TWI785115B - 一種白鳳菜總黃酮提取物及其製備方法與治療高尿酸血症的用途 - Google Patents

一種白鳳菜總黃酮提取物及其製備方法與治療高尿酸血症的用途 Download PDF

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Abstract

本發明屬於藥品或保健品領域，具體涉及一種白鳳菜總黃酮提取物及其製備方法與治療高尿酸血症的用途。該提取物中，以重量百分含量計，含有80~85%的芸香苷。藥效實驗結果顯示，該提取物可以在一定程度上降低高尿酸血症模型小鼠肝臟內黃嘌呤氧化酶的活性、降低尿酸的合成，具有一定的降尿酸作用，可以作為潛在的治療高尿酸血症或治療痛風的藥物；本發明白鳳菜總黃酮提取物的製備方法，在提取步驟後，通過選擇特定組成、特定配比的酶組成的複合酶進行酶解，進一步通過大孔樹脂萃取濃縮和大孔樹脂分離純化步驟，使得製備得到的白鳳菜總黃酮提取物中芸香苷的HPLC純度可達80~85%。

Description

一種白鳳菜總黃酮提取物及其製備方法與治療高尿酸血症的用途
本發明屬於藥品或保健品領域，具體涉及一種白鳳菜總黃酮提取物及其製備方法與治療高尿酸血症的用途。
痛風是嘌呤代謝紊亂和(或)尿酸排泄減少而致的血尿酸水準升高，單鈉尿酸鹽晶體在關節、軟骨和腎臟等沉積所致的一種代謝性疾病。其主要表現為反復發作性關節紅、腫、熱、痛與功能障礙，甚至關節畸形、腎石病及尿酸性腎病。而尿酸排泄減少或生成增多所致的高尿酸血症是痛風的主要病因。高尿酸血症不僅是痛風的直接誘因，還與代謝症候群、第二型糖尿病、高血壓、心血管疾病、慢性腎病等密切相關。高尿酸血症和痛風的發病機制與遺傳因素、環境因素、肝醣儲積症、腎功能不全、血液病和藥物等有關。
近年來，痛風及高尿酸血症的患病率逐年上升。流行病學研究顯示，在中國，成人高尿酸血症的患病率為8.4%，且男性高於女性，分別為9.9%、7.0%；城市居民明顯高於農村居民，分別為14.9%、6.6%；人均國內生產總值(GDP)水準較高的地區，高尿酸血症患病率也較高。
目前，用於抗高尿酸血症的藥物主要有3大類：黃嘌呤氧化酶抑制劑、尿酸鹽轉運蛋白1(URAT1)抑制劑和尿酸氧化酶。臨床上用於調節尿酸代謝的藥物有異嘌呤醇(allopurinol)、丙磺舒等，用於治療急性痛風性關節炎的藥物有秋水仙鹼、非甾體類抗炎藥和糖皮質激素等。然而，這些藥物有許多副作用，如：頭疼、皮疹、水腫、胃腸出血、慢性腎乳頭壞死及致死性過敏性症候群等等，從而導致其在臨床上的應用受到了很大程度的限制。
自古以來，中國、印度、加拿大等多個國家和地區就有用植物藥治療高尿酸血症和痛風的傳統。
白鳳菜（Gynura formosana Kitam .）是菊科菊三七屬多年生草本植物，又名白背天葵、片仔癀草，其含有豐富的維生素、生物鹼類以及黃酮類物質，是一種藥食兩用的植物。研究顯示，白鳳菜主要用於肺炎、肺癌、肝炎、肝硬化、高血壓等疾病的治療，其還有解熱解毒的功效。
目前，現有技術中尚沒有白鳳菜提取物可以用於治療高尿酸血症的相關報導。
為此，本發明提供一種白鳳菜總黃酮提取物，進而提供其製備方法與用途。
為解決上述技術問題，本發明是通過以下技術方案來實現的：
本發明提供一種白鳳菜總黃酮提取物，以重量百分含量計，含有80~85%的芸香苷(rutin)。
本發明還提供一種上述白鳳菜總黃酮提取物的製備方法，包括以下步驟： （1）提取：取白鳳菜加入提取溶劑進行提取，調節提取液的pH值為4-8，得反應液； （2）酶解：然後向反應液中加入複合酶進行酶解，30-50℃強制迴圈反應1-4小時，抽濾，收集濾液； （3）萃取、濃縮：將濾液用大孔樹脂A進行萃取，合併萃取液，將萃取液濃縮，得濃縮液； （4）分離、純化：將濃縮液離心，取上清液用大孔樹脂B分離純化，在波長為510nm下測定吸光度，收集洗脫液，濃縮、乾燥，即得。
較佳地，上述白鳳菜總黃酮提取物的製備方法，所述酶解步驟中，採用由木瓜蛋白酶、纖維素酶和果膠酶組成的複合酶進行酶解。
進一步較佳地，上述白鳳菜總黃酮提取物的製備方法，所述複合酶與所述白鳳菜的重量之比為：1:5~1:3。
進一步較佳地，白鳳菜總黃酮提取物的製備方法，所述複合酶中，木瓜蛋白酶、纖維素酶和果膠酶三者的重量比為（0.5-1.5）：（2-5）：（1-3）；
進一步較佳地，上述白鳳菜總黃酮提取物的製備方法，所述複合酶中，木瓜蛋白酶、纖維素酶和果膠酶三者的重量比為1：3：2。
進一步較佳地，上述白鳳菜總黃酮提取物的製備方法， 所述大孔樹脂A選自AB-8、DM-130、HZ841、ZH-00、ZH-01、ZH-02、ZH-03、CAD-40、CAD-45、BS-30中的至少一種； 所述大孔樹脂B選自 D-101、D-140、D-141、XAD-3、XAD-4、HP-20、HP-21、LD-605、LSA-10中的至少一種。
進一步較佳地，上述白鳳菜總黃酮提取物的製備方法，所述提取步驟中，提取溶劑為水，所述白鳳菜與所述水的重量之比為1：（20-60）。
進一步較佳地，上述白鳳菜總黃酮提取物的製備方法，所述分離、純化步驟中，洗脫溶劑為體積濃度為70-80%的乙醇水溶液，洗脫速度為 3-15m/小時。
進一步較佳地，上述白鳳菜總黃酮提取物的製備方法，所述分離、純化步驟中，洗脫溶劑為體積濃度為75%的乙醇水溶液，洗脫速度為5m/小時。
進一步較佳地，上述白鳳菜總黃酮提取物的製備方法，所述濃縮液中，白鳳菜總黃酮的濃度為0.5mg/mL。
進一步較佳地，上述白鳳菜總黃酮提取物的製備方法，所述萃取、濃縮步驟中，將濾液加入至盛有大孔樹脂A的提取罐中，在30℃、80-150rpm下攪拌6-24小時，過濾，以大孔樹脂A的重量計，取吸附後的大孔樹脂A加入10-30重量倍量的體積濃度為70-95%的乙醇溶液，然後在30℃、80-150rpm下攪拌6-24小時，過濾，即得萃取液。
進一步較佳地，上述白鳳菜總黃酮提取物的製備方法，所述提取步驟中，採用鹽酸或氫氧化鈉調節提取液的pH值為4-8。
進一步較佳地，上述白鳳菜總黃酮提取物的製備方法，所述乾燥為冷凍乾燥。
本發明還提供上述製備方法製備得到的白鳳菜總黃酮提取物。
本發明還提供一種藥物製劑，以上述白鳳菜總黃酮提取物、或者上述製備方法製備得到的白鳳菜總黃酮提取物為活性成分，按照常規工藝，加入常規輔料製成臨床上可接受的片劑、膠囊劑、散劑、合劑、丸劑、顆粒劑、糖漿劑、貼膏劑、栓劑、氣霧劑、軟膏劑或注射劑。
所述常規輔料為：填充劑、崩解劑、潤滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯味劑、防腐劑、基質等。填充劑包括：澱粉、預膠化澱粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、蔗糖等；崩解劑包括：澱粉、預膠化澱粉、微晶纖維素、羧甲基澱粉鈉、交聯聚乙烯吡咯烷酮、低取代羥丙纖維素、交聯羧甲基纖維素納等；潤滑劑包括：硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、二氧化矽等；助懸劑包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊脂、羥丙基甲基纖維素等；粘合劑包括，澱粉漿、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素等；甜味劑包括：糖精鈉、阿斯巴甜、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矯味劑包括：甜味劑及各種香精；防腐劑包括：尼泊金酯類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽類、苯紮溴銨、醋酸氯乙定、桉葉油等；基質包括：PEG6000、PEG4000、蟲蠟等。
本發明還提供上述白鳳菜總黃酮提取物、上述製備方法製備得到的白鳳菜總黃酮提取物、或者上述藥物製劑在製備治療高尿酸血症的藥品或保健品中的應用。
本發明還提供上述白鳳菜總黃酮提取物、上述製備方法製備得到的白鳳菜總黃酮提取物、或者上述藥物製劑在製備治療痛風的藥品或保健品中的應用。
本發明的技術方案具有如下優點：
(1)本發明提取分離得到一種含有80~85%的芸香苷的白鳳菜總黃酮提取物，藥效實驗結果顯示，該提取物可以在一定程度上降低高尿酸血症模型小鼠肝臟內黃嘌呤氧化酶的活性、降低尿酸的合成，具有一定的降尿酸作用，可以作為潛在的治療高尿酸血症或治療痛風的藥物；
(2)本發明白鳳菜總黃酮提取物的製備方法，在提取步驟後，通過選擇特定組成、特定配比的酶組成的複合酶在30-50℃下進行酶解，不僅避免了白鳳菜總黃酮化合物的結構在高溫下被破壞，而且使得白鳳菜總黃酮化合物能夠最大程度地被提取出來，進一步通過大孔樹脂萃取濃縮和大孔樹脂分離純化步驟，使得白鳳菜總黃酮化合物的提取率可達1.8%-2.0%，比現有方法中白鳳菜總黃酮化合物的提取率提高可達30%以上，製備得到的白鳳菜總黃酮提取物中芸香苷的HPLC純度可達80~85%。
本發明以下實施例和實驗例中，白鳳菜採自福建省漳州市龍文區登科村，經鑑定為白鳳菜。
實施例1
本實施例白鳳菜總黃酮提取物按照以下方法製備而成：
（1）提取：取白鳳菜100g，加入30重量倍量的水進行提取，用稀鹽酸調節提取液的pH值為5，得反應液；
（2）酶解：然後向反應液中加入25g複合酶（該複合酶由重量比為1：3：2的木瓜蛋白酶、纖維素酶和果膠酶組成）進行酶解，40℃強制迴圈反應3小時，抽濾，收集濾液；
（3）萃取、濃縮：將濾液加入至盛有AB-8大孔樹脂的提取罐中，在30℃、100rpm下攪拌12小時，過濾，以AB-8大孔樹脂的重量計，取吸附後的AB-8大孔樹脂加入20重量倍量的體積濃度為75%的乙醇溶液，然後在30℃、120rpm下攪拌12小時，過濾，即得萃取液，合併萃取液，將萃取液減壓濃縮至白鳳菜總黃酮的濃度為0.5mg/mL，得濃縮液；
（4）分離、純化：將濃縮液10000rpm高速離心10分鐘，取上清液加入裝有大孔樹脂D-101的層析柱內靜止吸附60分鐘，用體積濃度為75%的乙醇水溶液以5m/小時的速度洗脫，在波長為510nm下測定吸光度，以吸光度值為縱坐標、以洗脫時間為橫坐標作洗脫曲線圖（其圖譜如圖1所示），收集洗脫曲線中吸收峰範圍內的洗脫液，濃縮、冷凍乾燥，即得白鳳菜總黃酮提取物。
經過計算，本實施例白鳳菜總黃酮化合物的提取率為2.0%。
由圖1可知，洗脫液在340分鐘處出現一個明顯的吸收峰，峰形較為單一，說明洗脫液中黃酮相對較純。
A 、本實施例白鳳菜總黃酮提取物按照以下方法進行紅外光譜鑑定：
取一定品質烘乾後的芸香苷標準品，以1：100加入烘乾後的溴化鉀，經研磨後製成固體壓片，用傅立葉紅外分光光度計在掃描範圍4000-400cm-1 、解析度4、掃描次數為4的條件下繪製紅外光譜圖；同法繪製純化後的白背天葵提取物的紅外光譜圖，對比鑑定。結果如圖2所示。
由圖2可知，芸香苷標準品和白鳳菜總黃酮提取物的紅外光譜分別在3685.455~3018.177cm-1 左右均出現寬而強的吸收峰，是-OH的伸縮振動峰，顯示存在酚羥基或糖上的羥基，且數目較大；在2914.036cm-1 處出現弱吸收峰，是碳氫鍵的伸縮振動峰，說明飽和碳上的氫較少；在1654.694cm-1 處出現C=O的伸縮振動中強峰，兩者位置和峰型基本一致，說明提取物是黃酮類物質；在1371.88、1362.89 cm-1 處出現羥基的彎曲振動峰；在804.80、810.56cm-1 處出現苯環鄰位氫引起的吸收峰；在1010.07~696.62cm-1 處出現苯環上取代基位置引起的吸收峰，但峰位置不同，說明提取物與芸香苷的羥基取代位置不同；這些顯示，提取物中含有羥基、羰基以及不同位置取代的苯環等官能團，特徵吸收峰基本一致。因此可確定提取物是黃酮類化合物。
B、按照以下方法通過液相色譜分析本實施例白鳳菜總黃酮提取物中的芸香苷的含量:
B1、液相色譜條件的確定
液相色譜條件: 保護柱: Eclipse XDB-C18 AnalyticalGuard Column （4.6×12.5mm，5μm）：ZOR BZX Eclipse XDB-C18（4.6×150mm，5μm）；流速：0.5mL/分鐘；柱溫：35 ℃；檢測波長：368nm、254nm、210nm；進樣體積：10μL；流動相: 0.03% 甲酸水溶液（A），乙腈（B）；梯度洗脫程式如下：0~10分鐘，20%B； 10~12分鐘，20%~24%B；12~20分鐘，24%B；20~25分鐘，24%~30%B； 25~48分鐘，30%B。
B2、對照品溶液的配置
準確稱取芸香苷0.001g，溶解於1mL甲醇中，製成1mg/mL的單一對照品溶液。並用一次性濾膜過濾，裝入小試管中待用。
B3、測定
精密吸取對照品溶液、供試品溶液（實施例1製備的白鳳菜黃酮提取物，配製成濃度為1μg/μL的甲醇溶液），按照液相色譜檢測條件分別進行檢測分析。
對照品溶液的HPLC色譜圖如圖3所示，供試品溶液的HPLC色譜圖如圖4所示。
由圖3可知，芸香苷對照品溶液可在10分鐘內完全分離，芸香苷在本實驗的色譜條件下，色譜基線基本平直，呈現色譜峰無拖尾現象，雜質也無干擾，且出峰較早，其保留時間為2.745分鐘。
由圖4，通過面積歸一法計算可知，白鳳菜提取物中芸香苷的含量為81.29%。
實施例2
本實施例白鳳菜總黃酮提取物按照以下方法製備而成：
（1）提取：取白鳳菜100g，加入20重量倍量的水進行提取，用稀氫氧化鈉溶液調節提取液的pH值為8，得反應液；
（2）酶解：然後向反應液中加入20g複合酶（該複合酶由重量比為0.5：5：1的木瓜蛋白酶、纖維素酶和果膠酶組成）進行酶解，30℃強制迴圈反應4小時，抽濾，收集濾液；
（3）萃取、濃縮：將濾液加入至盛有DM-130大孔樹脂的提取罐中，在30℃、80rpm下攪拌24小時，過濾，取吸附後的DM-130大孔樹脂加入10重量倍量的體積濃度為95%的乙醇溶液，然後在30℃、80rpm下攪拌24小時，過濾，即得萃取液，合併萃取液，將萃取液減壓濃縮至白鳳菜總黃酮的濃度為0.5mg/mL，得濃縮液；
（4）分離、純化：將濃縮液6000rpm高速離心8分鐘，取上清液加入裝有大孔樹脂HP-21的層析柱內靜止吸附60分鐘，用體積濃度為80%的乙醇水溶液以3m/小時的速度洗脫，在波長為510nm下測定吸光度，以吸光度值為縱坐標、以洗脫時間為橫坐標作洗脫曲線圖，收集洗脫曲線中吸收峰範圍內的洗脫液，濃縮、冷凍乾燥，即得白鳳菜總黃酮提取物。
經過計算，本實施例白鳳菜總黃酮化合物的提取率為1.82%。
按照實施例1中“B項下”測定本實施例白鳳菜總黃酮提取物中的芸香苷。通過測定分析可知，HPLC圖譜中，本實施例白鳳菜總黃酮提取物中的芸香苷含量為80%。
實施例3
本實施例白鳳菜總黃酮提取物按照以下方法製備而成：
（1）提取：取白鳳菜100g，加入60重量倍量的水進行提取，用稀鹽酸調節提取液的pH值為4，得反應液；
（2）酶解：然後向反應液中加入32g複合酶（該複合酶由重量比為1.5：2：3的木瓜蛋白酶、纖維素酶和果膠酶組成）進行酶解，50℃強制迴圈反應1小時，抽濾，收集濾液；
（3）萃取、濃縮：將濾液加入至盛有ZH-01大孔樹脂的提取罐中，在30℃、150rpm下攪拌6小時，過濾，取吸附後的ZH-01大孔樹脂加入30重量倍量的體積濃度為70%的乙醇溶液，然後在30℃、150rpm下攪拌6小時，過濾，即得萃取液，合併萃取液，將萃取液減壓濃縮至白鳳菜總黃酮的濃度為0.5mg/mL，得濃縮液；
（4）分離、純化：將濃縮液8000rpm高速離心5分鐘，取上清液加入裝有大孔樹脂XAD-3的層析柱內靜止吸附60分鐘，用體積濃度為70%的乙醇水溶液以15m/小時的速度洗脫，在波長為510nm下測定吸光度，以吸光度值為縱坐標、以洗脫時間為橫坐標作洗脫曲線圖，收集洗脫曲線中吸收峰範圍內的洗脫液，濃縮、冷凍乾燥，即得白鳳菜總黃酮提取物。
經過計算，本實施例白鳳菜總黃酮化合物的提取率為1.91%。
按照實施例1中“B項下”測定本實施例白鳳菜總黃酮提取物中的芸香苷。通過測定分析可知，HPLC圖譜中，本實施例白鳳菜總黃酮提取物中的芸香苷含量為85%。
實驗例1 白鳳菜總黃酮提取物抗痛風實驗研究
1、實驗目的
採用腹腔注射黃嘌呤致高尿酸血症模型的方式增加體內尿酸前體含量，使尿酸生成增多，造成小鼠高尿酸血症模型。通過給高尿酸血症小鼠灌胃白鳳菜總黃酮提取物以小鼠血清中尿酸的抑制率、酸酐的抑制率和肝臟黃嘌呤氧化酶活性的抑制率為指標，探索白鳳菜總黃酮提取物對高尿酸血症引起的痛風症狀的影響。
2、實驗材料
2.1 實驗動物
小鼠，清潔級，♂，體重28±2g，84隻，購自吳氏動物中心。均飼養於空調室內，室溫22±2℃，濕度（60±5）%，喂標準顆粒飼料，自由飲水和攝食。
2.2 藥物
白鳳菜總黃酮提取物，異嘌呤醇片（合肥久聯製藥有限公司，批號：20140401），痛風定片（長春海外製藥，批號：1309105）；黃嘌呤（阿拉丁）；生理鹽水；尿酸套組（南京建成生物工程研究所，貨號C012，生產批號：20140918），黃嘌呤氧化酶套組（南京建成生物工程研究所，貨號A002，生產批號：20140210）；肌酐（Cr）套組（南京建成生物工程研究所，貨號C011-1）。
2.3 實驗器材
低速離心機；微量移液器；一次性注射器；毛細血管；錶玻璃；一次性離心管；手術剪；勻漿器。
3、實驗方法
3.1供試藥物
按照實施例1的方法製備白鳳菜總黃酮提取物作為供試藥物。
3.2 痛風實驗
3.2.1小鼠抗痛風實驗
雄性昆明小鼠，84隻，體重為28±2g，隨機分為7組，分別為空白組、模型對照組、痛風定片組、異嘌呤醇組、白鳳菜總黃酮提取物高、中、低劑量組。陽性組給予痛風定片（9.6mg/10g）和異嘌呤醇（0.2mL/10g），白鳳菜高、中、低劑量組分別按照24mg/10mL、12mg/10mL、6mg/10mL灌服白鳳菜總黃酮提取物水溶液，模型對照物灌服等體積的生理鹽水，連續11天，1次/天，
3.2.2血清中尿酸和肌酐指標
於末次給藥1小時後，將小鼠腹腔注射0.8% CMC-Na為溶劑配製的10 %黃嘌呤。造模0.5小時後，對小鼠進行摘眼球取血，取血後立即進行解剖並取下小鼠肝臟，並置於低溫保存。取得的血液樣品，3000r/分鐘離心5分鐘，取血清。按照套組說明進行測定尿酸和肌酐。
3.2.3肝臟中黃嘌呤氧化酶（XOD）活性測定
採血後立即將小鼠處死，快速取出肝臟，稱重，加入預冷至4 ℃的生理鹽水製成10％的勻漿，於3000r/分鐘離心10分鐘，取上清液，按照套組規定方法測定黃嘌呤氧化酶活性。
3.4 資料統計分析
指標檢測參照說明書進行計算，各組實驗資料以均數±標準差（x±s）表示，SPSS 20.0 統計學軟體進行統計分析，組間差異用單因素方差檢驗。
4、實驗結果
4.1 小鼠血清尿酸和肌酐水準測定
白鳳菜總黃酮提取物對小鼠血清尿酸水準的影響如表1所示。
表1 白鳳菜總黃酮提取物對小鼠血清尿酸水準的影響 (x±s)
Figure 107132766-A0304-0001
 注：與空白相比，# P ＜0.01，## P ＜0.001;與模型組相比，*P ＜0.01，**P ＜0.001
由表1可知，（1）造模給藥後，模型組血清尿酸水準明顯增加，與空白組比較差異具有統計學意義（P ＜0.001），顯示模型建立成功；
（2）治療給藥後，白鳳菜高、中、低三種劑量尿酸水平均有一定程度的降低，與模型組相比有明顯的統計學差異（P ＜0.01）；各組對血清肌酐的含量均無明顯差異。
4.2 小鼠肝臟黃嘌呤氧化酶水準測定
白鳳菜總黃酮提取物對小鼠血清尿酸水準的影響如表2所示。
表2 白鳳菜總黃酮提取物對小鼠血清尿酸水準的影響(x±s)
Figure 107132766-A0304-0002
 注：與空白相比，## P ＜0.01；與模型組相比，*P ＜0.05，**P ＜0.01；
由表2可知，（1）與空白組相比，模型組差異具有顯著性（P＜0.01），說明造模成功；
（2）中劑量組和高劑量組肝臟黃嘌呤氧化酶活性明顯低於模型組，差異具有顯著性（P ＜0.01，P ＜0.05），但是低劑量組與模型組相比無明顯統計學差異；這顯示，白鳳菜中、高劑量組在一定程度上降低高尿酸血症模型小鼠肝臟內黃嘌呤氧化酶的活性、降低尿酸的合成，從而達到一定的降尿酸作用。
顯然，上述實施例僅僅是為清楚地說明所作的舉例，而並非對實施方式的限定。對於所屬領域的普通技術人員來說，在上述說明的基礎上還可以做出其它不同形式的變化或變動。這裡無需也無法對所有的實施方式予以窮舉。而由此所引伸出的顯而易見的變化或變動仍處於本發明創造的保護範圍之中。
無。
為了使本發明的內容更容易被清楚的理解，下面根據本發明的具體實施例並結合附圖，對本發明作進一步詳細的說明，其中： 圖1是本發明實驗例1中洗脫液的圖譜； 圖2是本發明實施例1製備的白鳳菜總黃酮提取物的紅外光譜圖； 圖3是本發明實施例1中芸香苷對照品溶液的HPLC色譜圖； 圖4是本發明實施例1製備的白鳳菜總黃酮提取物的HPLC色譜圖。

Claims (3)

  1. 一種白鳳菜總黃酮提取物或含有所述白鳳菜總黃酮提取物之藥物製劑在製備治療高尿酸血症或治療痛風的藥品或保健品中的用途，其中所述白鳳菜總黃酮提取物係以一製備方法所製備，所述製備方法之特徵在於，包括以下步驟：(1)提取：取白鳳菜加入提取溶劑進行提取，調節提取液的pH值為4-8，得反應液，其中所述提取溶劑為水，所述白鳳菜與所述水的重量之比為1：(20-60)；(2)酶解：然後向反應液中加入複合酶進行酶解，30-50℃強制迴圈反應1-4小時，抽濾，收集濾液，其中上述複合酶由木瓜蛋白酶、纖維素酶和果膠酶組成，且所述複合酶與所述白鳳菜的重量之比為1：5~1：3，而所述複合酶中，木瓜蛋白酶、纖維素酶和果膠酶三者的重量比為(0.5-1.5)：(2-5)：(1-3)；(3)萃取、濃縮：將濾液用大孔樹脂A進行萃取，合併萃取液，將萃取液濃縮，得濃縮液，其中所述大孔樹脂A選自AB-8、DM-130、HZ841、ZH-00、ZH-01、ZH-02、ZH-03、CAD-40、CAD-45、BS-30中的至少一種；(4)分離、純化：將濃縮液離心，取上清液用大孔樹脂B分離純化，在波長為510nm下測定吸光度，收集洗脫液，濃縮、乾燥，即得，其中所述大孔樹脂B選自D-101、D-140、D-141、XAD-3、XAD-4、HP-20、HP-21、LD-605、LSA-10中的至少一種，又其中所述藥物製劑，其特徵在於，以所述白鳳菜總黃酮提取物為活性成分，加入輔料製成臨床上可接受的片劑、膠囊劑、散劑、合劑、丸劑、顆粒劑、糖漿劑、貼膏劑、栓劑、氣霧劑、軟膏劑或注射劑。
  2. 如申請專利範圍第1項所述之用途，其特徵在於，所述複合酶中，木瓜蛋白酶、纖維素酶和果膠酶三者的重量比為1：3：2。
  3. 如申請專利範圍第1項所述之用途，其特徵在於，所述分離、純化步驟中，洗脫溶劑為體積濃度為70-80%的乙醇水溶液，洗脫速度為3-15m/小時；所述濃縮液中，白鳳菜總黃酮的濃度為0.5mg/mL。
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