TWI757911B - 奇異果發酵汁液用於改善肌膚狀況的用途 - Google Patents

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Abstract

本發明提供一種奇異果的發酵汁液，是藉由一包含下列步驟之製備方法製得：將奇異果果實與水混合以得到培養液，以及將培養液及複數菌種進行發酵1-4日以得到奇異果發酵汁液。本發明另提供一種將奇異果發酵汁液用於改善肌膚狀態的用途。

Description

奇異果發酵汁液用於改善肌膚狀況的用途
本發明關於一種奇異果發酵汁液，特別是關於一種以兩種菌種進行發酵所得的奇異果發酵汁液。
自有機及天然成分肌膚保養品概念興起後，生技公司及保養品相關業者積極投入關於天然植物的相關產品的研發。為使植物類相關產品對身體健康助益有科學驗證的基礎，植物的成分分析及功效評估成為產品開發的重點項目。
奇異果(Kiwifruit，學名為Actinidia deliciosa)，又名獼猴桃，是獼猴桃屬多種木質攀緣植物的可食用漿果，是紐西蘭、澳洲、智利、法國、義大利、希臘等國家的商業作物，近年來成為研究開發的天然植物之一。
有鑑於此，研究或開發一種天然植物成分的能改善肌膚狀況的組合物來有效提升生物體的肌膚狀態是有其需求的。
本發明的一目的在於提供一種奇異果發酵汁液，是藉由一包含下列步驟的製備方法製得：(a)將葡萄糖、奇異果果實與水混合以得到一培養液，其中水的重量為奇異果果實總重的3-6倍；以及(b)將培養 液及複數菌種進行發酵1-4日以得到奇異果發酵汁液，其中複數菌種由相對於培養液為0.01-0.5wt%的酵母菌以及相對於培養液為0.01-0.25wt%的乳酸菌組成。
在一些實施例中，於(a)得到培養液的步驟中，葡萄糖的添加量為奇異果果實與水總重的8-10wt%。
在一些實施例中，於(b)將培養液及複數菌種進行發酵以得到奇異果發酵汁液的步驟由下列步驟組成：(b1)於培養液中加入酵母菌進行發酵0.5-2日後形成一初發酵汁液；(b2)於初發酵汁液中加入乳酸菌進行發酵0.5-2日後形成奇異果發酵汁液。
在一些實施例中，酵母菌為啤酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)，所述乳酸菌為嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)。
在一些實施例中，奇異果發酵汁液的pH值為3.2-3.8，且糖度為4.0以下。
在一些實施例中，奇異果發酵汁液的多酚含量大於200ug/mL。
在一些實施例中，奇異果發酵汁液的總多酚含量/培養液的總多酚含量的比值為6-8。
根據一些實施例，本發明提供一種將奇異果發酵汁液用於製備改善肌膚狀況的組合物的用途。
在一些實施例中，組合物是具有以下所述功能的至少其中兩種：提升肌膚保濕、提升肌膚彈力以及減少肌膚皺紋。
在一些實施例中，組合物含有1.0vol%的奇異果發酵汁液。
綜上，根據任一實施例的木瓜發酵汁液，可用以改善改善肌膚狀況。在一實施例中，在發酵過程中分次依序加入複數菌種並且控制使用各菌種的發酵時間，以使得菌種能有最佳的生長，並且進一步提升木瓜發酵汁液中有效成分濃度。
[圖1]是肌膚含水量的測試結果數據圖。
[圖2]是肌膚彈力的測試結果數據圖。
[圖3]是肌膚皺紋的測試結果數據圖。
圖式中「*」代表p值小於0.05，「**」代表p值小於0.01，以及「***」代表p值小於0.001。當「*」越多時，代表統計上的差異越顯著。
以下將描述本案的部分具體實施態樣。在不背離本案精神下，本案尚可以多種不同形式的態樣來實踐，不應將保護範圍限於說明書所具體陳述的條件。
本案使用Excel軟體進行統計分析。數據以平均值±標準差(SD)表示，各組之間的差異以學生t檢驗(student's t-test)進行分析。
本文中所使用數值為近似值，所有實驗數據皆表示在正負10%的範圍內，最佳為在正負5%的範圍內。
本文中所用的用語「糖度」所指為白利糖度(Degrees Brix，符號°Bx)，是測量糖度的單位，代表在20℃情況下，每100克水溶液中溶解的蔗糖克數，可用於判斷發酵過程中糖份被轉換的程度。
本文中所用的用語「肌膚」所指為人類或非人的哺乳動物的皮膚。
在一些實施例中，奇異果發酵汁液中為使用奇異果的果實進行發酵，其中奇異果學名為Actinidia deliciosa，又名獼猴桃，是獼猴桃屬多種木質攀緣植物的可食用漿果，大小約為一顆大型雞蛋，長度為5-8公分，直徑為4.5-5.5公分。奇異果的果皮呈纖維狀、顏色為暗綠色或棕色，而果肉是鮮綠色或金色，是紐西蘭、澳洲、智利、法國、義大利、希臘等國家的商業作物。本發明使用的來自台灣高雄地區的奇異果果實，但可使用的奇異果產地並不做限制。
本案所述「奇異果果實」可以包括其果肉/果實、含有果皮的果肉/果實、或含有籽的果肉/果實。
本案所述的奇異果發酵汁液，如同前述，在一些實施例中是指以水浸提含奇異果果實得到奇異果培養液後，再將此奇異果培養液經過特定發酵程序，形成奇異果發酵汁液。
在一些實施例中，奇異果發酵汁液可經由其他合適的處理步驟，得到奇異果發酵汁液中所含有的奇異果發酵物。舉例而言，「奇異果發酵物」可為由奇異果發酵汁液經乾燥而得的粉末。
在一些實施例中，奇異果發酵汁液藉由一包含下列步驟的製備方法製得：(a)將葡萄糖以及奇異果果實與水混合以得到培養液，其中水的重量為奇異果果實總重的3-6倍；以及(b)將培養液及複數菌種進行發酵1-4日以得到奇異果發酵汁液。
在一些實施例中，葡萄糖的添加量為奇異果果實與水總重的 8-10wt%。藉由添加葡萄糖，使培養液中具有足夠的糖度以確保發酵時菌種可以有足夠的養份，讓後續發酵可順利進行。
在一些實施例中，先將奇異果果實與水混合，於80-100℃下浸泡0.5-1.5小時以進行浸提，得到一奇異果的浸提液；再將葡萄糖加入至奇異果的水萃液中得到培養液。
而在另一些實施例中，可先將葡萄糖、奇異果果實與水一起混合，形成混合液；再將混合液於80-100℃下浸提0.5-1.5小時以得到培養液。藉由將葡萄糖與奇異果果實同時混合來進行浸提程序，由於不需再開啟浸提設備添加葡萄糖、且加入的葡萄糖可再經過高溫環境處理，有助於葡萄糖的溶解且可降低原料受污染風險。
在獲得培養液後，可將培養液及複數菌種進行發酵1-4日以得到奇異果發酵汁液。其中，複數菌種包括相對於培養液為0.01-0.5wt%的酵母菌及相對於培養液為0.01-0.25wt%的乳酸菌。在一些實施例中，培養液不另濾除其內部的固形物(浸提後的奇異果果實)而直接於其中加入菌種進行發酵(此時培養液的總重為固形物與液態的重量)，藉以利用菌種進一步提取固形物中的活性成分。在另一些實施例中，可先濾除培養液內部的固形物，再添加菌種進行發酵(此時培養液的總重為液態的重量)，藉此可避免當後續發酵反應過度時，產生其他較複雜且非所欲的成分而可較佳地控制浸提物品質。
在一些實施例中，將培養液及複數菌種進行發酵以得到奇異果發酵汁液的步驟中，酵母菌以及乳酸菌可以同時加入至培養液中。
在一些實施例中，將培養液及複數菌種進行發酵以得到奇異 果發酵汁液的步驟中，是將酵母菌以及乳酸菌以此特定順序進行分批發酵。舉例而言，在一些實施例中，先於培養液中加入酵母菌進行發酵0.5-2日後形成初發酵汁液；再於初發酵汁液中加入乳酸菌進行發酵0.5-2日後形成奇異果發酵汁液。
藉由先於培養液中添加酵母菌，可先將培養液中的糖份(例如葡萄糖)經發酵轉化為乙醇，而乙醇有助於浸提奇異果內的有效成分。而後，於初發酵汁液中加入乳酸菌，可使初發酵汁液內尚未反應的糖份經發酵而轉化為乳酸，以進一步消耗其中的糖份，進而降低初發酵汁液所含糖度。由於在初發酵汁液中產生了乳酸，其將會進一步改變整體反應環境(例如使初發酵汁液的pH值下降)，對於浸提奇異果內的有效成分亦有影響與助益(使溶於酸性溶液的有效成分更易浸提出)，糖度進一步降低。在一些實施例中，奇異果發酵汁液的糖度為4.0以下，以確保發酵反應完全。在一些實施例中，奇異果發酵汁液的pH值約為3.2-4.5，糖度約為3.0-4.0°Bx。
在一些實施例中，酵母菌以及乳酸菌可於25-40℃下進行發酵反應。若溫度超過40℃，則將會使菌種失去活性；若溫度低於25℃，則發酵反應的速率將過低、甚至無法進行發酵反應，不利於奇異果發酵汁液的取得。在一些實施例中，酵母菌以及乳酸菌可於28-32℃下進行發酵反應。
在一些實施例中，所使用的酵母菌可以是市售的啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。舉例而言，可為向財團法人食品工作發展研究所採購的寄存編號BCRC20271(國際寄存ATCC26602)菌株的啤 酒酵母。
在一些實施例中，所使用的乳酸菌可以是為市售的瑞士乳酸菌(Streptococcus thermophilus)、嗜熱鏈球菌(Lactobacillus plantarum)、嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophiles)或植物乳桿菌。舉例而言，也可採用瑞士乳酸菌TCI357(財團法人食品工作發展研究所寄存編號BCRC910846、國際寄存編號DSM33107)、寄存編號BCRC910805(國際寄存DSM33108)菌株的嗜熱鏈球菌TCI028、寄存編號BCRT910760(國際寄存DSM32451)菌株的嗜熱鏈球菌TCI378、或寄存編號BCRC910636(國際寄存DSM28121)菌株的嗜熱鏈球菌TCI633。
在一些實施例中，當培養液完成所有菌種的發酵步驟後，將先得到奇異果發酵原液。而後，將此奇異果發酵原液經過濾，再得到奇異果發酵汁液。舉例而言，在一些實施例中，可將培養液及複數菌種進行發酵1-5日後所得到奇異果發酵原液，經適當孔洞大小的濾網(例如200-400目篩網)過濾，以得到奇異果發酵汁液。
將此奇異果培養液經過特定發酵程序後所形成的奇異果發酵汁液可具有較高的總多酚含量。舉例而言，在一些實施例中，奇異果發酵汁液的總多酚含量為200-220μg/ml，而奇異果培養液的總多酚含量為20-40μg/ml。據此可知，藉由本案發酵方式所得的奇異果發酵汁液，其總多酚含量可被大幅提升6-8倍，故本案的發酵方式確實可有效改變奇異果水萃液中的所含成分，有效提升活性成分。在一些實施例中，此總多酚含量亦可作為奇異果發酵汁液的檢驗基準，此外，在一些實施例中，奇異果 發酵汁液的總多酚含量/該培養液的總多酚含量的比值為6-8，在一較佳實施例中，奇異果發酵汁液的總多酚含量/該培養液的總多酚含量的比值為7.26。
根據本案的一些實施例，以水浸提奇異果果實所得到的奇異果培養液，在經過特定發酵程序後所形成的奇異果發酵汁液，可改善肌膚狀況。故此奇異果發酵汁液可用於製備改善肌膚狀況組合物的用途。
在一些實施例中，前述的各組合物可為醫藥組合物、保養品組合物、食品組合物、保健食品組合物。
醫藥組合物可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於經腸道地(enterally)、非經腸道地(parenterally)或局部地(topically)投藥的劑型。例如可為：注射品(injection)[例如，無菌的水性溶液(sterile aqueous solution)或分散液(dispersion)]、無菌的粉末(sterile powder)、外部製劑(external preparation)或其他類似物。
醫藥組合物可進一步包含有一被廣泛地使用於藥物製造技術的醫藥上可接受的載劑(pharmaceutically acceptable carrier)。例如，醫藥上可接受的載劑可包含下列一種或多種載劑：乳化劑(emulsifier)、懸浮劑(suspending agent)、分解劑(decomposer)、崩解劑(disintegrating agent)、分散劑(dispersing agent)、黏結劑(binding agent)、賦形劑(excipient)、安定劑(stabilizing agent)、螯合劑(chelating agent)、稀釋劑(diluent)、膠凝劑(gelling agent)、防腐劑(preservative)、潤濕劑(wetting agent)、潤滑劑(lubricant)、吸收延遲劑(absorption delaying agent)、脂質體(liposome)以及類似之物。有關這些載劑的選用與數量是熟習此項技術人員可視情況進行選擇的。
在一些實施例中，醫藥上可接受的載劑可包含下列一種溶劑：水、生理鹽水(normal saline)、磷酸鹽緩衝生理鹽水(phosphate buffered saline，PBS)、含有醇的水性溶液(alcohol containing aqueous solution)以及其他任何合適的溶劑。
在一些實施例中，該醫藥組合物可由下列所述的任一種非經腸道途徑(parenteral routes)來投藥：皮下注射(subcutaneous injection)、表皮內注射(intraepidermal injection)、皮內注射(intradermal injection)以及病灶內注射(intralesional injection)。
在一些實施例中，醫藥組合物可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於局部施用於皮膚上的外部製劑(external preparation)。舉例而言，其可為下列所述的任一種，但不限於此：乳劑(emulsion)、凝膠(gel)、軟膏(ointment)、乳霜(cream)、貼片(patch)、擦劑(liniment)、粉末(powder)、氣溶膠(aerosol)、噴霧(spray)、乳液(lotion)、乳漿(serum)、糊劑(paste)、泡沫(foam)、滴劑(drop)、懸浮液(suspension)、油膏(salve)以及繃帶(bandage)。
在一些實施例中，外部製劑是藉由將醫藥組合物與一為熟習此項技藝者所詳知的基底(base)相混合而製成。
在一些實施例中，該基底可包含下列一種或多種的添加劑(additives)：水、醇(alcohols)、甘醇(glycol)、碳氫化合物 (hydrocarbons)[諸如石油膠(petroleum,jelly)以及白凡士林(white petrolatum,)]、蠟(wax)[諸如石蠟(paraffin)以及黃蠟(yellow wax)]、保存劑(preserving agents)、抗氧化劑(antioxidants)、界面活性劑(surfactants)、吸收增強劑(absorption enhancers)、安定劑(stabilizing agents)、膠凝劑(gelling agents)[諸如卡波普®974P(carbopol®974P)、微結晶纖維素(microcrystalline cellulose)以及羧基甲基纖維素(carboxymethylcellulose)]、活性劑(active agents)、保濕劑(humectants)、氣味吸收劑(odor absorbers)、香料(fragrances)、pH調整劑(pH adjusting agents)、螯合劑(chelating agents)、乳化劑(emulsifiers)、閉塞劑(occlusive agents)、軟化劑(emollients)、增稠劑(thickeners)、助溶劑(solubilizing agents)、滲透增強劑(penetration enhancers)、抗刺激劑(anti-irritants)、著色劑(colorants)以及推進劑(propellants)等。有關這些添加劑的選用與數量是落在熟習此項技術的人士的專業素養與例行技術範疇內。
在一些實施例中，保養品中可包含有一被廣泛地使用於保養品製造技術的可接受的佐劑(acceptable adjuvant)。例如，該可接受的佐劑可包含下列一種或多種佐劑：溶劑、膠凝劑、活性劑、防腐劑、抗氧化劑、遮蔽劑(screening agent)、螯合劑、界面活性劑、染色試劑(coloring agent)、增稠劑(thickening agent)、填料(filler)、香料以及氣味吸收劑。可根據實際需求對這些試劑的選用與數量進行合適的調整。
在一些實施例中，保養品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於護膚(skincare)或化妝(makeup)的形式，其可為 下列中的任一種，但不限於此：水性溶液(aqueous solution)、水-醇溶液(aqueous-alcohol solution)或油性溶液(oily solution)、呈水包油型(oil-in-water type)、油包水型(water-in-oil type)或複合型之乳劑、凝膠、軟膏、乳霜、面膜(mask)、貼片、貼布(pack)、擦劑、粉末、氣溶膠、噴霧、乳液、乳漿、糊劑、泡沫、分散液、滴劑、慕斯(mousse)、防曬油(sunblock)、化妝水(tonic water)、粉底(foundation)、卸妝產品(makeup remover products)、肥皂(soap)以及其他身體清潔產品(body cleansing products)等。
在一些實施例中，保養品亦可與下列中的已知活性的外用劑(external use agents)的一種或多種一起合併使用：美白劑(whitening agents)[諸如維生素A酸(tretinoin)、兒茶素(catechin)、麴酸、熊果苷以及維生素C]、保濕劑、殺菌劑(bactericides)、紫外線吸收劑(ultraviolet absorbers)、植物萃取物(plant extracts)[諸如蘆薈萃取物(aloe extract)]、皮膚營養劑(skin nutrients)、麻醉劑(anesthetics)、抗痘劑(anti-acne agents)、止癢劑(antipruritics)、止痛劑(analgesics)、抗皮膚炎劑(antidermatitis agents)、抗過角化劑(antihyperkeratolytic agents)、抗乾皮膚劑(anti-dry skin agents)、抗汗劑(antipsoriatic agents)、抗老化劑(antiaging agents)、抗皺劑(antiwrinkle agents)、抗皮脂溢出劑(antiseborrheic agents)、傷口治療劑(wound-healing agents)、皮質類固醇(corticosteroids)以及激素(hormones)。有關這些外用劑的選用與數量是落在熟習此項技術的人士的專業素養與例行技術範疇內。
在一些實施例中，醫藥組合物可被當作食品添加物(food additive)，藉由習知方法於原料製備時添加，或是於食品的製作過程中添加，而與任一種可食性材料配製成供人類與非人類動物攝食的食品產品。
在一些實施例中，食品的種類可為但不限於：飲料(beverages)、發酵食品(fermented foods)、烘培產品(bakery products)、健康食品(health foods)以及膳食補充品(dietary supplements)。
下列範例中的實驗步驟若無特別敘明，即在室溫(25±5℃)、常壓(1atm)下進行。
[例1]奇異果發酵汁液的製備例1
首先將奇異果(Actinidia deliciosa)徹底清洗，將其全果實打碎成粒徑12mm以下的奇異果顆粒。將奇異果顆粒與水以1：3-6的比例混合均勻以得到原料混合液，其中一較佳實施例為將奇異果顆粒與水以1：5的比例混合均勻以得到原料混合液。然後，根據原料混合液的總重，添加7.5wt%(重量百分比)的葡萄糖於奇異果的原料混合液中，將原料混合液在80℃-100℃下浸提0.5~1小時，其中一較佳實施例為將原料混合液在95℃下浸提0.5小時，得到奇異果培養液，培養液此時的糖度值為8.0°Bx。
待培養液冷卻至室溫後，進行發酵程序，先添加相對於培養液0.1wt%的啤酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)(購自食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心(BCRC)，寄存編號BCRC20271) 於培養液中，進行發酵0.5-2天以形成初發酵汁液，再添加相對於培養液為0.05wt%的嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)(購自BCRC，寄存編號BCRC910636)於初發酵汁液內，進行發酵0.5-2天以得到奇異果發酵汁液，其中一較佳實施例中。前述各發酵階段皆於30℃下進行，且殖菌後皆需攪拌均勻。奇異果發酵汁液設定的規格為pH值為3.5±0.3，糖度值為小於4.0°Bx，如檢驗符合該些規格，則判定發酵完成並得到奇異果發酵汁液，顯示大部分的糖份皆已反應。再另一較佳實施例中，奇異果發酵汁液會以200目篩網過濾進行過濾，去除發酵汁液的果粒殘渣。
在本發明的一實施例中，發酵程序可為先添加啤酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)，再添加嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)，也可將啤酒酵母菌及嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)一併添加共同發酵，本發明並不以此為限。
在本發明的一實施例中，在發酵中所採用的菌種也可為啤酒酵母菌之外的其他同屬不同種的酵母菌菌種，以及嗜熱鏈球菌之外的其他同屬不同種的鏈球菌菌種，本發明並不以此為限。
[例2]奇異果發酵汁液的製備例2
在此實施例中，描述奇異果發酵汁液的另一種製備方式，其中製備奇異果培養液的方式以及發酵完成後的規格及步驟大致如例1所述，本段落不再贅述，差異僅在於發酵程序中所使用的菌種以及發酵時間有所不同，詳細來說，先添加相對於培養液0.1wt%的啤酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)(購自食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心(BCRC)，寄存編號BCRC20271)於培養液中，進行發酵 0.5-2天以形成初發酵汁液，接著加入0.01-0.25wt%乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum TCI028，專利寄存於生物資源保存與研究中心，台灣，編號為BCRC910805)發酵1-3天，最後再加入3-10wt%醋酸桿菌(Acetobacter aceti，購買於生物資源保存與研究中心，台灣，編號為BCRC11688)發酵3-10天，以得到奇異果發酵汁液。
[例3]經過不同發酵製程所得奇異果發酵汁液的總多酚含量測試
標準曲線繪製：
首先，將10mg的沒食子酸(gallic acid，GA)(購自Sigma，料號：G7384)溶於水中，並添加10mL的體積至量瓶中，得到1000μg/mL濃度的沒食子酸溶液後，將該溶液儲存於-20℃作為儲備溶液。之後，將儲備溶液稀釋10倍至100μg/mL的濃度，而未使用完的液體則儲存於-20℃的環境。接著，於玻璃試管中分別配製0μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL及100μg/mL的沒食子酸標準溶液，配製方式顯示如下表一：
Figure 109134860-A0305-02-0015-1
之後，添加500μL的佛蕭酚試劑(Folin-Ciocalteu’s phenol reagent)(購自Merck，料號：1.09001.0100)、混合均勻並靜置3分鐘，接而添加400μL的7.5%碳酸鈉(sodium carbonate)(Sigma 31432，溶於水中)、混合均勻並反應30分鐘。接著，經由渦旋(vortex)確保無氣泡後取200μL的標準溶液於750nm下測量吸光值，並繪製標準曲線。
樣品總多酚定量實驗：
另外，將例1所得的A組奇異果發酵汁液以及例2所得的B組奇異果發酵汁液為樣本，並以例1所得的C組奇異果培養液(未發酵)為比較組。將各組分別以水稀釋20倍至1200μL並取100μL的體積至玻璃試管中，每組樣品需三重複。之後，添加500μL的佛蕭酚試劑、混合均勻並靜置3分鐘。
接而添加400μL的7.5%碳酸鈉、混合均勻並反應30分鐘~1小時。再經由渦旋確保無氣泡後取200μL的各組反應溶液於750nm下測量吸光值，並以內差法算出濃度後再回乘稀釋倍數以取得原濃度。
表二是本發明奇異果發酵汁液的總多酚含量檢測數據圖。由表二可見，C組(比較組，未經過發酵的奇異果培養液)的總多酚含量為30ug/mL，B組(奇異果發酵汁液，有經過例2所述的三種菌種發酵步驟)的總多酚含量為176ug/mL，A組(奇異果發酵汁液，有經過例1所述的二種菌種發酵步驟)的總多酚含量為218ug/mL；與比較組(C組)相較之下，A組的總多酚含量顯著的提升7.26倍，且明顯高於B組經過三種菌種發酵所得的奇異果發酵汁液。本實施例的結果顯示，經過例1所述的二種菌種發酵步驟，本發明的奇異果發酵汁液大量釋出總多酚。由於A組奇異果發酵汁液的總多酚含量最高，因此以該組的製備方式所得的奇異果發酵 汁液進行後續肌膚狀態的人體實驗。
Figure 109134860-A0305-02-0017-2
[例4]肌膚狀態人體實驗-以外用方式使用奇異果發酵汁液
為探討本發明的奇異果發酵汁液對於人體肌膚狀態的影響，因此以外用方式檢測受試者使用奇異果發酵汁液的各項肌膚數值變化。
使用樣品：含奇異果發酵汁液的面膜(以面膜布浸泡於含有奇異果發酵汁液的精華液中，使其充分吸收後製得)以及安慰劑面膜(以相同型號的面膜布浸泡於與前述精華液中，但其中的奇異果發酵汁液替換成等重的水)，再使其充分吸收後製得。於此實施例中，各面膜是含20mL的對應精華液。
含有奇異果發酵汁液的精華液成分：馨鮮酮(Hydroxyacetophenone，又名SymSave)0.6wt%、1,3-丁二醇(1,3-Butylene Glycol)5wt%、己二醇(1,2-Hexanediol)0.6wt%、奇異果發酵汁液1.0wt%，其餘為水。其中，此奇異果發酵汁液是由例1的製備方式而得。
受試者人數：8位25-60歲的受試者。
測試時長：共四周，每天早晚共使用兩次。
實驗方式：受試者將全臉清潔後，依據不同檢測項目，使用對應的儀器及測量方式，紀錄左右半臉於使用面膜前的數值(使用前數據)。而後，受試者在每日早晨及晚間睡前洗完臉後，分別將奇異果發酵汁液面膜以及安慰劑面膜貼敷於受試者的右半臉及左半臉上，經15分鐘後取下，每日兩次，為期4周，再以對應的儀器及測量方式，進行測量(使用後數據)，再與自身原左半臉、或右半臉的數值進行對照(使用前與使用後欲進行檢測時，受試者所在的測試區域的溫度與濕度為一致，以減少外界的溫濕度等因素會對皮膚所造成的影響)。
檢測項目：將分別對肌膚進行肌膚含水量、皮膚彈力、肌膚皺紋含量的檢測。
1.肌膚含水量
使用購自德國Courage+Khazaka electronic公司的肌膚含水量檢測探頭Corneometer® CM825(C+K Multi Probe Adapter System,Germany)對同一受試者在使用面膜前與後的面部肌膚進行檢測。該檢測探頭是基於電容的原理進行測量。當水分含量發生變化時，皮膚的電容值亦發生變化，故可通過測定皮膚電容值，分析皮膚表面的含水量。
請參閱圖1，該圖是受試者在使用含本案奇異果發酵汁液的精華液的面膜4周後的肌膚(上臉頰處)含水量改善情況，具體而言，將使用含本案奇異果發酵汁液的精華液的面膜前的肌膚含水量視為1(即100%)，使用含本案奇異果發酵汁液的精華液的面膜(測試組)後，受試者肌膚含水量平均顯著提升9.7%，而使用安慰劑面膜(安慰組)的使用前及使用後的肌膚含水量未有顯著差異。
由此可見，本發明的奇異果發酵汁液能提升肌膚含水量，因此具提升肌膚保濕的效果
2.皮膚彈力(Elasticity)
使用購自德國Courage+Khazaka electronic公司的肌膚彈力檢測探頭Cutometer® MPA580(C+K Multi Probe Adapter System,Germany)對同一受試者在測試前與測試後的面部肌膚進行檢測。測試原理是基於吸力和拉伸原理，在被測試的皮膚表面產生一個負壓將皮膚吸進一個測試探頭內，透過光學測試系統檢測皮膚被吸進探頭內的深度，並以內建軟體分析計算皮膚彈力。
請參閱圖2，該圖是受試者在使用含本案奇異果發酵汁液的精華液的面膜4周後的肌膚毛孔狀態改善情況，具體而言，將使用含本案奇異果發酵汁液的精華液的面膜前的肌膚皮膚彈力視為1(即100%)，使用含本案奇異果發酵汁液的精華液的面膜後，受試者肌膚皮膚彈力平均顯著增加10.8%，而使用安慰劑面膜的使用前及使用後的肌膚皮膚彈力未有顯著差異。
由此可見，本發明的奇異果發酵汁液具提升皮膚彈力的效果
3.肌膚皺紋
使用美國Canfield公司所販售的VISIA高階數位膚質檢測儀進行檢測，透過高解析度的相機鏡頭對同一受試者在測試前與測試後的面部肌膚進行拍攝，藉由標準白光照射、偵測皮膚陰影的變化，即可偵測紋理位置並得到數值，可代表皮膚的皺紋程度。
請參閱圖3，該圖是受試者在使用含本案奇異果發酵汁液的精華液的面膜4周後的肌膚皺紋數量改善情況，具體而言，將使用含本案奇異果發酵汁液的精華液的面膜前的肌膚皺紋數量視為1(即100%)，使用含本案奇異果發酵汁液的精華液的面膜後，受試者肌膚皺紋數量減少10.7%，而使用安慰劑面膜的使用前及使用後的肌膚皺紋數量則只有減少1.6%。
由此可見，本發明的奇異果發酵汁液具減少肌膚油脂的效果
綜合以上，透過例3的實驗數據可知，經過發酵步驟，本發明的奇異果發酵汁液大量釋出總多酚，總多酚數值含量明顯高於未經過發酵的奇異果發酵汁液，更進一步得知，依序以啤酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)及嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)進行發酵所得的奇異果發酵汁液的總多酚含量明顯高於依序以啤酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)及乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)及醋酸桿菌(Acetobacter aceti)進行發酵所得的奇異果發酵汁液的總多酚含量。透過例4所述的人體實驗可知，本發明的奇異果發酵汁液能提升肌膚含水量、提升肌膚彈力以及減少肌膚皺紋數量。
雖然本發明的技術內容已經以較佳實施例揭露如上，然其並非用以限定本發明，任何熟習此技藝者，在不脫離本發明的精神所作些許的更動與潤飾，皆應涵蓋於本發明的範疇內，因此本發明的保護範圍當視後附的申請專利範圍所界定者為準。

Claims (9)

  1. 一種奇異果發酵汁液用於製備改善肌膚狀況的組合物之用途，所述奇異果發酵汁液是藉由一包含下列步驟的製備方法製得：(a)將葡萄糖、奇異果果實與水混合以得到一培養液，其中水的重量為奇異果果實總重的3-6倍；以及(b)將所述培養液及複數菌種進行發酵1-4日以得到所述奇異果發酵汁液，其中所述複數菌種由相對於所述培養液為0.01-0.5wt%的酵母菌、相對於所述培養液為0.01-0.25wt%的乳酸菌以及相對於所述培養液為3-10wt%醋酸桿菌組成。
  2. 如請求項1所述的用途，其中所述(a)步驟的得到所述培養液的步驟中，葡萄糖的添加量為奇異果果實與水總重的8-10wt%。
  3. 如請求項1所述的用途，其中所述(b)將所述培養液及所述複數菌種進行發酵以得到所述奇異果發酵汁液的步驟由下列步驟組成：(b1)於所述培養液中加入酵母菌進行發酵0.5-2日後形成一初發酵汁液；以及(b2)於所述初發酵汁液中加入乳酸菌進行發酵0.5-2日後形成所述奇異果發酵汁液。
  4. 如請求項3所述的用途，其中所述酵母菌為啤酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)，所述乳酸菌為嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophilus)。
  5. 如請求項4所述的用途，其中所述奇異果發酵汁液的pH值為3.2-3.8，且糖度為4.0以下。
  6. 如請求項4所述的用途，其中所述奇異果發酵汁液的多酚含量大於200ug/mL。
  7. 如請求項4所述的用途，其中所述奇異果發酵汁液的總多酚含量/所述培養液的總多酚含量的比值為6-8。
  8. 如請求項1所述的用途，其中所述組合物具有以下功能的至少其中兩種：提升肌膚保濕、提升肌膚彈力以及減少肌膚皺紋。
  9. 如請求項8所述的用途，其中所述組合物含有1.0wt%的所述奇異果發酵汁液。
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