UA119046C2 - Модулятор фактора в комплемента - Google Patents

Модулятор фактора в комплемента Download PDF

Info

Publication number
UA119046C2
UA119046C2 UAA201603969A UAA201603969A UA119046C2 UA 119046 C2 UA119046 C2 UA 119046C2 UA A201603969 A UAA201603969 A UA A201603969A UA A201603969 A UAA201603969 A UA A201603969A UA 119046 C2 UA119046 C2 UA 119046C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
segment
antisense
sugar
nucleosides
wing
Prior art date
Application number
UAA201603969A
Other languages
English (en)
Inventor
Тамар Р. Ґросман
Майкл Л. МакКелеб
Ендрю Т. Вот
Сьюзан М. Фреєр
Original Assignee
Айоніс Фармасьютикалз, Інк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Айоніс Фармасьютикалз, Інк. filed Critical Айоніс Фармасьютикалз, Інк.
Publication of UA119046C2 publication Critical patent/UA119046C2/uk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1137—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12Y304/21047—Alternative-complement-pathway C3/C5 convertase (3.4.21.47), i.e. properdin factor B
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/10—Type of nucleic acid
    • C12N2310/11—Antisense
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
    • C12N2310/315—Phosphorothioates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
    • C12N2310/321—2'-O-R Modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
    • C12N2310/323—Chemical structure of the sugar modified ring structure
    • C12N2310/3231—Chemical structure of the sugar modified ring structure having an additional ring, e.g. LNA, ENA
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/33—Chemical structure of the base
    • C12N2310/334—Modified C
    • C12N2310/3341—5-Methylcytosine

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Amplifiers (AREA)
  • Optical Communication System (AREA)

Abstract

Винахід належить до сполуки, що здатна інгібувати експресію фактора В комплемента (CFB), яка містить модифікований олігонуклеотид, що складається з 20 зв'язаних нуклеозидів, що має послідовність нуклеотидних основ, яка складається з будь-якої з SEQ ID NO: 440, 198, 228, 237, 444, 448, 450, 453 і 455, або 16 зв'язаних нуклеозидів, що має послідовність нуклеотидних основ, яка складається з SEQ ID NO: 549 або 598, при цьому зазначений модифікований олігонуклеотид містить: геп-сегмент, що складається зі зв'язаних дезоксинуклеозидів; сегмент 5'-крило, що складається зі зв'язаних нуклеозидів; і сегмент 3'-крило, що складається зі зв'язаних нуклеозидів; при цьому геп-сегмент розташований між 5'-сегментом-крилом і 3'-сегментом крилом, і при цьому кожен нуклеозид кожного сегмента-крила містить 2'-O-метоксіетил-цукор або cEt-цукор; при цьому кожен міжнуклеозидний зв'язок являє собою фосфоротіоатний зв'язок, і при цьому кожен цитозин є 5-метилцитозин Також винахід стосується композиції, що містить заявлену сполуку, способу лікування заявленою сполукою захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента та застосування заявленої сполуки в лікуванні захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента.

Description

активації комплемента та застосування заявленої сполуки в лікуванні захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента.
Перелік послідовностей
Дана заявка подана разом з переліком послідовностей в електронному форматі.
Зазначений перелік послідовностей надано у вигляді файлу під назвою
ВІОГО183УМО5ЕО 5Т25.хХі, створеного 11 вересня 2014 року, розмір якого становить 225 Кр.
Інформація, що міститься в переліку послідовностей в електронному форматі, включена в даний опис за допомогою посилання у повному обсязі.
Галузь техніки
В даних варіантах реалізації запропоновані способи, сполуки і композиції для лікування, запобігання або полегшення захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента, шляхом введення суб'єкту інгібітору, специфічного по відношенню до фактора В комплемента (СЕВ).
Рівень техніки
Система комплемента являє собою частину вродженої імунної системи господаря, залучену до лізису чужорідних клітин, посилення фагоцитозу антигенів, агрегації антигеннесучих агентів і залучення макрофагів і нейтрофілів. Система комплемента підрозділяється на три шляхи активації-класичний, лектиновий і альтернативний шляхи- які сходяться до компонента С3 з утворенням ферментного комплексу, відомого як С3- конвертаза, який розщеплює ССЗ на СЗа і С3Б. СЗр зв'язується з СЗ-конвертазою, яка опосередкується СЕВ, і призводить до утворення С5-конвертази, яка розщеплює С5 на Сба і С5р, який ініціює шлях формування мембраноатакуючого комплекса, що призводить /- до формування мембраноатакуючого комплекса (МАС), що містить компоненти С5р, Сб, 07, С8 ії сС9.
Зазначений мембраноатакучий комплекс (МАС) утворює трансмембранні канали та руйнує фосфоліпідний бішар цільових клітин, приводячи до їх лізису.
У гомеостатичному стані альтернативний шлях є безперервно активованим на низькому «холостому» рівні внаслідок активації альтернативного шляху спонтанним гідролізом СЗ і утворенням СЗБ, який генерує С5-конвертазу.
Короткий опис винаходу
Система комплемента опосередковує вроджений імунітет і відіграє важливу роль в нормальній запальності реакції на пошкодження, але її дисрегуляція може призводити до
Зо важкого пошкодження. Активація альтернативного шляху активації комплемента на рівні вище конститутивного «холостого» рівня може призводити до необмеженої гіперактивності і проявлятися у вигляді захворювань, зв'язаних з дисрегуляцією комплемента.
Деякі варіанти реалізації, представлені в цьому документі, відносяться до способів лікування, запобігання або полегшення захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента, у суб'єкта шляхом введення |інгібітору, специфічного по відношенню до фактора В комплемента (СЕВ). Деякі варіанти реалізації, представлені в цьому документі, відносяться до способу інгібування експресії СЕВ у суб'єкта, який страждає від або у якого присутній ризик розвитку захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента, шляхом введення зазначеному суб'єкту СЕВ-специфічного інгібітору. В деяких варіантах реалізації спосіб зменшення або інгібування накопичення відкладень СЗ в оці суб'єкта, який страждає від або у якого присутній ризик розвитку захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента, включає введення зазначеному суб'єкту, СЕВ-специфічного інгібітору. В деяких варіантах реалізації спосіб зменшення або інгібування накопичення відкладень СЗ в нирці суб'єкта, який страждає від або у якого присутній ризик розвитку захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента, включає введення зазначеному суб'єкту СЕВ-специфічного інгібітору.
Детальний опис винаходу
Слід розуміти, що як вищенаведений загальний опис, так і наступний докладний опис носять лише ілюстративний і пояснювальний характер, і не обмежують заявлений винахід.
В даному описі використання однини включає множину, якщо спеціально не вказано інше.
В даному описі використання «або» означає «та/або», якщо не вказано інше. Більш того, вживання терміна «що включає (що містить)», а також інших форм, таких як «включає (містить)» і «включений (міститься)», не є обмежуючим. Крім того, такі терміни, як «елемент» або «компонент», включають як елементи і компоненти, що містять одну одиницю, так і елементи і компоненти, що містять більше однієї субодиниці, якщо спеціально не вказано інше.
В даному описі заголовки розділів наведені тільки для цілей організації і не обмежують описаний об'єкт винаходу. Зміст всіх документів або частин документів, наведених у даній 60 заявці, включаючи, але не обмежуючись ними, патенти, заявки на патент, статті, книги та монографії явним чином включено в даний опис за допомогою посилання у відношенні частин, а також повного документа, розглянутого в даному описі.
Якщо не вказано інше, наступні терміни вживаються у наступному значенні:
Термін «2-О-метоксіетил» (також 2-МОЕ їі 2-О(СНеге)-ОСНз) відноситься до 0О- метоксиетильної модифікації в положенні 2 фуранозного кільця. 2'-О-метоксіетил- модифікований цукор являє собою модифікований цукор.
Термін «2-МОБЕ-нуклеозид» (також 2'-О-метоксиетилнуклеозид) означає нуклеозид, що містить 2-МОЕ-модифіковану цукрову групу.
Термін «2'-заміщений нуклеозид» означає нуклеозид, що містить замісник в 2'-положенні фуранозильного кільця, відмінний від Н або ОН. В деяких варіантах реалізації 2'-заміщені нуклеозиди включають нуклеозиди з модифікаціями біциклічних цукрів.
Термін «3'-цільовий сайт» відноситься до нуклеотиду цільової нуклеїнової кислоти, який комплементарний самому крайньому нуклеотиду з 3'-кінця конкретної антисмислової сполуки.
Термін «5'-цільовий сайт» відноситься до нуклеотиду цільової нуклеїнової кислоти, який комплементарний самому крайньому нуклеотиду з 5'-кінця конкретної антисмислової сполуки.
Термін «5-метилцитозин» означає цитозин, модифікований метильної групою, приєднаною в положенні 5.5-метилцитозин являє собою модифіковану нуклеотидну основу.
Термін «приблизно» означає в межах 10 95 від значення. Наприклад, якщо сказано, що «сполуки здійснювали щонайменше приблизно 70 95 інгібування СЕВ», мається на увазі, що гальмування рівнів СЕВ відбувалося в межах діапазону від 60 925 до 80 95.
Термін «введення» або «здійснення введення» відноситься до шляхів введення антисмислової сполуки, запропонованої відповідно до даного винаходу, суб'єкту для виконання очікуваної функції. Приклад шляху введення, який може бути використаний, включає, але не обмежується ним, парентеральне введення, таке як підшкірна, внутрішньовенна або внутрішньом'язова ін'єкція або інфузія.
Термін «полегшення» відноситься до зменшення щонайменше одного показника, ознаки або симптому асоційованого захворювання, порушення або стану. В деяких варіантах реалізації полегшення включає відстрочення або уповільнення прогресування одного або більше показників стану або захворювання. Тяжкість показників може бути визначена за
Зо суб'єктивними чи об'єктивними критеріями, які відомі фахівцю в даній області техніки.
Термін «тварина» відноситься до тварини, яка відноситься до людини або не відноситься до людини, включаючи, але не обмежуючись ними, мишей, щурів, кроликів, собак, кішок, свиней і нелюдиноподібних приматів, включаючи, але не обмежуючись ними, мавп і шимпанзе.
Термін «антисмислова активність» означає будь-яку детектуєму або вимірну активність, властиву гібридизації антисмислової сполуки з цільовою нуклеїновою кислотою. В деяких варіантах реалізації антисмислова активність являє собою зниження кількості або рівня експресії цільової нуклеїнової кислоти або білка, що кодується такою цільовою нуклеїновою кислотою.
Термін «антисмислова сполука» означає олігомерну сполуку, яка здатна гібридизуватися з цільовою нуклеїновою кислотою шляхом утворення водневих зв'язків.
Приклади антисмислових сполук включають одноланцюгові і дволанцюгові сполуки, такі як антисмислові олігонуклеотиди, малі інтерферуючі РНК (міРНК), короткі шпилькові РНК (БИРНК), одноланцюгові РНК (олРНК) і сполуки на основі ступеня зайнятості (оссирапсу-базей сотроипа).
Термін «антисенсове інгібування» означає зниження рівнів цільової нуклеїнової кислоти в присутності антисмислової сполуки, комплементарної цільовій нуклеїновій кислоті, в порівнянні з рівнями цільової нуклеїнової кислоти у відсутності зазначеної антисмислової сполуки. «Антисмислові механізми» являють собою такі механізми, до яких залучена гібридизація сполуки з цільовою нуклеїновою кислотою, при цьому результатом або наслідком гібридизації є або розпад цілі, або зайнятість цілі з супутньою зупинкою клітинного механізму, до якого залучена, наприклад, транскрипція або сплайсинг.
Термін «антисенсовий олігонуклеотид» означає одноланцюговий олігонуклеотид, що містить послідовність нуклеотидних основ, яка забезпечує гібридизацію з відповідною областю або сегментом цільової нуклеїнової кислоти.
Термін «комплементарність основ» відноситься до здатності до точного5 спарювання нуклеотидних основ антисмислового олігонуклеотида з відповідними нуклеотидними основами в цільовій нуклеїновій кислоті (тобто гібридизації), і опосередковується утворенням водневих зв'язків за Уотсоном-Криком, хугстиновських або зворотних хугстиновських 60 водневих зв'язків між відповідними нуклеотидними основами.
Термін «біциклічна цукрова група» означає модифіковану цукрову групу, яка містить 4-7- членне кільце (включаючи, але не обмежуючись ним, фуранозил), що містить місток, що з'єднує два атома зазначеного 4-7--ленного кільця з утворенням другого кільця, в результаті чого утворюється біциклічна структура. В деяких варіантах реалізації 4-7-членне кільце являє собою цукрове кільце. В деяких варіантах реалізації 4-7-ч-ленне кільце являє собою фуранозил. В деяких таких варіантах реалізації зазначений місток з'єднує 2'-вуглець і 2г- вуглець фуранозила.
Термін «біциклічна нуклеїнова кислота» або «ВМА», або «нуклеозиди ВМА» означає мономери нуклеїнової кислоти, що містять місток, що з'єднує два атома вуглецю в 4-і 2- положенні цукрової ланки нуклеозида, тим самим утворюючи біциклічний цукор.
Приклади такого біциклічного цукру включають, але не обмежуються ними, (А) ас-і- метиленокси (4-СНг2-0-2)-«закриту» нуклеїнову кислоту (ЗНК), (В) В-ЮО-метиленокси (4- СНо-О- 2)-ЗНК, (С) етиленокси (4-(СНг)2-О-2)-ЗНК, (0) аміноокси (4-СН2-ОМ(Н)-2)- ЗНК і (Е) оксиаміно (2-СНо-М(Н)-О-2)-ЗНК, зображені нижче.
Й в В -е4 ув 5 о вх ту равя х
Ох А, ще Я и; 5-3 я - -а й і / о у! -М В хі За / и-о Мох йо п па Кк й
ІА) (В! пад аз (БЕ
В даному описі ЗНК-сполуки включають, але не обмежуються ними, сполуки, що містять щонайменше один місток між 4 2'--положенням цукру, при цьому кожен з містків незалежно містить 1 або від 2 до 4 зв'язаних груп, незалежно вибраних з -ІС(В:)(В2)|н-, -. С(Ві) -С(А2)-, -
Ф(ні)-М-, -Ф(-МАч)-, -С(-0)-, -Ф(-5)-, -О-, -БІ(Аі)2-, -5(-0)х-і-М(А:)-; де: х дорівнює 0, 1 або 2; п дорівнює 1, 2, З або 4; кожен НВ: Р» незалежно являє собою Н, захисну групу, гідроксил,
С-Сі2 алкіл, що містить замісники С1-С:і2 алкіл, Со-Сі2 алкеніл, що містить замісники С2-Сч12 алкеніл, С2-С12 алкініл, що містить замісники С2-С12 алкініл, С5-Сго арил, що містить замісники
С5-Сго арил, гетероциклічний радикал, що містить замісники гетероциклічний радикал, гетероарил, що містить замісники гетероарил, С5-С7 аліциклічні радикал, що містить замісники
С5-С7 аліциклічні радикал, галоген, О)ї, Му 9уУг, З, Мз, СОУ, ацил (С(-О)-Н), що містить замісники ацил, СМ, сульфоніл (5(-0)2-)1) або сульфоксил (5(-0)-)1); і кожен 1 ії Уг незалежно являє собою Н, С1-Сі2 алкіл, що містить замісники С:1-С12 алкіл, С2-С1і2 алкеніл, що містить замісники С2-С12 алкеніл, Сб2-Сі»2 алкініл, що містить замісники С2-Сі2 алкініл, Св-Сго арил, що містить замісники С5-Сго арил, ацил (С(-0)-Н), що містить замісники ацил, гетероциклічний радикал, що містить замісники гетероциклічний радикал, С1-Сі2 аміноалкіл, що містить замісники С1-С12 аміноалкіл або захисну групу.
Приклади груп, що утворюють місток 4-2", включених у визначення ЗНК, включають, але не
З5 обмежуються ними, одну з формул: -ІС(А:ХАРг)н-, -(С(А:ХАг))н-О-, - С(В:ї Аг)-М(Ні)-О- або -
С(В: Аг)-ОМ(А:)-. Крім того, інші групи, що утворюють місток, включені у визначення ЗНК, являють собою містки 4-СНе-2, 4-(СНг)2-2, 4-(СНг) 3-2, 4- СНо-О-2, 4-(СНг)2-0-2, 4-СНо-
ОМ(ВІ)-2 ії 4-СНо-М(НІ)-О-2", де кожен В: і А? незалежно являє собою Н, захисну групу або С.-
Сі алкіл.
У визначення ЗНК відповідно до даного винаходу також включені ЗНК, в яких 2- гідроксильна група рибозильного цукрового кільця з'єднана з 4-атомом вуглецю цукрового кільця, утворюючи таким чином метиленокси (4-СНе-0-2)-місток з утворенням біциклічної цукрової групи. Місток може також являти собою метиленову (СНго-) групу, яка з'єднує 2'- атом кисню і 4-атом вуглецю, при цьому вживається термін «метиленокси (4-СН2-0-23)-ЗНК».
Більш того, у випадку біциклічної цукрової групи, що містить етиленову місткову групу в даному положенні, вживається термін «етиленокси (4-СНа СНа2-0О-23)-ЗНК». В даному описі а-І-метиленокси (4-СНе-О-2), ізомер метиленокси (4-СНе-О-2)-ЗНК, також включений у визначення ЗНК.
Термін «кеп-структура» або «кінцевий кеп-фрагмент» означає хімічні модифікації, які були введені на будь-якому кінці антисмислової сполуки.
Термін «сЕї» або «конформаційно обмежений етил» означає біциклічну цукрову групу, яка містить місток, що з'єднує 4-вуглець і 2'-вуглець, при цьому зазначений місток має формулу: 4-СН(СНз)-0О-2".
Термін «конформаційно обмежений етил-нуклеозид» (також сЕЇ-нуклеозид) означає нуклеозид, що містить біциклічну цукрову групу, яка містить місток 4-СН(СНз)- 0-2".
Термін «фактор В комплементу (СЕВ)» означає будь-яку нуклеїнову кислоту або білок
СЕВ. Термін «нуклеїнова кислота СЕВ» означає будь-яку нуклеїнову кислоту, що кодує СЕВ.
Наприклад, в деяких варіантах реалізації нуклеїнова кислота СЕВ включає послідовність
ДНК, що кодує СЕВ, послідовність РНК, що транскрибується з ДНК, що кодує СЕВ (включаючи геномну ДНК, що містить інтрони і екзони), включаючи не кодуючу білок (тобто некодуючу) послідовність РНК і послідовність мРНК, що кодує СЕВ. Термін «МРНК СЕВ» означає мРНК, що кодує білок СЕВ.
Термін «СЕВ-специфічний інгібітор» відноситься до будь-якого агенту, здатного специфічно інгібувати експресію або активність РНК СЕВ і/або білка СЕВ на молекулярному рівні. Наприклад, СЕВ-специфічні інгібітори включають нуклеїнові кислоти (в тому числі антисмислової сполуки), пептиди, антитіла, малі молекули і інші агенти, здатні інгібувати експресію РНК СЕВ і/або білка СЕВ.
Термін «хімічно відмінна область» відноситься до області антисмислової сполуки, яка певною мірою хімічно відрізняється від іншої області цієї ж антисмислової сполуки.
Наприклад, область, яка містить 2'-О-метоксиетилнуклеотиди, хімічно відрізняється від області, що містить нуклеотиди без 2'-О-метоксиетильних модифікацій.
Термін «химерні антисмислові сполуки» означає антисмислові сполуки, що містять щонайменше дві хімічно відмінні області, при цьому кожна позиція містить велику кількість субодиниць.
Термін «комплементарність» означає здатність утворювати пари між нуклеотидними основами першої нуклеїнової кислоти і другої нуклеїнової кислоти.
Очевидно, що терміни «містити (включати)», «містить (включає)» і «що містить (включає)» передбачають включення зазначеного етапу або елемента, або групи етапів або елементів, але не виняток будь-якого іншого етапу або елемента, або групи етапів або елементів.
Термін «суміжні нуклеотидні основи» означає нуклеотидні основи, які безпосередньо примикають один до одного.
Термін «дезоксирибонуклеотид» означає нуклеотид, що містить водень в положенні 2'
Зо цукрової частини нуклеотиду. Дезоксирибонуклеотиди можуть бути модифіковані будь-яким із різних замісників.
Термін «отримання» або «отриманий для» відносяться до способу отримання олігомерної сполуки, яка специфічно гибрідизується з вибраною молекулою нуклеїнової кислоти.
Термін «ефективна кількість» означає кількість активного фармацевтичного агента, достатня для досягнення бажаного фізіологічного результату у індивідуума, що потребує такого агента. Ефективна кількість може варіювати серед індивідуумів в залежності від стану здоров'я та фізичного стану індивідуума, якого лікують, таксономічної групи індивідуумів, яких лікують, складу композиції, оцінки стану у індивідуума та інших відповідних факторів.
Термін «ефективність» означає здатність спричинювати бажаний ефект.
Термін «експресія» включає всі функції, за допомогою яких інформація, що кодується геном, перетворюється в структури, присутні і функціонуючі в клітині. Такі структури включають, але не обмежуються ними, продукти транскрипції і трансляції.
Термін «повністю комплементарний» або «на 100 95 комплементарний» означає, що кожна нуклеотидна основа першої нуклеїнової кислоти має комплементарну нуклеотидну основу в другій нуклеїновій кислоті. В деяких варіантах реалізації перша нуклеїнова кислота являє собою антисмислову сполуку, а цільова нуклеїнова кислота являє собою другу нуклеїнову кислоту.
Термін «гепмер (дартег)» означає химерну антисмислову сполуку, в якій внутрішня область, що містить велику кількість нуклеозидів, що забезпечують розщеплення РНКази Н, розташована між зовнішніми областями, що містять один або більше нуклеозидів, при цьому нуклеозиди, що становлять внутрішню область, хімічно відрізняються від нуклеозиду або нуклеозидів, що складають зовнішні області. Внутрішняя область може називатися «гепом», а зовнішні області можуть називатися «крилами».Термін «гібридизація» означає відпал комплементарних молекул нуклеїнової кислоти. В деяких варіантах реалізації комплементарні молекули нуклеїнової кислоти включають, але не обмежуються ними, антисмислову сполуку і нуклеїнову кислоту- мішень. В деяких варіантах реалізації комплементарні молекули нуклеїнової кислоти включають, але не обмежуються ними, антисенсовий олігонуклеотид і нуклеїнову кислоту-мішень.
Термін «ідентифікація тварини, яка страждає від або у якої присутній ризик розвитку бо захворювання, порушення і/або стану» означає ідентифікацію тварини, у якої було діагностовано зазначене захворювання, порушення і/або стан, або ідентифікацію тварини, схильної до розвитку зазначеного захворювання, порушення і/або стану. Така ідентифікація може бути здійснена будь-яким способом, включаючи оцінку анамнезу індивідуума і стандартні клінічні тести або оцінки.
Термін «безпосередньо примикає» означає, що між безпосередньо примикаючими елементами відсутні проміжні елементи.
Термін «індивідуум» означає тварину, що відноситься або не відноситься до людини, яку було вибрано для лікування або терапії.
Термін «інгібування експресії або активності» відноситься до зниження, блокади експресії або активності і не обов'язково вказує на повне усунення експресії або активності.
Термін «міжнуклеозидний зв'язок» відноситься до хімічного зв'язку між нуклеозидами. «Подовжені» антисмислові олігонуклеотиди являють собою ті антисмислові олігонуклеотиди, які містять один або більше додаткових нуклеозидів по відношенню до антисмислового олігонуклеотида, описаного в даному документі.
Термін «зв'язаний дезоксинуклеозид» означає основу нуклеїнової кислоти (А, с, С, Т, 3), що містить в якості замісників дезоксирибозу, зв'язану фосфатним ефіром з утворенням нуклеотида.
Термін «зв'язані нуклеозиди» означає примикаючі нуклеозиди, зв'язані один з одним міжнуклеозидним зв'язком.
Термін «невідповідна» або «некомплементарна нуклеотидна основа» відноситься до випадку, коли нуклеотидна основа першої нуклеїнової кислоти не здатна до спарювання з відповідною нуклеотидною основою другої або цільової нуклеїнової кислоти.
Термін «модифікований міжнуклеозидний зв'язок» відноситься до заміщення або будь- якої зміни по відношенню до міжнуклеозидного зв'язку, що зустрічається в природі (тобто фосфодиефірного міжнуклеозидного зв'язку).
Термін «модифікована нуклеотидна основа» означає будь-яку нуклеотидну основу, відмінну від аденіна, цитозина, гуаніна, тимідина або урацила. Термін «немодифікована нуклеотидна основа» означає пуринові основи-аденін (А) і гуанін (С), і піримідинові основи- тимін (Т), цитозин (С) і урацил ()).
Термін «модифікований нуклеозид» означає нуклеозид, який незалежно містить модифіковану цукрову групу і/або модифіковану нуклеотидну основу.
Термін «модифікований нуклеотид» означає нуклеотид, який незалежно містить модифіковану цукрову групу, модифікований міжнуклеозидний зв'язок або модифіковану нуклеотидну основу.
Термін «модифікований олігонуклеотид» означає олігонуклеотид, що містить щонайменше один модифікований міжнуклеозидний зв'язок, модифікований цукор і/або модифіковану нуклеотидну основу.
Термін «модифікований цукор» означає заміщення і/або будь-яка зміна по відношенню до природної цукрової групи.
Термін «модуляція» відноситься до зміни або корекції ознаки в клітині, тканині, органі або організмі. Наприклад, модуляція мРНК СЕВ може означати підвищення або зниження рівня МРНК СЕВ і/або білка СЕВ в клітині, тканині, органі або організмі. «Модулятор» здійснює зміни в клітині, тканині, органі або організмі. Наприклад, антисмислова сполука для СЕВ може являти собою модулятор, який зменшує кількість
МРНК СЕВ і/або білка СЕВ в клітині, тканині, органі або організмі.
Термін «мономер» відноситься до однієї ланки олігомера. Мономери включають, але не обмежуються ними, нуклеозиди та нуклеотиди, як ті, що зустрічаються в природі або модифіковані.
Термін «мотив» означає патерн немодифікованих і модифікованих нуклеозидів в антисенсовій сполуці.
Термін «природна цукрова група» означає цукрову групу, яка зустрічається в ДНК 25 (2-Н) або РНК (2-ОН).
Термін «міжнуклеозидний зв'язок, зустрічається в природі» означає 3-5- фосфодиефірний зв'язок.
Термін «некомплементарна нуклеотидна основа» відноситься до пари нуклеотидних основ, які не утворюють водневі зв'язки один з одним або не забезпечують гібридизацію іншим чином.
Термін «нуклеїнова кислота» відноситься до молекул, що складається з мономірних нуклеотидів. Термін «нуклеїнова кислота» включає, але не обмежується ними, рибонуклеїнові кислоти (РНК), дезоксирибонуклеїнові кислоти (ДНК), одноланцюгові нуклеїнові кислоти і бо дволанцюгові нуклеїнові кислоти.
Термін «нуклеотидна основа» означає гетероциклічну молекулу, здатну спарюватися з основою іншої нуклеїнової кислоти.
Термін «комплементарність нуклеотидної основи» відноситься до нуклеотидної основи, яка здатна спарюватися з іншою нуклеотидною основою. Наприклад, в ДНК аденін (А) комплементарний тиміну (Т). Наприклад, в РНК аденін (А) комплементарний урацилу (Ш). В деяких варіантах реалізації термін «комплементарна нуклеотидна основа» відноситься до нуклеотидної основи антисмислової сполуки, яка здатна спарюватися з нуклеотидною основою цільової нуклеїнової кислоти. Наприклад, якщо нуклеотидна основа в певному положенні антисмислової сполуки здатна утворювати водневі зв'язки з нуклеотидною основою в певному положенні цільової нуклеїнової кислоти, то положення утворення водневих зв'язків між олігонуклеотидом і цільовою нуклеїновою кислотою вважається комплементарним в даній парі нуклеотидних основ.
Термін «послідовність нуклеотидних основ» означає порядок розташування суміжних нуклеотидних основ незалежно від будь-якої модифікації цукрів, зв'язків або нуклеотидних основ.
Термін «нуклеозид» означає нуклеотидну основу, зв'язану з цукром.
Термін «нуклеозидний міметик» включає ті структури, які використовують для заміни цукру або цукру і основи, і не обов'язково зв'язки в одному або більше положеннях олігомерної сполуки, такі як, наприклад, нуклеозидні міметики, що містять морфоліно, циклогексеніл, циклогексил, тетрагідропіраніл, біциклічні або трициклічні міметики цукрів, наприклад, нефуранозні цукрові ланки. Термін «нуклеотидний міметик» включає ті структури, які використовують для заміни нуклеозида і зв'язка в одному або більше положеннях олігомерної сполуки, такі як, наприклад, пептидні нуклеїнові кислоти або морфолінові олігонуклеотиди (морфолінові оолігонуклеотиди, зв'язані-М /(Н)-С(-0)-О-або іншим нефосфодиефірним зв'язком). Термін «замінник цукру» перетинається з дещо ширшим терміном «нуклеозидний міметик», але вказує лише на заміну цукрової ланки (фуранозного кільця). В даному описі тетрагідропіранільні кільця ілюструють приклад замінника цукру, в якому фуранозна цукрова група була замінена тетрагідропіранільною кільцевою системою.
Термін «міметик» відноситься до груп, які замінюють цукор, нуклеотидну основу і/або
Зо міжнуклеозидний зв'язок. Як правило, міметик використовуютьзамість цукру або комбінації цукор-міжнуклеозидний зв'язок, а нуклеотидну основу зберігають для гібридизації з обраною ціллю.
Термін «нуклеотид» означає нуклеозид, що містить фосфатну групу, ковалентно зв'язану з цукровою частиною нуклеозида.
Термін «олігомерна сполука» означає полімер із зв'язаних мономерних субодиниць, здатний гібридизуватися щонайменше з областю молекули нуклеїнової кислоти.
Термін «олігонуклеозид» означає олігонуклеотид, в якому міжнуклеозидні зв'язки не містять атом фосфору.
Термін «олігонуклеотид» означає полімер із зв'язаних нуклеозидів, кожен 3 яких незалежно один від одного може бути модифікованим або немодифікованим.
Термін «парентеральне введення» означає введення за допомогою ін'єкції або інфузії.
Парентеральне введення включає підшкірне введення, внутрішньовенне введення, внутрішньом'язове введення, внутрішньоартеріальне введення, інтраперитонеальне введення або інтракраніальне введення, наприклад, інтратекальне або інтрацеребровентрикулярне введення.
Термін «фармацевтична композиція» означає суміш речовин, яка підходить для введення індивідууму. Наприклад, фармацевтична композиція може містити один або більше активних фармацевтичних агентів і стерильний водний розчин.
Термін «фармацевтично прийнятні солі» означає фізіологічно і фармацевтично прийнятні
БО солі антизмістовних з'єднань, тобто солі, які зберігають бажану біологічну активність вихідного олігонуклеотида і не надають будь-яких небажаних токсичних ефектів.
Термін «фосфоротіоатний зв'язок» означає зв'язок між нуклеозидами, при цьому фосфодиефірний зв'язок модифікований шляхом заміни одного з атомів кисню, що не утворюють місток, атомом сірки. Фосфоротіоатний зв'язок є модифікованим міжнуклеозидним зв'язок.
Термін «частина» означає певне число суміжних (тобто зв'язаних) нуклеотидних основ нуклеїнової кислоти. В деяких варіантах реалізації частина являє собою певне число суміжних нуклеотидних основ цільової нуклеїнової кислоти. В деяких варіантах реалізації частина являє собою певне число суміжних нуклеотидних основ антисмислової сполуки. Термін «запобігати» 60 відноситься до відстрочення або попередження початку, розвитку або прогресування (с;
захворювання, порушення або стану на період часу від декількох хвилин до невизначеного часу. Термін «запобігати» також означає зниження ризику розвитку захворювання, порушення або стану.
Термін "профілактично ефективна кількість" відноситься до кількості фармацевтичного агента, яке забезпечує корисний профілактичний або превентивний ефект для тварини. «Область» визначається як частина цільової нуклеїнової кислоти, що має щонайменше одну ідентифіковану структуру, функцію або характеристику.
Термін «рибонуклеотид» означає нуклеотид, що містить гідрокси в положенні 2'цукрової частини нуклеотида. Рибонуклеотиди можуть бути модифіковані будь-яким із різних замісників. «Сегменти» визначаються як менші частини або підчастини областей в межах цільової нуклеїнової кислоти.
Термін «побічні ефекти» означає фізіологічне захворювання і/або стани, пов'язані з лікуванням, відмінні від бажаних ефектів. В деяких варіантах реалізації побічні ефекти включають реакції в місці ін'єкції, порушення функції печінки, які виявляються в результаті дослідження, порушення функції нирок, гепатотоксичність, нефротоксичність, порушення центральної нервової системи, міопатії і нездужання. Наприклад, оппідвищені рівні амінотрансферази в сироватці можуть вказувати на гепатотоксичність або порушення функції печінки. Наприклад, підвищений рівень білірубіну може вказувати на гепатотоксичність або порушення функції печінки.
В даному описі «сайти» визначаються як унікальні положення нуклеотидних основ в межах цільової нуклеїнової кислоти.
Термін «уповільнює прогресування» означає зменшення розвитку зазначеного захворювання. Термін «що специфічно гібридизується» відноситься до антисмислової сполуки, що демонструє ступінь комплементарності між антисенсовим олігонуклеотидом і цільовою нуклеїновою кислотою, достатній для індукції бажаного ефекту, і що при цьому демонструє мінімальну дію або відсутність дії на нецільові нуклеїнові кислоти, в умовах, в яких специфічне зв'язування є бажаним, тобто в фізіологічних умовах в разі аналізів іп мімо і терапевтичного лікування. Термін «жорсткі умови гібридизації» або «жорсткі умови» відноситься до умов, в яких олігомерна сполука буде гібридизуватись з цільовою послідовністю, але з мінімальним числом інших послідовностей.
Термін «суб'єкт» означає тварину, що відноситься або не відноситься до людини, яку було вибрано для лікування або терапії.
Термін «ціль (мішень)» відноситься до білка, модуляція якого є бажаною. Термін «цільовий ген» відноситься до гена, що кодує ціль.
Термін «націлювання» означає спосіб розробки та відбору антисмислової сполуки, яка буде специфічно гібридизуватись з цільовою нуклеїновою кислотою і індукувати бажаний ефект.
Всі терміни «цільова нуклеїнова кислота», «цільова РНК», «цільовий РНК- транскрипт» і «нуклеїнова кислота-мішень» означають нуклеїнову кислоту, на яку можуть бути націлені антисмислової сполуки.
Термін «цільова область» означає частину цільової нуклеїнової кислоти, на яку націлені одна або більше антисмислових сполук.
Термін «цільовий сегмент» означає послідовність нуклеотидів цільової нуклеїнової кислоти, на яку націлена антисмислова сполука. Термін «5'- цільовий сайт» відноситься до самого крайнього нуклеотиду цільового сегмента з 5-кінця. Термін «3-цільовий сайт» відноситься до самого крайнього нуклеотиду цільового сегмента з 3'-кінця.
Термін «терапевтично ефективна кількість" означає кількість фармацевтичного агента, що забезпечує корисний терапевтичний ефект для індивідуума.
Термін «лікувати» відноситься до введення фармацевтичної композиції тварині для зміни або послаблення захворювання, порушення або стану у зазначеної тварини. В деяких варіантах реалізації тварині може бути введена одна або більше фармацевтичних композицій.
Термін «немодифіковані» нуклеотидні основи означає пуринові основи-аденін (А) і гуанін (С), і піримідинові основи-тимін (Т), цитозин (С) і урацил ().
Термін «модифікований нуклеотид» означає нуклеотид, що складається з нуклеотидних основ, які зустрічаються в природі, цукрових груп і міжнуклеозидних зв'язків. В деяких варіантах реалізації модифікований нуклеотид являє собою нуклеотид РНК (тобто В-0- рибонуклеозид) або нуклеотид ДНК (тобто ВД-О-дезоксирибонуклеозид).
Деякі варіанти реалізації
В деяких варіантах реалізації запропоновані способи, сполуки і композиції для інгібування бо експресії фактора В комплемента (СЕВ).
В деяких варіантах реалізації запропоновані антисмислової сполуки, націлені на нуклеїнову кислоту СЕВ. В деяких варіантах реалізації нуклетнова кислота СЕВ містить послідовність, представлену під номером доступу в СЕМВАМК ММ 001710.5 (включену в даний опис як 5ЕО ІО МО: 1), номером доступу в СЕМВАМК МТ 007592.15, вкорочену в межах нуклеотидів 31852000-31861000 (включену в даний опис як 5ЕО ІЮО МО: 2), номером доступу в СЕМВАМК ММ 001116486.1, вкорочену в межах нуклеотидів 536000- 545000 (включену в даний опис як 5ЕО ІЮ МО: 3), номером доступу в СЕМВАМК ХМ 001113553.2 (включену вданий опис як 5ЕОІЮО МО: 4) або номером доступу в СЕМВАМК ММ 0081982 (включену в даний опис як 5ЕО ІО МО: 5).
В деяких варіантах реалізації запропоновано сполуку, що містить модифікований олігонуклеотид, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів і має послідовність нуклеотидних основ, що містить щонайменше 8 суміжних нуклеотидних основ будь-якої з послідовностей нуклеотидних основ 5ЕО ІЮ МО: 6-808.
В деяких варіантах реалізації запропоновано сполуку, що містить модифікований олігонуклеотид, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів і має послідовність нуклеотидних основ, що містить щонайменше 9 суміжних нуклеотидних основ будь-якої з послідовностей нуклеотидних основ 5ЕО ІЮ МО: 6-808.
В деяких варіантах реалізації запропоновано сполуку, що містить модифікований олігонуклеотид, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів і має послідовність нуклеотидних основ, що містить щонайменше 10 суміжних нуклеотидних основ будь-якої з послідовностей нуклеотидних основ 5ЕО ІЮ МО: 6-808.
В деяких варіантах реалізації запропоновано сполуку, що містить модифікований олігонуклеотид, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів і має послідовність нуклеотидних основ, що містить щонайменше 11 суміжних нуклеотидних основ будь-якої з послідовностей нуклеотидних основ 5ЕО ІЮ МО: 6-808.
В деяких варіантах реалізації запропоновано сполуку, що містить модифікований олігонуклеотид, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів і має послідовність нуклеотидних основ, що містить щонайменше 12 суміжних нуклеотидних основ будь-якої з послідовностей нуклеотидних основ 5ЕО ІЮ МО: 6-808.
Зо В деяких варіантах реалізації запропоновано сполуку, що містить модифікований олігонуклеотид, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів і має послідовність нуклеотидних основ, що містить послідовність нуклеотидних основ будь-якої з 5ЕО ІЮ МО: 6-808.
В деяких варіантах реалізації запропоновано сполуку, що містить модифікований олігонуклеотид, що складається з послідовності нуклеотидних основ будь-якої з 5ЕО ІЮ МО: 6-808.
В деяких варіантах реалізації запропоновано сполуку, що містить модифікований олігонуклеотид, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, комплементарних в межах нуклеотидних основ 30-49, 48-63, 150-169, 151-170, 152-171, 154-169, 154-173, 156-171, 156- 175, 157-176, 158-173, 158-177, 480-499, 600-619, 638-657, 644-663, 738-757, 1089- 1108, 1135-1154, 1141-1160, 1147-1166, 1150-1169, 1153-1172, 1159-1178, 1162-1181, 1165- 1184, 1171-1186, 1171-1190, 1173-1188, 1173-1192, 1175-1190, 1175-1194, 1177-1196, 1183- 1202, 1208-1227, 1235-1254, 1298-1317, 1304-1323, 1310-1329, 1316-1335, 1319-1338, 1322- 1341, 1328-1347, 1349-1368, 1355-1374, 1393-1412, 1396-1415, 1399-1418, 1405-1424, 1421- 1440, 1621-1640, 1646-1665, 1646-1665, 1647-1666, 1689-1708, 1749-1768, 1763-1782, 1912- 1931, 2073-2092, 2085-2104, 2166-2185, 2172-2191, 2189-2208, 2191-2210, 2193-2212, 2195- 2210, 2195-2214, 2196-2215, 2197-2212, 2197-2216, 2202-2221, 2223-2238, 2223-2242, 2225- 2240, 2226-2245, 2227-2242, 2227-2246, 2238-2257, 2241-2260, 2267-2286, 2361-2380, 2388- 2407, 2397-2416, 2448-2467, 2453-2472, 2455-2474, 2457-2472, 2457-2476, 2459-2474, 2459- 2478, 2461-2476, 2461-2480, 2532-2551, 2550-2569, 2551-2566, 2551-2570, 2552-2568, 2552- 2570, 2552-2571, 2553-2568, 2553-2570, 2553-2571, 2553-2572, 2554-2571, 2554-2572, 2554- 2573, 2555-2570, 2555-2572, 2555-2574, 2556-2573, 2556-2574, 2556-2575, 2557-2573, 2557- 2574, 2557-2575, 2557-2576, 2558-2575, 2558-2576, 2558-2577, 2559-2576, 2559-2577, 2559- 2578, 2560-2577, 2560-2578, 2560-2579, 2561-2576, 2561-2578, 2561-2579, 2561-2580, 2562- 2577, 2562-2579, 2562-2581, 2563-2578, 2563-2580, 2563-2582, 2564-2581, 2564-2583, 2565- 2584, 2566-2583, 2566-2585, 2567-2582, 2567-2584, 2567-2586, 2568-2583, 2568-2585, 2568- 2587, 2569-2586, 2569-2588, 2570-2585, 2570-2587, 2570-2589, 2571-2586, 2571-2588, 2571- 2590, 2572-2589, 2572-2590, 2572-2 591, 2573-2590, 2573-2592, 2574-2590, 2574-2591, 2574- 2593, 2575-2590, 2575-2591, 2575-2592, 2575-2594, 2576-2593, 2576-2595, 2577-2594, 2577- 2595, 2577-2596, 2578-2594, 2578-2596, 2578-2597, 2579-2598, 2580-2596, 2580-2597, 2580- 2598, 60 2580-2599, 2581-2597, 2581-2598, 2581-2599, 2581-2600, 2582-2598, 2582-2599, 2582- 2600,
2582-2601, 2583-2599, 2583-2600, 2583-2601, 2583-2602, 2584-2600, 2584-2601, 2584- 2602, 2584-2603, 2585-2601, 2585-2603, 2585-2604, 2586-2601, 2586-2602, 2586-2604, 2586- 2605, 2587-2602, 2587-2603, 2587-2605, 2587-2606, 2588-2603, 2588-2604, 2588-2605, 2588- 2606, 2588-2607, 2589-2604, 2589-2605, 2589-2606, 2589-2607, 2589-2608, 2590-2605, 2590- 2606, 2590-2607, 2590-2608, 2590-2609, 2590-2609, 2591-2607, 2591-2608, 2591-2609, 2591- 2610, 2592-2607, 2592-2608, 2592-2609, 2592-2610, 2592-2611, 2593-2608, 2593-2609, 2593- 2610, 2593-2612, 2594-2609, 2594-2610, 2594-2611, 2594-2612, 2594-2613, 2595-2610, 2595- 2611, 2595-2612, 2595-2613, 2595-2614, 2596-2611, 2596-2612, 2596-2613, 2596-2614, 2596- 2615, 2597-2612, 2597-2612, 2597-2613, 2597-2614, 2597-2615, 2597-2616, 2598-2613, 2598- 2614, 2598-2615, 2598-2616, 2598-2617, 2599-2614, 2599-2615, 2599-2616, 2599-2617, 2599- 2618, 2600-2615, 2600-2616, 2600-2617, 2600-2618, 2600-2619, 2601-2616, 2601-2617, 2601- 2618, 2601-2619, 2601-2620, 2602-2617, 2602-2618, 2602-2619, 2602-2620, 2602-2621, 2603- 2618, 2603-2619, 2603-2620, 2603-2621, 2603-2622, 2604-2619, 2604-2620, 2604-2621, 2604- 2622, 2604-2623, 2605-2620, 2605-2621, 2605-2622, 2605-2623, 2605-2624, 2606-2621, 2606- 2622, 2606-2623, 2606-2624, 2606-2625, 2607-2622, 2607-2623, 2607-2624, 2607-2625, 2607- 2626, 2608-2623, 2608-2624, 2608-2625, 2608-2626, 2608-2627, 2609-2624, 2609-2625, 2609- 2626, 2609-2627, 2609-2628, 2610-2625, 2610-2626, 2610-2627, 2610-2628, 2610-2629, 2611- 2626, 2611-2627, 2611-2628, 2611-2629, 2611-2630, 2612-2627, 2612-2628, 2612-2629, 2612- 2630, 2612-2631, 2613-2628, 2613-2629, 2613-2630, 2613-2631, 2614-2629, 2614-2630, 2614- 2631, 2615-2630, 2615-2631 або 2616-2631 послідовності 5БЕО ІО МО: 1, при цьому вказаний модифікований олігонуклеотид щонайменше на 85 95, щонайменше на 90 95, щонайменше на 95
Фо або на 100 95 комплементарний 5ЕО ІО МО: 1.
В деяких варіантах реалізації запропоновано сполуку, що містить модифікований олігонуклеотид, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що має послідовність нуклеотидних основ, що містить частину з щонайменше 8 суміжних нуклеотидних основ, комплементарну частині, що має однакову довжину, з нуклеотидних основ 30-49, 48-63, 150- 169, 151-170, 152-171, 154-169, 154-173, 156-171, 156-175, 157-176, 158-173, 158-177, 480- 499, 600-619, 638-657, 644-663, 738-757, 1089-1108, 1135-1154, 1141-1160, 1147-1166, 1150- 1169, 1153-1172, 1159-1178, 1162-1181, 1165-1184, 1171-1186, 1171-1190, 1173-1188, 1173- 1192,
Зо 1175-1190, 1175-1194, 1177-1196, 1183-1202, 1208-1227, 1235-1254, 1298-1317, 1304- 1323, 1310-1329, 1316-1335, 1319-1338, 1322-1341, 1328-1347, 1349-1368, 1355-1374, 1393- 1412, 1396-1415, 1399-1418, 1405-1424, 1421-1440, 1621-1640, 1646-1665, 1646-1665, 1647- 1666, 1689-1708, 1749-1768, 1763-1782, 1912-1931, 2073-2092, 2085-2104, 2166-2185, 2172- 2191, 2189-2208, 2191-2210, 2193-2212, 2195-2210, 2195-2214, 2196-2215, 2197-2212, 2257, 2241-2260, 2267-2286, 2361-2380, 2388-2407, 2397-2416, 2448-2467, 2453-2472, 2455- 2474, 2457-2472, 2457-2476, 2459-2474, 2459-2478, 2461-2476, 2461-2480, 2532-2551, 2550- 2569, 2551-2566, 2551-2570, 2552-2568, 2552-2570, 2552-2571, 2553-2568, 2553-2570, 2553- 2571, 2553-2572, 2554-2571, 2554-2572, 2554-2573, 2555-2570, 2555-2572, 2555-2574, 2556- 2573, 2556-2574, 2556-2575, 2557-2573, 2557-2574, 2557-2575, 2557-2576, 2558-2575, 2558- 2576, 2558-2577, 2559-2576, 2559-2577, 2559-2578, 2560-2577, 2560-2578, 2560-2579, 2561- 2576, 2561-2578, 2561-2579, 2561-2580, 2562-2577, 2562-2579, 2562-2581, 2563-2578, 2563- 2580, 2563-2582, 2564-2581, 2564-2583, 2565-2584, 2566-2583, 2566-2585, 2567-2582, 2567- 2584, 2567-2586, 2568-2583, 2568-2585, 2568-2587, 2569-2586, 2569-2588, 2570-2585, 2570- 2587, 2570-2589, 2571-2586, 2571-2588, 2571-2590, 2572-2589, 2572-2590, 2572-2591, 2573- 2590, 2573-2592, 2574-2590, 2574-2591, 2574-2593, 2575-2590, 2575-2591, 2575-2592, 2575- 2594, 2576-2593, 2576-2595, 2577-2594, 2577-2595, 2577-2596, 2578-2594, 2578-2596, 2578- 2597, 2579-2598, 2580-2596, 2580-2597, 2580-2598, 2580-2599, 2581-2597, 2581-2598, 2581- 2599, 2581-2600, 2582-2598, 2582-2599, 2582-2600, 2582-2601, 2583-2599, 2583-2600, 2583- 2601, 2583-2602, 2584-2600, 2584-2601, 2584-2602, 2584-2603, 2585-2601, 2585-2603, 2585- 2604, 2586-2601, 2586-2602, 2586-2604, 2586-2605, 2587-2602, 2587-2603, 2587-2605, 2587- 2606, 2588-2603, 2588-2604, 2588-2605, 2588-2606, 2588-2607, 2589-2604, 2589-2605, 2589- 2606, 2589-2607, 2589-2608, 2590-2605, 2590-2606, 2590-2607, 2590-2608, 2590-2609, 2590- 2609, 2591-2607, 2591-2608, 2591-2609, 2591-2610, 2592-2607, 2592-2608, 2592-2609, 2592- 2610, 2592-2611, 2593-2608, 2593-2609, 2593-2610, 2593-2612, 2594-2609, 2594-2610, 2594- 2611, 2594-2612, 2594-2613, 2595-2610, 2595-2611, 2595-2612, 2595-2613, 2595-2614, 2596- 2611, 2596-2612, 2596-2613, 2596-2614, 2596-2615, 2597-2612, 2597-2612, 2597-2613, 2597- 2614, 2597-2615, 2597-2616, 2598-2613, 2598-2614, 2598-2615, 2598-2616, 2598-2617, 2599- 2614, 2599-2615, 2599-2616, 2599-2617, 2599-2618, 2600-2615, 2600-2616, 2600-2617, 2600- 2618, 2600-2619, 2601-2616, 2601-2617, 2601-2618, 2601-2619, 2601-2620, 2602-2617, 2602- 2618, 2602-2619, 60 2602-2620, 2602-2621, 2603-2618, 2603-2619, 2603-2620, 2603-2621, 2603- 2622, 2604-2619,
2604-2620, 2604-2621, 2604-2622, 2604-2623, 2605-2620, 2605-2621, 2605- 2622, 2605-2623, 2605-2624, 2606-2621, 2606-2622, 2606-2623, 2606-2624, 2606-2625, 2607- 2622, 2607-2623, 2607-2624, 2607-2625, 2607-2626, 2608-2623, 2608-2624, 2608-2625, 2608- 2626, 2608-2627, 2609-2624, 2609-2625, 2609-2626, 2609-2627, 2609-2628, 2610-2625, 2610- 2626, 2610-2627, 2610-2628, 2610-2629, 2611-2626, 2611-2627, 2611-2628, 2611-2629, 2611- 2630, 2612-2627, 2612-2628, 2612-2629, 2612-2630, 2612-2631, 2613-2628, 2613-2629, 2613-2630, 2613-2631, 2614-2629, 2614-2630, 2614-2631, 2615-2630, 2615-2631 або 2616-2631 послідовності 5ЕО ІЮ
МО: 1, при цьому зазначена послідовність нуклеотидних основ модифікованого олігонуклеотида щонайменше на 85 95, щонайменше на 90 95, щонайменше на 95 95 або на 100 до комплементарна 5ЕО ІО МО: 1.
В деяких варіантах реалізації запропоновано сполуку, що містить модифікований олігонуклеотид, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, комплементарних в межах нуклеотидних основ 1608-1627, 1685-1704, 1686-1705, 1751-1770, 1769-1784, 1871-1890, 1872-1891, 1873-1892, 1875-1890, 1875-1894, 1877-1892, 1877-1896, 1878-1897, 1879-1894, 1879-1898, 2288-2307, 2808-2827, 2846-2865, 2852-2871, 2946-2965, 3773-3792, 3819-3838, 3825-3844, 3831-3850, 3834-3853, 3837-3856, 3843-3862, 4151-4166, 4151-4170, 4153-4172, 4159-4178, 4184-4203, 4211-4230, 4609-4628, 4612-4631, 4615-4634, 4621-4640, 4642-4661, 4648-4667, 4686-4705, 4689-4708, 4692-4711, 4698-4717, 4714-4733, 5270-5289, 5295-5314, 5296-5315, 5830-5849, 5890-5909, 5904-5923, 6406-6425, 6662-6681, 6674-6693, 6954-6973, 6960-6979, 6977-6996, 6979-6998, 6981-7000, 6983-6998, 6983-7002, 6984-7003, 6985-7000, 6985-7004, 6990-7009, 7122-7141, 7125-7144, 7151-7170, 7353-7372, 7362-7381, 7683-7702, 7688-7707, 7690-7709, 7692-7707, 7692-7711, 7694-7709, 7694-7713, 7696-7711, 7696-7715, 7767-7786, 7785-7804, 7786-7801, 7787-7803, 7787-7805, 7787-7806, 7788-7803, 7788-7805, 7788-7806, 7788-7807, 7789-7806, 7789-7807, 7789-7808, 7790-7805, 7790-7807, 7790-7809, 7791-7808, 7791-7809, 7791-7810, 7792-7808, 7792-7809, 7792-7810, 7792-7811, 7793-7810, 7793-7811, 7793-7812, 7794-7811, 7794-7812, 7794-7813, 7795-7812, 7795-7813, 7795-7814, 7796-7811, 7796-7813, 7796-7814, 7796-7815, 7797-7812, 7797-7814, 7797-7816, 7798-7813, 7798-7815, 7798-7817, 7799-7816, 7799-7818, 7800-7819, 7801-7818, 7801-7820, 7802-7817, 7802-7819, 7802-7821, 7803-7818, 7803-7820, 7803-7822, 7804-7821, 7804-7823, 7805-7820,
Зо 7805-7822, 7805-7824, 7806-7821, 7806-7823, 7806-7825, 7807-7824, 7807-7825, 7807-7826, 7808-7825, 7808-7827, 7809-7825, 7809-7826, 7809-7828, 7810-7825, 7810-7826, 7810-7827, 7810-7829, 7811-7828, 7811-7830, 7812-7829, 7812-7830, 7812-7831, 7813-7829, 7813-7831, 7813-7832, 7814-7833, 7815-7831, 7815-7832, 7815-7833, 7815-7834, 7816-7832, 7816-7833, 7816-7834, 7816-7835, 7817-7833, 7817-7834, 7817-7835, 7817-7836, 7818-7834, 7818-7835, 7818-7836, 7818-7837, 7819-7835, 7819-7836, 7819-7837, 7819-7838, 7820-7836, 7820-7838, 7820-7839, 7821-7836, 7821-7837, 7821-7839, 7821-7840, 7822-7837, 7822-7838, 7822-7840, 7822-7841, 7823-7838, 7823-7839, 7823-7839, 7823-7840, 7823-7841, 7823-7842, 7824-7839, 7824-7840, 7824-7840, 7824-7841, 7824-7842, 7824-7843, 7825-7840, 7825-7841, 7825-7842, 7825- 7843, 7825-7844, 7826-7842, 7826-7843, 7826-7844, 7826-7845, 7827-7842, 7827-7843, 7827-7844, 7827-7845, 7827-7846, 7828-7843, 7828-7844, 7828-7845, 7828-7847, 7829-7844, 7829-7845, 7829- 7846, 7829-7847, 7829-7848, 7830-7845, 7830-7846, 7830-7847, 7830-7848, 7830-7849, 7831-7846, 7831-7847, 7831-7848, 7831-7849, 7831-7850, 7832-7847, 7832-7848, 7832-7849, 7832-7850, 7832- 7851, 7833-7848, 7833-7849, 7833-7850, 7833-7851, 7833-7852, 7834-7849, 7834-7850, 7834-7851, 7834-7852, 7834-7853, 7835-7850, 7835-7851, 7835-7852, 7835-7853, 7835-7854, 7836-7851, 7836- 7852, 7836-7853, 7836-7854, 7836-7855, 7837-7852, 7837-7853, 7837-7854, 7837-7855, 7837-7856, 7838-7853, 7838-7854, 7838-7855, 7838-7856, 7838-7857, 7839-7854, 7839-7855, 7839-7856, 7839- 7857, 7839-7858, 7840-7855, 7840-7856, 7840-7857, 7840-7858, 7840-7859, 7841-7856, 7841-7857, 7841-7858, 7841-7859, 7841-7860, 7842-7857, 7842-7858, 7842-7859, 7842-7860, 7842-7861, 7843- 7858, 7843-7859, 7843-7860, 7843-7861, 7843-7862, 7844-7859, 7844-7860, 7844-7861, 7844-7862, 7845-7860, 7845-7861, 7845-7862, 7846-7861 або 7846-7862 послідовності 5ЕО ІО МО: 2, при цьому вказаний модифікований олігонуклеотид щонайменше на 85 95, щонайменше на 90 95, щонайменше на 95 95 або на 100 95 комплементарний 5ЕО ІО МО: 2.
В деяких варіантах реалізації запропоновано сполуку, що містить модифікований олігонуклеотид, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що має послідовність нуклеотидних основ, що містить частину з щонайменше 8 суміжних нуклеотидних основ, комплементарних частині, що має однакову довжину, з нуклеотидних основ 1608-1627, 1685- 1704, 1686-1705, 1751-1770, 1769-1784, 1871-1890, 1872-1891, 1873-1892, 1875-1890, 1875- 1894, 1877-1892, 1877-1896, 1878-1897, 1879-1894, 1879-1898, 2288-2307, 2808-2827, 2846- 2865, 2852-2871, 2946-2965, 3773-3792, 3819-3838, 3825-3844, 3831-3850, 3834-3853, (510) 3837- 3856, 3843-3862, 4151-4166, 4151-4170, 4153-4172, 4159-4178, 4184-4203, 4211-4230,
4609- 4628, 4612-4631, 4615-4634, 4621-4640, 4642-4661, 4648-4667, 4686-4705, 4689-4708, 4692- 4711, 4698-4717, 4714-4733, 5270-5289, 5295-5314, 5296-5315, 5830-5849, 5890-5909, 5904- 5923, 6406-6425, 6662-6681, 6674-6693, 6954-6973, 6960-6979, 6977-6996, 6979-6998, 6981- 7000, 6983-6998, 6983-7002, 6984-7003, 6985-7000, 6985-7004, 6990-7009, 7122-7141, 7125- 7144, 7151-7170, 7353-7372, 7362-7381, 7683-7702, 7688-7707, 7690-7709, 7692-7707, 7692- 7711, 7694-7709, 7694-7713, 7696-7711, 7696-7715, 7767-7786, 7785-7804, 7786-7801, 7787- 7803, 7787-7805, 7787-7806, 7788-7803, 7788-7805, 7788-7806, 7788-7807, 7789-7806, 7789- 7807, 7789-7808, 7790-7805, 7790-7807, 7790-7809, 7791-7808, 7791-7809, 7791-7810, 7792-7808, 7792-7809, 7792-7810, 7792-7811, 7793-7810, 7793-7811, 7793-7812, 7794-7811, 7794- 7812, 7794-7813, 7795-7812, 7795-7813, 7795-7814, 7796-7811, 7796-7813, 7796-7814, 7796- 7815, 7797-7812, 7797-7814, 7797-7816, 7798-7813, 7798-7815, 7798-7817, 7799-7816, 7799- 7818, 7800-7819, 7801-7818, 7801-7820, 7802-7817, 7802-7819, 7802-7821, 7803-7818, 7803- 7820, 7803-7822, 7804-7821, 7804-7823, 7805-7820, 7805-7822, 7805-7824, 7806-7821, 7806- 7823, 7806-7825, 7807-7824, 7807-7825, 7807-7826, 7808-7825, 7808-7827, 7809-7825, 7809- 7826, 7809-7828, 7810-7825, 7810-7826, 7810-7827, 7810-7829, 7811-7828, 7811-7830, 7812- 7829, 7812-7830, 7812-7831, 7813-7829, 7813-7831, 7813-7832, 7814-7833, 7815-7831, 7815- 7832, 7815-7833, 7815-7834, 7816-7832, 7816-7833, 7816-7834, 7816-7835, 7817-7833, 7817- 7834, 7817-7835, 7817-7836, 7818-7834, 7818-7835, 7818-7836, 7818-7837, 7819-7835, 7819- 7836, 7819-7837, 7819-7838, 7820-7836, 7820-7838, 7820-7839, 7821-7836, 7821-7837, 7821- 7839, 7821-7840, 7822-7837, 7822-7838, 7822-7840, 7822-7841, 7823-7838, 7823-7839, 7823- 7839, 7823-7840, 7823-7841, 7823-7842, 7824-7839, 7824-7840, 7824-7840, 7824-7841, 7824- 7842, 7824-7843, 7825-7840, 7825-7841, 7825-7842, 7825-7843, 7825-7844, 7826-7842, 7826- 7843, 7826-7844, 7826-7845, 7827-7842, 7827-7843, 7827-7844, 7827-7845, 7827-7846, 7828- 7843, 7828-7844, 7828-7845, 7828-7847, 7829-7844, 7829-7845, 7829-7846, 7829-7847, 7829- 7848, 7830-7845, 7830-7846, 7830-7847, 7830-7848, 7830-7849, 7831-7846, 7831-7847, 7831- 7848, 7831-7849, 7831-7850, 7832-7847, 7832-7848, 7832-7849, 7832-7850, 7832-7851, 7833- 7848, 7833-7849, 7833-7850, 7833-7851, 7833-7852, 7834-7849, 7834-7850, 7834-7851, 7834- 7852, 7834-7853, 7835-7850, 7835-7851, 7835-7852, 7835-7853, 7835-7854, 7836-7851, 7836- 7852, 7836-7853, 7836-7854, 7836-7855, 7837-7852, 7837-7853, 7837-7854, 7837-7855,
Зо 7837- 7856, 7838-7853, 7838-7854, 7838-7855, 7838-7856, 7838-7857, 7839-7854, 7839-7855, 7839- 7856, 7839-7857, 7839-7858, 7840-7855, 7840-7856, 7840-7857, 7840-7858, 7840-7859, 7841- 7856, 7841-7857, 7841-7858, 7841-7859, 7841-7860, 7842-7857, 7842-7858, 7842-7859, 7842- 7860, 7842-7861, 7843-7858, 7843-7859, 7843-7860, 7843-7861, 7843-7862, 7844-7859, 7844-7860, 7844-7861, 7844-7862, 7845-7860, 7845-7861, 7845-7862, 7846-7861 і 7846-7862 послідовності 5ЕО І МО: 2, при цьому зазначена послідовність нуклеотидних основ модифікованого олігонуклеотида щонайменше на 85 95, щонайменше на 90 95, щонайменше на 95 95 або на 100 95 комплементарна 5ЕО ІЮ МО: 2.
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки або олігонуклеотиди націлені на область нуклеїнової кислоти СЕВ. В деяких варіантах реалізації такі сполуки або олігонуклеотиди, що націлені на область нуклеїнової кислоти СЕВ, містять частину з суміжних нуклеотидних основ, яка комплементарна частині, що має однакову довжину, з нуклеотидних основ в зазначеній області. Наприклад, зазначена частина може являти собою частину з щонайменше 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 або 16 суміжних нуклеотидних основ, комплементарних частини, що має однакову довжину, області, зазначеній у даному описі. В деяких варіантах реалізації такі сполуки або олігонуклеотид націлені на наступні нуклеотидні області послідовності ФЕО ІЮО МО: 1: 30-49, 48-63, 150-169, 151-170, 152-171, 154-169, 154-173, 156-171, 156-175, 157-176, 158-173, 158-177, 480-499, 600-619, 638-657, 644-663, 738-757, 1089-1108, 1135-1154, 1141-1160, 1147-1166, 1150-1169, 1153-1172, 1159- 1178, 1162-1181, 1165-1184, 1171-1186, 1171-1190, 1173-1188, 1173-1192, 1175-1190, 1175- 1194, 1177-1196, 1183-1202, 1208-1227, 1235-1254, 1298-1317, 1304-1323, 1310-1329, 1316- 1335, 1319-1338, 1322-1341, 1328-1347, 1349-1368, 1355-1374, 1393-1412, 1396-1415, 1399- 1418, 1405-1424, 1421-1440, 1621-1640, 1646-1665, 1646-1665, 1647-1666, 1689-1708, 1749- 1768, 1763-1782, 1912-1931, 2073-2092, 2085-2104, 2166-2185, 2172-2191, 2189-2208, 2191- 2210, 2193-2212, 2195-2210, 2195-2214, 2196-2215, 2197-2212, 2197-2216, 2202-2221, 2223- 2238, 2223-2242, 2225-2240, 2226-2245, 2227-2242, 2227-2246, 2238-2257, 2241-2260, 2267- 2286, 2361-2380, 2388-2407, 2397-2416, 2448-2467, 2453-2472, 2455-2474, 2457-2472, 2457- 2476, 2459-2474, 2459-2478, 2461-2476, 2461-2480, 2532-2551, 2550-2569, 2551-2566, 2551- 2570, 2552-2568, 2552-2570, 2552-2571, 2553-2568, 2553-2570, 2553-2571, 2553-2572, 2554- 2571, 2554-2572, 2554-2573, 2555-2570, 2555-2572, 2555-2574, 2556-2573, 2556-2574, 2556- 2575, 2557-2573, 60 2557-2574, 2557-2575, 2557-2576, 2558-2575, 2558-2576, 2558-2577, 2559- 2576, 2559-2577,
2559-2578, 2560-2577, 2560-2578, 2560-2579, 2561-2576, 2561-2578, 2561- 2579, 2561-2580, 2562-2577, 2562-2579, 2562-2581, 2563-2578, 2563-2580, 2563-2582, 2564- 2581, 2564-2583, 2565-2584, 2566-2583, 2566-2585, 2567-2582, 2567-2584, 2567-2586, 2568- 2583, 2568-2585, 2568-2587, 2569-2586, 2569-2588, 2570-2585, 2570-2587, 2570-2589, 2571- 2586, 2571-2588, 2571-2590, 2572-2589, 2572-2590, 2572-2591, 2573-2590, 2573-2592, 2574- 2590, 2574-2591, 2574-2593, 2575-2590, 2575-2591, 2575-2592, 2575-2594, 2576-2593, 2576- 2595, 2577-2594, 2577-2595, 2577-2596, 2578-2594, 2578-2596, 2578-2597, 2579-2598, 2580- 2596, 2580-2597, 2580-2598, 2580-2599, 2581-2597, 2581-2598, 2581-2599, 2581-2600, 2582- 2598, 2582-2599, 2582-2600, 2582-2601, 2583-2599, 2583-2600, 2583-2601, 2583-2602, 2584- 2600, 2584-2601, 2584-2602, 2584-2603, 2585-2601, 2585-2603, 2585-2604, 2586-2601, 2586- 2602, 2586-2604, 2586-2605, 2587-2602, 2587-2603, 2587-2605, 2587-2606, 2588-2603, 2588- 2604, 2588-2605, 2588-2606, 2588-2607, 2589-2604, 2589-2605, 2589-2606, 2589-2607, 2589-2608, 2590-2605, 2590-2606, 2590-2607, 2590-2608, 2590-2609, 2590-2609, 2591-2607, 2591-2608, 2591-2609, 2591-2610, 2592-2607, 2592-2608, 2592-2609, 2592-2610, 2592-2611, 2593-2608, 2593-2609, 2593-2610, 2593-2612, 2594-2609, 2594-2610, 2594-2611, 2594-2612, 2594-2613, 2595-2610, 2595-2611, 2595-2612, 2595-2613, 2595-2614, 2596-2611, 2596-2612, 2596-2613, 2596-2614, 2596-2615, 2597-2612, 2597-2612, 2597-2613, 2597-2614, 2597-2615, 2597-2616, 2598-2613, 2598-2614, 2598-2615, 2598-2616, 2598-2617, 2599-2614, 2599-2615, 2599-2616, 2599-2617, 2599-2618, 2600-2615, 2600-2616, 2600-2617, 2600-2618, 2600-2619, 2601-2616, 2601-2617, 2601-2618, 2601-2619, 2601-2620, 2602-2617, 2602-2618, 2602-2619, 2602-2620, 2602-2621, 2603-2618, 2603-2619, 2603-2620, 2603-2621, 2603-2622, 2604-2619, 2604-2620, 2604-2621, 2604-2622, 2604-2623, 2605-2620, 2605-2621, 2605-2622, 2605-2623, 2605-2624, 2606-2621, 2606-2622, 2606-2623, 2606-2624, 2606-2625, 2607-2622, 2607-2623, 2607-2624, 2607-2625, 2607-2626, 2608-2623, 2608-2624, 2608-2625, 2608-2626, 2608-2627, 2609-2624, 2609-2625, 2609-2626, 2609-2627, 2609-2628, 2610-2625, 2610-2626, 2610-2627, 2610-2628, 2610-2629, 2611-2626, 2611-2627, 2611-2628, 2611-2629, 2611-2630, 2612-2627, 2612-2628, 2612-2629, 2612-2630, 2612-2631, 2613-2628, 2613-2629, 2613-2630, 2613-2631, 2614-2629, 2614-2630, 2614-2631, 2615-2630, 2615-2631 і 2616-2631.
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки або олігонуклеотиди націлені на
Зо область нуклеїнової кислоти СЕВ. В деяких варіантах реалізації такі сполуки або олігонуклеотиди, що націлені на область нуклеїнової кислоти СЕВ, містять частину з суміжних нуклеотидних основ, яка комплементарна частині, що має однакову довжину, з нуклеотидних основ в зазначеній області. Наприклад, зазначена частина може являти собою частину з щонайменше 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 або 16 суміжних нуклеотидних основ, комплементарних частині, що має однакову довжину, області, зазначеної в даному описі. В деяких варіантах реалізації такі сполуки або олігонуклеотид націлені на наступні нуклеотидні області послідовності ФЕО ІЮ МО: 2: 1608-1627, 1685-1704, 1686-1705, 1751- 1770, 1769-1784, 1871-1890, 1872-1891, 1873 1892 1875-1890, 1875-1894, 1877-1892, 1877- 1896, 1878-1897, 1879-1894, 1879-1898, 2288-2307, 2808-2827, 2846-2865, 2852-2871, 2946- 2965, 3773-3792, 3819-3838, 3825-3844, 3831-3850, 3834-3853, 3837-3856, 3843-3862, 4151- 4166, 4151-4170, 4153-4172, 4159-4178, 4184-4203, 4211-4230, 4609-4628, 4612-4631, 4615-4634, 4621-4640, 4642-4661, 4648-4667, 4686-4705, 4689-4708, 4692-4711, 4698-4717, 4714-4733, 5270-5289, 5295-5314, 5296-5315, 5830-5849, 5890-5909, 5904-5923, 6406-6425, 6662-6681, 6674-6693, 6954-6973, 6960-6979, 6977-6996, 6979-6998, 6981-7000, 6983-6998, 6983-7002, 6984-7003, 6985-7000, 6985-7004, 6990-7009, 7122-7141, 7125-7144, 7151-7170, 7353-7372, 7362-7381, 7683-7702, 7688-7707, 7690-7709, 7692-7707, 7692-7711, 7694-7709, 7694-7713, 7696-7711, 7696-7715, 7767-7786, 7785-7804, 7786-7801, 7787-7803, 7787-7805, 7787-7806, 7788-7803, 7788-7805, 7788-7806, 7788-7807, 7789-7806, 7789-7807, 7789-7808, 7790-7805, 7790-7807, 7790-7809, 7791-7808, 7791-7809, 7791-7810, 7792-7808, 7792-7809, 7792-7810, 7792-7811, 7793-7810, 7793-7811, 7793-7812, 7794-7811, 7794-7812, 7794-7813, 7795- 7812, 7795-7813, 7795-7814, 7796-7811, 7796-7813, 7796-7814, 7796-7815, 7797-7812, 7797- 7814, 7797-7816, 7798-7813, 7798-7815, 7798-7817, 7799-7816, 7799-7818, 7800-7819, 7801- 7818, 7801-7820, 7802-7817, 7802-7819, 7802-7821, 7803-7818, 7803-7820, 7803-7822, 7804- 7821, 7804-7823, 7805-7820, 7805-7822, 7805-7824, 7806-7821, 7806-7823, 7806-7825, 7807- 7824, 7807-7825, 7807-7826, 7808-7825, 7808-7827, 7809-7825, 7809-7826, 7809-7828, 7810- 7825, 7810-7826, 7810-7827, 7810-7829, 7811-7828, 7811-7830, 7812-7829, 7812-7830, 7812- 7831, 7813-7829, 7813-7831, 7813-7832, 7814-7833, 7815-7831, 7815-7832, 7815-7833, 7815- 7834, 7816-7832, 7816-7833, 7816-7834, 7816-7835, 7817-7833, 7817-7834, 7817-7835, 7817- 7836, 7818-7834, 7818-7835, 7818-7836, 7818-7837, 7819-7835, 7819-7836, 7819-7837, 7819- 7838, 7820-7836, 60 7820-7838, 7820-7839, 7821-7836, 7821-7837, 7821-7839, 7821-7840, 7822- 7837, 7822-7838,
7822-7840, 7822-7841, 7823-7838, 7823-7839, 7823-7839, 7823-7840, 7823- 7841, 7823-7842, 7824-7839, 7824-7840, 7824-7840, 7824-7841, 7824-7842, 7824-7843, 7825- 7840, 7825-7841, 7825-7842, 7825-7843, 7825-7844, 7826-7842, 7826-7843, 7826-7844, 7826- 7845, 7827-7842, 7827-7843, 7827-7844, 7827-7845, 7827-7846, 7828-7843, 7828-7844, 7828- 7845, 7828-7847, 7829-7844, 7829-7845, 7829-7846, 7829-7847, 7829-7848, 7830-7845, 7830- 7846, 7830-7847, 7830-7848, 7830-7849, 7831-7846, 7831-7847, 7831-7848, 7831-7849, 7831- 7850, 7832-7847, 7832-7848, 7832-7849, 7832-7850, 7832-7851, 7833-7848, 7833-7849, 7833- 7850, 7833-7851, 7833-7852, 7834-7849, 7834-7850, 7834-7851, 7834-7852, 7834-7853, 7835- 7850, 7835-7851, 7835-7852, 7835-7853, 7835-7854, 7836-7851, 7836-7852, 7836-7853, 7836- 7854, 7836-7855, 7837-7852, 7837-7853, 7837-7854, 7837-7855, 7837-7856, 7838-7853, 7838- 7854, 7838-7855, 7838-7856, 7838-7857, 7839-7854, 7839-7855, 7839-7856, 7839-7857, 7839- 7858, 7840-7855, 7840-7856, 7840-7857, 7840-7858, 7840-7859, 7841-7856, 7841-7857, 7841- 7858, 7841-7859, 7841-7860, 7842-7857, 7842-7858, 7842-7859, 7842-7860, 7842-7861, 7843- 7858, 7843-7859, 7843-7860, 7843-7861, 7843-7862, 7844-7859, 7844-7860, 7844-7861, 7844- 7862, 7845-7860, 7845-7861, 7845-7862, 7846-7861 і 7846-7862.
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки або олігонуклеотиди націлені на 3'- нетрансльовану область (З'НТО) нуклеїнової кислоти СЕВ. В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки або олігонуклеотиди націлені на нуклеотиди 2574-2626 нуклеїнової кислоти СЕВ, що має послідовність нуклеотидних основ 5ЕО ІЮО МО: 1. В5 деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки або олігонуклеотиди містять частину з щонайменше 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 або 16 суміжних нуклеотидних основ, комплементарних частині, що має однакову довжину, в межах нуклеотидів 2574-2626 нуклеїнової кислоти СЕВ, що має послідовність нуклеотидних основ 5ЕСО ІО МО: 1.
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки або олігонуклеотиди націлені на область нуклеїнової кислоти СЕВ, що має послідовність нуклеотидних основ 5ЕО ІО МО: 1, в межах нуклеотидних основ 2457-2631, 2457-2472, 2457-2474, 2457-2476, 2457-2566, 2457-2570, 2457-2571, 2457-2572, 2457-2573, 2457-2574, 2457-2575, 2457-2576, 2457-2577, 2457-2578, 2457-2579, 2457-2580, 2457-2581, 2457-2582, 2457-2583, 2457-2584, 2457-2585, 2457-2586, 2457-2587, 2457-2588, 2457-2589, 2457-2590, 2457-2591, 2457-2592, 2457-2593, 2457-2594,
Зо 2457-2595, 2457-2596, 2457-2597, 2457-2598, 2457-2599, 2457-2600, 2457-2601, 2457-2602, 2457-2603, 2457-2604, 2457-2605, 2457-2606, 2457-2607, 2457-2608, 2457-2609, 2457-2610, 2457-2611, 2457-2612, 2457-2613, 2457-2614, 2457-2615, 2457-2616, 2457-2617, 2457-2618, 2457-2619, 2457-2620, 2457-2621, 2457-2622, 2457-2623, 2457-2624, 2457-2625, 2457-2626, 2457-2627, 2457-2628, 2457-2629, 2457-2630, 2457-2631, 2459-2474, 2459-2476, 2459-2566, 2459-2570, 2459-2571, 2459-2572, 2459-2573, 2459-2574, 2459-2575, 2459-2576, 2459-2577, 2459-2578, 2459-2579, 2459-2580, 2459-2581, 2459-2582, 2459-2583, 2459-2584, 2459-2585, 2459-2586, 2459-2587, 2459-2588, 2459-2589, 2459-2590, 2459-2591, 2459-2592, 2459-2593, 2459-2594, 2459-2595, 2459-2596, 2459-2597, 2459-2598, 2459-2599, 2459-2600, 2459-2601, 2459-2602, 2459-2603, 2459-2604, 2459-2605, 2459-2606, 2459-2607, 2459-2608, 2459-2609, 2459-2610, 2459-2611, 2459-2612, 2459-2613, 2459-2614, 2459-2615, 2459-2616, 2459-2617, 2459-2618, 2459-2619, 2459-2620, 2459-2621, 2459-2622, 2459-2623, 2459-2624, 2459-2625, 2459-2626, 2459-2627, 2459-2628, 2459-2629, 2459-2630, 2459-2631, 2461-2476, 2461-2566, 2461-2570, 2461-2571, 2461-2572, 2461-2573, 2461-2574, 2461-2575, 2461-2576, 2461-2577, 2461-2578, 2461-2579, 2461-2580, 2461-2581, 2461-2582, 2461-2583, 2461-2584, 2461-2585, 2461-2586, 2461-2587, 2461-2588, 2461-2589, 2461-2590, 2461-2591, 2461-2592, 2461-2593, 2461-2594, 2461-2595, 2461-2596, 2461-2597, 2461-2598, 2461-2599, 2461-2600, 2461-2601, 2461-2602, 2461-2603, 2461-2604, 2461-2605, 2461-2606, 2461-2607, 2461-2608, 2461-2609, 2461-2610, 2461-2611, 2461-2612, 2461-2613, 2461-2614, 2461-2615, 2461-2616, 2461-2617, 2461-2618, 2461-2619, 2461-2620, 2461-2621, 2461-2622, 2461-2623, 2461-2624, 2461-2625, 2461-2626, 2461-2627, 2461-2628, 2461-2629, 2461-2630, 2461-2631, 2551-2566, 2551-2570, 2551-2571, 2551-2572, 2551-2573, 2551-2574, 2551-2575, 2551-2576, 2551-2577, 2551-2578, 2551-2579, 2551-2580, 2551-2581, 2551-2582, 2551-2583, 2551-2584, 2551-2585, 2551-2586, 2551-2587, 2551-2588, 2551-2589, 2551-2590, 2551-2591, 2551-2592, 2551-2593, 2551-2594, 2551-2595, 2551-2596, 2551-2597, 2551-2598, 2551-2599, 2551-2600, 2551-2601, 2551-2602, 2551-2603, 2551-2604, 2551-2605, 2551-2606, 2551-2607, 2551-2608, 2551-2609, 2551-2610, 2551-2611, 2551-2612, 2551-2613, 2551-2614, 2551-2615, 2551-2616, 2551-2617, 2551-2618, 2551-2619, 2551-2620, 2551-2621, 2551-2622, 2551-2623, 2551-2624, 2551-2625, 2551-2626, 2551-2627, 2551-2628, 2551-2629, 2551-2630, 2551-2631, 2553-2570, 2553-2571, 2553-2572, 2553-2573, 2553-2574, 2553-2575, 2553-2576, 2553-2577, 2553-2578, 2553-2579, 2553-2580, 60 2553-2581, 2553-2582, 2553-2583, 2553-2584, 2553-2585, 2553-2586, 2553-2587, 2553-2588,
2553-2589, 2553-2590, 2553-2591, 2553-2592, 2553-2593, 2553-2594, 2553-2595, 2553-2596, 2553-2597, 2553-2598, 2553-2599, 2553-2600, 2553-2601, 2553-2602, 2553-2603, 2553-2604, 2553-2605, 2553-2606, 2553-2607, 2553-2608, 2553-2609, 2553-2610, 2553-2611, 2553-2612, 2553-2613, 2553-2614, 2553-2615, 2553-2616, 2553-2617, 2553-2618, 2553-2619, 2553-2620, 2553-2621, 2553-2622, 2553-2623, 2553-2624, 2553-2625, 2553-2626, 2553-2627, 2553-2628, 2553-2629, 2553-2630, 2553-2631, 2554-2573, 2554-2574, 2554-2575, 2554-2576, 2554-2577, 2554-2578, 2554-2579, 2554-2580, 2554-2581, 2554-2582, 2554-2583, 2554-2584, 2554-2585, 2554-2586, 2554-2587, 2554-2588, 2554-2589, 2554-2590, 2554-2591, 2554-2592, 2554-2593, 2554-2594, 2554-2595, 2554-2596, 2554-2597, 2554-2598, 2554-2599, 2554-2600, 2554-2601, 2554-2602, 2554-2603, 2554-2604, 2554-2605, 2554-2606, 2554-2607, 2554-2608, 2554-2609, 2554-2610, 2554-2611, 2554-2612, 2554-2613, 2554-2614, 2554-2615, 2554-2616, 2554-2617, 2554-2618, 2554-2619, 2554-2620, 2554-2621, 2554-2622, 2554-2623, 2554-2624, 2554-2625, 2554-2626, 2554-2627, 2554-2628, 2554-2629, 2554-2630, 2554-2631, 2555-2572, 2555-2573, 2555-2574, 2555-2575, 2555-2576, 2555-2577, 2555-2578, 2555-2579, 2555-2580, 2555-2581, 2555-2582, 2555-2583, 2555-2584, 2555-2585, 2555-2586, 2555-2587, 2555-2588, 2555-2589, 2555-2590, 2555-2591, 2555-2592, 2555-2593, 2555-2594, 2555-2595, 2555-2596, 2555-2597, 2555-2598, 2555-2599, 2555-2600, 2555-2601, 2555-2602, 2555-2603, 2555-2604, 2555-2605, 2555-2606, 2555-2607, 2555-2608, 2555-2609, 2555-2610, 2555-2611, 2555-2612, 2555-2613, 2555-2614, 2555-2615, 2555-2616, 2555-2617, 2555-2618, 2555-2619, 2555-2620, 2555-2621, 2555- 2622, 2555-2623, 2555-2624, 2555-2625, 2555-2626, 2555-2627, 2555-2628, 2555-2629, 2555-2630, 2555-2631, 2556-2573, 2556-2574, 2556-2575, 2556-2576, 2556-2577, 2556-2578, 2556-2579, 2556- 2580, 2556-2581, 2556-2582, 2556-2583, 2556-2584, 2556-2585, 2556-2586, 2556-2587, 2556-2588, 2556-2589, 2556-2590, 2556-2591, 2556-2592, 2556-2593, 2556-2594, 2556-2595, 2556-2596, 2556- 2597, 2556-2598, 2556-2599, 2556-2600, 2556-2601, 2556-2602, 2556-2603, 2556-2604, 2556-2605, 2556-2606, 2556-2607, 2556-2608, 2556-2609, 2556-2610, 2556-2611, 2556-2612, 2556-2613, 2556- 2614, 2556-2615, 2556-2616, 2556-2617, 2556-2618, 2556-2619, 2556-2620, 2556-2621, 2556-2622, 2556-2623, 2556-2624, 2556-2625, 2556-2626, 2556-2627, 2556-2628, 2556-2629, 2556-2630, 2556- 2631, 2557-2574, 2557-2575, 2557-2576, 2557-2577, 2557-2578, 2557-2579, 2557-2580, 2557-2581, 2557-2582, 2557-2583, 2557-2584, 2557-2585, 2557-2586, 2557-2587, 2557-2588, 2557-2589, 2557- 2590, 2557-2591, 2557-2592, 2557-2593, 2557-2594, 2557-2595, 2557-2596, 2557-2597, 2557-2598, 2557-2599, 2557-2600, 2557-2601, 2557-2602, 2557-2603, 2557-2604, 2557-2605, 2557-2606, 2557- 2607, 2557-2608, 2557-2609, 2557-2610, 2557-2611, 2557-2612, 2557-2613, 2557-2614, 2557-2615, 2557-2616, 2557-2617, 2557-2618, 2557-2619, 2557-2620, 2557-2621, 2557-2622, 2557-2623, 2557- 2624, 2557-2625, 2557-2626, 2557-2627, 2557-2628, 2557-2629, 2557-2630, 2557-2631, 2558-2575, 2558-2576, 2558-2577, 2558-2578, 2558-2579, 2558-2580, 2558-2581, 2558-2582, 2558-2583, 2558- 2584, 2558-2585, 2558-2586, 2558-2587, 2558-2588, 2558-2589, 2558-2590, 2558-2591, 2558-2592, 2558-2593, 2558-2594, 2558-2595, 2558-2596, 2558-2597, 2558-2598, 2558-2599, 2558-2600, 2558- 2601, 2558-2602, 2558-2603, 2558-2604, 2558-2605, 2558-2606, 2558-2607, 2558-2608, 2558-2609, 2558-2610, 2558-2611, 2558-2612, 2558-2613, 2558-2614, 2558-2615, 2558-2616, 2558-2617, 2558- 2618, 2558-2619, 2558-2620, 2558-2621, 2558-2622, 2558-2623, 2558-2624, 2558-2625, 2558-2626, 2558-2627, 2558-2628, 2558-2629, 2558-2630, 2558-2631, 2559-2576, 2559-2577, 2559-2578, 2559- 2579, 2559-2580, 2559-2581, 2559-2582, 2559-2583, 2559-2584, 2559-2585, 2559-2586, 2559-2587, 2559-2588, 2559-2589, 2559-2590, 2559-2591, 2559-2592, 2559-2593, 2559-2594, 2559-2595, 2559- 2596, 2559-2597, 2559-2598, 2559-2599, 2559-2600, 2559-2601, 2559-2602, 2559-2603, 2559-2604, 2559-2605, 2559-2606, 2559-2607, 2559-2608, 2559-2609, 2559-2610, 2559-2611, 2559-2612, 2559- 2613, 2559-2614, 2559-2615, 2559-2616, 2559-2617, 2559-2618, 2559-2619, 2559-2620, 2559-2621, 2559-2622, 2559-2623, 2559-2624, 2559-2625, 2559-2626, 2559-2627, 2559-2628, 2559-2629, 2559- 2630, 2559-2631, 2560-2577, 2560-2578, 2560-2579, 2560-2580, 2560-2581, 2560-2582, 2560-2583, 2560-2584, 2560-2585, 2560-2586, 2560-2587, 2560-2588, 2560-2589, 2560-2590, 2560-2591, 2560-
БО 2592, 2560-2593, 2560-2594, 2560-2595, 2560-2596, 2560-2597, 2560-2598, 2560-2599, 2560-2600, 2560-2601, 2560-2602, 2560-2603, 2560-2604, 2560-2605, 2560-2606, 2560-2607, 2560-2608, 2560- 2609, 2560-2610, 2560-2611, 2560-2612, 2560-2613, 2560-2614, 2560-2615, 2560-2616, 2560-2617, 2560-2618, 2560-2619, 2560-2620, 2560-2621, 2560-2622, 2560-2623, 2560-2624, 2560-2625, 2560- 2626, 2560-2627, 2560-2628, 2560-2629, 2560-2630, 2560-2631, 2561-2578, 2561-2579, 2561-2580, 2561-2581, 2561-2582, 2561-2583, 2561-2584, 2561-2585, 2561-2586, 2561-2587, 2561-2588, 2561- 2589, 2561-2590, 2561-2591, 2561-2592, 2561-2593, 2561-2594, 2561-2595, 2561-2596, 2561-2597, 2561-2598, 2561-2599, 2561-2600, 2561-2601, 2561-2602, 2561-2603, 2561-2604, 2561-2605, 2561- 2606, 2561-2607, 2561-2608, 2561-2609, 2561-2610, 2561-2611, 2561-2612, 2561-2613, 2561-2614, 2561-2615, 2561-2616, 2561-2617, 2561-2618, 2561-2619, 2561-2620, 2561-2621, 2561-2622, 2561- 60 2623, 2561-2624, 2561-2625, 2561-2626, 2561-2627, 2561-2628, 2561-2629, 2561-2630, 2561-2631,
2562-2577, 2562-2578, 2562-2579, 2562-2580, 2562-2581, 2562-2582, 2562-2583, 2562-2584, 2562- 2585, 2562-2586, 2562-2587, 2562-2588, 2562-2589, 2562-2590, 2562-2591, 2562-2592, 2562-2593, 2562-2594, 2562-2595, 2562-2596, 2562-2597, 2562-2598, 2562-2599, 2562-2600, 2562-2601, 2562- 2602, 2562-2603, 2562-2604, 2562-2605, 2562-2606, 2562-2607, 2562-2608, 2562-2609, 2562-2610,
2562-2611, 2562-2612, 2562-2613, 2562-2614, 2562-2615, 2562-2616, 2562-2617, 2562-2618, 2562- 2619, 2562-2620, 2562-2621, 2562-2622, 2562-2623, 2562-2624, 2562-2625, 2562-2626, 2562-2627, 2562-2628, 2562-2629, 2562-2630, 2562-2631, 2563-2580, 2563-2581, 2563-2582, 2563-2583, 2563- 2584, 2563-2585, 2563-2586, 2563-2587, 2563-2588, 2563-2589, 2563-2590, 2563-2591, 2563-2592, 2563-2593, 2563-2594, 2563-2595, 2563-2596, 2563-2597, 2563-2598, 2563-2599, 2563-2600, 2563- 102601, 2563-2602, 2563-2603, 2563-2604, 2563-2605, 2563-2606, 2563-2607, 2563-2608, 2563-2609, 2563-2610, 2563-2611, 2563-2612, 2563-2613, 2563-2614, 2563-2615, 2563-2616, 2563-2617, 2563- 2618, 2563-2619, 2563-2620, 2563-2621, 2563-2622, 2563-2623, 2563-2624, 2563-2625, 2563-2626, 2563-2627, 2563-2628, 2563-2629, 2563-2630, 2563-2631, 2564-2581, 2564-2582, 2564-2583, 2564- 2584, 2564-2585, 2564-2586, 2564-2587, 2564-2588, 2564-2589, 2564-2590, 2564-2591, 2564-2592,
15. 2564-2593, 2564-2594, 2564-2595, 2564-2596, 2564-2597, 2564-2598, 2564-2599, 2564-2600, 2564- 2601, 2564-2602, 2564-2603, 2564-2604, 2564-2605, 2564-2606, 2564-2607, 2564-2608, 2564-2609, 2564-2610, 2564-2611, 2564-2612, 2564-2613, 2564-2614, 2564-2615, 2564-2616, 2564-2617, 2564- 2618, 2564-2619, 2564-2620, 2564-2621, 2564-2622, 2564-2623, 2564-2624, 2564-2625, 2564-2626, 2564-2627, 2564-2628, 2564-2629, 2564-2630, 2564-2631, 2565-2584, 2565-2585, 2565-2586, 2565- 202587, 2565-2588, 2565-2589, 2565-2590, 2565-2591, 2565-2592, 2565-2593, 2565-2594, 2565-2595, 2565-2596, 2565-2597, 2565-2598, 2565-2599, 2565-2600, 2565-2601, 2565-2602, 2565-2603, 2565- 2604, 2565-2605, 2565-2606, 2565-2607, 2565-2608, 2565-2609, 2565-2610, 2565-2611, 2565-2612, 2565-2613, 2565-2614, 2565-2615, 2565-2616, 2565-2617, 2565-2618, 2565-2619, 2565-2620, 2565- 2621, 2565-2622, 2565-2623, 2565-2624, 2565-2625, 2565-2626, 2565-2627, 2565-2628, 2565-2629,
25 2565-2630, 2565-2631, 2566-2583, 2566-2584, 2566-2585, 2566-2586, 2566-2587, 2566-2588, 2566- 2589, 2566-2590, 2566-2591, 2566-2592, 2566-2593, 2566-2594, 2566-2595, 2566-2596, 2566-2597, 2566-2598, 2566-2599, 2566-2600, 2566-2601, 2566-2602, 2566-2603, 2566-2604, 2566-2605, 2566- 2606, 2566-2607, 2566-2608, 2566-2609, 2566-2610, 2566-2611, 2566-2612, 2566-2613, 2566-2614, 2566-2615, 2566-2616, 2566-2617, 2566-2618, 2566-2619, 2566-2620, 2566-2621, 2566-2622, 2566-
30 02623, 2566-2624, 2566-2625, 2566-2626, 2566-2627, 2566-2628, 2566-2629, 2566-2630, 2566-2631, 2567-2584, 2567-2585, 2567-2586, 2567-2587, 2567-2588, 2567-2589, 2567-2590, 2567-2591, 2567- 2592, 2567-2593, 2567-2594, 2567-2595, 2567-2596, 2567-2597, 2567-2598, 2567-2599, 2567-2600, 2567-2601, 2567-2602, 2567-2603, 2567-2604, 2567-2605, 2567-2606, 2567-2607, 2567-2608, 2567- 2609, 2567-2610, 2567-2611, 2567-2612, 2567-2613, 2567-2614, 2567-2615, 2567-2616, 2567-2617,
35 2567-2618, 2567-2619, 2567-2620, 2567-2621, 2567-2622, 2567-2623, 2567-2624, 2567-2625, 2567- 2626, 2567-2627, 2567-2628, 2567-2629, 2567-2630, 2567-2631, 2568-2585, 2568-2586, 2568-2587, 2568-2588, 2568-2589, 2568-2590, 2568-2591, 2568-2592, 2568-2593, 2568-2594, 2568-2595, 2568- 2596, 2568-2597, 2568-2598, 2568-2599, 2568-2600, 2568-2601, 2568-2602, 2568-2603, 2568-2604, 2568-2605, 2568-2606, 2568-2607, 2568-2608, 2568-2609, 2568-2610, 2568-2611, 2568-2612, 2568- 402613, 2568-2614, 2568-2615, 2568-2616, 2568-2617, 2568-2618, 2568-2619, 2568-2620, 2568-2621, 2568-2622, 2568-2623, 2568-2624, 2568-2625, 2568-2626, 2568-2627, 2568-2628, 2568-2629, 2568- 2630, 2568-2631, 2569-2586, 2569-2587, 2569-2588, 2569-2589, 2569-2590, 2569-2591, 2569-2592, 2569-2593, 2569-2594, 2569-2595, 2569-2596, 2569-2597, 2569-2598, 2569-2599, 2569-2600, 2569- 2601, 2569-2602, 2569-2603, 2569-2604, 2569-2605, 2569-2606, 2569-2607, 2569-2608, 2569-2609,
45 2569-2610, 2569-2611, 2569-2612, 2569-2613, 2569-2614, 2569-2615, 2569-2616, 2569-2617, 2569- 2618, 2569-2619, 2569-2620, 2569-2621, 2569-2622, 2569-2623, 2569-2624, 2569-2625, 2569-2626, 2569-2627, 2569-2628, 2569-2629, 2569-2630, 2569-2631, 2569-2586, 2569-2587, 2569-2588, 2569- 2589, 2569-2590, 2569-2591, 2569-2592, 2569-2593, 2569-2594, 2569-2595, 2569-2596, 2569-2597, 2569-2598, 2569-2599, 2569-2600, 2569-2601, 2569-2602, 2569-2603, 2569-2604, 2569-2605, 2569-
50 2606, 2569-2607, 2569-2608, 2569-2609, 2569-2610, 2569-2611, 2569-2612, 2569-2613, 2569-2614, 2569-2615, 2569-2616, 2569-2617, 2569-2618, 2569-2619, 2569-2620, 2569-2621, 2569-2622, 2569- 2623, 2569-2624, 2569-2625, 2569-2626, 2569-2627, 2569-2628, 2569-2629, 2569-2630, 2569-2631, 2571-2588, 2571-2589, 2571-2590, 2571-2591, 2571-2592, 2571-2593, 2571-2594, 2571-2595, 2571- 2596, 2571-2597, 2571-2598, 2571-2599, 2571-2600, 2571-2601, 2571-2602, 2571-2603, 2571-2604,
55 2571-2605, 2571-2606, 2571-2607, 2571-2608, 2571-2609, 2571-2610, 2571-2611, 2571-2612, 2571- 2613, 2571-2614, 2571-2615, 2571-2616, 2571-2617, 2571-2618, 2571-2619, 2571-2620, 2571-2621, 2571-2622, 2571-2623, 2571-2624, 2571-2625, 2571-2626, 2571-2627, 2571-2628, 2571-2629, 2571- 2630, 2571-2631, 2572-2589, 2572-2590, 2572-2591, 2572-2592, 2572-2593, 2572-2594, 2572-2595, 2572-2596, 2572-2597, 2572-2598, 2572-2599, 2572-2600, 2572-2601, 2572-2602, 2572-2603, 2572-
60 002604, 2572-2605, 2572-2606, 2572-2607, 2572-2608, 2572-2609, 2572-2610, 2572-2611, 2572-2612,
2572-2613, 2572-2614, 2572-2615, 2572-2616, 2572-2617, 2572-2618, 2572-2619, 2572-2620, 2572- 2621, 2572-2622, 2572-2623, 2572-2624, 2572-2625, 2572-2626, 2572-2627, 2572-2628, 2572-2629, 2572-2630, 2572-2631, 2573-2590, 2573-2591, 2573-2592, 2573-2593, 2573-2594, 2573-2595, 257 3- 2596, 2573-2597, 2573-2598, 2573-2599, 2573-2600, 2573-2601, 2573-2602, 2573-2603, 2573-2604,
2573-2605, 2573-2606, 2573-2607, 2573-2608, 2573-2609, 2573-2610, 2573-2611, 2573-2612, 2573- 2613, 2573-2614, 2573-2615, 2573-2616, 2573-2617, 2573-2618, 2573-2619, 2573-2620, 2573-2621, 2573-2622, 2573-2623, 2573-2624, 2573-2625, 2573-2626, 2573-2627, 2573-2628, 2573-2629, 2573- 2630, 2573-2631, 2574-2591, 2574-2592, 2574-2593, 2574-2594, 2574-2595, 2574-2596, 2574-2597, 2574-2598, 2574-2599, 2574-2600, 2574-2601, 2574-2602, 2574-2603, 2574-2604, 2574-2605, 2574-
2606, 2574-2607, 2574-2608, 2574-2609, 2574-2610, 2574-2611, 2574-2612, 2574-2613, 2574-2614, 2574-2615, 2574-2616, 2574-2617, 2574-2618, 2574-2619, 2574-2620, 2574-2621, 2574-2622, 2574- 2623, 2574-2624, 2574-2625, 2574-2626, 2574-2627, 2574-2628, 2574-2629, 2574-2630, 2574-2631, 2575-2592, 2575-2593, 2575-2594, 2575-2595, 2575-2596, 2575-2597, 2575-2598, 2575-2599, 2575- 2600, 2575-2601, 2575-2602, 2575-2603, 2575-2604, 2575-2605, 2575-2606, 2575-2607, 2575-2608,
15. 2575-2609, 2575-2610, 2575-2611, 2575-2612, 2575-2613, 2575-2614, 2575-2615, 2575-2616, 2575- 2617, 2575-2618, 2575-2619, 2575-2620, 2575-2621, 2575-2622, 2575-2623, 2575-2624, 2575-2625, 2575-2626, 2575-2627, 2575-2628, 2575-2629, 2575-2630, 2575-2631, 2576-2593, 2576-2594, 257 6- 2595, 2576-2596, 2576-2597, 2576-2598, 2576-2599, 2576-2600, 2576-2601, 2576-2602, 2576-2603, 2576-2604, 2576-2605, 2576-2606, 2576-2607, 2576-2608, 2576-2609, 2576-2610, 2576-2611, 2576-
20. 2612, 2576-2613, 2576-2614, 2576-2615, 2576-2616, 2576-2617, 2576-2618, 2576-2619, 2576-2620, 2576-2621, 2576-2622, 2576-2623, 2576-2624, 2576-2625, 2576-2626, 2576-2627, 2576-2628, 2576- 2629, 2576-2630, 2576-2631, 2577-2594, 2577-2595, 2577-2596, 2577-2597, 2577-2598, 2577-2599, 2577-2600, 2577-2601, 2577-2602, 2577-2603, 2577-2604, 2577-2605, 2577-2606, 2577-2607, 2577- 2608, 2577-2609, 2577-2610, 2577-2611, 2577-2612, 2577-2613, 2577-2614, 2577-2615, 2577-2616,
25: Й 2577-2517, 2577-2618, 2577-2619, 2577-2620, 2577-2621, 2577-2622, 2577-2623, 2577-2624, 25717- 2625, 2577-2626, 2577-2627, 2577-2628, 2577-2629, 2577-2630, 2577-2631, 2578-2597, 2578-2598, 2578-2599, 2578-2600, 2578-2601, 2578-2602, 2578-2603, 2578-2604, 2578-2605, 2578-2606, 2578- 2607, 2578-2608, 2578-2609, 2578-2610, 2578-2611, 2578-2612, 2578-2613, 2578-2614, 2578-2615, 2578-2616, 2578-2617, 2578-2618, 2578-2619, 2578-2620, 2578-2621, 2578-2622, 2578-2623, 2578-
2624, 2578-2625, 2578-2626, 2578-2627, 2578-2628, 2578-2629, 2578-2630, 2578-2631, 2579-2598, 2579-2599, 2579-2600, 2579-2601, 2579-2602, 2579-2603, 2579-2604, 2579-2605, 2579-2606, 2579- 2607, 2579-2608, 2579-2609, 2579-2610, 2579-2611, 2579-2612, 2579-2613, 2579-2614, 2579-2615, 2579-2616, 2579-2617, 2579-2618, 2579-2619, 2579-2620, 2579-2621, 2579-2622, 2579-2623, 2579- 2624, 2579-2625, 2579-2626, 2579-2627, 2579-2628, 2579-2629, 2579-2630, 2579-2631, 2580-2598,
2580-2599, 2580-2600, 2580-2601, 2580-2602, 2580-2603, 2580-2604, 2580-2605, 2580-2606, 2580- 2607, 2580-2608, 2580-2609, 2580-2610, 2580-2611, 2580-2612, 2580-2613, 2580-2614, 2580-2615, 2580-2616, 2580-2617, 2580-2618, 2580-2619, 2580-2620, 2580-2621, 2580-2622, 2580-2623, 2580- 2624, 2580-2625, 2580-2626, 2580-2627, 2580-2628, 2580-2629, 2580-2630, 2580-2631, 2581-2597, 2581-2598, 2581-2599, 2581-2600, 2581-2601, 2581-2602, 2581-2603, 2581-2604, 2581-2605, 2581-
2606, 2581-2607, 2581-2608, 2581-2609, 2581-2610, 2581-2611, 2581-2612, 2581-2613, 2581-2614, 2581-2615, 2581-2616, 2581-2617, 2581-2618, 2581-2619, 2581-2620, 2581-2621, 2581-2622, 2581- 2623, 2581-2624, 2581-2625, 2581-2626, 2581-2627, 2581-2628, 2581-2629, 2581-2630, 2581-2631, 2582-2600, 2582-2601, 2582-2602, 2582-2603, 2582-2604, 2582-2605, 2582-2606, 2582-2607, 2582- 2608, 2582-2609, 2582-2610, 2582-2611, 2582-2612, 2582-2613, 2582-2614, 2582-2615, 2582-2616,
2582-2617, 2582-2618, 2582-2619, 2582-2620, 2582-2621, 2582-2622, 2582-2623, 2582-2624, 2582- 2625, 2582-2626, 2582-2627, 2582-2628, 2582-2629, 2582-2630, 2582-2631, 2583-2601, 2583-2602, 2583-2603, 2583-2604, 2583-2605, 2583-2606, 2583-2607, 2583-2608, 2583-2609, 2583-2610, 2583- 2611, 2583-2612, 2583-2613, 2583-2614, 2583-2615, 2583-2616, 2583-2617, 2583-2618, 2583-2619, 2583-2620, 2583-2621, 2583-2622, 2583-2623, 2583-2624, 2583-2625, 2583-2626, 2583-2627, 2583-
2628, 2583-2629, 2583-2630, 2583-2631, 2585-2603, 2585-2604, 2585-2605, 2585-2606, 2585-2607, 2585-2608, 2585-2609, 2585-2610, 2585-2611, 2585-2612, 2585-2613, 2585-2614, 2585-2615, 2585- 2616, 2585-2617, 2585-2618, 2585-2619, 2585-2620, 2585-2621, 2585-2622, 2585-2623, 2585-2624, 2585-2625, 2585-2626, 2585-2627, 2585-2628, 2585-2629, 2585-2630, 2585-2631, 2586-2604, 2586- 2605, 2586-2606, 2586-2607, 2586-2608, 2586-2609, 2586-2610, 2586-2611, 2586-2612, 2586-2613,
2586-2614, 2586-2615, 2586-2616, 2586-2617, 2586-2618, 2586-2619, 2586-2620, 2586-2621, 2586- 2622, 2586-2623, 2586-2624, 2586-2625, 2586-2626, 2586-2627, 2586-2628, 2586-2629, 2586-2630, 2586-2631, 2587-2605, 2587-2606, 2587-2607, 2587-2608, 2587-2609, 2587-2610, 2587-2611, 2587- 2612, 2587-2613, 2587-2614, 2587-2615, 2587-2616, 2587-2617, 2587-2618, 2587-2619, 2587-2620, 2587-2621, 2587-2622, 2587-2623, 2587-2624, 2587-2625, 2587-2626, 2587-2627, 2587-2628, 2587-
60 002629, 2587-2630, 2587-2631, 2588-2606, 2588-2607, 2588-2608, 2588-2609, 2588-2610, 2588-2611,
2588-2612, 2588-2613, 2588-2614, 2588-2615, 2588-2616, 2588-2617, 2588-2618, 2588-2619, 2588- 2620, 2588-2621, 2588-2622, 2588-2623, 2588-2624, 2588-2625, 2588-2626, 2588-2627, 2588-2628, 2588-2629, 2588-2630, 2588-2631, 2589-2607, 2589-2608, 2589-2609, 2589-2610, 2589-2611, 2589- 2612, 2589-2613, 2589-2614, 2589-2615, 2589-2616, 2589-2617, 2589-2618, 2589-2619, 2589-2620, 2589-2621, 2589-2622, 2589-2623, 2589-2624, 2589-2625, 2589-2626, 2589-2627, 2589-2628, 2589- 2629, 2589-2630, 2589-2631, 2590-2606, 2590-2607, 2590-2608, 2590-2609, 2590-2610, 2590-2611, 2590-2612, 2590-2613, 2590-2614, 2590-2615, 2590-2616, 2590-2617, 2590-2618, 2590-2619, 2590- 2620, 2590-2621, 2590-2622, 2590-2623, 2590-2624, 2590-2625, 2590-2626, 2590-2627, 2590-2628, 2590-2629, 2590-2630, 2590-2631, 2591-2610, 2591-2611, 2591-2612, 2591-2613, 2591-2614, 2591- 102615, 2591-2616, 2591-2617, 2591-2618, 2591-2619, 2591-2620, 2591-2621, 2591-2622, 2591-2623, 2591-2624, 2591-2625, 2591-2626, 2591-2627, 2591-2628, 2591-2629, 2591-2630, 2591-2631, 2592- 2611, 2592-2612, 2592-2613, 2592-2614, 2592-2615, 2592-2616, 2592-2617, 2592-2618, 2592-2619, 2592-2620, 2592-2621, 2592-2622, 2592-2623, 2592-2624, 2592-2625, 2592-2626, 2592-2627, 2592- 2628, 2592-2629, 2592-2630, 2592-2631, 2593-2608, 2593-2612, 2593-2613, 2593-2614, 2593-2615, 2593-2616, 2593-2617, 2593-2618, 2593-2619, 2593-2620, 2593-2621, 2593-2622, 2593-2623, 2593- 2624, 2593-2625, 2593-2626, 2593-2627, 2593-2628, 2593-2629, 2593-2630, 2593-2631, 2594-2612, 2594-2613, 2594-2614, 2594-2615, 2594-2616, 2594-2617, 2594-2618, 2594-2619, 2594-2620, 2594- 2621, 2594-2622, 2594-2623, 2594-2624, 2594-2625, 2594-2626, 2594-2627, 2594-2628, 2594-2629, 2594-2630, 2594-2631, 2595-2611, 2595-2612, 2595-2613, 2595-2614, 2595-2615, 2595-2616, 2595- 20. 2617, 2595-2618, 2595-2619, 2595-2620, 2595-2621, 2595-2622, 2595-2623, 2595-2624, 2595-2625, 2595-2626, 2595-2627, 2595-2628, 2595-2629, 2595-2630, 2595-2631, 2596-2614, 2596-2615, 2596- 2616, 2596-2617, 2596-2618, 2596-2619, 2596-2620, 2596-2621, 2596-2622, 2596-2623, 2596-2624, 2596-2625, 2596-2626, 2596-2627, 2596-2628, 2596-2629, 2596-2630, 2596-2631, 2597-2612, 2597- 2613, 2597-2614, 2597-2615, 2597-2616, 2597-2617, 2597-2618, 2597-2619, 2597-2620, 2597-2621, 2597-2622, 2597-2623, 2597-2624, 2597-2625, 2597-2626, 2597-2627, 2597-2628, 2597-2629, 2597- 2630, 2597-2631, 2598-2613, 2598-2614, 2598-2615, 2598-2616, 2598-2617, 2598-2618, 2598-2619, 2598-2620, 2598-2621, 2598-2622, 2598-2623, 2598-2624, 2598-2625, 2598-2626, 2598-2627, 2598- 2628, 2598-2629, 2598-2630, 2598-2631, 2599-2614, 2599-2615, 2599-2616, 2599-2617, 2599-2618, 2599-2619, 2599-2620, 2599-2621, 2599-2622, 2599-2623, 2599-2624, 2599-2625, 2599-2626, 2599- 02627, 2599-2628, 2599-2629, 2599-2630, 2599-2631, 2600-2615, 2600-2616, 2600-2617, 2600-2618, 2600-2619, 2600-2620, 2600-2621, 2600-2622, 2600-2623, 2600-2624, 2600-2625, 2600-2626, 2600- 2627, 2600-2628, 2600-2629, 2600-2630, 2600-2631, 2601-2616, 2601-2617, 2601-2618, 2601-2619, 2601-2620, 2601-2621, 2601-2622, 2601-2623, 2601-2624, 2601-2625, 2601-2626, 2601-2627, 2601- 2628, 2601-2629, 2601-2630, 2601-2631, 2602-2618, 2602-2619, 2602-2620, 2602-2621, 2602-2622, 2602-2623, 2602-2624, 2602-2625, 2602-2626, 2602-2627, 2602-2628, 2602-2629, 2602-2630, 2602- 2631, 2603-2620, 2603-2621, 2603-2622, 2603-2623, 2603-2624, 2603-2625, 2603-2626, 2603-2627, 2603-2628, 2603-2629, 2603-2630, 2603-2631, 2604-2619, 2604-2620, 2604-2621, 2604-2622, 2604- 2623, 2604-2624, 2604-2625, 2604-2626, 2604-2627, 2604-2628, 2604-2629, 2604-2630, 2604-2631, 2605-2620, 2605-2621, 2605-2622, 2605-2623, 2605-2624, 2605-2625, 2605-2626, 2605-2627, 2605- 2628, 2605-2629, 2605-2630, 2605-2631, 2606-2621, 2606-2622, 2606-2623, 2606-2624, 2606-2625, 2606-2626, 2606-2627, 2606-2628, 2606-2629, 2606-2630, 2606-2631, 2607-2622, 2607-2623, 2607- 2624, 2607-2625, 2607-2626, 2607-2627, 2607-2628, 2607-2629, 2607-2630, 2607-2631, 2608-2623, 2608-2624, 2608-2625, 2608-2626, 2608-2627, 2608-2628, 2608-2629, 2608-2630, 2608-2631, 2609- 2624, 2609-2625, 2609-2626, 2609-2627, 2609-2628, 2609-2629, 2609-2630, 2609-2631, 2610-2625, 2610-2626, 2610-2627, 2610-2628, 2610-2629, 2610-2630, 2610-2631, 2611-2626, 2611-2627, 2611- 2628, 2611-2629, 2611-2630, 2611-2631, 2612-2627, 2612-2628, 2612-2629, 2612-2630, 2612-2631, 2613-2628, 2613-2629, 2613-2630, 2613-2631, 2614-2629, 2614-2630, 2614-2631, 2615-2630, 2615- 2631 або 2616-2631.
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки або олігонуклеотиди націлені щонайменше на 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 або 16 суміжних нуклеотидних основ в межах вищезазначених областей нуклеотидних основ. В деяких варіантах реалізації наступні нуклеотидні області послідовності 5ЕО ІО МО: 1 при націлюванні на них антисмислових сполук або олігонуклеотидів демонструють щонайменше 50 95 інгібування: 30-49, 48-63, 150- 169, 151-170, 152-171, 154-169, 154-173, 156-171, 156-175, 157-176, 158-173, 158-177, 480-499, 600-619, 638-657, 644-663, 738-757, 1089-1108, 1135-1154, 1141-1160, 1147-1166, 1150-1169, 1153-1172, 1159-1178, 1162-1181, 1165-1184, 1171-1186, 1171-1190, 1173-1188, 1173-1192, 1175-1190, 1175-1194, 1177-1196, 1183-1202, 1208-1227, 1235-1254, 1298-1317, 1304-1323, 1310-1329, 1316-1335, 1319-1338, 1322-1341, 1328-1347, 1349-1368, 1355-1374, 1393-1412, 1396-1415, 1399-1418, 1405-1424, 1421-1440, 1621-1640, 1646-1665, 1646-1665, 1647-1666, 60 1689-1708, 1749-1768, 1763-1782, 1912-1931, 2073-2092, 2085-2104, 2166-2185, 2172-2191,
2189-2208, 2191-2210, 2193-2212, 2195-2210, 2195-2214, 2196-2215, 2197-2212, 2197-2216, 2202-2221, 2223-2238, 2223-2242, 2225-2240, 2226-2245, 2227-2242, 2227-2246, 2238-2257, 2241-2260, 2267-2286, 2361-2380, 2388-2407, 2397-2416, 2448-2467, 2453-2472, 2455-2474, 2457-2472, 2457-2476, 2459-2474, 2459-2478, 2461-2476, 2461-2480, 2532-2551, 2550-2569, 2551-2566, 2551-2570, 2552-2568, 2552-2570, 2552-2571, 2553-2568, 2553-2570, 2559-2571, 2553-2572, 2554-2571, 2554-2572, 2554-2573, 2555-2570, 2555-2572, 2555-2574, 2556-2573, 2556-2574, 2556-2575, 2557-2573, 2557-2574, 2557-2575, 2557-2576, 2558-2575, 2558-2576, 2558-2577, 2559-2576, 2559-2577, 2559-2578, 2560-2577, 2560-2578, 2560-2579, 2561-2576, 2561-2578, 2561-2579, 2561-2580, 2562-2577, 2562-2579, 2562-2581, 2563-2578, 2563-2580, 2563-2582, 2564-2581, 2564-2583, 2565-2584, 2566-2583, 2566-2585, 2567-2582, 2567-2584, 2567-2586, 2568-2583, 2568-2585, 2568-2587, 2569-2586, 2569-2588, 2570-2585, 2570-2587, 2570-2589, 2571-2586, 2571-2588, 2571-2590, 2572-2589, 2572-2590, 2572-2591, 2573-2590, 2573-2592, 2574-2590, 2574-2591, 2574-2593, 2575-2590, 2575-2591, 2575-2592, 2575-2594, 2576-2593, 2576-2595, 2577-2594, 2577-2595, 2577-2596, 2578-2594, 2578-2596, 2578-2597, 2579-2598, 2580-2596, 2580-2597, 2580-2598, 2580-2599, 2581-2597, 2581-2598, 2581-2599, 2581-2600, 2582-2598, 2582-2599, 2582-2600, 2582-2601, 2583-2599, 2583-2600, 2583-2601, 2583-2602, 2584-2600, 2584-2601, 2584-2602, 2584-2603, 2585-2601, 2585-2603, 2585-2604, 2586-2601, 2586-2602, 2586-2604, 2586-2605, 2587-2602, 2587-2603, 2587-2605, 2587-2606, 2588-2603, 2588-2604, 2588-2605, 2588-2606, 2588-2607, 2589-2604, 2589-2605, 2589-2606, 2589-2607, 2589-2608, 2590-2605, 2590-2606, 2590-2607, 2590-2608, 2590-2609, 2590-2609, 2591-2607, 2591-2608, 2591-2609, 2591-2610, 2592-2607, 2592-2608, 2592-2609, 2592-2610, 2592-2611, 2593-2608, 2593-2609, 2593-2610, 2593-2612, 2594-2609, 2594-2610, 2594-2611, 2594-2612, 2594-2613, 2595-2610, 2595-2611, 2595-2612, 2595-2613, 2595-2614, 2596-2611, 2596-2612, 2596-2613, 2596-2614, 2596-2615, 2597-2612, 2597-2612, 2597-2613, 2597-2614, 2597-2615, 2597-2616, 2598-2613, 2598-2614, 2598-2615, 2598-2616, 2598-2617, 2599-2614, 2599-2615, 2599-2616, 2599-2617, 2599-2618, 2600-2615, 2600-2616, 2600-2617, 2600-2618, 2600-2619, 2601-2616, 2601-2617, 2601-2618, 2601-2619, 2601-2620, 2602-2617, 2602-2618, 2602-2619, 2602-2620, 2602-2621, 2603-2618, 2603-2619, 2603-2620, 2603-2621, 2603-2622, 2604-2619, 2604-2620, 2604-2621, 2604-2622, 2604-2623, 2605-2620, 2605-2621, 2605-2622, 2605-2623, 2605-2624, 2606-2621, 2606-2622, 2606-2623, 2606-2624, 2606-2625, 2607-2622, 2607-2623, 2607-2624, 2607-2625, 2607-2626, 2608-2623, 2608-2624, 2608-2625, 2608-2626, 2608-2627, 2609-2624, 2609-2625, 2609-2626, 2609-2627, 2609-2628, 2610-2625, 2610-2626, 2610-2627, 2610-2628, 2610-2629, 2611-2626, 2611-2627, 2611-2628, 2611-2629, 2611-2630, 2612-2627, 2612-2628, 2612-2629, 2612-2630, 2612-2631, 2613-2628, 2613-2629, 2613-2630, 0 2613-2631, 2614-2629, 2614-2630, 2614-2631, 2615-2630, 2615-2631 і 2616-2631.
В деяких варіантах реалізації наступні нуклеотидні області послідовності 5ЕО ІО МО: 2 при націлюванні на них антисмислових сполук або олігонуклеотидів демонструють щонайменше 50 95 інгібування: 1608-1627, 1685-1704, 1686-1705, 1751-1770, 1769-1784, 1871-1890, 1872-1891, 1873-1892, 1875-1890, 1875-1894, 1877-1892, 1877-1896, 1878-1897, 1879-1894, 1879-1898, 2288-2307, 2808-2827, 2846-2865, 2852-2871, 2946-2965, 3773-3792, 3819-3838, 3825-3844, 3831-3850, 3834-3853, 3837-3856, 3843-3862, 4151-4166, 4151-4170, 4153-4172, 4159-4178, 4184-4203, 4211-4230, 4609-4628, 4612-4631, 4615-4634, 4621-4640, 4642-4661, 4648-4667, 4686-4705, 4689-4708, 4692-4711, 4698-4717, 4714-4733, 5270-5289, 5295-5314, 5296-5315, 5830-5849, 5890-5909, 5904-5923, 6406-6425, 6662-6681, 6674-6693, 6954-6973, 6960-6979, 6977-6996, 6979-6998, 6981-7000, 6983-6998, 6983-7002, 6984-7003, 6985-7000, 6985-7004, 6990-7009, 7122-7141, 7125-7144, 7151-7170, 7353-7372, 7362-7381, 7683-7702, 7688-7707, 7690-7709, 7692-7707, 7692-7711, 7694-7709, 7694-7713, 7696-7711, 7696-7715, 7767-7786, 7785-7804, 7786-7801, 7787-7803, 7787-7805, 7787-7806, 7788-7803, 7788-7805, 7788-7806, 7788-7807, 7789-7806, 7789-7807, 7789-7808, 7790-7805, 7790-7807, 7790-7809, 7791-7808, 7791-7809, 7791-7810, 7792-7808, 7792-7809, 7792-7810, 7792-7811, 7793-7810, 7793-7811, 7793-7812, 7794-7811, 7794-7812, 7794-7813, 7795-7812, 7795-7813, 7795-7814, 7796-7811, 7796-7813, 7796-7814, 7796-7815, 7797-7812, 7797-7814, 7797-7816, 7798-7813, 7798-7815, 7798-7817, 7799-7816, 7799-7818, 7800-7819, 7801-7818, 7801-7820, 7802-7817, 7802-7819, 7802-7821, 7803-7818, 7803-7820, 7803-7822, 7804-7821, 7804-7823, 7805-7820, 7805-7822, 7805-7824, 7806-7821, 7806-7823, 7806-7825, 7807-7824, 7807-7825, 7807-7826, 7808-7825, 7808-7827, 7809-7825, 7809-7826, 7809-7828, 7810-7825, 7810-7826, 7810-7827, 7810-7829, 7811-7828, 7811-7830, 7812-7829, 7812-7830, 7812-7831, 7813-7829, 7813-7831, 7813-7832, 7814-7833, 7815-7831, 7815-7832, 7815-7833, 7815-7834, 7816-7832, 7816-7833, 7816-7834, 7816-7835, 7817-7833, 7817-7834, 7817-7835, 7817-7836, 7818-7834, (510) 7818-7835, 7818-7836, 7818-7837, 7819-7835, 7819-7836, 7819-7837, 7819-7838, 7820-7836,
7820-7838, 7820-7839, 7821-7836, 7821-7837, 7821-7839, 7821-7840, 7822-7837, 7822-7838, 7822-7840, 7822-7841, 7823-7838, 7823-7839, 7823-7839, 7823-7840, 7823-7841, 7823-7842, 7824-7839, 7824-7840, 7824-7840, 7824-7841, 7824-7842, 7824-7843, 7825-7840, 7825-7841, 7825-7842, 7825-7843, 7825-7844, 7826-7842, 7826-7843, 7826-7844, 7826-7845, 7827-7842, 7827-7843, 7827-7844, 7827-7845, 7827-7846, 7828-7843, 7828-7844, 7828-7845, 7828-7847, 7829-7844, 7829-7845, 7829-7846, 7829-7847, 7829-7848, 7830-7845, 7830-7846, 7830-7847, 7830-7848, 7830-7849, 7831-7846, 7831-7847, 7831-7848, 7831-7849, 7831-7850, 7832-7847, 7832-7848, 7832-7849, 7832-7850, 7832-7851, 7833-7848, 7833-7849, 7833-7850, 7833-7851, 7833-7852, 7834-7849, 7834-7850, 7834-7851, 7834-7852, 7834-7853, 7835-7850, 7835-7851, 7835-7852, 7835-7853, 7835-7854, 7836-7851, 7836-7852, 7836-7853, 7836-7854, 7836-7855, 7837-7852, 7837-7853, 7837-7854, 7837-7855, 7837-7856, 7838-7853, 7838-7854, 7838-7855, 7838-7856, 7838-7857, 7839-7854, 7839-7855, 7839-7856, 7839-7857, 7839-7858, 7840-7855, 7840-7856, 7840-7857, 7840-7858, 7840-7859, 7841-7856, 7841-7857, 7841-7858, 7841-7859, 7841-7860, 7842-7857, 7842-7858, 7842-7859, 7842-7860, 7842-7861, 7843-7858, 7843-7859, 7843-7860, 7843-7861, 7843-7862, 7844-7859, 7844-7860, 7844-7861, 7844-7862, 7845-7860, 7845-7861, 7845-7862, 7846-7861 і 7846-7862.
В деяких варіантах реалізації наступні нуклеотидні області послідовності 5ЕО ІЮО МО: 1 при націлюванні на них антисмислових сполук або олігонуклеотидів демонструють щонайменше 60 95 інгібування: 48-63, 150-169, 152-171, 154-169, 154-173, 156-171, 156- 175, 158-173, 158-177, 600-619, 1135-1154, 1141-1160, 1147-1166, 1153-1172, 1171-1186, 1173-1188, 1175-1190, 1749-1768, 1763-1782, 1763-1782, 1912-1931, 2189-2208, 2191-2210, 2193-2212, 2195-2210, 2195-2214, 2197-2212, 2197-2216, 2223-2238, 2225-2240, 2227-2242, 2238-2257, 2448-2467, 2453-2472, 2455-2474, 2457-2472, 2457-2476, 2459-2474, 2459-2478, 2461-2476, 2461-2480, 2550-2569, 2551-2566, 2552-2571, 2553-2568, 2553-2570, 2553-2571, 2553-2572, 2554-2571, 2554-2572, 2554-2573, 2555-2572, 2555-2574, 2556-2573, 2556-2574, 2556-2575, 2557-2574, 2557-2575, 2557-2576, 2558-2575, 2558-2576, 2558-2577, 2559-2576, 2559-2577, 2559-2578, 2560-2577, 2560-2578, 2560-2579, 2561-2578, 2561-2579, 2561-2580, 2562-2577, 2562-2579, 2562-2581, 2563-2578, 2563-2580, 2563-2582, 2564-2581, 2564-2583, 2565-2584, 2566-2583, 2566-2585, 2567-2582, 2567-2584, 2567-2586, 2568-2583, 2568-2585, 2568-2587, 2569-2586, 2569-2588, 2570-2587, 2570-2589, 2571-2588, 2572-2590, 2572-2591, 2573-2590, 2573-2592, 2574-2591, 2574-2593, 2575-2590, 2575-2592, 2575-2594, 2576-2593, 2576-2595, 2577-2594, 2577-2595, 2577-2596, 2578-2594, 2578-2597, 2579-2598, 2580-2596, 2580-2597, 2580-2598, 2580-2599, 2581-2597, 2581-2598, 2581-2599, 2581-2600, 2582-2598, 2582-2599, 2582-2600, 2582-2601, 2583-2599, 2583-2600, 2583-2601, 2583-2602, 2584-2600, 2584-2602, 2584-2603, 2585-2601, 2585-2603, 2585-2604, 2586-2602, 2586-2604, 2586-2605, 2587-2603, 2587-2605, 2587-2606, 2588-2603, 2588-2604, 2588-2606, 2588-2607, 2589-2605, 2589-2606, 2589-2607, 2589-2608, 2590-2605, 2590-2606, 2590-2607, 2590-2608, 2590-2609, 2591-2607, 2591-2609, 2591-2610, 2592-2608, 2592-2609, 2592-2611, 2593-2608, 2593-2609, 2593-2612, 2594-2609, 2594-2610, 2594-2611, 2594-2612, 2594-2613, 2595-2610, 2595-2611, 2595-2612, 2595-2613, 2595-2614, 2596-2611, 2596-2612, 2596-2613, 2596-2614, 2596-2615, 2597-2612, 2597-2613, 2597-2614, 2597-2615, 2597-2616, 2598-2613, 2598-2614, 2598-2615, 2598-2616, 2598-2617, 2599-2614, 2599-2615, 2599-2616, 2599-2617, 2599-2618, 2600-2615, 2600-2616, 2600-2617, 2600-2618, 2600-2619, 2601-2616, 2601-2617, 2601-2618, 2601-2619, 2601-2620, 2602-2617, 2602-2618, 2602-2619, 2602-2620, 2602-2621, 2603-2618, 2603-2619, 2603-2620, 2603-2621, 2603-2622, 2604-2619, 2604-2620, 2604-2621, 2604-2622, 2604-2623, 2605-2620, 2605-2621, 2605-2622, 2605-2623, 2605-2624, 2606-2621, 2606-2622, 2606-2623, 2606-2624, 2606-2625, 2607-2622, 2607-2623, 2607-2624, 2607-2625, 2607-2626, 2608-2623, 2608-2624, 2608-2625, 2608-2625, 2608-2626, 2608-2627, 2609-2624, 2609-2625, 2609-2626, 2609-2627, 2609-2628, 2610-2625, 2610-2626, 2610-2627, 2610-2628, 2610-2629, 2611-2626, 00 2611-2626, 2611-2627, 2611-2628, 2611-2629, 2611-2630, 2612-2627, 2612-2628, 2612-2629, 2612-2630, 2612-2631, 2613-2628, 2613-2629, 2613-2630, 2613-2631, 2614-2629, 2614-2630, 2614-2631, 2615-2630, 2615-2630, 2615-2631, 2615-2631 і 2616-2631.
В деяких варіантах реалізації наступні нуклеотидні області послідовності 5ЕО ІО МО: 2 при націлюванні на них антисмислових сполук або олігонуклеотидів демонструють щонайменше 60 95 інгібування: 1685-1704, 1686-1705, 1769-1784, 1871-1890, 1873-1892, 1875-1890, 1875-1894, 1877-1892, 1877-1896, 1879-1894, 1879-1898, 2808-2827, 3819-3838, 3825-3844, 3831-3850, 3837-3856, 4151-4166, 5890-5909, 5904-5923, 5904-5923, 6406-6425, 6977-6996, 6979-6998, 6981-7000, 6983-6998, 6983-7002, 6985-7000, 6985-7004, 7122-7141, 7683-7702, 7688-7707, 7690-7709, 7692-7707, 7692-7711, 7694-7709, 7696-7711, 7696-7715, (510) 7786-7801, 7787-7806, 7788-7803, 7788-7805, 7788-7806, 7788-7807, 7789-7806, 7789-7807,
7789-7808, 7790-7807, 7790-7809, 7791-7808, 7791-7809, 7791-7810, 7792-7809, 7792-7810, 7792-7811, 7793-7810, 7793-7811, 7793-7812, 7794-7811, 7794-7812, 7794-7813, 7795-7812, 7795-7813, 7795-7814, 7796-7813, 7796-7814, 7796-7815, 7797-7812, 7797-7814, 7797-7816, 7798-7813, 7798-7815, 7798-7817, 7799-7816, 7799-7818, 7800-7819, 7801-7818, 7801-7820, 7802-7817, 7802-7819, 7802-7821, 7803-7818, 7803-7820, 7803-7822, 7804-7821, 7804-7823, 7805-7822, 7805-7824, 7806-7823, 7806-7825, 7807-7824, 7807-7825, 7807-7826, 7808-7825, 7808-7827, 7809-7826, 7809-7828, 7810-7825, 7810-7827, 7810-7829, 7811-7828, 7811-7830, 7812-7829, 7812-7830, 7812-7831, 7813-7829, 7813-7832, 7814-7833, 7815-7831, 7815-7832, 7815-7833, 7815-7834, 7816-7832, 7816-7833, 7816-7834, 7816-7835, 7817-7833, 7817-7834, 7817-7835, 7817-7836, 7818-7834, 7818-7835, 7818-7836, 7818-7837, 7819-7835, 7819-7837, 7819-7838, 7820-7836, 7820-7838, 7820-7839, 7821-7837, 7821-7839, 7821-7840, 7822-7838, 7822-7840, 7822-7841, 7823-7838, 7823-7839, 7823-7841, 7823-7842, 7824-7840, 7824-7841, 7824-7842, 7824-7843, 7825-7840, 7825-7841, 7825-7842, 7825-7843, 7825-7844, 7826-7842, 7826-7844, 7826-7845, 7827-7843, 7827-7844, 7827-7846, 7828-7843, 7828-7844, 7828-7847, 7829-7844, 7829-7845, 7829-7846, 7829-7847, 7829-7848, 7830-7845, 7830-7846, 7830-7847, 7830-7848, 7830-7849, 7831-7846, 7831-7847, 7831-7848, 7831-7849, 7831-7850, 7832-7847, 7832-7848, 7832-7849, 7832-7850, 7832-7851, 7833-7848, 7833-7849, 7833-7850, 7833-7851, 7833-7852, 7834-7849, 7834-7850, 7834-7851, 7834-7852, 7834-7853, 7835-7850, 7835-7851, 7835-7852, 7835-7853, 7835-7854, 7836-7851, 7836-7852, 7836-7853, 7836-7854, 7836-7855, 7837-7852, 7837-7853, 7837-7854, 7837-7855, 7837-7856, 7838-7853, 7838-7854, 7838-7855, 7838-7856, 7838-7857, 7839-7854, 7839-7855, 7839-7856, 7839-7857, 7839-7858, 7840-7855, 7840-7856, 7840-7857, 7840-7858, 7840-7859, 7841-7856, 7841-7857, 7841-7858, 7841-7859, 7841-7860, 7842-7857, 7842-7858, 7842-7859, 7842-7860, 7842-7861, 7843-7858, 7843-7859, 7843-7860, 7843-7861, 7843-7862, 7844-7859, 7844-7860, 7844-7861, 7844-7862, 7845-7860, 7845-7861, 7845-7862, 7846-7861, 7846-7862 і 7847-7862.
В деяких варіантах реалізації наступні нуклеотидні області послідовності 5ЕО ІЮО МО: 1 при націлюванні на них антисмислових сполук або олігонуклеотидів демонструють щонайменше 70 95 інгібування: 48-63, 150-169, 152-171, 154-169, 154-173, 156-171, 156-175, 158-173, 158-177, 1135-1154, 1141-1160, 1147-1166, 1171-1186, 1173-1188, 1175-1190, 1749-
Зо 1768, 1763-1782, 1912-1931, 2193-2212, 2195-2210, 2195-2214, 2197-2212, 2197-2216, 2223-2238, 2225-2240, 2227-2242, 2453-2472, 2455-2474, 2457-2472, 2457-2476, 2459-2474, 2461-2476, 2461-2480, 2550-2569, 2551-2566, 2552-2571, 2553-2570, 2553-2571, 2553-2572, 2554-2571, 2554-2572, 2554-2573, 2554-2573, 2555-2572, 2555-2574, 2555-2574, 2556-2573, 2556-2574, 2556-2575, 2557-2574, 2557-2576, 2558-2575, 2558-2576, 2558-2577, 2559-2576, 2559-2577, 2559-2578, 2560-2577, 2560-2578, 2560-2579, 2561-2578, 2561-2579, 2561-2580, 2562-2577, 2562-2579, 2562-2581, 2563-2578, 2563-2580, 2563-2582, 2564-2581, 2564-2583, 2565-2584, 2566-2583, 2566-2585, 2567-2582, 2567-2584, 2567-2586, 2568-2585, 2568-2587, 2569-2586, 2569-2588, 2570-2587, 2570-2589, 2571-2588, 2571-2590, 2572-2589, 2572-2591, 2573-2590, 2573-2592, 2574-2591, 2574-2593, 2575-2592, 2575-2594, 2576-2593, 2576-2595, 2577-2594, 2577-2596, 2578-2597, 2579-2598, 2580-2596, 2580-2598, 2580-2599, 2581-2597, 2581-2600, 2582-2598, 2582-2600, 2582-2601, 2583-2599, 2583-2601, 2583-2602, 2584-2600, 2584-2602, 2584-2603, 2585-2601, 2585-2603, 2585-2604, 2586-2605, 2587-2606, 2588-2604, 2588-2606, 2588-2607, 2589-2605, 2589-2606, 2589-2607, 2589-2608, 2590-2605, 2590-2606, 2590-2607, 2590-2609, 2591-2607, 2591-2610, 2592-2611, 2593-2608, 2593-2612, 2594-2609, 2594-2610, 2594-2612, 2594-2613, 2595-2610, 2595-2611, 2595-2612, 2595-2613, 2595-2614, 2596-2611, 2596-2614, 2596-2615, 2597-2612, 2597-2613, 2597-2614, 2597-2615, 2597-2616, 2598-2613, 2598-2614, 2598-2615, 2598-2616, 2598-2617, 2599-2614, 2599-2615, 2599-2616, 2599-2617, 2599-2618, 2600-2615, 2600-2616, 2600-2617, 2600-2618, 2600-2619, 2601-2616, 2601-2617, 2601-2618, 2601-2619, 2601-2620, 2602-2617, 2602-2618, 2602-2619, 2602-2620, 2602-2621, 0 2603-2619, 2603-2620, 2603-2621, 2603-2622, 2604-2619, 2604-2620, 2604-2621, 2604-2622, 2604-2623, 2605-2620, 2605-2621, 2605-2622, 2605-2623, 2605-2624, 2606-2621, 2606-2622, 2606-2623, 2606-2624, 2606-2625, 2607-2622, 2607-2623, 2607-2624, 2607-2625, 2607-2626, 2608-2623, 2608-2624, 2608-2625, 2608-2626, 2608-2627, 2609-2624, 2609-2625, 2609-2626, 2609-2627, 2609-2628, 2610-2625, 2610-2626, 2610-2627, 2610-2628, 2610-2629, 2611-2626, 2611-2627, 2611-2629, 2611-2630, 2612-2627, 2612-2628, 2612-2629, 2612-2630, 2612-2631, 2613-2628, 2613-2629, 2613-2630, 2613-2631, 2614-2629, 2614-2630, 2614-2631, 2615-2630, 2615- 2630, 2615-2631 і 2616-2631.
В деяких варіантах реалізації наступні нуклеотидні області послідовності 5ЕО ІО МО: 2 при націлюванні на них антисмислових сполук або олігонуклеотидів демонструють 60 щонайменше 70 95 інгібування: 1685-1704, 1686-1705, 1769-1784, 1871-1890, 1873-1892,
1875-1890, 1875-1894, 1877-1892, 1877-1896, 1879-1894, 1879-1898, 3819-3838, 3825-3844, 3831-3850, 4151-4166, 5890-5909, 5904-5923, 5904-5923, 6406-6425, 6983-6998, 6983-7002, 6985-7000, 6985-7004, 7688-7707, 7690-7709, 7692-7707, 7692-7711, 7694-7709, 7696-7711, 7696-7715, 7786-7801, 7787-7806, 7788-7805, 7788-7806, 7788-7807, 7789-7806, 7789-7807, 7789-7808, 7790-7807, 7790-7809, 7791-7808, 7791-7809, 7791-7810, 7792-7809, 7792-7811, 7793-7810, 7793-7811, 7793-7812, 7794-7811, 7794-7812, 7794-7813, 7795-7812, 7795-7813, 7795-7814, 7796-7813, 7796-7814, 7796-7815, 7797-7812, 7797-7814, 7797-7816, 7798-7813, 7798-7815, 7798-7817, 7799-7816, 7799-7818, 7800-7819, 7801-7818, 7801-7820, 7802-7817, 7802-7819, 7802-7821, 7803-7820, 7803-7822, 7804-7821, 7804-7823, 7805-7822, 7805-7824, 7806-7823, 7806-7825, 7807-7824, 7807-7826, 7808-7825, 7808-7827, 7809-7826, 7809-7828, 7810-7827, 7811-7828, 7811-7830, 7812-7829, 7812-7831, 7813-7832, 7814-7833, 7815-7831, 7815-7833, 7815-7834, 7816-7832, 7816-7835, 7817-7833, 7817-7835, 7817-7836, 7818-7834, 7818-7836, 7818-7837, 7819-7835, 7819-7837, 7819-7838, 7820-7836, 7820-7838, 7820-7839, 7821-7840, 7822-7841, 7823-7839, 7823-7841, 7823-7842, 7824-7840, 7824-7841, 7824-7842, 7824-7843, 7825-7840, 7825-7841, 7825-7842, 7825-7844, 7826-7842, 7826-7845, 7827-7846, 7828-7843, 7828-7847, 7829-7844, 7829-7845, 7829-7847, 7829-7848, 7830-7845, 7830-7846, 7830-7847, 7830-7848, 7830-7849, 7831-7846, 7831-7849, 7831-7850, 7832-7847, 7832-7848, 7832-7849, 7832-7850, 7832-7851, 7833-7848, 7833-7849, 7833-7850, 7833-7851, 7833-7852, 7834-7849, 7834-7850, 7834-7851, 7834-7852, 7834-7853, 7835-7850, 7835-7851, 7835-7852, 7835-7853, 7835-7854, 7836-7851, 7836-7852, 7836-7853, 7836-7854, 7836-7855, 7837-7852, 7837-7853, 7837-7854, 7837-7855, 7837-7856, 7838-7854, 7838-7855, 7838-7856, 7838-7857, 7839-7854, 7839-7855, 7839-7856, 7839-7857, 7839-7858, 7840-7855, 7840-7856, 7840-7857, 7840-7858, 7840-7859, 7841-7856, 7841-7857, 7841-7858, 7841-7859, 7841-7860, 7842-7857, 7842-7858, 7842-7859, 7842-7860, 7842-7861, 7843-7858, 7843-7859, 7843-7860, 7843-7861, 7843-7862, 7844-7859, 7844-7860, 7844-7861, 7844-7862, 7845-7860, 7845-7861, 7845-7862, 7846-7861, 7846-7862 і 7847-7862.
В деяких варіантах реалізації наступні нуклеотидні області послідовності ЕС ІЮО МО: 1 при націлюванні на них антисмислових сполук або олігонуклеотидів демонструють щонайменше 80 95 інгібування: 152-171, 154-169, 156-171, 158-173, 1135-1154, 1171-1186,
Коо) 1173-1188, 1175-1190, 1763-1782, 1912-1931, 2197-2212, 2223-2238, 2225-2240, 2227-2242, 2457-2472, 2459-2474, 2461-2476, 2551-2566, 2553-2570, 2553-2571, 2553-2572, 2554-2573, 2555-2572, 2555-2574, 2556-2573, 2556-2574, 2556-2575, 2557-2574, 2557-2576, 2558-2575, 2558-2576, 2559-2577, 2559-2578, 2560-2577, 2560-2578, 2560-2579, 2561-2578, 2561-2579, 2561-2580, 2562-2577, 2562-2579, 2562-2581, 2563-2580, 2563-2582, 2564-2581, 2564-2583, 2565-2584, 2566-2583, 2567-2584, 2567-2586, 2568-2585, 2568-2587, 2569-2586, 2569-2588, 2570-2587, 2571-2588, 2571-2590, 2572-2589, 2572-2591, 2573-2590, 2573-2592, 2574-2591, 2574-2593, 2575-2592, 2576-2593, 2576-2595, 2577-2594, 2577-2596, 2578-2597, 2580-2598, 2580-2599, 2581-2597, 2581-2600, 2582-2601, 2583-2602, 2584-2603, 2585-2604, 2586-2605, 2587-2606, 2588-2607, 2589-2608, 2590-2606, 2590-2607, 2590-2609, 2591-2610, 2592-2611, 2593-2608, 2593-2612, 2594-2613, 2595-2611, 2595-2614, 2596-2615, 2597-2612, 2597-2613, 2597-2614, 2597-2615, 2597-2616, 2598-2613, 2598-2613, 2598-2614, 2598-2615, 2598-2616, 2598-2617, 2599-2614, 2599-2617, 2599-2618, 2600-2615, 2600-2617, 2600-2618, 2600-2619, 2601-2616, 2601-2617, 2601-2619, 2601-2620, 2602-2618, 2602-2621, 2603-2620, 2603-2621, 2603-2622, 2604-2619, 2604-2620, 2604-2621, 2604-2622, 2604-2623, 2605-2620, 2605-2621, 2605-2622, 2605-2623, 2605-2624, 2606-2621, 2606-2622, 2606-2623, 2606-2624, 2606-2625, 2607-2622, 2607-2623, 2607-2624, 2607-2625, 2607-2626, 2608-2623, 2608-2624, 2608-2625, 2608-2627, 2609-2624, 2609-2626, 2609-2627, 2609-2628, 2610-2625, 2610-2626, 2610-2628, 2610-2629, 2611-2626, 2611-2627, 2611-2629, 2611-2630, 2612-2627, 2612-2628, 2612-2630, 2612-2631, 2613-2628, 2613-2629, 2613-2631, 2614-2629, 2614-2630, 2614-2631, 2615-2630 і 00 2616-2631.
В деяких варіантах реалізації наступні нуклеотидні області послідовності 5ЕО ІО МО: 2 при націлюванні на них антисмислових сполук або олігонуклеотидів демонструють щонайменше 80 95 інгібування: 1685-1704, 1686-1705, 1873-1892, 1875-1890, 1877-1892, 1879-1894, 3819-3838, 4151-4166, 5904-5923, 6406-6425, 6985-7000, 7692-7707, 7694-7709, 7696-7711, 7786-7801, 7788-7805, 7788-7806, 7788-7807, 7789-7808, 7790-7807, 7790-7809, 7791-7808, 7791-7809, 7791-7810, 7792-7809, 7792-7811, 7793-7810, 7793-7811, 7794-7812, 7794-7813, 7795-7812, 7795-7813, 7795-7814, 7796-7813, 7796-7814, 7796-7815, 7797-7812, 7797-7814, 7797-7816, 7798-7815, 7798-7817, 7799-7816, 7799-7818, 7800-7819, 7801-7818, 7802-7819, 7802-7821, 7803-7820, 7803-7822, 7804-7821, 7804-7823, 7805-7822, 7806-7823, (510) 7806-7825, 7807-7824, 7807-7826, 7808-7825, 7808-7827, 7809-7826, 7809-7828, 7810-7827,
7811-7828, 7812-7829, 7812-7831, 7813-7832, 7814-7833, 7815-7834, 7816-7832, 7816-7835, 7817-7836, 7818-7837, 7819-7838, 7820-7839, 7821-7840, 7822-7841, 7823-7842, 7824-7843, 7825-7841, 7825-7842, 7825-7844, 7826-7845, 7827-7846, 7828-7843, 7828-7847, 7829-7848, 7830-7846, 7830-7849, 7831-7850, 7832-7847, 7832-7848, 7832-7849, 7832-7850, 7832-7851, 7833-7848, 7833-7849, 7833-7850, 7833-7851, 7833-7852, 7834-7849, 7834-7852, 7834-7853, 7835-7850, 7835-7852, 7835-7853, 7835-7854, 7836-7851, 7836-7852, 7836-7854, 7836-7855, 7837-7853, 7837-7856, 7838-7855, 7838-7856, 7838-7857, 7839-7854, 7839-7855, 7839-7856, 7839-7857, 7839-7858, 7840-7855, 7840-7856, 7840-7857, 7840-7858, 7840-7859, 7841-7856, 7841-7857, 7841-7858, 7841-7859, 7841-7860, 7842-7857, 7842-7858, 7842-7859, 7842-7860, 7842-7861, 7843-7858, 7843-7859, 7843-7860, 7843-7862, 7844-7859, 7844-7861, 7844-7862, 7845-7860, 7845-7861, 7846-7862 і 7847-7862.
В деяких варіантах реалізації наступні нуклеотидні області послідовності 5ЕО ІЮО МО: 1 при націлюванні на них антисмислових сполук або олігонуклеотидів демонструють щонайменше 90 95 інгібування: 154-169, 156-171, 158-173, 1135-1154, 1171-1186, 1 173- 1188, 1763-1782, 1912-1931, 2223-2238, 2227-2242, 2459-2474, 2461-2476, 2554-2573, 2555- 2574, 2560-2577, 2561-2578, 2561-2579, 2562-2581, 2563-2580, 2563-2582, 2564-2581, 2566- 2583, 2567-2584, 2568-2585, 2568-2587, 2569-2586, 2570-2587, 2576-2593, 2577-2594, 2577- 2596, 2578-2597, 2580-2599, 2581-2600, 2582-2601, 2583-2602, 2584-2603, 2586-2605, 2587- 2605, 2587-2606, 2588-2607, 2589-2608, 2590-2607, 2590-2609, 2592-2611, 2595-2614, 2596- 202615, 2597-2612, 2597-2613, 2597-2615, 2597-2616, 2598-2613, 2598-2613, 2598-2617, 2599- 2614, 2599-2618, 2600-2615, 2600-2619, 2601-2617, 2601-2620, 2602-2621, 2603-2622, 2604- 2623, 2605-2621, 2605-2622, 2605-2624, 2606-2625, 2607-2626, 2608-2623, 2608-2625, 2609- 2628, 2611-2627, 2611-2630, 2612-2628, 2612-2631, 2613-2629, 2614-2629, 2615-2630 і 2616- 2631.
В деяких варіантах реалізації наступні нуклеотидні області послідовності 5ЕО ІО МО: 2 при націлюванні на них антисмислових сполук або олігонуклеотидів демонструють щонайменше 90 95 інгібування: 1685-1704, 1686-1705, 1875-1890, 1877-1892, 1879-1894, 3819-3838, 5904-5923, 6406-6425, 7694-7709, 7696-7711, 7789-7808, 7790-7809, 7795-7812, 7795-7813, 7796-7813, 7796-7814, 7797-7814, 7797-7816, 7798-7815, 7798-7817, 7799-7816,
Коо) 7801-7818, 7802-7819, 7803-7820, 7803-7822, 7804-7821, 7805-7822, 7811-7828, 7812-7829, 7812-7831, 7813-7832, 7815-7834, 7818-7837, 7819-7838, 7821-7840, 7822-7840, 7822-7841, 7825-7842, 7832-7847, 7832-7848, 7832-7850, 7833-7848, 7833-7852, 7834-7849, 7834-7853, 7835-7850, 7836-7852, 7836-7855, 7837-7856, 7838-7856, 7839-7857, 7839-7858, 7840-7856, 7840-7857, 7840-7859, 7843-7858, 7843-7860 і 7846-7862.
В деяких варіантах реалізації наступні антисмислові сполуки або олігонуклеотиди націлені на область нуклеїнової кислоти СЕВ і здійснюють щонайменше 50 95 інгібування МРНК СЕВ, Мо
ІБІЄ: 516350, 532614, 5532632, 532635, 532638, 532639, 532686, 532687, 532688, 532689, 532690, 532691, 532692, 532692, 532693, 532694, 532695, 532696, 532697, 532698, 532699, 532700, 532701, 532702, 532703, 532704, 532705, 532706, 532707, 532770, 532775, 532778, 532780, 532791, 532800, 532809, 532810, 532811, 532917, 532952, 588509, 588510, 588511, 588512, 588513, 588514, 588515, 588516, 588517, 588518, 588519, 588520, 588522, 588523, 588524, 588525, 588527, 588528, 588529, 588530, 588531, 588532, 588533, 588534, 588535, 588536, 588537, 588538, 588539, 588540, 588541, 588542, 588543, 588544, 588545, 588546, 588547, 588548, 588549, 588550, 588551, 588552, 588553, 588554, 588555, 588556, 588557, 588558, 588559, 588560, 588561, 588562, 588563, 588564, 588565, 588566, 588567, 588568, 588569, 588570, 588571, 588572, 588573, 588574, 588575, 588576, 588577, 588580, 588581, 588585, 588586, 588589, 588590, 588599, 588603, 588606, 588608, 588610, 588614, 588616, 588628, 588631, 588632, 588634, 588636, 588638, 588640, 588645, 588646, 588654, 588656, 588658, 588660, 588662, 588664, 588670, 588672, 588676, 588682, 588688, 588696, 588698, 588807, 588808, 588809, 588813, 588814, 588815, 588819, 588820, 588822, 588823, 588838, 588839, 588840, 588841, 588842, 588846, 588847, 588848, 588849, 588850, 588851, 588852, 588853, 588854, 588855, 588856, 588857, 588858, 588859, 588860, 588861, 588862, 588863, 588864, 588865, 588866, 588867, 588868, 588870, 588871, 588872, 588873, 588874, 588875, 588876, 588877, 588878, 588879, 588880, 588881, 588882, 588883, 588884, 598999, 599000, 599001, 599002, 599003, 599004, 599005, 599006, 599007, 599008, 599009, 599010, 599011, 599012, 599013, 599014, 599015, 599018, 599019, 599023, 599024, 599025, 599026, 599027, 599028, 599029, 599030, 599031, 599032, 599033, 599034, 599035, 599058, 599062, 599063, 599064, 599065, 599070, 599071, 599072, 599073, 599074, 599076, 599077, 599078, 599079, 599080, 599081, 599082, 599083, 599084, 599085, 599086, 599087, 599088, 599089, 599090, (510) 599091, 599092, 599093, 599094, 599095, 599096, 599097, 599098, 599102, 599119, 599123,
599124, 599125, 599126, 599127, 599128, 599132, 599133, 599134, 599135, 599136, 599137, 599138, 599139, 599140, 599141, 599142, 599143, 599144, 599145, 599147, 599148, 599149, 599150, 599151, 599152, 599153, 599154, 599155, 599156, 599157, 599158, 599159, 599178, 599179, 599180, 599181, 599182, 599186, 599187, 599188, 599189, 599190, 599191, 599192, 599193, 599194, 599195, 599196, 599197, 599198, 599199, 599200, 599201, 599202, 599203, 599204, 599205, 599206, 599207, 599208, 599209, 599210, 599211, 599212, 599213, 599214, 599215, 599216, 599217, 599218, 599219, 599220, 599221, 599221, 599222, 599223, 599224, 599225, 599226, 599227, 599228, 599229, 599230, 599231, 599232, 599233, 599234, 599235, 599236, 599241, 599247, 599248, 599249, 599255, 599256, 599257, 599258, 599260, 599261, 599262, 599263, 599264, 599265, 599266, 599267, 599268, 599269, 599270, 599271, 599272, 599273, 599274, 599275, 599276, 599277, 599278, 599279, 599280, 599297, 599299, 599306, 599307, 599308, 599309, 599311, 599312, 599313, 599314, 599315, 599316, 599317, 599318, 599319, 599320, 599321, 599322, 599323, 599324, 599325, 599326, 599327, 599328, 599329, 599330, 599338, 599349, 599353, 599354, 599355, 599356, 599357, 599358, 599359, 599360, 599361, 599362, 599363, 599364, 599369, 599371, 599372, 599373, 599376, 599378, 599379, 599382, 599383, 599384, 599385, 599386, 599387, 599388, 599389, 599390, 599391, 599392, 599393, 599394, 599395, 599396, 599397, 599398, 599399, 599400, 599401, 599402, 599403, 599404, 599405, 599406, 599407, 599408, 599409, 599410, 599412, 599413, 599414, 599415, 599416, 599417, 599418, 599419, 599420, 599421, 599422, 599423, 599424, 599425, 599426, 599433, 599434, 599435, 599436, 599437, 599438, 599439, 599440, 599441, 599442, 599443, 599444, 599445, 599446, 599447, 599448, 599450, 599454, 599455, 599456, 599467, 599468, 599469, 599471, 599472, 599473, 599474, 599475, 599476, 599477, 599478, 599479, 599480, 599481, 599482, 599483, 599484, 599485, 599486, 599487, 599488, 599489, 599490, 599491, 599492, 599493, 599494, 599495, 599496, 599497, 599498, 599499, 599500, 599501, 599502, 599503, 599504, 599505, 599506, 599507, 599508, 599509, 599512, 599515, 599518, 599531, 599541, 599541, 599546, 599547, 599548, 599549, 599550, 599552, 599553, 599554, 599555, 599557, 599558, 599561, 599562, 599563, 599564, 599565, 599566, 599567, 599568, 599569, 599570, 599577, 599578, 599579, 599580, 599581, 599581, 599582, 599584, 599585, 599586, 599587, 599588, 599589, 599590, 599591, 599592, 599593, 599594, 599595, 601321, 601322,
Коо) 601323, 601325, 601327, 601328, 601329, 601330, 601332, 601333, 601334, 601335, 601336, 601337, 601338, 601339, 601341, 601342, 601343, 601344, 601345, 601346, 601347, 601348, 601349, 601362, 601367, 601368, 601369, 601371, 601372, 601373, 601374, 601375, 601377, 601378, 601380, 601381, 601382, 601383, 601384, 601385, 601386, 601387 і 601388.
В деяких варіантах реалізації наступні антисмислові сполуки або олігонуклеотиди націлені на область нуклеїнової кислоти СЕВ і здійснюють щонайменше 50 95 інгібування мРНК СЕВ,
ЗЕО ІО МО: 12, 30, 33, 36, 37, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 198, 203, 206, 208, 219, 228, 237, 238, 239, 317, 395, 396, 397, 398, 399, 400, 401, 402, 403, 404, 405, 406, 407, 408, 409, 410, 411, 412, 413, 414, 415, 416, 417, 418, 419, 420, 421, 422, 423, 424, 425, 426, 427, 428, 429, 430, 431, 432, 433, 434, 434, 435, 436, 437, 438, 439, 440, 441, 442, 443, 444, 445, 4Аб, 447, 448, 449, 450, 451, 452, 453, 454, 455, 456, 457, 458, 459, 460, 461, 462, 463, 464, 465, 468, 472, 473, 475, 478, 479, 488, 492, 494, 495, 498, 499, 500, 502, 503, 509, 510, 511, 512, 513, 514, 515, 517, 518, 522, 523, 524, 525, 529, 530, 531, 534, 535, 537, 540, 541, 542, 543, 544, 545, 546, 547, 549, 550, 551, 552, 553, 554, 555, 556, 557, 558, 559, 563, 564, 565, 569, 570, 572, 573, 577, 588, 589, 590, 591, 592, 594, 595, 596, 597, 598, 599, 600, 601, 602, 603, 604, 605, 606, 607, 608, 609, 610, 611, 612, 613, 614, 615, 616, 617, 618, 619, 623, 640, 641, 644, 645, 646, 647, 648, 649, 650, 651, 652, 653, 654, 655, 656, 657, 658, 659, 660, 661, 662, 663, 664, 665, 666, 667, 668, 669, 670, 671, 672, 673, 674, 675, 676, 677, 678, 679, 680, 681, 682, 683, 684, 685, 686, 687, 688, 689, 700, 704, 705, 706, 707, 708, 709, 711, 712, 713, 714, 715, 716, 717, 718, 720, 721, 722, 723, 724, 725, 726, 727, 728, 729, 730, 731, 732, 733, 734, 735, 736, 737, 738, 739, 740, 741, 742, 743, 744, 745, 745, 746, 747, 748, 749, 750, 751, 752, 753, 754, 755, 756, 758, 759, 760, 761, 762, 766, 767, 768, 769, 770, 771, 772, 773, 774, 775, 776, 777, 778, 779, 780, 781, 782, 783, 784, 785, 786, 787, 788, 789, 790, 791, 792, 793, 794, 795, 796, 797, 798, 799, 813, 833, 834, 841, 846, 849, 850, 867 і 873.
В деяких варіантах реалізації наступні антисмислові сполуки або олігонуклеотиди націлені на область нуклеїнової кислоти СЕВ і здійснюють щонайменше 60 95 інгібування МРНК СЕВ, Мо
ІБІЄ: 516350, 532614, 532635, 532686, 532687, 532688, 532689, 532770, 532800, 532809, 532810, 532811, 532917, 532952, 588512, 588513, 588514, 588515, 588516, 588517, 588518, 588519, 588522, 588523, 588524, 588525, 588527, 588528, 588529, 588530, 588531, 588532, 588533, 588534, 588535, 588536, 588537, 588538, 588539, 588540, 588541, 588542, 588543, 588544, (510) 588545, 588546, 588547, 588548, 588549, 588550, 588551, 588552, 588553, 588554, 588555,
588556, 588557, 588558, 588559, 588560, 588561, 588562, 588563, 588564, 588565, 588566, 588567, 588568, 588569, 588570, 588571, 588572, 588573, 588574, 588575, 588576, 588577, 588636, 588638, 588640, 588664, 588676, 588696, 588698, 588807, 588808, 588814, 588815, 588819, 588820, 588840, 588842, 588846, 588847, 588848, 588849, 588850, 588851, 588852, 588853, 588854, 588855, 588856, 588857, 588858, 588859, 588860, 588861, 588862, 588863, 588864, 588866, 588867, 588868, 588870, 588871, 588872, 588873, 588874, 588875, 588876, 588877, 588878, 588879, 588880, 588881, 588882, 588883, 588884, 598999, 599000, 599001, 599002, 599003, 599004, 599005, 599006, 599007, 599008, 599009, 599010, 599011, 599012, 599013, 599014, 599015, 599019, 599024, 599025, 599026, 599027, 599028, 599029, 599030, 599031, 599032, 599033, 599034, 599035, 599064, 599065, 599071, 599072, 599077, 599078, 599079, 599080, 599083, 599084, 599085, 599086, 599087, 599088, 599089, 599090, 599091, 599092, 599093, 599094, 599095, 599096, 599097, 599125, 599126, 599127, 599133, 599134, 599135, 599136, 599138, 599139, 599140, 599141, 599142, 599148, 599149, 599150, 599151, 599152, 599154, 599155, 599156, 599157, 599158, 599159, 599178, 599179, 599180, 599181, 599187, 599188, 599190, 599192, 599193, 599194, 599195, 599196, 599197, 599198, 599199, 599200, 599201, 599202, 599203, 599204, 599205, 599206, 599207, 599208, 599209, 599210, 599211, 599212, 599213, 599214, 599215, 599216, 599217, 599218, 599219, 599220, 599221, 599222, 599223, 599224, 599225, 599226, 599227, 599228, 599229, 599230, 599231, 599232, 599233, 599234, 599235, 599236, 599247, 599255, 599256, 599257, 599263, 599264, 599265, 599266, 599270, 599271, 599272, 599273, 599274, 599275, 599276, 599277, 599278, 599279, 599280, 599306, 599307, 599308, 599311, 599312, 599313, 599314, 599315, 599316, 599317, 599318, 599319, 599320, 599321, 599322, 599323, 599324, 599325, 599327, 599328, 599329, 599330, 599349, 599353, 599355, 599356, 599357, 599358, 599359, 599360, 599361, 599362, 599363, 599364, 599369, 599371, 599372, 599373, 599376, 599378, 599379, 599382, 599384, 599386, 599387, 599388, 599389, 599390, 599391, 599392, 599393, 599394, 599395, 599396, 599397, 599398, 599399, 599400, 599401, 599402, 599403, 599404, 599405, 599406, 599407, 599408, 599409, 599410, 599412, 599413, 599414, 599415, 599416, 599417, 599418, 599419, 599420, 599421, 599422, 599423, 599424, 599425, 599433, 599434, 599435, 599436, 599437, 599438, 599439, 599440, 599441, 599442, 599443, 599444, 599445, 599446, 599447, 599448,
Коо) 599456, 599467, 599468, 599471, 599472, 599473, 599474, 599475, 599476, 599477, 599478, 599479, 599480, 599481, 599482, 599483, 599484, 599485, 599486, 599487, 599488, 599489, 599490, 599491, 599492, 599493, 599494, 599495, 599496, 599497, 599498, 599499, 599500, 599501, 599502, 599503, 599504, 599505, 599506, 599507, 599508, 599512, 599531, 599547, 599548, 599549, 599552, 599553, 599554, 599555, 599557, 599558, 599562, 599563, 599564, 599565, 599566, 599567, 599568, 599569, 599570, 599577, 599578, 599579, 599580, 599581, 599582, 599584, 599585, 599586, 599587, 599588, 599589, 599590, 599591, 599592, 599593, 599594, 599595, 601323, 601327, 601329, 601332, 601333, 601333, 601334, 601335, 601336, 601338, 601339, 601341, 601342, 601343, 601344, 601345, 601346, 601347, 601348, 601349, 601368, 601369, 601371, 601372, 601374, 601375, 601377, 601378, 601380, 601381, 601382, 601383, 601384, 601385, 601386, 601387 і 601388.
В деяких варіантах реалізації наступні антисмислові сполуки або олігонуклеотиди націлені на область нуклеїнової кислоти СЕВ і здійснюють щонайменше 60 95 інгібування мРНК СЕВ,
ЗЕО ІО МО: 12, 33, 84, 85, 86, 87, 198, 228, 237, 238, 239, 317, 395, 396, 397, 398, 399, 400, 401, 402, 403, 404, 405, 406, 407, 408, 410, 411, 412, 413, 414, 415, 416, 417, 418, 419, 420, 421, 422, 423, 424, 425, 426, 427, 428, 429, 430, 431, 432, 433, 434, 435, 436, 437, 438, 439, 440, 441, 442, 443, 444, 445, 446, 447, 448, 449, 450, 451, 452, 453, 454, 455, 456, 457, 458, 459, 460, 461, 462, 463, 464, 465, 472, 473, 513, 514, 515, 531, 537, 541, 542, 543, 544, 545, 546, 547, 549, 550, 551, 552, 553, 554, 555, 556, 557, 558, 564, 565, 569, 570, 577, 590, 592, 595, 596, 597, 598, 599, 600, 601, 602, 603, 604, 605, 606, 607, 608, 609, 610, 611, 612, 613, 614, 615, 616, 617, 618, 644, 645, 646, 647, 648, 649, 650, 651, 652, 653, 654, 655, 656, 657, 658, 659, 660, 661, 662, 663, 664, 665, 666, 667, 668, 669, 670, 671, 672, 673, 674, 675, 676, 677, 678, 679, 680, 682, 683, 684, 685, 686, 687, 688, 689, 700, 704, 706, 707, 708, 709, 711, 712, 713, 714, 715, 716, 717, 720, 721, 722, 723, 724, 725, 726, 727, 727, 728, 729, 730, 731, 732, 733, 734, 736, 737, 738, 739, 740, 741, 742, 743, 744, 745, 745, 746, 747, 748, 749, 750, 751, 752, 753, 754, 755, 756, 758, 759, 760, 761, 767, 768, 770,772, 773, 774, 775, 775, 776, 776, 777, 777, 778, 779, 780, 781, 782, 783, 783, 784, 784, 785, 786, 787, 788, 789, 790, 791, 792, 793, 794, 795, 796, 797, 798, 799, 813, 833, 834, 841, 846, 849 і 850.
В деяких варіантах реалізації наступні антисмислові сполуки або олігонуклеотиди націлені на область нуклеїнової кислоти СЕВ і здійснюють щонайменше 70 95 інгібування мРНК СЕВ, Мо (510) ІБІЄ: 516350, 532614, 532686, 532687, 532688, 532770, 532800, 532809, 532810, 532811, 532917,
532952, 588512, 588513, 588514, 588515, 588516, 588517, 588518, 588524, 588529, 588530, 588531, 588532, 588533, 588534, 588535, 588536, 588537, 588538, 588539, 588540, 588541, 588542, 588543, 588544, 588545, 588546, 588547, 588548, 588549, 588550, 588551, 588552, 588553, 588554, 588555, 588556, 588557, 588558, 588559, 588560, 588561, 588562, 588563, 588564, 588565, 588568, 588569, 588570, 588571, 588572, 588573, 588574, 588575, 588577, 588636, 588638, 588640, 588696, 588698, 588807, 588814, 588815, 588819, 588842, 588847, 588848, 588849, 588850, 588851, 588852, 588853, 588856, 588857, 588858, 588859, 588860, 588861, 588862, 588863, 588866, 588867, 588870, 588871, 588872, 588873, 588874, 588875, 588876, 588877, 588878, 588879, 588880, 588881, 588882, 588883, 588884, 599000, 599001, 599003, 599004, 599005, 599008, 599009, 599010, 599011, 599014, 599015, 599024, 599025, 599027, 599028, 599029, 599030, 599031, 599032, 599033, 599034, 599072, 599077, 599080, 599085, 599086, 599087, 599088, 599089, 599090, 599091, 599093, 599094, 599095, 599096, 599097, 599125, 599126, 599134, 599138, 599139, 599148, 599149, 599150, 599151, 599152, 599154, 599155, 599156, 599157, 599158, 599187, 599188, 599193, 599195, 599196, 599197, 599198, 599199, 599200, 599201, 599202, 599203, 599204, 599205, 599206, 599207, 599208, 599210, 599211, 599212, 599213, 599214, 599215, 599216, 599217, 599218, 599219, 599220, 599221, 599222, 599223, 599224, 599225, 599226, 599227, 599228, 599229, 599230, 599231, 599232, 599233, 599234, 599235, 599236, 599266, 599272, 599272, 599273, 599274, 599275, 599277, 599278, 599279, 599280, 599280, 599306, 599311, 599312, 599313, 599314, 599315, 599316, 599317, 599318, 599319, 599320, 599321, 599322, 599323, 599325, 599327, 599328, 599329, 599330, 599355, 599357, 599358, 599359, 599360, 599361, 599362, 599363, 599364, 599369, 599371, 599372, 599373, 599378, 599379, 599382, 599384, 599386, 599387, 599388, 599389, 599390, 599391, 599392, 599393, 599394, 599395, 599396, 599397, 599398, 599399, 599400, 599401, 599402, 599403, 599404, 599405, 599406, 599407, 599408, 599409, 599410, 599413, 599414, 599415, 599416, 599417, 599418, 599419, 599420, 599421, 599422, 599423, 599424, 599433, 599434, 599435, 599436, 599437, 599438, 599439, 599440, 599441, 599442, 599443, 599445, 599446, 599447, 599448, 599472, 599473, 599474, 599475, 599476, 599477, 599478, 599479, 599480, 599481, 599482, 599483, 599484, 599485, 599486, 599487, 599488, 599489, 599490, 599491, 599492, 599493, 599494, 599495, 599496, 599497, 599498, 599499,
Коо) 599500, 599501, 599502, 599503, 599504, 599505, 599506, 599507, 599508, 599512, 599547, 599548, 599552, 599553, 599554, 599555, 599558, 599562, 599563, 599564, 599566, 599567, 599568, 599569, 599570, 599577, 599578, 599579, 599580, 599581, 599582, 599585, 599586, 599587, 599588, 599589, 599590, 599591, 599592, 599593, 599594, 599595, 601332, 601335, 601341, 601343, 601344, 601345, 601346, 601347, 601348, 601349, 601371, 601372, 601380, 601382, 601383, 601384, 601385, 601386 і 601387.
В деяких варіантах реалізації наступні антисмислові сполуки або олігонуклеотиди націлені на область нуклеїнової кислоти СЕВ і здійснюють щонайменше 70 95 інгібування мРНК СЕВ,
ЗЕО ІО МО: 12, 84, 85, 86, 198, 228, 237, 238, 239, 317, 395, 396, 397, 398, 399, 402, 403, 404, 405, 407, 408, 410, 411, 412, 412, А13, 414, А15, 416, 417, 418, 419, 420, 421, 422, 423, А24, 425, 426, 427, 428, 429, 430, 431, 432, 433, 433, 434, 435, 436, 437, 438, 439, 440, 441, 442, 443, 444, 445, 446, 447, 448, 449, 450, 451, 452, 453, 454, 455, 456, 457, 458, 459, 460, 461, 462, 463, 464, 464, 465, 472, 473, 513, 514, 515, 541, 542, 543, 544, 545, 546, 547, 549, 550, 551, 552, 553, 554, 555, 556, 557, 564, 565, 569, 592, 595, 596, 597, 598, 599, 600, 601, 602, 603, 604, 606, 607, 608, 609, 610, 611, 612, 613, 614, 615, 616, 617, 618, 645, 646, 647, 648, 649, 650, 653, 654, 655, 656, 659, 660, 662, 663, 664, 665, 666, 668, 669, 670, 671, 672, 673, 674, 675, 676, 677, 677, 678, 679, 680, 682, 683, 684, 686, 687, 688, 689, 706, 708, 709, 711, 712, 713, 714, 715, 720, 721, 722, 723, 724, 725, 726, 727, 728, 729, 730, 731, 732, 733, 734, 736, 737, 738, 739, 740, 741, 742, 743, 744, 745, 746, 747, 748, 749, 750, 751, 752, 753, 754, 755, 756, 767, 768, 773, 775, 776, 777, 778, 779, 780, 781, 782, 783, 784, 785, 786, 787, 788, 789, 790, 791, 792, 793, 793, 794, 795, 797, 798, 799, 813, 833, 834, 841, 846, 849, 867 і 873.
В деяких варіантах реалізації наступні антисмислові сполуки або олігонуклеотиди націлені на область нуклеїнової кислоти СЕВ і здійснюють щонайменше 80 95 інгібування МРНК СЕВ, Мо
ІБІЄ: 532686, 532809, 532810, 532811, 532917, 532952, 588512, 588517, 588518, 588533, 588534, 588535, 588536, 588537, 588538, 588539, 588540, 588542, 588543, 588544, 588545, 588546, 588547, 588548, 588549, 588550, 588551, 588552, 588553, 588554, 588555, 588556, 588557, 588558, 588559, 588560, 588561, 588562, 588563, 588564, 588565, 588571, 588638, 588640, 588696, 588698, 588807, 588814, 588849, 588850, 588851, 588853, 588857, 588858, 588859, 588860, 588861, 588862, 588863, 588866, 588867, 588871, 588872, 588873, 588874, (510) 588875, 588876, 588877, 588878, 588879, 588880, 588881, 588882, 588883, 599001, 599024,
599025, 599033, 599086, 599087, 599088, 599089, 599093, 599094, 599095, 599096, 599134, 599139, 599148, 599149, 599151, 599154, 599155, 599156, 599158, 599188, 599195, 599196, 599198, 599201, 599202, 599203, 599204, 599205, 599206, 599207, 599212, 599213, 599215, 599216, 599217, 599218, 599219, 599220, 599221, 599222, 599223, 599224, 599225, 599226, 599227, 599228, 599229, 599230, 599231, 599232, 599233, 599234, 599235, 599236, 599272, 599273, 599275, 599277, 599278, 599279, 599280, 599311, 599313, 599314, 599316, 599317, 599318, 599320, 599321, 599322, 599323, 599327, 599328, 599329, 599330, 599355, 599357, 599358, 599359, 599360, 599361, 599362, 599363, 599364, 599371, 599372, 599373, 599378, 599379, 599382, 599384, 599386, 599387, 599388, 599389, 599390, 599391, 599392, 599393, 599397, 599398, 599399, 599400, 599401, 599403, 599404, 599405, 599407, 599408, 599409, 599410, 599413, 599414, 599415, 599416, 599417, 599418, 599419, 599420, 599421, 599422, 599423, 599424, 599433, 599434, 599435, 599436, 599437, 599438, 599439, 599440, 599441, 599445, 599446, 599447, 599448, 599474, 599476, 599477, 599479, 599481, 599482, 599483, 599485, 599486, 599487, 599488, 599489, 599490, 599491, 599492, 599494, 599495, 599496, 599497, 599498, 599499, 599500, 599502, 599503, 599504, 599505, 599506, 599507, 599508, 599547, 599552, 599553, 599554, 599558, 599563, 599567, 599568, 599569, 599570, 599577, 599578, 599581, 599582, 599585, 599587, 599588, 599590, 599591, 599592, 599593, 599594, 601332, 601344, 601345, 601382, 601383 і 601385.
В деяких варіантах реалізації наступні антисмислові сполуки або олігонуклеотиди націлені на область нуклеїнової кислоти СЕВ і здійснюють щонайменше 80 95 інгібування мРНК СЕВ,
ЗЕО ІО МО: 84, 237, 238, 239, 317, 395, 397, 411, 412, 413, 414, 415, 417, 418, 419, 420, 421, 422, 423, 425, 426, 427, 429, 430, 431, 433, 434, 435, 436, 437, 438, 439, 440, 441, 442, 443, 444, 445, 446, 447, 448, 449, 450, 451, 452, 453, 454, 455, 456, 457, 458, 459, 460, 461, 462, 463, 464, 465, 472, 473, 514, 515, 542, 543, 544, 545, 546, 547, 550, 551, 552, 553, 554, 555, 556, 557, 564, 595, 599, 600, 601, 602, 603, 606, 607, 608, 609, 610, 611, 612, 613, 614, 615, 616, 617, 618, 646, 655, 660, 662, 663, 666, 669, 670, 671, 672, 673, 675, 676, 677, 678, 679, 682, 684, 686, 687, 688, 689, 706, 708, 709, 711, 712, 713, 714, 715, 720, 722, 723, 724, 725, 726, 727, 729, 730, 731, 732, 733, 736, 737, 738, 739, 740, 741, 742, 743, 744, 745, 746, 747, 748, 749, 750, 751, 752, 753, 754, 755, 756, 768, 775, 776, 778, 781, 782, 783, 784, 785, 787, 788, 789, 790, 791, 792, 793, 794, 799, 813, 833, 834, 841, 849, 867 і 873.
В деяких варіантах реалізації наступні антисмислові сполуки або олігонуклеотиди націлені на область нуклеїнової кислоти СЕВ і здійснюють щонайменше 90 95 інгібування МРНК СЕВ, Мо
ІБІВЄ: 532686, 532811, 532917, 588536, 588537, 588538, 588539, 588544, 588545, 588546, 588548, 588551, 588552, 588553, 588554, 588555, 588556, 588557, 588558, 588559, 588560, 588561, 588562, 588564, 588638, 588640, 588696, 588698, 588849, 588850, 588851, 588860, 588866, 588867, 588872, 588873, 588874, 588876, 588877, 588878, 588879, 588881, 588883, 599149, 599188, 599203, 599206, 599220, 599221, 599222, 599223, 599224, 599225, 599226, 599227, 599228, 599229, 599235, 599236, 599279, 599280, 599314, 599321, 599362, 599378, 599390, 599391, 599398, 599399, 599404, 599413, 599414, 599416, 599419, 599420, 599422, 599435, 599437, 599438, 599441, 599483, 599494, 599508, 599552, 599553, 599554, 599568, 599570, 599577, 599581, 599591, 599592 і 599593.
В деяких варіантах реалізації наступні антисмислові сполуки або олігонуклеотиди націлені на область нуклеїнової кислоти СЕВ і здійснюють щонайменше 90 95 інгібування мРНК СЕВ,
ЗЕО ІЮО МО: 84, 238, 239, 317, 412, 413, 420, 421, 426, 434, 436, 437, 438, 439, 440, 442, 443, 444, 445, 446, 448, 451, 452, 453, 454, 455, 456, 457, 458, 459, 460, 461, 462, 464, 465, 472, 473, 514, 515, 542, 543, 544, 545, 546, 551, 553, 555, 556, 599, 600, 601, 602, 610, 616, 617, 618, 662, 666, 670, 676, 677, 678, 688, 689, 713, 723, 729, 730, 740, 741, 742, 743, 744, 745, 746, 747, 748, 749, 755, 756, 768, 783, 793, 833 і 867.
В деяких варіантах реалізації сполука містить модифікований олігонуклеотид, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, комплементарних в межах нуклеотидів 2193- 2212, 2195-2210, 2457-2476, 2571-2590, 2584-2603, 2588-2607, 2592-2611, 2594-2613, 2597- 2616, 2600-2619 або 2596-2611 послідовності 5ЕО ІО МО: 1. В деяких варіантах реалізації сполука містить модифікований олігонуклеотид, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що має послідовність нуклеотидних основ, що містить будь-яку з 5ЕО ІЮО МО: 198, 228, 237, 440, 444, 448, 450, 453, 455, 549 і 598.
В деяких варіантах реалізації сполука містить модифікований олігонуклеотид, що має послідовність нуклеотидних основ, що складається з будь-якої з ФЕО ІЮ МО: 198, 228, 237, 440, 444, 448, 450, 453, 455, 549 і 598.
В деяких варіантах реалізації будь-яка з вищевказаних сполук або олігонуклеотидів містить 60 щонайменше один модифікований міжнуклеозидний зв'язок, щонайменше один модифікований цукор і/або щонайменше одну модифіковану нуклеотидну основу.
В деяких варіантах реалізації будь-яка з вищевказаних сполук або олігонуклеотидів містить щонайменше один модифікований цукор. В деяких варіантах реалізації щонайменше один модифікований цукор містить 2-О-метоксиетильну групу. В деяких варіантах реалізації щонайменше один модифікований цукор являє собою біциклічний цукор, такий як група 4"-
СН(СНз)-0-2, група 4-СНо-О-2' або група 4-(СНг)2-0-2..
В деяких варіантах реалізації модифікований олігонуклеотид містить щонайменше один модифікований міжнуклеозидний зв'язок, такий як фосфоротіоатний міжнуклеозидний зв'язок.
В деяких варіантах реалізації будь-яка з вищевказаних сполук або олігонуклеотидів містить щонайменше одну модифіковану нуклеотидну основу, таку як 5-метилцитозин.
В деяких варіантах реалізації будь-яка з вищевказаних сполук або олігонуклеотидів містить: геп-сегмент, що складається із зв'язаних дезоксинуклеозидів; сегмент 5-крило, що складається із зв'язаних нуклеозидів; і сегмент З-крило, що складається із зв'язаних нуклеозидів, при цьому вказаний геп-сегмент розташований між 5'-сегментом-крилом і 3'- сегментом-крилом, і при цьому кожен нуклеозид кожного сегмента-крила містить модифікований цукор. В деяких варіантах реалізації олігонуклеотид складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів і має послідовність нуклеотидних основ, що містить послідовність, представлену в 5ЕО ІЮ МО: 198, 228, 237, 440, 444, 448, 450, 453, 455, 549 або 598.
В деяких варіантах реалізації модифікований олігонуклеотид має послідовність нуклеотидних основ, що містить послідовність, представлену в 5ЕО ІЮО МО: 198, 228, 237, 440, 444, 448, 450, 453 або 455, при цьому вказаний модифікований олігонуклеотид містить: геп-сегмент, що складається з десяти зв'язаних дезоксинуклеозидів; сегмент 5-крило, що складається з п'яти зв'язаних нуклеозидів; і сегмент З3'--крило, що складається з п'яти зв'язаних нуклеозидів, при цьому вказаний геп-сегмент розташований між 5'-сегментом-крилом і 3'- сегментом-крилом, при цьому кожен нуклеозид кожного сегмента-крила містить 2'-0- метоксіетил-цукор; при цьому кожний міжнуклеозидний зв'язок являє собою фосфоротіоатний зв'язок, і при цьому кожен цитозин являє собою 5-метилцитозин.
В деяких варіантах реалізації сполука містить або складається з одноланцюгового модифікованого олігонуклеотида, що складається з 20 зв'язаних нуклеозидів, що мають послідовність нуклеотидних основ, що складається з послідовності, представленої в 5ЕО І
МО: 198, 228, 237, 440, 444, 448, 450, 453 або 455, при цьому зазначений олігонуклеотид містить: геп-сегмент, що складається з десяти зв'язаних дезоксинуклеозидів; сегмент 5-крило, що складається з п'яти зв'язаних нуклеозидів; і сегмент 3'--крило, що складається з п'яти зв'язаних нуклеозидів, при цьому вказаний геп-сегмент розташований між 5'-сегментом-крилом і 3- сегментом- крилом, при цьому кожен нуклеозид кожного сегмента-крила містить 2'-О-метоксіетил-цукор; при цьому кожний міжнуклеозидний зв'язок являє собою фосфоротіоатний зв'язок; і при цьому кожен цитозин являє собою 5-метилцитозин.
В деяких варіантах реалізації сполука містить І5І5 588540. В деяких варіантах реалізації сполука складається з ІБІ5 588540. В деяких варіантах реалізації ІБІЗ 588540 має наступну хімічну структуру:
їн
СИ Її о о ї но. Мт мон сромн с рин Мотм о смн, дення й за о : і-й г ни твер М, у ш- мн. у - Мін рн х е т НО щу Х : тішить 5, ко Х я-к-о ри хе? ти
Е : х її й -р- і А кол й у о Зно х З мо мо о ос Мне Х - я Мне х - от б в-во ке у -з 7 пари у ок
Й гом ух Зв в-о тм Й що 0770 МН» о, нд у п ЗО у Зв хи і з. шМтто х То за х ях й ня тм а й у ши й о хх о у - - ' Й ух йо мо є по вн. х й о Мне ух ши . в-во А у Зара и у о а І В; М Х І о її Ї роя ма н х з зр, Н - 8 й ре й а но х р, З х тв-в-а Мн на ну х по х Й г 7 М - НІ й х у о Ц і су х Мн» й Кк М м о ой т І а. ! Ї у
Зв во шо у Ув-вео тм у ану ДІЯ їх ; З у З бе М їщ- ! з , ше тя7 т у З в? Й 580 о о й Й ат х - о й з-р-0 ге - 0 Н мча х За «й й ) -- й 9 всйн м щі х ши І лін у ех Й ГК М
Не ще х і смт й и з мем у Вчи їх ( о. / ! ча в «й -и це х о м. АХ МН у З 9 чн; -. о ! х УА ри у в-во їх
Зв у ше -ї зн, З 5 зр пк а чия у х кв; у З у дн од щ - і г а 7 х в-во ; в-во ; 000000
Френе
В деяких варіантах реалізації сполука містить або складається з одноланцюгового модифікованого олігонуклеотида, що складається з 16 зв'язаних нуклеозидів, що має послідовність нуклеотидних основ, що складається з послідовності, представленої в 5ЕСО І
МО: 549, при цьому вказаний модифікований олігонуклеотид містить: геп-сегмент, що складається з десяти зв'язаних дезоксинуклеозидів; сегмент 5-крило, що складається з трьох зв'язаних нуклеозидів; і сегмент 3'-крило, що складається з трьох зв'язаних нуклеозидів; при цьому вказаний геп-сегмент розташований між 5'і-сегментом-крилом і 3- сегментом- крилом; при цьому кожен нуклеозид кожного сегмента-крила містить сЕї- цукор; при цьому кожний міжнуклеозидний зв'язок являє собою фосфоротіоатний зв'язок; і при цьому кожен цитозин являє собою 5-метилцитозин. В деяких варіантах реалізації сполука містить або складається з одноланцюгового модифікованого олігонуклеотида, що складається з 16 зв'язаних нуклеозидів, які мають послідовність нуклеотидних основ, що містить послідовність, представлену в 5ЕО І МО: 598, при цьому вказаний модифікований олігонуклеотид містить: геп-сегмент, що складається з десяти зв'язаних дезоксинуклеозидів; сегмент 5-крило, що складається з трьох зв'язаних нуклеозидів; і сегмент 3'-крило, що складається з трьох зв'язаних нуклеозидів; при цьому вказаний геп-сегмент розташований між 5'-сегментом-крилом і 3- сегментом- крилом; при цьому сегмент 5-крило містить 2'-О-метоксіетил-цукор, 2'-О-метоксіетил-цукор і сЕїі-цукор в 5-3'--напрямку; при цьому сегмент 3-крило містить СЕЇї- цукор, сЕї-цукор і 2"-О- метоксіетил-цукор в 5'-3-напрямку; при цьому кожний міжнуклеозидний зв'язок являє собою фосфоротіоатний зв'язок; і при цьому кожен цитозин являє собою 5-метилцитозин.
У будь-якому з вищенаведених варіантів реалізації сполука або олігонуклеотид може бути щонайменше на 85 95, щонайменше на 90 95, щонайменше на 95 95, щонайменше на 98 95, щонайменше на 99 95 або на 100 95 комплементарний нуклеїновій кислоті, що кодує
СЕВ.
У будь-якому з вищенаведених варіантів реалізації сполука або олігонуклеотид може бути одноланцюговим.
В деяких варіантах реалізації сполуки або композиції, описані в цьому документі, ефективні відповідно до щонайменше однієї з ІСво іп мій, що становить менше 250 нМ, менше 200 нМ, менше 150 нМ, менше 100 нМ, менше 90 нМ, менше 80 нМ, менше 70 нМ, менше 65 нМ, менше 60 нМ, менше 55 нМ, менше 50 нМ, менше 45 нМ, менше 40 нМ, менше 35 нМ, менше 30 нМ, менше 25 нМ або менше 20 нМ.
В деяких варіантах реалізації сполуки або композиції, описані в цьому документі, є у найвищий мірі переносимими, про що свідчить, щонайменше, одне з: підвищення значення аланінтрансамінази (АЛТ) або аспартаттрансамінази (АСТ) не більше ніж в 4 рази, в З рази або в 2 рази в порівнянні з тваринами, які отримували лікування фізіологічним розчином, або збільшення маси печінки, селезінки або нирки не більше ніж на 30 95, 20 Фо, 15 9, 12 96, 10
Фо, 2 Ус або 2 95. В деяких варіантах реалізації сполуки або композиції, описані в цьому документі, є у вищій мірі переносимим, про що свідчить відсутність підвищення рівня АЛТ або АСТ в порівнянні з тваринами, які отримували лікування фізіологічним розчином. В деяких варіантах реалізації сполуки або композиції, описані в цьому документі, є у вищій мірі переносимими, про що свідчить відсутність збільшення маси печінки, селезінки або нирки в порівнянні з тваринами, які отримували лікування фізіологічним розчином.
В деяких варіантах реалізації запропонована композиція, що містить сполуки згідно будь- якого з вищезазначених варіантів реалізації або його сіль і щонайменше один фармацевтично прийнятний носій або розчинник. В деяких варіантах реалізації зазначена композиція має в'язкість менше приблизно 40 сантипуаз (СП), менше приблизно 30 сантипуаз (СП), менше приблизно 20 сантипуаз (СП), менше приблизно 15 сантипуаз (СП) або менше приблизно 10 сантипуаз (СП). В деяких варіантах реалізації композиція, що має будь-яке з вищезазначених значень в'язкості, містить сполуку, запропоновану відповідно до даного винаходу, в концентрації приблизно 100 мг/мл, приблизно 125 мг/мл, приблизно 150 мг/мл, приблизно 175 мг/мл, приблизно 200 мг/мл, приблизно 225 мг/мл, приблизно 250 мг/мл, приблизно 275 мг/мл або приблизно 300 мг/мл. В деяких варіантах реалізації композиція, що має будь-яке з вищезазначених значень в'язкості і/або концентрації сполуки, має температуру, що являє собою кімнатну температуру, або приблизно 20 "С, приблизно 21 "С, приблизно 22 "б, приблизно 23 "С, приблизно 24 "С, приблизно 25 "С, приблизно 26 "С, приблизно 27 "С,
Зо приблизно 28 "С, приблизно 29 "С або приблизно 30 "0.
В деяких варіантах реалізації спосіб лікування, запобігання або полегшення захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента, у суб'єкта включає введення зазначеному суб'єкту специфічного інгібітору фактора В комплемента (СЕВ) що таким чином дозволяє лікувати, запобігати або полегшувати зазначене захворювання. В деяких варіантах реалізації альтернативний шлях активації комплемента активується на рівні, вище нормального. В деяких варіантах реалізації СЕВ- специфічний інгібітор являє собою антисмислову сполуку, націлену на СЕВ, таку як антисенсовий олігонуклеотид, націлений на СЕВ. В деяких варіантах реалізації СЕВ- специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів і має послідовність нуклеотидних основ, що містить щонайменше 8 суміжних нуклеотидних основ будь-якої з послідовностей нуклеотидних основ 5ЕО ІЮ МО: 6-808. В деяких варіантах реалізації СЕВ- специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що мають послідовність нуклеотидних основ, що містить або складається з будь-якої з 5ЕО ІЮО МО: 6-808. В деяких варіантах реалізації СЕВ-специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається 3 модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що мають послідовність нуклеотидних основ, що містить або складається з будь- якої з ФЕО ІЮО МО: 198, 228, 237, 440, 444, 448, 450, 453, 455, 549 і 598. В деяких варіантах реалізації СЕВ-специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з І5І5 532770, 552800, 532809, 588540, 588544, 588548, 588550, 588553, 588555, 588848 або 594430. В деяких варіантах реалізації СЕВ-специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з ІБІ5 588540, який має наступну хімічну структуру:
Мне
Мои о «4 о СА но. я м. трон ше 2 і ма - й дея ма 9 тт Мт осмв, Дт ій зва бкмо і |у ці и тв-е В у х нний : ат у в? он; х | ці у: 8 не Ї М л ниши х ев зом і - 7 у ІВ Н х 3-8 КА ни Я я Ум зо у З що м ха
Я у рен Я у | о. А І щоби В І --/ Мн» Ї їй
З 8-о зо ух - й з г б г ПИ хи М ЩО сво де х зву х а з х 3-в- зо і у - у тя ре - о мне ух 5 Мне у ши пи
З д-р ! у Зв-в- тив Й - о й й й рн х й й Й ї й х о. А я Кей Х це баба і 5. й ний у К-е й І вто гр -У ат у Мне у У мм бо мн. Й о х Н
Ї -кж ді х 2-0 - у
Фев «АК, х в-вео в х 2-7 - 5--о те Бо у в. її х 7 а Кі х Зх х -к й но у | ю.. Иго ; що! о о ех рі х у БІ м М ч Й Я )х а х З-в-о фер
З З. х Бе ші й і т
З вони гц Х | в-во шк И це М он
Й зе а Х З пиши х оц м «ЛЮ х І їх М Й й -О у «- о у п ке; у х Ї й зо мно -о МН х ее ран шк ШИ в-в-о
Тева в, у м км ї Я щої о Го т а Х ш-ни і С й ах ти, й х рн х о- у ев Й оно ой. х и ; во і З- - --зья
В деяких варіантах реалізації захворювання являє собою дегенерацію жовтої плями, таку як вікова дегенерація жовтої плями (АМО), яка може являти собою вологу форму АМО або суху форму АМО. В деяких варіантах реалізації суха форма АМО може являти собою географічну атрофію. В деяких варіантах реалізації захворювання являє собою захворювання нирок, таке як вовчаковий нефрит, системний червоний вовчак (5ІЕ), хворобу щільного осаду (000), СЗ-гломерулонефрит (СЗ3С2М), СЕНАБ-нефропатію або атиповий гемолітико-уремічний синдром (анНиб), або будь-яку комбінацію зазначених захворювань.
В деяких варіантах реалізації спосіб лікування, запобігання або полегшення дегенерації жовтої плями, такої як вікова дегенерація жовтої плями (АМО), у суб'єкта включає введення зазначеному суб'єкту СЕВ-специфічного інгібітору, що таким чином дозволяє лікувати, запобігати або полегшувати АМО, таку як волога форма АМО і суха форма АМО. В деяких варіантах реалізації суха форма АМО може являти собою географічну атрофію.
Географічна атрофія вважається запущеною сухою формою АМО, до якої залучена дегенерація сітківки. В деяких варіантах реалізації суб'єкт демонструє альтернативний шлях активації комплемента, який активується на рівні, вище нормального. В деяких варіантах реалізації введення антисмислової сполуки зменшує або пригнічує накопичення рівнів СЗ в оці, таких як рівні білка С3. В деяких варіантах реалізації введення антисмислової сполуки знижує рівень відкладень С3З в оці або інгібує накопичення відкладень ССЗ в оці. В деяких варіантах реалізації СЕВ-специфічний інгібітор являє собою антисмислову сполуку, яка орієнтована на
СЕВ, таку як антисенсовий олігонуклеотид, націлений на СЕВ. В деяких варіантах реалізації
СЕВ- специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів і має послідовність нуклеотидних основ, що містить щонайменше 8 суміжних нуклеотидних основ будь-якої з послідовностей нуклеотидних основ 5ЕО ІО МО: 6-808. В деяких варіантах реалізації
СЕВ-специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що мають послідовність нуклеотидних основ, що містить або складається з будь-якої з 5ЕО ІЮО МО: 6-
Зо
808. В деяких варіантах реалізації СЕВ-специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що мають послідовність нуклеотидних основ, що містить або складається з будь- якої з ФЕО ІЮО МО: 198, 228, 237, 440, 444, 448, 450, 453, 455, 549 і 598.
В деяких варіантах реалізації СЕВ-специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з ІБІ5 532770, 532800, 532809, 588540, 588544, 588548, 588550, 588553, 588555, 588848 або 594430. В деяких варіантах реалізації сполуку вводять суб'єкту парентерально.
В деяких варіантах реалізації спосіб лікування, запобігання або полегшення захворювання нирок, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента, у суб'єкта включає введення зазначеному суб'єкту специфічного інгібітору фактора В комплемента (СЕВ), що таким чином дозволяє лікувати, запобігати або полегшувати зазначене захворювання нирок. В деяких варіантах реалізації альтернативний шлях активації комплемента активується на рівні, вище нормального. В деяких варіантах реалізації
СЕВ-специфічний інгібітор являє собою антисмислову сполуку, націлену на СЕВ, таку як антисенсовий олігонуклеотид, націлений на СЕВ. В деяких варіантах реалізації СЕВ- специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів і має послідовність нуклеотидних основ, що містить щонайменше 8 суміжних нуклеотидних основ будь-якої з послідовностей нуклеотидних основ 5ЕО ІЮ МО: 6-808. В деяких варіантах реалізації СЕВ- специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що мають послідовність нуклеотидних основ, що містить або складається з будь-якої з 5ЕО І МО: 6-808. В деяких варіантах реалізації СЕВ-специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається 3 модифікованого олігонуклеотида, що складається 3 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що мають послідовність нуклеотидних основ, що містить або складається з будь- якої з ФЕО ІЮ МО: 198, 228, 237, 440, 444, 448, 450, 453, 455, 549 і 598. В деяких варіантах реалізації СЕВ-специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з ІбБІ5 532770, 532800, 532809, 588540, 588544, 588548, 588550, 588553, 588555, 588848 або 594430.
Зо В деяких варіантах реалізації сполуку вводять суб'єкту парентерально. В деяких варіантах реалізації захворювання нирок являє собою вовчаковий нефрит, системний червоний вовчак (5ІЕ), хворобу щільного осаду (000), СЗ-гломерулонефрит (СЗОИМ) СЕНН5- нефропатію або атиповий гемолітико- уремічний синдром (анНиб), або будь-яку комбінацію зазначених захворювань. В деяких варіантах реалізації захворювання нирок пов'язано з відкладеннями С3, такими як відкладення СЗ в клубочці. В деяких варіантах реалізації захворювання нирок пов'язано з рівнями циркулюючого СЗ3, які нижче нормальних, такими як рівні СЗ в сироватці або плазмі. В деяких варіантах реалізації введення сполуки знижує або інгібує накопичення рівнів СЗ в нирці, таких як рівні білка СЗ3. В деяких варіантах реалізації введення сполуки знижує рівень відкладень СЗ в нирці або інгібує накопичення відкладень СЗ в нирці, таких як рівні СЗ в клубочці. В деяких варіантах реалізації присутність або ризик розвитку захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента, у суб'єкта визначають, наприклад, шляхом детектування рівнів комплементу або рівнів мембраноатакуючого комплексу в крові суб'єкта тал"або шляхом виконання генетичного тесту на предмет генних мутацій факторів комплемента, пов'язаних з вказаним захворюванням.
В деяких варіантах реалізації спосіб інгібування експресії фактора В комплемента (СЕВ) у суб'єкта, який страждає від або у якого присутній ризик розвитку захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента, включає введення зазначеному суб'єкту інгібітору, специфічного по відношенню до фактора В комплемента (СЕВ), що таким чином дозволяє інгібувати експресію СЕВ у суб'єкта. В деяких варіантах реалізації введення інгібітору дозволяє інгібувати експресію СЕВ в оці. В деяких варіантах реалізації суб'єкт страждає від або у нього є ризик розвитку вікової дегенерації жовтої плями (АМО), такої як волога форма АМО і суха форма АМО. В деяких варіантах реалізації суха форма
АМО може являти собою географічну атрофію. В деяких варіантах реалізації введення інгібітору дозволяє інгібувати експресію СЕВ в нирці, наприклад, в клубочці. В деяких варіантах реалізації суб'єкт страждає від або у нього є ризик розвитку вовчакового нефриту, системного червоного вовчака (5ІЕ), хвороби щільного осаду (000), СЗ-гломерулонефриту (СзаМ), СЕНА5-нефропатії або атипового гемолітико-уремічного синдрому (аниб), або будь- якої комбінації зазначених захворювань. В деяких варіантах реалізації СЕВ-специфічний бо інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида,
що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів і має послідовність нуклеотидних основ, що містить щонайменше 8 суміжних нуклеотидних основ будь-якої з послідовностей нуклеотидних основ 5ЕО ІЮ МО: 6-808. В деяких варіантах реалізації СЕВ-специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що мають послідовність нуклеотидних основ, що містить або складається з будь-якої з 5ЕСО ІО МО: 6-808. В деяких варіантах реалізації СЕВ-специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що мають послідовність нуклеотидних основ, що містить або складається з будь-якої з БЕО
ІО МО: 198, 228, 237, 440, 444, 448, 450, 453, 455, 549 і 598. В деяких варіантах реалізації
СЕВ- специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з ІБІ5 532770, 532800, 532809, 588540, 588544, 588548, 588550, 588553, 588555, 588848 або 594430. В деяких варіантах реалізації сполуку вводять суб'єкту парентерально.
В деяких варіантах реалізації спосіб зменшення або інгібування накопичення відкладень ССЗ в оці суб'єкта, який страждає від або у якого присутній ризик розвитку захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента, включає введення зазначеному суб'єкту інгібітору, специфічного по відношенню до фактора В комплемента (СЕВ), що таким чином дозволяє зменшувати або інгібувати накопичення відкладень СЗ в оці суб'єкта. В деяких варіантах реалізації суб'єкт має або схильний до ризику розвитку вікової дегенерації жовтої плями (АМО), такої як волога форма АМО і суха форма
АМО. В деяких варіантах реалізації суха форма АМО може являти собою географічну атрофію. В деяких варіантах реалізації інгібітор являє собою антисмислову сполуку, яка націлена на СЕВ. В деяких варіантах реалізації СЕВ- специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-
ЗО зв'язаних нуклеозидів і має послідовність нуклеотидних основ, що містить щонайменше 8 суміжних нуклеотидних основ будь-якої з послідовностей нуклеотидних основ 5ЕО ІЮ МО: 6- 808. В деяких варіантах реалізації СЕВ-специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що мають послідовність нуклеотидних основ, що містить або складається з будь-
Зо якої з ФЕО ІЮ МО: 6-808. В деяких варіантах реалізації СЕВ-специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що мають послідовність нуклеотидних основ, що містить або складається з будь-якої з БЕО ІЮО МО: 198, 228, 237, 440, 444, 448, 450, 453, 455, 549 і 598. В деяких варіантах реалізації СЕВ-специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з ІБІБ 532770, 532800, 532809, 588540, 588544, 588548, 588550, 588553, 588555, 588848 або 594430. В деяких варіантах реалізації сполуку вводять суб'єкту парентерально.
В деяких варіантах реалізації спосіб зменшення або інгібування накопичення відкладень ССЗ в нирці суб'єкта, який страждає від або у якого присутній ризик розвитку захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента, включає введення зазначеному суб'єкту інгібітору, специфічного по відношенню до фактора В комплемента (СЕВ), що таким чином дозволяє зменшувати або інгібувати накопичення відкладень ССЗ в нирці суб'єкта. В деяких варіантах реалізації суб'єкт страждає від або у нього є ризик розвитку вовчакового нефриту, системного червоного вовчака (5 'Е), хвороби щільного осаду (000), СЗ-гломерулонефриту (СЗОМ), СЕНАБ-нефропатії або атипового гемолітико- уремічного синдрому (анНиб), або будь-якої комбінації зазначених захворювань. В деяких варіантах реалізації інгібітор являє собою антисмислову сполуку, яка націлена на СЕВ. В деяких варіантах реалізації СЕВ- специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається 3 10-30 зв'язаних нуклеозидів і має послідовність нуклеотидних основ, що містить щонайменше 8 суміжних нуклеотидних основ будь-якої з послідовностей нуклеотидних основ 5ЕО І МО: 6-808. В деяких варіантах реалізації СЕВ-специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що мають послідовність нуклеотидних основ, що містить або складається з будь-якої з 5ЕО ІЮ
МО: 6-808. В деяких варіантах реалізації СЕВ-специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що мають послідовність нуклеотидних основ, що містить або складається з будь-якої з ФЕО ІЮ МО: 198, 228, 237, 440, 444, 448, 450, 453, 455, 549 і 598.
В деяких варіантах реалізації СЕВ-специфічний інгібітор являє собою сполуку, що містить 60 або складається з ІБІБ 532770, 532800, 532809, 588540, 588544, 588548, 588550, 588553,
588555, 588848 або 594430. В деяких варіантах реалізації сполуку вводять суб'єкту парентерально.
Деякі варіанти реалізації відносяться до сполуки або композиції, описаної в цьому документі, для застосування в терапії. Деякі варіанти реалізації відносяться до сполуки, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів і має послідовність нуклеотидних основ, що містить щонайменше 8 суміжних нуклеотидних основ будь-якої з послідовностей нуклеотидних основ 5ЕО ІЮ МО: 6-808, для застосування в терапії. Деякі варіанти реалізації відносяться до сполуки, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що мають послідовність нуклеотидних основ, що містить або складається з будь-якої з 5ЕО І МО: 6-808, для застосування в терапії. Деякі варіанти реалізації відносяться до сполуки, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що мають послідовність нуклеотидних основ, що містить або складається з будь-якої з ФЕО ІЮ МО: 198, 228, 237, 440, 444, 448, 450, 453, 455, 549 і 598, для застосування в терапії. Деякі варіанти реалізації відносяться до сполуки, що містить або складається з ІБІ5 532770, 532800, 532809, 588540, 588544, 588548, 588550, 588553, 588555, 588848 або 594430, для застосування в терапії.
Деякі варіанти реалізації відносяться до сполуки або композиції, описаної в цьому документі, для застосування для лікування захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента. Деякі варіанти реалізації відносяться до сполуки, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-
ЗО зв'язаних нуклеозидів і має послідовність нуклеотидних основ, що містить щонайменше 8 суміжних нуклеотидних основ будь-якої з послідовностей нуклеотидних основ 5ЕСО І МО: 6-808, для застосування для лікування захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента. Деякі варіанти реалізації відносяться до сполуки, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що мають послідовність нуклеотидних основ, що містить або складається з будь-якої з ЕС ІЮ МО: 6-808, для застосування для лікування захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента. Деякі варіанти реалізації відносяться до сполуки, що містить або складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що мають послідовність нуклеотидних основ, що містить або складається з будь-якої з ФЕО ІЮО МО: 198, 228, 237, 440, 444, 448, 450, 453, 455, 549 і 598, для застосування для лікування захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента. Деякі варіанти реалізації відносяться до сполуки, що містить або складається з ІБІ5 532770, 532800, 532809, 588540, 588544, 588548, 588550, 588553, 588555, 588848 або 594430, для застосування для лікування захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента. В деяких варіантах реалізації альтернативний шлях активації комплемента активується на рівні, вище нормального. В деяких варіантах реалізації захворювання являє собою дегенерацію жовтої плями, таку як вікова дегенерація жовтої плями (АМО), яка може являти собою вологу форму АМО або суху форму АМО. В деяких варіантах реалізації суха форма АМО може являти собою географічну атрофію. В деяких варіантах реалізації захворювання являє собою захворювання нирок, таке як вовчаковий нефрит, системний червоний вовчак (51 Е), хворобу щільного осаду (000), СЗ-гломерулонефрит (СЗСИ2М) СЕНАБ-нефропатію або атиповий гемолітико-уремічний синдром (анНиб), або будь-яку комбінацію зазначених захворювань.
Деякі варіанти реалізації відносяться до сполуки, що містить або складається з ІбІ5 588540, який має наступну хімічну структуру:
Мне
Меорите о «І ій й не мя м. М. ОМ ше. / г Ї їй Ба Кк о тя М вч ІН 222 й З в о а ( лей Щі Ж и
Твої А х 5 мне у - МН» ! том у з п у І кот о ОА у в-вто тр хво ро но у Її з у /-р- м в) й кожи х р» ДМ м о оо чн, Х Ярн-ей МНа Х шу о
З ке р , о А х ек пт Хо о бвжо ов и ин
Е сиза й о. За у мли ет ит х фена у меті Хо і х К-й х і: о й 2 о бо т ; - чно у чл. ар : х Зе в ця у од в-во зон Я 5 » о тм х - і
В. (у А х і Ко х а МН й св! х я М т3 у Зв р-у м ге --ї р, х -- Мне у хо уже вва ще І Н Шен НИ зв у на ле
Шк мото у рн Н - 0 т Ї , 97 у - о у в-їно с "ін 4 з х в - ик х а я в а-внон н у у в-во Я бвмн у Ше М см'сьн, з « п х їй ше у О - т м ке у у / 7 Х гей нан У 2) ї Й Об й : МН А ів міх Х в'я до
Ва КО баяня 00 вно я мн см у о Мт т кн о же х З и ух | п-що ИГто їх М хв Н - о. Н шжж іт 7 ін х т- -ЯХх 5;/ і -Щщи у - у оно - 9 у й в-й-о ; зо у; а я для застосування для лікування захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента. В деяких варіантах реалізації альтернативний шлях активації комплемента активується на рівні вище нормального. В деяких варіантах реалізації захворювання являє собою дегенерацію жовтої плями, таку як вікова дегенерація жовтої плями (АМО), яка може являти собою вологу форму АМО або суху форму АМО. В деяких варіантах реалізації суха форма АМО може являти собою географічну атрофію. В деяких варіантах реалізації захворювання являє собою захворювання нирок, таке як вовчаковий нефрит, системний червоний вовчак (5 Е), хворобу щільного осаду (000), С3- гломерулонефрит (СЗ3СИМ), СЕНАБ-нефропатію або атиповий гемолітико-уремічний синдром (анивб), або будь-яку комбінацію зазначених захворювань.
Деякі варіанти реалізації відносяться до застосування сполуки або композиції, описаної в цьому документі, для виготовлення лікарського засобу для лікування захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента. Деякі варіанти реалізації відносяться до застосування сполуки, яка містить або що складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів і має послідовність нуклеотидних основ, що містить щонайменше 8 суміжних нуклеотидних основ будь-якої з послідовностей нуклеотидних основ 5ЕС 10 МО: 6-808, для виготовлення лікарського засобу для лікування захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента. Деякі варіанти реалізації відносяться до застосування сполуки, яка містить або що складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що мають послідовність нуклеотидних основ, що містить або складається з будь-якої з 5ЕО І МО: 6-808, для виготовлення лікарського засобу для лікування захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента. Деякі варіанти реалізації відносяться до застосування сполуки, яка містить або що складається з модифікованого олігонуклеотида, що складається з 10-30 зв'язаних нуклеозидів, що мають послідовність нуклеотидних основ, що містить або складається з будь-якої з 5ЕО ІО МО: 198, 228, 237, 440, 444, 448, 450, 453, 455, 549 і 598, для виготовлення лікарського засобу для лікування захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента. Деякі варіанти реалізації відносяться до застосування сполуки, яка містить або складається з ІБІ5 532770, 532800, 532809, 588540, 588544, 588548, 588550, 588553, 588555, 588848 або 594430, для виготовлення лікарського
Б засобу для лікування захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента. В деяких варіантах реалізації альтернативний шлях активації комплемента активується на рівні вище нормального. В деяких варіантах реалізації захворювання являє собою дегенерацію жовтої плями, таку як вікова дегенерація жовтої плями (АМО), яка може являти собою вологу форму АМО або суху форму АМО. В деяких варіантах реалізації суха форма АМО може являти собою географічну атрофію. В деяких варіантах реалізації захворювання являє собою захворювання нирок, таке як вовчаковий нефрит, системний червоний вовчак (5ЇЕ) хворобу щільного осаду (000), С3- гломерулонефрит (СЗОМ), СЕНАБ-нефропатію або атиповий гемолітико-уремічний синдром (аниб), або будь-яку комбінацію зазначених захворювань.
Деякі варіанти реалізації відносяться до застосування сполуки, яка містить або складається з ІБІ5 588540, який має наступну хімічну структуру:
МН. но
Мол з «1 о од но. Яся мин трон ей - чі Її рі х зв о нн МТМ, ен бв-ь-о син у І - Мн» Й - чне я її Ю х й 8--о й. 2-2 М х щ о й зві - та у ! ої у Те--р- пом в х 9. де г М сито су у і но. я у ше й -о ой Мн; х Уа-і ння у - ій 7 8-х зок У - мч х ген що г х бан рот ви 00 х Хі х а ср у птв--- оця шити й М шк р 2 у о. Це ій сх у чі га х я ще ! х «- у З в. 9) є 0 мно х Кк а Ме х шити . б довб- а у та Б- ни у о й ' х шия ух - о т МН 5, р у х й у Зв-р-о Мі шини у дж у : Ко! -ї є Ї ;чвй, Х о, я р. с х ЗМ х . м й о и мн Н 2 у я ух о /4
Ов-вно в у вро хи й СТ ди о Ї у тм7Зо у
З -сь но х С- зу у 2 9 и ; ї --А7 я х іх о х 3-0 в кн - о В ще й За дощ М х Го ни ДН
Зв-во з р у ур т і у й 2 Й Мотни
В» х ре н поч й о х чо у ех
Гб у 7 рі ІЧ З
У х а М ї х о 5 ІН. - 8 Мн х еа-йшо Й їв у в-йпо с теоре Ще й ве хі у ГНЕ» нон х в. Мосмб мн, о й Ак о її д у В Й у З моста я мо у тн х і а" ке х "Чай у ї
В; у -е 9 у ово з 7 х 7в-р-о в-во і 5- -- - я - с --т для виготовлення лікарського засобу для лікування захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента. В деяких варіантах реалізації альтернативний шлях активації комплемента активується на рівні вище нормального. В деяких варіантах реалізації захворювання являє собою дегенерацію жовтої плями, таку як вікова дегенерація жовтої плями (АМО), яка може являти собою вологу форму АМО або суху форму АМО. В деяких варіантах реалізації суха форма АМО може являти собою географічну атрофію. В деяких варіантах реалізації захворювання являє собою захворювання нирок, таке як вовчаковий нефрит, системний червоний вовчак (5 Е), хворобу щільного осаду (000), СЗ-гломерулонефрит (С3ЗС2М) СЕНАБ-нефропатію або атиповий гемолітико-уремічний синдром (анНиб), або будь-яку комбінацію зазначених захворювань.
У будь-якому з вищенаведених варіантів реалізації СЕВ-специфічний інгібітор може являти собою антисмислову сполуку, яка націлена на СЕВ. В деяких варіантах реалізації антисмислова сполука містить антисенсовий олігонуклеотид, наприклад, антисенсовий олігонуклеотид, що складається з 8-80 зв'язаних нуклеозидів, 12-30 зв'язаних нуклеозидів або 20 зв'язаних нуклеозидів. В деяких варіантах реалізації антисенсовий олігонуклеотид щонайменше на 80 95, 85 95, 90 95, 95 95 або 100 95 комплементарний будь-якій з послідовностей нуклеотидних основ, представлених в 5ЕО 0 МО: 1-5. В деяких варіантах реалізації антисенсовий олігонуклеотид містить щонайменше один модифікований міжнуклеозидний зв'язок, щонайменше один модифікований цукор і/або щонайменше одну модифіковану нуклеотидну основу. В деяких варіантах реалізації модифікований міжнуклеозидний зв'язок являє собою фосфоротіоатний міжнуклеозидний зв'язок, модифікований цукор являє собою біциклічний цукор або 2'-О-метоксіетил-цукор, і модифікована нуклеотидна основа являє собою 5- метилцитозин. В деяких варіантах реалізації модифікований олігонуклеотид містить геп- сегмент, що складається із зв'язаних дезоксинуклеозидів; сегмент 5'--крило, що складається із зв'язаних нуклеозидів; і сегмент 3'--крило, що складається із зв'язаних нуклеозидів; при цьому вказаний геп-сегмент безпосередньо примикає і розташований між 5'-сегментом-крилом і 3'- сегментом-крилом, і при цьому кожен нуклеозид кожного сегмента-крила містить модифікований цукор. В деяких варіантах реалізації антисенсовий олігонуклеотид вводять парентерально. Наприклад, в деяких варіантах реалізації антисенсовий олігонуклеотид може бути введений за допомогою ін'єкції або інфузії. Парентеральне введення включає підшкірне введення, внутрішньовенне введення, внутрішньом'язове введення, внутрішньоартеріальне введення, інтраперігонеальне введення або інтракраніальне введення, наприклад, інтратекальне або інтрацеребровентрікулярне введення.
Антисмислові сполуки
Олігомерні сполуки включають, але не обмежуються ними, олігонуклеотиди, олігонуклеозиди, аналоги олігонуклеотидів, міметики олігонуклеотидів, антисмислові сполуки, антисмислові олігонуклеотиди і міРНК. Олігомерна сполука може бути «антисмисловою» по відношенню до цільової нуклеїнової кислоти, тобто вона здатна гібридизуватись з цільовою нуклеїновою кислотою шляхом утворення водневих зв'язків.
Зо В деяких варіантах реалізації антисмислова сполука містить послідовність нуклеотидних основ, яка під час запису в 5-3'-напрямку містить зворотно- комплементарну послідовність цільового сегмента цільової нуклеїнової кислоти, на яку вона націлена.
В деяких варіантах реалізації довжина антисмислової сполуки становить від 10 до 30 субодиниць. В деяких варіантах реалізації довжина антисмислової сполуки становить від 12 до 30 субодиниць. В деяких варіантах реалізації довжина антисмислової сполуки становить від 12 до 22 субодиниць. В деяких варіантах реалізації довжина антисмислової сполуки становить від 14 до 30 субодиниць. В деяких варіантах реалізації довжина антисмислової сполуки становить від 14 до 20 субодиниць. В деяких варіантах реалізації довжина антисмислової сполуки становить від 15 до 30 субодиниць. В деяких варіантах реалізації довжина антисмислової сполуки становить від 15 до 20 субодиниць. В деяких варіантах реалізації довжина антисмислової сполуки становить від 1б до 30 субодиниць. В деяких варіантах реалізації довжина антисмислової сполуки становить від 16 до 20 субодиниць. В деяких варіантах реалізації довжина антисмислової сполуки становить від 17 до З30 субодиниць. В деяких варіантах реалізації довжина антисмислової сполуки становить від 17 до 20 субодиниць. В деяких варіантах реалізації довжина антисмислової сполуки становить від 18 до 30 субодиниць. В деяких варіантах реалізації довжина антисмислової сполуки становить від 18 до 21 субодиниці. В деяких варіантах реалізації довжина антисмислової сполуки становить від 18 до 20 субодиниць. В деяких варіантах реалізації довжина антисмислової сполуки становить від 20 до 30 субодиниць. Іншими словами, такі антисмислової сполуки являють собою від 12 до 30 зв'язаних субодиниць, від 14 до 30 зв'язаних субодиниць, від 14 до 20 субодиниць, від 15 до 30 субодиниць, від 15 до 20 субодиниць, від 16 до 30 субодиниць, від 16 до 20 субодиниць, від 17 до 30 субодиниць, від 17 до 20 субодиниць, від 18 до 30 субодиниць, від 18 до 20 субодиниць, від 18 до 21 субодиниці, від 20 до 30 субодиниць або від 12 до 22 зв'язаних субодиниць відповідно. В деяких варіантах реалізації довжина антисмислової сполуки становить 14 субодиниць. В деяких варіантах реалізації довжина антисмислової сполуки становить 16 субодиниць. В деяких варіантах реалізації довжина антисмислової сполуки становить 17 субодиниць. В деяких варіантах реалізації довжина антисмислової сполуки становить 18 субодиниць. В деяких варіантах реалізації довжина антисмислової сполуки становить 19 субодиниць. В деяких варіантах реалізації довжина бо антисмислової сполуки становить 20 субодиниць. В інших варіантах реалізації антисмислова сполука являє собою від 8 до 80, від 12 до 50, від 13 до З0, від 13 до 50, від 14 до З0, від 14 до 50, від 15 до З0, від 15 до 50, від 16 до З0, від 16 до 50, від 17 до З0, від 17 до 50, від 18 до 22, від 18 до 24, від 18 до З0, від 18 до 50, від 19 до 22, від 19 до З0, від 19 до 50 або від 20 до 30 зв'язаних субодиниць. В деяких таких варіантах реалізації довжина антисмислових сполук становить 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59,60, 61, 62,63, 64, 65,66, 67,68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79 або 80 зв'язаних субодиниць, або характеризується діапазоном, що визначається будь-якими двома із значень, зазначених вище. В деяких варіантах реалізації антисмислова сполука являє собою антисенсовий олігонуклеотид, а зв'язані субодиниці являють собою нуклеотиди.
В деяких варіантах реалізації антисмислові олігонуклеотиди можуть бути усіченими або вкороченими. Наприклад, одна субодиниця може бути делетована з 5'-кінця (5'-укорочення) або, як альтернатива, з З'-кінця (3-укорочення). Усічена або вкорочена антисмислова сполука, яка націлена на нуклеїнову кислоту СЕВ, може містити делецію двох субодиниць з 5-кінця або, як альтернатива, може містити делецію двох субодиниць з 3-кінця антисмислової сполуки. В якості альтернативи, делетовані нуклеозиди можуть бути розподілені по всій антисенсовій сполуці, наприклад, в антисенсовій сполуці, що містить делецію одного нуклеозида з 5'-кінця і делецію одного нуклеозида з 3'-кінця.
У разі, коли в подовженій антисенсовій сполуці присутня одна додаткова субодиниця, зазначена додаткова субодиниця може бути розташована на 5-або 3'-кінці антисмислової сполуки. У разі, коли присутні дві або більше додаткових субодиниць, зазначені субодиниці, що приєднуються, можуть примикати одна до одної, наприклад, в антисенсовій сполуці, що містить дві субодиниці, приєднані до 5-кінця (5'-приєднання) або, як альтернатива, до 3-кінців (3З'-'приєднання) зазначеної антисмислової сполуки. В якості альтернативи, субодиниці, що приєднуються, можуть бути розподілені по всій антисенсовій сполуці, наприклад, в антисенсовій сполуці, що містить одну субодиницю, приєднану до 5'- кінця, і одну субодиницю, приєднану до 3'-кінця.
Можна збільшувати або зменшувати довжину антисмислової сполуки, такої як антисенсовий оолігонуклеотид, і/або вводити в нього невідповідні основи без усунення
Зо активності. Наприклад, в У/сої! еї аї. (Ргос. Май). Асад. 5сі. ОБА 89:7305-7309, 1992) тестували серію антисмислових олігонуклеотидів довжиною 13-25 нуклеотидних основ на здатність індукувати розщеплення цільової РНК в моделі 3 ін'єкцією ооцитів. антисмислові олігонуклеотиди довжиною 25 нуклеотидних основ з 8 або 11 невідповідними основами біля кінців зазначених антисмислових олігонуклеотидів були здатні направляти специфічне розщеплення цільової мРНК, хоча і в меншій мірі, ніж антисмислові олігонуклеотиди, що не містять таких невідповідностей. Подібним чином специфічного по відношенню до цілі розщеплення досягали з використанням антисмислових олігонуклеотидів довжиною 13 нуклеотидних основ, в тому числі тих, які містили 1 або З невідповідності ((зацівспі єї аї. У. Маї).
Сапсег Іпбі. 93: 463-471) продемонстрували здатність олігонуклеотида, на 100 95 комплементарного мРНК рсІ-д і що містив З невідповідності мРНК бсіІ-хЇ, зменшувати експресію як рсі-2, так і ЮсІ-хЇ іп міо та іп мімо. Більш того, даний олігонуклеотид демонстрував сильну протипухлинну активність іп мімо.
Мапег і ЮОоїпіск (Мис. Асій. Не5. 16: 3341-3358, 1988) тестували серію тандемних антисмислових олігонуклеотидів довжиною 14 нуклеотидних основ і антисмислових олігонуклеотидів довжиною 28 і 42 нуклеотидних основи, що складалися з послідовності двох або трьох тандемних антисмислових олігонуклеотидів відповідно, на здатність зупиняти трансляцію дигідрофолатредуктази (ОНЕВ) людини в аналізі з ретикулоцитами кролика.
Кожен з трьох антисмислових олігонуклеотидів довжиною 14 нуклеотидних основ сам по собі міг інгібувати трансляцію, хоча і на більш помірному рівні, ніж антисмислові олігонуклеотиди довжиною 28 або 42 нуклеотидних основи.
Деякі мотиви і механізми антисмислових сполук
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки містять хімічно модифіковані субодиниці, організовані в патерни або мотиви для додання зазначеним антисенсовим сполукам таких властивостей, як підвищена інгібуюча активність, підвищена афінність зв'язування по відношенню до цільової нуклеїнової кислоти або стійкість до розпаду під дією нуклеаз іп мімо.
Химерні антисмислової сполуки, як правило, містять щонайменше одну область, модифіковану для надання підвищеної стійкості до розпаду під дією нуклеаз, підвищеної здатності до поглинання клітинами, підвищеної афінності зв'язування по відношенню до бо цільової нуклеїнової кислоти і/або підвищеної інгібуючої активності. Друга область химерної антисмислової сполуки може надавати іншу бажане властивість, наприклад, слугувати в якості субстрату для клітинної ендонуклеази РНКази Н, яка розщеплює РНК- ланцюг дуплексу РНК:
ДНК.
Антисмислова активність може бути результатом будь-якого механізму, до якого залучена гібридизація антисмислової сполуки (наприклад, олігонуклеотида) з цільовою нуклесновою кислотою, при цьому гібридизація, в кінцевому рахунку, обумовлює біологічний ефект. В деяких варіантах реалізації модулюють кількість і/або активність цільової нуклеїнової кислоти. В деяких варіантах реалізації зменшують кількість і/або активність цільової нуклеїнової кислоти. В деяких варіантах реалізації гібридизація антисмислової сполуки з цільовою нуклеїновою кислотою, в кінцевому рахунку, призводить до розпаду цільової нуклеїнової кислоти. В деяких варіантах реалізації гібридизація антисмислової сполуки з цільовою нуклесновою кислотою не приводить до розпаду цільової нуклеїнової кислоти. В деяких таких варіантах реалізації присутність антисмислової сполуки, яка гібридизована з цільовою нуклеїновою кислотою (зайнятість), призводить до модуляції антисмислової активності. В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки, що містять конкретний хімічний мотив або патерн хімічних модифікацій, особливо підходять для використання одного або більше механізмів. В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки функціонують більше ніж за одним механізмом і/або за механізмами, що не були пояснені. Відповідно, антисмислові сполуки, описані в цьому документі, не обмежуються конкретним механізмом.
Антисмислові механізми включають, без обмеження, антисенсовий механізм, опосередкований РНКазою Н; механізми РНК-інтерференції (РНКІ), які використовують шлях індукуємого РНК комплексу сайленсинга (ВІ5С) і включають, без обмеження, механізми міРНК,
ОоЛРНК і мікроРНК; і механізми на основі ступеня зайнятості. Деякі антисмислові сполуки можуть діяти більше ніж за одним таким механізмом і/або за додатковими механізмами.
Антисмислові механізми, опосередковані РНКазою Н
В деяких варіантах реалізації антисмислова активність щонайменше частково є наслідком розпаду цільової РНК під дією РНКази Н. РНКаза Н являє собою клітинну ендонуклеазу, яка розщеплює РЕК-ланцюг дуплексу РНК:ДНК. В даній області техніки відомо, що одноланцюгові антисмислові сполуки, які є «ДНК-подібними», викликають активність РНКази
Н в клітинах ссавців. Відповідно, антисмислові сполуки, що містять щонайменше частину нуклеозидів ДНК або ДНК-подібних нуклеозидів, можуть активувати РНКазу Н, що призводить до розщеплення цільової нуклеїнової кислоти. В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки, які використовують РНКазу Н, містять один або більше модифікованих нуклеозидів. В деяких варіантах реалізації такі антисмислові сполуки містять щонайменше один блок з 1-8 модифікованих нуклеозидів. В деяких таких варіантах реалізації зазначені модифіковані нуклеозиди не забезпечують активність РНКази Н. В деяких варіантах реалізації такі антисмислові сполуки являють собою гепмери, описані в цьому документі. В деяких таких варіантах реалізації геп гепмера містить нуклеозиди ДНК. В деяких таких варіантах реалізації геп гепмера містить ДНК-подібні нуклеозиди. В деяких таких варіантах реалізації геп гепмера містить нуклеозиди ДНК і ДНК-подібні нуклеозиди.
Деякі антисмислові сполуки, що містять гепмерний мотив, вважаються химерними антисенсовими сполуками. У гепмері внутрішня область, що містить велику кількість нуклеотидів, що забезпечують розщеплення РНКази Н, розташована між зовнішніми областями, що містять велику кількість нуклеотидів, які хімічно відрізняються від нуклеозидів внутрішньої області. У разі антисмислового олігонуклеотида, що містить гепмерний мотив, геп- сегмент, як правило, слугує в якості субстрату для розщеплення ендонуклеазою, тоді як сегменти-крила містять модифіковані нуклеозиди. В деяких варіантах реалізації області гепмера відрізняються типами цукрових груп, що складають кожну область, що відрізняється.
Типи цукрових груп, які використовують для диференціювання областей гепмера, в деяких варіантах реалізації можуть включати В-О- рибонуклеозид, В-ЮО-дезоксирибонуклеозид, 2'- модифіковані нуклеозиди (такі 2'- модифіковані нуклеозиди можуть включати 2'-МОЕ і 2'-0-СНз в числі інших) і нуклеозиди, модифіковані біциклічним цукром (такі нуклеозиди, модифіковані біциклічною цукром, можуть включати ті, які містять конформаційно обмежений етил). В деяких варіантах реалізації нуклеозиди в «крилах» можуть містити кілька модифікованих цукрових груп, включаючи, наприклад, 2-МОЕ, і біциклічних цукрових груп, таких як конформаційно обмежений етил або ЗНК. В деяких варіантах реалізації «крила» можуть містити декілька модифікованих і немодифікованих цукрових груп. В деяких варіантах реалізації «крила» можуть містити різні комбінації 2'-МОЕ-нуклеозидів, біциклічних цукрових груп, таких як бо конформаційно обмежені етил-нуклеозиди або ЗНК-нуклеозиди, і 2'-дезоксинуклеозидів.
Кожна область, що відрізняється, може містити однакові цукрові групи, варіантні групи або групи, що чергуються. Мотив «крило-геп-крило» часто описується як «Х-У-7», де «Х» представляє довжину 5'-крила, «У» представляє довжину гепа, і «7» представляє довжину 3'- «крила». «Х» і «7» можуть містити однакові, варіантні або цукрові групи, що чергуються. В деяких варіантах реалізації «Х» і «У» можуть містити один або більше 2'- дезоксинуклеозидів. «У» може містити 2'-дезоксинуклеозиди. В даному описі гепмер, описуваний як «Х-У-7», має таку конфігурацію, при якій геп безпосередньо примикає до кожного з 5'-«крила» і 3'-«крила».
Таким чином, між 5'--крилом» і гепом або гепом і 3'-««крилом» відсутні проміжні нуклеотиди.
Будь-яка з антисмислових сполук, описаних в цьому документі, може містити гепмерний мотив. В деяких варіантах реалізації «Х» і «7» є однаковими; в інших варіантах реалізації вони відрізняються. В деяких варіантах реалізації «У» становить від 8 до 15 нуклеозидів. Х, М або 7 можуть становити будь-яке число з 1,2, 3,4,5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30 або більше нуклеозидів.
В деяких варіантах реалізації антисмислова сполука, яка націлена на нуклеїнову кислоту СЕВ, містить гепмерний мотив, в якому геп складається з 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 або 16 зв'язаних нуклеозидів.
В деяких варіантах реалізації антисенсовий олігонуклеотид містить цукровий мотив, що описується формулою А наступним чином: (У) т-(В)п-(У)р-(В)А (Ах (О)а-(АХ- (В)ж-(9)х-(В)у-(9)», де: кожен А незалежно являє собою 2'-заміщений нуклеозид; кожен В незалежно являє собою біциклічний нуклеозид; кожен .) незалежно являє собою або 2'-заміщений нуклеозид, або 2'- дезоксинуклеозид; кожен О являє собою 2'-дезоксинуклеозид; т дорівнює 0-4; п дорівнює 0-2; р дорівнює 0-2; А дорівнює 0-2; ї дорівнює 0-2; м дорівнює 0-2; м/ дорівнює 0-4; х дорівнює 0-2; у дорівнює 0-2; 2 дорівнює 0-4; д дорівнює 6-14; при цьому: щонайменше один з: т, п і АВ відмінний від 0; щонайменше один з: м/ і у відмінний від 0; сума т, п, р, г і Її становить від 2 до 5; і сумам, м, х, у і 2 становить від 2 до 5.
Зо Сполуки РНКІ
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки являють собою інтерферуючі РНК- сполуки (РНКІ), які включають дволанцюгові РНК-сполуки (які також називаються короткою інтерферуючою РНК або міРНК) і одноланцюгові сполуки РНКІі (або олРНК). Такі сполуки діють щонайменше частково по шляху ВІ5С з розкладанням і/або секвеструванням цільової нуклеїнової кислоти (таким чином, включають мікроРНК/ сполуки-імітатори мікроРНК). В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки містять модифікації, які роблять їх особливо придатними для таких механізмів. і.Сполуки, що являють собою олРНК
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки, в тому числі ті сполуки, які особливо підходять для застосування в якості одноланцюгових сполук РНКІі (олРНК), містять модифіковану 5'-кінцеву область. В деяких таких варіантах реалізації зазначена 5'- кінцева область містить модифіковану фосфатну групу. В деяких варіантах реалізації такий модифікований фосфат стабілізований (наприклад, стійкий до розпаду/розщеплення в порівнянні з немодифікованим 5'-фосфатом). В деяких варіантах реалізації такі 5'-кінцеві нуклеозиди стабілізують 5'і-фосфорну групу. Деякі модифіковані 5'-кінцеві нуклеозиди можна зустріти в даній області техніки, наприклад, в М/О/2011/139702.
В деяких варіантах реалізації 5'-нуклеозид сполуки, що являє собою олРНК, має формулу Пс: сь
ІЄ | не ль 1 із
Не де:
Ті являє собою можливо захищену фосфорну групу;
Т» являє собою міжнуклеозидну зв'язуючу групу, яка зв'язує сполуку формули с золігомерною сполукою;
А має одну з формул: і. 3 С. р - : С о ; : й ех БАЗИ Ой 5. ря х Е
Ть ле С й я Ж або т в з ?
Схі О2 кожен незалежно являє собою Н, галоген, С:і-Св алкіл, Сі-Св алкіл, що містить замісники, Сі-Сє алкоксил, Сі-Св алюоксил, що містить замісники, Сг2-Свє алкеніл, С2-Св алкеніл, що містить замісники, С2-Св алкініл, Со-Св алкініл, що містить замісники, або М(Вз)(Ва);
О з являє собою 0, 5, М(В5) або С(Ве)(А?); кожен Аз, На Н5, Нві НВ; незалежно являє собою Н, Сі-Св алкіл, Сі-Свє алкіл, що містить замісники, або Сі-Св алкокси;
М зявляє собою О, 5, МАч4, С(Аи5)(Вів), С(Аі5)(Аів). С(А7)(Аів),. С(Аі5)-О(Аи7),. ОС(ВІ5) (Вів) або ОС(Н:5) (Вхг);
АВ:і« являє собою Н, С:і-Сє алкіл, Сі-Сє алкіл, що містить замісники, Сі-Сє алкоксил, С:1-Св алкоксил, що містить замісники, Сг-Свє алкеніл, Со-Св алкеніл, що містить замісники, С2-Св алкініл або С2-Св алкініл, що містить замісники;
В 15, Вів, Ві7 і Вів кожен незалежно являє собою Н, галоген, Сі-Свє алкіл, Сі-Свє алкіл, що містить замісники, Сі-Сє алкоксил, С1-Св алкоксил, що містить замісники, Сг-Св алкеніл, С2-
Св алкеніл, що містить замісники, С2-Сє алкініл або С2-Св алкініл, що містить замісники;
Вх: являє собою гетероциклічну основу; або, якщо присутній Вхг2, то Вхг являє собою гетероциклічну основу, а Вхі являє собою Н, галоген, Сі-Св алкіл, Сі-Св алкіл, що містить замісники, С:1-Свє алкоксил, С:1-Свє алкоксил, що містить замісники, Сг2-Св алкеніл, Сг-Сє алкеніл, що містить замісники, С2-Свє алкініл або С2-Св алкініл, що містить замісники;
Уа, 95, Уві у; кожен незалежно являє собою Н, галоген, С1-Св алкіл, Сі-Свє алкіл, що містить замісники, Сі-Св алкоксил, Сі-Сє алкоксил, що містить замісники, С2-Св алкеніл, Сго-Св алкеніл, що містить замісники, С2-Св алкініл або Со-Свє алкініл, що містить замісники; або д4 утворює місток з одним з: 5 або 7, при цьому зазначений місток містить від 1 до З зв'язаних бірадикальних груп, вибраних з 0, 5, МАїю, С(Нго)(А21і), С(Нго) -С(Вгі),
СІ-С(Аго)(В2і)і| і С(-О), а інші два з: 95, дві У;7 кож ен незалежно являє собою Н, галоген, С1-Св алкіл, Сі-Свє алкіл, що містить замісники, Сі-Сє алкоксил, Сі-Св алюкоксил, що містить замісники,
С2-Св алкеніл, С2о-Св алкеніл, що містить замісники, С2-Свє алкініл або С2-Св алкініл, що містить замісники; кожен Ко, Нго і НВ2ї незалежно являє собою Н, Сі-Св алкіл, Сі-Свє алкіл, що містить замісники, Сі-Св алкоксил, Сі-Свалкоксил, що містить замісники, С2-Св алкеніл, С2-Свє алкеніл, що містить замісники, С2-Св алкініл або С2о-Св алкініл, що містить замісники; Сї являє собою Н,
ОН, галоген або О-ІЇС(Рв)(Реи-КО-О) т-Хч1 12; кожен Нві Ве незалежно являє собою Н, галоген, Сі-Св алкіл або Сі-Св алкіл, що містить замісники;
Х 1 являє собою 0, 5 або М (Ех); 7 являє собою Н, галоген, С:і-Св алкіл, Сі-Св алкіл, що містить замісники, С2-Свє алкеніл,
С2-Сє алкеніл, що містить замісники, С2-Сє алкініл, С2-Св алкініл, що містить замісники, або
М (Ег) (Ез);
Еї, Ег і Ез кожен незалежно являє собою Н, Сі-Св алкіл або С:і-Св алкіл, що містить замісники; п дорівнює від 1 до приблизно б; т дорівнює 0 або 1; дорівнює 0 або 1; кожна група, що містить замісники, містить одну або більше можливо захищених
БО заміщаючих груп, незалежно вибираних з галогену, 091, М (91) (92), -МУї, 51, Мз, СМ, ОС (-Хг)ї, ОС(-Х2ІМ( г) ії (АХ) М ог);
Хг являє собою 0, 5 або Моз; кожен 1, «4» і ) з незалежно являє собою Н або С.і-Св алкіл; коли | дорівнює 1, 72 відрізняється від галогену або М(Ег)(Ез); і при цьому вказана олігомерна сполука містить від 8 до 40 мономерних субодиниць і здатна гібридизуватись щонайменше з частиною цільової нуклеїнової кислоти.
В деяких варіантах реалізації Мз являє собою О, СН-СН, ОСН: або ОС(Н)У(Вхг). В деяких варіантах реалізації Мз являє собою 0.
В деяких варіантах реалізації 4, 95, дє6 і д;7 кожен являє собою Н. В деяких варіантах реалізації д« утворює місток з одним з: 5 або .)7.
В деяких варіантах реалізації А має одну з формул: й ч що уж бу їх ча -й с-м : зу Ки або зе 0. де:
Схі ОС» кожен незалежно являє собою Н, галоген, С:-Св алкіл, С1і-Св алкіл, що містить замісники, Сі-Св алкоксил або Сі-Св алкоксил, що містить замісники. В деяких варіантах реалізації С: ії СО» кожен являє собою Н. В деяких варіантах реалізації С: і 0» кожен незалежно являє собою Н або галоген. В деяких варіантах реалізації СО: ії С» являє собою Н, а інший з: С ї ОО» являє собою Е, СНз або ОСН». В деяких варіантах реалізації Т : має формулу:
Кк.
Те
Кк. де:
Ва і Ас кожен незалежно являє собою захищений гідроксил, захищений тіол, С:1-Свє алкіл,
Сі-Св алкіл що містить замісники, С:-Свє алкоксил, Сі-Сє алюкоксил, що містить замісники, захищену аміногрупу або аміногрупу, що містить замісники; і
Вьявляє собою О або 5. В деяких варіантах реалізації Рь являє собою 0, і Ваі Вс кожен незалежно являє собою ОСН»з, ОСНе СНз або СН(СН З)».
В деяких варіантах реалізації б являє собою галоген, ОСНз, ОСНоЕ, ОСНЕ», ОСЕз, ОСН»г
СНз, О(СНг»Е, ОСН.СНЕ», ОСН.Е», ОСН»-АСН-СН», О(СНг)»-ОсСН», О(СНег)»- СН», О(СНг)»-
ОСЕ:з, О(СНг)з-АМ(Аіо (А), О(СН2г)-ОМ(Азто) (А), О(СНг)»-О(СНг)»- 0 М(Віо Вії), ОСН»С(-О)-
М(Аго)(Аі),, ОСН2гС(-0)-М(В12)-(СНг)2-М(Ато) (Алі) або О(СНег)2- / М(Ні2г)-С(-МА з) (М(Ато) (Ач), де
Віто, Ви, Ві2 ії Віз кожен незалежно являє собою Н або Сі- Св алкіл. В деяких варіантах реалізації Сх являє собою галоген, ОСНз, ОСЕз, ОСНе СНз, ОСН.СЕз, ОСН»-АСН-АСН», О(СНг)»2-
ОсСНз, О(СНг)2-О(СНг)-М(СНз)», ОСНгС(-0)- М(Н)сСНз, ОСНгС(-О0)-М(Н)-(СНег)2-М(СНз)».- або
ОоСНне-М(Н)-С(-МН)МН». В деяких варіантах реалізації С; являє собою Е, ОСНз або О(СНг)-ОСНз. В деяких варіантах реалізації С являє собою О(СНг)2-ОСН».
Зо В деяких варіантах реалізації 5'-кінцевий нуклеозид має формулу Пе: о, юн и и Е
НО то" же
І т;
Це
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки, в тому числі ті сполуки, які особливо підходять в якості ОЛРНК, містять один або більше типів модифікованих цукрових груп іабо цукрових груп, які зустрічаються в природі, розташованих по всьому олігонуклеотиду або його області в певному патерні або мотиві модифікацій цукрів. Такі мотиви можуть включати будь-яку з модифікацій цукрів, розглянутих в даному описі, і/ або інші відомі модифікації цукрів.
В деяких варіантах реалізації олігонуклеотиди містять або складаються з області, що містить однакові модифікації цукрів. В деяких таких варіантах реалізації кожен нуклеозид зазначеної області містить одну і ту ж модифікацію РНК-подібного цукру. В деяких варіантах реалізації кожен нуклеозид області являє собою 2'-Е-нуклеозид. В деяких варіантах реалізації кожен нуклеозид області являє собою 2'-ОМе-нуклеозид. В деяких варіантах реалізації кожен нуклеозид області являє собою 2'-МОБЕ-нуклеозид. В деяких варіантах реалізації кожен нуклеозид області являє собою сЕї-нуклеозид. В деяких варіантах реалізації кожен нуклеозид області являє собою ЗНК-нуклеозид. В деяких варіантах реалізації однакова область становить весь або суттєво весь олігонуклеотид. В деяких варіантах реалізації зазначена область становить весь олігонуклеотид за винятком 1-4 кінцевих нуклеозидів.
В деяких варіантах реалізації олігонуклеотиди містять одну або більше областей з модифікаціями цукрів, що чергуються, при цьому нуклеозиди чергуються між нуклеотидами, що містять модифікацію цукру першого типу, і нуклеотидами, що містять модифікацію цукру другого типу. В деяких варіантах реалізації нуклеозиди обох типів являють собою РНК- подібні нуклеозиди. В деяких варіантах реалізації нуклеозиди, що чергуються, обрані з: 2'-
ОМе, 2-Е, 2-МОЕ, ЗНК і сЕї. В деяких варіантах реалізації модифікації, що чергуються, являють собою 2'"-Е і 2'-ОМе. Такі області можуть бути суміжними або можуть перериватися по- різному модифікованими нуклеозидами або спряженими нуклеозидами.
В деяких варіантах реалізації кожна область, що чергується, з модифікаціями, що чергуються, складається з одного нуклеозида (тобто патерн являє собою (АВ) хАу, де А являє собою нуклеозид, що містить модифікацію цукру першого типу, і В являє собою нуклеозид, що містить модифікацію цукру другого типу; х дорівнює 1-20, і у дорівнює 0 або 1).
В деяких варіантах реалізації одна або більше областей, що чергуються, в мотиві, що чергується, містить більше одного нуклеозиду певного типу. Наприклад, олігонуклеотиди можуть містити одну або більше областей з будь-яким з наступних мотивів нуклеозидів:
ААВВАА; АВВАВВ; ААВААВ; АВВАВААВВ; АВАВАА; ААВАВАВ; /АВАВАА; АВВААВВАВАВАА; ВАВВААВВАВАВАА; або АВАВВААВВАВАВАА; де А являє собою нуклеозид першого типу, а В являє собою нуклеозид другого типу. В деяких варіантах реалізації А і В кожен вибраний з 2-Е, 2'-ОМе, ВМА і МОЕ.
В деяких варіантах реалізації олігонуклеотиди, що містять такий мотив, що чергується, також містять модифікований 5'-кінцевий нуклеозид, такий як нуклеозиди формули ІІс або Пе.
Зо В деяких варіантах реалізації олігонуклеотиди містять область, яка містить мотив 2-2-3.
Такі області містять наступний мотив:
ЧА)2-(В) (А) (С)у-(А) з», де: А являє собою перший тип модифікованого нуклеозиду;
В ії С являють собою нуклеозиди, модифіковані інакше, ніж А, однак В і С можуть містити однакові або різні модифікації відносно один одного; х і у дорівнюють від 1 до 15.
В деяких варіантах реалізації А являє собою 2'-ОМе-модифікований нуклеозид. В деяких варіантах реалізації В і С обидва являють собою 2'-Е-модифіковані нуклеозиди. В деяких варіантах реалізації А являє собою 2'-ОМе-модифікований нуклеозид, а В і С обидва являють собою 2'-Е-модифіковані нуклеозиди.
В деяких варіантах реалізації олігонуклеозиди містять наступний цукровий мотив: 5-(0)- (АВ)хАу-(0)», де:
ОО являє собою нуклеозид, що містить стабілізовану фосфатну групу. В деяких варіантах реалізації СО) являє собою нуклеозид, який має формулу Іс або Пе;
А являє собою перший тип модифікованого нуклеозиду; В являє собою другий тип модифікованого нуклеозиду;
О являє собою модифікований нуклеозид, що містить модифікацію, відмінну від нуклеозиду, що примикає до нього. Таким чином, якщо у дорівнює 0, то Ю повинен бути модифікований інакше, ніж В, і якщо у дорівнює 1, то О повинен бути модифікований інакше, ніж А. В деяких варіантах реалізації О відрізняється як від А, так і від В.
Х дорівнює 5-15;
У дорівнює 0 або 1; 72 дорівнює 0-4.
В деяких варіантах реалізації олігонуклеозиди містять наступний цукровий мотив: 5'-(0)-(Ах- (0)», де:
ОО являє собою нуклеозид, що містить стабілізовану фосфатну групу. В деяких варіантах реалізації СО) являє собою нуклеозид, який має формулу Іс або Пе;
А являє собою перший тип модифікованого нуклеозиду;
О являє собою модифікований нуклеозид, що містить модифікацію, відмінну від А. ХХ 60 дорівнює 11-30;
7 дорівнює 0-4.
В деяких варіантах реалізації А, В, С і О в наведених вище мотивах вибрані з: 2- ОМе, 2-Е, 2'-МОЕ, ЗНК і сЕї. В деяких варіантах реалізації О являє собою кінцеві нуклеозиди. В деяких варіантах реалізації такі кінцеві нуклеозиди не призначені для гібридизації з цільовою нуклеїновою кислотою (хоча один або більше можуть гібридизуватись випадково). В деяких варіантах реалізації нуклеотидна основу кожного нуклеозида ОО являє собою аденін, незалежно від ідентичності нуклеотидної основи у відповідному положенні цільової нуклеїнової кислоти. В деяких варіантах реалізації нуклеотидна основа кожного нуклеозида О являє собою тимін.
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки, в тому числі ті сполуки, які особливо підходять для застосування в якості ОЛРНК, містять модифіковані міжнуклеозидні зв'язки, розташовані по всьому олігонуклеотиду або його області в певному патерні або мотиві модифікованих міжнуклеозидних зв'язків. В деяких варіантах реалізації олігонуклеотиди містять область, яка містить мотив міжнуклеозидних зв'язків, що чергуються. В деяких варіантах реалізації олігонуклеотиди містять область однаково модифікованих міжнуклеозидних зв'язків. В деяких таких варіантах реалізації олігонуклеотид містить область, яка однаково зв'язана фосфоротіоатними міжнуклеозидними зв'язками. В деяких варіантах реалізації олігонуклеотид однаково зв'язаний фосфоротіоатними міжнуклеозидними зв'язками.
В деяких варіантах реалізації кожний міжнуклеозидний зв'язок олігонуклеотида вибраний з фосфодиефірного і фосфоротіоатного. В деяких варіантах реалізації кожний міжнуклеозидний зв'язок олігонуклеотида вибраний з фосфодиефірного і фосфоротіоатного, і щонайменше один міжнуклеозидний зв'язок являє собою фосфоротіоатний зв'язок.
В деяких варіантах реалізації олігонуклеотид містить щонайменше б фосфоротіоатних міжнуклеозидних зв'язків. В деяких варіантах реалізації олігонуклеотид містить щонайменше 8 фосфоротіоатних міжнуклеозидних зв'язків. В деяких варіантах реалізації олігонуклеотид містить щонайменше 10 фосфоротіоатних міжнуклеозидних зв'язків. В деяких варіантах реалізації олігонуклеотид містить щонайменше один блок із щонайменше б послідовних фосфоротіоатних міжнуклеозидних зв'язків. В деяких варіантах реалізації олігонуклеотид містить щонайменше один блок із щонайменше 8 послідовних фосфоротіоатних
Зо міжнуклеозидних зв'язків. В деяких варіантах реалізації олігонуклеотид містить щонайменше один блок із щонайменше 10 послідовних фосфоротіоатних міжнуклеозидних зв'язків. В деяких варіантах реалізації олігонуклеотид містить щонайменше один блок із щонайменше 12 послідовних фосфоротіоатних міжнуклеозидних зв'язків. В деяких таких варіантах реалізації щонайменше один такий блок розташований на 3'-кінці олігонуклеотида. В деяких таких варіантах реалізації щонайменше один такий блок розташований в межах З нуклеозидів 3'- кінця олігонуклеотида.
Олігонуклеотиди, що містять будь-який з різних цукрових мотивів, описаних в цьому документі, можуть містити будь-який мотив зв'язків. Наприклад, олігонуклеотиди, включаючи, але не обмежуючись ними, ті, які описані вище, можуть містити мотив зв'язків, вибраний з необмежуючої таблиці нижче: і. Сполуки, які являють собою міРНК
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки являють собою дволанцюгові сполуки
РНКІ (міРНК). У таких варіантах реалізації одна або обидва ланцюга можуть містити будь- який мотив модифікацій, описаний вище для олРНК. В деяких варіантах реалізації сполуки, що являють собою олЛРНК, можуть являти собою немодифіковані РНК. В деяких варіантах реалізації сполуки, що являють собою міРНК, можуть містити немодифіковані нуклеозиди РНК, але модифіковані міжнуклеозидні зв'язки.
Деякі варіанти реалізації відносяться до дволанцюгових композицій, в яких кожен ланцюг містить мотив, який визначається розташуванням одного або більше модифікованих або немодифікованих нуклеозидів. В деяких варіантах реалізації запропоновані композиції, що містять першу і другу олігомерну сполуку, які повністю або щонайменше частково гібридизовані з утворенням області-дуплекса, і додатково містять область, яка комплементарна і гибрідизується з нуклеїновою кислотою-мішенню. Підходящим є вміст в такій композиції першої олігомерної сполуки, яка являє собою антисенсовий ланцюг, повністю або частково комплементарний нуклеїновій кислоти- мішені, і другої олігомерної сполуки, яка являє собою сенсовий ланцюг, що містить одну або більше областей комплементарності і що утворює щонайменше одну область-дуплекс з першою олігомерною сполукою.
Композиції в деяких варіантах реалізації модулюють експресію генів шляхом гібридизації з нуклеїнової кислотою-мішенню, яка призводить до втрати її звичайної функції. В деяких варіантах реалізації розпад цільового СЕВ полегшує активований комплекс ВІ5С, який утворюється за допомогою композицій відповідно до даного винаходу.
Деякі варіанти реалізації відносяться до дволанцюгових композицій, в яких один з ланцюгів підходить, наприклад, для впливу на бажане завантаження протилежного ланцюга в комплекс ВІБС (або розщеплення). Композиції підходять для націлювання на вибрані молекули нуклеїнової кислоти і модуляції експресії одного або більше генів. В деяких варіантах реалізації композиції відповідно до даного винаходу гибрідизуються з частиною цільової РНК, що призводить до втрати звичайної функції зазначеної цільової РНК.
Деякі варіанти реалізації відносяться до дволанцюгових композицій, в яких обидва ланцюга містять гемімерний (Ппетітег) мотив, повністю модифікований мотив, позиційно модифікований мотив або мотив, що чергується. Кожен ланцюг композицій відповідно до даного винаходу може бути модифікований для виконання конкретної ролі, наприклад, в шляху міРнНК.
Використання відмінного мотиву в кожному ланцюзі або одного і того ж мотиву з різними хімічними модифікаціями в кожному ланцюзі дозволяє націлювати антисенсовий ланцюг на комплекс НВІЗС одночасно з інгібуванням включення сенсового ланцюга. В рамках даної моделі кожний ланцюг можна незалежно модифікувати так, щоб посилити його конкретну роль. Антисенсовий ланцюг може бути модифікований на 5- кінці для посилення ролі в одній з областей НВІ5С, тоді як 3'і-кінець може бути модифікований по-іншому для посилення ролі в іншій області ВІБО.
Дволанцюгові молекули олігонуклеотида можуть являти собою дволанцюгову молекулу полінуклеотида, що містить самокомплементарні сенсову і антисмислову області, при цьому зазначена антисмислова область містить нуклеотидну послідовність, комплементарну послідовності в цільовій молекулі нуклеїнової кислоти або її частини, а зазначена сенсова область містить нуклеотидну послідовність, відповідну послідовності цільової нуклеїнової
Зо кислоти або її частини. Дволанцюгові молекули олігонуклеотида можуть бути зібрані з двох окремих олігонуклеотидів, при цьому один ланцюг являє собою сенсовий ланцюг, а інший являє собою антисенсовий ланцюг, при цьому антисенсовий і сенсовий ланцюг є самокомплементарними (тобто кожен ланцюг містить нуклеотидну послідовність, комплементарну послідовності в іншому ланцюзі; при цьому, наприклад, антисенсовий ланцюг і сенсовий ланцюг утворюють дуплекс або дволанцюгову структуру, наприклад, в якій дволанцюгова область є від приблизно 15 до приблизно 30, наприклад, приблизно 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 або 30 пар основ; антисенсовий ланцюг містить нуклеотидну послідовність, комплементарну послідовності в цільовій молекулі нуклеїнової кислоти або її частини, і сенсовий ланцюг містить нуклеотидну послідовність, відповідну послідовності цільової нуклеїнової кислоти або її частини (наприклад, від приблизно 15 до приблизно 25 або більше нуклеотидів в дволанцюговій молекулі олігонуклеотида комплементарні цільовій нуклеїновій кислоті або її частині). В якості альтернативи, дволанцюговий олігонуклеотид зібрано Кк! одного олігонуклеотида, в якому самокомплементарні сенсова і антисмислова області міРНК зв'язані лінкером (лінкерами) на основі нуклеїнової кислоти або не на основі нуклеїнової кислоти.
Дволанцюговий олігонуклеотид може являти собою полінуклеотид з дуплексною, асиметричною дуплексною, шпильковою або асиметричною шпильковою вторинною структурою, що містить самокомплементарні сенсову і антисмислову області, при цьому зазначена антисмислова область містить нуклеотидну послідовність, комплементарну нуклеотидній послідовності в окремій молекулі цільової нуклеїнової кислоти або її частини, і зазначена сенсова область містить нуклеотидну послідовність, відповідну послідовності цільової нуклеїнової кислоти або її частині. Дволанцюговий олігонуклеотид може являти собою кільцевий одноланцюговий полінуклеотид, що містить дві або більше петльових структур і «стебло», що містить самокомплементарні сенсову і антисмислову області, при цьому зазначена антисмислова область містить нуклеотидну послідовність, комплементарну послідовності в цільовій молекулі нуклеїнової кислоти або її частині, і зазначена сенсова область містить нуклеотидну послідовність, відповідну послідовності цільової нуклеїнової кислоти або її частини, і при цьому зазначений кільцевий полінуклеотид може бути процессований або іп мімо, або іп міто з утворенням активної молекули міРНК, здатної бо опосередкувати РНКІ.
В деяких варіантах реалізації дволанцюговий олігонуклеотид містить окремі сенсові і антисмислові послідовності або області, при цьому зазначені сенсові і антисмислові області ковалентно зв'язані нуклеотидними або ненуклеотидними лінксерними молекулами, відомими в даній галузі техніки, або по черзі нековалентно зв'язані шляхом іонних взаємодій, утворення водневих зв'язків, ван-дер-ваальсових взаємодій, гідрофобних взаємодій і/або стекінг- взаємодій. В деяких варіантах реалізації дволанцюговий олігонуклеотид містить нуклеотидну послідовність, комплементарну нуклеотидній послідовності цільового гена. В іншому варіанті реалізації дволанцюговий олігонуклеотид взаємодіє з нуклеотидною послідовністю цільового гена таким чином, що викликає інгібування експресії зазначеного цільового гена.
В даному описі дволанцюгові олігонуклеотиди необов'язково обмежуються тими молекулами, які містять тільки РНК, але також включають хімічно модифіковані нуклеотиди і ненуклеотиди. В деяких варіантах реалізації молекули малої інтерферуючої нуклеїнової кислоти не містять нуклеотиди, що містять 2"-гідрокси (2-ОН). В деяких варіантах реалізації малі інтерферуючі нуклеїнові кислоти можливо не містять будь-які рибонуклеотиди (наприклад, нуклеотиди, що містять групу 2-ОН). Такі дволанцюгові олігонуклеотиди, для яких не потрібна присутність рибонуклеотидів в молекулі для забезпечення РНКІ, можуть проте містити приєднаний лінкер або лінкери, або інші приєднані або асоційовані групи, фрагменти або ланцюги, що містять один або більше нуклеотидів з групами 2-ОН.
Дволанцюгові олігонуклеотиди можуть містити рибонуклеотиди приблизно в 5, 10, 20, 30, 40 або 50 95 від усіх положень нуклеотидів. В даному описі термін «міРНК» еквівалентний іншим термінам, вживаним для опису молекул нуклеїнової кислоти, які здатні опосередковувати специфічну по відношенню до послідовності РНКІі, наприклад, термінам «мала інтерферуюча
РНК (міРНК)», «дволанцюгова РНК (длРНК)», «мікроРНК (мігРНК) »,«коротка шпилькова РНК (БИРНК)» «малий інтерферуючий олігонуклеотид», «мала інтерферуюча нуклеїнова кислота», « малий інтерферуючий модифікований олігонуклеотид» ,«хімічно модифікована міРНК» ,«РНК посттранскрипційного сайленсингу гена (рі925РНК)» і іншим. Крім того, в данному описі термін «РНКІі» еквівалентний іншим термінам, вживаним для опису специфічної по відношенню до послідовності РНК-інтерференції, таким як «посттранскрипційний сайленсинг гена», «інгібування транскрипції» або «епігенетика». Наприклад, дволанцюгові олігонуклеотиди
Зо можна використовувати для епігенетичного сайленсингу генів як на посттранскрипційному рівні, так і на претранскрипційному рівні. В необмежуючому прикладі епігенетична регуляція експресії генів молекулами міРНК відповідно до даного винаходу може бути наслідком міРНК-опосередкованої модифікації структури хроматину або патерну метилювання для зміни експресії генів (див., Наприклад, Мегаєї! єї аї., 2004, бсіеєпсе, 303, 672-676; Ра!І-Внаайга бї аї., 2004, Зсієпсе, 303, 669-672; АїІбНігє, 2002 Зсієпсе, 297, 1818-1819; Моіре єї а!., 2002 Зсієпсе, 297, 1833-1837; депимеїп, 2002 5сієпсе, 297, 2215-2218; та Наї єї аї!., 2002 бсіепсе, 297, 2232- 22317).
Передбачається, що сполуки і композиції в деяких варіантах реалізації, наведених у цьому документі, можуть прицільно впливати на СЕВ шляхом длРНК-опосередкованого сайленсингу генів або за механізмом РНКІі, включаючи, наприклад, «шпилькові»х або дволанцюгові ефекторні молекули РНК зі структурою «стебло-петля», в яких один ланцюг РНК з самокомплементарними послідовностями здатний приймати дволанцюгову конформацию, або дуплексні ефекторні молекули длРНК, що містять два окремих ланцюга РНК. В різних варіантах реалізації длРНК повністю складається з рибонуклеотидів або складається з суміші рибонуклеотидів і дезоксинуклеотидів, як, наприклад, гібриди РНК/ДНК, описані, наприклад, в
МО 00/63364, поданій 19 квітня 2000 року, або О5 Мо. 60/130377, поданій 21 квітня 1999 року.
ДлЛРНК або ефекторна молекула длРНК може являти собою одну молекулу з областю самокомплементарності такою, що нуклеотиди в одному із сегментів молекули утворюють пари основ з нуклеотидами в іншому сегменті молекули. В різних варіантах реалізації
ДлЛРНК, яка складається з однієї молекули, повністю складається з рибонуклеотидів або включає область рибонуклеотидів, комплементарних області дезоксирибонуклеотидів. В якості альтернативи, длРНК може містити два різні ланцюги, що містять область комплементарності один одному.
В різних варіантах реалізації обидва ланцюга повністю складаються з рибонуклеотидів, один ланцюг повністю складається з рибонуклеотидів, і один ланцюг повністю складається з дезоксирибонуклеотидів, або один або обидва ланцюга містять суміш рибонуклеотидів і дезоксирибонуклеотидів. В деяких варіантах реалізації області комплементарності щонайменше на 70, 80, 90, 95, 98 або 100 95 комплементарні один одному і послідовності цільової нуклеїнової кислоти. В деяких варіантах реалізації область длРНК, яка присутня в
Ге) дволанцюговій конформації, містить щонайменше 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30,
50, 75,100, 200, 500, 1000, 2000 або 5000 нуклеотидів, або містить всі нуклеотиди в КДНК або послідовності іншої цільової нуклеїнової кислоти, представленої в длРНК. В деяких варіантах реалізації длРНК не містить жодних одноланцюгових областей, таких як одноланцюгові кінці, або
ДлЛРНК являє собою «шпильку». В інших варіантах реалізації длРНК містить одну або більше одноланцюгових областей або липких кінців. В деяких варіантах реалізації гібриди РНК/ДНК містять ланцюг або область ДНК, яка являє собою антисенсовий ланцюг або область (наприклад, демонструє щонайменше 70, 80, 90, 95, 98 або 100 95 комплементарність цільовій нуклеїновій кислоті), і ланцюг або область РНК, яка являє собою сенсовий ланцюг або область (наприклад, демонструє щонайменше 70, 80, 90, 95, 98 або 100 95 ідентичність цільовій нуклеїновій кислоті), і навпаки.
В різних варіантах реалізації гібрид РНК/ДНК отримують іп міго із застосуванням способів ферментативного або хімічного синтезу, таких як ті, які описані в цьому документі, або ті, які описані в МО 00/63364, поданій 19 квітня 2000 року, або 05 Мо. 60/130377, поданій 21 квітня 1999 року. В інших варіантах реалізації ланцюг ДНК, синтезований іп міо, зв'язують в комплекс з ланцюгом РНК, отриманим іп мімо або іп міо, до, після або одночасно з трансформацією ланцюга ДНК в клітину. В інших варіантах реалізації длРНК являє собою ще одну кільцеву нуклеїнову кислоту, що містить сенсову і антисмислову область, або длРНК містить кільцеву нуклеїнову кислоту і або другу кільцеву нуклеїнову кислоту, або лінійну нуклеїнову кислоту (див., наприклад, УМО 00/63364, подану 19 квітня 2000 року, або ОБ Мо. 60/130377, подану 21 квітня 1999 року). Типові кільцеві нуклеїнові кислоти включають структури типу «ласо», в яких вільна 5'і- фосфорильна група нуклеотиду стає зв'язаною з 2'- гідроксильною групою іншого нуклеотиду шляхом «закільцьовування».
В інших варіантах реалізації длРНК містить один або більше модифікованих нуклеотидів, в яких положення 2" в цукрі містить галоген (такий як фторгрупа) або містить алкоксигрупу (таку як метоксигрупа), яка збільшує час напіввиведення длРНК іп міо або іп мімо в порівнянні з відповідною длРНК, в якій відповідне положення 2" містить водень або гідроксильну групу. В інших варіантах реалізації длРНК містить один або більше зв'язків між сусідніми нуклеотидами, відмінних від фосфодиефірного зв'язку, що зустрічається в природі. Приклади таких зв'язків включають фосфорамідні, фосфоротіоатні і фосфородитіоатні зв'язки. длРНК
Зо можуть також являти собою хімічно модифіковані молекули нуклеїнової кислоти, зазначені в патенті США Мо 6673661. В інших варіантах реалізації длРНК містить один або два кепованих ланцюга, описаних, наприклад, в У/О 00/63364, поданій 19 квітня 2000 року, або 5
Мо. 60/130377, поданій 21 квітня 1999 року.
В інших варіантах реалізації длРНК може являти собою будь-яку із щонайменше частково молекул длРНК, описаних в МО 00/63364, а також будь-яку з молекул длРНК, описаних в попередній заявці США 60/399998; і попередній заявці США 60/419532, і
РСТ/О52003/033466, зміст яких включено в даний опис шляхом посилання. Будь-яка з
ДлЛРНК може бути експресована іп мійго або іп мімо із застосуванням способів, описаних у цьому документі, або стандартних способів, таких як ті, які описані в У/О 00/63364.
Зайнятість
В деяких варіантах реалізації не передбачається, що антисмислові сполуки призводять до розщеплення цільової нуклеїнової кислоти через РНКазу Н або призводять до розщеплення або секвестрації по шляху ВІ5ОС. В деяких таких варіантах реалізації антисмислова активність може бути обумовлена зайнятістю, при цьому присутність гіоридизованої антисмислової сполуки порушує активність цільової нуклеїнової кислоти. В деяких таких варіантах реалізації антисмислова сполука може бути однаково модифікована або може містити суміш модифікацій і/або модифікованих і немодифікованих нуклеозидів.
Цільові нуклеїнові кислоти, цільові області та нуклеотидні послідовності
Нуклеотидні послідовності, що кодують фактор В комплемента (СЕВ), включають, без обмеження, такі послідовності: номер доступу в СЕМВАМК ММ 001710.5 (включену в даний опис як 5ЕО ІО МО: 1), номер доступу в СЕМВАМК МТ 007592.15, вкорочений в межах нуклеотидів 31852000-31861000 (включену в даний опис як 5ЕО ІО МО: 2), номер доступу в
СЕМВАМК ММУУ 001116486. 1, вкорочений в межах нуклеотидів 536000-545000 (включену в даний опис як БЕО ІЮ МО: 3), номер доступу в ОЕМВАМК ХМ 001113553.2 (включену в даний опис як 5ЕО ІО МО: 4) або номер доступу в СОЕМВАМК ММ 008198.2 (включену в даний опис як БЕО ІЮ МО: 5).
Гібридизація
В деяких варіантах реалізації гібридизація відбувається між антисмисловою сполукою, описаною в цьому документі, і нуклевновою кислотою СЕВ. Найбільш поширений механізм бо гібридизації включає утворення водневих зв'язків (наприклад, утворення водневих зв'язків по
Вотсону-Крику, хугстиновських або зворотних хугстиновських водневих зв'язків) між комплементарними нуклеотидними основами молекул нуклеїнової кислоти. Гібридизація може відбуватися в різних умовах. Жорсткі умови залежать від послідовностей і визначаються природою і складом гібридизуємих молекул нуклеїнової кислоти.
Способи визначення здатності послідовності специфічно гібридизуватись з цільовою нуклеїновою кислотою добре відомі в даній області техніки. В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки, запропоновані відповідно до даного винаходу, здатні специфічно гіоридизуватись з нуклеїновою кислотою СЕВ.
Комплементарність антисмислова сполука і цільова нуклеїнова кислота комплементарні один одному в разі, коли достатнє число нуклеотидних основ зазначеної антисмислової сполуки можуть утворювати водневі зв'язки з відповідними нуклеотидними основами зазначеної цільової нуклеїнової кислоти, в результаті чого буде досягатися бажаний ефект (наприклад, антисенсове інгібування цільової нуклеїнової кислоти, такої як нуклеїнова кислота СЕВ).
Може допускатись присутність некомплементарних нуклеотидних основ між антисмисловою сполукою і нуклесновою кислотою СЕВ за умови збереження у зазначеної антисмислової сполуки здатності специфічно гібридизуватись з цільовою нуклеїновою кислотою. Більш того, антисмислова сполука може гібридизуватись по одному або більше сегментам нуклеїнової кислоти СЕВ так, що проміжні або примикаючі сегменти не залучаються до явища гібридизації (наприклад, петльова структура, структура з невідповідностями або шпилькова структура).
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки, запропоновані відповідно до даного винаходу, або їх конкретна частина на або щонайменше на 70 95, 80 9, 85 95, 86 Зо, 87 У, 88 зо, 89 95, 90 905, 91 96, 92 96, 93 96, 94 95, 95 96, 96 96, 97 Зо, 98 96, 99 95 або 100 95 комплементарні нуклеїнові кислоті СЕВ, її цільовій області, цільовому сегменту або конкретній частині. Відсоток комплементарності антисмислової сполуки цільовій нуклеїновій кислоті може бути визначений з використанням звичайних способів.
Наприклад, антисмислова сполука, в якій 18 з 20 нуклеотидних основ зазначеної антисмислової сполуки комплементарні цільової області і, отже, будуть специфічно
Зо гіоридизуватись, представлятиме сполуку з 90 95 комплементарністю. В даному прикладі інші некомплементарні нуклеотидні основи можуть бути згруповані або можуть чергуватися з комплементарними нуклеотидними основами, і необов'язково повинні бути суміжними один з одним або з комплементарними нуклеотидними основами. Відповідно, антисмислова сполука довжиною 18 нуклеотидних основ, що містить чотири некомплементарних нуклеотидних основи, які фланковані двома областями повної комплементарності цільової нуклеїнової кислоти, демонструватиме спільну 77,8 906 комплементарність цільовій нуклеїновій кислоті і, таким чином, входить в обсяг даного винаходу. Відсоток комплементарності антисмислової сполуки по відношенню до області цільової нуклеїнової кислоти може бути визначений звичайним способом з використанням програм ВІ АБТ (основні засоби пошуку, що базуються на локальних вирівнюваннях) і програм РоуегВіІ А5Т, відомих в даній області техніки (АйвсйиЇ еї а!., у. Мої. Віо!., 1990, 215, 403 410; 7напд апа Мадаєп, Сепоте Вез., 1997, 7, 649 656).
Відсоток гомології, ідентичності або комплементарності послідовностей може бути визначений, наприклад, програмою Сар (Вісконсінський пакет програм для аналізу послідовностей (М/ізсопбіп бедиепсе Апаїузіз РасКаде), версія 8 для Опіх, Сепеїййс5 Сотриїег
Стор, Опімегейу Везєатгсі Рак, Майдізоп МУіїв.) з використанням установок параметрів за замовчуванням, в якій використовується алгоритм Сміта (Зтіїй) і Уотермана (У/аіегтап) (Аду.
Аррі. маї., 1981, 2, 482 489).
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки, запропоновані відповідно до даного винаходу, або їх конкретні частини повністю комплементарні (тобто на 100 95 комплементарні) цільовій нуклеїновій кислоті або її конкретній частині. Наприклад, антисмислова сполука може бути повністю комплементарна нуклеїновій кислоті СЕВ або її цільовій області, або цільовому сегменту або цільової послідовності. В даному описі термін «повністю комплементарний» означає, що кожна нуклеотидна основа антисмислової сполуки здатна до точного спаровування з відповідними нуклеотидними основами цільової нуклеїнової кислоти. Наприклад, антисмислова сполука з 20 нуклеотидних основ повністю комплементарна цільовій послідовності довжиною 400 нуклеотидних основ, якщо присутня відповідна частина цільової нуклеїнової кислоти з 20 нуклеотидних основ, яка повністю комплементарна вказаній антисенсовій сполуці. Термін «повністю комплементарний» може також використовуватися по відношенню до конкретної частини першої та/або другої бо нуклеїнової кислоти. Наприклад, частина з 20 нуклеотидних основ антисмислової сполуки довжиною 30 нуклеотидних основ може бути «повністю комплементарна» цільовій послідовності, довжина якої становить 400 нуклеотидних основ. Частина з 20 нуклеотидних основ олігонуклеотида довжиною 30 нуклеотидних основ повністю комплементарна цільовій послідовності, якщо цільова послідовність містить відповідну частину з 20 нуклеотидних основ, в якій кожна нуклеотидна основа комплементарна частині з 20 нуклеотидних основ антисмислової сполуки. В той же час, вся антисмислова сполука з ЗО нуклеотидних основ може бути або може не бути повністю комплементарним цільовій послідовності в залежності від того, чи є інші 10 нуклеотидних основ антисмислової сполуки також комплементарними цільовій послідовності.
Некомплементарна нуклеотидна основа може бути розташована на 5'-кінці або 3'- кінці антисмислової сполуки. В якості альтернативи, некомплементарна нуклеотидна основа або нуклеотидні основи можуть перебувати у внутрішньому положенні антисмислової сполуки. У разі, коли присутні дві або більше некомплементарних нуклеотидних основ, вони можуть бути суміжними (тобто зв'язаними) або несуміжними. В одному з варіантів реалізації некомплементарна нуклеотидна основа розташована в сегменті-крилі антисмислового гепмерного олігонуклеотида.
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки, довжина яких становить або становить до 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 або 20 нуклеотидних основ, містять не більше 4, не більше 3, не більше 2 або не більше 1 нуклеотидної основи, яка є некомплементарною по відношенню до цільової нуклеїнової кислоти, такої як нуклеїнова кислота СЕВ або її конкретна частина.
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки, довжина яких становить або 20 становить до 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 або 30 нуклеотидних основ, містять не більше 6, не більше 5, не більше 4, не більше 3, не більше 2 або не більше 1 нуклеотидної основи, яка є некомплементарною по відношенню до цільової нуклеїнової кислоти, такої як нуклеїнова кислота СЕВ або її конкретна частина.
Запропоновані антисмислової сполуки також включають ті сполуки, які комплементарні частині цільової нуклеїнової кислоти. В даному описі термін «частина» відноситься до певного числа суміжних (тобто зв'язаних) нуклеотидних основ в області або сегменті
Зо цільової нуклеїнової кислоти. Термін «частина» може також відноситися до певного числа суміжних нуклеотидних основ антисмислової сполуки. В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки комплементарні частині цільового сегмента щонайменше з 8 нуклеотидних основ. В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки комплементарні частині цільового сегмента щонайменше з 9 нуклеотидних основ. В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки комплементарні частині цільового сегмента щонайменше з 10 нуклеотидних основ. В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки комплементарні частині цільового сегмента щонайменше з 11 нуклеотидних основ. В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки комплементарні частині цільового сегмента щонайменше з 12 нуклеотидних основ. В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки комплементарні частині цільового сегмента щонайменше з 13 нуклеотидних основ. В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки комплементарні частині цільового сегмента щонайменше з 14 нуклеотидних основ. В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки комплементарні частині цільового сегмента щонайменше з 15 нуклеотидних основ. Також передбачені антисмислової сполуки, які комплементарні частині цільового сегмента щонайменше з 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 або більше нуклеотидних основ або з діапазону, що визначається будь-якими двома з даних значень.
Ідентичність антисмислові сполуки, запропоновані відповідно до даного винаходу, можуть також демонструвати певний відсоток ідентичності конкретній нуклеотидній послідовності, 5ЕО 10
МО, або сполуці, представленій конкретним номером Ізіз, або його частині. В даному описі антисмислова сполука є ідентичною послідовності, описаній в цьому документі, якщо вона має таку саму здатність до спарювання нуклеотидних основ.
Наприклад, РНК, яка містить урацил замість тимідину в описаній послідовності ДНК, буде вважатися ідентичною зазначеній послідовності ДНК, оскільки як урацил, так і тимідин утворюють пару з аденіном. Також передбачені вкорочені і подовжені варіанти антисмислових сполук, описаних в цьому документі, а також сполуки, що містять неідентичні основи по відношенню до антисмислових сполук, запропонованих відповідно до даного винаходу. Неїіїдентичні основи можуть примикати один до одного або можуть бути розподілені по всій антисенсовій сполуці. Відсоток ідентичності антисмислової сполуки 60 розраховують за числом основ, які демонструють спаровування, ідентичне по відношенню до послідовності, з якою його порівнюють.
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки або їх частини на або 30 щонайменше на 70 ув, 75 Уо, 80 95, 85 95, 90 95, 95 Зо, 96 бо, 97 Фо, 98 95, 99 Уо або 100 95 ідентичні одній або більше антисенсовим сполукам або 5ЕО ІО МО, або їх частині, описаній в даному документі.
В деяких варіантах реалізації частину антисмислової сполуки порівнюють з частиною цільової нуклеїнової кислоти, що має однакову довжину. В деяких варіантах реалізації частину з 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 або 25 нуклеотидних основ порівнюють з частиною цільової нуклеїнової кислоти, що має однакову довжину.
В деяких варіантах реалізації частину антисмислового олігонуклеотида порівнюють з частиною цільової нуклеїнової кислоти, що має однакову довжину. В деяких варіантах реалізації частину з 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 або 25 нуклеотидних основ порівнюють з частиною цільової нуклеїнової кислоти, що має однакову довжину.
Модифікації
Нуклеозид являє собою комбінацію основа-цукор. Частиною нуклеозида, що являє собою нуклеотидну основу (також відому як основа), зазвичай є гетероцикличічна основа. Нуклеотиди являють собою нуклеозиди, які додатково містять фосфатну групу, ковалентно зв'язану з цукровою частиною нуклеозида. Для тих нуклеозидів, які містять пентофуранозильний цукор, фосфатна група може бути зв'язана з 2-, З-або 5- гідроксильною групою цукру.
Олігонуклеотиди утворюються шляхом ковалентного зв'язування примикаючих нуклеозидів один з одним з утворенням лінійного полімерного олігонуклеотида. В олігонуклеотидній структурі фосфатні групи зазвичай називаються такими, що утворюють міжнуклеозидні зв'язки олігонуклеотида.
Модифікації антисмислових сполук включають заміщення або заміни в міжнуклеозидних зв'язках, цукрових групах або нуклеотидних основах. Модифіковані антисмислові сполуки часто є кращими в порівнянні з нативними формами завдяки бажаним властивостям, таким як, наприклад, підвищена здатність до поглинання клітинами, підвищена афінність по відношенню до нуклеїнової кислоти-мішені, підвищена стабільність в присутності нуклеаз або
Зо підвищена інгібуюча активність.
Хімічно модифіковані нуклеозиди можна також застосовувати для підвищення афінності зв'язування усіченого або вкороченого антисмислового олігонуклеотида по відношенню до цільової нуклеїнової кислоти. Відповідно, зіставні результати часто можуть бути отримані в разі більш коротких антисмислових сполук, що містять такі хімічно модифіковані нуклеозиди.
Модифіковані міжнуклеозидні зв'язки
Міжнуклеозидний зв'язок в РНК і ДНК, що зустрічається в природі, являє собою 3- 5- фосфодиефірний зв'язок. антисмислові сполуки, що містять один або більше модифікованих, тобто таких, що зустрічаються в природі, міжнуклеозидних зв'язків, часто вибирають в порівнянні з антисенсовими сполуками, що містять міжнуклеозидні зв'язки, що зустрічаються в природі, за рахунок бажаних властивостей, таких як, наприклад, підвищена здатність до поглинання клітинами, підвищена афінність по відношенню до цільових нуклеїнових кислот і підвищена стабільність в присутності нуклеаз.
Олігонуклеотиди, що містять модифіковані міжнуклеозидні зв'язки, містять міжнуклеозидні зв'язки, в яких зберігається атом фосфору, а також міжнуклеозидні зв'язки, що не містять атом фосфору. Типові фосфоровмісні міжнуклеозидні зв'язки включають, але не обмежуються ними, фосфодиефірні, фосфотриефірні, метилфосфонатні, фосфорамідатні і фосфоротівсатні.
Способи отримання фосфоровмісних і тих, що не містять фосфор, зв'язків добре відомі.
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки, націлені на нуклеїнову кислоту
СЕВ, містять один або більше модифікованих міжнуклеозидних зв'язків. В деяких варіантах реалізації модифіковані міжнуклеозидні зв'язки являють собою фосфоротіоатні зв'язки. В деяких варіантах реалізації кожен міжнуклеозидний зв'язок антисмислової сполуки являє собою фосфоротіоатний міжнуклеозидний зв'язок.
Модифіковані цукрові групи антисмислові сполуки можуть містити один або більше нуклеозидів, в яких цукрова група була модифікована. Такі нуклеозиди з модифікованим цукром можуть надавати антисенсовим сполукам підвищену стійкість до нуклеаз, підвищену афінність зв'язування або будь-яку іншу корисну біологічну властивість. В деяких варіантах реалізації нуклеозиди містять групи, які являють собою хімічно модифіковані рибофуранозні кільця. Приклади хімічно модифікованих рибофуранозних кілець включають, без обмеження, приєднання заміщуючих бо груп (включаючи 5-їі 2'-заміщуючі групи, утворення місткових зв'язків негемінальних кільцевих атомів з утворенням біциклічних нуклеїнових кислот (ВМА), заміну атома кисню рибозильного кільця на 5, М(В) або С(В:)(Аг)(А, Ні ії Аг кожен незалежно являє собою Н, С1-Сі2» алкіл або захисну групу) і їх комбінації. Приклади хімічно модифікованих цукрів включають 2'-Е-5-метил- заміщений нуклеозид (інші описані 5',2'-біс-заміщені нуклеозиди див. в міжнародній заявці РСТ
МО 2008/101157, опублікованій 8/21/08) або заміну атома кисню рибозильного кільця на 5 з додатковим заміщенням в 2'--положенні (див. опубліковану заявку на патент США И52005- 0130923, яка опублікована 16 червня 2005 року) або, як альтернатива, 5'і-заміщення ВМА (див. міжнародну заявку РОСТ МО 2007/134181, опубліковану 11/22/07, в якій ЗНК містить в якості замісників, наприклад, 5'-метильну або 5'-вінільну групу).
Приклади нуклеозидів, що містять модифіковані цукрові групи, включають, без обмеження, нуклеозиди, що містять 5-вінільну, 5'-метильну (А або 5), 4-5, 2-Е, 2-ОСН», 2:
ОоСнНосН», 2-ОСНе СН ї 2-О(СНггОсСН» заміщуючі групи. Замісник в положенні 2" може також бути вибраний з алліла, аміно, азидо, тіо, О-алліла, ОС:і-Сіо алкіла, ОСЕз, ОСНЬЕ,
Оо(СнНг»ЗсСнНІ, О(СНгО-ОМ(Ат) (Ан), / О-СНа-С(-0)-М(Ат) Ак) Її О-СНо-С(-0)-М(Н1)- (СНе)»-
М(Ат)Ап), де кожен В, Нт і НВ незалежно являє собою Н або С1-Сіо алкіл, що містить замісники, або не містить замісники.
В даному описі термін «біцикличні нуклеозиди» відноситься до модифікованих нуклеозидів, що містять біциклічну цукрову групу. Приклади біциклічних нуклеозидів включають, без обмеження, нуклеозиди, що містять місток між 4"-і 2'-атомами рибозильного кільця. В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки, запропоновані відповідно до даного винаходу, містять один або більше біциклічних нуклеозидів, що містять місток 4-27.
Приклади таких біциклічних нуклеозидів з містком 4-2 включають, але не обмежуються ними, одну з формул: 4-(СНг)-О-2'(ЗНК);. 2-(СНг)-5-2;. 4-(СНег)2-0О- 2" (ЕМА); 2-СН(СНз)-О- 2'їтакож називається конформаційно обмеженим етилом або сЕЮ і 4-СН(СНгОСснН»з)-0-2. (і аналоги, див. Патент США 7399845, виданий 15 липня 2008 року); 4-С(СНз)(СНз)-0О-2 (і аналоги, див. опубліковану міжнародну заявку УУО/2009/006478, опубліковану 8 січня 2009 року); 4-СНо-М (ОСНз)-2'її аналоги, див. опубліковану міжнародну заявку УУО/2008/150729, опубліковану 11 грудня 2008 року); 4-СН2-ОМ (СНз)-2 (див. опубліковану заявку на патент
США 052004-0171570, опубліковану 2 вересня 2004 роки); 4-СНо-М(Н)-0-2", де АВ являє собою
Н, С0:-С12 алкіл або захисну групу (див. патент США 7427672, виданий 23 вересня 2008 року); 4-СНе-С(Н) (СНз)-2'Їдив. Спайораднпуауа еї аї., 9). Ога. Спет., 2009 74, 118-134); і 4-
СНа-С(-СНг)-2'ї аналоги, див. опубліковану міжнародну заявку УМО 2008/154401, яка опублікована 8 грудня 2008 року).
Додаткові повідомлення, які відносяться до біциклічних нуклеозидів, можуть бути також знайдені в опублікованій літературі (див., наприклад: біпой єї аі., Спет. Соттип., 1998, 4, 455-456; КовнКіп еї аї., Темзапеадгоп, 1998, 54, 3607-3630; Мапіезвтейдії єї аї., Ргос.
Май. Асад. сі. ОБА, 2000., 97, 5633-5638; Китаг єї аї!., Віоогд. Мей. Спет. І ей., 1998, 8, 2219-2222; 5іпоп еї аї., У. Огу. Спет., 1998, 63, 10035-10039; 5гімавзіама єї а!., У. Ат. Спет. зЗос., 2007, 129 (26) 8362-8379; ЕІауаді еї аї., Сцт. Оріпіоп Іпмев5і. Огидв5, 2001., 2, 558-561;
Вгаазенеї а!., Спет. Віої!., 2001., 8, 1-7; ії Огит єї аї., Сит. Оріпіоп Мої. Тнег., 2001., 3, 239- 243; патенти США Мо 6268490; 6525191; 6670461; 6770748; 6794499; 7034133; 7053207; 7399845; 7547684; і 7696345; публікацію патенту США Ме ООБ5Б2008-0039618; 052009- 0012281; патенти
США серійний Мо 60/989574; 61/026995; 61/026998; 61/056564; 61/086231; 61/097787; і 61/099844; опубліковані міжнародні заявки РСТ УМО 1994/014226; МО 2004/106356; МО 2005/021570; МО 2007/134181; МО 2008/150729; МО 2008/154401; ії МО 2009/006478. Кожен з вищезазначених біциклічних нуклеозидів може бути отриманий з однією або більше стереохімічною конфігурацією цукру, включаючи, наприклад, са-і- рибофуранозу і ВДВ-О- рибофуранозу (див. міжнародну заявку РСТ/ОКОВ8/00393, опубліковану 25 березня 1999 роки як МО 99/14226).
В деяких варіантах реалізації біцикличні цукрові групи нуклеозидів ВМА включають, але не обмежуються ними, сполуки, що містять щонайменше один місток між 4-і 2'-положенням пентофуранозильної цукрової групи, при цьому такі містки незалежно містять 1 або від 2 до 4 зв'язаних груп, незалежно вибраних з-(С(Ва)(Рь)н-, «С(Ва) -С(НВь)-, -б(Ва)-М-, -С(-0)-, -С(-МВа)-, -С(-5)-, -О-, -5І(На)»-, -5(-0)х-і-М(Ва)-; де: х дорівнює 0, 1 або 2; п дорівнює 1, 2, З або 4; кожен На і Вь незалежно являє собою Н, захисну групу, гідроксил, С1-Сті2 алкіл, С1і- Сч2 алкіл, що містить замісники, С2-С12 алкеніл, С2-С12 алкеніл, що містить замісники, С2-Сі2 алкініл, 60 0 С2-С1і2 алкініл, що містить замісники, С5-Сго арил, Св5-Сго арил, що містить замісники,
гетероциклічний радикал, гетероциклічний радикал, що містить замісники, гетероарил, гетероарил, що містить замісники, С5-С7 аліциклічний радикал, С5-С7 аліциклічний радикал, що містить замісники, галоген, О)ї, МУ 92, З), Ма, СОО1, ацил (С(-О)-Н), ацил, що містить замісники, СМ, сульфоніл (5(-0)2-)1) або сульфоксил (5(-0)-91); і кожен її 92 незалежно являє собою НН, Сі1-Сіг2 алкіл, С:і-Сі2 алкіл, що містить замісники, С2-С1і2 алкеніл, С2-С12 алкеніл, що містить замісники, С2-С:2 алкініл, С2-С-2 алкініл, що містить замісники, С5-Сго арил,
С5-Сго арил, що містить замісники, ацил (Сі-О0)-Н), ацил, що містить замісники, гетероциклічний радикал, гетероциклічний радикал, що містить замісники, С1-С12 аміноалкіл,
С1-С12 аміноалкіл, що містить замісники, або захисну групу.
В деяких варіантах реалізації місток в біциклічній цукровій групі являє собою-
ІС(ВахАь)е-, /У(С(ВахАь)а-О-, «С(НаВь)-М(Н)-О- або -С(ВНаНь)»-ОМ(Н)-. В деяких варіантах реалізації місток являє собою 4-СНе-2, 4-(СНг)2-2, 4-(СН2г) 3-2, 4-СНо-О-2, 4-(СНг)»-О- 2, 4-
Сн-АОМ(А)-2 і 4-СНо-М(А)-О-2", де кожен К незалежно являє собою Н, захисну групу або С1-С12 алкіл.
В деяких варіантах реалізації біциклічні нуклеозиди також визначаються ізомерною конфігурацією. Наприклад, нуклеозид, що містить 4-2'-метиленокси-місток, може перебувати в а-І -конфігурації або в В-Ю-конфігурації. Раніше ВМА, що містили с-іІ- метиленокси (4-СНе2-О- 23, включали до антисмислових олігонуклеотидів, які демонстрували антисмислову активність (Егієдеп еї аї., Мисівіс Асід5 Незеєагсі, 2003 21, 6365-6372).
В деяких варіантах реалізації біцикличні нуклеозиди включають, але не обмежуються ними, (А) с-І-метиленокси (4-СН2-0-2)-ВМА, (В) В-О-метиленокси (4- СНо-0О-23)-ВМА, (С) етиленокси (4-(СНег)2-0О-2)-ВМА, (0) аміноокси (42-СН».АОМ(Н)-2)-ВМА, (Е) оксиаміно (42-СНь-
М(В)-О-2)-ВМА і (Р) метил(метиленокси) (4-СН(СНз)-О-2)-ВМА, (Ссї) метилентіо (4-СНе-5-2)-
ВМА, (Н) метиленаміно (42-СН2-М(Н)-2)-ВМА, (І) метилкарбоциклічну (4-СНо-СН(СНЗз)-2) ВМА, (3) пропіленкарбоциклічну (4-(СНг) з-23 ВМА і (К) вініл-ВМА, зображені нижче. о о| Вх о. Вх о. ВХ о. ВХ й м ! М У -Ж х-ї ша р чо пуд - Од ші (В) (с (р) : Вх З о Вх З 3 ВХ |. 3 ВХ
Ша тах З ку НІ Є рий З о. и ?
Я 7 бетон гав Є. я пише Кі3хо щи щи Ши Ше
За Му (з че (0) ст 5 «а тв
К (в) (в (0) (Н)
Фе Р.
Є о, ВХ о ВХ г о. вх о, ра ої
Теж «у Тв б лсво ок (роз бу (Ю СНО с, де Вх являє собою основу, і А незалежно являє собою Н, захисну групу, Сі-Сі2 алкіл або Сі-
Сі2 алкокси.
В деяких варіантах реалізації запропоновані біцикличні нуклеозиди, що мають формулу І:
тТ.-о Вх й о и оку щ А. - о,
І
Тв і де
Вх являє собою гетероциклічну основу; -04-О5-Ос- являє собою -СНо-М(ВНе)-СНе-, -С(-0)-М(Ве)-СНе-, -СН»АОМ(Ве)-, -СНо- Ве являє собою С1-Сі12 алкіл або захисну групу аміна; і Та і Тькожен незалежно являє собою Н, захисну групу гідроксила, кон'юговану групу, реакційноспроможну фосфорну групу, фосфорний фрагмент або ковалентне приєднання до субстрату.
В деяких варіантах реалізації запропоновані біцикличні нуклеозиди, що мають формулу ІІ:
І я МУ Не ої з св
Ї Й
І,
Де:
Вх являє собою гетероциклічну основу;
Таі Тьккожен незалежно являє собою Н, захисну групу гідроксила, кон'юговану групу, реакційноспроможну фосфорну групу, фосфорний фрагмент або ковалентне приєднання до субстрату; 7аявляє собою Сі-Св алкіл, Сго-Св алкеніл, Со-Св алкініл, Сі--Свє алкіл, що містить замісники,
С2-Св алкеніл, що містить замісники, С2-Св алкініл, що містить замісники, ацил, ацил, що містить замісники, амід, що містить замісники, тіол або тіогруппу, що містить замісники.
В одному з варіантів реалізації кожна з груп, що містить замісники, незалежно моно- або полі-заміщена заміщуючими групами, незалежно вибраними з галогену, оксо, гідроксилу, Оус, МуУсбуа, Зус, Мз, ОС(-Х)9Ус і МОеб(-Х) Моусуа, де кожен с, да і де незалежно являє собою Н, С:-Сє алкіл або С1-Свє алкіл, що містить замісники, і Х являє собою О або Мс.
В деяких варіантах реалізації запропоновані біцикличні нуклеозиди, що мають формулу ІП: ! а (о) о нХх / / о (о,
Ш
І,
Де:
Вх являє собою гетероциклічну основу;
Таі Тьккожен незалежно являє собою Н, захисну групу гідроксила, кон'юговану групу, реакційноспроможну фосфорну групу, фосфорний фрагмент або ковалентне приєднання до субстрату; 7ь являє собою Сі-Свє алкіл, Со-Сє алкеніл, С2-Св алкініл, Сі-Св алкіл, що містить замісники, С2-Св алкеніл, що містить замісники, С2-Свє алкініл, що містить замісники, або ацил (С(-О)-), що містить замісники.
В деяких варіантах реалізації запропоновані біцикличні нуклеозиди, що мають формулу ІМ: т,.-О ту
ТТ о,
Че у а
Яд -о ях
М ГУ
УК,
ОК де:
Вх являє собою гетероциклічну основу;
Таі Тьккожен незалежно являє собою Н, захисну групу гідроксила, кон'юговану групу, реакційноспроможну фосфорну групу, фосфорний фрагмент або ковалентне приєднання до субстрату;
Ва являє собою С.-Св алкіл, Сі-Св алкіл, що містить замісники, Сг-Сє алкеніл, Се-Сє алкеніл, що містить замісники, С2-Св алкініл або С2-Св алкініл, що містить замісники;
Кожен аа, дь, дес і да незалежно являє собою Н, галоген, Сі-Свє алкіл, С1-Свє алкіл, що містить замісники, Сг-Свє алкеніл, Со-Свє алкеніл, що містить замісники, С2-Свє алкініл або С2-Св алкініл, що містить замісники, С1-Свє алкоксил, Сі-Св алкоксил, що містить замісники, ацил, ацил, що містить замісники, С1-Свє аміноалкіл або С:і-Сє аміноалкіл, що містить замісники.
В деяких варіантах реалізації запропоновані біцикличні нуклеозиди, що мають формулу У:
Ча а. с Аь о пек ле фо до-т, / й ях Ух
У де:
Вх являє собою гетероциклічну основу;
Та ії Ть кожен незалежно являє собою Н, захисну групу гідроксила, кон'юговану групу, реакційноспроможну фосфорну групу, фосфорний фрагмент або ковалентне приєднання до субстрату; да, дь, деі декожен незалежно являє собою водень, галоген, С1-Сі2 алкіл, С1-С:2 алкіл, що містить замісники, С2-Сі2 алкеніл, С2-Сі2 алкеніл, що містить замісники, С2-С12 алкініл, С2-С12 алкініл, що містить замісники, С1-С12 алкоксил, С1-С12 алкоксигрупу, що містить замісники, 0),
ЗУ, ЗО, ЗО»), МУюк Ма, СМ, С(-0)09, С(-О)МОЮЮ Фб(-039, Об(-О)Мукю М(Н)С(-МН)МЮК,
М(НС(-О)М9Мк або М(Н)С(-5)МУмк; або де і дє разом являють собою -С(до) (Дн); ді дикожен незалежно являє собою Н, галоген, С1-С12 алкіл або С1-Сі2алкіл, що містить
Зо замісники.
Був описаний синтез і отримання мономерів метиленокси (4-СН2-0-2)-ВМА аденіну, цитозину, гуаніну, 5-метилцитозину, тиміну і урацилу разом з їх олігомеризацією («і властивостями розпізнавання нуклеїнових кислот (Ко5пКіп еї аї., Гемйапедгоп, 1998, 54, 3607- 3630). ВМА і їх отримання також описано в М/О 98/39352 і МО 99/14226.
Були також отримані аналоги метиленокси (4-СН2-0-23)-ВМА і 2'-тіо-ВМА (Китаг еї аї.,
Віоогд. Мей. Спет. Іей., 1998, 8, 2219-2222). Було також описано отримання «закритих»
аналогів нуклеозидів, що містять олігодезоксирибонуклеотидні дуплекси, у якості субстратів для полімераз нуклеїнових кислот (М/епде! єї аі., УМО 99/14226). Крім того, в даній області техніки був описаний синтез 2'-аміно-ВМА, нового конформаційно обмеженого аналога олігонуклеотида з високою афінністю (біпой еї аїЇ., У. Огу. Спет., 1998, 63, 10035-10039).
Крім того, були отримані 2'-аміно-і 2'-метиламіно-ВМА і раніше була описана термічна стабільність їх дуплексів з комплементарними ланцюгами РНК і ДНК.
В деяких варіантах реалізації запропоновані біцикличні нуклеозиди, що мають формулу МІ: ! о
ТО ВХ ж дк че ЗД
О-Ть/ че і дим я -. чи де:
Вх являє собою гетероциклічну основу;
Та ії Ть кожен незалежно являє собою Н, захисну групу гідроксила, кон'юговану групу, реакційноспроможну фосфорну групу, фосфорний фрагмент або ковалентне приєднання до субстрату; кожен ді, ді, Як і ді незалежно являє собою Н, галоген, С1-Сі12 алкіл, С1-С12 алкіл, що містить замісники, С2-С12 алкеніл, С2-Сі2 алкеніл, що містить замісники, С2-С:і2 алкініл, С2-С:2 алкініл, що містить замісники, С1-С12 алкоксил, С1-С12 алкоксил, що містить замісники, 0, 59), 50,
ЗО2 ОО, МуУюю о Мза, СМ, б(-0007У, Ф(-0)МдУю б(-0), ОСб(-О)Муюкю, 0 М(Н)С(-МН)МОК,
М(НС(-О)М9Мк або М(Н)С(-5) Мк; і ді дгабо ді і дкразом являють собою -С(до) (ди), де до і днкожен незалежно являє собою Н, галоген, С1-С:» алкіл або С1-Сі2 алкіл, що містить замісники.
Був описаний один з карбоциклічних біциклічних нуклеозидів, що містить місток 4-(СНг)з- 2", і аналоговий алкенільних місток 4-СН-СН-СНе-2' (Егеїег єї аї., Мисівіс Асід5 Везвеагси, 1997, (22), 4429-4443 і АІраєек еї аї., 9). Ог9у. Спет., 2006, 71, 7731-7740). Також був описаний синтез і отримання карбоциклічних біциклічних нуклеозидів разом з їх олігомеризацією і 25 біохімічними дослідженнями (5гімавіама еї аї., у). Ат. Спет. 5ос., 2007, 129 (26), 8362-8379).
В даному описі термін «4-2'-біциклічний нуклеозид» відноситься до біциклічного нуклеозиду, який містить фуранозне кільце, що містить місток, що з'єднує два атома вуглецю зазначеного фуранозного кільця, що з'єднує атом вуглецю 2" і атом вуглецю - цукрового кільця.
В даному описі термін «моноциклічні нуклеозиди» відноситься до нуклеозидів, які містять модифіковані цукрові групи, які не є біциклічні цукровими групами. В деяких варіантах реалізації цукрова група або аналог цукрової групи в нуклеозиді може бути модифікований або містити замісники в будь-якому положенні.
В даному описі термін «2'--модифікований цукор» означає фуранозильний цукор, модифікований в положенні 2. В деяких варіантах реалізації такі модифікації включають замісники, вибрані з: галогеніду, включаючи, але не обмежуючись ними, алкоксил, що містить замісники і не містить замісники, тіоалкіл, що містить замісники і не містить замісники, аміноалкіл, що містить замісники і не містить замісники, алкіл, що містить замісники і не містить замісники, аліл, що містить замісники і не містить замісники і алкініл, що містить замісники і не містить замісники. В деяких варіантах реалізації 2'- модифікації вибрані із замісників, включаючи, але не обмежуючись ними: О|(СНг)пО|тСНз,
О(СНо Мне, О(СНазоСНз, О(СНазЕ, О(СНаОМН»:, ОСНгС(-О)М(НІсСНз ії (СНОМ (СНег) пс Нзіг, де п і т дорівнюють від 1 до приблизно 10. Інші 2'-заміщуючі групи можуть бути також обрані 3: С1-С12 алкіла, алкіла, що містить замісники, алкеніла, алкініла, алкарила, аралкіла, О- алкарила або О-аралкіла, 5Н, 5СНз, ОСМ, СІ, ВІ, СМ, Е, СЕз, ОСЕз, БОСН», 502 СНз, ОМО»,
МО», Мз, МН», гетероциклоалкіла, гетероциклоалкарила, аміноалкіламіно, поліалкіламіно, силіла, що містить замісники, РНК-розщеплюючої групи, репортерної групи, інтеркалятора, групи для поліпшення фармакокінетичних властивостей або групи для поліпшення фармакодинамічних властивостей антисмислової сполуки та інших замісників, що володіють схожими властивостями. В деяких варіантах реалізації модифіковані нуклеозиди містять бічний ланцюг 2'-МОЕ (Вакег еї аї., 9. Віої. Снет., 1997, 272, 11944-12000). Було описано, що таке заміщення 2-МОЕЄЕ демонструє поліпшену афінність зв'язування в порівнянні з немодифікованими нуклеозидами і з іншими модифікованими нуклеозидами, такими як 2-15 О- метил, О-пропіл і О-амінопропіл. Також було показано, що олігонуклеотиди, що містять замісник 2-МОЕ, є антисенсовими інгібіторами експресії генів з перспективними характеристиками для застосування іп мімо (МАВТІМ, Неїм. Спіт. Асіа, 1995, 78, 486-504;
Айтапп єї аї., Спітіа, 1996, 50, 168-176; Аптапп єї а!., Віоспет. бос. Тгапв., 1996, 24, 630- 637; і Айтапп еї а!., МисІеовіде5 Мисіеоїідев, 1997, 16, 917-926).
В даному описі термін «модифікований тетрагідропірановий нуклеозид» або «модифікований
ТНР-нуклеозид» означає нуклеозид, що містить шестичленний тетрагідропірановий «цукор», який замінює пентофуранозильний залишок в звичайних нуклеозидах (замінник цукру).
Модифіковані ТНР-нуклеозиди включають, але не обмежуються ними, ті сполуки, які називаються в даній області техніки гекситолнуклетїновою кислотою (НМА), анітолнуклеїновою кислотою (АНА), манітолнуклетїновою кислотою (ММА) (див. ІГецтапп, Віоогд. Мед. Спет., 2002 10, 841- 854) або фтор-НМА (Б-НМА), що містить тетрагідропіранову кільцеву систему, проілюстровану нижче: щи Фі щи! щу
НО у вх НО Ст вх небствх
Е ОСН.у
В деяких варіантах реалізації вибрані замінники цукру, які мають формулу МІЇ: м
ОХ о, /
Че: а че их й л Кк, Ко че
Т Ш І
УЦ де незалежно для кожного із зазначеного принаймні одного тетрагідропіранового аналога нуклеозиду формули МІЇ:
Вх являє собою гетероциклічну основу;
Та і Ть кожний незалежно являє собою міжнуклеозидну зв'язуючу групу, яка зв'язує тетрагідропірановий аналог нуклеозиду із антисмисловою сполукою, або один із Та і Ть являє собою міжнуклеозидну зв'язуючу групу, яка зв'язує тетрагідропірановий аналог нуклеозиду із антисмисловою сполукою, а інший із Та і Ть являє собою Н, захисну группу гідроксилу, зв'язану кон'юговану групу або 5'-чи 3'-кінцеву групу;
Зо ат, аг, аз, дя, 95, дб і ду кожний незалежно являє собою Н, С:і-Св алкіл, який містить замісники С:і-Сє алкіл, Со-Свє алкеніл, який містить замісники С2-Сє алкеніл, Сго-Св алкініл або який містить замісники С2-Свє алкініл; і кожний із Ні і Во вибраний із водню, гідроксилу, галогену, який містить замісники або не містить замісники алкокси, МУїуг, 591, Мз, ОС(-Х),
ОС(-Х)МО1О», Музб(-Х)МУ 19» і СМ, де Х являє собою О, 5 або Му, і кожний «1, 9» і дз незалежно
З5 являє собою Н або С:-Св алкіл.
В деяких варіантах реалізації запропоновані модифіковані ТНР-нуклеозиди формули МІ, в яких а, 92, аз, д4, 95, дві д7 кожний являє собою Н. В деяких варіантах реалізації принаймні один із: ді, Дд2, 9 з, дл, д5, дв ії д7 відмінний від Н. В деяких варіантах реалізації принаймні один із: ді, д2, Оз, дл, д5, Че і ду являє собою метил. В деяких варіантах реалізації запропоновані ТНР- нуклеозиди формули МІЇ, в яких один із: Ві і В? являє собою фтор. В деяких варіантах реалізації Рі являє собою фтор, і В2 являє собою Н; Ві являє собою метокси, і В2 являє собою Н; і В: являє собою метоксиетокси, і Р2 являє собою Н.
В деяких варіантах реалізації замінники цукру містять кільця, які мають більше 5 атомів та більше одного гетероатома. Наприклад, існують дані про нуклеозиди, які містять морфолінові цукрові групи, та їх застосування в олігомерних сполуках (див., наприклад,
Вгагазснеї аї., Віоспетівігу, 2002, 41, 4503-4510; та патенти США 5698685, 5166315, 5185444 і 5034506). У даному описі термін «морфолінова група» означає замінник цукру, який має наступну формулу: ся Є Ві а
Ко
В деяких варіантах реалізації морфолінові групи можуть бути модифіковані, наприклад, шляхом приєднання або змінення різних замісних груп із наведеної вище структури морфолінової групи. У даному описі такі замінники цукру називаються «модифікованими морфоліновими групами».
Також запропоновані, без обмеження, комбінації модифікацій, такі як 2'-Є-5-метил- заміщені нуклеозиди (інші описані 5'2'-біс-заміщені нуклеозиди див. у міжнародній заявці РОСТ МО 2008/101157, опублікованій 21.08.08) та заміна атома кисню рибозильного кільця на 5 та додаткове заміщення в 2'-положенні (див. опубліковану заявку на патент США И52005- 0130923, яка опублікована 16 червня 2005 року) або, як альтернатива, 5- заміщення у біциклічній нуклеїновій кислоті (див. міжнародну заявку РСТ МО 2007/134181, опубліковану 22.11.07, в якій 4-СН2-О-2'-біциклічний нуклеозид додатково містить як замісники 5'-метильну або 5-вінільну групу в положенні 5). Також був описаний синтез та отримання карбоциклічних біциклічних нуклеозидів поряд з їх олігомеризацією та біохімічними дослідженнями (див., наприклад, 5гімавіама єї аї!., У. Ат. Спет. бос. 2007, 129(26), 8362-8379).
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки містять один або більше модифікованих циклогексенільних нуклеозидів, які являють собою нуклеозиди, які містять шестичленний циклогексеніл замість пентофуранозильного залишку в нуклеозидах, які зустрічаються у природі. Модифіковані циклогексенільні нуклеозиди включають, але не обмежуються ними, ті, які описані у даній галузі техніки (див., наприклад, спільну опубліковану заявку РСТ УМО 2010/036696, яка опублікована 10 квітня 2010 року, Кореупв еї аї., у). Ат.
Спет. 5Бос., 2008, 130(6), 1979-1984; Ногуаїйй єї аї., Теігапедгоп І ейегз, 2007, 48, 3621-3623;
МацуеїЇаєтгів єї аЇ., У. Ат. Спет. Бос., 2007, 129(30), 9340-9348; Си єї аї.,, Мисієозідев,
Мисіеоїіде5 а Мисівїс Асід5, 2005, 24(5-7), 993-998; Машймеїаєтв еї аї., Мисівіс Асід5 Незвеагси,
Зо 2005, 33(8), 2452-2463; ВКобеупз вї аї., Асіа СтувіаПоагарпіса, Зесіоп Е: 5ігписіига! Віоїосду апа
Стузіайгайоп Соттипісайопе, 2005, Е61(6), 585-586; Си єї аї!., Темганедгоп, 2004, 60(9), 2111- 2123; Си єї аї., Оіїдописієоїідев5, 2003, 13(6), 479-489; Мапа евї а!., У. Ог9у. Спет., 2003, 68, 4499- 4505; Метбеиге еї аї., Мисівіс Асідз Везєагси, 2001, 29(24), 4941-4947; Мапа еї аї., У. Ога. Снет., 2001, 66, 8478-82; Мапд еї аї., Мисієовіде5, Мисіеоїіде5 4 Мисієїс Асіаб5, 2001, 20(4-7), 785- 788; Мапа еї аЇ, 9. Ат. Спет., 2000., 122, 8595-8602; опубліковану заявку РСТ, МО 06/047842; та опубліковану заявку РОСТ УМО 01/049687; повний зміст кожної з яких включено в даний опис шляхом посилання). Деякі модифіковані циклогексенільні нуклеозиди мають формулу Х:
ФІ з т-п-ї з дз
Й й де В фі п дб М чий х 0 їв яв че т з де незалежно для кожного із зазначеного принаймні одного циклогексенільного аналога нуклеозиду формули Х:
Вх являє собою сгетероциклічну основу; ТЗ і Т4 кожен незалежно являє собою міжнуклеозидну зв'язуючу групу, яка зв'язує циклогексенільний аналог нуклеозиду з антисмисловою сполукою, або один з Т3 і Т4 являє собою міжнуклеозидну зв'язуючу групу, яка зв'язує тетрагідропірановий аналог нуклеозиду з антисмисловою сполукою, а інший з ТЗ і Т4 являє собою Н, гідроксильну захисну групу, групу зв'язаного кон'югата, або 5'- або 3'-термінальну групу; і ді, 2, Оз, да, 95, дв, 47, дві де кожний незалежно являє собою Н, С-1-
Св алкіл, який містить замісники Сі-Сє алкіл, С2-Св алкеніл, який містить замісники С2-Св алкеніл, С2-Св алкініл, який містить замісники С2-Св алкініл або іншу замісну групу для цукру.
У даному описі термін «2'-модифікований» або «2'-заміщений» відноситься до нуклеозиду, який містить цукор, котрий містить замісник у положенні 2, відмінний від Н або ОН. 2-- модифіковані нуклеозиди, включають, але не обмежуються ними, біциклічні нуклеозиди, в яких місток, котрий з'єднує два атома вуглецю цукрового кільця, з'єднує 2'- вуглець та інший вуглець цукрового кільця; і нуклеозиди із 2'-замісниками, які не утворюють місток, такими як аліл, аміно, азидо, тіо, О-аліл, О-С1-С1о алкіл, -ОСЕз, О- (СНг)2-О-СНвз, 2-О(СН2г)2ЗСН», О- (СНа-ОМ(Ат) (Аа) або О-СН»-С(-0)-М(Ат)(Ни), де кожний Нт та На незалежно являє собою Н, або Сі-Сіо алкіл, який містить замісники або не містить замісники. 2'-модифіковані нуклеозиди можуть додатково містити інші модифікації, наприклад, в інших положеннях цукру та/або в нуклеотидній основі.
У даному описі термін «2-Е» відноситься до нуклеозиду, який містить цукор, що містить фторгрупу у положенні 2" цукрового кільця.
У даному описі терміни «2-ОМЕ» або «2-ОСН»з», або «2'-О-метил» кожний відноситься до нуклеозиду, який містить цукор, що містить групу-ОСНз у положенні 2! цукрового кільця.
У даному описі терміни «МОЕ» або «2-МОЕ», або «2-ОСН».СНгОСН»», або «2-0- метоксіетил» кожний відноситься до нуклеозиду, який містить цукор, що містить групу- ОСН»
СНгОснН:;» у положенні 2" цукрового кільця.
У даному описі термін «олігонуклеотид» відноситься до сполуки, яка містить множину зв'язаних нуклеозидів. В деяких варіантах реалізації один або більше із зазначеної множини нуклеозидів є модифікованими. В деяких варіантах реалізації олігонуклеотид містить один або більше рибонуклеозид (РНК) та/або дезоксирибонуклеозид (ДНК).
У даній галузі техніки також відомо багато інших біциклічних та трициклічних кільцевих систем, які є замінниками цукру, які можуть бути використані для модифікації нуклеозидів для включення в антисмислові сполуки (див., наприклад, оглядову статтю: І ештапп, Віоога. Мед.
Спет., 2002, 10, 841-854). Такі кільцеві системи можуть піддаватися різним додатковим заміщенням для підвищення активності.
Способи отримання модифікованих цукрів добре відомі фахівцеві у даній галузі техніки.
Деякі типові патенти США, котрі описують отримання таких модифікованих цукрів, включають, без обмеження, 05: 4981957, 5118800, 5319080, 5359044, 5393878, 5446137, 5466786, 5514785, 5519134, 5567811, 5576427, 5591722, 5597909, 5610300, 5627053, 5639873, 5646265, 5670633, 5700920, 5792847 та 6600032, і міжнародну заявку
РСТ/О52005/019219, подану 2 червня 2005 року та опубліковану як МО 2005/121371 22 грудня 2005 року, повний зміст кожної з яких включено у даний опис шляхом посилання.
У нуклеотидах, які містять модифіковані цукрові групи, нуклеотидні основи (природні, модифіковані або їхню комбінацію) зберігають для гібридизації із відповідною нуклеїновою кислотою-мішенню.
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки містять один або більше нуклеозидів, які містять модифіковані цукрові групи. В деяких варіантах реалізації модифікована цукрова група являє собою 2-МОЕ. В деяких варіантах реалізації 2'-«МОЕ- модифіковані нуклеозиди розташовані в гепмерному мотиві. В деяких варіантах реалізації модифікована цукрова група являє собою біциклічний нуклеозид, котрий містить місткову групу (4-СН(СНз)-О-2). В деяких варіантах реалізації (4-СН(СНз)-О-2)-модифіковані нуклеозиди розташовані на всіх «крилах» гепмерного мотиву.
Модифіковані нуклеотидні основи
Модифікації або заміщення в нуклеотидній основі (або основі) структурно відрізняються від тих, які зустрічаються у природі, або синтетичних немодифікованих нуклеотидних основ, хоча за функціями рівнозначні їм. Як природні, так і модифіковані нуклеотидні основи здатні брати участь в утворенні водневих зв'язків. Такі модифікації нуклеотидної основи можуть надавати антисенсовим сполукам стійкість до нуклеаз, афінність зв'язування або будь-яку іншу корисну біологічну властивість. Модифіковані нуклеотидні основи включають синтетичні та природні нуклеотидні основи, такі як, наприклад, 5-метилцитозин (5-те-б).
Деякі заміщення в нуклеотидних основах, включаючи 5-метилцитозинові заміщення, особливо підходять для підвищення афінності зв'язування антисмислової сполуки щодо бо цільової нуклеїнової кислоти. Наприклад, було показано, що 5-метилцитозинові заміщення підвищують стабільність дуплексу нуклеїнової кислоти на 0,6-1,2"С (Запдунмі, М5, СтоокКе, 5 апа Герієи, В., едв., Апіїзепзе ВезеагїСНапа Арріїсайопз5, САС Ргев5, Воса Вашюп, 1993, рр. 276- 278).
Додаткові модифіковані нуклеотидні основи включають 5-гідроксиметилцитозин, ксантин, гіпоксантин, 2-аміноаденін, б-метильні та інші алкільні похідні аденіну і гуаніну, 2-пропільні та інші алкільні похідні аденіну і гуаніну, 2-тіоурацил, 2-тіотимін ї 2- тіоцитозин, 5-галогенурацил і цитозин, 5-пропініл. (-СбЕС-СНз)-урацил і цитозин, та інші алкінільні похідні піримідинових основ, б-азо-урацил, -цитозин і-тимін, 5-урацил (псевдоурацил), 4-тіоурацил, 8-галоген-, 8- аміно-, 8-тіол-, 8-тіоалкіл-, 8-гідроксил-та інші 8-заміщені аденіни та гуаніни, 5-галоген-, зокрема, 5-бром-, 5-трифторметил та інші 5- заміщені урацили та цитозини, 7-метилгуанін і 7-метиладенін, 2-Е-аденін, 2-аміноаденін, 8-азагуанін і 8-азааденін, 7-деазагуанін і 7- деазааденін, та З-деазагуанін і З-деазааденін.
Групи, які являють собою гетероциклічні основи, можуть також включати ті, в яких пуринова або піримідинова основа замінена іншими гетероциклами, наприклад, 7- деазааденіном, 7- деазагуанозином, 2-амінопіридином та 2-піридоном. Нуклеотидні основи, які особливо підходять для підвищення афінності зв'язування антисмислової сполуки, включають 5-заміщені піримідини, б-азапіримідини та М-2, М-6 і О-6-заміщені пурини, включаючи 2- амінопропіладенін, 5-пропінілурацил і 5-пропінілцитозин.
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки, націлені на нуклеїнову кислоту
СЕВ, містять одну або більше модифікованих нуклеотидних основ. В деяких варіантах реалізації антисмислові олігонуклеотиди, укорочені або із розширеним гепом, націлені на нуклеїнову кислоту СЕВ, містять одну або більше модифікованих нуклеотидних основ. В деяких варіантах реалізації модифікована нуклеотидна основа являє собою 5-метилцитозин. В деяких варіантах реалізації кожний цитозин являє собою 5-метилцитозин.
Кон'юговані антисмислові сполуки
Антисмислові сполуки можуть бути ковалентно зв'язані з однією або більше групами чи кон'югатами, які підвищують активність, розподіл у клітинах або поглинання клітинами отриманих антисмислових олігонуклеотидів. Типові кон'юговані групи включають холестеринові групи та ліпідні групи. Додаткові кон'юговані групи включають вуглеводи, фосфоліпіди, біотин,
Зо феназин, фолат, фенантридін, антрахінон, акридин, флуоресцеїни, родамін, кумарини і барвники.
Антисмислові сполуки можна також модифікувати таким чином, щоби вони містили одну або більше стабілізуючих груп, які, як правило, приєднують до одного або обох кінців антисмислової сполуки для посилення властивостей, таких як, наприклад, стійкість до нуклеаз. Стабілізуючі групи включають кеп-структури. Дані кінцеві модифікації захищають антисмислову сполуку із кінцевою нуклеїновою кислотою від розпаду під дією екзонуклеази і можуть полегшувати доставку та/або її локалізацію в клітині. Кеп може бути присутнім на 5'- кінці (5'-кеп) або на 3'-кінці (3'-кеп), або може бути присутнім на обох кінцях. Кеп-структури добре відомі у даній галузі техніки і включають, наприклад, інвертовані дезокси-кепи, позбавлені азотистих основ. Додаткові 3- і 5- стабілізуючі групи, які можуть бути використані для кепування одного або обох кінців антисмислової сполуки для надання їй стійкості до нуклеаз, включають ті групи, які описані в М/О 03/004602, опублікованій 16 січня 2003 року.
В деяких варіантах реалізації антисмислові сполуки, включаючи, але не обмежуючись ними, сполуки, які особливо підходять для застосування в якості олЛРНК, модифікують шляхом приєднання однієї або більше кон'югованих груп. Загалом, кон'юговані групи модифікують одну або більше властивостей олігонуклеотиду, який приєднується, включаючи, але не обмежуючись ними, фармакодинаміку, фармакокінетику, стабільність, зв'язування, абсорбцію, розподіл у клітинах, поглинання клітинами, заряд і кліренс. Кон'юговані групи, які зазвичай використовують у галузі хімії, зв'язують безпосередньо або через можливий кон'югат- зв'язуючий фрагмент або кон'югат- зв'язучу групу із вихідною сполукою, такою як олігонуклеотид. Кон'юговані групи включають, без обмеження, інтеркалятор, репортерні молекули, поліаміни, поліаміди, полієтиленгліколі, прості тіоефіри, прості поліефіри, холестерини, тіохолестеріни, молекули холевої кислоти, фолат, ліпіди, фосфоліпіди, біотин, феназин, фенантридин, антрахінон, адамантан, акридин, флуоресцеїни, родамін, кумарини і барвники. Деякі кон'юговані групи були описані раніше, наприклад, молекула холестерину (І еівіпдег еїаї., Ргос. Май). Асай. сі. ОБА, 1989, 86, 6553-6556), холева кислота (Мапопйагап єї аІ,, Віоогу. Мей. Спет. Іеї.,, 1994, 4, 1053-1060), простий тіоефір, наприклад, гексил-5- тритилтіол (МапоНагап єї аї., Апп. М. М. Асай. 5сі., 1992, 660, 306-309; Мапонагап еї аї., бо Віоогд. Мей. Сет. І еї., 1993, 3, 2765-2770), тіохолестерин (Обетаивзег" еї аї!., Мисі. Асіаз Везв.,
1992, 20, 533-538), аліфатичний ланцюг, наприклад, додекандіолові або ундецилові залишки (Заіїзоп-Вептоагав єї аіІ., ЕМВО 9., 1991, 10, 1111-1118; Карапом єї аІ., РЕВ5 г ей., 1990, 259, 327-330; Зміпагспик еї аї., Віоспітієе, 1993, 75, 49-54), фосфоліпіди, наприклад, ди- гексадецил-рац-гліцерин або триєтиламонію /1,2-ди-О-гексадецил-рац-гліцеро-3-Н- фосфонат (Мапогагап еї аї., Тейгапедгоп І еїй., 1995, 36, 3651-3654; ЗНнєа єї аї., Мисі. Асід5
Вевз., 1990, 18, 3777-3783), поліамін або поліетиленгліколевий ланцюг (Мапойагап еї аї.,
Мисієовіде5 4 Мисієоїідев, 1995, 14, 969-973), або адамантан-оцтова кислота (Мапогагап еї аїЇ.,
Теманеайдгоп І еїй., 1995, 36, 3651-3654), пальмітилова група (Мізнга єї аї., Віоспіт. Віорпув.
Асіа, 1995,1264, 229-237) або октадециламін-або гексиламінокарбонілоксихолестеринова група (Стооке еї аї., у). Рнагтасої. Ехр. ТНег., 1996, 277, 923-937).
Додаткові кон'югати, включаючи ті, які підходять для ОлЛРНК, та їх розташування у антисмислових сполуках, див., наприклад, у заявці США Моб1/583963.
Тестування антисмислових олігонуклеотидів іп мито
У даному документі описані способи обробки клітин антисенсовими олігонуклеотидами, які можуть бути модифіковані відповідним чином для обробки іншими антисенсовими сполуками.
Клітини можуть бути оброблені антисенсовими олігонуклеотидами після досягнення зазначеними клітинами приблизно 60-80 95 конфлюентності в культурі.
Один із реагентів, які зазвичай використовують для введення антисмислових олігонуклеотидів у культивовані клітини, включає катіонний ліпідний реагент для трансфекції ЛІПОФЕКТИН (Іпуйгодеп, Карлсобад, Каліфорнія). антисмислові олігонуклеотиди можуть бути змішані з ЛІПОФЕКТИНОМ в ОРТІ-МЕМ 1 (Іпмігодеп, Карлсбад, Каліфорнія) із досягненням бажаної кінцевої концентрації антисмислового олігонуклеотиду та концентрації
ЛІПОФЕКТИНУ, яка може знаходитися в діапазоні від 2 до 12 мкг/мл на 100 нМ антисмислового олігонуклеотиду.
Інший реагент, який використовується для введення антисмислових олігонуклеотидів у культивовані клітини, включає ЛІ ПОФЕКТАМІН (Іпмйгодеп, Карлсобад, Каліфорнія). Антисенсовий олігонуклеотид змішують із ЛІПОФЕКТАМІНОМ у середовищі ОРТІ-МЕМ 1 із пониженим вмістом сироватки (Іпуийгодеп, Карлобад, Каліфорнія) із досягненням бажаної концентрації
Зо антисмислового олігонуклеотиду і концентрації ЛІПОФЕКТАМІНУ, яка може знаходитись у діапазоні від 2 до 12 мкг/мл на 100 нМ антисмислового олігонуклеотиду.
Інша технологія, яка використовується для введення антисмислових олігонуклеотидів у культивовані клітини, включає електропорацію.
Ще одна технологія, яка використовується для введення антисмислових олігонуклеотидів у культивовані клітини, включає вільне поглинання олігонуклеотидів клітинами.
Клітини обробляють антисенсовими олігонуклеотидами звичайними способами. Клітини можуть бути зібрані через 16-24 години після обробки антисенсовими олігонуклеотидами, і в цей час вимірюють рівні РНК або білка, котрий кодується цільовою нуклеїновою кислотою, способами, відомими в даній галузі техніки та описаними в даному документі. Як правило, у випадку, коли обробку здійснюють в декількох повторах, дані представляють у вигляді середнього значення для повторних обробок.
Концентрація застосовуваного антисмислового олігонуклеотиду варіюється між лініями клітин. Способи визначення оптимальної концентрації антисмислового олігонуклеотиду для конкретної лінії клітин добре відомі у даній галузі техніки. антисмислові олігонуклеотиди, як правило, застосовують у концентраціях у діапазоні від 1 НМ до З00 нМ при трансфекції із використанням ЛІПОФЕКТАМІНУ. При трансфекції із використанням електропорації антисмислові олігонуклеотиди застосовують у більш високих концентраціях у діапазоні від 625 до 20000 нМ.
Виділення РНК
Аналіз РНК може бути виконаний на тотальній клітинній РНК або роїуу(А)- мРНК. Способи виділення РНК добре відомі у даній галузі техніки. РНК отримують із використанням способів, добре відомих у даній галузі техніки, наприклад, із використанням реагенту
ТАІ2ОЇ (Іпийгтодеп, Карлсобад, Каліфорнія) відповідно до протоколів, рекомендованими виробником.
Деякі показання
Деякі варіанти реалізації представлені в даному документі, відносяться до способів лікування, запобігання або полегшення захворювання, пов'язаного із дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента, у суб'єкта шляхом уведення СЕВ- специфічного бо інгібітору, такого як антисмислова сполука, яка орієнтована на СЕВ.
Приклади захворювань нирок, пов'язаних із дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента, які можна лікувати, запобігати та/або полегшувати способами, запропонованими відповідно до даного винаходу, включають СЗ-гломерулопатію, атиповий гемолітико-уремічний синдром (анНниб5), хворобу щільного осаду (000; також відому як мембранопроліферативний гломерулонефрит (МРОМ) І типу або СЗМері) і СЕНН5- нефропатію.
Додаткові захворювання нирок, пов'язані із дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента, які можна лікувати, запобігати та/або полегшувати способами, запропонованими відповідно до даного винаходу, включають ІдДА-нефропатію; мезангіокапілярний (мембранопроліферативний) гломерулонефрит (МРОМ); аутоімунні порушення, включаючи вовчаковий нефрит і системний червоний вовчак (5І'Е); індукований інфекцією гломерулонефрит (також відомий як постінфекційний гломерулонефрит); та ішемічно- реперфузійне пошкодження нирок, наприклад, посттрансплантаційне ішемічно-реперфузійне пошкодження нирок.
Приклади нениркових порушень, пов'язаних із дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента, які можна лікувати та/або запобігати способами, запропонованими відповідно до даного винаходу, включають захворювання очей, такі як дегенерація жовтої плями, наприклад, вікова дегенерація жовтої плями (АМО), включаючи вологу форму АМО і суху форму АМО, таку як географічна атрофія; оптіконевромієліт; захворювання рогівки, таке як запалення рогівки; аутоїмунний увеїт; і діабетична ретинопатія. Існують дані про те, що система комплементу залучена у захворювання очей. Уа Р, єї аї., Мої Іттипої! (2007) 44(16): 3901-3908. Додаткові приклади нениркових порушень, пов'язаних із дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента, які можна лікувати та/або запобігати способами, запропонованими відповідно до даного винаходу, включають васкуліт, пов'язаний З антинейтрофільними цитоплазматичними антитілами (АМСА), антифосфоліпідний синдром (також відомий як синдром антифосфоліпідних антитіл (АРБ)), астму, ревматоїдний артрит, міастенію гравіс ірозсіяний склероз.
Деякі варіанти реалізації, представлені в даному описі, відносяться до способів лікування, запобігання або полегшення захворювання нирок, пов'язаного із дисрегуляцією
Зо альтернативного шляху активації комплемента, у суб'єкта шляхом уведення СЕВ- специфічного інгібітору, такого як антисмислова сполука, яка орієнтована на СЕВ. В деяких варіантах реалізації захворювання нирок являє собою вовчаковий нефрит, системний червоний вовчак (ЗЕ), хворобу щільного осаду (000), СЗ-гломерулонефрит (СЗОаМ), СЕНА5-нефропатію або атиповий гемолітико-уремічний синдром (анНиб5) або будь-яку комбінацію зазначених захворювань.
Деякі варіанти реалізації, представлені в даному описі, відносяться до способів лікування, запобігання або полегшення дегенерації жовтої плями, такої як вікова дегенерація жовтої плями (АМО)), у суб'єкта шляхом уведення СЕВ-специфічного інгібітору, такого як антисмислова сполука, яка орієнтована на СЕВ. В деяких варіантах реалізації АМО являє собою вологу форму АМО або суху форму АМО. В деяких варіантах реалізації суха форма АМО може являти собою географічну атрофію. Дослідження показали зв'язок дисрегуляції альтернативного шляху активації комплемента й АМО. Компоненти комплементу є частими складовими очних друз, позаклітинної речовини, яка накопичується у жовтій плямі у пацієнтів з АМО. Крім того, існують дані про те, що варіанти СЕН і СЕВ є причиною майже 75 до випадків АМО у Північній Європі та Північній Америці. Також було виявлено, що специфічний поліморфізм СЕВ забезпечує захист від АМО. Раївеї, М. єї аї., Еує (2008) 22(6): 768-76. Крім того, миші, гомозиготні за нульовим геном СЕВ, демонструють нижчу активність шляху активації комплемента, демонструють менше ураження очей і неоваскуляризації хоріоіїдеї (СММ) після лазерної фотокоагуляції. ВоПгег, В. еї аїЇ., Іпмезві ОрпїйаіІтої Мів осі. (2009) 50(7): 3056-64. Крім того, лікування міРНК СЕВ захищає мишей від СМУ, індукованої лазером.
Вога, М5 еї аї., У Іттипої. (2006) 177(3):1872-8. Дослідження також показали, що нирки й очі мають спільні шляхи розвитку та особливості структури, включаючи композицію протомерів колагену ІМ базальної мембрани та васкулярність. Заміде ега)., У Ат бос Мерпгої. (2011) 22(8): 1403-15. Існує підтвердження того, що шлях активації комплемента залучений у захворювання нирок і очей. Наприклад, спадковий дефіцит білка-регулятора комплементу є причиною схильності до атипового гемолітико-уремічного синдрому й АМО. Віспага5 А еї аї.,
Адм Іттипої. (2007) 96:141-77. Крім того, хронічна хвороба нирок була пов'язана із АМО.
Міївси, 0. еї аї., Орпійа!тіс Ерідетіої. (2009) 16(3): 181-6; Спої, 9. еї аіЇ, Орпінаїтіс Ерідетіо). (2011) 18(6):259-63. Хвороба щільного осаду (000), захворювання нирок, пов'язане із 60 дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента, характеризується гострим бо нефритичним синдромом і очними друзами. Сти? апа тії, СепеНеміємв (2007) Умші 20.
Більше того, миші з генетичною делецією компонента альтернативного шляху активації комплемента демонструють співіснуючі фенотипи захворювань нирок та очей. Існують дані про те, що у мишей, гомозиготних за нульовим геном СЕН, розвивається БОЮ і присутні аномалії сітківки та дисфункція зору. РісКегіп9 еї аї., Маї Сепеї. (2002) 31(4): 424-8. Моделі захворювань нирок, пов'язані із дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента, у мишей також прийняті як моделі АМО. Реппевзі МЕ еї аї., Мої Аресіз Меа (2012) 33: 487-509.
Миші з нульовим геном СЕН, наприклад, являють собою загальноприйняту модель захворювань нирок, таких як ОО, ії АМО. Крім того, існують дані про те, що АМО пов'язана із системним джерелом факторів комплементу, які накопичуються локально в оці для управління альтернативним шляхом активації комплемента. І оуєї еї аї., Іпме5і ОрпіНа!тої! Мів зЗсі. (2012) 53(10): 6628- 37.
ПРИКЛАДИ
Необмежуючий опис і включення шляхом посилання
Тоді як деякі сполуки, композиції та способи, описані в даному документі, були навмисно описані відповідно до деяких варіантів реалізації, наступні приклади надані виключно для ілюстрації сполук, описаних в даному документі, і не обмежують їх. Повний зміст кожного із документів, наведених у даній заявці включено в даний опис шляхом посилання.
Очевидно, що послідовність представлена в кожному 5ЕО ІО МО. у прикладах, наведених у даному описі, не залежить від будь-якої модифікації цукрової групи, міжнуклеозидного зв'язку або нуклеотидної основи. Відповідно, антисмислові сполуки, які визначаються 5ЕО ІЮ МО., можуть незалежно містити одну або більше модифікацій цукрової групи, міжнуклеозидного зв'язку або нуклеотидної основи. антисмислові сполуки, котрі описані номером Івів (Ізіз Ме), демонструють комбінацію послідовності нуклеотидних основ і мотиву.
Приклад 1: антисенсове інгібування фактора В комплемента (СЕВ) людини у клітинах
Нера2 МОБ-гепмерами
Отримували антисмислові олігонуклеотиди, націлені на нуклеїнову кислоту фактора В комплемента (СЕВ) людини, і тестували їх на предмет дії на мРНК СЕВ іп міо.
Зо Зазначені антисмислові олігонуклеотиди тестували в серії експериментів зі схожими умовами культивування. Результати кожного експерименту представлені в окремих таблицях, наведених нижче. Культивовані клітини Нерсіаг зі щільністю 20000 клітин на лунку трансфікували 4500 нМ антисмислового олігонуклеотиду з використанням електропорації.
Після періоду обробки, що становив приблизно 24 години, з клітин виділяли РНК і вимірювали рівні мРНК СЕВ шляхом кількісної ПЛР в режимі реального часу. Набір праймер-зондів людини ВТ53459 (пряма послідовність АЛОТСОТОТатТасаСАТИастТТТОс, що позначається в даному описі 5ЕО ІЮ МО.: 810; зворотна послідовність СПОСОИСОСААТаАСТОаАСаАТСТТа, що позначається в даному описі ЗЕО ІО МО.: 811; послідовність зонда
ТАССС,АТТАССАСААдаСААССАТОССА, що позначається в даному описі 5ЕО ІЮ МО.: 812) використовували для вимірювання рівнів мРНК. Рівні мРНК СЕВ коректували у відповідності до загального змісту РНК, виміряного за допомогою ВІВОСВЕЕМФ). Результати представлені у вигляді відсотка інгібування СЕВ відносно необроблених контрольних клітин.
Знову отримані химерні антисмислові олігонуклеотиди в таблицях нижче отримували у вигляді МОБЄЕ-гепмерів 5-10-5. Довжина зазначених МОБЕ-гепмерів 5-10-5 становила 20 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив десять 2"- дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами-крилами в 5'-напрямку і З'-напрямку, кожен з яких містив п'ять нуклеозидів. Кожен нуклеозид в 5'-сегменті-крилі і кожен нуклеозид в 3'-сегменті-крилі містив 2'-
МОЄЕ-модифікацію. Міжнуклеозидні зв'язки вздовж кожного огепмера являли собою фосфоротіоатні (Р-Б) зв'язки. Всі залишки цитозину вздовж кожного гепмера являли собою
Б-метилцитозини. «Сайт ініціації» означає крайній нуклеозид з 5'-кінця, на який націлений гепмер, в послідовності гена людини. «Стоп-сайт» означає крайній нуклеозид з 3'-кінця, на який націлений гепмер, в послідовності гена людини. Кожен гепмер, перерахований в таблицях нижче, націлений або на мРНК СЕВ людини, що позначається в даному описі 5ЕО ІЮ
МО.: 1 (номер доступу в СЕМВАМК ММ 001710.5), або на геномну послідовність СЕВ людини, що позначається в даному описі БЕО ІЮ МО.: 2 (номер доступу в СЕМВАМК МТ 007592.15, укорочена в межах нуклеотидів 31852000-31861000), або на обидві. «н.д.» означає, що антисенсовий олігонуклеотид не націлений на дану конкретну послідовність гена зі 100 95 комплементарністю.
Таблиня і інгібування МРНК СЕВ МОБ -тепмерами 5-10-5, ваціленими на ЗЕ І МОСІї2
Стоп і'тап
Сайт сант пе . Сан -айт | М пи Мощі Тизьова пе топці сту ОЗЕО
М» ІІ інгаці 5ЕО послі- Паслілевність інгібу- ініицпанії ЗЕсО т пи из І з ДИ Но й т що У- ЗЕД В | уд мор о | мо: | ОВНЄТЬ вання мок мог і 2 що й , аСсТаАОСтаСсСА ЩІ : Й хІ5О0Ох 23 У Екзонвні прища Щ 36 1-4 175 З хз2Кю 15 45 | Екзоні | ЗОСЄССОСТОЛО 15 італ 176517 стаССАЄТ
Ще Щ Й Щ ЇЇ СОСААСАТОСА; І Ще пок й 532510 45 а | Бкзоні | СОЯААСАТОСЛХ Ії ітаб6 1785 | 8
САС
ТТТСССОСААЄ
«3 ві 70 | Екзані | ЧЕТ ТОССОБААЄ 26 ьта2 || о
АТССААОоС 532612 100 119 | Бкзоні А - Ста тотІстов 25 182 1540 | 16
САС що | ЩА ОТСАСАТТССЄ , ог 532813 148 ІТ | БЕюзоні | 77 АСА ес т 39 І865 1858 Н
СсСсСсстОоє
175 Екзоні бБАССТОСТСАСА ті 1575 ні | утесстте т 1875 1894 | із 178 Екзоні САССТАВАЄСТО 35Х 155
Гюоні Сас і ІТ і
З САССтТОЄТ 15 18587 іоов 14 юні | САССТАСА 2 ера
Шо бен і СТА 7 і коні | АСТОСАСА що 169 ря
Екзоні СТСАСТОТОСАА 21 155 Її
ССТОААЛС зі 105 1024 | іт
Екзон і ооосствв ! і коні о Й й Ной " сААостає - 1573 р а8592
СлнЕ ро роми «32623 336 | 353 Евзонів | УОТОСТСАСА 28 зонів | ССТОСАСА що в.д. ндо
ЗВ БУВ Екзон 2 оССсосСлоалоло 22 іо он | слосАтос 22 2189 зх зі 405 | Бкзен? | СТАССОССТОСА 37 216 З
ЗХ 12 Екзоні- ТІОАТСТОТАСОЄ 3гї 1 коні | сстосАЄ за зм 2220 в й Екон й АОС м п
ААпОДОСС Щі о песо ши ч43 | Бкздні | СССТСТТОВАВА що щи моні | МЕТСООАА Щі ми Мк
Екзон 2 вотовестют й 3347 -
ОПпАСААО й мо па 515 «ха | Бизанз | ТССАСТОССТОЮ зк 454 воно | состостто Що ні МВ 464 41 | вен | АСОЗОТАСААОС «5 кон | сАпААОСА 43 2372 2291. 29 409 | Бкздно | СУТОТСТОСАСА «4 пл їй 7 бкюн 7 АСОСС й 7. я сАССЄСОТ т Зпоню
Дощ отнк евекиерчетртетияня крим «37614 «вд «79 | відонв ТТОСТСТОСАЄТО й зенів | тосстте 7 яд вдо 03 во 0 Бкудні | АІТСОССОТТСТ ся Дищо юн й САС їй шій
САСАСССО 34 2814 3553 | 34 щро| рюзоня | САСТСАСАТТОТА й що 3 СТАпОСА що ка ро вх ват | Бюкзоні | ІСТСАТСАСТСАЄ ц та «12640 сп сло 0 | АОТОСАААсАО. «32 550 Фо | Екзоні | АОТОбАЛАСАСА 34 ОВ 2577 38
ІСТСАТСА й -оУ ТВОЯ
«33641 656 475 | Екюна | САТАБСЛОТОВА 13 звБа | с853 | 39
ААСАСАТС
«32542 | вв ЩІ 0 Бкзонз | ПАССОІСАТАОС 45 зято | зво | 4о
АСТОСААА
«12544 | єб8 авт | Бкзоня | ЗАЯТОТААСОСТ зв зятео | свех | яі
САТАССАЙ
«ззв | ета «93 | Бкзоні | СССОБАОАСТОТ 53 зва | зві | 82
ААСГОТСА. «зва | вко щоб 0 Бкзні | САЗАВССССОбА 27 зя85 | зво | з
САСІСТАА
532645 | вв ох | Бкзоні | ЗАТТОЄСАВАОЄС 20 зяея | 2913 | 44
ССС АСЗА
«33647 в ті | вкзонз | ОТОСОАТТОВ 25 зюо | зе | 45
САСАСССС
531634 0О6О8О0) 717) Екон | СТТОбСАООТОС з4 2905 | 2925 | 46
САТТООСА
НЕ зх пит зззбаа 00тая | 723 | Бкзоня | САТТСАСТТОЮСХ 25 зе12 | 2931 | 47
СОТ А о | І ОСТатсастотстосе Що ОО хз 729 745 есте В ПИ ча 2537 ЗМ 48
САСТССА ява |в) зв ще Й ОСТТСАСАВАТСОСТ | до й кзза5і 735 754 | Екзоні | Г1САСЛИАИ 44 2943 | 2962 | чо
Й стСстОосСс 5326523... 781 тво | Екзону | ССбІТОТСАСАЄ 27 зо49 | 2968 | 50
АВТСОСТСТ
«ік тат тво ЦеТиК | сесостосаттот з ще 1 ц или Т-: а мкзоніВ тАЄАЦпАТ й Нд, Но. ьо 3-3
СтнЕ пра єзлкя | яка тв, | САОТАССОСОСТ із ще я є
МАМИНЕ 12 їж рЖЗонІВ сесттІсте «і под, м сш 3-4 каУвкя пк -т в: | ТТОСАССАСТАС 8 щі зей ик гі БЕЗОоБІВ ря я н-к - с Нд. н.д. пд кто сеСсОостсе щі : 3-4
Кл 532636 7ко яо5 | Екзона | ЛОСТІТССТТОТОС 40 3152 зіт7р | 54
ААРОН зва? 0079500| 814 0 Бкзона | СІОЄССАССТТОЄ Зі зі580 | 377 | 55 ттотОасе
ПОД що щи СОСТОТСТТСАлО 7 щи щі й ха ів жі? Екзіон 4 пеестАЄ 13 ІК ЗО хв сатовлсає 7 - 7 СССССООСТОСА | 0О7-ог,-пшттп хззвво | ВИ 8БО | Екзоні пиві 17 зз4 | 3ах3 | 58 й Й отоостаас 5336ЩІ 000 я? аб 0 Бкіна | СОТААССИСОССО 25 310 | 3229 | хо
СТ ОСАЄТ
5-2 щ 4 АСОСАПСОТААО | и 2-21
ЗІБ 53 5 Екзон і руна 15 1316 3235 5 сесесвас «ззв63 | що ятя | Екзоні | ЗАОССАСОСАЄ 33 зз23 | з4р| ві сстаАОСС «32584 я 85 | Екзона | ЗССОСТООСЛОС ід 3229 | 3248 є
САСОСАСИХ
«з2вб5 | Ві 910 | Екзон4 | СЛАСАСССАССТ 17 зл254 | 3273 | є тостодса 7о- - ї ССОСТССААНАС щи пи пи що хВІдод 57 515 Екзоніа Щ рин їх за КУ аа й Й ССАССтТ 7 сотТессостее І ЩІ 035 532687 903 222 | Екзона | ГОСЯТССОСОСТОС за з2а6 03285 65
ААПАОСС
«32668 509 928 | Бкзоні | НАЛАСОСТОСОТС 14 32723291 85 сСОостсА 532660 915 аз4 | Екюна | ЗОСАОСЛАСОС 18 КЕ 3207 | 57 пива а
Стико | пи «3147 221 ог | в сонів БАСТСТТОССАЄ за вл нд щ плшИ шшх ВК ржзонів пААЗОоСтТе ах Вло Вал. ща 4-5 тик де р це галі щщ | ЦК) АТОДАСОАСТСТ с. Й хаті 527 ав БЕвзовів | 35.25 14 н.д. н.д. щ- пБИНАССА 4-5 532672 ка 975 | Екзан 5 СсттОоввОСАСО то 44 з239 Зак 7
ГІСА
332573 2 ЖІ | Бкзону | НБАЛАЄСТІСВО 37 3545 з5а ті
ССАСССТ
Ще Ще ААДОАСАСОАААО | - с 533474 ЗКВ ок Екзон 5 проф 28 зі Зк 74 оз) зво | 987 Бк СІК 532675 ета о | Екзон 5 ТСАБООЛАВАСА 15 3557 3575 73 спАдАОаСт 533576 Фе 1015 | Екзон 5 ТСБАСТОСТІСТА зі 3575 зе | 74
БАС
Стик пдпуряти ; длктя яз тдкя | в | СТІСТОТТОТТеС дк й - 532577 1035 1552 Екзонів т зеутрт ут деку 35 нол. н.д. ТХ «Кк Кана о а 533678 тов НЕТ | Бкзонб | 1САТОВАСССТ 19 3752 зттр | 76 пАдОосоТо тля ; Диди у | ТАЛОАТОТІСАТа | зн 5326то Ота по пені | ПО 24 ЗЕ 3777
ЗАСТ А НЕСЕ
ДОЩ | АССАСОТАСАТО ; Й 5313550 1о8о 1099 | Бкзонб | ПТ ІЗ з7в4 378378 овзею | ово | 00 Екон | Н ГАТОСА Й
ЩІ Й тік «| ТСТАОСАССАЄЮ щи зд ЩІ 532681 Ок ох сон б поши 20 з77та 3753 | то
ТАСАТОТІ вот м в «32653 | юз | 11 | Бкюнб | ЗАТССАТСТАЄС 33 3716 | 3795 | 89
АССАсОТА щи Й СТОТСТОАТССАТ ; ; 532683 ов 117 | Екзонб про ЕІ 3752 зві | я онов ююв І? | Екон, ТАССАС І «33654 | бяж | 3123 | Бкзонб | ССААТОСТОТСТОЯ 29 зтяв 0 двет ово
АТСАТС сало щи тво | ТТЕТООСТОСТОТО Й ДИ пи рр 1145 Екзоніб дасттоє 40 3513 3537 3
Таблння 2
Інгібування МРНК СЕВ МОБ-тенмерами 5-10-5, націленимн на ЗХЕО ПО МОСС 112
Стоп ме
С
МІЯ | нка 5 послі- | Послідовність інтібу- пло Ши З га ПЗ | довність вання знаю ІВ МО:
Мокі - пи Ми ЩО: ЩО
Мои -
Я 2 поляни | | | АСАСТТІТТООСТ ; Що щи 532686 іІ34 1154 | Бкзані | й ве зві з838 | 84 озие| авеопха | Вюсяє | ССТОТОА ЕЕ 33687 та 150 | Екзонб | ЧАСТАСАСАЄТТТ тт 38525 3844 | 85 пика ЯК яззб8Ю | 31550) 1172 | Бкзонб5 | КІСААТЕЛАЄТТО ві зя37 | зда | 87
АСТАСАС
Стих | САССТІСТОААТТ
АХ ї НИ 5 пе знів ААСТТЄА Я
Стик урннувая нк
АХ АК І. р 5329 ТІБ5Х ІМЯ | Екзонів АсттвсСАСС с 5 н.я. н.д. КО а ТСААТТА 0-7
Стик | АссАТААСТТОСС "| бююонів зссттст А Й 8-7 212 Щі СТТСАСАССАТАА Щи Й 532605 тт | 3196 | Бкзмн? ІІ «й яі53 чі72 ві озмех | ат | пе Екон | Стаса й З и 532694 | 185 1303 | Бкзонт | СТТОЄСТТСАСА 55 зі59 | діт | 92
ССАТААС
1. | АТОТООСАТАТОТ | ; Щи й 5326505 раВ о | і227 0 Бюкднт | 19 «5 зі8а «203 | 93 ояоє5 | ав 1227 конт | САСТАСА й пи пи ШИ САСПАСАСТТТСАС й 532696 235 1254 | Бкзон7 55 Я21 3230 | о
ССАААТІ 5 ро зрю в стик я до гід ! | | ПОТСТТСАТААТІ Й й даЗБит 1295 1517 | Екзовін сок де 53 н.д. н.п. п ти | САТТТСА (стик пери ре плгас Ош шя | АСТТаТООТСТТС Й й зло4 НА конів АТААТтІСЮ 53 н.д. н.д ок
Стик снрерут а гру. дане їмо 1529 | Екзонів АСТТСААСТ їтото 12 н.д. н.д. а7 п в СРСТІСА тіло 21. але | щ ТСССТОСАСТІСАА До Й Й х3ит0О 15і16 1335 | Екон 5 прищиків 53 зао05 за о озоме| 115 019350 тююве | сттотоо й п ТОТТАСТСССТОА | І Щ 532701 і122 | 1341 | Бкаоня | ЕЛ «2 4515 45314 | 99 ям | ав: | ів | Бконв | СТАЄ пИДИщИ 0135 | ТСТТОДТОТТАЄТ Щ Що ши ши
ХХ 1525 1347 БЕкзюнй | 7. ди Й і ча 4540 Не
СТАЄ
532703 1340 13685 Бкюна о ОЗТАСАСТОССТО «і що ав | 10;
АНОНС пИдИ Ще і ТСАТОСТОТАСАС | Щи Щ Й 532704 і335 | 1374 | Бкзонд ПОЕТ щі зва чт | 02 озит| ав 3740 Екоону | тасстад 532705 | 3303 | МИЗ | Нюзюоня | ЗРІССАСОСТСА хо ЯбЕБ | 4то5 | 103
САС А. саляня щи Й - "ГастососттсА Що 1 п. Й за2тО0й їл99 1415 | Екон | с ел ВО 46552 УМ ЧН НЕ
ОСС Аю «3а70т | 05 01424 | кн МТ ЧОСОобОоТОсСе 50 звоя | я7і7 0 5
ОТІССАЮС
ПАТСАРАТОНОВ - - 532708 НЕ 1430) Екон | ЗАТОАСАТОСОЮ 39 4704 «т23 | к р: ВЕ «3кт0о Тіто | 1436) Бкюнк | ЗАЗ6АТЧАТОЛО 8 за з729 | 107
АТС
СТИК СССАТОТТОТОСА
532710 і443 | 1452 Екон | нн ак н.д. яд. 0 О8 й 000) АТССАТС " 7 8-9 лиття кти «заті | овяе 01465 Бкюве | ССССБОССАТОТ 48 5023 | «паз | 109
ІК АА гіяятя ге 4 АтТІООсОТССССОЄ й гдло дон
ЗВЕТІЗ 1455 1474) Бвкзон ірон 48 БОдО ке Не ота | вх | я | ково | ССАТОТІ й с3-щ і 51 АСАСТААТТОЮ й до 2-2 35713 14 1450 | Екзов а щой й Я хОохХ 5054 а й й ДИ ОТ ТСААТОАСАОТА й щ 532714 1457 | 1456 | Бкюзано иалх 37 5041 ха ІЗ оноляє | ант | нео | Вюохо Ааттавтге 533713 0001473 | ідо? | Бкзона | ВТСТСАТСЛАТОА 47 хат | хаб | 13
САСІДАТ
5132715 і4то | 1495 | Бюзно | ГСССОСАТСТСАТ 36 хох3 хата ня
СААТИАС пет | ваз | зх) в АСАТССАСАТАА че . яя на нин тя рони в тестоест ва А. що
ШО щ о. СТНКЕО | дсАтТАПАСАТОС й . 5271 15595 із55 Екзханів. дух - їй н.д. н.а. 11Е и АБАТААТС --10 (тик й й 44 дин ШИ : САААСАСАТАЗ ї 4 532715 1545 15 | Екзонів де АЛСАСАТАЄ 48 н.п. н.д. ТІ? пе АСАТССАС 5.10 532720 5жа | вої | бкюно | ЛОСАТЕСАТОТТС 45 523 5259 | ІВ їй АсСТТСНІ 11. 0220-11 Екон | АЙССАААОССАТТ - дидя 00- Що 532721 іха5 1547 с. н й тен є зх 5І37 БІО НБУ ів САТЄСТІСА х32722 | і5б4 | віз жено СТТОБЛАВССЛА 45 хз43 05262 | 20
АССАТТОА
532713 | 1600 | їв» | кон | ОТСТТТСТТОбАХ 45 яма 538 13і 10 ОССАдАСО що ! щи Екзон | СІСАТТОРСТРІС щи й зпМморон ох дедав 34 зі5я 005214 | 123 2 Що Щи Екон | АТОТТИСТСАТТО ши пи ши «33724 512 | 1531 і 44 яза ков 23
ТСТІСТ
531725 1518 | ву» | мен | ОЛАСАСАТОТТО 34 5367 зва | 24 10 СТСАТІСТ що АСТТТОААСАЄ 532727 | 1624 | і543 | Єкюн | САСІТТОЛАСАЄ 43 5273) 5292 | 135 18 АтоттТаст 532733 1630 | їблв | Бкюн | АТССТІСАСТІТО 43 д3то «398 | 126 18 ААСАСАТ 532729) 16535 | ібх5 кон | ЕТССАТАТОСТТО 43 5255 | яз04 | 27 10 АСТТТСА 10 ТСОСТТЗА ящик ді г 532731 1586 | тої) Бен | СТСАБААЄТОЮ 42 5817 «ва р2о ії СТКТСАТС «32732 | 18503 |ілі; бкюн | САВАСАСТСАвА 42 «813 5вх2 о и пАСТООСТ 515252 | 695 | ті бно | атСследвАСА 31 530 | 5855) 13 ії СТСАСАСА «327133 | нм | ї723 Бон | САЛАССАТОССА 4 «545 | явбя | 132 ії ис АсСАСТ ту ІУТТСССАААССА, й щи 533734 70 | ато | бен | ТОТТОССАЛАССА зі І «вто | 33
Ії МИ КАСА 5327135 1734 | 753 Бон | ТТОТОЄТЛАТОВО зі 5дтя «во4 | 134
Іі ТАСССТт
Додли й що Екзон | СОТТОСТІСТОСТ Й дО п що 532735 1740 іт що с ча БК БЮ 135 они | ме зню бор ААТСОСТ й 532717 яв фар ддестА 30 5887 хво 136 1 ТОТОСТА
Кк тик АТО й - що - 532738 таз | тт | БЕН о | ПІОСССТОССАТО 43 х8о3 5912) 137
НІ атастт
«зн ЗАСсАТСТТС 532739 1758 | 1777 бен | ВАбАТСТТОвОСТ 35 5вве хе | 138
НИ ОССАТОС
- пути 533740 іша3 0 рда? бен | АСАОЄСССОСАТА 38 ЩО БНО 12 СсАасостете тим дити ди 532741 809 | ївдя | бкюн о | ВАСЛССАСАОСЮ ЗЕ БОВЕ 507 1
І: СССАТАСА . . Й Екзан ТтТАСТСТАпАСАЄЄ що й шк 532742 І815 | 18348 о ГлАТАХ ЗВ кн із | 4 озмтаз | ах фавм о АСАСЮСЮЄ й і
С АСА діт: - ще 532743 1821 удо бен | АЛСЛЛАВТАСТСХ г 5100 віз | 142
І: САСАССАС 2 та» 10551 Екон | ОТСАССАСАААС це ШИ пори ши «32744 827 | 1846 А 37 «106 щі25 143 озмма| ам фл БЖ ТАСТСАСА Й й і й 533745 іщ72 іде; бен | ТІЧАТТОАЛОТОТТ 38 51 570144 12 осттото 32746 | зят5 | їдот о Бкюоно | СТЗАЄСТІСАТІТО за ві5700| вів | 145 12 дататте піп що 01151 кан | ТАТСТССАООТСС | я Що щи 532747 вою | 1928 АЛ 35 кдОЗ 5322 | ї46 ями | ве |в) Бук СсастІст й
ПД 320031. Екзон | ЗААТТССТОСТТС щ щи 0201 532745 1073 | іаох | Боно | АТІСЛОСААТІСС 32 кт аа | 148 13 тОоСстІСТ 532750 10790) роюд | клон | САТАЛАЛАТТСЛО 32 ТІ 5492 | 149 13 СААТТОСТ 532731 | зов сода Боно | САТАОТСАТАЛА зі з4790 | 5408 150 із АТТСАОаА 512752 споє пря | Бкон о | ТОЛОСТІВАТСАЮ 30 5500 «ар | 15 13 СИСААСа сіл 21301351. Бкзан | ТАТТСТІТСАЄСТЕ Щ Дощ дим Ши
Стик ад А яти 533754 Я 0? | Екюів | С САЛАТОСОСС 30 н.д. нд | 153 ме | ТОАТАСТО 532755 | 070 | зодо | бен | БТТОЕТООСТОСВ 25 5ащю | ватя | 154 14 тсАоапо 532754 | 076 0 мюх бен | ОСТОЗАСТТОЯТТС зв ба | «БА | 155 14 остов 533757 2052 лраро Боно | СТСАЛАОСТОСА 18 571 абсо | 155 14 СІТІ 532758 | ОБ о сіот | бен | ОБЛАЄССТСЛАА 28 звтт | 55157 14 сстосаст 531159 | зея | міз | бек |ОГТОбЛОВАЛОС 23 Божі | 8702 | 158 14 СТСАЛАСОСС 532750 | пов пів | Боно | ВТООТАОІТОСА 3 бавю 0 втов | 159 14 ссаласст «33161 |) зб 002124 | Бюен | ТОбСЛЛОатостА ІВ хвоя | я во 14 сттосАсо 533753 2і2 | зіз1 о бжюно | ТЕТТОСТОССЛА 14 ет в730 18 14 тостаст
Таблиця З
Інгібування МРНК СТВ МОБ -тепмерами 5-10-5, націленими на ЗО ОО МОСТІ зт ЯЄтово| Цільова й й З в Сайт Стапо| 5БО
Ме15Іх . Сайт нт Цільова Посліловність Шо ов ій о 5ЕО івниаНИ -2вцт пост- інтнзу- ініиціаНИ -с8нт р
ЗБ ЗЕО | довність вання зБО 5вО МО:
Мо: ни Ук Нв
МС в
Н 2 сла ТССАССТСАСТО Й Й с. . 33812 -д. що | Екзані 77122255 З 1553 1812 | 183 їй й Ех Шо сОоСсттів і й 538213 вл. вод. Екзоні ТААВСАТОСАЄЄ БУ Ба 15ІХ 1553
ТАТ СС
ЩО САВАААТААССА ЩІ Щ Щи й
БЗО2КІА в.д. н.. Екзшні | У дз 35 1655 1їща 183 і : Й ТОСАОоСТ Й 533515 вд. в.д. Ек:зові ГУ т, й ФІ 15305 155 х ш ТААСОСАТС з сп ССАСТРТАЄОЛАЄ . що й 5ІКІв н.д. н.д. Еюкзоні пох ще т 16817 1536 іп оз | ва | ля | коні | САБААА А. й й й 532ЖІ7 нд. няо | Екзані | ЕСАОСАСІСТО зо ІБ82 1701 | 157
СОСтТІсАС спи ААОСТСССАСССТ й Щи й
БОКІВ н.д. н. ЕБЕкзані | 0042 15 ітат 173 і5К ові | ва | ня | Екон | ТЕО «зва ня нло | Екзоні СТОСАСААОСТОС зв 4 1713 | зво п що Шо ПО САСССТЕК т р для САВАААСТОСАС й ї- ле ще 832820 н.я. н. Екзоні прі й 1719 1735 17) ою | ва | ня | Екон | ААСТНОСА | Й
Екзон 2 я чт три я «332 вл. вдо | інтен | УСТ СТОСАСТ за зб | 2387 | іт : я стоассттс
Екзон: ОССТСАААЄСТС 532822 нд ндо | сінюн | СОС САЛАССТО з 2374 | 23035| 17 й; ТОСАЄСТСТ
Еєшюові ТОАТТОСССТСА 532823 н.д. нло | іншен | А РІВСССТО 19 Зако 23909 | 173 " й п ААЄССТО кали 4 | ССАСАСТСАТТО 4 дак дане й 30524 н.я. н.д. інтроні й УТ 350 І305 174
Щ СССТСААА сла | 1 САСТОСССАСАС пи
ВІКІ н.д. вл. Інтроні | прий 23 ВІ ЗАїї 175 і : ч ТСАТТОСС о ГРТАСаССАСТОС Й Ї «3382е д. н.з. нтдож 3 | 70 2 21398 2417 | 175
С САС АС т ! й сл | - СТАСТОСТаАСС дал ЩІ 532527 в.д. н.. ІнТроноЯ |у рія Т5 455 зах 177 і : ч ттостОосе й галити СТСАТССТАЄСТО , ЩИ й
ЗЕ нд. в.1. Інтван й | б. зт Ме іа 2гаці1 175
І щ Ко СТадсстт й плач . 4 ЄСТАСТСТСАТС Щі Й діях - 532825 н.д. н.яа. ін-рон і Щ пи 23 аа ша 179
О5Вю | вл | на ішрояї СТАСТОСТ - АСССТаССТАСТ ЩІ ; 53135 нд. н.л. Інтранії | сн що іа Ат 1хо ою | пл й й СТСАТССТ п 5 СтОТСАСОсСтТО й Щи Й 33и3 нд. відо | Інтрон б | 7.5 о 34 2450 2479 | 183 озе| вхо | ва |Інрент сота «33832 н.д. нал. | Інтрон2 зсессАссттОте 36 з заях | 152
АОС гіялах 4 ССТААААСТОСТ - | дві Й озпеао| вхо | ва. | Ілтрон? | ССТАЄСТСС ява |зн у) в
Щи ЗАШТСАСАААТИ ЩІ Щ 32834 н.д. но | Інтроні нік 19 3394 зх15 | 184 н АСОТСААА 532535 вл. вдо | Брно | СССТАЄТОССАТІ Ів котлі «во | 195 : Не ТСАСЄСТТ «ЗТЖ3Б | ондо | ня. | нтронї ТОТТОТОСААТС 25 з013 | 5032 186 -екшзманЯ | СТА СА А
«32537 нт до | інтооні | АААСОСТОАТОА Ів уз з133 | 187 йде: «Ж В.Д. нт десстаце х шій роде й і; п - | ЄСТТТОАССАСА - й 532545 в.д. н.д. Інтрен 7 аАстієЄ яЕ: з зако 155 мо ії: ТРІО шко нтроні | ОЗ НОТ САСАЄС й 4 гуд я 532530 н.д. нл. | троні | ТОСТОСТСАСА 34 3143 2і62 | 150 -севзон З | СТА АСАС
СтвЕ прочан - гілка зкза зл й СгАсОСАСсСАЄКО ка за 235703 2135 2152 |) БЕкзонів теттССстт 40 н.я. в.д. 18 :4-і « ль кА щи ттзататрето їп ло
Кан. АКА ЕБАТ тост тОос мамкт
Ід начинка 532768 | 63 | зво | кою | ТСАСАСАСАЛАС НІ вах | 6070 196 і 15 АСАОСТІТ й я ; де двия чай сво ТСТСТТАвБАЄ щ плит сдя зд її пдв АСАх із | зро | 31» 0 Бююно | АОСТОСТІСОВА де сові пи и шо т рятя 15 СТСАОСТТ й Шо р з ппеттаттатятяя 15 тІсСоАа щи ТІСТТСАТОИТАС Й тат 15 АКСТОСІТ «ла 321; 3336 Екзон ССССАТТСТІвА зі кова тек за 532775 21: | 223 й тстАСАЄ 3 оо ві | 20 бик реле пра кілят, заїя00 заяв | ТТСТТАТССССАТ ще | щк вата 317 й Екзовів теттаАт 38 н.д. н.д. ад яра
Ствк етери «32775 | 3224) 2343) юю | СТОССТІТСТТАТ « ще нд! му пе | ССОСАТТ
СтвЕ ред д рекття «32778 | зк | 2248) вуоня ТОАСАОСТОССТ 3 ще вдо | 204 252775 ро. шотьв ЖОВ | детуєр ту за Нд. надо нкд іх. їК ТІСТТАТС р три ГАЙ єзІт7тт | 2235 | заха | кн | ТСТСТСТСАСАЄ зв тив о) т7із5 | 205 15 стасстІтТ «Урі: т-во т У, язаттв о 2241 | 2здо | Яков о | ОАОСАТСТСТО 51 тізя | тая | зов 16 ТСАСАОСТ 15 тТСтТСтете ке трат сут хЗітВО | 22670 | зів | он | ПАСТИ ТО ТСАТ 56 ті5ро | 7іто 203 й іо | лосстове й шк ! «зт зт 3292 Екзон ТОТССТІСАСТТІ ї тіл тлю| здо
ШИ ши ши 16 СТСАТАО Що о р з ех ле з3ат82 | 2309) зз3ля | Бкюв | САСТАСАЛАОСА за 7193 тата | 216
І6 АссбАоса ззатяа 02315 | 2334 | жено | СТОСТОСЛОТАЄ Ки тю | тя ів АдАСЮШАДАЄ се СТАС взатва | 2321 | зздю | Мююн | ВЛСТСАСТОСТО зі 7205) 7мя | 2 16 СсСАСТАСАА.
ще Аа цИи я «зат85 | 2327 | 3345 Бююн | САТАБОСАСТОА за ті 7230 | 212 16 СТОСТОСА зв ПТ АССАТАЄН 532786 2331 | ззха | Бююн | БИТСЛОСАТАЄЮ зі тазі? 7236) 214 16 ОАСТСАСТ
Стик с с нпрртьтрчиня
ТАССТС ще й дядя - ча яз2тв7 0 з352 | 237) рююнів | СА СТСТОСЛА 42 7236 7255 | 15 пд СТАТТІ 15-17
Стик стае ред чат сздяво | дяк злня КО | ССАСААТСАССТ А що 5Іа7Тих 358 2377 Екзоків пором 32 в.п. н.п. 3165 ск лют СТА АСТ 15421:
Стнк тет скит єззтда | з354 | 2383 | вровя / СОбОСОССАСАА це ще я 4 пошу рльть Од скзонів ярих дор - рев як. «Ду її " пани ТСАССТСТ -т- що 12-17 «317од 2387 за Екзон «СІСТИ АСТ 13 7347 тек 2І8 пл тя | і? АТСААСОС шк й и нн й тенет «32т9і озжя | зад | кн | СБАСТІСТСТТОТ «2 1353 7372 | мі ї7 ОААСТАТ
РЕА, х Ко» Го. он Е че т «32702 з3о4 | зщіз | Рююн | АТОААЛССАСТІ і6 7359 тата мо 17 СІСТЕОов
Стик -
ДИМ що дз ОО) АСТТОААТОАЯА ще й 5322793) зщню | ЗНО 0 Бкзюнв | СТ ЕОААТВАМ 45 7355 таща | 221 ков 0 СпАСТТСТ іїт-18
Стик скит поет кізто зав з43х | воошв | АСАССААСТТОА й . во їм аш МА ЗІ р кзовін ври вчену їх Н.А. «В й тріо 0 АТОЛААСО " А й сп. РБтескетАстосе - «узтах | сх | заяв бюено | ТОСАСТАЄТОСЄ за таб2 т: 223 «377оК 2413 3451 Екзон САВАСАТС САЄСТ зв тебе тет аа пли -к -Тя 18 АСТОСССА й й грон дззтот заза 2458 Екзон ТІТТІТОССКАСАГА 15 тет звої злк пат я р яя 18 ТОСАСТАЄ що й па рота - ст 532798 з345 | заява | бкзон | ТТСТООТТТТТОС 45 760 тафо | 2265 15 АСАСАТС я«затав | з45р о | лято бкюн о) ТОССОСТТСТОС 47 786 7705 227 12 ТТЕТТОСА т пен тре язівоа | озаято | затв | бкюн о ТОСТІРІСНООЮТ Ід тва | тт | 228
ІВ тСстОастт еще т Ат яр «32801 | 2463 | зва | Єкюн | ОСТАССТОСТИТТ 47 тбо8 | 777 | 229 18 ОоссОстт «31502 ) 2459 | мах | Моно 0 плоСпОСТАЄЄ зі 7704 | 7723 | 230
ІВ теастттта пен ут «32593 | ся? | зяб Боно | ТЕСЛЯССАОВаС 41 тат | 33 18 АОСАСТІС «31804 |) 2523 | 2841 Бон | ТІСТССТІСЛОСО 34 7758 ттт7 | 233
ІЖ дососад сег ТОАСТЕТСТССТ «32503 І539 548 Бкасн ТОСбАСІТІСТОСТ 44 тт 7783 233
Не ТСАСССА «32805 | 3535 | за54 | бкюн | ПОАТСТТОСАСІ 46 ттта тло | 23 птах й 8 18 тІСТОСТтТ : Ї й що хІ25От 25410 | зхво обся | АЛАТССТСАТСТІ за тттв ттоя | 235 іх ТОСАСТІТ та хз зи а вй я «31808 | 2х47 | защу | Екон | АЛАСОСЛААТСС 20 тт82 тяоі 236
ІВ ТСАТСТТИ
532воа | з57р | схо | бен | ВТИСЛослОвАА 55 тоб 09340237 18 АСОССТТА «31810 | зжт7 | зов | Єкюв | ОССССТОТИСАЄ 74 тві2 | 7831) 238 я Що У 15 ГАССАААС і тв Аеце Ат коди дАТССХ
Тзболиця З
Інгійбування МРЕНК СЕВ МОБ -тенмерами 5-10-5, націленнми на БО З МОСС 113
Стоп сш - сайт сайт бант Стовп- пря ро Цільова інниані сайт зо БО зл тек ІніІшаЦИ аг - : Я НИ се сор НИ и хі й тт поглі- Послідовність І5вО ЗЕ ІнНгЕу- НН
ЗВО р й | 7 ще
ТА. й донвість ТМ | у Ме: вання МО
Мої Мк А А голо Інтроно ААСТТОССАСЄСТО ШИ ЩІ й 1. зага нд. н.я. ТР М ріод тех 4145 ЗР Не Ай -егкзан 7 | ОНА,
Екон іх- ВОСТТАТОСЄ «32843 | ня. | нд. |. толесттаторює тю тож 15 281 інтроно | АТІСТІЄ 532843 нд. нд. | прово ТСААСТІТСАСАА 1 оо5ор5 | воза 19 242
НИ АССАССА.
Іінтран рони пед «47544 нд я То ХНН АСААТСАЄ ліля 7345 33 243 252544 1.д. нд. 5- пови щі НА за 35 р тА | СтОоСАдО й екзанії т ЗЕ спАТтАД «32845 н.ч. нядо | гпреяо | АООДОСЛАТОАА 43 5459 ІЗ ма
НЯ СсААсїЇ х32к4о н.д. н.д. нтірок о й ТРОС тСлов БАБІ БлЕЙ 26 245 13 САТСТОСЄ сли АААТОТСТООСАЄ я лк Й що 532547 н.д. нд. | Інтран3 | АТОТСТОСОЛЯ | 3577 | 3396 їх 245
ТАС
ТОЮ У СТАСАСТО
5ЗІБАВ ня. | нло | Мпрон |ОССТАСАСТОССТ | рол 2а 247 15 ССТТАСОо т рих хг. ек 552840 | нд нд. Рон |СОСАТЄТОСОСАЄ | з | ти 16 зів і7 АТАССАА
АОССАОСТАЄНЄ - 323 н.я. н.д. інтрон й лодвсдОс ТАС НВ ах 13 435
ТОсСсААСА
З32ЕБІ | ондо | ндо | ТРОНІ АСАССТВАЗОАС 31350 2154 я хо й -екзоні | АДАСЮЄТТИ 532852 н.д. нд. | Інтрон?7 сОсСтвАССАСА 4482 4381 25 І51
ААСсТОС
ГОСТСААОСТАЄ Й Й й г. 325 н.д. н.д. інтрон7 везе длостАв чХ54 4373 го м
ІСТСАТО
532854 | нд | нд. Інтрон5 | ЗАСОВААОСАСО | зо77 | 3095 ІВ 153
АСАСААТА зе А ЕН 533855 нд. | нл іІнпоні | МАСОССЛАВОА зо В а за
СОСНА ТОСІ кон то ие кізккя й Й о | АОАВОТОССТІСТ пом Я , що
ПАЙ я ідо Ід. -інтров зх корч дитя а ап З -
А що тр САССАТС 5372857 н.д. нд. Інтранї | ОСТОООЛСОЛОСА «то | «та о 258
САС
532858 н.п. нядо | Інтрона | СААЛАТОТСТОВО 3479 3498 13 257
АСТОТСА
532859 | нд | нд, | ток дЛОЗлОбАСААТО | 50 | 5820 29 258 їв ТОСТПАВА
«з2550 нд, нд. | прово | ТОСТОЛССАЄТТО | сво | 7937 зо 259 ії АТС
Інтр СААСТТТСАСАА ще І - І «зві вл. н.д. ен о | СААСТІТСАСЛАХ 50і4 5013 18 зво ії ТКАССАТ 532552 нд яд. | Мпрово | ЛОСТОТОТОАТІЄ х4от х515 іх зві : ФО ТААОСТІ «32563 вл. яд. | ПРОНб ССАССТОТОСОТО о3рзк | 35 15 353 -екзон 7 | АСОЛАСАА
Екзпн «328634 | нд. яд. | 0ї7- | ЗАбОАСТСАСТТО | 5 то зі 253 інтронї | ААТТААА
І? тіні Ат я а 532855 ня. 0 нло | Інпронб | СБААТЗАТСАВО 35500 3035 30 ми сдостла
ШИ ОТСССТІСТССАТ Що І ! Що 532565 нд. нд. | Інтрон 5 поки зва | затв 16 265 30585 н.Йй н.д інтрон тттессЄ ЖЕ: 5 о
ТТААТСА й ПОСТОАОВАСАА | ш ' 53558 в.д. н.д. інтронб | 7 пр 4125 МА хі зт й ТВ | СААООСОоЄ ех в я КК Е «ЗІ5б0 | ондо 0 ня. інфент | СЛЛЕЄААЄОСАТС | 3 | то 5 за а ТІТТААС
Евзан 32570 чл. нд | 017- |ЛОСАСТСАСТІВА | 233 то ІВ 259
Щ іштрон | АТСАЛАЄС
І? 5327 нд. ндо фон ТІССАСОСААСТА 831300 583 Ії 270 в МО ОАОоСттТо пок ОТОСАСАСТССАОСС поли и щ що 532872 н.д. яд | Екзоні | САбАЄТОСЛО яхт | 576 ІЗ зт
АСТОТТТО
«32873 ня. ня. р ЯСААССТОСАСА тез8 | 7687 23 У
А | БНАУ екзоОні 532574 нд. нло прово | ТОСЛАСОЛОЛОС 7312 | тазі о 273 їв | дпадосто
Екзан У панам : галннх КОН СТАДОСАЯОТТАЄ 00013034 ц с 533575 в.д. н.д. ТІНТВОНО| ее 5120 5139 21 274 2 ТСАСОСА ли Ініроні | САССАТААСТТОС щи щи с 3576 в.чх. н.д. рон САССАТА М пас 31345 3157 31 Вт -гкзОоно | ГАСУ 532577 | нд | нд, | пров ТАЄСТАССАЄСТС | 353 | єв 17 276 із | тттотос - стен 532878 ня. яд. | Мпрен | СТРЧАССТСАССТ 5954 5073 13 її | сесосАА «32570 | нд, нд. | бюв |ССАССТСТЕТОТО | 6357 | зт 23 275 12 0 вОСАОСТ
Н ТІАСАААТСАСС ще тк щ - 532850 ня. ндо | З2роно | ПТСАСЛАЛССАСС ре | возв 5 УТ
ТО АТСТСТТ
БкзЗОнЯ | уруоднч в гурчречучучню п і ТІСТСАССТССОТ под НИ 4 щи зві в.л. н.а. -інтІрон пищинй дОЕ УТ іт їхо з ТаАТСАСА 532582 нд. нд. проб | ВЛДАЛОТОВСЛОЄ 5223 5244 13 зві 12 ТОотТТОСст
АСАССАССААОЄ
532584 ло) нло шроні САССАЄСААОО | зу | 3094 за 282 пААСГТА
Тр: : ТАТИСТОАССАСЄТ 532854 нд. нд. | пров | САТИСТОЛССАЄТ таб | таза 18 253 : і7 ТОССАТС
Екзоні еру в пре пллиок пиши ОССТСАССТТОСА іл п д лах 538585 н.д. вдо | сінтроно| пра десе вики ї30х а ї54 пес вазі тіл»ст т . | заАСТІСССТО є що й й
З 7 вд. н.д. Інтров 7 АгСАСАХ 445 4457 15 56 «ЗЕ щл чт Інтрон | ТСАССТІСАССТО кхахе «077 за тв пи ШІ ШІ ії АсСТССЄ ши шо т що з32Е89 ня. яд, | прово | ТАСАСТООСТОСТ то3х то54 27 ЗБЕ 15 ТАаСАТО
ТСАСТТСААСТТО - й й да
АТС ЕУ
53ЕеЮ | яло | ядо бро САОЛОАВОСАСА | сво | 833 25 290 ів АТОСТОСТО
Інтров -- я сект плат ша АПОСАССАССТТ ящ кла - ла 532552 н.д. вк.д. 14- тестсте а ЗіБ 47 21 зкзоні5 п «32893 ня ня Інтран 5 | ТО ТТССССТТСОССТ їв ї-а за заз виш шк ТОЇ -екзан і | ОССАСНА ШИ шо шо 5323804 ня дл інтрон БОЮССТООСТОТТЕ «віз «631 15 заз в що шо 10 ТПААОСС ши шо Що що
Інтрон - сере деп пТиЕ ЗАСТООСТТТСАТ клі пр ле запи
БЗІКОХ н.д. н.л. 15- СТОССАС кі 540 25 294 й СК Ат «кзанії й
Тігтув: їх ник сеснукучня «33кОв ня ще Інтров ПААСОСТТОСАЄ «415 «438 19 205 ад вд. п. 10 ОСААСТА ші шо су їз люде
Екзон -. САСТТОААТОХА хЗКот н.л. в.п. - Щ сс ТОЛАТОЛА ЕК ТАБ и таб інтрон | АССАЄТІ ії
ССАдОСОСПАЄ дала ві ААТСАССТОСА АС зі нале 5 зда
ЗВУ н.д. н.. 10- САСАССА 7315 тах 15 Ве
Й ЗАСАСНЗА гкзонії ти АР ТТ АТІЕТАНЯ «37300 яд дл інтрон ЗАССТІСАСТТОС ві53 вд з ла т т т 12 АтТОСстТтА ШИ т Щі ШИ
СС
«32007 т шт Інтрон | ТАВАААОТОССА дзот «м й хв ож я. зх ІЗ петиттоеє лк; й І; МЕ «37903 ня ня Інтров | СССАТОССТОАСТ вІох 6314 Ії змо в І шо 12 сист Що шо Й плит : а | ССАТОССТАТАСТ сяк сит ія по 532504 н.п. нд. | Гнтрон В пТТАСАА 519 а525 13 533
ДіїгльшиьтУ птРтЄтеттИАе 7 7о- 7 -
ГТССАСНІ
Ідтозн вежа Шо й 533906 00 ндо | ня | Мпрон БОССТОСТОСТСА | вот | 5616 27 за
Щі 7 13 ССССАсТ тн пАСбеСТООСтТатТ що тк І що 532907 | нд | нд, | Пров | ЗАБОССТООСТОЇ хро коза 32 зоб
ТА дОо дчятс ; ОЇ ЗАСТОСО СТІС тк ще пк зд
ВК н.д. ня. Екзові астАЄСТ 1577 1555 16 57
ТЛІ ЛЬ пд САТОСОТАТАЄ й й тло | нд. | Інтронї тт пас аСТО | 3805 | 4838 ка 308
ІАСААЄ
531919 над. ндо | Мпрон | САЛОВАСАЛАТОТЇ «вп | 5я1о о зао 13 КЛТСАААА 5132911 нд. нд. | Інтюнт | САССТООТСТІС 4562 | 4581 а зів й сАвАснА тло ОСП АСАТАСН -х ща я дах 532912 вл | ндо | МЖРон СТОСССАСАТАЄЮ | 55; щю с з 17 АААСНА
Екзан 532913) ня) ндо 0277 0 ЯСАСТСАСТТОАА | з37р | 73оо й 312
І інтрон ТАС 17
Інтрон продана «13914 в: СЕ СКК САСААТ 17 347 за 313 зашмія нолдкео н.д. 155 . САССТОСА їде Та: я, Зі екзвні7
Екзон салдіх я яд 17- |) СТСАСТТОААТОХА тів плоя ще 14 задУі «Ду н.д. . пере ЕЕ А: Та: шо Ії й 7 іітрон зАССАСТ іт 532915 | вл | вдо | Мпроно | СТІТСССАООСТІ 565 0 6585 28 315 13 ТС 532918 вд ядо бпроно | АвАЛАЄТОВОЛО 822600 6245 З зі5 12 стОоттОосе 532917 | зб04 02623 | Моно | ОСТОВСЛОСТЕТИ 7839 | тВ58 зо 37 15 ТААТТСА
Таблиня 5
Інгібування МЕНК СЕВ МОБ-тенмеряами 5-10-5, націленинми на БО ЮЮ МОСС
Стоп - са ій Сан Стов- сайт -СВНЕ | г вит й ; - інішіянії БО Іпльсва ніпівнії сашт зе БЕО
МІВ т М послі | Послідовність ді про во інтійу- ІВ зо В З совніств Бе пам: ван я М: моР | мо | б МО: кий авт Шан ї 2 с. ссласастетес й Щі щи
ЗО н.д. н.д. Екзовні тя і6Кі НЕ 8 315 д й ССтТтСАЄтТ й
АОС ААСпАСО Й Й 532920 ня. нодо | Інтрон б лослАослос 3978 3905 125 318
АСАСААТАС пд й САЛАТИАССТСА ди Ци т. Щі 53292 нд. д, | Інтрон: дет 3488 3507 39 320 322 н.д н.д. нтрон дАТОТСТЕ 455 й: 532922 вд. яд, | Інтрона | ЗВАОАСТСАСАХ ї4а7 3516 25 321
АТОАОСТС
532823 нл. нло о бпров | ОТАЗААЛОТОСВ 5335 | м 26 322 " 12 доастатто пита атятя 531914 ня. нд. бпроно | ТАСАЛАСАТСТО «51 «540 14 323 таААСсТас 532925 ня | нд. про о | СТОСТОСТСЛСС 5594 ЩбІЗ 26 324 : 13 ссаатост зх СТАСТООСАТТС щ їй - 532925 вд. ядо | Мирон | СТАСТОЮВОЛТС «027. 5046 зо 325 і ТОТОСТТА сто пл Й тнтрені | СССААААОСССА ме моз ЩА те лад нд. н.д. інтплриох прод іх дід 14 -й
Р АОпАпаОпА ! ; АССАСТТОВС і | за 532925 | вд. | яд, | Тон | ОАССАЄТТОВС ЇЇ тщо5 | тод 27 зі? й 17 АКТСТСССС
Іктрон сеть гало Р ССТОСААСОАОА дачу зач щ зе 332929 н.їз. н.д. 15- сюди пі тх14 7318 23 325 0 ОПВАвААОС екщі;
Екзон 5000 ететеаеєтетро «32230 н.б. яд. (45 сптоАсстетос та39 та5Е ща 329 що знтрон | ААСТАТТ ії сіл й ССССААЛАЧОСЕ що ла Д ди
За2931 н.я. н.д. | Інтроні ААйпОАСОЄ ко 2123 ті 330 гія ; - 1 СТТССААОСО щи щу ці де 5329533 н.д. нд. | Інтрон? | зтеттттаА 4555 4574 20 33 олотюх
ТІЛО
532934 | нд нд. | рон я | СОСАТОТТОТОС «віт | 5035 зо 333 -єкзоОн З | ААТСОСТТЄ «372015 ня що інтрон ЗАСТАЄ яд тий ї5 334 пи й шо 15 АТОбАСАА й й Ш Що нір ТОСТСССАССАС що що щ ци
З ТОТСАТС
КОНЯ | прут сут ря «47047 БкзмнЗ 0 АООСАССТТАСТ пеки шин Ще ще 37 т щ-л «інт УК ЗВІД 15 зас
АВ н.п. н.п. Ін ТР ан ГАСССАСА ії З ніх ОСТ САСЄ І Й стеж реко н
З рі
Іншрон Я | СТО ААТСЄС 532940 | я | ня | прянї ОТОСЛАТОСТЄ з00е | 5025 21 339 й -гкзон З | АПА АСТАЄТА й АСАССАСАСАЄ що З і що два н.д. н.д. Інтрон 5 стебсттст 4744 зт з зай «32035 ще 0 Івтрон. | СССААЛАПСАСА іт -т36 що зи бля 7 Пе НЯ ААСОЗАХА ШИ Шо ЩІ ЩЕ место й ААРОЄ І лм я и ще З янЕ ж 532945 | вдо яд. | Мброн | ОССЛЕАОЛАЮС ЇЇ во 0 586 в 384
Ш 10 АПААТОоТО потр итооасестття 532945 ная. ндо /фрожо РІСССАОССТЕМС 0 оовеву | взвв 15 345 й й ІЗ стсалооо
З шишки 532947 | вд нд. бжроно | ОССАСАСААОЮ «Во 025 хо 335
НА яд ів АПААТОТОС ТТ й «12948 ня. щ-т іктрон | АСАОТОССАОСА ді «490 за з47 пи й ШІ Не ААСААСАА ШИ ЩІ ЩІ ЩІ
БЕЗОНО | дея чита гілцац ' ТАСОСАВОТТАЄ ста сід щу дк 532545 н.д. вдо | «витроно| геасесАС 51195 5ІІК 23 345 її МА пн НІ
Й шен ія Інтрон | ССТОСТОСТСАС Що ди Що 2-0
БОБ н.д. н.д. га СССАСТеЄ З5о5 пе14 і: 350 ши й 7 ТОЄССАСТААССТ дя , ци - 23293 н.д. нд. | Інтрон т | тя 3425 за 13 Зі
ССАТІССС
ТТСССТтТОАССЯ І Й ЩІ «32054 нло | нл.о | Інтрон? | ЗСССТРТОАОСА зва | 4483 Ів 352
САААСЦ
САоттАс й ВАК ли тро ТССАСОААСТ пато о ІА ІІСА
537957 ЩІ яд | Їнтрон5 | ОСССАТОТТОТО «018 «37 44 що нин я Як сеююно | СААТОСТИ ши шк й шо гзадко - | СОТТСССАСТАА й дек 533955 н.д. нол. | Інтрон7 ССТЄСАТТ 3415 а 15 Іа ші «3795а Що ндо | Інтюоні | АООТАНАСАВСА зах да це 157 шин же кВ, - Еча т дсАаттТАЄ - ОХ жк ак ря, ши есе г 3 Б. -2 «37961 що нд інтрон ТтТСАСАААССАСС «под капот за зх0
ЛУ 1 ПОД п. І і АТСТСТТА ну км: я але
ЕБЕкзон З сек пром «1397 й вд трон ТАСТСАСОСАСА «119 «129 ца з5а злаОХ вол. н.д. -«їнтрисин др РК л1ісУ ої ія й ААТЄАК
Е ТААТОСТО
532955 | нд. / нло | рено | ПИСТСТЕВОСЄ Бз3 06512 24 зві й пе 13 сАстсст що інтрон зх ще галки щ ТСТСАСАОСтТОС дії діа д зл ква н.д. н.д. 15- сдюнтвюн чи Т115 7134 з 3652 " | стттСстОоТ зказній
Екон і7- ПпАДАССОАСА й й й 532055 яд. | нд. 0: ПАЛАВОВЛОВА 73719 07305 и зв3
І інтров | СТСАСТІСА
Й ССАТСТІТТААЄЄ | ; ЩІ де н.п. н.п. Інтрон 7 А виш 445 4853 1: з 7 п щі щі ссдодад Й «32957 нл. нд. трон ТССТСЛССССАЛО хво | аю Ії 355 із ТЕСТОСАС «37055 нд, 0/0 нд. | їЖрон | СТООСАСАСААО | сво що 15 зб ; іо ОСАСААТОТ
Інтоо ОТО ССАСАТА І І Й Й 532950 вл. ндо | Мпроно | ІСТОСССАСАТА 7382 та 23 367 17 СОСАААСН 532979 нд. яд. | проно | АСТІСАЮОСТОСТ «882 щої ІВ зв і 14 СССАССАС що ОГОАСАВСАСОААО шо дл Щ щи ха2е7і вл. н.д. Зовні , - ШТ ТО5х НК ВНУ ї. л д інтров пОААСсТтТ 5 В) інтроон - ге ду я А тич стада Тв ПОХаАСАААТОВ ци дик де дл 533972 н.д. н.п. 11- пря осів ое5У 13 470 4. | ССАТЛАТАА екзон 14
Н що трете Е 532073 яд, 0 ядо бПрно | СТОСТОССАЄСА -кта | во и 37 14 СТО АТЄ «12974 вл нд інтрон | АСВААТОВААСАА «418 кат в до 532374 вл. в.л. їй састттІсе 542 БЕБИ р 372 «32075 | яд. | нд. | Мирон | СОЗАТСТСАТОС 1 5 | тво м 373 14 ТТАТСЧТО суддя а ОтОастОоСОотес з ЦД ; ця 532976 нло о нд. | інтен | ЗТОСТОБОТОСТ «130 5149 Ів зта
Ь АСОСАСОТ
ЩІ 7. СААААСОССААО пт Щи , . 32977 н.д. н.д. Інтвовні | 7 ит ат 212 14 ї7ї5 7 САС ЗАЛО «37978 Й нд Інтросн | ССАТОСТСАССА за тази ха зт х2975 н.п. н.д. мо серии ді тя Ті таз ТО 37 7 17 СТТООСАТ й слдя ОСАСОСТООСАС що - І сна хата н.д. н.д. інтрон 5 |. пе де де ці 475 4772 35 477
ТТЛ
Інтро плини «37950 й ІРОН ОСАОСАОСТСТІ ха17 «оїв з ту злом нд. н.д. і4- пунуанна умі: сли Зо 57 щі | остстовА У - екзані
Екзан З детЧея ху пртеутр ре тре глялоч Й м ТСТСАССТССОТІ длже дядя що що
ЗОБІ н.л. н.д. -1нтрон | по 2957 тата во За : З ЗТСАСАб клю інтрон САСОТСЕСТСАсСИ с2д сегих - їо5
ЗІ3952 5. не зі З І яко
СТІТСССА ово) ню) мо) дев іІнтрок АСІССТСОСАЮС сек пд що .
Зах д. вк.д. Й - 550 вао 2 ВІ ях ха | вх | | ТТТСССАС ов! морю «33084 н.д. вдо троні толаОвАЄТСТО зха2 ЕК ІЗ З: -евзон 5 | СТАСАСТС «37085 нл пів САВАЛТСАССТО туз т3аї ІБН 53 зала М.Я. нд. т СААпСАпА вл ГАЗ -- оз тні: газоєк іт- ТАОСАААСОЗАО ! ! : де 531О5о х.л. н.п. . с хорр ких 7352 750 З ї84 ши ОО івтрон | САСТСАСТ що ! що сзтун Я й «лок - щі пювн з АССТІООСАОСА з з нд ака
Заше: Нол, н.а. «Інтран досастесе За вах ії лаг 4 інтюн суду вет А Ас кА нл. н.й. іх- бАвАсАлАТОЮО 9538 яз Е 15 55
СОТАТААА екзані4 сел СТА АСАСАлАО 44 че .
ЗДУ н.д. н.д. інтрон Ї ру Й 2І51 2159 І? 257
ОН ово вхо іон | ОСТОАТСА вірфню| корок ср ААТВБАТСАСООССА й зх з
АД Ю в.а4. н.д. інтроно | У. пов 2515 3535 І Зк ою | на | ва |Інтроно ОСТАНІ Й Й й аа інтрок СПАОССТЗАССТ - до с
Ов х.л. н.д. я пи ТЕ тА ТО Ха оявхмо| ха | вх | КО АААСИААТГ Й діа ТОСОТАТАЄТСТ : пз ; ще 32992 у ва нтрон Є з? за І? 390 гати с ТТААСАСАА АС 445; з 4 г; щі х3та03 х.л. н.а. нтран 150 2145 15 ЗІ
СТОАТОАЛА ою || вою . ОСТ ТАСААОТО Й Ї . що 3354 н.д. в.д. ідтрон Я | С й ато Як15 ТЕ 592 сичииче 5 АССТИа Ти ТсА са 2. я зв
ЗЛдчЄ : н.д. нтрон й пи ЧІ 4154 ше лаз ою; | на | ва |іяроне|осломася || 8015 зон сети в из
Осо нал н.х в на ТСАСССАВАТАА 57 128 5 а4 ек с М.Л. ан ї що тостесст - М -а ща вет ОДН «33052 | 2608 | заз | Ябюов 0 ТОСТОПСОСАСС 1 ов | тво во 305 15 ТОТІТТАА
Приклад 2: антисенсове інгібування фактора В комплемента (СЕВ) людини в клітинах
Нера2 МОБ-гепмерами
Отримували додаткові антисмислові олігонуклеотиди, націлені на нуклеїнову кислоту фактора В комплемента (СЕВ) людини, і тестували їх на предмет дії на мРНК СЕВ іп міо.
Культивовані клітини Нерсеа зі щільністю 20000 клітин на лунку трансфікували 4500 нм антисмислового олігонуклеотиду з використанням електропорації. Після періоду обробки, що становив приблизно 24 години, з клітин виділяли РНК і вимірювали рівні мРНК СЕВ шляхом кількісної ПЛР в режимі реального часу. Набір праймер-зондів людини НТ53460 МОВ (пряма послідовність СШАДИаСАССТСААТИалдААТСАА, що позначається в даному описі 5ЕО ІЮ МО.: 813; зворотна послідовність ТОССТОацСАСОааССтТТотТт, що позначається в даному описі ЗЕО
ІЮ МО.: 814; послідовність зонда АШАССАСААСТТОАдАИтТС, що позначається в даному описі
ЗЕО ІЮ МО.: 815) використовували для вимірювання рівнів мРНК. Рівні МРНК СЕВ коректували у відповідності до загального змісту РНК, виміряного за допомогою ВІВОСВЕЕМФ).
Результати представлені у вигляді відсотка інгібування СЕВ відносно необроблених контрольних клітин.
Знову отримані химерні антисмислові олігонуклеотиди в таблицях нижче отримували у вигляді МОБЄЕ-гепмерів 5-10-5. Довжина зазначених МОБЕ-гепмерів 5-10-5 становила 20 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив десять 2"- дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами-крилами в 5'-напрямку і З'-напрямку, кожний з яких містив п'ять нуклеозидів. Кожен нуклеозид в 5'-сегменті-крилі і кожен нуклеозид в 3'-сегменті-крилі містив 2'-МОЕ-модифікацію. Міжнуклеозидні зв'язки вздовж кожного сгепмера являли собою фосфоротіоатні (Р-Б) зв'язки. Всі залишки цитозину вздовж кожного гепмера являли собою
Б-метилцитозини. «Сайт ініціації» означає крайній нуклеозид з 5'-кінця, на який націлений гепмер, в послідовності гена людини. «Стоп-сайт» означає крайній нуклеозид з 3'-кінця, на який націлений гепмер, в послідовності гена людини. Кожен гепмер, перерахований в таблицях нижче, націлений або на мРНК СЕВ людини, що позначається в даному описі 5ЕО ІЮ
МО.: 1 (номер доступу в СЕМВАМК ММ 001710.5), або на геномну послідовність СЕВ людини, що позначається в даному описі БЕО ІЮ МО.: 2 (номер доступу в СЕМВАМК МТ 007592.15, укорочена в межах нуклеотидів 31852000-31861000), або на обидві. «н.д.» означає, що антисенсовий олігонуклеотид не націлений на дану конкретну послідовність гена зі 100 95 комплементарністю.
Таблиня 6
Інгібування МЕНК СЕВ МОБ -тенмерами 5-10-5. націленими на ЗО З МО 112
Стоп Стоп
Сай -ВВт | « СВТ -сСВитТ 2
ПІ що Нільова бе ния бе ЗЕ метві | бншапн ЗзЕО па ст Послідовність я М знипани БЕ) пе
ІЗ ЗВО На м МІС ЛЕлЛОВНіХ що бу" о то т мо: мор о | мок Ле ванну моз | Мо 07 532686 113500 | 1154 | Бкзоне | ЗСАСЕГНОЮСТ 48 звіб | зваж | 8
ССО СА й
1111111 ртттоосто нини шшишш 537688 1147 | 1156 | Екзонб | ГЛАОІТОАСТАЄ 47 зязі захо | 86
АСАСТТІТ хззбяа | 3153 | 1іт5 | Бкзонб | СІСААТТАЛОТІ «7 3837 зва
САСТАСАС
Стнк у сідче де
Шо й | САССТІСТСААТТ і в Й 5328500 | 1159 178 | Еко ша 39 зч43 зва2 ЖЕ шен пАсттоА й і і І ї-?
Стик о АСТТОССАССТІ 533591 1155 1154 |) БЕклонів | дея хня Кк н.д. н.д. що
До СТСААЛТТА 8-7
Стик - соди І Щі ОО АССАТААСТТОС й . хазбе3 | ті | 1100 | Бкзо уаннацня єт н.д, нд | 90
Мт: щи і СТТСАСАССАТА - 532503 | 1177 | 1195) Бкзон?7 | ТТ ОЛЮА «в 3153. | 4і72 | Фі озмез | пт | нев | конт АСТНеТА хзлвоє | 1183 | 1202 | Бкзонт | СТТООСТІСАЄ 50 зів | 47809
АССАТААС
532505 | 1208 1337 | Бююн7 | М ТОТСОСАТАТО «3 3154 4201) 03
ТТАЄСТАСА
АСАСАСТЕРЕ - - -Ь5- 531598 1335 1254 | Екзон7 глвАСАЄ то 52 БІ а230 ог
СССАЛАТТ
Стик серии дя де «3і607 | зав | 1317 | кров | ОСТСТТСАТААТТ «о ще ня | є да; іх ЗЕ: зх под пиття СУ -Д. .д. о й і КВ | ЗАТТТСА 1-5
Стих ; й галкл Що що 0 АСТТОТОСТСТТС й і «3369 1303. 23 Еко 52 д. я 7-а
Стнк - счрярутя
Й І АСТТСААСТТОТ Й овзвн| вю | вв ШИ бота й й че ді при шк ТОССТОАСТТСА : І що хз 1315 1535 Екзон Щ пр пе ве з8525 ЧЕ оиое| іме | 5350 вкюнв АстІатОоє й спите 532701 1322 | 134Р | Бкзоня | З ТАСТОССТО «в з15 | 4634 | в
АСТІСААС п Щі : ТСТТСОТОТТАСТ - й яззто3 | 1338 1337 | БЕкзонв | У РТОВТІ яв 4831 З840 | 100 они | вно) 537 кове СССТвАС Щ й 552703 | 1349 1365 0 Бююня | ОТ АКАСТОССТ 35 аа | я6Я | ві
Сила «ззто4 | ї355 | 1374 | Бкзонв | ІСАТОСТОТАСА й явая | 45673 оре ване; 5321705 | іза3 | 142 Бкюне | У1ТССАВССТІС п 3556 3705. 03
АОЗАСОСА заз | ще | 1315 0 Бкзюня | СОТЯСВОТТОСХ «є за | яті | 14
ОССТТСАВ по - АтадсСосотОоса й ц й язатот | 405 424 сон : ! 38 4508 4717 | 105
ОТТССАВС ззітою | ІА) 1430 | Екзона | ОАТОЛКАТОСЯ Ів ява 000) 4723 | 106 сстасоот що - ОЛОСАТОАТОАС : | Й хззтов | 1417 | 1436 | Екзонбї ЗАТ в 4710 371297 охате| з? | 36 кож | АтоссСоса !
Стик ще цк
Шо ї . с | СССАТОТТОТОС Що й 52716 14453 152 Екзонів спи ких 35 н.я. н.а. 105 що ААТССАТС ' й що Й | ГГ ТСССсОсосАТО Й п ї Щ яз37і1 | ї449 | 1455 | Екхоно рака ЗВ 5023 «042 ню вич | не |в | вкюне ТТОТОСАА 8о
532713 | вх | і378 | Бвзове | АТТОССТОСССЮ Із «039 | 5048 | о
СЄСАТОТТ
«32713 4510 450 | Бкзвно | ПОАОТААТТОВО 29 5015 «054 кажан що щи ши ТСААТОАСАСТА й І що й «32714 | іїч487 | 3495 | Екзона | ЛА ИЛО ча зо ково | із аттопатс й
Й ОСТАРТСТСАТСААТе | ши «37715 1472 40 Скздтй - ох " 4 пат «пах 13
За І7 1472 1402 Екзон 5 АСАСТААТ 45 хо47 про 113 п ши ТСОСООАТСТСА й щи шо «32715 | 1479 | 3Я95 | Екзоня | МА 54 5043 «оті я
ІСААТСАС тик . пра «34715 533) хз | врецв АСАТОСАСАТАА Щд . я
Зла і1735 зп. ОБ пуття дя ум у н.д. -Д. я тОСстСст 9-16
Ттик кв та дтичуч гадні щу са | АСАТАСАСАТОС сх
ЗЗкТІ1В і5х32 1555 Евзонів щи й КЕ над. н.д 1165 щу АСАТААТС а-10
СликЕ до Щ щі соді не Ще КО ССАААСАСАТАЗ Ще щи
Зат1 1545 іа Екзонів дич достутитя тя КІЯ н.д. н.ая. 117 0. АСАТКСАСс е-10 щи ЕЕЕЕХ з АтОтт «31720 І5ВО ідої | бкзон | АССАТТЗАТОТТ КУ «331 «350 | ІВ юю сСАСТТОСТ 533721 | 588 | бот | Якюн | АОССАЛАОСАТІ 45 5237 5255 | 119
НН САН ТСА
«31722 1593 іщіз | кн | СТТОбЛАБОСАА 35 5243 «з43 1 тю АПЙСАТТОА 532723 | 1500 | бів обов БІСТТТСТТОВАА 43 5349 | ха8 | іі
ІСТ АдАС «32723 | 1506 | іща5 бен СТСАТТОТОТТЄ за зв | яЗтЯ 1 іб ТЕС? АЄ 532725 | іб12 | 163 | ббюн / ЗТОТТОСТСАТТО 40 53610) 5380123
Ів тСттТІСТ 33726 | 1518 | їх37 | Якюен | ОЛАСАСАТОТІЮ БЕ хавт о | вза | 38
Іо СТСАТТСТ ще Ат АЄ 532727 534 | 1543 бкюн 0 ЗАСТТІЗААЛСАС х4 5273 х2а3 | 125
ІСТ
«35728 | 1530 | ідо | Бкююн | АТССТІТЯАСТІТО Ві зате | 5зря | 136
Не АМ'АСАТ 532720 536 | їв | Боно | ПЕССАТАТОСТТО х8 5285 5304 | 127 10 АСТРА 5332730 | баз | ів | Бен САССТТЕТОСАТ «І 5201 «3130 | 440
Но АТССТІСА
СтнЕ струт ред спи 021 | СТСАПАСАСТОС й ДИ под 532731 155 170 Еклонів седряреря с Зі 527 к4Ай 125 вон | СТІТСАТС 535732 мюз ілро| бкюено 0 САВАСАСТСАСА 59 5813 5852 | 130
ЦЕ саАстОост оно | АТОССАСАСАС; й «іБ253 | 1598 | 177 | бен | АТОССАСАВАВА кт 5839 «858 | 13 ії СТСАСсАЄСА 533733 тая | 1723 | кн | САЛАЛССАТОССЯ 34 х845 за іїю 11 ПАЗА АЄСТ 532734 | Р"о 0 ізо |) бкюно | ТОРТСОССАААОС хі кі «вт 133 1 АТНКСАСА 532735 | іт34 | 7530 бен ТТЛ ТААТОЮ хо 75) 894 1
ЦЕ стАСССТТ «32736 | іт | тю | бкюно / ОБТТОСІТОТОб 54 явя: | 5000 135 : " Щ В тААТСОСТ І Щ 7
«32737 | 17436 | ї785 | кн | ТОССАТОСТТОС 40 «яву | 5906 156
НЕ ттатОоотА «33738 001752 | ї7ті о ббено | ТТООСЄТВЮСАТ 49 5Що3 0 5913 | 137
НВ Оосттастт «32739 | 1758 ітт7 | бююоно/ бАбАТСТТОЮСС 47 вою | 5аРЯ 0 І38
НЕ ТОССАТОС галу . сп | Екзон | АСАЙСССССАТА сл при 533740 1803 1522 ни сх тет 4к бог ви | 135 ї- що . Евзон ПАСАСТАСАСК - лим й «32741 їввю | 1828 т й сто БО 8107 | 136
СССАТАСА сю | ово | яю во 532742 1815 | 1834 юн | БАСПОАВАСАСЄ 33 бої 063 14 12 АСАСЮСС «33743 | і821 іяча | бкюн 0 АСАЛАОТАСТСА за 5109 5115 | 183 12 САСАССАЄ сіла точи «| БЕкзон | ОТСАОССАСАААС й где Що щи з3атаЯ 1827 15-65 їх 5105 8135 145 озвино ви | нев) б ТАСТСАСА |в | вив) вв
ЗТ 1572 15951 щі рр 43 іх 517 144 поляк со ! Екзон | СТОАССТТОАТТ щи що - «3274 їдтв іо? і кл 53 157 віта | 135 засто й - й з» | Екзон | ТАТСТОСАССТО щи щи 532747 1909.) 1925 і кру зі щ-юз 5432 | 146 тре па дети цт «32745 0167 | ов | бно | СЛАТІЄСТОСТІ 30 ва 5аБО | 187
Не СРС полях таня 33 | Екон | АТТСАСОААТТС : сік по 532749 1973 1902 нини 40 5467 «86 | 148 озмю оз |юю| бо стастІст й 535753 вто | їрох | Боно | САТЛАЛАТІСАЄ 45 5473 5-2 145 13 СААТТОСТ скза САТАСТСАТАА: . ос «32751 їзях сор | бкюно | САТАСТСАТААА 43 вата вчая | 150 13 АТІСАСЮА 533152 Мюб 02025 | кон | ТБЛОСТТОАТСА ві бю вх | 15 13 СНО АС «32753 2012 | оз бкюно | ГАТІСТРОЛОСТІ 4 зоб | 6525 152
НК пАТСАЦО
Птн судоуя я . що | ЗАСАААТОСОСС ! 53275: МНЕ | 2067 Екзоні сети 35 гл. до 153 «32755 | 3070 | сова | бкюн о | СЯТРОТТСССТОб 43 Ба 0 ББТЯ 154 14 СО АСУ «32756 | Мб | сор | кн | ОСТОВАОТТОТТ щі «абх | ав8я | 155 14 сестсост «32757 0 союз | мої бкюно | СТСАЛАОСТОВА 36 5бті 56000136 14 сс пл пи Ши Екзон | ОПААОССТСАЛА це Ще Ще 532755 | ЗОВ 027 паллазне 54 вт? ввой | 157 оате) зво ме) ох | остесзат й й «33159 | 30054 0 2різ | Боно ЗІТОСАОНЛАЦЄ 52 5533 Бтоз | 158 14 СстсАдАаЄ пли лу дата Евзон СНАСТІ СА й сп зно й «затв | ЗНюЮ 0029 що і порція 22 вдо втоя | 159
ЕСЕ ССААОСС ї й ШІ х13тві зга | лічя | Екон | ТООСАЛОТОСТА ЩІ ско «тя ке ба ав М зи їх ії4 аттобсАеєз дв УК МЕ АК
ЗУБ щРі2 7131 Й селдичуявох ую 2 ат 072 іБ1 14 СОТ АЄТЕ
Приклад 3: антисенсове інгібування фактора В комплемента (СЕВ) людини в клітинах
Нера2 МОБ-гепмерами
Отримували додаткові антисмислові олігонуклеотиди, націлені на нуклеїнову кислоту фактора В комплемента (СЕВ) людини, і тестували їх на предмет дії на мРНК СЕВ іп міїго.
Зазначені антисмислові олігонуклеотиди тестували в серії експериментів зі схожими умовами культивування. Результати кожного експерименту представлені в окремих таблицях, наведених нижче. Культивовані клітини Нерса2 зі щільністю 20000 клітин на лунку трансфікували 5000 нМ антисмислового олігонуклеотида з використанням електропорації.
Після періоду обробки, що становить приблизно 24 години, з клітин виділяли РНК і вимірювали рівні МРНК СЕВ шляхом кількісної ПЛР в режимі реального часу. Набір праймер- зондів людини НТ53459 використовували для вимірювання рівнів мРНК. Рівні мРНК СЕВ коректували у відповідності до загального вмісту РНК, виміряним за допомогою
ВІВОСАВЕЕМУ. Результати представлені у вигляді відсотку інгібування СЕВ відносно необроблених контрольних клітин.
Знову отримані химерні антисмислові олігонуклеотиди, наведені в таблицях нижче, отримували у вигляді МОЕ-гепмерів 5-10-5. Довжина зазначених гепмерів становила 20 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив десять 2'-дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами-крилами в 5'-напрямку і З'-напрямку, кожен з яких містив п'ять нуклеозидів. Кожен нуклеозид в 5'-сегменті-крилі і кожен нуклеозид в З3'-сегменті-крилі містив 2-МОЕ-модифікацію. Міжнуклеозидні зв'язки вздовж кожного гепмера являли собою фосфоротіоатні (Р-5) зв'язки. Всі залишки цитозину вздовж кожного гепмера являли собою 5- метілцитозини. «Сайт ініціації» означає крайній нуклеозид з 5'-кінця, на який націлений гепмер, в послідовності гена людини. «Стоп-сайт» означає крайній нуклеозид з 3'-кінця, на який націлений гепмер, в послідовності гена людини. Кожен гепмер, перерахований в таблицях нижче, націлений або на мРНК СЕВ людини, що позначається в даному описі ЕС ІЮ МО.: 1 (номер доступу в СЕМВАМК ММ 001710.5), або на геномну послідовність СЕВ людини, що позначається в даному описі БЕО І МО: 2 (номер доступу в СЕМВАМК МТ 007592.15, укорочена в межах нуклеотидів 31852000- 31861000), або на обидві. «н.д.» означає, що антисенсовий олігонуклеотид не націлений на дану конкретну послідовність гена зі 100 95 комплементарністю. У разі, коли вирівнювання послідовностей для цільового гена в конкретній таблиці не показано, очевидно, що жоден з олігонуклеотидів, представлених в даній таблиці не вирівнюється зі 100 95 комплементарністю з даним цільовим геном.
Таблиня 7
Інтгібування МРНК СЕВ МОБ -тепмерами 5-10-5, напіленими на ЗХЕО ПІ МО:
Єжгінінівцй сайт Цільова Бо ЗО лозеяг. Сайтінінізий сайт Цільов й . 5 й
Міг семи кг тео Я пух й осліДОВНІСТІ НИ 1 й 15 зво ПІмОасі ОТ поласть Послідовність інгібування мо.
МОосі1 ШИ 5двхто 150 мо Екюоні | ЗВТСАСАТІСССТІ «4 зоре сосст «БЕ -2 ті Екзоні | ССТОСТСАСАТІССС 53 397 ша
МСС АСА и - «32814 154 і73 Екзоні | ЗАЄЄТООТСАСАТТС 84 12 сОСТІС «ВЕ І-К іт: Бкзові | АОАССТОСТСАСАТ 52 398 тосст
А тоб й 7 Шо
АТС
558556 159 2208 Екзові5 | ССТТОСВАСТОЛОСТ о о
ТІТТс пи шо 7 АССТОСТТОСОАСТО - 532770 пе 2212 «зон 15 - т 128 » | ех пою ко «ЕЕхВЕ 2195 1314 Екюнії | ВЗАССТОСТТСССЛО т 402
А сОЄ 558559 197 зво | Бкзенія | СТАСАССТОСТТОСО 46 з
АСТСА
«ТЯ 2453 472 Ектонів | ТОССОСТІСТОСТ 6 404 тттто 5д8575 3455 зат4 Екювів | УТЕЕТОСОВСТТСТО 4 405 аттІт «32800 3457 2375 | Екіонів | УСТТРТОССОСТТО «о 228
ІТ
«двят6 459 2478 Екзжнії | ССТОСТТТОССОСТ ві 05
ІСтОос яЕЩяТт 2461 2380 | Екюнів | ДЄСТОСТІТОСОЮ 5 4307
СтІст 516350 2550 1569 | Екюнів | АЗААААСССАААТО т о
СТСАТС хвяхО0ю зх81 2570 | Екюнів | СААЛАСССАЛАТ 58 409
ССТСАТ
«ЕВ 2551 157 Екюніїв | ДТАСЛАЛАСОСЛАХ 57 зів тостса
І й ТАТАСААЛААСССАА ен 2553 2572) Екюнів АТ 57 з яви | змо) ов | юшів | Моск я | п тт т ОО ТТАТАСААЛАСОСА ! «яЕхІ2 як 1573 хзоні8 х а пз
Я поля яд по СТТАТАОААААСОС ци «в5513 2555 3574 | Бконів : 37 413 ян | зн 00озз | Бкюхів | ЛАД я |в тт " 7 СТІ ССТТАТАСААЛАСЄ ! сяк 2556 157 кхзон 18 «а зі й щи 0 СССТТАТАПААААС - «88515 2457 зяте Екаееній | Є - ях пи 0 00 ! ОСТ ОСОСТРТАТАСАА т - що що що АССССТТАТАСАЛА -
ЗВЖ517 ї5АО ут Екзон ії ща У 7 ов ве |з 0 ве |до рак 558518 1580 579 Екзонії | ПАССССТТАТАбАА 57 чх
ААСССА
«85519 2561 3580 Бкюнія | ПЛАССССТТАТАВА ві що
АОС
588520 2582 І58РО | Екоонів | ЗАЛАСССОСТТАТАЄ 27 429 пев. 7 7 ААААСС ! «55521 2563 2582 Екзонія | ЗЗАЛАСССОСТТАТА 25 421
СААААС сщв5 й щи клонів | ЛОБАААССССТТАТ те то
ПИ ШІ ШИ ШІ АСАлЛАА Й 7 «Ве523 15:65 12584 | Екюнії | ЕАОБАЛАССОСТТА зв 423
ТтТАСААА пи 0 0 77-| ПСАОСАААССОСТТ т о 558325 3587 У5в Екзонії | ДЯСЛОВААЛССССТ зЕ 425
ТАТАСА пи Щи І ОТГ ОСАОСАОСАААСССЄ що
Во 2568 257 кзон 8 Я о и щи щи ОТ еСАОСАОСААЛАСОС щ
АБИ ВВ ТЕ Екзанії оЕ 47 щи І - ! ТССАОСАСОСАААСС й «ВВІВ 570 з5ЩО Екзовід СА 53 42Е оявює | 15902559 0овхнів ССПАТ я 31809 пт сто Броцію | ЗТССАОСАСВАЛАЄ й дя злІжОЗ ий, МИ коні есстта и 43; 588529 2572 350 Екзоніїя | ГЕТССАОСАВОЛАХ 7в 429 осостт
ТОТССАССАПОА; «85510 2573 3593 Бкзонія | СТОТССАОСАЮВАА та 430
АС ця ста - вілтів | ССТОТССАОСАООА що ті тях 57 17Н3 КОНІ 0 аАСоСС Б З «ви щи сто тронтів | СОСТОТССАОСАВО що п
УКХ ах іже рт, з пс їх ААВСЄ ї- ий 558523 2576 2505 Екоонії | ССОСТОТССАОСАЄ 83 433 сАдАСо 532818 577 3595 Екзонія | ЗССОСТОТССЛОСА у КЕ:
ОСПпАААС 535514 2я7В 2507 | Бююнія | СЗССССТОТОСЛОСА яв 434 апдАА «Вя 335 ї579 У5ОВ Екзонія | АОООСССТОТОСАОС як 435
АПОАА
«88534 2580 з5аа Бкзонія | СВСОСОССТОТОСАО 23 435
САССА сві що тов гріолів | ССАСОССССТОТОСА й пл п ШИ ши І оасСаса 7 Що
Еге От й «ВКи38 1582 за Екзонія | ЕСАСОССОСТОТСС о 435
АдпСАо 588519 2583 2602 Бкзонія | ГЕССАСОСОССТОТЄ ов 439
САССА
«Ве540 1584 з5д3 Екзонія | ІСССАСОСОССТИТ вх 44 сбвос пл сто щи ПО ГААТСССАСОССССТО що т хяя 2585 зва Екзовів | ЛАТОССАСОССОССТО т «4
ТАС
Й що "ААТССАСОСОСЄ й 585542 2535 2505 Екюнів | СВАТСССАСОСОССТ 83 442
СА
77 77 7-0 ОСТ ТСААТСССАСОГОСЄ 7 7 вБи54Х 2557 ШО Екзов 15 тетес ще З
ТТСААТСССАСОСОС - 585544 2585 збато000оБюзонів | ПЕСЛАТОССАСОССЯ Зо 344
СТО
АТТСААТСССАСОСе І «88545 зва 2508 Екюнії | МТСААТОССАСОС 22 ч45
Сстет вив 2599 звю Екзовів | ДАТЕСААТСОСАСОС 2 448
СО
«88547 зві звібо | Екюнів | ЛАТІСААТОССАСО ще 447 сосст «ВІВ 2502 зви Екювів | ЗТААТТСААТОССАЄС 23 448 си
ТІТААТТСААТОСТІ
«85549 2593 2613 | Еюкенів | 1ТААТТСЛАТСССА ще зав
ЕК: КК
ТТТТААТТСААТОСС " «855й 3593 25іЗ Екзонії | ТТТААТТСЛАТОСЄ ве 458
АОС
У ААд "ААТС. 5В51 2595 2814 | Бкюнів | ЗТ РААТТСЛАТОС за як
САС
588532 2505 2815 Екшюнів | ЗЕТААТТСЛАТС аз 452
ССАСО
«Вк 2507 звів Екзонії | СТОТРТТААТТСЛАТ 98 453
САС
595554 2598 звіт Екюнії | ЗСТОТЕТААТТСАА 28 454
ТА
АССТИСТТТРААТТСІ
«38 3599 2вІВ Екзюнії | МОСТОКТТТААТІСА 27 239
АТС
ЗСТОТТТТААТТС Я й 5328 2599 2915 Екзовів | МОСИЛОТТТТААТТОХ 95 239
АТОСС
АХСТОТТТТААТТЄ
588535 2600 2в1з Екзонії | САбСТОТТТТААТІС 23 54
ААТСС
0-0 то т СГ ОСАОСТОТТТТАА Що 5ВЖ5б ВН 2520 Еконів | ССЛОСТОТТТТААТІ 96 аа
СААТС з85557 2802 2621 Екюнії | СЯСАОСТИТТТТАЛ я 25 457
ТАТ
ТЕН АТ
«82558 зко3 15632 Екзонів | ТТОСАОСТОТТТТАА 24 458 тТТСАА
ТЕССАССТОТТН - 532917 з6о4 26123 Бкювів | ЗІОВСЛОСТОТТИТА Ф7 317
АТТСА
588559 3505 2624 00 Бкзонів | ГЗТСОСАЄСТОТТИ 25 45
ААТТС ттитерелеетевт хвяха моє 2525 Екзовід | ГЕОТСОСЛЯСТОТІТ 92 460
ТААТТ
УТСТЕССАПСТО - «ЗЕ 2507 2626 | Бкжюнів |З 19ТОСЛОСТОТИ 93 461
ТТААТ
532952 зво 2527 | Екшюнів | ТТ ТСОСЛОСТОТ ве 395
ТТТАА под ттсттстсесАССтТеа Й І 585562 збою зва 00 ен | ПлтотІотОослосто зо 462 іблповтор | ТІТТТА поря терте ЗАТ 588583 2519 2829 Екзон гРРОТтТетовсАОСТ до 463 15бповтов СТІТТ кВ м 2830 оЕкюн ГРРРоттотовюлеас 92 «54
Кб/повтор ТС «Ви з2 зва | 0 бжюно 0 ТІТТТОТТОТОССАЄ 58 465
Іб/повтар ст
Таблиня 8
Інгібування мЕНК СЕВ МОБ -тепмерами 5-10-5, наніленими на БЕ ПО МОМ: Ї або
ЗБОПМО 2
Стоп Стовп
Світ -3йт Ко Сайт «сайт БО вх м . ЕК я г щ -, САУ» сожете ішншідні | ЗБО | Тильсва . . НИ інНІаНИЇ Бо 7 ще їі ц ій Послідовність ітібуВваНнн припи й З;
ЗВО | 1 | область сетаовнх и ОД тзД о
МмОог1 0 ма: 7 МО мол спе ОСАТССАОСТСА Й що .
КЕНЕ н.д. н.д. Екзоні пепркумраи у 159а їа1х Б озввеех | вдо | яло/ Екюочі | стосостеа
АААТААСИАТСС І ков т т я 25 НАМ дп 47
АССТСАСТ каш Е н.д. вл. Екюні ВАССАБАЛАТАА 5 їх 227 45
САС ясості з | СТТАМВОСАЄССАЄ г єї щі що
БВ над. н.д. Екзов і й 4 1514 1533 ча
Ж онхо о) ня | Бюююі аААТААСЮ ровно || зв совки САСССАСТІАСО Щи Й : Що жа н.д. вл. Бкзоні праааа 36 НКИО іах9 та своя АССАСССАСТТА до Щи хвякоЗ л. вд. клав мана 47 1522 в О| 471
Бюзоні | содАссАЄ | во о |ва| т «БЯВО | нд нло | Бкюні | ОЗІССАОСАСТ о 585 іло4 | чи сте ввокли , | лАСатТеСАСОАС Щи сс тядко| дя ня. н.д. Екзаон і етос сст й ов 1556 1795 | 473 гвсяця АААСТОСАпАдО їх тяле де
ВУАН н.д. н.аа. Екзані вищ п й 1716 11735 аа
ЖЕО вл ТОСССАССС соскех Й з | ССАСЮООССССОС шн
Бики 30 а | Еклоні пора ка іт Ртта | 475 же) зо | 90 | тсАОоСтТС совгп- - ТСССООААСАТС Й Й й що
СсСААОВСОСЮ й 7 Й
Що - - і | САТСАСТТТСС
ЕЕ за та Екзоні | НТ 39 1777 ня. | 477 жена) зо | о ве | ССААСАТС гос - , СТОСТСАСАТТС -о ожвне| їі 170 | Бкюоні ССТТОССС 88500 і57 175 | Бкюні | СЕАБАССТВОТС є івтя | 1897 | 479
АСАТТЄСС
Стне - й спря. сля ще «с ЮФ апдатоачтосте Й
ЕВЕ5ОЇ 339 З | БЕкзонів полин 44 нд. нд. | ЩО й пз | АСАССТОС й хв8592 за 403) Екван3 | РЕССССТОСАбА 43 зроз | зр | я8і
САОСГАСНА
ЩО Що й А | АТСІСТАКСССС | Й Й Щ
БЕХ 390 409 0 Бкзоно | ПИ 34 198 2217 | 82 ою) 300 яю) Бевю | ТОСАСАСА й
Й І ГГ аСТАССпОТАбА
А КАСАА спе Що ССАСАСТОТААС . ЩІ й Й ехох т 52) зон З | Ся 37 кто ІЖох | чада
СОСОТСАТАЗ | зве |в) зве
Й Й Й | ТОСОСАТНЮСАЄ і Й - 5ЕВхОВ КО ТО 00 Екзон3 Прищі ії Зот хо15 | «85 ою | ве лов) коня доссосоз явяхат ох | 7134 0 Екюна | ОБСАОСТОЄСВАТ 32 2903 | 2523 | 485
ТНК АСсСАС 588508 то7 т15 | гкзані | ЗЯССАТТСАСТТ 45 1915 т934 | 487
САС
ТТСАГАСАТС - щи Що «88509 738 т57 | Екзанз3 | ПУТСАСАСАТ 52 2946 ав: | 485 осстеатста «вввоє вм 9 в дАсОАОотТсттОоо за зва ма гу на канів продо - в нод, .Д. ЯКУ і що ОЇ ГАОпАДдОоВ і А та 4-5
ЄлнЕ -. - -. гос | ОТАСАТСААЦОА й
ВЕБ 231 250 кзовіВ | слон 37 нд. нд. 400 7 ркюв їв СІСтТтНЄ я що
ХАССТІСООССЯ І І
«88602 259 отЕ | Екюну | ЛОСТІСООССА зі 3542 зав | я
ОСТСТІдА «ВдОЗ 1059 МОХ | Екон | ССАТСТАОСАСС 22 1773 3792 | 491
АССТАСАТ шк що Що | ООССССААТОСТ | що Щі
ЗБ п1Оо8 1127 Екзоне покращання 31 37 З8ії зд
СТСТСАТС
Ди й - ГААТТААОсТтТаАС ! т - й
І ТАСАСАСТ й
Стик пече ди шк гсвкде тка що ТНК | ТассАєсттсто ха тю ях зі 1155 Рікі Екзонів ААТтААОТ хо ш ак -ї
Стик | гААСТТОССАСЄ «88578 1157 Н186 Екзонів ТТСТСААТ 23 в.л. нлд. | 496 -7
СЕ. . щ «вЕ2то ї1да3 1185 Е й САТААСТТ СА дя я ч 307 5К57О 12 ТІБХ кзонів прища 25 я. -д. 497
Бжювв | ОСТІСТСА й ех
СТЕ О | АСсАТААСТТОС пли САТААСТ (ЯМ - - 532502 7 НН хзовів і ві зви 11 РР Екзонів ЄАССТІЄТ У вд. н.д. М 8-1 йлтик шк мктч й АСАСГАТААСТІ І
АКА 1173 РП же ; їв що 7 тах
ЕКО 1173 1155 Екзонів ОСССАССтТт 16 н.а. н.д. Фа 5-ї:
Стнко | ТоАСАССАТААЄ «ВЕБ ПЕТЯ | 1194 00 Бкзонів А 14 415 34170 | час
ІВ їх БА Екзонів ТТОССАЄС 13 чі15і1 зі юю зе; 588610 | 1313 | 1335 Бкзаня | ГАОТОССТОАСТ хо зБі2 | 4531 | 500
ТСААСТТО
02 ДИ | о ГтаатоттАатее й Ди 1. «вяві2 1325 ІЗ | Екзоня | ТТ 47 ча8 4537 | 501
СТСАСТІС що СОЯ тТТосАОСЄ | І 5БЕБі1Я 4 Евзон ттсАСпАЄ 4 455 АТО ій п щи "ГТСАТОАОСАТОА й | й «816 142і 1440) Екзон ТАМ щі 47і4 4733 | 503 й 7 7 й ТОАСАТОЄ щи й - ССОСССАТОТТО й й До Й
Й тТОГАдТСС й пон ДИ -- ОТААТТОООТОС й гл тдкї | кг
ЗЕ а 155 1477 зон 7 й ща ЧК Х 515 хх
ЗЕ З 18 Екзон ссосесАт З 3 і
ААОТСССОСАТО Що пом щи 555523 1852 | 1501) Екюоно | ЛАОТОССОВАТО 48 ча35 | 507500 505
ТАТСААТ
Стик пра «ява іхич гхв1 Бкюнів | ДАСАСАТАСАСА 45 . й «дя паз ш- іх: 1501 кзанів прут д и дв жи на. «Ж. МІ й й КСВ ОЇ ТОСАЗАТА ш х --
САААще шк й - . 555626 1555 | 1604 Бкюнід | СЛААОСАТІСАТ 33 «234 «253 | 508
СТТСАСТІ
«886528 1621 меЮ / Бкзовіб | ПІЗААСАСАТО 45 5270 «3850 | 509
ТІОСТСАТ
Щи що щи | сттссСАсаттттс | под Щ й «КЗ 1546) 1565 | Нкзовій | ТМ 3 5205 53314 | яй зве | 16001655 | Бков | САТАТСЄ 555632 147 | гебб | Бкзанію | ГОЕТССАОСТТТ за 5295 «315 | и
СТСАТАТ
«вве ів | їт08 | Бкзовії | РЗАСТСАСАвАС 15 5830 зя49 | 53
ТТ
ОССТОССАТОС - Й ЩІ 588635 іме | БЕ | Екзонії | ЗЄСТОССАТОСТ 55 Зоо «щю | 513
ТОВ
0 Ди пи р ТОАСТИОАСАТСТ - . под жІВКсЗЕ 1753 ІТК | Ековії піни мк 76 ОА 52 514 освввзв | атвх | ато | якові тато Й
ТІСТАТСТЕ САС
«Ето 912 | їа3і | Бюзоніз | ПЕСТАТСТЕСЛО 95 в406 8315 | 515
САТ
ЗУАТАААдтТтТ «вав тва: | 3001 Бкзювніз | АЯТСАТААААТІ 44 в4т6 395 | 515
СГАСОСААТІТ ще для за -щЩ20035 І СбАОТТЯТТСОС ; щи пи шт
БЕХ 1073 МИ ) Бклон 14 пойщи й «а ВО Яскі 517
ЕЕ ЗЕ т СОТОСА й й й пи Що АСССТСАААОСТ ЩІ шо таЕдає 27о85 ЗЕ) Екзаніїй лох - 57 ЗА 25 15 созоаттат рвав зв спала «ВЕдВ мн 2110 | Бкзонії | УБАбОЛАОССТО 48 5580 8689 | що
АААСНСТСО
5ЕЕ65І | 2007) МЕ о Бкзанія | СТАЄТТОСЛОСА Зо зве 06705) 550
АСССТСАА
ЗІТОСТАОТТ й що са «4 «вв: | 2103 | 2123 | ковій | СЛАОТОЄСТАСЇ 43 ва | 5
ССАСОдАС зввехя 00216500 | 2165 | Бкзонії | ГЕСТСАСАСАСА Із б5еза | 6073 832
ААСАСАОС
«ва зіт3 | Зо Бканіх | С ГОСТОСТОМО 58 5950 «ато | 523
АСАСААА
58658 | ОО 0235 | Екзонії | ПАОАССТССТТС 44 вовя това | 52я
ССАСГСАС
58868 2203 002221 Бкюніх | ТЗАТОТАСАЄС хо Зо тою | 525
ТЕСТ ТОсОо
СЕН. кт дети» й ОЇ СТТТСТТАТОСОС І й і 8 | АттСтТта д д і 15-16 обох Ди А шТВКО | ДОСТТТСТТАТОС й ля
Е5Е5КІ 2221 І2ЯВ | Бкзонів | соду 13 в.д. н.д. 527
КО ОСАТТСТ і-16 сідяя для 0.41 Ак | СТОСсСтТтТІСтТтАТ й дл 557 223 243 Еклонів хр кре ї в.л. н.чя. 3 як ССССАТІ 15-16 «вкяка У Я в дОастОосстттІстт ге ня нло| 525 вол п р канів зчия їх вл. -Д. ав
ОЇ АТОСОСА
15-16
Стяко 0 еаостоаєстттє - є Бк т. м. - «ВЕБ 25 | 2345 Екзонів | ДИНІ МУЄ 27 нд. в. «7 18 | ттАТОССС й щ 15-14
Ятнк прищ
ЩО для Да | АСАЙСТОССТТТ щ 235 «ях 2227 22Я5 | Бкзонів | и хо нд. нд. | 530 и СТІАТОСО 15-15 тата чвя584 2238 3257 Бкзоніє | ССАТСТОТСТСА а ті21 тії | 3
САС
0 сл 02331. | АСАТОИТОСТТО; Й п - До «ЗВево 2276 2295 | Бкзовіб | ЗЗАТОТССТІВА зі 7150 7179 | 433
СТІНА що ззая | зада | виіцизк | САССАТАОООАС 4 -ліа -433 сії товднк | дяк давя 0 ЯВЖ ОО) ССОССАСААТСА -
ЗА зді ззча «г 3 14
ДИ дядя зате б «- ТБААТСАААСОА дз тв що «свита зай зді | вкаднія | ТТ ТОССОСТІСТ їк сков пяве | «ло твскцй яджяо | ласк | праці с | ВСАООСТАЄСТОС я щі щи зе ит сАа 4845 зкв зкля | пюзлиціїв ЗТСаСАОСТОТІ ; пої тав | 419
Приклад 4: антисенсове інгібування фактора В комплемента (СЕВ) людини в клітинах
Нера2 МОБ-гепмерами
Отримували антисмислові олігонуклеотиди, націлені на нуклеїнову кислоту фактора В комплемента (СЕВ) людини, і тестували їх на предмет дії на мРНК СЕВ іп міїго. Зазначені антисмислові олігонуклеотиди тестували в серії експериментів зі схожими умовами культивування. Результати кожного експерименту представлені в окремих таблицях, наведених нижче. Культивовані клітини Нерббеа зі щільністю 20000 клітин на лунку трансфікували 3000 нМ антисмислового олігонуклеотида з використанням електропорації.
Після періоду обробки, що становив приблизно 24 години, з клітин виділяли РНК і вимірювали рівні МРНК СЕВ шляхом кількісної ПЛР в режимі реального часу. Набір праймер- зондів людини НТ53459 використовували для вимірювання рівнів мРНК. Рівні мРНК СЕВ коректували у відповідності до загального вмісту РНК, виміряного за допомогою ВІВОСАЕЕМОФ).
Результати представлені у вигляді відсотку інгібування СЕВ відносно необроблених контрольних клітин.
Знову отримані химерні антисмислові олігонуклеотиди в таблицях нижче отримували у вигляді МОЕ-гепмерів 4-8-5, МОЕ-гепмерів 5-9-5, МОЕ-гепмерів 5-10-5,
МОБ -гепмерів 3-10-4, МОЕ-гепмерів 3-10-7, МОЕ-гепмерів 6-7-6, МОЕ-гепмерів 6-8-6 або
МОЕ-гепмерів 5-7-5, або у вигляді дезокси-, МОЕ-і сЕЇ-олігонуклеотидів. Довжина МОЕ-гепмерів 4-8-5 становила 17 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив вісім 2'- дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами-крилами в 5-напрямку і 3З-напрямку, що містили чотири і п'ять нуклеозидів відповідно. Довжина МОБ-гепмерів 5-9-5 становила 19 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив дев'ять 2'-дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами-крилами в 5'-напрямку і 3- напрямку, кожен з яких містив п'ять нуклеозидів. Довжина МОБЄЕ-гепмерів 5-10-5 становила 20 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив десять 2'- дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами- крилами в 5'-напрямку і 3З'-напрямку, кожен з яких містив п'ять нуклеозидів. Довжина МОЕ- гепмерів 5-7-5 становила 17 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив сім 2'-
Зо дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами-крилами в 5'-напрямку і 3'--напрямку, кожен з яких містив п'ять нуклеозидів. Довжина МОБЄ-гепмерів 3-10-4 становила 17 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив десять 2'-дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами-крилами в 5-напрямку і З'-напрямку, що містили три і чотири нуклеозида відповідно. Довжина МОЕ-гепмерів 3-10-7 становила 20 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив десять 2'-дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами-крилами в 5'- напрямку і 3'і-напрямку, що містять три і сім нуклеозидів відповідно. Довжина МОЕ-гепмерів 6-7-6 становила 19 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив сім 2- дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами- крилами в 5-напрямку і 3'-напрямку, кожен з яких містив шість нуклеозидів. Довжина МОЄЕ-гепмерів 6-8-6 становила 20 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив вісім 2'-дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами-крилами в 5'і-напрямку і 3- напрямку, кожен з яких містив шість нуклеозидів. Міжнуклеозидні зв'язки вздовж кожного гепмера являли собою фосфоротісатні (Р-5) зв'язки. Всі залишки цитозину вздовж кожного гепмера являли собою 5-метилціийозини.
Довжина дезокси-, МОБ-ї сЕголігонуклеотидів становила 16 нуклеозидів, при цьому зазначені нуклеозиди містили або МОЕ-модифікацію цукру, або сЕЇ-модифікацію цукру, або дезокси-модифікацію. У стовпчику «хімічна структура» описані модифікації цукрів в кожному олігонуклеотиді. «К» означає сЕЇ-модифікацію цукру; «ЮО» означає дезоксирибозу; і «е» означає
МОЕ-модифікацію. «Сайт ініціації» означає крайній нуклеозид з 5'-кінця, на який націлений гепмер, в послідовності гена людини. «Стоп-сайт» означає крайній нуклеозид з З'-кінця, на який націлений гепмер, в послідовності гена людини. Кожен гепмер, перерахований в таблицях нижче, націлений або на мРНК СЕВ людини, що позначається в даному описі 5ЕО І МО.: 1 (номер доступу в СЕМВАМК ММ 001710.5), або на геномну послідовність СЕВ людини, що позначається в даному описі 5ЕО ІЮ МО. с: 2 (номер доступу в СЕМВАМК МТ 007592.15, укорочена в межах нуклеотидів 31852000-31861000), або на обидві. «н.д.» означає, що антисенсовий олігонуклеотид не націлений на дану конкретну послідовність гена зі 100 90 комплементарністю.
Тавлиня 5
Інгібування МРЕНК СЕВ дезоксн-, МОБ-і сЕі-олігонуклеотидяами, націленими на ЗБОЇ
МмОосіамозБОНУМОс2
Стоп- Стон-
ВНТ «БО ці з | сво 5ЕО
ЦІ Який і . - тлу МІХ гля
Меї5Іх пня й й млвова Тасліловність інгісуванн твищапе Мотив В;
ЗНО) ПР о) ооласть я ЗО | тр КО.
Мосі Ма. МОс:2 МО. Ух «зоБІЕ 2599 |2615| Екзонів |ОСТОТТІТААТІЕ 10 7834 тва (ее о
СААТОСЄ есгге па дих я Аг МА ЕКЕКЕКККЕ «ввхЖА| 35 00 63 | Бкзоні |СЗААСАТОСЛАВ то раю о зтвя ЕКВВМАЯ
СО ке «ввжта| 154 | 159) Екзоні ЗОСТСАСАТКОССТІ з івт5 | івво (КОЗАКА 43
ТС КЕке
СС ккІЕ 5вЕ574| 158 | 173 | Екзоні |МАССТОСТСЯСЯТ І в 1879 | вод (РКО «43 ра Кке
Стик уляртутн ія хе ще : роди шк | я | ТААСТТОССАЄСТ дк векаййй НЯ 5ВКЕТЕ БІ 1155 БЕкзанів 5- -е а н.д. вдо 23Х - пес кке
ТНК о |САТААСТТОССАС секадаваааа - ст ККе сво 0100 бик о |АОСАТААСТТОСС ; - Інекадааанав 5ВВЯВИ| 1175 0 1190|БЕкзонівб-| 5 | що 5 81565. й 547 - рожа кка пет АСК срллалттатт її Кк старт ЩШЕКИЕККНЕКЕ «ВяЕТО 2195 2210) Екзоні5 |ТССТТССВАОТ тв 5083 | вро (еко І зо
АС Кке те ета век аа: 5вЕЯТЬ| тот 2212 Бюконіх ПОСТОСТТЄССАВ ву 5овх | торо сеКаВВИЯ хо
ТСА ке
Стик Й - шк
СТІТСТТАТОССЄ вЕаааа й 01 |АТЕ Кк: 15-15
Стико | ОССТРУСТТАТОС секчачаааня 5ВВЯЩІ| 235 03240 | БЕкзоків нин 8 нд. | нд. | хх
ССА КЕ
15-35
Стик пепец скрер яр заводили. на |на и» песастІста ! 10 слі Інекоаів : зр пиши т14 соб тю шо о ЗВний НИК ПЕС Б ни то НН НОЙ ЕС БУ пн їі ях «веков| 2553 |2558| Екзонів МЛ ЛЛАСОСЛАЛІ во ттвя твоз (КОКОН сх сс Кк ме | рт вер
АТС жк дае | опт жердини «вевІ:| 2559 |3573| Екзонів | АТАСААААС із тт94 | твоо ЕФЕ І кв,
ССАА Кке
СКК хв птиних Е га вас; ек
АКА аа «ВЕЕІЯ| 2552 |2577 Бюзовія |СССТТАТАВАЛА | вв ттот | віз КК І ува
АС КЕе
Е СТРАТА ЄЦА ПИЖХКЕККИККЯ тт дл Костя «вявів| 2565 |2581| БЕкзонів | ААССССТТАТА 34 тво: | звів СЕЧА дер
АА Кк
НН На НН БОБ нзння
ВАЗ ока «вадао| зак | 2583 | Екзонів |! ЧЗАЛАССССТЬ ва твоз | звів |НА сто
Атяа іже соч НН ВЕС Б пеня 115 Ка п ще щи о АОСАССАААСОС Ст еекакавЯ «ввхІ8| зять |2586) Екзонів |" іх твоє | тязі 573 ев он ге вові Ста НЕ дн това! зт, | зло щі САОСАООАААСС ці т 1 нев заиБІ3| 2572 Т357| Екзоній |, 3 Ті т шт
СТІ Кке звяязя| 2573 |2548| Бконів |СЛОСАОСАЛАЄ тво твоз (КВК зх --л ке «веІє| 2574 | 2589 | Евзонів | ССЛОСЛОВАЛА 19 твоє своя (КОВКА І тв се Кке т кт || .000115 ЮТОСАОСАООАА й 552515. ееканаівная
КІ? 2Е75 ЗВО | Еказнів Асес 35 тій 7515 кре дос в дл жене 5я8Ж29| 3577 |2502| Бкзонів |СТОТОСЛОСАСО 49 ТВІР: тво БК сто
АААС Кке «вЕи3о) 257 2503 Бкюнів |СТОТОСЛОСАЄ и твіз о | вок |еКФНКНВККМ І в
ЗААА Кке зВ853І| 2579 594 Еконів (ОСІ НОСАВСЛЯ о 7813 свою КЕН ву
САА Кке звБе32| 2580 2595| Бкзонів | ССТОТОСАВСА о твіх | тязо КОН тво
ЗА ЕКе
ХСССТатесАЄ «міааанн Щ 558533) 3551 2596 | Екзонія З СОЄСТОТОСАВС твіб таз КЕКВ дз
АС Кке «ВВЕ3А| 2583 |2597| Екзонія | СССЄТОТОСАЮ | у твіт | таз | АКККЯ ява
САС їжЖе явЖе3:) 2583 |2598| Бкзанів ОО ССТОТОСА із тя | сдзз КИЯН вк
ЯСА КЕ: 558836 2554 |2509 Екеенів З СОССССТОТОСТІ тво | таза (ЕК І дв
АЗС Кке «яВ8І7| 255: 2600 Бкзонів (САСОСОССТОТС 33 тазо | таз РКО І св
Сі ЕК: завезв| 3585 |2601| БЕкюнів | АСВССССТОГ ГО 53 тя2і о тязе КАК тв
СА КК зввЕза| 2557 |3502 Бкюнія ІОССАСОСОЄСТО кі т812 лезт ЕКЗ Ї ско
Є Кке «вЕа4о| ся85 2503 Бкзонів МІСССАСВССССТ 55 зв23 | таз СЕКВЗЯКК Ї сов те ЕК
ЗБИВБШ5БШ5 1015-13... ІААТСССАСОСССС т ЗБ ІнекаванначЯ |.
ХЕЖВЯТ| ха ЗМІ Екзовніїй АТ САС ку тя тК3О гаків аа хв 11 ЕКе «вв5Я2| 2598 |2605| Екгонія | СКСАСОСССТЇ зо 7в25 | тло (КВК І оз сте Кке «вВ5843| 2591 |з505| Бкзонія | СААТСССАСОСС о тв26 | талі СКК. со
Ст Кк хвЕБЯЯ| 3502 | Екзонів ПІСААТСССАСОСТІ зе тв2т | тваз СКК код - ККе «я5В45 2593 |2608| Екзоні ЗІТСААТОССАСОЇ з тазе | твяз |НЕНККН со
ЕКСЙ Кке звЕжає| 2594 2509 БЕкюнів АТІСААТСОСАЄ бо тя2ю | тяза (КО ККЯ тов ес ЕКе хваБят| с5а5 |2510 БЕкюнія ААТТСААТОССА | 7830 | вах ек хв
Но Кке «ВВЕЯ5| 2595 |З611)| Екзонія |. САТТСААТОСО те 7831 | твав (АК КККОЯ І со
Со Еке явквлдо| зхот |2812| Бкзонів | Л1ААТТСЛАТОС з4 733 | трат БВ сою
СТАЄ Кк хвВЕ5О| з508 | 2513 Бкзонів 111 ТААТІСЛАТС 21 тя33 тва РКК сво ссА Ще рт А яр нак ла, теги) зве |3013| ркоонів ОТІТТААТТСААТ ца тв34 | твдо ІнМІЬКК | сої с їхе звЕвх2| зею |5| Екзонів ПОС ТААТТСААЙ ов 7835 | твхо С БФККЕКНЯК І хо»
С КК
«вахх3| З601 |2615| Екзанія СІОТІТЕТААТІСА | в, т836 вар еКВВЯ оз
АТС Кке явваха| з50О2 |2617) Бкзонів (СТЧЕТТТААНІС 53 заз | тах ССКВЗЯКК Ї соя
АААТ хке
АОСТОТТТТААТТ : зак 5ЕВЕжх 2603 2618 | Екзонія ЗСІОТТТТААТІ 5 Т838 тва КК І кох
САА Кк:
САОСТе ХАТ сеча Щі я«ввуяв 2604 |2619| Екзонія ОСТ ТЕТААТІ з 7539 | тех СР сов тА Кке пе тен
ЗБЕЕЗЯ| 3605 | 2521 Бкюнія ЗОСАЯСТОТИТА зо тв31 тва (РЕЧИ | сов
АТІ ККе звдеха| бот 02623 Екзонів | ЄУСАОСТОТІТТ во тва?» | тват (КАКАО сов
ААТ кке
ТООСАССТОТІТ й й секонд
ЗБЕВОО 2605 02533 | Бкзонія СІСОСЛОСТОТТ 76 тваз | зкхд ЕК ЇЇ о
ТАА КК: пеитледатятияя зліт «ЯВЖЕ:| 2609 | 2624 Екзоній | УТСОСЛОСТОТІ до тв44 | тяхо еКОВВВЯЯЯЯ у зввеєг| 2619 |2625| Екзонів | СОСАССТНВ ву твах | тво (ЕКО ККККК ву тт КЕкег
ПТТОТСПСАССТОА і о еекфавая 588563 2611 02626 Екюонію |ЛЛОТСОСАССТО ЇЇ 5, тваб | тка КВ в
НН КК:
ПІТОТееСАВС ї 100 еекадязавяяя «8ВЕА| 3612 2627 Бкюнів ПОТІОТСОСАЄСТІ 8, тват о тябз РБК я сІТ Кк: птататсосСАое й зразааачаЯЯЯ С. зВБЯЄ5 2613 2628 Екзонів | ТУТ ЕОТСОСАСЄ хі ядо нд. КВК сх їшт ке тттотттере ШЖЕКИХЕЕКЕЇ звяяба| 2614 |2420 Екоонів | ТТОТТОТОбСАЄ 25 ндо | ндо КФК се сто Кк: тт г я «кад ааайх «88557| 3615 |2630 Екзоніз МТТТОТОТСОСА 42 нло нд, ЕК ст
ОСТ кке «ввябж| біб 26351 Екзонів 1 ТТТОТТОТОВС 56 ндо о ндо ЕЯАКНЯВЯ
АЄєВ ккг
Тавблиня 10
Інгібування МРНК СЕВ МОБ-тепмерами 5-10-5, націленими на ХЕОСІ МО: ЇЇ або ЗБОЮ
МО
Стоп Ствн
Сайт -свйт ви Сай Ди щі іннппані ЗВО | Цілвова Щ ініиаці св 5ЕО щотеете іні Пьние 33 З . - - -- ВІ І сет, - іІБі5 ст те - Послідовність інгОуван пінерини Б Ір
ЗБОЮ НЕ абласть 7 зош но хо вЯя - ам
МО: МО Мосс Й олії ; ча хо
ПОД ОСАТССАОСТСА щи щи щ
ХЕВайх н.д. н.д. Екзоні покров 14 іхой 1515 ав
І й стесте щи "ГАААТААССАТСС ! шо Й !
ЗВО н.а. н.д. кзоні дру 05 вої я
ЗЕ н.п н.д БЕкзов АОССТСАЄТ по Н її я у Зх хЕОїВ н.д. н.пл. Евзані ПАОССАСАЛАТАА 3 1506 1527 ву
СПЛАТА СЮ
«ЯВЕОО | нд. яд. | Екзоні | СТТАСОСАССАб Ів 184 | 1633 | зво
АААТААСН
САСССАСТІАЄ : Щ щ Й «8002 | нд нл.о | Екзні | СССАСТТАбО 23 15:00) 1639. | 470
САССАСАА пд "ПТ АССАСССАСТТА ці щи ДИ - вка в.1л. н.д. Екзені | сухих 23 1527 1541 471
МАСАХ хв85о6 нд. нал. | Екзані | ЗООТССЛОбАСТ 15 1585 іт | 472 стесестт «ВЕК ня. ндо/ Екзані | ВАОЮТОСЛОСАЄ Із 1856 | 1705 | 873 тетоссст попщ АААСТОСАСААО й й Що о
ХЕ н.д. н.п. Екзоні | 15 ї1тіІй 1735 ат 7 й ТОССАССЄ шщ й 7 "Гавдососсссоє І т по «че зо 39 | Екзоні | СОЛОВОССССОС НЕ І75І ітта | 475
ТАТО що І пи щи ССООААСАТЕ І 5 де щи «вв? 48 87) Екані | Г-ССОбЛАСАТО ї4 іт56 | атвя | 47 пал "АТСАСТІТСССО щ щи що 5885585 - 75 | коні | САТСАСТИСССЮ ІВ їтев | 47
СААСАТЕ по Й СТОСТСАСАТТС - що - 588329 Іі 170 Бкюні | СТООІТСАС ха 1572 ів: | 478
Й ОСТ
585500 її7 178 | Бклоні | СТАНАССТООТО хо ідтв дет | 479
АсАТ Є йти проник «сво 530 455 конів СсОАстТОосТОСТо ах нл на «ко «ЕЕ 339 355 | Бконів | сАССТОС їх я. нал. Іо «8Е5О2 384 303 | Бкзоні | МУССССТОСАбА зо зраз о02м о | «ві
САС АСНЗА прати чук «58593 399 409 | Бкзоні | М СТСРАСОСССТ 29 зівея 02317 | 482
С(ССАСАСА 75 7 0051722 ГТ ОПТАСОСОТАВА - 5- пу 558593 487 «ва | Бконо | ООТАСОСЮТАЄ 47 2275 зе | 483
МИ АСАА
Й ! що СОАСАПТИТААЄ щи 7о - «88595 вл 500 0 Бкююні | ОАЄ «4 с5та 0 звеф | 488
І й СОТСАТАЄ 7 яВ8595 89 708 | Бкюніз | ГЗЄБАТТОССАЄ 43 сот 2916 | 63 о: щ СТ ООСАСОТОССАТ ді т БВ 588597 504 ті4 | Бкюнз | СЗСАСОТОСОД за 2203 | аз | 86 ти АСАС хвя5о8 чл т26 | Бкюні | ЗЯССАТТСАСТТ зоря 02934 | 487 сосаосте 7 щ то ОСТТТСТСАСАСАТО 7 щи п7ооО - дяВ5оо 738 57 0 ЕкюніЗ | боти 37 24 2оа55 58 й сОстТОотсто й
Стик - :
ААСОАОТС і
БЕ ря 43 Екзонів бій свАетст тоб іх н.д. н.д. ке 3-4 САСА АС шк щі Що щотик, СТАСАТОДАССА за ще Щі 10 їео т. У го Зо. 5 атсттоде рей ЕТНО н.д. НЯ; 3-4 пиляння «вввоз | охо отв | Екюная | МАЗСТІСОВССА 45 заз | зх | 4
ССТСТІЗА п вчу ас звяФої | 10890) 1108 | Бкзонб | НЕАТСТАОСАЄС «3 3773 уто2 |) 493 вла «ввеоя | зно) нт | Екон | СЗСЄССААТОСТ за зт9: | ЗВ1Р 493
СТСТОАТС
! З ААТТААОТТСАС 7 -
ВЕБОЄ 00125000) 3150 | ркзаоно | МАТТААОТІвА 37 зв34 | звх3 | 404
ТАПАСАЄТ
СлнЕ причи у чит зве | т івр вокнвн | ТОССАССТІСТСА | н пав па 3 скзонІв АТТАДСТ нд. п.д. ЗЕ - ї'тик - ге ци що й що ОЇ тААСтТТОСсАСС Що 5КЕ7А фЦї127 1155 / БЕкзонів г пе ТЕ ЗСсА й н.д. н.д. аа он | ТІСТСААТ госкло пиво ах | Кк поп | САТААСТТОССА де Й І їат завдя с і15х бконів есттстеА ші н.д. н.д. 49; пою тро ав, | АССАТААСТТОЄ ск ще нд | 90 35552 ? 198 Екзонів пршіщів 5 н.д. н.д. 0 зоні | СаССтТІСТ щ-ї
Стик. пу ну дввлау 0 аз7:0| о» вон» | АСАССАТААСТТ «о нд звайау БА їх БЖ НіІв стат оди го н.л. пол. ах миши щі СССАССТТ й-ї п 0. -ТТСАСАССАТААС Ді й шк ц ха 1175 1194 | Ркзон 7 пророк 5 151 р 4595 же) пт | пох) вкют | ТТОССАСЮ й
АТС АТ шк : . вх «вявіо | 1319 | 1335 | Бклонв | АЧІТСССТЯАСТТІ 47 зиз | 4631 | зоб
СААСРРО щ ОГтостоттАЄТОС - щ «щі 5 зад Бкзон й ат зів 4647 «01
СТОдСттТе ее звябі3 | зя96 | 1415) Екон | ЗСОСТРОСЛЮСС ві зава | ат | 502
ТІСАСЮСАЄ щи и И05К-20333 | ТСАТОАОСАТСА що р 7 й 1551 На Екзон 5 тАСАТОС їх 714 т 50х ох Що -051-00 | ССОСССАТОТТО Й що що що хеяБіВ | 1445 00 1465 БЕкюно канів за «оо «039 504 й ТОГААТСС кА лугу. ЕЕ Що й , - яд 5НЕВІО 1358 477 | Бкзоно | 9 ТАА оо ще а 32 ч081 «0:
СОСССССАТ хвяб23 | 1482 01501 | Бкзюно | ДАСЛРОССОбАТО 45 «аб | охота | 506
ТСАТСААТ що що ААСАСАТАСАСА «ява | 1541 «61 Екюні і 43 нд. ядо | 507
ТОСАСАТА
5-1 зяв526 001555 | ідоя | бкюн | САЛАОСАТІВАТ 45 5214 3253 | 508 нео | отІСАЄТТ 5ввб25 | 1621 0 їб4о бен | ПТОЛАСАСАТО 3 хіт | 5ахе | 509 яв 00 | тТоЄтСАТ ; 7 «83 жає | іввх | бно | СТТССАООТТТС ке БАХ кз14 | 5 о | САТАТСХ «вва32 | 647 0) з6бб6 | Бкюено | ТСТТССАСОТТТІ 35 «205 15315) я 00) ССАТАТС внз | здо 0 ітоф | Боно | АСАСТСАСАСАС хх «яз 0 хвла | хр
ЕН ТЕНТ ІС зввб36 | 1749 00 ітб5 | бкюв | БССТИССАТОСТ тв збо 0охепе | 53
НИ тасттота «58538 1753) ітвз3 | кн | ТБАСТОАСАТСТ 94 хвої ках | 514 по | тоасстос зво | 1912) 1931 | Ян | ПСТАТСТОСЛЬСЮ 34 во | баз5 | 515 із ТС звявяз 0 з982 о ово; | Екон | АОТСАТААЛААТІЕ «о віт 0оелюх | 56
І3 | САССААТТ звявах 0002073 | змюз | бююон 0 СОАОТТОТТОССТ 57 6552 0 бе | 517 7 о | соотосА і ' вва зожх 0 зімо| бкюн | ЛОССТСАЛАОСТ 45 дбта Бої | 518 ї4 | сОАотТтст «вявяя | 2691 | зі | Бюшюно |) ОЄЛОБААСОСТО їй во | «бою | іо і | здаостоа зон утасттопАда зявахр | 097 0 іб ббюно/ ОІАСТТВАОСА 43 вб85 | ет | яга 14 | АОССТСАА те | 103000 011330 Бкюно | СААОТСОТАСТІ щ дими причи МД ть альиЯ шо жішш Яеооскиче - Ем СВ БЕ М 1 й 14 ссдоасАдО тдвоея | 128 0 сід | Екюно | ТОСТСАСАСАСА - пери пре я
Те шо 7 15 | ААСАСАСС я й М хдвах 002і7200| зії | Якюно | ТІСТОСТОСТОМЛО чі во | «ото | 53 їх АСГАГАдА вякаеЕ | 3196 0/0 2215 Якюн | ТАБАССТОСТТСС хо бова 0 лов3 я
ТЯ ни 7 15 | бАстсАб т ! : : звжесю | 2202 | 2221 | ков | ПІБАТОТАЧАСО 27 чоов това | 525 " їх о | тосттесо хо БІВ явЕхяа 002310 | д238 | бнк 0 ЄРТТСТТАТСОСЄ 4о нд. яд. | 526
Евкзонів | АТІСТІСТ пл о А ПЕ ПО ПО НО НО НИЖНЯ їлик рукави й й ОССТТТСТТАТСС «БЯ584 2221 | 2240 | БЕкзовів | 77 т- ев ня. нд. 527 й и | ССАТТСТ ще 1-6
Стик тут р ериртркетртр А пр дата з 1343 | ркзонів | СТОССТТІСТТАТ й нд . зла зад шй шаиіш КО підт я срет 75і ї.л. на. й пря ССССАТІ 15-16
Стик сту - й | под А ОЇ АОСтТОССттТтСтт і
Бик З2ЕХ З244 | БЕкзонів печити 43 н. н.д. Зак нОГАТОСССА 7 : 1-16
Стнк га пером щи сячи | | сАастасстттст -. «ВВОбІ 2226 | 2245 со проанй 53 н.д. яд, 529
ЕБкзонів | Татосос д А 5.18 їлик - ери - «вих оз за | в 70 | АСАОСТОССТТТ са 530
Зщ5АБУ й ша око певервод рити 9 н.й. н.я. 53 тк ік СТТАТОСЄС іп-ка по Нд т оно | ОСАТСТСТСТСАЄ - ла - До х5яві х238 | зах: | Боно | ВСАТСТСТСТСАС ба 7122 та | 53 їй АОС 5ВВбБ 0002276 | гзе5 жено | АОЛТОТИСТТОМ 46 тбо0оліте | 532 16 СТІТатса ск САВСАТАВОСАС Й «ваббЕ 002330 0) зда | Боно | САССАТЛОССАО 7 7214 7233 | 33 16 ТСАСТОССТ
Стик хи ич их дня на «8867о ззкі ЗДО 0 вазонів | ССОССАСААТСА «в ня ня «14
Та 17 явори ротові | ССТеТосА щи їй вол, 7 10й-їо (зо ТПААТОАЛАЄ «ВЯ7І 397 | заі6 | кон | ТЛАТОААЛССА 48 7362 "зр | 535
І7 СтТІСТЄтТт кеди ВСАА 5вВЄТЯ 0 за30 | защо 0 ббюно 0 еЛЕССАСЄТАЄТ 29 7665 | вва | 536
Їх СКАН з88бт6 | ояв о | зяот | Мен | СОСТТКТОСТТТТ 58 те83 07702 | во 15 ТА АСАС вяЄтЕ 0 дядя 0 о4ті | бно | ПІТТОССОСТІСТ 45 7685 ттав | 538 15 сОІТІТТі хв5ББО | сявб | зявх | кон | ОГЛОБТЛОСТОС зб тро | 7720) 539 їв ттІттОоСсо оо 2 ; з теттавдатттіс - па даю | що «кКеВ2 2532 зяхр | кон | ТСТТОВАОТИСТ 47 7787 ття6 | 30 18 ССтІСАС жит: ЕЕ стини визна х «ЗВІТІ | 3509 | звід бкюно | АОСТОТТЕТАЛТІ 95 78340 ляїз | 239
ІВ СААТССС
«32917 2604 | 26а3 0 бкюно | БТСОСЛОСТОТІ 96 твзе осві | 37 8 ТТААТТСА
Таблиця 1
Інгібування ЧМРНК СТВ МОБ -гепмерами, націленими на ББО 13 МО. 1 або
ЗО МО.
Стоп ще Стоп и ш Сайт ш-
Сайт -овйт «е ініщіяні | байт ЗЕ тет: | інФфНІЯНИ | ЗВО Цільова . . оо НИ Ї ву ук ще
КІВ ре х й Послідовність інтібува І БО й Мотив 1
ЗО НВ; соласть чня то На; ма. мМос:і 0 Мо: -- 6 | МО 7
МО, й і І зад
ААКТССТСА х9ва35 | 0 2552 1558 | Екзонії | ЗААЛАСССА ів тткт | т8оз | 5.7-5 | 619
ААТССТСА пкт сня авота | 2553 | 2550 | Нкювів | МААЛАССС ЗВ ттяв | тя 3-04 | оо
АААТОСТЄ з0е037 3543 | 2450 Бвзонів | ВОАЛАЛСОС 19 ттяВ 0 свея | 57-40 6520
АААТССТС
АОААдАСС 08975 2554 | 2570) Бкюнія | ГСЛАЛАЄО і5 ттве свої | 3--я я пГААДАТСОСТ под Щи р-7- ОСТ ТАБААААСС й ди що п хаея | дяка 0 зро Бкзоній | ОЛАЛА 32 тво | сеї | я-7-5 | 63
САААТССТ тА А й Що Що «оВа76 | зха 2571 Бкюнії | МАСААЛАС із тто0 0 т8об | 3-04 00 833
ССАААТСС
. й . . й 7 дя д; жи ль Щі Й хвепзо | озхях | 2571 | Бкюнія | МТАСЛАЛАС 7 ТКУ | 7воб | 5-7-5) 623
ССАААТСЄ тРгатадїа дя 5о5от7 | 2557 | 3573 | Бкзоніяй | 1 ТАТАЗАЛА ІЗ тт: | твоя | 3-10-4 | 8
АГССААДдТ ср 7: Е 500 25547 | 2573 | Бкзоніх | ТАТАСАЛА 13 ттоз 0 ляав | я--5 0 823
АСССАВАТ
СТТАТАСАА
АСССААА Й тата зобом: 53802574 | Бюзюнія | СТТАТАбАХ з ттоз 0 лява | 47-53) 524
ААСССААА
ОССТІАТАЄ; ! Й І хо8о7о 0 2550 | 3575 | Бкзонів | ЧТ ТАТАСА Е ттоз твій | 3-10-4 | 625
ЗААСГССАА ства тая 5а9041| 2559 2575 Бкюнія | ЧСТТАТАСА 19 тя тео | щ-т-50| 528
АААСССАА
СССТТАТАЄ Й І ховов | зяб 002576 | Бкеонів | ЧССТТАТАЄ 42 тт | 7811 | 3-Н0-я 0 526
ААДАСССА поли ди --1 ОСТЕССТТАТАЄ І Й | пи шик «99043 | 560 2574 | Ехзоній Пл Іо ттех | тя ох | вк й й ААААСОСА зовові зро) 2577 | Бкзанів | ССССТТАТА то тт95 | 7812 | 3-04 827
СААлААССС «99048 | зявр о 002577 | Бкзонії | ССЄСТРАТА 12 ттож | тя13 5.75) 87 х90044 | 2 «т прут Й те ОО лЯІ2 05 :
СААААСК зазо52 3552 | 2478 Бкзанів | ВЕСОСТТАТ іо ттот | віз | 3-о-а | 628
АПСААЛАСС
"ГТТдт 399045 2562 | 2578 | Екзонії | ССССІТАТ З ттет | 7813 | 5-7-5 | «28
АСААдААСЄ
АССССтТ 5овов3 | 3563 2570 Бкюнії | ПАССССТРА о тво 714 0 3-о-я | 529
ТАСААААЄ ее 99045 2563 | 2579 | Екзонів | ААССОСТТА ІВ ттея о лвіа | 5-7-5. 629
ТтТАСБААААЄ зали авовЯ | 2564 | 2580 | Бкюніф | ЛАССССТІ 2 ттов | тя15 00 3-04 | 83о
АТАСАААА зозаят | 2564 | 2580 Екаонів | 2ААСОССТІ ттов 0 твіх | 857-500 830
АТАСАдАд що Щи САААССССТ : і «овавх | зяб | 2581) Бкюнія САЛО о тв0о | тя16 0 3-4 | вза ох гу ЯМ ві конів ТАТАПААА іо ій ї
Нд що ! САААССССТ дод 7 слі хоФОчя | зах 002581 | Екюній |У а тва | лві6 | я-7-50| 63
ТАТАСАдА «ововв 3566000 2582 | Бкзанія | ОБААЛОССС о твої | отяї7 | АНЯ | 833
ТТАТАСАА подо и ді ОСАДАСССС й що Й 2-2 ; хоеомо | зхек | 2583 | Бкзоній | ОБАЛАСССО ІВ 61 світ | 8-50 8533
ТТАТАСАА. ходова | 2567 | 3553 | Бкюнії | ОбАлАСОС а тва тая | 3-10-4 | 633
ТТТАТАСА
- зевІ ; АССАААССС 9 7902 трів 7-5 513 а-О5О 257 585 Гкзонів ЕТТАТАЄСА В тщо2 В ; тв | САСБАДАСС зап твіб ловля | бла ни бкюв ші ОСТІ. Ат Ас й й Шо І І - ев | ОССАССАлАС щ ясла таза зла 615
АССАСЛААА зе що тазі твоя «1
Б | бкювіВ | ссосттАТ - порт ря ре «с Е 15 САСКСАСИАА 15 ткоє тво зв-я 47 око їхті ЗБК хзонії прощ І 12 т 52
ПИ Що АССССТТА ще зяще 0 Бювнів ССАОСАЄА 37 тат та лаяв ехо Х ШТ 155 "кзоній пух 437 ЧЕ;
МИ ААССССТТ ев | ОСА АСН ще ткох твоя | 3-14 612 й те | ТССАОСАС я тела твлх | зал | 5 зояов: 2575 | 2501 БЕкзоні5 | ОТССАВСА зв ті | тоб | з-та-я | ва: аж 575 ІБ кзані ОСсАААССС А 4 . ст СсАС х8 - тт | 3-4 каз й тк | СТО ТОСАЮ ля ткі13 твої зв4 ваз 353 БкюніВ | САОЗАДАЄ - щі тю ха | ЕЕ 15 состотосА пі 7віІЗ тка | 3-НЬ зе
ЗОЕОна І5ТЕ ре конів | сан хі твіЗ тва п САС ААА й пу тк | ЕКС ССТОТС - віх тязі | з.о-я 545
ВО З5У6 | Ркзонії САССАСОА т 715 й Й Шо ТЯ Екон ші ССАОСАСй т п Ша я | сКюВів Ї емсАоО те | АСОССССТО я ясії те1ї3 | зв-я діт зІйщ ! САСХНСОСТ - ті та34 0 Зла вав 1554 Іо Еклон 18 пТеСАСеА 71 7515 783 бе | ССАСОСТОТС -це лоїй 7515 їв о
ТО Екон ! й тотесАОоЄ й Щі ІЗ ШИ Й й 778 Ной Е нйй о СтотосАю Ш вОщю 25 р зоні стстосАд бе | ТСОССАСОСС щ лоз тут зла-я 5
Тео - БТ 759 і Екзон ! Й состотес о
ВУАН 2257 (ад зоні пре ит нт ектріичення н Щі ссстотес й те | ЛАТСССАСГО -- 7974 тв19 | здв-я 53 т Екон й Сщосстс Що й Й вд лидк й | СААТСССАЄ - таза тав | 3-за-я | бла ха 2555 ОХ Екзонії сесестит це й ТААТЧКТА - тро тва х-1д-4 хх 1 25) ва конів птн ую тн ут нти ни га їі то А ; де доня отв | ІТСААТССС - тов тва» | з-яа-я | вах хі 25 ВМ | Екзоній асосгест ТУ о ТМ Те й й ! й САСОСОСЮ ій азс й І кзоні сАСеСеСЄ
Най Най на ков й ссАСКС їй
ЗХ ккд ККУ "КЗ їх сеАєсССЄ на Тео пон 15 сосАСОСЄ й ТБ й 53014 ї554 2618 Екзоні5 СеСАСОСС ? те | ТІТААТІСАА -еїй тва За-4 0 Бо хо МІ) Екзонів ТЕССАСОЄ 7830 тЕАб | хі хеорі5 | 2596 03613 | БЕкзюнії | ПТААТСА 45 тязі | тва? м-н б
АТСССАСИ що і ; о | ТТЕТААТТСА ї і ци «ом? 3507 | 2513 | БЕкзонів за 7в3зх | твая | 3-10-4 | 653
БИ ще Екзонії АТСССАС 4 55 АВ 3-10-4 а чевоія | осяря 0 зві4 | Бконів | ЗЕ ПРААТІС 56 таза | тядю | 3-10-4. 663
ААТСССА
ПД ТОТІТТААТТ і ; що Що «кнно| 2509 15 | Бкзній |. Вірі 50 тВ3Я 0 7850 | 3-10-3 | 5
СААТССС
ОТСТІТТТААд й ЩА зво | ою | 2615 | Бкзонії | СУТ ЕЕААТ о 7935 7851 3104) 855
ТСААТС
ДИ ц пктя ОСТаттттТА ЩІ Щи ЩІ ЩІ Що зчод2: | 2601 1817 | Екзоні8 надра 34 тЕза | 7853 0 3-о-4 | 665
ЗАТІСААТС пол щи ЩІ ООГАаСТОТТІТ | ЩІ хаап22 | 3805 | 3818 | Екхзонії | і7 тв3т | 7853 | 3-10-3 | 687
Що ААТТСААТ Й «00023 | 2603 | 3619 | Бкзонів | САЯСТНТТІ 52 тваж | 7554 | 3-0-4 | 668
ТААТІСАА
СТСОСАОСТ
«32917 | запа | 2633 | Екзані8 | СТТТТААТТС де 735 0 тВ5я | 5-10-5 | 317 хводгя | 2604 | 2620 | Екзонів | ЗСАЯСТОТІ 88 тв | 7855 | 3-10-4 0 659
ТТААТТСА пи щи | СОСАССТОТ Й і : | с звайзя | 2605 | 2521 | Екзанів | 2- 85 78340 0 с856 | 3-10-3 | ато
ТТТААТІЄ пидеш ши ди 5 | ТСОСАОСтТО й пори ; що хво ІО0о 222 | Екзонів | КК. т, ва та тат | НМА | вті
ТТІТААТІТ ме? 2823 Екзонії СТРРТАХТ ЩЕ 78542 ТЕ 003-103 зт й і татсогАОс Й здаазв своя | 2624 | Екзонія | 73 связ св | 3-10-4 | 573 й ТОТІТТАА хаспло 2605 0) 2825 | Бкюнів |З ГОТСВСАЄ 7 тва 0 твбо | 3-10-4 | 27
СТОСТТІТА
Й и . ГаттотОКА і й
Й ОСТОТІТІ дала Ще лвзя 0 | ТОТТОТСОС пн иа сяк ха тої 2527 БЕкзон 15 поумнаннни тка ТО 0-4 та
ССС
«00032 2612 0) збзв | Кюн | ГОТТОТО то вдо | ндо| 3-3 677 іфЖнавтен | САС ТСТІ пр др дез оКлов ЗТ о; я нище зо0о33 | збі3 0 зв | Жено | ПОТТОТОЮ Во ядо | яд. 310-678 іТЄЮпновтав | САС звеа34 0 зі4 | 25 Цен | ТЕОІТОИТЄ т надо вдо) 3-ННЯ | то ібповтор | Сб АСНТО 99035 | 253 2631 | бкюн | ТЛО 53 н.д нд | 3-10-4 | 680 іЖповтер | СТА СЮ
Таблиня 12
Інгібування мЕНК СВ МОБ тенпмерами. наніленими на ЗО ПО МО: Її або
ЗО юЮ МО.
Стоп дом Стоп рах - Сан ш
Віт -саНІ щи о си ти
Ку дти-х . ба тніІйЦц ах ЗЕ сотолю | МИЩаАННЯ | 5БО Тильсва й . Ше 0-0 | БО й
ІІ» пт - - Послідовність | пцібува | й БО - Мотив Іо
ЕС НВ) оссласть М ни 13 «о щи А ння н МО мосі | ка: й у А | МО: : МО: -
71117111 замека | її 1 Її
АлАТ І
А А- -
АКА ЛНЬЯ
КАТА
Я БАРА ко ї
ААССССТІ
ВАК І
Сл
Гсрзнесї 177 17171
АНлАНЯ
СЛ УТЯ
АК ААУ шим зе -х
ІКДСАХ
«хі лк аа а попи Що ТТТААТТСА : Й і меотЕ | 255 з сонній |у тА й т таз тато 5-5 | во оо 506 12 | Екзов АТСССАСЕ 831 | 754 5-т-5 з пет доп, зредте | 2507 | 2613 | Бкзоні5 | ЕТААТТСА о тЕїз | тяЯк 0 8-7-5 | 662
АТ САЄС
«нюво збе о | зві 0 Бюзонія | ЗЕТЕТААТТЄ 79 т83аз | тваа | 5-75 | 3
ААУ СА скнжщі 2599 | 2615 | Бкзонів | ТРТТААТІ 7 тЕ3а | т850 0 щ--5 | Б
СААТОСС
«со082 3600 | збіб | Бкзовія8 СІТІ ТТААТ| у тязя тя: о 5-7-50 665
ТСААТОС хаодеу 2601 | звіт | Бюзонії | УСТОТТТТА вт тезб 0 тв53 | хл7-3 | вв
АТТСААТС
Й о ТАосстаттТІТ й ЩО й пи зооохе 2602 | 2615 0 Бкаонів | ДОТИ 5 тв37 | твхз | 8-7-5 3 667
ЗАТТСААТ
Й І САОСТОТтІТ Щ
ТААТТСАА
ОСТОССАОСТ
«32917 | 3603 0 3623 | Бкзовій | ОТТТТААТТС 2 тя3е | твхв | 5-05 | 317
А зоодже | 2604 | 2623 | Бкзоніх | УСАССТОТУ Ві тахо | тая 5що
ТТААТІСА що Щ 1 СОасАОоСтТОТ | и ЩІ Й «090857 | 3605 3621 | Екзові85 | 27 7 В тяяо | 7855 | 8-75 | вто
І ТІТААТІС 7 пи деки про й ТО А СНО ц я» -скя пог кт «допЖе 2605000 2622 | Бкзонії | ЇСОСАОСТО з4 тва | тя | к-т | т
ТІТТААТТ
«оооде | бот 003623 | Бкзові5 | ЗІСОСАОСТ кі тяЯз | тв | 8-75) 472
ПТТТТААТ
Що і : татсосАсс Й й що -юдюоє | 2605 02524 | Бкюзоніх | тва | твяо 0 --7-5 | 673 й ТОТТІТТАА я«оо0ої1 0 060 | 2625 Бкзонії | 15ТСОСАЄ 74 тА 0780 | 85-7-5 0 674
СТОТТТТА
«од: зві0 | 2260 Бковнії | СЕОТСОСА 55 твая | звер | --0 875
ОСТ РТТ й В щи (| таттатсос й пн рони о яоовоз 261100 | 2627 Бкзоні5 | ЯТЕОТОВС що тяаб | 7862) 5-7-5 | 675
АОСТОТТТ зворея | 2612 | зав | вен | ПОТТОЛ 52 до ооондо 5-75 0677 іб'лповтор | САЄЄТТОСТ | І 7 пет здох | 2613 | 2625 (пон | ПЕТОТТОТСО в? вдо) на 0 В-7-3 00878 ібпавтов | САС і «ок зб1і34 | звзаю 00 бкюно | ГРГОТТОТО 85 ло нд 0-75 87 ібповтов | СА ССО | І явеют | озві5 | зві Бкзон | ТІТЕТОТКЯ те ндо | вдо | 5-7-5 3 583 ісповтов | СУС АСЮТЕ
Табляиня 13
Інгізування МЕНЕ СЕВ МОБ-тепмерами, націленимнона ЗХ) ПО МО: 1 або 5ЕОІ МО так Стоп Сяйт Стоп
Свт Щі ЩА НИ їй що ініціанії -сайт Цільова о інишадо -саНт хво хотоєти» | ЗНІНЕ м Тльо - . 2 пс ва ; й
МІВ тВ | ЗЕО М ІТосліповність 0 знгбува | ПЯБО | 5БО |) Мотив ІБ хБОІ область то й те
МО НІ) ння б 1 ко:
Ми | зо. моОос2 | МО
НО М ПО ПО НОЯ НОЯ НОЯ НИ НАХ НІ
СЗЗ нЕЗ ЕЕ 599515 2552 ЗМІ БЕкюнії | САААЛІЧТЄ 45 ТКУ 750х щ--5 аВіІ
АТАСАААдс зопххї 2553 2511) Екюнії | ЄСАААТССТ но 7755 тк 5-5-5 ак
ГИ
ЕЕ ЗЛЕ
359332 554 ах Екзані5 | СЄГСАААТОС їх то ТЕТ 5-5-5 кі
СТТАТАСАА
Є сирки КЕ тер 89334 2557 2575 | Екюнії | ЛААСССАДА 5 той 7810 -5-8 5
СССТТАТАС
А
Ес ЕЛЕЗЕЗЕЗЯ виеААТИ І5ІЗ 2517) Екзоніб | ВААДАСССА не тА тВі2 5-У ак?
А
ЕЕ СЛЕЗЕЗЕЗЕЯ
509337 550 2515 | Бкзон 15 | АВБАЛАДССЄ 39 тах 713 5-5-5 ке
А
ААЛСССТТА
ЗО а 2579 | Екзон ії | ТАСААЛАСС 57 тоб т8і3 -Я-я ока
Є
АААССССТЕ
Зводу раткя 580 | Екюнії | АТАСААААЄ га тт 75 5-5 50
Є
АААССССТЕ ак Бад 254 0 Бкзоніб | АТАСВАААЛАЄ 15 ТУ 75І5 б-7-6 ГЕзеД
С
ЕЕ СЛЕЗЕЗЕЗЕя хо954О 53 аі1 Екзонії | ТАТАБАдДАА 17 тт 7515 -а-у за
С
САААССОСЄСТ
389252 І15543 шкі Екзані5 | ТАТАБАААА тав ті й-7-5 Бі с
ЗЕ ЕНЕЗЗЕЗ за5лаі1 рат 2282 | Екзонії | ТТАТАСААА рж тт ткі7 -я 532
А
ПОЛ ААСЄЧ ох ІБ 2552 | Екюніїх | ТТАТАСААА ІБ тУува 78І7 0-7-5 оч перен нЕ к тях
СЗЗ СЛ
595542 ІВ 2553 | Екзонії | СТТАТАСАА 10 тка 7815 5-щ-5 пвх
А
АССАААСЦЄ з952к4 І5Оо5 83 Екзонів | СТТАТАЄСАА ІЗ ткой 75І5 б-7-8 вах
А
СЗЗ СЕЗ
89344 5655 2583 | Екзані5 | ССТІТАТАЮСА ій ТИ тщ15 а-5-5 Бо
Ех явно зве ХМ ово ввовн нм во 50о344 2567 02583 Бююонії | СССТТАТАЄ 32 твої | 7520) 5-0-5 | 505
А
ПСАССАААС
«ФО2Яб 2567 02395 Бкзоні8 | СССТТАТАЄ зі тяО2 | 75230) 85-7-50| 505
А бен еннее ДНЮ во ввів нм во 590345 2565 0 3555 БЕкзоній | ССССТТАТА 19 тваз | 73 | 85-0-5 606 а лЛОСАОПАдА 509257 2558 03586 Бюонівб | СОССТТАТА із 7503 7821 8-7-6 0) 506
САОСАОСАА
САОСАОВАХ
599258 23560 2587 Екзоній | АСОССТТАТ 28 тебя 0) 7822) 85-7-5 3) що?
А вен в не ве МИТА 8 овеов» нні 590347 2570 3555 Екзоній | ААССССТТА 46 тво5 | 7833) 85-9-5 | 508 т т
ТОСАОСАСО тТеСАОГАСВ 5Фо200 0 25ТР 00 2389 0 Бюоніб | АААССССТТ 28 ткоб | з534 0 5-7-50| 59
А отесСАосАа 390340 2572) 3520 Ехзоній | САААССССТ «0 тт 7825) 8--5 ) о бек нн) нне ВАЖКО є ви звн нм тв аТеСсАОосСАВ т
ТОТССАОСА
509350 1573 3591 Бюконів | пОАААСССС 49 тЖов | с82в ях | то т
ТОТССАОСА
50О203 2573 2591 Бкзонів | ОСААДАСССС 35 ткоя | 7526 | --650000 то т сСстОтесАЄ 590351 2575 2503 БЕкзоній | САОСАААСС 46 тео | тез5 о) 85-о-5 | 703 вені |в ом оте івн ям т сстатосАЄ 590253 0 2575 3593 | Ехзоні8 | САОСАААСС із тво | тязя 0-60 3 с
СССТОТССА
599352 2575 3594 Бкзоніб | ОСАООАААС 49 твір | т52о 0 5-0-5.| 703 с
СССТОТССА
50204 2575 2994 Бконівб | ОГАОСАДАС за тярРОЇ| 7529 0 -7-50| 703
Си
СОС
559353 ВТ 2595 Екезнії | ААСОСААА щ- ТІ тк3О 5-5-5 о
С спас
ІОВ ІВ 595 Екзов ії | АОСАСЮЗААА 33 7812 тка й-т-й тая віт |в вен мою) зо ввожн км т
ОСС за 7 Те Екзон 1 | САОСАССАА х5 7вії тк3ї1 3-0-х тв
А хан еи хо0сюа 2575 ІБч0 Еюквонії | САОСАССАА іх 7513 т83і щ-7-6 тох
А
АСаССССЄТЬ сах 55 555 Екзон ії 0 ТОСАСгГАСО ві ті 733 5-9-5 тоб
ДА
АСОССС
359257 50 ТУЗ5 Екзон 1 | ТОССТАОСАСОЮ 27 ТКІх ТІ й-7-й тв
А
САС хОо5Ка 553 559 Екшзонії | ЧСТССАССАЄ 54 7Т785Іб 7534 к-2-5 707 с сіно) н вже зожю| » о веовні ем
ОО БЕ 55 Екшесній | ОТПОСАССАС 3 твІб та 5-7-5 КЕН її
СТАСНССЄ оо 1552 ю БЕкзовії | НИССАССА 5х Тіт 735 Б-т-в тв інею тин ПИ) еоввове ем
АТ За КН Екзанії | СТОТССАСИС 45 ТІВ твій щ-1-й ЕН
А чо ва 53 Екзонії | ССТОТССАЄ Ка 5 7537 й-1-5 ТІЙ
С
АТСССАССС
Б 1555 2505 БЕкзовів | СССТОТССА 27 ТЕО тка бет-й т сені ве но вен ШОб| мова вні ямі т
ААТСАСО
25933 ІА5а ЗМ 0 Бкзов РК СОС 35 ти 73 йд-т-й т
А
СААТСССАЄС чо 587 ІОВ Бкзан ії ССО С і 7522 де й-1-5 ТРА с
ТСААТОССА
МІХ 555 2508 БЕкзанів | ССС зі 7523 ті 8-7-5 14 с
ТІСААТССЄС хе ШВ5О ТІ? Екзов Б | АСИСТ то тв тА а-7-5 7ІБ т
АТІСААТ Є
БА ра; п Екон | САН СЄСТ по ТВА ТтКАХ а-7-й ТІ г
ААТІСААТС
УМХ 551 д6095 БЕкшеній | ССАСОССС ов 75726 7848 8-7-5 717 ін вин ХК я вхо знемО т сну» |ме тн ЖК | з | ви пе) ем| т
ОБ Ію 592 2510 Екенії | СССТАСООЄ 5 727 745 5-7-5 ТІВ
С
ТТААТТСАА
509310 1503 3641 0 Бююніб | ТСССАСОСС 39 тЕОВ 0 пвЯа о 8-7-60000 тів е
ТТТААТТСА
509311 2504 002612 Бкзоній АТОССАСОС 83 тяза сват о 8-75 72о
Си «98317 зап 2-13 Екзоній ТИТААТІСА 72 ТЕЗ вв 6-7-В 72 пул д Блез І скЕзаніє ува ак а їж ог їжею рн шу
АТІКА тттРА АТ 509313 2505 0) 2614 |) Бкзонія | ЗТТТТААТТС 85 тя3Ь | сБав о) 5-75 | 723
ААТСССАСОЄ те ще т90314 | 2507 | 315 |) Екзонії | ОТТТЕААТЕЇ у теза | тахо 8-75 | 723 ж ЩІ І і СААТСССАС і 0 пи прод | ви 16 | СТСТТТТААТ Щі тела | пет: | «ак | уд 599315 зав 2815 | Бкзоній п кднА ті 735 ТЕ щ-т-5 724
ТААТ СА
ОСТОТТТТА
599315 2500 0 3617 0 Бкзоній | АТТСААТОС о тв3я | тех 0 в--50| 725 с
АОСТОТТІТ
590317 2500 3615 0 Бкзонії | ААТТСААТО 87 т835 | 7вх3 0 8-57 с
САССТОТІТ
599318 2601 03610) Бкзоніб | ТААТТСААТ Ві тязв | тв54 0-76 | 727 с
ОСАОСТаТІ 509319 2502 2529 Бююнів | ТТААТТСАА т тя37 тях 0 в-7-5000 728 т
СОСАССТОТ
599320 0 2603 2621 Бкзоній | ТІТААТТСА 8 тВ38 тя 0 6--50729
А
ОТСОСАОСТ
532217 23604 0 2623 БЕкзоні8 | СТТТТААТТО 22 т839 | тв 0 5-05) 317
А ппекиета 509321 зе 2522 | Бухонів | ГСОСлЯСТО зо тв3а | 7857) 8-7-65 | 730
Васі ХЛ аку пкасноіх ТТТТААтТТСА що Ель Ельза Ге -й ТУ 11і1Ал ой стос 99312 3605 | 2523 | Екзоній | ЗІСОСА9СІ во тво | тяж | 8-50 73) пУкл ше - реа кан СтТтТТТААттТе ч: ех ее» нн І 111 дл: й «00323 | з5оє | 2623 | Бкзаній | КОВСЛОС ві ті 0 тяхо 0 в-во 732
ТОТТІТААТТ пи па по В ттатсосАЄ : под 05 д 599314 | 2507 2525 | Бкзонів | СТотттРААТ «8 тв4з | 7860 | 8--5 | 733
ХИТРА дІ
СТТатсА 509325 2608 03626 Бюконіб | ОСТОТТІТА в 7А3 0 тЕбР о й-7-6 0734
А тоттотсос 599325 2600 2627 Бкзоній АОоСтТОоТтТттТ 52 тяза | зва2 | 8-т-50| 735
А ткзмно ТІЗІТОТОЮ гот дич чн кзин - сих пищищи - й - -ус 559497 заї10 ОК |, е САС 58 н.чял. н.д. Б-7-6 Так іб/повтор т звезія | біо 03623 | ен) ПТОІТОТОВ 87 ндо | ндо -76Б ОО) 737 іблювтор | САССТОТІТ доліт що т ре «99333 | збі | за 0 Вкюно 0 РЕРТОТРОТ ща вл. яд. | 8-7-5 | 738 іфповтор | ССАСЄТОЇ і Щі 506230| 15 0 зс63р | Бююно | ТТТІТОТТОЇ 87 ндо | ядо 0 в-5о)0 739 ібповторд | СССАОСТОСТ І
Таблиня 14
Інгібування МРЕНК СЕВ МОБ-гепмерами, націленими на ЗО ПО МО: 1 або бо МО. 2
Стоп лм Стоп
Сайт -СВйт їх: девит -сайт т
ПО ще що мВ НІНО У ЕВ
МІ пи но 5Е щ Нільова Послідовність | інпгібува | З ЗЕ во Містнв НЕ:
БО) З | область ння шо Мо
МО: ко: чаги МО
АТАСААААЄС
СА
ТАТАСАААА те
ТТАТАСААА хО9Я М аа 574 Бкзаніх | АСССААЛАТС хі т7Ко ТтвОоЖ | 3-10-7 зі12 м
СТТАТАСАА ові 2525 дята Бкзонії ААСЕСАдАТ їх тов ТКщ | 3-16-7 чіх
СС
ССТТАТАСА оп Ехо ЕТ Бквснії | ЛААСССААА 34 77951 ТЕ | 3-17 314 те
ОСССТТАТАЄ
09453 раз 2575 Екзоніх | ААЛАСССАА 44 Т782 ТЕР 0 3-10-7 415
АТ
ССССТТАТА хоо454 285 ЩЕ БЕкзоній ПСПААААСССА їх т7тох т82 | Цю 315
АА
АССССТТАТ
ОА 55 ри Тит Бкзаонії АСПААААСОЄС 25 7794 7815 | 3-10-7 417
АА
ААССССТТА
СА
АААССССТЕ
5457 2551 КО Екзовії | АТАЛААдАЄ 48 ттае тв15 ) 8-10-7 З19 с
САААССССТ хо 55 ха ТЕ8і1 БЕкзоній ТАТАСАААА й ТАКЕ ті | 3-67 420 м
СПАЛА п жк 253 582 Бкзонії ТТАТАСАдА 13 ТЕ т517 | 3-7 451
АС в зе венн Ж ит» вени в оба 253 ЇхЕЗ Боснії | СТТАТАСА А 17 пов ТК185 | 3-16-7 4357
АА
ГАССАААОЄС
АА
СССТТАТАСб
АН
АССАСОСААА ха93а3 23557 556 | Екзоніїх | ССОССТІАТА ЗЕ тег тд | 3-10-7 435
СА
САССАОСАА
505454 2505 2Ж87 | Ркзон 15 АССССТРТАТ 35 тої Та | АН? 435
Ас
СГТАССАОСА тА
ТАС АвСе засп485 257 З25ЕВ | Бкзон ЇЇ | АААСЄСОСтТТ 45 705 т884 | 3-10-7 З2В
АТ
ПССАССАЄ за93Е7 2271 8590 | БЕкзов іх | СДААСОЄСТ - таб 7825 | 3-10-7 237
ТА
ТЛТСеСАСКА ха 2573 з591 Екзон Ії | ЗА ААСССС 51 тат тк2Б | НТ 28 т
БІ З зао4щя 2573 ТЕХ | БРкзон 18 | АОСАААССС 3 тва тк | АНТ 430 ст
ССС Ас
ЄС ов фнн)тннв меми обо чех» зи) зап4ті 1572 З | Бкзов 8 САС АдАС п що тре | 3-16-7 435
СС сссостеКе х85472 вата І5З5 Екзон ії | АОСАСЮСААА та т 7833 | 3-07 433
СС нт |в юмюм о зон ни 595473 2577 ї5905 | Екзоні5 | САИОСАОСАА 74 ті ТЕР 3 238
АЄ саеасссстот 03474 157 2597 | Екзенії | ССАОССАСЄСА я ткіз3 Та | 5-7? 354 дА
МОСС
00475 з5та ЖК | Бкзенії | ГАС АдО та 7Щі1З та | 5.7 4335
АА сАСОСССТ 004715 1550 4590 | БЕкзон Ж ОО ОСА АС Б 715 т3А | 53-30-7 436
ССАСОСОССС х-54377 ра ща БЕкзоній ТОТССАССА 53 ТІ ТЕТ 3-19-7 437 спе ие жень ПИЄЮЮ зо вижене) оо хат ХХ 10 Екзонів | СТОТССАСС 72 ткіТ 7835 | 3-07 38
Ас
ТОК АСОаС ховати 2583 2602 | Бкзен і | ССТСОТССАС щі тщіх ткат7 | 3-7 з3щ8
СА
АТЛАС
О94БО 2554 ОЗ Екшенії | СССТУТССА т тків Та | 3-7 350 вне хно же) венн СХИТА пове нн зе
СООС
ПИ ПИ ПО ПО Піно НИНІ ННЯ НОЖА НОЖНІ
СААТЖКАС зова з5Еб ща Екзон 5 ОКО Є 57 тва тая | 3-10-7 а
СА
ТСААТССА
ОХ 57 2006 Екзонів ССС ма те т84аї1 3-10-7 343 с вне ни| нин ЖОКЮ | золю и ні жо ЛЕБЕ 2607 Екзонів АС СтО 73 7542 1 3-07 434
ТС
АТІСААТОЄ х99485 а з Еклонії І САС 52 824 7543 3-12-7 чах ат
ААЛІСГААТО хобава їхоб АЮ Екзоні САС Ку т82х теЯ4 | 34307 чай то хо ра са10 Екзон ії ГОМАССОСО 54А 7525 7вах 3-4057 З
СТ
ТААТІСАА
ЕК
ТІТААТІСА
БАК и ах 2512 Екзон ії АТСССАСОЄ х7 У ТЯ 103-107 148
С венозне юо|нняию МОХЖЮЄ| в яю хвоя в хо ко54 2513 Екзонії | АЖСЄСАСОЄ о тК25 тк45 3-10-7 а5И
База 595 2813 Екзан 15 | ААТСССАСО 57 753 таз | 3-30-7 45і
С
ТОТІТТІААТТ
Ба 2598 251х Бкзонії | ГТААТСЄССАС 5Е ТБ 75 | 3-40-7 Зк чо ат 2516 Екюнії | ПТААВССА тА тк32 Т55І | 3-07 Я
С
СТСТТІТААТ
Мие433 59 2515 БЕкзоні ТСААТССА що т ті 5-5-65 53
С
ОСІСТІТА
ОО ОВ 2517 Екзон ії АТІСААТОСС за 7833 тка 3-10-7 Я
СА
ОСТ ТТА ховаза 595 517 Екзоні5 | АТІСААТОСС 5 7533 тих й-я-4 454
СА
АССТСТЕЕ валах їхое ІвіВ Екзан 15 | ААТІСААТС 5 тА ти53 3-10-7 дя
СК
АСОСТСТР
-ющах 1505 2615 Екзонів ААТІСТААТС і та 7552 0-5-65 Р
С межа хю|внюн ПАПоОм| зо яеолноне
БО дю 2518 Екзооніх ТААТІСААТ ко ТІ ТЕ5А 0 3-АНУ 55 се
ТААТІСААТ ет охо ен пипМмО во ве вним хуя? 2501 Ба Екзанії | ТТААТІСАА 58 7535 ТВА | 353-407 ах
ТС ат 9437 26501 зо Бкзоніїв ТТААТІСАА зі тк3а ТЕХ 2-5-5 іа т
СОСАСЮТИ
АТ а КЕН
АТ
ТО АССТЬ вк ку Мк 52 Екзон 15 | ТІТТААТІСА І 7535 тяКТ | 3-07 28
А ща 253 ЗБ Екзані8 | ТТТТААТТСА ЕВ тез ТБ п-8-5 Зх
А вниз |хн)внянК|Шнияне я о/з» венно х3050і7т гоп 2623 Екзанії СТТТТААТІС за тела 78525 | 5-05 317
А сЗтегАсоСт ча Ммю ЗБ БІ Бкзон 15 | СТТТТААТІС хо тв3а ТЕБЕ | 3-10-7 37
А
СТАТ
А тИаИтсеасалоєс
С татесАс 559441 2005 258. Екзан 15 | ТОТІТТААТТ в тва тиха й-я-й вас
С
ТІСТА ЄС т тІВБТСОСАФб хео442 26505 02 Екзон ії СТОТТТТААТ 76 тя то щ-5-5 5 т сота
АТ
ЧТО СОСА
ВСЯ ЕІ зле е я
АТ вен хи вен Мб ово вел нм зам І505 3527 Екюювів | АССТАТТТЕ ка 7ваЗ тивБ2 | 535-10-47 355
А тапиштСОоє 595444 ВОК БІ Еклані5 | АОС З 7вАЗ т552 п-8-8 зщ5
А
- ТІСТО ібповтю |...
Й іл опр гг
ТА я тпПегст 1б/повтор
Т
СЗЗ он снетЕз ее зва 210 асо й САССТСТТЕ щк н.д. воля. й-8-й 453 1іб/новтор т пери РЕЖ вохонрнія зва 1 аз й ОсСБАаСтТаТЕ ЗА в.д. вл. 3-1 з543 1іб/новтор й ї
Екзу ТТТТОТРОТ 1б/певтор т пере же Ж хотонрнія жах 2513 2531 ; СОСАССТОТ о в.ї. нд. | 3-10-7 | 4655 10/повтор т
СЗЗ ет сля ес хоче 12 а Й СОС АСАТСТ 87 н.д. н.д. 0-К-й 05 1О/повтор т
Приклад 5: антисенсове інгібування фактора В комплемента (СЕВ) людини в клітинах
Нера2 МОБ-гепмерами
Отримували додаткові антисмислові олігонуклеотиди, націлені на нуклеїнову кислоту фактора В комплемента (СЕВ) людини, і тестували їх на предмет дії на мРНК СЕВ іп міїго.
Зазначені антисмислові олігонуклеотиди тестували в серії експериментів зі схожими умовами культивування. Результати кожного експерименту представлені в окремих таблицях, наведених нижче. Культивовані клітини Нерс2 зі щільністю 20000 клітин на лунку трансфікували 2000 НМ антисмислового олігонуклеотида з використанням електропорації. Після періоду обробки, що становив приблизно 24 години, з клітин виділяли
РНК ї вимірювали рівні мРНК СЕВ шляхом кількісної ПЛР в режимі реального часу. Набір праймер-зондів людини НТ53459 використовували для вимірювання рівнів мРНК. Рівні мРНК
СЕВ коректували у відповідності до загального вмісту РНК, виміряного за допомогою
ВІВОСАВЕЕМУ. Результати представлені у вигляді відсотку інгібування СЕВ відносно необроблених контрольних клітин.
Знову отримані химерні антисмислові олігонуклеотиди в таблицях нижче отримували у вигляді МОЕ-гепмерів 4-8-5, МОЕ-гепмерів 5-8-5, МОЕ-гепмерів 5-9-5, МОЄЕ-гепмерів 5-10-5,
МОБ -гепмерів 6-7-6, МОЕ-гепмерів 3-10-5 або МОЕ-гепмерів 6-8-6. Довжина МОЕ-гепмерів 4-8- 5 становила 17 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив вісім 2- дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами-крилами в 5-напрямку і 3З-напрямку, що містили чотири і п'ять нуклеозидів відповідно. Довжина МОБ-гепмерів 5-8-5 становила 18 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив вісім 2'-дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами-крилами в 5-напрямку і 3- напрямку, кожен з яких містив п'ять нуклеозидів. Довжина МОЕ-гепмерів 5-9-5 становила 19 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив дев'ять 2'--дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами-крилами в 5'- напрямку і З'-напрямку, кожен з яких містив п'ять нуклеозидів. Довжина МОЕ-гепмерів 5-10- 5 становила 20 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив десять 2- дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами-крилами в 5-напрямку і 3'-напрямку,
Зо кожен з яких містив п'ять нуклеозидів. Довжина МОБЕ-гепмерів 3-10-5 становила 18 нуклеозидів, при цьому центральний геп- сегмент містив десять 2'-дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами-крилами в 5- напрямку і З'-напрямку, що містять три і п'ять нуклеозидів відповідно. Довжина МОЄЕ-гепмерів 6-7-6 становила 19 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив сім 2'-дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами- крилами в 5'-напрямку і 3'і- напрямку, кожен з яких містив шість нуклеозидів. Довжина МОЕ- гепмерів 6-8-6 становила 20 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив вісім 2'- дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами-крилами в 5-напрямку і 3'-напрямку, кожен з яких містив шість нуклеозидів. Кожен нуклеозид в 5'-сегменті-крилі і кожен нуклеозид в 3'-сегменті-крилі містив 2-МОЕ-модифікацію. Міжнуклеозидні зв'язки вздовж кожного гепмера являли собою фосфоротіоатні (Р-) зв'язки. Всі залишки цитозину вздовж кожного гепмера являли собою 5-метилцитозини. «Сайт ініціації» означає крайній нуклеозид з 5'-кінця, на який націлений гепмер, в послідовності гена людини. «Стоп-сайт» означає крайній нуклеозид з З-кінця, на який націлений гепмер, в послідовності гена людини.
Кожен гепмер, перерахований в таблицях нижче, націлений або на мРНК СЕВ людини, що позначається в даному описі 5ЕО І МО.: 1
(номер доступу в СЕМВАМК ММ 001710.5), або на геномну послідовність СЕВ людини, що позначається в даному описі 5ЕО ІЮ МО. с: 2 (номер доступу в СЕМВАМК МТ 007592.15,
укорочена в межах нуклеотидів 31852000-31861000), або на обидві. «н.д.» означає, що антисенсовий олігонуклеотид не націлений на дану конкретну послідовність гена зі 100 95 комплементарністю.
Таблнин 15
Інгібування МЕНК СЕВ МОБ тепмерами, націленими на ХЕО ПО ОМО.: | або «ОЗ МО.:2
Стоп Сав Стоп ноя - УЗ -
Сайт -СВЙТ ве інііяц -сяйт БО че м щ - я ЕК -. реж ау я тет | ІНН ща ільова . бо пк ЕЕ Й щеї15І5 щ пе ле ще Не Послідовність інгтува | ЗБ) З Мотив КЗ)
ЗЕ НН сорВласть ння ІЗ І мо.
МОг1 0 МО: що пвя МО: ша ї МО: пк я тат лек - - ССССтТТАТА ; зва16бОо 02560000 | 2577 | Екзонів щі зв ттах 0 7віз | 85-8-5 | 740 і й " ОААААСССА й пил КК пи яреїб2 | зя62 | 2579) Екзанів | МАССССТТА п ттот о т8і4 | 58-50 | лаз
ТАПААААСС
АТАСААЛАС
Кеш Яги тая До
Аа ; слух віх Ох -
НЯ й іділллаАло «юне | 2566 | 2583 Бкзонія | МОСАЛАССС а тваї | зві | 5-8-5 | 745
СТТАТАСАА тллзе 0-0 ЩІ | САООАдАСС Й ЩО п 529156 | 2557 | 3584 | Екзонів | ЛОБАВАСС Гри твб2 | 7818 0 5-8-500 745
ОССТТАТАСА щ щ до ГаслосАААС поді | зали | ко 75 зюієт| 2568 | зявя 0 Бкюнії | ОСАОСАЛАЄ ІЗ тез | тя2о | 5-85) 745
СОСТТАТАЄ
-кнЕВ | оз559 | з585 0) Бкзонів | МУСАбОАЛА Ів твоя 07821 | я-8-я тя
ССССТТАТА
Аг В ГІд моста
АС. К- 4 пси
ААЦССУКСЄСЗІЇд явоїті | сята | 25800 Бкзонія | САОСАОЄ зо т8от | 7Е2Я | 5-8-5 | ті
АААССССТТ х0е172| 2573 2500 Бкюнів | СТОСАОСАВ 31 тва 07825 | 8-5 752
ПАААССССТ
ТОТОСАССА ; й и Еююні | ОоААдСССС я й й
І лине щи | СтТОТОсСАоС 4 петля п - звої74| 2575 | 2503 | Бкзоні5 | У ЕЗТССАОО 25 тів | 7827 0 5--5 7
АПСАААССС
500175) 2875 | 2593 | Екзонів | С-ТОТССАЄ хо тВРРО | 7ж28 | 5-8-5 | 755
ГАССАААСС хваї76 | 2577 | 2594 | Екзонії | КОСТОТОСА за 7812 07829 | я-8-5 | 756
ОСАОСАААС
Щ | 2 й сесстетос 0 Що й - люта лАд - - що саессостат Й 1: Й 582175 | 580 0 З507 | Бкзонія | ПИ Я 7 тві5 | 7833 | 5-85 ТВ
Ш І Ш ССАССАССА слссо
Б «ЕМ хао150 0 з552 02509 | Бкзенів | САСБОСССТ 52 твіто | 7834 0 5-8-5 | 7
ОТОСАВСАЄ ее
Кс
КІС А
К.І 15. и ою ое вен содостюю| | вознозех,
АКА.
ТАС
ТОССАСсОоЄ
ААДАСОК
А?ііК А,
ЗО5ЩА---ї-хею1ТШЗШ011Ш-2-52----- 532517 зм З6І3 | Екзаній | СТІТТААТІС щі 783 ТЖНБ | 5-10-5 | 317
А рт Гетеен по я ретеретяо ко тт ТеСтоЮ ши Й
Таблиця 16 інгібування МЕНК СЕВ МОБ-тепмерами, напіленими на БО ІП МО: 1 збо «ВО МО:
Стоп Сай Стоп --ом й ВИТ й щ
Сайт -айт з іно Й ЗО «тоте їБйнаві 0 ЖБО | Цільова НИ шу шт | ЗБО в
МеІЗІХ | иеци. й с Послідовність | інгібува ї ЗЕ Міотив |. «БО | ТО область ослюдовню й ле т Мо.
Осі ж. - КО :
Мо Ше мог ї: ІАЕ пАЛлІКК І где зда ладі 8 АТАСААААСС ак стр зад ще гас
ЗАХа ЗУ | Бюмнів САААТОСТЄ хз 7788 ТБ | 6-7-6 | 552 : ще «- ш-а - АТАСАдААСС . стер трак | 43 я | ок сви щи цк ТАТА АААС - тов ще се що воза за 3374 | БЕкюнік | Не ТТБ ІА е-- 53 ожомя ооха | 2572) Бкюнів | ССАААТССТ оз | тю | то, вт | вах - - й 5 | ТАТАСААААС --в соло | з зд ко| чо - й щи судна ТТАТАСАААА . в - 4 в
Зак ЗВ 2375 | Бкзон ІБ суч ; й В; ТВО | 3 | ТЕ погея т пет дет ЛТТАТАСА: ; сте: - 4 В д тло дою | ГГ ОСТТАТАСАА Й спе | з . що да иа Екзан 15 до зсее ня ца НУ тВ10 -7-6 ви
ХАСССАДА
АЛОССАлА пллсслА плалосся 00 |в» о зюз| но кротут лекц яке - АССССТТАТА щ сеонує нащо сок
М. дав ЛУ | БЕюкзоні5 й що 52 ТО тІ3 щ-7-6 585
ПААААСОСА 15 |з) єтв | вав кад зак зд т ! АССССТТАТА : пяа зоря до | а зезоі ЗРО | 3578 | Бююнів | Як 93 7т96 | ві | 3-5 | 7 т сттАт псллаАлК.
СОССТТАТ
АЛЛА. 5: ду
ТАЛА іпсжля Ве.
КУТА кій льоду тттАдтт
АТСССАЮС ет а Ат й м ще
ЗА. їй о в Али
СЛАТОССА пики й дим | ЗСТОТТТТАА й лезо | зош» | зуп к й поле ди щи ГГ АССТОТТТТА й пори пи п В
ТІ 2518 | Еюзанів дттЄ дАТе Зв 73 785335 | 30-Х ПЕБУ пи щ пи що АССТОТІТТ й поля ЇЇ соку | лозою лк
КЕ. 153 її
ТААТІСАХ поле Це 1 СОСАССТОТТ Й о Й 1 з99262| БОР | 2631 | Бюонів : 53 тязе | 7856 | 3-10-5 | 785 7 М ТТААТТСА
ПД 2 дощ. 5 ГГ тТОбСАостТотТ Й пи шо ШИ ев | 3605 | ЗК | Бкзонів ї, ; 7840 | 7857 | 3-5) 783 споле дили М ; УСОСАОЄС ; 7 поп оо
Кя 2 А хі Мк я пор пики Я 5 тТОтТСОсСАССТ дя аа | лес дир щи 2507 | 364 | Еююнів СсттттТАат «3 таз | 7вхо 0 5-85 | 75 2525 Бкзоні8 тт, 76 таз | 7860 | 3-5 793 ї Кк ЕЕГ
КАХ іхлії1ї1д пот «Їїхіії1ї1д воли пло ЇЇ ля 5 | СТТОТСОСАЄ | 7 що пи чадо | сою 0 з | Бкзанів | ЗА я тдА | зв: | 5855 | 794 7 СТОТІГА поле Ще дим ще 5 тТаттатоссА - пеле ще 1 до зоввя | Ій | 2527 | Бюдній Я 58 7845 | 7863 | 3-05 | 7о5 й ОаСтТОоттІТ поле й пи що ТОТТОТСОСА що прин рик шия щи
БІ ЗІ Бкзон ік ЄбтЕлчттт НЯ 14х КБ 3-К-2 Б звозве | збі: о) зав) 0 бкюно | ТІСТІОТОВС з няло | нд. | 3-10-5 | 796 іб/новтор | АКТІ і ще й де Екзов ТОРТ ше ве щщк меха звір ОЗ ; ві зо нд о | нд. | 5-85 | 706 ма й ібповтар | ВОСТІ ТІ й Щі Щ кави тати - зай х | чо зод270 | 613 | зво | бен | БІЛІ ЧТСЮ 46 нд нд 3-5 | 797 іб/іповтор | САаССТОТЕ і
З89210 9613 здо 00 Бкюно | ТТОТТОТОЄ 76 ядо | нд. | 8-85.) 707 ібповтор о САС ТОТІ зт миз сб | бююно / ПЛТОТЄ ва ндо | нд | ЗАННХ 798 ібповтор | ССАСНСТОСЕ сля й притя Екзон тТІтІСТНС - «ве х 589211 2613 сію 0 бкюно | ГЛТОТІОТО тк нд | ня 85 | 8 іб'повтево ОМАН 99373 | 64 | 263ро (еКюв о | ПГЕГТТТСТЬ що вдо | ня | ЗА 0795 іЗлпеовтов | ОССАСНОТО 5вез13 збі | бр (он 0 ТРЕЛТОТТСЇС ву ядо нд | 585 | 709
Рб'повтою | САКНОТОТ
Таблиця 17 інгібування МРНК СЕВ МОБ-тепмерами, напіленими на ЗЕОО МО: 1 або
Зап МОл2 ітон що ї'троп
Світ -айт ве ин -сайт «БО меті | ешавно| ЗБ) | БНілюова 1 тілювність | ішібува ИХЕО 29 | мотко У
ЗБОЮ в оолясть ння т В ха: щої 0 О това ВО ше ; ща: 2 нове ви) вен САМЕ з |тилтео вн з
ЗИ 2833 287Р | Екзанії ССАААТОСТ Зк як ЗО | 5-8-6 Бе
СА тез вп вен МАЄ но!теоти вн зЗаЗ35о ре ва13 | Еюзмнів | СССАЛАТОС ща ТВЕ 7807 | 6585-6 БУ зовн рнн|нен ЖОМКО є Ітеолви вні п
ВаОЗаО аа 2373 | Екзенії | АССГАДАТС ох тв 7505 | е-в5-й ЯЗ
СТ явовн винне МХЕМЕ з тю тв вн
Ваза 253 2574 | Екзонії | ЛАСОСАДАТ І Тло ТО | 8-8-6 З
С зовн вх вне ДАЄМО є Ітновно вве ян заз да 3373 | Екзонії | АААСССААА С і ВМР б На тс
ССТТАТАЄ
АТ сиве во вена ШО ново не че жа зу 2377 | Бююнів | БАЗ ААССКА та ЕХ: 7812 | 65-66 о дА
АСК ССТТАТ аа яв 2375 | Екзон Її | АБААААСОС ТЕ Тл 7915 | е-в-6 417 ви Бо ас а ВВЕ ееовю в» вен ЩЕОМЕО пото вно в я 99395 ду 8579 | Екзонії5 | ТАЗААААСС т Та ТВіЯ | 68- ЗБ
СА сти вовк ве ШК в тет вм в з9а307 Іі 2850 | Екзоній | АТАЛААААЄС 5 тт ЗІ | 5-8-6 З теза вн вен ШНМ Ля Іти тив во з99358 заг ЗАВЕ | Еюкзонів | ТАТАСЛДАдА ща ТТ | ТВі | 686 аа
СС з» ве зо веев ШНМА я оте хи вн ві ща 253 83582 | Екзон1ії | ІТАТАСААА 5 778 ТРУ | 6-8- Я
АС сееовновв нене ДНЮ волю вив 940 г 2585 | Екзонії | СТТАТАСА А яЕ лю 78185 | 6-5-6 Уже дА п ПИ ПО ПОН ПЕСНИ ПОХОНННЯ НОЯ НОХННЯ КОНЯ НОЖА
ССАСОСААдС
ЗХ 2586 2385 | Бкзов і ССТТАТАС 77 ТВ 752 5-6 Я еко) вю |не зюжн СЕМА по зн джю ве о еко) зе |з пюжи СХСИМА ото |яновве чо 2357 286 | БЕконійб ССССТТАТА 5 ТБ 831 2-К-й 325
СА
САС дА за9 рах ЗУ | Бюзанії | АССССТІТАТ щ Та3 822 о: 326 вен) зе |іє леже МЕХЛАЄ ю | -в.|ли ого пе сек) е |вв вен ЗМОЖНА |» о ве0нн вве пу
З9940Х 25 338 | Бкюшнії ЗАСОСОССТТА що тв 7823 5-5-4 437
ТОСАССАС
АТ
СТА ОАЄ
БО зу З3950 | Екзон і | САЛААСЄССЄСТ КК, тов 7825 ве а37
ТА сне) ве |нн)тням ПРА о ви. жк вве є
З9908 3572 з Екзон і | ОПАДАЄ 87 7507 ТЕ 2-8-6 429 т сві зв но теже АХА ев ./ни ее во
СТ
СТО ТССАС сс ни) в |нн)тняю ЗКХМЖ в | ню.жн с в 991 БА 2394 | Еквнії ОГАССАААЄС 43 ТВО за 5-8-6 333
НЕ
ССС
Зо41х 2576 ЗЗ95 | Екзонії АСАОСАЛА б ТВ 730 ее 435 сс
ОСС
АС
СОТ зни) в |ви леже ЖАКА з | вв.|ню сво ок
АОС
АА пАСсОс
СА
СТАС с
СТАС
І:
СТАС за 3582 2601 | Екзон 15 | СТО ТАС ге ТБЕЇ ТЕЗ 2--й 438 у ди Ве
А
ТАС аОНо 2 ДО | Бкзон 15 | СТО ОСА щі ТВІ5 7557 | 8-6 53 пери в я рр
ТАС
ЗУЗХХ 258 ЗК | Бкзанів | ЄСТОТОСАЄ 55 ТЩіІ5 83 | 55-х ва
ЕЗЕЗЕЗЕ ЛИС ЕЗЕяСЯ
АТСССАСОЄС
ЗОЗ з55а ЗБ | Бклон 5 | ССС СА Зі КІЗ 1535 | б-- в: ери ак я Гери
ЕЗЕЯЕЗЕ НИ ЕЗЕЗЕЗя ме 25 2503 | Бкзоні5 | СССТОТОСА 59 ТІЙ ТЕ | 95 Ти їх
ААТСССАСо
А
ААТОСАСС ха гл6 МН | Бкзонії | ССС ха ТЕЛ Тк35 | 5-5 Тіз
СААТОСАЄ зач 2386 ЗО | Бкзанів | НОТ 90 ТЕО ВО | 5-8-ї рай
СА
СААТСАС
С
ТСААТСССА
За ба 2506 | Ркзоні5 | СОССОСТОТ 55 ЗУ тваї щ-й-й ща
С
ЕСЕЯЕЗЕ НИЗ
99351 2аВЕ 2505 | Бкзон 15 ХИСТ 58 ТА БА а-8-5 ТІ со пери в терен за Ка 2007 | Бкзон Я | АСОССССТО и Да: ТКА | в-5-й ри: де
ЕЗЕЯЕЗЕ ЯЗ хзаща 255 2007 | Бкзон і | ВЕОССССТІ 85 ТЕ ТВ 5-05 ті т
АЛІСА АТОЄС ма 2259 ФБ0О5 | РБкзоні5 | САСОСНАЮЄЄТ 58 ТЯ таз | 5-5 445
СЗЗ ЕН ЕЗЕЗЕЗЯ
АТІСААТОЄ їх
ААТІСААТС
ААЛІСААТС т
ТААТТСААТ
ЗІ за 210 | Бкзон ії | СССАСОСЦЄС 13 тщ26 тва | 585 що ери т ви Герерня
ТААТІСААТ за9367 бач, 250 | Ркзоні5 | СОСКА гі 73 тах 2-55 ІВ
СЗЗ ІЕЕ пор па пор ПОЇ ТТААТІСАА : ваз | о при пи п ПО Я ПЕ ПОЛОН ПОН КОН КОНЯ НААН
ТТААТТСАА оз заз ЗР О| Еюкзвнії | ТСССАСССЄ зо ТІВ | з78Я8 | 5-0 НН ее хи теен ДОАКЮЄ зо вновю зе лю
ТІТААТІСА
599425 2503 2512 | Екзонії | АТСССАССЄ 15 ТВ | 747 | е-8-6 439 сно) с» жо ве МОЖ во веови се за
ТЕТААТІСА
С ню змо мо тен МЛМ мо /ввове вве во
Є гг Ач
СТТГІААТТС
БОщаі 2555 314 | Екзоні8 | ЛАТСОКСАСЄЄ 30 ТЕМ О| ОО | ев м ями) з» |ннівнюв МЖЖМО ю | ню.не вм в соті зп якій | Бгодьіїб ЗТТТТААТІС щі пе оз «ве 7
ТОТІТТААТЕ
Зо 2505 2515 | Екзон І | СААТССАС в ТЯЗІ 750 | 6-56 453
І:
ОСТОСТТІТА
Є зов яю же теже ДИОАЮО зо /я»овв зе те
За З 2518 | Екзоніб5 | ААТТСААТС 16 7835 | 7835 | 5-5 т26
Є ож оо хво тежн ПАПОЯО є ояюовн з ту 5376 ЗБї 2519 | Еюзонії | ТДАТІСААТ 5 78535 | 78 | 5-95 727 с ви) же жо теже ПАМКЛА | зо ви вн зе тю о зЕ0З 2620 | Евзвнії | ТТААТІСАА зі 7817 | 855 | 5-05 78 ен жи теже ПЛАПСА ою яеовю 5 т 599378 2503 253 | Екзніїх | ТТТААТІСА. оо ТВА ТБ | я та
А хи ж жо стежте ФМС 5 яю ве ою ву 532917 2604 25235 | Бкзов ії | СТТЕТААТІЄ 95 тва Та | 510-5 | 867
Ах дпа тях пути ци ; дик дет -- ТСН Ах й ,; ще ще дах
СТІНКА оз зЕ0О8 0626 | Екзанії | ССТОІТІТІТА за т7вА3 | Т8Бі1 5-04 та нн) охе ке вежв ХЛ | мо пе вя| нт нн) зв |ни вт ЖИТ в | винен вв мак ро 2677 | Екзоніб | АСОСТОТТІТ 2 7544 | 3852 | 555 873 то тРТСтОо 1Б/повтевд т сролоє що щи Бкзон | ТІТОТТОТСЄ Щ дах лаз кроле зе дж Еко тес ви шо та -1в саотов якій зе Екзон ТЕС СТ ці те --
Приклад 6: антисенсове інгібування фактора В комплемента (СЕВ) людини в клітинах
Нерсг.
Отримували додаткові антисмислові олігонуклеотиди, націлені на нуклеїнову кислоту фактора В комплемента (СЕВ) людини, і тестували їх на предмет дії на мРНК СЕВ іп міїго.
Культивовані клітини Нерсбе зі щільністю 20000 клітин на лунку трансфікували 1000 нм антисмислового олігонуклеотида з використанням електропорації.
Після періоду обробки, що становив приблизно 24 години, з клітин виділяли РНК і вимірювали рівні мРНК СЕВ шляхом кількісної ПЛР в режимі реального часу. Набір праймер-зондів людини НТ53459 використовували для вимірювання рівнів мРНК. Рівні
МРНК СЕВ коректували у відповідності до загального вмісту РНК, виміряного за допомогою
ВІВОСАВЕЕМФ. Результати представлені у вигляді відсотку інгібування СЕВ відносно необроблених контрольних клітин.
Знову отримані химерні антисмислові олігонуклеотиди в таблицях нижче отримували у вигляді дезокси, МОБЕ-і сЕголігонуклеотидів. Довжина дезокси-, МОБ-і сЕїЇ- олігонуклеотидів становила 16 нуклеозидів, при цьому зазначені нуклеозиди містили або МОЕ-модифікацію цукру, або сЕЇ-модифікацію цукру, або дезокси-модифікацію. У стовпчику «хімічна структура» описані модифікації цукрів в кожному олігонуклеотиді. «К» означає сЕі-модифікацію цукру; «ЮО» означає дезоксирибозу; і «е» означає МОБ- модифікацію. «Сайт ініціації» означає крайній нуклеозид з 5-кінця, на який націлений гепмер, в послідовності гена людини. «Стоп-сайт» означає крайній нуклеозид з З-кінця, на який націлений гепмер, в послідовності гена людини. Кожен гепмер, перерахований в таблицях нижче, націлений або на мРНК СЕВ людини, що позначається в даному описі БЕО ІЮ МО.: 1 (номер доступу в СЕМВАМК ММ 001710.5), або на геномну послідовність СЕВ людини, що позначається в даному описі 5ЕО ІО МО.: 2 (номер доступу в СЕМВАМК МТ 007592.15, укорочена в межах нуклеотидів 31852000-31861000), або на обидві. «н.д.» означає, що антисенсовий олігонуклеотид не націлений на дану конкретну послідовність гена зі 100 905
Зо комплементарністю.
Таблиня 15
Інгібування МЕНК СЕВ дезоксн-, МОЕ-н еБі-олігонуклеотидами, напіленнми на ЗЕ ДО
МОсіао5БОПІМОсІ ботан Стоп оСант о |сейт| 95 | Сайт хайт «ЕО
Ме | хницнавн о К| ЗБОЮ | БНільсва Послідовність пні схван сш ЗБО мМестив т
КМЗ | ЗБОЮ | ПО | облясть нина ня ФО В п ха.
МО 1. ча |: 7 1 щу пл ЕЕ тА в дич Кеди 2 Б Ок в з «КУ - «КЕ. Гьд й ЗВ | 3870| Екзоній сич 28 лях | 05 пе
З АТС як ЗІ
У озкшао | яка і СТТАТАСАЛААС й пядя 15 скееіііні ) «В | 275 | Екзоній й де 2795 тщІВ щи
В СА ЯКЕ ма
Зх98і лякі | лат і5 КССТТАТАСААА «т ляархо |З еккееккЗ й
ВІ |3576 | Бкзов 15 й 33 т |З що а. ах ласку влас шк х и чу чи ех зва | 9250 Бкюнів Кі; ТО | т814 с
З АААА чОКЕ. 658 хо даже | 2 8-8 АААСЄСТТАТА зей заз | еККЕЗеЕККЖКВКЙ в; СААА акк КІ
Зоря Аа СТТА ее кОая 3 Ки; ОК Я щюЗ дя | чех А МСА АСОССтТА сг зах | КК
Таса вк
З від ЧО. я пом 0 САСсАлАСССС 4 Хек пкт пра
Вата | 2595| Екзон 15 й т1щО5 1520 шк 7 ТТАТ «КЕ 73 корч ун дм що вом Ск н її мая з'ї
ВОЗ дея зв: 04 ІСАССАССАЛАСС В зеукт о дл | ЕККЗЕККФфКОКИ
ЗВВ'| Екзонів сет й ТО тай ди 74
ЗОЗ | доня | я ши ттоететогу ак 576 : зятя | 7590 СТОСЛОСАОСАХ еккееккЧаа ї ло що бю х шлях
ККЗ | ден Що резтетв яот китн ак «5
І длдде ях тої рел НИ ;
ЯЗ дя дядя петянта нки пок да 4 | 2578 |2593 конів звіз твоя сКаееККаННЙ гплтт тла пи 5ВО
ЗО чЕк тт при тях 5 -КУх що й г за кт що
МА до лк Алли тивАтня ЕК 5ВА дек. б ин ШК я дит х КЕ Ба
ЯЗ | дея | укла везоо іо |ССАСОСОССТОТО ко 22 2 1 о 9 ЗБ ЗБОЮ Екзовій сАЄ з тво екЕкеекк ак 093 у Що пт чав 587 ха пог щи пит ві і пк я 0. нуту ак 88 дез - зн ше дОКк За - кі. Пе 152 «я. Мк
А ДО затреварринви ок БИ за о есяттю тин аакк ха
ЗА лад о зкох| Бкзунії | ЕЗАТСССАСОСС . орють я ІЗ 02605) ЕкзоніВ | Лету 33 ТІ секееккоаю
Кз де щі я ди А СМАК 5
ЗА до лек дути ак 5а3 53 ни шо отак зах
Мк ре чле АТ тд їх : чу а ЗА | ОЗ509| Екзов ІВ Який СААТСОСАС зво | свя еккеекк ЦВК порт б ЩІ ПІВ 395 -юза дит де заттедатеее ве - сот В ВД тах ктТио аж зи
АС о ОЗ 78аБ ак «ос
УЗ ля ЇЇ ля тек кт кути ча 398
ЗО яв ТТЕТААТТСАА жк здо
ТТРТААТТСААТЕ ККеге БЕЗ
З заці |за "5 ТОТТТТААТТСААТ Я щпю55 п-9ВК2 СТТТТАА ши ККеее ваз то ана п райк ві
ЖОЗУ озав дяк лервття дл о х
МК лк лк ТТ ХАТА ККесе «а
Х ТКСповтор | БЕ ККеег 5/7
В іб'повтов | РОТ ак 12
Е ібповтев СТ ОО |КЕКеег Уж й й 7 |ТЮповтов СТ Що 7 тора піб
З ІЖповтою (21 Ккгег 58 аа ссм ТЕСТУ В еККеРЕКОХ зер ся рен детелоєт | вх на яю 17 | БА довтор | АССТ Щ що 7 кКесе око
Приклад 7: антисенсове інгібування фактора В комплемента (СЕВ) людини в клітинах
Нерсг 5 Отримували додаткові антисмислові олігонуклеотиди, націлені на нуклеїнову кислоту фактора В комплемента (СЕВ) людини, і тестували їх на предмет дії на мРНК СЕВ іп міїго.
Зазначені антисмислові олігонуклеотиди тестували в серії експериментів зі схожими умовами культивування. Результати кожного експерименту представлені в окремих таблицях, наведених нижче. Культивовані клітини Нерсе2 зі щільністю 20000 клітин на лунку трансфікували 500 нМ антисмислового олігонуклеотида з використанням електропорації. Після періоду обробки, що становив приблизно 24 години, з клітин виділяли РНК і вимірювали рівні
МРНК СЕВ шляхом кількісної ПЛР в режимі реального часу. Набір праймер-зондів людини
ВТ53459 використовували для вимірювання рівнів мРНК. Рівні мРНК СЕВ коректували у відповідності до загального вмісту РНК, виміряного за допомогою ВІВОСНЕЕМФ). Результати представлені у вигляді відсотку інгібування СЕВ відносно необроблених контрольних клітин.
Знову отримані химерні антисмислові олігонуклеотиди в таблицях нижче отримували у вигляді дезокси, МОЕ-і сЕг-олігонуклеотидів або у вигляді МОЕ-гепмерів 5- 8-5, МОБ-гепмерів 5-9-5, МОЕ-гепмерів 5-10-5, МОЕ-гепмерів 6-7-6, МОЕ-гепмерів 3-10- 5 або МОЕ-гепмерів 6-8- б.
Довжина дезокси-, МОБ-ї сЕголігонуклеотидів становила 16 нуклеозидів, при цьому зазначені нуклеозиди містили або МОЕ-модифікацію цукру, або сЕЇ-модифікацію цукру, або дезокси-модифікацію. У стовпчику «хімічна структура» описані модифікації цукрів в кожному олігонуклеотиді. «К» означає сЕЇ-модифікацію цукру; «ЮО» означає дезоксирибозу; і «е» означає
МОЕ-модифікацію.
Довжина МОБЕ-гепмерів 5-8-5 становила 18 нуклеозидів, при цьому центральний геп- сегмент містив вісім 2'-дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами-крилами в 5- напрямку і 3'і-напрямку, кожен з яких містив п'ять нуклеозидів. Довжина МОЕ-гепмерів 5-9-5 становила 19 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив дев'ять 2- дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами-крилами в 5-напрямку і 3'-напрямку,
Зо кожен з яких містив п'ять нуклеозидів. Довжина МОБЕ-гепмерів 5-10-5 становила 20 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив десять 2'-дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами-крилами в 5'-напрямку і З'-чапрямку, кожен з яких містив п'ять нуклеозидів. Довжина МОЄЕ-гепмерів 3-10-5 становила 18 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив десять 2'-дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами- крилами в 5'-напрямку і 3'-напрямку, що містять три і п'ять нуклеозидів відповідно. Довжина
МОЄ -гепмерів 6-7-6 становила 19 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив сім 2'-дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами- крилами в 5'-напрямку і З3'-напрямку, кожен з яких містив шість нуклеозидів. Довжина МОЄЕ-гепмерів 6-8-6 становила 20 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив вісім 2'-дезоксинуклеозидів і був фланкований сегментами-крилами в 5'-напрямку і 3- напрямку, кожен з яких містив шість нуклеозидів. Кожен нуклеозид в 5'-сегменті-крилі і кожен нуклеозид в 3'-сегменті-крилі містив 2'-МОЕ-модифікацію. Міжнуклеозидні зв'язки вздовж кожного гепмера являли собою фосфоротіоатні (Р-5) зв'язки. Всі залишки цитозину вздовж кожного гепмера являли собою 5- метілцитозини. «Сайт ініціації» означає крайній нуклеозид з 5'-кінця, на який націлений гепмер, в послідовності гена людини. «Стоп-сайт» означає крайній нуклеозид з З-кінця, на який націлений гепмер, в послідовності гена людини. Кожен гепмер, перерахований в таблицях нижче, націлений або на мРНК СЕВ людини, що позначається в даному описі БЕО ІЮ МО.: 1 (номер доступу в СЕМВАМК ММ 001710.5), або на геномну послідовність СЕВ людини, що позначається в даному описі 5ЕО ІО МО.: 2 (номер доступу в СЕМВАМК МТ 007592.15,
укорочена в межах нуклеотидів 31852000-31861000), або на обидві. «н.д.» означає, що антисенсовий олігонуклеотид не націлений на дану конкретну послідовність гена зі 100 95 комплементарністю.
Таблиця 19 інгібування МЕНК СЕВ дезокон-, МОЮБ-н сБі-алігонуклеотидами, націленими на 5БО ІВ
МО: 1абоЗБО З МОМ: 2 їотон Ся
Євітт | -сайт зе Сайт |-сайт БО 2. - стят, р М ШИ - секту «І сототе | ШНИНВЕНО| ЗБОЮ| БНільона . . НИ іні | ЗЕ
МУЗ дан - Посліловніс інтібува ст т Мох 1
БІБ евОТ)) НО) | рдлясть | осдовність пен ЗВО ботив ок калі | МО. МО |в. ши
І з ебія: зач 3566 Бкзанів АААСССАААТССТТ 35 зтвко | ві века 457 пиши Що ОО ІСАТ Що ЩІ ОО Яккее Що «ноя оз5341 2650 Бкзонів ЛАСОСАААТОСТ щ стае озер; ЕКБЕВЯВКМО ся ни Що Що САТ й ше кегг 7 601153 2553 |3557 Екзюнів |МАААССОСАААТС І з, т787 |тоз КОЖНУ | доз тА І чккег 01319) 3552 |2567| Екзоніх ПАЛАСОСАЛАТОСІ 9 тв? | твоз СЕК І го
Й їсА Й І «Якеее 601154 2553 |2555| Бкзанів |САЛАСССАААТОЇ 33 7755 | лоз ЯКО 55
Й Й | сте й й о |Яккаее Й 390 ля51 03968) Бкзонів ОААААСССАААТСЇ 4 ство твої |ЕКЕВВЯВИЯ | яр 1220 253 | 2568 сто 2 : ТЩОХ зкене 55 601155) 2554 |2969 Бкзовід | СААААСОСАААТ І 33 | рю лоз БАН І во, тро ру сст і кксее падала ка АНЯ яаіі56! 9535 270 Бкзов ІВ ТАС АСКАдА й тов | каз зекн мак «59
Й НИ Ні Те Й Щі ша ШІ 601232) ях |2570) Екзонів | ДОАЛАЛОССАЛА 23 ттво | ох СЕЕКЯЖКАК І хо
Щ ШІ ОТ Й о о |ЯКесе «піт ше - 5 АТАСАЗААСОСдА зеккачаккій -
ЩО1157) 2535 2571 Бкзонів |У з 77914 тоб 560 1| Екзон ії дтЄ 7751 ЗБ дкне щ- - ск дк зе АТАКА ААСССТАА да свдк ЕЕЕКОВННОЙ пи тат; А йчитк й дн й ск ря за | ТАТАСБАЛААСОСА ллаз | зодт | «ЕЕКОВВАК ще
Екзов 18 де ААААСОСА В ТТ 178507 пжккю ; З пора па пи Що 5 | ТАТАБААААССЄС сящя | седе КЕКВ пл 2535 | з575| Екзон 18 че АОААЛАСЮЄ а 7791 | 7808 сонна ЗИ во 01160) 2559 |2574| Екзонів | ТАТАСААЛАЄС в 7794 | твою сЕБКОМКМЕ І зві
І ЩІ ШО САА Щ о |Яккеєе «ноз зя39 2474 Бкзанів СТТАТАСАА АС її стаз тво ек «6 пілоє| 539 | 3574 он САА ТРУБОЮ реве З воі737| зба зятя | Бкуонів | ССТТАТАСААААЄ ці сто | во «КК | в пиши по о Шо СА Й 7 7 |дкеге ШИ ва1їв3 зді 02478 Бкзовів СССТТАТАСАААА а тако ле ЕЕ. які тр що і Кс й Пр |аккее шк воло) 2561 |25765| Бкзонів (СССТТАТАСААЛА | в ттеє |78і1 ЕКО І 3 р шо Що Ко Й Щ дкеге Шо мібї! о56у |2477| Бкзові8 | ССОСТТАТАСАЛА й ттт | свіз ееМВЯНАЯ | св 1164) 23562 |287; зон АС і 7797 | 783 пуве 588
З жов зкзоній шк АТА тик рони в сст 177 | дове» Шо свт Бкаонів | ПСААТОССАСОС зв таз; | ваз еБКОВНИМА | зо5 пи па по по о й пи аа 7 слітвя! яд оселя г.. 01384 АРІСААТСОСАСО Що село | ох ЗЕКККЯНВНЯ | св 501194) 2593 |2608| БкзоніВ |Сер 4 ОКО |та зах з пу Ат ча пе в. че дата ЕЕ КК пищ или щи ТІААТТСААТССС | й сяк ККУ 01197 59 |) Бкзонів й 43 тазі ме | що нт) зве |зжп|Бюснів дод | ден
А АТ А. аїр, г «нміза| зя9я |3613| ЕвзоніВ Зі 733 0 твац | «о а аккег и сег візі! ква 9614) Бузоніх ГОТТТІААТТСАХА зо сея5 село СеЕКАБЯЯ | кро щирі ще 28в1іЗ| Еклов 15 те 45 Гах. гало Яке сх мк пе
ІК чЧикес 01203 2603 2617 БкзоніВ 83 7837 78531 604
ААТ аккег нХ яке
Куди жк ди Й Гоа СУ УТ Я дрож А. їй: сюжет дор ілі «Е МАКИ: звдя | зо Бююнів | САОСТОТТТТААТ ді твло зала СРБКАВНИЯЯ | ко кА АЖ кА МЕ і тА -45 Плед; ха Яккее МАХ пи и й ТОСАССТОТІТІТА; Й - со | ееЕКМНННЯ |, й щи ще СОСАОССТОТТТТА - - ск еЕКваНаНа | .
ЕЕ сова НЕЗНСТІСЗ шя
Ат Якксег ща чикег
СТЕ у АРМ Т З ев с БЕЖ ЩІ во12О6| об 0 2623| Бкзонія ЗТСССАОСТОТТІ тв твах вза СБК | ко
І Е злчи вні оз6іЮ 2625) Бкюнів | ПІБТСОСАЄСТОЇ в твах | тво | СБК вт 11 пЕКеЄ
ТОТСТООСАОСТ | се сяк ВЕК | Су : зкїз | лкля| БЕ ТТОТТОТСОСАЄС ; ке кии ки ЩІ ШИЯ 501214) біз обов он | ва вдо вдо 513 іХоповтер | 1 Щ Ж дев " слтлія! звітх | лк Екон | ТІТОТТОТСОСАЄ й ек | стек дія! лязо|лятт! Екзан | ТТТТОТТОТСОСА п секісвжнійща 01216)! біз об СНО ГЕ 73 вдо | вдо З ві? " Іблповтов | СТ | ло дове папичн лиця Бкзово | ТІТТТОТТОТСОСА - сек 0317 ВІК 3 й 66 вдо | нд ів
Таблиня 20
Інгібування МЕНК СЕВ дезокен-, МОБ-н сБі-зптонуклгеотидамин, націленими на ЗЕ ПЗ
МО: або БО 1 МОЛ 2 топ Стоц
Сайт о | -сант вс Сайт о |-савт ст
Мія каоявит ЗБО Нільова Послідовність інтібуван пніціний зво Мотнв Бу
ЗЕО ГЕ); нк срласть ня ЗЕО що ха.
МОаСі І ща.: ВО: |що: і З сион| б хо вежі |МАТОТНЄО 0 лю хрдненнк ху ня ПИ ПО ПОЛЯ МОХ ПОН КОНЯ НОЯ СС НН
ТАБ Ккоге ді кегег іді чкеге
А їКеве
ТТА Якеге
ТРА ЕКеве
Її сбкеге
СТІ КЕкеге
КІ ее в скеег
АОС дЗкеге
ААЄ ЧКеге
ААА чкеге ль окевге взі чкеге во. йкеге кВА акегег
Які скеге 1 йкеве
ЕС сбкеге
1 ря 71
ТО синя р уже шк ї о |йКегее шо - п ЗЕеге ші
Є ШИ 7 |йкове що євібо 2593 |ЗБОВ| Бкзонів | ТСААТСССАЄС 34 свв | тва |ЗЕККОЯЙЯЙФЯ | соя се 33 525 |75431| я
Беж Зкеге Шо ва1261| 2594 |2Ж09| Екзонія ЛАТЕСААТСССАС 17 тво | тва | КНКЯВНЯИ хо ге ї: 7 2 7534 ТЯ ЗО
Не: оЯкеге Що
Се |джесе шо сліди пи ттААТТеАА З - 501263 2595 2511 Бкзонія | С ІЛАТІСААТОСС ; 7е110 0 тдяк КККЯВЯЯЯЯЯ | со
АсО 3 731 зак ВО
Ас оКеге що - чу - тат АД хе х ле САС АПОЛАТО 72 таза | лват СКБКЯК І подо де ТЕ г х з |. Зкеее Ж секс ле Й 1 |дввеє НН - вує де а ТАТА зх «5 2
С Якеге Що пд жи Щи ТСТТТТААТТСА тт
Я 1 акеге 7
ААТ т | Якеге й
ГА ; Тл І « аОВІ ей оКеге под . птесбедеестеттт : з «ЕК б нив ЄКеге АЖ ц - яд дяк Мета стад 5-Х ї паяти
З «кеге ТО
І І 7 |вкреє М »дді | 7 йкеге 7
А т- 15 Т83В| щі їй
ФаКе серілита лег рих а САНТІ ЕЖЖИЖЕ х
Екон ВА 65 таз |свзв ЗБЕ о
Бл «кеге й суху . шк песто е Аг пе и - 1ГА - 7 |дкеве шк
ТТ | акеве - тт пооКАоСтО 78 твяб вв КАВА з і | Яке шк ха ї ке ГЕ ї Кр вая дінев Я 1б'повтов я ; д. я. | Зкеее я з |іноя ТОТЄОЄКЄ ож |ня (КК ве
Ібіновтор | Що що | Якеве й обі |2630| Екон |ГРТТОТТСТООСА бе «ккаааачая р тет 00 130311 ЇЇ ж
ЗіЖповтов о 5 зх - |Дкеве 5
Таблиця 21
Інгібування МРНК СТВ дезоксн-, МОВБ-н сгі-олігонуклеотидами, нанціленими на БО ТП)
МО; аю звО ПО:
Стоп Степ йовМт о | сайте с: байт о | «сайт 5ЕО тюте | НПВ | ЗЕЖО | Нільона шко. . НИ зініцниці | ЗО : ніщо
ЯВИ сер - вслід коли ІРО УуВщ пери ЕЕ Міотнв ЕН
МЕТ «БОШ ПЗ / область іослідовність інт пувах чо ш Хотнв Мо. косі | МО: МО: |що: тт
І р: 273 |о5Щв о Бкаонів | САССАССАААСС з свав | тво СКЕЯЯАЯЯВЯЯ | сла я се ей АЮ рах тет р б кул кх рови, Кінев ее, ряй й шКеше о скКеве па. КЕ
ТВА. се
Алл кое кміла: ддт сук СОСТИПСАСКАЄ з щ снузуд | ВЕКНАЧННЯЯ | - тиви ен веж | денс 5 ям піде
АА Ккеге 580 0905 Бкіонії СООСТОТССАОСА 1 сві5 | тво | КЕН | зе а чи зи ше) ях поА -, Як ші Ель Ккеее че ета и А. їх ЕЕ лядо | 2597) Бкзонії СОСОССТОТОСАЄ 4к тві7 тез» ЕКОЯЯЯАЯЯ | се поши ПВ ПА МО "ІСАЄ Що | |Ккесе ШИ што обліт пор чат - ев ПАСОК СТО ОС - - дела | «КЕН | сви топотн яю вен док яв яння
АОС Ккеге
АК. ре іно 1315 яв «АЛІ ВЕН Х 23 ГБ 1еаіІ,, Як
Ас Ккггв сильні севве
Молю ті лаяв 76010 Бкзонів | СОСАСОСОССТОТ тк свлї | тезе | КККВВЯЯЯ | сяк
В пи СА ЩІ ШО 0 |Кевег Й
Ж. стече о у У г т, г т ев да Як : .
спреї й І ; половгя нтАОАІвтЕНЯ ККее. т ре дело ДИ пря пити юн Егеге щі я з5| ак щ- те; су Кггге 7 сп що дих канти ти - 7 |Жевве 72 ббі36т| 2595 т : 7 |Ккеге 59, шо за | 2611 Бкзоній - - сек гул сКесе Й кп З петтуеттня М жкергг ла 3-3 лег дюкк егрвт ялАлегя ска піні
: 7 Кіеве тс щі їх
ПО |ТАХА й
ІВлповтер | ТСТ що ї ОЕкеее ві;
ТТТТІСТІОТСОСА ре "7 |Кегег
Таблиця 22
Інгібування мРчІК СЕ МОБ-тепмерами, націленимн на БЕ НО БНО: 1 або зво МО: 2
Стоп мод Стоп
Сайт | сайт АЙ сайт інші ії 5ЕО Цільова щ пп БО ЗЕ
Меізр; | НИ ГО ньо Послідовність | ншобува ЖЕО | МОЖ | Мотив | 1
ЗО 1б додасть М т НВ; ка: ж вел Аа | МО п
Мосі Ко 7 кого | БЕ ії -
АСВ
ЗччІ7 Май 2500 | Екланії | ТОТССАЄСА зе ті? їв3 | 5-9-5 5 і6.
ГСАСОСОЄ
93 ТЕЗ ЗИ | Екзоній | СТСТОСАСЄЄ р БІБ | 75355 | па ню
А
ОСА яю АКА ЗМО | Бкзаній ССС САСЄЬ 11 кі 537 | 710
Є
АТІКА СОЄ ща За 2503 | Екмнії | ССО ТОСА 7 То Тт35 | я щі її
ААТОССАСЄ зам ІБ ТОК | Екязон і | ССО ТО Тл 739 | 5-95-5 712
СААТСССАС за 557 2505 | Бкзон 18 | ССС 13 Т52 ТО | БУ 7іх
Гай
ТСААТСССА же ОХ гдя5 ЗБ | Бкюній | СОБКССТОТ 17 ТІ тЯї | 8-5 т с ща пев У 7 | Екзонії | АССеСССТО зо зва 2 | 5-55 715 т
АРТІСААТОЄ
359385 5 БОБ | Бююнія | САС ЄТ 23. ТщХ т53 | 555 тів с
ААТТСААТС зіва 591 ОК | БЕкланії ССАСОСССЄ 13 526 їжа | 5-5-35 17 т
ТААТІСЛАТ
599367 ЗО БІО | Екзон ій | СЕСАСОСОС НН ТЕТ | ТБ | 5-3 715 с
ТТААТТСЛА
ЗВО3О5 в: ЗМІ | Бкзаній | ТОССАССНЯ 10 КІВ ав | п 19
Є сен ле у ТТТААТІСА суд са са не па аа ІМ 012 жзон 15 сек чин 15 2 їв; 5-9-5 ТЕ
АТОССАСОС в |» | в) 595 | в и ПИ ПНЯ ПОЛЯ МЕЗО ПОН ПОМ НОЯ НОЯ НОЯ
ТТТТААТІС
99570 зах 213 | Екюшюнійї | ВАТСССАСО 33 7830 ТЯ | хх У тери рен я Герерх 9371 У 2614 | Бкзаніїя | СААТОССАЄ з Ті Т849 | 595 ТІ їх тер ее 399373 З5о5 БІБ | Екюній | ТІЕСААТОСЄ 3 ТКА ТМ Ах 74
А ери кер за1374 ЗУ 26517 | Бюзонії | АТІСААТОС ій Та ТЕ32 | 5-95 о ери рн в кре 9372 Зх 2615 | Екзанії | ААТІСААТС 17 ТК35 тва 5-53 ТІ6
ЕН
САССТСТТЕ
9937о 26 2515 | Екзоній | ТААТТСААТ іх УКІБ зва а-а-а ТЕХ і
САТ
399377 зап 220 | Бкзмній | ТТААТІСАА 3 ТКА ТЩЗ Ах ТВ ер ер в кре тери рев Гереря
З9ах75 зовУ 2621 | Евзонія | ТТТААТІСА іі ТЕЗЕ Та | ня о
А перерви Тетеря ви Зах "МІ | Екхонії | ССТАААТОССТ 7 УК т7еО6 о--6 10
СА тер рн вк яри
Зак да 2372 | Екюнії | СССА ААУ 23 ТК 7807 | 6 З
Тс тер рн вк ерерня а ие: 2573 | ЕкзаніЯя | АСССАААТС ді ТТ ТО | КВ во
СТ
ЕТЕЗЕЗСЗІ НЕНСІ
9351 зу 2573 | Екзонії | АДСССАЛАТ В 775 ТВО --8-6 ЗІЗ
Се
ССТТАТАСА да
СЗЗ СИС
З99583 Оп 26 | Евзонії | ААЛАСССЯА КО; Тл тя 2-к-6 ЗІЗ
АТ ери яр вк я Грею каз Сл 2577 | БжкзаніїЯ | СААЛААСССА р тТт93 т8І12 | КВ же
АА
АССССТТАТ
АА
ААССОСТТА
СА тери рн я Терен зах97 а 2250 | Екюшюнії | АТАСААдАС 33 тва 715 | 6Еб6 з15
С нов оновен ЦК опи ен в
З9ЗУЕ за 2381 | Екюніїйї | ТАТАСАААА За 5; | 746 | це 2
СС пе ж вен ДМА вот вн нн) в
Зо035О 2563 2382 | Бкзонії | ТТАТАСАЛА 23 7795 | 7517 | 6 31
АС повне вен ДИМ нот ленні
МОЮ ЗУБА 3585 | Екзовій | СТТАТАСАА 54 7195 | В | 68 423
АА ою нове ди, оте тен
МОЖ ЗХ ЗЗБ4 | Екзані5 | ССТТАТАСА 50 ЗВО | БІ | 8-й 423
АА, невже овен ЩЕНЯ вовеожо нн во вена Зб 2353 | БЕкзоній | СОССТІАТАЄ 8 Тв З820 | 5-8-8 я ви нове ФВ) кове жено в
ЗО з -аВО | Еюкзнії | СЕССТТАТА 17 ТВ | 7931 | 688 455 ою овен ДЕ) хо не во жа ЗБЕ 3587 | Екзанії | АОСОЄСТТАТ рії ТВ | Ж | 6-86 як
Ас яв зновее ДНА совно жені в
ЗВО4ОХ ЗВО 2358 | Екзоніб | ААЄСЄСТТА 12 ЗБОЮ | 73 | 68 427
ТА рю вен ДИКЖИІ нове ян в ооо Зя7о 2589 | Екюшнів | АААСОССТІТ зі ТВ | 782 | 5-8-в ОВ
АТ из зю|вен ДАЖХИЇ » він
З зх 2390 | Екюнії | САААССССТ 18 тб | 723 | бе Зх
ТЛССАЄССА
ЗОВ ра 2391 | Екзонії | САЛА 33 ТО | 706 | бе 439 повне овен БМ вози
Кр Кан! 3592 | Екзовій | АССОАДААССЄ 63 ТЕ | | в 430
СТ мови вве НК оте в що ЗБТЯ З5953 | Екзані85 | САС ААСС зв ЗВО | КЛ | 8-й я3і ов зновен ФМХ яв женні в
ЗЗЗЯ Зх З | Екзоній | ОСАЄОСАААС БО ТВ | 729 | ва 452 сс нео вкя вен ВКМ ною ен
ЗОЗ дя 893 | Еюкзнії | АНГАОСААА ві ДН зе 433 сс ша Пе ЕЗТеЕЗІ кош УТ ЗЗ9К | Екзанії | САИСАСОСАА в ТЕМ О| Ж | 6-86 З3В ас ве и вен ДА зов ее ві
ЗВОЯ14 275 З | Екзоні5 | ССАОСАССА і БІ | 78532 | 68 3 дА
АССССТО
ОО х зя7а 2598 | Еюкзнів | ТОСАССАСНХ 37 ТВІЖ | 7835 | 5-8-й 435
АА сер вн |зн|веен ОЕМ) я |в |еу ні
З994І5 АН 2399 | Екюнів | БТОСАЄСАЄ з ті | 7534 | бе 435
СТАС ю4і17 ау! КОЮ | Екюнія | ТОТССАОСА їв тів Т535 | 6 337
С
ЕЗЕЯЕЗС СлСтсЗС ся жюВІЕ ЗБЕ З | Екзоонів | СТО ТОСАСЄ за ТБ? БІБ | 6-8-6 азЕ
АХ
ТАС мкА 2554 203 | Бкзоні8 | ССТОТССАС 23 ТБІВ 7ЕІ7 | 586 435
ЕЗЕЗЕЗЕІ сля
ЕЗЕЗЕЗС ЗсЛСЗсІс ся паза за ТМ | Екзоні5 | СССТО СА о ТІВ ТВЗЖ | ш-8-й о
ЕЗЕЗЕЗСЯ нт заз ЗяКХ ШУМ | Бюшаній | ССС ЗЕ ТВО 735 | ве 4
А
ЕЗТЕЗІ З СлСтсЗС ся ви й ЗБ | Бююнія СТО ЗХ ТВі ТО | 65-8- 342
СА
ТААТСССА
С
СЗЗ З СЛЕЗЕЗС ся зач ЗЕ 2507 | Екзоні5 | АЧАСОСТО 5 ТЕ 782 | ве кі:
Я
АТТСААТС кед
ЕЗЕТЕЗСІ СЕЗ ЕЗС ся мюЯг5 а ЗУ | Екзнія | ЄСАСЕНКАХЄ о 533 ТЯ | 6 з46 пе
ТААТІСААТ жю з! ЗВ10 | Екзюнів | СССАСОССС Ка: тав Бах | 6-8-6 447
Ст
ТТААТІСАА
-
ЕЗЯЕЗС ССС
Заоаахо 293 2512 | Екзон і5 | АСССАСОС 5 тва ЗУВЯ; | ш-8-й Зо
Кай
ТІТТААТІС
Са
ЕЗТЕЗС ССС СЯ с-к
ТОТТТТААТТ зОо0432. зе 2515 | Екзон і | СААТСЄСГАЄ ща Ти ТЕЖ | о-8-й 453
СЗЗ У СЕЗЕЗе я
СЗЗ СЕЗ ся 29 за 2523 | Екзоні5 | СІІТІТААТІ 2 Т859 ТВБЯ | 5-5 317
СА
ТОАССТО
ЗаЗАТО рон БА | Екзаній | ТЕТТААТІС 73 ТК 85 5-0 То
А
ЗЕ: ЛЕ
БюЗВО 50 2625 | Екзоніх | ФбІТІТААТТ 77 ТБ ТОБ | я ті
Є
«ово ляп ве . ТОТСОСАСВ - - ак как да
За зБ06 ЗВАЯ | Екзон 18 ія 5 а 7835 5-9-5 732 пече АЄє зЗаз32 267 2625 | Бюзовій | СТОТІТТАА 5В ТАЗ ТЕО З-5-3 735 ї ваза БО ЗІБ | ЕБкзон 18 | СТ ОТІТТТА 53 ТкаЗ ТБ --й 734
А
ТО ТОСсС 9388 зепе 2627 | Бвзоні8 | АСЄТОСТІТТ 83 ТЕ за 5-8 У3а
А
Бклон Не: ах БІ ЗВ уд САС 23 н.д. нд. 5-95 736 іЄповтор |. т
З9аі5А Тв 2525 пиши сСАсОСТОТІ 53 нал. н.д. 2-95 737 ібповтор |, щі І ї кал щ дк Екон ТЕТСТІСТС й сте -
Хн33К7 зві зв ве вож ж -щ я 13 сСАССТИаТТ вавлє джу вк Екон ТІТІТСТІСТ се кпк -а
Зак БІ 2531 й рифи Ба н.д. нд. -9-5 за
Таблиня 23 інгібування МЕНК СЕВ МОБ-тепмерами, націленнми на ЗЕ) ПО МО. І во
БО ЦО МО.
Степ - Стоп
Сайт | -сайт СВТ сайт т, ро - то зиНиВЕ се зо піна | тільова 5 інфін гу і
Меїщів | Бшенй | 5БО 0 Цілвюва | етідовність | інгібува | ЗВО 9 | мотнев
ЗО І ооласть ння т І ха: щЩОосі1 | МО. тч. в МО ша : каг2| 77 сту дів ще ТАБААААЄЄ - лапи | з пк с
ЛІ жа ЗЗЛЮК| Екзон ій й М І. ТТаК ТО | 5-15 Т85 пд щи - й | АТАСАЛА АС М що я | т - -
За9212 пе ж соні ще сретемр ТВО ТЯ | 535-105 кб
ССАААТСОСТ й й й Й ! й Те суч я дгди вче та | ТАТАЄбАААХ й д-щ соля | а й ср
ЗЕ 2372 | Екзон ів ГОСАААТС 36 лю 537 | 3-3 т; сота щи ші ! - | ТТАТАСААА д що док - с сов кій 8536 ВЗ | Екзан 15 ще 5 Та ОК | 3-10 КЕ пухкі пат ле : СТТАТАБАА « ситу са | задо -5 кі за 57 конів р : а ТІ ТО | 3-10-3 То пики по 5 | ОСТТАТАСА І пд а о
Ма 2378 | Екзан ії АААСГСААА В: ж ТІ | 5-5 п поля пшево | золю з | СССТТАТАЄ пари па а
ТВ 3576 | Екзон ії ААААСССАХ у ТА І | 3-106-5 ті сил дк -- СС СТРАТА ще - - - 599220 2560 23577 | Екюнів | ткати тта5 | с7вз | 3-Н5 о
ІБ дя | Екзані8 АСАЛАДССС за щ7аа ТІ | 3-10-5 531 слот де - АЕС ССТТА ! - . - - кА зх з канів ; ех 3 9 ТІ 5-1 тай пиди ши Щи 20237600 | АААСОССТТ ; пиши п о МО с553 2350 | Екзоній АТАСААлАЄ о те їі5 | 3-10-5 733 яко ря теє Со ен то
ССАССОЮЄ піц й , ТТААТТСАА | пе сплю | дз к Щі вваз53 | за | 261 О| Екзнія | ПНІ А 33 тва | зяб | 30-50 773 й й тсСсСАСОСС подяк Ки й 5 | ТІТААТІСА | прод пд пи аа Іа 2612 | Екзанії дети ти 23 7530 Т847 | 5155 ТЗ 7 й й АТСОСАСОС 7 й ; - Щ ТІТТААТІСА | - здаз54 | сяде | з6І3 | БЕкзонія | НН ТУ а тя: | ся зло | тм й АТСССАСС под СТТТТААТТС | пт дохо. ЇЇ ок зддояя | 3597 | БІ кмнів поліурія і 7832 | ще 305 | 775 і 714 Евкзац ААТСССАЄ і сі ЩА 3-4
ДОКИ ЩІ щи ОСТГТОТТТТААТТ І пи и за с їх Екзиан СААТСССА ціа х КІ за Та сдилято | сло дю | в з | СТОТІТТААТ щ пед дві! дя ко| яоя
БУ; а обі | Еюзоні8 ТСААЛССС б твАа ТР | 3-1055 7 зоозчк | зв | 2617 | Екзоній фон за таза | лях | зн | 778 ! ! й і АТТСААТОС і й плин Й АОоСтТОотІТТ - | 51 дак 5ваз58 | 50 ВІВ | Екюнія |" і - 40 тва | 7833 305 | 7 7 7 | ААТТСААТС 7 спол де | | | САССТОТІТ і пи пл и зобо5О | з502 | З6рО | Бкзаній йк 38 7837 | таза | 3-0-5 | 78
Й й ТААТТСААТ Й щщ Й Що сгАасстТатЕ пе 1-1 зп ЩІ зві зБ03 | 2820 | ЕБвзовій и 54 тя3я | за | 34105 | ві шк ТТААТТСАА й 7
ТАСААААОС зво | 3552 3570 | Екзоніб | САААТОСТО ха ттвт7 | 78о3 | б | Ві
А
АТАСсаАдАС задатя | 3553 | 257Р | Екзаній | ССАДАТССТ о ТТВЕ 0 З7В06 | 67-60 882 с
ТАТАСАААА зва | за | 2572 | Екююнії | СССАААТОС 57 та | ще 6 | бе
СТТАТАСАА зца275 | з355 | 2574 | ЕкзоніЯ | ААСССАААТ г тя | здоб 5-7-8 | Б с
ССТТАТАСА
ССОСТТАТАЄ зоо277 | За 3576 | Екзаній | ЛАААСССГАА Ні тя 711 | 57-60 686
А
СОССТТАТА зод278 | 3550 | 3577 | Бюзаній | БААААСССА о та 07813 | 57-60 887
А
АССССТТАТ
Зю27 | 2560 | 2578 | Екзмонійя | АОДАЛАССС за тля | з8і3 0 6--46 | БЕ
А
ААССССТТА звезяв | зи 2579 | Бкзонії | ТАСААААСС 7 тю | 714 0 657-450 683 с
СТСССАССТ
5332917 | БО 3523 | Екзоаній | СТІТТААТІС я5 7в3а | та58 | 5-Ця | 37 спдле: щи дич ба | СОСАОСТОТ Й пья пори а
Беязба | ЗМО | 3631 0 Екмнії | тегааттесд 49 7839 786 | 3 0 тво «долка | дяк Зк | в.з ї і яп тра сват злая | в
ЗвОодаЗ Зм ДАХ Екзонії ТТТТААТТС 5. ТА за; 3-х 153 слолих що ця 5 | СТОССАЄСТ - пе попи да зво | ЗО | 2823 | Екюній СТТТТААТТ 53 784Р | сяЗя | 330-578 спдляо ще ; б5 | ТОТОССАОС В й с ЇЇ зле ; здазЕя 2607 | 263 | Екзоній | 53 1842 | зяхо 30-53 73 9365 ово; об Бюовів | ТТ ТААТ топка | лялечка 5 | ТТСТСОСАС : пкИИИЮ6ДЧИВИтиИщще щ Екзаон СТСТТТТАА З 5 їй 3-5 соплі І що СТТОТОССА ді по пп Й здат 2609 | 626 | Бкзовій 53 тва | т7вбр | за | ям
І Що ССТОТТІТА. - ЩІ ; таттштоос Щі пИЗЮВИШитиИиици заззби | 810 | 2627 | ЕкюніЗ т уки 5і 7в45 | 73 3050 795
В я Еювшзан АОСТСТІТТ і я Кк 3-1
ДОКИ Й ле Екзан | ТІОТТОТСО Й піп здеазва | збо зв | 0 педа ЗВ ндо | яд | 3105 | 76 ще ій'ловтор | САССТСТІТ ще й пики ле Екзон ІТТСТТОТСО М днк звазта | з8ІЗ | за каси Ам ва нд нд | МН | 797 ! І іЯлювтов | САОСТОТТ 7 7 І
Екз ТТТТСТТСТе Щи зо9а7р | сбіз | зкзо | Бкюн о | ТТТОТТОК во ндо | ндо| 310-535 | 798 івповмюрво СОСАССТОТ
Еклзех ТТТТТСТРОот - звезт2 | збі4 о с6зр| Беюно | ГЕТРОТИЯЇ т ндо | нд 30-5| 709 ібповмово САТ і пра пи р 5 ттТеОСАЄЄ - пан под о щаа205 | ЗБ07 002634 | Екзоній | Є ха 7843 0 тяяю | 8 | 793 зобов обо? 26) конів | ІЗТТТААТ спляк ї ле тотоАЄ 5 по Й сп Й звого6 | зБ0ОБ | 2625 | Бкзоній | 7. і 82 І843 | 786060 585 793 и» що СТОаТІТТАА 7 - ЩІ щи СТІОТСОСА и лот во |. 5оо207 зо | 3626 | Бкзонів | 7 62 твяя вв: | я-8-5 | точ
ОСТОТІТТА дод щі теттотсос ; поле З пас й звезов | 2610 0827 | Бкзоній | ут 56 тяда | 7863 | 5 | 795
Ш що АСЄТаттттТ й сплляд ду Екон ТІСТІ - сок сде заазю зби! ЗВ у пурурн во вд нд | 8-5 | 7об й й іЯлювтов | САОСТОТТТ Щ щ
Ел тт т зве210 | збі? | кю | Бкюон | БИ ТОТОС ндо | ндо| 583 7 іб'повтюро САТ зве»: | 3513 | зво (Цен 0 ТТРОТТОТО б ндо о ндо| 8-3 | 728 ідлювтові СЖАСЄСТОТ
Еко ТІТІТатТІсСТ й ве - зе2і3 | збія | збір | еконо | ПІТ ОТТО 67 ндо | ндо| 58-5 | 799 ібповтеро САС Щі
Таблиця 24
Інгібування мЕНЕ СЕВ МОБ-тепмерами 5-5, напіленими на ЗЕС ОО МО: 1 або
БОЮ МО
Стоп сх мох й зм Стовп-
Сайт -а8тТ в: сайт в нт «| знйивани | БО | Ідльова ШО Шк інйдану | СЯт | ЗЕ
ТАТ | сет пд Послідовність ІНТЦЗУВАНО| дет ЗО Із
ЗО ПУ З. область 7 ЗБОЇВ т. косо ма: ня хо: Ір МО. п Я пи оте і спос ш ! ; ТОСТСАСАТТОС т 5 па | за «яДятО 150 159. | Бвюні | я 73 І і8за | 396 ою) аю 369 | Бкюні | сс т й соло ; . ЄСТОСТСАСАТТ Ці - й ще зва5ті 152 171 0 Екзоні ніки що 1873 івез | 397 і І состтосс Е пи й й | ПАССТОСТСАСЯ о що о й 533514 154) 173 | Бююні | ЗАЄСТООТСЛСА 5 їв15 | 184 0 з тт - Що - ТАСАССТОСТСА - оц
ЗаБа72 155 173 Екіюні дай ге 1877 івод | 395 7 й й САТТОССТ Й ШО
Що й | | ССТАСАЮСТОЮСТ й щ 588573 ізв 177 Бизоні у ат 72 1879 1895 | 399 ря САСАТТОС
1 10001 311
11111111 реяспААЄ 1 ГО її нин ши І п ни по ПО ПО гоихкт згщя ; Я СТОТІТІДАТІСА. ; -- чо ск
БЕЗ ва зві Еконій й 5 1537 785 435 споке рун уми ше ОСТОИТТІТААТІЄ - сюда ще щи
ЗЕВ55А | 598 | 3617 00 Екон! с : таз 7832 | 354 пло де д АОСТОТІТТААТТ се 4 сват щк
ВІР ою | 3618 | Бкюнія | ПІ З 7834 7853 | 239 вва дере лез 8-0 зу | СОСАСОСТОТТ БЕ «і се зва які заз. Б Екзонів ААТТСААТ мі 1833 1856 е
ОСА гаях! зво дкла | во. зу | ОТСОСАОСТОТТ пл щ по 414 зо 7523 | Бюзонійв ТТААТТСА жо 1835 зва 5317 пастлю лкпк явля | канві педа ее «т пак лиса ке 824 | Бкюонів | ГТСОСАЮСТО 5 таб | 7859 | 459 гопке дикптж дючк | - - | ТІСТСССАЄЮТЬ -е сов ле гкк
Ва З ЗВ | Екон! й 75 Та Тв ді где и зе Екзон тт СА Є -- й звя562 | свою ЗК й 53 І.Д. -д. НА соишия зви дез ЕБкзон ТЕСТІ АС к ска за 25іС сс. : й з я Ж. т 453 ост Ще де Екзон ТЕСТІ СОСА - - зв5лоа Мі 2530 : пли 3 І.Д. н.д. БІ септик що де Екзон ТЕТ ОТО х ця
Ви 13 Зв - їе ж я. я 465
Приклад 8: дозозалежне антисенсове інгібування СЕВ людини в клітинах Нерса МОЕ- гепмерами 5-10-5
З описаних вище досліджень відбирали гепмери, що демонстрували інгібування мРНК
СЕВ іп міо, і тестували їх в різних дозах в клітинах Нерс2. Клітини висівали зі щільністю 20000 клітин на лунку і трансфікували 0,313 мкМ, 0,625 мкМ, 1,25 мкМ, 2,50 мкМ, 5,00 мкм або 10,00 мкМ концентраціями антисмислового олігонуклеотида, зазначеними в таблиці нижче, з використанням електропорації. Після періоду обробки, що становив приблизно 16 години, з клітин виділяли РНК і вимірювали рівні мРНК СЕВ шляхом кількісної ПЛР в режимі реального часу. Набір праймер-зондів людини ВТ53459 використовували для вимірювання рівнів мРНК. Рівні мРНК СЕВ коректували у відповідності до загального вмісту РНК, виміряного за допомогою ВІВОСНЕЕМФ).
Результати представлені у вигляді відсотку інгібування СЕВ відносно необроблених контрольних клітин.
Також представлена напівмаксимальна інгібуюча концентрація (ІСво) кожного олігонуклеотида. Рівні мРНК СЕВ знижувалися дозозалежно в клітинах, оброблених антисенсовим олігонуклеотидом.
Таблиця 25
Мо 1515 0,313 0,625 1,25 2,50 5,00 10,00 ІСво
Й МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ (МКМ) 532614 532635 | 12 | 0 | з | 28 | 0 | 0 | мо / 532692 | 26 | 0 | ж 12 | 52 | 55 | 74 | з7 532770 532775 | 8 | 0 | 26 | 35 | 47 | 59 | 62 /
МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ (МКМ) 532800 | 0 | 5 | 30 | 65 | 50 | 7/5 | З 532809 | 12 | 30 | 28 | 40 | 46 | 65 | 46 532810 | 28 | 44 | 32 | 69 | 84 | 95 | 12 532811 | 66 | 83 | 90 | 94 | 97 | 99 | «03 532917 | 64 | 85 | 88 | 96 | 97 | 99 | «03 (532952 | 50 | 53 | 68 | 80 | 9 | 94 | 04
Приклад 9: дозозалежне антисенсове інгібування СЕВ людини в клітинах Нерсаг2
З описаних вище досліджень відбирали гепмери, що демонстрували інгібування мРНК СЕВ іп міїго, і тестували їх в різних дозах в клітинах Нерс2. Зазначені антисмислові олігонуклеотиди тестували в ряді експериментів зі схожими умовами культивування. Результати кожного експерименту представлені в окремих таблицях, наведених нижче. Клітини висівали зі щільністю 20000 клітин на лунку і трансфікували 0,08 мкМ, 0,25 мкМ, 0,74 мкМ, 2,22 мкМ, 6,67
МКМ ої 20,00 мкМ концентраціями антисмислового олігонуклеотида, зазначеними в таблиці нижче, з використанням електропорації. Після періоду обробки, що становив приблизно 16 години, з клітин виділяли РНК і вимірювали рівні МРНК СЕВ шляхом кількісної ПЛР в режимі реального часу. Набір праймер-зондів людини ВТ53459 використовували для вимірювання рівнів мРНК. Рівні мРНК СЕВ коректували у відповідності до загального вмісту РНК, виміряного за допомогою ВІВОСВЕЕМ?У. Результати представлені у вигляді відсотку інгібування СЕВ відносно необроблених контрольних клітин.
Також представлена напівмаксимальна інгібуюча концентрація (ІС5о) кожного олігонуклеотида. Рівні мРНК СЕВ знижувалися дозозалежно в клітинах, оброблених антисенсовим олігонуклеотидом.
Таблиця 26
МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ о БЗ2ВІЇ 19 | 53 | 81 | 87 | 96 | 97 | 02 588834 7 | 42 | 64 | 92 | 98 | 98 | 05 588835 | 11 | 30 | 66 | 89 | 97 | 97 | 05 / 588837 | 6 | 39 | 67 | 89 | 96 | 97 | 05 / 588838 0 | 27 | 41 | 81 | 87 | 97 | то 588842 | 17 | 51 | 68 | 86 | 93 | 95 | 03 588843 | 21 | 38 | 72 | 90 | 95 | 96 | 04 588870 9 | з | 56 | 88 | 95 | 97 | 06 / (588872 | 18 | 28 | 5 | 84 | 92 | 97 | 06
Таблиця 27
МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ (МКМ) о БЗ2ВІЇ 31 | 70 | 89 | 94 | 97 | 97 | ом 588844 | 31 | 60 | 77 | 9 | 95 | 96 | ом 588846 | 32 | 52 | 78 | 89 | 95 | 97 | 02 588848 20 | 40 | 73 | 9 | 96 | 98 | оз / 588854 | 17 | 55 | 5 | 84 | 94 | 96 | 04 588855 10 | 32 | 56 | 82 | 93 | 96 | 06 588856 13 | 46 | 75 | 90 | 96 | 97 | 03 / 588857 | 11 | 52 | 73 | 94 | 96 | 97 | оз / (588858 | 19 | 48 | 75 | 94 | 97 | 98 | оз
Таблиця 28
Й МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ (МКМ) 53281 | 42 | 66 | 88 | 96 | 97 | 98 | 01 588859 18 | 46 | 66 | 90 | 96 | 97 | 04 588860 55 | 80 | 94 | 97 | 97 | 97 | «0 588861 24 | 61 | 86 | 93 | 96 | 97 | 02 588862 25 | 64 | 85 | 94 | 96 | 98 | 01 588863 | 50 | 73 | 89 | 96 | 96 | 98 | «01 588864 52 | 80 | 92 | 96 | 98 | 98 | «01 588865 | 46 | 72 | 91 | 96 | 96 | 99 | «01 588866 47 | 76 | 88 | 96 | 97 | 98 | «01 588867 | 43 | 69 | 83 | 92 | 96 | 99 | 01
Таблиця 29
МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ (МКМ) 5280 0 | 14 | 38 | 72 | 89 | 96 | ї2
БЗаВІ1 | 18 | 54 | 79 | 93 | 96 | 97 | оз 532952 | 19 | 34 | 73 | 87 | 94 | 96 | 04 588534 | 17 | 13 | 44 | 7 | 93 | 97 | 09 / 588544 | 12 | 43 | 69 | 86 | 89 | 93 | 04 588545 | 17 | 55 | 67 | 86 | 9 | 93 | оз / 588546 | 10 | 32 | 67 | 85 | 9 | 93 | 06 / 588552 | 27 | 54 | 76 | 90 | 9 | 97 | 02 588553 | 32 | 68 | 87 | 93 | 95 | 97 | ом 588560 16 | 54 | 76 | 90 | 94 | 96 | 03 (588561 | 18 | 45 | 68 | 85 | 93 | 96 | 04
Таблиця 30
МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ (МКМ) о БЗ2ВТЇ 22 | 60 | 82 | 94 | 97 | 98 | 02 588536 2 | 38 | 65 | 90 | 96 | 97 | 06 / 588547 | 19 | 35 | 61 | 86 | 93 | 97 | 05 / 588548 19 | 36 | 75 | 88 | 95 | 96 | 04 588554 | 0 | 76 | 92 | 95 | 97 | 97 | «0 588555 | 31 | 61 | 89 | 96 | 97 | 98 | ом 588563 25 | 48 | 72 | 86 | 94 | 96 | 03 (588564 | 15 | 33 | 63 | 89 | 9 | 97 | 05 /
Таблиця 31
МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ (МКМ) 52811 39 | 68 | 86 | 96 | 98 | 98 | ом 588538 0 | 40 | 82 | 94 | 97 | 98 | 03 588539, 34 | 65 | 88 | 95 | 98 | 98 | 01 588540 30 | 51 | 81 | 9 | 97 | 98 | 02 588549, | 31 | 57 | 82 | 95 | 96 | 98 | ом (588550 | 34 | 65 | 88 | 96 | 98 | 98 | ол
МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ (МКМ) 588551 47 | 66 | 87 | 96 | 98 | 99 | «01 588557 | 40 | 84 | 95 | 98 | 98 | 98 | «01 588558 | 45 | 73 | 93 | 97 | 98 | 99 | «01 588559 51 | 69 | 83 | 96 | 98 | 99 | «01 (588565 | 19 | 56 | 81 | 92 | 96 | 98 | 02
Приклад 10: дозозалежне антисенсове інгібування СЕВ людини в клітинах Нерсг2
З описаних вище досліджень відбирали гепмери, що демонстрували інгібування мРНК СЕВ іп міїго, і тестували їх в різних дозах в клітинах Нерс2. Зазначені антисмислові олігонуклеотиди тестували в ряді експериментів зі схожими умовами культивування. Результати кожного експерименту представлені в окремих таблицях, наведених нижче.
Клітини висівали зі щільністю 20000 клітин на лунку і трансфікували 0,06 мкМ, 0,25 мкМ, 1,00
МКМ, і 4,00 мкМ концентраціями антисмислового олігонуклеотида, зазначеними в таблиці нижче, з використанням електропорації. Після періоду обробки, що становив приблизно 16 години, з клітин виділяли РНК і вимірювали рівні МРНК СЕВ шляхом кількісної ПЛР в режимі реального часу. Набір праймер-зондів людини НТ53459 використовували для вимірювання рівнів мРНК.
Рівні мРНК СЕВ коректували у відповідності до загального вмісту РНК, виміряного за допомогою
ВІВОСАВЕЕМ?У. Результати представлені у вигляді відсотку інгібування СЕВ відносно необроблених контрольних клітин.
Також представлена напівмаксимальна інгібуюча концентрація (ІС5о) кожного олігонуклеотида. Рівні мРНК СЕВ знижувалися дозозалежно в клітинах, оброблених антисенсовим олігонуклеотидом.
Таблиця 32 0,25 1,00 4,00 ІСво же мм | мм | мм | мм | сх 50 | 16 | 28 2ЮЩ(| 69 | 9 | 05 59902044. | 14 | з3з2 | 74 | 9 | 04 5990205. | (0. 2 ЮБх/з | 56 | 9 | 07 5ОВЗІ | 28 | 46 | 80 | .ЮЙюКуа.ї.ЙШогш 59077. | (В | 20 | 5 | 80 | 08 5ОВО | рю 9 | юю 33 | 48 | 7 | 09 586 | 77/77 777122 | 53 | 83 | 08 5 | 13 | 37 | 69 2 | 82 | 05 5ЯЮЇ | 19 2 ЮЩ | 29 | 75 | 898 | 04 599188. | (0 | 21 | 62 | 85 | 08
Таблиця 33 0,25 1,00 4,00 ІСво ме | мм им | мм | мм ок 532917, | Йо ЮК. 2 ЮюЮюЮрДЙр42 | 8 | 5 щ 9 | 04 59198. | щ--.-.,ю3 | 7725 | 64 | 89 | 06 2 ЩЗе
0,25 1,00 4,00 ІСво мжее мм | мм | мм) ммо | ом 599202 | -.иКОС- СГЦ... 744 | 772... | 87 щ| 05 599316 | 77 | 37 | 66 | 88 | 05 599317. | (8 ЇЇ 71 | 5 | 8 | 70 5993201. | (8 | 33 | 7 | 85 | 05 599302. | 24 2 ющЩщ | 38 | 66 | 87 | 04 5993207. | 22 2 ющЩ | 32 | 66 | 89 | 04 ( 5993208. | (0 | 2 юЮюЮрЛЖЗі | 59 | 88 | 07 ( 599374 | 23 2 ЮщЩ | 42 | 80 | 9 | 03 599378. | (гі |77171717р57 7711780 |... 9 | 02 2
Таблиця 34 0,25 1,00 4,00 ІСво ме мимо | мм | мм) ммо | ом 588860 | 17 | 60 | 76 | 9 | 03 601282 | 48 2 | 68 | 8 | 88 | 0 601269. | 18 | 5 | 80 2 | 9 | 02 601275 | 14 2 | 39 | 78 | 9 | 04 601383. | 53 | 81 5 щ | 86 | 94 | «006 601385 | 52 2 щЩ | 74 | 89 | 9 | «006 601332 | 4 | 69 | 86 | 9 | 0 601345 | 936 2 щЩ | 75 | 86 | 95 | 0 601346 | 31 | 69 | 82 | 9 | 0
Таблиця 35 0,25 1,00 4,00 ІСво мжее мм | мм | мм) ммо | ом 532917. | 31 | 66 | 86 | 9 | 0 599208. | 24 | 7750 | 7771 77789 | 2 юДфщЩщо03 599267. | (4 | 48 | 80 | 88 | 02 599441. | 242 2Ю(| 57 | 80 | 87 | 02 5494 | 13 | 55 | 86 | 9 | 03 599552. | 30 | 69 | 9 | 95 | 01 599553. | 34 | 7 | 9 | 96 | 01 (5554. | 30 | 74 | 93 5 щЩщ| 9 | о «
0,25 1,00 4,00 ІСво ме | мм им | мм | мм ок 599568. | (40 | 77 | 90 | 9 | о 599570 | 6 | 82 | 93 | 96 | «006 599581. | ..ю27 | 60 | 80 | 9 | 02 // о 59Я591 | 49 | 74 2 | 93 2 ЮДЩщ | 96 | «006 599592. | 46 | 76 2 ЮЩ | 90 | 9 | о
Таблиця 36 0,25 1,00 4,00 ІСво ме | мм им | мм) мм | ок 588860 | 11777751 7777780 | ...92 | 03 599547, | 23 2 юЮЩщ | 60 | 82 | 9 | 02 599578. | --.,ийил?Я 77749 | 7 82 | 2... (ШФЦО.Ї/ | 02 о 5ЯБЯЮ | 24 | 62 2 | 80 2 5 Щ | 9 | 02 601210 | 34 | 64 | 86 | 9 | 0 601212 | 46 | 68 | 88 | 9 | о 601213. | 54 | 80 2 5 юЮЩщ| 90 | 92 | «006 601216, | 45 2 ЮЩ | 57 | 76 | 898 | 0 601264 | 29 2 2 щЩ | 58 | 86 | 95 | 02 601279. | 44 | 80 | 92 | 9 | о іоовбот2ві | 51 | 80 2 | 2 щюЮщ6еї 2 | ющющ94 6 юфщЩ | «006
Приклад 11: дозозалежне антисенсове інгібування СЕВ людини в клітинах Нерсе
З описаних вище досліджень відбирали гепмери, що демонстрували інгібування мРНК СЕВ іп міїго, і тестували їх в різних дозах в клітинах Нераг. Крім того, отримували дезокси-, МОЕ-ї
СЕг-олігонуклеотид, ІБІ5 594430, з такою ж послідовністю (СТССТтоСИ,аАатсСАас, ЗЕО І МО.: 549) і цільовою областю (цільовий сайт ініціації 2195 послідовності 5ЕО 10 МО.: 1 і цільовий сайт ініціації 6983 послідовності ФЕЮО ІЮО Ме: 2), що ї у ІБІ5 588870, іншого дезокси-, МОБ-і сЕї- олігонуклеотида. ІБІ5 594430 являв собою сЕї-гепмер 3-10-3.
Клітини висівали із щільністю 20000 клітин на лунку і трансфікували 0,01 мкМ, 0,04 мкМ, 0,12
МКМ, 0,37 МКМ, 1,11 мкМ, 3,33 мкМ і 10,00 мкМ концентраціями антисмислового олігонуклеотида, зазначеними в таблиці нижче, з використанням електропорації. Після періоду обробки, що становив приблизної16 години, з клітин виділяли РНК і вимірювали рівні мРНК СЕВ шляхом кількісної ПЛР в режимі реального часу. Набір праймер-зондів людини НТ53459 використовували для вимірювання рівнів мРНК. Рівні мРНК СЕВ коректували у відповідності до загального змісту РНК, виміряного за допомогою ВІВОСВЕЕМеУ. Результати представлені у вигляді відсотку інгібування СЕВ відносно необроблених контрольних клітин.
Також представлена напівмаксимальна інгібуюча концентрація (ІС5о) кожного олігонуклеотида. Рівні мРНК СЕВ знижувалися дозозалежно в клітинах, оброблених антисенсовим олігонуклеотидом.
Таблиця 37
МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ МКМ (МКМ) 588536 |. 0 | 0 | 0 | 5 | 45 | 7 | 9 | 14 588548 | 0 | 0 | 0 | 719 | 52 | 78 | 90 | те 58553 | 0 | 0 | 9 | 42 | 76 | 85 | 9 | 06 58555 | 0 | 52 | 23 | 58 | 78 | 83 | 95 | 03 588847 | 4 | 1 | 18 | 45 | 67 | 84 | 9 | 05 588848 | 0 | з | 13 | 38 | 67 | 83 | 95 | 06 (54430 | 0 | 0 | 10 | 34 | 50 | 55 | 84 | 14
Приклад 12: переносимість МОЕ-гепмерів, націлених на СЕВ, у мишей СО1
Миші СО1Ф (Снапез Вімег, МА) являють собою багатоцільову модель у мишей, що часто використовується для тестування безпеки і ефективності. Мишей лікували антисенсовими олігонуклеотидами ІБ5І5, відібраними з досліджень, описаних вище, і оцінювали на предмет змін рівнів різних хімічних маркерів плазми.
Дослідження 1 (з МОЕ-гепмерами 5-10-5)
Групам семитижневих самців мишей СО1 підшкірно вводили шляхом ін'єкції 100 мг/кг олігонуклеотида І5БІ5 один раз на тиждень протягом 6 тижнів. Групі самців мишей СО1 підшкірно вводили шляхом ін'єкції фосфатно-буферний розчин (ФБР) один раз на тиждень протягом 6 тижнів. Однією групі мишей підшкірно вводили шляхом ін'єкції 100 мг/кг контрольного олігонуклеотида ІБІ5 141923 (ССТТОССТОААСаИатТосСтТос, що позначається в даному описі
ЗЕО ІЮ МО.: 809, МОЕ-гепмер 5-10-5 без відомої мішені у мишей) один раз на тиждень протягом б тижнів. Мишей піддавали евтаназії через 48 годин після останньої дози, і брали органи і плазму для подальшого аналізу.
Хімічні маркери плазми
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІЗІ5 на функцію печінки і нирок вимірювали рівні трансаміназ і азоту сечовини крові (АСК) в плазмі з використанням автоматичного аналізатора для клінічної біохімії (Нітаспі Озутриє АО400є, Мелвілл, Нью-Йорк). Результати представлені в таблиці нижче. Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали зміни рівнів будь-якого з маркерів функції печінки або нирок за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 38
Хімічні маркери в плазмі мишей СО1 в 40 день -В- 3 - (3 1 в | «8 | ши
МО/л МО/л мг/дл
Значення маси
Масу тіла мишей вимірювали в 40 день перед умертвінням мишей. Також вимірювали масу органів, печінки, нирки і селезінки після умертвіння мишей. Результати представлені в таблиці нижче. Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали зміни маси за межами діапазону, очікуваного для
Зо антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 39
Значення маси (г) для мишей СО1 в 40 день 11111110 тіло | о Нирка, | Печінка | Селезінка.:0Ч/
ФБР 7777777 17171717171717441 11111081 20 Їм
І8ІЗ532770...ююЙ Й Юї7р7р7юрюрюля42 | 06 1.23 | 02 2 щФ -И(
І8ВІЗ532800...777777/177717171711л43 77106171 28 | 03 2 2щ "
ВІЗ 532809... 171717171711л42 |71110617177171122 | 0
ВІЗ 53281077 177771711143 77106171 23 | ..с02г
ВІЗ 532952... 17777744 | 71081771 25 Щ | 03 2 «(
ВІЗ Я3419239....ЙюЙюЙюЮюЮюЮюЮЙКНКІЇ 4117 1711106 1711120 Їм
Дослідження 2 (з МОЕ-гепмерами 5-10-5)
Групам 6-8-тижневих самців мишей СО1 підшкірно вводили шляхом ін'єкції 100 мг/кг олігонуклеотида ІЗІЗ один раз на тиждень протягом 6 тижнів. Двом групам самців мишей СОЇ підшкірно вводили шляхом ін'єкції ФБР один раз на тиждень протягом б тижнів. Одній групі мишей підшкірно вводили шляхом ін'єкції 100 мг/кг контрольного олігонуклеотида ІБІ5 141923 один раз на тиждень протягом б тижнів. Мишей піддавали евтаназії через 48 годин після останньої дози, і брали органи і плазму для подальшого аналізу.
Хімічні маркери плазми
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІЗІ5 на функцію печінки і нирок вимірювали рівні трансаміназ, альбуміну і АСК в плазмі з використанням автоматичного аналізатора для клінічної біохімії (Нітаспі Оіїтутриз АШ4О00є, Мелвілл, Нью-Йорк). Результати представлені в таблиці нижче. Олігонуклеотиди І5І5, які викликали зміни рівнів будь- якого з маркерів функції печінки або нирок за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 40
Хімічні маркери в плазмі мишей СО1 в 45 день
АЛТ АСТ . АСК 0001 мош моду Альомноюю ду
ВІЗ 588536..777777711111148 77117601 11711291 1111131
ВІЗ 58855277 1777771117611 71711798 Ї111140 11111300
ВІЗ 588563... 17711150 77711799 | ..Ююж44 6 ЮюЮДЩщф| 28
Значення маси
Масу тіла мишей вимірювали в 42 день. Також вимірювали масу органів, печінки, нирки і селезінки після умертвіння мишей в 45 день. Результати представлені в таблиці нижче.
Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали зміни маси за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 41
Значення маси (г) для мишей СО1 в 40 день 11111110 тіло | о Нирка, | Печінка | Селезінка.:0Ч/
І8ВІЗ1419239...юЙКБХ/ | 43 | 06 2 щЩщ| 24 | 02
ВІЗ 53280 7777/1774 111110611171771111719 Їм
ВІЗ 532952... 17777743 | 7/1 06 177724 | 2 щЩщ 02 г НГ| о ( «
ВІЗ 588539... 171717171сл44 11111062 |11102
ВІЗ 588545 .-:/ | 44 | 08 2 ющ( | 33 | 03
ВІЗ 588547,...-.:.:.:ККЮ5.:/ | 42. | 06 | 33 | 03 2 "(
ВІЗ 588548...-.-.:КК:/"МКРГУН/|////// 43 | 77/06 17771728 | ..02г
ВІЗ 588549,..юЮюЮС:/К.:.Г./.|Ї777///соої2 | 06 1777 28 | щ 03 2 «
ВІЗОВОЇ 7777 1777771139 11110611 22 | 02 2щ
ВІЗ БВВБ52 71777714 11110611 22 | 022
ВІЗ 588559..Й.ЮЮюЮю717171717171л43 |7111061171711112г7 | 03 2
Дослідження З (з МОЕ-гепмерами 5-10-5)
Групам 6-8-тижневих самців мишей СО1 підшкірно вводили шляхом ін'єкції 100 мг/кг олігонуклеотида ІЗІЗ один раз на тиждень протягом 6 тижнів. Двом групам самців мишей СОЇ підшкірно вводили шляхом ін'єкції ФБР один раз на тиждень протягом б тижнів. Мишей піддавали евтаназії через 48 годин після останньої дози, і брали органи і плазму для подальшого аналізу.
Хімічні маркери плазми
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІЗІ5 на функцію печінки і нирок вимірювали рівні трансаміназ, альбуміну і АСК в плазмі з використанням автоматичного аналізатора для клінічної біохімії (Нітасні СОіутрих АШ400е, Мелвілл, Нью-Йорк). Результати представлені в таблиці нижче. Олігонуклеотиди І5І5, які викликали зміни рівнів будь- якого з маркерів функції печінки або нирок за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 42
Хімічні маркери в плазмі мишей СО1 в 42 день
АЛТ АСТ . АСК 0001 мош моду Альомноюю ду
АЛТ АСТ . АСК 00001 мош 3) моду | Альомноюю ду
Значення маси
Масу тіла мишей вимірювали в 42 день. Також вимірювали масу органів, печінки, нирки і селезінки після умертвіння мишей в 42 день. Результати представлені в таблиці нижче.
Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали зміни маси за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 43
Значення маси (г) для мишей СО1 в 40 день 11111110 тіло | Нирка, | Печінка | Селезінка.:ЙЩЧ 8ВІЗ588544...-.-.:УМК/.: З" Г/ | 44 | 06 2 2ЮщЩ(| 79 | 0 ві 588546...-.-.:УКХ: | 43 | 06 2 щЩ| 24 | 02
ВІЗ 588556... 77711139 1111066 | 27 |в
ВІЗ 588557..Й..ЮЮЮЮЮ.:К |. ЮЙМИМИАї..ЮЮ.|.ЮЙИЙв 1433 | Юр 2 щжфжюБЮ 8ВІЗ 58856077 Ї7777171138 77111066 | 732 | 03 гФ
ВІЗ 588562... | Ї71111066 | 28 | 2 щ(02 г гФ КЗ" 8588564... | 40 | (06 2 | 28 | 03 Ф ві 588565... | 77/39 | 2. ..юЮЙ062ЮЩщЩ| 22 | 02 2 Ф (
Дослідження 4 (с (5) СсЕЇ-гепмерами і дезокси-, МОЕ-і сег олігонуклеотидами)
Групам десятитижневих самців мишей СО1 підшкірно вводили шляхом ін'єкції 50 мг/кг олігонуклеотида І5І5 з описаних вище досліджень один раз на тиждень протягом 6 тижнів. Крім того, два олігонуклеотида, ІБІ5 594431 і ІБІ5 594432, отримували у вигляді СЕЇ-гепмерів 3-10-3 і також тестували в даному дослідженні. ІБІ5 594431 (АССТОСТТОСОСАСТСА, ЗЕО І МО.: 550) націлений на ту ж область, що і ІЗІЗ 588871, дезокси-, МОЕ-і сЕЇ-гепмер (цільовий сайт ініціації 2197 послідовності БЕО ІЮО МО.: 1 ї цільовий сайт ініціації 6985 послідовності 562 ІЮ МО.: 2).
ІБІБ 594432 (ТаСТСАСАТТОССТТО, 5ЕО ІО МО.: 542) націлений на ту ж область, що і ІБЗІЗ 588872, дезокси-, МОЕ-і сЕЕгепмер (цільової сайт ініціації 154 послідовності «ЕО ІЮ МО.: 1 ії цільовий сайт ініціації 1875 послідовності 5ЕО ІЮ МО.: 2).
Двом групам самців мишей СО1 підшкірно вводили шляхом ін'єкції ФБР один раз на тиждень протягом б тижнів. Мишей піддавали евтаназії через 48 годин після останньої дози, і брали органи і плазму для подальшого аналізу.
Хімічні маркери плазми
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІЗІ5 на функцію печінки і нирок вимірювали рівні трансаміназ, альбуміну, креатиніну і АСК в плазмі з використанням автоматичного аналізатора для клінічної біохімії (Нітасні Оїутрих АО400є, Мелвілл, Нью-Йорк).
Результати представлені в таблиці нижче. Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали зміни рівнів будь-якого з маркерів функції печінки або нирок за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Зо
Таблиця 44
Хімічні маркери в плазмі мишей СО1 в 42 день я ення Гб Гібо ГТМ. (МО/л) (МО/л) (г/дл) (мг/дл) (мг/дл)
ФБР ЇЇ 777777 -1111111117111171 | 777 | 27 | 02 | 29
ФБР. | 7777-1717 1130 | 36 | 27 | 02 | 26
І8І5 588835 | Дезоксиь МОЕЇСЕ, | 70 | 98 | 30 | 02 | 27 8І5 594430 | 370-3сЕ | 89 | 99 | 24 | 01 | 28
Значення маси
Масу тіла мишей вимірювали в 39 день. Також вимірювали масу органів, печінки, нирки і селезінки після умертвіння мишей в 42 день. Результати представлені в таблиці нижче.
Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали зміни маси за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 45
Значення маси (г) для мишей СО 71111111... .| Хімічнаструктура, | Тіло | Нирка | Печінка | Селезінка
ФБР. ЇЇ 777777171717-1111717171717171717171711711157 | 06 | 21 | 0
ФБР ЇЇ 77777717171717-1111111111111711145 | 07 | 25 | 02
І8І5 588834 | Дезокси МОЕЇСЕЇ | 40 | 06 | 32 | 02
І8І5 588837 | Дезокси МОЕЇсСЕЇ | 38 | 06 | 24 | 03
І8І5 588846 | Дезокси МОЕЇсСЕЇ | 39 | 06 | 23 | 02
І8І5 588857 | Дезокси МОЕЇсСЕЇ | 39 | 06 | 33 | 02
І8І5 588858 | Дезокси МОЕЇсСЕЇ | 37 | 06 | 34 | 02
І8І5 588861 | Дезокси МОЕЇСЕЇ | 39 | 06 | 26 | 04
І8І5 588862 | Дезокси МОЕЇсСЕЇ | 34 | 06 | 25 | 04
І8І5 588863 | Дезокси МОЕЇСЕЇ | 40 | 06 | 27 | 03 8ІЗ 594430 | ЗлоЗ3сЕЇ 77/39 | 06 | 22 | 02 віз 594431. | ЗлоЗ3сЕЇ 77/36 | 06 | 32 | 02
Дослідження 5 (з МОБЕ-гепмерами, (5) сЕітепмерами і дезокси-, МОБ-і сЕ- олігонуклеотидами)
Групам 8-9-тижневих самців мишей СО1 підшкірно вводили шляхом ін'єкції 50 мг/кг олігонуклеотида ІБІ5 один раз на тиждень протягом 6 тижнів. Двом групам самців мишей СОЇ підшкірно вводили шляхом ін'єкції ФБР один раз на тиждень протягом б тижнів. Мишей піддавали евтаназії через 48 годин після останньої дози, і брали органи і плазму для подальшого аналізу.
Хімічні маркери плазми
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІЗІ5 на функцію печінки і нирок вимірювали рівні трансаміназ, альбуміну, креатиніну і АСК в плазмі з використанням автоматичного аналізатора для клінічної біохімії (Нітаспі Озутриє АО400є, Мелвілл, Нью-Йорк). Результати представлені в таблиці нижче. Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали зміни рівнів будь-якого з маркерів функції печінки або нирок за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 46
Хімічні маркери в плазмі мишей СО1 в 42 день я Зк Го або ГТ о.
МО/л МО/л г/дл мг/дл мг/дл
ФБР. 17777771 11933 | 84 | 29 | 02 | 28
ФБР 17777171 1132 | 65 | 25 | 0 | 27
І8І5 532770 | 5105МОЕ | 69 | 100 | 29 | 01 | 28
І8І5 532809 / 5105МОЕ | 69 | 127 | 28 | 01 | 26
І8І5 588540 / 5105МОЕ | 66 | по | 28 | 01 | 26
І8І5 588870 / Дезокси МОЕЇСЕ, | 48 | 69 | 24 | 01 | з
Значення маси
Масу тіла мишей вимірювали в 40 день. Також вимірювали масу органів, печінки, нирки і селезінки після умертвіння мишей в 42 день. Результати представлені в таблиці нижче.
Олігонуклеотиди ІІ, які викликали зміни маси за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 47
Значення маси (г) для мишей СО 11111111 | Хімічнаструктура | Тіло | Нирка | Печінка | Селезінка
ФБР Ї 77777717 -11111171717171171111146 | 07 | 23 | 02
ФБР Ї 77777717 -111111111117111144 | 07 | 23 | 02 8І5 532692 | 5105МОЕ | 44 | 06 | 28 | 02
ІБ 532770 | 5105МОЕ | 43 | 06 | 22 | 02
71111... | Хімічнаструктура | Тіло | Нирка | Печінка | Селезінка
І8ІЗ 532775 | 5105МОЕ | 43 | 06 | 28 | 02
І8І5 588842 | Дезоксиь МОЕЇСЕ | 41 | 06 | 26 | 02
І8І5 588851 | Дезоксь МОЕЇСЕ | 46 | 06 | 26 | 02
І8І5 588870 | Дезоксь МОЕЇСЕЇ | 43 | 06 | 22 | 02
ВІЗ 588872 | Дезоксь МОЕЇСЕ | 39 | 06 | 32 | 03
Дослідження 6 (з дезокси-, МОЕ-і се! олігонуклеотидами)
Групам 8-9-тижневих самців мишей СО1 підшкірно вводили шляхом ін'єкції 50 мг/кг дезокси-,
МОЕ-їі сег олігонуклеотидів один раз на тиждень протягом 6 тижнів. Двом групам самців мишей
СО1 підшкірно вводили шляхом ін'єкції ФБР один раз на тиждень протягом 6 тижнів. Мишей піддавали евтаназії через 48 годин після останньої дози, і брали органи і плазму для подальшого аналізу.
Хімічні маркери плазми
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІЗІ5 на функцію печінки і нирок вимірювали рівні трансаміназ, альбуміну, креатиніну, білірубіну і АСК в плазмі з використанням автоматичного аналізатора для клінічної біохімії (Нііасні Сіутрих АО4О00є, Мелвілл, Нью- Иорк). Результати представлені в таблиці нижче. Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали зміни рівнів будь-якого з маркерів функції печінки або нирок за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 48
Хімічні маркери в плазмі мишей СО1 в 45 день -- б» (ів | ЛИ ГО ОО 1 бо- (МО/л) (МО/л) (г/дл) (мг/дл) (мг/дл) (мг/дл)
І8ІЗ 599553. | 43 | 86 | 29 | 01 | 02 | 28 8ВІБ 601209. | 68 | 104 | 29 | 01 | 02 | з0 ві бОт216. | 90 | 125 | 29 | 01 | 02 | 29
Значення маси
Масу тіла мишей вимірювали в 40 день. Також вимірювали масу органів, печінки, нирки і селезінки після умертвіння мишей в 45 день. Результати представлені в таблиці нижче.
Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали зміни маси за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 49
Значення маси (г) для мишей СО 11111110 тло | нирка, | Печінка, | Селезінка.:07
ФБР 7777777 17171717171742117171717117108 | 23 1102 2 2щ
ВІЗ 599552... 1777777 38177771 06 23 | .г02 2
І8ІЗ 599578... 17777737. 1771711106 | 20 | 02 2 2щ
ВІЗ 599581.7777777171717111111401111771111106 711125 |. 02 2 2щ-
ВІЗ 599590..;М.ЦЮДЮЮЮСЮСслЯ 7 177171711106 1711135 | 702 2 2щ-
ВІЗ 599591.Й.ЙЮ.Ю.Й.ЙЮЮЯ77.7Ю71717138.1117111111008 111127 |111102 2
ВІЗ бОТ212 7777 17771717171179381111171111106 7111298 | 02 2 2щ-
ВІЗ бО1216.7777777717711111142 17711106 11127 |111102 2
Дослідження 7 (з МОЕ-гепмерами і дезокси-, МОЕ-їі сЕг-олігонуклеотидами)
Групам 8-9-тижневих самців мишей СО1 підшкірно вводили шляхом ін'єкції 100 мг/кг олігонуклеотидів ІБІ5 один раз на тиждень протягом 6 тижнів. Одній групі самців мишей СО підшкірно вводили шляхом ін'єкції ФБР один раз на тиждень протягом б тижнів. Мишей піддавали евтаназії через 48 годин після останньої дози, і брали органи і плазму для подальшого аналізу.
Хімічні маркери плазми
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІЗІ5 на функцію печінки і нирок вимірювали рівні трансаміназ, альбуміну, креатиніну і АСК в плазмі з використанням автоматичного аналізатора для клінічної біохімії (Ніаснпі Оїтутрих АО400е, Мелвілл, Нью-Йорк). Результати представлені в таблиці нижче. Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали зміни рівнів будь-якого з маркерів функції печінки або нирок за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 50
Хімічні маркери в плазмі мишей СО1 в 45 день я тентю Паб (оба ГИ Го. (МоО/л) (МО/л) (г/дл) (мг/дл) (мг/дл)
ФБР. | 777717 -1171717171171111711120 | 702 | 27 | 02 | 26
І8І5 588843 | Дезоксиь МОЕЇСЕЇ | 98 | 194 | 27 | 01 | 24 вв тат аби (обл ТИКИ Гиоя. (МоО/л) (МО/л) (г/дл) (мг/дл) (мг/дл)
І8І5 599267 | 3105МОЕ | 96 | 132 | 26 | 02 | 27
І8І5 599378 | 595МОЕ | 77 | 99 | 27 | 01 | 23
Значення маси
Масу тіла мишей вимірювали в 44 день. Також вимірювали масу органів, печінки, нирки і селезінки після умертвіння мишей в 49 день. Результати представлені в таблиці нижче.
Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали зміни маси за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 51
Значення маси (г) для мишей СО 11111111 | Хімічнаструктура | Тіло | Нирка | Печінка | Селезінка
ФБР. ЇЇ 777771717-1171171171111171111139 17106 1 19 | 0
І8І5 588843 | Дезокси МОЕЇСЕЇ | 41 | 06 | 24 | 02
І8І5 588851 | Дезокси МОЕЇСЕЇ | 42 | 06 | 22 | 02
І8ІЗ 599024 | ЗлЛ0О4МОЕ | 4 | 06 | 40 | 02
І8І5 599087 | 575МОЕ | 44 | 08 | 26 | 03
І8ІЗ 599093 | 575МОЕ | 39 | 06 | 23 | 02
І8ІЗ 599202 | 585МОЕ | 43 | 06 | 26 | 02
І8ІЗ 599203 | 585МОЕ | 42 | 06 | 26 | 02
І8Із 599208 | 585МОЕ | 40 | 06 | 21 | 02
І8І5 599267 | ЗЛО5МОЕ | 42 | 08 | 25 | 03
І8І5 599322 | 676МОЕ | 43 | 06 | 22 | 02
І8ІЗ 599374 | 595МОЕ | 37 | 06 | 22 | 02 віз 599441 | 686МОЕ | 42 | 06 | 25 | 03
Дослідження 8 (з МОЕ-гепмерами, дезокси-, МОЕ-і сЕг-олігонуклеотидами, і сСЕЇ- гепмерами)
Групам 8-9-тижневих самців мишей СО1 підшкірно вводили шляхом ін'єкції 100 мг/кг МОЕ- гепмерів або 50 мг/кг дезокси-, МОБ-ї сЕголігонуклеотидів або сЕЇ-гепмерів один раз на тиждень протягом б тижнів. Одній групі самців мишей СО1 підшкірно вводили шляхом ін'єкції
ФБР один раз на тиждень протягом 6 тижнів. Мишей піддавали евтаназії через 48 годин після останньої дози, і брали органи і плазму для подальшого аналізу.
Хімічні маркери плазми
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІЗІ5 на функцію печінки і нирок вимірювали рівні трансаміназ, альбуміну, креатиніну і АСК в плазмі з використанням автоматичного аналізатора для клінічної біохімії (Ніаснпі Оїтутрих АО400е, Мелвілл, Нью-Йорк). Результати представлені в таблиці нижче.
Таблиця 52
Хімічні маркери в плазмі мишей СО1 в 43 день
Хімічна Доза (мг/кг/ АЛТ АСТ Альбумін Креатинін АСК структура тиждень) (МоО/л) (МО/л) (г/дл) (мг/дл) (мг/дл)
ФБР. | - | - | 37 | 57 | 25 | 008 | 26
ІБІВ
ІБІВ
ІБІВ
ІБІВ
ІБІВ
ІБІВ
ІБІВ
ІБІВ
ІБІВ
ІБІЄ Дезокси, МОЕ
ІБІВ
Значення маси
Масу тіла мишей вимірювали в 36 день. Також вимірювали масу органів, печінки, нирки і селезінки після умертвіння мишей в 43 день. Результати для маси органів виражали у вигляді відношення до маси тіла і приводили до співвідношення для контролю ФБР.
Таблиця 53
Маса органу/маса тіла (МТ) для мишей СО
Хімічна Доза Нирка/мт / Печінка/мт | Селезінка/мт структура (мг/кг/тиждень)
ФБР ЇЇ 7-17 -11111117117111110 770 1710 5-10-5 5-10-5 5-10-5 5-10-5
ІБІ5 588544 5-10-5 1 МОоЕ ГО 5-10-5 5-10-5 5-10-5
Хімічна Доза Нирка/мт | Печінка/мт | Селезінка/мт структура (мг/кг/тиждень) 5-10-5
Дезокси,
ІБІБ 588848 МОЕ і 50 1,3 1,0
СЕ
ІІ 594430 | 310-3сЕ| -: 50 | 14 | 7 | 09 2 щ к«БвКжї)
Аналізи для визначення рівнів цитокінів
Кров, отриману від усіх груп мишей, відправляли в АпіеСНОіадповіїс5 для вимірювання рівнів різних цитокінів, таких як І./-6, МОС, МІР1ВД, ІР-10, МСРІ, МІР-1с ії ВАМТЕ5. Результати представлені в таблиці 54.
Таблиця 54
Рівні цитокінів (пг/мл) в плазмі мишей СОЇ структура
ФБР. 177777 -1111171770 | 16 | 23 | 20 | 17 | 6 | 2
ІзІ5 532770 | 5-10-5МОЕ | 101 | 718 | 146 | 116 | 101 | 24 | 6
ІЗІ5 532800 | 5-10-5 МОЕ
ІзІ5 532809 | 5-10-5МОЕ | 66 | 19 | 60 | 32 | 55 | 20 | 4
ІЗІ5 588540 | 5-10-5 МОЕ
ІЗІ5 588544 | 5-10-5 МОЕ
ІзІ5 588548 | 5-10-5МОЕ | 164 | 712 | 90 | 66 | 84 | ло | 4
ІЗІ5 588550 | 5-10-5 МОЕ
ІзІ5 588553 | 5-10-5МОЕ | 62 | 714 | 183 | 60 | 103 ї 9 | 4
ІБІ5 588555 | 510-5МОЕ | 70 | 19 | 172 | 171 | 178 | 16 | 9
ІзІ5 594430 | 3-10-3 сЕ!
Гематологічні аналізи
Кров, отриману від усіх груп мишей, відправляли в АпіеСНОіадповіїс5 для вимірювання гематокриту (НСТ), а також різних клітин крові, таких як лейкоцити (М/ВС), еритроцити (ВВС) і тромбоцити, і загального вмісту гемоглобіну (НЬ). Результати представлені в таблиці 55.
Таблиця 55
Гематологічні маркери в плазмі мишей СОЇ
Хімічна нет Но (г/дл) Мвс вво Тромбоцити структура Фо д 103/мкл) 105/мкл) 103/мкл)
ФБР. (| - | 46 | 15 | 7 1 9 | 96 5-10-5 5-10-5 5-10-5 5-10-5 5-10-5 5-10-5
(ее 5 Гете ок обжн| ПИ структура Фо 103/мкл) 105/мкл) 103/мкл) 5-10-5 зв | моє 9616 5-10-5 зв | моє мо 6181 5-10-5 зв | моє 0909618
Дезокси,
ІБІ5 588848 МОЕ і 40 15 10 840
СЕ віз 594430 | 3л0-3сЕ | 45 | 14 | 8 | 9 | 993
Приклад 13: переносимість антисмислових олігонуклеотидів, націлених на СЕВ людини, у щурів лінії Спрег-Доулі
Щури лінії Спрег-Доулі являють собою багатоцільову модель, яка використовується для оцінки безпеки та ефективності. Щурів лікували антисенсовими олігонуклеотидами ІбБІЗ5 з досліджень, описаних в прикладах вище, і оцінювали на предмет змін рівнів різних хімічних маркерів плазми.
Дослідження 1 (з МОЕ-гепмерами 5-10-5) 7-в8-тижневих самців щурів лінії Спрег-Доулі утримували в умовах 12-годинного циклу світло/темрява і годували без обмеження звичайним кормом для щурів Ригіпа, раціон 5001.
Групам з 4 щурів лінії Спрег-Доулі кожна підшкірно вводили шляхом ін'єкції 100 мг/кг МОЕ- гепмерів 5-10-5 один раз на тиждень протягом б тижнів. Одній контрольній групі з б щурів підшкірно вводили шляхом ін'єкції ФБР один раз на тиждень протягом 6 тижнів. Через дві доби після останньої дози щурів піддавали евтаназії, і брали органи і плазму для подальшого аналізу.
Функція печінки
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІБІ5 на функцію печінки вимірювали рівні трансаміназ в плазмі з використанням автоматичного аналізатора для клінічної біохімії (Ніаснпі ОіІутрив
АЦ4О0є, Мелвілл, Нью-Йорк). Вимірювали рівні АЛТ (аланінтрансамінази) і АСТ (аспартаттрансамінази) в плазмі, і результати, виражені в МО/л, представлені в таблиці нижче.
Олігонуклеотиди І5БІ5, які викликали зміни рівнів будь-яких маркерів функції печінки за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 56
Маркери функції печінки у щурів лінії Спрег-Доулі еВ ИШЗА- З З « А- : 5:31. | 5 (МО/л) (МО/пл)
ФБР 7777777171717171717171711111111Ї111171716611111117111111111134
ВІЗ БВВББО 777777777777111111111111Ї11111106911111С1Ї1111111111571С
Функція нирок
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІЗІ5 на функцію нирок вимірювали рівні азоту сечовини крові (АСК) і креатиніну в плазмі з використанням автоматичного аналізатора для клінічної біохімії (Ніїаспі ОСіІутрих5 АШ4О0є, Мелвілл, Нью-Йорк). Результати, виражені в мг/дл, представлені в таблиці нижче. Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали зміни рівнів будь-якого з маркерів функції нирок за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 57
Маркери функції нирок (мг/дл) у щурів лінії Спрег-Доулі 1111111111АСКО 11711111 Креатинін////:
Значення маси
Вимірювання маси тіла проводили в 39 день. Масу печінки, серця, селезінки і нирки вимірювали в кінці дослідження в 42 день, і результати представлені в таблиці нижче.
Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали будь-які зміни маси органів за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 58
Значення маси (г) 11111110 Тіло, | Печінка | Селезінка. | Нирка.0
Дослідження 2 (з дезокси-, МОЕ-і СЕ! олігонуклеотидами) 9-10-тижневих самців щурів лінії Спрег-Доулі утримували в умовах 12-годинного циклу світло/темрява і годували без обмеження звичайним кормом для щурів Ригіпа, раціон 5001.
Групам з 4 щурів лінії Спрег-Доулі кожна підшкірно вводили шляхом ін'єкції 100 мг/кг дезокси-,
МОБЕ-і сЕг-олігонуклеотидів один раз на тиждень протягом 6 тижнів. Двом контрольним групам з
З щурів кожна підшкірно вводили шляхом ін'єкції ФБР один раз на тиждень протягом 6 тижнів.
Через дві доби після останньої дози щурів піддавали евтаназії, і брали органи і плазму для подальшого аналізу.
Функція печінки
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІБІ5 на функцію печінки вимірювали рівні трансаміназ в плазмі в 42 день з використанням автоматичного аналізатора для клінічної біохімії (Нітасні
Оіутриз АШО400є, Мелвілл, Нью-Йорк). Вимірювали рівні АЛТ (аланінтрансамінази) і АСТ (аспартаттрансамінази), і альбуміну в плазмі, і результати представлені в таблиці нижче.
Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали зміни рівнів будь- яких маркерів функції печінки за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 59
Маркери функції печінки у щурів лінії Спрег-Доулі
АЛТ АСТ . ни (МО/л) (МО/л) дльбумін (уд)
ІЗІ5 588554
ІВІЗ 588835
ІЗІ5 588842
ІЗІ5 588843
ІЗІ5 588846
ІЗІ5 588847
ІЗІ5 588864
ІЗІ5 594430
Функція нирок
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІЗІ5 на функцію нирок вимірювали рівні азоту сечовини крові (АСК) і креатиніну в плазмі з використанням автоматичного аналізатора для клінічної біохімії (Ніїаспі ОіІутрих АШ4ООє, Мелвілл, Нью-Йорк). Результати, виражені в мг/дл, представлені в таблиці нижче. Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали зміни рівнів будь-якого з маркерів функції нирок за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 60
Маркери функції нирок (мг/дл) у щурів лінії Спрег-Доулі 1111111111АСКО 11711111 Креатинін////:
ІЗІ5 588554
ІВІЗ 588835
ІЗІ5 588842
ІЗІЗ 588843
ІЗІ5 588846
ІЗІ5 588847
ІЗІ5 588864
ІЗІ5 594430
Значення маси
Вимірювання маси тіла проводили в 39 день. Масу печінки, серця, селезінки і нирки вимірювали в кінці дослідження в 42 день, і результати представлені в таблиці нижче.
Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали будь-які зміни маси органів за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 61
Значення маси (г) 11111110 Тіло, | Печінка | Селезінка. | Нирка.0
ФБР. /////////171717171/17466 | 16 17171717171109. | 38 2 щЩ
ФБР. 777777777/7171717171717485...ЮЙ. | 16.17.7709... |. 36 2 щ Дд/І
ІЗІ5 588554
ІВІЗ 588835
ІЗІ5 588842
ІЗІ5 588843
11111111 Тіло | Печінка | Селезінка | Нирка.0
ІЗІ5 588846
ІЗІ5 588847
ІЗІ5 588864
ІЗІ5 594430
Дослідження З (з МОЕ-гепмерами) 9-10-тижневих самців щурів лінії Спрег-Доулі утримували в умовах 12-годинного циклу світло/темрява і годували без обмеження звичайним кормом для щурів Ригіпа, раціон 5001.
Групам з 4 щурів лінії Спрег-Доулі кожна підшкірно вводили шляхом ін'єкції 100 мг/кг МОЕ- гепмерів один раз на тиждень протягом 6 тижнів. Одній контрольній групі з 6 щурів підшкірно вводили шляхом ін'єкції ФБР один раз на тиждень протягом б тижнів. Через дві доби після останньої дози щурів піддавали евтаназії, і брали органи і плазму для подальшого аналізу.
Функція печінки
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІБІ5 на функцію печінки вимірювали рівні трансаміназ в плазмі в 43 день з використанням автоматичного аналізатора для клінічної біохімії (Нітасні
ОСОіутрих АШ4О00є, Мелвілл, Нью-Йорк). Вимірювали рівні АЛТ (аланінтрансамінази) і АСТ (аспартаттрансамінази) в плазмі, і результати, виражені в МО/л, представлені в таблиці нижче.
Олігонуклеотиди І5БІ5, які викликали зміни рівнів будь-яких маркерів функції печінки за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 62
Маркери функції печінки у щурів лінії Спрег-Доулі с. АЛТ АСТ .
ФБР 7777/7171 -1111111111152 11 |з 5-10-5 3-10-4
ІЗІ5 599093 5-7-5 МОЕ
ІЗІ5 599149 4-8-5 МОЕ
ІЗІ5 599155 4-8-5 МОЕ
ІЗІ5 599202 5-8-6МОЕ | 65 | 86 | 35
ІЗІ5 599203 5-8-5 МОЕ
ІЗІ5 599208 5-8-5 МОЕ 3-10-5 3-10-5
Функція нирок
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІЗІ5 на функцію нирок вимірювали рівні азоту сечовини крові (АСК) і креатиніну в плазмі з використанням автоматичного аналізатора для клінічної біохімії (Ніїаспі ОіІутрих АШ4ООє, Мелвілл, Нью-Йорк). Результати, виражені в мг/дл, представлені в таблиці нижче. Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали зміни рівнів будь-якого з маркерів функції нирок за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 63
Маркери функції нирок (мг/дл) у щурів лінії Спрег-Доулі 11111111 | Хімічнаструєтура.ї | АСК | Креатинін//
ФБР 71/11 -111111111111111116 11111103
Значення маси
Вимірювання маси тіла проводили в 39 день. Масу печінки, серця, селезінки і нирки вимірювали в кінці дослідження в 42 день, і результати представлені в таблиці нижче.
Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали будь-які зміни маси органів за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 64
Значення маси (г) 11111111. |Хімічнаструктура| Тіло | Печінка | Селезінка | Нирка. /
ФБР ЇЇ 7777-1114 11716 |711110 14 віз 599261 | З105МОЕ | 277 | 710 | 098 | 32
Дослідження 4 (з МОЕ-гепмерами) 9-10-тижневих самців щурів лінії Спрег-Доулі утримували в умовах 12-годинного циклу світло/темрява і годували без обмеження звичайним кормом для щурів Ригіпа, раціон 5001.
Групам з 4 щурів лінії Спрег-Доулі кожна підшкірно вводили шляхом ін'єкції 100 мг/кг МОЕ- гепмерів один раз на тиждень протягом 6 тижнів. Одній контрольній групі з 6 щурів підшкірно вводили шляхом ін'єкції ФБР один раз на тиждень протягом б тижнів. Через дві доби після останньої дози щурів піддавали евтаназії, і брали органи і плазму для подальшого аналізу.
Функція печінки
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІБІ5 на функцію печінки вимірювали рівні трансаміназ в плазмі в 42 день з використанням автоматичного аналізатора для клінічної біохімії (Нітасні
Оіутриз АШО400є, Мелвілл, Нью-Йорк). Вимірювали рівні АЛТ (аланінтрансамінази) і АСТ (аспартаттрансамінази) в плазмі, і результати, виражені в МО/л, представлені в таблиці нижче.
Олігонуклеотиди І5БІ5, які викликали зміни рівнів будь-яких маркерів функції печінки за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 65
Маркери функції печінки у щурів лінії Спрег-Доулі с. АЛТ АСТ . п Хімічна структура (МО/л) (МО/л) Альбумін (г/дл)
ФБР 7777/1771 -111111711111148 11777 11139800 5-10-5 5-10-5 5-10-5
ІЗІ5 599268 3-10-5 пе НИ То З ПОЛЯ ПОН ПО
ІЗІ5 599322 6-7-6 МОЕ
ІЗІ5 599374 5-9-5 МОЕ
ІЗІ5 599378 5-9-5 МОЕ
ІЗІ5 599380 5-9-5 МОЕ
ІЗІ5 599441 6-8-6 МОЕ
Функція нирок
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІЗІ5 на функцію нирок вимірювали рівні азоту сечовини крові (АСК) і креатиніну в плазмі з використанням автоматичного аналізатора для клінічної біохімії (Ніїаспі ОіІутрих АШ4ООє, Мелвілл, Нью-Йорк). Результати, виражені в мг/дл, представлені в таблиці нижче. Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали зміни рівнів будь-якого з маркерів функції нирок за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 66
Маркери функції нирок (мг/дл) у щурів лінії Спрег-Доулі 11111111 771717 Хімічна структура
ФБР 11111115 11111104
ІБІ5 532800 5-10-5 МОЕ
ІБІ5 532809 5-10-5 МОЕ
ІЗІ5 588540 5-10-5 МОЕ
ІБІ5 599268 3-10-5 МОЕ
ІБІ5 599322 6-7-6 МОЕ
ІБІ5 599374 5-9-5 МОЕ
ІЗІ5 599378 5-9-5 МОЕ
ІБІ5 599380 5-9-5 МОЕ
ІЗІ5 599441 6-8-6 МОЕ
Значення маси
Вимірювання маси тіла проводили в 39 день. Масу печінки, серця, селезінки і нирки вимірювали в кінці дослідження в 42 день, і результати представлені в таблиці нижче.
Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали будь-які зміни маси органів за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 67
Значення маси (г) 11111111... |Хімічнаструктура| Тіло | Печінка | Селезінка | Нирка:Й
ФБР. 7/7 17717171 |111502 177.16. | 2 щ-069 | 937
Дослідження 5 (з МОЕ-гепмерами і дезокси-, МОЕ-їі сЕг-олігонуклеотидами) 9-10-тижневих самців щурів лінії Спрег-Доулі містили в умовах 12-годинного циклу світло/темрява і годували без обмеження звичайним кормом для щурів Ригіпа, раціон 5001.
Групам з 4 щурів лінії Спрег-Доулі кожна підшкірно вводили шляхом ін'єкції 100 мг/кг МОЕ- гепмера або 50 мг/кг дезокси-, МОБЕ-ї сЕг-олігонуклеотидів один раз на тиждень протягом 6 тижнів. Одній контрольній групі з 4 щурів підшкірно вводили шляхом ін'єкції ФБР один раз на тиждень протягом 6 тижнів. Через дві доби після останньої дози щурів піддавали евтаназії, і брали органи і плазму для подальшого аналізу.
Функція печінки
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІБІ5 на функцію печінки вимірювали рівні трансаміназ в плазмі в 42 день з використанням автоматичного аналізатора для клінічної біохімії (Нітасні
Оіутриз АШО400є, Мелвілл, Нью-Йорк). Вимірювали рівні АЛТ (аланінтрансамінази) і АСТ (аспартаттрансамінази) в плазмі, і результати, виражені в МО/л, представлені в таблиці нижче.
Олігонуклеотиди І5БІ5, які викликали зміни рівнів будь-яких маркерів функції печінки за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 68
Маркери функції печінки у щурів лінії Спрег-Доулі 00000100 хнестуюув 0 моду | моду Альсуми піл)
ФБР 17777771 111149 | 74 | 33
Функція нирок
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІЗІ5 на функцію нирок вимірювали рівні азоту сечовини крові (АСК) і креатиніну в плазмі і сечі з використанням автоматичного аналізатора для клінічної біохімії (Ніїаспі ОіІутрих АШ4ООє, Мелвілл, Нью-Йорк). Результати, виражені в мг/дл, представлені в таблиці нижче. Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали зміни рівнів будь-якого з маркерів функції нирок за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 69
Маркери функції нирок (мг/дл) в плазмі щурів лінії Спрег-Доулі 11111110 Хімічнаструкєтура.їд////////// | АСК | Креатинін.
ФБР 77/11 Ї11118 | 0532
Таблиця 70
Маркери функції нирок (мг/дл) в сечі щурів лінії Спрег-Доулі 11111110, Хімічнаструктура |Загальнийбілок| Креатинін!
ФБР Ї777777771771717171711717171-111111111111111711111180111111111920
І8ІЗ 532770. | /// 57О5МОЕ 777 | 71466 |777777769 2
ВІЗ 588856 00 | 00000000 ДезоксЬ, МОБЇісЕ | 25977777 68 4
І8І5 588867 | Дезоксь МОЕЇСЕ | 33777777 68 4
Значення маси
Вимірювання маси тіла проводили в 39 день. Масу печінки, серця, селезінки і нирки вимірювали в кінці дослідження в 42 день, і результати представлені в таблиці нижче.
Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали будь-які зміни маси органів за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 71
Значення маси (г) 11111111 | Хімічнаструктура | Тіло | Печінка | Селезінка | Нирка
ФБР 7 17717171 і 1489 | 716 | 09 | 35
Дослідження 6 (з МОЕ-гепмерами, дезокси-, МОЕ-і сЕг-олігонуклеотидами, і СЕЇ- гепмерами)
Самців щурів утримували в умовах 12-годинного циклу світло/лемрява і годували без обмеження звичайним кормом для щурів Ригіпа, раціон 5001. Групам з 4 щурів кожному підшкірно вводили шляхом ін'єкції 100 мг/кг МОЕ-гепмерів або 50 мг/кг дезокси-, МОБ-і сЕї- олігонуклеотида або сЕі-гепмера один раз на тиждень протягом б тижнів. Одній контрольній групі з 4 щурів підшкірно вводили шляхом ін'єкції ФБР один раз на тиждень протягом 6 тижнів.
Через дві доби після останньої дози щурів піддавали евтаназії, і брали органи і плазму для подальшого аналізу.
Функція печінки
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІБІ5 на функцію печінки вимірювали рівні трансаміназ в плазмі в 42 день з використанням автоматичного аналізатора для клінічної біохімії (Нітасні
ОСОіутрих АШ4О00є, Мелвілл, Нью-Йорк). Вимірювали рівні АЛТ (аланінтрансамінази) і АСТ (аспартаттрансамінази) в плазмі, і результати, виражені в МО/л, представлені в таблиці нижче.
Таблиця 72
Маркери функції печінки
Хімічна структура Доза АЛТ АСТ Альбумін руктур (мг/кг/лтиждень) | (МО/л) | (МоО/л (г/дл)
ФБР Ї 7777-1111 -111111111154 | 73 | 43
ІЗІ5 532770 5-10-5 МОЕ
ІЗІЗ 532800 5-10-5 МОЕ
ІЗІ5 532809 5-10-5 МОЕ
ІЗІ5 588540 5-10-5 МОЕ 70077189 | 202 | 44
ІЗІ5 588544 5-10-5 МОЕ
ІЗІ5 588548 5-10-5 МОЕ
ІЗІ5 588550 5-10-5 МОЕ 7001 80 | 133 | 36
ІЗІ5 588553 5-10-5 МОЕ
ІЗІ5 588555 5-10-5 МОЕ
ІБІЗ 588848 Дезокси, МОЕ і се!
ІЗІ5 594430 3-10-3 се!
Функція нирок
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІБІ5 на функцію нирок вимірювали рівні загального білка і креатиніну в сечі з використанням автоматичного аналізатора для клінічної біохімії (Нітасні
ОСіутрих АЦ400є, Мелвілл, Нью-Йорк). Результати представлені в таблиці нижче.
Олігонуклеотиди ІБІ5, які викликали зміни рівнів будь-якого з маркерів функції нирок за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів, виключали з подальших досліджень.
Таблиця 73
Співвідношення загальний білок/креатинін в сечі щурів я, Співвідношення
ФБР С / Їм
ІЗІ5 532770 5-10-5
ГМО її 5-10-5 5-10-5 5-10-5 5-10-5 5-10-5 5-10-5 5-10-5 5-10-5
ІЗІ5 594430 3-10-3 се!
Значення маси
Вимірювання маси тіла проводили в 39 день. Масу печінки, серця, селезінки і нирки вимірювали в кінці дослідження в 42 день, і результати представлені в таблиці нижче.
Результати для маси органів виражали у вигляді відношення до маси тіла і приводили до співвідношення для контролю ФБР.
Таблиця 74
Співвідношення маса органу/маса тіла (МТ) лев, Геобовно | сетанатт | пезнатт | нерант структура (мг/кг/тиждень)
ФБР | 7/7 -777717117717171717171717-11111711111110 110 110
Приклад 14: ефективність антисмислових олігонуклеотидів щодо мРНК СЕВ у трансгенних по НСЕВ мишей.
Відібрані сполуки тестували на предмет ефективності у трансгенних по СЕВ людини мишей, лінія-засновник Ме б. Ген СЕВ людини розташований на хромосомі 6: положення 31913721- 31919861. Для отримання трансгенних мишей, що експресують ген СЕВ людини, обирали фосміду (Гозтіа) (АВС14-50933200023), що містила послідовність СЕВ. Рестрикційні ферменти
Сіа І (31926612) і Адеє І (31926815) використовували для отримання фрагмента довжиною 22127 пар основ, що містив ген СЕВ, для пронуклеарної ін'єкції. ДНК підтверджували шляхом аналізу з рестрикційними ферментами з використанням Рми І. Фрагмент ДНК довжиною 22127 пар основ вводили шляхом ін'єкції ембріоснам С57ВІ/6 Мас. Виводили б позитивних засновників.
Засновник Мо 6 експресував мРНК СЕВ печінки людини і його схрещували з З3-ім поколінням.
Нащадків мишей 3-го покоління використовували для оцінки антисмислових олігонуклеотидів (АБО) СЕВ людини на предмет зменшення мРНК СЕВ людини.
Лікування
Групам з З мишей кожна підшкірно вводили шляхом ін'єкції 50 мг/кг олігонуклеотидів ІБІ5 два рази на тиждень протягом першого тижня з подальшим введенням 50 мг/кг олігонуклеотидів
ІБІЗ один раз на тиждень протягом ще трьох тижнів.
Одній контрольній групі з 4 мишей підшкірно вводили шляхом ін'єкції ФБР два рази на тиждень протягом 2 тижнів протягом першого тижня протягом ще трьох тижнів. Через дві доби після останньої дози щурів піддавали евтаназії, і брали органи і плазму для подальшого аналізу.
Зо Аналіз РНК
В кінці періоду введення доз РНК екстрагували з печінки і нирки для аналізу рівнів МРНК
СЕВ методом ПЛР в режимі реального часу. Рівні мРНК СЕВ людини вимірювали з використанням набору праймер-зондів людини НТ53459. Рівні мРНК СЕВ приводили до
ВІВОСАВЕЕМУ, а також до гену "домашнього господарства", циклофіліну. Результати розраховували у вигляді відсотка інгібування експресії МРНК СЕВ в порівнянні з контролем. Всі антисмислові олігонуклеотиди здійснювали інгібування рівнів МРНК СЕВ людини в печінці.
Таблиця 75
Відсоток зниження рівнів МРНК СЕВ у мишей НСЕВ 11110532770 | 777171786.777777711111171Ї111111111111787С1 пс У: т Я ПО С ПОД ПО с. ПО пи: С ТЯ ПО: С ПООООООООООООООННЯ КОН : ПО
Приклад 15: антисенсове інгібування СЕВ миші іп мімо.
Отримували кілька антисмислових олігонуклеотидів, націлених на мРНК СЕВ миші (номер доступу в ОЕМВАМК ММ 008198.2, включений в даний опис як 5ЕО ІЮО МО.: 5). Цільові сайти ініціації і послідовності кожного олігонуклеотида описані в таблиці нижче. Химерні антисмислові олігонуклеотиди в таблиці нижче отримували у вигляді МОЄЕ- гепмерів 5-10-5. Довжина зазначених гепмерів становила 20 нуклеозидів, при цьому центральний геп-сегмент містив 10 2г"-дезоксинуклеозидів і був фланкований по обидва боки (в 5'-і 3'-напрямках) "крилами", кожне з яких містило 5 нуклеозиди. Кожен нуклеозид в 5'-сегменті-крилі і кожен нуклеозид в 3'-сегменті- крилі містив 2'-«МОЕ- модифікацію. Міжнуклеозидні зв'язки вздовж кожного гепмера являли собою фосфоротіоатні (Р-5) зв'язки. Всі залишки цитозину вздовж кожного гепмера являли собою 5-метилцитозини.
Таблиця 76
Гепмери, націлені на СЕВ миші
Цільовий сайт
МО.: 5
Лікування
Групам з чотирьох мишей С57ВІ /6 кожній вводили шляхом ін'єкції 50 мг/кг ІБІ5 516269, ІБІЗ 516272, ІБІ5 516323, ІБІ5 516330 або І5БІ5 516341 щотижня протягом З ижнів. Контрольній групі мишей вводили фосфатний буферний розчин (ФБР) щотижня протягом З тижнів.
Аналіз РНК СЕВ
В кінці дослідження РНК екстрагували з тканини печінки для аналізу СЕВ методом ПЛР в режимі реального часу з використанням набору праймер-зондів АТ53430 (пряма послідовність
СОСОСААДАСАССААТТТОТОА, що позначається в даному описі 5ЕО ІЮО МО.: 816; зворотна послідовність ТЕИСТАСССАССТТОСТТОТ, що позначається в даному описі 5ЕО ІЮО МО.: 817; послідовність зонда СТАСАТАСТатоССААТСССИСТАТТОССХ, що позначається в даному описі 5ЕО І МО.: 818). Рівні мРНК нормалізували з використанням ВІВОСВЕЕМЕ. Як показано в таблиці нижче, деякі антисмислові олігонуклеотиди забезпечували зменшення СЕВ миші відносно контролю ФБР. Результати представлені у вигляді відсотка інгібування СЕВ відносно контролю.
Зо
Таблиця 77
Відсоток інгібування мРНК СЕВ миші у мишей С57ВІ /6
Аналіз білка
Вимірювали рівні білка СЕВ в нирці, печінці, плазмі і в оці шляхом вестерн-блот з використанням антитіла кози анти-СЕВ (бідта Аїагісн). Результати представлені у вигляді відсотка інгібування СЕВ відносно контролю ФБР. "н.д.» означає, що для даного зразка не проведені вимірювання. Як показано в таблиці нижче, антисенсове інгібування СЕВ олігонуклеотидами І5БІ5 призводило до зменшення білка СЕВ в різних тканинах. Як показано в таблиці нижче, системне введення олігонуклеотидів ІБІЄ ефективно знижувало рівні СЕВ в оці.
Таблиця 78
Відсоток інгібування білка СЕВ миші у мишей С57ВІ /6
Ме ІЗІЗ | Нирка | Печінка | Плазма | Окю 11516269. | 7720. | 58 | нд. | 70 2 щ " 11516272 |... 48 | 774 | нд | 99 2 11516323. | 773 | 777/785..ЮЙЮЙЙ.| ЮК 50.ЙЙї1.ЙБ..ЙЮД2 2 ЖФж-"« 11156330 |... ИюИ77 | 802 2юЮюЮж | нд | нд і 5Іб341 | 777780... |... 88 юю | 2 ЮюЮК,Ц68 | нд
Приклад 16: дозозалежне антисенсове інгібування СЕВ миші
Групам з чотирьох мишей С57ВІ /6 кожній вводили шляхом ін'єкції 25 мг/кг, 50 мг/кг або 100 мг/кг ІБІ5 516272 і ІБІ5 516323 щотижня протягом 6 тижнів. Іншим двом групам мишей вводили шляхом ін'єкції 100 мг/кг ІБІ5 516330 або ІБІ5 516341 щотижня протягом б тижнів. Двом контрольним групам мишей вводили шляхом ін'єкції фосфатний буферний розчин (ФБР) щотижня протягом 6 тижнів.
Аналіз РНК СЕВ
РНК екстрагували з тканин печінки і нирки для аналізу СЕВ методом ПЛР в режимі реального часу з використанням набору праймер-зондів ВТ53430. Рівні мРНК нормалізували з використанням ВІВОСВЕЄЕМ?У. Як показано в таблиці нижче, антисмислові олігонуклеотиди забезпечували дозозалежне зменшення СЕВ миші відносно контролю ФБР. Результати представлені у вигляді відсотка інгібування СЕВ відносно контролю.
Таблиця 79
Відсоток інгібування мРНК СЕВ миші у мишей С57ВІ /6 516272 516323 пит СХ 25 ПО То По ПОН: Те ООН ПОН У
Аналіз білка
Вимірювали рівні білка СЕВ в плазмі шляхом вестерн-блоту з використанням антитіла кози анти-СЕВ (бЗідта АїІдйсн). Як показано в таблиці нижче, антисенсове інгібування СЕВ олігонуклеотидами ІБІЗ призводило до зменшення білка СЕВ. Результати представлені у вигляді відсотка інгібування СЕВ відносно контролю ФБР. "н.д.» означає, що для даного зразка не проведені вимірювання.
Рівні більа СЕВ також вимірювали в оці шляхом вестерн-блоту. Всі групи лікування демонстрували 95 95 інгібування СЕВ, при цьому вимірювання для деяких зразків були нижче рівнів детектування для зазначеного аналізу.
Таблиця 80
Відсоток інгібування білка СЕВ миші у мишей С57ВІ /6 516272 516323 50111118 о во111Г11111111190111111 пт СКЛ ПО Ст ООН КО МО пи Сх 75 Я ПОТ ООН КО МО
Приклад 17: вплив антисмислового інгібування СЕВ в моделі у мишей МАВЛМ ЕТ
МИВЛМ Е1 являє собою найстарішу класичну модель вовчака, коли у мишей розвиваються важкі вовчакоподібні фенотипи, співставні з фенотипами у пацієнтів з вовчаком (ТНеопПороціов,
АМ апа Оіхоп, Р) Адмапсев іп Іттипоіоду, мої. 37, рр. 269-390, 1985). Дані вовчакоподібні фенотипи включають лімфаденопатію, спленомегалію, підвищений рівень антиядерних аутоантитіл (АМА) в сироватці, включаючи Ідсї до дволанцюгової ДНК (длДНК), більшість з яких являють собою да га і Ідс23, і опосередкований імунними комплексами гломерулонефрит (СМ), який виявляється у віці 5-6 місяців і призводить до ниркової недостатності і смерті у віці 10-12 місяців.
Дослідження 1
Проводили дослідження для демонстрації того, що лікування антисенсовими олиіїонуклеотидами, націленими на СЕВ, зменшить патологію нирок в моделі у мишей. 17- тижневих самок мишей МАВ/Л/ Е1 купували у Ччасквоп І арогаюгіез. Групи з 16 мишей кожна отримували дози, що становлять 100 мкг/кг,/тиждень ІБІ5 516272 або ІБІ5 516323, протягом 20 тижнів. Інша група з 16 мишей отримувала дози, що становили 100 мкг/кг/тиждень контрольного олігонуклеотида ІБІ5 141923, протягом 20 тижнів. Інша група з 10 мишей отримувала дози ФБР протягом 20 тижнів і слугувала в якості контрольної групи, з якою порівнювали інші групи.
Термінальні кінцеві точки збирали через 48 годин після введення шляхом ін'єкції останньої дози.
Коо) Аналіз РНК СЕВ
РНК екстрагували з тканини печінки і нирки для аналізу СЕВ методом ПЛР в режимі реального часу з використанням набору праймер-зондів ВТ53430. Рівні мРНК нормалізували з використанням ВІВОСВЕЕМЄ. Як показано в таблиці нижче, деякі антисмислові олігонуклеотиди забезпечували зменшення СЕВ миші відносно контролю ФБР. Результати представлені у вигляді відсотка інгібування СЕВ відносно контролю.
Таблиця 81
Відсоток інгібування мРНК СЕВ миші у мишей МАВЛМ ЕТ
Го ла931111101111111111Ї11111111110
Протеїнурія
Протеїнурію очікували у 6095 тварин в даній моделі у мишей. Кумулятивну частоту виникнення важкої протеїнурії вимірювали шляхом обчислення співвідношення загального білка і креатиніну з використанням клінічного аналізатора. Результати представлені в таблиці нижче і показують, що лікування антисенсовими олігонуклеотидами, націленими на СЕВ, забезпечувало зменшення протеїнурії у мишей у порівнянні з контролем ФБР і мишами, які отримували лікування контрольним олігонуклеотидом.
Таблиця 82
Кумулятивна частота виникнення важкої протеїнурії у відсотках у мишей МАВЛМ Е1
Гв1
ІЗІ5 516272 11116
ІЗІ5 516323 0
ІЗІ5 141923
Виживаність
Виживаність мишей контролювали шляхом ведення підрахунку мишей на початку лікування і потім знову на 20 тижні. Результати представлені в таблиці нижче і показують, що лікування антисенсовими олігонуклеотидами, націленими на СЕВ, збільшувало виживаність мишей у порівнянні з контролем ФБР і мишами, які отримували лікування контрольним олігонуклеотидом.
Таблиця 83
Кількість мишей, що вижили, і 956 виживаності 1 20 Чо тиждень тиждень виживаності на 20 тижні
ФБР 777777777171717171711111110117 11111161 Ї1111111116сс2с20
ІЗІ5 516272
ІЗІ5 516323
ІЗІ5 141923
Відкладення в клубочках
Кількість відкладень С3, а також відкладень ІдСї в клубочках нирок вимірювали шляхом імуногістохімічного аналізу з використанням антитіла анти-С3. Результати представлені в таблиці нижче і показують, що лікування антисенсовими олігонуклеотидами, націленими на
СЕВ, забезпечувало зменшення відкладень як С3, так і ІДС, в клубочках нирок у порівнянні з контролем ФБР і мишами, які отримували лікування контрольним олігонуклеотидом.
Таблиця 84
Відсоток інгібування відкладення в клубочках у мишей МАВЛМ Е1
Ме 1515 516272 516323 141923 нини нишшшш
Дослідження 2 16-тижневих самок мишей МАВЛЛ/ Е1 купували у Часкзоп І арогафогіе5. Група з 10 мишей отримувала дози, що становили 100 мкг/кг/ тиждень ІБІ5 516323, протягом 12 тижнів. Інша група з 10 мишей отримувала дози, що становили 100 мкг/кг/ лиждень контрольного олігонуклеотида
ІБІЗ 141923, протягом 12 тижнів. Інша група з 10 мишей отримувала дози ФБР протягом 12 тижнів і слугувала в якості контрольної групи, з якою порівнювали інші групи. Термінальні кінцеві точки збирали через 48 годин після введення шляхом ін'єкції останньої дози.
Аналіз РНК СЕВ
РНК екстрагували з тканини печінки і нирки для аналізу СЕВ методом ПЛР в режимі реального часу з використанням набору праймер-зондів НТ53430. Як показано в таблиці нижче, лікування ІБІ5 516323 забезпечувало зменшення СЕВ миші відносно контролю ФБР. Результати представлені у вигляді відсотка інгібування СЕВ відносно контролю.
Таблиця 85
Відсоток інгібування мРНК СЕВ миші у мишей МАВЛМ ЕТ
Ме 1515 516323 141923 01111116
Протеїнурія
Кумулятивну частоту виникнення важкої протеїнурії оцінювали шляхом вимірювання співвідношення загального білка і креатиніну в сечі, а також шляхом вимірювання загальних рівнів мікроальбуміну. Результати представлені в таблиці нижче і показують, що лікування антисенсовими олігонуклеотидами, націленими на СЕВ, зменшувало протеїнурію у мишей у порівнянні 3 контролем ФБР і мишами, які отримували лікування контрольним олігонуклеотидом.
Таблиця 86
Протеїнурія у мишей МАВЛАУ Е1, виміряна у вигляді рівнів мікроальбуміну в сечі (мг/дл) тиждень тиждень тиждень тиждень 516323 01111110 1 54 | 04 141923 7770 828 |. ю.86 2 щЩ | 56
Таблиця 87
Протеїнурія у мишей МАВЛА ЕТ, виміряна у вигляді співвідношення загального білка і креатиніну тиждень тиждень тиждень тиждень 516323 171755 2 ЮЩ | 78 | 866 | 72 141923 7.68 юЮюЮюЮ|Ї ющл00 1 135 | 72
Виживаність
Виживаність мишей контролювали шляхом ведення підрахунку мишей на початку лікування і потім знову на 12 тижні. Результати представлені в таблиці нижче і показують, що лікування антисенсовими олігонуклеотидами, націленими на СЕВ, збільшувало виживаність мишей у порівнянні з контролем ФБР і мишами, які отримували лікування контрольним олігонуклеотидом.
Таблиця 88
Кількість мишей, що вижили. 11111101 лтиждень// | Лотиждень//7/7/7/:УЗИ
ФБР 1111Ї111111111111116111111111111111981
ІЗІ5 516323
ІЗІ5 141923 нн пиши
Приклад 18: вплив антисмислового інгібування СЕВ в моделі у мишей МА.
У моделі вовчакового нефриту у мишей МВАЇ/рг розвивається 5І Е-подібний фенотип, що характеризується лімфаденопатією внаслідок накопичення подвійних негативних (С04- СОВ83 і
В220: Т-клітин. У даних мишей спостерігається прискорена смертність. Крім того, зазначені миші демонструють високі концентрації циркулюючих імуноглобулінів, які включають підвищені рівні аутоантитіл, таких як АМА, антитіла до одноланцюгової ДНК (олЛДНК), анти-ав5 ДНК, анти-
т і ревматоїдних факторів, що призводить до утворення великої кількості імунних комплексів (Апагемув, В. еї аї!., У. Ехр. Мед. 148: 1198-1215, 1978)
Лікування
Проводили дослідження для вивчення того, чи викличе лікування антисенсовими олігонуклеотидами, націленими на СЕВ, регресію патології нирок у зазначеній моделі у мишей. 14-тижневих самок мишей МРАЇ/рг купували у дЧаскбзоп Іарогаїогієх. Група з 10 мишей отримувала дози, що становили 50 мкг/кг/ тиждень ІБІ5 516323, протягом 7 тижнів. Інша група з мишей отримувала дози, що становили 50 мкг/кгн/тиждень контрольного олігонуклеотида ІбБІ5 141923, протягом 7 тижнів. Інша група з 10 мишей отримувала дози ФБР протягом 7 тижнів і 10 слугувала в якості контрольної групи, з якою порівнювали інші групи. Термінальні кінцеві точки збирали через 48 годин після введення шляхом ін'єкції останньої дози.
Аналіз РНК СЕВ
РНК екстрагували з тканини печінки для аналізу СЕВ методом ПЛР в режимі реального часу з використанням набору праймер-зондів АТ53430. Як показано в таблиці нижче, І5І5 516323 зменшував СЕВ відносно контролю ФБР. Результати представлені у вигляді відсотка інгібування СЕВ відносно контролю.
Таблиця 89
Відсоток інгібування мРНК СЕВ миші у мишей
МАЇЛрг 563243. 1777777771117168с21С
Патологія нирок
Патологію нирок оцінювали двома способами. Гістологічні зрізи нирки фарбували гематоксиліном і еозином. Контроль ФБР демонстрував присутність мультигломерулярних півмісяців, канальцевих циліндрів, що є симптомом гломерулосклерозу. Зрізи у мишей, яких лікували І5БІ5 516323, навпаки, демонстрували відсутність півмісяців, канальцевих циліндрів з мінімальними фіброзними змінами капсули Боумена, сегментарний ріст мезангіальних клітин від помірного до сильного і потовщення клубочкової базальної мембрани.
Накопичення ССЗ в нирці також оцінювали шляхом імуногістохімічного аналізу з використанням антитіл анти-С3. Показник інтенсивності імуногістохімічного забарвлення СЗ для всієї нирки розраховували за системою оцінки інтенсивності, яку обчислювали шляхом фіксації 10 клубочків на нирку і розрахунку інтенсивності позитивного фарбування С3. Результати
Зо представлені в таблиці нижче і показують, що лікування ІБІ5 516323 зменшувало накопичення
СЗ в нирках в порівнянні з контрольними групами.
Таблиця 90
Накопичення С3З в нирках у мишей МВІ /рг . . Кількісне визначення СЗ
Показник інтенсивності о
С флеш СИХ середнього ФБР
ПЛЕТЕНІ: х ВИ ПОН ЛК ООН КОН 7: УНН
МЕЛЕ ЖЕ ЕР В ПЕ З НН КО: СО
Рівні СЗ в плазмі
Зменшення СЕВ пригнічує активацію альтернативного шляху активації комплемента, що запобігає витраті СЗ і призводить до явного підвищення рівнів СЗ в плазмі. Рівні СЗ в плазмі, отриманої в результаті останнього кровопускання, вимірювали за допомогою клінічного аналізатора. Результати представлені в таблиці нижче і показують, що лікування ІбБІ5 516323 підвищувало рівні СЗ (р «0,001) в плазмі в порівнянні з контрольними групами.
Таблиця 91
Рівні СЗ в плазмі (мг/дл) у мишей МНАЇ Л/рг
Ме ІБІЗ 516323 141923
Дані результати показують, що лікування антисенсовими олігонуклеотидами, націленими на
СЕВ, викликає регресію патології нирок в моделі вовчака у мишей.
Приклад 19: вплив антисмислового інгібування СЕВ в моделі у мишей СЕН Неї
Модель гетерозиготних по СЕН (СЕН Неї, СЕН») мишей експресує білок, який являє собою мутантний фактор Н, в комбінації з повнорозмірним білком миші (РісКегіпа, М. б. еї аї., у. Ехр.
Меа. 2007. 204: 1249-56). У даних мишей гістологія нирок залишається нормальною до віку у шість місяців.
Дослідження 1
Групи з 8 шеститижневих СЕН"-мишей кожна отримували дози, що становили 75 мг/кг/тиждень ІБІ5 516323 або ІБІ5 516341, протягом 6 тижнів. Інша група з 8 мишей отримувала дози, що становили 75 мг/кг/ тиждень контрольного олігонуклеотида ІБІ5 141923, протягом 6 тижнів. Інша група з 8 мишей отримувала дози ФБР протягом 6 тижнів і слугувала в якості контрольної групи, з якою порівнювали інші групи. Термінальні кінцеві точки збирали через 48 годин після введення шляхом ін'єкції останньої дози.
Аналіз РНК СЕВ
РНК екстрагували з тканини печінки і нирки для аналізу СЕВ методом ПЛР в режимі реального часу з використанням набору праймер-зондів НТ53430. Як показано в таблиці нижче, антисмислові олігонуклеотиди зменшували СЕВ відносно контролю ФБР. Результати представлені у вигляді відсотка інгібування СЕВ відносно контролю.
Таблиця 92
Відсоток інгібування МРНК СЕВ миші у СЕН 7-мишей
Ме 1515 516323 80111188 516341 во 141923 нини лиш
Рівні СЗ в плазмі
Зменшення СЕВ пригнічує активацію альтернативного шляху активації комплемента, що запобігає витраті СЗ і призводить до явного підвищення рівнів СЗ в плазмі. Рівні СЗ в плазмі, отриманої в результаті останнього забору плазми, вимірювали за допомогою клінічного аналізатора. Результати представлені в таблиці нижче і показують, що лікування ІбБІ5 516323 підвищувало рівні СЗ в плазмі до нормальних рівнів.
Зо
Таблиця 93
Рівні СЗ в плазмі (мг/дл) у СЕН ""-мишей
Ме ІБІЗ 516323 516341 141923. | .ЙЙЙЮЙИЙ8 г щжщ
Дослідження 2
Групи з 5 СЕН--мишей кожна отримували дози, що становили 12,5 мг/кг/ тиждень, 25 мг/кг/тиждень, 50 мг/кг/тиждень, 75 мг/кг/тиждень або 100 мг/кг/лиждень І5ЗІ5 516323 або ІБ5І5 516341, протягом б тижнів. Інша група з 5 мишей отримувала дози, що становили 75 мкг/кг/ тиждень контрольного олігонуклеотида ІБІ5 141923, протягом б тижнів. Інша група з 5 мишей отримувала дози ФБР протягом 6 тижнів і слугувала в якості контрольної групи, з якою порівнювали інші групи. Термінальні кінцеві точки збирали через 48 годин після введення шляхом ін'єкції останньої дози.
Аналіз РНК СЕВ
РНК екстрагували з тканини печінки і нирки для аналізу СЕВ методом ПЛР в режимі реального часу з використанням набору праймер-зондів НТ53430. Як показано в таблиці нижче, антисмислові олігонуклеотиди зменшували СЕВ відносно контролю ФБР дозозалежно.
Результати представлені у вигляді відсотка інгібування СЕВ відносно контролю.
Таблиця 94
Відсоток інгібування мРНК СЕВ миші в печінці СЕН «--мишей 516323 516341 нн жининннниш ши лвог90с1
Рівні СЗ в плазмі
Зменшення СЕВ пригнічує активацію альтернативного шляху активації комплемента, що запобігає витраті СЗ і призводить до явного підвищення рівнів СЗ в плазмі. Рівні СЗ в плазмі, отриманої в результаті останнього забору плазми, вимірювали за допомогою клінічного аналізатора. Результати представлені в таблиці нижче і показують, що лікування олігонуклеотидами І5І5, націленими на СЕВ, підвищувало рівні СЗ в плазмі.
Таблиця 95
Рівні СЗ в плазмі (мг/дл) у СЕН «-мишей 11111101 Дозабмууютижден.7//://|.7777777/С3 СС
ФБР 11111111 516323 516341 ши ЕХ Ух З ПО Зх ПО: Ж: ПО
Приклад 20: вплив антисмислових олігонуклеотидів І5БІ5, націлених на СЕВ людини, у яванських макак.
Яванських макак лікували антисенсовими олігонуклеотидами ІбІЄ, відібраними з досліджень, описаних в прикладах вище. Оцінювали ефективність і переносимість антисмислових олігонуклеотидів, а також їх фармакокінетичний профіль у печінці та нирках.
У момент проведення даного дослідження геномна послідовність яванських макак була недоступна в базі даних Національного центру біотехнологічної інформації (МСВІ); тому перехресна реактивність з послідовністю гена яванських макак не могла бути підтверджена. Замість цього, послідовності антисмислових олігонуклеотидів ІІ, що застосовувались у яванських макак, порівнювали з послідовністю макак-резус на предмет гомології. антисмислові олігонуклеотиди людини, тестовані нижче, є перехресно- реагуючими (з
О або 1 невідповідністю) з геномною послідовністю макаки-резус (номер доступу в СЕМВАМК
Мо. МУУ 001116486.1, укорочена в межах нуклеотидів 536000-545000, що позначається в даному описі БЕО ІО МО.: 3). Сайти ініціації і стоп-сайти кожного олігонуклеотида, націленого на
ЗЕО ІО МО.: 3, представлені в таблиці нижче. "Сайт ініціації" означає крайній нуклеотид 3 5'-кінця, на який націлений гепмер, в послідовності гена макаки-резус. "Невідповідності" означають число нуклеотидних основ в олігонуклеотидами людини, які не відповідають геномній послідовності макаки-резус.
Таблиця 96
Комплементарність антисмислових олігонуклеотидів геномної послідовності СЕВ макаки-резус (ЗЕО ІО МО: 3)
Цільовий сайт . . . с. ЗЕО І 532770 | 6788. | -:БКр.Д0...юЮюЮю7 | .юЮюЮюрюрИьИюБЛО5МОЕ | 198 532800 | 7500 | -.:(( ( Х 077 / | 7111/1505 МОЕ | 228 532809 | 7614 | -: 0777771 11111110 505МОЕ | 237 588555 | 7643. | -:КГ 077 / | 71/10/5105 МОЕ | 55 (594430 | 6790. | -.юЮК(,/яЙЯД011111С0Ї171171ДИДИ7711003-0-3сЕ, 77 549
Лікування
Перед дослідженням мавп витримували в карантині протягом щонайменше 30- денного періоду, під час якого тварин щодня спостерігали на предмет загального стану здоров'я. Мавпи були в віці 2-4 років, і їх маса становила від 2 до 4 кг. Одинадцяти групам з 4-6 випадковим чином розділених самців яванських макак кожна підшкірно вводили шляхом (ін'єкції олігонуклеотид ІБІ5Х або ФБР в чотирьох ділянках на спині за годинниковою стрілкою (тобто зліва, зверху, праворуч і знизу), одну ділянку на дозу. Мавпам вводили чотири навантажувальні дози ФБР або 40 мг/кг ІБІ5 532800, ІБІ5 532809, ІБІБ 588540, ІБІ5 588544, ІБІ5 588548, ІБІЗ 588550, ІБІ5 588553, ІБІ5 588555, ІБІ5 588848 або ІбБІ5 594430 протягом першого тижня (1, 3, 5 і 7 дні), а потім вводили дози ФБР або 40 мг/кг олігонуклеотида ІБІ5 один раз на тиждень протягом 12 тижнів (14, 21, 28, 35, 42, 49, 56, 63, 70, 77 і 84 дні). ІБІ5 532770 тестували окремого дослідження з подібними умовами з двома самцями і двома самками яванських макак в групі.
Цільове зменшення СЕВ в печінці
Аналіз РНК
У 86 день брали зразки печінки і нирок в двох екземплярах (кожен приблизно 250 мг) для аналізу МРНК СЕВ. Зразки піддавали миттєвому заморожуванню в рідкому азоті після аутопсії протягом приблизно 10 хвилин після умертвіння.
РНК екстрагували з печінки і нирки для аналізу методом ПЛР в режимі реального часу для
Зо вимірювання експресії мРНК СЕВ. Результати представлені у вигляді відсотка зміни мРНК відносно контролю ФБР, нормалізованого з використанням ВІВОСАЕЕМУ. Рівні РНК також нормалізували з використанням гена "домашнього господарства", Циклофіліна А. Рівні РНК вимірювали за допомогою наборів праймер-зондів НВТ53459, описаного вище, або 854445 МОВ (пряма послідовність СОСААСАдДасСТСАсТОаАААТСАА, що позначається в
З5 даному описі 5ЕО 10 МО.: 819; зворотна послідовність ТаСсСсТапСАваассстетт, позначається в даному описі 5ЕО ІЮ МО.: 820; послідовність зонда АШМАССАСАДИтТТОадАаТтТс, що позначається в данному описі 5ЕО ІО МО.: 815).
Як показано в таблицях нижче, лікування антисенсовими олігонуклеотидами ІбІ5 призводило до зменшення мРНК СЕВ в порівнянні з контролем ФБР. Аналіз рівнів МРНК СЕВ показав, що деякі олігонуклеотиди І5І5 знижували рівні СЕВ в печінці і/або нирці. Тут "0" означає, що гальмування рівнів експресії не відбувалося. «"» Означає, що вказаний олігонуклеотид тестували в окремому дослідженні з подібними умовами.
Таблиця 97
Відсоток інгібування мРНК СЕВ в печінці яванських макак відносно контролю ФБР
Й філін А ЕЕМ філін А ВЕЕМ 588548 | 68 щ З 67 | 68 | 67 ооБВВБ55 | 73177711 11111111 Ї111111169сСсС 588848 |. 71777770 11111116 11111101
Таблиця 98
Відсоток інгібування мРНК СЕВ в нирці яванських макак відносноконтролю ФБР
Й лофілін А СВЕЕМ клофілін А ОСВЕЕМ 588540 | 70.7... 171171117167 11111769 2 588553. | 86 2 7777/8477 86777 |7771717117185.ЮЖЮЖЮШ 588848. | 89 ЮюЮ177777911177717117187 11717119
Аналіз білка
У всіх наявних тварин збирали приблизно 1 мл крові в 85 день і переносили в пробірки, що містили калієву сіль ЕОТА. Зразки крові відразу переносили на мокрий лід або КгуогаскК, і центрифугували (3000 об/хв протягом 10 хвилин при 4 "С) з отриманням плазми (приблизно 0,4 мл) протягом 60 хвилин після забору. Вимірювали рівні СЕВ в плазмі шляхом радіальної імунодифузії (БІ) з використанням поліклонального антитіла до фактору В. Результати представлені в таблиці нижче. ІБІ5 532770 тестували в окремому дослідженні і рівні білка в плазмі вимірювали в 91 або 92 день у даної групи.
Аналіз СЕВ в плазмі показав, що деякі олігонуклеотиди І5БІЗ5 знижували рівні білка безперервним чином. І5БІ5 532770, який тестували в окремому дослідженні, знижував рівні білка
СЕВ в 91/92 день на 50 95 в порівнянні з вихідними значеннями. Зниження рівнів білка СЕВ в плазмі добре корелює зі зниженням рівня мРНК СЕВ в печінці в відповідних групах тварин.
Таблиця 99
Рівні білка в плазмі (95 від вихідних значень) у яванської макаки 11111111 день | ЗОдень | 5вдень | 7адень | В8бдень
ФБР. 77777777 17111113 1115 17171711795..ЮЙЮЙ17юЮЙ7К783 .рДБюрюИюрии86 ГРІ
І8ВІЗ 53280077 17711117 | 168 17171152 17777391 34
І8ІЗ 532809... | 104 | 121 177100 17778011
11111111. .| день | ЗОдень | 5вдень | 7адень | 8бдень
І8ВІЗ 588848... | 116 | 95. 7.921769 |(Щ:(х«Л шщ с7
Дослідження переносимості
Вимірювання маси тіла
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІБІЗ5 на загальний стан здоров'я тварин вимірювали масу тіла і органів, і результати представлені в таблиці нижче. «"» Означає, що вказаний олігонуклеотид тестували в окремому дослідженні з подібними умовами і є середнім значенням для вимірювань у самців і самок мавп. Дані результати показують, що вплив лікування антисенсовими олігонуклеотидами на масу тіла і органів знаходилося в межах діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів.
Таблиця 100
Кінцеві значення маси тіла (г) у яванської макаки 77777.7.7ю | день | ї4день | 28день| 42день | 5бдень | 7Одень | 84день
Таблиця 101
Кінцеві значення маси органів (г) у яванської макаки 11111111. | Селезінка | Серце | Нирка | Печінка.:Й9/ віз 594430. ....юЮюЮюЮНШНЦДЙ| Ю.Й юю 119 | 7148 | 6959
Функція печінки
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІБІ5 на функцію печінки брали зразки крові у всіх груп дослідження. Зразки крові брали з головної, підшкірної або стегнової вени через 48 годин після введення доз. Мавпам не давали їсти протягом ночі перед збором крові. Кров (1,5 мл) збирали в пробірки без антикоагулянту для відділення сироватки. Пробірки витримували при кімнатній температурі протягом як мінімум 90 хвилин, а потім центрифугували (приблизно 3000 об/хв протягом 10 хвилин) з отриманням сироватки. Вимірювали рівні різних маркерів функції печінки з використанням хімічного аналізатора Тозпіра 200ЕВ МЕО (Товпіба Со., Японія).
Вимірювали рівні АЛТ і АСТ в плазмі, і результати, виражені в МО/л, представлені в таблиці нижче. Аналогічним чином вимірювали рівень білірубіну, маркера функції печінки, і результати,
виражені в мг/дл, представлені в таблиці нижче. «"» означає, що вказаний олігонуклеотид тестували в окремому дослідженні з подібними умовами і є середнім значенням для вимірювань у самців і самок мавп. Дані результати показують, що більшість антисмислових олігонуклеотидів не впливали на функцію печінки за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів.
Таблиця 102
Рівні хімічних маркерів функції печінки в плазмі яванських макак в 86 день 001 мою 01моду | БВирюноювю
ВІЗ 5328007777777771111111111111165111717111117117186 11111101
ВІЗ 588848...77777777771717111111111169111711711111111165 11171102 ві 594430... 17717171717171786111171111111153 11711102
Функція нирок
Для оцінки впливу олігонуклеотидів ІБІ5 на функцію нирок брали зразки крові у всіх груп дослідження. Зразки крові брали з головної, підшкірної або стегнової вени через 48 годин після введення доз. Мавпам не давали їсти протягом ночі перед збором крові. Кров збирали в пробірки без антикоагулянту для відділення сироватки. Пробірки витримували при кімнатній температурі протягом як мінімум 90 хвилин, а потім центрифугували (приблизно 3000 об/хв протягом 10 хвилин) з отриманням сироватки. Вимірювали рівні АСК і креатиніну з використанням хімічного аналізатора Тоз5піра 200 ЕВ МЕО (Тознпівба Со., Японія). Результати, виражені в мг/дл, представлені в таблиці нижче. «"» означає, що вказаний олігонуклеотид тестували в окремому дослідженні з подібними умовами і є середнім значенням для вимірювань у самців і самок мавп.
Для аналізу сечі свіжу сечу у всіх тварин збирали вранці з використанням чистого піддону для клітки на мокрому льоду. Їжу прибирали на ніч за день до збору сечі, але забезпечували водою. Аналізували зразки сечі (приблизно 1 мл) для визначення співвідношення білка і креатиніну (білок/креатинін)у з використанням автоматичного хімічного аналізатора То5піра 2гО0ЕА МЕО (Товпіра Со., Японія). "п. 4. » означає, що рівень білка в сечі був нижче межі детектування для зазначеного аналізатора.
Дані хімічного складу плазми і сечі показують, що більшість олігонуклеотидів ІБІ5 не чинили ніякого впливу на функцію нирок за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів.
Таблиця 103
Рівні хімічних маркерів функції нирок (мг/дл) в плазмі яванських макак в 86 день 11111111 АСКО | Креатинін, | Загальнийбілок8
ФБР 777777777717171717171171717171281 171171717117109 1 | 80 1
І8ВІЗ5327707.....ююЮюЙМхМКМЦ | 77720 | 77777109. | .Ю.ЮюЮюЮюЙИюИл6в щу
ВІЗ 532800777777777711171111111125|11117171171009 11111175
ВІЗ 532809... 1771717171123 1111717171171008 11111174
ВІЗ 58854071 17111111301Ї7111717117100811 11111175
ВІЗ 588544...-.СЮК,:../ |Ї7777Сс/со2в6/|771717171711710911 11111174
ВІЗ 588548.....77777/1771717171125|11171711009 11111176
ВІЗ 58855071 |17111711сл24 11117109 11111172
11111111 АСКО | 0 Креатинін, | Загальнийбілок9
ВІЗ 58855372 |11117171171008 11111721
ВІЗ 58855571 111111125 |11171717117100811 11111176 8ВІЗ588848....7777777171711711сл24 11111109 11111175 СС ві 594430... |Ї7717171717125 |Ї71171717117108 11111172
Таблиця 104
Співвідношення загальний білок/креатинін в сечі яванських макак нІ?н"НОГЦ?ЙЇЙЇЙИИИИВВОВТЬТНТТЬСШХИТИТТОО ЕТ СТУ ЛИ СТ
ЕЛЕН: Ко ПОН Ж х НО КОН т Ж : КОН
ВІЗ 588848. 7777777771111111111111111111Ї111111000911111та1ссС
Гематологія
Для оцінки будь-якого впливу олігонуклеотидів І5І5 у яванських макак на гематологічні параметри брали зразки крові, що являли собою приблизно 0,5 мл крові, у кожного з наявних тварин дослідження, в пробірки, що містили К2-ЕОТА. Аналізували зразки для визначення кількості еритроцитів (ВВС), кількості лейкоцитів (МВС), кількості окремих лейкоцитів, наприклад, моноцитів, нейтрофілів, лімфоцитів, а також кількості тромбоцитів, вмісту гемоглобіну і гематокриту з використанням гематологічного аналізатора АОМІАТ20О (Вауєг",
США). Дані представлені в таблицях нижче. «"» означає, що вказаний олігонуклеотид тестували в окремому дослідженні з подібними умовами і є середнім значенням для вимірювань у самців і самок мавп.
Зазначені дані показують, що олігонуклеотиди не викликали ніяких змін гематологічних параметрів за межами діапазону, очікуваного для антисмислових олігонуклеотидів в даній дозі.
Таблиця 105
Кількість клітин крові у яванських макак - . Лімфоцити | Моноцити вво Тромбоцити (хі Мвс Нейтрофіли й . ния ос де віз 588550 | 61 | 343 | 99 | за | 617 | 46 віз 588555 | 51 | 41 | 96 | 451 | 497 | 35
Таблиця 106
Гематологічні параметри у яванських макак
ІЗІ5 532770"
ІВІЗ 532800
ІВІЗ 532809
ІЗІ5 588540
ІЗІ5 588544
ІЗІ5 588548
ІВІЗ 588550
ІВІЗ 588553
ІВІЗ 588555
ІЗІ5 588848
ІВІЗ 594430
Вимірювання концентрації олігонуклеотидів
Концентрацію повнорозмірного олігонуклеотида вимірювали в тканинах нирки та печінки.
Спосіб, що використовувався, являв собою модифікацію раніше опублікованих способів (І еєде еї а!., 1996; Севагу єї аі!., 1999), що складаються з екстракції сумішшю фенол-хлороформ (рідина- рідина) з подальшою твердофазною екстракцією. Концентрації в зразках тканин розраховували з використанням калібрувальних кривих з нижньою межею кількісного визначення (1 ОС), що складає приблизно 1,14 мкг/г. Результати, виражені в мкг/г тканини печінки або нирки, представлені в таблиці нижче.
Таблиця 107
Розподіл антисмислових олігонуклеотидів 11111111 | Ниркасмкг/)у | Печінка (мкг/у) |Співвідношення Нирка/Печінка
ІВІ5 532800 3881 1633
ІВІ5 588540 3074 1410
ІЗІЗ 588548 3703 1233
ІВІ5 588550 4242
ІЗІ5 588553 3096
ІЗІ5 588555 4147 1860
ІЗІ5 588848 2235
ІЗІ5 594430 1548
ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВМОСТЕЙ
«Мідюх хіх Віаитасвитісаїх. Хас. й Хліг тбадмає юштікало Хих. «Щире ВОДУЛЯТОРИ ВАКТОВА В КОМИЛЕМЕНТА «3303 вині хіфнох БЗВУУ ВА «і5їі» 2313-88-33 «зом 50 «ЩИхе рахапуха вегмія 5.5 -екій» і «іх МЕ «о3йх дик -213з5 мою зарієпх «ой «їх ОК «ЙЙй СЛИВ. .КИ573 хх 1 часістІся зскхстККх ссстозстоаЗ садстсВвасЯ фс стссс ЗстгоЧахчу у тссцриааао оз зозасадосЗ засне сезутзссваа аасасацат. Мо пхакавалов стасдоосто акдозоазоа зозпалоапоа асзспаєтад пібтацих ї5) зво сяз сіхЗцасясх ЧеЗссваЗсвВ ЗасІаЗусзЗжа зсзщрссзоЗ асзсассВтс зай стассссвФфр сссадсттсв стостоссте ссзасосо й Во азс аак сто зо 296 мех пі ес ах сец ще ї 5 «ех «ав ст Кс січ Зк «сс КЕ ВІК СТО ОК ках їх АХ ву вух зла ге оцій цю бук фжнь век ге рне хіє бе) Бім рез рев зеб Зі 5іу
М 17 23 з ак яко вх кса хаб КК с ЗК сб сс св 993 Кос тс сс 18х маї твготїтвВг о тве о вга тер хаб ревно зіа аг о рго бій Зі пек См бат їх що ї5 лю 983 ЗО3 за зад айс ава дос здає мох що сфе бек осв бла ло 4ї4а тен бін піу ма! іч 318 уз сі ші ек РБе дто ім ім (п оби р 5 50
Че сад са ст) аз тас Зо то сст Тож обо тжс гас ссо тас о сст 485 у ЗУ Аза зец об чує мар сСуз бро Зак обу ВБе о тук вро Тукобко 50 55 ТИ
З-рсво зсв сс зсс тос яоЗ тст яса Фррогсс год зос о всс сто пас 536 хатобів те АГЕ ТнгосСув Агробяг о тТвР біб ЗеготгроЗне ТНКоряб вуб
Т5 за ах вс сві засо савоваф вух Ясла аву обся зва сус вв Чея вксокях 533
ТВгОопів Ар осів вуз увкоУав Аг бух Віа пів Су ато аа хів нія чо чу це тах о япа апа спа спа аб Ес паз аас ппя пав так ха сс су м за
Сух Бгто Ага во міх АхрОвве сій дха піу йій тує ТгроБго 4го Зет ії25 а МУ поп жає кає заг га зах зат заз ато се тля гає Во та дає зо? о
Вко туго тук Ази уві Звк Аз» З) їі Зебовйе нії сСуз туг АЗр ОБУ 172 125 338 7 й Й 129 125 135 хас вет сто ср юс тост сг важ сг Зсх тос са із ат щ9с сода МК
Чу тк се АБФфОМу ЗК дів лап ага твг пух Зі Ха) для бік АгЯ їв 115 їлх 150 та ЗТ дос сво ага пее Вс Таб пас ад вда пз воз тах ота т Тув три Зак обі цій тне 5із Хі суз Ар оахи Бі Аза БРУ тег суз Заг
КЗ їх ТБ5 зас кс цк ВЕК КК лк Зае зсв зу за5 цс ос зас су Вс соє БУя ааповта бі Хта Бгто їі біу тпгоагу фу жа! Щіу Бек Зів тує Ага 3 375 ї5о сл. аа ває мое асс жає сабо баб Мас со зад сть о ако ско со й уеи оп аз оЗаг жа тйгобтув МіЗ Суз Як Ако Оу їей стиг їв Аго 185 130 із3У цес тес сво сор соз зсо тоб саз ва доб во ще юю ад 299 аз Зо бік зчг О1л АГ ОАГУ ТВК Су ЗРОСТИ «Ту Зі ес їгв Заг Зі тир а зОо5 І чЧач ст їсс тс сяя пак сс КЕКС КО ХК ча во ех сг35 ЗВУ УК за півовте чего бух бій зар ошеє Бль Ме: тує дао ТР ОРРО біз біз хаї
М гач Т25 230 че аа ВК со ока ех зб со ака баз апб ака бла зпа во да МИ
Аза бій АЇа ее рен зег щег о їев ТР Фів ТИГР озТе зір бі узі ар 235 240 235 ост Зав зат ЗО сзс дос ссз щоб аа сез саб ззо соро аао абс пес Ма
А1В ЗІЗ Азробіу міз бу річр бі 515 1 1 вуз АК уз тів Ма! 255 що сб Вс сст їсз Фр тсс зт зве зЕС ЇЗС сто део ств Зб щої тез НИ
КБ ОАВЕ вит ЗК біу Баг оМес АБ Олія Тука ха зе АН піу бак св 270 ПУХ
Час я ат фресок ай тс св За о вва за ха ост Щ165о
Аарозвг хів Сім вій яЯвг Аа КНе тк обі Аа ух мух Кук вве ха сно Зах зе аах хта ахх баз аз мо са адт таї т 5 заф ста ада кат вух ї2па
Ахповвц ів пий їх УР АТЯ зве тує піу маї 5 Рга Ага туг су вах 3аа 305 3В ста дта ага гаї дос аса тас ссс аяа ат таз іс заа Зту ст аа 125 ваа ма) тве оту Аїщ чиготує его їуз 11е їгроха) зу тат баг У и Ух щук 35 35) 325 зса зас Ос ву заї зсз ззс тоа3 Зо ас3 зз3 сза сос жат з33 Зо 1394 хів Аза озиає заб дей дід овер отго маф тне ме біб ме; дев бін Хв
У 33 їх) зву хх уза зас сас ваз 03 ваз соЗ заз асу ал о аобоазе ааФ асо ЩЕ ака туго йзіч зво Нія Муз ер бух бек обі ТР одхя ТВб обу5 бух Аа
Я 355 Зх піс «ав вол ока кає дос ака аму аз каб сса дат пас дже сов соя ве сен бій діа Ущі Бук Зек мет Мет Зако ткробко Азр о Азро уві) го вка з 355 Іа зах сос топ зас сас зо сс са дес важ що сто З ат На щої 13435
Зо Фу тк оАзи АКу ТНК ого міх уві) їіз іє зе; Мек їйг АЕН ОЗІУ 35 Зо зх щю то сеас ззс зт сос юю ово сса Є аст ск ВЕС Зх пе ві «ЗУ із їжи віз Аби мет біу У Авробба тій тмкоулі ї1б За бін Хій гу ач ЗО Я чвс ттФфосІЗ тс ау ЗНс аву уз су ана лях сс аз Зах Зах тах 1249 вар орян вен Тут ЗТ піу Бух АкроАга бух Ах Бе АагО бів ах) тує їх 20 «тп яву пи ах зр їх З щі За ск 33 333 аас саа За аах їн мем Азрохаї туго сві вне бу зі біу его ів ха1 Ази бій УЩі Ах 05 Би 335 вус вах Зсу тт ст їсос яп янв пас яВх уяв са «ВХ ко т Зав і хів Аа Аїа сви аїа вк бух Був Аж АКА ПІВ пів ніх аї вна вух
БИ дАк 4х6 пода Заї атз зай аас сту бай бах т їїк зас саа ато ак За аг зак Аа мет зіш Ази рез зів Ар оУ: во туго цій меж 10 азр 555 ЗИ 55 70 зза ус сви ст сто зх сто ТЕ ще аз ас 99 933 сас де 339 1756
Зів вого зі зегб мен ове бен ПУ 5іу мес о са|ф ТгВ ЗІ ні Ага ОБВ 375 З80 ї85 чу всс ча ся сясС пн оса ссВ Чу сну сс яву ях сся ЯКс нЕх 78
Піу ТвРоАзротує нія бує піп еко тРб осів АТа бух хів бек оуді ХВ
А БЕЗ що пох сої кба аа зда пає зад вас тах ато ва пс око то їх да ї832 лгф ово вк овфух Му міх ід ЗвгоСух мет РУ Аїд Уді Уві Зег шій 585 513 515 та ХЕ Во са ага цех дез аб ре ст ет. вто чаї зас аа) Зав ікКо чує вне УБі му їнг о А1в ій віз сухо рве ївг оса) Азр АБ охо З
КУ КИ Не. «вк св зх: заз ЗК дак КА Зо» за заз ваза сякровс схо Ба яка іх вів зеє хів муз маї зв о баї іх 5ІУ Біб груз ага лев змен б1н 18 535 540 54 ЕН заз зх зо ста КЕ сабо соб пає тас паб оасу ас под яяяй авя зи 1325 бін «уаї маї сви спе оміз го або Тує дп її дп Ру Був буз Щи
ОЕо 5 пса аз ай сот дав ЖЖ кат спас кат зас ої со сто айс аа ск: 2024 діа у їЗе его б1р Бе тук Азротук Азр уві Аз ів їі8 їух і2и 57 575 зва заз з3ї зз0 сто заз тат спос сза зст Зжс воас ссс атї ук сте сс 2972 ух Ази пух цс; вуз Тук З1у ЗІ ТНК Хі АК орі Х)в су» 4ц Рг 285 У Й п то вс сао сов вовозст сов псЕ тт Зуб ст сх Ко ЗТ Зб же 2124 су мг осіб бЗіу тб тн оаго лій цен аг гав о рге ре тМгротнг тег ще БО що т: са сла тай аа паз заз сі ск сек са сах ба ак аа ще ТАБ
См бів ій фа бух бів шій іже Беб вРо діа сій Ар хе вух іа
БМ 52 25 530 тло ВЗ тгл. За заз заз аза азд сла вет сз3 зао зав або ас 2ЩІ16 їФи вве ар бог Бі ТУ Зіш Куз ци Без тйг Аг фу 610 УВІ тут 535 що 545 атс аа дах 598 заї ззу заз щос зас тах з33 зу33 з3т ост сза 3 ллка
Її Куб АЗл Обі АВ Муз Мув бі Заг суб ЗІБ АСВ АБИ АТ ОЇ ту" 55) 5 БО сс сс дос тт ос заяв пу ВЗ зас ну їся ча Зх Яс ВоК ссх 2317?
Аза орга бі тує бер бує чаї руб зо Хі Зв обів маї ма! Твгонго
БІ 520 КІ секс сух ху вс па апа Яся ап боб сах й Яакопок о айх акт ЗІБ
Ага ОРОВ їеи Суб тйг Фіу Фіу Мат бек овгто Гук Ад Ар овРО АХА ТА?
БО еко за кс а б АТ Ббї дос дос сб сб аа 5 сас зад аа ат сум вЕНІЯ ух ага Фіу зр зек сік біу его зер оі)е Ущі ні ух Агу ЗВГ АК вок 200 725 та тс ЖЕ св оце БЕ ча ак вас ТЗ ща ча ото дах мо ос зай їАцЕ рве хів іп таї Зі Уві жі або їгр о5ру ха) Узі АЗзЗроУВі см вуз я ТВ 723 зво спа ал са са заз сад яса ссх Зсу сВс фс сов с тт са аа ліпобій суз Ага біпо су біп Уді во Аїа нів Афа Агу Ав БВ нія го 735 тай ак айс сто кжт саз ку ста ссс боб схо аб баз ааа «їх каа пах за 118 Ахпоїзу вве сій Уа іви вса тер осені шій їж бен о стй Ар 745 750 755 зап се те Ед ТЖЕ ста тав цу детодагадва дз. Іще
Зін ахвоцян зЗію вне фа
БАН хзазитвайа сазствкчах адсвдадала авзавлавида ява кщаВ сюда» хеї» ВОПІХ «й32х дик -13 нею парієпя «цик чЧозччізячУ зксжсвоуЧчих ЧоЗувкЗсЗ ЗпАТеККссх товщ тс совки ка тетсттсстт стссзоптст оостосттЕс встстотаВо псзоовсасо сеоксстосса 1:50 ззссттасаа лепісхвуз хоста сх хх суто стоастястоаЗ ї53 зЕпопзасстє чесстогстс ссацостнца цпізгаотоЗсе возасстсаа ств ТусВх 230 слеваєстео сідооізмсза псаатжстсс тасткоадсс кспсдзутац скдацайтає З зичтчссткак касививнски ква ккї зі кксвЗ хаЗазЗасачО вика зм сттооссзза зтозссттоЗ зстсстозсс тсзасттозтс гоасстоссто засстсссва а25 вакактдада піасаєсвх зазслалтвх актеовлссза зосттівК своп, зва жетстоЧчІтс свссссТосе фзоісовся востцптоссО БОЗТЖУККТС соЗаицЗааа Уа ассататіс ссавсттає азатотсозво запотоотоз сзхаассаавх сскатосвах о чацисстапа азпасцячаз скота засне ххассасасс саЗакисока й ззозозааЗс сзсстотосс сстосодсся Фсзтосатоас саоавсвоса Ффссасс 220 птацатзака стос теассета стЗвеазоаз замлазаоа асо ТК стсозасоуз ззуІссВпатт гТггсвоЗ ново чівав зак вцу ВсссвуоУХ В тасавзаїсх сацссттуї: озщозЗвасоя доваоасстї тозоооатся зопоаотесо що пцпасстасаз сказ ах фкадесексс садках ема вккх текаватода ЗО
Кстоухузс хозззккккх авсзасссста соті су зсхуасвайя всусссурай Ой зааонасссст сатщсамцю тсстостосо згадаєте сасатсвато тсттсесЗсах ТОК зсаасссіа сізазаси посів сасосуцавх ТКтЕтаклко ставках Ж зпеастовоу ссжтстостОС суто а хост стссатсіс їЗсстстоЗа Я кзаксастск кадасссівк дакссаксст стожхоттайс зЗазтлайіє са стета ї25О заатиссзов асан взсзавастзоЗ зазхссхсаз пзсссссвсо засвпазстЗ їхха чкмамласс севсстсссо стосттосс тотссссапа ТтсгтТЕссст дог ЗастЗ НЕ вкхсатехї піст ясктІ сЗІвХуцанХ ттІсссвцтта стозаазстає зазазесеваЄ аа суттессвов Товста сототацло пащу зва Ммевадваці Мо
Чапаассза ааудаєуйхтт зоаоєтаоао паазоакацах сацадаклоо воза ЗУБИ «вухах аа сс зЕВвсасвся зесзасвоЗО озоасЗвосто озбсстагх мо тсжпотссст зако тттпзаса стззазазза зстаазассо зазаззавох. їв астазазост паза аббуккозса збапазоото запитах ауто ТАМ х«есккзасКа ссацсхсзЗс ЗЗЗссстсс состхцовто стос Зевса ік тапазсвщос шопосозасст осадотосса озасазсапає боагатадаао сто іо зузаоолає зоомбавово аатвічалов зеіаоцух жнив сІсв ососЯасАЄ їзхЗ іїдвочссваос возсзвусва зосзаассаа часзсзвссже сстцссссва Яга ік тетсстосст тссазсосса тодпозоасза тстозасссс сао сЗацюссте Оу хахесзловоє сіскіЗЕскО баЗЗіаавка авББіаднку коссткссха ско КАЙ БЕ «твиссстсстї при тттто фреон тсвІсВисК жТсвсвЕсВа То ТиВКсВ ідо сестссваеов Мел осоо зссссавао зестастов стодадодос запаратсав ТЕ адек кхссвасххс кссваовцоЗ Кон астЗ Зав схУх ЗссстТсКВИ ява сттстзсссо гассстовос ЗзозсасогВс стосзозест асовоцтсся поацеассся 2335 заавдаслоаз вВахсаадавза сзамказааа збдгазаєух апалаквЗа чзукалиах та тотоуцснях чассІвяЧус воаазвсзачУ свопчсЗЗсЗо сплав О КТЗ ЕцаА аа састаоосза затрзасзаза тодостаасс зпозаззова пасасттттай ппотпасгапс КО чцЗазазційв паапаадаг са таак скткактаав хаккктаккех зпузсткссао г5дО
Фсзосссстпе ззоссвзоаза ззсастсзаа засо чвазасаче фазавтссву 253 азазаттзаз задтазатаа зазастваст стає заоаазоевх муллелеаа ІН мих час сссцзувссв спичЧацитає яссонноа яку сток яяосХ ММ мласттус сгстсттетое вавазсватсс зстЗтссзаа зссзсзсоас ттсоЗаЗасО со пзааасаска посесо семхтактаса анода тзазатезкх ккккастсх 2ВВО зкавсаоакив свсхскссЗ3 достстасса вгсЯсасста сспзутоваВх сс За) цеццисвоас засос дасаасвна) птвааацса госсстсос стасаттст. по пиписеуза сапсапослоа сопавоцаох замало піскозахти сахаясткКЕ НІНА щІтстствсс тт Вста с стсзцтост асстсоЗтоє стсабвсстс 52О коасзпосоапоз кастоскоса зсссузак сссспаєах асаазоаадо зозогазеска ЗІ жизсквІкіс чайцасвнкЗ хозсссвссВ стасассозу заст увоссс тоасогоЗсТо ЗЕ) севмшесоосез зссототезФо запабаветс сбюаоснвоа асист сера 30 стдассоьва скквкаєсех сазашеанає сова сагбекасу бус ЗІ5О) сезестсзво сСТЧСЕсЕТЕ сстсзсжїку кткзЗаяККс сскЗІзсЗАс хабстсВстх заха
Зкбазесія табїассттов ааасссатоа тессссотост стктцоутсвс тотатессту З4Бо щезсісссяц ясСатухцнся паті стца стКЖсказа сксскксако хасоВеВссе ї54а стсззовоЧт поссоазост ттсстотстт ссстрасаза застатадаа ззавтевата ча стпацоатоа зсасоцха зоскгплаза садацавоЗа паЗсазууєв снназасхуЗо ЗО ззаваахзця ззацуаасау ззотЗксвих зуссуЗзусст звассЗстст сстадсВссс 3720 «задоаасаа сазан заз пзасоттса засїсатда асамлассх ТТйО зпазастлоз пцасслолоа псабузоадпаєс сапбааєхи: абаддазюєса аавазуахих З зухквастта зсуву созвЗкссхс стзхссстоз астсозаоаа зкоозавс А8аа петозтстес сзасастаос восстазвоз стссВоОсссо Ботоадасаде аоазОсссг аа 550 зааааілеє авакеккавх стамсскекь мсссхвухає утоавазхтачу густу за схавухстк сахувВсску зесссєкава ссКІККастО заз етск Ото цК лоща застсостоз ззжстсссза тсзсзотатт стабтттсза тоссатоадсо соктоавескс 140 сзгассхага зековсааві затовкокза азслааолтй пн сокацкв всатацаєса СО свтяссссяв ВаХХтсЧЧІс ввачтЧіста явцсзцвясво саауваиЗсВ Встав. зго сазацсацст саатцадаатео заттатозад птсзозпате апсозатоайть спапдапькоа а пост яплазвІска яаЗіЯаа Звісасоаза сталеву сви З3ви вссозссасте тогастсзаа зресозасзо сзозатсе поса оаа зах а за40 аавссіілва Застава завсбоеастО поотслааоє плас тапсзчакоах НІ тавасхїззаа Зчутцвваця СЯ аЗиКх сяк ця Хто Чиї ВаВО Уа згзасттозз з3зссаооєЗ зоЗзтЗатоЗе стстжссстс тссзсзозсс зсавоаттоза 45205 чікадудакєх завивка поки хтлка захазхитах адкакоакця чеках ада заЩИ тазсатссст сстаззаст сЗазссоасЗс ссоссзтотс зІсЗзгсстоЗ ТоЗзстоЗ 3730 зчсазаазцаа сс ватгссацест сага поадасеаах ауто АНІ свацуссвох сасвзвсвстВ сасссвууцу сОоБцссстя пах с яувостОцх ЗВУ) зетсевистст сотка їтсзтзазов агтсттсста зоссстотоа тсзастатсх 4925 пхаассстте птпаасттас «сассстосс акотататтх стра лллаз ссавтккає ЗНО хкссткахсх сстВссстсв созкссхахс кссусуЗсяа част ЯсвсяВ сс ка засгсадтта стоабсаттоа тозоаатбсоо дасттостаї асаттозсаа Здразсосааа зщю авсссвазуу) Аа А ЗУ заміаа ся осоаза аплтацкакт ство ЗІ
ЗщИщТЕцОВ сссТоЕССТ ТесЖКІТТаК ссстсвзЗвх хсхЗтЗсЕ ОЗ КУ х.бткзатох асоалоавоааа самодаатмив ссоадсттсга азадазаєвла тоазсавасах Бей зЗкчктсдаайв хсавоаЗастах здававсст чаазасаку стсосасснавну зассочувоя 533 сапатасазо созатазаса зсвоевастет состсвоцЕтк сгостцаацта аїлеаттитя, ЕН чтктктакаєє хзааактска зкаєствва алсбомьомк ваксеокиу оту НІ зеєчисяств стсстастІс стцусвстцх ксястІкЗВКс хуЗЗВаКсВс ЗуЗВстІКЦ 552а жастітава ватезллита тадісстаєса Зітавсасой опзгасацаа оссададодо 550 шсзвоцчяє яасавахуае апа Зфростзава асазстазвх стстадсацх хай кхдасттсда зт ятк став сК вскахачияа Кто сх ЗсвсуВаЗниа Угоо асавнтотйссо Зоо сстгусгссу стрес тцстссссВЕ заастссас 5 ссзазаовст Зсїдсгатт Ззазаатоаао тобтссоащ свкозосаєа ВКОКеСКВСХ БАКУ кткказата заацккацтя хо кх свічках кскЗазаася саЗ3ВБачУХ звхО зссоцвІтвсс зсазопсазсс зсоодсзодес ззозтстсво гсЗетотазо сзсзоватсс 5345 севтавівоЗ Заст афугоазОїс зацотвааак опозобаоо залодоааяав. о ахуцккатай Запвхоцтя) суха хЯлайЗ ктчдякКккс сотка КІН КХ ми свисзсссух сзззЗоаузсЗз созозостос зтоФдоЧосто соосчестов спсвсттТтого 5126 стае спасе састатаЗає засазазааає астсозайсвда забсаосцта МИ цахаапааєа салпузчаленр кепі а сабсотахтвіх стпеадцкий сапетикиа вач тсехсІЗсаЗЬ ксстЗсВсхс сасссвтсст сватасВосс ссвтгсосІтЗ сасоссво 530 сапісаовоа Заощаааза сотазааціта Зоаатрасає ЗЗзососазаз зсазваазеї. ехо исовсвага вчи асо зїасісшииа суссазааоу запала Ядасстацаця Ба? хзузвахвУх «хіт «стаз ЗВУ ЗатоЗ Зззззазоава ЗсвОоЗахос вважа стодатттта ховастатає асуссстоа тесаадеєзсаа даатаацех ааататавиє вія зоавствтсаз згас ссвозуссст Зззачаваоцє содоазвноос ходвоЗаст БОБ заз сарпестцат тесту ттсх ссттатсстт татадЗссса ТТ вва сифпаєстоава Золасваєух чаги своа зок сткса актаєссактх пспацсваса БУТИ звахвзизся кжсттОЗсна зак ЗтЗВовтссс ваооазсяяЗ хоЗ99сахоя УК заопоммно сзаєсзоозаз адатоатнс состава сстаутста зааунилта БО саплєли дстолесоає аапезспама зоЗазатааєс аоказуозай пса аває ВНІ тпвсцеявокх ЄЗЕссаЄсКВ ззруззизНс хиастсгстОс ВоеЗцУзЕВе зва 35 ттатсогстоз зоаосаоааа заостовстс ппазаопаодх стасатсзат загаапзаа Но зззкідазааа сука яазячаиВх хотачассст авхтссктлкх аск Іди сспсєсаттвс стстесатос стсссВвсстс состзсвова ВЩрЗисто озазазозго 71305 стєдататмв сесазастах засааазтєа адолеовком.о адазаатоде асо ЩЕ тсстттІптнк соцаЧцвотЯ ацісссІвт стНасКККВя ХВсЕКОкВЗВ ЗОВ ааай ІБ тоастетітоа затостяаса зоїосссаве ссссзазевпт ссжеевсвот зсзосвстІ 55 «іст кІтОк прут ткІ ВусуБкяскк твакавексоа саададавак саклатм Та ззафоззесгсс тусестуссст ЗІстрКаЗа зІсссввоКо пса сви осо сваНяОс КН аззазазетсе заатзсатат детазтаат сзаддзавиас адаассмно безссттаво ще зсспсзучус тІЧссІЗсОї яучісвяЧавВ сири; Сер ККОХ яхта тю сжттацтса фссзацасяс зазсазоаас яЗссзтостт созоозство озатствсх 7и2О
Заауцаксса мкроатогУв се сссм авто: аатеадзстоа звазтазтоа ТВА асатсуцева зсуви сус ЗЗОасстс гсвсесссоЯВ дасІкусяся ТР спайсстете бсазптаста ссстооста зозараааєї ссзазатоаа заоЗВх. ТК тжстаїтзасо сстізсстос подасаова сао кя автсинався Збудсясви 1550 сатехтяхх сопдахсссс кспзазсазо ЗаЗУусоЗЗОа зсвоЗсзсто зссатО тчо їз«сзсїувиВ свзасстця сацесЗТеТЇ бзазозїта асскссаавес сазазтветца т58О зазазссгзоза зстогоздаай зспохадо гіббаєсуса ЗутЯгтссасу даплссацєв ВІКНІ піменіказа сзасбвсасаа запакссаяс кох ссх зоавзоассяксо сасвазацхх М тсгстїцізуа суєсатевст зтазасаато мини теї гбсссзаО зсаасстка 5150 ззассаєкої Зоасгагта здазопаоа блппаахаух слвчдуосвай вових 557 взазсацаєт скор есха стсстовеся сстелстсст ЗрссастоВс состава кІВО ттаціїтсста состоссгтсе граба ссаз азс схема кт ЗИ сзасссайод ссадовааао катааотцоза секта хяЯ автзухкгЗх состадвадйя 550 зхсссвазуз ссвстоссозв Звсзсосоав хозувстаас ссастастта саВісвутаї яавО зтсзоззосї зазазастаааз заасстстат асо суасатаєска пбкаактска 5520 кісті кісок аа фнюсвстах яасозаассс гтІсттІссос сеВстссуКу 550 «ссацузайа ксхвсІККЕсв ЗууазвакУЗ ЗІХЗКусвса ставав скастаде КБ сага авІт саттсапайт птазвстека спотодостат хх тпаа зп кацих БУМ змісті сте сих стх Фсхссстссв ссвовсатах хВстстскто ассссВтсоВ Іа атозітссвжх сстсІвгсвгс сттрЗазстас взадаатсте встсассстає зсссатсскоу 582О тЗаєсктсках цпстсаакає костоацєтак собу ховввасасо торіссттоу 5550 стІхсзцхззк ссІЗажЧссстст ЗНОС уК Іс Кх сова ФСК и сттедстаас аттазастса аспетадсст аасаєутсай дасаоєктово засахатоцо щюЮ а хх «й» 3 «3 ЖК «2Рфх дик «іх» Жаєвса внізхтв «ВХУю З й ззхІзччазксх Кс тНЕКх сссясвохОЗ зуТНсвУЗО сасЗастО Зоо Огу во асттстосет сессзозкеєа затоазстеко стасстсозс стессвдапта потозаатта ї21 тазахсв ссоассвсатз своставтку ухохахіхсх захвоавовся Зав ссосе іа зи дозі Заст сотка КОВІ ТАК ТККХ Бе вазссаствй сактаслоос пболоассакк пбапобсазкх адасетвкох актоукепох КОДУ тсхстсхЗЗх хосвсссстЗ суОсЗутОуВ сам хОкОс суворо тоессвацава 160 згазссайойт ссссозаєтта асадаєовтсоа позаоатоцх дасацассло квхбокатоєа Яга
Зізчазссса зЗарневідай заклсстясз адазсзаЗКс сстсзссвто сстодЗстсс «ЩО сазаппосзз соссасстох зЕстобовоз ссзооотоса госсазааса ссаоТогасх що чссстакаїа асвотеаце біакоасеєь зок озсаоа зачатка зазавасаоиух КУН ттссттивос бозовухсно ПЕТ сви ЧедзоаЗцУЄ пазах тус вЗЗасгсаду що стукхасацав хессязссух оксочоЗуа товфуовоше стЕтозаая ТстаОЗНа о тора сттЗ сзостодзас тогоосзосс фсссзассва ВтсБстЕсКе сеЕстосадох ТБ зазістааза азсізааЗїс ікасаастх «топках хстнстася ваааскссия да сазавзццєс ссопртядсв о воуксссосс посясовиас тттеЗсВжся Вест ТсКО Зоо савтопсвоассс тоассозоас зосзсссво созхоавссто затеежетас сссоттеаое що амнмааста асом МУБесЕКта ваакелсклх боса кс ккотасеку їохИ завіІчсесат «сітках с хУКпВессах осЕВХстсКї зуттцаціаа ВЕСТЦЗЦІКХ. 1550 стзоодзсосс зодоосз9со сасасавост сссааатест саддостосях мозапсооа МАВ саесккок бессеаєссвє каст еко сск аввукссксс сстоЗКчас 120 «хзахтсвх сісвісКсяЄ КТКсвевіоу ЗаКЕЕсссво стЗтоазаажт ззеававате 1950 затоспеетсс зсзестатст отазстстат стосзовсса дотазоцдеко псбооцова 1373 зазФазазос садаайват клаасаоска казоаасока сзсслзачак скла ізо ззасвцхчцс точяисхсхцІ всситавсвВс зсззосавсх запзаптова стодассстх 1450 зЕЕтстоспео сстзаамвща зажстадас Зтастоазаоа пдапоспача сбадаавдае ув
Засстааазо зазнав пасок свсявзоза хз стксу Оса ТО 1585 тжтсежтиво се вастоз сс сосх соц ттоаа катксслоЗза заптватаха МОУ сотзодвасло зсзодосааа стосадатоє сазаасастаз акхзсатави водою 1555 «хчухаооО свузууано зеззокову свочЕстааи став ЄКт сВаасттоцає 37450 зстозостаз стзозсазос заззсавасс звоасасцес абоскоаєко додемовеі їв хдлпкккзяє кттктвахоє сакок ак кін Коса соту 1350 тЕсвІсттуЗ ФсстстІЗтс сОодВостЗВо оз єВас сжкссствос тОстовссес 1550 загазсхее єсзжодсі зпозосказа стравах єкт о ззахасааке ізо зссвсттсах тях тшсНек сову сва Човхсстцсх кттооВОва пого оЗІЄ 20 зазаптосст ссттссозст тстссааозо соссзвопеао коаплакаєь кам БЕ сети так сеталсстат якабахвках зішоулУх «ІВ сток зі тр зовсіс: заовісовяЗ застассВао заодсвозоє Фоапаопеке паздосаато 820 затотовзоса стздсстазо Зозозааева пабабалцеє засвазаксв засадах БЕЖ) зазаствтю: вппасчасай зп тня ссазцизіво паца Е Бак ЧіВе 235 зоссозззссз зопозазазз заавнизої таасстттхМа таапсоавква сссмимс зАЦо сгасвсавссо стіздпаазтса аваддаєакі бсадсадіоз здацазаоцаз сазподааах ІМ сестІзІнКІ ства сзЗ зсззовсоса остсстосао пастозоВає остоаттк 520) тсазізасст засто) асоаззаза) ааасассяай пола тла БУ чсветЕствсх їсросстсу тстсвавцєсв вессчстціс «вона свса пожотЕгиВа Зако засующиаваї вла птстесетає тасаатавоа ставав сок сях. хек хостатвдахту зіхалаєхтих спр ставка «ктчссавЗх паза 150 тов зезозосоае: стовоасаас озазасаала азкаксоєк ссссскаєсає 2873 застатес стаасадеєвю бабок паж саке соса абастехайх ЕЕ хлЕхдкІкЕк каско соч ЗОЗсхтсгЗцс Стас стес Вуса о сктстосвас зт астос тосзаєссзоа осавссссав водсвсаво запосоаЗВиа ЩО сесвїасса сгувовадає абпвевесь досвотаєяо спожив сх асссхасоцо ІБ петкклацкі зсоавкатях сазпзазакЗ песто сопузсвчаЗ сотку 312 задстозссс ттовсстова сососаоцес аоатостовт сптосатоеї асзцксткся З5О сіссссовохЯ. садок скейт Кал віхвав ссхклкієта завскЧкоке БИ акЕхкжчанк «ЕК КЕсІВКс сІЧНоаЗВаКсК ВсЗаККссст ЗЕ ТОуУ товсті З3Кю сетчвсзстс сосзозсвзеет овсстеЗжК стозстотос сваасвооткх са 3сВ3 ККЗ ассгєзезаз азашесза азот кокс сстза соазвазссях зззаЗавоке зга паска якцушевсва тссвоОеКтО Задисжуна зуп посада зако тапосоззаз топаоздзооо асазбатаах соптсацх цапа Ббасуєтх з песастстаза зоаасаавсвя аазсуавеаа коаксствоВ ссстухсЗЗОК тс зю тсІвсстоуЕ Зствозкоза ссздасзвса стопа ссаЗ саастттата завоссаада ЗО заотатотаат саасттаавх сапдалаєод аоовбелима впссеаваєх паза зха зчааксткЗкх захсКсскау здвсквустсс скуВксВКЕК свусесст дІВсесцу З7Ко сссссвооза загстссзоа востаєтсва всстосжтосс стецваства акжссМосВЕ ВА
Чала КеіЗачкоїсх Кроклаадчаос сксссхЗхсс свопсзасуєт зсхЗазНесх Зк стсввхсвся Зізхтстясу ттсаВЖцссВ ОД ОсЕТКВ ЖлсТоСтоВК гово ЗО тазотгакоо ботолапсоса хадкастаєско Каптсовьака сппсапцатає ббпазвакик Ма зззікавахзт укстзаксай заЗзадсвЗсв вуса кО ЗзуссвсЗвОа задуха жо заатсзаека син кай зпабеаптва аспоаасам зле асеа падав ху лева. оезмовава зобов вологі одеса зопчаавссах заз хЕхохноксвВ зЗНИискциаІ зосацнаєса Єбциусаато зазцієзата поааасетася БУ зас оа зопоссастт тогопгсаза с маваісса вагпавоадь ластгаллаза ЯИ зссзаазакоа їзауаскскя зЗіссвУасу озЗКсхстЗ33 ЗківіаЗзВаВХ ЗщсуКЗцВаЗ 35 мезо чсоатостсв сттсостссс сЗсзпассас запеовоаВає сапроозсеа 4445 слссдаазаза оссглосава саптьутаєсло басалопаах поета абахссок ча хцаваЗсіЗУ висеосасс Зссикцисях свист зеЗ ЗосуЗЕауКХ зозацУцяКХ пУщо тежетостож сесзосестес сеассжттокс адассацопайх зкойссопяка апткапкка СУ хвапактяха кксвиннаоя чок заз сзіЗасІс захи ВЕС ККсЕ захо
Тасузсссто сзсзззозат гЗзстсстзаа пссстотоде саастасевс таассоттес Я кхаакллакт сассктвсса сахакатає шлезехтазху баахокактх каксклетах Аг сего с сеутстусІтс тусвопатту свсвзоатоа псопочассо авжтастцес збо замзатвзаза маацаст зттатасайс засазозавмо пталаваєсо папопаоах Ач застава за акадссьає стзавсста ни асх тесусав куповкояко За вхесікскК хтЕКтссКІК зуВІЗКсхах щсчккхЗаЗВ ККЗ сстКх ЗасозЗссаЗ аа зЕопазсзвсз зросте тодс ттссзадаза озсаатааоас засаєк сазадісааа ЕРИ саетатозоааа асопіозазоа Зла го баваатоавоЗ зсапзграчає асадоцааа ЗУ чаайацлаєтека аксткткскса кс вавтавккса кесттсстсї всссстаау Іо стсждаєтос сеосааазасс ЖЕСТ ТоВЕКс стсстЕССТВ ВСТА сага. хУКо став аслаласт зотлеавйсост апазводоло азбука абтазаца І
Кк таКЕ БЕсстатасх КАкасвІйх ЗуВвасааау ЗссзавцЧаз ЗссВаЗацаХ 3Ммю засазостзо саасаооФфстї одсттазаа зсаоссвє стотоатазе тераєлосваа по ам есс заз аєтос вссаєавева ззлемсмиа аспсдааааа асвавкаст ККУ яхшаки ку ККЖЕТАЖККККЕ КК УККТХ ХБКЖксККах ваВКККсКах ставок КО 535 стасссоттто созатоззотг Фетссзаотт ЕтовосвсаЄ Бстсстеото Бассадатов ЗБЯр заставі стзазтстот фіосатза зізозайсвх айхаасвита сбезакраєка КУ саацсввсса ХесВОаЧсєсВ аоавустсвих саВсхЗтвнцс ВсВувлАксс засвиКоВоЄ 5255. зсттосоеча сФідасосся ззотовазто позотавтоа ааопосєзала тоадссокаао ХВ ззатоБку: сіохразаці хзабккккск кекткіаскЗ Кут пс За чззаФаазсяї чзазасічгв сота зас стчао састетоТос гоазсЗОсВ Уа зсаітам звсізтззасз асваззавса стєезатсзац омоадсомоз тазове ВІН вактзаацих ссср асостаюкк попу хаво висхшесвих Ху якВцВХ що сссзозстос зстовсстос засосзоссс сзфсссттас зесссмавсс зуєсводааЕ ЩАхо зозоаазаєї зоаавдітаза аатвахатов бсрайазух аадаавкквх скасадазай відо чив зсств состсстВсу гсязОоова ЗвосуЗчаосс топвовІваВ аваауусстВ БУ жктлеасттсв встасаасяї тазсзазава азазазасво датзестоа аїтллвакаає ВН такцакціцьскстЗаткаа псссвазаат аапіхдаайтт асласкквах хаксазукна ВМ заасзтссв3 зхсссхозоЗ зазуоссоЗо ззаозЗзстоЗа дозстоФодт зз9азосзда ча титацітяа атм ттлат ссатеттта касети зоевессі ЗеассдаЗ недо пакавстспа зкустпаех Куссуссавх ХВсоВІТЯС свцсваксаця ЗізвавВсяхи У «тзиазицио Ззасзазуаї зауаісссва засво ЗсатовзвоЗО оз БО е апозвапазас патасскоази сразадсита збактазцаа зле тазяз захкахкккх НОЗІ звасуасляав зоні пзахавсвоах засни Зстчввосоя тесвотствх Стики ттохссзазо салозостоас єссстоасгаса озагатсваа злету мл таїстаазаа аг зЗаацалааао ЗіЗауксусєа дозазасєскта своспицаву авта тоавзваВии УВО спгзтІсстзво чари зпусссттваї сожусствО соасстсту сабо ще кое. Зосовассеос сстасздаах посапстока ацзададатом хоаакатойх НИ стВНстЗєу зсвазухсва зЗузсакстсЗ паза са сссстсоЧсх сстттоатас тах заапоавотоз пбсссезтас тоасссслах асттзгапав зхпазазааєс абкокктВах ТОВ мист аа сасбсопаза добааозланко Зі ксобота свасттиток Тесс оуцВ ха ззідахтста зшрасссстх звхзусхсвс ззозояЗасс досві св заховОтссе тю стттІтсстВ є оЗовоа єуссаацтоа мапфамнню ссссаацнка ззааацзсага ТЕБ) акпсачакой стаотавкох паооуацаса паопешцнех свехухацуя ствсвувкох 72 зЗассіакака кухклазаах дна ен сств ЗсстЗассс тет сЗа "Зо стазаасзса збосвоозага отсатспсттс сазоаєлтаоз захтстаєза ахсвахскаті т псассствась добкохасла заз са бсазехазча захвзхацих зсхсавав КЕ зссззазуса дсзазазсву зхасстаскс зсЗсссоаЗа сстссвсотс асо етеК УчЕо заптзстосс стоостова озозавстос зазатовоза позов стстааодоц БЕ хішсккоока пасок списана ссяйлпвсацс сусувсвасв суттє ТеБа здакссхитжЕ зщасавиа засчууас ззцсастуцсе сатвтеЗтта састоааЕх їтао0 задтттпата спсатжтекта аадосстаас пспсдатьскта азіцстцала аасслуавоє УВО ппапозацах астааоєтк сстассхспах зЗсхутасхЗ ззссвасату ЗаасаххКа ЗО здцсзсззаа затссзустс суїїссваЗ вазссаївсога саазазнм сттотазаєі т925 коажсастат асасвайсто овес скко моссжиоах ашзлорраце ям лица ТОВ зсазстзоача заоазздалув зразсвуссв зозсссзазо зазатсвсао зесаЗассся кола зацастоавст сстассвсс това остаа стос сс ссоразаєсе аптттссаса ВІ сином зхозссацаа сепсстчусх костулесус сттхтатоасся вес що задузувоту кажосЗцяся ктктдатова ТЗТТтеНЕТо Ттаразава? стоааакцьс ЩО акаттогах хататоавато дтактайсос апіайхтіата дулаутатох сацеволова вив звасхазала ассссхнізЗ ссстститкоа зсезтзстаах свассствут тост іо тагттназац зсспетоатта стсжзадтос веселе теаєкестх сссазадай БО шхаєтисоа здавав гтастсацає папозавуцє увстваєтсс вксвавВссо Бен зкссвосзіо схисжЕІхцОс сіхсассаЕт Кетле вав сстетаєт пек й52о
КЕсстетйжж согесстссВ созозбакак гасі ву ваплЄбсвкоєса адпаєгст а, БК «ссссвсствсс пітассксвУ ззазавтскс ксссвсссвс стстсвхсст осоВКстстЯ запо тассттозсз стостота стгсстетеЕ стозЗасат ЗЕМ поетеса Ю ссеблеюмтсх зо ьаєта бкпопсваоєсє сосмиех ссхясузсх «осркаєскаа БУТ стчЕтачусі авто таВвсчЧІцКсВ позовах Зу жав ВОЗ пусутаауцх аго пзазсзакост зЗЕттсскаас аєзаотоссто апхажтооти заптпкацтв попки БЕБО ткххжкКххк диваххавіх хі вВкаЗ КхоЗІчаЗНсс зссстотНас свое ща тазатстатсот тетсаЕтсст тасстоВсзс стпдаєтеса зассссгтайт тегадатася ВІ їх поої 0: а «КК» ЯпаВ
«212» ДНК Я хіх» Мзсезса тчізета «ЕВ0х каіз ср5 свйй (9235..4023) «КН 4 ахацататах сягав ЗаЗВсвцОз: вавчестстя сесїЕсяЧсх сЯцЕссККВУ о тсесстосттз ттЗтттссст засзозвоазс савсссссту осоастссст пап сеК 125 слладесазсо ааззааасяав сзасовак але. гзедревйать сазагаєо, 150 ккжккКтклк ВСУ сс Кс КІ МНК ЗВ Я УВК КК 237
Ме дев о Рго 1 ста аз а лк лок ос су Мк св ас ста ОК сов За ах 5 меч мет УЗ) меч йо Суз беу цей Рйе цей туго рго Ту го Аа Ар тс сб зсс тсс тс сот сво зас сте заї абс БсЖ Фо дес асо тес КЕ
Зак оАід тк оБаг су Бо бій АЗИ ха АЗИ фі Упг «у піу тнигорне 2й 25 З 15 ге м КУ 35 вт ст ас «зх ус бо ес ссї он зу «Її ско Зо ВХ їсс її ЗЕ твер плат Ні йіу ТКроаіа р біу чпагобаб рей Хій тук ЗяК сук ле ак хо кск ка вк хто ас кв сс сс За ска ку кі КК ла яв як ча
Бгто піп йту вно Тут Бго Заг о бго діа деб ага ви бух Бук НАгб Зах 5 Бо 55 зда газ тва баз асо са аза вс асо св Мем ста аск аа За дм. Я
Оіу ІЙ тгр Бій тТиг о РгО Аго АїЗз ТйгоАгЯ беговео тт окуз АТа УЗ о гу о тос зах сет дос Сас ос сес вас сос оф ат їсо сто фас осо оте цих суЗ муз Рго Зі ні сСуз Бо АЗЙ Рго ЗУ Ж Зегогев ЗУ АВ мя! 5 Зо 55 сФр вся до тес сес ст Фут сат Фо овес Ззаа біс СОС їЗї Сас с 573 зга Тв пі Бек оАга РНе бі нів бу АвроБує Маї АК тег АК суб 106 5 о 115 тло їлфоаах пух ху соб АКО по Кох цосо Я со Яр окок о сВеро 52ї сег оцет Ав ви ді вен отв ПіУ Баг Аза піц ага сів бух сів їх я МЕ зо зас За ви по аз заа асо да соб аїс таб о сає сабо сте ас зх цва дхи пік Уві тр бек Зіу ТВгоій ба ї)фо сУх лагу ій га Ту баг 135 38 145 тат заг тс мл да Зак вто Зегосст део сту вує ас ес тег їх тус АЗИ орна га ЗіБ о ахромаі дія го АЇя зо) ОТу твгоБег ре Бог
КОН 155 п «вс Зк сте з3а зсс вс зас ссс асо сзо 339 аса ав дат сат 933 155 вів мат без бі Вій твгбовея его те бій АБ ОТВК гу Аввонів 51 155 170 М зас жа акт За акт айс абсо їат св Зоб ств азс ау Зб свт ст 515 згп іх тТаг МУ твгоавп таб тує АТа АТа ви Ахап бвгомаї туго ви 155 155 Кк М а ат дах дат бла акобай сіє бу абс ас оада аспоатр є гц Бі меж Мат Ази Ахп сій меж бій і2в Бей (фіу Меї ух гг омет Аза тт а 25 ких ясатроцаа амеба бат сс акс аб сте ста заса зат ода заз їсс аа 09 зів 0410 12 гу мі АТ 18 їі ізцоіви тВгоАБроБіу ух 5ег ази га 7 У
І ха йи5 зху зух щук її сс Зав зс5 цк вх зас св зЕс Зоаз ЗВО зтс ста зу? мех обі біу че вго мух тає ліз уаї лхо сів хів ака зів хів Кен 255 2ї5 г лат пі вах бай лаб вай ааго пас гак осга дає ако ках дос ак: зу ВО
Ах 116 Ази Фі? Бу5 Ага Аза Азротук о іви Азо Ф12 тук Аза їі У 245 250 55 зЕЗ зас ага сто забє птоз зас оз аа пад са за? заз см воо т що
Узі ЗУ їух зви Ахр укї АзІоТга Аг ЗІЗ зи Аа З ец ЗРУ Заг
М В 27 275 зв зач зви Зо: ЗБ УЧ св ЗК КЕ вес ск СО ос са за ЗХ М мух мук Вяв о бБіх ЗІ» аг Бія Віа Ба Хі ве» Біо дер тк ув Аїа 250 -ї5 290 сіла тає бах зх км заз бак амур оста емо або ксе але сус зба аВе 153 сви МмізЗ Ф13й уз) ве бі: Мміз меб сей Азроузі еко суз бе тт Або 235 300 305 апс аве тпс дао охо ооо вас ато воза са адо асо бот Фах сай пай 1157
ТтвеоїЗе сух Зіу УЗ БУ Ази меї Зег АБ Ах АТ Заг Ахроців ЗИ 3 315 зха зди вс сс жо саж цес аст зїї зо ссо зао Зо са по зго тОг ма5 ага тнговра т) ові» Уа) їнгохія ух вра бу» зер ій УВО ОТве сх
ООВих ЗО ПУ тоЗ ще Зх сх яке кс ЯВ сва ХО Зх «хз всВ обста Ос «Вс Кс 1223 аа бі аї8 вви хів его Ахробій тгроУаії івго о твпкоаїа Зіа нія сук за 345 356 355 ще оксає Зав зас ває аб баб мб ста зб аз ак вах ха дал зе 1341 виз о аго АБроаіу АБ ОАЗромі5 бек оцву Тр оАКО УЗ деп чаї е1у дер
ЗО 325 370 ссс вва тсс сад зм; кре ава пз тс ст з паз зза деа да Зх 1159 его іуз бек З1й ткробіу 1уз бі) ее ігор тіФ Мій іух Аза хі їв 375 Б 385
Тсс ста Ф9у3 Ктт от цс їТт осо 383 Зз30 ззс с3о пої Зжс сто оо 1437
Бек орто Біб вМе Ар жа! ВНе Аїд губ цу лам біМ бБіу Хі це 1
КУ КІ жх тс її Зх вт Чяк яко З ск сто янв ско цу сво зах Чув дО 1255 пра тук йіу авровар хів Аіа ев оре) бух Бей аіа бій рук уді Кук ях АМ ам вхо ххх дкхосах аск ар оккк о акх жі Кік Кк пу ак вія За КК ї533
Маї хвготТвг міх АТа агу вка хів сух ви вго бух Те Меї єїй А1а 320 а25 з36 а35 зай сл) ст ла сз3 аз сс сад вує зас асо ту азз Зає са заз їхй1х зп іш АЇЗ фе АР Ага го ів бік 5ег о твг осуз дгФфоазроніз У 445 345 50 зас За сто сту зас заз саЗ зу ост сст ост СЗТ тт ЯЕс Ффос хто КУ азп УЗ зе зе Аз зм ів о зЗег ові рго Аїя віз ня Ма! Аза ря
Бк 45 Оз зах 599 зас заз сто вас ЗЕ зас ст азу зто Фа чо а топ озсЗ 1577
АзпоБіх Звг огук рен одяй дів лев ів руб меж БІУ а! БІБ тер отнк 7 ях 380 зас хах зсс чиЗ З Му їх Зла пл пла абс ас осхя сок оваєт хх ї725
Бегопує віза Фіз маї уаї веб осі ср Бу ву меї БВ кг Аж БЕ
Зах БО зач зса Бах Як ау Чя 5 ко вс цес СБУ ЖЕТ «ста Тс вух 539 аск Тит твРодав охаї ага бін ма чаї твгохев БІЙ рна зїяц суз бяг о ЗІМ ТВ що Ох т 515 аз озха зат дав ад лох тс ааз чок зудоасо асе ясх о бса ус сх КУ сів оіш А5ромій Зв вго Суз уз Фу маф ІТ ОТО БРО Бец бек 520 25 хо тсо сФос сафосст саз заз бсс то ст ста пад 898 ка зад аїс дай зЕБа
Зак хів фій вго бій «Ту Заг сух зебр оізи Бій Бі Уаї ЗИ 318 їх
КАЗУ зва 545
Зах ек кс жк ся СК сх ся дО цк с ЗсВ «ХО ова Как вто 11
Зі бі пет вве ага вай бан обів Бі Бім біб Ма во) Зі) ту ма 556 З ЗБ мав осє з ад ве тах сс каб ог од сао дса СЯ асо кН зай ї1з55
СУу5 го Заг іх Ре їжте Бо Тут вто маі ій їі Ага їй дув агу 55 70 І тс зсо ос бос що абс асо сто са аст сла ат са зад апі З вже
Заг ТМ Обіу Зак тТги Зве ТКг ім зій те зіп АзроАгО іх Те Уді 55 585 та У зи злу цез зви сс ЗІЗ ца Зі скоса сота сза ста газ зас т 256у
Бук їжи Віа бін остуа агя вій Хі ага суб рга ага Бга Бі аАхр вне
БОЮ Ба 51 заз пає збу дБ кас ка ссос са хо сс хв хво ат зго Є За ме бін оавп оту бік Туб агу Бгто вагу Бегорго Туг Туг дея хаї Баг Вед 515 БІ) 52» чай ато б веб сабо сб как чає зас таб ас сус СЗЗ здо Кс ос 5337 піз і3е бегорйе міз Суз туг АоО СТУ тує ток сти аку Оіу Бегоаіа 3 235 855 аат сс асо ос сза зго адк пос соапй за аз зо о Зтацй аха збу ако КОХ
Ази Ага тик сух Зм узі Ази Му АгО тк ов «іх сів так Аа Те 55 У 555 цк сво все зов зга цоб ас ас ог заг са в ак га ат зое й сп вай о Зпй бі відо ові туг суз Заг аха га Зі 338 га 112 ЗУ
ЗМ АХ БУК 575 зсв вце зву зо цес жук сце бо сс сх Зах вас ас щі вес КЕ РЕЯ
Твговага бух Уа? біу пегбоагу тиг аг ке біз вав Має ха Твротує
БНО 585 М сас сак аах се За сок асо сто са дЗс їсс са со соз св су їхАЗ ніх сСух хег аго У їйви тагоівч Ага Біу бек бій арго аг твгбосСув 235 щю 5 аз оаа сок пос век сот ло пОор ас паб пох Кий Топ обва чає сб 2УЗу «іп обі; оіу З1у Заг открозек сіфу твг Осій его заго Су піп Аврозаг 210 х тт кжс агмр;ркас оз зсс сст саз паз ато ос да ох жк ста кож ко 2445 вне мет тук Азро тик овгко Бій 51й Уві Аза З1И Аза ваз зви Зв оЗек ти 7345
У 73 735 «Жп Зсео соза ясс зт зза поз пс па пс пай Зах зда гас азс ста Бе зво тв Обі Унг жін діб Бу ув) Аа ХАІ ЗИ АХА і мії ЗвбБоБго 4 уча т я оц ва свв оси зв «цу Вуд вт вх сх Зх о ссх та ве тгс аха 2543 ві пів бів пій бух ага Агу Хі хів ієн о зяа про ває о бфіуУу Бар овях
У У: У вас ВЕЖ ас ст ко тя пах ду» са вс ас ЗК З сс ус зас тка
Зап охів тТжгобев Уа! ви З5ройіу две зар кає Хе Бі Аїа Зіу лен
Тк 7 тах
Кг зов Зо сс яв аз у ста ціх аг та зії За 388 вто за КЕЙ
РнжотТвгобіу Віа бух цу суп огец уві дай вен Хія 515 ву Хв! 5і1х в 735 БА за ках пз ЗІЗ лаз сся аче сЗу пох сів ЗсЯ вся тв Зсс о ВсВ ся ХАВУ зве отут сіу Уа! Суз Рго аг Буг АТа цем о уаі ТВКОТУК АТа к ОТук 505 10 315 сп оаза ат зюкрам ада во тс Зап сда даз азс ау зат оба зас Тл го ага їі) тка уз) вух ма) зве аю о Зіп Зі Зег Зб аа А1я АБО
БХЙ ки Б 535 їз ЗЕ Зсу за ззО сіб За за Ві За ках за зас са ва с г тр ОЖВі ХВР ЗУБ руб яв пегРоЗІН Хі в ту 516 АзвоВів Зуб ев ща щі 55 запо кса без ах пас дес вад аа пок сс св уся З хясопос ях ЯВИ
Су фег Фу ТР ОА ТР губ РО АТа ви сів» Аза маї тТук бег меє 855 що ще аха апт стап сса паз пас абс се ст ода пос бо лак осог апо соас 2597 мої Звк Тгровго ЗИ Ав» її Рго вго и Бім тТгв Аа АгО Та Агу да ТЕ СУ Й «вт тс вт Вт схо щТЗ Все ат ЗЗа її гас аще ау щує 393 Заг ТОгх нія зі Хі ї1с2 ісц мех твгоодюв ЗЕ ув ні» АВ МОХ 5ІіУ ЗМ АВ
БМ Ба їтств як аск Зк азс Зх чаЗ во се Час КО хх КВК ях вах зв 2973 тро хів спе Уві Хів зх піч Хі вбу веб без мем туг хів Біу бу
Зо ще що Зк паї по аагодаєт сб опоФф пає пак тах ос Ас оо тато кох ооде пса
Ар Аго іуз АЖпоРго Ак сій Ахротук ей АЗо Уді тує Уа! Ре бі1у 320 3235 550 ах соза сет сто ото дає саз бо айс авсо вах ост Ка Зб спо даФ 3055
УВІ ік гг ів у Азрохій ущі Аза ї112 дхп Адіщ іщи Аа багогух 335 з за5 заа зас ат За) сва са ще то зах цс заз затб аб) зай вас сто ЗМ цу Ахв ода Зіб бій ніх узі вн зу уві цих Ажромет зів Аза 8
НВ 55 їмуз
Зав вс век тс тт са ях ЗК пах пай зу свзу СТ сто ВУЄ с з бів ашвоУгі Бйк пе бів меф хів аа» лів пеб обі кгц о чаг гли
ІІ чу КРЖЯ си ех ас Зк Коб Зав сах ак аа Зах ве Зак хаК оса ау си 3213 су Біу меб уд! тРрошіюв НІЖ ес ух сту Тит азо тує НІ5 вух бів о 5 З 355 са за сад зо аай авмео това бо ас со сх Бо лабо зох баз, 3255
Рга тРЕ Зб АТа груз 112 Зег уаї Тк одка оРго Заг оїх5 «Му міз
НН 15 10 час тост За Ядоч ст ча ото ст за їЗс тет то ста зга 3303 сі Зекосуз Мет бі Аа Ма) Мазі заг обі тує вне сві зво ТКг 1011 зло М:
Фе аса сзу тої їгу ст Чу ОВС Вс зас ца сяс їсв8 віїс 85 3345
Аза Аїд Вів суз вне тн оба! Ар оАше бух біб нів Зег Хі рух
Ми Зх КЕКВ чис вФф ах а ню пазу азу со як сто аз атв о Чва зва 3353
Маї дяк ма! пі 21У обуй бух ага оажр о бви ПІН ОХів бів рух Уа! зок це Ми ста тух баколос пас о таб аако ах аб дах алла ай зва Зка а 318 ве Ба оНіз бко Ахро тує Ах тт хвгойін бух зцжх бін іа пу
МІ 055 Оу зії сек аа кт тях Засо тах уяс ЗЕ Зсо сто вхо вабф ско яву 3453
Хі БР ім ЕпЕ о Тує ахротук Азов Уві 313 фей хів уз ву суб
Ток МЕ ап. а а аатї зай одасб о ссо аб оакб дод пох ав как се се 528
Азпосж5 ке) АЗпотуго АЗровго тик ії дкО вгОо Ме осгух ви его 1050 їа35 152 тс сс дво зо3 ЗсЗз зст сова Ост тт Зою сте сет ств вх сх. 3573 тує ТК опів оВіу Тйг о ТНК Аг від веб яра Одже мг рге тТве оте
УК Не ТМ
ЗсЕ ХУ кая са са ай дай чав КЗ Ех сс св сля Зак все яБіВ таб обу бівоів бій бух шім Біб Бен бен о Бгто Аза 010 Авро116
М12О 25 1130 ааа вет сту Ж ВТО їст заз заз заз айс ааз сто ас соб ва ЕВ їу5 413 ков рве узі ек 515 010 Оу уз Куб цеу тпг АКО (у5
ТКУ ії 1135
За9 дес хво ЗІс ззО азс Фо оз 33 зав до Зос соо озф вода ЗМОВ
М охаї туго хів ри ден БУ Азрогуб вуз Бі ЕК осух 15 АГ ро її хе чах су бай тях обоє спа зок їзї пвх вйа охо за пзк як хе 3753
АвроАЇа пів туго АТа око сіу туго Ар бух о Уаф ух Аве хів дао вх ле 1375 зах за зе айс сет бод вк т тат асї за зда Бі ак лих з7ча
Ба Уді уді Так овкоа АгО Ра іви см ТВе о 5іж йшік ма? Заг орга 1155 8 а тат цит Зще сп ай ас зе аа 53 зах а мія сс їКаї
Туг Аїз Ази рга Аза твг осе5 Аго Зі зро заг Б1Уу БУ ого те 44355 2 25 ка ск Сас аа зу Зак сах хКс аку сяя оуУ 991 Фо яр вас 3885
Жів чаї ніх ух вх оБве ака рве хів бів ма? БРу баї хів Бек 215 РЕ уче зва ча ска зах дуб тк аая аб ос ва соц сив аа ка 53а33 тив їу уаї Уві АВ Уаф Суб БУХ дей Пій оБуб ага Пій Буб5 ФВ 1225 во 123х па соб ос саб збс спа пас Зк о сас Зо оаабс ст: їв саа то ЗУ ха) его Аза о міЗ АТ АКО Азробне мі У одхаоіво вне ім УЗ 12-83 їіх45 зх5а ст ссс точ ст аз дво зва сто са ож Зо ЗЕ то ВЕ т. 021
Ту о Бгя Троя, же сб обу іль осі) аа ор али ве іє ра
М КІ 1255 сс їяа содутїтссх зсхочасяоа зсчсзузах хЗазктаааа свускосУухе ща ян вактактх НВ «йРйх У «АЖ» ТТБ «гії дяк «їі» Ми мжезсвіне «ах «І со яййй МІ, СЕН «пох 5 цетссвхсяс Всаптстсвко ззаавастца зеттттаааї тата озадогооа о
Фкстатостт баса помозасас задав стіпадацо ЗааОУтов 125 сссткзЗсся ЗхсадзучаКО сов сву ват стагт госІсВаттО сага І товНасссже тттсяжцаає ЗКтссЗОваа ЗсяВВщеТВ сОтВсВсВВВ паст оЗЄ їх сапостосао дтоссапаз азаїтосата здапоєттаЗО паса) задово КН азспацате пасатттоЗ мосазстт Засдецазау валів сесаоаоуча зва «ідо зиееа ЦІЇ ЗстоЗаскт ст «с а Вся ЗО З8О зів меу твеомех 51 1 дос оклк со сх кв пк ЗК ськ сі с ХВ ес ук СК КсХ да ях ет вго шій Ман Су іви маї ем оіви таї іем біу бе беє Бет Фу
У 10 15 о пах зо зас оба аст сс о сх да пгт со пс сза ук сб сЄд тю хіу жа) Зек А18 Тиговго Уа! іви бій АЇа Агу вра цій УЗ) бек су 3 35 її сер ово Фо са уБо Зо ааа що пес Жсо ТЕХ са СТЕ СК са З5Е
Зегоцяв бів біу хаі бін хів туз бі бік ЗероБне цій цей зп ів 213) 4 КІ щук зх «ву З схо Зно вс «ї5 хх Кк сх ос тк КЗ ков КВ ще ціх Бі іп оваіа зам обі Тує зви пух вто паб Бі Ме Туг оБгу туге 55 5 55 ткх ума сад ах сва ам бах ада зкеб ага Зх зе бе ах вах са ля
Кто мат шій ТВгоаго ТйгоСуз аг бек тйг о сіу бек откр о бег Азроіех 70 725 Зо заз асо соло обдає сала лаб ям обо сао аз ого паз то аа оба ажа НОМ сій тег оАгО Арій туз 12 хз п 1у5 АТ ОТО суз АгО АВ БЕ
Зо 35 цю сос тас сс соз сс сафоовс тет сза зт ооо са ТЕС фа ссс сою То
АКФфосув рго ага ев Зі АБробНя біб дей СТУ бій вМе ТК Ого АБУ 105 Мо М: тсс о сос цс тя опис сто ЯОХ дис ся яху КЕ КК сва сс ха дат 755
Зак ово Бе тТук вай ев Зак ОА ПІВ Хі баг оБне біб дух Тує зар
КК зх: І вич ох У
Чак ха оцю КК под дає ох сх дах сх ко фо саа даб зах оо БЕ іПіУ тУгБ УдІ ви Аг Ту йвгб о АТа Аха Ага ТВг оСех щів пій ай щу 155 148 145 ска б ах ву тах ага дра ат тат Ват пах цаа їх ва тає туї кВА дга тво ахр о ЗІХ ЗР тлг Аза ї1е Куз АзроАБроВіЖ АЇВ ВРУ ук сух 1у3 155 ТУ сис ват сс Вох Важ сек іх що зсз за3 зво зо оз зос саз тс За; врга аз орга Зіу Жіа рго хів Зі тТвб ага у А Оу Звиобіфв ту їв 175 1ї25 інЗ «с сх дав ЗВ ах ЗК аск КАЄ сс тс пс СЗЗ дав ссх Зус скя апа ага оцено мін Зяр хів хаф Твйготує ніж Сук бВК Аа 0іфу бвмомаї сви 85 з в т ох Зх сад да5 сбуа заз су свя пал зах Яцо їба тб ах З 238 ага біу его бій ух Аг огуз Су «ів мі: іу (31у Зеготто вк У ке 25 23 ама аз сс М. мо саз зав боб же ат хаб пас м о споб саа пд 13055 тТвВеоФіу го Баг су5 Оп Ар щег бйе ме? тук Азрозее вго б1й Ми 215 Ка т 215 жи ХВ хо сс Заа га її ста їдк хоста аса баб асс аз аа ба мА
Уа АВ ун Аа РАе іей бег Зег ге ївго шій зйг о ф1іе шім Ту АТЗ о зе зай «хі 235 я
За Зст дао Заї дод сас а0с сс до 938 с3о с3о ззо зо за ЗЕ 1155
АзроАїа біз азр осі нів Зак обко 51у бі) бій бій дух Агу пух Хв 235 зх 253 ТВО чис ста ас соб їспр опа стос вт ай вс твс сту хв стя дах ща 1230 чат ви Ар вро заг опіу баг омет аха гів ГУК бен ома! Бе лжроаїу їх 5 ик кка зах ап ат вда аз азс аак жжк ака що зх зав ка хаос 278
Зег Аа 5ег 118 5іу Зег Зег ах Ре тТйг БМ А1З3 туз агу СуЗ ви "ВО 785 235 зсс зв ста зії 330 39 вгЗ За вас са 58 зс3 зад ста сза саї 1325
ЖВгодоп бан хі Уфч звук а| ія зегб отує БУ Кая Ага го Агертує
ЕН! з
ФЧї стІс сід Яся їЗу ост ВсЗ сс сос пнЗ Зто ст ЗК ВОа хо ст 1374
Яіу ви вві їВРотук Афа тб оУафї кго гук ха! веб Уа Ага чаї ов ще 315 Ко чаї дай айй аах айо дат зб пас зда Фі ака заз айо Зк дало огай ї422
АжхрожБи Ага звг зве Азо Аа Ахор о тго Узі зве охіц їм ви Аха Фів 325 33 115 343 ас авт баї заз зас саєс ваз сб аз) са за або зас асо заз а Мт 132 его тує" ЗІ АЗрОНіЗ ВУЗ мезо ву» Зоб БІУ їТйг АБИ ТВгГОвУх АГО 345 Зх 355 ет схе сво сх вто тах вос ЗїЗ зхЗ зас: ЗО Осз 933 За Зсс сс 1535 ій їян бій вій баї туго цеєбомек ме пає тез Мія Бі вар овія ро
Іо 55 173 сс два Час ко пас о дбф овсс се сат піс вс вгс вої ат пс зи 1555 вга пів сб1у ТРроляп ак тб оаго міх Уа Хе хів їів Меї так Ар 3275 80 ЗК че кта сво ло ато за бала ад сет зво аз Зк ак сао аб ак 15414 «у гу о міЗ Ази мес хіу «ТУ А5погко узі тик Оу тів (іп Азроїї8 350 355 БІ «ца з: ТО ста азс збо пос аЗа за ссс заз аат о ссо заз заз зах 1552
Ага А1з ів ізИ Азроїі1є Ху Ак Аз оБго 1ух Ази вга Агу зи Яхр за5 чі 4і5 42 ас ст Заї ог Іат ого Сб доб Че оче се сто цк ЗК с в 12150 тує мав лавр оУуді тук о уа! вМня діу Уа! пі пте рам чаї апа паб оуд
Ат АЩщ БО зв зи вах Зк ххи Зх кс зав аа Зах зв заз сах ках ЗК тКх К75В зла хів ахп ій бан овіа Звб ух фух ахроап сів оніє нії Уді еп ай 445 450 ага іс аай бах аз зай зах сло баз аат о зло таб саа аза аз. ї18п5 іх ма ух ахромех біц Ахроцез Ой АЗп жа! рве туг сій меб Ге 350 55 чаї заз асо аая бот сту ват ост ту щу ач дта ол зад са за їнчА азроаіц їВгоцух 5егогец 5ег о геу суз біу мет сві ттр 10 міз уз
А) 75 ЗІ ава дус вс ат каї саї за3 саз ссз їФф) саз осо зво ато са Фе 1562 це ЗРК АБВ ВВ тує Віз вуз Віз вго ТРБОБів Аів губ хів Зек кві «55 450 35 що
Вт сс сот сів зай дав сах даЗ вос ху ВІЗ зо Яск по чт хох РО
ЧвгоАгя рув обев обу у РЕ Обі) ік осСубх мех (Ту Аза уа! Уа! цех ща ці пах знроІак тк я ктфоаса чив че сах хус сх ахЗ Б; зах вх са5 і8з8 ім Те ве Уфі іви 3Зпгоата 418 МІ бух ве мех Уві а5р АЮ Й га 525 530 зай сві ге аїс вааЗ Ві а ото 595 щУх сав ад сво пас сто ода пр4Б5 муз ній его її зуз ма) Зег уяв! Бу 5І1Х 15 АТО АгО Азрогєо 1
Зах Кк. За» зт дяя ЗВО Зс сто сс сс ссс зва Тс Зах ЗЕ З3ї под зва заи 255 хів бів бів чаї рев вне нів кго Бу» ТуК ази хіх ай ПІУ Куб Бук щі КК ЗО ча ода за аб сс дао їх хат дах тат бат ві бих та зе аву ЗНО
Аїа хр «Бу гів бга піц БйВ Туг АБИ Туг Бр Уа! Аа ви УВІ вух 5655 зга УТ5 550 ст вааю зас зад сс айо тат доє сав аст сб задо соб ато МУ с НН цез вух дахи гу ве) муз Туг ЗУ 1 ОТИг гез АТО Бго Б1е суЗ кеу
З УВО 555 ссс хаЯс Зсо з3а доз йсс всв соз Фо ста зе стт сот сво вса дос ІІ5В ро бує ТНК Обі ЗіУ ТВб ОТ АБУ АТ МеВ Абу рез вбо сР1й ТНК АВ 50 в вів виб ксдрк ва баз бак ай пай са їх сл осо і зло Зах ях вла в те Сузх бу5 сів оніз бух сію Чіп ван обем о бто Уа! бух акроуді бух іх ко їх зх ста кЖж па ст паз сда во азо ак ств акт со зав зай що 2335
Аїх із вне УЗ) Заг ори За 5іУ ух Зако їеи ТВ АкОфбух ЗНО УВ 53 535 а тас аїс ази вах зов зас заз ава зго а 3? ода аа зат ст ага ХХІ
Чуг жів улов ЗіУ ЗВ вух вуж АЇВ Баг о скуз БР Аго АЗроАїВ зве
Беж У БУ» БЕН зве ЗК яв ще ках зву зво Зхс аз Зах Зсс їст 95 959 ЗІ. ас таза муь іа бів біжу тує біз муз хаі му» бе Мій Зак ЗІБ Маї Маї твт бот то вт «са се сс сте Тс пово очА Я пХа Явс сс свт ех час бос па 2А75 вто ака п їм Суз ти ОосТу Ту узі Азр его ГУК АТа Ар о нго АЙ
Ко «вх чо заса бас заяв пса са ос спо яае ссй ско ат ох сас заз вада а 2525
ТкосСух уз б1у Азрозег с1у З1У вто їеи їіз Уді міх БУХ АКО ЗВ ях тах п тс Зх са че що ж вас фОоЗ поя цта ба вас а тс 2574
Ага вна хі дій уві бі Уді Хі дає тїгаоЗіу т) УЛ) Азротві пух
УМ уз ТЕЗ зв ж сла зо су свя св ст Зі сс ТЕ ХВО ре ОВ ЗВ ТЕ 2 зго ваговій агй ака бій бів мамо Уаф чар туго вів ге фев рве
Та ру 735 р кає ак аак кжж тк кад око пт ск КЗ ста ва бас ва обкю вда ВУХ
Ні іа ахп феи бра цій УЗ! зво вго ТР ус оїуї АВ Куз ву ух 745 Т55 355 заї заз вах зе ут т ста тая ададсктесь дсадоювово хуковазаса ПЕТЯ аїр Бій ар оре біу Ра грец т зазтааацеа зітасаатаа саааавазаз зазазаззаа зва ТБ «20» В какМУх о
«кієх днк «2і3» штучна послідовність «ггох й «Кй3и пинтетичней аліговукледтид «Ах В зстчаоастах свуусзаооа 20 «йЩйх «АХ ТО «Мах дик «кі3» штУучия паслідаоввість пегом «кАї» сяНнтитичнай авігазуклеотид
АМЩюх ї Що зассссоста зосуЗссвУх хо «ск» 5 «їх да «тМіх дик «213» чтучна посптдаввЗсть «ЕОМ Й ехх3і» смвтетнчнай опітіганукаватид «ние 8 Й с«вуавІаксгс зацсоуцацО що кгібх 5 ска: га «їй ДНК «33» щтучна послідовність «Идпх «Тїйх бинтетичний олігонуклватид «апп З стжттсссоох зсавосазоє ти «а» ЩО «г» 90 «візі» дих «пІ1їх дтузна послідовнісль лізу «ЕЙЇ» оКентатичний олітенувлсвтид «ВХ аклтатаккк холкахстях Ко «а «АХМю ло хйхЕх дик - «К43» фтучна носвідавніксть «Каб» «йй3х щинтетичний злібгонувлестих «цк чісзсвівсс сттсссстос 5 «ВМ 1ї
«231 а «ВХ ДНК Й І «еЗїх ежучна послідовні ск «ве «ЖХОйУ сСимтатичний олігонукпавотид «МИКа 19 загс саттесстке У «ох 3 «234ї» а «ЗИ» дих «3їх щцтучна послідовність «220» . «ТІїйх сминтеуичний опігонуклвотид «М» 3 загттцВсу топос Ж «аМУує М -К3ї а «ВИ дНЕ Й «ВХ штучна послідовність длд. хакі Й «Ей Синтетичний олігомуклеотид «кх 14 зстесваасс гзазсстодЕ 23 «Мі: її «21їх 20 «від» дни Й «ТА» Штучна послідовність «ЙО й й «ВИЯ» бинзетичими йаігонуклеєткд «вх 15 зкхчазаєттк сазвкккаца а «аю В «М» г ха» дик Й Й «213» штучна послідовність «ВИ» «Йй3 сСинтитичний оліговунлитих «В 16 чессзазссто завстссяци 2о «2105 17 «вай ЙО «ЯЩфЕх днк й кі штучна поспідовність «ке І «Тїх сСиктетинний слігонуклеотад «я 17 стезотавсс запстозаВе у хан 1 «аа ТВ « дах ДНК Й Й «дії» штучаа ваозідавність хедох . е«ЕЖУх КинтетиЗВаА здіганукледтий «Ах їй звозозозва стозассеоа в «вв ія «ий кВ «ЕКИх дик , Й «КК шщтузвЗ паслідавні ст» «ВО» й «ЕХ» сввтетизиний аатгонукаеотий «НН З ззвоЗсвоау зззазастоВ хо
Кк 2 «кій» ХО «ЩЕ» ДМК Й Й «Мі щтучнна песпі давнє «й «ТИЙ сину ииний апіганукавитид «Бе ЗО Й чав састуссавя то «Ми «іх 2 «ли НЕ й й «ЖИ» ощтучна послідовне «КАХ
ХЛЕЙ» пурмтетичний олігонуклеутий. см» З пледи асан т «Ве ХХ за НИ кЕЩІх дик сао ШТУЧНЕ МН ВНі КТ каДИх «аа3е ОПИНтТАТИиЧНЕК пПЛІКУЗНУНЛИТКА ха хстййкккКЖх ккаВадавка а «кл 3 «вий о «ВЩї» ДНК хе» оштучия песВідоВністо кЕсяМ сватетВНяМ апігануєвостий. «МИТ ШЕ
ТкааТККВ кексу До
СУС ШК. «хііз 0 «кА ДНК й каМіх ручка послідовне
Я
Ура Й . Й хом СиМтТаТичнНИий бА1ТОонукАВУТИК «Кк. ТЯ тезвавааєс оз восх та «ЕМІх 35 екв ха «пи ДЕ Й й хКМІх ощтучна послідовність
КЕЙ хіх оциМмтТЕтичний олігомукАфОотТиХ «Не А сестеттм сазатеооза в «Мк 5 «31» ХО - ій дНЕ Й . хВАЖе Бтучна посялтдовністю шк «МАЯ» бемчатичний затговукаватид «ем В ладесо сзлевадале ВІ «М ЗУ хм ОК «или» ДНх «жі штучна послідеаНніКти. ем . Й «ай сиНнтТатТичНний лігво НуКаАниТИид хм хкхнохКях еко Іск дО «іще В «ее В «КМ дак хК3 штучив пОаСсВідеви т «КЕОХ хжхї» квнуєтичий злігазуєвсатий
ХАЙ ТЕ
ВУЖ ВУ жа ЖОВиОВ РМ хЕМок 25 «КЯ КО хиййи ДЕ хЕКМиМ штучна ПОСЛІДОВНІ СЕМ «ЖИ СиМтетичЗний сазчгох Ууклестид «МК З зкобоматава дссадахоаа Ре хат Що кеіх хо сказ ЯВИ . . «ВА» щфтучна послідовність «сад» «ВІЙ осумчтетичний сатгомуклеєтид «ме чиаммса сема тасой о «Км ЛЕ «ЕМ 28 «аа НК , «ММ ЗБУМНа ПОСАДИВ «ВОМ Й «ЖЖ» пинтвтвнНиу паЗгОнукавтид «НИ І Й адм азам 5 «ВМ ТЕ «ТР» а -к КЗ 7 т ДОК й «А тучна послідовник «ВЯВ» що ку оСиМмтЕТИчМИиЙ олігомуклаотий «КО ЗХ теастстоса стофосоте за «ще Я
УКХ У
«2122 НЕ «ХЛ» Бмнучна йосліДдйавчоть «ЛІДА
ОУУУУВ, т к. їх ї ке г Б «АМ3У жинтІЄЗичНиВ пАїітОовукавотий «800 33 таки КНх ства З «Йи «5 У «Кіш» дек «КІЗ» щтучна послідовнійте де «МКй» ОпиМмтятИиМНниЙй бвігомуклеутий лак 3 сахкккаеа задали 3 «2105 35 «ад ТО «Кіш днк «ДІ» шуУЗни ідо нНіяте «МІХ хкАХ» КиНтТатичнНИиЙй чпіровукнивтид «ем З
«вавстквсвкх ЗсвЗуВЗЗца Ех «ЕД «АЯе 7 «23» днк Й й «81Х» штучнв воаспідовЗість «ОО
ТЕ» сннтотчнияЙ звіганукваотТий «НЕ тека ККаКЕ слКаКиЗЕВа 2 тіше 32 «Ве ВИ хеМїх дк «1Ув штучна песяі ваність «ще «Вау синтетичний ЗлігнунлУткх «У званцякІхк ВІКИ Хищий за «ий ЗВ «іх о
КРМІх днк я уст го У жу. «ЖІ» втеча носвідзниність «КЕОУ «ЕЕ» сКВНтстТЯчВиЙй зВібсзнуклявтий «НК ЗЕ
Зако ДОК КсВЕсВ 2 «ей» 33 «Кай МО «ех дих «2135 штучна пилідшниішть «еще» «Ії сСинтатичний олпібойунлчатих пк Гука ати минТКи «т я свІзЗсвитоЯ ЗЗаЗаЗчя ХЙ хи З «КА: Уа ках днк
ККЖУ тучцня паснідавиість сузй хЕЖЕ ей дминуштТИНнНяЯХ спігонуклечтТид «ЩЕ Я засспесата сов оаа 73 «Елі «Ля В «аі8е ДНК . «КАМИ» штучна паспідовиіфоть «ВИЙ «ВаЯх СИнтааивай апігавзуклеотид
«йде ЖЕ звассях зве Ва Я туф» І хиййм КИ
ЕМ ДНК . сії уча песнідавві шт» «ІТ Й сЕж3в СЕНтТеТНЧНИХ митну юттв
НЕ Я сесзужиаає пЕжжесВя що «МО» 43 кидала кім дих єйЩ1іїх щуУЧчнНА нпоспідДмнКЗИВК «ЕВ Й
ТЕЙ У» синтетичний слібчнуклеотех каш ЯЗ «винкс вовченя У «3 83
ЛЕ а
КУН хЕАжи дих Й «М штучка послідов сеть хамих «Зййх синтетичний сатгонуклетид «Нюх 44 «зго пезов песссодоаз - о в «міх 2 «ІЙ ВНЕ й «КІ: Мтучна поглідовмісте «ВХ «МОЯ» семзазичнви аліганукаветид «а 5 ацшсвктахх загавацк ЗА «Я» ЧУ хиб В «Ей ВХ «га» штумна вОблідовністе «ЕМ хтййи ШЯмтТаТючНний олігопуклявтий ляКуУхХ 45 «ттЗасНК ЗІЗ й «10 47 «й хе» ДМК «ЕЗМИх оштунка пшеслідшеність сузгу хи «ІшуМ синтетичний злігонунноотуих
«ЩЮх 47 свІїсвсттЗ зсаодстосоЗ їй «кіс» 48 «йії В «ф3бх ДНК -2135 штучнз паслідавність іх синтатиницяй злі газчУукВвоЗтТид, «НИх а зккчсхчКсх яки В 20 «гій З «ау» ТИ «810» ДМК -ей13з щкучня посліжонність ха діх «23» синтетичний олігонукнайтка о У тсавсвовус СІК 0 «адм а «Фр: 20 «Ме ДНК «213» втучив посвідовністое «ех «їкі» сянтатичний аліганукляєвтий «006 55 сстціхтсЗс заст х Ко -г10х 5 -а4й2 ВО «Мих дих
АВЕ3» штучний послідювність «ВЛ»
ТТ МУ чо су помити и м мечем кІгку»М синтотичкий оліговукнзатид «400 51 сссостссці грсзсвоВї ли «Це» Ух «Ві» и «аЩо: ДНК й «81їх штучна послідовність
ИН
«ФМ сихтатинняй алігазуклоотид «іп» БИ сазцівсссксо стос 2 «М цу хіх 2 «21й» ДНК «ИАЇ» Змучна пасаїдовність «ай
«КК3г КинтстимнНий апібзнукливзтий «Мк 53 кканааака весрсеиуке хп «Кл» 4 «їм 8 тій ДАХ «КІЛЬ оБВіучма поблідовнійть «або
ХА . я ; «МИЛО пюмтатичмиМй Бої гоМвуклехтид «Юа асжлличЗла за І «Ме З хеі1їх ЕВ яийлм ВИ «В» ЗВ учНа Ліда
Кк дах «ВЗ» сСинтЕТЕЧНЕВВ БВЛігаНнУКаВИУТИД
Ох 55 хедкжкасих ЕКОН то «В В «ВК 2 «ЖИ» ДН хе4аЗ» фтучна послідовність
Ек МХиМмтетиммий ЗЛігОнуклкотид «ВМ 5 сс алу Ах т са у «ВАМ Й хаВем дих «ААУ ОВУЧНІ ВЛ ВЕН Кт хЕКОх й й «ай» синтвтТичНний ЯЛігеНнуКНтТНА «Ох ху
Четснахяц СВК їй «В 58 «ЕЕ та «Й3МИх дяк з Ум еуе г пет у, -5А3» штучна поеспілавністе» «ТМ «9235 сиетеЕтТиЧчНИВ авігонткватий «Не сш КЕ КН КОКяЯ т хащі 58 «лі тв «вай» ЖК «КИМ штучна послідовність сим во «КІХУ снтетични зніганукаеатий «5 53 ззІвжусссгу сус ах в «гіох ща «й» ХВ «еЩїх ДМК Й й «ТР» штучних валів оть «ах Й «Її» сминтеумчкий снпікзнукватех «сно ЩО
БЕ ВОЦЦІЖ КК КН РМ
«Мк щі п Ко «а о хе3йх ДНК «РАХ штучна послідснністе
БО Я
«3» синтетичний алігонуйназтий «ен Я «авоссвсцс зааЗтааасе Ко «ЕМ БЕ «РИ т «КА ДНК
ХК» штУЧчВВ паслідааність «220» - «КЕ сЕнтТетТиинЯЯ спзгоЗУкизатТяд «МИЖе Б; зано сс БеОе р «Ем «кі ЗО «алу ОДНЕ «МУх штучна послідовність «ВО «ВЕй» сивуетичний слігонухизотий «дю» ВЗ саавацссве сттсстовоВ. БУ «РІО» а хЕЩі ха «иїль ЩЕ «23» Втучкна пОслздавнстх «дю хе оСПимтштичмий олігонукиаотих -ме сові тевав апосассте а «Ме в «аЩіх хеМЕм дик -к3е ВНучна восліДаЕНЬИТк
«ВІЩУ «йкї» СивтТетичний одігонуклестид «аОих вх тече хесВВБНК 2 «и. р аа» Б «Я: ЙО «Ках ДНК І «МАХ штучиа послідевизсть «ВІ й «КЛїХх жинтетичний оліговухклестид, «НН» ВВ Й зЗаазостсса ссссастсся т хжіЇчх ВУ «ий ка «Вій ДНК І Й хфйх цТучна послідовна сть «ах й «ХЕЖУ свнитотааВий аптгонукаватид. «НК БЕ Й щриацивац ветссцессх ЗЕ «ЕІ БИ «ка3» о «ие ДНК й «КМ» ЗНЗучна послідовніктк «ак «ЖИ» Сикіштичний олігонукавоатнд, ек» ВА
Зако вт мк ФО «НЕ ВИ «ММ ТО сеаз ДВК «КАХ тучна послідовнійт» «Ех «ЖЕЯ опЕнтастичний опігенукннитид п З зкчааоцак сиза азва та «вам 7 «іх» хкїїх ДВК яМЯ 3 Штучна неклідаиність» «ЕКх хх свити тичний знігонухиаотих «ННіх то сттсВОссВс состоомі зо «ЕМ т «кі» ха «иа» НЕ
«Мійе Ззучна песлідаовність «ВО «МАйх бумтатичний оатгомукавотид «НМ Ті фдааааєтх Звсозсстеї КВ «им ТУ хх ЗВ
СУТО ве «вада НЕ Й Й «В3й» Ззучна послідовні к «Й «ЗЕ» пивтатичний пт ОнНуКкавИтеА. «НКИ зазагацааа адгледВе хй «Ох ТУ хЕМх Б «лій ДНУ Й Й «ВІ» штучна ПОХЛІДОВИТ КЕ «А «ВУ» о пинтЕтТИиМНиИй ОЛігОонуклЛевтИй «МК 3 чхкаціацааза сазан за «АДхк Я «ких ЩО «Кік» ДВК «НЯМ» овтучня носнідняність
ЕТОМ
ЕКЗ» Квт тТичниЙй зпісчнуєвасптий
АМКУ Я скувсксксх ссвхоцхКоо ХВ «ідо 25 «ака ЗВ хе» дик «кІЗУх цтучна послідивність «АЛ» І «ШІМ одинтЕтТичниХ пкігонуклеотав кН У сттстостає гост за хи ТЕ «ода ИЙ
ТЕ» ДНК ання «МІЛМ щучна пОсСТідОВН СТЬ «ЛВ «ЖЕЯ» о спинтатечниВ затговукавитий кКх В хкхлахпцаце сеааах З «ВИ 7 «ВХ То
«їй» дих «МУ» учня нисніднанікте хекцх «223 бентІктТичНЕЙ пігеН Учити ха ОХ їачахвккка хапаяккхяй о «аж УВ «3 о «АЩІ» ДЕ ві Іучна паклідовнікте чЕдах . «Й» оПимтвтінчний олігонуклаєуна й» Ж знацусвца спека сов. У «Щи В ких 2 «12 дек Й . «КА Вігучма пеблідовмійть «од Й «КАЛ. пимТетичний спігмунаутид «вх кв акка кава. «о «02 ВО «Ве го хейт дик «ий 3а откчни яЗклідевнікть «КА «аййх Синтетичний ОПігОНУЮВНУТИЙ «КУ КО Ще зЗзхссвусса Зсассниццся т хар А «ка ЛВ «Мік дик «83» штучна неслідчікт
Хей» «223» синтатичнкЕ слігнунанатне ха І тес стцяхК сахСтВцсНх 2 «ЕМ ВИ са ий кафед дик аКМЖУ жтучавх паспідонністо «ав» хетйх синтетинвяй слірснуклозтид. «МЕ ду позатастот стпатссвио т «ЕМНже В хх «ЗІ» дих скйбх ВКУЧНаО НОХЛІДЕВНІКТЬ «І сжкам пкнтТетячниХ апіганукаеатив «ВМ її «КМ «йаїх 2 «Іуди «Жа3» штучна п дідаБНістх
КЕ Й
«03 синтетичний зніранукива ти «Не ща
ЗЕБСККЕЕКО ВКТсК ВК У се» де
Ка ЗИ хх дик «ЖЕ3» Штучна посліду к «ВН шк дТїїю синтЕтТичний пи гомуклВотМхд «НН КЕ
ФМ Зовсяс ТеСЕТ зх «Мі» ЩЕ «Вії» Ж «Кале ДНК й «Ме оштумма послідовність
Как «ВИЩ» Сумзетимний олігонуклеєтий «ННІ: 8» зазвікевит адакал. КЕ сами Ву чЕ і: ї» ЩЕ «Жілх ДИ «ВіЇї» штучна вохлідевнікть
БІКа Й Й «ТЕЗ: пимтитичими оліпанжннемтка ха ХУ стсивІшнНи ХОМ УВЦ зо «ла 85 хащі З «М дих «ЖІ» штучна пзсвідазЗість кешАе «ЖІїх сиктетахний зпірзчнуквоотий «ні: ВВ
ТАТ сВ За ЦЕТО то єдУх З с» КІ їм х А. Ж З «Ех ДЕК «23» штучна посліді т» хе й сей)» свнтучтичний знігонувлеа те хащих Ще вкхІчскнях шістка йкта та «1 В «ВАЄ Й ха» дих «ий уучна пеплідвинікті» «ВІ» й хакі» осСинуйтячний ЗпіКбНуюнчутиа
А ЗИ зссвтввесу зосвссухКу КЕ «кім» В «кій 2
АС дк «хі течна воспіднванікте» «Ох Й ха» пюЕнтЄтечНиЙ ЗнвігенвувІхтид «Нюх «Ек хииКа Кал КИ 2 «Ох За «Ва» ще хе х дих каі3» штучка наелпідвиність «Ех кас їх синтатичний здігонуканстий «Я» ЧЕ тсттоЗсхтс Зевс е їй «ЕМ ЗІ «кйй» В кожен ДНК - й «ЕЗМіУ щуханя пасів оть хх «ВИ смнтТатичний слікомукизотих «Кк Ж звична ого 73 «Ще «Ва «ййбе НН «КАМ ктТУучва асп давні ст «ВЛ «ТАЖ сюнішеннний олігонукаеатид «Ме Ло канахайжех асист 2
«0: ЗУ «3» о «21й» днк й Й «213а штучна послідовність «акйх «23: оцинтатичний олігонУклЕфтТиДд «Ох ЗУ захеххката аїтізацітса то « 2 їОх ВО «М о лкіка ВВЕ й : хйХЗ» штучна лослідовність «20» ше «РЯЯ» оПинтетичмий олігомуклвотид -щааз З аплламаатс сповжаатта че «АМПЬ НИ к«Е3Міх 25 «ій ДН й й «МІЯ» Шручна послідовність кий «КЗ КИНтТетичний олігонУклестид «ЗО» а актхткавскх вала ви «АН з «А го хІ1їх дак «я|3» Штучна пЗслідовмійть
АТгОх «люк3» синтетичний блігонуклявтид «ах Зх хокктзакК сао 20 «фо» 33 «авіх ТЕ «її днк «213» Штучна послідовність «ВЕУ кад3» сивтетичний злігонуклязтид, цНь тодІтзоатссс совстусвно та че» ма «кій ЛИ хїйх дик
Фі цеучна поснідавність хай «ФЕЯ срнтетичний слігонуклеатид «фа ОЙ кпжЕтостатт загс 2
«МЕ КУ «Вії 8 кЕібх дяк
К з ІМ знаю в «ха3» штучна ВесафоВВІсть «Ох «АХ осЕНнтЧтниНнУяЙ апігазвукаватид «що МИ й хашмлиах кокимнюх екале Щ ха ЗО «ЕМіх дик -кіЇ» Штучна неслідавніють хх Й «МЕї» Кент тТнчний звіганукпеатні «ще що Й
КВК КОХА ЯКУ КУ
«лом 3 «Ки щИ
ЕМ дих й сб)» щтучаа посиздавн сять хи о «23» сСинтатичкий олігоамукаветих «Нє МА «Фетссвассх тов оЗоА о «М це «вла ЙО «Ай» ДНК й хтУХ» жтТузна послідовні єть «ев й «КЕЕх СвнуШТачниЙ пазгомукаєсттид «Ннух 0 зас сасоттова ща «МИ хі Ж «лайте ДЕ «ХУ Жзучна паелідавніти «ик Й Й «ЕЛ оСинтВтТичНнийЙ ОЯБСОНУКЛЕУТИА «Ко ЛО атака соках КУ ка 5 хтаї ТО «МІХ дик «КАЛ» ВТУчЧНа пі ДОВНі Ст «м єай 3» опиНнтетТичний пліганунинуУгН «че ЦЕ засзвовтва свЗЗсВеЗВ ха хи. ЗЕ «Аби В
Яке НК ши
МВ цреузчна васчідавністк
АВЕОх ; «КЇйх щВнІШтизчнЯй затговукаваид «ОО» ЖИ? . заззасахта кож ОО ХЕ «ВМ. ЗОВ «о В «ваг НЕ й й хЕїйе Змучна азелідовні сн «Ве
УЖ» сюинзтазичниа затгомуклес ий. ен: В тксатав зедатеа ХА каже в хЕиМи 8В «М» див ше «ВЗ» ВтУЧНа ВИХЛІіІДОВНІКТ» «йо опинтктичний оЛігоНнуквямзтид; «а 3085 песни ХИХКЦКЦй КУ ек «о З дз дик «ках втТУчНЬ ВебсВіданНТст «ех «КМУ пшвнтетизннИ звігозуклестий «де У зхтаццессх сусссвтвсх ло «30 М «аа» а «ВЕй» ДНК що «ТМЕх щтучка послідовністе хЕКЦх й «ТЯ синтетичний олігонуклеотив «Не «Емі МК «І що «12 ДнЕ «ХЛ: и жчНа пибатдивністи «ЕТО» й Й сКййе ПЕНТЕТИЧНИЙ ОЛіКОНУКЛЕЧУТНД,
«Нв З за тиаастиасав ай «М «Ох 3 сидів Ж хойл ДНЕ І І «ЕМ» ощтучна поклідовність
АТ» о циМтатичний ОлігОнУКЛвОТИй «МК» 343 що хЕКюх «дай» ДВК «Сі32 Вмучна поклідовнікте «их Й і «ТЕЛ» оПимтЕТИЧНИЙ ЗПігОонукливВтнА «ку З І спе ииЕ сВксавуцВх 2 «Ам 315 «Е іх «М «КУ дяк «КЗЗ» втУчни язспідпенІсть «Ох яКЕКА» прнтаетичний звігчнуєваттий «ню 3 К
ЗКЕВЕСсІВИВК ХВККЕКККсХ Ко св
ОН НК
ВУЖ Ах хежих ДМЕ «5335 Щтухна похлідавність «Ох «ФЕМ сийтетичний диїгомуказотид «не Її ХВ . зезїзазсак сесозеа с «МЕ ККУ ка ім ЛЕ «й ї2е НЕК І .
ХХХ» оштузвна послідовність «ВЛ й й «КК» сунуачтичний опеговуклестид «НМ Зі? хказахатах закамивай г дЕНАХ ТО «К3і2з дк «кій» гучна послідовність «ЕТО «кйЯ» диНтТятТичниИй бвігонукннитий,
«ях 315 І засзутцата тус ТЙ «ЕМ 5 «кеїї» КО «ій: днк й , «Крим шення пасліІдсдвнсяк «20 й . «Там щянтатиачнний апігоанукаватяд «м «дгсаааага ттЗВІщттсеа Та «230х МО «211» 2 «212: ДНК . Й «ХХХ цтучна паслідовв сук «вик шк «Ех Сдинзатичний олЗгонуУКЛВОЗиД «МБ. ат тттпаааосс гаадгатетда та «ен о
Ех 20 «від» ДВК й й «хеї.»е штучна послідовність ее
Хайді» Симтетичний олігонуклвотид се 21 поко аайсопаао В «діло 172 «Віїх 80 кг12х дих «х11» штучна гпеслідааність дегох «23 пЕнНтТЄтичний елігенуклевтид «ах 1 сттсвитНККх хх кацазЗУ ха «230 123 «вії ЛВ хвїйїх днк «213» тучка нослідовзніста «ВАХ «ій3» синтетичний олібсонуклаоти у «ан 193 зтастостсз стоссетсся 2 «Ще зга хІйї» З «вій ДНК «ВАХ: штучна послідовність «евдх
«МА3х сКНТЯТИЧнНЙ пипігшнуклавзуви «Вб І паса КОКЕКаКЕЕ у
КД» 125 ха
ІЗ» ДНК «ХА3» штучна вилЛіДННіштЬ «одох «ВХ» СЕНТ ТиЧНИВй плігенуНяетТКИ «ках ЛУ чЧахикіяайх Зак ха «Ме КЕЙ «ее ЗО «Зм ДК «кА3е штучна пиклідциність «Ех й й «й» синтитТичниВ пліглнунивитни «ах МЕ Й звухкхкчакх Керн асиХ ке: «з Й «ВАМе ФО хаш ДНК «ДЗ тучиВ паспідениність
ВО й й хакі» КинтТоетечний заіганукасатий ен ЗУ жессвІаВсс стос 30
Емо В ей ХВ «Хе НК й Й «ЕМ ЩЕ Учва полі дивнстх «Ве «ШУ СимтштичиМй опіговуказотий «ще їХ5 тазик ататссвта Ки «Ок 325 «тії» 20 «ках НЕ «ее щтучма послідовність уч «ВЕ е бикІтєтмчмий блісбнуклтУутид «ме Пи сипавацаєх зима тв евапе 3 хай В «ЗМІ» дих «Ві» Штучне мклідсвнікте лю вик «ій Симіжтичний влігануквнивзтий «Ме 138 -х кацазаєтка чних цяцих ІВ «а «КМ То «вйк» ДВК . . «3 ручна попиїдоинікто кю ще Й «ВИ бинтатТичний опігануйлаотий «ах ЗХ Що вивеакаця звехснцоя що «ВІВ З 32 «Е ЗЕ «В «ЕМ дк «БЖ» втуУучЧНя посВіданністе «ЕТХ . й «ака» сицтетвивий члігоазувлеотий хАЦоух 32 сзаассвоЗс свозовуася то «КМ» 353 «иа Й «МИ» днк ше «ЖБї» штучна паситдавнішуєь «во» ще «КМТ ЖМ сянтТатичний пазганукаВв А хи Ж й тата а посада за как я аж 5 «кал НЕ Й й «ЕМ оштучма послідовність «ШИ «КЛ» биктвлуизний спігомуклаутид «Кк 138 зано аах гавкає 23 «але Я «Мк Що «2125 дих «АЖ» РУЧНА НОКЛІДНН КТ
ЕМ й сйеЗа синтетичний знігбнувнке хе хх
ЗеттцсутНх потивхсоцу КУ хе 36 «РЕЯ Й «жо ДНК «ЖАХ штучних послідацність
«ЕВо» ше «ТО3х синтетичний олігонукавотий «ме Ії зргатоавее вста КО «ВЗМОх ЗЛУ ре х; кі» Ха «ЖЕ ДЕ й . кеМух цтучна подлздоВн ть «ЕЙ й . «ФИТх цивтштихнмй опігонуклаутид «Ме 139 зладестаге академ 20 «ЕМУМ ЗЕ хі ха хи ДЕ Й . хіх щтучиа постідоаність «и» «їШУх оциМмтетичМмий олігоМмуклоУгИд. «М» 358 цапасскед спкцепакОя 2 «Ай ЗВ
ВЕ дО «ва» ДНК й й «ВЕЖ щи жчна песлідевність «ЕТ Й «АК ПИНТИТЕЧНЕМ епігенуУКННиЗтТиК нюх 133 «свайе І «ВАК ЗВ хом ДУХ «КІЗ штучна іуслідюнНісте хЕФЦх . «сих синтетичний здігонусноотий кЯіщЕ Ме пвевсевсяи сосссатВсВ та «хм 48ї «ай ВО «аа ДНК «ТІЇ» штучна послідазність «а е й «ШИХ схнТатТихваВ пп гтачжкапвутид хан ЗА каста СОДСЕЛЦКЕ КЕ «у лу «ЖКих ЗО «ках НЕ
«Ве оштумна ноплідояність «Абе опинтТитичний олісвзнукавитих
НМ Ла зказацкакх хайакниках ха «а: З «им «кйка ДНК Й . «У» учив нзснідзнністо «ВЗ: синтетичний Злібвнуклийтий чих» 443 цхлвциаиаа вухнохений 2 коле З «Мк Ро «іш дк «КАХ» ухчиВ поснідавність ее «КйВе пемІтТичний заіговуєненчтий кА ДА сто ЗО З ка: Зах «В їх та «ВВ як Й й «ХА» фтуУуцва носнідавнЗ ск «ВІВ о, «ЕІ сицтВтичЗМиХ олігинукиватай «Не Щ ставав еВ КН
МОм МЕ
УЖ.
Ме хо жадйи ДНК й хх штучна послідовність «М» хЕЕЯх синтетичний слігомукавотид «Мк: 1
Кама КИСЛИХ ТВ «КАП 147 хаВвє «али ДИ «йо ВтУЧНа НИХЛТАКИНІКТЬ «ВВ «АЙЗе опинтиятТичний Заігвнуканиткх «ЩЕ лах савттостне ТеТуЩКККо 22
Ех ЛАВ «Я В
«Мах одне . , «к34» штучна пок нуавн єть «ТІВ Й -КХЇ» ХицтЕтиаинай адпігонУвиоатна «Ок ЗЕ зктсааВах кому хех о «кал З
Хей Й «ЕМ дж ска У штупнх поси давн ть «ТОМ . й
ЕЛ» осКнтТетечниМ знігенукновтва ках ЩА Що сзуІвавасс засос те «сезкюю щО хеіЯ ха «Мі дик й , е833з учи поопідовНЗСТЬ еще о «Ех диктЕтичниМ слігомукиватав «Ані ЖИ «ВЕН Зак то хау ІЧ
Мія 2. се ах й
МАК ДЕ й й «ВМ о Жежмиа послхдовиаете «АПе «ЕЕ ОПимтТатичМий отігом УКкЯВОТид «МК ОБУ І й мжкнлазах садідеалоо ха «Ве ЗХ «ЩЕ «ІЛ дих «Ай» ОВижчЧНа ваклідаанікте «Ах «ВАЗ» опинтатичний ОЛігвнукАКВтий «ЗИ тахкеЕхцну пттоавхкицу ТИ «ее 453 «Й ВИ «КМУ днк «вії» штузиа посвідпацісто «КЕОх «Іі» хинтетячнЯй зазіревукноа ти «Не ЯН асан ета еих КхУ «Вк ха
«А ИЙ «ВМ днк «й33» штучна послідовність «ах «253» сннтотачний заїзгонукаестид «ОО Я Що зІтоссссст соосЗсвоЗО що хм» Зх «аа й «Мх днк й , «хІ3» штучва послідовність «220 що «ТІ3» сунтетанний олігочнукаватид «НИЄ ЗЕ що цежсовзскО хек Одх о «ВМ зв І «айй Ка «йИЇУ» днк , «Е1іЯх штучна послтідавніст кре «Фейхм сиктатичний опігонуклестид «ме ХУ стсзааасте позбав 28 каф 357 кезіх 20 «ал» ДНК й й «її» оштучма послідовнійть «2 «ИЙ» опиктатичмий олігонуклеогид -Мю 152 зплаазсетка аадецаці, та від 15А «аін Що хеїйх дик -2135 штучна насліденніїсть ха гі» «Рй)» Синтетичний бвлігонунлязткд
Я ІК
Фк оачва сс свАМ а «23105 158 «аЯі УЗ «230 ДНК керу» цтучнах послідовність «Ве й дЖййх сСинтетачнай зпігануклеотид «ай І
ЗЕпаєаавто папизацесу 0
«105 150 хіМ То «Рій» ДВК й й «Віз» у чна поклідавність «ав й «М232 бинтатеячний плігануннястни «Ю2 150
: «дк ани 3; шпенаазівиа Халати 22 «ВМ 1 ня «21а» дик «В132 штучна послідовність «ЙО «В23» Синтетичний олігонуклейтий «в0обх 153 Й татіяккодх вахта х 20 «В» НІ «ЇХ» 20 «аї2х дек «13» втучна песпідовніст» «ах «223» Синтетичний сліговнуклестид «в» 153 Що хссзастсяс сесссссас а го хх «ді Й «Вій ДНК Й , хй)ї» штучна паспідовність «Е0 ше «ЩИї» Савнзеазичний пазкоанукаваутид «НН: 155 й тзазватеа зате ТЕ «й10х 155 ке Мо та «вій» ДВК й й «2310» штумна послідовність «ил «йй3е Пинтатичнмий олігонуклиотий «Зах ії54 своддалідац Засоспацюує 20 «кій» 55 «вїХе 90 хеЗіх дих й й -х13з щтучна послідевність «Ох Й й «223» сСкнтатичкий олігонукнзатид «МКНие 165 азццассвов звузвооВес Ки
«НМ ще «ам» В «аїав ДН : : «КАЙ» о ВРтучНа Ліда ВНніть «Ва «мий» пувтатичнЕВ влігенуантиА «НИХ БВ се тазза аггавадата та «ме КЕ іх 50 кейте ДНК й . «КІМ уумна пОслЛіДОВДНіКТе «ВИ . Й «СИХ спамтатичняй оліганукЛЕЙТНА «Ще 5 іеставцасти МКС ди «іо» 358 ета Ку «Вій ДЕ «Ай» УЧНІ пПОКЛіДОВНіІКТВ «вАох поні «ВЗ опинНтТатичний Зліконукляйтий «ах 55 пзнухелеаки Ху РІ «ке ЗВ «хх «Ії дк «КаЗе тучнвВ ПеспмНцН сто «ех Й : «ЖАй» осинтштнсний спібчнукаоатид «хм Й ск вднянк КесВКККККХ ЗУ «лі 1 саке ИЙ «тій ДЕК «ЛІ штучна послідовитсть
КУ кім синтетичний соліговнуклватий «ще ОМ й «азс аваовссса т «Це М ках ХО «ай ДНК Й Й
ВК» цУчнЙй пПОСВПіДОВНУТК ки ЛОх «ВИ» спиктатичниМй олігомУКАВИТИД ка закис кцва хопЕцссЕкг ха
М 155 «21» о «їй ДНК Й Й «2М7х втучна послідовність «ИЙ й Й «В83У спантетичний олігомукавотнА «Мне ОВ стестгвзазгс млагасшх Й «ех 33 -Х1їз га «й ії 7 х ДНЕ Й й «21їх штучна послідовність «ВР «З2їхМ Сикмтатичний олігонукавотид «НК» 373 тевжтоссст саваєстова ВО «Щі 174 «211» 20 «йо 0 ДНК Й й «ЕЖМів щтучма пбллідовнійть
Ач «й» обимтеатичних олігонуклеотид -00х 174 седовекеа кс сада 23 «ват» 175 хаМіх їО «0212» дик «ВХ» штучна послідовність подо Й й «Ф23» сивтетичкий плігонувнентчи хаб» 375 пастка ства за «ах 175 «Ії 20 «Хіг» днк «213» штучна послідовність «кадх й «Еай» синтетичний слтгонуклестид
Нюх 176 тхзозссаст дсссасвст зо «ЕМх Щ77 «231 23 «вій ДНК й «б3йх штучна послідовність сЕкпх «ЕЙ бимівтимний олігонуклвотид «ап» 177 сезатсстав ссттс НК 5 ха МК «Ай В хеіхУ ДЕК . , хаАУх штучна послідов стк. ке окя й хдІїУ сКвитетичний зазгомукавотид «ях З? Щ стсвтсства тостувсстї їй хара ДВ «вії «ах ДНК . . «213» штучна паспідавнісяк «дао» о. хІйім сунтетиннай апіганукаватид «Од» Щ88 щк
СКЛО ККВ ТОК ХЕ ках що «КА ХО
АХКМІх щтухна посадове «ЙО . : «ВИ» сиМІвтичний олЛігоОнуКкАКОЗий «і» 5 асестасста ЗкЕжхоатик 20 «о 151 «іх 8 «кій ДВ . Й «Й о Шуучма пепЛлідоанійть ет хМ «КИЯ» опимтТЕТичНиЙ боігонУнлваТий «МК ІК кажи аєкя хека ху «Ае ЖНХ хи «Уха дих -В13» щтучна пуніданніште «вдох Й «ий 3 синтетичний бижгин уклаитщи ха 15: с«есевсстто сезссстосо и ха 1853 карі 2 «ВМ дик Й . хх хна пеаслідаані сть «Ах «ВМлЛх сувІВтичНий ЗаЗЕ азнукапесттид
-кх 55 ткхваааасеа пес алики 2 «ВН: ІВ «зх Ко «кій» ДВК , Й «ВК» мучна поклідванікте «ик : : «Жайх оСикіжштичний оліконукАОтТиА «ме Ва зазкказава хау кайа аа «ве 355 «зх о якій» дик Й й «тій» ручна ябплідоаністе «Та обимівтичний блігзнукинитий «ей» 85 соекастто ВІКИ ХХ В «иа ЇВ «Вже їй «Зх дяк . «ка3: тення пасВідаВВість «ЕфОМ ше «ккї» спнатетниниИ «пігзвуклеатиа «Му ЖЕ
КЕНЕ Кос КОсжа ЗУ «хх 1АТ «Ка ха «их ДМК й й «ЖК3мМ щтунка послідовну ше «ВХ «ау» сицтетичний олігонуюттив, «НТ» й зване пз 23 хЕМІє КЕ «іх ЙО «ва ДНК й й «КАН» внузнма яделідовмість «ВИ». «МЛ» осювтазЗичниЙй пдіганукаваотид «ЗО 5 ккхсдаска кааацмнНих та «НЕ: 88 «ВЕКіМ то ха ДНК й й «сих штучна посвідовність «Ох пах Сбичтоежуицияй запірну яки)» КиНтТштиячНнях ЗпігаНнукичНиТиЙ
«ни 183 зицізссасс ОбЕБаНКИ КЕ «ЗОМ 156 «ії й «йїйУ ДНК «213» штучка послідовність ха «ай3» синтетичний слігонуклеотид хх ОМ тссатосптсзс зсстоззово 2О «ах МУ «11» 5) «Вій ДЕ «23М3іх штучна послідовність «ЙЛПУ хіх Симтетичмий слігомуклеотид «НЕ 151 сезосоаоса остсттостЕ 23 «Мо М «ті» о «йІ1й: ЛНК . Й хИїйх шчзучка паслідавнісль «Й» й «ВИЙ» Сювтетичний аліганукавоткд «а ЗХ зкехусцказ Звадканкіх їа «0 133 «МЕ» хо «Вій» ДНК «23» штучна тнисідовніякть ха Й «йй3е синустуичний олігбонуйливзтидй «Ан 155 ттЯзувтссу ЗсосзЗопоза Зо «кій» 484 «важ й «гЗ0х дяк «К33 втеча поспідністо «вом Й й «Фі» смнтетапняй апігоцуквоатид «йди Я заапстжвоа татссвакоє КУ «230х 195 «211» 20 «ай ДНИ
ХАН» щЩиучна поСліДОВНСТЬ
Ейох
«ВКіх оспанівтихиий олігонукАВОозий «НО» 335 щ зав ке згозавсазац БАКА АТЕ ха «йІйх ЗЕ «сі» 28 «Й» ДНК Й Й «ЕМ Вмчучна посадив их «Ед й й
АТХ» синтЕзихний бАЗгОонукаво ий «ре 35 тевазсвсаа ВВА ІЗ «ЕМ МЕ ккйй ха «ижик ДНК Й й
Мах щтухма послідовні сте «их «ЕТїх сихмтатичний оОлігонукАвоТий «МКМ З? «ЕК їз «г їх ви «хай» ДЕ Й ; «ТЯ штучна поплідовмійте чИЖИ диМмІйТтИичнии ЗпігОопуЖНиУТИиХ «ех УК злети а В «хе ММ ха «3» дих
ЯКА щТжЧНа послідшаніть «ах о, «3 опинтитичних звікпиунннитей ка зівхяцапих сесухссояцх ща «ах се ВВ. хх пе НК хадЯ» штучна послідовність «Ввох й
ХЕ сувтетячний затгануУкавотид «ме З
Іжа КцЕ ОСТ ї «ве ща
ІЩЕ са «ай ДЕ й й «еЖУ: Бебучка послідовник ше «игох ка23» синтетичний оллгомуклеотид «аби А І тссссзттст тозтогзовс 20 «М 0205 «Ві й хаХих ДЕК «213» штучна послідовність «Вабх й «323» синтетичний олігонукластид «ень ОКХ тЕстІтатссс сзстстТаЗЕ 20 «КД» 293 «ВВЕ о «М3йх днк «213» штучна послідов сть «ее0х Й «203» синтетичний аз спмукпеоткА «В0йх 203 стоцсстттст твісссоаї З «ЕМ КрА «клі» 20 «Вій» ДЕК Й Й «Е1їх штучна послідовність «й по Й Й «й2йх опинтатичним олігонукавоткА «ем Я ткасазцстас птах ли «він
АЇУЕх 20 «АЩіл дк «?і35» шШтучма послідовність ел» «РАХ» пимтятячний злігонукнястид «ох 205 ке ках вес го «ій хаВ хв го «237 дих й -2і3з Штучна песлідавність «2ЕОх «203» сСинтетичкий олігонуклвотад «НН ЩЕ тозосатстс готово сЕ те хаМмЕ 207 «а1і» В «вій ДНК й хай» цеучна пеасатдавність
«ого «сАйХ» дюнтєтичний опігЗнуклеЗтид «аю 202 псатактевау сахакстлко 20 «апа ОХ «МУ 25 «г3З2х дик й «КЗЗ втечна нослідавність «ТЕХ й «ккЯ» синтатичний звігозуУклеотид «арх ТОВ Що тавсттхакІ аг КУ «е«йіббх лаз «й та «гійх дик еєкі3» тучня паслідавнасть «ЕЕ» «2823» свнтатичиний зизгонуклзотиай «ння 205 Й такт ктцяк ТтуКоКсВкнИ хе «ех 53)
УНН
«Мйх ДЕ «213» о щтучна послідовність ква «23» сКинтатичний ддігонуклеотид «00 810 сазасз3сззза ззвссацню 23 «М «ах 2О «ВІЙ» ДНК Й І «ВМЯ» диучна послідовність «23 «ВАЗ Синтетичний ааітгенуклазтид «ах «тскххскацт асадаздайх ЖИ «Не ІЙ «іі» 20 хгї2з ДВК «йї3х штучна яоплідовність
Уа -«лй3» синтетичний злдігануклосптий «бю М звстсвстсс спа асла га ягіОох 213 хай а «й4й» дих
«2333 щтТучна послідовність «ого «АйХ» сянтетинцяя зпігануклеотид ках 21 сахззчавсх свсхсстссВ їо «від» ЛІЯ кі3їх 50 хезїд» дик Й й «-2432 Штучна песлідавиість кгох тай3» пвНТЯЕТиЧНЕЙйЙ слігануклестид, «3800 318 захсадсаха пезвстсвсх а са» І «ВАУх по хаійх дик -2і132 штучка послідовність хх «223» сСинтетичкий олігонуклвотид «ще 01: зд тІвссттстОг заці ФВ ках 216 «віз до а, лпнЕ ххх ДНК , к21ї» штжчма послідовність «Ви «ВУ» осимзетичмий олігонукавогид «опе Ів ссззавісвс сМмлаєаац, та «ЕН ХМ «й1іх дО «24аз ДНК й й «ВІЇ» длучна поклідавність -Ййх «8аЇ» бунтетичний олігонУклевтид «а 517 чазехяскав авассаксках за «АН 218 «ВКхх го «212» дек -«йі3» штучна послідовність «гг0х «ККЗ» сянтетанняй алігануклестий «30 3 схсктцховв статсавоЗО 25 «КМ 219 «Ей ла
«йде ДЕК й «1» Зтучмна поглідовнісль
«Й
«Ех Спинтетичний олігонУКАВИд
«НМ ЛІ такс зухзаастах ЗИ «Жібх 22
«К3х га
«Рій» ДН І кЕЗМУх щштучна посліДОВНСТЬ оо» що детйхМ синтетичний олзігонукавотид
«мн ХО атзааасойс хто го «Е їх 2 ІЗ 1
«21їз 20
«Ай ВЕ
«13» штучна воглідовність
«ВІ и.
хабоух щимтетичний олігомукявотид
«юю 241 зсстоватов ааспаєткох 23 «ЕЕ ВИХ
«1і1х
-212з днк
«КАїУ шиучна паслідовніхть
«82Ох
«айЯ» шЕвНтТетичнНиМ блігеонукаватед
«ЗО 855 пкаскаястх чавакчяВНся за «210» 223
«2145 о
«авг днк
«213» штучна песлідоиність и»
ялкї» синтетичний плігонукляозтих
«ах ТгЇ тесасувсс сссзЗастох 70 «М» га
«ай ка
«Вій» ДНК
«ії» шнучна послідовність хх хеййх синтетичний олігомуклвотид
«МК» 224 сааасатсся стастессса то «У лах
«Т1їз 20
«кій» ДНК й Й
«23ух щтучма послідовність
«пздх ШИ
«Р2їх Ццимівтичний олігонуклвотид
«ММ Ки мм псада сабссаєстає 20 «Ми 285
«8531 га
«ій» ДНЕ
«ВМ.» штучна послідовмість
«лад» шк
«ФЕйх цимІівтичМмий олігонуклеотид
«п» лив сесБадевЕе соасадасакх 2В «ЩО 2
«3Міх 20 таіб» ДНИ й й
«Т1йх ощтучма песлідоамість тЕдо» ше хййХ» сСмимтетичняй зпігяаВ Укпсалптий
«вс» 225 пнннинлаило ект Зса В «й» 5
«Щи 20 ке30х дих
«ії» штучна послішавністі
«ех Й й
«-й23» сСкнтетичний олігонукиавотив
«НЕО 25 ск ЕктЧкк пеКЕСКЦНКЕ 20 «210» 223
«ВАК З хай ДНК Й х2і13» штучна послідовність
«вх хй23 Кинтетичний олігомухаеотид
«Ме 228 спотасстост ІТС сСост 23 хиМми г
«Мі 20
«вЯй» ДНК . й
«ВІ» штучна послідовність
«ай
«23» пекнтатичний олігонуклеотид
«во а това ка типи уси 2 хм Ох
«211 20
«даже ДНК Й Й
«У» ощтучма поглідовмість»
х. іч БО
«ВЙЯж Симпатичний блігомуклевтий
«щнк» 233 злсзассзово дсадеаєьа Й «ЩЕ 83
«11» ло
«йіб» ДНК й й хаЩ1й» штучна послідовність
«аа»
«ВИ» осюмзетвчний баігонуУклестид
«ВМ 237 зажестса вссававсая ха «830х 3 каві» 28
«24й» ДНК й й
«Кі1йх шзучна погблідовнісль
-220х
«ВИЗ» оСЕнтетичНиВ влігзнувлявтий
«00 233 . хазауккккк «екхсаркка 20 «Віз 834
«АХ3х то
«Л12з дик
«23 штучна послідовність
«КОХ й .
«3 синтетичний алігонуклестид
«Ах ТА тезхсіщнв ЗбтостсстЕ те «ад К3У
«ай 7
«21їх дик , Й
-їі3з штучна посиатдавн сть
«ау й й
«птах сбанзвтячний зачзгонукааатид
«Мне 23»
зайтсстоят сехоазаих їй «дій 255 кеЗіх га
«кій ДНК Й
«АХ» штучна послідовність еайх
«КйЇ» обкмтатичники пслігомуклаотид сю 35 азасксткааат «как 2
«Му ЛУ
«М о
-с3ік» ДВК
«ВХ Вручмна послідовність
«ай Й
«ВЗ динтетичний олігонукнасзтид тай» 237 птссацсаца ааасолсекуя Р «віх 735 кгМіх 50
«кій» ДВК й ;
«ТА5х Штучна восвідовність
«їх
«АР пимтетичний зВігзнуєдептий
«вх 23В опсстмє васпоанийе 20 «КМ» ХУ
«іх 0
«212 дих Й й
«кі3» штучна песлтдавусть я й
«223 щнтатанняй ппзганукпзатид
«Я00х 215 Й здстустткй зутсааТсКг у «2105 280
«са 7 х23йх дик
«2135 шщтучна пеклідовність кал
«ФТ3х синтетичний олігонуклеотид
«НК: 240 засттоссзс стоавоватоа 23 хаМм сАх
«ім 2
«2122 ДНК й й
«Ім цзучна послідовністк
«ад
«Я» опкмтетичний блігонувлозтид
«М в хкаклжтати «ххх а «ВО» йай
«ХЕ 20
«К10» днк
«13 штучна послідовність
«ЩЕ
«вк3ї» сивТтетичзий слігануклвеотид,
«МНК ТА тсзастттсв сзаассвося го
«830 543
«831 2
«вій» ВВЕ й й
«2Ї3» штучна послідовність сей» нище
«фййх Сбимтетичний олігонуклевтид
«п» 243 тозссадаак пахеокалаай 2 «10 244 дв)ііх 20
«іл» ДНЕ й Й
«її» учма поблідоямість
«йй» обиміатичниМ опігомуклеотид
«-Мю: 344 адагослаза гадав 2 «ВМ АТ
«гії» 20
«8122 днк й й
«АТ вУчЧНаО йпблідавність
«ебох
«ККЗ» сСкнтетичний опігонУклоатид
«ВОМ 24У пкт кс наука 5 «йо аву ге и хакі» дих
«213» шуучна послідовні стТе хВлік»
«223» синтетичний олігонуклесотид
«Я уяв ззататстзоа ззасосс399 5 «МЕ Та
«Ра В
«Що ДНК І й
«Мих штучна послідовно сть
«ВАХ»
«МЕйЙх спдюзатичний оалігонуУклаеатид
«НИ 247 зсгтазаата стос тази) КВ «в3е 245
«Зх го
«кі2» ДВК й й
«вій» о щіучна йоплідовнідть
«Іо
«КИ» оСюинтятичний злігонуклястид
«300» 238 соасатлет сазатацзай ха «і» 249 «ха1їх 2 «фе ДНК «В1ї» штучна паслідовністк «аа» «ХКИх пинзазамнаий аптгомукаваткА «НЕ 243 задззазвстаз зеставааза То кам я «д1їз ТЗ «Рій» ДЕ , й «МІХ ітучна послідовнісли «в й й «ВВ8Ях Синтатичний олігонуклейтнд «Нм 250 акакттдаац аЗазгадактй 2 «РіО 251
ІТ го «ай» дих й й «ї3Ує дітучна ноблідовність
У Й й «ФВ ХУе пинтетичний олігонуклеотид «до» 5 зинпігухалоє воваваив: 2 «вій» 252 «211» 23 ких ДНК «233» щштунвЗ паслдоясєть «гг0х «223» саянтетиясний сазігонуклостид «ММ ач десскгавоц хвутстсау го гій 253 -каї» йо «Ей ДНК «ЕМ» штучка послідовність «ИЙ «ФЕН» оСимтетичмий олігонукавотид «Нюх 253 засзозазоа поасзвовайа 23 «Ве 5
ЗІ ШК
«в й» ДВК Й Й «ВУ» штучна поклідовнікль ка 2Их «2232 Синтжтичний олігонуклеотнА
«8000» 254 Що задувссаай чазаЗахУкх а «ййх Й «Фіг ТО «тій дяк Й й «33» Штучна песлідавність «Тх «ЯЗ спинтаетечний апіганукпеатай
Ах 255 паза сскх кети К т «Ай» В хау о «іх днк «й132 штучна посліжНність «агох «ай3» синтетичний плігонукнзатку «хх 5 чекозиасяч чвоваВочЕс То «ох 257 ке 5 «ай ТО «й 12» дя . І яеі3» щтучиа послідовнлІть лай ха піие «3» синтетичний олігонуклеотид «НЕ ЛУ тсззатотст соозповса 23 хм СЕ «АКіМ йо «212» «ДНК й , хиХйх о црузна песбаздоавністн «ай» Й й «ЛЯХ о сиктатичиий оаліганукавоткд «Нр 255 зацаацвацаа хх цада га «ЗЛО З чих са ке 12 дик й й «2Е3З» штучна поспідовніст» «ЙЙ Хе пиититичний олієзнуйливзтий каф го кхчсіІчассас ТЗОВ 30 «кіз ж «Вії Й «21» дк «233 дтунна посліжавність сут жде і «їх сдинтатичний блігонукизотим ках ЩО Що ставсххтхсво вавассвссВХ «о «ВО Ві «ВАК й «ї10» днк «2132 Щтучнаи послідовність «Ех о , «Фіз смитетТиЧНИиЙйЙ слігомуклеотиад «ацох 253 й зусжсхцков тесхвЦЦХ 20 «Мох 282 «й ВО «Тійи ДНК «213» штучна послідовність «Ех . «223» Синтетичний олігомуклеотид «ть Ву Й сезсстотос стазоозоза 23 «Щі 23 «211» 20 «ВІ2» ДНК , й «ВМ» штучна послідовність «йди й хвайх Синтетичний спігомукавотид «Ну» 253 й заззастгває міаатовлад та «Бу 53 га НИ «ай» ДЕ Й Й «ФЯЇ3» учна поклідовнікт» ках Й «йй3» Синтетичний Вліговуклзотке «ав оо дка Й тоцивІпихо ване тну То сейм йБУ хажже й «232х дик й «К33» штучиз пасаідавність «гг0х Й й «2235 сиутотачниа алігавуклостий «Не Я Що
ЗБогсжтІве сте 6 «830 355
Мі» 2 -саай2 ДНК хи» штучна послідовмість «ах
«йк3» сицтетизчнай аптгоанукпестид «а Бе тсззсттсттї ззаттзасЗ НІ «ах 257 «Аа й «К3ИУ ДНК «й13» штучна послідовність «КОМ й й хій3» снитеунчний плігомуклестид «ЯК Т6У
Фзосазозза засос 20 «Е ру У КЕ «вар а «ЕВІх днк . Й «213» Штучна паспідавністм «во 2. ках СивнІетичний аліконукивогид «МНке 55 : зада я тхтккавцг аа з «аМх во «1їз га «їй ДНК Й Й «Мі лучна поклідовнікть «вх «Фе Синтетичний олігонуклавтид «0» В ацаастедов гуаахуадає 2 ший ЛУ «ре го «-212з дик Й й «Кі штучна песвідавність «ох «й23» свнтетичснай «лігозукловтид «Ох 2755 хЕссауцкаа сіяЧнаККК го «210з 27
СК За х х А їх Ж ян хіх дик «213» штучна послідовність «Ех кгйЯ» синтеатичмий олігомукхлеотид «фе 27 сзсацієсва совет то «МУ Ху: хіх а «свй ДНК . й «2Х3» Зпучна полідовністм
ХЕ» той Синтатичний заіговуклеотив хан туХ Щ «свят ася двцасВциі Кл «а 273 «ВЖЕ» й
ХІМ днЕ «МУЗ» штучня послідовність «Ве «ла3» синтетичний патгонуклестий ав УЗ Щ ззазаезаЗ зоазазасха то «ЕД дта «аЯЯ» ях «її НК Й нЕЩх» фтучна поспідовністи «ВаОх й «ВИХ щувтетазвий зазтовукавотид «Ом й сезоаЗеяаВе сЗстовосоВ У «Ех ух «хг «еїдь ДНК бок ких нтчна пасиїдавиЗ Те «РИ й «ТЕЖ оцинТШтичниЙй опігонуУКАВОТИЙ «КЕ лу
Уаскакаций косо З «ВН ІВ км хо «вій дНЕ Й й «КА Щіучма поспліІДОВНІКТЬ
ДЕгОох «КК3 лиНтЄтТЯчнНЯй ЗнігзвукаеЯятий
ММ ТЕ хви КК ККУ РІ «УЗїх ЗІ бе 5
ОК ки «8325 МК й «833» штучна писміфанісяь «КМ «ЗИ Ум синтуштТичнНий сизгОмукаеотим «НН Ту стЕТаЗестеВ сстсссссЗ т «Кк У шах «Ме» анк Ше «ХАЙ» Зтучна васпідавнієть кегоух Й й
-сЕкл3» пинтетиячний заікзамкаватид оо» ФК с. спот Зк асх го «КАП ий
«3 8 хх днк й ,
«33» штучна пасвідоВність кегухм Й й сікі» сунтетячняй длігануквеатед ках 975 Що шва осях «о «-й1йЗз ВО
«Ей Й
«г3їх дих .
«213» штучна поснпідавнзсть
«Ох
«Ї323М скктетичний слігонукивоТяд
«Не ВО Щи ттстсвККуХ КОККуКсВКя, г «відм хВі
«вії» дп
«йайх днк кх2і3» штучна послідовність
«ВИХ
«83 Синтетичний слігомуКЯвОТиА
«щи 28 пк сзззпсЗ пото сс т «МЕ КН:
«Аа В
«вай ДНК . Й
«ВМ» шручна посліДОВНІСТЕ
«402 .
«ВАЗ» опентатичний псаігонуУвлЯпТИд
«а В? й асазгазваа з3ззаавамла ха «В: 283
«КР то
«айк» ДВК й й
«АЖ» штучна послідовність
«г й
«йй3» Кинтетичний Ззпігзнуклнотий,
капох ої свучекзасс поту 20 «2310 284
«й В
«Я41ух дих
«КІЇй» штучна послідовні «ВИ. «Ех оСудтеатичний олігонуклестид «М» ИйЯ сФажсвссюва пещираоос ФО «КМ СКХ «в 25 «ат ДНК Й , «ВІЯУ цтучна посадова сте «оо «ЖЖ» шимтатичний опігомухаестуд еще СВІ зтасватахет зсвзасодас 2 «ЕМ ХЕ «да Я «кої» ДБК й й «иКих штучна паслідаввіклх хай й «ЖИїЇх щантавтичнай дазгОнУКЛАВТВА «З» СВБ зам кіаатеакай ХЙ «М ТИ? «Ед ха «Кік ДЕ «ВЕУ» оЖтучна поклідовніять хИЙ Же обимтктиений олівзн УКИКУТИД «аа» ХВ; киВТНиуМ ПУБаЛеКеИХ 2 «ие БЕ хек и «тво дек ек втучна песліджвнікстзх «ще «АХЯ СЕН ТЯТиЧНЕЙ нігенуванетий «ВОМ СЕК ха СКК ККЗ ли «вій ЗАЗ «ВАК В
УЗН
«ії шуучна оасвідвинікта «Пе хЕйХ» синтетичний злігонукавотих «0» СНО тавастесвяс стВсОВІсто То «їх 3
Мі» ла
«аКй» ДНК І Й хЕїхх штучна послідовних хІїхх дивтТетичний сдігонуклесоатид «Ні ЯВИ сздвозазза заатКа то «ЩЕ чу «ик В «Фо» ДНК Й «КБУ штухня васпідавність «Рей й «КЖХ» щцинтатачмий алпібануклестнА «ан ТІ Щ
ДОП тет З «ОМ м «кіз да «Ай» ДНК «Мі щтучна постить «ВПУ хоіййх синтетичний олігонукавотив о ЩЕ жажтссссте патоссма їа хм ІЧ «клі Я х Ще нНк . Й «МИ» Вжучаа пасвідовність «ек «ЩТЙМ синтаханнай датгонуклестий «Нм ВЗ
ОЕМ КТО АБОАЦНАХ ЗО
«Ще ЩА «іх о «кіно НЕ «ЕК» Бучма послідовність «ВЕН «ВИЙ» инчетичний сятгомукаеотид ерихе йИЗа застава сазеотавеваа їй «ах 95 «Мих ха «к3Хо ДВК й хкйЖе Щтучна поплідовні тк «ЕкІхх «ККЛе олюмтетячмий олігонуклвотид «вою» ЗУ давав садом азвска КО «й» 29
«ім о «АК» НЕ ха.их штучна послідовність «ВВП І
КЕШ» сумтетизний олігочукивотий «ЯМ СЧИ тсзсттозвх двазсоВсте ТЗ «да» дах «і Я2 7 «ій днк екід» ВтУчни послідовність «Кох «КЖЯ» сИНтТитТУЯЧчНяЙ зпігсзнекнязуни, «Я 35 екс ЗаскиацаИ «й ов дО «КККи ЕВ хакі» дик «ВІ» щтуЧНа прилідовність ха «йй3 синтатичНниИ йлігануцлетна кв са автсвссуце павзЗазадяа т «иа ЯВВ «ЕК т «М дик «ЖхІ3» тУЧНЯ песпідявністе
КР
«Жах щиНтТЄтТичЧНМе олігонукНнеивтий
Ак пак адкЕ КВК лИКиа т «ва «вух «Ії дих «Жі3 штучна пислідявнікті» «КК «АХЯх шиНтетичНниЙй Зпікзнуклявука
ЯКУ Щі кавхзЗс хаос вни т ема М юр А яшХДКюЮ хи хихах ДК «13 жу Учня пожлідяність «Не «ЕЕ сивтатичНний опіковунливтих «ее зараза зо й
«ЕМ ЗЕ «хи ДНК й Й «33» штучна послідовнсть ках Й хКХВ» щантетвчний зпатгомукавотид «Нм ЛО сссзтссста астодества ТЗ «ав хе «Рай «ЖИМ ДНК Й . «23Х» штинаа послід сь «ЕН о Й
Хей» свнтТетизний зазгомувавстий «ВО ОВ сосна сях зигота Та «ЗМУ ща «Ек В «КЕ ДЕК . , «КІХ» ччУчна посзідоваЗ ск хлВе «ЕТ сикмідзинняйх апітонуклЛвоТиА «ММ За пил Заст саци КУ «Ей ОХ
ЖК ж
Ух тк «ЙМЕе оХтучна поклідовнійте. «Ийе бимувтичний олігонуклавтий, «й» 30
ЯЛИНИ КОКО В, РІ хай ДОВ ха да «ЗМ дих Й й «Кай» туУЧНЕ песніДеВНіКтЗУ «Ох й «ей сину чНК ср ачУКЗОТИА «НЕ ЩОБ цс ЧК сяли Зо хх 307 «Й КО «вій ДНК
ХЕ» Мжучна послідов тИть «ВО й «ХХ сентУЄТЬИЗНиЙ зЗігомукаестид «Ка У цактетееимт зга т
«Раю 308
«с1іїїх 80
«Жі2з дих
«КМУ» фтуєма яослідовність
«Его Й
«Кв3» пПимтетичний зліронуклезтий
«ау» ОВ сашцажтата зсаєсаня 20 «й ЗОВ
«іх 2
«212» дяк
«й штучна послідовність
«2»
«КЗ пимтгетичняй зпігсзнуєниЗтий
«300» 305 залосазлах пізстзайла 23 «ка» З
«211» 20 кох дих
-«хії» штучна песлідавність его
«3» сЕНТЯТиЧчНЕЙВ анігануклзатий
«Мх 10 с. твсстцекі кс я км «21053
«вік ла хЕзйх ДНК
«213 штучна послівзовність
«А ЛТЕх
«У3їЇх синтетичний олігонухлеотид
«НН Зх Що схссссзозт зосоззапсоз 2 «ЕМ 31:
«11» 2
«Вій» ДНК й й
«ВХ» очучна послідовність
«лк
«КРЯ» пинзатичний блігомуклвоткд
«40» 317 Й пуактиастт заатвазаєй 20 «ев ОЗ
«211 2 х212» дак
«213» штучна посдідовність
«ЕЕОх
«йкі» синтетичний оліговуклястий
«00хм 313 засос аккВвссі аа 2
Аа а ка Че г З «Мих дик ккйї» тучиВ зеспідаВНі сть «ТІбх й «КАЛ» СННТЕТИЧНИЙ ЗМИВ УюЛе тА дай» ЗІ ством тузиЗсоЗсх З «ке ЗІ хи» и «ММ Вк «ХЇї» щтТуУЧНВ ПОСНЗДаВВІСТЬ «ТІВМ «ЖА3 ккнтетичниИй зазеанУкВочтНА «що
ХЕХКІ І СКК КУ
«хай» ЗК «ЖАЯе
КТУЕМ дик «Ті» втучня песміщовністК «ЕД й
ЇХ синтштичний запітонуУклвачти «Ме ЗІ азам мае косх а как ЗІ « і аг З
Кан ДЕК й . хЕМіх ЖтТучха послідовна оть «ІП» «аКЯх Ким атичний ОлігОомукаютий «НН ОЗ? евсвоста злак во «т Ще хіх до «іл ДК «Хм ЗчУучна пасаідавністк «одоух «Ва: динтазичНий Визгонукавотид кі хват кепка Кен «ий» ЗІ «Ве Й ду дак «КА» ВтТумнНВ послідовність» «сх «023» скит уУЮЧНИЙ ніг аНнунтий «НК БЖ попа зноа чеслевикаа го «Еапю БА «ех ЩО скій» дик «КІЛ гучна пеопідевністя «ЕК Й «КИ» обюктетуичмих олігомуклямтий ев 355 заданих хааамзиа та «ВИ. ЗКХ «ем ЗЕ «й ДН «Вій» З учна пислідааніть «Роух шк «ХАЙ ПЕНТЕТИЧНИМ ааігонуУЄЛеТИДХ ем 35 зчеавайккай мн ке «ВО» ЗЕ хЕЩух «лай» ДИ «Ві3» чна НОхлЛідДвАНіКтВ. «ак й Й «ой пинНтжтТИичЧНий БЛІГОНУКЛИВТКА, «в ЖК . ясадавацтя зпвуухоаккй зо «Я» 353 «Вії о
ММ НК
Неї» штучна вЗзсвідаввість а «сек» Синтетичний чаіговуєлестий ох Ж твозижовкс тота к ще
МОМ 353 «КІЛ хеЩіх ДМК о, І «13» ощдтучнна послідовність «ЕК» хх сиктатичмай спіганУкиитад
НК ЗХЯ сеежсстоя сосеВОБсЕ ІВ «ЕЩщЕ ЗИХ хіх ЇВ «від» ДУМ й ха» штучна ПОКліДвЕНістТЕ ке й Й «вай» пиНнІйТичний здігонукЛвОТид
«НИМ Ех масмщаве мила Її
АОУ ЗІ сей а «АЖ ДНК й , «ех цтуУухна ПОСЛІДОВНІ
ЛИН с х їх -
АТОМ синів днний апіганукаватид я ІВ сота гажацаа КИ «ЕМ 327 «Аж» хЕих ДНх й . «Зх шщухий послідавні см «АВК «ТЯМ синтетинний ай ганукалвоутна «ати ЗУ сс стто секс ТО км ЗЕЕ «кі й «йййе ДЕК хЕЕЕ» штузка послідовна єте «ап хКИйУ Суимтатичмий ОолігОомукАВОотид «Ме ЗеЙ сстдсазаза завозЗааве та «Ве ЗІ хів дО «РІ» ДН «ЖК знучна песнідейнікть хай о цинтатичНнЕкй вліктнунлейтих о ЗЕ яптубтеакике кока кахх КІ «иа З «М т щхЕ М х дик «ка3» туУучна яподідчнністо хек ккд ОПИНТИтТИичНнИЙй зпірзнуипявтий ках З хаесовжиов сон то ке 351 «ка «кали ДНК хіх шЕжжнна послідовні «ке й хІйх синтТетизний слігозуклаотих
«а 35 зі тсвав меамлита за «КМОх З кій КЗ «байк ДНК «ЕїУ щтучна ВюЮжаздавні ск «Ве й «ФТ0х смиктатичний олігонукавоїтид «Я 35 зітасаацта застала. КУ «Ох ЗХ -Е ЗІ» а хо4Ее ДЕ І «ЕЖИхМ щтухна пеослідОВнІ ск «ВЕ «ШИХ опиктетичний олігонуклвотий «Кк» «Ще «Ех ЗО
Хм. «Кік» КВХ : ; «45» Втучма послідовність «МОХ «ЕВВ пимтвтиммий олігонуклезтий «оз 33 земна мих ВУ «йАЛе 335 «БАКУ «ЕМ днк «Ка» ШТУЧНО ПеслідсВНість
Ах таж сЕИиТІЧТЕЧНКЕВ зпігацувааатни хек Я хЗстссснеЄ вет КХ ке «20» 335 «ШИ «ВИХ ДНК «Ех штучва лесдідовніста» «КК» хВйих синтетичний слігозуклаотий «НИХ 335 заасазвиа шсгассева. ТО «ОЗ йТ «КМ хо «йїх» ДВХ й «ЖЖ штучна послідовні ув «ДЖ
«В23» Сунтетичний олігонуклястид «Не 337 застава стзбалтах т «ВМ. За ке1їз о 210» днк що «13» ззучна поглідовнік»и «вай» пюнзтазичний олігонукавиткА «ННІ 338 делла згстллст зи «и а
ЗУ го «ай» ДВК но ній : дл «2135 Злучна послідовність «лкодх «23» Синтазтичний олігонукивотнА «і» 53 щфосааксої згсадаадаца 20 «Ра 3 ч«Е Мі 20 «тіїх» днк Й й «КІЗ» штучна яолідовніястю» «То» «сккХ» пинтетичняя звісзнУукниотид «Об ЗО зсззазазай засос 20 «хо» 143 «й то «23Міїх ди «213» штухчих послідовність как кЕй3х синтетичний олігонукиватий «НН ЗАї сггазавооз сзаззодозаа то «ЕМ 54; «311» 2 «2Бйз днк хв3ц» шШтучнз послідовність «Й Й «ВТХх опантазиавний плогонукпеотид «НМ» 349 аадсссазва таза та КІ «ВМ «3 20 «2312 дик «233» штучна поролідовність
«айЦх «2215 скнтетичнния звірануклеатид «400Ох 345 звкцезиссх сосна 20 «1» 34 «й 76
Вій» дик «ві 3 штуЧНаА пеклідейність хх «вй3 синтетичний БЛлігОнунляєтий «Ще 344 пироицаа ппаязатаку 0 «ЩО» 335 «83ім го тхіїй» ДНК й «ЙйХ3е штучна поплідовність -еЕдх
АХ й - : «ЙйУ» опимтєтичний олігонуклеотид «ВІкух 345 ідоли Сад 20 «Ві1по 345 «11 йо «212» дих «213 Штучна послідовмість «ах «223: цЕНТЯТИЧНКЕВ олігонуклеттид «кацох За зутацацаа) азЗаатеках 20 «во» 347 «ах о хі» дак
Зх : : -ві3» штучна послідовніть го» -кйї» синтетичний злігонуклявзтий «ЯМ 347 зсавзкЗссаЗз чааасайзАй 20 «210 358 «а ТО ха» дик «2132 Штучна пнохлідевнікть «ЩО «ййХ» синтетичний палігонуютитий «Нюх За тазасвоспсх зстсзсссва у х210х 3аз «-2411х 7 «ВАй»и ДНК «233х дтучна посліжавність сто
«Її» пуимтетичний олігонуклисти ев» За іст твах віск аЗоих 2 «Вапи З5И
«іх о
«212 дик
«ВІЗ» зчучка поглідовмісте
-220х
«3» обюмтетичний болігомуклевтий
«005 350 техаєтжети айелеаемх ТА «ВКОе 35 хе КО
«вій Ди
«213: цтучна послідовніхль тала
«2 Синтетичний одігонуУКлеВтТНА
«300» 351 штжссаккайк птах КО «210» 35Й
«ВАК Ко
«312» дак
«ВРУ» штучна зеплідянніякть ках й
«йк3ї» синтетичний злігонуюннтид
«АПУ І;
тІсссттса ссасайпося о «дах 354
«ВА» й
«23 дик
«83Хх штуцнях послідовність
«Ве
«235 синтатиннай слігануклавотид
«Я БЕ
«тЗшсесста пови ів КО «МІХ 354
«й 8
«ЛАле ВК
«ЩИХ штучна послідовність
«ах
«ЗАЯМ осивзетичний слігонуклеоткд
«що 354 зсказвеаде Зацацеїса то «ВО ОТ «КМ 25 «2» Да
«Зі» щЩуучка посдійовнтоь
У ЩІ о «ВУ дмитатихний олігонукивОоТад «ре ЗИ ето ІчЕвІ оса у то «1Ох 355 а 7а
ЗАД КО. «іі ДМК й «213х штучна послідовні кт
ХЕ фрх й «03 синтетичний слігохукавотиав «нє ЩЕ Щ ччетссснсї ЗассжсеВЕЕ Ж «0» ЗУ «ВАМе Й «ел ДЕК «213 штуччв послідочність кох «ий» синтатичний слігозуклестид хЯіНтх ЯЩуУ х. к «ух
ММтаозоза сце 2 хе ж «11 й «Вали ДНК й . хи» штучна посасдовнітгю «ВК й . «ВИЙ» сувтатичний плігомеУклеид «ННх 355 ксзастаавоти скаттвекка а «ВО З хклрУ жо «райх ДК й й «ВЕ» омручна пчодлідвеанікть ки З ще Й «ВЛ Синтетичний олібзнуклнптий ке 358 фсасвайссй севтссссїяй во «ие ЗБ «о Я «КЗ дяк . «хі» штучеЗ послідов істЬ «зов» що «ЕТ3» синтЕштТичнай питранУкиватид ханке ЗО тастевеста пава що «Ми У «ЇМ З)
«Мі» дик . Й «ЕКЗ» Виучни нислідинністе «квох . й «Ай опЕНтТАТиЧНЕК ВЛіГеНУНЛЯЄТИАЕ «ЗО ЗА хякукАкках кккайккикх ку «Ще УВА хх о «дк ВВЕ «13» штучна пеклідввніктТе шихВх «ВИЙ оцинтатТичНний оЛіГВНуКАКаТКу, «й» ЗБЕ таккакацкх ЧикжКККНю Та «Ве НУ «ЕХМю й кала ДЕК «еі3» ШтТучнв песвідзниіст
БУ де ц . «ай3е синтитичний Зпігенукнястий «ВЕ ЖАХ й зчанлацчазаа встовехкя ве «ка ЗБА «Вуж В «Кф ДНК Й й «АРХ» ТУЯ Во ват»
ЕК Кя й
КАК Хю Хвтатинивй патгонуклестид он ЗВ й севтштІтІВ вгосссацаца. ща їх ЗБЕ я ках а «лаб» ДЕ кТїйх щштучма послідов суд, хАшМе . Й кТТйх сиМтЕтичний Олігонукавоий «Кт АХ жестсевссоо засос то хажіе 55 ке го «2 І дих Й -ХАЛе штучна песпідванійтв кодом «йй3» синте тичЧНеМ олігенуввлунА хх ще
КОНЯХ ЗсцЦВакУх ку
Хей 357
«ші» ЛИ «іх дик «Каїн ВТУЧНЕВ пПеСПіДаКНІ Кт» «ТО «кл» СЕНТ ТВЧНИХ антТКчнуУКТааТИЯХ хв ЗБЕ «й ЗА «3» В «Зм ДК «КА3о тТжЧНе пеклі ть «ЕОМ й , «йКйш осЕнІшТУВЧНИМ длігонуклеЗтНИі «Ох ЗБЕ Ще
ВІДТІК КХЕККВОКВЕ ко «Мах З «их МО «Мі ДЕК «33» шеучзий послідовна сх
Ук
ЩІ мотор ситий пуд ниж ух мати
ЄТТ3м снтЕТИЧНИЙ ОлігОЗукиаотив ха ЯКЕ «МЕ Я «КЕ ло ккїйУ ДЕК Й І «МИ Бучма поОсолідавМіИте сю | Й хи» пиМмІшШтУчник ОопігОмуКоМмуУТИД «ММ ЗА зоасалааак збе камах ха «о» ЗУ ха ще «ий ДК «ФЕЇ» штучна вохлідевніктв. «ТЯ» бинтятичний олігвнукАвотнА хащах скаскоссяс сясучссвХЄ з «ий ЗХ «Вже ТВ «КМ днк хафїх штучвя ВСАА Вас» «АВ й -Ф2їх синте тапннй зпігзнуклостидй «Не ЗУ щи КТК т
«ВМ я «вії» 50 «Вих НИК й й хі» штучна послідовність «АВ» ШИ «223» щамтетичний олігонуклестид «Ах 373 чаазтсїсву ссїтатесс т хіМюо ху «вл З «ВХйх днк Й й хЕ)і» штучна пасаідавністк «вййх «ТІ3» гмнУезичнай заатгомуклеотид «00 0375
Федстодате стаодсаодї тв «КМУ ХХ кл іх 2 «РІ» ДНК , й «КЗих чучаа послідавні см «вве , . «йТйх Спинтазичний олігонукавотид «НИ: 375 стазааці)юса звзазоаа 80 «2ійхм Ч75
ІМ» га «йзй» ВК «2ЯіЇх штучна похлідовність «ай «йаЗе димтвтичний злігонуклявзтид «ап» 37 тпатоєбкчає свои у 2 «кап» 377 хбїїх 2 «іх дик «112 штучна пеблідавніств» его -ййУх скнитиЕтТиЧчинИи спігенувледтии «ах 57
Зазатии зсзцазцаца ха «2ійх З78 «411 й ххАйх ДНК «й» штучна послідовність «Ва» «Ки» Сануатичний слігомуклестид «НК» ОУ7В ззазсазвесте соту а 25
«аз 31
«ІВ йо хвійх дих
«ВІЗ штучна похлідаовнікт»
хщЕе М
«Й» осСинтатичний ЗИїфгБоНуннявтку,
хау» ХУ хстовКих зухахкикий Км «Рій» ЗВ
«їх о хКВбУ дак
«иіЗ» штучна язснідввнійть
«КІЗ х
«аКк3» пинтетичний знірзнукцвЗтий
«аг дО свакссшкив роки сня ФО «ка» ДІ
«3 БО кед дих Й й
«екйл» оБубучна песен КЗ»
«Ох тай» сЕНТеТЕЧНИИ ніг чНевлетнА
«нн ЗХ здксесснн сКжКкхККа ла «ТУх 357.
«ВК КО
«хи ДЕК кхІі3» штучна носліднннієтух
«Ох хшїх синтетичний здіганукдестий
«ах ВНІ таза совововосо зо «КВ ЖІ
«кій Й хеЖЕх ДНК .
«ЕіХк щтухна жилівивність хай Б те й щЕйІМ синтетичний спіконукизиатий
«м» ЗА саазатсвсс тосззодия. кВ химіх ЗНА ках ВВ
«еЛа» ДНЕ І
«ХХ» оцрузна послідовна сть «вл й й
«ЕК» сювіатичнеВ даїгавнукавотий «Од» ЗВ
«во» Й «аю В «їх Вик «ЖАХ» З жчНа пл ідааНнійте «дл 2, «ай3» СЕНТЕТНЧНИВ МІГ ЕНУКИЕК ТИ, «х 385 акихсннах аа т «Ріде ЗВ дих «діл» ДВК І І хаїЗе тучна плодлідовнікте «МІВ» «ТЕ ОПИМТБТИЧНИЙ ОЛІгОНУКАВОГИА «апа 85 пвовсвавяЗ посох акайа зо «ий» 387 чу Зо «вВо» ВХ «ХіЛе Щручма посоплідовмійть сах . «ВИЯУ о СЕнтТетичний слігомукаветид «В» 382 ктавзаваа ДЕЛІ ОВ ТЗ «аз» ЗВ «23Х» ТВ хЕ їде дк . Й т»ї3» штучна воклідовнікте яККІ» бинтІйтичнНИиЙ ОНігОНуклиОТИЙ «(кі КК зихчитацеа пн снакИ КК «кіс» ЗБ «й ТО «ШЗМїМ дих «ЇВїх штучна песпідевніст
Ех й кай3х снитетчНЕй плігОнуУВННЕ «ниє ІК стІВостаВх «тиви ццийХ 83 хЕміх 38 «вай й х. КМ днк Й «УЖ» штучна послідавністо «вд «ЩИЖУ осентЕтинняй спігонухнеатий «Кк Я хЗааЗкакжах ковка з «дю «ее 80 «832 дк «Ай ШТУЧНІ ВеФІЗ ДОВ УТК дЕфх кАї» пвнтетичний зпігавУкнемтид «ах З звали застосо а У ка: АХ ої с «зх днк Й -КЩїх щтуснз песцвідащаЗ ск
Сея . й «ХЕЇ» сни тЕтТинНяВ «піранукаеид ках З
ЗЕцЕКаКаа КЗ ТЕ «о» 333 «Хе ха ках дих й «33х Щщтуиха послідовне «ВІ» й Й «Ех синтетичний спігОоМмукавутид сен Б «іще Зм «Й «але ДНК . Й «ЗИ» Штучна послідовність «й Ох «йИЯе пунтатичний оатгаНнУКАЮУТИД «ВО З зхаскхазах аа КУ «ВО» 335 «Кк ЩО «кій» ДИ й й «ей щужчна прадідваність хииЗв оСинтуктичний Заібзнунлнитих кате 355 хосудксчевВ чес уня за ера» ІК «де ВЗ «ЕМ» днк Й «Ж13» штучна веспідоавність
ХИЛКе кої сиптстихний пшиітонукивитяв
«ех 355 й сам акахь сек «0 «МО» 25 ха ЖИ «біде ДВК й і «ВХ» З Учна шаглідавністк «Й «Ваїх цинтатичнака аазговнукаватид «НМ» 337 й ке ака ТК дО «ТИХ ВЕ «іх са «е3йх НЕ І «аКЕе штучна послідовне шЕЛК» «ШИ» опМимтшШатичКий олігомукаветих «Ко ла саоасстоцк саозутосся 3о «ЩІ ОК «ІМ що «ків ДНК І й «Хі» Змучна поситдовніств «ВХ й Й «КИ» пинтетичний аатганукавотид «ЗМО» 385 нд ккхадакс вокасавтм о «їде І кІМіх їв «кїй» ДВК й І хай» обтучна послідовність «Ех «КХЛ» опимтетиммий овігонпукамутий «вк ОХ шен Кал ТО «а СХ «ХХ СВ
ХЕ» дих «ві3е тучна поклідванікти «ДН ше «Йде пинтвтичний ОлЛігануУкАв а
Ап я стсостткса Зиазпу ЗЕ кам КУ «й» МИ «ий дих «ЯМ штучна пшеснірність «ВОД квЕше й . «С023х синуєтТичний ЗЛіГОНУКАЛЕТИИХ
«ас ях заапсптостке соовотсац зр «ви ОО «231х 20 «Кай» ДНК й Й хаХЯх штучна послідовність «ай й й хаййМ оСюмтетичний олігомуклеотид «0: 803 свадасстос ттссозався то «ЕМх ябя «зві» 2 «812: ДНК хКХИх штучна послідовність «др Й Й «ТАйУ Сюнзазвмний алаігомуклестид «НН НІ
ТІТОВ КТ 2 «ох а «832 «війт НЕ й й «Ер щтучна послідовність «ай пх Й й хаййх оцимтетичний олігонуклвозид «Ко 0 Зах сткккасоос ЖЖСКОостЕКЕ КО «Вт ці «Мах 20 «2ійв Дни й «ВМ» дпучна послідовність «ай «Хе Синтетичний олігонукавотвд «ах 435 сетоптттів СЕС У «ВМ Я «ММ о «із ДНК «КІХ» Бітучма послідовність кох Й тЕМІЯ» одюмтвтичмий олігомуклевтид «Зх 0 хассхакКК граки 2 «210» ІЗ «ВІК го «3» дик «ії» штучна послідовність «Ох
«ге3х сихтетичний опігомукавотидй
«НН 405 вдаззасссв затсстсвіг їй «230 а ей ло
«їх ДНК
«213» щтучна послідовність
«ад
«223х сКинтетичкий солігонукдеотид
«аппе ВНю тзоззаассс зазжсстсаї то «ціх 16
«1125 20
«аїйУ ДНК
«215 штучка послідовність
«АПУ я«бйїх цдинтетичний слігочуклаютид
«апа АТО зІзозззасс сззатсстса 25 «ЦІ» ЯМ
«А1і1х
«вій2 днк й й
«ВУ учна послідовність
«Ва
«ВАЯ» обемнзезучний оазгонукавстид
«НО заїазаааає соадатссх п «М: 5
«ЕМУх М
«еЩд» ДЕ
«23» штучна поклідовнікть
«в
«йй3» Синтетичний злпігонуклявзтий
-АїКух 41 гівтноавайв ссовавнуєєу 20 «кій» 413
«й т козам дик й й
«2135 щтуУЧНА песвідевністо кеВ йх ех сихтетинний двігануклватид
«нн 413 сжжЕЗЕЗсззВ ЗсссваАВКсС 2 «МІ» 414
«211 й)
«212 ДНК
«АЙ» Штучна послідовність ху дек МХ й . «КЛ свнтетичний звігчнУкнаптий «ВІ ЗІ секівкциаа зх кАКНК РУ «кій ЗІЗ «Ех «Фі2х ДАК «ХА3» ошТЖЧиа пе ліжаНіКт» «Ім «ев ОСННТеТЕЧНИМ плігенеВн уки «Нюх 15 «Ех акана пак КкВааХ ву «аа МА «аїи дО ках ДЕК «3 щуучна посліді ст «3» синтетичниК олігонуКиеОТКХ, хаїнтх ів «кекс щІВїви ВаааВсеКяВА. 25 шапйв і7 сащін о «МУ ДНК «вух штучна поасвідозність «сеВх ШИ «ТЩ3» сжнтотнзнив зазганукАеотТИий «МН І? зессстівІя заааассса. щу ж їй хе Ам ОО хи дО «Вії: ДВЕ й «МИ» тумна ПОСЛІДОВНІ СТМ
БУ Неи Ц Й «ШЩІЯ» оСимтатмсний оліговукАвОТна «НК ЗВ аайстглеках гозадастса їй кащв ж «іх 8 «Кік дк «Ка ТУчнНа поплідовкійть дог
СКЕАЛ» КЕНТеТНЧНЕЙ спігснуяневтид «ща 1 зивасекххя кхназааакхе 2 «вк а «ві» З «Вих ДНК й «ЕІ» штучні пеаслідонністіх
«Ох І «223» скитетичекй слігпнукноотид «ох а озввкссску зівцаааВсх га «210» а2і
ОН
«гій» днк «Й» штучна поспішність «ІЩЕ «3» сСинтитичний Олігонукнеотив «(аг цувавсессу свІнцвааве ха «РРО» Й «231» й «КіК» днк «йї3» втучав послідовність
КЕ
«КАЯ» шинтетичний звібгануклестид кВ 422 заовззсссс хувуЗоваяВ 20 «ві ях «ле В «Щі2х дик Й . кеї3» штучнах песававність хедіке й хіФгїх сиктитинняй слігануказатад «НА ЯЗ сзпозаассс стека а ха 454 «21» 20 «Вій» ДНК хКійх штучна послідовність «АХ «КХНх гинтезичний слігомуклеотид «НН ЯиЯ згаззааа «іа 22 «ЩО ех
Му о «вай» ДНЕ «ФВ)н штучна послідовніклк
ЕКО» ик «ЖИВ» опимтетичний бліє омуклвотид «асо» 325 зяспедзаває сполакаца За «312: га «аййи Кб «ЕЩ1їх дик
-213з щтучниа послідовність «ох «23 Синтетичний злікануклеатих «аюх аг стацсаоуваа соссЕхАТаЯ 20 «10 427 «и о хйї2» ДНК «2132 штучна рослідовиність пах «223: синтятичний олігонуйлеотки «Зх ау «сяосвоцва вессссттяхя 20 его» 325 «Ві» йо «1йх ді «132 штучна послідовність ха» «ай3» синтетичний слігонуклестих «(нт ЯсЙ пе гссзоФсзоЗза засос 0 кер аг «Й» З «і?» днк й
АКіх» Уучна пасипїдавність «ВХ «ВЯйм Симтвзичний алзгопмнукаєттид «НМ ай зззгеазеавз зааассстлл ХП «М 430 «КЗ» 25 хиай» ДВК й й «2Мує штучна послідовність
Хей» о бПимтетичний олігонуклеотид «йо» а сита зой боаавссох й «кій» а «гії 2 кох дик -2і3з штучна послідаиність хеЕох «223» синтетичний олігонуклізатид хіх Я сееотссаас зопавассос г «М 43: «фі. ЛО
«кал ДНЕ «ЕЯйх щтучмма послідовні кте хакд й «айЯе оцинтвтичних ОлЛІігОНуКляМТий «м ОЖАЙ тотхоутсав сяркнакех КУ «Мох ЯЗ
ЕХ їх то «ВІЙ ДВХ І І «23Іх мучнма послідовність «ЕХО «Ше ОСиМтЕтичниМй ОлЛігонуюнмукид, «МЖх 433 хаос повоцанакє ТИ хек ЩА «ЕМ ло
І хи екю. МВ й й «ХМ шШчтучМма пМоЛідОовМість «ВО «ВКА» бимтетичний ЗпігспнуклявтТий «щюх 8333 сн «ВІКНА Та «АМе 45 . «ВЕ «Мам дих «ВЗ» щтучня места Кт «ЕХО й , «8 3» скитетТканиМ сліглйи жимаатиь ха А зофиссктці сосках а
БУДУ
«а Ко «Мих ДНК й ка» штучна ззслідовністе «Ех «ЕКЗ» синтетичний зазгазуклестий «них 3 сацресств проза ца в «ИЗММ яЖу вон хо ха теййе ДНК Й «Ж Муза послідовні «ЕЙ» оцимтитичмий Од ТОНУуКЛЕУгИД «МК З17 ле Моск та «КАП ЛВ
«езі» ха
«їй ДНК й й кафй» перучна пасалтдовністк
«аа Й Й
«Май» Синтазимний апігонукаватид
«що ЗВ сегасосг гортссацеву то хіх ах хай» ха
«фАй2 ДНК й Й
«Ах це учна посатдавнісль
«Й й й
«Т2Я» Синтетичний ааїганукавотид
«Не 43 теггасцвос стотссавга У «202 553
«ЕЗМКЮх го
«кій» ДВК й й
«23» БМучна послідовність
«ад й Й
«ВАХ» Синтетичний олігонуклизтий
«Фе 4 аклюсаєтих сс кацх 2 «ва ЗК
«ЕМ 20
«5325 дик
«йії» штУчЧнВ песпідовність
«ТОМ й хакі» пинтТетичний зпіганукнеатид каінух 451 звтсссвсЗс ссстЗссово 205 «й аа хв хо
«гїжх ДНК
«Мах шеучня послідовня сть
«ИЙ
«2й43х синтатичний слігокуклаотид
«нт» ЯАХ саажсссзсо сессстотсса 20 «Мт 44ї х?2іїх: 20
-й125 ди
«МАЗ» лучна послідовність
«ВЙдх
«ВАЛ»: оСинтетичниб оаігамуклвотид
«Зі» 443 шхкаавхєксоги зккпТук ЗІ
«ВМ» 444
У свій ДЕК й й «ВАЛ» дзучна послідовмість «йо «КИЯ» бюинтетичний ваігомукластид «хх 44 зедаатсоса сорго КО «30» дай «21 20 «вій» дНи й й «МЗЯ» дпучна паслідовністе
НУ
«ВЗ» Сматетичний полігонуклеоткд «4005 445 азмлжааткекск асоссссої Та «Ще щі «Му 2 «Рай ДВК «ВЗ: штучна послідовність «ах «ЯЗ» пинтетичний олігонуклестий «а» лак захтсавици «сносостя 20 «21 47 «Ме 23 «Зм днк «кї3» штучна песвідавність кгйох екс» синтетичний зпігацуказатва «ЯК Я тзаттсватс своя 80 «ЕМ лай -йії хо «ій» дик «фЗУх штучна послідовну «вв «2ЕЯх Сихтетичний олігомуклвотид «М» 448 ткваттеваж ссосасосссс го хе 445 «211 по «212 дик «КІЇ» фтучна послідовність «20Их «23» синтетичний олігонуклаотиА ха лаз тхтІтхаавухсва ТссоМ ВОК ха
«й3й» ЗУ
«Ме о
«832 дяк
«йАЇ» штучмма послідовність алго
«ЙЛ3їх пунтетичнуй олігонуквазтий
«оз ЗМ млтаатісв ампскасят 2 «із 4
«Ф3Ще Ей
«2310 днк Й
«йії» штУчна послідовність»
«220»
«йкі» синтятичний звігонуклоптид
«00 451 чиххтнаккс вах Екаса дО «0 53
«вії» са
«210 дик
«81315 штучна пжпідовність кефір
-й23х скнтеуичкий опігонуклеажид
«їх Я;
їоіттсзнЕх савзтсссВоу то «аціх 453
«Ві ЙО
«Йійх ДНК
«ах штучна послідовність
«МП»
«ЕХ» сммтшатичзний саігонукавотид
«Нюх 453 стазтттаві зсозаавсссає 23 «ВО» яп
«ВЕ То
«зо ДВЕ
«ФІ132: штучна послідовну єх
«ФйуУе Синівтичний влігонуклавтид
«а» аа зЗпіяскктай сслаакскхта ХО «кс 455 хар кій» днк
«13 штучна песлідевністе
«Де
«2235 синтетичнкй олігоенунловтва
«и Ат саагтИатттї заттсваксо РІ
«23» 455
«Ріг 2 кім днк й
-Х35» штучна пасвідовЗсть
«гео»
сакї» шЖинтетачвий зліговуклодтид
«вію» ака зсзастчсхх свакхтсавтс о «іп» 557 х2ї1е 73 кеіох дик Й
«Її» штучна васпідзаНість
«его
«ЕХ» синтетичний ослігонуклеатид
«Об» ау
«зсвустасх сівахтсвВх у «23» ах
«ках їй
«ке 32 х дк Й Й
«3» штУчва поснптдаВєть
«ох й
«223 синтетичний апігомукивотид
«ник ЯчВ Щ тедсзастоє тттзазетсза то «2305 а
«231 2
«вай ДНК І
«ЕВИ» о щтучма послідовність
«а»
хВййх Синзезичний олігомуУклеОТтид сво: ЗУ масел зма 20 «би Бо хо1їх 20
«вій ДИ Й
«813» длучна пролідовмість пагдх
«23» бунтавтичнив олігонуУдлЛеЙТиД
«кап» ЗБ ттассоападєс хохтттаату за «їх Я
«Ве ТО
32 дик
«2313» штучна песлідовніст»
«20х
«8223» смнтштисний спіганУуклодтид
«щих Бу я - жк я зІтусасна сертхкавх с хи феХ «Важ ТО «КМ днк «Кі: ВтТжМиВ послідов сть. «ОВУ «ТУ Кі їх сауни КУ «ких» синтетичний оаЗзгонуклестид «У Я тхасхаХсвс зЗирсхТоя о «й 3 «Вже В хів днк . хіх» втучна пасвідавність «Кох яаЖХ» синуетиУний олібнувлецтиа
Ам аву й тттцхХВКс В КОС х ве «адм» а «Ве ТВ «ММ ДМК й , «ЕК» теза паспЗдавн тм «ДІО» 2, «аКйх синтетичних диігонукаватиа «НЕ ЯМ жа ц пе Ка «ОМ 355 «Ж І хай» ЖК І І «ЖИ» ощцтуучий похлідОВНІКть хиХЦо «Ей осСимтатихмий олігомуклавтий «хх Я тва хаккак собаку в: «Ме ЗБ «г З кЕйЕ ДНК «МО ШТУЧНА МепліДОВНіСтЬь «МИХ «КВ3 меж ТичЧНИМ епігенувВатий, «М ЩЕ «гі З? еВ й хедих ДМК «ФМ шжучии ПОСВіДОЗИ ТТ «КИ хТйй»е буктетичний олігонухклестид
«ах 85? Щ заказов сеаджиких хо «Тіп ВЕ «КМУ У «сеї дек «ихХ» штучна пес ість «КК ж, тиіг ера ех узі ги г: ках «ЙЕЯх пинтитчНиЙй звігануквезтна -йМОх а дк писсавчивис зезЗвиссВО ге «й» МУ «вій БО «Ух дяк Й й «ках ШтТечВи Вас дАВЕ СТЬ «гм «ЕК» скнтствивиЙй зпігануклпеатий дат. Яца Ще стузццавкс вона ихЗу КЕ «аю а
КУКИ пу ще «ВЖЕ ДНК Й . «ЖЕКи ухва пос нідажн Ук
ЕВ коди «ЕТих сиве шчиМниЙй ПАТ ОМуУКІЧКиД «ще В
СУМ лугу куту ря тасксвастта зазаксааай 2 «Ме атХ кЕііз ЖО «Кай 2 МНЕ . Й «ЕЕУе штжена подлідовнікт» кА Жах
ТЕ. ке щу ц тк. її як о я хто оцимтетиМний олікомукляотий «ам ах вкпаєттимох бацециссни о «ках ЯК «Еїїх З «ЕТІх дик ка» щтУЧНЬ КОТ ДИВВісСТВ «ТО
СКК СнКтТЕТИННИХ паібануклостид.
КАХ БІ й Що щк
ЗИ ИЦ СЕШЖХКЕСХ, М «Ех Я «В ЗИ «КіЛо ДНК й хЕМУю веузна посяде сте
ХМ
«КЕН димтЕштизний опігОМуклаутид
«ІН УА пе ке вивих "б засос астосвесося 7а хе АТ «ей ЙО «ХХ МНЕ «ЖМУх шщтумна поплідзаність «Й «бЕЧе оСикзетичний ЗлігОмуклвотид «Ве 474 я зма Мосс 7 «ЕМО ТЕ аж «ил ДЕ й «ТІЗв шіжчна пОослідДВВНістЬ. «ЕХ хво йе цимтвтичний ОЛісонуклвОтиХ «НКЮ Ух
Й зас щх де ії прац х заудацек Рг «ЕЕ чив кІїї» 8 «тії дик «ке туМНИ пешліДОВИ ІК» хКТКуУ «ЕКЗ синтетичних саіранекишатна «ВУХ Же хесспоузас сІсББОКН хе как Я
Ії А «важ «ЕМ дих й Й «83» тучна послідов
ХЕ
«їх сСинуфтихний олікок УкищОУТаК «МК ЗИ Е сатсасветс содрааае 2 «ЕМ 475 я ОО
СУ. Ме «ках ДН й хезйе БижчМнА леосліДОВнІйТЬ сах
Б ще ких - та и ск, «КИЯ» ощимтетичний опігомуктамутид ках ТЕ
КЕН аКАВ ККД КККХ а «я» т «МАХ» Й хІзах днЕ яса 3» учив неклідшиністх «ЩЕ
«ай бинтвтичний ВАіГОНУуКАЄОТЕЙ «ОМ ха тв ей Кегкахкике 2 «ае 48 «Ех о са НЕ хКЕХХ» ши учма послідовність се Ох «ВЖХЯ» бумзестичний олігомуклаатид, сю ЗДО) зОазтуааа вовсясстсс та «ЕХОМ НЕ же ХУ «Ріг ДНК «ХХХ Вбумза паспідовність «й. Як Й й «Жт3х сианійфтинвУх ппфгонукноштид. «мкА 481 сс вос охузцевццях 20 хеМмЕ ВЕ «йад Й «Війя ДНК хЕїЕх еучиа послідонніст «Ре «МИКиМ щянтетичний слігонуйдеотих «НК ке Ву «мити к секс а. ЗИ «ках З «3 Й «хи ДНК «ЇМ» штучна песліновність «ВАН й
Хей» щнвтетичний слігонухннстих «НИ БИ звізсЗазЗса зввассвВоЗа. 85 «МО ак «кі хо сих пМмЕ ва МК че 15» я учна пощх КК вач «КМ І «ТЕЖм синтетичний сиігвануннинтни «ол» Яде зцазавтута ссотсвеви ща «10» ЕХ «КРЕМ го «Кіа ДНЕ «ЕК щтучзна послішавніств хащі «МАМ ю сентнуннций сизгоануиццу ие «0 455 Й скан ак КО «ЕЛ ЗК «МАХ» ЗИ клі» ДМЕ «АД» МОутнх песпзуканеть кеВ й «жа сиНТЧТНЧНИК Фнігонукинтни «Я «кім ЯКУ «Ка МИ
ЕМО» дик . й тех Втучня мошлідиВя се «ДІ й «03» сиктетнсний зниігачукавотих «нн» АБУ пек си 20 «іх ях са ла «иййе ДНЕ й : «Щі нтучка послідовність «Ме хх оспиМмтетихмий олігомукавотид «ВН Ай ттоптозоВоа Воослатовх ВУ «ВУ ад
ЕЕ до «Жій ВИК «ВХЯ» о щтУЧМА ПОдЛТДОВНІСТЬ. «ад «ЖАЯ» КЕНІЖЛВчЧНиВ ЗаігеНУЮНВИТНА «ам ЗК зак поухаааво ка
Фо ОО иа ЕК хЕЛюМ ДК «ІЗ жужчна инідоннНіст ах І кей3м сита тичний онігонухнастид
АК АЖ сезсзтазаа засто о «Мік Ат кі. хе «Та ВН
Ол Б їх зи оті хУКЯМ фручна пасаздавні тк
«Й «8Иї» Сбиянтауачний олігануклеатид «але ЯЗ амкеєли сама ІВ
АТОМ НЕ
«аа а хаЩтх ДЕ й й «Ух тучиа поаслздовні ск «оо» ще кеш х сМмитатихнай олігонуУКИВОТИА «НИМ. театовака сао У «ак НЕ «Кк ха «ЖИ» ДНК «ЕМ» штучна послідовність «Вл «бах сМнтТЕштТИичМий олігонукАавотиА «Ан» ЯЗ часта ати СТИ їй хи Я «М» 80 «Ве НЕ | Й хЕЩМЯх щрбучна послідовність «ав» «ИЙ» опивтетимний плігонуУКаВОТИД ен аазхаацзі актазасаєх ща «и» В «МК хо «дій» ДВЕ «КА оВижчНа поУлЛідвеніКкте «ТЗ» оинтйунчний ОЯЗгОНУКлЛаВТКА
ХАІ» У уапевекии уевакеиа КІ «ай» ча «екю хо кЕЗеМ дик ехії» туУЧНаА песпідеВНість» «Ех «МУ» синтЕТИЧНИЙ ЗАГОНУ ОТИД. «НЕ Ящ тат тцкея «стЕКїсняХ то ха у «вий Й «КАХе ДНК
«Ії» учна порлідавністк « 8 ? де . І
Уч скантетичнах пд спнмиклвотид «ее ЯВу сваха тцс свсстістса тп «210 лок «й 7 «ій» ДНК ; й «21» штучна послідовність «вейх «223» Сантетичний олігонукаватид «НК ЯВИ ай зезссзхавс стассасстї хо хе А ай» ла «10» ДНК Й й «еМих туУчна послідавністк «Ве Й й кох» синтвтизний патгонУкаваз кА «Не За м, самих х чгасассата астласкасе го «30 5) км тю «ій» ДВК й й «Щи штучна попблідовнікть «садах й «ЙЙТФе Сиктатичний олігонуклевтид «ЗНМ 5 хвоста буси тй 2 «калом «Фі гЙ кгїгз дяк . . -кіХ» штучна паслідаавіст» кемух «КЙЇ» свнтзтичнай чаіганукаостИид «ацох 551 тати тачк ста га «2105 502
СЕ ло хаЩйх ДНК к«аМ3х штучха послідовність «ВО й «ВИЦе синтетичний од гонукластид «00 0509 зсзатеосав стада 23 «ЯМ 003 хКМу» Зі мий ВЕ м Ук, с Ся р. «33. ЗЗухна поклідовнігк клйдх Й Й «КИ» щита ий пазравуКИВаТий, «ММ: З хеакзаззах закадкатою КЕН
Аа ще «кЩйв ха хвайк ДНЕ й «Ж» тучна ВОКлідовннлк «ВИ «ЖМЙхУ осминтавтТичний ЗатгануКАВОТИА «мк ОМ тереесата сутосав КУ «Мох ЩО тещі» ха «аа ВЕК . . «ВХ» щучна воплідоеність «ВИЙ щимЗатичний оазгонукявоУТид «мк вах шапкою сесоогскак о: «яв щу «ТВМіМ до тюфа» ДВК хкййи тучма постідовнійте «Іо «ИМЯ» ОСимТатТичНиЙ олігенуканятий
АЙІКУМ ЩО хват кох Х КУ «КМ ЗЕ «КАК В хефЕх дик «813» Штучна спеоснідавніст
Ех о
АТМ Синтетичний слігок уки «НЕ ОЦЩОХ ззсІзсзтвИз сатссвощЕВ в хім 05 «Й й кал ДНК й хКХИ» штучна послідовність «АЙ. «ТЕЛ» сивнзетичних аатгонуклетий «мк МВ казацкаєка ака кое «Ва В
«ТМКх го
«гій» ДВК й й
«2А3» штучна пплідояніть ках Й й
«223» сдинтитичний блігонуннеотии,
«Ох 598 кххоазакаса хаххолкках ха «кала БО
«МуМ г
«212» ДВК . й
«ВЕ32: ди учна послідовнікта кл» .
«223» Синтетичний олігонуклявтий
«ОК пісбкаццї схпсататих зга «й302 5
«й Мі» 20
«ЕМ» дек
«ДЗ» штучна ВОслпідяоввіясте»
«Ед
«Ей синтетичний злігонуклвотид хвою» 51 тсттслазах сттслахтаке 70 «іх іх
«вах ха
«ЕМЕх дих
«213» штучна поспідавністье
«Ех
«223» сСентатичний солігонуклеати
«НКЕхе 15 зпастІвива зсжпосЕКе о «Ме 513
«Ві Й
«Ай ДНК хе1їх шШтучнв послідовзкість
«Ай хагйх димтетичний слігонукиготид
«Нюх 513 зсстоссато детосттото З «Це М хеїїз 2 я«21ах дви Й
«ЇЇ: штучна поглідовність чи, У дах хайХе Синтатичний олігонукивотид хат» 5 тзасуааваю км МЕ
«ай 515 «21» Зо «дій» дик | Й «А» штУЧНІ песлУДшВВіСТЬ
АТОМ тий3їз опинтетичНниВ слігонуклоатид «ох 5 ще пісідклклк ВРХ зо «лій» 5 «Е1їх 80 «2135 дик й й «вії» штУЧВА заслідоВвЯсть «ЕФ «ик3» синтетичний злігонуклеатид «АКУх щій що зассзхззай скесвчазасх 20 «21 517 «їх ТО «Вр днк і й «213» штучна поспздоавністьк «фойх й «їх» санушачтичний плтгонУКЛВОТИД «мує 5ІУ ще тіаацттаим тов євиа за «МУ М хі» В «аз?» ДНК й Й «21їх цтучна послідовність «вк Й й «й» обПинтитичний олігонуклевтид «ак ІК аоикхсавАа стопу з хвійг ЗІЗ «81їх 20 «гії днк «иа» штумНа посдідояністю «Его» «Дй3ї» синтетичний заірочнуклесптнд «00 3 ще час созаасхсо Б «М» У «сад ха хеййх ДНК «МІХ штукий послідовні стк «лав» І хЕйух димтетичмий олігомуклвотид «а» ХА пксацдітозаз зазосстова 22
«ВНІ 52І «ХХ» о «еїд» ДНК й «83» штучна поклідовніясть «фгУє синтетичний олігонуклевйтид «апа» З чтвацтуЗхай холбаззаду ха «ВН 5ЗИЙ «Зх То хеїй» ДНК Й й «3» штучна поклідовність.
БА Ох - ц «ва: Синтетичний олібонуклязтид «кад ЗХ хопклацака свадкацацух 22 «ЙЛИ 573 «83їх 0 хІ1ї» днк . «3» штучна послідовність «Ем» жйй3» синтетичний ЗНігануклевтид «Ах
ХК СТссХ свовсясвох ЗО таз» 524 «ва 7 «Е3Міх днк «2135 штучив песлідаваієть «ех «223» смнтетинний зизгануклаитид «ЯОм (14 тзвавссіссх супу Кс5у «а «230х 555 «ії» а «Кай ДНЕ «Ії» штучна послідовність «ва хай Симтетичний слігонуклеотид «ННх» 55 зтзатцїяза сетсстессо 25 «В ЗрА «ЕМ Ко «Вій» ДИ . Я «23» штучна паслідовніять «ки» «ДЗ Чинтетимний олігонуклеотид кащво зе сттусттвск сепбаєкєука зи
«иа ИЙ «ЕК жо «МКУ днк й «ЛАЗ» штуУчза послідовність «ВУ «АХ» бинтатичний алігонуклестид. «Ах КУ соску ТА КСВ ТКХ З «ий КЕ «ех КО «Ко дк «КАЯ» втучня пЗСВідаВвість
ДАТУ й жикіх синтетиминИй зВірзнУклсотид «ах ЗК
ВІСК шеКВСоК що «КЮю Зх «ах СО «Жах дик. . й «ЕЖХ» штуння вазі єть «В й . «Кі» сунтшчзихний зпігонукпеутВА «Ме ЩЕ «азс тт жккКЮ КУ «ЩО 530 «кі Й «Ай ДНК і «ІДУ штучка послідовні ть «Ме Й
ХІМ синтетичний ФетгомжкАгОоТид «ант ОЗЯЕ Щк зезастосст вестассс о «МИ ку «йлі Я «вве ДНК . й «ММ оБтумна постідеаномех. «ВИ «МАЯ» опинтазкчнНиВ ваігонУЮЛЕКТИД
НН 53 зБКацеки какая Ко ка «Ех в: «тії» де
Кр. сажки ги не у «Кай» учНЕ пноснідбвнійте «ЕЕОх Й -кхйх КинтетичНЯй ЗНірзнукневтий «НК 535 пошуеєх застава за хм З «Мі» Й «й 12 хо ЯН Й «ЕКИх цжузаа послідовність «ЕВ й кий» Свнтетизний олігонувлевтуид, «М 555 й садезтвоЗО вссовстосх зе кВ» хм «Кі «Ех днк й й «ЖІ» тУчив пеаспідовнієте «ЕІ» ш «ЇІ3 сЕНтТетечнив опігунжУклсвтид ен Що сешссячиях «ВК КВ 25 «ай 53 «важке ТО «ЗКУ дик . Й «кі» Штучни носпідовнікте «КІбх Й такі» ПИНтТЄтТичнНий ЗлікОнуклвоий «Ям 535 хаввЕних КК ОК КУ «а ЗДУ «ВАК ВО хе» дих Й Й «2ЖУ» цаучни неклідаанікть «КО» «иКї» сСинтнтичний ЗЛІТКОНУКЛеЧУТНИ нюх ЩЕ зсахссвска стсссспаєх хо -ох З
Зо пд хЖАКИ ОО хи дих «Ку ШТУЧНА Чл ЛідвЕНісте ко тк їх ух я ххйкм
Хей синуятичний ЗЛІгОНукАаватий «АК хх сОСТуСТНК Куккоуєсацх 5 -2х 53х «й М хіх дих «ІЗ» Втучна нихлідейністе «ке ха» синтетичний Зпіганжкавотих
«нн й чи
ЕЕ БСК 2 «МЕ 555 «Іі Я хЕІЖе ДНК «Й1ї» йтжучна послідовність хи «ВУ» книтетичний злібгозунлестив «АдОдУ ха й
Февореасст дсжетецсса що «З» ха «Віа й квійе ДЕК «ВІХх йжУучМиЗ послідовність «МВ «гІїх Квнтетичний заісанукаестид «АНІ ОЗ стстсоцаЗех готосттсВВ т ха ЯМ яРлїх ЗБ «ВІ2» ДНЕ й й «МІЯ» птучна пасвідавнєх «Й й Й «ХХЙУ Синівзичний апзгамукЛВИ ВА «НК 5 де х «Кк заачеатста ад ха «Ве І «ЕЕ 3 хайк ДНК й - «ВЕЖУ штуєна похлідовнікть
КО» «ТЗ» пинтктичний ЗА конукннотий «МК Я
ПЕ НИВ ЗИ т «да 3 «ЕМ 35 кох дих «хі3» штучна песпідовністю «ТА . свй КНТ тТЕчНКХ М Ган УБНЕТУВ клеї тету Вия ТЕшОКЕ 16 «ах 5 «Між в «ак НК «Але ДНК І хейих тузна послідовність «ВОК й кКал паніаУННЯнай аазгонуклостид
«ще Я
ЗаККІЕа СВК ЕКХ їж «Аа 545 хаКХх 5 «ЕЗІМ дик Й «КЛ ШТУЧНІ ПОСЛТДОЖНЯУСЬ
АТОМ
«ЇМ» сннІВІТВиЗИВ заїзганУукавВаТий се ях . хдадекцуц со ЗУ «ХМ: 53 «ві» ІБ ех ДК . Й «213» втуцва поспідавн ть зо» хан «шу сину тТизная заазгонуУукЛвИаТиД «НЕ Но цк пат ТЕце КАЛ ха «Ід 5 «хіх ЗБ хейтк ДНК ; й дІЩих штучна пошлідОВн тк «Ве . Й «Ж» диміІвтТичнМИи оАЛігОонУКАВОТИЙ кН Я Й агтатхаасохх пд 15 хай жі «Км 36 люйхо ДВ. ха бБіжмиУ песплідоаністю» «кжцУ . «КИ осемтитиМНниЙй зпігбонекдватид как» БК й шен ВОК ї6 «ка 548 хай» ІБ «ЕЩМЕ» дМк «Хі3» щтечсва послідовна «Во й , «БУМ синтетичний плімануклвитив «МН ЛЯХ сЕссттссоЗ Фо їв
УЖ КеТУ «ії 15 «во ЯК : й шКАЦе т учМа пемоліІдеВМ шт «ех
-Жї» синус ТИиЧнИй питганУкаватий
АЖ ЩО й зсотсскусх ЗЗсВ. їб «аа Ух «їх» 5
АТМ х ДК «кА3» ЩтУчиа послвідацаість «ТОМ Й «ХЖ3» пиЕнтТтетниний «пі анУКЛВИтНИ «ак У сек КВК їв «02 0552 «23» 15 «Кам ДК . Й еХіЯ» ОтУчЧНІ паст даВВУють
ШШВю ше «3» сМитшунниМИх сизгонУКЛВОЖЯЙ сш п Й
ПКЕЕ ТЕКА 18 «83» 555 «Ві СУ «ВИМ ДНК - «їх ще жчха послідов ІТ «В «ших сивтетичний сатгонукдеотий «кт З
СсТЦЕсСВУВСВ ТАБ їБ «а плЯ «Мі 15 «вій» ДНК «Вій» бмЗучна вослідовнмійть «аа» «КІЯ» ойюнптетечнив заїгомеклечутид ех» 558 зажаекцКкх «ТВО КХ ІК «М ОЗ
ВУАН
«їй Вик «РІЗ» штучни неснідевнікте «ее хаАйЗе сИиВтТетичНИЙ Звігбнуєюнхтий «ах ЩЕ стХХКаКсце Ко її «кіс З «ка ІВ хаМих ДМЕ «ФІЗ» штучні пЕфсніжавнЗ ць
«ФО «КІХ» сннжетичная зпігануєвеотий кю 58 щу ОКХ 1 ей 55 хиййи ІБ «ЕМіх дих . Й сайХе ЩУЧНА пестідУН Кт ка «223» сину ТИЧНЕЙ НК КН чкл-отид «НІХ 557 задпиказак ккжках їЕ «Й Зх УЗ «ЕХ «ДВА» дек ; : «ВА штучна поклідовні тв - х п й о «АК» оСимуєтичний олігонукАвоТий -ММУх 55 пласта асеке 35 «Же пща «ВМ 16 «ай ДИ ха» йуУЧчнНа пислідавнистк
Боня ях «й щинтатичний олітанукавотид «ух 555 й хнпайааттк ази 415 «Ка» ЯБа «ЕМ 1 «12» дих «КАЛ щіузма послідовність «ах Й «Ж» КинтТетТичНиМ паеігомукавотид «ЗО 55 й зхннадаки Кайдаш їх «А 55 «М ІВ «іл» дк й «КАХ» Щтучна послідовні стек
АРЕОх
ЖИМ ДЕНТЕАТИЧНИЙ Опігомукавотид
СКМ ИЙ тихих цада акксай ККЗ кад З; «ек 35 «кі дяк -«йЩХ» штутмня поплідовність кВОх ка «23 сдинтатТичних плігонуклеотив «НМ УНІ щк ик ВИК Ки її «ай МУ «Ак 18 кхЕйхМ дик «ВІЗ» Щтуучна послідовно тх хх й «Ух скитустТичний ситгокукивоатиав ха ЗХ І сс ЕхвЕлця ЗАЯККх їБ «й 53 «ВА хіх дик «ЛАЗ» штучна послідювністу «ВІ «ДУ» синтатичнийх слтгочухклеотий «Я0йх ВА й ссессттвитзЗа зас 15 хкщвь Ух «лай У «во» ННК й , «ери штузна посідав сх «Ве й Й кити» щСантатнчвиМ апотануУКАВОТИД «900» 555 аск ттата пазах хб «вх БОБ
МЕ КЕ
«кій ДВК й й «ВА ручна пОКлЛідаовнікиь «йИЗ» пинтвтТичний ЗАТКОНеКЛНУТИЙ «в ЗЕ азни ках айва їх «Ей І «ее 5 3 дк «КАХ БтУЧНИ неслідеВНісте «ом й «МО3» оснитетТКчнЙй слікомукиеатид. «Нє ЩЕ заасесттка тацели Зк ками ЗЕ «й ів 5 «АХ ДЕК
«213» Бтучаз неслідонвність «КК «К3» динтятичний злігонуйлевтид кафе ак зазатссоку вуацяй 15 «са ОБУ кеї3х 15 «10» дних «МАЛ» о щіучма песлідовмість «ад» «ВАЗУ бмитетичний олігомукавотид «З» М звадасссост хатаца.
ЗЕ «Ві 570 хіііз «айй» ДНК «І нучна послідовністк «ККйх «223 е Сикнтатичний олзгонуклватий «кю БУВ вазазасссс тах 15 «ЕМ нуї «ЕМ 15 таід» ДЕ Й «Ай» бмучна послідовкість «ах він й й . «Фа Же. сюинтетизний пдігонукавотид «Зх У кафіаайссс стмма НУ «ашке Вт ких 1 «е«Ккіхз ДВБ «кіЯ» ручна послідовність «220» «ВКЯ» опюмтезичмеий овігомуклеотий «ММ» 529 зказвадаєт ста ї5 «В» З «3 а тезл» «ДВК , , «АХ дучмна послідовність кеТИх тЕК3» опПрмтветичмий олігомуклаючтид «ЗО 573 зусвіайааає сстла ІБ «вій» 578 «211 16
«КЩіхз Кк й «Яд» щи жчма пвОдяідовНі сть кЕкВ» ї «ПМ пимтетичний ЗнігонекнвОТий «ах УТ попа с 15 хай ЛИ «І сейм ДЕК й й ххАе ЩІучна пролідовність «аКМ «ККЕЯУ ойиетеатучний ппфггомукАеетий ем. УТУ сециисміах ВКМ їх «КА ОЛИВ «3 35 -5303» дих . Й «Кай» штучна пелиздеВНіІстТЬ «Ох «ЖХЙ СИНТЕТИЧНИМ см гнути «КМ 57 каКаКВ пашККХ ХУ «А 56? «ВЕК ЇВ «ВМім дих «Оу» штуузня пЗзеніВинвіІєть «Ех о -22Х синтетичний скігодлукквитка «хни ПТУ й пессвосяанІ зас ща
УУБО КУ КУ
«аа ОВУ «Віа» ДНК І ходах Штузна паспедавнтсть «ах й й «ЕХ» щфантетачниМ звігазукаЛвОотТид «НИК яв туга зда ІБ «3 БТ «КІ» їж «кіл ДВЕ «аж3и щЩтучма послідовнійть «к х де й й «Куй ОПиМІйтИчниЙй ОпігонуКклЕсТиЙй сао» 5Ї3 сор а аа їй «жі» 55 хеіїх «аб ДИКЕ «ЗЕ» Зпучна пасяідшаність «22: «КЛйх о сунтетТичний саігонукаватид «Не ЗБ й салат зцОщаа їУ «Ам ха ЛЕ хаййе ДНК . . «КИ» зЗчузна поодідааність как». . «ИМйхУ панічний плігонуУваВОТиД «Не ЗВ петасво сводаа ЇВ «ВУ Я хіх ЩЕ «най ДНК . . «ЖИ: ЗБучна посвідааність ее Й «ФАЗ пинтатТичНий ОЛІгОНУНАВОТНИИ «ММ УК песстаувета зкаоца їй «2: 583 «ВАМ В «ЕМ ДВК мона Бе ї4 пес ох З ау, «КЗ оштуУучни поснідВННісЄтТУ
ЕМ й
ЄЕК» СиНнівтичний зпігзнундазтий ах УК І зЗсссксхцисо пси 15 «Емо 58 «Ва» «Ех ДНК й й сті» атучвя поспідаваЗстх «ЕЕ «3» симтЕтТечний «лігонуквеитий ха» БЯ же сстцЕ «ЗЦла 16 «ВЛ 555 «іх ЛЕ
БК Я хи саАКК ДНК Й «КІ» ошЖучка посліДОЇВМІСТЬ
СВЙ
«МАЯ» гвичетичний сатгомукаФтий «НМ 555 акІНокуУ, года ї5
«Ен» 555 дІ)МіМ 38 «хййїй» ЩІК «фії» о штучма поглідовність «Ай й «Ффйх Ппимтеатичмий олігонуклеотид «М» ЗВ стацвосовма косах 15 «Мі ПВ? «тії» 16 «вйх» ДНЕ «Їх штучна послідовність «АП» «ПЧ» обиміватичний олігомуклеотид «а» 582 педа рога ї5 «Мі: лВА кеМіх 15 «еййхо ДАХ Й й хаХЦУ штучма поблідоВвність «Ех . «ВЛЯ» обюнтатичник плігомуклевйтид «М: 588 сежєВ24ЄДКККХХ ТБЖКККа їі «ВО» 58 хі3ух «тій дик «КУ» штучна послідовність
У Й
«223» сСинтитичний опігонуклеотни «а» БИ й тсессасассс со 12 «ей 595 «о 5 крих ДНК й е«еі3» штучна посвідоввість «Ох «223» сСинтетнивай алігануквеотид «ню НО азсссасоко «сто 15 «Е3Мх 551 «гії» їх «кій ДНЕ Й «й1Их штучма послідовність хиййх обимтетичмий олігомуклеотид «М УЗ заїксескайцє пла ї6
«В» 5 «КА Же се 3 штучна слідовнісу».
ВЕУ
«23» синтетичний влібвзнунноотив кант» Уч пази пня 1 «вай 533 «КАК Й
ЕЕ дяк таІ3» штучна поспідонність хе щЕх «ФК3» синтетичний слігонуслсотид «ха(щУх ХХ ісянЕсссвс сс у ІБ «рік 5
ЕК 5 «сх днк «кі» штучна послідовиЯ ст» «Ое «шу щивтатмУниЙй зажгавуклестид «НМ БВ сІсзвхсссВ ср У «ЕМх УК жкайх ЗВ «вій» ДЕК «ЗИ» тучна посяздавн ск «РЕП» «БЕ оси ичний ЗаігОНУКАВОУТИЙ, «ме Бах аскеватисс асо ІВ «еще «їх «хало ДИ «КАЛУ оШтучма поплідовнійть
ЕЖОМ
«КХЙ» опимтатичний осігобмуклявгий «В 5 аахжжадикт сала ї5 «й УЗ «Ей АК «лик дик «213» штучня заЄліднніктх «ВХ «лЕх щини тТетичний злігоавунлаотий «Я» 5 застав с совоЗс їж
«ам ЧЕ «12» 15 «17 ДНК Й й х815» штучна послідовмість «ВП й Й хай» цямтатичний сазгонукавотид «005 053 щ тІзастсваат сегасЗ ї5 «що КЕ «алі» 45 «ах ДНК й Й «КІ» Цучна паспзідовннтк «ой «ВИШ» бавнтетичний олігомукавоткА «НМ 53 зллазвтсваа тестах 15 «М БО яезї» хеЯ2е ДНК Й й «ВР» мучна погяіїдовність «вах я «ВЕЖ» Сентеатичний олігонуклаотий «ен Б ккхккааккса ашссса 1
КОС
«ХХ 16 «212» днк «В33» штучна послідовністо кг -«йй3» синтетечний заігавуквовтид «апом 501 зЗксххВВіїс звхссх 15 «2305 803 «ХА 15 «23 дик -21325 штучна послідавизс та «Ех «2235 синуштичний спігокукавате «ННІ БПХ тобЕжтЕЗаже са 16 «ЕМ ВИ 21» «йКйе ДНК й Й «КІЛ» шзучна пасаздовність «йЙх «а2йм Смнизетичний аптгоанукавоетид «Зх 53 пер ктяах хбавхх ії «В БОЮ «КМ» 16 «231Я дек Й й «Фі13): штучна похлідовніять «ййОх «223 бинтятичний олігонуклвотий «іх ВА
Яктаттккай кібвах ї8 «23ї0х 53
ІЗ» 36 «кій» ДВК «ВЗ» шШтучма послідовність «Ох Й й «ВдУ» Синтетичний олігонуклиотид кад У й ар:хоїхухАа вушслй НЯ «ва БВ «Мі 15 «2312» дяк Й Й «Ккі3» шщтУчнв песлідовністе кто» «КЗ» дУнтетичний опігонуклептид ях БОБ й садскцкткх вахкса ік «заз Вау «йії: 35 «ійх дик «213 штучний послівовність «а й хФ2і3іх синтетичний слігонукивотид «НВ: ОБОХ спсвпстожЕЕ газет 16 хм Б «із 1 «йай» ДНК хиїц» еучна пасазтдавність «Вк» «КЯйЙх бмнчзетичний длігонуклеютид «Нюх БІВ кусазктат іа. 15 «240 МІВ «ух іБ «їй» дик «вій» штучна неплідовнійть
Его «ик3» синтетичний беігомукляутий
«НМ ОБО зерна ц тах 15 хЕМми ЩО «иа» 5 «Ще» ДНК п «ЕХ Вуюаа посатдавніств «ов» що кт жУ Кантата чняМ пп гамукавитТид «ке З зеспзспацето тва ХВ «ВЩх ЩІ «ка З чайне дик й й
АЖХУх ручна послідов тк «ВЕ «ЕХ щантетинний апіговукавоиа «же БІ тісне ел 18 «Ох В
ЖАБ ЖК
«ейк» дих . й «МИ учна вослідевн тк «Ей оСимтетимний Олігонуклавтий «й АХ «мисдеаа же Е ї5 ха Ід кі 15 «8402 ДИ «А» БтУчОа послідпанвість» кеТоух «ХМИ32 синтетичний звігрзвуєвентиВ ка М сенс СКК Е ї6 «ар БІ
УЗ ІД
«Аж М «а» ДЕх «3» Жуузня поснівсвність «ВУ і «У» синтатичиий спін АатиВ «не ВІ й тафічнсея сотої 18 «ЩІ» Вії тещі» 45 «дай» НЕ , «Хе чумна паглідавннутх «ВИМ одиМтетичмий опугонукАватТид
«ЩЮх БІУ кідтІдккх апКщх 15 «ВО 5 ххх 16
«Вій» дик
«13» штучна прслідовність
«вх й Й й
«823» бСинтатичний олігонукливткй
«Зх ТЕ Й муки карст 15 «ВО» БІ?
«2іїх
«212» ДНК
«3» штучна поклідовнікть
«Ф23» цинтетичний олігонукластий
-ЩМЮз 1 ктттЯттвх, зЗбацкї НЯ «во» БІВ
«Вау: їв хиМих ДНК
«йї3» штучна послідовність»
«Ех
«йй3» Кивтетичний овлігонуклеотид
«Ах в сттхтоттох сЗсвос Бо «ріс» о
«ії» 17
«їх дик , Й
«ШИХ цчучна пасаідовнстк
«В 2 й Й кЕййх Синтетичний алзгонукавотид
«лю 5 заааастсаа абсо ХЕ «їх БІО
«2115 17
«жіно ДНИ хе» штучна послідовність
-2502
«ВХ» оПимтвтичммий олігомуклвотгий
«0 520 аЗааваєткта ай 1? «10» 621
«ВК» 1 хаїїх днк
«213» уучив поплідовніясть
«ВЕО»
«Ф33» синтитТичний БВизКонуклоеотнв «Не БІ
Хацивавкик ааЗХКХХ Ежя «а ВО? «ам ЗУ «сіл» ДЕК «ХУ: втучна неоліт сте ха «23» синтнитТичнНий звібонуннеиткй хо Іх зхвчааааки «ааахях її «ой» 523 «ВАК У «АКд» дик «еїЩе штучна неслідаиністеу хаУ «бл динтятичний ЗЛігонуклавтуне ка ВЕ ттлІвоазиаа ссспйах ї «кв Ба «о «ВРУ днк й «ЖАХ» штучна васпідаввість «ХФОх Й хЕїх» синтетичний затгомуклестид «Нше ВоХ «тат авааа вс М «ММ ВІ «в» хаЯй» ДВК : й «ЖЇИх штучна щорлідовнкк «Й «Я Сикнтатихний ЗАЗгОНУКЛЕИА ек ВХ ткхжкахаова ааспосва її «и ВБИВ ке 15 «Еіг2 ДВА «ХЛ» Штучна послідовність єдДКух тка СМмнтТатТичиМи ЗезгчнкличуИи ск БІВ й сехтклЕяця вавскжи ї7 «ех Бай сажа ЖИ «ВМ дк хеаї» Жуана поспідозиїсто ха «223» синтетичний олігонуклаотид «що Бу «тссстїзІза заз ЗУ «й» 25 «В» ОЇ? хиМз днк «213» штучна послідовністо «ще «йй3» синтетичний алібсонуклестид «Ку» ІЙ вссссттауя Здвазвсс 17 па БІВ «ВЖЕ ОО? «ЕМ ДНК «213» жтузна послідовність «пах «йкї» синтетичний пдігочуклестид «Зх 529 ззссссттзї заз 17 «Фі» НО «Кай» 4 «ій ДНК й Й к23і1х ісучна поспідавнаістк «Ве й й дІТїх цикнтатичний олігонекавотад «МИ ВІВ защвсссстта тараада І «Ві БИ «2112: 17 «лайл ДНК «МІ щтучна послідовмійть «ай хВйЙх обимтетичмий олігомуклявтид ев» 31 пайасссь аїазада Т7 «ВО» 532 хіх 1 «гії днк еаі3» Штучна послідеинікті» «20» «йа3» синтетичкий олігонукнвотви «Ох вих
Чизззессстї ствІЗовА її кій» вх «вай 47 «212 ДНК «КЩїз штунна посліданість хЕщх «йЙ3 сСинтстичний здігацуклеотид хащі 3 зоцввасссс тхатво 17 «Із 538 «В ХУ хЕвБах дек -й43» штучна паслідовність хе» «йй3» синтетичний олібгонуклестий, ха п свочиавссс сттвсяО ї7 «вах 5 «а 1? хеіс» днк й Й «вії» штучна паслідоввість
АКРх «любі» синтетизвий зліговуклеатид «Мне ви сзозззасс состава 17 «МІ «ві Я «Ай ДНК о Й хЕ)ї» штучна паспздовністк «ЕйТре й тах щинтштимний оліконуклвазид «НН 15 азсвроавас ССС Тах їх «М 537 «23» 15 -кіайа ДНЕ Й й хеїйх штучма послідовхість «ВЙШе осбимлтетичмий олігомуклаотид «ВО» ОО 53У сазовайдава лет Р «кала БВ «21їю 17 «2135 дек «ЄЕК» шШіучна пехдлідвевність «22Их «22У» спкнтатичний плігенунннотеи «ха» 58 ссвоснуцна ВСІХ 17 «М «33 «алі 1? «Вій» ДНК
«21» тучна послідовністи «ФО: Й хЕКух Сюнтезтичний опігомукавогид о У тссзсв3ва аассссї 17
АЕМ о ва «й» 7 « 212 о ДНК Й й «3х» Віучна послідовністк «Во «Т2Х» щянтетачнай зятгонукавотид
НКУ зчіссвзоасзаа зас 47 «М» о їі «2332 47 «Тієї» ДНК Й Й «23» щбтуучна послідовні сл «ей Й «ЕТї» сдинтетихний пизгонукаватид «Не Б й хорі ссвІк ва пава ху «30 І «211 і «Ай» ВЕ «Щі» штучна послідовність сайпх «фа» осцимівричмий олігонуклеотий «аю ліптссадеа пада 17 «Мі БАЗ хх 17 «ті днк «каїЇ» щтуУЧНА пислідовність «го «23» бМитетичний олігенуклавзтид «ЗО 543 «св саях западає 17 «війз вай «3 У ха12з днк «213 тУчня послідовність «АК к3а23» синтетичний олігомуклестих «ЯК» Ах сестцтссву свуовая 3
АК чх хх 37
«Ах днк й й хх» жтучна послідоввість «ВаОх хаж сивтетичний олігонуказотий, «щу ах фс стахсс осв чи Її «ка» БІВ «важ Її «ЕМ дик
У
«КАХ» тУучна поснпідовиіст»
АТТШх сКйЯ: СЕНТ тТичНиЙ зЗвігзнекнивЗуихй ек ше «ами БА; «МАХ ХХ «Мій» дик «АЇав штучна НОКЛіІДОВНіКТЕ «ййЗа бивтитичний плігОоНуУНЛЯВТИХ «Ах У весслихах ппацкай 17 «иа» В «ЕК 37 «Зах дк «хАї» Штучна послідовність» «ТІ си ПЕНТЄТУНИЙ плігомукнаиВтий ках ЧЕ такое Ктя Кава ї? «в КЗ «А Ії
КЗ» дих «ий» пуучни нохліднанікть
КУТ Й якжйх СиНтТатичний бЯТРбОНуКАВОТКа кам ще «ВККС ЗВ х ее «ВАЖк її «ЕЩіх дик «дії» жтучня вче ден Кл «КІ «ВХ3» снитетичний злігзикилнтна «а» вс ссовсосссс сахссва КУ
ЕМ 51 са Її «АХ ДНК «33» о дтучна пролтдовит сть «дв» й хеййМ синтетичний слігомуклеютий «це Я щ тссевсрсо стогсоЗ: ку «ОБ БУ «жі» ї7 «КАМ НЕ й «Ма» Штучна послідозкість «ЩЕ» й «дй3х сМитетичний олігомухлеотид «Не Кл у авсссвасро сосцисє ї5 хеМе о с35 «ЕЕ? «ахае ДНК й хід» цтучна послідовних «де : «КХЯх умтватичкиий одітовуУхаВУгиД, «НН УЗ зажогавоцю сел і «ВО» вия хо ї іх 3 «ій ДН й й «ВА: ВЗ УЧНОЮ ВЕКЛІДОВНІК ТЕ кад «ВЗ» опинтвтичний злігбвнуканитий «вах щу нх хаавкетсако пики хх не «лів» 555 «аЖфе «Вих дик й Й «АХ» штучна васліданність
АКТОух «КА» сувтетичнияй чні сонне тид. «я ЗИ тезу Ве сс. Ко «10» ве «Ме, «йКйе НЕ | І «ЙРМЕх цухна ВОглідовн ск «ЕП хійух осиктТштТичний олітомукивОтТий онко Влв звеваатессв соссосї 17
«ВМО» ВУ к1ро 17 «а й2 ДИ Й Й «ВА Ззучна поаслідовністк «ЙЯХх «2Яхм Синтетичний олігаонуклейтид «Нюх 557 чссват асасссе 1? «Мох БІВ ей» 37 тур те «аїйх ДМЕ й «2)їхМ штучна поспудавність «Ей «ої» синтетичний олігонуклеотид хаНтю БІВ заЕтсзвтсс сво 17 «ЦІ 5УЗ «1 і? «Вих ДНК «01» штучна послідовність «80 хЕТйх о цдентетичний сліговнуклестий «0» 559 тавстсзаес ссводсс 17 еще а - 23 17 хаіїй дик «21їх штучна послідовність хЕБЕУ о чг«ах Синтетичний Олі танукизоатяд «а ВА ттзаттсзат сссасос 17 «ВМ щи «211 17 «е1о» ДНК ких ці Уучна послідовність «Ах Й Й «ВЯЙх синтетичний пазгомуклестид «Не БІ кттааттва гг 12 ха» БИ «ФМ З -ій дНИ «КАЛ» оштучма послідовність «их «23» обмитетичник пслігомуклеотид «З 58 хххжхлаєтка атсксках 17
«ВАЛ вАї «МІ І «Ей» днк . Й «ТХЖе щиучна послідваність єв «йЙДе обимтетичнихй блігопуклейтид «800 563 влас адек 17 «й М хеїїх 1 «іл дек «БІЙ» Бучма поглідовмість «23 «МКЯх опуимтетичний олігонукаватид село» ща сама садком 17 «ЕМ» БАХ хЕМЕх 17 «ій» НК «КІЗ» штуУЧНА послідовність
АІох са синНтТатичниВ спігенунлсстий яю Б ттпткттаат КсЯНХКЄ 17 «3105 ВЕ
ФАК ХУ хй1ї дк «ІА3в штучна песлідовністе ха» хай3» синтетичний олігронукдестий «Нім БЕЙ сФстсттстЗа Тс 1? «Ме КТ «іх 7 «ефе» днк й Й «Ух штМиНая пас ДОащН ть «вах «ККХЯх сантатичняй апзгомукаватид «МНК: ББУ азс ва аттса 1 «аЩе БОЄ «83 3 «212» днк «ВА» впучна послідовність кох «КА3и обимтетичний олігонуклеотид ка» а сизим затай 7
«є» во «КАХК ОО ХУ хз» днк «213» Штучня послідовність кад» І «223» синтетичний олігонунлезтид ох БУ дсацптоктт ївактса 47 «РО УМ «Му 17 «212» днк Й й «3» Штучна поплідонністо вч ОЯ «2йХ» динтвтичний олігонукливтид «кап 7 сасвалузиу сідає їУ «вій» БУй «М 3 «212» дак «К1ї» втучна воблідовність
АгІд» 3223 пинтетіа я заїігт ;, у
Сай» ПеЕнтатичмниМ опігомуклевтид «Ві ші ккІаказківк тка 17 «іа 57и
М, ЬякЯ
МАК м хаїї» дих «213» штучна послідявнікть «Аг» кай3» динтстуичний олігонуклябзтий кА пух чсасзасто сгІсспну 17 «їй 73 «А е ї7 «2310 днк «8113 штупняз послпідааНість «Ех Й «Ії» синтетичний плігануквостяй хан БИ такс сук хва 17 «ах 674 «а 4? «Вій ДНК «Ми» штучна паслідозність «2 Ве й «Ф2йх синтетичний аазгацуклеотид «НМ 574
«8305 БЕЗ «ккух З «йййх ДВК й «Ж3Я» зузна поклідовніктк «АЙ «йЖУх синів тТизний ОЗОНУ КЛЕО ВД, як. ВИХ пока Са 17 «ще ще -іМ Її «ках НЕ «М шнучна поситдовніеть «ВИК» хейцх симтетичний олігомукАаВОТий ев ВІК зоїтоїсоез остов Ех М «хЕЩі БЕ «Мі 17 «ВІ ДНК й й «КМ» дзумна послідовність сах «МІЯ» сюмтезкчний патгомукаванид «Ме БЕ?
ККД ОК 17 «ве 528 деку 3
Ах» ВВЕ «ЕК» щтучна поклідовнійть «ДО» І хАйПе обимтетичний олігонукавотий с щІВ пали пам 17 «ВМ Буй хаїї15 3 «вія» дик «ВІ УЧНаА ТОЛІДВВНИТК туя «ЙИЯе осинтатичний ОЛТгОНеКаВатид «ацам БІй хусток акя знов м «кіз» БВ хкайї» 37 «833х дик -4135 штТучНА песНідевність «ВЕ «Ії сивтТетечний диігчнукачетих
«МЕМ БМ «че вов ска їх:
Ме КІ «Тіз Її «ил ДНЕ Й кТВМіх штучка послідовні «ВМ
Коб сунтатичний одіконукаеотив хат Ах тзпазачссс зааТссТКА їз «ВХ 682 - КОЖ кА х хУ ДЕ хоїУх о жтузна дпослідозЗність «АПУ хІїїх синтетичний адігонукисстий «Ох ВЕ зтзоЗзааВсс саавУссс 12 «Ех На «ліг ІВ «ЕМ ДНК , й
АКЗІх щтУчна ПОЛ ДОВВІ ЮТЬ хво» ще детшІМ сиМушТХНВах зпіганУкаватва. «чим. ВЕ таїзопааавс соващтсся 15 «М ща ії З «как» ДНК , хаВї ошжучна послідовність
Сокя «КАЧЯ» одивтетичний сатгомухлестид «Нм х ОА гл атазава асгсаае 12 «Ме ВИ хеЩіМ 18 «иййе ДВК
З. ху г ех бухт каКе ручна пошдавн тк и Мх
Хей оСиктетичмий олігтомуклаватад каску БАЗ смлламвоха асо 15 «КА ВАВ «Еш Ж хх М дих «ФАЗ» штучна какліІДшАНІсть «Й23» синтятичний Зліген ткати д саке пес аказа аадеспеокай ї5 ха» ВВ «М 15 «аа» ДЕК й й «ВАЖ» Штучна послідовність седО я «ВКЙУ бумтетичний опігомукавмтид «щих. ДІ смлктатав зазассгав Ко кацін ВИЙ «М 35 твій» дик . «ХХ дірумна послідданчстк «ОА «ЛЯХ пентатичнеВ аваітамуклетид «Кі 55 акт таса зааааска Ії «30» БВ ке 3 «езк» ВВЕ й й «аа» штучна поплідовнікть
МЕСчй кол хе пиМмІТБтТИичМниЙй олігонукава ий «аск» ЩА яеасттпвтАк азадавогх 15 «и М хізвк їх «1» ВКЕ «Май» в уУчна послідовність поко. Й «ВИЗ» ОПННТЕТЕЧНИВ аг ОНУКАЛНЯТИА «нях 5 вижокетка кацазааих ХЕ «Аме ВХ хащі З «кі ДНК «ка» тТечии заслідванікат
ЕТО» «КК» Кунтетичний знігонуєнивтий «ще КЕ
ІЗББХАККЕХ вих З «ЗМ ЗО «ЖЖ М «І ДНК «815М штучна послідовність «ЕМП
«Я обимтатичний олігонуклаотид
«Вк 532 чоааасссо. тамасаладй 13 «ВУ вч ка11» 15
«212» ДНК Й
«ВІ» штучна послідовність
«ВА І
«ВУЖ.
Смнзатичний саігонукаватид
«нн» 533 аззааасссс ттатазааа 15 «МУ ВБОА
«2313» 18
«РИ ДК І І
«Ей дзучна поасатдовністк
«ЙЛх .
«ах синтезвчний алігоануклеатид
«ВН За саззааастх сттатазаа м «Ме Бах
«Ех
«Е3йк» ДНК й й
«ВАЇ»: тучна послідовність хйййУи ойимгтвтичний олігомуклеотид
-Мюз 835 жаззаайати псзгаваца 15 «з ВЗА ххх М
«21йх дих
«243» впУчЧНа яБВЕЛіДОВНІСТЬ
«ад» І
«Ай3» пинтетичний олігонУКАЄОТид
«(з БВ заслозцааає спиххатай 15 «віп» Уа;
«вже 1
«212 х днк
«йА1ї» штучна поплідовність кагох
-2й3» свнтТатвчний оаігомуклеогид
«аю Бе
«зисзочява стсстхйТа їв «210 535
«Віз З
«Мих ДНК хИїЖх штучна пасвідавність
Зх
Мч «КИ» опимтетиячмУй зпїігомукняозтид -д00з А сесаоєсвовай асп 18 «ай» М км 13 «432 дих «ВАЇ» бШручма послідовмісте «230 «ВАХ» обюміатичний олігомуковотид «МН М шазсоаода аасссла 15 «МІУ ТП «її М «212 дих «ДІЇ» дпучна послідовність «20 «22Ї» оПуентатичнюй оліконуУкавоутна «Ох 700 зчісказсада зааелсст 18 «2 ТО кМуюм «лїй» ДВК й й «й13 штучна поплідовність его» «Ава» бдимтетичний олігомуклеотид «аз 201 писсарлаз певаасегої ї9 «ай» ОпХ хі.» 15 хо1йз дик «аКУх штучна подлідевнідть «ще «ай3» сСинтетичнии БЛігОануУКЛЯВТКА ха М соти свцх вадаваляох 1 «ех 73 «2: 1 «РУ днк «213» штучна поспідовніст» «г хетіз синтетицний опігониклозтид «ЯНКне От сстжцІссВО саван ІЗ хгМе ла «211. 13 «Вій» ДНК «АВМ» штучна послідовність
«ІЙ»
БЖ хай» оСимтетичмий олігонуклвотид «аа 70 типоховеса поадолайх М «ау Я «її із «іх» ДНЕ І хЕХЯх штучна послідовність хау оСимтетичмий олігомуклвутид «НМ» УпУ псссстоаїсс зосаозааа 19 хаМм пЕб «11 ІЗ «вій ДНК ха» ручна послідовність «дО» «ХМ» Синтетичний пятгомукавотид «ННІ и ацетат ссрацсадца 1 «10 707 хеЩїїх 19 вай» ДВК . , «дЕУе штучна послідовність «ккд «ййЗи Семтатичний олігонуклеотий «пай» 705 тватонитста копала м «ка ОХ «її 15 «2125 дих «АЛ» вучна послідовність «2ох «АЖ3» сСкнтатичнюх блігом»уклвогмА пах 708 ссакцккккх фіскадєав та «23 В «1 15 кіз дек «АйЗ» штучна поплідовнікть «Кох «ЛЕ3» шнитетичний зпігонуклаеозтий «НИ м «ссзкчксск хаККсоМмаА їх
Або саду В «Вій» ДНК
ХВ» шжузна послідовність «Вр» хлдїх динтетичний олігонкклеотив «ВМ З Й тсессверссо статево М ка ЛА «ве 5 «зх ДНК «2Щїх втучза взсвідонвість
КОХ хЕкїх кивтатичний авіравунневтий км ТІ зХсссвоЗК сот ІЗ «а АХ хай ХВ «23іїмМ дик . Й «ЇВ3» Щтучна песнзздавність «ох й Й де 3х Кит етТисних спібанУкВООтТВД «НЕшео
ЗДЕСКсВКЦи СЕКТ КЯ. 13 «ЯН 73 «аа З «Ії ДЕК «МІХ штучна послідашність «ВИ хадй» унтетичний плігонуклестих «002 ТІ «савтсссвсц сосстаесе 18 «ЖЕ УТА «и З хоіїге НЕ й Й «23» сучка послідовник а, ху хеййх осимтатичний опзтовуУкиваїТнй «МК т «Ве КМ «ТВ З
Ей» ДК й й «ХХ» Штучна послідовність «ЛЖОх «ВИ: оСкнтатачниВ ааірамуУКаВОТИА «а От тткявкиика касешкках 5 «ЕК «іх 15
«ЕМіх днк І й «КІЇ3» штучиаа послідовність кЕгОх хвйїх сКинтотичвий здігонуклестид, «Ап х 716 зетсявтссс зсосссст 13 «аз ТА реце.
Еах дик -«кіїх штучна поспідянність сего» -ккіх синтетичний олігонуклозтид аю 71 зхакхсависс свІВссссх ІЗ «ій» 715 «каїм І еМйМ дих -2135 штучна послідавність «БІО» й «223» сиктетичнвй спібсонукновтид «Нв ЛІВ їззуїсавтс соБсосоЄ 13 «40; 713 «а 8 «Вій» ДНК хеії» Штучна послідовність «ЗІ» хІйїх щнтетичний длігонуклестий «Не 7395 ттавитсвавх ссср 15 дими Ем «кій» ІЗ «Вал» ДНК Й «й3їхМ чтучна паспЗдовність «ИЙ» «ФойхМ Симтевтахнай олЗіговуУкаватид «апа ТЛ тктавтксва тоссаспог 1 хай» жі «Мі З «212» ДНК : «МАЙ» омучна послідовність «або» й й «ай 3: пинтезичима ппігомуклетид хадох 721 тіхтваїтса атспкахоє 13 мА Як й
«М» 1 «та» ДНК й Й «Їй» штучна пюослідовність «ВВ й й «вай» пмвзатичник алігонуклестид «НЕ УЙЙ цідллагттс аатегеасо їх «Ме т «їі З «війт ДВК й «Мих штучна послідовні слтк «ай . Й «Тйх Синтетичний алігонуклевтий «Мн УЗ хауткттавтт садах М «ВМ ти тії о 15 «аїйа ДН І й «аїр» атучна послідовність «ам» що хайЯх оСимтетичмий олігомукавоутид «М» 733 глав таат тезайссоа 15 «ВМ УХХ «юн 1 «12» ДИМ «МАЖ: штучна поролідовність «ай соми - ; «йа3» Смнтатичний олігонукавотид «Зх 72У цехахххкай кткаатких 15 хай й «21ре В кхсі» дяк «кії» штучна песпідовнійть кеТгох еЕкЯ» оскнтетичмнУй олігонуклеутий с 225 ззіхзкктта агткадтях 39 «210 7 «31» 39 «МИ» днк «аї3» штучна песлідовність «ах хеїї» синтетичний звігонуклийтид «ЧО 727 сацстЗкхх затв 15
«ЕМ 725 «АР» ІЗ «Ах днк хеї3» шШтучза послідовність «В20х й хіх Кизтатичний олігознуклеотид «ВХ ТТ зезасіІзустт хтазутсвау ІЗ «дах 7ХВ «аїр 13 кгЗех днк «її штучна поспідавність
Его -К2їз сентетичняй олігануквовЗтид
НІ
«шксавсіЗК: хтаастовь Із -тісюв 230 «Ай З «232 дих «іі» штучна послідовність хау «023 сСинтстуичний сліганукнаатиу хан. Що теосЗОостоє тт сВ їі8 ха 73 «дії» ІЗ «Вій» ДНК й ха1їх» штучна послідовність «вабх кеш сявтТетичний здіговУуклеотид «Не У зіва тва ІЗ «Мох т «сії» ї8 хййй: ДНК «Зам штучна послідовність
ЕК кайИх синтетичний оплігомукизотид «Ва 0733 котесдсзаст оттттазтх 19 «ВМ. тд 1. 1 «атйм ДНИ «81» пучна послідовність «ВХ» Синтетичний олігонукавотид -0й» 733 туІвусосацо сабеекавх 15
«іп» 734 кеМЕх 35 «сік Дек хдаї3» Штучна поплідовність «Его» шк «Й опимівтичний олігонуклвотий «0 М
Фехаксцсза скоткттай їз хаЩпи кім 15 «232» ДВ хай» Бмучма послідовність «Й «23 обСимтвтичмий Олігомуклвотид «ММ» 735 мила декана 15 «МІХ У хЕїїхМ 15 «вій» ДНК й о «ВІ3» бпучна ппголідовність «ай «ВАХ» динтатичнивВ олігонуклайткд «00 736 кіркхвксяак айсщНлях їв «- Щі Те 7 З 7 «3М1х 15 хЕЩї» Дяк хййЯ» штучни пзслідавнійть «Ех «юка» Синтетичний здігбонукивотид іаох 717 хксасхакла «Ва ІЗ є» 23К «ай «23 дих -2135 щтучна подлідовністі» хх «ай3» сСинтатизний плігонукнтатай «ЯН. Уц
ТтттоасгтЯтс дсвастцкх 13 «Мо 73 «ех В «2 32 хо ДНК кезМи» еунна послідовність
ХАЙ кА кггїМ смитатичвих спіганукаеотид «М Уща
ЖЕсЕВаєтсот стос ЕНЕ Не
«ще ей Ще 15 «КіХ» ОДНЕ й І «ех штучна послідовне «ИЙ хаеїЯх синтетичний оліговуКАВОТИй «ати АД хім 74Х «Бі І «йійе ДНК І хеВБЯх Жтучна послідовність «ВИН
Хей сивтетичний слігонукаестий «ре зесссттата здзаззссє ЗЕ «ІМ тхХ «кі ІВ «воло» НК ще «КМ щетучнаА пегбаїдавміс. ха ййе й «ЖИйх спинтазечниВ паігонухавотид «В ИЙ засексктах авададех М «Ре Те «1 ЗК «хах» ВЕ хиїУ» щтучна послідовнійть «ВФУ» «КЕЯе о пимтжтимний опігонуклвутий «Кк 233 вими жала казанах 15 «В: Та
Ух, ха чЕАЖи зе «с» днк «а З» СВ УЧНІ врллідеВНіттіь хащОо» «ЙЙЗа обинтятичний пЛігаНнУКЛНА «іх та сини х вунцвний ХВ «і» УЗ хе 35 «ес днк «ФУ фтуцихя пезспілсоваість хЕоЦе «ой» симуткннах слісануклоатий «КК АХ
«да» 745 цк «МІХ ДНК «кА» втечНнІ васлідаввість
Ех «йКЯ» КинтТетТичиНнЯ аліговукваптий каОбх 748 «ка 747 ха 35 «ою днк «КАЛ» штучна песлідвністе «Том Й еХА3О опкнтєтичний спігчнуєваятий «вх 74 «ід ТА «АК хім ди «аа» о Втучна поснідониїсте ха» «223» осинкстичний звігозувнястнх «ні тлй засвзоачазавс ссстхвВ її хм Тая «ай ЗВ я МЕ НК . Й «КВУ Штучна поаслпідавнусть хаеОх ня «ЕтЖУ щКИинуштдиваВ апзгавнуУКЛОоТтиА хай» хі сага СеБТТКАХ ІЗ «МОм 755 «іх 18 «ий ДЕК й хоЩйЯх штучна послідевитТИть «ХМ хіпце осивтатичний оліголуклаєтид «Об їй семуазаая вссостта їх «Ще «їх хАаїл ДЕ і «КМ щуучка пОпліДОВНіТк «ЕЙ» пимтЕтичний ЗаїгОопукАвВОтид
«дО 5 кссадкадаа засссетх 1 ай» ВЕ я, хи ха я «212» дик «АХ» оштуУЧНаА послідевність «ОТО «аий3 Дентетичник опігонУєваязтид «Ох 752
Чісказкафу ааалеккх ї5 «ВІ 753 «віх «212» дих «ХУ» штучна подлідовність кагох «ау дийтитичний плігоанунлезтни хх 753 тохскацкар пааакиок 18 «вда 75й «ВМ А хІ1ї» днк «йа3х штучна послідовність
КжЬя «йКї» синтетичний плібзнукнаотий «ах тА с«стЗссспосЗ зЗаЗаЗосс 13 «Оз 5 «7ії» 15 «ВИх дих
ДА13х штучна послідовність «ВИН «ФІ3х синтетичний олігонуклеитай «ННх Я сстптссзФс зоазаасс 13 хм 75 «Ві» 15 «вам» ДНК хх» штучна послідовність «Й» й «ВКХУ Скнтатачнай аазгозуклестид «НМ яНУ спстаттгсай сазпааде 15 «еще Ту «г1їх 18 -212х дих хЕїле Бручна послідовність «ТО «скла» бинтіетичний плігомуклвотид
«АЮ ТАЙ «ссокоацтса зспоцвай 18 «ва 5 «їх 3 «212» дик «иіЩ» Біучма поблідовмість -й го» І . «КА» обимтжтичмний опігомуклевтид «00» 258 сти бедра па і8 «ВПУ Уа
ЧЕМ
«21»» днк «ВІЇ» Бучма послідовність «220 Й Й «ВА3» пюнтатУчник баігонуУуклайтид «оо 553 акдкккккох ккавкаді 15 «а УБО «В1Ех й «Еїд» дек Й й «АЕ3У» штучна нокхлідовнікть подо» «ВЗ» пийтетичний бліконуклязтид кап» ТВО сасасссте уссаоао 18 «аз 7 «23: 18 «232 дих . -кїїз шфтУчна песлідавність кегох сайі» свиТетТичнНЕЙ слігенуввевтид «ие 75 стсвсцстссу пуссяцся ї5 «ах 752 «Ех ІВ
Ух ; «2ійх днк хеїх» штучна послідовністе» «ЕП «Ей3Ї» сицтатичний здігонуйлавзтий «Мих ТБ? тттвгцсссс хукссвОК 13 «230х ТЕ «211 13 «хіх ДНЕ «Мі штучна послідовність «ах
«23» сивтстичний сдігонуклдестид, каф ТВ тсссвоосо сІЯуссвц їх «й 754 «231: 18 «Кі» дак «й13» штечна послідовність еще «ййї» шУнтитичвий сдігзнуклазтид ха УВА пхсссвсвпс ссхосса 18 яка 755 ха 18 леї2х дик Й Й «хі3» ШтУчНа пеосвідавність ке фух «хі» щеиНнтетичний звігануєвоптид
АМНІМ 75 муксссвсзК сс 15 ейійз ге «Й Кк й
ВАХ» ІВ «812: дик «213 Штучна посліжавнісКтх хе» о «Р2їх синустичний слігонуклеотив «ННію Убб сазтсссвсо ссостото іх хе лу «ві» ІВ «Вій» ДНК хеїх» штучва паслтдовність «аа «ВХ сунтеатимний аазганукаватид «НЕ. 957 тсваатстсах ЗО 15 «М ТБ «МІ 18 «кій» ДНЕ «ВІ» штучна послідовність ххипй» димтетичний олігомуклвотид «М 768 сайт єкка сама 18 «210 753 «211» хід дих Й «13» штучна поклідовність
«Ех й хІйїх свитетичний олігомукиеотий «я» ТВ вІтсввуссс ЗсеЯссссї ії іа» «г 15 «жі Дек «ЖАЗ» втучня воасвідавність «ЕХ жак3 синтетичний Зпігануклестий дух ТУ завтхсваВХсК свое ІЗ «ао ТУ «кі: 35 «ЕМ дик тейї» тТуЧНО ПОСЛІДОВНІСТЬ «ТИХ «8І3» скнтштичниЯВ звіранукиеатиа. сни» З таажжсВахс кеВ ї5 «ЕМме 2 «ай їй хе ДНК кЕі3» щтучка послідов сях «Ех І «й2Ях осуцтетичний олігонуклаотий «Не ТУХ я ттззттсзае ссозсосе іх «ВЩР КХХ «и» ЗВ «ейі ДНК І й «Хі» дчузна паспідовність «Й «ЕКУх Каніазинний аачгонукледтий ян ТЗ как тсда борг агоєх 15 «ЩО» У7я «ех 15 ух тен - 3 Хе ДН Й й «АЛ ошРучна послідовність
КА йи инІшТИчниИМ слігОомжклаОтиД «В а «ххтавттка ато її «Ве т кА «КІМ Дак «лам Штучна поплідовнікть
«ДТ ге хай» Синтетичний олігонуклаотид «НТ ТЕ спите закт зашскиає ік «30 7 «її» 18 «їде дНЕ «215м штучна поглідовністек «Ед» «вАйх пинтЕТичМмУМ олігнуклиатид «Ах ТВ заЕтткайхт савтсски 1 «МЕ 7 «ЖЕ 35 «ВІЙ» дк І «и» ж жчня вослідавизоть «вих «ЛЗ» Сентетичний олігонуклеотид «У ТУ «токккхїзак хсзасос їх «дій» 775 «віїх 15 «ХК: ВЕК хеААх дтучна послідовність «ад «Р2Ї» сСкатетнчвий апчтгонуклептид «а» ТУ чати вуса 48 са У7 ке В «в4йм днк «Ве еучив послідовність «ахох «ійЯт сСянтетачний опігонуКлатий «Кр ТВ засквіїтка втссавтс 158 «аайх 755 хвіїх ІК «Же» ДНК й й каії» Штучна послідовність кох «вЙїУ сивтетичний плігонуклавнтид «НМУ» ТВО «воастакхтт сахісгацх 15 «Її ТІ
КУ із ї8 тд» ДК
«ЗМ» штучна послідовність «Ве «Ейїх синтетичний олігомуклеотид «апа ДІ асзастотет тзаттсва Кк «ЕМ» 783 «гір 18 «вай» ДНК хг13х штучна послідовкість «ВПУ хіх синтетичний олігонуклестид «3005 тд сасвостост стаз іх хаМе 785 «вл ІВ «ДТ: ВК хтїХ»У шжучва послідовність «до
КЕЙ» пантетичний ааугонуклестид «МНН УЗ кгезсаиев тва 15 «МУ ТЯ -2їх 18
Ух ту хеййе ДЕ Й й «1. штучна послідовність «ай «ФЕП оцимтетичмий олігонукавозид «НК ТАЗ птезеадоста крав М «РМ ТЙх хг11з 18 «дала» дви , й «іх шпучна послідовність ках «фей сСинтаетичнив алігонукаватид «М 7855 твплаааєсти адатскх 15 «й Що УББ «їм 35 хті)сз дик хаі35 ту поспідбеміст «кі3о Штучна поблідовмість кЕгОох «83 осВНтТЯТИичНЕЙ боігонуклевзгид «НЕ ВЕ зізузввзасу свавВІКсЕ 18 «210 787 «ВАК» 18 кої дик єкі3» штучна пеоспідавнісуь кох «ЕВ3Щ» свнтатИичний алігануклавтид «вх 757 хатабвваде ссязНтсе 18 «ве ТВА «ВМ «21й дик «13» штучна послідовність «920» «23» пинтитТичНий злігенунннатий «хЗОобх 785 кІйхацчиаах «сквАЗкЕ 18 «іх 78 «вві» ІВ «й1йх дик -2135 штучка посглівазисть кох «223» синутустичний ослігонувиестих
БЕН НУ сІхвхяцяйа Зсссваах 15 кбійх 730 «211: 18 «их ДНК х2ї3х штучна послідовність «ВПУ й й хх щинтетичний олігонуклеотид оно ЗО ссттатазаа аасссааа ї5 «це Ту хіх 38 «й: ДВЕ «ВХїх лучна погАідовністк
ЖИАк «ім Симітвтичний ол гОопуУКЛЕЧУТИД хай» ссоткаєаца ааассова 18 «ВА 7ВЙ «23їх 18 «212» дак Й «йі32 штучна песлідовність ггОох . «ква» сЕНтТЯтичНий опігонуютнутид «кт хЗккчІЗусх БЕХ 15 «ем 2 ях М
«313» дн ще ххх тучна посліДОВНІСТЬ
«Ева»
«АЙЛУ опвкмтатичних злігтсвіуєдевотид
«00: 753 минає мезлллай ІВ «ВМ ММ кг11х і
«вій ДЕК Й Й
«ВАЙУ овручна посблідеймість
«230»
«ВАХ» обюмтетичний олігонулевтид
«00 0 За змовсвоав спла 15 «ВМтХ УЧ хаїїх 18
«ай дик
«13» одлпучна похлідовність
«330
«23» сСвнучтичниЙй длігознувлазтий
«НУ шнурка ЗСУ ХХ їх «2102 735
«віх 18 хз дек
-2Р3» штучна послідовність хагх
«ай3ї» синтетичний олігомнуклестид
«Ах УЗА ттоссоссце застастх 1 «Ме 0О79у
«в» ІВ
«ай днк Й ,
«231» штучна послідавністк
«Ве й яТЇї» смататичний авпігонУкаид
«НМ 0 УЗУ зала сах 14 «їй 795
-г11х 1 екз де
«ТАТ» шіучма послідовність
«Во»
«ХХХ» обюмтетменив блігонуклевтид
«ах 733 тихих каз 13
«Ме мк «211х 18 «Кай ДНК й хаЦМіх ртучка послідовність «ВР хеййх цинтетичний олігонуклеотид «НН а тЕТттастоє сосвасТо ії хм Но «211 ЛЕ «їй» ДНК хі)» штучна послздовнЗ сть «дае Й хІїй» сантеатичний слігомуклестид «я: Вод зааасссааа сс 15 «еще Я я, Я ня з ії5 «212» ДНК Й й їй» штучна посадова ст пах штУчна пасаздавна ск «вайх Спинзатичний опзковукаготд «В В ададайссста аатсст 16 «Ме 802
МІХ а теййз ДК «ВАЛ» Штучна послідовність «й» хай3» пюмівтичмий блігомукляотий «з 802 тахасбаалає болад ї6 «і: ВОЗ ках 16 «210» дих «13» штучна похлідовність ках сайа3в синтетичний плігонунлизтий «о» Бах тївтвцийна сссдиВ 15 хЕМе 8 «вай й «212 днк ят1Ух штучна паспідавність «каде кегІх синтатичинчй алігонукаотид хан щи сатааззоз цевого 2
«Ох Ок «й й «Але ДНК . й ху штучна пасатдианитюк «ах й . хай ценз ВтТичниМ пат амУКаВИтид «НМ» ВИХ зіссттгвцс сао аВеа Ки «КЕ ще «ай ка хай: ДНК Й Й
ДЕК щу Уучваа песатдевн ет «Й» «йх пинтатечний ЗліКОнуклетий, «НК 53 зетчстІата Мак ди «Ох ВО
ТЕ Щїр ха ха їй» ДЕ Й й «ВЕУ» тучна поклідовнікть
КУ ах . . «ВИЗ опинтвтнчний вліБбнунливтий «аа 53 ккал ат совка Ве КУ «ие ВЗА «а т «23Їх дяк «ка» щтжчня песпідавНіст» «ЕТох . . «Хи3» щинуштТасвиЙй спісацУкдноптяВ
НЕ ЩЕ
ХЕККлашККА ЧК КУ его» ВОЗ «акме ХВ хи Дек «3 жЖтуузка посівні сть
АК: хойіх сицтетичний солігонукавотих «не В сетжсссєв зе т «ЦЕ я хвйй А хай ЯН . - «САУ ошзучна пюесяідианттв жиХйх хай» праймер «МКЮоО ЩІа аахокескоук паці ка З
«гій ВІ 81їх 21 «Кі» ДВК «ФАХ» Штучна поплідовнікть яЕКах «ЕХ» Повлимео «ча» пшнзаата Ззтпазакоко З ах «вах ВІЙ «ІМ 2 «дій» дак «ТАЗ» Втучна ясплідовніясть»
Бач «ТУ ВомА «ау» 1 сасезатає сасалеєсаво своя 47 «кій» ІЗ «231 54 «332х дак «йі3» штеУчна васлідовність «ЕОМ «дКї» пазраєеи «МЮх щІЗ сзазасвасх сазтцавакс 33 їх «еф Віа хай ДНК «З13х штучка послідовність «й ре 5 «ФЕїх праймер «Нм ВІ тоасстоозоо оссжвсвх її «ЦІ: щл «211х 15 «В1йз ДЕК Й «ВІЯх Бмучма послідовмість «вйдх «В3Ї5 зонд «еНМІх 815 азаккасаав зіва, їБ «21» ВІ «Хі» 20 «М: дак «2132 штУчеи послідоанікст» кг ох яай3» повймев «ще ща да9сззвсвО сазтхссосо3 ТИ «Мох 8 «21» 23 «ай» ДНК й хІії3» Штучна послідовність «ге0У х233» праймер «щи. 01у таастзссса ссттсстох 20 «ЕМО: 8515 «пай В «3 днк «831» штучна поспїдовнстк «йодх
АРІ Зача «КИ. ВІВ «хзааквску ставі заТас 25 «Моз «А» Я «гій» дик Й Й «23 нучна послідавнікти «Ав» «ФМ Смивтетичний олігануклеотед «апа ВІЗ «аю НІ -21ї1х 1 «сил» ДНЕ хйїйх штучна поспідовмість са «ХАЯх оСимтетичмий олігонуклеотид «ВМ В каста ада ел Н

Claims (14)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Сполука, яка містить модифікований олігонуклеотид, що складається з (ї) 20 зв'язаних нуклеозидів, що має послідовність нуклеотидних основ, яка складається з будь-якої з 5ЕО ІЮ МО: 440, 198, 228, 237, 444, 448, 450, 453 і 455, або (ії) 16 зв'язаних нуклеозидів, що має послідовність нуклеотидних основ, яка складається з 5ЕО І МО: 549 або 598, при цьому зазначений модифікований олігонуклеотид містить: геп-сегмент, що складається зі зв'язаних дезоксинуклеозидів; сегмент 5'-крило, що складається зі зв'язаних нуклеозидів; і сегмент 3'-крило, що складається зі зв'язаних нуклеозидів; при цьому геп-сегмент розташований між 5'-сегментом-крилом і 3'і'-сегментом крилом, і при цьому кожен нуклеозид кожного сегмента-крила містить 2'-О-метоксіетил-цукор або сЕСцукор; при цьому кожен міжнуклеозидний зв'язок являє собою фосфоротіоатний зв'язок, і при цьому кожен цитозин є 5-метилцитозин.
2. Сполука за п. 1, де модифікований олігонуклеотид складається з 20 зв'язаних нуклеозидів, що має послідовність нуклеотидних основ, яка складається з послідовності, представленої в ЗБЕО ІО МО: 440, 198, 228, 237, 444, 448, 450, 453 або 455, при цьому модифікований олігонуклеотид містить геп-сегмент, що складається з десяти зв'язаних дезоксинуклеозидів; сегмент 5'-крило, що складається з п'яти зв'язаних нуклеозидів; і сегмент 3'-крило, що складається з п'яти зв'язаних нуклеозидів; при цьому геп-сегмент розташований між 5'-сегментом-крилом і 3'-сегментом крилом, при цьому кожен нуклеозид кожного сегмента-крила містить 2'-О-метоксіетил-цукор; при цьому кожен міжнуклеозидний зв'язок являє собою фосфоротіоатний зв'язок, і при цьому кожен цитозин є 5- метилцитозин.
З. Сполука за п. 2, де модифікований олігонуклеотид складається з 20 зв'язаних нуклеозидів, що має послідовність нуклеотидних основ, яка складається з послідовності, представленої в Зо ЗЕО ІЮ МО: 440, при цьому модифікований олігонуклеотид містить геп-сегмент, що складається з десяти зв'язаних дезоксинуклеозидів; сегмент 5'-крило, що складається з п'яти зв'язаних нуклеозидів; і сегмент 3'-крило, що складається з п'яти зв'язаних нуклеозидів; при цьому геп-сегмент розташований між 5'-сегментом-крилом і 3'-сегментом крилом, при цьому кожен нуклеозид кожного сегмента-крила містить 2'-О-метоксіетил-цукор; при цьому кожен міжнуклеозидний зв'язок являє собою фосфоротіоатний зв'язок, і при цьому кожен цитозин є 5- метилцитозин.
4. Сполука за п. 1, де модифікований олігонуклеотид складається з 16 зв'язаних нуклеозидів, що має послідовність нуклеотидних основ, яка складається з послідовності, представленої в ЗЕО ІЮ МО: 598, при цьому модифікований олігонуклеотид містить геп-сегмент, що складається з десяти зв'язаних дезоксинуклеозидів; сегмент 5'-крило, що складається з трьох зв'язаних нуклеозидів; і сегмент 3'-крило, що складається з трьох зв'язаних нуклеозидів; при цьому геп-сегмент розташований між 5'-сегментом-крилом і 3'-сегментом крилом; при цьому сегмент 5-крило містить 2"-О-метоксіетил-цукор, 2'-О-метоксіетил-цукор і сЕїцукор в 5-3- напрямку; при цьому сегмент 3'-крило містить СЕЇ-цукор, СЕЕцукор і 2'-О-метоксіетил-цукор в 5"- 3'-напрямку; при цьому кожен міжнуклеозидний зв'язок являє собою фосфоротіоатний зв'язок; і при цьому кожен цитозин є 5-метилцитозин.
5. Сполука за п. 1, де модифікований олігонуклеотид складається з 16 зв'язаних нуклеозидів, що має послідовність нуклеотидних основ, яка складається з послідовності, представленої в ЗЕО ІЮ МО: 549, при цьому модифікований олігонуклеотид містить геп-сегмент, що складається з десяти зв'язаних дезоксинуклеозидів; сегмент 5'-крило, що складається з трьох зв'язаних нуклеозидів; і сегмент 3'-крило, що складається з трьох зв'язаних нуклеозидів; при цьому геп-сегмент розташований між 5'-сегментом-крилом і 3'-сегментом крилом; при цьому кожен нуклеозид кожного сегмента-крила містить СЕЇ-цукор; при цьому кожен міжнуклеозидний зв'язок являє собою фосфоротіоатний зв'язок, і при цьому кожен цитозин є 5-метилцитозин.
6. Композиція, здатна інгібувати експресію фактора В комплемента (СЕВ), яка містить сполуку за будь-яким з пп. 1-5 або її сіль і фармацевтично прийнятний носій.
7. Спосіб лікування, запобігання або полегшення захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента, у суб'єкта, який включає введення зазначеному Зо суб'єкту сполуки за будь-яким з пп. 1-5 або композиції за п. б, що забезпечує лікування, запобігання або полегшення зазначеного захворювання.
8. Спосіб за п. 7, де альтернативний шлях активації комплемента активований на рівні вище нормального.
9. Спосіб за п. 7, де захворювання являє собою дегенерацію жовтої плями, вікову дегенерацію жовтої плями (АМО), вологу форму АМО, суху форму АМО або географічну атрофію.
10. Спосіб за п. 7, де захворювання являє собою захворювання нирок, вовчаковий нефрит, системний червоний вовчак (ЗЕ), хворобу щільного осаду (000), СЗ-гломерулонефрит (СзаМ), СЕНАВ5-нефропатію або атиповий гемолітико-уремічний синдром (аНни5Б).
11. Застосування сполуки за будь-яким з пп. 1-5 або композиції за п. б для виготовлення лікарського засобу для лікування, запобігання або полегшення захворювання, пов'язаного з дисрегуляцією альтернативного шляху активації комплемента.
12. Застосування за п. 11, де альтернативний шлях активації комплемента активований на рівні вище нормального.
13. Застосування за п. 11, де захворювання являє собою дегенерацію жовтої плями, вікову дегенерацію жовтої плями (АМО), вологу форму АМО, суху форму АМО або географічну атрофію.
14. Застосування за п. 11, де захворювання являє собою захворювання нирок, вовчаковий нефрит, системний червоний вовчак (51Е), хворобу щільного осаду (000), сС3- гломерулонефрит (СЗОМ), СЕНЕК5-нефропатію або атиповий гемолітико-уремічний синдром (анивб).
UAA201603969A 2013-09-13 2014-12-09 Модулятор фактора в комплемента UA119046C2 (uk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361877624P 2013-09-13 2013-09-13
PCT/US2014/055458 WO2015038939A2 (en) 2013-09-13 2014-09-12 Modulators of complement factor b

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA119046C2 true UA119046C2 (uk) 2019-04-25

Family

ID=52666522

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201603969A UA119046C2 (uk) 2013-09-13 2014-12-09 Модулятор фактора в комплемента

Country Status (33)

Country Link
US (5) US20160222389A1 (uk)
EP (2) EP3603677A1 (uk)
JP (3) JP6666250B2 (uk)
KR (1) KR102381790B1 (uk)
CN (2) CN105744959B (uk)
AU (2) AU2014318580B2 (uk)
BR (1) BR112016004671B1 (uk)
CA (1) CA2921842A1 (uk)
CL (2) CL2016000606A1 (uk)
CR (1) CR20160170A (uk)
DK (1) DK3043827T3 (uk)
DO (1) DOP2016000063A (uk)
EA (1) EA035433B1 (uk)
ES (1) ES2745758T3 (uk)
HK (1) HK1225638A1 (uk)
HR (1) HRP20191600T1 (uk)
HU (1) HUE045109T2 (uk)
IL (1) IL244095A0 (uk)
LT (1) LT3043827T (uk)
MA (1) MA38959A1 (uk)
MX (2) MX371518B (uk)
MY (1) MY181251A (uk)
PE (2) PE20160500A1 (uk)
PH (1) PH12016500443A1 (uk)
PL (1) PL3043827T3 (uk)
PT (1) PT3043827T (uk)
RS (1) RS59252B1 (uk)
RU (1) RU2662967C2 (uk)
SG (2) SG10201806787VA (uk)
SI (1) SI3043827T1 (uk)
UA (1) UA119046C2 (uk)
WO (1) WO2015038939A2 (uk)
ZA (1) ZA201601236B (uk)

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK2092065T4 (da) 2006-10-18 2019-10-21 Ionis Pharmaceuticals Inc Antisense-forbindelser
EP3067421B1 (en) 2011-02-08 2018-10-10 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds comprising bicyclic nucleotides and uses thereof
RU2686080C2 (ru) 2013-05-01 2019-04-24 Ионис Фармасьютикалз, Инк. Композиции и способы
PL3043827T3 (pl) * 2013-09-13 2020-03-31 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulatory czynnika b dopełniacza
SG11201604692UA (en) * 2013-12-12 2016-07-28 Alnylam Pharmaceuticals Inc Complement component irna compositions and methods of use thereof
RS59182B1 (sr) * 2014-05-01 2019-10-31 Ionis Pharmaceuticals Inc Kompozicije i postupci za modulaciju ekspresije faktora b komplementa
WO2017135397A1 (ja) * 2016-02-05 2017-08-10 協和発酵キリン株式会社 補体ｂ因子の発現を抑制するアンチセンスオリゴヌクレオチド
AU2017290593A1 (en) 2016-06-27 2019-01-03 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Quinazoline and indole compounds to treat medical disorders
AU2017368050A1 (en) 2016-11-29 2019-06-20 Puretech Lyt, Inc. Exosomes for delivery of therapeutic agents
TW201827596A (zh) * 2016-12-23 2018-08-01 日商協和醱酵麒麟有限公司 抑制補體b因子之表現之核酸
WO2019027015A1 (ja) * 2017-08-02 2019-02-07 協和発酵キリン株式会社 核酸複合体
EP3704252A1 (en) 2017-11-01 2020-09-09 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Complement component c3 irna compositions and methods of use thereof
WO2020109343A1 (en) 2018-11-29 2020-06-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy for treatment of macular degeneration
EP4142738A1 (en) * 2020-04-30 2023-03-08 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Complement factor b (cfb) irna compositions and methods of use thereof
WO2022028507A1 (zh) 2020-08-07 2022-02-10 上海美悦生物科技发展有限公司 一种杂环类化合物、其制备方法及用途
KR20230049115A (ko) 2020-08-07 2023-04-12 상하이 메이유에 바이오테크 디벨롭먼트 컴퍼니 리미티드 보체 인자 b 억제제 및 이의 약학적 조성물, 제조 방법 및 용도
AU2022325715A1 (en) * 2021-07-17 2024-02-01 Sirnaomics, Inc. Products and compositions
EP4396346A1 (en) 2021-09-02 2024-07-10 Silence Therapeutics GmbH Nucleic acids for inhibiting expression of complement factor b (cfb) in a cell
IL312399A (en) 2021-10-29 2024-06-01 Alnylam Pharmaceuticals Inc Complement factor B (CFB) iRNA compositions and methods of using them
WO2023129496A2 (en) * 2021-12-27 2023-07-06 Apellis Pharmaceuticals, Inc. Rnas for complement inhibition
KR20240108505A (ko) 2022-01-26 2024-07-09 상하이 메이유에 바이오테크 디벨롭먼트 컴퍼니 리미티드 보체 인자 b 억제제의 염 형태, 결정형, 이의 제조 방법 및 응용
WO2024097861A1 (en) * 2022-11-02 2024-05-10 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Methods for modulating complement factor b expression

Family Cites Families (65)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5118800A (en) 1983-12-20 1992-06-02 California Institute Of Technology Oligonucleotides possessing a primary amino group in the terminal nucleotide
FR2567892B1 (fr) 1984-07-19 1989-02-17 Centre Nat Rech Scient Nouveaux oligonucleotides, leur procede de preparation et leurs applications comme mediateurs dans le developpement des effets des interferons
US5185444A (en) 1985-03-15 1993-02-09 Anti-Gene Deveopment Group Uncharged morpolino-based polymers having phosphorous containing chiral intersubunit linkages
US5166315A (en) 1989-12-20 1992-11-24 Anti-Gene Development Group Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids
US5506337A (en) 1985-03-15 1996-04-09 Antivirals Inc. Morpholino-subunit combinatorial library and method
US5034506A (en) 1985-03-15 1991-07-23 Anti-Gene Development Group Uncharged morpholino-based polymers having achiral intersubunit linkages
US5591722A (en) 1989-09-15 1997-01-07 Southern Research Institute 2'-deoxy-4'-thioribonucleosides and their antiviral activity
ATE190981T1 (de) 1989-10-24 2000-04-15 Isis Pharmaceuticals Inc 2'-modifizierte nukleotide
US5646265A (en) 1990-01-11 1997-07-08 Isis Pharmceuticals, Inc. Process for the preparation of 2'-O-alkyl purine phosphoramidites
US5670633A (en) 1990-01-11 1997-09-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Sugar modified oligonucleotides that detect and modulate gene expression
GB9009980D0 (en) 1990-05-03 1990-06-27 Amersham Int Plc Phosphoramidite derivatives,their preparation and the use thereof in the incorporation of reporter groups on synthetic oligonucleotides
EP0455905B1 (en) 1990-05-11 1998-06-17 Microprobe Corporation Dipsticks for nucleic acid hybridization assays and methods for covalently immobilizing oligonucleotides
DE59208572D1 (de) 1991-10-17 1997-07-10 Ciba Geigy Ag Bicyclische Nukleoside, Oligonukleotide, Verfahren zu deren Herstellung und Zwischenprodukte
US5359044A (en) 1991-12-13 1994-10-25 Isis Pharmaceuticals Cyclobutyl oligonucleotide surrogates
FR2687679B1 (fr) 1992-02-05 1994-10-28 Centre Nat Rech Scient Oligothionucleotides.
EP0577558A2 (de) 1992-07-01 1994-01-05 Ciba-Geigy Ag Carbocyclische Nukleoside mit bicyclischen Ringen, Oligonukleotide daraus, Verfahren zu deren Herstellung, deren Verwendung und Zwischenproduckte
JPH08504559A (ja) 1992-12-14 1996-05-14 ハネウエル・インコーポレーテッド 個別に制御される冗長巻線を有するモータシステム
AU6449394A (en) 1993-03-30 1994-10-24 Sterling Winthrop Inc. Acyclic nucleoside analogs and oligonucleotide sequences containing them
US5446137B1 (en) 1993-12-09 1998-10-06 Behringwerke Ag Oligonucleotides containing 4'-substituted nucleotides
US5519134A (en) 1994-01-11 1996-05-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Pyrrolidine-containing monomers and oligomers
US5627053A (en) 1994-03-29 1997-05-06 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. 2'deoxy-2'-alkylnucleotide containing nucleic acid
US5597909A (en) 1994-08-25 1997-01-28 Chiron Corporation Polynucleotide reagents containing modified deoxyribose moieties, and associated methods of synthesis and use
US6770748B2 (en) 1997-03-07 2004-08-03 Takeshi Imanishi Bicyclonucleoside and oligonucleotide analogue
JP3756313B2 (ja) 1997-03-07 2006-03-15 武 今西 新規ビシクロヌクレオシド及びオリゴヌクレオチド類縁体
US6794499B2 (en) 1997-09-12 2004-09-21 Exiqon A/S Oligonucleotide analogues
ES2242291T5 (es) 1997-09-12 2016-03-11 Exiqon A/S Análogos de nucleósidos bicíclicos y tricíclicos, nucleótidos y oligonucleótidos
US6043352A (en) 1998-08-07 2000-03-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. 2'-O-Dimethylaminoethyloxyethyl-modified oligonucleotides
WO2000021559A2 (en) * 1998-10-09 2000-04-20 Musc Foundation For Research Development Blocking factor b to treat complement-mediated immune disease
AU781598B2 (en) 1999-04-21 2005-06-02 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for inhibiting the function of polynucleotide sequences
ATE356824T1 (de) 1999-05-04 2007-04-15 Santaris Pharma As L-ribo-lna analoge
US6525191B1 (en) 1999-05-11 2003-02-25 Kanda S. Ramasamy Conformationally constrained L-nucleosides
EP1244667B1 (en) 1999-12-30 2006-04-05 K.U. Leuven Research & Development Cyclohexene nucleic acids
CA2452458A1 (en) 2001-07-03 2003-01-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. Nuclease resistant chimeric oligonucleotides
US6964950B2 (en) * 2001-07-25 2005-11-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of C-reactive protein expression
EP2325303B1 (en) * 2002-09-13 2013-11-06 Life Technologies Corporation Thermostable reverse transcriptases and uses thereof
WO2004044132A2 (en) 2002-11-05 2004-05-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modified oligonucleotides for use in rna interference
CA2504694C (en) 2002-11-05 2013-10-01 Isis Pharmaceuticals, Inc. Polycyclic sugar surrogate-containing oligomeric compounds and compositions for use in gene modulation
DK2284266T3 (da) 2002-11-14 2014-01-13 Thermo Fisher Scient Biosciences Inc sIRNA-MOLEKYLE MOD TP53
US6673661B1 (en) 2002-12-20 2004-01-06 Taiwan Semiconductor Manufacturing Co., Ltd. Self-aligned method for forming dual gate thin film transistor (TFT) device
WO2004103288A2 (en) 2003-05-13 2004-12-02 New York Society For The Ruptured And Crippled Maintaining The Hospital For Special Surgery Method of preventing recurrent miscarriages
JP4731324B2 (ja) 2003-08-28 2011-07-20 武 今西 Ｎ−ｏ結合性架橋構造型新規人工核酸
WO2005027962A1 (en) 2003-09-18 2005-03-31 Isis Pharmaceuticals, Inc. 4’-thionucleosides and oligomeric compounds
US7959919B2 (en) 2003-11-19 2011-06-14 Novelmed Therapeutics, Inc. Method of inhibiting factor B-mediated complement activation
PT1713503E (pt) * 2004-02-10 2013-11-14 Nat Jewish Health Inibição do factor b, a via alternativa do complemento e métodos relacionados
KR20070085113A (ko) * 2004-05-11 2007-08-27 가부시키가이샤 알파젠 Rna간섭을 생기게 하는 폴리뉴클레오티드, 및 이를 이용한유전자발현억제 방법
JP2008501693A (ja) 2004-06-03 2008-01-24 アイシス ファーマシューティカルズ、インク． 遺伝子調節で使用するための個別に調節された鎖を有する二本鎖組成物
EP1799859B1 (en) * 2004-09-17 2014-07-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Enhanced antisense oligonucleotides
WO2006047842A2 (en) 2004-11-08 2006-05-11 K.U. Leuven Research And Development Modified nucleosides for rna interference
GB0521716D0 (en) * 2005-10-25 2005-11-30 Genomica Sau Modulation of 11beta-hydroxysteriod dehydrogenase 1 expression for the treatment of ocular diseases
PL2314594T3 (pl) 2006-01-27 2014-12-31 Isis Pharmaceuticals Inc Zmodyfikowane w pozycji 6 analogi bicykliczne kwasów nukleinowych
CA2651453C (en) 2006-05-11 2014-10-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. 5'-modified bicyclic nucleic acid analogs
US8809514B2 (en) * 2006-09-22 2014-08-19 Ge Healthcare Dharmacon, Inc. Tripartite oligonucleotide complexes and methods for gene silencing by RNA interference
CN101589143A (zh) * 2006-11-27 2009-11-25 Isis药物公司 用于治疗高胆固醇血症的方法
US20100190837A1 (en) 2007-02-15 2010-07-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. 5'-Substituted-2-F' Modified Nucleosides and Oligomeric Compounds Prepared Therefrom
WO2008106644A2 (en) * 2007-03-01 2008-09-04 Advanced Vision Therapies, Inc. Treatment of diseases characterized by inflammation
CA2688321A1 (en) 2007-05-30 2008-12-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. N-substituted-aminomethylene bridged bicyclic nucleic acid analogs
EP2173760B2 (en) 2007-06-08 2015-11-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Carbocyclic bicyclic nucleic acid analogs
ES2376507T5 (es) 2007-07-05 2015-08-31 Isis Pharmaceuticals, Inc. Análogos de ácidos nucleicos bicíclicos 6-disustituidos
CA2730203C (en) * 2008-07-10 2016-12-13 Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam Complement antagonists and uses thereof
DK2361256T3 (da) 2008-09-24 2013-07-01 Isis Pharmaceuticals Inc Cyclohexenyl-nukleinsyreanaloger
CN103154014B (zh) 2010-04-28 2015-03-25 Isis制药公司 修饰核苷、其类似物以及由它们制备的寡聚化合物
WO2012012443A2 (en) * 2010-07-19 2012-01-26 Bennett C Frank Modulation of dystrophia myotonica-protein kinase (dmpk) expression
EP2697244B1 (en) * 2011-04-13 2017-05-17 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of ptp1b expression
PL3043827T3 (pl) 2013-09-13 2020-03-31 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulatory czynnika b dopełniacza
RS59182B1 (sr) * 2014-05-01 2019-10-31 Ionis Pharmaceuticals Inc Kompozicije i postupci za modulaciju ekspresije faktora b komplementa

Also Published As

Publication number Publication date
SG11201601445XA (en) 2016-03-30
WO2015038939A3 (en) 2015-07-02
ES2745758T3 (es) 2020-03-03
JP7158363B2 (ja) 2022-10-21
US20160222389A1 (en) 2016-08-04
MA38959A1 (fr) 2017-08-31
CA2921842A1 (en) 2015-03-19
CN105744959B (zh) 2020-12-01
US20190048351A1 (en) 2019-02-14
CL2016000606A1 (es) 2017-02-17
SG10201806787VA (en) 2018-09-27
PE20160500A1 (es) 2016-05-21
HUE045109T2 (hu) 2019-12-30
CR20160170A (es) 2016-07-15
AU2014318580B2 (en) 2019-12-12
WO2015038939A2 (en) 2015-03-19
KR20160054595A (ko) 2016-05-16
MX2020001258A (es) 2020-03-20
EP3043827A4 (en) 2017-05-24
PH12016500443A1 (en) 2016-05-16
LT3043827T (lt) 2019-08-12
CL2018002334A1 (es) 2018-12-14
RU2662967C2 (ru) 2018-07-31
JP7297112B2 (ja) 2023-06-23
AU2020201763A1 (en) 2020-04-02
HRP20191600T1 (hr) 2019-11-29
CN112359042A (zh) 2021-02-12
JP2022058784A (ja) 2022-04-12
DOP2016000063A (es) 2016-06-01
EA035433B1 (ru) 2020-06-15
HK1225638A1 (zh) 2017-09-15
RU2016113763A (ru) 2017-10-16
JP2016533765A (ja) 2016-11-04
US20240247268A1 (en) 2024-07-25
MX371518B (es) 2020-01-31
US11926830B2 (en) 2024-03-12
RS59252B1 (sr) 2019-10-31
MX2016003263A (es) 2016-12-08
DK3043827T3 (da) 2019-08-26
US20200149047A1 (en) 2020-05-14
PE20190354A1 (es) 2019-03-07
EA201690582A1 (ru) 2016-07-29
MY181251A (en) 2020-12-21
JP2020036600A (ja) 2020-03-12
EP3043827B1 (en) 2019-07-03
PT3043827T (pt) 2019-09-26
BR112016004671B1 (pt) 2020-12-29
EP3603677A1 (en) 2020-02-05
JP6666250B2 (ja) 2020-03-13
US20220243209A1 (en) 2022-08-04
SI3043827T1 (sl) 2019-08-30
KR102381790B1 (ko) 2022-03-31
IL244095A0 (en) 2016-04-21
PL3043827T3 (pl) 2020-03-31
EP3043827A2 (en) 2016-07-20
AU2014318580A1 (en) 2016-03-03
CN105744959A (zh) 2016-07-06
ZA201601236B (en) 2017-05-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA119046C2 (uk) Модулятор фактора в комплемента
US20240318183A1 (en) Modulation of prekallikrein (pkk) expression
Wu et al. In vitro and in vivo study of phloretin‐induced apoptosis in human liver cancer cells involving inhibition of type II glucose transporter
UA126266C2 (uk) ДВОНИТКОВИЙ ЗАСІБ ДЛЯ RNAi, ЗДАТНИЙ ІНГІБУВАТИ ЕКСПРЕСІЮ HAO1 (ОКСИДАЗИ 1 ГІДРОКСИКИСЛОТ (ГЛІКОЛАТОКСИДАЗИ)) В КЛІТИНІ
UA121656C2 (uk) Олігомерна сполука та спосіб лікування захворювання, пов'язаного з порушенням регуляції альтернативного шляху комплементу
US20200206153A1 (en) Use of cannabidiol in the treatment of tuberous sclerosis complex
UA128406C2 (uk) Сполуки та способи для зниження експресії lrrk2
CN107083385A (zh) 产热的miRNA调节剂
SA515361121B1 (ar) تركيبات تخطي للأكسون خاصة بمعالجة الحَثَل العَضَلِيّ
CN103314003A (zh) 通过特异性内源miRNA 激活表达的组合物和方法
ES2743600T3 (es) Métodos de tratamiento de los trastornos inflamatorios vasculares
HUE031559T2 (hu) Eljárás angiogenezis, vaszkularizáció vagy érjavítás elõsegítésére vagy tumor-angiogenezis gátlására
US20210395733A1 (en) Monocarboxylate Transporter 4 (MCT4) Antisense Oligonucleotide (ASO) Inhibitors For Use As Therapeutics In The Treatment Of Cancer
UA124961C2 (uk) ДВОНИТКОВА РИБОНУКЛЕЇНОВА КИСЛОТА (dsRNA) ДЛЯ ІНГІБУВАННЯ ЕКСПРЕСІЇ ALAS1
CN106310275A (zh) 用于降低细胞衰老水平的组合物及其用途
CN107362365A (zh) Gpr31抑制剂在制药中的应用
Yang et al. A LINC00341‐mediated regulatory pathway supports chondrocyte survival and may prevent osteoarthritis progression
Tao et al. Chitosan-coated artesunate protects against ulcerative colitis via STAT6-mediated macrophage M2 polarization and intestinal barrier protection
JP2011063612A (ja) 開腹手術後の癒着の予防剤
KR102127218B1 (ko) 뇌 신경 교종 치료용 약물 제조에서의 화합물의 용도
BR112021013369A2 (pt) Moduladores de expressão de yap1
US20200397860A1 (en) Slit and bone growth modulation
WO2024172148A1 (ja) 多価結合性核酸剤
AU2003295561A1 (en) Inhibitory oliogonucleotides targeted to bcl-2
US20220193110A1 (en) Nxtar-derived oligonucleotides and uses thereof