TWI428141B

TWI428141B - 藉投予髓鞘再形成劑對脫髓鞘疾病及麻痺之醫藥用途與組合

Info

Publication number: TWI428141B
Application number: TW093101747A
Authority: TW
Inventors: Stephen J Karlik; Michael A Pleiss; Andrei W Konradi; Francine S Grant; Christopher M Semko; Darren Dressen; Elizabeth Messersmith; Stephen Freedman; Ted Yednock
Original assignee: Elan Pharm Inc
Priority date: 2003-01-24
Filing date: 2004-01-27
Publication date: 2014-03-01
Also published as: RU2005126728A; AU2011201262A1; US20050215565A1; TW200427462A; AU2010212446B2; AU2004207536A1; KR20050114212A; US20050069541A1; KR20130100802A; AU2004207536B2; US7576101B2; EP1592386A4; MXPA05007823A; AU2010201472A1; RU2412721C2; JP2007521249A; EP1592386A2; CO5670359A2; EP2484381A1; TW201311238A

Description

藉投予髓鞘再形成劑對脫髓鞘疾病及麻痺之醫藥用途與組合

一般而言，本發明係關於可在病患中用以治療脫髓鞘疾病與症狀及/或減少麻痺之組合物、化合物。

發炎為已形成血管組織對感染或損傷之回應，且受到白血球對於血管內皮細胞之黏連及其浸潤至周圍組織中所影嚮。在正常發炎時，浸潤之白血球會釋出有毒介體，以殺死侵入之生物體、吞噬碎屑與死亡細胞，並在組織修復與免疫回應上扮演一項角色。但是，在病理學疾病發炎時，浸潤之白血球係過度回應，且可能造成嚴重或致死傷害。參閱，例如Hickey,Psychoneuroimmunology II(大學出版社1990)。

整合素為一種涉及細胞黏連性、免疫細胞潛移及活化作用之細胞表面糖蛋白之族群。α-4整合素係藉由所有循環白血球表現，惟嗜中性白血球除外，且搭配無論是β-1(β ₁)或β-7(β ₇)整合素亞單位，形成異種二聚體受體；α-4 β-1(α ₄ β ₁)與α-4 β-7(α ₄ β ₇)兩者均在白血球潛移越過血管內皮上扮演一項角色(Springer等人，Cell 1994,76：301-14；Butcher等人，Science 1996,272：60-6)，並有助於主質內之細胞活化作用與存活(Damle等人，J.Immunol.1993；151：2368-79；Koopman等人，J.Immunol.1994,152：3760-7；Leussink等人，Acta Neuropathol.2002,103：131-136)。α ₄ β ₁係構成上地表現於淋巴細胞、單細胞、巨噬細胞、肥大細胞、嗜鹼細胞及嗜伊紅細胞上。

α-4 β-1(亦稱為極遲抗原-4，VLA-4)係結合至血管細胞黏連分子-1(Lobb等人，J.Clin.Invest.1994,94：1722-8)，其係在慢性發炎之許多位置處，藉由血管內皮表現(Bevilacqua等人，1993 Annu.Rev.Immunol.11：767-804；Postigo等人，1993 Res.Immunol.144：723-35)。α ₄ β ₁具有其他配位體，包括纖維網蛋白及其他胞外間質(ECM)成份。

α-4 β-7二聚體係與黏膜選址素細胞黏連分子(MAdCAM-1)交互作用，並媒介淋巴細胞導航至腸(Farstad等人，1997 Am.J. Pathol.150：187-99；Issekutz,1991 J.Immunol.147：4178-84)。MAdCAM-1於血管內皮上之表現亦在患有炎性腸疾病(IBD)之病患腸道中之發炎位置處被增加(Briskin等人，1997 Am.J.Pathol.151：97-110)。

黏連分子，譬如α-4整合素，係為治療劑之潛在標的。例如，其中α-4整合素為亞單位之VLA-4受體係為重要標的，因其係與駐在腦部內皮細胞上之配位體交互作用。由於腦部發炎所造成之疾病與症狀，係具有特別嚴重之影嚮。在另一項實例中，α-4 β-7整合素二聚體為重要標的，此係由於其涉及胃腸道中之淋巴細胞導航與病理學發炎所致。

α-4 β-1整合素係表現於經活化之淋巴細胞與單細胞之胞外表面上，該細胞係牽連急性炎性腦部損傷及與多發性硬化(MS)有關聯之血液腦部障壁(BBB)分解之發病原理(Coles等人，1999 Ann.Neurol.46(3)：296-304)。抵抗α-4整合素之藥劑已於活體外與活體內被測試其消炎潛力。參閱Yednock等人，Nature 1992,356：63-66；1998年11月24日頒予Bendig等人之美國專利5,840,299，及1999年12月14日頒予Thorsett等人之美國專利6,001,809。活體外實驗証實α-4整合素抗體會阻斷淋巴細胞連附至腦部內皮細胞。測試α-4整合素抗體對於動物作用之實驗，該動物具有以人工方式引致之模擬多發性硬化之症狀，實驗性自身免疫腦脊髓炎(EAE)，已証實抗-α-4整合素抗體之投藥會在該動物中預防腦部發炎及後續麻痺。此等實驗共同地確認抗-α-4整合素抗體為治療多發性硬化及其他炎性疾病與病症之潛在有用治療劑。

迄今，仍未發現抑制或預防脫髓鞘作用之治療劑，遑論促進髓鞘再形成之藥劑。例如，多發性硬化會衝擊人類健康，及為保持健康之花費，超過任何其他脫髓鞘疾病。對於MS沒有任何有效治療存在。其係為一種主要折磨年輕成人(意即，平均30歲)之疾病，其中每1,000個人發生1起病例。實驗性自身免疫腦脊髓炎為用於研究MS之主要動物模式。但是，與EAE不同，MS為具有不明原因之自身免疫性疾病。疾病進展之特徵為免疫細胞流入中樞神經系統中，最後造成水腫、脫髓鞘作用、軸索傷害與損失。

新穎化合物，組合物，及使用此等化合物與組合物以抑制脫髓鞘作用、促進髓鞘再形成及/或治療與脫髓鞘作用有關聯之麻痺之方法是需要的，且持續尋求疾病之治療，譬如MS，以及與發炎連結之其他脫髓鞘疾病。

以上文為基礎，治療此等疾病之新穎組合物與方法是需要的，其將有效地治療或抑制此等疾病，以致使病患可達成長壽命期限與較佳生命品質。

本發明係關於在哺乳動物中促進神經細胞髓鞘再形成之方法，其包括以髓鞘再形成有效量對該哺乳動物投予髓鞘再形成劑。在本發明方法中之哺乳動物較佳為人類，且該人類係患有使細胞脫髓鞘之症狀。

根據本發明，使細胞脫髓鞘之症狀包括多發性硬化、先天性代謝病症、伴隨著異常髓鞘形成之神經病、藥物引致之脫髓鞘作用、輻射引致之脫髓鞘作用、遺傳性脫髓鞘症狀、朊病毒引致之脫髓鞘症狀、腦炎引致之脫髓鞘作用或脊髓損傷。症狀較佳為多發性硬化。

本發明進一步關於一種組合物，其包含治療上有效量之髓鞘再形成劑，其在投予有需要之病患時，係預防脫髓鞘作用，及/或促進髓鞘再形成。

在本發明之方法與組合物中，髓鞘再形成劑可為抗體、抗體之免疫學上活性片段、化合物或其組合。抗體或其免疫學上活性片段較佳為那塔利諸馬(natalizumab)(Antegren^®)或其免疫學上活性片段。

在本發明之方法與組合物中，髓鞘再形成劑可為式I,IA,IB,IC,II,IIA或IIB之小化合物。化合物較佳為下式IB化合物其中：Ar¹係選自包括芳基、經取代之芳基、雜芳基及經取代之雜芳基； Ar²係選自包括芳基、經取代之芳基、雜芳基及經取代之雜芳基；R¹²係選自包括烷基、經取代之烷基、環烷基及經取代之環烷基，或R¹²與R¹³和結合至R¹²之氮原子與結合至R¹³之碳原子一起，形成雜環族或經取代之雜環族基團；R¹³係選自包括氫、烷基及經取代之烷基，或R¹²與R¹³和結合至R¹²之氮原子與結合至R¹³之碳原子一起，形成雜環族或經取代之雜環族基團；R¹⁴係選自包括氫、烷基、經取代之烷基、環烷基、經取代之環烷基、芳基及經取代之芳基；R¹⁵係選自包括烷基與經取代之烷基，或R¹⁵與R¹⁶和彼等所結合之氮原子一起形成雜環族或經取代之雜環族基團；R¹⁶係選自包括烷基與經取代之烷基，或R¹⁵與R¹⁶和彼等所結合之氮原子一起形成雜環族或經取代之雜環族基團；且Y係選自包括-O-、-NR¹⁰⁰-及-CH₂-，其中R¹⁰⁰為氫或烷基；及其藥學上可接受之鹽。

於進一步具體實施例中，化合物較佳為下式IC化合物其中R^x為羥基或C_1-5烷氧基，及其藥學上可接受之鹽。此化合物較佳為N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯。

於另一項具體實施例中，化合物較佳為下式IIB化合物其中：Ar³¹係選自包括芳基、經取代之芳基、雜芳基及經取代之雜芳基；R³²係選自包括烷基、經取代之烷基、環烷基及經取代之環烷基，或R³²與R³³和結合至R³²之氮原子與結合至R³³之碳原子一起，形成雜環族或經取代之雜環族基團；R³³係選自包括氫、烷基及經取代之烷基，或R³²與R³³和結合至R³²之氮原子與結合至R³³之碳原子一起，形成雜環族或經取代之雜環族基團；R³⁴係選自包括氫、烷基、經取代之烷基、環烷基、經取代之環烷基、芳基及經取代之芳基；且R³⁷為芳基、雜芳基、經取代之芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族、芳氧基、經取代之芳氧基、芳烷氧基、經取代之芳烷氧基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基；及其藥學上可接受之鹽。

於又另一項具體實施例中，化合物為N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯。

本發明亦關於一種醫藥組合物，其包含治療上有效量之式I,IA,IB,IC,II,IIA或IIB化合物及其藥學上可接受之鹽。此化合物較佳為式IB,IC或IIB化合物。於一項較佳具體實施例中，化合物為N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯。

本發明之髓鞘再形成劑可單獨投藥，或併用其他髓鞘再形成劑、抗-α-4-劑或消炎劑。本發明進一步關於醫藥組合物，其包含藥學上可接受之載劑，及如本文中所揭示之治療上有效量之髓鞘再形成劑。本發明之醫藥組合物可進一步包含一或多種其他藥劑，包括其他髓鞘再形成劑、抗-α-4-劑或消炎劑。

本發明之組合物可藉由多種投藥模式投藥，包括口腔、非經腸(例如皮下、硬膜下、靜脈內、肌內、鞘內、腹膜腔內、大腦內、動脈內或病灶內投藥途徑)、局部、定位(例如手術應用或外科栓劑)、直腸及肺(例如氣溶膠、吸入或粉末)。

本發明之另一方面係提供一種組合療法，其包含治療上有效量之髓鞘再形成劑及治療上有效量之消炎劑。消炎劑包括但不限於親腎上腺皮質激素(ACTH)、皮質類固醇(例如潑尼松、甲基氫化潑尼松、地塞米松皮質固醇、可體松、氟氫化可體松、氫化潑尼松、6 α-甲基氫化潑尼松、氟羥脫氫皮質甾醇及β-美塞松)、干擾素(例如干擾素β-1b與干擾素β-1a)、Copaxone^®或非類固醇消炎藥物(例如阿斯匹靈、柳酸鈉、膽鹼三柳酸鎂、沙沙雷特(Salsalate)、二氟苯柳酸、硫酸沙(sulfasalazine)、歐沙(olsalazine)、對-胺基酚衍生物、吲哚、茚醋酸、雜芳基醋酸、鄰胺基苯甲酸、烯醇酸、烷酮、二芳基取代之呋喃酮、二芳基取代之吡唑、吲哚醋酸及碸基醯基苯胺)。髓鞘再形成劑可選自任何式I,IA,IB,IC,II,IIA或IIB化合物。或者，髓鞘再形成劑可為抵抗VLA-4之抗體或其免疫學上活性片段或多肽，其係結合至VLA-4，藉以防止其結合至同源配位體。

組合療法可用以治療患有多發性硬化、先天性代謝病症、具有異常髓鞘形成之神經病、藥物引致之脫髓鞘作用、輻射引致之脫髓鞘作用、遺傳性脫髓鞘症狀、普來恩(prion)引致之脫髓鞘症狀、腦炎引致之脫髓鞘作用或脊髓損傷之病患。

本發明之又另一方面係提供一種式I,IA,IB,IC,II,IIA或IIB化合物於藥劑製備上之用途，該藥劑係在有需要之病患中治療脫髓鞘疾病。化合物較佳為式IB,IC或IIB化合物。於一項較佳具體實施例中，化合物為N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯。

於本發明之另一方面係提供一種在具有脫髓鞘疾病之病患中使麻痺逆轉之方法，其包括對該病患投予髓鞘再形成劑，其量足以在該有需要之病患中，抑制脊髓中免疫細胞之淋巴細胞浸潤，以促進脊髓中神經細胞之髓鞘再形成，及藉以治療麻痺。本發明之另一方面係提供一種髓鞘再形成劑於藥劑製備上之用途，該藥劑係在有需要之病患中治療脫髓鞘疾病，或在具有脫髓鞘疾病之病患中治療麻痺。

本發明之此等及其他目的、優點及特徵，對熟諳此藝者而言，將在閱讀如下文更完整地描述之方法與配方之細節時而明瞭。

發明詳述

在描述本發明方法與治療劑之前，應明瞭的是，本發明並不限於所述之特定方法與治療劑，因其當然可改變。亦應明瞭的是，本文中所用之術語係僅為達成描述特定具體實施例之目的，且並不意欲限制，因為本發明之範圍將僅受限於隨文所附之申請專利範圍。

在提供數值範圍之情況下，應明瞭的是，各插入值，達下限單位之十分之一，除非內文另有清楚指述，否則在該範圍上下限之間，及在該所述範圍中之任何其他所述或插入值，係被涵蓋在本發明內。此等較小範圍之上下限可獨立地被包含在較小從屬於所述範圍中之任何特別排除在外之界限內。在所述範圍包含界限之一或兩者之情況下，排除此被包含兩界限之任一個之範圍，亦被包含在本發明中。亦意欲涵蓋在內者為落在所引述範圍內之任何數值。

除非另有定義，否則於本文中所使用之所有技術與科學術語均具有與一般熟諳本發明所歸屬技藝者通常所瞭解之相同意義。雖然類似或相當於本文中所述之任何方法與物質亦可使用於本發明之實施或測試上，但現在將描述較佳方法與物質。本文中所提及之所有公報均併於本文供參考，以揭示與描述該公報所引述有關之方法及/或物質。

1.縮寫與定義

根據此詳細說明文，係應用下列縮寫與定義。必須指出的是，於本文中使用之單數形式"一個"、"一種"及"該"係包括複數指示物，除非內文另有清楚指述。因此，例如指稱"一種抗體"係包括多個此種抗體，而指稱"該劑量"係包括指稱一或多個劑量，及熟諳此藝者所已知之其相當物等等。

本文中所討論之公報係僅提供其在本申請案申請日期前之揭示內容。此處並不欲被解釋為承認本發明由於先前之發明而不具有先於此種公報之權利。再者，所提供之公報日期可能會與實際公報日期不同，其可能必須獨立經確認。

1.1.縮寫

下列縮寫已被使用於本文中。

1.2定義

關於二十種天然生成胺基酸之縮寫，係按照習用使用法(免疫學-A合成(第2版，E.S.Golub & D.R.Gren編著，Sinauer協會， Sunderland,Mass.,1991))。此二十種習用胺基酸，非天然胺基酸，譬如α,α-二取代胺基酸、N-烷胺基酸，乳酸，及其他非習用胺基酸之立體異構物(例如D-胺基酸)，亦可為本發明多肽之適當成份。非習用胺基酸之實例包括：4-羥脯胺酸、γ-羧基麩胺酸酯、ε-N,N,N-三甲基離胺酸、ε-N-乙醯基離胺酸、O-磷酸絲胺酸、N-乙醯絲胺酸、N-甲醯甲硫胺酸、3-甲基組胺酸、5-羥離胺酸、ω-N-甲基精胺酸及其他類似胺基酸與亞胺基酸(例如4-羥脯胺酸)。再者，胺基酸可藉由糖基化作用、磷醯化作用等進行改質。

於本文中使用之多肽符號表示法中，左手方向為胺基末端方向，而右手方向為羧基末端方向，根據標準使用法與慣用法。同樣地，除非另有指定，否則單股多核苷酸序列之左手末端為5'末端；雙股多核苷酸序列之左手方向係被稱為5'方向。新生RNA轉錄本之5'對3'添加之方向係被稱為轉錄方向；於具有與RNA相同序列之DNA股上，且其係為5'對RNA轉錄本之5'末端之序列區域，係被稱為"上游序列"；於具有與RNA相同序列之DNA股上，且其係為3'對RNA轉錄本之3'末端之序列區域，係被稱為"下游序列"。

"多核苷酸序列"之措辭，係指從5'至3'末端讀取之脫氧核糖核苷酸或核糖核苷酸鹼基之單或雙股聚合體。其包括自身複製質粒、DNA或RNA與非功能性DNA或RNA之傳染性聚合體。

下列術語係用以描述兩個或多個多核苷酸間之序列關係："參考序列"、"比較窗口"、"序列同一性"、"序列同一性之百分比"及"實質同一性"。"參考序列"為已定義之序列，作為序列比較之基準使用；參考序列可為較大序列之子集，例如為全長cDNA之一個鏈段，或在序列清單中所予之基因序列，譬如圖11或12之多核苷酸序列，或可包含完整DNA或基因序列。一般而言，參考序列為長度至少20個核苷酸，常常為長度至少25個核苷酸，且經常為長度至少50個核苷酸。由於兩個多核苷酸可各(1)包含在兩個多核苷酸之間類似之序列(意即完整多核苷酸序列之一部份)，與(2)可進一步包含在兩個多核苷酸之間背離之序列，在兩個(或更多個)多核苷酸間之序列比較，典型上係經由將此兩個多核苷酸之序列於"比較窗口"上比較而進行，以鑒別與比較序列類似性之局部區域。於本文中使用之"比較窗口"係指至少20個鄰接核苷酸位置之概念鏈段，其中可將一個多核苷酸序列與至少20個鄰接核苷酸之參考序列比較，且其中當對於兩種序列之最適宜對準，而與參考序列(其未包含增加或缺失)比較時，多核苷酸序列在比較窗口中之部份可包含20個百分比或較少之增加或缺失(意即間隙)。關於對準比較窗口之序列之最適宜對準，可藉由Smith & Waterman,Adv.Appl.Math.2：482(1981)之局部類同性演算法，藉由Needleman & Wunsch,J.Mol.Biol.48：443(1970)之類同性對準演算法，藉由Pearson & Lipman Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)85：2444(1988)之搜尋類似性方法(其每一個均以其全文併於本文供參考)，藉由此等演算法之電腦化施行(GAP、BESTFIT、FASTA及TFASTA，在Wisconsin遺傳學包裝軟體7.0版中，遺傳學電腦集團，575科學博士，Madison,Wis.)，或藉由檢查而進行，且藉由各種方法產生之最良好對準(意即，於比較窗口上造成最高百分比之序列類似性)係經選擇。"序列同一性"一詞係意謂兩個多核苷酸序列於比較窗口上係為相同(意即，在核苷酸-對-核苷酸基準上)。"序列同一性之百分比"一詞係以下述方式計算而得，將比較窗口上兩種經最適宜對準之序列作比較，測定兩種序列中相同核酸鹼基(例如A、T、C、G、U或I)發生之位置數，以產生相配位置數，將相配位置數除以比較窗口中之總位置數(意即窗口大小)，並將其結果乘以100，而產生序列同一性之百分比。於本文中使用之術語"實質同一性"係表示多核苷酸序列之一種特徵，當在至少20個核苷酸位置之比較窗口上，常常係在至少25-50個核苷酸之窗口上，與參考序列比較時，其中多核苷酸包含具有至少85百分比序列同一性，較佳為至少90至95百分比序列同一性，更通常為至少99百分比序列同一性之序列，其中序列同一性之百分比係經由將參考序列與多核苷酸序列於比較窗口上作比較計算而得，該多核苷酸序列可包含總計為參考序列之20百分比或較低之缺失或增加。參考序列可為較大序列之子集。

當應用於多肽時，"序列同一性"一詞係意謂肽在相應位置處共用相同胺基酸。"序列類似性"一詞係意謂肽在相應位置處具有相同或類似胺基酸(意即保守取代)。"實質同一性"一詞係意謂兩種肽序列，當經最適宜對準時，譬如藉由程式GAP或BESTFIT，使用預設間隙加權，係共用至少80百分比序列同一性，較佳為至少90百分比序列同一性，更佳為至少95百分比序列同一性，或更多(例如99百分比序列同一性)。不相同殘留位置，較佳係因保守胺基酸取代而不同。"實質類似性"一詞係意謂兩種肽序列共用相應百分比之序列類似性。

於本文中使用之"實質上類似"一詞，係意謂任何在序列上具有改變之多肽，以致於功能上相當之胺基酸係用以取代多肽中之一或多個胺基酸，因此產生一種改變，其對於多肽之結合性質未具有或具有相對較少影嚮。例如，在序列內之一或多個胺基酸殘基，可被類似極性或類似大小之另一個胺基酸取代。

"實質上純"一詞係意謂目的物種為存在之主要物種(意即，在莫耳濃度基準上，其係比組合物中之任何其他個別物種較大量)，且實質上純化之離份較佳為一種組合物，其中目的物種佔所存在全部巨分子物種之至少約50百分比(在莫耳濃度基準上)。一般而言，實質上純組合物將佔存在於組合物中之全部巨分子物種之超過約80至90百分比。目的物種最佳係經純化至必須之均一性(污染物種不能在組合物中藉習用偵測方法偵測出)，其中組合物基本上包含單一巨分子物種。

為達將胺基酸取代分類為保守或非保守之目的，故將胺基酸分類如下：第I組(疏水性側鏈)：正白胺酸、met、ala、val、leu、ile；第II組(中性親水性側鏈)：cys、ser、thr；第III組(酸性側鏈)：asp、glu；第IV組(鹼性側鏈)：asn、gln、his、lys、arg；第V組(殘基影嚮鏈取向)：gly、pro；及第VI組(芳族側鏈)：trp、tyr、phe。保守取代係涉及相同種類中胺基酸間之取代。非保守取代係構成此等種類之一之成員與另一成員之交換。

得自免疫球蛋白成熟重與輕鏈之可變區域之胺基酸，係個別被指稱為Hx與Lxx，其中"x"為指定胺基酸位置之數目，根據Kabat等人，具免疫學重要性之蛋白質序列(國家衛生研究所，Bethesda,Md.(1987)與(1991))之體系(後文總稱為"Kabat"，其係以全文併於本文供參考)。Kabat列出關於各亞組抗體之許多胺基酸序列，且列出對該亞組中各殘基位置之最常存在胺基酸。Kabat使用一種對所列示序列中之每一個胺基酸指定殘基數之方法，且此指定殘基數之方法已變成此領域中之標準。Kabat氏體系可延伸至未被包含在此綱要中之其他抗體，其方式是將討論中之抗體與Kabat中之一致序列之一對準。Kabat編號系統之使用，係容易地鑒別不同抗體中相當位置處之胺基酸。例如，在人類抗體L50位置處之胺基酸，係佔據老鼠抗體胺基酸位置L50之等效位置。

"試劑"或"藥劑"術語係用以表示結合至配位體受體之生物活性分子。例如，會與VLA-4受體或VCAM-1免役反應之抗體或其片段，可在病患中以統計學上顯著量用以促進髓鞘再形成及/或減少麻痺。可用以結合細胞表面受體之肽或擬肽或相關化合物亦意欲涵蓋在內，並可藉此項技藝中已知之方法以合成方式製成。會與VLA-4受體反應之如本文中所討論或對熟諳此藝者為顯而易見之其他試劑，亦意欲涵蓋在內。

於本文中使用之"髓鞘再形成劑"係指在病患中以統計學上顯著量促進髓鞘再形成及/或減少麻痺之任何藥劑。此種藥劑較佳係包括免疫球蛋白(例如抗體、抗體片段及以重組方式產生之抗體或其片段)、多肽(例如對整合素之配位體蛋白質之可溶性形式)及小分子，其在以有效量投藥時，係在病患中抑制脫髓鞘作用及/或促進髓鞘再形成。其當以有效量對病患投予時，亦可造成麻痺之減少。此等藥劑可選自抗-α 4整合素劑(較佳為抗-α4 β拮抗劑)與抗-VCAM-1劑。但是，參照本發明，此種抗-α4整合素與抗-VCAM-1劑僅包括當以有效量投藥時，會抑制脫髓鞘作用及/或促進髓鞘再形成及/或減少麻痺者。

於本文中使用之"抗-α-4整合素劑"一詞，係指任何專一性地結合至包含α-4亞單位之整合素，且抑制整合素之活性藥劑。

"整合素拮抗劑"一詞包括任何抑制含α-4亞單位之整合素與整合素配位體及/或受體結合之藥劑。整合素拮抗劑較佳係抑制α-4 β-1二聚體結合至其同源配位體。此種拮抗劑可包括抗整合素抗體或含抗體同系物之蛋白質以及其他分子，譬如對整合素之配位體蛋白質之可溶性形式。對含α-4亞單位整合素之配位體蛋白質之可溶性形式，包括可溶性VCAM-1、VCAM-1融合蛋白質或雙官能性VCAM-1/Ig融合蛋白質。例如，可投予整合素配位體或其片段之可溶性形式，以結合至整合素，且較佳係競爭細胞上之整合素結合位置，藉以導致類似投予拮抗劑之作用，譬如抗-整合素(例如VLA-4)抗體。特定言之，會結合配位體但不會誘出整合素依存性發出訊息之可溶性整合素突變型，係被包含在本發明之範圍內。

所謂"那塔利諸馬(natalizumab)"或"Antegren^®"係指一種抵抗VLA-4之人化抗體，如在共同擁有之美國專利5,840,299與6,033,665中所述者，其係以全文併於本文供參考。亦意欲涵蓋於本文中者為其他VLA-4專一抗體。此種髓鞘再形成抗體與免疫球蛋白包括但不限於美國專利6,602,503與6,551,593，已公告之美國專利申請案20020197233(Relton等人)中所述之免疫球蛋白，且如進一步於本文中所討論者。

於本文中使用之"功效"一詞，就慢性劑量服用法而論，係指特定治療服用法之有效性。功效可以此疾病過程對本發明藥劑回應之改變為基礎進行度量。例如，在MS之治療上，功效可藉由復發-減輕MS上之復發頻率，及藉由當使用譬如MRI之方法偵測時，於中樞神經系統中新損傷之存在或不存在而度量。

於本文中使用之"成功"一詞，就慢性治療服用法而論，係指特定治療服用法之有效性。這包括功效、毒性(例如配方或劑量單位之副作用與病患容許度)、病患順應性等之平衡。對於被認為"成功"之慢性投藥服用法而言，其必須使病患照顧與功效之不同方面達成平衡，以產生最有利之病患結果。

於本文中使用之術語"專一性地結合"或"結合專一性"係指其中專一性結合對之一個成員，不會對於其專一結合配對物以外之分子顯示任何顯著結合之狀況(例如，對其結合配對物之親和力為約1000x或更多)。於本發明中，小化合物，譬如N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯，將不會對α-4整合素或包含α-4整合素之受體以外之任何多肽顯示顯著結合。例如，於本發明方法中使用，而以結合親和力大於0.3nM結合至α-4整合素之小化合物，係被稱為專一性地結合至α-4整合素。

於本文中使用之術語"誘出免疫回應"與"誘出宿主免疫回應"，係指在引進本發明藥劑至病患時，在病患中對包含α-4整合素之受體，產生免疫回應。於病患中之免疫回應，其特徵可為與α-4整合素受體之血清反應性，其係為未經治療病患之至少兩倍，更佳為未經治療病患反應性之三倍，且又更佳為未經治療病患反應性之至少四倍，其中血清免疫反應性係使用大約1：100之血清稀釋液度量。

"藥學上可接受之載劑或賦形劑"一詞係意指用以形成一部份配方之任何化合物，其係意欲僅充作載劑，意即，本身並不意欲具有生物學活性。藥學上可接受之載劑或賦形劑大致上為安全、無毒性，且既非於生物上亦非在其他方面是不期望的。藥學上可接受之載劑或賦形劑，當在本專利說明書與申請專利範圍中使用時，係包括一種及超過一種之此種載劑。

術語"治療"與"治療處理"及其類似術語係使用於本文中，以一般性地意指獲得所要之藥理學與生理學作用。更明確言之，本文中所述用以治療具有脫髓鞘疾病或症狀之病患之試劑，會造成下列之一或多個：(1)阻止脫髓鞘作用；(2)抑制脫髓鞘作用；(3)促進髓鞘再形成；(4)減緩或停止麻痺；及(5)減少/使麻痺逆轉。因此，此作用可為預防性，以預防或部份預防疾病，其病徵或症狀為觀點，及/或可為治療性，以部份或完全治癒疾病、症狀、病徵或歸因於疾病之不利作用為觀點，依被治療之症狀或疾病而定。於本文中使用之"治療處理"一詞係涵蓋哺乳動物特別是人類中疾病之任何治療，且包括：(a)在可能易罹患疾病但尚未被診斷為具有該疾病之病患中預防疾病發生；(b)抑制疾病，意即遏制其發展；或(c)舒解疾病，意即造成疾病及/或其病徵或症狀之退化。本發明係針對治療患有相關於病理學發炎之疾病之病患。本發明係涉及預防、抑制或舒解歸因於病理學發炎與脫髓鞘作用歷經一段長時間之不利作用，及/或因對存在於生物系統中歷經一段長時間之不適當發炎之生理回應所造成者。

所謂"治療上有效量"係指於本文中所揭示之藥劑、試劑或試劑組合之量，當投予哺乳動物時，係足以在動物中以統計學上顯著之量，促進哺乳動物細胞髓鞘再形成，及/或減少麻痺。

所謂"髓鞘再形成有效量"一詞係指藥劑、試劑或組合物之量有效抑制病患中之脫髓鞘作用及/或促進髓鞘再形成，及/或減少麻痺。"髓鞘再形成有效量"係依化合物或組合物，欲被治療之特定疾病及其嚴重性，及欲被治療哺乳動物之年齡、體重等而改變。

所謂"慢性投藥"係指本發明藥劑、試劑或組合療法之投藥，其量與週期性會造成下列之一或多種：(1)在具有脫髓鞘疾病或症狀之病患中減少麻痺；(2)在具有脫髓鞘疾病或症狀之病患中停止麻痺之進展；(3)在具有脫髓鞘疾病或症狀之病患中促進髓鞘再形成；及(4)在具有脫髓鞘疾病或症狀之病患中預防脫髓鞘作用。投藥較佳為隔週、每週、每月或隔月，但可為每日。更佳情況是，治療為每週或每月，且係投藥6個月至數年或病患之餘年，依被治療之疾病或症狀而定。

式I,IA,IB,IC,II,IIA及IIB化合物有關聯之其他定義，均如其中之定義。

2.本發明之一般方面

本發明係基於令人驚訝之結果，一種被稱為選擇性黏連分子抑制劑(SAMI)之剛出現新穎化合物類型之慢性投藥，係以致使促進髓鞘再形成之方式，提供炎性回應之適當控制。現有抑制劑尚未能提供此種在炎性回應上之控制，且疾病繼續進展。本發明人於本文中所要顯示者，為一種小化合物，較佳係以式I與II化合物為例，較佳為式IB、IC及IIB，其可用於治療此種病理學發炎。此等小化合物可使用慢性劑量服用法或短期劑量服用法投藥。但是，慢性劑量服用法較佳係保持病理學發炎之壓抑。因此，為使本發明一些較重要之優點得以實現，則髓鞘再形成劑之含量必須被保持數個月或甚至數年。

在一般意義中，本發明之方法並未涉及任何特定投藥模式，因為投藥模式係依活性劑與被發展以投予活性劑之配方之形式而定。投藥模式包括口腔、非經腸(例如皮下、硬膜下、靜脈內、肌內、鞘內、腹膜腔內、大腦內、動脈內或病灶內投藥途徑)、局部、定位(例如手術應用或外科栓劑)、直腸及肺(例如氣溶膠、吸入或粉末)。投藥途徑較佳為非經腸。投藥途徑係基於被投予之組合物(例如，免疫球蛋白係以靜脈內方式投予，對小化合物係以經口方式投予)、組織瞄靶(例如椎管內投藥，以瞄準脊髓損傷之位置)等，如一般技術之技工所習知者。

此外，髓鞘再形成劑可與用以治療、改善或舒減與脫髓鞘症狀或疾病有關聯之病徵之其他化合物或組合物併用。再者，於本文中所揭示之化合物可單獨投藥或併用其他藥劑，譬如其他髓鞘再形成劑，包括抗體及其免疫學上活性片段(例如那塔利諸馬(natalizumab))。當合併投藥時，該小化合物可在與此等其他化合物或組合物相同之配方中，或在個別配方中投藥。當合併投藥時，髓鞘再形成劑抗體相較於小化合物髓鞘再形成劑、其他化合物及組合物，一般係在個別配方中投藥。當合併投藥時，髓鞘再形成劑可在用以治療、改善或舒減病徵之其他化合物與組合物之前、之後或與其同時投藥。本發明之一般概念係關於引進相對較固定量之活性劑至病患之循環系統中，歷經數月或數年期間。髓鞘再形成劑之此種慢性投藥，係為提供在病理學發炎上之適當控制，被保持在固定程度下歷經一段時間。藉由保持活性劑之治療含量歷經一段時間，病理學發炎可在病患中以慢性方式被壓抑。

在極特定意義中，本發明係涉及在人類病患中，獲得及保持包含α-4整合素之二聚體之受體飽和含量在約65%至100%之範圍內，更佳係在75%與100%之間，且又更佳係在80-100%之間。此等受體飽和含量係以慢性方式(例如歷經6個月左右期間)保持在此等含量下，以允許持續壓抑病理學發炎。

一般而言，髓鞘再形成劑可選自專一性地結合至α-4-整合素或專一性地結合α-4-整合素之藥劑。例如，於本發明方法中所使用之小化合物可選自具有對α-4-整合素之結合親和力為0.3至3nM之化合物。抗體，譬如那塔利諸馬(natalizumab)，其具有對α-4-整合素之結合親和力為約0.2至約0.4nM，亦可經選擇。

於本發明之另一方面，本文中所述之化合物與組合物可用以抑制免疫細胞由血流潛移至中樞神經系統，例如在多發性硬化之情況中，或潛移至會造成髓磷脂之炎性所引致破壞之區域。此等藥劑或試劑較佳係以抑制脫髓鞘作用及進一步可促進髓鞘再形成之方式，抑制免疫細胞潛移。藥劑或試劑亦可對於先天性代謝病症，其中浸潤之免疫細胞會影嚮髓磷脂外鞘之發展，主要係在CNS中，預防脫髓鞘作用，並促進中樞神經系統之髓鞘再形成。當試劑被投予具有由脫髓鞘疾病或症狀所引致之麻痺之病患時，較佳亦會減少麻痺。

3.對於治療之適應徵

被包括以藉由本文中所揭示之組合物、化合物及方法治療之炎性疾病，一般係包括關於脫髓鞘作用之症狀。於組織學上，髓磷脂異常係為無論是脫髓鞘或不良髓鞘形成。脫髓鞘作用係意謂髓磷脂之破壞。不良髓鞘形成係指由於寡樹突膠質細胞機能障礙所造成之髓磷脂不健全形成或維持。於本文中所揭示之組合物與方法較佳係意欲治療關於脫髓鞘作用之疾病與症狀，並幫助髓鞘再形成。意欲被涵蓋以進行治療之其他疾病或症狀，包括腦膜炎、腦炎及脊髓傷害，以及一般係由於炎性回應之結果而引致脫髓鞘作用之症狀。於本文中所揭示之化合物、組合物及方法，並非針對其中有例如基因缺陷而導致不適當髓磷脂形成例如不良髓鞘形成之疾病與症狀。

於本文中所揭示之組合物、化合物及藥液係意欲用於治療與脫髓鞘作用有關聯之症狀與疾病。涉及脫髓鞘作用之疾病與症狀，包括但不限於多發性硬化、先天性代謝病症(例如苯丙酮酸尿症、泰薩氏幼年型黑矇白癡病、Niemann-Pick疾病、高歇氏病、Hurler氏徵候簇、Krabbe氏疾病及其他腦白質病變)、具有異常髓鞘形成之神經病(例如Guillain Barre、慢性免疫脫髓鞘多神經病(CIDP)、多病灶CIDP、抗-MAG徵候簇、GALOP徵候簇、抗硫酸腦苷脂抗體徵候簇、抗-GM2抗體徵候簇、POEMS徵候簇、神經束衣炎、IgM抗-GD1b抗體徵候簇)、藥物相關之脫髓鞘作用(例如因為氯喹、FK506、心舒寧、普魯卡因醯胺及吉梅定(zimeldine)之投藥所造成)、其他遺傳性脫髓鞘症狀(例如碳水化合物缺乏糖蛋白、Cockayne氏徵候簇、先天性低髓鞘形成、先天性肌肉營養不良、Farber氏疾病、Marinesco-Sjogren徵候簇、變色腦白質病變、Pelizaeus-Merzbacher疾病、Refsum疾病、朊病毒相關之症狀及Salla疾病)及其他脫髓鞘症狀(例如腦膜炎、腦炎或脊髓損傷)或疾病。

有各種可用以在活體內研究此等疾病之疾病模式。例如，動物模式係包括但不限於：

3.1.多發性硬化

最常見之脫髓鞘疾病為多發性硬化，但許多其他代謝與炎性病症會造成缺乏或異常髓鞘形成。MS為慢性神經疾病，其係出現於早期之成人期，並在大部份病例中進展至顯著病廢。單單在美國就有大約350,000件MS病例。除了創傷之外，MS為在早期至中期成人期中神經病病廢之最常見原因。

MS之原因尚未被測得。MS之特徵為慢性發炎、脫髓鞘作用及神經膠樣變性(傷疤)。脫髓鞘作用可能會對於軸索傳導造成無論是陰性或陽性作用。陽性傳導異常包括減緩之軸索傳導、於脈衝之高而不低頻率群存在下發生之可變傳導阻斷或完全傳導阻斷。陽性傳導異常包括異位脈衝產生，自發性地或在機械應力之後，及在脫髓鞘表現序列間之異常"串擾"。

在實驗過敏性腦脊髓炎中，已發現對於無論是髓磷脂鹼性蛋白質(MBP)或髓磷脂蛋白脂質蛋白質(PLP)之髓磷脂蛋白質具有反應性之T細胞，係媒介CNS發炎。亦已發現病患具有提高含量之CNS免疫球蛋白(Ig)。進一步可能情況是，在MS中發現之一些組織傷害係藉由經活化之T細胞、巨噬細胞或星形細胞之細胞活素產物所媒介。

目前，80%被診斷患有MS之病患，在疾病展開後可生活20年。處理MS之療法，包括(1)以疾病過程之修正為目的之治療，包括急性惡化及針對疾病長期壓抑之治療；(2)MS病徵之治療；(3)醫療併發症之預防與治療，及(4)續發之個人與社會問題之處理。

MS之展開可為急驟的，或太過溫和以致不會造成病患尋求醫療照顧。最常見病徵包括一或多個四肢虛弱、由於視神經炎所致之視覺模糊、感覺失調、複視及失調症。疾病之過程可被分層，成為三種一般類別：(1)復發MS，(2)慢性漸進式MS，及(3)不活性MS。復發MS之特徵為神經病機能障礙之再發作。MS發作一般係引出歷經數天至數週，接著可完全、部份或不回復。自發作回復一般係發生在病徵最高峰之數週至數個月內，惟一些回復極少可持續2或較多年。

慢性漸進式MS會造成逐漸漸進式惡化，而無安定化或緩和時期。此形式係在具有先前復發MS病歷之病患中發展，惟在20%之病患中不會喚起復發。急性復發亦可發生於漸進式過程期間。

第三種形式為不活性MS。不活性MS之特徵為可變程度之固定神經不足。患有不活性MS之大部份病患具有較早期之復發MS病歷。

疾病過程亦依病患之年齡而定。例如，有利預後因素包括早期展開(排除童年)、展開後5年之復發過程及極少殘留病廢。比較上而言，不良預後係與較遲展開年齡(意即40歲或更老)及漸進式過程有關聯。此等變數係互相依存，因為慢性漸進式MS傾向於在比復發MS較晚之年齡開始。得自慢性漸進式MS之病廢，通常係由於病患中之漸進式截癱或四癱(麻痺)所致。於本發明之一方面，病患較佳係在當病患處於緩解期時被治療，而非在疾病之復發階段。

無論是親腎上腺皮質激素或口服皮質類固醇(例如口服潑尼松或靜脈內甲基氫化潑尼松)之短期使用，係為治療具有急性惡化MS之病患之唯一特定治療措施。

對於MS之較新療法包括以干擾素β-1b、干擾素β-1a及Copaxone^®(以前稱為共聚物1)治療病患。此三種藥物已証實會顯著地降低疾病之復發率。此等藥物係以肌內方式或皮下方式自行投藥。

但是，沒有一種現行治療形態可抑制脫髓鞘作用，遑論促進或允許自發性髓鞘再形成或減少麻痺。本發明之一方面係意欲涵蓋以本文中所揭示之藥劑治療MS，無論單獨或併用其他標準治療形態。

3.2.先天性代謝病症

先天性代謝病症包括苯丙酮酸尿症(PKU)及其他胺基酸性尿、泰薩氏幼年型黑矇白癡病、Niemann-Pick疾病、高歇氏病、Hurler氏徵候簇、Krabbe疾病及其他會衝擊發展中外鞘之腦白質病變，如更完整地於下文中所描述者。

PKU為新陳代謝作用之遺傳錯誤，因酵素苯丙胺酸羥化酶缺乏所造成。此種酵素之喪失會造成精神遲延、器官傷害、不尋常姿勢，且在母親PKU之情況中，可嚴重地危害懷孕。關於研究PKU之模式已在老鼠中發現。經確認具有PKU之幼兒較佳係被維持在不含或降低苯丙胺酸之食物療法下。本發明之一方面係併用此種食物療法與本文中所揭示之化合物與組合物，以預防脫髓鞘作用，並使由於PKU而受到傷害之細胞髓鞘再形成。

古典泰薩氏幼年型黑矇白癡病係出現在約6個月大之病患中，且最後將造成病患在5歲時死亡。此疾病係由於酵素己糖胺酶A(hex A)之缺少所致，其係為使腦部與神經細胞中之某些脂肪物質降解所必須。於此酵素不存在下，此等物質會蓄積，並導致神經細胞破壞。hex A酵素缺乏之另一種形式係發生於稍後之生命中，且被稱為hex A缺乏之幼年慢性與成年展開形式。病徵係類似古典泰薩氏幼年型黑矇白癡病之特徵。亦有此酵素缺乏之成年展開形式。目前沒有任何對於該疾病/缺乏之治癒或治療，只有在子宮內測試胎兒關於該疾病之預防措施。因此，本文中所揭示之化合物與組合物可用於改善或預防細胞之破壞。

Niemann-Pick疾病係落在三種分類中：急性嬰兒形式，B型較不常見，為慢性非神經病形式，及C型為該疾病之生物化學上與遺傳上不同形式。在正常個體中，細胞膽固醇係被輸入溶酶體中以進行處理，然後被釋出。取自患有Niemann-Pick之病患之細胞，已被証實在膽固醇自溶酶體釋出上有缺陷。這會導致膽固醇過度積聚在溶酶體內部，造成處理錯誤。已發現NPC1具有類似其他蛋白質中之已知硬脂醇感測區域，這指出其係在調節膽固醇運輸量上扮演一項角色。對於Niemann-Pick之類型A與C形式，沒有任何成功療法已被確認。對C型而言，係建議病患按照低膽固醇膳食。因此，本文中所揭示之化合物與組合物可用於改善或預防細胞之破壞。

高歇氏病係為因基因突變所造成之遺傳病。於正常情況下，此基因係負責身體所必須而被稱為葡糖腦苷脂酶之酵素，以分解脂肪葡糖腦苷脂。在患有高歇氏病之病人中，身體不能夠適當地產生此種酵素，且該脂肪不能被分解。就像泰薩氏幼年型黑矇白癡病一樣，高歇氏病係相當較常見於來自東歐之猶太人後代(Ashkenazi)，惟來自任何種族之個體均可能患有。在Ashkenazi猶太人口中，高歇氏病為最常見之遺傳病症，其中發生率為大約450個人中1人。在一般大眾中，高歇氏病會影嚮大約100,000個人中之1人。

在1991年，酵素替補療法變成可以採用作為關於高歇氏病之第一個有效治療。此治療包括以靜脈內方式給予之葡糖腦苷脂酶之經修改形式。預期本文中所揭示之組合物與化合物可單獨使用，或更佳係併用葡糖腦苷脂酶投藥，以在患病病人中治療該疾病。

Hurler氏徵候簇亦被稱為黏多醣症類型I，為一種重疊疾病。此等遺傳疾病共同擁有黏多醣在纖維母細胞中之細胞蓄積。此等疾病為遺傳上可區別。纖維母細胞與骨髓移植似乎沒有幫助，因此，需要可用於改善疾病嚴重性與進展之化合物與組合物。本文中所揭示之化合物與組合物可被投予病患，以改善疾病進展及/或嚴重性。

Krabbe氏疾病(亦稱為球狀細胞腦白質病變)為正染色體隱性症狀，由於半乳糖基神經醯胺酶(或半乳糖腦苷脂酶)缺乏所造成，其為一種使髓磷脂之主要脂質成份分解代謝之溶酶體酵素。在法國之發生率估計為1：150,000個新生兒。此疾病會導致中樞與末梢神經系統之脫髓鞘作用。展開一般係發生於生命之第一年期間，且症狀為迅速漸進式，但幼年、青年期或成人展開形式亦已被報告，具有較可變之進展速率。診斷係從酵素檢測(半乳糖基神經醯胺酶缺乏)建立。有數種天然動物模式(老鼠、狗、猴子)。Krabbe氏疾病，如同所有腦白質病變，未有已知治癒或有效治療。本發明之一項具體實施例係使用本文中所揭示之組合物與化合物，以治療或改善Krabbe氏疾病及其他腦白質病變。

腦白質病變為一組遺傳決定之漸進式病症，其係影嚮腦部、脊髓及末梢神經。其包括腎上腺腦白質病變(ALD)、腎上腺脊髓神經病(AMN)、Aicardi-Goutiers徵候簇、Alexander氏疾病、CACH(意即具有中樞神經系統低髓鞘形成或消失白質疾病之童年失調症)、CADASIL(意即大腦正染色體主動脈病，具有皮質下梗塞與白腦病)、Canavan疾病(海棉狀變性)、腦腱黃瘤病(CTX)、Krabbe氏疾病(上文所討論者)、變色腦白質病變(MLD)、新生兒腎上腺腦白質病變、卵巢腦白質病變徵候簇、Pelizaeus-Merzbacher疾病(X-連結之痙攣性截癱)、Refsum疾病、van der Knaap徵候簇(具有皮質下囊腫之空泡形成腦白質病變)及Zellweger徵候簇。該疾病均無有效治療，更不用說是治癒。因此，治療或改善疾病病徵之方式，譬如利用本文中所揭示之組合物與化合物，是必須的。

3.3.具有異常髓鞘形成之神經病

有多種慢性免疫多神經病存在，其會在病患中造成脫髓鞘作用。症狀展開之年齡會隨著症狀而改變。關於此等疾病之標準治療係存在，且可與本文中所揭示之組合物及化合物併用。或者，所揭示之組合物與化合物可單獨使用。現行標準療法包括下列：

3.4.藥物與輻射所引致之脫髓鞘作用

某些藥物與輻射可在病患中引致脫髓鞘作用。負責脫髓鞘作用之藥物，包括但不限於氯喹(chloroquine)、FK506、心舒寧(perhexiline)、普魯卡因醯胺及吉梅定(zimeldine)。

輻射亦可引致脫髓鞘作用。由於輻射所致之中樞神經系統(CNS)毒性，咸認係因以下所造成，(1)對血管結構之傷害，(2)寡樹突膠質細胞-2星形細胞原始粒子與成熟寡樹突膠質細胞之缺失，(3)於海馬、小腦及皮質中之神經幹細胞群集之缺失，及細胞活素表現之一般化改變。大部份輻射傷害係由於某些癌症治療期間投予之放射療法所造成。關於回顧，可參閱Belka等人，2001 Br.J.Cancer 85：1233-9。但是，輻射曝露亦可為太空人(Hopewell,1994 Adv.Space Res.14：433-42)，以及在曝露至放射性物質之情況中之問題。

已接受藥物或已意外地或故意地曝露至輻射之病患，可歷經一項利益，其方式是投予本文中所揭示化合物或組合物之一，以阻止脫髓鞘作用或促進髓鞘再形成。

3.5.涉及脫髓鞘作用之遺傳性症狀

會造成脫髓鞘作用之其他遺傳徵候簇/疾病，包括Cockayne氏徵候簇、先天性低髓鞘形成、Farber氏疾病、變色腦白質病變、Peliszaeus-Merzbacher疾病、Refsum、朊病毒相關之症狀及Salla疾病。

Cockayne氏徵候簇(CS)為少見遺傳病症，其中人們係對陽光敏感，具有短身高，且具有過早老化之外觀。在Cockayne氏徵候簇之古典形式(類型I)中，病徵為漸進式，且典型上係在一歲後變得顯而易見。Cockayne氏徵候簇之早期展開或先天性形式(類型II)係在出生時出現。令人感興趣的是，不像其他DNA修補疾病，Cockayne氏徵候簇並未連結至癌症。CS為多系統病症，其會體系胞與腦部之深遠生長破壞，與漸進惡病質，視網膜、耳蝸及神經病變性，其中在癌症中腦白質病變與脫髓鞘神經病不會增加。於曝露至UV(例如陽光)後，具有Cockayne氏徵候簇之病患可以不再進行轉錄偶合修補。至目前為止，已確認Cockayne氏徵候簇中欠缺之兩種基因，CSA與CSB。CSA基因已在染色體5上發現。兩種基因均對會與轉錄機制之成份及與DNA修補蛋白質交互作用之蛋白質進行編碼。

迄今，對於患有此疾病之病患，沒有任何已被確認之治癒或有效治療。因此，本發明之一方面係以本文中所揭示之化合物與組合物治療此疾病。

先天性低髓鞘形成具有數種名稱，包括先天性不良髓鞘形成神經病、先天性低髓鞘形成多神經病、先天性低髓鞘形成(洋葱球)多神經病、先天性低髓鞘形成神經病、因低髓鞘形成所造成之先天性神經病、低髓鞘形成神經病及CHN。在人類之最常見遺傳病症中，遺傳性末梢神經病為一種會產生末梢神經漸進退化之複雜、臨床上及遺傳上龐雜病症組群。先天性低髓鞘形成為病症組群之一。此組群包括遺傳性神經病，具有傾向於對壓力麻痺，Charcot-Marie-Tooth疾病、Dejerine-Sottas徵候簇及先天性低髓鞘形成神經病。對於任何此等病症沒有已知治癒或有效治療。

Farber氏疾病具有數種名稱，包括：Farber脂肉芽腫病、神經醯胺酶缺乏、酸神經醯胺酶缺乏、AC缺乏、N-月桂基神經鞘胺醇脫醯基酶缺乏及N-醯基神經鞘胺醇醯胺基水解酶。正如某些名稱所顯示，該疾病係由於酸神經醯胺酶(亦稱為N-醯基神經鞘胺醇醯胺基水解酶，ASAH)之缺乏而發生。該酶之缺少會造成非磺酸化酸性黏多糖在神經元與神經膠質細胞中之蓄積。具有此疾病之病患通常死於2歲以前。

變色腦白質病變(MLD)為一種因酵素芳基硫酸酯酶A缺乏所造成之遺傳病症。其係為一種被稱為腦白質病變之遺傳病症組群之一，其係影嚮髓磷脂外鞘之生長。MLD有三種形式：嬰兒晚期、幼年及成人。在嬰兒晚期形式中，其係為最常見，病徵之展開係在6個月與2歲之間開始。嬰兒通常在出生時為正常，但最後喪失先前獲得之能力。病徵包括張力過弱(低肌肉緊張度)、語言能力異常、精神能力喪失、失明、僵硬性(意即未經控制之肌肉緊密)、搐搦、受傷害之吞服能力、麻痺及癡呆症。幼年形式之病徵係在4與14歲之間開始，且包括減弱之學校表現、精神退化、失調症、猝發及癡呆症。在成年形式中，16歲後開始之病徵可包括受傷害之專心、抑鬱、精神病學障礙、失調、震顫及癡呆症。猝發可發生在成年形式中，但比其他形式較不常見。在全部三種形式中，精神退化通常為第一個跡象。

Peliszaeus-Merzbacher疾病(亦被稱為出生前後嗜蘇丹腦白質病變)為一種造成蛋白脂質蛋白質異常之X-連結遺傳病症。此異常會造成嬰兒之死亡，典型上在一歲之前。沒有關於此疾病之任何已知治療或治癒。

Refsum疾病(亦被稱為植烷酸氧化酶缺乏、多發神經炎型動作失調性遺傳病或遺傳性運動與感覺神經病IV(HMSN IV))係因基因中之突變所造成，其係使植烷醯基-CoA羥化酶(PAHX或PHYH)編碼。主要臨床特徵為色素性視網膜炎、慢性多神經病及小腦跡象。植烷酸，為不尋常分枝鏈脂肪酸(3,7,11,15-四甲基-十六酸)，其係蓄積在患有此疾病之病患組織與體液中，且由於缺少PAHX而不能夠被代謝。每月進行一次或兩次之血漿除去法，係有效地將此酸自身體移除，並允許限制植烷酸攝取之飲食限制解放。

朊病毒相關之症狀包括Gerstmann-Straussler疾病(GSD)、Creutzfeldt-Jakob疾病(CJD)、家族性致死失眠症，且朊病毒蛋白質之迷行異構重組物可在此等病症以及在庫魯病與羊搔癢症(一種在綿羊中發現之疾病)中，充作傳染劑。此朊病毒術語係衍生自"蛋白質傳染劑"(Prusiner,Science 216：136-44,1982)。有朊病毒相關蛋白質(PRP)之蛋白分解性分裂作用，其會造成澱粉狀蛋白原肽，其會聚合成不溶性原纖維。

Salla疾病及其他類型之涎尿，係為涉及關於唾液酸儲存問題之疾病。其係為正染色體隱性神經變性病症，可以嚴重嬰兒形式(意即ISSD)或以盛行於芬蘭之慢慢漸進成年形式(意即Salla疾病)呈現。主要病徵為張力過弱、小腦失調症及精神遲延。對於舒減或改善治療，此等症狀與疾病亦意欲涵蓋在內。

3.6.其他脫髓鞘症狀

其他會造成脫髓鞘作用之症狀，包括感染後腦炎(亦稱為急性散佈性腦脊髓炎ADEM)、腦膜炎及對脊髓之傷害。於本文中所揭示之組合物與化合物亦預期用於治療此等其他脫髓鞘症狀。

4.髓鞘再形成劑

根據本發明，髓鞘再形成劑可選自專一性地結合至α-4-整合素之藥劑。具有結合並抑制α-4整合素能力之各種類型藥劑可為髓鞘再形成劑，且因此可用於本發明之實施上。許多此種α-4-整合素拮抗劑已被確認並經特徵鑒定，且特定藥劑係描述於下文中。此等α-4-整合素拮抗劑可對於髓鞘再形成活性進行篩檢。明確言之，此等藥劑可包括小化合物與多肽(例如免疫球蛋白)兩者。在本文中所揭示之陳述內容下，熟諳此藝者將能夠鑒別其他將能夠以生物學上擬似或類似特別描述藥劑之方式抑制包含α-4-整合素二聚體之藥劑，以抑制脫髓鞘作用及/或促進髓鞘再形成及/或減少麻痺。本發明係意欲包括此種藥劑之慢性投藥。由於亦意欲包括藥劑之組合，故亦提供小化合物以外藥劑之討論。

4.1化合物

各種化合物已被確認為干擾VLA-4與VCAM-1結合之藥劑。某些此等化合物，當以有效量投予病患時，會抑制脫髓鞘作用及/或促進髓鞘再形成及/或減少麻痺。根據本發明之化合物包括下文段落4.1.1中所述之式I,IA,IB,IC,II,IIA及IIB內之化合物。

4.1.1.式I與式II化合物

於一方面，可作為髓鞘再形成劑利用之化合物，係為被下式I定義之化合物。此等化合物具有對VLA-4之結合親和力，當藉由IC₅₀表現時為約15μM或較小(按下文實例A中所述度量)，並充作髓鞘再形成劑：其中R¹係選自包括烷基、經取代之烷基、芳基、經取代之芳基、環烷基、經取代之環烷基、雜環族、經取代之雜環族、雜芳基及經取代之雜芳基；R²係選自包括氫、烷基、環烷基、經取代之環烷基、環烯基、經取代之環烯基、雜環族、經取代之雜環族、經取代之烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基，且R¹與R²和結合至R²之氮原子與結合至R¹之SO₂基團一起，可形成雜環族或經取代之雜環族基團；R³係選自包括氫、烷基、經取代之烷基、環烷基、經取代之環烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族，而當R²不形成雜環族基團時，其中R¹、R²及R³和結合至R²之氮原子與結合至R³之碳原子一起，可形成雜環族或經取代之雜環族基團；R⁵為-(CH₂)_x-Ar-R^5’，其中R^5’係選自包括-O-Z-NR⁸R^8’與-O-Z-R^8”，其中R⁸與R^8’係獨立選自包括氫、烷基、經取代之烷基、環烷基、經取代之環烷基、雜環族、經取代之雜環族，且其中R⁸與R^8’係接合而形成雜環或經取代之雜環，R^8”係選自包括雜環與經取代之雜環，且Z係選自包括-C(O)-與-SO₂-；Ar為芳基、雜芳基、經取代之芳基或經取代之雜芳基；x為1至4之整數；Q為-C(X)NR⁷-，其中R⁷係選自包括氫與烷基；且X係選自包括氧與硫；及其藥學上可接受之鹽。

於另一項具體實施例中，此等化合物可以前體藥物提供，其係在活體內轉化(例如水解、生物代謝等)成上文式I化合物。於此種具體實施例之一項較佳實例中，式I化合物之羧酸基係經改質成將在活體內轉化成羧酸基(包括其鹽)之基團。於一項特佳具體實施例中，此種前體藥物係以式IA化合物表示：其中：R¹係選自包括烷基、經取代之烷基、芳基、經取代之芳基、環烷基、經取代之環烷基、雜環族、經取代之雜環族、雜芳基及經取代之雜芳基；R²係選自包括氫、烷基、環烷基、經取代之環烷基、環烯基、經取代之環烯基、雜環族、經取代之雜環族、經取代之烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基，且R¹與R²和結合至R²之氮原子與結合至R¹之SO₂基團一起，可形成雜環族或經取代之雜環族基團；R³係選自包括氫、烷基、經取代之烷基、環烷基、經取代之環烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族，且當R²不形成雜環族基團時，其中R¹、R²及R³和結合至R²之氮原子與結合至R³之碳原子一起，可形成雜環族或經取代之雜環族基團；R⁵為-(CH₂)_x-Ar-R^5’，其中R^5’係選自包括-O-Z-NR⁸R^8’與-O-Z-R^8”，其中R⁸與R^8’係獨立選自包括氫、烷基、經取代之烷基、環烷基、經取代之環烷基、雜環族、經取代之雜環族，且其中R⁸與R^8’係接合而形成雜環或經取代之雜環，R^8”係選自包括雜環與經取代之雜環，且Z係選自包括-C(O)-與-SO₂-； Ar為芳基、雜芳基、經取代之芳基或經取代之雜芳基；x為1至4之整數；R⁶係選自包括2,4-二酮基-四氫呋喃-3-基(3,4-烯醇)、胺基、烷氧基、經取代之烷氧基、環烷氧基、經取代之環烷氧基、-O-(N-琥珀醯亞胺醯基)、-NH-金鋼烷基、-O-膽基-5-烯-3-β-基、-NHOY，其中Y為氫、烷基、經取代之烷基、芳基及經取代之芳基，-NH(CH₂)_pCOOY，其中p為1至8之整數，且Y係如上文定義，-OCH₂NR⁹R¹⁰，其中R⁹係選自包括-C(O)-芳基與-C(O)-經取代之芳基，且R¹⁰係選自包括氫與-CH₂COOR¹¹，其中R¹¹為烷基及-NHSO₂Z'，其中Z'為烷基、經取代之烷基、環烷基、經取代之環烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族及經取代之雜環族；Q為-C(X)NR⁷-，其中R⁷係選自包括氫與烷基；且X係選自包括氧與硫；及其藥學上可接受之鹽，具有下列附帶條件(A)當R¹與R²和懸垂至R¹之SO₂基團與懸垂至R²之氮一起形成糖精-2-基，R³為-CH₃，R⁵為對-[(CH₃)₂NC(O)O-]苄基，且Q為-C(O)NH-時，則R⁶不為-OC(CH₃)₃；(B)當R¹為對-甲基苯基，R²與R³和懸垂至R²之氮原子與懸垂至R³之碳原子一起形成衍生自D-脯胺酸之四氫吡咯基環；R⁵為衍生自D-苯丙胺酸之對-[(4-甲基六氫吡-1-基)NC(O)O-]苄基，且Q為-C(O)NH-時，則R⁶不為-OC(CH₃)₃；(C)當R¹為嘧啶-2-基，R²與R³和結合至R²之氮原子與結合至 R³之碳原子一起形成四氫吡咯基環，R⁵為對-[(CH₃)₂NC(O)O-]苄基，且Q為-C(O)NH-時，則R⁶不為-OC(CH₃)₃；及(D)當R¹為對-甲基苯基，R²與R³和懸垂至R²之氮原子與懸垂至R³之碳原子一起形成(2S)-六氫吡-2-羰基環；R⁵為對-[(CH₃)₂NC(O)O-]苄基，且Q為-C(O)NH-時，則R⁶不為-OC(CH₃)₃。

上文式I與IA化合物之進一步說明，及關於製備此等化合物之程序與反應條件，係描述於U.S.S.N.s 09/126,958(1998年7月31日提出申請，並以美國專利6,489,300發佈)中，其係以全文併於本文供參考。

在上文式I與IA化合物中，R¹較佳係選自包括烷基、經取代之烷基、芳基、經取代之芳基、雜環族、經取代之雜環族、雜芳基及經取代之雜芳基。R¹更佳係選自包括芳基、經取代之芳基、雜芳基及經取代之雜芳基。

在上文式I與IA化合物中，R¹較佳係選自包括苯基、4-甲基苯基、4-第三-丁基苯基、2,4,6-三甲基苯基、2-氟苯基、3-氟苯基、4-氟苯基、2,4-二氟苯基、3,4-二氟苯基、3,5-二氟苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、3,4-二氯苯基、3,5-二氯苯基、3-氯基-4-氟苯基、4-溴苯基、2-甲氧苯基、3-甲氧苯基、4-甲氧苯基、3,4-二甲氧基苯基、4-第三-丁氧基苯基、4-(3'-二甲胺基-正-丙氧基)-苯基、2-羧基苯基、2-(甲氧羰基)苯基、4-(H₂NC(O)-)苯基、4-(H₂NC(S)-)苯基、4-氰基苯基、4-三氟甲基苯基、4-三氟甲氧苯基、3,5-二-(三氟甲基)苯基、4-硝基苯基、4-胺基苯基、4-(CH₃C(O)NH-)苯基、4-(PhNHC(O)NH-)苯基、4-甲脒苯基、4-甲基甲脒苯基、4-(CH₃SC(=NH)-)苯基、4-氯基-3-(H₂NS(O)₂-)苯基、1-萘基、2-萘基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、嘧啶-2-基、喹啉-8-基、2-(三氟乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基、嗎福啉-4-基、2-噻吩基、5-氯基-2-噻吩基、2,5-二氯-4-噻吩基、1-N-甲基咪唑-4-基、1-N-甲基吡唑-3-基、1-N-甲基吡唑-4-基、1-N-丁基吡唑-4-基、1-N-甲基-3-甲基-5-氯基吡唑-4-基、1-N-甲基-5-甲基-3-氯基吡唑-4-基、2-噻唑基及5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基。

在上文式I與IA化合物中，R²較佳係選自包括甲基、苄基、-(CH₂)₂-2-噻吩基及-(CH₂)₂-φ。

於一項較佳具體實施例中，在上文式I與IA化合物中，R²與R³和結合至R²取代基之氮原子與結合至R³取代基之碳，一起形成4至6個環原子之雜環族基團或經取代之雜環族基團，在環中具有1至2個雜原子，選自包括氮、氧及硫，該環係視情況被1至2個取代基取代，取代基選自包括氟基、甲基、羥基、酮基(=O)、胺基、苯基、硫苯基、硫苄基、(硫代嗎福啉-4-基)C(O)O-、CH₃S(O)₂-及CH₃S(O)₂O-，或可稠合至另一個環，譬如苯基或環烷基環，以提供10至14個環原子之稠合環雜環，在環中具有1至2個雜原子，選自包括氮、氧及硫。此種雜環包括一氮四圜基(例如L-一氮四圜基)、噻唑啶基(例如L-噻唑啶基)、六氫吡啶基(例如L-六氫吡啶基)、六氫吡基(例如L-六氫吡基)、二氫吲哚基(例如L-2,3-二氫吲哚-2-基)、四氫喹啉基(例如L-1,2,3,4-四氫喹啉-2-基)、硫代嗎福啉基(例如L-硫代嗎福啉-3-基)、四氫吡咯基(例如L-四氫吡咯基)，經取代之四氫吡咯基，譬如4-羥基四氫吡咯基(例如4-α-(或β-)羥基-L-四氫吡咯基)、4-酮基四氫吡咯基 (例如4-酮基-L-四氫吡咯)、4-氟基四氫吡咯基(例如4-α-(或β-)氟-L-四氫吡咯基)、4,4-二氟四氫吡咯基(例如4,4-二氟-L-四氫吡咯基)、4-(硫代嗎福啉-4-基C(O)O-)四氫吡咯基(例如4-α-(或β-)-(硫代嗎福啉-4-基C(O)O-)-L-四氫吡咯基、4-(CH₃S(O)₂O-)四氫吡咯基(例如4-α-(或β-)(CH₃S(O)₂O-)-L-四氫吡咯基、3-苯基四氫吡咯基(例如3-α-(或β-)苯基-L-四氫吡咯基)、3-硫苯基四氫吡咯基(例如3-α-(或β-)-硫苯基-L-四氫吡咯基)、4-胺基四氫吡咯基(例如4-α-(或β-)胺基-L-四氫吡咯基)、3-甲氧基四氫吡咯基(例如3-α-(或β-)甲氧基-L-四氫吡咯基)、4,4-二甲基四氫吡咯基，經取代之六氫吡基，譬如4-N-Cbz-六氫吡基與4-(CH₃S(O)₂-)六氫吡基，經取代之噻唑啶基，譬如5,5-二甲基噻唑啶-4-基、1,1-二酮基-噻唑啶基(例如L-1,1-二酮基-噻唑啶-2-基)，經取代之1,1-二酮基-噻唑啶基，譬如L-1,1-二酮基-5,5-二甲基噻唑啶-2-基，1,1-二酮基硫代嗎福啉基(例如L-1,1-二酮基-硫代嗎福啉-3-基)等。

在上文式I與IA化合物中，Q較佳為-C(O)NH-或-C(S)NH-。

在上文式I與IA化合物中，Ar較佳為芳基或經取代之芳基，而又更佳為苯基或經取代之苯基。x較佳為1。

在上文式I與IA化合物中，R⁵較佳係選自經由以下列基團取代而出現之所有可能異構物：3-[(CH₃)₂NC(O)O-]苄基，4-[(CH₃)₂NC(O)O-]苄基，4-[(六氫吡啶-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(六氫吡啶-4'-基)C(O)O-]苄基， 4-[(1'-甲基六氫吡啶-4'-基)C(O)O-]苄基，4-[(4'-羥基六氫吡啶-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(4'-甲醯氧基六氫吡啶-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(4'-乙氧羰基六氫吡啶-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(4'-羧基六氫吡啶-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(3'-羥甲基六氫吡啶-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(4'-羥甲基六氫吡啶-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(4'-苯基-1'-Boc-六氫吡啶-4'-基)-C(O)O-]苄基，4-[(4'-六氫吡啶酮-1'-基乙烯縮酮)C(O)O-]苄基，4-[(六氫吡-4'-基)-C(O)O-]苄基，4-[(1'-Boc-六氫吡-4'-基)-C(O)O-]苄基，4-[(4'-甲基六氫吡-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(4'-甲基高六氫吡-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(4'-(2-羥乙基)六氫吡-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(4'-苯基六氫吡-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(4'-(吡啶-2-基)六氫吡-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(4'-(4-三氟甲基吡啶-2-基)六氫吡-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(4'-(嘧啶-2-基)六氫吡-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(4'-乙醯基六氫吡-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(4'-(苯基C(O)-)六氫吡-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(4'-(吡啶-4-基C(O)-)六氫吡-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(4'-(苯基NHC(O)-)六氫吡-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(4'-(苯基NHC(S)-)六氫吡-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(4'-甲烷磺醯基六氫吡-1'-基-C(O)O-)苄基， 4-[(4'-三氟甲烷磺醯基六氫吡-1'-基-C(O)O-)苄基，4-[(嗎福啉-4'-基)C(O)O-]苄基，3-硝基-4-[(嗎福啉-4'-基)-C(O)O-]苄基，4-[(硫代嗎福啉-4'-基)C(O)O-]苄基，4-[(硫代嗎福啉-4'-基碸)-C(O)O-]苄基(替代命名法4-[(1,1-二酮基硫代嗎福啉-4-基)-C(O)O-]苄基)，4-[(四氫吡咯-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(2'-甲基四氫吡咯-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(2'-(甲氧羰基)四氫吡咯-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(2'-(羥甲基)四氫吡咯-1'-基)C(O)O-]苄基，4-[(2'-(N,N-二甲胺基)乙基)(CH₃)NC(O)O-]苄基，4-[(2'-(N-甲基-N-甲苯-4-磺醯基胺基)乙基)(CH₃)N-C(O)O-]苄基，4-[(2'-(嗎福啉-4'-基)乙基)(CH₃)NC(O)O-]苄基，4-[(2'-(羥基)乙基)(CH₃)NC(O)O-]苄基，4-[雙(2'-(羥基)乙基)NC(O)O-]苄基，4-[(2'-(甲醯氧基)乙基)(CH₃)NC(O)O-]苄基，4-[(CH₃OC(O)CH₂)HNC(O)O-]苄基，4-[2'-(苯基NHC(O)O-)乙基-]HNC(O)O-]苄基，3-氯基-4-[(CH₃)₂NC(O)O-]苄基，3-氯基-4-[(4'-甲基六氫吡-1'-基)C(O)O-]苄基，3-氯基-4-[(4'-(吡啶-2-基)六氫吡-1'-基)C(O)O-]苄基，3-氯基-4-[(硫代嗎福啉-4'-基)C(O)O-]苄基，及3-氟基-4-[(CH₃)₂NC(O)O-]苄基。

在式IA化合物中，R⁶較佳為2,4-二酮基-四氫呋喃-3-基(3,4-烯醇)、甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、異丙氧基、正-丁氧基、第三-丁氧基、環戊氧基、環丙基甲氧基、新戊氧基、2-α-異丙基-4-β-甲基環己氧基、2-β-異丙基-4-β-甲基環己氧基、2-甲氧基苯氧基、2-(嗎福啉-4-基)乙氧基、-O(CH₂CH₂O)₂CH₃、2-(苯氧基)乙氧基、-OCH₂C(CH₃)₂NHBoc、-NH₂、苄氧基、-NHCH₂COOH、-NHCH₂CH₂COOH、-NH-金鋼烷基、-NHSO₂-對-CH₃-φ、-NHCH₂CH₂COOCH₂CH₃、-NHOY'，其中Y'為氫、甲基、異丙基或苄基，O-(N-琥珀醯亞胺醯基)、-O-膽基-5-烯-3-β-基、-OCH₂-OC(O)C(CH₃)₃、-O(CH₂)_zNHC(O)W，其中z為1或2，且W係選自包括吡啶-3-基、N-甲基吡啶基及N-甲基-1,4-二氫-吡啶-3-基，-NR"C(O)-R'，其中R'為芳基、雜芳基或雜環族，且R"為氫或-CH₂C(O)OCH₂CH₃。

在式IA化合物中，R⁶又更佳係選自包括甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、異丙氧基、正-丁氧基、第三-丁氧基、環戊氧基、環丙基甲氧基、新戊氧基、2-α-異丙基-4-β-甲基環己氧基、2-β-異丙基-4-β-甲基環己氧基、2-甲氧基苯氧基、2-(嗎福啉-4-基)乙氧基、-O(CH₂CH₂O)₂CH₃、2-(苯氧基)乙氧基、-OCH₂C(CH₃)₂NHBoc及苄氧基。

上文式I與IA範圍內之較佳化合物，舉例言之，係包括：N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸乙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸乙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸正-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸環戊酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯基丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸正-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸環戊酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(六氫異菸鹼醯基氧基)苯丙胺酸乙酯

N-(α-甲苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-甲基六氫異菸鹼醯基氧基)苯丙胺酸乙酯

N-(α-甲苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-3-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸乙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(1-第三-丁基羰基氧基-4-苯基六氫吡啶-4-基羰基氧基)苯丙胺酸乙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-[(1,1-二酮基)硫代嗎福啉羰基]-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-[(1,1-二酮基)硫代嗎福啉-3-羰基]-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)肉胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)肉胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)肉胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基) 苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲胺基磺醯氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲胺基磺醯氧基)苯丙胺酸

N-(1-甲基咪唑-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-胺基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)肉胺醯基-L-4-(嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(α-甲苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(六氫吡-2-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(α-甲苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸N-金鋼烷基醯胺

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺醯基甘胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲胺基磺醯氧基) 苯丙胺酸甲酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(六氫吡-2-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(4-苄氧羰基六氫吡-2-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)肉胺醯基-L-4-(六氫異菸鹼醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-[(1,1-二酮基)硫代嗎福啉-3-羰基]-L-4-(嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-[(1,1-二酮基)硫代嗎福啉-3-羰基]-L-4-(嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)肉胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基-5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(1-甲基咪唑-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

2-(糖精-2-基)丙醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基-5,5-二甲基)硫脯胺醯基 -L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(吡啶-3-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-D-脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-N-甲基丙胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-硝基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-[(1,1-二酮基)硫代嗎福啉-3-羰基]-L-4-(N,N-二甲胺基磺醯氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)肉胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-N-甲基丙胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(六氫異菸鹼醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(四氫吡咯-1-基羰基氧基) 苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸新戊酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸新戊酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-第三-丁氧羰基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸乙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸乙酯

2-(糖精-2-基)丙醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

2-(糖精-2-基)丙醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸N-(甲苯-4-磺醯基)肉胺醯基-L-4-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)肉胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-N-甲基丙胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)肉胺醯基-L-4-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-N-甲基丙胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(吡啶-3-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(嘧啶-2-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-硝基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(4-氰基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲胺基磺醯氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(1-第三-丁氧羰基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸乙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-乙醯基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸乙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-甲烷磺醯基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸乙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(嗎福啉-4-基羰基氧基)-3-硝基苯基丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(1-第三-丁氧羰基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-N-甲基-2-(第三-丁基)甘胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-三氟甲氧基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

3-[N-(甲苯-4-磺醯基)-N-甲胺基]-1-[1-第三-丁氧羰基-2-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯基乙基]一氮四圜-2-酮

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基-5,5-二甲基)硫脯胺醯基 -L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基-5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(嘧啶-2-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

3-[N-(甲苯-4-磺醯基)-N-甲胺基]-1-[1-羧基-2-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯基乙基]一氮四圜-2-酮

N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(六氫異菸鹼醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(四氫吡咯-1-基羰基氧基) 苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(2,5-二氯噻吩-3-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-乙醯胺基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-第三-丁基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(吡啶-2-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(2-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(3-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(2,4-二氟苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-乙醯胺基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(4-三氟甲氧基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(4-氰基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(3,3-二甲基)脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(3,3-二甲基)脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-(1,4-二氧-8-氮-螺[4.5]癸-8-基)羰基氧基)苯丙胺酸乙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-(1,4-二氧-8-氮-螺[4.5]癸-8-基)羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4'-乙醯基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4'-甲烷磺醯基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4'-苯基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(六氫吡-1-基羰基氧基) 苯丙胺酸第三-丁酯

2-(糖精-2-基)丙醯基-L-4-(4'-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4'-甲烷磺醯基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸(N'-第三-丁氧羰基-2-胺基-2-甲基丙基)酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4'-乙醯基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4'-羥基六氫吡啶-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-(2'-(嗎福啉-4'基)乙基)胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-(1,4-二氧-8-氮-螺[4.5]癸-8-基)羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-(2'-羥乙基)-N-甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-4-(4'-(2-羥乙基)六氫吡-1-基羰基氧基)-L-苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-(2'-甲醯氧基乙基)-N-甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-(2'-羥乙基)-N-甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-(甲氧羰基甲基)胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-(4-N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4'-甲氧基六氫吡啶-1-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4'-甲氧基六氫吡啶-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-4-酮基脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-反式-4-羥脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(3-氟基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(嗎福啉基-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-(4-N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(嗎福啉基-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-(4-N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(2-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(2,4-二氟苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(吡啶-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基-硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(3-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(4-第三-丁基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-(3,3-二甲基)脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(2,5-二氯噻吩-3-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(4-甲氧基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(4-甲氧基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1-酮基-硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1-酮基-硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(3,4-二氟苯磺醯基)-L-脯胺醯基-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(3,4-二氟苯磺醯基)-L-脯胺醯基-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(3,4-二氟苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(3,4-二氟苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸乙酯

N-(吡啶-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(吡啶-2-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(吡啶-2-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(吡啶-2-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(3-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(2-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(3,4-二氟苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(3,5-二氟苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(2,4-二氟苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(4-氯苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(3-氯苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(2-氯苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(3,4-二氯苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(3,5-二氯苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(3-氯苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(3,4-二氯苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-甲氧基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(3-甲氧基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(2-甲氧基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(3,4-二甲氧基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(2,4-二氟苯磺醯基)-L-(硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(3,4-二氯苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(3-氯苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(3-氯基-4-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(3,4-二氟苯磺醯基)-L-(硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(3,4-二氟苯磺醯基)-L-(硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(2,5-二氯噻吩-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基 -L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(8-喹啉磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(8-喹啉磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(8-喹啉磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(8-喹啉磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-苯基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4'-(乙氧羰基)六氫吡啶-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(吡啶-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(3-磺醯胺基-4-氯-苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1-酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(2,4-二氟苯磺醯基)-L-(1-酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N- 二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸2,2-二甲基丙酯

N-(吡啶-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸2,2-二甲基丙酯

N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸環丙基甲酯

N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸甲酯

N-(吡啶-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸乙酯

N-(吡啶-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸環丙基甲酯

N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸2-甲氧苯酯

N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸正-丁酯

N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸正-丙酯

N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸2,2-二甲基丙醯氧基甲酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-(4'-(2'-胺基乙基)嗎福啉基)胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-[4-(羧基)六氫吡啶-1-基羰基氧基]苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-雙-(2-羥乙基)胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-[3-(羥甲基)六氫吡啶-1-基羰基氧基]苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-三氟甲烷磺醯基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-(N-苯基脲)苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(2-三氟乙醯基-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(1-甲基吡唑-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(1-甲基吡唑-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(吡啶-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(吡啶-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N-甲基-N-(2-二甲胺基乙基)胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-甲基-N-(2-二甲胺基乙基)胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫丙基-L-4-(N-甲基-N-(2-二甲胺基乙基)胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-甲基-N-(2-二甲胺基乙基)胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)]苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)]苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-3-氯基-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)]苯丙胺酸異丙酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(4-(2'-吡啶基)-六氫吡-1-基羰基氧基)]苯丙胺酸異丙酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(4-(2'-吡啶基)-六氫吡-1-基羰基氧基)]苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-硝基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(4-胺基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-苯基胺甲醯基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-苯基胺甲醯基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(1-正-丁基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(吡啶-4-基羰基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-4-酮基脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-反式-4-羥脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(4-氰基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(4-胺基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-4-酮基脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-[3-(羥甲基)六氫吡啶-1-基羰基氧基]苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(4,4-二氟)脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(4,4-二氟)脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-(4-苯甲醯基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(1-甲基-1H-咪唑-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(4-氰基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(4-甲脒基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸甲酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-4-酮基脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-4-羥脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-(4-苯甲醯基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(4-甲脒基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸甲酯

N-(3-氟基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基羰氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-[N-甲基-N-(2-(N-甲基-N-甲苯磺醯基-胺基)乙基)胺甲醯基氧基]苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-[N-(2-(N'-苯基胺基羰基氧基)乙基)胺甲醯基氧基)]苯丙胺酸異丙酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-4-(反式-羥基)脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-4-(反式-羥基)脯胺醯基-L-4-(N,N二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-甲脒基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

六氫吡-1,4-二羧酸雙-{4-[(2S)-2-第三-丁氧羰基-2-((4R)-5,5-二甲基-3-(甲苯-4-磺醯基)噻唑啶-4-羧醯胺基)乙基]苯基}酯

六氫吡-1,4-二羧酸雙-{4-[(2S)-2-羧基-2-((4R)-5,5-二甲基-3-(甲苯-4-磺醯基)噻唑啶-4-羧醯胺基)乙基]苯基}酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(吡-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(2-羥甲基四氫吡咯-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(2-羥甲基四氫吡咯-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(2-甲氧羰基四氫吡咯-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)]苯丙胺酸

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)]苯丙胺酸第三-丁酯

六氫吡-1,4-二羧酸雙-{4-[(2S)-2-異丙氧羰基-2-((2R)-1-(甲苯-4-磺醯基)四氫吡咯-2-羧醯胺基)乙基]苯基}酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(4-羥基)脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸2-(2-甲氧基乙氧基)乙酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(4-(2-嘧啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)]苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氟基-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1-甲烷磺醯基吡-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-[2-(1,1-二酮基-2,3-二氫-3,3-二甲基-1,2-苯并異噻唑-2-基)乙醯基]-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-[2-(N-2,10-樟腦沙坦基)乙醯基]-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-[2-(N-2,10-樟腦沙坦基)乙醯基]-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-[2-(N-2,10-樟腦沙坦基)乙醯基]-L-3-氯基-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(4-溴苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-溴苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(4-羥基)脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(4-(2-嘧啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)]苯丙胺酸

六氫吡-1,4-二羧酸雙-{4-[(2S)-2-第三-丁氧羰基-2-((2R)-1-(甲苯-4-磺醯基)四氫吡咯-2-羧醯胺基)乙基]苯基}酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)]苯丙胺酸異丙酯

N-(4-氟基苯磺醯基)噻唑啶基-2-羰基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(4-氟基苯磺醯基)噻唑啶基-2-羰基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(4-酮基)脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(4-酮基)脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(4-氟基苯磺醯基)噻唑啶基-2-羰基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)]苯丙胺酸

N-(4-硝基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)]苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)噻唑啶基-2-羰基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)]苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-溴苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)]苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-(N-苯基硫代羰基)六氫吡-1-基羰基氧基)]苯丙胺酸異丙酯

N-(4-氟基苯磺醯基)噻唑啶基-2-羰基-L-4-(4-甲基高六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

六氫吡-1,4-二羧酸雙-{4-[(2S)-2-羧基-2-((2R)-1-(甲苯-4-磺醯基)四氫吡咯-2-羧醯胺基)乙基]苯基)酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-4-(甲烷磺醯氧基)脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-胺基羰基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(4-胺基羰基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(4-甲脒基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(4-硝基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)]苯丙胺酸

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)]苯丙胺酸乙酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(4-氟基苯磺醯基)噻唑啶基-2-羰基-L-4-(4-甲基高六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(1-甲基吡唑-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(1-甲基咪唑-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(1-甲基咪唑-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1-甲烷磺醯基吡-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-4-(甲烷磺醯氧基)脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲烷磺醯基)-N-苄基甘胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-溴苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-三氟甲氧基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(4-三氟甲氧基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-三氟甲氧基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(4-羥基)脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(4-三氟甲氧基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(1-甲基咪唑-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-3-氯基-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(1-甲基咪唑-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-3-氯基-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(1-甲基咪唑-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(1-甲基咪唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(1-甲基吡唑-3-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(1-甲基吡唑-3-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(1-甲基吡唑-3-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(1-甲基吡唑-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(1-甲基咪唑-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-3-氯基-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(1-甲基吡唑-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸2-苯氧基乙酯

N-(1-甲基吡唑-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(1-甲基吡唑-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸乙酯

N-(3-氯基-1,5-二甲基吡唑-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯-4-(4-(5-三氟甲基-2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸及其藥學上可接受之鹽，以及上文所列舉之任何酯化合物，其中一種酯係被選自包括甲酯、乙酯、正-丙酯、異丙酯、正-丁酯、異丁酯、第二-丁酯、第三-丁酯及新戊酯之另一種酯置換。

式I、IA及IB範圍內之更佳化合物，舉例言之，係包括：N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸乙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-[(1,1-二酮基)硫代嗎福啉-3-羰基]-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)肉胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基) 苯丙胺酸異丙酯

N-(甲苯-4-磺醯基)肉胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基-5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-N-甲基丙胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(四氫吡咯-1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)肉胺醯基-L-4-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯基丙胺酸第三-丁酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基-5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N_二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(四氫吡咯-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-羥基六氫吡啶-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(2,5-二氯噻吩-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯

N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸2,2-二甲基丙酯

N-(吡啶-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸眼睛丙基甲酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-[N-甲基-N-(2-(N'-甲基-N'-甲苯磺醯基-胺基)乙基)胺甲醯基氧基]苯丙胺酸異丙酯

N-(4-氟基苯磺醯基)-L-4-(反式-羥基)脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(2-甲氧羰基四氫吡咯-1- 基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(4-羥基)脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(4-氟基苯磺醯基)噻唑啶基-2-羰基-L-4-(4-甲基高六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-(2-吡啶基)六氫吡-1- 基羰基氧基)苯丙胺酸

N-(3-氯基-1,5-二甲基吡唑-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯-4-(4-(5-三氟甲基-2-吡啶基)六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸及其藥學上可接受之鹽。

上文式I與IA之較佳化合物包括下表3中所提出者：於式I與IA化合物之一項較佳具體實施例中，化合物係被下式IB所定義：其中：Ar¹係選自包括芳基、經取代之芳基、雜芳基及經取代之雜芳基；Ar²係選自包括芳基、經取代之芳基、雜芳基及經取代之雜芳基；R¹²係選自包括烷基、經取代之烷基、環烷基及經取代之環烷基，或R¹²與R¹³和結合至R¹²之氮原子與結合至R¹³之碳原子一起，形成雜環族或經取代之雜環族基團；R¹³係選自包括氫、烷基及經取代之烷基，或R¹²與R¹³和結合至R¹²之氮原子與結合至R¹³之碳原子一起，形成雜環族或經取代之雜環族基團；R¹⁴係選自包括氫、烷基、經取代之烷基、環烷基、經取代之環烷基、芳基及經取代之芳基；R¹⁵係選自包括烷基與經取代之烷基，或R¹⁵與R¹⁶和彼等所結合之氮原子一起形成雜環族或經取代之雜環族基團；R¹⁶係選自包括烷基與經取代之烷基，或R¹⁵與R¹⁶和彼等所結合之氮原子一起形成雜環族或經取代之雜環族基團；且Y係選自包括-O-、-NR¹⁰⁰-及-CH₂-，其中R¹⁰⁰為氫或烷基；及其藥學上可接受之鹽。

在上文式IB化合物中，較佳情況是R¹²為烷基、經取代之烷基，或R¹²與R¹³和結合至R¹²之氮原子與結合至R¹³之碳原子一起，形成雜環族或經取代之雜環族基團。在上文式IB化合物中，R¹⁴較佳為氫或烷基。

在上文式IB化合物中，Ar¹較佳係選自包括苯基、4-甲基苯基、4-第三-丁基苯基、2,4,6-三甲基苯基、2-氟苯基、3-氟苯基、4-氟苯基、2,4-二氟苯基、3,4-二氟苯基、3,5-二氟苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、3,4-二氯苯基、3,5-二氯苯基、3-氯基-4-氟苯基、4-溴苯基、2-甲氧苯基、3-甲氧苯基、4-甲氧苯基、3,4-二甲氧基苯基、4-第三-丁氧基苯基、4-(3'-二甲胺基-正-丙氧基)-苯基、2-羧基苯基、2-(甲氧羰基)苯基、4-(H₂NC(O)-)苯基、4-(H₂NC(S)-)苯基、4-氰基苯基、4-三氟甲基苯基、4-三氟甲氧苯基、3,5-二-(三氟甲基)苯基、4-硝基苯基、4-胺基苯基、4-(CH₃C(O)NH-)苯基、4-(PhNHC(O)NH-)苯基、4-甲脒苯基、4-甲基甲脒苯基、4-[CH₃SC(=NH)-]苯基、4-氯基-3-[H₂NS(O)₂-]苯基、1-萘基、2-萘基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、嘧啶-2-基、喹啉-8-基、2-(三氟乙醯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基、2-噻吩基、5-氯基-2-噻吩基、2,5-二氯-4-噻吩基、1-N-甲基咪唑-4-基、1-N-甲基吡唑-3-基、1-N-甲基吡唑-4-基、1-N-丁基吡唑-4-基、1-N-甲基-3-甲基-5-氯基吡唑-4-基、1-N-甲基-5-甲基-3-氯基吡唑-4-基、2-噻唑基及5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基。

在上文式IB化合物中，較佳為R¹²與R¹³和結合至R¹²之氮原子與結合至R¹³之碳原子一起，形成下式雜環族或經取代之雜環族：

其中X係選自包括-S-、-SO-、-SO₂及視情況經取代之-CH₂-；m為0至12之整數；n為0至2之整數；且R'係選自包括烷基、經取代之烷基及胺基。

較佳情況是，m為1，X為-S-或-CH₂-，R'為烷基或經取代之烷基。

又更佳為R¹²與R¹³和結合至R¹²之氮原子與結合至R¹³之碳原子一起，形成雜環族或經取代之雜環族，選自包括一氮四圜基、噻唑啶基、六氫吡啶基、六氫吡基、硫代嗎福啉基、四氫吡咯基、4-羥基四氫吡咯基、4-酮基四氫吡咯基、4-氟基四氫吡咯基、4,4-二氟四氫吡咯基、4-(硫代嗎福啉-4-基C(O)O-)四氫吡咯基、4-[CH₃S(O)₂O-]四氫吡咯基、3-苯基四氫吡咯基、3-硫苯基四氫吡咯基、4-胺基四氫吡咯基、3-甲氧基四氫吡咯基、4,4-二甲基四氫吡咯基、4-N-Cbz-六氫吡基、4-[CH₃S(O)₂-]六氫吡基、噻唑啶-3-基、5,5-二甲基-噻唑啶-3-基、5,5-二甲基噻唑啉啶-4-基、1,1-二酮基-噻唑啶基、1,1-二酮基-5,5-二甲基噻唑啶-2-基及1,1-二酮基硫代嗎福啉基。

在式IB化合物中，Ar²較佳係選自包括苯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基及4-吡啶-2-酮基。

在式IB中，Y較佳為-O-，且當Y為-O-時，部份基團-OC(O)NR¹⁵R¹⁶較佳係選自包括(CH₃)₂NC(O)O-、(六氫吡啶-1-基)C(O)O-、(4-羥基六氫吡啶-1-基)C(O)O-、(4-甲醯氧基六氫吡啶-1-基)C(O)O-、(4-乙氧羰基六氫吡啶-1-基)C(O)O-、(4-羧基六氫吡啶-1-基)C(O)O-、(3-羥甲基六氫吡啶-1-基)C(O)O-、(4-羥甲基六氫吡啶-1-基)C(O)O-、(4-六氫吡啶酮-1-基乙烯縮酮)C(O)O-、(六氫吡-1-基)-C(O)O-、(1-Boc-六氫吡-4-基)-C(O)O-、(4-甲基六氫吡-1-基)C(O)O-、(4-甲基高六氫吡-1-基)C(O)O-、(4-(2-羥乙基)六氫吡-1-基)C(O)O-、(4-苯基六氫吡-1-基)C(O)O-、(4-(吡啶-2-基)六氫吡-1]-基)C(O)O-、(4-(4-三氟甲基吡啶-2-基)六氫吡-1-基)C(O)O-、(4-(嘧啶-2-基)六氫吡-1-基)C(O)O-、(4-乙醯基六氫吡-1-基)C(O)O-、(4-(苯基C(O)-)六氫吡-1-基)C(O)O-、(4-(吡啶-4'-基C(O)-)六氫吡-1-基)C(O)O、(4-(苯基NHC(O)-)六氫吡-1-基)C(O)O-、(4-(苯基NHC(S)-)六氫吡-1-基)C(O)O-、(4-甲烷磺醯基六氫吡-1-基-C(O)O-、(4-三氟甲烷磺醯基六氫吡-1-基-C(O)O-、(嗎福啉-4-基)C(O)O-、(硫代嗎福啉-4-基)C(O)O-、(硫代嗎福啉-4'-基碸)-C(O)O-、(四氫吡咯-1-基)C(O)O-、(2-甲基四氫吡咯-1-基)C(O)O-、(2-(甲氧羰基)四氫吡咯-1-基)C(O)O-、(2-(羥甲基)四氫吡咯-1-基)C(O)O-、(2-(N,N-二甲胺基)乙基)(CH₃)NC(O)O-、(2-(N-甲基-N-甲苯-4-磺醯基胺基)乙基)(CH₃)N-C(O)O-、(2-(嗎福啉-4-基)乙基)(CH₃)NC(O)O-、(2-(羥基)乙基)(CH₃)NC(O)O-、雙(2-(羥基)乙基)NC(O)O-、(2-(甲醯氧基)乙基)(CH₃)NC(O)O-、(CH₃OC(O)CH₂)HNC(O)O-及2-[(苯基NHC(O)O-)乙基-]HNC(O)O-。

於一項較佳具體實施例中，化合物係被下式IC所定義其中R^x為羥基或C_1-5烷氧基，及其藥學上可接受之鹽。此化合物較佳為N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯。

於另一方面，可作為髓鞘再形成劑利用之化合物，係為被下式II所定義之化合物。此等化合物具有對VLA-4之結合親和力，當藉由IC₅₀表示時為約15μM或較小(按下文實例A中所述度量)，並充作髓鞘再形成劑：其中：R²¹係選自包括烷基、經取代之烷基、芳基、經取代之芳基、環烷基、經取代之環烷基、雜環族、經取代之雜環族、雜芳基及經取代之雜芳基；R²²係選自包括氫、烷基、經取代之烷基、環烷基、經取代之環烷基、環烯基、經取代之環烯基、雜環族、經取代之雜環族、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基，且R²¹與R²²和結合至R²²之氮原子與結合至R²¹之SO₂一起，可形成雜環族或經取代之雜環族基團；R²³係選自包括氫、烷基、經取代之烷基、環烷基、經取代之環烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族，且其中R²²與R²³和結合至R²²之氮原子與結合至R²³之碳原子一起，可形成飽和雜環族基團或飽和經取代之雜環族基團，其附帶條件是，當經單取代時，於該飽和經取代之雜環族基團上之取代基不為羧基；Q為-C(X)NR⁷-，其中R⁷係選自包括氫與烷基；X係選自包括氧與硫；且R²⁵為-CH₂Ar²²-R^25’，其中Ar²²為芳基或雜芳基，且R^25’係選自包括芳基、雜芳基、經取代之芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族、芳氧基、經取代之芳氧基、芳烷氧基、經取代之芳烷氧基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基、雜環族-O-、經取代之雜環族-O-、雜芳烷氧基及經取代之雜芳烷氧基；及其藥學上可接受之鹽。

於另一項具體實施例中，本發明之化合物亦可以前體藥物提供，其係在活體內轉化(例如水解、生物代謝等)成為上文式II化合物。於此具體實施例之一項較佳之實例中，式II化合物中之羧酸係經改質成將在活體內轉化成羧酸(包括其鹽)之基團。於一項特佳具體實施例中，此種前體藥物係以式IIA化合物表示：其中R²¹係選自包括烷基、經取代之烷基、芳基、經取代之芳基、環烷基、經取代之環烷基、雜環族、經取代之雜環族、雜芳基及經取代之雜芳基；R²²係選自包括氫、烷基、經取代之烷基、環烷基、經取代之環烷基、環烯基、經取代之環烯基、雜環族、經取代之雜環族、芳基、經取代之芳基、雜芳基及經取代之雜芳基，且R²¹與R²²和結合至R²²之氮原子與結合至R²¹之SO₂一起，可形成雜環族或經取代之雜環族基團；R²³係選自包括氫、烷基、經取代之烷基、環烷基、經取代之環烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族及經取代之雜環族，且R²²與R²³和一起結合至R²²之氮原子與結合至R²³之碳原子，可形成飽和雜環族基團或飽和經取代之雜環族基團，其附帶條件是，當經單取代時，於該飽和經取代之雜環族基團上之取代基不為羧基；R²⁵為-CH₂Ar²²-R^25’，其中Ar²²為芳基或雜芳基，且R^25’係選自包括芳基、雜芳基、經取代之芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族、芳氧基、經取代之芳氧基、芳烷氧基、經取代之芳烷氧基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基、雜環族-O-、經取代之雜環族-O-、雜芳烷氧基及經取代之雜芳烷氧基； R²⁶係選自包括2,4-二酮基-四氫呋喃-3-基(3,4-烯醇)、胺基、烷氧基、經取代之烷氧基、環烷氧基、經取代之環烷氧基、-O-(N-琥珀醯亞胺醯基)、-NH-金鋼烷基、-O-膽基-5-烯-3-β-基、-NHOY，其中Y為氫、烷基、經取代之烷基、芳基及經取代之芳基，-NH(CH₂)_pCOOY，其中p為1至8之整數，且Y係如上文定義，-OCH₂NR²⁹R³⁰，其中R²⁹係選自包括-C(O)-芳基與-C(O)-經取代之芳基，且R³⁰係選自包括氫與-CH₂COOR³¹，其中R³¹為烷基，及-NHSO₂Z'，其中Z'為烷基、經取代之烷基、環烷基、經取代之環烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族或經取代之雜環族；Q為-C(X)NR⁷-，其中R⁷係選自包括氫與烷基；且X係選自包括氧與硫；及其藥學上可接受之鹽。

上文式II與IIA化合物之進一步說明，及關於製備此等化合物之程序與反應條件，係描述於U.S.S.N.09/127,346(1998年7月31日提出申請)、09/688,820(2000年10月17日提出申請之連續案，並以美國專利6,583,139發佈)及10/382,988(2003年3月7日提出申請之連續案)中，其全部以其全文均併於本文供參考。

於式II與IIA化合物之一項較佳具體實施例中，化合物係被下式IIB所定義：其中：Ar³¹係選自包括芳基、經取代之芳基、雜芳基及經取代之雜芳基；R³²係選自包括烷基、經取代之烷基、環烷基及經取代之環烷基，或R³²與R³³和結合至R³²之氮原子與結合至R³³之碳原子一起，形成雜環族或經取代之雜環族基團；R³³係選自包括氫、烷基及經取代之烷基，或R³²與R³³和結合至R³²之氮原子與結合至R³³之碳原子一起，形成雜環族或經取代之雜環族基團；R³⁴係選自包括氫、烷基、經取代之烷基、環烷基、經取代之環烷基、芳基及經取代之芳基；且R³⁷為芳基、雜芳基、經取代之芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族、芳氧基、經取代之芳氧基、芳烷氧基、經取代之芳烷氧基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基；及其藥學上可接受之鹽。

在上文式IIB化合物中，較佳情況是R³²為烷基、經取代之烷基，或R³²與R³³和結合至R³²之氮原子與結合至R³³之碳原子一起，形成雜環族或經取代之雜環族基團，且R³⁴為氫或烷基。

在上文式化合物IIB中，R³⁷較佳為芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族或經取代之雜環族。於一項較佳具體實施例中，R³⁷為經取代之芳基，其中芳基係被一至三個獨立選自包括烷基與烷氧基之取代基取代。於一項較佳具體實施例中，R³⁷為經取代之雜芳基，其中雜芳基係被一至三個獨立選自包括烷基、烷氧基及酮基之取代基取代。於另一項較佳具體實施例中，R³⁷為經取代之芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基係經2,6-二-取代。於又另一項較佳具體實施例中，R³⁷為2,6-二-取代芳基，其中取代基係獨立選自包括烷基與烷氧基。於又另一項較佳具體實施例中，R³⁷為2,6-二-取代雜芳基，其中取代基係獨立選自包括烷基、酮基及烷氧基。於另一項較佳具體實施例中，R³⁷係選自包括2,6-二烷氧基芳基、2,6-二烷氧基雜芳基、2-烷基-6-烷氧基芳基、2-烷基-6-烷氧基雜芳基、2-酮基-6-烷氧基雜芳基、2-酮基-6-烷基雜芳基及視情況經取代之四氫咪唑-2,4-二酮-3-基。

在上文式II與IIA化合物中，R²¹較佳係選自包括烷基、經取代之烷基、芳基、經取代之芳基、雜環族、經取代之雜環族、雜芳基及經取代之雜芳基。R²¹更佳係選自包括芳基、經取代之芳基、雜芳基及經取代之雜芳基。

在上文式II與IIA化合物中，R²¹又更佳係選自包括4-甲基苯基、4-氯苯基、1-萘基、2-萘基、4-甲氧苯基、苯基、2,4,6-三甲基苯基、2-(甲氧羰基)苯基、2-羧基苯基、3,5-二氯苯基、4-三氟甲基苯基、3,4-二氯苯基、3,4-二甲氧基苯基、4-(CH₃C(O)NH-)苯基、4-三氟甲氧苯基、4-氰基苯基、3,5-二-(三氟甲基)苯基、4-第三-丁基苯基、4-第三-丁氧基苯基、4-硝基苯基、2-噻吩基、1-N-甲基-3-甲基-5-氯基吡唑-4-基、1-N-甲基咪唑-4-基、4-溴苯基、4-甲脒苯基、4-甲基甲脒苯基、4-[CH₃SC(=NH)]苯基、5-氯基-2-噻吩基、2,5-二氯-4-噻吩基、1-N-甲基-4-吡唑基、2-噻唑基、5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基、4-[H₂NC(S)]苯基、4-胺基苯基、4-氟苯基、2-氟苯基、3-氟苯基、3,5-二氟苯基、吡啶-3-基、嘧啶-2-基、4-(3'-二甲胺基-正-丙氧基)-苯基及1-甲基吡唑-4-基。

在上文式II與IIA化合物中，R²²較佳為氫、甲基、苯基、苄基、-(CH₂)₂-2-噻吩基及-(CH₂)₂-φ。

於另一項較佳具體實施例中，上文式II與IIA化合物中之R²²與R²³，及式IIB化合物中之R³²與R³³，和結合至R²²或R³²之氮原子與結合至R²³或R³³之碳原子一起，形成飽和雜環族基團或飽和經取代之雜環族基團，其附帶條件是，當經單取代時，於該飽和經取代之雜環族基團上之取代基不為羧基。

在上文式II與IIA化合物中，Q較佳為-C(O)NH-或-C(S)NH-。

在式II與IIA化合物中，R²⁵較佳係選自包括經由被下列基團取代而出現之所有可能異構物：4-(2-羧基苯氧基)苄基、4-(苄氧基)苄基、4-[(1-甲基六氫吡啶-4-基)-O-]苄基、4-(咪唑-2-酮-1-基)苄基及4-(3-甲醯基咪唑-2-酮-1-基)苄基。

在式IIA化合物中，R²⁶較佳為2,4-二酮基-四氫呋喃-3-基(3,4-烯醇)、甲氧基、乙氧基、異丙氧基、正-丁氧基、第三-丁氧基、環戊氧基、新-戊氧基、2-α-異丙基-4-β-甲基環己氧基、2-β-異丙基-4-β-甲基環己氧基、-NH₂、苄氧基、-NHCH₂COOH、-NHCH₂CH₂COOH、-NH-金鋼烷基、-NHCH₂CH₂COOCH₂CH₃、-NHSO₂-對-CH₃-φ、-NHOR⁸，其中R⁸為氫、甲基、異丙基或苄基，O-(N-琥珀醯亞胺醯基)、-O-膽基-5-烯-3-β-基、-OCH₂-OC(O)C(CH₃)₃、-O(CH₂)_zNHC(O)W，其中z為1或2，且W係選自包括吡啶-3-基、N-甲基吡啶基及N-甲基-1,4-二氫-吡啶-3- 基，-NR"C(O)-R'，其中R'為芳基、雜芳基或雜環族，且R"為氫或-CH₂C(O)OCH₂CH₃。

上文式II與IIA範圍內之較佳化合物，舉例言之，係包括下列：N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-4-(α-甲基苄氧基)-L-苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-4-(2-羧基苯氧基)-L-苯丙胺酸

N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-O-(苄基)-L-酪胺酸及其藥學上可接受之鹽。

上文式II與IIA之較佳化合物係包括下表4中所提出者。

當描述本發明之化合物、組合物及方法時，下述術語具有下述意義，除非另有指出。

定義

於本文中使用之"醯基"係指基團H-C(O)-、烷基-C(O)-、經取代之烷基-C(O)-、烯基-C(O)-、經取代之烯基-C(O)-、炔基-C(O)-、經取代之炔基-C(O)-環烷基-C(O)-、經取代之環烷基-C(O)-、芳基-C(O)-、經取代之芳基-C(O)-、雜芳基-C(O)-、經取代之雜芳基-C(O)、雜環族-C(O)-及經取代之雜環族-O(O)-，其中烷基、經取代之烷基、烯基、經取代之烯基、炔基、經取代之炔基、環烷基、經取代之環烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族及經取代之雜環族，均如本文定義。

"醯基胺基"係指基團-C(O)NRR，其中各R係獨立選自包括氫、烷基、經取代之烷基、烯基、經取代之烯基、炔基、經取代之炔基、芳基、經取代之芳基、環烷基、經取代之環烷基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族，且其中各R係與氮原子一起接合，以形成雜環族或經取代之雜環，其中烷基、經取代之烷基、烯基、經取代之烯基、炔基、經取代之炔基、環烷基、經取代之環烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族及經取代之雜環族均如本文定義。

"醯氧基"係指基團烷基-C(O)O-、經取代之烷基-C(O)O-、烯基-C(O)O-、經取代之烯基-C(O)O-、炔基-C(O)O-、經取代之炔基-C(O)O-、芳基-C(O)O-、經取代之芳基-C(O)O-、環烷基-C(O)O-、經取代之環烷基-C(O)O-、雜芳基-C(O)O-、經取代之雜芳基-C(O)O-、雜環族-C(O)O-及經取代之雜環族-C(O)O-，其中烷基、經取代之烷基、烯基、經取代之烯基、炔基、經取代之炔基、環烷基、經取代之環烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族及經取代之雜環族，均如本文定義。

"烯氧基"係指基團"烯基-O-"。

"經取代之烯氧基"係指基團"經取代之烯基-O-"。

"烯基"係指烯基，較佳係具有2至10個碳原子，且更佳為2至6個碳原子，並具有至少1個且較佳為1-2個烯基不飽和位置。

"經取代之烯基"係指具有1至5個取代基之烯基，取代基獨立選自包括烷氧基、經取代之烷氧基、醯基、醯基胺基、硫代羰基胺基、醯氧基、胺基、甲脒基、烷基甲脒基、硫代甲脒基、胺醯基、胺基羰基胺基、胺基硫代羰基胺基、胺基羰基氧基、芳基、經取代之芳基、芳氧基、經取代之芳氧基、芳氧基芳基、經取代之芳氧基芳基、鹵素、羥基、氰基、硝基、羧基、羧基烷基、羧基取代之烷基、羧基-環烷基、羧基取代之環烷基、羧基芳基、羧基取代之芳基、羧基雜芳基、羧基取代之雜芳基、羧基雜環族、羧基取代之雜環族、環烷基、經取代之環烷基、胍基、胍基碸、硫醇、硫基烷基、經取代之硫基烷基、硫芳基、經取代之硫芳基、硫環烷基、經取代之硫環烷基、硫雜芳基、經取代之硫雜芳基、硫雜環族、經取代之硫雜環族、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族、環烷氧基、經取代之環烷氧基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基、雜環基氧基、經取代之雜環基氧基、氧基羰基胺基、氧基硫代羰基胺基、環烷基氧基、經取代之環烷基氧基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基、-OS(O)₂-烷基、-OS(O)₂取代之烷基、-OS(O)₂-芳基、-OS(O)₂取代之芳基、-OS(O)₂-雜芳基、-OS(O)₂取代之雜芳基、-OS(O)₂-雜環族、-OS(O)₂取代之雜環族、-OSO₂-NRR，其中R為氫或烷基，-NRS(O)₂-烷基、-NRS(O)₂取代之烷基、-NRS(O)₂-芳基、-NRS(O)₂取代之芳基、-NRS(O)₂-雜芳基、-NRS(O)₂取代之雜芳基、-NRS(O)₂-雜環族、-NRS(O)₂取代之雜環族、-NRS(O)₂-NR-烷基、-NRS(O)₂-NR-取代之烷基、-NRS(O)₂-NR-芳基、-NRS(O)₂-NR-取代之芳基、-NRS(O)₂-NR-雜芳基、-NRS(O)₂-NR-取代之雜芳基、-NRS(O)₂-NR-雜環族、-NRS(O)₂-NR-取代之雜環族，其中R為氫或烷基，單-與二-烷胺基、單-與二-(經取代之烷基)胺基、單-與二-芳胺基、單-與二取代之芳胺基、單-與二-雜芳基胺基、單-與二取代之雜芳基胺基、單-與二-雜環族胺基、單-與二取代之雜環族胺基，不對稱二-取代胺類，具有不同取代基，獨立選自包括烷基、經取代之烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族及經取代之烯基，具有藉習用阻斷基團所阻斷之胺基，阻斷基團譬如Boc、Cbz、甲醯基等，或烯基/經取代之烯基，被-SO₂-烷基、-SO₂取代之烷基、-SO₂-烯基、-SO₂取代之烯基、-SO₂- 環烷基、-SO₂取代之環烷基、-SO₂-芳基、-SO₂取代之芳基、-SO₂-雜芳基、-SO₂取代之雜芳基、-SO₂-雜環族、-SO₂取代之雜環族及-SO₂NRR取代，其中R為氫或烷基。

取代基較佳係獨立選自包括烷氧基、經取代之烷氧基、醯基、醯基胺基、醯氧基、胺基、經取代之胺基、胺醯基、胺基羰基胺基、胺基羰基氧基、芳基、經取代之芳基、芳氧基、經取代之芳氧基、羧基、羧基酯類、氰基、環烷基、經取代之環烷基、環烷基氧基、經取代之環烷基氧基、鹵素、雜芳基、經取代之雜芳基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基、雜環族、經取代之雜環族、羥基、硝基及氧基羰基胺基。

"烷氧基"係指基團"烷基-O-"，其舉例言之，係包括甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、異丙氧基、正-丁氧基、第三-丁氧基、第二-丁氧基、正-戊氧基、正-己氧基、1,2-二甲基丁氧基等。

"經取代之烷氧基"係指基團"經取代之烷基-O-"。

"烷基"係指烷基，較佳係具有1至10個碳原子，且更佳為1至6個碳原子。此術語係以下列基團為例，譬如甲基、第三-丁基、正-庚基、辛基等。

"經取代之烷基"係指1至10個碳原子之烷基，具有1至5個取代基，獨立選自包括烷氧基、經取代之烷氧基、醯基、醯基胺基、硫代羰基胺基、醯氧基、胺基、甲脒基、烷基甲脒基、硫代甲脒基、胺醯基、胺基羰基胺基、胺基硫代羰基胺基、胺基羰基氧基、芳基、經取代之芳基、芳氧基、經取代之芳氧基、芳氧基芳基、經取代之芳氧基芳基、氰基、鹵素、羥基、硝基、羧基、羧基烷基、羧基取代之烷基、羧基-環烷基、羧基取代之環烷基、羧基芳基、羧基取代之芳基、羧基雜芳基、羧基取代之雜芳基、羧基雜環族、羧基取代之雜環族、環烷基、經取代之環烷基、胍基、胍基碸、硫醇、硫基烷基、經取代之硫基烷基、硫芳基、經取代之硫芳基、硫環烷基、經取代之硫環烷基、硫雜芳基、經取代之硫雜芳基、硫雜環族、經取代之硫雜環族、雜芳基、經取代之芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族、環烷氧基、經取代之環烷氧基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基、雜環基氧基、經取代之雜環基氧基、氧基羰基胺基、氧基硫代羰基胺基、環烷基氧基、經取代之環烷基氧基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基、-OS(O)₂-烷基、-OS(O)₂取代之烷基、-OS(O)₂-芳基、-OS(O)₂取代之芳基、-OS(O)₂-雜芳基、-OS(O)₂取代之雜芳基、-OS(O)₂-雜環族、-OS(O)₂取代之雜環族、-OSO₂-NRR，其中R為氫或烷基，-NRS(O)₂-烷基、-NRS(O)₂取代之烷基、-NRS(O)₂-芳基、-NRS(O)₂取代之芳基、-NRS(O)₂-雜芳基、-NRS(O)₂取代之雜芳基、-NRS(O)₂-雜環族、-NRS(O)₂取代之雜環族、-NRS(O)₂-NR-烷基、-NRS(O)₂-NR-取代之烷基、-NRS(O)₂-NR-芳基、-NRS(O)₂-NR-取代之芳基、-NRS(O)₂-NR-雜芳基、-NRS(O)₂-NR-取代之雜芳基、-NRS(O)₂-NR-雜環族、-NRS(O)₂-NR-取代之雜環族，其中R為氫或烷基，單-與二-烷胺基，單-與二-(經取代之烷基)胺基、單-與二-芳胺基、單-與二取代之芳胺基、單-與二-雜芳基胺基、單-與二取代之雜芳基胺基、單-與二-雜環族胺基、單-與二取代之雜環族胺基、不對稱二-取代胺類，具有不同取代基，獨立選自包括烷基、經取代之烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族及經取代之雜環族及經取代之烷基，具有藉習用阻斷基團阻斷之胺基，阻斷基團譬如Boc、Cbz、甲醯基等，或烷基/經取代之烷基，被-SO₂-烷基、-SO₂取代之烷基、-SO₂-烯基、-SO₂取代之烯基、-SO₂-環烷基、-SO₂取代之環烷基、-SO₂-芳基、-SO₂取代之芳基、-SO₂-雜芳基、-SO₂取代之雜芳基、-SO₂-雜環族、-SO₂取代之雜環族及-SO₂NRR取代，其中R為氫或烷基。

"次烷基"係指線性與分枝狀二價烷基，具有1至10個碳原子，且更佳為1至6個碳原子。此術語係以下列基團為例，譬如亞甲基(-CH₂-)、1,6-次庚基、1,8-次辛基、次乙基(-CH₂CH₂-)、次丙基異構物(例如-CH₂CH₂CH₂-與-CH(CH₃)CH₂-)等。

"經取代之次烷基"係指具有1至5個取代基之次烷基，取代基獨立選自包括烷氧基、經取代之烷氧基、醯基、醯基胺基、硫代羰基胺基、醯氧基、胺基、甲脒基、烷基甲脒基、硫代甲脒基、胺醯基、胺基羰基胺基、胺基硫代羰基胺基、胺基羰基氧基、芳基、經取代之芳基、芳氧基、經取代之芳氧基、芳氧基芳基、經取代之芳氧基芳基、鹵素、羥基、氰基、硝基、羧基、羧基烷基、羧基取代之烷基、羧基-環烷基、羧基取代之環烷基、羧基芳基、羧基取代之芳基、羧基雜芳基、羧基取代之雜芳基、羧基雜環族、羧基取代之雜環族、環烷基、經取代之環烷基、胍基、胍基碸、硫醇、硫基烷基、經取代之硫基烷基、硫芳基、經取代之硫芳基、硫環烷基、經取代之硫環烷基、硫雜芳基、經取代之硫雜芳基、硫雜環族、經取代之硫雜環族、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族、環烷氧基、經取代之環烷氧基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基、雜環基氧基、經取代之雜環基氧基、氧基羰基胺基、氧基硫代羰基胺基、-OS(O)₂-烷基、-OS(O)₂取代之烷基、-OS(O)₂-芳基、-OS(O)₂取代之芳基、-OS(O)₂-雜芳基、-OS(O)₂取代之雜芳基、-OS(O)₂-雜環族、-OS(O)₂取代之雜環族、-OSO₂-NRR，其中R為氫或烷基，-NRS(O)₂-烷基、-NRS(O)₂取代之烷基、-NRS(O)₂-芳基、-NRS(O)₂取代之芳基、-NRS(O)₂-雜芳基、-NRS(O)₂取代之雜芳基、-NRS(O)₂-雜環族、-NRS(O)₂取代之雜環族、-NRS(O)₂-NR-烷基、-NRS(O)₂-NR-取代之烷基、-NRS(O)₂-NR-芳基、-NRS(O)₂-NR-取代之芳基、-NRS(O)₂-NR-雜芳基、-NRS(O)₂-NR-取代之雜芳基、-NRS(O)₂-NR-雜環族、-NRS(O)₂-NR-取代之雜環族，其中R為氫或烷基，單-與二-烷胺基、單-與二-(經取代之烷基)胺基、單-與二-芳胺基、單-與二取代之芳胺基、單-與二-雜芳基胺基、單-與二取代之雜芳基胺基、單-與二-雜環族胺基、單-與二取代之雜環族胺基、不對稱二-取代胺類，具有不同取代基，獨立選自包括烷基、經取代之烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族及與經取代之烯基，具有藉習用阻斷基團阻斷之胺基，阻斷基團譬如Boc、Cbz、甲醯基等，或烯基/經取代之烯基，被-SO₂-烷基、-SO₂取代之烷基、-SO₂-烯基、-SO₂取代之烯基、-SO₂-環烷基、-SO₂取代之環烷基、-SO₂-芳基、-SO₂取代之芳基、-SO₂-雜芳基、-SO₂取代之雜芳基、-SO₂-雜環族、-SO₂取代之雜環族及-SO₂NRR取代，其中R為氫或烷基。

"炔基"係指炔基，較佳係具有2至10個碳原子，且更佳為3至6個碳原子，並具有至少1個且較佳為1-2個炔基不飽和性之位置。

"經取代之炔基"係指具有1至5個取代基之炔基，取代基獨立還自包括烷氧基、經取代之烷氧基、醯基、醯基胺基、硫代羰基胺基、醯氧基、胺基、甲脒基、烷基甲脒基、硫代甲脒基、胺醯基、胺基羰基胺基、胺基硫代羰基胺基、胺基羰基氧基、芳基、經取代之芳基、芳氧基、經取代之芳氧基、芳氧基芳基、經取代之芳氧基芳基、鹵素、羥基、氰基、硝基、羧基、羧基烷基、羧基取代之烷基、羧基-環烷基、羧基取代之環烷基、羧基芳基、羧基取代之芳基、羧基雜芳基、羧基取代之雜芳基、羧基雜環族、羧基取代之雜環族、環烷基、經取代之環烷基、胍基、胍基碸、硫醇、硫基烷基、經取代之硫基烷基、硫芳基、經取代之硫芳基、硫環烷基、經取代之硫環烷基、硫雜芳基、經取代之硫雜芳基、硫雜環族、經取代之硫雜環族、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族、環烷氧基、經取代之環烷氧基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基、雜環基氧基、經取代之雜環基氧基、氧基羰基胺基、氧基硫代羰基胺基、-OS(O)₂-烷基、-OS(O)₂取代之烷基、-OS(O)₂-芳基、-OS(O)₂取代之芳基、-OS(O)₂-雜芳基、-OS(O)₂取代之雜芳基、-OS(O)₂-雜環族、-OS(O)₂取代之雜環族、-OSO₂-NRR，其中R為氫或烷基，-NRS(O)₂-烷基、-NRS(O)₂取代之烷基、-NRS(O)₂-芳基、-NRS(O)₂取代之芳基、-NRS(O)₂-雜芳基、-NRS(O)₂取代之雜芳基、-NRS(O)₂-雜環族、-NRS(O)₂取代之雜環族、-NRS(O)₂-NR-烷基、-NRS(O)₂-NR-取代之烷基、-NRS(O)₂-NR-芳基、-NRS(O)₂-NR-取代之芳基、-NRS(O)₂-NR-雜芳基、-NRS(O)₂-NR-取代之雜芳基、-NRS(O)₂-NR-雜環族、-NRS(O)₂-NR-取代之雜環族，其中R為氫或烷基，單-與二-烷胺基、單-與二-(經取代之烷基)胺基、單-與二-芳胺基、單-與二取代之芳胺基、單-與二-雜芳基胺基、單-與二取代之雜芳基胺基、單-與二-雜環族胺基、單-與二取代之雜環族胺基、不對稱二-取代胺類，具有不同取代基，獨立選自包括烷基、經取代之烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族及經取代之炔基，具有藉習用阻斷基團阻斷之胺基，阻斷基團譬如Boc、Cbz、甲醯基等，或炔基/經取代之炔基，被-SO₂-烷基、-SO₂取代之烷基、-SO₂-烯基、-SO₂取代之烯基、-SO₂-環烷基、-SO₂取代之環烷基、-SO₂-芳基、-SO₂取代之芳基、-SO₂-雜芳基、-SO₂取代之雜芳基、-SO₂-雜環族、-SO₂取代之雜環族及-SO₂NRR取代，其中 R為氫或烷基。

"甲脒基"係指基團H₂NC(=NH)-，且"烷基甲脒基"一詞係指具有1至3個烷基之化合物(例如烷基HNC(=NH)-)。

"胺基"係指基團-NH₂。

"經取代之胺基"係指基團-NRR，其中各R基團係獨立選自包括氫、烷基、經取代之烷基、烯基、經取代之烯基、環烷基、經取代之環烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族及經取代之雜環族，其條件是兩個R基團均不為氫；或其中R基團可與氮原子一起接合，以形成雜環族或經取代之雜環。

"胺醯基"係指基團-NRC(O)烷基、-NRC(O)經取代之烷基、-NRC(O)環烷基、-NRC(O)取代之環烷基、-NRC(O)烯基、-NRC(O)取代之烯基、-NRC(O)炔基、-NRC(O)取代之炔基、-NRC(O)芳基、-NRC(O)取代之芳基、-NRC(O)雜芳基、-NRC(O)取代之雜芳基、-NRC(O)雜環族及-NRC(O)取代之雜環族，其中R為氫或烷基，且其中烷基、經取代之烷基、烯基、經取代之烯基、炔基、經取代之炔基、環烷基、經取代之環烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族及經取代之雜環族，均如本文定義。

"胺基羰基胺基"係指基團-NRC(O)NRR、-NRC(O)NR-烷基、-NRC(O)NR-取代之烷基、-NRC(O)NR-烯基、-NRC(O)NR-取代之烯基、-NRC(O)NR-炔基、-NRC(O)NR-取代之炔基、-NRC(O)NR-芳基、-NRC(O)NR-取代之芳基、-NRC(O)NR-環烷基、-NRC(O)NR-取代之環烷基、-NRC(O)NR-雜芳基與-NRC(O)NR-取代之雜芳基、 -NRC(O)NR-雜環族及-NRC(O)NR-取代之雜環族，其中各R係獨立為氫、烷基，或其中各R係與氮原子一起接合，以形成雜環族或經取代之雜環，以及其中胺基之一係藉習用阻斷基團阻斷，阻斷基團譬如Boc、Cbz、甲醯基等，且其中烷基、經取代之烷基、烯基、經取代之烯基、炔基、經取代之炔基、環烷基、經取代之環烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族及經取代之雜環族，均如本文定義。

"胺基羰基氧基"係指基團-NRC(O)O-烷基、-NRC(O)O取代之烷基、-NRC(O)O-烯基、-NRC(O)O取代之烯基、-NRC(O)O-炔基、-NRC(O)O取代之炔基、-NRC(O)O-環烷基、-NRC(O)O取代之環烷基、-NRC(O)O-芳基、-NRC(O)O取代之芳基、-NRC(O)O-雜芳基、-NRC(O)O取代之雜芳基、-NRC(O)O-雜環族及-NRC(O)O取代之雜環族，其中R為氫或烷基，且其中烷基、經取代之烷基、烯基、經取代之烯基、炔基、經取代之炔基、環烷基、經取代之環烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族及經取代之雜環族，均如本文定義。

"胺基硫代羰基胺基"係指基團-NRC(S)NRR、-NRC(S)NR-烷基、-NRC(S)NR-取代之烷基、-NRC(S)NR-烯基、-NRC(S)NR-取代之烯基、-NRC(S)NR-炔基、-NRC(S)NR-取代之炔基、-NRC(S)NR-芳基、-NRC(S)NR-取代之芳基、-NRC(S)NR-環烷基、-NRC(S)NR-取代之環烷基、-NRC(S)NR-雜芳基與-NRC(S)NR-取代之雜芳基、-NRC(S)NR-雜環族及-NRC(S)NR-取代之雜環族，其中各R係獨立為氫、烷基，或其中各R係與氮原子一起接合，以形成雜環族或經取代之雜環，以及其中胺基之一係藉習用阻斷基團阻斷，阻斷基團譬如Boc、Cbz、甲醯基等，且其中烷基、經取代之烷基、烯基、經取代之烯基、炔基、經取代之炔基、環烷基、經取代之環烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族及經取代之雜環族，均如本文定義。

"芳基"係指6至14個碳原子之不飽和芳族碳環基團，具有單環(例如苯基)或多重縮合環(例如萘基或蒽基)，該縮合環可以或可以不為芳族(例如2-苯并唑啉酮、2H-1,4-苯并-3(4H)-酮-7基等)，其條件是連接點係經過芳族環原子。較佳芳基包括苯基、萘基及5,6,7,8-四氫萘-2-基。

"經取代之芳基"係指被1至3個取代基取代之芳基，取代基選自包括羥基、醯基、醯基胺基、硫代羰基胺基、醯氧基、烷基、經取代之烷基、烷氧基、經取代之烷氧基、烯基、經取代之烯基、炔基、經取代之炔基、甲脒基、烷基甲脒基、硫代甲脒基、胺基、胺醯基、胺基羰基氧基、胺基羰基胺基、胺基硫代羰基胺基、芳基、經取代之芳基、芳氧基、經取代之芳氧基、環烷氧基、經取代之環烷氧基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基、雜環基氧基、經取代之雜環基氧基、羧基、羧基烷基、羧基取代之烷基、羧基-環烷基、羧基取代之環烷基、羧基芳基、羧基取代之芳基、羧基雜芳基、羧基取代之雜芳基、羧基雜環族、羧基取代之雜環族、羧基醯胺基、氰基、硫醇、硫基烷基、經取代之硫基烷基、硫芳基、經取代之硫芳基、硫雜芳基、經取代之硫雜芳基、硫環烷基、經取代之硫環烷基、硫雜環族、經取代之硫雜環族、環烷基、經取代之環烷基、胍基、胍基碸、鹵基、硝基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族、環烷氧基、經取代之環烷氧基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基、雜環基氧基、經取代之雜環基氧基、氧基羰基胺基、氧基硫代羰基胺基、-S(O)₂-烷基、-S(O)₂取代之烷基、-S(O)₂-環烷基、-S(O)₂取代之環烷基、-S(O)₂-烯基、-S(O)₂取代之烯基、-S(O)₂-芳基、-S(O)₂取代之芳基、-S(O)₂-雜芳基、-S(O)₂取代之雜芳基、-S(O)₂-雜環族、-S(O)₂取代之雜環族、-OS(O)₂-烷基、-OS(O)₂取代之烷基、-OS(O)₂-芳基、-OS(O)₂取代之芳基、-OS(O)₂-雜芳基、-OS(O)₂取代之雜芳基、-OS(O)₂-雜環族、-OS(O)₂取代之雜環族、-OSO₂-NRR，其中R為氫或烷基，-NRS(O)₂-烷基、-NRS(O)₂取代之烷基、-NRS(O)₂-芳基、-NRS(O)₂取代之芳基、-NRS(O)₂-雜芳基、-NRS(O)₂取代之雜芳基、-NRS(O)₂-雜環族、-NRS(O)₂取代之雜環族、-NRS(O)₂-NR-烷基、-NRS(O)₂-NR-取代之烷基、-NRS(O)₂-NR-芳基、-NRS(O)₂-NR-取代之芳基、-NRS(O)₂-NR-雜芳基、-NRS(O)₂-NR-取代之雜芳基、-NRS(O)₂-NR-雜環族、-NRS(O)₂-NR-取代之雜環族，其中R為氫或烷基，單-與二-烷胺基、單-與二-(經取代之烷基)胺基、單-與二-芳胺基、單-與二取代之芳胺基、單-與二-雜芳基胺基、單-與二取代之雜芳基胺基、單-與二-雜環族胺基、單-與二取代之雜環族胺基、不對稱二-取代胺類，具有不同取代基，獨立選自包括烷基、經取代之烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族及經取代之雜環族，及在經取代之芳基上藉習用阻斷基團阻斷之胺基，阻斷基團譬如Boc、Cbz、甲醯基等，或被-SO₂NRR取代，其中R為氫或烷基。

較佳取代基係選自包括羥基、醯基、醯基胺基、醯氧基、烷基、經取代之烷基、烷氧基、經取代之烷氧基、烯基、經取代之烯基、胺基、經取代之胺基、胺醯基、胺基羰基氧基、胺基羰基胺基、芳基、經取代之芳基、芳氧基、經取代之芳氧基、環烷氧基、經取代之環烷氧基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基、雜環基氧基、經取代之雜環基氧基、羧基、羧基酯類、氰基、環烷基、經取代之環烷基、鹵基、硝基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族及氧基羰基胺基。

"芳氧基"係指基團芳基-O-，其舉例言之，係包括苯氧基、萘氧基等。

"經取代之芳氧基"係指經取代之芳基-O-基團。

"芳氧基芳基"係指基團-芳基-O-芳基。

"經取代之芳氧基芳基"係指芳氧基芳基，在任一個或兩個芳基環上被1至3個取代基取代，取代基選自包括羥基、醯基、醯基胺基、硫代羰基胺基、醯氧基、烷基、經取代之烷基、烷氧基、經取代之烷氧基、烯基、經取代之烯基、炔基、經取代之炔基、甲脒基、烷基甲脒基、硫代甲脒基、胺基、胺醯基、胺基羰基氧基、胺基羰基胺基、胺基硫代羰基胺基、芳基、經取代之芳基、芳氧基、經取代之芳氧基、環烷氧基、經取代之環烷氧基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基、雜環基氧基、經取代之雜環基氧基、羧基、羧基烷基、羧基取代之烷基、羧基-環烷基、羧基取代之環烷基、羧基芳基、羧基取代之芳基、羧基雜芳基、羧基取代之雜芳基、羧基雜環族、羧基取代之雜環族、羧基醯胺基、氰基、硫醇、硫基烷基、經取代之硫基烷基、硫芳基、經取代之硫芳基、硫雜芳基、經取代之硫雜芳基、硫環烷基、經取代之硫環烷基、硫雜環族、經取代之硫雜環族、環烷基、經取代之環烷基、胍基、胍基碸、鹵基、硝基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族、環烷氧基、經取代之環烷氧基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基、雜環基氧基、經取代之雜環基氧基、氧基羰基胺基、氧基硫代羰基胺基、-S(O)₂-烷基、-S(O)₂取代之烷基、-S(O)₂-環烷基、-S(O)₂取代之環烷基、-S(O)₂-烯基、-S(O)₂取代之烯基、-S(O)₂-芳基、-S(O)₂取代之芳基、-S(O)₂-雜芳基、-S(O)₂取代之雜芳基、-S(O)₂-雜環族、-S(O)₂取代之雜環族、-OS(O)₂-烷基、-OS(O)₂取代之烷基、-OS(O)₂-芳基、-OS(O)₂取代之芳基、-OS(O)₂-雜芳基、-OS(O)₂取代之雜芳基、-OS(O)₂-雜環族、-OS(O)₂取代之雜環族、-OSO₂-NRR，其中R為氫或烷基，-NRS(O)₂-烷基、-NRS(O)₂取代之烷基、-NRS(O)₂-芳基、-NRS(O)₂取代之芳基、-NRS(O)₂-雜芳基、-NRS(O)₂取代之雜芳基、-NRS(O)₂-雜環族、-NRS(O)₂取代之雜環族、-NRS(O)₂-NR-烷基、-NRS(O)₂-NR-取代之烷基、-NRS(O)₂-NR-芳基、-NRS(O)₂-NR-取代之芳基、-NRS(O)₂-NR-雜芳基、-NRS(O)₂-NR-取代之雜芳基、-NRS(O)₂-NR-雜環族、-NRS(O)₂-NR-取代之雜環族，其中R為氫或烷基，單-與二-烷胺基、單-與二-(經取代之烷基)胺基、單-與二-芳胺基、單-與二取代之芳胺基、單-與二-雜芳基胺基、單-與二取代之雜芳基胺基、單-與二-雜環族胺基、單- 與二取代之雜環族胺基、不對稱二-取代胺類，具有不同取代基，獨立選自包括烷基、經取代之烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族及經取代之雜環族，及在經取代之芳基上藉習用阻斷基團阻斷之胺基，阻斷基團譬如Boc、Cbz、甲醯基等，或被-SO₂NRR取代，其中R為氫或烷基。

"芳烷氧基"係指芳基-次烷基-O-基團。

"經取代之芳烷氧基"係指經取代之芳基-次烷基-O-基團。

"羧基"係指基團-COOH及其藥學上可接受之鹽。

"羧基酯類"係指-C(O)O-烷基、-C(O)O取代之烷基、-C(O)O-烯基、-C(O)O取代之烯基、-C(O)O-芳基、-C(O)O取代之芳基、-C(O)O-環烷基、-C(O)O取代之環烷基、-C(O)O-雜芳基、-C(O)O取代之雜芳基、-C(O)O-雜環族及-C(O)O取代之雜環族。

"環烯基"係指3至8個碳原子之環狀烯基，具有單一環狀環。

"環烷氧基"係指-O-環烷基。

"經取代之環烷氧基"係指-O-取代之環烷基。

"環烷基"係指3至12個碳原子之環烷基，具有單或多重縮合環，舉例言之，係包括金鋼烷基、環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環辛基等。"環烷基"較佳係指3至8個碳原子之環烷基，具有單一環狀環。

"經取代之環烷基"與"經取代之環烯基"係指環烷基或環烯基，較佳為3至8個碳原子，具有1至5個取代基，獨立選自包括酮基(=O)、硫酮基(=S)、烷氧基、經取代之烷氧基、醯基、醯基胺基、硫代羰基胺基、醯氧基、胺基、甲脒基、烷基甲脒基、硫代甲脒基、胺醯基、胺基羰基胺基、胺基硫代羰基胺基、胺基羰基氧基、芳基、經取代之芳基、芳氧基、經取代之芳氧基、芳氧基芳基、經取代之芳氧基芳基、鹵素、羥基、氰基、硝基、羧基、羧基烷基、羧基取代之烷基、羧基-環烷基、羧基取代之環烷基、羧基芳基、羧基取代之芳基、羧基雜芳基、羧基取代之雜芳基、羧基雜環族、羧基取代之雜環族、環烷基、經取代之環烷基、胍基、胍基碸、硫醇、硫基烷基、經取代之硫基烷基、硫芳基、經取代之硫芳基、硫環烷基、經取代之硫環烷基、硫雜芳基、經取代之硫雜芳基、硫雜環族、經取代之硫雜環族、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族、環烷氧基、經取代之環烷氧基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基、雜環基氧基、經取代之雜環基氧基、氧基羰基胺基、氧基硫代羰基胺基、-OS(O)₂-烷基、-OS(O)₂取代之烷基、-OS(O)₂-芳基、-OS(O)₂取代之芳基、-OS(O)₂-雜芳基、-OS(O)₂取代之雜芳基、-OS(O)₂-雜環族、-OS(O)₂取代之雜環族、-OSO₂-NRR，其中R為氫或烷基，-NRS(O)₂-烷基、-NRS(O)₂取代之烷基、-NRS(O)₂-芳基、-NRS(O)₂取代之芳基、-NRS(O)₂-雜芳基、-NRS(O)₂取代之雜芳基、-NRS(O)₂-雜環族、-NRS(O)₂取代之雜環族、-NRS(O)₂-NR-烷基、-NRS(O)₂-NR-取代之烷基、-NRS(O)₂-NR-芳基、-NRS(O)₂-NR-取代之芳基、-NRS(O)₂-NR-雜芳基、-NRS(O)₂-NR-取代之雜芳基、-NRS(O)₂-NR-雜環族、-NRS(O)₂-NR-取代之雜環族，其中R為氫或烷基，單-與二-烷胺基、單-與二-(經取代之烷基)胺基、單-與二-芳胺基、單-與二取代之芳胺基、單-與二-雜芳基胺基、單-與二取代之雜芳基胺基、單-與二-雜環族胺基、單-與二取代之雜環族胺基、不對稱二-取代胺類，具有不同取代基，獨立選自包括烷基、經取代之烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族與經取代之雜環族及經取代之炔基，具有藉習用阻斷基團阻斷之胺基，阻斷基團譬如Boc、Cbz、甲醯基等，或炔基/經取代之炔基，被-SO₂-烷基、-SO₂取代之烷基、-SO₂-烯基、-SO₂取代之烯基、-SO₂-環烷基、-SO₂取代之環烷基、-SO₂-芳基、-SO₂取代之芳基、-SO₂-雜芳基、-SO₂取代之雜芳基、-SO₂-雜環族、-SO₂取代之雜環族及-SO₂NRR取代，其中R為氫或烷基。

較佳取代基係選自包括酮基(=O)、硫酮基(=S)、烷氧基、經取代之烷氧基、醯基、醯基胺基、醯氧基、胺基、經取代之胺基、胺醯基、胺基羰基胺基、胺基羰基氧基、芳基、經取代之芳基、芳氧基、經取代之芳氧基、羧基、羧基酯類、氰基、環烷基、經取代之環烷基、環烷基氧基、經取代之環烷基氧基、鹵素、雜芳基、經取代之雜芳基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基、雜環族、經取代之雜環族、羥基、硝基及氧基羰基胺基。

"胍基"係指基團-NRC(=NR)NRR、-NRC(=NR)NR-烷基、-NRC(=NR)NR-取代之烷基、-NRC(=NR)NR-烯基、-NRC(=NR)NR-取代之烯基、-NRC(=NR)NR-炔基、-NRC(=NR)NR-取代之炔基、-NRC(=NR)NR-芳基、-NRC(=NR)NR-取代之芳基、-NRC(=NR)NR-環烷基、-NRC(=NR)NR-雜芳基、-NRC(=NR)NR-取代之雜芳基、-NRC(=NR)NR-雜環族及-NRC(=NR)NR-取代之雜環族，其中各R 係獨立為氫與烷基，以及其中胺基之一係藉習用阻斷基團阻斷，阻斷基團譬如Boc、Cbz、甲醯基等，且其中烷基、經取代之烷基、烯基、經取代之烯基、炔基、經取代之炔基、環烷基、經取代之環烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族及經取代之雜環族，均如本文定義。

"胍基碸"係指基團-NRC(=NR)NRSO₂-烷基、-NRC(=NR)NRSO₂取代之烷基、-NRC(=NR)NRSO₂-烯基、-NRC(=NR)NRSO₂取代之烯基、-NRC(=NR)NRSO₂-炔基、-NRC(=NR)NRSO₂取代之炔基、-NRC(=NR)NRSO₂-芳基、-NRC(=NR)NRSO₂取代之芳基、-NRC(=NR)NRSO₂-環烷基、-NRC(=NR)NRSO₂取代之環烷基、-NRC(=NR)NRSO₂-雜芳基與-NRC(=NR)NRSO₂取代之雜芳基、-NRC(=NR)NRSO₂-雜環族及-NRC(=NR)NRSO₂取代之雜環族，其中各R係獨立為氫與烷基，且其中烷基、經取代之烷基、烯基、經取代之烯基、炔基、經取代之炔基、環烷基、經取代之環烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族及經取代之雜環族，均如本文定義。

"鹵基"或"鹵素"係指氟基、氯基、溴基及碘基，且較佳為氟基、氯基或溴基。

"雜芳基"係指芳族碳環基團，具有2至10個碳原子，與1至4個選自包括氧、氮及硫之雜原子在其環或氧化物內。此種雜芳基可具有單環(例如吡啶基或呋喃基)或多重縮合環(例如吲基或苯并噻吩基)，其中一或多個縮合環可以或可以不為芳族，其條件是連接點係經過芳族環原子。此外，雜芳基之雜原子可經氧化，意即形成吡啶N-氧化物或1,1-二酮基 -1,2,5-噻二唑等。此外，該環之碳原子可被酮基(=O)取代。較佳雜芳基包括吡啶基、吡咯基、吲哚基、呋喃基、嗒基、嘧啶基、吡基、1-酮基-1,2,5-噻二唑基及1,1-二酮基-1,2,5-噻二唑基。

"經取代之雜芳基"係指被1至3個取代基取代之雜芳基，取代基選自包括羥基、醯基、醯基胺基、硫代羰基胺基、醯氧基、烷基、經取代之烷基、烷氧基、經取代之烷氧基、烯基、經取代之烯基、炔基、經取代之炔基、甲脒基、烷基甲脒基、硫代甲脒基、胺基、胺醯基、胺基羰基氧基、胺基羰基胺基、胺基硫代羰基胺基、芳基、經取代之芳基、芳氧基、經取代之芳氧基、環烷氧基、經取代之環烷氧基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基、雜環基氧基、經取代之雜環基氧基、羧基、羧基烷基、羧基取代之烷基、羧基-環烷基、羧基取代之環烷基、羧基芳基、羧基取代之芳基、羧基雜芳基、羧基取代之雜芳基、羧基雜環族、羧基取代之雜環族、羧基醯胺基、氰基、硫醇、硫基烷基、經取代之硫基烷基、硫芳基、經取代之硫芳基、硫雜芳基、經取代之硫雜芳基、硫環烷基、經取代之硫環烷基、硫雜環族、經取代之硫雜環族、環烷基、經取代之環烷基、胍基、胍基碸、鹵基、硝基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族、環烷氧基、經取代之環烷氧基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基、雜環基氧基、經取代之雜環基氧基、氧基羰基胺基、氧基硫代羰基胺基、-S(O)₂-烷基、-S(O)₂取代之烷基、-S(O)₂-環烷基、-S(O)₂取代之環烷基、-S(O)₂-烯基、-S(O)₂取代之烯基、-S(O)₂- 芳基、-S(O)₂取代之芳基、-S(O)₂-雜芳基、-S(O)₂取代之雜芳基、-S(O)₂-雜環族、-S(O)₂取代之雜環族、-OS(O)₂-烷基、-OS(O)₂取代之烷基、-OS(O)₂-芳基、-OS(O)₂取代之芳基、-OS(O)₂-雜芳基、-OS(O)₂取代之雜芳基、-OS(O)₂-雜環族、-OS(O)₂取代之雜環族、-OSO₂-NRR，其中R為氫或烷基，-NRS(O)₂-烷基、-NRS(O)₂取代之烷基、-NRS(O)₂-芳基、-NRS(O)₂取代之芳基、-NRS(O)₂-雜芳基、-NRS(O)₂取代之雜芳基、-NRS(O)₂-雜環族、-NRS(O)₂取代之雜環族、-NRS(O)₂-NR-烷基、-NRS(O)₂-NR-取代之烷基、-NRS(O)₂-NR-芳基、-NRS(O)₂-NR-取代之芳基、-NRS(O)₂-NR-雜芳基、-NRS(O)₂-NR-取代之雜芳基、-NRS(O)₂-NR-雜環族、-NRS(O)₂-NR-取代之雜環族，其中R為氫或烷基，單-與二-烷胺基、單-與二-(經取代之烷基)胺基、單-與二-芳胺基、單-與二取代之芳胺基、單-與二-雜芳基胺基、單-與二取代之雜芳基胺基、單-與二-雜環族胺基、單-與二取代之雜環族胺基、不對稱二-取代胺類，具有不同取代基，獨立選自包括烷基、經取代之烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族及經取代之雜環族，及在經取代之芳基上藉習用阻斷基團阻斷之胺基，阻斷基團譬如Boc、Cbz、甲醯基等，或被-SO₂NRR取代，其中R為氫或烷基。

取代基較佳係選自包括上文被定義為對於經取代之芳基較佳者。

"雜芳基氧基"係指基團-O-雜芳基，且"經取代之雜芳基氧基"係指基團-O-取代之雜芳基。

"雜芳烷氧基"係指基團雜芳基-次烷基-O-。

"經取代之雜芳烷氧基"係指經取代雜芳基-次烷基-O-基團。

"雜環"或"雜環族"係指飽和或不飽和基團，具有單環或多重縮合環，在環內具有1至10個碳原子與1至4個雜原子，選自包括氮、硫或氧，其中，在稠合環系統中，一或多個環可為芳基或雜芳基。

"經取代之雜環族"係指被1至3個取代基取代之雜環基團，取代基選自包括酮基(=O)、硫酮基(=S)、烷氧基、經取代之烷氧基、醯基、醯基胺基、硫代羰基胺基、醯氧基、胺基、甲脒基、烷基甲脒基、硫代甲脒基、胺醯基、胺基羰基胺基、胺基硫代羰基胺基、胺基羰基氧基、芳基、經取代之芳基、芳氧基、經取代之芳氧基、芳氧基芳基、經取代之芳氧基芳基、鹵素、羥基、氰基、硝基、羧基、羧基烷基、羧基取代之烷基、羧基-環烷基、羧基取代之環烷基、羧基芳基、羧基取代之芳基、羧基雜芳基、羧基取代之雜芳基、羧基雜環族、羧基取代之雜環族、環烷基、經取代之環烷基、胍基、胍基碸、硫醇、硫基烷基、經取代之硫基烷基、硫芳基、經取代之硫芳基、硫環烷基、經取代之硫環烷基、硫雜芳基、經取代之硫雜芳基、硫雜環族、經取代之硫雜環族、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族、環烷氧基、經取代之環烷氧基、雜芳基氧基、經取代之雜芳基氧基、-C(O)O-芳基、-C(O)O取代之芳基、雜環基氧基、經取代之雜環基氧基、氧基羰基胺基、氧基硫代羰基胺基、-OS(O)₂-烷基、-OS(O)₂取代之烷基、-OS(O)₂-芳基、-OS(O)₂取代之芳基、-OS(O)₂-雜芳基、-OS(O)₂取代之雜芳基、-OS(O)₂-雜環族、-OS(O)₂取代之雜環族、-OSO₂-NRR，其中R為氫或烷基，-NRS(O)₂-烷基、-NRS(O)₂取代之烷基、-NRS(O)₂-芳基、-NRS(O)₂取代之芳基、-NRS(O)₂-雜芳基、-NRS(O)₂取代之雜芳基、-NRS(O)₂-雜環族、-NRS(O)₂取代之雜環族、-NRS(O)₂-NR-烷基、-NRS(O)₂-NR-取代之烷基、-NRS(O)₂-NR-芳基、-NRS(O)₂-NR-取代之芳基、-NRS(O)₂-NR-雜芳基、-NRS(O)₂-NR-取代之雜芳基、-NRS(O)₂-NR-雜環族、-NRS(O)₂-NR-取代之雜環族，其中R為氫或烷基，單-與二-烷胺基、單-與二-(經取代之烷基)胺基、單-與二-芳胺基、單-與二取代之芳胺基、單-與二-雜芳基胺基、單-與二取代之雜芳基胺基、單-與二-雜環族胺基、單-與二取代之雜環族胺基、不對稱二-取代胺類，具有不同取代基，獨立選自包括烷基、經取代之烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族與經取代之雜環族及經取代之炔基，具有藉習用阻斷基團阻斷之胺基，阻斷基團譬如Boc、Cbz、甲醯基等，或炔基/經取代之炔基，被-SO₂-烷基、-SO₂取代之烷基、-SO₂-烯基、-SO₂取代之烯基、-SO₂-環烷基、-SO₂取代之環烷基、-SO₂-芳基、-SO₂取代之芳基、-SO₂-雜芳基、-SO₂取代之雜芳基、-SO₂-雜環族、-SO₂取代之雜環族及-SO₂NRR取代，其中R為氫或烷基。

取代基較佳係選自包括關於經取代環烷基所定義之較佳取代基。

雜環與雜芳基之實例，包括但不限於一氮四圜、吡咯、咪唑、吡唑、吡啶、吡、嘧啶、嗒、吲、異吲哚、吲哚、二氫吲哚、吲唑、嘌呤、喹、異喹啉、喹啉、呔、萘基吡啶、喹啉、喹唑啉、啈啉、喋啶、咔唑、咔啉、菲啶、吖啶、二氮菲、異噻唑、啡、異唑、啡、酚噻、四氫咪唑、二氫咪唑、六氫吡啶、六氫吡、二氫吲哚、鄰苯二甲醯亞胺、1,2,3,4-四氫異喹啉、4,5,6,-四氫苯并[b]噻吩、噻唑、噻唑啶、噻吩、苯并[b]噻吩、嗎福啉基、嗎福啉基、硫代嗎福啉并、硫代嗎福啉基(亦被稱為硫基嗎福啉基)、六氫吡啶基、四氫吡咯、四氫呋喃基等。

"雜環基氧基"係指基團-O-雜環族，而"經取代之雜環基氧基"係指基團-O-取代之雜環族。

"N,N-二甲基胺甲醯基氧基"係指基團-OC(O)N(CH₃)₂。

"酮基"係指(=O)。

"氧次烷基"係指-OCH₂CHR^d-，其中R^d為烷基。

"氧基羰基胺基"係指基團-OC(O)NH₂、-OC(O)NRR、-OC(O)NR-烷基、-OC(O)NR-取代之烷基、-OC(O)NR-烯基、-OC(O)NR-取代之烯基、-OC(O)NR-炔基、-OC(O)NR-取代之炔基、-OC(O)NR-環烷基、-OC(O)NR-取代之環烷基、-OC(O)NR-芳基、-OC(O)NR-取代之芳基、-OC(O)NR-雜芳基、-OC(O)NR-取代之雜芳基、-OC(O)NR-雜環族及-OC(O)NR-取代之雜環族，其中R為氫、烷基，或其中各R係與氮原子一起接合，以形成雜環族或經取代之雜環，且其中烷基、經取代之烷基、烯基、經取代之烯基、炔基、經取代之炔基、環烷基、經取代之環烷基、芳基經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族及經取代之雜環族，均如本文定義。

"氧基硫代羰基胺基"係指基團-OC(S)NH₂、-OC(S)NRR、 -OC(S)NR-烷基、-OC(S)NR-取代之烷基、-OC(S)NR-烯基、-OC(S)NR-取代之烯基、-OC(S)NR-炔基、-OC(S)NR-取代之炔基、-OC(S)NR-環烷基、-OC(S)NR-取代之環烷基、-OC(S)NR-芳基、-OC(S)NR-取代之芳基、-OC(S)NR-雜芳基、-OC(S)NR-取代之雜芳基、-OC(S)NR-雜環族及-OC(S)NR-取代之雜環族，其中R為氫、烷基，或其中各R係與氮原子一起接合，以形成雜環族或經取代之雜環，且其中烷基、經取代之烷基、烯基、經取代之烯基、炔基、經取代之炔基、環烷基、經取代之環烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族及經取代之雜環族，均如本文定義。

"硫基烷基"係指基團-S-烷基。

"經取代之硫基烷基"係指-S-取代之烷基。

"硫代甲脒基"係指基團RSC(=NH)-，其中R為氫或烷基。

"硫芳基"係指基團-S-芳基，而"經取代之硫芳基"係指基團-S-取代之芳基。

"硫代羰基胺基"係指基團-C(S)NRR，其中各R係選自包括氫、烷基、經取代之烷基、烯基、經取代之烯基、炔基、經取代之炔基、芳基、經取代之芳基、環烷基、經取代之環烷基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族、經取代之雜環族，且其中各R係與氮原子一起接合，以形成雜環族或經取代之雜環，其中烷基、經取代之烷基、烯基、經取代之烯基、炔基、經取代之炔基、環烷基、經取代之環烷基、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基、雜環族及經取代之雜環族，均如本文定義。

"硫環烷基"係指基團-S-環烷基。

"經取代之硫環烷基"係指基團-S-取代之環烷基。

"硫雜芳基"係指基團-S-雜芳基，而"經取代之硫雜芳基"係指基團-S-取代之雜芳基。

"硫雜環族"係指基團-S-雜環族，而"經取代之硫雜環族"係指基團-S-取代之雜環族。

"硫醇"係指基團-SH。

"視情況經取代"係意謂所列舉之基團可未經取代，或所列舉之基團可經取代。

"藥學上可接受之鹽"係指鹽，其係保持本發明化合物之生物有效性與性質，且其在生物上或在其他方面不會是不期望的。在許多情況中，本發明之化合物能夠形成酸及/或鹼鹽，此係由於胺基及/或羧基或其上之類似基團存在所致。

藥學上可接受之鹼加成鹽可製自無機與有機鹼。衍生自無機鹼之鹽，僅舉例言之，係包括鈉、鉀、鋰、銨、鈣及鎂鹽。衍生自有機鹼之鹽，包括但不限於以下之鹽，一級、二級及三級胺類，譬如烷基胺類、二烷基胺類、三烷基胺類、經取代之烷基胺類、二(經取代之烷基)胺類、三(經取代之烷基)胺類、烯基胺類、二烯基胺類、三烯基胺類、經取代之烯基胺類、二(經取代之烯基)胺類、三(經取代之烯基)胺類、環烷基胺類、二(環烷基)胺類、三(環烷基)胺類、經取代之環烷基胺類、二取代環烷基胺、三取代環烷基胺類、環烯基胺類、二(環烯基)胺類、三(環烯基)胺類、經取代之環烯基胺類、二取代環烯基胺、三取代環烯基胺類、芳基胺類、二芳基胺類、三芳基胺類、雜芳基胺類、二雜芳基胺類、三雜芳基胺類、雜環族胺類、二雜環族胺類、三雜環族胺類、混合之二-與三-胺類，其中胺上之至少兩個取代基係為不同，且係選自包括烷基、經取代之烷基、烯基、經取代之烯基、環烷基、經取代之環烷基、環烯基、經取代之環烯基、芳基、雜芳基、雜環族等。亦包括其中二或三個取代基與胺基氮一起形成雜環族或雜芳基之胺類。

適當胺類之實例，僅舉例言之，係包括異丙胺、三甲胺、二乙胺、三(異丙基)胺、三(正-丙基)胺、乙醇胺、2-二甲胺基乙醇、丁三醇胺、離胺酸、精胺酸、組胺酸、咖啡鹼、普魯卡因、海巴胺、膽鹼、甜菜鹼、乙二胺、葡萄糖胺、N-烷基葡萄糖胺、可可鹼、嘌呤、六氫吡、六氫吡啶、嗎福啉、N-乙基六氫吡啶等。亦應明瞭的是，其他羧酸衍生物可用於本發明之實施，例如羧酸醯胺類，包括羧醯胺、低碳烷基羧醯胺、二烷基羧醯胺等。

藥學上可接受之酸加成鹽類可製自無機與有機酸。衍生自無機酸之鹽，包括鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。衍生自有機酸之鹽，包括醋酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、蘋果酸、丙二酸、琥珀酸、順丁烯二酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、桂皮酸、苯乙醇酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、對-甲苯-磺酸、柳酸等。

"藥學上可接受之陽離子"一詞係指藥學上可接受鹽之陽離子。

化合物製備

本發明化合物可使用下文一般方法與程序，製自易於取得之起始物質。應明瞭的是，在給予典型或較佳處理條件(意即反應溫度、時間、反應物之莫耳比、溶劑、壓力等)之情況下，其他處理條件亦可使用，除非另有述及。最適宜反應條件可隨著所使用之特定反應物或溶劑而改變，但此種條件可由熟諳此藝者藉例行最佳化程序測定。

此外，正如熟諳此藝者所明瞭的，習用保護基可能是必須的，以防止某些官能基遭受不想要之反應。關於各種官能基之適當保護基以及保護與去除保護特定官能基之適當條件，係為此項技藝中所習知。例如，許多保護基係描述於T.W.Greene與G.M.Wuts，有機合成上之保護基，第二版，Wiley,New York,1991，及其中引述之參考資料。

再者，本發明化合物典型上含有一或多個對掌中心。因此，若需要，則此種化合物可被製成或單離成純立體異構物，意即成為個別對掌異構物或非對映異構物，或成為富含立體異構物之混合物。所有此種立體異構物(與富含之混合物)均包含在本發明之範圍內，除非另有指出。純立體異構物(或富含之混合物)可使用例如此項技藝中所習知之光學活性起始物質或立體選擇性試劑製成。或者，此種化合物之外消旋混合物可使用例如對掌性管柱層析、對掌性解析劑等分離。

根據下列化合物製備，R¹,R²,R³,R⁵,R⁶及R⁷均如本文關於式I、IA、II及IIA之定義。此外，根據下列化合物製備，R¹係相當於：Ar¹如本文中關於式IB之定義， R²¹如本文中關於式II與IIA之定義，及Ar²¹如本文中關於式IIB之定義；R²係相當於：R¹²如本文中關於式IB之定義，R²²如本文中關於式II與IIA之定義，及R³²如本文中關於式IIB之定義；R³係相當於：R¹³如本文中關於式IB之定義，R²³如本文中關於式II與IIA之定義，及R³³如本文中關於式IIB之定義；R⁵係相當於：R²⁵如本文中關於式II與IIA之定義；且R⁶係相當於：OH關於式I與II，OR¹⁴如本文中關於式IB之定義，R²⁶如本文中關於式IIA之定義，及OR³⁴如本文中關於式IIB之定義。

於合成之一種較佳方法中，式I、IA、II及IIA化合物，其中Q為-C(O)NR⁷-，與式IB、IC及IIB化合物係以下述方式製成，首先使式III胺基酸：與式IV氯化磺醯偶合：以提供式V之N-磺醯基胺基酸：

此反應典型上係經由使式III胺基酸與至少一當量，較佳為約1.1至約2當量之氯化磺醯IV，在惰性稀釋劑譬如二氯甲烷等中反應而進行。一般而言，此反應係於約-70℃至約40℃之溫度範圍下，進行約1至約24小時。此反應較佳係於適當鹼存在下進行，以清除反應期間所產生之酸。適當鹼，舉例言之，係包括三級胺類，譬如三乙胺、二異丙基乙胺、N-甲基嗎福啉等。或者，反應可於Schotten-Baumann型條件下進行，使用含水鹼，譬如氫氧化鈉及其類似物，作為鹼。在反應完成時，所形成之N-磺醯基胺基酸V係藉習用方法回收，包括中和、萃取、沉澱、層析、過濾等。

上述反應中所採用之式III胺基酸為無論是已知化合物，或可藉習用合成程序製自已知化合物之化合物。用於此反應中之適當胺基酸之實例，包括但不限於L-脯胺酸、反式-4-羥基-L-脯胺酸、順式-4-羥基-L-脯胺酸、反式-3-苯基-L-脯胺酸、順式-3-苯基-L-脯胺酸、L-(2-甲基)脯胺酸、L-甲基六氫吡啶酸、L-一氮四圜-2-羧酸、L-二氫吲哚-2-羧酸、L-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧酸、L-噻唑啶-4-羧酸、L-(5,5-二甲基)噻唑啶-4-羧酸、L-硫代嗎福啉-3-羧酸、甘胺酸、2-第三-丁基甘胺酸、D,L-苯基甘胺酸、L-丙胺酸、α-甲基丙胺酸、N-甲基-L-苯丙胺酸、L-二苯基丙胺酸、肌胺酸、D,L-苯基肌胺酸、L-天門冬胺酸β-第三-丁酯、L-麩胺酸γ-第三-丁酯、L-(O-苄基)絲胺酸、1-胺基環丙烷羧酸、1-胺基環丁烷羧酸、1-胺基環戊烷羧酸(環白胺酸)1-胺基環己烷羧酸、L-絲胺酸等。若需要，則在上述與氯化磺醯IV之反應中，可採用式III胺基酸之相應羧酸酯類，譬如甲酯類、乙酯類等。接著，使用習用試劑與條件使酯基水解成羧酸，意即，以鹼金屬氫氧化物在惰性稀釋劑譬如甲醇/水中處理，於是提供N-磺醯基胺基酸V。

同樣地，在上述反應中所採用之式IV氯化磺醯類為無論是已知化合物，或可藉習用合成程序製自已知化合物之化合物。此種化合物典型上係製自其相應之磺酸，意即製自式R¹-SO₃H化合物，使用三氯化磷與五氯化磷。此反應一般係經由使磺酸與約2至5莫耳當量之三氯化磷及五氯化磷接觸而進行，無論是不含溶劑或在惰性溶劑中，譬如二氯甲烷，於約0℃至約80℃範圍內之溫度下，歷經約1至約48小時，而得氯化磺醯。或者，式IV氯化磺醯類可製自其相應之硫醇化合物，意即製自式R¹-SH化合物，經由將該硫醇以氯(Cl₂)與水於習用反應條件下處理。

適用於本發明之氯化磺醯類之實例，包括但不限於氯化甲烷磺醯、氯化2-丙烷磺醯、氯化1-丁烷磺醯、氯化苯磺醯、氯化1-萘磺醯、氯化2-萘磺醯、氯化對-甲苯磺醯、氯化α-甲苯磺醯、氯化4-乙醯胺基苯磺醯、4-氯化甲脒基苯磺醯、氯化4-第三-丁基苯磺醯、氯化4-溴苯磺醯、氯化2-羧基苯磺醯、氯化4-氰基苯磺醯、氯化3,4-二氯苯磺醯、氯化3,5-二氯苯磺醯、氯化3,4-二甲氧基苯磺醯、氯化3,5-雙三氟甲基苯磺醯、氯化4-氟基苯磺醯、氯化4-甲氧基苯磺醯、氯化2-甲氧羰基苯磺醯、氯化4-甲基胺基苯磺醯、氯化4-硝基苯磺醯、氯化4-硫醯胺基苯磺醯、氯化4-三氟甲基苯磺醯、氯化4-三氟甲氧基苯磺醯、氯化2,4,6-三甲苯磺醯、氯化2-苯基乙烷磺醯、氯化2-噻吩磺醯、氯化5-氯基-2-噻吩磺醯、氯化2,5-二氯-4-噻吩磺醯、氯化2-噻唑磺醯、氯化2-甲基-4-噻唑磺醯、氯化1-甲基-4-咪唑磺醯、氯化1-甲基-4-吡唑磺醯、氯化5-氯基-1,3-二甲基-4-吡唑磺醯、氯化3-吡啶磺醯、氯化2-嘧啶磺醯等。若需要，則可在上述反應中，使用氟化磺醯、溴化磺醯或磺酸酐替代氯化磺醯，以形成式V之N-磺醯基胺基酸。

式V之中間物N-磺醯基胺基酸亦可經由使式VI磺醯胺：與式L(R³)CHCOOR^y之羧酸衍生物反應而製成，其中L為脫離基，譬如氯基、溴基、碘基、甲烷磺酸酯、甲苯磺酸酯等，且R^y為氫或烷基。此反應典型上係經由使磺醯胺VI與至少一當量，較佳為1.1至2當量之羧酸衍生物接觸而進行，於適當鹼存在下，譬如三乙胺，在惰性稀釋劑中，譬如DMF，於約24℃至約37℃之溫度範圍下，歷經約0.5至約4小時。此反應係進一步描述於Zuckermann等人，J.Am.Chem.Soc.,1992,114,10646- 10647中。用於此反應中之較佳羧酸衍生物為α-氯基與α-溴基羧酸酯類，譬如溴基醋酸第三-丁酯等。當在此反應中採用羧酸酯時，係接著使用習用程序使酯基水解，而得式V之N-磺醯基胺基酸。

然後，經由使式V之中間物N-磺醯基胺基酸與式VII胺基酸衍生物偶合，製成本發明化合物：

此偶合反應典型上係使用習知偶合試劑進行，譬如碳化二亞胺、BOP試劑(六氟膦酸苯并三唑-1-基氧基-參(二甲胺基)鏻)等。適當碳化二亞胺類，舉例言之，係包括二環己基碳化二亞胺(DCC)、1-(3-二甲胺基-丙基)-3-乙基碳化二亞胺(EDC)等。若需要，則碳化二亞胺偶合試劑之聚合體承載形式亦可使用，包括例如在Tetrahedron Letters,34(48),7685(1993)中所述者。此外，習知偶合促進劑，譬如N-羥基琥珀醯亞胺、1-羥基苯并三唑等，可用以幫助偶合反應。

此偶合反應典型上係經由使N-磺醯基胺基酸V與約1至約2當量之偶合試劑，及至少一當量，較佳為約1至約1.2當量之胺基酸衍生物VII接觸，在惰性稀釋劑中進行，譬如二氯甲烷、氯仿、乙腈、四氫呋喃、N,N-二甲基甲醯胺等。一般而言，此反應係在從約0℃至約37℃之溫度範圍下進行約12至約24小時。在反應完成時，藉習用方法回收本發明之化合物，包括中和、萃取、沉澱、層析、過濾等。

或者，可使N-磺醯基胺基酸V轉化成鹵化醯，並使此鹵化醯與胺基酸衍生物VII偶合，以提供本發明之化合物。鹵化醯V可經由使V與無機酸鹵化物接觸而製成，譬如二氯化亞硫醯、三氯化磷、三溴化磷或五氯化磷，或較佳係與氯化草醯，在習用條件下進行。一般而言，此反應係使用約1至5莫耳當量之無機酸鹵化物或氯化草醯進行，無論是不含溶劑或在惰性溶劑中，譬如二氯甲烷或四氯化碳，於約0℃至約80℃範圍內之溫度下，歷經約1至約48小時。觸媒譬如DMF亦可使用於此反應中。

然後，使N-磺醯基胺基酸V之鹵化醯與至少一當量，較佳為約1.1至約1.5當量之胺基酸衍生物VII接觸，在惰性稀釋劑中，譬如二氯甲烷，於從約-70℃至約40℃之溫度範圍下，歷經約1至約24小時。此反應較佳係於適當鹼存在下進行，以清除反應期間所產生之酸。適當鹼，舉例言之，係包括三級胺類，譬如三乙胺、二異丙基乙胺、N-甲基嗎福啉等。或者，反應可於Schotten-Baumann型條件下進行，使用含水鹼，譬如氫氧化鈉等。在反應完成時，藉習用方法回收本發明之化合物，包括中和、萃取、沉澱、層析、過濾等。

或者，本發明化合物可以下述方式製成，首先形成式VIII二胺基酸衍生物：

式VIII二胺基酸衍生物可容易地經由使式III胺基酸與式VII 胺基酸衍生物偶合而製成，使用習用胺基酸偶合技術與試劑，譬如上述之碳化二亞胺、BOP試劑等。然後，可使二胺基酸VIII磺酸化，使用式IV氯化磺醯，並使用上述之合成程序，以提供本發明之化合物。

上述反應中所採用之式VII胺基酸衍生物係為無論是已知化合物，或可藉習用合成程序製自已知化合物之化合物。例如，式VII胺基酸衍生物可經由使市購可得之2-乙醯胺基丙二酸二乙酯(Aldrich,Milwaukee,Wisconsin,USA)以烷基或經取代之烷基鹵化物，進行C-烷基化而製成。此反應典型上係經由將2-乙醯胺基丙二酸二乙酯以至少一當量之乙醇鈉與至少一當量之烷基或經取代之烷基鹵化物，在回流乙醇中處理約6至約12小時而進行。然後，使所形成之C-烷基化丙二酸酯脫乙醯基化，水解，及脫羧基化，經由在鹽酸水溶液中，於回流下加熱約6至約12小時，以提供胺基酸，典型上為其鹽酸鹽。

適用於上述反應之式VII胺基酸衍生物之實例，包括但不限於L-酪胺酸甲酯、L-3,5-二碘酪胺酸甲酯、L-3-碘基酪胺酸甲酯、β-(4-羥基-萘-1-基)-L-丙胺酸甲酯、β-(6-羥基-萘-2-基)-L-丙胺酸甲酯等。若需要，當然亦可採用上述化合物之其他酯類或醯胺類。

為使合成變得容易，本發明化合物典型上係被製成酯，意即其中R⁶為烷氧基或經取代之烷氧基等。若需要，則可使用習用條件與試劑使酯基水解，以提供其相應之羧酸。典型上，此反應係經由將酯以至少一當量之鹼金屬氫氧化物處理而進行，譬如氫氧化鋰、鈉或鉀，在惰性稀釋劑中，譬如甲醇或甲醇與水之混合物，於約0℃至約24℃之溫度範圍下，歷經約1至約10小時。或者，苄基酯類可藉氫解作用移除，使用鈀觸媒，譬如鈀/碳。若需要，則可使所形成之羧酸類偶合至胺類，譬如β-丙胺酸乙酯，羥基胺類，譬如羥胺與N-羥基琥珀醯亞胺，烷氧基胺類及經取代之烷氧基胺類，譬如O-甲基羥胺與O-苄基羥胺等，使用如上述之習用偶合試劑與條件。

正如熟諳此藝者所明瞭的，存在於本發明化合物之任何取代基上之其他官能基，可使用習知合成程序，容易地經改質或衍化，無論是在上述偶合反應之前或之後。例如，存在於本發明化合物或其中間物之取代基上之硝基，可容易地藉由鈀觸媒譬如鈀/碳存在下之氫化作用而被還原，以提供其相應之胺基。此反應典型上係於約20℃至約50℃之溫度下，在惰性稀釋劑譬如甲醇中，進行約6至約24小時。具有硝基在例如R³取代基上之化合物，可在上述偶合反應中，例如利用4-硝基苯基丙胺酸衍生物等製成。

同樣地，可使吡啶基於鉑觸媒存在下，譬如鉑氧化物，在酸性稀釋劑中氫化，以提供其相應之六氫吡啶基類似物。一般而言，此反應係經由將吡啶化合物以氫處理而進行，在從約20psi至約60psi，較佳為約40psi之壓力範圍下，於觸媒存在下，在約20℃至約50℃之溫度下，於酸性稀釋劑中，譬如甲醇與鹽酸水溶液之混合物，歷經約2至約24小時。具有吡啶基之化合物可在上述偶合反應中，利用例如β-(2-吡啶基)-、β -(3-吡啶基)-或β-(4-吡啶基)-L-丙胺酸衍生物，容易地製成。

此外，當本發明化合物或其中間物之取代基含有一級或二級胺基時，此種胺基可進一步經衍化，無論是在上述偶合反應之前或之後，舉例言之，以提供醯胺類、磺醯胺類、脲類、硫脲類、胺基甲酸酯類、二級或三級胺類等。於此種取代基上具有一級胺基之化合物，可例如藉由其相應硝基化合物進行如上述之還原而製成。或者，此種化合物可在上述偶合反應中，利用衍生自離胺酸、4-胺基苯基丙胺酸等之式VII胺基酸衍生物製成。

以下述作為說明，具有含一級或二級胺基之取代基之本發明化合物或其中間物，可使用習用醯化試劑與條件容易地被N-醯基化，以提供其相應醯胺。此醯化反應典型上係經由將胺基化合物以至少一當量，較佳為約1.1至約1.2當量之羧酸處理而進行，於偶合試劑存在下，譬如碳化二亞胺、BOP試劑(六氟膦酸苯并三唑-1-基氧基-參(二甲胺基)-鏻)等，在惰性稀釋劑中，譬如二氯甲烷、氯仿、乙腈、四氫呋喃、N,N-二甲基甲醯胺等，於從約0℃至約37℃之溫度範圍下，歷經約4至約24小時。促進劑，譬如N-羥基琥珀醯亞胺、1-羥基苯并三唑等，較佳係用以幫助醯化反應。適用於此反應之羧酸類之實例，包括但不限於N-第三-丁氧羰基甘胺酸、N-第三-丁氧羰基-L-苯丙胺酸、N-第三-丁氧羰基-L-天門冬胺酸苄酯、苯甲酸、N-第三-丁氧羰基六氫異菸鹼酸、N-甲基六氫異菸鹼酸、N-第三-丁氧羰基六氫菸鹼酸、N-第三-丁氧羰基-L-四氫異喹啉-3-羧酸、N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺酸等。

或者，含有一級或二級胺基之本發明化合物或其中間物可使用鹵化醯或羧酸酐進行N-醯基化，以形成其相應之醯胺。此反應典型上係經由使胺基化合物與至少一當量，較佳為約1.1至約1.2當量之鹵化醯或羧酸酐接觸而進行，在惰性稀釋劑中，譬如二氯甲烷，於從約為約-70℃至約40℃之溫度範圍下，歷經約1至約24小時。若需要，則可使用醯化觸媒，譬如4-(N,N-二甲胺基)吡啶，以促進醯化反應。醯化反應較佳係於適當鹼存在下進行，以清除反應期間所產生之酸。適當鹼，舉例言之，係包括三級胺類，譬如三乙胺、二異丙基乙胺、N-甲基嗎福啉等。或者，反應可於Schotten-Baumann型條件下進行，使用含水鹼，譬如氫氧化鈉等。

適用於此反應之醯基鹵化物與羧酸酐類之實例，包括但不限於氯化2-甲基丙醯、氯化三甲基乙醯、氯化苯乙醯、氯化苯甲醯、氯化2-溴基苯甲醯、氯化2-甲基苯甲醯、氯化2-三氟甲基苯甲醯、氯化異菸鹼醯、氯化菸鹼醯、氯化甲基吡啶醯、醋酸酐、琥珀酐等。胺甲醯基氯化物，譬如氯化N,N-二甲基胺甲醯、氯化N,N-二乙基胺甲醯等，亦可使用於此反應中，以提供脲類。同樣地，可採用二碳酸酯，譬如二碳酸二-第三-丁酯，以提供胺基甲酸酯類。

以類似方式，含有一級或二級胺基之本發明化合物或其中間物，可使用磺醯基鹵化物或磺酸酐進行N-磺酸化，以形成磺醯胺。適用於此反應之磺醯基鹵化物與磺酸酐類，包括但不限於氯化甲烷磺醯、氯化氯甲烷磺醯、氯化對-甲苯磺醯、三氟甲烷磺酸酐等。同樣地，可使用胺磺醯基氯化物，譬如氯化二甲基胺磺醯，以提供磺醯胺(例如>N-SO₂-N<)。

此外，存在於本發明化合物或其中間物之取代基上之一級與二級胺基，可與異氰酸酯或硫代異氰酸酯反應，個別獲得脲或硫脲。此反應典型上係經由使胺基化合物與至少一當量，較佳為約1.1至約1.2當量之異氰酸酯或硫代異氰酸酯接觸而進行，在惰性稀釋劑中，譬如甲苯等，於約24℃至約37℃之溫度範圍下，歷經約12至約24小時。使用於此反應中之異氰酸酯與硫代異氰酸酯係為市購可得，或可使用習知合成程序製自市購可得之化合物。例如，異氰酸酯與硫代異氰酸酯係容易地經由使適當胺與光氣或硫代光氣反應而製成。適用於此反應之異氰酸酯與硫代異氰酸酯之實例，包括但不限於異氰酸乙酯、異氰酸正-丙酯、異氰酸4-氰基苯酯、異氰酸3-甲氧苯酯、異氰酸2-苯乙酯、硫代異氰酸甲酯、硫代異氰酸乙酯、硫代異氰酸2-苯基乙酯、硫代異氰酸3-苯基丙酯、硫代異氰酸3-(N,N-二乙胺基)丙酯、硫代異氰酸苯酯、硫代異氰酸苄酯、硫代異氰酸3-吡啶基酯、螢光素異硫氰酸酯(異構物L)等。

再者，當本發明化合物或其中間物含有一級或二級胺基時，胺基可使用醛類或酮類以還原方式烷基化，以形成二級或三級胺基。此反應典型上係經由使胺基化合物與至少一當量，較佳為約1.1至約1.5當量之醛或酮，及至少一當量(以胺基化合物為基準)金屬氫化物還原劑接觸，譬如氰基硼氫化鈉，在惰性稀釋劑中，譬如甲醇、四氫呋喃、其混合物等，於約0℃至約50℃之溫度範圍下，進行約1至約72小時。適用於此反應之醛類與酮類，舉例言之，係包括苯甲醛、4-氯苯甲醛、戊醛等。

以類似方式，當本發明化合物或其中間物具有含羥基之取代基時，羥基可進一步經改質或衍化，無論是在上述偶合反應之前或之後，以提供醚類、胺基甲酸酯類等作為實例。例如，於R⁵取代基上具有羥基之式I與II化合物，可在上述反應中，使用衍生自酪胺酸等之式VII胺基酸衍生物製成。

舉例言之，具有含羥基之取代基之本發明化合物或其中間物可容易地經O-烷基化，以形成醚類。此O-烷基化反應典型上係經由使羥基化合物與適當鹼金屬或鹼土金屬鹼接觸而進行，譬如碳酸鉀，在惰性稀釋劑中，譬如丙酮、2-丁酮等，以形成該羥基之鹼金屬或鹼土金屬鹽。此鹽一般並未經單離，但係當場與至少一當量之烷基或經取代之烷基鹵化物或磺酸酯反應，譬如烷基氯化物、溴化物、碘化物、甲烷磺酸酯或甲苯磺酸酯，而得醚。一般而言，此反應係於約60℃至約150℃之溫度範圍下進行約24至約72小時。當在反應中採用烷基氯化物或溴化物時，較佳係將催化量之碘化鈉或鉀添加至反應混合物中。

適用於此反應之烷基或經取代之烷基鹵化物與磺酸酯之實例，包括但不限於溴醋酸第三-丁酯、N-第三-丁基氯乙醯胺、1-溴基乙苯、α-溴苯基醋酸乙酯、2-(N-乙基-N-苯基胺基)氯乙烷、2-(N,N-乙胺基)氯乙烷、2-(N,N-二異丙基胺基)氯乙烷、2-(N,N-二苄基胺基)氯乙烷、3-(N,N-乙胺基)氯丙烷、3-(N-苄基-N-甲胺基)氯丙烷、N-(2-氯乙基)嗎福啉、2-(六亞甲基亞胺基)氯乙烷、3-(N-甲基六氫吡)氯丙烷、1-(3-氯苯基)-4-(3-氯基丙基)六氫吡、2-(4-羥基-4-苯基六氫吡啶)氯乙烷、甲苯磺酸N-第三-丁氧羰基-3-六氫吡啶甲酯等。

或者，存在於本發明化合物或其中間物之取代基上之羥基可使用Mitsunobu反應進行O-烷基化。在此反應中，係使醇，譬如3-(N,N-二甲胺基)-1-丙醇等，與約1.0至約1.3當量之三苯膦及約1.0至約1.3當量之偶氮二羧酸二乙酯反應，在惰性稀釋劑中，譬如四氫呋喃，於約-10℃至約5℃之溫度範圍下，歷經約0.25至約1小時。然後添加約1.0至約1.3當量之羥基化合物，譬如N-第三-丁基酪胺酸甲酯，並將反應混合物於約0℃至約30℃之溫度下攪拌約2至約48小時，以提供O-烷基化產物。

以類似方式，含有芳基羥基之本發明化合物或其中間物可與芳基碘化物反應，以提供二芳基醚。一般而言，此反應係以下述方式進行，使用適當鹼，譬如氫化鈉，在惰性稀釋劑中，譬如二甲苯，於約-25℃至約10℃之溫度下形成羥基之鹼金屬鹽。然後，將此鹽以約1.1至約1.5當量之溴化亞銅硫化二甲烷錯合物，於約10℃至約30℃之溫度範圍下，處理約0.5至約2.0小時，接著是約1.1至約1.5當量之芳基碘化物，譬如2-碘基苯甲酸鈉等。然後，將反應物加熱至約70℃至約150℃，歷經約2至約24小時，以提供二芳基醚。

此外，含羥基化合物亦可容易地經衍化，以形成胺基甲酸酯。在一種製備此種胺基甲酸酯類之方法中，係使本發明之羥基化合物或其中間物與約1.0至約1.2當量之氯甲酸4-硝基苯酯接觸，在惰性稀釋劑中，譬如二氯甲烷，於約-25℃至約 0℃之溫度範圍下，歷經約0.5至約2.0小時。將所形成之碳酸酯以過量，較佳為約2至約5當量之三烷基胺譬如三乙胺處理約0.5至2小時，接著是約1.0至約1.5當量之一級或二級胺，提供胺基甲酸酯。適用於此反應之胺類實例，包括但不限於六氫吡、1-甲基六氫吡、1-乙醯基六氫吡、嗎福啉、硫代嗎福啉、四氫吡咯、六氫吡啶等。

或者，在製備胺基甲酸酯類之另一種方法中，係使含羥基化合物與約1.0至約1.5當量之氯化胺甲醯接觸，在惰性稀釋劑中，譬如二氯甲烷，於約25℃至約70℃之溫度範圍下，歷經約2至約72小時。典型上，此反應係於適當鹼存在下進行，以清除反應期間所產生之酸。適當鹼舉例言之，係包括三級胺類，譬如三乙胺、二異丙基乙胺、N-甲基嗎福啉等。此外，較佳係將至少一當量(以羥基化合物為基準)之4-(N,N-二甲胺基)吡啶添加至反應混合物中，以幫助反應。適用於此反應之胺甲醯基氯化物之實例，舉例言之，係包括氯化二甲基胺甲醯、氯化二乙基胺甲醯等。

同樣地，當本發明化合物或其中間物含有一級或二級羥基時，此種羥基可容易地被轉化成脫離基，並置換，以形成例如胺類、硫化物及氟化物。例如，4-羥基-L-脯胺酸之衍生物可經由已衍化羥基之親核性置換，被轉化成其相應之4-胺基、4-硫基或4-氟-L-脯胺酸衍生物。一般而言，當在此等反應中採用對掌性化合物時，在連接至已衍化羥基之碳原子處之立體化學，典型上係被逆轉。

此等反應典型上係以下述方式進行，首先使羥基轉化成脫離基，譬如甲苯磺酸酯，經由在吡啶中，將羥基化合物以至少一當量之磺醯基鹵化物處理，譬如氯化對-甲苯磺醯等。此反應一般係在約0℃至約70℃之溫度下，進行約1至約48小時。然後，所形成之甲苯磺酸酯可容易地以疊氮化鈉置換，例如經由使甲苯磺酸酯與至少一當量之疊氮化鈉接觸，在惰性稀釋劑中，譬如N,N-二甲基甲醯胺與水之混合物，於約0℃至約37℃之溫度範圍下，歷經約1至約12小時，以提供其相應之疊氮基化合物。接著，可使疊氮基藉由例如氫化作用，使用鈀/碳觸媒進行還原，以提供胺基(-NH₂)化合物。

同樣地，甲苯磺酸酯基團可容易地被硫醇置換，以形成硫化物。此反應典型上係經由使甲苯磺酸酯與至少一當量之硫醇接觸而進行，譬如硫酚，於適當鹼存在下，譬如1,8-二氮雙環并[5.4.0]十一-7-烯(DBU)，在惰性稀釋劑中，譬如N,N-二甲基甲醯胺，於約0℃至約37℃之溫度下，歷經約1至約12小時，以提供硫化物。此外，將甲苯磺酸酯以嗎福啉基三氟化硫處理，在惰性稀釋劑中，譬如二氯甲烷，於約0℃至約37℃之溫度範圍下，歷經約12至約24小時，獲得其相應之氟基化合物。

再者，具有含碘基芳基之取代基之本發明化合物或其中間物，例如當式I或II之R⁵為(4-碘苯基)甲基時，可容易地使反應物轉化成聯芳基化合物，無論是在上述偶合之前或之後。典型上，此反應係經由將碘基芳基化合物以約1.1至約2當量之芳基碘化鋅處理而進行，譬如2-(甲氧羰基)苯基碘化鋅，於鈀觸媒存在下，譬如四(三苯膦)鈀，在惰性稀釋劑中，譬如四氫呋喃，於約24℃至約30℃之溫度範圍下，直到反應完成為止。此反應係進一步描述於例如Rieke,J.Org.Chem. 1991,56,1445中。

在一些情況中，本發明化合物或其中間物可含有具有一或多個硫原子之取代基。此種硫原子將會存在，例如，當上述反應中所採用之式III胺基酸係衍生自L-噻唑啶-4-羧酸、L-(5,5-二甲基)噻唑啶-4-羧酸、L-硫代嗎福啉-3-羧酸等時。當存在時，可使用習用試劑與反應條件使此種硫原子氧化，無論是在上述偶合反應之前或之後，以提供亞碸或碸化合物。關於使硫化合物氧化成亞碸之適當試劑，舉例言之，係包括過氧化氫、3-氯基過氧苯甲酸(MCPBA)、過碘酸鈉等。氧化反應典型上係經由使硫化合物與約0.95至約1.1當量之氧化劑接觸而進行，在惰性稀釋劑中，譬如二氯甲烷，於約-50℃至約75℃之溫度範圍下，歷經約1至約24小時。然後，可使所形成之亞碸進一步氧化成其相應之碸，其方式是使亞碸與至少另外一當量之氧化劑接觸，譬如過氧化氫、MCPBA、過錳酸鉀等。或者，此碸可經由使硫化物與至少二當量且較佳為過量之氧化劑接觸而直接地製成。此種反應係進一步描述於March,"高等有機化學"，第4版，第1202-1202頁，Wiley出版社(1992)中。

如上文所述，具有氫以外者之R²取代基之本發明化合物，可在上述偶合反應中，使用式III經N-取代之胺基酸製成，譬如肌胺酸、N-甲基-L-苯丙胺酸等。或者，此種化合物可藉由式I或V磺醯胺(其中R²為氫)之N-烷基化作用，使用習用合成程序製成。典型上，此種N-烷基化反應係經由使磺醯胺與至少一當量，較佳為1.1至2當量之烷基或經取代之烷基鹵化物接觸而進行，於適當鹼存在下，譬如碳酸鉀，在惰性稀釋劑中，譬如丙酮、2-丁酮等，於約25℃至約70℃之溫度範圍下，歷經約2至約48小時。適用於此反應之烷基或經取代之烷基鹵化物之實例，包括但不限於碘化甲烷等。

此外，式I或V磺醯胺類，其中R²為氫，且R¹為2-烷氧羰基芳基，可以分子內方式環化，以形成1,2-苯并異噻唑-3-酮衍生物或其類似物。此反應典型上係經由將磺醯胺，譬如N-(2-甲氧羰基苯磺醯基)甘胺酸-L-苯丙胺酸苄酯，以約1.0至1.5當量之適當鹼處理而進行，譬如鹼金屬氫化物，在惰性稀釋劑中，譬如四氫呋喃，於約0℃至約30℃之溫度範圍下，歷經約2至約48小時，而得經環化之1,2-苯并異噻唑-3-酮衍生物。

最後，式I或II化合物，其中Q為-C(S)NR⁷-，係在上述合成程序中，利用胺基硫代羰基酸衍生物替代胺基酸III而製成。此種胺基硫代羰基酸衍生物可藉由Shalaky等人，J.Org.Chem., 61：9045-9048(1996)，與Brain等人，J.Org.Chem.,62：3808-3809(1997)及其中引述之參考資料中所述之程序製成。

4.1.2. 化合物之醫藥配方

一般而言，本發明之化合物將藉由此等化合物之任何所接受之投藥模式，以治療上有效量投予。化合物可藉由多種途徑投藥，包括但不限於口腔、非經腸(例如皮下、硬膜下、靜脈內、肌內、鞘內、腹膜腔內、大腦內、動脈內或病灶內投藥途徑)、局部、鼻內、定位(例如手術應用或外科栓劑)、直腸及肺(例如氣溶膠、吸入或粉末)。因此，此等化合物係有效作為可注射與口服組合物兩者。化合物可藉由灌注或藉由快速注射連續投藥。化合物較佳係藉由非經腸途徑投藥。化合物更佳係藉由靜脈內途徑投藥。此種組合物係以醫藥技藝上習知之方式製成。

本發明化合物意即活性成份之實際量，係依許多因素而定，譬如待治療疾病之嚴重性，意即與脫髓鞘作用或脫髓鞘作用有關之麻痺有關聯之症狀或疾病，病患之年齡與相對健康情況，所使用化合物之功效，投藥之途徑與形式及其他因素。

此種化合物之毒性與治療功效，可藉標準醫藥程序，在細胞培養物或實驗動物中測定，例如用以測定LD₅₀(對50%個體群致死之劑量)與ED₅₀(在50%個體群中於治療上有效之劑量)。於毒性與治療作用間之劑量比，係為治療指數，且其可以LD₅₀/ED₅₀比例表示。顯示大治療指數之化合物係為較佳。

得自細胞培養物檢測與動物研究之數據可用於調配供使用於人類之劑量範圍。此種化合物之劑量較佳係位於循環濃度之範圍內，包括具有極少或無毒性之ED₅₀。此劑量可在此範圍內改變，依所採用之劑型及所使用之投藥途徑而定。對使用於本發明方法中之任何化合物而言，治療上有效劑量可首先自細胞培養物檢測作估計。劑量可在動物模式中調配，以在細胞培養物中測定時，達成包含IC₅₀(意即待測化合物達成病徵一半最高抑制之濃度)之循環血漿濃度範圍。此種資訊可用以較精確地測定人類中之可使用劑量。血漿中之含量可例如藉由高性能液相層析法度量。本發明化合物之有效血液含量較佳係大於或等於10毫微克/毫升。

醫藥組合物投予病患之量係依被投藥之藥物、投藥目的，譬如預防或治療，病患狀態、投藥方式等而改變。在治療應用上，組合物係以足以治癒或至少部份遏制疾病病徵及其併發症之量，投予已經患有疾病之病患。達成此目的之適當量係被定義為"治療上有效劑量"。對此用途有效之量係依被治療之疾病狀態而定，以及由負責臨床師之判斷依一些因素而定，譬如發炎之嚴重性，病患之年齡、體重及一般症狀等。

投予病患之組合物係呈前文所述之醫藥組合物形式。此等組合物可藉習用殺菌技術殺菌，或可殺菌過濾。所形成之水溶液可經包裝以其本身供使用，或經凍乾，該經凍乾之製劑係在投藥之前，與無菌水性載劑合併。化合物製劑之pH值典型上係在3與11之間，更佳為5至9，且最佳為7至8。應明瞭的是，某些前述賦形劑、載劑或安定劑之利用將會造成醫藥鹽之形成。

活性化合物係有效涵蓋寬廣劑量範圍，且一般係以藥學上或治療上有效量投藥。本發明化合物之治療劑量係根據例如治療之特定用途、化合物之投藥方式、病患之健康與症狀及指定醫師之判斷而改變。例如，對靜脈內投藥而言，劑量典型上係在每千克體重約20微克至約500微克之範圍內，較佳為每千克體重約100微克至約300微克。供鼻內投藥之適當劑量範圍一般為每千克體重約0.1微微克至1毫克。有效劑量可外推自活體外或動物模式試驗系統所導出之劑量-回應曲線。典型上，臨床家將投予此化合物，直到所達到之劑量達成所要之作用為止。

當作為醫藥採用時，本發明化合物通常係以醫藥組合物之形式投藥。本發明亦包括醫藥組合物，其含有作為活性成份之一或多種上述本發明化合物，伴隨著一或多種藥學上可接受之載劑或賦形劑。所採用之賦形劑典型上為一種適合投予人類病患或其他哺乳動物之賦形劑。在製造本發明之組合物時，通常係將活性成份與賦形劑混合，藉由賦形劑稀釋，或裝在載體內，其可呈膠囊、小藥囊、紙片或其他容器形式。當賦形劑充作稀釋劑時，其可為固體、半固體或液體物質，其係充作活性成份之媒劑、載劑或媒質。因此，組合物可呈片劑、丸劑、粉末、錠劑、小藥囊、扁囊劑、酏劑、懸浮液、乳化液、溶液、糖漿、氣溶膠(為固體或在液體媒質中)，含有例如至高10重量%活性化合物之軟膏，軟與硬明膠膠囊、栓劑、無菌可注射溶液及無菌包裝粉末形式。

於製備一種配方時，可能必須在與其他成份合併之前研磨活性化合物，以提供適當粒子大小。若活性化合物為實質上不溶性，則一般係將其研磨成小於200網目之粒子大小。若活性化合物為實質上水溶性，則通常係藉由研磨調整粒子大小，以在配方中提供實質上均勻分佈，例如約40網目。

適當賦形劑之一些實例，包括乳糖、右旋糖、蔗糖、花楸醇、甘露醇、澱粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、海藻酸鹽、西黃蓍樹膠、明膠、矽酸鈣、微晶性纖維素、聚乙烯基四氫吡咯酮、纖維素、無菌水、糖漿及甲基纖維素。此等配方可另外包含：潤滑劑，譬如滑石、硬脂酸鎂及礦油；潤濕劑；乳化與懸浮劑；防腐劑，譬如羥苯甲酸甲酯與丙酯；增甜劑；及矯味劑。本發明之組合物可經由採用此項技藝中已知之程序調配，以致使在對病患投藥後，提供活性成份之快速、持續或延遲釋出。

活性化合物在醫藥組合物與其單位劑型中之量可廣泛地改變或調整，依特定應用、引進方式、特定化合物之功效及所要之濃度而定。"單位劑型"一詞係指適合作為單一劑量之物理上分立單位，以供人類病患與其他哺乳動物使用，各單位含有預定量之活性物質，經計算以產生所要治療效果，且伴隨著適當醫藥賦形劑。具治療活性化合物之濃度可從約1毫克/毫升改變至1克/毫升。

對非經腸投藥而言，化合物較佳可在適當惰性載劑中調配，譬如無菌生理食鹽水。例如，化合物在載劑溶液中之濃度典型上係在約1-100毫克/毫升之間。所投予之劑量將由投藥途徑決定。較佳投藥途徑包括非經腸或靜脈內投藥。治療上有效劑量為有效產生顯著降低脫髓鞘作用，及顯著增加髓鞘再形成之劑量。此量較佳係足以在病患中產生統計學上顯著量之髓鞘再形成。

舉例言之，關於製備固體組合物，譬如片劑，係將主要活性成份與醫藥賦形劑混合，以形成含有本發明化合物之均勻混合物之固體預先調配組合物。當指稱此等預先調配組合物為均勻時，係意謂活性成份均勻地分散於整個組合物中，以致可容易地將組合物再分成相等有效單位劑型，譬如片劑、丸劑及膠囊。然後，將此固體預先調配物再分成上述類型之單位劑型，其含有例如0.1至約500毫克本發明之活性成份。

本發明之片劑或丸劑可經塗覆或以其他方式摻配，以提供獲得長期作用優點之劑型。例如，片劑或丸劑可包含內部劑量與外部劑量成份，後者係呈一種包封於前者上之形式。此兩種成份可藉由腸溶性層分隔，該層係用以阻止在胃中崩解，並允許內部成份完整通過進入十二指腸中，或被延遲釋出。多種物質可使用於此種腸溶性層或塗層，此種物質包括多種聚合酸及聚合酸與一些物質之混合物，該物質譬如蟲膠、鯨蠟醇及纖維素醋酸酯。

其中可摻入本發明之新穎組合物以供經口方式或藉由注射投藥之液體形式，包括溶液、適當地經矯味之糖漿、水性或油懸浮液，及具有可食用油類譬如玉米油、棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油之經矯味乳化液，以及酏劑及類似醫藥媒劑。

供吸入或吹入用之組合物，包括在藥學上可接受之水性或有機溶劑或其混合物中之溶液與懸浮液，及粉末。液體或固體組合物可含有如前文所述之適當藥學上可接受之賦形劑。組合物可藉由口腔或鼻呼吸途徑投藥，以提供局部或系統作用。在較佳藥學上可接受溶劑中之組合物可利用惰性氣體霧化。霧化之溶液可直接自噴霧裝置吸入，或噴霧裝置可連接至面罩篷或間歇性正壓力呼吸機。溶液、懸浮液或粉末組合物較佳可經口或經鼻，從以適當方式傳輸配方之裝置投藥。

本發明化合物可以持續釋出形式投藥。持續釋出製劑之適當實例，包括含有蛋白質之固體疏水性聚合體之半滲透性基質，該基質係呈成形物件形式，例如薄膜或微膠囊。持續釋出基質之實例，包括聚酯、水凝膠(例如聚(甲基丙烯酸2-羥乙酯)，如由Langer等人，J.Biomed.Mater.Res.15：167-277(1981)與Langer,Chem.Tech.12：98-105(1982)所述者，或聚(乙烯醇))、聚內交酯(美國專利3,773,919)、L-麩胺酸與γL-麩胺酸乙酯之共聚物(Sidman等人，Biopolymers 22：547-556,1983)、不可降解之乙烯-醋酸乙烯酯(Langer等人，如前文出處)、可降解之乳酸-乙醇酸共聚物譬如LUPRON DEPOT^TM(意即可注射微球體，由乳酸-乙醇酸共聚物與留普內酯(leuprolide)醋酸鹽所組成)及聚D-(-)-3-羥丁酸(EP 133,988)。

本發明化合物可以持續釋出形式投藥，例如積貯注射劑、植入製劑或滲透泵，其可以致使允許活性成份持續釋出之方式調配。關於持續釋出配方之植入物係為此項技藝中所習知。植入物可以生物可降解或生物不可降解之聚合體，被調配成包括但不限於微球體、板狀物。例如，乳酸及/或乙醇酸之聚合體係形成被宿主所良好地容許之可侵蝕聚合體。植入物係被放置在接近蛋白質沉積物之位置(例如，與神經變性病症有關聯之澱粉狀蛋白沉積物形成之位置)，以致使活性劑在該位置之局部濃度，係相對於身體之其餘部份增加。

下列配方實例係說明本發明之醫藥組合物。

配方實例1

製備含有下列成份之硬明膠膠囊：

將上述成份混合，並以340毫克量填入硬明膠膠囊中。

配方實例2

片劑配方係使用下述成份製成：

將諸成份摻合，並壓縮，以形成各重為240毫克之片劑。

配方實例3

製備含有下列成份之乾粉吸入器配方：

將活性混合物與乳糖混合，並將混合物添加至乾粉吸入器具中。

配方實例4

各含有30毫克活性成份之片劑係按下述製成：

使活性成份、澱粉及纖維素通過20號網目美國篩網，並充分地混合。將聚乙烯基-四氫吡咯酮溶液與所形成之粉末混合，然後使其通過16號網目美國篩網。使如此製成之顆粒於50至60℃下乾燥，並通過16號網目美國篩網。接著，將預先通過30號網目美國篩網之羧甲基澱粉鈉、硬脂酸鎂及滑石，添加至顆粒中，於混合後，使其在片劑機上壓縮，而產生各重為150毫克之片劑。

配方實例5

各含有40毫克藥劑之膠囊係按下述製成：

將活性成份、纖維素、澱粉、硬脂酸鎂摻合，通過20號網目美國篩網，並以150毫克量填入硬明膠膠囊中。

配方實例6

各含有25毫克活性成份之栓劑係按下述製成：

使活性成份通過60號網目美國篩網，並懸浮於已使用最小必要熱預先熔解之飽和脂肪酸甘油酯中。然後，將混合物倒入額定2.0克容量之栓劑模具中，並使其冷卻。

配方實例7

每5.0毫升劑量各含有50毫克藥劑之懸浮液係按下述製成：

將藥劑、蔗糖及三仙膠摻合，通過10號網目美國篩網，然後與微晶性纖維素及羧甲基纖維素鈉在水中預先製成之溶液混合。將苯甲酸鈉、矯味劑及著色劑以一些水稀釋，且伴隨著攪拌添加。接著添加足量水，以產生所需要之體積。

配方實例8

各含有15毫克活性成份之硬明膠膠囊係按下述製成：總計 425.0毫克

將活性成份、纖維素、澱粉及硬脂酸鎂摻合，通過20號網目美國篩網，並以560毫克量填入硬明膠膠囊中。

配方實例9

靜脈內配方可按下述製成：

一般係將治療化合物組合物置於具有無菌通入口之容器中，例如具有可藉由皮下注射用針頭或類似尖銳工具穿孔之塞子之靜脈內溶液袋或小玻瓶。

配方實例10

局部配方可按下述製成：

將白色軟性石蠟加熱直到呈熔融態為止。摻入液態石蠟與乳化用蠟，並攪拌直到溶解為止。添加活性成份，並持續攪拌直到分散為止。然後，使混合物冷卻直到為固體為止。

於本發明方法中所採用之另一種較佳配方，係採用經皮傳輸裝置("貼藥")。此種經皮貼藥可以經控制之量，用以提供本發明化合物之連續或不連續灌注。經皮貼藥供藥劑傳輸之構造與用途，係為此項技藝中所習知。參閱，例如1991年6月11日頒予之美國專利5,023,252，其係併於本文供參考。此種貼藥可經建構，以供連續、搏動或依要求傳輸藥劑。

當期望或必須引進醫藥組合物至腦部時，可使用直接或間接安置技術。直接技術通常涉及將藥物傳輸導管安置至宿主之腦室系統中，以旁通血液-腦部障壁。一種此類用於輸送生物學因子至身體特定解剖區域之可植入傳輸系統，係描述於美國專利5,011,472中，其係併於本文供參考。

間接技術，其一般而言係為較佳，通常涉及調配組合物，以經由使親水性藥物轉化成脂質可溶性藥物，提供藥物潛伏化作用。潛伏化作用通常係經由阻斷存在於藥物上之羥基、羰基、硫酸酯及一級胺基而達成，以使得藥物更具脂質可溶性，且易於接受輸送越過血液-腦部障壁。或者，親水性藥物之傳輸可經由動脈內灌注可暫時打開血液-腦部障壁之高張力溶液而被加強。

根據本發明之一方面，化合物可單獨，以化合物之組合，併用髓鞘再形成及/或抗-α-4-抗體，或併用消炎劑進行投藥，該消炎劑典型上係用以治療與脫髓鞘作用有關聯之症狀與疾病。當合併投藥時，此等小化合物可以與此等其他化合物或組合物相同之配方，或以個別配方投藥。當合併投藥時，髓鞘再形成劑可在該其他化合物與組合物之前、之後或與其同時投藥。

本發明之醫藥組合物係適用於多種藥物傳輸系統。供使用於本發明之適當配方，可參閱Remington氏醫藥科學，Mace出版公司，Philadelphia,PA，第17版(1985)。

為提高血清半生期，可將化合物包覆，引進微脂粒之腔管中，製成膠體，或可採用提供化合物之延長血清半生期之其他習用技術。有多種方法可採用，以製備微脂粒，如在例如Szoka等人，美國專利4,235,871、4,501,728及4,837,028中所述者，其每一件均併於本文供參考。

聚合體共軛物

本發明化合物可被調配成聚合體共軛物並以其投藥。聚合體共軛物可顯示勝過非共軛聚合體之利益，譬如經改良之溶解度與安定性。

照此，可採用單一聚合體分子，以進行與本發明化合物之共軛作用，惟亦意欲涵蓋的是，亦可連接大於一種之聚合體分子。本發明之共軛化合物可利用於活體內以及非活體內應用兩者中。此外，應明瞭的是，共軛用聚合體可利用任何其他基團、部份基團或其他共軛物種，按對於最終用途應用之適當方式。舉例言之，其可在一些應用中，用於使一種官能性部份基團以共價方式結合至聚合體，以對聚合體賦予UV-降解抵抗性或抗氧化作用或其他性質或特性。作為另一項實例，其可在一些應用中有利地使聚合體官能基化，以賦與其反應性，並使其能夠交聯至藥物分子，及提高整個共軛物質之各種性質或特性。因此，聚合體可含有不會排除本發明組合物之共軛化合物對其所意欲目的之功效之任何官能基、重複基團、鏈結或其他構成結構。

可有用地採用以達成此等所要特性之說明性聚合體，係描述於同前文出處，以及在PCT WO 01/54690(頒予Zheng等人)中，以其全文均併入本文供參考。可使聚合體偶合至本發明化合物(較佳係經由連結基部份基團)，以形成不會顯著地可被人類酵素分裂之安定鍵結。一般而言，為使鍵結成為不會"顯著地"可分裂，需要連接聚合體與聚合體所連結之本發明化合物之鍵結，不超過約20%係在24小時期間內分裂，當藉由此藝中之標準技術度量時，包括但不限於高壓液相層析法(HPLC)。

本發明化合物最佳係經由聚合體上之末端反應性基團共軛，惟共軛作用亦可自非末端反應性基團分枝。具有反應性基團之聚合體於本文係被稱為"經活化之聚合體"。反應性基團係選擇性地與本發明化合物上之反應性基團反應。經活化之聚合體係經反應，以致使連接可發生在本發明化合物上之任何可取用官能基處。本發明化合物之胺基、碳、自由態羧基、經適當活化之羰基、羥基、脈基、經氧化之碳水化合物部份基團、胺基、碳及巰基(若可採用)，可作為連接位置使用。

一般而言，每莫耳本發明化合物，係採用約1.0至約10莫耳之活化聚合體，依濃度而定。最後量為以下數項間之平衡，使反應程度達到最大，同時使產物之非專一性改質降至最低，且同時界定將保持最適宜活性而同時使本發明化合物之半生期達最佳化之化學性質。較佳係保有本發明化合物至少約50%之生物學活性，且最佳係保有100%。

反應可藉由用以使生物活性物質與惰性聚合體反應之任何適當技藝上所明瞭之方法進行。一般而言，此方法係涉及製備經活化之聚合體，然後使本發明化合物與經活化之聚合體反應，以產生適用於配方之可溶性化合物。此種改質反應可藉由數種方法進行，其可涉及一或多個步驟。本文所包括之聚合體物質較佳為室溫下水溶性。此種聚合體之非限制性清單，包括聚氧化烯均聚物，譬如聚乙二醇(PEG)或聚丙二醇、聚氧乙烯化多元醇，其共聚物及其嵌段共聚物，其條件是保持嵌段共聚物之水溶性。

在本發明之較佳實作上，C₁-C₄烷基聚烷二醇之聚烷二醇殘基，較佳為聚乙二醇(PEG)，或此種二醇類之聚(氧基)烷二醇殘基，可有利地摻入吾人感興趣之聚合體系統中。因此，本發明化合物所連接之聚合體可為聚乙二醇(PEG)之均聚物或為聚氧乙基化多元醇，其條件是，在所有情況中，聚合體為室溫下可溶於水中。此種聚合體之非限制性實例，包括聚氧化烯均聚物，譬如PEG或聚丙二醇、聚氧乙烯化二醇類，其共聚物及其嵌段共聚物，其條件是保持嵌段共聚物之水溶性。

聚氧乙基化多元醇之實例，包括但不限於聚氧乙基化甘油、聚氧乙基化花楸醇、聚氧乙基化葡萄糖或其類似物。聚氧乙基化甘油之甘油主鏈為例如在動物與人類中，於甘油單-、二-及三酯中天然生成之相同主鏈。因此，此分枝未必被視為身體中之外來劑。

一般熟諳此藝者將明瞭前述清單僅只是說明而已，且具有本文中所述品質之所有聚合體物質均意欲涵蓋在內。聚合體不需要具有任何特定分子量，但分子量較佳係在約300與100,000之間，更佳係在10,000與40,000之間。特定言之，20,000或較大之大小，在防止由於腎臟中過濾所致之產物損失上，為最有效。

聚乙二醇(PEG)與相關聚氧化烯(PAO)在此項技藝中已知為製備藥物之有用附加物。參閱，例如PCT WO 93/24476。PEG亦已被共軛至蛋白質、肽及酵素，以增加活體內水溶液溶解度與循環壽命，以及降低抗原性。參閱，例如美國專利5,298,643與5,321,095，兩案均頒予Greenwald等人。PCT WO 93/24476係揭示使用酯鏈結，以將有機分子以共價方式結合至水溶性聚乙二醇。因此，本發明化合物較佳係以聚乙二醇(PEG)衍生物投藥。

因此，本發明之化合物或共軛物可含有以共價方式連接至其上之一或多種聚乙二醇(PEG)取代基。此種共軛物當與缺乏聚乙二醇取代基之化合物比較時，係展示經改良之血清半生期。未受限於任何理論，咸認經改良之血清半生期係與至少一種聚乙二醇本體於化合物結構上之共價共軛作用有關聯。

"PEG"一詞係指包含多重氧化烯單位之聚合體。此種聚合體係視情況以取代基單封端，取代基較佳係選自烷基、芳基、經取代之烷基及經取代之芳基。此種聚合體所包含者為二胺基封端之聚氧化烯聚合體，其在此項技藝中被稱為Jeffamines^®。又再者，此種聚合體可視情況含有一或多種非氧化烯單位，譬如市購可得之聚[己二酸二(乙二醇)酯、聚[酞酸二(乙二醇)酯二醇類等。

所謂PEG衍生物係指聚乙二醇聚合體，其中在聚乙二醇本身中所發現之一或兩個末端羥基已被改質。適當改質之實例包括以可經保護或未經保護之替代官能基，以低分子量配位體，或以另一種巨分子或聚合體，置換一或兩個羥基。聚乙二醇中末端羥基之改質，可經由使聚乙二醇與包含互補反應性官能基之化合物反應而達成，該官能基包括能夠與聚乙二醇中之羥基進行反應之官能基。本發明化合物之PEG衍生物可含有一或多個藉由連結基團以共價方式連接至其上之聚乙二醇(PEG)取代基。

"連結基團"或"連結基"係指一或多個以共價方式將本發明之未經PEG取代之化合物與一或多個PEG基團連接之基團。各連結基可為對掌性或非對掌性、線性、分枝狀或環狀，且在其原子內含物上可為均勻或不均勻(例如，僅含有碳原子之連結基，或含有碳原子以及一或多個存在於連結基上之雜原子之連結基)。

此一或多個PEG基團係使用習用化學技術，以共價方式連接至連結基，提供PEG基團對連結基之共價鏈結。此連結基依次可以共價方式連接至本發明之其他未經PEG取代之化合物。造成此種鏈結之反應化學係為此項技藝中所習知。此種反應化學係涉及利用連結基上之互補官能基、本發明之未經PEG取代之化合物及PEG基團。連結基上之互補官能基較佳係經選擇，相對於可在PEG基團上用於結合之官能基，或可被引進至PEG基團上以供結合者。再一次，此種互補官能基為此項技藝中所習知。

此種聚合體具有數目平均分子量為約100至100,000；較佳為約1,000至50,000；更佳為約10,000至約40,000。

5. 免疫球蛋白

在一項特殊具體實施例中，本發明之藥劑為免疫球蛋白，當被投予病患時，其會抑制脫髓鞘作用及/或促進髓鞘再形成及/或減少麻痺。此等免疫球蛋白可選自會選擇性地結合至α-4整合素，或包含α-4整合素之二聚體，譬如α-4 β-1，或結合VCAM-1之免疫球蛋白。免疫球蛋白較佳係結合α-4 β-1，並抑制α-4 β-1活性。免疫球蛋白較佳為抗體或其片段。

所謂"抗體"係指包括完整免疫球蛋白，譬如IgG1(或任何IgG亞組)或IgM，或衍生自抗體之抑制劑，譬如那塔利諸馬(natalizumab)(Antegren^®)。

所謂"抗體同系物"係指包括含有經由二硫化物鍵連結之免疫球蛋白輕與重鏈之完整抗體。"抗體同系物"一詞亦意欲涵蓋包含一或多種多肽之蛋白質，該多肽選自免疫球蛋白輕鏈、免疫球蛋白重鏈及其抗原結合片段，其能夠結合至一或多種抗原(意即整合素或整合素配位體)。由超過一種多肽所組成之抗體同系物之成份多肽，可視情況經二硫化物結合或者以共價方式交聯。因此，"抗體同系物"包括類型IgA,IgG,IgE,IgD,IgM之完整免疫球蛋白(以及其亞型，例如IgG1)，其中免疫球蛋白之輕鏈可為類型κ或λ。"抗體同系物"亦包括完整抗體之部份，其保有抗原結合專一性，例如Fab片段、Fab'片段、F(ab')₂片段、Fv片段、scFv片段、重與輕鏈單體或二聚體或其混合物。

當本發明之藥劑為抗體時，單株抗體為較佳抗體。與典型上包含針對抵抗不同抗原決定部位之不同抗體之多株抗體製劑對照，各單株抗體係針對抵抗抗原上之單一抗原決定部位。單株抗體之第二個優點是，其係藉由未受其他免疫球蛋白污染之方式合成，例如藉由噬菌體顯示或單離自雜種瘤。雖然本發明意欲涵蓋多株與單株抗體兩者作為本發明之藥劑，但單株抗體係為較佳，因其係高度地專一，且因此，本發明主要係以單株抗體為觀點加以討論。

"天然抗體與免疫球蛋白"通常為約150,000道爾吞之雜四聚體糖蛋白，由兩種相同輕(L)鏈與兩種相同重(H)鏈所組成。各輕鏈係藉由一個共價二硫鍵連接至重鏈，然而二硫化物鏈結之數目係在不同免疫球蛋白同型物之重鏈間改變。各重與輕鏈亦具有規則間隔之鏈內二硫化物橋基。各重鏈於一端具有一個可變功能部位(V_H)，接著是多個恒定功能部位。各輕鏈於一端具有一個可變功能部位(V_L)，而於其另一端具有一個恒定功能部位；輕鏈之恒定功能部位係與重鏈之第一個恒定功能部位排成一行，而輕鏈可變功能部位係與重鏈之可變功能部位排成一行。咸認特定胺基酸殘基係形成輕與重鏈可變功能部位間之界面(Clothia等人，1985,J.Mol.Biol.,186：651-63；Novotny等人，1985,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,82：4592-6)。

此外，其他抗體可使用此藝中可取得之技術確認。例如，本發明之單株抗體可使用噬菌體顯示技術製成。然後，單離會選擇性地結合至α-4整合素或包含α-4整合素之二聚體之抗體片段。經由噬菌體顯示以產生此種抗體之舉例較佳方法，係揭示於美國專利6,225,447；6,180,336；6,172,197；6,140,471；5,969,108；5,885,793；5,872,215；5,871,907；5,858,657；5,837,242；5,733,743及5,565,332中。

"變型"抗體於本文中係指在胺基酸序列上，因為在母抗體序列中增加、缺失及/或取代一或多個胺基酸殘基，而與"母"抗體胺基酸序列不同之免疫球蛋白分子。母抗體或免疫球蛋白可為多株抗體、單株抗體、人化抗體、首次接觸抗原之抗體或任何抗體片段。在較佳具體實施例中，此變型包含一或多個胺基酸取代基在母抗體之一或多個高可變區域中。例如，此變型可包含至少一個，例如約一至約十個，且較佳為約二至約五個取代，在母抗體之一或多個高可變區域中。通常，此變型將具有一種胺基酸序列，其具有與母抗體重或輕鏈可變功能部位序列至少75%胺基酸序列同一性，更佳為至少80%，更佳為至少85%，更佳為至少90%，且最佳為至少95%。關於此序列之同一性或類同性，在本文中係被定義為在使序列對準及若必要而引進間隙以達成最大百分比序列同一性後，於候選序列中與母抗體殘基相同之胺基酸殘基之百分比。沒有任何N-末端、C-末端或內部增長、缺失或插入於抗體序列中，將被解釋為影嚮序列同一性或類同性。此變型係保有結合受體之能力，且較佳係具有優於母抗體之性質。例如，此變型可具有較強結合親和力、經提高之使受體活化之能力等。為分析此種性質，吾人應比較此變型之Fab形式與母抗體之Fab形式，或比較此變型之全長形式與母抗體之全長形式。本文特別感興趣之變型抗體為一種當與母抗體比較時，在生物學活性上顯示至少約10倍，較佳為至少約20倍，且最佳為至少約50倍提高之抗體。於本文中"母"抗體為一種被用於製備此變型之胺基酸序列編碼之抗體。母抗體較佳係具有人類骨架區域，且具有人類抗體恒定區域。例如，母抗體可為人化或人類抗體。"單離"之抗體為一種已被確認並分離及/或自其天然環境之成份回收之抗體。其天然環境之污染成份為會干擾抗體之診斷或治療用途之物質，並可包括酵素、激素及其他蛋白質性或非蛋白質性溶質。在較佳具體實施例中，此抗體係經純化(1)至大於95重量%抗體，當藉Lowry方法測定時，且最佳為大於99重量%，(2)至足以獲得N-末端或內部胺基酸序列之至少15個殘基之程度，利用旋轉杯定序儀，或(3)至均一性，於還原或未還原條件下，使用柯麥西(Coomassie)藍色或較佳為銀色染料，藉SDS-PAGE達成。經單離之抗體包括當場於重組細胞內之抗體，因為抗體之天然環境之至少一種成份將不存在。但是，經分離之抗體一般係藉由至少一個純化步驟製成。

5.1. 單株抗體

單株抗體亦可使用習用雜種瘤方法或基因工程製成。此等方法已被廣泛地應用於產生雜種細胞系，其會分泌高含量之單株抗體，抵抗許多專一抗原，且亦可用以產生本發明之單株抗體。例如，老鼠(例如Balb/c老鼠)可藉由腹膜腔內注射，以抗原α-4抗原決定部位免疫。在已經過足夠時間以允許免疫回應後，使老鼠犧牲，並獲得脾臟細胞，且與骨髓細胞瘤細胞融合，使用此項技藝中所習知之技術。然後，使所形成之融合細胞，雜種瘤，在選擇性培養基中生長，並使用限制稀釋條件，使存活細胞在此種培養基中生長。於無性繁殖與再無性繁殖後，可單離雜種瘤，其會分泌抗體(例如IgG或IgM種類或IgG1亞組之抗體)，其會選擇性地結合至標的α-4或包含α-4整合素之二聚體。為產生對人類用途為專一之藥劑，接著可將經單離之單株用以產生嵌合與人化抗體。抗體亦可被製成為抗肽抗體。此種抗肽抗體係被製成以抵抗α-4整合素之肽。

"嵌合"一詞，當指稱本發明之藥劑時，係意謂一種藥劑，其係由兩種或多種具有不同結構及/或具有不同起源之蛋白質之鏈結(化學交叉鏈結或共價或其他類型)所組成。因此，嵌合α-4整合素拮抗劑可包含一種為α-4整合素拮抗劑或片段之部份基團，與另一種不為α-4整合素拮抗劑之部份基團。

"嵌合"蛋白質之物種為"融合"或"融合蛋白質"，係指兩種或多種蛋白質或其片段經由其個別肽主鏈之共線性、共價鏈結，最佳係經過使此等蛋白質編碼之多核苷酸分子之基因表現。因此，較佳融合蛋白質為嵌合蛋白質，其包含髓鞘再形成抗體或其片段，以共價方式連結至第二個部份基團，其對髓鞘再形成抗體並非原先存在的(意即，其係衍生自另一種免疫球蛋白或多肽)。本發明之較佳融合蛋白質可包含保有抗原結合專一性之完整抗體之部份，例如Fab片段、Fab'片段、F(ab')₂片段、Fv片段、scFv片段、重鏈單體或二聚體、輕鏈單體或二聚體、包含一個重鏈與一個輕鏈之二聚體等。

最佳融合蛋白質為嵌合，且包含髓鞘再形成部份基團，經稠合或者連結至免疫球蛋白輕鏈、重鏈或兩者之所有或部份鉸鏈與恒定區域。因此，本發明之特徵為一種分子，其包含：(1)髓鞘再形成部份基團，(2)第二個肽，例如增加髓鞘再形成部份基團之溶解度或活體內壽命者，例如免疫球蛋白超族群之一員或其片段或部份，例如IgG之部份或片段，例如人類IgG1重鏈恒定區域，例如CH2、CH3及鉸鏈區域。明確言之，"髓鞘再形成部份基團/Ig融合物"為一種包含本發明之生物活性髓鞘再形成部份基團之蛋白質。髓鞘再形成劑之物種為"整合素/Fc融合物"，其係為一種包含經連結至免疫球蛋白恒定功能部位之至少一部份之本發明髓鞘再形成免疫球蛋白之蛋白質。較佳Fc融合物係包含經連結至含有重免疫球蛋白鏈之C末端功能部位之抗體片段之本發明髓鞘再形成免疫球蛋白。

"融合蛋白質"一詞亦意謂髓鞘再形成部份基團，其係經由單-或異官能性分子，以化學方式連結至第二個部份基團(造成"嵌合"分子)，其不為髓鞘再形成部份基團且係如下文所述重新製自經純化之蛋白質。因此，與以重組方式連結不同，以化學方式連結而其係為融合蛋白質之嵌合分子，其一項實例可包含：(1)α-4整合素亞單位瞄靶部份基團，例如VCAM-1部份基團，其能夠結合至帶有VLA-4之細胞表面上之VLA-4；(2)第二個分子，其係增加瞄靶部份基團之溶解度或活體內壽命，例如聚烷二醇聚合體，譬如聚乙二醇(PEG)。α-4瞄靶部份基團可為任何天然生成之α-4配位體或其片段，例如VCAM-1肽或類似之保守地經取代之胺基酸序列。

嵌合、首次接觸抗原^®及人化抗體可製自非人類抗體，並可具有如同其製自之抗體之相同或類似結合親和力。可使用針對產生嵌合抗體所發展之技術(Morrison等人，1984 Proc.Natl. Acad.Sci.81：6851；Neuberger等人，1984 Nature 312：604；Takeda等人，1985 Nature 314：452)，其方式是將得自適當抗原專一性之老鼠抗體分子之基因與例如得自適當生物學活性之人類抗體分子之基因一起接合；此種抗體係在本發明之範圍內。例如，使老鼠單株抗體之可變(V)區域編碼之核酸可接合至使人類恒定(C)區域編碼之核酸，例如IgG1或IgG4。因此，所形成之抗體為物種雜種，一般具有得自非人類抗體之抗原結合功能部位與得自人類抗體之C或效應子功能部位。

人化抗體為具有可變區域之抗體，其主要是得自人類抗體(受體抗體)，但其具有實質上得自非人類抗體(供體抗體)之互補性決定區。參閱，例如Queen等人，1989 Proc.Natl Acad.Sci.USA 86：10029-33；WO 90/07861；及美國專利6,054,297；5,693,761；5,585,089；5,530,101及5,224,539。此等抗體之一或多個恒定區域一般亦得自人類抗體。人類可變功能部位典型上係選自具有顯示與所要非人類可變區結合功能部位高類同性之序列之人類抗體。重與輕鏈可變殘基可衍生自相同抗體或不同人類抗體。此外，此等序列可經選擇為數種人類抗體之同意物，譬如在WO 92/22653中所述者。

在人類可變區域內之特定胺基酸係經選擇以供取代，以預測之構形與抗原結合性質為基礎。這可使用一些技術測得，譬如電腦模型製作，可變區域內某些位置處之胺基酸行為與結合性質之預測，及取代作用之觀察。例如，當胺基酸在非人類可變區域與人類可變區域之間不同時，人類可變區域可經改變，以反映出非人類可變區域之胺基酸組成。使抗-α-4抗體人化之數種實例，係描述於本文中。

所謂"人化抗體同系物"係指藉由重組DNA技術製成之抗體同系物，其中對抗原結合並不需要之人類免疫球蛋白輕或重鏈之一部份或全部胺基酸，已被用於取代得自非人類哺乳動物免疫球蛋白輕或重鏈之相應胺基酸。"人類抗體同系物"為一種抗體同系物，其中免疫球蛋白輕或重鏈之所有胺基酸(不管其是否為抗原結合所需)均衍生自人類來源。

在一項特殊具體實施例中，本發明慢性劑量服用法中所使用之抗體為人化抗體，如在美國專利5,840,299中所揭示者，其係併於本文供參考。

在另一項具體實施例中，可使含有人類抗體基因之轉基因老鼠以抗原α-4結構免疫，並可使用雜種瘤技術以產生選擇性地結合至α-4之人類抗體。

嵌合人類及/或人化抗體可藉由重組表現產生，例如在人類雜種瘤(Cole等人，單株抗體與癌症療法，Alan R.Liss，第77頁(1985))，在骨髓細胞瘤細胞或在中國大頰鼠卵巢(CHO)細胞中之表現。或者，可將使抗體編碼之序列併入適用於引進動物基因組中之載體內，藉以產生轉基因動物。一項實例係在轉基因動物譬如牛之牛乳中產生此種抗體。參閱，例如美國專利5,849,992與5,304,489。適當轉基因包括具有得自乳腺專一基因之啟動子及/或增強子之轉基因，例如酪蛋白或β-乳球蛋白質。

5.1.1. 人化與首次接觸抗原 ^® 之抗體

在本發明之一項具體實施例中，係提供對VLA-4之α-4亞單位為專一之人化(與首次接觸抗原^®)免疫球蛋白(或抗體)，其當以有效量投予時，係抑制脫髓鞘作用及/或促進髓鞘再形成及/或減少麻痺。人化與首次接觸抗原^®抗體為動物(典型上為哺乳動物)來源之抗體，其已使用基因工程學技術改質。此等技術係使用人類序列，用以置換恒定區域及/或可變區域骨架序列，同時保有抗體之原始抗原專一性。人化與首次接觸抗原^®抗體係共同衍生自對人類抗原(例如人類VCAM-1或人類VLA-4)具專一性之齧齒動物(例如老鼠與大頰鼠)抗體。經由使供體抗體(得自抗原所投予動物之抗體)再成形為具有得自將被投予該抗體以達治療目的之動物之序列，則於抗體投藥時，在動物中將有降低之宿主回應。只有Fc區域或除了互補性決定區(CDR)以外之全部，可被受體功能部位置換，其中受體為該再成形抗體欲被投予之動物(例如哺乳動物，譬如人類、馴養動物、農業動物等)。

結合至VLA-4之α-4亞單位，且當以有效量投予病患時會抑制脫髓鞘作用之抗體，係為較佳。更佳為當以有效量投藥時，在病患中引致髓鞘再形成及/或減少麻痺之抗體，其中該病患係患有脫髓鞘疾病或症狀。

典型上，老鼠抗體之CDR係被移植至人類抗體中之相應區域上，因其係為CDR(意即，三個在抗體重鏈中，三個在輕鏈中)，其係為老鼠抗體(或任何其他動物抗體)結合至專一抗原之區域。CDR之移植係藉由基因工程學達成，而其中CDR DNA序列係藉由老鼠重與輕鏈可變(V)區域基因鏈段之無性繁殖決定，然後藉由位置引導之致突變轉移至相應人類V區域。在此過程之最後階段中，係添加所要同型物(通常對CH為γ I，而對CL為κ)之人類恒定區域基因鏈段，並使人化重與輕鏈基因共表現於哺乳動物細胞中，以產生可溶性人化抗體。

此等CDR對人類抗體之轉移，係賦予此抗體具有最初老鼠抗體之抗原結合性質。老鼠抗體中之六個CDR係於結構上被裝載在V區域"骨架"區上。CDR-接枝成功之原因是老鼠與人類抗體間之骨架區域可具有極類似之3-D結構，具有對CDR之類似連接點，以致CDR可被交換。此種人化抗體同系物可被製備，例如在Jones等人，1986,Nature 321：522-5；Riechmann等人，1988,Nature 332：323-7；Queen等人，1989,Proc.Nat.Acad.Sci.USA 86：10029；及Orlandi等人，1989,Proc.Nat.Acad.Sci.USA 86：3833中所舉例者。

雖然如此，在骨架區域內之某些胺基酸係被認為會與CDR交互作用，且影嚮整個抗原結合親和力。CDR自老鼠抗體之直接轉移，無需人類V區域骨架之任何改質，以產生重組人化抗體之，經常會造成結合親和力之部份或完全喪失。在數種情況中，改變受體抗體(例如人類抗體)骨架區域中之殘基，以獲得結合活性，顯得很重要。

Queen等人，1989(前文)與WO 90/07861(蛋白質設計實驗室)已描述人化抗體之製備，其係經由將老鼠MAb(抗-Tac)之CDR 與人類免疫球蛋白骨架及恒定區域合併，而在受體抗體骨架區域中含有經改質之殘基。一種解決結合親和力損失問題，而無需人類V區域骨架殘基之任何改質之辦法，係涉及兩個關鍵步驟。首先，藉由電腦分析器，針對最初老鼠抗體V區域骨架之最適宜蛋白質序列類同性，選擇人類V骨架區域。在第二個步驟中，係藉由電腦製作老鼠V區域之三級結構模型，以使得可能與老鼠CDR交互作用之骨架胺基酸殘基形象化。然後，將此等老鼠胺基酸殘基重疊於類似人類骨架上。關於其他細節，參閱美國專利5,693,762；5,693,761；5,585,089；及5,530,101(蛋白質設計實驗室)。

可使用於本發明中之某些含α-4亞單位之整合素拮抗劑，包括具有B抗原決定部位專一性之嵌合與人化重組抗體同系物(意即，完整免疫球蛋白及其部份)，其已被製成且描述於美國專利5,932,214(MAb HP1/2)中。關於製備嵌合(老鼠可變-人類恒定)與人化抗-整合素抗體同系物之起始物質，可為如前文所述之老鼠單株抗-整合素抗體，市購可得之單株抗-整合素抗體(例如HP2/1,Amae國際公司，Westbrook,Me)。其他較佳人化抗-VLA-4抗體同系物係由Athena神經科學公司描述於PCT/US95/01219(1995年7月27日)、美國專利5,840,299與6,033,665中。5,932,214、5,840,299及6,033,665專利之內容均以其全文併於本文供參考。

此等人化抗-VLA-4抗體包含人化輕鏈與人化重鏈。人化輕鏈包含三個互補性決定區(CDRI、CDR2及CDR3)，具有得自老鼠21.6免疫球蛋白輕鏈之相應互補性決定區之胺基酸序列，及得自人類κ輕鏈可變區域骨架序列之可變區域骨架，惟在至少一個位置中胺基酸位置係被存在於老鼠21.6免疫球蛋白輕鏈可變區域骨架之相等位置中之相同胺基酸所佔據。人化重鏈包含三個互補性決定區(CDR1、CDR2及CDR3)，具有得自老鼠21.6免疫球蛋白重鏈之相應互補性決定區之胺基酸序列，及得自人類重鏈可變區域骨架序列之可變區域骨架，惟在至少一個位置中，胺基酸位置係被存在於老鼠21.6免疫球蛋白重鏈可變區域骨架之相等位置中之相同胺基酸所佔據。參閱美國專利5,840,299與6,033,665。

經單離α-4整合素拮抗劑之片段(例如本文中所述抗體同系物之片段)亦可有效地藉由重組方法，藉由蛋白分解消化或藉由化學合成，使用熟諳此藝者已知之方法產生。在重組方法中，多肽之內部或末端片段可經由從對經單離之刺蝟狀多肽進行編碼之DNA序列之一端(對末端片段而言)或兩端(對內部片段而言)，移除一或多個核苷酸而產生。經致突變DNA之表現會產生多肽片段。以某些核酸內切酶之消化亦可產生會使一陣列片段編碼之DNA。使蛋白質片段編碼之DNA亦可藉由隨機剪切、限制消化或其組合而產生。蛋白質片段可直接產生自完整蛋白質。肽可專一性地被蛋白分解酵素分裂，包括但不限於血纖維蛋白溶酶、凝血酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶原或胃蛋白酶。此等酶之每一個係對其攻擊之肽鍵類型專一。胰蛋白酶係催化其中羰基係得自通常為精胺酸或離胺酸之鹼性胺基酸肽鍵之水解作用。胃蛋白酶與胰凝乳蛋白酶原係催化得自芳族胺基酸類譬如色胺酸、酪胺酸及苯丙胺酸之肽鍵之水解作用。經分裂蛋白質片段之替代組，係經由防止在對蛋白分解酵素敏感之位置處之分裂而產生。例如，離胺酸之ε-胺基酸基與三氟硫代醋酸乙酯在溫和鹼性溶液中之反應，係產生經阻斷之胺基酸殘基，其相鄰肽鍵已不再對藉由胰蛋白酶之水解作用敏感。蛋白質可經改質，以產生對蛋白分解酵素敏感之肽鏈結。例如，半胱胺酸殘基以β-鹵基乙基胺類之烷基化作用，係產生被胰蛋白酶水解之肽鏈結(Lindley,1956,Nature 178：647)。此外，可利用會使專一殘基處之肽鏈分裂之化學試劑。例如，溴化氰會使甲硫胺酸殘基處之肽分裂(Gross等人，1961,J.Am.Chem.Soc.83：1510)。因此，經由將蛋白質以改質劑、蛋白分解酵素及/或化學試劑之各種組合處理，蛋白質可被區分成所要長度之片段，未具有片段之重疊，或被區分成所要長度之重疊片段。

5.1.1.1. 那塔利諸馬(natalizumab)與相關之人化抗體

本發明係提供一種使用專一性地結合至VLA-4配位體之人化免疫球蛋白之方法，無論單獨或合併，以促進髓鞘再形成。一種供使用於此種治療方法及藥劑中之較佳抗體，包括歸屬於Elan醫藥公司之美國專利5,840,299中所述者，其係以全文併於本文。另一方面係意欲涵蓋具有髓鞘再形成活性之此等抗體片段於活體內作為評估之用途。

人化抗體包含人化輕鏈與人化重鏈。於一方面，人化輕鏈可包含三個互補性決定區(意即CDR1、CDR2及CDR3)，具有得自老鼠21-6免疫球蛋白輕鏈之相應互補性決定區之胺基酸序列，及得自人類κ輕鏈可變區域骨架序列之可變區域骨架，惟在選自包括位置L45,L49,L58及L69之第一組群之至少一個位置中，其中胺基酸位置係被存在於老鼠21.6免疫球蛋白輕鏈可變區域骨架之相等位置中之相同胺基酸所佔據。

人化重鏈包含三個互補性決定區(意即CDR1、CDR2及CDR3)，具有得自老鼠21-6免疫球蛋白重鏈之相應互補性決定區之胺基酸序列，及得自人類重鏈可變區域骨架序列之可變區域骨架，惟在選自包括H27,H28,H29,H30,H44,H71之至少一個位置中，其中胺基酸位置係被存在於老鼠21-6免疫球蛋白重鏈可變區域骨架之相等位置中之相同胺基酸所佔據。免疫球蛋白係專一性地結合至VLA-4，其中親和力具有下限為約10⁷M^-1與上限為老鼠21-6免疫球蛋白親和力之約五倍。

通常，人化輕與重鏈可變區域骨架係個別得自RE1與21/28'CL可變區域骨架序列。當人化輕鏈可變區域骨架係得自RE1時，至少兩個骨架胺基酸係被置換。一個胺基酸係得自前文所述之第一組位置。其他胺基酸係得自包括位置L104、L105及L107之第三組。此位置係被存在於得自人類免疫球蛋白而非RE1之κ輕鏈相等位置中之相同胺基酸所佔據。

一些人化免疫球蛋白具有稱為La或Lb之成熟輕鏈可變區域序列，或稱為Ha、Hb或Hc之成熟重鏈可變區域序列(圖13)。較佳人化免疫球蛋白包括具有La輕鏈與Ha、Hb或Hc重鏈者(圖14)。

人化免疫球蛋白具有實質上得自人類免疫球蛋白(稱為受體免疫球蛋白)之可變骨架區域，及實質上得自稱為μMAb 21.6(被稱為供體免疫球蛋白)之老鼠免疫球蛋白之互補性決定區。恒定區域，若存在時，亦實質上得自人類免疫球蛋白。人化抗體展示對VLA-4之專一性結合親和力為至少10⁷、10⁸、10⁹或10¹⁰M^-1。通常，人化抗體對VLA-4之結合親和力上限係在μMAb 21.6(約10⁹M^-1)之三或五之因數內。結合親和力之下限亦經常在μMAb 21.6之三或五之因數內。

舉例言之，人化抗體可例如使用老鼠MAb 21.6單株抗體製成。關於產生人化抗體之起始物質係為μMAb 21.6。此抗體之單離與性質係描述於美國專利6,033,655(歸屬於Elan醫藥公司)中，其係以全文併於本文供參考。簡言之，μMAb 21.6係對VLA-4之α-4亞單位為專一，且已被証實會抑制人類淋巴細胞結合至以腫瘤壞死因子刺激之大白鼠腦細胞之組織培養物。從N-末端至C-末端，輕與重鏈兩者均包含功能部位FR1,CDR1,FR2,CDR2,FR3,CDR3及FR4。胺基酸對各功能部位之指定，係根據Kabat之編號慣用法。

下一步驟係涉及選擇人類抗體以供應骨架殘基。將老鼠CDR取代至人類可變功能部位骨架中，若人類可變功能部位骨架採取與CDR所源自之老鼠可變骨架相同或類似構形時，最可能造成保留其正確空間取向。這是經由自人類抗體獲得人類可變功能部位而達成，其骨架序列展示與衍生出CDR之老鼠可變骨架功能部位之高度序列同一性。重與輕鏈可變骨架區域可衍生自相同或不同人類抗體序列。人類抗體序列可為天然生成之人類抗體之序列，或可為數種人類抗體之一致序列。參閱Kettleborough等人，Protein Engineering 4：773(1991)；Kolbinger等人，Protein Engineering 6：971(1993)。

適當人類抗體序列係藉由老鼠可變區域之胺基酸序列與已知人類抗體序列之電腦比較而確認。此種比較係個別地對重與輕鏈進行，但對每一個之原理係類似。此比較發現μ21.6輕鏈顯示與亞型κ1之人類輕鏈之最大序列同一性；μ21.6重鏈顯示與亞型一之人類重鏈之最大序列同一性，如前文所述由Kabat所定義者。因此，輕與重人類骨架區域通常係衍生自此等亞型之人類抗體或此種亞型之一致序列。顯示與得自μMAb 21.6之相應區域之最大序列同一性之較佳輕與重鏈人類可變區域，係個別得自抗體RE1與21/28'CL。

然後，電腦模型可用以進一步提高人化抗體結合至其同系抗原之能力。老鼠CDR區域與人類可變骨架區域之非天然並列可能會造成非天然構形限制，除非藉由某些胺基酸殘基之取代作修正，否則其會導致結合親和力之損失。關於取代用胺基酸殘基之選擇，一部份係藉由電腦模型決定。用於產生免疫球蛋白分子之三次元影像之電腦硬體與軟體，可廣泛地取得。一般而言，分子模式係自免疫球蛋白鏈或其功能部位之已解出結構開始而製成。欲被模製之鏈係與已解出三次元結構之鏈或功能部位比較胺基酸序列類似性，且顯示最大序列類似性之鏈或功能部位係經選擇作為分子模型建構之起始點。例如，對於μMAb 21.6之輕鏈，製作骨架區域CDR1與CDR2區域模型之起始點係為人類輕鏈RE1。對於CDR3區域，起始點為得自不同人類抗體HyHEL-5之輕鏈之CDR3區域。已解出之起始結構係經修改，以允許被模製之免疫球蛋白鏈或功能部位中之實際胺基酸與起始結構中胺基酸間之差異。然後，將已修改之結構組裝成複合免疫球蛋白。最後，此模式係藉由能量降至最低化作用，及經由確認所有原子均在彼此之適當距離內，且鍵結長度與角度係在化學上可接受之極限內，而進行精修。

正如上文所指出者，本發明之人化抗體包含實質上得自人類免疫球蛋白之可變骨架區域，及實質上得自被稱為μMAb 21.6之老鼠免疫球蛋白之互補性決定區。在已確認μMAb 21.6與適當人類受體免疫球蛋白之互補性決定區(CDR)後，下一步驟，係決定得自此等成份之那一個殘基(若含有時)應被取代，以使所形成之人化抗體之性質達最佳化。一般而言，人類胺基酸殘基被老鼠取代應被降至最低，因為老鼠殘基之引進會增加抗體在人類中引出HAMA回應之危險。胺基酸係以其對CDR構形及/或結合至抗原之可能影嚮為基礎，而作關於取代之選擇。此種可能影嚮之研究係經由製作模型，胺基酸在特定位置處之特性之檢查，或特定胺基酸之取代或致突變作用之經驗觀察。

當胺基酸在μMAb 21.6可變骨架區域與相當人類可變骨架區域之間不同時，人類骨架胺基酸通常應被相當老鼠胺基酸取代，此係若合理地預期該胺基酸：(1)以非共價方式直接結合抗原(例如在μMAb 21.6之位置L49、L69處之胺基酸)，(2)係鄰近CDR區域，在由Chothia等人如前文出處所提出之替代定義下為CDR區域之一部份，或者與CDR區域交互作用(例如，係在CDR區域之約3Å內)(例如在μMAb 21.6之位置L45,L58,H27,H28,H29,H30及H71處之胺基酸)，或(3)參與V_L-V_H界面(例如在μMAb 21.6之位置H44處之胺基酸)。

取代用之其他候選者為受體人類骨架胺基酸，其在該位置對於人類免疫球蛋白是不尋常的(例如在μMAb 21.6之位置L104、L105及L107處之胺基酸)。此等胺基酸可被得自較典型人類免疫球蛋白之相等位置之胺基酸取代。或者，得自老鼠MAb 21.6中之相等位置之胺基酸，當此種胺基酸為相等位置處之人類免疫球蛋白之典型代表時，可被引進人類骨架區域中。

一般而言，符合上述標準之所有或大部份胺基酸之取代係為所要的。但是，有時關於特定胺基酸是否符合上述標準有些含糊，則產生替代變型免疫球蛋白，其中之一具有該特定取代，其他則否。人化抗體通常將含有人類輕鏈骨架殘基被相應μMAb 21.6殘基在至少1、2或3且更通常為4個下列位置處之取代：L45、L49、L58及L69。人化抗體通常亦含有人類重鏈骨架殘基之取代，在至少1、2、3、4或5及有時6個下列位置處：H27、H28、H29、H30、H44及H71。H36亦可視情況經取代。在較佳具體實施例中，當人類輕鏈受體免疫球蛋白為RE1時，此輕鏈亦含有取代，在至少1或2且更通常為3個下述位置處：L104、L105及L107。此等位置係被得自具有較典型胺基酸殘基之人類免疫球蛋白相等位置之胺基酸取代。用以取代之適當胺基酸係示於圖13與14中。

通常，人化抗體中之CDR區域係實質上相同，且更通常係與μMAb 21.6抗體中之相應CDR區域相同。但是，有時，一般期望改變CDR區域中之殘基之一。例如，實例4係確認μMAb 21.6 CDR3與VCAM-1配位體間之胺基酸類似性。此觀察指出，人化抗體之結合親和力可能會經由將重鏈CDR3區域再設計成又更接近地相似VCAM-1而經改良。因此，一或多個得自CDR3功能部位之胺基酸，可被得自VCAM-1結合功能部位之胺基酸取代。雖然通常並不期望，但有時可製造CDR殘基之一或多個保守胺基酸取代，而不會可感知地影嚮所形成人化免疫球蛋白之結合親和力。

除了上文討論之專一胺基酸取代之外，人化免疫球蛋白之骨架區域通常為實質上相同，且更通常係與其用以衍生之人類抗體之骨架區域相同。當然，骨架區域中之許多胺基酸對抗體之專一性或親和力，係造成極少或無直接貢獻。因此，骨架殘基之許多個別保守取代可被容許，而不會少許改變所形成人化免疫球蛋白之專一性或親和力。但是，一般而言，此種取代是不期望的。

可變區域之產生在已於概念上選擇人化免疫球蛋白之CDR與骨架成份下，可採用多種方法以產生此種免疫球蛋白。由於密碼之簡併性，故多種核酸序列將使各免疫球蛋白胺基酸序列編碼。所要之核酸序列可藉由重新固相DNA合成，或藉由所要多核苷酸較早期製成變型之PCR致突變而產生。寡核苷酸所媒介之致突變為用以製備標的多肽DNA之取代、缺失及插入變型之較佳方法。參閱Adelman等人，DNA 2：183(1983)。簡言之，標的多肽DNA係經由使所要突變編碼之寡核苷酸雜化至單股DNA模板而改變。於雜化作用後，DNA聚合酶係用以合成模板之整體第二個互補股鏈，其係併入寡核苷酸引物中，並使所選定之改變在標的多肽DNA中編碼。

恒定區域之選擇按前述產生之人化抗體之可變鏈段典型上係被連結至免疫球蛋白恒定區域(Fc)之至少一部份，其典型上為人類免疫球蛋白。人類恒定區域DNA序列可根據習知程序，自多種人類細胞單離，但較佳為不滅之B-細胞(參閱Kabat等人，如前文出處，與WO 87/02671)(其每一個均以其全文併於本文供參考)。抗體一般係含有輕鏈與重鏈恒定區域。重鏈恒定區域通常包含CH1、鉸鏈、CH2、CH3及CH4區域。

人化抗體包括具有所有類型恒定區域之抗體，包括IgM、IgG、IgD、IgA及IgE，與任何同型物，包括IgG1、IgG2、IgG3及IgG4。當期望人化抗體展示細胞毒活性時，恒定功能部位通常為互補固定恒定功能部位，且此種類典型上為IgG1。當不想要此種細胞毒活性時，恒定功能部位可為IgG2種類。人化抗體可包含得自一種以上之種類或同型物之序列。

5.1.1.2. 其他抗-VLA-4抗體

其他抗-VLA-4抗體包括但不限於HP1/2、HP-2/1、HP2/4、L25及P4C2。此等抗體亦可以有效量投藥，以在病患中抑制脫髓鞘作用及/或促進髓鞘再形成及/或減少麻痺，如熟諳此藝者，如本文中所討論者，及如此項技藝中一般已知者將易於明瞭的。

在老鼠中產生之單株抗體經常係於稍後經人化，以在注射老鼠抗體之人類病患中避免人類抗-老鼠抗體(HAMA)免疫回應。此係藉由CDR接枝或再成形而發生。因此，典型上，抗體最初為老鼠單株抗體，其係經過CDR接枝或再成形變成人化，如上文關於21.6抗體所討論者。

明確言之，人化抗體具有對VLA-4之專一性，並具有促進髓鞘再形成、預防脫髓鞘作用及/或減少麻痺之能力。此等抗體係衍生自一些來源(例如典型上為老鼠)，可變功能部位之至少一或多個互補性決定區(CDR)係衍生自供體非人類抗-VLA-4抗體，且其中可以已經是或可以不是受體抗體重及/或輕可變骨架區域之最少改變，以保有供體抗體結合專一性。CDR-接枝之重鏈可變功能部位之抗原結合區域，較佳係包含相應於位置31-35(CDR1)、50-65(CDR2)及95-102(CDR3)之CDR。在一項較佳具體實施例中，重鏈進一步包含非人類殘基在骨架位置27-30(Kabat編號)。此重鏈可進一步包含非人類殘基在骨架位置75(Kabat編號)。此重鏈可進一步包含非人類殘基在骨架位置77-79或66-67與69-71或84-85或38及40或24(Kabat編號)。CDR-接枝之輕鏈可變功能部位之抗原結合區域，較佳係包含相應於位置24-34(CDR1)、50-56(CDR2)及89-97(CDR3)之CDR。在一項較佳具體實施例中，輕鏈進一步包含非人類殘基在骨架位置60與67(Kabat編號)。此等殘基命名係根據Kabat編號法進行編號(Kabat等人，第5版，第4卷，具免疫學重要性之蛋白質序列，美國人類保健服務部門，NIH,USA(1991))。

老鼠抗體HP1/2之合成與人化作用. HP1/2為另一種針對抵抗VLA-4之抗體。製備此抗體之人化變型以用於人類病患中之方法，係在本文中加以描述，且係進一步描述於歸屬於Biogen公司之美國專利6,602,503中，並據此以其全文併於本文供參考。人化抗體之序列係提供如下。HP1/2 V_H DNA序列(SEQ ID NO.：1)及其經轉譯之胺基酸序列(SEQ ID NO.：2)為：

HP1/2 V_H兩種序列與族群IIC一致序列間之比較，顯示僅有之不尋常殘基係在胺基酸位置80、98及121(意即Kabat編號中之79、94及121)。雖然Tyr-80在亞組IIC中為不變的，但其他經定序之老鼠V_H區域具有其他芳族胺基酸類在此位置，惟均無Trp。大部份之人類與老鼠V_H具有精胺酸殘基在Kabat位置94。Asp-94在HP1/2 V_H中之存在係極端地稀少；只有一個帶負電荷殘基之經報告實例在此位置。在Kabat位置113之脯胺酸亦為不尋常，但在CDR構形中不太可能是重要的，因其與彼等相距很遠。構成CDR1之胺基酸已在三個其他定序老鼠V_H區域中發現。但是，CDR2與CDR3對HP1/2是獨特的，且並未在任何其他經報告之老鼠V_H中發現。

HP1/2 V_K DNA序列(SEQ ID NO.：3)及其經轉譯之胺基酸序列(SEQ ID NO.：4)如下：

HP1/2 V_K為Kabat族群V之一員(Kabat等人，第5版，第4卷，具免疫學重要性之蛋白質序列，美國人類保健服務部門(1991))，且未具有不尋常殘基。CDR1與CDR3之胺基酸是獨特的。構成CDR2之胺基酸已被報告於一種其他老鼠V_K中。

CDR-接枝之抗-VLA-4抗體之設計.為設計CDR-接枝之抗-VLA-4抗體，必須測定老鼠HP1/2之那一個殘基包含輕與重鏈之CDR。在較不可變骨架序列中之三個高可變性區域，已在輕與重鏈兩者上發現(Wu與Kabat,J.Exp.Med.132：211-250(1970)；Kabat等人，(1991))。在大部份情況中，此等高可變區域係相應於但可延伸超過CDR。老鼠HP1/2之CDR係根據Kabat等人(1991)，藉由與其他V_H及V_K序列對準而明瞭。老鼠HP1/2 V_H之CDR係經確認，且相應於人化V_H序列中經確認之殘基，如下：

此等係個別相應於Kabat編號中之AA₃₁-AA₃₅、AA₅₀-AA₆₅及AA₉₅-AA₁₀₂。老鼠HP1/2 V_K之CDR係經確認，且相應於人化V_K序列中經確認之殘基，如下：

此等係相應於Kabat編號中之相同編號胺基酸。因此，只有V_K而非V_H之邊界，CDR係相應於Kabat CDR殘基。經選擇以接受HP1/2(供體)CDR之人類骨架為NEWM與RE1，個別對於重與輕鏈。NEWM與RE1序列已在Kabat等人(1991)中發表。

人化HP1/2抗體之人化重鏈可變區域之DNA與相應胺基酸序列(SEQ ID NO.：5及6)為：

人化HP1/2抗體之人化輕鏈可變區域之DNA與相應胺基酸序列(SEQ ID NO.：7及8)為：

除了上述人化HP1/2抗體輕與重鏈以外，其他受體重與輕鏈區域亦可用於供體HP1/2區域之插入。所有下列構造物均含有Ser-75(Kabat編號)。STAW構造物進一步含有Gln對Thr在位置77，Phe對Ala在位置78，及Ser對Trp在位置79(Kabat編號)。V_H DNA序列(SEQ ID NO.：9)及其經轉譯之胺基酸序列(SEQ ID NO.：10)係敘述於下文：

KAITAS構造物含有Arg對Lys(位置66)、Val對Ala(位置67)、Met對Ile(位置69)、Leu對Thr(位置70)及Val對Ala(位置71)(Kabat編號)之其他變化。KAITAS V_H DNA序列(SEQ ID NO.：11)及其經轉譯之胺基酸序列(SEQ ID NO.：12)係敘述於下文：

SSE構造物包含Ala對Ser(位置84)與Ala對Glu(位置85)(Kabat編號)之其他改變。SSE V_H DNA序列(SEQ ID NO.：13)及其經轉譯之胺基酸序列(SEQ ID NO.：14)係敘述於下文：

KRS構造物包含Arg對Lys(位置38)與Pro對Arg(位置40)(Kabat編號)之其他改變。KRS V_H DNA序列(SEQ ID NO.：15)及其經轉譯之胺基酸序列(SEQ ID NO.：16)係敘述於下文：

AS構造物包含Val對Ala在位置24(Kabat編號)之改變。AS V_H DNA序列(SEQ ID NO.：17)及其經轉譯之胺基酸序列(SEQ ID NO.：18)為：

人化輕鏈一般需要少許(若有時)修改。但是，在人化抗-VLA-4抗體之製備中，數種經驗變化確實會改良抗體對其配位體之免疫學活性。例如，具有老鼠輕鏈之具有Ser突變之人化重鏈，係比老鼠HP1/2之功效低約2.5倍。具有人化輕鏈之相同人化重鏈為約4倍較低之功效。

人化V_K構造物(VK1)包含Ser對Asp取代，在位置60，及Ser取代Tyr，在位置67。DNA序列(SEQ ID NO.：19)及其經轉譯之胺基酸序列(SEQ ID NO.：20)係敘述於下文：

另一種V_K構造物(意即VK2)具有已被恢復原始RE1骨架之DQMDY序列。DNA及其相應胺基酸序列(SEQ ID NO.：21及22)係提供於下文：

第三種V_K構造物為VK3，具有SVM對DQM在胺基末端中，與兩種其他殘基改變。DNA及其相應胺基酸序列(SEQ ID NO.：23及24)為：

關於如何製備各此等輕與重鏈序列之細節，係提供於美國專利6,602,503中，其係據此以其全文併於本文供所有目的參考用。上文輕與重鏈之各種組合可以如此藝中已知之電腦模型為基礎製備。

辨識並結合至α-4整合素之其他抗體為此項技藝中已知。其包括但不限於GG5/3(Keszthelyi等人，Neurology 47(4)：1053-1059(1996))、FW3-218-1(ATCC編號：HB-261；抵抗綿羊α4整合素之IgG2b抗體)及R1-2(ATCC編號：HB-227；在Rattus norvegicus中發展之IgG2b抗體)。無論抗體係在老鼠或其他動物中發展，各序列可經基因工程設計，以致其係以此藝中已知者為基礎，並藉助於電腦模型而被人化。然後，可評估抗-α-4整合素人化抗體，關於其促進髓鞘再形成及/或抑制脫髓鞘作用及/或減少麻痺之能力，以本文中所揭示之活體外與活體內檢測為基礎。

5.2. 抗體片段

亦意欲用於治療涉及脫髓鞘作用之病症與症狀者，為結合至抗-α-4或VCAM-1，以致其會抑制VLA-4與VCAM-1交互作用之抗體之抗體片段。抗體片段包括Fab、F(ab')₂、scFv及Fv片段，其可使用於本文中所揭示之組合物中。

於本文中使用之"Fab片段"一詞係指含有單一抗原結合區域之部份抗體分子，其包含分子之重與輕鏈之一部份。

於本文中使用之"F(ab')₂片段"一詞係指含有兩種抗原結合區域之部份抗體分子，且其包含分子之輕鏈與一部份重鏈。

於本文中使用之"Fv片段"一詞係指涉及抗原辨識與結合之抗體分子部份。

於本文中使用之"scFv"一詞係指單鏈Fv(scFv)片段。此等scFv片段為重組抗體衍生物，其僅包含藉由可撓性連結基連接之抗體重與輕鏈之可變功能部位。scFv抗體片段包含抗體之V_H與V_L功能部位，其中此等功能部位係存在於單一多肽鏈中。一般而言，Fv多肽進一步在V_H與V_L功能部位之間包含多肽連結基，其使得scFv能夠形成抗原結合所要之結構。關於scFv之回顧，參閱Pluckthun單株抗體之藥理學，第113卷 ,269-315(Rosenburg與Moore編著，Springer-Verlag,New York 1994)。

在抗體片段中亦包括雙抗體。"雙抗體"一詞係指具有兩個抗原結合位置之小抗體片段，此等片段包含一個重鏈可變功能部位(V_H)，經連接至相同多肽鏈(V_H-V_L)中之輕鏈可變功能部位(V_L)。經由使用太短以致不允許在相同鏈上之兩個功能部位之間配對之連結基，則功能部位係被迫使與另一個鏈之互補功能部位成對，並產生兩個抗原結合位置。雙抗體係更完整地描述於例如EP 404,097；WO 93/11161；及Hollinger等人，1993 Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90：6444-8中。

抗體片段亦包括線性抗體。"線性抗體"之措辭，當使用於整個本申請案中時，係指例如在Zapata等人，1995 Protein Eng.8(10)：1057-62中所述之抗體。簡言之，此等抗體包含一對協力Fd鏈段(V_H-C_H 1-V_H-C_H 1)，其係形成一對抗原結合區域。線性抗體可為雙專一性或單專一性。

抗體之木瓜蛋白酶消化會產生兩種相同抗原結合片段，稱為"Fab"片段，各具有單一抗原結合位置，及一個殘留"Fc"片段，其名稱反映出其容易結晶之能力。胃蛋白酶處理會產生F(ab')₂片段，其具有兩個抗原結合位置，且仍然能夠使抗原交聯。

數種老鼠抗-VLA-4單株抗體已在先前被描述過。參閱，例如美國專利6,602,503、6,033,665及5,840,299，如進一步於本文中所討論者，且其係以全文併於本文供參考；Sanchez-Madrid等人，1986,Eur.J.Immunol.16：1343-9；Hemler等人，1987,J.Biol.Chem.262：11478-85；Pulido等人，1991,J.Biol.Chem.,266：10241-45；Issekutz 等人，1991,J.Immunol.,147：109(TA-2 MAb)。能夠辨識VLA-4之α及/或β鏈之此等抗-VLA-4單株抗體及其他抗-VLA-4抗體(例如美國專利5,888,507-Biogen公司，及其中引述之參考資料)，將可用於根據本發明之治療方法中。較佳為將辨識涉及結合至VCAM-1與纖維網蛋白配位體之VLA-4 α-4鏈抗原決定部位之抗VLA-4抗體(意即可在涉及配位體辨識之位置結合至VLA-4，並阻斷VCAM-1與纖維網蛋白結合之抗體)。此種抗體已被定義為B抗原決定部位專一抗體(B1或B2)(Pulido等人，1991，同前文出處)，且亦為根據本發明之抗-VLA-4抗體。

抵抗VLA-4之完全人類單株抗體同系物為另一種較佳結合劑，其可在本發明之方法中阻斷或塗覆VLA-4配位體。在其完整形式中，其可使用活體外引動之人類脾細胞製備，如由Boerner等人，1991,J.Immunol.,147：86-95所述者。或者，其可藉由存庫無性繁殖製備，如由Persson等人，1991,Proc.Nat.Acad.Sci.USA,88：2432-36，或由Huang等人，1991,J.Immunol.Meth.,141：227-236所述者。美國專利5,798,230(1998年8月25日，"製備人類單株抗體之方法及其用途")係描述自人類B細胞製備人類單株抗體。根據此方法，產生人類抗體之B細胞係經由以愛氏噸-巴爾(Epstein-Barr)病毒或其會表現愛氏噸-巴爾病毒核抗原2(EBNA2)之衍生物感染而不滅。接著關閉不滅所需之EBNA2功能，其會造成增加抗體生產。其他方法係為此項技藝中已知。

關於產生完全人類抗體之又再另一種方法，參閱例如美國專利5,789,650，其係描述能夠產生異種抗體之轉基因非人類動物，與具有失活內源免疫球蛋白基因之轉基因非人類動物。內源免疫球蛋白基因係藉由反有意義多核苷酸及/或藉由針對抵抗內源免疫球蛋白之抗血清壓抑。異種抗體係被通常不會在該非人類動物物種之基因組中發現之免疫球蛋白基因編碼。一或多種含有未重排異種人類免疫球蛋白重鏈序列之轉基因，係被引進非人類動物中，於是形成轉基因動物，其能夠於功能上重排轉基因免疫球蛋白序列，並產生被人類免疫球蛋白基因編碼之各種同型物之抗體存庫。此種異種人類抗體係在B-細胞中產生，然後，使其以下述方式造成不滅，例如與使不滅之細胞系譬如骨髓細胞瘤融合，或藉由其他技術操控此種B-細胞，以使能夠產生單株、異種、完全人類抗體同系物之細胞系永存。大的未經免疫人類噬菌體顯示庫亦可用以單離高親和力抗體，其可使用標準噬菌體技術發展成人類治療劑。

在製備真實"嵌合抗體"之早期方法(意即，其中整個恒定與整個可變區域係衍生自不同來源)之後，一種新穎途徑係被描述於EP 0239400(Winter等人)中，其中抗體係經由以來自另一物種對於一物種，取代(在特定可變區域內)其互補性決定區(CDR)而被改變。此方法可用於例如以得自老鼠可變區域功能部位之替代CDR，取代得自人類重與輕鏈Ig可變區域功能部位之CDR。接著，可將此等經改變之Ig可變區域與人類Ig恒定區域合併至已產生之抗體，其在組成上全為人類，惟經取代之老鼠CDR除外。與真實嵌合抗體比較，預期此種CDR取代之抗體較不可能在人類中引出免疫回應，因為CDR取代之抗體含有相當少非人類成份。此種經由CDR"接枝"使單株抗體人化之方法，已被稱為"再成形"(Riechmann等人，1988,Nature 332：323-7；與Verhoeyen等人，1988,Science 239：1534-6)。

5.3. 抗體純化

當使用重組技術時，抗體可在圍膜間隙中以胞內方式產生，或直接分泌至培養基中。若抗體係以胞內方式產生，則作為第一個步驟，係藉由例如離心或超過濾移除微粒子碎屑，無論是宿主細胞或經溶解片段。Carter等人，生物/技術，10：163-7(1992)係描述一種用於單離被分泌至大腸桿菌圍膜間隙中之抗體之程序。簡言之，細胞糊劑係於醋酸鈉(pH 3.5)、EDTA及氟化苯基甲磺醯(PMSF)存在下解凍，歷經約30分鐘，細胞碎屑可藉離心移除。在當抗體係被分泌至培養基中之情況下，得自此種表現系統之上層清液，一般係首先使用市購可得之蛋白質濃縮濾器進行濃縮，例如Amicon或Millipore Pellicon超過濾單元。蛋白酶抑制劑，譬如PMSF，可在任何前述步驟中加入，以抑制蛋白水解，並可加入抗生素，以防止偶發污染物之生長。

製自細胞之抗體組合物較佳係在LPHIC之前，接受至少一個純化步驟。適當純化步驟之實例包括羥基磷灰石層析、凝膠電泳、滲析及親和層析法，其中親和層析法為較佳純化技術。蛋白質A作為親和力配位體之適合性，係依存在於抗體中之任何免疫球蛋白Fc功能部位之物種與同型物而定。蛋白質A可用以純化以人類γ1、γ2或γ4重鏈為基礎之抗體(Lindmark等人，1983 J.Immunol.Meth.62：1-13)。對所有老鼠同型物與人類 γ3而言，係建議蛋白質G(Guss等人，1986 EMBO J.5：1567-75)。親和力配位體所連接之基質，最常為瓊脂糖，但可取用其他基質。機械上安定之基質，譬如受控孔隙玻璃或聚(苯乙烯二乙烯基)苯，相較於使用瓊脂糖可達成者，允許較快速流率與較短處理時間。在抗體包含C_H3功能部位之情況下，Bakerbond ABX^TM樹脂(J.T.Baker,Phillipsburg,N.J.)可用於純化。關於蛋白質純化之其他技術，譬如於離子交換管柱上分級分離、乙醇沉澱作用、逆相HPLC、於矽膠上層析、於肝素SEPHAROSE^TM上層析、於陰離子或陽離子交換樹脂上層析(譬如聚天門冬胺酸管柱)、聚焦層析、SDS-PAGE及硫酸銨沉澱作用，亦可採用，依欲被回收之抗體而定。

在任何初步純化步驟之後，使包含吾人感興趣抗體與污染物之混合物接受LPHIC。欲被純化之抗體組合物經常係存在於得自先前純化步驟之緩衝劑中。但是，在LPHIC步驟之前，可能必須將緩衝劑添加至抗體組合物中。許多緩衝劑可以取用，且可藉由例行實驗術作選擇。在裝填緩衝劑中包含欲被純化之抗體及至少一種污染物之混合物，其pH值係使用無論是酸或鹼調整至pH值約2.5-4.5，依開始之pH值而定。裝填緩衝劑較佳係具有低鹽濃度(意即低於約0.25M鹽)。

混合物係被裝填在HIC管柱上。HIC管柱通常包含已偶合疏水性配位體(例如烷基或芳基)之鹼基質(例如交聯瓊脂糖或合成共聚物材料)。較佳HIC管柱包括被苯基取代之瓊脂糖樹脂(例如苯基SEPHAROSE^TM管柱)。許多HIC管柱為可市購而得。實例包括但不限於苯基瓊脂糖6 FAST FLOW^TM管柱，具有低或高取代(Pharmacia LKB生物技術，AB,Sweden)；苯基SEPHAROSE^TM高性能管柱(Pharmacia LKB生物技術，AB,Sweden)；辛基SEPHAROSE^TM高性能管柱(Pharmacia LKB生物技術，AB,Sweden)；FRACTOGEL^TM EMD丙基或FRACTOGEL^TM EMD苯基管柱(E.Merck,Germany)；MACRO-PREP^TM甲基或MACRO PREP^TM第三-丁基載體(Bio-Rad,California)；WP HI-丙基(C₃)^TM管柱(J.T.Baker,New Jersey)；及TOYOPEARL^TM醚、苯基或丁基管柱(TosoHaas,PA)。

抗體係使用在正常情況下與裝填緩衝劑相同之溶離緩衝劑，自管柱溶離。溶離緩衝劑可使用例行實驗術作選擇。溶離緩衝劑之pH值係在約2.5-4.5之間，並具有低鹽濃度(意即低於約0.25M鹽)。已發現不必使用鹽梯度液以溶離吾人感興趣之抗體；所要之產物係在不會顯著地結合至管柱之流經溶離份中回收。

LPHIC步驟係提供一種自不想要之污染物(例如不正確結合之輕與重片段)中移除正確折疊與二硫化物結合抗體之方式。特定言之，此方法係提供一種實質上移除經本文特徵鑒定為正確折疊之抗體片段而其輕與重鏈未能經過二硫化物鏈結結合之不純物之方式。

經純化蛋白質之診斷或治療配方，可藉由提供呈生理學上可接受載劑形式之抗體組合物而製成，其實例係於下文提供。

為自HIC管柱移除污染物(例如無折疊抗體及不正確結合之輕與重片段)以致使其可再使用，故可使包含尿素之組合物(例如6.0M尿素，1% MES緩衝劑pH 6.0,4mM硫酸銨)流經管柱。其他方法為此項技藝中已知。

5.4. 免疫球蛋白配方

具有所要治療效果之抗體與免疫球蛋白可在生理學上可接受之載劑中投予病患。抗體可以多種方式投藥，包括但不限於非經腸投藥，包括皮下、硬膜下、靜脈內、肌內、鞘內、腹膜腔內、大腦內、動脈內或病灶內投藥途徑，定位(例如手術應用或外科栓劑)及肺(例如氣溶膠、吸入或粉末)，以及如進一步於下文中所述者。

依引進方式而定，免疫球蛋白可以多種方式調配。具治療活性免疫球蛋白在配方(意即足以抑制脫髓鞘作用及/或促進髓鞘再形成之配方)中之濃度，可從約1毫克/毫升改變至1克/毫升。免疫球蛋白組合物當投予有需要之病患時，較佳係達到病患中免疫球蛋白之血液含量為約10毫微克/毫升或較多。

免疫球蛋白係較佳經調配在適當惰性載劑中，譬如無菌生理食鹽水，供非經腸投藥。例如，免疫球蛋白在載劑溶液中之濃度典型上係介於約1-100毫克/毫升之間。所投予之劑量將藉由投藥途徑決定。較佳投藥途徑包括非經腸或靜脈內投藥。

對非經腸投藥而言，本發明之抗體可以物質在具有醫藥載劑之生理學上可接受稀釋劑中之溶液或懸浮液之可注射劑量投藥，該載劑可為無菌液體，譬如水與油類，添加或未添加界面活性劑，及其他藥用製劑係為石油、動物、植物或合成來源之油例如花生油、大豆油及礦油之製劑。一般而言，二醇類，譬如丙二醇或聚乙二醇，係為較佳液體載劑，特別是對可注射溶液而言。本發明之抗體可以積貯注射劑或植入製劑之形式投藥，其可以致使允許活性成份持續釋出之方式調配。較佳組合物係包含單株抗體在5毫克/毫升下，經調配在以HCl調整至pH 6.0且包含50mM L-組胺酸、150mM NaCl之緩衝水溶液中。

治療上有效劑量為有效產生脫髓鞘作用上之顯著降低及髓鞘再形成上之值得注意增加之劑量。此量較佳係足以在病患中產生統計學上顯著量之髓鞘再形成。

根據本發明之一項重要特徵，辨識並結合至VLA-4之免疫球蛋白可單獨投藥，或併用典型上用以治療與脫髓鞘作用有關聯症狀與疾病之消炎劑。消炎劑之投藥可發生在以免疫球蛋白投藥之前、同時或之後。

髓鞘再形成抗體或免疫球蛋白例如那塔利諸馬(natalizumab)之治療上有效量，可經由與關於已知抗體所建立之有效劑量比較，與在活體內與活體外模式中所獲得關於那塔利諸馬(natalizumab)之數據一起採用而估計。數據較佳係得自脫髓鞘作用抑制之研究。正如此項技藝中所已知者，可能必須調整劑量，此係由於免疫球蛋白變性或新陳代謝作用、全身對定位之傳輸，以及免疫球蛋白所投予病患之年齡、體重、一般健康狀態、性別、飲食、投藥時間、藥物交互作用及症狀之嚴重性所致。熟諳此藝者經過例行實驗術，可施行此種調整，並決定適當劑量。

免疫球蛋白之治療配方係經由將具有所要純度之免疫球蛋白與選用之生理學上可接受載劑、賦形劑或安定劑混合而製成(Remington氏醫藥科學，第16版，A.Osol編著，1980，及較近期之版本)，呈凍乾餅或水溶液形式，以供儲存。可接受之免疫球蛋白載劑、賦形劑或安定劑，係為在所採用之劑量與濃度下，對接受者無毒性、非治療性及/或非致免疫性，且包括緩衝劑，譬如磷酸鹽、檸檬酸鹽及其他有機酸類；抗氧化劑，包括抗壞血酸；低分子量(低於約10個殘基)多肽；蛋白質，譬如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水性聚合體，譬如聚乙烯基四氫吡咯酮；胺基酸，譬如甘胺酸、麩醯胺、天冬素、精胺酸或離胺酸；單醣、雙醣及其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合劑，譬如EDTA；糖醇類，譬如甘露醇或花楸醇；可形成鹽之抗衡離子，譬如鈉；及/或非離子性界面活性劑，譬如Tween、Pluronics或聚乙二醇(PEG)。載劑分子之特殊實例，包括但不限於葡萄糖胺聚糖(例如肝素硫酸鹽)、玻尿酸、硫酸角質素、軟骨素4-硫酸鹽、軟骨素6-硫酸鹽、硫酸乙醯肝素與皮膚素硫酸鹽、伯列肯(perlecan)及戊多硫酸鹽。

包含免疫球蛋白之醫藥組合物，若需要，亦可包含藥學上可接受之無毒性載劑或稀釋劑，其係為調配供動物或人類投藥用之醫藥組合物之常用媒劑。稀釋劑係經選擇，以致不會影嚮此組合之生物學活性。實例包括但不限於蒸餾水、生理磷酸鹽緩衝之鹽水、林格氏溶液、右旋糖溶液及Hank氏溶液。

本發明之藥劑可經調配成注射製劑，其方式是使彼等溶解、懸浮或乳化於水性或非水性溶劑中，譬如植物或其他類似油類、合成脂肪酸甘油酯、高碳脂族酸之酯類或丙二醇。此等配方亦可含有習用添加劑，譬如增溶劑、等滲劑、懸浮劑、乳化劑、安定劑及防腐劑。

免疫球蛋白亦可被使用於欲經由吸入或肺傳輸投藥之氣溶膠配方中。本發明之藥劑可經調配在加壓之可接受推進劑中，譬如二氯二氟甲烷、丙烷、氮等。

免疫球蛋白亦可被捕獲於製成之微膠囊中，例如藉由凝聚技術或藉由界面聚合作用(例如羥甲基纖維素或明膠-微膠囊與聚甲基丙烯酸甲酯微膠囊)，在膠態藥物傳輸系統(例如微脂粒、白蛋白微球體、微乳化液、毫微粒子及毫微膠囊)或在巨乳化液中。此種技術係揭示於Remington氏醫藥科學中，同前文出處。

欲被用於活體內投藥之免疫球蛋白必須是無菌。這是在凍乾與重配之前或之後，經過無菌過濾薄膜，藉由過濾而容易地達成。免疫球蛋白通常係以凍乾形式或在溶液中儲存。

治療免疫球蛋白組合物一般係被置於具有無菌入口之容器中，例如具有可藉由皮下注射針頭或類似尖銳工具穿孔之塞子之靜脈內溶液袋或小玻瓶。

持續釋出製劑之適當實例，包括含蛋白質之固體疏水性聚合體之半滲透性基質，此基質係呈成形物件形式，例如薄膜或微膠囊。持續釋出基質之實例包括聚酯、水凝膠(例如聚(甲基丙烯酸2-羥乙酯)，如由Langer等人，J.Biomed.Mater.Res.15：167-277(1981)與Langer,Chem.Tech.12：98-105(1982)所述者，或聚(乙烯醇))、聚內交酯(美國專利3,773,919)、L-麩胺酸與γ L-麩胺酸乙酯之共聚物(Sidman等人，Biopolymers 22：547-556,1983)、不可降解之乙烯-醋酸乙烯酯(Langer等人，如前文出處)，可降解之乳酸-乙醇酸共聚物，譬如LUPRON DEPOT^TM(意即，由乳酸-乙醇酸共聚物與留普內酯(leuprolide)醋酸鹽所組成之可注射微球體)，及聚D-(-)-3-羥丁酸(EP 133,988)。

雖然聚合體，譬如乙烯-醋酸乙烯酯與乳酸-乙醇酸，使得分子能夠釋出超過100天，但某些水凝膠係釋出蛋白質，歷經較短時期。當被包膠之抗體留在身體中歷經長時間時，其可能會由於在37℃下曝露至濕氣之結果而變性或凝集，造成生物學活性之喪失，及致免疫性之可能改變。可設計出關於免疫球蛋白安定化作用之合理策略，依所涉及之機制而定。例如，若已發現凝集機制為經過硫基-二硫化物交換之分子間S-S鍵結形成，則安定化作用可經由將氫硫基殘基改質，自酸性溶液凍乾，控制水份含量，使用適當添加劑，發展特定聚合體基質組合物等而達成。

持續釋出免疫球蛋白組合物亦包含微脂粒捕獲之免疫球蛋白。含有免疫球蛋白之微脂粒係藉本質上已知之方法製備。參閱，例如Epstein等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 82：3688-92(1985)；Hwang等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 77：4030-4(1980)；美國專利4,485,045；4,544,545；6,139,869；及6,027,726。微脂粒一般具有小(約200至約800埃)單層狀類型，其中脂質含量大於約30莫耳百分比(莫耳%)膽固醇；經選擇之比例係對最適宜之免疫球蛋白療法作調整。

本發明之免疫球蛋白可以持續釋出形式投藥，例如積貯注射劑、植入製劑或滲透泵，其可以一種致使允許活性成份持續釋出之方式調配。持續釋出配方之植入物為此項技藝中所習知。植入物係以生物可降解或生物不可降解之聚合體調配成微球體、板狀物等。例如，乳酸及/或乙醇酸之聚合體係形成一種良好地被宿主容許之可侵蝕聚合體。植入物係被放置在接近蛋白質沉積物之位置(例如與神經變性病症有關聯之澱粉狀蛋白沉積物形成之位置)，以致使在該位置處之活性劑之局部濃度，相對於身體之其餘部份，係經增加。

此外，預防脫髓鞘作用及/或引致髓鞘再形成之免疫球蛋白，可經由對病患投予會使全部或部份抗體(例如單鏈Fv)編碼之多核苷酸而被提供。多核苷酸係在適當媒劑中投予病患，以允許免疫球蛋白在病患中以治療上有效量表現。

免疫球蛋白之典型日服劑量可涵蓋從約1微克/公斤至高達約10毫克/公斤或更多之範圍，依本文中所提及之因素而定。典型上，臨床家將投予免疫球蛋白，直到達成之劑量達到所要之作用為止。此種療法之進展係容易地藉習用檢測監測。

"安定"抗體或抗體片段配方為一種於儲存時其中之蛋白質基本上保有其物理安定性及/或化學安定性及/或生物學活性之配方。用以度量蛋白質安定性之各種分析技術可於此項技藝中取得，且係回顧於例如肽與蛋白質藥物傳輸，247-301(Vincent Lee編著，Marcel Dekker公司，New York,N.Y.,1991出版)與A.Jones,Adv.Drug Delivery Rev.10：29-90(1993)中。安定性可在所選定之溫度下進行度量，歷經所選定之時期。此配方較佳係於室溫(約30℃)或於40℃下安定至少1個月，及/或在約2-8℃下安定至少1年，至少約2年。再者，配方較佳係在使配方冷凍(至例如-70℃)及解凍之後為安定的。

在目視檢查顏色及/或透明性時，或當藉由UV光散射或藉由尺寸排阻層析度量時，若蛋白質未顯示任何凝集、沉澱及/或變性之跡象，則其係在醫藥配方中"保有其物理安定性"。

若化學安定性在特定時間下係致使蛋白質被認為仍然保有其如下文定義之生物學活性，則蛋白質係在醫藥配方中"保有其化學安定性"。化學安定性可經由偵測並定量蛋白質之化學上改變形式而進行評估。化學改變可涉及大小改變(例如修剪)，其可使用例如尺寸排阻層析、SDS-PAGE及/或基質輔助雷射解吸附離子化作用/飛行時間質量光譜法(MALDI/TOFMS)評估。其他類型之化學改變包括電荷改變(例如由於脫醯胺作用之結果而發生)，其可藉由例如離子交換層析評估。

當例如在抗原結合檢測中測定時，若免疫球蛋白在特定時間下之生物學活性係在醫藥配方被製成時所展示生物學活性之約10%內(在檢測之誤差內)，則免疫球蛋白係在醫藥配方中"保有其生物學活性"。

5.5. 免疫球蛋白組合物之投藥途徑

如上文簡略討論者，前文所討論之醫藥組合物可被投予，以提供多發性硬化或其他脫髓鞘作用相關病症之預防及/或治療處理。在治療應用上，組合物係被投予懷疑或已經患有譬如多發性硬化疾病之病患，其量係足以促進髓鞘再形成。達成此目的之適當量係被定義為治療上或藥學上有效劑之量。

醫藥組合物係藉由非經腸、局部、靜脈內、口腔或皮下、肌內局部投藥法進行投藥，譬如藉由氣溶膠或經皮方式，用以預防及/或治療處理。雖然本發明之蛋白質物質可在口服(p.o.)投藥後存活經過腸，但藉積貯注射之皮下(s.c.)、靜脈內(i.v.)、肌內(i.m.)、腹膜腔內投藥或藉植入製劑為較佳。

醫藥組合物可以多種單位劑型投藥，依投藥方法而定。例如，適合口服投藥之單位劑型包括粉末、片劑、丸劑、膠囊及錠劑。

本發明組合物用於治療上述症狀之有效劑量，將依許多不同因素而改變，包括投藥方式、標的位置、病患之生理狀態及所投予之其他藥劑。因此，治療劑量將需要被調整至使安全性與功效達最佳化。此等組合物可投予哺乳動物作為獸醫用途，及在人類中作為臨床用途，以類似其他治療劑之方式，意即在生理學上可接受之載劑中。一般而言，投藥劑量係涵蓋從約0.0001至100毫克/公斤宿主體重之範圍，且更通常為0.01至0.5毫克/公斤。

於一項較佳治療服用法中，抗體係在每千克病患體重1至5毫克抗體之劑量下，藉由靜脈內灌注或皮下注射投藥。此劑量係在2至8週之間隔下重複。在此範圍內，較佳治療服用法為每千克體重3毫克抗體，在4週間隔下重複。

6. 藥物組合

如前文所述，沒有任何以前所述之藥物或藥物組合經確認為停止關於脫髓鞘病之神經功能之漸進損失。有一些會壓抑免疫所媒介之發炎，且亦可降低多發性硬化之復發率之藥物存在。此等及其他用以治療與多發性硬化有關聯之病徵，及與脫髓鞘作用有關聯之症狀與疾病之藥物，亦意欲涵蓋在內，以與本文中所揭示之化合物與組合物合併使用。一或多種欲被使用於藥液中及/或與本文中所揭示之化合物與組合物併用之藥劑，其選擇係依疾病之處理而定。例如，在MS中，疾病處理可被分類成兩組：(1)意欲遏制疾病過程之治療，與(2)徵候處理。各種藥物組合可使用於種類(D)中。例如，本文中所揭示之化合物與組合物可與免疫抑制劑一起投藥，以進一步抑制免疫細胞流入，及藉以抑制脫髓鞘活性。例如，可使用免疫抑制劑，譬如皮質類固醇。

髓鞘再形成劑(例如抗-α-4整合素抗體，小化合物α-4整合素拮抗劑等)可與用以治療、改善或舒減與脫髓鞘症狀或疾病有關聯病徵之其他化合物或組合物併用。用以治療、改善或舒減與脫髓鞘症狀或疾病(包括多發性硬化)有關聯病徵之其他藥劑，包括但不限於：肌肉鬆弛劑(例如苯甲二氮、環苯雜林(cyclobenzaprine)、克羅那吉片(clonazepam)、可樂寧(clonidine)、去氧苯比妥(primidone)等)、抗膽鹼能藥(例如丙泛西林(propantheline)、二環若明(dicyclomine)等)、中樞神經系統刺激劑(例如苯異妥英)、非類固醇消炎劑(NSAID，譬如異丁苯丙酸(ibuprofen)、那丙新(naproxen)及酮基丙吩(ketoprofen))、干擾素、免疫球蛋白、葛拉提拉莫(glatiramer)(Copaxone^®)、絲裂黃酮(mitoxantrone)(Novantrone^®)、米索普斯托(misoprostol)、腫瘤壞死因子-α抑制劑(例如伯吩尼酮(pirfenidone)、因弗利西馬(infliximab)等)及皮質類固醇(例如類皮質糖與礦物類皮質激素)。

治療多發性硬化之常用藥劑包括干擾素β-1b(Betaseron^®)、干擾素β-1a(Avonex^®)、高劑量干擾素β-1a(Rebif^®)、葛拉提拉莫(glatiramer)(Copaxone^®)、免疫球蛋白、絲裂黃酮(Novantrone^®)、皮質類固醇(例如潑尼松、甲基氫化潑尼松、地塞米松等)。其他皮質類固醇亦可使用，且包括但不限於皮質固醇、可體松、氟氫化可體松、氫化潑尼松、6 α-甲基氫化潑尼松、氟羥脫氫皮質甾醇及β-美塞松。

欲與本文中所揭示之化合物與組合物併用之藥劑之劑型，係依病患及所利用之藥物組合而改變。例如，干擾素典型上係按下述投藥：干擾素β-1a(Avonex^®)係投予30微克，一週一次；干擾素β-1a係在約22微克或44微克下投藥，一週三次；及干擾素β-1b(Betaseron^®)係在250微克下，於間隔天投藥(Durelli等人，Lancet 359：1453-60,2002)。典型上，干擾素係針對復發或減輕多發性硬化而投藥。因此，與本文中所揭示之髓鞘再形成劑併用，干擾素之較佳範圍可包含約0.1微克至約250微克，且更佳為約0.5微克至約50微克，依其中搭配本文中所揭示之其他髓鞘再形成化合物與組合物投予之藥劑之方式而定。

意欲與本發明一起使用之非類固醇消炎劑(NSAID)，係包括但不限於非選擇性COX抑制劑與選擇性COX-2抑制劑。非選擇性COX抑制劑包括但不限於柳酸衍生物(例如阿斯匹靈、柳酸鈉、膽鹼三柳酸鎂、沙沙雷特(Salsalate)、二氟苯柳酸、硫酸沙(sulfasalazine)及歐沙(olsalazine))、對-胺基酚衍生物(例如乙醯胺吩(acetaminophen))、吲哚與茚醋酸(例如四苯醯吡咯乙酸(tolmetin)、二可吩拿克(diclofenac)及酮洛拉克(ketorolac))、雜芳基醋酸(例如阿布普吩(abuprofen)、那丙新(naproxen)、氟雙丙吩、酮基丙吩(ketoprofen)、吩普吩(fenprofen)及普羅辛(oxaprozin))、鄰胺基苯甲酸或滅酸酯類(例如甲滅酸與甲氯滅酸)、烯醇酸(例如氧胺類(oxicams)，譬如吡氧胺(piroxicam)與美氧胺(meloxicam))及烷酮(例如那布美東(nabumetone))。選擇性COX-2抑制劑包括二芳基取代之呋喃酮(例如羅費庫西比(rofecoxib))、二芳基取代之吡唑(例如塞拉庫西比(celecoxib))、吲哚醋酸(例如依托多拉克(etodolac))及碸基醯基苯胺類(例如尼美沙利得(nimesulide))。NS經常與干擾素合併投藥，以減輕由接受例如Avonex^®之病患所經歷之流行性感冒狀病徵。常用NS包括那丙新(naproxen)、異丁苯丙酸(ibuprofen)及酮基丙吩(ketoprofen)。捕熱息痛(paracetamol)亦經常被投予病患。參閱Reess等人，2002 Mult.Scler.8：15-8。

葛拉提拉莫(glatiramer)醋酸鹽(GA,Copaxone^®)為合成分子，其會抑制髓磷脂鹼性蛋白質反應性T細胞之活化作用，並引致特徵為消炎作用之T-細胞存庫。再者，葛拉提拉莫(glatiramer)可進入中樞神經系統(CNS)中，然而干擾素-β卻不能(Dhib-Jalbut,2002 Neurology 58：S3-9；Weinstock-Guttman等人，2000 Drugs 59：401-10)。

絲裂黃酮為蒽二酮合成劑，其已被証實有效治療續發性漸進多發性硬化(SP-MS)。但是，此種藥物之用途再一次受到其累積心臟毒性所限制(Weinstock-Guttman等人，2000)。

腫瘤壞死因子-α(TNF-α)在脫髓鞘作用中可為關鍵細胞活素(Walker等人，2001 Mult.Scler.7：305-12)。因此，會拮抗TNF-α功能或抑制其合成之藥劑之利用，可與本文中所揭示之藥劑與化合物併用。其可包括抗-TNF-α抗體(例如因弗利西馬(infliximab))以及藥劑，譬如伯吩尼酮(pirfenidone)。伯吩尼酮為非肽藥物，其已被証實會降低TNF-α合成，並阻斷對TNF-α之受體。與上述出處相同。

在大部份脫髓鞘症狀與疾病中之長久以來唯一依靠，一直是ACTH、類皮質糖及類皮質類固醇之利用。使用此等藥劑，係因其抗水腫與消炎作用。ACTH通常係於80U下投予病患，在500毫升5%右旋糖與水中，於6-8小時內以靜脈內方式給予，歷經3天。其亦可於40U/毫升下，以肌內方式，在40U之劑量下，每12小時投藥，歷經7天，其中此劑量係接著每3天減少。參閱S.Hauser，"多發性硬化及其他脫髓鞘病"，Harrison氏內部醫藥原理，2287-95(第13版，Isselbacher等人編著，1994)。甲基氫化潑尼松典型上係在500毫升D5W中，慢慢地於6小時內投藥，較佳係在早晨。常用劑量包括每日1000毫克，歷經3天，每日500毫克，歷經3天，及每日250毫克，歷經3天。與上述出處相同。甲基氫化潑尼松-潑尼松組合亦常投予。典型上，1000毫克靜脈內甲基氫化潑尼松係於三天內投藥，接著是每天1毫克/公斤之口服潑尼松，歷經14天。因此，為與本文中所揭示之化合物與組合物合併使用，類固醇可以範圍從約1至約1000毫克/公斤之量投藥，歷經約1至14天，按需要而定。

脫髓鞘症狀譬如MS中之副作用為疲勞及減退之認知功能。譬如金剛胺鹽酸鹽與苯異妥英之藥劑已常被用以治療與MS有關聯之疲勞(Geisler等人，1996 Arch.Neurol.53：185-8)。

此種組合療法之利益在於其可減輕目前一些藥物所遭遇之種類專一與藥劑專一副作用。干擾素-β之種類專一副作用，包括發熱、發冷、肌痛、關節痛及其他流行性感冒狀病徵，在注射後2-6小時開始，且典型上係於注射24小時後解決。有時干擾素-β亦會引致先前存在之MS病徵暫時惡化。藥劑專一副作用包括注射位置與干擾素β-1b反應。此等作用之處理可經由訂製投藥之劑量與時間，開立乙醯胺吩(acetaminophen)、非類固醇消炎藥物(NSAID)及類固醇之適當組合而達成。參閱Munschauer等人，1997 Clin.Ther.19：883-93。

因此，可減少被投予之特定藥物量之藥物組合，可減少病患所經歷之不利副作用。

當合併投藥時，小化合物髓鞘再形成劑可在與此等其他化合物或組合物相同之配方中，或在個別配方中投藥。當合併投藥時，相較於其他化合物與組合物，髓鞘再形成免疫球蛋白一般係在個別配方中投藥。當合併投藥時，髓鞘再形成劑可在用以治療、改善或舒減病徵之其他化合物與組合物之前、之後或與其同時投藥。

7. 慢性投藥劑量服用法

本發明之慢性治療服用法係提供α-4整合素劑(例如小分子或免疫球蛋白)，其含量將保持足夠受體飽和，以在需要之病患中壓抑病理學發炎。本發明之方法需要每兩週投藥一次或每月一次至每兩個月一次，其中重複之服藥係發生歷經至少六個月期間，且更佳為一年或較久。本發明之方法係涉及在人類病患中，獲得並保持包含α-4整合素(例如VLA-4)之二聚體之受體飽和含量在約65%至100%之範圍內，更佳為75%至100%之間，且又更佳為80-100%之間。此等受體飽和含量係保持在以慢性方式(例如歷經6個月左右期間)允許持續壓抑病理學發炎之含量下。

在一項特殊具體實施例中，髓鞘再形成劑為抗體，較佳為人化或人類抗體，且服藥係以每月為基準。在另一項特殊具體實施例中，髓鞘再形成劑為如上文定義之式I,IA,IB,IC,II,IIA或IIB化合物。受體飽和之含量可經監測，以測定服藥使用法之功效，並度量生理標記物，以確認劑量服用法之成功性。作為一項確認，抗體之血清含量可經監測，以確認抗體之清除率，並測定半生期對治療功效之潛在作用。

對於以本發明之藥劑治療而言，劑量係涵蓋從約0.0001至100毫克/公斤宿主體重之範圍，且更通常為0.01至5毫克/公斤。例如，劑量可為1毫克/公斤體重或10毫克/公斤體重。劑量與頻率係依藥劑在病患中之半生期而改變。投藥之劑量與頻率可依該處理是否為預防或治療而改變。對免疫球蛋白投藥而言，各服藥注射一般係介於2.0至8.0毫克/公斤劑量之間。對化合物投藥而言，各服藥注射一般係介於1.0至50.0毫克/公斤劑量之間。根據本文中所提供之陳述內容，有效劑量可經由自病患獲得流體試樣而監測。關於此點，一般而言，係使用此項技藝中所習知之方法，取得血清或腦脊髓液試樣，並測定整合素受體飽和。理想上，係於最初服藥之前取得試樣；接著在各治療之前及/或之後取得試樣並度量。

作為包含重複個別服藥之慢性投藥之一種替代方式，髓鞘再形成劑可以持續釋出配方投藥，其條件是劑量係致使受體飽和之含量仍然保持足以壓抑發炎。例如，受控釋出系統可用以慢性地投予本發明範圍內之髓鞘再形成劑。適當受控釋出劑型之討論，可參閱Lesczek Krowczynski， 長期釋出劑型 ，1987(CRC出版社公司)。

各種受控釋出技術係涵蓋極寬廣範圍之藥物劑型。受控釋出技術包括但不限於物理系統與化學系統。物理系統包括但不限於具有速率控制薄膜之儲器系統，譬如微包膠、巨包膠及薄膜系統；未具有速率控制薄膜之儲器系統，譬如中空纖維、超微孔性纖維素三醋酸酯及多孔性聚合體基材與發泡體；單塊系統，包括以物理方式溶於非多孔性、聚合體或彈性基質中之系統(例如不可侵蝕、可侵蝕、周圍藥劑進入及可降解)，及以物理方式分散在非多孔性、聚合體或彈性基質中之物質(例如不可侵蝕、可侵蝕、周圍藥劑進入及可降解)；層合結構，包括化學上類似或不類似外部控制層之儲器層；及其他物理方法，譬如滲透泵或吸附於離子交換樹脂上。

化學系統包括但不限於聚合體基質之化學侵蝕(例如非均質或均質侵蝕)或聚合體基質之生物侵蝕(例如非均質或均質)。受控釋出系統種類之其他討論，可參閱Agis F.Kydonieus，受控釋出技術：方法、理論及應用，1980(CRC出版社公司)中。

本發明之方法可用以治療患有涉及或由於病理學發炎而發生之病症之病患，或以預防方式治療處於特定病症危險下之病患。預防對治療處理所必須之劑量服用法可以改變，且將必須針對特定用途與經治療之病症作設計。

在一些方法中，兩種或多種藥劑(例如，如本文中所揭示之具有不同結合專一性之單株抗體、單株抗體及化合物)係同時投藥，於此種情況中，所投予各藥劑之劑量係落在所指示之範圍內。組合療法亦可發生在對病患連續投予藥劑之情況下，具有投藥期間所要之時間間隔。間隔亦可為不規則，按經由度量受體飽和含量或經由追蹤疾病過程之其他標記所指示者。

熟諳者將易於明瞭劑量程度可作為特定藥劑、病徵嚴重性及病患對副作用感受性之函數而改變。一些特定藥劑係比其他更有效。對於特定藥劑之較佳劑量係容易地由熟諳此藝者藉多種方式測定。較佳方式為度量特定藥劑之生理功效。

在預防應用上，醫藥組合物係以慢性方式投予容易接受或者處於特定疾病危險下之病患，其量足以免除或降低危險或延遲疾病之開始。此種量係被定義為預防上有效之劑量。在患有多發性硬化而於緩解中之病患中，危險可藉由NMR照影進行評估，或在一些情況中，藉由病患所發現之初期徵候適應徵評估。

本發明組合物對於治療上述症狀之有效劑量服用法，係依許多不同因素而改變，包括投藥方式、標的位置、病患生理狀態及所投予之其他藥劑。因此，治療劑量必須被調整至使安全性與功效達最佳化。一般而言，劑量服用法之各投藥係涵蓋從約0.0001至約100毫克/公斤宿主體重之範圍，通常為約0.01至約50，且更通常為約0.1至約30毫克/公斤。

本發明之髓鞘再形成劑可與有效量之抵抗急性與慢性發炎之其他治療劑一起使用。此種藥劑包括其他黏連分子拮抗劑(例如其他整合素、選擇素及免疫球蛋白(Ig)超族群成員(參閱Springer,Nature(1990)346：425-433；Osborn(1990)Cell 62：3；及Hynes(1992)Cell 9：11))。整合素為包含α鏈(120-180kDa)與β鏈(90-110kDa)之異種二聚體跨膜糖蛋白，一般具有短細胞質功能部位。例如，三種重要整合素，LFA-1、Mac-1及P150,95，具有不同α亞單位，稱為CD11a、CD11b及CD11c，與一個共同β亞單位，稱為CD18。LFA-1(α _L β ₂)係被表現於淋巴細胞、粒性細胞及單細胞上，且主要係結合至Ig-族群成員反受體，稱為ICAM-1，及相關配位體。ICAM-1係被表現於許多細胞上，包括白血球與內皮細胞，且係於血管內皮上藉由細胞活素向上調節，譬如TNF與IL-1。Mac-1(α _M β ₂)係被分佈於嗜中性白血球與單細胞上，且亦結合至ICAM-1。第三種β ₂整合素，P150,95(α _X β ₂)，亦已在嗜中性白血球與單細胞上發現。選擇素包括L-選擇素、E-選擇素及P-選擇素。

可與髓鞘再形成劑併用之其他消炎劑，包括抗體及細胞活素之其他拮抗劑，細胞活素譬如間白血球活素IL-1至IL-13、腫瘤壞死因子α與β(TNF-α與TNF-β)、干擾素α、β及γ，腫瘤生長因子β(TGF-β)、菌落刺激因子(CSF)及粒性細胞單細胞菌落刺激因子(GM-CSF)。其他消炎劑包括抗體及化學細胞活素之其他拮抗劑，化學細胞活素譬如MCP-1、MIP-1 α、MIP-1 β、RANTES、外觀音杉素及IL-8。其他消炎劑包括NS、類固醇及發炎之其他小分子抑制劑。投藥之時機與序列、配方、投藥途徑及合併療法用藥劑之有效濃度，係如上文關於抵抗α-4整合素之人化抗體、抵抗α-4整合素之小化合物及藥物組合所述者。

8. 測試試劑

試劑可於活體外與活體內進行測試。現有許多活體外模式，以測試試劑是否會結合至α-4亞單位，如此項技藝中所已知。測試試劑在活體內是否具有促進髓鞘再形成及抑制脫髓鞘作用之活性，可使用實驗性自身免疫腦脊髓炎(EAE)動物模式進行。EAE為中樞神經系統之炎性症狀，具有與多發性硬化之類似性(Paterson，免疫病理學教科書，Miescher與Mueller-Eberhard編著，179-213,Grune與Stratton,N.Y.1976)。

EAE可在大白鼠中，由單一腹膜腔內注射對髓磷脂鹼性蛋白質為專一之CD4-陽性T-細胞無性繁殖系而引致。發炎係在4至12小時內引發；到第4或5天時，內源單細胞與淋巴細胞係浸潤腦幹與脊髓中之發炎血管，導致尾與後肢麻痺。

EAE腦部切片可測試其維持白血球連結之能力，使用例如Stamper與Woodruff,J.Exp.Med.144：828-833(1976)中所述之活體外結合檢測。抵抗白血球黏連受體之試劑，可在實例4所述之活體外切片檢測中檢驗抑制活性。如表12與13中所示，U937細胞(人類單核血球細胞系)之連附幾乎完全被抵抗人類VLA-4整合素之抗體所阻斷。髓鞘再形成抗體，當與抵抗其他黏連分子之抗體比較時，係產生顯著較大之阻斷作用。

令人驚訝的是，選擇性地抑制α ₄整合素(P4G9與HP1/7)之纖維網蛋白結合活性之抗體，係提高U937連附至EAE血管。此等結果指出，α ₄整合素之纖維網蛋白結合活性在活體外不會直接涉及U937黏連至EAE血管。表12與13亦顯示，抵抗許多其他白血球黏連受體之抗體，係對結合至EAE血管之U937或淋巴細胞毫無作用。

在使用上述α ₄ β ₁試劑之活體外結果下，此等抗體對EAE進展之作用亦可在活體內經由度量麻痺展開之延遲或麻痺嚴重性之降低而進行測試。其中一個可用於本發明中之抗體HP2/1之保護作用，係提供於實例4中。

有效抑制白血球結合至腦部內皮細胞，且藉以潛在地抑制脫髓鞘作用或促進髓鞘再形成之其他試劑，可利用黏連檢測確認。例如，使用HP2/1或N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯作為對照組，其他抗體或試劑可經篩檢其抑制淋巴細胞結合至α ₄ β ₁整合素已知配位體之能力。數種其他試劑可經由以VLA-4白血球細胞表面受體之α ₄亞單位為標的，確認為會抑制黏連。

可使用於本發明方法與組合物中之單株抗體，包括例如HP2/1、TY21.6、TY21.12及L25，如在美國專利6,033,665中所討論者，其係以全文併於本文供參考。此等抗體係與VLA-4之α鏈反應，並阻斷結合至VCAM-1、纖維網蛋白及發炎之腦部內皮細胞，但不會影嚮β ₁整合素族群其他成員之活性。

選擇性地對VLA-4/VCAM-1標的反應之其他試劑亦可使用。例如，與VCAM-1結合功能部位VLA-4(α ₄)交互作用之抗體，搭配僅阻斷淋巴細胞潛移至發炎位置譬如多發性硬化期間之腦部之β ₁鏈，可用以促進髓鞘再形成。再者，此試劑不會影嚮基質交互作用(藉由β ₁整合素之所有成員所媒介)，其亦不會影嚮正常陽免疫(藉由α ₄ β ₇所媒介)。此種及其他此類試劑之製造係良好地在此項技藝之技術範圍內。

9. 實例

提出下述實例，以對一般熟諳此藝者提供如何製造及使用本發明之完整揭示內容與說明，且並不意欲限制本發明人所認為其發明之範圍，亦非意欲表示下文實驗為所進行之全部或僅有之實驗。已盡力確保關於所使用數目之正確性(例如數量、溫度等)，但一些實驗誤差與偏離應被考慮。除非另有指明，否則份數為重量份數，分子量為重量平均分子量，溫度係以攝氏度數表示，而壓力係在於或接近大氣。

9.1. 化合物之合成

在下文實例中，若縮寫未定義於上文，則其具有其一般所接受之意義。再者，所有溫度均以攝氏度數表示(除非另有指出)。下述方法係用以製備如下文所提出之化合物。

方法1 N-甲苯磺醯化程序

適當胺基酸之N-甲苯磺醯化作用係經由Cupps,Boutin及Rapoport,J.Org.Chem. 1985,50,3972之方法進行。

方法2 甲酯製備程序

胺基酸甲酯類係使用Brenner與Huber Helv.Chim.Acta 1953,36,1109之方法製成。

方法3 BOP偶合程序

所要之二肽酯係藉由適當N-保護之胺基酸(1當量)與適當胺基酸酯或胺基酸酯鹽酸鹽(1當量)、六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基-參(二甲胺基)鏻[BOP](2.0當量)、三乙胺(1.1當量)及DMF之反應製成。將反應混合物於室溫下攪拌過夜。使粗產物藉急驟式層析純化，而得二肽酯。

方法4 氫化作用程序I

氫化作用係使用甲醇中之10%鈀/碳(10重量%)，於30psi下進行過夜。經過矽藻土墊過濾混合物，並濃縮濾液，以產生所要之胺基化合物。

方法5 水解程序I

於適當酯之急冷(0℃)THF/H₂O溶液(2：1，5-10毫升)中添加LiOH(或NaOH)(0.95當量)。將溫度保持在0℃下，而反應係在1-3小時內完成。以醋酸乙酯萃取反應混合物，並使水相凍乾，而造成所要之羧酸鹽。

方法6 酯水解程序II

於適當酯之急冷(0℃)THF/H₂O溶液(2：1，5-10毫升)中，添加LiOH(1.1當量)。將溫度保持在0℃下，而反應係在1-3小時內完成。濃縮反應混合物，並使殘留物溶於H₂O中，及以HCl水溶液將pH值調整至2-3。以醋酸乙酯萃取產物，並將合併之有機相以鹽水洗滌，以MgSO₄脫水乾燥，過濾，及濃縮，而產生所要之酸。

方法7 酯水解程序III

使適當酯溶於二氧陸圜/H₂O(1：1)中，並添加0.9當量之0.5N NaOH。將反應物攪拌3-16小時，然後濃縮。使所形成之殘留物溶於H₂O中，並以醋酸乙酯萃取。凍乾水相，而產生所要之羧酸酯鈉鹽。

方法8 磺醯化作用程序I

在已溶於二氯甲烷(25毫升)中，並冷卻至-78℃之經適當保護之胺基苯基丙胺酸類似物(11.2毫莫耳)中，添加所要之氯化磺醯(12毫莫耳)，接著逐滴添加吡啶(2毫升)。使溶液溫熱至室溫，並攪拌48小時。將反應溶液轉移至具有二氯甲烷(100毫升)之250毫升分液漏斗中，並以1N HCl(50毫升x 3)、鹽水(50毫升)及水(100毫升)萃取。使有機相脫水乾燥(MgSO₄)，並濃縮溶劑，而產生所要之產物。

方法9 還原胺化作用程序

Tos-Pro-p-NH2-Phe以適當醛之還原胺化作用，係使用醋酸、三乙醯氧基硼氫化鈉、二氯甲烷進行，並將合併之混合物於室溫下攪拌過夜。使粗產物藉急驟式層析純化。

方法10 BOC移除程序

使無水鹽酸鹽(HCl)氣體於0℃下起泡經過適當Boc-胺基酸酯之甲醇性溶液，歷經15分鐘，並將反應混合物攪拌三小時。使溶液濃縮成漿液，並溶於Et₂O中，且再濃縮。重複此程序，並將所形成之固體於高真空下放置過夜。

方法11 第三-丁酯水解程序I

使第三-丁酯溶於CH₂Cl₂中，並以TFA處理。反應係在1-3小時內完成，此時濃縮反應混合物，並使殘留物溶於H₂O中，及凍乾，而產生所要之酸。

方法12 EDC偶合程序I

於N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺酸(1當量)之CH₂Cl₂溶液(5-20毫升)中，將適當胺基酸酯鹽酸鹽(1當量)、N-甲基嗎福啉(1.1-2.2當量)及1-羥基苯并三唑(2當量)混合，放置在冰浴中，並添加1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺(1.1當量)。使反應物上升至室溫，並攪拌過夜。將反應混合物倒入H₂O中，並將有機相以飽和NaHCO₃、鹽水洗滌，脫水乾燥(MgSO₄或Na₂SO₄) ，過濾，及濃縮。使粗產物藉管柱層析純化。

方法13 EDC偶合程序II

於適當N-保護之胺基酸(1當量)之DMF溶液(5-20毫升)中，將適當胺基酸酯鹽酸鹽(1當量)、Et₃N(1.1當量)及1-羥基苯并三唑(2當量)混合，放置在冰浴中，並添加1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺(1.1當量)。使反應物上升至室溫，並攪拌過夜。使反應混合物於EtOAc與H₂O之間作分液處理，並將有機相以0.2N檸檬酸、H₂O、飽和NaHCO₃、鹽水洗滌，脫水乾燥(MgSO₄或Na₂SO₄)，過濾，及濃縮。使粗產物藉管柱層析或預備之TLC純化。

方法14 磺醯化作用程序II

使適當氯化磺醯溶於CH₂Cl₂中，並放置在冰浴中。添加L-Pro-L-Phe-OMe˙HCl(1當量)與Et₃N(1.1當量)，並使反應物溫熱至室溫，及在氮大氣下攪拌過夜。濃縮反應混合物，並使殘留物於EtOAc與H₂O之間作分液處理，且將有機相以飽和NaHCO₃、鹽水洗滌，脫水乾燥(MgSO₄或Na₂SO₄)，過濾，及濃縮。使粗產物藉管柱層析或預備之TLC純化。

方法15 磺醯化作用程序III

於L-Pro-L-4-(3-二甲胺基丙氧基)-Phe-OMe[使用方法10中所述之程序製成](1當量)在CH₂Cl₂中之溶液內，添加Et₃N(5當量)，接著是適當氯化磺醯(1.1當量)。使反應物溫熱至室溫，並於氮大氣下攪拌過夜。使混合物濃縮，溶於EtOAc中，以飽和NaHCO₃與0.2N檸檬酸洗滌。以固體NaHCO₃使水相呈鹼性，並以EtOAc萃取產物。將有機相以鹽水洗滌，脫水乾燥(MgSO₄或Na₂SO₄)，過濾，及濃縮。使粗製甲酯藉預備之TLC純化。其相應之酸係使用方法7中所述之程序製成。

方法16 氫化作用程序II

於阿拉克酮(azlactone)之甲醇(10-15毫升)溶液中，添加NaOAc(1當量)與10% Pd/C。將此混合物於40psi H₂下放置在氫化器上。8-16小時後，經過矽藻土墊過濾反應混合物，並濃縮濾液，以產生脫氫二肽甲酯。使此酯溶於二氧陸圜/H₂O(5-10毫升)中，於其中添加0.5N NaOH(1.05當量)。在攪拌1-3小時後，濃縮反應混合物，並使殘留物再溶於H₂O中，及以EtOAc洗滌。以0.2N HCl使水相呈酸性，並以EtOAc萃取產物。將合併之有機相以鹽水(1 x 5毫升)洗滌，脫水乾燥(MgSO₄或Na₂SO₄)，過濾，及濃縮，而產生酸，為非對映異構物之大約1：1混合物。

方法17 第三-丁酯水解程序II

使此第三-丁酯溶於CH₂Cl₂(5毫升)中，並以TFA(5毫升)處理。反應係在1-3小時內完成，此時濃縮反應混合物，並使殘留物溶於H₂O中，及濃縮。使殘留物再溶解於H₂O中，並凍乾，而產生所要之產物。

實例1 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸乙酯之合成

標題化合物係按照關於實例4製備所概述之程序，及適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃)₂SO)：δ=8.33(d,1H),7.70(d,2H),7.41(d,2H),7.24(d,2H),7.00(d,2H),4.52-4.44(m,1H),4.09-4.00(m,3H),3.53(bs,2H),3.38-3.31(m,3H),3.11-3.01(m,3H),2.39(s,3H),2.32(bs,4H),2.19(s,3H),1.61-1.50(m,3H),1.43-1.38(m,1H),1.13(t,3H).

¹³C NMR(CD₃)₂SO)：δ=171.1,171.1,153.9,149.8,143.6,134.1,133.9,130.0,129.8,127.4,121.5,61.2,60.7,54.2,54.1,53.3,49.0,45.7,44.0,43.4,35.8,30.5,23.8,21.0,14.0.

實例2 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸乙酯之合成

於反應小玻瓶中，將7.00克(15.2毫莫耳，1.0當量)Ts-Pro-Tyr(H)-OEt與1.86克(15.2毫莫耳，1.0當量)DMAP合併。然後，添加二氯甲烷(50毫升)、三乙胺(2.12毫升--1.54克，15.2毫莫耳，1.0當量)及氯化二甲基胺甲醯(1.68毫升--1.96克，18.2毫莫耳，1.2當量)。將小玻瓶緊密地加蓋，並使反應溶液漩渦打轉，獲得均勻溶液。然後，將反應溶液加熱至40℃。48小時後，所形成無色溶液之TLC顯示完全轉化。將反應溶液按下述處理：將50毫升EtOAc與50毫升己烷添加至反應混合物中，並將反應混合物以3 x 50毫升己烷洗滌，及以3 x 50毫升 0.5M檸檬酸、2 x 50毫升水、2 x 50毫升10% K₂CO₃及1 x 50毫升飽和NaCl洗滌。以MgSO₄脫水乾燥，過濾，蒸發獲得8.00克(99%)標題化合物，為透明油，其係於靜置時固化。自5：3：2庚烷/EtOAc/CH₂Cl₂再結晶。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃)₂SO)：δ=8.32(d,1H),7.70(d,2H),7.41(d,2H),7.23(d,2H),7.00(d,2H),4.52-4.44(m,1H),4.09-4.02(m,3H),3.37-3.31(m,1H),3.11-2.96(m,3H),3.00(s,3H),2.87(s,3H),2.39(s,3H),1.61-1.50(m,3H),1.43-1.38(m,1H),1.13(t,3H).

¹³C NMR(CD₃)₂SO)：δ=171.1,171.1,154.0,150.0,143.6,133.9,133.9,130.0,129.8,127.4,121.5,61.2,60.6,53.3,49.0,36.3,36.1,35.8,30.5,23.8,21.0,14.0.

實例3 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.72(d,2H),7.36(d,1H),7.33(d,2H),7.16(d,2H),7.03(d,2H),5.07(七重峰，1H),4.78(dt,1H),4.08-4.05(m,1H),3.67(bs,2H),3.57(bs,2H),3.41-3.35(m,1H),3.24(dd,1H),3.15-3.07(m,1H),3.04(dd,1H),3.46-2.43(m,7H),2.34(s,3H),2.05-2.02(m,1H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.9,170.4,153.6,150.5,144.3,133.2,133.1,130.2,130.0,127.9,121.7,69.5,62.2,54.7,53.4,49.6,46.1,44.3,43.7,37.2, 29.7,24.1,21.6,21.6,21.4.

實例4 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

將41.2克(84.34毫莫耳，1.0當量)Ts-Pro-Tyr(H)-OtBu與17.0克(84.34毫莫耳，1.0當量)4-硝基苯基氯甲酸酯合併。添加700毫升CH₂Cl₂。以隔片罩蓋。連接N₂管線。將燒瓶浸入4：1水/EtOH+乾冰漿液中，並攪拌，以冷卻至-15℃。於五分鐘內，添加29.38毫升(21.33克，210.81毫莫耳，2.5當量)Et₃N，並攪拌。於-10至-15℃下攪拌1小時。於3分鐘內，添加9.35毫升(8.45克，84.34毫莫耳，1.0當量)N-甲基六氫吡，並攪拌。攪拌過夜，同時溫熱至室溫。以700毫升己烷稀釋。以10% K₂CO₃重複洗滌，直到水層中不再見及黃色(4-硝基酚)為止。以飽和NaCl洗滌。以無水MgSO₄脫水乾燥，過濾，蒸發。溶解於500毫升EtOH中，並蒸發以移除Et₃N。重複一次。溶解於400毫升EtOH中，並添加600毫升水，及攪拌以使固體或油沉澱。若為油，則激烈攪拌以固化。藉過濾分離固體。將溶解、沉澱及過濾重複一次。以水沖洗以移除微量黃色。高真空至恒定質量，產生標題化合物，為白色固體。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.72(d,2H),7.33(d,3H),7.17(d,2H),7.02(d,2H),4.71(q,1H),4.09-4.06(m,1H),3.67(bs,2H),3.57(bs,2H),3.41-3.34(m,1H),3.22(dd,1H),3.16-3.09(m,1H),3.03(dd,1H),2.46-2.43(m,7H),2.34(s,3H),2.05-2.02(m,1H),1.57-1.43(m,3H),1.47(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=171.8,169.9,153.6,150.4,144.3,133.4,133.1,130.3,130.0,127.9,121.6,82.6,62.3,54.5,53.8,49.6,46.1,44.3,43.7,37.3,29.7,27.8,24.1,21.4.

實例5 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法7中所述之程序，製自實例1之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ=7.74(d,2H),7.42(d,2H),7.26(d,2H),7.04(d,2H),4.58-4.54(m,1H),4.16-4.12(m,1H),3.70(bs,2H)3.53(bs,2H),3.43-3.31(m,1H),3.26-3.13(m,7H),2.82(s,3H),2.43(s,3H),1.98-1.94(m,1H),1.76-1.51(m,3H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ=175.7,173.6,154.8,151.6,146.1,136.3,134.8,131.9,131.3,129.1,122.7,63.6,55.9,53.9,50.7,43.5,37.6,31.3,25.5,21.5.

實例6 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸正-丁基酯之合成

標題化合物係按照關於實例2製備所概述之程序，及適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃)₂SO：δ=8.31(d,1H),7.70(d,2H),7.41(d,2H),7.23(d,2H),6.99(d,2H),4.53-4.46(m,1H),4.10-4.01(m,1H),3.63-3.30(m,1H),3.10-2.96(m,3H),3.00(s,3H),2.88(s,3H),2.39(s,3H),1.59-1.30(m,6H), 1.33-1.20(m,2H),0.85(t,3H).

¹³C NMR(CD₃)₂SO：δ=171.4,171.3,154.2,150.2,143.7,134.0,130.1,130.0,127.6,121.7,64.3,61.2,59.2,53.4,49.0,36.2,36.0,35.8,30.0,23.8,21.0,18.5,13.5.

實例7 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸環戊酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃)₂SO：δ=8.27(d,1H),7.70(d,2H),7.41(d,2H),7.22(d,2H),6.99(d,2H),5.04(bs,1H),4.48-4.40(m,1H),4.08-4.05(m,1H),3.34-3.30(m,1H),3.09-2.95(m,3H),3.00(s,3H),2.88(s,3H),2.39(s,3H),1.76-1.74(m,2H),1.57-1.40(m,10H).

¹³C NMR(CD₃)₂SO：δ=171.3,171.0,154.2,150.2,432.7,134.1,130.1,130.0,127.6,121.6,77.4,61.2,53.4,49.0,36.2,36.1,35.7,32.0,30.5,23.8,23.2,21.0.

實例8 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃)₂SO：δ=8.18(d,1H),7.71(d,2H),7.41(d,2H),7.23(d, 2H),6.99(d,2H),4.42-4.38(m,1H),4.10-4.07(m,1H),3.37-3.30(m,1H),3.09-2.95(m,3H),3.00(s,3H),2.88(s,3H),2.39(s,3H),1.58-1.50(m,3H),1.40-1.30(m,1H),1.36(s,9H).

¹³C NMR(CD₃)₂SO：δ=171.1,170.3,154.2,150.2,143.8,134.2,134.1,130.2,130.0,127.6,121.6,81.0,61.3,53.8,49.0,36.3,36.0,35.9,30.5,27.5,23.8,21.0.

實例9 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法7中所述之程序，製自實例2之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃)₂SO：δ=8.13(d,1H),7.70(d,2H),7.41(d,2H),7.23(d,2H),6.99(d,2H),4.51-4.44(m,1H),4.11-4.09(m,1H),3.40-3.34(m,2H),3.11-2.94(m,3H),3.00(s,3H),2.87(s,3H),2.39(s,3H),1.59-1.36(m,4H).

¹³C NMR(CD₃)₂SO：δ=172.7,171.2,153.6,150.2,143.8,134.3,134.0,130.2,130.0,127.6,121.6,61.3,53.2,49.0,36.3,36.1,35.9,30.4,23.8,21.0.

實例10 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-3-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸乙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.74(m,2H),7.70-7.36(m,4H),7.24-7.14(m,3H), 6.93-4.90(m,1H),4.78-4.27(m,3H),4.05-3.55(m,.5H),3.48-3.43(m,5H),3.37-3.30(m,3H),3.02-3.08(bs,3H),2.99(bs,3H),2.45(s,1.5H),2.43(s,1.5H),2.12(m,1H),198,1.80(m,.5M),1.62-1.44(m,2.5H),1.29(t,1.5H),1.24(t,1.5H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=171.1,171.0,170.9,154.9,154.8,151.8,151.6,144.4,144.3,137.6,137.1,133.1,132.9,130.0,129.9,129.5,129.2,127.9,127.9,126.5,126.1,122.9,122.7,120.7,120.5.

實例11 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.76(d,2H),7.35(d,2H),7.22(d,2H),7.01(m,3H),5.05(m,1H),4.85(m,1H),4.57(d,1H),4.38(d,1H),3.86(s,1H),3.19-3.00(m,2H),3.09(s,3H),3.01(s,3H),2.45(s,3H),1.24(t,6H),1.16(s,3H),1.09(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.3,168.4,154.9,150.6,144.8,132.9,132.8,130.3,130.0,128.2,121.7,73.4,69.5,54.5,53.2,50.4,37.7,36.5,36.3,29.0,23.8,21.5,21.4.

實例12 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.75(d,2H),7.34(d,2H),7.23(d,2H),7.05-6.98(m,3H),4.76(m,1H),4.56(d,1H),4.40(d,1H),3.85(s,1H),3.09-3.00(m,8H),2.44(s,3H),1.43(s,3H),1.16(s,3H),1.09(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=169.8,168.3,154.9,150.6,144.8,133.2,132.9,130.4,130.0,128.2,121.6,82.6,73.4,54.6,53.8,50.4,37.8,36.5,36.3,29.0,27.7,23.8,21.5.

實例13 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法7中所述之程序，製自實例11之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.76(d,2H),7.35(d,2H),7.25(d,2H),7.14(d,1H),7.02(d,2H),5.17(br s,1H),4.89(m,1H),4.56(d,1H),4.40(d,1H),3.90(s,1H),3.30-3.00(m,8H),2.43(s,3H),1.09(s,6H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=172.7,169.3,155.2,150.6,144.9,133.1,132.7,130.5,130.1,128.1,121.9,73.3,54.5,53.3,50.5,36.9,36.6,36.4,29.0,23.7,21.5.

實例14 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-[(1,1-二酮基)硫代嗎福啉-3-羰基]-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

L-硫代嗎福啉-5-羧酸係藉由Larsson與Carlson(Acta Chemica Scan. 1994,48,517-525)之方法製成。N-(甲苯-4-磺醯基)-L-硫代嗎福啉-5-羧酸係使用方法1中所述之程序製成，然後，於BOP與NMM存在下，偶合至DMF中之第三-丁基酪胺酸，在水溶液處理及急驟式層析後，獲得N-(甲苯-4-磺醯基)-L-[硫代嗎福啉-3-羰基]-L-4-苯丙胺酸第三-丁酯。

4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)之形成係根據上文實例2，而硫代嗎福啉基成為1,1-二酮基-硫代嗎福啉基之氧化作用係根據Larsson與Carlson(Acta Chemica Scan. 1994,48,522)。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.68(d,2H),7.37(d,2H),7.08(m,4H),6.73(d,1H),5.11(m,1H),4.62(m,1H),4.23(m,1H),4.00(m,1H),3.82(m,1H),3.14(s,3H),3.03(s,3H),2.80(m,5H),2.44(s,3H),1.48(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=171.3,169.9,164.4,145.6,135.4,132.6,130.8,130.4,127.3,121.9,83.0,56.1,53.8,49.4,48.7,44.5,42.0,36.9,36.6,36.4,27.8,21.5.

實例15 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-[(1,1-二酮基)硫代嗎福啉-3-羰基]-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例14之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ=7.77(d,2H),7.40(d,2H),7.22(d,2H),7.00(d,2H),5.19(m,1H),4.65(m,1H),4.30(m,1H),3.95(m,1H),3.61(m,1H),3.20(m,5H),3.09(s,3H),2.97(s,3H),2.43(s,3H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ=174.1,168.0,157.0,152.0,146.4,137.7,135.3,131.7,131.6,128.8,123.0,57.1,54.8,51.1,50.9,48.0,47.7,43.2,37.4,36.8,36.7,21.5.

實例16 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.74(d,2H),7.33(d,2H),7.25(d,2H),7.20-7.00(m,3H),4.74(m,1H),4.55(d,1H),4.38(d,1H),3.83(s,1H),3.66(br m,2H),3.57(br m,2H),3.08-3.05(m,2H),2.45-2.42(m,7H),2.33(s,3H),1.42(s,9H),1.15(s,3H),1.08(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=169.7,168.2,153.6,150.3,144.7,133.3,132.7,130.4,129.9,128.1,121.5,82.6,73.4,54.5,53.7,50.4,46.0,44.2,43.6,37.7,28.9,27.7,23.8,21.4.

實例17 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例16之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=8.31(d,1H),7.72(d,2H),7.42-7.35(m,4H),7.08(d,2H),4.90-4.68(m,1H),4.64-4.61(m,1H),4.47-4.44(m,1H),4.01(s,1H), 3.36-3.32(br m,4H),3.27-3.25(m,1H),3.22-3.10(m,1H),2.94(s,3H),2.43(s,3H),1.14(s,3H),1.07(s,3H).

實例18 N-(甲苯-4-磺醯基)肉胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.66(d,2H),7.34(d,2H),7.18(d,2H),7.07(d,2H),6.98(d,1H),5.03(m,1H),4.81(m,1H),3.69(d,1H),3.49(d,1H),3.08(m,2H),3.04(s,3H),2.99(s,3H),2.63(s,3H),2.43(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=167.4,154.9,150.8,144.4,132.6,130.2,130.1,127.7,122.0,110.9,69.5,57.3,53.9,53.0,37.1,36.6,21.6,21.4.

實例19 N-(甲苯-4-磺醯基)肉胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例2製備之程序，及適當起始物質之取代製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.67(d,2H),7.34(d,2H),7.19(d,2H),7.03(d,2H),6.98(d,1H),4.76(m,1H),3.67(q,1H),3.06(m,2H),3.16(s,3H),2.99(s,3H),2.64(s,3H),2.43(s,3H),1.42(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.0,137.2,154.9,150.7,144.3,133.2,132.9,130.3,130.0,127.7,121.9,82.6,83.9,53.3,37.2,36.6,36.4,27.9,21.4.

實例20 N-(甲苯-4-磺醯基)肉胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法7中所述之程序，製自實例18之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.41(d,2H),7.10(d,2H),6.98(d,2H),6.75(d,2H),4.42(m,1H),3.43(m,2H),3.04(m,2H),2.80(s,3H),2.69(s,3H),2.33(s,3H),2.14(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=174.2,170.2,156.9,151.9,145.6,135.5,135.2,131.4,131.1,128.9,123.0,54.6,54.0,37.4,36.8,36.7,21.4.

實例21 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲胺基磺醯氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

以氯化二甲基胺磺醯取代氯化二甲基胺甲醯，並按照關於製備實例2之方法，獲得標題化合物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.72(d,2H),7.34(d,2H),7.21(s,4H),4.69(m,1H),4.04(m,1H),3.4(m,1H),3.24(m,3H),2.96(s,6H),2.42(s,3H),2.02(m,1H),1.45(m,13H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=166.3,165.3,144.8,140.0,130.9,126.4,125.6,123.5,117.3,95.5,78.3,57.8,49.2,45.2,34.2,32.9,25.0,23.4,19.7,17.1.

實例22 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲胺基磺醯氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例21之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ=7.73(d,2H),7.41(d,2H),7.38(d,2H),7.22(d,2H),4.69(m,1H),4.11(m,1H),3.41(m,2H),3.19(m,2H),2.94(s,6H),2.41(s,3A),1.78(m,1H),1.61(m,3H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ=174.3,174.0,150.8,145.9,137.3,135.1,132.1,131.2,129.1,123.1,63.3,54.6,50.6,39.1,37.5,31.6,25.3,21.5.

實例23 N-(甲苯-4-磺醯基)-肉胺醯基-L-(4-嗎福啉胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

在Ts-Pro-Tyr(H)-O-第三-丁酯製備中以肌胺酸取代L-脯胺酸，並以氯化4-嗎福啉碳醯取代氯化二甲基胺甲醯，及按照關於實例2製備之方法，獲得標題化合物，為白色固體。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.61(d,2H),7.28(d,2H),7.16(d,2H),7.02(d,2H),4.69(m,1H),3.67(m,8H),3.58(m,1H),3.48(m,1H),3.06(m,2H),2.59(s,3H),2.36(s,3H),1.26(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 169.7,167.1,153.5,150.1,144.1,133.1,133.0,133.0,130.1,129.8,127.4,121.6,82.6,66.3,53.6,53.1,44.5,43.7,36.9,36.4,27.6,21.2.

實例24 N-(甲苯-4-磺醯基)肉胺醯基-L-4-(六氫異菸鹼醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例23之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ=7.30(d,2H),7.02(d,2H),6.88(d,2H),6.67(d,2H),4.33(m,1H),3.32(m,3H),3.25(m,2H),3.12(m,3H),2.89(m,1H),2.70(m,3H),2.22(s,3H),2.03(s,3H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ=174.2,170.3,155.6,151.7,145.6,135.8,135.2,131.5,131.1,128.9,123.0,67.5,54.6,54.0,37.4,36.8,21.5.

實例25 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-[(1,1-二酮基)硫代嗎福啉-3-羰基]-L-4-(嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

以氯化4-嗎福啉碳醯取代氯化二甲基胺甲醯，並按照關於實例2與14之製備方法，獲得標題化合物，為白色固體。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.76(d,1H),7.68(d,1H),7.37(m,2H),7.14(m,2H),7.05(m,1H),6.97(d,1H),6.80(d,0.5H),6.57(d,0.5H),5.09(m,0.5H),4.91(m,0.5H),4.75(m,0.5H),4.62(m,0.5H),4.25(m,0.5H),4.09(m,2H),3.79(m,4H),3.65(m,4H),2.91(s,3H),2.44(s,3H),1.69(s,4H),1.44(s,5H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.0,169.8,164.8,164.4,153.7,150.4,145.6,145.4,135.4,135.3,132.9,130.8,130.7,130.5,130.4,127.5,127.2,122.1,121.8,83.01,82.8,66.4,56.1,56.1,53.7,53.6,49.5,49.3,48.6,44.7,43.9,42.0, 41.6,36.9,36.3,27.8,21.5.

實例26 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-[(1,1-二酮基)硫代嗎福啉-3-羰基]-L-4-(嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例25之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ=7.67(m,2H),7.32(m,2H),7.08(m,2H),6.93(m,2H),5.09(m,1H),4.54(m,1H),4.19(m,0.5H),4.02(m,0.5H),3.81(m,0.5H),3.66(m,8H),2.99(m,7H),2.32(s,3H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ=174.0,168.0,155.7,151.9,151.8,146.6,146.4,137.5,135.5,135.3,131.7,131.6,131.6,128.8,123.3,122.9,67.6,57.3,57.1,54.8,51.1,50.9,50.6,46.0,45.3,45.2,43.0,37.4,37.0,21.5.

實例27 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

NMR數據如下：¹³C NMR(CDCl₃)：δ=7.87-7.83(m,2H),7.26-7.13(m,5H),4.74-4.69(m,1H),4.05(m,1H),3.36(m,1H),3.24-3.17(m,1H),3.11-3.01(m,4H),2.97(s,3H),2.05-2.02(m,1H),1.60-1.47(m,3H),1.46(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.6,170.0,165.7,154.9,150.6,133.2,132.4,130.7,130.2,121.7,116.7,82.7,62.3,53.7,49.6,37.2,36.6,36.4,29.9,27.9, 24.2.

實例28 N-(甲苯-4-磺醯基)肉胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=8.17(d,1H),7.59(d,2H),7.26(d,2H),7.13(d,2H),7.00(d,2H),4.66(m,1H),3.60(m,6H),3.04(m,2H),2.56(s,3H),2.40(m,7H),2.34(s,3H),1.41(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=169.7,167.0,153.4,150.2,144.0,133.0,132.9,130.1,129.8,127.4,121.6,82.2,54.3,53.5,53.1,45.8,44.2,43.5,36.9,27.6,21.2.

實例29 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基-5,5-二甲基)-硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

實例12之產物係藉由Larsson與Carlson(Acta Chemica Scan.1994,48,517-525)之方法氧化，產生標題化合物，為白色固體。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.73(d,2H),7.36(d,2H),7.21(d,2H),7.06-6.95(m,3H),4.79(m,1H),4.38(dd,2H),4.10(s,1H),3.18-2.95(m,8H),2.43(s,3H),1.45(s,9H),1.33(s,3H),1.08(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=169.8,166.2,154.9,120.7,145.8,133.0,131.9,130.2,128.5,121.9,82.9,68.0,60.9,59.3,53.9,37.5,36.6,36.3,27.7,21.6, 19.3,18.5.

實例30 N-(1-甲基咪唑基-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例106之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=8.07(d,1H),7.75(s,1H),7.71(s,1H),7.25(d,2H),7.01(d,2H),4.71-4.66(m,1H),4.28-4.24(m,1H),3.77(s,3H),3.42-3.05(m,3H),3.09(s,3H),2.96(s,3H),1.84-1.69(m,2H),1.61-1.54(m,2H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=174.4,174.1,156.9,151.9,141.8,137.7,135.6,131.6,127.6,122.9,63.7,54.7,50.8,37.4,36.8,36.7,34.3,31.6,25.4.

製備實例A 2-(糖精-2-基)丙醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

N-(苯并異噻唑酮)-L-丙胺醯基-L-酪胺酸第三-丁酯係以下述方式製成，首先合併經急冷至0℃之THF中之氫化鈉(洗除礦油)與逐滴添加之N-(2-甲氧羰基)磺醯基-L-丙胺酸-L-酪胺酸第三-丁酯在THF中之溶液。將反應物於0℃下攪拌一小時，然後，在室溫下兩小時。以EtOAc與0.2N HCl萃取反應混合物，將合併之EtOAc層以0.2N HCl、飽和NaHCO₃及飽和NaCl連續洗滌。使有機層以MgSO₄脫水乾燥，過濾，及濃縮。藉矽膠層析過濾殘留物，而得N-(苯并異噻唑酮)-L-丙胺醯基-L-酪胺酸第三-丁酯。接著，按照實例2中所述之程序製成標題化合物。

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)(非對映異構物之1：1混合物)δ=8.15(m,2H)；8.5(m,3H)；7.20(m,2H)；6.95(m,2H)；4.75(m,1H)；4.30(m,1H)；3.05(s,3H)；2.95(m,2H)；2.90(s,3H)；1.75與1.65(兩個d,3H)；1.30與1.35(兩個s,9H).

實例31 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基-5,5-二甲基)-硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例29之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.75(m,3H),7.29(m,4H),7.08(d,2H),4.95(m,1H),4.46-4.20(m,3H),3.17(s,3H),3.30-3.10(m,2H),3.02(s,3H),2.43(s,3H),1.15(s,3H),0.88(s,3H).

¹³CNMR(CDCl₃)：δ=127.2,167.5,155.8,150.3,145.4,133.6,132.6,130.8,130.2,128.3,121.9,67.9,65.8,60.8,53.9,36.8,36.6,35.8,21.6,18.8,15.0.

實例32 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例27之產物。

NMR數據如下：¹³C NMR(CDCl₃)：δ=7.88-7.84(m,2H),7.54(d,1H),7.26-7.18(m,4H), 7.01(d,2H),6.92(s,3H),4.88-4.83(m,1H),4.14-4.11(m,1H),3.39-3.29(m,2H),3.13(m,2H),3.00(s,3H),2.99(s,3H),1.92-1.89(m,1H),1.59-1.43(m,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=173.1,172.4,165.6,155.5,150.4,133.2,131.9,130.6,130.3,121.8,116.6,61.9,53.1,49.6,36.6,36.3,30.2,23.9.

實例33 N-(甲苯-4-磺醯基)-D-脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡 -1-基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

NMR數據如下：¹³C NMR(CDCl₃)：δ=7.72(d,2H),7.33(d,3H),7.17(d,2H),7.02(d,2H),4.71(q,1H),4.09-4.06(m,1H),3.67(bs,2H),3.57(bs,2H),3.41-3.34(m,1H),3.22(dd,1H),3.16-3.09(m,1H),3.03(dd,1H),2.46-2.43(m,7H),2.05-2.02(m,1H),1.57-1.43(m,3H),1.47(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.8,169.9,153.6,150.4,144.3,133.4,133.1,130.3,130.0,127.9,121.6,82.6,62.3,54.5,53.8,49.6,46.1,44.3,43.7,37.3,29.7,27.8,24.1,21.4.

實例34 N-(甲苯-4-磺醯基)-N-甲基-L-丙胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

NMR數據如下： ¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.68(d,2H),7.31(d,2H),7.17(d,2H),7.04(d,2H),6.86(d,1H),4.65(m,1H),4.47(q,1H),3.71-3.53(m,4H),3.24-2.92(m,2H),2.50-2.40(m,10H),2.35(s,3H),1.45(s,9H),0.92(d,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.1,169.9,153.6,150.4,143.9,135.6,133.3,130.2,129.9,127.2,121.8,82.4,55.4,54.6,53.6,46.0,44.2,43.7,37.2,29.6,27.8,21.4,11.5.

實例35 N-(4-硝基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=8.38-8.34(m,2H),8.05-8.00(m,2H),7.16-2.12(m,2H),7.03-6.94(m,3H),4.74-4.68(m,1H),4.15-4.14(m,1H),3.41-3.32(m,1H),3,23-3.14(m,2H),3.08(s,3H),3.03(m,1H),2.98(s,3H),2.05(m,1H),1.66-1.48(m,3H),1.47(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.0,169.9,154.8,150.6,150.4,142.4,132.9,130.2,129.0,124.5,121.6,82.7,62.2,53.4,49.4,37.0,36.5,36.2,30.1,27.7,24.1.

實例36 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-[(1,1-二酮基)-硫代嗎福啉-3-羰基]-L-4-(NN-二甲胺基磺醯氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係使用關於實例21製備所述之程序，及適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.73(d,1H),7.67(d,1H),7.35(m,2H),7.27(m,2H),6.88(d,1H),6.66(d,1H),5.08(m,0.5H),4.97(m,0.5H),4.71(m,0.5H),4.61(m,0.5H),4.25(m,0.5H),4.03(m,1H),3.21-3.04(m,4H),2.89(s,3H),2.83(s,3H),2.78(m,3H),2.42(s,3H),1.44(s,4.5H),1.38(s,4.5H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=169.8,169.6,164.9,164.5,149.3,149.1,145.6,145.4,135.4,135.0,134.6,130.9,130.6,130.5,127.4,127.2,122.0,121.8,83.0,83.0,56.0,53.7,49.2,49.1,48.5,41.9,41.4,38.6,36.8,36.2,27.7,21.5.

實例37 N-(甲苯-4-磺醯基)肉胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

以硫代嗎福啉取代N-甲基六氫吡，並按照關於實例4製備之方法，獲得標題化合物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.65(d,2H),7.33(d,2H),7.20(d,2H),7.04(d,2H),4.76(m,1H),3.89(m,4H),3.68(d,1H),3.48(d,1H),3.10(m,2H),2.66(m,7H),2.41(s,3H),1.43(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=169.9,167.2,153.5,150.3,144.3,133.1,130.3,130.0,127.6,121.8,82.5,53.8,53.3,47.0,36.4,37.2,36.6,27.8,27.3,27.0,21.4.

實例38 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-N-甲基丙胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例34之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.65(d,2H),7.34(d,2H),7.27(d,2H),7.09(d,2H),4.64-4.50(m,2H),4.48-4.23(m,2H),3.60-2.96(m,8H),2.92(s,3H),2.55(s,3H),2.40(s,3H),0.93(d,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=174.3,173.1,154.9,151.6,145.5,137.0,136.1,131.6,131.2,128.5,123.1,56.4,54.8,54.0,43.8,37.3,30.2,21.5,13.2.

實例39 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例81之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ=8.03(m,1H),7.73(d,2H),7.41(d,2H),7.28(d,2H),7.08(d,2H),4.70-4.65(m,1H),4.12-4.00(m,5H),3.38-3.36(m,1H),3.31-3.06(m,7H),2.43(s,3H),1.77-1.48(m,5H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ=168.4,159.1,130.0,129.1,125.6,125.1,123.0,116.9,57.2,48.8,46.3,44.5,31.5,25.6,19.3,15.4.

實例40 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例82之產物。

NMR數據如下： ¹H NMR(CD₃OD)：δ=7.73(d,2H),7.41(d,2H),7.27(d,2H),7.04(d,2H),4.68-4.65(m,1H),4.10-4.07(m,1H),3.90(t,2H),3.77(t,2H),3.38-3.11(m,4H),2.66(m,4H),2.43(s,3H),1.80-1.48(m,5H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ=168.4,168.2,149.4,145.7,139.8,129.7,129.0,125.6,125.1,123.1,116.9,57.2,48.8,44.6,42.1,36.0,31.4,25.7,22.1,21.8,19.3,15.4.

實例41 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(六氫異菸鹼醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例80之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ=8.08(m,1H),7.73(d,2H),7.41(d,2H),7.27(d,2H),7.03(d,2H),4.71(m,1H),4.11-4.08(m,1H),3.61(t,2H),3.47-3.38(m,3H),3.31-3.11(m,4H),2.43(s,3H),1.77-1.47(m,10H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ=168.3,168.1,158.8,149.6,145.9,139.8,129.5,129.0,125.6,125.1,123.1,116.9,57.2,48.6,44.6,40.6,40.1,36.0,31.4,25.7,20.9,20.6,19.3.

實例42 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(四氫吡咯-1-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例83之產物。

NMR數據如下： ¹H NMR(CD₃OD)：δ=8.08(m,1H),7.73(d,2H),7.41(d,2H),7.04(d,2H),7.27(d,2H),4.72-4.68(m,1H),4.11-4.08(m,1H),3.57-3.53(t,2H),3.43-3.28(m,3H),3.25-3.06(m,4H),2.43(s,3H),1.99-1.80(m,4H),1.78-1.49(m,5H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ=168.2,158.3,149.2,145.8,139.8,129.4,129.1,125.6,125.1,123.1,116.9,57.2,48.7,44.5,41.5,31.4,25.7,20.6,19.8,19.3,15.4.

實例43 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例108之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ=7.73(d,2H),7.41(d,2H),7.27(d,2H),7.04(d,2H),4.95-4.93(m,1H),4.10-4.07(m,1H),3.71-3.65(m,6H),3.50(t,2H),3.40-3.10(m,4H),2.43(s,3H),1.78-1.48(m,4H).

¹³CNMR(CD₃OD)：δ=168.4,168.2,149.6,145.7,139.8,129.1,125.6,125.1,123.1,116.8,61.5,57.2,44.5,36.0,31.4,25.6,19.3,15.4.

實例44 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸新戊酯之合成

將異丙醇鈦(0.3當量)添加至Tos-Pro-Tyr乙酯(1當量)與過量新戊醇中。將混合物於氬大氣下加熱至回流過夜。於減壓下移除過量新戊醇，並使殘留物藉急驟式管柱層析純化(矽膠，己烷：EtOAc 2：1)，而得新戊酯白色固體(0.9克，85%)。標題化合物係按照實例4中所述之程序製成。

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)δ=8.29(d,1H,J=7.91Hz)；7.68(d,2H,J=8.45Hz)；7.40(d,2H,J=8.34Hz)；7.24(d,2H,J=8.57Hz)；7.00(d,2H,J=8.57Hz)；4.56(m,1H)；4.07(m,1H)；3.73(s,2H)；3.55(br s,2H)；3.40(m,3H)；3.10(m,3H)；2.40(s,3H)；2.35(br s,4H)；2.20(s,3H)；1.55(m,3H)；1.37(m,1H)；0.85(s,9H).

實例45 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸新戊酯之合成

將異丙醇鈦(0.3當量)添加至Tos-Pro-Tyr乙酯(1當量)與過量新戊醇中。將混合物於氬大氣下加熱至回流過夜。於減壓下移除過量新戊醇，並使殘留物藉急驟式管柱層析純化(矽膠，己烷：EtOAc 2：1)，獲得新戊酯白色固體(0.9克，85%)。標題化合物係按照實例2中所述之程序製成。

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)δ=8.28(d,1H,J=8.13Hz)；7.68(d,2H,J=8.4Hz)；7.40(d,2H,J=7.9Hz)；7.23(d,2H,J=8.56Hz),6.99(d,2H,J=8.35Hz)；4.57(m,3H)；2.40(s,3H)；1.55(m,3H)；1.38(m,1H)；0.85(s,9H).

實例46 2-(糖精-2-基)丙醯基-L-4-(4-甲基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照實例A與實例4製備中所述之程序製成。

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)(非對映異構物之1：1混合物)δ=8.31(m,1H)；8.26(m,1H)；8.03(m,3H)；7.20(m,2H)；7.00(m,2H)；4.73(m,1H)；4.30(m,1H)；3.58(br s,2H)；3.40(br s,2H)；3.02(m,1H)；2.95(m,1H)；2.35(br s,4H)；2.20(s,3H)；2.75與2.65(兩個d,3H)；1.35與1.32(兩個s,9H).

實例47 2-(糖精-2-基)丙醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述程序，製自製備實例A之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)(非對映異構物之1：1混合物)δ=12.75(br s,1H)；8.28(m,2H)；8.05(m,3H)；7.20(m,2H)；7.00與9.95(兩個d,2H)；4.75(m,1H)；4.40(m,1H)；3.10(m,1H)；3.05(s,3H)；2.95(m,1H)；2.90(s,3H)；2.75與2.60(兩個d,3H).

實例48 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-N-甲基丙胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例2合成之程序，及適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.68(d,2H),7.31(d,2H),7.17(d,2H),7.04(d,2H), 6.87(d,2H),4.67(m,1H),4.48(q,1H),3.09(s,3H),3.00(s,3H),3.14-2.92(m,2H),2.46(s,3H),2.43(s,3H),1.45(s,9H),0.92(d,3H).

¹³CNMR(CDCl₃)：δ=170.2,169.9,154.9,150.6,143.9,135.6,133.2,130.2,130.0,127.3,121.9,82.5,55.5,53.7,37.2,36.6,36.4,29.7,27.8,21.4,11.5.

實例49 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

L-硫代嗎福啉-3-羧酸係藉由Larsson與Carlson(Acta Chemica Scan. 1994,48,517-525)之方法製成。N-(甲苯-4-磺醯基)-L-硫代嗎福啉-3-羧酸係使用方法1中所述之程序製成。標題化合物係按照關於實例2合成之程序，及適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.69(d,2H),7.31(d,2H),7.16(d,2H),6.98(d,2H),6.86(d,1H),4.71(m,1H),4.62(m,1H),3.94(m,1H),3.31(m,1H),3.09(m,4H),2.98(s,3H),2.67(m,1H),2.50(m,1H),2.40(s,3H),2.31(m,1H),2.10(m,1H),1.49(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=169.9,167.4,154.8,150.6,144.2,136.8,132.8,130.4,130.2,127.3,121.8,82.6,55.2,54.0,43.3,36.5,36.3,27.8,25.2,24.6,21.4.

實例50 N-(甲苯-4-磺醯基)肉胺醯基-L-4-(1，1-二酮基硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例121之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ=7.67(d,2H),7.40(d,2H),7.27(d,2H),7.09(d,2H),4.61(m,1H),4.12(m,2H),3.99(m,2H),3.60(m,2H),3.23(m,8H),2.58(s,3H),2.42(s,3H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ=174.2,170.3,155.0,151.6,145.6,136.1,135.2,131.5,131.1,128.9,123.0,54.6,54.0,52.4,52.2,44.4,44.0,37.4,36.8,21.4.

實例51 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照由Larsson與Carlson所述之程序(Acta Chemica Scan. 1994,48,522)，製自實例49之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.76(d,2H),7.37(d,2H),7.08(d,2H),6.98(d,2H),6.56(d,1H),4.95(m,1H),4.62(m,1H),3.99(m,2H),3.25(m,1H),3.07(s,3H),2.97(m,8H),2.44(s,3H),1.48(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.0,164.8,154.9,150.7,145.4,135.3,132.6,130.7,130.3,127.5,122.3,82.8,56.1,53.6,49.5,48.6,41.6,36.6,36.4,27.9,21.6.

實例52 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例71製備所述之程序製成。

NMR數據如下： ¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.75(d,2H),7.36(d,2H),7.12(d,2H),6.98(d,2H),6.58(d,1H),4.93(m,1H),4.63(m,1H),4.09(m,2H),3.72(m,4H),3.63(m,2H),3.51(m,2H),3.24(m,1H),2.96(m,4H),2.43(s,3H),1.46(s,9H).

¹³CNMR(CDCl₃)：δ=170.0,164.8,153.7,150.4,145.4,135.2,132.9,130.7,130.4,127.5,122.1,82.9,66.4,56.1,53.6,49.4,48.5,44.7,43.9,41.6,36.3,27.8,21.6.

實例53 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-N-甲基丙胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例48之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.68(d,2H),7.31(d,2H),7.20(d,2H),7.11-7.04(m,3H),6.35(br s,1H),4.81(m,1H),4.52(q,1H),3.35-2.98(m,2H),3.09(s,3H),3.00(s,3H),2.45(s,3H),2.43(s,3H),0.91(d,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=173.7,170.8,155.2,150.6,144.0,135.4,133.2,130.2,130.0,127.3,122.1,55.5,53.2,36.6,36.5,36.4,29.8,21.4,11.6.

實例54 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

L-硫代嗎福啉-3-羧酸係藉由Larsson與Carlson之方法(Acta Chemica Scan. 1994,48,517-525)製成。N-(甲苯-4-磺醯基)-L-硫代嗎福啉-3-羧酸係使用方法1中所述之程序製成。然後，標題化合物係按照關於實例2合成之程序製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.87-7.82(m,2H),7.20(t,2H),7.16(d,2H),7.00(d,2H),6.76(d,1H),4.74(t,1H),4.65(q,1H),3.92(d,1H),3.32(dd,1H),3.17-3.00(m,2H),3.09(s,3H),2.99(s,3H),2.76-2.66(m,1H),2.62(dd,1H),2.46(dt,1H),2.22(d,1H),1.49(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.0,167.2,165.5,154.8,150.7,135.8,132.7,130.5,130.1,121.9,116.9,82.8,55.3,53.9,43.4,36.6,36.4,36.3,27.9,25.8,25.0.

實例55 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照由Larsson與Carlson所述之程序(Acta Chemica Scan. 1994,48,522)，製自實例54之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.92-7.88(m,2H),7.24(t,2H),7.09(d,2H),6.97(d,2H),6.41(d,1H),4.96(d,1H),4.62(d,1H),4.03(d,1H),3.26(dd,1H),3.13-2.92(m,6H),3.09(s,3H),2.97(s,3H),1.49(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.1,165.9,164.5,154.9,150.7,134.0,132.4,130.5,130.4,122.2,117.3,83.0,56.1,53.4,50.0,49.1,41.7,36.6,36.3,36.1,27.9.

實例56 N-(吡啶-3-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

N-苄基-L-脯胺酸係使用方法12中所述之程序，偶合至L-酪胺酸第三-丁酯。N-苄基-L-脯胺醯基-L-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯基-丙胺酸第三-丁酯係按照關於實例2製備之程序製成。L-脯胺醯基-L-(4-N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯係使用方法4中所述之程序，製自前述反應之產物。標題化合物係使用關於氯化3-吡啶磺醯製備所述之程序(參閱Crowell等人，J.Med.Chem.,1989,32,2436-2442)與上一反應之產物製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=9.95(d,1H),8.83(dd,1H),8.14-8.10(m,1H),7.51-7.47(m,1H),7.16-7.13(m,3H),7.02-6.99(m,2H),4.72-4.69(m,1H),4.09-4.06(m,1H),3.41-3.39(m,1H),3.23-3.17(m,1H),3.13-2.98(m,1H),3.07(s,3H),2.97(s,3H),2.04(m,1H),1.59-1.47(m,3H),1.45(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.1,169.9,154.8,153.9,150.5,148.4,135.5,133.0,130.1,123.9,121.6,82.6,52.2,53.6,49.5,37.1,36.5,36.3,29.9,27.8,24.0.

製備實例B N-(嘧啶-2-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係經由取代氯化2-嘧啶磺醯(參閱Skulnick等人，J.Med.Chem.,1997,40,1149-1164)，並按照關於實例56製備之方法而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=8.28(d,2H),7.39(d,1H),7.02(d,2H),6.88(d,2H), 6.54(m,1H),4.76-4.69(m,1H),4.57-4.55(m,1H),3.64(m,1H),3.55-3.52(m,1H),3.09-3.03(m,1H),3.08(s,3H),2.99-2.95(m,1H),2.98(s,3H),2.32(m,1H),2.01-1.97(m,3H),1.37(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=172.1,170.4,160.6,157.7,154.8,150.3,133.0,130.1,121.3,110.5,82.0,60.7,53.3,47.5,37.1,36.5,36.3,28.9,27.7,24.1.

實例57 N-(4-硝基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例35之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=8.36(d,2H),8.02(d,2H),7.42(d,1H),7.20(d,2H),7.01(d,2H),4.86(m,1H),4.18-4.15(m,1H),3.46-3.43(m,1H),3.32-3.26(m,1H),3.19-3.11(m,2H),3.09(s,3H),3.01(s,3H),1.91(m,1H),1.65-1.54(m,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=172.9,171.7,155.5,150.4,150.4,142.1,133.2,130.5,129.1,124.6,121.8,61.9,52.9,49.6,36.6,36.3,36.3,30.6,24.1.

實例58 N-(4-氰基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例2製備所述之程序，及適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.94(d,2H),7.82(d,2H),7.13(d,2H),7.05-6.99 (m,3H),4.71-4.66(m,1H),4.12-4.09(m,1H),3.36-3.35(m,1H),3.22-3.11(m,2H),3.07(s,3H),3.06-3.01(m,1H),2.97(s,3H),2.05(m,1H),1.63-1.37(m,3H),1.46(s,9H).

¹³CNMR(CDCl₃)：δ=170.1,169.9,154.8,150.6,140.8,133.1,132.9,130.2,128.4,121.7,117.1,116.9,82.7,62.2,53.4,49.4,37.0,36.5,36.3,30.1,27.8,24.1.

實例59 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲胺基磺醯氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例36之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ=7.79(m,2H),7.44(m,2H),7.27(m,2H),7.17(m,2H),5.21(m,1H),4.64(m,1H),4.14(m,1H),3.61(m,2H),3.24(m,2H),3.08(m,2H),2.89(s,6H),2.80(m,2H),2.43(s,3H).

¹³CNMR(CD₃OD)：δ=173.9,168.1,168.0,150.8,150.8,146.7,146.5,137.6,137.5,137.1,136.9,132.2,132.1,131.7,131.6,128.8,123.3,123.1,57.3,54.8,51.0,50.8,50.5,47.9,47.8,43.2,43.0,39.0,39.0,37.4,37.0,21.5.

實例60 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例51之產物。

NMR數據如下： ¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.79(d,2H),7.43(d,2H),7.20(d,2H),7.00(d,2H),5.21(m,1H),4.65(m,1H),4.12(m,1H),3.75(m,1H),3.29(m,3H),3.08(s,3H),3.00(m,1H),3.00(m,1H),2.97(s,3H),2.80(m,3H),2.44(s,3H).

¹³CNMR(CDCl₃)：δ=165.1,159.0,147.9,143.1,137.6,128.6,126.1,122.7,122.6,119.8,114.3,48.3,45.8,41.6,34.0,28.0,27.8,27.7,12.5.

實例61 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照由Larsson與Carlson所述之程序(Acta Chemica Scan. 1994,48,522)，製自根據本文實例製成之N-(甲苯-4-磺醯基)-L-硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.77(d,2H),7.38(d,2H),7.18(m,3H),7.09(d,2H),4.83-4.57(m,3H),3.77-3.60(m,2H),3.36-3.23(m,1H),3.15-3.00(m,7H),2.85-2.73(m,1H),2.46(s,3H),1.50(s,9H).

實例62 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.96(d,2H),7.80(d,2H),7.26-7.13(m,3H),7.01(d,2H),4.72-4.70(m,1H),4.11-4.08(m,1H),3.40-3.37(m,1H),3.25-3.10(m, 2H),3.07(s,3H),3.04-3.02(m,1H),2.98(s,3H),2.06(m,1H),2.06-2.04(m,1H),1.61-1.52(m,3H),1.46(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.3,169.9,154.9,150.6,139.9,134.9,133.1,130.2,128.4,126.5,121.7,82.7,62.3,5.35,49.6,37.2,36.6,36.3,30.0,27.824.1.

實例63 N-(1-甲基吡唑基-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例117之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=8.84(br s,1H),7.93(s,1H),7.79(s,1H),7.68-7.65(m,1H),7.18(d,2H),6.99(d,2H),4.88-4.81(m,1H),4.08-4.06(m,1H),3.92(s,3H),3.45-3.40(m,1H),3.34-3.27(m,1H),3.11-3.01(m,5H),2.97(s,3H),1.82(m,1H),1.66-1.57(m,2H),1.45(m,1H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=173.1,172.9,159.1,158.6,150.4,138.8,133.4,133.2,130.3,121.9,117.3,62.0,53.1,49.7,39.4,36.6,36.5,36.4,30.4,23.9.

實例64 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例61之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=8.34(d,1H),7.70(d,2H),7.33(d,2H),7.14(d,2H), 7.01(d,2H),5.07(m,1H),4.93(m,1H),4.43(d,1H),4.01(d,1H),3.68(m,1H),3.37(m,1H),3.17(s,3H),3.14(m,1H),3.09(s,3H),2.54(m,1H),2.43(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=171.5,166.4,156.4,150.5,145.5,134.2,134.1,131.4,130.3,128.1,121.8,64.3,59.2,53.7,50.5,36.9,36.5,35.8,21.6.

實例65 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例84之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.83(m,2H),7.73(d,1H),7.16(m,4H),6.99(d,2H),5.57(br s,1H),4.87(m,1H),4.76(m,1H),4.53(d,1H),4.10(d,1H),3.34(m,1H),3.22(d,2H),3.12(s,3H),3.04(s,3H),2.43(m,1H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=172.1,168.7,155.7,150.5,133.6,133.1,130.8,130.7,121.7,116.9,116.6,65.3,53.3,51.3,36.8,36.4,36.1,33.4.

實例66 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)-硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例製備2所述之程序，及適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.91(m,2H),7.26(m,4H),7.02(d,2H),6.96(d,1H),4.75(m,1H),4.55(d,1H),4.42(d,1H),3.86(s,1H),3.08(s,3H),3.05(m, 2H),3.00(s,3H),1.43(s,9H),1.17(s,3H),1.16(s,3H).

¹³CNMR(CDCl₃)：δ=169.9,168.1,167.6,164.2,154.9,150.6,133.1,132.2,131.0,130.9,130.4,121.7,116.9,116.6,82.7,73.5,54.7,53.7,50.5,37.8,36.6,36.4,29.1,27.8,23.8.

實例67 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例68製備所述之程序製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.91-7.87(m,2H),7.27-7.25(m,2H),7.15(d,2H),6.51(d,1H),4.93-4.90(m,1H),4.64-4.58(m,1H),4.14-3.99(m,7H),3.28-2.90(m,10H),1.47(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.1,167.6,164.5,153.1,149.8,133.9,133.4,130.7,130.5,121.7,117.4,117.1,83.1,56.1,53.4,51.6,49.9,48.9,43.1,41.6,36.2,27.8.

實例68 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

以硫代嗎福啉取代N-甲基六氫吡，並按照關於實例4製備之方法，及根據Larsson與Carlson(Acta Chemica Scan. 1994,48,522)使硫代嗎福啉基環中之硫基氧化，獲得標題化合物，為白色固體。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.75(d,2H),7.35(d,2H),7.17(d,2H),6.99(d,2H), 6.65(d,1H),4.92-4.90(m,1H),4.63-4.60(m,1H),4.15-3.95(m,7H),3.30-3.23(m,1H),3.14(t,4H),3.07-2.80(m,6H),2.45(s,3H),1.48(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=169.9,164.8,153.1,149.8,145.5,135.1,133.6,130.7,127.5,121.8,82.9,60.3,56.1,53.7,51.8,49.3,48.4,43.1,42.7,41.5,36.3,27.8,21.5.

實例69 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照實例37中所述之程序，及適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.88-7.83(m,2H),7.26-7.15(m,5H),7.01(d,2H),4.74-4.67(m,1H),4.08-4.05(m,1H),3.91-3.80(m,4H),3.41-3.35(m,1H),3.24-3.00(m,3H),2.70-2.65(t,4H),2.06-2.04(m,1H).1.60-1.46(m,12H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.5,169.8,153.4,150.2,133.5,130.7,130.5,130.3,121.6,116.8,116.5,82.6,62.2,53.6,49.6,47.0,46.4,37.2,29.8,27.8,27.3,27.0,24.1.

實例70 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)-硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例66之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.90(m,2H),7.30-7.14(m,5H),7.02(d,2H),5.83 (br s,1H),4.90(m,1H),4.57(d,1H),4.40(d,1H),3.96(s,1H),3.09(s,3H),3.28-3.02(m,2H),3.00(s,3H),1.13(s,6H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=173.2,169.2,164.2,163.9,155.3,150.6,133.1,132.0,131.0,130.9,130.6,122.0,117.0,116.7,73.3,54.6,53.3,50.5,37.0,36.7,36.4,29.0,23.7.

實例71 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

以氯化4-嗎福啉胺甲醯取代氯化二甲基胺甲醯，並按照關於實例2製備之方法，獲得標題化合物，為白色固體。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.91-7.87(m,2H),7.26-7.20(m,2H),7.11(d,2H),6.98(d,2H),6.43(d,1H),4.95-4.92(m,1H),4.62-4.60(m,1H),4.05-4.00(m,2H),3.74(t,4H),3.66-3.52(m,4H),3.30-2.92(m,6H),1.48(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.1,164.5,150.4,134.6,132.7,130.5,122.0,117.4,117.1,83.1,66.5,56.1,53.4,49.9,49.0,44.7,44.0,41.6,36.2,27.8.

實例72 N-(4-三氟甲氧基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.89(d,2H),7.35(d,2H),7.25-7.13(m,3H),7.01(d,2H),4.70(m,1H),4.09-4.06(m,1H),3.39-3.36(m,1H),3.24-3.01(m,5H), 2.98(s,3H),2.05(m,1H),1.62-1.47(m,3H),1.46(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.4,169.9,154.9,152.7,150.6,134.6,113.2,130.2,130.1,121.7,120.2,82.7,62.2,53.6,49.6,37.2,36.6,36.3,29.9,27.8,24.1.

實例73 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

按照關於實例2製備之方法，並根據Larsson與Carlson(Acta Chemica Scan. 1994,48,522)，使硫代嗎福啉基環中之硫基氧化，獲得標題化合物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.70(d,2H),7.31(d,2H),7.04(d,2H),6.93(d,2H),6.59(d,1H),5.01(m,2H),4.65(m,1H),4.01(d,1H),3.90(d,1H),3.25(m,1H),3.00(s,3H),2.82(m,8H),2.37(s,3H),1.22(s,3H),1.20(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.3,165.0,154.6,150.5,145.1,135.2,132.3,130.4,130.0,127.2,122.1,69.5,55.9,53.1,49.1,48.5,41.4,36.3,36.1,35.9,21.4.

實例74 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基-5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照由Larsson與Carlson所述之程序(Acta Chemica Scan. 1994,48,522)，製自實例66之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.88(m,2H),7.24(m,4H),7.05(d,2H),6.95(d,1H),4.80(m,1H),4.40(m,2H),4.10(s,1H),3.17-3.03(m,2H),3.10(s,3H), 3.01(s,3H),1.47(s,9H),1.36(s,3H),1.11(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=169.8,168.6,166.0,154.5,150.8,139.7,133.0,131.5,131.4,130.3,122.0,117.1,116.8,83.0,68.0,60.9,59.3,53.8,37.4,36.6,36.4,27.8,18.9,18.8.

實例75 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基-5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照由Larsson與Carlson所述之程序(Acta Chemica Scan. 1994,48,522)，製自實例11之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.75(d,2H),7.38(d,2H),7.21(d,2H),7.03(m,3H),5.08(m,1H),4.89(m,1H),4.38(m,2H),4.10(s,1H),3.22-3.04(m,2H),3.10(s,3H),3.00(s,3H),2.43(s,3H),1.26(m,9H),1.09(s,3H).

¹³CNMR(CDCl₃)：δ=170.3,166.3,150.8,145.9,132.8,131.9,130.3,128.6,122.0,69.8,68.0,60.9,59.4,53.4,37.4,36.6,36.4,21.6,21.5,19.2,18.6.

實例76 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例74之產物。

NMR數據如下：¹³C NMR(CDCl₃)：δ=171.7,167.9,137.3,164.5,155.9,150.4,133.6,131.8,131.3,131.2,130.8,121.9,117.1,116.8,67.8,60.9,59.9,53.8,36.8,36.6,36.0,19.1,19.0.

實例77 N-(嘧啶-2-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自製備實例B之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=8.45(br m,2H),8.22(br s,1H),7.55(d,1H),7.11(d,2H),6.95(d,2H),6.81(m,1H),4.80-4.74(m,2H),3.70(m,1H),3.55(m,1H),3.20-3.08(m,4H),2.98(s,3H),2.89-2.76(m,1H),2.13-1.96(m,3H),1.60(m,1H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=190-0,173.6,171.0,155.2,153.9,150.6,133.2,130.1,121.9,110.3,62.0,55.1,48.2,36.6,36.6,36.3,30.2,23.4.

實例78 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(4-甲基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

按照關於實例4製備之方法，並根據Larsson與Carlson(Acta Chemica Scan. 1994,48,522)使硫代嗎福啉基環中之硫基氧化，獲得標題化合物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.76(d,2H),7.37(d,2H),7.12(d,2H),6.96(d,2H),6.57(d,1H),4.95(m,1H),4.62(m,1H),4.03(m,2H),3.67(m,4H),3.25(m,1H),2,89(m,4H),2.45(m,6H),2.35(s,3H),1.48(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.0,164.8,153.7,150.5,145.4,135.3,132.8,130.7,130.4,127.5,122.2,82.9,56.2,54.6,54.5,53.6,49.5,48.6,46.0,44.2, 43.7,41.6,36.3,27.9,21.6.

實例79 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例85之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=4.98,(m,1H),4.90(m,1H),4.44(d,1H),4.03(d,1H),3.67(m,1H),3.37(m,1H),3.25-3.02(m,1H),3.20(s,3H),3.11(s,3H),2.68(m,1H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=171.7,167.9,166.3,164.4,157.0,156.4,150.5,139.6,134.0,133.1,131.3,131.1,130.9,121.9,117.2,116.9,64.1,58.8,53.7,50.6,36.9,36.5,35.6.

實例80 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(六氫異菸鹼醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

以六氫吡取代N-甲基六氫吡，並按照關於實例4製備之方法，獲得標題化合物，為白色固體。

NMR數據如下：¹³CNMR(CDCl₃)：δ=7.70(d,2H),7.32-7.26(m,2H),7.14(d,2H),7.01(d,2H),4.72-4.68(m,1H),4.07-4.05(m,1H),3.60-3.49(m,4H),3.37-3.31(m,1H),3.22-2.98(m,3H),2.42(s,3H),2.02(m,2H),1.61-1.55(m,6H),1.50-1.45(m,13H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=177.3,170.7,169.8,150.6,144.3,133.1,130.1, 129.9,127.9,121.6,110.8,82.5,62.2,57.2,53.7,49.5,44.9,37.2,29.7,27.8,25.7,24.1,21.4.

實例81 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(1，1-二酮基硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

實例82之產物係藉由Larsson與Carlson之方法(Acta Chemica Scan. 1994,48,517-525)氧化，產生標題化合物，為白色固體。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.69(d,2H),7.33-7.29(m,3H),7.20(d,2H),7.00(d,2H),4.71-4.66(m,1H),4.13-4.04(m,5H),3.37-3.32(m,1H),3.21-3.00(m,7H),2.41(s,3H),2.05-2.01(m,1H),1.52-1.44(m,12H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.7,169.7,149.8,144.3,134.4,133.3,130.6,130.0,127.9,121.4,82.7,62.4,54.0,52.1,49.7,43.2,37.6,29.7,28.1,24.4,21.7.

實例82 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

以硫代嗎福啉取代N-甲基六氫吡，並按照關於實例4製備之方法，獲得標題化合物，為白色固體。

NMR數據如下：¹³C NMR(CDCl₃)：δ=7.70(d,2H),7.31-7.26(m,2H),7.16(d,2H),7.00(d,2H),4.72-4.66(m,1H),4.07-4.04(m,1H),3.89-3.79(m,4H),3.37-3.32(m,1H),3.22-2.99(m,3H),2.67(t,4H),2.42(s,3H),2.02(m,2H),1.50-1.45(m, 12H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=177.2,170.7,169.8,153.5,150.2,144.3,133.6,132.9,130.3,129.9,127.9,121.5,82.5,62.4,53.7,49.5,47.0,46.4,37.2,29.6,27.8,27.3,24.1,21.4.

實例83 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(四氫吡咯-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

以四氫吡咯氯化碳醯取代氯化二甲基胺甲醯，並按照關於實例2製備之方法，獲得標題化合物，為白色固體。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.71(d,2H),7.32(d,2H),7.15(d,2H),7.04(d,2H),4.73-4.67(m,1H),4.07-4.04(m,1H),3.53(t,2H),3.45(t,2H),3.36-3.32(m,1H),3.24-2.98(m,3H),2.42(s,3H),2.03-1.88(m,5H),1.75(s,1H),1.52(1.24(m,12H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.7,169.8,153.1,150.4,144.3,133.1,130.1,129.9,127.9,121.6,110.8,99.8,82.5,62.2,53.7,49.5,46.3,37.2,29.7,27.8,25.6,24.8,24.0,21.4.

實例84 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.87(m,2H),7.28-7.13(m,5H),7.02(d,2H),4.70- 4.60(m,2H),4.58(d,1H),4.06(d,1H),3.38-3.01(m,3H),3.09(s,3H),3.00(s,3H),2.58(m,1H),1.47(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=169.7,167.8,154.9,150.7,132.7,130.9,130.7,130.4,121.8,117.1,116.8,82.9,65.1,53.9,51.4,36.8,36.6,36.4,33.1,27.9.

實例85 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照Larsson與Carlson之氧化作用程序(Acta Chemica Scan. 1994,48,517-525)，製自實例84之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.90(m,2H),7.30-7.04(m,7H),4.83-4.58(m,3H),3.66(m,2H),3.32-3.24(m,1H),3.09-2.85(m,2H),3.10(s,3H),3.01(s,3H),1.50(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=173.1,169.8,168.0,165.6,154.9,150.9,132.6,131.1,131.0,130.3,122.3,117.3,117.0,83.2,62.8,57.8,53.9,49.0,36.8,36.6,36.4,27.9.

實例86 N-(2,5-二氯噻吩-3-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.14(d,2H),7.09(s,1H),7.07(d,1H),7.01(d,2H),4.73-4.66(m,1H),4.32-4.28(m,1H),3.42-3.17(m,3H),3.08(s,3H),3.06-3.0 1(m,1H),2.98(s,3H),2.17-2.04(m,1H),1.84-1.60(m,2H),1.60-1.46(m,1H),1.45(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.2,169.9,154.9,150.6,133.4,133.1,131.2,130.2,127.9,127.0,121.7,82.7,62.2,53.6,49.3,37.2,36.6,36.4,30.1,27.8,24.2.

實例87 N-(4-乙醯胺基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=8.58(s,1H),7.70-7.67(m,4H),7.32(d,1H),7.14(d,2H),7.01(d,2H),4.68(m,1H),3.99(m,1H),3.37-3.34(m,1H),3.23-3.16(m,1H),3.11-3.01(m,1H),3.08(s,3H),2.98(s,3H),2.13(s,3H),1.97-1.94(m,1H),1.55-1.47(m,3H),1.44(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=171.1,169.9,169.4,155.0,150.6,143.3,133.3,130.2,130.0,128.9,121.7,119.4,82.7,62.2,53.8,49.6,37.2,36.6,36.4,29.9,27.8,24.4,24.1.

實例88 N-(4-第三-丁基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照實例73製備所概述之程序，及適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下： ¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.81(d,2H),7.59(d,2H),7.07(d,2H),6.97(d,2H),6.46(d,1H),4.95(m,1H),4.62(m,1H),4.06(m,2H),3.23(m,1H),3.07(m,4H),2.97(m,4H),2.81(m,4H),1.55(s,9H),1.37(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.0,164.9,158.2,154.8,150.6,135.0,132.6,130.2,127.4,126.9,122.2,82.7,56.1,53.5,49.7,48.8,41.5,36.5,36.3,36.1,35.2,30.8,27.8.

實例89 N-(吡啶-3-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例56之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ=8.95(s,1H),8.83(d,1H),8.28-8.24(m,1H),7.73-7.69(m,1H),7.30(d,2H),7.05(d,2H),4.68-4.63(m,1H),4.29-4.25(m,1H),3.47-3.41(m,1H),3.38-3.22(m,2H),3.09(s,3H),3.06-3.02(m,1H),2.96(s,3H),1.92-1.66(m,4H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ=174.2,173.9,160.6,160.0,156.9,152.9,152.0,147.9,139.1,136.9,135.7,131.6,126.5,123.1,63.1,54.8,50.4,37.5,36.8,36.7,32.2,25.5.

實例90 N-(2-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

L-硫代嗎福啉-3-羧酸係藉由Larsson與Carlson之方法(Acta Chemica Scan. 1994,48,517-525)製成。N-(2-氟基苯-4-磺醯基)-L-硫代嗎福啉-3-羧酸係使用方法1中所述之程序製成。標題化合物係根據上文所提出之程序，使用適當起始物質製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.92(m,1H),7.69(m,1H),7.34(m,2H),7.16(m,2H),6.99(m,2H),6.60(d,1H),5.01(m,1H),4.64(m,1H),4.03(m,2H),3.29(m,1H),3.06(m,6H),2.90(m,7H),1.49(d,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=169.9,164.8,160.3,156.9,154.9,150.7,136.6,136.4,132.7,131.0,130.3,128.8,126.4,126.2,125.1,122.2,118.1,117.8,82.7,56.3,56.7,50.2,49.5,41.8,36.5,36.3,27.8.

實例91 N-(3-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

L-硫代嗎福啉-5-羧酸係藉由Larsson與Carlson之方法(Acta Chemica Scan. 1994,48,517-525)製成。N-(3-氟基苯-4-磺醯基)-L-硫代嗎福啉-5-羧酸係使用方法1中所述之程序製成。標題化合物係根據上文所提出之程序，使用適當起始物質製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.66(m,1H),7.58(m,2H),7.34(m,1H),7.07(d,1H),6.92(d,1H),6.42(d,1H),5.00(m,1H),4.58(m,1H),4.02(m,2H),3.22(m,1H),3.05(s,3H),2.98(m,6H),1.45(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.0,164.5,164.4,161.0,154.9,150.6,140.3,140.2,132.5,131.9,131.8,130.2,123.2,123.1,122.2,121.4,121.2,115.0,114.7,82.9,56.1,53.4,49.9,49.1,41.7,36.5,36.3,36.0,27.8.

實例92 N-(2，4-二氟苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

L-硫代嗎福啉-5-羧酸係藉由Larsson與Carlson之方法(Acta Chemica Scan. 1994,48,517-525)製成。N-(2,4-二氟苯-4-磺醯基)-L-硫代嗎福啉-5-羧酸係使用方法1中所述之程序製成。標題化合物係根據上文所提出之程序，使用適當起始物質製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.93(m,1H),7.15(m,2H),7.04(m,4H),6.53(d,1H),4.97(m,1H),4.64(m,1H),4.05(m,2H),3.21(m,3H),3.17(s,3H),2.97(m,5H),1.43(s,9H).

¹³CNMR(CDCl₃)：δ=170.0,164.6,154.9,150.7,132.6,132.6,130.3,122.6,122.1,112.6,112.3,107.0,106.7,106.3,82.8,56.3,53.5,50.5,49.8,42.0,36.5,36.3,27.8.

實例93 N-(4-乙醯胺基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例87之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ=8.05(d,1H),7.78(m,4H),7.26(d,2H),7.02(d,2H),4.94(m,1H),4.72-4.67(m,1H),4.13-4.09(m,1H),3.40-3.36(m,1H),3.30-3.05(m,3H),3.08(s,3H),2.97(s,3H),2.15(s,3H),1.81-1.51(m,4H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ=174.3,174.2,172.3,156.9,152.0,144.9,135.5,132.4,131.6,130.2,122.9,120.7,63.2,54.7,50.6,37.5,36.8,36.7,31.7,25.4, 24.0.

實例94 N-(4-三氟甲氧基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例72之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ=7.93(d,2H),7.48(d,2H),7.28(d,2H),7.03(d,2H),4.72-4.68(m,1H),4.17-4.13(m,1H),3.45-3.42(m,1H),3.28-3.11(m,2H),3.14-3.07(m,1H),3.09(s,3H),2.97(s,3H),1.85-1.69(m,3H),1.59(m,1H).

¹³CNMR(CD₃OD)：δ=174.2,174.1,157.0,153.9,152.0,137.3,135.6,131.7,131.5,123.0,122.5,121.8,63.1,54.7,50.6,37.4,36.8,36.6,31.9,25.4.

實例95 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係使用實例2中所述之程序，及適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.90(m,2H),7.22(m,4H),7.00(m,3H),5.08(m,1H),4.84(m,1H),4.56(d,1H),4.42(d,1H),3.88(s,1H),3.15-2.99(m,2H),3.09(s,3H),3.00(s,3H),1.26-1.16(m,12H).

¹³CNMR(CDCl₃)：δ=170.4,168.2,167.5,164.1,154.9,150.7,132.8,132.2,132.1,131.0,130.8,130.3,121.8,116.9,116.6,73.5,69.6,54.6,53.2, 50.5,37.6,36.6,36.3,29.1,23.8,21.6,21.5.

實例96 N-(4-氰基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例58之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ=8.14(d,1H),7.94-7.89(m,4H),7.29(d,2H),7.03(d,2H),4.70-4.66(m,1H),4.21-4.17(m,1H),3.47-3.40(m,1H),3.31-3.21(m,2H),3.11-3.04(m,1H),3.09(s,3H),2.97(s,3H),1.87-1.72(m,3H),1.70-1.61(m,1H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ=174.2,173.9,157.0,152.0,142.9,135.7,134.5,131.7,129.7,123.0,118.6,111.8,63.0,54.7,50.5,37.4,36.8,36.7,32.0,25.4.

實例97 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(3,3-二甲基)脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係使用關於實例98製備所述之程序製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.76(d,1H),7.75(d,1H),7.35(d,1H),7.34(d,1H),7.33(d,1H),7.20(d,1H),7.10(d,1H),7.03(d,1H),6.91(d,0.5H),6.08(d,0.5H),4.86(ddd,0.5H),4.77(q,0.5H),3.61-3.47(m,2H),3.27-3.02(m,3H),3.09(s,3H),3.00(s,3H),2.45(s,1.5H),2.43(s,1.5H),1.75-1.68(m,0.5H),1.61-1.51(m,0.5H),1.45(s,4.5H),1.40(s,4.5H),1.48-1.25(m,3H)；0.95(s,1.5H),0.80(s,1.5H)；0.61(s,1.5H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.4,170.1,170.0,169.6,155.0,154.9,150.7,150.6,144.3,144.2,133.4,133.1,132.8,132.6,130.7,130.2,129.9,129.8,128.0,121.8,121.7,82.6,82.2,71.5,71.2,53.6,52.7,47.3,47.2,42.7,42.5,38.2,38.1,37.7,37.5,36.6,36.3,27.8,27.8,27.2,23.4,23.2,21.5.

實例98 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(3,3-二甲基)脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

3,3-二甲基脯胺酸(參閱Sharma與Lubell,J.Org.Chem.1996,61,202-209)係使用方法1中所述之程序N-甲苯磺醯基化。然後，標題化合物係按照關於實例2製備所述之程序製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.76(d,1H),7.74(d,1H),7.36(d,1H),7.33(d,2H),7.19(d,1H),7.10(d,1H),7.03(d,1H),6.91(d,0.5H),6.89(d,0.5H),5.06(七重峰，0.5H),4.96(七重峰，0.5H),4.98-4.83(m,1H),3.59-3.48(m,2H),3.31-3.03(m,3H),3.09(s,3H),3.00(s,3H),2.45(s,1.5H),2.43(s,1.5H),1.75-1.66(m,0.5),1.62-1.52(m,0.5H),1.34-1.22(m,3H),1.27(s,1.5H),1.25(s,1.5H),1.22(s,1.5H),1.20(s,1.5H),0.95(s,1.5H),0.78(s,1.5H),0.60(s,1.5H),0.57(s,1.5H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.8,170.6,170.0,169.7,154.9,150.8,150.6,144.4,144.2,133.2,132.5,132.5,130.7,130.2,129.9,129.8,128.0,122.0,121.8,71.5,17.2,69.5,69.3,53.0,52.2,47.3,47.2,42.8,42.5,38.2,38.1,37.6,37.2,36.6,36.3,27.1,23.4,23.2,21.6,21.6,21.5,21.5.

藉由上述之方法製成之其他化合物，係包括下文表II實例99-137中所提出者。此外，於表II中所發現之實例101,109,111, 117,132及137係如下述作為舉例：

實例101 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)-L-苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照關於實例2製備所概述之程序製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃)₂SO：δ=8.28(d,1H),7.70(d,2H),7.41(d,2H),7.23(d,2H),6.99(d,2H),4.86(七重峰，1H),4.47(m,1H),4.40(m,1H),4.10(m,1H),4.07(m,1H),3.38(m,1H),3.30(m,1H),3.09(m,3H),2.95(s,3H),3.00(s,3H),2.88(s,3H),2.39(s,3H),1.63(m,3H),1.51(m,3H),1.44(m,1H),1.39(m,1H),1.16(d,3H),1.11(d,3H).

¹³C NMR(CD₃)₂SO：δ=171.3,170.8,154.2,150.2,143.7,134.1,130.2,130,127.6,121.6,68.2,61.2,53.5,49,36.3,36.1,35.7,30.5,23.8,21.4,21.4,21.

實例109 N-(苄基磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-(4-N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例111之產物。

物理數據如下：MS(FAB)(M+H)⁺ 550.

計算值：對C₂₅H₃₁N₃O₇S₂；C,54.62；H,5.68；N 7.64.

實測值：C 54.51；H 5.60；N 7.63.

實例111 N-(苄基磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-(4-N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例2製備所概述之程序，並經由取代適當起始物質而製成。

物理數據如下：MS[M+H]⁺ 550.

計算值：對C₂₉H₃₉N₃O₇S₂；C,57.52；H,6.45；N,6.94.

實測值：C,57.32；H,6.52；N,6.81.

實例117 N-(甲基-吡唑-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-(4-N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

取代氯化N-甲基-吡唑磺醯(參閱Dickson,US 3,665,009(1972年5月23日))，並按照關於實例56製備之方法，獲得標題化合物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.83(s,1H),7.76(s,1H),7.26(m,1H),7.15(m,2H),7.00(m,2H),4.69(m,1H),3.95(m,1H),3.93(s,3H),3.38(m,1H),3.23-3.11(m,1H),3.10-2.99(m,4H),2.99(s,3H),2.05(m,1H),1.66-1.46(m,3H),1.44(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.7,169.9,154.9,150.6,138.9,133.2,132.5,130.2,121.7,117.9,82.6,62.4,53.7,49.7,39.6,37.7,36.6,36.4,29.9,27.9,24.2.

實例132 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)-苯丙胺酸 第三-丁酯之合成

以硫代嗎福啉取代N-甲基六氫吡，並按照關於實例4與14製備之方法，獲得標題化合物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.87-7.82(m,2H),7.28-7.17(m,5H),7.01(d,2H),4.71-4.69(m,1H),4.14-4.05(m,5H),3.39-3.36(m,1H),3.23-3.01(m,7H),2.05-2.03(m,1H),1.58-1.44(m,12H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=170.4,169.8,153.0,149.7,134.2,130.6,130.5,121.3,116.8,116.5,82.6,62.1,53.6,51.8,49.5,43.1,42.7,37.2,29.7,27.8,24.2.

實例137 N-(甲基-吡唑-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-(4-N,N-二甲基胺甲醯基氧基)-苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照關於實例117製備所述之程序製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.83(s,1H),7.76(s,1H),7.27(d,1H),7.13(d,2H),7.01(d,2H),5.06-5.02(m,1H),4.80-4.73(m,1H),3.97-3.94(m,1H),3.93(s,3H),3.44-3.37(m,1H),3.25-3.19(m,1H),3.09-3.00(m,5H),2.97(s,3H),2.06-2.02(m,1H),1.66-1.48(m,3H),1.23(d,6H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.8,170.5,154.9,150.6,138.9,132.9,32.5,130.2,121.7,117.8,69.5,62.3,53.2,49.7,39.6,37.1,36.6,36.3,29.9,24.1,21.6,21.5.

藉由上述方法製成之其他化合物，包括下述：

實例138 N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

氯化N-甲基吡唑磺醯係藉由將N-甲基吡唑添加至已急冷(0℃)之氯基磺酸中而製成。使反應混合物溫熱至室溫，然後於N₂氣流下加熱至100℃過夜。接著，使反應混合物冷卻至室溫，並急冷至0℃。於此溶液中，添加二氯化亞硫醯(2.5當量)，並將反應物在室溫下攪拌30分鐘，然後溫熱至70℃，歷經兩小時。使反應物冷卻至室溫，接著於冰浴中急冷。將水與冰慢慢添加至反應混合物中，以沉澱白色固體，藉過濾收集之。將所要之氯化磺醯以冷水與己烷洗滌。然後，標題化合物係按照關於實例2製備所概述之程序，藉由適當起始物質之取代而製成，熔點：169-170℃。

實例139 N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例138之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.94(s,1H)；7.79(s,1H)；7.25(d,2H,J=8.8Hz)；7.0(d,2H,J=8.8Hz)；5.15(br s,1H)；4.80(m,1H)；4.54(d,1H,J=9.H Hz)；4.39(d,1H,J=9.3Hz)；3.93(s,3H)；3.88(s,1H)；3.23-3.02(m,2H)；3.07(s,3H)；2.98(s,3H)；1.27(s,3H)；1.14(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：173.86,169.05,155.23,150.47,139.21,133.59,133.15,130.53,121.84,117.57,73,58,54,71,53.75,50.42,39.60,37.18,36.60,36.36,35.11,28.97,23.95.

實例140 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-(1,4-二氧-8-氮-螺[4.5]癸-8-基)羰基氧基)苯丙胺酸乙酯之合成

標題化合物係按照關於實例4所概述之程序，藉由適當起始物質之取代而製成。

物理數據如下：MS(+ESI)：630[M+H]⁺.

對C₃₁H₃₉N₃O₉S˙0.2 CH₂Cl₂之分析計算值：C,57.94；H,6.14；N,6.50.

實測值：C,57.73；H,5.90；N,6.47.

實例141 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-(1,4-二氧-8-氮-螺[4.5]癸-8-基)羰基氧基)苯丙胺酸之合成

實例140之產物係使用方法5中所述之程序水解，但採用甲醇作為溶劑，並使反應於25℃下進行24小時。然後，蒸發溶劑，使殘留物溶於H₂O中，以二氯甲烷洗滌，及凍乾，而得標題化合物。

物理數據如下：MS(+ESI)：619[M+H]⁺.

對C₂₉H₃₅N₃O₉SLi˙1.5 H₂O之分析計算值：C,53.37；H,6.02；N,6.44.

實測值：C,53.40；H,5.58；N,6.48.

實例142 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4'-乙醯基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

實例127之產物係使用方法5中所述之程序水解，但採用甲醇作為溶劑，並使反應於25℃下進行24小時。然後，蒸發溶劑，使殘留物溶於H₂O中，以二氯甲烷洗滌，及凍乾，而得標題化合物。

物理數據如下：MS(+ESI)：587[M+H]⁺.

對C₂₈H₃₃N₄O₈SLi˙3 H₂O之分析計算值：C,52.01；H,6.08；N,8.66.

實測值：C,52.03；H,5.36；N,8.04.

實例143 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4'-甲烷磺醯基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

實例128之產物係使用實例142中所述之程序水解。

物理數據如下：MS(+ESI)：623[M+H]⁺.

對C₂₇H₃₃N₄O₉S₂Li˙2H₂O之分析計算值：C,48.79；H,5.61；N,8.43.

實測值：C,48.66；H,5.14；N,8.04.

實例144 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4- (4'-苯基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物之乙酯係按照關於實例4所概述之程序，藉由適當起始物質之取代而製成。然後，將乙酯使用實例142中所述之程序水解。

物理數據如下：MS(-ESI)：619[M-H]^-.

對C₃₂H₃₆N₄O₇SLi˙2H₂O之分析計算值：C,58.00；H,5.93；N,8.45.

實測值：C,57.65；H,5.49；N,8.13.

實例145 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

使實例125之產物(0.7克，1毫莫耳)溶於二氯甲烷(9毫升)中。使溶液冷卻至0℃，並添加三氟醋酸(1.0毫升)，且將所形成之透明溶液攪拌4小時。然後，將反應溶液以另外之二氯甲烷(50毫升)稀釋，以飽和碳酸氫鈉溶液(3 x 50毫升)洗滌，脫水乾燥(K₂CO₃)，及汽提出溶劑，獲得白色固體(0.465克)。使此物質急驟式層析(9：1 CH₂Cl₂：EtOH)，獲得透明油，將其以己烷洗滌數次，而得白色固體(0.289克，48%)。

物理數據如下：MS(+ESI)：601.7[M+1]⁺.

對C₃₀H₄₀N₄O₇S˙0.25CH₂Cl₂之分析計算值：C,58.42；H,6.56；N,9.01.

實測值：C,58.79；H,6.51；N,8.74.

實例146 2-(糖精-2-基)丙醯基-L-4-(4'-甲基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述程序，製自實例46之產物，熔點=117-122℃(伴隨著發泡)。

物理數據如下：對C₂₅H₂₈N₄O₈S˙1.5H₂O之分析計算值：C,52.53；H,5.47；N,9.80.

實測值：C,52.26；H,5.36；N,9.23.

實例147 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4'-甲烷磺醯基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例128所概述之程序，藉由適當起始物質之取代而製成。

物理數據如下：MS(+ESI)：696[M+NH₄]⁺.

對C₃₁H₄₂N₄O₉S₂˙0.5CH₂Cl₂之分析計算值：C,51.62；H,6.00；N,7.76.

實測值：C,51.55；H,6.21；N,7.60.

實例148 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸(N'-第三-丁氧羰基-2-胺基-2-甲基丙基)酯之合成

將(BOC)₂O(96毫克，0.44毫莫耳)添加至得自實例9之產物(200毫克，0.4毫莫耳)、N-Boc-2-胺基-2-甲基-L-丙醇(965毫克，0.5毫莫耳)及催化量之DMAP在含有吡啶(50微升)之THF(92毫升)中之溶液內。將混合物於室溫及氬氣下攪拌48小時。將混合物倒入1N HCl中，並以醋酸乙酯萃取。洗滌(1N HCl)有機相，脫水乾燥(MgSO₄)，及在減壓下移除溶劑。使殘留物藉急驟式層析純化(EtOAc：己烷2：1)，而得所要之化合物，為非晶質白色泡沫物(150毫克，55%)。

物理數據如下：MS：[M+H]⁺在675.

MS(+ESI)：[M+NH₄]⁺在692(100%).

實例149 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸2-(嗎福啉-4-基)乙酯之合成

標題化合物係按照關於實例148所概述之程序，經由以2-嗎福啉基乙醇取代N-Boc-2-胺基-2-甲基-L-丙醇而製成。

物理數據如下：對C₃₀H₄₀N₄O₉S˙0.5 H₂O之分析計算值：C,57.58；H,6.60；N,8.95.

實測值：C,57.26；H,6.29；N,8.82.

實例150 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4'-乙醯基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例127所概述之程序製成，藉由適當起始物質之取代。

物理數據如下：MS(+ESI)：660.4[M+NH₄]⁺

對C₃₂N₄₂N₄O₈S˙0.15CH₂Cl₂之分析計算值：C,58.91；H,6.50；N,8.55.

實測值：C,58.64；H,6.36；N,8.40.

實例151 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4'-羥基六氫吡啶-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例4所概述之程序製成，經由以4-六氫吡啶醇取代N-甲基六氫吡。

物理數據如下：對C₃₁H₄₁N₃O₈S˙0.6 H₂O˙0.22 EtOAc之分析計算值：C,59.28；H,6.86；N,6.51

實測值：C,58.92；H,6.37；N,6.47.

實例152 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-(2'-(嗎福啉-4'基)乙基)胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照實例4所概述之程序，經由以4-(2-胺基乙基)嗎福啉取代N-甲基六氫吡製成。

物理數據如下：對C₃₂H₄₄N₄O₈S˙0.25 H₂O之分析計算值：C,59.20；H,6.91；N,8.63

實測值：C,59.01；H,6.54；N,8.38.

實例153 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-(1,4-二氧-8-氮-螺[4.5]癸-8-基)羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

物理數據如下：MS(-ESI)：656[M-H]^-.

對C₃₃H₄₃N₃O₉S˙0.1CH₂Cl₂之分析計算值：C,59.67；H,6.54；N,6.31.

實測值：C,59.83；H,6.63；N,6.66.

實例154 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-(2'-羥乙基)-N-甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例4所概述之程序，經由以2-(甲胺基)乙醇取代N-甲基六氫吡製成。

物理數據如下：對C₂₉H₃₉N₃O₈S˙0.5 H₂O之分析計算值：C,58.18；H,6.73；N,7.02.

實測值：C,57.95；H,6.5；N,6.9.

實例155 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4'-甲醯氧基六氫吡啶-1-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係經由實例151之產物以甲酸處理過夜並攪拌而製成。標題化合物係在移除過量甲酸之後，以白色泡沫物(130毫克，94%)獲得。

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)δ 12.8(s,1H)；8.23(s,1H)；8.09(d,1H) ；7.69(d,2H),7.4(d,2H)；7.23(d,2H),7.02(d,2H)；5.00(m,1H)；4.45(m,1H)；4.10(m,1H)；3.6-3.8(br,2H)；3.4(br s,1H)；3.25(m,2H)；3.10(m,2H)；2.95(m,1H)；2.35(s,3H)；1.95(m,2H)；1.56-1.75(m,5H)；1.4(m,1H).

IR(KBr，公分^-1)3400,2950,1720,1680,1510,1430,1325,1250,1150,1010,650,75,540.

MS((+)ESI,m/z(%))605(100[M+NH,1⁺).

對C₂₈H₃₃N₃O₉S.0.66 H₂O之分析計算值：C,56.09；H,5.77；N,7.01.

實測值：C,56.14；H,5.83；N,6.78.

實例156 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4'-羥基六氫吡啶-1-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照實例4所概述之程序，藉由適當起始物質之取代而製成，熔點64-67℃(伴隨著發泡)。

物理數據如下：對C₃₀H₃₉N₃O₈S˙0.75 H₂O˙0.1 EtOAc之分析計算值：C,58.51；H,6.67；N,6.73.

實測值：C,58.55；H,6.09；N,6.78.

實例157 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4'-(2-羥乙基)六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

此碳酸酯係經由將Tos-Pro-Tyr-第三-丁酯以氯甲酸4-硝基苯酯處理，接著添加N-(2-羥基乙基)六氫吡(使三乙胺二氯甲烷急冷至0℃，然後於室溫下攪拌過夜)而製成。使粗產物藉急驟式層析純化(矽膠，95：5 EtOAc：EtOH)，而得白色固體，熔點158-160℃。(0.387克，58%)。

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)δ 8.15(d,1H,J=7.90Hz)；7.70(d,2H,J=6.59Hz)；7.40(d,2H,J=7.90Hz)；7.23(d,2H,J=8.56Hz)；7.00(d,2H,J=8.56Hz)；4.42(m,1H)；4.38(m,1H)；4.08(m,1H)；3.51(m,4H)；3.34(m,3H)；3.09(m,1H)；2.99(m,2H)；2.43(m,6H)；2.39(s,3H)；1.59(m,3H)；1.39(m,1H)；1.35(s,9H).

IR(KBr，公分^-1)3505,3400,2990,2930,2890,1730,1700,1670,1510,1430,1350,1220,1200,1160,670,590,545.

MS((-)ESI,m/z(%))643(98[M-NH₄]).

對C₃₂H₄₄N₄O₈S之分析計算值：C,59.61；H,6.88；N,8.69.

實測值：C,59.06；H,6.95；N,8.43.

實例158 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-(2'-甲醯氧基乙基)-N-甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係經由將實例154之產物以甲酸處理過夜並攪拌而製成。在移除過量甲酸之後，標題化合物係以白色泡沫物(110毫克，77%)獲得。

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)δ 12.8(s,1H)；8.25(d,1H)；8.08(d,1H)；7.69(d,2H),7.40(d,2H)；7.22(d,2H),6.98(dd,2H)；4.47(m,1H)；4.35(m,1H)；4.27(m,1H)；4.10(m,1H)；3.65(m,1H)；3.55(m,1H)；2.85-3.15(重疊m,7H)；2.40(s,3H)；1.55(m,3H)；1.40(m,1H).

IR(KBr，公分^-1)3420,2910,1725,1510,1400,1340,1270,1150,675,590, 550.

MS((+)ESI,m/z(%))579(100[M+NH,1⁺).

對C₂₆H₃₁N₃O₉S.0.66H₂O之分析計算值：C,54.45；H,5.68；N,7.33

實測值：C,54.41；H,5.60；N,7.24.

實例159 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-(2'-羥乙基)-N-甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照實例4所概述之程序，藉由適當起始物質之取代而製成，熔點49-52℃。

物理數據如下：對C₂₈H₃₇N₃O₈S˙0.5 H₂O之分析計算值：C,57.52；H,6.55；N,7.19.

實測值：C,57.56；H,6.38；N,7.14.

實例160 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-4-(N-(甲氧羰基甲基)胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

此碳酸酯係經由將Tos-Pro-Tyr-第三-丁酯以氯甲酸4-硝基苯酯處理，接著添加甘胺酸甲酯(使三乙胺二氯甲烷急冷至0℃，然後於室溫下攪拌過夜)而製成。使粗產物藉急驟式層析純化(矽膠，3：2 EtOAc：己烷)，而得白色泡沫物(0.640克，35%)。

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)δ 8.15(d,1H,J=8.12Hz)；8.12(d,2H,J=6.15Hz)；7.73(d,2H,J=8.34Hz)；7.40(d,2H,J=7.90Hz)；7.24(d,2H, J=8.56Hz)；6.98(d,2H,J=8.34Hz)；4.25(m,1H)；4.07(m,1H)；3.83(d,2H,J=6.15Hz)；3.64(s,3H)；3.32(m,1H)；3.02(m,3H)；2.39(s,3H)；1.56(m,3H)；1.41(m,1H)；1.35(s,9H).

IR(KBr，公分^-1)3400,2990,1745,1680,1500,1370,1350,1200,1160,670,600.

MS((+)ESI,m/z(%))621(100[M+NH₄]⁺)

對C₂₉H₃₇N₃O₉S之分析計算值：C,57.70；H,6.18；N,6.96.

實測值：C,57.63；H,6.11；N,6.74.

實例161 N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照關於實例138所概述之程序，藉由適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.91(s,1H),7.81(s,1H),7.21(d,2H,J=8.2Hz),7.03(m,3H)；5.03(m,1H),4.84(m,1H),4.55(d,1H),4.42(d,1H),3.96(s,3H),3.83(s,1H),3.18-3.01(m,2H),3.10(s,3H),3.01(s,3H),1.28(s,3H),1.24(m,6H),1.17(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.43,166.31,154.92,150.68,132.91,132.88,130.34,121.78,117.69,73.76,69.61,54,79,53.2,50.52,39.61,37.62,36.58,36.35,28.96,24.02,21.57,21.49.

實例162 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4'-甲氧基六氫吡啶-1-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照關於實例156所概述之程序，藉由適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(DSMO-d₆,400MHz)δ 8.10(d,1H)；7.72(d,2H)；7.41(d,2H)；7.24(d,2H)；7.02(d,2H)；4.92(m,1H)；4.45(m,1H)；4.10(m,1H)；3.8(br s,1H)；3.65(br s,1H)；3.40(m,2H)；3.25(s,3H)；2.95-3.15(重疊m,5H)；2.40(s,3H)；1.85(br,2H)；1.4-1.6(m,6H)；1.18(d,3H)；1.12(d,3H).

IR(KBr，公分^-1)3400,2950,1720,1520,1425,1340,1210,1160,1100,625,590,540.

MS((+)ESI,m/z(%))633[M+NH]⁺)

實例163 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4'-甲氧基六氫吡啶-1-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法5中所述之程序，製自實例162之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)δ 12.8(s,1H)；8.10(d,1H)；7.72(d,2H)；7.41(d,2H)；7.24(d,2H)；7.02(d,2H)；4.45(m,1H)；4.10(m,1H)；3.8(br s,1H)；3.65(br s,1H)；3.40(m,2H)；3.25(s,3H)；2.95-3.15(重疊m,5H)；2.40(s,3H)；1.85(br,2H)；1.4-1.6(m,6H).

IR(KBr，公分^-1)3400,2950,1720,1520,1425,1340,1210,1160,1100,625,590,540.

MS((-)ESI,m/z(%))572(100[M-H]^-).

對C₂₈H₃₅N₃O₈S˙0.33 EtOAc.1H₂O之分析計算值：C,56.73；H,6.44；N,6.77.

實測值：C,56.96；H,6.01；N,6.76.

實例164 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-4-酮基脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

使二氯甲烷(7毫升)冷卻至-60℃(氯仿/乾冰浴)。添加氯化草醯(0.15毫升)。使得自實例165之產物(870毫克)與無水DMSO(0.26毫升)溶於二氯甲烷(8毫升)中，並慢慢地添加至上述溶液中。將反應物於-60℃及乾燥條件下攪拌30分鐘。添加三乙胺(1.05毫升)。於5分鐘後，移除乾冰浴。將反應物在室溫下攪拌1小時。於真空中蒸發溶劑。將醋酸乙酯(30毫升)添加至殘留物中。將混合物以檸檬酸溶液(5%，2 x 30毫升)與飽和NaHCO₃溶液(2 x 30毫升)及最後以鹽水洗滌。以MgSO₄使溶液脫水乾燥。於真空中蒸發溶劑，並將殘留物於矽膠管柱上沖洗，而得440毫克所要之產物，熔點：78-80℃。

實例165 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-反式-4-羥脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

使N-(甲苯-4-磺醯基)-L-反式-4-羥脯胺醯基-L-4-(羥基)苯丙胺酸第三-丁酯(1.60克)與氯化二甲基胺甲醯(0.30毫升)於0℃下，在冰浴中，溶於DMF中。將碳酸鉀粉末(2.03克)添加至溶液中。5分鐘後，移除冰浴。將反應物於室溫下攪拌6小時。過濾固體。將醋酸乙酯(40毫升)添加至溶液中。將溶液以檸檬酸溶液(5%，40毫升)洗滌2次，並以飽和NaHCO₃溶液(40毫升)洗滌1次。然後，將溶液以鹽水洗滌，並以MgSO₄脫水乾燥。於真空中蒸發溶劑，獲得1.07克標題化合物，熔點：170-172℃。

實例166 N-(3-氟基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

使N-(3-氟基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(在基)苯丙胺酸第三-丁酯(700毫克)與氯化二甲基胺甲醯(0.2毫升)於0℃下，在冰浴中，溶於DMF(15毫升)中。將碳酸鉀粉末(1.375克)添加至溶液中。5分鐘後，移除冰浴。將反應物於室溫下攪拌6小時。過濾固體。將醋酸乙酯(20毫升)添加至溶液中。將溶液以檸檬酸溶液(5%，30毫升，2x)與飽和NaHCO₃溶液洗滌。然後，將溶液以鹽水洗滌，並以MgSO₄脫水乾燥。於真空中蒸發溶劑，而得890毫克標題化合物，熔點：107-109℃。

實例167 N-(嗎福啉基-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-(4-N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

N-(嗎福啉基-磺醯基)-L-脯胺酸係使用由Cheeseright等人，J.Chem.Soc.Perkin Trans.1 1994,12,1595-1600所述之程序製成。標題化合物係按照關於實例2製備之程序製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.13(d,2H),7.03(d,2H),6.92(d,1H),4.71(q,1H),4.25(t,1H),3.67(t,4H),3.39(dt,1H),3.28-3.19(m,1H),3.23(t,4H),3.18(dd, 1H),3.08(dd,1H),3.09(s,3H),3.00(s,3H),2.16-2.08(m,2H),1.98-1.86(m,1H),1.78-1.66(m,1H),1.45(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 171.2,170.4,154.8,150.7,132.9,130.3,121.7,82.7,66.3,62.6,53.3,49.6,46.2,37.0,36.6,36.3,30.5,27.8,24.7.

實例168 N-(嗎福啉基-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-(4-N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例167之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ 8.04(d,1H),7.25(d,2H),7.01(d,2H),4.71-4.64(m,1H),4.22(dd,1H),3.62-3.50(m,4H),3.43-3.31(m,2H),3.24(dd,1H),3.11(t,4H),3.09(s,3H),3.03(dd,1H),2.97(s,3H),2.22-2.11(m,1H),1.98-1.80(m,3H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ 174.65,174.58,174.00,156.60,151.70,135.30,131.20,122.70,67.10,63.10,54.59,54.50,50.6,47.10,37.10,36.50,36.40,32.0,25.60.

實例169 N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例14與117製備所述之程序製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.93(s,1H),7.80(s,1H),7.12(d,2H),6.98(d,2H),6.44(d,1H0HH),4.95(m,1H),4.66(m,1H),4.04(m,2H),3.98(s,3H),3.19 (m,2H),3.06(m,6H),2.98(m,4H),1.42(m,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.58,164.75,154.91,150.75,139.33,132.73,132.43,130.43,122.18,119.66,83.07,56.02,53.23,50.03,49.03,41.49,39.63,36.56,36.31,36.16,27.87.

實例170 N-(2-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例90之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ 7.90(m,1H),7.72(m,1H),7.56(d,1H),7.37(m,2H),7.20(d,2H),7.07(d,2H),5.18(m,1H),4.59(m,1H),4.26(m,1H),3.76(m,2H),3.36(m,1H),3.21(m,2H),3.08(m,6H),2.96(s,3H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ 173.85,168.04,162.06,158.69,156.92,152.06,137.69,135.05,131.83,131.59,129.77,128.44,128.26,126.21,123.17,119.04,118.75,57.04,54.99,52.08,51.66,43.36,37.24,36.83,36.66.

實例171 N-(2,4-二氟苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例92之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ 8.88(m,1/2H),8.14(m,1/2H),7.90(m,1H),7.64(m,1H),7.20(m,2H),7.10(m,1H),7.03(m,2H),5.16(m,1H),4.63(m,1H), 4.28(m,1H),3.75(m,2H),3.41(m,1H),3.15(m,5H),3.02(m,4H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ 173.91,168.04,156.93,152.05,135.15,133.81,133.67,131.60,123.13,113.48,113.18,107.38,107.02,57.02,55.02,52.29,51.84,43.45,37.34,36.83,36.66.

實例172 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例49之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.67(d,2H),7.32(d,2H),7.21(d,2H),7.10(d,1H),7.00(d,2H),5.40(bs,>1H),4.85(m,2H),3.95(m,1H),3.41(m,1H),3.07(m,6H),2.98(m,4H),2.62(m,1H),2.41(m,5H),2.13(m,1H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 173.40,168.49,155.26,144.44,136.88,132.95,130.51,130.30,127.28,122.08,55.34,53.45,43.43,36.62,36.38,35.85,25.25,24.54,21.43.

實例173 N-(吡啶-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基-硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照關於實例56製備所概述之程序，藉由適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 9.13(m,1H),8.90(m,1H),8.19(m,1H),7.56(m,1H),7.23(d,2H),7.04(d,2H),6.93(d,1H),5.07(m,1H),4.85(m,1H),4.62(d, 1H),4.48(d,1H),3.92(s,1H),3.20-3.05(m,2H),3.12(s,3H),3.03(s,3H),1.32-1.16(m,12H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.30,167.75,154.19,150.67,148.59,135.72,132.94,132.72,130.27,123.91,121.78,73.62,69.64,54.69,53.12,50.48,37.50,36.53,36.29,29.05,23.73,21.54,21.46.

實例174 N-(3-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例91之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ 7.68(m,3H),7.44(m,1H),7.20(m,2H),7.01(m,2H),5.21(m,1H),4.60(m,1H),4.20(m,1H),3.75(m,1H),3.43(m,1H),3.21(m,3H),3.02(m,4H),2.96(m,4H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ 173.98,167.98,165.89,162.56,156.94,152.06,142.70,142.61,135.11,133.30,133.19,131.57,124.71,123.25,122.21,121.93,116.05,115.71,57.27,54.87,54.79,51.29,51.06,43.24,37.11,36.83.

實例175 N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例169之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ 8.11(s,1H),7.83(s,1H),7.36(d,1H),7.24(d,2H), 7.02(d,2H),5.16(m,1H),4.69(m,1H),4.19(m,1H),3.90(s,3H),3.81(m,2H),3.33(m,3H),3.10(s,3H),3.02(m,4H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ 174.07,168.11,156.93,152.08,140.12,135.05,134.90,131.67,123.28,121.82,57.33,54.77,50.83,50.64,42.94,39.80,37.02,36.84,36.76.

實例176 N-(4-第三-丁基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例88之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ 7.70(d,2H),7.53(d,2H),7.04(d,2H),6.87(d,2H),5.09(m,1H),4.48(m,1H),3.99(m,1H),3.60(m,1H),2.90(m,5H),2.80(m,5H),1.15(s,9H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ 173.95,168.09,159.33,156.88,152.09,137.52,135.03,131.54,128.68,128.15,123.32,57.27,54.81,50.75,43.04,36.97,36.82,36.65,36.16,31.35.

實例177 N-(甲苯-4-磺醯基)-(3,3-二甲基)脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例97之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.77(d,1H),7.75(d,1H),7.42-7.33(M3.5H),7.27 (d,1H),7.19(d,0.5H),7.10(d,1H),7.03(d,1H),5.07-5.00(m,0.5H),4.94-4.87(m,0.5),3.67(d,1H),3.58-3.52(m,1H),3.35-3.25(m,1H),3.19-3.08(m,2H),3.11(s,3H),3.02(s,3H),2.45(s,1.5H),2.43(s,1.5H),1.70-1.57(m,1H),1.34-1.27(m,1H),0.94(s,1.5H),0.75(s,1.5H),0.54(s,6H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 174.6,174.4,171.8,171.4,155.7,150.5,150.4,144.5,144.4,133.5,132.6,130.9,130.6,130.0,129.9,128.0,127.9,122.2,122.0,71.2,70.9,53.3,52.2,47.3,47.1,43.0,42.7,38.1,37.9,36.6,36.4,27.0,26.8,23.3,23.0.

實例178 N-(2,5-二氯噻吩-3-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例86之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ 8.10(d,1H),7.25(d,2H),7.20(s,1H),7.0(d,2H),4.65(m,1H),4.35(m,1H),3.55-3.35(m,2H),3.30-3.20(m,2H),3.15-3.00(m,4H),2.95(s,3H),2.05-1.80(m,2H),1.80-1.65(m,2H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ 174.2,173.9,156.9,151.9,135.9,135.5,132.3,131.6,128.9,128.6,122.9,63.1,54.8,54.7,50.3,37.4,36.8,36.7,32.1,25.5.

實例179 N-(4-甲氧基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法7中所述之程序，製自實例180之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ 7.78(d,2H),7.27(d,2H),7.09(d,2H),7.02(d,2H),4.71-4.67(m,1H),4.10-4.06(m,1H),3.88(s,3H),3.41-3.31(m,1H),3.28-3.07(m,6H),2.97(s,3H),1.81-1.50(m,4H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ 168.3,168.2,159.2,150.9,145.9,129.5,125.6,125.3,123.5,116.9,109.6,57.2,50.2,48.7,44.6,31.4,30.8,30.6,25.7,19.3.

實例180 N-(4-甲氧基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係使用實例2中所述之程序，藉由適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.76(d,2H),7.34(d,1H),7.14(d,2H),7.03-6.97(m,4H),5.08-5.04(m,1H),4.77(m,1H),4.05-4.03(m,1H),3.86(s,3H),3.37-3.34(m,1H),3.26-3.19(m,1H),3.10-3.01(m,4H),2.98(s,3H),2.02(m,1H),1.56-1,46(m,3H),1.25(d,6H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.8,170.3,163.4,154.8,150.5,132.9,130.1,129.9,127.6,121.6,114.3,69.4,62.1,55.4,53.2,49.5,37.1,36.5,36.2,29.7,24.0,21.5,21.4.

實例181 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1-酮基-硫代嗎福啉-3-羰基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例182之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ 7.90(m,1H),7.78(m,2H),7.40(m,2H),7.26(m,2H),7.03(m,2H),5.14(m,1H),4.64(m,2H),3.81(m,1H),3.71(m,2H),3.19(m,1H),3.14(m,3H),3.02(m,4H),2.84(m,1H),2.60(m,1H),2.42(m,4H),2.21(m,1H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ 174.22,173.93,169.59,156.88,152.08,152.05,146.44,146.26,137.75,137.63,135.61,134.96,131.79,131.64,131.55,131.39,128.75,128.66,123.35,123.06,57.03,54.88,54.66,51.64,42.69,42.51,40.34,37.12,36.83,36.66,32.76,21.51.

實例182 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1-酮基-硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例49製備所述之程序製成。根據Larsson與Carlson(Acta Chemica Scan.1994,48,517-525)，使硫代嗎福啉氧化成1-酮基-硫代嗎福啉。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.72(m,2H),7.69(m,2H),7.31(m,2H),7.11(m,2H),7.07(m,2H),6.96(m,2H),4.79(m,1H),4.54(m,1H),3.80(m,4H),3.04(4H),2.92(m,3H),2.64(m,1H),2.43(m,4H),1.44(s,3H),1.36(s,6H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 169.8,166.5,166.3,154.6,150.5,150.4,144.9,144.4,135.7,135.3,132.8,130.5,130.1,29.9,127.4,126.9,122.1,121.4,82.6,82.2,55.6,53.9,53.1,50.6,48.1,47.8,41.7,40.5,38.3,36.4,36.1,31.1,27.5,21.2.

實例183 N-(3,4-二氟苯磺醯基)-L-脯胺醯基-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照關於實例2製備所述之程序，藉由適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.72-7.60(m,2H),7.87-7.37(m,1H),7.13-7.11(m,3H),7.01(d,2H),5.08-5.04(m,1H),4.81-4.74(m,1H),4.09-4.06(m,1H),3.39-3.35(m,1H),3.26-3.19(m,1H),3.12-2.97(m,8H),2.06-2.03(m,1H),1.66-1.57(m,3H),1.26(d,6H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.50,170.40,154.90,153.60,150.70,150.30,133.30,132.90,130.10,125.00,121.80,121.80,118.50,112.80,69.60,62.20,53.20,49.60,37.10,36.60,36.30,30.10,24.20,21.59,21.56.

實例184 N-(3,4-二氟苯磺醯基)-L-脯胺醯基-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法7中所述之程序，製自實例183之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ 8.10(d,1H),7.84-7.77(m,1H),7.69-7.65(m,1H),7.53-7.45(m,1H),7.28(d,2H),7.02(d,2H),4.72-4.68(m,1H),4.19-4.16(m,1H),3.43-3.39(m,1H),3.31-3.21(m,2H),3.13-3.05(m,4H),2.97(s,3H),1.86-1.61(m,4H).

¹³CNMR(CD₃OD)：δ 174.2,174.1,164.7,156.9,154.9,152.0,151.6,135.8,135.6,131.6,129.7,122.9,119.7,118.8,63.1,54.7,50.5,37.4,36.8,36.6, 31.9,25.5.

實例185 N-(3,4-二氟苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係使用實例92中所述之程序，藉由適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.71(m,2H),7.33(m,1H),7.07(d,2H),6.91(d,2H),6.36(d,1H),4.95(m,1H),4.61(m,1H),4.03(m,2H),3.16(m,2H),3.13(m,4H),3.07(m,1H),2.93(s,9H),1.43(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.07,169.45,164.42,155.06,155.44,154.81,152.21,152.17,150.58,148.81,148.64,134.90,134.85,132.41,130.29,124.82,124.71,124.66,121.97,119.07,118.76,117.52,117.23,82.92,55.98,53.20,50.10,49.40,41.76,36.41,36.16,35.99,27.64.

實例186 N-(3,4-二氟苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例185之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ 6.22(m,1H),6.03(m,1H),5.84(m,1H),5.58(m,2H),5.38(m,2H),3.33(m,1H),3.01(m,1H),2.57(m,1H),2.14(m,1H),1.91(m,1H),1.66(m,3H),1.44(s,3H),1.35(m,3H),1.32(s,3H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ 173.97,167.89,156.94,153.53,152.07,150.00, 137.48,135.17,131.63,126.54,126.43,123.20,120.21,119.96,118.84,118.57,57.25,54.82,51.29,49.86,43.29,37.21,36.85,36.67.

實例187 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係使用實例82中所述之程序，藉由適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.64(d,2H),7.33(d,2H),7.25(d,2H),7.08-6.97(m,3H),4.76(m,1H),4.57(d,1H),4.38(d,1H),3.83(s,1H),3.95-3.78(m,4H),3.09(m,2H),2.69(m,4H),2.43(s,3H),1.44(s,9H),1.16(s,3H),1.08(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 169.78,168.36,153.53,150.28,144.84,133.53,132.76,130.51,130.03,128.19,121.58,82.69,73.42,54.56,53.78,50.46,47.05,46.40,37.80,29.06,27.76,27.37,27.04,23.86,21.52.

實例188 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例187之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.77(d,2H),7.37(d,2H),7.28(d,2H),7.22(d,1H),7.03(d,2H),5.35(br s,1H),4.91(m,1H),4.60(d,1H),4.39(d,1H),3.91(s,1H),3.96-3.28(m,4H),3.30-3.07(m,2H),2.67(m,4H),2.45(s,3H),1.10(s,3H),1.08(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 173.09,169.45,153.81,150.28,145.02,133.42,132.61,130.60,130.12,128.13,121.86,73.28,54.51,53.31,50.48,47.08,46.47,36.97,28.97,27.35,27.03,23.70,21.52.

實例189 N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸乙基酯之合成

標題化合物係按照關於實例117製備所述之程序，藉由適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.89(s,1H),7.81(s,1H),7.19(d,2H),7.00(m,3H),4.87(m,1H),4.54(d,1H),4.42(d,1H),4.18(q,2H),3.95(s,3H),3.81(s,1H),3.11(m,2H),3.08(s,3H),2.99(s,3H),1.30(s,3H),1.25(t,3H),1.16(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.98,168.34,154.91,150.71,139.62,132.88,130.28,121.85,117.71,73.77,61.66,54.80,53.16,50.53,39.64,37.63,36.60,36.36,28.98,24.00,13.92.

實例190 N-(吡啶-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例191之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 9.09(s,1H),8.82(m,1H),8.20(m,1H),7.56(m,1H),7.23(d,2H),7.07(d,1H),5.58(br s,1H),4.83(m,1H),4.56(m,2H),4.07(s,1H),3.14(m,2H),3.07(s,3H),2.99(s,3H),1.26(s,3H),1.18(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 173.04,168.29,155.16,153.39,150.60,147.96,136.43,133.91,133.06,130.66,130.50,124.65,122.14,121.91,73.43,54.58,53.21,50.38,37.18,36.64,36.38,29.25,23.64.

實例191 N-(吡啶-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例56製備所述之程序，及適當起始物質之取代而製成。

物理數據如下：MS：[M+H]⁺ 593

對C₂₇H₃₆N₄O₇S₂˙0.5H₂O之分析計算值：C,53.88；H,6.07；N,9.27.

實測值：C,53.98；H,6.07；N,9.27.

實例192 N-(吡啶-2-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

取代氯化2-吡啶磺醯(參閱Corey等人，J.Org.Chem.1989,54,389-393)，並按照關於實例56製備之方法，獲得標題化合物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 8.59(d,1H),8.00-7.89(m,2H),7.78(d,1H),7.53-7.49(m,1H),7.16(d,2H),7.01(d,2H),5.05-4.99(m,1H),4.85-4.78(m,1H),4.60-4.57(m,1H),3.44-3.35(m,2H),3.25-3.19(m,1H),3.07(s,3H),3.06-3.01(m,1H),2.97(s,3H),2.19-2.13(m,1H),1.88-1.71 (m,2H),1.55(m,1H),1.22-1.19(m,6H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.90,170.30,156.20,154.80,150.50,150.00,138.00,133.10,130.10,127.00,123.40,121.60,69.20,62.80,53.30,49.60,37.20,36.40,36.20,29.80,24.30,21.42,21.40.

實例193 N-(吡啶-2-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法7中所述之程序，製自實例192之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ 8.67(d,1H),8.27(d,1H),8.07-8.02(m,1H),7.96-7.91(m,1H),7.65-7.61(m,1H),7.27(d,2H),7.01(d,2H),4.72-4.69(m,1H),4.58-4.54(m,1H),3.44-3.37(m,2H),3.28-3.24(m,1H),3.13-3.05(m,4H),2.96(s,3H),1.94-1.89(m,2H),1.70-1.63(m,2H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ 174.5,174.4,174.2,157.7,156.9,151.9,139.9,135.6,131.6,128.8,124.7,122.9,64.1,54.8,54.7,50.9,37.5,36.8,36.7,31.9,25.6.

實例194 N-(吡啶-2-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照關於實例192製備所述之程序，藉由適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下： ¹H NMR(CDCl₃)：δ 8.64-8.62(m,1H),7.98-7.92(m,2H),7.56-7.51(m,1H),7.28-7.21(m,3H),7.01(d,2H),5.01-4.97(m,1H),4.88-4.85(m,2H),4.80(d,1H),4.63(d,1H),4.19(s,1H),3.11-3.07(m,5H),2.98(s,3H),1.28(s,3H),1.26-1.18(m,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.3,168.4,155.5,154.9,150.7,150.4,138.2,133.0,130.4,127.5,123.5,121.8,73.5,69.5,54.7,53.3,51.0,37.6,36.6,36.4,29.3,23.9,21.52,21.50.

實例195 N-(吡啶-2-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法7中所述之程序，製自實例194之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ 8.70-8.69(m,1H),8.07-8.01(m,1H),7.92-7.89(m,1H),7.67-7.63(m,1H),4.77-4.67(m,3H),4.30(s,1H),3.23-3.06(m,5H),2.97(s,3H),1.27-1.18(m,6H).

¹³CNMR(CD₃OD)：δ 174.1,171.2,157.0,151.9,151.6,139.9,135.7,131.8,131.7,129.0,124.6,122.9,74.3,61.6,55.7,54.9,51.9,37.6,36.8,36.7,30.1,24.9.

實例196 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照關於實例49製備所述之程序，藉由適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.67(d,2H),7.30(d,2H),7.12(d,2H),6.97(d,2H),6.86(d,1H),5.05(m,1H),4.70(m,2H),3.90(m,1H),3.31(m,1H),3.06(m,4H),2.97(s,3H),2.68(m,1H),2.50(m,1H),2.44(s,3H),2.29(m,1H),2.13(m,1H),1.24(s,3H),1.22(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.35,167.55,155.00,150.61,144.20,136.80,132.51,130.24,130.14,127.20,121.82,69.48,55.14,53.55,43.26,36.43,36.16,25.21,24.56,21.48,21.31.

實例197 N-(3-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.68(d,1H),7.61-7.52(m,2H),7.36(dt,1H),7.21(d,2H),7.02(d,2H),6.94(d,1H),5.05(七重峰，1H),4.85(q,1H),4.59(d,1H),4.41(d,1H),3.88(s,1H),3.17-3.03(m,2H),3.09(s,3H),3.00(s,3H),1.25(d,3H),1.23(d,3H),1.16(s,3H),1.12(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.3,168.1,162.6,154.9,150.7,137.9,132.8,131.3,130.4,123.9,121.8,121.0,115.4,73.5,69.6,54.5,53.2,50.5,37.6,36.6,36.3,29.0,23.7,21.6,21.5.

實例198 N-(2-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.92-7.87(m,1H),7.67-7.59(m,1H),7.33-7.24(m,2H),7.21(d,2H),7.03(d,2H),6.93(d,1H),5.03(七重峰，1H),4.83(q,1H),4.67(d,1H),4.63(d,1H),4.03(s,1H),3.16-3.03(m,2H),3.09(s,3H),3.00(s,3H),1.31(s,3H),1.24(d,3H),1.22(d,3H),1.19(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.3,168.1,159.2,154.9,150.7,136.0,132.9,132.0,130.3,124.6,121.8,117.6,73.3,69.6,54.8,53.2,50.3,37.6,36.6,36.3,29.1,23.9,21.6,21.5.

實例199 N-(3,4-二氟苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.77-7.71(m,1H),7.70-7.65(m,1H),7.40-7.31(m,1H),7.20(d,2H),7.02(d,2H),6.87(d,1H),5.05(七重峰，1H),4.88-4.82(m,1H),4.55(d,1H),4.44(d,1H),3.91(s,1H),3.17-3.03(m,2H),3.09(s,3H),3.00(s,3H),1.25(d,3H),1.23(d,3H),1.23(s,3H),1.18(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.4,167.9,154.9,150.7,133.1,132.7,130.4,124.4,121.8,118.5,118.0,73.6,69.7,54.6,53.1,50.5,37.6,36.6,36.3,29.2,23.7,21.6,21.5.

實例200 N-(3,5-二氟苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

實例201 N-(2,4-二氟苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.94-7.86(m,1H),7.20(d,2H),7.03(d,2H),7.02-6.95(m,2H),6.88(d,1H),5.03(七重峰，1H),4.82(q,1H),4.67(d,1H),4.61(d,1H),4.01(s,1H),3.16-3.03(m,2H),3.09(s,3H),3.00(s,3H),1.36(s,3H),1.23(d,3H),1.21(d,3H),1.20(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.3,167.9,154.9,150.7,133.7,132.8,130.3, 121.8,112.1,106.1,73.4,69.6,54.9,53.2,50.4,37.6,36.6,36.3,29.1,23.9,21.6,21.5.

實例202 N-(4-氯苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.82(d,2H),7.53(d,2H),7.21(d,2H),7.02(d,2H),6.93(d,1H),5.05(七重峰，1H),4.89-4.82(m,1H),4.55(d,1H),4.41(d,1H),3.87(s,1H),3.17-3.03(m,2H),3.09(s,3H),3.00(s,3H),1.25(d,3H),1.23(d,3H),1.16(s,6H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.3,168.1,154.9,150.7,140.4,134.5,132.8,130.4,129.7,129.5,121.8,73.5,69.6,54.6,53.1,50.5,37.6,36.6,36.3,29.1,23.8,21.6,21.0.

實例203 N-(3-氯苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.88(t,1H),7.78-7.75(m,1H),7.64-7.61(m,1H),7.51(t,1H),7.21(d,2H),7.02(d,2H),6.92(d,1H),5.05(七重峰，1H), 4.89-4.82(m,1H),4.58(d,1H),4.40(d,1H),3.88(s,1H),3.18-3.03(m,2H),3.09(s,3H),3.00(s,3H),1.25(d,3H),1.23(d,3H),1.16(s,3H),1.14(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.3,168.0,154.9,150.7,137.7,135.7,133.9,132.8,130.7,130.3,127.9,126.2,121.8,73.6,69.96,54.5,53.2,50.5,37.6,36.6,36.3,29.1,23.7,21.6,21.5.

實例204 N-(2-氯苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 8.08(dd,1H),7.54-7.52(m,2H),7.45-7.39(m,1H),7.19(d,2H),7.02(d,2H),6.79(d,1H),5.00(七重峰，1H),4.78(d,1H),4.75-4.68(m,1H),4.69(d,1H),4.19(s,1H),3.09(s,3H),3.06(d,2H),3.00(s,3H),1.38(s,3H),1.23(s,3H),1.23(d,3H),1.19(d,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.3,168.1,154.9,150.7,135.6,134.4,132.8,132.7,132.4,130.3,127.3,121.8,73.3,69.5,54.7,53.3,50.4,37.6,36.6,36.3,29.6,23.7,21.6,21.5.

實例205 N-(3,4-二氯苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.97(d,1H),7.70(dd,1H),7.63(d,1H),7.20(d,2H),7.02(d,2H),6.86(d,1H),5.05(七重峰，1H),4.89-4.82(m,1H),4.55(d,1H),4.43(d,1H),3.92(s,1H),3.17-3.03(m,2H),3.09(s,3H),3.00(s,3H),1.26(d,3H),1.22(d,3H),1.23(s,3H),1.18(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.3,167.9,154.9,150.7,138.7,136.1,134.2,132.7,131.4,130.3,129.8,127.1,121.8,73.6,69.7,54.6,53.1,50.5,37.5,36.6,36.3,29.2,23.7,21.6,21.5.

實例206 N-(3,5-二氯苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.76(d,2H),7.62(t,1H),7.20(d,2H),7.03(d,2H),6.85(d,1H),5.05(七重峰，1H),4.89-4.82(m,1H),4.57(d,1H),4.42(d,1H),3.92(s,1H),3.18-3.04(m,2H),3.09(s,3H),3.00(s,3H),1.25(d,3H),1.23(d,3H),1.27(s,3H),1.18(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.3,167.8,154.9,150.7,139.1,136.5,133.7,132.7,130.3,126.2,121.8,73.7,69.7,54.6,53.1,50.5,37.5,36.6,36.3,29.2,23.7,21.6,21.5.

實例207 N-(3-氯苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4- (N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.85(m,1H),7.76(m,1H),7.63(m,1H),7.53(m,1H),7.06(d,2H),6.96(d,2H),6.37(m,1H),5.01(m,1H),4.62(m,1H),4.01(m,2H),3.26(m,1H),3.06(s,3H),2.96(m,7H),1.49(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.0,164.5,154.9,150.6,140.0,136.1,134.2,132.5,131.3,130.2,127.4,125.5,122.2,82.8,56.0,53.3,49.9,49.2,41.7,36.5,36.3,36.0,27.8.

實例208 N-(3,4-二氯苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.91(m,1H),7.66(m,2H),7.06(d,2H),6.94(d,2H),6.33(m,1H),4.98(m,1H),4.60(m,1H),3.49(m,3H),3.12(m,2H),3.04(s,3H),3.00(m,2H),2.94(s,3H),1.44(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.0,164.3,154.8,150.6,138.8,137.9,134.3,132.4,132.0,130.3,129.2,126.4,122.1,83.0,55.5,53.1,50.2,49.5,41.8,36.5,36.2,36.0,27.7.

實例209 N-(4-甲氧基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.81(d,2H),7.22(d,2H),7.06-6.99(m,5H),5.04(七重峰，1H),4.89-4.82(m,1H),4.56(d,1H),4.39(d),3.88(s,3H),3.83(s,1H),3.17-3.03(m,2H),3.09(s,3H),3.00(s,3H),1.25(d,3H),1.22(d,3H),1.15(s,3H),1.12(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.3,168.5,163.8,154.9,150.7,132.9,130.4,130.3,127.4,121.7,114.5,73.5,69.5,55.6,54.6,53.2,50.5,37.7,36.6,36.3,29.1,23.9,21.6,21.5.

實例210 N-(3-甲氧基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.47-7.45(m,2H),7.37-7.36(m,1H),7.21(d,2H),7.19-7.15(m,1H),7.04-6.98(m,3H),5.04(七重峰，1H),4.88-4.82(m,1H),4.58(d,1H),4.40(d,1H),3.89(s,1H),3.87(s,3H),3.17-3.03(m,2H),3.09(s,3H),3.00(s,3H),1.25(d,3H),1.23(d,3H),1.15(s,3H),1.08(s,3H).

¹³CNMR(CDCl₃)：δ 170.3,168.3,160.2,154.9,150.7,136.9,132.9,130.5, 130.4,121.7,120.2,120.0,112.6,73.4,69.6,55.7,54.5,53.2,50.4,37.7,36.6,36.3,29.1,23.7,21.6,21.5.

實例211 N-(2-甲氧基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.92(dd,1H),7.54(dd,1H),7.21(d,2H),7.07-7.00(m,4H),6.96(d,1H),5.01(七重峰，1H),4.83-4.76(m,1H),4.73(d,1H),4.61(d,1H),4.17(s,1H),3.93(s,3H),3.14-3.03(m,2H),3.09(s,3H),3.00(s,3H),1.36(s,3H),1.22(d,3H),1.21(s,3H),1.19(d,3H).

¹³CNMR(CDCl₃)：δ 170.3,168.7,157.7,154.9,150.6,135.4,133.0,132.5,130.3,125.2,121.7,120.5,112.6,73.3,69.5,56.0,54.8,53.3,50.4,37.7,36.6,36.3,29.2,24.1,21.6,21.5.

實例212 N-(3,4-二甲氧基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.50(dd,1H),7.31(d,1H),7.21(d,2H),7.05-7.01(m,3H),6.97(d,1H),5.04(七重峰，1H),4.89-4.82(m,1H),4.56(d,1H),4.40(d,1H),3.95(s,3H),3.94(s,3H),3.89(s,1H),3.17-3.03(m,2H),3.09(s, 3H),3.00(s,3H),1.25(d,3H),1.22(d,3H),1.16(s,3H),1.14(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.3,168.5,154.9,153.5,150.7,149.4,132.9,130.4,127.6,122.3,121.7,110.6,110.3,73.5,69.6,56.3,56.1,54.6,53.2,50.5,37.7,36.6,36.3,29.2,23.8,21.6,21.5.

實例213 N-(2,4-二氟苯磺醯基)-L-(硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.89(m,1H),7.16(m,2H),6.97(m,4H),6.77(d,1H),4.72(m,1H),4.60(m,1H),3.92(m,1H),3.29(m,1H),3.09(m,5H),2.93(s,3H),2.70(m,2H),2.55(m,1H),2.10(m,1H),1.42(s,9H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.0,168.0,167.7,137.1,164.4,164.3,161.1,160.9,157.7,157.5,154.8,150.5,132.7,132.6,132.4,130.4,124.0,123.8,121.7,112.2,111.9,106.5,106.1,105.8,82.6,55.4,53.9,43.5,36.4,36.2,27.7,26.8,25.5.

實例214 N-(3,4-二氯苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例208之產物。

NMR數據如下： ¹H NMR(CD₃OD)：δ 8.04(m,1H),7.68(m,2H),7.52(m,1H),7.21(d,2H),7.02(d,2H),5.22(m,1H),4.63(m,1H),4.22(m,1H),3.71(m,1H),3.57(m,1H),3.30(m,3H),3.08(s,3H),3.02(m,3H),2.97(s,3H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ 174.0,168.0,156.9,152.1,140.7,139.3,135.2,133.2,131.6,130.7,128.3,123.2,57.2,54.9,54.6,51.7,51.4,43.3,37.3,36.9,36.7.

實例215 N-(3-氯苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例207之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ 7.94(m,1H),7.77(m,2H),7.58(m,1H),7.46(d,1H),7.19(d,2H),7.07(d,2H),5.23(m,1H),4.63(m,1H),4.20(m,1H),3.71(m,1H),3.43(m,1H),3.26(m,4H),3.17(s,3H),2.95(m,5H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ 168.0,152.1,142.5,136.8,135.0,132.7,131.6,128.6,127.1,123.3,57.2,54.9,51.4,51.2,43.2,37.2,36.8,36.7.

實例216 N-(3-氯基-4-氟基苯磺醯基)-L-(1,1-二酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ 7.93(d),7.90(m),7.29(s),7.27(d),7.04(d),4.60 (m),4.46(d),3.90-3.40(m),3.10(s),2.98(s),1.43(s).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ 171.5,166.5,156.9,151.9,135.2,131.3,129.9,127.9,127.8,123.1,117.8,117.5,101.4,83.7,57.9,56.0,42.9,37.3,36.9,36.7,28.1.

實例217 N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例49與117製備所述之程序製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.77(s),7.63(s),7.08(d),6.93(d),6.76(d),6.71(d),5.50(d),5.22(s),4.82(t),4.61(q),3.83(s),3.25(dt),3.04(m),2.90(s),2.05(dd),1.34(s).

¹³CNMR(CDCl₃)：δ 169.3,166.8,154.7,150.4,138.4,132.4,132.2,130.2,121.4,118.3,105.4,82.5,55.2,53.6,53.3,39.5,38.3,36.6,36.3,36.1,27.6,23.5.

實例218 N-(3,4-二氟苯磺醯基)-L-(硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ 7.88(m,1H),7.70(m,1H),7.57(m,1H),7.23(d,2H),7.03(d,2H),6.83(d,1H),5.63(dd,1H),5.07(t,1H),4.58(m,1H),3.22-3. 00(m,3H),3.09(s,3H),2.98(s,3H),2.07(dd,1H),1.44(s,9H).

¹³CNMR(CD₃OD)：δ 171.3,169.3,156.9,152.0,135.0,131.6,126.5,122.9,120.2,119.9,119.4,118.7,118.4,106.4,83.6,56.5,55.6,37.1,36.8,36.6,28.1,25.2.

實例219 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 9.09(s,1H),8.88(m,1H),8.16(m,1H),7.50(m,1H),7.22(d,2H),7.01(d,2H),6.91(d,1H),5.05(m,1H),4.85(m,1H),4.60(d,1H),4.46(d,1H),3.89(s,1H),3.93-3.83(m,4H),3.11(m,2H),2.69(m,4H),1.29-1.16(m,12H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.3,167.8,154.3,153.5,150.4,148.7,135.8,133.1,132.9,130.4,124.0,121.8,73.7,69.7,54.7,53.2,50.5,47.1,46.4,37.6,29.1,27.4,27.0,23.8,21.6,21.5.

實例220 N-(3,4-二氟基苯磺醯基)-L-(硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例218之產物。

NMR數據如下： ¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.89(s,1H),7.57-7.46(m，2H),7.35(d,1H),7.32-7.22(m,1H),7.09(d,2H),6.91(d,2H),6.64(d,1H),5.50(d,1H),4.89(s,1H),4.88-4.79(m,1H),3.17-3.02(m,3H),3.02(s,3H),2.93(s,3H),1.75(dd,1H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 173.6,167.7,155.5,152.0,151.8,150.1,148.4,132.8,130.4,124.6,121.5,118.7,118.5,117.5,117.3,117.1,106.9,54.9,53.0,36.4,36.2,36.0,23.4.

實例221 N-(2,5-二氯噻吩-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.18(d,2H),7.11(s,1H),7.00(d,2H),6.87(d,1H),5.03-4.99(m,1H),4.84-4.81(m,1H),4.65-4.56(m,2H),4.07(s,1H),3.10-3.01(m,5H),2.98(s,3H),1.37(s,3H),1.22(s,3H),1.21(s,3H),1.18(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.3,167.7,154.9,150.7,132.9,132.8,131.9,130.3,128.0,127.0,121.8,73.4,69.6,54.8,53.2,50.5,37.5,36.6,36.3,29.1,23.8,21.6,21.5.

實例222 N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.89(s,1H),7.80(s,1H),7.21(d,2H),7.01(m,3H),5.03(m,1H),4.83(m,1H),4.54(d,1H),4.40(d,1H),3.95(s,3H),3.86(m,4H),3.80(s,1H),3.09(m,2H),2.68(m,4H),1.28(s,3H),1.22(m,6H),1.16(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.4,168.3,153.5,150.4,139.3,133.3,132.9,130.4,121.7,117.6,73.8,69.7,54.8,53.2,50.5,47.1,46.439.6,37.6,29.0,27.4,27.1,24.0,21.6,21.5.

實例223 N-(8-喹啉磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 9.01-8.99(m,1H),8.56-8.53(m,1H),8.27-8.23(m,1H),8.07-8.04(m,1H),7.66-7.61(m,2H),7.55-7.51(m,1H),7.17(d,2H),7.01(d,2H),5.27-5.23(m,1H),5.07-4.98(m,1H),4.84-4.76(m,1H),3.34-3.20(m,3H),3.06-2.98(m,4H),2.97(s,3H),2.15-2.09(m,1H),1.64-1.51(m,3H),1.23(d,6H).

¹³CNMR(CDCl₃)：δ 172.0,170.5,154.9,151.5,150.6,143.9,136.8,135.6,134.9,134.1,133.3,130.2,129.2,125.6,122.3,121.7,69.3,62.8,53.5,48.7,37.3,36.5,36.3,29.7,24.3,21.6,21.6.

實例224 N-(8-喹啉磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法7中所述之程序，製自實例223之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ 9.03-9.01(m,1H),8.49-8.42(m,2H),8.23-8.20(m,1H),8.09-8.07(m,1H),7.73-7.61(m,2H),7.25(d,2H),7.00(d,2H),5.30-5.27(m,1H),4.73-4.69(m,1H),3.38-3.21(m,3H),3.09-3.02(m,4H),2.95(s,3H),1.86(m,1H),1.78-1.73(m,1H),1.58-1.50(m,2H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ 175.3,174.2,164.7,156.9,152.9,145.2,138.5,136.9,135.8,135.6,131.6,130.9,126.9,123.8,122.9,63.9,54.7,50.0,37.5,36.8,36.7,31.6,25.5.

實例225 N-(8-喹啉磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 9.05-9.03(m,1H),8.53-8.49(m,1H),8.26-8.22(m,1H),8.08-8.05(m,1H),7.65-7.60(m,1H),7.56-7.52(m,1H),7.19(d,2H),7.06(d,1H),7.00(d,2H),5.17(d,1H),4.94(m,1H),7.74-4.78(m,2H),4.66(s,1H),3.08-2.99(m,8H),1.20-1.16(m,12H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.2,168.9,154.9,151.5,150.6,144.2,136.7,134.4,134.4,133.1,130.3,129.2,125.5,122.3,121.7,73.2,69.3,54.8,53.3, 50.6,37.6,36.6,36.3,29.2,24.1,21.5,21.4.

實例226 N-(8-喹啉磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法7中所述之程序，製自實例225之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ 9.06-9.04(m,1H),8.45-8.39(m,2H),8.23-8.14(m,1H),7.72-7.61(m,2H),7.32(d,2H),7.03(d,2H),5.12(d,1H),4.87(d,1H),4.69-4.64(m,2H),3.28-3.02(m,5H),2.98(s,2H),1.18(s,3H),1.08(s,3H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ 174.1,171.8,157.1,152.9,152.0,145.5,138.4,137.3,135.8,135.6,135.1,131.8,130.9,126.8,123.8,122.9,73.7,55.9,54.8,51.7,37.6,36.8,36.7,30.2,25.0.

實例227 N-(3-磺醯胺基-4-氯-苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 8.45(d,1H),7.91(d,1H),7.67(d,1H),7.13(d,2H),7.06(d,1H),7.01(d,2H),5.90(br s,2H),5.06-5.02(m,1H),4.79-4.72(m,1H),4.14-4.10(m,1H),3.42-3.39(m,1H),3.25-3.14(m,2H),3.07(s,3H),3.04-2.97(m,1H),2.96(s,3H),1.98-1.96(m,1H),1.72-1.62(m,3H),1.28-1.25(m,6H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.8,170.7,155.1,150.6,141.4,136.9,136.1, 132.9,132.8,131.9,130.3,128.7,121.9,69.8,62.1,53.3,49.6,36.9,36.6,36.4,30.4,24.3,21.6,21.6.

實例228 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(1-酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照關於實例182製備所述之程序，及適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.77(d,2H),7.72(d,2H),7.33(m,2H),7.20(m,2H),7.12(d,2H),7.01(m,2H),5.10(m,1H),5.01(m,1H),4.84(m,1H),4.75(m,1H),3.80(m,3H),3.05(m,4H),2.96(m,3H),2.74(m,1H),2.42(m,4H),1.30-1.20(m,6H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.6,170.4,166.8,166.7,154.9,150.7,150.6,145.1,144.8,135.8,135.5,132.7,130.6,130.4,130.3,130.0,127.7,127.1,122.4,121.8,69.8,69.4,55.8,53.7,52.9,50.8,48.2,47.9,42.0,41.2,38.4,36.6,36.5,36.3,31.2,21.5,21.5.

實例229 N-(2,4-二氟苯磺醯基)-L-(1-酮基硫代嗎福啉-3-羰基)-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.91(m,1H),7.30(m,2H),6.97(m,4H),4.71(m,1H),4.55(m,1H),3.90(m,2H),3.77(m,1H),3.11(m,4H),2.85(m,3H),2.80 (m,1H),2.60(m,2H),1.46(s,9H),1.39(s,9H).

¹³CNMR(CDCl₃)：δ 170.0,168.0,167.9,166.4,166.2,164.6,164.4,162.7,161.4,161.2,157.9,157.8,154.8,150.6,150.4,132.8,132.5,132.4,130.9,130.4,130.1,123.3,123.1,122.2,121.6,121.1,122.6,122.2,111.9,106.6,106.3,105.9,82.8,82.3,55.8,54.1,53.2,51.6,49.2,48.7,43.1,42.3,38.7,36.5,36.2,31.8,27.7.

實例230 N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸2,2-二甲基丙酯之合成

使得自實例161之產物(1克，0.72毫莫耳)溶於新戊醇(5毫升)中。添加異丙醇鈦(IV)(260毫克，0.9毫莫耳)，並將混合物於100℃及惰性大氣下加熱48小時。於減壓下移除過量新戊醇，並使殘留物藉急驟式管柱層析純化(矽膠，CHCl₃中之1% MeOH)，而得標題化合物，為白色固體(1.02克，97%)。

物理數據如下：MS(+)ESI[M+H]⁺ 610；[M+NH₄]⁺ 627(100%).

對C₂₉H₃₉N₅O₇S之分析計算值：C,53.18；H,6.45；N,11.49.

實測值：C,53.46；H,6.38；N,11.06.

實例231 N-(吡啶-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸2,2-二甲基丙酯之合成

使得自實例173之產物接受關於實例230製備所述之酯交換程序。使化合物藉急驟式管柱層析純化(矽膠，CHCl₃中之1% MeOH)，接著自醋酸乙酯再結晶，而得標題化合物，為白色固體(720毫克，47%)。

物理數據如下：對C₂₈H₃₈N₄O₇S₂之分析計算值：C,55.43；H,6.31；N,9.23.

實測值：C,55.37；H,6.32；N,9.22.

實例232 N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸環丙基甲酯之合成

使得自實例161之產物接受關於實例230製備所述之酯交換程序。在急驟式管柱層析(矽膠，CHCl₃中之1% MeOH)之後，標題化合物係以白色固體獲得(860毫克，70%)。

物理數據如下：對C₂₆H₃₅N₅O₇S₂之分析計算值：C,52.6；H,5.94；N,11.8.

實測值：C,52.49；H,5.93；N,11.62.

實例233 N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸甲酯之合成

標題化合物係按照關於實例161製備所述之程序，及適當起始物質之取代而製成。

物理數據如下：MS(+)ESI[M+H]⁺ 554；[M+NH₄]⁺ 571(100%).

對C₂₃H₃₁N₅O₇S₂˙0.2 EtOAc之分析計算值：C,50.04；H,5.75；N,12.26.

實測值：C,50.12；H,5.69；N,12.19.

實例234 N-(吡啶-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸乙基酯之合成

使得自實例173之產物接受關於實例230製備所述之酯交換程序。使化合物藉急驟式管柱層析純化(矽膠，CHCl₃中之2% MeOH)，接著自醋酸乙酯再結晶，而得標題化合物，為白色固體(1.2克，61%)。

物理數據如下：對C₂₅H₃₂N₄O₇S₂之分析計算值：C,53.18；H,5.71；N,9.92.

實測值：C,53.14；H,5.72；N,9.57.

實例235 N-(吡啶-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸環丙基甲酯之合成

使得自實例173之產物接受關於實例230製備所述之酯交換程序。在急驟式管柱層析(矽膠，CHCl₃中之2% MeOH)，及自EtOAc/己烷(1克，65%)再結晶之後，將化合物分離為白色固體。

物理數據如下：對C₂₇H₃₄N₄O₄S₂之分析計算值：C,54.9；H,5.8；N,9.48.

實測值：C,54.77；H,5.65；N,9.46.

實例236 N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸2-甲氧苯酯之合成

於得自實例139之化合物(1.79克，3.31毫莫耳)、2-甲氧基-酚(0.45克，3.64毫莫耳)及BOP(1.61克，3.64毫莫耳)在二氯甲烷(25毫升)中之溶液內，在0℃下，添加三乙胺(0.7毫升，4.97毫莫耳)。然後，使反應混合物慢慢溫熱至25℃，將其在氮氣下攪拌24小時。藉由添加100毫升飽和鹽水使反應淬滅，並以EtOAc萃取。將有機萃液以2N HCl(3次)、飽和碳酸氫鈉(3x)及飽和鹽水(2x)相繼洗滌，以MgSO₄脫水乾燥，並蒸發成2.1克粗產物。急驟式層析(溶離劑：96-4二氯甲烷：EtOAc)，獲得1.85克白色固體，將其以己烷研製，而得1.68克(79%)白色結晶，熔點72-75℃。

物理數據如下：對C₂₉H₃₅N₅O₈S₂之分析計算值：C,59.94；H,5.46；N,10.85.

實測值：C,53.45；H,5.62；N,10.31.

實例237 N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸正-丁酯之合成

在冰冷卻時，以HCl氣體使實例139化合物(2克)在正-丁醇(50毫升)中之溶液飽和。將混合物於環境溫度下攪拌36小時，在真空中蒸發至幾乎乾涸，然後於5% NaHCO₃與氯仿之間作分液處理。使有機層脫水乾燥，並於真空中蒸發，獲得900毫克標題化合物。

物理數據如下：MS：[(+)ESI],[M+H]⁺ 596.

實例238 N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸正-丙酯之合成

在冰冷卻時，以HCl氣體使N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸(2克)在正-丙醇(50毫升)中之溶液飽和。將混合物於環境溫度下攪拌36小時。在真空中蒸發至幾乎乾涸，然後於5% NaHCO₃與氯仿之間作分液處理。使有機層脫水乾燥，並於真空中蒸發，提供1500毫克標題化合物。

物理數據如下：MS：[(+)ESI],[M+H]⁺ 582.

實例239 N-(1-甲基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸2,2-二甲基丙醯氧基甲酯之合成

將碘化鉀(324毫克)立即添加至實例139之化合物(1.08克)、第三戊酸氯甲酯(294毫克)及粉末狀K₂CO₃(222毫克)在DMF(5毫升)中之混合物內。將反應混合物於環境溫度下攪拌過夜，在水(12毫升)與醋酸乙酯(60毫升)之間作分液處理。將已分離之有機層以冰冷0.1N硫代硫酸鈉、水及鹽水洗滌，然後以MgSO₄脫水乾燥，過濾，及在真空中蒸發，而產生750毫克標題化合物。

物理數據如下：MS：[(+)ESI],[M+H)⁺ 654.

實例240 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-苯基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例4所概述之程序，藉由適當起始物質之取代而製成。以白色固體獲得，熔點60-65℃。

物理數據如下：MS(+ESI)694.3[M+NH₄]⁺.

對C₃₆H₄₄N₄O₇S˙0.5C₄H₈O₂之分析計算值：C,63,31；H,6.71；N,7.77.

實測值：C,63.12；H,6.58；N,7.69.

實例241 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4'-(乙氧羰基)六氫吡啶-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

胺基甲酸酯係經由將Tos-Pro-Tyr-第三-丁酯以氯甲酸4-硝基苯酯處理，接著添加六氫異菸鹼酸乙酯(使三乙胺、二氯甲烷急冷至0℃，然後於室溫下攪拌過夜)而製成。使粗產物藉急驟式層析純化(矽膠，95：5 EtOAc：Et₃N)，而得白色固體.(78克，39%)。

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ 8.15(d,1H,J=7.68Hz)；7.70(d,2H,J=8.34Hz)；7.40(d,2H,J=7.90Hz)；7.22(d,2H,J=8.56Hz)；7.00(d,2H,J=8.56Hz)；4.37(m,1H),4.07(q,2H,J=7.14,14.08Hz)；4.03(m,2H)；3.90(m,1H)；3.34(m,1H)；3.09(m,2H)；3.00(m,3H)；2.59(m,1H)；2.39(s,3H)；1.87(m,2H)；1.58(m,5H)；1.41(m,1H)；1.35(s,9H)；1.18(t,3H,7.14Hz).

IR(KBr，公分^-1)：3410,2990,2950,1725,1680,1510,1430,1355,1220, 1200,1170,1000,675,595.

MS((+)ESI,m/z(%))689(100[M+NH₄]⁺)；691(37[M+NH₄]⁺)

對C₃₄H₄₅N₃O₉S之分析計算值：C,60.79；H,6.75；N,6.25.

實測值：C,60.59；H,6.67；N,6.22.

實例242 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-(4'-(2'-胺基乙基)嗎福啉基)胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例152之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ 12.75(s,1H)；8.08(d,1H)；7.68(d,2H)；7.60(t,1H)；7.39(d,2H)；7.21(d,2H)；6.97(d,2H)；4.46(m,1H)；4.08(m,1H)；3.56(m,4H)；3.26(m,3H)；3.09(m,2H)；2.94(m,1H)；2.49(s,6H)；2.48(s,3H)；1.5(m,3H)；1.38(m,1H).

IR(KBr，公分^-1)3400,2975,1725,1650,1500,1350,1150,650,575,550.MS((-)ESI,m/z(%))587(100[M-H]⁺).

對C₂₈H₃₆N₄O₈S.HCOOH.0.5H₂O之分析計算值：C,54.11；H,6.11；N,8.70.

實測值：C,53.96；H,6.02；N,8.68.

實例243 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-[4-(羧基)六氫吡啶-1-基羰基氧基]苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法6與11中所述之程序，製自實例241之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ 12.50(bs,2H)；8.08(d,1H,J=7.90Hz)；7.69(d,2H,J=8.34Hz)；7.39(d,2H,J=7.90Hz)；7.22(d,2H,J=8.56Hz)；6.99(d,2H,J=8.56Hz)；4.46(m,1H)；4.09(m,1H)；4.00(m,1H)；3.90(m,1H)；3.30(m,1H)；3.09(m,3H)；2.95(m,2H)；2.49(m,1H)；2.38(s,3H)；1.86(m,2H)；1.36-1.61(m,6H).

IR(KBr，公分^-1)3400,2960,1720,1535,1430,1350,1200,1160,670,590,550.

MS((+)ESI,m/z(%))605(100[M+NH₄]⁺)

對C₂₈H₃₃N₃O₉SH₂O之分析計算值：C,55.53；H,5.65；N,6.94.

實測值：C,55.23；H,5.82；N,6.59.

實例244 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-雙-(2-羥乙基)胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

胺基甲酸酯係經由將Tos-Pro-Tyr-iPr酯以氯甲酸4-硝基苯酯處理，接著添加二乙醇胺(使三乙胺、二氯甲烷急冷至0℃，於室溫下攪拌過夜)而製成。使粗產物藉急驟式層析純化(矽膠，98：2 EtOAc：EtOH)，而得白色泡沫物。(0.180克，28%)。

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ 8.26(d,1H,J=7.90Hz)；7.69(d,2H,J=8.12Hz)；7.40(d,2H,J=8.12Hz)；7.23(d,2H,J=8.56Hz)；6.99(d,2H,J=8.56Hz)；4.87(m,1H)；4.83(t,1H,J=5.49Hz)；4.76(t,1H,J=5.49Hz)；4.42(m,1H)；4.08(m,1H)；3.58(m,2H)；3.51(m,2H)；3.44(m,2H) ；3.34(m,3H)；2.99-3.09(m,3H)；2.39(s,3H)；1.59(m,3H)；1.41(m,1H)；1.16(d,3H,J=6.15Hz)；1.12(d,3H,J=6.15Hz).

IR(KBr，公分^-1)3420,2940,1725,1535,1670,1520,1460,1410,1350,1220,1160,1110,670,600,550.

MS((+)ESI,m/z(%))606(15[M+H]⁺)；623(100[M+NH₂]⁺)

對C₂₉H₃₉N₃O₉SH₂O之分析計算值：C,56.66；H,6.56；N,6.84.

實測值：C,56.66；H,6.41；N,6.72.

實例245 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-[3-(羥甲基)六氫吡啶-1-基羰基氧基]苯丙胺酸異丙酯之合成

胺基甲酸酯係經由將Tos-Pro-Tyr-iPr酯以氯甲酸4-硝基苯酯處理，接著添加3-六氫吡啶甲醇(使三乙胺、二氯甲烷急冷至0℃，於室溫下攪拌過夜)而製成。使粗產物藉急驟式層析純化(矽膠，3：2 EtOAc：己烷)，而得白色泡沫物(0.519克，67%)。

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ 8.26(d,1H,J=7.90Hz)；7.69(d,2H,J=8.12Hz)；7.40(d,2H,J=8.12Hz)；7.22(d,2H,J=8.56Hz)；6.98(d,2H,J=8.34Hz)；4.85(m,1H)；4.57(bs,1H)；4.42(m,1H)；3.99-4.09(m,3H)；3.85(m,1H)；3.31(m,1H)；3.22(m,1H)；2.91-3.10(m,4H)；2.80(m,1H)；2.55(m,1H)；2.39(s,3H)；1.51-1.72(m,6H)；1.42(m,2H)；1.16(d,3H,J=6.15Hz)；1.11(d,3H),J=6.15Hz).

IR(KBr，公分^-1)3400,2990,2940,2880,1725,1520,1430,1350,1220,1165,1100,660,600,550.

MS((-)ESI,m/z(%))614(30[M-H]).

對C₃₁H₄₁N₃O₈S之分析計算值：C,60.47；H,6.71；N,6.82.

實測值：C,59.83；H,6.61；N,6.59.

實例246 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-三氟甲烷磺醯基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例128所概述之程序，及適當起始物質之取代而製成。

物理數據如下：MS(+ESI)：733[M+H]⁺.

對C₃₁H₃₉F₃N₄O₉S₂˙0.10 C₄H₈O₂之分析計算值：C,50.20；H,5.40；N,7.55.

實測值：C,50.25；H,5.46；N,7.07.

實例247 N-(4-(N-苯基脲)苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

將實例107(250毫克，0.51毫莫耳)、異氰酸苯酯(62毫克，0.56毫莫耳)及三乙胺(76微升，0.56毫莫耳)之混合物於氬氣下加熱至回流。使回流持續過夜。於減壓下移除溶劑，並使殘留物藉急驟式層析純化(矽膠，己烷：EtOAc 1：1，然後EtOAc)，而得標題化合物，為灰白色泡沫物(160毫克，46%)，熔點112-115℃。

物理數據如下： MS(+ESI)[M+NH₄]⁺ 697(100%).

實例248 N-(2-三氟乙醯基-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.70-7.66(m,2H),7.35-7.30(m,1H),7.27-7.21(m,1H),7.14-7.10(m,2H),7.01(d,2H),5.09-4.95(m,1H),4.89-4.75(m,2H),4.14-4.07(m,1H),3.93-3.85(m,2H),3.35-3.20(m,2H),3.13-2.97(m,9H),2.05-2.01(m,1H),1.63(1.50(m,3H),1.20(d,6H).

¹³CNMR(CDCl₃)：δ 170.7,170.6,170.5,156.3,155.8,154.9,150.6,140.1,139.2,135.1,135.1,13.2,133.0,133.0,132.9,130.2,130.1,129.9,126.9,126.4,126.3,125.8,121.7,118.3,114.5,69.6,62.1,62.0,53.2,49.6,46.6,46.5,45.1,42.7,40.9,37.1,36.6,36.3,30.1,30.0,29.2,27.8,24.2,24.2,21.6,21.6.

實例249 N-(1-甲基吡唑-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

取代氯化N-甲基吡唑-3-磺醯(參閱歐洲專利申請案095925)，並按照關於實例56製備之方法，獲得標題化合物。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.45(d,1H),7.21(d,2H),7.09(d,1H),7.01(d,2H),6.71(d,1H),5.03-4.98(m,1H),4.87-4.84(m,1H),4.60-4.59(m,2H),4.05(s,1H),3.97(s,3H),3.12-3.01(m,5H),2.98(s,3H),1.22-1.15(m,12H).

¹³CNMR(CDCl₃)：δ 170.3,168.3,154.9,150.7,146.7,133.0,131.9,130.3,121.7,108.9,73.5,69.5,54.7,53.3,50.7,39.9,37.7,36.6,36.3,28.8,24.1,21.5,21.5.

實例250 N-(1-甲基吡唑-3-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係製自實例249之產物，使用方法7中所述之程序。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ 8.25(d,1H),7.76(d,1H),7.32(d,2H),7.01(d,2H),6.70(d,1H),4.74-4.71(m,1H),4.68(d,1H),4.56(d,1H),4.12(s,1H),3.97(s,3H),3.24-3.07(m,5H),2.97(s,3H),1.14(s,3H),1.13(s,3H).

¹³CNMR(CD₃OD)：δ 174.1,171.4,157.0,151.9,148.2,135.7,134.2,131.8,122.9,109.6,74.4,55.6,55.0,51.5,40.0,37.6,36.8,36.7,29.6,24.8.

實例251 N-(吡啶-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照關於實例56製備所概述之程序製成，其中係使用氯化4-吡啶磺醯N-氧化物代替氯化3-吡啶磺醯(參閱Marsais與共同研究者，J.Org.Chem.1987,52,1133-1136)。N-氧化物之脫氧作用係使用Aoyagi與共同研究者，Synthesis 1997,891之程序達成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 8.89-8.87(m,2H),7.72-7.70(m,2H),7.19(d,2H), 7.01(d,2H),6.79(d,1H),5.05-5.01(m,1H),4.85-4.82(m,1H),4.58(d,1H),4.45(d,1H),3.91(s,1H),3.11-3.02(m,5H),2.99(s,3H),1.28-1.16(m,12H).

¹³CNMR(CDCl₃)：δ 170.3,167.7,154.9,151.5,150.7,144.2,132.7,130.3,121.8,120.9,73.6,69.7,54.6,53.1,50.4,37.5,36.6,36.3,29.1,23.6,21.6,21.5.

實例252 N-(吡啶-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法7中所述之程序，製自實例251之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ 8.78(d,2H),7.42(d,1H),7.69(d,2H),7.35(d,2H),7.06(d,2H),4.69-4.61(m,3H),4.16(s,1H),3.25-3.19(m,1H),3.13-3.05(m,4H),2.97(s,3H),1.25(s,6H).

¹³CNMR(CD₃OD)：δ 174.1,170.5,157.0,152.2,152.0,147.2,135.8,131.8,123.1,122.7,73.9,55.6,54.9,54.4,37.5,36.8,36.7,30.1,24.8.

實例253 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N-甲基-N-(2-二甲胺基乙基)胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

將起始酸(500毫克)、(2S)-2-胺基-3-{4-[(2-二甲胺基乙基)-甲基胺甲醯基氧基]苯基}丙酸第三-丁酯(730毫克)、HOBt(235毫克)及4-甲基嗎福啉(0.87毫升)在DMF(10毫升)中之溶液，於0℃下，在冰浴中攪拌。將1-[3-(二甲胺基)丙基]-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(360毫克)添加至溶液中。10分鐘後，移除冰浴。將反應物於室溫下攪拌3小時。添加醋酸乙酯(20毫克)。將溶液以飽和NaHCO₃溶液(30毫升)洗滌2次，然後以鹽水洗滌。以MgSO₄使溶液脫水乾燥。在真空中蒸發溶劑，並使殘留物於矽膠上急驟式層析，獲得385毫克標題化合物。

物理數據如下：MS：[(+)ESI],[M+H]⁺ 663.

實例254 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-甲基-N-(2-二甲胺基乙基)胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例253製備所述之程序，及適當起始物質之取代而製成。

物理數據如下：MS：[(+)ESI],[M+H]⁺ 617.

實例255 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫丙基-L-4-(N-甲基-N-(2-二甲胺基乙基)胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例253之產物。

物理數據如下：MS：[(+)ESI],[M+H]⁺ 607.

實例256 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N-甲基-N-(2-二甲胺基乙基)胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例254之產物。

物理數據如下：MS：[(+)ESI],[M+H]⁺ 561.

實例257 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(4-甲基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例4製備所述之程序，及適當起始物質之取代而製成，熔點：64-67℃。

物理數據如下：MS：[M+H]⁺ 699.

對C₃₁H₄₀ClFN₄O₇S₂˙H₂O之分析計算值：C,51.90；H,5.9；N,7.8.

實測值：C,51.53；H,5.50；N,7.62.

實例259 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例258之產物。

物理數據如下：MS：[M+1]603.

對C₂₄H₂₇FN₃O₇S₂之分析計算值：C,49.02；H,4.63；N,7.15.

實測值：C,49.25；H,4.89；N,6.73.

實例260 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例82製備所述之程序，及適當起始物質之取代而製成，熔點.111-114℃。

物理數據如下：MS：+ESI[M+NH₄]⁺ 719.

對C₃₀H₃₇ClFN₃O₇S之分析計算值：C,50.02；H,5.46；N,5.8.

實測值：C,50.23；H,5.10；N,5.50.

實例261 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照關於實例82製備所述之程序，及適當起始物質之取代而製成，熔點77-81℃。

物理數據如下：MS：[M+NH₄]⁺ 705.

對C₂₉H₃₅ClFN₃O₇S₃之分析計算值：C,50.61；H,5.13；N,6.1.

實測值：C,50.33；H,5.07；N,5.94.

實例262 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)]苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照關於實例2製備所述之程序，及適當起始物質之取代而製成，熔點65-69℃。

物理數據如下：MS：[M+NH₄]⁺ 647.

對C₂₇H₃₃ClFN₃O₇S₂之分析計算值：C,51.46；H,5.28；N,6.4.

實測值：C,51.29；H,5.19；N,6.50.

實例263 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照關於實例2製備所述之程序，及適當起始物質之取代而製成，熔點68-72℃。

物理數據如下：MS：[M+H]⁺ 626.

對C₂₈H₃₆ClN₃O₇S₂之分析計算值：C,53.77；H,5.80；N,6.71.

實測值：C,53.26；H,5.8；N,6.63.

實例264 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯基-4-(4-甲基六氫吡 -1-基羰基氧基)]苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照關於實例4製備所述之程序，及適當起始物質之取代而製成。

物理數據如下：MS：[M+H]⁺ 685.

對C₃₀H₃₈ClN₄O₇之分析計算值：C,52.59；H,5.59；N,8.18.

實測值：C,52.09；H,5.48；N,7.77.

實例265 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-3-氯基-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)]苯丙胺酸異丙酯之合成

物理數據如下： MS：[M+H]⁺ 580.

對C₂₇H₃₄ClN₃O₇S˙0.5H₂O之分析計算值：C,55.04；H,6.00；N,7.13.

實測值：C,55.06；H,5.71；N,6.93.

實例266 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯-4-(4-(2'-吡啶基)-六氫吡 -1-基羰基氧基)]苯丙胺酸異丙酯之合成

物理數據如下：MS：[M+H]⁺ 748.

對C₃₄H₃₉ClFN₅O₇S₂之分析計算值：C,54.57；H,5.25；N,9.3.

實測值：C,54.26；H,5.10；N,9.07.

實例267 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-3-氯-4-(4-(2'-吡啶基)-六氫吡 -1-基羰基氧基)]苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例4製備所述之程序，及適當起始物質之取代而製成，熔點80-86℃。

物理數據如下：MS：[M+H]⁺ 762.

對C₃₅H₄₁ClFN₅O₇S₂之分析計算值：C,55.14；H,5.42；N,9.19.

實測值：C,54.67；H,5.40；N,8.69.

實例268 N-(4-硝基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4- (N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

物理數據如下：對C₂₆H₃₂N₄O₉S之分析計算值：C,54.16；H,5.59；N,9.72.

實測值：C,53.69；H,5.24；N,9.52.

實例269 N-(4-胺基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係使用方法4中所述之程序，製自實例268之產物。

物理數據如下：對C₂₆H₃₄N₄O₇S之分析計算值：C,57.13；H,6.27；N,10.25.

實測值：C,56.30；H,6.12；N,10.05.

實例270 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照關於實例82製備所述之程序，及適當起始物質之取代而製成。

物理數據如下：對C₂₉H₃₇N₃O₇S₂之分析計算值：C,57.69；H,6.18；N,6.96.

實測值：C,57.36；H,5.99；N,6.76.

實例271 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-苯基胺甲醯基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ 8.62(s,1H)；8.11(d,1H)；7.73(d,2H)；7.45(m,4H)；7.26(m,3H)；7.04(m,2H)；6.95(m,1H)；6.25(d,1H)；4.90(m,1H)；4.50(m,1H)；4.11(m,1H)；3.6(br,4H)；3.4(br,4H)；3.10(m,2H)；3.00(m,1H)；2.40(s,3H)；1.60(m,3H)；1.40(m,1H)；1.18(d,3H)；1.12(d,3H).

IR(KBr，公分^-1)3400-3500(br),2950,2900,1725,1650,1540,1450,1240,1210,1000,760,675,580,540.

MS((+)ESI,m/z(%))706(100[M+H]⁺).

對C₃₆H₄₃N₅O₈S.0.35EtOAc之分析計算值：C,60.98；H,6.27；N,9.51.

實測值：C,50.31；H,6.16；N,9.33.

實例272 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(4-苯基胺甲醯基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法7中所述之程序，製自實例271之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ 12.8(s,1H)；8.62(s,1H)；8.11(d,1H)；7.73(d,2H),7.45(m,4H)；7.26(m,3H)；7.04(m,2H)；6.95(m,1H)；6.25(d,1H)；4.50(m,1H)；4.11(m,1H)；3.6(br,4H)；3.4(br,4H)； 3.10(m,2H)；3.00(m,1H)；2.40(s,3H)；1.60(m,3H)；1.40(m,1H).

IR(KBr，公分^-1)3400,1725,1650,1540,1450,1240,1210,1000,760,675,580,540.

MS((-)ESI,m/z(%))662(100[M-H]⁺).

實例273 N-(1-正-丁基吡唑-4-磺醯基)-L-(5,5-二甲基)硫脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照關於實例137製備所述之程序，及適當起始物質之取代而製成。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 7.89(s,1H),7.83(s,1H),7.21(d,2H),7.06(d,1H),7.02(d,2H),5.04(七重峰，1H),4.89-4.82(m,1H),4.57(d,1H),4.41(d,1H),4.16(t,2H),3.78(s,1H),3.14(dd,1H),3.06(dd,1H),3.09(s,3H),3.00(s,3H),1.85(六重峰，2H),1.36-1.23(m,2H),1.27(s,3H),1.24(d,3H),1.21(d,3H),1.16(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ 170.4,168.3,154.9,150.7,139.2,131.8,130.3,121.8,117.0,73.8,69.6,54.8,53.2,52.7,50.6,37.7,36.6,36.3,31.8,28.9,24.0,21.6,21.5,19.4,13.3.

實例274 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(吡啶-4-基羰基)六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ 8.69(dd,2H),8.28(d,1H)；7.71(d,2H)；7.43(m,4H)；7.26(d,2H)；7.04(d,2H)；4.86(m,1H)；4.42(m,1H)；4.05(m,1H)；3.4-3.8(brm,9H)；3.05(m,3H)；2.40(s,3H)；1.60(m,3H)；1.40(m,1H)；1.18(d,3H)；1.15(d,3H).

IR(KBr，公分^-1)3400,1725,1650,1510,1200,1160,1100,1010,650,600,550.

MS((+)ESI,m/z(%))692(100[M+H]⁺).

對C₃₅H₄₁N₅O₉S.0.75H₂O之分析計算值：C,59.60；H,6.07；N,9.93

實測值：C,59.45；H,5.86；N,9.88.

實例275 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-4-酮基脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例164之產物。

物理數據如下：MS[(-)ESI][M-H])516.

實例276 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-反式-4-羥脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例165之產物。

物理數據如下：MS[(-)ESI][M-H])518.

實例277 N-(4-氰基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照關於實例2製備所述之程序，及適當起始物質之取代而製成，熔點166-167℃。

實例278 N-(4-胺基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例107之產物。

物理數據如下：對C₂₃H₂₈N₄O₇S之分析計算值：C,47.34；H,4.84；N9.60.

實測值：C,47.57；H,5.20；N,8.75.

實例279 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-4-酮基脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

使乙腈(3毫升)冷卻至-40℃(CH₃CN/乾冰)。添加氯化草醯(0.10毫升)。使N-(甲苯-4-磺醯基)-L-4-羥脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯(300毫克)與無水DMSO(0.008毫升)溶於乙腈(4毫升)中，並添加至上述溶液中。將反應物於-40℃及乾燥條件下攪拌半小時。將三乙胺(0.33毫升)添加至溶液中。於5分鐘後，移除乾冰浴。將反應物於室溫下攪拌1小時。在真空中蒸發溶劑，並添加醋酸乙酯(15毫升)。將混合物以水洗滌(3x)，然後以鹽水洗滌。以MgSO₄ 使溶液脫水乾燥。在真空中蒸發溶劑，並將殘留物於矽膠管柱上沖洗，而得150毫克標題化合物，熔點84-85℃。

實例280 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-[3-(羥甲基)六氫吡啶-1-基羰基氧基]苯丙胺酸之合成

標題化合物係按照關於實例4製備所述之程序，及適當起始物質之取代而製成，熔點84-85℃。

實例281 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(4,4-二氟)脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

物理數據如下：MS：[(+)ESI],[M+NH₄]⁺ 599.

實例282 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(4,4-二氟)脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法7中所述之程序，製自實例281之產物。

物理數據如下：MS：[(+)ESI],[M+NH₄]557.

實例283 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-(4-苯甲醯基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ 8.27(d,1H)；7.69(d,2H)；7.45(m,7H)；7.249d,2H)；7.02(d,2H)；4.86(m,1H)；4.42(m,1H)；4.07(m,1H)；3.65(br s,4H)；3.45(br s,4H)；3.35(m,1H)；3.05(m,3H)；2.38(s,3H)；1.60(m,3H)；1.40(m,1H)；1.18(d,3H)；1.11(d,3H).

IR(KBr，公分^-1)3400,1725,1675,1625,1510,1425,1350,1250,1175,1110,1010,700,660,590,550.

MS((+)ESI,m/z(%))708(100[M+NH₂]⁺).

對C₃₆H₄₂N₄O₈S.0.5H₂O之分析計算值：C,61.79；H,6.19；N,8.01.

實測值：C,61.64；H,6.10；N,7.72.

實例284 N-(1-甲基-1H-咪唑-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

胺基甲酸酯係經由將1-甲基咪唑-4-磺醯基-Pro-Try-iPr酯以氯甲酸4-硝基苯酯處理，接著添加二甲胺(使三乙胺、二氯甲烷0℃，於室溫下攪拌過夜)而製成。使粗產物藉急驟式層析純化(矽膠，95：3：2 EtOAc：EtOH；Et₃N)，接著自EtOAc再結晶。獲得白色固體，熔點162-164℃(8.7克，66%)。

物理數據如下：對C₂₄H₃₃N₅O₇S之分析計算值：C,53.82；H,6.21；N,13.08.

實測值：C,53.47；H,6.13；N,12.96.

實例286 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例285之產物，熔點116-118℃。

實例287 N-(4-氰基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照關於實例4製備所述之程序，及適當起始物質之取代而製成，熔點70-71℃。

實例288 N-(4-甲脒基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸甲酯之合成

使甲醇(無水)冷卻至0℃。使HCl在溶液中起泡15分鐘，以製成飽和溶液。添加實例277，並將反應混合物於0℃下攪拌30分鐘，然後在室溫下24小時。蒸發溶劑。添加甲醇中之NH₃(2M，5毫升)。將反應物於室溫下攪拌24小時。蒸發溶劑。使殘留物在CH₃CN：H₂O(20：80)中藉逆相HPLC純化。於12.45分鐘之滯留時間下，將產物分離，並凍乾，提供標題化合物。

NMR數據如下：¹H NMR(在DMSO中)多重峰，在1.47-1.55ppm(1H),1.63-1.72ppm(3H)，單重峰，在2.87ppm(3H)，單重峰，在3.02ppm(3H)，多重峰，在3.05-3.10ppm(2H)，多重峰，在3.17-3.22ppm(1H)，多重峰，在3.37-3.42ppm(1H)，單重峰，在3.62ppm(3H)，多重峰，在4.21-4.23ppm(1H)，四重峰，在4.48-4.56ppm(1H)，二重峰，在7.00-7.03ppm(2H)，二重峰，在7.23-7.26ppm(2H)，寬廣吸收峰，在7.20-7.50ppm，雙重峰，在8.02-8.03ppm(4H)，二重峰，在8.48-8.52ppm(1H).

實例289 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-4-羥脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

標題化合物係按照關於實例4製備所述之程序，及適當起始物質之取代而製成，熔點80-82℃。

實例290 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-4-羥脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

使N-(甲苯-4-磺醯基)-L-4-羥脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯(160毫克)溶於甲酸(7毫升)中。將反應物於室溫下攪拌6小時。蒸發溶劑，並使殘留物在20：80CH₃CN/水中，使用逆相HPLC純化。於5.85分鐘之滯留時間下，獲得50毫克標題化合物，熔點170-172℃。

實例291 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-(4-苯甲醯基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例283之產物。

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ 12.8(s,1H)；8.27(d,1H)；7.69(d,2H)；7.45(m,7H)；7.24(d,2H)；7.02(d,2H)；4.42(m,1H)；4.07(m,1H) ；3.65(br s,4H)；3.45(br s,4H)；3.35(m,1H)；3.05(m,3H)；2.38(s,3H)；1.60(m,3H)；1.40(m,1H).

IR(KBr，公分^-1)3400,1725,1675,1625,1510,1425,1350,1260,1175,1110,1010,700,660,590,550.

MS((+)ESI,m/z(%))666(100[M+NH₄]⁺).

對C₃₃H₃₆N₄O₈S.0.66H₂O之分析計算值：C,60.00；H,5.69；N,8.48

實測值：C,60.36；H,5.70；N,7.81.

實例292 N-(4-甲脒基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸甲酯之合成

標題化合物係按照關於實例287與288製備所述之程序製成。

物理數據如下：MS：[(+)ESI][M+H]604.

實例293 N-(3-氟基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基羰氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自實例166之產物，熔點82-83℃。

實例294 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-[N-甲基-N-(2-(N'-甲基-N'-甲苯磺醯基-胺基)乙基)胺甲醯基氧基]苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ 8.27(d,1H)；7.71(d,2H)；7.69(d,2H)；7.40(m,4H)；7.24(d,2H)；6.99(d,2H)；4.86(m,1H)；4.43(m,1H)；4.06(m,1H)；3.51(m,1H)；3.2-3.35(m,3H)；2.9-3.2(重疊m,7H)；2.67(d,3H)；2.38(s,6H)；1.60(m,3H)；1.40(m,1H)；1.20(d,3H)；1.15(d,3H).

IR(KBr，公分^-1)3400,2975,2950,1725,1680,1510,1450,1400,1280,1225,1150,1110,800,730,675,575,550.

MS((+)ESI,m/z(%))760(100[M+NH₄]⁺).

對C₃₆H₄₆N₄O₉S₂之分析計算值：C,58.20；H,6.24；N,7.54.

實測值：C,57.90；H,6.30；N,7.34.

實例295 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-[N-(2-(N'-苯基胺基羰基氧基)乙基)胺甲醯基氧基)]苯丙胺酸異丙酯之合成

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,400MHz)：δ 9.67(s,1H)；8.27(d,1H)；7.72(d,2H)；7.47(d,2H)；7.42(d,2H)；7.24(m,4H)；6.98(m,3H)；4.87(m,1H)；4.45(m,1H)；4.18(m,2H)；4.05(m,1H)；3.4(m,3H)；3.05(m,3H)2.40(s,3H)；1.6(m,3H)；1.40(m,1H)；1.2(d,3H)；1.15(d,3H).

IR(KBr，公分^-1)3350,2950,1725,1675,1600,1550,1500,1325,1200,1150,1100,650,575,525.

MS((+)ESI,m/z(%))698(100[M+NH₄]⁺)

對C₃₄H₄₀N₄O₉S.0.21 EtOAc.0.5H₂O之分析計算值：C,59.08；H,6.07；N,7.91.

實測值：C,59.08；H,6.02；N,7.80.

實例296 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-4-(反式-羥基)脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸異丙酯之合成

標題化合物係按照實例2中所述之程序，及適當起始物質之取代而製成。

物理數據如下：MS：[(+)ESI],[M+NH₄]583.

實例297 N-(4-氟基苯磺醯基)-L-4-(反式-羥基)脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

物理數據如下：MS：[(+)ESI],[M+NH₄]597.

實例298 N-(4-甲脒基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法5中所述之程序，製自實例288之產物，熔點130-132℃。

實例299 六氫吡 -1,4-二羧酸雙-{4-[(2S)-2-第三-丁氧羰基-2- ((4R)-5,5-二甲基-3-(甲苯-4-磺醯基)噻唑啶-4-羧醯胺基)乙基]苯基}酯之合成

標題化合物係按照實例4中所述之程序製成，惟使用0.5當量之六氫吡。

物理數據如下：對C₅₈H₇₄N₆O₁₄S₄之分析計算值：C,57.69；H,6.18；N,6.96.

實測值：C,58.01；H,6.07；N,6.68.

實例300 六氫吡 -1,4-二羧酸雙-{4-[(2S)-2-羧基-2-((4R)-5,5-二甲基-3-(甲苯-4-磺醯基)噻唑啶-4-羧醯胺基)乙基]苯基}酯之合成

標題化合物係藉由得自實例299之二-第三-丁酯，以甲酸之水解作用製成，獲得白色泡沫物(300毫克，定量)。

物理數據如下：對C₅₀H₅₈N₆O₁₄S₄之分析計算值：C,54.83；H,5.34；N,7.67

實測值：C,55.10；H,5.57；N,7.37.

藉由上述方法製成之其他式I與Ia化合物，係包括下表5實例301-370中所提出者。

此外，表5中之實例319,324,325,332,333,334,335及349係如下述作為舉例：

實例319 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(4-羥基)脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

使起始N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(4-羥基)脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯(300毫克)溶於甲酸(15毫升)中。將反應物於室溫下攪拌72小時。蒸發溶劑，並使用HPLC逆相20-80% CH₃CN/水使殘留物純化。於10.75分鐘之滯留時間下，獲得82毫克標題化合物，熔點：128-130℃。

實例324 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(4-酮基)脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

使起始N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(4-酮基)脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯(130毫克)溶於甲酸(7毫升)中。將反應物於室溫下攪拌6小時。在真空中蒸發溶劑，而得150毫克所要之產物，熔點：111-112℃。

實例325 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(4-酮基)脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡 -1-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

使起始N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(4-酮基)脯胺醯基-L-4-(4-甲基六氫吡-1-基羰基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯(150毫克)溶於甲酸(7毫升)中。將反應物於室溫下攪拌6小時。在真空中蒸發溶劑，並使用HPLC逆相20-80% CH₃CH/水使殘留物純化。滯留時間為10.34分鐘。使產物凍乾，而產生82毫克標題化合物，熔點：99-101℃。

實例332 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(4-甲烷磺醯氧基)脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯之合成

使起始N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(4-羥基)脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯(300毫克)與氯化甲基磺醯於0℃下，在冰浴中，溶於THF(7毫升)中。添加三乙胺(0.21毫升)。10分鐘後，移除冰浴。將反應混合物於室溫下攪拌24小時。添加醋酸乙酯(20毫升)。將混合物以檸檬酸(5%，20毫升，2x)洗滌，並以飽和NaHCO₃溶液(20毫升)，然後以鹽水洗滌。使溶液以MgSO₄脫水乾燥。蒸發溶劑，並於矽膠管柱上沖洗殘留物。在真空中蒸發溶劑，而得300毫克所要之產物，熔點：73-74℃。

實例333 N-(4-胺基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

將起始N-(4-胺基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸甲酯(300毫克)與LiOH溶液(2M，0.6毫升)添加至甲醇(6毫升)中。將反應物於室溫下攪拌7小時。在真空中蒸發溶劑，並使用HPLC逆相20-80% CH₃CN/水使殘留物純化。於12.11分鐘之滯留時間下，獲得27毫克所要之產物，熔點：130-132℃。

實例334 N-(4-胺基羰基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

將起始N-(4-胺基羰基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸甲酯(300毫克)與LiOH溶液(2M，0.5毫升)添加至甲醇(6毫升)中。將反應物於室溫下攪拌8小時。在真空中蒸發溶劑，並使用HPLC逆相20-80% CH₃CN/水使殘留物純化。於12.69分鐘之滯留時間下，獲得20毫克所要之產物，熔點：123-125℃。

實例335 N-(4-甲脒基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸之合成

將起始N-(4-甲脒基苯磺醯基)-L-脯胺醯基-L-4-(硫代嗎福啉-4-基羰基氧基)苯丙胺酸甲酯(300毫克)與LiOH溶液(2M，0.5毫升)添加至甲醇(6毫升)中。將反應物於室溫下攪拌8小時。在真空中蒸發溶劑，並使用HPLC逆相20-80% CH₃CN/水使殘留物純化。於11.78分鐘之滯留時間下，獲得25毫克所要之產物，熔點：123-125℃。

實例349 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(4-甲烷磺醯氧基)脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸之合成

使起始N-(甲苯-4-磺醯基)-L-(4-甲烷磺醯氧基)脯胺醯基-L-4-(N,N-二甲基胺甲醯基氧基)苯丙胺酸第三-丁酯(200毫克)溶於甲酸(5毫升)中。將反應混合物於室溫下攪拌6小時。在真空中蒸發溶劑，提供所要之產物(195毫克)，熔點：83-84℃ 。

實例371 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-4-(α-甲基苄氧基)-L-苯丙胺酸之合成

使N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-酪胺酸甲酯(785毫克，1.89毫莫耳)在室溫下溶於DMF(20毫升)中。於其中，添加K₂CO₃(1.1當量，281毫克)與1-溴基乙苯(1.1當量，284微升)。將反應物於室溫下攪拌12小時。添加醋酸乙酯(100毫升)，並將有機層以鹽水(5 x 50毫升)洗滌數次。使有機層以MgSO₄脫水乾燥。於減壓下過濾與蒸發溶劑後，分離油。使粗製物質於矽膠上藉溶離純化(EtOAc/己烷(1：4))。將所要之物質分離，32%產率(330毫克，0.6毫莫耳)。然後，於室溫下以MeOH：H₂O(1：1)(15毫升)中之NaOH(1.1當量，27毫克)處理4小時後，使甲酯(330毫克.0.6毫莫耳)轉化成其相應之酸。添加EtOAc以及水。收集水層，並以1N HCl酸化至pH 2.5，且以EtOAc再萃取。使有機層以MgSO₄脫水乾燥。於減壓下過濾與蒸發溶劑後，分離泡沫物，定量產量。

NMR數據如下：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)：δ=7.71(bd,2H),7.34(m,7H),7.20(m,1H),7.01(m,2H),6.80(d,2H,J=8.37Hz),5.27(m,1H),4.75(m,1H),4.04(m,1H),3.23-2.93(m,4H),2.42(s,3H),1.85(m,1H),1.60(d,3H,J=6.09Hz),1.36-1.26(m,3H).

¹³C NMR(75MHz,CDCl₃)：δ=174.74,172.22,157.53,145.00,143.77,133.42,130.76,130.58,129.14,128.60,128.48,127.94,126.15,116.57,76.39, 62.73,53.90,50.09,37.09,25.07,24.52,22.17.

質譜：(FAB)537(M+H).

實例372 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-4-(2-羧基苯氧基)-L-苯丙胺酸之合成

於0℃下，將N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-L-酪胺酸甲酯(2.14克，5.16毫莫耳)添加至油中之氫化鈉60%(1.1當量，228毫克)在二甲苯(50毫升)中之懸浮液內。將反應混合物攪拌5分鐘，並添加溴化亞銅硫化二甲烷複合物(1.4當量，1.48克)。將反應混合物於23℃下攪拌0.5小時。於其中，添加2-碘基苯甲酸鈉(1.5當量，8.06毫莫耳)，並使反應混合物回流12小時。添加EtOAc(100毫升)，並將有機層以NH₄Cl、10% HCl及鹽水洗滌，然後以MgSO₄脫水乾燥。使粗製物質於管柱層析(矽膠)上，以CHCl₃：MeOH(9：1)溶離，並分離，為油狀物。經由於室溫下以NaOH(1.1當量)在MeOH：H₂O(1：1)中處理4小時，而製成酸。分離二酸，為泡沫物。

NMR數據如下：¹H NMR(300MHz,CDCl₃)：δ=7.71(m,2H),7.29(m,4H),7.19(m,4H),6.72(m,1H),4.84(m,1H),4.13(m,1H),3.39(m,1H),3.11(m,3H),2.43(s,3H),1.89(m,1H),1.48(m,3H).

¹³C NMR(75MHz,CDCl₃)：δ=172.67,157.84,155.89,155.04,145.17,133.61,133.19,133.08,131.69,131.02,130.64,128.42,127.87,124.24,120.04,119.61,116.12,62.81,50.31,37.28,30.69,24.81,22.15.

質譜：(FAB)553(M+H).

實例373 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-O-(苄基)-L-酪胺酸之合成

將N-(甲苯-4-磺醯基)-L-Pro-OH以(COCl)₂與DMF在CH₂Cl₂中處理，於蒸發後，獲得N-(甲苯-4-磺醯基)-1-Pro-Cl。將此產物以L-Tyr(Bn)-OH與NaOH在THF與H₂O中處理，於酸化，萃取，以MgSO₄脫水乾燥及蒸發後，獲得標題化合物，為透明油。

NMR數據如下：¹H NMR(DMSO-d₆,300MHz)：δ=8.04(d,J=8.2,1H),7.70(d,J=8.1,2H),7.42-7.21(m,6H),7.15(d,J=8.5,2H),6.90(d,J=8.5,2H),5.04(s,2H),4.49-4.42(m,1H),4.13-4.09(m,1H),3.33-3.27(m,2H),3.10-2.89(m,3H),2.38(s,3H),1.60-1.35(m,4H).

¹³C NMR(DMSO-d₆,75MHz)：δ=172.63,170.8,157.0,143.6,137.2,133.8,130.3,129.8,129.4,128.9,128.4,127.6,125.3,114.4,69.1,61.3,53.4,49.0,35.8,30.4,23.8,21.0.

質譜：(+FAB,3-硝基苄醇)523(M+H).

實例374 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-4-(1-H,2-酮基-3-甲基四氫嘧啶-1-基)-L-苯丙胺酸之合成

標題化合物係使用方法11中所述之程序，製自其相應之第三-丁酯。

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ=7.73(d,2H),7.58(d,1H),7.34(d,2H),7.21(d,2H),7.17(d,2H),4.79(q,1H),4.15-4.11(m,1H),3.68-3.63(m,2H),3.48-3.39(m,3H),3.27(dd,1H),3.17(dd,1H),3.15-3.07(m,1H),2.99(s,3H),2.43(s,3H), 2.16-2.08(m,2H),2.00-1.98(m,1H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=173.4,172.2,164.2,156.4,144.4,142.5,134.1,133.0,130.2,130.0,127.9,126.2,62.1,53.4,49.5,48.9,47.9,36.5,35.9,30.2,24.2,22.0,21.4.

實例375 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-4-(2-甲氧苯基)-L-苯丙胺酸之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CD₃OD)：δ=7.70(m,2H),7.36(m,4H),7.22(m,4H),6.98(m,2H),4.75(m,1H),4.10(m,1H),3.71(s,3H),3.29(m,2H),3.11(m,2H),2.39(s,3H),1.75(m,1H),1.53(m,3H).

¹³C NMR(CD₃OD)：δ=174.4,174.2,158.1,145.9,138.9,136.7,135.1,131.2,130.9,130.8,130.2,129.9,129.1,122.0,112.6,63.3,55.9,54.6,50.5,37.9,31.5,25.2,21.4.

實例376 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-4-(2-甲氧苯基)-L-苯丙胺酸之合成

NMR數據如下：¹H NMR(CDCl₃)：δ 8.41(d,1H),8.21(s,1H),8.03(d,1H),7.98(s,1H),7.74(d,2H),7.39(d,1H),7.33(d,2H),4.72-4.68(m,1H),4.17-4.13(m,1H), 3.54-3.34(m,3H),3.20-3.12(m,1H),2.82(s,6H)m2.43(s,3H),2.09-2.04(m,1H),1.79-1.59(m,3H).

¹³C NMR(CDCl₃)：δ=173.7,171.8,154.5,147.2,144.4,137.8,135,5,133.2,130.1,127.9,126.4,62.2,53.0,49.5,38.5,36.0,30.3,24.4,21.4.

實例377 N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-4-(2,4,5-三酮基-3-(3-氯苯基)-四氫咪唑-1-基)-L-苯丙胺酸苄酯之合成

化合物係經由將N-(甲苯-4-磺醯基)-L-脯胺醯基-4-[(3-氯苯基脲基)-四氫咪唑-1-基]-L-苯丙胺酸異丙酯以氯化草醯在二氯甲烷中處理而製成。使粗產物藉急驟式層析純化(矽膠，3：2己烷：EtOAc)，而得白色固體(0.410克，50%)。

MS((+)ESI,m/z(%)746(100[M+H]+)(746/748 1Cl)

實例378 N-(苯基-磺醯基)-D-脯胺醯基-1-4-(2,6-二甲氧基苯基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係經由使2,6-二甲氧基苯基二羥基硼烷與4'-碘苯基丙胺酸衍生物偶合而製成，以提供二甲氧基聯苯基丙胺酸，譬如標題化合物，按照Hagmann等人，Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters,2001；11(20)：2709-2713；Kamenecka等人，Bioorganic & Mediicinal Chemistry Letters,2002；12(16)：2205-2208；及Doherty等人,Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters,2003；13(11)：1891-1895中所概述之程序。

實例379 N-(3,5-二氯苯基-磺醯基)-D-脯胺醯基-L-4-[4-(甲基羰基胺基丁 基)-2,5-二酮基-四氫咪唑-1-基]苯丙胺酸之合成

標題化合物係按照WO 01/54690中所概述之程序製成。

實例380 N-(2,6-二氯苯基-羰基)-L-4-(2,6-二甲氧基苯基)苯丙胺酸之合成

標題化合物係經由使2,6-二甲氧基苯基二羥基硼烷與4'-碘苯基丙胺酸衍生物偶合而製成，以提供二甲氧基聯苯基丙胺酸，譬如標題化合物，按照WO 99/36393與Sircar等人，生物有機與醫藥化學，2002；10(6)：2051-2066中所概述之程序。

實例381 N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡 -4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯之合成 氯化3-吡啶磺醯

標題化合物之自由態鹼可藉由已公告之程序，製自3-吡啶磺酸(Aldrich)：Corey等人，J.Org.Chem.1989,54(2)：389。或者，標題化合物之鹽酸鹽可藉由已公告之程序，製自3-吡啶磺酸(Aldrich)：Crowell等人，J.Med.Chem.1989,32(11)：2436；Karaman等人，J.Am.Chem.Soc.1992,114(12)：4889。

L-3,3-二甲基-4-硫脯胺酸

標題化合物可藉由已公告之程序，製自L-青黴胺(Aldrich)：Samanen等人，J.Med.Chem.1989,32(2)：466；Nagasawa等人，J.Med.Chem.1984,27(5)：591。

N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺酸

pH=7.4之緩衝劑係經由使磷酸氫二鈉(43.2克，0.304莫耳)與磷酸二氫鉀(11.8克，0.0870莫耳)溶於H₂O中而製成，獲得體積1.0升。於L-3,3-二甲基-4-硫脯胺酸(25.4克，0.157莫耳)在700毫升pH=7.4緩衝劑之0℃溶液中，添加氯化3-吡啶磺醯(28.0克，0.157莫耳)在300毫升CH₂Cl₂中之溶液，並攪拌。將混合物攪拌24小時，同時溫熱至室溫，並藉由添加3M H₂SO₄酸化至pH=2，使黃色固體沉澱。藉過濾兩相而分離黃色固體，並將CH₂Cl₂層分離，及蒸發，而得另外之黃色固體。將合併之黃色固體在700毫升H₂O中攪拌1小時，以使結合之無機鹽溶解，並再一次藉過濾分離。將兩水層合併，並以EtOAc(3 x 500毫升)萃取。將EtOAc層以鹽水洗滌，以硫酸鈉處理，過濾，及蒸發，而得另外之黃色固體。將黃色固體之所有液份合併，而得36.1克(76%)N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺酸。

N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-L-酪胺酸異丙酯

將1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(4.83克，0.0253莫耳)添加至已溶於125毫升DMF中之N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺酸(6.37克，0.0211莫耳)、L-酪胺酸異丙酯鹽酸鹽(5.48克，0.0211莫耳)、1-羥基苯并三唑(5.69克，0.0421莫耳)及4-甲基嗎福啉(2.32毫升，2.13克，0.0211莫耳)之0℃溶液內。將混合物攪拌16小時，同時溫熱至室溫，並添加200毫升EtOAc與200毫升H₂O。振盪混合物，並分離水層，且將有機層以0.2M檸檬酸(2 x 100毫升)、H₂O(2 x 100毫升)、飽和NaHCO₃(2 x 100毫升)、H₂O(2x 100毫升)及鹽水(2 x 100毫升)洗滌。將有機層以硫酸鈉處理，過濾，及蒸發，而得9.40克(86%)N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-L-酪胺酸異丙酯，為黃色泡沫物。

¹H NMR(CDCl₃,300MHz)δ 9.08(bs,1H),8.86(bs,1H),8.16(dt,J_d=8.1Hz,J_t=2.0Hz,1H),7.51(dd,J=8.0Hz,J=4.6),7.07(d,J=8.1Hz,2H),6.87(d,J=8.1Hz,1H),6.74(d,J=8.1Hz,2H),5.96(bs,1H),5.06(七重峰，J=6.3,1H),4.83(dt,J_d=6.0Hz,J_t=7.8Hz,1H),4.57(d,J=9.3Hz,1H),4.46(d,J=9.3Hz,1H),3.91(s,1H),3.09(dd,J=14.1Hz,J=5.4Hz,1H),2.98(dd,J=14.1Hz,J=7.5Hz,1H),1.25(t,J=6.6Hz,6H),1.18(s,3H),1.13(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃,75MHz)δ 170.5,168.0,155.2,154.2,148.6,135.9,130.7,127.6,124.1,115.5,105.5,73.7,69.7,54.7,53.4,50.5,37.5,29.2,23.7,21.62,21.55.

N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡 -4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯

使N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-L-酪胺酸異丙酯(1.51克，2.89毫莫耳)與氯甲酸4-硝基苯酯(0.58克，2.89毫莫耳)溶於40毫升CH₂Cl₂中，並將溶液攪拌15分鐘，同時在4：1 H₂O/EtOH之-15℃漿液與乾冰中冷卻。於此溶液中添加Et₃N(1.00毫升，0.73克，7.23莫耳)，並攪拌2分鐘，且將溶液於-15℃下攪拌1小時。於所形成之懸浮液中，添加1-甲基六氫吡(0.32毫升，0.289克，2.89毫莫耳)，並攪拌1分鐘，且將混合物攪拌16小時，同時溫熱至室溫。將混合物以40毫升己烷稀釋，並以10%(w/v)K₂CO₃(4 x 50毫升)洗滌，直到水層中未見及任何黃色(4-硝基酚)為止。將有機層以鹽水(75毫升)洗滌，以硫酸鈉處理，過濾，及蒸發，而得淡黃色殘留物。使殘留物於矽膠上藉層析純化，使用70：25：5 CH₂Cl₂/EtOAc/EtOH，而得1.53克(84%)N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-1-酪胺酸異丙酯，為無色泡沫物。

¹H NMR(CDCl₃,300MHz)δ 9.09(d,J=2.1Hz,1H),8.87(dd,J=4.9Hz,J=1.6Hz,1H),8.16(dt,J_d=8.4Hz,J_t=2.0Hz,1H),7.51(dd,J=8.2Hz,J=4.9Hz,1H),7.21(d,J=8.4Hz,2H),7.02(d,J=8.4Hz,2H),6.89(d,J=7.8Hz,1H),5.05(七重峰，J=6.4Hz,1H),4.84(q,J=7.0Hz,1H),6.59(d,J=9.9Hz,1H),4.47(d,J=9.9Hz,1H),3.90(s,1H),3.67(bs,2H),3.58(bs,2H),3.18-3.03(m,2H),2.45(t,J=10.2Hz,4H),2.34(s,3H),1.26(d,J=6.0Hz,3H),1.23(d,J=6.6Hz,3H),1.20(s,3H),1.17(s,3H).

¹³C NMR(CDCl₃,75MHz)δ 170.4,167.8,154.3,153.7,150.6,148.7,135.8,133.1,133.0,130.4,133.0,121.8,73.7,69.7,54.8,54.6,54.5,50.5,46.1,44.3,43.8,37.6,29.1,23.8,21.6,21.5.

9.2.藥劑之活體內與活體外篩檢實例A 測定候選化合物對VLA-4結合之活體外檢測

活體外檢測係用以評估候選化合物對α ₄ β ₁整合素之結合。在此項檢測中結合之化合物可藉習用檢測(例如競爭性結合檢測)，用以評估生物試樣中之VCAM-1含量。此項檢測係對低達約1nM之IC₅₀值敏感。

α ₄ β ₁整合素之活性係藉由可溶性VCAM-1與Jurkat細胞之交互作用度量(例如美國培養物類型收集處編號TIB 152、TIB 153及CRL 8163)，該Jurkat細胞為一種表現高含量α ₄ β ₁整合素之人類T-細胞系。VCAM-1係以α ₄ β ₁整合素依賴性方式與細胞表面交互作用(Yednock等人，J.Bio.Chem.,1995,270：28740)。

重組可溶性VCAM-1係以嵌合融合蛋白質表現，其含有VCAM-1之七個胞外功能部位在N-末端上，及人類IgG₁重鏈恒定區域在C-末端上。VCAM-1融合蛋白質係藉由Yednock同前文出處所述之方式製成及純化。

使Jurkat細胞在補充10%牛胎兒血清、青黴素、鏈黴素及麩醯胺之RPMI 1640中生長，按Yednock同前文出處所述。

使Jurkat細胞以1.5mM MnCl₂與5微克/毫升15/7抗體於冰上培養30分鐘。Mn⁺²係使受體活化，以提高配位體結合，而15/7為單株抗體，其會辨識α ₄ β ₁整合素之已活化/配位體所佔據之構形，並使分子閉鎖至此構形中，藉以使VCAM-1/α ₄ β ₁整合素交互作用安定化。Yednock等人，同前文出處。類似15/7抗體之抗體已由其他研究人員製成(Luque等人，1996,J.Bio.Chem.,271：11067)，且可使用於此項檢測中。

然後，使細胞於室溫下，以候選化合物培養30分鐘，在涵蓋從66微克/毫升至0.01微克/毫升之不同濃度範圍中，使用標準5-點連續稀釋。接著，將15微升可溶性重組VCAM-1融合蛋白質添加至Jurkat細胞中，並於冰上培養30分鐘(Yednock等人，同前文出處)。

然後，將細胞洗滌兩次，並在1：200下，再懸浮於PE-共軛山羊F(ab')₂抗-老鼠IgG Fc(Immunotech,Westbrook,ME)中，及在冰上，於黑暗中培養30分鐘。將細胞洗滌兩次，並使用標準螢光活化之細胞選取器("FACS")分析法分析，按Yednock等人，同前文出處中所述。

具有IC₅₀低於約15μM之化合物具有對α ₄ β ₁之結合親和力。

當在此項檢測中測試時，實例1-381之各化合物(或酯化合物之相應羧酸類，意即前體藥物)具有IC₅₀為15μM或較小。

實例B 測定候選化合物對α ₄ β ₁ 結合之活體外飽和檢測

下文係描述活體外檢測，以在下一實例中所述之實驗性自身免疫腦脊髓炎("EAE")模式中，或在其他活體內模式中，測定化合物為活性所必須之血漿含量。

將對數生長Jurkat細胞洗滌，並再懸浮於含有20微克/毫升15/7抗體(描述於上文實例中)之正常動物血漿中。

將Jurkat細胞稀釋兩倍至無論是正常血漿試樣中，其含有已知候選化合物量，在涵蓋從66微克/毫升至0.01微克/毫升之不同濃度範圍中，使用標準12點連續稀釋，提供標準曲線，或者稀釋至得自經候選化合物治療之動物末梢血液之血漿試樣中。

然後，使細胞於室溫下培養30分鐘，以磷酸鹽緩衝之鹽水("PBS")洗滌兩次，其含有2%牛胎兒血清與各1mM之氯化鈣及氯化鎂(檢測培養基)，以移除未結合之15/7抗體。

接著，使細胞曝露至藻紅蛋白-共軛山羊F(ab')₂抗-老鼠IgG Fc(Immunotech,Westbrook,ME)，其已被吸附以提供任何非專一性交叉反應性，其方式是與得自被研究之動物種類之5%血清在1：200下共培養，並在黑暗中，於4℃下培養30分鐘。

將細胞以檢測培養基洗滌兩次，並再懸浮於其中。然後，將其以標準螢光活化之細胞選取器分析法分析，按Yednock等人，J.Bio.Chem.,1995,270：28740中所述。

接著，將數據以螢光對劑量作圖，例如以正常劑量-回應方式。造成曲線上方高平坦區之劑量程度，係表示在活體內模式中為獲得功效所必須之含量。

此項檢測亦可用以測定為使其他整合素譬如α ₉ β ₁整合素之結合位置飽和所必須之血漿含量，該整合素係為與α ₄ β ₁最密切相關之整合素(Palmer等人，1993,J.Cell Bio.,123：1289)。

因此，上述檢測可使用已以會使α ₉整合素編碼之cDNA轉移感染之人類結腸癌細胞系SW 480(ATTC #CCL228)(Yokosaki等人,1994,J.Bio.Chem.,269：26691)，替代Jurkat細胞進行，以度量α ₉ β ₁整合素之結合。作為對照組，可使用會表現其他α與β ₁亞單位之SW 480細胞。

使用此項檢測，在活體內模式中為對α ₄ β ₁與α ₉ β ₁獲得功效所必須之血漿含量，已經針對在此項檢測中測試之本發明化合物建立。因此，本發明之另一方面係針對一種在哺乳動物病患中治療疾病之方法，該疾病係藉由α ₉ β ₁所媒介，且此方法包括對該病患投予治療上有效量之本發明化合物。此種化合物較佳係在上述醫藥組合物中投藥。有效每日服藥係依病患之年齡、體重、狀態而定，該因素可容易地由負責臨床師確定。但是，在一項較佳具體實施例中，此等化合物係每天投予約20至500微克/公斤。

實例1 實驗過敏性腦脊髓炎之臨床逆轉， 使用N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]- O-[1-甲基六氫吡 -4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯

實驗過敏性腦脊髓炎為中樞神經系統(CNS)以實驗方式引致之細胞所媒介之自身免疫炎性病症，其係充作多發性硬化之動物模式。浸潤物典型上包含淋巴細胞與巨噬細胞，惟有時會發現多形核細胞(Traugott等人，1985 Cell.Immunol.91：240-54；Traugott等人，1986 Cell.Immunol.99：395-410)。EAE係在容易感染之動物中，經由注射完整Freund氏佐劑(CFA)中之均化CNS抗原而被主動地引致。EAE亦可藉由得自主動地免疫之動物之經活化髓磷脂專一T細胞而被動地轉移(Paterson,1960,J.Exp.Med.111：119-36)。對疾病之易感染性不僅依所使用之引致抗原與動物種類而定，其亦受動物之年齡、性別及商業來源所影嚮(Tsunoda等人，1996,J.Neuropath.Exp.Neurol.55：673-86)。

正如同在MS中，臨床EAE可以數種不同形式作為表象。在一些模式中，動物會發展急性單相病症，接著自然恢復。但是，在其他模式中，動物將發展慢性復發疾病，其特徵為反覆臨床發作，伴隨著間歇性之恢復時期(Tsunoda等人，1996)。EAE之慢性漸進形式可在成年Hartley天竺鼠中，經由以佐劑中之完整CNS之免疫作用而引致(Wisniewski等人，1983,J.Neuropath.& Exp.Neurol.42：243-55；Karlik等人，1986,Neurology 36：1112-4；Karlik等人，1993,Magn.Reson.Med.30：326-31)，其中動物顯示臨床徵候之漸進惡化，而無恢復或緩解時期。於組織學上，脫髓鞘作用之大匯合斑係伴隨連續單核CNS浸潤。

物質與方法：動物與EAE之引致. 將雌性Hartley天竺鼠(Charles River Canada,St.Constant,Quebec)保持在受控光線環境中，並無限制地允許食物與水。EAE係在50隻動物(200-250克)中，經由項背，皮內注射0.6毫升經均化同基因CNS組織與完整Freund氏佐劑之1：1混合物，及另外10毫克/毫升結核分枝桿菌(Difco)而引致。動物係每日由盲檢觀察者進行評估，使用如下述之4-點臨床等級：0=無異常；0.5=連續一天以上之體重減輕；1=失調與不良修正反射；2=後肢輕癱、尿失禁、糞便阻塞；3=麻痺；4=末端麻痺。

治療服用法. N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯為一種小分子，其係以高親和力結合至人類與天竺鼠4整合素(抑制細胞黏連至VCAM之IC₅₀值=1nM)。咸認在動物中之疾病到免疫後40天時為慢性，且因此治療期係在此時開始，並持續10、20、30或40天。動物係接受無論是0.5毫升鹽水(為N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯之媒劑；n=20)或30毫克/公斤N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯(n=25)，一天兩次。隨著服藥使用法，N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯之受體飽和含量(>10nm)係一直保持著。動物之一個亞組係接受N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯，歷經30天，然後抽離處理，並使動物再保持10天(n=5)。所有處理均以皮下方式投予。

動物犧牲與組織學分析. 於第40天，使未經處理之慢性 EAE動物(n=5)犧牲，另外為非EAE對照組(n=5)。在各10天處理間隔之後，將得自各組之5隻動物犧牲(0.25毫升戊巴比妥鈉)收集血液試樣，以供FACS分析(參閱下文)，並將腦部與脊髓解剖及切片。使用三個脊髓切片，相應於索之腰、胸及頸區域。將腦部切成五份橫向切片。將前三份近端切片合併在一個區塊中，而將最後兩份末梢切片合併在另一區塊中。使組織固定在10%福馬林中，並包埋於石蠟中。將五個毫微米切片以蘇木素-曙紅(H-E)或單鉻-R-西恩林(cyanlin)(SCR)染色，並由盲檢觀察者評估四種類之每一個：(1)腦膜發炎，(2)血管周圍浸潤，(3)腦炎或(4)脊髓炎與脫髓鞘作用(表6)。合併之病理學評分係表示得自每隻動物之全部5份CNS切片之總評分(來自20種可能性)。

為定量在脊髓中所觀察到之異常，故將以H-E染色之切片分成12個代表性派餡餅區域。於各區域中，使用Sigma掃描Pro影像分析軟體(SPSS公司)，計數0.12平方毫米視場內之細胞數，並對整個脊髓計算全部12個區域中合併之平均細胞數(每隻動物36個視場)。應注意的是，因所有細胞核均被計數，故細胞數除了浸潤物以外，可包含神經元與神經膠質細胞。因此，在非EAE動物中之細胞計數係充作基線。

定量反轉錄作用-PCR：IL-2,IL-10,MCP-1. RNA係單離自30毫克經冷凍之天竺鼠脊髓，使用S.N.A.P.^TM(簡易核酸製劑)總RNA單離套件(Invitrogen)，根據製造者之說明書，經修改以包括第二個DNAse處理步驟，接著是於S.N.A.P.管柱上之另外純化。藉由添加第二個DNAse處理，吾人發現當使用反轉錄酶負對照組RT-PCR檢測度量時，對此等試樣與檢測係一致地不可測得DNA污染。

關於IL-2、IL-10及MCP-1之引物/探測物序列與濃度，係示於表7中，以及用於各基因之標準RNA。RT-PCR係以三份複製，使用ABI PRISM^® 7700序列偵測系統進行。50微升反應物含有10至800毫微克總RNA，且上文所示濃度下之引物與探測物係在反應緩衝劑中，其包含6.67%甘油(Amresco)；5.5mM MgCl；300μM dATP,dCTP,dGTP及dUTP；100nM探測物；1.25單位之AmpliTaq Gold^® DNA聚合酶(Applied Biosystems)；1X TagMan^®緩衝劑A(TagMan^® PCR核心試劑套件，Applied Biosystems)、20單位RNase抑制劑(Roche)；1.25單位老鼠白血病病毒(MuLV)反轉錄酶(Applied Biosystems)。RNA之反轉錄係於48℃下進行30分鐘，接著是10分鐘變性步驟，在95℃下。PCR係藉由40次熱循環進行，包括95℃歷經15秒，接著為60℃歷經1分鐘。各板包含使用列示於表7中之標準RNA之標準曲線，與兩個另外之對照試樣：1)正對照組RNA試樣，被使用於所有板上，2)非模板對照組(NTC)。

對於所示之所有數據，標準曲線之相關係數係大於0.990。對三份複製試樣之偏差係數係小於0.2。因用於標準曲線之RNA係為含有恒定但未知量之標的信息之RNA之非均質混合物，故所計算之數目是相對的。

FACS分析. 於免疫作用後80天時，自非EAE動物、鹽水處理之動物、N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯處理之動物及斷除N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯後10天之動物，收集肝燐脂化血液試樣。對全部程序，係將所有試樣保持於4℃下。使150微升試樣曝露至原始抗體歷經30分鐘，洗滌兩次，然後於5%天竺鼠血清(Beckman Coulter#PN EM055 1)存在下，以PE-共軛山羊抗-老鼠IgG Fc培養。使紅血球以Becton-Dickinson溶解溶液溶解，並將試樣於FACScan流量細胞計數器(Becton Dickinson,MountainView,CA)上檢查，於不同細胞群集上藉由光散射選通。

統計分析. 統計分析係使用SigmaStat v2軟體(SPSS公司)進行。臨床評分係使用Mann Whitney分級總和試驗評估，同時以雙向ANOVA評估病理學評分。定量異常係使用Kruskal-Wallis ANOVA於分級上作比較。於各情況中，p<0.05被認為是有意義的。線性回歸係於脊髓中之平均細胞計數上進行。

結果：臨床逆轉. 動物係於免疫後第9天開始顯示疾病之臨床跡象，並持續至第40天。此時，疾病被認為是慢性的。治療期係於第40天開始，且持續最少10天至最多40天。雖然接受鹽水之動物顯示持續之臨床進展直到實驗結束為止，但以N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療之動物，係在最初治療後2-3天，開始顯示臨床逆轉起始(圖1A)。於治療開始之前，在具有經建立之臨床評分為2之數隻動物中，N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯會逆轉此輕癱，且動物能夠在整個治療期間使用其後肢(意即迴轉至臨床評分1)。依治療延續時間而定，一些先前已顯示疾病跡象之動物，當接受N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯時，顯示完全不含疾病。在治療期之過程中，N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療動物之平均臨床評分，係顯著地低於鹽水處理之動物(p<0.001，Mann Whitney分級總和試驗)。

N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療組，有小的短暫增加，集中於免疫後第54天(圖1A)。兩隻動物在臨床徵候之程度上顯示中等波動；其係從完全不存在臨床跡象(評分0)擺動至極輕微失調(評分1)。但是，動物均未脫離治療，因吾人先前已使用對α ₄整合素之抗體觀察，其中動物停止對治療之回應，完全是由於天竺鼠排斥老鼠或人化抗體所致。動物使用N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯之長時期治療，無附屬問題(譬如注射位置發炎)。

在動物之一個亞組中，N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯係被投藥30天，然後移除，並使動物保持在鹽水注射下，歷經實驗之最後10天。一旦斷除N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯，臨床進展即恢復，類似接受鹽水歷經治療延續期間之動物之臨床過程(圖1B)。在免疫後70天與80天之間，N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療後動物之平均臨床評分，係顯著地大於在整個治療期間接受N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯之動物(p<0.05，Mann Whitney分級總和試驗)。概略言之，N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯係成功地投藥高達40天，而無任何不利副作用，且其係保持與慢性漸進EAE有關聯之臨床缺失之逆轉。

結果：病理學異常之逆轉. 病理學異常係在H-E與SCR染色之腦部與脊髓切片上評估。於圖2中，左邊之面板為以SCR染色之切片，其係將髓磷脂染成藍色(x40)。右邊之面板為高放大倍率(x250)之H-E染色切片，取自相應SCR相片之背側中間區域(圖2)。圖2面板A與B中所示之切片，係取自正常天竺鼠，並顯示既未發炎亦無脫髓鞘作用。到免疫後第40天時，慢性動物具有廣泛之腦膜與血管周圍發炎，以及脫髓鞘作用之一或多個大軟膜下斑點(圖2C)。浸潤細胞之密度係顯著地增加(圖2D)。隨著疾病進展，所觀察到之病理學異常變得較極端。於免疫後第60天，接受20天鹽水處理之對照動物具有嚴重腦膜浸潤，大面積之脊髓炎，及局部脫髓鞘作用(圖2E、F)。到免疫後第80天時，實質上整個脊髓切片均被浸潤並脫髓鞘，包括一些灰色物質區域之侵入(圖2I、J)。對照上而言，接受N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療20天之動物，在免疫後第60天時具有遠為較小之脫髓鞘區域，並有少量腦膜與血管周圍細胞侵入(圖2G、H)。於N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療40天後，病理學恢復仍然較大；動物顯示幾乎沒有腦膜與血管周圍浸潤，且髓磷脂仍然完整(圖2K、L)。

得自每隻動物之總共五個區塊係由盲檢觀察者評分，且合併之病理學評分係表示得自四個種類每一個之全部五個切片之總評分(腦膜發炎、血管周圍浸潤、脊髓炎及脫髓鞘作用；圖3)。在治療期之過程中，接受N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯之動物，在全部四個種類之平均病理學評分上，相對於鹽水處理動物，係顯示顯著降低(p<0.001，雙向ANOVA)。當移除N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯，並使動物再保持10天而未治療時，在全部四種類中之平均合併病理學評分係顯著地高於持續接受小分子歷經治療延續期間之動物(圖3；p<0.05，Kruskal Wallis ANOVA在使用SNK試驗之分級上)。

結果：病理學異常之定量. 上述以定性方式評分之病理學逆轉，係在脊髓中以定量方式確認。平均細胞數係計算自腰、胸及頸索之H-E染色切片上之12個代表性0.12平方毫米區域，並合併以檢視整個脊髓(圖4)。所有未經治療之EAE動物係比非EAE動物具有顯著較高細胞計數，這表示細胞浸潤正如預期地在疾病期間增加(p<0.001，雙向ANOVA)。在低達10天之N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療後，發現細胞數顯著降低，並保持經過治療之第20、30及40天，相對於鹽水處理之動物(p<0.001，雙向ANOVA)。再者，以N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療20、30或40天之動物之平均細胞計數，係顯著地低於慢性對照動物(p<0.05，Kruskal Wallis ANOVA，在使用SNK試驗之分級上)，且在N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療40天後，脊髓中之平均細胞計數與非EAE動物並無不同。此等平均之線性回歸，証實脊髓中炎性細胞之漸進損失(r²=0.90)。自此直線之斜率，吾人可計算細胞損失之速率為8個細胞/平方毫米/天。在移除N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯後，於保持在鹽水下再歷經10天之動物中，再一次發現平均細胞數之顯著增加(p<0.05，ANOVA在使用SNK試驗之分級上)。

結果：定量PCR. 定量PCR係於脊髓之腰部切片上進行，以評估IL-2、IL-10及MCP-1之含量，且此等結果係讚許已經討論之病理學逆轉。在鹽水處理之動物中，IL-2之量係增加經過疾病之慢性期。對照上而言，接受N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯之動物幾乎未具有任何可測得之IL-2 RNA。在斷除N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯之後，脊髓中之IL-2量係回復至相當於經鹽水處理動物之程度。關於IL-10與MCP-1係見及類似結果。細胞活素RNA含量上之顯著降低，在治療期間係為顯著的，接著在移除抑制劑後，回復至高含量(圖5)。

結果：FACS分析. 當藉FACS分析測定時，EAE動物以N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯之治療，與經鹽水處理之動物比較，會在循環中造成大為增加之α ₄整合素鮮明淋巴細胞之百分比。此等結果指出被末梢免疫作用活化之淋巴細胞，於 N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯存在下，未能進入CNS中，並蓄積在循環中(圖6與7A)。與此指出一致的是，當移除N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯時，循環中之α ₄整合素鮮明淋巴細胞之百分比係回復至經鹽水處理之程度，且CNS發炎恢復(圖7A)。沒有可辨識之α ₄整合素低與高單細胞之亞群集；但是，在EAE動物中，α ₄整合素於循環單細胞上之一般表現卻增加(圖7B)。此種增加並不受N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯所影嚮，這進一步指出末梢免疫反應不會被治療所抑制。

實例2 在慢性EAE中，α ₄ 整合素長期抑制後之自發性髓鞘再形成

經由抑制α-4 β-1(α ₄ β ₁)整合素(VLA-4)而被阻斷之免疫細胞流入中樞神經系統中之模式係經研究，以測定炎性細胞之存在是否會壓抑實驗性自身免疫腦脊髓炎中之自發性髓磷脂修復。已麻痺之天竺鼠係在EAE之已進展脫髓鞘階段中，以α ₄ β ₁專一抑制劑N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療(Piraino等人，J.Neuroimmunol.2002,131：147-159)，且吾人發現：(1)於40天治療後，87%斑點顯示髓鞘再形成之証據；(2)髓磷脂修復係發生在50%總損害區域中；及(3)50%動物恢復運動神經功能。在經媒劑治療之動物中，運動神經功能無顯著修復或增益。此等結果顯示CNS發炎之長期抑制，於標的髓磷脂修復不存在下，可幫助自發性髓鞘再形成之機制。

方法

動物與疾病引致. 將雌性Hartley天竺鼠(200-250克，Charles River Canada,St.Constant,Quebec)保持在光亮與溫度控制環境中，並無限制地允許食物與水。EAE係經由項背皮內注射0.6毫升經均化同基因CNS組織與完整Freund氏佐劑(Difco,Detroit,MI)之1：1混合物，及另外10毫克/毫升結核分枝桿菌(Difco)而引致。於第9天，動物開始顯示疾病之臨床跡象，且到免疫後第40天時被認為是慢性。將動物稱重，並每日由盲檢觀察者評估，使用如下述之4-點臨床等級：0-無異常；0.5-連續一天以上體重減輕；1-失調與不良修正反射；2-後肢輕癱、尿失禁、糞便阻塞；3-麻痺；及4-末端麻痺。

治療標準. 動物係以疾病嚴重性為基礎經選擇，以供治療，根據兩種標準：(1)動物必須已在疾病之慢性階段(意即在免疫後至少40天)；與(2)動物必須在開始治療期之前，已達到臨床評分2(意即後肢輕癱)。在吾人過去與此慢性漸進EAE模式有關之經驗中，具有臨床評分為2之95%慢性動物，係顯示脊髓中之溫和至嚴重脫髓鞘作用，涵蓋從脫髓鞘作用之數個小病灶至一或多個大匯合斑點之範圍。於治療期間開始之前，固守此等標準係使髓磷脂損失之可能性達最佳化。

治療服用法. 符合兩種治療標準之動物，係間隔10、20、30或40天治療。N-[N-(3-吡啶碸基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯為一種小分子(分子量~500Da)，其係以高親和力結合至人類與天竺鼠α ₄整合素(於100%血清存在下，抑制細胞黏連至高密度VCAM-1之IC₅₀=1-10nm)。動物係在治療期間，每日兩次接受無論是鹽水(n=16)或N-[N-(3-吡啶碸基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯(30毫克/公斤，n=12)。在此服藥使用法下，N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯之受體飽和含量(>10nm)係一直保持著。兩種治療藥品係以皮下方式投藥。此外，動物群係在接受臨床評分2之數天內犧牲，以充作基線"d0"對照組。

組織收集與處理. 在犧牲(0.25毫升戊巴比妥鈉)之後，將動物除血，並將CNS解剖及切片。使用三個脊髓切片，相應於索之腰、胸及頸區域。將組織固定在10%福馬林中，並包埋於石蠟中。將五個微米橫截面以單鉻-R-花青苷染色，其係為定性髓磷脂染料，並藉由光學顯微鏡檢查法檢視脫髓鞘作用(藍染色不存在)與髓鞘再形成(損傷內之淡藍染色區域)之証據。

自各腰、胸及頸切片，將得自末梢端之5毫米脊髓片塊於4℃下固定在2.5%戊二醛中。然後，將得自各橫截面中央之0.5毫米薄片分成背側與腹面二等分。將此等薄片後固定在四氧化鋨中，並包埋於環氧樹脂中。以甲苯胺藍染色之一微米橫截面係藉由光學顯微鏡檢查法檢視脫髓鞘作用與髓鞘再形成之証據。將含有損傷之區域進一步切片，供電子顯微鏡術用，並將薄切片以過錳酸鉀與含乙醇醋酸鈾硫染色，及在Philips EM 300顯微鏡下檢視。

組織學分析. 脊髓病理學係使用由McGavern等人，J.Neurosci.Res.1999,58：492-504所修改之方法定量。得自每隻動物12個橫截面之影像係在40x放大倍率下，使用Nikon Coolpix 995數位照像機拍攝。Sigma掃描Pro影像分析軟體(SPSS公司)係用以計算各橫截面內之總損傷面積與髓鞘再形成損傷面積兩者(以任意單位)。將此等面積加總，以產生對於整個脊髓之總估計，且髓鞘再形成面積係以總損傷面積之百分比表示。

結果與討論. 在此項研究中之主要目的，係為測定免疫細胞潛移至CNS中之長期抑制是否允許現存脊髓損傷之自發性髓鞘再形成。EAE之天竺鼠模式在以全CNS勻漿免疫之後，係顯示未緩和之漸進疾病(Wisniewski等人，J.Neuropath.Exp.Neurol.1983,42：243-255；Karlik等人，1986,Neurology 36：1112-4；Karlik等人，1993,Magn.Res.Med.30：326-331)。急性麻痺係在大約10天後開始，到第20天時，具有顯著之脫髓鞘作用(Karlik等人，1986,Neurology 36：1112-4；Karlik等人，1993,Magn.Res.Med.30：326-331)。40天後，顯示完全兩側後肢麻痺之95%動物，在整個腦幹與脊髓中，具有中等至嚴重之脫髓鞘作用。重要而應指出的是，在此疾病階段下之動物，未曾復發或緩解，其亦未自發性地恢復。在現行研究中，治療只有在動物抵達此階段時才引發-免疫後至少40天，且顯示完全兩側後肢麻痺(臨床評分2)。然後，動物係接受無論是α ₄ β ₁整合素之小分子抑制劑N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯，或媒劑(鹽水)，間隔10、20、30或40天。圖8顯示單鉻-R-花青苷染色之脊髓切片之代表性光顯微照片(圖8A-F)。在對照組(治療之"0"天)中，廣泛脫髓鞘作用係顯見於每隻動物中；損傷典型上係缺乏完整髓磷脂，顯示以含有經吞噬髓磷脂碎屑在其前緣之泡沫狀巨噬細胞之稠密免疫細胞浸潤(圖8A、8B)。在最短治療間隔(10天)中，經鹽水與N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯處理之動物，係持續顯示脊髓中之大面積脫髓鞘作用，與最少髓磷脂蒼白之証據。對照上而言，在20天N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療後，許多損傷顯示擴散之淡藍染色，類似古典上所描述之陰影斑點，其係為MS病患中髓鞘再形成之指標(圖8D)。在鹽水對照動物內之斑點，仍然保持缺乏髓磷脂(圖8C)。到治療第40天時，發現兩治療組之間，於整個髓磷脂外觀上之顯著差異。在經N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療之動物中，大部份損傷係以陰影斑點呈現(圖8F)，而在對照動物中之損傷係顯示極少(若含有時)藍色染色(圖8E)。

為更良好之界定組織學外觀上之改變，故以較高解析度檢視組織試樣，藉由光與電子顯微鏡術(EM)兩者(圖9)。在經30天鹽水處理之動物中，甲苯胺藍染色之半薄切片顯示正常髓磷脂區域(圖9A)，以及嚴重脫髓鞘作用與軸索損失區域(圖9B)。在此兩種區域間之小過渡區帶含有相對較小口徑之薄而具鞘之軸索(圖9B)，其可表示企圖修復之最近脫髓鞘軸索。亦有遭受Wallerian變性之軸索之不斷証據，在損傷及在正常髓鞘區域兩者內。在接受N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯之動物中(圖9C)，薄髓鞘軸索區域係大為擴張，且軸索傾向於具有較大口徑，這表示較一般之修復回應，經常在整個損傷區域中。電子顯微鏡術係確認此觀察。大口徑軸索周圍之濃厚髓磷脂包覆物，為"正常"壓實髓磷脂之代表，係示於圖9D中。在接受40天鹽水處理之動物中，損傷區域顯示髓磷脂缺乏，其中大軸索係完全被脫髓鞘(圖9E)。對照上而言，以N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療係造成多重薄髓磷脂層環繞大口徑軸索之外觀，代表髓鞘再形成之狀態(圖9F)。因此，顯示N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯之長期投藥，允許具有慢性漸進EAE動物之脊髓中自發性髓鞘再形成。

為定量N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯之作用，故測定顯示髓鞘再形成証據之斑點百分比。將顯示髓磷脂蒼白之損傷數目除以經由其整個長度取自每隻動物之脊髓橫截面內之損傷總數(圖10)(關於此方法，可參閱Warrington等人，2000,Proc.Nat'l Acad.Sci.USA 97：6820-5)。鹽水處理20、30及40天後，顯示髓鞘再形成之斑點之平均百分比，係介於10與20%之間；在此等動物中，隨著時間，於髓磷脂蒼白之發生上，沒有顯著改變(圖10A)。對照上而言，在N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3- 二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯投藥20天後，脊髓中陰影斑點之頻率係被增加，超過經鹽水處理之動物，達到68%；30與40天後，發生率個別為77%與87%(p<0.001，2-向ANOVA，使用Tukey試驗)。此等數值係顯著地高於治療引發時(第0天與第10天)(p<0.05，2-向ANOVA，使用Tukey試驗)，這顯示化合物係以時間依存方式增加髓鞘再形成之發生率。由於顯示髓鞘再形成証據之斑點百分比在過去20天並未顯著地增加’故顯示髓鞘再形成係大部份以同步方式，在治療第10天與第20天之間引發(圖10A)。

亦度量脊髓中斑點髓鞘再形成之整體程度。圖10B係顯示代表性脊髓切片，在腹角中具有大脫髓鞘損傷。對每隻動物測定總損傷面積，其方式是將所有脊髓切片內之所有損傷描圖，並將面積加總。同樣地，經由將髓磷脂蒼白區域描圖，度量總髓鞘再形成面積。圖10C-F係描繪總損傷面積對髓鞘再形成之百分比。在經鹽水之處理動物中，損傷極少顯示任何修復之証據，具有涵蓋2與11%間之範圍之平均，且在40天治療期間內無顯著差異(圖10C-F)。對照上而言，在N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療20、30或40天後，經確認之大部份損傷顯示可變程度之髓鞘再形成，範圍從2至100%，在大部份損傷中(髓鞘再形成之平均面積為大約50%)(圖10D-5)(p<0.001，2-向ANOVA，使用Tukey試驗)。因此，雖然在整個40天之治療期中，損傷係顯見於所有動物中，但N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3- 二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯會增加髓鞘再形成之發生率與百分比。再者，在經N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療之動物中，髓鞘再形成之証據係與所發現之運動神經功能恢復一致。治療之起始點為臨床評分2，其係表示完全兩側後肢麻痺。在50%經N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療之動物中，麻痺係被逆轉至臨床評分1，表示動物恢復顯著使用其後肢(p<0.05，Mann Whitney分級總和試驗)。在對照動物中未曾發現功能性恢復。

自發性髓鞘再形成，藉由定義，為特別設計以刺激髓鞘再形成之治療介入不存在下之髓磷脂修復(Miller等人，1995,Microsc.Res.Tech.32：230-245)。自發性修復係充分考証於涉及當使用卡普利酮(cuprizone)、溶血卵磷脂或溴化乙錠時之急性毒性傷害之脫髓鞘作用動物模式中(Dubois-Dalcq等人，1990,Bioessays 12：569-576)，及在病毒腦炎模式中(Miller等人，1995,Microsc.Res.Tech.32：230-245)，或在具有寬廣免疫抑制或免疫細胞耗乏之模式中(Rodriguez等人，1992,Neurol.42：348-57；與Murray等人，2001,Brain 124：1403-16)。在此等情況中，髓鞘再形成可於數週內完成。N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯為一種小分子，其會干擾免疫細胞上之α ₄ β ₁整合素活性，且係被設計成疾病限制劑，以預防腦部之炎性細胞浸潤，而非作為直接促進髓磷脂修復之藥劑(Piraino等人，2002,J.Neuroimmunol.131： 147-159)。由於CP-EAE之天竺鼠模式為非偶發疾病，其不會正常地顯示修復，故發現疾病限制劑可獨自促進自發性髓鞘再形成，是重要的。此等結果顯示炎性環境本身會壓抑或壓倒正常修復機制，且最後可能導致其耗盡。雖然在經鹽水處理之動物中有髓鞘再形成之微觀証據，但其不會達到顯著程度，且未曾藉由臨床緩解而達成。因此，顯示經由壓抑免疫細胞浸潤，N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯會防止新形成髓磷脂之攻擊，並允許修復。

CNS之經引致髓鞘再形成，事實上已藉由多種方式達成，包括髓磷脂糖脂(Raine等人，1978,Acta.Neuropathol.(Berl).43：43-53；Traugott等人，1982,J.Neurol.Sci.56：65-73)、CNS專一抗血清、純免疫球蛋白(Warrington等人，2001,J.Allergy Clin.Immunol.108：121-5)或生長因子(Yao等人，1995,Proc.Nat'l Acad.Sci.USA 92：6190-4)之投藥。近來亦已証實，血清衍生之人類單株抗體(IgM)可經過寡樹突膠質細胞之直接刺激，而顯著地促進髓鞘再形成(Warrington等人，2000,Proc.Nat'l Acad.Sci.USA 97：6820-6825；Bieber等人，2002,Glia 37：241-9；Mitsunaga等人，2002,FASEB J.16：1325-1327)。胚胎與成年神經幹細胞兩者之移植，亦已在缺乏模式中，導致寡樹突膠質細胞之產生與新髓磷脂合成(Halfpenny等人,2002,Lancet Neurol.1：31-40)。雖然此等研究已証實CNS能夠修復，但重要而應指出的是，治療上所引致之髓鞘再形成不會停止疾病前進。例如，Notch途徑近來已牽連作為MS中髓鞘形成之抑制劑，反映出寡樹突膠質細胞、神經膠質細胞及前進中發炎間之交互作用(John等人，2002,Nat.Med.8：1115-21)。在炎性病症譬如MS中，CNS仍然易受攻擊傷害。

髓鞘再形成抗體，譬如那塔利諸馬(natalizumab)，會在EAE中，經由抑制新炎性細胞之其他方式連續流入，而逆轉疾病病理學。已進入CNS中之細胞，係被正常細胞凋零機制清除(Hyduk等人，1998,J.Neuropath.Exp.Neurol.57：602-614)。與此等觀察一致，N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯已被証實，隨著增加治療延續時間，係漸進地降低免疫細胞浸潤物及其有關聯之炎性介體(Piraino等人，2002,J.Neuroimmunol.131：147-159)。在關於復發MS之受控試驗中，那塔利諸馬証實，歷經六個月期間之治療，當與使用安慰劑治療之病患比較時，會導致較少炎性腦部損傷與較少復發。治療係在試驗期間良好地被容許，且在經那塔利諸馬治療之病患中，有經改良之安寧認知(Miller等人，2003,New Engl.J.Med.348：15-23)。因此，藥劑，譬如抗-α ₄整合素抗體療法，與化合物，譬如N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯，將不僅充作MS中之疾病限制因素，亦作為許可CNS修復之藥劑。

雖然本發明已參考其特殊具體實施例加以描述，但熟諳此藝者應明瞭的是，可在未偏離本發明之真實精神與範圍下施行各種改變，且可替代使用等效事物。此外，可施行許多修正，以使特定狀況、物質、物質組合物、方法、一或多個處理步驟適應本發明之目的、精神及範圍。所有此種修正均意欲在本發明之範圍內。

實例3 人化21.6抗體之建構

嵌合輕與重鏈係經由使老鼠21.6 V_L與V_H區域之PCR無性繁殖cDNA連結至人類恒定區域建構而成。老鼠cDNA序列之5'-與3'-末端係使用經特殊設計之PCR引物修改。5'-末端PCR-引物(表8)，其係雜化至使前導物序列之開始處編碼之DNA序列，其係意欲產生對有效轉譯為必須之DNA序列(Kozak,J.Mol.Biol.196：947-950(1987))，並產生HindIII限制位置，供無性繁殖至表現載體中。3'-末端引物(表8)，其係雜化至對J區域之末端編碼之DNA序列，其係意欲產生對接合至恒定區域為必須之DNA序列，並產生BamHI位置，供無性繁殖至表現載體中。PCR放大之產物係以HindIII與BamHI消化，無性繁殖至pUC19載體中，並定序以確認在PCR放大期間未發生任何錯誤。然後，使經修改之老鼠21.6可變區域次代無性繁殖至含有無論是人類κ或γ-1恒定區域之哺乳動物細胞表現載體中。

表8

將老鼠21.6可變區域之結構製作模型. 建立老鼠21.6抗體之V_L與V_H區域之分子模型。此模型係建立於Silicon圖解IRIS 4D工作站上，於UNIX工作系統下操作，並使用分子模製包裝QUANTA(Polygen公司，USA)。老鼠21.6 V_L區域之FR結構，係以人類Bence-Jones免疫球蛋白RE1之解出結構為基礎(Epp等人，Biochemistry 14：4943-4952(1975))。老鼠21.6 V_H區域之FR結構係以老鼠抗體Gloop2之解出結構為基礎。將FR中之相同殘基保留；使用在QUANTA內之設備取代非相同殘基。老鼠21.6 V_L區域之CDR1與CDR2係個別經確認為屬於正則結構組2與1(Chothia等人，J.Mol.Biol.196：901-917(1987))。由於RE1之CDR1與CDR2屬於相同正則組，故老鼠21.6 V_L區域之CDR1與CDR2係於RE1之CDR1與CDR2結構上製作模型。老鼠21.6 V_L區域之CDR3並未顯示相應於任何關於V_L區域CDR3之正則結構組。但是，資料庫搜尋顯示，老鼠21.6 V_L區域中之CDR3係類似老鼠HyHEL-5 V_L區域中之CDR3(Sheriff等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 84：8075-8079(1987))。因此，老鼠21.6 V_L區域之CDR3係於老鼠 HyHEL-5 V_L區域中之CDR3結構上製作模型。老鼠21.6 V_H區域之CDR1與CDR2係個別經確認為屬於正則結構組1與2。老鼠21.6 V_H區域之CDR1係於Gloop2 V_H區域之CDR1上製作模型，其係密切地相似關於V_H區域CDR1之正則第1組之成員。老鼠21.6 V_H區域之CDR2係於老鼠HyHEL-5之CDR2上製作模型(Sheriff等人，同前文出處)，其亦為於V_H區域CDR2之正則第2組之一員。對V_H區域之CDR3而言，沒有正則結構。但是，老鼠21.6 V_H區域中之CDR3係類似老鼠R19.9 V_H區域中之CDR3(Lascombe等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 86：607-611(1989))，並在此CDR3上製作模型，其方式是移除存在於老鼠R19.9 V_H區域之CDR3圈環頂端之額外絲胺酸殘基，並回火及精製此間隙。最後，使此模型接受最陡峭降下與結合梯度能量減到最低，使用CHARMM電位(Brooks等人，J.Comp.Chem.4：187-217(1983))，如在QUATAN中所施行者，以舒解不利原子接觸，並使凡得瓦與靜電交互作用達最佳化。

對骨架序列之再成形人類21.6可變區域之設計-同系人類抗體之選擇. 其FR顯示與老鼠21.6高百分比同一性之人類可變區域，係藉由胺基酸序列之比較而被確認。表10與11係將老鼠21.6可變區域與所有已知之老鼠可變區域，然後與所有已知之人類可變區域作比較。老鼠21.6 V_L區域係經確認為屬於老鼠κ V_L區域亞組5，如被Kabat所定義者。個別老鼠κ V_L區域係經確認具有與老鼠21.6 κ V_L區域(38C13V'CL與PC613'CL)多達93.4%之同一性。老鼠21.6 V_L區域係最類似亞組1之人類κ V_L區域，如被Kabat所定義者。個別人類κV_L區域係經確認具有與老鼠21.6 κV_L區域多達72.4%之同一性。得自最類似人類可變區域RE1之一之骨架區域(FR)，係用於再成形人類21.6 V_L區域之設計。老鼠21.6 V_H區域係經確認為屬於老鼠V_H區域亞組2c，如被Kabat所定義者。個別老鼠重鏈可變區域係經確認具有與老鼠21.6 V_H區域(17.2.25'CL與87.92.6'CL)多達93.3%之同一性。老鼠21.6 V_H區域係最類似亞組1之人類V_H區域，如被Kabat等人，如前文出處所定義者。個別人類V_H區域係經確認具有與老鼠21.6 V_H區域多達64.7%之同一性。得自最類似人類可變區域21/28'CL之一之FR係用於再成形人類21.6 V_H區域之設計。

骨架區域中胺基酸之取代

(A)輕鏈. 關於再成形人類21.6 V_L區域之設計過程中之下一步驟，是將得自老鼠21.6 V_L區域之CDR接合至得自人類RE1之FR(Palm等人，Physiol.Chem.356：167-191(1975))。於再成形人類21.6 V_L區域之第一種變型(La)中，係在人類FR中造成七個改變(表10，圖13)。在FR4中之位置104、105及107，係將得自RE1之胺基酸，以得自另一個人類κ輕鏈之較典型人類J區域胺基酸取代(Riechmann等人，Nature 332：323-327(1988))。

於FR2中之位置45，係將通常存在於RE1中之離胺酸改變成精胺酸，如在老鼠21.6 V_L區域中，於該位置上所發現者。在此位置之胺基酸殘基，於維持老鼠21.6 V_L區域之CDR2圈環上，被認為是重要的。

於FR2中之位置49，係將通常存在於RE1中之酪胺酸改變成組胺酸，如在老鼠21.6 V_L區域中，於該位置上所發現者。於老鼠21.6 V_L區域中，在此位置之組胺酸，於模型中係被發現定位在結合位置中央，且可能造成在抗體-抗原結合期間，與抗原直接接觸。

於FR3中之位置58，係將通常存在於RE1中之纈胺酸改變成異白胺酸，如在老鼠21.6 V_L區域中，於該位置上所發現者。在此位置之胺基酸殘基，在維持老鼠21.6 V_L區域之CDR2圈環上，被認為是重要的。

於FR3中之位置69，係將通常存在於RE1中之蘇胺酸改變成精胺酸，如在老鼠21.6 V_L區域中，於該位置上所發現者。於老鼠21.6 V_L區域中，在此位置之精胺酸，於模型中係被發現定位在鄰近老鼠21.6 V_L區域之CDR1圈環，且可能造成在抗體-抗原結合期間，與抗原直接接觸。

再成形人類21.6 V_L區域之第二種變型(稱為Lb)係經設計，含有如上述之相同取代，惟於RE1之FR2中，在位置49未施行改變(圖13)。

(B)重鏈. 在關於再成形人類21.6 V_H區域之設計過程中之下一步驟，係使得自老鼠21.6 V_H區域之CDR接合至得自21/28'CL之FR(Dersimonian等人，J.Immunol.139：2496-2501(1987))。於再成形人類21.6V區域之第一種變型(Ha)中，係在人類骨架區域中施行五種改變(表11，圖14)。於人類FR中之五種改變係在位置27、28、29、30及71。

在FR1中之位置27、28、29及30，係將存在於人類21/28'CL中之胺基酸改變成於老鼠21.6 V_H區域中，在此等位置上所發現之胺基酸。雖然此等位置係被稱為在FR1內(Kabat等人，如前文出處)，但位置26至30係為形成V_H區域之CDR1圈環之結構圈環之一部份。因此，可能情況是，在此等位置之胺基酸係直接涉及結合至抗原。事實上，位置27至30係為關於V_H區域之CDR1正則結構之一部份，如由Chothia等人，如前文出處所定義者。

於FR3中之位置71，存在於人類21/28'CL中之精胺酸係被改變成丙胺酸，如在老鼠21.6 V_H區域中，於該位置上所發現者。位置71係為關於V_H區域之CDR2正則結構之一部份，如由Chothia等人，如前文出處所定義者。

自此老鼠21.6可變區域之模型，顯示位置71上之丙胺酸在維持V_H區域之CDR2圈環上，是很重要的。精胺酸取代此位置上之丙胺酸，極可能瓦解CDR2圈環上之安置。

再成形人類21.6 V_H區域之第二種變型(Hb)含有上文關於變型Ha所述之五種所施行之改變，加上一種於FR2中之其他改變。

於FR2中之位置44，係將存在於人類21/28'CL中之精胺酸改變成甘胺酸，如在老鼠21.6 V_H區域中，於該位置上所發現者。以已發表關於V_L-V_H區域之填充及關於老鼠21.6可變區域模型之資訊為基礎，一般認為位置44之胺基酸殘基在V_L-V_H區域之填充上，可能是重要的。

再成形人類21.6V區域變型Hc係經設計，以製作看起來更類似人類VCAM-1之CDR3圈環。老鼠21.6抗體與人類VCAM-1兩者係結合至α ₄ β ₁整合素。抗體之V_H區域之CDR3圈環係為六種CDR圈環中最多樣性的，且一般係為抗體在抗體-抗原交互作用中之最重要單一成份(Chothia等人，如前文出處；Hoogenboom & Winter,J.Mol.Biol.227：381-388(1992)；Barbas等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89：4457-4461(1992))。若干序列類似性係在老鼠21.6 V_H區域之CDR3與人類VCAM-1之胺基酸86至94之間經確認，特別是在CDR3圈環中之YGN(酪胺酸-甘胺酸-天冬素)序列與VCAM-1中之FGN(意即苯丙胺酸-甘胺酸-天冬素)序列之間。此等序列係被認為是相關於RGD(意即，精胺酸-甘胺酸-天門冬胺酸)在各種細胞黏連事件中重要之序列(Main等人，Cell 71：671-678(1992))。因此，在CDR3中之位置98，係將存在於老鼠21.6 V_H區域中之酪胺酸改變成苯丙胺酸，如在人類VCAM-1序列中所發現者。

於FR2中之位置36之可能取代，亦被考慮。老鼠21.6 V_H鏈含有不尋常半胱胺酸殘基，在FR2中之位置36。於FR2中之此位置，在相關老鼠與人類序列中，經常為色胺酸(表11)。雖然半胱胺酸殘基對於抗體之構形經常是重要的，但老鼠21.6可變區域之模型並未指示此半胱胺酸殘基係無論是直接或間接被抗原結合所涉及，因此存在於人類21/28'CL V_H區域之FR2中之色胺酸，在人化21.6抗體之全部三種變型中，係保留未經取代。

再成形人類21.6抗體之建構.再成形人類21.6 V_L區域之第一種變型(resh21.6 VLa)係建構自重疊PCR片段，基本上如由Daugherty等人，Nucleic Acids Res.19：2471-2476(1991)所述者。如前文出處所述經修改且被插入pUC19中之老鼠21.6 V_L區域，係作為模板使用。合成四對引物，APCR1-vla1、vla2-vla3、vla4-vla5 及vla6-vla7(表9)。相鄰對係藉由至少21個鹼基重疊。APCR1引物係互補至pUC19載體。使適當引物對(0.2微莫耳)與10毫微克模板DNA及1單位AmpliTaq DNA聚合酶(Perkin Elmer Cetus)在含有10mM Tris-HCl(pH 8.3),50mM KCl,200μM dNTP及1.5mM MgCl₂之50微升PCR緩衝劑中合併。各反應係進行25個循環。於最初在94℃下熔解5分鐘後，使反應在94℃下循環1分鐘，55℃ 1分鐘，及72℃ 2分鐘，且最後在72℃下再培養10分鐘。於引物-回火與延長步驟間之激升時間為2.5分鐘。得自第一輪PCR反應之四種反應產物(A、B、C及D)係經酚萃取與乙醇沉澱。

PCR產物，A與B及C與D，係在第二輪PCR反應中接合。將PCR產物，A與B及C與D(各50毫微克)添加至50微升PCR反應(如前文所述)中，並經過如上文所述之20次循環放大，惟回火溫度係被提升至60℃。此等反應之產物係被稱為E與F。所使用之PCR引物對係個別為APCRI-vla3與vla4-vla7。PCR產物E 與F係經酚萃取與乙醇沉澱，然後在類似上述之兩步驟-PCR反應中，使用APCR1與vla7作為末端引物，藉由其自有之互補性，在第三輪PCR反應中組裝在一起。代表整個再成形人類21.6 V_L區域而包括前導物序列之完整組裝片段，係以HindIII與BamHI消化，且被無性繁殖至pUC19中，以供定序。具有正確序列之無性繁殖系係被稱為resh21.6 VLa。

建構再成形人類21.6 V_L區域之第二種變型(Lb)，其係於再成形人類21.6 V_L區域之第一種變型(La)中，藉由Kamman等人，Nucl.Acids Res.17：5404(1989)之方法，使用PCR引物，造成較少修改。合成兩組引物(表9)。各PCR反應基本上係在如上述之相同條件下進行。在第一個PCR反應中，係使用致突變引物21.6 VLb2以破壞SryI位置(Thr-ACC-97至Thr-ACA-97)，而產生resh21.6 VLa2。然後，在第二個PCR反應中，係將致突變引物21.6 VLb1(His-49至Tyr-49)與pUC-resh21.6 VLa2一起使用，作為模板DNA。將PCR產物以SryI與BamHI切割，且次代無性繁殖於pUC-resh21.6 VLa2中，以相同限制酵素分裂。具有正確序列之無性繁殖系係被稱為pUC-resh21.6 VLb。

再成形人類21.6 V_H區域之變型"a"係使用如關於建構再成形人類21.6 V_L區域之變型"a"(表9)所述之相同PCR方法建構。將對於再成形人類425 V_H區域之變型"g"(Kettleborough等人，如前文出處)與再成形人類AUK12-20 V_H區域之變型"b"編碼之HindIII-BamHI DNA片段次代無性繁殖至pUC19載體中，個別產生pUC-resh425g與pUC-reshAUK12-20b(AUK12-20之變型"b"係藉由片段V_Ha425之PCR致突變衍生，由Kettleborough等人，如前文出處所述，及使以下胺基酸序列(SEQ ID NO.：50)編碼：QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFT SYYIHWVRQAPGQGLEWVG YIDPFNGGTSYNQKFKGKVTMTVDTSTNTAYMELSSLRSEDTAVYYCAR GGN-RFAY WGQGTLVTVSS(間隔係隔開FR與CDR區域))。

質粒pUC-resh425g與pUC-reshAUK12-20b，以及含有老鼠21.6 V_H區域而當被改質以用於建構嵌合21.6重鏈(pUC-chim21.6 V_H)時之pUC載體，係作為模板DNA使用於後續PCR反應中。PCR引物係經設計且合成以供建構再成形人類21.6 V_H區域之變型"a"(表9)。PCR產物A係使用pUC-reshAUK12-20b作為DNA模板且APCRI-vhal作為PCR引物對而獲得。PCR產物B與D係使用pUC-chim21.6 V_H作為DNA模板且vha2-vha3與vha6-APCR4個別作為PCR引物對而獲得。最後，PCR產物C係使用pUC-resh425g作為DNA模板且vla4-vla5作為PCR引物對而獲得。使最後PCR產物次代無性繁殖至pUC19中，作為Hind-BamHI片段，以供DNA定序。具有正確DNA序列之無性繁殖系係被稱為pUC-resh21.6 VHa。再成形21.6可變區域之第一種變型之DNA與胺基酸序列，係示於圖15中。

再成形人類21.6 V_H區域之其餘變型，基本上係如上文關於建構再成形人類21.6 V_L區域之變型"b"所述進行建構。合成兩組引物(表9)。對於第二種(Hb)與第三種(Hc)變型，係個別將致突變引物21.6 VHb(Arg-44至Gly-44)與21.6 VHc(Tyr-98至Phe-98)使用於PCR反應中，以pUC-resh21.6 VHa作為模板DNA。將PCR產物VHb與VHc以限制酵素切割，且次代無性繁殖於pUC載體 pUC-resh21.6 VHa中，個別作為MscI-BamHI與PstI-BamHI片段，而產生pUC-resh21.6 VHb與pUC-resh21.6 VHc。

再成形人類21.6 V_H區域之第一種變型(Ha)係以類似用於建構再成形人類21.6 V_L區域之第一種變型(La)之方式建構。但是，於此情況中，PCR引物係與三種不同模板DNA一起使用，當已經修改以供嵌合21.6重鏈表現之老鼠21.6 V_H區域，人化425 V_H區域變型"g"(Kettleborough等人，如前文出處)及人化AUK12-20變型"b" V_H區域(表9)。人化21.6重鏈可變區域之第一種變型之DNA與胺基酸序列，係示於圖16中。人化21.6 V_H區域之第二種與第三種變型(Hb與Hc)係使用PCR引物建構，以在人化21.6 V_H區域之第一種變型(Ha)中造成較少修正(表9)。

表10

實例4 腦部發炎之EAE模型

A.於EAE腦部切片中淋巴細胞結合至發炎內皮之活體外分析. 按照Yednock等人，Nature 356：63-66(1992)中所述之程序，於疾病之第5天(尾/後肢麻痺之第一天)，將腦部移離具有EAE之大白鼠。使腦部迅速地冷凍，切片，及以淋巴樣細胞懸浮液覆蓋(如上文關於腫瘤注射腦部所述之方法)。使人類 U937細胞選擇性地結合至大白鼠EAE腦部中之發炎血管。U937細胞以抗-VLA-4抗體HP2/1預處理，係完全抑制其結合至EAE腦部之相鄰切片中之發炎血管。

如表12中所示，人類U937細胞結合至EAE腦部中之發炎血管，係被抵抗VLA-4之試劑(抗-α4,HP2/1；與抗-β2,AIIB2)所抑制，但不被抵抗許多其他黏連受體之抗體所抑制。會選擇性地抑制VLA-4之纖維網蛋白(FN)-結合活性之兩種抗體，不會影嚮U937結合至EAE血管(P4G9與HP1/7)。表13顯示剛單離人類淋巴細胞與單細胞，以及剛單離大白鼠與老鼠淋巴細胞對發炎EAE血管之結合，亦選擇性地被抵抗VLA-4之抗體所抑制。檢測按前述施行，且結合程度係使用細胞之參考群集定量。

B.抗-VLA-4抗體之活體內投藥之作用. 將抗-VLA-4投予大白鼠(腹膜腔內投藥)，以測定抗體對於EAE進展之作用。對下表14，於各實驗中，係將T-細胞無性繁殖系於第0天投予。於第2天，使動物接受腹膜腔內注射PBS，所指示量之經純化抗-α ₄整合素，或所指示量之經純化對照抗體。所有抗體均為老鼠IgG₁。疾病係被定義為完全尾部或尾部與後肢麻痺。在發展疾病之動物中，麻痺係於第4或5天開始，於第5或6天達到最高峰，並接著穩定地減少。兩個額外實驗係獲得可比擬之結果。當於第3、4及7天度量時(第3天為抗體投藥後一天，且為最早展開麻痺之前一天)，白血球之循環含量與差別計數在HP2/1治療與PBS對照動物之間不能區別。整體量之HP2/1係購自AMAC；MOPC係得自Sigma；OX-1與OX-7係得自科學用之Bioproducts公司。

於第6天，自實驗2與3，將腦部移離數隻害有EAE與健康抗-α ₄整合素治療EAE大白鼠。在得自害病EAE動物之腦部，有廣泛浸潤，然而白血球不能在以抗-α ₄整合素治療之EAE大白鼠中被檢出。

實例5 其他VLA-4抗體之產生

免疫作用與篩檢擬案. TY21.6與21.12係針對人類B細胞系Ramos(得自ATCC)而引起。將已在Freund氏完整佐劑中均化之10⁷個Ramos細胞注射至Balb/c老鼠中(腹膜腔內投藥)。十四天後，以另一份10⁷個Ramos細胞(於Freund氏不完全佐劑中均化，以腹膜腔內投予)使動物加速。另外14天後，將動物以2x10⁶個活Ramos細胞注射(靜脈內投藥)。於最後加速後三天，移除脾臟，單離脾細胞，與SP/2骨髓細胞瘤融合，並覆蓋於大約2,000個井上。篩檢上層清液，關於其抑制人類B細胞系Ramos結合至經VCAM-1轉染L-細胞之能力。經VCAM-1轉染之L細胞係使用標準技術製成：藉PCR單離VCAM-1 cDNA；引物係以已發表之序列為基礎合成而得，及模板RNA係單離自TNF-刺激之人類臍靜脈內皮細胞(HUVEC)。經單離之cDNA係被轉染至老鼠L細胞，及單離會表現高含量VCAM-1信息之無性繁殖系。對黏連檢測，係將VCAM-1 L細胞覆蓋於96井板上，並使其達到匯合。U937細胞係以PKH26(Zynaxis細胞科學公司，Malvern,Pa.)螢光標識，以雜種瘤上層清液在冰上預處理30分鐘(200,000個細胞/試樣)，並添加至個別VCAM-1井。允許黏連在室溫下發生30分鐘，然後將井洗滌，以移除未結合細胞，並將其餘細胞以40微升0.1% Triton溶解。將20微升萃液於Pandex板讀取器上分析，以測定螢光程度(意即，結合細胞數目)。結合程度係藉由相對於與輸入細胞總數/井(意即200,000個U937細胞)有關聯螢光之螢光百分比測定。兩種個別雜種瘤係經確認為Ramos結合至VCAM-1之有效阻斷劑，且被安定化作為無性繁殖系。此等抗體係被稱為TY21.6與TY21.12。

測得兩種抗體會與α ₄整合素反應，因為此等抗體係自細胞表面經標識之人類淋巴細胞之溶胞產物沉澱兩種蛋白質譜帶。此等蛋白質於分子量上為150與130kD，其係個別相應於α ₄與β ₁整合素鏈之已知分子量。相同譜帶係在平行試樣中，藉由市購可得之良好特徵鑒定之抵抗人類α ₄整合素之抗體(HP2/1抗體)沉澱。未檢出其他蛋白質譜帶。此等結果指出21.6與21.12會與α ₄ β ₁整合素複合物反應。

TY21.6與21.12抗體係進一步藉由FACS分析作特徵鑒定，使用藉由間接免疫螢光法使細胞染色之標準方法。兩種抗體均會與人類B細胞系JY(其係表現α ₄整合素，但僅低含量之β ₁)反應。兩種抗體均未能與人類K562細胞或與人類嗜中性白血球(其係表現β ₁，但極低含量之α ₄整合素)反應。最後，兩種抗體均會與已使用人類α ₄ β ₁整合素轉染之老鼠L細胞(如上文關於VCAM-1轉染之L細胞所述產生，使用人類T細胞系Jurkat作為模板RNA)反應，但不會與對照轉染L細胞反應。反應性之一種相同型式係以HP2/1獲得，然而抵抗β ₁整合素之一種良好特徵鑒定抗體(AIIB2)不會與JY反應，但會與K562及嗜中性白血球反應。因此，TY21.6與TY21.12係選擇性地與α ₄整合素反應。

B. TY21.6,TY21.12及L25之功能性特徵鑒定. 全部三種抗體TY21.6,TY21.12及L-25(Clayberger等人，J.Immunol.138：1510-1514(1987))均有效地抑制人類淋巴細胞結合至TNF-刺激之大白鼠腦部EC。將原發性大白鼠腦部EC或大白鼠腦部EC無性繁殖系(上述)覆蓋於96井組織培養板上。在一些井中之EC係以TNF(如上述)刺激4-24小時。Jurkat、U937或Ramos細胞係經螢光標識(如上述)，以所指示之抗體預處理，然後添加至個別井中(200,000個細胞/井；三份井/抗體治療)。結合程度係如上文關於VCAM-196-井結合檢測所述測得。其結果係摘錄於表15中。

亦發現全部三種抗體均會抑制人類淋巴細胞結合至VCAM-1轉染之L細胞(檢測如上述)，如表16中所示。

如表17中所示，全部三種抗體均會抑制細胞結合至EAE腦部切片中之發炎血管(檢測係按前述施行)。

一些抵抗α ₄整合素之抗體(譬如HP2/4；Pulido等人，J.Biol.Chem.266：10241-10245(1991))會引致淋巴細胞自身凝集。此凝集之基礎係缺乏瞭解。在此相同報告中，係報告L25會引致淋巴細胞凝集。但是，吾人尚未能夠重現此等觀察。在本發明方面，當直接與HP2/4比較時，L25、TY21.6及21.12不會引致細胞凝集。經由將100,000個U937細胞與抗體上層清液(最後稀釋1：5)於96井組織培養板之井中(100微升最後體積/井)混合而引致凝集。允許凝集發生30分鐘至4小時，並以目視方式使用任意+/-評價系統評分，與無抗體對照組比較。其結果係示於表18中。

一些抵抗α ₄整合素之抗體會抑制被抗-α ₄整合素抗體HP2/4所引致之凝集。HP2/1、TY21.6及TY21.12會阻斷HP2/4所引致之細胞凝集，然而L25則不會。此項檢測係按上述施行，惟在添加引致凝集之抗體HP2/4(HP2/4雜種瘤上層清液之最後濃度為1：20)之前，U937細胞係以阻斷用抗體(上層清液經1：5稀釋，或純化之抗體，在5微克/毫升下)在冰上預處理30分鐘。

除了VCAM-1以外，α ₄ β ₁整合素會媒介細胞結合至FN之CS-1功能部位。一些抵抗α ₄整合素之抗體會抑制FN結合，如同關於L25、TY21.6及TY21.12之情況；全部三種抗體為與HP2/1一樣有效。此項檢測係如Pulido等人，(1991)，同前文出處中所述施行。其結果係摘錄於表20中。

本申請案係請求個別於2003年1月24日與2003年9月5日提出申請之美國臨時申請案編號60/442,713與60/500,316之利益。前述申請案與所有參考資料，頒予之專利，及其中引述之已公告專利申請案，其全部內容均併於本文供參考。

圖1A. 在N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療期間，慢性實驗自身免疫腦脊髓炎之長期逆轉。EAE係在雌性Hartley天竺鼠中，經由項背皮內注射0.6毫升經均化同基因CNS組織與完整Freund氏佐劑(CFA)之1：1混合物，伴隨著10毫克/毫升失活結核分枝桿菌而被引致。於免疫後第40天開始，使動物接受無論是鹽水(n=20，0.5毫升/天)或N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯(n=25，30毫克/公斤，2x/天)，歷經10、20、30或40天。於治療期之過程中，以N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療動物之平均臨床評分，係顯著地低於鹽水對照組(p<0.001，MannWhitney分級總和試驗)。再者，於長期N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯投藥期間未發現不利副作用，且未逃逸治療，因已於先前使用抗體觀察。

圖1B. 在移除N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯之後，回復至臨床上主動疾病。在以N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療30天後，五隻動物係再保持10天未使用小分子投藥。一旦N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯被抽離，動物即回復至疾病之臨床進展。在第70天與第80天之間，後-N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯動物之平均臨床評分，係顯著地高於在整個治療期間接受N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯之動物(p<0.05，Mann Whitney分級總和試驗)。

圖2. 在長期N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療期間之病理學恢復。面板C、E、G、I及K為單鉻-R-花青苷(SCR)染色之脊髓切片(放大倍率40X)。面板B、D、F、H、J及L顯示取自相應SCR-染色照片背側中間區域之蘇木素-曙紅(H-E)染色切片之高放大倍率(250X)。取自正常天竺鼠之此切片(2A)顯示既無發炎亦無脫髓鞘作用，面板(2B)亦然，其為相應之H-E切片。到免疫作用後第40天時，未接受治療之動物顯示廣泛腦膜發炎，及脫髓鞘作用之大的背側中間斑點(2C)。浸潤細胞在此區域(2D)中之密度，係遠高於圖2。甚至後來在疾病中，於免疫作用後第60天，經鹽水處理之動物顯示脫髓鞘作用之大軟膜下區域(2E)，具有極高密度之細胞浸潤物(2F)。對照上而言，接受20天N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療之動物，具有遠為較小之脫髓鞘作用面積(2G)，及遠為較低之細胞浸潤密度在損害區域中(2H)。在2I中之動物表示接受40天鹽水處理。實質上整個切片均被浸潤且脫髓鞘，包括一些灰色物質區域之侵入。雖然在2J中之細胞浸潤，從免疫作用後第60天起減少(參閱2F)，但其仍然遠高於2B中所見及之正常含量。但是，於N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療40天後，幾乎沒有腦膜與血管周圍發炎，且髓磷脂係顯然地保持原狀(2K)。細胞浸潤(2L)係實際上與正常動物(2B)相同。

圖3. 在N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療期間，於慢性EAE中降低病理學異常。動物係接受無論是鹽水(n=20)或N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯(n=25)，歷經10、20、30或40天。此外，動物之亞組係接受N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯歷經30天，然後抽離治療，歷經實驗之其餘10天(後-N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯組)。在犧牲之後，使腦部與脊髓固定在福馬林中，並包埋於石蠟中。將五微米切片以蘇木素-曙紅(H-E)或單鉻-R-花青苷染色，並以盲檢方式指定4-數字病理學評分，以四種類之每一個之評估為基礎：(3A)腦膜發炎，(3B)血管周圍浸潤，(3C)腦炎，及(3D)脫髓鞘作用。應注意的是，非EAE動物在所有種類中具有評分為零。於治療期之過程中，接受N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯之動物，相對於經鹽水處理之動物，於四種類之每一個中，在平均病理學評分上，係顯示顯著降低(p<0.001，2-向ANOVA)。當移除N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯，且動物再保持10天而未治療時，在全部四種類中之平均合併病理學評分，係回復至顯著地高於持續接受小分子之動物(p<0.05，Kruskal Wallis ANOVA，在使用SNK試驗之分級上)。

圖4. 以N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療減少脊髓浸潤。浸潤細胞之平均數目係在得自覆蓋整個脊髓之十二個派餡餅形區域之代表性區域中計數(參閱方法)。與非EAE動物比較，於細胞浸潤上之顯著增加，係隨著EAE之誘發而發生(δ，p<0.05；Kruskal Wallis ANOVA，於使用SNK試驗之分級上)。N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療之動物，在10、20、30或40天治療後，係比經鹽水處理之動物，具有較少細胞在脊髓中(*，p<0.001，雙向ANOVA)。再者，以N-[N-(3-吡啶磺醯基) -L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療20、30或40天之動物，比對照組(d40)EAE動物，具有顯著較低之細胞計數(，p<0.05，Kruskal Wallis ANOVA，於使用SNK試驗之分級上)。在移除N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯後，於再保持10天未使用小分子之動物中之平均細胞計數，與接受連續N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療之動物比較，係顯著增加(p<0.05，Kruskal Wallis ANOVA，於使用SNK試驗之分級上)。

圖5. 以N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療，減少炎性細胞活素之表現。使一片腰部脊髓驟然冷凍於液態氮中，且例行性地處理以萃取RNA，供定量PCR分析。雖然可忽視之細胞活素RNA含量在非EAE動物中被檢出，但IL-2(B)、IL-10(C)及MCP-1(A)之表現係在具有CNS發炎之d40對照動物中提高。雖然經鹽水處理之動物在整個實驗期間具有增加之炎性細胞活素含量，但接受N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯之動物在其表現上顯示顯著降低，與臨床及病理學恢復一致。在移除N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯，及CNS再浸潤時，IL-2、IL-10及MCP-1之表現再一次上升至相當於經鹽水處理動物之程度。

圖6. α ₄整合素於淋巴細胞上之表現。於免疫後第80天，肝燐脂化血液試樣係收集自非EAE動物、經鹽水處理之動物、經N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療之動物及斷除N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯後10天之動物。使試樣曝露抵抗α ₄整合素之抗體，然後在流量細胞計數器上檢視，於不同細胞群集上藉由光散射選通。動物以N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療，與經鹽水處理之動物比較，係造成β ₄整合素鮮明淋巴細胞在循環中之大增加。此等結果表示α-4表現細胞之數目。當化合物存在於鹽水對照組治療之動物中時，有更多α-4表現細胞。x-軸表示α-4表現；y-軸表示藉由FACS評估之細胞數目。

圖7. 在免疫作用後第80天，α ₄整合素於循環中之淋巴細胞與單細胞上之表現。肝燐脂化血液試樣係於免疫作用後第80天，收集自所有組群之動物，曝露至抵抗α ₄整合素之抗體，並藉由流量細胞計數法篩選。面板A顯示以N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯之治療，與非EAE及經鹽水處理之動物比較，造成α ₄整合素鮮明淋巴細胞百分比在循環中大為增加，這指出經活化之末梢淋巴細胞，於抑制劑存在下，未能進入CNS中。與此概念一致，當移除N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯時，此等細胞在循環中之百分比係回復至鹽水處理之程度，且回復CNS發炎，如面板B中所示。β ₄整合素於循環單細胞上之一般表現，係在所有EAE動物中增加，惟沒有可辨識之亞群集。於α ₄整合素表現上之此種單核血球增加，並不受N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯所影嚮，這指出該抑制劑不會影嚮末梢免疫反應。

圖8. 陰影斑點係被發現於N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療之動物中。影像8A-F為得自治療組中之個別動物之代表性單鉻-R-花青苷染色脊髓切片。(8A)低倍鏡影像(40x)顯示脊髓中脫髓鞘作用之程度。(8B)脫髓鞘損害在"第0天"(第0天為疾病誘發後至少度量40天，其中動物達成臨床評分2或較大)對照動物之高倍鏡影像(100x)，顯示濃密細胞浸潤與泡沫狀巨噬細胞，含有經吞噬髓磷脂碎屑(箭頭)。(8C)得自接受20天鹽水處理動物之損害，仍然保持完全缺乏髓磷脂(250x)。(8D)對照上而言，接受20天N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療之動物，呈現具有擴散藍染色覆蓋斑點之損害(250x)。(8E)媒劑處理40天後，嚴重脫髓鞘作用係顯見於脊髓中(100x)。(8F)但是，N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯療法40天後，大部份損害均顯示透明髓磷脂蒼白(100x)。

圖9. 半薄與EM切片均確認使用N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療藥品之髓鞘再形成。甲苯胺藍色半薄切片係示於面板9A、9B及9C中(均為400x)。得自相同動物之代表性EM切片，係示於面板9D、9E及9F中(9D與9E，1100x；9F，1300x)。(圖9A與9D)正常髓磷脂。(9B與9E)鹽水處理之第30天。一些小口徑軸索顯示薄的有髓鞘外殼(t)，並置於完全脫髓鞘作用(d)與正常髓磷脂(n)之間。一些軸索係進行Wallerian變性(箭頭)。於此情況中，變性軸索係被發現於正常呈現之髓磷脂中(箭頭9B)。電子顯微鏡術確認環繞大口徑軸索之髓磷脂包覆不存在(9E)。(9C與9F)N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療第30天。在接受N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯之動物中，在影像左邊之一個正常呈現髓磷脂區域(n)，係位於鄰近類似口徑之薄的有髓鞘軸索之一個大區域(t)。此薄的有髓鞘軸索區域係較廣泛，且包含大口徑軸索(9C)。EM係確認環繞大直徑軸索之多層薄髓磷脂包覆物，為髓鞘再形成之表徵(9F)。

圖10. N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯係增加脊髓中髓鞘再形成之發生率與面積兩者。(10A)顯示髓磷脂蒼白之損害數目，係以在每隻動物之平均十二個脊髓橫截面內之損害總數之百分比表示。N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯(黑色棒塊)，相對於經鹽水處理動物(白色棒塊)，係增加髓鞘再形成之發生率，且使用N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療，在陰影斑點之頻率上，有時間依存性增加。(10B)測定髓鞘再形成程度之操作法之表示圖。在脊髓切片內之全部損害之形狀均被描圖，並計算輪廓內之面積。顯示髓磷脂蒼白之損害亦被描圖，而產生每隻動物之髓鞘再形成總面積，且髓鞘再形成之程度係以總損害面積之百分比表示(10C-F)各散佈圖顯示總損害面積沿著x-軸，及顯示髓磷脂蒼白之該損害百分比沿著y-軸。在鹽水處理動物中之損害(白色符號)顯示幾乎無髓鞘再形成。對照上而言，N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療之20、30或40天後，在N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療動物中之大部份損害(黑色符號)顯示髓鞘再形成程度上之變異性(0-100%)。平均百分比面積係示於棒塊圖表中，在各散佈圖之右邊(鹽水，白色棒塊；N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯，黑色棒塊)。於20、30或40天治療後，N-[N-(3-吡啶磺醯基)-L-3,3-二甲基-4-硫脯胺醯基]-O-[1-甲基六氫吡-4-基羰基]-L-酪胺酸異丙酯治療之動物，比治療10天後或所有鹽水對照組(<10%)，具有顯著較高之髓鞘再形成百分比(50%)。

圖11A與11B. 老鼠21.6輕鏈可變區域之個別DNA與胺基酸序列。

圖12A與12B. 老鼠21.6重鏈可變區域之個別DNA與胺基酸序列(SEQ ID NO.：51-52)。

圖13. 老鼠與再成形人類21.6輕鏈可變區域之胺基酸序列(SEQ ID NO.：55-58)之比較。為CDR圈環結構之Chothia正則序列一部份之胺基酸殘基，係以星號標示。RE1顯示得自人類RE1輕鏈V_L區域之FR與CDR。La與Lb為再成形人類21.6 V_L區域之兩種變型。於La之FR中之殘基，與RE1序列中不同者，係劃上底線。在Lb中，只顯示骨架區域中與RE1中不同之殘基。

圖14. 老鼠與再成形人類21.6重鏈可變區域之胺基酸序列(SEQ ID NO.：59-63)之比較。為Chothia CDR圈環結構之正則序列一部份之胺基酸殘基，係以星號標示。2*CL顯示得自人類21/28'CL抗體V_H區域之FR與CDR。Ha、Hb及Hc為再成形人類21.6 V_H區域之三種變型。於Ha之FR中之殘基，與21/28'CL序列中不同者，係劃上底線。在Hb與Hc中，只顯示骨架區域中，與21/28'CL中不同之殘基。

圖15A與15B. 再成形人類21.6輕鏈可變區域之第一種變型("a")之cDNA與胺基酸序列(SEQ ID NO.：64-65)。

圖16A與16B. 再成形人類21.6重鏈可變區域之第一種變型("a")之DNA與胺基酸序列(SEQ ID NO.：66-67)。

圖17A與17B. 圖17A為得自用以設計再成形人類21.6輕鏈可變區域之亞組5之老鼠κ V_L區域之109胺基酸長序列(SEQ ID NO.：68)。圖17B為得自用以設計再成形人類21.6輕鏈可變區域之亞組1之人類V_L區域之114胺基酸長序列(SEQ ID NO.：69)。此等序列係進一步描述於上文表10中。

圖18A與18B. 圖18A為得自用以設計再成形人類21.6重鏈可變區域之亞組2c之老鼠V_H區域之125胺基酸長一致序列(SEQ ID NO.：70)。圖18B為得自用以設計再成形人類21.6重鏈可變區域之亞組1之人類V_H區域之129胺基酸長一致序列(SEQ ID NO.：71)。此等序列係進一步描述於上文表11中。

<110> 美商伊蘭製藥公司(Elan Pharmaceuticals,Inc.)

<120> 藉投予髓鞘再形成劑對脫髓鞘疾病及麻痺之組合物及治療

<130> 002010-854

<140> TW093101747

<141> 2004-01-27

<150> US 60/442,171 US 60/500,316

<151> 2003-01-24 2003-09-05

<160> 71

<170> FastSEQ for Windows Version 4.0

<210> 1

<211> 360

<212> DNA

<213> 人類

<220>

<221> CDS

<222> (1)...(360)

<400> 1

<210> 2

<211> 120

<212> PRT

<213> 人類

<400> 2

<210> 3

<211> 318

<212> DNA

<213> 人類

<220>

<221> CDS

<222> (1)...(318)

<400> 3

<210> 4

<211> 106

<212> PRT

<213> 人類

<400> 4

<210> 5

<211> 429

<212> DNA

<213> 人類

<220>

<221> CDS

<222> (1)...(429)

<400> 5

<210> 6

<211> 143

<212> PRT

<213> 人類

<400> 6

<210> 7

<211> 383

<212> DNA

<213> 人類

<220>

<221> CDS

<222> (1)...(375)

<400> 7

<210> 8

<211> 124

<212> PRT

<213> 人類

<400> 8

<210> 9

<211> 429

<212> DNA

<213> 人類

<220>

<221> CDS

<222> (1)...(429)

<400> 9

<210> 10

<211> 143

<212> PRT

<213> 人類

<400> 10

<210> 11

<211> 429

<212> DNA

<213> 人類

<220>

<221> CDS

<222> (1)...(429)

<400> 11

<210> 12

<211> 143

<212> PRT

<213> 人類

<400> 12

<210> 13

<211> 372

<212> DNA

<213> 人類

<220>

<221> CDS

<222> (1)...(372)

<400> 13

<210> 14

<211> 124

<212> PRT

<213> 人類

<400> 14

<210> 15

<211> 429

<212> DNA

<213> 人類

<220>

<221> CDS

<222> (1)...(429)

<400> 15

<210> 16

<211> 143

<212> PRT

<213> 人類

<400> 16

<210> 17

<211> 429

<212> DNA

<213> 人類

<220>

<221> CDS

<222> (1)...(429)

<400> 17

<210> 18

<211> 143

<212> PRT

<213> 人類

<400> 18

<210> 19

<211> 386

<212> DNA

<213> 人類

<220>

<221> CDS

<222> (1)...(386)

<400> 19

<210> 20

<211> 128

<212> PRT

<213> 人類

<400> 20

<210> 21

<211> 386

<212> DNA

<213> 人類

<220>

<221> CDS

<222> (1)...(386)

<400> 21

<210> 22

<211> 128

<212> PRT

<213> 人類

<400> 22

<210> 23

<211> 386

<212> DNA

<213> 人類

<220>

<221> CDS

<222> (1)...(386)

<400> 23

<210> 24

<211> 128

<212> PRT

<213> 人類

<400> 24

<210> 25

<211> 37

<212> DNA

<213> 人類

<220>

<221> CDS

<222> (20)...(37)

<400> 25

<210> 26

<211> 6

<212> PRT

<213> 人類

<400> 26

<210> 27

<211> 35

<212> DNA

<213> 人類

<400> 27

<210> 28

<211> 37

<212> DNA

<213> 人類

<220>

<221> CDS

<222> (20)...(37)

<400> 28

<210> 29

<211> 6

<212> PRT

<213> 人類

<400> 29

<210> 30

<211> 33

<212> DNA

<213> 人類

<400> 30

<210> 31

<211> 39

<212> DNA

<213> 人類

<400> 31

<210> 32

<211> 32

<212> DNA

<213> 人類

<400> 32

<210> 33

<211> 39

<212> DNA

<213> 人類

<400> 33

<210> 34

<211> 41

<212> DNA

<213> 人類

<400> 34

<210> 35

<211> 40

<212> DNA

<213> 人類

<400> 35

<210> 36

<211> 42

<212> DNA

<213> 人類

<400> 36

<210> 37

<211> 59

<212> DNA

<213> 人類

<400> 37

<210> 38

<211> 33

<212> DNA

<213> 人類

<400> 38

<210> 39

<211> 38

<212> DNA

<213> 人類

<400> 39

<210> 40

<211> 51

<212> DNA

<213> 人類

<400> 40

<210> 41

<211> 67

<212> DNA

<213> 人類

<400> 41

<210> 42

<211> 26

<212> DNA

<213> 人類

<400> 42

<210> 43

<211> 66

<212> DNA

<213> 人類

<400> 43

<210> 44

<211> 64

<212> DNA

<213> 人類

<400> 44

<210> 45

<211> 63

<212> DNA

<213> 人類

<400> 45

<210> 46

<211> 37

<212> DNA

<213> 人類

<400> 46

<210> 47

<211> 27

<212> DNA

<213> 人類

<400> 47

<210> 48

<211> 17

<212> DNA

<213> 人類

<400> 48

<210> 49

<211> 18

<212> DNA

<213> 人類

<400> 49

<210> 50

<211> 116

<212> PRT

<213> 人類

<400> 50

<210> 51

<211> 483

<212> DNA

<213> 小鼠

<220>

<221> CDS

<222> (53)...(432)

<400> 51

<210> 52

<211> 126

<212> PRT

<213> 小鼠

<400> 52

<210> 53

<211> 470

<212> DNA

<213> 小鼠

<220>

<221> CDS

<222> (1)...(432)

<400> 53

<210> 54

<211> 144

<212> PRT

<213> 小鼠

<400> 54

<210> 55

<211> 106

<212> PRT

<213> 人類

<400> 55

<210> 56

<211> 107

<212> PRT

<213> 人類

<400> 56

<210> 57

<211> 106

<212> PRT

<213> 人類

<400> 57

<210> 58

<211> 6

<212> PRT

<213> 人類

<400> 58

<210> 59

<211> 123

<212> PRT

<213> 人類

<400> 59

<210> 60

<211> 119

<212> PRT

<213> 人類

<400> 60

<210> 61

<211> 123

<212> PRT

<213> 人類

<400> 61

<210> 62

<211> 6

<212> PRT

<213> 人類

<400> 62

<210> 63

<211> 6

<212> PRT

<213> 人類

<400> 63

<210> 64

<211> 406

<212> DNA

<213> 人類

<220>

<221> CDS

<222> (16)...(393)

<400> 64

<210> 65

<211> 126

<212> PRT

<213> 人類

<400> 65

<210> 66

<211> 454

<212> DNA

<213> 人類

<220>

<221> CDS

<222> (16)...(441)

<400> 66

<210> 67

<211> 142

<212> PRT

<213> 人類

<400> 67

<210> 68

<211> 109

<212> PRT

<213> 人類

<400> 68

<210> 69

<211> 130

<212> PRT

<213> 人類

<220>

<221> VARIANT

<222> 32,33

<223> Xaa=任何胺基酸

<400> 69

<210> 70

<211> 125

<212> PRT

<213> 人類

<220>

<221> VARIANT

<222> 106,120

<223> Xaa=任何胺基酸

<400> 70

<210> 71

<211> 129

<212> PRT

<213> 人類

<220>

<221> VARIANT

<222> 115

<223> Xaa=任何胺基酸

<400> 71

Claims

一種髓鞘再形成劑之用途，其係用以製備在哺乳動物中以促進神經細胞之髓鞘再形成之量治療脫髓鞘疾病之藥物，其中該髓鞘再形成劑為結合至α-4 β-1整合素之抗體或其免疫學上活性片段。
根據申請專利範圍第1項之用途，其中哺乳動物為人類。
根據申請專利範圍第2項之用途，其中人類係患有使細胞脫髓鞘之症狀，且其中該症狀為多發性硬化、先天性代謝病症、具有異常髓鞘形成之神經病、藥物引致之脫髓鞘作用、放射引致之脫髓鞘作用、遺傳性脫髓鞘症狀、朊病毒引致之脫髓鞘症狀、腦炎引致之脫髓鞘作用或脊髓損傷。
根據申請專利範圍第3項之用途，其中人類係患有多發性硬化。
根據申請專利範圍第1至4項中任一項之用途，其中抗體為單株抗體或單株抗體之免疫學上活性片段。
根據申請專利範圍第5項之用途，其中單株抗體為嵌合抗體、人類抗體、基因工程之抗體或雙專一性抗體。
根據申請專利範圍第6項之用途，其中嵌合抗體為人化或首次接觸抗原。
根據申請專利範圍第1至4項中任一項之用途，其中抗體為人化抗體或其免疫學上活性片段。
根據申請專利範圍第8項之用途，其中人化抗體為那塔利諸馬(natalizumab)或其免疫學上活性片段。
根據申請專利範圍第9項之用途，其中那塔利諸馬係以靜脈內方式或皮下方式投藥。
根據申請專利範圍第1-4項中任一項之用途，其中抗體之免疫學上活性片段為Fab、scFv或F(ab')₂。
根據申請專利範圍第9項之用途，其中藥劑係以慢性方式投予有需要之哺乳動物。
根據申請專利範圍第10項之用途，其中那塔利諸馬係以靜脈內方式投予哺乳動物。
根據申請專利範圍第13項之用途，其中該投藥會造成那塔利諸馬在該哺乳動物中之有效血液含量為至少約1毫微克/毫升。
根據申請專利範圍第13項之用途，其中那塔利諸馬之有效血液含量為約1毫微克/毫升。
根據申請專利範圍第1項之用途，其中髓鞘再形成劑係以慢性方式投藥。
根據申請專利範圍第15項之用途，其中髓鞘再形成劑之慢性投藥為每週。
根據申請專利範圍第16項之用途’其中髓鞘再形成劑之慢性投藥為每兩週一次。
根據申請專利範圍第16項之用途，其中髓鞘再形成劑之慢性投藥為每月。
根據申請專利範圍第16項之用途，其中髓鞘再形成劑之慢性投藥為每兩個月一次。
根據申請專利範圍17至20項中任一項之用途，其中髓鞘再形成劑之慢性投藥歷經至少6個月期間。
根據申請專利範圍17至20項中任一項之用途，其中髓鞘再形成劑之慢性投藥歷經一年或更長之期間。
根據申請專利範圍第4項之用途，其中多發性硬化(MS)為復發-緩和(relapsing-remitting)MS。
根據申請專利範圍第4項之用途，其中多發性硬化(MS)為慢性MS。
根據申請專利範圍第1-4、23及24項中任一項之用途，其中將消炎劑與髓鞘再形成劑共同投予哺乳動物。
根據申請專利範圍第25項之用途，其中消炎劑為干擾素或葛拉提拉莫(glatiramer)醋酸鹽。
根據申請專利範圍第26項之用途，其中干擾素為干擾素β-1b或干擾素β-1a。
一種髓鞘再形成劑之用途，其量足以抑制脊髓中免疫細胞之淋巴細胞浸潤，以促進脊髓中神經細胞之髓鞘再形成，且藉以在該有需要之病患中治療麻痺，該用途係用於製備在該病患中減少麻痺之藥劑，其中該髓鞘再形成劑為抗-VLA-4抗體。
根據申請專利範圍第28項之髓鞘再形成劑用途，其中該具有麻痺之病患係患有多發性硬化、先天性代謝病症、具有異常髓鞘形成之神經病、藥物引致之脫髓鞘作用、放射引致之脫髓鞘作用、遺傳性脫髓鞘症狀、朊病毒引致之脫髓鞘症狀、腦炎引致之脫髓鞘作用或脊髓損傷。
根據申請專利範圍第28或29項之髓鞘再形成劑用途，其中病患為人類。
根據申請專利範圍第28項之髓鞘再形成劑用途，其中抗 -VLA-4抗體係結合α-4 β-1整合素。
根據申請專利範圍第31項之髓鞘再形成劑用途，其中抗-VLA-4抗體為單株抗體。
根據申請專利範圍第32項之髓鞘再形成劑用途，其中單株抗體為嵌合抗體、人類抗體、基因工程之抗體或雙專一性抗體。
根據申請專利範圍第33項之髓鞘再形成劑用途，其中嵌合抗體為人化或首次接觸抗原。
根據申請專利範圍第34項之髓鞘再形成劑用途，其中人化抗體為那塔利諸馬(natalizumab)。
根據申請專利範圍第28項之髓鞘再形成劑用途，其中髓鞘再形成劑係以慢性方式投予有需要之病患。
根據申請專利範圍第36項之髓鞘再形成劑用途，其中髓鞘再形成劑之慢性投藥係每週發生。
根據申請專利範圍第36項之髓鞘再形成劑用途，其中髓鞘再形成劑之慢性投藥係每兩週發生。
根據申請專利範圍第36項之髓鞘再形成劑用途，其中髓鞘再形成劑之慢性投藥係每月發生。
根據申請專利範圍第37至39項中任一項之髓鞘再形成劑用途，其中該慢性投藥歷經至少6個月期間。
根據申請專利範圍第37至39項中任一項之髓鞘再形成劑用途，其中該慢性投藥歷經至少12個月期間。
根據申請專利範圍第28項之髓鞘再形成劑用途，其中免疫抑制劑為干擾素。
根據申請專利範圍第42項之髓鞘再形成劑用途，其中干擾素為干擾素β-1b或干擾素β-1a。
根據申請專利範圍第29項之髓鞘再形成劑用途，其中該病患為人類。
根據申請專利範圍第44項之髓鞘再形成劑用途，其中該人類罹患多發性硬化。
根據申請專利範圍第45項之髓鞘再形成劑用途，其中多發性硬化(MS)為復發-緩和MS。
根據申請專利範圍第45項之髓鞘再形成劑用途，其中多發性硬化(MS)為慢性MS。
根據申請專利範圍第24或47項之用途，其中該慢性MS為慢性漸進式(progressive)MS。