KR20050114212A

KR20050114212A - 수초재생제의 투여에 의한 탈수초성 질환 및 마비의 치료및 조성물

Info

Publication number: KR20050114212A
Application number: KR1020057013695A
Authority: KR
Inventors: 스티브 제이. 칼릭; 마이클 에이. 플리스; 안드레이 더블유. 콘래디; 프랜신 에스. 그랜트; 크리스토퍼 엠. 셈코; 다렌 드레센; 엘리자베스 메써스미스; 스티븐 프리드먼; 테드 예드넉
Original assignee: 엘란 파마슈티칼스, 인크.
Priority date: 2003-01-24
Filing date: 2004-01-26
Publication date: 2005-12-05
Also published as: US20050215565A1; MXPA05007843A; CA2514125A1; NO20053920L; AU2004207536A1; AU2011201262A1; UY28170A1; PE20040942A1; RU2005126728A; EP2484381A1; TWI428141B; NO20053920D0; US7576101B2; AU2010212446B2; JP2007521249A; JP2006516624A; AU2010212446A1; SK50642005A3; WO2004066932A2; EP3527228A1

Abstract

본 발명은 필요한 환자에서 탈수초를 억제하고, 수초재생을 향상하고 및/또는 마비를 치료하는 방법 및 조성물을 제공한다. 바람직하게는 이와 같은 조성물은 면역글로불린(예를 들면, 항체, 항체 단편 및 재조합 제조된 항체 또는 단편), 폴리펩티드(예를 들면 인테그린에 대한 용해형 리간드 단백질) 및 소분자를 포함하고, 유효량을 투여할 경우 환자의 탈수초를 억제하고 및/또는 수초재생을 향상시킨다. 본 명세서에 기술된 조성물 및 방법은 탈수초와 연관된 증상 및 질환을 완화시키기 위하여 사용되는 기타 항염증제를 사용할 수 있다.

Description

수초재생제의 투여에 의한 탈수초성 질환 및 마비의 치료 및 조성물{Composition for and treatment of demyelinating diseases and paralysis by administration of remyelinating agents}

본 발명은 탈수초성 질환 및 증상을 치료 및/또는 환자의 마비를 감소할 수 있는 화합물, 조성물에 관한 것이다.

염증은 감염 또는 상처에 대한 혈관 조직의 반응으로 혈관의 내피세포에 백혈구가 점착되고 주변조직으로 그들이 침윤되는 것에 영향을 받는다. 정상 염증에서는, 침윤된 백혈구는 독성 매개자를 방출시켜 침투한 유기체를 죽이고, 죽은 세포와 잔해(debris)를 식균하여, 조직 재생 및 면역반응에 관여한다. 그러나 병원성 염증에서는, 침윤된 백혈구가 과반응성이 되어 심각하고 치명적인 피해를 야기할 수 있다(예컨대 Hickey, Psychoneuroimmunology Ⅱ, Academic Press, 1990 참조).

인테그린(integrin)은 세포 점착, 면역세포 이동 및 활성화에 관여하는 세포-표면 당단백질의 일종이다. 알파-4-인테그린은 호중구를 제외한 모든 순환하는 백혈구에 의해 발현되고 베타-1(β₁) 또는 베타-7(β₇) 인테그린 서브유닛과 결합하여 헤테로다이머 수용체(heterodimeric receptors)를 형성한다; 알파-4 베타-1(α₄β₁) 및 알파-4 베타-7(α₄β₇) 모두는 혈관 내피세포를 관통하는 백혈구에 관여를 하고(Springer et al., Cell 1994, 76:301-14; Butcher et al., Science 1996, 272:60-6), 실질조직(parenchyma) 내에서 세포의 활성화 및 생존의 원인이 된다(Damle et, al,. J. Immunol . 1993:151:2368-79;Koopman et al., J. Immunol . 1994, 152:3760-7;Leussink et al., Acta Neuropathol . 2002, 103:131-136). α₄β₁은 림프구(lymphocytes), 단핵구(monocytes), 대식세포(macrophages), 비만세포(mast cells), 호염구(basophils) 및, 호산구(eosinophils)에서 항시 발현된다.

알파-4-베타-1(very late antigen-4, VLA-4으로도 불린다)은 만성 염증의 여러 부위에서 혈관 내피세포에 의해 발현되는 혈관 세포 점착 분자-1(Lobb et al., J. Clin . Invest. 1994, 94:1722-8)와 결합한다(Bevilacqua et al, 1993 Annu . Rev. Immunol . 11:767-804;Postigon et al., 1993 Res. Immunol . 144:723-35). α₄β₁의 리간드는 피브로넥틴과 다른 세포외 기질(Extracellular matrix ECM) 구성성분 등이 있다.

알파-4-베타-7 이량체는 점막 어드레신 세포 점착 분자(mucosal addressin cell adhesion molecule, MAdCAM-1)와 결합하고 림프구를 소화관으로 귀환(homing)하는 것을 매개한다(Farstad et al., 1997 Am. J. Pathol . 150:187-99;Issekutz, 1991 J. Immunol . 147:4178-84). 혈관 내피세포에서 MAdCAM-1의 발현은 염증성 장 질환(IBD)를 가지고 환자의 위장관의 염증 부위에서 증가된다(Briskin et al., 1997 Am. J. Pathol . 151:97-110).

알파-4 인테그린과 같은 점착 분자는 잠재적인 치료제의 타겟이다. 예컨대, 알파-4 인테그린의 소단위인 VLA-4 수용체는 뇌의 내피세포에 존재하는 리간드와 결합하기 때문에 중요한 타겟이다. 뇌 염증에 의해 야기되는 질병과 증상은 특히 심각한 예후를 나타낸다. 또 다른 예인 알파-4-베타-7 인테그린 이량체는 림프구의 귀환(homing) 및 위장관에 병리학적 염증에 관여하기 때문에 중요한 타겟이 된다.

알파-4 베타-1 인테그린은 활성환된 림프구과 단핵구의 세포외 표면에서 발현되고, 급성 뇌 염증 병변과 다발성 경화증(MS)과 관련 있는 혈뇌장벽(blood brain barrier, BBB) 파손의 발병기전에 관련이 있다(Coles et al., 1999 Ann. Neurol. 46(3):296-304). 알파-4-인테그린에 대한 약제는 항-염증성 잠재적 약물로 in vivo 및 in vitro 에서 테스트되고 있다. Yednock et al., Nature 1992, 356:63-66; 1998, 11월 24일에 특허된 Bendig 등의 미국특허 번호 No.5,840,299 및 1999년 12월 14일에 특허된 Thorsett 등의 미국 특허번호 No.6,001,809를 참조하라. 상기 in vitro 실험들은 알파-4 인테그린 항체가 뇌의 내피세포에 림프구가 부착하는 것을 차단하는 것을 설명하고 있다. 다발성 경화증과 유사한 증상, 실험적으로 자가면역 뇌척수염(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)을 인공적으로 유도한 동물에서 알파-4 인테그린 항체의 효과를 측정한 실험에서 항-알파-4 인테그린 항체의 투여가 실험동물에서 뇌의 염증 및 이에 수반되는 마미를 억제하는 것으로 나타났다. 종합적으로 상기 실험들은 항-알파-4 인테그린 항체가 다발성 경화증 및 다른 염증성 질환 및 질병의 잠재적인 치료제로 유용함을 확인해 준다.

지금까지 수초 재생을 촉진하는 약제 뿐만 아니라 탈수초를 억제 또는 예방하는 치료법이 개발되지 못했다. 예컨대, 다발성 경화증은 어떤 다른 탈수초성 질병보다도 인간의 건강을 위협하고 건강 유지에 비용이 든다. 그러나 MS(다발성 경화증)에 효과적인 치료법이 존재하지 않는다. 이는 1000명 개체당 1명 정도의 발병률을 가지며 주로 젊은 성인(평균 연령 30세)에게 발병하는 질병이다. 실험적인 자가 면역 뇌척수염은 MS를 연구하는데 사용되는 주요 동물 모델이다. 그러나 EAE와는 달리, MS는 발병 원인을 모르는 자가면역 질환이다. 면역세포가 중추신경계로 유입되는 것에 의해 질병이 진행되어 결국 부종, 탈수초, 축색돌기 손상 및 소실이 야기된다.

탈수초를 억제하고 수초 재생을 촉진하며 및/또는 탈수초와 관련된 마미를 치료하는 신규 화합물, 조성물 및 상기 화합물 및 조성물을 이용한 방법이 염증과 관련이 있는 다른 탈수초성 질병 및 MS 같은 질병을 치료하기 위해 필요하므로 계속적으로 연구되어야 한다.

발명의 요약

상기에 기초하여, 환자가 긴 수명 및 더 나은 삶의 질을 영위할 수 있도록, 상기 질환을 효과적으로 치료 또는 저해할 상기 질환을 치료하는 신규 조성물 및 방법이 요구된다.

본 발명은 수초재형성(remyelinating) 유효량으로 수초재형성제를 포유동물에게 투여하는 것을 포함하는, 포유동물에서 신경 세포의 수초재형성을 촉진하는 방법에 관한 것이다. 바람직하게는, 본 발명의 방법에서 포유동물은 인간이며, 인간은 세포를 탈수초하는(demyelinate) 증상으로부터 고생한다.

본 발명에 따른 세포를 탈수초하는 증상은 다발경화증, 선천성 대사 질환, 비정상적인 수초형성을 갖는 신경병증, 약물 유도된 탈수초형성, 방사선 유도된 탈수초형성, 유전적인 탈수초형성 증상, 프리온 유도된 탈수초형성 증상, 뇌염 유도된 탈수초형성, 또는 척수 손상을 포함한다. 바람직하게는, 상기 증상은 다발경화증이다.

본 발명은 또한 이를 필요로 하는 대상에게 투여할 때 탈수초형성을 막고/막거나 수초재형성을 촉진하는 치료학적 유효량의 수초재형성제를 포함하는 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 방법 및 조성물에서, 수초재형성제는 항체, 항체의 면역학적으로 활성인 단편, 화합물 또는 이의 조합일 수 있다. 항체 또는 이의 면역학적으로 활성인 단편은 바람직하게는 나탈리주마브(Antegren) 또는 이의 면역학적으로 활성인 단편이다.

본 발명의 방법 및 조성물에서, 수초재형성제는 화학식 I, IA, IB, IC, II, HA, 또는 IIB의 작은 화합물일 수 있다. 상기 화합물은 바람직하게는 하기 화학식IB의 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염이다.

화학식 IB

상기식에서,

Ar¹은 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 및 치환된 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택되며;

Ar²는 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴 및 치환된 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택되며;

R¹²는 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 및 치환된 시클로알킬로 구성된 군으로부터 선택되거나 또는 R^l2 및 R¹³는 R^l2 에 결합된 질소 원자 및 R^l3 에 결합된 탄소 원자와 함께 헤테로고리 또는 치환된 헤테로고리기를 형성하며;

R¹³은 수소, 알킬, 및 치환된 알킬로 구성된 군으로부터 선택되거나, 또는 R¹² 및 R¹³ 은 R^l2 에 결합된 질소 원자 및 R^l3 에 결합된 탄소 원자와 함께 헤테로고리 또는 치환된 헤테로고리기를 형성하며;

R¹⁴는 수소, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 아릴, 및 치환된 아릴로 구성된 군으로부터 선택되며;

R^l5는 알킬, 및 치환된 알킬로 구성된 군으로부터 선택되거나, 또는 R^l5 및 R¹⁶는 이들이 결합된 질소 원자와 함께 헤테로고리 또는 치환된 헤테로고리기를 형성하며;

R^l6은 알킬 및 치환된 알킬로 구성된 군으로부터 선택되거나 또는 R^l5 및 R¹⁶는 이들이 결합된 질소 원자와 함께 헤테로고리 또는 치환된 헤테로고리기를 형성하며; 및

Y는 -O-, -NR¹⁰⁰-, 및 -CH₂- 로 구성된 군으로부터 선택되며(식 중, R¹⁰⁰ 은 수소 또는 알킬임)이다].

추가의 구현예에서, 화합물은 바람직하게는 하기 화학식IC의 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염이다.

화학식 IC

상기식에서, R^x는 히드록시 또는 C₁ _-5 알콕시이다.

바람직하게는, 상기 화합물은 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르이다.

또 다른 구현예에서, 상기 화합물은 바람직하게는 하기 화학식 IIB의 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염이다.

화학식 IIB

상기식에서,

Ar³¹은 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 및 치환된 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택되며;

R³²는 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 및 치환된 시클로알킬로 구성된 군으로부터 선택되거나 또는 R³² 및 R³³는 R³² 에 결합된 질소 원자 및 R³³ 에 결합된 탄소 원자와 함께 헤테로고리 또는 치환된 헤테로고리기를 형성하며;

R³³은 수소, 알킬, 및 치환된 알킬로 구성된 군으로부터 선택되거나, 또는 R³² 및 R³³는 R³² 에 결합된 질소 원자 및 R³³ 에 결합된 탄소 원자와 함께 헤테로고리 또는 치환된 헤테로고리기를 형성하며;

R³⁴는 수소, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 아릴, 및 치환된 아릴로 구성된 군으로부터 선택되며; 및

R³⁷은 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로고리, 치환된 헤테로고리, 아릴옥시, 치환된 아릴옥시, 아랄콕시, 치환된 아랄콕시, 헤테로아릴옥시, 치환된 헤테로아릴옥시이다].

여전히 또 다른 구현예에서, 상기 화합물은 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-0-[1-메틸피페라진-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르이다.

본 발명은 또한 치료학적 유효량의 화학식 I, IA, IB, IC, II, IIA, 또는 IIB의 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다. 바람직하게는, 상기 화합물은 화학식 IB, IC, 또는 IIB의 화합물이다. 바람직한 구현예에서, 상기 화합물은 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르이다.

본 발명의 수초재형성제는 단독으로 또는 기타 수초재형성제, 항-알파-4-물질, 또는 항염증제와 조합되어 투여될 수 있다. 본 발명은 또한 본원에 개시된 약학적으로 허용가능한 담체 및 치료학적 유효량의 수초재형성제를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 약학 조성물은 추가로 기타 수초재형성제, 항-알파-4-물질, 또는 항염증제를 포함하는 하나 이상의 부가적인 물질을 포함할 수 있다.

본 발명의 조성물은 경구, 비경구 (예를 들면, 피하, 경막밑, 정맥내, 근육내, 경막내, 복강내, 뇌내, 동맥내, 또는 병변내 투여 경로), 국부, 국부적 (예를 들면, 외과 도포 또는 외과 좌약), 직장, 및 폐 (예를 들면, 에어로졸, 흡입물, 또는 분말)을 포함하는 다양한 투여 방식에 의해 투여될 수 있다.

본 발명의 또 다른 양태는 치료학적 유효량의 수초재형성제 및 치료학적 유효량의 항염증제를 포함하는 병용요법을 제공한다. 항염증제는 이에 제한되지 않고, 하기를 포함한다: 부신피질자극호르몬 (ACTH), 코르티코스테로이드 (예를 들면, 프레드니손, 메틸프레드니솔론, 덱사메타손 코르티솔, 코르티손, 플루드로코르티손, 프레드니솔론, 6α-메틸프레드니솔론, 트리암시놀론, 및 베타메타손), 인터페론 (예를 들면, 인터페론 베타-lb 및 인터페론 베타-la), Copaxone, 또는 비스테로이드성 항염증 약물 (예를 들면, 아스피린, 소듐 살리실레이트, 콜린 마그네슘 트리살리실레이트, 사살레이트, 디플루니살, 설파살라진, 올살라진, 파라-아미노페놀 유도체, 인돌, 인덴 아세트산, 헤테로아릴 아세트산, 안트라닐산, 에놀산, 알카논, 디아릴-치환된 퓨란, 디아릴-치환된 피라졸, 인돌 아세트산, 및 설포아닐리드). 수초재형성제는 화학식 I, IA, IB, IC, II, IIA, 또는 IIB의 임의의 화합물로부터 선택될 수 있다. 대안적으로, 수초재형성제는 VLA-4에 대한 항체 또는 이의 면역학적으로 활성인 단편 또는 VLA-4에 결합하여, 동족의 리간드에 결합하는 것을 막는 폴리펩티드일 수 있다.

병용요법은 다발경화증, 선천성 대사 질환, 비정상적인 수초형성을 갖는 신경병증, 약물 유도된 탈수초형성, 방사선 유도된 탈수초형성, 유전적인 탈수초형성 증상, 프리온 유도된 탈수초형성 증상, 뇌염 유도된 탈수초형성, 또는 척수 손상으로 고생하는 대상을 치료하기 위해 이용될 수 있다.

본 발명의 여전히 또 다른 양태는 이를 필요로 하는 대상에서 탈수초형성 질환의 치료용 약물의 제조를 위한 화학식 I, IA, IB, IC, II, IIA, 또는 IIB의 화합물의 용도를 제공한다. 바람직하게는, 상기 화합물은 화학식 IB, IC, 또는 IIB의 화합물이다. 바람직한 구현예에서, 상기 화합물은 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르이다.

본 발명의 또 다른 양태에서, 이를 필요로 하는 대상에서 척수에서 신경 세포의 수초재형성을 촉진하기 위해 척수에서 면역 세포의 림프구 침윤을 저해하기에 충분한 양의 수초재형성제를 대상에게 투여하여, 이를 필요로 하는 상기 대상에서 마비를 치료하는 것을 포함하는 탈수초형성 질환을 갖는 대상에서 마비를 역전시키는(reverse) 방법이 제공된다.

본 발명의 또 다른 양태는 이를 필요로 하는 대상에서 탈수초형성 질환의 치료 또는 탈수초형성 질환을 갖는 대상에서 마비의 치료용 약물의 제조를 위한 수초재형성제의 용도를 제공한다.

본 발명의 상기 및 기타 목적, 이점, 및 특징은 하기에 더욱 충분히 기재된 상세한 방법 및 제형물을 읽을 때 당업자에게 명백해질 것이다.

도 1A. N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 처리 동안 만성 실험적인 자가면역 뇌척수염의 연장된 역전. EAE는 10 mg/mL의 불활성화된 엠. 튜버쿨로시스(M. tuberculosis)과 함께, 균질화된 동족 CNS 조직 및 프로인드 완전 면역반응 항진제 (CFA)의 1:1 혼합물 0.6 mL의 목덜미 진피내 주사를 통해 암컷 하틀리(Hartley) 기니아 피그에서 유도된다. 면역 후 40일에 시작하여, 동물은 10, 20, 30 또는 40일 동안 염수(n=20, 0.5 mL/일) 또는 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 (n=25, 30 mg/kg, 2x/일)를 받았다. 처리 기간의 과정에 걸쳐, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르로 처리된 동물의 평균 임상 기록은 염수 대조군의 것보다 현저하게 낮았다 (p < 0.001, Mann Whitney 순위합검정). 더욱이, 연장된 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 투여 동안 어떠한 부작용도 관찰되지 않았으며, 처리로부터 어떠한 이탈도 항체에 대해 이전에 관찰되지 않았다.

도 1B. 임상적으로 활성인 질환으로의 회복에 이은 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르의 제거. N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르로 처리 30일 후에, 5마리의 동물을 소분자 투여 없이 추가적인 10일 동안 유지하였다. 일단 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르가 제거되면, 동물은 질환의 임상 진전으로 회복하였다. 70일 및 80일 사이에, 후(post)-N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 동물의 평균 임상 기록은 처리 기간을 통해 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 받은 동물의 것보다 현저하게 높았다 (p < 0. 05, Mann Whitney 순위합검정).

도 2. 연장된 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 처리 동안 병리학적 회복. 패널 A, C, E, G, I 및 K는 솔로크롬-R-시아닌 (SCR) 염색된 척수 섹션이다 (배율 40X). 패널 B, D, F, H, J 및 L은 해당하는 SCR-염색된 사진의 등쪽 중간 부위로부터 취한 헤마톡실린-에오신 (H-E) 염색된 섹션의 고배율(250X)을 보여준다. 정상적인 기니아 피그로부터 취한 상기 섹션(2A)은 해당하는 H-E 섹션인 패널(2B)와 같이 염증 또는 탈수초형성을 보여주지 않는다. 면역 후 40일까지, 처리를 받지 않은 동물은 광대한 수막 염증 및 탈수초형성의 큰 등쪽 중간 플라크를 보여주었다 (2C). 상기 부위(2D)에서 침윤 세포의 밀도는 도 2에서보다 훨씬 높았다. 질환의 후기에서조차, 면역 후 60일에, 염수 처리된 동물은 세포성 침윤물의 높은 밀도를 가지면서(2F), 탈수초형성의 큰 연질막밑 부위(2E)를 보여주었다. 대조적으로, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 처리의 20일을 받은 동물은 탈수초형성의 훨씬 더 적은 부위(2G), 및 손상 부위내에서 훨씬 더 낮은 밀도의 세포성 침윤(2H)을 가졌다. 2I로 표시된 동물은 40일의 염수 처리를 받았다. 실제로, 회색 물질의 일부 부위의 침투를 포함하는 전체 섹션을 침윤하고, 탈수초형성하였다. 2J에서 세포성 침윤이 면역 후 60일에서부터 감소되었지만(2F 참고), 2B에서 관찰된 정상적인 수준보다 여전히 훨씬 더 높았다. 40 일의 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 처리 후에, 그러나, 수막 및 혈관주위 염증이 거의 없었으며, 수초는 명백히 그대로였다(2K). 세포성 침윤 (2L)은 실제적으로 정상적인 동물(2B)과 동일하였다.

도 3. N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-0-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 처리 동안 만성 EAE에서 감소된 병리 이상. 동물은 10, 20, 30 또는 40일 동안 염수 (n=20) 또는 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-0-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 (n=25)를 받았다. 부가적으로, 동물의 서브그룹은 30일 동안 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-0-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 받은 후, 실험의 나머지 10일 동안 처리를 제거하였다 (후-N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 그룹). 희생에 이어, 뇌 및 척수를 포르말린에 고정하고, 파라핀에 포매하였다.

5㎛ 섹션을 헤마톡실린-에오신 (EI-E) 또는 솔로크롬-R-시아닌으로 염색하고, 4가지 항목의 각각에서의 평가에 기초하여 4-디지트 병리 기록을 무작위로 할당하였다: (3A) 수막 염증, (3B) 혈관주위 침윤, (3C) 뇌염, 및 (3D) 탈수초형성. 비-EAE 동물은 모든 항목에서 0의 기록을 가진다는 것을 주목한다. 처리 기간의 과정에 걸쳐, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 받은 동물은 염수 처리된 동물에 대해 4가지 항목의 각각에서 평균 병리 기록에서 현저한 감소를 보여주었다 (p < 0.001, 2-way ANOVA). N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 제거하고, 동물을 처리 없이 부가적인 10일 동안 유지했을 때, 모든 4가지 항목에서 평균 조합된 병리 기록은 소분자를 계속 받은 동물보다 현저하게 높았다 (p < 0.05, SNK 시험을 이용한 등급에 대한 Kruskal Wallis ANOVA).

도 4. N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 처리를 이용한 감소된 척수 침윤. 침윤 세포의 평균 수는 전체 척수를 커버하는 12개의 파이 형태의 영역으로부터 대표적인 영역에서 계산하였다 (방법 참고). 세포성 침윤에서 현저한 증가는 비-EAE 동물과 비교하여 EAE의 유도와 함께 발생하였다 (δ, p < 0.05; SNK 시험을 이용한 등급에 대한 Kruskal Wallis ANOVA). N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 처리된 동물은 치료의 10, 20, 30 또는 40일에 따라 염수 처리된 동물보다 세포가 적었다 (^*, p < 0.001, two-way ANOVA). 더욱이, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 이용하여 20, 30 또는 40일 동안 처리된 동물은 대조군 (d40) EAE 동물보다 현저하게 낮은 세포수를 가졌다 (#, p < 0.05, SNK 시험을 이용한 등급에 대한 Kruskal Wallis ANOVA). N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르의 제거 후에, 소분자 없이 부가적인 10일 동안 유지된 동물에서 평균 세포수는 연속적인 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 처리를 받은 동물과 비교하여 현저하게 증가하였다 (p < 0.05, SNK 시험을 이용한 등급에 대한 Kruskal Wallis ANOVA).

도 5. N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 처리를 이용한 염증 시토카인의 감소된 발현. 허리 척수 조각을 액체 질소에서 급격히 동결하고, 정량적인 PCR 분석을 위한 RNA를 추출하기 위해 통상적으로 진행하였다. 무시할 수 있는 시토카인 RNA 수준이 비-EAE 동물에서 검출된 반면, IL-2(B), IL-10(C) 및 MCP-1(A)의 발현은 CNS 염증을 갖는 d40 대조군 동물에서 증가하였다. 염수 처리된 동물이 실험의 지속을 통해 증가된 염증성 시토카인 수준을 가진 반면, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 받은 동물은 임상 및 병리학적 회복과 일치하는 이의 발현에서 현저한 감소를 보여주었다. N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르의 제거 및 CNS의 재침윤시, IL-2, IL-10 및 MCP-1의 발현은 다시 염수 처리된 동물에서와 필적할만한 수준으로 상승하였다.

도 6. 림프구에 대한 α₄ 인테그린의 발현. 면역 후 80일에, 헤파린 처리된 혈액 시료를 비-EAE 동물, 염수 처리된 동물, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 처리된 동물 및 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르의 제거 후 10일의 동물로부터 수집하였다.

시료를 α₄ 인테그린에 대한 항체에 노출시킨 후, 광 산란기에 의해 상이한 세포 집단 상에 게이트에서 조절하는 흐름세포측정기 상에서 검사하였다. N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 이용하여 동물의 처리는 염수 처리된 동물과 비교하여 혈액 순환에서 β₄ 인테그린 밝은 림프구에서 큰 증가를 야기하였다. 상기 결과는 알파-4 발현 세포의 수를 나타낸다. 화합물이 염수-대조군 처리된 동물에 존재할 때, 더욱 많은 알파-4 발현 세포가 존재한다. x-축은 알파-4 발현을 나타내며; y-축은 FACS에 의해 평가된 세포수를 나타낸다.

도 7. 면역 후 80일에 혈액 순환에서 림프구 및 단핵구에 대한 α₄ 인테그린의 발현. 헤파린 처리된 혈액 시료를 면역 후 80일에 모든 그룹의 동물에서 수집하고, α₄ 인테그린에 대한 항체에 노출하고, 흐름세포측정법에 의해 분류하였다. 패널 A는 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 이용한 처리가 비-EAE 및 염수 처리된 동물과 비교하여 혈액 순환에서 α₄ 인테그린 밝은 림프구의 백분율의 큰 증가를 야기하는 것을 보여주는데, 이는 활성화된 말초 림프구가 저해제의 존재하에 CNS에 들어갈 수 없다는 것을 제시한다. 상기 생각과 일치하여, 혈액 순환에서 상기 세포의 백분율은 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르가 제거되고, CNS 염증이 패널 B에 보여준 바와 같이 회복될 때, 염수 처리된 수준으로 회복되었다. 순환하는 단핵구에 대한 β₄ 인테그린의 일반적인 발현은 모든 EAE 동물에서 증가하였지만, 분별가능한 아집단은 없었다. 상기 α₄ 인테그린 발현에서 단핵구 증가는 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르에 의해 영향을 받지 않았는데, 이는 저해제가 말초 면역 반응에 영향을 주지 않았다는 것을 제시한다.

도 8. 그림자 플라크가 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 처리된 동물에서 관찰된다. 이미지 8A-F는 처리군내의 별개의 동물 유래의 대표적인 솔로크롬-R-시아닌 염색된 척수 섹션이다. (8A) 저출력 이미지(40x)는 척수에서 탈수초형성의 정도를 보여준다. (8B) "0일" (0일은 동물이 2 이상의 임상 기록을 달성하는 질환 유도 후 적어도 40일에 측정된다) 대조군 동물에서 탈수초형성된 손상의 고출력 이미지 (100x)는 짙은 세포성 침윤 및 대식된 수초 찌꺼기를 포함하는 기포성 대식세포를 보여준다(화살표). (8C) 20일의 염수 처리를 받은 동물의 손상은 완전히 수초가 없었다 (250x). (8D) 대조적으로, 20일의 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 처리를 받은 동물은 플라크를 덮는 확산된 청색 염색을 갖는 손상을 나타내었다 (250x). (8E) 심한 탈수초형성이 40일의 운반체 처리 후에 명백하였다(100x). (8F) 40일의 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 치료 후에, 그러나, 대부분의 손상은 명확한 수초 창백을 보여주었다 (100x).

도 9. 박절 및 EM 섹션은 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 처리를 이용한 수초재형성을 확인한다. 톨루이딘 블루 박절 섹션은 패널 9A, 9B, 및 9C에 보여준다(모두 400x). 동일한 동물 유래의 대표적인 EM 섹션은 패널 9D, 9E 및 9F에 보여준다 (9D 및 9E, 1100x; 9F, 1300x). (도 9A 및 9D) 정상적인 수초. (9B 및 9E) 염수 처리의 30일. 일부 작은 혈관 축색돌기는 완전한 탈수초형성(d) 및 정상적인 수초(n) 사이에 가지런히 놓인 얇게 수초화된 시트(t)를 보여주었다. 일부 축색돌기는 Wallerian 퇴화를 겪었다 (화살표). 상기 경우에, 퇴화하는 축색돌기는 정상적으로 보이는 수초내에서 관찰되었다 (화살표, 9B). 전자현미경검사는 큰 혈관 축색돌기 주위를 둘러싸는 수초의 부재하에 확인되었다 (9E). (9C 및 9F) N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 처리의 30일. N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 받은 동물에서, 이미지(n)의 왼쪽에서 정상적으로 보이는 수초의 영역은 유사한 혈관(t)의 얇게 수초화된 축색돌기의 큰 영역에 인접하여 위치한다. 얇게 수초화된 축색돌기의 영역은 더욱 광대하고, 큰 혈관 축색돌기로 이루어졌다 (9C). EM은 수초재형성의 표시인 큰 직경 축색돌기를 둘러싸는 얇은 수초의 다층을 확인한다 (9F).

도 10. N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르는 척수내에서 수초재형성의 발생 및 영역을 증가시켰다. (1OA) 수초 창백을 보여주는 손상의 수는 각 동물에 대한 12개의 척수 단면의 평균내에 총 손상 수의 백분율로서 표시하였다. N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르(흑색 막대기)는 염수 처리된 동물(백색 막대기)에 대해 수초재형성의 발생을 증가시켰으며, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 처리를 이용한 그림자 플라크의 빈도수의 시간 의존성 증가가 있었다. (10B) 수초재형성의 정도를 결정하는 방법론의 표시. 척수 섹션내의 모든 손상의 모양을 추적하고, 윤곽 내의 영역을 계산하였다. 수초 창백을 보여주는 손상은 또한 추적하여 각 동물에 대한 수초재형성의 총 면적을 수득하였으며, 수초재형성의 정도를 총 손상 면적의 백분율로서 표시하였다. (10C-F) 각각의 분산 플롯은 x-축을 따라 총 손상 면적 및 y-축을 따라 수초 창백을 보여주는 손상의 백분율을 보여준다. 염수 처리된 동물(백색 기호)에서의 손상은 수초재형성이 거의 없었다. 대조적으로, 20, 30, 또는 40일의 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 처리 후에, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 처리된 동물(흑색 기호)에서 대부분의 손상은 수초재형성의 정도에서 다양성을 보여주었다(0-100%). 평균 백분율 면적은 각 분산 플롯의 오른쪽에 막대 그래프로 보여준다 (염수, 백색 막대기; N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르, 흑색 막대기). 20, 30 또는 40일의 치료 후에, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 처리된 동물은 10일 처리 후 또는 모든 염수 대조군(< 10%)보다 수초재형성의 현저하게 높은 백분율을 가졌다(50%).

도 11A 및 11B. 마우스 21.6 중쇄 가변 부위의 각각의 DNA 및 아미노산 서열.

도 12A 및 12B. 마우스 21.6 중쇄 가변 부위의 각각의 DNA 및 아미노산 서열.

도 13. 마우스 및 재형성된 인간 21.6 경쇄 가변 부위의 아미노산 서열의 비교. CDR 루프 구조에 대한 Chothia 표준 서열의 부분인 아미노산 잔기는 별표로 표시한다. RE1은 인간 RE1 경쇄의 V_L 부위 유래의 FR 및 CDR 을 보여준다. La 및 Lb는 재형성된 인간 21.6 V_L 부위의 두가지 버전이다. RE1 서열의 것과 상이한 La의 FR에서의 잔기가 밑줄 그어진다. Lb에서, RE1의 것과 상이한 골격 부위의 유일한 잔기를 보여준다.

도 14. 마우스 및 재형성된 인간 21.6 중쇄 가변 부위의 아미노산 서열의 비교. CDR 루프 구조에 대한 Chothia 표준 서열의 부분인 아미노산 잔기는 별표로 표시한다. 2*CL은 21/28'CL 서열 항체의 V_H 부위 유래의 FR 및 CDR 을 보여준다. Ha, Hb, 및 Hc는 재형성된 인간 21.6 V_H 부위의 세가지 버전이다. 21/28'CL 서열의 것과 상이한 Ha의 FR에서의 잔기가 밑줄 그어진다. Hb 및 Hc에서, 21/28'CL의 것과 상이한 골격 부위의 유일한 잔기를 보여준다.

도 15A 및 15B. 재형성된 인간 21.6 경쇄 가변 부위의 제1 버전("a")의 cDNA 및 아미노산 서열.

도 16A 및 16B. 재형성된 인간 21.6 중쇄 가변 부위의 제1 버전("a")의 cDNA 및 아미노산 서열.

도 17A 및 17B. 도 17A는 재형성된 인간 21.6 경쇄 가변 부위를 디자인하기 위해 이용된 서브그룹 5로부터 마우스 카파 V_L 부위의 109개 아미노산 길이 서열이다. 도 17B는 재형성된 인간 21.6 경쇄 가변 부위를 디자인하기 위해 이용된 서브그룹 1로부터 인간 V_L 부위의 114개 아미노산 길이 서열이다. 상기 서열은 또한 하기 표 10에 기재된다.

도 18A 및 18B. 도 18A는 재형성된 인간 21. 6 중쇄 가변 부위를 디자인하기 위해 이용된 서브그룹 2c로부터 마우스 V_H 부위의 125개 아미노산 길이 보존 서열이다. 도 18B는 재형성된 인간 21. 6 중쇄 가변 부위를 디자인하기 위해 이용된 서브그룹 1로부터 인간 V_H 부위의 129개 아미노산 길이 보존 서열이다. 상기 서열은 또한 하기 표 11에 기재된다.

하기의 실시예는 본 발명을 어떻게 제조하고 사용하는지에 대한 완전한 개시와 기재를 가지고 이들을 당업자에게 제공하기 위한 것으로서, 발명자가 발명으로서 간주하는 범주를 제한하거나 하기 실험을 전부 또는 일부만 수행하는 것을 나타내는 것이 아니다. 사용된 숫자(예: 양, 온도, 등)에 대하여 정확성은 확실하나, 몇몇 실험적 에러 및 편차가 간주되어져야 한다. 다른 표기가 없다면, 부(part)는 중량부이고, 분자량은 평균 분자량이고, 온도는 섭씨 온도이고, 압력은 대기 또는 그 근처의 압력이다.

9.1 화합물의 합성

하기의 실시예에서, 약어가 위에 정의되지 않았다면, 그것은 일반적인 통념을 가진다. 나아가, 모든 온도는 (다른 표시가 없다면) 섭씨 온도이다. 다음의 방법들은 하기 표시된 화합물을 제조하는데 사용된다.

방법 1

N - 토실레이션 ( N - Tosylation ) 과정

적당한 아미노산의 N-토실레이션은 Cupps. Boutin와 Rapoport의 방법(J. Org.Chem. 1985, 50, 3972)를 통해 수행되었다.

방법 2

메틸 에스테르 제조 과정

아미노산 메틸 에스테르는 Brenner와 Huber의 방법(Helv . Chim . Acta 1953, 36, 1109)을 이용하여 제조되었다.

방법 3

BOP 커플링(Coupling) 과정

바람직한 디펩티드 에스테르는 적당한 아미노산 에스테르 또는 아미노산 에스테르 히드로클로라이드(1 당량), 벤조트리아졸-1-일옥시-트리스(디메틸아미노)포르포늄 헥사플루오로포스페이트[BOP](2.0 당량), 트리에틸아민(1.1 당량) 및 DMF와 적당한 N-보호(protected) 아미노산 (1 당량)의 반응에 의해 제조되었다. 상기 반응 혼합물을 밤새(overnight) 실온에서 교반하였다. 조 생성물(crude product)을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 디펩티트 에스테르를 얻었다.

방법 4

수소첨가(Hydrogenation) 과정 Ⅰ

수소첨가는 메탄올에 용해된 카본 상에서(10중량%) 10% 팔라듐을 이용하여 30 psi에서 밤새 수행되었다. 혼합물을 셀라이트(Celite) 패드(pad)를 통과시켜 여과하였고, 여과물을 농축하여 원하는 아미노 화합물을 얻었다.

방법 5

가수분해(Hydrolysis) 과정 Ⅰ

적당한 에스테르의 냉각된(0℃) THF/H₂O 용액(2:1, 5-10 mL)에 LiOH(또는 NaOH)(0.95 당량)을 첨가하였다. 0℃로 온도를 유지하고 반응을 1-3시간 동안 완료하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 수용상(aqueous phase)을 동결건조하여 원하는 카복실레이트 염을 얻었다.

방법 6

에스테르 가수분해 과정 Ⅱ

적당한 에스테르의 냉각된(0℃) THF/H₂O 용액(2:1, 5-10 mL)에 LiOH(1.1 당량)을 첨가하였다. 0℃로 온도를 유지하고, 반응을 1-3시간 동안 완료하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 잔류물은 H₂O로 용해시키고, 수용성 HCl를 이용하여 pH를 2-3으로 조정하였다. 생성물을 에틸 아세테이트로 추출한 후, 결합된 유기상(organic phase)을 함수(brine)로 세척하고, MgSO₄로 건조하고, 여과하고 농축하여 원하는 산을 얻었다.

방법 7

에스테르 가수분해 과정 Ⅲ

적당한 에스테르를 디옥산(dioxane)/H₂O(1:1)에 용해시키고, 0.9 당량의 0.5N NaOH를 첨가하였다. 3-16시간 동안 반응액을 교반한 후 농축하였다. 얻은 잔류물을 H₂O에 용해시킨 후, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 수용상을 동결건조하여 원하는 카복실레이트 염을 얻었다.

방법 8

술포닐화 ( Sulfonylation ) 과정 Ⅰ

메틸렌 클로라이드(25 ㎖)에 용해되어 -78℃로 냉각된, 적당하게 보호된 아미노페닐알라닌 아날로그(11.2 mmol)에 원하는 술포닐 클로라이드(12 mmol)을 첨가한 후, 피리딘(2 mL)을 드롭와이즈(dropwise) 방식으로 첨가하였다. 용액을 실온으로 따뜻하게 하고, 48시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 메틸렌 클로라이드(100 mL)와 함께 250 mL 분액 깔대기로 옮긴 후, 1N HCl(50 mL×3), 함수(50 mL), 그리고 물(100 mL)로 추출하였다. 유기상을 건조하고(MgSO₄), 용매를 농축하여 원하는 생성물을 얻었다.

방법 9

환원성 아미노화 (Reductive Amination ) 과정

적당한 알데히드를 이용한 Tos-Pro-p-NH₂-Phe의 환원성 아미노화는 아세트산, 소듐 트리아세트옥시보로히드라이드(sodium triacetoxyborohydride), 메틸렌 클로라이드를 이용하여 수행하였고, 결합된 혼합물은 실온에서 밤새 교반하였다. 조 생성물은 플래쉬 크로마토그래피로 정제하였다.

방법 10

BOC 제거 과정

무수물의 히드로클로라이드(HCl) 가스는 적당한 Boc-아미노산 에스테르의 메탄올 용액(methanolic solution)을 통하여 0℃에서 15분간 버블(bubble)되었고, 반응 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 상기 용액을 시럽(syrup)으로 농축하고, Et₂O에 용해시킨 후, 재농축하였다. 이 과정을 반복하였으며, 얻은 고체를 고진공(high vacuum) 하에서 밤새 두었다.

방법 11

tert -부틸 에스테르 가수분해 과정 Ⅰ

tert-부틸 에스테르를 CH₂Cl₂에 용해시킨 후, TFA로 처리하였다. 상기 반응은 반응 혼합물이 농축되는 시간인 1-3시간 내에 완료하였고, 잔류물은 H₂O에 용해시킨 후 동결건조하여 원하는 산을 얻었다.

방법 12

EDC 커플링 과정 Ⅰ

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤린(1 당량)의 CH₂Cl₂ 용액(5-20 mL)에 적당한 아미노산 에스테르 히드로클로라이드(1 당량), N-메틸포르폴린(1.1-2.2 당량) 및 1-히드록시벤조트리아졸(2 당량)을 혼합한 후, 아이스 배쓰(ice bath)에 두고, 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸-카르보디이미드(1.1 당량)을 첨가하였다. 상기 반응액을 실온으로 상승하게 하고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 H₂O에 부은 후, 유기상을 sat. NaHCO₃, 함수로 세척하고, 건조하고(MgSO₄ 또는 Na₂SO₄), 여과하고 농축하였다. 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피로 정제하였다.

방법 13

EDC 커플링 과정 Ⅱ

적당한 N-보호 아미노산(1 당량)의 DMF 용액(5-20 mL)에 적당한 아미노산 에스테르 히드로클로라이드(1 당량), Et₃N(1.1 당량) 및 1-히드록시벤조트리아졸(2 당량)을 혼합한 후, 아이스 배쓰에 두고, 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸-카르보디이미드(1.1 당량)을 첨가하였다. 상기 반응액을 실온으로 상승하게 하고, 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc와 H₂O로 분획화한 후, 유기상을 0.2 N 구연산(citric acid), H₂O, sat. NaHCO₃, 함수로 세척하고, 건조하고(MgSO₄ 또는 Na₂SO₄), 여과하고 농축하였다. 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피 또는 예비 TLC(preparative TLC)로 정제하였다.

방법 14

술포닐화 과정 Ⅱ

적당한 술포닐 클로라이드를 CH₂Cl₂에 용해시킨 후, 아이스 배쓰에 두었다. L-Pro-L-Phe-OMe·HCl(1 당량)과 Et₃N(1.1 당량)을 첨가하고, 상기 반응액이 실온으로 따뜻해지도록 하고 질소 대기 하에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 잔류물을 EtOAc와 H₂O 사이에 분획화한 후, 유기상을 sat. NaHCO₃, 함수로 세척하고, 건조하고(MgSO₄ 또는 Na₂SO₄), 여과하고 농축하였다. 조 생성물을 칼럼 크로마토그래피 또는 예비 TLC로 정제하였다.

방법 15

술포닐화 과정 Ⅲ

CH₂Cl₂에 용해된 L-Pro-L-4-(3-디메틸아미노프로필옥시)-Phe-OMe의 용액(1 당량)(방법 10에 기재된 과정으로 제조됨)에 Et₃N(5 당량)을 첨가하고, 적당한 술포닐 클로라이드(1.1 당량)을 첨가하였다. 상기 반응액이 실온으로 따뜻해지도록 하고 질소 대기 하에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 농축하고, EtOAc로 용해시킨 후, sat. NaHCO₃와 0.2 N 구연산으로 세척하였다. 수용상을 고체 NaHCO₃를 이용하여 염기성(basic)으로 만들고, 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 유기상을 함수로 세척하고, 건조하고(MgSO₄ 또는 Na₂SO₄), 여과하고 농축하였다. 조 메틸 에스테르를 예비 TLC로 정제하였다. 상응하는 산은 방법 7에 기재된 과정으로 제조하였다.

방법 16

수소첨가 과정 Ⅱ

아즈락톤(azlactone)의 메탄올 용액(10-15 mL)에 NaOAc(1 당량)와 10% (Pd/C)를 첨가하였다. 이 혼합물을 40 psi H₂에서 히드로제네이터(hydrogenator) 상에 두었다. 8-16 시간 후에 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통과시켜 여과한 후, 여과물을 농축하여 디히드로디펩티드 메틸 에스테르를 얻었다. 상기 에스테르를 디옥산(dioxane)/H₂O(5-10 mL)에 용해시킨 후, 여기에 0.5 N NaOH(1.05 당량)을 첨가하였다. 1-3시간 동안 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 농축하고, 잔류물을 H₂O에 재용해시키고, EtOAc로 세척하였다. 수용상을 0.2 N HCl로 산성(acidic)으로 만들고, 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 결합된 유기상을 함수(1×5 ㎖)로 세척하고, 건조하고(MgSO₄ 또는 Na₂SO₄), 여과하고 농축하여 상기 산을 1:1 혼합물의 부분입체이성질체(diastereomer)로서 얻었다.

방법 17

tert -부틸 에스테르 가수분해 과정 Ⅱ

tert-부틸 에스테르를 CH₂Cl₂(5 mL)에 용해시키고, TFA(5 mL)를 처리하였다. 상기 반응은 반응 혼합물이 농축되는 시간인 1-3시간 내에 완료하였다. 잔류물을 H₂O에 재용해시킨 후 동결건조하여 원하는 생성물을 얻었다.

실시예 1

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-(4- 메틸피페라진 -

1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 에틸 에스테르의 합성

상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질로 대체하여 실시예 4의 제조에서 약술된 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 2

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -

L-4-( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌 에틸 에스테르의 합성

반응 바이얼에 7.00 g(15.2 mmol, 1.0 eq) Ts-Pro-Tyr(H)-OEt 와 1.86 g(15.2 mmol, 1.0 eq) DMAP 를 결합시켰다. 이후, 메틸렌 클로라이드(50 mL), 트리에틸아민(2.12 mL -- 1.54 g, 15.2 mmol., 1.0 eq), 그리고 디메틸카르바밀 클로라이드(1.68 mL -- 1.96 g, 18.2 mmol, 1.2 eq)를 첨가하였다. 상기 바이얼의 뚜껑을 단단히 덮은 후, 상기 반응 용액을 흔들어 균등질의 용액을 얻었다. 상기 반응 용액을 40℃로 가열하였다. 48시간 후, 얻은 무색(colorless) 용액의 TLC는 완전한 전환(complete conversion)을 나타내었다. 반응 용액은 워크업(workup)은 다음과 같았다: 상기 반응 혼합물에 50 mL EtOAC와 50 mL 헥산을 첨가한 후, 3×50 mL 0.5 mL 헥산을 상기 반응 혼합물에 첨가하여 세척하고, 3×50 mL 0.5M 구연산, 2×50 mL 물, 2×50 mL 10% K₂CO₃, 그리고 1×50 mL sat. NaCl로 세척한다. MgSO₄로 건조한다. 여과한다. 증발시켜 8.00 g(99%)의 상기 타이틀 화합물을 깨끗한 오일로 수득한 후, 세운 채로 응고시킨다. 5:3:2 헵탄/EtOAc/CH₂Cl₂로부터 재결정화한다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 3

1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 4

1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

41.2 g(84.34 mmol, 1.0 eq) Ts-Pro-Tyr(H)-OtBu와 17.0 g(84.34 mmol, 1.0 eq) 4-니트로페닐 클로로포르메이트를 결합시킨다. 700 mL CH₂Cl₂를 첨가한다. 셉텀(septum)으로 뚜껑을 덮는다. N₂ 라인을 부착한다. 상기 플라스크를 4:1 물/EtOH + 드라이 아이스 슬러리(slurry)에 침지하고, -15℃로 냉각되도록 교반한다. 5분 이상 교반하면서 29.38 mL(21.33 g, 210.81 mmol, 2.5 eq) Et₃N를 첨가한다. -10℃ 내지 -15℃에서 1시간 동안 교반한다. 3분 이상 교반하면서 9.35 mL(8.45 g, 84.34 mmol, 1.0 eq) N-메틸 피페라진을 첨가한다. 실온으로 데우면서 밤새 교반한다. 700 mL 헥산으로 희석한다. 수용상에서 노란색(4-니트로페놀)이 보이지 않을 때까지 10% K₂CO₃로 반복 세척한다. sat.NaCl로 세척한다. 무수물 MgSO₄로 건조시킨다. 여과한다. 증발농축한다(evaporate). 500 mL EtOH에 용해시키고, 증발농축하여 Et₃N을 제거한다. 1회 반복한다. 400 mL EtOH에 용해시키고, 교반하면서 600 mL 물을 첨가하여 고체 또는 오일을 침전시킨다. 만약 오일인 경우에는 응고시키기 위하여 강하게 교반한다. 여과하여 상기 고체를 분리한다. 용해, 침전 및 여과를 한번 더 반복한다. 물로 린스(rinse)하여 노란색을 제거한다. 일정한 양(mass)의 고진공은 흰색 고체의 상기 타이틀 화합물을 생기게 한다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 5

1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 1의 생성물로부터 방법 7에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 6

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌 n -부틸 에스테르의 합성

상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질로 대체하여 실시예 2의 제조에서 약술된 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 7

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌 시클로펜틸 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 8

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 9

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 2의 생성물로부터 실시예 7에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 10

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-3-

( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌 에틸 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 11

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -

L-4-( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 12

L-4-( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 13

L-4-( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 11의 생성물로부터 실시예 7에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 14

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-[(1,1- 디옥소 ) 티아모르폴린 -

3-카르보닐]-L-4-( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌

tert -부틸 에스테르의 합성

L-티아모르폴린-5-카르복실산을 Larsson과 Carlson의 방법(Acta Chemica Scan. 1994, 48, 517-525)에 의하여 제조하였다. N-(톨루엔-4-술포닐)-L-티아모르폴린-5-카르복실산은 방법 1에 기재된 과정을 이용하여 제조한 후, BOP와 NMM의 존재 하에서 DMF에 용해된 t-부틸 티로신과 커플링하였다. 이후, 수용성 워크업과 플래쉬 크로마토그래피를 수행하여 N-(톨루엔-4-술포닐)-L-[티아모르폴린-3-카르보닐]-L-4-페닐알라닌 tert-부틸 에스테르를 얻었다.

4-(N,N-디메틸카르바밀옥시) 그룹은 상기 실시예 2에 의하여 제조하였고, 티아모르롤리노 그룹은 Larsson과 Carlson(Acta Chermica Scan. 1994, 48, 522)에 의해 1,1-디옥소-티아모르폴리노 그룹으로 산화시켰다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 15

3-카르보닐]-L-4-( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 14의 생성물로부터 실시예 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 16

L-4-(4- 메틸피페라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌

tert -부틸 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 17

L-4-(4- 메틸피페라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 16의 생성물로부터 방법 11에 기재된 방법을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 18

N -(톨루엔-4- 술포닐 ) 사르코실 -L-4-

( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 19

N -(톨루엔-4- 술포닐 ) 사르코실 -L-4-

상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질로 대체하여 실시예 2의 제조를 위한 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 20

N -(톨루엔-4- 술포닐 ) 사르코실 -L-4-

( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 18의 생성물로부터 방법 7에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 21

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

( N,N - 디메틸아미노술포닐옥시 )페닐알라닌

tert -부틸 에스테르의 합성

디메틸카르바밀 클로라이드를 디메틸설파모일 클로라이드로 대체하고, 실시예 2의 제조를 위한 방법에 따라 상기 타이틀 화합물을 얻었다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 22

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

( N,N - 디메틸아미노술포닐옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 21의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 23

N -(톨루엔-4- 술포닐 )- 사르코실 -L-(4- 모르폴린카르바밀옥시 )

페닐알라닌 t -부틸 에스테르의 합성

Ts-Pro-Tyr(H)-O-t-부틸 에스테르의 제조에서 L-프롤린을 사크로신(sacrosine)으로 대체하고, 디메틸카르바밀 클로라이드를 4-모르폴린카르보닐 클로라이드로 대체하고, 실시예 2의 제조를 위한 방법에 따라 흰색 고체의 상기 타이틀 화합물을 얻었다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 24

N -(톨루엔-4- 술포닐 ) 사르코실 -L-4-

( 이소니페코토일옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 23의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 25

3-카르보닐]-L-4-(모르폴린-4- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌

tert -부틸 에스테르의 합성

디메틸카르바밀 클로라이드를 4-모르폴린카르보닐 클로라이드로 대체하고 실시예 2 및 14의 제조 방법들에 따라 흰색 고체의 상기 타이틀 화합물을 얻었다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 26

3-카르보닐]-L-4-(모르폴린-4- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 25의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 27

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 28

N -(톨루엔-4- 술포닐 ) 사르코실 -L-4-

(4- 메틸피페라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 29

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(1,1- 디옥소 -5,5-디메틸)-

티아프롤릴 -L-4-( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌

tert -부틸 에스테르의 합성

실시예 12의 생성물을 Larsson과 Carlson의 방법(Acta Chemica Scan. 1994, 48, 517-525)에 의해 산화하여 흰색 고체의 상기 타이틀 화합물을 얻었다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 30

N -(1- 메틸이미다졸릴 -4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -

상기 타이틀 화합물은 실시예 106의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

제조예 A

2-(사카린-2-일) 프로피오닐 -L-4-

N-(벤즈이소티아졸론)-L-알라닐-L-티로신 t-부틸 에스테르는 0℃로 냉각된 THT에 용해되고 소듐 히드라이드(미네틸 오일이 없도록 세척됨)에 THT에 용해된 N-(2-메톡시카르보닐)술포닐-L-알라닌-L-티로신 t-부틸 에스테르 용액을 드롭와이즈(dropwise) 방식으로 첨가하여 첫번째로 결합시킴으로써 제조되었다. 반응액을 1시간 동안 0℃에서 교반한 후, 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc와 0.2 N HCl로 추출하고, 결합된 EtOAc 층을 0.2 N HCl, sat. NaHCO₃ 및 sat. NaCl로 연속 세척하였다. 유기층을 MgSO₄로 건조한 후, 여과하고 농축하였다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 여과하여 N-(벤즈이소티아졸론)-L-알라닐-L-티로신 t-부틸 에스테르를 얻었다.

이후, 실시예 2에 기재된 과정에 따라 상기 타이틀 화합물을 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 31

티아프롤릴 -L-4-( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 29의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 32

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-

4-( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 27의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 33

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-D- 프롤릴 -L-4-

(4- 메틸피페라진 -1-일)페닐알라닌 t -부틸 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 34

N -(톨루엔-4- 술포닐 )- N - 메틸 -L- 알라닐 -L-4-(4- 메틸피페라진 -

1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 t -부틸 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 35

N -(4- 니트로벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 36

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-[(1,1- 디옥시 )-

티아모르폴린 -3-카르보닐]-L-4-

( N,N - 디메틸아미노술포닐옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질로 대체하여 실시예 21의 제조에서 약술된 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 37

N -(톨루엔-4- 술포닐 ) 사르코실 -L-4-

( 티오모르폴린 -4- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

N-메틸피페라진을 티오모르폴린으로 대체하고 실시예 4의 제조를 위한 방법에 따라 상기 타이틀 화합물을 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 38

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- N - 메틸알라닐 -

상기 타이틀 화합물은 실시예 34의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 39

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -

L-4-(1,1- 디옥소티오모르폴린 -4- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 81의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 40

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

( 티오모르폴린 -4- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 82의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 41

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -

L-4-( 이소니페코토일옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 80의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 42

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

( 피롤리딘 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 83의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 43

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

(모르폴린-4- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 108의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 44

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

(4- 메틸피페라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 네오펜틸 에스테르의 합성

티타늄 이소프로폭시드(0.3 당량)을 Tos-Pro-Tyr 에틸 에스테르(1 당량)과 여분의 네오펜틸 알코올에 첨가하였다. 혼합물을 아르곤 대기 하에서 밤새 환류하도록 가열하였다. 초과된 네오펜틸 알코올을 감소된 압력하에서 제거한 후, 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피(실리카, 헥산: EtOAc 2:1)로 정제하여 흰색 고체(0.9 g, 85%)의 네오펜틸 에스테르를 얻었다. 실시예 4에 기재된 과정에 따라 상기 타이틀 화합물을 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 45

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

( N , N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌 네오펜틸 에스테르의 합성

티타늄 이소프로폭시드(0.3 당량)을 Tos-Pro-Tyr 에틸 에스테르(1 당량)과 여분의 네오펜틸 알코올에 첨가하였다. 혼합물을 아르곤 대기 하에서 밤새 환류하도록 가열하였다. 초과된 네오펜틸 알코올을 감소된 압력하에서 제거한 후, 잔류물을 플래쉬 칼럼 크로마토그래피(실리카, 헥산: EtoAC 2:1)로 정제하여 흰색 고체의 네오펜틸 에스테르를 얻었다. 실시예 2에 기재된 과정에 따라 상기 타이틀 화합물을 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 46

2-(사카린-2-일) 프로피오닐 -L-4-

(4- 메틸피페라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌

tert -부틸 에스테르의 합성

상기 타이틀 화합물은 제조예 A 및 실시예 4에 기재된 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 47

2-(사카린-2-일) 프로피오닐 -L-4-

( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 제조예 A의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 48

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- N - 메틸알라닐 -L-4-

상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질로 대체하여 실시예 2의 합성 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 49

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-( 티아모르폴린 -3-카르보닐)-

L-티아모르폴린-3-카르복실산은 Larsson과 Carlson의 방법(Acta Chemica Scan. 1994, 48, 517-525)에 의해 제조하였다. N-(톨루엔-4-술포닐)-L-티아모르폴린-3-카르복실산은 방법 1에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다. 상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질로 대체하여 실시예 2의 합성 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 50

N -(톨루엔-4- 술포닐 ) 사르코실 -

상기 타이틀 화합물은 실시예 121의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 51

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -3-카르보닐)-

상기 타이틀 화합물은 Larsson과 Carlson에 의해 개시된 과정(Acta Chemica Scan. 1994, 48, 522)에 따라 실시예 49의 생성물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 52

L-4-(모르폴린-4- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 71의 제조에서 기재된 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 53

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- N - 메틸알라닐 -

상기 타이틀 화합물은 실시예 48의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 54

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L-( 티아모르폴린 -3-카르보닐)-

L-티아모르폴린-3-카르복실산은 Larsson과 Carlson의 방법(Acta Chemica Scan. 1994, 48, 517-525)에 의해 제조하였다. N-(톨루엔-4-술포닐)-L-티아모르폴린-3-카르복실산은 방법 1에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

이후, 상기 타이틀 화합물은 실시예 2의 합성 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 55

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -3-카르보닐)-

상기 타이틀 화합물은 Larsson과 Carlson에 의해 개시된 과정(Acta Chemica Scan. 1994, 48, 522)에 따라 실시예 54의 생성물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 56

N -(피리딘-3- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

N-벤질-L-프롤린을 방법 12에 기재된 과정을 이용하여 L-티로신 t-부틸 에스테르에 커플링하였다. N-벤질-L-프롤릴-L-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐-알라닌 t-부틸 에스테르는 실시예 2의 제조에서 기재된 과정에 따라 제조하였다. L-프롤릴-L-(4-N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 t-부틸 에스테르는 방법 4에 기재된 과정을 이용하여 이전 반응의 생성물로부터 제조하였다. 상기 타이틀 화합물은 3-피리딘 술포닐 클로라이드(Crowell et al., J. Med . Chem., 1989, 32, 2436-2442)와 마지막 반응의 생성물의 제조에서 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

제조예 B

N -(피리미딘-2- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

상기 타이틀 화합물은 2-피리미딘 술포닐 클로라이드를 대체하고(Skulnick et al., J. Med . Chem., 1997, 40, 1149-1164) 실시예 56의 제조 방법에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 57

N -(4- 니트로벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 35의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 58

N -(4- 시아노벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질로 대체하고 실시예 2의 제조에서 기재된 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 59

L-4-( N,N - 디메틸아미노술포닐옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 36의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 60

상기 타이틀 화합물은 실시예 51의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 61

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(1,1- 디옥소 ) 티아프롤릴 -

상기 타이틀 화합물은 여기에 기재된 상기 실시예들에 의해 제조된, N-(톨루엔-4-술포닐)-L-티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르로부터 Larsson과 Carlson에 의해 개시된 과정(Acta Chemica Scan. 1994, 48, 522)에 따라 제조되었다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 62

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 63

N -(1- 메틸피라졸릴 -4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 117의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 64

상기 타이틀 화합물은 실시예 61의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 65

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L- 티아프롤릴 -L-4-

( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 84의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 66

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸)-

tert -부틸 에스터의 합성

상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질로 대체하여 실시예 2의 제조에서 기재된 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 67

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -

3-카르보닐)-L-4-(1,1- 디옥소티오모르폴린 -

4- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스터의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 68의 제조에서 기재된 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 68

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -

3-카르보닐)-L-4-(1,1- 디옥소티오모르폴린 -

N-메틸피페라진을 티오모르폴린으로 대체하여 실시예 4의 제조방법에 따라 수행한 후, Larsson과 Carlson(Acta Chemica Scan. 1994, 48, 522)에 의해 티로모르폴리노 링에 있는 황 그룹(sulfur group)을 산화시켜서 흰색 고체의 상기 타이틀 화합물을 얻었다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 69

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -

L-4-( 티오모르폴린 -4- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌

tert -부틸 에스터의 합성

상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질로 대체하여 실시예 37에 기재된 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 70

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸)-

상기 타이틀 화합물은 실시예 66의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 71

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -3-

카르보닐)-L-4-(모르폴린-4- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌

tert -부틸 에스터의 합성

디메틸카르바밀 클로라이드를 4-모르폴린카르바밀 클로라이드로 대체하여 실시예 2의 제조 방법에 따라 흰색 고체의 상기 타이틀 화합물을 얻었다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 72

N -(4- 트리플루오로메톡시벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -

L-4-( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스터의 합성

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 73

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -3-

카르보닐)-L-4-( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌

이소프로필 에스테르의 합성

실시예 2의 제조방법에 따라 수행한 후, Larsson과 Carlson(Acta Chemica Scan. 1994, 48, 522)에 의해 티로모르폴리노 링에 있는 황 그룹(sulfur group)을 산화시켜서 상기 타이틀 화합물을 얻었다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 74

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(1,1- 디옥소 -5,5-디메틸) 티아프롤릴 -

상기 타이틀 화합물은 Larsson과 Carlson(Acta Chemica Scan. 1994, 48, 522)에 개시된 과정에 따라 실시예 66의 생성물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 75

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(1,1- 디옥소 -5,5-디메틸) 티아프롤릴 -

L-4-( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스터의 합성

상기 타이틀 화합물은 Larsson과 Carlson(Acta Chemica Scan. 1994, 48, 522)에 개시된 과정에 따라 실시예 11의 생성물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 76

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -

상기 타이틀 화합물은 실시예 74의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 77

N -(피리미딘-2- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 제조예 B의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 78

카르보닐)-L-4-(4- 메틸피페라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌

tert -부틸 에스테르의 합성

실시예 4의 제조 방법을 수행한 후에 Larsson과 Carlson(Acta Chemica Scan. 1994, 48, 522)에 의해 티아모르폴리노 링의 황 그룹을 산화시켜서 상기 타이틀 화합물을 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 79

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L-

(1,1- 디옥소 ) 티아프롤릴 -L-4-( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 85의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 80

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

( 이소니페코토일옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

N-메틸피페라진을 피페라진으로 대체하고 실시예 4의 제조 방법에 따라 흰색 고체의 상기 타이틀 화합물을 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 81

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

(1,1- 디옥소티오모르폴린 -4- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌

tert -부틸 에스테르의 합성

실시예 82의 생성물을 Larsson과 Carlson의 방법(Acta Chemica Scan. 1994, 48, 517-525)에 의해 산화시켜 흰색 고체의 상기 타이틀 화합물을 얻었다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 82

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

N-메틸피페라진을 티오모르폴린으로 대체하고 실시예 4의 제조방법에 따라 흰색 고체의 상기 타이틀 화합물을 얻었다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 83

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

( 피롤리딘 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

디메틸카르바밀 클로라이드를 피롤리딘카르보닐 클로라이드로 대체하고 실시예 2의 제조방법에 따라 흰색 고체의 상기 타이틀 화합물을 얻었다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 84

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 85

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(1,1- 디옥소 ) 티아프롤릴 -

상기 타이틀 화합물은 Larsson과 Carlson의 산화 과정(Acta Chemica Scan. 1994, 48, 517-525)에 따라 실시예 84의 생성물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 86

N -(2,5- 디클로로티오펜 -3- 술포닐 )-L- 프롤릴 -

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 87

N -(4- 아세트아미도벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 88

N -(4- tert - 부틸벤젠술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -

3-카르보닐)-L-4-( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌

tert -부틸 에스테르의 합성

상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질로 대체하여 실시예 73의 제조에서 약술된 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 89

N -(피리딘-3- 술포닐 )-L- 프롤릴 -

상기 타이틀 화합물은 실시예 56의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 90

N -(2- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -

tert -부틸 에스테르의 합성

L-티아모르폴린-3-카르복실산은 Larsson과 Carlson의 방법(Acta Chemica Scan. 1994, 48, 517-525)에 의해 제조하였다. N-(2-플루오로벤젠-4-술포닐)-L-티아모르폴린-3-카르복실산은 방법 1에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다. 상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질을 이용하여 상기 기재된 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 91

N -(3- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -

tert -부틸 에스테르의 합성

L-티아모르폴린-5-카르복실산은 Larsson과 Carlson의 방법(Acta Chemica Scan. 1994, 48, 517-525)에 의해 제조하였다. N-(3-플루오로벤젠-4-술포닐)-L-티아모르폴린-5-카르복실산은 방법 1에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다. 상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질을 이용하여 상기 기재된 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 92

N -(2,4- 디플루오로벤젠술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -

tert -부틸 에스테르의 합성

L-티아모르폴린-5-카르복실산은 Larsson과 Carlson의 방법(Acta Chemica Scan. 1994, 48, 517-525)에 의해 제조하였다. N-(2,4-디플루오로벤젠-4-술포닐)-L-티아모르폴린-5-카르복실산은 방법 1에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다. 상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질을 이용하여 상기 기재된 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 93

N -(4- 아세트아미도벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -

상기 타이틀 화합물은 실시예 87의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 94

상기 타이틀 화합물은 실시예 72의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 95

상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질로 대체하고 실시예 2에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 96

N -(4- 시아노벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -

상기 타이틀 화합물은 실시예 58의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 97

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(3,3-디메틸) 프롤릴 -

상기 타이틀 화합물은 실시예 98의 제조에서 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 98

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(3,3-디메틸) 프롤릴 -

3,3-디메틸 프롤린(Sharma and Lubell, J. Org . Chem. 1996, 61, 202-209)은 방법 1에 기재된 과정에 따라 N-토실레이션시켰다. 이후, 상기 타이틀 화합물은 실시예 2의 제조에서 기재된 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

상기 기재된 방법들에 의해 제조된 다른 화합물들은 하기 표 Ⅱ에 있는 실시예 99-137에 표시된 것들을 포함한다. 또한, 표 Ⅱ에 있는 실시예 101, 109, 111, 117, 132 및 132는 다음과 같이 예시된다.

실시예 101

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -

4-( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )-L-페닐알라닌

이소프로필 에스테르의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 2의 제조에서 약술된 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 109

N-( 벤질술포닐 )-L-(5,5-디메틸)

티아프롤릴 -L-(4-N,N- 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 111의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같았다:

MS(FAB) [M+H]⁺ 550.

Calcd. for: C₂₅H₃₁N₃O₇S₂; C, 54.62; H, 5.68; N 7.64.

Found: C 54.51; H 5.60; N 7.63

실시예 111

N-( 벤질술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-

(4-N,N- 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

물리적 데이터는 다음과 같았다:

MS[M+H]⁺ 550.

Calcd. for: C₂₉H₃₉N₃O₇S₂; C, 57.52; H, 6.45; N 6.94.

Found: C, 57.32; H, 6.52; N, 6.81

실시예 117

N -( 메틸 - 피라졸 -4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -

L-(4- N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌

tert -부틸 에스테르의 합성

N-메틸-피라졸 술포닐 클로라이드(Dickson, US 3,665,009)(May 23, 1972)를 대체하고 실시예 56의 제조 방법에 따라 상기 타이틀 화합물을 얻었다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 132

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-

4-(1,1- 디옥소티오모르폴린 -4- 일카르보닐옥시 )-

페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

N-메틸피페라진을 티아모르폴린으로 대체하고 실시예 4 및 14의 제조 방법에 따라 상기 타이틀 화합물을 얻었다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 137

N -( 메틸 - 피라졸 -4- 술포닐 )-

L- 프롤릴 -L-(4- N,N - 디메틸카르바밀옥시 )-

페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 117의 제조에서 기재된 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

표 4

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶	실시예 번호
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-O-n-부틸	99
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-O-시클로펜틸	100
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂	101
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(피페리딘-4-일)C(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃	102
ψ-CH₂-	R²/R³=시클릭3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(1-메틸피페리딘-4-일)C(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃	103
ψ-CH₂-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH	104
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(1-Boc-4-페닐피페리딘-4-일)-C(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃	105

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶	실시예 번호
1-메틸이미다졸-4-일	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃	106
p-NH₂-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃	107
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(모르폴린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃	108
p-CH₂-	R²/R³=시클릭 -CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH	109
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH₂-NH-CH₂-(L-피페라지닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH	110
p-CH₂-	R²/R³=시클릭 -CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃	111
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-NH-아다만틸	112
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-NHCH₂C(O)OH	113
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NS(O)₂O-]벤질-	-OCH₃	114

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶	실시예 번호
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 -CH₂CH₂-NH-CH₂(L=피페라지닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃	115
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 -CH₂CH₂-(Cbz)NHCH₂-[L-4-N-(Cbz)-피페라지닐]		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃	116
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃	117
3-피리딜	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH	118
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(1-Boc-피페라진-4-일)C(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃	119
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(모르폴린-4-일)C(O)O-]벤질--	-OCH₂CH₃	120
p-CH₃-ψ-	-CH₃	H	p-[(티오모르폴린-4-일 술폰)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃	121
p-CH₃-ψ-	-CH₃	H	p-[(티오모르폴린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OH	122
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	2,4-디옥소-테트라히드로퓨란-3-일(3,4-에놀)	123
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(피페라진-4-일)C(O)O-]벤질-	-OH	124
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(1-Boc-피페라진-4-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃	125

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶	실시예 번호
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(피페라진-4-일)C(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃	126
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-아세틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃	127
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-메탄술포닐피페라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃	128
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		3-니트로-4-[(모르폴린-4-일)-C(O)O-]벤질-	-OH	129
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(1-Boc-피페라진-4-일)C(O)O-]벤질-	-OH	130
p-CH₃-ψ-	-CH₃	-C(CH₃)₃	p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃	131
p-F-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(1,1-디옥소티오모르폴린-4-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃	132
p-F-ψ-	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(모르폴린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃	133
p-CH₃-ψ-	R²/R³=시클릭 -CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모르폴린-3-일)		p-[(모르폴린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OH	134
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃	135
모르폴린-4-일	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃	136
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭 3 탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₃	137

상기 기재된 방법에 의해 제조된 추가적인 화합물은 다음을 포함한다.

실시예 138

N-(1- 메틸피라졸 -4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -

L-4-(N,N- 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

N-메틸피라졸 술포닐 클로라이드는 N-메틸피라졸을 냉각된(0℃) 클로로설폰산에 첨가하여 제조하였다. 반응 혼합물은 실온으로 따뜻하게 하고, N₂의 스트림(stream) 하에서 밤새 100℃로 가열하였다. 이후, 반응 혼합물을 실온으로 식힌 후 0℃로 냉각하였다. 상기 용액에 티오닐 클로라이드(2.5 eq.)를 첨가하고, 상기 반응액을 실온에서 30분 동안 교반하고, 2시간 동안 70℃로 데웠다. 상기 반응액을 실온으로 식힌 후 다시 아이스 배쓰에서 냉각시켰다. 상기 반응 혼합물에 물과 아이스를 서서히 첨가하여 흰색 고체를 침전시키고, 이를 여과로 수집하였다. 원하는 술포닐 클로라이드를 냉수와 헥산으로 세척하였다.

이후, 상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질, mp:169-170℃로 대체하고 실시예 2의 제조에서 약술된 과정에 따라 제조하였다.

실시예 139

N-(1- 메틸피라졸 -4- 술포닐 )-L-(5,5-

디메틸) 티아프롤릴 -L-4-(N,N- 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 138의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 140

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-(N-

(1,4- 디옥사 -8- 아자 - 스피로[4.5]데칸 -8-일) 카르보닐옥시 )페닐알라닌

에틸 에스터의 합성

상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질로 대체하여 실시예 4에서 약술된 과정에 따라 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같았다:

MS (+ESI) 630 [M+H]⁺.

Anal. Calcd. for: C₃₁H₃₉N₃O₉S·0.2 CH₂Cl₂; C, 57.94; H, 6.14; N 6.50.

Found: C, 57.73; H, 5.90; N, 6.47

실시예 141

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-(N-(1,4- 디옥사 -8- 아자 - 스피로[4.5]데칸 -8-일)카르보닐옥시)페닐알라닌의 합성

실시예 140의 생성물을 방법 5에 기재된 과정을 이용하여 가수분해하였다. 단, 용매로는 메탄올을 사용하고, 반응을 24시간 동안 25℃에서 수행하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 H₂O로 용해시키고, 메틸렌 클로라이드로 세척한 후, 동결건조하여 상기 타이틀 화합물을 얻었다.

물리적 데이터는 다음과 같았다:

MS (+ESI): 619 [M+H]⁺.

Anal. Calcd. for: C₂₉H₃₅N₃O₉SLi·1.5 H₂O; C, 53.37; H, 6.02; N 6.44.

Found: C, 53.40; H, 5.58; N, 6.48.

실시예 142

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

(4'- 아세틸피페라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

실시예 127의 생성물을 방법 5에 기재된 과정을 이용하여 가수분해하였다. 단, 용매로는 메탄올을 사용하고, 반응을 24시간 동안 25℃에서 수행하였다. 용매를 증발시킨 후, 잔류물을 H₂O로 용해시키고, 메틸렌 클로라이드로 세척한 후, 동결건조하여 상기 타이틀 화합물을 얻었다.

물리적 데이터는 다음과 같았다:

MS (+ESI): 587 [M+H]⁺.

Anal. Calcd. for: C₂₈H₃₃N₄O₈SLi·3H₂O; C, 52.01; H, 6.08; N 8.66.

Found: C, 52.03; H, 5.36; N, 8.04.

실시예 143

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

(4'- 메탄술포닐피페라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

실시예 128의 생성물을 실시예 142에 기재된 과정을 이용하여 가수분해하였다.

물리적 데이터는 다음과 같았다:

MS (+ESI): 623 [M+H]⁺.

Anal. Calcd. for: C₂₇H₃₃N₄O₉S₂Li·2 H₂O; C, 48.79; H, 5.61; N 8.43.

Found: C, 48.66; H, 5.14; N, 8.04.

실시예 144

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

(4'- 페닐피페라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물의 에틸 에스테르는 적당한 출발 물질로 대체하여 실시예 4에서 약술된 과정에 따라 제조하였다. 이후, 상기 에틸 에스테르를 실시예 142에 기재된 과정을 이용하여 가수분해하였다.

물리적 데이터는 다음과 같았다:

MS (-ESI) 619 [M-H]^-.

Anal. Calcd. for: C₃₂H₃₆N₄O₇SLi·2H₂O; C, 58.00; H, 5.93; N 8.45.

Found: C, 57.65; H, 5.49; N, 8.13.

실시예 145

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

(피페라진-1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

실시예 125의 생성물(0.7 g, 1 mmol)을 메틸렌 클로라이드(9 mL)에 용해시켰다. 용액을 0℃로 냉각시키고, 트리플루오로아세트산(1.0 mL)을 첨가하였다. 얻은 투명한(clear) 용액을 4시간 동안 교반하였다. 상기 반응 용액을 추가적인 메틸렌 클로라이드(50 mL)로 희석한 후, 포화된 소듐 카르보네이트 용액(3×50 mL)로 세척하고, 건조하고(K₂CO₃), 용매를 제거하여 흰색 고체(0.465 g)를 얻었다. 이 물질의 플래쉬 크로마토그래피(9:1 CH₂Cl₂:EtOH)로 투명한 오일을 얻었고, 이를 헥산으로 여러 번 세척하여 흰색 고체를 얻었다.

물리적 데이터는 다음과 같았다:

MS (+ESI): 601.7 [M+H]⁺.

Anal. Calcd. for: C₃₀H₄₀N₄O₇S·0.25 CH₂Cl₂; C, 58.42; H, 6.56; N 9.01.

Found: C, 58.79; H, 6.51; N, 8.74.

실시예 146

2-(사카린-2-일) 프로피오닐 -L-4-(4'- 메틸피페라진 -1-

일카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 46의 생성물(200 mg, 0.4 mmol)로부터 방법 11에 기재된 과정, mp=117-122℃(with foaming)을 이용하여 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같았다:

Anal. Calcd. for: C₂₅H₂₈N₄O₈S·1.5 H₂O; C, 52.53; H, 5.47; N 9.80.

Found: C, 52.26; H, 5.36; N, 9.23.

실시예 147

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-(4'- 메탄술포닐

피페라진-1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질로 대체하여 실시예 128을 위해 약술된 과정에 따라 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같았다:

MS (+ESI): 696 [M+NH₄]⁺.

Anal. Calcd. for: C₃₁H₄₂N₄O₉S₂·0.5 CH₂Cl₂; C, 51.62; H, 6.00; N 7.76.

Found: C, 51.55; H, 6.21; N, 7.60.

실시예 148

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

(N,N- 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌 (N'- tert -

부톡시카르보닐 -2-아미노-2- 메틸프로필 )에스테르의 합성

(BOC)₂O(96 mg, 0.44 mmol)을 실시예 9의 생성물, N-Boc-2-아미노-2-메틸-1-프로판올(965 mg, 0.5 mmol) 및 피리딘(50 ㎕)을 함유하는 THF(92 mL)에 용해된 DMAP의 촉매양(catalytic amount)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 아르곤 하에서 48시간 동안 실온에서 교반하였다. 상기 혼합물을 1 N HCl에 붓고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기상을 세척(1 N HCl) 및 건조(MgSO₄)하고 감소된 압력하에서 용매를 제거하였다. 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피(EtOAc:헥산 2:1)로 정제하여 원하는 화합물을 무정형의 흰색 폼(foam)으로 얻었다(150mg, 55%)Y.

물리적 데이터는 다음과 같았다:

MS: 675에서 [M+H]⁺.

MS (+ESI): 692(100%)에서 [M+NH₄]⁺ .

실시예 149

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

(N,N- 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌 2-(모르폴린-4-일)

에틸 에스테르의 합성

상기 타이틀 화합물은 N-Boc-2-아미노-2-메틸-1-프로판올을 2-모르폴리노에탄올로 대체하고 실시예 148에서 약술된 과정에 따라 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같았다:

Anal. Calcd. for: C₃₀H₄₀N₄O₈S·0.5 H₂O; C, 57.58; H, 6.60; N 8.95.

Found: C, 57.26; H, 6.29; N, 8.82.

실시예 150

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

(4'- 아세틸피페라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌

tert -부틸 에스테르의 합성

상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질로 대체하여 실시예 127을 위해 약술된 과정에 따라 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같았다:

MS (+ESI): 660.4 [M+NH₄]⁺.

Anal. Calcd. for: C₃₂H₄₂N₄O₈S·0.15 CH₂Cl₂: C, 58.91; H, 6.50; N 8.55.

Found: C, 58.64; H, 6.36; N, 8.40.

실시예 151

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

(4'- 히드록시피페라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌

tert -부틸 에스테르의 합성

상기 타이틀 화합물은 N-메틸 피페라진을 4-피페리디놀로 대체하고 실시예 4에서 약술된 과정에 따라 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같았다:

Anal. Calcd. for: C₃₁H₄₂N₃O₈S₂·0.6 H₂O·0.22 EtOAc: C, 59.28; H, 6.86; N 6.51.

Found: C, 58.92; H, 6.37; N, 6.47.

실시예 152

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

(N-(2'-(모르폴린-4'-일)에틸) 카르바밀옥시 )페닐알라닌

tert -부틸 에스테르의 합성

상기 타이틀 화합물은 N-메틸 피페라진을 4-(2-아미노에틸)모르폴린으로 대체하고 실시예 4에서 약술된 과정에 따라 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같았다:

Anal. Calcd. for: C₃₂H₄₄N₄O₈S·0.25 H₂O: C, 59.20; H, 6.91; N 8.63

Found: C, 59.01; H, 6.54; N, 8.38.

실시예 153

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-(N-(1,4- 디옥사 -8- 아자 - 스피로[4.5]데칸 -8-일)카르보닐옥시)페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

물리적 데이터는 다음과 같았다:

MS (-ESI): 656 [M-H]^-.

Anal. Calcd. for: C₃₃H₄₃N₃O₉S·0.1 CH₂Cl₂: C, 59.67; H, 6.54; N 6.31.

Found: C, 59.83; H, 6.63; N, 6.66.

실시예 154

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

(N-(2'- 히드록시에틸 )-N- 메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌

tert -부틸 에스테르의 합성

상기 타이틀 화합물은 N-메틸 피페라진을 2-(메틸아미노)에탄올로 대체하고 실시예 4에서 약술된 과정에 따라 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같았다:

Anal. Calcd. for: C₂₉H₃₉N₃O₈S·0.5 H₂O: C, 58.18; H, 6.73; N 7.02.

Found: C, 57.95; H, 6.5; N, 6.9.

실시예 155

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

(4'- 포르밀옥시피페리딘 -1-일) 카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 151의 생성물을 포름산(formic acid)으로 밤새 교반 처리하여 제조하였다. 과잉의 포름산을 제거하여 상기 타이틀 화합물을 흰색 폼(130 mg, 94%)으로 얻었다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

MS ((+)ESI: m/z (%)) 605 (100[M+NH, 1⁺).

Anal. Calcd. for: C₂₈H₃₃N₃O₉S.0.66H₂O: C, 56.09; H, 5.77; N 7.01.

Found: C, 56.14; H, 5.83; N, 6.78.

실시예 156

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

(4'- 히드록시피페리딘 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌

이소프로필 에스테르의 합성

상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질, mp.64-67℃(with foaming)로 대체하고 실시예 4에서 약술된 과정에 따라 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같았다:

Anal. Calcd. for: C₃₀H₃₉N₃O₈S·0.75 H₂O·0.1 EtOAc: C, 58.51; H, 6.67; N 6.73.

Found: C, 58.55; H, 6.09; N, 6.78.

실시예 157

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-(4'-(2- 히드록시에틸 )피페라진-1-

일카르보닐옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

카르보네이트는 Tos-Pro-Tyr-t-부틸 에스테르에 4-니트로페닐 크로로포르메이트를 처리한 후, N-(2-히드록실 에틸)피페라진(트리에틸아민, 메틸렌 클로라이드)을 첨가하고 (0℃로 냉각, 실온에서 밤새 교반하여) 제조하였다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카, 95:5 EtOAc:EtOH)로 정제하여 흰색 고체, mp.158-160℃(0.387 g, 58%)를 얻었다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

MS ((-)ESI: m/z (%)) 643 (98[M-NH₄]).

Anal. Calcd. for: C₃₂H₄₄N₄O₈S: C, 59.61; H, 6.88; N 8.69.

Found: C, 59.06; H, 6.95; N, 8.43.

실시예 158

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-(N-2'-

포르밀옥시에틸 )-N- 메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 154의 생성물을 포름산(formic acid)으로 밤새 교반 처리하여 제조하였다. 과잉의 포름산을 제거하여 상기 타이틀 화합물을 흰색 폼(foam)(110 mg, 77%)으로 얻었다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

MS ((+)ESI: m/z (%)) 579 (100[M+NH,1⁺).

Anal. Calcd. for: C₂₆H₃₁N₃O₉S.0.66H₂O: C, 54.45; H, 5.68; N 7.33.

Found: C, 54.41; H, 5.60; N, 7.24.

실시예 159

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-(N-(2'- 히드록시에틸 )-N-

메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질, mp.49-52℃로 대체하고, 실시예 4에서 약술된 과정에 따라 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같았다:

Anal. Calcd. for: C₂₈H₃₇N₃O₈S·0.5 H₂O: C, 57.52; H, 6.55; N 7.19.

Found: C, 57.56; H, 6.38; N, 7.14.

실시예 160

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-(N-

( 메톡시카르보닐메틸 ) 카르바밀옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

카르보네이트는 Tos-Pro-Tyr-t-부틸 에스테르에 4-니트로페닐 크로로포르메이트를 처리한 후, 글리신 메틸 에스테르(트리에틸아민, 메틸렌 클로라이드)를 첨가하고 (0℃로 냉각, 실온에서 밤새 교반하여) 제조하였다. 조 생성물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카, 3:2 EtOAc:헥산)로 정제하여 흰색 폼(0.640 g, 35%)를 얻었다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

MS ((+)ESI: m/z (%)) 621 (100[M+NH₄]⁺).

Anal. Calcd. for: C₂₉H₃₇N₃O₉S: C, 57.70; H, 6.18; N 6.96.

Found: C, 57.63; H, 6.11; N, 6.74.

실시예 161

N-(1- 메틸피라졸 -4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸)

티아프롤릴 -L-4-(N,N- 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌

이소프로필 에스테르의 합성

상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질로 대체하고 실시예 138에서 약술된 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 162

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

(4'- 메톡시피페리딘 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌

이소프로필 에스테르의 합성

상기 타이틀 화합물은 적당한 출발 물질로 대체하고 실시예 156에서 약술된 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

MS ((+) ESI, m/z (%)) 633 [M+NH]⁺).

실시예 163

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

(4'- 메톡시피페리딘 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 162의 생성물로부터 방법 5에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

MS ((-)ESI: m/z (%)) 572 (100 [M-H]^-).

Anal. Calcd. for: C₂₈H₃₅N₃O₈S·0.33EtOAc.1H₂O: C, 56.73; H, 6.44; N 6.77.

Found: C, 56.96; H, 6.01; N, 6.76.

실시예 164

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L-4- 옥소프롤릴 -L-4-(N,N-

디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

디클로로메탄(7 mL)을 -60℃로 냉각시켰다(클로로포름/드라이 아이스 배쓰). 옥사릴 클로라이드(0.15 mL)를 첨가하였다. 실시예 165로부터 얻은 생성물(870 mg)과 드라이 DMSO(0.26 mL)를 디클로로메탄(8 mL)에 용해시키고, 상기 용액에 서서히 첨가하였다. 반응액을 건조한 조건에서 30분 동안 -60℃에서 교반하였다. 트리에틸아민(1.05 mL)을 첨가하였다. 5분 후, 드라이 아이스 배쓰를 제거하였다. 반응액을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 진공상태(in vacuo)에서 증발시켰다. 에틸 아세테이트(30 mL)를 상기 잔류물에 첨가하였다. 혼합물을 구연산 용액(5%, 2×30 mL)과 포화된 NaHCO₃ 용액(2×30 mL); 그리고 최종적으로 함수로 세척하였다. 상기 용액을 MgSO₄로 건조시켰다. 용매를 진공상태(in vacuo)에서 증발시켰다. 잔류물을 실리카겔 칼럼에 흘려서 440 mg의 원하는 생성물, mp:78-80℃을 얻었다.

실시예 165

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- trans -4-

히드록시프롤릴 -L-4-(N,N- 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌

tert -부틸 에스테르의 합성

N-(톨루엔-4-설포일)-L-trans-4-히드록시프롤릴-L-4-(히드록시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르(1.60 g)과 디메틸카르바밀 클로라이드(0.30 mL)을 아이스 배쓰 내에서 DMF에 0℃에서 용해시켰다. 포타슘 카르보네이트 분말(2.03 g)을 상기 용액에 첨가하였다. 5분 후, 상기 아이스 배쓰를 제거하였다. 반응액을 6시간 동안 실온에서 교반하였다. 고체를 여과하였다. 에틸 아세테이트(40 mL)를 상기 용액에 첨가하였다. 상기 용액을 구연산 용액(5%, 40 mL)으로 2회, 그리고 포화된 NaHCO₃ 용액(1 mL)으로 1회 세척하였다. 이후, 상기 용액을 함수로 세척한 후, MgSO₄로 건조하였다. 용매를 진공상태(in vacuo)에서 증발시켜 1.07 g의 상기 타이틀 화합물, mp:170-172℃을 얻었다.

실시예 166

N-(3- 플루오로벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-

(N,N- 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

N-(3-플루오로벤젠설포일)-L-프롤릴-L-4-(히드록시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르(700 g)와 디메틸카르바밀 클로라이드(0.2 mL)을 아이스 배쓰 내에서 DMF(15 mL)에 0℃에서 용해시켰다. 포타슘 카르보네이트 분말(1.375 g)을 상기 용액에 첨가하였다. 5분 후, 상기 아이스 배쓰를 제거하였다. 반응액을 6시간 동안 실온에서 교반하였다. 고체를 여과하였다. 에틸 아세테이트(20 mL)를 상기 용액에 첨가하였다. 상기 용액을 구연산 용액(5%, 30 mL, 2×), 그리고 포화된 NaHCO₃ 용액으로 세척하였다. 이후, 상기 용액을 함수로 세척한 후, MgSO₄로 건조하였다. 용매를 진공 상태(in vacuo)에서 증발시켜 890 mg의 상기 타이틀 화합물,mp:107-109℃를 얻었다.

실시예 167

N -( 모르폴리노 - 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-(4- N,N -

N-(모르폴리노-술포닐)-L-프롤린은 Cheesseright 등이 개시한 과정(J. Chem . Soc. Perkin . Trans. I 1994, 12, 1595-1600)을 이용하여 제조하였다. 상기 타이틀 화합물은 실시예 2의 제조에서 기재된 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 168

디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 167의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 169

N -(1- 메틸피라졸 -4- 술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-

상기 타이틀 화합물은 실시예 14 및 117의 제조에서 기재된 과정에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 170

N -(2- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-

( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 90의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 171

N -(2,4- 디플루오로벤젠술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-

( N,N - 디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 92의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 172

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-( 티아모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-( N,N -

디메틸카르바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 타이틀 화합물은 실시예 49의 생성물로부터 방법 11에 기재된 과정을 이용하여 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같았다:

실시예 173

N -(피리딘-3- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸- 티아프롤릴 -L- 4( N , N -디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질로 대체하여 실시예 56의 방법에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 174

N -(3- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차를 이용하여 실시예 91의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 175

N -(1- 메틸피라졸 -4- 술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차를 이용하여 실시예 169의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 176

N -(4- tert - 부틸벤젠술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차를 이용하여 실시예 88의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 177

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-(3,3-디메틸)프로필-L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차를 이용하여 실시예 97의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 178

N -(2,5- 디클로로티오펜 -3- 술포닐 )-L-프로필-L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차를 이용하여 실시예 86의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 179

N -(4- 메톡시벤젠술포닐 )-L-프로필-L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 7의 절차를 이용하여 실시예 180의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 180

N -(4- 메톡시벤젠술포닐 )-L-프로필-L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질로 대체하여 실시예 2의 방법에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 181

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(1-옥소- 티오모르폴린 -3-카르보닐) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차를 이용하여 실시예 182의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 182

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(1-옥소- 티오모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

상기 화합물을 실시예 49에 기재된 방법에 따라 제조하였다. 티오모르폴린 그룹의 1-옥소-티오모르폴린 그룹으로의 산화는 Larsson과 Carlson의 방법에 따라 수행하였다(Acta Chemica Scan, 1994, 4S, 517-525).

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 183

N -(3,4- 디플루오로벤젠술포닐 )-L-프로필-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 184

N -(3,4- 디플루오로벤젠술포닐 )-L-프로필-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 7에 기재된 절차를 이용하여 실시예 183의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 185

N -(3,4- 디플루오로벤젠술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-( N , N -디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질로 대체하여 실시예 92의 방법에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 186

N -(3,4- 디플루오로벤젠술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-( N , N -디메틸카바밀옥시)페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차를 이용하여 실시예 185의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 187

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-( 티오모르폴린 -4-일- 카르보닐옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질로 대체하여 실시예 82의 방법에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 188

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-( 티오모르폴린 -4-일카르보닐옥시)페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차를 이용하여 실시예 187의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 189

N -(1- 메틸피라졸 -4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 에틸 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질로 대체하여 실시예 117의 방법에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 190

N -(피리딘-3- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차를 이용하여 실시예 191의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 191

N -(피리딘-3- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[M+H]⁺593

Anal.Calcd. for C₂₇H₃₆N₄O₇S₂·0.5H₂O:C,53.88;H,6.07;N,9.27.

Found:C,53.98;H,6.07;N,9.27.

실시예 192

N -(피리딘-2- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

2-피리딘술포닐 클로라이드를 치환(Corey et al., J. Org . Chem. 1989, 54, 389-393 참조)하고 실시예 56의 방법에 따라 상기 화합물을 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 193

N -(피리딘-2- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 7에 기재된 절차를 이용하여 실시예 192의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 194

N -(피리딘-2- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질로 대체하여 실시예 192의 방법에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 195

N -(피리딘-2- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 7에 기재된 절차를 이용하여 실시예 194의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 196

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-( 티아모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질로 대체하여 실시예 49의 방법에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 197

N -(3- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 198

N -(2- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 199

N -(3,4- 디플루오로벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 200

N -(3,5- 디플루오로벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 201

N -(2,4- 디플루오로벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 202

N -(4- 클로로벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 203

N -(3- 클로로벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 204

N -(2- 클로로벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프리필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 205

N -(3,4- 디클로로벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N -디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 206

N -(3,5- 디클로로벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N -디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 207

N -(3- 클로로벤젠술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 208

N -(3,4- 디클로로벤젠술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 209

N -(4- 메톡시벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 210

N -(3- 메톡시벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 211

N -(2- 메톡시벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 212

N -(3,4- 디메톡시벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N -디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 213

N -(2,4- 디플루오로벤젠술포닐 )-L-( 티아모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 214

N -(3,4- 디클로로벤젠술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차를 이용하여 실시예 208의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 215

N -(3- 클로로벤젠술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차를 이용하여 실시예 207의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 216

N -(3- 클로로 -4- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(1,1- 디옥소티아모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-( N , N -디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 217

N -(1- 메틸피라졸 -4- 술포닐 )-L-( 티아모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-( N , N - 디메틸카보밀록시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

상기 화합물을 실시예 49 및 실시예 117의 방법에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 218

N -(3,4- 디플루오로벤젠술포닐 )-L-( 티아모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 219

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티오프롤릴 -L-( 티오모르폴린 -4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 220

N -(3,4- 디플루오로벤젠술포닐 )-L-( 티아모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차에 따라 실시예 218의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 221

N -(2,5- 디클로로티오펜 -3- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 222

N -(1- 메틸피라졸 -4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( 티오모르폴린 -4- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 223

N -(8- 퀴놀린술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 224

N -(8- 퀴놀린술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 7에 기재된 절차를 이용하여 실시예 223의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 225

N -(8- 퀴놀린술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 226

N -(8- 퀴놀린술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 7에 기재된 절차에 따라 실시예 225의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 227

N -(3- 술폰아미도 -4- 클로로 - 벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 228

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(1- 옥소티오모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질로 대체하여 실시예 182의 방법에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 229

N -(2,4- 디플루오로벤젠술포닐 )-L-(1- 옥소티오모르폴린 -3-카르보닐)-L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 230

N -(1- 메틸피라졸 -4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 2,2-디메틸프로필 에스테르의 합성

실시예 161의 산물(1g., 0.72 mmol)을 네오펜틸 알코올(5 mL)에 용해하였다. 여기에 티타늄(IV) 이소프로폭사이드(260 mg, 0.9 mmol)를 첨가하고 상기 혼합물을 비활성 대기하에서 100℃로 48시간 동안 가열하였다. 감압 하에서 과량의 네오펜틸 알코올을 제거하고 잔사를 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(실리카, CHCl₃에 용해된 1% MeOH)로 정제하여 흰색 고체상의 화합물을 수득하였다(1.02g, 97%).

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS(+)ESI[M+H]⁺610; [M+NH₄]⁺627(100%)

Anal.Calcd. For C₂₉H₃₉N₅O₇S:C,53.18;H,6.45;N,11.49.

Found:C,53.46;H,6.38;N,11.06.

실시예 231

N -(피리딘-3- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 2,2-디메틸프로필 에스테르의 합성

실시예 173의 산물을 실시예 230의 방법에 따라 에스테르 교환 반응시켰다. 상기 화합물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(실리카, CHCl₃에 용해된 1% MeOH)로 정제하고 에틸 아세테이트로부터 재결정화하여 흰색 고체상의 화합물을 수득하였다(720 mg, 47%).

물리적 데이터는 다음과 같다:

Anal. Calcd. For C₂₈H₃₈N₄O₇S₂:C,55.43;H,6.31;N,9.23.

Found:C,55.37;H,6.32;N,9.22.

실시예 232

N -(1- 메틸피라졸 -4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 시클 로프로필메틸 에스테르의 합성

실시예 161의 산물을 실시예 230의 방법에 따라 에스테르 교환 반응시켰다. 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(실리카, CHCl₃에 용해된 1% MeOH)로 정제하여 흰색 고체상의 화합물을 수득하였다(860 mg, 70%).

물리적 데이터는 다음과 같다:

Anal. Calcd. For C₂₆H₃₅N₅O₇S₂:C,52.6;H,5.94;N,11.8.

Found:C,52.49;H,5.93;N,11.62.

실시예 233

N -(1- 메틸피라졸 -4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 메틸 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질로 대체하여 실시예 161의 방법에 따라 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS (+) ESI[M+H]⁺554; [M+NH₄]⁺571(100%).

Anal. Calcd. For C₂₃H₃₁N₅O₇S₂·0.2 EtOAc:C,50.04;H,5.75;N,12.26.

Found:C,50.12;H,5.69;N,12.19.

실시예 234

N -(피리딘-3- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 에틸 에스테르의 합성

실시예 173의 산물을 실시예 230의 방법에 따라 에스테르 교환 반응시켰다. 이를 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(실리카, CHCl₃에 용해된 2% MeOH)로 정제하고 에틸아세테이트로부터 재결정화하여 흰색 고체상의 화합물을 수득하였다(1.2 g, 61%).

물리적 데이터는 다음과 같다:

Anal. Calcd. For C₂₅H₃₂N₄O₇S₂:C,53.18;H,5.71;N,9.92.

Found:C,53.14;H,5.72;N,9.57.

실시예 235

N -(피리딘-3- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 시클 로프로필메틸 에스테르의 합성

실시예 173의 산물을 실시예 230의 방법에 따라 에스테르 교환 반응시켰다. 이를 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(실리카, CHCl₃에 용해된 2% MeOH)로 정제하고 EtOAc/헥산으로부터 재결정화하여 흰색 고체상의 화합물을 수득하였다(1 g, 65%).

물리적 데이터는 다음과 같다:

Anal. Calcd. For C₂₇H₃₄N₄O₄S₂:C,54.9;H,5.8;N,9.48.

Found:C,54.77;H,5.65;N,9.46.

실시예 236

N -(1- 메틸피라졸 -4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 2- 메톡시페닐 에스테르

메틸렌 클로라이드(25 mL)에 용해되어 있는 실시예 139에서 제조한 화합물(1.79 g, 3.31 mmol), 2-메톡시-페놀(0.45 g, 3.64 mmol) 및 BOP(1.61 g, 3.64 mmol) 용액에 트리에틸아민(0.7 mL, 4.97 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 교반하면서 25℃로 서서히 24시간 동안 질소 하에서 가열하였다. 상기 반응물을 포화 염수 100mL를 첨가하여 식히고 EtOAc로 추출하였다. 상기 유기 추출물을 2N HCl(3배), 포화 소디움 비카르보네이트(3x) 및 포화 염수(2x)로 순차적으로 세척하고, MgSO₄ 하에서 건조 및 증류시켜 2.1g의 조생성물을 수득하였다. 플래쉬 크로마토그래피(용리액:96-4 메틸렌 클로라이드:EtOAc)에 의해 1.85 g의 흰색 고체를 수득하고 헥산으로 연화하여 융점이 72-75℃인 흰색 결정 1.68 g(79%)을 수득하였다.

물리적 데이터는 다음과 같다:

Anal. Calcd. For C₂₉H₃₅N₅O₈S₂:C,59.94;H,5.46;N,10.85.

Found:C,53.45;H,5.62;N,10.31.

실시예 237

N -(1- 메틸피라졸 -4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 n-부틸 에스테르의 합성

n-부탄올에 용해한 실시예 139의 산물(2 g) 용액을 HCl 가스 하에서 아이스-쿨링에 의해 포화시켰다. 상기 혼합물을 실온에서 36시간 동안 교반하고 진공 증류하여 건조한 상태가 되도록 한 다음 5% NaHCO₃와 클로로포름으로 분획하였다. 유기층을 건조시키고 진공 증류하여 화합물 900 mg을 수득하였다.

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[(+)ESI], [M+H]⁺596

실시예 238

N -(1- 메틸피라졸 -4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 n-프로필 에스테르의 합성

n-프로판올(50 mL)에 용해시킨 N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌(2 g) 용액을 HCl 가스 하에서 아이스-쿨링에 의해 포화시켰다. 상기 혼합물을 실온에서 36시간 동안 교반하고, 진공증류하여 건조한 다음 5% NaHCO₃와 클로로포름으로 분획하였다. 유기층을 건조시키고 진공증류하여 화합물 1500 mg을 수득하였다.

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[(+)ESI],[M+H]⁺582.

실시예 239

N -(1- 메틸피라졸 -4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 2,2- 디메틸프로피오닐옥시메틸 에스테르의 합성

DMF(5 mL)에 용해되어 있는 실시예 139의 화합물(1.08 g), 클로로메틸피발레이트(294 mg) 및 K₂CO₃ 분말(222 mg)에 포타슘 아이오다이드(324 mg)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 하룻밤 동안 교반하고, 물(12 mL)과 에틸 아세테이트(60 mL)로 분획하였다. 분리된 유기층을 차가운 0.1N 소디움 티오설페이트, 물 및 염수로 세척하고 MgSO₄ 하에서 건조시킨 후 여과하고 진공건조하여 화합물 750 mg을 수득하였다

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[(+)ESI],[M+H]⁺654.

실시예 240

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-(4- 페닐피퍼라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질로 대체하여 실시예 4의 방법에 따라 제조하였다. 융점이 60-65℃인 흰색 고체를 수득하였다.

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS(+ESI) 694.3 [M+NH₄]⁺

Anal.Calcd for C₃₆H₄₄N₄O₇S·0.5C₄H₈O₂:C,63.31;H,6.71;N,7.77.

Found:C,63.12;H,6.58;N,7.69.

실시예 241

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-(4'-( 에톡시카르보닐 ) 피퍼리딘 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

Tos-Pro-Tyr-t-부틸 에스테르에 4-니트로페닐클로로포름에이트를 처리한 다음 에틸이소니페코테이트(트리에틸아민, 메틸렌 클로라이드, 0℃로 냉각시킨 다음 실온에서 하룻밤 동안 교반)를 첨가함으로써 카바메이트를 제조하였다. 상기 조생성물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카, 95:5 EtoAc:Et₃N)로 정제하여 흰색 고체를 수득하였다(.78 g, 39%).

NMR 데이터는 다음과 같다:

MS((+)ESI, m/z(%))689(100[M+NH₄]⁺);691(37[M+NH₄]⁺).

Anal.Calc'd for C₃₄H₄₅N₃O₉S:C,60.79;H,6.75;N,6.25.

Found:C,60.59;H,6.67;N,6.22.

실시예 242

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( N -(4'-(2'- 아미노에틸 ) 모르폴리노 ) 카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차에 따라 실시예 152의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

MS((-)ESI, m/z(%))587(100[M-H]⁺).

Anal.Cal'd for C₂₈H₃₆N₄O₈S.HCOOH.0.5H₂O:C,54.11;H,6.11;N,8.70.

Found:C,53.96;H,6.02;N,8.68.

실시예 243

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-[4-( 카르복실 ) 피퍼리딘 -1- 일카르보닐옥시 ]페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 6 및 11에 기재된 절차를 이용하여 실시예 241의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

MS((+)ESI,m/z(%))605(100[M+NH₄]⁺).

Anal.Calc'd for C₂₈H₃₃N₃O₉SH₂O:C,55.53;H,5.65;N,6.94.

Found:C,55.23;H,5.82;N,6.59.

실시예 244

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( N , N - 비스 -(2-하이드록시에틸) 카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

Tos-Pro-Tyr-iPr 에스테르에 4-니트로페닐 클로로포르메이트를 처리한 다음 디에탄올 아민(트리에틸아민, 메틸렌 클로라이드, 0℃로 냉각하고, 실온에서 하룻밤 동안 교반)을 첨가함으로써 카바메이트를 제조하였다. 상기 조생성물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카, 98:2 EtOAc:EtOH)로 정제하여 흰색 성상의 화합물을 수득하였다(0.180 g, 28%).

NMR 데이터는 다음과 같다:

MS((+)ESI,m/z(%))606(15[M+H]⁺);623(100[M+NH₂]⁺).

Anal. Calc'd for C₂₉H₃₉N₃O₉SH₂O:C,56.66;H,6.56;N,6.84.

Found:C,56.66;H,6.41;N,6.72.

실시예 245

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-[3-( 하이드록시메틸 ) 피퍼리딘 -1-일카르보닐옥시]페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

Tos-Pro-Tyr-iPr 에스테르에 4-니트로페닐 클로로포르메이트를 처리하고 3-피퍼리딘 메탄올(트리에틸아민, 메틸렌 클로라이드, 0℃로 냉각, 실온에서 하룻밤 동안 교반)을 첨가하여 카바메이트를 제조하였다. 상기 조생성물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카, 3:2 EtOAc:Hex)로 정제하여 흰색 성상의 화합물을 수득하였다(0.519 g, 67%).

NMR 데이터는 다음과 같다:

MS((-)ESI,m/z(%))614(30[M-H]).

Anal.Cal'd for C₃₁H₄₁N₃O₈S:C,60.47;H,6.71;N,6.82.

Found:C,59.83;H,6.61;N,6.59

실시예 246

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-(4- 트리플루오로메탄술포닐피퍼라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발물질로 대체하여 실시예 128의 방법에 따라 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS(+ESI):733[M+H]⁺.

Anal.Calc'd for C₃₁H₃₉F₃N₄O₉S₂·0.10 C₄H₈O₂:C,50.20;H,5.40;N,7.55.

Found:C,50.25;H,5.46;N,7.07.

실시예 247

N -(4-(N- 페닐우레아 ) 벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

실시예 107(250 mg, 0.51 mmol), 페닐 이소시아네이트(62 mg, 0.56 mmol) 및 트리에틸아민(76 μL, 0.56 mmol)의 혼합물을 가열하고 아르곤 하에서 환류시켰다. 환류는 하룻밤 동안 지속하였다. 감압 하에서 용매를 제거하고 잔사를 플래쉬 크로마토그래피(실리카, 헥산:EtOAc 1:1, EtOAc)로 정제하여 융점이 112-115℃인 오프-화이트(off-white) 색상의 화합물을 수득하였다(160 mg, 46%).

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS(+ESI) [M+NH₄]⁺697(100%).

실시예 248

N -(2- 트리플루오로아세틸 -1,2,3,4- 테트라하이드로이소퀴놀린 -7- 술포닐 )-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질을 대체하여 실시예 2의 방법에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 249

N -(1- 메틸피라졸 -3- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

N-메틸피라졸-3-술포닐 클로라이드를 치환한 다음(유럽특허출원 095925 참조) 실시예 56의 방법에 따라 상기 화합물을 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 250

N -(1- 메틸피라졸 -3- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시0페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 7에 기재된 절차를 이용하여 실시예 249의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 251

N -(피리딘-4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

3-피리딘술포닐 클로라이드를 대신하여 4-피리딘술포닐 클로라이드 N-옥사이드를 사용하여 실시예 56의 방법에 따라 상기 화합물을 제조하였다(Marsais and coworkers, J. Org . Chem. 1987, 52, 1133-1136). N-옥사이드의 탈산소 반응은 Aoyagi의 방법을 사용하여 수행하였다(Aoyagi and coworkers, Synthesis 1997, 891)..

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 252

N -(피리딘-4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 7에 기재된 절차를 이용하여 실시예 251의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 253

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N - 메틸 - N -(2- 디메틸아미노에틸 )카바밀옥시)페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

DMF(10 mL)에 용해시킨 출발 산(500 mg), (2S)-2-아미노-3-{4-[2-디메틸아미노에틸)-메틸카바모일옥시]페닐}프로피온산 tert-부틸 에스테르(730 mg), HOBt(235 mg) 및 4-메틸모르폴린(0.87 mL) 용액을 0℃의 아이스 배스에서 교반하였다. 상기 용액에 1-[3-(디메틸아미노)프로필]-3-에틸카보디이미드 하이드로클로라이드(360 mg)를 첨가하였다. 10분 후에 아이스 배스를 제거하였다. 상기 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 에틸 아세테이트(20 mg)를 첨가하였다. 상기 용액을 포화 NaHCO₃ 용액(30 mL)으로 2회 세척한 다음 염수로 세척하였다. 상기 용액을 MgSO₄로 건조시켰다. 상기 용매를 진공 증류하고 잔사를 실리카겔 상에서 플래쉬 크로마토그래피하여 화합물 385 mg을 수득하였다.

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[+ESI],[M+H]⁺ 663.

실시예 254

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( N - 메틸 - N -(2- 디메틸아미노에틸 ) 카바밀옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질을 대체하여 실시예 253의 방법에 따라 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[(+)ESI],[M+H]⁺617.

실시예 255

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N - 메틸 - N -(2- 디메틸아미노에틸 )카바밀옥시)페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차를 이용하여 실시예 253의 산물로부터 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[(+)ESI],[M+H]⁺607.

실시예 256

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( N - 메틸 - N -(2- 디메틸아미노에틸 ) 카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차를 이용하여 실시예 254의 산물로부터 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같다;

MS:[(+)ESI],[M+H]⁺561.

실시예 257

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-3- 클로로 -4-(4- 메틸피퍼라진 -1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 제조

상기 화합물을 적합한 출발 물질을 대체하여 실시예 4의 방법에 따라 제조하였다. 융점:64-67℃

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[M+H]⁺699.

Anal.Calcd. for C₃₁H₄₀ClFN₄O₇S₂·H₂O:C,51.90;H,5.9;N,7.8.

Found: C, 51.53; H,5.50; N,7.62.

실시예 259

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-3- 클로로 -4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 방법을 사용하여 실시예 258의 산물로부터 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[M+1]603.

Anal.Cald. for C₂₄H₂₇FN₃O₇S₂:C,49.02;H,4.63; N,7.15.

Found:C,49.25;H,4.89; N,6.73.

실시예 260

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-3- 클로로 -4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질로 대체하여 실시예 82의 방법에 따라 제조하였다. 융점: 111-114℃

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:+ESI[M+NH₄]⁺719.

Anal.Calcd. for C₃₀H₃₇ClFN₃O₇S: C,50.02; H,5.46; N,5.8.

Found:C,50.23; H,5.10; N,5.50

실시예 261

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-3- 클로로 -4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 이소프리필 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질로 대체하여 실시예 82의 방법에 따라 제조하였다. 융점 77-81℃.

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[M+NH₄]⁺705.

Anal. Calcd. for C₂₉H₃₅ClFN₃O₇S₃:C,50.61;H,5.13;N,6.1.

Found:C,50.33; H,5.07; N,5.94.

실시예 262

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-3- 클로로 -4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )]페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질로 대체하여 실시예 2의 방법에 따라 제조하였다. 융점 65-69℃.

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[M+NH₄]⁺647.

Anal.Calcd. for C₂₇H₃₃ClFN₃O₇S₂:C,51.46; H,5.28; N,6.4.

Found:C,51.29; H,5.19; N,6.50.

실시예 263

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-3- 클로로 -4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질로 대체하여 실시예 2의 방법에 따라 제조하였다. 융점 68-72℃

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[M+H]⁺626.

Anal.Calcd. for C₂₈H₃₆ClN₃O₇S₂:C,53.77;H,5.80;N,6.71.

Found: C,53.26; H,5.8; N,6.63.

실시예 264

N -(4- 플루오로벤젠술포닐술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-3- 클로로 -4-(4- 메틸피퍼라진 -1-일카르보닐옥시)]페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질로 대체하여 실시예 4의 방법에 따라 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[M+H]⁺685.

Anal. Calcd. for C₃₀H₃₈ClN₄O₇:C,52.59;H,5.59;N,8.18.

Found: C,52.09;H,5.48;N,7.77.

실시예 265

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-3- 클로로 -4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )]페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[M+H]⁺580.

Anal.Calcd. for C₂₇H₃₄ClN₃O₇S·0.5 H₂O:C,55.04;H,6.00;N,7.13.

Found:C,55.06;H,5.71;N,6.93.

실시예 266

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-3- 클로로 -4-(4-(2'-피리딜)-피퍼라진-1-일카르보닐옥시)]페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[M+H]⁺748.

Anal. Calcd. for C₃₄H₃₉ClFN₅O₇S₂:C,54.57;H,5.25;N,9.3.

Found:C,54.26;H,5.10;N,9.07.

실시예 267

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-3- 클로로 -4-(4-(2'-피리딜)-피퍼라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질로 대체하여 실시예 4의 방법에 따라 제조하였다. 융점 80-86℃.

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[M+H]⁺762.

Anal.Calcd. for C₃₅H₄₁ClFN₅O₇S₂:C,55.14;H,5.42;N,9.19.

Found:C,54.67;H,5.40;N,8.69.

실시예 268

N -(4- 니트로벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

물리적 데이터는 다음과 같다:

Anal. Calcd. for C₂₆H₃₂N₄O₉S:C,54.16;H,5.59;N,9.72.

Found:C,53.69;H,5.24;N,9.52.

실시예 269

N -(4- 아미노벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

상기 화합물을 방법 4에 기재된 절차를 이용하여 실시예 268의 산물로부터 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같다:

Anal. Calcd. for C₂₆H₃₄N₄O₇S:C,57.13;H,6.27;N,10.25.

Found:C,56.30;H,6.12;N,10.05.

실시예 270

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( 티오모르폴린 -4- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

물리적 데이터는 다음과 같다:

Anal. Calcd. for C₂₉H₃₇N₃O₇S₂:C,57.69;H,6.18;N,6.96.

Found: C,57.36;H,5.99;N,6.76.

실시예 271

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-(4- 페닐카바밀피퍼라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

MS((+)ESI,m/z(%))706(100[M+H]⁺).

Anal.Calcd.for C₃₆H₄₃N₅O₈S.0.35 EtOAc:C,60.98;H,6.27;N,9.51.

Found:C,50.31;H,6.16;N,9.33.

실시예 272

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-(4- 페닐카바밀피퍼라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 7에 기재된 절차를 이용하여 실시예 271의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다.

MS((-)ESI,m/z(%))662(100[M-H]⁺).

실시예 273

N -(1-n- 부틸피라졸 -4- 술포닐 )-L-(5,5-디메틸) 티아프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질로 대체하여 실시예 137의 방법에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 274

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-(피리딘-4- 일카르보닐 ) 피퍼라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다.

MS((+)ESI,m/z(%))692(100[M+H]⁺).

Anal.Calcd.for C₃₅H₄₁N₅O₉S. 0.75H₂O:C,59.60;H,6.07;N,9.93

Found:C,59.45;H,5.86;N,9.88.

실시예 275

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-4- 옥소프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차를 이용하여 실시예 164의 산물로부터 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같다.

MS[(-)ESI][M-H])516.

실시예 276

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-트랜스-4- 하이드록시프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차를 이용하여 실시예 165의 산물로부터 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같다.

MS[(-)ESI][M-H])518.

실시예 277

N -(4- 시아노벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질로 대체하여 실시예 2의 방법에 따라 제조하였다. 융점 166-167℃.

실시예 278

N -(4- 아미노벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차를 이용하여 실시예 107의 산물로부터 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같다:

Anal. Calcd. For C₂₃H₂₈N₄O₇S:C,47.34;H,4.84;N,9.60.

Found:C,47.57;H,5.20;N,8.75.

실시예 279

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-4- 옥소프롤릴 -L-4-(4- 메틸피퍼라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

아세토니트릴(3 mL)를 -40℃로 냉각하였다(CH₃CN/드라이 아이스). 옥살릴 클로라이드(0.10 mL)를 첨가하였다. N-(톨루엔-4-술포닐)-L-4-하이드록시프롤릴-L-4-(4-메틸피퍼라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert -부틸 에스테르(300mg) 및 건조 DMSO(.008 mL)를 아세토니트릴(4 mL)에 용해한 후 상기 용액을 첨가하였다. 상기 반응물을 건조 조건으로 30분간 -40℃에서 교반하였다. 상기 용액에 트리에틸아민(0.33 mL)를 첨가하였다. 5분 후에 드라이 아이스 배스를 제거하였다. 상기 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 상기 용매를 진공증류하였고 에틸 아세테이트(15 mL)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 물로 세척한 다음(3x), 염수로 세척하였다. 상기 용액을 MgSO₄ 하에서 건조시켰다. 상기 용매를 진공증류하고 잔사를 실리카 겔 컬럼으로 정제하여 융점이 84-85℃인 화합물 150 mg을 수득하였다.

실시예 280

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-[3-( 하이드록시메틸 ) 피퍼리딘 -1-일카르보닐옥시]페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질로 대체하여 실시예 4의 방법에 따라 제조하였다. 융점 84-85℃.

실시예 281

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(4,4- 디플루오로 ) 프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[(+)ESI],[M+NH₄]⁺599.

실시예 282

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(4,4- 디플루오로 ) 프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 7에 기재된 절차를 이용하여 실시예 281의 산물로부터 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[(+)ESI],[M+NH₄]557.

실시예 283

N-(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-(4- 벤조일피퍼라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

MS((+)ESI,m/z(%))708(100[M+NH₂]⁺).

Anal.Calcd. for C₃₆H₄₂N₄O₈S. 0.5H₂O:C,61.79;H,6.19;N,8.01.

Found:C,61.64;H,6.10;N,7.72.

실시예 284

N -(1- 메틸 -1H- 이미다졸 -4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

1-메틸이미다졸-4-술포닐-Pro-Try-iPr 에스테르에 4-니트로페닐 클로로포름에이트를 처리한 다음 디메틸아민을 첨가하여 카바메이트를 제조하였다(트리에틸아멘, 메틸렌 클로라이드, 0℃ 실온에서 하룻밤 동안 교반). 조생성물을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하고 EtOAC로부터 재결정화하였다. 융점 162-164℃인 흰색 고체를 수득하였다(8.7g, 66%).

물리적 데이터는 다음과 같다:

Anal. Calcd. for C₂₄H₃₃N₅O₇S:C,53.82;H,6.21;N,13.08.

Found:C,53.47;H,6.13;N,12.96.

실시예 286

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-4-( 티오모르폴린 -4- 일카르보닐옥시 ) 프롤릴 -L-4-( 티오모르폴린 -4-일카르보닐옥시)페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차를 이용하여 실시예 285의 산물로부터 제조하였다. 융점 116-118℃.

실시예 287

N -(4- 시아노벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( 티오모르폴린 -4- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질을 대체하여 실시예 4의 방법에 따라 제조하였다. 융점 70-71℃.

실시예 288

N -(4- 아미디노벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 메틸 에스테르의 합성

메탄올을 0℃로 냉각하였다. 상기 용액에 HCl를 첨가하여 포화 용액으로 제조하였다. 실시예 277의 화합물을 첨가하고 반응 혼합물을 0℃에서 30분간 교반한 다음 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고 메탄올에 용해되어 있는 NH₃(2M, 5mL)를 첨가하였다. 상기 반응물을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시켰다. 잔사를 CH₃CN:H₂O(20:80)을 이용한 역상 HPLC로 정제하였다. 머무름 시간 12.45분에 산물을 분리하고 냉동건조하여 화합물을 수득하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 289

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-4- 하이드록시프롤릴 -L-4-( 티오모르폴린 -4- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발 물질로 대체하여 실시예 4의 방법에 따라 제조하였다. 융점 80-82℃.

실시예 290

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-4- 하이드록시프롤릴 -L-4-( 티오모르폴린 -4- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-4-하이드록시-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르(160 mg)를 포름산(7 mL)에 용해하였다. 상기 반응물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고 잔사를 CH₃CN/물이 20:80으로 혼합된 용매를 이용한 역상 HPLC로 정제하였다. 머무름 시간이 5.85분일 때, 융점 170-172℃의 화합물 50 mg을 수득하였다.

실시예 291

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-4- 프롤릴 -L-(4- 벤조일피퍼라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차를 이용하여 실시예 283의 산물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

MS((+)ESI,m/z(%))666(100[M+NH₄]⁺).

Anal.Calcd. for C₃₃H₃₆N₄O₈S.0.66H₂O:C,60.00;H,5.69;N,8.48

Found:C,60.36;H,5.70;N,7.81

실시예 292

N -(4- 아미디노벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( 티오모르폴린 -4- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌 메틸 에스테르의 합성

상기 화합물을 실시예 287 및 288의 방법에 따라 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[(+)ESI][M+H]604.

실시예 293

N -(3- 플루오로벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차를 이용하여 실시예 166의 산물로부터 제조하였다. 융점 82-83℃.

실시예 294

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-[ N - 메틸 - N -(2-( N '- 메틸 - N '- 톨루엔술포닐 -아미노)에틸)카바밀옥시]페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

상기 화합물을 적합한 출발물질을 대체하여 실시예 4의 방법에 따라 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

MS((+)ESI,m/z(%))760(100[M+NH₄]⁺).

Anal.Calcd.for C₃₆H₄₆N₄O₉S₂:C,58.20;H,6.24;N,7.54.

Found:C,57.90;H,6.30;N,7.34.

실시예 295

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-[ N -(2-( N '- 페닐아미노카르보닐옥시 )에틸) 카바밀옥시 ]페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

MS((+)ESI,m/z(%))698(100[M+NH₄]⁺).

Anal.Calcd.for C₃₄H₄₀N₄O₉S.0.21 EtOAc. 0.5H₂O:C,59.08;H,6.07;N,7.91.

Found:C,59.08;H,6.02;N,7.80.

실시예 296

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L-4-(트랜스- 하이드록시 ) 프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 이소프로필 에스테르의 합성

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[(+)ESI],[M+NH₄]583.

실시예 297

N -(4- 플루오로벤젠술포닐 )-L-4-(트랜스- 하이드록시 ) 프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

물리적 데이터는 다음과 같다:

MS:[(+)ESI],[M+NH₄]597.

실시예 298

N -(4- 아미디노벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 5에 기재된 절차를 이용하여 실시예 288의 산물로부터 제조하였다. 융점 130-132℃.

실시예 299

피퍼라진 -1,4-디카르복실산 비스 -{4-[(2S)-2- tert - 부톡시카르보닐 -2-((4R)-5,5-디메틸-3-(톨루엔-4-술포닐)티아졸리딘-4-카르복사미도)에틸]페닐}에스테르의 합성

피퍼라진 0.5 eq를 사용하여 실시예 4에 기재된 방법에 따라 상기 화합물을 제조하였다.

물리적 데이터는 다음과 같다:

Anal. Calcd. for C₅₈H₇₄N₆O₁₄S₄:C,57.69;H,6.18;N,6.96.

Found:C,58.01;H,6.07;N,6.68.

실시예 300

피퍼라진 -1,4-디카르복실산 비스 -{4-[(2S)-2- 카르복시 -2-((4R)-5,5-디메틸-3-(톨루엔-4-술포닐)티아졸리딘-4-카르복사미도)에틸]페닐}에스테르의 합성

실시예 299의 디-t-부틸 에스테르를 포름산으로 가수분해함으로써 흰색 성상의 화합물을 제조하였다(300 mg, 정량적으로).

물리적 데이터는 다음과 같다:

Anal.Calcd. for C₅₀H₅₈N₆O₁₄S₄:C,54.83;H,5.34;N,7.67

Found:C,55.10;H,5.57;N,7.37.

하기 표 5에서 실시예 301-370에 기재된 것을 포함하는 화학식 I 및 Ia의 다른 화합물들은 상술한 방법에 의해 제조되었다.

표 5

실시예	R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
301	p-CH₃-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂CH₂-NH-CH₂-(L-피퍼라지닐)		p-[CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
302	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[2-(하이드록시메틸)피롤리딘-1-일-C(O)O-]-벤질-	-OC(CH₃)₃
303	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂ -S-C(CH₃)_2-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[2-(하이드록시메틸)피롤리딘-1-일-C(O)O-]-벤질-	-OH
304	p-CH₃-Ψ-	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[2-(CH₃OC(O)-)피롤리리딘-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
305	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(티오모르폴린-4-일)-C(O)O-벤질-	-OH
306	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
307	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
308	p-CH₃-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂CH(OH)CH₂-(L-4-하이드록시피롤리디닐)		p-[(티오모르폴린-4-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
309	p-CH₃-Ψ-	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-O(CH₂CH₂O)₂CH₃
310	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃

실시예	R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
311	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-플루오로-4-[(CH₃)₂NC(O)O-]-벤질-	-OCH(CH₃)₂
312	p-CH₃-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-CH₂N-(SO₂CH₃)-CH₂-(L-4-메탄술포닐-피퍼라지닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
313	R¹/R²=1,1-디옥소-2,3-디하이드로-3,3-디메틸-1,2-벤즈이소티아졸-2-일-		H	p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
314	R¹/R²=N-2,10-캄포술타밀-		H	p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
315	R¹/R²=N-2,10-캄포술타밀-		H	p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
316	R¹/R²=N-2,10-캄포술타밀-		H	3-클로로-4-[(CH₃)₂NC(O)O-]-벤질-	-OCH(CH₃)₂
317	p-Br-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘- 4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
318	p-Br-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘- 4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
319	p-CH₃-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-CH(OH)-CH₂-(L-4-하이드록시피롤리디닐)		p-[(4-메틸피퍼라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OH

실시예	R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
320	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(4-피리미딘-2-일)피퍼라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
321	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[4-(피리미딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
322	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-CH₂-S-(티아졸리딘-2-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
323	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-CH₂-S-(티아졸리딘-2-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
324	p-CH₃-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-C(O)-CH₂-(L-4-옥소피롤리디닐)		p-[(티오모르폴린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OH
325	p-CH₃-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-C(O)-CH₂-(L-4-옥소피롤리디닐)		p-[(4-메틸피퍼라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
326	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-CH₂-S-(티아졸리딘-2-일)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
327	p-NO₂-Ψ-	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
328	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-CH₂-S-(티아졸리딘-2-일)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
329	p-Br-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
330	p-CH₃-Ψ-	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(ΨNHC(S)-)피퍼라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
331	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-CH₂-S-(티아졸리딘-2-일)		p-[(4-CH₃-호모피퍼라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃

실시예	R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
332	p-CH₃-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂CH(-OSO₂CH₃)-CH₂-(L-4-메탄술폭시-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
333	p-H₂NC(O)_-Ψ-	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
334	p-H₂NC(O)_-Ψ-	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(티오모르폴린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OH
335	p-H₂NC(=N)_-Ψ-	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(티오모르폴린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OH
336	p-NO₂-Ψ-	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
337	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-클로로-[(4-피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]-벤질-	-OCH₂CH₃
338	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(4-피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]-벤질-	-OH
339	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-CH₂-S-(티아졸리딘-2-일)		p-[(4-CH₃-호모피퍼라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
340	1-메틸피라졸-4-일-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
341	1-메틸이미다졸-4-일-	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
342	1-메틸이미다졸-4-일-	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
343	p-CH₃-Ψ-	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH

실시예	R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
344	p-CH₃-Ψ-	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
345	p-CH₃-Ψ-	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
346	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
347	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
348	p-CH₃-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂CH₂N(-SO₂-CH₃)CH₂-(4-메탄술포닐-피퍼라진-2-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
349	p-CH₃-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂CH(-OSO₂-CH₃)CH₂-(L-4-메탄술폭시-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
350	CH₃-	-CH₂Ψ	H	p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
351	p-Br-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
352	p-CF₃O-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
353	p-CF₃O-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
354	p-CF₃O-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
355	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH

실시예	R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
356	p-F-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂CH(OH)CH₂-(L-4-하이드록시피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
357	p-CF₃O-Ψ-	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
358	1-메틸이미다졸-4-일	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		3-클로로-4-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
359	1-메틸이미다졸-4-일	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		3-클로로-4-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
360	1-메틸이미다졸-4-일	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
361	1-메틸이미다졸-4-일	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
362	1-메틸피라졸-4-일	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
363	1-메틸피라졸-4-일	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
364	1-메틸피라졸-4-일	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
365	1-메틸피라졸-4-일	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
366	1-메틸피라졸-4-일	R²/R³ = 시클릭3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		3-클로로-4-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
367	1-메틸피라졸-4-일	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₂OΨ

실시예	R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
368	1-메틸피라졸-4-일	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(4-(피리딘-2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
369	1-메틸피라졸-4-일	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(4-피리딘 -2-일)피퍼라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃
370	1,5-디메틸-3-클로로피라졸-4-일	R²/R³ = 시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[4-[5-CF₃-피리딘-2-일)피퍼라진-1 일)-C(O)O-]벤질-	-OH

또한, 표 5의 실시예 319, 324, 325, 332, 333, 334, 335 및 349는 다음과 같이 예시하였다.

실시예 319

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(4- 하이드록시 ) 프롤릴 -L-4-(4- 메틸피퍼라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(4-하이드록시)프롤릴-L-4-(4-메틸피퍼라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르(300 mg)를 포름산(15 mL)에 용해시켰다. 상기 반응물을 실온에서 72시간 동안 교반하였다. 용매를 증발시키고 잔사를20-80% CH₃CN/물을 이용한 역상 HPLC로 정제하였다. 머무름 시간 10.75분에 융점이 128-130℃인 화합물 82 mg을 수득하였다.

실시예 324

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(4-옥소) 프롤릴 -L-4-( 티오모르폴린 -4- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(4-옥소)프롤릴-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르(130 mg)를 포름산(7 mL)에 용해하였다. 상기 반응물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 용매를 진공하에서 증발시켜 융점이 111-112℃인 목적으로 하는 산물 150 mg을 수득하였다.

실시예 325

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(4-옥소) 프롤릴 -L-4-(4- 메틸피퍼라진 -1- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(4-옥소)프롤릴-L-4-(4-메틸피퍼라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르(150 mg)를 포름산(7 mL)에 용해하였다. 상기 반응물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 증발시키고, 잔사를 20-80% CH₃CH/물을 이용한 역상 HPLC로 정제하였다. 머무름 시간은 10.34분이였다. 산물을 냉동건조하여 융점이 99-101℃인 화합물 82 mg을 수득하였다.

실시예 332

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(4- 메탄술포닐옥시 ) 프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌 tert -부틸 에스테르의 합성

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(4-하이드록시)프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르(3000 mg)와 메틸술포닐 클로라이드를 0℃의 아이스 배스 내에서 THF(7 mL)에 용해하였다. 여기에 트리에틸아민(0.21 mL)을 첨가하였다. 10분 후에 상기 아이스 배스를 제거하였다. 반응 혼합물을 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 에틸 아세테이트(20 mL)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 시트르산(5%, 20 mL, 2x)으로 세척하고 포화 NaHCO₃ 용액(20 mL)으로 세척한 후 염수로 세척하였다. 상기 용액을 MgSO₄ 하에서 건조시켰다. 용매를 증발시키고 잔사를 실리카겔 컬럼에 적용시켰다. 용매를 진공 증류하여 융점이 73-74℃인 목적으로 하는 산물 300 mg을 수득하였다.

실시예 333

N-(4-아미노벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 메틸 에스테르(300 mg) 및 LiOH 용액(2M, 0.6 mL)을 메탄올(6 mL)에 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 7시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 증류하고, 잔사를 20-80% CH₃CN/물을 이용한 역상 HPLC로 정제하였다. 머무름 시간 12.11분에 융점이 130-132℃인 목적으로 하는 산물 27 mg을 수득하였다.

실시예 334

N -(4- 아미노카르보닐벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( 티오모르폴린 -4- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

N-(4-아미노카르보닐벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 메틸 에스테르(300 mg) 및 LiOH 용액(2M, 0.5 mL)을 메탄올(6 mL)에 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 8시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 증류하고, 잔사를 20-80% CH₃CN/물을 이용한 역상 HPLC로 정제하였다. 머무름 시간 12.69분에 융점이 123-125℃인 목적으로 하는 산물 20 mg을 수득하였다.

실시예 335

N -(4- 아미노벤젠술포닐 )-L- 프롤릴 -L-4-( 티오모르폴린 -4- 일카르보닐옥시 )페닐알라닌의 합성

N-(4-아미노벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 메틸 에스테르(300 mg) 및 LiOH 용액(2M, 0.5 mL)을 메탄올에 첨가하였다(6 mL). 상기 반응 혼합물을 실온에서 8시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 증류하고 잔사를 20-80% CH₃CN/물을 이용한 역상 HPLC로 정제하였다. 머무름 시간 11.78분에 융점이 123-125℃인 목적으로 하는 산물 25 mg을 수득하였다.

실시예 349

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L-(4- 메탄술포닐옥시 ) 프롤릴 -L-4-( N , N - 디메틸카바밀옥시 )페닐알라닌의 합성

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(4-메탄술포닐옥시)프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르(200 mg)를 포름산(5 mL)에 용해하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 용매를 진공 증류하여 융점이 83-84℃인 목적으로 하는 산물(195 mg)을 수득하였다.

실시예 371

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -4-(α- 메틸벤질옥시 )-L-페닐알라닌의 합성

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-티로신 메틸 에스테르(785 mg, 1.89 mmol)을 실온에서 DMF(20 mL)에 용해하였다. 여기에 K₂CO₃(1.1 eq, 281 mg)와 1-브로모에틸 벤젠(1.1 eq, 284μL)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 에틸 아세테이트(100 mL)를 첨가하고 유기층을 염수(5 x 50 mL)로 수회 세척하였다. 상기 유기층을 MgSO₄ 하에서 건조시켰다. 이를 여과한 후 감압 하에서 용매를 증발시키고 오일을 분리하였다. 상기 조생성물을 실리카겔(EtOA/헥산 (1:4))에 용리시킴으로써 정제하였다. 목적으로 하는 물질을 32%의 수율로 분리하였다(330 mg, 0.6 mmol). 메틸 에스테르(330 mg, 0.6 mmol)를 MeOH:H₂O(1:1)(15 mL)에 용해되어 있는 NaOH로 실온에서 4시간 동안 처리하여 대응되는 산의 형태로 전환하였다. EtOAc를 물과 함께 첨가하였다. 수용성 층을 회수하고 1N HCl로 pH 2.5가 되도록 산성화한 후 EtOAc로 재추출하였다. 유기층을 MgSO4 하에서 건조시켰다. 이를 여과한 후 용매를 감압 하에서 증발시켜 발포체를 정량적으로 분리하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

매스 스펙트로스코피:(FAB)537(M+H)

실시예 372

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -4-(2- 카르복시페녹시 )-L-페닐알라닌의 합성

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-티로신 메틸 에스테르(2.14 g, 5.16 mmol)를 오일에 용해된 60% 소디움 하이드라이드(1.1 eq, 228 mg) 현탁액에 첨가하여 0℃, 자일렌(50 mL)에서 용해시켰다. 상기 반응 혼합물을 5분간 교반하고 쿠프로스 브로마이드 디메틸 설파이드 혼합물(1.4 eq, 1.48 g)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 23℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 여기에 소디움 2-아이오도벤조에이트(1.5 eq, 8.06 mmol)를 첨가하고 반응 혼합물을 12시간 동안 환류시켰다. EtOAc(100 mL)를 첨가하고 유기층을 NH₄Cl, 10% HCl 및 염수로 세척한 다음 MgSO₄ 하에서 건조시켰다. 조생성물을 CHCl₃:MeOH(9:1)와 함께 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔)에 용리하여 오일 형태로서 분리하였다. 이를 MeOH:H₂O(1:1)에 용해되어 있는 NaOH(1.1 eq)로 실온에서 4시간 동안 처리하여 산 형태로 제조하였다. 상기 이염기산을 발포체 형태로 분리하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

매스 스펙트로스코피:(FAB)553(M+H).

실시예 373

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -O-(벤질)-L-티로신의 합성

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-Pro-OH를 CH₂Cl₂에 용해되어 있는 (COCl)₂와 DMF로 처리한 다음 증류하여 N-(톨루엔-4-술포닐)-L-Pro-Cl를 수득하였다. 상기 산물을 THF와 H₂O에 용해되어 있는 L-Tyr(Bn)-OH 및 NaOH로 처리하여 산성화, 추출, MgSO₄를 이용한 건조 및 증류하여 투명한 오일 형태의 화합물을 수득하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

매스 스펙트로스코피:(+FAB, 3-니트로벤질 알코올)523(M+H).

실시예 374

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -4-(1-H, 2-옥소-3- 메틸테트라하이드로피리딘 -1-일)-L-페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 방법 11에 기재된 절차를 이용하여 t-부틸 에스테르에 상응되는 화합물로부터 제조하였다.

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 375

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -4-(2- 메톡시페닐 )-L-페닐알라닌의 합성

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 376

NMR 데이터는 다음과 같다:

실시예 377

N -(톨루엔-4- 술포닐 )-L- 프롤릴 -4-(2,4,5- 트리옥소 -3-(3- 클로로페닐 )- 테트라하이드로이미다졸 -1-일)-L-페닐알라닌 벤질 에스테르의 합성

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-4-[(3-클로로페닐 우리도)-테트라하이드로이미다졸-1-일]-L-페닐알라닌 이소프로필 에스테르를 메틸렌 클로라이드에 용해되어 있는 옥살릴 클로라이드로 처리하여 상기 화합물을 제조하였다. 조생성물을 플래쉬 크로마토그래피(실리카, 3:2 Hex:EtOAc)로 정제하여 흰색 고체를 수득하였다(0.410 g, 50%).

MS((+)ESI,m/z(%)746(100[M+H]+)(746/748 1Cl)

실시예 378

N -( 페닐 - 술포닐 )-D- 프롤릴 -L-4-(2,6- 디메톡시페닐 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물과 같은 디메톡시바이페닐알라닌을 제공하기 위해 Hagmann 등의 방법(Hagmann et al., Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2001;11(20):2709-2713; Kamemecka et al., Bioorganic &Medicinal Chemistry Letters, 2002;12(16):2205-2208; 및 Doherty et al., Bioorganic &Medicinal Chemistry Letters, 2003;13(11):1891-1895)을 이용하여 2,6-디메톡시페닐보론산과 4'-아이오도페닐알라닌 유도체를 커플링함으로써 상기 화합물을 제조하였다.

실시예 379

N -(3,5- 디클로로페닐 - 술포닐 )-D- 프롤릴 -L-4-[4-( 메틸카르보닐아미노부틸 )-2,5- 디옥소 -이미다졸리딘-1-일]페닐알라닌의 합성

상기 화합물을 WO 01/54690의 방법에 따라 제조하였다.

실시예 380

N -(2,6- 디클로로페닐 -카르보닐)-L-4-(2,6- 디메톡시페닐 )페닐알라닌의 합성

상기 화합물과 같은 디메톡시페닐알라닌을 제공하기 위해 WO 99/36393 및 Sircar 등(Sircar et al., Bioorganic & Medicinal Chemistry, 2002;10(6):2051-2066)의 방법에 따라 2,6-디메톡시페닐보론산과 4'-아이오도페닐알라닌 유도체를 커플링함으로써 상기 화합물을 제조하였다.

실시예 381

N -[ N -(3- 피리딘술포닐 )-L-3,3-디메틸-4- 티아프롤릴 ]- O -[1- 메틸피퍼라진 -4- 일카르보닐 ]-L-티로신 이소프로필 에스테르의 합성

3- 피리딘술포닐 클로라이드

공지된 방법에 따라 3-피리딘술폰산(Aldrich)으로부터 상기 화합물의 유리 염기를 제조하였다(Corey et al., J. Org . Chem. 1989, 54(2):389). 선택적으로, 상기 화합물의 하이드로클로라이드는 공지된 방법을 이용하여 3-피리딘술폰산(Aldrich)로부터 제조될 수 있다(Crowell et al., J. Med Chem. 1989, 32(11):2436; Karaman et al., J. Am. Chem . Soc. 1992, 114(12):4889).

L-3,3-디메틸-4- 티아프롤린

공지된 방법에 따라 L-페니실아민(Aldrich)으로부터 상기 화합물을 제조하였다(Samanen et al., J. Med . Chem . 1989, 32(2):466; Nagasawa et al., J. Med . Chem. 1984, 27(5):591).

N -(3- 피리딘술포닐 )-L-3,3-디메틸-4- 티아프롤린

디소디움 하이드로겐 포스페이트(43.2 g, 0.304 mol)와 디하이드로겐 포스페이트(11.8 g, 0.0870 mol)를 H₂O에 용해하여 부피가 1.0L가 되도록 함으로써 pH=7.4인 버퍼를 제조하였다. 300mL CH₂Cl₂에 용해되어 있는 3-피리딘술포닐 클로라이드(28.0 g, 0.157 mol)의 용액을 교반하면서 pH=7.4 버퍼 700 mL에 용해되어 있는 L-3,3-디메틸-4-티아플롤린(25.4 g, 0.157 mol)의 0℃ 용액을 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온으로 가온하면서 24시간 동안 교반한 다음 3M H₂SO₄를 첨가하여 pH=2로 산성화함으로써 노란색 고체가 침전되도록 하였다. 상기 노란색 고체를 여과하여 분리하고 CH₂Cl₂ 층을 분리한 다음 증류하여 추가로 노란색 고체를 수득하였다. 노란색 고체를 모두 합하여 700 mL H₂O에서 1시간 동안 교반하여 관련 무기 염기를 용해시키고 여과하여 다시 한번 분리하였다. 2개의 수용성 층을 합하여 EtOAC(3 X 500ml)로 추출하였다. EtOAC 층을 염수로 세척하고 소디움 설페이트로 처리한 다음 여과 및 증류하여 추가로 노란색 고체를 수득하였다. 상기 노란색 고체를 모두 합하여 N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤린 36.1 g(76%)을 수득하였다.

N -[ N -(3- 피리딘술포닐 )-L-3,3-디메틸-4- 티아프롤릴 ]-L-티로신 이소프로필 에스테르

1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 하이드로클로라이드(4.83 g, 0.0253 mol)를 DMF 125 mL에 용해되어 있는 N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤린(6.37 g, 0.0211 mol), L-티로신 이소프로필 에스테르 하이드로클로라이드(5.48 g, 0.0211 mol), 1-하이드록시벤조트리아졸(5.69 g, 0.0421 mol) 및 4-메틸모르폴린(2.32 mL, 2.13 g, 0.0211 mol)의 0℃ 용액에 첨가하였다. 상기 혼합물을 실온으로 가온하면서 16시간 동안 교반한 다음 EtOAc 200 mL와 H₂O 200 mL를 첨가하였다. 상기 혼합물을 흔들어 섞은 다음 수용성 층을 분리하고 유기층을 0.2M 시트르산(2 x 100 mL), H₂O(2 x 100 mL), 포화 NaHCO₃(2 x 100 mL), H₂O(2 x 100 mL) 및 염수(2 x 100 mL)로 세척하였다. 상기 유기층을 소디움 설페이트로 처리한 다음 여과 및 증류하여 노란색 발포체 형태의 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-L-티로신 이소프로필 에스테르 9.40 g(86%)을 수득하였다.

N -[ N -(3- 피리딘술포닐 )-L-3,3-디메틸-4- 티아프롤릴 ]- O -[1- 메틸피퍼라진 -4- 일카르보닐 ]-L-티로신 이소프로필 에스테르

N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-L-티로신 이소프로필 에스테르(1.51 g, 2.89 mmol) 및 4-니트로페닐 클로로포름에이트(0.58 g, 2.89 mmol)를 CH₂Cl₂ 40 mL에 용해한 다음 상기 용액을 4:1 H₂O/EtOH의 슬러리 및 드라이 아이스를 이용하여 -15℃로 냉각하면서 15분간 교반하였다. 2분 이상 교반하면서 상기 용액에 Et₃N(1.00 mL, 0.73 g, 7.23 mol)를 첨가하고 상기 용액을 -15℃에서 1시간 동안 교반하였다. 상기 현탁액에 1-메틸피퍼라진(0.32 mL, 0.289 g, 2.89 mmol)을 1분간 교반하면서 첨가하고, 상기 혼합물을 실온으로 가온하면서 16시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 40 mL 헥산으로 희석하고 수용성 층에 노란색(4-니트로페놀)이 나타나지 않을 때까지 10%(w/v) K₂CO₃(4 x 50 mL)로 세척하였다. 유기층을 염수(75 mL)로 세척하고 소디움 설페이트로 처리한 다음 여과 및 증류하여 연노란색 잔사를 수득하였다. 상기 잔사를 CH₂C_l2/EtOAc/EtOH 70:25:5의 용매를 이용하여 실리카겔이 충진된 크로마토그래피로 정제함으로써 무색 발포체 형태의 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피퍼라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 1.53 g(84%)을 수득하였다.

9.2. 제제의 체내(In vivo) 및 시험관(In vitro) 스크리닝

실시예 A

VLA-4에 대한 후보 화합물의 결합 측정용 시험관 분석

α₄β₁ 인테그린에 대한 후보 화합물의 결합을 분석하기 위하여 시험관 분석이 사용되었다. 이와 같은 분석에서 결합하는 화합물은 공지의 분석방법(예를 들면, 경쟁적 결합 분석)을 통하여 생물 시료에서 VCAM-1 수준을 분석하기 위하여 사용될 수 있다. 이와 같은 분석은 약 1 nM 이하의 IC₅₀ 값에 민감하다.

α₄β₁ 인테그린의 활성은 용해성 VCAM-1과 높은 수준의 α₄β₁ 인테그린을 발현하는 인간 T-세포주인 Jurkat 세포(예를 들면, American Type Culture Collection 번호 TIB 152, TIB 153 및 CRL 8163)와의 상호작용으로 측정하였다. VCAM-1은 α₄β₁ 인테그린에 의존하는 방식으로 세포표면과 상호작용한다(Yednock et. al., J. Bio. Chem., 1995, 270:28740).

재조합 용해성 VCAM-1은 N-말단에 7개의 VCAM-1의 세포외 도메인을 포함하고, C-말단에 인간 IgG₁ 중쇄 불변영역을 포함한 키메라 혼성 단백질로 발현되었다. 앞서 언급한 Yednock의 문헌에 기술된 방식으로 ZVCAM-1 혼성 단백질을 제조하고 정화하였다.

앞서 언급한 Yednock의 문헌에 기술된 대로, 10% 태아 소혈청, 페니실린, 스트렙토마이신 및 글루타민이 보강된 RPMI 1640에서 Jurkat 세포를 배양하였다.

1.5 mM MnCl₂ 및 5 ㎍/mL 15/7 항체와 함께 Jurkat 세포를 얼음에서 30분동안 배양하였다. Mn⁺²는 리간드 결합을 향상시키기 위하여 수용체를 활성화시키고, 15/7은 활성화/리간드 점유 α₄β₁ 인테그린의 배좌를 인식하고, 분자를 이와 같은 배좌로 가두어 VCAM-1/vα₄β₁ 인테그린 상호작용을 안정화시키는 모노클로날 항체이다. 상기 Yednock 등. 15/6 항체와 유사한 항체들이 다른 연구자들(Luque 등, 1996, J. Bio. Chem., 271:11067)에 의해 제조되었으며, 이와 같은 분석에 사용될 수 있다.

이후, 표준 5-점 연속 희석법을 사용하여 66㎍/mL 내지 0.01㎍/mL의 다양한 농도로 후보 화합물과 함께 세포를 실온에서 30분 동안 배양하였다. 이후, 15μL의 용해성 재조합 VCAM-1 혼성 단백질을 Jurkat 세포에 첨가하고 얼음에서 30분동안 배양하였다(상기 Yednock 등).

이후, 세포를 두번 세척하고, PE-접합 염소 F(ab')2 항마우스 IgG Fc (Immunotech, Westbrook, ME)에서 1:200으로 재현탁하고, 얼음에서 암실조건하에 30분동안 배양하였다. 세포를 두번 세척하고 상기 Yednock 등에 기술된 대로 표준 형광 활성 세포 분류장치(FACS)로 분석하였다.

약 15 μM 이하의 IC₅₀을 갖는 화합물은 α₄β₁에 대한 결합 친화력을 갖는다.

이와 같은 분석에서 시험할 경우, 실시예 1-381의 각각의 화합물(또는 에스테르 화합물의 대응 카르복실산, 즉, 프로드럭(prodrugs))은 15 μM 이하의 IC₅₀을 갖는다.

실시예 B

α₄β₁에 대한 후보 화합물의 결합 측정용 시험관 포화 분석

아래에는 다음 실시예에서 기술된 실험성 자가면역 뇌척수염(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis; EAE) 모델 또는 기타의 체내 모델에서 활성을 가지는 화합물에 요구되는 플라즈마 수준을 측정하기 위한 시험관 분석을 기술하고 있다.

로그(log) 성장 Jurkat 세포를 세척하고 20㎍/㎖의 15/7 항체(상기 실시예에서 기술된)를 포함한 정상 동물 혈청에 재현탁하였다.

Jurkat 세포를 표준 곡선에 대한 표준 12 지점 연속 희석법을 사용하여 66 ㎍/mL 내지 0.01 ㎍/mL의 다양한 농도의 알려진 후보 화합물을 포함한 정상 플라즈마 시료에 2배 희석하거나, 후보 화합물 처리된 동물의 말단 혈액에서 수득된 혈장 시료에 2배 희석하였다.

이후, 세포를 30분동안 실온에서 배양하고, 2% 태아 소혈청 및 각각 1mM의 염화 칼슘 및 염화 마그네슘(분석 배지)를 포함하는 인산 완충 식염수(PBS)로 두번 세척하여 결합하지 않은 15/7 항체를 제거하였다.

이후, 세포를 파이코에리트린-결합 염소 F(ab')2 항마우스 IgG Fc(Immunotech, Westbrook, ME)에 노출하였으며, 상기 항마우스 IgG Fc는 연구대상 동물종의 5% 혈청과 1:200의 비율로 함께 공동배양하고, 4℃에서 30분동안 암실에서 배양함으로써 비특이적 교차 반응성을 위해 흡착되었다.

세포를 분석 배지로 두번 세척하고 동일한 배지로 재현탁하였다. 이후 Yednock 등, J. Bio. Chem., 1995, 270: 28740에 기술된 바에 따라 표준 형광 활성화 세포 분류장치 분석으로 분석하였다.

이후, 상기 데이터를 형광 대 투약의 그래프로 즉 정상 투약 반응 방식으로 그래프화하였다. 곡선의 상부 안정기를 야기하는 투약 수준은 체내 모델에서 효능을 얻을 수 있는데 필요한 수준을 나타낸다.

이와 같은 분석은 α₄β₁에 가장 밀접하게 관련된 인테그린인 α₉β₁ 인테그린과 같은 기타 인테그린의 결합 위치를 포화시키는데 필요한 플라즈마 수준을 결정하는데에도 사용될 수 있다(Palmer 등, 1993, J. Cell Bio., 123: 1289).

따라서, α₉β₁ 인테그린의 결합을 측정하기 위하여 상기 기술된 분석은 Jurkat 세포를 대신하여 α₉ 인테그린(Yokosaki 등, 1994, J. Bio. Chem., 269: 26691)을 암호화한 cDNA로 감염된 인간 대장암 세포주 SW 480 (ATTC #CCL228)을 사용하여 수행될 수 있다. 대조군으로서, 기타의 α 및 β₁을 발현하는 SW 480 세포가 사용될 수 있다.

이와 같은 분석을 사용하여, α₄β₁에 α₉β₁에 대한 체내 모델에서 효능을 얻기 위해 필요한 플라즈마 수준이 이와 같은 분석에서 시험된 본 발명의 화합물에 대하여 설정되었다.

따라서, 본 발명의 또 다른 관점은 포유동물 환자에서 질환을 치료하는 방법에 관한 것으로, 상기 질환은 α₉β₁에 의해 매개되고, 상기 방법은 치료학적으로 유효량의 본 발명의 화합물을 환자에게 투여하는 것을 포함한다. 이와 같은 화합물은 상기에 기술된 약제학적 조성물에 투여되는 것이 바람직하다. 효과적인 하루 투여량은 나이, 체중, 환자의 조건에 의존하고, 이와 같은 요인들은 수행 임상의에 의해 용이하게 확인될 수 있다. 그러나, 바람직한 실시예에서 상기 화합물들은 하루에 약 20 내지 500 ㎍/㎏으로 투여된다.

실시예 1

N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 사용한 실험성 알러지 뇌척수염의 임상 반전

실험적 알러지 뇌척수염(EAE)은 실험적으로 유도된 중추신경계(CNS)의 세포 매개 자가면역 염증 질환으로 다중 경화증의 동물 모델로 제공된다. 비록 다형핵 세포(plymorphonuclear cells)이 때때로 관찰되지만, 침윤물(infiltrate)은 일반적으로 림프구 및 대식세포로 구성되어 있다(Traugott 등, 1985 Cell. Immunol. 91: 240-54; Traugott 등, 1986 Cell. Immunol. 99: 395-410). EAE는 완전한 Freund의 보조제(CFA)에서 균질화 CNS 항원을 주사함으로써 민감성 동물에서 활발하게 유도된다(Paterson, 1960, J. Exp. Med. 111:119-36). 질환에 대한 민감성은 유도항원과 사용된 동물종에 의존할 뿐만 아니라 동물의 나이, 성별 및 구입원에 의해서도 영향을 받는다(Tsunoda 등, 1996, J. Neuropath. Exp. Neurol. 55:673-86).

MS에서와 같이, 임상적 EAE는 여러 상이한 형태로 나타날 수 있다. 일부 모델에서, 동물들은 자발적 회복이 수반되는 급성 단상성(monophasic) 질환으로 발전된다. 그러나, 다른 모델에서는 간헐적인 회복 기간을 갖는 재발성 임상 공격으로 특징되는 만성 재발성 질환으로 발전된다(Tsunoda 등, 1996). 만성 진행성 형태의 EAE는 보조제에서 전 CNS로 변역화함으로써 성인 Hartley 기니아 피크(guinea pigs)에서 유도될 수 있으며(Wisniewski 등, 1983, J. Neuropath. & Exp. Neurol. 42:243-55; Karlik 등, 1986, Neurology 36: 1112-4; Karlik 등, 1993, Magn. Reson. Med. 30:326-31), 여기서 상기 동물은 회복 또는 완화 기간 없이 임상 증상의 진행성 악화를 나타내었다. 조직학적으로, 탈수초의 대형 융합성 플라크는 연속적인 단핵성 CNS 침윤을 동반한다.

재료 및 방법: 동물 및 EAE 유도. 암컷 Hartley 기니아 피그(Charles River Canada, St. Constant, Quebec)을 광조절 환경에서 유지하고, 음식과 물을 임의로 허락하였다. 균질화 동급체(isologous) CNS 조직 및 Freund 보조제가 1:1로 혼합된 0.6 mL의 혼합물과 10 mg/mL의 Mycobacterium tuberculosis(Difco)를 경부, 진피내 주입하여 EAE가 50마리 동물(200-250g)에서 유도되었다. 4 지점 임상 스케일(4-point clinical scale)을 사용하여 관계되지 않은 관찰자에 의해 매일 동물을 검사하였다. 상기 4 지점 임상 스케일은 하기의 점수를 사용한다: 0= 비정상이 없음; 0.5= 하루 이상의 체중 감소 연속일; 1= 운동 실조 및 불량한 두위반사(righting reflex); 2= 후지 마비, 요실금, 대변 매복증; 3= 마비; 4= 말단 마비.

치료 섭생. N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르는 인간 및 기니아 피크의 α₄ 인테그린과 높은 친화력(VCAM에 대한 세포 부착의 억제에 대한 IC₅₀ = 1 nm)으로 결합하는 소분자이다. 동물의 질환은 면역화후 40일째까지 만성으로 사료되므로, 치료시기는 이때부터 시작하여 10, 20, 30 또는 40일동안 지속된다. 하루에 두번 0.5 mL 식염수(N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르에 대한 매개체; n=20) 또는 30 mg/kg N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르(n=25)를 동물에 투여한다. 투여 섭생으로서, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르의 수용체 포화 수준(>10nm)이 전체시간동안 유지되었다. 동물중 하나의 하위군이 30일동안 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 투여받았으며, 이후 치료를 중지하고, 추가로 10일 동안(n=5) 동물을 유지시켰다. 모든 치료는 피하에 투여되었다.

동물 도축 및 조직학적 분석. 비-EAE 대조구(n=5) 뿐만아니라 비치료된 만성 EAE 동물(n=5)을 40일째에 도축하였다. 각각 10일 치료 간격으로 치료후, 각 군에서 5마리의 동물을 도축하였고(0.25 mL 소듐 펜토바비탈), FACS 분석용 혈액시료를 수집하고(하기 참조), 뇌와 척수를 해부하고 조각내었다. 척추의 허리, 가슴 및 경부 부위에 해당하는 3개의 척수 섹션이 사용되었다. 뇌는 5개의 횡행 단면으로 절단하였다. 첫번째 3개의 근접 섹션을 하나의 블록으로 결합하고, 마지막 2개의 원거리 섹션을 또다른 블록으로 격합하였다. 조직은 10% 포르말린에 고정하고, 파라핀에 파묻었다. 5개의 nm 섹션을 헤마톡실린-에오신(H-E) 또는 솔로크롬-R-시아닌(SCR)로 염색하고, 4개의 항목 각각에 대하여 관계되지 않은 관찰자를 통하여 평가하였다: (1) 경막 염증, (2) 혈관주위 침윤, (3) 뇌척수염 또는 (4) 척수염 및 탈수초(표 6). 결합 병리학 점수는 각각의 동물에서 모든 5개의 CNS 조각으로부터의(포텐셜 20으로부터) 전체 점수를 나타낸다.

표 6

병리학적 점수 스케일

M: 경막에서의 염증 반응 0: 불변 1: 단핵 세포에 의한 혈관주위 및/또는 경막 침윤, 1-3개 혈관 포함됨 2: 4-6 혈관 포함됨 3: 6+ 혈관 포함됨 4: 거의 모든 또는 모든 혈관 포함됨

P: 실질 혈관주위 침윤 0: 불변 1: Virchow-Robin 공간에서 침윤된 1-3 실질 혈관 2: 4-6 혈관 포함됨 3: 6+ 혈관 포함됨 4: 실질적으로 모든 또는 모든 혈관 포함됨

E: 뇌염 또는 척수염 0: 신경 실질의 침입이 없음; 신경 실질을 침입하는 미세교세포 또는 염증 세포 1: 일부 분산된 세포 2: 여러 혈관주위 커프스(cuffs)로부터 유래된 세포에 의한 침입 3: 넓은 면적의 신경 실질이 포함됨 4: 실질적으로 전체 구획이 침윤됨

D: 탈수초, 수초재생, 및 수초 잔사 0: 탈수초 없음 1: 단일 병소의 연막하 탈수초 또는 수초 잔사 2: 여러 소병소의 탈수초 3: 하나의 대형 융합성 영역의 탈수초 4: 여러 대형 융합성 영역의 탈수초

척수에서 관찰된 비정상을 정량화하기 위하여, H-E로 염색된 섹션을 12개의 대표적인 파이형 영역으로 나누었다. 각각의 영역에서, Sigma Scan Pro 이미지 ㅂ분석 소프트웨어(SPSS Inc.)를 사용하여 12 mm²의 보기영역내에서 세포수를 계산하고, 전체 척수(동물 하나당 36개의 보기영역)에 대한 모든 12개 영역의 결합 평균 세포수를 산출하였다. 모든 세포핵을 계수함으로써 세포수가 침윤물 이외의 신경세포 및 신경교세포를 포함할 수 있다. 지금부터, 비-EAE 동물에서의 세포 계수가 기준선으로서 제공된다.

정량적 역전사 - PCR : IL-2, IL-10, MCP -1. S.N.A.P.^TM(단순 핵산 제조) 전체 RNA 분리 키트(Invitrogen)을 사용하여 제조자의 지침에 따르고, S.N.A.P 컬럼상에서의 추가 정제공정을 수반하는 2차 DNA 분해효소(DNAse) 치료단계를 포함하도록 변형시켜서 30mg의 냉동 기니아 피그 척수로부터 RNA를 분리하였다. 이차 DNA 분해효소 치료를 추가함으로써, 발명자는 이와 같은 시료 및 역전사 음성 대조 RT-PCR 분석을 사용하여 측정된 분석에서 DNA 오염이 관찰되지 않는다는 것을 발견하였다.

각각의 유전자에 사용되는 표준 RNA 뿐만아니라, IL-2, IL-10 및 MCP-1에 대한 프라이머/프로브 서열 및 농도가 표 7에 기재되어 있다. RT-PCR은 ABI PRISM^® 7700 서열 감지 시스템을 사용하여 삼중으로 수행되었다. 50의 반응물은 10-800 ng의 총 RNA 및 앞에서 나타낸 농도의 프라이머 및 프로브를 반응 완충액에 포함하고 있으며, 상기 반응 완충액은 6.67% 글리세롤(Amresco); 5.5mM MgCl; 300μM dATP, dCTP, dGTP 및 dUTP; 100 nM 프로브; 1.25 유닛의 AmpliTaq Gold^® DNA 폴리머라제(Applied Biosystems), 20 유닛의 RNase 억제제(Roche); 1.25 유닛의 쥐(murine) 백혈병 바이러스(MuLV) 역전사효소(Applied Biosystems)로 구성되어 있다. RNA의 역전사는 48℃에서 30분동안 수행하고, 이후 95℃에서 10분간 변성 단계를 수행한다. PCR은 95℃에서 15초후 60℃에서 1분동안으로 구성된 40번의 열순환을 통해 수행된다. 각각의 플레이트는 표 7에 기재된 표준 RNA를 사용한 표준 곡선 및 두개의 추가 대조구 시료를 포함한다: (1) 모든 플레이트상에서 사용되는 양성 대조 RNA 시료; (2) 비기질 대조구(NTC).

표 7

척수에서의 평균 세포수

치료군	평균 세포수/0.12 mm²
비-EAE	61±3.2
d40 대조구	107±6.1
d50 식염수	138±8.3
D60 식염수	137±8.3
D70 식염수	143±6.7
D80 식염수	113±4.8
D50 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르	97±3.9
D60 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르	86±4.2
D70 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르	89±8
D80 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르	70±4

표준 곡선의 상관계수는 나타내어진 모든 데이터에 대하여 0.990 이상이었다. 삼중 시료에 대한 편차계수는 0.2 이하이었다. 표준곡선에 사용된 RNA가 일정하지만 알 수없는 양의 표적 메시지를 포함하는 RNA의 이종성 혼합물이기 때문에 계산된 수가 상대적이다.

FACS 분석. 면역화후 80일째에, 헤파린화 혈액 시료를 비-EAE 동물, 식염수 치료된 동물, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 치료된 동물 및 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르의 투여 중지후 10일된 동물로부터 수집하였다. 모든 시료는 모든절차를 위해 4℃에서 유지되었다. 150 ㎕ 시료를 30분동안 일차 항체에 노출시키고, 2번 세척하고, 5% 기니아 피크 혈청 (Beckman Coulter #PN EM055 1)의 존재하에 PE-접합 염소 항마우스 IgG Fc와 함께 배양하였다. 적혈구를 Becton-Dickinson 용해용액으로 용해시키고, 시료를 광산란을 통해 상이한 세포 개체수를 수집하는 FACScan flow cytometer(Becton Dickinson, Mountain View, CA)상에서 검사하였다.

통계적 분석. SigmaStat v2 소프트웨어 (SPSS Inc.)를 사용하여 통계적 분석을 수행하였다. Mann Whitney rank sum 시험을 사용하여 임상 점수를 측정하였고, 반면에 two-way ANOVA를 사용하여 병리학 점수를 측정하였다. 정량적인 비정상은 Kruskal-Wallis ANOVA를 사용하여 랭크(rank)상에서 비교하였다. 각각의 경우, p<0.05를 중요하게 고려하였다. 선형 회귀는 척수에서 평균 세포수상에서 수행하였다.

결과: 임상 반전. 동물들은 면역화후 9일째에 질환의 임상적 징후를 나타내기 시작하였으며, 40일째까지 계속되었다. 이와 같은 시점에서, 상기 질환은 만성으로 사료된다. 치료 기간은 40일째부터 시작하여 최소 10일동안 최대 40일동안 지속하였다. 식염수를 주입한 동물은 실험이 종료될 때까지 계속적인 임상 표명을 나타낸 반면에, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 치료된 동물은 최초 치료후 2-3일부터 임상 반전을 나타내기 시작하였다(도 1A). 치료가 시작되기전에 설정 임상 점수가 2를 갖는 여러 동물에 있어서, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르가 마비(paresis)를 역전시켰으며, 동물들은 치료기간에 걸쳐 자신의 후지(hind limb)를 사용할 수 있었다(즉, 임상 점수 1에 대한 반전). 치료기간에 의존하여, 이전에 질환 징후를 나타내었던 일부 동물들은 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 투여받으면서 완전히 질환이 사라졌다. 전체 치료 기간 경로에 걸쳐서, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 치료된 동물의 평균 임상 점수는 식염수 치료된 동물보다 현저히 낮았다(p<0.001, Mann Whitney rank sum test).

N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 치료된 군에서, 면역화후 54일째에 일시적인 소규모 증가가 존재하였다(도 1A). 2개의 동물은 임상 징후 정도에서 온건한 변동을 나타내었다; 이들은 임상 신호가 완전히 존재하지 않는 것(0 점)부터 매우 약한 보행실조(1 점)까지 동요한다. 그러나, α₄ 인테그린에 대한 항체를 사용하여 미리 관찰하였기 때문에 치료에서 일탈한 동물을 없었으며, 쥐 또는 인간화 항체의 기니아 피그 거절로 인하여 상기 동물은 전체적으로 치료에 대한 반응을 중지하였다. N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 사용한 연장기간동안 동물치료에 따른 (주사부위 염증과 같은)부수적인 문제점은 없었다.

동물중 하나의 하위군에 있어서, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 30일동안 주사하고, 이후 제거하고, 동물을 실험의 최종 10일동안 식염수 주사제에서 유지시켰다. 일단 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 투여를 중지하면, 치료기간동안 식염수를 투여한 돌물의 임상 경로와 유사하게 임상 회기가 복귀한다. 면역화 70일째 및 80일째 사이에서 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 후치료된 동물의 평균 임상 점수는 치료 기간에 걸쳐 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르가 투여된 돌물의 임상 점수보다 현저히 높았다(p<0.05, Mann Whitney rank sum test). 요약하면, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르가 어떠한 부정적인 부작용없이 40일까지 성곡적으로 투여되었으며, 이는 만성 진행성 EAE와 연관된 임상 결점의 반전을 유지하였다.

결과: 병리학적 비정상의 반전. 병리학적 비정상은 H-E 및 SCR 염색 뇌 및 척추 섹션상에서 평가되었다. 도 2에서, 왼쪽 패널은 수초(myelin)를 푸른색으로 염색하는 SCR 염색 섹션이다(x40). 오른쪽 패널은 해당 SCR 사진의 배내측(dorsal medial) 부위로부터 취합된 고확대 (x250) H-E 염색 섹션이다(도 2). 도 2의 패널 A 및 B에 도시된 섹션은 정상 기니아 피그로부터 수집되었으며, 염증 및 탈수초를 나타내지 않는다. 면역후 40일째까지 만성 동물은 하나 이상의 대형 연막하 플라크의 탈수초 뿐만아니라 광범위한 경막 및 혈관주위 염증을 갖는다(도 2C). 침윤성 세포의 밀도가 현저히 증가하였다(도 2D). 관찰된 병리학적 비정상은 병이 진행될수록 보다 증상이 심해졌다. 면역화후 60일째에 20일동안 식염수 치료를 받은 대조구 동물은 심각한 경막 침윤, 대면적 척수염 및 병소 탈수초를 보였다(도 2E, 2F). 면역화후 80일째까지 일부 영역의 회백질(gray matter) 침입을 포함한 실질적으로 전체 척추 섹션이 침윤되고 탈수초되었다(도 2I, 2J). 대조적으로, 20일동안 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 치료를 받은 동물은 면역화후 60일째에 보다 작은 영역의 탈수초를 가지며, 소수의 경막 및 혈관주위 세포 침입이 존재한다(도 2G, 2H). N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 치료 40일후 병리학적 회복이 여전히 크다; 동물은 거의 경막 및 혈관 주위 침윤을 보이지 않으며, 수초가 완전한 상태로 남아있다(도 2K, 2L).

각각의 동물로부터 수득된 5개 블록 전체를 관계되지 않은 관찰차에 의해 점수화하였고, 결합 병리학적 점수는 4개의 항목(경막 염증, 혈관주위 침윤, 척수염 및 탈수초; 도 3) 각각에서 모든 5개 섹션으로부터의 전체 점수를 나타낸다. 치료기간 경로에 걸쳐서 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 투여한 동물은 식염수 치료 동물과 비교하여 모든 4개 항목에서 평균 병리학적 점수가 현저히 감소하였다(p<0.0001, two way ANOVA). N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르가 제거될 경우, 치료없이 추가로 10일동안 동물이 유지되고, 4개 모든 항목에서의 평균 결합 병리학 점수가 치료기간동안 소분자를 계속적으로 투여받은 동물보다 현저히 높았다(도 3; p<0.05, SNK test를 이용한 랭크상 Kruskal Wallis ANOVA).

결과: 병리학적 비정상의 정량화. 상기에서 정성적으로 점수화된 병리학적 반전이 척수에서 정략적으로 확인되었다. 세포의 평균수는 요추, 흉추 및 경추의 H-E 염색 섹션상의 12개의 대표적 0.12 mm² 영역으로부터 계산되었으며, 전체 척수를 시험하기 위하여 결합되었다(도 4). 모든 비치료 EAE 동물은 비-EAE 동물보다 현저히 높은 세포수를 가지며, 이것은 질환기간동안 예상한대로 세포 침윤이 증가함을 의미한다(p<0.001, two-way ANOVA). N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 치료 10일 이후 세포수의 현저한 감소가 관찰되었으며, 식염수-치료 동물에 대하여는 치료 20, 30 및 40일에 걸쳐 현저한 세포수 감소가 유지되었다(p<0.001, two-way ANOVA). 추가로, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르로 20, 30 또는 40일동안 치료된 돌물의 평균 세포수는 만성 대조구 동물의 평균 세포수보다 현저히 낮았으며(p<0.05, SNK 시험을 이용한 rank상에서의 Kruskal Wallis ANOVA), 및 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 치료 40일 후, 척수의 평균 세포수가 비-EAE 동물의 평균세포수와 상이하지 않았다. 이와 같은 평균 세포수의 선형 회귀는 척수(r²=0.90)에서의 염증세포 진행성 손실을 입증한다. 이와 같은 선의 경사로부터, 발명자는 8 세포/mm²/일의 세포손실율을 계산할 수 있다. N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 제거한 후 추가로 10일동안 식염수에 유지된 동물에서 평균 세포수의 현저한 증가가 다시 관찰되었다(p<0.05, SNK 시험을 이용한 rank상에서의 ANOVA).

결과: 정량적 PCR . IL-2, IL-10 및 MCP-1의 수준을 평가하기 위하여 척수의 허리 섹션상에서 정량적 PCR을 수행하였으며, 결과는 이미 토론된 병리학적 반전에 경의를 표하고 있다. 식염수치료 동물에서, IL-2의 양은 질환의 만성기에 걸쳐 증가하였다. 대조적으로, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 투여받은 동물은 IL-2 RNA가 거의 검출되지 않았다. N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르의 투여중지후, 척수에서의 IL-2 양은 식염수 치료 동물과 비교할 수 있을 정도의 수준으로 복귀하였다. 유사한 결과들이 IL-10 및 MCP-1에서 관찰되었다. 치료기간동안 사이토카인 RNA 수준의 현저한 감소가 명백하며, 억제제의 제거후 높은 수준으로 복귀하였다(도 5).

결과: FACS 분석. FACS 분석에 의해 측정된 바와 같이, EAE 동물의 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 치료로 인하여 식염수치료 동물과 비교시 순환계에서의 α₄ 인테그린 브라이트 림프구 분율을 크게 증가시켰다. 이와 같은 결과들은 말단 면역화에 의해 활성화된 림프구들이 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 존재하에 CNS로 진입할 수 없으며, 순환계에 축적된다는 것을 제시한다(도 6 및 7A). 이와 같는 제안과 일치되어, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르가 제거될 경우 순환계에서의 α₄ 인테그린 브라이트 림프구의 분율이 식염수 치료 수준으로 복귀되었고, CNS 염증도 회복되었다(도 7A). α₄ 인테그린 저 및 고 단핵구의 식별가능한 소집단이 존재하지는 않았지만, 순환 단핵구상에서의 α₄ 인테그린의 일반적인 발현이 EAE 동물에서 증가하였다(도 7B). 이와 같은 증가는 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르에 의해 영향받지 안았으며, 이것은 주변 면역 반응이 상기 치료에 의해 억제되지 않았다는 것을 추가로 제시한다.

실시예 2

만성 EAE에서의 α₄ 인테그린의 연장된 억제후의 자발적인 수초재생

실험적 자가면역 뇌척수염에서 염증 세포의 존재가 자발적인 수초 치료를 억제하는지 여부를 측정하기 위하여 알파-4 베타-1 (α₄β₁) 인테그린 (VLA-4) 블록을 억제함으로서 차단되는 중추신경계로의 면역세포 유입 모델이 연구되었다. 마비된 기니아 피크는 EAE의 앞선 탈수초 단계에 α₄β₁ 특이적 억제제인 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르로 치료되었고(Piraino 등, J. Neuroimmunol. 2002, 131:147-159), 발명자는 (1) 치료 40일후 플라크의 87%가 수초재생의 물증을 제시하였고; (2) 전체 장애 영역의 50%에서 수초 회복이 발생하였고; 및 (3) 동물의 50%가 운동 기능을 회복하였다는 것을 발견하였다. 매개체 치료 동물에서는 운동 기능의 현저한 회복이 발견되지 않았다. 이와 같은 결과는 목표한 수초 회복이 존재하지 않는 상태에서 CNS 염증의 연장된 억제가 자발적인 수초재생 기작을 용이하게 할 수 있다는 것을 나타낸다.

방법.

동물 및 질환 유도. 암컷 Hartley 기니아 피그(200-250g, Charles River Canada, St. Constant, Quebec)를 광 및 온도조절 환경에서 유지하고, 음식과 물을 임의로 허락하였다. 균질화 동급체(isologous) CNS 조직 및 완전한 Freund 보조제(Difco, Detroit, MI)가 1:1로 혼합된 0.6 mL의 혼합물과 10 mg/mL의 Mycobacterium tuberculosis(Difco)를 경부, 진피내 주입하여 EAE를 유도하였다. 동물들은 9일째에 질환에 대한 임상적 징후를 나타내기 시작하였으며, 면역화후 40일째까지 만성으로 사료되었다. 돌물들은 4 지점 임상 스케일(4-point clinical scale)을 사용하여 관계되지 않은 관찰자에 의해 매일 체중을 측정하고 평가되었다. 상기 4 지점 임상 스케일은 하기의 점수를 사용한다: 0= 비정상이 없음; 0.5= 하루 이상의 체중 감소 연속일; 1= 운동 실조 및 불량한 두위반사(righting reflex); 2= 후지 마비, 요실금, 대변 매복증; 3= 마비; 4= 말단 마비.

치료 기준. 두가지 기준에 따라 질환의 심한 정도에 기초하여 치료하기위하여 동물을 선택하였다: (1) 질환의 만성 단계에 있는 동물(즉, 면역화후 적어도 40일); 및 (2) 치료기간이 시작하기 전에 임상 점수가 2인 동물(즉, 후지 마비). 이와 같은 EAE의 만성 진행성 모델을 이용한 발명자의 지난 경험에서, 임상 점수가 2인 만성 동물의 95%가 탈수초의 여러 작은 병소로부터 하나 이상의 대형 융합성 플라크까지의 범위로 척수에서의 가혹한 탈수초에 대하여 온건함을 나타내었다. 이와 같은 기준에 대한 고수하는 것은 치료 기간이 시작하기 전의 수초 손실에 대한 가능성을 최적화한다.

치료 섭생. 두가지 치료 기준에 부합하는 동물을 10, 20, 30 또는 40일 간격으로 치료하였다. N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르는 인간 및 기니아 피크의 α₄ 인테그린과 높은 친화력(고밀도 VCAM-1에 대한 세포 부착의 억제에 대한 IC₅₀ = 1-10 nm)으로 결합하는 소분자(분자량~500Da)이다. 동물들은 치료기간동안 하루에 두번씩 식염수 (n = 16) 또는 (N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 투여받았다. 투여 섭생으로서, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르의 수용체 포화 수준(>10nm)은 전체 시간동안 유지되었다. 두가지 치료는 피하 투여되었다. 또한, 일단의 동물은 기준선 "d0" 대조구로서 제공하도록 2의 임상 점수를 받기 이전에 도축된다.

조직 수집 및 치료. 도축후(0.25 mL 소듐 펜토바비탈), 동물을 방혈하고, CNS를 해부하고, 조각내었다. 척추의 허리, 가슴 및 경부 부위에 해당하는 3개의 척수 섹션이 사용되었다. 조직을 10% 포르말린에 고정하고, 파라핀에 파묻었다. 5개의 μm 교차-섹션을 정성적 수초 염색인 솔로크롬-R-시아닌(SCR)로 염색하고, 탈수초(청색 염색 부존재) 및 수초재생(장애안의 엷은 청색 염색 영역)의 증거를 위하여 광학현미경으로 조사하였다.

허리, 가슴 및 경부 섹션 각각으로부터, 원말단으로부터의 5 mm 조각의 척수를 2.5% 글루타르알데히드에서 4℃하에 고정하였다. 이후, 교차 섹션 각각의 중심으로부터의 0.5 mm 슬라이스를 등 및 배의 절반으로 등분하였다.

이와 같은 슬라이스들은 오스뮴 테트록사이드에서 후고정되고, 에폭시 수지에 파묻었다. 1 미크론의 톨루이딘 블루로 염색된 교차 섹션은 탈수초 및 수초재생의 증거를 위해 광학현미경으로 조사하였다. 장애를 포함한 영역은 전자현미경 관찰을 위해 추가로 조각내어지고, 얇은 섹션들은 과망간산염 칼륨 및 에탄올릭 우라닐 아세트산염(ethanolic uranyl acetate)으로 염색하고 Philips EM 300 현미경으로 조사하였다.

조직학적 분석. 척수 병리상태를 McGavern 등, J. Neurosci. Res. 1999, 58: 492-504를 변형한 방법을 사용하여 정량화되었다. 1마리 동물당 12개의 교차 섹션의 평균으로부터의 영상을 Nikon Coolpix 995 디지털 카메라를 사용하여 40배 확대하여 촬영하였다. 각각의 교차 섹션내의(임의 단위) 총 장애 역역 및 수초재생 장애 영역 모두를 산출하기 위하여 Sigma Scan Pro 영상 분석 소프트웨어(SPSS Inc.)를 사용하였다. 이와 같은 영역들은 총 척수에 대한 전체적인 평가를 얻기 위하여 합해지며, 척수재생 영역은 총 장애 영역의 분율로 표시된다.

결과 및 토의. 이와 같은 연구의 첫번째 목적은 면역세포 이동의 CNS로의 확장된 억제가 존재하는 척수 장애의 자발적인 수초재생을 가능하게 하는지 여부를 확인하는 것이다. EAE의 기니아 피그 모델은 전체 CNS 균질현탁액으로 면역화후 비-회복 진행성 질환을 나타낸다(Wisniewsk 등, J. Neuropath. Exp. Neurol. 1983, 42: 243-255; Karlik 등, 1986, Neurology 36: 1112-4; Karlik 등, 1993, Magn, Res. Med. 30: 326-331). 급성 마비는 대략 10일후 시작되며, 20일째까지는 두드러진 탈수초를 나타낸다(Karlik 등, 1986, Neurology 36: 1112-4; Karlik 등, 1993, Magn. Res. Med. 30:326-331). 40일후 완전한 양방향 후지 마비를 나타내는 동물의 50%가 뇌간 및 척수에 걸쳐 심각한 탈수초에 대한 온건함을 갖는다. 이와 같은 질환 단계에 있는 동물들은 결코 재발하거나 원상태로 되독아가지 않으며, 자발적으로 회복되지도 않는다. 현재의 연구에서, 동물이 이와 같은 단계- 면역화후 적어도 40일 및 완전한 양방향 후지 마비 (임상 점수 2)-를 나타내는 시기에만 치료를 개시하였다. 이후 동물들에게 10, 20, 30 또는 40일 간격으로 α₄β₁ 인테그린의 소분자 억제제인 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 또는 매개체(식염수)를 투여하였다.

도 8은 솔로크롬-R-시아닌 염색된 척수 섹션의 대표적인 광학현미경 사진을 도시하고 있다(도 8A-F). 대조구에서는(0일 치료), 광범한 탈수초가 모든 동물에서 입증되었으며; 장애는 일반적으로 순수한 수초가 결여되어 있으며, 이들의 선도 가장자리에서 식세포호돤 수초 잔사를 포함하는 거품 대식세포의 고밀도의 면역 세포 침윤을 나타낸다(도 8A, 8B). 가장 짧은 치료 간격(10일)에서, 식염수와 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 치료된 동물들은 수초 창백(myelin pallor)의 최소 증거와 함께 계속적으로 척수에서 넓은 영역의 탈수초를 나타낸다. 대조적으로, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 치료 20일후 나타난 많은 장애들은 MS 환자에서 탈수초를 의미하는 고전적으로 기술된 셰도우(shadow) 플라크와 유사한 페일 블루 염색(pale blue staining)을 확산시킨다(도 8D). 식염수내의 플라크는 수초가 결여된 동물을 조절한다(도 8C). 치료 40일째까지, 두개의 치료군사이의 전체적인 수초 외모에 있어서 현저한 차이점이 관찰되었다. N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 치료 동물에서의 대부분의 장애는 셰도우 플라크(도 8F)로 나타나는 반면에, 대조구 동물에서의 장애는 만약 존재한다면 옅은 블루 염색을 나타내었다(도 8E).

조직학적 외모에서의 변화를 보다 우수하게 정의하기 위하여, 조직 시료를 광학 및 전자 현미경(EM) 모두를 사용하여 고해상도로 조사하였다(도 9). 30일 식염수 치료 동물에 있어서, 톨루이딘 블루(toluidine blue) 염색 세미틴(semithin) 섹션은 현저한 탈수초 및 축상 손실(도 9B) 뿐만아니라 정상 수초 영역(도 9A)을 나타내었다. 이와 같은 두 영역간의 작은 전이영역은 비교적 작은 직경의 얇은 차폐 축색을 포함하며(도 9B), 이것은 최근에 회복을 시도한 탈수초 축색을 나타낼 수 있다. 또한, 장애 내부 및 정상적으로 수초화된 영역 모두에서 월러변성(Wallerian degeneration)을 겪은 축색의 빈번한 증거가 존재하였다. N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 투여받은 동물에 있어서(도 9C), 얇게 수초화된 축색 영역이 매우 확장되었으며, 축색은 보다 큰 직경을 갖는 경향이 있으며, 이는 종종 장애 영역 전제에서 일반적인 회복 반응을 의미한다. 전자 현미경은 이와 같은 관찰을 확인하였다. 대표적인 "정상" 콤팩트 수초인 대형 직경 축색 주위 수초의 얇은 외피가 도 9D에 도시되어 있다. 40일동안 식염수 치료를 받은 동물에 있어서, 대형 축색이 완전히 탈수초화될 경우 장애 영역이 수초 부족을 나타내었다(도 9E). 대조적으로, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 사용한 치료는 대형 직경의 축색 주위에 다중의 얇은 수초층이 출현하였으며, 이는 탈수소화 상태를 나타낸다(도 9F). 그러므로, 연장된 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르의 투여는 만성 진행성 EAE를 갖는 동물의 척수에서 자발적인 탈수초화를 가능하게 한다.

N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르의 효과를 정량화하기 위하여, 탈수초화 증거를 나타내는 플라크의 분율을 측정하였다. 수초 창백을 나타내는 장애수를 동물 각각으로부터 이의 길이 전체에 걸쳐 취합된 척수의 교차섹션내 장애의 총개수로 나누었다(도 10)(방법에 대하서는 Warrington 등, 2000, Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 97:6820-5 참조). 식염수 치료 20일, 30일 및 40일후, 탈수초화를 나타낸 플라크의 평균 분율은 10 내지 20%이었다; 이와 같은 동물에서 수초 창백 발생율은 시간경과에 따라 현저한 변화는 없었다(도 10A). 대조적으로, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 투여 20일후, 척수에서의 셰도우 플라크 빈도는 식염수 치료 동물에 비하여 증가하여 65%에 도달하였으며; 30일 및 40일후에는 발생율이 각각 77% 및 87%에 도달하였다(p<0.001, Tukey 시험을 사용한 2-way ANOVA). 이와같은 수치는 초기치료(0일 및 10일) 수치보다 현저히 높았으며(p<0.05, Tukey 시험을 사용한 2-way ANOVA), 이것은 화합물이 시간 의존적 방식으로 수초재생의 발생을 증가시켰다는 것을 나타낸다. 수초재생 증거를 나타내는 플라크 분율이 지난 20일동안 현저히 증가하지 않았기 때문에 수초재생이 치료 10일 및 20일 사이에 동시발생 방색으로 대부분 개시되었던 것으로 사료된다(도 10A).

또한, 척수에서 전체적인 플라크 수초재생 정도를 측정하였다. 도 10B는 전각에서 대형 탈수초화 장애를 갖는 대표적인 척수 섹션을 도시하고 있다. 총 장애 영역은 각 동물에 대하여 모든 척수내의 모든 장애를 추적하고, 영역들을 합하여 측정하였다. 이와 유사하게, 수초재생의 총 영역은 수초 창백 영역을 추적하여 측정하였다. 도 10C-F는 탈수초화 분율에대한 총 장애 영역을 플롯화하고 있다. 식염수 치료 동물에 있어서, 2% 내지 11% 사이의 평균값을 가지며, 장애가 어떠한 회복 증거를 거의 나타내지 않으며, 40일 치료 기간에 걸쳐 현저한 차이점도 없었다.(도 10C-F). 대조적으로, 20일, 30일 또는 40일간의 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 치료후, 대부분의 확인된 장애들은 2 내지 100% 사이의 다양한 정도의 수초재생을 나타내었다(수초재생 평균 영역이 50%)(도 10D-5). (p<0.001, Tukey 시험을 이용한 2-way ANOVA). 그러므로, 40일 치료기간에 전체에 걸쳐 모든 동물에서 장애가 명백하게 나타난 반면에, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르는 수초재생 발생 및 분율을 증가시켰다. 또한, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 치료 동물에서 수초재생 증거는 관찰된 운동 기능의 재습득과 일치한다. 치료 개시시점은 임상 점수가 2일때이며, 이때 완전한 양방향 후지 마비를 나타낸다. N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르 치료 동물의 50%에서, 마비가 임상점수 1로 회복되었으며, 이것은 동물이 자신의 후지를 다시 사용할 수 있다는 것을 나타낸다(p<0.05, Mann Whitney rank sum 시험). 대조구 동물에서는 기능회복이 관찰되지 않았다.

정의에 의해 자발적인 수초재생은 수초재생을 자극하도록 특별히 고안된 치료적 중재없이 수초를 회복시키는 것이다(Miller 등, 1995, Microsc. Res. Tech. 32: 230-245). 자발적인 회복은 큐프리존(cuprizone), 리소레시틴(lysolecithin) 또는 에티디움 브로마이드(ethidium bromide) 등에 의한 급성 독성 피해를 포함한 탈수초 동물 모델(Dubois-Dalcq 등, 1990, Bioessays 12: 569-576), 및 바이러스 뇌염 모델(Miller 등, 1995, Microsc. Res. Tech. 32: 230-245), 또는 광범위한 면역억제 또는 면역세포 고갈 모델(Rodriguez 등, 1992, Neurol. 42: 348-57; 및 Murray 등, 2001, Brain 124: 1403-16)에 자세히 문서화되어 있다. 이와 같은 예에서, 수초재생이 수주내에 완료될 수 있다. N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르는 면역세포상의 α₄β₁ 인테그린 활성을 방해하는 소분자이고, 수초 회복을 직접적으로 향상시키기 위한 제제라기 보다는 뇌에서 염증성 세포 침윤을 예방하기 위한 질환제한제로 설계되었다(Piraino 등, 2002, J. Neuroimmunol. 131:147-159). CP-EAE의 기니아 피그 모델이 정상적으로 회복하지 못하는 비-간헐적 질환이기때문에, 질환제한제 자체로 자발적인 수초재생을 향상시킨다는 발견은 매우 중요하다. 이와 같은 결과는 염증환경 자체가 정상적인 회복 기작을 억제 또는 제압하고, 결국 이들의 소진을 유도한다는 것을 나타낸다. 비록 식염수 치료 동물에서도 현미경적 수초재생 증거가 있었지만, 현저한 수준을 나타내지는 못하였고, 임상적인 완화를 결코 수반하지 않았다. 결국, 면역세포 침윤을 억제함으로써 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르가 신생 수초의 공격을 예방하고 이의 회복을 가능하게 한다고 사료된다.

CNS의 유도 수초재생은 수초 당지질의 투여(Raine 등, 1978, Acta. Neuropathol. (Berl). 43: 43-53; Traugott 등, 1982, J. Neurol. Sci. 56: 65-73), CNS-특이적 항혈철, 정제 면역글로불린(Warrington 등, 2001, J. Allergy Clin. Immunol. 108:121-5), 또는 성장요소(Yao 등, 1995, Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 92:6190-4)를 포함한 여러 수단을 통하여 달성되었다. 최근에는 혈청 유래 인간 단일클론 항체(IgM)이 희소돌기아교세포(oligodendrocyte)의 직접적 자극을 통하여 수초재생을 분명히 향상시킬 수 있다는 사실이 알려져있다(Warrington 등, 2000, Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 97: 6820-6825; Bieber 등, 2002, Glia 37:241-9; Mitsunaga 등, 2002, FASEB J. 16: 1325-1327). 배아 및 성인 신경 간세포 모두의 이식은 결핍 모델에서 희소돌기아교세포 및 신생 수초 합성의 발생을 유발한다(Halfpenny 등, 2002, Lancet Neurol. 1: 31-40). 이와같은 연구들이 CNS가 회복가능하다는 것을 나타내는 반면에, 치료학적으로 유도된 수초재생이 진행중인 질환을 중단시키지 않는다는 것을 주지하는 것이 중요하다. 예를 들면, Notch 경로가 MS에서의 수초화 억제제로서 최근에 알려져 있으며, 이는 희소돌기아교세포, 신경교세포 및 진행성 염증간의 상호작용을 나타낸다(John 등, 2002, Nat. Med. 8: 1115-21). MS와 같은 염증질환에 있어서, CNS는 여전히 공격받기 쉽다.

나탈리주바브와 같은 수초재생성 항체는 신생 염증 세포의 다른 연속적 유입을 억제함으로써 EAE에서 병변을 회복시킨다. 이미 CNS로 들어간 세포들은 정상적인 식세포 기작에 의해 제거된다(Hyduk 등, 1998, J. Neuropath. Exp. Neurol. 57:602-614). 이와 같은 관찰과 일치되어, N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르는 치료기간이 증가함에 따라 면역세포 침윤 및 이와 관련된 염증 매개체를 점진적으로 감소시킨다는 것을 입증하고 있다(Piraino 등, 2002, J. Neuroimmunol. 131:147-159). MS를 재발시키기 위한 조절 시험에 있어서, 플라시보 치료를 받은 환자와 비교할때 나탈리주마브가 6개월 이상의 치료가 염증성 뇌 장애 및 재발을 거의 유도하지 못하였다는 것을 입증하고 있다. 시험기간중 치료가 성공적으로 허용되었으며, 나탈리주마브 치료 환자들중에서 향상된 환자들이 있었다(Miller 등, 2003, New Engl. J. Med. 348: 15-23). 결국, 항-α₄ 인테그린 항체 치료와 같은 제제 및 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르와 같은 화합물은 MS에서 질환 제한 요소로서 작용할 뿐만아니라 CNS 회복을 가능하게 하는 제제가 될 것이다.

본 발명이 이의 특이적인 실시예에 관하여 기술하고 있지만, 당업자는 본 발명의 진정한 사상 및 범위를 벋어나지 않으면서 댜앙한 변경이 이루어질 수 있고 등가물로 치환될 수 있다는 사실을 이해하여야 한다. 또한, 본 발명의 목적, 사상 및 범위에 대하여 특정 상황, 물질, 물질 조성물, 방법, 방법 단계 또는 단계를 채택하기 위하여 많은 변형들이 행해질 수 있다. 이와 같은 모든 변형들은 본 발명의 범위안에 존재한다.

실시예 3

인간화 21.6 항체의 제조

마우스 21.6 V_L 및 V_H 영역의 PCR 클론 cDNA를 인간 불변 영역과 연결시켜 경쇄 및 중쇄 키메라를 제조하였다. 마우스 cDNA 서열의 5' 및 3' 말단은 특별히 고안된 PCR 프라이머를 사용하여 변형되었다. 리더서열의 개시부를 암호화하는 DNA 서열 5' 말단 PCR 프라이머(표 8)는 효율적인 번역에 필요한 DNA 서열을 제조하고(Kozak, J. Mol. Biol. 196:947-950(1987)), 발현 벡터로의 클로닝을 위한 HindIII 제한위치를 생성하도록 설계되었다. J 영역의 말단을 암호화하는 DNA 서열과 혼성화하는 3'-말단 프라이머(표 8)는 불변 영역에 대한 슬라이싱에 필요한 DNA 서열을 제조하고, 발현 벡터로의 클로닝을 위한 BamHI 위치를 생성하도록 설계되었다. PCR 증폭 생성물은 HindIII 및 BamHI로 절단되고, pUC19 벡터로 클로닝되며, PCR 증폭기간중에 에러가 발생하지 않았다는 사실을 확인하기 위하여 서열을 결정하였다. 이후, 채택된 마우스 21.6 가변 영역은 인간 카파(kappa) 또는 감마(gamma)-1 불변 영역을 포함하는 포유동물 발현 벡터로 서브클로닝되었다.

키메라 21.6 항체 제조용 PCR 프라이머

A. 경쇄 가변 영역1. 5'말단 제조용 프라이머(37-mer)5' C AGA AAG CTT GCC GCC ACC ATG AGA CCG TCT ATT CAG 3' HindIII Kozak M R P S I Q 공통서열2. 3'말단 제조용 프라이머 (37-mer)5' CC GAG GAT CCA CTC ACG TTT GAT TTC CAG CTT GGT 3' BamHI 스플라이스 공여부

B. 중쇄 가변 영역1. 5'말단 제조용 프라이머(37-mer)5' C AGA AAG CTT GCC GCC ACC ATG AAA TGC AGC TGG GTC 3' HindIII Kozak M K C S W V 공통서열2. 3'말단 제조 D 프라이머 (37-mer)5' CC GAG GAT CCA CTC ACC TGA GGA GAC GGT GAC T 3' BamHI 스플라이스 공여부

마우스 21.6 가변 영역의 구조 모델링. 마우스 21.6 항체의 V_L 및 V_H 영역의 분자 모델을 제조하였다. UNIX 운용 시스템하에서 작동하는 Silicon Graphics IRIS 4D 워크스테이션상에서 분자 모델링 패키지 QUANTA (Polygen Corp., USA)를 사용하여 상기 모델을 제조하였다. 마우스 21.6 V_L 영역의 FR 구조는 인간 Bence-Jones 면역글로불린 RE1의 해결구조에 기초하였다(Epp 등, Biochemistry 14: 4943-4952(1975)). 마우스 21.6 V_H 영역의 FR 구조는 마우스 항체 Gloop2의 해결 구조에 기초하였다. FR에 동일한 잔기들이 유지되었다; 동일하지 않은 잔기들은 QUANTA내 시설을 사용하여 치환되었다. 마우스 21.6 V_L 영역의 CDR1 및 CDR2는 각각 기준 구조군 2 및 1에 속하는 것으로 밝혀졌다(Chothia 등, J. Mol. Biol. 196:901-917(1987)). RE1의 CDR1 및 CDR2가 동일한 기준군에 속하기 때문에 마우스 21.6 V_L 영역의 CDR1 및 CDR2는 RE1의 CDR1 및 CDR2의 구조상에 모델링되었다. 마우스 21.6 V_L 영역의 CDR3는 어떠한 V_L 영역의 CDR3에 대한 기준 구조군과도 부합되지 않는것으로 사료된다. 그러나, 데이터베이스 검색은 마우스 21.6 V_L 영역의 CDR3가 마우스 HyHEL-5 V_L 영역의 CDR3와 유사하다는 것을 나타내었다(Sheriff 등, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84: 8075-8079(1987)). rufrnr, 마우스 21.6 V_L 영역의 CDR3가 마우스 HyHEL-5 V_L 영역의 CDR3상에 모델링 되었다. 마우스 21.6 V_H 영역의 CDR1 및 CDR2는 각각 기준 구조군 1 및 2에 속하는 것으로 밝혀졌다. 마우스 21.6 V_H 영역의 CDR1은 Gloop2 V_H 영역의 CDR1상에 모델링되었으며, 이것은 V_H 영역의 CDR1에 대한 기준군 1의 구성원과 매우 닯았다. 마우스 21.6 V_H 영역의 CDR2는 마우스 HyHEL-5의 CDR2상에 모델링되었으며(Sheriff 등), 이는 또한 V_H 영역의 CDR2에 대한 기준군 2의 구성원이다. V_H 영역의 CDR3에 대하여는 기준구조가 존재하지 않는다. 그러나, 마우스 21.6 V_H 영역의 CDR3는 마우스 R19.9 V_H 영역의 CDR3와 유사하며(Lascombe 등, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:607-611 (1989)), 마우스 R19.9 V_H 영역의 CDR3 루프의 정점에 존재하는 잉여 세린 잔기를 제거하고, 어닐링하고, 간격을 정제함으로써 이와 같은 CDR3상에 모델링되었다. 바람직하지 않은 원자 접촉을 제거하고 반데르발스와 정전기 상호작용을 최적화하기 위하여 상기 모델은 QUANTA에서 실시한 것과 같이, CHARMM 포텐셜을 사용한 최종적으로 가장 가파른 하강(steepest descent) 및 접합 기울기 에너지 최소화(conjugate gradients energy minimization)를 수행한다.

재성형 인간 21.6 가변 영역의 설계 - 골격 서열용 상동성 인간 항체의 선택. FR이 마우스 21.6의 FR과 높은 비율의 동질성을 나타내는 인간 가변 영역을 아미노산 서열을 비교하여 규명하였다. 표 10 및 11은 마우스 21.6 가변 영역을 모든 알려진 마우스 가변영역들 및 모든 알려진 인간 가변 영역들과 비교하고 있다. 마우스 21.6 V_L 영역은 Kabat에 의해 정의된 바와 같이 마우스 카파 V_L 영역 하위군 5에 속하는 것으로 규명되었다. 각각의 마우스 카파 V_L 영역은 마우스 21.6 카파 V_L 영역(38C13V'CL 및 PC613'CL)과 93.4%의 동질성을 갖는 것으로 확인되었다. 마우스 21.6 V_L 영역은 Kabat에 의해 정의된 바와 같이 인간 카파 V_L 영역 하위군 1과 가장 유사하였다. 각각의 인간 카파 V_L 영역은 마우스 21.6 카파 V_L 영역과 72.4%의 동질성을 갖는 것으로 확인되었다. 가장 유사한 인간 가변 영역중 하나인 RE1로부터의 골격 영역(FR)은 재성형 인간 21.6 V_L 영역의 설계에 사용되었다. 마우스 21.6 V_H 영역은 Kabat에 의해 정의된 바와 같이 마우스 V_H 영역 하위군 2c에 속하는 것으로 규명되었다. 각각의 마우스 중쇄 가변영역은 마우스 21.6 V_H 영역(17.2.25'CL 및 87.92.6'CL)과 93.3%의 동질성을 갖는 것으로 확인되었다. 마우스 21.6 V_H 영역은 Kabat 등에 의해 정의된 바와 같이 인간 V_H 영역 하위군 1과 가장 유사하였다. 각각의 인간 V_H 영역은 마우스 21.6 V_H 영역과 64.7%의 동질성을 갖는 것으로 확인되었다. 가장 유사한 인간 가변 영역중 하나인 21/28'CL로부터의 FR은 재성형 인간 21.6 V_H 영역의 설계에 사용되었다.

골격 영역에서의 아미노산 치환

(A) 경쇄. 재성형 인간 21.6 V_L 영역에 대한 설계 방법에서 다음단계로는 마우스 21.6 V_L 영역 유래 CDR을 인간 RE1 유래 FR과 결합하는 것이다(Palm 등, Physiol. Chem. 356: 167-191 (1975)). 재성형 인간 21.6 V_L 영역의 일차 버젼(La)에서 인간 FR에 7개의 변형이 이루어졌다(표 10, 도 13). FR4의 104, 105 및 107 위치에서, RE1 유래 아미노산이 또다른 인간 카파 경쇄 유래의 보다 일반적인 인간 J 영역 아미노산으로 치환되었다(Riechmann 등, Nature 332:323-327 (1988)).

FR2의 45 위치에서, RE1에 정상적으로 존재하는 라이신은 마우스 21.6 V_L 영역의 해당 위치에서 발견되는 아르기닌으로 변경되었다. 이와 같은 위치의 아미노산 잔기는 마우스 21.6 V_L 영역의 CDR2 루프를 지지하는데 있어서 중요한 것으로 사료되었다.

FR2의 49 위치에서, RE1에 정상적으로 존재하는 티로신은 마우스 21.6 V_L 영역의 해당 위치에서 발견되는 히스티딘으로 변경되었다. 마우스 21.6 V_L 영역에서 이와 같은 위치의 히스티딘은 모델에서 결합 위치 중간에 위치되는 것으로 관찰되었으며, 항체-항원 결합중에 항원과의 직접적인 접촉을 가능하게 하였다.

FR3의 58 위치에서, RE1에 정상적으로 존재하는 발린은 마우스 21.6 V_L 영역의 해당 위치에서 발견되는 이소류신으로 변경되었다. 이와 같은 위치의 아미노산 잔기는 마우스 21.6 V_L 영역의 CDR2 루프를 지지하는데 있어서 중요한 것으로 사료되었다.

FR3의 69 위치에서, RE1에 정상적으로 존재하는 트레오닌은 마우스 21.6 V_L 영역의 해당 위치에서 발견되는 아르기닌으로 변경되었다. 마우스 21.6 V_L 영역에서 이와 같은 위치의 아르기닌은 모델에서 마우스 21.6 V_L 영역의 CDR1 루프에 인접하여 위치되는 것으로 관찰되었으며, 항체-항원 결합중에 항원과의 직접적인 접촉을 가능하게 하였다.

재성형 인간 21.6 V_L 영역(Lb로 부름)의 이차 버젼은 RE1의 FR2에서 49 위치에서 변경이 없다는 것을 제외하고는 상기와 동일한 치환을 포함하도록 설계되었다(도 13).

(B) 중쇄. 재성형 인간 21.6 V_H 영역에 대한 설계 방법에서 다음단계로는 마우스 21.6 V_H 영역 유래 CDR을 21/28'CL 유래 FR과 결합하는 것이다(Dersimonian 등, J. Immunol. 139: 2496-2501 (1987)). 재성형 인간 21.6 V_H 영역의 일차 버젼(Ha)에서 인간 골격 영역에 5개의 변경이 이루어졌다(표 11, 도 14). 인간 FR에서의 5개 변경은 27, 28, 29, 30 및 71 위치에 존재한다.

FR1의 27, 28, 29 및 30 위치에서, 인간 21/28'CL에 존재하는 아미노산을 마우스 21.6 V_H 영역의 해당 위치에서 발견되는 아미노산으로 변경하였다. 비록 이와 같은 위치들이 FR1에 명시되어 있지만(Kabat 등), 26 내지 30 위치는 V_H 영역의 CDR1 루프를 형성하는 구조 루프의 일부이다. 그러므로, 이와 같은 위치의 아미노산은 항원 결합에 직접적으로 참여한다. 실로, 27 내지 30 위치는 Chothia 등에 의해 정의된 바와 같이 V_H 영역의 CDR1에 대한 기준 구조의 일부이다.

FR3의 71 위치에서, 인간 21/28'CL에 존재하는 아르기닌은 마우스 21.6 V_H 영역의 해당 위치에서 발견되는 알라닌으로 변경되었다. 71 위치는 Chothia 등에 의해 정의된 바와 같이 V_H 영역의 CDR2에 대한 기준 구조의 일부이다. 마우스 21.6 가변 영역의 모델로부터, 71 위치의 알라닌은 V_H 영역의 CDR2 루프를 지지하는데 있어서 중요한 것으로 사료되었다. 이와 같은 위치에서 아르기닌을 알라닌으로 치환하는 것은 아마도 CDR2 루프의 안착을 방해하는 것 같다.

재성형 인간 21.6 V_H 영역의 이차 버젼(Hb)은 상기 버젼 Ha에서 기술된 5개의 변경을 포함하고, FR2에서 추가로 1개의 변경을 수행하였다.

FR2의 44 위치에서, 인간 21/28'CL에 존재하는 아르기닌은 마우스 21.6 V_H 영역의 해당 위치에서 발견되는 글리신으로 변경되었다. V_L-V_H 영역 패킹 및 마우스 21.6 가변 영역 모델상에서 공개된 정보에 기초하여, 44 위치의 아미노산 잔기가 V_L-V_H 영역 패킹에서 중요할 것을 사료된다.

CDR3를 인간 VCAM-1과 보다 유사하게 보이게 하기 위하여 재성형 인간 21.6 V_H 영역 버젼 Hc을 설계하였다. 마우스 21.6 항체와 인간 VCAM-1 모두는 α₄β₁ 인테그린과 결합한다. 항체의 V_H 영역의 CDR3 루프는 6개의 CDR 루프중에서 가장 다양하며, 항체-항원 상호작용에서 일반적으로 항체의 가장 중요한 단일 성분이다(Chothia 등; hoogenboom & Winter, J. Mol. Biol. 227:381-388 (1992)); Barbas 등, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89: 4457-4461 (1992)). 마우스 21.6 V_H 영역의 CDR3와 인간 VCAM-1의 86 내지 94 아미노산간의, 특히, CDR3 루프의 YGN(티로신-글리신-아스파라긴) 서열과 VCAM-1의 FGN(즉, 페닐알라닌-글리신-아스파라긴) 서열간의 일부 서열 유사성이 규명되었다. 이와 같은 서열들은 다양한 세포 부착에서 중요한 RGD(즉, 아르기닌-글리신-아르파르트산) 서열과 관련되어 있는 것으로 사료된다. 그러므로, CDR3의 98위치에서 마우스 21.6 V_H 영역에 존재하는 티로신을 인간 VCAM-1의 서열에서 발견되는 페닐알라닌으로 변경하였다.

또한, FR2의 36 위치에서 가능한 치환도 고려하였다. 마우스 21.6 V_H 사슬은 FR2의 36 위치에 비정상적인 시스테인 잔기를 포함한다. FR2의 이와 같은 위치는 관련된 마우스와 인간 서열에서 일반적으로 트립토판이다(표 11). 비록 시스테인 잔기가 항체 배좌에 대하여 종종 중요하지만, 마우스 21.6 가변 영역의 모델은 이와 같은 시스테인 잔기가 직접적으로 또는 간접적으로 항원 결합에 참여하여, 인간 21/28'CL V_H 영역의 FR2에 존재하는 트립토판이 인간화 21.6 항체의 모든 3개의 버젼에서 치환되지 않은 상태로 존재한다는 것을 규명하지 않았다.

재성형 인간 21.6 항체의 제조. Daugherty 등, Nucleic Acids Res. 19: 2471-2476 (1991)에 의해 기술된 바와 같이 PCR 단편을 필수적으로 겹침으로써 재성형 인간 21.6 V_L 영역의 일차 버젼(resh21.6VLa)을 제조하였다. 앞서 기술된대로 채택되고 pUC19로 삽입된 마우스 21.6 V_L 영역을 주형으로 사용하였다. 4개의 프라이머 쌍, APCR1-vla1, vla2-vla3, vla4-vla5, 및 vla6-vla7을 합성하였다(표 9).인접한 쌍들은 적어도 21개의 염기로 겹쳐진다. APCR1 프라이머는 pUC19 벡터에 상보적이다. 적당한 프라이머 쌍(0.2 μmole)을 10 ng의 주형 DNA와 결합하였으며, 10 mM Tris-HCl(pH 8.3), 50 mM KCl, 200 μM dNTP 및 1.5 mM MgCl2를 포함한 50 ㎕의 PCR 완충용액중의 1 유니트의 AmpliTaq DNA 중합효소 (Perkin Elmer Cetus)와 결합하였다. 각각의 반응은 25 순환동안 수행하였다. 94℃에서 5분동안 초기 용융후, 94℃에서 1분, 55℃에서 1분 및 72℃에서 2분동안 반응을 순환하였으며, 마지막으로 72℃에서 추가로 10분동안 배양하였다. 프라이머 어닐링 및 확장 단계 사이의 설정온도 도달시간(ramp time)은 2.5분이었다. PCR 반응의 일차 라운드로부터 수득된 4개의 반응(A, B, C 및 D)의 생성물은 페놀 추출물 및 에탄올 침전물이었다.

표 9

PCR 생성물 A 및 B와 C 및 D는 PCR 반응의 이차 라운드에서 결합된다. PCR 생성물 A 및 B와 C 및 D(각각 50 ng)는 50 ㎕ PCR 반응물(상기에서 기술된)에 첨가되고 어닐링 온도를 60℃까지 상승시키는 것을 제외하고는 앞서 기술한대로 20순환을 통해 증폭된다. 이와 같은 반응 생성물은 E 및 F로 명명한다. 사용된 프라이머쌍은 각각 APCR1-vla3 및 vla4-vla7이다. PCR 생성물 E 및 F는 페놀 추출되거나 에탄올 침전되었으며, 이후, 최종 프라이머인 APCR1 및 vla7을 사용한 앞서 기술된 PCR 반응과 유사한 이단계 PCR 반응에서 이들 자신의 상보체에 의한 PCR 반응의 3번째 순환에서 조립되었다. 리더서열(leader sequence)을 포함한 전체 재성형 인간 21.6 V_L 영역을 나타내는 완전히 조립된 단편은 HindIII 및 BamHI로 절단되고 서열결정을 위해 pUC19로 클로닝되었다. 정확한 서열을 갖는 클론을 resh21.6VLa로 명명하였다.

Kamman 등, Nucl. Acids Res. 17:5404(1989)의 방법에 따라 재성형 인간 21.6 V_L 영역(La)의 일차 버젼을 약간 변형시키는 PCR 프라이머를 사용하여 재성형 인간 21.6 V_L 영역(Lb)의 이차 버젼을 제조하였다. 2세트의 프라이머를 합성하였다(표 9). 각각의 PCR 반응은 앞서 기술한 것과 동일한 조건하에서 필수적으로 수행하였다. 일차 PCR 반응에서, StyI 부위(Thr-ACC-97 내지 Thr-ACA-97)를 파괴하여 resh21.6VLa2를 생성하기 위하여 돌연변이성 프라이머 21.6VLb2가 사용되었다. 이후, 이차 PCR 반응에서, 주형 DNA로서 pUC-resh21.6VLa2와 함께 돌연변이성 프라이머 21.6VLb1 (His-49 내지 Tyr-49)를 사용하였다. PCR 생성물을 StyI 및 BamHI로 절단하고, 동일한 제한효소로 절단된 pUC-resh21.6VLa2로 서브클로닝하였다. 정확한 서열을 갖는 클론을 pUC-resh21.6VLb로 명명하였다.

재성형 인간 21.6 V_L 영역의 버젼 "a"를 제조하기 위해 기술된 것과 동일한 PCR 방법을 사용하여 재성형 인간 21.6 V_H 영역의 버젼 "a"를 제조하였다(표 9). 재성형 인간 425 V_H 영역의 버젼 "g"(Kettleborough 등) 및 재성형 인간 AUK12-20 V_H 영역의 버젼 "b"를 암호화하는 HindIII-BamHI DNA 단편을 각각 pUC-resh425g 및 pUC-reshAUK12-20b를 생성하는 pUC19로 서브클로닝하였다. (AUK12-20의 버젼 "b"는 Kettleborough 등에 의해 기술된 V_H a425 단편의 PCR 돌연변이생성에 의해 유래되고, 하기의 아미노산 서열을 암호화한다: QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYSFT SYYIH WVRQAPGQGLEWVGYIDPFNGGTSYNQKFKG KVTMTVDTSTNTAYMELSSLRSEDTAVYYCARGGN-RFAY WGQGTLVTVSS (행간은 FR 및 CDR 영역을 분리한다)).

키메라 21.6 중쇄(pUC-chim21.6V_H)에 사용하도록 변형된 마우스 21.6 V_H 영역을 포함한 pUC 벡터 뿐만아니라 pUC-res425g 및 pUC-reshAUK12-20b 플라스미드가 이후의 PCR 반응에서 주형 DNA로 사용되었다. 재성형 인간 21.6 V_H 영역의 버젼 "a"를 제조하기 위하여 PCR 프라이머가 설계되고 합성되었다(표 9). pUC-reshAUK12-20b를 DNA 주형으로 사용하고, APCR1-vha1을 PCR 프라이머 쌍으로 사용하여 PCR 생성물 A를 수득하였다. pUC-chim21.6V_H을 DNA 주형으로 사용하고, vha2-vha3 및 vha6-APCR4를 각각 PCR 프라이머쌍으로 사용하여 PCR 생성물 B 및 D를 수득하였다. 마지막으로, pUC-resh425g를 DNA 주형으로 사용하고, vla4-vla5를 PCR 프라이머쌍으로 사용하여 PCR 생성물 C를 수득하였다. DNA 서열 결정을 위해 최종 PCR 생성물을 HindIII-BamHI 단편인 pUC19로 서브클로닝하였다. 정확한 서열을 갖는 클론을 pUC-resh21.6VHa로 명명하였다. 재성형 21.6 가변영역의 일차 버젼의 DNA 및 아미노산 서열이 도 15에 도시되어 있다.

재성형 인간 21.6 V_L 영역의 버젼 "b"를 제조하기 위하여 상기 기술된 방법에 따라 재성형 인간 21.6 V_H 영역의 나머지 버젼들을 제조하였다. 2세트의 프라이머를 합성하였다(표 9). 이차 버젼(Hb) 및 삼차 버젼(Hc)을 위해, DNA 주형으로 pUC-resh21.6VHa와 함께 돌연변이성 프라이머인 21.6VHb (Arg-44 내지 Gly-44) 및 21.6VHc (Tyr-98 내지 Phe-98)을 각각 사용하였다. PCR 생성물 VHb 및 VHc를 제한효소르 자르고 pUC-resh21.6VHb 및 pUC-resh21.6VHc를 생성하기 위하여 각각 MscI-BamHI 및 PstI-BamHI 단편인 pUC 벡터 pUC-resh21.6VHa로 서브클로닝하였다.

재성형 인간 21.6 V_L 영역(La)의 일차 버젼 제조에 사용된 방법과 유사한 방식으로 재성형 인간 21.6 V_H 영역(Ha)의 일차 버젼을 제조하였다. 그러나, 이와 같은 경우 3개의 상이한 주형 DNA인 키메라 21.6 중쇄 발현을 위해 이미 채택되었던 마우스 21.6 V_H 영역, 인간화 425 V_H 영역 버젼 "g"(Kettleborough 등) 및 인간화 AUK12-20 버젼 "b" V_H 영역과 함께 PCR 프라이머를 사용하였다(표 9). 인간화 21.6 중쇄 가변영역의 일차 버젼의 DNA 및 아미노산 서열이 도 16에 도시되어 있다. 인간화 21.6 V_H 영역의 일차 버젼(Ha)을 약간 변형시키는 PCR 프라이머를 사용하여 인간화 21.6 V_H 영역의 이차 및 삼차 버젼(Hb 및 Hc)을 제조하였다(표 9).

표 10

부호설명: (Kabat) Kabat 등에 따른 숫자매김; (#) 분자 모델링에서 사용되는 순차적 숫자매김; (마우스 21.6) 마우스 21.6 항체 유래 V_L 영역의 아미노산 서열; (마우스 카파 5) 하위군 5 유래 마우스 카파 V_L 영역의 공통 서열(Kabat 등); (인간 RED) 인간 V_L 영역의 아미노산 서열(Palm 등, Physiol. Chem. 356: 167-191 (1975)); (RH V_L 21.6) 재성형 인간 V_L 영역의 버젼 L1의 아미노산 서열; (*) CDR 루프에 대한 표준 구조의 일부인 잔기 (Chothia 등); (밑줄) 아미노산 잔기가 변경된 인간 FR의 잔기.

표 11

부호설명: (Kabat) Kabat 등에 따른 숫자매김; (#) 분자 모델링에서 사용되는 순차적 숫자매김; (마우스 21.6) 마우스 21.6 항체 유래 V_H 영역의 아미노산 서열; (마우스 2c) 하위군 2c 유래 마우스 V_H 영역의 공통 서열(Kabat 등); (인간 1)하위군 1 유래 인간 V_H 영역의 공통 서열(Kabat 등); (인간 21/28'CL) 인간 V_H 영역의 아미노산 서열(Dersimonian 등, J. Immunol., 139: 2496-2501(1987)); (RH V_H 21.6) 재성형 인간 V_H 영역의 버젼 H1의 아미노산 서열; (*) CD 루프에 대한 표준 구조의 일부인 잔기 (Chothia 등); (밑줄) 아미노산 잔기가 변경된 인간 FR의 잔기.

실시예 4

뇌염증의 EAE 모델

A. EAE 뇌의 섹션에서 염증성 내피에 결합하는 림프구의 시험관 분석.

Yednock 등, Nature 356:63-66(1992)에 기술된 절차에 따라 EAE를 가진 랫트로부터 질환 5일째(꼬리/후지 마비 1일째)에 뇌를 제거하였다. 뇌를 신속하게 냉동하고, 섹션화하고, 림프구양세포(lymphoid cell) 현탁액으로 씌운다(종양 주입뇌에 대해 상기 기술한 방법). 인간 U937 세포는 렛트 EAE 뇌의 염증성관에 특이적으로 결합하였다. 항-VLA-4 항체 HP2/1을 이용한 U937세포의 전처리는 EAE 뇌의 인접 섹션에서 염증성관에 대한 결합을 완전히 억제시켰다.

표 12에 나타난 바와 같이, EAE 뇌에서 염증성 관에 대한 인간 U937 세포의 결합은 VLA-4에 대한 시약(항-α₄, HP2/1; 및 항-β₂, AIIB2)에 의해 억제되었지만, 많은 수의 기타 부착 수용체에 대한 항체에 의해서는 억제되지 않았다. VLA-4의 피브로넥틴(fibronectin; FN)-결합 활성을 선택적으로 억제하는 2개의 항체는 EAE 관(P4G9 및 HP1/7)에 대한 U937 결합에는 영향을 주지 않았다. 표 13은 새로이 분리된 랫트 및 마우스 림프구 뿐만아니라 새로이 분리된 인간 림프구 및 단핵세포의 염증성 EAE 관에 대한 결합이 VLA-4에 대한 항체에 의해 선택적으로 억제되었다는 것을 나타내고 있다. 이와 같은 분석은 앞서 기술된 바와 같이 수행되었으며, 결합정도는 세포의 기준 모집단을 사용하여 정량화되었다.

표 12

U397 세포 처리	도관 클론	EAE에 대한 상대결합(조절%)
항-β₁ 인테그린	AIIB2	8±3
항-α₃ 인테그린	A043	111±5
항-α₄ 인테그린	HP2/1(선택적으로 FN 및 VCAM-1 결합 억제)	3±1
항-α₄ 인테그린	P4G9(선택적으로 FN 결합 억제)	151±7
항-α₄ 인테그린	HP1/7(선택적으로 FN 결합 억제)	338±41
항-α₅ 인테그린	F1D6	104±6
항-α₆ 인테그린	GoH3	88±11
항-α₄ 및 -α₅	F4G9 및 P106(결합)	138±8
항-α₃, -α₄ 및 -α₆	A043, P1D5, 및 GoH3(결합)	112±3
항-CD44	Homos-3	107±4
항-L-선택	TQ-1	96±4
항-β₂ 인테그린	P4H9	77±1
항-β₂ 인테그린	TS1/18	98±5
항-β₂ 인테그린	P4H9 (25℃에서 검사)	100±10
항-β₂ 인테그린	TS1/18 (25℃에서 검사)	114±2
항-α₄ 인테그린	HP2/1 (25℃에서 검사)	5±1
항-LFA-1	IOT1G	123±2
항-Mac-1	LM2/1	107±3

표 13

항체 특이성	클론	세포형태	EAE 관에 대한 상대결합(조절%)
항-β₁ 인테그린	AIIB2	인간 림프구	7±2
항-α₄ 인테그린	HP2/1	인간 림프구	0±0
항-α₄ 인테그린	HP2/1	인간 림프구	1±1
항-α₄ 인테그린	HP2/1	랫트 림프구	18±7
항-α₄ 인테그린	R1-2	마우스 림프구	43±2
항-CD2	OX-34	랫트 림프구	100±10
항-L-선택	MEL-14	마우스 림프구	92±4
Peyer 판 귀환 수용체(Peyer's patch homing receptor)	18.2.6	랫트 림프구	117±12
항-LFA-1	OX-52	랫트 림프구	87±1
항-CD45	OX-1	랫트 림프구	90±3
항-Thy 1.1	OX-7	랫트 림프구	87±3
항-CD4	OX-35	랫트 림프구	107±8
항-단핵세포/T 세포 표면	OX-44	랫트 림프구	102±8

B. 항-VLA-4 항체의 체내 투여 효과.

진행성 EAE에서 항체 효과를 측정하기 위하여 항-VLA-4를 랫트에 투여하였다(복막 투여). 하기 표 14에 대하여, 각 실험에서 T-세포 클론을 0일째에 투여하였다. 2일째, PBS, 표시양의 정제 항-α₄ 인테그린 또는 표시양의 정제 대조구 항체를 동물에게 복막 투여하였다. 모든 항체들은 마우스 IgG1이었다. 완전한 꼬리 또는 꼬리 및 후지 마비로 질환을 규정하였다. 질환이 진전된 동물에서, 마비가 4 또는 5일째에 시작되어, 5 또는 6일째에 절정을 이루고, 이후 점차 감소하였다. 2개의 추가 실험은 비교가능한 결과를 제공하였다. 3, 4 및 7일째 측정할 경우(3일째는 항체투여후 1일째이고, 최초 마비 발병 1일전이다), 백혈구의 순환 수준과 감별검사(differential count)가 HP2/1-치료 동물과 PBS 조절 동물사이에 차이가 있었다. 벌크양의 HP2/1을 AMAC; Sigma의 MOPC; Bioproducts for Science의 OX-1과 OX-7로부터 구입하였다.

6일째에 실험 2와 3을 통하여 여러 질환에 걸린 EAE 및 건강한 항-α₄ 인테그린 치료 EAE 랫트에서 뇌를 제거하였다. 질환에 걸린 EAE 동물 유래 뇌에는 활발한 침윤이 존재한 반면에, 항-α₄ 인테그린으로 치료된 EAE 랫트에서는 백혈구가 검출되지 않았다.

표 14

실험1마비증세를 보인 동물수
치료	5일	6일	7일
항체 투여없음	4/5	5/6	4/6
HP2/1 (1.2 mg)	0/6	0/6	0/6
MOPC (1.2 mg)	6/6	6/6	5/6

실험2마비증세를 보인 동물수
치료	4일	5일	6일
항체 투여없음	4/5	5/6	5/5
HP2/1 (1.0 mg)	0/6	0/6	2/4
OX-1 (1.0 mg)	5/5	5/5	5/5
OX-7 (1.0 mg)	5/6	5/5	5/5

실험3마비증세를 보인 동물수
치료	4일	5일	6일
항체 투여없음	6/6	6/6	6/6
HP2/1 (1.0 mg)	1/1	2/5	2/5
OX-1 (1.0 mg)	1/5	2/5	1/5
OX-7 (1.0 mg)	0/6	0/6	2/6

실시예 5

추가 VLA-4 항체 제조

면역화 및 탐색 실험계획.

인간 B 세포주 Ramos (ATCC로부터 수득함)에 대항하여 TY21.6 및 21.12를 사육하였다. Freund 완전 보조제에서 균질화된 10⁷ Ramos 세포를 Balb/c 마우스에 주입하였다(복막투여). 14일후, 2×10⁶ 생 Ramos 세포를 동물에 주입하였다(정맥투여). 최종 boost후 3일째에 비장을 제거하고, 비장림프구(splenocyte)를 분리하고, SP/2 골수종과 혼성화하고, 약 2000개 웰(well)에 도말하였다. VCAM-1 감염 L-세포에 대한 인간 B 세포주 Ramos 결합을 억제하는 능력에 대하여 상등액을 탐색하였다. VCAM-1 감염 L-세포는 표준 기술을 사용하여 제조되었다: VCAM-1 cDNA를 PCR을 통해 분리하고; 공지 서열에 기초하여 프라이머를 합성하고, TNF-자극 인간 제대정맥 상피세포(umbilical vein endothelial cells(HUVEC))에서 주형 RNA를 분리하였다. 분리한 cDNA를 마우스 L 세포에 감염시키고, 높은 수준의 VCAM-1 메시지를 발현하는 클론을 분리하였다. 부착 분석을 위해, VCAM-1 L 세포를 96 웰 플레이트에 도말하고, 컨플루언시(confluency)에 도달하게 한다. U937 세포를 PKH26(Zynaxis Cell Science, Inc., Malvern, Pa)로 형광 표지하고, 하이브리도마(hybridoma) 상등액으로 얼음중에서 30분동안 예비처리하고(200,000 세포/시료), 개개의 VCAM-1 웰에 첨가하였다. 실온에서 30분동안 부착되도록 방치한 후, 웰을 세척하여 비결합 세포를 제거하고, 잔여세포를 40㎕의 0.1% Triton으로 용해하였다. 20 ㎕의 추출물을 Pandex plate reader에서 분석하여 형광 세기를 측정하였다(즉, 결합세포수). 결합정도를 총 투입세포수/웰과 연관된 형광에 대한 형광분율로 측정하였다(즉, 200,000 U937 세포). 2개의 개별 하이브리도마를 VCAM-1에 결합된 Ramos의 잠재 억제제로 확인하였으며, 클론으로 안정화되었다. 항체를 TY21.6 및 TY21.12로 명명하였다.

항체가 세포표면 표지 인간 림프구의 용해물로부터 2개의 단백질 밴드를 침전시키므로 2개의 항체가 무도 α₄ 인테그린과 반응하는 것으로 측정되었다. 이와 같은 단백질들은 150 및 130 kD 분자량을 가지며, 이것은 각각 알려진 분자량의 α₄ 및 β₁ 인테그린 사슬에 대응한다. 인간 α₄ 인테그린에 대한 구입가능하고 특성이 잘알려진 항체(HP2/1 항체)에 의해 동일한 밴드들이 평행 시료에서 침전되었다. 다른 단백질 밴드는 검출되지 않았다. 이와같은 결과는 21.6 및 21.12가 α₄β₁ 인테그린 복합체와 반응한다는 것을 제시한다.

간접 면역형광에 의한 세포염색 표준 방법을 사용하여 FACS 분석을 통해 TY21.6 및 21.12 항체의 특성을 추가로 분석하였다. 2개 항체 모두 인간 B 세포주, JY(α₄인테그린을 발현하고, 낮은 수준의 β₁을 발현한다.)와 반응한다. 2개 항제 모두 인간 K562 세포 또는 인간 호중구(β₁을 발현히고, 매우 낮은 수준의 α₄인테그린을 발현한다.)와는 반응하지 않는다. 마지막으로, 2개 항체 모두는 인간 α₄β₁ 인테그린으로 감염된 마우스 L 세포(앞서 기술한 바와 같이 주형 RNA로서 인간 T 세포주 Jurkat를 이용한 VCAM-1 감염 L 세포의 제조방법으로 제조된)와 반응하지만, 대조구 감염 L 세포와는 반응하지 않았다. 동일한 경향의 반응성을 HP2/1을 통해 얻었지만, 특성이 잘 규명된 β₁ 인테그린에 대한 항체는 JY와 반응하지 않았으며, K562 및 호중구와는 반응하였다. 결국, YY21.6 및 TY21.12가 α₄인테그린과 선택적으로 반응한다.

B. TY21.6, TY21.12 및 L25의 기능 특성 규명.

모든 3개, TY21.6, TY21.12 및 L25(Clayberger 등, J. Immunol. 138: 1510-1514 (1987))의 항체는 TNF-자극 랫트 뇌 EC에 결합하는 인간 림프구를 효율적으로 억제한다. 프라이머리 랫트 뇌 EC, 또는 랫트 뇌 EC 클론 (앞서 기술된)을 96웰 조직 배양 플레이트에 도말하였다. 일부 웰의 EC를 TNF(앞서 기술된)로 4-24시간동안 자극하였다. Jurkat, U937 또는 Ramos 세포를 형광 표지하고(앞서 기술된), 표시 항체로 예비처리하고, 이후 각각의 웰에 첨가하였다(200,000 세포/웰; 웰/항체/치료 삼중). 결합 정도는 앞서 기술된 VCAM-1 96웰 결합 분석방법에 따라 측정하였다. 결과를 표 15에 요약하여 정리하였다.

표 15

실험 1			실험 2
1도 랫트 뇌 EC	U937	% 입력 결합세포	클론 RBEC	항체	% 입력 결합 Jurkat	% 입력 결합 Ramos
0	항체 없음	7±1	0	항체 없음	3±1	2±1
TNFα	항체 없음	36±5	TNFα	항체 없음	66±3	40±1
TNFα	HP2/1	13±2	TNFα	HP2/1	6±1	2±1
TNFα	21.6	7±1	TNFα	TY21.6	8±2	1±1
TNFα	21.12	5±2	TNFα	TY21.12	8±1	1±0
			TNFα	L25	12±3	2±1

표 16에 기재된 바와 같이 3개 항체 모두가 VCAM-1 감염 L 세포(앞서 기술된 분석)에 결합하는 인간 림프구를 억제하는 것이 관찰되었다.

표 16

항체	% 입력 결합 Ramos	% 입력 결합 U937
없음	45±13	60±6
HP2/1	0±0	3±2
L25	9±2	11±2
TY21.6	1±1	0±1
TY21.12	0±0	1±0

표 17에 나타난 바와 같이, 3개 항체 모두는 EAE 뇌의 섹션에서 염증성 도관 결합하는 세포를 억제한다(앞서 기술된대로 수행된 분석).

표 17

U937 치료	결합
항체 없음	100±10
TY21.6	0±1
TY21.12	0±1
L25	1±1
HP2/1	3±1

α₄ 인테그린에 대한 일부 항체들(HP2/4과 같은; Pulido 등, J. Biol. Chem. 266:10241-10245 (1991))은 림프구의 자가응집을 유도한다. 이와 같은 응집에 대한 기초는 잘 이해되어 있지 못하다. 동일한 보고에서, L25는 림프구 응집을 유도한다고 보고되었다. 그러나, 발명자들이 이와 같은 관찰을 재현할 수 있다고는 할 수 없다. 발명자 판단으로는 HP2/4와 집접 비교할 때 L25, TY21.6 및 21.12가 세포 응집을 유도하지 못한다. 96 웰 조직 배양 플레이트의 웰(100 ㎕ 최종 부피/웰)에서 항체 상등액과 100,000 U937세포를 혼합함으로써(최종 희석 1:5) 응집을 유도하였다. 30분 내지 4시간동은 응집이 일어나도록 하였으며, 비항체 대조구와 비교하여 임의의 +/- 등급시스템으로 시각적으로 점수화하였다. 그 결과를 표 18에 나타내었다.

표 18

유도항체	U937의 응집 정도
없음	-
HP2/1	-
L25	-
TY21.6	-
TY21.12	-
HP2/4	+++

α₄ 인테그린에 대한 일부 항체들은 항 α₄ 인테그린 항체 HP2/4, HP2/1, TY21.6 및 TY21.12 블록 HP2.4 유도 세포 응집에 의해 유도된 응집을 억제하는 반면에 L25는 억제하지 못한다. 이와 같은 분석은 응집 유도 항체 HP2/4(HP2/4 하이브로도마 상등액의 최종 농도가 1:20이었다.)를 첨가하기 전에 U937를 30분동안 얼음에서 방해 항체(1:5로 희석된 상등액 또는 5 ㎍/mL의 정제 항체)로 예비처리하는 것을 제외하고는 앞서 설명한 방법으로 수행하였다.

표 19

U937의 예비처리	HP2/4에 의해 유도된 응집정도
없음	+++
HP2/1	-
L25	+++
TY21.6	-
TY21.12	+/-

VCAM-1 이외에도, α₄β₁ 인테그린은 FN의 CS-1 도메인에 결합하는 세포를 매개한다. α4 인테그린에 대한 일부 항체는 FN 결합을 억제하며, 이는 , L25, TY21.6 및 TY21.12에 대한 경우이다; 3개 항체 모두는 HP2/1만큼 효과적이다. 이와 같은 분석은 Pulido 등(1991)에 기술된 바에 따라서 수행되었다. 결과를 표 20에 기재하였다.

표 20

플레이트 코팅	BSA	FN	FN	FN	FN	FN
Jurkat 치료	없음	없음	HP2/1	21.6	21.12	L25
% 입력 결합	2±1	77±6	42±7	43±6	34±2	21±1
(% 억제)	-	-	(47)	(45)	(55)	(60)

본 출원은 미국 가출원번호 제60/442,713호(2003년 1월 24일 출원) 및 60/500,316호(2003년 9월 5일 출원)를 우선권주장하였다. 앞서 언급한 본 출원의 모든 내용 및 여기에 인용된 모든 참조문헌들, 등록특허, 공개특허출원들은 본 명세서에 참조문헌으로 포함된다.

문헌

하기의 발행물, 특허 및 특허출원들은 본 출원에 윗첨자로 인용된다:

¹ Hemler 및 Takada, European Patent Application Publication No. 330,506, published August 30, 1989

² Elices 등, Cell, 60: 577-584(1990)

³ Springer, Nature, 346:425-434 (1990)

⁴ Osborn, Cell, 62:3-6 (1990)

⁵ Vedder 등, Surgery, 106:509 (1989)

⁶ Pretolani 등, J. Exp. Med., 180:795 (1994)

⁷. Abraham 등, J. Clin. Invest., 93:776 (1994)

⁸ Mulligan 등, J. Immunology, 150: 2407 (1993)

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¹⁰ Li 등, arterioscler, Thromb., 13:197 (1993)

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¹⁷ Baron 등, J. Exp. Med., 177:57 (1993)

¹⁸ van Dinther-Janssen 등, J. Immunology, 147:4207 (1991)

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²⁴ Paavonen 등, Int. J. Can., 58:298 (1994)

²⁵ Schadendorf 등, J. Path., 170:429 (1993)

²⁶ Bao 등, Diff., 52:239 (1993)

²⁷ Lauri 등, British J. Cancer, 68:862 (1993)

²⁸ Kawaguchi 등, Japanese J. Cancer Res., 83:1304 (1992)

²⁹ Kogan 등, 미국특허번호 제5,510,332, 1996년 4월 23일 등록됨

³⁰ 국제특허출원공개번호 WO 96/01644

상기 발행물, 특허 및 특허출원들은 각각의 발행물, 특허 및 특허출원이 참조문헌으로 전체 내용이 포함되도록 특이적으로 및 개별적으로 언급되는 것과 동일한 정도로 본 명세서에 전체 내용이 참조문헌으로 포함된다.

본 발명의 방법 및 치료제가 기재되기 전에, 본 발명은 특정 방법 및 치료제가 당연히 변할 수 있기 때문에, 이에 제한되지 않는다는 것을 이해해야 한다. 또한, 본 발명의 범위는 단지 첨부된 청구범위에 의해 제한될 것이므로, 본원에 이용된 용어는 단지 특정 구현예를 기재할 목적이며, 제한할 의도는 아니라는 것을 이해해야 한다.

값의 범위가 제공되는 경우에, 명세서가 명확히 범위의 상한 및 하한 사이에 다르게 언급하지 않고, 상기 언급된 범위에서 임의의 기타 언급되거나 또는 중간값을 언급하지 않는다면 하한의 단위의 1/10까지 각각의 중간값이 본 발명내에 포함된다는 것을 이해해야 한다. 상기 작은 범위의 상한 및 하한은 독립적으로 언급된 범위에서 임의의 구체적으로 제외된 범위에 속하는 더 작은 것에 포함될 수 있다. 언급된 범위가 경계의 하나 또는 양자를 포함하는 경우에, 상기 포함된 경계를 제외한 범위는 또한 본 발명에 포함된다. 또한, 인용된 범위에 해당하는 임의의 값이 고려된다.

다르게 지정되지 않는다면, 본원에 이용된 모든 기술적 및 과학적인 용어는 본 발명이 속하는 당업자에 의해 통상 이해되는 동일한 의미를 가진다. 본원에 개시된 것과 유사하거나 또는 동등한 임의의 방법 및 물질이 또한 본 발명의 실시 또는 시험에 이용될 수 있지만, 바람직한 방법 및 물질이 지금 기재된다. 본원에 언급된 모든 공보는 공보가 인용된 것과 관련된 방법 및/또는 물질을 개시 및 기재하기 위해 본원에 참고로 포함된다.

1. 약어 및 정의

상세한 기재에 따라, 하기 약어 및 정의가 적용된다. 본원에 이용된, 단수 형태 "a", "and", 및 "the"는 명세서가 명확히 다르게 언급하지 않는다면, 복수 형태를 포함한다는 것을 이해해야 한다. 그리하여, 예를 들면, "항체"에 대한 참고는 복수의 상기 항체를 포함하며, "투여"에 대한 참고는 당업자에게 공지된 하나 이상의 투여 및 이의 동등물에 대한 참고를 포함한다.

본원에 논의된 공보는 본 출원의 출원일 전에 이의 개시를 위해 단지 제공된다. 본 발명이 선행 발명을 통해 상기 공보에 앞서는 권리를 인정하는 것으로 본원에서 해석되지 않는다. 또한, 제공된 공보일은 독립적으로 확인할 필요가 있을 수 있는 실제 공보일과 상이할 수 있다.

1.1. 약어

하기 약어가 본원에 이용되었다.

AC 산 세라미다제

AcOH 아세트산

ACTH 부신피질자극호르몬

ADEM 급성파종뇌염

ALD 부신백질이영양증

AMN 부신척수신경병증

aq 또는 aq. 수성

BBB 혈뇌장벽

bd 넓은 더블렛

bm 넓은 멀티플렛

Bn 벤질

Boc tert-부톡시카르보닐

Boc₂0 디-tert-부틸 디카보네이트

BOP 벤조트리아졸-1-일옥시-트리스(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트

bs 넓은 싱글렛

C 면역글로불린의 불변 부위

CACH 중추신경계 저수초형성을 갖는 유아기 조화운동불능

CADASIL 피질밑 경색 및 백색질뇌증을 갖는 대뇌 상염색체 우성 동맥병증

Cbz 카보벤질옥시

cDNA 상보적인 데옥시리보핵산

CDR 상보성 결정 부위

CDR1 상보성 결정 부위 1

CDR2 상보성 결정 부위 2

CDR3 상보성 결정 부위 3

CFA 프로인드 완전 면역반응 항진제

CHCl₃ 클로로포름

CH₂Cl₂ 디클로로메탄

CIDP 만성 면역 탈수초형성 다발신경병증

CJD Creutzfeld-Jakob 질환

CNS 중추신경계

(COCl)₂ 옥살릴 클로라이드

COX-2 시클로옥시게나아제-2

CS 코카인 증후군

CSF 집락자극인자

CTX 뇌힘줄황색종증

d 더블렛

DBU 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-엔

DCC 1,3-디시클로헥실카보디이미드

dd 더블렛의 더블렛

DMAP 4-N,N-디메틸아미노피리딘

DME 에틸렌 글리콜 디메틸 에테르

DMF N,N-디메틸포름아미드

DMSO 디메틸설폭시드

DNA 데옥시리보핵산

dt 트리플렛의 더블렛

EAE 실험적인 자가면역 뇌척수염

EBNA2 엡스타인-바 바이러스 핵 항원 2

ECM 세포외 기질

EDC 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카보디이미드 히드로클로라이드

EDTA 에틸렌디아민테트라아세테이트

ELAMS 내피부착분자

EM 전자현미경검사

Et₃N 트리에틸아민

Et₂0 디에틸 에테르

EtOAc 에틸 아세테이트

EtOH 에탄올

eq 또는 eq. 당량

FACS 형광표지세포분리기

Fmoc N-(9-플루오레닐메톡시카르보닐)

FmocONSu N-(9-플루오레닐메톡시카르보닐)-숙신이미드

FR 골격 부위

FR1 골격 부위 1

FR2 골격 부위 2

FR3 골격 부위 3

g 그램

GA 글라티라머 아세테이트

GALOP 보행실조, 자가항체, 노년, 개시, 다발신경병증

GM-CSF 과립구 단핵구 집락자극인자

GSD Gerstmanm-Straussler 질환

h 또는 hr 시간

H 면역글로불린의 중쇄

HAMA 인간 항-마우스 항체

HBr 브롬화수소산

HCl 염산

H-E 헤마톡실린-에오신

hex A 헥소아미니다제 A

HIC 소수성 상호작용 크로마토그래피

HIG 인간 면역글로불린

HMSN IV 유전성 운동 및 감각 신경병증 IV (또한, 유전성 다발신경염성 실조로서 알려짐)

H₂0 물

HOBT 1-히드록시벤조트리아졸 수화물

HUVEC 인간 배꼽 혈관내피세포

ICAM-1 세포간 부착분자 1

Ig 면역글로불린

IgG 면역글로불린 G

IgM 면역글로불린 M

IL 인터루킨

IL-1 인터루킨-1

IL-2 인터루킨-2

IL-8 인터루킨-8

K₂CO₃ 탄산칼륨

L 면역글로불린의 경쇄

LFA-1 림프구 기능 관련 항원 1 (또한, β2 인테그린, CD 11a/CD18 및 α_Lβ₂로서 알려짐)

m 멀티플렛

MAbs 단클론 항체

Mac-1 α_Mβ₂ 인테그린 (또한, CD11b/CD18로서 알려짐)

MAdCAM-1 점막 주소단백질 세포 부착 분자

MALDI/TOF MS 매트릭스 보조 레이저 탈착/비행시간 질량 분석법

MBP 수초 염기성 단백질

MCP-1 단핵구화학주성단백질 1

MeOH 메탄올

MES 2-(N-모르폴리노)에탄설폰산

mg 밀리그램

MgS0₄ 황산마그네슘

min. 분

MIP-1α 대식세포 염증 단백질 1 알파

MIP-lβ 대식세포 염증 단백질 1 베타

mL 밀리리터

MLD 이염색백색질장애

mm 밀리미터

mM 밀리몰

mmol 밀리몰

MOG 수초-희소돌기아교세포 당단백질

mp 융점

MS 다발경화증

N 노르말

NaCl 염화나트륨

Na₂CO₃ 탄산나트륨

NaHC0₃ 중탄산나트륨

NaOEt 소듐 에톡시드

NaOH 수산화나트륨

NH₄Cl 암모늄 클로라이드

NMM N-메틸모르폴린

NSAID 비스테로이드성 항염증

PCR 중합효소 연쇄 반응

PEG 폴리에틸렌 글리콜

Phe L-페닐알라닌

PKU 페닐케톤뇨증

PLP 단백지질 단백질

PMSF 페닐메틸술포닐플루오라이드

POEMS 다발신경병증 장기종대 내분비병증, M-단백질 및 피부 변화

Pro L-프롤린

PRP 프리온 관련 단백질

psi 평방인치당 파운드

PtO₂ 산화백금

q 쿼테트

quint. 퀸테트

RANTES 활성화시 조절되며, 정상적인 T-세포가 케모카인을 발현 및 분비함 (또한, 작은 유도성 시토카인 A5로서 알려짐)

RNA 리보핵산

rt 실온

RT-PCR 역전사 중합효소 연쇄 반응

s 싱글렛

SAMIs 선택적인 부착 분자 저해제

sat 또는 sat. 포화됨

scFv 단일쇄 Fv 단편

SCR 솔로크롬-R-시아닌

SDS 소듐 도데실 설페이트

SDS-PAGE 소듐 도데실 설페이트 폴리아크릴아미드 겔 전기영동

SP-MS 이차 진전 다발경화증

t 트리플렛

t-BuOH tert-부탄올

TFA 트리플루오로아세트산

TGF-β 종양성장인자 베타

THF 테트라히드로푸란

TLC 또는 tlc 박층 크로마토그래피

TNF 종양괴사인자

TNF-α 종양괴사인자 알파

TNF-β 종양괴사인자 베타

Ts 토실

TsCl 토실 클로라이드

TsOH 토실레이트

UV 자외선

VCAM-1 혈관 세포 부착 분자 1

V_H 가변 도메인의 중쇄

V_L 가변 도메인의 경쇄

VLA-4 매우 늦은 항원 4 (또한, 알파-4 베타-1, α₄β₁으로서 알려짐)

μL 마이크로리터

ρ 페닐

1.2. 정의

20개의 천연적으로 발생하는 아미노산에 대한 약어는 통상적인 용법을 따른다 (IMMUNOLOGY-A SYNTHESIS (2nd ed., E. S. Golub & D. R. Gren, eds., Sinauer Associates, Sunderland, Mass., 1991)). 20개의 통상적인 아미노산, 비천연 아미노산, 예를 들면, α,α-디치환된 아미노산, N-알킬 아미노산, 락트산 및 기타 비통상적인 아미노산의 입체이성질체 (예를 들면, D-아미노산)가 또한 본 발명의 폴리펩티드의 적당한 성분일 수 있다. 비통상적인 아미노산의 예는 하기를 포함한다: 4-히드록시프롤린, γ-카르복시글루타메이트, ε-N,N,N-트리메틸라이신, ε-N-아세틸라이신, O-포스포세린, N-아세틸세린, N-포르밀메티오닌, 3-메틸히스티딘, 5-히드록시라이신, ω-N-메틸아르기닌, 및 기타 유사한 아미노산 및 이미노산 (예를 들면, 4-히드록시프롤린). 더욱이, 아미노산은 글리코실화, 인산화 등에 의해 변형될 수 있다.

본원에 이용된 폴리펩티드 표시법에서, 표준 용법 및 관습에 따라서, 왼쪽 방향은 아미노 말단 방향이며, 오른쪽 방향은 카복시 말단 방향이다. 유사하게, 다르게 지정되지 않는다면, 단일 가닥 폴리뉴클레오티드 서열의 왼쪽 말단은 5' 말단이며; 이중 가닥 폴리뉴클레오티드 서열의 왼쪽 방향은 5' 방향으로 언급된다. 초기 RNA 전사체의 5' 에서 3' 첨가 방향은 전사 방향으로 언급되며; RNA 전사체의 5' 말단에 대한 5'인 RNA와 동일한 서열을 갖는 DN가닥 상의 서열 부위는 "상류 서열"로서 언급되며; RNA 전사체의 3' 말단에 대한 3'인 RNA와 동일한 서열을 갖는 DN가닥 상의 서열 부위는 "하류 서열"로서 언급된다.

표현 "폴리뉴클레오티드 서열"은 5' 에서 3' 말단으로 읽혀지는 데옥시리보뉴클레오티드 또는 리보뉴클레오티드 염기의 단일 또는 이중 가닥 중합체를 말한다. 이는 자가복제 플라스미드, DNA 또는 RNA의 감염성 중합체 및 비기능성 DNA 또는 RNA를 포함한다.

하기 용어는 2 이상의 폴리뉴클레오티드 사이의 서열 관계를 기재하기 위해 이용된다: "기준 서열", "비교 윈도우", "서열 동일성", "서열 동일성(%)", 및 "실질적인 동일성". "기준 서열"은 서열 비교를 위한 기준으로서 이용되는 정의된 서열이며; 기준 서열은 더 큰 서열의 서브세트, 예를 들면, 총 길이 cDNA의 단편 또는 서열 목록에서 제시된 유전자 서열, 예를 들면, 도 11 및 12의 폴리뉴클레오티드 서열일 수 있거나, 또는 완전한 DNA 또는 유전자 서열을 포함할 수 있다. 일반적으로, 기준 서열은 길이가 20 뉴클레오티드 이상, 종종 길이가 25 뉴클레오티드 이상, 종종 길이가 50 뉴클레오티드 이상이다. 2개의 폴리뉴클레오티드는 각각 (1) 2개의 폴리뉴클레오티드 사이에 유사한 서열 (즉, 완전한 폴리뉴클레오티드 서열의 부분을 포함할 수 있으며, (2) 2개의 폴리뉴클레오티드 사이에 불일치하는 서열을 추가로 포함할 수 있으므로, 2개(또는 그 이상)의 폴리뉴클레오티드 사이의 서열 비교는 전형적으로 서열 유사성의 국부 영역을 확인 및 비교하기 위해 "비교 윈도우"에 대해 2개의 폴리뉴클레오티드의 서열을 비교함으로써 수행된다. 본원에 이용된 "비교 윈도우"는 20개 이상의 인접한 뉴클레오티드 위치의 개념적인 단편을 말하며, 여기에서 폴리뉴클레오티드 서열은 20개 이상의 인접한 뉴클레오티드의 기준 서열과 비교될 수 있으며, 비교 윈도우에서 폴리뉴클레오티드 서열의 부분은 2 개 서열의 최적 정렬을 위해 기준 서열(첨가 또는 결실을 포함하지 않음)과 비교하여 20% 이상의 첨가 또는 결실(즉, 갭)을 포함할 수 있다. 비교 윈도우를 정렬하기 위해 서열의 최적 정렬은 [Smith & Waterman, Adv. Appl. Math. 2: 482 (1981)]의 국부적인 상동성 알고리즘에 의해, [Needleman & Wunsch, J. Mol. Biol. 48: 443 (1970)]의 상동성 정렬 알고리즘에 의해, [Pearson & Lipman, Proc. Natl. Acad. Sci.(USA) 85: 2444 (1988)]의 유사성 방법에 대한 탐색에 의해 (이의 각각은 전체적으로 참고로 포함된다), 상기 알고리즘(GAP, BESTFIT, FASTA, 및 TFASTA, Wisconsin Genetics software Package Release 7.0, Genetics Computer Group, 575 Science Dr., Madison, Wis.)의 컴퓨터화된 수행에 의해, 또는 검사에 의해 수행될 수 있으며, 다양한 방법에 의해 생성된 최적의 정렬(즉, 비교 윈도에 대해 서열 유사성의 가장 높은 백분율을 초래함)이 선택된다. 용어 "서열 동일성"은 2개의 폴리뉴클레오티드 서열이 비교 윈도에 대해 동일한 (즉, 뉴클레오티드에 의한 뉴클레오티드 기재로) 것을 의미한다. 용어 "서열 동일성(%)"은 비교 윈도우에 대해 2개의 최적으로 정렬된 서열을 비교하고, 동일한 핵산 염기(예를 들면, A, T, C, G, U, 또는 I)가 매치된 위치의 수를 수득하기 위해 양자의 서열에서 발생하는 위치의 수를 결정하고, 매치된 위치의 수를 비교 윈도우에서 위치의 총 수(즉, 윈도우 크기)로 나누고, 결과에 100을 곱하여 서열 동일성(%)을 수득함으로써 계산된다.

본원에 이용된 용어 "실질적인 동일성"은 폴리뉴클레오티드 서열의 특성을 나타내는데, 여기에서 폴리뉴클레오티드는 20개 이상의 뉴클레오티드 위치의 비교 윈도우에 대해, 자주 25-50개 이상의 뉴클레오티드의 윈도우에 대해 기준 서열과 비교하여 85% 이상의 서열 동일성, 바람직하게는 90 내지 95% 이상의 서열 동일성, 더욱 통상 99% 이상의 서열 동일성을 갖는 서열을 포함하는데, 여기에서 서열 동일성(%)은 기준 서열과 비교 윈도우에 대해 기준 서열의 총 20% 이하의 결실 또는 첨가를 포함할 수 있는 폴리뉴클레오티드 서열을 비교함으로써 계산된다. 기준 서열은 더 큰 서열의 서브세트일 수 있다.

폴리펩티드에 적용된, 용어 "서열 동일성"은 펩티드가 해당하는 위치에서 동일한 아미노산을 공유하는 것을 의미한다. 용어 "서열 유사성"은 펩티드가 해당하는 위치에서 동일하거나 또는 유사한 아미노산(즉, 보존 치환)을 갖는 것을 의미한다. 용어 "실질적인 동일성"은 디폴트 갭 웨이트(weight)를 이용한 프로그램 GAP 또는 BESTFIT에 의해 최적으로 정렬될 때 2개의 펩티드 서열이 80% 이상의 서열 동일성, 바람직하게는 90% 이상의 서열 동일성, 더욱 바람직하게는 95% 이상의 서열 동일성 또는 그 이상 (예를 들면, 99% 서열 동일성)을 공유하는 것을 의미한다. 바람직하게는, 동일하지 않은 잔기 위치는 보존 아미노산 치환에 의해 상이하다. 용어 "실질적인 유사성"은 2개의 펩티드 서열이 서열 유사성의 해당하는 백분율을 공유하는 것을 의미한다.

본 발명에 있어서, 용어 "실질적으로 유사한"은 폴리펩티드 내의 하나 이상의 아미노산이 기능적으로 동등한 아미노산으로 치환되는 서열의 변화를 갖고, 따라서 폴리펩티드의 결합 특성에 대해 영향을 전혀 미치지 않거나 상대적으로 매우 미소한 영향을 미치는 임의의 폴리펩티드를 의미하는 것으로 의도된다. 예를 들면, 서열 내의 하나 이상의 아미노산 잔기는 유사한 극성 또는 유사한 크기의 다른 아미노산으로 치환될 수 있다.

용어 "실질적으로 순수한"은 대상 종이 주된 종이고(즉, 조성물에 있어서, 상기 대상 종은 몰 기준으로 임의의 다른 개별 종에 비해 더 많이 존재한다), 바람직하게는, 실질적으로 정제된 분획은 상기 대상 종이 존재하는 모든 매크로분자 종들 중 적어도 약 50%(몰 기준)를 포함하는 조성물이다. 일반적으로, 실질적으로 순수한 조성물은 조성물에 존재하는 모든 매크로분자 종들 중 약 80 내지 90% 이상을 포함할 것이다. 가장 바람직하게는, 상기 대상 종은 상기 조성물이 단일 매크로분자 종을 필수성분으로 하여 구성되는 필수적 균질성(essential homogeneity)으로 정제된다(조성물 내에서 오염 종은 통상적인 검출 방법에 의해 검출될 수 없다).

아미노산 치환을 보존성 또는 비보존성으로 분류하기 위하여, 아미노산들을 하기와 같이 그룹화하였다: 그룹 I (소수성 측쇄): 노르루신(norleucine), met, ala, val, leu, ile; 그룹 II (중성 친수성 측쇄): cys, ser, thr; 그룹 III (산성 측쇄): asp, glu; 그룹 IV (염기성 측쇄): asn, gln, his, lys, arg; 그룹 V (사슬 방향에 영향을 주는 잔기): gly, pro; 및 그룹 VI (방향성 측쇄): trp, tyr, phe. 보존성 치환은 동일한 클래스 내의 아미노산 간의 치환을 수반한다. 비보존성 치환은 상기 클래스들 중 한 부류의 아미노산을 다른 클래스의 아미노산으로 치환한다.

면역글로불린의 성숙한 중쇄 및 경쇄의 가변 영역으로부터의 아미노산은 각각 Hx 및 Lxx로 표시되고, 상기 "x"는 참고문헌 [Kabat et al., SEQUENCES OF PROTEINS OF IMMUNOLOGICAL INTEREST (National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1987) and (1991))] (상기 문헌의 내용은 본 명세서의 일부로서 편입되고, 이하, 총괄하여 "Kabat"라고 함)의 방법에 따른 아미노산 위치를 표시하는 번호이다. 케이배트(Kabat)는 각 서브클래스에 대한 항체의 아미노산 서열을 다수 열거하고, 상기 서브클래스 내의 각 잔기 위치에 대해 가장 통상적으로 발생하는 아미노산을 열거한다. Kabat는 열거된 서열 내의 각 아미노산에 대해 잔기 번호를 부여하는 방법을 사용한다. Kabat의 방법은 해당 항체를 Kabat 중의 공통 서열(consensus sequences)과 정렬함으로써, 일람표 내에 포함되지 않은 다른 항체들에게도 연장될 수 있다. Kabat의 넘버링 체계를 이용하면 상이한 항체 내의 등가 위치의 아미노산을 용이하게 확인할 수 있다. 예를 들면, 인간 항체의 L50 위치의 아미노산은 마우스 항체의 아미노산 위치 L50에 대해 등가인 위치를 차지한다.

용어 "시약" 또는 "약제"는 리간드 수용체에 결합하는 생물학적으로 활성인 분자를 나타내는데 사용된다. 예를 들면, VLA-4 수용체 또는 VCAM-1과 면역 반응하는 항체 또는 그의 단편은 수초재형성을 촉진하고/하거나 대상에서 통계적으로 유의한 양으로 마비를 감소시키는데 사용될 수 있다. 세포 표면 수용체에 결합하여 작용할 수 있는 펩티드, 또는 펩티드 모방 물질(peptidomimetics) 또는 관련된 화합물도 또한 고려되고, 이들은 당업계에 알려져 있는 방법에 의해 합성 제조될 수 있다. 본 명세서에서 설명되거나 당업자들에게 자명한 VLA-4 수용체와 반응하는 기타 시약들도 고려된다.

본 발명에 있어서, "수초재형성제"는 수초재형성을 촉진하고/하거나 대상에서 통계적으로 유의한 양으로 마비를 감소시키는 임의의 악제를 의미하는 것으로 사용된다. 바람직하게는, 상기 약제는 면역글로불린 (예를 들면, 항체, 항체 단편, 및 재조합으로 제조되는 항체 또는 단편), 폴리펩티드 (예를 들면, 인테그린에 대한 리간드 단백질의 수용성 형태) 및 소분자를 포함하고, 이는 유효량으로 투여되는 경우 환자에서 탈수초형성을 억제하고/하거나 수초재형성을 촉진한다. 또한, 상기 약제는 환자에게 유효량으로 투여되는 경우 마비를 감소시키게 할 수 있다. 상기 약제들은 항-알파4 인테그린 약제 (바람직하게는, 항-알파4 베타1 길항제) 항-VCAM-1 약제로부터 선택될 수 있다. 하지만, 본 발명과 관련하여, 상기 항-알파4 인테그린 및 항-VCAM-1 약제는 유효량으로 투여되는 경우 탈수초형성을 억제하고/하거나 수초재형성을 촉진하고/하거나 마비를 감소시키는 것들만을 포함한다.

본 발명에 있어서, 용어 "항-알파-4 인테그린 약제"는 알파-4 서브유닛을 포함하는 인테그린에 특이적으로 결합하고 상기 인테그린의 활성을 억제하는 임의의 약제를 의미한다. 용어 "인테그린 길항제"는 알파-4-서브유닛-포함 인테그린이 인테그린 리간드 및/또는 수용체와 결합하는 것을 억제하는 임의의 약제이다. 바람직하게는, 상기 인테그린 길항제는 알파-4베타-1 2량체가 그와 동종 기원의 리간드에 결합하는 것을 방지한다. 상기 길항제는 항-인테그린 항체들 또는 항체 상동성-포함 단백질, 및 인테그린에 대한 리간드 단백질의 수용성 형태와 같은 기타 분자를 포함할 수 있다. 상기 알파-4 서브유닛-포함 인테그린에 대한 리간드 단백질의 수용성 형태는 수용성의 VCAM-1, VCAM-1 융합 단백질, 또는 이중 기능성 VCAM-1/Ig 융합 단백질을 포함한다. 예를 들면, 인테그린 리간드 또는 그의 단편의 수용성 형태는 투여되어 인테그린에 결합할 수 있고, 바람직하게는 세포 상의 인테그린 결합 부위에 대해 경쟁함으로써 항-인테그린(예컨대, VLA-4)과 같은 길항제의 투여와 유사한 효과를 얻을 수 있다. 특히, 리간드에 결합하지만 인테그린-의존성 신호전달을 유발하지 않는 수용성 인테그린 돌연변이체는 본 발명이 범위 내에 포함된다.

"나탈리주마브(natalizumab)" 또는 "앤티그렌(Antegren)"은 본 발명과 공동 출원인의 미국 특허 제 5,840,299호 및 제 6,033,665호(상기 특허의 내용들은 본 명세서의 일부로서 편입됨)에 개시되어 있는 인간화된 VLA-4에 대한 항체를 의미한다. 또한, 본 발명에 있어서 VLA-4 특이적 항체도 포함된다. 상기 수초재형성 항체 및 면역글로불린은 이하 본 명세서에 더 설명되는 미국 특허 제 6,602,503호 및 제 6,551,593호, 공개된 미국 출원 제 20020197233호 (Relton et al.)에 개시된 면역글로불린들을 포함하지만, 그에 한정되는 것은 아니다.

본 명세서의 장기적 복용 계획의 내용에 있어서, 용어 "효능"은 특정 치료 계획의 효과를 의미한다. 효능은 본 발명의 약제에 반응하여 질환의 추이 변화에 기초하여 측정될 수 있다. 예를 들어, MS의 치료에 있어서, 효능은 재발-완화 MS에서의 재발의 빈도에 의해, 및 MRI와 같은 방법을 이용하여 검출되는 중앙 신경계에서 장애의 존재 또는 부재에 의해 측정될 수 있다.

본 명세서의 장기적성 치료 계획의 내용에 있어서, 용어 "성공"은 특정 치료 계획의 효과를 의미한다. 이는 효능의 균형, 독성(예를 들어, 제제 또는 복용 단위의 부작용 및 환자 내성) 및 환자의 복용 편의성 등을 포함한다. "성공적으로" 생각되는 장기적 투여 계획을 위하여 환자 관리의 상이한 측면들 및 가장 바람직한 환자 성과를 생성하는 효능 간에 균형을 맞추어야 한다.

본 발명에 있어서, 용어 "특이적으로 결합"("specifically binds" or "binds specifically")이란 특이적 결합 쌍 중의 한 구성요소가 그의 특이적 결합 대상 이외의 분자들에 임의의 특이적인 결합을 나타내지 않을 상황을 말한다(예를 들어, 그의 결합 대상에 대한 친화도는 약 1000배 이상). 본 발명에 있어서, 소 화합물(small compounds), 예를 들어 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르는 알파-4 인테그린 또는 알파-4 인테그린을 포함하는 수용체 이외의 임의의 폴리펩티드에 특이적인 결합을 나타내지 않을 것이다. 예를 들어, 0.3 nM 이상의 결합 친화도로 알파-4 인테그린에 결합하는 본 발명의 방법에서 사용되는 소 화합물은 알파-4 인테그린에 특이적으로 결합한다고 할 수 있다.

본 발명에 있어서, "면역 반응을 유발" 및 "숙주 면역 반응을 유발"은 대상에게 본 발명의 약제를 도입시킨 후 대상에서 알파-4 인테그린을 포함하는 수용체에 대해 면역 반응이 생성됨을 의미한다. 약 1:100의 혈청 희석을 이용하여 혈청 면역반응성을 측정하는 경우, 대상에서 면역 반응은 알파-4 인테그린 수용체와의 혈청 반응성이 미처리 대상에 비해 적어도 2배, 보다 바람직하게는, 미처리 대상의 반응성에 비해 3배, 보다 더 바람직하게는, 미처리 대상의 반응성에 비해 4배인 것을 특징으로 한다.

용어 "약학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제"는 단지 담체로서 작용하는 것으로 의도되는, 즉, 그 자체가 생물학적 활성을 갖는 것으로 의도되지 않는 제제의 일부를 형성하는데 사용되는 임의의 화합물을 의미한다. 일반적으로, 약학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제는 안전하고, 비독성이고, 생물학적으로 또는 다르게 바람직하다. 본 명세서 및 특허청구범위에서 사용되는 약학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제는 하나 이상의 상기 담체를 포함한다.

본 발명에 있어서, 용어 "치료"("treating" 및 "treatment" 등)는 일반적으로 기대되는 약리학적 및 생리학적 효과를 얻는 것을 의미한다. 보다 상세하게, 탈수초형성 질환 또는 증상을 앓는 대상의 치료에 사용되는 본 명세서에 기재된 시약을 사용하여 다음 중 하나 이상 효과를 얻는 것을 의미한다: (1) 탈수초형성의 방지; (2) 탈수초형성의 억제; (3) 수초재형성의 촉진; (4) 마비의 지연 또는 정지; 및 (5) 마비의 경감/반전. 따라서, 효과는 질환, 그의 증상 또는 상태를 예방 또는 부분적으로 예방하는 의미에서 예방적일 수 있고/있거나, 치료될 증상 또는 질환에 따라 질환에 기인한 질환, 상태, 증상 또는 부작용의 부분적 또는 완전한 치료의 의미에서 치료적일 수 있다. 본 명세에 있어서, 용어 "치료"는 포유류, 특히 인간에 있어서 질환의 모든 치료를 포괄하고, 다음을 포함한다: (a) 어떤 질환에 걸리기 쉬울 수 있지만 아직 그 질병으로 진단되지 않은 대상에서 상기 질환이 발생하는 것을 방지; (b) 질환의 억제, 즉 그의 발병의 정지; 또는 (c) 질환의 경감, 즉, 질환 및/또는 그의 증상 또는 상태의 역행 야기. 본 발명은 병리적 염증에 관련된 질환을 앓는 환자를 치료하는 것에 관한 것이다. 본 발명은 장시간에 걸쳐 병리적 염증 및 탈수초형성에 기인한 부작용 및/또는 장시간에 걸친 생물학적 시스템 내에 존재하는 부적절한 염증에 대한 생리학적 반응에 의해 야기되는 것을 예방, 억제, 또는 경감하는 것에 관련된다.

"치료학적 유효량"은 포유류에게 투여되는 경우 포유류 세포의 수초재형성의 촉진 및/또는 동물에서 통계적으로 유의한 양으로 마비의 경감에 충분한 본 명세서에 개시되는 약제, 시약 또는 시약들의 혼합물의 양을 의미한다.

용어 "수초재형성 유효량"은 대상에서 탈수초형성 억제 및/또는 수초재형성의 촉진 및/또는 마비의 감소에 유효한 약제, 시약, 또는 조성물의 양을 의미한다. "수초재형성 유효량"은 화합물 또는 조성물, 치료될 특정 질환 및 그의 중증도, 치료될 포유류의 연령, 체중 등에 따라 변할 것이다.

"장기적 투여"는 다음 중 하나 이상을 야기하는 양 및 주기로 본 발명의 약제, 시약 도는 혼합물을 투여하는 것을 의미한다: (1) 탈수초형성 질환 또는 증상을 갖는 대상에서 마비의 감소, (2) 탈수초형성 질환 또는 증상을 갖는 대상에서 마비의 진행 정지; (3) 탈수초형성 질환 또는 증상을 갖는 대상에서 수초재형성의 촉진; 및 (4) 탈수초형성 질환 또는 증상을 갖는 대상에서 탈수초형성의 방지. 투여는 2주마다, 1주마다, 1달마다, 또는 2달마다 수행될 수 있지만, 매일 투여할 수도 있다. 보다 바람직하게는, 치료는 매주 또는 매달 수행되고 치료될 질환 또는 증상에 따라 6개월 내지 몇 년 또는 환자의 남은 생애 동안 투여될 수 있다.

화학식 I, IA, IB, IC, II, IIA, 및 IIB의 화합물에 대한 추가적인 정의는 본 명세서의 다른 부분에서와 같다.

2. 본 발명의 일반적인 측면

본 발명은 선택적인 결합 분자 억제제(SAMIs)로 알려져 있는 신규 화합물들의 신규 클래스를 장기적으로 투여하면 수초재형성을 촉진하는 방법으로 염증 반응을 적절하게 조절할 수 있다는 놀라운 결과에 기초한다. 기존의 억제제들은 상기 염증 반응에 대해 상기와 같은 조절을 제공하지 못했고, 질환은 계속해서 진행되었다. 본 발명에 있어서 본 발명자들은 바람직하게는, 화학식 I 및 II의 화합물, 바람직하게는 화학식 IB, IC, 및 IIB로 예시되는 소 화합물의 클래스가 상기의 병리학적 염증의 치료에 유용하다는 것을 확인하였다. 상기 소 화합물들은 장기 복용 계획 또는 단기 복용 계획을 이용하여 투여될 수 있다. 하지만, 병리학적 염증의 억제를 유지할 수 있다는 점에서 장기적 복용 계획이 바람직하다. 따라서, 본 발명의 보다 중요한 장점의 일부를 실현하기 위하여, 수초재형성제의 수준은 몇 달 또는 심지어 몇 년에 걸쳐 유지될 필요가 있다.

일반적인 의미에서, 투여 형태는 활성제 형태 및 활성제의 투여를 위해 개발된 제제에 따라 다르기 때문에, 본 발명의 방법은 임의의 특정 투여 형태에 관한 것이 아니다. 투여 형태는 경구, 비경구(예를 들어, 피하, 경막하, 정맥내, 근육내, 수막강내, 복막내, 대뇌내, 동맥내 또는 병변내의 투여 경로), 국소, 국부(예를 들어, 외과적 적용 또는 외과적 좌약), 직장, 및 폐(예를 들어, 에어로졸, 흡입, 또는 파우더)를 포함한다. 바람직하게는, 투여 경로는 비경구 경로이다. 투여 경로는 당업자에게 알려져 있는 바와 같이, 투여되는 조성물(예를 들어, 정맥내 투여되는 면역 글로불린 대 경구 투여되는 소 화합물), 조직 표적화(예를 들어, 척수 손상 부위를 표적으로 하는 수막강내 투여) 등을 기초로 한다.

또한, 수초재형성제는 탈수초형성 상태 또는 질환에 관련된 증상을 치료, 경감 또는 완화시키는데 사용되는 다른 화합물 또는 조성물과 병용될 수 있다. 또한, 본 명세서에 개시되는 화합물들은 단독으로, 또는 항체 및 그의 면역학적으로 활성인 단편을 포함하는 다른 수초재형성제와 같은 다른 약제와 병용 투여될 수 있다. 병용 투여되는 경우, 소 화합물은 상기 다른 화합물 또는 조성물과 동일한 제제로 투여되거나, 개별적인 제제로 투여될 수 있다. 병용 투여되는 경우, 일반적으로 상기 수초재형성제 항체는 소 화합물 수초재형성제, 다른 화합물 및 조성물과 별개의 제제로 투여된다. 병용 투여되는 경우, 수초재형성제는 증상의 치료, 경감 또는 완화에 사용되는 다른 화합물 및 조성물 이전에, 이후에 또는 그와 동시에 투여될 수 있다. 본 발명의 일반적인 개념은 몇 달 또는 몇 년의 기간에 걸쳐 환자의 순환계에 상대적으로 일정한 양의 활성제를 도입하는 것에 관한 것이다. 상기 수초재형성제의 장기적 투여는 시간의 흐름에 따라 병리학적 염증이 일정한 수준에서 유지되도록 적절한 조절을 제공하는 것이다. 일정 시간 동안 활성제의 치료학적 수준을 유지함으로써, 병리학적 염증은 환자에서 장기적으로 억제될 수 있다.

매우 특정적 의미에서, 본 발명은 인간 환자에 있어서 알파-4 인테그린을 포함하는 2량체의 수준을 약 65% 내지 100%, 보다 바람직하게는 75% 내지 100%, 보다 더 바람직하게는 80-100%의 범위로 얻고 유지하는 것을 포함한다. 상기 수용체 포화 수준은 계속적인 병리학적 염증의 억제를 위하여 상기 수준에서 장기적으로(예를 들어, 6개월에 걸쳐) 유지된다.

일반적으로, 상기 수초재형성제는 특이적으로 알파 4-인테그린에 결합하는 또는 특이적으로 알파-4 인테그린을 결합시키는 약제로부터 선택될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 방법에 사용되는 소 화합물은 0.3 내지 3 nM의 알파-4-인테그린에 대한 결합 친화도를 갖는 화합물들로부터 선택될 수 있다. 또한, 약 0.2 내지 약 0.4 nM의 알파-4-인테그린에 대한 결합 친화도를 갖는 나탈리주마브(natalizumab)과 같은 항체도 선택될 수 있다.

본 발명의 다른 측면에 있어서, 본 명세서에서 설명되는 화합물 및 조성물은 예컨대, 다발 경화증의 경우에 있어서 혈류로부터 중앙 신경계로, 또는 수초의 면역-유도 파괴를 야기하는 부위로의 면역 세포 이동을 억제하는 데 사용될 수 있다. 바람직하게는, 상기 약제 또는 시약은 탈수초형성을 억제하는 방식으로 면역 세포 이동을 억제하고, 추가적으로 수초재형성을 촉진할 수 있다. 또한, 상기 약제 또는 시약은 주로 CNS에서 수초의 발생에 영향을 미치는 면역 세포를 침투시키는 선천성 대사 질환에 대해 중앙 신경계의 탈수초형성을 억제하고 수초재형성을 촉진할 수 있다. 바람직하게는, 상기 시약은 또한 탈수초형성 질환 또는 상태에 의해 유도된 마비를 갖는 환자에게 투여되는 경우 마비를 경감시킨다.

3. 치료를 위한 징후

본 발명에 따른 조성물, 화합물 및 방법에 의한 치료를 위해 포함되는 염증 질환은 일반적으로 탈수초형성에 관여된 증상을 포함한다. 조직학적으로, 수초 이상은 탈수초형성 또는 이상수초형성(dysmyelinating)이다. 탈수초형성은 수초의 파괴를 의미한다. 이상수초형성은 올리고덴드로사이트의 이상기능에 기인한 수초의 불완전한 형성 또는 유지를 의미한다. 바람직하게는, 본 발명의 조성물 및 방법은 탈수초형성에 관련된 질환 및 증상을 치료하고 수초재형성을 촉진하는 것으로 생각된다. 치료를 위해 고려되는 추가적인 질환 또는 상태는 수막염, 뇌염, 및 척수 손상 및 일반적으로 염증 반응의 결과로서 탈수초형성을 유도하는 상태를 포함한다. 본 발명에 따른 화합물, 조성물 및 방법은 예컨대, 적절하지 않은 수초 형성, 예컨대, 이상수초형성을 야기하는 것과 같은 유전적 결합이 존재하는 질환 및 상태에 관한 것이 아니다.

본 발명의 조성물, 화합물 및 혼합물은 탈수초형성과 관련된 증상 및 질환을 치료하는 데 사용되는 것으로 고려된다. 탈수초형성에 관련된 질환 및 증상은 다발경화증, 선천성 대사 질환(예를 들면, 페닐케톤뇨증, 타이-삭스(Tay-Sachs) 질환, 니만-픽(Niemann-Pick) 질환, 고오셔(Gaucher's) 질환, 헐러 증후군(Hurler's syndrome), 크라베(Krabbe's) 질환 및 기타 백색질장애), 이상 수초형성을 갖는 신경병증 (예를 들면, 길랑 바레(Guillain Barre), 만성 면역 탈수초형성 다발신경병증(CIDP), 다초점성 CIDP, 항-MAG 증후군, GALOP 증후군, 항-설파티드 항체 증후군, 항-GM2 항체 증후군, POEMS 증후군, 신경주위염, IgM 항-GDlb 항체 증후군), 약물 관련 탈수초형성 (예를 들면, 클로로퀸(chloroquine), FK506, 퍼헥실린(perhexilinee), 프로카인아미드(procainamide) 및 지멜딘(zimeldine)의 투여에 의해 야기됨), 기타 유전성 탈수초형성 증상 (예를 들면, 탄수화물-결핍 당단백질, 코카인 증후군, 선천성 저수초증, 선천성 근육 퇴행 위축, 파버(Farber's) 질환, 마리네스코-스조그렌 증후군(Marinesco-Sjogren syndrome), 이염색백색질장애, 펠리재우스-메르츠바체르(Pelizaeus-Merzbacher) 질환, 레프섬(Refsum) 질환, 프리온 관련 증상, 및 살라(Salla) 질환) 및 기타 탈수초형성 증상(예를 들면, 수막염, 뇌염 또는 척수 손상) 또는 질환을 포함하지만, 그에 한정되는 것은 아니다.

상기 질환의 생체내(in vivo) 연구에 사용될 수 있는 다양한 질환 모델이 있다. 예를 들어, 동물 모델은 다음을 포함하지만 그에 한정되는 것은 아니다:

표 1

질환 모델	종
EAE	마우스, 래트, 기니아 피그
수초-올리고덴드로사이트 당단백질(MOG) 유도된 EAE	래트
탈수초형성의 TNF-α 트랜스제닉 모델	마우스

3.1. 다발경화증

가장 흔한 탈수초형성 질환은 다발경화증이지만, 다수의 다른 대사 및 염증 질환이 결함을 갖거나 비정상적인 수초형성을 야기한다. MS는 만성적인 신경 질환이고, 이는 성년 초기에 나타나고 대부분의 경우에 있어서 심각한 장애로 발전한다. 미국에서만 약 350,000건의 MS가 존재한다. 외상성 장애(trauma) 이외에, MS는 초기에서 중기 성년기에서 신경학적 장애의 가장 흔한 원인이다.

MS의 원인은 아직 밝혀지지 않았다. MS는 만성 염증, 탈수초형성 및 신경아교증(흉터 형성)을 특징으로 한다. 탈수초형성은 축삭 전도에 음성 또는 양성 효과를 야기할 수 있다. 양성 전도 이상은 느려진 축삭 전도, 임펄스의 낮지 않고 높은 주파수 트레인의 존재 또는 완전한 전도 폐색의 존재 하에서 발생하는 가변 전도 폐색을 포함한다. 양성 전도 이상은 원 장소 외 임펄스 발생, 동시 또는 이후에 발생하는 기계적 스트레스 및 탈수초화된 엑손 간의 비정상적인 "혼선(cross-talk)"을 포함한다.

수초 단백질, 수초 염기성 단백질(MPB) 또는 수초 단백지질 단백질(PLP)에 대해 반응성인 T 세포는 실험적인 알레르기성 뇌척수염에 있어서 CNS 염증을 매개하는 것으로 관찰되었다. 또한, 환자는 증가된 CNS 면역글로불린(Ig) 수준을 갖는 것으로 밝혀졌다. 또한, MS에서 관측된 일부의 조직 손상은 활성화된 T 세포, 마크로파지 또는 아스트로사이트의 사이토킨 생성물에 의해 매개 될 수도 있다.

현재, MS로 진단된 80%의 환자가 발병 후 20년 동안 생존한다. MS의 치료법은 (1) 급성 증오를 포함하는 질환 추이의 변경을 목표로 하고 질환의 장기 억제에 관한 치료; (2) MS 증상의 치료; (3) 의료 합병증의 예방 및 치료; 및 (4) 이차 개인적 및 사회적 문제의 관리를 포함한다.

MS의 발병은 극적이거나 매우 완만해서 환자가 의료적 주의를 기울이지 않게 할 수도 있다. 가장 흔한 증상은 하나 이상의 팔 또는 다리의 약화, 시각 신경염에 기인한 시각 흐림 현상, 감각 장애, 복시(diplopia) 및 조화운동불능을 포함한다. 질환의 추이는 (1) 재발성 MS, (2) 만성 진행성 MS, 및 (3) 비활성 MS의 3개의 일반적인 카테고리로 계층화될 수 있다. 재발성 MS는 신경학적 기능이상의 재발성 발병을 특징으로 한다. 일반적으로 MS의 발병은 수 일 내지 수 주에 걸쳐 발전하고 이어서 완전 또는 부분적으로 회복되거나 전혀 회복되지 않을 수 있다. 일반적으로 발현으로부터 회복은 증상의 최대로부터 수 주 내지 수 개월 내에 발생하지만, 드물게는 일부 회복은 2년 이상 동안 계속 될 수 있다.

만성 진행성 MS는 안정 또는 완화 없이 점진적으로 진행되면서 악화시킨다. 상기 형태는 20%의 환자에서 재발이 전혀 철회될 수 없다고 할지라도, 이전에 재발성 MS 병력을 갖는 환자에서 발생한다. 진행 추이 동안에 급성 재발이 발생할 수도 있다.

세 번째 형태는 비활성 MS이다. 비활성 MS는 가변 크기의 고정된 신경학적 결손을 특징으로 한다. 비활성 MS를 갖는 대부분의 환자는 재발 MS의 초기 병력을 갖는다.

또한, 질환 추이는 환자의 나이에 의존한다. 예를 들어, 바람직한 예후 요인은 초기 발병(유년기 제외), 재발 추이 및 발병 후 5년 후의 미미한 후유증 장애를 포함한다. 반대로, 바람직하지 못한 예후는 발병의 늦은 연령(즉, 40세 이상) 및 진행성 추이와 연관이 있다. 만성 진행성 MS는 늦은 연령에서 시작되어 재발 MS로 되는 경향이 있기 때문에, 상기 변수들은 상호의존성이다. 만성 진행성 MS로부터의 장애는 일반적으로 환자에서 진행성 하반신 마비 또는 사지 마비 (마비)에 기인한다. 본 발명의 일 측면에 있어서, 환자가 질환의 재발 단계보다는 경감 단계에 있는 경우 환자는 바람직하게는 치료될 것이다.

아드레노코르티코트로픽 호르몬 또는 경구 코르티코스테로이드(예를 들어, 경구 프레드니손 또는 정맥내 메틸프레드니솔론)의 단기적 사용은 MS의 급성 증오를 갖는 환자를 치료하기 위한 유일한 특이적인 치료 수단이다.

MS의 보다 신규한 치료법은 인터페론 베타-1b, 인터페론베타-1a, 및 코팍손(Copaxone)(이전에 코폴리머 1로 알려짐)를 포함한다. 상기 세 약물들은 질환의 재발 속도를 현저히 감소시키는 것으로 밝혀졌다. 상기 약물들은 근육내 또는 피하내로 자가 투여된다.

하지만, 현재의 치료 양식들 중 어떤 것도 자발적인 수초재형성의 촉진 또는 허용 또는 마비의 감소는 말할 것도 없고, 탈수초형성을 억제하지 못한다. 본 발명의 일 측면은 본 발명의 약제 단독으로 또는 다른 표준 치료 양식과 병용하여 MS를 치료하는 것에 관한 것이다.

3.2. 선천성 대사 질환

선천성 대사 질환은 페닐케톤뇨증 (PKU) 및 다른 아미노아시두리아스(aminoacidurias), 테이-삭스(Tay-Sachs) 질환, 니만-피크(Niemann-Pick) 질환, 고셔(Gaucher's) 질환, 헐러 증후군(Hurler's syndrome), 크라베(Krabbe's) 질환 및 하기에서 보다 상세히 설명되는 수초의 발생에 영향을 주는 기타 백색질장애를 포함한다.

PKU는 효소 페닐알라닌 하이드록실라제에서의 결손에 의해 야기되는 선천성 대사 오차이다. 상기 효소의 손실은 정신 지체, 기관 손상, 비정상적인 자세를 유발하고, 모계 PKU에 있어서, 임신을 심각하게 손상시킨다. PKU를 연구하기 위한 모델은 마우스에서 발견되었다. 바람직하게는 PKU를 갖는 것으로 확인된 유아는 페닐알라닌이 없거나 적은 식이법을 유지한다. 본 발명의 일 측면은 상기 식이법을 본 발명의 화합물 및 조성물과 병용하여 탈수초형성을 방지하고 PKU에 기인하여 손상되는 세포를 수초재형성 시키는 것에 관한 것이다.

전형적인 테이-삭스 질환은 약 6개월의 대상에서 나타나고 결국 5세까지 대상의 죽음을 야기할 것이다. 상기 질환은 뇌 및 신경 세포에서 특정 지방 물질을 분해하는데 필수적인 효소, 헥소아미니다제 A(hex A)의 결핍에 기인한다. 효소의 부재 하에서 상기 물질은 축적되고 신경 세포의 파괴를 야기한다. hex A 효소 결핍의 다른 형태는 생애의 후반부에서 발생하고 이는 hex A 결핍의 소년기, 만성 및 성인기 발병 형태라고 한다. 증상은 전형적인 테이-삭스 질환의 특징과 유사하다. 또한, 효소 결핍의 성인기 발병 형태가 있다. 현재 상기 질환/결핍에 대한 치료법이 없고, 단지 태아의 자궁내 시험의 질환 진단 수단만이 존재할 뿐이다. 따라서, 본 발명의 화합물 및 조성물은 상기 세포의 파괴를 경감 또는 방지하는데 사용될 수 있다.

니만-피크 질환은 급성 유아기 형태, 보다 덜 통상적이고, 만성이고, 비신경학적 형태의 타입 B, 및 생화학적으로 및 유전학적으로 구별되는 형태인 타입 C의 3개의 카테고리로 나뉜다. 정상적인 개체에 있어서, 세포 콜레스테롤은 가공(processing)을 위해 리소좀으로 운반되어 들어가고, 그 후에 방출된다. 니만-피크 질환을 갖는 대상으로부터 분리한 세포는 리소좀으로부터 콜레스테롤을 분비하는 능력이 없음이 밝혀졌다. 이는 리소좀 내에 콜레스테롤의 과다 축적을 야기하고, 가공 오차를 발생시킨다. NPC1은 다른 단백질들에서와 유사한 공지의 스테롤-감지 부위를 갖는 것으로 밝혀졌고, 이는 콜레스테롤 수송에 있어서 중요한 역할을 수행함을 제안한다. 니만-피크 질환의 타입 A 및 C에 대해 성공적인 치료법은 확인되지 않았다. 타입 C에 대하여, 환자들은 저-콜레스테롤 식이요법을 따르도록 권장된다. 따라서, 본 발명에 따른 화합물 및 조성물은 상기 세포의 파괴를 경감 또는 방지하는데 사용될 수 있다.

고셔 질환은 유전자 돌연변이에 의해 야기되는 선천성 질환이다. 일반적으로, 상기 유전자는 신체가 지방, 글루코세레브로시드를 파괴하는데 필요한 글루코세레브로시다제라고 하는 효소에 관여한다. 고셔 질환을 갖는 환자에 있어서, 신체는 상기 효소를 적절하게 생산할 수 없고 상기 지방은 분해될 수 없다. 테이-삭스 질환과 마찬가지로, 고셔 질환은 어떤 인종 중 개인이 걸릴 수 있다고 할지라도, 동유럽(Ashkenazi) 출신의 유대인의 후손들에서 현저히 자주 발생한다. 아시케나지의 유대 인종 중에서, 고셔 질환은 가장 일반적인 유전 질환이고, 450명 중 1명 꼴로 발병한다. 일반적인 인구에 있어서, 고셔 질환은 100,000명 중 약 1명 꼴로 발병한다.

1991년에, 효소 교체 치료법이 고셔 질환의 유효한 최초 치료로서 사용되었다. 상기 치료법은 변형된 형태의 글루코세레브로시다제 효소를 정맥내 투여하는 것으로 구성된다. 본 발명의 조성물 및 화합물은 단독으로 또는 보다 바람직하게는 글리코세레브로시다제 투여와 병용하여 발병된 대상에서 질환을 치료하는데 사용될 수 있다.

점액다당류증 타입 I로도 알려져 있는 헐러 증후군은 일종의 중복 질환(overlapping diseases)이다. 상기 유전 질환은 섬유아세포 내의 점액다당류의 세포성 축적을 공유한다. 상기 질환들은 유전학적으로 구별가능하다. 섬유아세포 및 골수 이식은 도움이 되지 못하는 것으로 보이고, 따라서 질환의 중증도 및 진행의 완화에 유용한 화합물 및 조성물이 요구된다. 본 발명에 따른 화합물 및 조성물은 대상에 투여되어 질환의 진행 및/또는 중증도를 완화시킬 수 있을 것이다.

크라베 질환(공세포 백색질장애라고도 알려져 있음)은 수초의 주요 지질 성분을 대사시키는 리소좀 효소인 갈락토실세라미다제(또는 갈라토세레브로시다제) 결핍으로부터 발생하는 상염색체 퇴행성 증상이다. 프랑스인에 있어서의 발병은 1:150,000 출산으로 추정된다. 상기 질환은 중앙 및 말초 신경계의 탈수초형성을 야기한다. 일반적으로 생애 첫 해 동안에 발병하고 증상은 급격히 진행되지만, 또한, 유아기, 사춘기 및 성년기 발병 형태가 보고되었으며, 이들은 보다 가변적인 진행 속도를 갖는다. 진단은 효소 분석법(갈락토실세라미다제 결핍)으로부터 확립되었다. 몇 개의 자연 동물 모델(마우스, 개, 원숭이)이 존재한다. 모든 백색질장애와 마찬가지로, 크라베 질환은 알려진 치료법 또는 효과적인 치료법을 갖지 않는다. 본 발명의 일 구체예는 본 발명에 따른 조성물 및 화합물을 사용하여 크라베 질환 및 다른 백색질장애를 치료 또는 경감한다.

백색질장애는 뇌, 척수 및 말초 신경을 감염 시키는 유전학적으로 결정된 진행성 질환의 그룹이다. 상기 질환은 부신백질이영양증 (ALD), 아드레노수초신경병증 (AMN), 아이카디-구티어스 증후군 (Aicardi-Goutiers syndrome), 알렉산더(Alexander's) 질환, CACH (즉, 중추신경계 저수초형성 또는 소멸성 백질 질환을 갖는 유아기 조화운동불능), CADASIL (즉, 피질밑경색 및 백색질뇌증을 갖는 대뇌 상염색체 우성 동맥병증), 카나반(Canavan) 질환 (해면질 퇴행), 뇌힘줄황색종증(CTX), 크라베 질환 (상기에서 설명됨), 이염색백색질장애(MLD), 신생아 부신백질이영양증, 난소백색질장애 증후군, 펠리재우스-메르츠바체르(Pelizaeus-Merzbacher) 질환 (X-연관 연축성 하반신마비), 레프섬(Refsum) 질환, 반 데르 납 증후군(van der Knaap syndrome) (피질밑 낭종을 갖는 액포성 백색질장애) 및 젤베거 증후군(Zellweger syndrome)을 포함한다. 상기 질환들 중 어떤 것도 치유는 물론이고 효과적인 치료법을 갖지 않는다. 결과적으로, 예컨대, 본 명세서의 조성물 및 화합물을 사용하는 것에 의하여, 상기 질환의 증상을 치료 또는 완화하는 수단이 필요하다.

3.3. 비정상적인 수초형성을 갖는 신경병증

환자에서 탈수초형성을 야기하는 다양한 만성 면역 다발신경병증이 존재한다. 상기 증상의 발병 연령은 증상에 따라 다양하다. 상기 질환들을 치료하기 위한 표준적 치료법이 존재하고 본 발명에 다른 조성물 및 화합물과 병용될 수 있다. 다른 방법으로, 본 발명에 따른 조성물 및 화합물을 단독으로 사용할 수 있다. 존재하는 표준 치료법은 다음을 포함한다:

표 2

신경병증	임상 특징	치료법
만성 면역 탈수초화 다발신경병증(CIDP)	1-80세에 발병.쇠약, 감각 손상, 및 신경 비대를 특징으로 함.	프레드니손, 시클로스포린 A 또는 메토트렉사에이트, HIG, 혈장 교환을 이용한 T-세포 면역억제
다중초점 CIDP	28 내지 58세에 발병.비대칭성 쇠약, 느린 진행 또는 완화-재발의 추이를 갖는 감각 손상을 특징으로 함.	프레드니손을 이용한 T-세포 면역억제인간 면역글로불린(HIG)
다중초점 운동 신경병증(MMN)	25 내지 70세에 발병하고, 여성에 비해 남성에서 2배의 발병율. 1-30년에 걸쳐 진행하는 쇠약, 근육 위축, 다발형성, 및 경련을 특징으로 함.	HIG혈장 교환, 시클로포스파미드, 리툭산(Rituxan)을 이용한 B 세포 면역 억제
수초-관련 당단백질(MAG)에 결합하는 IgM을 갖는 신경병증	일반적으로 50세 이상에서 발병하고 서서히 진행하는 감각 손상(100%), 쇠약, 게인 질환(gain disorder), 떨림을 특징으로 함.	B-세포 억제혈장 교환시클로포스파미드리툭산α-인터페론클라드리빈 또는 플루다라빈프레드니손
GALOP 증후군(보행 장애, 자가항체, 늦은 연령, 발병, 다발신경병증)	다발신경병증을 갖는 보행 장애	HIG혈장 교환시클로포스파미드
크로우-푸카세(Crow-Fukase) 증후군 및 타카쯔키(Takatsuki) 질환으로도 알려져 있는 POEMS 증후군(다발신경병증, 기관비대증, 내분비병증, M-단백질 및 피부 변화)	27 내지 80세에 발병하고 쇠약, 감각 손상, 감소 또는 제거된 힘줄 반사, 피부질환 및 기타 특징을 가짐.	골경화성 손상은 방사선조사로 치료됨. 화학요법(멜팔란 및 프레드니손)으로 광범위한 손상 치료.

3.4. 약물 및 방사선 유도된 탈수초형성

특정 약물 및 방사선은 대상에서 탈수초형성을 유도할 수 있다. 탈수초형성에 관여하는 약물은 클로로퀸, FK506, 퍼헥실린, 프로카인아미드, 및 지멜딘을 포함하지만 그에 한정되는 것은 아니다.

또한, 방사선도 탈수초형성을 유도할 수 있다. 방사선에 기인한 중앙 신경계(CNS) 독성은 (1) 혈관 구조에 대한 손상, (2) 올리고덴드로사이트-2 애스토로사이트 전구체 및 성숙한 올리고덴드로사이트의 제거, (3) 해마, 소뇌 및 피질 내의 신경 줄기 세포 군집의 제거, 및 사이토킨 발현의 일반화된 변경에 의해 야기되는 것으로 생각된다. 대부분의 방사선 손상은 특정 암의 치료 동안에 수행되는 방사선치료에 기인한다. 이에 대해 Belka et al., 2001 Br.J.Cancer 85:1233-9를 참조할 수 있다. 하지만, 방사선 물질에의 노출의 경우에 있어서 뿐만 아니라 우주 비행사에 대해 문제가 될 수도 있다(Hopewell, 1994 Adv. Space Res. 14:433-42).

약물을 투여 받았거나 사고로 또는 의도적으로 방사선에 노출된 환자는 본 발명에 따른 화합물 또는 조성물 중 하나를 투여 받음으로써 탈수초형성을 방지하거나 수초재형성을 촉진하는 장점을 가질 수 있다.

3.5. 탈수초형성을 수반하는 유전성 증상

탈수초형성을 야기하는 추가적인 유전성 증후군/질환은 코카인 증후군, 선천성 저수초형성증, 파버(Farber's) 질환, 이염색백색질장애, 펠리스재우스-메르바체르(Peliszaeus-Merzbacher) 질환, 레프섬(Refsum), 프리온 관련 증상 및 살라(Salla) 질환을 포함한다.

코카인 증후군(CS)은 사람이 햇빛에 민감하고, 짧은 키를 갖고, 조로의 생김새를 갖는 드문 유전성 질환이다. 코카인 증후군 전형적인 형태(타입 I)에 있어서, 증상은 진행성이고 일반적으로 1세 이후에 명백해진다. 코카인 증후군의 초기 발병 또는 선천성 형태(타입 II)는 출생시에 명백하다. 흥미롭게도, 다른 DNA 수리 질환과 상이하게, 코카인 증후군은 암과 연관되지 않는다. CS는 암의 증가 없이 백색질장애 및 탈수초형성 신경병증을 수반하고, 체세포 및 뇌의 심각한 성장 정지 및 진행성 카켁시아(cachexia), 망막, 달팽이(cochlear), 및 신경학적 퇴행 모두를 야기하는 다중-시스템 질환이다. UV(예를 들어, 햇빛)에 노출된 후에, 코카인 증후군을 갖는 대상은 전사-연결된 수리를 더 이상 수행할 수 없다. 코카인 증후군에서 결손인 2개의 유전자 CSA 및 CSB가 확인되었다. CSA 유전자는 5번 염색체에서 발견된다. 상기 두 유전자 모두 전사 기구의 화합물들과 및 DNA 수리 단백질과 상호작용하는 단백질을 코딩한다.

현재까지, 상기 질환을 앓는 환자에 대해 치유법 또는 효과적인 치료법이 확인되지 않았다. 따라서, 본 발명의 일 측면은 본 발명에 따른 화합물 및 조성물을 이용하여 상기 질환을 치료하는 것에 관한 것이다.

선천성 저수초형성증은 선천성 이상수초형성 신경병증, 선천성 저수초형성 다발신경병증, 선천성 저수초형성 (양파 구근) 다발신경병증, 선천성 저수초형성 신경병증, 저수초형성에 의해 야기되는 선천성 신경병증, 저수초형성 신경병증 및 CHN을 포함하는 다수의 명칭을 갖는다. 인간에 있어서 가장 흔한 유전성 질환들 중에서, 유전성 말초 신경병증은 복잡하고, 임상적으로 및 유전학적으로 말초 신경의 진행성 손상을 야기하는 질환들의 외래성 그룹이다. 선천성 저수초형성증은 일군의 질환들 중 하나이다. 상기 그룹은 압박 마비에 걸리기 쉬운 유전성 신경병증, 샤르코-마리-투스(Charcot-Marie-Tooth) 질환, 데제린-솟타 증후군(Dejerine-Sottas syndrome), 및 선천성 저수초형성 신경병증을 포함한다. 상기 질환들 중 어떠한 것에 대해서도 치유법 또는 효과적인 치료법은 알려져 있지 않다.

파버 질환은 파버 지질육아종증, 세레미다제(ceremidase) 결핍, 산 세라미다제 결핍, AC 결핍, N-라우릴스피노고신 데아실라제 결핍, 및 N-아실스핀고신 아미도하이드롤라제를 포함하는 다수의 명칭을 갖는다. 어떤 명칭이 의미하는 바와 같이, 상기 질환은 산 세라미다제(N-아실스핀고신 아미도하이드롤라제, ASAH라고도 알려져 있음)의 결핍에 기인하여 발생한다. 상기 효소의 결핍은 뉴런 및 아교 세포에서 비-설폰화 산 점액다당류의 축적을 야기한다. 상기 질환을 앓는 환자는 일반적으로 2세 이전에 사망한다.

이염색백색질장애 (MLD)는 효소 아릴설파타제 A의 결핍에 의해 야기되는 유전성 질환이다. 수초의 성장에 영향을 주는 백색질장애라고 불리는 유전성 질환 그룹 중 하나이다. MLD는 3가지 유형이 존재한다: 늦은 유아기, 소아기, 및 성인기. 가장 흔한 유형인 늦은 유아기 유형에 있어서, 증상의 발병은 6개월 내지 2세 사이에서 시작된다. 일반적으로 유아는 출생시에는 정상이지만, 이전에 얻은 능력을 점진적으로 상실한다. 증상은 근육긴장저하(낮은 근육 긴장도), 비정상적인 말하기, 정신적 능력의 상실, 시각상실, 경축(즉, 조절되지 않는 근육의 단단함), 경련, 손상된 삼킴, 마비 및 치매를 포함한다. 소아기 유형의 증상은 4 내지 14세 사이에서 시작되고, 손상된 학업 수행, 정신 황폐, 조화운동불능, 발작, 및 치매를 포함한다. 성인 유형에 있어서, 16세 이후에 시작되는 증상은 손상된 집중력, 우울증, 정신의학적 장애, 조화운동불능, 떨림, 및 치매를 포함할 수 있다. 발작은 성인기 유형에서 발생할 수 있지만, 다른 유형들에 있어서는 흔하지 않다. 모든 유형에 있어서 정신 황폐가 일반적으로 첫 번째 신호이다.

펠리스재우스-메르바체르 질환 (출생전후기 수단염색성 백색질장애라고도 알려져 있음)은 단백지질 단백질의 비정상을 야기하는 X-연관된 유전성 질환이다. 상기 비정상은 일반적으로 1세 이전에 유아의 사망을 야기한다. 상기 질환의 치유법 또는 치료법은 알려져 있지 않다.

레퍼섬 질환(피탄산 옥시다제 결핍, 유전성 다발신경염성 실조 또는 유전성 운동 및 감각 신경병증 IV, HMSN IV 라고도 알려져 있음)은 피타노일-CoA 하이드록실라제(PAHX 또는 PHYH)을 인코딩하는 유전자의 돌연변이에 의해 야기된다. 주요 임상적 특징은 색소성 망막, 만성 다발신경병증 및 소뇌 신호이다. 피탄산, 희귀한 분지쇄 지방산(3,7,11,15-테트라메틸-헥사데카노산)은 상기 질환을 앓는 환자의 조직 및 유체에 축적되고 PAHX의 결핍 때문에 대사될 수 없다. 1달에 1회 또는 2회 수행되는 혈장분리 반출술은 신체로부터 산을 효율적으로 제거하고 피탄산 유입을 제한하는 식이적 구속을 보다 자유롭게 허용한다.

프리온 관련 증상은 저스트만-스트라우슬러(Gerstmann-Straussler) 질환(GSD), 크로이츠펠트-야콥(Creutzfeldt-Jakob) 질환 (CJD), 가족 치명적 불면증을 포함하고, 프리온 단백질의 비정상적 아이소형(isoforms)은 상기 질환들에서 및 쿠루 및 면양진전병(양에서 발견되는 질환)에서 감염제로 작용할 수 있다. 프리온이라는 용어는 "단백질 감염제"(Prusiner, Scierace 216:136-44, 1982)로부터 유래한다. 프리온 관련 단백질 (PRP)의 단백질분해 분리는 불용성 피브릴로 중합되는 아밀로이드형성 펩티드를 야기한다.

살라 질환 및 다른 유형의 시알루리아스(sialurias)는 시알산(sialic acid) 저장에 관한 문제를 수반한다. 그것들은 심각한 유년기 유형(즉, ISSD)으로서 또는 핀랜드에서 흔한 서서히 진행하는 성년기 유형(즉, 살라 질환)으로서 제공될 수 있는 상염색체 열성 신경퇴행성 질환이다. 주요 증상은 근육긴장저하, 소뇌 조화운동불능 및 정신 지체이다. 또한, 상기 증상 및 질환에 대해 고식(palliative) 치료법 또는 개선 치료법이 사용된다.

3.6. 기타 탈수초형성 증상

탈수초형성을 야기하는 기타 증상들은 감염후 뇌염 (급성파종뇌염, ADEM이라고도 알려져 있음), 수막염 및 척수 손상을 포함한다. 본 발명의 조성물 및 화합물은 상기 기타 탈수초형성 증상의 치료에 사용될 수 있을 것이다.

4. 수초재형성제

본 발명에 따라, 수초재형성제는 알파-4-인테그린에 특이적으로 결합하는 물질로부터 선택될 수 있다. 알파-4-인테그린에 결합하여 저해하는 능력을 갖는 다양한 유형의 물질은 수초재형성제일 수 있으므로, 본 발명의 실시예 이용될 수 있다. 많은 상기 알파-4-인테그린 길항제가 동정 및 규명되었으며, 특정 물질이 하기에 기재된다. 상기 알파-4-인테그린 길항제는 수초재형성 활성에 대해 스크리닝될 수 있다. 구체적으로, 상기 물질은 작은 화합물 및 폴리펩티드 (예를 들면, 면역글로불린) 양자를 포함할 수 있다. 본원에 개시된 교시에 따라, 당업자는 탈수초형성을 저해하고/하거나 수초재형성을 촉진하고/하거나 마비를 감소시키기 위해 구체적으로 기재된 물질과 유사하거나 또는 생물학적으로 모방하는 방식으로, 알파-4 함유 인테그린을 저해할 수 있는 기타 물질을 동정할 수 있을 것이다. 본 발명은 상기 물질의 만성 투여를 포함할 의도이다. 또한, 물질의 조합을 포함하는 것이 고려되며, 작은 화합물이외의 물질의 논의가 또한 제공된다.

4.1. 화합물

다양한 화합물이 VLA-4 및 VCAM-1 결합을 방해하는 물질로서 확인되었다. 유효량으로 환자에게 투여될 때 상기 특정 화합물은 탈수초형성을 저해하고/하거나 수초재형성을 촉진하고/하거나 마비를 감소시킨다. 본 발명에 따른 화합물은 하기 섹션 4.1.1.에 기재된 화학식 I, IA, IB, IC, II, IIA, 및 IIB를 포함한다.

4.1.1. 화학식 I 및 화학식 II의 화합물

하나의 양태에서, 수초재형성제로서 이용돌 수 있는 화합물은 하기 화학식 I로 정의된 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염이다. 상기 화합물은 약 15μM 이하의 IC₅₀으로 표시되는 VLA-4에 대한 결합 친화성을 가지며, 수초재형성제로서 작용한다:

화학식 I

상기식에서,

R^l은 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 치환된 아릴, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 헤테로고리, 치환된 헤테로고리, 헤테로아릴 및 치환된 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택되며;

R²는 수소, 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 시클로알케닐, 치환된 시클로알케닐, 헤테로고리, 치환된 헤테로고리, 치환된 알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택되며, R¹ 및 R²는 R²에 결합된 질소 원자 및 R¹에 결합된 SO₂ 기와 함께 헤테로고리 또는 치환된 헤테로고리기를 형성할 수 있으며;

R³은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로고리, 치환된 헤테로고리로 구성된 군으로부터 선택되며, R² 가 헤테로고리기를 형성하지 않을 때, R^l, R² 및 R³ 는 R²에 결합된 질소 원자 및 R³에 결합된 탄소 원자와 함께 헤테로고리 또는 치환된 헤테로고리기를 형성할 수 있으며;

R⁵는 -(CH₂)_x-Ar-R^5'이며 [식 중, R^5'는 -O-Z-NR⁸R^8' 및 -O-Z-R^8" 로 구성된 군으로부터 선택되며 (여기에서, R⁸ 및 R^8' 은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 헤테로고리, 치환된 헤테로고리로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되며, R⁸ 및 R^8' 은 헤테로고리 또는 치환된 헤테로고리를 형성하기 위해 연결되며, R⁸ ^"은 헤테로고리 및 치환된 헤테로고리로 구성된 군으로부터 선택되며, Z는 -C(O)- 및 -S0₂- 로 구성된 군으로부터 선택된다);

Ar은 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴 또는 치환된 헤테로아릴이며; x는 1 내지 4의 정수이다;

Q는 -C(X)NR⁷- 이며(식 중, R⁷은 수소 및 알킬로 구성된 군으로부터 선택되며; X는 산소 및 황으로 구성된 군으로부터 선택된다.

또 다른 구현예에서, 상기 화합물은 생체내에서 상기 화학식 I의 화합물로 전환되는(예를 들면, 가수분해, 대사 등) 약물전구체로서 제공될 수 있다. 상기 구현예의 바람직한 예에서, 화학식 I의 화합물의 카르복실산기는 생체내에서 카르복실산기(이의 염을 포함)로 전환될 작용기로 변형된다. 특히 바람직한 구현예에서, 상기 약물전구체는 화학식 IA의 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염으로 표시된다:

화학식 IA

상기식에서,

R³는 수소, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로고리, 치환된 헤테로고리로 구성된 군으로부터 선택되며, R² 가 헤테로고리기를 형성하지 않을 때, R^l, R² 및 R³ 는 R²에 결합된 질소 원자 및 R³에 결합된 탄소 원자와 함께 헤테로고리 또는 치환된 헤테로고리기를 형성할 수 있으며;

R⁶은 2,4-디옥소-테트라히드로푸란-3-일 (3,4-엔올), 아미노, 알콕시, 치환된 알콕시, 시클로알콕시, 치환된 시클로알콕시, -O-(N-숙신이미딜), -NH-아다만틸, -O-콜레스트-5-엔-3-β-일, -NHOY(식 중, Y는 수소, 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 및 치환된 아릴이다), -NH(CH₂)_pCOOY(식 중, p는 1 내지l 8의 정수이며, Y는 상기 정의된 바와 같다), -OCH₂NR⁹R¹⁰ (식 중, R⁹은 -C(O)-아릴 및 -C(O)-치환된 아릴로 구성된 군으로부터 선택되며, R¹⁰은 수소 및 -CH₂COOR¹¹ (식 중, R¹¹은 알킬이다)로 구성된 군으로부터 선택되며), 및 -NHSO₂Z' (식 중, Z'은 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로고리 및 치환된 헤테로고리이다)로 구성된 군으로부터 선택되며;

Q는 -C(X)NR⁷- 이며(식 중, R⁷은 수소 및 알킬로 구성된 군으로부터 선택되며; X는 산소 및 황으로 구성된 군으로부터 선택되며;

단,

(A) R¹ 및 R²가 R¹에 펜던트한 S0₂ 기 및 R²에 펜던트한 질소와 함께 사카린-2-일기를 형성하고, R³가 -CH₃ 이고, R⁵가 p-[(CH₃)₂NC(O)0-]벤질이고, Q가 -C(O)NH- 일 때, R⁶는 -OC(CH₃)₃ 가 아니며;

(B) R¹이 p-메틸페닐이고, R² 및 R³가 R²에 펜던트한 질소 원자 및 R³에 펜던트한 탄소 원자와 함께 D-프롤린으로부터 유도된 피로디닐 고리를 형성하고; R⁵ 가 D-페닐알라닌으로부터 유도된 p-[(4-메틸피페라진-1-일)NC(O)O-]벤질이며, Q가 -C(O)NH- 일 때, R⁶은 -OC(CH₃)₃ 가 아니며;

(C) R¹이 피리미딘-2-일이고, R² 및 R³가 R²에 결합된 질소 원자 및 R³에 결합된 탄소 원자와 함께 피롤리디닐 고리를 형성하며, R⁵가 p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질이고, Q가 -C(O)NH- 일 때, R⁶ 는 -OC(CH₃)₃ 가 아니며; 및

(D) R¹이 p-메틸페닐이고, R² 및 R³가 R²에 펜던트한 질소 원자 및 R³에 펜던트한 탄소 원자와 함께 (2S)-피페라진-2-카르보닐 고리를 형성하며; R⁵가 p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질이고, Q가 -C(O)NH- 일 때, R⁶ 는 -OC(CH₃)₃ 가 아니다.

상기 화학식 I 및 IA의 화합물 및 상기 화합물을 제조하는 절차 및 반응 조건의 추가의 기재는 전체적으로 본원에 참고로 포함된 U.S.S.N.s 09/126,958 (1998.7.31 출원되고, 미국 특허 제6,489,300호로서 허여됨)에 기재된다.

바람직하게는, 상기 화학식 I 및 IA의 화합물에서, R¹은 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로고리, 치환된 헤테로고리, 헤테로아릴 및 치환된 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된다. 더욱 바람직하게는, R¹은 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴 및 치환된 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택된다.

바람직하게는, 상기 화학식 I 및 IA의 화합물에서, R¹은 하기로 구성된 군으로부터 선택된다: 페닐, 4-메틸페닐, 4-t-부틸페닐, 2,4,6-트리메틸페닐, 2-플루오로페닐, 3-플루오로페닐, 4-플루오로페닐, 2,4-디플루오로페닐, 3,4-디플루오로페닐, 3,5-디플루오로페닐, 2-클로로페닐, 3-클로로페닐, 4-클로로페닐, 3,4-디클로로페닐, 3,5-디클로로페닐, 3-클로로-4-플루오로페닐, 4-브로모페닐, 2-메톡시페닐, 3-메톡시페닐, 4-메톡시페닐, 3,4-디메톡시페닐, 4-t-부톡시페닐, 4-(3'-디메틸아미노-n-프로폭시)-페닐, 2-카르복시페닐, 2-(메톡시카르보닐)페닐, 4-(H₂NC(0)-)페닐, 4-(H₂NC(S)-)페닐, 4-시아노페닐, 4-트리플루오로메틸페닐, 4-트리플루오로메톡시페닐, 3,5-디-(트리플루오로메틸)페닐, 4-니트로페닐, 4-아미노페닐, 4-(CH₃C(O)NH-)페닐, 4-(PhNHC(O)NH-)페닐, 4-아미디노페닐, 4-메틸아미디노페닐, 4-(CH₃SC(=NH)-)페닐, 4-클로로-3-(H₂NS(0)₂-)페닐, 1-나프틸, 2-나프틸, 피리딘-2-일, 피리딘-3-일, 피리미딘-2-일, 퀴놀린-8-일, 2-(트리플루오로아세틸)-1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀린-7-일, 모르폴린-4-일, 2-티에닐, 5-클로로-2-티에닐, 2,5-디클로로-4-티에닐, 1-N-메틸이미다졸-4-일, 1-N-메틸피라졸-3-일, 1-N-메틸피라졸-4-일, 1-N-부틸피라졸-4-일, 1-N-메틸-3-메틸-5-클로로피라졸-4-일, 1-N-메틸-5-메틸-3-클로로피라졸-4-일, 2-티아졸릴 및 5-메틸-1,3,4-티아디아졸-2-일.

바람직하게는, 상기 화학식 I 및 IA의 화합물에서, R²은 메틸, 벤질,-(CH₂)₂-2-티에닐, 및 -(CH₂)₂-ψ로 구성된 군으로부터 선택된다.

하나의 바람직한 구현예에서, 상기 화학식 I 및 IA의 화합물에서, R² 및 R³은 R² 치환기에 결합된 질소 원자 및 R³ 치환기에 결합된 탄소와 함께 질소, 산소 및 황으로 구성된 군으로부터 선택된 고리에서 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 4 내지 6개의 고리 원자의 헤테로고리기 또는 치환된 헤테로고리기를 형성하는데, 상기 고리는 플루오로, 메틸, 히드록시, 옥소(=0), 아미노, 페닐, 티오페닐, 티오벤질, (티오모르폴린-4-일)C(O)O-, CH₃S(0)₂- 및 CH₃S(0)₂0- 로 구성된 군으로부터 선택된 1 내지 2개의 치환기로 임의 치환되거나, 또는 질소, 산소 및 황으로 구성된 군으로부터 선택된 고리에서 1 내지 2개의 헤테로원자를 갖는 10 내지 14개의 고리 원자의 융합된 고리 헤테로고리기를 제공하기 위해 페닐 또는 시클로알킬 고리와 같은 또 다른 고리에 융합될 수 있다. 상기 헤테로고리는 하기를 포함한다: 아제티디닐 (예를 들면, L-아제티디닐), 티아졸리디닐 (예를 들면, L-티아졸리디닐), 피페리디닐 (예를 들면, L-피페리디닐), 피페라지닐 (예를 들면, L-피페라지닐), 디히드로인돌릴 (예를 들면, L-2,3-디히드로인돌-2-일), 테트라히드로퀴놀리닐 (예를 들면, L-1,2,3,4-테트라히드로퀴놀린-2-일), 티오모르폴리닐 (예를 들면, L-티오모르폴린-3-일), 피롤리디닐 (예를 들면, L-피롤리디닐), 치환된 피롤리디닐, 예를 들면, 4-히드록시피롤리디닐 (예를 들면, 4-α-(또는 β-)히드록시-L-피롤리디닐), 4-옥소피롤리디닐 (예를 들면, 4-옥소-L-피롤리디닐), 4-플루오로피롤리디닐 (예를 들면, 4-α-(또는 β-)플루오로-L-피롤리디닐), 4,4-디플루오로피롤리디닐 (예를 들면, 4,4-디플루오로-L-피롤리디닐), 4-(티오모르폴린-4-일C(0)0-)피롤리디닐 (예를 들면, 4-α-(또는 β-)-(티오모르폴린-4-일C(0)O-)-L-피롤리디닐, 4-(CH₃S(O)₂O-)피롤리디닐 (예를 들면, 4-α-(또는 β-)(CH₃S(0)₂0-)-L-피롤리디닐, 3-페닐피롤리디닐 (예를 들면, 3-α-(또는 β-)페닐-L-피롤리디닐), 3-티오페닐피롤리디닐 (예를 들면, 3-α-(또는 β-)-티오페닐-L-피롤리디닐), 4-아미노피롤리디닐 (예를 들면, 4-α-(또는 β-)아미노-L-피롤리디닐), 3-메톡시피롤리디닐 (예를 들면, 3-α-(또는 β-)메톡시-L-피롤리디닐), 4,4-디메틸피롤리디닐, 치환된 피페라지닐, 예를 들면, 4-N-Cbz-피페라지닐 및 4-(CH₃S(0)₂-)피페라지닐, 치환된 티아졸리디닐, 예를 들면, 5,5-디메틸티아졸리딘-4-일, 1,l-디옥소-티아졸리디닐 (예를 들면, L-1,1-디옥소-티아졸리딘-2-일), 치환된 1,1-디옥소-티아졸리디닐, 예를 들면, L-1,1-디옥소-5,5-디메틸티아졸리딘-2-일, 1,1-디옥소티오모르폴리닐(예를 들면, L-1,1-디옥소-티오모르폴린-3-일) 등.

상기 화학식 I 및 IA의 화합물에서, Q는 바람직하게는 -C(O)NH- 또는 -C(S)NH- 이다.

상기 화학식 I 및 IA의 화합물에서, Ar은 바람직하게는 아릴 또는 치환된 아릴이며, 더 더욱 바람직하게는 페닐 또는 치환된 페닐이다.

바람직하게는, x는 1 이다.

상기 화학식 I 및 IA의 화합물에서, R⁵는 바람직하게는 하기 그룹을 이용한 치환에 의해 발생하는 모든 가능한 이성질체로부터 선택된다:

3-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질,

4-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질,

4-[(피페리딘-1'-일)C(O)0-]벤질,

4-[(피페리딘-4'-일)C(O)O-]벤질,

4-[(1'-메틸피페리딘-4'-일)C(O)O-]벤질,

4-[(4'-히드록시피페리딘-1'-일)C(O)O-]벤질,

4-[(4'-포르밀옥시피페리딘-1'-일)C(O)O-]벤질,

4-[(4'-에톡시카르보닐피페리딘-1'-일)C(O)0-]벤질,

4-[(4'-카르복시l피페리딘-1'-일)C(0)O-]벤질,

4-[(3'-히드록시메틸피페리딘-1'-일)C(O)O-]벤질,

4-[(4'-히드록시메틸피페리딘-1'-일)C(O)0-]벤질,

4-[(4'-페닐-1'-Boc-피페리딘-4'-일)-C(O)O-]벤질,

4-[(4'-피페리돈-1'-일 에틸렌 케탈)C(O)O-]벤질,

4-[(피페라진-4'-일)-C(O)O-]벤질,

4-[(1'-Boc-피페라진-4'-일)-C(O)O-]벤질,

4-[(4'-메틸피페라진-1'-일)C(O)O-]벤질,

4-[(4'-메틸호모피페라진-1'-일)C(O)O-]벤질,

4-[(4'-(2-히드록시에틸)피페라진-1'-일)C(O)O-]벤질,

4-[(4'-페닐피페라진-1'-일)C(O)O-]벤질,

4-[(4'-(피리딘-2-일)피페라진-1'-일)C(O)0-]벤질,

4-[(4'-(4-트리플루오로메틸피리딘-2-일)피페라진-1'-일)C(O)0-]벤질,

4-[(4'-(피리미딘-2-일)피페라진-1'-일)C(0)0-]벤질,

4-[(4'-아세틸피페라진-1'-일)C(O)0-]벤질,

4-[(4'-(페닐C(O)-)피페라진-1'-일)C(0)0-]벤질,

4-[(4'-(피리딘-4-일C(O)-)피페라진-1'-일)C(O)O-]벤질,

4-[(4'-(페닐NHC(O)-)피페라진-1'-일)C(O)O-]벤질,

4-[(4'-(페닐NHC(S)-)피페라진-1'-일)C(O)O-]벤질,

4-[(4'-메탄술포닐피페라진-1'-일-C(O)O-)벤질,

4-[(4'-트리플루오로메탄술포닐피페라진-1'-일-C(O)O-)벤질,

4-[(모르폴린-4'-일)C(O)O-]벤질,

3-니트로-4-[(모르폴린-4'-일)-C(O)O-]벤질,

4-[(티오모르폴린-4'-일)C(O)0-]벤질,

4-[(티오모르폴린-4'-일 설폰)-C(O)O-]벤질

(대안적인 명명법 4-[(1,1-디옥소티오모르폴린-4-일)-C(O)O-]벤질),

4-[(피롤리딘-1'-일)C(0)O-]벤질,

4-[(2'-메틸피롤리딘-1'-일)C(O)O-]벤질,

4-[(2'-(메톡시카르보닐)피롤리딘-1'-일)C(O)0-]벤질,

4-[(2'-(히드록시메틸)피롤리딘-1'-일)C(0)O-]벤질,

4-[(2'-(N,N-디메틸아미노)에틸)(CH₃)NC(0)0-]벤질,

4-[(2'-(N-메틸-N-톨루엔-4-술포닐아미노)에틸)(CH₃)N-C(O)O-]벤질,

4-[(2'-(모르폴린-4'-일)에틸)(CH₃)NC(O)O-]벤질,

4-[(2'-(히드록시)에틸)(CH₃)NC(O)0-]벤질,

4-[비스(2'-(히드록시)에틸)NC(O)O-]벤질,

4-[(2'-(포르밀옥시)에틸)(CH₃)NC(O)O-]벤질,

4-[(CH₃OC(O)CH₂)HNC(O)O-]벤질,

4-[2'-(페닐NHC(O)O-)에틸-]HNC(O)O-]벤질,

3-클로로-4-[(CH₃)₂NC(O) 0-]벤질,

3-클로로-4-[(4'-메틸피페라진-1'-일)C(O)O-]벤질,

3-클로로-4-[(4'-(피리딘-2-일)피페라진-1'-일)C(0)0-]벤질,

3-클로로-4-[(티오모르폴린-4'-일)C(0)0-]벤질, 및

3-플루오로-4-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질.

화학식IA의 화합물에서, R⁶은 바람직하게는 2,4-디옥소-테트라히드로푸란- 3-일(3,4-엔올), 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 이소프로폭시, n-부톡시, t-부톡시, 시클로펜톡시, 시클로프로필메톡시, 네오펜톡시, 2-α-이소프로필-4-β-메틸시클로헥속시, 2-β-이소프로필-4-β-메틸시클로헥속시, 2-메톡시페녹시, 2-(모르폴린-4-일)에톡시, -O(CH₂CH₂0)₂CH₃, 2-(페녹시)에톡시, -OCH₂C(CH₃)₂NHBoc, -NH₂, 벤질옥시, -NHCH₂COOH, -NHCH₂CH₂COOH, -NH-아다만틸, -NHS0₂-p-CH₃-ρ, -NHCH₂CH₂COOCH₂CH₃, -NHOY' (식 중, Y'는 수소, 메틸, 이소-프로필 또는 벤질이다), O-(N-숙신이미딜), -O-콜레스트-5-엔-3-β-일, -OCH₂-OC(O)C(CH₃)₃, -O(CH₂)_zNHC(O)W (식 중, z는 1 또는 2이며, W는 피리드-3-일, N-메틸피리딜, 및 N-메틸-1,4-디히드로-피리드-3-일로 구성된 군으로부터 선택된다), -NR"C(O)-R' (식 중, R'은 아릴, 헤테로아릴 또는 헤테로고리이며, R"은 수소 또는 -CH₂C(O)OCH₂CH₃ 이다)이다.

더 더욱 바람직하게는, 화학식 IA의 화합물에서 R⁶는 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 이소프로폭시, n-부톡시, t-부톡시, 시클로펜톡시, 시클로프로필메톡시, 네오펜톡시, 2-α-이소프로필-4-β-메틸시클로헥속시, 2-β-이소프로필-4-β-메틸시클로헥속시, 2-메톡시페녹시, 2-(모르폴린-4-일)에톡시, -O(CH₂CH₂0)₂CH₃, 2-(페녹시)에톡시, -OCH₂C(CH₃)₂NHBoc, 및 벤질옥시로 구성된 군으로부터 선택된다.

상기 화학식 I과 IA의 범위에 속하는 바람직한 화합물로는 다음을 들 수 있다.

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 n-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 시클로펜틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 n-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 시클로펜틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(이소니페코토일옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르,

N-(α-톨루엔술포닐)-L-프롤일-L-4-(N-메틸이소니페코토일옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르,

N-(α-톨루엔술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-3-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(1-tert-부틸카보닐옥시-4-페닐피페리딘-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-[(1,1-디옥소)티아모포린-3-카보닐]-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-[(1,1-디옥소)티아모포린-3-카보닐]-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)사코실-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)사코실-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)사코실-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸아미노술포닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸아미노술포닐옥시)페닐알라닌,

N-(1-메틸리미다졸-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-아미노벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)사코실-L-4-(모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(α-톨루엔술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(피페라진-2-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(α-톨루엔술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 N-아다만틸 아미드,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌글리신,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 메틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(피페라진-2-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(4-벤질옥시카보닐피페라진-2-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)사코실-L-4-(이소니페코토일옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-[(1,1-디옥소)티아모포린-3-카보닐]-L-4-(모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-[(1,1-디옥소)티아모포린-3-카보닐]-L-4-(모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)사코실-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소-5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(1-메틸이미다졸-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

2-(사카린-2-일)프로피오노일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소-5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(피리딘-3-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-D-프롤일-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-N-메틸알라닐-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-니트로벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-[(1,1-디옥소)티아모포린-3-카보닐]-L-4-(N,N-디메틸아미노술포닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)사코실-L-4-(차오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-N-메틸알라닐-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(1,1-디옥소티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(이소니페코토옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(피롤리딘-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 네오펜틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 네오펜틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-tert-부틸옥시카보닐피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르,

2-(사카린-2-일)프로피오노일-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

2-(사카린-2-일)프로피오노일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)사코실-L-4-(1,1-디옥소티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)사코실-L-4-(티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-N-메틸알라닐-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)사코실-L-4-(1,1-디옥소티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소티오모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소티오모포린-3-카보닐)-L-4-(모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-N-메틸알라닐-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(티오모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티오모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(피리딘-3-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(피리미딘-2-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-니트로벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(4-시아노벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소티오모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸아미노술포닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소티오모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(1-tert-부틸옥시카보닐피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-아세틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-메탄술포닐피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(모포린-4-일카보닐옥시)-3-니트로페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(1-tert-부틸옥시카보닐피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-N-메틸-2-(tert-부틸)글리시닐-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(1,1-디옥소티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(1,1-디옥소티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(1,1-디옥소티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-트리플로로메톡시벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

3-[N-(톨루엔-4-술포닐)-N-메틸아미노]-1-[1-tert-부틸옥시카보닐-2-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐에틸]아제티딘-2-온,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소-5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소-5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(피리미딘-2-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

3-[N-(톨루엔-4-술포닐)-N-메틸아미노]-1-[1-카복시-2-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐에틸]아제티딘-2-온,

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(이소니페코토일옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(1,1-디옥소티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(피롤리딘-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(2,5-디클로로티오펜-3-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-아세트아미도벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-tert-부틸벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(2-플로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(3-플로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(2,4-디플로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-아세트아미도벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(4-트리플로로메톡시벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(4-트리플로로메톡시벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-시아노벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(3,3-디메틸)프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(3,3-디메틸)프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 iso-프로필 에스테르,

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N-(1,4-디옥사-8-아자-스피로[4.5]데칸-8-일)카보닐옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N-(1,4-디옥사-8-아자-스피로[4.5]데칸-8-일)카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4'-아세틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4'-메탄술포닐피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4'-페닐피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

2-(사카린-2-일)프로피오닐-L-4-(4'-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4'-메탄술포닐피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌(N'-tert-부톡시카보닐-2-아미노-2-메틸프롤일)에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4'-아세틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4'-히드록시피페라딘-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N-(2'-(모포린-4'-일)에틸)카바밀)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N-(1,4-디옥사-8-아자-스피로[4.5]데칸-8-일)카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N-(2'-히드록시에틸)-N-메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-4-(4'-(2-히드록시에틸)피페라진-1-일카보닐옥시)-L-페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N-(2'-포르밀옥시에틸)-N-메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N-(2'-히드록시에틸)-N-메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N-(메톡시카보닐메틸)카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-(4-N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4'-메톡시피페리딘-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4'-메톡시피페리딘-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-4-옥소프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-trans-4-히드록시프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(3-플로로벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(모포리노-술포닐)-L-프롤일-L-(4-N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(2-플로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(2,4-디플로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(피페라딘-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸-티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(3-플로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(4-tert-부틸벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-(3,3-디메틸)프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(2,5-디클로로티오펜-3-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(4-메톡시벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(4-메톡시벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1-옥소-티오모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1-옥소-티오모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(3,4-디플로로벤젠술포닐)-L-프롤일-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(3,4-디플로로벤젠술포닐)-L-프롤일-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(3,4-디플로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(3,4-디플로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-(티아모포린-4-일카보닐)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-(티아모포린-4-일카보닐)페닐알라닌,

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르,

N-(피리딘-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(피리딘-2-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(피리딘-2-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(피리딘-2-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(피리딘-2-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(3-플로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(2-플로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(3,4-디플로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(3,5-디플로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(2,4-디플로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(4-클로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(3-클로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(2-클로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(3,4-디클로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(3,5-디클로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(3-클로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(3,4-디클로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-메톡시벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(3-메톡시벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(2-메톡시벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(3,4-디메톡시벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(2,4-디플로로벤젠술포닐)-L-(티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(3,4-디클로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(3-클로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(3-클로로-4-플로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(3,4-디플로로벤젠술포닐)-L-(티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-(티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(3,4-디플로로벤젠술포닐)-L-(티아모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(2,5-디클로로티오펜-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(8-퀴놀린술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(8-퀴놀린술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(8-퀴놀린술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(8-퀴놀린술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-페닐피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4'-(에톡시카보닐)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(피리딘-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(3-설폰아미도-4-벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1-옥소티오모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(2,4-디플로로벤젠술포닐)-L-(1-옥소티오모포린-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 2,2-디메틸프로필 에스테르,

N-(피리딘-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 2,2-디메틸프로필 에스테르,

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 시클로프로필메틸 에스테르,

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 메틸 에스테르,

N-(피리딘-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르,

N-(피리딘-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 시클로프로필메틸 에스테르,

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 2-메톡시페닐 에스테르,

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 n-부틸 에스테르,

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 n-프로필 에스테르,

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 2,2-디메틸프로피오닐옥시메틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N-(4'-(2'-아미노에틸)모포리노)카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-[4-(카복시)피페리딘-1-일카보닐옥시]페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-bis-(2-히드록시에틸)카바밀옥시]페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-[3-(히드록시메틸)피페리딘-1-일카보닐옥시]페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-트리플로로메탄술포닐피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-(N-페닐우레아)벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(2-트리플로로아세틸-1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀린-7-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(1-메틸피라졸-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(1-메틸피라졸-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(피리딘-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(피리딘-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N-메틸-N-(2-디메틸아미노에틸)카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N-메틸-N-(2-디메틸아미노에틸)카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N-메틸-N-(2-디메틸아미노에틸)카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N-메틸-N-(2-디메틸아미노에틸)카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-3-클로로-4-(4-메틸피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-3-클로로-4-(N,N-디메티카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-3-클로로-4-(티오모르포린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-3-클로로-4-(티오모르포린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-3-클로로-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)]페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-3-클로로-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-3-클로로-4-(4-메틸피페라진-1-일카르보닐옥시)]페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-3-클로로-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)]페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-3-클로로-4-(4-(2'-피리딜)-피페라진-1-일카보닐옥시)]페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-3-클로로-4-(4-(2'-피리딜)-피페라진-1-일카보닐옥시)]페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-니트로벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(4-아미노벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-페닐카바밀피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-페닐카바밀피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(1-n-부틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(피리딘-4-일카보닐)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-4-옥소프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-trans-4-히드록시프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(4-시아노벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(4-아미노벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-4-옥소프롤일-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-[3-(히드록시메틸)피페라딘-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(4,4-디플로로)프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(4,4-디플로로)프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-(4-벤조일피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(1-메틸-1H-이미다졸-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-4-(티오모포린-4-일카보닐옥시)프롤일-L-4-(티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(4-시아노벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(4-아미디노벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 메틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-4-옥소프롤일-L-4-(티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-4-히드록시프롤일-L-4-(티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-(4-벤조일피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(4-아미디노벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 메틸 에스테르,

N-(3-플로로벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-[N-메틸-N-(2-(N'-메틸-N'-톨루엔술포닐-아미노)에틸)카보닐옥시)]페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-[N-(2-(N'-페닐아미노카보닐옥시)에틸)카보닐옥시)]페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-4-(trans-히드록시)프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-4-(trans-히드록시)프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-아미디노벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

피페라진-1,4-디카르복실산 bis-{4-[4-(2S)-2-tert-부톡시카보닐-2-((4R)-5,5-디메틸-3-(톨루엔-4-술포닐)티아졸리딘-4-카복스아미도)에틸]페닐}에스테르,

피페라진-1,4-디카르복실산 bis-{4-[4-(2S)-2-카복시-2-((4R)-5,5-디메틸-3-(톨루엔-4-술포닐)티아졸리딘-4-카복스아미도)에틸]페닐}에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(피라진-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(2-히드록시메틸피롤리딘-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(2-히드록시메틸피롤리딘-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(2-메톡시카보닐피롤리딘-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-3-클로로-4-(티오모르핀-4-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)]페닐알라닌,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)]페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

피페라진-1,4-디카르복실산 bis-{4-[(2S)-2-이소프로폭시카보닐-2-((2R)-1-(톨루엔-4-술포닐)피롤리딘-2-카복스아미도)에틸]페닐}에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(4-히드록시)프롤일-L-4-(티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 2-(2-메톡시에톡시) 에틸 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(4-(2-피리미딜)피페라진-1-일카보닐옥시)]페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-3-플로로-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1-메탄술포닐피라진-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-[2-(1,1-디옥소-2,3-디히드로-3,3-디메틸-1,2-벤지소티아졸-2-일)아세틸]-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-[2-(N-2,10-캠포술트아밀)아세틸]-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-[2-(N-2,10-캠포술트아밀)아세틸]-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-[2-(N-2,10-캠포술트아밀)아세틸]-L-3-클로로-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(4-브로모벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-브로모벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(4-히드록시)프롤일-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(4-(2-피리미딜)피페라진-1-일카보닐옥시)]페닐알라닌,

피페라진-1,4-디카르복실산 bis-{4-[(2S)-2-tert-부톡시카보닐-2-((2R)-1-(톨루엔-4-술포닐)피롤리딘-2-카복스아미도)에틸]페닐}에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)]페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)티아졸리디닐-2-카보닐-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(4-플로로벤젠술포닐)티아졸리디닐-2-카보닐-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(4-옥소)프롤일-L-4-(티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(4-옥소)프롤일-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(4-플로로벤젠술포닐)티아졸리디닐-2-카보닐-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)]페닐알라닌,

N-(4-니트로벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)]페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)티아졸리디닐-2-카보닐-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)]페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-브로모벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)]페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-(N-페닐티오카보닐)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)티아졸리디닐-2-카보닐-L-4-(4-메틸호모피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

피페라진-1,4-디카르복실산 bis-{4-[(2S)-2-카복실-2-((2R)-1-(톨루엔-4-술포닐)피롤리딘-2-카복스아미도)에틸]페닐}에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-4-(메탄술포닐옥시)프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-아미노카보닐벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(4-아미노카보닐벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(4-아미디노벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(티오모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(4-니트로벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)]페닐알라닌,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-3-클로로-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)]페닐알라닌 에틸 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-3-클로로-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)]페닐알라닌,

N-(4-플로로벤젠술포닐)티아졸리디닐-2-카보닐-L-4-(4-메틸호모피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(1-메틸피라졸-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-3-클로로-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(1-메틸이미다졸-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(1-메틸이미다졸-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1-메탄술포닐피라진-3-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1-메탄술포닐옥시)프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(메탄술포닐)-N-벤질글리시닐-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-브로모벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-트리플로로메톡시벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(4-트리플로로메톡시벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-트리플로로메톡시벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(4-플로로벤젠술포닐)-L-(4-히드록시)프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(4-트리플로로메톡시벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(1-메틸이미다졸-4-술포닐)-L-프롤일-L-3-클로로-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌,

N-(1-메틸이미다졸-4-술포닐)-L-프롤일-L-3-클로로-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(1-메틸이미다졸-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(1-메틸이미다졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(1-메틸이미다졸-3-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(1-메틸이미다졸-3-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(1-메틸이미다졸-3-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(1-메틸이미다졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(1-메틸이미다졸-4-술포닐)-L-프롤일-L-3-클로로-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르,

N-(1-메틸이미다졸-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 2-페녹시에틸 에스테르,

N-(1-메틸이미다졸-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-3-클로로-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(1-메틸이미다졸-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-3-클로로-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르,

N-(3-클로로-1,5-디메틸피라졸-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-3-클로로-4-(4-(5-트리플로로메틸-2-피리딜)피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

및 상기한 하나의 에스테르가 메틸 에스테르, 에틸 에스테르, n-프로필 에스테르, 이소프로필 에스테르, n-부틸 에스테르, 이소부틸 에스테르, sec-부틸 에스테르, tert-부틸 에스테르 및 네오펜틸 에스테르로 이루어진 그룹에서 선택된 다른 에스테르로 치환된 에스테르 화합물 중의 하나는 물론 이들의 약학적으로 허용가능한 염.

상기 화학식 I과 IA의 범위에 속하는 더욱 바람직한 화합물로는 다음을 들 수 있다.

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(이소니페코토실옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르,

N-(α-톨루엔술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(1-tert-부틸카보닐옥시-4-페닐피페리딘-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-[(1,1-디옥소)티아모포린-3-카보닐]-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-[(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-[(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카보닐옥시)페닐알라닌,

N-(톨루엔-4-술포닐)사코실-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(1-메틸이미다졸-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-아미노벤젠술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)사코실-L-4-(모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(α-톨루엔술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(피페라진-2-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(4-벤질옥시카보닐피페라진-2-카보닐)-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-[(1,1-디옥소)티아모포린-3-카보닐]-L-4-(모포린-4-일카보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-프롤일-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르,

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)사르코실-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소-5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(1-메틸이미다졸-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소-5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(피리딘-3-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-D-프롤릴-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-N-메틸알라닐-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-니트로벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)사르코실-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-N-메틸알라닐-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(1,1-디옥소티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(이소니페코토일옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(피롤리딘-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 네오펜틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 네오펜틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-tert-부틸옥시카르보닐피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)사르코실-L-4-(1,1-디옥소티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)사르코실-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-N-메틸알라닐-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)사르코실-L-4-(1,1-디옥소티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-N-메틸알라닐-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(피리딘-3-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(피리미딘-2-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-니트로벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(4-시아노벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(1-tert-부틸옥시카르보닐피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-아세틸피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-메탄술포닐피레라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(모르폴린-4-일카르보닐옥시)-3-니트로페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(1-tert-부틸옥시카르보닐피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-N-메틸-2-(tert-부틸)글리시닐-L-4-(4-메틸피레라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(1,1-디옥소티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(1,1-디옥소티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(1,1-디옥소티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-트리플루오로메톡시벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

3-[N-(톨루엔-4-술포닐)-N-메틸아미노]-1-[1-tert-부틸옥시카르보닐-2-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐에틸]아제티딘-2-원

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소-5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소-5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(피리미딘-2-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

3-[N-(톨루엔-4-술포닐)-N-메틸아미노]-1-[1-카르복시-2-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐에틸]아제티딘-2-원

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(이소니페코토일옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(1,1-디옥소티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(피롤리딘-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(2,5-디클로로티오펜-3-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-아세트아미도벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-tert-부틸벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(피리딘-2-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(2-플루오로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(3-플루오로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(2,4-디플루오로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-아세트아미도벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(4-트리플루오로메톡시벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(4-시아노벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(3,3-디메틸)프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(3,3-디메틸)프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소-프로필 에스테르

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N-(1,4-디옥사-8-아자-스피로[4,4]데칸-8-일)카르보닐옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N-(1,4-디옥사-8-아자-스피로[4,4]데칸-8-일)카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4'-아세틸피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4'-메탄술포닐피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4'-페닐피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4'-메탄술포닐피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌(N'-tert-부톡시카르보닐-2-아미노-2-메틸프롤릴)에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4'-아세틸피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4'-히드록시피페라딘-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N-(2'-(모르폴린-4'-일)에틸)카르바밀 옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N-(1,4-디옥사-8-아자-스피로[4,5]데칸-8-일)카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N-(2'-히드록시에틸)-N-메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4'-(2-히드록시에틸)피페라진-1-일카르보닐옥시)-L-페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N-(2'-포르밀옥시에틸)-N-메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N-(2'-히드록시에틸)-N-메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N-(메톡시카르보닐메틸)카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-(4-N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로일 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4'-메톡시피페리딘-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4'-메톡시피페리딘-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-4-옥소프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-트랜스-4-히드록시프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(3-플루오로벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(모르폴리노-술포닐)-L-프롤릴-L-(4-N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(모르폴리노-술포닐)-L-프롤릴-L-(4-N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(2-플루오로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(2,4-디플루오로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(피리딘-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸-티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(3-플루오로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(4-tert-부틸벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-(3,3-디메틸)프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(2,5-디클로로티오펜-3-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(4-메톡시벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(4-메톡시벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1-옥소-티오모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1-옥소-티오모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(3,4-디플루오로벤젠술포닐)-L-프롤릴-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(3,4-디플루오로벤젠술포닐)-L-프롤릴-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(3,4-디플루오로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(3,4-디플루오로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르

N-(피리딘-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(피리딘-2-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(피리딘-2-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(피리딘-2-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(3-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(2-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(3,4-디플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(3,5-디플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(2,4-디플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(4-클로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(3-클로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(2-클로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(3,4-디클로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(3,5-디클로로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(3-클로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(3,4-디클로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-메톡시벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(3-메톡시벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(2-메톡시벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(3,4-디메톡시벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(2,4-디플루오로벤젠술포닐)-L-(티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(3,4-디클로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(3-클로로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(3-클로로-4-플루오로벤젠술포닐)-L-(1,1-디옥소티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(3,4-디플루오로벤젠술포닐)-L-(티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티오프롤릴-L-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(3,4-디플루오로벤젠술포닐)-L-(티아모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(2,5-디클로로티오펜-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(8-퀴놀린술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(8-퀴놀린술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(8-퀴놀린술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(8-퀴놀린술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-페닐피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4'-(에톡시카르보닐)피페리딘-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(피리딘-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(3-술폰아미도-4-클로로-벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1-옥소티오모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(2,4-디플루오로벤젠술포닐)-L-(1-옥소티오모르폴린-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 2,2-디메틸프로필 에스테르

N-(피리딘-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 2,2-디메틸프로필 에스테르

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 시클로프로필메틸 에스테르

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 메틸 에스테르

N-(피리딘-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르

N-(피리딘-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 시클로프로필메틸 에스테르

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 2-메톡시페닐 에스테르

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 n-부틸 에스테르

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 2,2-디메틸프로피오닐옥시메틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N-(4'-(2'-아미도에틸)모르폴리노)카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-[4-(카르복시)피페리딘-1-일카르보닐옥시]페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-비스-(2-히드록시에틸)카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-[3-(히드록시메틸)피페리딘-1-일카르보닐옥시]페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-트리플루오로메탄술포닐피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-(N-페닐우레아)벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(2-트리플루오로아세틸-1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀린-7-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(1-메틸피라졸-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-3-클로로-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-3-클로로-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-3-클로로-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-3-클로로-4-(4-(2'-피리딜)-피페라진-1-일카르보닐옥시)]페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-3-클로로-4-(4-(2'-피리딜)-피페라진-1-일카르보닐옥시)]페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-니트로벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(4-아미노벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-페닐카르바밀피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-페닐카르바밀피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(1-n-부틸피라졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(피리딘-4-일카르보닐옥시)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-4-옥소프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-트랜스-4-히드록시프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(4-시아노벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(4-아미노벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-4-옥소프롤릴-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-[3-(히드록시메틸)피페리딘-1-일카르보닐옥시]페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(4,4-디플루오로)프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(4,4-디플루오로)프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-(4-벤조일피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(1-메틸-1H-이미다졸-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)프롤릴-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(4-시아노벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(4-아미디노벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 메틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-4-옥소프롤릴-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-4-히드록시프롤릴-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-(4-벤조일피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(4-아미디노벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 메틸 에스테르

N-(3-플루오로벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-[N-메틸-N-(2-(N'-메틸-N'-톨루엔술포닐-아미노)에틸)카르바밀옥시]페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-[N-(2-(N'-페닐아미노카르보닐옥시)에틸)카르바밀옥시)]페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-4-(트랜스-하이드록시)프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-4-(트랜스-히드록시)프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-아미디노벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(피라진-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(2-히드록시메틸피롤리딘-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(2-히드록시메틸피롤리딘-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(2-메톡시카르보닐피롤리딘-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-3-클로로-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)]페닐알라닌

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)]페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(4-하이드록시)프롤릴-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 2-(2-메톡시에톡시)에틸 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(4-(2-피리미딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)]페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-3-플루오로-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1-메탄술포닐피라진-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-브로모벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-브로모벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(4-히드록시)프롤릴-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(4-(2-피리미딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)]페닐알라닌

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)]페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)티아졸리디닐-2-카르보닐-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(4-플루오로벤젠술포닐)티아졸리디닐-2-카르보닐-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(4-옥소)프롤릴-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(4-옥소)프롤릴-L-4-(4-메틸피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(4-플루오로벤젠술포닐)티아졸리디닐-2-카르보닐-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)]페닐알라닌

N-(4-니트로벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)]페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)티아졸리디닐-2-카르보닐-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)]페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-브로모벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)]페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-(N-페닐티오카르보닐)피페라진-1-일카르보닐옥시)]페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)티아졸리디닐-2-카르보닐-L-4-(4-메틸호모피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-4-(메탄술포닐)프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-아미노카르보닐벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(4-아미노카르보닐벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(4-아미디노벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(티오모르폴린-4-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(4-니트로벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)]페닐알라닌

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-3-클로로-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)]페닐알라닌 에틸 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-3-클로로-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)]페닐알라닌

N-(4-플루오로벤젠술포닐)티아졸리디닐-2-카르보닐-L-4-(4-메틸호모피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(1-메틸피라졸-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-3-클로로-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(1-메틸이미다졸-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(1-메틸이미다졸-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(4-플루오로벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(1-메탄술포닐피라진-3-카르보닐)-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-(메탄술포닐옥시)프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(4-브로모벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-트리플루오로메톡시벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(4-트리플루오로메톡시벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-트리플루오로메톡시벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(4-플루오로메톡시벤젠술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(4-플루오로메톡시벤젠술포닐)-L-(4-히드록시)프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(4-트리플루오로메톡시벤젠술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(1-메틸이미다졸-4-술포닐)-L-프롤릴-L-3-클로로-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌

N-(1-메틸이미다졸-4-술포닐)-L-프롤릴-L-3-클로로-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(1-메틸이미다졸-4-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(1-메틸이미다졸-4-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(1-메틸피라졸-3-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(1-메틸피라졸-3-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(1-메틸피라졸-3-술포닐)-L-프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(1-메틸피라졸-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 tert-부틸 에스테르

N-(1-메틸피라졸-4-술포닐)-L-프롤릴-L-3-클로로-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 이소프로필 에스테르

N-(1-메틸피라졸-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-4-(N,N-디메틸카르바밀옥시)페닐알라닌 2-페녹시에틸 에스테르

N-(1-메틸피라졸-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-3-클로로-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

N-(1-메틸피라졸-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-3-클로로-4-(4-(2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌 에틸 에스테르

N-(3-클로로-1,5-디메틸피라졸-3-술포닐)-L-(5,5-디메틸)티아프롤릴-L-3-클로로-4-(4-(5-트리플루오로메틸-2-피리딜)피페라진-1-일카르보닐옥시)페닐알라닌

및 약학적으로 허용가능한 그들의 염

상기 일반식 Ⅰ 및 ⅠA의 바람직한 화합물은 하기 표 3에 기재된 것을 포함한다:

표 3

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-O-n-부틸
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-O-시클로펜틸
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-O-n-부틸
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-O-시클로펜틸
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[피페리딘-4-일)C(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃
Ψ-CH₂-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(1-메틸피페리딘-4-일)C(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃
Ψ-CH₂-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		m-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(1-Boc-4-페닐피페리딘-4-일)-C(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소치 오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소치 모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	CH₃-	H	p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ-	CH₃-	H	p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	CH₃-	H	p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
1-메틸이미다졸-4-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-NH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	CH₃-	H	p-[(모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
Ψ-CH₂-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH₂-NH-CH₂-(L-피페라지닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
Ψ-CH₂-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH₂-NH-CH₂-(L-피페라지닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH₂-(Cbz)NHCH₂-[L-4-N-(Cbz)- 피페라진일]		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	CH₃-	H	p-[(피페리딘-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소치모포린-3-일)		p-[(모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OH
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-F-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ	-CH₃	H	p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂ _--SO₂-C(CH₃)₂-(L-1,1-디옥소 -5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
1-메틸피라졸 -4-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-SO₂-C(CH₃)₂-(L-1,1-디옥소 -5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-F-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
3-피리딜	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(D-피롤리디닐)		p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ	-CH₃	-CH₃	p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-니트로-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ	-CH₃	H	p-[(티오모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ	-CH₃	-CH₃	p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(티오모포린-4-일 설폰)-C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(티오모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OH

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(피페리딘-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(피롤리딘-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OCH₂C(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	OCH₂C(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(1-Boc-피페라진-4-일)C(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃
p-CH₃-Ψ	-CH₃	H	p-[(티오모포린-4-일 설폰)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ	-CH₃	H	p-[(티오모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ	-CH₃	-CH₃	p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-S-CH₂-(L-티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ	-CH₃	H	p-[(티오모포린-4-일 설폰)-C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ	-CH₃	-CH₃	p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-F-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-S-CH₂-(L-티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-F-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
피리딘-3-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-니트로-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-N≡C-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)	-	p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-F₃C-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
1-메틸피라졸 -4-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-F-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-S-CH₂-(L-티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	2,4-디옥소-테 트라히드로푸란-3일(3,4-에놀)
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(피페라진-4-일)C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(1-Boc-피페라진-4-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(피페라진-4-일)C(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-아세틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-메탄술포닐피페라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		3-니트로-4-[(모포린-4-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(1-Boc-피페라진-4-일)C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ	-CH₃	-C(CH₃)₃	p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-F-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-F-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(1,1-디옥소티오모포린-4-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(1,1-디옥소티오모포린-4-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-F-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(1,1-디옥소티오모포린-4-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-F-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(티오모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-F-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-F-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-F-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-F₃CO-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-F-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-SO₂-C(CH₃)₂-(L-1,1-디옥소-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-SO₂-C(CH₃)₂-(L-1,1-디옥소-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OH
p-F-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-SO₂-C(CH₃)₂-(L-1,1-디옥소-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
피리미딘-2-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-F-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티아졸리딘-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
2,5-디클로로티엔-3-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃C(O)NH-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-C(CH₃)₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
피리딘-2-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
o-F-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
m-F-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
2,4-디플로로-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃C(O)NH-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-C(F)₃O-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-F-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-N≡C-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
모포린-4-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-C(CH₃)₂-(L-4,4-디메틸피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-C(CH₃)₂-(L-4,4-디메틸피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
1-메틸피라졸-4-일-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(티오모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
1-메틸이미다졸-4-일-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
1-메틸피라졸-4-일-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃C(O)NH-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-(CH₃)₃C-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
피리딘-3-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-N≡C-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(1,4-디옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-일)-C(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(1,4-디옥사-8-아자스피로[4.5]데칸-8-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-아세틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-메탄술포닐-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-Ψ-피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-NH-CH₂-(L-피페라지닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-F₃CO-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-C(CH₃)₂-(4,4-디메틸피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-C(CH₃)₂-(4,4-디메틸피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃C(O)NH-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
o-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
모포린-4-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
m-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
2,4-디플로로-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
모포린-4-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
1-메틸피라졸-4-일-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
o-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
2,4-디플로로-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-S-CH₂-(L-티오모포린-3-일)		p-[(CH3)2NC(O)O-]벤질-	-OH
피리딘-3-일-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
m-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
피리딘-2-일-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
1-메틸피라졸-4-일-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-메탄술포닐피페라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-Ψ-피페라진-1-일)C(O)(O)-]벤질-	-OC(CH₃)₃

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-O-CH₂C(CH₃)₂-NHC(O)OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-O-CH₂CH₂-(모포린-4일)
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-아세틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NCH₂CH₂N(CH₃)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NCH₂CH₂N(CH₃)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NCH₂CH₂N(CH₃)C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NCH₂CH₂N(CH₃)C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-히드록시피페리딘-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-(CH₃)₃C-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(티오모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
2,5-디클로로티엔-3-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃O-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-C(CH₃)₂-(4,4-디메틸피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH_S-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH_S-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(티오모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(모포린-4-일)-CH₂CH₂NHC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(1,4-디옥사-8-아자스피로[4,5]데칸-8-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(티오모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OH

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
피리딘-2-일-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-(O)-CH₂-(L-1-옥소티오모포린-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
4-Cl-3-(NH₂-SO₂-)-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH_S-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(티오모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH_S-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[HOCH₂CH₂N(CH₃)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH_S-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(2-(히드록시메틸)피롤리딘-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH_S-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(2-(히드록시메틸)피롤리딘-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(2-(CH₃OC(O)-)피롤리딘-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(HC(O)O-)피페리딘-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OH

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(히드록시피페리딘-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(티오모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(CH₃CH₂OC(O)-)피페리딘-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(HOCH₂CH₂-)피페라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-l-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-l-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[HC(O)OCH₂CH₂N(CH₃)C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[HOCH₂CH₂N(CH₃)C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[CH₃OC(O)CH₂NHC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
퀴놀린-8-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
3,4-디플로로-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(티오모포린-4-일)-C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃O-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-(O)-CH₂-(L-1-옥소티오모포린-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
3,4-디플로로-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-H₂N-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
3,4-디플로로-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
3,4-디플로로-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
퀴놀린-8-일-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-(O)-CH₂-(L-1-옥소티오모포린 -4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
1-n-부틸피라졸-4-일-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
1-메틸피라졸-3-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
2-(CF₃C(O)-)-1,2,3,4-테트라히드로-이소퀴놀린-7-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(ΨNHC(O)-)-피페라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-메톡시피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-피리딘-4-일C(O))피페라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-C(O)-CH₂-(L-4-옥시피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH(OH)CH₂-(L-4-히드록시피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
m-F-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-메톡시피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(ΨNHC(O)-)-피페라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-(ΨNHC(O)NH)Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸 티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸 티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-CH₃SO₂-)피페라진-1-일)-C(O)O]벤질-	-OCH(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(모르폴린-4-일)CH₂CH₂NHC(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(HO(O)-)피페리딘-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(HOCH₂CH₂)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-O₂N-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-HOCH₂-)피페리딘-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		3-클로로-4-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-S-CH₂-(L-티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
1-메틸피라졸-3-일-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
m-F-Ψ--	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
o-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
3,4-디플로로-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
3,5-디플로로-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
2,4-디플로로-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-NH₂-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-N≡C-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH(OH)CH₂-(L-4-히드록시피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂C(O)CH₂-(L-4-옥시피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
피리딘-2-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸 티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-Cl-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸 티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
m-Cl-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸 티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
o-Cl-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸 티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
3,4-디클로로-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸 티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
3,5-디클로로-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸 티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸 티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
피리딘-3-일-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸 티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸 티아졸리딘-4-일)		p-[(티오모포린-4-일)-C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
퀴놀린-8-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸 티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
m-Cl-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH₂-SO₂-CH₂-(L-1, 1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
피리딘-2-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸 티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
3,4-디클로로-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH₂-SO₂-CH₂-(L-1, 1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
2,5-디클로로티엔-3-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸 티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃O-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸 티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
m-CH₃O-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸 티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
o-CH₃O-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸 티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
3,4-디메톡시-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5, 5-디메틸 티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
2,4-디플로로-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-S-CH₂-(L-티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
3,4-디클로로-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH₂-SO₂-CH₂-(L-1, 1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
m-Cl-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH₂-SO₂-CH₂-(L-1, 1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
2,4-디플로로-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-S(O)-CH₂-(L-1-옥소티오모포린-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-C(O)-CH₂-(L-4-옥소피롤리디닐)		p-[(4-메틸피페라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH(OH)CH₂-(L-4-히드록시피롤리디닐)		p-[(티오모포린-4-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(3-(HOCH₂-)피페리딘-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CF₂-CH₂-(L-4, 4-디플로로-디롤리디닐		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-O(CH₂CH₂O)₂CH₃

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH(-O-C(O)티오모포린-4-일)CH₂-(L-4-(티오모포린-4-일)C(O)O-피롤리디닐)		p-[티오모포린-4-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CF₂-CH₂-(L-4,4-디플로로-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(4-피리미딘-2-일)피페라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(ΨC(O)-)피페라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-플로로-4-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]-벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]-벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂N-(-SO₂CH₃)-CH₂-(L-4-메탄술포닐-피페라지닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
1-메틸이미다졸-4-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-Br-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-Br-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-NH₂C(=N)-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH₃
p-N≡C-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[티오모포린-4-일)-C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH(-O-C(O)티오모포린-4-일)-CH₂-(L-4-(티오모포린-4-일)C(O)O-피롤리디닐)		p-[티오모포린-4-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-C(O)-CH₂-(L-4-옥시피롤리디닐)		p-[티오모포린-4-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-C(O)-CH₂-(L-4-옥시피롤리디닐)		p-[티오모포린-4-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-C(O)-CH₂-(L-4-옥시피롤리디닐)		p-[(4-메틸피페라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(4-피리미딘-2-일)피페라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
퀴놀린-8-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
피리딘-4-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(4-피리딘-2-일)피페라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
m-F-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-S-(티아졸리딘-2-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-S-(티아졸리딘-2-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-C(O)-CH₂-(L-4-옥소피롤리디닐)		p-[티오모포린-4-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
p-NH₂-C(=N)-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[티오모포린-4-일)-C(O)O-]벤질-	-OCH₃
p-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-C(O)-CH₂-(L-4-옥소피롤리디닐)		p-[(4-메틸피페라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-S-(티아졸리딘-2-일)		p-[(4-피리딘-2-일)피페라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
p-NO₂-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-피리딘-2-일)피페라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-S-(티아졸리딘-2-일)		p-[(4-피리딘-2-일)피페라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-Br-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(4-피리딘-2-일)피페라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
P-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(ΨC(O)-)피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
P-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(ΨNHC(S)-)피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-S(티아졸리딘-2-일)		p-[(4-CH₃-호모피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
P-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[p-CH₃-Ψ-SO₂N(CH₃)CH₂CH₂N(CH₃)-C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
P-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[ΨNHC(O)O-CH₂CH₂NHC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
3-Cl-4-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH₂-SO₂-CH₂-(L-1,1-디옥소티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
1-메틸피라졸-4-일-	R²/R³=시클릭-CH₂CH₂-S-CH₂-(L-티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
P-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH(-OSO₂CH₃)-CH₂-(L-4-메탄설폭시-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-H₂NC(O)-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-H₂N-C(=N)-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
p-H₂NC(O)-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[티오모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OH
p-H₂N-C(=N)-Ψ	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[티오모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OH
p-NO₂-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]-벤질-	-OCH₂CH₃
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]-벤질-	-OH
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-S-(티아졸리딘-2-일)		p-[(4-CH₃-호모피페라진-1-일)C(O)O-]-벤질-	-OH
1-메틸피라졸-4-일-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
1-메틸이미다졸-4-일-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
1-메틸이미다졸-4-일-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
P-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
P-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
P-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
P-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH₂N(-SO₂-CH₃)CH₂-(4-메탄술포닐-피페라진-2-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
P-CH₃-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH(-OSO₂-CH₃)CH₂-(L-4-메탄설폭시-피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
3,4-디플로로-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-S-CH₂-(L-티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
피리딘-3-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(티오모포린-4-일)C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
3,4-디플로로-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-CH₂-S-CH₂-(L-티오모포린-3-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH(OH)CH₂-(L-4-히드록시피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
P-Br-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
P-CF₃O-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
P-CF₃O-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
P-CF₃O-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH(OH)CH₂-(L-4-히드록시피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
P-CF₃O-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
1-메틸이미다졸-4-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		3-클로로-4-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
1-메틸이미다졸-4-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		3-클로로-4-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
1-메틸이미다졸-4-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
1-메틸이미다졸-4-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OH
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OCH(CH₃)₂
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
1-메틸이미다졸-4-일	R²/R³=시클릭3탄소원자(L-피롤리디닐)		3-클로로-4-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O]벤질-	-OCH(CH₃)₂
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₂OΨ
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O]벤질-	-OH
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		3-클로로-4-[(4-(피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O]벤질-	-OCH₂CH₃

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
1,5-디메틸-3-클로로피라졸-4-일-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[4-[5-CF₃-피리딘-2-일)피페라진-1-일)-C(O)O-]벤질-	-OH
p-F-Ψ-	R²/R³=시클릭-CH₂CH(OH)CH₂-(L-4-히드록시피롤리디닐)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)₃
피리딘-4-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OH
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH₂C(CH₃)₃
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH₂O-C(O)C(C(CH₃)₃
피리딘-3-일-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH₂C(CH₃)₃
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	2-CH₃O-Ψ-O-
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH₂cyclopropyl
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₂CH₃
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₂CH₂CH₃

R¹	R²	R³	R⁵	R⁶
1-메틸피라졸-4-일	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-O-CH₃
피리딘-3-일-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OC(CH₃)
피리딘-3-일-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH₂CH₃
피리딘-3-일-	R²/R³=시클릭-CH₂-S-C(CH₃)₂-(L-5,5-디메틸티아졸리딘-4-일)		p-[(CH₃)₂NC(O)O-]벤질-	-OCH₂시클로프로필

화학식 I 및 IA의 화합물의 바람직한 실시예에서, 상기 화합물은 하기의 화학식 IB:

이 때, Ar¹은 아릴(aryl), 치환된 아릴, 헤테로 아릴 및 치환된 헤테로 아릴로 이루어진 군에서 선택되고;

Ar²는 아릴(aryl), 치환된 아릴, 헤테로 아릴 및 치환된 헤테로 아릴로 이루어진 군에서 선택되고;

R¹²는 알킬(alkyl), 치환된 알킬, 시클로알킬 및 치환된 시클로알킬로 이루어진 군에서 선택되거나 또는 R¹² 및 R¹³이 R¹²에 결합된 질소원자 및 R¹³에 결합된 탄소원자와 함께 헤테로시클릭기(基) 또는 치환된 헤테로시클릭기를 형성하고;

R¹³은 수소, 알킬 및 치환된 알킬로 이루어진 군에서 선택되거나 또는 R¹² 및 R¹³이 R¹²에 결합된 질소원자 및 R¹³에 결합된 탄소원자와 함께 헤테로시클릭기(基) 또는 치환된 헤테로시클릭기를 형성하고;

R¹⁴는 수소, 알킬, 치환된 알킬, 시클로 알킬, 치환된 시클로 알킬, 아릴 및 치환된 아릴로 이루어진 군에서 선택되고;

R¹⁵는 알킬 및 치환된 알킬로 이루어진 군에서 선택되거나 또는 R¹⁵ 및 R¹⁶이 그들에 결합된 질소원자와 함께 헤테로시클릭기 또는 치환된 헤테로시클릭기를 형성하고;

R¹⁶은 알킬 및 치환된 알킬로 이루어진 군에서 선택되거나 또는 R¹⁵ 및 R¹⁶이 그들에 결합된 질소원자와 함께 헤테로시클릭기 또는 치환된 헤테로시클릭기를 형성하고; 그리고,

Y는 -O-, -NR¹⁰⁰ 및 -CH₂-로 이루어진 군에서 선택되는데, 이 때 R¹⁰⁰은 수소 또는 알킬이다;

그리고, 그들의 약제학적으로 가능한 염으로 정의된다.

바람직하게는 상기 화학식 IB의 화합물에서, R¹²는 알킬 또는 치환된 알킬이거나 R¹² 및 R¹³이 R¹²에 결합된 질소원자 및 R¹³에 결합된 탄소원자와 함께 헤테로시클릭기 또는 치환된 헤테로시클릭기를 형성하는 것이다. 바람직하게는 상기 화학식 IB의 화합물에서 R¹⁴는 수소 또는 알킬이다.

바람직하게는 상기 화학식 IB의 화합물에서, Ar¹은 페닐, 4-메틸페닐, 4-t-부틸페닐, 2,4,6-트리메틸페닐, 2-플루오로페닐, 3-플루오로페닐, 4-플루오로페닐, 2,4-디플루오로페닐, 3,4-디플루오로페닐, 3,5-디플루오로페닐, 2-클로로페닐, 3-클로로페닐, 4-클로로페닐, 3,4-디클로로페닐, 3,5-디클로로페닐, 3-클로로-4-플루오로페닐, 4-브로모페닐, 2-메톡시페닐, 3-메톡시페닐, 4-메톡시페닐, 3,4-디메톡시페닐, 4-t-부톡시페닐, 4-(3'-디메틸아미노-n-프로폭시)-페닐, 2-카르복시페닐, 2-(메톡시카르보닐)페닐, 4-(H₂NC(O)-)페닐, 4-(H₂NC(S)-)페닐, 4-시아노페닐, 4-트리플루오로메틸페닐, 4-트리플루오로메톡시페닐, 3,5-디-(트리플루오로메틸)페닐, 4-니트로페닐, 4-아미노페닐, 4-(CH₃C(O)NH-)페닐, 4-(PhNHC(O)NH-)페닐, 4-아미디노페닐, 4-메틸아미디노페닐, 4-[CH₃SC(=NH)-]페닐, 4-클로로-3-[H₂NS(O)₂-]페닐, 1-나프틸, 2-나프틸, 피리딘-2-일(yl), 피리딘-3-일, 피리딘-4-일, 피리미딘-2-일, 퀴놀린-8-일, 2-(트리플루오로아세틸)-1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀린-7-일, 2-시에닐(thienyl), 5-클로로-2-시에닐, 2,5-디클로로-4-시에닐, 1-N-메틸이미다졸-4-일, 1-N-메틸피라졸-3-일, 1-N-메틸피라졸-4-일, 1-N-부틸피라졸-4-일, 1-N-메틸-3-메틸-5-클로로피라졸-4-일, 1-N-메틸-5-메틸-3-클로로피라졸-4-일, 2-치아조릴(thiazolyl) 및 5-메틸-1,3,4-치아디아졸(thiadiazol)-2-일로 이루어진 군에서 선택되는 것이다.

바람직하게는 상기 화학식 IB의 화합물에서 R¹² 및 R¹³은 R¹²에 결합된 질소원자 및 R¹³에 결합된 탄소원자와 함께 하기 화학식의 헤테로시클릭 또는 치환된 헤테로시클릭을 형성한다.

이 때, X는 -S-, -SO-, -SO₂- 및 임의적으로 치환된 -CH₂-로 이루어진 군에서 선택되며;

m은 0 내지 12 사이의 정수이며;

n은 0 내지 2 사이의 정수이며;

R'는 알킬, 치환된 알킬 및 아미노로 이루어진 군에서 선택된다.

바람직하게는 m은 1, X는 -S- 또는 -CH₂-, R'는 알킬 또는 치환된 알킬이다.

보다 바람직하게는 R¹² 및 R¹³은 R¹²에 결합된 질소원자 및 R¹³에 결합된 탄소원자와 함께 헤테로시클릭 또는 아제티디닐(azetidinyl), 치아조리디닐(thiazolidinyl), 피페리디닐, 피페라지닐, 치오몰포리닐, 피롤리디닐, 4-히드록시리록리디닐, 4-옥소피롤리디닐, 4-플루오로피롤리디닐, 4,4-디플루오로피롤리디닐, 4-(티오모르폴린-4-일C(O)O)-)피롤리디닐, 4-[CH₃S(O)₂O-]피롤리디닐, 3-페닐피롤리디닐, 3-치오페닐피롤리디닐, 4-아미노피롤리디닐, 3-메톡시피롤리디닐, 4,4-디메틸피롤리디닐, 4-N-Cbz-피페라지닐, 4-[CH₃S(O)₂-]피페라지닐, 치아조리딘-3-일, 5,5-디메틸-치아조리딘-3-일, 5,5-디메틸치아조린딘-4-일, 1,1-디옥소치아조리디닐, 1,1-디옥소-5,5-디메틸치아조리딘-2-일 및 1,1-디옥소치오몰포리닐로 이루어진 군에서 선택된 치환된 헤테로시클릭을 형성한다.

바람직하게는 화학식 IB에서 Ar²는 페닐, 2-피리딜, 3-피리딜, 4-피리딜 및 4-피리드-2-오닐로 이루어진 군에서 선택된다.

바람직하게는 화학식 IB에서, Y는 -O-이고, Y가 -O-일 때, 그 부분 - OC(O)NR¹⁵R¹⁶은 (CH₃)₂NC(O)O-, (피페리딘-1-일)C(O)O-, (4-히드록시피페리딘-1-일)C(O)O-, (4-포르밀옥시피페리딘-1-일)C(O)O-, (4-에톡시카르보닐피페리딘-1-일)C(O)O-, (4-카르복실피페리딘-1-일)C(O)O-, (3-히드록시메틸피페리딘-1-일)C(O)O-, (4-히드록시메틸피페리딘-1-일)C(O)O-, (4-피페리돈-1-일 에틸렌 케탈)C(O)O-, (피페라진-1-일)-C(O)O-, (1-Boc-피페라진-4-일)-C(O)O-, (4-메틸피페라진-1-일)C(O)O-, (4-메틸호모피페라진-1-일)C(O)O-, (4-(2-히드록시에틸)피페라진-1-일)C(O)O-, (4-페닐피페라진-1-일)C(O)O-, (4-(피리딘-2-일)피페라진-1]-일)C(O)O-,(4-(4-트리플루오로메틸피리딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-, (4-(피리미딘-2-일)피페라진-1-일)C(O)O-, (4-아세틸피페라진-1-일)C(O)O-,(4-(페닐C(O)-)피페라진-1-일)C(O)O-, (4-(피리딘-4'-일C(O)-)피페라진-1-일)C(O)O-, (4-(페닐NHC(O)-)피페라진-1-일)C(O)O-, (4-(페닐NHC(S)-)피페라진-1-일)C(O)O-, (4-메타네술포닐피페라진-1-일-C(O)O-,(4-트리플루오로메타네설토닐피페라진-1-일-C(O)O-, (모르폴린-4-일)C(O)O-, (치오모르폴린-4-일)C(O)O-, (치오모르폴린-4'-일 설폰)-C(O)O-, (피롤리딘-1-일)C(O)O-, (2-메틸피롤리딘-1-일)C(O)O-, (2-메톡시카르보닐)피롤리딘-1-일)C(O)O-, (2-(히드록시메틸)피롤리딘-1-일)C(O)O-, (2,-(N,N-디메틸아미노)에틸)(CH₃)NC(O)O-, (2-(N-메틸-N-톨루엔-4-술포닐아미노)에틸)(CH₃)N-C(O)O-, (2-(모르폴린-4-일)에틸)(CH₃)NC(O)O-, (2-(히드록시)에틸)(CH₃)NC(O)O-, 비스(2-(히드록시)에틸)NC(O)O-, (2-(포밀옥시)에틸)(CH₃)NC(O)O-, (CH₃OC(O)CH₂)HNC(O)O- 및 2-[(페닐NHC(O)O-)에틸-]HNC(O)O-로 이루어진 군에서 바람직하게 선택된다.

실시예에서, 상기 화합물은 하기 화학식 IC에 의해 정의된다.

이 때, R^x는 히드록시 또는 C₁ _-5 알콕시 및 그들의 약제학적으로 가능한 염이다. 바람직하게는 상기 화합물은 N-[N-(3-피리디네설폭닐)-L-3,3-디메틸-4-치아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르이다.

또 다른 측면에서, 리미레이네이팅제(remyleinating agents)로 사용할 수 있는 상기 화합물은 하기의 화학식 II에 의해 정의되는 화합물이다. 이러한 화합물은 약 15μM 또는 그 이하의 IC₅₀(하기 실시예 A에서 기재된 대로 측정됨)에 의해 나타난 대로 VLA-4에 결합 친화력을 가지며, 리미레이네이팅제로 작용한다.

이 때, R²¹은 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 치환된 아릴, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 헤테로시클릭, 치환된 헤테로시클릭, 헤테로아릴 및 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군에서 선택되며;

R²²는 수소, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 시클로알케닐, 치환된 시클로알케닐, 헤테로시클릭, 치환된 헤테로시클릭, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로 아릴 및 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군에서 선택될 수 있으며 R²¹ 및 R²²는 R²²에 결합된 질소 원자 및 R²¹에 결합된 SO₂기와 함께 헤테로시클릭기 또는 치환된 헤테로시클릭기를 형성할 수 있으며;

R²³은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 치환된 헤테로시클릭 그리고 R²² 및 R²³이 R²²에 결합된 질소 원자 및 R²³에 결합된 탄소원자가 함께 포화-헤테로시클릭기 또는 포화된 치환 헤테로시클릭기를 형성하되 단일치환되었을 때 상기 포화-치환된 헤테로시클릭기에의 치환기가 카르복실기가 아닌 것을 조건으로 형성할 수 있는 것으로 이루어진 군에서 선택되며;

Q는 -C(X)NR⁷-이며, 이 때, R⁷은 수소 및 알킬로 이루어진 군에서 선택되며;

X는 산소 및 황으로 이루어진 군에서 선택되며;

R²⁵는 -CH₂Ar²²-R^25'이며, 이 때, Ar²²는 아릴 또는 헤테로아릴이며 R^25'는 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 치환된 헤테로시클릭, 아릴옥시, 치환된 아릴옥시, 아랄콕시, 치환된 아랄콕시, 헤테로아릴옥시, 치환된 헤테로아릴옥시, 헤테로시클릭-O-, 치환된 헤테로시클릭-O-, 헤테로아랄콕시 및 치환된 헤테로아랄콕시로 이루어진 군에서 선택된다.

그리고, 그들의 약제학적으로 가능한 염도 이에 포함된다.

또 다른 실시예에서, 본원발명의 조성물은 또한 상기 화학식 II의 화합물로 생체내에서 변화하는(즉 가수분해 또는 물질대사를 거치는 등) 전구약물로 제공될 수 있다.그러한 실시예의 바람직한 예에서 화학식 II의 화합물에서 카르복실릭산은 생체내에서 카르복실릭산(그 염을 포함한다)으로 변화할 기로 변형된다. 특히 실시예에서, 그러한 전구약물은 화학식 IIA의 화합물에 의해서 표시된다.

R²²는 수소, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 시클로알케닐, 치환된 시클로알케닐, 헤테로시클릭, 치환된 헤테로시클릭, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴 및 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군에서 선택되며, R²¹ 및 R²²는 R²²에 결합된 질소 원자 및 R²¹에 결합된 SO₂기와 함께 헤테로시클릭기 또는 치환된 헤테로시클릭기를 형성할 수 있으며;

R²³은 수소, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로시클릭 및 치환된 헤테로시클릭으로 이루어진 군에서 선택되며; R²² 및 R²³이 R²²에 결합된 질소 원자 및 R²³에 결합된 탄소원자가 함께 단일치환되었을 때 상기 포화된 치환 헤테로시클릭기에의 치환기가 카르복실기가 아닌 것을 조건으로 포화된 헤테로시클릭기 또는 포화된 치환 헤테로시클릭기를 형성할 수 있으며;

R²⁵는 -CH₂Ar²²-R^25'이며, 이 때, Ar²²는 아릴 또는 헤테로아릴이며 R^25'는 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 치환된 헤테로시클릭, 아릴옥시, 치환된 아릴옥시, 아랄콕시, 치환된 아랄콕시, 헤테로아릴옥시, 치환된 헤테로아릴옥시, 헤테로시클릭-O-, 치환된 헤테로시클릭-O-, 헤테로아랄콕시 및 치환된 헤테로아랄콕시로 이루어진 군에서 선택되며;

R²⁶은 2,4-디옥소-테트라히드로푸란-3-일(3,4-에놀), 아미노, 알콕시, 치환된 알콕시, 시클로알콕시, 치환된 시클로알콕시, -O-(N-숙시니미딜), -NH-아다만틸, -O-콜레스트-5-엔-3-β-일, -NHOY 이 때 Y는 수소, 알킬, 치환된 알킬, 아릴 및 치환된 아릴임, -NH(CH₂)_PCOOY 이 때 P는 1에서 8까지의 정수이며 Y는 앞서 정의한 것임, -OCH₂NR²⁹R³⁰ 이 때 R²⁹는 -C(O)-아릴 및 -C(O)-치환된 아릴로 이루어진 군에서 선택되며, R³⁰은 수소 및 -CH₂COOR³¹ (이 때, R³¹은 알킬)로 이루어진 군에서 선택됨, 및 -NHSO₂Z' 이 때 Z' 는 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로시클릭 또는 치환된 헤테로시클릭인 것으로 이루어진 군에서 선택되며;

Q는 -C(X)NR⁷-이며, 이 때, R⁷은 수소 또는 알킬로 이루어진 군에서 선택되며;

X는 산소 또는 황으로 이루어진 군에서 선택된다;

그리고, 그들의 약제학적으로 가능한 염으로 나타내진다.

상기 화학식 II 및 IIA의 화합물의 더 자세한 설명 및 그 화합물들을 제조하는 과정 및 반응 조건은 미국 특허 출원 제09/127,346호(1998년 7월 31일 출원), 제09/688,820호 (계속출원, 200년 10월 17일 출원 및 미국 특허 제6,583,139호로 공고) 및 제10/382,988호 (계속출원, 2003년 3월 7일 출원)에 기재되어 있다. 그리고, 상기 출원 모두는 모든 내용에 대해 본원출원에 참고문헌으로 들어 있다.

바람직하게는 상기 화학식 II 및 IIA의 화합물에서 R²¹은 알킬, 치환된 알킬, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로시클릭, 치환된 헤테로시클릭, 헤테로아릴 및 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군에서 선택된다. 보다 바람직하게는 R²¹은 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴 및 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군에서 선택된다.

한층 더 바람직하게는 상기 화학식 II 및 IIA의 화합물에서 R²¹은 4-메틸페닐, 4-클로로페닐, 1-나프틸, 2-나프틸, 4-메톡시페닐, 페닐, 2,4,6-트리메틸페닐, 2-(메톡시카르보닐)페닐, 2-카르복시페닐, 3,5-디클로로페닐, 4-트리플루오로메틸페닐, 3,4-디클로로페닐, 3,4-디메톡시페닐, 4-(CH₃C(O)NH-)페닐, 4-트리플루오로메톡시페닐, 4-시아노페닐, 3,5-디-(트리플루오로메틸)페닐, 4-t-부틸페닐, 4-t-부톡시페닐, 4-니트로페닐, 2-시에닐(thienyl), 1-N-메틸-3-메틸-5-클로로피라졸-4-일, 1-N-메틸이미다졸-4-일, 4-브로모페닐, 4-아미디노페닐, 4-메틸아미디노페닐, 4-[CH₃SC(=NH)]페닐, 5-클로로-2-시에닐, 2,5-디클로로-4-시에닐, 1-N-메틸-4-피라조릴, 2-치아조릴(thiazolyl), 5-메틸-1,3,4-치아디아졸-2-일, 4-[H₂NC(S)]페닐, 4-아미노페닐, 4-플루오로페닐, 2-플루오로페닐, 3-플루오로페닐, 3,5-디플루오로페닐, 피리딘-3-일, 피리미딘-2-일, 4-(3'-디메틸아미노-n-프로폭시)-페닐 및 1-메틸피라졸-4-일로 이루어진 군에서 선택된다.

바람직하게는 상기 화학식 II 및 IIA의 화합물에서 R²²는 수소, 메틸, 페닐, 벤질, -(CH₂)₂-2-시에닐 및 -(CH₂)₂-ψ이다.

또 다른 실시예에서 상기 화학식 II 및 IIA의 화합물에서 R²² 및 R²³ 그리고 화학식 IIB의 화합물에서 R³² 및 R³³은 R²² 또는 R³²에 결합된 질소원자와 R²³ 또는 R³²에 결합된 탄소원자가 함께 단일치환되었을 때 상기 포화된 치환 헤테로시클릭기에의 치환기가 카르복실기가 아닌 것을 조건으로 포화된 헤테로시클릭기 또는 포화된 치환 헤테로시클릭기를 형성한다.

상기 화학식 II 및 IIA의 화합물에서 Q는 바람직하게는 -C(O)NH- 또는 -C(S)NH-이다.

화학식 II 및 IIA의 화합물에서 R²⁵는 4-(2-카르복시페녹시)벤질, 4-(벤질옥시)벤질, 4-[(1-메틸피페리딘-4-일)-O-]벤질, 4-(이미다졸리드-2-온(one)-1-일)벤질 및 4-(3-포르밀이미다졸리드-2-온-1-일)벤질로 이루어지는 상기 군으로 치환됨으로 생기는 모든 가능한 이성질체로 이루어지는 군에서 바람직하게 선택된다.

화학식 IIA의 화합물에서 R²⁶은 바림직하게는 다음의 것이다. 2,4-디옥소-테트라히드로푸란-3-일 (3,4-에놀), 메톡시, 에톡시, iso-프로폭시, n-부톡시, t-부톡시, 시클로펜톡시, neo-펜톡시, 2-α-iso-프로필-4-β-메틸시클로헥속시, 2-β-이소프로필-4-메틸시클로헥속시, -NH₂, 벤질옥시, -NHCH₂COOH, -NHCH₂CH₂COOH, -NH-아다만딜, -NHCH₂CH₂COOCH₂CH₃, -NHSO₂-p-CH₃-ψ, -NHOR⁸ 이 때 R⁸은 수소, 메틸, iso-프로필 또는 벤질임, O-(N-숙시니미딜), -O-콜레스트-5-엔-3-β-일, -OCH₂-OC(O)C(CH₃)₃, -O(CH₂)_zNHC(O)W 이 때 z는 1 또는 2이며 W는 피리드-3-일, N-메틸피리딜 및 N-메틸-1,4-디히드로-피리드-3-일로 이루어진 군에서 선택됨, -NR″C(O)-R′ 이 때 R′는 아릴, 헤테로아릴 또는 헤테로시클릭이며 R″은 수소 또는 -CH₂C(O)O0CH₂CH₃이다.

상기 화학식 II 및 IIA의 범위 내의 바람직한 화합물은 예를 대신해서 다음의

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-4-(α-메틸벤질옥시)-L-페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-4-(2-카르복시페녹시)-L-페닐알라닌

N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프롤릴-4-O-(벤질)-L-티로신

및 그들의 약제학적으로 가능한 염이다.

상기 화학식 II 및 IIA의 바람직한 화합물은 하기 표 4에 나열된 것들을 포함한다.

R²¹	R²²	R²³	R²⁵	R²⁶	Q = -C(O)NR⁷- 이 때의 R⁷
p-CH₃-ψ-	R²² /R²³ = 시클릭 3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[O-(o-카르복시페닐]-벤질-	-OH	H
p-CH₃-ψ-	R²² /R²³ = 시클릭 3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-벤질옥시벤질-	-OH	H
p-CH₃-ψ-	R²² /R²³ = 시클릭 3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(1-메틸피페리딘-4-일)-O-]벤질-	-OCH₂CH₃	H
p-CH₃-ψ-	R²² /R²³ = 시클릭 3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(이미다졸리드-2-온(one)-1-일)벤질-	-OC(CH₃)₃	H
p-CH₃-ψ-	R²² /R²³ = 시클릭 3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[3-포르밀이미다졸리드-2-온-1-일)벤질-	-OH	H
p-CH₃-ψ-	R²² /R²³ = 시클릭 3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[(이미다졸리드-2-온-1-일)벤질-	-OH	H
p-CH₃-ψ-	R²² /R²³ = 시클릭 3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[1-H-2-옥소-3-메틸 테트라히드로 피리미딘-1-일]벤질-	-Ot-Bu	H
p-CH₃-ψ-	R²² /R²³ = 시클릭 3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[1-H-2-옥소-3-메틸 테트라히드로 피리미딘-1-일]벤질-	-OH	H

R2¹	R²²	R²³	R²⁵	R²⁶	Q = -C(O)NR⁷- 이 때의 R⁷
p-CH₃-ψ-	R²² /R²³ = 시클릭 3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		4-[2-메톡시 페닐]-벤질-	-Ot-Bu	H
p-CH₃-ψ-	R²² /R²³ = 시클릭 3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		4-[2-메톡시 페닐]-벤질-	-OH	H
p-CH₃-ψ-	R²² /R²³ = 시클릭 3 탄소 원자(L-피롤리디닐)		p-[2,4,5-트리옥소-3-(3-클로로페닐)-테트라히드로이미다졸-1-일]-벤질-	-OBz	H

화학식 II 및 IIA의 화합물의 바람직한 실시예에서, 상기 화합물은 하기 화학식 IIB:

이 때,

Ar³¹은 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴 및 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군에서 선택되며;

R³²는 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬 및 치환된 시클로알킬로 이루어진 군에서 선택되거나 R³² 및 R³³은 R³²에 결합된 질소원자 및 R³³에 결합된 탄소원자와 함께 헤테로시클릭 또는 치환된 헤테로시클릭기를 형성하며;

R³³은 수소, 알킬 및 치환된 알킬로 이루어진 군에서 선택되거나 R³² 및 R³³은 R³²에 결합된 질소원자 및 R³³에 결함된 탄소원자와 함께 헤테로시클릭 또는 치환된 헤테로시클릭기를 형성하며;

R³⁴는 수소, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬, 아릴 및 치환된 아릴로 이루어진 군에서 선택되며; 그리고

R³⁷은 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 치환된 헤테로시클릭, 아릴옥시, 치환된 아릴옥시, 아랄콕시, 치환된 아랄콕시, 헤테로아릴옥시, 치환된 헤테로아릴옥시이다.

그리고 그들의 약제학적으로 가능한 염으로 정의된다.

바람직하게는 상기 화학식 IIB의 화합물에서 R³²는 알킬, 치환된 알킬이거나 R³² 및 R³³은 R³²에 결합된 질소원자 및 R³³에 결합된 탄소원자와 함께 헤테로시클릭 또는 치환된 헤테로시클릭기를 형성하고 R³⁴는 수소 또는 알킬이다.

바람직하게는 상기 화학식 IIB의 화합물에서 R³⁷은 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴, 치환된 헤테로아릴, 헤테로시클릭 또는 치환된 헤테로시클릭이다. 실시예에서 R³⁷은 아릴로 치환되며, 이 때 아릴은 알킬 및 알콕시로 이루어진 군에서 독립적으로 선택된 하나에서 셋 사이의 치환체로 치환된다. 실시예에서 R³⁷은 헤테로아릴로 치환되며, 이 때 헤테로아릴은 알킬, 알콕시 및 옥소로 이루어진 군에서 독립적으로 선택된 하나에서 셋 사이의 치환체로 치환된다. 또 다른 실시예에서 R³⁷은 아릴 또는 헤테로아릴로 치환되며, 이 때 아릴 또는 헤테로아릴은 2,6-디(di)로 치환된다. 또 다른 실시예에서는 R³⁷은 2,6-디로 치환된 아릴이며 이 때, 치환체는 알킬 및 알콕시로 이루어진 군에서 독립적으로 선택된다. 또 다른 실시예에서는 R³⁷은 2,6-디로 치환된 헤테로아릴이며 이 때, 치환체는 알킬, 옥소 및 알콕시로 이루어진 군에서 독립적으로 선택된다. 또 다른 실시예에서 R³⁷은 2,6-디알콕시아릴, 2,6-디알콕시헤테로아릴, 2-알킬-6-알콕시아릴, 2-알킬-6-알콕시헤테로아릴, 2-옥소-6-알콕시헤테로아릴, 2-옥소-6-알킬헤테로아릴 및 임의로 치환된 이미다졸리딘-2,4-디온-3-일로 이루어진 군에서 선택된다.

바람직하게는 상기 화학식 IIB의 화합물에서, Ar³¹은 4-메틸페닐, 4-클로로페닐, 1-나프틸, 2-나프틸, 4-메톡시페닐, 페닐, 2,4,6-트리메틸페닐, 2-(메톡시카르보닐)페닐, 2-카르복시페닐, 3,5-디클로로페닐, 4-트리플루오로메틸페닐, 3,4-디클로로페닐, 3,4-디메톡시페닐, 4-(CH₃C(O)NH-)페닐, 4-트리플루오로메톡시페닐, 4-시아노페닐, 3,5-디-(트리플루오로메틸)페닐, 4-t-부틸페닐, 4-t-부톡시페닐, 4-니트로페닐, 2-시에닐(thienyl), 1-N-메틸-3-메틸-5-클로로피라졸-4-일, 1-N-메틸이미다졸-4-일, 4-브로모페닐, 4-아미디노페닐, 4-메틸아미디노페닐, 4-[CH₃SC(=NH)]페닐, 5-클로로-2-시에닐, 2,5-디클로로-4-시에닐, 1-N-메틸-4-피라조릴, 2-치아조릴(thiazolyl), 5-메틸-1,3,4-치아디아졸-2-일, 4-[H₂NC(S)]페닐, 4-아미노페닐, 4-플루오로페닐, 2-플루오로페닐, 3-플루오로페닐, 3,5-디플루오로페닐, 피리딘-3-일, 피리미딘-2-일, 4-(3'-디메틸아미노-n-프로폭시)-페닐 및 1-메틸피라졸-4-일로 이루어진 군에서 선택된다.

본 발명의 화합물, 조성물 및 방법을 설명함에 있어 다른 지시사항은 없는 경우 다음의 용어들은 아래와 같은 의미를 가진다.

정의

여기서 사용된, “아실(acyl)"은 H-C(O)-, 알킬-C(O)-, 치환 알킬-C(O)-, 알케닐-C(O)-, 치환 알케닐-C(O)-, 알키닐-C(O)-, 치환 알키닐-C(O)-시클로알킬-C(O)-, 치환 시클로-C(O)-, 아릴-C(O)-, 치환 아릴-C(O)-, 헤테로아릴-C(O)-, 치환 헤테로아릴-C(O)-, 헤테로시클릭-C(O)- 및 치환 헤테로시클릴 C(O)- 기(group)를 미하며, 여기서 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭 및 치환 헤테로시클릭은 여기서 정의된 것과 같다.

"아실아미노(acylamino)“는 -C(O)NRR 기를 의미하며, 여기서 각각의 R은 수소, 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴, 치환 아릴, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 치환 헤테로시클릭으로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되고, 각각의 R은 질소원자와 함께 헤테로시클릭 또는 치환 헤테로시클릭 링을 형성하기 위해 결합(join)된다. 여기서 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭 및 치환 헤테로시클릭은 여기서 정의된 것과 같다.

“아실록시(acyolxy)”는 알킬-C(O)O-, 치환 알킬-C(O)O-, 알케닐-C(O)O-, 치환 알케닐-C(O)O-, 알키닐-C(O)O-, 치환 알키닐-C(O)O-, 아릴-C(O)O-, 치환 아릴-C(O)O-, 시클로알킬-C(O)O-, 치환 시클로알킬-C(O)O-, 헤테로아릴-C(O)O-, 치환 헤테로아릴-C(O)O-, 헤테로시클릭-C(O)O- 및 치환 헤테로시클릭-C(O)O- 기를 의미하며, 여기서 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭 및 치환 헤테로시클릭은 여기서 정의된 것과 같다.

“알케녹시(alkenoxy)"는 ”알케닐-O-" 기(group)를 의미한다.

"치환 알케녹시“는 ”치환 알케닐-O-"기를 의미한다.

“알케닐(alkenyl)"은 바람직하게는 2부터 10개, 더 바람직하게는 2부터 6개까지 탄소원자를 가지고, 적어도 하나, 바람직하게는 1~2개의 알케닐 불포화 부위(site)를 가지 알케닐 기를 의미한다.

“치환 알케닐(substituted alkenyl)”은 알콕시, 치환 알콕시, 아실(acyl), 아실아미노, 티오카보닐아민(thiocarbonylamino), 아실록시, 아미노, 아미디노(amidino), 알킬아미디노, 티오아미디노, 이모아실, 아미노카보닐아미노, 아미노티오카보닐아미노, 아미노카보닐록시, 아릴, 치환 아릴, 아릴록시(aryloxy), 치환 아릴록시, 아릴록시아릴, 치환 아릴록시아릴, 할로젠, 하이드록실, 사이아노, 니트로, 카복실, 카복실알킬, 카복실-치환 알킬, 카복실-시클로알킬, 카복실-치환 시클로알킬, 카복실아릴, 카복실-치환 아릴, 카복실헤테로아릴, 카복실-치환 헤테로아릴, 카복실헤테로시클릭, 카복실-치환 헤테로시클릭, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 구아니디노, 구아니디노설폰, 티올, 티오알킬, 치환 티오알킬, 티오아릴, 치환 티오아릴, 티오시클로알킬, 치환 티오시클로알킬, 티오헤테로아릴, 치환 티오헤테로아릴, 티오헤테로시클릭, 치환 티오헤테로시클릭, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 치환 헤테로시클릭, 시클록알콕시, 치환 시클로알콕시, 헤테로아릴록시, 치환 헤테로아릴록시, 헤테로시클록시, 치환 헤테로시클록시, 옥시카보닐아미노, 옥시티오카보닐아미노, 시클로알킬록시, 치환 시클로알킬록시, 헤테로아릴록시, 치환 헤테로아릴록시, -OS(O)₂-알킬, -OS(O)₂-치환 알킬, -OS(O)₂-아릴, -OS(O)₂-치환 아릴, -OS(O)₂-헤테로아릴, -OS(O)₂-치환 헤테로아릴, -OS(O)₂-헤테로시클릭, -OS(O)₂-치환 헤테로시클릭, R이 수소 또는 알킬인 -OS(O)₂-NRR, R이 수소 또는 알킬인 -NRS(O)₂-알킬, -NRS(O)₂-치환 알킬, -NRS(O)₂-아릴, -NRS(O)₂-치환 아릴, -NRS(O)₂-헤테로아릴, -NRS(O)₂-치환 헤테로아릴, -NRS(O)₂-헤테로시클릭, -NRS(O)₂-치환 헤테로시클릭, -NRS(O)₂-NR-알킬, -NRS(O)₂-NR-치환 알킬, -NRS(O)₂-NR-아릴, -NRS(O)₂-NR-치환 아릴, -NRS(O)₂-NR-헤테로아릴, -NRS(O)₂-NR-치환 헤테로아릴, -NRS(O)₂-NR-헤테로시클릭, R이 수소 또는 알킬인 -NRS(O)₂-NR-치환 헤테로시클릭, 모노- 및 디-알킬아미노, 모노- 및 디-(치환 알킬)아미노, 모노- 및 디-아릴아미노, 모노- 및 디-치환 아릴아미노, 모노- 및 디-헤테로아릴아미노, 모노- 및 디-치환 헤테로아릴아미노, 모노- 및 디-헤테로시클릭 아미노, 모노- 및 디-치환 헤테로시클릭 아미노, 알킬, 치환 알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 치환 헤테로시클릭으로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된 다른 치환체를 가진 비대칭 디-치환 아민으로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환체를 가진 아케닐 기 및 Boc, Cbz, 포르밀(formyl) 등과 같은 전통적인 차단 기(blocking group)에 의해 차단된 아미노기를 가진 치환 알케닐 기 또는 -SO2-알킬, -SO2-치환 알킬, -SO2-알케닐, -SO2-치환 알케닐, -SO2-시클로알킬, -SO2-치환 시클로알킬, -SO2-아릴, -SO2-치환 아릴, -SO2-헤테로아릴, -SO2-치환 헤테로아릴, -SO2-헤테로시클릭, -SO2-치환 헤테로시클릭 및 R이 수소 또는 알킬인 SO2NRR로 치환 알케닐/치환 알케닐 기를 의미한다.

바람직하게는, 치환체들은 알콕시, 치환 알콕시, 아실, 아실아미노, 아실록시, 아미노, 치환 아미노, 아미노아실, 아미노카보닐아미노, 아미노카보닐옥시, 아릴, 치환 아릴, 아릴록시, 치환 아릴록시, 카복실, 카복실 에스테르, 사이아노, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 시클로알킬록시, 치환 시클로알킬록시, 할로겐, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로아릴록시, 치환 헤테로아릴록시, 헤테로시클릭, 치환 헤테로시클릭, 하이드록실, 나이트로 및 옥시카글보닐아미노로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된다.

“알콕시(alkoxy)"는 예를 들면 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, iso-프로록시, n-부톡시, tert-부톡시, sec-butoxy, n-펜톡시, n-헤톡시, 1,2-디메틸부톡시 등을 포함하는 ”알킬-O-"기를 말한다.

“치환 알콕시”는 “치환 알킬-O-" 기를 말한다.

“알킬”은 바람직하게는 1 내지 10, 더 바람직하게는 1 내지 6개의 탄소원자를 가진 알킬기를 말한다. 예를 들면 메틸, t-부틸, n-헵틸, 옥틸 등과 같은 기(group)를 포함한다.

“치환 알킬”은 알콕시, 치환 알콕시, 아실(acyl), 아실아미노, 티오카보닐아민(thiocarbonylamino), 아실록시, 아미노, 아미디노(amidino), 알킬아미디노, 티오아미디노, 이모아실, 아미노카보닐아미노, 아미노티오카보닐아미노, 아미노카보닐록시, 아릴, 치환 아릴, 아릴록시(aryloxy), 치환 아릴록시, 아릴록시아릴, 치환 아릴록시아릴, 할로젠, 하이드록실, 사이아노, 니트로, 카복실, 카복실알킬, 카복실-치환 알킬, 카복실-시클로알킬, 카복실-치환 시클로알킬, 카복실아릴, 카복실-치환 아릴, 카복실헤테로아릴, 카복실-치환 헤테로아릴, 카복실헤테로시클릭, 카복실-치환 헤테로시클릭, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 구아니디노, 구아니디노설폰, 티올, 티오알킬, 치환 티오알킬, 티오아릴, 치환 티오아릴, 티오시클로알킬, 치환 티오시클로알킬, 티오헤테로아릴, 치환 티오헤테로아릴, 티오헤테로시클릭, 치환 티오헤테로시클릭, 헤테로아릴, 치환아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 치환 헤테로시클릭, 시클록알콕시, 치환 시클로알콕시, 헤테로아릴록시, 치환 헤테로아릴록시, 헤테로시클록시, 치환 헤테로시클록시, 옥시카보닐아미노, 옥시티오카보닐아미노, 시클로알킬록시, 치환 시클로알킬록시, 헤테로아릴록시, 치환 헤테로아릴록시, -OS(O)2-알킬, -OS(O)2-치환 알킬, -OS(O)2-아릴, -OS(O)2-치환 아릴, -OS(O)2-헤테로아릴, -OS(O)2-치환 헤테로아릴, -OS(O)2-헤테로시클릭, -OS(O)2-치환 헤테로시클릭, R이 수소 또는 알킬인 -OS(O)2-NRR, R이 수소 또는 알킬인 -NRS(O)2-알킬, -NRS(O)2-치환 알킬, -NRS(O)2-아릴, -NRS(O)2-치환 아릴, -NRS(O)2-헤테로아릴, -NRS(O)2-치환 헤테로아릴, -NRS(O)2-헤테로시클릭, -NRS(O)2-치환 헤테로시클릭, -NRS(O)2-NR-알킬, -NRS(O)2-NR-치환 알킬, -NRS(O)2-NR-아릴, -NRS(O)2-NR-치환 아릴, -NRS(O)2-NR-헤테로아릴, -NRS(O)2-NR-치환 헤테로아릴, -NRS(O)2-NR-헤테로시클릭, -NRS(O)2-NR-치환 헤테로시클릭, 모노- 및 디-알킬아미노, 모노- 및 디-(치환 알킬)아미노, 모노- 및 디-아릴아미노, 모노- 및 디-치환 아릴아미노, 모노- 및 디-헤테로아릴아미노, 모노- 및 디-치환 헤테로아릴아미노, 모노- 및 디-헤테로시클릭 아미노, 모노- 및 디-치환 헤테로시클릭 아미노, 알킬, 치환 알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 치환 헤테로시클릭으로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된 다른 치환체를 가진 비대칭 디-치환 아민으로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환체를 가진 1 내지 10개의 탄소원자를 가지는 알킬 기 및 Boc, Cbz, 포르밀(formyl) 등과 같은 통상적인 막음 기(blocking group)에 의해 막음된 아미노기를 가진 치환 알킬 기 또는 -SO2-알킬, -SO2-치환 알킬, -SO2-알케닐, -SO2-치환 알케닐, -SO2-시클로알킬, -SO2-치환 시클로알킬, -SO2-아릴, -SO2-치환 아릴, -SO2-헤테로아릴, -SO2-치환 헤테로아릴, -SO2-헤테로시클릭, -SO2-치환 헤테로시클릭 및 R이 수소 또는 알킬인 SO2NRR로 치환된 치환된 알킬/치환 알킬 기를 의미한다.

“알킬렌(alkylene)"은 1 내지 10, 더 바람직하게는 1 내지 6 개의 탄소원자를 가진 선상 또는 가지(branch) 이가 알킬기를 말한다. 예를 들면, 메틸렌 (-CH2-), 1,6-헵틸렌, 1,8-옥틸렌, 에틸렌 (-CH2CH2-), 프로필렌 이성질체 (예를 들면, -CH2CH2CH2- 및 -CH(CH3)CH2-) 등을 포함한다.

“치환 알킬렌”은 알콕시, 치환 알콕시, 아실(acyl), 아실아미노, 티오카보닐아민(thiocarbonylamino), 아실록시, 아미노, 아미디노(amidino), 알킬아미디노, 티오아미디노, 아미노아실, 아미노카보닐아미노, 아미노티오카보닐아미노, 아미노카보닐록시, 아릴, 치환 아릴, 아릴록시(aryloxy), 치환 아릴록시, 아릴록시아릴, 치환 아릴록시아릴, 할로젠, 하이드록실, 사이아노, 니트로, 카복실, 카복실알킬, 카복실-치환 알킬, 카복실-시클로알킬, 카복실-치환 시클로알킬, 카복실아릴, 카복실-치환 아릴, 카복실헤테로아릴, 카복실-치환 헤테로아릴, 카복실헤테로시클릭, 카복실-치환 헤테로시클릭, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 구아니디노, 구아니디노설폰, 티올, 티오알킬, 치환 티오알킬, 티오아릴, 치환 티오아릴, 티오시클로알킬, 치환 티오시클로알킬, 티오헤테로아릴, 치환 티오헤테로아릴, 티오헤테로시클릭, 치환 티오헤테로시클릭, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 치환 헤테로시클릭, 시클록알콕시, 치환 시클로알콕시, 헤테로아릴록시, 치환 헤테로아릴록시, 헤테로시클록시, 치환 헤테로시클록시, 옥시카보닐아미노, 옥시티오카보닐아미노, -OS(O)2-알킬, -OS(O)2-치환 알킬, -OS(O)2-아릴, -OS(O)2-치환 아릴, -OS(O)2-헤테로아릴, -OS(O)2-치환 헤테로아릴, -OS(O)2-헤테로시클릭, -OS(O)2-치환 헤테로시클릭, R이 수소 또는 알킬인 -OS(O)2-NRR, R이 수소 또는 알킬인 -NRS(O)2-알킬, -NRS(O)2-치환 알킬, -NRS(O)2-아릴, -NRS(O)2-치환 아릴, -NRS(O)2-헤테로아릴, -NRS(O)2-치환 헤테로아릴, -NRS(O)2-헤테로시클릭, -NRS(O)2-치환 헤테로시클릭, -NRS(O)2-NR-알킬, -NRS(O)2-NR-치환 알킬, -NRS(O)2-NR-아릴, -NRS(O)2-NR-치환 아릴, -NRS(O)2-NR-헤테로아릴, -NRS(O)2-NR-치환 헤테로아릴, -NRS(O)2-NR-헤테로시클릭, -NRS(O)2-NR-치환 헤테로시클릭, 모노- 및 디-알킬아미노, 모노- 및 디-(치환 알킬)아미노, 모노- 및 디-아릴아미노, 모노- 및 디-치환 아릴아미노, 모노- 및 디-헤테로아릴아미노, 모노- 및 디-치환 헤테로아릴아미노, 모노- 및 디-헤테로시클릭 아미노, 모노- 및 디-치환 헤테로시클릭 아미노, 알킬, 치환 알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 치환 헤테로시클릭으로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된 다른 치환체를 가진 비대칭 디-치환 아민으로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환체를 가진 알킬렌 기 및 Boc, Cbz, 포르밀(formyl) 등과 같은 통상적인 막음 기(blocking group)에 의해 막음된 아미노기를 가진 치환 알케닐 기 또는 -SO2-알킬, -SO2-치환 알킬, -SO2-알케닐, -SO2-치환 알케닐, -SO2-시클로알킬, -SO2-치환 시클로알킬, -SO2-아릴, -SO2-치환 아릴, -SO2-헤테로아릴, -SO2-치환 헤테로아릴, -SO2-헤테로시클릭, -SO2-치환 헤테로시클릭 및 R이 수소 또는 알킬인 SO2NRR로 치환 알케닐/치환 알케닐 기를 의미한다.

“알키닐(alkynyl)"은 2 내지 10, 더 바람직하게는 3 내지 6 개의 탄소원자를 가지고 적어도 하나, 바람직하게는 1 내지 2 개의 알키닐 불포화 부위를 가진 알키닐기를 말한다.

“치환 알키닐”은 알콕시, 치환 알콕시, 아실(acyl), 아실아미노, 티오카보닐아민(thiocarbonylamino), 아실록시, 아미노, 아미디노(amidino), 알킬아미디노, 티오아미디노, 아미노아실, 아미노카보닐아미노, 아미노티오카보닐아미노, 아미노카보닐록시, 아릴, 치환 아릴, 아릴록시(aryloxy), 치환 아릴록시, 아릴록시아릴, 치환 아릴록시아릴, 할로젠, 하이드록실, 사이아노, 니트로, 카복실, 카복실알킬, 카복실-치환 알킬, 카복실-시클로알킬, 카복실-치환 시클로알킬, 카복실아릴, 카복실-치환 아릴, 카복실헤테로아릴, 카복실-치환 헤테로아릴, 카복실헤테로시클릭, 카복실-치환 헤테로시클릭, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 구아니디노, 구아니디노설폰, 티올, 티오알킬, 치환 티오알킬, 티오아릴, 치환 티오아릴, 티오시클로알킬, 치환 티오시클로알킬, 티오헤테로아릴, 치환 티오헤테로아릴, 티오헤테로시클릭, 치환 티오헤테로시클릭, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 치환 헤테로시클릭, 시클록알콕시, 치환 시클로알콕시, 헤테로아릴록시, 치환 헤테로아릴록시, 헤테로시클록시, 치환 헤테로시클록시, 옥시카보닐아미노, 옥시티오카보닐아미노, -OS(O)2-알킬, -OS(O)2-치환 알킬, -OS(O)2-아릴, -OS(O)2-치환 아릴, -OS(O)2-헤테로아릴, -OS(O)2-치환 헤테로아릴, -OS(O)2-헤테로시클릭, -OS(O)2-치환 헤테로시클릭, R이 수소 또는 알킬인 -OS(O)2-NRR, R이 수소 또는 알킬인 -NRS(O)2-알킬, -NRS(O)2-치환 알킬, -NRS(O)2-아릴, -NRS(O)2-치환 아릴, -NRS(O)2-헤테로아릴, -NRS(O)2-치환 헤테로아릴, -NRS(O)2-헤테로시클릭, -NRS(O)2-치환 헤테로시클릭, -NRS(O)2-NR-알킬, -NRS(O)2-NR-치환 알킬, -NRS(O)2-NR-아릴, -NRS(O)2-NR-치환 아릴, -NRS(O)2-NR-헤테로아릴, -NRS(O)2-NR-치환 헤테로아릴, -NRS(O)2-NR-헤테로시클릭, -NRS(O)2-NR-치환 헤테로시클릭, 모노- 및 디-알킬아미노, 모노- 및 디-(치환 알킬)아미노, 모노- 및 디-아릴아미노, 모노- 및 디-치환 아릴아미노, 모노- 및 디-헤테로아릴아미노, 모노- 및 디-치환 헤테로아릴아미노, 모노- 및 디-헤테로시클릭 아미노, 모노- 및 디-치환 헤테로시클릭 아미노, 알킬, 치환 알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 치환 헤테로시클릭으로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된 다른 치환체를 가진 비대칭 디-치환 아민으로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 치환체를 가진 알키닐 기 및 Boc, Cbz, 포르밀(formyl) 등과 같은 통상적인 막음 기(blocking group)에 의해 막음된 아미노기를 가진 치환 알키닐 기 또는 -SO2-알킬, -SO2-치환 알킬, -SO2-알케닐, -SO2-치환 알케닐, -SO2-시클로알킬, -SO2-치환 시클로알킬, -SO2-아릴, -SO2-치환 아릴, -SO2-헤테로아릴, -SO2-치환 헤테로아릴, -SO2-헤테로시클릭, -SO2-치환 헤테로시클릭 및 R이 수소 또는 알킬인 SO2NRR로 치환 알키닐/치환 알키닐 기를 의미한다.

“아미디노”는 H2NC(=NH)- 기를 말하며, “알킬아미디노”는 1 내지 3 개의 알킬기 (예를 들면, 알킬HNC(=NH)-)를 가진 화합물을 말한다.

“아미노”는 -NH2기를 말한다.

“치환 아미노”는 -NRR 기를 말하며, 여기서 각각의 R 기는 수소, 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 및 치환 헤테로시클릭으로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되며, R 기 모두가 수소가 아니며, 또는 R 기는 질소원자와 함께 결합되어 헤테로시클릭 또는 치환 헤테로시클릭 고리(ring)를 형성할 수 있다.

“아미노아실”은 R이 수소 또는 알킬인 -NRC(O)알킬, -NRC(O)치환 알킬, -NRC(O)시클로알킬, -NRC(O)치환 시클로알킬, -NRC(O)알케닐, -NRC(O)치환 알케닐, -NRC(O)알키닐, -NRC(O)치환 알키닐, -NRC(O)아릴, -NRC(O)치환 아릴, -NRC(O)헤테로아릴, -NRC(O)치환 헤테로아릴, -NRC(O)헤테로시클릭 및 -NRC(O)치환 헤테로시클릭 기를 말하며, 여기서 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭 및 치환 헤테로시클릭은 여기서 정의된 바와 같다.

“아미노카보닐아미노”는 NRC(O)NRR, -NRC(O)NR-알킬, -NRC(O)NR-치환 알킬, -NRC(O)NR-알케닐, -NRC(O)NR-치환 알케닐, -NRC(O)NR-알키닐, -NRC(O)NR-치환 알키닐, -NRC(O)NR-아릴, -NRC(O)NR-치환 아릴, -NRC(O)NR-시클로알킬, -NRC(O)NR-치환 시클로알킬, -NRC(O)NR-헤테로아릴 및 -NRC(O)NR-치환 헤테로아릴, -NRC(O)NR-헤테로시클릭 및 -NRC(O)NR-치환 헤테로시클릭 기를 말하며, 각각의 R은 수소, 알킬이거나, 각각의 R이 질소원자와 결합하여 헤테로시클릭 또는 치환 헤테로시클릭 고리를 형성하며, 또한 아미노기의 하나는 Boc, Cbz, 포르밀 등과 같은 통상적인 막음 원자단(blocking groups)에 의해 막음된다. D여기서 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭 및 치환 헤테로시클릭은 여기서 정의된 바와 같다.

“아미노카보닐옥시”는 R인 수소 또는 알킬인 -NRC(O)O-알킬, -NRC(O)O-치환 알킬, -NRC(O)O-알케닐, -NRC(O)O-치환 알케닐, -NRC(O)O-알키닐, -NRC(O)O-치환 알키닐, -NRC(O)O-시클로알킬, -NRC(O)O-치환 시클로알킬, -NRC(O)O-아릴, -NRC(O)O-치환 아릴, -NRC(O)O-헤테로아릴, -NRC(O)O-치환 헤테로아릴, -NRC(O)O-헤테로시클릭 및 -NRC(O)O-치환 헤테로시클릭 기를 말하며, 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭 및 치환 시클릭은 여기서 정의된 바와 같다.

“아미노티오카보닐아미노”는 NRC(S)NRR, -NRC(S)NR-알킬, -NRC(S)NR-치환 알킬, -NRC(S)NR-알케닐, -NRC(S)NR-치환 알케닐, -NRC(S)NR-알키닐, -NRC(S)NR-치환 알키닐, -NRC(S)NR-아릴, -NRC(S)NR-치환 아릴, -NRC(S)NR-시클로알킬, -NRC(S)NR-치환 시클로알킬, -NRC(S)NR-헤테로아릴 및 -NRC(S)NR-치환 헤테로아릴, -NRC(S)NR-헤테로시클릭 및 -NRC(S)NR-치환 헤테로시클릭 기를 말하며, 각각의 R은 수소, 알킬이며 질소원자와 결합하여 헤테로시클릭 또는 치환 헤테로시클릭 고리를 형성하며, 또한 아미노기의 하나는 Boc, Cbz, 포르밀 등과 같은 통상적인 막음 원자단(blocking groups)에 의해 막음된다. 여기서 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭 및 치환 헤테로시클릭은 여기서 정의된 바와 같다.

“아릴”은 단일 환(single ring) (예를 들면, 페닐) 또는 다중 축합 고리(multiple condensed rings) (예를 들면, 나프틸 또는 안트릴)가진 6 내지 14 개의 탄소원자를 가진 불포화 방향족 카복실릭 기를 말하며, 여기서 축합 고리(condensed rings)는 방향족 (예를 들면, 2-벤즈옥스아조리논, 2H-1,4-벤즈옥사진-3(4H)-one-7yl 등)이거나 아닐 수 있으며, 여기서 부착점은 방향족고리 원자를 통한다. 바람직한 아릴은 페닐, 나프틸 및 5,6,7,8-테트라하이드로나프트-2-yl을 포함한다. (162 page 20 lines)

“치환 아릴”은 하이드록시, 아실, 아실아미노, 티오카복실아미노, 아실록시, 알킬, 치환 알킬, 알콕시, 치환 알콕시, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아미디노, 알킬아미디노, 티오아미디노, 아미노, 아미노아실, 아미노카보닐록시, 아미노카복실아미노, 아미노티오카보닐아미노, 아릴, 치환 아릴, 아릴록시, 치환 아릴록시, 시클로알콕시, 치환 시클로알콕시, 헤테로아릴록시, 헤테로아릴록시, 치환 헤테로아릴록시, 헤테로시클록시, 치환 헤테로시클록시, 카복실, 카복실알킬, 카복실-치환 알킬, 카복실-시클로알킬, 카복실-치환 시클로알킬, 카복실아릴, 카복실-치환 아릴, 카복실헤테로아릴, 카복실-치환 헤테로아릴, 카복실헤테로시클릭, 카복실-치환 헤테로시클릭, 카복실아미도, 사이아노, 티올, 티오알킬, 치환 티오알킬, 티오아릴, 치환 티오아릴, 티오헤테로아릴, 치환 티오헤테로아릴, 티오시클로알킬, 치환 티오시클로알킬, 티오헤테로시클릭, 치환 티오헤테로시클릭, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 구아니디노, 구아니디노설폰, 할로, 니트로, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 치환 헤테로시클릭, 시클로알콕시, 치환 시클로알콕시, 헤테로아릴록시, 치환 헤테로아릴록시, 헤테로시클록시, 치환 헤테로시클록시, 옥시카보닐아미노, 옥시티오카보닐아미노, -S(O)2-알킬, -S(O)2-치환 알킬, -S(O)2-시클로알킬, -S(O)2-치환 시클로알킬, -S(O)2-알케닐, -S(O)2-치환 알케닐, -S(O)2-아릴, -S(O)2-치환 아릴, -S(O)2-헤테로아릴, -S(O)2-치환 헤테로아릴, -S(O)2-헤테로시클릭, -S(O)2-치환 헤테로시클릭, -OS(O)2-알킬, -OS(O)2-치환 알킬, -OS(O)2-아릴, -OS(O)2-치환 아릴, -OS(O)2-헤테로아릴, -OS(O)2-치환 헤테로아릴, -OS(O)2-헤테로시클릭, -OS(O)2-치환 헤테로시클릭, R이 수소 또는 알킬인 -OSO2-NRR, -NRS(O)2-알킬, -NRS(O)2-치환 알킬, -NRS(O)2-아릴, -NRS(O)2-치환 아릴, -NRS(O)2-헤테로아릴, -NRS(O)2-치환 헤테로아릴, -NRS(O)2-헤테로시클릭, -NRS(O)2-치환 헤테로시클릭, -NRS(O)2-NR-알킬, -NRS(O)2-NR-치환 알킬, -NRS(O)2-NR-아릴, -NRS(O)2-NR-치환 아릴, -NRS(O)2-NR-헤테로아릴, -NRS(O)2-NR-치환 헤테로아릴, -NRS(O)2-NR-헤테로시클릭, R이 수소 또는 알킬인 -NRS(O)2-NR-치환 헤테로시클릭, 모노- 및 디-알킬아미노, 모노- 및 디-(치환 알킬)아미노, 모노- 및 디-아릴아미노, 모노- 및 디-치환 아릴아미노, 모노- 및 디-헤테로아릴아미노, 모노- 및 디-치환 헤테로아릴아미노, 모노- 및 디-헤테로시클릭 아미노, 모노- 및 디-치환 헤테로시클릭 아미노; 알킬, 치환 알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭 및 치환 헤테로시클릭으로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된 다른 치환체들을 가진 비대칭 디-치환 아민 및 Boc, Cbz, 포르밀 등과 같은 통상적인 막음 원자단(blocking groups)에 의해 막음되거나 또는 R이 수소 또는 아릴인 -SO2NRR로 치환 아릴 상의 아미노기로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환체들로 치환된 아릴 기를 말한다.

바람직한 치환체들은 하이드록시, 이실, 아실아미노, 아실록시, 알킬, 치환 알킬, 알콕시, 치환 알콕시, 알케닐, 치환 알케닐, 아미노, 치환 아미노, 아미노아실, 아미노카보닐록시, 아미노카보닐아미노, 아릴, 치환 아릴, 아릴록시, 치환 아릴록시, 시클로알콕시, 치환 시클로알콕시, 헤테로아릴록시, 치환 헤테로아릴록시, 헤테로시클록시, 치환 헤테로시클록시, 카복실, 카복실 에스테르, 사이아노, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 할로, 니트로, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 치환 헤테로시클릭 및 옥시카보닐아미노로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

“아릴록시”는 예들 들면, 페녹시, 나프톡시 등을 포함하는 아릴-O- 기를 말한다.

“치환 아릴록시”는 치환 아릴-O-기를 말한다.

“아릴록시아릴”은 -아릴-O-아릴 기를 말한다.

“치환 아릴록시아릴”은 하나 또는 양 아릴 환이 하이드록시, 아실, 아실아미노, 티오카복실아미노, 아실록시, 알킬, 치환 알킬, 알콕시, 치환 알콕시, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아미디노, 알킬아미디노, 티오아미디노, 아미노, 아미노아실, 아미노카보닐록시, 아미노카복실아미노, 아미노티오카보닐아미노, 아릴, 치환 아릴, 아릴록시, 치환 아릴록시, 시클로알콕시, 치환 시클로알콕시, 헤테로아릴록시, 헤테로아릴록시, 치환 헤테로아릴록시, 헤테로시클록시, 치환 헤테로시클록시, 카복실, 카복실알킬, 카복실-치환 알킬, 카복실-시클로알킬, 카복실-치환 시클로알킬, 카복실아릴, 카복실-치환 아릴, 카복실헤테로아릴, 카복실-치환 헤테로아릴, 카복실헤테로시클릭, 카복실-치환 헤테로시클릭, 카복실아미도, 사이아노, 티올, 티오알킬, 치환 티오알킬, 티오아릴, 치환 티오아릴, 티오헤테로아릴, 치환 티오헤테로아릴, 티오시클로알킬, 치환 티오시클로알킬, 티오헤테로시클릭, 치환 티오헤테로시클릭, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 구아니디노, 구아니디노설폰, 할로, 니트로, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 치환 헤테로시클릭, 시클로알콕시, 치환 시클로알콕시, 헤테로아릴록시, 치환 헤테로아릴록시, 헤테로시클록시, 치환 헤테로시클록시, 옥시카보닐아미노, 옥시티오카보닐아미노, -S(O)2-알킬, -S(O)2-치환 알킬, -S(O)2-시클로알킬, -S(O)2-치환 시클로알킬, -S(O)2-알케닐, -S(O)2-치환 알케닐, -S(O)2-아릴, -S(O)2-치환 아릴, -S(O)2-헤테로아릴, -S(O)2-치환 헤테로아릴, -S(O)2-헤테로시클릭, -S(O)2-치환 헤테로시클릭, -OS(O)2-알킬, -OS(O)2-치환 알킬, -OS(O)2-아릴, -OS(O)2-치환 아릴, -OS(O)2-헤테로아릴, -OS(O)2-치환 헤테로아릴, -OS(O)2-헤테로시클릭, -OS(O)2-치환 헤테로시클릭, R이 수소 또는 알킬인 -OSO2-NRR, -NRS(O)2-알킬, -NRS(O)2-치환 알킬, -NRS(O)2-아릴, -NRS(O)2-치환 아릴, -NRS(O)2-헤테로아릴, -NRS(O)2-치환 헤테로아릴, -NRS(O)2-헤테로시클릭, -NRS(O)2-치환 헤테로시클릭, -NRS(O)2-NR-알킬, -NRS(O)2-NR-치환 알킬, -NRS(O)2-NR-아릴, -NRS(O)2-NR-치환 아릴, -NRS(O)2-NR-헤테로아릴, -NRS(O)2-NR-치환 헤테로아릴, -NRS(O)2-NR-헤테로시클릭, R이 수소 또는 알킬인 -NRS(O)2-NR-치환 헤테로시클릭, 모노- 및 디-알킬아미노, 모노- 및 디-(치환 알킬)아미노, 모노- 및 디-아릴아미노, 모노- 및 디-치환 아릴아미노, 모노- 및 디-헤테로아릴아미노, 모노- 및 디-치환 헤테로아릴아미노, 모노- 및 디-헤테로시클릭 아미노, 모노- 및 디-치환 헤테로시클릭 아미노; 알킬, 치환 알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭 및 치환 헤테로시클릭으로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된 다른 치환체들을 가진 비대칭 디-치환 아민 및 Boc, Cbz, 포르밀 등과 같은 통상적인 막음 원자단(blocking groups)에 의해 막음되거나 또는 R이 수소 또는 아릴인 -SO2NRR로 치환 아릴 상의 아미노기로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환체들로 치환된 아릴록시아릴 기를 말한다.

“아랄콕시”는 아릴-알킬렌-O- 기를 말한다.

“치환 아랄콕시”는 치환 아릴-알킬렌-O- 기를 말한다.

“카복실”은 -COOH 기 및 이들의 약학적으로 수용 가능한 염을 말한다.

“카복실 에스테르”는 -C(O)-O-알킬, -C(O)-O-치환 알킬, -C(O)-O-알케닐, -C(O)-O-치환 알케닐, -C(O)-O-아릴, -C(O)-O-치환 아릴, -C(O)-O-시클로알킬, -C(O)-O-치환 시클로알킬, -C(O)-O-헤테로아릴, -C(O)-O-치환 헤테로아릴, -C(O)-O-헤테로시클릭 및 -C(O)-O-치환 헤테로시클릭을 말한다.

“시클로알케닐”은 단일의 순환 링을 가진 3 내지 8 개의 탄소원자의 순환 알케닐 기를 말한다.

“시클로알콕시”는 -O-시클로알킬 기를 말한다.

“치환 시클로알콕시”는 -O-치환 시클로알킬 기를 말한다.

“시클로알킬”은 예를 들면, 아다만틸, 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로옥틸 등을 포함하는 단일 또는 다중 축합 고리를 가진 3 내지 12개의 탄소 원자의 시클릭 알킬 기를 말한다. 바람직하게는, “시클로알킬”은 단일 순환 고리를 가진 3 내지 8 개의 탄소원자를 가진 시클릭 알킬 기를 말한다.

“치환 시클로알킬” 및 “치환 시클로알케닐”은 옥소 (=O), 티옥소 (=S), 알콕시, 치환 알콕시, 아실, 아실아미노, 티오카보닐아미노, 아실록시, 아미노, 아미디노, 알킬아미디노, 티오아미디노, 아미노아실, 아미노카보닐아미노, 아미노티오카르보닐아미노, 아미노카르보닐록시, 아릴, 치환 아릴, 아릴록시, 치환 아릴록시, 아릴록시아릴, 치환 아릴록시아릴, 할로겐, 하이록실, 사이아노, 니트로, 카복실, 카복실알킬, 카복실-치환 알킬, 카복실-시클로알킬, 카복실-치환 시클로알킬, 카복실아릴, 카복실-치환 아릴, 카복실헤테로아릴, 카복실-치환 헤테로아릴, 카복실헤테로시클릭, 카복실-치환 헤테로시클릭, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 구아니디노, 구아니디노설폰, 티올, 티오알킬, 치환 티오알킬, 티오아릴, 치환 티오아릴, 티오시클로알킬, 치환 티오시클로알킬, 티오헤테로아릴, 치환 티오헤테로아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 치환 헤테로시클릭, 시클로알콕시, 치환 시클로알콕시, 헤테로아릴록시, 치환 헤테로아릴록시, 헤테로시클록시, 치환 헤테로시클록시, 옥시카보닐아미노, 옥시티오카보닐아미노, -S(O)2-알킬, -S(O)2-치환 알킬, -S(O)2-아릴, -S(O)2-치환 아릴, -S(O)2-헤테로아릴, -S(O)2-치환 헤테로아릴, -S(O)2-헤테로시클릭, -S(O)2-치환 헤테로시클릭, R이 수소 또는 알킬인 -OSO2-NRR, -NRS(O)2-알킬, -NRS(O)2-치환 알킬, -NRS(O)2-아릴, -NRS(O)2-치환 아릴, -NRS(O)2-헤테로아릴, -NRS(O)2-치환 헤테로아릴, -NRS(O)2-헤테로시클릭, -NRS(O)2-치환 헤테로시클릭, -NRS(O)2-NR-알킬, -NRS(O)2-NR-치환 알킬, -NRS(O)2-NR-아릴, -NRS(O)2-NR-치환 아릴, -NRS(O)2-NR-헤테로아릴, -NRS(O)2-NR-치환 헤테로아릴, -NRS(O)2-NR-헤테로시클릭, R이 수소 또는 알킬인 -NRS(O)2-NR-치환 헤테로시클릭, 모노- 및 디-알킬아미노, 모노- 및 디-(치환 알킬)아미노, 모노- 및 디-아릴아미노, 모노- 및 디-치환 아릴아미노, 모노- 및 디-헤테로아릴아미노, 모노- 및 디-치환 헤테로아릴아미노, 모노- 및 디-헤테로시클릭 아미노, 모노- 및 디-치환 헤테로시클릭 아미노; 알킬, 치환 알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭 및 치환 헤테로시클릭으로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된 다른 치환체들을 가진 비대칭 디-치환 아민 및 Boc, Cbz, 포르밀 등과 같은 통상적인 막음 원자단(blocking groups)에 의해 막음되거나 또는 -SO2-알킬, -SO2-치환 알킬, -SO2-알케닐, -SO2-치환 알케닐, -SO2-시클로알킬, -SO2-치환 시클로알킬, -SO2-아릴, -SO2-치환 아릴, -SO2-헤테로아릴, -SO2-치환 헤테로아릴, -SO2-헤테로시클릭, -SO2-치환 헤테로시클릭 및 R이 수소 또는 알킬인 SO2NRR로 치환 알키닐/치환 알키닐 기로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5 개의 치환체를 가진, 바람직하게는 3 내지 8 개의 탄소원자를 가진 시클로알킬 또는 시클로알케닐 기를 말한다.

바람직한 치환체들은 옥소 (=O), 티옥소 (=S), 알콕시, 치환 알콕시, 아실, 아실아미노, 아실록시, 아미노, 치환 아미노, 아미노아실, 아미노카보닐아미노, 아미노카복실옥시, 아릴, 치환 아릴, 아릴록시, 치환 아릴록시, 카복실, 카복실 에스테르, 사이아노, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 시클로알킬록시, 치환 시클로알킬록시, 할로, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로아릴록시, 치환 헤테로아릴록시, 헤테로시클릭, 치환 헤테로시클릭, 하이드록실, 니트로 및 옥시카르보닐아미노로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

“구아니디노”는 각각의 R이 수소 및 알킬인 -NRC(=NR)NRR, -NRC(=NR)NR-알킬, -NRC(=NR)NR-치환 알킬, -NRC(=NR)NR-알케닐, -NRC(=NR)NR-치환 알케닐, -NRC(=NR)NR-알키닐, -NRC(=NR)NR-치환 알키닐, -NRC(=NR)NR-아릴, -NRC(=NR)NR-치환 아릴, -NRC(=NR)NR-시클로알킬, -NRC(=NR)NR-헤테로아릴, -NRC(=NR)NR-치환 헤테로아릴, -NRC(=NR)NR-헤테로시클릭 및 -NRC(=NR)NR-치환 헤테로시클릭 기를 말하며, 여기서 아미노 기의 하나는 Boc, Cbz, 포르밀 등과 같은 통상적인 막음 원자단에 의해 막음되고, 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭 및 치환 헤테로시클릭은 여기서 정의된 것과 같다.

“구아니디노설폰”은 각각의 R이 수소 및 알킬인 -NRC(=NR)NRSO2-알킬, -NRC(=NR)NRSO2-치환 알킬, -NRC(=NR)NRSO2-알케닐, -NRC(=NR)NRSO2-치환 알케닐, -NRC(=NR)NRSO2-알키닐, -NRC(=NR)NRSO2-치환 알키닐, -NRC(=NR)NRSO2-아릴, -NRC(=NR)NRSO2-치환 아릴, -NRC(=NR)NRSO2-시클로알킬, -NRC(=NR)NRSO2-치환 시클로알킬, -NRC(=NR)NRSO2-헤테로아릴 및 -NRC(=NR)NRSO2-치환 헤테로아릴, -NRC(=NR)NRSO2-헤테로시클릭 및 -NRC(=NR)NRSO2-치환 헤테로시클릭 기를 말하며, 여기서 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭 및 치환 헤테로시클릭은 여기서 정의된 바와 같다.

“할로” 또는 “할로겐”은 플루오로, 클로로, 브로모, 및 아이오도, 바람직하게는 플로오로, 클로로 또는 브로모를 말한다.

“헤테로아릴”은 고리 또는 이들의 산화물 내에 2 내지 10 개의 탄소 원자 및 고리 내에 산소, 질소 및 황으로 우리어진 그룹으로부터 1 내지 4 개의 헤테로 원자를 가진 방향족 카복실릭 기를 말한다. 이러한 헤테로아릴 기는 단일 고리 (예를 들면, 피리딜 또는 푸릴) 또는 다중 축합 고리 (예를 들면, 인도리지닐 또는 벤조티에닐)을 가질 수 있으며, 이 경우 부착점이 방향족 고리 원자를 통하는 경우 축합 고리의 1 이상은 방향족이거나 그렇지 않을 것이다. 또한,헤테로아릴 기의 헤테로 원자들은 산화될 수 있다. 즉, 피리딘 N-옥사이드 또는 1,1-디옥소-1,2,5-티아디아졸 등을 형성할 것이다. 뿐만 아니라, 고리의 탄소원자들은 옥소 (=O)로 치환될 수 있다. 바람직한 헤테로아릴은 피리딜, 피로릴, 인도릴, 푸릴, 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐, 1-옥소-1,2,5-티아디아조릴 및 1,1-디옥소-1,2,5-티아디아조릴로 치환될 수 있다.

“치환 헤테로아릴”은 하이드록시, 아실, 아실아미노, 티오카복실아미노, 아실록시, 알킬, 치환 알킬, 알콕시, 치환 알콕시, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아미디노, 알킬아미디노, 티오아미디노, 아미노, 아미노아실, 아미노카보닐록시, 아미노카복실아미노, 아미노티오카보닐아미노, 아릴, 치환 아릴, 아릴록시, 치환 아릴록시, 시클로알콕시, 치환 시클로알콕시, 헤테로아릴록시, 헤테로아릴록시, 치환 헤테로아릴록시, 헤테로시클록시, 치환 헤테로시클록시, 카복실, 카복실알킬, 카복실-치환 알킬, 카복실-시클로알킬, 카복실-치환 시클로알킬, 카복실아릴, 카복실-치환 아릴, 카복실헤테로아릴, 카복실-치환 헤테로아릴, 카복실헤테로시클릭, 카복실-치환 헤테로시클릭, 카복실아미도, 사이아노, 티올, 티오알킬, 치환 티오알킬, 티오아릴, 치환 티오아릴, 티오헤테로아릴, 치환 티오헤테로아릴, 티오시클로알킬, 치환 티오시클로알킬, 티오헤테로시클릭, 치환 티오헤테로시클릭, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 구아니디노, 구아니디노설폰, 할로, 니트로, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 치환 헤테로시클릭, 시클로알콕시, 치환 시클로알콕시, 헤테로아릴록시, 치환 헤테로아릴록시, 헤테로시클록시, 치환 헤테로시클록시, 옥시카보닐아미노, 옥시티오카보닐아미노, -S(O)2-알킬, -S(O)2-치환 알킬, -S(O)2-시클로알킬, -S(O)2-치환 시클로알킬, -S(O)2-알케닐, -S(O)2-치환 알케닐, -S(O)2-아릴, -S(O)2-치환 아릴, -S(O)2-헤테로아릴, -S(O)2-치환 헤테로아릴, -S(O)2-헤테로시클릭, -S(O)2-치환 헤테로시클릭, -OS(O)2-알킬, -OS(O)2-치환 알킬, -OS(O)2-아릴, -OS(O)2-치환 아릴, -OS(O)2-헤테로아릴, -OS(O)2-치환 헤테로아릴, -OS(O)2-헤테로시클릭, -OS(O)2-치환 헤테로시클릭, R이 수소 또는 알킬인 -OSO2-NRR, -NRS(O)2-알킬, -NRS(O)2-치환 알킬, -NRS(O)2-아릴, -NRS(O)2-치환 아릴, -NRS(O)2-헤테로아릴, -NRS(O)2-치환 헤테로아릴, -NRS(O)2-헤테로시클릭, -NRS(O)2-치환 헤테로시클릭, -NRS(O)2-NR-알킬, -NRS(O)2-NR-치환 알킬, -NRS(O)2-NR-아릴, -NRS(O)2-NR-치환 아릴, -NRS(O)2-NR-헤테로아릴, -NRS(O)2-NR-치환 헤테로아릴, -NRS(O)2-NR-헤테로시클릭, R이 수소 또는 알킬인 -NRS(O)2-NR-치환 헤테로시클릭, 모노- 및 디-알킬아미노, 모노- 및 디-(치환 알킬)아미노, 모노- 및 디-아릴아미노, 모노- 및 디-치환 아릴아미노, 모노- 및 디-헤테로아릴아미노, 모노- 및 디-치환 헤테로아릴아미노, 모노- 및 디-헤테로시클릭 아미노, 모노- 및 디-치환 헤테로시클릭 아미노; 알킬, 치환 알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭 및 치환 헤테로시클릭으로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된 다른 치환체들을 가진 비대칭 디-치환 아민 및 Boc, Cbz, 포르밀 등과 같은 통상적인 막음 원자단(blocking groups)에 의해 막음되거나 또는 R이 수소 또는 아릴인 -SO2NRR로 치환 아릴 상의 아미노기로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환체들로 치환된 헤테로아릴 기를 말한다.

바람직하게는, 치환체들은 치환 아릴에서 바람직하게 정의된 것들로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

“헤테로아릴록시”는 -O-헤테로아릴을 말하며, “치환 헤테로아릴록시”는 -O-치환 헤테로아릴 기를 말한다.

“헤테로아랄콕시”는 헤테로아릴-알킬렌-O-기를 말한다.

“치환 헤테로아랄콕시”는 치환 헤테로아릴-알킬렌-O- 기를 말한다.

“헤테로시클” 또는 “헤테로시클릭”은 단일 고리 또는 다중 축합 고리를 가진, 질소, 황 또는 산소로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1 내지 10 개의 탄소원자 및 1 내지 4 개의 헤테로 원자 포화 또는 불포화 기를 말하며, 여기의 융합된 고리 시스템에서 1 이상의 고리가 아릴 이러거나 헤테로아릴일 수 있다.

“치환 헤테로시클릭”은 옥소 (=O), 티오옥소 (=S), 알콕시, 치환 알콕시, 아실, 아실아미노, 티오카복실아미노, 아실록시, 알킬, 치환 알킬, 알콕시, 치환 알콕시, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아미디노, 알킬아미디노, 티오아미디노, 아미노, 아미노아실, 아미노카보닐록시, 아미노카복실아미노, 아미노티오카보닐아미노, 아릴, 치환 아릴, 아릴록시, 치환 아릴록시, 시클로알콕시, 치환 시클로알콕시, 헤테로아릴록시, 헤테로아릴록시, 치환 헤테로아릴록시, 헤테로시클록시, 치환 헤테로시클록시, 카복실, 카복실알킬, 카복실-치환 알킬, 카복실-시클로알킬, 카복실-치환 시클로알킬, 카복실아릴, 카복실-치환 아릴, 카복실헤테로아릴, 카복실-치환 헤테로아릴, 카복실헤테로시클릭, 카복실-치환 헤테로시클릭, 카복실아미도, 사이아노, 티올, 티오알킬, 치환 티오알킬, 티오아릴, 치환 티오아릴, 티오헤테로아릴, 치환 티오헤테로아릴, 티오시클로알킬, 치환 티오시클로알킬, 티오헤테로시클릭, 치환 티오헤테로시클릭, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 구아니디노, 구아니디노설폰, 할로, 니트로, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 치환 헤테로시클릭, 시클로알콕시, 치환 시클로알콕시, 헤테로아릴록시, -C(O)O-아릴, -C(O)O-치환 아릴, 헤테로시클리록시, 치환 헤테로시클록시, 옥시카보닐아미노, 옥시티오카보닐아미노, -S(O)2-알킬, -S(O)2-치환 알킬, -S(O)2-시클로알킬, -S(O)2-치환 시클로알킬, -S(O)2-알케닐, -S(O)2-치환 알케닐, -S(O)2-아릴, -S(O)2-치환 아릴, -S(O)2-헤테로아릴, -S(O)2-치환 헤테로아릴, -S(O)2-헤테로시클릭, -S(O)2-치환 헤테로시클릭, -OS(O)2-알킬, -OS(O)2-치환 알킬, -OS(O)2-아릴, -OS(O)2-치환 아릴, -OS(O)2-헤테로아릴, -OS(O)2-치환 헤테로아릴, -OS(O)2-헤테로시클릭, -OS(O)2-치환 헤테로시클릭, R이 수소 또는 알킬인 -OSO2-NRR, -NRS(O)2-알킬, -NRS(O)2-치환 알킬, -NRS(O)2-아릴, -NRS(O)2-치환 아릴, -NRS(O)2-헤테로아릴, -NRS(O)2-치환 헤테로아릴, -NRS(O)2-헤테로시클릭, -NRS(O)2-치환 헤테로시클릭, -NRS(O)2-NR-알킬, -NRS(O)2-NR-치환 알킬, -NRS(O)2-NR-아릴, -NRS(O)2-NR-치환 아릴, -NRS(O)2-NR-헤테로아릴, -NRS(O)2-NR-치환 헤테로아릴, -NRS(O)2-NR-헤테로시클릭, R이 수소 또는 알킬인 -NRS(O)2-NR-치환 헤테로시클릭, 모노- 및 디-알킬아미노, 모노- 및 디-(치환 알킬)아미노, 모노- 및 디-아릴아미노, 모노- 및 디-치환 아릴아미노, 모노- 및 디-헤테로아릴아미노, 모노- 및 디-치환 헤테로아릴아미노, 모노- 및 디-헤테로시클릭 아미노, 모노- 및 디-치환 헤테로시클릭 아미노; 알킬, 치환 알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭 및 치환 헤테로시클릭으로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된 다른 치환체들을 가진 비대칭 디-치환 아민 및 Boc, Cbz, 포르밀 등과 같은 통상적인 막음 원자단(blocking groups)에 의해 막음되거나 또는 R이 수소 또는 아릴인 -SO2NRR로 치환 아릴 상의 아미노기로 이루어진 그룹으로부터 선택된 1 내지 3개의 치환체들로 치환된 헤테로시클릭 기를 말한다.

바람직하게는, 치환체들은 치환 시클로알킬에서 정의된 바람직한 치환체들로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

헤테로시클 및 헤테로아릴의 예로는, 여기에 한정되지 않지만 아케티딘, 피리롤, 이미다졸, 피라졸, 피리딘, 피라진, 피리미딘, 피리다진, 인돌리진, 이소인돌, 인돌, 디하이드로인돌, 인다졸, 푸린, 퀴놀리진, 이소퀴놀린, 퀴놀린, 프탈라진, 나프틸피린딘, 퀴녹살린, 퀴나졸린, 시놀린, 프레리딘, 카르바졸, 카르볼린, 페난티리딘, 아크리딘, 페난트롤린, 이소티아졸, 페나진, 이속사졸, 페녹사진, 페노티아진, 이미다졸리딘, 이미닺ㄹ린, 피페리딘, 인돌린, 프탈리미드, 1,2,3,4-테트라하이드로이소퀴놀린, 4,5,6,7-테트라하이드로벤조[b]티오펜, 티이졸, 티아졸리딘, 티오펜, 벤조[b]티오펜, 몰포리노, 몰포리닐, 티오몰포리노, 티오몰포리닐 (티아몰포리닐라고도 불림), 피페리디닐, 피로리딘, 테트라하이드로푸리닐 등을 포함한다.

“헤테로시클록시”는 -O-헤테로시클릭 기를 말하며, “치환 헤테로시클록시”는 -O-치환 헤테로시클릭을 말한다.

“N,N-디메틸카바밀록시”는 -OC(O)N(CH3)2 기를 말한다.

“옥소”는 (=O)를 말한다.

“옥시알킬렌”은 Rd가 알킬인 -OCH2CHRd를 말한다.

“옥시카보닐아미노”는 R이 수소, 알킬이며, 각 R이 질소원자와 결합하여 헤테로시클릭 또는 치환 헤테로시클릭 링을 형성하는 -OC(O)NH2, -OC(O)NRR, -OC(O)NR-알킬, -OC(O)NR-치환 알킬, -OC(O)NR-알케닐, -OC(O)NR-치환 알케닐, -OC(O)NR-알키닐, -OC(O)NR-치환 알키닐, -OC(O)NR-시클로알킬, -OC(O)NR-치환 시클로알킬, -OC(O)NR-아릴, -OC(O)NR-치환 아릴, -OC(O)NR-헤테로아릴, -OC(O)NR-치환 헤테로아릴, -OC(O)NR-헤테로시클릭 및 -OC(O)NR-치환 헤테로시클릭 기를 말하며, 여기서 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭 및 치환 헤테로시클릭은 여기서 정의된 것과 같다.

“옥시티오카르보닐아민”은 R이 수소, 알킬이며, 각 R이 질소원자와 결합하여 헤테로시클릭 또는 치환 헤테로시클릭 링을 형성하는 -OC(S)NH2, -OC(S)NRR, -OC(S)NR-알킬, -OC(S)NR-치환 알킬, -OC(S)NR-알케닐, -OC(S)NR-치환 알케닐, -OC(S)NR-알키닐, -OC(S)NR-치환 알키닐, -OC(S)NR-시클로알킬, -OC(S)NR-치환 시클로알킬, -OC(S)NR-아릴, -OC(S)NR-치환 아릴, -OC(S)NR-헤테로아릴, -OC(S)NR-치환 헤테로아릴, -OC(S)NR-헤테로시클릭 및 -OC(S)NR-치환 헤테로시클릭 기를 말하며, 여기서 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭 및 치환 헤테로시클릭은 여기서 정의된 것과 같다.

"티오알킬“은 -S-알킬 기를 말한다.

“치환 티오알킬”은 -S-치환 알킬 기를 말한다.

“티오아미디노”는 R이 수소 또는 알킬인 RSC(=NH)-를 말한다.

“티오아릴”은 -S-아릴을 말하며, “치환 티오아릴”은 -S-치환 아릴기를 말한다.

“티오카보닐아미노”는 각 R이 수소, 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 아릴, 치환 아릴, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 치환 헤테로시클릭으로 이루어진 그룹으로부터 선택되고, 질소 원자와 함께 헤테로시클릭 또는 치환 헤테로시클릭을 형성하도록 결합되는 -C(S)NRR 기를 말하며, 여기서 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 알키닐, 치환 알키닐, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 아릴, 치환 아릴, 헤테로아릴, 치환 헤테로아릴, 헤테로시클릭 및 치환 헤테로시클릭은 여기서 정의된 것과 같다.

“티오시클로알킬”은 -S-시클로알킬기를 말한다.

“치환 티오시클로알킬”은 -S-치환 시클로알킬기를 말한다.

“티오헤테로아릴”은 -S-헤테로아릴기를 말하고, “치환 티오헤테로아릴”은 -S-치환 헤테로아릴기를 말한다.

“티오헤테로시클릭”은 -S-헤테로시클릭기를 말하고, “치환 티오헤테로시클릭”은 -S-치환 헤테로시클릭기를 말한다.

“티올”은 -SH기를 말한다.

“선택적 치환”은 열거된 기(group)가 치환되지 않거나 치환될 수 있는 것을 의미한다.

"약학적으로 수용가능한 염“은 본 발명 화합물의 생물학적 효능과 특성을 유지하고, 생물학적으로나 다른 경우에도 바람직한 염을 말한다. 많은 경우에 본 발명의 화합물은 아미노 및/또는 카복실기 또는 이에 유사한 기의 존재 하에 산 및/또는 염기 염을 형성할 수 있다.

약학적으로 수용가능한 염기 첨가 염은 무기 및 유기 염으로부터 제조될 수 있다. 무기염으로부터 분리된 염은 예를 들어, 나트륨, 칼륨, 리튬, 암모니아, 칼슘 및 마그네슘염을 포함하고 여기에 제한되지 않고, 알킬 아민, 디알킬 아민, 트리알킬 아민, 치환 알킬 아민, 디(치환 알킬) 아민, 트리 (치환 알킬) 아민, 알케닐 아민, 디알케닐 아민, 트리아케닐 아민, 치환 알케닐 아민, 디(치환 알케닐) 아민, 트리(치환 알케닐) 아민, 시클로알킬 아민, 디(시클로알킬)아민, 트리(시클로알킬) 아민, 치환 시클로알킬 아민, 이치환 시클로알킬 아민, 삼치환 시클로알킬 아민, 시클로알케닐아민, 디(시클로알케닐)아민, 트리(시클로알케닐)아민, 치환 시클로알케닐 아민, 이치환 시클로알케닐 아민, 삼치환 시클로알케닐 아민, 아릴 아민, 디아릴 아민, 트리아릴 아민, 헤테로아릴 아민, 디헤테로아릴 아민, 트리헤테로아릴 아민, 헤테로시클릭 아민, 디헤테로시클릭 아민, 트리헤테로시클릭 아민, 혼합 디- 및 트리-아민과 같은 일차, 이차 및 삼차 아민의 염을 포함하며, 여기서 아민의 적어도 2 개의 치환체는 서로 다르며 알킬, 치환 알킬, 알케닐, 치환 알케닐, 시클로알킬, 치환 시클로알킬, 시클로알케닐, 치환 시클로알케닐, 아릴, 헤테로아릴, 헤테로시클릭 등으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 또한, 2 또는 3개의 치환체들이 아미노 니트로젠과 함께 헤테로시클릭 또는 헤테로아릴 기를 형성하는 아민이 포함된다.

적절한 아민의 예를 예시하면, 이소프로필아민, 트리메틸 아민, 디에틸 아민, 트리(이소-프로필)아민, 트리(n-프로필)아민, 에탄올아민, 2-디메틸아미노에탄올, 트로메타민, 리신, 아르기닌, 히스티딘, 카페인, 프로카인, 히드라바민, 콜린, 베타인, 에틸렌디아민, 글루코사민, N-알킬글루카민, 테오브로민, 푸린, 피페라진, 피레리딘, 모르폴린, N-에틸피페리딘 등을 포함한다. 또한, 다른 카복실 산 유도체, 예를 들면 카르복사미드, 낮은 알킬 카르복사미드, 디알킬 카르복사미드 등을 포함하는 카복실릭 애시드 아미드(carboxylic acid amides)가 이 본 발명의 구현에 유용하게 사용될 수 있다.

약학적으로 수용가능한 산 추가 염은 무기 및 유기 산으로부터 제조될 수 있다. 무기산으로부터 유래한 염들은 하이드로클로릭 애시드, 하이드로브로믹 애시드, 설푸릭 애시드, 니트릭 애시드, 포스포릭 애시드 등을 포함한다. 유기산으로부터 유래한 염은 아세틱 애시드, 프로피오닉 애시드, 글리콜릭 애시드, 피루빅 애시드, 옥살릭 애시드, 말릭 애시드, 말론익 애시드, 석시닉 애시드, 말렉익 애시드, 푸마릭 애시드, 탈타릭 애시드, 시트릭 애시드, 벤조익 애시드, 신나믹 애시드, 만델릭 애시드, 메탄설포닉 애시드, 에탄설포닉 애시드, p-톨루엔-설포닉 애시드, 살리실릭 애시드 등을 포함한다.

“약학적으로 수용가능한 양이온”은 약학적으로 수용가능한 염의 양이온을 의미한다.

화합물 제조

본 발명 화합물은 다음의 일반적인 방법과 과정을 이용하여 용이하게 입수 가능한 시작 물질로부터 제조될 수 있다. 전형적이거나 바람직한 공정 조건 (즉, 반응 온도, 시간, 반응물질의 몰비, 용매, 압력 등)이 주어지고, 또한 다른 언급이 없다면 다른 공정 조건들이 사용될 수 있는 것으로 이해될 것이다. 최적 반응 조건은 사용된 특별한 반웅물질 또는 용매에 따라 달라질 수 있으며, 이러한 조건들은 이 기술 분야의 숙련자에 의해 통상의 최적 과정에서 결정될 수 있다.

뿐만 아니라, 이 기술분야의 숙련자에게 명백한 바와 같이, 통상적인 보호 기 (protecting groups)가 어떤 작용기가 원하지 않는 반응을 하지 못하게 하는데 필요할 수 있다. 보호를 위한 적절한 조건뿐 아니라 다양한 작용기에 적합한 보호기 및 특정 작용기의 탈보호는 이 기술 분야에 공지되어 있다. 예를 들면, 수많은 보호기들이 T. W. Greene 및 G. M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, Second Edition, Wiley, New York, 1991 및 여기에 언급된 문헌들에 설명되어 있다.

더욱이, 본 발명의 화합물은 전형적으로 1 이상의 키랄 중심을 가질 것이다. 따라서 원한다면, 이러한 화합물은 순수한 입체이성질체, 즉 각각의 에난티오머 또는 부분이성질체, 또는 입체이성질체가 많은 혼합물로 제조되거나 분리될 수 있다. 이러한 모든 입체이성질체 ( 및 입체이성질체 강화 혼합물)은 다른 지시가 없는 한 본 발명의 범위 내에 포함된다. 수순 입체이성질체 (또는 입체이성질체 강화 혼합물)은 예를 들면, 이 기술 분야에서 공지된 광학적으로 활성인 시작 물질 또는 입체 선별 반응물질을 이용하여 제조될 수 있다. 선택적으로, 이러한 화합물의 라세미체 혼합물은 예를 들면, 키랄 컬럼 크로마토그래피, 키랄 분할제 등을 사용하여 분리될 수 있다.

다음의 화합물 제조에 따라, R1, R2,R3,R5,R6 및 R7 은 식 I, IA, II 및 IIA를 위해 여기에서 정의한 바와 같다. 뿐만 아니라, 다음의 화합물 제조에 따라 R1은 다음에 대등하다:

식 IB를 위해 여기에 정의된 바와 같이 Ar1,

식 II 및 IIA를 위해 여기에 정의된 바와 같이 R21 및

식 IIB를 위해 여기에 정의된 바와 같이 Ar21;

R2는 다음에 대등하다:

식 IB를 위해 여기에 정의된 바와 같이 R12,

식 II 및 IIA를 위해 여기에 정의된 바와 같이 R22 및

식 IIB를 위해 여기에 정의된 바와 같이 R32;

R3은 다음에 대등하다:

식 IB를 위해 여기에 정의된 바와 같이 R13,

식 II 및 IIA를 위해 여기에 정의된 바와 같이 R23 및

식 IIB를 위해 여기에 정의된 바와 같이 R33;

R5은 다음에 대등하다:

식 II 및 IIA를 위해 여기에 정의된 바와 같이 R25; 및

R6은 다음에 대등하다:

식 I 및 II를 위해 여기에 정의된 바와 같이 OH,

식 IB를 위해 여기에 정의된 바와 같이 OR14

식 IIA를 위해 여기에 정의된 바와 같이 R26 및

식 IIB를 위해 여기에 정의된 바와 같이 OR34;

바람직한 합성 방법에서, Q가 -C-(O)NR7-인 식 I, IA, II 및 IIA의 화합물 및 식 IB, IC 및 IIB의 화합물은 식 III의 아미노산을

식 IV의 술포닐 클로라이드와 최초로 결합시켜 제조하여

식 V의 N-술포닐 아미노산을 제공한다.

이 반응은 식 III의 아미노산을 디클로로메탄 등과 같은 불활성 희석제에서 술포닐 클로라이드 IV와 적어도 1, 바람직하게는 약 1.1 내지 약 2 당량(equivalent)과 반응시킴으로써 수행된다. 일반적으로, 이 반응은 약 -70℃에서 약 40℃의 온도범위에서 약 1 내지 약 24시간 동안 수행된다. 바람직하게는, 이 반응은 반응 동안에 발생한 산소를 제거할 수 있는 적절한 염기의 존재하에서 수행된다. 적절한 염기들은 예를 들면, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린 등과 같은 tert 아민을 포함한다. 선택적으로, 이 반응은 염기로 소듐 하이드록사이드와 같은 알카리 수용액을 사용하는 Schotten-Baumann type 조건 하에서 수행될 수 있다. 이 반응의 종결 시에 중화, 추출, 침전, 크로마토그래피, 정제 등을 포함하는 통상적인 방법에 의해 결과물인 N-술포닐 아미노 애시드 V가 수득된다.

상기 반응에서 사용된 식III의 아미노산은 공지된 화합물이나 또는 통상적인 합성 과정으로 공지된 화합물로부터 제조될 수 있는 화합물일 수 있다. 이 반응에 사용된 적절한 아미노산은 여기에 한정되지 않지만, L-프로린, 트랜스-4-하이드록시-L-프로린, 시스-4-하이드록시-L-프로린, 트랜스-3-페닐-L-프로린, 시스-3-페닐-L-프로린, L-(2-메틸)프로린, L-피페콜리닉 애시드, L-아제티딘-2-카복실산, L-인돌린-2-카복실산, L-1,2,3,4,-테트라하이드로이소퀴놀린-3-카복실산, L-티아졸리딘-4-카복실산, L-(5,5,-디메틸)티아졸리딘-4-카복실산, L-티아모르폴린-3-카복실산, 글리신, 2-테르트-부틸글리신, D,L-페닐글리신, L-알라닌, α-메틸아민, N-메틸-L-페닐알라닌, L-디페닐알라닌, 살코신, D,L-페닐살코신, L-아스팔틱 애시드 β-테르트-부틸 에스테르, L-글루타믹 애시드 γ-테르트-부틸 에스테르, L-(O-벤질)세린, 1-아미노시클로프로판카복실애시드, 1-아미노시클로부탄카복실애시드, 1-아미노시클로펜탄카복실애시드(시클로류신) 1- 아미노시클로헥산카복실애시드, L-세린 등을 포함한다. 원한다면, 메틸 에스테르, 에틸 에스테르 등과같은 식 III의 아미노산에 대응하는 카복실애시드 에스테르는 상기 반응에서 술포닐 클로라이드 IV과 사용될 수 있다. 카복실산에 대한 에스테르 기의 후속적인 가수분해는 통상의 반응물질과 조건들, 즉 메탄/물과 같은 불활성 희석제 내에서 알칼리 메탈 하이드록사이드로 처리하여 N-술포닐 아미노산 V를 제공한다.

유사하게, 상기 반응에서 사용된 식 IV의 술포닐 클로라이드는 공지된 화합물이거나 통상의 합성 과정으로 공지된 화합물로부터 제조될 수 있는 화합물일 수 있다. 이러한 화합물들은 포스포러스 트리클로라이드 및 포스포러스 펜타클로라이드를 사용하여 대응하는 설폰산으로부터, 즉 식 R1-SO3H의 화합물로부터 제조된다. 이 반응은 일반적으로 설폰산을 포스포러스 트리클로라이드 및 포스포러스 펜타클로라이드의 약 2~5 몰랄 당량과 함께 디클로로메탄과 같은 순(neat) 용매 또는 불활성 용매에서 약 0~80℃의 온도범위에서 약 1~48 시간동안에 반응시킴으로써 술포닐 클로라이드를 제공하게 된다. 선택적으로, 식 IV의 술포닐 클로라이드는 통상의 반응 조건으로 티올을 클로린(Cl2)과 물을 반응시킴으로써 대응하는 티올 화합물로부터 즉, 식 R1-SH의 화합물로부터 제조될 수 있다.

본 발명에 적절히 사용되는 술포닐 클로라이드의 예는 여기에 한정되지는 않지만, 메탄술포닐 클로라이드, 2-프로판술포닐 클로라이드, 1-부탄술포닐 클로라이드, 벤젠술포닐 클로라이드, 1-나프탈렌술포닐 클로라이드, 2-나프탈렌술포닐 클로라이드, p-톨루엔술포닐 클로라이드, α-톨루엔술포닐 클로라이드, 4-아세트아미도벤젠술포닐 클로라이드, 4-아미디노벤젠술포닐 클로라이드, 4-테르트-부틸벤젠술포닐 클로라이드, 4-브로모벤젠술포닐 클로라이드, 2-카복실벤젠술포닐 클로라이드, 4-시아노벤젠술포닐 클로라이드, 3,4-디클로로벤젠술포닐 클로라이드, 3,5,-디클로로벤젠술포닐 클로라이드, 3,4-디메톡시벤젠술포닐 클로라이드, 3,5-디트리플로로메틸벤젠술포닐 클로라이드, 4-플로로벤젠술포닐 클로라이드, 4-메톡시벤젠술포닐 클로라이드, 2-메톡시카보닐벤젠술포닐 클로라이드, 4-메틸아미도벤젠술포닐 클로라이드, 4-니트로벤젠술포닐 클로라이드, 4-티오아미도벤젠술포닐 클로라이드, 4-트리플로로메틸벤젠술포닐 클로라이드, 4-트리플로로메톡시벤젠술포닐 클로라이드, 2,4,6-트리메틸벤젠술포닐 클로라이드, 2-페닐에탄술포닐 클로라이드, 2-티오페네술포닐 클로라이드, 5-클로로-2-티오페네술포닐 클로라이드, 2,5-디클로로-4-티오페네술포닐 클로라이드, 2-티아졸술포닐 클로라이드, 2-메틸-4-티아졸술포닐 클로라이드, 1-메틸-4-이미다졸술포닐 클로라이드, 1-메틸-4-피라졸술포닐 클로라이드, 5-클로로-1,3-디메틸-4-피라졸술포닐 클로라이드, 3-피리딘술포닐 클로라이드, 2-피리미딘술포닐 클로라이드 등을 포함한다. 원한다면, 상기 반응에서 식 V의 N-술포닐 아미노산을 형성하기 위하여 술포닐 플로로 술포닐 프로마이드 또는 무수 설폰산이 설포니 클로라이드의 존재하에서 사용될 수 있다.

식 V의 중간체 N-술포닐 아미노산은 클로로, 브로모, 아이오도(iodo), 메실레이트 토실레이드 등과 같은 식 L(R3)CHCOORy(여기서 L은 이탈기)의 카복실산 유도체 및 수소 또는 알킬기와 함께 식 VI의 설폰아미드를 반응시킴으로써 또한 제조될 수 있다.

이 반응은 전형적으로 설폰아미드 VI을 카복실산 유도체의 적어도 1, 바람직하게는 1.1 ~ 2 당량과 함께 DMF와 같은 불활성 희석제, 트리에틸아민과 같은 적절한 염기의 존재 하에서 약 24℃~약 37℃의 온도범위, 약 0.5 ~ 4 시간동안 반응함으로써 수행된다. 이 반응은 Zuckermann et al,, J. Am. Chem , Soc ., 1992, 114, 10646-10647에서 더 구체적으로 설명되어 있다. 본 반응에 사용되는 바람직한 카복실산 유도체는 tert-부틸 브로모아세테이트 등과 같은 α-클로로 및 α-브로모카복실산 에스테르이다. 카복실산 에스테르가 본 발명에 사용되는 경우 에스테르기는 식 V의 N-술포닐 아미노산을 제공하기 위해 통상의 공정을 사용하여 후속적으로 가수분해된다.

본 발명의 화합물은 식 V의 중간체 N-술포닐 아미노산을 식 VII의 아미노산 유도체와 결합시킴으로써 제도된다.

이 결합 반응은 카보디이미드, BOP 시약 (벤조트리아졸-1-이록시(yloxy)-트리(디메틸아미노)포스포니움 헥사플로로포스포네이트) 등과 같은 공지의 결합 반응물질을 사용함으로써 수행된다. 적절한 카보디이미드는 예를 들면, 디시클로헥실카보디이미드(DCC) 1-(3-디메틸아미노-프로필)-3-에틸카보디이미드(EDC) 등을 포함한다. 원한다면, 카보디이미드 결합제의 폴리머 보강 형태가 사용될 수 있는데 예를 들면, Tetrahedron Letters, 34(48), 7685(1993)에 설명된 것을 포함한다. 또한, N-하이드록시숙시니이미드, 1-하이드록시벤조트리아졸 등과 같은 공지의 결합 촉진제가 결합을 용이하게 하기 위해 사용될 수 있다.

이 결합 반응은 전형적으로 N-술포닐아미노산 V을 결합제 약 1내지 약 2 당량과 함께, 아미노산 유도체 VII의 적어도 1, 바람직하게는 약 내지 약 2 당량을 디클로로메탄, 클로로폼, 아세토니트릴, 테트라하이드로푸란, N,N-디메틸프름아미드 등과 같은 불활성 희석재 내에서 반응시킴으로써 수행된다. 일반적으로, 이 반응은 약 0℃ 내지 약 37℃의 온도범위에서, 약 12시간 내지 약 24시간 동안 반응된다. 반응의 종결 시에, 본 발명의 화합물은 중화, 추출, 침전, 크로마토그래피, 정체 등을 포함하는 통상적인 방법으로 수득된다.

선택적으로, N-술포닐 아미노산 V는 본 발명의 화합물을 제공하기 위해 산 할로겐화물 및 아미노산 유도체 VII이 결합된 산 할로겐화물로 전환될 수 있다. 산 할로게화합물 V는 V를 통상의 조건 하에서 티오닐 클로라이드, 포스포러스 트리클로라이드, 포스포러스 트리브로미드 또는 포스포러스 펜타-클로라이드, 바람직하게는 옥사릴(oxalyl) 클로라이드와 반응시킴으로써 제조될 수 있다. 일반적으로, 이 반응은 약 1 내지 5 몰라 당량의 무기 산 할로겐화물 또는 옥사릴 클로라이드를 사용하여 디클로로메탄 또는 카본 테트라클로라이드와 같은 순 용매 또는 불활성 용매 내에서 약 0℃내지 약 80℃의 온도 범위에서 약 1시간 내지 약 8 시간동안 수행된다.

이후, N-술포닐 아미노산 V의 산 할로겐화물은 디클로메탄과 같은 불활성 희석제 내애서 약 -70℃ 내지 약 40℃의 온도범위에서 약 1 시간 내지 약 24시간동안 적어도 1, 바람직하게는 약 1.1 내지 약 1.5 당량의 아미노산 유도체 VII와 반응된다. 바람직하게는, 이 반응은 반응 동안에 발생하는 산을 제거하기 위해 적절한 염기의 존재 하에서 수행된다. 적절한 염기들은 예를 들면, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린 등과 같은 3차 아민을 포함한다. 선택적으로, 이 반응은 수산화나트륨 등과 같은 알칼리 수용액을 사용하는 Schotten-Baumann-type 조건들 하에서 수행될 수 있다. 반응의 종결 시에, 본 발명의 화합물은 중화, 추출, 침전, 크로마토그래피, 정체 등을 포함하는 통상적인 방법으로 수득된다.

선택적으로, 본 발명의 화합물은 식 VIII의 디아미노 애시드 유도체를 먼저 형성시킴으로서 제조될 수 있다.

식 VIII의 디아미노 애시드 유도체는 상기에서 기술된 것과 같이, 통상적인 아미노산 결합 기술 및 카보디이미드, BOP 시약 등과 같은 반응제를 사용하여 식 III의 아미노산을 식 VII의 아미노산 유도체를 결합시킴으로써 용이하게 제조될 수 있다. 그 후 본 발명의 화합물을 제공하기 위해 디아미노 애시드 VIII은 식 IV의 술포닐 클로라이드를 사용하고 상기에서 설명된 합성 방법을 사용하여 설폰화될 수 있다.

상기 반응에서 사용된 식 VII의 아미노산 유도체는 공지된 화합물이거나 통상의 합성 방법을 이용하여 공지 화합물에서 제조될 수 있는 화합물이다. 예를 들면, 식 VII의 아미노산 유도체는 상업적으로 입수 가능한 디에틸 2-아세트아미도말론네이트(Aldrich, Milwaukee, Wisconsin, USA)를 알킬 또는 치환 알킬 할로겐화물과 함께 C-알킬레이팅 함으로써 제조될 수 있다. 이 반응은 전형적으로 약 6 시간 내지 약 12시간 동안 환류 에탄올에서 디에킬 2-아세트아미도말론네이트를 적어도 1 당량의 소윰 에토사이드 및 적어도 1 당량의 알킬 또는 치환 알킬 할로겐화물로 처리함으로써 수행된다. 그 후 아미노산, 전형적으로는 염산 염을 제공하기 위해 생성된 C-알킬화 말론네이트는 환류하는 수성 염산에서 약 6시간 내지 약 12시간 동안 가열하여 디아세틸레이트, 가수분해 및 디카르복실레이트된다.

상기 반응의 사용에 적절한 식 VII의 아미노산 유도체의 예는 여기에 제한되지 않지만, L-티로신 메틸 에스테르, L-3,5-디아이오도티로신 메틸 에스테르, L-3-아이오도티로신 메틸 에스테르, β-(4-하이드록시-나프트-1-일)-L-알라닌 메틸 에스테르, β-(6-하이드록시-나프트-2-일)-L-알라닌 메틸 에스테르 등을 포함한다. 원한다면, 당연히 상기에 언급된 화합물의 다른 에스테르나 아미드가 또한 사용될 수 있다.

용이한 합성을 위하여, 본 발명의 화합물은 에스테르, 즉 R6가 알콕시 또는 치환 알콕시기 등인 형태로 제조된다. 원한다면, 에스테르기는 대응하는 카르복실산을 제공하기 위해 통상적인 조건과 반응물질을 사용하여 가수분해될 수 있다. 전형적으로 이 반응은 에스테를 메탄올 또는 메탄올 혼합물 및 물과 같은 불활성 희석제 내에서 약 0℃ 내지 약 24℃의 온도범위에서 약 1 시간 내지 약 10시간 동안, 리듐, 소듐 또는 포타슘 하이드록사이드와 같은 알카리 메탈 하이드록사이드를 적어도 1 당량과 처리함으로써 수행된다. 선택적으로, 벤질 에스테르는 팔라듐 온 카본(palladium on carbon)과 같은 팔라듐 촉매를 사용한 가수소분해를 통하여 제거될 수 있다. 원한다면, 생성된 카복실산은 상기에서 언급된 바와 같이 통상의 결합제 및 조건을 사용하여 β-알라닌 에틸 에스테르와 같은 아민, 하이드록실아민과 같은 하이드록시아민 및 N-하이드록시숙시니이미드, 알콕시아민 및 O-메틸하이드록시아민 및 O-벤질하이드록실아민과 같은 치환 알콕시아민 등에 결합될 수 있다.

당해 기술 분야에서 명백한 바와 같이, 본 발명 화합물의 어느 치환체 상에 존재하는 다른 작용기들은 공지된 합성 방법을 사용하여 상기 설명된 결합 반응 전 또는 후에 용이하게 변경되거나 파생될 수 있다. 예를 들어, 본 발명 화합물의 치환체에 존재하는 니트로기 또는 이들의 중간체는 대응하는 아미노기를 제공하기 위해 팔라듐 온 카본과 같은 팔라듐 촉매의 존재 하의 수소첨가에 의해 용이하게 환원된다. 이 반응은 전형적으로 메탄올과 같은 불활성 희석재에서 약 20℃ 내지 약 50℃의 온도에서 약 6시간 내지 약 12시간 동안 수행된다. 예를 들어, R3 치환체 상에 니트로기를 가진 화합물은 예를 들면 상기 설명된 결합 반응에서 4-니트로페닐알라닌 유도체 등을 사용하여 제조될 수 있다.

유사하게, 피리딜기는 대응하는 피레라디닐 유사체를 제공하기 위해 산성 희석제 내에서 팔라듐 옥사이드와 같은 팔라듐 촉매의 존재 하에 수소첨가될 수 있다. 일반적으로, 이 반응은 메탄올 혼합물 및 수성 염산과 같은 산성 희석제 내에서 약 20℃ 내지 약 50℃의 온도에서 약 6시간 내지 약 12시간 동안 촉매의 존재 하에 약 20 psi 내지 약 60 psi의 압력, 바람직하게는 40 psi의 압력으로 피린딘 화합물을 수소와 반응시켜 수행한다. 피리딜기를 가진 화합물은 상기에서 설명된 결합 반응에서 예를 들면, β-(2-피리딜)-, β-(3-피리딜)- 또는 β-(4-피리딜)-L-알라닌 유도체를 사용하여 용이하게 제조될 수 있다.

추가적으로, 본 발명 화합물의 유도체 또는 이들의 중간체가 1차 또는 2차 아미노기를 포함하는 경우 이러한 아미노기는 예를 들면, 아미드, 설포아미드 유레아, 티오유레아, 카바메이트, 2차 또는 3차 아민 등을 제공하기 위해 상기 결합 반응 전 또는 후에 추가로 더 유도화될 수 있다. 이러한 치환체 상에 1차 아미기를 가진 화합물은 상기에서 설명한 바와 같이, 예들 들면 대응하는 니트로 화합물의 환원을 통해 제조될 수 있다. 선택적으로, 이러한 화합물들은 상기에서 설명한 결합 반응에서 리신, 4-아미노페닐알라닌 등으로부터 유래한 식 VII의 아미노산 유도체를 사용하여 제조될 수 있다.

예들 들면, 1차 또는 2차 아미노기를 포함하는 유도체를 가진 본 발명 화합물 또는 이들의 유도체는 대응하는 아미드를 제공하기 위해 통상의 아실화제 및 조건을 사용하여 용이하게 N-아실화될 수 있다. 이 아실화 반응은 아미노 화합물을 적어도 1, 바람직하게는 약 1.1 내지 약 1.2 당량의 카르복실 산을 카보디이미드, BOP 시약 (벤조트리아졸-1-일록시-트리(디메틸아미노)-포스포니듐 헥사플루로포스포네이트) 등과 같은 결합제의 존재 하에, 디클로로메탄, 클로로포름, 아세토니트릴, 테트라하이드로푸란, N-N-디메틸포름아미드 등과 같은 불활성 희석제 내에서 약 0℃ 내지 약 37℃의 온도에서 약 4시간 내지 약 24시간 동안 반응함으로써 수행된다. 바람직하게는, 아실화 반응을 용이하게 하기 위해 하이드록시숙시이미드, 1-하이드록시벤조트리아졸 등과 같은 촉진제가 사용된다. 이 반응에 사용되는 적절한 카복실산의 예는 여기에 제한되지는 않지만, N- tert-부틸록시카보닐글신, N- tert-부틸록시카보닐-L-페닐알라린, N- tert-부틸록시카보닐-L-아스팔틱 애시드 벤질 에스테르, 벤조익 애시드, N- tert-부틸록시카보닐이소니페코틱 애시드, N-메틸이소니페코틱 애시드, N- tert-부틸록시카보닐니페코틱 애시드, N- tert-부틸록시카보닐-L-테트라하이드로이소퀴놀린-3-카복실릭 애시드, N-(톨루엔-4-술포닐)-L-프로린 등을 포함한다.

선택적으로, 1차 또는 2차 아미노기를 포함하는 본 발명 화합물의 유도체 또는 이들의 중간체는 대응하는 아미드를 형성하기 위해 아실 할라이드 또는 무수 카복실산을 이용하여 N-아실화될 수 있다. 이 반응은 전형적으로 아미노 화합물을 적어도 1, 바람직하게는 약 1.1 내지 약 1.2 당량의 아실 할라이드 또는 무수 카복실산을 디클로로메탄과 같은 불활성 희석제 내에서 약 -70℃ 내지 약 40℃의 온도에서 약 1시간 내지 약 24시간 동안 반응함으로써 수행된다. 원한다면, 아실화 반응을 촉진하기 위해 4-(N,N-디메틸아미노)피리딘과 같은 아실화 촉매가 사용될 수 있다. 아실화 반응은 반응 동안에 생성되는 산을 제거하기 위해 적절한 염기의 존재 하에서 수행되는 것이 바람직하다. 적절한 염기들은 예를 들면, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린 등과 같은 3차 아민을 포함한다. 선택적으로, 이 반응은 수산화나트륨 등과 같은 알칼리 수용액을 사용하는 Schotten-Baumann-type 조건들 하에서 수행될 수 있다.

본 반응에서 사용하기에 적절한 아실 할라이드 및 무수 카복실산의 예는 여기에 제한되지 않지만, 2-메틸프로피오닐 클로라이드, 트리메틸아세틸 클로라이드, 페닐아세틸 클로라이드, 벤조일 클로라이드, 2-브로모벤조일 클로라이드, 2-메틸벤조일 클로라이드, 2-트리플로로메틸벤조일 클로라이드, 이소니코티노일 클로라이드, 니코티노일 클로라이드, 피코리노일 클로라이드, 아세틱 안하이드라이드, 숙시닉 안하이드라이드 등을 포함한다. 본 반응에서 유레아(urea)를 제공하기 위해 N,N-디메틸카바밀 클로라이드, N,N-디에틸카바밀 클로라이드 등과 같은 카바밀 클로라이드가 사용될 수 있다. 유사하게, 카바메이트를 제공하기 위해 디-tert-부틸 디카보네이트와 같은 디카보네이트가 사용될 수 있다.

유사한 방법으로, 술포닐 할라이드 또는 무수 술폰산을 사용하여 술폰아미드를 형성하기 위해 1차 또는 2차 아미노기를 포함하는 본 발명 화합물의 유도체 또는 이들의 중간체는 N-설폰화될 수 있다. 본 반응에 사용하기에 적절한 술포닐 할라이드 및 무수 술폰산은 여기에 제한되지 않지만, 메탄술포닐 클로라이드, 클로로메탄술포닐 클로라이드, p-톨루엔술포닐 클로라이드, 트리플로로메탄술포닉 안하이드라이드 등을 포함한다. 유사하게, 술프아미드 (예를 들면, >N-SO2-N<)를 제공하기 위해 디메틸술프아모일 클로라이드와 같은 술프아모일 클로라이드가 사용될 수 있다.

추가적으로, 유레아 또는 티오유레아를 제공하기 위해 1차 또는 2차 아미노기를 포함하는 본 발명 화합물의 유도체 또는 이들의 중간체가 각각 이소시아네이트 또는 티오이소시아네이트와 반응될 수 있다. 이 반응은 전형적으로 아미노 화합물을 적어도 1, 바람직하게는 약 1.1 내지 약 1.2 당량의 이소시아네이트 또는 티오이소시아네이트를 톨루엔 등과 같은 불활성 희석제 내에서 약 24℃ 내지 약 37℃의 온도에서 약 12시간 내지 약 24시간 동안 반응함으로써 수행된다. 본 반응에 사용된 이소시아네이트 및 티오이소시아네이트는 상업적으로 입수 가능하거나 또는 공지의 합성 방법을 사용하여 상업적으로 입수 가능한 화합물로부터 제조될 수 있다. 예를 들면, 이소시아네이트 및 티오이소시아네이트는 적절한 아민을 포스진 또는 티오포스진과 반응시켜 용이하게 제조될 수 있다. 본 반응의 사용에 적합한 이소시아네이트 및 티오이소시아네이트는 여기에 제한되지 않지만, 에틸 이소시아네이트, n-프뢸 이소시아네이트, 4-시아노페닐이소시아네이트, 3-메톡시페닐 이소시아네이트, 2-페닐에틸 이소시아네이트, 메틸 티오이소시아네이트, 에틸 티오이소시아네이트, 2-페닐에틸 티오이소시아네이트, 3-페닐프로필 티오이소시아네이트, 3-(N,N-디에틸아미노)프로필 티오이소시아네이트, 페닐 티오이소시아네이트, 벤질 티오이소시아네이트, 3-피리딜 티오이소시아네이트, 플루레세인 티오이소시아네이트 (이성질체 L) 등을 포함한다.

더욱이, 본 발명 화합물 또는 이들의 중간체가 1차 또는 2차 아미노기를 포함하는 경우, 아미노기는 2차 또는 3차 아미노기를 형성하기 위해 알데하이드 또는 케톤을 사용하여 환원적으로 알킬화 될 수 있다. 이 반응은 전형적으로 아미노 화합물을 적어도 1, 바람직하게는 약 1.1 내지 약 1.5 당량의 알데하이드 또는 케톤 및 아미노 화합물에 대하여 적어도 1 당량의 소듐 시아노보로하이드라이드와 같은 금속 수소화물 환원제를 메탄올, 테트라하이드로푸란, 이들의 혼합물 등과 같은 불활성 희석제 내에서 약 0℃ 내지 약 50℃의 온도에서 약 1시간 내지 약 72시간 동안 반응함으로써 수행된다. 본 반응에 사용하기에 적합한 알데하이드 및 케톤은 예를 들면, 벤즈알데하이드, 4-클로로벤즈알데하이드, 발레알데하이드(valeraldehyde) 등을 포함한다.

유사한 방법으로, 예들 들어 에스테르, 카바메이트 등을 제공하기 위해 본 발명 화합물 또는 이들의 중간체가 하이드록실기를 포함하는 치환체를 가지는 경우 하이드록실기는 상기 결합 반응 전 또는 후에 추가로 변형되거나 파생될 수 있다. R5 치환체 상의 하이드록실기를 가진 식 I 및 II의 화합물은 상기 설명된 반응에서 티로신 등으로부터 유래된 식 VII의 아미노산 유도체를 사용하여 제조될 수 있다.

예를 들면, 에테르를 형성하기 위하여 하이드록실기를 포함하는 치환체를 가진 본 발명 화합물 또는 이들의 중간체들은 용이하게 O-알킬화 될 수 있다. 이 O-알킬화 반응은 하이드록실기의 알칼리 또는 알칼리 토금속 염을 형성하기 위해 하이드록시 화합물을 아세톤 2-부타논 등과 같은 불활성 희석제와 내에서 포타슘 카보네이트와 가은 적절한 알칼리 또는 알칼리 토금속 염기와 함께 반응시킴으로써 수행된다. 이 염은 에테르를 제공하기 위해 통상적으로 분리되지 않지만, 알킬 클로라이드, 브로마이드, 아이다인, 메실레이트 또는 토실레이트와 같은 알킬 또는 치환 알킬 할라이드 도는 설포네이트의 적어도 1 당량과 연속(in situ) 반응한다. 일반적으로, 이 반응은 약 60℃ 내지 약 150℃의 온도 범위에서 약 24시간 내지 약 72시간 동안 수행된다. 바람직하게는, 알킬 클로라이드 또는 브로마이드가 이 반응에 사용되는 경우 촉매량의 소듐 또는 포타슘 아이오다인이 반응 혼합물에 첨가된다.

이 반응의 사용에 적절한 알킬 또는 치환 알킬 할라이드 및 술포네이트의 예는 여기에 제한되지 않지만, tert-부틸 브로모아세테이트, N-tert-부틸클로로아세트아미드, 1-브로모에틸벤젠, 에틸 α-브로모페닐아세테이트, 2-(N-에틸-N-페닐아미노)에틸 클로라이드, 2-(N,N-에틸아미노)에틸 클로라이드, 2-(N,N-디이소프로필아미노)에틸 클로라이드, 2-(N,N-디벤질아미노)에틸 클로라이드, 3-(N,N-에틸아미노)프로필 클로라이드, 3-(N-벤질-N-메틸아미노)프로필 클로라이드, N-(2-클로로에틸)모르폴린, 2-(헥사메틸에네이미노)에틸 클로라이드, 3-(N-메틸피페라진)프로필 클로라이드, 1-(3-클로로페닐)-4-(3-클로로프로필)피페라진, 2-(4-하이드록시-4-페닐피페리딘)에틸 클로라이드, N-tert-부틸옥시카보닐-3-피페리딘메틸 토실레이트 등을 포함한다.

선택적으로, 본 발명 화합물 또는 이들의 중간체의 치환체에 존재하는 하이드록실기는 Mitsunobu 반응을 이용하여 O-알킬화 될 수 있다. 이 반응에서, 3-(N,N-디메틸아미노)-1-프로판올 등과 같은 알콜이 약 1 내지 약 1.3 당량의 트리페닐포스핀 및 약 1 내지 약 1.3 당량의 디에틸 아조디카복실레이트와,테트라하이드로푸란과 같은 불활성 희석제 내에서 약 -10℃ 내지 약 5℃의 온도에서 약 0.25시간 내지 약 1시간 동안 반응된다. 그 후 N-tert-부틸티로신 메틸 에스테르와 같은 하이드록시 화합물 약 1 내지 약 1.3 당량이 추가되고, 이 반응 혼합물은 약 0℃ 내지 약 30℃에서 약 2 시간 내지 약 48시간 동안 교반됨으로써 O-알킬화 산물을 제공한다.

유사한 방법으로, 아릴 하이드록시기를 포함하는 본 발명 화합물 또는 이들의 중간체를 아릴 아이오아디으와 반응하여 디아릴 에스테를 제공할 수 있다. 일반적으로, 이 반응은 자일렌과 같은 불활성 희석제 내에서 약 -25℃ 내지 약 10℃의 온도에서 소듐 하이드라이드와 같은 적절한 염기를 사용하여 하이드록실기의 알카리 금속 염을 형성함으로써 수행된다. 그 후 이 염은 쿠프러스 브로마이드 디에틸 설파이드 복합체 약 1.1 내지 약 1.5 당량과 약 10℃ 내지 약 30℃의 온도 범위에서 약 0.5 시간 내지 약 2,0 시간 동안 반응시키고, 그 후 소듐 2-아이도벤조에이트 등과 같은 아릴 아이다인 약 1.1 내지 약 1.5 당량을 반응시킨다. 그 후 이 반응은 디아릴 에스테를 제공하기 위해 약 2 시간 내지 약 24 시간 동안 약 70℃ 내지 약 150℃로 가열된다.

추가적으로, 하이드록시-포함 화합물은 카바메이트를 형성하기 위해 용이하게 유도체화될 수 있다. 이러한 카바메이트를 제조하기 위한 하나의 방법에서, 본 발명 하이드록시 화합물 또는 이들의 중간체는 약 1.0 내지 약 1.2 당량의 4-니트로페닐 클로로포르메이트와 디클로로메탄과 같은 불활성 희석제에서 약 -25℃ 내지 약 0℃의 온도 범위에서 약 0.5 시간 내지 약 2.0 시간동안 반응된다. 생성되는 카보네이트의 과 처리, 바람직하게는 트리에틸아민과 같은 트리알킬아민 약 2 내지 약 5 당량을 약 0.5 시간 내지 약 2시간 동안 처리하고, 그 후 1차 또는 2차 아민의 약 1.0 내지 약 1.5 당량의 처리는 카바메이트를 생성하게 한다. 이 반응에 사용하기에 적절한 아민의 예는 다음에 한정되지 않지만, 피페라진, 1-메틸피페라진, 1-아세틸피페라진, 모르폴린, 티오모르폴린, 피롤리딘, 피페리딘 등을 포함한다.

선택적으로, 카바메이트를 제조하는 다른 방법에서, 하이드록시-포함 화합물은 약 1.0 내지 약 1.5 당량의 카바밀 클로라이드와 디클로로메탄과 같은 불활성 희석제에서 약 25℃ 내지 약 70℃의 온도 범위에서 약 2시간 내지 약 72시간동안 반응된다. 전형적으로, 이 반응은 반응 동안 발생하는 산을 제거하기 위해 적절한 염기의 존재 하에서 수행된다. 적절한 염기는 예를 들면, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린 등과 같은 3차 아민을 포함한다. 추가적으로, 4-(N,N-디메틸아미노)피리딘의 적어도 1 당량이 반응을 용이하게 하기 위해 반응 혼합물에 첨가되는 것이 바람직하다. 이 반응에 사용하기에 적절한 카바밀 클로라이드의 예는 예를 들면, 디메틸카바밀 클로라이드, 디에틸카바밀 클로라이드 등을 포함한다.

마찬가지로, 본 발명 화합물 또는 이들의 중간체가 1차 또는 2차 하이드록실기를 포함하는 경우, 이러한 하이드록실기는 예들 들면, 아민, 설파이드 및 플루라이드를 형성하기 위해 이탈기로 용이하게 전환되거나 치환될 수 있다. 예를 들면, 4-하이드록시-L-프로린의 유도체는 유도된 하이드록실기의 친핵성 치환반응을 경유하여 대응하는 4-아미노, 4-티오 또는 4-플루로-L-프로린 유도체로 전환될 수 있다. 일반적으로, 키랄 화합물이 이들 반응에 사용되면, 유도된 하이드록실기에 부탁된 탄소원자에서의 입체화학이 전형적으로 역전된다.

이들 반응들은 전형적으로 하이드록시 화합물을 p-톨루엔술포닐 클로라이드 등과 같은 술포닐 할라이드의 적어도 1 당량을 피리딘 내에서 반응시켜 토실레이트와 같은 이탈기 내로 하이드록실 기를 먼저 전환시킴으로써 수행된다. 이 반응은 일반적으로 약 0℃ 내지 약 70℃의 온도에서 약 1 시간 내지 약 48시간 동안 수행된다. 생성된 토실레이트는 그 후 예들 들면, 토실레이트를 적어도 1 당량의 소듐 아지드를 N,N-디메틸포름아미드 및 물의 혼합물과 같은 불활성 희석제 내에서 약 0℃ 내지 약 37℃에서 약 1시간 내지 약 20시간 동안 반응시켜 소듐 아지드와 용이하게 치환되도록 하여 대응하는 아지도 화합물을 생성하도록 한다. 그 후 아지도 그룹은 예를 들면, 파라듐 온 카본 촉매를 사용한 수소화로 환원되어 아미노 (-NH2) 화합물을 제공할 수 있다.

유사하게, 토실레이트 기는 티올로 쉽게 치환되어 설파이드를 형성할 수 있다. 이 반응은 토실레이트를 적어도 1 당량의 티오페놀과 같은 티올과 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데크-7-에네(DBU)와 같은 적절한 염기의 존재 하에서 N,N-디메틸포름아미드와 같은 불활성 희석제에서 약 0℃ 내지 약 37℃의 온도에서 약 1시간 내지 약 12시간 반응함으로써 수행되어 설파이드를 생성하게 된다. 추가적으로, 토실레이트를 몰포리노술퍼 트리플루오라이드(morpholinosulfur trifluoride)로 디클로로메탄과 같은 불활성 희석제 내에서 약 0℃ 내지 약 37℃의 온도 범위에서 약 12 시간 내지 약 24 시간동안 반응시키면 대응하는 플루로 화합물을 제공하게 된다.

더욱이, 예를 들면, 식 I 또는 II의 R5가 (4-아이오도페닐)메틸기인 아이오도아릴기를 포함하는 치환체를 가진 본 발명 화합물 또는 이들의 중간체는 상기 결합 반응 전 또는 후에 비아릴 화합물로 용이하게 전환될 수 있다. 전형적으로 이 반응은 아이오도아릴 화합물은 약 1.1 내지 약 2 당량의 2-(메톡시카보닐)페닐징크 아이오딘과 같은 알릴징크 아이오다인과 팔라듐 테트라(트리페닐포스핀)와 같은 팔라듐 촉매의 존재 하에서 테트라하이드로푸란과 같은 불활성 촉매 내에서 약 24℃ 내지 약 30℃의 온도 범위에서 반응시킴으로써 수행된다. 이 반응은 예를 들면, Rieke, J. Org . Chem . 1991, 56, 1445에 더 구체적으로 설명되어 있다.

몇몇 경우에, 본 발명 화합물 또는 이들의 중간체는 1 이상의 황(sulfur) 원자를 가진 치환체를 가질 수 있다. 황 원자는 예들 들면, 상기 반응에서 사용된 식 III의 아미노산이 L-티아졸리딘-4-카복실릭 애시드, L-(5,5-디메틸)티아졸리딘-4-카복실릭 애시드, L-티아모르폴린-3-카복실릭 애시드 등으로부터 유래되는 경우에 존재할 것이다. 존재하는 경우, 설폭사이드 또는 설폰 화합물을 제공하기 위해 이러한 황 원자들은 통상적인 반응물질 및 반응조건들을 사용하여 상기 결합 반응 전 또는 후에 산화될 수 있다. 설파이드 화합물을 설폭사이드로 산화시키기 위해 적절한 시약으로는 예를 들면, 하이드로젠 퍼록사이드, 3-클로로펄옥시벤조익 애시드(MCPBA), 소듐 퍼리오데이트 등을 포함한다. 산화 반응은 전형적으로 설파이드 화합물을 약 0.95 내지 약 1.1 당량의 산화제를, 디클로로메탄과 같은 불활성 희석제 내에서 약 -50℃ 내지 약 75℃의 온도 범위에서 약 1 시간 내지 약 24 시간 동안 반응시킴으로써 수행된다. 그 후 생성된 설폭사이드는 설폭사이드를 적어도 1 추가 당량의 하이드로젠 펄옥사이드, MCPBA, 포타슘 펄망가네이트 등과 같은 산화제와 반응시킴으로써 대응하는 설폰(sulfone)으로 산화될 수 있다. 선택적으로, 설폰은 설파이드를 적어도 2당량, 바람직하게는 그 이상의 산화제로 처리함으로써 직접 제조될 수 있다. 이러한 반응들은 “Advanced Organic Chemistry", 4th Ed., pp. 1202-1202, Wiley Publishers, (1992)에 추가로 설명되어 있다.

상기에서 기술된 바와 같이, 수소외 R2 치환체를 가진 본 발명 화합물은 상기 설명된 결합 반응에서 살코신, N-메틸-L-페닐알라닌 등과 같은 식 III의 N-치환 아미노산을 사용하여 직접 제조될 수 있다. 선택적으로, 이러한 화합물은 통상적인 합성 방법을 사용하여 식 I 또는 V (여기서 R2는 수소)의 설폰아미드의 N-알킬화로 제조될 수 있다. 전형적으로, 이 N-알킬화 반응은 설폰아미드를 적어도 1, 바람직하게는 1.1 내지 2 당량의 알킬 똔느 치환 알킬 할라이드로, 포타슘 카보네이트와 같은 적절한 염기 내에서 아세톤, 2-부타논 등과 같은 불활성 희석제 내에서 약 25℃ 내지 약 70℃의 온도 범위에서 약 2 시간 내지 약 48시간 동안 반응시킴으로써 수행된다. 이 반응의 사용에 적절한 알키 또는 치환 알킬 할라이드의 예는 여기에 제한되지 않지만, 메틸 아이오다이드 등을 포함한다.

추가적으로, R2가 수소이고, R1이 2-알콕시카보닐아릴기인 식 I 또는 V의 설폰아미드는 1,2-벤즈이소티아졸-3-온 유도체 또는 이들의 유사체를 형성하기 위해 분자가 환화(cyclized)될 수 있다. 이 반응은 전형적으로 N-(2-메톡시카보닐페닐술포닐)글리신-L-페닐알라닌 벤질 에스테르와 같은 설폰아미드를 약 1.0 내지 약 1.5 당량의 알칼리 메탈 하이라이드와 같은 적절한 염기로, 테트라하이드로푸란과 같은 불활성 희석제 내에서 약 0℃내지 약 30℃의 온도 범위에서 약 2시간 내지 약 48시간 동안 반응시켜 환화 1,2-벤즈이소티아졸-3-온 유도체를 형성한다.

마지막으로, Q가 -C(S)NR7-인 식 I 또는 IIDML 화합물은 상기에 설명된 합성 방법에서 아미노산 III의 위치에 아미노 티오노애시드 유도체를 사용함으로써 제조된다. 이러한 아미노 티오노애시드 유도체들은 Shalaky et al., J. Org . Chem, 61:9045-9048(1996) 및 Brain et al., J. Org . Chem ., 62:3808-3809(1997) 및 여기에 언급된 참고문헌에 기재된 방법으로 제조될 수 있다.

4.1.2. 화합물의 약학 제형물

일반적으로, 본 발명의 화합물은 상기 화합물에 대한 임의의 허용된 투여 방식에 의해 치료학적 유효량으로 투여될 것이다. 상기 화합물은 하기를 포함하나 이에 제한되지 않는 다양한 경로에 의해 투여될 수 있다: 경구, 비경구 (예를 들면, 피하, 경막밑, 정맥내, 근육내, 경막내, 복강내, 뇌내, 동맥내, 또는 병변내 투여 경로), 국부, 비강내, 국부적 (예를 들면, 외과 도포 또는 외과 좌약), 직장, 및 폐 (예를 들면, 에어로졸, 흡입물, 또는 분말). 따라서, 상기 화합물은 주사 및 경구 조성물 양자로서 효과적이다. 상기 화합물은 주입 또는 일시 주사에 의해 연속적으로 투여될 수 있다. 바람직하게는, 상기 화합물은 비경구 경로에 의해 투여된다.

더욱 바람직하게는, 상기 화합물은 정맥내 경로에 의해 투여된다. 상기 조성물은 약학 업계에 공지된 방식으로 제조된다.

본 발명의 화합물의 실질적인 양, 즉 활성 성분은 수많은 인자, 예를 들면, 질환의 심각성, 즉, 치료되는 탈수초형성과 관련된 증상 또는 질환 또는 탈수초형성과 관련된 마비, 대상의 나이 및 상대적인 건강, 이용된 화합물의 효능, 투여 경로 및 형태, 및 기타 인자에 의존할 것이다.

상기 화합물의 독성 및 치료 효능은 예를 들면, LD₅₀ (집단의 50%에 치명적인 투여량) 및 ED₅₀ (집단의 50%에서 치료학적을 효과적인 투여량)을 측정하기 위해, 세포 배양 또는 실험 동물에서 표준 약학 절차에 의해 측정될 수 있다. 독성 및 치료 효과 사이의 투여 비율은 치료 지수이며, 이는 비율 LD₅₀/ED₅₀으로서 나타낼 수 있다. 큰 치료 지수를 나타낸는 화합물이 바람직하다.

세포 배양 분석 및 동물 연구로부터 수득된 데이타는 인간에 이용하기 위한 투여량 범위를 나타내는데 이용될 수 있다. 상기 화합물의 투여량은 바람직하게는 거의 또는 전혀 독성이 없는 ED₅₀을 포함하는 순환 농도의 범위내이다. 투여량은 이용된 투여 형태 및 이용된 투여 경로에 의존하여 상기 범위내에서 변할 것이다. 본 발명의 방법에 이용된 임의의 화합물에 대해, 치료학적으로 효과적인 투여량은 세포 배양 분석으로부터 초기에 평가될 수 있다. 투여량은 세포 배양에서 측정된 IC₅₀ (즉, 증상의 최대 반 저해를 달성하는 시험 화합물의 농도)를 포함하는 순환하는 혈장 농도 범위를 달성하기 위해 동물 모델에서 나타낼 수 있다. 상기 정보는 인간에서 유용한 투여량을 더욱 정확하게 측정하기 위해 이용될 수 있다. 혈장에서의 수준은 예를 들면, 고성능 액체 크로마토그래피에 의해 측정될 수 있다. 본 발명의 화합물의 효과적인 혈액 수준은 바람직하게는 10 ng/ml 이상이다.

환자에게 투여된 약학 조성물의 양은 투여된 것, 투여 목적, 예를 들면, 예방 또는 치료, 환자의 상태, 투여 방식 등에 의존하여 변할 것이다. 치료학적 적용에서, 조성물은 질환으로 이미 고생하는 환자에게 질환 및 이의 합병증의 증상을 적어도 부분적으로 정지시키거나 또는 치료하기에 충분한 양으로 투여된다. 이를 달성하기에 적당한 양은 "치료학적으로 유효한 투여량"으로 정의된다. 상기 이용에 효과적인 양은 치료되는 질환 상태뿐만 아니라, 염증의 심각성, 환자의 나이, 체중 및 일반적인 상태 등과 같은 인자에 의존하여 주치의의 판단에 의존할 것이다.

환자에게 투여되는 조성물은 상기 기재된 약학 조성물의 형태이다. 상기 조성물은 통상적인 멸균 기술에 의해 멸균될 수 있거나 또는 멸균 여과될 수 있다. 생성된 수용액은 있는 그대로 포장되거나, 또는 동결건조될 수 있으며, 동결건조된 제제는 투여 전에 멸균 수성 담체와 조합된다.

화합물 제제의 pH는 전형적으로 3 내지 11, 더욱 바람직하게는 5 내지 9, 가장 바람직하게는 7 내지 8일 것이다. 이전의 특정 부형제, 담체, 또는 안정화제의 이용이 약학 염의 형성을 초래할 것이라는 것을 이해할 것이다.

활성 화합물은 폭 넓은 투여 범위에 대해 효과적이며, 약학적 또는 치료학적유효량으로 일반적으로 투여된다. 본 발명의 화합물의 치료학적 투여량은 예를 들면, 치료가 행해지는 특정 용도, 화합물의 투여 방식, 환자의 건강 및 상태, 및 처방 내과의사의 판단에 따라 변할 것이다. 예를 들면, 정맥내 투여에 대해, 투여량은 전형적으로 체중 kg 당 약 20㎍ 내지 약 500㎍, 바람직하게는 체중 kg 당 약 10㎍ 내지 약 300㎍의 범위일 것이다.

비강내 투여에 대한 적당한 투여 범위는 일반적으로 체중 kg 당 약 0.1pg 내지 1 mg 이다. 효과적인 투여량은 시험관내 또는 동물 모델 시험 시스템으로부터 유도된 투여량-반응 곡선으로부터 외삽될 수 있다. 전형적으로, 임상의는 투여량이 원하는 효과를 달성할 때까지 화합물을 투여할 것이다.

약제로서 이용될 때, 본 발명의 화합물은 통상 약학 조성물의 형태로 투여된다. 본 발명은 또한 활성 성분으로서 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제와 조합된, 상기 본 발명의 화합물의 하나 이상을 포함하는 약학 조성물을 포함한다. 이용된 부형제는 전형적으로 인간 대상 또는 기타 포유동물에 투여하기에 적합한 것이다. 본 발명의 조성물의 제조시, 활성 성분은 통상 부형제와 혼합되며, 부형제로 희석되거나 또는 캡슐, 향주머니, 종이 또는 기타 용기의 형태일 수 있는 담체내에 포함된다. 부형제가 희석제로서 이용될 때, 이는 고체, 반고체, 또는 액체 물질일 수 있으며, 이는 활성 성분에 대한 운반체, 담체 또는 매질로서 작용한다. 그리하여, 상기 조성물은 정제, 환, 분말, 로젠(lozenge), 카셰, 엘릭시르, 현탁액, 에멀션, 용액, 시럽, 에어로졸 (고체로서 또는 액체 매질에서), 예를 들면, 10 중량% 이하의 활성 화합물을 포함하는 연고, 연질 및 경질 젤라틴 캡슐, 좌약, 멸균 주사액, 및 멸균 포장 분말의 형태일 수 있다.

제형물의 제조시, 기타 성분과 조합하기 전에 적당한 입자 크기를 제공하기 위해 활성 화합물을 분쇄하는 것이 필요할 수 있다.

활성 화합물이 실질적으로 불용성이면, 이는 통상적으로 200 메쉬 미만의 입자 크기로 분쇄된다. 활성 화합물이 실질적으로 수용성이면, 입자 크기는 제형물에서 실질적으로 균일한 분포, 예를 들면, 약 40 메쉬를 제공하기 위해 분쇄에 의해 통상 조절된다.

적당한 부형제의 일부 예는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 소르비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 칼슘 포스페이트, 알기네이트, 트라가칸트, 젤라틴, 칼슘 실리케이트, 미세결정성 셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로오스, 멸균수, 시럽, 및 메틸 셀룰로오스를 포함한다. 상기 제형물은 부가적으로 하기를 포함할 수 있다: 윤활제, 예를 들면, 활석, 마그네슘 스테아레이트, 및 미네랄 오일; 습윤제; 유화제 및 현탁제; 보존제, 예를 들면, 메틸- 및 프로필히드록시-벤조에이트; 감미제; 및 풍미제. 본 발명의 조성물은 당업계에 공지된 절차를 이용함으로써 환자에게 투여 후에 활성 성분의 신속한, 지속된 또는 지연된 방출을 제공하도록 제형화될 수 있다.

약학 조성물에서 활성 화합물의 양 및 이의 단위 투여 형태는 특정 적용, 방식 또는 도입, 특정 화합물의 효능, 및 원하는 농도에 의존하여 폭 넓게 변하거나 또는 조절될 수 있다. 용어 "단위 투여 형태"는 인간 대상 및 기타 포유동물에 대한 단위 투여로서 적합한 물리적으로 별개의 단위를 말하며, 각 단위는 적당한 약학 부형제와 조합하여, 원하는 치료 효과를 생성하도록 계산된 활성 물질의 예정된 양을 포함한다.

치료학적으로 활성인 화합물의 농도는 약 1 mg/ml 내지 1 g/ml일 것이다.

바람직하게는, 상기 화합물은 적당한 불활성 담체, 예를 들면 멸균 식염수 용액에서 비경구 투여에 대해 제형화될 수 있다. 예를 들면, 담체 용액에서 화합물의 농도는 전형적으로 약 1-100 mg/ml이다. 투여된 투여량은 투여 경로에 의해 결정될 것이다.

바람직한 투여 경로는 비경구 또는 정맥내 투여를 포함한다.

치료학적으로 유효한 투여량은 탈수초형성의 현저한 감소 및 수초재형성의 현저한 증가를 생성하기에 효과적인 투여량이다. 바람직하게는, 상기 양은 대상에서 통계학적으로 유의한 양의 수초재형성을 생성하기에 충분하다.

예를 통해, 정제와 같은 고체 조성물을 제조하기 위해, 주요한 활성 성분은 약학 부형제와 혼합되어 본 발명의 화합물의 균질 혼합물을 포함하는 고체 예비제형 조성물을 형성한다. 상기 예비제형 조성물을 균질한 것으로서 언급할 때, 활성 성분이 조성물이 정제, 환 및 캡슐과 같은 동일하게 효과적인 단위 투여 형태로 용이하게 세분될 수 있도록 조성물을 통해 균일하게 분산된 것을 의미한다. 상기 고체 예비제형물은 이어서 예를 들면, 본 발명의 0.1 내지 약 500mg의 활성 성분을 포함하는 상기 기재된 유형의 단위 투여 형태로 세분된다.

본 발명의 정제 또는 환은 코팅되거나 또는 그렇지 않으면 연장된 작용의 이점을 제공하는 투여 형태를 제공하기 위해 제형화될 수 있다.

예를 들면, 정제 또는 환은 내부 투여 및 외부 투여 성분을 포함할 수 있으며, 후자는 전자에 대해 외피의 형태이다. 2가지 성분이 위에서 붕괴에 저항하기 위해 이용되는 장(enteric) 층에 의해 분리될 수 있으며, 내부 성분을 십이지장으로 그대로 통과하게 하거나 또는 방출을 지연시킨다. 다양한 물질이 상기 장 층 또는 코팅에 이용될 수 있으며, 상기 물질은 수많은 중합체성 산 및 중합체성 산과 셀락, 세틸 알코올, 및 셀룰로오스 아세테이트와 같은 물질의 혼합물을 포함한다.

본 발명의 신규 조성물이 경구로 또는 주사로 투여하기 위해 혼입될 수 있는 액체 형태는 수용액, 적당하게 풍미된 시럽, 수성 또는 오일 현탁액, 및 옥수수 오일, 면실유, 참깨유, 코코넛 오일, 또는 땅콩유와 같은 식용 오일로 풍미된 에멀션뿐만 아니라, 엘릭시르 및 유사한 약학 운반체를 포함한다.

흡입 또는 주입용 조성물은 약학적으로 허용가능한, 수성 또는 유기 용매, 또는 이의 혼합물 주의 용액 및 현탁액, 및 분말을 포함한다. 액체 또는 고체 조성물은 전술한 적당한 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함할 수 있다. 상기 조성물은 국부 또는 전신성 효과를 위해 경구 또는 비강 호흡 경로에 의해 투여될 수 있다.

바람직하게는 약학적으로 허용가능한 용매 중의 조성물은 불활성 기체의 이용에 의해 분무될 수 있다. 분무된 용액은 분무 장치로부터 직접 흡입될 수 있거나 또는 상기 분무 장치는 얼굴 마스크 텐트 또는 간헐적인 양압 호흡기에 부착될 수 있다. 용액, 현탁액, 또는 분말 조성물은 상기 제형물을 적당한 방식으로 전달하는 장치로부터, 바람직하게는 경구로 또는 비강으로 투여될 수 있다.

본 발명의 화합물은 서방성으로 투여될 수 있다. 서방성 제제의 적당한 예는 단백질을 포함하는 고체 소수성 중합체의 반투과성 매트릭스를 포함하며, 상기 매트릭스는 성형된 제품, 예를 들면, 필름, 또는 마이크로캡슐의 형태이다. 서방성 매트릭스의 예는 폴리에스테르, 히드로겔(예를 들면, [Langer et al., J. Biomed. Mater. Res. 15: 167-277(1981)] 및 [Langer, Chem. Tech. 12: 98-105 (1982)]에 기재된 폴리(2-히드록시에틸-메타크릴레이트) 또는 폴리(비닐 알코올)), 폴리락티드 (미국 특허 제3,773,919호), L-글루탐산 및 감마 에틸-L-글루타메이트의 공중합체(Sidman et al., Biopolymers 22: 547-556, 1983), 비분해성 에틸렌-비닐 아세테이트 (Langer et al., 이하 동일), 분해성 락트산-글리콜산 공중합체, 예를 들면, LUPRON DEPOT^TM (즉, 락트산-글리콜산 공중합체 및 류프로리드 아세테이트로 구성된 주입가능한 미세구), 및 폴리-D-(-)-3-히드록시부티르산(EP 133,988)을 포함한다.

본 발명의 화합물은 서방성 형태, 예를 들면, 축적물(depot) 주사, 임플란트 제제, 또는 삼투 펌프로 투여될 수 있으며, 이는 활성 성분의 서방성을 허용하는 방식으로 제형화될 수 있다. 서방성 제형물에 대한 임플란트는 당업계에 주지되어 있다. 임플란트는 생분해성 또는 비생분해성 중합체와 함께, 미세구, 슬랩을 포함하나 이에 제한되지 않는 것으로서 제형화될 수 있다. 예를 들면, 락트산 및/또는 글리콜산의 중합체는 숙주에 의해 허용되는 부식성 중합체를 형성한다.

임플란트는 단백질 저장소(예를 들면, 신경변성 질환과 관련된 아밀로이드 저장소의 자리)의 자리 근처에 위치하여, 활성 물질의 국부적인 농도가 신체의 나머지에 대한 자리에서 증가된다.

하기 제형예는 본 발명의 약학 조성물을 예시한다.

제형예 1

하기 성분을 포함하는 경질 젤라틴 캡슐을 제조한다:

성분 양(mg/캡슐)

활성 성분 30.0

전분 305.0

마그네슘 스테아레이트 5.0

상기 성분을 혼합하고, 340 mg 양으로 경질 젤라틴 캡슐내로 충전한다.

제형예 2

정제 조제를 하기 성분을 이용하여 제조한다:

성분 양(mg/캡슐)

셀룰로오스, 미세결정성 200.0

콜로이드성 이산화규소 10.0

스테아르산 5.0

성분을 배합하고, 압착하여 정제를 형성하며, 각각의 무게는 240 mg이다.

제형예 3

하기 성분을 포함하는 건조 분말 흡입 제형물을 제조한다:

성분 중량%

활성 성분 5

락토오스 95

활성 혼합물을 락토오스와 혼합하고, 혼합물을 건조 분말 흡입 장치에 첨가한다.

제형예 4

활성 성분의 30 mg을 각각 포함하는 정제를 하기와 같이 제조한다:

성분 양(mg/캡슐)

활성 성분 30.0 mg

전분 45.0 mg

미세결정성 셀룰로오스 35.0 mg

폴리비닐피롤리돈 4.0 mg

(10% 수용액)

소듐 카르복시메틸 전분 4.5 mg

마그네슘 스테아레이트 0.5 mg

활석 1.0 mg

총 120 mg

활성 성분, 전분 및 셀룰로오스를 번호 20 메쉬 미국 체를 통해 통과시키고, 철저하게 혼합한다. 폴리비닐피롤리돈 용액을 생성된 분말과 혼합하고, 이를 이어서 16 메쉬 미국 체를 통해 통과시킨다.

생성된 과립을 50 내지 60℃에서 건조하고, 16 메쉬 미국 체를 통해 통과시킨다. 이전에 번호 30 메쉬 미국 체를 통해 통과시킨 소듐 카르복시메틸 전분, 마그네슘 스테아레이트, 및 활석을 이어서 과립에 첨가하고, 혼합 후에, 정제기에서 압착하여 각각의 무게가 150 mg인 정제를 수득한다.

제형예 5

40 mg의 약물을 각각 포함하는 캡슐을 하기와 같이 제조한다:

성분 양(mg/캡슐)

활성 성분 40.0 mg

전분 109.0 mg

마그네슘 스테아레이트 1.0 mg

총 150.0 mg

활성 성분, 셀룰로오스, 전분, 마그네슘 스테아레이트를 배합하고, 번호 20 메쉬 미국 체를 통해 통과시키고, 150 mg 양으로 경질 젤라틴 캡슐내로 충전하였다.

제형예 6

25 mg of 활성 성분을 각각 포함하는 좌약을 하기와 같이 제조하였다:

성분 양

활성 성분 25 mg

포화 지방산 글리세리드 2,000 mg 까지

활성 성분을 번호 60 메쉬 미국 체를 통해 통과시키고, 필요한 최소열을 이용하여 이전에 용융된 포화 지방산 글리세리드에 현탁한다. 상기 혼합물을 명목상 2.0 g 용량의 좌약 몰드에 쏟고, 냉각시켰다.

제형예 7

5.0 ml 투여량 당 50 mg의 약물을 각각 포함하는 현탁액을 하기와 같이 제조하였다.

성분 양

활성 성분 50.0 mg

잔탄 검 4.0 mg

소듐 카르복시메틸 셀룰로오스(11%)

미세결정성 셀룰로오스 (89%) 50.0 mg

수크로오스 1.75 g

소듐 벤조에이트 10.0 mg

향신료 및 색소 q.v.

정제수 5.0 ml까지

약물, 수크로오스 및 잔탄 검을 배합하고, 번호 10 메쉬 미국 체를 통해 통과시키고, 물에 미세결정성 셀룰로오스 및 소듐 카르복시메틸 셀룰로오스의 이전에 제조된 용액과 혼합하였다. 소듐 벤조에이트, 향신료, 및 색소를 일정량의 물로 희석하고, 교반하에 첨가하였다. 충분한 물을 원하는 부피를 수득하기 위해 첨가하였다.

제형예 8

15 mg의 활성 성분을 각각 포함하는 경질 젤라틴 정제를 하기와 같이 제조하였다:

성분 양(mg/캡슐)

활성 성분 15.0 mg

전분 407.0 mg

마그네슘 스테아레이트 3.0 mg

총 425.0 mg

활성 성분, 셀룰로오스, 전분, 마그네슘 스테아레이트를 배합하고, 번호 20 메쉬 미국 체를 통해 통과시키고, 560 mg 양으로 경질 젤라틴 캡슐내로 충전하였다.

제형예 9

정맥내 제형물을 하기와 같이 제조할 수 있다:

성분 양

활성 성분 250.0 mg

등장 염수 1000 ml

치료학적 화합물 조성물은 일반적으로 멸균 접근 포트를 갖는 용기, 예를 들면, 정맥내 용액 백 또는 피하 주사 바늘 또는 유사한 날카로운 기구에 의해 구멍을 뚫을 수 있는 스토퍼를 갖는 바이얼내에 위치한다.

제형예 10

국부 제형물을 하기와 같이 제조할 수 있다:

성분 양

활성 성분 1-10 g

유화 왁스 30 g

액체 파라핀 20 g

백색 연질 파라핀 100 g 까지

백색 연질 파라핀을 녹을 때까지 가열한다. 액체 파라핀 및 유화 왁스를 혼입하고, 용해시까지 교반한다. 활성 성분을 첨가하고, 분산될 때까지 교반을 계속한다. 혼합물을 이어서 고체가 될 때까지 냉각한다.

본 발명의 방법에 이용되는 또 다른 바람직한 제형물은 경피 전달 장치 ("패치")를 이용한다. 상기 경피 패치는 조절된 양으로 본 발명의 화합물의 연속적 또는 불연속적 주입을 제공하기 위해 이용될 수 있다. 약제 전달용 경피 패치의 구축 및 이용은 당업계에 주지되어 있다. 예를 들면, 본원에 참고로 포함된 미국 특허 제5,023,252호(1991.6.11 허여)를 참고한다. 상기 패치는 연속적인, 맥박치는, 또는 요구시 약제의 전달을 위해 구축될 수 있다.

직접적 또는 간접적 설치 기술은 약학 조성물을 뇌에 도입하는 것이 바람직하거나 또는 필요할 때 이용될 수 있다. 직접 기술은 통상 혈액-뇌 장벽을 우회하기 위해 숙주의 심실계내로 약물 전달 카테터의 설치를 포함한다. 신체의 특정 해부학상의 부위에 생물학적 인자의 수송을 위해 이용되는 하나의 주입가능한 전달 시스템은 본원에 참고로 포함된 미국 특허 제5,011,472호에 기재된다.

일반적으로 바람직한 간접 기술은 통상 친수성 약물의 지용성 약물로의 전환에 의해 약물 잠복 과정을 제공하기 위해 조성물을 제형화하는 것을 포함한다. 잠복 과정은 일반적으로 약물을 더욱 지용성으로 만들고, 혈액-뇌 장벽에 대한 수송을 용이하게 하기 위해 약물 상에 존재하는 히드록시, 카르보닐, 설페이트, 및 일차 아민기의 봉쇄를 통해 달성된다. 대안적으로, 친수성 약물의 전달은 일시적으로 혈액-뇌 장벽을 열 수 있는 고장액의 동맥내 주입에 의해 증가될 수 있다.

본 발명의 하나의 양태에 따라, 화합물은 단독으로, 수초재형성 및/또는 항-알파-4-항체와 조합하여, 또는 탈수초형성과 관련된 증상 및 질환을 치료하기 위해 전형적으로 이용되는 항염증제와 조합하여 투여될 수 있다. 조합하여 투여될 때, 작은 화합물은 상기 기타 화합물 또는 조성물과 동일한 제형물, 또는 별개의 제형물로 투여될 수 있다.

조합하여 투여될 때, 수초재형성제는 기타 화합물 및 조성물 전에, 후에, 또는 동시에 투여될 수 있다.

본 발명의 약학 조성물은 다양한 약물 전달 시스템에 이용하기에 적합하다. 본 발명에 이용하기에 적합한 제형물은 [Remington's Pharmaceutical Sciences, Mace Publishing Company, Philadelphia, PA, 17th ed. (1985)]에 발견된다.

혈청 반감기를 증가시키기 위해, 화합물은 캡슐화되거나, 리포좀의 루멘내로 도입되거나, 콜로이드로서 제조되거나, 또는 화합물의 연장된 혈청 반감기를 제공하는 기타 통상적인 기술이 이용될 수 있다. 다양한 방법이 예를 들면, 본원에 참고로 포함된 [Szoka et al., 미국 특허 제4,235,871호, 제4,501,728호 및 제4,837,028호] 에 기재된 바와 같이, 리포좀을 제조하는데 유용하다.

중합체 콘쥬게이트

본 발명의 화합물은 중합체 콘쥬게이트로서 제형화되고 투여될 수 있다. 중합체 콘쥬게이트는 비콘쥬게이트된 중합체에 비해 이점, 예를 들면 개선된 용해도 및 안정성을 나타낼 수 있다.

상기와 같이, 단일 중합체 분자는 본 발명의 화합물과 함께 이용될 수 있지만, 또한 하나의 중합체 분자 이상이 또한 부착될 수 있다는 것을 고려한다. 본 발명의 콘쥬게이트된 화합물은 생체내 뿐만 아니라 비생체내 적용 양자에서 유용성을 발견할 수 있다.

부가적으로, 콘쥬게이팅 중합체는 말단 용도 적용에 적합한 임의의 기타 작용기, 모이어티, 또는 기타 콘쥬게이트된 종을 이용할 수 있다는 것을 인식할 것이다. 예를 통해, 일부 적용에서 중합체에 UV-분해 내성, 또는 항산화, 또는 기타 성질 또는 특성을 부여하는 중합체 기능성 모이어티에 공유적으로 결합하는데 유용할 수 있다. 추가의 예로서, 일부 적용에서 중합체를 약물 분자에 대해 반응성이며, 가교하도록 기능화하고, 전체 콘쥬게이트된 물질의 다양한 성질 또는 특성을 증가시키는 것이 유리할 수 있다. 따라서, 중합체는 이의 의도된 목적을 위해 본 발명의 조성물의 콘쥬게이트된 화합물의 효능을 배제하지 않는 임의의 작용기, 반복 그룹, 연결, 또는 기타 구성하는 구조를 포함할 수 있다.

상기 바람직한 특성을 달성하기 위해 유용하게 이용될 수 있는 예시적인 중합체는 상기 기재된 것뿐만 아니라, 본원에 전체적으로 참고로 포함된 PCT WO01/54690(Zheng et al.)에 기재된다. 중합체는 본 발명의 화합물에 커플링되어 (바람직하게는, 링커 모이어티를 통해), 인간 효소에 의해 현저하게 절단되지 않는 안정한 결합을 형성할 수 있다. 일반적으로, "현저하게" 절단가능하지 않는 결합에 대해, 중합체 및 중합체가 연결된 본 발명의 화합물을 연결하는 약 20% 이하의 결합이 고압액체 크로마토그래피(HPLC)를 포함하나 이에 제한되지 않는 당업계의 표준 기술에 의해 측정된 바와 같이, 24시간 내에 절단되는 것을 요한다.

본 발명의 화합물은 콘쥬게이션이 또한 비말단 반응성기로부터 분지될 수 있지만, 가장 바람직하게는 중합체 상의 말단 반응성기를 통해 콘쥬게이트된다. 반응성기(들)을 갖는 중합체는 본원에 "활성화된 중합체"로서 표시된다. 반응성기는 본 발명의 화합물 상의 반응성기와 선택적으로 반응한다. 활성화된 중합체(들)은 부착이 본 발명의 화합물 상의 임의의 유용한 작용기에서 일어날 수 있도록 반응한다. 본 발명의 화합물의 아미노, 탄소, 유리 카르복실기, 적당하게 활성화된 카르보닐기, 히드록실, 구아니딜, 산화된 탄수화물 모이어티, 아미노, 탄소 및 머캅토기(유용하다면)가 부착 자리로서 이용될 수 있다.

일반적으로, 농도에 의존하여 본 발명의 화합물의 몰당 약 1.0 내지 약 10 몰의 활성화된 중합체가 이용된다. 최종 양은 생성물의 비특이적인 변형을 최소하하면서 반응의 정도를 최대화하는 것과 동시에 본 발명의 화합물의 반감기를 최적화하면서 최적 활성을 유지할 화학을 정의하는 것 사이의 균형이다. 바람직하게는, 본 발명의 화합물의 생물학적 활성의 약 50% 이상이 유지되며, 가장 바람직하게는 100%가 유지된다.

반응은 생물학적으로 활성인 물질과 불활성 중합체를 반응시키기 위해 이용되는 임의의 적당한 당업계 인식된 방법에 의해 일어날 수 있다. 일반적으로, 상기 방법은 활성화된 중합체를 제조한 후, 본 발명의 화합물과 활성화된 중합체를 반응시켜 제형물에 적합한 가용성 화합물을 제조하는 것을 포함한다. 상기 변형 반응은 하나 이상의 단계를 포함할 수 있는 수 개의 방법에 의해 수행될 수 있다. 본원에 포함된 상기 중합체 물질은 바람직하게는 실온에서 수용성이다. 상기 중합체의 비제한적인 리스트는 폴리알킬렌 옥시드 단독중합체, 예를 들면, 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 또는 폴리프로필렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌화된 폴리올, 이의 공중합체 및 이의 블록 공중합체(단, 블록 공중합체의 수 용해도가 유지된다면)를 포함한다.

본 발명의 바람직한 실시에서, C_l-C₄ 알킬 폴리알킬렌 글리콜의 폴리알킬렌 글리콜 잔기, 바람직하게는 폴리에틸렌 글리콜(PEG), 또는 상기 글리콜의 폴리(옥시)알킬렌 글리콜 잔기가 목적하는 중합체 시스템에서 유리하게 혼입된다. 그리하여, 본 발명의 화합물이 부착되는 중합체는 폴리에틸렌 글리콜 (PEG)의 단독중합체일 수 있거나 또는 모든 경우에 중합체가 실온에서 수용성이라면 폴리옥시에틸화된 폴리올이다. 상기 중합체의 비제한적인 예는 폴리알킬렌 옥시드 단독중합체, 예를 들면, PEG 또는 폴리프로필렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌화된 폴리올, 이의 공중합체 및 이의 블록 공중합체(단, 블록 공중합체의 수 용해도가 유지된다면)를 포함한다.

폴리옥시에틸화된 폴리올의 예는 이에 제한되지 않고, 폴리옥시에틸화된 글리세롤, 폴리옥시에틸화된 소르비톨, 폴리옥시에틸화된 글루코오스 등을 포함한다. 폴리옥시에틸화된 글리세롤의 글리세롤 골격은 모노-, 디-, 및 트리글리세리드에서 예를 들면, 동물 및 인간에서 천연적으로 발생하는 동일한 골격이다. 그러므로, 상기 분지는 신체에서 외래 물질로서 반드시 보이는 것은 아니다.

당업자는 이전 리스트가 단지 예시적이며, 본원에 기재된 품질을 갖는 모든 중합체 물질이 고려된다는 것을 인식할 것이다. 중합체는 임의의 특정 분자량을 가질 필요는 없으나, 분자량이 약 300 내지 100,000, 더욱 바람직하게는 10,000 내지 40,000인 것이 바람직하다. 특히, 20,000 이상의 크기가 신장에서 여과로 인한 생성물의 손실을 막는데 가장 효과적이다.

폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 및 관련된 폴리알킬렌 옥시드 (PAO's)는 약물의 제조를 위한 유용한 부가물로서 당업계에 공지되어 있다. 예를 들면, PCT WO 93/24476를 참고한다. PEG는 또한 수 용해도 및 순환하는 삶을 증가시키고, 항원성을 감소시키기 위해 단백질, 펩티드 및 효소에 콘쥬게이트 되었다. 예를 들면, 미국 특허 제5,298,643호 및 제5,321,095호(양자가 Greenwald et al에게 허여)를 참고한다. PCT WO 93/24476는 유기 분자를 수용성 폴리에틸렌 글리콜에 공유적으로 결합시키기 위해 에스테르 연결을 이용하는 것을 개시한다. 그리하여, 본 발명의 화합물은 바람직하게는 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 유도체로서 투여된다.

상기와 같이, 본 발명의 화합물 또는 콘쥬게이트는 거기에 공유적으로 부착된 하나 이상의 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 치환기를 포함할 수 있다. 상기 콘쥬게이트는 폴리에틸렌 글리콜 치환기가 부족한 화합물과 비교하여, 개선된 혈청 반감기를 입증한다. 임의의 이론에 제한되지 않고, 개선된 혈청 반감기는 화합물의 구조 상에 하나 이상의 폴리에틸렌 글리콜 실체의 공유 콘쥬게이션과 관련되는 것으로 믿어진다.

용어 "PEG"는 복수 옥시알킬렌 단위를 포함하는 중합체를 말한다. 상기 중합체는 바람직하게는 알킬, 아릴, 치환된 알킬, 및 치환된 아릴로부터 선택된 치환기로 임의로 모노-캡핑된다. 상기 중합체에 포함되는 것은 Jeffamines으로서 당업계에 공지된 디아미노 캡핑된 폴리옥시알킬렌 중합체이다. 여전히, 상기 중합체는 임의로 하나 이상의 비-옥시알킬렌 단위, 예를 들면, 시판되는 폴리[디(에틸렌 글리콜)아디페이트, 폴리[디(에틸렌 글리콜)프탈레이트 디올 등을 포함할 수 있다.

PEG 유도체는 폴리에틸렌 글리콜 자체에서 발견된 하나 또는 양자의 말단 히드록실기가 변형된 폴리에틸렌 글리콜 중합체를 의미한다. 적당한 변형의 예는 하나 또는 양자의 히드록실기(들)을 저분자량 리간드, 또는 또 다른 고분자 또는 중합체로 보호 또는 탈보호될 수 있는 대안적인 작용기로 치환하는 것을 포함한다. 폴리에틸렌 글리콜에서 말단 히드록실기의 변형은 폴리에틸렌 글리콜과 폴리에틸렌 글리콜에서 히드록실기와 반응할 수 있는 작용기를 포함하는 보충적인 반응성 작용기를 포함하는 화합물을 반응시킴으로써 달성될 수 있다. 본 발명의 화합물의 PEG 유도체는 거기에 연결기에 의해 공유적으로 부착된 하나 이상의 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) 치환기를 포함할 수 있다.

"연결기" 또는 "링커"는 본 발명의 비-PEG 치환된 화합물과 하나 이상의 PEG 작용기를 공유적으로 연결하는 작용기(들)을 말한다. 각각의 링커는 키랄, 아키랄(achiral), 선형, 분지형 또는 고리형일 수 있으며, 원자 함량에서 균일 또는 이질일 수 있다 (예를 들면, 단지 탄소 원자를 포함하는 링커 또는 링커 상에 존재하는 탄소 원자 뿐만 아니라 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 링커).

PEG 작용기(들)은 PEG 작용기의 링커에 공유적인 연결을 제공하는 통상적인 화학 기술을 이용하여 링커에 공유적으로 부착된다. 링커는 차례로 그렇지 않으면, 본 발명의 비-PEG 치환된 화합물에 공유적으로 부착될 수 있다. 상기 연결을 초래하는 반응 화학은 당업계에 주지되어 있다. 상기 반응 화학은 링커 상의 보충적인 작용기, 본 발명의 비-PEG 치환된 화합물 및 PEG 작용기의 이용을 포함한다. 바람직하게는, 링커 상의 보충적인 작용기는 결합을 위한 PEG 작용기 상에 유용하거나 또는 결합을 위해 PEG 작용기 상에 도입될 수 있는 작용기에 대해 선택된다. 다시, 상기 보충적인 작용기는 당업계에 주지되어 있다.

상기 중합체는 수평균 분자량이 약 100 내지 100,000; 바람직하게는 약 1,000 내지 50,000; 더욱 바람직하게는 약 10,000 내지 약 40,000이다.

5. 면역글로불린

하나의 특정 구현예에서, 본 발명의 물질은 환자에게 투여될 때 탈수초형성을 저해하고/하거나 수초재형성을 촉진하고/하거나 마비를 감소시키는 면역글로불린이다. 상기 면역글로불린은 알파-4 인테그린 또는 알파-4 인테그린을 포함하는 이합체, 예를 들면, 알파-4 베타-1에 선택적으로 결합하거나, 또는 VCAM-1에 결합하는 면역글로불린으로부터 선택될 수 있다. 바람직하게는, 상기 면역글로불린은 알파-4 베타-1에 결합하고, 알파-4 베타-1 활성을 저해한다. 면역글로불린은 바람직하게는 항체 또는 이의 단편이다.

"항체"는 완전한 면역글로불린, 예를 들면, IgG1 (또는 임의의 IgG 서브클래스) 또는 IgM, 또는 항체로부터 유도된 저해제, 예를 들면, 나탈리주마브(Antegren)을 포함하는 것을 의미한다.

"항체 동족체"는 이황화 결합을 통해 연결된 면역글로불린 경쇄 및 중쇄로 구성된 본래의 항체를 포함하는 것을 의미한다. 용어 "항체 동족체"는 또한 하나 이상의 항원(즉, 인테그린 또는 인테그린 리간드)에 결합할 수 있는 면역글로불린 경쇄, 면역글로불린 중쇄 및 이의 항원 결합 단편으로부터 선택된 하나 이상의 폴리펩티드를 포함하는 단백질을 포함하는 것을 의미한다. 하나 이상의 폴리펩티드로 구성된 항체 동족체의 성분 폴리펩티드는 임의로 이황화 결합될 수 있거나 또는 그렇지 않으면 공유적으로 연결될 수 있다. 따라서, "항체 동족체"는 유형 IgA, IgG, IgE, IgD, IgM (뿐만 아니라 이의 서브유형, 예를 들면, IgGl)의 본래의 면역글로불린을 포함하는데, 여기에서 면역글로불린의 경쇄는 카파 또는 람다 유형일 수 있다. "항체 동족체"는 또한 항원 결합 특이성을 보유하는 본래의 항체의 부분, 예를 들면, Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')₂ 단편, Fv 단편, scFv 단편, 중쇄 및 경쇄 단량체 또는 이합체 또는 이의 혼합물을 포함한다.

본 발명의 물질이 항체인 경우에, 단클론 항체가 바람직한 항체이다. 전형적으로 상이한 에피토프에 대한 상이한 항체를 포함하는 다클론 항체 제제와 대조적으로, 각각의 단클론 항체는 항원 상의 단일 에피토프에 대한 것이다. 단클론 항체의 두번째 이점은 기타 면역글로불린에 의해 오염되지 않는 수단, 예를 들면, 파아지 현시(display) 또는 하이브리도마로부터 분리에 의해 합성된다는 것이다.

본 발명이 본 발명의 물질로서 다클론 및 단클론 항체 양자를 포함할 의도이지만, 단클론 항체가 매우 특이적이므로 바람직하며, 본 발명은 그리하여 주로 단클론 항체의 용어로 논의된다.

"천연 항체 및 면역글로불린"은 통상 2개의 동일한 경쇄(L) 및 2개의 동일한 중쇄(H)로 구성된 약 150,000 달톤의 헤테로테트라머성 당단백질이다. 각각의 경쇄는 하나의 공유 이황화 결합에 의해 중쇄에 연결되는 반면, 이황화 연결의 수는 상이한 면역글로불린 이성질형태의 중쇄 사이에 변한다. 각각의 중쇄 및 경쇄는 또한 규칙적으로 공간을 갖는 사슬내 이황화 브리지를 갖는다. 각각의 중쇄는 하나의 말단에 가변성 도메인(V_H)에 이은 수많은 불변 도메인을 가진다. 각각의 경쇄는 하나의 말단에 가변성 도메인(V_L) 및 이의 다른 말단에 불변 도메인을 가지며; 경쇄의 불변 도메인은 중쇄의 제1 불변 도메인과 정렬되며, 경쇄 가변성 도메인은 중쇄의 가변성 도메인과 정렬된다. 특정 아미노산 잔기는 경쇄 및 중쇄 가변성 도메인 사이의 접촉면을 형성하는 것으로 믿어진다 (Clothia et al., 1985, J. Mol. Biol., 186: 651-63; Novotny et al., 1985, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82: 4592-6).

게다가, 기타 항체는 당업계에 유용한 기술을 이용하여 확인될 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 단클론 항체는 파아지 현시 기술을 이용하여 제조될 수 있다. 알파-4 인테그린 또는 알파-4 인테그린을 포함하는 이합체에 선택적으로 결합하는 항체 단편을 분리한다. 파아지 현시를 통해 상기 항체를 제조하는 전형적인 바람직한 방법이 미국 특허 제6,225,447호; 제6,180,336호; 제6,172,197호; 제6,140,471호; 제5,969,108호; 제5,885,793호; 제5,872,215호; 제5,871,907호; 제5,858,657호; 제5,837,242호; 제5,733,743호 및 제5,565,332호에 개시된다.

본원에서 "변이체" 항체는 부모(parent) 항체 서열에서 하나 이상의 아미노산 잔기(들)의 첨가, 결실 및/또는 치환을 통해 "부모" 항체 아미노산 서열과 상이한 면역글로불린 분자를 말한다. 부모 항체 또는 면역글로불린은 다클론 항체, 단클론 항체, 인간화된 항체, primatized 항체 또는 임의의 항체 단편일 수 있다. 바람직한 구현예에서, 상기 변이체는 부모 항체의 하나 이상의 과변이 부위(들)에서 하나 이상의 아미노산 치환(들)을 포함한다. 예를 들면, 상기 변이체는 부모 항체의 하나 이상의 과변이 부위에서 하나 이상, 예를 들면, 약 1 내지 10, 바람직하게는 약 2 내지 약 5 개의 치환을 포함할 수 있다.

통상적으로, 상기 변이체는 부모 항체 경쇄 또는 경쇄 가변성 도메인 서열과 75% 이상의 아미노산 서열 동일성, 더욱 바람직하게는 80% 이상, 더욱 바람직하게는 85% 이상, 더욱 바람직하게는 90% 이상, 가장 바람직하게는 95% 이상의 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 가질 것이다. 상기 서열에 대한 동일성 또는 상동성은 최대% 서열 동일성을 달성하기 위해 서열을 정렬하고 필요하다면 갭을 도입한 후에, 부모 항체 잔기와 동일한 후보 서열에서 아미노산 잔기의 백분율로서 본원에 정의된다. 항체 서열내로의 N-말단, C-말단, 또는 내부 연장, 결실, 또는 삽입 어느 것도 서열 동일성 또는 상동성에 영향을 주는 것으로서 해석되지 않을 것이다. 상기 변이체는 수용체에 결합하는 능력을 보유하며, 바람직하게는 부모 항체의 것보다 우수한 성질을 가진다. 예를 들면, 상기 변이체는 더 강한 결합 친화성, 수용체를 활성화시키는 증가된 능력 등을 가질 수 있다. 상기 성질을 분석하기 위해, 부모 항체의 Fab 형태와 상기 변이체의 Fab 형태 또는 부모 항체의 총 길이 형태와 변이체의 총 길이 형태를 비교해야 한다. 본원에 특히 관심 있는 변이체 항체는 부모 항체와 비교할 때, 약 10배 이상, 바람직하게는 약 20배 이상, 가장 바람직하게는 약 50배 이상의 생물학적 활성의 증가를 나타내는 것이다. 본원의 "부모" 항체는 상기 변이체의 제조를 위해 이용되는 아미노산 서열에 의해 코딩되는 것이다. 바람직하게는, 상기 부모 항체는 인간 골격 부위 및 인간 항체 불변 부위(들)을 가진다. 예를 들면, 부모 항체는 인간화되거나 또는 인간 항체일 수 있다. "분리된" 항체는 이의 천연 환경의 성분으로부터 확인되고, 분리되고/되거나 회수된 것이다. 이의 천연 환경의 오염 성분은 상기 항체에 대한 진단 또는 치료 용도를 방해하는 물질이며, 효소, 호르몬, 및 기타 단백질성 또는 비단백질성 용질을 포함할 수 있다. 바람직한 구현예에서, 상기 항체는 (1) Lowry 방법에 의해 측정된 바와 같이, 95 중량% 이상, 가장 바람직하게는 99 중량% 이상, (2) 회전 컵 시쿼네이터(sequenator)의 이용에 의해 N-말단 또는 내부 아미노산 서열의 15 잔기 이상을 수득하기에 충분한 정도로, 또는 (3) 쿠마쉬 블루 또는 바람직하게는 은 염색을 이용하여 환원 또는 비환원 조건하에 SDS-PAGE에 의해 균일하게 정제될 것이다. 분리된 항체는 항체의 천연 환경의 하나 이상의 성분이 존재하지 않을 것이므로 재조합 세포내에서 인 시투 항체를 포함한다. 통상적으로, 그러나, 분리된 항체는 하나 이상의 정제 단계에 의해 제조될 것이다.

5.1. 단클론 항체

단클론 항체는 또한 하이브리도마 방법 또는 유전자 조작법을 이용하여 제조될 수 있다. 상기 방법은 많은 특이적인 항원에 대해 높은 수준의 단클론 항체를 분비하는 하이브리드 세포주를 제조하기 위해 널리 적용되어 왔으며, 또한 본 발명의 단클론 항체를 제조하기 위해 이용될 수 있다. 예를 들면, 마우스 (예를 들면, Balb/c 마우스)가 복강내 주사에 의해 항원 알파-4 에피토프를 이용하여 면역화될 수 있다. 면역 반응을 허용하도록 충분한 시간이 경과된 후에, 마우스를 희생하고, 비장 세포를 수득하고, 당업계에 주지된 기술을 이용하여 골수종세포와 융합하였다. 생성된 융합 세포인 하이브리도마를 이어서 선택 배지에 키우고, 생존하는 세포를 제한 희석 조건을 이용하여 상기 배지에 키웠다. 클로닝 및 재클로닝 후에, 표적인 알파-4 또는 알파-4 인테그린을 포함하는 이합체에 선택적으로 결합하는 항체(예를 들면, IgG 또는 IgM 클래스 또는 IgG1 서브클래스)를 분비하는 하이브리도마를 분리할 수 있다. 인간 용도에 특이적인 물질을 제조하기 위해, 분리된 단클론은 이어서 키메라 및 인간화된 항체를 제조하기 위해 이용될 수 있다. 항-펩티드 항체인 항체가 또한 제조될 수 있다. 상기 항-펩티드 항체는 알파-4 인테그린의 펩티드에 대해 제조될 수 있다.

본 발명의 물질을 언급할 때, 용어 "키메라"는 상기 물질이 이종의 구조 및/또는 이종의 유래를 갖는 2 이상의 단배질의 연결(화학적 가교 또는 공유 또는 기타 유형)로 구성된 것을 의미한다. 그리하여, 키메라 알파-4 인테그린 길항제는 알파-4 인테그린 길항제 또는 단편인 하나의 모이어티 및 알파-4 인테그린 길항제가 아닌 또 다른 모이어티를 포함할 수 있다.

"키메라" 단백질, "융합" 또는 "융합 단백질"의 종은 이의 개별적인 펩티드 골격을 통해, 가장 바람직하게는 상기 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드 분자의 유전자 발현을 통해 2 이상의 단백질 또는 이의 단편의 동일한 선형의 공유 연결을 말한다. 그리하여, 바람직한 융합 단백질은 수초재형성 항체(즉, 또 다른 면역글로불린 또는 폴리펩티드로부터 유래한 것)에 대해 원래가 아닌 두번째 모이어티에 공유적으로 연결된 수초재형성 항체 또는 이의 단편을 포함하는 키메라 단백질이다. 본 발명의 바람직한 융합 단백질은 항원 결합 특이성을 보유하는 본래의 항체의 부분, 예를 들면, Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')₂ 단편, Fv 단편, scFv 단편, 중쇄 단량체 또는 이합체, 경쇄 단량체 또는 이합체, 하나의 중쇄 및 하나의 경쇄로 구성된 이합체 등을 포함할 수 있다.

가장 바람직한 융합 단백질은 키메라이며, 융합되거나 또는 그렇지 않으면 힌지 및 면역글로불린 경쇄, 중쇄, 또는 양자의 불변 부위의 전부 또는 부분에 연결된 수초재형성 모이어티를 포함한다. 그리하여, 본 발명은 하기를 포함하는 분자를 특징으로 한다: (1) 수초재형성 모이어티, (2) 두번째 펩티드, 예를 들면, 수초재형성 모이어티의 용해도 또는 생체내 수명을 증가시키는 것, 예를 들면, 면역글로불린 슈퍼 패밀리의 멤버 또는 이의 단편 또는 부분, 예를 들면, IgG의 부분 또는 단편, 예를 들면, 인간 IgG1 중쇄 불변 부위, 예를 들면, CH2, CH3, 및 힌지 부위. 구체적으로, "수초재형성 모이어티/Ig 융합"은 본 발명의 생물학적으로 활성인 수초재형성 모이어티를 포함하는 단백질이다. 수초재형성제의 종은 면역글로불린의 불변 도메인의 적어도 부분에 연결된 본 발명의 수초재형성 면역글로불린을 포함하는 단백질인 "인테그린/Fc 융합"이다. 바람직한 Fc 융합은 중쇄 면역글로불린의 C 말단 도메인을 포함하는 항체의 단편에 연결된 본 발명의 수초재형성 면역글로불린을 포함한다.

용어 "융합 단백질"은 또한 수초재형성 모이어티가 아니며("키메라" 분자를 초래함), 하기 기재된 정제된 단백질로부터 드 노보(de novo)로 제조된 두번째 모이어티에 모노 또는 헤테로-기능성 분자를 통해 화학적으로 연결된 수초재형성 모이어티를 의미한다. 그리하여, 융합 단백질인 재조합적으로 연결된 것과 반대로, 화학적으로 연결된 키메라 분자의 하나의 예는 하기를 포함할 수 있다: (1) 알파-4 인테그린 서브유닛 타겟팅 모이어티, 예를 들면, VLA-4 함유 세포의 표면 상에서 VLA-4에 결합할 수 있는 VCAM-1 모이어티; (2) 타겟팅 모이어티의 용해도 또는 생체내 수명을 증가시키는 두번째 분자, 예를 들면, 폴리알킬렌 글리콜 중합체, 예를 들면, 폴리에틸렌 글리콜 (PEG). 알파-4 타겟팅 모이어티는 임의의 천연적으로 발생하는 알파-4 리간드 또는 이의 단편, 예를 들면, VCAM-1 펩티드 또는 유사한 보존적으로 치환된 아미노산 서열일 수 있다.

키메라, primatized 및 인간화된 항체는 비인간 항체로부터 제조될 수 있으며, 이들이 제조된 항체와 동일하거나 또는 유사한 결합 친화성을 가질 수 있다. 예를 들면, 적당한 생물학적 활성의 인간 항체 유래의 유전자와 함께, 적당한 항원 특이성의 마우스 항체 분자 유래의 유전자를 스플라이싱함으로써 키메라 항체의 제조를 위해 개발된 기술 (Morrison et al., 1984 Proc. Natl. Acad. Sci. 81: 6851; Neuberger et al., 1984 Nature 312: 604; Takeda et al., 1985 Nature 314: 452)이 이용될 수 있으며; 상기 항체는 본 발명의 범위 내이다. 예를 들면, 마우스 단클론 항체의 가변성(V) 부위를 코딩하는 핵산이 인간 불변(C) 부위, 예를 들면, IgG1 또는 IgG4를 코딩하는 핵산에 연결될 수 있다. 생성된 항체는 그리하여 일반적으로 비인간 항체 유래의 항원 결합 도메인 및 인간 항체 유래의 C 또는 이펙터(effector) 도메인과의 종 하이브리드이다.

인간화된 항체는 주로 인간 항체(수용체 항체) 유래이나, 비인간 항체(제공자 항체) 유래의 실질적으로 상보성 결정 부위를 갖는 가변 부위를 갖는 항체이다. 예를 들면, Queen et al., 1989 Proc. Natl Acad. Sci. USA 86: 10029-33; WO 90/07861; 및 미국 특허 제6,054,297호; 제5,693,761호; 제5,585,089호; 제5,530,101호 및 제5,224,539호를 참고한다. 상기 항체의 불변 부위(들)은 일반적으로 또한 인간 항체 유래이다. 인간 가변성 도메인은 전형적으로 원하는 비인간 가변 부위 결합 도메인과 높은 상동성을 나타내는 서열을 갖는 인간 항체로부터 선택된다. 중쇄 및 경쇄 가변성 잔기는 동일한 항체, 또는 상이한 인간 항체로부터 유래될 수 있다. 게다가, 서열은 수 개의 인간 항체의 컨센서스(consensus), 예를 들면, WO 92/22653에 기재된 것으로서 선택될 수 있다.

인간 가변 부위 내의 특이적인 아미노산은 예상된 입체형태 및 항원 결합 성질에 기초하여 치환을 위해 선택된다.

이는 컴퓨터 모델링, 가변 부위 내의 특정 위치에서 아미노산의 행동 및 결합 성질의 예상 및 치환의 효과의 관찰과 같은 기술을 이용하여 측정될 수 있다. 예를 들면, 아미노산이 비인간 가변 부위 및 인간 가변 부위 사이에 상이할 때, 인간 가변 부위는 비인간 가변 부위의 아미노산 조성을 반영하기 위해 변경될 수 있다. 인간화된 항-알파-4 항체의 일부 예는 본원에 기재된다.

"인간화된 항체 동족체"는 항원 결합에 요구되지 않는 인간 면역글로불린 경쇄 또는 중쇄의 아미노산의 일부 또는 모두가 비인간 포유동물 면역글로불린 경쇄 또는 중쇄 유래의 해당하는 아미노산으로 치환된, 재조합 DNA 기술에 의해 제조된 항체 동족체를 의미한다. "인간 항체 동족체"는 면역글로불린 경쇄 또는 중쇄의 모든 아미노산(이들이 항원 결합에 필요하는지에 무관하게)이 인간 유래인 항체 동족체이다.

특정 구현예에서, 본 발명의 만성 투여 계획에 이용된 항체는 본원에 참고로 포함된 미국 특허 제5,840,299호에 개시된 인간화된 항체이다.

또 다른 구현예에서, 인간 항체 유전자를 포함하는 형질전환 마우스는 항원 알파-4 구조로 면역화될 수 있으며, 하이브리도마 기술이 알파-4에 선택적으로 결합하는 인간 항체를 생성하기 위해 이용될 수 있다.

키메라, 인간 및/또는 인간화된 항체는 재조합 발현, 예를 들면, 인간 하이브리도마(Cole et al., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p.77 (1985)), 골수종세포 또는 차이니즈 햄스터 오바리(CHO) 세포에서 발현에 의해 제조돨 수 있다. 대안적으로, 항체를 코딩하는 서열은 동물의 게놈 내로 도입하여 형질전환 동물을 생산하기에 적합한 벡터 내로 혼입될 수 있다. 하나의 예는 소와 같은 형질전환 동물의 우유에서 상기 항체를 생산하는 것이다. 예를 들면, 미국 특허 제5,849,992호 및 제5,304,489호를 참고한다. 적당한 트랜스진(transgene)은 유선 특이적 유전자, 예를 들면 카제인 또는 β-락토글로불린 유래의 프로모터 및/또는 인핸서를 갖는 트랜스진을 포함한다.

5.1.1. 인간화된 및 Primatized 항체

본 발명의 하나의 구현예에서, VLA-4의 알파-4 서브유닛에 특이적인 인간화된 (및 Primatized) 면역글로불린 (또는 항체)이 제공되며, 이는 유효량으로 투여될 때, 탈수초형성을 저해하고/하거나 수초재형성을 촉진하고/하거나 마비를 감소시킨다. 인간화된 및 Primatized 항체는 유전공학 기술을 이용하여 변형된 동물 (전형적으로 포유동물) 유래의 항체이다. 상기 기술은 항체의 원래의 항원 특이성을 보유하면서, 불변 부위 및/또는 가변 부위 골격 서열을 인간 서열로 대체하기 위해 이용된다. 인간화된 및 Primatized 항체는 인간 항원 (예를 들면, 인간 VCAM-1 또는 인간 VLA-4)에 대한 특이성을 갖는 설치류 (예를 들면, 마우스 및 햄스터) 항체로부터 통상 유도된다. 항체가 치료 목적으로 투여될 동물 유래의 서열을 가지기 위해 제공자 항체 (항원이 투여되는 동물 유래의 항체)를 재형성함으로써, 항체의 투여시 동물에서 감소된 숙주 반응이 있을 것이다. 단지 Fc 부위 또는 거의 상보성 결정 부위(CDR)가 수용체 도메인으로 대체될 수 있으며, 여기에서 수용체는 재형성된 항체가 투여되는 동물이다(예를 들면, 인간, 사육 동물, 농업 동물 등과 같은 포유동물).

유효량으로 환자에게 투여될 때 탈수초형성을 저해하는 VLA-4의 알파-4 서브유닛에 결합하는 항체가 바람직하다.

가장 바람직한 것은 유효량으로 투여될 때, 탈수초형성 질환 또는 증상으로 고생하는 대상에서 수초재형성을 유도하고/하거나 마비를 감소시키는 항체이다.

전형적으로, 뮤린 항체의 CDR은 인간 항체의 해당하는 부위로 이식되는데, 이는 특정 항원에 결합하는 마우스 항체(또는 임의의 기타 동물 항체)의 부위인 CDR (즉, 항체 중쇄에 3개, 경쇄에 3개)이기 때문이다.

CDR의 이식은 유전 공학에 의해 달성되며, 이로 인해 CDR DNA 서열은 뮤린 중쇄 및 경쇄 가변성 (V) 부위 유전자 단편의 클로닝에 의해 결정되며, 위치지정 돌연변이유발에 의해 해당하는 인간 V 부위로 이식된다. 과정의 최종 단계에서, 원하는 이성질형(통상 CH에 대해 감마 I 및 CL에 대해 카파)의 인간 불변 부위 유전자 단편이 첨가되며, 인간화된 중쇄 및 경쇄 유전자가 가용성 인간화된 항체를 생산하기 위해 포유동물 세포에서 동시 발현된다.

인간 항체로 상기 CDR의 전달은 상기 항체에 원래의 뮤린 항체의 항원 결합 성질을 부여한다. 뮤린 항체에서 6개의 CDR이 V 부위 "골격" 부위 상에 구조적으로 마운팅된다. CDR-그라프팅이 성공적인 이유는 마우스 및 인간 항체 사이의 골격 부위가 CDR에 대한 유사한 부착점과 매우 유사한 3-D 구조를 가질 수 있어, CDR이 상호교환될 수 있다는 것이다. 상기 인간화된 항체 동족체는 예를 들면, [Jones et al., 1986, Nature 321: 522-5; Riechmann et al. 1988, Nature 332: 323-7; Queen et al., 1989, Proc. Nat. Acad. Sci. USA 86: 10029; 및 Orlandi et al., 1989, Proc. Nat. Acad. Sci. USA 86: 3833]에 예시된 바와 같이 제조될 수 있다.

그럼에도 불구하고, 골격 부위 내의 특정 아미노산은 CDR과 상호작용하고, 전체적인 항원 결합 친화성에 영향을 주는 것으로 생각된다. 인간 V 부위 골격의 임의의 변형 없이 재조합 인간화된 항체를 제조하기 위해 뮤린 항체로부터 CDR의 직접적인 전달은 종종 결합 친화성의 부분적이거나 또는 완전한 손실을 초래한다. 몇 개의 경우에, 결합 활성을 수득하기 위해 수용체 항체 (예를 들면, 인간 항체)의 골격 부위 내의 잔기를 변경하는 것이 중요한 것 같다.

Queen et al., 1989 (이하 동일) 및 WO 90/07861 (단백질 디자인 실험실)은 뮤린 MAb (항-Tac)와 인간 면역글로불린 골격 및 불변 부위의 CDR을 조합함으로써 수용체 항체의 골격 부위 내의 변형된 잔기를 포함하는 인간화된 항체의 제조를 기재하였다. 인간 V 부위 골격 잔기의 임의의 변형 없이 결합 친화성의 손실의 문제를 해결하는 하나의 해결책은 2가지 주요 단계를 포함한다.

먼저, 인간 V 골격 부위는 원래의 뮤린 항체의 V 부위 골격에 대한 최적 단백질 서열 상동성에 대한 컴퓨터 분석가에 의해 선택된다. 제2 단계에서, 뮤린 V 부위의 3차 구조가 컴퓨터에 의해 모델링되어 뮤린 CDR과 상호작용할 것 같은 골격 아미노산 잔기를 본다. 상기 뮤린 아미노산 잔기는 이어서 상동의 인간 골격 상에 겹친다. 부가적인 상세한 것에 대해, 미국 특허 제5,693,762호; 제5,693,761호; 제5,585,089호; 및 제5,530,101호 (단백질 디자인 실험실)를 참고한다.

본 발명에 유용한 특정 알파-4 서브유닛 포함 인테그린 길항제는 키메라 및 미국 특허 제5,932,214호 (MAbHP1/2)에 기재되고 제조된 B 에피토프 특이성을 갖는 인간화된 재조합 항체 동족체(즉, 본래의 면역글로불린 및 이의 부분)을 포함한다. 키메라 (마우스 가변성-인간 불변) 및 인간화된 항-인테그린 항체 동족체의 제조용 출발 물질은 이전에 기재된 뮤린 단클론 항-인테그린 항체, 시판되는 단클론 항-인테그린 항체(예를 들면, HP2/1, Amae International, Inc., Westbrook, Me)일 수 있다.

기타 바람직한 인간화된 항-VLA-4 항체 동족체는 PCT/US95/01219 (1995.7.27), 미국 특허 제5,840,299호 및 제6,033,665호에서 Athena Neurosciences, Inc.에 의해 기재된다. 제5,932,214호, 제5,840,299호 및 제6,033,665호 특허의 내용은 본원에 전체적으로 참고로 포함된다.

상기 인간화된 항-VLA-4 항체는 인간화된 경쇄 및 인간화된 중쇄를 포함한다. 인간화된 경쇄는 마우스 21.6 면역글로불린 경쇄의 해당하는 상보성 결정 부위 유래의 아미노산 서열을 갖는 3개의 상보성 결정 부위 (CDRI, CDR2 및 CDR3) 및 적어도 하나의 위치에서 아미노산 위치가 마우스 21.6 면역글로불린 경쇄 가변 부위 골격의 동등한 위치에 존재하는 동일한 아미노산에 의해 차지되는 것을 제외하고 인간 카파 경쇄 가변 부위 골격 서열 유래의 가변 부위 골격을 포함한다.

인간화된 중쇄는 마우스 21.6 면역글로불린 중쇄의 해당하는 상보성 결정 부위 유래의 아미노산 서열을 갖는 3개의 상보성 결정 부위(CDR1, CDR2 및 CDR3), 및 적어도 하나의 위치에서 아미노산 위치가 마우스 21.6 면역글로불린 중쇄 가변 부위 골격의 동등한 위치에 존재하는 동일한 아미노산에 의해 차지되는 것을 제외하고 인간 중쇄 가변 부위 골격 서열 유래의 가변 부위 골격을 포함한다. 미국 특허 제5,840,299호 및 제6,033,665호를 참고한다.

분리된 알파-4 인테그린 길항제의 단편 (예를 들면, 본원에 기재된 항체 동족체의 단편)은 또한 재조합 방법, 단백질분해 절단, 또는 당업자에게 공지된 방법을 이용한 화학 합성에 의해 효율적으로 제조될 수 있다. 재조합 방법에서, 폴리펩티드의 내부 또는 말단 단편은 분리된 고슴도치(hedgehog) 폴리펩티드를 코딩하는 DNA 서열의 하나의 말단(말단 단편에 대해) 또는 양자의 말단(내부 단편에 대해)으로부터 하나 이상의 뉴클레오티드를 제거함으로써 생성될 수 있다.

돌연변이된 DNA의 발현은 폴리펩티드 단편을 생성한다. 특정 엔도뉴클레아제를 이용한 절단은 또한 단편의 어레이를 코딩하는 DNA를 생성할 수 있다. 단백질의 단편을 코딩하는 DNA는 또한 무작위 전단, 제한효소 절단, 또는 이의 조합에 의해 생성될 수 있다. 단백질 단편은 본래의 단백질로부터 직접 생성될 수 있다. 펩티드는 플라스민, 트롬빈, 트립신, 키모트립신, 또는 펩신을 포함하나 이에 제한되지 않는 단백질분해 효소에 의해 특이적으로 절단될 수 있다. 상기 효소의 각각은 이것이 공격하는 펩티드 결합의 유형에 대해 특이적이다. 트립신은 카르보닐기가 염기성 아미노산, 통상 아르기닌 또는 라이신 유래인 펩티드 결합의 가수분해를 촉매한다. 펩신 및 키모트립신은 방향족 아미노산, 예를 들면 트립토판, 티로신, 및 페닐알라닌 유래의 펩티드 결합의 가수분해를 촉매한다. 절단된 단백질 단편의 대안적인 세트는 단백질 분해 효소에 민감한 자리에서 절단을 막음으로써 생성된다. 예를 들면, 약간 염기성 용액에서 에틸트리플루오로티오아세테이트와 라이신의 ε-아미노산기의 반응은 인접한 펩티드 결합이 더 이상 트립신에 의한 가수분해에 민감하지 않은 봉쇄된 아미노산 잔기를 수득한다.

단백질은 단백질분해 효소에 민감한 펩티드 연결을 생성하기 위해 변형될 수 있다. 예를 들면, β-할로에틸아민을 이용한 시스테인 잔기의 알킬화는 트립신에 의해 가수분해되는 펩티드 연결을 수득한다 (Lindley, 1956, Nature 178: 647). 게다가, 특정 잔기에서 펩티드 사슬을 절단하는 화학 물질이 이용될 수 있다. 예를 들면, 시아노겐 브로마이드는 메티오닌 잔기에서 펩티드를 절단한다 (Gross et al., 1961, J. Am. Chem. Soc. 83: 1510). 그리하여, 단백질을 다양한 변형제의 조합, 즉 단백질분해 효소 및/또는 화학 물질로로 처리함으로써, 단백질은 단편의 중첩 없이 원하는 길이의 단편으로 나누어질 수 있거나 또는 원하는 길이의 중첩되는 단편으로 나누어질 수 있다.

5.1.1.1. 나탈리주마브 및 관련된 인간화된 항체

본 발명은 수초재형성을 촉진하기 위해 단독으로 또는 조합하여 VLA-4 리간드에 특이적으로 결합하는 인간화된 면역글로불린을 이용하는 방법을 제공한다. 상기 치료 방법 및 약물에 이용하기 위한 하나의 바람직한 항체는 본원에 전체적으로 포함된 미국 특허 제5,840,299호(Elan Pharmaceuticals 에게 허여)에 기재된 것을 포함한다. 또 다른 양태는 생체내에서 평가된 수초재형성 활성을 갖는 상기 항체의 단편의 이용을 고려한다.

인간화된 항체는 인간화된 경쇄 및 인간화된 중쇄를 포함한다. 하나의 양태에서, 인간화된 경쇄는 마우스 21-6 면역글로불린 경쇄의 해당하는 상보성 결정 부위 유래의 3개의 상보성 결정 부위 (즉, CDR1, CDR2 및 CDR3), 및 위치 L45, L49, L58 및 L69로 구성된 제1군으로부터 선택된 적어도 하나의 위치에서 아미노산 위치가 마우스 21.6 면역글로불린 경쇄 가변 부위 골격의 동등한 위치에 존재하는 동일한 아미노산에 의해 차지되는 것을 제외하고 인간 카파 경쇄 가변 부위 골격 서열 유래의 가변 부위 골격을 포함한다.

인간화된 중쇄는 마우스 21-6 면역글로불린 중쇄의 해당하는 상보성 결정 부위 유래의 아미노산 서열을 갖는 3개의 상보성 결정 부위(CDR1, CDR2 및 CDR3), 및 H27, H28, H29, H30, H44, H71로 구성된 군으로부터 선택된 적어도 하나의 위치에서 아미노산 위치가 마우스 21-66 면역글로불린 중쇄 가변 부위 골격의 동등한 위치에 존재하는 동일한 아미노산에 의해 차지되는 것을 제외하고 인간 중쇄 가변 부위 골격 서열 유래의 가변 부위 골격을 포함한다. 면역글로불린은 약 10⁷M^-1의 하한 및 마우스 21-6 면역글로불린의 친화성의 약 5배의 상한을 갖는 친화성으로 VLA-4에 특이적으로 결합한다.

통상, 인간화된 경쇄 및 중쇄 가변 부위 골격은 각각 RE1 및 21/28'CL 가변 부위 골격 서열 유래이다. 인간화된 경쇄 가변 부위 골격이 RE1 유래일 때, 2 이상의 골격 아미노산이 대체된다. 하나의 아미노산은 상기 기재된 위치의 제1 그룹 유래이다. 다른 아미노산은 위치 L104, L105 및 L107로 구성된 제3 그룹 유래이다. 상기 위치는 RE1 이외의 인간 면역글로불린 유래의 카파 경쇄의 동등한 위치에 존재하는 동일한 아미노산에 의해 차지된다.

일부 인간화된 면역글로불린은 La 또는 Lb로 표시된 성숙 경쇄 가변 부위 서열 또는 Ha, Hb 또는 Hc로 표시된 성숙 중쇄 가변 부위 서열을 가진다 (도 13). 바람직한 인간화된 면역글로불린은 La 경쇄 및 Ha, Hb 또는 Hc 중쇄를 갖는 것을 포함한다(도 14).

인간화된 면역글로불린은 실질적으로 인간 면역글로불린 유래의 가변성 골격 부위 및 실질적으로 mu MAb 21.6로 불리는 마우스 면역글로불린(제공자 면역글로불린으로서 언급됨) 유래의 상보성 결정 부위를 가진다.

존재한다면 불변 부위(들)은 또한 실질적으로 인간 면역글로불린 유래이다. 인간화된 항체는 10⁷, 10⁸, 10⁹, 또는 10¹⁰M^-1 이상의 VLA-4에 대한 특이적인 결합 친화성을 나타낸다. 통상, VLA-4에 대한 인간화된 항체의 결합 친화성의 상한은 mu MAb 21.6 (약 10⁹ M^-1)의 것의 3 또는 5의 인자 내이다. 종종, 결합 친화성의 하한은 또한 mu MAb 21.6의 것의 3 또는 5의 인자 내이다.

인간화된 항체는 예를 들면, 마우스 MAb 21.6 단클론 항체에 대해 예시된 바와 같이 제조될 수 있다. 인간화된 항체의 제조용 출발 물질은 mu MAb 21.6 이다. 상기 항체의 분리 및 성질은 본원에 전체적으로 참고로 포함된 미국 특허 제6,033,655 (Elan Pharmaceuticals,Inc.에게 허여)에 기재된다. 간단히, mu MAb 21.6 은 VLA-4의 알파-4 서브유닛에 대해 특이적이며, 종양괴사인자로 자극된 래트 뇌 세포의 조직 배양물에 대한 인간 림프구 결합을 저해하는 것으로 밝혀졌다. N-말단에서 C-말단으로, 경쇄 및 중쇄 양자는 도메인 FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 및 FR4 를 포함한다. 각 도메인에 아미노산의 할당은 Kabat의 넘버링 관습에 따른다.

다음 단계는 골격 잔기를 공급하기 위해 인간 항체를 선택하는 것을 포함한다. 마우스 CDR의 인간 가변성 도메인 골격으로의 치환은 대개 인간 가변성 도메인 골격이 CDR이 유래한 마우스 가변성 골격과 동일 또는 유사한 입체형태를 채택한다면, 이의 올바른 공간 방향의 보유를 초래할 것 같다. 이는 골격 서열이 CDR이 유래된 뮤린 가변성 골격 도메인과 높은 정도의 서열 동일성을 나타내는 인간 항체 유래의 인간 가변성 도메인을 수득함으로써 달성된다. 중쇄 및 경쇄 가변성 골격 부위는 동일 또는 상이한 인간 항체 서열로부터 유래될 수 있다. 인간 항체 서열은 천연적으로 발생하는 인간 항체 서열 또는 수 개의 인간 항체의 공통 서열일 수 있다. Kettleborough et al., Protein Engineering 4: 773 (1991); Kolbinger et al., Protein Engineering 6: 971 (1993)를 참고한다.

적당한 인간 항체 서열은 마우스 가변 부위의 아미노산 서열과 공지된 인간 항체의 서열의 컴퓨터 비교에 의해 확인된다. 상기 비교는 중쇄 및 경쇄에 대해 별도로 수행되나, 원리는 각각에 대해 유사하다. 상기 비교는 mu 21.6 경쇄가 서브타입 카파 1의 인간 경쇄와 매우 큰 서열 동일성을 보여주며; mu 21.6 중쇄가 Kabat에 의해 상기 정의된 서브타입 1의 인간 중쇄와 매우 큰 서열 동일성을 보여준다는 것을 나타낸다. 그리하여, 경쇄 및 중쇄 인간 골격 부위는 통상 상기 서브타입의 인간 항체, 또는 상기 서브타입의 공통 서열로부터 유래된다. mu MAb 21.6 유래의 해당하는 부위와 매우 큰 서열 동일성을 보여주는 바람직한 경쇄 및 중쇄 인간 가변 부위는 각각 항체 RE1 및 21/28'CL 유래이다.

컴퓨터 모델링이 이어서 이의 인지 항원에 결합하는 인간화된 항체의 능력을 증가시키기 위해 이용될 수 있다. 뮤린 CDR 부위와 인간 가변성 골격 부위의 비자연적인 병치는 비자연적인 입체형태 구속을 초래할 수 있으며, 이는 특정 아미노산 잔기의 치환에 의해 수정되지 않는다면, 결합 친화성의 손실을 초래한다. 치환을 위한 아미노산 잔기의 선택은 부분적으로 컴퓨터 모델링에 의해 결정된다. 면역글로불린 분자의 3차원 이미지를 생성하는 컴퓨터 하드웨어 및 소프트웨어는 널리 유용하다. 일반적으로, 분자 모델은 면역글로불린 사슬 또는 이의 도메인에 대한 풀린 구조로부터 출발하여 생성된다. 모델링되는 사슬은 풀린 3차원 구조의 사슬 또는 도메인과 아미노산 서열 유사성에 대해 비교되며, 큰 서열 유사성을 보여주는 사슬 또는 도메인은 분자 모델의 구축에 대한 출발점으로서 선택된다. 예를 들면, mu MAb 21.6의 경쇄에 대해, 골격 부위, CDR1 및 CDR2 부위를 모델링하는 출발점은 인간 경쇄 RE1 이었다. CDR3 부위에 대해, 출발점은 상이한 인간 항체 HyHEL-5의 경쇄 유래의 CDR3 부위이었다. 풀린 출발 구조는 모델링된 면역글로불린 사슬 또는 도메인에서 실제적인 아미노산 및 출발 구조에서의 것 사이의 차이를 허용하기 위해 변형된다. 상기 변형된 구조는 이어서 복합 면역글로불린으로 어셈블링된다. 최종적으로, 상기 모델은 에너지 최소화 및 모든 원자가 서로 적당한 거리 내에 있으며, 결합 길이 및 각이 화학적으로 허용가능한 한계내에 있다는 것을 확인함으로써 개선된다.

상기 기재된 바와 같이, 본 발명의 인간화된 항체는 실질적으로 인간 면역글로불린 유래의 가변성 골격 부위 및 실질적으로 mu MAb 21.6으로 불리는 마우스 면역글로불린 유래의 상보성 결정 부위를 포함한다. mu MAb 21.6의 상보성 결정 부위(CDR) 및 적당한 인간 수용체 면역글로불린을 확인한 후에, 다음 단계는 있다면, 상기 성분 유래의 어느 것이 생성된 인간화된 항체의 성질을 최적화하기 위해 치환되어야 하는가를 결정하는 것이다. 일반적으로, 뮤린으로 인간 아미노산 잔기의 치환은 최소화되어야 하는데, 이는 뮤린 잔기의 도입이 인간에서 HAMA 반응을 유도하는 항체의 위험을 증가시키기 때문이다. 아미노산은 CDR 입체형태 및/또는 항원에 대한 결합에 대한 이의 가능한 영향에 기초하여 치환에 대해 선택된다. 상기 가능한 영향의 조사는 모델링, 특정 위치에서 아미노산의 특성의 조사, 또는 특정 아미노산의 치환 또는 돌연변이유발의 효과의 실험적인 관찰에 의한다.

아미노산이 mu MAb 21.6 가변성 골격 부위 및 동등한 인간 가변성 골격 부위 사이에 상이할 때, 아미노산이 하기이기를 합리적으로 기대된다면 인간 골격 아미노산은 통상 동등한 마우스 아미노산에 의해 치환되어야 한다:

(1) 비공유적으로 항원에 직접 결합하고 (예를 들면, mu MAb 21.6의 위치 L49, L69의 아미노산),

(2) CDR 부위에 인접하고, [Chothia et al., 이하 동일]에 의해 제안된 대안적인 정의 하에 CDR 부위의 부분이며, 그렇지 않으면 CDR 부위와 상호작용하며 (예를 들면, CDR 부위의 약 3Å 내이다)(예를 들면, mu MAb 21.6의 위치 L45, L58, H27, H28, H29, H30 및 H71의 아미노산), 또는

(3) VL-VH 접촉면에 참여한다 (예를 들면, mu MAb 21.6의 위치 H44의 아미노산).

치환에 대한 기타 후보는 상기 위치(예를 들면, mu MAb 21.6의 위치 L104, L105 및 L107의 아미노산)에서 인간 면역글로불린에 대해 예외적인 수용체 인간 골격 아미노산이다. 상기 아미노산은 더욱 전형적인 인간 면역글루불린의 동등한 위치로부터의 아미노산으로 치환될 수 있다. 대안적으로, 마우스 MAb 21.6에서 동등한 위치 유래의 아미노산은 상기 아미노산이 동등한 위치에서 인간 면역글로불린에 대해 전형적일 때 인간 골격 부위 내로 도입될 수 있다.

일반적으로, 상기 기준을 수행하는 아미노산의 모두 또는 대부분의 치환이 바람직하다. 종종, 그러나, 특정 아미노산이 상기 기준을 만족시키는지 및 대안적인 변이체 면역글로불린이 제조될 것인지에 대해 일부 애매함이 있으며, 이 중의 하나는 특정 치환을 가지며, 이 중의 다른 것은 특정 치환을 가지지 않는다. 인간화된 항체는 통상 1, 2 또는 3 이상, 더욱 통상적으로 4의 하기 위치: L45, L49, L58 및 L69에서 해당하는 mu MAb 21.6 잔기로 인간 경쇄 골격 잔기의 치환을 포함할 것이다. 인간화된 항체는 또한 통상적으로 1, 2, 3, 4, 또는 5, 및 종종 6의 하기 위치: H27, H28, H29, H30, H44 및 H71에서 인간 중쇄 골격 잔기의 치환을 포함한다.

임의로, H36은 또한 치환될 수 있다. 바람직한 구현에에서, 인간 경쇄 수용체 면역글로불린이 RE1일 때, 경쇄는 또한 1 또는 2 이상, 더욱 통상적으로 3의 하기 위치: L104, L105 및 L107에서 치환을 포함한다. 상기 위치는 더욱 전형적인 아미노산 잔기를 갖는 인간 면역글로불린의 동등한 위치 유래의 아미노산으로 치환된다. 치환되는 적당한 아미노산은 도 13 및 14에 보여준다.

통상적으로 인간화된 항체에서 CDR 부위는 실질적으로 동일하며, 더욱 통상적으로 mu MAb 21.6 항체에서 해당하는 CDR 부위와 동일하다. 그러나, 종종 CDR 부위에서 잔기 하나를 변화시키는 것이 바람직하다. 예를 들면, 실시예 4는 mu MAb 21.6 CDR3 및 VCAM-1 리간드 사이의 아미노산 유사성을 확인한다. 상기 관찰은 인간화된 항체의 결합 친화성이 VCAM-1을 더욱 유사하게 닮기 위해 중쇄 CDR3 부위를 재디자인함으로써 개선될 수 있다는 것을 제시한다. 따라서, CDR3 도메인 유래의 하나 이상의 아미노산은 VCAM-1 결합 도메인 유래의 아미노산으로 치환될 수 있다. 통상 바람직하지 않지만, 종종 생성된 인간화된 면역글로불린의 결합 친화성에 인식가능하게 영향을 주지 않고, CDR 잔기에 대한 하나 이상의 보존 아미노산 치환을 하는 것이 가능하다.

전술한 특정 아미노산 치환이외에, 인간화된 면역글로불린의 골격 부위는 통상적으로 실질적으로 동일하며, 더욱 통상적으로 이들이 유래된 인간 항체의 골격 부위와 동일하다. 당연히, 골격 부위에서 많은 아미노산은 항체의 특이성 또는 친화성에 거의 또는 전혀 직접적인 기여를 하지 못한다. 그리하여, 골격 잔기의 많은 개개의 보존 치환은 생성된 인간화된 면역글로불린의 특이성 또는 친화성의 인식가능한 변화 없이 허용될 수 있다. 그러나, 일반적으로 상기 치환은 바람직하지 않다.

가변 부위의 생성. 개념적으로 인간화된 면역글로불린의 CDR 및 골격 성분을 선택하였으므로, 상기 면역글로불린을 제조하는데 다양한 방법이 유용하다. 코드 축퇴성 때문에, 다양한 핵산 서열이 각각의 면역글로불린 아미노산 서열을 코딩할 것이다. 바람직한 핵산 서열은 드 노보 고체상 DNA 합성 또는 원하는 폴리뉴클레오티드의 이전에 제조된 변이체의 PCR 돌연변이유발에 의해 제조될 수 있다. 올리고뉴클레오티드 매개 돌연변이유발은 표적 폴리펩티드 DNA의 치환, 결실 및 삽입 변이체를 제조하는데 바람직한 방법이다. Adelman et al., DNA 2: 183 (1983)을 참고한다. 간단히, 표적 폴리펩티드 DNA는 단일가닥 DNA 주형에 원하는 돌연변이를 코딩하는 올리고뉴클레오티드를 혼성화함으로써 변경된다. 혼성화 후에, DNA 중합효소가 올리고뉴클레오티드 프라이머를 혼입하고, 표적 폴리펩티드 DNA에서 선택된 변경을 코딩하는 주형의 전체적인 두번째 상보 가닥을 합성하기 위해 이용된다.

불변 부위의 선택. 전술한 바와 같이 제조된 인간화된 항체의 가변성 단편은 전형적으로 면역글로불린 불변 부위(Fc), 전형적으로 인간 면역글로불린의 것의 적어도 일부에 연결된다.

인간 불변 부위 DNA 서열은 다양한 인간 세포, 바람직하게는 불사 B-세포로부터 주지된 절차에 따라 분리될 수 있다 (Kabat et al., 이하 동일, 및 WO 87/02671)(이의 각각은 전체적으로 참고로 포함된다). 통상적으로, 항체는 경쇄 및 중쇄 불변 부위 양자를 포함할 것이다. 중쇄 불변 부위는 통상적으로 CH1, 힌지, CH2, CH3, 및 CH4 부위를 포함한다.

인간화된 항체는 IgM, IgG, IgD, IgA 및 IgE를 포함하는 모든 유형의 불변 부위, 및 IgG17 IgG2, IgG3 및 IgG4를 포함하는 임의의 이성질형을 갖는 항체를 포함한다. 인간화된 항체가 세포독성 활성을 나타내는 것이 바람직한 경우에, 불변 도메인은 통상적으로 보체 고정 불변 도메인이며, 상기 부류는 전형적으로 IgGl 이다. 상기 세포독성 활성이 바람직하지 않은 경우에, 불변 도메인은 IgG2 부류일 수 있다. 인간화된 항체는 하나 이상의 부류 또는 이성질형 유래의 서열을 포함할 수 있다.

5.1.1.2. 기타 항- VLA -4 항체

기타 항-VLA-4 항체는 HP1/2, HP-2/1, HP2/4, L25, 및 P4C2를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 상기 항체는 또한 본원에 논의되고 일반적으로 당업계에 공지된 것으로서 당업자가 용이하게 인식하는 바와 같이 환자에서 탈수초형성을 저해하고/하거나 수초재형성을 촉진하고/하거나 마비를 감소시키는 유효량으로 투여될 수 있다.

자주, 마우스에서 생성된 단클론 항체는 이후에 마우스 항체로 주사된 인간 대상에서 인간 항-마우스 항체 (HAMA) 면역 반응을 피하기 위해 인간화된다. 이는 CDR 그라프팅 또는 재모양형성에 의해 일어난다.

그리하여, 전형적으로 항체는 21.6 항체DP 대해 전술한 바와 같이, CDR 그라프팅 또는 재모양형성을 통해 인간화되는 제1 마우스 단클론 항체이다.

구체적으로, 인간화된 항체는 VLA-4에 대한 특이성을 가지며, 수초재형성을 촉진하고, 탈수초형성을 막고/막거나 마비를 감소시키는 능력을 가진다.

상기 항체는 가변성 도메인의 하나 이상의 상보성 결정 부위(CDR)가 제공자 비인간 항-VLA-4 항체 유래이며, 제공자 항체 결합 특이성을 보유하기 위해 수용체 항체 중쇄 및/또는 경쇄 가변성 골격 부위의 최소 변경이 있거나 없을 수 있는 공급원(예를 들면, 전형적으로 마우스)으로부터 유래된다.

바람직하게는, CDR-그라프팅된 중쇄 가변성 도메인의 항원 결합 부위는 위치 31-35(CDR1), 50-65 (CDR2) 및 95-102 (CDR3)에 해당하는 CDR을 포함한다. 바람직한 구현예에서, 중쇄는 또한 골격 위치 27-30 (Kabat 넘버링)에서 비인간 잔기를 포함한다. 중쇄는 또한 골격 위치 75 (Kabat 넘버링)에서 비인간 잔기를 포함한다. 중쇄는 또한 골격 위치(들) 77-79 또는 66-67 및 69-71 또는 84-85 또는 38 및 40 또는 24 (Kabat 넘버링)에서 비인간 잔기를 포함한다. 바람직하게는, CDR-그라프팅된 경쇄 가변성 도메인의 항원 결합 부위는 위치 24-34(CDR1), 50-56 (CDR2) 및 89-97(CDR3)에 해당하는 CDR을 포함한다. 바람직한 구현예에서, 경쇄는 또한 골격 위치 60 및 67 (Kabat 넘버링)에서 비인간 잔기를 포함한다.

상기 잔기 표시는 Kabat 넘버링 (Kabat et al., 5th ed. 4 vol. SEQUENCES OF PROTEINS OF IMMUNOLOGICAL INTEREST, U.S. Department of Health Human Services, NIH, USA (1991))에 따라 번호를 매긴다.

마우스항체 HP1/2의 합성 및 인간화. HP1/2는 VLA-4에 대한 또 다른 항체이다. 인간 대상에 이용하기 위한 상기 항체의 인간화된 버전의 제조 방법은 본원에 기재되며, 또한 미국 특허 제6,602,503호(Biogen, Inc.에게 허여)에 기재되며, 전체적으로 본원에 참고로 포함된다. 인간화된 항체의 서열은 하기와 같이 제공된다. HP1/2 VH DNA 서열 및 이의 번역된 아미노산 서열은 하기이다:

HP1/2 V_H 2개의 서열 및 패밀리 IIC의 공통 서열 사이의 비교는 유일한 비정상적인 잔기는 아미노산 위치 80, 98 및 121(즉, Kabat 넘버링에서 79, 94 및 121)이라는 것을 나타냈다. Tyr-80이 서브그룹 IIC에서 불변자이지만, 기타 서열 결정된 뮤린 V_H 부위는 상기 위치에서 기타 방향족 아미노산을 가지나, 어느 것도 Trp를 가지지는 않는다. 대부분의 인간 및 뮤린 V_HS 는 Kabat 위치 94에서 아르기닌 잔기를 가진다. HP1/2 V_H 에서 Asp-94 의 존재는 극도로 희귀하며; 상기 위치에 음전하의 잔기의 유일하게 보고된 하나의 예가 있다. Kabat 위치 113에서 프롤린은 또한 비정상적이나, 이로부터 거리 때문에 CDR의 입체형태에서 중요할 것 같지는 않다. CDR1을 구성하는 아미노산은 3개의 기타 서열 결정된 뮤린 V_H 부위에서 발견되었다. 그러나, CDR2 및 CDR3은 HP1/2에 대해 유일하며, 임의의 기타 보고된 뮤린 V_H에서 발견되지 않는다.

HP1/2 V_K DNA 서열 및 이의 번역된 아미노산 서열은 하기와 같다:

HP1/2 V_K는 Kabat 패밀리 V의 멤버이며 (Kabat et al., 5th ed., 4 vol., SEQUENCES OF PROTEINS OF IMMUNOLOGICAL INTEREST, U.S. Department of Health Human Services (1991)), 비정상적인 잔기를 갖지 않는다. CDRl 및 CDR3의 아미노산은 독특하다. CDR2를 구성하는 아미노산이 하나의 기타 뮤린 V_K 에 보고되었다.

CDR-그라프팅된 항-VLA-4 항체의 디자인. CDR-그라프팅된 항-VLA-4 항체를 디자인하기 위해, 뮤린 HP1/2의 어느 잔기가 경쇄 및 중쇄의 CDR을 포함하는지를 결정하는 것이 필요하였다. 덜 가변성 골격 서열의 중간의 과변이의 3개의 부위가 경쇄 및 중쇄 양자에서 발견된다 (Wu 및 Kabat, J. Exp. Med. 132: 211-250 (1970); Kabat et al., (1991)). 대개의 경우에, 상기 과변이 부위는 CDR 에 해당하나, CDR을 넘어서 신장될 수 있다. 뮤린 HP1/2의 CDR은 기타 V_H 및 V_K 서열과의 정렬에 의해 Kabat et al., (1991)에 따라 밝혀졌다. 뮤린 HP1/2 V_H의 CDR은 확인되었으며, 하기와 같이 인간화된 V_H 서열에서 확인된 잔기에 해당한다:

CDR1 AA₃₁-AA₃₅

CDR2 AA₅₀-AA₆₆

CDR3 AA₉₉-AA₁₁₀

상기는 Kabat 넘버링에서 각각 AA₃₁-AA₃₅, AA₅₀-AA₆₅, 및 AA₉₅-AA₁₀₂에 해당한다. 뮤린 HP1/2 V_K의 CDR은 확인되었으며, 하기와 같이 인간화된 V_K 서열에서 확인된 잔기에 해당한다:

CDR1 AA₂₄-AA₃₄

CDR2 AA₅₀-AA₅₆

CDR3 AA₈₉-AA₉₇

상기는 Kabat 넘버링에서 동일하게 넘버링된 아미노산에 해당한다. 그리하여, V_H가 아닌 V_K CDR의 유일한 경계는 Kabat CDR 잔기에 해당한다. HP1/2 (제공자) CDR을 수용하기 위해 선택된 인간 골격은 중쇄 및 경쇄 각각에 대해 NEWM 및 RE1 이었다. NEWM 및 RE1 서열은 Kabat et al., (1991)에 공개되었다.

인간화된 HP1/2 항체의 인간화된 중쇄 가변 부위의 DNA 및 해당하는 아미노산 서열은 하기이다:

인간화된 HP1/2 항체의 인간화된 경쇄 가변 부위의 DNA 및 해당하는 아미노산 서열은 하기이다:

상기 인간화된 HP1/2 항체 경쇄 및 중쇄외에, 기타 수용체 중쇄 및 경쇄 부위가 또한 제공자 HP1/2 부위의 삽입을 위해 이용될 수 있다. 모든 하기 구축물은 Ser-75 (Kabat 넘버링)를 포함한다. STAW 구축물은 또한 위치 77에 Gln에서 Thr, 위치 78에 Phe에서 Ala, 및 위치 79에 Ser에서 Trp을 포함한다 (Kabat 넘버링). V_H DNA 서열 및 이의 번역된 아미노산 서열은 하기에 설명된다:

KAITAS 구축물은 Arg에서 Lys으로 (위치 66), Val에서 Ala로 (위치 67), Met 에서 Ile로 (위치 69), Leu에서 Thr로 (위치 70) 및 Val에서 Ala로 (위치 71)의 부가적인 변화를 포함한다 (Kabat 넘버링). KAITAS V_H DNA 서열 및 이의 번역된 아미노산 서열은 하기에 설명된다:

SSE 구축물은 Ala에서 Ser로 (위치 84) 및 Ala에서 Glu로 (위치 85)의 부가적인 변화를 포함한다 (Kabat 넘버링). SSE V_H DNA 서열 및 이의 번역된 아미노산 서열은 하기에 설명된다:

KRS 구축물은 Arg에서 Lys로 (위치 38) 및 Pro에서 Arg로 (위치 40)의 부가적인 변화를 포함한다 (Kabat 넘버링). KRS V_H DNA 서열 및 이의 번역된 아미노산 서열은 하기에 설명된다:

AS 구축물은 위치 24에서 Val에서 Ala로의 변화를 포함한다 (Kabat 넘버링). AS V_H DNA 서열 및 이의 번역된 아미노산 서열은 하기이다:

인간화된 경쇄는 일반적으로 있다면 거의 변형을 요하지 않는다. 그러나, 인간화된 항-VLA-4 항체의 제조에서, 수 개의 실험적인 변화는 이의 리간드에 대한 항체의 면역학적 활성을 개선하였다. 예를 들면, 뮤린 경쇄에 대해 Ser 돌연변이를 갖는 인간화된 중쇄는 뮤린 HP1/2보다 약 2.5배 낮은 효능이었다. 인간화된 경쇄와 동일한 인간화된 중쇄는 약 4배 낮은 효능이었다.

인간화된 V_K 구축물(VK1)은 위치 60에 Ser에서 Asp 치환, 및 위치 67에 Tyr 에 대해 Ser를 포함한다. DNA 서열 및 이의 번역된 아미노산 서열은 하기에 설명다:

또 다른 V_K 구축물 (즉, VK2)은 회복된 원래의 RE1 골격의 DQMDY 서열을 가진다. DNA 및 해당하는 아미노산 서열은 하기에 제공된다:

세번째 V_K 구축물은 VK3이며, 아미노 말단에 DQM에 대해 SVM 및 2개의 기타 잔기 변화를 가진다. DNA 및 해당하는 아미노산 서열은 하기이다:

상기 경쇄 및 중쇄 서열의 각각이 제조되는 방법에 관한 자세한 것은 모든 목적에 대해 본원에 전체적으로 참고로 포함된 미국 특허 제6,602,503호에 제공된다. 상기 경쇄 및 중쇄의 다양한 조합은 당업계에 공지된 컴퓨터 모델링에 기초하여 제조될 수 있다.

알파-4 인테그린을 인지하고 결합하는 부가적인 항체가 당업계에 공지되어 있다. 상기는 GG5/3 (Keszthelyi et al., Neurology 47(4): 1053-1059 (1996)), FW3-218-1 (ATCC No.: HB-261; an IgG2b antibody against sheep alpha 4 integrin), 및 R1-2 (ATCC No.: HB-227; IgG2b antibody developed in Rattus norvegicus)를 포함하나 이에 제한되지 않는다. 상기 항체가 마우스 또는 기타 동물에서 발생하는지 간에, 서열 각각은 당업계에 공지된 것에 기초하고, 컴퓨터 모델링의 도움으로 인간화되도록 유전적으로 조작될 수 있다. 항-알파-4 인테그린 인간화된 항체는 이어서 본원에 개시된 시험관내 및 생체내 분석에 기초하여 수초재형성을 촉진하고/하거나 탈수초형성을 저해하고/하거나 마비를 감소시키는 이의 능력에 대해 평가될 수 있다.

5.2. 항체 단편

탈수초형성과 관련된 질환 및 증상을 치료하는데 이용하기 위해 또한, VLA-4 및 VCAM-1 상호작용을 저해하도록 항-알파-4 또는 VCAM-1에 결합하는 항체의 항체 단편이 고려된다. 항체 단편은 본원에 개시된 조성물에 이용될 수 있는 Fab, F(ab')₂, scFv 및 Fv 단편을 포함한다.

본원에 이용된 용어 "Fab단편"은 분자의 중쇄 및 경쇄 양자의 부분으로 구성된 단일 항원 결합 부위를 포함하는 부분적인 항체 분자를 말한다.

본원에 이용된 용어 "F(ab')₂ 단편"은 분자의 경쇄 및 중쇄의 부분으로 구성되며, 항원 결합 부위 양자를 포함하는 부분적인 항체 분자를 말한다.

본원에 이용된 용어 "Fv 단편"은 항원 인지 및 결합에 관련된 항체 분자의 부분을 말한다.

본원에 이용된 용어 "scFv"는 단일쇄 Fv(scFv) 단편을 말한다.

scFv 단편은 단지 유연성 링커에 의해 연결된 항체 중쇄 및 경쇄의 가변성 도메인으로 구성된 재조합 항체 유도체이다. scFv 항체 단편은 항체의 V_H 및 V_L 도메인을 포함하는데, 여기에서 상기 도메인은 단일 폴리펩티드 사슬에 존재한다. 일반적으로, Fv 폴리펩티드는 또한 scFv를 항원 결합에 대한 원하는 구조를 형성하게 하는 V_H 및 V_L 도메인 사이의 폴리펩티드 링커를 포함한다. scFv의 검토를 위해, Pluckthun in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, 269-315 (Rosenburg 및 Mooreeds., Springer-Verlag, New York 1994)를 참고한다.

또한, 항체 단편에 디아바디(diabody)가 포함된다. 용어 "디아바디"는 2개의 항원 결합 자리를 갖는 작은 항체 단편을 말하며, 상기 단편은 동일한 폴리펩티드 사슬(V_H-V_L)에서 경쇄 가변성 도메인(V_L)에 연결된 중쇄 가변성 도메인(V_H)을 포함한다. 동일한 사슬 상에 2개의 도메인 사이의 짝을 이루지 못할 정도로 작은 링커를 이용함으로써, 상기 도메인은 또 다른 사슬의 상보적인 도메인과 짝을 이루도록 하며, 2개의 항원 결합 자리를 생성하게 한다. 디아바디는 예를 들면, EP 404,097; WO93/11161; 및 Hollinger et al., 1993 Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-8에 더욱 상세히 기재된다.

항체 단편은 또한 선형 항체를 포함한다. 본 출원을 통해 이용될 때, 표현 "선형 항체"는 예를 들면, Zapata et al., 1995 Protein Eng. 8(10): 1057-62에 기재된 항체를 말한다. 간단히, 상기 항체는 앞뒤로 연결된 Fd 단편(V_H-C_H1-V_H-C_H1)의 쌍을 포함하는데, 이는 항원 결합 부위의 쌍을 형성한다. 선형 항체는 이중특이적 또는 단일특이적일 수 있다.

항체의 파파인 절단은 각각은 단일 항원 결합 자리를 갖는 "Fab" 단편이라 불리는 2개의 동일한 항원 결합 단편, 및 이의 이름이 용이하게 결정화하는 이의 능력을 반영하는 잔기 "Fc" 단편을 생성한다. 펩신 처리는 2개의 항원 조합 자리를 가지며, 여전히 항원을 가교할 수 있는 F(ab')₂ 단편을 수득한다.

수 개의 마우스 항-VLA-4 단클론 항체가 이전에 기재되었다. 예를 들면, 본원에 또한 논의되고, 본원에 전체적으로 참고로 포함된 미국 특허 제6,602,503호, 제6,033,665호, 및 제5,840,299호; Sanchez-Madrid et al., 1986, Eur. J. Immunol. 16: 1343-9; Hemler et al., 1987, J. Biol. Chem. 262: 11478-85; Pulido et al., 1991, J. Biol. Chem., 266: 10241-45; Issekutz et al., 1991, J. Immunol., 147: 109(TA-2MAb))를 참고한다. VLA-4의 알파 및/또는 베타 사슬을 인식할 수 있는 상기 항-VLA-4 단클론 항체 및 기타 항-VLA-4 항체 (예를 들면, 미국 특허 제5,888,507호-Biogen, Inc. 및 본원에 인용된 참고)는 본 발명에 따른 치료 방법에 유용할 것이다. VCAM-1 및 피브로넥틴 리간드에 대한 결합에 관련된 VLA-4 알파-4 사슬 에피토프를 인식하는 항-VLA-4 항체(즉, 리간드 인식에 관련된 자리에서 VLA-4에 결합하고, VCAM-1 및 피브로넥틴 결합을 봉쇄할 수 있는 항체)가 바람직하다. 상기 항체가 B 에피토프-특이적 항체 (B1 또는 B2)로서 정의되었으며 (Pulido et al., 1991, 이하 동일), 또한 본 발명에 따른 항-VLA-4 항체이다.

VLA-4에 대한 완전히 인간 단클론 항체 동족체는 본 발명의 방법에서 VLA-4 리간드를 봉쇄 또는 결합할 수 있는 또 다른 바람직한 결합 물질이다. 이의 본래의 형태에서, 상기는 Boerner et al., 1991, J. Immunol., 147:86-95에 기재된 바와 같이, 생체내 프라이밍된 인간 비장세포를 이용하여 제조될 수 있다.

대안적으로, 이는 Persson et al., 1991, Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 88: 2432-36 또는 Huang et al., 1991, J. Immunol. Meth., 141: 227-236에 의해 기재된 바와 같은 레퍼토리 클로닝에 의해 제조될 수 있다. 미국 특허 제5,798,230호 (1998.8.25, "Process for the preparation of human monoclonal antibodies and their use")는 인간 B 세포 유래의 인간 단클론 항체의 제조를 기재한다. 본 방법에 따라, 인간 항체 생산 B 세포는 엡스타인-바 바이러스 핵 항원 2 (EBNA2)를 발현하는 엡스타인-바 바이러스, 또는 이의 유도체를 이용한 감염에 의해 불사된다. 불사에 필요한 EBNA2 기능은 이어서 차단되며, 이는 항체 생산의 증가를 초래한다. 부가적인 방법이 당업계에 공지된다.

완전히 인간 항체를 제조하는 여전히 또 다른 방법에 대해, 이종 항체를 생성하는 형질전환 비인간 동물 및 불활성화된 내재하는 면역글로불린 유전자를 갖는 형질전환 비인간 동물을 기재하는 미국 특허 제5,789,650호를 참고한다. 내재하는 면역글로불린 유전자는 안티센스 폴리뉴클레오티드 및/또는 내재하는 면역글로불린에 대한 항혈청에 의해 억제된다. 이종 항체는 비인간 동물의 종의 게놈에서 통상 발견되지 않는 면역글로불린 유전자에 의해 코딩된다. 재배열되지 않은 이종 인간 면역글로불린 중쇄의 서열을 포함하는 하나 이상의 트랜스진이 비인간 동물에 도입되어, 형질전환 면역글로불린 서열을 기능적으로 재배열하고, 인간 면역글로불린 유전자에 의해 코딩되는 다양한 이성질형의 항체의 레퍼토리를 생성할 수 있는 형질전환 동물을 형성한다. 상기 이종 인간 항체는 B-세포에서 생산되며, 이는 이후에 골수종과 같은 불사 세포주와의 융합 또는 상기 B-세포를 단클론, 이종, 완전히 인간 항체 동족체를 생산할 수 있는 세포주를 영속하는 기타 기술에 의해 처리함으로써 불사된다(immortalized). 큰 비면역화된 인간 파아지 현시 라이브러리가 또한 표준 파아지 기술을 이용하여 인간 치료제로서 개발될 수 있는 고친화성 항체를 분리하기 위해 이용될 수 있다.

진정한 "키메라 항체"(즉, 전체 불변 및 전체 가변 부위가 상이한 공급원으로부터 유래됨)의 제조를 위한 초기 방법에 이어, 신규 접근이 EP 0239400 (Winter et al.)에 기재되며, 여기에서 항체는 또 다른 유래의 것과 하나의 종에 대한 이의 상보성 결정 부위(CDR)의 치환(제시된 가변 부위내에서)에 의해 변경된다. 상기 방법은 예를 들면, 인간 중쇄 및 경쇄 Ig 가변 부위 도메인 유래의 CDR을 뮤린 가변 부위 도메인 유래의 대안적인 CDR로 대체하기 위해 이용될 수 있다. 상기 변경된 Ig 가변 부위는 이어서 인간 Ig 불변 부위와 조합되어 치환된 뮤린 CDR을 제외하고 조성에서 전적으로 인간인 항체를 생성할 수 있다. 상기 CDR-치환된 항체는 진정한 키메라 항체와 비교하여 인간에서 면역 반응을 덜 유도할 것으로 예상되는데, 이는 CDR-치환된 항체가 상당히 적은 비인간 성분을 포함하기 때문이다. CDR "그라프팅"을 통해 단클론 항체를 인간화하는 방법은 "재모양형성(reshaping)"이라 불린다 (Riechmann et al., 1988, Nature 332: 323-7; and Verhoeyen et al., 1988, Science 239: 1534-6).

5.3. 항체 정제

재조합 기술을 이용할 때, 항체는 세포내로, 원형질막공간으로, 또는 배지내로 직접 생산될 수 있다. 항체가 세포내로 생산된다면, 제 1 단계로서, 미립자 찌꺼기, 숙주 세포 또는 용해된 단편이 예를 들면, 원심분리 또는 한외여과에 의해 제거된다. Carter et al., Bio/Technology 10: 163-7(1992)는 대장균의 원형질막공간으로 분비되는 항체를 분리하는 절차를 기재한다. 간단히, 세포 페이스트를 약 30분에 걸쳐 소듐 아세테이트(pH 3.5), EDTA, 및 페닐메틸술포닐플루오라이드 (PMSF)의 존재하에 융해한다. 세포 찌꺼기를 원심분리에 의해 제거할 수 있다. 항체가 배지내로 분비되는 경우에, 상기 발현 시스템으로부터의 상층액은 일반적으로 먼저 시판되는 단백질 농축 필터, 예를 들면, Amicon 또는 Millipore Pellicon 한외여과 단위체를 이용하여 농축된다. PMSF와 같은 프로테아제 저해제가 단백질 가수분해를 저해하기 위해 임의의 이전 단계에서 포함될 수 있으며, 항생제가 우연한 오염물질의 성장을 막기 위해 포함될 수 있다.

상기 세포로부터 제조된 항체 조성물은 바람직하게는 LPHIC 전에 하나 이상의 정제 단계를 거친다. 적당한 정제 단계의 예는 히드록실아파타이트 크로마토그래피, 겔 전기영동, 투석, 및 친화성 크로마토그래피를 포함하며, 친화성 크로마토그래피가 바람직한 정제 기술이다. 친화성 리간드로서 단백질 A의 적합성은 종 및 항체에 존재하는 임의의 면역글로불린 Fc 도메인의 이성질형에 의존한다.

단백질 A는 인간 γl, γ2, 또는 γ4 중쇄에 기초한 항체를 정제하기 위해 이용될 수 있다 (Lindmark et al., 1983 J. Immunol. Meth. 62: 1-13). 단백질 G가 모든 마우스 이성질형 및 인간 γ3에 대해 바람직하다 (Guss et al., 1986 EMBO J. 5: 1567-75). 친화성 리간드가 부착되는 매트릭스는 가장 종종 아가로오스이나, 기타 매트릭스가 유용하다. 기계적으로 안정한 매트릭스, 예를 들면, 조절된 공극 유리 또는 폴리(스티렌디비닐)벤젠은 아가로오스를 이용하여 달성될 수 있는 것보다 빠른 유속 및 더 짧은 가공 시간을 허용한다. 항체가 C_H3 도메인을 포함하는 경우에, Bakerbond BX^TM 수지 (J. T. Baker, Phillipsburg, N. J.)가 정제에 유용하다. 단백질 정제에 대한 기타 기술, 예를 들면, 이온 교환 칼럼 상의 분획화, 에탄올 침전, 역상 HPLC, 실리카 상의 크로마토그래피, 헤파린 SEPHAROSE^TM 상의 크로마토그래피, 음이온 또는 양이온 교환 수지 상의 크로마토그래피 (예를 들면, 폴리아스파르트산 칼럼), 크로마토포커싱, SDS-PAGE, 및 암모늄 설페이트 침전이 또한 회수되는 항체에 의존하여 유용하다.

임의의 예비 정제 단계(들)에 이어, 목적하는 항체 및 오염물(들)을 포함하는 혼합물을 LPHIC 한다. 종종, 정제되는 항체 조성물은 이전 정제 단계 유래의 버퍼에 존재할 것이다. 그러나, LPHIC 단계 전에 항체 조성물에 버퍼를 첨가하는 것이 필요할 수 있다. 많은 버퍼가 유용하며, 통상적인 실험화에 의해 선택될 수 있다. 로딩 버퍼에 정제되는 항체 및 하나 이상의 오염물을 포함하는 혼합물의 pH는 출발 pH에 의존하여 산 또는 염기를 이용하여 약 2.5-4.5의 pH로 조절된다. 바람직하게는, 상기 로딩 버퍼는 낮은 염 농도 (즉, 약 0.25 M 염 이하)를 가진다.

혼합물을 HIC 칼럼 상에 로딩한다. HIC 칼럼은 통상적으로 소수성 리간드 (예를 들면, 알킬 또는 아릴기)가 커플링되는 기본 매트릭스 (예를 들면, 가교된 아가로오스 또는 합성 공중합체 물질)를 포함한다. 바람직한 HIC 칼럼은 페닐기 (예를 들면, Phenyl SEPHAROSE^TM 칼럼)로 치환된 아가로오스 수지를 포함한다. 많은 HIC 칼럼이 시판된다. 예는 낮은 또는 높은 치환을 갖는 Phenyl SEPHAROSE 6 FASTFLOWTM 칼럼 (Pharmacia LKB Biotechnology, AB, Sweden); Phenyl SEPHAROSE^TM 고성능 칼럼(Pharmacia LKB Biotechnology, AB, Sweden); Octyl SEPHAROSE^TM 고성능칼럼 (Pharmacia LKB Biotechnology, AB, Sweden); FRACTOGEL^TM EMD 프로필 또는 FRACTOGEL^TM EMD 페닐 칼럼 (E. Merck, Germany); MACRO-PREP^TM 메틸 또는 MACRO-PREP^TM t-부틸 Supports (Bio-Rad, California); WP HI-Propyl(C₃)^TM 칼럼 (J. T. Baker, New Jersey); 및 TOYOPEARL^TM 에테르, 페닐 또는 부틸 칼럼 (TosoHaas, PA)을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.

상기 항체는 통상 로딩 버퍼와 동일한 용출 버퍼를 이용하여 칼럼으로부터 용출된다. 상기 용출 버퍼는 통상적인 실험화를 이용하여 선택될 수 있다. 용출 버퍼의 pH는 약 2.5-4.5 이며, 낮은 염 농도(즉, 약 0.25M 염 미만)를 가진다. 목적하는 항체를 용출하기 위해 염 구배를 이용하는 것이 필요하지 않으며; 원하는 산물은 칼럼에 현저하게 결합하지 않는 분획을 통한 흐름에서 회수된다는 것을 발견하였다.

LPHIC 단계는 원하지 않는 오염물(예를 들면, 올바르지 않게 연관된 경쇄 및 중쇄 단편)으로부터 올바르게 폴딩되고, 이황화결합된 항체를 제거하기 위한 방식을 제공한다. 특히, 상기 방법은 경쇄 및 중쇄가 이황화결합을 통해 결합될 수 없는 올바르게 폴딩된 항체 단편으로서 본원에 규명된 불순물을 실질적으로 제거하기 위한 수단을 제공한다.

정제된 단백질의 진단 또는 치료 제형물은 이의 예가 하기l에 제공되는 생리학적으로 허용가능한 담체의 형태로 항체 조성물을 제공함으로써 제조될 수 있다.

재사용될 수 있는 HIC 칼럼으로부터 오염물(예를 들면, 비폴딩된 항체 및 올바르게 결합되지 않은 경쇄 및 중쇄 단편)을 제거하기 위해, 요소(예를 들면, 6.0 M 요소, 1% MES 버퍼 pH 6.0, 4 mM 암모늄 설페이트)를 포함하는 조성물이 칼럼을 통해 흐를 수 있다. 기타 방법이 당업계에 공지되어 있다.

5.4. 면역글로불린 제형물

원하는 치료 효능을 가진 항체 및 면역글로불린은 개체에 생리학적으로 허용가능한 담체 중에 투여될 수 있다. 상기 항체는 피하, 경막밑, 정맥내, 근육내, 경막내, 복강내, 뇌내, 동맥내, 또는 병변내 경로 투여를 포함한 비경구 투여, 국재된 투여 (예를 들면, 외과 도포 또는 외과 좌약), 및 폐 (예를 들면, 에어로졸, 흡입물, 또는 분말) 및 아래 더욱 더 기재되어 있는 바와 같은 방법, 그러나 이들 예에 한정되지는 않는 다양한 방법에 의하여 투여될 수 있다.

도입의 방식에 따라, 상기 면역글로불린은 다양한 방식으로 제제화될 수 있다. 상기 제형물 (즉, 탈수초형성을 억제 및/또는 수초재형성을 촉진하기에 충분한 제형물) 중에 치료학적으로 활성인 면역글로불린의 농도는 약 1mg/ml 내지 1 g/ml의 범위다. 바람직하게는, 투여가 필요한 개체에 투여되는 경우, 상기 면역글로불린 조성물은 약 10 ng/ml이상의 개체 중에서의 면역글로불린의 혈중 수준에 도달한다.

바람직하게는, 상기 면역글로불린은 멸균된 생리적 식염수와 같은, 적합한 불활성 담체 중에서 비경구 투여를 위하여 제제화될 수 있다. 예를 들면, 상기 담체 용액 중의 면역글로불린의 농도는 일반적으로 약 1-100 mg/ml이다. 투여되는 용량은 투여경로에 의하여 결정된다. 바람직한 투여 경로에는 비경구 또는 정맥내 투여가 포함된다.

비경구 투여에 대하여, 본 발명의 항체는 계면활성제의 첨가 또는 첨가 없이 물 및 기름과 같은 멸균 액체일 수 있는 약제학적 담체와 함께 생리학적으로 허용가능한 희석제 중의 상기 물질의 주사용 투여량의 용액 또는 현탁액으로 투여될 수 있으며, 다른 약제학적 조제물은 석유, 동물, 채소, 또는 합성 기원, 예를 들면, 땅콩유, 대두유 및 미네랄유의 조제물이다. 일반적으로, 프로필렌 글리콜 또는 폴리에틸렌 글리콜과 같은 글리콜이 바람직한 액체 담체, 특이 주사용액을 위한 액체 담체이다. 본 발명의 항체는 활성 성분이 지속적으로 방출되도록 하는 것과 같은 방식으로 제제화될 수 있는 저장 주사 또는 임플란트 조제물의 형태로 투여될 수 있다. 바람직한 조성물은 HCl로 pH 6.0으로 조정된 50 mM L-히스티딘, 150 mM NaCl로 구성되는 수성 버퍼 중에 제제화되어 있는 5mg/mL의 단클론 항체를 포함한다.

치료적으로 효과적인 용량은 탈수초형성을 유의하게 감소시키고 수초재형성을 현저하게 증가시키는 데 효과적인 용량이다. 바람직하게는, 상기 양은 개체에서 통계학적으로 유의한 양의 수초재형성을 생성하기에 충분한 것이다.

본 발명의 중요한 특징에 따르면, VLA-4를 인식하고 결합하는 면역글로불린은 단독으로, 또는 탈수초형성과 연관된 조건 및 질병을 치료하는데 일반적으로 사용되는, 항염증제와 조합되어 투여될 수 있다. 항염증제의 투여는 상기 면역글로불린의 투여 전, 동시 또는 투여 후에 이루어질 수 있다.

수초재형성시키는 항체 또는 면역글로불린, 예 나탈리주마브 (natalizumab)의 치료학적으로 효과적인 양은, 생체내 및 시험관내 모델 모두에서 나탈리주마브에 대하여 얻어진 데이터를 주합하여, 알려진 항체에 대한 확립된 효과적인 용량과 비교함으로서 추정될 수 있다. 당업계에 알려진 바와 같이, 용량의 조정이 면역글로불린의 분해 또는 대사, 전신 또는 국재 전달 뿐만 아니라, 면역글로불린이 투여되는 개체의 나이, 체중, 일반적 건강, 성, 음식, 투여 시간, 약물 반응 및 조건의 경중으로 인하여 필요할 수 있다. 그러한 조정은 일상적 실험을 통하여 당업자에 의하여 이루어지고 적합한 용량이 결정된다.

상기 면역글로불린의 치료적 제형물은 동결건조된 케이크 또는 수용액의 형태로, 선택적으로 생리학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 안정화제와 함께 원하는 순도를 가진 면역글로불린을 혼합함으로써 저장용으로 제조된다 (Remington's Pharmceutical Sciences, 16th ed., A. Osol, Ed., 1980 and more recent editions). 허용가능한 면역글로불린 담체, 부형제 또는 안정화제는 비독성이고, 비치료적이고, 및/또는 투여량 및 이용되는 농도에서 투여받는자에게 비면역원성이며, 포스페이트, 시트레이트 및 다른 유기산과 같은 버퍼; 아스코르산을 포함한 항산화제; 저분자량 (약 10 잔기 미만) 폴리펩티드; 혈청 알부민, 젤라틴, 또는 면역글로불린과 같은 단백질; 폴리비닐피롤리돈과 같은 친수성 중합체; 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 아르기닌 또는 라이신과 같은 아미노산; 포도당, 만노오스, 또는덱스트린을 포함한 단당, 이당 및 다른 탄수화물; EDTA와 같은 킬레이트화제; 만니톨 또는 소르비톨과 같은 당 알콜; 소듐과 같은 염 형성 카운터이온; 및/또는 트윈, 플루로닉스 또는 폴리에틸렌 글리콜 (PEG)과 같은 비이온성 계면활성제가 포함된다. 담체 분자의 특이적 예에는 글리코스아미노글리칸 (예, 헤파린 설페이트), 히알루론산, 케라탄 설페이트, 콘드로이틴-4-설페이트, 콘드로이틴-6-설페이트, 헤파란 설페이트, 및 더마핀 설페이트, 페르레칸 및 펜토폴리설페이트가 포함되나, 이들 예에 한정되는 것은 아니다.

면역글로불린을 포함하는 약제학적 조성물은 또한, 원하는 경우, 동물 또는 인간에 투여하기 위하여 제제화된 약제학적 조성물에 통상적으로 사용되는 운반체인, 약제학적으로 허용가능하고, 비독성인 담체 또는 희석제를 포함할 수 있다. 상기 희석제는 상기 조합의 생물학적 활성에 영향을 미치지 않도록 선택된다. 예에는, 증류수, 생리적 인산완충염수 (PBS), 링거액, 덱스트로오스 용액 및 행크 용액이 포함되나, 이들 예에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 제제 (agent)는 식물 또는 다른 유사한 오일, 합성 지방족산 글리세라이드, 고급 지방족 산 또는 프로필렌 글리콜의 에스테르와 같은 수성 또는 비수성 용매 중에 용해, 현탁화 및 유화시킴으로써 주사용 제조물로서 제제화될 수 있다. 상기 제형물은 또한 가용화제, 등장화제, 현탁화제, 유화제, 안정화제 및 보존제와 같은 통상적인 첨가제가 포함될 수 있다.

상기 면역글로불린은 또한 흡입 또는 폐 전달을 통하여 투여될 에어로졸 제형물에 사용될 수 있다. 본 발명의 제제는 디클로로디플루오로메탄, 프로판, 질소 등과 같은 가압된 허용가능한 추진제 중에 제제화될 수 있다.

상기 면역글로불린은 또한 예를 들면, 코아세르베이션 기법 또는 계면 중합법 (예, 히드록시메틸셀룰로오스 또는 젤라틴-마이크로캡슐 및 폴리-메틸메타크릴레이트 마이크로캡슐)에 의하여 제조된 마이크로캡슐 중에, 콜로이드성 약물 전달 시스템 (예, 리포좀, 알부민 미세구, 마이크로에멀션, 나노입자 및 나노캡슐) 중에 또는 마크로에멀션 중에 포집될 수 있다. 그러한 기법은 상게서 Rernington's Pharmaceutical Sciences에 개시되어 있다.

생체내에 사용되기 위한 면역글로불린은 멸균되어야만 한다. 이는 동결건조 및 재구성 전 또는 후에, 멸균 여과막을 통하여 여과함으로써 용이하게 달성된다. 상기 면역글로불린은 보통 동결건조된 형태 또는 용액 중에 저장될 것이다.

치료적 면역글로불린 조성물은 보통 멸균 접근 포트를 가진 용기, 예를 들면 피하 주사 바늘 또는 비슷한 날카로운 기구에 의하여 관통될 수 있는 마개를 가진 정맥내 용액 백 또는 바이얼 내에 놓여진다.

지속방출 조제물의 적합한 예에는 성형된 물품의 형태, 예, 필름 또는 마이크로캡슐의 형태인, 상기 단백질을 포함하는 고상 소수성 중합체의 반투과성 매트릭스를 포함한다. 지속 방출 매트릭스의 예는 폴리에스테르, 히드로겔 (예, Langer 등, J.Biomed. Mater. Res. 15: 167-277 (1981)) 및 Langer, Chem. Tech. 12: 98-105 (1982)에 개시되어 있는 폴리(2-히드록시에틸-메타크릴레이트) 또는 폴리(비닐알콜)), 폴리락티드 (미국특허 제3773919호), L-글루탐산 및 감마 에틸-L-글루타메이트의 공중합체 (Sidman 등, Biopolymers 22: 547-556, 1983), 비분해성 에틸렌-비닐 아세테이트 (Langer 등, 상게서), LUPRON DEPOTTM과 분해성 락트산-글리콜산 공중합체 (즉, 락트산-글리콜산 공중합체 및 루프롤라이드 아세테이트로 구성된 주사가능한 미세구), 및 폴리-D-(-)-3-히드록시부티르산 (EP 133,988)가 포함된다.

에틸렌-비닐 아세테이트 및 락트산-글리콜산과 같은 중합체는 100일에 걸쳐 분자를 방출할 수 있게 하는 반면, 어떤 히드로겔은 더 짧은 기간 동안 단백질을 방출한다. 포집된 항체가 체내에 긴 시간 동안 잔류하는 경우, 37℃ 수분에 노출되어 변성 또는 응집되어, 생물학적 활성의 상실 및 면역원성의 변화를 일으킬 수 있다. 관련되는 기작에 따라 면역글로불린 안정화를 위한 합리적인 전략이 고안될 수 있다. 예를 들면, 응집 기작이 티오-디설파이드 교환을 통한 분자간 S-S 결합 형성인 것으로 밝혀진 경우, 안정화는 설프히드릴 잔기를 변화시키는 것, 산성 용액으로부터 동결건조시키는 것, 수분 함량을 제어하는 것, 적합한 첨가제를 사용하는 것, 특이적인 중합체 매트릭스 조성물 등을 개발하는 것에 의하여 달성될 수 있다.

지속방출 면역글로불린 조성물은 또한 리포좀에 포집된 면역글로불린을 포함할 수 있다. 면역글로불린을 포함하는 리포좀은 그 자체로서 알려진 방법에 의하여 제조된다. 예를 들면, Epstein et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82: 3688-92 (1985); Hwang et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 4030-4 (1980); 미국특허 제4,485,045호; 제4,544,545호; 제6,139,869호; 및 제6,027,726호 참조. 보통 지질 함량이 약 30 몰% 콜레스테롤 이상인 작고 (약 200 내지 약 800 A), 단일라멜라 형태이다; 상기 선택된 비율은 최적 면역글로불린 치료를 위하여 조정된 것임.

본 발명의 상기 면역글로불린은 활성 성분이 지속 방출되도록 하는 방식으로 제제화될 수 있는, 지속 방출 형태, 예를 들면 저장 주사 (depot injection), 임플트 조제물, 또는 삼투압 펌프로 투여될 수 있다. 지속 방출 제제화를 위한 임플란트는 당업계에 잘 알려져 있다. 임플란트는 생분해 또는 생분해가능하지 않은 중합체와 함께 미세구, 슬랩 등으로 제제화된다. 예를 들면, 락트산 및/또는 글리콜산의 중합체는 숙주에 의하여 잘 허용되는 침식가능한 중합체를 형성한다. 상기 임플란트는 단백질 침적 부위 (예, 신경퇴화 질환과 연관된 아밀로이드 침전의 형성 부위) 근처에 놓여져, 활성 성분의 국지적 농도가 신체의 다른 부위에 비하여 그 부위에서 증가되도록 한다.

더욱이, 탈수초생성을 예방하고 및/또는 수초재형성을 유도하는 면역글로불린은 개체에 전 또는 부분적 항체 (예, 단일쇄 Fv)를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 투여함으로써 제공될 수 있다. 상기 폴리뉴클레오티드는 적절한 운반체 중에 개체에 투여되어 상기 개체에 치료학적으로 효과적인 양으로 면역글로불린을 발현할 수 있다.

전형적인 일일 투여량은 본 명세서에 언급된 인자에 따라, 약 1㎍/kg 내지 약 10 mg/kg 이상의 범위의 면역글로불린일 수 있다. 일반적으로, 임상의는 원하는 효능을 달성하는 투여량이 도달할 때까지 면역글로불린을 투여할 것이다. 이 치료의 진전은 통상적 분석에 의하여 용이하게 모니터링된다.

"안정한" 항체 또는 항체 단편 제형물은 그 안의 단백질이 필수적으로 그 물리적 안정성 및/또는 화학적 안정성을 유지하는 것이다. 단백질 안정성을 측정하기 위한 다양한 분석 방법이 당업계에 알려져 있으며, 예를 들면, Peptide and Protein Drug Delivery, 247-301, (Vincent Lee Ed., Marcel Dekker, Inc., New York, N. Y., Pubs. 1991) 및 A. Jones, Adv. Drug Delivery Rev. 10: 29-90 (1993)에 개시되어 있다. 안정성은 선택된 시간 동안 선택된 온도에서 측정될 수 있다. 바람직하게는, 상기 제형물은 실온 (약 30℃) 또는 40℃에서 적어도 1 개월 동안 및/또는 약 2-8℃에서 적어도 1년 동안 적어도 2년 동안 안정하다. 더욱이, 상기 제형물은 바람직하게는 상기 제형물의 동결 (예, -70℃로) 및 해동 후에도 안정하다.

색 및/또는 투명도를 육안 관찰하여 또는 UV 광산란에 의하거나 크기배제 크로마토그래피에 의하여 측정된 응집, 침전 및/또는 변성의 징표가 없는 경우, 단백질은 약제학적 조성물 중에서 "그 화학적 안정성을 보유한다". 화학적 안정성은 상기 단백질의 화학적으로 변형된 형태를 검출 및 정량함으로써 검사될 수 있다. 화학적 변형은 예를 들면, 크기배제 크로마토그래피, SDS-PAGE 및/또는 MALDI/TOF MS를 사용하여 평가될 수 있다. 화학적 변형의 다른 형태에는 예를 들면, 이온 교환 크로마토그래피에 의하여 평가될 수 있는 전하 변형 (예, 탈아민화의 결과로서 일어나는 것)이 포함된다.

면역글로불린이 주어진 시간에서 상기 면역글로불린의 생물학적 활성이 예를 들면, 항원-결합 분석으로 결정된 상기 약제학적 조성물이 제조된 시점에서 보였던 생물학적 활성의 약 10% (분석의 오차 범위 내) 이내이면, 약제학적 조성물 중에서 "그 생물학적 활성을 보유한다".

5.5. 면역글로불린 조성물의 투여 경로

위에서 간단하게 언급된 바와 같이, 상기 논의된 약학 조성물은 다발성 경화증d 또는 다른 탈수초형성과 연관된 질병의 예방 및/또는 치료적 처리를 위하여 투여될 수 있다. 치료적 적용에서, 조성물은 탈수소형성을 촉진하기에 충분한 양으로, 다발성 경화증과 같은 질병이 의심되거나, 이미 앓고 있는 환자에게 투여된다. 이를 달성하기에 적합한 양은 치료학적으로 또는 약제학적으로 효과적인 용량으로서 정의된다.

상기 약학 조성물은 치료 및/또는 치료 처치를 위하여, 에어로졸 또는 경피와 같은, 비경구적, 국부적, 정맥내, 경우, 또는 피하, 근육내 국부 투여에 의하여 투여될 수 있다. 본 발명의 단백질성 물질은 경구 투여 (p.o.), 피하 (s.c.); 정맥내 (i.v.), 근육내 (i.m.), 저장 주사에 의한 복막 투여 후 장을 통과하는데 생존할 수 있을지라도; 또는 임플란트 조제물에 의하여 투여되는 것이 바람직하다.

상기 약학 조성물은 투여 방법에 따라 다양한 단일 투여량 형태로 투여될 수 있다. 예를 들면, 경구 투여에 적합한 단일 투여량 형태에는 분말, 정, 알약, 캡슐 및 로젠지가 포함된다.

상기한 바와 같은 조건을 치료하기 위하여, 본 발명의 상기 조성물의 효과적인 용량은 투여 수단, 표적 부위, 환자의 생리학적 상태, 및 투여되는 다른 약물을 포함한, 많은 다른 인자에 따라 달라질 수 있다. 따라, 치료 투여량은 안전성 및 효능을 최적화하기 위하여 적정될 필요가 있다. 이들 조성물은 다른 치료제와 비슷한 방식으로, 즉 생리학적으로 허용가능한 담체 중에 수의 용도로 포유동물 및 인간에서의 임상 용도로 투여될 수 있다. 일반적으로, 상기 투여량은 숙주 체중 kg 당 약 0.0001 내지 100 mg, 더욱 일반적으로는 0.01 내지 0.5 mg의 범위이다.

바람직한 치료 계획에서, 상기 항체는 환자 체중 kg 당 1 내지 5 mg 항체의 용량으로 정맥내 주입 또는 피하 주사에 의하여 투여된다. 상기 용량은 2 내지 8주 간격으로 반복된다. 이 범위 내에서, 바람직한 치료 계획은 4 주 간격으로 반복된, 체중 kg 당 3 mg 항체이다.

6. 약물 조합

상기한 바와 같이, 종래 기술된 어떠한 약물 또는 약물 조합도 탈수초형성 질병에 대하여 신경기능의 점진적 상실을 중단시키는 것으로 확인된 바 없다. 면역 매개된 염증을 억제하고 또한 다발성 경화증의 재발 속도 (relapse rate)를 감소시킬 수 있는 일부 약물이 존재하였다. 다발성 경화증과 연관된 증상 및 탈수초형성과 연관된 조건 및 질병을 치료하는데 사용된 이들 및 다른 약물도 또한, 본 명세서에 개시된 화합물 및 조성물과 조합되어 사용되는 것에 고려된다. 본 명세서에 개시된 화합물 및 조성물과의 칵테일 및/또는 조합에 사용되어질 하나 이상의 제제의 선택은 질환의 처리 (management)에 따라 달라진다. 예를 들면, 다발성 경화증에서, 질환 처리는 2개 그룹으로 분류될 수 있다: (1) 질환 진행을 중지시키기 위하여 고안된 처리, 및 (2) 대증적 처리 (symptomatic management). 약물의 다양한 조합이 카테고리 (D)에 사용될 수 있다. 예를 들면, 본 명세서에 개시된 상기 화합물 및 조성물은 면역 세포의 유입을 추가로 억제하여 탈수초형성 활성을 억제하는 면역억제제와 함께 투여될 수 있다. 예를 들면, 코르티코스테로이드와 같은 면역억제제가 사용될 수 있다.

수초재형성제 (예를 들면, 항-알파-4 인테그린 항체, 소분자 알파-4 인테그린 길항제 등)는 탈수초형성 증상 또는 질환과 연관된 증상을 치료, 개선 또는 경감하기 위하여 사용되는 다른 화합물 또는 조성물과 함께 조합될 수 있다.

다발성 경화증을 포함한, 탈수초형성 증상 또는 질환과 연관된 증상을 치료, 개선 또는 경감하기 위하여 사용되는 다른 제제에는, 근육 완화제(relaxant) (예를 들면, 디아제팜, 시클로벤자프린, 클로나제팜, 클로니딘, 프리미돈 등),항콜린제 (예를 들면, 프로판텔린, 디시클로민 등), 중추신경자극제 (예를 들면, 페몰린), 비스테로이드 항염증제(이부프로펜, 나프록센 및 케토프로펜과 같은 NSAID), 인터페론, 면역글로불린, 글라티라메르 (Copaxone), 미톡산트론 (Novantrone), 미소프로스톨, 종양괴사인자-알파 저해제 (예, 피르페니돈, 인플릭시마브 등) 및 코르티코스테로이드 (예를 들면, 글루코코티코이드 및 미네랄로코티코이드)가 포함되나, 이들 예에 한정되는 것은 아니다.

다발성 경화증을 치료하는데 일반적인 약제는 인터페론 베타-lb (Betaseron), 인터페론베타-la (Avonex), 고용량 인터페론베타-la (Rebif), 글라티라메르 (Copaxone)_, 면역글로불린, 미톡산트론 (Novantrone), 코르티코스테로이드 (예를 들면, 프레드니손, 메틸프레드니솔론, 덱사메타손 등)이 포함된다. 다른 코르티코스테로이드가 또한 사용될 수 있으며, 코르티솔, 코르티손, 플루드로코르티손, 프레드니솔론, 6α-메틸프레드니솔론, 트리암시놀론, 및 베타메타손가 포함되나, 이들 예에 한정되는 것은 아니다.

본 명세서에 개시된 화합물 및 조성물과 함께 조합되어 사용되는 약제의 투여 형태는 개체 및 사용되어질 약물 조합에 따라 달라질 수 있다. 예를 들면, 인터페론은 일반적으로 다음과 같이 투여된다: 인터페론베타-la (Avonex)는 주 일회 300 ㎍ 투여된다: 인터페론 베타-la는 주 3회 약 22 ㎍ 또는 44 ㎍ 투여된다: 및 인터페론 베타-lb (Betaserono)는 하루 걸러 250㎍ 투여된다 (Durelli et al., Lancet 359: 1453-60, 2002). 일반적으로 인터페론은 재발성 또는 진동성(remitting) 다발경화증에 대하여 투여된다. 따라서, 본 명세서에 개시된 수초재형성제와의 조합에 있어서, 인터페론의 바람직한 범위는, 본 명세서에 개시된 다른 수초재형성 화합물 및 조성물과의 조합되어 투여되는 방식에 따라 약 0. 1 ㎍ 내지 약 250 ㎍, 더욱 바람직하게는 약 0.5㎍ 내지 약 50 ㎍일 수 있다.

본 발명과 함께 사용되는 것이 고려되는 비스테로이드성 항염증제 (NSAIDs)에는 비선택성 COX 저해제 및 선택성 COX-2 저해제가 포함된다. 비선택성 COX 저해제에는 살리실산 유도체 (예를 들면, 아스피린, 소듐 살리실레이트, 콜린 마그네슘 트리살리실레이트, 사살레이트, 디플루니살, 설파살라진, 및 올살라진), 파라-아미노페놀 유도체 (예를 들면, 아세트아미노펜), 인돌 및 인덴 아세트산 (예를 들면, 톨메틴, 디클로페낙, 및 케토록락), 헤테로아릴 아세트산 (예를 들면, 아부프로펜, 나프록센, 플루르비프로펜, 케토프로펜, 페프로펜, 및 옥사프로진), 안트라닐산 오르페나메이트(예를 들면, 메페나믹산 및 메클로페나믹산), 에놀산 (예를 들면, 피록시캄 안드멜록시캄과 같은 옥시캄), 및 알카논 (예를 들면, 나부메톤)이 포함되나, 이들 예에 한정되는 것은 아니다. 선택성 COX-2 저해제에는 디아릴-치환된 퓨란 (예를 들면, 로페콕시브), 디아릴-치환된 피라졸 (예를 들면, 셀렉콕시브), 인돌 아세트산 (예를 들면, 에토돌락크), 및 설포아닐리드 (예를 들면, 니메술라이드)가 포함된다. NS는 종종 예를 들면, Avonexo를 투여받는 환자가 경험하는 독감 유사 증상을 감소시키기 위하여 인터페론과 조합되어 투여된다. 통상의 NS에는 나프록센, 이부프로펜, 및 케토프로펜이 포함된다. 파라세타몰도 또한 종종 환자에 투여된다. Reess et al., 2002 Mult. Scler. 8: 15-8 참조.

글라티라메르 아세테이트 (GA, Copaxone)는 수초 염기성 단백질-반응성 T 세포의 활성화를 억제하고, 항염증 효과에 의하여 특징지워지는 T-세포 레파토리를 유도하는 합성 분자이다. 더욱이, 글라티라메르는 인터페론-베타가 접근할 수 없는, 중추신경계 (CNS)에 접근할 수 있다 (Dhib-Jalbut, 2002 Neurology 58: S3-9; Weinstock-Guttman et al., 2000 Drugs 59: 401-10).

미톡산트론은 2차 진행성 다발경화증 (SP-MS) 치료에 효과적인 것으로 알려진, 안트라센디온 합성제이다. 그러나, 이 약물을 사용하는 것은 그의 누진적 심장독성에 의하여 다시 제한된다 (Weinstock-Guttman et al., 2000).

종양괴사인자-알파 (TNF-a)는 탈수초형성에 있어서 핵심 사이토카인일 것이다 (Walker et al., 2001 Mult. Scler. 7: 305-12). 따라서, TNF-a 기능을 길항하거나 합성을 억제하는 약제를 사용하는 것은 본 명세서에 개시된 약제 및 화합물과조합에 유용할 수 있다. 이것은 피르페니돈과 같은 약제 뿐만 아니라 항-TNF-a 항체 (예를 들면, infliximab)가 포함된다. 피르페니돈은 TNF-a의 합성을 감소시키고 TNF-a에 대한 수용체를 봉쇄하는 것으로 알려진 비펩티드 약물이다.

대부분의 탈수초형성 조건 및 질병에서 오랜 동안 중추는 ACTH, 글로코코티코이드 및 코티코이드 스테로이드를 사용하는 것이었다. 이들 약제는 그들의 항-부종 및 항-염증 효과를 위하여 사용된다. ACTH는 보통 3일 동안 6-8 시간에 걸쳐서 500 mL 5% 덱스트로오스 및 물 500 ml 중에서 정맥 내로 주어지는 80 U로 개체에 투여된다. 또한, 7일 동안 매 12 시간마다 40U의 용량으로, 다음으로 매 3일마다 감소된 용량으로 40U/ml로 근육내 투여될 수 있다. Garrison's Principles of Internal Medicine 2287-95 (13th ed., Isselbacher et al., ed. 1994) 중의 S. Hauser, "Multiple sclerosis and other demyelinating diseases" 참조.

메틸프레드니솔론은 보통 바람직하게는, 아침에 6시간에 걸쳐서 500ml D5W 중에 천천히 투여된다. 통상의 투여량은 3일 동안 매일 1000 mg, 3일 동안 매 500 및 3일 동안 매일 250 mg을 포함한다. 메틸프레드니솔론-프레드니손 조합이 또한 보통 투여된다. 일반적으로, 1000 mg의 정맥내 메틸프레드니솔론은 3일에 걸쳐서 투여된 후에, 14일 동안 1일당 1 mg/kg으로 프레드니손이 경구투여된다. 따라서, 본 명세서에 개시된 화합물 및 조성물과 함께 조합하여 사용하기 위하여, 상기 스테로이드는 필요에 따라, 약 1 내지 14일에 걸쳐서 약 1 내지 약 1000 mg/kg의 양으로 투여될 수 있다.

MS와 같은 탈수초형성 조건에 있어서 부작용은 피로 및 감소된 인지 기능이다. 아만타딘 히드로클로라이드 및 페몰린과 같은 제제는 MS와 연관된 피로를 치료하기 위하여 종종 사용되어 왔다 (Geisler et al.,1996 Arclz. Neurol. 53: 185-8).

그러한 조합 치료의 이점은 상기 약물의 일부에 현재 발생하는 부류-특이적 및 약제-특이적 부작용을 감소시킬 수 있다는 것이다.

인터페론-베타의 부류 특이적 (class-specific) 부작용에는 주사 후 2-6 시간에 시작하여 보통 주사 후 24 시간에 풀어지는 열, 오한, 근육통, 관절통 및 다른 독감 유사 증상이 포함된다. 때때로 인터페론-베타는 또한 이미 존재하는 MS 증상의 일시적 악화를 유도한다. 약제-특이적 부작용에는 인터페론 베타-lb와 주사-부위 반응이 포함된다. 이들 부작용의 처리는 용량 및 투여 시간의 조절, 아세트아미노펜, 비스테로이드 항-염증 약물 (NSAIDs) 및 스테로이드의 적절한 조합을 처방함으로써 달성될 수 있다. Munschauer et al., 1997 Clin. tuer. 19: 883-93 참조.

따라서, 투여되는 특정한 약물의 양을 감소시킬 수 있는 약물의 조합은 환자에 의하여 겪게되는 부작용을 감소시킬 수 있다.

조합으로 투여되는 경우, 상기 작은 화합물 수초재형성제가 이들 다른 화합물 및 조성물과 동일한 제형물 중에서 ,또는 별도의 제형물 중에서 투여될 수 있다. 조합으로 투여되는 경우, 상기 수초재형성 면역글로불린은 다른 화합물 및 조성물과는 다른 제형물 중에서 투여되는 것이 일반적이다. 조합으로 투여되는 경우, 수초재형성제는 증상을 치료, 개선 또는 경감하는데 사용되는 상기 다른 화합물 및 조성물 전, 후 또는 동시에 투여될 수 있다.

7. 만성 투여 투여량 (Dosage) 계획

본 발명의 만성 처리 계획은 그것을 필요로 하는 환자에서 병리적 염증을 억제하기 충분한 수용체 포화를 유지할 수준으로 알파-4-인테그린 제제(예, 소분자 또는 면역글로불린)을 제공한다. 본 발명의 방법은 적어도 6개월, 더욱 바람직하게는 1년 이상의 기간에 걸쳐서 반복된 도우징 (dosing)과 함께, 매 2주마다 일회 또는 1개월에 일회 내지 매 2개월에 일회 투여를 수반한다. 본 발명의 방법은 약 65% 내지 100%, 더욱 바람직하게는 75% 내지 100%, 및 더 더욱 바람직하게는 80-100%의 범위에서 알파-4-인테그린 (예를 들면, VLA-4)을 포함하는 인간 환자에서 이합체의 수용체 포화 수준을 얻고 유지하는 것과 관련된다. 이들 수용체 포화 수준은 만성적으로 (예, 약 6 개월의 기간에 걸쳐서) 이들 수준에 유지되어 병리적 염증을 계속적으로 억제할 수 있도록 한다.

특정한 구현예에서, 수초재형성제는 항체, 바람직하게는 인간화된 또는 인간 항체이고, 상기 도우징은 매월 기준으로 된다. 또다른 특정한 구현예에서, 수초재형성제는 하기하는 바와 같은 화학식 I, IA, IB, IC, II, IIA, 또는 IIB의 화합물이다. 수용체 포화의 수준은 도우징 계획의 효능을 결정하기 위하여 모니터링될 수 있고, 생리적 마커가 투여량 계획의 성공을 확인하기 위하여 측정되었다. 확인으로서, 항체의 혈청 수준은 항체의 제거 (clearance)를 확인하기 위하여 상기 처리의 효능에 대한 반감기의 잠재적 효과를 결정하기 위하여 모니터링될 수 있다.

본 발명의 약제로 처리하는데 있어서, 투여량은 약 0.0001 내지 100 mg/숙주체중 kg, 더욱 일반적으로는 0.01 내지 5 mg/숙주 체중 kg이다. 예를 들면, 투여량은 1mg/kg 체중 또는 10 mg/kg 체중일 수 있다. 투여량 및 빈도는 환자에서의 상기 약제의 반감에 따라 달라진다. 투여량 및 투여의 빈도는 상기 처리가 예방적 또는 치료적인지에 따라 달라질 수 있다. 면역글로불린 투여에 대하여, 각 투여량 주사는 일반적으로 2.0 내지 8.0m/kg 투여량이다. 화합물 투여에 대하여, 각 투여량 주사는 일반적으로 1.0 내지 50.0 mg/kg 투여량이다.

본 명세서에 제공된 가르침에 따라, 효과적인 투여량은 환자로부터 액체 시료를 얻음으로써 모니터링될 수 있다. 이를 위하여, 일반적으로 혈액 혈청 또는 뇌척수액 시료가 취하여지고 인테그린 수용체 포화가 당업계에 잘 알려진 방법을 사용하여 결정된다. 이상적으로, 시료는 최초 투여 (dosing) 전에 취하여지고, 후추 시료가 채취되고 각 처리 전 및/또는 후에 측정된다.

반복되는 개별 투여량 (dosing)으로 구성되는 만성적 투여에 대한 대안으로, 투여량이 수용체 포화의 수준이 염증을 억제하기에 충분한 정도로 유지되도로 하는 한, 수초재형성제가 지속방출 제형물로서 투여될 수 있다. 예를 들면, 제어된 방출 체계가 본 발명의 범위 내에서 수초재형성제를 만성적으로 투여하는데 사용될 수 있다. 적절한 제어방출 투여량 형태에 대한 논의는 Lesczek Krowczynski, EATENDED-RELEASE DOSAGE FORMS, 1987 (CRC Press, Inc.)에서 발견할 수 있다.

상기 다양한 제어방출 방법은 아주 넓은 범위의 약물 투여 형태를 포함한다. 제어방출 방법은 물리적 체계 및 화학적 체계를 포함하나, 여기에 한정되는 것은 아니다. 물리적 체계에는, 마이크로포집화, 마크로포집화 및 막 체계와 같은, 속도제어 막을 갖는 저장소 체계; 중공 섬유, 초 마이크로다공성 셀룰로오스 트리아세테이트 및 다공성 중합체 기판 및 폼 (foam)과 같은 속도 제어막이 없는 저장소 체계; 비다공성, 중합체 또는 탄성중합체 매트릭스 (예를 들면, 비침식성, 침식성, 환경인자 제제 인입, 및 분해) 중에 물리적으로 용해된 체계, 및 비다공성, 중합체 또는 탄성중합체 매트릭스 (예를 들면, 비침식성, 침식성, 환경인자 제제 인입, 및 분해) 중에 물리적으로 분산된 물질를 포함한, 모노리틱 체계; 외부 제어층에 화학적으로 비슷하거나 비슷하지 않은 저장층을 포함하는 적층 구조 및 삼투펌프와 같은 다른 물질적 방법 또는 이온교환 수지에 흡착이 포함되나, 이들 예에 한정되지 않는다.

화학적 체계에는, 중합체 매트릭스의 화학적 침식 (예를 들면, 이질 또는 동질 침식), 또는 중합체 매트릭스의 생물학적 침식 (예를 들면, 이질 또는 동질)이 포함되나, 이들 예에 한정되는 것은 아니다. 제어 방출을 위한 체계의 카테고리에 대한 추가의 논의는 Agis F. Kydonieus, CONTROLLED RELEASE TECHNOLOGIES: METHODS, THEORY AND APPLICATIONS, 1980 (CRC Press, Inc.)에서 발견할 수 있다.

본 발명의 방법은 병리적인 염증과 관련되거나 그로부터 발생하는 질환을 앓고 있는 환자를 치료하기 위하여, 또는 특정한 질환에 걸릴 위험이 있는 환자를 예방적으로 치료하기 위하여 사용될 수 있다. 예방 대 치료 처리를 위하여 필요한 투여량 계획은 달라질 수 있고, 특정한 용도 및 치료될 질환에 대하여 고안될 필요가 있다.

일부 방법에 있어서, 투여되는 각 약제의 투여량이 지정된 범위 내에서 해당되는 경우에는, 2 이상의 약제 (예, 다른 결합 특이성을 가진 단클론 항체, 단클론 항체 및 본 명세서에 개시된 화합물)가 동시에 투여된다. 조합 치료는 상기 약제가 투여 기간인 원하는 시간 간격으로 환자에 연속적으로 투여되는 경우에도 일어날 수 있다. 간격은 수용체 포화 수준을 측정함으로써 또는 질병 경과의 다른 지표를 따름으로써 나타내어지는 바와 같이 불규칙적일 수 있다.

당업자라면 용량 수준은 특정한 약제, 증상의 경중 및 부작용에 대한 개체의 민감도의 함수로서 변화할 수 있다는 것을 용이하게 이해할 것이다. 특이적인 약제의 일부는 다른 것보다 더 강력하다. 주어진 약제에 대한 바람직한 투여량은 다양한 수단에 의하여 당업자에 의하여 용이하게 결정될 수 있다. 바람직한 수단은 주어진 약제의 생리적 능력을 측정하는 것이다.

예방적 적용에 있어서, 약제학적 조성물은 질병을 제거하거나 질병의 위험을 감소하거나 지연하기에 충분한 양으로 특정한 질병에 민감하거나 걸릴 위험이 있는 환자에 만성적으로 투여된다. 그러한 양은 예방적으로 유효한 용량인 것으로 정의된다. 완화 상태에 있는 다발성 경화증 환자에서, 위험은 NMR 이미지화, 또는 일부 경우에서는, 상기 환자에 의하여 관찰된 예비-증상적 징표에 의하여 검사될 수 있다.

상기한 조건의 치료를 위한 본 발명의 조성물의 효과적인 투여량 계획은, 투여 수단, 표적 위치, 환자의 생리적 상태, 및 투여되는 다른 약물을 포함하는 많은 다른 인자에 따라 달라질 수 있다. 따라서, 치료 투여량은 안전성 및 효능을 최적화하기 위하여 적정될 필요가 있을 것이다. 일반적으로, 투여량 계획의 각 투여는 약 0.0001 내지 약 100 mg/kg, 일반적으로 약 0.01 내지 약 50, 더욱 일반적으로는 약 0.1 내지 약 30 mg/kg 숙주 체중일 수 있다.

본 발명이 수초재형성제는 급성 및 만성 염증에 대한 다른 치료제의 효과적인 양과 함께 사용될 수 있다. 그러한 약제에는 흡착 분자 (예를 들면, 다른 인테그린, 셀렉틴, 및 면역글로불린(Ig) 수퍼패밀리 구성원 (Springer, Nature (1990) 346: 425- 433; Osborn (1990) Cell 62: 3; 및 Hynes (1992) Cell 9: 11) 참조)의 다른 길항체가 포함된다. 인테그린은 α사슬 (120-180 kDa) 및 일반적으로, 짧은 세포질 도메인을 갖는 β 사슬 (90-110 kDa)로 구성되는 헤테로이합체성 막투과 당단백질이다. 예를 들면, 3개의 중요한 인테그린, LFA-1, Mac-1 및 P150,95은 CDIIa, CDIIb 및 CD11c로 표시되는 다른 알파 서브유닛, 및 CD18로 표시되는 공통의 베타 서브유닛을 갖는다. LFA-1 (α_Lβ₂)는 림프구, 과립구 및 단핵세포에서 발현되고, 주로 ICAM-1라고 하는 Ig-패밀리 구성원 카운터-수용체 및 관련 리간드에 결합한다. ICAM-1은 백혈구 및 내피세포를 포함한 많은 세포에서 발현되고, TNF 및 IL-1과 같은 사이토카인에 의하여 혈관 내피 세포에서 상승조절된다. Mac-1(α_Mβ₂)은 중성구 및 단핵세포에 분포되어 있고, 또한 ICAM-1에 결합한다. 세번째 β₂ 인테그린, P150,95 (α_Xβ₂)도 또한 중성구 및 단핵세포에서 발견된다. 상기 셀렉틴은 L-셀렉틴, E-셀렉틴 및 P-셀렉틴으로 구성된다.

상기 수초재형성제와 조합으로 사용될 수 있는 다른 항염증제에는 인터루킨IL-1 내지 IL-13, 종양괴사인자 α 및 β (TNF-α 및 TNF-β), 인터페론α,β 및 γ, 종양성장인자 베타 (TGF-β), 콜로니자극인자 (CSF) 및 과립구 단핵세포 콜로니성장인자 (GM-CSF)와 같은 사이토카인의 항체 및 다른 길항제가 포함된다. 다른 항염증제에는 MCP-1, MIP-lα, MIP-1β, RANTES, 엑소탁신 및 IL-8이 포함된다. 다른 항염증제에는 NS, 스테로이드 및 염증의 다른 소분자 억제제가 포함된다.

투여의 시간 및 순서, 제형물, 투여 경로 및 조합 치료를 위한 약제의 효과적인 농도는 알파-4-인테그린에 대한 인간화 항체, 알파-4 인테그린에 대한 소 화합물 및 상기 약물 조합에 대하여 상기한 바와 같다.

8. 약제 시험

약제는 시험관내 및 생체내로 시험될 수 있다. 당업계에 알려진 바와 같이, 약제가 알파-4 서브유닛에 결합할지를 시험하기 위한 많은 생체내 모델이 존재한다. 수초재형성제을 촉진하고 탈수초형성을 억제하는데 상기 약제가 생체내 활성을 가지고 있는지 시험하는 것은 실험적 자가 면역 뇌척수염 (EAE) 동물 모델을 사용하여 수행될 수 있다. EAE는 다발성 경화증과 유사성을 갖는 중추신경체계의 염증 조건이다 (Paterson, IN TEXTBOOK OF IMMUNOPATHOLOGY, eds. Miescher and Mueller-Eberhard, 179-213, Grune 및 Stratton, N. Y. 1976).

EAE는 수초 염기성 단백질에 대하여 특이적인 CD4-양성 세포 클론의 단일 복막 주사에 의하여 래트에 유도될 수 있다. 염증은 4 내지 12 시간 내에 개시된다; 내재적 단핵세포 및 림프구는 뇌줄기 및 척수 내의 염증된 혈관을 침투하여, 4 또는 5일 안에 꼬리 및 뒷다리의 마비를 일으킨다.

EAE 뇌의 단편은 예를 들면, Stamper 및 Woodruff, J. Exp. Med. 144: 828-833 (1976)에 개시되어 있는 시험관내 결합 분석을 사용하여 백혈구 부착을 지지하는 능력에 대하여 검사될 수 있다. 백혈구 흡착 수용체에 대한 약제는 실시예 4에 기술된 바와 같은 시험관내 절편 분석법에서 저해 활성에 대하여 검사될 수 있다. 표 12 및 13에 나타낸 바와 같이, U937 세포 (인간 단핵세포주)의 부착은 인간 VLA-4 인테그린에 대한 항체에 의하여 거의 완전하게 저해되었다. 상기 수초재형성항체는 다른 흡착 분자에 대한 항체와 비교하여 유의하게 높은 억제 효과를 나타내었다.

놀랍게도, α4 인테그린 (P4G9 및 HP 1/7)의 피브로넥틴 결합 활성을 선택적으로 저해하는 항체는 상기 EAE 혈관에 대한 U937 부착을 증가시켰다. 이들 결과는 α4 인테그린의 피브로넥틴 결합 활성은 시험관내에서 EAE 혈관에 대한 U937 흡착과 직접적으로 연관되어 있지 않다는 것을 암시한다. 표 12 및 13은 또한,다른 백혈구 흡착 수용체가 U937 또는 림프구가 EAE 혈관에 결합하는데 효과가 없었다는 것을 나타낸다.

상기한 α₄β₁ 약제를 사용한 시험관내 결과에 따르면, EAE 진행에 대한 이들 항체의 효과는 마비의 개시의 지연 또는 마비의 심한정도의 감소를 측정함으로써 생체내에서도 또한 시험될 수 있다. 본 발명에서 유용한 항체 중의 하나인, HP2/1의 보호적 효과는 실시예 4에 제공되어 있다.

뇌 내피 세포에 백혈구가 결합하는 것을 억제하여 잠재적으로 수초재형성을 억제 또는 촉진하는데 효과적인 추가적인 약제는 흡착 분석을 사용하여 확인될 수 있다. 실시예를 위한 대조군으로서 HP2/1 또는 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르를 사용하여, 다른 항체 또는 약제가 림프구가 α₄β₁ 인테그린에 대한 알려진 리간드에 대하여 결합하는 것을 억제하는 능력에 대하여 탐색될 수 있다. 여러 다른 약제가 VLA-4 백혈구 세포 표면 수용체의 α₄ 서브유닛을 표적화함으로써 흡착을 억제하는 것이 확인될 수 있다.

본 발명의 방법 및 조성물에 유용한 단클론 항체에는 그 전체로서 원용에 의하여 본 명세서에 포함되어지는, 미국특허 제6,033,665호에 논의되어 있는 바와 같은, 예를 들면, HP2/1, TY21.6, TY21.12, 및 L25가 포함된다. 이들 항체는 VLA-4의 α 사슬과 반응하고, VCAM-1, 피브로넥틴 및 염증이 형성된 뇌 내피 세포에 결합하는 것을 억제하나, β₁ 인테그린 패밀리의 다른 구성원의 활성에는 영향을 미치지 않는다.

VLA-4/VCAM-1 표적에 대하여 선택적으로 반응하는 다른 약제가 또한 사용될 수 있다. 예를 들면, 다발성 경화증 중의 뇌와 같은, 염증 부위에 림프구가 이동하는 것만을 억제하는 β₁ 사슬과 조합되어 VCAM-1 결합 도메인 VLA-4 (α₄)와 반응하는 항체는 수초재형성을 촉진하기 위하여 사용될 수 있다. 더욱이 이 약제는 (β₁ 인테그린의 모든 구성원에 의하여 매개되는) 매트릭스 반응에 영향을 미치지 않을 뿐만 아니라 (α₄β₇에 의하여 매개되는) 정상적인 내장 면역에도 영향을 미치지 않을 것이다. 이것 및 다른 그러한 약제의 생산은 당업계의 기술의 범위 내이다.

Claims

탈수초성 질환을 치료하기 위하여 포유동물에서 신경세포의 수초재생을 향상시키는 양으로 약제를 제조하기 위한 수초재생제의 용도.
제1항에 있어서, 상기 포유동물이 인간인 것을 특징으로 하는 용도.
제2항에 있어서, 상기 인간은 세포를 탈수초화하는 질환을 앓고 있으며, 상기 질환은 다중경화증(multiple sclerosis), 선천성 대사 장애(congenital metabolic disorder), 비정상 수초화를 동반한 신경장해(neuropathy with abnormal myelination), 약물 유도 탈수초화(drug induced demyelination), 방사선 유도 탈수초화(radiation induced demyelination), 유전적 탈수초화 질환(hereditary demyelinating condition), 프리온 유도 탈수초화 질환(prion induced demyelinating condition), 뇌염 유도 탈수초화(encephalitis induced demyelination), 또는 척수 상해(spinal cord injury)인 것을 특징으로 하는 용도.
제3항에 있어서, 상기 인간이 다중경화증을 앓고 있는 것을 특징으로 하는 용도.
제1항 내지 제4항중 어느 한 항에 있어서, 상기 수초재생제가 항체 또는 이의 면역학적으로 활성이 있는 단편인 것을 특징으로 하는 용도.
제5항에 있어서, 상기 항체가 단일클론(monoclonal) 항체 또는 단일클론 항체의 면역학적으로 활성이 있는 단편인 것을 특징으로 하는 용도.
제6항에 있어서, 상기 단일클론 항체가 키메라(chimeric) 항체, 인간 항체, 유전공학적 항체, 또는 양쪽특이적 항체인 것을 특징으로 하는 용도.
제7항에 있어서, 상기 키메라 항체가 인간화 또는 영장류화되는 것을 특징으로 하는 용도.
제5항에 있어서, 상기 항체 또는 이의 면역학적으로 활성이 있는 단편이 알파-4 베타-1 인테그린과 결합하는 것을 특징으로 하는 용도.
제9항에 있어서, 상기 항체가 인간화 항체 또는 이의 면역학적으로 활성이 있는 단편인 것을 특징으로 하는 용도.
제10항에 있어서, 상기 인간화 항체가 나탈리주마브(natalizumab) 또는 이의 면역학적으로 활성이 있는 단편인 것을 특징으로 하는 용도.
제11항에 있어서, 상기 나탈리주마브가 정맥 또는 피하 투여되는 것을 특징으로 하는 용도.
제5항 내지 제11항중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체의 면역학적으로 활성이 있는 단편이 Fab, scFv, 또는 F(ab')₂인 것을 특징으로 하는 용도.
제11항에 있어서, 상기 약제가 필요한 포유동물에게 만성적으로 투여되는 것을 특징으로 하는 용도.
제12항에 있어서, 상기 나탈리주마브가 포유동물에게 정맥 투여되며, 상기 투여가 포유동물에서 적어도 약 1 ng/mL의 나탈리주마브 유효 혈액 수준을 유발하는 것을 특징으로 하는 용도.
제15항에 있어서, 상기 나탈리주마브 유효 혈액 수준이 약 1 ng/mL인것을 특징으로 하는 용도.
제1항에 있어서, 상기 수초재생제가 만성적으로 투여되는 것을 특징으로 하는 용도.
제18항에 있어서, 상기 수초재생제의 만성 투여가 적어도 1년의 기간에 걸쳐 매주 또는 매달 수행되는 것을 특징으로 하는 용도.
제1항 내지 제4항중 어느 한 항에 있어서, 상기 수초재생제와 함께 항염증제를 포유동물에게 공동 투여하는 것을 특징으로 하는 것을 특징으로 하는 용도.
제18항에 있어서, 상기 항염증제가 부신피질자극성 호르몬(adrenocorticotropic hormone), 코르티코스테로이드(corticosteroid), 인터페론(interferon), 글라티라머 아세트산염(glatiramer acetate), 또는 비스테로이드성 항염증약제(non-steroidal anti-inflammatory drug)인 것을 특징으로 하는 용도.
제20항에 있어서, 상기 인터페론이 인터페론 베타-1b 또는 인터페론 베타-1a인것을 특징으로 하는 용도.
제20항에 있어서, 상기 코르티코스테로이드가 프레드니손(prednisone), 메틸프레드니솔론(methylprednisolone), 덱사메타손 코르티솔(dexamethasone cortisol), 코르티손(cortisone), 플루드로코르티손(fludrocortisone), 프레드니솔론(prednisolone), 6α-메틸프레드니솔론(6α-methylprednisolone), 트리암시놀론(triamcinolone) 또는 베타메타손(betamethasone)인 것을 특징으로 하는 용도.
제22항에 있어서, 상기 코르티코스테로이드가 프레드니손인 것을 특징으로 하는 용도.
제20항에 있어서, 상기 비스테로이드성 항염증약제가 아스피린(aspirin), 소듐 살리실레이트(sodium salicylate), 콜린 마그네슘 트리살리실레이트(choline magnesium trisalicylate), 살살레이트(salsalate), 디플루니살(diflunisal), 설파살라진(sulfasalazine), 올살라진(olsalazine), 파라-아미노페놀 유도체(para-aminophenol derivative), 인돌(indole), 인덴 아세트산(indene acetic acid), 헤테로아릴 아세트산(heteroaryl acetic acid), 안트라닐산(anthranilic acid), 에놀산(enolic acid), 알카논(alkanone), 디아릴 치환 퓨라논(diaryl-substituted furanone), 디아릴 치환 피라졸(diaryl-substituted pyrazole), 인돌 아세트산(indole acetic acid), 또는 설폰아닐리드(sulfonanilide)인 것을 특징으로 하는 용도.
필요한 환자에게 투여할 경우 탈수초화를 억제하고 수초재생을 향상시키는 치료학적으로 유효량의 수초재생제, 및 항염증제를 포함하는 병용 요법.
제25항에 있어서, 상기 수초재생이 필요한 환자가 다중경화증, 선천성 대사 장애, 비정상 수초화를 동반한 신경장해, 약물 유도 탈수초화, 방사선 유도 탈수초화, 유전적 탈수초화 질환, 프리온 유도 탈수초화 질환, 뇌염 유도 탈수초화, 또는 척수 상해를 앓고 있는 것을 특징으로 하는 병용요법.
제25항에 있어서, 상기 수초재생제가 항체 또는 이의 면역학적 활성이 있는 단편이고, 상기 항체가 VLA-4에 결합하는 것을 특징으로 하는 병용요법.
제27항에 있어서, 상기 수초재생제가 알파-4 베타-1 인테그린에 결합하는 항체인 것을 특징으로 하는 병용요법.
제27항에 있어서, 상기 수초재생제가 항체 또는 이의 면역학적 활성이 있는 단편이고, 상기 항체가 VLA-4에 결합하고, 상기 수초재생제가 필요한 환자에게 만성적으로 투여되는 것을 특징으로 하는 병용요법.
제25항에 있어서, 상기 병용요법는 필요한 환자에게 투여할 경우 탈수초를 예방하고 수초재생을 향상시키는 치료학적으로 유효량의 이차 수초재생제를 포함하고, 상기 이차 수초재생제가 단일클론 항체 또는 단일클론 항체의 면역학적으로 활성이 있는 단편인 것을 특징으로 하는 병용요법.
제31항에 있어서, 상기 항체가 단일클론 항체인 것을 특징으로 하는 병용요법.
제30항 또는 제31항중 어느 한항에 있어서, 상기 단일클론 항체가 키메라 항체, 인간 항체, 유전공학적 항체, 또는 양쪽특이적 항체인 것을 특징으로 하는 병용요법.
제32항에 있어서, 상기 키메라 항체가 인간화 또는 영장류화되는 것을 특징으로 하는 병용요법.
제33항에 있어서, 상기 인간화 항체가 나탈리주마브 또는 이의 면역학적으로 활성이 있는 단편인 것을 특징으로 하는 병용요법.
제30항에 있어서, 상기 일차 수초재생제가 화학식 I, IA, IB, IC, II, IIA 또는 IIB의 화합물인 것을 특징으로 하는 병용요법.
제35항에 있어서, 상기 이차 수초재생제가 화학식 IB, IC 또는 IB의 화합물인 것을 특징으로 하는 병용요법.
제36항에 있어서, 상기 일차 수초재생제가 N-[N-(3-피리딘술포닐)-L-3,3-디메틸-4-티아프롤릴]-O-[1-메틸피페라진-4-일카르보닐]-L-티로신 이소프로필 에스테르인 것을 특징으로 하는 병용요법.
제25항에 있어서, 상기 항염증제가 부신피질자극성 호르몬, 코르티코스테로이드, 인터페론, 글라티라머 아세트산염, 또는 비스테로이드성 항염증약품인 것을 특징으로 하는 병용요법.
제38항에 있어서, 상기 인터페론이 인터페론 베타-1b 또는 인터페론 베타-1a인 것을 특징으로 하는 병용요법.
제38항에 있어서, 상기 코르티코스테로이드가 프레드니손, 메틸프레드니솔론, 덱사메타손 코르티솔, 코르티손, 플루드로코르티손, 프레드니솔론, 6α-메틸프레드니솔론, 트리암시놀론 또는 베타메타손인 것을 특징으로 하는 병용요법.
제38항에 있어서, 상기 비스테로이드성 항염증약품이 아스피린, 소듐 살리실레이트, 콜린 마그네슘 트리살리실레이트, 살살레이트, 디플루니살, 설파살라진, 올살라진, 파라-아미노페놀 유도체, 인돌, 인덴 아세트산, 헤테로아릴 아세트산, 안트라닐산, 에놀산, 알카논, 디아릴 치환 퓨라논, 디아릴 치환 피라졸, 인돌 아세트산, 또는 설폰아닐리드인 것을 특징으로 하는 병용요법.
제38항에 있어서, 상기 비스테로이드성 항염증약품이 아스피린, 소듐 살리실레이트, 콜린 마그네슘 트리살리실레이트, 살살레이트, 디플루니살, 설파살라진, 올살라진, 파라-아미노페놀 유도체, 인돌, 인덴 아세트산, 헤테로아릴 아세트산, 안트라닐산, 에놀산, 알카논, 디아릴 치환 퓨라논, 디아릴 치환 피라졸, 인돌 아세트산, 또는 설폰아닐리드인 것을 특징으로 하는 병용요법.
제25항에 있어서, 상기 수초재생제가 정맥 또는 피하 투여형인 것을 특징으로 하는 병용요법.
제25항에 있어서, 상기 수초제생제가 적어도 1년의 기간에 걸쳐 매주 또는 매달 필요한 환자에게 투여되는 것을 특징으로 하는 병용요법.
척수 신경세포의 수초재생을 촉진함으로써 필요한 환자에서 마비를 치료하기 위하여 척수에서 면역세포의 림프구 침윤을 억제하기에 충분한 양으로 환자의 마비를 경감시키는 약제 제조를 위한 수초재생제의 용도.
제45항에 있어서, 상기 마비를 갖고 있는 환자가 다중경화증, 선천성 대사 장애, 비정상 수초화를 동반한 신경장해, 약물 유도 탈수초화, 방사선 유도 탈수초화, 유전적 탈수초화 질환, 프리온 유도 탈수초화 질환, 뇌염 유도 탈수초화, 또는 척수 상해를 앓고 있는 것을 특징으로 하는 수초재생제의 용도.
제45항 또는 제46항중 어느 한 항에 있어서, 상기 환자가 인간인 것을 특징으로 하는 수초재생제의 용도.
제45항에 있어서, 면역억제제(immunosuppressant)의 공동투여를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 수초재생제의 용도.
제45항에 있어서, 상기 수초재생제가 항-VLA-4 항체인 것을 특징으로 하는 수초재생제의 용도.
제45항에 있어서, 상기 항-VLA-4 항체가 알파-4 베타-1 인테그린과 결합하는 것을 특징으로 하는 수초재생제의 용도.
제50항에 있어서, 상기 항-VLA-4 항체가 단일클론 항체인 것을 특징으로 하는 수초재생제의 용도.
제51항에 있어서, 상기 단일클론 항체가 키메라 항체, 인간 항체, 유전공학적 항체, 또는 양쪽특이적 항체인 것을 특징으로 하는 수초재생제의 용도.
제52항에 있어서, 상기 키메라 항체가 인간화 또는 영장류화되는 것을 특징으로 하는 수초재생제의 용도.
제53항에 있어서, 상기 인간화 항체가 나탈리주마브인 것을 특징으로 하는 수초재생제의 용도.
제45항에 있어서, 상기 수초재생제가 필요한 환자에게 만성적으로 투여되는 것을 특징으로 하는 수초재생제의 용도.
제55항에 있어서, 상기 수초제생제의 만성 투여가 적어도 12개월동안 매주 또는 매달 수행되는 것을 특징으로 하는 수초재생제의 용도.
제48항에 있어서, 상기 면역억제제가 부신피질자극성 호르몬, 코르티코스테로이드 또는 인터페론인 것을 특징으로 하는 수초재생제의 용도.
제57항에 있어서, 상기 인터페론이 인터페론 베타-1b 또는 인터페론 베타-1a인 것을 특징으로 하는 수초재생제의 용도.
제57항에 있어서, 상기 코르티코스테로이드가 프레드니손, 메틸프레드니솔론, 덱사메타손 코르티솔, 코르티손, 플루드로코르티손, 프레드니솔론, 6α-메틸프레드니솔론, 트리암시놀론 또는 베타메타손인 것을 특징으로 하는 수초재생제의 용도.