TWI334354B

TWI334354B - Use for treating atherosclerosis, dyslipidemias and related conditions

Info

Publication number: TWI334354B
Application number: TW093113730A
Authority: TW
Inventors: Kang Cheng; M Gerard Waters; Kathleen M Metters; Gary O'neill
Original assignee: Merck Sharp & Dohme; Merck Frosst Canada Ltd
Priority date: 2003-05-15
Filing date: 2004-05-14
Publication date: 2010-12-11
Also published as: US20110118292A1; ECSP056156A; HK1092722A1; PT1624871E; KR100806008B1; RS20120499A1; EP1624871A1; AR041089A1; EA200501817A1; JP4637833B2; MY140639A; DE602004022036D1; EP2116244A1; CA2525772A1; HRP20120818T1; CR9808A; CR8047A; GT200400098A; MEP60108A; ZA200508288B

Description

1334354 玖、發明說明【發明所屬之技術領域】本發明係有關治療動脈粥樣硬化’血脂症障礙及相關病症之方法及醫藥組合物。【先前技術】终驗酸（niacin或nicotinic acid)(e比咬-3-缓酸）是一般已知具有增咼的向密度脂蛋白（HDL)jk清量效果的藥物。但菸鹼酸常引起皮血管舒張，有時稱作潮紅⑺ushin幻。此一副作用是由於菸鹼酸導致皮膚内前列腺素D2釋出所致，其嚴重性可使許多病人停止菸驗酸治療。本發明係關於藉給予菸鹼酸或另一種菸鹼酸受體拮抗劑及併用可減少或消除有時會發生的皮血管舒張之化合物，以治療動脈粥樣硬化，異常脂血症（dyslipidemias)，糖尿病及有關疾病，此治療能在無潮紅下進行。這是藉給予终驗酸或终驗酸受體激動劑及拮抗Dp受體的化合物完成。有不同類型的受體與前列腺素如交互作用…種前列腺素 D2又體無作DP ’另一種前列腺素受體稱作"crth2"。本發明使用DP受體的拮抗作用預防，減少或降低潮紅的發生。因之，本發明之一目的在排除或減少使用菸鹼酸或另一種菸鹼酸受體激動劑治疼人沾，、的動脈粥樣硬化，異常脂血症 (dyslipidemias)，糖尿病及有關或嚴重性）。疾病時的潮紅(發生頻率及/ 本發明另一療。目的在提供減少副作用的動脈粥樣硬化治 92718.doc 1334354 本發明另一目的在提供經口使用的固定組合的醫藥組合物。有下述說明中可明顯看出本發明的此等目的及其他目的。【發明内容】本發明概述提供一種治療有治療需要的人的動脈粥樣硬化的方法，此法包括給予病人菸鹼酸或其鹽或溶劑合物，或另一種菸鹼酸受體激動劑及DP受體拮抗劑，給予的量可有效治療動脈粥樣硬化而無顯著的潮紅。本發明詳述於驗酸（吼啶-3-羧酸）是常見的藥物，以其提高密度脂蛋白（HDL)量及其他改變脂血特點（降低很低的密度 (VLDL)，低密度脂蛋白（LDL)，三酸甘油酯，自由態脂肪酸（FFA)及脂白（a)[Lp⑷])而聞名。於驗酸在以治療有效劑量，如每天約50毫克至約8克給予人時會提高HDL量。但於驗酸常導致皮血管舒張，也稱作潮紅。潮紅使皮膚變紅，並伴有發熱，癢或刺激感。有時可能極令人不快，並可嚴重到使多數病人停止终驗酸治療。本發明係關於用於驗酸或其鹽或>谷劑合物’或另一種私驗酸受體激動劑治療、預防動脈粥樣硬化及其他此處所述疾病，而無潮紅發生。於人’此係藉給予於驗酸或其鹽或溶劑合物，或另一種於驗酸體激動劑及结抗DP受體的化合物，以預防、減少或降低潮紅的發生率及/或嚴重性而達成。 92718.doc 1334354

的於驗酸或菸鹼酸受體激動劑β

的受體，稱之為"DP

紅出現的菸鹼酸或其鹽或溶劑合物，对锒硬化有效而無潮或另一種菸鹼酸受體激動劑及DP受體拮抗劑。本=明另-有利的-方面是增高有此需要的病人的血清 HDL量的方法，其包括給予病人菸鹼酸或其鹽或溶劑合物，或另一種菸鹼酸受體激動劑及Dp受體拮抗劑，該組合的量可有效增高病人血清HDL量而不出現潮紅。本發明另一有利的一方面是治療需治療的病人的異常脂血症的方法，其包括給予病人菸鹼酸或其鹽或溶劑合物，或另一種菸鹼酸受體激動劑及DP受體拮抗劑，其量足以治療病人的異常脂血症，而無潮紅出現。本發明另一有利的一方面是降低需治療的病人的血清 VLDL或LDL的方法，其包括給予病人菸鹼酸或其鹽或溶劑合物’或另一種菸鹼酸受體激動劑及DP受體拮抗劑，其量足以降低病人的VLDL或LDL的量，而無潮紅出現。本發明另一有利的一方面是降低需治療的病人的血清三酸甘油酯量的方法，其包括給予病人菸鹼酸或其鹽或溶劑合物’或另一種菸鹼酸受體激動劑及DP受體拮抗劑，其量足以降低病人的企清三酸甘油酯量，而無潮紅出現。本發明另一有利的一方面是降低需治療的病人的血清 92718.doc 1334354

Lp(a)量的方法’其包括給予病人菸鹼酸或其鹽或溶劑合物，或另一種菸驗酸受體激動劑及Dp受體拮抗劑，其量足以降低病人的血清Lp(a)量，而無潮紅出現。此處所謂Lp(a) 是指脂蛋白（a)。本發明特別有利的一方面是關於上述各方法，其中使用菸鹼酸或其鹽或溶劑合物。更有利的是使用菸鹼酸。本發明另有利的方面疋DP受體拮抗劑選擇性地調節Dp受體，其量足以降低或預防病人的潮紅效果。本發明另一特別有利的方面是關於上述各方法，其中使用於驗k而DP又體拮抗劑選擇性地調節Dp受體而不實質上調節CRTH2受體。本發明另—特別有利的方面是關於治療需此類治療的人動脈粥樣硬化’異常血脂，糖尿病或有關疾病的方法，其。括、予病人菸鹼酸或其鹽或溶劑合物，或另一種菸鹼酸又體激動劑及DP受體拮抗劑，該組合的給予量是可有效地治療動脈粥樣硬化’異常血脂，糖尿病或有關疾病而不出現潮紅。〜κ用體拮抗劑化合物與菸鹼酸或》或冷幻°物，或另一種於驗酸受體激動劑合用以治療y 動脈粥樣硬化而不發生潮紅。本發月3特別有利的方面是關於上述方法，立中dm 體结抗劑是選自化合物A至AJ，及其醫藥上可接受的鹽。特別有用的供拮抗DP受體及抑制潮紅效果的化合物的^ 包括如下化合物： 927l8.doc 1334354

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及其醫藥上可接受的鹽。 92718.doc -11 - 1334354 此處所謂動脈粥樣硬化是只ϋ管疾病，其特點是在大動脈及中等大小的動脈内璧有含膽固醇及脂的粥樣斑沉積。動脈粥樣硬化包括血管疾病及醫藥從事工作的醫生所認知的了解的情況。動脈粥樣硬化心血管疾病，包括再血管化（revascularization)手術後的血管再狹窄，冠心病（也稱作冠狀動脈疾病或局部缺血心臟病），腦血管疾病，包括多發性栓塞癡呆，及週邊血管疾病，包括勃起功能障礙，都是動脈粥樣硬化的表徵，所以也包括在，，動脈粥樣硬化"及動脈粥樣硬化疾病Π —詞内。此處所謂”異常脂血症"是其傳統意義，是指不正常血漿脂量，如腿(低）、LDL(高）、VLDL(高）、三酸甘油醋（高）、脂蛋白⑷（高）、FFA(高）、及其他也清脂，《其組合。其可為非合併症或是特定有關疾病或情況的一部分如糖尿病 (糖尿病性異常血脂），代謝病徵等。所以，無合併症的異常血脂及由潛在情況所引起的異常血脂也包括在本發明内。病人D司包括使用本發明活性劑預防或治療醫藥情況的哺乳動物，特別是人。病人藥物的給予包括自我給予及由他人、、·α予。病人可能需要治療已存在的疾病或醫學情況，或可能需要治療或預防動脈粥樣硬化發生的危險。 ”治療有效量"一詞意謂藥物的量能誘發所需生物反應或醫學反應的量。例如’於驗酸常以約5G毫克至約8克的劑量給予。預防有效量"及"防止有效量"諸詞是指藥物的量會防止或減少要防止的生物或醫學情況的發生。多數情形下，預 92718.doc -12· 1334354 防有效量於治療有效量相同。此處所述發明包括給予處所述的化合物及組合物以預防或減v虺〜病，腦血管疾病及/或間歇性跛行（intermittent claudication)之發生或再發的危險。冠心病包括死亡，心肌梗塞（即心臟病發作），及冠狀動脈再血管化手術◎腦血官疾病包括局部缺血或出血中風（也稱作腦血管意外 (Cei*ebrovascularaccident))及短暫局部缺血發作。間歇性跛行是週邊血管疾病病徵。此處所謂”動脈粥樣硬化疾病"一阈包括冠心病，腦血管疾病，及經驗過一或多次非致死動脈粥樣硬化疾病的間歇性跛行，有再發的可能。因之，本發明也提供預防或減少動脈粥樣硬化疾病第一次發生或再發的方法，其包括給予有此危險的病人此處所述預防有效量的化合物，同時並預防或減低實質的潮红。給予時病人可已有動脈粥樣硬化或有可能發生的危險。此法還關於預防或使新的動脈粥樣硬化損傷或斑之形成變慢’預防或使已有的損傷或斑之生長變慢，以及使已有的損傷或斑退化’同時並預防或減少潮紅。因之’本發明也提供停止或減緩動脈粥樣硬化進行的方法’包括停止或減緩動脈粥樣硬化斑進行的方法，此法包括給予需此治療的病人治療有效量的任何此處所述Dp结抗劑及與其相混合的菸鹼酸或另一種菸鹼酸受體激動劑。此法也包括停止或減緩於開始治療時已存在的動脈粥樣硬化斑（即”已存在的動脈粥樣硬化斑"）的進展，以及停止或減緩有動脈粥樣硬化的病人的新動脈粥樣硬化斑的生成。 92718.doc •13- 山4354 本發明g — + 方面包括預防或減少動脈粥樣硬化斑破裂的 1險的方法’此法包括給予需此治療的病人預防有效量的过的任何化合物及於驗酸或另一種於驗酸受體激動此處所謂破裂意謂斑之脫落，脫落的斑會在血管内存積。本發明又一方面包括預防或減少發展動脈粥樣硬化的〇險的方法，此法包括給予有此治療需要的病人預防有效夏的此處所述的化合物。本發明另一方面係關於治療或預防動脈粥樣硬化，異常血月曰或有關情況的方法，此法包括以抑制潮紅或減少潮紅有效里的抑文體拮抗劑給予有此需要的病人，然後再以有效，。療或預防動脈粥樣硬化、異常血脂或相關情況的於驗酸，其鹽或溶劑合物，或另一種菸鹼酸受體激動劑在不出現潮紅下治療。本發明另一方面係關於上述方法，尚包括以HMg c〇_A 還原酶抑制劑對病人作預先治療（pre_treating)或治療。本發明另-方面係關於治療或預防上述情況的方法，其中HMG Co-A還原酶抑制劑是辛伐他叫imvastatin)。此處所述方法的一方面是關於有效達成上述結果的量的菸鹼酸或另一種菸鹼酸受體激動劑化合物受體拮抗劑之使用，此等DP受體括抗劑是選擇性地調節別受體而不調節CRTH2受體。所以，此DP受體拮抗劑於Dp受體（即Ki)之親合性至少較於CRTH2M之親合性大1〇倍（數揀低& 值）。任何根據此等指導與DP交互作用的化合物可認作是 "DP選擇性”的。 92718.doc -14· I334354 ”無實質潮紅”―詞意謂使用治療量的菸鹼作用。終驗酸之潮紅效果在病人對治療:見的副性後常少見，其嚴重性也減少，但仍會出現=產生耐受红兮里& f出現某種程度的潮 *果。所以，’’無實質潮紅"意謂當其出現輕，或是較其他情形較少出現潮紅。較佳是潮紅 ^ 少一八：：二更佳是減少一半，最佳是潮紅之出現減二刀之一或更多。同樣，其嚴重性較佳是減少至少三八之-，更佳是減少至少一半，最佳減少至少三分之二或= 多。很明顯，潮紅之發生及其嚴重性最佳是減少百分:百，但無此需要。 ’ 任一特定病人的特定劑量取決於多種因素，包括年齡、體重、—般健康情形、性別、飲食、'给予時間、、給予途徑、、排出速度、藥物組合及病人病情的嚴重性。有關此等^素的考量是-般臨床醫生在蚊治療、預防或停止病情發展的治療有效劑量或預防有效劑量所已知的。預期此處所述化合物會以每日給予作基礎視所需治療或預防時間長度給予，包括給予病人數月、數年或終生給予。此處所述化合物可與一或多種另外的活性劑一起給予。此等活性劑可以是脂修正化合物或有其他醫藥活性的化合物，或是有脂修正作用及其他醫藥活性的劑。可使用的此等其他活性劑的例包括，但不限於，HMG_c〇A還原酶抑制劑，其包括其内酯化的或二羥基開放形式及其醫藥上可接欠的鹽或酯，包括，但不限於，洛伐他汀（l〇vastatin)(見美國專利4,342,767號），辛伐他汀（simvastatin)(見美國專利 92718.doc •15- 1334354 4,444,784號），二羥基開放酸辛伐他汀，特別是其銨或鈣鹽，普伐他汀（pravastatin)，特別是其鈉鹽（見美國專利 4,346,227號），氟伐他汀（fluvastatin)，特別是其鈉鹽（見美國專利5,354,772號），托伐他汀（81;〇¥331&1;丨11)，特別是其弼鹽 (見美國專利5,273,995號），皮他伐他汀（0沆&¥&31&1;丨11)也稱作 NK-104(見國際專利公告W0 97/23200號）及羅蘇伐他汀 (rosuvastatin)，也稱作 ZD-4522，（CRESTOR® ;見美國專利 5,260,440號）；HMG-CoA合成酶抑制劑；鯊烯環氧酶抑制劑；鯊烯合成酶抑制劑；醯基輔酶A ;膽固醇醯基轉移酶 (ACAT)抑制劑，包括ACAT-1或ACAT-2選擇性抑制劑及 ACAT-1及-2雙抑制劑；微粒體三酸甘油酯轉移蛋白（MTP) 抑制劑；内皮脂酶抑制劑；膽酸多價螯合劑；LDL受體誘導劑；血小板凝集抑制劑，例如糖蛋白Ilb/IIIa血纖維蛋白受體拮抗劑及阿斯匹靈；人過氧化物酶體增殖體活化的受體T (PPAR τ )激動劑，包括一稱作格列酮（glitazone)的化合物，例如 β比格列 _ (pioglitazone)及羅格列 _ (rosiglitazone) 及包括屬於噻唑烷二酮構造的化合物以及屬於噻唑烷二酮構造之外的ΡΡΑΙΙγ激動劑；PPARa激動劑如桂利嗪 (clofibrate)，非諾貝特（fenojfibrate)包括微粒化的非謹貝特，及吉非貝齊（gemfibrozil) ; PPAR雙重α/γ激動劑；維生素Β6(也稱作α比多辛（pyridoxine)及其醫藥上可接受的鹽如 HC1鹽；維生素B12(也稱作氰鈷胺）；業酸或其醫藥上可接受的鹽或酯，如鈉鹽及曱基葡糖胺鹽；抗氧化維生素如維生素C及E，及β葫蘿卜素；β-阻斷劑；血管緊張素II拮抗劑如 92718.doc -16- 1334354 氣沙坦（losartan);血管緊張素轉化酶抑制劑如依那普利 (enalapril)及卡托普利（captopril);高血壓蛋白原酶抑制劑，#5通路阻斷劑如頌笨地平（nifedipine)及地爾硫卓 (diltiazem);内皮素拮抗劑；增強ABCA1基因表現的劑；膽固醇酯轉移蛋白（CEPT)抑制化合物，5-脂氧化酶活化蛋白 (FLAP)抑制化合物，5-脂氧化酶（5-LO)抑制化合物，類麝油X受體（FXR)配位體，包括拮抗劑及激動劑；肝X受體 (LXR)-a配位體，LXR-β配位體，二膦酸鹽化合物如阿侖膦酸納；環氧酶-2抑制劑如羅非克西（rofecoxib)及西勒克西 (celecoxib);及減弱血·管發炎的化合物。膽固醇吸收抑制劑也可用於本發明。此類化合物阻斷膽固醇由小腸腔進入小腸的腸上皮細胞，從而減少血清膽固醇量。膽固酵吸收抑制劑的例見於美國專利5,846,966號， 5,631，365 號，5,767,115 號，6,133,001 號，5,886，171 號， 5,856,473號，5,756,470號，5,739,321號，5,919,672號，及國際專利申請案W0 00/63703號，W0 00/60107號，W0 00/38725號，WO 00/34240號 ’ WO 00/20623號，WO 97/45406 號，W0 97/16424 號，W0 97/16455 號及 WO 95/08532 號。最著名的膽固醇吸收抑制劑是易滋提美（ezetimibe)，也叫作 1_(4_ 氟苯基）-3(R)-[3(S)-(4-氟苯基）-(3-羥基丙基）]-4(S)-(4-羥基苯基）-2-氮雜環丁烷酮’見美國專利5,767，115及 5,846,966 號。膽固醇吸收抑制劑的治療有效量包括約每天〇. 〇 1毫克/公斤至約3〇毫克/公斤體重，較佳是約〇.1毫克/公斤至約15毫 92718.doc -17- 1334354 克/公斤。對於糖尿病病人，本發明所用化合物可與f用的糖尿病藥物-起給予。例如’接受此處所述治療的糖尿病病人也可同時給予胰島素或口服抗糖尿病藥物。此處可用的口服糖尿病藥物的是二曱雙胍。劑量信息此處所謂菸鹼酸是指，但本發明也可使用菸鹼酸的鹽或溶劑合物，多種菸鹼酸的醫藥上可接受的鹽及溶劑合物可用於本發明。鹼金屬鹽，特別是鈉及鉀鹽可用於本發明。同樣，鹼土金屬，特別是鈣及鎂鹽，可如此處所述使用。各種氨鹽，如銨及經取代的銨化合物的鹽也可如此處所述使用。同樣，菸鹼酸的溶劑合物也可用於本發明。其例包括半水CT物，單-’ 一-，二-及倍半水合物。特別適用於本發明的是自由態酸，α比咬_ 3 _缓酸。此處所述DP拮抗劑可以低至約0 〇1毫克/公斤/天至高至約100毫克/公斤/天的劑量用於哺乳動物病人，特別是人，減少或預防潮紅，此等劑量可以單一劑量或分數個劑量給予〇此處所述菸鹼酸的使用劑量是低至約5〇毫克/天至高至約8克/天，可一次給予或分數次給予。開始可用較低劑量，然後逐步增加以減少潮紅。菸鹼酸之外的菸鹼酸受體激動劑的劑量範圍很大。一般而言，用於治療動脈粥樣硬化的菸鹼酸受體激動劑可以低至約0.01毫克/公斤/天至高至約1〇〇毫克/公斤/天一次給予 927i8.doc -18· 1334354 或分成數次給予。其代表性劑量是約Qi毫線至約2克/ 天。用於本發明的化合物可以各種習用途徑給予。較佳途徑是經口。终驗酸，其鹽或溶劑合物，或其他祕酸受體激動劑及 DP拮抗劑可-起給予或分別以多劑給予，例如每天二次，三次’或四次給予，仍屬於本發明範圍。如需特長時間的持續釋出，如釋出延至24小時以上的持續釋出產物，可每天才又藥人但較佳疋每天給予單一劑量。同樣也可早晚使用一次。醫藥組合物此處所述醫藥組合物一般含菸鹼酸或另一種菸鹼酸受體激動劑，DP受體拮抗劑及醫藥上可接受的載劑。適宜的經口組合物的例包括錠，膠囊，糖衣錠，懸浮液，可分散的散或顆粒’乳液，糖漿及酏劑。載劑成分的例包括稀釋劑’結合劑’崩解劑，滑潤劑，甘味劑，矯味劑，增色劑’防腐劑’等等。稀釋劑的例包括，例如，碳酸鈣，碳酸鈉’乳糖’磷酸鈣及磷酸鈉。結合劑的例包括澱粉，明膠’及阿拉伯膠。滑潤劑的例包括硬脂酸鎂，硬脂酸鈣，硬脂酸及滑石粉。鍵可以是未塗覆的或以已知技術塗覆的。此種塗覆可延長崩解，所以可延長胃腸道的吸收，從而提供在長時間内的持續作用。於本發明一具體實施例中，將菸鹼酸或另一種於鹼酸受體激動劑與DP受體拮抗劑及載劑混合，製成固定的混合產 92718.doc -19- 1334354 物。此固定的混合產物可以是口服的錠或膠囊。更具體地說，於另一具體實施例中，將菸鹼酸，或其鹽或/谷劑5物，或另一種終驗酸受體激動劑（約工至約1 〇⑻毫克）與DP受體拮抗劑（約i至約5〇〇毫克）及醫藥上可接受的載劑混合’製成口服的錠或膠囊。在調配菸鹼酸醫藥組合物時於長時間内持續釋出是特別重要的。特佳是持續釋出的錠。例如，可用時間延遲物料如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。此劑形也可以美國專利4,256，1〇8 ; 4，166,452及4,265,874號所述技術作塗覆製成控制釋出的渗透治療鍵。也有其他控制釋出技術，此處也包括此等技術。一般用以減緩菸鹼酸持續釋出的錠的成分包括各種纖維素化合物，如甲基纖維素，乙基纖維素，丙基纖維素，羥基丙基纖維素，羥基乙基纖維素，羥基丙基曱基纖維素，微結晶纖維素，澱粉等。持續釋出調配物也可用各種天然的及合成物料。其例包括各種藻酸鹽，聚乙烯吡咯酮，黃蓍膠，刺槐豆膠，瓜耳膠，明膠，各種長鏈醇，如鯨蠟基蜂蠟。特佳的持續釋出錠使用菸鹼酸與一或多種上述的纖維素化合物混合物壓成持續釋出的錠成為聚合物基質。在壓前可加D P拮抗劑化合物於混合物内，或者塗覆於基質的外面。於更佳具體實施例中，將菸鹼酸與基質生成物料合併，壓成持續釋出錠核，再將Dp拮抗劑化合物與一或多種塗覆劑混合塗於錠核外面。 92718.doc 1334354 更佳的是上述的鍵再用HMGC〇_A還原酶抑制劑，例如辛伐他；T塗覆。這樣的具體實施例含三種活性成分，Η祕 C〇-A還原酶抑制劑及DP拮抗劑，其於攝入時即釋出，及菸驗酸，其可於上述長時間内釋出。；根據本發明，持續釋出錠的—般釋出時間為約1至約48 小時，較佳是約4至24小時，更佳是約8至約16小時。硬明膠膠囊是另一種口服固體劑形。此種膠囊同樣也含於上述載劑混合的活性成分。軟明膠膠囊含活性成分及與水共溶的溶劑，如丙二醇，醜及乙醇，或油如花生油，液體石壤或橄禮油。水性懸浮液也含活性成分及與其相混合的適於製成水性懸浮液的賦形劑。此類賦形劑包括懸浮劑，例如羧甲基纖維素納’甲基纖維素，經基丙基曱基纖維素，藻酸鈉，聚已烯吡咯酮，黃蓍膠及阿拉伯膠；分散劑或濕潤劑，例如卵磷脂；防腐劑，例如對羥基苯曱酸乙酯或正丙酯，增色劑，矯味劑，甘味劑，等等。適於藉加水製成水性懸浮液的可分散的散及顆粒與分散劑或濕潤劑，懸浮劑及一或多種防腐劑混合提供活性成分。適宜的分散劑或濕潤劑及懸浮劑如上所列舉者。也可製成糖漿及酏。特佳的醫藥組合物是持續釋出的錠，其含菸鹼酸或其鹽或浴劑合物，及DP受體拮抗劑及與其相混合的醫藥上可接受的載劑。另一特佳的醫藥組合物是持續釋出的錠，其含菸鹼酸或 92718.doc 21- 1334354 其鹽或溶劑合物，及DP受體拮抗劑，及HMG Co-A還原酶抑制劑及與其相混合的醫藥上可接受的載劑。另一特佳的醫藥組合物是持續釋出的錠，其含菸鹼酸， DP受體拮抗劑及辛伐他汀，及與其相混合的醫藥上可接受的載劑。另一特佳的醫藥組合物是持續釋出的錠，其含菸鹼酸， DP受體拮抗劑，其係選自化合物A至AJ所構成的群，及與其相混合的醫藥上可接受的載劑。另一特佳的醫藥組合物是含菸鹼酸，DP受體拮抗劑，其係、選自由 4匕合物 A ' B、D、E、X、AA、AF、AG、AH、AI、及AJ所構成的群，及與其相混合的醫藥上可接受的載劑。另一特佳的醫藥組合物是含菸鹼酸，DP受體拮抗劑化合物A及與其相混合的醫藥上可接受的載劑。另一特佳的醫藥組合物是含菸鹼酸，DP受體拮抗劑化合物B及與其相混合的醫藥上可接受的載劑。另一特佳的醫藥組合物是含菸鹼酸，DP受體拮抗劑化合物D及與其相混合的醫藥上可接受的載劑。另一特佳的醫藥組合物是含菸鹼酸，DP受體拮抗劑化合物E及與其相混合的醫藥上可接受的載劑。另一特佳的醫藥組合物是含菸鹼酸，DP受體拮抗劑化合物X及與其相混合的醫藥上可接受的載劑。另一特佳的醫藥組合物是含菸鹼酸，DP受體拮抗劑化合物AA及與其相混合的醫藥上可接受的載劑。另一特佳的醫藥組合物是含菸鹼酸，DP受體拮抗劑化合 92718.doc -22- 1334354 物AF及與其相混合的醫藥上可接受的載劑。另一特佳的醫藥組合物是含菸鹼酸，DP受體拮抗劑化合物AG及與其相混合的醫藥上可接受的載劑。另一特佳的醫藥組合物是含菸鹼酸，DP受體拮抗劑化合物AH及與其相混合的醫藥上可接受的載劑。另一特佳的醫藥組合物是含於驗酸，DP受體拮抗劑化合物AI及與其相混合的醫藥上可接受的載劑。另一特佳的醫藥組合物是含於驗酸，DP受體拮抗劑化合物AJ及與其相混合的醫藥上可接受的載劑。另一更佳之醫藥組合物是含菸鹼酸，前述DP受體拮抗劑中之一及辛伐他汀與其混合的醫藥上可接受的載劑。另一特佳的醫藥組合物是持續釋出的錠，其含菸鹼酸， DP受體拮抗劑，其係選自由化合物A至AJ所構成的群，及辛伐他汀，及與其相混合的醫藥上可接受的載劑。另一特佳的醫藥組合物是持續釋出的錠，其含菸鹼酸， DP受體拮抗劑，其係選自由.化合物A、B、D、E ' X、AA、 AF、AG、AH、AJ、及辛伐他汀，及與其相混合的醫藥上可接受的載劑。 "組合物"一詞，除包括上述醫藥組合物外，尚包括任何直接或間接由二種或多種成分，活性成分形成的混合物，複合物或凝聚物，或由一或多種成分分離生成，或由一或多種成分經由其他反應或交互作用生成。因之，本發明醫藥組合物包括任何藉將化合物，任何活性成分，及醫藥上可接受的賦形劑混合所製成的組合物。 92718.doc -23- 1334354 本發明另一方面係關於菸鹼酸或其鹽或溶劑合物，或另一種於驗酸受體激動劑，DP拮抗劑在製造藥物上的用途。此藥物有上述用途。更具體地說，本發明另一方面係關於菸鹼酸或其鹽或溶劑合物，或另一種菸鹼酸受體激動劑，DP拮抗劑及HMG Co-A還原酶抑制劑，如辛伐他汀，在製造藥物上的用途。此藥物有上述用途。除作為於驗酸受體激動劑基準的於驗酸外，尚說明了多種菸鹼酸受體激動劑。下列文獻揭示了菸鹼酸受體激動劑的化合物：

Lorenzen, A. et al. Molecular Pharmacology 5 9: 349-357 (2001)，

Lorenzen, A. et al. Biochemical Pharmacology 64: 645-648 (2002)，

Soga, T. et al. Biochemical and Biophysical Research Comm. 303: 364-369(2003)，

Tunaru, S. et al. Nature Medicine 9:352-355(2003) »

Wise, A. et al. Journal of Biological Chemistry 278: 9869-9874(2003)，及

Van Herk, T. et al. Journal of Medicinal Chemistry 46: 3945-3951(2003) ° 現已注意到菸鹼酸受體的部分拮抗劑，如van Herk等所揭示者，包括於本發明組合物及治療方法内。而且，菸鹼酸受體以於2002年10月24日公佈的WO 02/ 92718.doc -24- 1334354 084298A2 及於 Soga，T.等，Tunaru，S.等及 Wise，Α.等（說明見上）内証實及定性。多種DP受體拮抗劑化合物已被公佈，並使用及包括於本發明方法内。例如，DP受體拮抗劑可根據2001年10月25日公佈的W0 01/79169號，2003年5月2日公佈的EP 13 05286 號，2002年11月28日公佈的WO 02/094830號及2003年7月31 日公佈的WO 03/062200號製得。化合物AB可根據2001年9 月13日公佈的WO 01/66520A1說明合成，化合物AC可根據 2003年3月20日公佈的WO 03/022814 A1說明合成，化合物 AD及AE可根據2003年9月25日公佈的W0 03/078409說明合成。其他本發明所用代表性DP拮抗劑化合物可根據下述實例合成。【實施方式】實例1 [5-[(4-氣苯基）硫基]-4-(甲基續酿基）-6,7,8,9-四氮°比β定弁 [3,2-b]中氮茚-6-基]乙酸（化合物G)

步驟1 4-氣菸鹼醛標題化合物是如F. Marsais et al·, J. Heterocyclic Chem., 25, 81(1988)所述製備。步驟2 4-(曱基硫基）菸醛於NaSMe(9.5克，135毫莫耳）於MeOH(250毫升）内的溶液 92718.doc -25- 1334354 中加MeOH(250毫升）内的步驟1所製4·氯菸鹼醛（13.5克， 94.4毫莫耳）。此反應混合物於60°C維持15分鐘。將反應混合物倒於NH/l及EtOAc上。分離有機相，用h2〇洗，於 NajO4上乾燥。然後將化合物於二氧化矽膠上以5〇%己烷内的EtOAc純化，得標題化合物。步驟3 (2Z)-2-疊氮基曱基硫基）吡啶_3_基]丙_2_烯酸甲醋將4-(甲基硫基）菸鹼醛（4.8克，31亳莫耳）及疊氮乙酸甲酯 (9.0克，78毫莫耳）於Me〇H(5〇毫升）内的溶液於_12QC加於 25%的NaOMe於MeOH(16.9毫升，78毫莫耳）内的溶液中。監測内溫，在30分鐘加入期間維持於_1〇〇c至_12(>(：間。然後將所得混合物於冰·浴⑽拌數小時，再於冰浴内於冷房授拌過夜。將此懸浮液倒於冰及犯^^混合物，攪拌1〇分鐘後將泥樣物過濾。產物用冷ho洗’再真空乾燥，得標題化合物，為米色固體（7.4克），其含少許鹽。此化合物再於二氧化矽膠上以EtOAc純化。步驟4 4·(曱基硫基）]H-°比咯并[2,3-b]吡咬-2-缓酸曱_ 將步驟3化合物（0.40克，16毫莫耳）於二甲苯（16毫升）内的懸浮液緩慢加熱至14〇°c。於丨4(rc過丨5分鐘後，將黃色溶液冷至室溫。在氮生成期間必須小心有放熱的可能。將懸子液冷至0 c ’過濾’用二曱苯洗，得標題化合物。步驟5 4.(甲基硫基^心从…四氫咐咬并⑶叫中氮茚-7-羧酸乙酯於步驟4化合物（〇.35克，毫莫耳）於DMF(20毫升）内的 92718.doc -26 · 1334354 溶液中於0°C加NaH(l_2當量）。5分鐘後，加nBu4NI(0_10克）及4-溴丁酸乙酯（0.40毫升）。於室溫過1小時後，將反應混合物倒於飽和NH4C1及EtOAc上。分離有機相，用H20洗，於NaS04上乾燥。蒸發後，粗製產物以閃色層分析純化。然後將二酯溶於THF(7.0毫升）内，於0°C加1.06 Μ第三-丁氧化鉀於THF内的溶液（2.2毫升）。於室溫過1小時後，將反應混合物倒於飽和NH4C1及EtOAc上。分離有機相，於 Na2S04上乾燥，減壓蒸發，得標題化合物，為乙基及甲基酯混合物。步驟6 4-(甲基硫基）-8,9-二氫。比啶并[3,2-b]中氮茚-6(7H)酮於步驟5化合物（0.32克）内加EtOH(8.0毫升）及濃HC1(2.0 毫升）。將得懸浮液回流5小時。將反應混合物於EtOAc及 Na2C03間分開。分離有機相，蒸發，得標題化合物。步驟7 (2E，2Z)-[4-(甲基硫基）-8,9-二氫"比啶并[3,2-b]亞中氮茚-6(7H)基]乙酸乙酯於亞磷羧基乙酸三乙酯（0.45克，2.17毫莫耳）於DMF(12 毫升）内的溶液中加80% NaH(0.06克，2.00毫莫耳）及步驟6 化合物（0.22克，1.00毫莫耳）。於55°C過4小時後，將反應混合物倒於飽和NH4C1及EtOAc上。分離有機相，減壓蒸發。粗製產物作閃色層分析純化，得標題化合物。步驟8 [4-(曱基硫基）-6,7,8,9-四氫。比啶并[3,2-b]中氮茚-6- 基]乙酸乙酯將步驟7化合物在加熱下溶於MeOH-THF内。於此預冷過的溶液中於室溫加Pt02，所得混合物於一大氣氫壓下維持 92718.doc -27- 1334354 18小時》反應混合物小心以矽藻土用CH2C12過濾。將濾過物減壓蒸發，得標題化合物。或者是，將步驟7化合物以 Pd(OH)2於EtOAc内於40磅/吋氫壓氫化18小時。步驟9 [4-(曱基磺醯基）-6,7,8,9_四氫吼啶并[3,2-b]中氮茚 -6-基]乙酸乙酉旨於MeOH(3.0毫升）内的步驟8化合物（0.08克，0.27毫莫耳）内加Na2WO4(0.10克）及30%H2〇2(600微升）。一小時後，將反應混合物於H20及EtOAc間分開。有機相用H20洗，分離並蒸發。標題化合物以閃色層分析純化。步驟10 [5-[(4-氯苯基）硫基]-4-(甲基磺醯基）-6,7,8,9-四氫 0比啶并[3,2-b]中氮茚-6-基]乙酸乙酯於4,4’-二氣二苯基二硫化物（0.24克）之1,2-二氣乙烧（2.0 毫升）溶液中加S〇2C12(50微升）。於步驟9化合物（0.05克）於 DMF(2_0毫升）内的溶液中加前述混合物（約18〇微升）。此反應繼之4 NMR，於室溫維持至無起始物質。將此反應混合物倒於飽和NaHC〇3及EtOAc上。分離有機相，蒸發，標題化合物以閃色層分析純化。步驟11 [5-[(4-氣笨基）硫基;]_4-(曱基磺醯基）-6,7,8,9-四氫 °比啶并[3,2-b]中氮茚-6-基]乙酸於溶於1/1 THF-MeOH混合物内之步驟1〇化合物内加1N NaOH °於室溫過18小時後，將反應混合物於飽和nh4C1及 EtOAc間分開《分離有機相，於Na2S〇4上乾燥，蒸發，得標題化合物。 HNMR(500 MHz，丙_-心）δ 11.00(bs，1H), 8.60(d, 1H)， 92718.doc • 28 * 1334354 7.80(d, 1H), 7.20(d, 2H), 4.65(m, 1H), 4.20(m, 1H), 3.75(m, 111)，3.35(3,311)，2.80至2.10(111，614)。實例2 [5-[(4-氯苯基）硫基·4_(甲基硫基）_6,7,8,9_四氫D比啶并 [3,2-b]中氮茚-6-基]乙酸（化合物η)

此標題化合物可以如實例1步驟丨0及丨丨所述用實例1步驟 8化合物製備。 m/z 418。實例3 [5-[(3,4-二氣苯基）疏基_4_(曱基磺醯基）·6,7,8,9_四氫。比啶并[3,2_b]中氮茚-6-基]乙酸（化合物工）

此標題化合物可以如實例1所述用步驟1〇之雙（3,4_二氯苯基）二硫製備。 H NMR(500 MHz，丙酮-d6) δ 8.55(d，1H)，7.85(d，1H)， 7.35(d, 1H), 7.15(s, 1H), 6.95(d, 1H), 4.60(m, 1H), 4.15(m, 1H)，3.8〇(m，1H)，3.4〇(s，SH)，2 8〇至 2 i〇(m, 6H)。 m/z 484。對映體疋於Chiralecel 〇D柱25公分X20毫米上用己烷内 92718.doc •29· 1334354 的30%異丙醇17%乙醇0.2。/。乙酸分離，流逮8毫升/分鐘。其純度是於Chiralecel OD柱25公分χ46毫米証實，用己烧内的 35%異丙醇0.2%乙酸，流速i.O毫升/分鐘。易移動對映體 Tr=9.7分鐘，少移動對映體Tr=ll.l分鐘。實例4 [5-(4-氣苯甲醯基）_4_(甲基磺醯基）_6,7,8,9_四氫〇比啶并 [3,2-b]中氣Bp-6-基]乙酸（化合物J)

步驟1 [5-(4-氯苯甲醯基）-4-(曱基硫基）_6,7,8,9_四氫吡啶并[3，2-b]中氮茚-6-基]乙酸乙酯於4·氯苯甲醯氣（〇.30克，L7毫莫耳）於丨，2_二氯乙烷（6〇毫升）内的溶液中加A1C13(0.24克，1.8毫莫耳）。5分鐘後將實例1步驟8所得[4-(甲基硫基）-6,7,8,9-四氫吡啶并[3,2_b] 中氮茚_6_基]乙酸乙酯（〇 15克，〇 Ο毫莫耳）於12•二氣乙烷 (6·0毫升）内的溶液加於前一混合物内。於80°C過4小時後，將反應混合物於EtOAc&NaHC〇3間分開。分離有機相，於 Na2S〇4上乾燥，蒸發。標題化合物以閃色層分析純化。步驟2 [5-(4-氯苯甲醯基）_4-(甲基磺醯基）_6,7,8,9_四氫啦咬并[3,2-b]中氮茚-6-基]乙酸乙酯 ^ (4-乳本曱酿基）_4-(曱基硫基）-6,7,8,9 -四氫。比唆并 [3’2 b]中鼠茚-6-基]乙酸乙醋（0.12克，0.27毫莫耳）於 Me〇H(5.〇毫升）内的溶液中加Na2WO4(0.1克）及30%h2〇2 92718.doc • 30· 1334354 (300微升）。將此反應混合物於55。(：攪拌1小時。然後將反應混合物於H2〇及EtOAc間分開。有機相用h2〇洗，於Na2S〇4 上乾燥，蒸發。標題化合物以閃色層分析純化。步驟3 [5-(4-氣苯甲醯基）_4-(甲基磺醯基）_6,7,8,9-四氫。比啶并[3,2-b]中氮茚-6-基]乙酸將[5-(4-氯笨曱醯基）-4-(甲基磺醯基）_6,7,8,9•四氫吡啶并[3，2-b]中氮茚-6-基]乙酸乙酯如實例1步驟丨丨所述處理，製得標題化合物。 4 NMR(500 MHz，丙醐-d6) δ 8.55(d，1H)，7.90(d，2H)， 7.65(d, 1H), 7.45(d, 2h), 4.55(m, 1H), 4.25(m, 1H), 3.45(m, 1H), 3.20 (s，3H)，2.05至 3.00(m，6H)。 m/z446 ° 實例5 [5-(4-溴苯基）硫基]-4_(曱基磺醯基）_6,7,8,9•四氫比啶并 [3,2-b]中氮茚-6-基]乙酸（化合物κ)

標題化合物是如實例1所述用4,4，-二溴二苯基二硫製備。 4 NMR(500 MHz’ 丙酮_d6) δ 8.60(d，1Η)，7.80(d，1Η)， 7.35(d, 2H), 7.00(d, 2H), 4.65(m, 1H), 4.20(m, 1H), 3.80(m, 1H)，3.35 (s，3H), 2.80至 2.10(m，6H)。實例6方法-1 [9-[(3,4-二氯苯基）硫基―丨气甲基磺醯基）_7,8·二氫·6Η_η比啶 92718.doc • 31 · 1334354 并[3,4-b]吡咯辛_8_基]乙酸（化合物l)

步驟1 2-(甲基硫基）菸鹼醛標題化σ物疋用2-溴菸驗醛（A Numata Synthesis 1999頁 306)如實例i步驟2製備，但溶液是於55χ：加熱2小時。步驟2 (2Ζ)·2-疊氛_3_[2_(甲基硫基）吼咬_3_基]丙_2_烯酸甲酯標題化合物是如實例1步驟3所述製備。步驟3 4-(曱基硫基）_1Η_吡咯并[3,2_c]吡啶_2_羧酸曱酯將（2Z)-2-疊氮_3-[2-(甲基硫基）吡啶_3_基]丙_2_烯酸甲酯 (1.00克，4.00毫莫耳）於三甲基苯（5〇毫升）内的溶液於熱1小時。再將反應混合物冷至室溫，再冷至〇它，過滤沉澱物’用冷三甲基苯洗，製得標題化合物。步驟4 曱基硫基）-8-氧-7,8-二氫-6H-0比略并[3,4-b]0比略辛-7-羧酸曱酯於4-(甲基硫基）-1Η-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-羧酸曱酯（〇.3〇克’ 1.35耄莫耳）於THF(3毫升）内的溶液中加第三-丁氧化鉀 (1.42毫升/1.41毫莫耳）及丙烯酸甲酯（300微升）之1.06 ]^的 THF溶液。所得混合物於80°C加熱18小時。將反應混合物於EtOAc及NH4C1間分開，用矽藻土過濾。分離有機相，於 Na2S04上乾燥，過濾，得標題化合物。步驟5 1-(曱基硫基）_6,7·二氫-8H-吡啶并[3,4-b]吡咯辛_8_嗣 92718.doc •32· 1334354 將1-(甲基硫基）_8_氧_7,8_二氫_6H_吡咯并[3,4_b]吡咯辛 -7-缓酸甲醋如實例1步驟6所述轉化成標題化合物。步驟6 [8_羥基_丨-(甲基硫基）-7,8-二氫-6H-吡啶并[3,4-b] 吡咯辛_8-基]乙酸甲酯將1-(甲基硫基）-6,7-二氫-8H-吡啶并[3,4-b]吡咯辛-8-酮 (0.15克’ 0.68毫莫耳），溴乙酸甲酯（〇 34毫升），Zn_cu(0.226 克）於THF(3.0毫升）内的混合物作超音波振動2小時。然後於 60 C加熱5分鐘至反應完全。將反應混合物於Et〇Ac及 ΝΗπι間分開。分離有機相’於Na2S〇4上乾燥，過濾，減壓蒸發’得標題化合物。此化合物作閃色層分析純化。步驟7 [1-(甲基硫基）·7 8_二氫_6H_吡啶并[3,4 b]吡咯辛 -8-基]乙酸甲酯於 CH3CN(3.2 毫升）内的 Nal(0.300克）内加 TMSCI(0.266毫升）。將此混合物加於水浴内的[8-羥基_丨_( ▼基硫基）7,8_ 二氫-6H-。比啶并[3,4-b]吡咯辛-8-基]乙酸曱酯（〇15克， 0.515耄莫耳）於（：113匸]^(1.5毫升）之懸浮液中。〇_5小時後，將反應混合物於EtOAc及NaHC〇3間分開。分離有機相，用硫代硫酸鈉洗，於MgS〇4上乾燥，蒸發。標題化合物作閃色層分析純化。步驟8 [1-(曱基石夤酿基）-7,8-二氫-6H-nt咬并[3’4-b]。比哈辛 -8-基]乙酸甲酯將[1-(甲基硫基）-7,8-二氫-6H-。比啶并[3,4-b]吡咯辛_8_基] 乙酸甲酯如實例1步驟9所述轉化成標題化合物。步驟9 [9-[(3,4-二氣笨基）硫基]-1-(甲基續酿基）·7,8_二氣 92718.doc -33- 1334354 -6H-吡啶并[3,4-b]吡咯辛·8_基]乙酸將Π -(甲基磺醯基）-7,8-二氫_6Η·η比啶并[3,4_b]吡咯辛基]乙酸甲酯如實例1步驟l〇&U所述轉化成標題化合物，步驟10中用雙（3,4-二氯苯基）二硫。 4 NMR(5〇〇 MHz，丙酮〇 δ 8.35(d，1H)’ 7.8〇(d，1H) 7.35(d, 1H), 7.15(s, 1H)} 6.95(d} 1H), 4.55(m, 1H), 4.35(m 1H), 3.90(m, 1H), 3.30(s, 3H), 3.15(m, 1H), 3.05(m, 1H); 2.80(m，1H)，2.50(m，1H)。實例6方法-2 [9-[(3,4_二氯苯基）硫基]_i_(曱基確醢基）_7 8二氫·。比咬并[3,4-b]吡咯辛-8-基]乙酸步驟1 1_(甲基硫基）-7,8-二氫-6H-吡啶并[3,4-b]吡咯辛·8_醇於實例6方法-1步驟5所得1-(甲基硫基）_6,7_二氫_8沁吡啶并[3,4_b]吡咯辛-8-酮（0.55克，2.2毫莫耳）於Et〇H(1〇毫升）-THF(1毫升）内的懸浮液中於〇°c加NaBH4(〇.l〇克，2.6 毫莫耳）。於室溫過3 0分鐘後，加丙_停止反應。減壓蒸發去，谷劑’殘餘物内加EtOAc及H2〇。分離有機相，於MgS〇4 上乾燥’並洛發。標題化合物以EtOAc/己烧洗，過減。步驟2 2-[1-(甲基硫基）-7,8-二氫-6H-°比啶并[3,4-bp比咯辛 -8-基]丙二酸二甲酉旨於1-(甲基硫基）-7,8-二氫-6H-。比咬并[3,4-b]e比〇各辛_8_醇 (0.54克’2.1毫莫耳）於THF(10毫升）内的懸浮液中於_78。〇加 1 Μ的NaHMDS於THF内的溶液（2.35毫升，2.4毫莫耳）及氯磷酸二苯酯（0.53毫升，2_6毫莫耳）。30分鐘後加丙二酸二 92718.doc •34- 1334354 甲醋（0.73毫升，6·4毫莫耳）及THF内的1 μ NaHMDS(6.8毫升，6.8毫莫耳）。然後將反應混合物升至(TC，再升至室溫。將此混合物於EtOAc及ΝΗβΙ間分開。有機相於MgS04上乾燥，並热發。標題化合物作閃色層分析純化。步驟3 [1(甲基硫基）_7，g·二氫_6h_。比咬并〇比〇各辛 -8-基]乙酸甲酯於2_[1-(甲基硫基）·7,8-二氫·6Η-吡啶并[3,4-b]吡咯辛-8- 基]丙二酸二甲酯（0·59克，2.17毫莫耳）及DMSO(4毫升）之混合物内加Η2〇(0·45毫升）内的NaC1(〇 45克）。於l5(rc過18小時後，將反應混合物於Et〇Ac&H2〇間分開。分離有機相於

Na2S04上乾燥’並蒸發。標題化合物作閃色層分析純化。步驟4 [9-[(3,4-二氣苯基）硫基]（甲基續醯基）_7,8二氣 -6H-吡啶并[3,4_b]吡咯辛·8基]乙酸此標題化合物是用[卜（甲基硫基）_7,8-ΚΗ-吡咬并 [3,4-b]吡咯辛_8_基]乙酸甲酯如實例6方法_丨步驟8至9所述製備。實例7 [10·[(3,4-二氯苯基）甲硫基]小（甲基項醯基）_6,7,8 9四氣吡啶并[3,4-b]中氮節_9_基]乙酸（化合物μ)

步驟1 [Η甲基《基）-6,7,8,9_四氫㈣并[3 4 b]中氮節 -9-基]乙酸乙酯 92718.doc -35· 1334354 標題化合物是用實例6步驟3產物方法製備。步驟2 以實例1步驟5至9相

將步驟1產物用實例丨步驟丨^丨丨相同方式 (3,4-一氯笨基）二硫轉化成標題化合物。卜、忍；T硫基]_1_(曱基磺醯 '比啶并[3,4-b]中氮茚-9-基]乙酸 >驟10-11相同方式以步驟1〇之雙曱基 MS M+l=485。實例8 (4-(甲基磺醯基）5{[4_(三氟甲基）苯基]硫基卜6,7,8,9_四氣· 吡啶并[3,2-b]中氮茚_6_基）乙酸（化合*N)

此標題化合物是如實例述用雙[4_(三氟甲基）苯基]二硫製備。 . H NMR(500 MHz，丙酮-d6) δ 8.55(d，1H)，7.75(d，1H)， 7.45(d, 2H), 7.15(d, 2H)} 4.55(m, 1H), 4.15(m, 1H), 3,80(m, 1H)，3.30 (s，3H)，2.80至 2,10(m，6H)。 m/z 5 13(M+1) 〇實例9 [5-[(2-氣-4-氟苯基）硫基]·4_(甲基磺醯基）_6,7,8,9_四氫_0比咬并[3,2-b]中氮茚-6-基]乙酸（化合物〇)

92718.doc •36· 1334354 用雙（2-氯-4-氟苯基）二硫此標題化合物是如實例1所述製備。 m/z 469(M+1)。實例10 [4-(甲基確酿基）-5-(2-萃其、呆i硫基）-6,7,8,9-四氫-吡啶并 [3,2-b]中氮茚-6-基]乙酸（化合物p) SOgMe

此標題化合物是如實例丨所述用二（2_萘基）二硫製備 m/z467(M+l) 實例11 [5-[(2,3-二氣苯基）硫基]_4_(甲基磺醯基）·6,7,8,9_四氫-〇比啶并[3,2-b]中氮茚-6-基]乙酸（化合物⑺

此標題化合物是如實例1所述用雙（2,3-二氣苯基）二硫製備。 4 NMR(500 MHz，丙酮-d6) δ 8.85(d，1H)，7.80(d，1H)， 7.30(d，1H)，7.00(t，1H)，6.60(d, 1H), 4.60(m，1H)，4.20(m， lH)，3.80(m，lH)，3.40(s，3H)，2.8(^2.10(m，6H)。實例12 [5-[(4-甲基苯基）硫基]甲基磺醯基）-6,7,8,9-四氫-。比啶 92718.doc -37· 1334354 并[3,2_b]中氮茚-6_基]乙酸（化合物R)

此標題化合物是如實例1所述用對-甲苯基二硫製.備。 H NMR(500 MHz,丙酮-d6) δ 8.55(d，1H)，7.80(d，1H)， 6.95(m, 4H)} 4.60(m, 1H), 4.15(m, 1H), 3.80(m, 1H), 3,35(s, 3H), 2·80至 2.10(m，6H)。實例13 [4-(甲基續酿基）-5-(苯基硫基）-6,7,8,9-四氫-e比咬并[3,2-b] 中氮茚-6-基]乙酸（化合物S)

此標題化合物是如實例1所述用二笨基二硫製備。 4 NMR(500 MHz,丙酮-d6) δ 8.55(d，1H)，7.80(d，1H)， 7.15S6.90(m，5H)，4.60(m，lH)，4.15(m,lH),3.75(m，lH), 3.30(s，3H)，2.8C^2.10(m，6H)。實例14 [5-[(2,4 -二氯笨基）硫基]-4-(曱基確酿基）-6,7，8，9 -四氫-n比啶并[3,2-b]中氮茚-6-基]乙酸（化合物T) 92718.doc -38· 1334354

此標題化合物是如實例丨所述用雙（2,4_二所述用雙（2,4-二氣苯基）二硫製

7.35(s, 1H), 7.〇〇(d, 1H), 6.65(d, 1H), 4.55(m, 1H) 1H), 3.80(m, 1H), 3.35(s, 3H), 2.80^2.10(m, 6H) 〇内製備。 85(d，1H)， 65(d, 1H), 4.55(m, 1H), 4.15(m, 實例15 [5-[(4-氣苯基）硫基]_4_(曱基確醯基）6,7,8,9_四氫“比咬并 [4,3-b]中乳茚-6-基]乙酸（化合物u)

此標題化合物是如實例1所述用3_氣菸鹼醛（Heter〇cycles p. 151，1993)製備，只是最後的環化是於回流藉加疊氮化物於秦烧完成。 NMR(500 MHz，丙酮-d6) δ 9.20(s，1H)，8.85 (s，1H), 7.20(d, 2H), 7.00(d, 2H), 4.70(m} 1H), 4.3〇(m, 1H), 3.75(m, 1H)，3.35(s, 3Η)，2·80至 2.10(m，6H)。實例16 [9-[(4-氯苯基）硫基]-1-(甲基續醯基）-7,8-二氫-611-«»比嘻辛_ 8-基]乙酸（化合物V) 92718.doc -39. 1334354

Cl 此払題化合物是用實例6方法丨步驟8產物如實例丨步驟1〇及11内所述方法’步_用雙（4氣苯基）二硫製備。 H NMR(500 MHz, ^ ig-d6) δ 8.25-8.3(m, 1Η), 7.71-7.75(ms 1H)，7_12-7.17(m，2H)，6.97-7.04(m，2H), 4.45-4_51(m，1H)， 4.32-4.39(m，1H)，3.73-3.80(m，1H)，3 29(s，3H)，3 15_3 21 (m, 1H), 2.99-3.08(m, 1H), 2.66-2.73(m, 1H), 2.46-2.54(m, 1H)。實例17 (_M(4-氯节基）-7-氟-5-(甲烷磺醯基）_丨，2,3,4_四氫環戊[b] 吲哚-3-基]乙酸（化合物e)

步驟1 : (+/_)_(7-氟·12,3,4-四氫環戊[b]吲哚_3_基）乙酸乙基酉旨

C02Et 將10.00克4-氟-2·碘苯胺，6.57克2-(2-氧環戊基）乙酸乙酿及121毫克對-曱苯磺酸於100毫升苯内的溶液在a氣下用 Dean-Stark trap回流24小時。然後蒸餾去笨。再加6〇毫升 DMF，再去氣，加19毫升Hunig氏鹼，再加4〇5毫克 92718.doc •40- 1334354

Pd(OAc)2。將此溶液加熱至115〇c 3小時，然後冷至室溫。加300毫升1N.HC1及200毫升醋酸乙酯停止反應，此混合物用矽藻土過濾。分離各相，酸相用2〇〇毫升醋酸乙酯萃取二次。合併有機層’用鹽水洗，於NkSCn上乾燥，用矽藻土過濾，濃縮。粗製物質再用100%曱笨作閃色層分析純化，得標題化合物。 iNMR(丙酮-d6) δ 9.76(br s，1H)，7.34(dd，1H)，7.03(d，1H)， 6.78(td，1H)，4.14(q，2H), 3.57(m，1H)，2.85-2.55(m，5H)， 2_15(m，1H)，1.22(t，3H)。步驟2 · (+/-)-(7-氟-1，2,3,4-四氫環戊[b]吲哚-3-基）乙酸

於1_24克步驟1所製的酯於14毫升四氫呋喃（Thf)之溶液中於室溫加7毫升MeOH，繼之加7毫升2N NaOH。2.5小時後將反應混合物倒入含醋酸乙酯（Et〇Ac)/lN HC1的分離漏斗内。分離各相，酸相用EtOAc萃取二次。合併有機層，用鹽水洗，於NajO4上乾燥，蒸發至乾，得粗製油體，以其原樣用於下一步驟（純度>90%)。 4 NMR(丙酮-d6) δ 10.90(br s，1H)，9.77(br s, 1H)，7.34(dd， lH),7.04(dd, 1H), 6.79(td, 1H), 3.56(m, 1H), 2.90-2.50(m, 5H), 2.16(m, 1H), MS(-APCl)m/z 232.2(M-H) ° 步驟3 : (+/-)-(5-溴-7-氟-1,2,3,4-四氫環戊[b]吲哚-3-基）乙酸

92718.doc -41 - 1334354 於2.20克步驟2所製得的酸（純度>90%)於30毫升吡啶内的溶液中於-4XTC加6.85克三溴化吡啶鑌。將此懸浮液於〇。〇搜拌10分鐘，再於室溫攪拌3〇分鐘。然後於高真空不加熱除去溶劑。將粗製物質溶於40毫升AcOH内，於此〇艺冷溶液中分批加2.88克鋅粉。將此懸浮液於15°C攪拌15分鐘，在加熱至室溫攪拌15分鐘。此時加in HC1停止混合物反應，將混合物倒入含鹽水/EtOAc的分離漏斗内。分離各層’ 有機層用水、鹽水洗，於Ν&8〇4上乾燥，濃縮。此物質直接使用不必純化。 H NMR(丙 _-d6) δ 10.77(br s，1Η), 9.84(br s，1Η)，7.09(m， 2H), 3.60(m, 1H), 2.95-2.65(m, 4H), 2.56(dd, 1H), 2.19(m, 1H)。步驟4 : (+/-)-[5-溴-4-(4-氯苄基）-7-氟-1，2,3,4-四氫環戊[b] 0引°朵-3 -基]乙酸

於2.13克步驟3所製的酸於1〇毫升THF内的溶液中加重氮甲烷於醚内的溶液’加過量直至以TLC監測酸已完全消耗。然後真空除去溶劑。於這樣製成的粗製甲基酯於2〇毫升DMF内的溶液中於_78〇c加539毫克NaH懸浮液（於油内的 6〇〇/❶懸浮液）。此懸浮液於〇°C攪拌10分鐘，再用1.70克4-氯苄基溴處理。5分鐘後，將溫度升至〇t：,將此混合物攪拌 20分鐘。此時加2毫升Ac〇H停止反應，再將此混合物倒入 92718.doc • 42- 1334354 含IN HCl/EtOAc的分離漏斗内。分離各層，有機層用鹽水洗，於無水Na2S04上乾燥，濃縮。將此烷基化的物質用步驟2所述方法水解《此粗製產物進一步用EtOAc/己烷研磨純化’得標題化合物。 4 NMR(丙酮-d6) δ 10.70(br.s，1H)，7.31(d，2H)，7.18(d，1H)， 7.06(d, 1H), 6.92(d, 2H), 5.90(d, 1H), 5.74(d, 1H), 3.61(m, 1H), 3.00-2.70(m, 3H), 2.65(dd, 1H), 2.39(dd, 1H), 2.26(m, 1H), MS (-APCI)m/z 436.3, 434.5(M_H)。步驟5 : (+)-[5-溴-4-(4-氣苄基）-7-氟-1，2,3,4-四氫環戊[b] 吲哚-3-基]乙酸

於2.35克步驟4所製的酸於130毫升Et〇H的溶液内於80°C 加780微升（S)-(-)-l-(l-萘基）乙基胺。將此溶液冷至室溫攪拌過夜。所回收的鹽（1.7克）再用200毫升EtOH重結晶。過渡後將所得固體鹽用IN HC1中和，產物用EtOAc萃取。有機層用鹽水洗，於無水Na2S04上乾燥，濃縮。此物質再用 Si〇2墊過濾’用EtOAc洗離，得標題對映體。二種對映體的滯留時分別為7·5分鐘及9.4分鐘[ChiralPak AD柱，己烷/2-丙醇/醋酸（95:5:0.1)]。多極性對映體為98〇/〇 ee。ee=98〇/〇 ; 滯留時=9.4分鐘[ChiralPak AD柱：250x4.6毫米，己烷/2-丙醇/醋酸（75:25:0.1) ; [a]D”=+39.2。（c 1〇, Me〇H)。步驟6 : (-)-[4-(4-氯苄基）_7·氟_5_(曱烷磺醯基卜^心四 92718.doc -43· 1334354 氫環戊[b]吲哚-3 -基]乙酸及鈉鹽先將步驟5所得的酸（15.4克）用重氮甲烷酯化。此磺醯化是藉混合這樣製得的酯與16.3克甲烷亞磺酸鈉鹽及30.2克 CuI(I)於甲基吡咯烷酮内完成。將此懸浮液以n2流去氣，加熱至150°C攪拌3小時，然後冷至室溫。加500毫升醋酸乙酯及500毫升己烷停止反應，混合物用Si〇2墊過濾，用EtOAc 洗離。將有機相濃縮。將粗製油體溶於EtOAc内，用水洗三次’用鹽水洗一次，於無水Na2S04上乾燥，過濾，濃縮。粗製物質再作閃色層分析純化，用EtOAc内100%甲苯至50% 曱苯作梯度洗離，得14克磺化的酯，此再以步驟2所述方法水解。相繼作二次重結晶製得標題化合物：先用醋酸異丙酯/庚烷，繼之用CH2C12/己烷。 NMR(500 MHz,丙酮-d6) δ 10.73(br s，1H)，7.57(d，2H， J=8.8 Hz), 7.31(m, 1H), 7.29(m, 1H), 6.84(d, 2H, J=8.8 Hz), 6.29(d, 1H, Jab=17.8 Hz), 5.79(d, 1H, JAB=17.8 Hz), 3.43(m, 1H), 2.98(s, 3H), 2.94(m, 1H), 2.85-2.65(m, 3H), 2.42(dd, 1H，Ji = 16.1 Hz, J2=10.3 Hz)，2.27(m, 1H)。13C NMR(125 MHz丙酮-d6) δ 173.0，156.5 (d，JCF=237 Hz)，153.9，139.2, 133.3，130.0(d，Jcf=8.9 Hz)，129.6，128.2，127.5(d，Jcf=7.6 Hz), 122.2(d, Jcf=4.2 Hz), 112.3(d, Jcf= 29.4 Hz), 111.0(d, JCF=22.6 Hz), 50.8, 44.7, 38.6, 36.6, 36.5, 23.3。MS(-APCI) m/z 436.1，434.1(M-H)_。ee=97% ;滯留時=15.3 分鐘 [(：11卜31〇61〇〇柱：250\4.6毫米，己烷/2-丙醇/乙醇/醋酸 (90:5:5:0.2)] ; [a]D21=-29.30(c 1.0, MeOH)。熔點 175.(Tc。 92718.doc -44 - 1334354 納鹽是藉將EtOH( 100毫升）内的上面製得的6.45克（14.80 毫莫耳）酸化合物以14.80毫升IN NaOH溶液處理製備。真空除去溶劑’將粗製固體在回流下溶於1.2公升異丙基醇。蒸館溶劑使最終容積減至500毫升。此鈉鹽藉冷至室溫結晶。將結晶的鈉鹽溶於H20内，用乾冰預冰凍，真空凍乾，得標題化合物鈉鹽。 !H NMR(500 MHz DMSO-d6) δ 7.63(dd, 1H, Ji=8.5 Hz, h=2.6 Hz), 7.47(dd, 1H, Ji=9.7 Hz, J2=2.6 Hz), 7.33(d, 2H，J=8.4 Hz)，6.70(d，2H，J=8.4 Hz)，6.06(d，1H，Jab=17.9

Hz), 5.76(d, 1H, JAB=17.9 Hz), 3.29(m, 1H), 3.08(s, 3H), 2.80(m, lH),2.69(m, 1H), 2.55(m, 1H), 2.18(m, 2H), 1.93(dd, 1H，：^ = 14.4 Hz, J2 = 9.7 Hz)。

實例17A 另一種製備（+/-)-[5·溴-4-(4-氯节基）-7-氟-l，2,3,4·四氫環戊[b]吲哚-3-基]乙酸（實例17,步驟4)的方法步驟1 : (+/-)-7-氟-1，2,3,4-四氫環戊[b]吲哚-3-基）乙酸二環己基胺（DCHA)鹽將0.526 Μ的2-溴-4-氟苯胺於二曱苯内的溶液與（2-氧環戊基）乙酸乙酯（1.5當量）及硫酸（0.02當量）加熱至回流20小時。以Dean-Stark裝置共沸除去水。此反應繼之以NMR，20 小時後，可觀察到已有80_85%轉化成需要的亞胺中間體。反應混合物用1 Μ碳酸氫鈉溶液（〇.2容積）洗15分鐘，蒸發有機部分。將剩餘漿體真空（0.5毫米汞柱）蒸餾。於30°C蒸餾二曱苯，於50-110。(：蒸餾未反應的過多的酮；於11〇-18〇°(：回收 92718.doc -45· 1334354 的亞胺為栋色澄清液體，純度83。/〇。然後將亞胺中間體加於去氣的醋酸卸（3當量），單水合氯化四-η-丁基銨（1當量），醋酸鈀（〇.03當量）及N，N_:曱基乙醯胺之混合物内（亞胺終濃度=0.365 M)。將此反應混合物加熱至115 °C 5小時，再任其冷至室溫。然後加3N K〇H(3當量）’將混合物於室溫攪拌1小時。將反應混合物用水（1 〇容積）稀釋，用甲苯（3x0.75容積）洗。將水相用3N HC1酸化至pH 1’用第三-丁基甲基醚（2χ〇_75容積）萃取。合併之有機部分用水（0.75容積）洗。於此澄清淺棕色溶液内加二環己基胺（1當量）’此溶液於室溫攪拌16小時。過壚鹽，用醋酸乙酯、第三-丁基甲基醚洗，任其乾燥，得標題化合物。鑑定：94A%。 1H NMR(500 MHz, CDC13): δ 9.24(s, 1Η), 7.16-7.〇8(m, 2H), 6.82(t, 1H), 6.2(br, 2H), 3.6-3.5(m, 1H), 3.04-2.97(m, 2H), 2.88-2.70 (m，3H)，2.66(dd，1H)，2.45-2.37(m，1H)， 2.13-2.05(m，2.05)，1.83(d，4H)，1.67(d，2H)，1.55-143(% 4H)，1.33-1.ll(m，6H)。步驟2 . (+/-)-(5-漠-7-氟-1,2,3,4-四虱環戊[b]。引0朵_3_基）乙酸將上步驟1所得DCHA鹽於二氣曱烷（0.241 Μ溶液）内的泥樣物冷至-20至-15°C。一次加吼啶（2當量），於此泥樣物内費30至45分鐘滴加溴（2.5當量），同時維持溫度於·2〇〇Cs -15°C間。（於加1/3溴時反應混合物變稠，須更有效的授掉。事實上是’於加1/2溴時混合物又變”鬆"。）加完後令反癖混合物於-1 5 °C再老化一小時。然後用5分鐘加醋酸（3 〇4當 92718.doc -46 - 1334354 里）’並分批加鋅粉（3·〇4當量）。(部分鋅於-15°C加入，令混合物老化5分鐘以確保繼續放熱（約_15〇c至_1〇。(：））。以約加辞5次重複此操作，費時3〇分鐘。待不見有放熱後迅速加剩餘的辞。整個操作費時約3〇至45分鐘。加完後，將此批加溫至室溫，老化1小時’濃縮。將反應混合物移入曱基第三_丁基醚（MTBE，0.8容積），加10。/〇醋酸水溶液（0.8容積）。將混合物（結晶鹽，例如苯基偶氮二胺基°比咬）於室溫老化1小時，用s〇lka_fl〇c過濾。S〇lka-fl〇c墊用MTBE(約0.2容積）沖洗，將濾過物（雙相，MTBE/水相）移入萃取器。有機相用水（〇_8容積）洗。濃縮MTBE萃取物，移入異丙基醇（IPA ’ 0.25容積）結晶出化合物。加水（0.25容積），該批老化1小時。再加水（〇.33容積），費時一小時。加完水後，再將此批老化1小時’過濾，用30/70 IPA/水（0.15 容積）沖洗。於十45。(：爐内將結晶溴酸乾燥。步驟3:(+/-)-[5-溴-4-(4-氯苄基）-7-氟_1，2,3,4-四氫環戊[15] 吲哚-3-基]乙酸將步驟2所得溴酸溶於二甲基乙醯胺（〇.416 Μ溶液）内，一次加碳酸鉋（2.5當量）。於此泥樣物中一次加4-氣苄基氣（2.5 當量），將此批加熱至50°C 20小時。再將此批冷至室溫，用 5分鐘加5>1氩氧化鈉（4.00當量）（溫度升至+40。〇。再將反應物於50°C老化約3小時，冷至室溫，移入L型萃取器内。此溶液用異丙基醋酸酯（IPAc，2容積）稀釋，冷至+15°C *此溶液用5N HC1酸化至約pH 2。分離各層，有機層用水（2X2容積）洗。將IPAc溶液濃縮，移入ΙΡΑ(0·8容積），結晶產物。 92718.doc • 47- 1334354 用2小時加水（8公升），將此批過濾，得標題化合物。此批可於+40°C爐内乾燥24小時。實例18 (+/-)_{4-[1-(4-氯苯基）乙基]-7-氟-5-甲烷磺醯基-US，4·® 氫環戊[b]吲哚-3-基}乙酸（化合物X)

此標題化合物係根據2003年7月30日公佈之pCT W0 03/062200號所述方法合成。實例19 (+/-)-[9-(4-氯苯基氟-甲烷磺醯基_2,3,4,9-四氫-1H-吟嗤-1-基]乙酸（化合物γ)

此標題化合物係根據2003年7月30日公佈之pCT WO 03/062200號所述方法合成。實例20 [4-(4-氣苄基）-7-氟_5·曱烷磺醯基_丨_氧^,2,3,4-四氫環戊[b] °引0朵-3 -基]乙酸（化合物z)

ch3 92718.doc •48- 1334354 此標題化合物係根據2003年7月30日公佈之PCT WO 03/062200號所-述方法合成。實例2 1 {9-[(3,4-二氯苯基）硫基]-1-異丙基-7,8-二氫-6H-吡啶并 [3,4-b]吡咯辛-8-基}乙酸（對映體A及對映體B)(化合物AA)

步驟1 2-氯菸鹼醛於二異丙基胺（110毫升，780毫莫耳）於THF(500毫升）内的溶液中於-40°C加2.5 Μ的n-BuLi之己烷溶液（300毫升， 750毫莫耳）。5分鐘後，將反應混合物冷至-95°C，然後相繼加DMPU(15毫升）及2-氣吡啶（50毫升，532毫莫耳）。將所得混合物加溫於-78°C攪拌4小時。然後，將此黃色懸浮液再冷至-95°C，再加DMF(70毫升）。將最終反應混合物加溫至-78°C，於此溫度攪拌1.5小時。將此反應混合物倒入冷 HCL水溶液（3N，800毫升）内並攪拌5分鐘。加濃NH4OH調整pH至7.5。用EtOAc萃取水層三次。合併之有機層用NH4C1 及鹽水洗，於Na2S04上乾燥，過濾，濃縮。粗製物質進一步用二氧化矽膠墊純化，用100%己烷至100% EtOAc梯度洗離，此產物再於己烷内結晶，得標題化合物，為灰黃色固體。步驟2 (2Z)-2 -豐氣-3-(2 -乳。比咬-3-基）丙-2 -稀酸甲酷 92718.doc -49· 丄州4354 將2-氯菸鹼醛（20.0克，139.9毫莫耳）及疊氮乙酸甲酯 (32.2毫升，349_.7毫莫耳）於^〇11(168毫升）内的溶液於魏加於25% NaOMe於MeOH内的溶液（80毫升，349毫莫耳）中。於此加入時間3〇分鐘内監測内溫並維持於約_2〇β(：。然後將所得混合物於冰浴内攪拌數小時，再於冷室冰浴内攪拌過夜。然後將此懸浮液倒於冰及的混合物上，攪拌 1〇分鐘後過濾。產物用冷Η"洗，真空下乾燥。將粗製物質溶於CH2C12内，加MgSCU。此懸浮液用二氧化矽膠墊過濾，用CHei2洗。將濾過物減壓濃縮，得米色沉澱物（2〇克）標題產物。步驟3 4-氣-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-羧酸甲酯將（2Z)-2-疊氮-3-(2·氯吡啶-3-基）丙-2-烯酸曱酯（21克，88 毫莫耳）於二曱基苯（880毫升）内的溶液加熱至回流i小時。將此反應混合物冷至室溫，再冷至〇〇c，過濾沉澱物，用冷己烷洗。將此物質於1:20 EtOAc/己烷内攪拌過夜，過濾後得標題產物，為淡黃色固體（13.2克）。步驟4 1-氯-8-氧-7,8-二氫-6H-吡啶并[3,4-b]吡咯辛-7-羧酸曱酿於4-氯-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-羧酸甲酯（125克，59毫莫耳）於THF(116毫升）-甲笨（460毫升）内之溶液中加1.〇 μ第三-丁氧化奸之1.0 M THF溶液（64毫升，64毫莫耳）及丙烯酸甲酯（55毫升’ 611毫莫耳）。所得混合物於i〇〇〇c加熱18小時。然後’將此懸浮液冷至室溫，倒於飽和NH4Ci水溶液（400 毫升）及己统（400毫升）之混合物。傾出固體，過濾，用h2〇 92718.doc -50- 1334354 及己烧洗’得標題化合物。步驟5 1-氯-6,7-二氫-8H-吡啶并[3,4_b]吡咯辛-8-酮於前一步驟化合物内加異丙醇（8〇毫升）及濃HC1(2.0毫升）’同時於10(TC攪拌1小時。將反應混合物於EtOAc及 NazCO3間分開。分離有機相，蒸發，得標題化合物。步驟6 1-異丙烯基_6,7_二氫·8H_吡啶并[3,4_b]吡咯辛_8•酮於1_氯-6,7-二氫-8H-吡啶并[3,4_b]吡咯辛-8-酮（5.0克， 24.3毫莫耳），參（二亞苄基丙酮）二鈀（〇)(1〇克，丨〇9毫莫耳）及三苯基胂（2.70克’ 8.82毫莫耳）於DMF( 100毫升）内之混合物中加二丁基異丙烯基錫院（9 ·6〇克，29. 〇〇毫莫耳）。將所得混合物去氣，於78 °C加熱18小時。減壓蒸發溶劑，加 CHaCh及矽藻土於此混合物中，然後以矽藻土過濾。標題化合物以閃色層分析（己烷内50%至1〇〇% EtOAc)純化。步驟7 (2E)-(1-異丙烯基-6,7-二氫-8H-吡啶并[3,4-b]亞吡咯辛-8-基）乙酸乙酯於1-異丙烯基-6,7-二氫-8H-吡啶并[3,4-b]吡咯辛_8·酮 (0.60克，2.8毫莫耳）及膦醯基乙酸三乙酯（1 〇〇克，4 46毫莫耳）於THF(24毫升）内的溶液中於_78«c加8〇% NaH(〇 12 克，4.00毫莫耳），任此反應混合物升至〇°c，再升至室溫。將反應混合物倒於飽和NHUC1及EtOAc上。分離有機相，於

NajO4上乾燥，蒸發。標題化合物作閃色層分析純化（己烷内的 40% EtOAc)。步驟8 (1-異丙基-7,8-二氫-6H·吡咬并[3,4-b]T>比洛辛•美）乙酸乙酯 92718.doc .51· 1334354 於（2E)-(1-異丙烯基_6 7_二氫_8H•吡啶并[3 4_b]亞吡咯辛-8-基）乙酸.乙酯（〇40克，1_4毫莫耳）於MeOH(20毫升）内的溶液中加Pd(OH)2(0.20克此混合物於Η。一氣壓下攪拌3 小時。將混合物與矽藻土上過濾，蒸發，得標題化合物。 γ驟9 {9-[(3,4-二亂苯基）硫基]·ι_異丙基_7,8_二氫_6η_π比咬并[3,4-b]»比洛辛_8-基}乙酸乙酯於雙（3,4-二氣苯基）二硫（0.24克，0.67毫莫耳）於CH2C12 (5.6毫升）内的溶液中加s〇2Ci2(0.036毫升）。將所得黃色混合物於至溫稅拌1小時。將此溶液於〇〇C加於（ι_異丙基二氫-61^比啶并[3,4-13]吡咯辛-8-基）乙酸乙酯（〇.15克，0.52 毫莫耳）於DMF(5.6毫升）内的溶液中。於〇。〇過i 5小時後，反應混合物倒於飽和NaHC〇3及EtOAc上。分離有機層，於

NajO4上乾燥，過濾，蒸發。標題化合物作閃色層分析純化（己烷内的30%至40% EtOAc)。步驟10 {9-[(3,4- 一氯本基）硫基]-1-異丙基- 7,8-二氫·6Η-α比咬并[3,4-b]°比哈辛-8-基}乙酸於{9-[(3,4-一氣苯基）硫基]_1-異丙基_7,8_二氫_6士11比咬并[3,4-b]吡咯辛-8-基}乙酸乙酯（〇·23克，0·5〇毫莫耳）於 THF(5毫升）及MeOH(2.5毫升）内之溶液中加1.〇 μ NaOH (1.5毫升’ 1,5毫莫耳於室溫攪拌ι8小時後，加毫升），蒸發溶劑。將殘餘物溶於EtQAc/H2〇内，有機相用 ΗζΟ及鹽水洗。乾燥（Na2S〇4)後’將溶液過濾並蒸發。殘餘物用1:1 EtOAc:己烷攪拌，過濾後得標題化合物，為白色固體。 92718.doc -52- 1334354 !H NMR(MeOH-d6) δ 1.14-1.26(m, 6H), 2.47-2.56(m, 1H), 2.56-2.64(m, 1-H), 2.94-3.05(m, 2H), 3.81-3.89(111, 1H), 4.22- 4.30(m, 1H), 4.33-4.44(m, 2H), 6.93-6.99(m, 1H), 7.14-7.19 (m, 1H), 7.33-7.39(m, 1H), 7.54-7.59(m, 1H), 8.16-8.21(m, 1H) 〇將步驟10產物用CH2N2轉化成甲基酯，再將此酯用對掌固定相（chiralcel OD柱2x25公分）作HPLC分離，用己烷内12% 2 -丙醇以6宅升/分鐘流速洗離。對映體a(少極性）之滞留時 31.9分鐘，對映體8(多極性）之滞留時35 5分鐘。以實例17 步驟10水解A及B，得標題化合物對映體a及B。實例22 ((lR)-6-氟-8-(甲基磺醯基）_9-{(lS)-l-[4-(三氟甲基）苯基] 乙基}-2,3,4,9-四氫-1H_咔唑-1-基）乙酸（化合物AJ)

步驟1:氯化2·(2-溴-4-氟苯基）肼鑌於2-溴-4-氟苯胺於濃HCi(1.5 Μ)内的懸浮液中於_1〇它緩慢加10.0 Μ的NaN〇2(l.i當量）懸浮液。此混合物於〇(>c攪拌 2.5小時。然後加冷（_3〇。(：）311(：：12於濃]^(：1内的溶液（3 8 μ)，同時維持内溫低於1〇。〇，形成之混合物於⑺艺下機械攪拌分鐘，然後於室溫攪拌丨小時。將稠泥樣物過濾，任固體氣乾過夜。再將此固體懸浮於冷HC1,再過濾。將乾燥物質 92718.doc -53- 1334354 懸淨於Et2〇内’攪拌10分鐘’過濾，氣乾過夜，得標題化合物，為米色.固體。步驟2 : (+/-)(8-溴-6-氟-2,3,4,9-四氫_1只-咔唑-1-基）乙酸乙酯於步驟1化合物（1當量）於Ac〇H(0.5 M)内的懸浮液申加 (2·氧環己基）乙酸乙酯（1當量）。將此混合物攪拌丨6小時，冷卻，減壓蒸發除去AcOH^殘餘物用Et0Ac稀釋，用水及飽和NaHCCb水溶液洗。有機層於Na2S〇4上乾燥，濃縮。然後將殘餘物於二氧化矽膠墊上純化，用甲苯洗離。濃縮濾過物，於己烧内授拌，過渡後得標題化合物，為白色固體。 MS(+APCI)m/z 354·2(Μ+Η)+。步驟3 . (+/-)-[6-氟- 8-(甲基確醯基）_2,3,4,9-四氫-1Η-咔唑 -1-基]乙酸乙醋於步驟2化合物（1當量）於DMS〇水溶液（〇28Μ)内的溶液中加曱烷亞磺酸鈉（3當量）及碘化銅（3當量）。混合物内通入 Νζ5分鐘，反應物在沁氣下於1〇〇它攪拌。十二小時後加更多曱烷亞磺酸鈉（2當量）及碘化銅（2當量）。此混合物再於 100C攪拌12小時，冷卻，用Et〇Ac稀釋，用1NHC1酸化此混合物。將懸浮液攪拌30分鐘，用矽藻土過濾。濾過物用水洗，於NasSO4上乾燥’濃縮。殘餘物用二氧化矽膠墊過遽’先用甲苯洗離除去非極性雜質，再用2:丨己烷/Et〇Ac混合物洗去雜質，得所需產物。將用己烷/Et〇Ac混合物洗離的濾過物濃縮，得標題化合物，為灰黃色固體。MS(_ApCI) m/z 352.1(Μ·Η)·。步驟4 : [(lR)-6-氟-8-(曱基磺醯基）_2,3,4,9_四氫·1Η咔唑 92718.doc -54· 1334354 -1-基]乙酸乙醋將步驟3所.製外消旋混合物用製備用HPLC於chiralpak AD製備柱上解析，用己烷内1 5% iPrOH混合物洗離。以終產物活性為基準証實多極性對映體（長滯留時）為標題化合物。步驟5 : [(lR)-9-[(lS)-l-(4-氣苯基）乙基]-6-氟-8-(曱基磺醯基）-2,3,4,9 -四氮-1H -味0坐-1 -基]乙酸乙酉旨於步驟4化合物（1當量），三苯基膦（1.5當量）及“幻-丨-。· 氯苯基）乙醇（1 · 5當量，根據參照例1所述通法製備）於 THF(0.175 M)内的溶液中加費時1〇分鐘加疊氮羧酸二·第二丁醋（2.1 M，於THF内，1.5當量）。此混合物於室溫授拌2 小時，並濃縮。殘餘物以二氧化矽膠閃色層分析純化，用曱苯内的7% EtOAc洗離，得所需產物（純度約90%)，直接用於下一步驟。步驟6 : [(lR)-9-[(lS)-l-(4-氣苯基）乙基]-6-氟-8-(甲基磺醯基）-2,3,4,9-四氫-1H-咔唑-卜基]乙酸及氯苯基）乙基]-6- 氟 -8-( 甲基磺醯基）· 2,3,4,9-四氫-1H-咔唑-1-基]乙酸於步驟5化合物於2:1 THF及曱醇（0.1 M)之混合物内之溶液中加IN LiOH溶液（3當量）。此混合物於室溫攪拌2小時，力oAcOH，蒸發除去溶劑。將殘餘物溶於EtOAc/H2〇内，有機層用鹽水洗，於Na2S04上乾燥，過濾，濃縮。殘餘物於己烷内的30°/。EtOAc攪拌，將產物懸浮於二乙醚，以超音波振動45分鐘，過濾，於50°C高真空乾燥24小時，得標題 92718.doc •55· 1334354 化合物，為白色固體。MS(-APCI)m/z 462.1(M-H) 或者是’用-(+/-) [6-氟- 8-(甲基續酿基）-2，3,4,9 -四氫-1H_ 咔唑-1-基]乙酸乙酯如步驟5行烷基化，得2種非鏡像立體異構物混合物：[(1R)_9-[(1S)-1_(4-氣苯基）乙基]_6_氟_8_(甲基石黃醯基）-2,3,4,9-四氫-1H-咔唑-1-基]乙酸乙酯及[(iS)_9_ [(18)-1-(4-氯笨基）乙基]-6-氟-8-(甲基績酿基）-2,3,4,9-四氫 -1H-咔唑-1·基]乙酸乙酯。將此非鏡像立體異構物混合物用下述方法作選擇性水解解析’得所需[(1R)_9-[(is)-1-(4-氯本基）乙基]_6_氣- 8-(甲基續醯基）-2,3,4,9-四氫-1H-味《坐-1_ 基]乙酸。解析：將[(lR)-9-[(lS)-l-(4-氯笨基）乙基]_6_氟_8·(甲基磺醯基）-2,3,4,9-四氫-1H-咔唑-1-基]乙酸乙酯及[(1S)_9_[(1S)_ 1-(4-氣苯基）乙基]_6_氟_8_(甲基磺醯分^七…四氫-丨沁咔唑-1-基]乙酸乙酯（1當量）之非鏡像立體異構物混合物溶於 3.5/1之丁1^/]^6〇11(0.25 1^)内，冷至〇。〇。緩慢加1^〇111>? 水/谷液（1當量），將此混合物攪拌丨2小時或攪拌至[(丨R)_9_ [(18)-1-(4-氯苯基）乙基]_6-氟-8_(甲基磺醯基）_2,3,4,9_四氫-1H-咔唑·丨_基]乙酸乙酯幾乎完全水解，另一非鏡像立體異構物在此條件下只少許水解。加Ac〇H，蒸發除去溶劑。將殘餘物溶於EtOAc/H2〇内，有機層用鹽水洗，於Na2S〇4 上乾燥’過渡’濃縮。以閃色層分析用含1% AcOH的己烷内的40% Et0Ac分離[(1S)_9_[(1SH4氣苯基）乙基]_6_氟_8_ (曱基磧醯基）_2,3,4,9-四氫-1H_咔唑_丨·基]乙酸乙酯及 92718.doc -56 - [(lR)-9-[(lS)-l-(4-氯苯基）乙基]_6_氟-8·(甲基項醢基）-2,3,4,9-四氨-1Η-咔唑-ΐ_基]乙酸，得[(ir)_9-[(1S)-1-(4-氣苯基）乙基]-6-氟-8-(甲基磺醯基）·2,3,4,9-四氫-1H-咔唑 -1-基]乙酸，de>90%，於己烷内的3〇%EtOAc攪振，得所需化合物，為白色固體，de>95%。步驟7 : [(lR)-6 -氟- 8-(甲基項醯基）_2,3,4,9-四氫-111-味。坐 -1-基]乙酸甲酯

於[(lR)-9-[(lS)-l-(4-氣苯基）乙基]-6-氟-8_(甲基磺醯基）-2,3,4,9-四氫-1H-咔唑-1-基]乙酸（[a]D=_226。，於MeOH 内）於MeOH内之溶液（0.1 Μ)中加10%鈀/碳（10%重量/重量）。此混合物内通入Ν2 5分鐘。此反應物於室溫在氫氣壓 (球形瓶内）擾拌24小時，用矽藻土墊過濾，用CH2C12洗離。減壓蒸發溶劑’殘餘物用CH2C12攪振，得化合物[(lR)-6-氟 •8_(甲基磺醯基）-2,3,4,9-四氫-1H-咔唑-1-基]乙酸甲酯。

ch3 步驟8 : ((1R)_6-氟-8-(甲基磺醯基）-9-{(lS)-l-[4-(三氟曱基）苯基]乙基}-2,3,4,9-四氫-1H-咔唑-1-基）乙酸 (化合物AJ) 於步驟7化合物（丨當量），三苯基膦（1.5當量）及UR)]· [4·(三氟曱基）笨基]乙醇（1.5當量）於THF(0.2 Μ)内的溶液中費時20分鐘加偶氮二羧酸二-第三-丁酯。將此混合物於室 92718.doc -57· 1334354 溫授拌2小時並濃縮。殘餘物以二氧化矽膠閃色層分析純化’用曱笨内妁10% EtOAc洗離，得（（lR)-6-氟-8-(甲基磺酿基(三氟甲基）苯基]乙基}_2 3 4 9_四氫 -1H-啼唾-丨·基）乙酸甲酯（純度約9〇%)，直接用於下一反應。於以上所得酯（1當量）於3.5/1 THF/MeOH(0.25)混合物内之溶液中於〇°C緩慢加LiOH 1N水溶液（1當量），此混合物於〇 C攪拌16小時’直至此酯近完全水解；在此條件下另一少部分非鏡像立體異構物之水解速度报慢。加AcOH，真空除去溶劑。將殘餘物溶於EtOAc/H2〇内，有機層用鹽水洗，於 NaaSO4上乾燥’過濾，蒸發。為除去未反應的甲基醋，此殘餘物可用二氧化矽膠墊過濾，先用1〇% Et〇Ac/甲苯洗離’再用60% EtOAc/甲苯，含1% Ac〇H，洗離。殘餘物用 30% EtOAc/己烷攪振，於50乞高真空下乾燥16小時，得標通化合物，為白色固體，de及ee>95%(以對掌HPLC檢定）。 MS(-APCI)m/z 496.0(M-H)·。[〇c]D=-l8i。，sMe〇H内。生物學本發明所用有選擇性DP拮抗劑作用的化合物一般展現對 DP的親合性（Ki)少大於對CRTH2受體展現的親合性（Ki)工〇倍（數字較低仏值）。本發明所用典型〇1>拮抗劑對Dp受體之選擇性較對CRTH2受體選擇性至少大1〇倍。更特定地說，此選擇性DP受體拮抗劑對Dp受體的選擇性至少比對 CRTH2受體的選擇性大1〇〇倍。尤其特定的是，此選擇性Dp 受體拮抗劑對DP受體的選擇性至少比對(：尺丁112受體的選擇性大800· i 000倍’即對DP受體的親合性（Ki)較對crth2受體 927l8.doc -58- 1334354 的親合性（Ki)大80(M〇〇〇倍。此處所謂化合物"選擇性地調節DP受體，，意謂化合物以達有效治療的濃度結合於DP受體並拮抗DP受體，而在此達治療的濃度實質上不調節CRTH2受體。一般而言，此處所用DP拮抗劑對CRTH2受體之親合性（Ki) 約〇·5微莫耳或更高《其對CRTH2受體之親合性約0.5微莫耳或更高的，對DP受體的選擇性較對CRTH2至少高10倍的化合物’可用於抑制給予菸鹼酸而無此種選擇性DP拮抗劑時引起的潮紅。化合物對重組人DP及CRTH2受體的親合性及選擇性的測定化合物對DP及CRTH2受體的親合性及選擇性是用 Abramovitz M.et al. Biochem. Biophys. Acta(2000)1483:285-293及 Sawyer N.et al· Br. J. Pharmacol. (2002) ; 137:1163-1172所述放射配位體結合鑑定測定。簡言之，用人胚胎腎 (HEK)293EBNA(Epstein Barr virus Nuclear Antigen)細胞 (稱為HEK293E細胞系）建立個別表現人DP及CRTH2受體的安定細胞系。以此等重組細胞系製備的膜部分用於平衡競爭放射配位體結合鑑定以測定化合物對DP及CRTH2受體的親合性及選擇性。將對應於全長編碼序列的DP及CRTH2 cDNAs次克隆 (subcloned)於哺乳動物表現載體pCEP4(Invitrogen)的適當位置，於HEK293E細胞表現。將細胞以氮於800磅/吋2在有蛋白酶抑制劑（2 mM AEBSF，10 μΜ E-64，100 μΜ量抑蛋白酶肽及0.05毫克/毫升胃酶抑制劑）之存在下於冰上空化30分 92718.doc •59- 1334354 鐘後.使細胞溶解，以差別離心（lOOOxg 10分鐘，然後 160,000xg 30分鐘）製備膜。將160,000xg小丸以Dounce均質化（Dounce A ; 10振幅（strokes)以約5至10毫克/毫升懸浮於10 mM HEPES/KOH(pH 7.4)，内含 1 mM EDTA)，然後於液體氮内於-80°C冰凍。於0.2毫升於10 mM HEPES/HOH (pH 7.4)，内含1 mM EDTA，10 mM MnCl2及 0.7 μΜ [3H]PGD2 (200 Ci/mmol)，終培養容積完成受體結合鑑定。此反應藉加160,000xg部分的膜蛋白質（約30微克供DP，10微克供 CRTH2)開始。將配位體加於二曱基亞砜（DMSO)，在所有培養中維持於1%(容積/容積）恆定。在有10μΜ非放射活性PGD2 之存在下測定特異結合。培養係於微軌搖動器内於室溫進行 60分鐘。用以無EDTA的鑑定培養緩衝液（4°C)預濕的96-凹 Unifilter GF/C(Canberra Packard)作快速過濾測定結合鑑定，使用Tomtec Mach III 96-凹半自動細胞收穫器。各濾過器用3至4毫升相同的緩衝液洗，於55°C乾燥90分鐘，結合於各過濾器的殘餘放射活性藉加5〇微升Ultima Gold F (Canberra Packard)用 1450 Microbeta(Wallac)計數器作閃爍計數測定。最大特異結合是以在無競爭者之存在下以總結合減去非特異結合界定。鑑定化合物的每一濃度的特異結合’以最大特異結合的百分比表示。以最大特異結合百分比為試驗化合物濃度的函數建立S形平衡競爭曲線’以習用的套裝軟體使用單驅動非線性小二乘曲線（simPlex driven non-linear least-squars curve)擬合常規’以四參數方程式分析，測定 92718.doc .60- 354 回折點（InPt)。試驗化合物的結合親合性是藉由方程式 ΚθηΗ/i +([放射配位體]/Kd)計算平衡抑制常數（Ki)決定，其中Kd是放射配位體_受體交互作用的平衡分解常數。在益法測定InPt時，則用IC50(即抑制5〇%最大特異結合所需的試驗化合物濃度）。一般而言，本發明所用化合物顯示對Dp受體的&為低至約〇.4nM至高至約16·3nMβ同樣，本發明所用化合物一般颂不對0111^2文體之Ki低至約18〇 nM至高至約22〇〇〇 nM 或更南。化合物對鼠由菸鹼酸誘發的血管舒張的影響此處所述選擇性DP拮抗劑之效價可用人菸鹼酸誘發的鼠模型測定潮紅抑制效果顯示。在給予已用載體（如作為對照）或DP拮抗劑的預先處理的鼠菸鹼酸（ΝΑ)後測定鼠耳的血流（血管舒張測定，著名的人潮紅成分”具體地說，此研究使用雄性C57BL/6鼠（約25克每一試驗組評估五隻鼠。將戊巴比妥用水稀釋成終濃度為5毫克/毫升，以〇·3毫升/鼠作複腔注射。將DP拮抗劑溶於5%羥基丙基β-環糊精内，終濃度為5毫克/毫升，化合物以〇.2毫升容積/鼠（約4〇 mpk)腹腔内給予。將菸鹼酸溶於5%羥基丙基β-環糊精内，終濃度為 12.5毫克/毫升。將菸鹼酸儲液用2Ν NaOH調整成ΡΗ 7.4，以0.2毫升/鼠作皮下注射（約1〇〇 mpk)。從給予菸鹼酸之求5分鐘開始在15分鐘内每30秒以雷射

Doppler灌注造影器（periScan PIM II，Perimed，Sweden)測定鼠耳皮膚灌注。計算給予載體或於鹼酸後10分鐘内的平均 92718.doc -61 - 1334354 灌注百分比變化，就每一動物所產生的平均灌注百分比變化與時間對照製成曲線圖。然後計算每一曲線圖平均灌注 (%ΔΧ分鐘）之曲線下的面積（AUC)，每一組的結果以平均 AUCiiSEM表示。化合物D於鼠抑制PGD_2誘發的血管舒張（圖丨）。圖1中，係於注射PGD-2前3〇分鐘給予化合物1)(〇1>拮抗劑卜試驗過的DP拮杬劑於鼠抑制菸鹼酸誘發的血管舒張；選用的化合物的數據見圖2及3 » 此處所引用的所有專利，專利申請及公告今附上其全文供參考。雖則特定的較佳具體實施例已於此詳述，可以看出還有多種變化仍鼠屬於本發明範圍。【圖式簡單說明】本發明結合後附圖解作說明：圖1為顯示化合物D於鼠抑制由前列腺素D2誘發的血管舒張的圖；圖2為顯不化合物D於鼠抑制由菸鹼酸誘發的血管舒張的圍，圖3為顯示其他選出的化合物於鼠抑制由菸驗酸誘發的血管舒張的圖。 92718.doc •62-

Claims

1334354 Λ 第093113730號專利申請案中文申請專利範圍替換本(99年9月）拾、申請專利範圍： 1. 一種下式E化合物

及菸鹼酸之用途，其係用於製造治療動脈粥狀硬化、異 .常血脂、糖尿病或提高HDL膽固醇而無實質的潮紅之藥物。 2. 如請求項1之用途，其中該藥物包含約1000毫克之菸鹼酸及約1至500毫克之化合物Ε。 3. 如請求項1之用途，其中該藥物進一步包含辛伐他汀 (simvastatin)。 4. 如請求項3之用途，其中該藥物包含約20毫克之辛伐他汀。 5. 如請求項1之用途，其中該藥物進一步包含托伐他汀 (atorvastatin) ° 92718-990924.doc