TWI686391B - 新穎化合物 - Google Patents

Abstract

本發明係有關於一種新穎喹

Description

新穎化合物

本發明係有關於一種新穎喹

啉(quinoxaline)衍生物化合物、包含所述化合物之醫藥組成物、製備所述化合物之製程及所述化合物在疾病(如癌症)治療中之用途。

依據本發明之第一態樣，提供如式(I)之化合物、其醫藥可接受性鹽類或其溶劑化物：

該式(I)包含任何互變異構(tautomeric)或立體異構(stereochemically isomeric)型態，其中， n為等於1或2之整數；R₁為氫、C_1-6烷基、羥基取代之C_1-6烷基、經-C(=O)NHCH₃取代之C_1-6烷基、或經-S(=O)₂-C_1-4烷基取代之C_1-6烷基；R_2a為氫、氟或氯；R_2b或R_2c各自獨立為甲氧基(methoxy)或羥基(hydroxyl)；R₃為氫、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、或經C_3-6環烷基取代之C_1-2烷基；R₄為氫、甲基或乙基。

於一實施態樣中，係提供式(Ia)化合物、其醫藥可接受性鹽類或其溶劑化物：

該式(Ia)包含任何互變異構(tautomeric)或立體異構(stereochemically isomeric)型態，其中，n為等於1或2之整數；R₁為氫、C_1-6烷基、羥基取代之C_1-6烷基、經-C(=O)NHCH₃取代之C_1-6烷基、或經-S(=O)₂-C_1-4烷基取代之C_1-6烷基；R_2a為氫、氟或氯；R_2b或R_2c各自獨立為甲氧基(methoxy)或羥基(hydroxyl)；R₃為氫、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、或經C_3-6環烷基取代之C_1-2烷基； R₄為氫、甲基或乙基。

於一實施態樣中，係提供式(Ib)化合物、其醫藥可接受性鹽類或其溶劑化物：

該式(Ib)包含任何互變異構(tautomeric)或立體異構(stereochemically isomeric)型態，其中，n為等於1或2之整數；R₁為氫、C_1-6烷基、羥基取代之C_1-6烷基、經-C(=O)NHCH₃取代之C_1-6烷基、或經-S(=O)₂-C_1-4烷基取代之C_1-6烷基；R_2b或R_2c各自獨立為甲氧基(methoxy)或羥基(hydroxyl)；R₃為氫、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、或經C_3-6環烷基取代之C_1-2烷基。

於一實施態樣中，係提供式(Ic)化合物、其醫藥可接受性鹽類或其溶劑化物：

該式(Ic)包含任何互變異構(tautomeric)或立體異構(stereochemically isomeric)型態，其中，R₁為氫、C_1-6烷基、羥基取代之C_1-6烷基、經-C(=O)NHCH₃取代之C_1-6烷基、或經-S(=O)₂-C_1-4烷基取代之C_1-6烷基；R_2b或R_2c各自獨立為甲氧基(methoxy)或羥基(hydroxyl)。

於一實施態樣中，係提供式(Id)化合物、其醫藥可接受性鹽類或其溶劑化物：

該式(Id)包含任何互變異構(tautomeric)或立體異構(stereochemically isomeric)型態，其中，R_2b或R_2c各自獨立為甲氧基(methoxy)或羥基(hydroxyl)。

於一實施態樣中，係提供式(Ie)化合物、其醫藥可接受性鹽類或其溶劑化物：

該式(Ie)包含任何互變異構(tautomeric)或立體異構(stereochemically isomeric)型態，其中，R₁為氫、C_1-6烷基、羥基取代之C_1-6烷基、經-C(=O)NHCH₃取代之C_1-6烷基、或經-S(=O)₂-C_1-4烷基取代之C_1-6烷基；R_2b或R_2c各自獨立為甲氧基(methoxy)或羥基(hydroxyl)。

WO2006/092430、WO2008/003702、WO01/68047、WO2005/007099、WO2004/098494、WO2009/141386、WO2004/030635、WO2008/141065、WO2011/026579、WO2011/028947、WO2007/003419、WO00/42026、WO2012/154760、WO2011/047129、WO2003/076416、WO2002/096873、WO2000/055153、EP548934、US4166117、WO2011/135376、WO2012/073017、WO2013/061074、WO2013/061081、WO2013/061077、WO2013/061080、WO2013/179034、WO2013/179033、WO2014/174307各揭示一系列的雜環衍生物。

除非內文另有所指，本文所有章節內所涉及之式(I)(包含本發明之用途、方法及其他態樣)包括如在此定義之所有涉及其他子式(sub-formula)(如Ia、Ib、Ic、Id)、亞群(sub-group)、較佳態樣(preference)、實施態樣(embodiment)及實施例(example)。

使用於此之字首「C_x-y」(其中x及y為整數)係指在一給定的基團中的碳原子數。因此，C_1-6烷基包含1至6個碳原子，C_3-6環烷基含有3至6個碳原子，羥基取代之C_1-6烷基含有1至6個碳原子，以此類推。

使用於此作為一基團或一基團之一部分之術語「C_1-2烷基」、「C_1-4烷基」或「C_1-6烷基」係指一含有1或2，或1至4或1至6個碳原子之直鏈或支鏈飽和烴基。此類基團的例子包括甲基、乙基、n-丙基、異丙基、n-丁基、異丁基、二級丁基(sec-butyl)、叔丁基(tert-butyl)、n-戊基、異戊基、新戊基(neopentyl)或己基等。

使用於此之術語「C_3-6環烷基」係指一3至6個碳原子之飽和單環烴環。此類基團的例子包括環丙基、環丁基、環戊基、環己基。

使用於此作為一基團或一基團之一部分之術語「羥基取代之C_1-4烷基」或「羥基取代之C_1-6烷基」係指在此所定義之C_1-4烷基或C_1-6烷基，其中一個以上(亦即，一或更多個)之氫原子經一羥基取代。因此，術語「羥基取代之C_1-4烷基」或「羥基取代之C_1-6烷基」包括單羥基取代之C_1-4烷基、單羥基取代之C_1-6烷基，以及亦包括多羥基取代之C_1-4烷基與多羥基取代之C_1-6烷基。可有一個、兩個、三個或多個氫原子經一羥基取代，因此該羥基取代之C_1-4烷基或羥基取代之C_1-6烷基可具有一個、兩個、三個或多個羥基。此類基團之例子包括羥甲基(hydroxymethyl)、羥乙基(hydroxyethyl)、羥丙基(hydroxypropyl)等。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，n為等於1之整數。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，n為等於2之整數。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，R₁為氫或C_1-6烷基，具體為C_1-6烷基，更具體為甲基。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，R₁為氫或C_1-6烷基，具體為C_1-6烷基，更具體為乙基。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，R₁為氫。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，R_2a為氫或氟。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，R_2a為氫。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，R_2a為氟。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，R_2b為甲氧基。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，R_2b為羥基。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，R_2c為甲氧基。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，R_2c為羥基。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，R_2b為甲氧基且R_2c為羥基。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，R_2b為羥基且R_2c為甲氧基。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，R_2b及R_2c兩者皆為甲氧基。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，R_2b及R_2c兩者皆為羥基。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，R₃為氫。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，R₃為C_1-6烷基，具體為C_1-4烷基，更具體為異丙基。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，R₃為C_1-6烷基，具體為C_1-4烷基，更具體為甲基。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，R₄為氫。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，R₄為甲基或乙基。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，n為等於1之整數；R₁為C_1-6烷基，具體為C_1-4烷基，更具體為甲基；R_2a為氫或氟，具體為氫； R_2b為甲氧基；R_2c為甲氧基；R₃為氫或C_1-6烷基，具體為C_1-6烷基，更具體為C_1-4烷基，再更具體為異丙基；R₄為氫。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，n為等於1或2之整數；R₁為C_1-6烷基，具體為C_1-4烷基，更具體為甲基或乙基；R_2a為氫或氟，具體為氫；R_2b為甲氧基；R_2c為甲氧基；R₃為氫或C_1-6烷基，具體為C_1-6烷基，更具體為C_1-4烷基，再更具體為異丙基或甲基；R₄為氫。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中，n為等於1之整數。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中，n為等於2之整數。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中，R₁為氫或C_1-6烷基，具體為C_1-6烷基，更具體為甲基。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中，R₁為氫或C_1-6烷基，具體為C_1-6烷基，更具體為乙基。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中，R₁為氫。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中，R_2a為氫或氟。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中，R_2a為氫。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中，R_2a為氟。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中，R_2b為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中，R_2b為羥基。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中，R_2c為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中，R_2c為羥基。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中，R_2b為甲氧基且R_2c為羥基。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中，R_2b為羥基且R_2c為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中，R_2b及R_2c兩者皆為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中，R_2b及R_2c兩者皆為羥基。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中，R₃為氫。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中，R₃為C_1-6烷基，具體為C_1-4烷基，更具體為異丙基。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中，R₃為C_1-6烷基，具體為C_1-4烷基，更具體為甲基。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中，n為等於1之整數；R₁為C_1-6烷基，具體為C_1-4烷基，更具體為甲基；R_2a為氫或氟，具體為氫；R_2b為甲氧基；R_2c為甲氧基；R₃為氫或C_1-6烷基，具體為C_1-6烷基，更具體為C_1-4烷基，再更具體為異丙基。

於一實施態樣中，式(Ia)化合物中， n為等於1或2之整數；R₁為C_1-6烷基，具體為C_1-4烷基，更具體為甲基或乙基；R_2a為氫或氟，具體為氫；R_2b為甲氧基；R_2c為甲氧基；R₃為氫或C_1-6烷基，具體為C_1-6烷基，更具體為C_1-4烷基，再更具體為異丙基或甲基。

於一實施態樣中，式(Ib)化合物中，n為等於1之整數。

於一實施態樣中，式(Ib)化合物中，n為等於2之整數。

於一實施態樣中，式(Ib)化合物中，R₁為氫或C_1-6烷基，具體為C_1-6烷基，更具體為甲基。

於一實施態樣中，式(Ib)化合物中，R₁為氫或C_1-6烷基，具體為C_1-6烷基，更具體為乙基。

於一實施態樣中，式(Ib)化合物中，R₁為氫。

於一實施態樣中，式(Ib)化合物中，R_2b為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Ib)化合物中，R_2b為羥基。

於一實施態樣中，式(Ib)化合物中，R_2c為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Ib)化合物中，R_2c為羥基。

於一實施態樣中，式(Ib)化合物中，R_2b為甲氧基且R_2c為羥基。

於一實施態樣中，式(Ib)化合物中，R_2b為羥基且R_2c為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Ib)化合物中，R_2b及R_2c兩者皆為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Ib)化合物中，R_2b及R_2c兩者皆為羥基。

於一實施態樣中，式(Ib)化合物中，R₃為氫。

於一實施態樣中，式(Ib)化合物中，R₃為C_1-6烷基，具體為C_1-4烷基，更具體為異丙基。

於一實施態樣中，式(Ib)化合物中，R₃為C_1-6烷基，具體為C_1-4烷基，更具體為甲基。

於一實施態樣中，式(Ib)化合物中，n為等於1之整數；R₁為C_1-6烷基，具體為C_1-4烷基，更具體為甲基；R_2b為甲氧基；R_2c為甲氧基；R₃為氫或C_1-6烷基，具體為C_1-6烷基，更具體為C_1-4烷基，再更具體為異丙基。

於一實施態樣中，式(Ib)化合物中，n為等於1或2之整數；R₁為C_1-6烷基，具體為C_1-4烷基，更具體為甲基或乙基；R_2b為甲氧基；R_2c為甲氧基；R₃為氫或C_1-6烷基，具體為C_1-6烷基，更具體為C_1-4烷基，再更具體為異丙基或甲基。

於一實施態樣中，式(Ic)化合物中，R₁為氫或C_1-6烷基，具體為C_1-6烷基，更具體為甲基。

於一實施態樣中，式(Ic)化合物中，R₁為氫或C_1-6烷基，具體為C_1-6烷基，更具體為乙基。

於一實施態樣中，式(Ic)化合物中，R₁為氫。

於一實施態樣中，式(Ic)化合物中，R_2b為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Ic)化合物中，R_2b為羥基。

於一實施態樣中，式(Ic)化合物中，R_2c為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Ic)化合物中，R_2c為羥基。

於一實施態樣中，式(Ic)化合物中，R_2b為甲氧基且R_2c為羥基。

於一實施態樣中，式(Ic)化合物中，R_2b為羥基且R_2c為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Ic)化合物中，R_2b及R_2c兩者皆為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Ic)化合物中，R_2b及R_2c兩者皆為羥基。

於一實施態樣中，式(Ic)化合物中，R₁為氫或C_1-6烷基，具體為C_1-4烷基，更具體為甲基；R_2b為甲氧基；R_2c為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Ic)化合物中，R₁為C_1-6烷基，具體為C_1-4烷基，更具體為甲基或乙基；R_2b為甲氧基；R_2c為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Id)化合物中，R_2b為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Id)化合物中，R_2b為羥基。

於一實施態樣中，式(Id)化合物中，R_2c為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Id)化合物中，R_2c為羥基。

於一實施態樣中，式(Id)化合物中，R_2b為甲氧基且R_2c為羥基。

於一實施態樣中，式(Id)化合物中，R_2b為羥基且R_2c為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Id)化合物中，R_2b及R_2c兩者皆為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Id)化合物中，R_2b及R_2c兩者皆為羥基。

於一實施態樣中，式(Ie)化合物中，R₁為氫或C_1-6烷基，具體為C_1-6烷基，更具體為甲基。

於一實施態樣中，式(Ie)化合物中，R₁為氫或C_1-6烷基，具體為C_1-6烷基，更具體為乙基。

於一實施態樣中，式(Ie)化合物中，R₁為氫。

於一實施態樣中，式(Ie)化合物中，R_2b為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Ie)化合物中，R_2b為羥基。

於一實施態樣中，式(Ie)化合物中，R_2c為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Ie)化合物中，R_2c為羥基。

於一實施態樣中，式(Ie)化合物中，R_2b為甲氧基且R_2c為羥基。

於一實施態樣中，式(Ie)化合物中，R_2b為羥基且R_2c為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Ie)化合物中，R_2b及R_2c兩者皆為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Ie)化合物中，R_2b及R_2c兩者皆為羥基。

於一實施態樣中，式(Ie)化合物中，R₁為C_1-6烷基，具體為C_1-4烷基，更具體為甲基；R_2b為甲氧基；R_2c為甲氧基。

於一實施態樣中，式(Ie)化合物中，R₁為C_1-6烷基，具體為C_1-4烷基，更具體為甲基或乙基； R_2b為甲氧基；R_2c為甲氧基。

於一實施態樣中，式(I)化合物中，n為等於1或2之整數；R₁為氫或C_1-6烷基，具體為C_1-4烷基，更具體為甲基或乙基；R_2a為氫或氟，具體為氫；R_2b為甲氧基或羥基；R_2c為甲氧基或羥基；R₃為C_1-6烷基，具體為C_1-4烷基，更具體為異丙基或甲基；R₄為氫。

於一實施態樣中，在此所定義之式(I)化合物係選自下列化合物或為下列化合物之一者：

其醫藥可接受性鹽類或其溶劑化物。

於一實施態樣中，在此所定義之式(I)化合物係選自下列化合物或下列化合物之一者：

其醫藥可接受性鹽類或其溶劑化物。

為避免疑義，應當瞭解的是一取代基之每一通常及特定較佳態樣、實施態樣及實施例可與一個以上、較佳為所有之其他的取代基之每一通常及特定較佳態樣、實施態樣及實施例組合，而本申請案涵括所有之此類實施態樣。

式(I)化合物之製備方法

在此章節，如在本發明其他章節，除非內文另有所指，提及式(I)也包括如文中所定義的所有其他亞群及其實施例。

一般而言，可根據下列反應流程圖製備式(I)化合物。

於流程圖1中，採用下列反應條件：

1：在適當的溶劑(如二

烷(dioxane)、N,N-二甲基甲醯胺(N,N-dimethylformamide)、N,N-二甲基乙醯胺(N,N-dimethylacetamide))及在室溫至回流的溫度範圍下，使式(II)中間物與甲醛(formaldehyde)反應。

辨識何種條件下在分子的何種部位上設置適當的保護基，此被認為是在本領域技術人員的知識範圍內。例如，在R₁取代基上或在吡唑(pyrrazole) 基團上的保護基，或在R₃取代基上或在R_2a,b,c取代基上的保護基，或其組合。本領域技術人員也被認為能夠辨識最可行的保護基，例如-C(=O)-O-C_1-4烷基或

或O-Si(CH₃)₂(C(CH₃)₃)或-CH₂-O-CH₂CH₂-O-CH₃。

本發明也包括氘化的化合物。該些氘化化合物可藉由在合成程序中使用適當的氘化中間物進行製備。

式(I)化合物也可透過本領域習知反應或官能基轉換彼此轉化。

藉由與C_1-6烷基-W或羥基取代之C_1-6烷基-W，其中W為一適當的離去基(如鹵基(如溴基等))，在適當的鹼(例如氫化鈉(sodium hydride)或碳酸鉀(potassium carbonate))及適當的溶劑(例如乙腈(acetonitrile)或N,N-二甲基甲醯胺(N,N-dimethylformamide))的存在下反應，R₁為氫的式(I)化合物可轉化為R₁為C_1-6烷基或羥基取代之C_1-6烷基的式(I)化合物。

在適當的鹼(例如氫化鈉(sodium hydride))及適當的溶劑(例如N,N-二甲基甲醯胺(N,N-dimethylformamide))的存在下，藉由與W-C_1-6烷基-O-Si(CH₃)₂(C(CH₃)₃)反應，接著藉由習知方法進行該矽烷保護基的去保護反應，R₁為氫的式(I)化合物可轉化為R₁為C_1-6烷基-OH的式(I)化合物。

在適當的鹼(例如三乙胺(triethylamine))及適當的溶劑(例如醇類(如甲醇))的存在下藉由與C_1-6烷基-乙烯碸反應，或在適當的去質子化試劑(如NaH)及適當的溶劑(如二甲基甲醯胺)的存在下藉由與C_1-6烷基-2-溴乙基碸反應，R₁為氫的式(I)化合物可轉化為R₁為羥-S(=O)₂-C_1-6烷基取代之乙基的式(I)化合物。

在適當的溶劑(如二氯甲烷)的存在下藉由與三溴化硼(boron tribromide)反應，R_2b或R_2c為-OCH₃的式(I)化合物可轉化為R_2b或R_2c為-OH的式(I)化合物。

在適當的鹼(例如碳酸鉀)及適當的溶劑(如N,N-二甲基甲醯胺)的存在下藉由與碘甲烷(methyl iodine)反應，R_2b或R_2c為-OH的式(I)化合物可轉化為R_2b或R_2c為-OCH₃的式(I)化合物。

一般而言，根據下列反應流程圖，藉由與動物(如大鼠或人)的肝組分(liver fractions)培養，並依序從培養基中分離所欲產物，也可製得式(Id)化合物。

式(II)或(II-a)中間物可如WO2011/135376(例如WO2011/135376之式(I-b)或(I-b-3)化合物)中所述而製備。

本發明另一態樣係為如文中所定義之式(I)化合物之製備方法，該方法包括： (i)在一適當的溶劑(例如二

烷、N,N-二甲基甲醯胺(N,N-dimethylformamide)、N,N-二甲基乙醯胺(N,N-dimethylacetamide))中及在適當的溫度(如室溫至回流的溫度範圍)下，使式(II)化合物與甲醛反應；

其中，R₁、R_2a、R_2b、R_2c、R₃、R₄及n如文中所定義；且爾後選擇性地將式(I)化合物之一化合物轉化為式(I)化合物之另一化合物。

其醫藥可接受性鹽類、溶劑化物或衍生物

在此章節中，如本發明所有其他章節，除非內文另有所指，提及的式(I)包括文中所定義其所有其他亞群、較佳態樣、實施態樣及實施例。

除非特別指出，提及的具體化合物也包括其離子型態、鹽類、溶劑化物、異構物、互變異構體、酯類、前驅藥物、同位素及受保護型態，例如下述所討論者；較佳為，其離子型態、或鹽類或互變異構體或異構物或溶劑化物；且更佳為，其離子型態、或鹽類或互變異構體或溶劑化物或受保護型態，再更佳為，其鹽類或互變異構體或溶劑化物。式(I)之許多化合物可存在於鹽類型態，例如酸加成鹽類或某些情況之有機及無機鹼(如羧酸鹽(carboxylate)；磺酸鹽(sulphonate)及磷酸鹽)的鹽類。所有這些鹽類皆在本發明之範疇中，且提及的式(I)化合物包括該些化合物的鹽類型態。應當理解，提及的「衍生物」包括其 離子型態、鹽類、溶劑化物、異構物、互變異構體、酯類、前驅藥物、同位素及受保護型態。

根據本發明之一態樣，係提供一種如本文所定義的化合物或其鹽類、互變異構體或溶劑化物。根據本發明另一態樣，係提供一種如本文所定義的化合物或其鹽類或溶劑化物。提及的本文所定義的式(I)化合物及其亞群包括在其範疇內的該些化合物的鹽類或溶劑化物或互變異構體。

本發明該些化合物之鹽類型態為典型的醫藥可接受性鹽類，且醫藥可接受性鹽類的例子如Berge等人在「Pharmaceutically Acceptable Salts,J.Pharm.Sci.,Vol.66,pp.1-19(1977)」所討論。然而，非醫藥可接受性的鹽類也可製備作為接著可轉化為醫藥可接受性鹽類的中間物型態。該些非醫藥可接受性鹽類型態，例如在本發明化合物之純化或分離中可為有用的，也形成本發明之一部分。

藉由如Pharmaceutical Salts：Properties,Selection,and Use,P.Heinrich Stahl(Editor),Camille G.Wermuth(Editor),ISBN：3-90639-026-8,Hardcover,388 pages,August 2002所述方法之習知化學方法，可從含有鹼或酸基團之母化合物合成本發明之鹽類。一般而言，藉由在水或有機溶劑或兩者之混合物中將該些化合物之自由酸或鹼型態與適當的鹼或酸反應，可製備該些鹽類；通常，可使用非水性介質，如醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈。取決於來自所形成鹽類之酸之pKa，本發明化合物可存在單或雙鹽類。

酸加成鹽可與廣泛有機或無機兩者的各種酸形成。酸加成鹽的例子包括與選自由醋酸、2,2-二氯醋酸、己二酸、褐藻酸、抗壞血酸(如L-抗壞血酸(L-ascorbic))、L-天冬胺酸、苯磺酸(benzenesulphonic acid)、苯甲酸(benzoic acid)、 4-乙醯胺基苯甲酸(4-acetamidobenzoic acid)、丁酸、(+)樟腦酸((+)camphoric acid)、樟腦磺酸(camphor-sulphonic acid)、(+)-(1S)-樟腦-10-磺酸((+)-(1S)-camphor-10-sulphonic acid)、癸酸、羊油酸(caproic acid)、辛酸(caprylic acid)、肉桂酸(cinnamic acid)、檸檬酸(citric acid)、環己烷胺基磺酸(cyclamic acid)、十二烷基硫酸(dodecylsulphuric)、乙烷-1,2-二磺酸、乙烷磺酸(ethanesulphonic acid)、2-羥基乙磺酸(2-hydroxyethanesulphonic acid)、甲酸、富馬酸、半乳糖二酸(galactaric acid)、龍膽酸、葡萄庚酸(glucoheptonic acid)、D-葡糖酸(D-gluconic acid)、葡萄糖醛酸(glucuronic acid)(如D-葡萄糖醛酸)、麩胺酸(glutamic acid)(如L-麩胺酸)、α-酮戊二酸(α-oxoglutaric acid)、甘醇酸(glycolic acid)、馬尿酸(hippuric acid)、氫溴酸、氫氯酸、氫碘酸、羥乙磺酸(isethionic acid)、乳酸(如(+)-L-乳酸、(±)-DL-乳酸)、乳糖酸、馬來酸、蘋果酸、(-)-L-蘋果酸、丙二酸(malonic acid)、(±)-DL-杏仁酸、甲磺酸(methanesulphonic acid)、萘磺酸(naphthalenesulphonic acid)(如萘-2-磺酸)、萘-1,5-二磺酸、1-羥基-2-萘酸、菸鹼酸(nicotinic acid)、硝酸、油酸、乳清酸、草酸(oxalic acid)、棕櫚酸(palmitic acid)、撲酸(pamoic acid)、磷酸、丙酸、L-焦麩胺酸、丙酮酸(pyruvic acid)、水楊酸(salicylic acid)、4-胺基水楊酸、癸二酸(sebacic acid)、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、單寧酸、(+)-L-酒石酸、硫氰酸(thiocyanic acid)、甲苯磺酸(toluenesulphonic)(如對甲苯磺酸(p-toluenesulphonic))、十一烯酸(undecylenic acid)及戊酸(valeric acid)所組成之群組、以及醯化胺基酸與陽離子交換樹脂之酸所形成之鹽類。

該些鹽類之一具體群組由醋酸、氫氯酸、氫碘酸、磷酸、硝酸、硫酸、檸檬酸、乳酸、琥珀酸、馬來酸、蘋果酸、羥乙磺酸(isethionic acid)、富馬酸、苯磺酸、甲苯磺酸、甲磺酸(methanesulphonic，mesylate)、乙磺酸 (ethanesulphonic acid)、萘磺酸、戊酸、乙酸、丙酸、丁酸、丙二酸、葡萄糖醛酸及乳糖酸所形成之鹽類所組成。酸加成鹽之其他群組包括由醋酸、己二酸、抗壞血酸、天冬胺酸、檸檬酸、DL-乳酸、富馬酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸、馬尿酸、氫氯酸、麩胺酸、DL-蘋果酸、甲磺酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸及酒石酸所形成之鹽類。

若該化合物為陰離子或具有可為陰離子之一官能基，則可與一適當的陽離子形成一鹽類。適當的無機陽離子的例子包括，但不限於：鹼金屬離子(如Na⁺及K⁺)、鹼土金屬陽離子(如Ca²⁺及Mg²⁺)及其他陽離子(如Al³⁺)。適當的有機陽離子的例子包括，但不限於：銨離子(即，NH₄ ⁺)及經取代之銨離子(如NH₃R⁺、NH₂R₂ ⁺、NHR₃ ⁺、NR₄ ⁺)。

一些適當的經取代之銨離子的例子為衍生自：乙胺(ethylamine)、二乙胺(diethylamine)、二環己胺(dicyclohexylamine)、三乙胺(triethylamine)、丁胺(butylamine)、乙二胺(ethylenediamine)、乙醇胺(ethanolamine)、二乙醇胺(diethanolamine)、哌

(piperazine)、苄胺(benzylamine)、苯基苄胺(phenylbenzylamine)、膽鹼(choline)、葡甲胺(meglumine)及胺丁三醇(tromethamine)，與胺基酸(如賴胺酸(lysine)及精胺酸(arginine))。常見四級銨離子之例子為N(CH₃)₄ ⁺。

該些式(I)化合物中包含一氨官能基，其可形成四級銨鹽，例如藉由根據本領域技術人員習知方法與烷基化劑反應。此類四級銨化合物落於式(I)之範疇。含有氨官能基之式(I)化合物也可形成N-氧化物。本文提及的含有氨官能基之式(I)化合物也包括該N-氧化物。含有幾個氨官能基之化合物中的一個以上氮原子可被氧化以形成N-氧化物。N-氧化物之具體例子為三級氨或含氮雜環 之氮原子之N-氧化物。N-氧化物可藉由以一氧化劑(例如過氧化氫或過酸(per-acid，如過氧羧酸(peroxycarboxylic acid))，參見Advanced Organic Chemistry,by Jerry March,4th Edition,Wiley Interscience,pages之例子)處理對應之氨而形成。更具體地，N-氧化物可藉由L.W.Deady(Syn.Comm.(1977),7,509-514)之程序得到，其中使該氨化合物與間氯過苯甲酸(m-chloroperoxybenzoic acid，MCPBA)例如在如二氯甲烷之惰性溶劑中反應。

本發明之化合物可例如與水(即，水合物)或常見有機溶劑形成溶劑化物。如文中所使用，「溶劑化物」一詞意指本發明化合物與一個以上溶劑分子之物理性結合。此物理性結合涉及不同程度的離子及共價鍵結，包括氫鍵。在某些例子中，該溶劑化物將能夠分離，例如當一個以上溶劑分子被包含於該結晶性固體之晶格中時。「溶劑化物」一詞意欲涵蓋溶液相及可分離之溶劑化物兩者。適當的溶劑化物的非限定例子包括本發明化合物與水、異丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸或乙醇胺等之組合。本發明化合物雖在溶液中，仍可發揮其生物功效。

溶劑化物為藥物化學中所習知。其對於用於一製備物質之製程(如有關其純化)、該物質之儲存(如其安定性)及易於處理該物質之程序而言是重要的，且其常形成在一化學合成之分離或純化階段之部分。本領域技術人員可以通過標準的和長期使用的技術手段加以確定水合物或其它溶劑化物是否已藉由用於製備給定的化合物的分離條件或純化條件而形成。此類技術的例子包括熱重分析(thermogravimetric analysis，TGA)、微差掃描熱量法(differential scanning calorimetry，DSC)、X射線晶體學(X-ray crystallography，如單晶X射線晶體學(single crystal X-ray crystallography)或X光粉末繞射(X-ray powder diffraction))以 及固態NMR(SS-NMR，也為習知魔角旋轉NMR(Magic Angle Spinning NMR)或MAS-NMR)。此類技術為熟練的化學家的標準分析工具的一部份，如NMR、IR、HPLC及MS。或者，本領域技術人員可刻意使用結晶條件以形成一溶劑化物，此等結晶條件包括特定溶劑化物所需之溶劑量。爾後，上述標準方法可用來確認溶劑化物是否已經形成。式(I)亦包含任何複合物(complexes)(如包合複合物(inclusion complexes)或與化合物(如環糊精)之籠合物(clathrates)，或與金屬之複合物)。

再者，本發明化合物可具有一個以上多晶型(結晶)或非晶形型態，且因此應當包含於本發明之範疇中。

式(I)化合物可存在許多不同的幾何異構物及互變異構體，及提及的式(I)化合物包括所有的此些型態。為避免疑義，其中化合物可存在數種幾何異構物或互變異構體形式之一且僅具體描述或呈現一者，其他仍由式(I)所涵蓋。互變異構體形式的其他例子包括，例如酮(keto-)、烯醇(enol-)及烯醇化物(enolate-)形式，如在例如下列之互變異構對的形式：酮/烯醇(keto/enol，如下所示)、亞胺/烯胺(imine/enamine)、醯胺/亞胺基醇(amide/imino alcohol)、脒/烯二胺(amidine/enediamines)、亞硝基/肟(nitroso/oxime)、硫酮/烯硫醇(thioketone/enethiol)、和硝基/酸式硝基(nitro/aci-nitro)。

在式(I)化合物包含一個以上掌性中心(chiral centres)，且可存在兩個以上(意即，兩個或更多個)光學異構物的形式時，提及的式(I)化合物包括其所有的光學異構物形式(如對映異構物(enantiomers)、差向異構物(epimers)及非鏡像 異構物(diastereoisomers))，可以是個別的光學異構物的形式，或是兩個以上光學異構物之混合物(如外消旋混合物(racemic mixtures))的形式，除非內文另有所指。該些光學異構物可藉由其光學活性而被表徵或鑑定(意即，+及-異構物，或d及l異構物)，或可使用利用Cahn、Ingold及Prelog發展之「R」及「S」命名法(參見Advanced Organic Chemistry by Jerry March,4th Edition,John Wiley & Sons,New York,1992,pages 109-114，及亦參見Cahn,Ingold & Prelog(1966)Angew.Chem.Int.Ed.Engl.,5,385-415)之絕對立體化學表徵之。光學異構物可藉由包含掌性層析法(chiral chromatography)(在掌性擔體上的層析法)的幾種技術予以分離，且此類技術為本領域技術人員所習知。相對於掌性層析法的另一方法，光學異構物可藉由與掌性酸，如(+)-酒石酸、(-)-焦麩胺酸、(-)-二甲苯醯基-L-酒石酸、(+)-杏仁酸、(-)-蘋果酸、及(-)-樟腦磺酸，形成非鏡像異構物鹽類，藉由優先結晶以分離該非鏡像異構物，然後解離該鹽類以得到獨立的自由鹼之對映異構物。

其中式(I)化合物存在兩個以上光學異構物形式，在一對對映異構物中的一對映異構物可能表現優於另一對映異構物，例如在生物活性方面。因此，在某些情況中，可能希望僅使用一對對映異構物之一者或複數個非鏡像異構物之一者作為治療試劑。據此，本發明提供含有具有一個以上掌性中心之式(I)化合物之組成物，其中，至少55%(如至少60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%)之式(I)化合物呈現為單一光學異構物(如對映異構物或非鏡像異構物)。於一通常實施態樣中，式(I)化合物之總量的99%以上(如實質上全部)可呈現為一單一光學異構物(如對映異構物或非鏡像異構物)。當鑑識出一特定異構物形式(如S構型或E異構物)，這意味著所述異構物形式實質上不含其他異構物，即， 所述異構物形式呈現於本發明化合物總量之至少55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、99%或以上(如實質上全部)。

於前後文中，每當化合物包括下列鍵結

，此意指該化合物為一具有未知結構之單一立體異構物或立體異構物之混合物。

本發明化合物包括具有一個以上同位素取代之化合物，且提及的具體元素包含該元素所有的同位素於其範疇中。例如，提及的氫包含¹H、²H(D)、及³H(T)於其範疇中。類似地，提及的碳及氧分別包含¹²C、¹³C及¹⁴C與¹⁶O及¹⁸O於它們的範疇中。該些同位素可為放射性或非放射性。於本發明一實施態樣中，該些化合物包含非放射性同位素。此類化合物較適於治療用途。然而，於另一實施態樣中，該化合物可含有一個以上放射性同位素。含有此類放射性同位素之化合物在診斷上是有用的。

酯類如帶有羧酸基或羥基之式(I)化合物之羧酸酯或醯氧酯(acyloxy esters)也為式(I)所涵蓋。於本發明一實施態樣中，式(I)包含帶有羥基之式(I)化合物之酯類於其範疇中。於本發明另一實施態樣中，式(I)不包含帶有羥基之式(I)化合物之酯類於其範疇中。醯氧基(逆酯)之例子以-OC(=O)R表示，其中R為醯氧取代基，例如C_1-7烷基、C_3-20雜環基或C_5-20芳基，較佳為C_1-7烷基。醯氧基之具體例子包括，但不限於：-OC(=O)CH₃(乙醯氧基)、-OC(=O)CH₂CH₃、-OC(=O)C(CH₃)₃、-OC(=O)Ph、及-OC(=O)CH₂Ph。

舉例而言，某些前驅藥物為該活性化合物之酯類(如生理可接受性代謝不穩定酯(physiologically acceptable metabolically labile ester))。「前驅藥物」係指例如在體內轉化成式(I)之生物活性化合物之任何化合物。在代謝期間，該 酯基被切斷以產生該活性藥物。該些酯類可藉由例如將母化合物中任何的羥基酯化而形成，其中若適當的話，事先保護母化合物中存在的任何其他反應基團，接著如果需要的話去除保護。

此代謝不穩定酯類的例子包括C_1-6胺基烷基[如：胺乙基(aminoethyl)；2-(N,N-二乙基胺基)乙基(2-(N,N-diethylamino)ethyl)；2-(4-嗎啉)乙基(2-(4-morpholino)ethyl)；以及醯氧基-C_1-7烷基[如：醯氧基甲基(acyloxymethyl)；醯氧基乙基(acyloxyethyl)；新戊醯氧基甲基(pivaloyloxymethyl)；乙醯氧基甲基(acetoxymethyl)；1-乙醯氧基乙基(1-acetoxyethyl)；1-(1-甲氧基-1-甲基)乙基-羰氧基乙基(1-(1-methoxy-1-methyl)ethyl-carbonyloxyethyl)；1-(苯甲醯氧基)乙基(1-(benzoyloxy)ethyl)；異丙氧羰氧基甲基(isopropoxy-carbonyloxymethyl)；1-異丙氧-羰氧基乙基(1-isopropoxy-carbonyloxyethyl)；環己基-羰氧基甲基(cyclohexyl-carbonyloxymethyl)；1-環己基-羰氧基乙基(1-cyclohexyl-carbonyloxyethyl)；環己氧基-羰氧基甲基(cyclohexyloxy-carbonyloxymethyl)；1-環己氧基-羰氧基乙基(1-cyclohexyloxy-carbonyloxyethyl)；(4-四氫吡喃氧基)羰氧基甲基((4-tetrahydropyranyloxy)carbonyloxymethyl)；1-(4-四氫吡喃氧基)羰氧基乙基(1-(4-tetrahydropyranyloxy)carbonyloxyethyl)；(4-四氫吡喃基)羰氧基甲基((4-tetrahydropyranyl)carbonyloxymethyl)；及1-(4-四氫吡喃基)羰氧基乙基(1-(4-tetrahydropyranyl)carbonyloxyethyl])。再者，某些前驅藥物經酵素活性化以產出該活性化合物，、或一化合物，此化合物於進一步化學反應時產出該活性化合物(例如，在抗原導向酶前驅藥物療法(antigen-directed enzyme pro-drug therapy，ADEPT)、基因導向酶前驅藥物療法(gene-directed enzyme pro-drug therapy，GDEPT)及配體定向酶前驅藥物療法(ligand-directed enzyme pro-drug therapy，LIDEPT)等的情況。)舉例而言，該前驅藥物可為醣類衍生物或其他糖苷共軛體，或可為胺基酸酯類衍生物。

蛋白酪氨酸激酶(Protein Tyrosine Kinases，PTK)

描述於此之本發明化合物抑制或調制某些酪氨酸激酶之活性，因此該些化合物在藉由這些酪氨酸激酶(特別是FGFR)介導(mediate)的疾病狀態或情況之治療或預防上是有用的，特別是治療。

FGFR

蛋白酪氨酸激酶(PTK)受體之纖維母細胞生長因子(FGF)家族調節包含有絲分裂(mitogenesis)、創傷癒合(wound healing)、細胞分化(cell differentiation)與血管生成(angiogenesis)、及發育(development)之生理功能之多樣性系列。正常及惡性細胞兩者之生長及增生受FGFs局部濃度變化所影響，FGFs是作為自分泌(autocrine)與旁分泌因子之細胞外訊號分子(extracellular signalling molecules)。自分泌FGF訊號在類固醇激素依賴性癌症(steroid hormone-dependent cancers)進展到激素獨立狀態(hormone independent state)上特別重要。FGFs及其受體在某些組織及細胞株中表現增加的程度而過度表現被認為促進了惡性表型。再者，有些致癌基因(oncogenes)係編碼生長因子受體的基因的同源物(homologues)，且在人類胰腺癌(human pancreatic cancer)中有潛在FGF相關訊號(FGF-dependent signalling)之異常活化(aberrant activation)(Knights et al.,Pharmacology and Therapeutics 2010 125：1(105-117)；Korc M.et al Current Cancer Drug Targets 2009 9：5(639-651))。

兩個原型成員是酸性纖維母細胞生長因子(aFGF或FGF1)及鹼性纖維母細胞生長因子(bFGF或FGF2)，且至今，已確認至少二十種不同的FGF家族成員。對FGFs的細胞反應係透過高親和性跨膜蛋白酪氨酸激酶纖維母細胞生長因子受體(fibroblast growth factor receptor，FGFR)編號為1至4之四種類型(FGFR1至FGFR4)進行傳遞。

由於此激酶在許多腫瘤類型中被活化，除影響內皮細胞增生外，FGFR1路徑之干擾應當影響腫瘤增生。FGFR1在腫瘤相關的血管系統中過度表現及活化，意味該些分子在腫瘤血管生成中扮演的角色。

近期研究中已顯示在典型小葉瘤(Classic Lobular Carcinomas，CLC)中的FGFR1表現與致瘤性(tumorigenicity)間的連結。CLCs佔所有乳腺癌的10-15%，且一般而言，缺乏p53及Her2表現而保留雌激素受體之表現。在約50%之CLC情況中已確認了8p12-p11.2之基因擴增，且此顯示與增加的FGFR1表現間的連繫。針對FGFR1使用siRNA或該受體之小分子抑制劑之初步研究，顯示帶有此擴增之細胞株對抑制該訊號路徑特別敏感。橫紋肌肉瘤(Rhabdomyosarcoma，RMS)是最常見的兒科軟組織肉瘤(pediatric soft tissue sarcoma)，其可能是骨骼肌成肌(skeletal myogenesis)過程中異常增生和分化導致的結果。FGFR1在原發性橫紋肌肉瘤腫瘤中是過度表現的，且與5' CpG島的低甲基化及AKT1、NOG及BMP4基因的異常表現相關。FGFR1還與鱗狀肺癌(squamous lung cancer)、結腸直腸癌(colorectal cancer)、惡性膠質瘤(glioblastoma)、星形細胞瘤(astrocytomas)、前列腺癌(prostate cancer)、小細胞肺癌(small cell lung cancer)、黑色素瘤(melanoma)、頭頸部癌(head and neck cancer)、甲狀腺癌(thyroid cancer)、子宮癌(uterine cancer)有關。

纖維母細胞生長因子受體2對酸性及/或鹼性纖維母細胞生長因子以及角質細胞生長因子配體(keratinocyte growth factor ligand)具有高親和性。纖維母細胞生長因子受體2在成骨細胞(osteoblast)生長及分化的過程中，也傳播強效的FGFs的成骨功效。纖維母細胞生長因子受體2中的突變，導致複雜的功能變化，呈現顱縫的異常骨化(顱縫早閉)，意味FGFR訊號在骨內膜形成中的主要作用。例如，在特徵為過早的顱縫骨化的亞伯氏綜合症(Apert(AP)syndrome)中，多數案例與纖維母細胞生長因子受體2中的點突變造成獲得性突變(gain-of-function)相關。此外，在患者顱骨綜合症中的突變篩查顯示一些經常性的FGFR2突變與菲佛綜合症(Pfeiffer syndrome)的嚴重形式有關。FGFR2的特定突變包括在FGFR2中的W290C、D321A、Y340C、C342R、C342S、C342W、N549H及K641R。

在人類骨骼發育中的幾種嚴重異常，包括亞伯氏綜合症、克魯松氏綜合症、杰克遜維斯氏綜合症、Beare-Stevenson回狀皮膚綜合症、菲佛綜合症，被認為與纖維母細胞生長因子受體2中的突變發生有關。大多數，若非全部，菲佛綜合症(PS)的案例也由纖維母細胞生長因子受體2基因之新生突變所引起，且近期顯示，在纖維母細胞生長因子2中的突變破壞管理配體特異性之基本規則之一。意即，纖維母細胞生長因子受體之兩種突變體接合形式，FGFR2c及FGFR2b，已獲得與非典型FGF配體結合並活化之能力。配體特異性之喪失導致異常的訊號，並且表明這些疾病綜合症之嚴重表型起因於纖維母細胞生長因子受體2之異位配體依賴性活化(ectopic ligand-dependent activation)。

FGFR3受體酪氨酸激酶之基因畸變，如染色體易位(chromosomal translocation)或點突變導致異位表達或失調(ectopically expressed or deregulated)、組成活化(constitutively active)之FGFR3受體。這樣的異常與在多發性骨髓瘤(multiple myelomas)和膀胱(bladder)，肝(hepatocellular)，口腔鱗狀細胞癌(oral squamous cell carcinoma)和子宮頸癌(cervical carcinomas)的一個次群相關。據此，FGFR3抑制劑在多發性骨髓瘤、膀胱及子宮頸癌的處理中是有用的。FGFR3在膀胱癌中也是過度表現的，特別是浸潤性膀胱癌。FGFR3在尿路上皮癌(urothelial carcinoma，UC)中藉由突變而被頻繁地活化。增加的表現與突變相關(85%的突變腫瘤呈現高水平表現)，但也有42%的腫瘤沒有偵測到呈現過度表現的突變，包含許多肌肉侵入性腫瘤(muscle-invasive tumor)。FGFR3也與子宮內膜癌(endometrial cancer)和甲狀腺癌(thyroid cancer)相關。

FGFR4的過度表現與前列腺癌及甲狀腺癌兩者中的不良預後有關。此外，生殖細胞多樣性(germline polymorphism)(Gly388Arg)與肺癌、乳腺癌、結腸癌、肝癌(HCC)和前列腺癌的發病率增加有關。此外，FGFR4的平截形(包括激酶區域)也已被發現表現在40%的垂體瘤(pituitary tumour)，但未表現在正常組織中。已在肝癌、結腸癌及肺癌中觀察到FGFR4過度表現。FGFR4已涉及結腸癌及肝癌，其中配體FGF19的表現經常升高。FGFR4也與星形細胞瘤(astrocytomas)及橫紋肌肉瘤(rhabdomyosarcoma)有關。

纖維變性病況(Fibrotic condition)是從纖維組織異常或過度沉積而產生的主要的醫療問題。此發生在許多疾病中，包括肝硬化(liver cirrhosis)、腎小球性腎炎(glomerulonephritis)、肺纖維化(pulmonary fibrosis)、全身性纖維化(systemic fibrosis)、類風濕性關節炎(rheumatoid arthritis)、以及傷口癒合(wound healing)的自然過程。病理學纖維化之機制尚未完全了解，但認為是由各種細胞因子(包括腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor，TNF)、纖維母細胞生長因子 (fibroblast growth factors，FGFs)、血小板衍生生長因子(platelet derived growth factor，PDGF)和參與纖維母細胞增生及細胞外基質蛋白(extracellular matrix proteins，包括膠原蛋白(collagen)及纖連蛋白(fibronectin))沉積之轉化生長因子(transforming growth factor beta，TGFβ))之作用所致。此導致組織結構及功能的改變以及隨後的病理狀況。

許多臨床前研究已證明了在肺纖維化的臨床前模型中的纖維母細胞生長因子之調升。已報導TGFβ1及PDGF參與纖維化過程且進一步公開的工作，表明FGF’s的提高及纖維母細胞增生隨之增加，可能是對增加的TGFβ1響應。抗纖維化試劑吡非尼酮(pirfenidone)的臨床功效報導表明在如特發性肺纖維化(idiopathic pulmonary fibrosis，IPF)之病症中靶向纖維化機制之潛在治療益處。特發性肺纖維化(也稱作隱源性纖維性肺泡炎(Cryptogenic fibrosing alveolitis))是涉及肺結疤的漸進病症。漸漸地，肺的氣囊由纖維化組織取代，變厚，導致不可逆的喪失將氧氣傳送至血流中的組織功能。病情的症狀包括呼吸急促(shortness of breath)、慢性乾咳(chronic dry coughing)、乏力(fatigue)、胸痛(chest pain)和食慾不振(loss of appetite)導致體重迅速下降。該病症5年後有非常嚴重約50%的死亡率。

因此，抑制FGFR的化合物在提供防止腫瘤生長或誘導腫瘤細胞凋亡的手段上是有用的，特別是抑制血管生成(angiogenesis)。因此，預期這些化合物將證明在治療或預防如癌症之增生性疾病中是有用的。特別是，受體酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinases，RTK)之活化突變或受體酪氨酸激酶之調升的腫瘤可能對抑制劑特別敏感。在此所討論的特定RTKs之任何同功異形體(isoform) 之活化突變的患者亦發現以RTK抑制劑的治療特別有益，例如具有FGFR3-TACC3易位的腫瘤(如膀胱或腦腫瘤)之病患。

血管內皮生長因子受體(Vascular Endothelial Growth Factor Receptor，VEGFR)

慢性增生疾病常伴隨著深厚的血管生成(angiogenesis)，其可有助於或維持發炎及/或增生狀態，或其透過血管的侵襲性增生導致組織破壞。

血管生成通常用於描述新的或替代的血管發展，或新生血管(neovascularisation)。胚胎中建立血管是必要且為生理正常過程。一般而言，在大多數正常的成人組織中，除了排卵(ovulation)、月經(menses)及傷口癒合(wound healing)的部位，血管生成並不會發生。然而，許多疾病之特徵在於持久及不受管制的血管生成。例如，在關節炎(arthritis)中，新的毛細血管侵襲關節並破壞軟骨。在糖尿病(diabetes)(以及很多不同的眼科疾病)中，新血管侵入黃斑(macula)或視網膜(retina)或者其它眼部結構，並且可能導致失明。動脈粥狀硬化(atherosclerosis)的過程中與血管生成相關。腫瘤生長和轉移已被發現是血管生成相關性的。

隨著重大疾病涉及血管生成之認知，一直有辨識並發展血管生成之抑制劑的研究。這些抑制劑通常依對血管生成級聯(cascade)中個別標靶之反應而分類，血管生成串聯例如藉由血管生成訊號使內皮細胞活化；降解酶的合成及釋放；內皮細胞遷移；內皮細胞的增生；以及毛細小管的形成。因此，血管生成發生在許多階段，並正在嘗試發現並開發在各種階段阻斷血管生成的化合物。

有教示血管生成之抑制劑之公開文獻，藉由不同的機制工作，在如癌症及轉移、眼部疾病、關節炎及血管瘤的疾病中是有利的。

血管內皮生長因子(VEGF)，一種多肽，為體外內皮細胞之促細胞分裂劑(mitogenic)並刺激體內血管生成反應。VEGF也與不適當的血管生成有關。VEGFR(s)為蛋白酪氨酸激酶(PTKs)。PTKs催化涉及細胞功能之蛋白中的特定酪氨酸殘基之磷酸化，從而調節細胞生長、生存及分化。

VEGF的三種PTK受體已被確認：VEGFR-1(Flt-1)；VEGFR-2(Flk-1或KDR)及VEGFR-3(Flt-4)。這些受體涉及血管生成並參與訊號傳導。特別感興趣的是VEGFR-2，它是一種跨膜受體PTK，主要表達於內皮細胞。藉由VEGF的VEGFR-2的活化在啟動腫瘤血管生成的訊息傳導路徑中是關鍵步驟。VEGF表達可組成腫瘤細胞且也可響應某些刺激而調升。這類刺激的一種是低氧，其中VEGF表達在腫瘤及相關宿主組織中是調升的。VEGF配體藉由結合其細胞外VEGF結合位置活化VEGFR-2。此導致在VEGFR-2細胞內激酶區域的受體VEGFRs的二聚化和酪氨酸殘基的自磷酸化。激酶區域操作以從ATP轉移磷酸根至酪氨酸殘基，從而提供了對VEGFR-2的下游蛋白訊號通知的結合位點，最終導致血管生成的引發。

在激酶區域之VEGFR-2結合位點的抑制會阻礙酪氨酸殘基之磷酸化從而干擾血管生成之啟動。

血管生成係藉由所謂血管生成因子之各種細胞生長激素介導(mediate)之新血管生成之生理過程。雖然其在固態瘤(solid tumor)中的潛在病理作用已被廣泛地研究30年以上，近期已確認慢性淋巴細胞白血病(chronic lymphocytic leukemia，CLL)及其他惡性血液疾病中的血管生成增強。在CLL患 者之骨髓及淋巴結兩者中，已藉由各種實驗方法為血管生成之增加程度提供證據。雖然在此疾病之病理中的血管生成作用尚待完全闡明，但實驗數據表明數種血管生成因子在疾病進展中發揮作用。血管生成之生物標記也被證實在CLL中是預後相關。此顯示VEGFR抑制劑對於如CLL之淋巴疾病之患者也是有用的。

為使一腫瘤塊超過一臨界尺寸，其必須發展一相關的脈管系統(vasculature)。已提出靶向腫瘤脈管系統會限制腫瘤膨脹且可為一有用的癌症治療法。腫瘤生長之觀察已表明小腫瘤塊能存在於一組織中而不需任何腫瘤特有的脈管系統。非血管化腫瘤之生長停滯已被歸因於在腫瘤中心之缺氧效果。近期，已確認各種促血管生成因子及抗血管生成因子並且已導向「血管生成開關」之概念，其為一種過程，其中，破壞了腫瘤塊中血管生成刺激及抑制劑的正常比例，而允許了自主血管生成。該血管生成開關似乎是由驅動惡性轉化之相同基因改變所支配：致癌基因之活化及腫瘤抑制基因之丟失。數種生長因子扮演血管生成之正調節因子。其中最重要的是血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、鹼性纖維母細胞生長因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)及血管生成素(angiogenin)。如血小板反應蛋白(thrombospondin，Tsp-1)、血管抑素(angiostatin)及內皮抑素(endostatin)之蛋白作為血管生成之負調節因子。

在小鼠模型中，VEGFR2而非VEGFR1之抑制顯著干擾血管生成開關、持久血管生成及初始腫瘤生長。在晚期腫瘤中，當腫瘤在初期生長抑制後之治療期間重新生長時，對VEGFR2阻斷之表型耐藥性(phenotypic resistance)浮現。此對VEGF阻斷之耐藥性涉及腫瘤血管生成之再活化，與VEGF無關，而與其他促血管生成因子(包括FGF家族成員)之缺氧所引導之誘導相關。此等其他 促血管生成的訊號與迴避期(evasion phase)中腫瘤的血管重建及腫瘤的再生有功能性的牽連，例如在VEGF抑制中的FGF阻斷過程。

在第2期的研究中，在以泛VEGF受體酪氨酸抑制劑(AZD2171)治療之患者中，有證據顯示神經膠質母細胞瘤(glioblastoma)血管正常化。血管正常化之MRI測定與循環生物標記之結合提供了用於評估對血管生成劑響應之有效手段。

PDGFR

惡性腫瘤是失控的細胞增生產物。細胞生長由生長促進和生長抑制因子之間的微妙平衡控制。在正常組織中，這些因子之生產及活化造成分化細胞以維持器官之正常完整性及功能性之受控制及規律的方式生長。惡性細胞逃避這種控制；自然的平衡被打破(透過各種機制)，並且發生不規律、異常的細胞生長。在腫瘤發展中的一重要生長因子是血小板衍生生長因子(platelet-derived growth factor，PDGF)，其包括通過細胞表面酪氨酸激酶受體發訊號並刺激各種細胞功能(包括生長、增生及分化)之胜肽生長因子家族。

選擇性抑制劑之優點

有差異化選擇性特性之FGFR激酶抑制劑之發展，提供一新的機會，以在FGFR失調驅動疾病之患者亞群中，使用這些靶向藥物。化合物在額外的激酶(特別是VEGFR2及PDGFR-beta)上表現降低的抑制作用，提供機會以具有一有區別的副作用或毒性特性，並因此允許更有效的治療這些適應症。VEGFR2及PDGFR-beta之抑制劑分別與如高血壓(hypertension)或水腫(oedema)之毒性相關。在VEGFR2抑制劑的情況中，此高血壓效應往往是劑量限制，在某些患者族群中可能是禁忌並且需要臨床管理。

生物活性及治療用途

本發明之化合物及其亞群具有纖維母細胞生長因子受體(FGFR)抑制或調制活性、及/或血管內皮生長因子受體(VEGFR)抑制或調制活性、及/或血小板衍生生長因子受體(PDGFR)抑制或調制活性，且其在預防或治療在此所述疾病狀態或病症上是有效的。此外，本發明化合物及其亞群在預防或處理藉由該激酶介導的疾病或病症上是有效的。論及疾病狀態或病症，如癌症，之預防或治療，包括緩解或降低癌症發病率於其範疇中。

在此所使用之「調制(modulation)」一詞，當應用於一激酶之活性時，係意在定義該蛋白激酶之生物活性程度的變化。因此，調制包括造成相關蛋白激酶活性增加或減少之生理變化。在後述情況中，調制可描述為「抑制」。所述調制可直接或間接地產生，且可由任何機制在任何生理層面(physiological level)介導，包括例如在基因表現層面(包含例如轉錄、轉譯及/或轉譯後修飾)、在直接或間接作用在激酶活性程度上之編碼調節元件(encoding regulatory elements)之基因表現層面。因此，調制可意味著激酶之升高/抑制表現或過度表現或表現不足，包括基因擴增(如多重基因拷貝(multiple gene copies))及/或藉由轉錄效果增加或降低表現，以及蛋白激酶之超活性或低活性及活化或去活性(包括藉由突變活化或去活性)。術語「已調制」、「調制中」及「調制」被相應地解釋。

在此所使用之「介導」一詞，如本文所述與激酶結合使用(並適用於例如各種生理過程、疾病、狀態、狀況、療法(therapies)、治療(treatments)或干預)，意在限制性地操作，使得施加該詞的各種過程、疾病、狀態、狀況、治療和干預為彼等其中激酶起著生物作用者。在施加該詞於一疾病、狀態或情況 中，透過激酶起的生物作用可為直接或間接且對疾病、狀態或狀況(或其病因或進展)之症狀表現可為必需及/或充分的。因此，激酶活性(且特別是激酶活性異常程度，如激酶過度表現)不一定是該疾病、狀態或狀況之近端病因；反之，可以設想，所述激酶介導的疾病、狀態或狀況包括那些具有多因子病因和複雜的進展，其中所討論的激酶僅部分參與。在該詞應用於治療、預防或干預(intervention)的情況中，激酶所起的作用可為直接或間接且對於該治療、預防之操作或干預之結果可為必要及/或充分。因此，透過激酶介導之疾病狀態或狀況包括對任何特定癌症藥物或治療之抗性發展。

因此，舉例而言，本發明化合物在緩解或降低癌症發病率上是有效的。

更具體地，式(I)化合物及其亞群為FGFRs之抑制劑。舉例而言，本發明化合物具有抗FGFR1、FGFR2、FGFR3、及/或FGFR4之活性，且特別是選自FGFR1、FGFR2、及FGFR3之FGFRs；或者，具體而言，式(I)化合物及其亞群為FGFR4之抑制劑。

較佳化合物為抑制一種以上選自FGFR1、FGFR2、FGFR3、及FGFR4之FGFR之化合物。本發明較佳化合物為具有低於0.1μM之IC₅₀值者。

本發明化合物也具有抗VEGFR之活性。

此外，許多本發明化合物呈現相較於對VEGFR(特別是VEGFR2)及/或PDGFR而言，對FGFR 1、2、及/或3、及/或4具有選擇性，且這些化合物表示為本發明一較佳實施態樣。具體而言，該些化合物在VEGFR2上呈現選擇性(selectivity over VEGFR2)。舉例而言，本發明許多化合物對FGFR1、2、及/或3、及/或4具有IC₅₀值，其在對VEGFR(特別是VEGFR2)及/或PDGFR B之IC₅₀值之十 分之一至百分之一之間。具體而言，相較於VEGFR2，本發明較佳化合物抗或抑制FGFR(特別是FGFR1、FGFR2、FGFR3及/或FGFR4)具有至少10倍以上之活性。相較於VEGFR2，本發明化合物抗或抑制FGFR(特別是FGFR1、FGFR2、FGFR3及/或FGFR4)更佳具有至少100倍以上之活性。可利用在此所述之方法測定之。

由其活性在調制或抑制FGFR及/或VEGFR激酶之結果可見，該化合物在提供預防腫瘤生長或誘導腫瘤細胞凋亡，特別是抑制血管生成的手段上是有效的。因此，預期該些化合物在治療或預防如癌症之增生性疾病上將證明是有效的。此外，本發明化合物在具有細胞增生、凋亡或分化失調之病症之治療中是有效的。

具體而言，具有VEGFR活化突變或VEGFR上調之腫瘤及具有血清乳酸脫氫酶值(level)升高之患者可能對於本發明化合物特別敏感。具有在此討論之特定RTKs之任何同功異形體(isoform)之活化突變之患者也可能發現以本發明化合物治療特別有利。例如，在急性白血病細胞中的VEGFR過度表現，其中複製前驅體(clonal progenitor)可能表現VEGFR。再者，具有FGFR任何同功異形體(如FGFR1、FGFR2或FGFR3或FGFR4)之活化突變或上調或過度表面之特定腫瘤可能對本發明化合物特別敏感，因此如在此所論及之具有此類特定腫瘤之患者也可發現以本發明化合物治療特別有利。較佳地，該治療可為涉及或針對如在此討論之受體酪氨酸激酶之一者之突變形式。具有此種突變之腫瘤之診斷可利用所屬領域具有通常知識者所知技術及在此討論如RTPCR及FISH之技術進行。

可被治療(或抑制)之癌症例子包括，但不限於：腫瘤(carcinoma)，例如膀胱(bladder)、乳腺(breast)、結腸(colon)(例：大腸癌(colorectal carcinomas)，如結腸腺癌(colon adenocarcinoma)及結腸限瘤(colon adenoma))、腎(kidney)、尿道上皮(urothelial)、子宮(uterus)、表皮(epidermis)、肝(liver)、肺(lung)(例如腺癌(adenocarcinoma)、小細胞肺癌和非小細胞肺癌(small cell lung cancer and non-small cell lung carcinomas)、鱗狀肺癌(squamous lung cancer))、食道(oesophagus)、頭頸(head andneck)、膽囊(gall bladder)、卵巢(ovary)、胰腺(pancreas)(例：胰腺外分泌癌(exocrine pancreatic carcinoma))、胃(stomach)、胃腸道(gastrointestinal，也被稱為胃(gastric))癌(例：胃腸道間質瘤(gastrointestinal stromal tumours))、子宮頸(cervix)、子宮內膜(endometrium)，甲狀腺(thyroid)、前列腺(prostate)或皮膚(skin)(例如鱗狀細胞癌(squamous cell carcinoma)或隆突性皮膚(dermatofibrosarcoma protuberans))之癌；垂體腫瘤(pituitary cancer)、淋巴系造血腫瘤(hematopoietic tumour of lymphoid lineage)，例如白血病(leukemia)、急性淋巴細胞性白血病(acute lymphocytic leukemia)、慢性淋巴細胞性白血病(chronic lymphocytic leukemia)，B細胞淋巴瘤(B-cell lymphoma，如瀰慢性大B細胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma))、T細胞淋巴瘤(T-cell lymphoma)、霍奇金淋巴瘤(Hodgkin’s lymphoma)、非何傑金氏淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma)、毛細胞淋巴瘤(hairy cell lymphoma)或伯基特淋巴瘤(Burkett's lymphoma)；髓系造血腫瘤(hematopoietic tumour of myeloid lineage)，例如白血病(leukemias)、急性和慢性髓細胞性白血病(acute and chronic myelogenous leukemias)、慢性骨髓性白血病(chronic myelomonocytic leukemia，CMML)、骨髓增生性疾病(myeloproliferative disorder)、骨髓增生綜合徵(myeloproliferative syndrome)、骨髓增生異常綜合徵 (myelodysplastic syndrome)或早幼粒細胞白血病(promyelocytic leukemia)；多發性骨髓瘤(multiple myeloma)；甲狀腺濾泡癌(thyroid follicular cancer)；肝癌(hepatocellular cancer)、間充質起源腫瘤(tumour of mesenchymal origin，如尤因氏肉瘤(Ewing’s sarcoma))，如纖維肉瘤(fibrosarcoma)或橫紋肌肉瘤(rhabdomyosarcoma)；中樞或外週神經系統的腫瘤，如星形細胞瘤(astrocytoma)、神經母細胞瘤(neuroblastoma)、神經膠質瘤(glioma，如膠質母細胞瘤(glioblastoma multiforme))或神經鞘瘤(schwannoma)；黑色素瘤(melanoma)；精原細胞瘤(seminoma)；畸胎瘤(teratocarcinoma)；骨肉瘤(osteosarcoma)；著色性幹皮(xeroderma pigmentosum)；角化棘皮瘤(keratoctanthoma)；甲狀腺濾泡癌(thyroid follicular cancer)；或卡波西氏肉瘤(Kaposi's sarcoma)。具體而言，鱗狀肺癌、乳腺癌、結腸直腸癌、惡性膠質瘤、星形細胞瘤、前列腺癌、小細胞肺癌、黑色素瘤、頭頸部癌、甲狀腺癌、子宮癌、胃癌、肝癌、宮頸癌、多發性骨髓瘤、膀胱癌、子宮內膜癌、尿路上皮癌、結腸直腸癌、橫紋肌肉瘤、腦下垂體癌。

可被治療(或抑制)的癌症的例子包括，但不限於：膀胱癌(bladder cancer)、尿路上皮癌(urothelial cancer)、轉移性尿路上皮癌(metastatic urothelial cancer)、手術無法切除尿路上皮癌(surgically unresectable urothelial cancer)、乳腺癌(breast cancer)、神經膠質母細胞瘤(glioblastoma)、肺癌(lung cancer)、非小細胞肺癌(non small cell lung cancer)、鱗狀細胞肺癌(squamous cell lung cancer)、肺的腺癌(adenocarcinoma of the lung)、肺腺癌(pulmonary adenocarcinoma)、小細胞肺癌(small cell lung cancer)、卵巢癌(ovarian cancer)、子宮內膜癌(endometrial cancer)、子宮頸癌(cervical cancer)、軟組織肉瘤(soft tissue sarcoma)、頭和頸鱗狀細胞癌(head and neck squamous cell carcinoma)、胃癌(gastric cancer)、食道癌 (oesophageal cancer)、食道的鱗狀細胞癌(squamous cell carcinoma of the oesophagus)、食道癌(adenocarcinoma of the oesophagus)、膽管癌(cholangiocarcinoma)、肝細胞癌(hepatocellular carcinoma)。

某些癌症對以特定藥物治療具有抗性。這可能是因為腫瘤的類型或可能因以該化合物治療所引起。就此點而言，涉及的多發性骨髓瘤包括硼替佐米敏感的多發性骨髓瘤(bortezomib sensitive multiple myeloma)或難治性多發性骨髓瘤(refractory multiple myeloma)。類似地，涉及的慢性骨髓性白血病(chronic myelogenous leukemia)包括伊馬替敏感慢性髓細胞性白血病(imitanib sensitive chronic myelogenous leukemia)和難治性慢性粒細胞性白血病(refractory chronic myelogenous leukemia)。慢性骨髓性白血病也稱為慢性髓性白血病(chronic myeloid leukemia)、慢性粒細胞性白血病(chronic granulocytic leukemia)或CML。同樣地，急性骨髓性白血病(acute myelogenous leukemia)，也稱為急性髓細胞性白血病(acute myeloblastic leukemia)、急性粒細胞性白血病(acute granulocytic leukemia)、急性非淋巴細胞性白血病(acute nonlymphocytic leukaemia)或AML。

本發明化合物也可用於無論是否癌前病變或穩定的異常細胞增生之造血性疾病之治療中，例如骨髓增生性疾病(myeloproliferative diseases)。骨髓增生性疾病("MPD"s)為在骨髓中生產過量細胞之一疾病群組。它們都涉及到並可能發展成骨髓增生異常綜合症(myelodysplastic syndrome)。骨髓增生性疾病包括真性紅細胞增多症(polycythemia vera)、原發性血小板增多症(essential thrombocythemia)和原發性骨髓纖維化(primary myelofibrosis)。進一步的血液病為嗜酸性細胞增多綜合癥(hypereosinophilic syndrome)。T細胞淋巴組織增生性疾病(T-cell lymphoproliferative)包括那些來自天然殺手細胞的疾病。

此外，本發明的化合物可用於胃腸道(也稱為胃)癌，如胃腸道間質瘤。胃腸癌係指胃腸道的惡性疾病，包括食道、胃、肝、膽道系統、胰腺、腸和肛門。

因此，在用於治療包含異常細胞生長之疾病或症狀之此發明之醫藥組成物、用途或方法中，於一實施態樣中之包含異常細胞生長之疾病或病症為一癌症。

癌症的特定子集(sebset)包括多發性骨髓瘤、膀胱癌、子宮頸癌、前列腺癌和甲狀腺癌、肺癌、乳腺癌和結腸癌。

癌症的另一子集包括多發性骨髓瘤、膀胱癌、肝癌、口腔鱗狀細胞癌和宮頸癌。

本發明化合物，其具有FGFR(如FGFR1)抑制活性，在乳腺癌(特別是典型小葉癌(Classic Lobular Carcinomas，CLC))之治療或預防上特別有效。

當本發明化合物具有FGFR4活性時，其在前列腺癌或垂體(pituitary)癌之治療中也是有效的，或其在乳腺癌、肺癌、前列腺癌、肝癌(HCC)或肺癌之治療中是有效的。

具體而言，本發明化合物作為FGFR抑制劑，在多發性骨髓瘤、骨髓增生性疾病、子宮內膜癌、前列腺癌、膀胱癌、肺癌、卵巢癌、乳腺癌、胃癌、結腸直腸癌、以及口腔鱗狀細胞癌之治療中是有效的。

癌症之另一子集為多發性骨髓瘤、子宮內膜癌、膀胱癌、子宮頸癌、前列腺癌、肺癌、乳癌、結腸直腸癌和甲狀腺癌。

具體而言，本發明化合物在多發性骨髓瘤(特別是具有t(4；14)易位或過度表現FGFR3之多發性骨髓瘤)、前列腺癌(激素難治性前列腺癌)、子宮內 膜癌(尤其是具有FGFR2活化突變子宮內膜腫瘤中)和乳腺癌(特別是小葉乳腺癌)之治療中是有效的。

具體而言，該化合物在如典型小葉癌(CLC)之小葉癌之治療中是有效的。

當該化合物具有抗FGFR3活性時，其在多發性骨髓瘤和膀胱癌之治療中是有效的。

具體而言，該化合物具有對抗具有FGFR3-TACC3易位之腫瘤之活性，特別是具有FGFR3-TACC3易位之膀胱或腦腫瘤。

具體而言，該化合物可用於t(4；14)易位陽性多發性骨髓瘤之治療。

於一實施態樣中，該化合物可用於肉瘤(sarcoma)之治療。於一實施態樣中，該化合物可用於肺癌之治療，如鱗狀細胞癌。

當該化合物具有抗FGFR2活性時，其可用於子宮內膜癌、卵巢癌、胃癌、肝癌、子宮癌、宮頸癌和大腸癌之治療。FGFR2在上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer)也過度表現，因此本發明化合物特別可用於如上皮性卵巢癌之卵巢癌之治療。

於一實施態樣中，該化合物可用於肺癌之治療，特別是非小細胞肺癌(NSCLC)、鱗狀細胞癌、肝癌、腎癌、乳腺癌、結腸癌、結腸直腸癌、前列腺癌。

本發明化合物也可用於以VEGFR2抑制劑或VEGFR2抗體(如癌思停(Avastin))預處理之腫瘤之治療。

具體而言，本發明化合物可用於抗VEGFR2之腫瘤之治療。VEGFR2抑制劑及抗體用於甲狀腺和腎細胞癌之治療，因此本發明化合物可用於抗VEGFR2之甲狀腺和腎細胞癌之治療。

該等癌症可為對任何一種以上選自FGFR1、FGFR2、FGFR3、FGFR4之FGFRs(例如一種以上選自FGFR1、FGFR2或FGFR3之FGFRs)之抑制敏感之癌症。

可透過載於下文之細胞生長分析方法、或透過載於標題為「診斷之方法」之章節之方法，測定一特定癌症是否為對FGFR或VEGFR訊號抑制敏感之一者。

本發明化合物，特別是具有FGFR或VEGFR抑制活性之化合物，特別可用於治療或預防與出現FGFR或VEGFR上升值相關或以之為特徵的類型之癌症，例如在本發明引言章節內文中提及之癌症。

本發明化合物可用於成人之治療。本發明化合物可用於兒科患者之治療。

已發現某些FGFR抑制劑可用以與其他抗癌試劑組合。例如，將誘導細胞凋亡之抑制劑與通過不同機制調節細胞生長之另一試劑結合從而治療兩種癌症發展特徵，是有利的。此類組合之例子載於下文。

本發明化合物可用於治療因增生失調導致的其他症狀，例如第II型或非胰島素依賴型糖尿病(type II or non-insulin dependent diabetes mellitus)、自身免疫性疾病(autoimmune diseases)、頭部創傷(head trauma)、中風(stroke)、癲癇症(epilepsy)、神經變性疾病(neurodegenerative diseases，如阿爾茨海默氏症(Alzheimer’s))、運動神經元疾病(motor neurone disease)、進行性核上性麻痺 (progressive supranuclear palsy)、皮質基底節變性(corticobasal degeneration)、以及皮克病(Pick’s disease，如自身免疫性疾病(autoimmune diseases)和神經變性疾病(neurodegenerative diseases))。

可使用本發明化合物之疾病症狀及狀態之一亞群可由炎性疾病(inflammatory diseases)、心血管疾病(cardiovascular diseases)和傷口癒合(wound healing)所組成。

已知FGFR及VEGFR在細胞凋亡、血管生成、增生、分化及轉錄中起作用，因此本發明化合物也可用於除了癌症之下列其他疾病之治療：慢性炎症性疾病(chronic inflammatory diseases)，例如系統性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus)、自體免疫介導的腎小球性腎炎(autoimmune mediated glomerulonephritis)、類風濕性關節炎(rheumatoid arthritis)、銀屑病(psoriasis)、炎性腸病(inflammatory bowel disease)、自體免疫性糖尿病(autoimmune diabetes mellitus)、濕疹過敏反應(Eczema hypersensitivity reactions)、哮喘(asthma)、慢性阻塞性肺病(COPD)、鼻炎(rhinitis)，和上呼吸道病(upper respiratory tract disease)；心血管疾病(cardiovascular diseases)，例如心臟肥大(cardiac hypertrophy)、再狹窄(restenosis)、動脈粥樣硬化(atherosclerosis)；神經變性疾病(neurodegenerative disorders)，例如阿茲海默症(Alzheimer’s disease)、AIDS相關性癡呆(AIDS-related dementia)、帕金森氏症(Parkinson’s disease)、肌萎縮性側索硬化症(amyotropic lateral sclerosis)、色素性視網膜炎(retinitis pigmentosa)、脊髓性肌萎縮(spinal muscular atropy)和小腦變性(cerebellar degeneration)；腎小球腎炎(glomerulonephritis)；骨髓增生異常綜合癥(myelodysplastic syndromes)；缺血有關的損傷的心肌梗死(ischemic injury associated myocardial infarctions)；中風和再 灌注損傷(stroke and reperfusion injury)；心律失常(arrhythmia)；動脈粥狀硬化(atherosclerosis)；毒素誘導或酒精相關肝病(toxin-induced or alcohol related liver diseases)；血液病(haematological diseases)，如慢性貧血(chronic anemia)和再生障礙性貧血(aplastic anemia)；肌肉骨骼系統的退行性疾病(degenerative diseases of the musculoskeletal system)，如骨質疏鬆症和關節炎(osteoporosis and arthritis)、阿司匹林敏感性鼻竇炎(aspirin-sensitive rhinosinusitis)、囊性纖維化(cystic fibrosis)、多發性硬化症(multiple sclerosis)、腎臟疾病(kidney diseases)和癌症疼痛(cancer pain)。

此外，FGFR2之突變與數種在人類骨骼發展中的嚴重異常有相關，因此本發明化合物可用於治療在人類骨骼發展中的異常，包括顱縫異常骨化(顱縫早閉)、亞伯氏(AP)綜合症、克魯松氏症(Crouzon syndrome)、傑克遜-威斯綜合症(Jackson-Weiss syndrome)、比爾-史蒂文生皮膚迴旋綜合症(Beare-Stevenson cutis gyrate syndrome)和菲佛綜合症(Pfeiffer syndrome)。

本發明化合物，具有FGFR(如FGFR2或FGFR3)抑制活性，特別可用於骨骼疾病之治療或預防。特定的骨骼疾病為軟骨發育不全(achondroplasia)或致死性侏儒症(thanatophoric dwarfism，也稱為致死性發育不良(thanatophoric dysplasia))。

本發明化合物，具有FGFR(如FGFR1、FGFR2或FGFR3)抑制活性，特別可用於進行性纖維化為一病徵之疾病之治療或預防。纖維化情況，其中，本發明化合物可用於治療的，包括表現出纖維組織異常或過度沉積之疾病，例如在肝硬化、腎小球性腎炎、肺纖維化、全身性纖維化、類風濕性關節炎、 以及傷口癒合之自然過程中的纖維組織。具體而言，本發明化合物也可用於肺纖維化之治療，特別是用於特發性肺纖維化(idiopathic pulmonary fibrosis)。

在腫瘤相關血管中之FGFR及VEGFR之過度表現及活化，本發明化合物在預防及干擾腫瘤血管生成之起始中也起了作用。具體而言，本發明化合物可用於癌症、轉移(metastasis)、白血病(leukemia’s，如CLL)、眼部疾病(ocular diseases，如在年齡相關性黃斑變性(age-related macular degeneration)、特別是濕形式的年齡相關性黃斑變性(wet form of age-related macular degeneration))、局部缺血性增生性視網膜病(ischemic proliferative retinopathies，如早產兒視網膜病(retinopathy of prematurity，ROP)和糖尿病性視網膜病(diabetic retinopathy))、類風濕性關節炎(rheumatoid arthritis)和血管瘤(hemangioma)之治療。

本發明化合物作為FGFR1-4、VEGFR及/或PDGFR A/B之抑制劑之活性可利用下列實施例所示分析測量並藉由所給定的化合物呈現之活性程度可定義IC₅₀值。本發明較佳化合物為具有IC₅₀值低於1μM之化合物，較佳低於0.1μM。

本發明提供具有FGFR抑制或調制活性之化合物，且其可用於藉由FGFR激酶介導之疾病狀態或病症之預防或治療。

於一實施態樣中，係提供如本文所定義之化合物用於治療用途，作為一藥物。於另一實施態樣中，係提供如本文所定義之化合物用於藉由FGFR激酶介導之疾病狀態或病症之預防或治療之用途，特別是用於治療。

因此，舉例而言，本發明化合物可用於緩解或降低癌症之發病率。因此，於另一實施態樣中，係提供如本文所定義之一種化合物用於癌症之預防或治療，特別是治療。於一實施態樣中，如本文所定義之化合物用於FGFR 相關癌症之預防或治療。於一實施態樣中，如本文所定義之化合物用於藉由FGFR激酶介導之癌症之預防或治療。

據此，本發明特別是提供：

- 一種用於藉由FGFR激酶介導之疾病狀態(state)或病症(condition)之預防或治療之方法，該方法包括給予個體(subject)其所需之如本文所定義之式(I)化合物。

- 一種用於如本文所述之疾病狀態或病症之預防或治療之方法，該方法包括給予個體其所需之如本文所定義之式(I)化合物。

- 一種用於癌症之預防或治療之方法，該方法包括給予個體其所需之如本文所定義之式(I)化合物。

- 一種用於緩解或降低藉由FGFR激酶介導之疾病狀態或病症之發病率之方法，該方法包括給予個體其所需之如本文所定義之式(I)化合物。

- 一種抑制FGFR激酶之方法，該方法包括使該激酶接觸如在此所定義之激酶抑制式(I)化合物。

- 一種利用如本文所定義之式(I)化合物抑制一FGFR激酶活性而調制一細胞過程(例如細胞分裂)之方法。

- 一種如本文所定義之式(I)化合物，用以作為藉由抑制一FGFR激酶活性之一細胞過程(例如細胞分裂)之調節子(modulator)。

- 一種如本文所定義之式(I)化合物，用於癌症之預防或治療，特別是癌症之治療。

- 一種如本文所定義之式(I)化合物，用以作為FGFR之調節子(如抑制劑)。

- 如本文所定義之式(I)化合物之用途，為用於FGFR激酶介導之疾病狀態或病症之預防或治療之藥劑製造，該化合物具有如在此所定義之式(I)。

- 如本文所定義之式(I)化合物之用途，為用於在此所述之疾病狀態或病症之預防或治療之藥劑製造。

- 如本文所定義之式(I)化合物之用途，為用於癌症之預防或治療(特別是治療)之藥劑製造。

- 如本文所定義之式(I)化合物之用途，為用於調節(如抑制)FGFR活性之藥劑製造。

- 如本文所定義之式(I)化合物之用途，為用於藉由抑制FGFR激酶活性以調制細胞過程(如細胞分裂)之藥劑製造。

- 如本文所定義之式(I)化合物之用途，為用於以FGFR(如FGFR1或FGFR2或FGFR3或FGFR4)激酶之上調為特徵之疾病或病症之預防或治療之藥劑製造。

- 如本文所定義之式(I)化合物之用途，為用於一癌症之預防或治療之藥劑製造，該癌症為以FGFR激酶(如FGFR1或FGFR2或FGFR3或FGFR4)之上調為特徵者。

- 如本文所定義之式(I)化合物之用途，為用於選自有FGFR3激酶基因畸變(aberration)之亞群體(sub-population)之患者之癌症之預防或治療之藥劑製造。

- 如本文所定義之式(I)化合物之用途，為用於已被診斷為有FGFR3激酶基因畸變之亞群體之形成部分之患者之癌症之預防或治療之藥劑製造。

- 一種用於以FGFR激酶(如FGFR1或FGFR2或FGFR3或FGFR4)上調為特徵之疾病或病症之預防或治療之方法，該方法包括給予如本文所定義之式(I)化合物。

- 一種用於緩解或降低以FGFR激酶(如FGFR1或FGFR2或FGFR3或FGFR4)上調為特徵之疾病或病症之發病率之方法，該方法包括給予如本文所定義之式(I)化合物。

- 一種用於預防或治療患有或疑似患有癌症之患者之癌症(或緩解或降低其之發病率)之方法；所述方法包括：(i)使患者以進行診斷測試以測定患者是否具有FGFR3基因的基因畸變；以及(ii)若患者的確具備所述變異體(variant)，然後施予患者如本文所定義的式(I)的化合物，其具有FGFR3激酶抑制活性。

- 一種用於以FGFR激酶(如FGFR1或FGFR2或FGFR3或FGFR4)上調為特徵之疾病或病症之預防或治療(或緩解或降低其發病率)之方法；該方法包括：(i)使患者進行診斷測試以檢測FGFR激酶(如FGFR1或FGFR2或FGFR3或FGFR4)上調特徵標記；以及(ii)在診斷測試指出FGFR激酶上調時，然後施予患者本文所定義的式(I)的化合物，其具有FGFR激酶抑制活性。

於一實施態樣中，藉由FGFR激酶介導之疾病為腫瘤相關疾病(如癌症)。於一實施態樣中，藉由FGFR激酶介導之疾病為非腫瘤相關疾病(如，除了癌症以外之本文所揭示之任何疾病)。於一實施態樣中，藉由FGFR激酶介導之疾病為本文所述之病症。於一實施態樣中，藉由FGFR激酶介導之疾病為本文所述之骨骼病症。在人類骨骼發展中之特定異常包括顱縫異常骨化(顱縫早閉)、亞伯氏(AP)綜合症、克魯松氏症(Crouzon syndrome)、傑克遜-威斯綜合症(Jackson-Weiss syndrome)、比爾-史蒂文生皮膚迴旋綜合症(Beare-Stevenson cutis gyrate syndrome)、菲佛綜合症(Pfeiffer syndrome)、軟骨發育不全和致死性侏儒症(也稱為致死發育異常)。

突變激酶

耐藥激酶突變可能出現在以激酶抑制劑治療之患者群體中。此等部分發生在與治療中使用之特定抑制劑結合或交互作用之蛋白之區域。這樣的突變降低或增加抑制劑結合及抑制有問題的激酶的能力。其可能發生在任何與 抑制劑交互作用或對於支撐所述抑制劑與標靶結合是重要的胺基酸殘基。與標的激酶結合而不需要與突變的胺基酸殘基交互作用之抑制劑，將可能不受突變影響，且依然為該酵素有效的抑制劑。

在胃癌患者樣本中的研究顯示在FGFR2中存在兩個突變，在exon IIIa之Ser167Pro及在exon IIIc之剪接位點突變(splice site mutation)之940-2A-G。這些突變與導致顱縫早閉綜合症之生殖系活化突變相同且在13%之原發性胃癌組織研究中被觀察到。此外，在5%之受測患者樣本中觀察到FGFR3活化突變且FGFRs過度表現與此患者組群預後不良相關。

此外，已在引起功能性獲得(gain-of-function)、過度表現(over-expressed)或組成型(constitutively)活化生物狀態之FGFR中觀察到染色體易位或點突變。

本發明化合物因此可有與表現突變分子標靶(如FGFR)之癌症有關的特定應用。具有此類突變之腫瘤之診斷可利用本領域技術人員習知及如本文所述之技術(如RTPCR及FISH)進行。

已提出在FGFR之ATP結合位點之保守蘇胺酸殘基(conserved threonine residue)之突變會導致耐抑制劑性。FGFR1中的胺基酸纈胺酸561(valine 561)已突變為甲硫胺酸(methionine)，其對應先前報導之在Abl(T315)及EGFR(T766)中發現之突變，Abl(T315)及EGFR(T766)已顯示賦予對選擇性抑制劑之抗性。FGFR1 V561M的分析數據顯示相較於野生型，此突變賦予對酪氨酸激酶抑制劑抗性。

診斷方法

在式(I)化合物給藥之前，患者可被篩選以測定是否該患者正罹患或可能罹患的疾病或病症是可使用具有抗FGFR及/或VEGFR之活性之化合物治療之疾病或病症。

舉例而言，可分析來自患者之生物樣本以測定是否該患者患有或可能患有特徵為導致FGFR及/或VEGFR值(level)或活性上調、或正常FGFR及/或VEGFR活性之路徑敏化、或這些生長因子訊息路徑之上調(例如生長因子配體值(level)或生長因子配體活性)、或對FGFR及/或VEGFR活化之下游生化路徑之上調之基因異常或異常蛋白表現之疾病或病症，例如癌症。

導致FGFR及/或VEGFR訊息之活化或敏化之異常之例子包括細胞凋亡路徑之喪失或抑制、受體或配體之上調、或受體或配體出現突變變異體(如PTK變異體)。具有FGFR1、FGFR2或FGFR3或FGFR4之突變或上調之腫瘤，特別是FGFR1過度表現或FGFR2或FGFR3之功能性獲得突變之腫瘤，可能對FGFR抑制劑特別敏感。

舉例而言，在一些病症中已確認了FGFR2中產生功能性獲得之點突變。具體而言，在10%之子宮內膜腫瘤中已確認在FGFR2中的活化突變。

此外，FGFR3受體酪氨酸激酶之基因畸變，如染色體易位或點突變，導致異位表達或失調、組成性活化之FGFR3受體，該等基因畸變已被確認並且連結到多發性骨髓瘤(multiple myelomas)、膀胱癌和子宮頸癌(cervical carcinomas)的子集。已在伊馬替尼治療(imatinib-treated)之患者中確認PDGF受體之特定突變T674I。此外，在約50%之乳腺小葉癌(lobular breast cancer，CLC)的例子中已證實8p12-p11.2之基因擴增，且此顯示與FGFR1之表現增加有關。以 siRNA直接抗FGFR1或該受體之小分子抑制劑之初步研究，顯示帶有此擴增之細胞株對此訊息路徑之抑制特別敏感。

或者，可對取自患者之生物樣本進行FGFR或VEGFR之負調節子或抑制子之損失之分析。在本文中，「損失」一詞包括編碼該調節子或抑制子之基因的刪除(deletion)、該基因之截短(truncation)(如突變)、該基因轉錄產物之截短(truncation)、或該轉錄產物之失活(如點突變)或由其他基因產物鉗合(sequestration)。

上調(up-regulation)一詞包括升高的表現或過度表現、以及過活化及活化，升高的表現或過度表現包括基因擴增(如多基因複製)及藉由轉錄作用增加的表現，過活化及活化包括藉由突變之活化。因此，可使患者經由診斷測試以檢測EGFR及/或VEGFR上調之標記特性。診斷一詞包括篩選。標記，包括遺傳標記，其包括，例如DNA組成物之測量，以鑑定FGFR和/或VEGFR的突變。標記一詞也包括FGFR及/或VEGFR之上調之特徵的標記，包括酵素活性、酵素值(level)、酵素狀態(如是否磷酸化)及前述蛋白之mRNA值(level)。

診斷測試及篩選通常以選自腫瘤活檢樣品(tumour biopsy samples)、血液樣品(分離和富集的脫落腫瘤細胞)、糞便活檢(stool biopsies)、痰(sputum)、染色體分析、胸膜液(pleural fluid)、腹膜液(peritoneal fluid)、經頰矛(buccal spears)、活檢或尿之生物樣本進行。

蛋白之突變及上調之辨識及分析方法為本領域技術人員所習知。篩選方法可包括，但不限於標準方法，例如反轉錄酶聚合酶鏈反應(RT-PCR)或原位雜交，如螢光原位雜交(FISH)。

個別攜帶FGFR及/或VEGFR中的突變之鑑別，可意指該患者可能特別適合以FGFR及/或VEGFR抑制劑治療。在治療之前，腫瘤可優先篩查FGFR及/或VEGFR變異體之存在。篩查過程通常涉及直接定序、寡核苷酸微陣列分析、或突變特異性抗體。此外，具有這些突變之腫瘤之診斷可利用本領域技術人員習知及如本文所述如RT-PCR及FISH之技術進行。

此外，如FGFR或VEGFR2之突變形式可透過直接定序例如腫瘤活檢而予以鑑定，例如利用PCR及如前所述之對PCR產物直接定序之方法。本領域技術人員應當知道用於前述蛋白之過度表現、活化或突變之檢測之習知技術可應用於本情形。

在透過RT-PCR篩查中，藉由產生mRNA之cDNA複製、接著透過PCR擴增cDNA，而評估腫瘤中的mRNA值(level)。PCR擴增之方法、引子之選擇及擴增條件為本領域技術人員所習知。核酸操作及PCR是透過標準方法進行，如在例如「Ausubel,F.M.et al.,eds.(2004)Current Protocols in Molecular Biology,John Wiley & Sons Inc.，」或「Innis,M.A.et al.,eds.(1990)PCR Protocols：a guide to methods and applications,Academic Press,San Diego」中所述。涉及核酸技術之反應及操作也描述於「Sambrook et al.,(2001),3rd Ed,Molecular Cloning：A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Laboratory Press」。或者，可使用市售RT-PCR套組(例如Roche Molecular Biochemicals)或載於美國專利4,666,828、4,683,202、4,801,531、5,192,659、5,272,057、5,882,864及6,218,529之方法並作為參考併入本文。用於評估mRNA表現之原位雜交技術之例子可為螢光原位雜交(參見Angerer(1987)Meth.Enzymol.,152：649)。

一般而言，原位雜交技術包括下列主要步驟：(1)固定待分析的組織；(2)樣本進行預雜交處理以增加目標核酸之可親性，並減少非專一性結合；(3)雜交核酸混合物至生物結構或組織中的核酸；(4)雜交後清洗以去除在雜交中未結合之核酸片段；以及(5)偵測雜交的核酸片段。用於此類應用中的探針通常有標記，例如放射性同位素或螢光物質。較佳的探針有足夠的長度，例如約50、100或200個核苷酸至約1000個以上核苷酸，使其在嚴格條件下能夠與目標核酸進行特定雜交。進行FISH的標準方法描述於「Ausubel,F.M.et al.,eds.(2004)Current Protocols in Molecular Biology,John Wiley & Sons Inc and Fluorescence In Situ Hybridization：Technical Overview by John M.S.Bartlett in Molecular Diagnosis of Cancer,Methods and Protocols,2nd ed.；ISBN：1-59259-760-2；March 2004,pps.077-088；Series：Methods in Molecular Medicine」。

基因表達圖譜分析之方法描述於「(DePrimo et al.(2003),BMC Cancer,3：3)」。簡要地，程序如下：利用(dT)24寡聚物引發第一股cDNA合成，接著隨機六聚體引子合成第二股cDNA與，以從總核糖核酸(total RNA)合成雙股cDNA。該雙股cDNA用以作為利用生物素化之核醣核苷酸(biotinylated ribonucleotides)之cDNA體外轉錄之模板。根據Affymetrix(Santa Clara,CA,USA)所述程序將cRNA化學性片段化，然後在人類基因組陣列上雜交隔夜。

或者，可藉由組織樣本之免疫組織化學法、使用微量滴定板(microtitre plate)之固相免疫分析、西方墨點法、二維SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳、ELISA、流式細胞儀(flow cytometry)及其他本領域已知用於偵測特定蛋白之方法，分析來自mRNAs表現之蛋白質產物。檢測方法可包括位點專一性抗體之使 用。本領域技術人員可知所有這些用於檢測FGFR及/或VEGFR上調或用於檢測FGFR及/或VEGFR變異體或突變體之已知技術可用於本發明。

如FGFR或VEGFR之蛋白質脂異常值(level)可利用標準酵素分析測量，例如本文所述之這些分析。也可在組織樣本例如腫瘤組織中檢測活化或過度表現。藉由如來自Chemicon International之分析測量該酪胺酸激酶活性。該受關注之酪氨酸激酶可從該樣本裂解物中免疫沉積而得並且測量其活性。

用於測量FGFR或VEGFR(包含其同功異形體(isoform))之過度表現或活化之其他方法包括微血管密度之測量。此可例如利用描述於「Orre and Rogers(Int J Cancer(1999),84(2)101-8)」之方法測量。分析方法也包括標記之使用，例如在VEGFR的情況中，其包括CD31、CD34及CD105。

因此，所有這些技術也可被用以辨識特別適合以本發明化合物治療之腫瘤。

本發明化合物在具有突變的FGFR的患者之治療上特別有用。在62%之口腔鱗狀細胞癌中觀察到在FGFR3中的G697C突變，G697C突變導致激酶活性的組成活性化。FGFR3之活化突變也在膀胱癌的病例中被確認。這些突變是具有不同程度患病率(prevelence)之六種：R248C、S249C、G372C、S373C、Y375C、K652Q。此外，FGFR4中的Gly388Arg多型性已被發現與前列腺癌，結腸癌，肺癌，肝癌(HCC)和乳腺癌發病率及侵略性之增加有關。本發明化合物在具有FGFR3-TACC3易位之患者之治療中特別有效。

因此，再又一態樣中，本發明包括根據本發明之化合物於製造用於患者疾病狀態或病症之治療或預防之藥劑之用途，該患者已被篩檢並已測定 患有或有風險患有一可以具有抗FGFR(against FGFR)之活性之化合物治療之疾病或病症。

對患者篩選出特定的突變包括G697C、R248C、S249C、G372C、S373C、Y375C、FGFR3中的K652Q突變以及FGFR4中的Gly388Arg多型性。

於又一態樣中，本發明包括本發明化合物於患者之癌症之預防及治療的用途，該患者選自具有FGFR基因變異體(例如FGFR3中的G697C突變以及FGFR4中的Gly388Arg多型性)之亞群體。

血管正規化之MRI檢測(如利用MRI梯度回波(MRI gradient echo)、自旋回波(spin echo)和對比度增強來測量血容量、相對血管尺寸和血管通透性)結合循環生物標記物(循環前身(progenitor)細胞(CPCs)、CECs、SDF1及FGF2)也可用以辨識以本發明化合物治療之VEGFR2-抗性腫瘤。

醫藥組成物及組合

鑒於其之有用的藥理特性，本案化合物可配製成用以給藥目的之各種醫藥型式。

於一實施態樣中，該醫藥組成物(如配方)包括至少一本發明之活性化合物以及一種以上醫藥可接受性載體(carriers)、助劑(adjuvants)、賦形劑(excipients)、稀釋劑(diluents)、填充劑(fillers)、緩沖劑(buffers)、穩定劑(stabilisers)、防腐劑(preservatives)、潤滑劑(lubricants)或其他所屬領域具有通常知識者已知之材料以及選擇性其他治療或預防藥劑。

為製備本發明醫藥組成物，將作為活性成分之一有效量之本發明化合物與一醫藥性可接受之載體結合成一緊密混合物，該載體可採用廣泛的多種形式，取決於所欲給藥之劑型形式。該醫藥組合物可為適合於口服、腸胃外、 局部、鼻內、眼、耳、直腸、陰道內或經皮施用的任何形式。這些醫藥組成物可依所欲為單一劑量形式為宜，較佳適合於口服、直腸、經皮或腸胃外注射。舉例而言，在口服劑量形式中製備該組成物時，可使用任何常用的藥物介質，例如在口服液態藥劑(如懸浮液、糖漿、酏劑及溶液)的情況中，可為水、乙二醇、油、醇類等；或者固態載體，例如在粉劑、丸劑、膠囊和片劑的情況中，可為例如澱粉、糖、高嶺土、潤滑劑、黏合劑、崩解劑等。

因為其易於給藥，片劑和膠囊代表最有利的口服劑量單位形式，在這種情況下，顯然使用固體醫藥載體。對於非腸道組成物，載體通常包括無菌水，至少占大部分，雖然可包含其他成分以例如協助溶解性。注射溶液，例如可製備為其中該載體包含鹽水溶液、葡萄糖溶液或鹽水和葡萄糖溶液的混合物。可注射懸浮液在使用適當的液態載體、懸浮藥劑等的情況下也可被製備。在適合用於經皮給藥的組成物中，該載體選擇性包括一滲透增強劑及/或一合適的潤濕劑，其選擇性與任何性質之少量適合的添加劑組合，該添加劑不會對皮膚引起顯著的有害作用。所述添加劑可促進皮膚給藥及/或有助於製備所欲組成物。該些組成物可以各種方式給藥，例如經皮貼劑、點藥(spot-on)、軟膏。特別有利的是配製前述醫藥組成物為劑量單位形式(dosage unit form)以易於給藥及劑量均勻。本文及申請專利範圍所述劑量單位形式係指物理上分離的單位，適合做為單一劑量，每一單位含有預定量之經計算與所需醫藥載體組合以產生所欲治療效果之活性成分。此類劑量單位形式之例子為片劑(包括刻痕或包衣片劑)、膠囊、丸劑、粉劑包、糯米紙囊劑、注射溶液或懸浮液、一茶匙量、一湯匙量等，及其隔離的多單元結合形式。

特別有利的是配製前述醫藥組成物為劑量單位形式以易於給藥及劑量均勻。本文及申請專利範圍所述劑量單位形式係指物理上分離的單位，適合做為單一劑量，每一單位含有預定量之經計算與所需藥物載體組合以產生所欲治療效果之活性成分。此類劑量單位形式之例子為片劑(包括刻痕或包衣片劑)、膠囊、丸劑、粉劑包、糯米紙囊劑、注射溶液或懸浮液、一茶匙量、一湯匙量等，及其隔離的多單元結合形式。

本發明的化合物的施用量足以發揮其抗腫瘤活性。

本領域技術人員可輕易地從以下呈現的測試結果決定有效劑量。一般而言，預期的治療有效量為0.005毫克/公斤體重至100毫克/公斤體重，特別是從0.005毫克/公斤體重至10毫克/公斤體重。一整天中，以適當間距，其可以一次、兩次、三次、四次以上分劑量的方式適當地施用所需劑量。所述分劑量可配製成單位劑型(unit dosage form)，例如，每單位劑型含有0.5至500毫克，特別是1毫克至500毫克，更特別是10毫克至500毫克的活性成分。

根據給藥模式，該醫藥組成物較佳包含：0.05至99重量%，更佳為0.1至70重量%，甚至更佳為0.1至50重量%之本發明化合物；以及1至99.95重量%，更佳為30至99.9重量%，甚至更佳為50至99.9重量%之醫藥可接受性載體，所有百分比係基於該組成物之總重。

作為本發明又一態樣，預想本發明化合物與另一抗癌試劑之組合，特別是用以作為一醫療藥劑，更特別是用於癌症或相關疾病之治療。

為治療上述病症，本發明化合物可有利的與一種以上其他醫療藥劑組合，更具體地，在癌症治療中與其他抗癌藥劑或助劑組合。抗癌藥劑或助劑(治療中的支持劑)之例子包括但不限於：

- 鉑配位化合物，例如順鉑(cisplatin)，其選擇性與氨磷汀(amifostine)、卡鉑(carboplatin)或奧沙利鉑(oxaliplatin)組合；

- 紫杉烷類化合物(taxane compounds)，如紫杉醇(paclitaxel)，紫杉醇蛋白結合粒子(Abraxane^TM)或西他賽(docetaxel)；

- 拓樸異構酶I抑制劑，如喜樹鹼化合物(camptothecin compounds)，例如伊立替康(irinotecan)、SN-38、托泊替康(topotecan)、托泊替康鹽酸(topotecan hcl)；

- 拓樸異構酶II抑制劑，如抗腫瘤鬼臼乙叉甙(anti-tumour epipodophyllotoxins)或鬼臼毒素衍生物(podophyllotoxin derivatives)，例如依托泊苷(etoposide)、磷酸依托泊苷(etoposide phosphate)或替尼泊苷(teniposide)；

- 抗腫瘤長春花生物鹼(anti-tumour vinca alkaloids)，如長春鹼(vinblastine)、長春新鹼(vincristine)或長春瑞濱(vinorelbine)；

- 抗腫瘤核苷衍生物(anti-tumour nucleoside derivatives)，例如5-氟脲嘧啶(5-fluorouracil)、亞葉酸(leucovorin)、吉西他濱(gemcitabine)、吉西他濱鹽酸鹽(gemcitabine hcl)、卡培他濱(capecitabine)、克拉屈濱(cladribine)、氟達拉濱(fludarabine)、奈拉濱(nelarabine)；

- 烷基化劑(alkylating agents)，如氮芥(nitrogen mustard)或亞硝基脲(nitrosourea)，例如環磷醯胺(cyclophosphamide)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、卡莫司汀(carmustine)、塞替派(thiotepa)，美法崙(mephalan，melphalan)、洛莫司汀(lomustine)、六甲蜜胺(altretamine)、白消安(busulfan)、達卡巴嗪(dacarbazine)、雌莫司汀(estramustine)、異環磷醯胺(ifosfamide)(選擇性與美司鈉(mesna)組合)、哌泊溴烷(pipobroman)、甲基苄肼(procarbazine)、鏈尿佐菌素(streptozocin)、替莫唑胺(telozolomide)、尿嘧啶(uracil)；

- 抗腫瘤蒽環衍生物(anti-tumour anthracycline derivatives)，例如柔紅黴素(daunorubicin)、阿黴素(doxorubicin)(其係選擇性與右雷佐生(dexrazoxane)組合)、doxil、伊達比星(idarubicin)、米托蒽醌(mitoxantrone)、表柔比星(epirubicin)、表柔比星鹽酸鹽(epirubicin hcl)、戊柔比星(valrubicin)；

- 靶向IGF-1受體之分子，如鬼臼苦素(picropodophylline)；

- 四環素衍生物(tetracarcin derivatives)，例如替曲卡星A(tetrocarcin A)；

- 糖皮質激素(glucocorticoïds)，如潑尼松(prednisone)；

- 抗體，例如曲妥珠單抗(HER2抗體，trastuzumab)、利妥昔單抗(抗CD20抗體，rituximab)、吉妥珠單抗(gemtuzumab)、吉妥珠單抗奧佐米星(gemtuzumab ozogamicin)、西妥昔單抗(cetuximab)、帕妥珠單抗(pertuzumab)、貝伐單抗(bevacizumab)、阿崙單抗(alemtuzumab)、依庫珠單抗(eculizumab)、替伊莫單抗(ibritumomab tiuxetan)、若莫單抗(nofetumomab)、帕尼單抗(panitumumab)、托西莫單抗(tositumomab)、CNTO328；

- 雌激素受體拮抗劑(estrogen receptor antagonists)或選擇性雌激素受體調節劑(selective estrogen receptor modulators)或雌激素合成抑制劑，例如他莫昔芬(tamoxifen)、氟維司群(fulvestrant)、托瑞米芬(toremifene)、屈洛昔芬(droloxifene)、氟維司群(faslodex)、雷洛昔芬(raloxifene)或來曲唑(letrozole)；

- 芳香化酶抑制劑(aromatase inhibitors)，如依西美坦(exemestane)、阿那曲唑(anastrozole)、來曲唑(letrazole)、睾內酯(testolactone)和伏氯唑(vorozole)；

- 分化劑(differentiating agents)，如類視黃醇(retinoids)、維生素D(vitamin D)或視黃酸(retinoic acid)和視黃酸代謝阻斷劑(retinoic acid metabolism blocking agents，RAMBA)，例如維甲酸(accutane)；

- DNA甲基轉移酶抑制劑(DNA methyl transferase inhibitors)，如阿扎胞苷(azacytidine)或地西他濱(decitabine)；

- 抗葉酸(antifolates)，例如培美曲塞二鈉(premetrexed disodium)；

- 抗生素(antibiotics)，例如，放線菌素D(antinomycin D)、博來黴素(bleomycin)、絲裂黴素C(mitomycin C)、更生黴素(dactinomycin)、洋紅黴素(carminomycin)、道諾黴素(daunomycin)、左旋咪唑(levamisole)、普卡黴素(plicamycin)、光神黴素(mithramycin)；

- 抗代謝物(antimetabolites)，例如，氯法拉濱(clofarabine)、胺基蝶呤(aminopterin)、阿糖胞苷(cytosine arabinoside)或氨甲喋呤(methotrexate)、阿扎胞苷(azacitidine)、阿糖胞苷(cytarabine)、氟尿苷(floxuridine)、噴司他丁(pentostatin)、硫鳥嘌呤(thioguanine)；

- 細胞凋亡誘導劑(apoptosis inducing agents)和抗血管生成劑(antiangiogenic agents)，如Bcl-2抑製劑，例如YC137、BH312、ABT737、棉酚(gossypol)、HA 14-1、TW37或癸酸(decanoic acid)；

- 微管蛋白結合劑(tubuline-binding agents)，例如考布他汀(combrestatin)、秋水仙素(colchicines)或諾考達唑(nocodazole)；

- 激酶抑制劑(如EGFR(表皮生長因子受體)抑制劑、MTKI(多靶向激酶抑制劑)、mTOR抑制劑、cmet抑制劑)，例如黃吡哚(flavoperidol)、甲磺酸伊馬替尼(imatinib mesylate)、厄洛替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)、達沙替尼(dasatinib)、拉帕替尼(lapatinib)、拉帕替尼二甲苯磺酸鹽(lapatinib ditosylate)、索拉非尼(sorafenib)、舒尼替尼(sunitinib)、舒尼替尼馬來酸鹽(sunitinib maleate)、西羅莫司脂化物(temsirolimus)、6-{二氟-[6-(1-甲基-1H-吡唑-4- 基)[1,2,4]三唑並[4,3-b]嗒

-3-基]甲基}喹啉或其醫藥可接受性鹽類(6-{difluoro[6-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]methyl}quinoline or a pharmaceutically acceptable salt thereof)、6-[二氟(6-吡啶-4-基-[1,2,4]三唑並[4，3-b]嗒

-3-基)甲基]喹啉(6-[difluoro(6-pyridin-4-yl[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl)methyl]quinoline)或其醫藥可接受性鹽類；

- 法尼基轉移酶抑制劑(farnesyltransferase inhibitors)，例如，替吡法尼(tipifarnib)；

- 組蛋白乙醯化酶(histone deacetylase，HDAC)抑制劑，例如丁酸鈉(sodium butyrate)、辛二醯苯胺異羥肟酸(suberoylanilide hydroxamide acid，SAHA)、縮酚酸肽(depsipeptide，FR 901228)、NVP-LAQ824、R306465、JNJ-26481585、曲古菌素A(trichostatin A)、伏立諾他(vorinostat)；

- 泛素-蛋白酶體路徑(ubiquitin-proteasome pathway)抑制劑，例如PS-341、MLN.41或硼替佐米(bortezomib)；

- 曲貝替定(Yondelis)；

- 端粒酶(telomerase)抑制劑，例如端粒酶素(telomestatin)；

- 基質金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase)抑制劑，例如巴馬司他(batimastat)、馬立馬司他(marimastat)、普林如果司他(prinostat)或美司他(metastat)；

- 重組白介素(recombinant interleukins)，例如阿地白介素(aldesleukin)、尼白介素(denileukin diftitox)、干擾素α 2a(interferon alfa 2a)、干擾素α 2b(interferon alfa)、聚乙二醇干擾素α 2b(peginterferon alfa 2b)；

- MAPK抑制劑；

- 類視色素(Retinoids)，例如阿利維甲酸(alitretinoin)、貝沙羅汀(bexarotene)、維甲酸(tretinoin)；

- 三氧化二砷(Arsenic trioxide)；

- 天冬醯胺酸酶(Asparaginase)；

- 類固醇(Steroids)，例如屈他雄酮丙酸酯(dromostanolone propionate)、醋酸甲地孕酮(megestrol acetate)、諾龍(nandrolone)(癸酸鹽(decanoate)、苯丙酸酯(phenpropionate))、地塞米松(dexamethasone)；

- 促性腺激素釋放激素激動劑或拮抗劑(Gonadotropin releasing hormone agonists or antagonists)，例如阿巴瑞克(abarelix)、戈舍瑞林醋酸鹽(goserelin acetate)、組氨瑞林乙酸鹽(histrelin acetate)、醋酸亮丙瑞林(leuprolide acetate)；

- 沙利度胺(Thalidomide)、來那度胺(lenalidomide)；

- 巰嘌呤(Mercaptopurine)、米托坦(mitotane)、帕米膦酸二鈉(pamidronate)、培加酶(pegademase)、培門冬酶(pegaspargase)、拉布立酶(rasburicase)；

- BH3類似物，例如ABT-737；

- MEK抑制劑，例如PD98059、AZD6244、CI-1040；

- 細胞集落刺激因子類似物(colony-stimulating factor analogs)，例如非格司亭(filgrastim)、培非司亭(pegfilgrastim)、沙格司亭(sargramostim)；促紅血球生成素或其類似物(erythropoietin or analogues)(例如，阿法達貝泊汀(darbepoetin alfa))；白細胞介素11(interleukin 11)；奧普瑞白介素(oprelvekin)；唑來膦酸(zoledronate)、唑來膦酸(zoledronic acid)；芬太尼(fentanyl)；雙膦酸鹽(bisphosphonate)；帕利夫明(palifermin)。

-類固醇類染色體P450 17 α-羥化酶-17,20-裂解酶抑制劑(steroidal cytochrome P450 17alpha-hydroxylase-17,20-lyase inhibitor，CYP17)，例如阿比特龍(abiraterone)、醋酸阿比特龍(abiraterone acetate)。

於一實施態樣中，本發明係有關於一種式(I)化合物、其醫藥可接受性鹽類或其溶劑化物、或其任何亞群及實例，與6-{二氟[6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)[1,2,4]三唑並[4,3-b]嗒

-3-基]甲基}喹啉(6-{difluoro[6-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]methyl}quinoline)或其醫藥可接受性鹽類之組合。

於一實施態樣中，本發明係有關於一種式(I)化合物、其醫藥可接受性鹽類或其溶劑化物、或其任何亞群及實例，與6-[二氟(6-吡啶-4-基[1,2,4]三唑並[4,3-b]嗒

-3-基)甲基]喹啉(6-[difluoro(6-pyridin-4-yl[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl)methyl]quinoline)或其醫藥可接受性鹽類之組合。

於一實施態樣中，本發明係有關於一種醫藥組成物，包括一式(I)化合物、其醫藥可接受性鹽類或其溶劑化物、或其任何亞群及實例，以及6-{二氟[6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)[1,2,4]三唑並[4,3-b]嗒

-3-基]甲基}喹啉(6-{difluoro[6-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyridazin-3-yl]methyl}quinoline)或其醫藥性可接受鹽類。

於一實施態樣中，本發明係有關於一種醫藥組成物，包括一式(I)化合物、其醫藥可接受性鹽類或其溶劑化物、或其任何亞群及實例，以及6-[二氟(6-吡啶-4-基[1,2,4]三唑並[4,3-b]嗒

-3-基)甲基]喹啉 (6-[difluoro(6-pyridin-4-yl[1,2,4]triazolo[4,3-b]pyiidazin-3-yl)methyl]quinoline)或其醫藥可接受性鹽類。

本發明化合物亦具有在敏化腫瘤細胞供放射治療和化學治療的治療應用。

因此，本發明化合物可用以作為「放射線增敏劑(radiosensitizer)」及/或「化學增敏劑(chemosensitizer)」或可與其他「放射線增敏劑」及/或「化學增敏劑」組合。

如本文所用之「放射線增敏劑」一詞係定義為一分子，較佳為一低分子量分子，施用給動物治療有效量以提高細胞對離子化輻射之敏感性及/或促進可以離子化輻射治療之疾病之治療。

如本文所用之「化學增敏劑」一詞係定義為一分子，較佳為一低分子量分子，施用給動物治療有效量以提高細胞對化療之敏感性及/或促進可以化療治療之疾病之治療。

於文獻中，已給出了放射線增敏劑作用模式之數種機制，包括：缺氧細胞放射線增敏劑(hypoxic cell radiosensitizers，如2-硝基咪唑化合物(2-nitroimidazole compounds)及苯並三

二氧化物(benzotriazine dioxide compounds))，其模仿氧或另一種方式是表現得像在缺氧下之生物還原劑；無缺氧細胞放射線增敏劑(non-hypoxic cell radiosensitizers，如鹵代嘧啶(halogenated pyrimidines))，其可為DNA鹼基之類似物且較佳與癌細胞之DNA合併並從而促進DNA分子之輻射誘導斷裂及/或防止正常DNA修復機制；以及已被假設為放射線增敏劑在疾病治療中之各種其他潛在的作用機制。

許多癌症治療程序目前採用放射線增敏劑結合X射線放射。X射線活化放射線增敏劑之例子包括，但不限於：甲硝唑(metronidazole)、米索硝唑(misonidazole)、去甲基醚醇硝唑(desmethylmisonidazole)、哌莫硝唑(pimonidazole)、依他硝唑(etanidazole)、尼莫唑(nimorazole)、絲裂黴素C(mitomycin C)、RSU 1069、SR 4233、EO9、RB 6145、菸鹼醯胺(nicotinamide)、5-溴脫氧尿苷(5-bromodeoxyuridine，BUdR)、5-碘脫氧尿苷(5-iododeoxyuridine，IUdR)、溴脫氧胞苷(bromodeoxycytidine)、氟脫氧尿苷(fluorodeoxyuridine，FUdR)、羥基脲(hydroxyurea)、順鉑(cisplatin)、及治療有效類似物與其衍生物。

癌症的光動力療法(Photodynamic therapy，PDT)採用可見光作為敏化劑之放射線活化劑。光動力放射線增敏劑之例子包括，但不限於：血卟啉衍生物(hematoporphyrin derivatives)、光敏素(Photofrin)、苯並卟啉衍生物(benzoporphyrin derivatives)、錫初卟啉(tin etioporphyrin)、脫鎂葉綠甲酯酸a(pheoborbide-a)、細菌葉綠素-a(bacteriochlorophyll-a)、萘酞青(naphthalocyanines)、酞青素(phthalocyanines)、鋅酞青(zinc phthalocyanine)、和治療有效的類似物和其衍生物。

放射線增敏劑可與一種以上其他化合物之治療有效量一起施用，包括但不限於：促進放射線增敏劑與目標細胞結合之化合物；控制對目標細胞之治療物、營養物及/或氧之流量之化合物；具有或不具有額外放射之作用在腫瘤之化療試劑；或用於治療癌症或其他疾病之其他治療有效化合物。

化學增敏劑可與一種以上其他化合物之治療有效量一起施用，包括但不限於：促進化學增敏劑與目標細胞結合之化合物；控制對目標細胞之治療物、營養物及/或氧之流量之化合物；作用於腫瘤之化療試劑或其他用於治療 癌症或其他疾病之治療有效化合物。鈣拮抗劑(Calcium antagonists)，例如維拉帕米(verapamil)，被認為可與抗腫瘤藥劑組合，以在抵抗這些可接受的化療藥劑之腫瘤細胞中建立化學敏感性，並能增強這些化合物在藥物敏感的惡性腫瘤中的功效。

鑒於其有效的藥理特性，根據本發明之該些組合之該些成分，即，一種以上其他醫療藥劑及根據本發明之化合物可配製成用於給藥目的的各種藥物形式。該些成分可分別配製在獨立的醫藥組成物中或含有所有成分的單一醫藥組成物中。

本發明因此也有關於一種醫藥組成物，其含有一個以上其他醫療藥劑及根據本發明之化合物，並與一藥物載體一起。

本發明更有關於根據本發明之組合在用於抑制腫瘤細胞生長之醫藥組成物之製造之用途。

本發明更有關於一種含有作為第一活性成份之根據本發明之化合物以及作為再一活性成份之一種以上抗癌藥劑之產品，作為組合製劑，供同時、分別或依序使用於治療患有癌症之患者。

該一個以上其他醫療藥劑及根據本發明之化合物可同時施用(如在分別的或單一的組成物中)或以任意順序依序施用。在後者情況中，該兩個以上化合物將可在一時期內及以充分確保達到有利或協同作用之量與方式施用。應明瞭較佳的施用方法及施用順序、以及用於組合之每一成分之個別劑量及規範，將取決於施用的特定其他醫療藥劑及本發明化合物、其施用途徑(route)、欲處理的特定腫瘤及欲治療之特定宿主。施用的最佳方法及順序及劑量及規範可由所屬領域具有通常知識者使用習知方法並鑑於本文所載訊息而輕易決定。

當作為一組合，根據本發明之化合物與該一個以上其他抗癌藥劑之重量比可由所屬領域具有通常知識者所決定。所述比例及確切劑量及施用頻率取決於根據本發明之特定化合物及所使用之其他抗癌藥劑、治療之特定病症、治療之病症之嚴重性、特定患者之年齡、體重、性別、飲食、施用時間及一般健康狀況、施用模式以及其他個體正服用之醫藥，為本領域技術人員所習知。再者，顯而易見地，有效每日用量可降低或增加，取決於治療對象之反應及/或取決於醫師處方本發明化合物之評價。本發明式(I)化合物及其他抗癌藥劑之具體重量比可為1/10至10/1，較特別是1/5至5/1，更特別是1/3至3/1。

鉑配位化合物有利的施用劑量為身體表面積之每平方米1至500mg(mg/m²)，例如50至400mg/m²，具體地，每次療程，順鉑劑量為約75mg/m²，且卡鉑(carboplatin)為約300mg/m²。

紫杉類化合物有利的施用劑量為身體表面積之每平方米50至400mg(mg/m²)，例如75至250mg/m²，具體地，每次療程，紫杉醇(paclitaxel)劑量為約175至250mg/m²，且多西他賽(docetaxel)為約75至150mg/m²。

喜樹鹼類化合物有利的施用劑量為身體表面積之每平方米0.1至400mg(mg/m²)，例如1至300mg/m²，具體地，每次療程，伊立替康(irinotecan)劑量為約100至350mg/m²，且拓撲替康(topotecan)為約1至2mg/m²。

抗腫瘤鬼臼毒素衍生物有利的施用劑量為身體表面積之每平方米30至300mg(mg/m²)，例如50至250mg/m²，具體地，每次療程，依托泊苷(etoposide)劑量為約35至100mg/m²，且替尼泊苷(teniposide)為約50至250mg/m²。

抗腫瘤長春花(vinca)生物鹼有利的施用劑量為身體表面積之每平方米2至30mg(mg/m²)，具體地，每次療程，長春鹼(vinblastine)劑量為約3至12 mg/m²，長春新鹼(vincristine)為約1至2mg/m²，且長春瑞濱(vinorelbine)為約10至30mg/m²。

抗腫瘤核苷酸衍生物鹼有利的施用劑量為身體表面積之每平方米200至2500mg(mg/m²)，例如700至1500mg/m²，具體地，每次療程，5-FU劑量為約200至500mg/m²，吉西他濱(gemcitabine)為約800至1200mg/m²，且卡培他濱(capecitabine)為約1000至2500mg/m²。

烷基化劑(如氮芥或亞硝基脲)有利的施用劑量為身體表面積之每平方米100至500mg(mg/m²)，例如120至200mg/m²，具體地，每次療程，環磷醯胺(cyclophosphamide)劑量為約100至500mg/m²，苯丁酸氮芥(chlorambucil)為約0.1至0.2mg/m²，卡莫司汀(carmustine)為約150至200mg/m²，且洛莫司汀(lomustine)為約100至150mg/m²。

抗腫瘤蒽環衍生物有利的施用劑量為身體表面積之每平方米10至75mg(mg/m²)，例如15至60mg/m²，具體地，每次療程，阿黴素(doxorubicin)劑量為約40至75mg/m²，柔紅黴素(daunorubicin)為約25至45mg/m²，且伊達比星(idarubicin)為約10至15mg/m²。

抗雌激素劑每日有利的施用劑量為身體表面積之每平方米約1至100mg(mg/m²)，取決於特定藥劑及治療病症。他莫昔芬(Tamoxifen)有利口服施用劑量為每日兩次，5至50mg，較佳為10至20mg，持續治療充分時間以達成並維持治療效果。托瑞米芬(Toremifene)有利口服施用劑量為每日一次，約60mg，持續治療充分時間以達成並維持治療效果。阿那曲唑(Anastrozole)有利口服施用劑量為每日一次，約1mg。屈洛昔芬(Droloxifene)有利口服施用劑量為每日一 次，約20-100mg。雷洛昔芬(Raloxifene)有利口服施用劑量為每日一次，約60mg。依西美坦(Exemestane)有利口服施用劑量為每日一次，約25mg。

抗體的有利施用劑量為身體表面積之每平方米約1至5mg(mg/m²)，或者若有不同，則如本領域所習知。曲妥珠單抗(Trastuzumab)有利施用劑量為身體表面積之每平方米1至5mg(mg/m²)，具體為每次療程2至4mg/m²。

這些劑量可施用，例如每次療程施用一次、兩次或更多次，該些劑量可重複，例如每7、14、21或28天。

式(I)化合物、醫藥可接受性加成鹽(特別是醫藥可接受性酸加成鹽)、及其立體異構物形式，在其可用於檢測或辨識標記化合物及其他分子、胜肽、蛋白、酵素或受體之間之複合物的形成中，而可具有珍貴的診斷特性。

檢測或辨識方法可使用標記有藥記試劑(如放射性同位素、酵素、螢光物質、冷光物質等)之化合物。放射性同位素之例子包括¹²⁵I、¹³¹I、³H及¹⁴C。酵素通常可透過適當基質之結合，反過來催化一可檢測的反應，而被檢測。其之例子包括，例如β-半乳糖苷酶(beta-galactosidase)、β-葡糖苷酶(beta-glucosidase)、鹼性磷酸酶(alkaline phosphatase)、過氧化物酶(peroxidase)和蘋果酸脫氫酶(malate dehydrogenase)，較佳為辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase)。冷光物質包括，例如魯米諾(luminol)、魯米諾衍生物、螢光素(luciferin)、水母發光蛋白(aequorin)和螢光素酶(luciferase)。

生物樣本可定義為身體組織或體液。體液的例子為腦脊髓液、血液、血漿、血清、尿、痰、唾液等。

一般合成途徑(route)

下列實施例示出本發明，但該些實施例僅是實施例，並不意在以任何方式限制申請專利範圍之範疇。

實驗部分

以下，術語「DCM」意指二氯甲烷，「Me」意指甲基，「Et」意指乙基，「MeOH」意指甲醇，「DMF」意指二甲基甲醯胺(dimethylformamide)，「Et₂O」意指二乙基醚(diethyl ether)，「EtOAc」意指乙酸乙酯(ethyl acetate)，「ACN」意指乙腈(acetonitrile)，「H₂O」意指水，「THF」意指四氫呋喃(tetrahydrofuran)，「MgSO₄」意指硫酸鎂(magnesium sulfate)，「NH₄OH」意指氫氧化銨(ammoniumhydroxide)，「K₂CO₃」意指碳酸鉀(dipotassium carbonate)，「MgCl₂」意指氯化鎂(magnesium chloride)，「iPrNH₂」意指異丙胺(isopropylamine)，「NH₄HCO₃」意指碳酸氫銨(ammonium bicarbonate)，「DMSO」意指二甲亞碸(dimethyl sulfoxide)，「EDTA」意指乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid)，「NADP」意指菸鹼醯胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate)，「SFC」意指超臨界流體層析法(supercritical fluid chromatography)，「MP」意指熔點。

A.中間物之製備

中間物1或N-(3,5-二甲氧基苯基)-N'-(1-甲基乙基)-N-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)喹

啉-6-基]乙烷-1,2-二胺(N-(3,5-dimethoxyphenyl)-N'-(1-methylethyl)-N-[3-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)quinoxalin-6-yl]ethane-1,2-diamine)如WO2011/135376中之化合物4所述，並且可依據其對化合物4所述方法製備。

中間物2或N-(3,5-二甲氧基苯基)-N'-(1-甲基乙基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)喹

啉-6-基]乙烷-1,2-二胺(N-(3,5-dimethoxyphenyl)-N'-(1-methylethyl)-N-[3-(1H-pyrazol-4-yl)quinoxalin-6-yl]ethane-1,2-diamine)如WO2011/135376中之自由鹼化合物137所述，並且可依據其對化合物137所述方法製備。

中間物3或N-(3,5-二甲氧基苯基)-N'-(1-甲基)-N-[3-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)喹

啉-6-基]乙烷-1,2-二胺(N-(3,5-dimethoxyphenyl)-N'-(1-methyl)-N-[3-(1-ethyl-1H-pyrazol-4-yl)quinoxalin-6-yl]ethane-1,2-diamine)如WO2011/135376中之化合物449所述，並且可依據其對化合物449所述方法製備。

中間物4或N-(3,5-二甲氧基苯基)-N'-(1-甲基乙基)-N-[3-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)喹

啉-6-基]乙烷-1,2-二胺(N-(3,5-dimethoxyphenyl)-N'-(1-methylethyl)-N-[3-(1-ethyl-1H-pyrazol-4-yl)quinoxalin-6-yl]ethane-1,2-diamine)如WO2011/135376中之化合物135所述，為自由鹼或鹽酸鹽，並且可依據其對化合物135所述方法製備。

中間物5或N-(3,5-二甲氧基苯基)-N'-(1-甲基乙基)-N-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)喹

啉-6-基]丙烷-1,3-二胺(N-(3,5-dimethoxyphenyl)-N'-(1-methylethyl)-N-[3-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)quinoxalin-6-yl]propane-1,3-diamine)如WO2011/135376中之化合物382所述，並且可依據其對化合物382所述方法製備。

中間物6或7-溴-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-喹

啉(7-bromo-2-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)-quinoxaline)如WO2011/135376中之中間物2所述，並且可依據其對中間物2所述方法製備。

將WO2011/135376併入此文作為參考。

實施例A1

a)中間物7

之製備

在二

烷(dioxane，100mL)中之中間物6(5g，17mmol)、2-氟-3,5-二甲氧基苯胺(2-fluoro-3,5-dimethoxyaniline，3.6g，21mmol)、叔丁醇鈉(sodium tert-butoxide，5g，52mmol)及外消旋-二(二苯基膦基)-1,1'-聯萘(rac-bis(diphenylphosphino)-1,1’-binaphthyl，0.54g，0.87mmol)之混合物在室溫下及氮氣流下除氣(degas)。10分鐘後，在室溫及氮氣流下分批加入醋酸鈀(II)(palladium(II)acetate，388mg，1.7mmol)。在95℃下加熱該反應混合物5小時。冷卻該反應混合物至室溫並倒至冰水及DCM。通過celite^®過濾墊過濾該混合物。分離有機層，利用MgSO₄乾燥，過濾並蒸發至乾。從二乙醚(diethylether)結晶該殘留物並過濾該沉澱物，在真空下乾燥以獲得4g(61%)之中間物7。

b)中間物8

之製備

在5℃於氮氣流下，加入氫化鈉(Sodium hydride，0.21g，5.35mmol)至中間物7(0.7g，1.85mmol)於DMF(25mL)之溶液中。在5℃下攪拌該混合物1小時。在5℃於氮氣流下，滴加(2-溴乙氧基)-叔丁基二甲基矽烷((2-Bromoethoxy)-tert-butyldimethylsilane，0.51mL，2.40mmol)並且在室溫下攪拌該反應混合物24小時。將該混合物倒入冰水中並以EtOAc萃取該產物。以H₂O清洗該有機層，利用MgSO₄乾燥，過濾並蒸發以獲得1.2g(quant.)之中間物8。在下一步驟中使用該粗產物不需任何純化。

c)中間物9

之製備

加入四丁基氟化銨(Tetrabutyl ammonium fluoride，1M於THF中)(2mL；2mmol)至中間物8(1g；1.85mmol)於THF(20mL)之溶液中，並在室溫下攪拌該反應混合物3小時。在水及EtOAc之間分配該反應混合物。以鹽水清洗該有機層，利用MgSO₄乾燥，過濾並蒸發至乾。利用層析法通過矽膠(不規則SiOH，15-40μm，80g，沖提液：98% DCM、2% MeOH、0.1% NH₄OH)純化該殘留物 (1.2g)。收集該純化分並蒸發溶劑。從二乙醚中結晶該殘留物(500mg)。過濾該沉澱物並乾燥以獲得410mg(52%)之中間物9。MP：172℃(K)。

d)中間物10

之製備

在5℃下，滴加甲磺醯氯(Methanesulfonyl chloride，0.3mL，3.88mmol)至中間物9(547mg，1.29mmol)及三乙胺(triethylamine，0.9mL，6.46mmol)於DCM(15mL)中之溶液。在此溫度下攪拌該反應混合物1小時，以DCM稀釋並倒入10%的K₂CO₃水溶液中。傾析該有機層，利用MgSO₄乾燥，過濾並蒸發以獲得850mg之中間物10(>100%)。在下一步驟中使用該粗產物不需任何純化。

e)中間物11

之製備

於密封管中，在100℃加熱中間物10(0.648g，1.29mmol)及異丙胺(isopropylamine，2.4mL，28mmol)於CH₃CN(15mL)中之混合物24小時。冷卻該反應混合物至室溫，以DCM稀釋並倒入水中。傾析該有機層，利用MgSO₄乾燥，過濾並蒸發至乾。利用層析法通過矽膠(不規則SiOH，24g，梯度：從3% MeOH、 97% DCM至10% MeOH、90% DCM)純化該殘留物。收集該純化分並蒸發溶劑以獲得452mg(75%)之中間物11。

B.式(I)化合物之製備

實施例B1

化合物1

之製備

N-(3,5-二甲氧基苯基)-N'-(1-甲基乙基)-N-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)喹

啉-6-基]乙烷-1,2-二胺(中間物1)(0.42g，0.9mmol)、甲醛(37%水溶液，0.21mL，2.8mmol)於二

烷(8mL)中之溶液在室溫下攪拌3天。添加水及EtOAc。傾析該有機層，以水清洗，利用MgSO₄乾燥，蒸發至乾。利用層析法通過矽膠(固定相：球形裸二氧化矽(Spherical bare silica)，5μm，150x30.0mm；移動相：梯度，從0.2% NH₄OH、98% DCM、2% MeOH至1.2% NH₄OH、88% DCM、12% MeOH)純化該殘留物(0.52g)。收集含有所欲產物之分並蒸發至乾。從MeOH及Et₂O之混合物中結晶該殘留物(0.37g)。過濾該沉澱物並乾燥，產出0.27g(64%)之化合物1(MP：190℃(DSC))。

實施例B2

化合物2

之製備

N-(3,5-二甲氧基苯基)-N'-(1-甲基乙基)-N-[3-(1H-吡唑-4-基)喹

啉-6-基]乙烷-1,2-二胺(中間物2)(0.24g，0.52mmol)、甲醛(37%水溶液，0.12mL，1.55mmol)於二

烷(8mL)中之溶液在室溫下攪拌3天無轉變。加入K₂CO₃(0.22g，1.55mmol)並進一步於室溫下攪拌該溶液3天。萃取該有機層，利用MgSO₄乾燥，並蒸發至乾。利用層析法通過矽膠(固定相：球形裸二氧化矽(Spherical bare silica)，5μm，150x30.0mm；移動相：梯度，從0.2% NH₄OH、98% DCM、2% MeOH至1.3% NH₄OH、87% DCM、13% MeOH)純化該殘留物(0.176g)。收集含有所欲產物之分並蒸發至乾。以乙腈/水(20/80)冷凍乾燥該殘留物(79mg)以獲得黃色膠狀粉末之化合物2(66mg，34%)。

實施例B3

化合物3及4之製備

在1mg/ml蛋白質下，將50μM的中間物1與12,000g來自大鼠肝組分(fraction of rat liver)在37℃下共同培養60分鐘。準備10mM中間物1在甲醇中之儲存液並於培養基質(incubation medium)中稀釋200倍(0.25ml in 50ml)(於培養中，最終甲醇濃度為0.5%)。培養緩衝液含有1mM EDTA、5mM MgCl₂、及100mM磷酸鉀緩衝液(pH 7.4)。透過添加NADP(1mM最終濃度)起始反應。透過在乾冰上快速冷卻(flash freezing)終止培養。

利用乙酸乙酯最初萃取所得代謝物。蒸發該代謝物部分(metabolite fraction)至乾，重新溶解於DMSO：water(1：1，v/v)並利用反相UPLC分離。利用兩隻Interchim Strategy C18-2,2.2μm,(150mm x 3.0mm ID)管柱，使用溶劑A以及線性梯度5-70%B，以0.8ml/min，進行20分鐘以達成分離。25mM 醋酸銨(pH4.0)之溶劑A及乙腈/甲醇(60/40，v/v)之溶劑B組成溶劑。收集對應所欲產物之層析峰部分，並蒸發至乾，產出化合物3及4。

化合物3

化合物3也可依據實施例1所述方法從WO2011/135376之化合物645開始製備。

化合物4

抑或，化合物3及4也可以下述方式製備：

在5℃及氮氣流下，滴加三溴化硼(Boron tribromide，1M於DCM中，6mL，6mmol)至化合物1於DCM(25mL)中之溶液。使該溶液緩慢地升高至室溫並攪拌1.5小時。以DCM稀釋該反應混合物，倒入鹽水中並以固體K₂CO₃鹼化。分離該有機層並以鹽水清洗，利用MgSO4乾燥，過濾並蒸發至乾。利用層析法通過矽膠(不規則SiOH，40g；移動相：梯度，從0.5% NH₄OH、94.5% DCM、5% MeOH至0.5% NH₄OH、89.5% DCM、10% MeOH)純化該殘留物。收集含有產物的部分並蒸發至乾，產出110mg(23%)之化合物1以及287mg之化合物3及4 之混合物。藉由非長性SFC(Chiralpak AD-H 5μm 250*30mn；移動相：0.3%異丙胺、70% CO₂、30% MeOH)純化後者的部分。收集純化分，濃縮並從Et₂O/ACN結晶。過濾沉澱物以得到53mg(11%)之化合物3(MP：255℃,K)與148mg(31%)之化合物4(MP：256℃,K)。

實施例B4

於甲醇中製備2mM的中間物1儲存液並且在培樣基質中稀釋200倍(在培養中，最終甲醇濃度為0.5%)。在1mg/ml蛋白質下，與12,000g來自大鼠肝組分(fraction from rat liver)在37℃下共同培養60分鐘。培養緩衝液含有1mM EDTA、5mM MgCl₂、及100mM磷酸鉀緩衝液(pH 7.4)。透過添加NADP(1mM最終濃度)起始反應。透過在乾冰上快速冷卻終止培養。

所得培養液(1ml)與5倍體積之乙腈混合，渦旋混合並超聲波震盪10分鐘。藉由3200rpm，在8℃下離心30分鐘去除蛋白質。去除上清液並在30℃氮氣氣流下蒸發至乾。將萃取物重新溶解於乙腈/水(1：1，v/v)。樣品以下述方式分析：

UPLC與MS檢測

超高效液相層析儀泵

Acquity Binary Solvent Manager/Waters 2777 CTC-Pal-injector

UV檢測器

Waters Acquity PDA

MS檢測器

Waters G2(S)QToF MS/Thermo LTQ-Orbitrap

數據系統

Waters Masslynx 4.1

操作條件：

管柱：

nterchim,Strategy C18-2,2.2μm 2x(150mm x 3.0mm ID)

管柱溫度：

T=60℃

樣品溫度：

T=10℃

移動相：

溶劑A：0.025M醋酸銨，pH 4.0

溶劑B：60/40(v/v)的乙腈/甲醇

沖提模式：

線性梯度

時間：30分鐘

流速：0.8ml/min

注射器注入：

移動相：乙腈：水(1：1,v/v)

流速：5μl/min

檢測條件

MS條件-waters synapt g2及g2s質譜儀

利用Waters SYNAPT G2及G2S質譜儀進行MS分析，配備雙電噴霧離子化探針，並以高解析度及正離子模式下操作。毛細管電壓設定為3千伏和錐體在40V。來源溫度為120℃，脫溶劑溫度400℃。以樣品噴霧遞送甲酸鈉溶液來校準質譜儀。LockSpray^TM ESI探針提供校準Leucine Enkephaline鎖定質量之獨立來源。使用m/z 556.2771之Leucine離子作為全MS及MSMS模式中之鎖定質量。以具有可變掃描時間(0.5-1.0sec)之質心模式獲得QTOF數據(MS,MSMS)。利用Masslynx軟體處理所有數據。

MS條件-thermo ltq-orbitrap質譜儀

LTQ-Orbitrap質譜儀配備有一在正離子模式下操作之電噴霧離子化來源。使用外部校準或鎖定質量校準(鎖定質量離子在m/z 391.2843)獲得準確的質量測量。來源參數調整為使用10ng/μL不變藥物標準溶液之最大靈敏度。使用相同溶液定義在MSⁿ斷裂過程中最佳的碰撞能量。選擇代謝物以供進行利用數據依賴性掃描之LC-MS蹤跡後MSⁿ斷裂。於質心模式中獲得數據並利用XCalibur軟體處理。

於上述實驗中，偵測化合物4([MH]+ m/z 445)、化合物3([MH]+ m/z 445)及化合物5([MH]+ m/z 431)。

化合物5：

實施例B5

化合物6之製備

中間物3(292mg，0.675mmol)、甲醛(37%水溶液，151μL，2.02mmol)於1,4-二

烷(5.48mL)中之溶液在室溫下攪拌3天。當注意低轉化時，添加額外的甲醛(37%水溶液，252μL，3.37mmol)並在70℃下攪拌該反應混合物16小時。

添加H₂O及EtOAc。傾析該有機層，利用MgSO₄乾燥，過濾並蒸發至乾。

利用層析法通過矽膠(不規則SiOH，40g；移動相：梯度，從95% DCM、5% MeOH、0.5% NH₄OH至90% DCM、10% MeOH、1% NH₄OH)純化該殘留物(0.325g)。混合並濃縮含有該產物之部分，以得到一中間物部分(imtermediate fraction)(106mg)，使其由Et₂O/ACN混合物中結晶，過濾及乾燥後獲得86mg(28%)之化合物6。MP：170℃(K)。

實施例B6

作為鹽酸鹽(1.65HCl 2.2H₂O)之化合物7

之製備

中間物4(293mg，0638mmol)、甲醛(37%水溶液，143μL，1.91mmol)於1,4-二

烷(5.16mL)中之溶液在室溫下攪拌3天。當注意到無轉化時，添加額外的甲醛(37%水溶液，238μL，3.18mmol)並在70℃下攪拌該反應混合物16小時。再一次，添加額外的甲醛(37%水溶液，477μL，6.36mmol)並在70℃下攪拌該反應混合物16小時。添加H₂O及EtOAc。傾析該有機層，利用MgSO₄乾燥，過濾並蒸發至乾。

利用層析法通過矽膠(球形裸二氧化矽，5μm，150x30.0mm；移動相：梯度，從0.2% NH₄OH、98% DCM、2% MeOH至1% NH₄OH、90% DCM、10% MeOH)純化該殘留物(0.48g)。混合並濃縮含有產物之部分以得到148mg之中間物部分，其透過非掌性SFC(固定相：CYANO 6μm 150x21.2mm，移動相：90% CO₂、10% MeOH(0.3% iPrNH₂))純化。混合並濃縮含有產物之部分以得到100mg之中間物部分，將其溶解於MeOH。在0℃下添加0.1mL在iPrOH中的HCl(2-5N)。接著濃縮該混合物並以Et₂O取得所得殘留物。過濾並乾燥該沉澱物以得到103mg(29%)之紅色固體之化合物7。MP：152℃(K)。

實施例B7

化合物8之製備

中間物11(382mg，0.82mmol)及甲醛(37%水溶液，308μL，4.11mmol)於二

烷(10mL)中的溶液在60℃下加熱3天。添加H₂O及EtOAc。傾析該有機層，利用MgSO₄乾燥，過濾並蒸發至乾。利用層析法通過矽膠(球形裸二氧化矽，5μm，150x30.0mm；梯度：從71%庚烷、1% MeOH(+10% NH₄OH)、28% EtOAc至0%庚烷、20% MeOH(+10% NH₄OH)、80% EtOAc)純化該殘留物。收集純化的部分並蒸發至乾。透過反相層析法(X-Bridge-C18 5μm 30*150mm；梯度：從80% NH₄HCO₃ 0.5%、20% CH₃CN至0% NH₄HCO₃ 0.5%、100% CH₃CN)純化殘留物(65mg)。收集純化的部分並蒸發以得到15mg(4%)之化合物8。MP：266℃(K)。

實施例B8

化合物9之製備

中間物5(0.21g，0.46mmol)及甲醛(37%水溶液，0.1mL，1.4mmol)於1,4-二

烷(8mL)之溶液在室溫下攪拌3天。一個禮拜後，添加額外的甲醛(37% 水溶液，0.5mL，20.55mmol)，在室溫下再攪拌該混合物2天。添加H₂O及EtOAc。萃取該有機層，利用MgSO₄乾燥，並蒸發至乾。

透過反相層析法(靜止相：X-Bridge-C18 5μm 30*150mm；移動相：梯度：從85% NH₄HCO₃ 0.5%、15% ACN至0% NH₄HCO₃ 0.5%、100% ACN)純化殘留物(170mg)。混合含有產物之部分並濃縮以得到一中間物部分(10mg)，其以乙腈/水(20/80)冷凍乾燥，得到9mg(4%)之黃色粉末之化合物9。MP：在80℃(K)時膠狀(gum at 80℃(K))。

分析部分

LCMS(液相層析儀/質譜儀)(見表A1)

利用UPLC(高效液相層析儀)Acquity(Waters)系統進行LC測量，其包含具有除氣器之二元泵、自動取樣器、二極體陣列偵測器(DAD)及管柱，如下述各個方法中所說明，該管柱維持在40℃。來自管柱之流體被帶至MS偵測器。該MS偵測器配置有一電噴灑離子源。毛細管針電壓為3kV，且在Quattro(來自Waters三重四極質譜儀)上，來源溫度維持在130℃。使用氮氣作為霧化氣體。使用Waters-Micromass MassLynx-Openlynx數據系統進行數據收集。

在Waters Acquity BEH(橋接乙基矽氧烷/二氧化矽混雜物(bridged ethylsiloxane/silica hybrid))C18管柱(1.7μm，2.1 x 100mm)上以0.343ml/min之流速進行反相UPLC。使用兩種移動相(移動相A：95% 7mM醋酸銨/5%乙腈；移動相B：100%乙腈)進行一梯度條件，從84.2% A及15.8% B(維持0.49分鐘)至10.5% A及89.5% B(於2.18分鐘內)，維持1.94分鐘並回到初始條件(於0.73min分鐘 內)，維持0.73分鐘。使用2μl注射體積。正及負離子化模式之錐電壓為20V。使用0.1秒之間隔掃描延遲，於0.2秒內掃描100至1000以獲得質譜。

DSC

針對複數個化合物，以DSC1(Mettler-Toledo)測定熔點(MP)。以10℃/分鐘之溫度梯度測量熔點。最高溫度為350℃。值為峰值。

針對複數個化合物以Kofler加熱工作台獲得熔點，Kofler加熱工作台由一具有線性溫度梯度之加熱板、滑動指標(sliding pointer)及攝氏溫度刻度所組成。

NMR

針對化合物1、2、6至9，利用使用內部氘鎖(internal deuterium lock)並配備有逆三重共振探針頭(inverse triple-resonance(¹H,¹³C,¹⁵N TXI)probe head)之Bruker Avance III 500進行該NMR試驗。化學位移(δ)以百萬分率(ppm)呈現。

針對化合物3及4，每一部分溶解於250μl無水DMSO-d6並將所得溶液移入具有對各溶劑匹配之磁化率之5mm Shigemi NMR管。

試驗紀錄於配備有逆檢測5-mm冷凍探針(cryoprobe)(CPTCI)之Bruker Avance 600MHz光譜儀。1D ¹H及2D NOESY、HSQC及HMBC光譜被記錄，進行標準Bruker脈衝程式運算。該NOESY光譜用於通過空間連通性之測定；該HMBC光譜用於通過鍵結連通性。化學位移(δ)以ppm呈現。¹H NMR化學位移數據係使用在2.50ppm之DMSO-d5多重峰的中心或在1.94ppm之乙腈-d2多重峰的中心作為內部參考而由1D ¹H光譜獲得。耦合常數(Coupling constants)以Hz測量。¹³C NMR化學位移由使用在39.51ppm之DMSO-d6多重峰的中心作為內部參考而獲得。

化合物1

在350°K下進行¹H NMR

¹H NMR(500MHz，DMSO-d ₆)δ ppm 0.99(d,J=6.5Hz,6 H)2.84(spt,J=6.5Hz,1 H)2.88-2.93(m,2 H)3.56(br.s.,2 H)3.76(s,3 H)3.82-3.91(m,5 H)3.93(s,3 H)6.42(d,J=2.2Hz,1 H)6.57(d,J=2.2Hz,1 H)6.97(d,J=2.7Hz,1 H)7.26(dd,J=9.1,2.7Hz,1 H)7.75(d,J=9.1Hz,1 H)8.14(s,1 H)8.46(s,1 H)8.87(s,1 H)

化合物2

在350°K下進行¹H NMR

¹H NMR(500MHz，DMSO-d ₆)δ ppm 0.99(d,J=6.6Hz,6 H)2.84(spt,J=6.6Hz,1 H)2.88-2.95(m,2 H)3.56(br.s.,2 H)3.76(s,3 H)3.80-3.95(m,5 H)6.43(d,J=2.2Hz,1 H)6.57(d,J=2.2Hz,1 H)6.99(d,J=2.7Hz,1 H)7.26(dd,J=9.5,2.7Hz,1 H)7.75(d,J=9.5Hz,1 H)8.35(br.s.,2 H)8.92(s,1 H)13.08(br.s.,1 H)

化合物3

在300°K下進行¹H NMR

¹H NMR(600MHz，DMSO-d ₆)δ ppm 0.98(d,J=6.42Hz,6 H)2.82(spt,J=6.50Hz,1 H)2.88(t,J=4.53Hz,2 H)3.69(s,3 H)3.91(s,3 H)6.29(d,J=2.27Hz,1 H)6.42(d,J=2.27Hz,1 H)6.89(br.s.,1 H)7.25(br.s.,1 H)7.75(d,J=9.07Hz,1 H)8.18(s,1 H)8.53(s,1 H)8.89(s,1 H)

化合物4

在300°K下進行¹H NMR

¹H NMR(600MHz，DMSO-d ₆)δ ppm 0.96(d,J=6.70Hz,6 H)2.81(spt,J=6.70Hz,1 H)2.86(t,J=4.34Hz,2 H)3.79(s,3 H)3.91(s,3 H)6.26(d,J=1.89Hz,1 H)6.41(d,J=2.27Hz,1 H)6.91(br.s.,1 H)7.27(br.s.,1 H)7.75(d,J=9.44Hz,1 H)8.18(s,1 H)8.53(s,1 H)8.89(s,1 H)

化合物6

在300°K下進行¹H NMR

¹H NMR(500MHz，DMSO-d₆)δ ppm 1.43(t,J=7.3Hz,3 H)2.22(br s,3 H)2.82(br s,2 H)3.50-4.10(m,10 H)4.20(q,J=7.3Hz,2 H)6.46(d,J=1.9Hz, 1 H)6.59(d,J=1.9Hz,1 H)6.92(br s,1 H)7.25(br d,J=7.3Hz,1 H)7.77(d,J=9.1Hz,1 H)8.20(s,1 H)8.58(s,1 H)8.92(s,1 H)

化合物7

在300°K下進行¹H NMR

¹H NMR(500MHz，DMSO-d ₆)δ ppm 1.32(dd,J=9.8,6.6Hz,6 H)1.44(t,J=7.4Hz,3 H)3.35-3.60(m,3 H)3.93(s,3 H)3.79(s,3 H)4.22(q,J=7.5Hz,2 H)4.43(br d,J=12.9Hz,1 H)4.58(br s,1 H)6.56(d,J=2.5Hz,1 H)6.70(d,J=2.2Hz,1 H)7.17(br d,J=1.9Hz,1 H)7.30(dd,J=9.3,2.4Hz,1 H)7.84(d,J=9.1Hz,1 H)8.23(s,1 H)8.62(s,1 H)9.02(s,1 H)10.26(br s,1 H)

化合物8

在350°K下進行¹H NMR

¹H NMR(500MHz，DMSO-d ₆)δ ppm 0.99(d,J=6.6Hz,6 H)2.85(spt,J=6.5Hz,1 H)2.92(t,J=4.6Hz,2 H)3.58(br s,2 H)3.80-4.05(m,11 H)6.84(d,J=6.9Hz,1 H)6.92(br s,1 H)7.20(br d,J=9.5Hz,1 H)7.79(d,J=9.1Hz,1 H)8.15(s,1 H)8.46(s,1 H)8.89(s,1 H)

化合物9

在300°K下進行¹H NMR

¹H NMR(500MHz，DMSO-d ₆)δ ppm 0.97(br d,J=5.4Hz,6 H)1.64(br s,2 H)2.72(br s,2 H)2.84(spt,J=6.4Hz,1 H)3.50-3.80(m,7 H)3.84(s,3 H)3.92(s,3 H)6.21(d,J=2.2Hz,1 H)6.61(d,J=2.5Hz,1 H)6.92(br s,2 H)7.71(d,J=9.5Hz,1 H)8.19(s,1 H)8.54(s,1 H)8.91(s,1 H)

二氮呯(diazepine)環之一些訊號變寬，超過在300 K於DMSO-d6中測得之光譜之檢測。

藥理部分

生物分析A

FGFR1(酵素檢測分析)

於30μL之最終反應體積中，FGFR1(h)(25ng/ml)與50mM HEPES pH 7.5、6mM MnCl₂、1mM DTT、0.1mM Na₃VO₄、0.01% Triton-X-100、500nM Btn-Flt3及5μM ATP在化合物(1% DMSO最終濃度)存在下共同培養。在室溫培養60分鐘後，以2.27nM EU-anti P-Tyr、7mM EDTA、31.25nM SA-XL-665及0.02% BSA，在室溫下，進行60分鐘以終止反應。之後，測量時差性螢光共振能量轉移(Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer，TR-FRET)訊號(ex340nm.Em 620nm,em 655nm)，並以RFU(相對螢光單位(Relative Fluorescence Units))表示結果。在此分析中，測定不同化合物濃度(範圍10μM至0.1nM)之抑制功效並用以計算IC₅₀(M)及pIC₅₀(-logIC₅₀)值。

FGFR2(酵素檢測分析)

於30μL之最終反應體積中，FGFR2(h)(150ng/ml)與50mM HEPES pH 7.5、6mM MnCl₂、1mM DTT、0.1mM Na₃VO₄、0.01% Triton-X-100、500nM Btn-Flt3及0.4μM ATP在化合物(1% DMSO最終濃度)存在下共同培養。在室溫培養60分鐘後，以2.27nM EU-anti P-Tyr、7mM EDTA、31.25nM SA-XL-665及0.02% BSA，在室溫下，進行60分鐘以終止反應。之後，測量時差性螢光共振能量轉移(Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer，TR-FRET)訊號(ex340nm.Em 620nm,em 655nm)並以RFU(相對螢光單位 (Relative Fluorescence Units))表示結果。在此分析中，測定不同化合物濃度(範圍10μM至0.1nM)之抑制功效並用以計算IC₅₀(M)及pIC₅₀(-logIC₅₀)值。

FGFR3(酵素檢測分析)

於30μL之最終反應體積中，FGFR3(h)(40ng/ml)與50mM HEPES pH 7.5、6mM MnCl₂、1mM DTT、0.1mM Na₃VO₄、0,01% Triton-X-100、500nM Btn-Flt3及25μM ATP在化合物(1% DMSO最終濃度)存在下共同培養。在室溫培養60分鐘後，以2.27nM EU-anti P-Tyr、7mM EDTA、31.25nM SA-XL-665及0.02% BSA，在室溫下，進行60分鐘以終止反應。在室溫下，進行60分鐘以終止反應。之後，測量時差性螢光共振能量轉移(Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer，TR-FRET)訊號(ex340nm.Em 620nm,em 655nm)並以RFU(相對螢光單位(Relative Fluorescence Units))表示結果。在此分析中，測定不同化合物濃度(範圍10μM至0.1nM)之抑制功效並用以計算IC₅₀(M)及pIC₅₀(-logIC₅₀)值。

FGFR4(酵素檢測分析)

於30μL之最終反應體積中，FGFR4(h)(60ng/ml)與50mM HEPES pH 7.5、6mM MnCl₂、1mM DTT、0.1mM Na₃VO₄、0.01% Triton-X-100、500nM Btn-Flt3及5μM ATP在化合物(1% DMSO最終濃度)存在下共同培養。在室溫培養60分鐘後，以2.27nM EU-anti P-Tyr、7mM EDTA、31.25nM SA-XL-665及0.02% BSA，在室溫下，進行60分鐘以終止反應。之後，測量時差性螢光共振能量轉移(Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer，TR-FRET)訊號(ex340nm.Em 620nm,em 655nm)並以RFU(相對螢光單位(Relative Fluorescence Units)) 表示結果。在此分析中，測定不同化合物濃度(範圍10μM至0.1nM)之抑制功效並用以計算IC₅₀(M)及pIC₅₀(-logIC₅₀)值。

KDR(VEGFR2)(酵素檢測分析)

於30μL之最終反應體積中，KDR(h)(150ng/ml)與50mM HEPES pH 7.5、6mM MnCl₂、1mM DTT、0.1mM Na₃VO₄、0.01% Triton-X-100、500nM Btn-Flt3及3μM ATP在化合物(1% DMSO最終濃度)存在下共同培養。在室溫培養120分鐘後，以2.27nM EU-anti P-Tyr、7mM EDTA、31.25nM SA-XL-665及0.02% BSA，在室溫下，進行60分鐘以終止反應。之後，測量時差性螢光共振能量轉移(Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer，TR-FRET)訊號(ex340nm.Em 620nm,em 655nm)並以RFU(相對螢光單位(Relative Fluorescence Units))表示結果。在此分析中，測定不同化合物濃度(範圍10μM至0.1nM)之抑制功效並用以計算IC₅₀(M)及pIC₅₀(-logIC₅₀)值。

Ba/F3-FGFR1(負IL3或正IL3)(細胞增生分析)

在384孔盤中，在添加50μl細胞培養基質(無酚紅RPMI-1640、10% FBS、2mM L-麩醯胺(L-Glutamine)及50μg/ml健他黴素(Gentamycin))前，噴佈100nl於DMSO之化合物稀釋液，每個孔之細胞培養基質含有20000個Ba/F3-FGFR1-轉染細胞。細胞置於37℃及5% CO₂之培養箱。於24小時後，添加10μl的Alamar Blue溶液(0.5mM K₃Fe(CN)₆、0.5mM K₄Fe(CN)₆、0.15mM刃天青(Resazurin)及100mM磷酸鹽緩衝液)至孔盤中，在37℃及5% CO₂下培養4小時之後，在螢光孔盤讀取機中測量RFU’s(相對螢光單位)(ex.540nm.,em.590nm.)。

在此分析中，測定不同化合物濃度(範圍10μM至0.1nM)之抑制功效並用以計算IC₅₀(M)及pIC₅₀(-logIC₅₀)值。

在10ng/ml小鼠IL3存在下，進行相同實驗，以做為反篩選(counterscreen)。

Ba/F3-FGFR3(負IL3或正IL3)(細胞增生分析)

在384孔盤中，在添加50μl細胞培養基質(無酚紅RPMI-1640、10% FBS、2mM L-麩醯胺(L-Glutamine)及50μg/ml健他黴素(Gentamycin))前，噴佈(spary)100nl於DMSO之化合物稀釋液，每個孔之細胞培養基質含有20000個Ba/F3-FGFR3-轉染細胞。細胞置於37℃及5% CO₂之培養箱。於24小時後，添加10μl的Alamar Blue溶液(0.5mM K₃Fe(CN)₆、0.5mM K₄Fe(CN)₆、0.15mM刃天青(Resazurin)及100mM磷酸鹽緩衝液)至孔盤中，在37℃及5% CO₂下培養4小時後，在螢光孔盤讀取機中測量RFU’s(相對螢光單位)(ex.540nm.,em.590nm.)。

在此分析中，測定不同化合物濃度(範圍10μM至0.1nM)之抑制功效並用以計算IC₅₀(M)及pIC₅₀(-logIC₅₀)值。

在10ng/ml小鼠IL3存在下，進行相同實驗，以做為反篩選(counterscreen)。

Ba/F3-KDR(負IL3或正IL3)(細胞增生分析)

在384孔盤中，在添加50μl細胞培養基質(無酚紅RPMI-1640、10% FBS、2mM L-麩醯胺(L-Glutamine)及50μg/ml健他黴素(Gentamycin))前，噴佈100nl於DMSO之化合物稀釋液，每個孔之細胞培養基質含有20000個Ba/F3-KDR-轉染細胞。細胞置於37℃及5% CO₂之培養箱。於24小時後，添加10μl的Alamar Blue溶液(0.5mM K₃Fe(CN)₆、0.5mM K₄Fe(CN)₆、0.15mM刃天青(Resazurin)及100mM磷酸鹽緩衝液)至孔盤中，在37℃及5% CO₂下培養4小時後，在螢光孔盤讀取機中測量RFU’s(相對螢光單位)(ex.540nm.,em.590nm.)。

在此分析中，測定不同化合物濃度(範圍10μM至0.1nM)之抑制功效並用以計算IC₅₀(M)及pIC₅₀(-logIC₅₀)值。

在10ng/ml小鼠IL3存在下，進行相同實驗，以做為反篩選(counterscreen)。

Ba/F3-FGFR4(細胞增生分析)

在384孔盤中，在添加50μl細胞培養基質(無酚紅RPMI-1640、10% FBS、2mM L-麩醯胺(L-Glutamine)及50μg/ml健他黴素(Gentamycin))前，噴佈100nl於DMSO之化合物稀釋液，每個孔之細胞培養基質含有20000個Ba/F3-FGFR4-轉染細胞。細胞置於37℃及5% CO₂之培養箱。於24小時後，添加10μl的Alamar Blue溶液(0.5mM K₃Fe(CN)₆、0.5mM K₄Fe(CN)₆、0.15mM刃天青(Resazurin)及100mM磷酸鹽緩衝液)至孔盤中，在37℃及5% CO₂下培養4小時後，在螢光孔盤讀取機中測量RFU’s(相對螢光單位)(ex.540nm.,em.590nm.)。

在此分析中，測定不同化合物濃度(範圍10μM至0.1nM)之抑制功效並用以計算IC₅₀(M)及pIC₅₀(-logIC₅₀)值。

本發明化合物於上述分析之數據提供於表A2。

生物分析B

酵素結合分析(KINOMEscan^®)

利用DiscoveRx公司(San Diego,California,USA(www.kinomescan.com))進行之KINOMEscan^®技術測定本文所揭露之化合物之激酶酵素結合親和性。表A3報導所得之Kd值(nM)、及該Kd值為抑制劑結合常數。

Claims (46)

1. 一種如式(I)之化合物、其醫藥可接受性鹽類或其溶劑化物：

   

   該式(I)包含其任何互變異構(tautomeric)或立體異構(stereochemically isomeric)型態，其中，n為等於1或2之整數；R₁為氫、C_1-6烷基、羥基取代之C_1-6烷基、經-C(=O)NHCH₃取代之C_1-6烷基、或經-S(=O)₂-C_1-4烷基取代之C_1-6烷基；R_2a為氫、氟或氯；R_2b或R_2c各自獨立為甲氧基(methoxy)或羥基(hydroxyl)；R₃為氫、C_1-6烷基、C_3-6環烷基、或經C_3-6環烷基取代之C_1-2烷基；R₄為氫、甲基或乙基。
2. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中，該化合物具有以下結構：

   
3. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中，R_2a為氫或氟。
4. 如申請專利範圍第3項所述之化合物，其中，R_2a為氟。
5. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中，該化合物具有以下結構：

   
6. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中，n為等於1之整數。
7. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中，R₃為氫。
8. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中，R₃為C_1-6烷基，具體為C_1-4烷基。
9. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中，該化合物具有以下結構：

   
10. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中，R₁為氫或C_1-6烷基。
11. 如申請專利範圍第10項所述之化合物，其中，R₁為C_1-6烷基。
12. 如申請專利範圍第11項所述之化合物，其中，R₁為甲基。
13. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中，R_2b為甲氧基。
14. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中，R_2b為羥基。
15. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中，R_2c為甲氧基。
16. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中，R_2c為羥基。
17. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中，該化合物為：

    

    或其之醫藥可接受性鹽類或溶劑化物。
18. 如申請專利範圍第17項所述之化合物，其中，該化合物為：

    
19. 如申請專利範圍第1項所述之化合物，其中，該化合物係選自：

    

    

    ；以及

    
20. 一種製備如申請專利範圍第1項所述之式(I)化合物之方法，該方法包括：在一適當的溶劑中，於一適當的溫度下，使一式(II)化合物與甲醛反應，

    

    其中，R₁、R_2a、R_2b、R_2c、R₃、R₄及n如申請專利範圍第1項所定義。
21. 一種醫藥組成物，包括如申請專利範圍第1至19項中之任一項所述化合物。
22. 如申請專利範圍第1至19項中之任一項所述之化合物係用於治療。
23. 如申請專利範圍第1至19項中之任一項所述之化合物係用於FGFR激酶介導之疾病狀態或狀況之預防或治療。
24. 如申請專利範圍第1至19項中之任一項所述之化合物係用於癌症之預防或治療。
25. 如申請專利範圍第24項所述之用於治療癌症之化合物，其中，該癌症為膀胱癌(bladder cancer)、尿路上皮癌(urothelial cancer)、乳腺癌(breast cancer)、神經膠質母細胞瘤(glioblastoma)、肺癌(lung cancer)、卵巢癌(ovarian cancer)、子宮內膜癌(endometrial cancer)、子宮頸癌(cervical cancer)、軟組織肉瘤(soft tissue sarcoma)、頭和頸鱗狀細胞癌(head and neck squamous cell carcinoma)、胃癌(gastric cancer)、食道癌(oesophageal cancer)、膽管癌(cholangiocarcinoma)、或肝細胞癌(hepatocellular carcinoma)。
26. 如申請專利範圍第25項所述之用途之化合物，其中，該癌症為轉移性尿路上皮癌、或手術無法切除尿路上皮癌。
27. 如申請專利範圍第25項所述之用途之化合物，其中，該癌症為非小細胞肺癌、鱗狀細胞肺癌、小細胞肺癌、或肺的腺癌。
28. 如申請專利範圍第25項所述之用途之化合物，其中，該癌症為膀胱癌。
29. 如申請專利範圍第28項所述之用途之化合物，其中，該癌症為具有FGFR3染色體易位之膀胱癌。
30. 如申請專利範圍第28項所述之用途之化合物，其中，該癌症為具有FGFR3點突變之膀胱癌。
31. 如申請專利範圍第24項所述之用於治療癌症之化合物，其中：(i)該癌症為具有FGFR1、FGFR2、FGFR3、或FGFR4突變體的腫瘤；或(ii)該癌症為具有FGFR2、或FGFR3功能性獲得突變體的腫瘤；或(iii)該癌症為具有FGFR1過度表現的腫瘤。
32. 如申請專利範圍第25項所述之用於治療癌症之化合物，其中，該癌症為膽管癌。
33. 如申請專利範圍第24項所述之用於治療癌症之化合物，其中，該化合物為

    

    。
34. 如申請專利範圍第25項所述之用於治療癌症之化合物，其中，該化合物為

    

    。
35. 如申請專利範圍第26項所述之用於治療癌症之化合物，其中，該化合物為

    

    。
36. 如申請專利範圍第27項所述之用於治療癌症之化合物，其中，該化合物為

    

    。
37. 如申請專利範圍第28項所述之用於治療癌症之化合物，其中，該化合物為

    

    。
38. 如申請專利範圍第29項所述之用於治療癌症之化合物，其中，該化合物為

    

    。
39. 如申請專利範圍第30項所述之用於治療癌症之化合物，其中，該化合物為

    

    。
40. 如申請專利範圍第31項所述之用於治療癌症之化合物，其中，該化合物為

    

    。
41. 如申請專利範圍第32項所述之用於治療癌症之化合物，其中，該化合物為

    

    。
42. 如申請專利範圍第1項所述之化合物係用於抑制FGFR激酶。
43. 如申請專利範圍第18項所述之化合物係用於抑制FGFR激酶。
44. 一種如申請專利範圍第1至19項中之任一項所述之化合物之用途，用以製造用於FGFR激酶介導之疾病狀態或狀況之預防或治療之一藥物。
45. 一種如申請專利範圍第1至19項中之任一項所述之化合物之用途，用以製造用於癌症之預防或治療之一藥物。
46. 一種如申請專利範圍第1至19項中之任一項所述之化合物之用途，用以製造用於一癌症之治療之一藥物，其中，該癌症為膀胱癌、尿路上皮癌、乳腺癌、神經膠質母細胞瘤、肺癌、卵巢癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、軟組織肉瘤、頭和頸鱗狀細胞癌、胃癌、食道癌、膽管癌、或肝細胞癌。