О50ЕКЗ.1, ВАКОб748.1, ХР 002963764.1,
АСМЗ34158.1, ХР 001764503.1, ХР 002311750.1, ХР 001782495.11, ХР 002988642.1,
ХР 002465625.1, ХР 002892051.1, ХР 002279649.1, МР 171666.1, АВК28430.1, ВАС42067 1,
АЕО99869.1, МР 1747131, ХР 001781706.1, АВСб6б6204.1, ХР 002964775.1, МР 001064901.2,
ХР 002961706.1, ХР 002519477.1, ХР 001559854.1, СсвнзЗа2г594.1, ВАВУ2258.1, 60 ХР 002264897.1, ААІ59025.1, ХР 002862576.1, АСІ 53124.1, ХР 002521476.1, МР 2000451,
ВАуВО814.1, СВІЗ8794.3, ХР 776769.1, МР 001141372.1, ЕЕС74485.1, ЕАМ76557.1,
ХР 002318861.1, МР 001172660.1, ХР 002880978.1, ААООО706.1, ВАКО7606.1,
ХР 002979336.1, ВАС42841.1, ВАР46296.1, ХР 002306380.1, ХР 002865907.1, АСОаза49211,
ХР 002876375.1, МР 001056685.1, ХР 002264292.1, ХР 002893443.1, МР 001066096.1,
БЕЕБЕБЕ534771, СВНЗ2607.1, ЕАМО94753.1, МР 001130939.1, МР 182121.1, ХР 002437749.1,
МР 191222.1, ХР 002865881.1, ХР 5697081, ХР 002279670.1, ВАШО4774.1, АВРЕ93894.1,
ВА0О4304.1, АСОЗ3785.1, МР 1949441, МР 180337.1, ААВбЗ277.1, ВАШВ5246.1,
ХР 002456654.1, АСМ27732.1, ХР 002445325.1, ЕЕН40289.1, ХР 001838184.2,. ВА.В5532.1,
ХР 002866555.1, ЕАУ88477.1, АСО47870.1, ХР 0023100741, ХР 0024572241, ЕАЙ25521.1, вАШВ7689.1, МР 001044838.1, ХР 002521004.1, ХР 002882043.1, ХР 002527038.1,
ХР 002318721.1, ХР 002979339.1, МР 1760861, ХР 001560028.1, АВС59092.1, АВЕ93891.1,
АСАЗ8435.1, БАМ78983.1, МР 179782.1, ССА21696.1, ХР 002334340.1, ЕРЕХ88387.1,
МР 001044554.1, ХР 002321857.1, МР 173862.1, МР 195660.1, ХР 001554079.1, ЕА/13864.1,
ЕЕСб67630.1, ЕАМ76183.1, ААРБ4710.2, МР 001065112.2, АСО10924.1, ХР 00155927541,
ЕЕСб7338.1, ХР 002273811.1, А0БубВ2г42.1, МР 001065698.1, САМб66874.1, САВ41474.1,
ХР 002868908.1, ХР 002904660.1, САНА7816.1, МР 1892431, ЕАМ98229.1, ХР 002448320.1,
О81117.2, ХР 002458797.1, ХР 002277129.1, ВАШ88829.1, САМб67559.1, ВАКОВ8О0341,
ХР 002894062.1, ХР 002894891.1, ХР 002279981.1, АВНА16451.1, МР 201150.1, ААМбО854.1,
ХР 002521002.1, ХР 002521474.1, ХР 002875311.1, МР 195661.1, ААР79889.1, МР 1751931,
РОВІ88.1, ВАКОВ8270.1, СВІ21357.3, ХР 002870817.1, ХР 002904451.1, АВА95812.1,
ХР 002998647.1, МР 001066166.2, ХР 002894690.1, ЕРМ92064.1, ХР 002278009.1,
ХР 002336002.1, ССА1Т6508.1, ХР 002868909.1, ЕАйЗ1703.1, С96517, ЕАУВ86526.1,
ХР 002307954.1, ХР 002904638.1, ХР 002266883.1, ХР 002439880.1, ХР 002892730.1,
А0І52567.1, ЕСІб61791.1, ХР 002511196.1, Бсйс043721, ХР 002511875.1, АСЕ7518911,
МР 001055681.1, ХР 001589816.1, МР 001170655.1, ХР 002300789.1, ХР 001934479.1,
ХР 001587730.1, ХР 001554079.1, ХР 001559275.1, ХР 002868908.1, ХР 002998647.1,
ЕРМ92064.1, ХР 002605799.1, ВАС43393.1, АВК28457.1, АА!/ 548871, ВАС43161.1,
ХР 002333384.1, 7Р 03631129.1, ААІГ 84318.1, ВАШОЗВ56.1, ХР 002593704.1, УР 001965159.1,
ХР 002454121.1, ЕЕХ88390.1, АВНА1Т6969.1, МР 177109.3, ХР 002441724.1, МР 001166017.1,
З0 ВАВУ2256.1, АСЕ75340.1, ААЙЗ39645.1, ХР 002312417.1, ХР 002887239.1, МР 001172609.41,
МР 001065766.1, ХР 002515053.1, ААЇ 548851, АВА16897.1, ХР 002878579.1,
МР 001140775.1, ХР 003275955.1, -Р 08045694.1, вАШУ4Об9 1, ХР 001654558.1,
ХР 002436562.1, ЕАМ88702.1, ВАКОЗб85.1, ХР 003327629.1, ХР 002322606.1, ЕЕН4А27021,
ХР 002037976.1, МР 1727741, ХР 002282477.1, ЕЕХ88388.1, ХР 002522465.1, ЕР2214701,
ААО41955.1, ААІ 54886.1, ХР 002450277.1, ХР 002862559.1, ХР 002335046.1, ХР. 003328408.1,
АСЕ75187.1, ХР 001849294.1, ХР 002444132.1, ХР 002894061.1, ЕРМ77015.1, ЕСІ69992.1,
СВІ17962.3, ААІ/54884.1, ХР 002998650.1, ХР 002105150.1, ХР 002877615.1, ЕР2224121,
ХР 002439815.1, ХР 002300790.1, СВІ40О391.3, АЕІ59774.1, ХР 002801151.1, ХР. 003325267.1,
ХР 001554577.1, ЕАМ79865.1, ХР 002465796.1, ХР 002931035.1, АВА9У1371.1, АСЕ753381,
ХР 001592850.1, ХР 001362981.1, ХР 002271246.1, БОВ11905.1, МР 176713.1, СВО27248.1,
МР 566155.1, ЕРХ87732.1, ЕЕС71661.1, АСОс2г9О046.1, МР 001130576.1, ХР 001843663.1,
АВК25134.1, ЕЄСІ65081.1, ХР. 002722841.1, ААЇІ 67908.2, ААО15579.1, МР. 1220471, ЕРАО4617 1,
УР 001522424.1, АСВ87383.1, МР 001027517.1, ЕЕЕБ52725.1, ХР 002078257.1,
ХР 002722842.1, 7Р 05128707.1, ХР 003208874.1, ААКЗ1592.1, АВА9У5747.2, МР 001181472.1,
МР 001075572.1, ХР 001108915.1, ХР 001520882.1, ХР. 002063219.1, ЕР222408.1, ААГ 577211,
ЕРМ/47740.1, ААОгОВ34.1, САМ74644.1, ХР 002722849.1, ВАСЗО0028.1, САМ757291,
ХР 002115603.1, ААМ72309.1, ЕЕСб68823.1, САМ'18519.1, БЕА13863.1, ХР 002906159.1,
МР 001003947.1, 2Р 01858832.1, ХР 002882162.1, ХР 002089195.1, ХР 002892729.1,
САМ68037.1, МР 001130648.1, МР 001166016.1, МР 172773.4, А0БубВ241.1, ЕСІб2551.1,
ЕРМб63658.1, ХР 002300103.1, ХР 001658673.1, ХР 001367719.1, МР 77514641,
ХР 001375048.1, ААН213771, МР 72758941, ХР 0022718471, ХР 001809620.1,
ХР 002897528.1, МР 190421.1, ХР 002282468.1, ХР 536868.2, ЕЕЕ58297.1, ХР 001992105.1,
ЕАМ82190.1, А0БО2О161.1, ХР 001363065.1, ЕАШО77129.3, ЕАМ72807.1, Єбасозо77.1,
МР 001181489.1, МР 001177869.1, ХР 001966135.1, ВААЗ9ЗУБ22.1, ВАКО7250.1, 55: ХР 002133118.1, МР. 001042228.1, ААІ 57720.1, ХР. 002897529.1, АААЗ5712.1, МР. 002275016.1,
МР 0007702, ХР 002721578.1, ХР 321208.4 ААМО9532.1, ЕРЕМб1085.1, ВАКОб179.1,
ЕЕХ88389.1, МР 001602608.1, ХР 513140.3, МР 001182438.1, ААОЗ1068.1, МР 001093242.1,
ХР 001367758.2, ЕБ218984.1, УР 691921.1, САН5Б9У9О68.1, ААБВО270.1, САН5БЗОб67.1,
АСО99381.2, УР 003810988.1, МР 957888.1, СВМУУ44755.1, 2Р 05042596.1, 2Р 01913735.1, 60 2Р 05043097, АБОО01451, МР 004494060.1, Р 08206912.1, ВАЕ78452.1, МР 11422241,
АС56357.1, МР 640381.1, 7Р 04384919.1, 7Р 08025219.1, 27Р 07715822.1, 7Р 06847816.1,
УР 001702784.1, АЕК27137.1, 7Р 07716433.1, 7Р 08199554.1, МР 004495520.1, МР 3457181, 7Р 08022914.1, МР 001851443.1, ВАСОБО428.1, МР 001135848.1, ВАБГО5905.1, МР 3456951,
АСРЗОбО91.1, АСРЗО9664.1, АСРЗО635.1, АСРЗ9633.1, АСРЗО710.1, АСРЗО9698.1, АСРЗ9711.1,
ВАЕ47475.1, ВАЕ47474.1, АВМ/76858.1, АСОБ50699.1, АСРЗО9643.1, АСРЗО9639.1, АСРЗО7О08.1,
АСМб68663.1, АСРЗ39642.1, АСРЗ39684.1, АСРЗ39636.1, 7Р 05095005.1, АСРЗ9652.1, ВАЕ47473.1,
АСМб68664.1, АСРЗ39646.1, АСРЗ39680.1, АСРЗ9692.1, АСРЗ39675.1, АСРЗ9632.1, 7Р 05129284.1,
АСРЗО9706.1, АСРЗО9695.1, АСМ68665.1, АСРЗО9654.1, АСРЗ9665.1, АСРЗ9649.1, ВАЕ47472.1,
АСМб68668.1, АСРЗ9676.1, АСРЗ39648.1, АСРЗ39647.1, 7Р 01102434.1, АСМб68666.1, АСРЗ39641.1,
АСМб68669.1, Р 01625037.1, АСРЗ9690.1, АСРЗ39696.1, АСРЗ9697.1, АСРЗ39707.1, АСРЗ39682.1,
АСРЗОБ65О.1, АСРЗОБбЗ8.1, Р 05126641.1, САНО4-396.1, АСРЗОБ658.1, Р 01102687.1,
АСООбУ72.1, МР 001413041.1, МР 5520581, АОЕОБ5601.1, А0І19685.1, ВАЕ4747941, 2Р 01626700.1, 27Р 01618279.41, САНб1448.1, УР 001411305.1, УР 003591161.1, 2Р 01615522.1, АСМб68667.1, АСРЗОБбБ1.1, 27Р 05095535.1, 2Р 01618489.1, МР 4188821,
А0І19983.1, АСРЗОб77.1, ВАЕ47476.1, АСРЗОБ655.1, АСРЗОб656.1, АО0І19696.1, ВАЕ474771,
УР 001413399.1, МР 459878.1, ВАЕ47480.1, ВАЕ47481.1, АСРЗО653.1, ВАЕ47478.1,
УР 001681656.1, 27Р 01618281.1, 27Р 01627262.41, УР 001413057.1, УР 7607401,
УР 001242466.1, УР 001203574.1, САНбБ1454.1, УР 002129656.1, УР 001672075.1,
АСРЗО9709.1, МР 001990805.1, МР 946959.1, МР 001203575.1, МР 7832131, МР. 003059227.1,
МР 004110202.1, АСРЗОб45.1, УР 487538.1, САНбІ451.1, МР 570816.1, МР 5341071,
УР 001413223.1, МР 001242465.1, МР 557448.1,7Р 08631162.1, МР 773883.1, 7Р 00997728.1,
АСРЗОб683.1, МР 7684931, МР 7738821, 2Р 08271781.1, САНб1449.1, МР 003883668.1,
УР 003332953.1, МР 004535688.1, МР 495502.1, УР 459378.1, 7Р. 08700267.1, 7Р 01863452.1, 7Р 06860085.1, ВАЕ474871, МР 6179031, 7Р 08207422.1, ВАЕ47486.1, 7Р 01041003.1,
ВАЕ47484.1, АСВА78197.1, САНбІ1456.1, 7Р 01858113.1, АСРЗ39681.1, ВАЕ47485.1, АСРЗ9673.1,
ВАЕ47483.1, АСРЗ9669.1, ВАЕ47482.1, АСРЗО674.1, АСРЗО704.1, АСРЗО9703.1, МР 4970951,
АСРЗО9672.1, АСРЗ39702.1, АСРЗО670.1, АСРЗОб6б6б6.1, УР 458852.1, АСРЗО687.1, АСРЗО688.1,
АСРЗО634.1, АСРЗОБВ86.1, АСРЗОбБбБО1, АСРЗО70О0.1, МР 001411309.1, 7Р 01465241.1,
АСРЗ9701.1, АСРЗ9679.1, АСРЗО657.1, АСРЗО694.1, АСРЗ9659.1, АСРЗО9671.1, АСР39693.1 і
МР 003342921.1.
Фермент Еь
В іншому прикладі фермент ЕЕ може являти собою щонайменше одну АЇїЇКВ- алкангідроксилазу (Еь), вибрану з групи, що включає:
УР 001185946.1, О9МУМ/МУб.1, МР 957898.1, МР 9577281, МР 694427.1, ВАС98365.1,
Р 00957064.1, САС86944.1, МР 001672212.1, САВ5Б9525.1, АСНО9З213.1, АСНО9З2151,
АСНУЗ9ЗУ216.1, ААК5б6792.1, АСНОЗ9З229.1, АС591348.1, ААРА1820.1, 7Р. 05128075.1, САМ58121.1,
САМ58085.1, АСО44675.1, АСИб2808.1, Р 01738706.1, 2Р 01916228.1, 2Р 01225325.1,
УР 001023605.1, АСуг2747.1, АСТО11401, ААТО1Т722.2, СВА27418.1, МР 001889129.1,
ЕС.С97932.1, АСТО1201.1, 72Р 05083049.1, МР 5540981, Р 01900149.1, Арагб619.1,
АОС26657.1, АрО26640.1, Р 06838771.1, Аро2гбб49.1, Арс2гбб51.1, Р 02374120.1,
УР 368326.1, 27Р 02380481.1, АОС26643.1, Аро2гбб28.1, МР 4423461, Арагбв20.1,
Арагббаі7.1, Р 07673680.1, АрС26638.1, МР 002232139.1, МР 001118743.1, 7Р 01764629.1,
УР 108945.1, МР 3341851, 7Р 04897834.1, 7Р 02889567.1, МР 6203861, МР 002897546.1, 2Р 02166109.1, 7Р 02904755.1, АрОС26639.1, МР 001892637.1, АрС26642.1, 7Р 04939380.1, йИР 02464124.1, МР 1024171, САСЗ6356.1, АСуг2727.1, МР 001764240.1, МР 0027656091,
УР 001945311.1, 7Р 03586616.1, АСуг2665.1, 7Р 03574223.1, САСЗ7038.1, 7Р 02456517.1,
УР 001807560.1, УР 002779449.1, ААК9У7454.1, УР 002912304.1, АСНА5Б5689.1,
УР 003397515.1, МР 004361423.1, МР 7727341, АСУбБ5О14.1, АСТЗ31523.1, Абугг750.1, 2Р 07375042.1, МР 002776786.1, АСВ11552.1, 7Р 02363472, АрОС26653.1, 7Р 04383196.1, 2Р 02356342.1, Абуг2751.1, МР 952571.1, АСО43494.1, МР 001135977.1, МР 002764193.1,
УР 003855036.1, МР 004078475.1, ААКОУ7448.1, 7Р 04388098.1, АСХЗ30747.1, Арагбб632.1,
Абугг719.1, АБОг21492.1, 7Р 05061580.1, А0ОНВ72654.1, АС765961.1, АСХЗ30755.1,
УР 001849604.1, ААМ64895.1, МР 004495037.1, МР 7024971, МР 001069662.1,7Р 06850622.1,
ВАРЗ34299.1, САВ5Б1024.2, МР 004008018.1, МР 003768535.1, АСОб5О13.1, 7Р 07282765,
МУР 8862091, Абуг2725.1, 7Р 08155372.1, МР 004493362.1, 7Р 05228000.1, 7Р 07717360.1,
ВАОб7О20.1, МР 004524245.1, Р 07715778.1, МР 2177691, АС5БО1349.1, МР 9601051, 2Р 07014137.1, МР 004746682.1, 7Р 08022271.1, АСМб62569.1, АБОЗ37951.1, МР 003647687.1,
УР 003837040.1, АрО2гб6бО01, МР 002768905.1, 7Р 08553310.1, Арс26597.1, Абуг2749.1,
Арц2гб598.1, МР 001704327.1, 27Р 04385381.1, 7Р 04751264.1, Арогбб09.1, Арагбб10.1, 60 0 2Р 06417258.1, АОрО266071, АОРО8338.1, МР 003275257.1, МР 004084103.1, АрОсг6630.1,
драгббв25.1, АОрс2гб605.1, АОО26599.1, Р 05218167.1, АБОЗ7950.1, МР 9213541, драгбб45.1, АОос2гб6612.1, МР 004493370.1, УР 6385011, МР 003809668.1, МР 9622981, 2Р 04750514.1, АОрсСегббО8.1, АОТВ2701.1, АСООбУ73.1, МР 1208331, АОсе2гб6618.1, драгббво2.1, АОС26б23.1, Р 04383566.1, 2Р 08122407.1, МР 004077166.1, 7Р 05041651.1,
Р 04608296.1, АВООЗ351.2, МР 003658078.1, АБОЗ7949.1, АОС2г6б652.1, МР 002765850.1,
ААКОУ7447.1, САО24434.1, САС40954.1, АСТ9У12031, МР 1208291, Р 07282558,
УР 003298195.1, МР 001851790.1, 7Р 05827357.1, АОС26633.1, САВ5Ь1020.1, МР 9539081, 2Р 07990416.1, МР 1195321, 7Р 08442348.1, Р 08276444.1, 7Р 04661203.1, АВО12068.2,
УР 001846325.1, АБОЗ7952.1, 4Р 08198697.1, -Р 00996652.1, УР 001707231.1, 2йР 08433663.1, 7Р 08205256.1, МР 003732372.1, УР 9065291, АСТ91204.1, МР 001506534.1,
УР 001713880.1, МР 883357.1, МР 004525252.1, АОС26604.1, МР 001134633.1, 7Р 08195602, 4Р 06690500.1, 2Р 05826167.1, АЮОМ81595.1, 2Р 06056754.1, ААКЗ1348.1, МУР 2517151, 4Р 08461977.1, иР 05847237.1, УР 7122181, МР 001084670.1, 7Р 04387164.1, МР 2600411,
УР 002873097.1, АОсС26614.1, ААКУ7446.1, УР 001280943.1, 7Р 04386125.1, ААСЗ6353.2,
ССА291591, СА0БІ10804.1, ССА29151.1, САС40953.1, ССА29161.1, АВА55770.1, ААБОУЗ604.4,
ССА29173.1, ССА29155.1, ССА29156.1, АВА55772.1, ССА29154.1, АВАБб55793.1, ССА29162.1,
ССА29170.1, Р 03824539.1, ССА29166.1, ССА29136.1, Р 06065934.1, АВВ54493.1,
ССА29169.1, МР 003112137.1, ССА29127.1, ССА29148.1, ССА29160.1, Р 06057458.1,
АВА5Б5773.1, МР 004016090.1, ССА2О9139.1, УР 480358.1, АВА55787.1, ССА291501,
ССА29130.1, Р 07775830.1, АВАБ5Б5779.1, ССА29132.1, УР 003732938.1, ВАВЗ3284.1,
ССА29149.1, ССА29145.1, АВА55783.1, ССА29137.1, ССА29129.1, ССА29158.1, ССА29176.1,
ССА29142.1, ССА29144.1, ВАВЗ33287.1, ССА29133.1, ССА29140.1, ССА29135.1, 7Р 06066074.1, 2Р 03823182.1, ССА29171.1, ССА29152.1, ССА29131.1, АВА55780.1, ССА29163.1, ССА291431,
ССА29153.1, МУР 001580600.1, ССА29134.1, ССА29138.1, МР 0460981, Р 06072466.1, йР 05361594.1, АСИО43504.1, ССА29147.1, ССА29146.1, Р 06061712.1, АСТО911851,
АСТ91147.1, АСТО9О1178.1, АСТ91167.1, АСТО1181.1, АСТ91188.1, 7Р 06069784.1, АСТ91205.1, 2Р 06725872.1, АСТ91171.1, ССА29128.1, АВУ56787.1, АОЕО5602.1, АСО43474.1, АСОг27181,
АВВ90688.1, АСО43519.1, АВВ96093.1, АСО43485.1, АСО43493.1, АВМ/76857.1, АСТ91163.1,
Абуг2г673.1, 7Р 06188150.1, АСТ9О1242.1, АСТ91225.1, АСТ91211.1, АСО43479.1, АСО43491.1,
АСО43522.1, АСИО43486.1, АСТ91221.1, АСуг2662.1, АСИО43506.1, АСО43487.1, АСТ91259.1,
ААА97866.1, АСИО43502.1, МР 001252544.1, АВВ96084.1, АСИО43520.1, АСуг2668.1,
АСИ4.3503.1, АСТ91230.1, АВА55777.1, АСТ91231.1, 7Р 01748311.1, АСу2г2724.1, АСО43475.1,
АСОЯ43511.1, АСО43490.1, 2Р 08330953.1, АСИО43484.1, СВХО1596.1, АСТО91168.1,
УР 096989.1, АСТ9О1215.1, МР 1253701, АСТ91233.1, АСО43478.1, АОЕО5603.1, АСОг2715.1,
АСИО43512.1, АСТ91196.1, АСуг2692.1, АСО43510.1, АСО43521.1, АСТО911741, АСТУ912131,
АСТ91142.1, АСТ91206.1, АСТ9У1216.1, АСТО91182.1, АСТ9У1Т255.1, АСТО1246.1, АСТУ912171,
АСТ91155.1, АСТ9124041, АСТ91207 1, АСИ43495.1, УР 1282491, АСТ91160.1,
УР 004052990.1, АСТ91226.1, АСИО43507.1, АВОб1855.1, АСТ91214.1, АСТ91220.1,
УР 001188237.1, АСу22689.1, йР 01689499.1, МР 004379711.1, АСуг2г748.1, АВВОЗО0683.1,
АСТ91223.1, АСТ91235.1, АВОб61786.1, АСО43508.1, АСО43492.1, АСТ91219.1, АСТ912441,
АВОб1856.1, АСТ91239.1, АСИ43473.1, АВОб61850.1, АСТ91262.1, АСТ91261.1, АСТ91224.1,
АСО43499.1, АСО43488.1, АБОг1767.1, МР 004654946.1, АБО21777.1, АВВ9О6089.1,
АВОб1852.1, АВОб61847.1, АСТ9У1222.1, АрОг21764.1, АСИО43477.1, АрОг21773.1, АВОб1787.1,
АВВ96080.1, АВОб61857.1, АСТ91228.1, АВВ96070.1, АрО21744.1, АСТ9У1245.1, САСІ17608.1,
А0БО21747.1, МУР 001349162.1, АВКбЗ3807.1, 2Р 06879583.1, МР 2502161, АСТ912341, 2Р 01364874.1, АВО61789.1, АРО21772.1, АСО43516.1, АСО43505.1, АСО43501.1, АСТО12361, 2Р 07792758.1, АС264723.1, АРО21743.1, АРО21759.1, АС2б64752.1, АрО21755.1, АСО75517 1,
УР 790621.1, АСВІ1І1551.1, АБО2г1748.1, МР 2512641, Р 01365940.1, АО2г17621,
АрОг1739.1, АСО43496.1, АВО61854.1, 7Р 06878434.1, АСО43489.1, АСО43483.1, АрРО21746.1,
АСТ9У1237.1, йР 01895378.1, АСТО91164.1, АБО21736.1, АСу2г2711.1, АСИб47541, 2Р 05042146.1, А0БО21688.1, АОБО21648.1, МР 001348003.1, АОРОВ8б656.1, АрОг17371,
АрОг1760.1, АРО21754.1, АРО21740.1, АСА64758.1, АСО43497.1, 7Р 01912185.1, АВВ96111 1,
АСи4.3482.1, АСВ115491, АРО21775.1, ССА29157.1, АрО21681.1, АРО21668.1, АрОг21656.1,
АСИЯ4.3517.1, АСТ91165.1, АСуг2695.1, АСуг2688.1, АВВУ96071.1, АрО21763.1, АСТУ91241.1,
АБО21735.1, АСВІ11550.1, АрОг21778.1, АСТ91172.1, АрО21765.1, АВВ96087.1, СВОЗО233.1,
Абугг752.1, АВВО6105.1, АСВ15251.1, АСу22694.1, АСЯб64741.1, АСИб64706.1, АВВО6108.1,
АСТ91191.1, АВВ96101.1, АВВ90691.1, АС2б64745.1, УР 691842.1, АВВ96075.1, АВВ90682.1,
АВВ90690.1, АРО21676.1, АРО21679.1, АВОб61768.1, МР 4358571, АСуг2722.1, АСТ91238.1,
АС264725.1, САС14062.1, АрОг21682.1, АСЯб4771.1, АСЯб4718.1, АСЯб4724.1, АрОг16701, 60 А0БО21667.1, САСЗ7048.1, АС264708.1, АВВ96092.1, АСуг2687.1, АСЯб64703.1, АрРО21690.1,
АВВ9У2364.1, АСВ11547.1, АСИб64720.1, АрОг21655.1, АСЯб64717.1, АРО21680.1, АС264757 1,
АСІ64733.1, АСТ91144.1, АСО43481.1, АСТ91179.1, Р 02181409.1, АС264704.1, АВВ96073.1,
Абуг2г675.1, АСЯА64721.1, АВВ96090.1, АСуг2г729.1, АСО43515.1, Р 01307000.1, АВВ90685.1,
УР 003862088.1, АС264715.1, АСИб47101, АСуг2735.1, АВВ90687.1, АрОг1661.1,
АБОг1674.1, АСТ91177.1, АВВ54492.1, АВВО6076.1, АВВ92365.1, АСТ91194.1, АрОг1689.1,
Абуггб691.1, АВВ90681.1, АБО21649.1, АРО21671.1, АСЯб64728.1, АВВО6095.1, САС40945.1,
АрО2г1652.1, АрО21665.1, АОБО8461.1, АрОг21678.1, АСАб64705.1, АСу2г2690.1, АрОг21675.1,
АрО2г1685.1, АВВ96072.1, АСуг2г736.1, АСВ11540.1, АВВОб6091.1, АСІО4540.1, АСТУ91251.1,
АСТ91146.1, АСТ91166.1, АСТ91156.1, АБО21752.1, АрОг21673.1, АрОг21725.1, АВВ961041,
АВВ90694.1, АВВ90696.1, АСТ91173.1, АРО21647.1, 7Р 037008041, АСТ91232.1, АрРО21694.1,
САС40949.1, АВВ92361.1, АСТ91195.1, АСІО4538.1, АрО21691.1, АСуг26851, АРО2г1653.1,
АВ5І12461.1, АС264736.1, АСИ64772.1, АВВ90680.1, АБО21659.1, АС2б47741, АрОг16841,
АрОг1729.1, АрО21650.1, АрО21733.1, АСЯ647551, АСИб64751.1, АВАБб55775.1, АрОг217381,
ССА29174.1, АрРО21669.1, АС264744.1, АРО21654.1, АрО21768.1, АВВ96106.1, ССА29168.1,
АСТ91176.1, АСВ11555.1, АВВ90695.1, АРО21660.1, АСуг2666.1, АС264778.1, АрОг1766.1,
АрО2г1677.1, 7Р 02161687.1, ССА29165.1, АРО21745.1, АСВ11548.1, АВВ90689.1, АВВ96107 1,
ААТА6052.1, АрОг21718.1, АрОг21722.1, АВВ96088.1, ЕРМ/40271.1, АрО21686.1, АВВ96103.1,
АСИОЯ4.3500.1, АСВ11536.1, АВВ92360.1, ССА29167.1, АСТ91199.1, АС2б4770.1, АСуг27161,
АВА55786.1, АС264737.1, АВВ96083.1, АСуг2676.1, АСИб64735.1, АСТО1212.1, АСуг2765.1,
САШОЇТ371.1, САС17734.1, АВОЗ6389.1, АСВ11537.1, САСО8515.1, АСЯ64714.1, АСИО435131,
АвВ9бО82.1, АОМ21387.1, АрОг21711.1, АВОЗ36392.1, АВАТ0770.1, САСЗ7049.1, АВВ96098.1,
АВВ90692.1, АСВ11535.1, АС2б64768.1, АСу22756.1, АВВ96094.1, АВА55791.1, АВВ96078.1,
АСТ91141.1, АСЯб64779.1, АСИб64750.1, САШЧО1Т370.1, АС264753.1, АСИО43480.1, АВАБ557941,
АВВ9б6085.1, АВВ96110.1, МР. 004448035.1, АС264709.1, АВВ96102.1, АСА64773.1, ССА29175.1,
АСИб4749.1, АСИб4756.1, АСИ64781.1, АВОб1777.1, АСИб64759.1, АСЯ64764.1, АСЯ647401,
АСТ91249.1, 7Р 03702922.1, АСВ11545.1, АС264775.1, АСИ64769.1, АСТ91145.1, АСИб4742.1,
АСТ9У1254.1, АСЯб4762.1, АСИб64716.1, АСЯб4777.1, АОМ26559.1, АВВ96096.1, АС264780.1, 2Р 01201250.1, САН55829.1, Р 01052921.1, АВВОб6О077.1, А0БО21658.1, АСТУ91161,
АВВ90684.1, АСНА5б6750.1, АВВ90697.1, АС264746.1, АВВО2367.1, АСТО11391, АСИб4763.1,
АСТ91200.1, АВОб61773.1, АВВО60О81.1, АС264748.1, АС2б47821, АСО43498.1, АрОг16511,
АВВ90679.1, ВАСОб233.1, АС264747.1, АВВОб6О86.1, АС264761.1, АВВ92370.1, АВОб17741,
АСТ9У1175.1, АВВ90686.1, АСВ11546.1, Р 0174060411, АВОб17851, МУР 0015313771,
ХР 001434539.1, АВА55767.1, АВО21865.1, АВЕ55636.1, АВАБ55751.1, АВВ90698.1, АБО12311.1,
АСІ264765.1, АВВ92366.1, АВВ92368.1, АСІО4539.1, ХР. 001023288.1, АС264783.1, АрО216921, йР 01753800.1, АСИб4760.1, АСиб4700.1, Р 010554801, АС2б4767.1, АСЯ6470141,
АВА55745.1, АВА55752.1, АСИб64766.1, УР 6146401, АВА55759.1, АрО21723.1, ВАСІОб232 1, 2Р 01002389.1, АВВО90693.1, АСТ91264.1, АВВ9У92358.1, ВАБР99026.1, АВНА1ТО0769.1, 2Р 00959618.1, АЕАО8580.1, АрО22986.1, САВЬ1023.1, САС40958.1, АРО21709.1, САВЬ1025.1,
АСІ15226.1, АСуг2680.1, Р 05741459.1, АСТ91248.1, АВО48567.1, АВО61792.1, АСуг2754.1,
ЕРМ53276.1, ААІ 876441, АСТО9О1209.1, 7Р 02147281.1, АСО43518.1, АСЯ64776.1, АСВ11543.1,
АСТ91151.1, АСу22764.1, АСТО1159.1, АВА1Т8186.1, АЕАОВ8579.1, АрОг1770.1, АВЕ55634.1,
САД27179.1, АВА55741.1, АРО21705.1, Р. 01754375.1, АСВ11541.1, АСА56751.1, АСТ9О12501,
АрО2г1769.1, АрО21753.1, АВВ96097.1, АСТ91208.1, АВО21867.1, АрОг21757.1, АСВ11554.1,
АВА55749.1, САС40951.1, АО21719.1, АВВОУ6074.1, Р 00954267.1, 2Р 05786269.1,
АЕН7б912.1, АВА55742.1, АВА55748.1, ВАСОб236.1, АрОг21732.1, АВА55750.1, АВА55768.1,
АСТЗ31522.1, 2Р 05090796.1, АСИб64739.1, МР 915886.1, АБО21731.1, САС40948.1,
ХР 001032273.1, АЕН7бО11.1, АВАБбБ5743.1, АВОб17691, АВА5Б5755.1, 2Р 05122263.1,
АрОг1756.1, АВАБ5Б5744.1, АВА55746.1, Р 01901011.1, Р 02150761.1, АбО2г17421,
АСА5б6752.1, АВА55747.1, АВЕ55637.1, АВА55740.1, АВА55760.1, 7Р. 00948812.1, АВА55804.1,
А0БО21771.1, Р 05342453.1, АВЕ55638.1, МР 508336.1, АВВ9У2357.1, Р 01049702.1,
АВИО48546.1, АВИО48555.1, АВА557641, АВО21866.1, Р 05079274.1, Р 01880441.1,
АСІ64738.1, 7Р 05842058.1, АСТ91218.1, АВА55769.1, АВА55739.1, АВА55803.1, АСТ91247.1,
АВА55782.1, АС217539.1, АВВ92359.1, АСНбЗ9УО66.1, 7Р 01035050.1, АС217537.1, АВА55774.1,
АСІ64729.1, АСЯ17538.1, 2Р 01751972.1, АСА64731.1, АСЯб64702.1, ААНІ13803.1, АЕО284001,
Р 0509921311, САВ5Б1021.1, АСИ17531.1, АЕН7бОЇ4.1, Р 05051648.1, АС2б472641,
АСЯ17540.1, АСИб4727.1, Р 02152773.1, АСТ9У1253.1, АСИ17536.1, ХР 001423873.1,
АСЯ17534.1, МР 168645.1, АС217520.1, АВУ56786.1, АСВ11539.1, Р. 01157350.1, АЕН76910.1,
АВУ56784.1, ААУ85982.1, АСТ9У1257.1, АСВ11544.1, АСЯ17532.1, 7Р 01746661.1, АВА55771.1,
ВАСОб235.1, єшНЗ2гО49.1, МР 001166282.1, АВОб1799.1, АВА55757.1, АЕН7б69151, 60 АСОБ59264.1, АВО26125.1, АЕАОВ8577.1, АСТ91265.1, АВУ56785.1, АСИ17528.1, АВОб1798.1,
АРО2г1749.1, АСТО91263.1, АСТО91252.1, АСЯб4722.1, АВОб1771.1, АСЯ17526.1, АВО26123.1,
АРО2г1714.1,7Р 01000906.1, АВО61796.1, АОС29534.1, АСВ15250.1, АСО47155.1, АСЯ17525.1,
АСВ11553.1, АВОЗ6391.1, АЕН7б6913.1, АС217523.1, АВОб61781.1, АСЯ17524.1, 7Р 01914093.1,
АСВ11538.1, 7Р 01015838.1, АСО22693.1, АСВ15252.1, САС86945.1, АСОБ59265.1, АВОб61791.1, / АСИ17521.1, АВО26124.1, АСЯб4732.1, АСИО43514.1, АСТО1256.1, АСМб63043.1, АС575820.1, 2Р 08666479.1, САНОЗ133.1, ВАСОб234.1, АЕН7бО916.1, АВО61790.1, АВЕ72965.1, АСЯ64711.1,
АСВ11542.1, ААУ26148.1, АВАБ5776.1, АСЯ17522.1, АС7б64734.1, АЕАОВ8578.1, АС175301, 7Р 04062748.1, Абуг2755.1, МР 969039.1, ААМ26149.1, АСбуг2761.1, АВО48543.1, 7Р 08414255.1, ААТО1720.1, 2Р 01444283.1, АВАБ55796.1, АВО48542.1, МР 001042010.1,
МР 001234392.1, МР 3515101, АСИб4730.1, Р 08634611.1, АСи175291, АСуг2667.1,
ААТО1719.1, МР 004283531.1, АВОб1801.1, АС/17519.1, АВО15266.1, САВ5Б1040.1,
АС7б64707.1, АСО2г2766.1, АВО26121.1, 7Р 01878984.1, САВ5О1039.1, АВА55795.1, АВО15269.1,
АВО15247.1, АСуОг2763.1, АВО15251.1, АСЯ17527.1, АВО152701, Абугг769.1, АРЕО6670 1, 2Р 05780387.1, АВО61770.1, АСТО91258.1, АВО15258.1, АВО15257.1, АВО48545.1, САС86946.1,
АВО15267.1, Р 01741446.1, АВО48544.1, МУР 002296646.1, АЕН7бО17.1, АОбС29550.1,
УР 002527219.1, АВКВ88246.1, АОМ21388.1, АСТО1210.1, Р 05064795.1, АВІ)16487.1,
ХР 002675644.1, АВ.О16489.1, АРА71089.1, АБА71088.1, ААТ46053.1, Р 01744806.1, 2Р 01037964.1, 7Р 00955262.1, АВО)16493.1, МР 001840157.1, 7Р 00964204.1, АВВ40596.1,
АСВ15249.1, А0БО82963.1, МР 004499590.1, 2Р 01011524.1, АСуг2758.1, 7Р 01748906.1,
АСМЗ30052.1, Р 06191942.1, МР 001188029.1, АСОбЗ3080.1, МР 166583.1, ААМ41375.1, 2Р 00998265.1, АС)дг2757.1, АВВ13506.2, АВІ13999.1, АВІТ4004.1, АВВ13509.1, МР 3719801, 2Р 01755711.1, 7Р 05065835.1, 7Р 00959368.1, ХР 001020063.1, АВО)16481.1, АВІ14006.1, 27Р 05101918.1, 2Р 01913733.1, АВІТ4001.1, АВМО92270.1, АВІ14003.1, САНОЗ132.1,
УР 973211.1, АВА55797.1, МР. 003578527.1, АВО16483.1, АВО16482.1, СВУ78068.1, АСТО1260 1,
МР 5091551, АВВ1І3508.1, АВ.О16485.1, АВОб1779.1, АВІ14005.1, АСМб63042.1, АОС29543.1, 2Р 02153440.1, МР 709335.1, АВІТ13998.1, АВІТ14002.1, ААВ70825.1, АСХЗ30751.1, АВІТ4000.1,
УР 003617173.1, Р 01155421.1, АСХЗ30752.1, МР 5428871, АОС29546.1, ААСЗ8359.1,
АРС29541.1, ХР 001020064.1, 27Р 01442436.1, 7Р 05103090.1, АОС29544.1, АВОб1809.1,
ААУ8О9939.1, АСНОЗО235.1, САН5Ь58В30.1, АВО26095.1, МР 004011670.1, АВО26084.1,
АБА71083.1, АВО26087.1, АВОб61806.1, АОС29531.1, АВО26109.1, АСуг2753.1, АВО26089.1,
АВО26093.1, АВО26092.1, АВОб61827.1, АВО26105.1, АВО26112.1, ААТО1721.1, АВО261201,
АВО26090.1, АВО26088.1, АВОб61811.1, АВО61783.1, САНЬ5827.1, АСНОЗ232.1, АВОб61828.1,
АОС29530.1, АСНУЗ234.1, ААОВ88276.1, САН55В23.1, АВО26103.1, АСНУЗ233.1, АВОб61836.1,
АВО26094.1, АВОб1840.1, МР 004534277.1, Р 05845010.1, АВОб1821.1, АСНО9231.1,
ААМУб8403.1, АВОб61839.1, САНЬбОЗ98.1, АВО26085.1, АВОб61826.1, АВОб61822.1, АВО26110.1,
АВОб1810.1, АВОб1844.1, АВОб1825.1, АВО26099.1, Абдуг2г767 1, АВО26102.1,
УР 004535707.1, Абуггуб21, АВО260971, ВАСб5444.1, АВОб1829.1, УР 1140831,
САН5Ь5828.1, АВО26106.1, МР 552229.1, МР 0491901, АВО26116.1, САН5Ьб61ТО7.1, САМ32407.1,
АВО26101.1, АВОб1841.1, АВМ79805.1, 72Р 05075249.1, ААС2г7438.2, МР 003754872.1,
АОС29532.1, АБА71139.1, АБА71107.1, АБА71095.1, МР 001268217.1, АБА7112611,
АРА71094.1, САН5б6108.1, АОС29533.1, АБА71085.1, 7Р. 05054453.1, АБА71097.1, АРА71086.1,
АРрА71114.1, АОС29548.1, АБА7У11011, АОС29547.1, АБА71138.1, АОС29542.1, АБА71098.1,
АРрА71128.1, АРА71105.1, АРА71093.1, АБА71135.1, АБА71100.1, МР 5574791, АБА71113.1,
АРА71091.1, АОС29537.1, АБА71084.1, АБА71090.1, САН5бОЗ4.1, ХР 002945767.1,
АБА71137.1, АБА71103.1, АБА71118.1, АБА71133.1, АБА71102.1, АОС29536.1, САН5б61Т00.1,
САН5Бб101.1, АСІТ15225.1, АСІ15225.1, АВО26091.1, САНЬ5В26.1, САН5Б824.1, 7Р. 08484419.1,
АРрА?71111.1, АСО22759.1, САН5Ь5В25.1, САН5Ьб61ТО6.1, САНЬб6ОЗ9.1, САС40957.1, 7Р. 05075037.1,
САН5ЬбІ102.1, 2Р 06846296.1, АВ.О16491.1, 7Р 05067177, ХР 001698107.1, ВАНІО0789.1,
ВАНТО791.1, ВАНІО0О793.1, ВАНІ0788.1, АВО16490.1, ВАНІО800.1, ВАНІТО0790.1, ВАНТО792.1, 7Р 05075214.1, ВАНТ0799.1, ВАНІТО795.1, ВАНІТО0О787.1, ВАНІ10798.1, ВАНІТО794.1, ВАНІ1ТО801.1,
ВАНТО796.1, ВАНІ10797.1, ВАНІТО802.1, САН5б6ОЗ5.1, САН5бОЗб6.1, АОС29538.1, АВХ76425.1, 2Р 06727686.1,27Р 07774883. і МР 001615042.1.
Фермент Ег
Фермент Е? може бути здатним до перетворення 1-алканолу на відповідний 1-алканаль.
Зокрема, Ег може являти собою щонайменше одну з Р4і50-алкангідроксилаз (Ез) під ЕС 1.14.15.3, АІкКВ-алкангідроксилаз (Еь) під ЕС 1.14.15.3, алкогольоксидаз (Ес) під ЕС 1.1.3.20 або алкогольдегідрогеназ (Ея) під ЕС 1.1.1.1 або ЕС 1.1.1.2. Більш конкретно, Ег може бути вибраним із групи, що включає Ра5О-алкангідроксилазу (Ез), АІКВ-алкангідроксилазу (Ек), алкогольоксидазу (Ес) під ЕС 1.1.3.20, АІКО-алкогольдегідрогеназу (Ес) й алкогольдегідрогеназу бО /((Бавї) під ЕС 1.1.1.1 або ЕС 1.1.1.2.
Зокрема, Ег може являти собою АїЇІКВ-алкангідроксилазу (Ев), також відому як алканмонооксигеназа. Більш конкретно, Е?»2 може характеризуватися щонайменше 50 95 ідентичністю послідовності з алканмонооксигеназою з Рзхепдотопаз ршіда сРо1, що кодується аквст. Ще більш конкретно, Ег може характеризуватися щонайменше 50 95 ідентичністю послідовності з поліпептидом УР 001185946.1. Більш конкретно, Е» може містити поліпептид, який характеризується щонайменше 50, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 91, 94, 95, 98 або 100 95 ідентичністю послідовності з поліпептидом УР 001185946.1.
Фермент Ес
Алкогольоксидаза (Ес) може бути вибрана з групи, що включає:
АА5Б46878.1, АСХ81419.1, ААБАб6879.1, САВ753531, ААБ46880.1, ХР 7123501,
ХР 002422236.1, ХР 712386.1, ЕЕО43775.1, ХР 001525361.1, ХР 001386087.1, ХР 459506.2,
САВ75351.1, САВ75352.1, ХР 001385255.2, ЕОКЗ39369.2, ХР 001484086.1, ХР 002618046.1,
ХР 002548766.1, ХР 002548765.1, ХР 003041566.1, ХР 003328562.1, ХР 001214264.41,
ХР 001904377.1, ХР 6582271, ХР 001591990.1, ХР 7530791, ХР 002569337.1,
ХР 001268562.1, ХР 003348911.1, ЕСРОО120.1, ХР 001389382.1, ЕЕНЗ7923.1,
ХР 001264046.1, ЕСО58212.1, ХР 001554225.1, ХР 003298648.1, ХР 9590051,
ХР 002841296.1, ХР 001940486.1, ЕСВА52262.1, ЕЕО89581.1, ЕС2ОО9881.1, ЕРОЗ3355.1,
ХР 001821106.1, ХР 002622231.1, ЕсаИа03784.1, ЕСС44059.1, ХР 003018036.1,
ХР 003011696.1, ЕРМ90752.1, ХР 001227812.1, ХР 7581701, ХР 001243546.1,
ХР 002479333.1, ХР 0033447071, ЕРМУТ4100.1, ХР 003071927.1, ХР 003171263.1,
ХР 003051757.1, ХР 002147053.1, ЕЕНТ9591.1, ЕЕН5БО473.1, ХР 001792978.1, ХР 3870941,
ЕРМ98644.1, ХР 002788971.1, ХР. 002842592.1, ЕЕХО4185.1, ХР 003231449.1, ХР. 001729067.1,
СВХ94189.1, ХР 001413535.1, АСЕ22878.1, ВБ5МУМУ29.1, ХР 002994642.1, ХР 002269629.1,
ХР 002519938.1, ХР 002982582.1, МР 001047464.1, ЕЕС7З3620.1, ХР 002981110.1,
ХР 002960521.1, МР 5667291, ХР 001541970.1, ХР 002967201.1, ВАКОО483.1,
ХР 002182547.1, ВАКО2336.1, ХР 002454190.1, ХР 002328753.1, ХР 002867943.1,
ХР 002285334.1, САСВ87643.1, САМ71289.1, ХР 002454188.1, ААІ 31049.1, ХР 002464494.1,
ААІЇ 310211, МР 1171871, ХР 002543430.1, САА1Т8625.1, ХР 002883430.1, МР 193673.2,
ХР 002529832.1, ХР 001753124.1, МР 001142399.1, АСМ27562.1, ХР 002464495.1,
АСНАЗб691.1, ВАУВбб655.1, ВБМУМУ28.1, МР 001148058.1, АВА17814.1, ЕАМ78905.1, МР. 1945861,
ААМб3097.1, ААКб4154.1, МР 001064839.2, ХР 002869492.1, ХР 002314488.1, ААЇІ 310241, 7Р 06967355.1, ААРБ4248.2, ХР 002311685.1, АСЕ87929.1, МР 9070781, ЕСЕО7035.1,
УР 001849908.1, ХР 002464496.1, ЕЕСб67160.1, ДАІ 31027.1, ХР 001761391.1, ХР. 002961172.1,
ХР 002528823.1, ХР 002966834.1, МР 001176205.1, ХР 001763007.1, ХР 002272123.1,
ХР 002889487.1, ХР 003003157.1, МР 285451.1, ЕСОз23219.1, МР 171895.2, МР 003395677.1, 00927МУ89.1, АСЕ88407.1, 2Р 06413771.1, ЕЕЕБ51131.1, МР 003835264.1, МР 003397164.1,
УР 004081922.1, ХР 003294587.1, ЕЕЕ51130.1, МР 003647529.1, МР. 003647985.1, СВІ29206.3,
ХР б29786.1, 2Р 07964664.1, ЕЕЕ57396.1, ЕЕЄНОЗУ589.1, МР 003265796.1, МР 001840752.1, 7Р 08620775.1, АСАЗб6О76.1, 2Р 05043749.1, МР 980677.1, 27Р 05043728.1, МР 6928941,
МР 710223.1, ЕЕСб7159.1, ААРОЗІ1І101, ЕРАВ8В5О69О7.1, МР 6918051, МР 55101241,
УР 001174466.1, МР 002796294.1, МР 004716331.1, МР 001019547.1, УР 58573741,
АЕАВ8бО07.1, МР 960830.1, МР 004743970.1, 2Р 03431349.1, 7Р 06448642.1, 7Р 07430351.1,
МР 215006.2, 7Р 03535393.1, 7Р 06801690.1, МР 001849132.1, МР 854165.1, 7Р 03427234,
СвВо27378.1, МР 334920.1, 27Р 08571383.1, МР 728161.1, 7Р 01896040.1, 7Р 03530923.1,
МР 5513061, МР 003167456.1, МР 60О6070.1, 2Р 06850167.1, АОРОЗ9О95.1, МР 9079861, 4Р 04924166.1, 2Р 08139923.1, УР 001270300.1, УР 5218301, УР 0031474101,
УР 002007173.1, АОНб2464.1, МР 004382294.1, МР 7472231, ХР 004687462.1, МР 9021591, 2Р 04936784.1, МР 003914667.1, 2Р 01306356.1, 7Р 04750553.1, УР 002875279.1,
УР 004704374.1, УР 0016713921, МР 24905541, 2Р 06876360.1, УР 001345853.1,
МР 002437969.1, УР 004356853.1, МР 3510751, СВІ23676.3, УР 001189668.1,
УР 001528881.1, МР 001613612.1, МР 001747218.1, МР 003393002.1, МР 001365074.1, 4Р 07778129.1, Р 07392715.1, МР 001553329.1, МР 262925.1, МР 751961.1, МР 5641831,
УР 003811876.1, МР 002356821.1, МР 001051828.1, МР 001837525.1, МР 7165131, 4Р 01915079.1, йР 02156621.1, МР 001184631.1, МР 001475595.1, Р 05042393.1,
УР 962228.1, УР 001612275.1, АОМ55625.1, МР 001675797.1, МР 003555260.1, 7Р. 01075039.1,
УР 003812822.1, УР. 001503351.1, ЕЕМ52938.1, МР 001759063.1,7Р 06503577.1, МР. 8710251, 4Р 08564919.41, УР 002310162.1, УР 73287541, УР 001092722.1, УР 7393241,
ХР 002333995.1, МР 085596.1, МР 928870.1, ЕСОО5748.1, МР 4439931, 7Р 08138057.1, 4Р 050415871, 2Р 07011380.1, УР 001612684.1, 2Р 07669342.1, 2Р 06508361.1, 60 0 2ИР 03423639.1, УР 923293.1, 7Р 05061865.1, 7Р 08181496.1, МР 5596051, 7Р 06841320.1,
2Р 01620712.1, МР 001896340.1, 2Р 03276650.1, МР 004303194.1, 7Р 08180715.1, 2Р 06382740.1, 27Р 01034555.1, УР 004604560.1, УР 001020142.1, УР 9353751, 2Р 01546137, 27Р 07661079.1, УР 001860640.1, 7Р 06052841.1, 27Р 01881170.1, 27Р 05781455.1, УР 9327321, 7Р 08119300.1, УР 004715268.1, 7Р 03697402.1,
МР 004126957.1, 27Р 06703136.1, МР 6424451, 7Р 08273900.1, УР 0045243131, 7Р 01902993.1, МР 001900094.1, АЕЄА84888.1, УР 004690289.1, МР 7143581, МР 6824711,
УР 0032391, УР 9974651, УР 003452130.1, 2Р 01739153.1, УР 004219483.1,
УР 001761298.1,7Р 01438251.1, СВІЗ7146.3,27Р 04748383.1, МР 004362245.1,7Р 05912795.1,
УР 003390234.1, МР 003122799.1, ССВ77579.1, ЕСВОб416.1, 7Р 08389346.1, МР 1914961, 7Р 05224727, 2Р 01125614.1, УР 4662871, УР 001368620.1, УР 001380256.1,
УР 002361951.1, МР 002756103.1, МР 001801399.1, 27Р 06847140.1, МР 003200069.1,
УР 001940247.1, МР 001584322.1, 7Р 04679227.1, МР 0024936741, МР 002135530.1,
УР 004290424.1, МР 001772011.1, 7Р 08189046.1, 7Р 03423640.1, МР 001834251.1, 2Р 01041752.1, МР 001533410.1, МР 269751.1, МР 002432994.1, УР. 003694653.1, САЮ47896.1,
МР 7693591, МР 004239460.1, МР 004605221.1, МР 001961214.1, МР 001837513.1,
УР 004335962.1, УР 004358600.1, 2Р 05050026.41, УР 003202983.1, ВА0БОЗ777.1, 2Р 02165013.1, МР 774131.1, МР 4321691, 7Р 05000547.1, МР 001261233.1, ХР. 002593969.1,
ХР 002603265.1, УР 003342435.1, 2Р 01253183.1, ЕСОЗ6831.1, УР 001866737 1,
УР 001523879.1, МР 1335941, МР 003768990.1, МР 001237820.1, МР 003133224.1, йР 01896771.1,7Р 01865125.1, МР 9603191, МР 826958.1, МР 003326608.1, МР. 002219515.1,
МР 217926.1, 7Р 07441899.2, МР 001208178.1, АОМ420О38.1, МР 002433510.1, 7Р. 08274313.1,
ЕСОЗ8668.1, 2Р 03393221.1, МР 356358.1, 7Р 06055780.1, МР 001684562.1, 7Р 08528157 1,
ВАБОЗІ162.1, МР 001800712.1, АСІ 371061, МР 8834891, 2Р 01075202.1, МР 9694461, 2 01129577, УР 001530285.1, 27Р 04746501.1, УР 001341980.1, УР 9050031, йИР 05218299.112Р 08665577 1.
Зокрема, алкогольоксидаза (Ес) може бути вибрана з групи, що включає: АА5З46878.1,
АСХ81419.1, ААБ46879.1, САВ75353.1, ААБ46880.1, ХР 7123501, ХР 002422236.1,
ХР. 712386.1, ЕЕО43775.1, САВ75351.1, САВ75352.1, ХР 002548766.1і ХР 002548765.1..
Фермент Ед
Зокрема, АІК.)-алкогольдегідрогеназа (Ех) може бути вибрана з групи, що включає: 0005931, О9МУМУМУ2.1, 2Р 00957061.1, МР 957894.1, САСЗ8030.1, УР 6944301,
УР 957725.1, МР 001672216.1, МР 552061.1, МР 1304101, 7Р 06155535.1, 7Р 01222730.1,
УР 691907.1, МР 002297804.1, МР 004283522.1, МР 001234383.1, МР 004435031.1, 2Р 05110316.1,7Р 05042898.1, УР 004466324.1,7Р 08553549.1, ХР. 004125220.1, АрІ22536.1,
А0І1Т8461.1, МР 003810975.1, МР 6623461, МР 004427557.1, МР 692606.1, 7Р 05043291.1,
УР 4407521, 27Р 02386160.1, 7Р 04763547.1, 27Р 02361232.1, УР 003376674.1, 27Р 02354055.1, 7Р 05085930.1, АБОО00130.1, МР 003643016.1, 7Р 05040520.1, МР 6919221,
ААХ2г3098.1, ВАБО7З371.1, МР 104379.1, МР 002551960.1, МР 003908558.1, МР 9879031, 7Р 05785860.1, МР 004145612.1, МР 004140926.1, СА788300.1, 7Р 05041901.1, МР 5336451, йР 01754259.11, СВАЗІ1І223.1, МР 5875421, МР 106852.1, 7Р 08402506.1, 7Р 05055020.1, 7Р 02400829.1, МР 1047471, 7Р 02409412.1, МР 001057269.1, МР 004229837.1, МР. 2944291,
УР 001028112.1, Р 02479747, МР 002874799.1, 7Р 03541051.1, МР 003606536.1, 7Р 02887167.1, МР 001795572.1, МР 487451.1, АСИ62814.1, МР 560809.1, 27Р 02167462.1,
УР 004482869.1, МР 001581248.1, 7Р 07374066.1, МР 001203981.1, 7Р 06840259.1,
Р 0191514541, МР 7745251, 7Р 03561080.1, УР 001208258.1, УР 001897374.1,
УР 001413909.1, УР 3664691, УР 5218541, УР 004490642.1, УР 003280349.1, 7Р 03588744.1, МР 001562229.1, МР 001120981.1, 7Р 03574970.1, МР 00423422541, 2 02377531.1, 7Р 02149954.1, УР 001237360.1, 27Р 03266156.1, УР 7828211,
УР 004754039.1, ВАВб1732.1, 7Р 07046388.1, 7Р 02145452.1, ВАР45123.1, МР 002129953.1,
МР 003812439.1, 7Р 01055291.1, ВАР45124.1, ЕСН71399.1, 7Р 05060389.1, 7Р 05090872.1,
ВАР45126.1, ВАВО7804.1, 7Р 06053464.1, МР 001238278.1, 7Р 04944469.1, МР 0011711601,
УР 002984373.1, МР 002237649.1, 7Р 08276443.1, ВАРО8451.1, 7Р 05124197.1, МР 5686401, 7Р 05785341.1, МР 7690371, МР 370657.1, МР 775005.1, 2Р 02911119.1, МР 1654601, 2Р 02891796.1, УР 62232841, 7Р 07675057.1, УР 001901188.1, УР 003592183.1,
Р 02361040, МР 5182441, УР 001809673.1, МР 9470321, УР 001766369.1,
УР 002255997.1, 7Р 04940241.1, УР 004012032.1, УР 8410491, УР 002983249.1,
УР 003643276.1, УР 003855487.1, УР 003778137.1, 27Р 02361104.1, СВАЗОБ11 1, 2Р 05781295.1, УР 7568651, 7Р 02461782, УР 002007988.1, УР 004110133.1,
УР 002229680.1, 7Р 02386040.1, МР 004684069.1, МР 373268.1, УР 4406141, МР 4214411, 60 МУР 26489641, УР 004362617.1, 7Р 06053847.1, УР 3665381, УР 003812285.1,
УР 004154520.1, 4Р 019010811, 4Р 02372179, 4Р 02453559.1, АБРОУВ8В564.1,
УР 003747084.1, 7Р 02487888.1, Р 01768075.1, 7Р 02400664.1, МР 1066801, МР 7247531,
УР 002907583.1, УР 004482470.1, УР 1675821, УР 27010941, УР 004362333.1, 4Р 02504034.1, УР 003189363.1, МР 9732121, 2Р 00952746.1, УР 4596651, МР 7772181,
УР 5811071, 4Р 01878091.1, 4Р 01057973, УР 002913124.1, 4Р 0103557041,
УР 001777560.1, УР 5526271, 4Р 02890876.1, УР 5871461, УР 004141814.1,
УР 001685369.1, 4Р 05343380.1, МР 886000.1, 4Р 04942359.1, 4Р 01913732.1, 2Р 08244266.1, УР 002233254.1, 4Р 0181667041, УР 8372331, 4Р 07478008.1, 2Р 01985205.1, Р 07473972.1, 7Р 01067090.1, Р 01867788.1, Р 01754024.1, ЕСОМ19144.1, йР 077412831, Р 06876839.1, МР 002395287.1, Р 07795498.1, МР 1026921, МР 2527891,
УР 004451100.1, 2Р 01305514.1, МР 002438481.1, 2Р 04930310.1, МР 00181018941,
УР 104187.1, 2Р 01367534.1, УР 001346382.1, Р 01878466.1, МР 7890171, УР 0011154221, 4Р 05067451.1, 4Р 05842072.1, УР 001682976.1, УР 7613481, УР 004611600.1,
УР 004188241.1, МР 4197611, ЕРМ85163.1, МР 684227.1, Р 061774551, МР 9350881,
МР 004614491.1, 7Р 08697916.1, МР 004689366.1, 2Р 05052326.1, УР 267420.1, МР 7285751,
УР 001759584.1, УР 5574461, 4Р 06844897.1, 4Р 0607979941, УР 003771143.1, 2Р 05094472.1, МР 5116221, АСРГО98205.1, МР 5823141, Р 07660450.1, УР 004065269.1,
УР 003979606.1, МР 002520401.1, МР 003579281.1, йР 01749397.1, Р 03265018.1, 4Р 07283393.1, УР 00153215041, УР 2989411, 4Р 06688181.1, 4Р 01611660.1, йР'02367747.1, БОР4А28701, 2Р 00993245.1, АВУ65992.1, МР 3548001, 2Р 01747277 1,
УР 561728.1, 2Р 02190947.1, УР 605824.1, МР 001991873.1, 2Р 00955792.1, УР. 003594401.1,
УР 004156101.1, МР 001472858.1, МР 001746950.1, 2Р 08410042.1, Р 01116604.1,
АОРОЗ912.1, ХР 01692203.1, МР 001328534.1, МР 9992361, МР 002278452.1, Р 01306234.1,
УР 002871776.1, 7Р 02369920.1, 7Р 01896942.1, УР 002289724.1, АЕС07584.1, МР 9990051,
МР 003552461.1, УР 2706681, 4Р 06862917.1, УР 001811327.1, УР 001166036.1,
АВУУО6653.1, Р 01548976.1, Р 07774606.1, 7Р 05888080.1, МР 003301477.1, МР 3417481, 4Р 05100248.1, УР 9180381, УР 001500869.1, УР 004305296.1, УР 003342584.1,
МР 9479611, 4Р 05124765, 4Р 01904700.1, УР 003696207.1, УР 004156699.1,
УР 001241858.1, МР 104253.1, МР 676241.1, 2Р 01736903.1, Р 00960121.1, МР 4360191,
МР 002945716.1, МР 2595941, ЕРМ86615.1, ААУ87334.1, МР 900970.1, АЕСО7409.1,
УР 3490871, УР 004141055.1, УР 001169476.1, УР 001566960.1, УР 2604721, 4Р 07028078.1, УР 004610468.1, УР 003066461 1, УР 9610961, -Р 08666573.1, 4Р 02187363.1, УР 001631518.1, 4Р 08141293.1, УР 001666324.1, МР 3870831,
УР 001526184.1, УР 1652131, МР 003694923.1, МР 004433897.1, УР 0012654391.1, 2Р 05068964, УР 002313077.1, 4Р 02372305.1, УР 004486039.1, УР 3419011,
УР 001862312.1, МР 004681983.1, МР 6173731, ЕРМ86570.1, УР 001673285.1, ВАКЗ9604.1,
УР 001669327.1, МР 004353150.1, МР 001888124.1, Р 08645365.1, УР 0034107841,
УР 841363.1, БСРА4033.1, МР 001633470.1, БОР4А2855.1, Р 011151251, А0Н57794.1,
УР 784649.1, МУР 373898.1, 0047944.1, МР 001117950.1, 2Р 02380339.1, 2Р 03697092.1,
МР 003187112.1, МР 004065439.1, МР 7422261, МР 002429878.1, МР 003556403.1,
АЕН8В1535.1, УР 001887935.1, МР 554605.1, 7Р 07333059.1, МР 001991668.1, УР. 003694210.1,
УР 2226801, УР 002232672.1, УР 001763402.1, УР 001806802.1, УР 6621561, 4Р 05153429.1, 7Р 01893457.1, 7Р 04595387.1, АОРО9389.1, 7Р 02890074.1, УР. 001313582.1,
МР 387401.1, Р 01863693.1, МР 750630.1, 2Р 04939997.1, МР 268077.1, 2Р 05169265.1,
МР 88899441, 4Р 08408421.1, УР 001155137.1, МР 6990171, УР 002008190.1,
УР 004493716.1, МР 266277.1, МР 004654190.1, МР 943422.1, Р 05162503.1, Р. 02905080.1, 4Р 02905080.1, 4Р 03784461.1, УР 001601784.1, УР 002233786.1, УР 6228421,
УР 002822679.1, 2Р 04944312.1, йР 05179897.1, УР 004483124.1, УР 003390414.1,
УР 77196841, УР 001628465.1, УР 004311599.41, 4Р 01037150.1, 4Р 01611812.1,
Р 03575238.1, УР 002278603.1, МР 001593845.1, БС001613.1, МР 2975741, МУР 36750941,
УР 998315.1, 7Р 08664883.1, Р 05114787.1, 7Р 05450190.1, МР 298028.1, 7Р 01034678.1,
УР 002827796.1, МР 372762.1, МР 004466723.1, иР 01012072.1, МР 320380.1, 7Р 01075202.1,
УР 001312358.1, МР 681895.1,27Р 07718189.1, ЕСРБ5Б8В68.1, МР 003750799.1, МР. 002984725.1,
УР 002543360.1, 2Р 01040714.1, йР 04717111.1, МР 002422932.1, УР 003506115.1, 55: 2Р 01444019, 4Р 03587285.1, УР 7714391, УР 001947593.1, УР 001049712.1,
УР 003979888.1, УР 001553786.1, МР 003980878.1, МР 001578274.1, МР 4724421,
УР 778292.1, ЕСЕ56670.1, МР 002779312.1, МР 4321691, МУР 560963.1, МР 001265285.1,
УР 002822699.1, МР 002278091.1, 2Р 08632361.1, МР 002229178.1, Р 06840392.1, 4Р 05069105.1, 7Р 00998644.1, МР 004487901.1, УР 680905.1, УР 728088.1, УР. 001985833.1, бО МР 002007099.1, 2Р 05066777.1, йР 01551182.1, МР 002973332.1, Р 04681414.1,
2Р 07675148.1, АЕН8ФЗ3964.1, МР 004692042.1, СВОЗ36337.1, ЕСР4А8473.1, 7Р 03585612.1,
УР 001369428.1, МР 001897527.1, АЕСО8472.1, МР 001166065.1, МР 4370181, МР 29468941,
УР 002541437.1, УР 004692953.1, МР 1074841, УР 995681.1, МР 7652671, МР 1662231, 4Р 01740635.1, МР 001234127.1, йР 02186681.1, УР 004140839.1, УР 00158449941,
А0І17244.1, Р 08698744.1, УР 001022991.1, ЕРМ84582.1, Р 01743515.1, МР 001816113.1,
УР 004688050.1, УР 001342912.1, 4Р 01125614, барозог8в.1, 4Р 03569823.1, 4Р 05089337.1, МР 001901091.1, МР 886663.1, Р 07718907.1, МР 004687387.1, МР 5214641, 4-Р 06688394.1, йР 08099738.1, 2Р 02885452.1, МР 003744085.1, МР 001328823.1, 2Р 02488044.1, 4Р 01015005.1, УР 002983153.1, 4Р 06898725.1, 4Р 05886707 1, 2Р'08101209.1, 2йР 03319462.1, МУР 003134969.1, МР 001188857.1, МР 0045577671,
УР 004675666.1, УР 004358728.1, УР 002252541.1, УР 6840091, -Р 05085667 1, 4Р 02144674, УР 004127560.41, 4Р 01901604.1, УР 004280074.1, Агсаб7402.1,
УР 001416516.1, 4Р 01054720, 4Р 08197897.1, МР 1072351, УР 002909966.1, 2Р 01545876.1, 2Р 02147729.1, 7Р 00946537.1, 7Р 01903844.1, 7Р 05085589.1, АСМ84069.1,
МР 3671721, Р 02165272.1, МР 7016961, Р 04935724.1, Р 02191362.1, 2Р 01740154, 2Р 07662819.1, МР 1039081, УР 003159313.1, УР 003197010.1, 4Р 02152342,
УР 001907189.1, МР 004387414.1, МР 001413869.1, 2йР 01916549.1, Р 03264661.1,
ААУВ8В2г840.1, МР 003277969.1, МР 7674331, Р 01226234.1, БЕСЕ55950.1, МР 88247441, -Р 04680938.1, УР 004417965.1, 4Р 013671421, ЕСМ13684.1, УР 001262083.1,
Р '01881606.1, 2Р 01002680.1, МР 003606679.1, МР 001868359.1, 2Р 01446736.1,
УР 004141411.1, УР 002438878.1, УР 002500414.1, ЕаРББб7Б1, -Р 08405873.1,
УР 002975318.1, УР 002823637.1, -Р 02188786.1, УР 004617386.1, АВІ 610011,
УР 004190679.1, УР 00441871041, УР 001264994.1, МР 2523991, АСА21517.1,
УР 002541208.1, УР 001369943.1, УР 7894541, УР 004688060.1, УР 6116231,
КР 07795086.1, 4Р 04929943.1, УР 004444316.1, 4Р 01866687.1, 2Р 05973466.1,
УР 004353327.1, 4Р 05780591.1, 4Р 05784784, МР 9365641, 4Р 05739211.1, 4Р 05113045.1, -Р 06689273.1, 4Р 06972168.1, 4Р 01616404, 4Р 07659253.1, 4Р 05117914.1, МР 585662.1, МР 004230016.1, МР 763554.1, МР 744101.1, Р 02465308,
АСМ56476.1, УР 004689565.1, УР 001600608.1, 4Р 06792595.1, УР 001258553.1, 0 4Р 05165722, 4Р 03785098.1, УР 0022767441, УР 002524856.1, АрРОВА20.1,
УР 001669248.1, 4Р 04764988.1, 4Р 08528163.1, -Р 08529409.1, 2Р 05944625.1,
УР 676267.1, СВА26630.1, МР 001592413.1, УР 003486465.1, 7Р 02187562.1, 7Р 03702891.1,
УР 7602831, 4Р 05450850.1, УР 004533595.1, 4Р 02153313.1, УР 001859265.1,
УР 001524099.1, 7Р 06126913.1, 2Р 07374926.1, 7Р 05050787.1, 7Р 01035411.1, О8УЕМ2.2,
МР 002280903.1, гам2151241, УР 0046030101, 4Р 05088581 1, УР 004302488.1,
УР 004141219.1, МР 6975691, УР 003908705.1, УР 9155051, УР 001789228.1,
УР 001042739.1, УР 1334051, 4Р 05180516.1, 4Р 05174702.1, 4Р 01438051 1, 4Р 04590345.1, Р 08411937.1, МР 356519.2, 7Р 00964019.1, 7Р 00998343.1, 7Р 05181994.1,
УР 004107969.1, 2Р 02168070.1, Р 01750865.1, УР 574504.1, МР 004579902.1, МР 1044401, йР 05452167, йР 05342702.1, УР 001862883.1, УР 004538242.1, Р 07471513.1, 4Р 05169558.1, 7Р 00956995.1, 7Р 05096699.1, МР 004610916.1, 7Р 01218118.1, ААОЗ52101, 4Р 02405087.1, 7Р 04890639.1, МР 3522371, 2ИР 02413594.1, ИР 07474023.1, МР 5413171,
УР 001993222.1, 4Р 08199001.1, УР 4718391, 4Р 02492080.1, 4Р 04901176.1, 4Р 06915396.1, йР 074748451, йР 07477743.1, МР 004152647.1, МР 004755056.1, йР '05086419.1, МР 004577547.1, АСО99850.1, МР 980426.1, 7Р 05457072.1, 7Р 05936041.1,
МР 700124.1, А0Т85599.1, МР 110012.1, 2Р 05076113.1, МР 001068288.1, 2Р 02457871.1, 4Р 01014169.41, ЕСЕб60620.1, УР 00134681041, УР 003408795.1, УР 003769675.1,
УР 001257876.1, ЕСНУОЗ583.1, Р 01442222.1, УР 331617.1, 7Р 05636703.1, МР 001594896.1,
УР 002822967.1, УР 1188231, 4Р 01878717, 4Р 07375284, УР 001371250.1, 2Р 0765868241, УР 002898825.1, 4Р 01547199.1, УР 2230701, 4Р 051614821, 4Р 04679742.1, МР 002778618.1, йР 01626756.1, йР 05101564.1, УР 002947374.1,
МР 385053.1, МР 001328117.1, УР 004493948.1, УР 003339515.1, МР 004699488.1, 4Р 05101969.1, МР 4853521, Р 01746033.1, Р 06712293.1, 2Р 01158125.1, Р 01058616.1, 4Р 05739755.1, МР 949067.1, Р 02364657.1, МР 570690.1, МР 001208663.1, 2Р. 02357557 1, 24Р 04751682.1, МР 001326253.1, УР 4876661, Р 05167919.1, А0БІ18237.1, УР 002825245.1, 4Р 02144858.1, 4Р 02188790.1, 4Р 06794586.1, УР 001809828.1, УР 9979741,
УР 001476791.1, 4Р 08635286.1, УР 6762871, 4Р 07308228.41, 4Р 04596242,
УР 001622726.1, МР 699590.1, 4Р 01446884.1, УР 001168504.1, 4Р 01616388.1, 4Р 05117189.1, Р 05876432.1, АОТб4694.1, Р 01754911.1, 7Р 05880498.1, 7Р. 02360829.1, 60 2Р 06052433.1, 4Р 08663540.1, УР 003768966.1, 4Р 02165422.1, 4Р 00960985.1,
2Р 07026655.1, МР 001753039.1, МР 3712881, ХР 002974725.1, ХР 776880.1, 7Р 05784963.1, 4Р 05124380.1, МР 459030.1, 7Р 05090690.1, 7Р 05064893.1, 7Р 02367982.1, 7Р. 01890564.1,
МР 541848.1,27Р 00960263.1, 7Р 02961617.1, МР. 001242097.1 і 2Р 05838258.1.
Зокрема, Ес може бути вибраним із групи, що включає: 000593.1, О9УМЛА2.1, 2Р 00957061.1, МУР 957894.1, САС38030.1, УР 694430.1, МР 957725.1і Р 001672216.1.
Фермент Ейчі
Алкогольдегідрогеназа (Езчі) може бути вибрана з групи, що включає: АЯНПЕ, АапР, міав,
Уанпо, аетаА, Еш, мМіам, АЯНЕ, АЯНР, УНАХ, манк, нанаА, НігО, 5егА, Тан, Ода, Сад, Ста, мегА,
Уріс, ха, Меа), пис, МеїО, Мов), масо, мМаст, МосМ, Ма9Р, МаїВ, мії, маіВ, М227Н, ГанА, СараА,
Ера, бід, Саю, Сіса, СірА, СіІрВ, сСірс, сіро, СрзА та Урнпс з бактерій, зокрема з Е. соїї.
Фермент Ез
Фермент Ез може бути здатним до перетворення щонайменше одного 1-алканалю на відповідну алкановую кислоту. Зокрема, Ез може бути вибраним із групи, що включає Р450- алкангідроксилази (Еза) під ЕС 1.14.15.3-, АІКкКВ-алкангідроксилази (Ев) під ЕС 1.14.15.3, біфункціональні алкогольоксидази (Ес) під ЕС 1.1.3.20, біфункціональні АЇК.О- алкогольдегідрогенази (Евз)) або біфункціональні алкогольдегідрогенази (Евї) під ЕС 1.1.1.1 або
ЕС 1.1.1.2, здатні до окиснення 1-алканолу через 1-алканаль безпосередньо у відповідну алканову кислоту, й альдегіддегідрогенази (Ее).
Фермент Ее
Фермент Еге, альдегіддегідрогеназа, може бути здатним до каталізу перетворення: ш-оксоалканова кислота (естер) - ю-карбоксіалканова кислота (естер).
Щоб каталізувати вищевказану реакцію, Ее може являти собою альдегіддегідрогеназу під ЕС 1.2.1.3, ЕС 1.2.1.4 або ЕС 1.2.1.5, оксидази жирних спиртів під ЕС 1.1.3.20, АЇКО- алкогольдегідрогенази під ЕС 1.1.99.- та алкогольдегідрогенази під ЕС 1.1.1.1 або ЕС 1.1.1.2.
В одному прикладі Ее може бути здатним до специфічного каталізу наступної реакції: 0ш-оксоалканова кислота (естер) - МАЮБ(Р) - о-карбоксіалканова кислота (естер) їж
МАФ(Р)НАНУ.
У цьому випадку фермент Ее може являти собою альдегіддегідрогеназу під ЕС 1.2.1.3, ЕС 1.2.1.4 або ЕС 1.2.1.5 і може бути вибраним із групи, що включає Ріт, О5д, МАрЕ, А5ІЮ, санА,
ЕпттаА, Еєаб, Аза, зай, РичЕ, Сабт, Мдаму, ВеїВ, РША, РишисС, ЕвєаВ, АІдА, Ріт, ЕША, Сабо, лав,
ТупА та Упеї з бактерій, зокрема, з Е. соїї.
В іншому прикладі фермент Ее може бути здатним до каталізу наступної реакції:
Фш-оксоалканова кислота (естер) ж ОО» - д-карбоксіалканова кислота (естер) ї НгО».
У цьому випадку Ее може являти собою оксидази жирних спиртів під ЕС 1.1.3.20 та може бути вибраний із переліку, передбаченого для ферменту Ес вище.
В іншому прикладі Ее може являти собою щонайменше одну з АЇКО-алкогольдегідрогеназ під
ЕС 1.1.99 і може бути вибраний із переліку, передбаченого вище для Ейді.
У додатковому прикладі Ее може являти собою алкогольдегідрогенази під ЕС 1.1.1.1 або ЕС 1.1.1.2, вибрані з переліку, передбаченого для ферменту Едді.
Фермент Е4
Фермент Ех може бути здатним до перетворення щонайменше одної алканової кислоти на відповідний естер алканової кислоти. Зокрема, Ел. може являти собою щонайменше одну з синтаз воску-естеру, також відомих як алкоголь-О-ацилтрансфераза (ЕС 2.3.1.20, ЕС 2.3.1.75) (Ед або алкоголь-О-ацетилтрансфераза (Ео) (ЕС 2.3.1.20, ЕС 2.3.1.75 або ЕС 2.3.1.84).
В одному прикладі Ел. може являти собою щонайменше одну з синтаз воску-естеру (Ей).
Більш конкретно, Ел: може характеризуватися щонайменше 50 95 ідентичністю послідовності з
АОРІ1 Асіпефорасієг саІсоасеїйси5 або О-ацетилтрансферазою з НайейМа спе|цепвіє. Ще більш конкретно, Е. може характеризуватися щонайменше 50 95 ідентичністю послідовності з поліпептидом УР 045555.1, М/Р 011398768.1 або МР 808414.2. Більш конкретно, Ел. може містити поліпептид, який характеризується щонайменше 50, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 91, 94, 95, 98 або 100 95 ідентичністю послідовності з поліпептидом, вибраним з групи, що включає поліпептид ХР 045555.1, МУР 011398768.1 і МР 808414.2. В одному прикладі Е« може містити поліпептид, який характеризується щонайменше 50, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 91, 94, 95, 98 або 100 95 ідентичністю послідовності з послідовністю під 5ЕО ІЮ МО:2.
Фермент Е;
Зокрема, фермент Еєможе бути вибраним із групи, що включає:
МУР 011398768.1, МР 8084142, МР 001178653.1, ХР 003272721.1, ХР 002720111.1,
МР 001002254.1, ХР 529027.1, ХР 002831804.1, ВАС28882.1, ХР 5490562, ХР 002918053.1,
ХР 001085075.1, ХР 002763005.1, ХР 002700092.1, ХР 599558.4, ЕОГ 959401, бО ХР 001496780.1, САЮВ92671, ЕЕВ28125.1, УР 0047471601, УР 004746900.1,
УР 004746665.1, МР 004746558.1, МР 004746531.1, МР 004746530.1, УР 004745948.1,
УР 004745222.1, МР 004744358.1, МР 004743710.1, МР 002492297.1, АЕК4084641,
УР 001847685.1, МР 001712672.1, МР 001706290.1, МР 004724737.1, УР 004723134.1,
АЕ.ШЬ1098.1, АЕ.48174.1, АЕ.47480.1, УР 004392630.1, УР 004099725.1, МР 003912033.1,
МР 003652731.1, МР 003301387.1, МР 003298139.1, МР 001509672.1, МР 001505948.1,
УР 001432486.1, МР 001432432.1, МР 9248931, МР 923981.1, МР 9228691, МР 9225971,
УР 92241941, 4Р 08629145.1, 4Р 08628906.1, УР 0013800271, УР 001280731.1,
УР 001280730.1, МР 888966.1, МУР 8905401, УР 8882361, МР 8882231, УР 8885741,
УР 884705.1, МР 889488.1, МР 886248.1, УР 8825341, УР 8810691, МР 8814441,
МР 883472.1, УР 8796421, УР 8840731, МР 880917.1, УР 882201.1, УР 87942241,
УР 707862.1, МР 7078471, МР 7076331, МР 7075721, МР 7075711, МР 7067851,
УР 706267.1, МР 7055861, МР 705294.1, МР 7029291, МР 7015721, МР 7005761,
УР 700081.1, МР 7000331, МР 700018.1, МР 7000171, МР 6999991, ССВ78299.1,
Сов78283.1, Сов722331, УР 004663601.1, УР 004525283.1, УР 004524901.1,
МР 004524237.1, УР 004524223.1, МР 004523752.1, УР 004522677.1, МР 0045217971,
УР 004521441.1, МР 004020500.1, МР 004014348.1, ЕС2О40684.1, ЕСОЗ8684.1, ЕСОЗ8655.1,
Еш.ОЗ37244.1, ЄБО36970.1, Є0О36701.1, МР 003951335.1, МР 003812176.1, МР 003811992.1,
УР 003810691.1, УР 003810418.1, УР 003809501 1, 4Р 08574204, ССА197601,
ХР 002900672.1, 4Р 06414567, 4Р 06413635.1, 4Р 06411773.1, 4Р 06411772.1, 4Р 06271823, 2Р 05620754.1, 4Р 053600011, 4Р 04752019, 4Р 04751943.1, 4Р 04750965.1, 4Р 04750465.1, 4Р 04750453, 4Р 04750228.1, 4Р 04750091.1, 4Р 04749363.1, 4Р 04749348.1, 4Р 04749293, 4Р 04749287 1, 4Р 04749022.1, 4Р 04748677 41, 4Р 04747379, 4Р 04747377, 4Р 04747348, 4Р 04747282.1, 4Р 04747159, 4Р 04747093.1, 4Р 04746958.1, 4Р 04717323, 4Р 04684258.1,
КР 04386203, -Р 043850821, 4Р 04384030.1, 4Р 04384029, -Р 03534755.1, 4Р 01115502.1, йР 01102322.1, МР 004583872.1, УР 004583323.1, УР 004573656.1,
УР 004571392.1, МР 003513699.1, 2Р 08553011.1, 2Р 08552672.1, УР 003467054.1,
УР 003572597.1, МР 579515.1, МР 001136465.1, МР 001136231.1, МР 001135959.1,
УР 001135349.1, МР 001133828.1, МР 001133806.1, МР 001133693.1, МР 001133270.1,
З0 МР 001132329.1, МР 001131721.1, МР 001131631.1, МР 001073715.1, МР 001073143.1,
УР 001072388.1, МР 001072036.1, МР 001071893.1, МР 001071814.1, МР 0010716891,
УР 001070856.1, МР 001069682.1, МР 001069164.1, МР 001068496.1, МР 9393771,
УР 642242.1, МР 6416641, МР 6б41419.1, УР 6409191, МР 6407831, МР 6407041,
УР 640572.1, МР 6405711, МР 640494.1, УР 6397091, МР 6391981, МР 6385231,
МР 638030.1, МУР 637968.1, МР 637380.1, УР 4466031, МР 001185377.1, МР 2001512,
МР 568547.1, МР 1976411, МР 200150.1, МР 1971391, МР 190490.1, МР 19048841,
МР 177356.1, МР 004495408.1, УР 004495023.1, УР 004494197.1, МУР 004494168.1,
УР 004493973.1, МР 004493936.1, УР 004493628.1, МР 004493589.1, УР 00449350941,
УР 004493477.1, МР 004493462.1, УР 004492352.1, МР 004492155.1, УР 004492039.1,
МР 004491716.1, УР 004491715.1, МР 004491501.1, УР 003375642.1, МР 003411203.1,
УР 003410436.1, МР 003395271.1, МР 003395089.1, МР 003393635.1, МР 003384208.1,
УР 003379551.1, 2Р 04388235.1, МР 002134168.1, 2Р 01900421.1, Р 01900085.1, 4Р 01899829.1, Р 01898741.1, ВАКОБ274.1, ВАШОЗб23.1, ВАШУ7841.1, ВАКОВ8349.1, вВАШеЗ204.1, ВАШУ2722.1, ВАКОб6О83.1, ВАШВ6545.1, ВАКО2325.1, ВАУВ5619.1,. ВА.ВА4892.1, йР 0521828141, 4Р 05218149.1, 4Р 05217310, 4Р 05216978.41, 4Р 05216447, 4Р 05216446.1, Р 05216025.1, 7Р 05214687.1, 7Р 08476543.1, Р 04749239.1, УР 8230601,
АОРОЗ9УБ639.1, АОРО8ВО51.1, АОРО8Ф855.1, АОРОВ710.1, АОРОб265.1, Р 08461736.1, 4Р 08461735.1, 7Р 07608690.1, МР 045555.1, УР 872243.1, УР 004009106.1, МР. 004008736.1,
УР 004008003.1, МР 004007600.1, МР 004006799.1, МР 004006436.1, УР 004006072.1,
МР 004005008.1, УР 003486913.1, МР 30189841, 4Р 08434757 1, УР 004079491.1,
УР 004078785.1, МР 004077880.1, МР 004076486.1, МР 004076464.1, УР 004076350.1,
УР 004075391.1, УР 0040748641, 4Р 01103855.1, УР 4652741, -Р 08403393.1, 2Р 08402717.1, йР 08402716.1, МР 004427559.1, УР 001277083.1, УР 001276783.1,
УР 524767.1, МР 5227391, МР 521788.1, МР 004335162.1, МР 004333708.1, УР. 004332973.1,
УР 004332349.1, МР 004157731.1, УР 004224204.1, МР 003275673.1, УР 003275371.1,
УР 003274979.1, МР 003274924.1, МР 003274705.1, МР 956544.1, МР 955502.1, МР 9550071,
УР 954887.1, МР 9548861, МР 9548591, УР 9543991, УР 9537151, МР 9530731,
УР 952592.1, УР 951909.1, МР 9512981, МР 9510831, 2Р 08287899.1, Р 08272356.1, 2Р 08270967.1, ССАбО0О99.1, ССАБб7З71, МР 983728.1, МР 5508331, МР 5491241, бО МР 1217951, МР 120815.1, МР 118589.1, МР 1177831, МР 1173751, УР 003646883.1,
УР 003646055.1, МР 003645661.1, ЕЄСЕ49469.1, 7Р 08234310.1, СВ253121.1, МР 004010866.1,
ЕСЕ24961.1, ЕЄСЕ18726.1, ЕСЕ15701.1, ЕЄСЕ12950.1, ЕСЕ10026.1, ЕЄС8О3968.1, 7Р. 08206563.1, -Р 08205089.1, 2Р 08204958.1, 7Р 08204416.1, Р 08203326.1, МР 7143811, МР 7138171,
УР 694462.1, УР 6935241, УР 003341775.1, МР 003339587.1, 2Р 08197177, А0М/01905.1,
УР 004242683.1, 4Р 07484742.2, 4Р 07441979.2, 4Р 07441978.2, 4Р 07437333.2, -Р 06960424.1, 2Р 06801236.1, 4Р 06799517, 4Р 05769718.1, 24Р 05768326.1, 4Р 05767970.1, йР 05766272.1, йР 05763839.1, УР 0032042651, УР 003203570.1,
УР 003200768.1, МР 003134884.1, МР 003134608.1, йиР 05140320.1, МР 001140997.1,
ЕЕЕб4643.1, ЕЕЕ55448.1, БЕЕЕЗ2548.1, Р 03534756.1, Р 03533653.1, Р 03531929.1,
БЕЕС71274.1, ЕАМ98969.1, ЕАМ75974.1, ЕАУ75973.1, Ари24988.1, Р 08157247, 4Р 08156660.1, -4Р 08156249.1, 4Р 08153292, 4Р 08152876.1, 4Р 08152662.1,
УР 002946672.1, МР 9606691, МР 9606291, УР 960328.1, МР 9581341, МР 9574621,
УР 001022272.1, 7Р 08123690.1, 7Р 08120547.1, 7Р 08119498.1, ЄСВ29195.1, БСВ27143.1,
УР 003770089.1, МР 003769971.1, МР 003764703.1, МР 003764513.1, УР 003103950.1,
МР 003168536.1, УР 003168331.1, УР 003166844.1, СА)В88696.1, МР 76952041,
УР 001141853.1, МР 001108534.1, МР 001106516.1, МР 9078241, МР 9073441, УР 9069451,
УР 906856.1, МР 9068551, МР 906831.1, МР 906494.1, МР 9062431, МР 90596241,
УР 905765.1, МР 905343.1, УР 9052391, МР 3257961, МР 1304131, МР 62525541,
МР 624462.1, МР 3381291, МР 3380041, МР 3378591, МР 337740.1, МР 3376941,
МР 336266.1, МР 3359191, МР 335351.1, МР 334638.1, МР 2182571, МР 21825141,
МР 217997.1, МР 2178881, МР 2177511, МР 2177501, МР 2176461, МР 21760441,
МР 217603.1, МР 2170001, МР 216801.1, МР 2162761, МР 2159411, МР 21541041,
МР 214735.1, 2Р 04661667.1, ЕРМ/44815.1, ЕРМ/44455.1, йиР 08024634.1, 2Р 08024620, -Р 08023777.1, йР 08023597.1, МР 002784032.1, УР 002783585.1, УР 002782904.1,
МР 002782647.1, УР 002780099.1, МР 002779887.1, УР 002778497.1, МР 002777657.1,
УР 002777402.1, Р 07966321.1, Р 07944768.1, СВІ21867.3, СВІ40547.3, СВІ4О544.3,
СВІ40540.3, СВІ40536.3, СВІ40534.3, СВІ40533.3, СВІЗ2385.3, Р 05765756.1, 7Р 05765643.1, 4Р 05765597.1, йР 05765596.1, МР 001705267.1, УР 001704692.1, УР 001704281.1,
УР 001702654.1, МР 001701260.1, 2Р 05770434.1, йР 05766274.1, Р 05762133.1,
З0 0 2Р 05762130.1, йР 01101223.1, УР 481580.1, МР 9796231, МР 979196.1, 2Р 07414300.2, 4Р 03537340.1, 4Р 03537339.1, 4Р 03536772, -4Р 03536404, 4Р 03433478.1, -Р 03430367 1, 4Р 03430260.1, 4Р 03429345.1, 4Р 03428583.41, 4Р 03426905.1, 4Р 03426458.1, 4Р 03426456.1, 4Р 03426455, 4Р 03425014, 4Р 03424082.1, 4Р 0342164941, 4Р 03419291.1, 4Р 03418394, 4Р 03417976, 4Р 03414875.1, 24Р 06952098.41, 4Р 05528769.1, 4Р 05527907, -Р 05227984, 4Р 05227897.1, 4Р 05227653.1, 4Р 05227585.1, 4Р 05227420, Р 05227202, 4Р 05226387.1, 4Р 05226386.1, 4Р 05225355.1, 4Р 05225200, 4Р 05223431 1, 4Р 05223402.1, 2Р 04697793.1, 2ИР 02550609.1, 7Р 02548969.1, ЕЕЕ25493.1, АВО13188.2, 7Р 07205208.1,
УР 589436.1, ВАОЗ3896.1, 2Р 07718107.1, 2Р 07717513.1, йИР 07717390.1, 2иР 07716424.1, й4Р 04384387, 4Р 07376578.1, 4Р 06871097, -Р 06852444, 4Р 06852442.1, 2Р 06852283.1, 4Р 06852150.1, 4Р 06852032.1, -Р 06850980.1, 4Р 06850766.1, -Р 06850644.1, -Р 06849846.1, 2Р 06849446.1, 24Р 06849265.1, -Р 06848894.1, -Р 06848550.1, 2Р 06847321.1, 4Р 06847245, 2Р 0672864041, 4Р 06155537.1, -4Р 03822106.1, 4Р 03822105.1, 4Р 0326490941, 4Р 0191597941, 4Р 01914209.1, йР 01909198.41, 4Р 01895985.1, 4Р 01893763, 4Р 01893601 1, 4Р 01893547.1, 24Р 01864269.1, 4Р 01736818.1, 4Р 01693481.1, 4Р 01626518.41, 4Р 01616172.1, 4Р 01461648.1, 4Р 01439861.1, 4Р 01311414, 4Р 01222733, 4Р 01038993.1, 4Р 00997001.1, 4Р 06533596.1, 4Р 07308012, 4Р 07282351 1, 4Р 07282257, 4Р 07278697, 4Р 07277986.1, 4Р 07277798, 4Р 07011797.1, 4Р 06913634,
Р 0671107541, 4Р 06575037.1, 4Р 06523715, 2Р 06522644, 4Р 06520408.1, 4Р 06518751.1, 4Р 06514733.1, 4Р 06511304, -Р 06510466.1, 4Р 06509700.1, -Р 06504004.1, 4Р 06452618.1, 4Р 06451687, 2Р 06450049.41, 4Р 06444722, 2Р 06443996.1, 2Р 064436771, 4Р 06438510, 4Р 06435077 1, 4Р 06434554.1, 2Р 06432969.1, 4Р 06431341.1, 4Р 0643091541, 4Р 0512942341, 4Р 05127637, 55: 0 2Р 05126217, -Р 05096686.1, 4Р 0509501341, -Р 0509440041, 4Р 05093434.1, 4Р 05043539.1, Р 05041631.1, Р 04959394.1, 7Р 04956551.1, Р 01052702.1, МР 4370201,
УР 436128.1, УР 4325121, УР 432391.1, Р 06072118.1, 2Р 06069021.1, 2Р 06065092.1, -Р 06062254.1, УР 003032200.1, МР 003030813.1, МР 002766854.1, УР 002766842.1,
УР 002766292.1, МР 002765623.1, МР 002765076.1, МР 002764977.1, УР 00276497641, бО МР 002764693.1, МР 002764633.1, УР 002646305.1, МР 002646304.1, УР 001853537.1,
УР 001853530.1, МР 001853214.1, МР 001852100.1, МР 001851711.1, МР 001851686.1,
УР 001851684.1, МР 001851611.1, МР 001851610.1, МР 001851579.1, МР 001850950.1,
УР 001850935.1, МР 001850900.1, МР 001850899.1, МР 001850378.1, МР 001849911.1,
УР 001849825.1, МР 001849624.1, МР 001849470.1, МР 001848848.1, МР 001848784.1,
МР 001822237.1, МР 001289190.1, МР 001289078.1, МР 001288434.1, МР 0012877271,
УР 001286168.1, МР 001085790.1, МР 8567931, МР 6293871, МР 615587.1, МР 61525241,
УР 457389.1, МР 2635301, МР 962591.1, МР 9624111, МР 962281.1, МР 9612341,
МР 960903.1, МР 960387.1, МР 960090.1, МР 959281.1, МР 9590651, МР 8574031,
МР 857149.1, МР 857148.1, МР 8570471, МР 8569071, МР 8567591, МР 8561561,
МР 855443.1, МР 8551121, МР 8538921, МР 8284321, МР 603766.1, ХР 0030812241,
УР 003778608.1, МУР 003730939.1, ХР 003059244.1, АР0І13131.1, ХР 002992800.1,
ХР 002963877.1, ХР 0014197791, ХР 002988280.1, ХР 002987493.1, СвВНЗ2551.1,
СвНЗ2550.1, СВНІ9575.1, СВНІ9574.1, МР 003627553.1, ХР 002879777.1, ХР 0028776571,
ХР 002877655.1, ХР 002873570.1, ХР 002871716.1, ХР 002870738.1, ХР 002868506.1,
ХР 002865972.1, ХР 002864239.1, ХР 002862308.1, 7Р 05823139.1, МР 001043877.1, 7Р 06693274.1, 7Р 06058985.1, МР 001044374.1, ХР 002835451.1, ХР 00278754241,
ХР 002785958.1, ХР 002785645.1, ХР 002783220.1, ХР 002774061.1, ХР 002767852.1,
ХР 002766051.1, ХР 002765456.1, ХР 002765455.1, ХР 002677788.1, ХР 002671612.41,
ХР 002736281.1, СВАЗ1373.1, ХР 002184474.1, ХР 002325936.1, ХР 002323705.1,
ХР 002325937.1, ХР 002323911.1, ХР 002323706.1, ХР 002328965.1, ХР 002318416.1,
ХР 002310400.1, АСУЗ8597.1, АСУЗ8596.1, АСУЗ38595.1, АСУЗ8594.1, АСУЗ8593.1,
АСУЗ8592.1, АСУЗ8591.1, АСУЗ8590.1, АСХВ813151, АСХ813141, ХР 001868729.1,
ХР 001847517.1, ХР 001847515.1, ХР 002502575.1, АСИ2г0370.1, АСИ18073.1,
ХР 002523348.1, ХР 002516707.1, ХР 0024290161, ВАНВОб673.1, ХР 002440221.1,
ХР 002459294.1, ХР 002458560.1, ХР 3201674, ХР 001780431.1, ХР 002364905.1,
ХР 002263196.1, ХР 002263137.1, ХР 002263409.1, ХР 002263252.1, ХР 002268615.1,
ХР 002278404.1, ХР 002274522.1, ХР 002282418.1, ХР 001633379.1, ХР 001632267.1,
ХР 001632004.1, ХР 001622638.1, ХР 002155609.1, ХР 759225.1, ХР 002152406.1,
ХР 001914129.1, ХР 001738032.1, ХР 001731626.1, ХР 001209859.1, САМ7945141,
САМ78449.1, САМ72806.1, САМ71951.1, САМ71950.1, САМ76656.1, САМб2907.1, АА708051.1,
АВО21022.1, АВО21021.1, АВО21020.1, АВО96321.1, ВАБО1088.1, ХР 7581061, ВАС42871.1,
ВАВО9801.1 і ВАВО9102.1.
В іншому прикладі фермент Еї може бути вибраним із групи, що включає наступні ідентифікаційні номери генів згідно з МСВІ: 6647910, 13882037, 13883719, 50084045, 83635736, 118163591, 118569740, 118570272, 119538589, 119959533, 126237252, 126567232, 126629771, 148572721, 148572722, 149823553, 149825234, 169147806, 196196001, 214037899, 219677786, 257447091, 262316603, 283813570, 301796553, 301796826, 311312714, 311696766, 325556018, 332970561, 333482117, 333482229, 333482837, 333484048, 334890574, 334890744, 353189260, 358244577, 359308666, 359732244, 359818908, 363993190, 365814880, 374845325, 377531673, 378802538, 384523048, 391857871, 391858262, 391861199, 396932954, 396935129, 399235093, 400203587, 407372801, 407812577, 432156225, 433296179, 442581482, 443888426, 444755700, 449424446, 464803513, 479864102, 479886236, 479966651, 480005669, 480024154, 480028610, 490485999, 498274456, 500625946, 515076064, 516264416, 516277644, 516906883, 516908681, 516909557, 516913828, 516945324, 517143888, 517432433, 517516200, 518350146, 518501601, 518568414, 518644062, 518944419, 518947555, 521014811, 521056034, 521076792, 521077398, 521090665, 521712969, 521812448, 521986522, 522129827, 522136843, 522139413 і 522139737.
Фермент Еу
Зокрема, фермент Ез може бути вибраним із групи, що включає ЕСА72844.1, МР. 0150221, 569991, ААР72О991.1, ЕОМ63695.1, ВААОБ552.1, ААР72992.1, 569992, ААР72995.1,
ХР 002552712.1, ХР 001646876.1, ХР 002551954.1, ЕСАВ82692.1, ЕОМб61766.1, ЕСАВ86689.1,
ЕСА74966.1, ААШОЗ735.1, МР 0116931, ХР 4456661, ВАА13067.1, ААР72993.1, ЕСАб2172.1,
ХР. 4557621 і ЕСА58658.1.
Фермент Е5
Фермент Ех може бути здатним до перетворення щонайменше одного естеру алканової кислоти на відповідний естер о-гідроксіалканової кислоти. Зокрема, Ех може являти собою будь-який фермент, перелічений для Еї. Зокрема, Ех: може являти собою щонайменше одну з
Р4іБ5О0-алкангідроксилаз (Ез) під ЕС 1.14.15.3 або АІкВ-алкангідроксилаз (Еь) під ЕС 1.14.15.3.
Фермент Ев бо Фермент Евє може бути здатним до перетворення щонайменше одного естеру о0-
гідроксіалканової кислоти на відповідний естер Ф-оксоалканової кислоти. Зокрема, Ев може являти собою будь-який фермент, перелічений для Ег. Зокрема, Еє може бути вибраним із групи, що включає Р450-алкангідроксилази (Еа) під ЕС 1.14.15.3-, АІКВ-алкангідроксилази (Е»ь) під ЕС 1.14.15.3, алкогольоксидази (Ес) під ЕС 1.1.3.20 та алкогольдегідрогенази (Е«) під ЕС 1.1.1.1 або ЕС 1.1.1.2.
Вираз "якщо присутній", який застосовують щодо ферменту Ебв, стосується клітин, які були генетично модифіковані для продукування естеру д-оксоалканової кислоти. Клітини згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу можуть характеризуватися збільшеною експресією ферменту Еє відносно клітини дикого типу, таким чином вони здатні продукувати естер 0- оксоалканової кислоти. В іншому прикладі клітини згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу також можуть не характеризуватися збільшеною експресією ферменту Евє відносно клітини дикого типу, таким чином вони не здатні продукувати естер Ф-оксоалканової кислоти.
Таким чином, ці клітини переважно продукують естер о-гідроксіалканової кислоти. Отже, якщо клітини згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу характеризуються збільшеною експресією ферменту Еє (тобто якщо він присутній), то вони можуть продукувати естер Ф- оксоалканової кислоти.
Фермент Е?7
Фермент Е7 може бути здатним до перетворення щонайменше однієї 0д-оксоалканової кислоти на відповідний естер д0-аміноалканової кислоти. Зокрема, Е7 може являти собою 0- трансаміназу під ЕС 2.6.1 (Ек).
Зокрема, фермент Е7 може являти собою амінотрансферазу (Ен), вибрану з групи, що включає фермент з Рзейдотопах5 ршда (МУР 016502144; М/Р 016500675.1), Спготобасіегійт міоїасецшт (МР 901695.1), Кподобрасіег зрпаєгоїдез 2.4.1 (УР 353455.1) та ЗНМИО А, ААО41041.1,
ААК15486.1, АВЕО3917.1, АЮАбО6991, АОАб1Т066.1, АОВб2525.1, АБ! 07495.1, СА786955.1,
ЕРМ/82310.1, ЕРМ/87681.1, Е2С99983.1, Е2ООЗ3176.1, ЕСЕ58369.1, ЕСНОбб6В81.1, ЕСНОВЗ331.1,
ЕСН24301.1, ЕСНЗ2343.1, ЕСНАб412.1, ЕСН5ОЬБОЗ3.1, ЕСНб2152.1, ЕСНб7З39.1, ЕСН7ОВ821.1,
ЕСН71404.1, ЕСН78772.1, ЕСНВ5312.1, ЕСНО7105.1, ЕСРБО7УБО6.1, МР 1028501, МР 1065601,
МР 248912.1, МР 248990.1, МР 3540262, МР 421926.1, МР 6376991, МР 6427921,
МР 744329.1, МР 7447321, МР 7472831, МР 7950391, ХР 002943905.1, МР 001021095.1,
МР 001059677.1, МР 001061726.1, МР 001066961.1, МР 001074671.1, МР 001120907.1,
УР 001140117.1, МР 001170616.1, МР 001185848.1, МР 001188121.1, МР 001233688.1,
УР 001268866.1, МР 001270391.1, МР 001345703.1, МР 001412573.1, МР 001417624.41,
УР 001526058.1, МР 001579295.1, МР 001581170.1, МР 001668026.1, МР 001669478.41,
УР 001671460.1, МР 001685569.1, МР 001747156.1, МР 001749732.1, МР 001765463.1,
МР 001766294.1, МР 001790770.1, МР 001808775.1, МР 001809596.1, МР 001859758.1,
УР 001888405.1, МР 001903233.1, МР 001977571.1, МР 002229759.1, МР 002231363.1,
УР 002280472.1, МР 002297678.1, МР 002543874.1, МР 002549011.1, МР 002796201.1,
УР 002801960.1, МР 002875335.1, МР 002897523.1, МР 002912290.1, МР 002974935.1,
УР 003060891.1, МР 003264235.1, МР 003552364.1, УР 003578319.1, МР 003591946.1,
МР 003607814.1, МР 003641922.1, УР 003674025.1, МР 003692877.1, МР 003755112.1,
УР 003896973.1, МР 003907026.1, МР 003912421.1, МР 004086766.1, МР 004142571.1,
УР 004147141.1, МР 004228105.1, МР 004278247.1, МР 004305252.1, МР 004356916.1,
УР 004361407.1, МР 004378186.1, МР 004379856.1, МР 004390782.1, МР 0044724421,
УР 004590892.1, МР 004612414.1, МР 004676537.1, МР 004693233.1, МР 004701580.1,
МР 004701637.1, МР 004704442.1, УР 108931.1, МР 1104901, МР 168667.1, МР 2379311,
УР 260624.1, МР 262985.1, МР 271307.1, МР 276987.1, МР 3341711, МР 33717241,
МУР 350660.1, МР 3511341, МР 364386.1, МР 366340.1, МР 3697101, МР 37058241,
УР 426342.1, МР 440141.1, МР 442361.1, МР 468848.1, МР 5216361, МР 5543631,
УР 608454.1, МР 610700.1, МР 6149801, МР 6222541, УР 625753.1, МР 68059041,
МР 7516871, МР 7670711, МР 774090.1, МР 774932.1, МР 7883721, УР 8585621,
УР 928515.1, МР 983084.1, МР 995622.1, 7Р 00948889.1, 27Р 00954344.1, 7Р 00959736.1, 4Р 00998881.1, 4 01011725.1, 2Р 01037109.1, 4Р 01058030.1, 2Р 01076707.1, 4Р 01103959.1, 4 01167926.1, 2Р 01224713.1, 4Р 01442907, 2Р 01446892.1, 4Р 01550953.1, 4Р 01625518.1, 2Р 01745731.1, 4Р 01750280.1, 2Р 01754305.1,
Р 01763880, 4Р 01769626.1, 2Р 01865961.1, 4Р 01881393.1, 2Р 01901558.1, 4Р 02145337 1, 4Р 02151268.1, 2Р 02152332.1, 4Р 02167267.1, 2Р 02190082.1, 4Р 02242934, 4Р 02360937.1, 2Р 02367056.1, 4Р 023854771, 2Р 02456487.1, 4Р 02883670.1, 4Р 03263915.1, 2Р 03263990.1, 4Р 03400081.1, 2Р 03452573.1, 4Р 03456092.41, 4Р 03517291.1, 4Р 03529055.1, 2Р 03571515.1, 2Р 03572809.1, бО 0 2Р 03587785, 4Р 03588560.1, 2Р 03697266.1, 4Р 03697962.1, 2Р 04521092.1,
4Р 04590693.1, 4Р 04890914.1, 2Р 04891982.1, 4Р 04893793.1, 2Р 04902131.1, 4Р 04905327 1, 4Р 04941068.1, 2Р 04944536.1, 4Р 04945255.1, -Р 04959332.1, 4Р 049641811, 4Р 05053721.1, 2Р 05063588.1, 4Р 05073059.1, 2Р 05077806.1, 4Р 05082750.1, 4Р 05091128.1, 2Р 05095488.1, 4Р 05101701.1, 2Р 05116783.1, /4Р 05121836, 4Р 05127756.1, 2Р 05637806.1, 4Р 05742087.1, 2Р 05783548.1, 4Р 05786246.1, 4Р 05843149.1, 2Р 05945960.1, 4Р 06459045.1, 4Р 06487195.1, 4Р 06492453.1, 4Р 06493162.1, 2Р 06703644.1, 4Р 06731146.1, 2Р 06839371.1, 4Р 07007312.41, 4Р 07266194.1, 2Р 07374050.1, 4Р 07662787.1, 2Р 07778196.1, 4Р 07797983.1, 4Р 08099459.1, 2Р 08138203.1, 2Р 08141719.1, 4Р 08142973.1, 2Р 08177102, 4Р 08185821.1, 2Р 08186468.1, 4Р 08208888.1, 2Р 08266590.1, 4Р 084020411, 4Р 08406891.1, Р 08522175.1, 4Р 08527488.1, 2Р 08631252.1, 4Р 08636687.1.
Зокрема, фермент Е7, може являти собою амінотрансферазу (Еп), вибрану з групи, що включає: МР 901695.1, Р 03697266.1, ААО41041.1, МР 002796201.1, 2Р 03697962.1,
МР 001859758.1, УР 002229759.1, УР 001120907.1, УР 11049041, 4Р 04964181.1,
УР 7749321, УР 001766294.1, УР 001581170.1, УР 62225441, 4Р 03588560.1,
УР 001809596.1, МР 370582.1, 7Р 03572809.1, МР 248990.1, УР 001888405.1, Р. 04905327.1,
УР 001061726.1, МР 001668026.1, 7Р 01750280.1, 7Р 07778196.1, ЕСН71404.1, МР. 7443291,
УР 004147141.1, АОНбТО66.1, 2Р 05783548.1, МР 004701637.1, МР 366340.1, МР. 003264235.1, є,ароз176.1, УР 001268866.1, 2Р 01901558.1, 4Р 05121836.1, УР 003692877 1, 4Р 03517291.1, МР 002974935.1, МР 001668026.1, АОНб1ТО66.1, МР 744329.1, МР 001268866.1,
УР 004701637.1, 2Р 08142973.1, АОНб2525.1, МР 610700.1, МР 747283.1, АОНб2525.1,
УР 001270391.1, УР 004704442.1, УР 61070041, УР 0017471561, 4Р 08138203.1, 27Р 07266194.1, ЕСН7ОВ21.1, МР 3511341, БЕСНЗ2343.1, БЕСНОВ3311, ЕСНб73391,
МР 001668026.1, УР 0047016371, УР 2379311, 2Р 03400081.1, 2Р 05116783.1, 4Р 01550953.1, 7Р 07662787.1, МР 928515.1, МР 788372.1, МР 001021095.1, 7Р 07797983.1,
УР 003578319.1, УР 004305252.1, МР 2489121, 2Р 08636687.1, УР 003912421.1,
УР 751687.1,2Р 08142973.1, МР 271307.1,2иР 05082750.1, МР 001417624.11УуР 3534551.
Вираз "якщо присутній", що застосовується щодо ферменту Е7, стосується клітин, які були генетично модифіковані для продукування естеру ш-аміноалканової кислоти. Клітини згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу можуть характеризуватися збільшеною експресією ферменту Е7 відносно клітини дикого типу, таким чином вони здатні продукувати естер оФ- аміноалканової кислоти. В іншому прикладі клітині згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу також можуть не характеризуватися збільшеною експресією ферменту Е7 відносно клітини дикого типу, таким чином вони не здатні продукувати естер дю-аміноалканової кислоти.
Таким чином, ці клітини переважно продукують естер 0-оксоалканової кислоти. В одному прикладі клітина, яка характеризується збільшеною експресією ферменту Евє, але не БЕ, відносно клітини дикого типу, може бути здатною продукувати естер д-оксоалканової кислоти. В іншому прикладі, якщо клітина не є генетично модифікованою для збільшення експресії як Ев, так і Е7, клітина може продукувати естер о-гідроксіалканової кислоти.
Фермент Ен
Зокрема, фермент Ен, може бути вибраним із групи, що включає:
ЗНМИ А, ААО41041.1, ААК15486.1, АВЕОЗ3917.1, АОНбОб699.1, АОНбЄ1ТО66.1, АОНб2525.1,
АЕГ 074951, СА786955.1, ЕЕМУ82310.1, ЕРМУ87681.1, Е2С99983.1, Е2ООЗ176.1, ЕСЕ58369.1,
ЕСНОббВ81.1, ЕСНОВЗ331.1, ЕСН24301.1, ЕСНЗ2З343.1, ЕСНАб412.1, ЕСН5ЬБОЗ3.1, ЕСНб2152.1,
ЕСНб7339.1, ЕСН7ОВ21.1, ЕСН71404.1, ЕСІН7В7У72.1, ЕСНВ85312.1, ЕСНО7105.1, ЕСРБ7596.1,
МР 102850.1, МР 106560.1, МР 2489121, МР 248990.1, МР 3540262, МР 4219261,
МР 637699.1, МР 6427921, МР 7443291, МР 744732.1, МР 7472831, МР 7950391,
МР 901695.1, ХР 002943905.1, МР 001021095.1, МР 001059677.1, МР 001061726.1,
МР 001066961.1, МР 001074671.1, МР 001120907.1, МР 001140117.1, МР 001170616.1,
УР 001185848.1, УР 001188121.1, МР 001233688.1, МР 001268866.1, МР 001270391.1,
УР 001345703.1, МР 001412573.1, МР 001417624.1, МР 001526058.1, МР 001579295.1,
УР 001581170.1, МР 001668026.1, МР 001669478.1, МР 001671460.1, МР 001685569.1,
УР 001747156.1, МР 001749732.1, МР 001765463.1, МР 001766294.1, МР 001790770.1,
УР 001808775.1, МР 001809596.1, МР 001859758.1, МР 001888405.1, МР 001903233.1,
УР 001977571.1, МР 002229759.1, МР 002231363.1, МР 002280472.1, МР 002297678.1,
УР 002543874.1, УР 002549011.1, МР 002796201.1, МР 002801960.1, МР 002875335.1,
УР 002897523.1, МР 002912290.1, МР 002974935.1, МР 003060891.1, МР 003264235.1,
УР 003552364.1, УР 003578319.1, МР 003591946.1, МР 003607814.1, МР 003641922.41, бо МР 003674025.1, МР 003692877.1, МР 003755112.1, МР 003896973.1, МР 003907026.1,
УР 003912421.1, МР 004086766.1, МР 004142571.1, МР 004147141.1, МР 004228105.1,
УР 004278247.1, УР 004305252.1, МР 004356916.1, МР 004361407.1, МР 004378186.1,
УР 004379856.1, УР 004390782.1, МР 004472442.1, УР 004590892.1, МР 004612414.41,
УР 004676537.1, УР 004693233.1, МР 004701580.1, МР 004701637.1, МР 0047044421,
МР 108931.1, МР 110490.1, МР 168667.1, МР 237931.1, МР 2606241, УР 26298541,
УР 271307.1, МР 276987.1, МР 334171.1, МР 337172.1, МР 3506601, МР 35113441,
УР 364386.1, МР 366340.1, МР 3697101, МР 370582.1, МР 4263421, МР 4401411,
УР 442361.1, МР 468848.1, МР 521636.1, МР 5543631, МР 6084541, МР 6107001,
УР 614980.1, МР 6222541, МР 6257531, МР 680590.1, МР 7516871, МР 7670711,
МР 774090.1, МР 7749321, МР 788372.1, УР 858562.1, МР 9285151, МР 9830841,
УР 995622.1, 7Р 00948889.1, 7Р 00954344.1, 7Р 00959736.1, 7Р 00998881.1, Р 01011725, 4Р 0103710941, 4Р 01058030.1, 2Р 01076707.1, 4Р 01103959.1, 2Р 01167926.1, 2 01224713, 27Р 014429071, 2Р 01446892.1, 4Р 01550953.1, 2Р 01625518.1, 4 017457311, 4Р 01750280.1, 2Р 01754305.1, 4Р 01763880.1, 2Р 01769626.1, 2Р 0186596141, 4Р 01881393.1, 2Р 01901558.1, 4Р 021453371, 2Р 02151268.1, 4Р 021523321, 4Р 02167267.1, 2Р 02190082.1, 4Р 022429341, 2Р 02360937.1, 4Р 02367056.1, 2Р 023854771, 4Р 02456487.1, 2Р 02883670.1, 4Р 03263915.1, 4Р 03263990.1, 4Р 03400081.1, Р 03452573.1, 4Р 03456092.1, 2Р 03517291.1, 4Р 03529055.1, 4Р 03571515.1, 2Р 03572809.1, 4Р 03587785.1, -Р 03588560.1, йР 0369726641, 4Р 03697962.1, 2Р 04521092.41, 2Р 04590693.1, 4Р 04890914.1, 4Р 04891982.41, 4Р 04893793.1, 2Р 04902131.1, 4Р 04905327.1, 2Р 04941068.1, 4Р 04944536.1, 4Р 04945255.1, -Р 04959332.1, 4Р 04964181.1, 2Р 05053721.1, 4Р 05063588.1, 4Р 05073059.1, 2Р 05077806.1, 4Р 05082750.1, 2Р 05091128.1, 4Р 05095488.1, 4Р 05101701.1, 2Р 05116783.1, 4Р 05121836.1, 2Р 05127756.1, йР 0563780641, 4Р 05742087.1, 2Р 05783548.1, 4Р 05786246.1, 2Р 05843149.1, 4Р 05945960.1, 4Р 06459045.1, 2Р 06487195.1, 4Р 06492453.1, 2Р 06493162.1, 4Р 06703644.1, 4Р 06731146.1, 2Р 06839371.1, 4Р 07007912.1, 2Р 07266194.1, 4Р 07374050.1, 4Р 07662787.1, 2Р 07778196.1, 4Р 07797983.1, -Р 08099459.1, 4Р 08138203.1, 4Р 08141719.1, 2Р 08142973.1, 4Р 08177102.1, 2Р 08185821.1, 2Р 08186468.1, 4Р 08208888.1, 2Р 08266590.1, 4Р 08402041.1, 2Р 08406891.1, 28 08522175.1,2Р 08527488.1,27Р 08631252.1 і 7Р 08636687.1.
Клітина згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу може бути генетично модифікована для збільшення експресії ферментів Еї-Ебє відносно клітин дикого типу. Клітина може бути додатково генетично модифікована для збільшення експресії щонайменше ферментів Ев і/або
Е7. В одному прикладі ферменти Ен, Ег2, Ез, Е5 і Еє можуть являти собою щонайменше одну з
АЇКВ-алкангідроксилаз (Ев), а фермент Е- може являти собою синтазу воску-естеру (Ей).
Зокрема, - АІКкВ-алкангідроксилаза (Еь) характеризується щонайменше 60905 ідентичністю послідовності щодо 5ЕО ІЮО МО:1; і - синтаза воску-естеру (Е) характеризується щонайменше 60 9о ідентичністю послідовності щодо 5ЕО ІЮ МО:2.
В іншому прикладі, якщо клітина згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу є генетично модифікованою для продукування щонайменше одного естеру о0-аміноалканової кислоти, клітина може бути модифікована для експресії щонайменше однієї о-трансамінази (Ек), яка може характеризуватися щонайменше 60 95 ідентичністю послідовності щодо ЗЕО ІО МО:3.
Фермент Ев
Клітина згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу може бути додатково генетично модифікована для зниження експресії щонайменше одного ферменту Ев, який розщеплює щонайменше одну проміжну сполуку в ході перетворення алканів на естер о- функціоналізованої карбонової кислоти. Зокрема, фермент Ев може являти собою фермент, здатній грати роль у функціональній активності клітини щодо розкладання жирних кислот.
Зокрема, Ев може бути вибраним з переліку, що включає ацил-КоА-дегідрогеназу (Е)) (РадЕ), еноїл-КоА-гідратазу (Е)) (ЕРайВ), З-гідроксіацил-КоА-дегідрогеназу (Ек) (Раав) і р-кетотіолазу, також відому як 3-ксетоацил-КоА-тіолаза (РайдА) (Е)).
Жирні кислоти поглинаються та переносяться через клітинну мембрану шляхом транспортного/ацдил-активуючого механізму. Перша внутрішньоклітинна стадія включає перетворення ацил-КоА в еноїл-КоА за допомогою ацил-КоА-дегідрогенази (Е), остання має назву РадЕ у випадку Е. соїї. Активність ацил-КоА-дегідрогенази можна оцінити, як описано в рівні техніки, наприклад, шляхом відслідковування концентрації МАОН спектрофотометричними 60 методами при 340 нм в 100 мМ МОРБ, рн 7,4, 0,2 мм еноїл-КоА, 0,4 мМ МАОН. Одержаний еноїл-КоОА перетворюється на 3-кетоацил-КоА через 3-гідроксіацил-КоА за допомогою гідратації та окиснення, які каталізуються еноїл-КоА-гідратазою/К)-3-гідроксіацил-КоА-дегідрогеназою (Е/Ею), які мають назву РайВ і Рай) у Б. соїї. Еноїл-КоА-гідратазну/З-гідроксіацил-Код- дегідрогеназну активність а саме утворення продукту МАЮОН, можна оцінити спектрофотометричними методами, як описано в рівні техніки, наприклад, як коротко викладено для РадЕ. Нарешті, З-кетоацил-КоА-тіолаза (Е)), РадА й Раді у Е. соїї каталізують розщеплення
З-кетоацил-КоА з утворенням ацетил-КоА й вихідного ацил-КоА, вкороченого на два атоми вуглецю. Активність кетоацил-КоА-тіолази можна оцінити, як описано в рівні техніки, наприклад, у Апіопепком, У., еї аї, 1997.
В одному прикладі застосовуваний у даному документі термін "ацил-КоА-дегідрогеназа" може означати поліпептид, здатний до каталізу перетворення ацил-КоА на еноїл-КоА в межах шляху В-окиснення. Наприклад, поліпептид РадЕ у Е. соїї (номер доступу: ВАА77891.2) може являти собою ацил-КоА-дегідрогеназу. Застосовуваний у даному документі термін "еноїл-Код- гідратаза", що також називається 3-гідроксіацил-КоА-дегідрогеназа, стосується поліпептиду, який здатний до каталізу перетворення еноїл-КоА на З-кетоацил-КоА за допомогою гідратації та окиснення в межах шляху В-окиснення. Наприклад, поліпептиди Раав і Раду у Е. соїї (номери доступу: ВАЕ77457.1 і Р77399.1, відповідно) являють собою еноїл-КоА-гідратази.
Застосовуваний у даному документі термін "кетоацил-КоА-тіолаза" може стосуватися поліпептиду, який здатний до каталізу розщеплення З-кетоацил-КоА с утворенням ацил-КоА, вкороченого на два атоми вуглецю, та ацетил-КоА, як заключної стадії шляху - окиснення.
Наприклад, поліпептиди БадА і Раді у Е. соїї (номер доступу: УР 491599.1 і Р7б503.1, відповідно) являють собою кетоацил-КоА-тіолази.
Ферменти Е» та Е:о
Клітина згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу може бути додатково генетично модифікована для збільшення експресії відносно клітини дикого типу ферменту Е», що являє собою ацил жирної кислоти - кофермент А-естеразу метилових естерів ВіоН (Ет); і/або - ферменту Ето, що являє собою ацил жирної кислоти - кофермент А-тіоестеразу (Ей), вибрану з групи, що включає ТезА, ТезВ, УсіА, Гаам, мріє і УБдс.
Зокрема, Ет може бути здатним гідролизувати естери жирних кислот до вільних жирних кислот і відповідного спирту; і/або Е» може бути здатним гідролизувати ацил жирної кислоти - кофермент А до вільних жирних кислот і коферменту А.
Фермент Е1
Клітина згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу може містити додаткову генетичну мутацію, яка збільшує експресію щонайменше одного білка-переносника відносно клітини дикого типу. Ця додаткова мутація дозволяє клітині збільшувати поглинання щонайменше однієї жирної кислоти. Зокрема, білок-переносник може являти собою АЇКІ (ЗЕО ІО МО: 4 або 5) і/або
Раді (ЗЕО І МО: 6). АЇКЇ і/або Раді можуть функціонувати як щонайменше один білок- переносник порівняно з клітиною дикого типу. В одному прикладі клітину можна генетично модифікувати для надекспресії обох генів їайді і аїЇкі. Клітина згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу може бути додатково генетично модифікована для збільшення експресії АЇКІ-. і/або Раді. відносно клітини дикого типу.
В одному прикладі фермент Е:ї може являти собою Рай або ВАА16205.1
Фермент Е:2
Клітина згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу може містити додаткову генетичну мутацію, яка збільшує експресію ацил-КоА-синтетази (фермент Е:2г) під ЕС 6.2.1.3, ЕС 2.3.1.86 відносно клітини дикого типу. Фермент Е:ї2 може каталізувати перетворення жирної кислоти на естер жирної кислоти та КоА, тобто молекулу, в якій функціональна група -ОН на карбоксигрупі замінена на -5-КоА. Наприклад, поліпептиди Радо і РааК у Е. соїї (номер доступу: ВАА15609.1
МР 416216.4, відповідно) являють собою ацил-КоА-синтетази. В іншому прикладі Еї2 може являти собою довголанцюгова жирна кислота-КоА-лігазу під УР. 001724804.1.
Фермент Еіз
Фермент Еїз може бути здатним до перетворення естеру Фф-оксоалканової кислоти на відповідний естер д0-карбоксіалканової кислоти, зокрема, фермент Е:з може являти собою будь- який із ферментів Ез, визначених вище. Більш конкретно, Еїз може бути вибраним із групи, що включає Р4і50-алкангідроксилази (Ез) під ЕС 1.14.15.3-, АІКВ-алкангідроксилази (Еь) під ЕС 1.14.15.3, біфункціональні алкогольоксидази (Ес) під ЕС 1.1.3.20, біфункціональні АЇїК.)- алкогольдегідрогенази (Евз)) або біфункціональні алкогольдегідрогенази (Евї) під ЕС 1.1.1.1 або
ЕС 1.1.1.2, здатні до окиснення естеру оФ-гідроксіалканової кислоти через естер о0- 60 оксоалканової кислоти безпосередньо на відповідний естер о0-карбоксіалканової кислоти; й альдегіддегідрогенази (Ее).
Фермент Е:4
Фермент Е:ї4 може бути здатним до перетворення естеру ш-карбоксіалканової кислоти на відповідний діестер Ф-карбоксіалканової кислоти. Зокрема, фермент Еї4 може являти собою будь-який з ферментів Ех, визначених вище. Більш конкретно, Еї4 може являти собою щонайменше одне з синтази воску-естеру (Ед або алкоголь-О-ацилтрансферази (Е») (ЕС 2.3.1.20, ЕС 2.3.1.75 або ЕС 2.3.1.84).
Клітина згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу не містить генетичної модифікації, яка збільшує експресію відносно клітини дикого типу щонайменше одного з наступних ферментів Его-Ега, вибраних із групи, що включає: - Еоацил-АСР-тіоестерази під ЕС 3.1.2.14 або ЕС 3.1.2.22, - Е»гі ацил-КоА-тіоестерази під ЕС 3.1.2.2, ЕС 3.1.2.18, ЕС 3.1.2.19, ЕС 3.1.2.20 або ЕС 3.1.2.22, - Ег2 ацил-КоА:АСР-трансацилази, - Ег:полікетидсинтазу й - Еггсинтазу гексанової кислоти.
Зокрема, клітина згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу характеризується експресією ферментів Его-Ег4, що притаманна клітині дикого типу. Таким чином, ферменти Его-
Ег«е не піддаються ані надекспресії, ані нокауту в клітинах згідно зі способом за даним винаходом. Більш конкретно, експресія будь-якого з ферментів Его-Ега, інакше кажучи ферменту
Его, Егі, Егг, Егз або Ега, усіх ферментів Его, Егі, Егг, Егз та Ега4 не є генетично модифікованою в клітині згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу. Ще більш конкретно, клітина згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу може характеризуватися природною експресією, що притаманна клітині дикого типу, будь-якого з ферментів Его-Ега, які можуть бути присутніми у вихідній клітині в природних умовах. Таким чином, можна вважати, що клітини згідно з будь- яким із аспектів даного винаходу не характеризуються рекомбінантною експресією будь-якого з ферментів Его-Ег«. Це є особливо переважним, оскільки клітини без збільшеної експресії будь- якого з ферментів Его-Ега« (тобто з експресією будь-якого з ферментів Его-Ег4, що притаманна клітині дикого типу) потім можна легко відбирати для застосування алкану як джерела вуглецю під час утворення естеру ф-функціоналізованої карбонової кислоти. Зокрема, будь-яка клітина зі збільшеною експресією будь-якого з ферментів Его-Егл може приводити до збільшеного продукування жирних кислот, які можуть застосовуватися як джерело вуглецю для утворення 0- функціоналізованих карбонових кислот і/або їх естерів клітиною зі збільшеною експресією будь- якого з ферментів Его-Ега. Таким чином, клітини зі збільшеною експресією будь-якого з ферментів Его-Ег« можуть віддавати перевагу застосуванню високої концентрації жирних кислот як субстрату для продукування естерів Ф-функціоналізованих карбонових кислот, і, таким чином, алкани не будуть застосовуватися клітиною для утворення естеру ю-функціоналізованої карбонової кислоти. Застосування інших джерел вуглецю, що не є алканами, для утворення естеру Ф-функціоналізованої карбонової кислоти може суттєво збільшувати затрати на одержання, оскільки для продукування більшої кількості жирних кислот клітинам будуть необхідні інші джерела вуглецю, такі як глюкоза. Відповідно, застосування клітин згідно з будь- яким із аспектів даного винаходу, які не містять генетичної модифікації, яка збільшує експресію відносно клітини дикого типу щонайменше одного з наступних ферментів Его-Ега, застосовується згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу для одержання щонайменше одного естеру Ф-функціоналізованої карбонової кислоти із щонайменше одного алкану.
Ферменти Его-Ега
Ферменти Его-Егг докладно описані в УМО2013024114 як ферменти Е-Ехм, відповідно, на сторінках 60-79 в УМО2013024114.
Згідно з іншим аспектом даного винаходу передбачений спосіб одержання щонайменше одного естеру шф-функціоналізованої карбонової кислоти, при цьому спосіб включає стадію приведення щонайменше однієї клітини згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу в контакт щонайменше з одним алканом. Зокрема, естер ю-функціоналізованої карбонової кислоти, що утворюється, може бути вибраним із групи, що включає естери о-гідроксіалканової кислоти, 0- оксоалканової кислоти, д-карбоксіалканової кислоти, 0-аміноалканової кислоти. Зокрема, естер
Фш-функціоналізованої карбонової кислоти може являти собою метиловий естер 12- амінолауринової кислоти, метиловий естер 12-гідроксилауринової кислоти, метиловий (ді)естер 12-карбоксилауринової кислоти й/або метиловий естер лауринової кислоти з алкану-додекану.
В іншому прикладі одержуваний естер Ф-функціоналізованої карбонової кислоти може являти собою метиловий естер 11-аміноундеканової кислоти, метиловий естер 11-гідроксіундеканової бо кислоти, метиловий (ді)естер 11-карбоксіундеканової кислоти й/або метиловий естер ундеканової кислоти з алкану-ундекану. Щонайменше в одному додатковому прикладі як побічний продукт можуть утворюватися монофункціональні спирти й/або альдегіди.
Застосовуваний у даному документі термін "приведення в контакт" означає створення безпосереднього контакту між алканом і/або клітиною згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу у водному розчині. Наприклад, клітина і алкан не можуть знаходитися в різних компартментах, розділених за допомогою бар'єра, такого як неорганічна мембрана. Якщо алкан є розчинним і може поглинатися клітиною або може дифундувати через біологічні мембрани, тоді його можна просто додати до клітини згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу у водному розчині. У випадку, якщо він є недостатньо розчинним, то його можна розчинити у придатному органічному розчиннику перед додаванням до водного розчину. Фахівець в даній галузі може приготувати водні розчини алканів, що характеризуються недостатньою розчинністю, шляхом додавання придатного органічного й/або полярного розчинників. Такі розчинники можуть забезпечуватися в формі органічної фази, що містить рідкий органічний розчинник. В одному прикладі органічний розчинник або фаза можуть вважатися рідкими, якщо вони є рідкими за 25 "С та нормального атмосферного тиску. В іншому прикладі жирна кислота може забезпечуватися в формі естеру жирної кислоти, такого як відповідні метиловий або етиловий естери. В іншому прикладі сполуки та каталізатори можуть бути приведені в контакт іп міїго, тобто в більш-менш збагаченому або навіть очищеному стані, або можуть бути приведені в контакт іп 5йи, тобто вони складають частину метаболізму клітини та відповідно вступають у реакцію всередині клітини.
Термін "водний розчин" застосовується взаємозамінно з терміном "водне середовище" та стосується будь-якого розчину, що містить воду, переважно воду як розчинник, який можна застосовувати для збереження клітини згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу, щонайменше тимчасово, в метаболічно активному й/або життєздатному стані, та він містить, якщо вони необхідні, будь-які додаткові субстрати. Фахівцю в даній галузі відомі способи одержання численних водних розчинів, що звичайно називаються середовища, які можна застосовувати для збереження клітин за даним винаходом, наприклад, середовище ІВ у випадку Е. соїї. Переважним є застосування як водного розчину мінімального середовища, тобто середовища з достатньо простим складом, яке містить лише мінімальний набір солей і поживних речовин, необхідних для збереження клітини в метаболічно активному й/або життєздатному стані, на відміну від складних середовищ, для запобігання необов'язкових забруднень продуктів небажаними побічними продуктами. Наприклад, як мінімальне середовище можна застосовувати середовище МО.
Згідно з іншим аспектом даного винаходу передбачений спосіб одержання щонайменше одного естеру Ф-функціоналізованої карбонової кислоти з алкану, при цьому спосіб включає (а) приведення в контакт з алканом наступних ферментів: () ферменту Ен, здатного до перетворення алкану на відповідний 1-алканол; (і) ферменту Ег, здатного до перетворення 1-алканолу з (ї) на відповідний 1-алканаль; (ії) ферменту Ез, здатного до перетворення 1-алканалю з (її) на відповідну алканову кислоту; (м) ферменту Ех, здатного до перетворення алканової кислоти з (ії) на відповідний естер алканової кислоти; та (м) ферменту Е5, здатного до перетворення естеру алканової кислоти з (ім) на відповідний естер о-гідроксіалканової кислоти.
Спосіб згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу може включати стадію (р) приведення в контакт з естером о-гідроксіалканової кислоти наступних ферментів: (м) ферменту Ев, здатного до перетворення відповідного естеру о-гідроксіалканової кислоти з (м) на відповідний естер 0-оксоалканової кислоти; або (мі) ферменту Евє, здатного до перетворення відповідного естеру о-гідроксіалканової кислоти з (м) на відповідний естер Фд-оксоалканової кислоти, й ферменту Е7, здатного до перетворення естеру д-оксоалканової кислоти на відповідний естер д0-аміноалканової кислоти; або (мії) ферменту Еє, здатного до перетворення відповідного естеру о-гідроксіалканової кислоти з (м) на відповідний естер 0д-оксоалканової кислоти, й ферменту Еїз, здатного до перетворення естеру Ф-оксоалканової кислоти на відповідний естер оФо-карбоксіалканової кислоти, й ферменту Е:4, здатного до перетворення естеру одо-карбоксіалканової кислоти на відповідний діестер о-карбоксіалканової кислоти.
Ферменти, які застосовують згідно з будь-яким із аспектів даного винаходу, можуть бути такими самими, як ферменти, розкриті в контексті клітини згідно з даним винаходом. бо ПРИКЛАДИ
Вищевикладене описує переважні варіанти здійснення, які, як буде зрозуміло фахівцям в даній галузі, можна піддавати змінам або модифікаціям під час розробки, конструювання або експлуатації без відхилення від обсягу формули винаходу. Припускають, що ці зміни, наприклад, охоплені обсягом формули винаходу.
Приклад 1
Одержання лауринової кислоти (метилового естеру) та ундеканової кислоти (метилового естеру) з додекану та ундекану (а також метанолу у випадку метилових естерів), відповідно, за допомогою цільноклітинного біокаталізатора, що несе алканмонооксигеназу й синтазу воску- естеру та є ослабленим щодо ферментів, які каталізують розкладання жирних кислот, і ферменту, що гідролізує естери жирних кислот до вільних жирних кислот і відповідного спирту.
Приклад 2
Одержання метилового естеру 12-амінолауринової кислоти й метилового естеру 11- аміноундеканової кислоти з додекану та ундекану, відповідно, за допомогою цільноклітинного біокаталізатора, що несе алканмонооксигеназу, синтазу воску-естеру й о-трансаміназу та є ослабленим щодо ферментів, які каталізують розкладання жирних кислот, і ферменту, що гідролізує естери жирних кислот до вільних жирних кислот і відповідного спирту.
Приклад З
Конструювання вектора експресії для надекспресії гена їТааюр БЕ. соїї та гена Напйеїйа спе)непзі5, що кодує синтазу воску-естеру
Вектор рСОЕ--адО Ес-ме5 Нене (ЗЕО ІО МО':7) несе ген їадО з Е. соїї (який кодирує ацил-
КоА-синтазу) та ген синтази воску-естеру з НапейПйа спе)епзіє (ЗЕБО ІЮО МО:2), кодон- оптимізований для експресії в Е. соїї. У той час як ацил-КоА-синтаза відповідає за активацію жирних кислот у відповідні тіоестери КоА, синтаза воску-естеру необхідна для утворення естеру з ацилу жирної кислоти-КоОА й спирту, більш конкретно, метанолу. Вектор базується на плазміді рРОСОБОцеї-1 (Мегск Віозсіепсе5; Ноттінгем, Велика Британія) та несе ген Тадо під контролем промотору їас і ген, що кодує синтазу воску-естеру з Напейа спе|непвзі5, під контролем промотору Т5. Тадо БЕ. сої, а також касети з промоторами їас та Т5 ампліфікували за допомогою
ПЛР з геномної ДНК БЕ. соїї МУ3110, відповідно, ген, що кодує синтазу воску-естеру з Найеїйа спе)інепоіх, одержували шляхом синтезу ДНК. Каркас вектора й чотири ДНК-фрагменти, що являють собою тадо Е. соїї, касети з промоторами ас і Т5 і ген, що кодує синтазу воску-естеру з
Напеїіа спе)чепві5, зливали із застосуванням комерційно доступного набору для рекомбінації іп мйго (набір для клонування та збирання ДНК МЕВиїдег Нігі; МЕВ; Франкфурт-на-Майні,
Німеччина) с одержанням вектора ЯСОБЕ-адО Ес-жшевз Нене (ЗЕО І МО 77).
Приклад 4
Конструювання штамів Е. соїї, що здатні до перетворення алканів у відповідні метилові естери ш-функціоналізованих жирних кислот
Вектор експресії рВТ10 ак! (див. Приклад 1 з М/0/2011/131420 щодо особливостей конструювання та внесену до переліку послідовність під 5БЕО ІЮО МО: 8) містить гени аїкВ, аїко, акт, ак та ак з оперона аіК Рзендотопавх оіІеомогап5. Відповідні продукти генів каталізували окиснення алканів до відповідних алканолів, алканалів і жирних кислот (АІКВСТ), а також поглинання субстратів (АЇКІ). Крім того, продукти гена АІКВОТ також каталізували окиснення метилових естерів жирних кислот, раніше утворені під дією ферментів ацил-КоА-синтетази і синтетази воскуг-естеру з жирних кислот і метанолу (див. Приклад 1). Вектор ру2г94 аїабнН В.5. ТА С.м(С) (див. Приклад 1 з УУО/2013/024114 щодо особливостей конструювання та внесену до переліку послідовність під 560) ІЮ МО: 17) несе гени аа з ВасшШив5 5,ИБІй5 (що кодує аланіндегідрогеназу) та См 2505 з Спготобрасіегішт міоїасешт (що кодує о0- трансаміназу). У той час як ю-трансаміназа відповідає за перетворення ОГАМЕ та ОШШАМЕ на відповідні аміни АГАМЕ та АОАМЕ, аланіндегідрогеназа була необхідна для одержання донора аміну аланіну з пірувату та неорганічного аміаку.
Плазміди рвтТто ак! ої рсСОг-адаО Ес-ме5 Нспе, а також за необхідності руг94 аіїаОнН В.5. ТА С.у(СУ, трансформували шляхом електропорації в Е. соїї МУ3110 АБіон діадЕ, її висівали на чашки з І В-агаром із додаванням канаміцину (50 мкг/мл), ампіциліну (100 мкг/мл) і спектиноміцину (100 мкг/мл), залежно від конкретного випадку. Трансформантів піддавали скринінгу щодо наявності та автентичності плазмід за допомогою одержання плазмід і рестрикційного аналізу. Одержували наступні штами: - Б. соїї М/У3110 Адріон лгадЕ рвт10 ак /рсоОв-адаО Ес-ше5 Непне, - Б. соїї МУ3110 дБіон лдтТаає рвтт1о ак! / ро294 аїабН В.5. ТА С.м(СО / рСОЕ-адО Ес- мжез Нене.
Приклад 5 бо Біотрансформація для перетворення алканів на відповідні метилові естери оФ-
функціоналізованих жирних кислот
Штами БЕ. соїї МУ3110 АБіон лгадЕ рвВтТ10 аїкі / рСОг-адО Ес-жше5 Нове та Е. соїї МУЗ3110 двріон лтадЕ рвттО ак / ро294 аїаОН В.5. ТА С.у(СО / рСОг--адО Ес-мжше5 Неспе піддавали періодичному культивуванню з підживлюванням, а потім біотрансформації для дослідження їхньої здатності продукувати метиловий естер омега-гідроксилауринової кислоти (НІАМЕ), метиловий естер омега-оксолауринової кислоти (ОГАМЕ), метиловий естер омега- амінолауринової кислоти (АГАМЕ), монометиловий естер додекандіової кислоти (ОСАМЕ) та диметиловий естер додекандіової кислоти (ОСАОМЕ) з додекану. Штами також піддавали періодичному культивуванню з підживлюванням, а потім біотрансформації для дослідження їхньої здатності продукувати метиловий естер омега-гідроксіундеканової кислоти (НОАМЕ), метиловий естер омега-оксоундеканової кислоти (ОШАМЕ), метиловий естер омега- аміноундеканової кислоти (АОАМЕ), монометиловий естер ундекандіової кислоти (ШОАМЕ) диметиловий естер ундекандіової кислоти (ШОАЮОМЕ) з ундекану. Його здійснювали у 8 паралельних системах культивування від ОАЗОІР.
Для культивування застосовували реактори об'ємом 1 л, які були оснащені верхньопривідними змішувачами й імпелерними турбінами. Для відслідковування процесу в режимі реального часу вимірювали рнН і рОг». Вимірювання ОТЕ/СТК слугували, окрім іншого, для оцінки метаболічної активності й придатності клітин. рН-зонди калібрували за допомогою калібрування за двома точками з розчинами для вимірювань, рН 4,0 ї рН 7,0, згідно з технічною документацією, наданою ЮАЗОІР. Реактори підготовляли згідно з технічною документацією, наданою БАЗОІР, при цьому встановлювали необхідні сенсори та з'єднувальні вузли, а також вал змішувача. Потім реактори заповнювали 300 мл води й автоклавували протягом 20 хв. при 121 "С для забезпечення стерильності. рОг- зонди поляризували протягом ночі (щонайменше б год.) після приєднання до підсилювача вимірювань. Потім воду вилучали в асептичних умовах та заміняли на середовище для одержання високої щільності клітин, що містило 1,76 г/л (МН4а)2505, 19,08 г/л КаНРО», 12,5 г/л
КНеРО», 6,66 г/л дріжджових екстрактів, 11,2 г/л тринатрійцитрату дигідрату, 17 мл/л стерилізованого шляхом фільтрації 1 95 розчину цитрату заліза-амонію і 5 мл/л стерилізованого шляхом фільтрації вихідного розчину мікроелементів (що містив 36,50 г/л НСІ (37 95), 1,91 г/л
Мпсї274 НО, 1,87 г/л 2150477 НО, 0,84 г/л дигідрату етилендіамінтетраоцтової кислоти, 0,30 г/л
НзВоО», 0,25 г/л Маг?МоО2 НО, 4,70 г/л СасСі»2 Но, 17,80 г/л Ре5О277 НегО, 0,15 г/л СисСі2"2
НгО) з 15 г/л глюкози як джерела вуглецю (доданої шляхом дозованого додавання 30 мл/л стерильного живильного розчину, що містив 500 г/л глюкози, 1 95 (вага/об'єм) Маа5О277 НО і 2,2. 95 (вага/об'єм) МНАСІ) з 50 мг/л канаміцину.
Потім рОг-зонди калібрували із застосуванням калібрування за однією точкою (змішувач: 600 об./хв./ насичення газом: 10 сл/год. повітря) до 100 95 та канали для підживлювання, введення коректувального засобу та індукованого засобу очищали за допомогою нерозбірної мийниці згідно з технічною документацією, наданою ЮБАБСІР. Для цього трубки спочатку промивали 7095 етанолом, потім 1 М Маон, далі стерильною демінералізованою водою і нарешті заповнювали відповідним середовищем.
Усі вищевказані штами Е. соїї культивували спочатку з кріокультури у середовищі І В (25 мл у струшувальній колбі з перегородками об'ємом 100 мл) з 50 мг/л канаміцину протягом ночі при 37 "С та 200 об./хв. протягом приблизно 18 год. Потім 2 мл цієї культури переносили для другої стадії попереднього культивування у 25 мл середовища для одержання високої щільності клітин, що містило 1,76 г/л (МН4а)2505, 19,08 г/л К»НРО», 12,5 г/л КНгРО», 6,66 г/л дріжджових екстрактів, 11,2 г/л дигідрату тринатрійцитрату, 17 мл/л стерилізованого шляхом фільтрації 1 95 розчину цитрату заліза-амонію та 5 мл/л стерилізованого шляхом фільтрації вихідного розчину мікроелементів (що містив 36,50 г/л НСІ (37 905), 1,91 г/л МписСі2"4 НО, 1,87 г/л 7150477 НО, 0,84 г/л дигідрату етилендіамінтетраоцтової кислоти, 0,30 г/л НзВОз, 0,25 г/л Ма"МоО-72 НО, 4,70 г/л 5о0 Сасі»"2 НО, 17,80 г/л Ре5О477 Н2О, 0,15 г/л СисСі»"2 НгО) з 15 г/л глюкози як джерела вуглецю (доданої шляхом дозованого додавання 30 мл/л стерильного живильного розчину, що містив 500 г/л глюкози, 1 95 (вага/об'єм) Ма5О477 НгО й 2,2 95 (вага/об'єм) МНАСІ), з уже описаними антибіотиками у струшувальну колбу об'ємом 100 мл та інкубували при 37 "С/200 об./хв. протягом додаткових 6 год.
Для засівання реакторів при оптичній щільності, що становила 0,1, вимірювали ОЮОвоо другої стадії попереднього культивування та розраховували кількість культури, необхідну для засівання. Необхідну кількість культури додавали за допомогою шприца об'ємом 5 мл через прокладку у прогрітий та продутий повітрям реактор.
Застосовували наступну стандартну програму бо
Зо налаштування налаштування 11111111 СГ 5 СС песня як» Гоше не» суміш) потоку газу) вирощування вирощуванн вирощування а 400 | 1500 |б ст 2195 | 2495 | б в спі 72 іотрансфор- об/хв. | об /хв. іотрансфор о о іотрансфор- Сл/год.І од /год. мація мація мація ббценарійїд 77111111 рН доводили до рН 6,8 з одного боку за допомогою 12,595 розчину амонію. Під час культивування та біотрансформації концентрацію розчиненого кисню (рОг або БО) в культурі доводили щонайменше до 3095 за допомогою змішувача-живильника та ступеня насичення газом. Після інокуляції значення СО падало від 100 до 30 95, при цьому його підтримували стабільним протягом залишкового часу культивування.
Культивування здійснювали у вигляді періодичного культивування з підживлюванням, де початок підживлювання запускався у вигляді доставки протягом фази підживлювання 5 г/л"год. живильного розчину глюкози, що містив 500 г/л глюкози, 1 95 (вага/об'єм) Ма5О4"7 НО та 2,2 96 (вага/об'єм) МНАСІ, при цьому пік БО індукував завершення фази періоду культивування. З моменту початку підживлювання температуру 37 "С знижували до 30 "С. Через 10 год. після початку підживлювання експресію генів ферментів окиснення індукували за допомогою 0,025 Фо (об'єм/ об'єм) ОСРК. Початок продукування (- початок біотрансформації) здійснювали через 14 год. після початку підживлювання. З цією метою 150 мл додекану або ундекану додавали у вигляді порції у ферментаційний бульйон.
Для кількісної оцінки Г5МЕ та НІ 5 у ферментаційних зразках зразки відбирали через 1/2/4/20/22 год. після початку біотрансформації. Ці зразки готували для аналізу, як описано у прикладі 6.
Приклад 6
Кількісна оцінка продуктів на основі І С-ЕБІ/М52
Кількісну оцінку НГАМЕ, ОГАМЕ, АГАМЕ, ОСАМЕ та ОБАОМЕ, а також НОАМЕ, ООАМЕ,
АШАМЕ, ОСАМЕ та ШОАОМЕ у ферментаційних зразках здійснювали за допомогою І С-ЕБІ/М52 з урахуванням зовнішнього калібрування для всіх аналізованих зразків (0,1-50 мг/л) та із застосуванням внутрішнього стандарту аміноундеканової кислоти (АОА для НІ З5МЕ) та аз-
І ЗМЕ (для І МЕ).
У даному випадку використовували наступні вимірювальні пристрої: - систему для ВЕРХ 1260 (Адііепі; Беблінген) з автоматичним дозатором (51367Е), насосом для двокомпонентних сумішей (513128) і термостатом для колонок (013164А); - мас-спектрометр Тгіреїюцаа 6410 (Адіїепі; Беблінген) із джерелом ЕЗ5І; - колонку для ВЕРХ: Кіпеїех С18, 100 х 2,1 мм, розмір частинок: 2,6 мкм, розмір пор 100 А (Рпепотепех; Ашаффенбург); - передколонку: вбудований фільтр для ВЕРХ-колонки КтиаКаїспег Ойга; глибина фільтра 0,5 мкм та внутрішній діаметр 0,004 мм (Рпепотепех; Ашаффенбург).
Зразки підготовлювали шляхом відмірювання за допомогою піпетки 1900 мкл розчинника (80 95 (об'єм/об'єм) ацетонітрилу, 20 95 двічі дистильованої НгО (об'єм/об'єм) ж 0,1 95 мурашиної кислоти) та 100 мкл зразка у реакційну посудину об'ємом 2 мл. Суміш перемішували на вортексі протягом приблизно 10 секунд, а потім центрифугували при приблизно 13000 об./хв. протягом 5 хв. Прозорий супернатант відбирали із застосуванням піпетки та, після відповідного розведення, аналізували з розчинниками (80 95 (об'єм/об'єм) АСМ, 20 95 двічі дистильованої НгО (об'єм/об'єм) ж 0,1 95 мурашиної кислоти). 100 мкл ІЗ5ТО відміряли за допомогою піпетки у кожні
900 мкл зразка (10 мкл для об'єму зразка, що становив 90 мкл).
ВЕРХ-розділення здійснювали за допомогою вищезгаданих колонки та передколонки. Об'єм введеної проби становив 0,7 мкл, температура колонки 50 "С, швидкість потоку 0,6 мл/хв.
Рухому фазу складали елюент А (0,1 95 (об'єм/об'єм) водний розчин мурашиної кислоти) та елюент В (ацетонітрил з 0,1 95 (об'єм/об'єм) мурашиної кислоти). Застосовували наступний профіль градієнта.
Час (хв.| Елюент А (бо Елюент В бо 0 77 23 0,3 77 23 0,4 40 бо 2,5 40 бо 2,6 2 98 5,5 2 98 5,6 77 23 9 77 23
Аналіз Е5І-М52 проводили у режимі позитивної іонізації при наступних параметрах джерела
ЕБІ: " температура газу 280 С; » швидкість потоку газу 11 л/хв.; "« тиск розпилення 50 фунтів/кв. дюйм; " напруга на капілярі 4000 В.
Виявлення та кількісну оцінку сполук НСАМЕ, ОГАМЕ, АГАМЕ, ОБАМЕ, ОБАОМЕ, НОАМЕ,
ОШАМЕ, АОШАМЕ, ОСАМЕ та ОСАОМЕ проводили при наступних МКМ-параметрах, при цьому у кожному випадку дочірній іон застосовували для якісного визначення та один для кількісного визначення.
Таблиця 1
Аналізовані зразки ГА та ГАМЕ виявляли у 5ІМ-режимі (маса/заряд 201 і 215) зразок Імаса/заряді Імаса/заряді мс Іеві 1 0О5МЕ | 2452 | 1674 | 25... | (б 1 0О5МЕ | 2452 7771494 | 5017 111118 7005 | 2312 17772132 | 50 | щ 0 г Ф /( 17005 | 2312 17771491 | 25 1 О5МЕ | 22921777 1972 | (РО | ОО
НВ | 2172 177771 1812 | 535 2 щЩ | 0 77085 | 21521777 1612 | 25... | ..ЮЙ0.:ЙСБС 705 | 252 17777952 | 60 2 щЩ(| їз
Приклад 7
Перетворення алканів у відповідні метилові естери Ф-функціоналізованих жирних кислот за допомогою БЕ. соїї МУ3110 Аріон АїТадЕ рвт10о ак / росОБ-адо Ес-шев5 Нопе та Е. соїї МУ3110 двріон АгадЕ рвт10 аїкі /р.)294 аїабН В.5. ТА С.у(СО / рСОБ-адо Ес-жшез Непе
Із застосуванням вищезгаданих протоколів можна було показати, що Е. соїї МУ3110 АБіон діадЕ рвтТ10 аїкІ /рсоОв-адо Ес-ше5з Неопе продукує ОБАМЕ та ОСАОМЕ з додекану, а також
ОБАМЕ та ОСАОМЕ з ундекану (див. таблиці 1 та 2). Крім того, можна було показати, що Е. соїї
УУ3110 АдБіонН АтТааЕ рвт10 ак! / ро294 аїабН В.5. ТА С.м(СО / рбОЕ-адО Ес-жшез5 Непе продукує НІ АМЕ та АГАМЕ з додекану, а також НОАМЕ та АОАМЕ з ундекану (див. таблиці 2 та 3).
Таблиця 2
Концентрація метилових естерів 0-функціоналізованих жирних кислот, одержаних з додекану за допомогою штамів Е. соїї МУ3110 АБріон лгадаЕ рвтт1о аїкІ/рсоОв-адо Ес-шез Нопе (штам 1) та
Е. соїї МУ3110 АБіоН лгадЕ рвтто аїкі /р.уг94 аїабН В.5. ТА С.м(СО / рСОБ-адо Ес-мев5 Нене (штам 2) мгтл мгтл мгтл мг сл мгсл
Штам2 | 50 |Невизначено| 60 |Невизначено| -: 12 (ш(ш
Таблиця З
Концентрація метилових естерів 0-функціоналізованих жирних кислот, одержаних з ундекану за допомогою штамів Е. соїї МУ3110 АБріон лгадаЕ рвтт1о аїкІ/рсоОв-адо Ес-шез Нопе (штам 1) та
Е. соїї МУ3110 АБіоН лгадЕ рвтто аїкі /р.уг94 аїабН В.5. ТА С.м(СО / рСОБ-адо Ес-мев5 Нене (штам 2)
Штам с поАМе с САМЕ с лоАМе с ОАЕ с роломе (г/л (г/л (г/л (г л (г л
ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
«110» Евонік Дегусса ГмбХ «120» БІОТЕХНОЛОГІЧНЕ ОДЕРЖАННЯ о-ФУНКЦІОНАЛІЗОВАНИХ КАРБОНОВИХ КИСЛОТ |І
ЇХНІХ ЕСТЕРІВ
-1305 20150027З3ЕР -1505 ЕРІ15196180 -1515 2015-11-25 -1605» 7 -170» РаїепіНп версія 3.5 -2105 1 «2115 401 20. «2125 БІЛОК «213» Реєидотопах ршіда -4005 1
Мей Геи Сім Гуз Ніз Агу Маї Геи Авр 5ег Аїа Рго Си Туг Маї А5р 1 5 10 15
Гуз Гуз Гуз Туг І еи Тгр Пе Геи 5ег ТНг І єи Тер Рго Аа Тнг Рго зо 20 25 зо
Ме! Пе Спу Пе Ттр Гей Аа Авп Сім Тиг Спу Тгтр Спу Пе Ре Туг 35
СТУ І єм Маї І еи І єи Маї Тр Туг Спу Ага Г еи Рго І еи Г еи Авр Аа 50 55 бо /Меї Ріпє Сіу Сіш Авр РНе Авп Авп Рго Рго Сім Спи Маї Маї Рго Г ув 65 70 75 80
Ї еи Спи Гуз Сім Агу Туг Туг Ага Маї І єи Тнг Туг І єи Тнг Маї Рго 85 90 95
Меї Ніз Туг Аа Айа ГГ еи Пе Маї 5ег Аїа Тгр Тр Ма! Сіу Тнг Сп 100 105 110
Рго Меї 5ег Тр І єи Сім Пе Спу Аа І ей Аа І єи 5ег І єи Спу Пе 115 120 125 маї Азп Су І еи Айа І єи Авп ТНг Сіу Нів Спи І єи Спу Нів ГІ уз І ув 130 135 140
Си ТАг Рне Азвр Аг Тр Меї Аїа І уз Пе Маї І еи Аїа Маї Ма! Спу 145 150 155 160
Тугаїчу Ні5 Ре РНе Іе Сии Нів Авп Гуз С1у Нів Ні Агу Азвр Маї
Зо 165 170 175
Аа Тниг Рго Меї Азр Рго Аїа Тпг Зег Агу Меї Спіу Спи Зег Пе Туг 180 185 190
Гуз Рпе Бе! Іе Ага Сім Пе Рго Спу АІа Ре Пе Агу Аа Тгтр Сіу 195 200 205
Їеи Спи Спи Сп Агу Гей Зег Агу Агу Сіу Сп Зег Ма! Тгтр бег Ріе 210 215 220
Авр Авп СіІш Пе І еи Сп Рго Меї Іе Пе Тнг Маї Іе І еи Туг Аіа 225 230 235 240
Ма! Гей І си Аа І єи РНе Сіу Рго Гуз Меї І єи Маї РнНе І єи Рго Пе 245 250 255
Сіп Меї Аа Ре Сту Тр Тгр Сип І еи Тиг Зег Аа Азп Туг Пе Спи 260 265 270
Ні5 Туг СПУ Геи І ви Агу Сп Гуз Меї Сім Авр Стпу Аг Туг Спи Нів 275 280 285 бо
Сіп Гуз Рго Ні Нів 5ег Тр Авп 5ег Авп Ніз Іе Маї Зег Авп І еи 290 295 00
Ма Геи РНе Нів І єи Сп Ага Нів 5ег Авр Ні Ні Аа Нів Рго ТНг 305 з10 315 320
Аг Зег Туг ап Бег Гей Агу Авр РнНе Рго ау І єи Рго Аа ГІ еи Рго 325 330 335
Тигаїпу Туг Рго Су Аа Рне Геи Меї Аа Ме! Пе Рго Сіп Тгтр Рпе 340 345 350
Ага бег Ма! Меї Авр Рго І уз Маї Маї Авр Тр Аа Спу Сіу Авр І єи 355 360 365
Авп І уз Пе Сіп Пе Азр Авр 5ег Меї Аг9 Сім Тнг Туг Гей Гуз Гуз 370 375 380
Рпе Спу Тнг Зег 5ег Аа Спу Ні бег Зег 5ег ТНг 5ег Аа Маї Аа 385 390 395 400 зег
Зо -2105 2 «2115 458 0«2125» БІЛОК -213» Напеїа сПпе|непвів «-4005 2
Меї Тнг Рго Геи 5ег Рго Маї Азр Сп Пе РнНе ГГ еи Ттр І єи СПм Гув 1 5 10 15
Аго Сп Сп Рго Меї Ніз Маї Спіу Спу Геи Нів Пе РНе 5ег Рпе Рго 20 25 Зо
Ар Азр Аа Азвр Аа І уз Туг Меї Тиг Сім І єи Аа Сіп Сій Ї єи Агу 35 40 45
Аа Туг Аа Тнг Рго Сіп Аа Рго РНе Авп Аг Аг І еи Аго СіІп Аг9 50 55 60
Тр Слу Ага Туг Туг Ттр А5р ТНг Авр Аа Сп РНе Авр Геи Си Нів 65 70 75 80 б0О Ні Ріє Ага Ніз Сі Айа Гей Рго Гуз Рго Су Ага Іе Агу Сім Гей
85 90 95
Ї еи Ага Ні Маї 5ег Аа Сім Ні Зег Авп І єи Меї Авр Ага Сіи Аг9 100 105 110
Рго Меї Тгтр Сім Суз Нів Г еи Пе Сіи Спу Пе Агу Стіу Агу Агу Рпе 115 120 125
Аа Маї Туг Туг Гуз Аа Ні Ні5 Сув Меї І еи Авр Су Маї Аа Аа 130 135 140
Меї Агу Меї Суз Маї Гуз Зег Туг Зег Рне Авр Рго ТНг Аа Тиг Спи 145 150 155 160
Меї Ріо Рго Іе Тгр Аа Іе Зег Гуз Авр Маї Тнг Рго Аа Агу Спи 165 170 175
Тпиг ап Аа Рго Айа Ага Сіу Авр І єи Маї Ні 5ег І єи 5ег Сп ЇЇ еи 180 185 190 маї Спи Спу Аа Сту Агу Сп І єи Ада Тпг Маї Рго ТНг І еи Пе Агд 195 200 205
Зо сій Геи Спу Гуз Авп ГГ еи ГІ си Гуз Аа Агу Авр Авр 5ег Авр Аа Спу 210 215 220
Ї еи Пе Рнеє Ага Аїа Рго Рго 5ег Іе І еи Авп Сп Агу Пе Тит Спу 225 230 235 240
Зег Агу Ага Ре Аїа Аа Сіп 5ег Туг Аа І єи Спи Ага РНе Гуз Аа 245 250 255
Пе Спу Гуз Аа РНе Сіп Аа Тнг Маї Авп Азр Маї Маї! І єи Аа Маї 260 265 270
Суз Сіу Зег Аа І єи Агу Азп Тут І єи І єи бег Ага Сп Аа І єи Рго 275 280 285
Азр ап Рго І єи Пе Аїа Меї Аїа Рго Меї 5ег Пе Ага СіІп Ар Авр 290 295 00 зЗег А5р бег Сіу Авп Сп Пе Аа Ме! Пе Гей Аа Авп І еи Спу ТНг 305 з10 315 з20 60 Ніз Пе Аа Ар Рго Маї Агу Ага Геи Сім Г еи ТНг Сп Айва 5ег Аіа
Зб
325 330 335
Агоу Си Зег Гуз Спи Агу Рне Агу Сіп Меї Тиг Рго СПм Спи Аа Маї 340 345 350
Азп Туг ТАг Аа Г єи ТАг І еи Аа Рго 5ег СІу І еи Авп Геи І єи ТНг 355 360 365
СПУ Ї єи Айа Рго Гуз Ттр Сіп Аа Ріє Азп Маї Маї Пе бег Авп Маї 370 375 380
Рго Сту Рго Авп Гуз Рго І єи Туг Тгтр Азп Сту Айа Агу І ви Спи Спу 385 390 395 400
Меї Туг Рго Маї 5ег Пе Рго Маї Авр Туг Аа Аа ГІ еи Авп Іе ТНг 405 до 415
Ї еи Маї Бег Туг Агу Авр Сп ГГ еи Спи Рпе Сіу Рне Тнг Аа Су Агд 420 425 430
Ага Тит Гей Рго бег Меї Сп Аг І єи І еи Азр Тут Пе Сіи Сп Спу 435 440 445
Зо
Пе Аа Си Геи Сім Гуз Аа Аа Сіпу Маї 450 455 «2105» З «2115» 459 «212» БІЛОК «213» Спготобасіевелит міоіасеит «4005 З
Меї Сіп Гуз Сп Агу ТАг Тнг Зег Сп Ттр Агу Сі Гей Ар Айа Аа 1 5 10 15
Ні Нів Геи Ні Рго Ріє ТНиг Ар Тнг Аа 5ег І ви Авп Сіп Аа Спу 20 25 Зо
Аа Ага Ма! Меї Тнг Ага Спу СіПм СпПу Ма! Туг Геи Тгр Авр Бег Спи 35 40 45
Стпу Авп Гуз Пе Пе Азр Стпу Меї Аа Су І єи Тгтр Суз Маї Авп Маї 50 55 бо
Сіу Туг спу Ага Гуз Ар РНе Аа Сім Айа Аа Агу Ага Сіп Меї Сіи 60 65 70 75 80
Сі Г еи Рго Ріє Туг Азп Тиг РНе Ре Гуз ТАг Тиг Ні Рго Аїа Маї 85 90 95 маї Сім І єи бег Зег І ей Гей Аа Спи Маї Тнг Рго Аа Спу Рпе Азр 100 105 110
Агу Маї Рпе Туг ТАг Авп 5ег Спу 5ег Спи Бег Ма! Азр Тит Ме! Пе 115 120 125
Аг9 Меї Маї Ага Аго Туг Тгр Авр Маї Сп Спу Гуз Рго Спи Гув Гув 130 135 140
Тиг Ге Пе Спіу Агу Тгтр Азп сту Туг Ніз Спу Зег Тиг Пе Спу Су 145 150 155 160
Аа 5ег Геи Спіу Сіу Меї Гуз Туг Меї Ніз Спи Сп С1у Авр І єеи Рго 165 170 175
Пе Ро Стпу Меї Аїа Ніз Пе Спи Сіп Рго Тер Тр Тут Гуз Ніз СПу 180 185 190
Зо
Гуз А5р Меї Тиг Рго Азр Спи РНе Сіу Маї Маї Аїа Аа Аг Тгр І єи 195 200 205
Сі Сім Гув Пе Геи Си Пе Спу Аа Азвр Гуз Маї Аа Аа РНе Маї 210 215 220 сСіу Спи Рго Пе Сіп Спіу АІа Спу Спу Маї Пе Маї Рго Рго Аа Тнг (225 230 235 240
Туг Тір Рго Сіи Пе Спи Ага Пе Суз Агу Гуз Туг Авр Ма! І єи Гей 245 250 255 маї Аа Азр Сіи Ма! Пе Суз Сіу Рне Сіу Ага Тнг Сіу Спи Тер Рне 260 265 270
Сіу Ні Сип Нів Рпе Сіу РНе Сіп Рго Авр ГГ еи РНе ТНг Аїйа Аїа ГГ ув 275 280 285 ам гГеи Зег Зег Спіу ТугГеи Рго Пе Сіу Аа Ма! Рне Маї Спу Гув 290 295 00
Аго Маї Аіа Сіи Спу І еи Пе Аа Сіу Спу А5р Ріє Авп Нів Спу Рпе 60 305 з10 315 з20
Зв
ТАг Туг Зег Су Нів Рго Маї Суз Аа Аїа Маї Аа Ні Аа Азп Маї 325 330 335
Аа Аїа І єи Агу Ар Сім Спу Пе Маї Сіп Аго Маї Гуз Авр Авр Іе 340 345 350
Сіу Рго Туг Меї Сіп Гуз Аго Тр Аг Сім Тиг Рпе Зег Агу РНе Си 355 360 365
Нів МаїЇ А5р Ар Маї Аго Стпу Ма! Спу Меї Маї Сіп Аа Ре Тнг Гей 370 375 380 маї Гуз Авп Гуз Аїа Гуз Агоу Си І еи Ре Рго Авр Рпе Стпу Спи Пе 385 390 395 400
Сіу Ти еи Суз Агу Авр Пе Рне РнНе Агу Авп Азвп Г єи Іе Меї Агд 405 до 415
Аа Суз Спу Авр Ніз Пе Маї 5ег Аа Рго Рго І єи Ма! Меї Тнг Аг 420 425 430
Зо
АІа Си Ма! Азр Сім Меї І єи Аа Маї Аа Суши Агу Суз І ви Сім СПИ 435 440 445
Рпе Спи Сіп ТАг ГГ еи Гуз Аа Агу Су І єи Аа 450 455 «-210» 4 «2115» 230 «212» БІЛОК «213» Реєидотопах ршіда «400» 4
Меї 5ег Рне 5ег Азп Туг ГГ уз Маї Ме Аа Меї Рго Маї І єи Маї Аа 1 5 10 15
Авп РНе Маї І єи Сту Айа Аа Тнг Аа Тгр Аа Авп Си Авп Туг Рго 20 25 зо
Аа Гуз 5ег АІа Спіу Туг Авп Сп Спу Авр Тр Маї Ага 5ег Рне Авп 35 40 45
Рпе Зег Гуз Маї Туг Ма! Спу Спи Спи Геи СПу Авр І єи Авп Маї Спу 50 55 60 60
Сіу Спу Аа Геи Рго Авп Аїа Авр Маї 5ег Пе Спіу Авп Авр ТАг ТНг 65 70 75 80
Ї еи Тиг Рпє Азр Пе Аа Туг Рне Маї 5ег 5ег Авп ЇІе Аїа Маї Авр 85 90 95
Рпе Ріє Маї Сіу Маї Рго Ага Ага Аа Гуз Рпе Сіп СПу Спи Гув 5ег 100 105 110
Пе Бег Зег І єи СПу Аг Маї Зег Сіи Маї А5р Туг Спу Рго Аа Пе 115 120 125
Ї еи Зег І єи Сіп Туг Ні Туг Авр 5ег РНе Сім Аго Гей Туг Рго Туг 130 135 140 маї Ссіу Маї Спу Маї Спу Агу Ма! Г еи Ре РНе Авр Гуз Тиг Ар Спу 145 150 155 160
Аа Гей Зег Зег РНе Азр Іе Гуз Авр Гуз Тгр Аа Рго АЇіа Рпє Сп 165 170 175
Ма! Сіу І єи Ага Туг Авр І еи Спу Авзп 5ег Тр Мей І ви Авп бЗег Ар 180 185 190
Маї Ага Туг Пе Рго РНе Гуз ТНг Азр Ма! Тиг Спу Ти ГГ еи Спу Ріо 195 200 205 маї Рго Маї Зег ТАг Гуз Пе Спи Маї А5р Рго РнНе Іе І єи Зег І єи 210 215 220
Сіу Аа 5ег Туг Ма! Ре 225 230 «2105» 5 «2115 230 «212» БІЛОК 213» Штучна послідовність «220» «223» АЇКІ «4005» 5 ма! Зег Рне 5ег Авп Туг Гуз Маї Пе Аа Меї Рго Маї І еи Маї Аіа 1 5 10 15 60 //Авп РНе Маї І єм Сту Айа Аа Тнг Аа Тгр Аа Авп Си Авп Туг Рго
20 25 Зо
Аа Гуз 5ег Аа Сіу Туг Авп Сп Спіу Авр Тгр Маї Ага 5ег Рне Авп 35 40 45
Рпе Зег Гуз Маї Туг Ма! Спу Спи Спи Геи СПу Авр І єи Авп Маї Спу 50 55 60
Сіу Спу Аа Геи Рго Авп Аїа Авр Маї 5ег Пе Спіу Авп Авр ТАг ТНг 65 70 75 80
Ї еи Тиг Рпє Азр Пе Аа Туг Рне Маї 5ег 5ег Авп ЇІе Аїа Маї Авр 85 90 95
Рпе Ріє Маї Сіу Маї Рго Ага Ага Аа Гуз Рпе Сіп СПу Спи Гув 5ег 100 105 110
Пе Бег Зег І єи СПу Аг Маї Зег Сіи Маї А5р Туг Спу Рго Аа Пе 115 120 125
Ї еи Зег І єи Сіп Туг Ні Туг Авр 5ег РНе Сім Аго Гей Туг Рго Туг 130 135 140
Зо маї Ссіу Маї Спу Маї Спу Агу Ма! Г еи Ре РНе Авр Гуз Тиг Авр Су 145 150 155 160
Аа Гей Зег Зег РНе Азр Іе Гуз Авр Гуз Тгр Аа Рго АЇіа Рпє Сп 165 170 175
Маї Су І єи Ага Туг Авр І еи Спу Авзп 5ег Тр Меї І еи Авзп бег Ав5р 180 185 190
Маї Ага Туг Пе Рго РНе Гуз ТНг Азр Ма! Тиг Спу Ти ГГ еи Спу Ріо 195 200 205 маї Рго Маї Зег ТАг Гуз Пе Спи Маї Авр Рго РНе Пе Геи 5ег І єи 210 215 220
Сіу Аа 5ег Туг Ма! Ре 225 230 «210» 6 «211» 446 «212» БІЛОК 213» Штучна послідовність 60 ді
«223» ЕАРІ «-4005» 6
Меї Зег Сип Гуз ТНАг І еи Рне Тнг Гуз зег Аа І єи Аа Маї Аїа Маї 1 5 10 15
Аа єи Пе 5ег ТАг Сп Аа Тгр 5ег Аа Спіу РНе Сіп Гей Авп Си 20 25 Зо
Рпе 5ег бег Зег С1у І єи Спу Агу Айїа Туг 5ег СПу Спи Спу Айа Пе 35 40 45
Аа Авр Авр Ага Су Авп Маї 5ег Агу Авп Рго Аа ГГ еи Пе Тиг Меї 50 55 бо
Рпе Авр Аг Рго Тнг РНе Зег Аа Сіу Аа Маї Туг Пе Авр Рго Авр 65 70 75 80 маї Авп Пе Зег Спу ТНг Зег Рго Зег Спу Агу 5ег І єи Гуз Аа Азр 85 90 95
ЗО Авп Їе Аа Рго ТНг Аа Тр Маї Рго Азп Меї Ні Рнеє Маї Аа Рго 100 105 110
Пе Авп Ар СіІп Рпе Сту Ттр Сіу Аа 5ег Пе ТНг Зег Азп Туг Спу 115 120 125
Ї еи Аіа Тнг Сім Ре Авп Азвр ТНг Туг Аа Спу Спу Зег Ма! СІу СПу 130 135 140
Тиг Тиг Авр ГГ еи Спи Тнг Меї Авп І єи Авп ГГ еи Зег Спу Аа Туг Ага 145 150 155 160
Ї еи Авп Авп Аа Тр 5ег РНе Су І єи Спіу Рнеє Азвп Аа Маї Туг Аа 165 170 175
Аг Аа Гуз Пе Спи Ага РНе Аїа Сіу Авр І єи Стпу Сп І еи Маї Аа 180 185 190
Сіу Сп Пе Меї Сп 5ег Рго Аа Сіу СПп Ти Сп Сп Спту Слп Аїйа 195 200 205
Ї еи Аа Аа Тниг Аа Авп Су Пе Авр Зег Азп ТНг Гуз Те Аїа Нів 210 215 220 бо
Ї еи Авп апу Авп Сп Ттр Сіу РНе Сіу Тгр Авп Аїа Су Пе І єи Туг 225 230 235 240
Сі Геи Авр Гуз Авп Авп Аг Туг Ага Геи ТАг Туг Ага Зег Сім Маї 245 250 255
І уз Пе Авр Ре Гуз Сіу Азп Туг бег бег Авр І єи Азп Агу Аа Рпе 260 265 270
Азп Авп Туг Су Г еи Рго Пе Рго Тнг Аа Тнг Стпу Спу Аа Тнг Сп 275 280 285 зЗег Сіу ТугІ и ТАг І еи Авп ГГ еи Рго Сіи Меї Тгтр Сім Ма! Зег Сіу 290 295 З00
Туг Авп Агу Маї Авр Рго ап Тр Аа Іе Ні Туг 5ег І єи Аа Туг 305 з10 315 320
Тпиг Зег Тр Зег Сп Ріє ап Сп І єи Гуз Аа Тнг Зег ТНиг Зег Спу 325 330 335
З0 /Авр ТгГ єи Ре Сп Гуз Ні Спи Спу Рпе Гуз Азвр Аїа Туг Ага Пе 340 345 350
Аа Гей Сіу Ти Тнг Туг Тут Туг Авр Авр Авп Тр Тиг Ре Ага ТНг 355 360 365
Су Пе Аа Ріе Авр Авр 5ег Рго Маї Рго Аа Сіп Авп Агу 5ег Пе 370 375 380 зЗег Пе Рго Авр Сп Авр Аг Ре Ттр І єи 5ег Аа Сіу Тит ТНг Туг 385 390 395 400
Аа Ре Авп Гуз Авр Аа 5ег Ма! Азр Маї Спу Ма! Зег Туг Меї Нів 405 до 415 сапу ап Бег Маї Гуз Пе Авп Сіи Спу Рго Туг Сп Рпе Сім Бег Спи 420 425 430
Стпу Гуз Аа Тгр І єи Рне Сіпу ТНиг Авп РНе Азп Туг Аіа Рпє 435 440 445 -2105 7 «2115 7387 60 0о«2125 ДНК
213» Штучна послідовність «223» вектор рРСОЕ--айО Ес-мев5 Нене й «4005 7 сдддаїсісд асдсісіссс Падсдасі ссідсдаша дддааададс айшдісада бо азашаацда дсдссідіса сшдсіда їаіаїдадаа Пашаасс Пайаааїда 120 7 даааааадса асдсасша ааїаадаїас дапосіні сданодаїда асассіаїаа 180
Нааасіаї!ї саїстанаї Паїданії ноїагатас аайацісіадшонааа 240 дадаайнаад аааайааагс іІсдааааїаа іааадддааа аїсадіції даіаїсаааа й 300
Нагасаці саасдаїааї асааааїаа аїасааасіа іІдааданасадіаша збо паюсаїй адааїассії Поїдісдсс спансдас іІсссіаїадааднсостанй 420 7 сістадааад іагаддаасі іІссснсаїй Нддаїссаа Подідадсдд аїаасааца 480 сдадсісаї дсасадщдаї сдасасщії дасаанааї саїсодсіса іїазїаайіді 540 дададюдаа паїдадсодс ісасаайсс асаасодій сссісіадаа аїаайшої 600
Нпаасаддад діаааасаїа юнаасоадс ашіаїаса Шодоадна сдадасдас 660 даасасдсаї Шадада аадаанйдаа даадацші9до спаассоН ааїсссдсдда 720 т сонссдасяа дадаїсаасс сідассона ісааїсісід діадаїаці ндадсадіє 780 ддісасасас їасдссодаїс аассідсой ідааїгаю дадоаддіааїдасссся 840 саадсіддаа даасдсадієс дсдсушос сдспашо саасаадда ддаодсідаа 900 даааддсдаї сдсуносаї даїдаюсс їаашайно саагаіссод ідодсосідн 0960 щасашоа соїдссддда даїсдісодї ааасойаас ссойоіага ссссдсоающа 1020 т дсидадсаї садснаасо аїадсддсдс аїсддсдай одНаїсоідісіаасшос 1080
Іїсасасасід дааааадща одаїаааас сдссунсад сасдіаайс Ідасссоїтаї 1140 адддсдаїсад сіаісіасдуд сааааддсас ддіадісааї Нсууноца аайасаїсаа 1200 дсЯшодід ссдааайасс аїсідссада дссацшса Шсаїадсо сасідсаїаа 1260 сддсіасс9д9 аїдсадіасу іІсааасссда асіддідссу даадашад снйсідса 1320 й аїасассддс ддсассасід дідщаосодаа аддсосдаїд сідасісасс дсаайадсі 1380 додсдаассід даасадона асдсдассіа ддіссосід Носаїссдуд дсааададсі 1440 ддащдшащдасо дсоусідссдс шіагсасаї Шосссід ассанаасі дссідсідй 1500 їаїсдаасід ддаідддсада ассідсцаї сасіаасссу сдсдаїайс саддуноді 1560 о аааададна дсдаааїаїс сошассодс іаїсасддас оПаасассі днсааєс 1620 днасдаас аагааадацді Ііссадсадсі ддашсісс адісідсаїс Шсосдсада 1680 сддаюоддагд ссадіюсадс аадідддас ададсонда дідааасюда ссодасадціа 1740 сосіддаа ддсіаасс НМассдадід дсдссосід дісадсоца асссазаюа 1800 тайдайаї сатадюдіа дсаїсддн дссддідссо ісдасодаад ссааасідді 1860 ддаюагюдаї даїаадаад іассассадо іІісаассдддаї дадсшої9 саааддасс 1920 7 дсадащдагд сідадовнасі ддсадсдісс сдадсіасс даїдаааїса їсааааа(їдд 1980 сідднНасас ассддсдаса Ісдсддіааї ддадаадаа ддайнссідс дсайдієда 2040 ісдіаааааа дасащдаїйс їддшссодо ІШаасодіс іаїсссаасд адайдаада 2100
Ідісдісаїд садсаїссід дсдіасадда адісдсддсі айддсодіас спссддсіс 2160 садюдідаа дсддідаааа Іспсдіаді даааааадаї ссаїсдсна ссдаададіє 2220 7 асюдіщдасі шшщоссосс дісадсісас дддаїасааа діассдаадс щаддади 2280 їсддадад Нассдаааї сіаасдісду ааааайно сдасдадаасіасодідасда 2340 адсасдсддс ааадіддаса агааадссід адсдаансяо даїссаїдса садідаааїс 2400 ащдааааай їашодснй аїдадсодаї аасаайцага агадсаїдсі ддісадіай 2460 дадсдаїдса гдсасоддийї сссісіадаа аїааншої Наасіша ддаддіаааа. 2520 т ассадддіа дсісісасса Ісаїсаїсаї сасадсісід дссідунНос дсосоадісс 02580 сасаюдасас сдсідадссс ддісдаїсаа аїсцсіді ддсіддадаа дсдісадсад 2640 ссдаюдсасо ісдаїдаосії дсасашіс адсісссід аїдасодсада сосдаадіаї 2700 ащдассдадс дасосадса асідсдідса іасдсдасос сдсаддсасс айсаассяї 2760 соссідсдіс адсасда9да ссопПасіа! дддасассо адсісаді сдассюдад 2820 т саїсацшіс дісасдаадс дсідссдааа ссодддісдса Нсодсдаасіойддсссас 2880 оанадсосд9у адсайсіаа Ісюаддаї сотюаасаоїс сдашідада дідссаїсід 2940 аїсдаадоса іссоїддіса ссушсодсо дШасіаса аддсосаїса сютайсід 000 дасдащіад ссдссаїдсо їаїдщюсоїо аааїссіаса дсцдаїсс дассдсаасу 3060 дадаїдссдс сдашодос їаїсадсааа дасоцассс сдосісдіда аасісаадса 3120 й ссдосадсодад дідассідої дсасісссід Ісссадсда Подададаїос соддісдісаа 3180 сіддсдасся іІсссдасссі дайсдідад сідддсаааа аспосідаа ддсодсуідас 3240 дасісщасд сдддісєдаї Шісдсосі ссдссаадса псідаасса асдсаїсасс 3300 ддіадссдсес дішосоддс дсададсіас дсапддаас дсшаадос даїсдаїаад 3360 о дсанссадо сіасдоцаа сдашідаю сідасодідї дсдунссос асідсдаіаас 3420 ташосща дссдссаадс ссідссддаї саассасща Посааїдос сссіаїдадс 3480 аїссдісаду асдаїадсда садсддсааї садаїсдсда ідаїссіддс дааісідддс 3540 асссасаїсд сддасссдаді ссдісдша даасідасдс аадсаадсудсісдсдададс 3600 ааададсдсі Іссдісадаї дасдссддаа даддсадіда асіаїассодс дсідасссід 3660 дссссдадса дісідааїсі дсюасадаї Подссссда ааддсадос сіисааціс 3720 7 дюдайадса асунссадд сссдааїаад ссдсідіасі ддаасддідс дсодссіддаа 3780 додсадіаїс сддашеїтаї Іссіісодаї їіаїдсдоасаї Юааїаїсас ісідунадс 3840 ассддас аасіддаай юдисасс одсаїдісдсс діасссідсс дісдадсаа 3900 соісіднода апйасанда дсааддсай дссдадсіду адааадсодс ідосоїдіаа 3960 сісдадаїсд аадасдсааї аасіадсаїа ассссндда дссісіааас ддаїсйдад 4020 7 дсісдадісї ддіааадааа ссдсідсідс дзааашоаа сдссадсаса Юддасісдіє 4080 тТастіадсдса дсНаанаа ссіадоасідс їдссассдсі дадсааїаасіадсаїаасс 4140 ссцПдддасс ісіааасддо Іісйдадада шШщшосід ааассісадд сашдадаа 4200 дсасасодіс асасідсійс сддіадісаа іІааассодіа аассадсааї адасаїаадс 4260 додсташаа сдасссідсс сідаассдас дассоддадіса ісдіддссда аїсйдсдудс 4320 т сссісддсії даасдаацо Надасана Шодссдасі асснддіюа ісісдссй 4380 сасдіадідо асааайсії ссаасюдаїс їдсдсдсдад дссаадсдаї снпснснЯ 4440
Іссаадаїаа дссідісіад сисаадіаї дасдддсіда їасідддссу дсаддсосіс 4500 сайдсссаяд іІсддсадсда саїссйсодд сасдаїшо ссдоунНасід сосідіасса 4560 аадсдддас аасдіаадса сіасацшся сісаїсдсса дсссадісдд асадсдади 4620 т ссаїадсдії ааддшсаї Падсодссіс ааагадаїсс ідйсаддаа ссддаїсааа 4680 дадіїссісс дссоасіддас сіассааддс аасодсіаїді ісісйуси ндісадсаа 4740 даїадссада ісааїдісда ісаїддсідо сісдаадайа ссідсаадаа ідісайосо 4800 сідссансі ссааайдса діисдсодсії адсіддаїаа сдссасддаа ідаїдісцдіє 4860 дюсасааса аддюасії сіасадсдсод дадааїсісяо сісісіссад дддаадссда 4920 й адшссааа аддісойоа ісааадсісо ссосонаї Ісаїсаадсс Насддісас 4980 сдіаассадс аааїсааїаї сасідідїду сисадоассо ссаїссасід сададссоїа 5040 сааащіасд дссадсаасо іІсдайсдад ашдаососісо аїдасдссаа сіассісіда 5100 таанодацдіс дазаснсода сдаїсассдс Псссісаїа сісйссц йсааїаца 5160 о пдаадсаїй гаїсададії андісісаї дадсддатас аїайдаа діашадаа 5220 аааїааасаа аїадсіадсі сасісддісо сіасосіссоа досоїдадасідсддсддудс 5280 дсідсддаса саїасаааді Іасссасада пссдддаї аадсаддода сіаасайід 5340 аддсааааса дсаддассдс дссоадіддсуд НШссаїа досіссдсссіссідссада 5400 дисасаїаа асадасодсії Нссдаїоса ісідідддад ссаїдаддсі саассаюаа 5460
Ісідасадіа сдддсдааас ссдасаддас Нааадаїсс ссассушс садсдодісд 5520 7 сісссісцо сдсісіссід Нссдасссії дссудашасс ддаїассідііссдссніс 5580 їсссйасду даадіддас дошсісаї адсісасаса сідаїаїсіс ддсісдоаіді 5640 аддісднсд сіссаадсід досідіаадс аадаасіссс сойсадссс дасідсідсд 5700 сеНаїссдд їІаасідійса сндадісса асссддаааа дсасодіааа асдссасідд 5760 садсадссаї їддіаасіду дадіїсдсад аддашой їіадсіаааса сдсдоанусі 5820 7 спдаадідї дсдссааадії ссоддсіасас ї(ддааддаса дзашоаона сідідсісїд 5880 сдааадссад Нассасдді їІаадсаднс сссаасідас Наассійсо аїсааассас 5940 сіссссадді дданінсоу Шасаддас ааааданас дсосадаааа аааддаїсіс 6000 аадаадаїсс Шоаїсії істасюдаас сосісіадаї Нсадіосаа Шаїсісй 6060 сааащіадс ассідаацдіс адссссаїас даїаїаацдії діаайсіса юНадісаї 6120 т дссссдсдсс сассддаадо адсідасща ойоаадосі сісааддоса ісддісдада 6180
Ісссдддсс їааїдадюа дсіааснас айаацоса Пососісасідсссдсш 6240 ссадсоддда аассідісді дссадсідса Наагдааїс ддссаасодсод сддададачя 6300 сдашосої айдддсодсс ададідаш цсшсас садідадасу ддсаасадсі 6360 даносссії сассдссідуд сссюадада айосадсаа дсоддіссасо сіддшосс 6420 т ссадсадаоасяа ааааїссіді Ндаюаїдао Наасоддсодо дагаіаасаї дадсідісн 6480 соддіаїсдіс діаїсссасі ассдадайді ссдсассаас дсдсадсссо дасісддіаа 6540 ддсодсодсаї їдсдсссадс дссаїсідаї сондоасаас садсаїсоса дідддаасда 6600
Ідсссісай садсашос а(ддщшой даааассдда саїддсасіс садісдссії 6660 сссойссодс їаїсддсіда ашданос дадідадаїа Шадссад ссадссадас 6720 й дсадасдсдс сдадасадаа снаацддс ссдсіаасад сасдашосддідассса 6780 адсдассад ашдсіссасд сссадісодсо їассадїсійс аїдддадааа аїааїасіді 6840
Шайюддащі сюдісадад асаїсаадаа аїаасдсс9д9у аасацадід саддсадсії 6900 ссасадсааї досаїссідд Ісаїссадсо даїаднааї даїсадссса сідасдсун 6960
Бо дсдсдадаад апдідсасс дссосшШас аддсісдас дссоуснсдіісіассаїсд 7020 асассассас дсюдсассс аднодаїсоад сдсдадац ааісдссудсудасаашося 7080 асдасодсод саддассада сіддаддіда саасдссааї садсаасдасідшШосссЯ 7140 ссаднона їдссасдсддо Ндадаайції аайсадсіс сдосаїсдсс дсносаси 7200
Шесссодсодї Шсодсадаа асдщдасіда ссіддісас сасдсдоддаа асоддісідаї 7260 аададасасс досаїасісї дсдасаїсодї аїаасуцас ддшсаса Псассассс 7320
Щдаайодасі сіспсс9додд содсіаїсаїд ссаїассдсуд ааадашіо сдссайсда 7380 тдаїіс 7387

Claims (8)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Клітина мікроорганізму для одержання естеру о-функціоналізованої карбонової кислоти з ундекану й/або додекану, де клітина є генетично модифікованою для збільшення експресії відносно клітини дикого типу АїЇКВ-алкангідроксилази й синтази воску-естеру, де АЇКВ- алкангідроксилаза має амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО:1 і синтаза воску-естеру має амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:2, де клітина генетично модифікована для збільшення експресії відносно клітини дикого типу ферменту, здатного до перетворення естеру о-оксоалканової кислоти на відповідний естер о- аміноалканової кислоти, де вказаний фермент являє собою о-трансаміназу під ЕС 2.6.1; і де клітина не містить вже існуючої генетичної модифікації, яка збільшує експресію відносно клітини дикого типу одного з наступних ферментів, вибраних із групи, що включає: - адил-АСР-тіоестеразу під ЕС 3.1.2.14 або ЕС 3.1.2.22, - ацил-КоА-тіоестеразу під ЕС 3.1.2.2, ЕС 3.1.2.18, ЕС 3.1.2.19, ЕС 3.1.2.20 або ЕС 3.1.2.22, - адил-КоА:АСР-трансацилазу, - полікетидсинтазу й - синтазу гексанової кислоти.
2. Клітина за п. 1, де вказана клітина являє собою БЕ. соїї.
3. Клітина за будь-яким із попередніх пунктів, де клітина додатково генетично модифікована для збільшення експресії відносно клітини дикого типу ацил-КоА-синтетази під ЕС 6.2.1.3 або ЕС
2.3.1.86.
4. Спосіб одержання естеру о-функціоналізованої карбонової кислоти, де спосіб включає стадію приведення клітини за будь-яким із пп. 1-3 в контакт з ундеканом й/або додеканом.
5. Спосіб зап. 4, де - естер Ф-функціоналізованої карбонової кислоти являє собою метиловий естер 12- амінолауринової кислоти, метиловий естер 12-гідроксилауринової кислоти, метиловий (ді)естер 12-карбоксилауринової кислоти й/або метиловий естер лауринової кислоти з додекану; й/або - естер Фо-функціоналізованої карбонової кислоти являє собою метиловий естер 11- аміноундеканової кислоти, метиловий естер 11-гідроксіундеканової кислоти, метиловий (діестер 11-карбоксіундеканової кислоти й/або метиловий естер ундеканової кислоти з ундекану.
6. Спосіб одержання естеру Ф-функціоналізованої карбонової кислоти з ундекану й/або додекану, де спосіб включає приведення АЇКВ-алкангідроксилази й синтази воску-естеру в контакт з ундеканом й/або додеканом, і де АЇКВ-алкангідроксилазу й синтазу воску-естеру приводять у контакт з ундеканом й/або додеканом у формі клітини, генетично модифікованої для збільшення експресії відносно клітини дикого типу АІКкКВ-алкангідроксилази й синтази воску- естеру, де АЇІКкВ-алкангідроксилаза має амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО:1 і синтаза воску-естеру має амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:2, де клітина генетично модифікована для збільшення експресії відносно клітини дикого типу ферменту, здатного до перетворення естеру о-оксоалканової кислоти на відповідний естер о- аміноалканової кислоти, де вказаний фермент являє собою о-трансаміназу під ЕС 2.6.1; і де клітина не містить вже існуючу генетичну модифікацію, яка збільшує експресію відносно клітини дикого типу одного з наступних ферментів, вибраних із групи, що включає: - адил-АСР-тіоестеразу під ЕС 3.1.2.14 або ЕС 3.1.2.22, - ацил-КоА-тіоестеразу під ЕС 3.1.2.2, ЕС 3.1.2.18, ЕС 3.1.2.19, ЕС 3.1.2.20 або ЕС 3.1.2.22, бо - адил-КоА:АСР-трансацилазу,
- полікетидсинтазу й - синтазу гексанової кислоти.
7. Спосіб за п. 6, де клітина являє собою Е. сої).
8. Спосіб зап. 6 або п. 7, де - естер о-функціоналізованої карбонової кислоти являє собою метиловий естер 12- амінолауринової кислоти, метиловий естер 12-гідроксилауринової кислоти, метиловий (ді)естер 12-карбоксилауринової кислоти й/або метиловий естер лауринової кислоти з додекану; й/або - естер Фо-функціоналізованої карбонової кислоти являє собою метиловий естер 11- аміноундеканової кислоти, метиловий естер 11-гідроксіундеканової кислоти, метиловий (діестер 11-карбоксіундеканової кислоти й/або метиловий естер ундеканової кислоти з ундекану.
UAA201611957A 2015-11-25 2016-11-25 БІОТЕХНОЛОГІЧНЕ ОДЕРЖАННЯ <font face="Symbol">w</font>-ФУНКЦІОНАЛІЗОВАНИХ КАРБОНОВИХ КИСЛОТ І ЇХНІХ ЕСТЕРІВ UA127099C2 (uk)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP15196180 2015-11-25

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA127099C2 true UA127099C2 (uk) 2023-04-19

Family

ID=54770815

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201611957A UA127099C2 (uk) 2015-11-25 2016-11-25 БІОТЕХНОЛОГІЧНЕ ОДЕРЖАННЯ <font face="Symbol">w</font>-ФУНКЦІОНАЛІЗОВАНИХ КАРБОНОВИХ КИСЛОТ І ЇХНІХ ЕСТЕРІВ

Country Status (15)

Country Link
US (1) US10913960B2 (uk)
EP (1) EP3173478A1 (uk)
JP (2) JP6925118B2 (uk)
KR (1) KR20170061088A (uk)
CN (1) CN107034246A (uk)
AR (1) AR106816A1 (uk)
AU (1) AU2016262715B2 (uk)
BR (1) BR102016027703A2 (uk)
CA (1) CA2949410A1 (uk)
MX (1) MX2016015380A (uk)
MY (1) MY191006A (uk)
RU (1) RU2751363C2 (uk)
SG (2) SG10201609831UA (uk)
TW (1) TWI790195B (uk)
UA (1) UA127099C2 (uk)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2803208T3 (es) 2015-12-17 2021-01-25 Evonik Operations Gmbh Una célula acetogénica genéticamente modificada
WO2018019867A1 (en) 2016-07-27 2018-02-01 Evonik Degussa Gmbh N-acetyl homoserine
CN109486784B (zh) * 2018-11-30 2020-06-09 江南大学 一种能催化西他沙星五元环关键中间体的ω-转氨酶突变体

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU8498298A (en) * 1997-07-21 1999-02-10 E.I. Du Pont De Nemours And Company Transformed yeast strains and their use for the production of monoterminal and diterminal aliphatic carboxylates
RU2376868C2 (ru) * 2003-01-17 2009-12-27 Даниско А/С Способ
JP5357011B2 (ja) 2006-05-11 2013-12-04 エヴォニク インダストリーズ アーゲー 遺伝的に操作された微生物株を用いる、スフィンゴイド塩基の改善された生産
CA3035878C (en) * 2007-03-28 2023-01-03 REG Life Sciences, LLC Enhanced production of fatty acid derivatives
DE102007052463A1 (de) 2007-11-02 2009-05-07 Evonik Degussa Gmbh Fermentative Gewinnung von Aceton aus erneuerbaren Rohstoffen mittels neuen Stoffwechselweges
DE102007060705A1 (de) 2007-12-17 2009-06-18 Evonik Degussa Gmbh ω-Aminocarbonsäuren oder ihre Lactame, herstellende, rekombinante Zellen
DE102008040193A1 (de) 2008-07-04 2010-01-07 Evonik Röhm Gmbh Verfahren zur Herstellung freier Carbonsäuren
DE102009000661A1 (de) 2009-02-06 2010-08-12 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur Herstellung von 2,6-Dioxabicyclo-(3.3.0)-octan-4,8-dion[1S,5S]
DE102009009580A1 (de) 2009-02-19 2010-08-26 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur Herstellung freier Säuren aus ihren Salzen
US8158391B2 (en) 2009-05-06 2012-04-17 Dna Twopointo, Inc. Production of an α-carboxyl-ω-hydroxy fatty acid using a genetically modified Candida strain
ES2707747T3 (es) 2009-09-25 2019-04-04 Reg Life Sciences Llc Producción de derivados de ácidos grasos
DE102009046623A1 (de) 2009-11-11 2011-05-12 Evonik Röhm Gmbh Verwendung eines zu einem MeaB-Protein homologen Proteins zur Erhöhung der enzymatischen Aktivität einer 3-Hydroxycarbonsäure-CoA-Mutase
DE102009046626A1 (de) 2009-11-11 2011-05-12 Evonik Degussa Gmbh Candida tropicalis Zellen und deren Verwendung
DE102010015807A1 (de) 2010-04-20 2011-10-20 Evonik Degussa Gmbh Biokatalytisches Oxidationsverfahren mit alkL-Genprodukt
DE102011110946A1 (de) 2011-08-15 2016-01-21 Evonik Degussa Gmbh Biotechnologisches Syntheseverfahren von omegafunktionalisierten Carbonsäuren und Carbonsäure-Estern aus einfachen Kohlenstoffquellen
ES2678647T3 (es) * 2011-09-27 2018-08-14 Exxonmobil Research And Engineering Company Acil-ACP sintasas de éster de cera
EP2944697A1 (en) * 2014-05-13 2015-11-18 Evonik Degussa GmbH Method of producing nylon

Also Published As

Publication number Publication date
JP7186261B2 (ja) 2022-12-08
TWI790195B (zh) 2023-01-21
BR102016027703A2 (pt) 2017-05-30
SG10202002995VA (en) 2020-05-28
TW201739914A (zh) 2017-11-16
JP2021129603A (ja) 2021-09-09
US20170145448A1 (en) 2017-05-25
CA2949410A1 (en) 2017-05-25
JP2017140015A (ja) 2017-08-17
EP3173478A1 (en) 2017-05-31
RU2016146334A (ru) 2018-05-28
MX2016015380A (es) 2017-05-24
US10913960B2 (en) 2021-02-09
KR20170061088A (ko) 2017-06-02
AU2016262715A1 (en) 2017-06-08
RU2751363C2 (ru) 2021-07-13
AU2016262715B2 (en) 2022-12-22
CN107034246A (zh) 2017-08-11
MY191006A (en) 2022-05-27
RU2016146334A3 (uk) 2020-04-30
JP6925118B2 (ja) 2021-08-25
AR106816A1 (es) 2018-02-21
SG10201609831UA (en) 2017-06-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Crépin et al. Metabolic engineering of Cupriavidus necator for heterotrophic and autotrophic alka (e) ne production
KR101814888B1 (ko) 5-아미노레불린산 고수율 균주 및 이의 제조방법과 응용
CN105813625A (zh) 生产酰基氨基酸的方法
US9005953B2 (en) Recombinant microorganism having butanol production capacity and butanol production method
ES2905957T3 (es) Expresión funcional de monooxigenasas y métodos de uso
US8524472B2 (en) Method for producing 2-butanol and recombinant microorganism having 2-butanol production capacity
Liang et al. Constructing an ethanol utilization pathway in Escherichia coli to produce acetyl-CoA derived compounds
CN109536398A (zh) 用于产量增加的方法中的重组体微生物
CN105492616A (zh) 使用含有可通过丙酸盐诱导的ilvbn操纵子的重组棒杆菌生产L-亮氨酸、L-缬氨酸、L-异亮氨酸、α-酮异戊酸、α-酮-β-甲基戊酸或α-酮异己酸的方法
Drejer et al. Methanol-based acetoin production by genetically engineered Bacillus methanolicus
WO2007047680A2 (en) Increasing the activity of radical s-adenosyl methionine (sam) enzymes
TW201217536A (en) Method for preparing alpha-ketopimelic acid by C1-elongation
JP7186261B2 (ja) ω－官能化カルボン酸及びそのエステルの生物工学的な製造
US20220112526A1 (en) Biosynthesis of vanillin from isoeugenol
Zhang et al. Bioconversion of methanol into value-added chemicals in native and synthetic methylotrophs
JP2017517258A (ja) アシルアミノ酸の生合成による製造
US20210292799A1 (en) Biotechnological production of cannabinoids
WO2020069142A1 (en) Optimized expression systems for expressing berberine bridge enzyme and berberine bridge enzyme-like polypeptides
CN109295085A (zh) 一种生产乳酸和3-羟基丁酸共聚酯的基因工程菌及其构建方法和应用
US20220112525A1 (en) Biosynthesis of vanillin from isoeugenol
WO2021042057A1 (en) Systems and methods for preparing cannabinoids and derivatives
Pérez-García et al. From brown seaweed to a sustainable microbial feedstock for the production of riboflavin
Jiang et al. Raising the production of phloretin by alleviation of by-product of chalcone synthase in the engineered yeast
KR100702728B1 (ko) 환상 뎁시펩티드 합성효소 및 그의 유전자 및 환상뎁시펩티드의 대량생산계
WO2023150538A1 (en) Methods of producing hydroxytyrosol