TWI329645B

TWI329645B - Novel pyrazolopyrimidines as cyclin dependent kinase inhibitors

Info

Publication number: TWI329645B
Application number: TW092124336A
Authority: TW
Inventors: J Guzi Timothy; Paruch Kamil; P Dwyer Michael; J Doll Ronald; Moopil Girijavallabhan Viyyoor; S Alvarez Carmen; Chan Tin-Yau; Knutson Chad; Madison Vincent; O Fischmann Thierry; W Dillard Lawrence; D Tran Vinh; Min He Zhen; Anthony James Ray; Park Haengsoon
Original assignee: Schering Corp; Pharmacopeia Drug Discovery
Priority date: 2002-09-04
Filing date: 2003-09-03
Publication date: 2010-09-01
Also published as: WO2004026229A2; MXPA05002572A; US7067661B2; KR20050033659A; MY137843A; EP1534712A2; JP2006502184A; CA2497544A1; DE60313872D1; WO2004026229A3; ZA200501846B; CA2497544C; US20060178371A1; AU2003298571B2; AR041133A1; DE60313872T2; US7514442B2; HK1071572A1; US20040106624A1; TW200413376A

Description

1329645 玖、發明說明： « · 【發明所屬之技術領域】本發明有關可作為蛋白質激酶抑制劑之吡唑并[l，5-a]嘧啶化合物，含此化合物之醫藥組合物，及使用此化合物或醫藥組合物治療例如癌症、發炎、關節炎、病毒疾病、神經退化疾病如阿茲海默氏（Alzheimer’s)疾病、心臟血管疾病及真菌疾病之治療方法。本申請案主張2002年9月4曰申請之美國專利臨時申請號60/408,029之優先權。【先前技術】週期素倚賴性激酶（CDKs)為絲胺酸/蘇胺酸蛋白質激酶，其為細胞週期及細胞增殖背後之驅動力。個別CDK’s如 CDta、CDK2、CDK3、CDK4 ' CDK5、CDK6 及 CDK7、CDK8 及類似物在細胞週期漸進中扮演不同角色且可歸類為Gl、S 或G2M期酵素。非控制之增殖作用為癌細胞之檢驗印記且在許多重要實心瘤中高頻率發生CDK功能錯調節。CDK2及 CDK4由於其活性在廣泛種類之人類癌症中經常錯調節而特別受到注意。CDK2活性對細胞週期油G1其漸進至S期而言為必須者，且CDK2為G1檢核點之重要成分之一》檢核點作用為維持細胞週期事件之適當順序且使細胞對傷害或對增殖訊號反應，同時在癌細胞中喪失適當之檢核點控制造成腫瘤形成。該CDK2路徑以腫瘤抑制劑功能（如p52、RB及 p27)及癌基因活化作用（週期素E)之程度影響腫瘤形成。許多報導已證明CDK2之輔活化劑（週期素E)及抑制劑（p27)兩者分別於乳癌、結腸炎、非小細胞肺癌、胃癌、前列腺癌 87250.doc 1329645 、膀胱癌、非-荷葛金（non-Hodgkin.’s)淋.巴癌、卵巢癌及其他癌症中過度表現或表現不足。它們的改變表現已顯示與增加之CDK2活性量及不良之總存活率有關。此觀察使 CDK2及其調節路徑為近年來發展之必要標的，數種腺苷5’-三磷酸酯（ATP)競爭性小有機分子以及肽於文獻中已報導作為有潛力治療癌症之CDK抑制劑。US 6,413,974第1攔第 23行-第15欄第10行提供對各種CDKs及其與各種癌症關聯性之良好描述。 CDK抑制劑為已知。例如黃素比多醇（flavopiridol)(式I) 為目前經歷人類臨床試驗之非選擇性CDK抑制劑。A. M. Sanderowicz等人，J. Clin. Oncol. (1998) M, 2986-2999。

式i 其他已知之CDKs之抑制劑包含例如歐樂姆辛（olomoucine) (J Vesely等人，Eur，J. Biochem.，（1994) 224, 771-786)及羅可維汀（rocsovitine)(I. Meijer等人，Eur. J· Biochem.，（1997) 243. 527-536) 〇 US 6,107,305描述某種吡唑并[3,4-b]吡啶化合物為CDK抑制劑。該‘305專利之例舉化合物具有式II : 87250.doc -9-

式II K. S. Kim 等人，J. Med. Chem. 11(2002) 3905-3927 及 WO 02/10162揭示某種胺基嘍唑化合物為CDK抑制劑。吡唑并嘧啶為已知。例如WO 92/18504、WO 02/50079、 WO 95/35298、WO 02/40485、EP 94304104.6、EP 0628559 (相當於 US 專利 5,602，136; 5,602，137 及 5,571，813)、US 6,383,790 ' Chem. Pharm. Bull., (1999) 47., 928、J. Med. Chem·，（1997)扭，296、J· Med. Chem., (1976) 11，517及 Chem. Pharm. Bull., (1962) l〇 620揭示各種 p比也并密咬。仍需要一種新穎化合物、調配物、治療方法以治療與 CDKs有關之疾病及失調。因此，本發明之目的係提供一種可用以治療或預防或舒緩此疾病及失調之化合物。【發明内容】許多具體例中，本發明提供作為週期素倚賴性激酶之抑制劑之新一類吡唑并[l，5-a]嘧啶化合物、製備此化合物之方法、含一或多種此化合物之醫藥組合物、製備包括一或多種此化合物之醫藥調配物之方法、及使用此化合物或醫藥組合物治療、預防、抑制或舒緩與CDKs有關之一或多種 87250.doc -10- 1329645 疾病之方法® . , 一方面，本發明揭示一種化合物、或該化合物之醫藥可接受性鹽或溶劑化物，該化合物具有式in所示通式：

式III 其中： R為未經取代之芳基或經一或多個基團取代之芳基，該基團可相同或不同，各基團獨立選自由鹵素、CN、-OR5、SR5 、-CH2〇R5、_C(0)R5、-so3h、-s(o2)r6、-s(o2)nr5r6、-nr5r6 、-c(o)nr5r$、-cf3、-ocf3及雜環基所組成之组群； R2係選自由R9'烷基、炔基、炔基烷基、環烷基、-CF3 ' -c(〇2)r6、芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、雜環基、經K 個R9基取代之烷基（該R9基可相同或不同且各R9基係獨立選擇）、經1-3個芳基取代之芳基或雜芳基所組成之組群，該基可相同或不同且獨立選自苯基、吡啶基、嘧吩基、呋喃基及1»塞吨基， Κ(〇Η2)πΓ-Ν^^Ν—R8 V^(CH2)m^^N-R8 j—芳基一fv/~Vl-R8 、一芳基O-y , 及 ί R3係選自由下列所組成之組群：Η、齒素、_NR5R6、 -C(0)NR5R6、烷基、块基、環烷基、芳基、芳基烷基、雜環基、雜環基烷基、雜芳基及雜芳基烷基、 87250.doc -11- 1329645

之雜環基團各可經或視情況可獨立經一或多個可相同或不同之基團取代，各基團獨立選自下列所組成之組群：齒素、垸基、芳基、環娱:基、CF3 ' CN、-〇CF3、、-OR5、-NR5R6、_(CR4R5)nNR5R6、_C(〇2)R5、<(0^5、 -C(0)NR5R6、-SR6、-S(02)R6、-S(02)NR5R6、-n(R5)S(〇2)R7 、-n(r5)c(o)r7 及-n(r5)c(o)nr5r6; R4為H、鹵基或烷基； R5為H或烷基； R6係選自由Η、烷基、芳基、芳基烷基、環烷基、雜環基、雜環基燒基、雜芳基及雜芳基烷基所組成之組群，其中該烷基、芳基、芳基烷基、環烷基、雜環基、雜環基烷基、雜芳基及雜芳基燒基可為未經取代或視情況經一或多個可相同或不同之基團取代，各基團獨立選自下列所组成之組群.卤素 '燒基、芳基、環燒基、雜環基燒基' CF3、〇cf3 、CN、-OR5、-NR5R1()、-n(R5)Boc、-(CR4R5)nOR5、-C(02)R5、 -C(0)R5、-C(0)NR5R10、_s〇3H、-SR丨0、-S(〇2)R7、-S(02)NR5R丨0 、-N(R5)S(〇2)R7、-N(R5)C(0)R7及-n(r5)c(o)nr5r10 ; 87250.doc •12· 1329645 R10係選自由Η、烷基、芳基、芳基烷基、環烷基、雜環基、雜環基烷基、雜芳基及雜芳基烷基所組成之組群，其中該燒基、芳基、芳基烷基、環烷基、雜環基、雜環基烷基、雜芳基及雜芳基烷基可為未經取代或視情況經一或多個可相同或不同之基團取代’各基團獨立選自下列所組成之組群：自素、烷基、芳基、環烷基、雜環基烷基、cF3、〇CF3、CN、-OR5、-NR4R5、-N(R5)Boc、-(CR4R5)n〇R5、-C(02)R5 、-C(0)NR4R5、-C(0)R5、-S03H、-SR5、-S(02)R7、-S(02)NR4R5 、-n(r5)s(o2)r7、-n(r5)c(o)r7及-n(r5)c(o)nr4r5 ; 或視情況（i)基圈_NR5R10中之R5及R10或（ii)基團_NR5R6中之R5及R6可一起形成環烷基或雜環基基團，該環烷基或雜環烷基基圏各為未經取代或視情況獨立經一或多個R9基取代； R係選自由燒基、環炫1基、芳基、雜芳基、芳基统基及雜芳基烷基所組成之組群，其中該烷基、環烷基、雜芳基烷基、芳基、雜芳基及芳基烷基可為未經取代或視情況獨立經一或多個可相同或不同之基團取代，各基團獨立選自下列所組成之組群：鹵素、烷基、芳基、環烷基、CF3、OCF3 、CN、-OR5、-NR5R1(>、-CH2OR5、-C(02)R5、-C(0)NR5R10 ' -C(0)R5' -SR10' -S(02)R10' -S(02)NR5R10' -N(R5)S(02)R10 、-N(R5)C(0)r1〇及-n(r5)c(o)nr5r10 ; R8係選自由 R6、-C(0)NR5R10、-S(02)NR5R10、-C(0)R7及 -s(o2)r7所組成之組群； R9係選自自素、CN、-NR5R1()、-C(02)R6、-C(0)NR5R10 、-OR6、-SR6、-S(02)R7、-S(02)NR5R10、-N(R5)S(〇2)R7、 -n(r5)c(o)r7及-n(r5)c(o)nr5r10 ; 87250.doc • 13- 1329645 m為0至4 ;及 • » η為1至4 ; 但條件為：（i)當R為未經取代之苯基時，R2不為烷基、 -C(〇2)R6、芳基或環烷基，及（ii)當r經羥基取代之苯基時， R2僅為自素》式III化合物可作為蛋白酶激酶抑制劑且可用以治療及預防增殖性疾病例如癌症、發炎及關節炎。其亦可用於治療神經退化疾病如阿茲海默氏（Alzheimer，s)疾病、心臟血管疾病、病毒疾病及真菌疾病。【實施方式】一具體例中，本發明揭示由結構式出所示之吡唑并喃咬化合物，或其醫藥可接受性鹽或溶劑化物，其中各種基團如前述定義。另一具體例中’ R為未經取代之芳基或經一或多個基團取代之芳基’該基團可相同或不同，各基團獨立選自由卣素、CN、-OR5、_s(〇2)nr5r6、_s〇3li、ch2〇R5、_s(〇2)R6、、-CF3、-0CF3及雜環基所組成之組群。另一具體例中’ R2為鹵素、CF3、CN、低碳燒基及環烷基β 另一具體例中，R3為Η、未經取代之芳基、未經取代之雜芳基、經一或多個選自鹵素、CN、-OR5、CF3、-〇CF3、低碳燒基及環燒基之所組成之組群之基團取代之芳基經一或多個選自鹵素、CN、-OR5、CF3、-OCF3、烷基及環烷基之所組成之組群之基團取代之雜芳基、及雜環基。另一具體例中，R4為Η或低碳烷基。另一具體例中，R5為Η或低碳烷基。 87250.doc -14- 1329645 另一具體例中，η為1或2。又一具體例中，R為未經取代之笨基。

又一具體例中，R為經一或多個選自F、cl、Br、CN、s〇3H 、-S(〇2)NR5R6、-S(〇2)CH3、-oh、CF3及嗎琳基所組成組群之取代基取代之苯基。又-具體例中，R2為F、α、Br、CF3、低碳燒基、環丙基、環丁基或環戊基。又一具體例中，R3為H、芳基（其中該芳基可為未經取代或視It況、，二或多個可相同或不同之基團取代，各基團獨上選自F C1、Br、CF3、低碳燒基、1f氧基及CN所組成之 •群）燒基#芳基、雜環基或經至少—個經基院基取代之雜環基。又一具體例中，& R為2-鼠苯基、2-氯苯基、2,3_二氯苯基、2-甲基苯基、2_甲氧基苯基、

〇

又一具體例中，R4為H。 I㈣例巾’ R5為Η。本發明化合物群示於表卜 87250.doc -15- 1329645 表1

87250.doc -16- 1329645

87250.doc -17· 1329645

HN

X^^V"S02CH3

87250.doc -18 - 1329645

87250.doc -19- 1329645

87250.doc •20 1329645

N…N

HO

HN

Br

N •N

OH n〜n

HN

Br

N N H〇、 so2ch3

HN

'N

XX

H D- S02CH3

〇H HN

N S〇2CH3

OH HN

Br

、N

S02CH3 H S〇2CH3

S02CH3 so2ch3 否則上述及整個揭示中所用之下列么叫卜列名3除非另有說明應了解為具有下列意義： ”病患"包含人類及動物。 "哺乳類"意指人類及其他哺乳類動物。 ••烷基"意指可為直鏈或分支且在鏈中包括約i至約2〇個碳原子之脂族烴基。較佳之烷基在鏈中含約丨至約12個碳原子。更佳之烷基在鏈中含約1至約6個碳原子。分支意指一或多個低碳烷基如甲基、乙基或丙基鍵結至直鏈烷基鏈上。"低碳烷基"意指鏈中含约1至約6個碳原子且可為直鏈或 87250.doc •21- 1329645 分支之基。經取代纟元基意指該貌基可.經一或多個可相同或不同之取代基取代’各取代基係獨立選自自基、烷基、芳 ― 基、環烷基、氰基、羧基、燒氧基 '烷硫基、胺基、_NH(烷基）、-NH(環烷基）、·Ν(烷基）2、羧基及_c(0)0_烷基所組成之组群。適宜燒基之非限制性實例包含甲基、乙基、正呙基、異丙基及第三丁基。 ~ •'炔基"意指含至少一個碳碳參鍵且可為直鏈或分支且在鏈中包括約2至約15個碳原子之脂族烴基。較佳之炔基在鏈中具有約2至約12個碳原子；且更好鏈中含約2至約4個碳原 φ 子。分支意指一或多個低碳烷基如甲基、乙基或丙基鍵結至直鏈炔基鏈上《"低碳炔基"意指鏈中約2至約6個碳原子且可為直鏈或分支之基。適宜炔基之非限制性實例包含乙炔基、丙炔基、2·丁炔基及3_甲基丁炔基。"經取代炔基" 意扣炔基可經一或多個可相同或不同之取代基取代，各取代基係獨立選自燒基、芳基及我基所組成之組群。芳基意扣包括約6至約14個碳原子、較好約6至約1〇個_ 碳原子之芳族單環或多環系統。該芳基可視情況經一或乡· 個可相同或不同且如本文定義之"環系統取代基"所取代。，，適宜芳基之非限制性實例包含苯基及萘ρ · @雜万基"意指包括約5至約14個環原子、較好約5至約1〇固承原=且其中一或多個環原予為非碳之元素例如氮、氧或Κ單獨或組合狀況之芳族單環或多環系統。較好雜芳含約5至約6個環原予。該"雜芳基"可視情況經-或多個可相同或不同且如本文定義之，，環系統取代基，，取代。雜芳 87250.doc •22· 1329645 基命名則之字首氮雜'氧雜或硫雜分別意指存在有至少一個氮、氧或硫原子作為環原子。雜芳基之氮原子可視情況氧化成對應之N-氧化物。適宜雜芳基之非限制性實例包含叶匕咬基、峨畊基、吱喃基、塞吩基、嘧咬基、異巧峻基、異4唑基、嘮唑基、嘍唑基、吡唑基、呋咕基、吡咯基、二唑基、1，2,4·噻二唑基、嗒畊基、喳噚啉基、酞畊基、咪唑并[l，2-a]吡啶基、咪唑并嘧唑基、苯并呋咕基、嘀哚基、氮雜吲哚基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、喳啉基、咪唑基、p塞吩并吡啶基、喳唑啉基、嘧吩并嘧啶基、吡咯 '二· 并毗啶基、咪唑并吡啶基、異喹啉基、苯并氮雜吲哚基、^ 1，2,4-三畊基、苯并噻唑基等。 "芳烷基"或"芳基烷基"意指芳基-烷基_，其中芳基及烷基如削述。幸父佳之芳燒基包括低碳垸基。適宜芳燒基之非限制實例包含+基、2-表乙基及萘基甲基。經由燒基與母基團鍵結。 "燒基芳基"意指垸基-芳基，其中燒基及芳基如前述。較 _ 佳之燒基芳基包括低碳燒基。適宜垸基芳基之非限制實例籲為甲苯基。經由芳基與母基圏鍵結。 π環烷基"意指包括約3至約10個碳原子，較好約5至約1〇 ·. 個碳原子之非芳族單-或多環系統。較佳之環烷基烷含有約 5至約7個J承原子。j暮燒基可視情況經一或多個"環系統取代基"取代’其可相同或不同且如前述定義。適宜單環環燒基之非限制實例包含環丙基、環戊基、環己基、環庚基等。適宜多環環烷基之非限制實例包含1-十氫萘基 '原冰片基 87250.doc -23· 1329645 、金剛烷基等。 W指氟、氯、漠或.較佳為氟、為氟及氯。衣系翁代基冑指附接至芳族或非芳族環系統之取代土，其可置換在例如環系統所提供之氮上。環系統取代基 =目同或不同’各獨立選自芳基、雜芳基、芳垸基、燒基雜芳貌基、燒基雜芳基、禮基、幾基燒基、燒氧基、芳乳基、芳減基、酿基、芳㈣m基、氛基 1基、垸氧基窥基、芳氧基窥基、芳燒氧基幾基、燒基㈣基、芳基韻基、雜芳基伽基、燒硫基、芳硫基、雜芳硫基、芳燒硫基、雜芳燒硫基、環燒基、雜環基、ΥιΥ2Ν_ 、ΥΑΝ-燒基·、Yiy2NC(〇)·及 YiY2NS〇2·，其中 I 及 A 可相同或不同且獨立選自氫、垸基、芳基及芳燒基所成之租群。 "雜環基”意指包括約3至約1〇個環原子，較好約5至約1〇個環原予之非芳族飽和單環或多環系統，纟中環系統中一或多個原子為碳以外之元素，例如氮、氧或硫（單獨或组合）袞系’”先中不存在相鄰氧及/或硫原子。較佳之雜環基含有約5至約6個環原子。雜環基名稱之字首氮雜、氧雜或硫雜分別意指存在有氮、氧或硫原子作為環原子。雜環基環中任何-NH可以經保護方式存在例如_N(B〇c)、_n(CBz)、基等；此經保護基圈亦視為本發明之一部分。該雜環基可視情況經一或多個"環系統取代基"取代，其可相同或不同且如本文定義。雜環基之氮或硫原子可視情況氧化成對麻 87250.doc •24· 1329645 之N-氧化物、s-氧化物或S，S-二氧咚物 '適宜單環雜環基環之非限制實例包含哌啶基、吡咯啶基、哌畊基、嗎啉基、硫嗎啉基、嘍唑啶基、1，4-二氧環己基、四氫呋喃基、四氫嘍吩基等。需注意本發明之含雜原子之環系統中，在相鄰於N、〇或 S之碳原子上無羥基且在相鄰其他雜原子之碳上無基。因此，例如，下列環中：

4 5 : Η -OH基不直接鍵結至標記為2及5之碳上》 ”炔基烷基"意指炔基-烷基-，其中炔基及烷基如前述。較佳之決基含有低碳块基及低碳燒基《經由燒基鍵結至母基图上。適宜炔基烷基之非限制實例包含炔丙基甲基。 "雜芳烷基”意指雜芳基_烷基-，其中該雜芳基及烷基如前述。較佳之雜芳烷基含有低碳燒基》適宜芳燒基之非限制二實例包含吡啶基甲基及喳啉_3_基甲基。經烷基鍵結至母基 _ 團上。 ”羥基烷基"意指HO-烷基-，其中烷基如前述。較佳之羥 ' 基烷基含低碳烷基。適宜羥基烷基之非限制實例包含羥基甲基及2·羥基乙基。 "醯基"意指H-C(O)-、烷基-C(O)-或環烷基_C(0)-基，其中各種基如前述。經由該羰基鍵結至母基團。較佳之醯基含低碳烷基。適宜醯基之非限制實例包含甲醯基、乙醯基及 87250.doc •25- 1329645 丙酿基。 < * "芳醯基”意指芳基-c(o)-基，其中芳基如前述。經由該羰基鍵結至母基團。適宜芳醯基之非限制實例包含苯甲醯基及1-莕甲醯基。 "烷氧基"意指烷基-0-基，其中烷基如前述。適宜烷氧基之非限制實例包含甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基及正丁氧基。係經該醚氧鍵結至母基團。 π芳氧基"意指芳基-0-基，其中芳基如前述。適宜芳氧基之非限制實例包含苯氧基及萘氧基。係經由該醚氧鍵結至母基團。 ^ π芳烷氧基”意指芳烷基-0-基，其中芳烷基如前述。適宜芳烷氧基之非限制實例包含芊氧基及1-或2-莕基甲氧基。係經由醚氧鍵結至母基團。 "烷硫基"意指烷基-S-基，其中烷基如前述。適宜烷硫基之非限制實例包含甲硫基及乙硫基。係經由該硫鍵結至母基團。 ”芳硫基”意指芳基-S-基，其中芳基如前述。適宜芳硫基之非限制實例包含苯硫基及莕硫基。係經由該硫鍵結至母基團。 "芳烷硫基"意指芳烷基-s_基，其中芳烷基如前述。適宜芳硫基之非限制實例為芊硫基。係經由該硫鍵結至母基團。 "烷氧基羰基"意指烷基-0-C0-基。適宜烷氧基羰基之非限制實例包含甲氧基羰基及乙氧基羰基。係經由該羰基鍵結至母基團。 87250.doc -26- 1329645 ”芳氧基羰基"意指芳基-o-c(o)-基。適宜芳氧基羰基之非限制實例包含苯氧基羰基及萘氧基羰基。係經由該羰基鍵結至母基團。 "芳烷氧基羰基"意指芳烷基-o-c(o)-基。適宜芳烷氧基羰基之非限制實例為苄氧基羰基。係經由該羰基鍵結至母基團。 "烷基磺醯基"意指烷基-s(o2)-基。較佳之基為其中烷基為低碳烷基者。係經由該磺醯基鍵結至母基團。

”芳基磺醯基”意指芳基-s(o2)-。係經由該磺醯基鍵結至母基團。、 "經取代”意指在所指定之原子上之一或多個氫經選自所示基置換，但在既有環境下不超過所指定原子之正常價數，且該取代產生穩定化合物。適宜取代基及/或變數之組合若可導致穩定化合物則均可行。”安定化合物"或"安定結構" 意指化合物充分穩定而可自反應混合物單離至可用程度之純度並調配成有效之治療劑。 '•視情況經取代"意指經特定基、殘基或基團之視情況取代。需了解說明書、反應圖、實例及表中之具未滿足價數之 --任何雜原子係假設具有氫原子以滿足該價數。當化合物中之官能基稱為"經保護”時，此意指該基為經改質態以在化合物進行反應時，排除在所保護位置上不需要之副反應。適宜保護基將可由熟知本技藝者所了解且可參考標準教科書如T.w. Greene等人，有機合成之保護基 87250.doc -27- 1329645 (1991)，Wiley,紐約。 — 當任何變數（如芳基、雜環基，R2等）在任何構成或式m -中出現一次以上時，其各次出現之定義在每一次其他出現時各有其獨立之定義。本文所用之’’組合物"欲包含包括特定量之特定成分之產品’以及直接或間接源自組合特定量之特定成分之任何產 *· 物。本發明化合物之前藥及溶劑化物亦包含於本文。本文所用前藥”代表為藥物前驅物且在對個體投藥後經代謝或化學過程歷經.化學轉換產生式m化合物或其鹽及/或溶劑化物之化合物。前藥之討論見於T Higuchi& v stella，A c s 研时會系列之作為新穎遞送系統之前藥（丨987) ^及藥物設 "十中之生物可逆載劑，（1987)，Edward B R〇che編輯，美國醫藥協會及派拉蒙出版社，兩者均併於本文供參考。 "溶劑化物"意指本發明化合物與一或多種溶劑分子之物理結合。此物理結合包含變化程度之離子及共價鍵結，包：_ 含氫鍵。某些例中，溶劑化物在例如一或多種溶劑分予併-鲁入結晶固體之晶格時，將可單離。，，溶劑化物”包含溶液相及可單離溶劑化物兩者。適宜溶劑化物之非限制實例包含· 乙醇鹽、甲醇鹽等。，•水合物"為其中溶劑分子為Η2〇之溶劑化物。 "有效量"或"治療有效量"意欲描述本發明化合物或組合物有效抑制CDK(s)且因此可產生所需治療、舒緩、抑制或預防效果之量。 87250.doc -28- 1329645 式m化合物.可形成鹽，其亦在本發明範園内。有關本文《式m化合㈣了解有關其鹽類，除非另有說明。本文所用之"鹽㈤"代表與無機及/或有機酸形成之酸性鹽以及與無機及/或有機驗形成线性鹽。此外，當式臟合物同時口有鹼性基團如（但不限於）吡啶或咪唑及酸性基團如（但不限於）羧酸時，可形成兩性離子（"内鹽且包含在本文所用之"鹽（類）"名詞中。以醫藥可接受性（亦即非毒性生理可接受）鹽較佳，但亦可使用其他鹽。式m化合物之鹽可例如藉式III化合物與某量之酸或鹼，例如等當量之酸或鹼，在介質如其中鹽可.沉澱之介質中或在水性介質中反應，接著凍乾而形成。例舉之酸加成鹽包含乙酸鹽、抗壞血酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦績酸鹽、反丁締二酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫蛾酸鹽、乳酸鹽、順丁晞二酸鹽、曱烷磺酸鹽、莕磺酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、磷酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、丁二 fee鹽、硫酸單 '酒石酸鹽、硫代氰酸鹽、甲苯續酸鹽等。· 此外’一般被視為適合自鹼性醫藥化合物形成醫藥可接受性鹽之酸討論於例如S. Berge等人，醫藥科學期刊（1977) 拉U1 1-19 ; P, Gould,國際醫藥期刊（1986) U 201-217 ; Anderson等人，醫藥化學實務（1996)，學院出版社，紐約；及橘皮書（食品藥物管理局，華盛頓D.C.之網站”該等揭示併入本文供參考。例舉之驗性鹽包含銨鹽、鹼金屬鹽如鈉、II及钾鹽、鹼 87250.doc • 29- 1329645 土金屬鹽如終及鎂鹽、與有機鹼（例如有機胺）如二環己基胺、第二丁基胺之鹽、及與胺基酸如精胺酸、離胺酸等之鹽 - 。鹼性含氮基可以例如低碳烷基齒（如甲基、乙基、及丁基 - 氯化物、溴化物及碘化物）、硫酸二烷酯（如硫酸二甲酯、二乙酯及二丁酯）、長鏈由化物（如癸基、月桂基、及硬脂基氯化物、溴化物及碘化物）、芳烷基齒化物（如苄基及苯乙基溴. 化物）等予以四級化。所有此酸鹽及鹼鹽欲在本發明範園内之醫藥可接受性鹽且所有酸及鹼鹽被視為均等於游離態之本發明目的之對應$ 化合物。二式III化合物及其鹽、溶劑化物及前藥可存在為其互變體二 (例如醯胺或亞胺基醚)。所有此互變態在本文中為本發明之一部分。

本化合物（包含該化合物之鹽、溶劑化物及前藥以及前藥之鹽及溶劑化物）之所有立體異構物（例如幾何異構物、光學異構物等）例如因各種取代基之不對稱碳而存在之異構物（包含對映異構物’其甚至可在無不對稱碳時亦存在）、旋轉異構物、拓樸異構物及非對映異構物均在本發明範圍内，如同位置異構物(如4-吡啶基及3·吡啶基)。本發明化合物之個別立體異構物可為例如實質上不含其他異構物或可與例如消旋異構物或與所有其他或其他所選擇之立體異構物混合 1974命名法所定義之S 前藥"等名詞欲同等地立體異構物、旋轉異。本發明之對掌中心可具有wIUPAC 或R組態。使用"鹽"、"溶劑化物，，、" 應用於本發明化合物之對晚異構物、 87250.doc -30· 1329645 構物、互變體·、位置異構物、消旋物或前藥之鹽、溶劑化物及前藥。〜本發明化合物具有藥理性質；尤其，式ΠΙ化合物可能為蛋白質激酶如週期素倚賴性激酶（CDKs)例如CDC2(CDK1) 、CDK2、CDK4、CDK5、CDK6 ' CDK7及 CDK8之抑制劑。式III之新穎化合物預期可用於治療增殖性疾病如癌症、自動免疫疾病、病毒及病、真菌疾病、神經學/神經退化失調、關節炎、發炎、抗·增殖（如眼睛視網膜病）、神經元、禿髮及心臟血管疾病。該等疾病及失調許多列於前面引述之 US 6,413,974 其揭示併於本文供參考。更詳言之’式III化合物可用於治療各種癌症，包含（但不限於）下列：癌瘤包含（但不限於）膀胱癌、乳癌、結腸癌、腎癌、肝癌、肺癌（包含小細胞肺癌）、食道癌、膽囊癌、衫P 巢癌、胰癌、胃癌、頸癌、甲狀腺癌、前列腺癌及皮膚癌（包含鱗狀細胞癌）；淋巴樣系之造血腫瘤，包含白血癌、急性淋巴白血癌、急性淋巴胚，胞白血癌、B-細胞淋巴癌、T-細胞淋巴癌、霍金氏（Hodgkins)淋巴癌、非霍金氏淋巴癌、髮細胞淋巴癌及布克特氏（Burkett’s)淋巴癌；骨髓系之造血腫瘤，包含急性及慢性骨髓性白血癌、脊髓發育不良徵候群及前骨髓細胞白血癌；間葉源腫瘤，包含纖維肉瘤及橫紋肌肉瘤；中樞及末梢神經系統之腫瘤，包含星細胞瘤、神經母細胞瘤、神經膠瘤及神經鞘瘤；及 87250.doc -31- 1329645 其他腫瘤—包含黑色瘤、精細胞瘤、畸胎瘤、骨肉瘤、外生性色素現瘤、keratoctanthoma、甲狀腺卵胞癌及卡波西氏（Kaposi's)肉瘤。由於CDKs—般在調節細胞增殖上之主要角色，因此抑制劑可作為可逆之制細胞劑，其可用於治療具有異常細胞增殖特徵之任何疾病，如良性前列腺肥大、家族性腺瘤息肉病、神經纖維瘤、動脈硬化、肺纖維化、關節炎、牛皮癖、絲球體腎炎、血管造型術或血管手術後之再阻塞、肥大瘢形成、發炎性腸疾病、移植排斥、内毒素休克及真菌感染。式III化合物亦可用於治療阿茲海默氏疾病，如最近發現 CDK5與腦脊髓（tau)蛋白質之磷醯化有關所教示（生物化學期刊（1995) 112, 741_749)。式III化合物可誘發或抑制細胞凋亡。細胞凋亡反應為各種人類疾病之異常現象。式m化合物作為細胞凋亡之調節劑將可用以治療癌症（包含但不限於前述類型者）、病毒感染 (包含但不限兮泡疹病毒、痘病毒、非洲淋巴細胞瘤病毒、 Sindbis病毒及腺病毒）、預防mv_感染之個體之AIDS發展、自動免疫疾病（包含但不限於全身性狼瘡、紅斑、自動免疫調節之絲球體腎炎、風濕性關節炎、牛皮癖、發炎性腸疾病及自動免疫糖尿病）、神經退化疾病（包含但不限於阿茲海默氏疾病、AIDS-相關癌呆、帕金森氏（parkinson，s)疾病、肌萎縮性侧索硬化、色素性視網膜癌、脊肌肉萎縮及小腦退化）、脊鶴發育不良徵候群、成血不全性貧血、與心肌梗 87250.doc •32- 1329645 塞有關之缺血性損傷及再灌注損傷、節律不整、動脈硬化、毒素誘發或·酒精相關性肝疾病、血液學疾病（包含但不限於慢性貧血及成血不全性貧血）、肌肉骨骼系統之退化疾病 (.包含但不限於骨質疏鬆症及關節炎）、阿斯匹靈敏感性鼻竇炎、囊腫纖維化、多發性硬化、腎疾病及癌疼痛。

式III化合物作為CDKs抑制劑可調節細胞RNA及DNA合成量。該等藥劑因此可用於治療病毒感染（包含但不限於 HIV、人類乳頭狀瘤病毒、泡疹病毒、痘病毒、非洲淋巴細胞瘤病毒、Sindbis病毒及腺病毒）。式III化合物=亦可用於化學預防癌症。化學預防定義為藉阻斷起始之突變事件或藉阻斷已被傷害之惡性瘤細胞前之發展而抑制侵入性癌發展或抑制腫瘤復發。式III化合物亦可用以抑制腫瘤血管形成及遷移。

式III化合物亦可作為其他蛋白質激酶如蛋白質激酶C、 her2、raf 1、MEK1、MAP 激自每、EGF 受體、PDGF 受體、IGF 受體、PI3激酶、weel激酶、Src、Abl之抑制劑且因此可有效治療與其他、蛋白質激酶有關之疾病。本發明另一目的係治療患有受CDKs調節之疾病或病況之哺乳類（如人類）之方法，係對該哺乳類投與治療有效量之至少一種式III化合物或該化合物之醫藥可接受性鹽或溶劑化物。式III化合物之較佳劑量約0.001至500毫克/公斤體重/天。特佳之劑量約0.01至25毫克/公斤體重/天之式III化合物或該化合物之醫藥可接受性鹽或溶劑化物。 87250.doc •33- 1329645 本發明化合物亦可與一或多種抗癌症療法如放射療法及 _ /或一或多種技癌劑組合（一起或依序投予）投藥，該抗癌劑：係選自制細胞劑、細胞毒素劑（例如但不限於DNA相互作用藥劑（如順氯胺銘或多索鹵賓（doxorubicin)));坦垸气 (taxanes)(如坦羅特（taxotere)、坦醇（taxol));拓樸異構酶II 抑制劑（如依托塞（etoposide));拓樸異構酶I抑制劑（如艾諾泰肯（irinotecan)(或CPT-11)、肯技斯塔（camptostar)或托譜泰肯（topotecan));小管相互作用劑（如帕克利坦（paclitaxel)、多塞坦（docetaxel)或艾譜塞酮（epothilone));荷爾蒙劑（如坦墨希分（tamoxifen));胸腺嘧喊脫氧核甞酸合成酶抑制劑（如 5 -氟尿p密咬）；抗-代謝劑（如胺甲噪呤（methoxtrexate));燒化劑（如泰默醯胺（temozolomide)(TEMODARTM 購自 Schering-Plough公司，Kenilworth，紐^睪西州）、環鱗酿胺）；法呢基蛋白質轉移酶抑制劑（如SARASARTM (4-[2-[4-[(llR)-3，10-二溴-8-氯-6，11-二氫-511-苯并[5,6]環庚并[1，2-15]吡啶-11-基] -1-哌啶基]-2-氧代乙基]-1-哌啶羧醯胺）或SCH 66336購自 ^ Schering-Plou琴h公司’ Kenilworth，紐澤西州）、替普法尼-鲁 (tipifarnib)(Zarnestra®或R115777，購自 Janssen醫藥公司）、 •士 L778，l23 (法呢基蛋白質轉移酶抑制劑，購自Merck公司， .. 白宮區，紐澤西州），BMS 214662 (法呢基蛋白質轉移酶抑制劑，購自 Bristol-Myers Squibb醫藥公司，Princeton，紐澤西州）、訊號傳導抑制劑（如愛利沙（Iressa)(購自Astra Zeneca 醫藥公司，英國）、塔希瓦（Tarceva) (EGFR激酶抑制劑）、對 EGFR之抗體（如C225)、GLEEVECTM(C-abl激酶抑制劑，購 87250.doc -34- 1329645 自Novartis醫藥公司，East Hanover，紐澤西州）、干擾素如干擾 _ (intron)(購自 Schering-Plough公司）、Peg-干擾酮（Peg-Intron)(購自Schering-Plough公司）、荷爾蒙治療組合、芳族酶組合、ara-C、阿霉素（adriamycin)、胞色垸（cytoxan)及葛希塔賓（gemcitabine)。

其他抗癌劑（亦稱為抗贅瘤劑），包含（但不限於）尿嘧啶氮芥、氮芥（Chlormethine)、艾法酿胺（Ifosfamide)、美法命 (Melphalan)、苯丁酸氮芥（Chlorambucil)、柏溴燒（Pipobroman) 、曲他胺（Triethylenemelamine)、三伸乙基硫代磷酿胺 (Triethylenethiophosphoramine)、馬利蘭（Busulfan)、卡默斯汀 (Carmustine)、羅姆斯:?丁（Lomustine)、斯特吐辛（Streptozocin) 、達卡貝ρ井（Dacarbazine)、氟索利唉（Floxuridine)、塞塔賓 (Cytarabine)、6-氫硫基嗓呤、6-硫代胍、磷酸氟達賓 (Fludarabine phosphate)、号利舶（oxaliplatin) ' 雷可瓦寧 (leucovorin)、哼利鉑（ELOXATIN™，購自 Sanofi_Synthelabo 醫藥公司，法國）、分妥斯達汁（Pentostatine)、長春驗、長？春新驗、長春典辛（Vindesine)、平陽黴素（Bleomycin)、更生黴素（Dactinomycin)、柔紅黴素（Daunorubicin)、多索鹵賓 (Doxorubicin)、艾比鹵賓（Epirubicin)、艾達鹵賓（Idarubicin) · · 、光輝黴素（Mithramycin)、去氧助間型徽素（Deoxycoformycin) 、絲裂黴素-C(Mitomycin-C)、L-門冬醯胺酶、替尼泊 (Teniposide) 17α-乙炔:基雌二醇、已烯雌酿、睪酮、潑尼松 (Prednisone)、氟甲睪 _ (Fluoxymesterone)、多莫斯坦 _ 丙酸鹽（Dromostanolone propionate)、睪内醋（Testolactone)、甲 87250.doc -35- 1329645 地孕嗣乙酸鹽（Megestrol acetate)、甲基潑尼松、甲基睪丸 — 酉同、強的松（Prednisolone)、鼻浪花（Triamcinolone)、氯晞雌.: 醚（Chlorotrianisene)、輕孕 _ (Hydroxyprogesterone)、胺鹵米特（Aminoglutethimide)、雌莫斯汀（Estramustine)、曱經孕 . _ 乙酸鹽（Medroxyprogesteroneacetate)、利普胺（Leuprolide) 、福特胺（Flutamide)、托瑞米分（Toremifene)、高瑞林 (goserelin)、順氯胺銘、竣胺舶（Carboplatin)、幾基尿素、胺沙林（Amsacrine)、普卡貝 _ (Procarbazine)、米多坦（Mitotane) 、米技山酮（Mitoxantrone)、左米梭（Levamisole)、納瓦賓、~ (Navelbene)、=胺斯塔咬（Anastrazole)、雷塔唆（Letrazole)、卡配晞塔賓（Capecitabine)、雷羅色分（Reloxafine)、多羅塞分（Droloxafine)或六甲蜜胺。若調配為固定劑量，此組合產物利用本文所述劑量範園内之本發明化合物及其他在其劑量範圍内之醫藥活性劑。例如，CDC2抑制劑歐樂姆辛（olomucine)已發現與已知之細胞毒素劑在誘發細胞凋亡中有相乘作用（細胞科學期刊？ (1995) 108, 207)。式III化合物與已知抗癌劑或細胞毒素劑 β 當不適合調配在一起時，可依序投藥。本發明不限於依序投藥；式III化合物可在已知抗癌劑或細胞毒素劑投藥前後 · · 投藥。例如，週期素倚賴性激酶抑制劑黃素比多醇 (flavopiridol)之細胞毒素活性受抗癌劑投藥順序之影響。

Cancer Reaearch，（1997) 11，3375。此技術為熟知本技藝者以及參予之醫師所悉知。據此，本發明一目的係包含組合物，其包括某量之至少 87250.doc -36- 1329645 一種式III化合物或其醫藥可接受性鹽或溶劑化物及某量之 -或多種抗癌療法及選自上述之抗癌劑，其中化合物/治療之量導致所需之治療效果。本發明化合物之醫藥性質可藉數種藥理分析確認。後述此例舉之藥理分析已利用本發明化合物及其鹽進行。本發明又有關醫藥組合物，其包括至少一種式ΙΠ化合物或該化合物之醫藥可接受性鹽或溶劑化物及至少一種醫藥可接受性載劑》

就自本發明所述化合物製備醫藥組合物而言，惰性之醫藥可接受性载'劑可為固體或液體。固體劑型包含粉劑、錠劑、可分散顆粒劑、膠囊、藥囊及栓劑。該粉劑及錠劑可包括約5至約95%活性成分。適宜之固體載劑為本技藝已知 ’例如碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石、糖或乳糖。錠劑、粉劑、藥囊及膠囊可使用為適合經口投藥之固體劑型。醫藥可接受性載劑及製造各種組合物之方法實例可見於Α.

Gennaro (編輯），雷明頓藥理科學第18版（199〇)，Mack出版公司，Easton,賓州。液態製劑包含溶液、懸浮液及乳液。實例可述及水或水_ ‘ 丙二醇溶液用以非經腸道注射或添加甜味劑及霧濁劑供口 . 服溶液、懸浮液及乳液。液態製劑亦可包含鼻内投藥之溶液。適用於吸入之氣溶膠製劑可包含溶液及粉劑固體，其可與醫藥可接受性載劑如惰性壓縮氣體如氮氣組合。亦包含固態製劑，其在欲使用前才轉化成液體劑型供口 87250.doc -37- 1329645 服或非經腸道投藥。此液態劑型包含溶液、懸浮液及乳液。本發明化合物亦可經皮遞送。該經皮組合物可製成乳霜、乳劑、氣溶膠及/或乳液且可包含於基質或儲存形式之經皮貼片中，如本領域就本目的所習知者。本發明化合物亦可經皮下遞送。較好該化合物口服投藥。較好，該醫藥組合物呈單位劑型。此劑型中，該製劑次分成含適當量活性成分之式一大小劑型’如達到所需目的之有效量。單位製劑中-活性化合物之量可自約1毫克至約1〇〇毫克，較好約1毫克至約50毫克，更好自約1毫克至約25毫克之間變化或調整，依據特定用途而定。所用確實劑量可視病患需求及欲治療病況之嚴重度而定。對特定狀況決定適當劑量療程在本領域熟知範圍内。為便利起見，總日劑量可分成數次且如所需在一天内分次投藥。本發明化合物及/或其醫藥可接受性鹽之投藥量及次數將可依據臨床醫師考慮如病患年齡、病況及大小以及欲治療病徵嚴重性♦因素而調整。對口服投藥之典型推薦曰劑量可自約1毫克/天至約500毫克/天間之範圍，較好1毫克/天至200¾克/天’分兩次至四次投藥。本發明另一目的係包括醫藥有效量之至少一種式HI化合物或該化合物之醫藥可接受性鹽或溶劑化物及醫藥可接受性載劑、載體或稀釋劑之套組。 87250.doc -38- 1329645 本發明另一目的係包括有效量之至少一種式πι化合物或 -該化合物之醫藥可接受性鹽或溶劑化物及至少一種上述抗 ; 癌療法及/或抗癌劑之套組，其中該兩種或多種成分之量導致所需治療效果。本文揭示之發明由下列製劑及實例加以舉例，但非用以限制本發明。其他機制路徑及類似結構將為本技藝者所悉知。當提出 NMR數據時，在 Varian VXR-200 (200 MHz,咕）、 _ 3 ;

Varian Gemini-300 (300 MHz)或 XL-400 (400 MHz)上獲得丨!1 光譜並以自Me4Si之下磁場ppm數表示，括旅内為質子數、二上多重峰及偶合常數（赫茲，Hz)。當報導LC/MS數據時，使用應用生物系統API· 100質譜儀及島津SCL-10A LC管柱進行分析：Altech鉑C18，3微米，33毫米X 7毫米ID;梯度流速 :0分鐘-10% CH3CN、5分鐘-95% CH3CN、7分鐘-95% CH3CN 、7.5分鐘· 1 〇% CHsCN、9分鐘·停止。提供駐留時間及所觀察之母離子。 Γ_ 下列溶劑及_試劑可藉其縮寫表示於括弧内：

薄層層析：TLC 二氯甲烷：CH2C12 · 乙酸乙酯：AcOEt或EtOAc

甲醇：MeOH

三氟乙酸：TFA

三乙胺：Et3N或TEA 丁氧基羰基：n-Boc或Boc 87250.doc •39· 1329645 核磁共振分光計：nmr 液體層析質·譜儀：lcms 高解析質譜儀：HRMS 當升：mL 耄莫耳：mmol 微升：A 1 克：g 毫克：mg 室溫或rt (周團）：約25。(：。實例通常本發明所述化合物可經下述一般路徑製備β以第= 丁醇鉀及甲酸乙酯處理起始物腈（反應圖1}獲得中間物烯醇 2 ’其以聯胺處理獲得所需3 -胺基p比吃。 i應圖1 R2

號數3之化合物與號數5之適當官能基化酮酯縮合獲得峨淀酮6，如反應圖3所示。此一般路徑中所用之酮基酯為市售或可如反應圖2所說明般製得。反應圖2

87250.doc -40- 1329645 號數9之氯牝物可藉P〇ci3處理吡啶酮8而製備。當尺2等於 Η，此位置之-取代對號數9之化合物而言，可能藉親電子性鹵化、酿化及各種其他親電子性芳族取代作用進行。 Ν7-胺基官能基之併入可經由號數9之化合物與適當胺反應而置換該氯化物，如反應圖3所示。反應圖3

10 當號數6之化合物中R3=OEt，則號數12之二氯化物易藉反應圖4所述般製備。7-氯化物之選擇性置換可獲得號數13之化合物，其可易於轉化成號數14之產物。反應圖4

87250.doc •41 - 1329645 號數15之化合物中，如反應圖5所示，磺酸之氯化作用獲 -得16 ’接著直接進行胺置換獲得號數17之化合物。反應圖5

依循德國專利DE 19834047 A1第19頁之程序。於KOtBu ? (6.17克’ 0.0—5》莫耳）之無水THF(40毫升）溶液中，滴加環丙基乙腈（2.0克’ 0.025莫耳）及甲酸乙酯（4.07克，0.055莫耳）之無水THF (4毫升）溶液。立即形成沉澱。此混合物攪拌丨2 „ 小時。在真空下濃縮且殘留物與Et2〇 (5〇毫升）攪拌。傾析且所得殘留物以EhO (2 X 50毫升）洗滌且真空自殘留物移除Ε^Ο。殘留物落於冷卻之ha (2〇毫升）中並以12 n HC1調整至pH 4-5。混合物以CH2C12(2 χ 5〇毫升）萃取。合併有機層，以MgSCU脫水並真空濃縮獲得褐色液體之醛。 87250.doc -42· 1329645 步騾B : - -

V : Η 製備例1步驟八之產物（2.12克，〇.〇195莫耳）、1^川112.1120 (1.95克，0.039莫耳）及1.8克（0.029莫耳）冰醋酸（1.8克，0.029 ' 莫耳）溶於EtOH (10毫升）中。回流6小時並真空濃縮。殘留物於CH2Cl2(l5〇毫升）中攪拌且pH以IN NaOH調整至9。有機層以食鹽水洗條，以MgS〇4脫水並真空濃縮，獲得堪質橘色固體產物=,_。 .IT 二製備例基本上同製備例丨所述程序’僅以表2攔2所示之腈替代，獲得表2攔3之化合物：

87250.doc -43· 1329645 此反應如（Κ.0. Olsen，有機化學期刊（1987) 52, 4531-4536)所述嵌~進行。因此，於二異丙基醯胺鋰之THF攪拌溶液中在-65°C至-70°C滴加剛蒸餾之乙酸乙酯。所得溶液攪拌 30分鐘且以THF溶液添加醯氣。反應混合物在-65°C至-70°C 攪拌30分鐘接著藉添加1 N HC1溶液終止。所得兩相混合物溫至周圍溫度。所得混合物以EtOAc (100毫升）稀釋且收集有機層。水層以EtOAc (100毫升）萃取。合併有機層，以食鹽水洗滌，脫水（Na2S04)並真空濃縮，獲得粗製/3 -酮基酯，其用於隨後縮合反應。製備例5-10 基本上同製備例4所述程序，僅以表3欄2所示之醯氯替代，獲得表3欄3之0 -酮基酯：表3 製備例欄2 欄3 數據 5 〇 II ? ϋ 產率="% rj^p^^OEt LCMS: MH+=223 ^^OMe 6 〇 II Η ί? 產率=99% LCMS: MH+=253 MeO人〆 OMe OMe -44· 87250.doc 1329645 7 9^' CI Cl 產率=8〇% LCMS: MH+ = 261 8 c/ci cr^ 產率=93% MH+= 199 9 產率=93% 10 i A A 產奉=100% 製備例11 於酸之THF溶液中添加Et3N，接著在-20至-30°C添加氣甲酸異丁酯。混合物在-20至-30°C攪拌30分鐘後，在氬氣中濾除三乙胺鹽酸鹽，且濾液添加至-65至-70°C之LDA-EtOAc 反應混合物（如方法A所述般製備）中。添加IN HC1後，接著例行操作反應混合物並蒸發溶劑，單離粗製之沒-酮基酯。該粗製物質用於隨後縮合反應。製備例12-13.12 基本上同製備例11所述相同條件，僅以表4欄2所示之致酸替代，獲得表4襴3之化合物：

ο R^OH

OEt 87250.doc •45- 表4 製備例 ' 'M2 欄3 數棱 12 〇YH cm0Et 產率= 99% MH+ = 213 13 όχ 0cjrEt- 產率=70% MH+ = 275 13.10 c/c, ο ο 產率=99 ΜΗ" =199 13.11 〇 ‘〇^α Ο ο CbzN^J 產率=99 ΜΗ+ = 334 13.12 〇 CbzN^J^CI Ο Ο 產卑=99 MH+ = 334 製備例14

1329645 3-胺基吡唑（2.0克，24.07毫莫耳）及苯曱醯基乙酸乙酯 (4.58毫升，1.1當量）之AcOH (15毫升）溶液回流加熱3小時。反應混合物冷卻至室溫並真空濃縮。所得固體以EtOAc稀釋並過濾獲得白色固體（2.04克，40%產率）。製備例15-32.15 基本上同製備例14所述相同程序，僅以表5欄2所示之胺基吡唑及表5欄3所示之酯替代，獲得表5欄4之化合物： 87250.doc -46- 1329645 表5 -製備例襴2 欄3 —襴4 . 15 nh2 Η 〇 Ο 八 CH3 〇 16 ΝΗρ Η ο 17 ΝΗ〇 Η 0 ο (Qj^^〇^ch3 cf3 cf3 〇 18 ΝΗο Η 0 ο 八 ch3 ^χ> ο 19 νη2 ri ν- Η ο ο 八 CH3 Χό 〇 20 VH2 Η ο ο 八 ch3 °χτί 0 47- 87250.doc 1329645

87250.doc ·48· 1329645

87250.doc -49· 1329645

苯甲醯基乙酸乙酯（1.76毫升，^當量）及3_胺基·4_氰基吡唑（1.0克，9.25毫莫耳）之Ac〇H (5 〇毫升）(1〇毫升）溶液回流加熱72小時。所得溶液冷卻至室溫，真空濃縮，並以EtOAc稀釋。過滤所得沉澱，以Et〇Ad*滌且真空乾燥 (0.47克，21%產率）。製備例33.10 :

依循US專利3,907,799之程序。鈉（2.3克，2當量）逐次添加^ 至EtOH (150毫升）中。當鈉芫全溶解時，添加3_胺基峨峻（42 克，0.05莫耳）及丙二酸二乙酯（87克，hl當量）且所得溶液加熱回流< 3小時。所得懸浮液冷卻至室溫並過濾。濾餅以 EtOH (100¾升）洗滌並溶於水（25〇毫升）中。所得溶液於冰浴中冷卻且pH以丨辰HC1調整至1 -2。過遽所得懸浮液，並以水（1〇〇毫升）洗滌及真空乾燥獲得白色固體（4 75克，63%產 87250.doc •50- 丄329645 率）。 - 製備例、基本上同製備例33輯述相同程序，冑以表I·所示〈化合物替代’獲得表5.1欄3之化合物：

0 CI 製備例14所製備之化合物（ι·〇克，4.73毫莫耳）之p〇cl3(5 毫升）及峨啶（0.25毫升）溶液在室溫攪拌3天《所得衆液以扮2〇稀釋’過滤且固體殘留物以Et2〇洗條。合併之Et2〇洗液冷卻至0°C並以冰處理。當發生激烈反應，所得混合物以h2〇稀釋，分離且水層以Ε^Ο萃取。合併之有機相以h2〇及飽和 NaCl洗滌’以Na2S〇4脫水’過遽及濃縮’獲得淡黃色固體 (0.86克，79°/。產率）。LCMS: MH+=230。製備例35-H 14 : 87250.doc •51 - 1329645 基本上同製備例34所述相同程序，僅以表6襴2所示之化合物替代，獲得表6欄3之化合物：表6

87250.doc -52- 1329645

87250.doc 53- 1329645 50 51 52 53 53.10 53.11 53.12 53.13 53.14

產率= 88% LCMS: ΜΗ" = 314 產率=43% LCMS: MH+=223 產率=30% LCMS: MH+=295 產率=98% LCMS: MH+=244 產率=96 MH+ =371 I軍 MH+ =371 產率= quant. MH+ =236

· 87250.doc -54- 1329645 製備例53.15 -

POCI3 (62毫升）在氮氣下冷卻至5它及添加二甲基苯胺 (11.4克，2.8當量）及製備例33.10製備之化合物（4/75克， 0_032莫耳）。反應混合物溫至60°C並攪拌隔夜。反應混合物冷卻至30°C並減壓蒸除p〇Cb。殘留物溶於CH2C12 (300毫升）並倒入冰上。..撥拌15分鐘後，混合物之pH以固體NaHC03 調整至7-8。分.離層且有機層以h20 (3 X 200毫升）洗滌，以 MgS〇4脫水’過遽並濃縮粗產物藉快速層析純化使用5〇: 5〇 CH2C12:己溶液作為溶離液，溶離該二甲基苯胺。溶離液接著改變成75:25 CH2C12:己烷以溶離所需產物（4.58克，77% 產率）。MS: MH+=188。製備例 53.16-53.17 基本上同製備例53.15所述相同程序，僅以表6.10襴2所示之化合物替代，’獲得表6 1〇欄3之化合物：表 6.10

87250.doc -55- 1329645 製備例54 -

製備例34所製備之化合物（0.10克，0.435毫莫耳）之CH3CN (3毫升）溶液以NBS (0.085克，1.1當量）處理。反應混合物在室溫攪拌1小時且減壓濃縮。粗產物藉快速層析純化使用 20% EtOAc之己烷溶液作為溶離液（0.13克，100%產率）。 LCMS: MH+=3_08。製備例55-67.1-5 基本上同製備例54所述相同程序，僅以表7欄2所示之化合物替代，獲得表7欄3之化合物：表7 製備例襴2 攔3 數據 55 ' Cl Cl LCMS: MH+=326 56 Cl Cl 9υμγ Cl Cl LCMS: MH+=342 57 cf3 Cl cf3 Cl LCMS: MH+=376 87250.doc • 56· 1329645

87250.doc 57- 1329645

87250.doc 58- 1329645 製備例68 : -

製備例35所製備之化合物（0.3克，1.2毫莫耳）之CH3CN · (15毫升）溶液以NCS (0.18克，1·1當量）處理且所得溶液加熱 -回流4小時。添加其他NCS (0.032克，0.2當量）且所得溶液回流攪拌隔夜。反應混合物冷卻至室溫，真空濃縮且殘留物藉快速層析使用20% EtAc之己烷溶液作為溶離液純化 (0.28克，83%產率）。LCMS: MH+=282。二. 製備例69 : 基本上同製備例68所述相同程序，僅以表8欄2所示之化合物替代，獲得表8欄3之化合物：表8 f備例欄2 欄3 數據 69 Cl 八八 Μ / Yield = 82% υ LCMS: ΜΗ、 υ Ύ Cl Cl 286 實例1

87250.doc -59· 1329645 製備例56之產物（0.12克，0.35毫莫耳）及4-甲基磺醯基苯胺鹽酸鹽（0.065克，0.9當量）及iPr2NEt (1.0毫升）加熱至i〇〇°C 歷時48小時。反應混合物冷卻至室溫並藉製備性薄層層析使用含5% (10% NH4OH之MeOH)溶液之CH2C12作為溶離液 (0.033克，23%產率）》LCMS: MH+=477。Mp=180-182°C。實例 2-21.1 5 : 基本上同實例1所述相同程序，僅以表9欄2所示之化合物及表9欄3所示之胺替代，製備表9攔4之化合物：表9

實例欄2 欄3- 欄4 數據 2 9υμγ Cl Cl Η2ΝΌ Cl ΗΝΌ lcms： MH+= 346； mp= 58- 65°C 3 V Cl Η2ΝΌ 9ym' HNO LCMS: MH*= 339; mp= 112- 116°C 4 Cl H2Nu，3 lcms： MH*= 417； mp= 232- 235°C 87250.doc •60- 1329645

5 Cl Η2Νχΐ 、^"so2ch3 LCMS: MH"= 461; mp= 117- 118°C 6 cf3 Cl H2l cf3 HNxi so2ch3 LCMS: MH+= 511; mp= 210- 212°C 7 Cl H2NXX so2ch3 l3 LCMS: MH+= 409; mp= 214- 215°C 8 Cl Η2ΝΌ HNO LCMS: MH+= 331; mp= 166- 168°C 9 *Yn-n Cl Η2ΝΌ HNO LCMS: MH+= 345; mp= 144°C -61 - 87250.doc 1329645 10 Cl Hl3 l3 LCMS: MH+= 405; mp= 210- 211°C 11 Cl H2NU_ HNxx_ LCMS: MH+= 407; mp= 213- 216°C 12 Cl Hl: HNXX \^^so2ch3 LCMS: MH+= 477; mp= 249- 253°C 13 Cl、Ν、Ν》 Cl H2Nxx， O〇〇,XX^r Cl W/N-n HNU0 [ 產率= 72% LCMS: MH+ = 518. 14 Am 0CH3、n、n’ Cl H2Np Cl OCHakyN^f^ HNxp Cl 產率= 75% LCMS: MH+ = 429. -62- 87250.doc 1329645

87250.doc 63- 1329645 19 ci Cl H2NU \)CH3 20 Cl H2NXX \""^02CH3 °χΐί HNXX ^^so2ch3 LCMS: MH+= 393; mp= 192- 194°C 21 Cl h13 l3 LCMS: M2H+= 445; mp= 202- 204°C 21. 10 〇arMr Cl H2l ΗΝχχ 21. 11 Cl H2Nti \^^S02CH3 HlH， 21. 12 CbO Br CI H2NX5l ^^so2ch3 Gbz、n ΒΓ HNxx_ -64· 87250.doc

1329645 所選擇實例之額外數據如下：實例 13: 4 NMR (CDC13) δ 8.21 (s，1H)，8.07 (s，1H)， 7.66-7.64 (m, 2H), 7.60-7.39 (m, 3H), 7.10-7.07 (m, 2H), 6.56 (s, 1H), 3.99 (dd, J=5.1, 4.5 Hz, 4H), 3.31 (dd, J=5.1, 4.5 Hz, 4H)。實例 14: 4 NMR (CDC13) δ 8.16 (s，1H)，8.14 (d，J=2.1 Hz, 1H), 7.63 (m, 1H), 7.5-7.45 (m, 2H), 7.23-7.09 (m, 3H), 6.84-6.76 (m，2H)，6.64 (m，1H), 4.03 (s，3H)。實例 15: 4 NMR (CDC13) δ 8.32 (s，1H)，7.51 (d，1H)， 7.43-7.33 (m，4H)，6.78 (d，2H)，6.72 (t，1H)，2.52 (s，3H)。實例 16: 4 NMR (CD3OD) δ 8·31 (s, 1H)，7.75-7.69 (m，2H), 7.64-7.60 (m，2H)，7.56-7.37 (m，2H), 6.-37 (s，1H), 4.79 (s，2H)。 87250,doc -65- 1329645 實例22

無水DMF (80毫升）在N2下添加至胺磺酸（3.10克，17.9毫莫耳）及NaH(60%之礦油，1.43克，35.8毫莫耳）之混合物中，混合物在25°C攪拌2小時，接著添加製備例54之產物（5.00 克，16.2毫莫耳）。混合物在25°C攪拌24小時，接著蒸發溶劑且殘留物藉矽膠層析純化使用EtOAc:MeOH (4:1)作為溶離液，獲得淡黃色固體（2.32克，32%產率）。LCMS: MH+=447, ιηρ>250。。。眚例23-26 基本上同實例22所述相同程序’僅以表10欄2所示之化合物及表10欄3所示之胺替代，製備表10欄4之化合物：表10

實例欄2 欄3 欄4 數據 24 CI h2n^^so3h HN^w-so3H U LCMS: M2H+= 445; mp- 206- 208°C 25 CI 1 9υμγ F Yn-n HN^as〇3H LCMS: M2H+= 465; mp >250° C 87250.doc •66- 1329645

實例22之產物（44毫克’ 0.10毫莫耳）及PCi5 (21毫克，〇·ΐ〇毫莫耳）於無水丨，2-二氯乙烷中在Ν2下回流攪拌2.5小時。混合物冷卻至25°C，添加丙胺（0.20毫升，2.4毫莫耳）且混合物在25°C攪拌2小時β接著蒸發溶劑且殘留物藉矽膠層析純化使用CH2C12: EtOAe (2G:1)作為溶離液，獲得淡黃色固體 (26毫克 54/。產率）。LCMS:臟，卿=2〇12〇3<^。實例28-67 基本上同實例27所述相同物及表11欄3所示之胺替代程序，僅以表11欄2所示之化合製備表11襴4之化合物： 87250.doc -67- 1329645 袅11

實例攔2 欄3 欄4 數據 28 I Η2Ν^ζ .ΗΝ1^ LCMS: Μ2Η+= 474; mp= 101-104°C 29 ΗΝχχΗ I ΗΝ\ ΗΝχχ 人〇-〇 LCMS: Μ2Η、 472; mp= 237-239°C 30 ΟΗ ηνχχλ^〇η ο,χο LCMS: M+= 488; mp= 175-177°C 31 ΗΝχχ:Η νη4οη ΗΝχν LCMS: MH"= 444; mp= 206-208°C 32 ν η2ν、 ηνΧΧλ ό'、'ο LCMS: MH+= 458; mp= 231-233°C 68- 87250.doc 1329645

33 ΗΝχι so3h H2N^^nhboc ΗΝγ^1 H ^//s^n^^nhboc LCMS: MHf= 589; mp= 195-197°C 34 nh2 HNXXv〒Br A TJ LCMS: MH*= 717; 35 h2n^J〇 °X4 HNXXsj〇 d'、b LCMS: MH.= 536; mp= 216-218°C 36 h2N^-^-〇h LCMS: M+= 502; mp= 165-168°C 37 H2NO °X4 LCMS: MH*= 522; mp= 147-150°C 69- 87250.doc 1329645

38 °χΰΓ ΗΝχχ3Η Η2Νΰ LCMS: M2H+= 523; mp= 192-195°C 39 η2ν^\ ^^n、boc 〜χχ。。 LCMS: MH+= 629; mp= 127-129°C 40 HN^t> LCMS: MH*= 514; mp >200°C (dec.) 41 V ΗΝχχΗ Η2Νγ^〇Η Vr ^<r〇H LCMS: M2H+= 504; mp >200°C (dec.) 42 ΗΝη_ η2ν^\〇^ hn、^ LCMS: M2H+= 504; mp= 172-173°C -70- 87250.doc 1329645

43 η2ν^ν/ 1 LCMS: MH*= 517; mp= 165-167°C 44 Η2Ν^ζ) o'b LCMS: M2H*= 537; mp= 101-103°C 45 V H2N^Oj V HNiXsja ό-b LCMS: M2H"= .537; mp= 1 lO-II^C 46 ^ . η2ν、/^ν，^ Ο〇 ηνύ^ η LCMS: M2H、 559; mp= 47 广ΟΗ ΗΝ—ΟΗ ΗΝΆ r〇H LCMS: M，= 532; mp= 90-92°C •71- 87250.doc

48 H2N^〇ii\ w力、 LCMS: MH+= 559; mp= 163-165°C 49 HNU ^^"so3h -s〇3h ΗΝγ^ ^O^s^n-^so3h LCMS: M+= 552; mp= 206-208°C 50 h2n^\〇/ HN^ 、OH LCMS: MH"= 520; mp= 122-124°C 51 H2N、产 OH k〇H HNUS：^〇H d，'b \h LCMS: M+= 532; mp= 98-100°C 52 °x^ o h2n^L〇/ HN^ LCMS: M2H+= 518; mp= 182-184°C 87250.doc 72- 1329645 53 Η2Νχ^/Ν^ LCMS; MH+= 531; mp= 78-80°C 54 HN^ kX HNtXCr Λ LCMS: MH*= 529; mp= 228-230°C 55 Η2Νγ-〇Η σ HNY^i H LCMS: MH"= 580; mp= 108-110°C 56 H2N—OH o" °X^r hn^〇h °'、。A LCMS: MH*= 580; mp= 102-105°C 57 H2N%0 °X4 LCMS: M2H*= 528; mp= •73- 87250.doc 1329645 58 H2NvO HN、^^ 〆 cTb ) LCMS: M2H+= 557 m.p.= 204-207 59 Υη h ph3 LCMS: M2H+= 557 60 °X4 ' V) h2n^^nV v 二D LCMS: M2H+= 571 m.p.= 114 -117 61 V n2N.^^rCN °^r HNV/^ ^t 一:N LCMS: M2H+= 554 m.p = 127-130 62 1 N-BOC ^b'〇-BOC LCMS: M2H+=613 m.p = 145 -149 63 Hl Η2ΝνΛ 1 N-BOC LCMS: M2H+=613 m.p.= 137 -140 87250.doc •74- 1329645

HrV^ ^^s；n^n_b〇c 64 HNxp S034 - H2N'^oh HNtp 〇，、N 〜0H U H LCMS: M2H+= 490; mp= 87-90°C 65 so3h .人H V HNlp 〇?、s丫 LCMS: M2hf= 504; mp= 115-120°C 66 HNU_ .--OH PvMr F k/N'N HNn H ^SbN—OH LCMS: M2H争= 508; mp= 67 iT^i 广 h2n^n/ LCMS: MH*= 1 101°C xp *Yn'n 1 ηνίΡι h // Λ t O O 1

87250.doc 75- 1329645 實例68

三氟乙酸（2.0毫升）在0°C添加至製備例33之產物（200毫克，0.34毫莫耳）之無水CH2C12溶液中。混合物在0°C攪拌5 分鐘，接著在25°C攪拌90分鐘，接著倒入固體Na2C03(10.0 克）上。添加H20 (150毫升）且混合物以CH2C12 (3 X 25毫升）萃取。萃取液以Na2S04脫水，過遽且蒸發溶劑。殘留物藉矽膠層析純化使用（：112(：12:]^6〇11:濃]^114〇11(10:1:0.1)作為溶離液，獲得淡黃色固體（100毫克，60%產率）。LCMS: MH+= 487，mp=110-112〇C。實例69 :

實例21.14所製備之化合物（0.10克，0.25毫莫耳）及脯胺酸醇（0.12毫升，5當量）及iPr2NEt(0.22毫升，5當量）溶液回流加熱 24 小時。（產率：0.09 克，80%)。MS: MH+=466， mp=177-180°C。實例70-78 : 87250.doc -76- 1329645 基本上同實例69所述相同程序，僅以表12欄2所示之化合物替代，製備表12欄3之化合物： A 12 實例欄2 欄3 70 σ切 71 ΗΟ-^0 Η γΝχΝγζ V、N 72 \〇H 、〇Η V、n HNu_ 73 ΛγΝΗ2 ΌΗ I Η Br 74 α ΗΟ> h〇9\4 hnuS02CH3 87250.doc -77-

1329645 於實例21.12製備之化合物之無水乙腈溶液中在周圍溫度滴加TMSI (4當量）。10分鐘後真空移除乙腈。所得黃色泡沫以2NHC1溶液（7毫升）處理接著立即以Et20(5X)洗滌。水相之pH以50% NaOH (aq)調整至10且產物藉NaCl(s)使溶液 87250.doc -78- 1329645 飽和接著以C-H2C12 (5X)萃取而單離，獲得所需產物。實例80 : - 基本上同實例79所述相同程序，僅以表13欄2所示之化合物替代，製備表13欄3之化合物：表13

分析: 样病毒架構：週期素E藉PCR選殖入PVL1393 (Pharmingen, La Jolla,加州），而在胺基端添加5個組胺殘基而在鎳樹脂上純化。表現之蛋白質約為45kDa。CDK2藉PCR選殖入 pVLl393，而在羧基端添加凝血素抗原決定基tag (YDVPDYAS)。表現之蛋白質大小約為34kDa。

I 酵素製造：表現週期素E及CDK2之重組桿病毒以相等多 — . 價感染力（MOI=5)共同感染至SF9細胞中48小時。藉1〇〇〇 V RPM離心10小時收取細胞，接著粒片在冰上於5倍粒片體積

之含 50 mM Tris pH 8.0、150 mM NaCn、1% NP40、1 mM DTT 及蛋白酶抑制劑（Roche診斷GmbH，Mannheim，德國）之溶胞緩衝液中溶胞30分鍾。溶胞物在15000 RP1V[旋轉l〇分鐘且保留上澄液。5毫升鎳珠粒（對一升SF9細胞而言）以溶胞緩衝液（Qiagen GmbH，德國）洗滌3次。於桿病毒上澄液中添加咪 87250.doc • 79- 峻至終濃度20 mM，接著以鎳珠粒在4°C培育45分鐘。蛋白質以含250 mM咪峻之溶胞緩衝液溶洗。溶離液於2升含50 mM Tris pH 8.0、1 mM DTT、10 mM MgCl2、1〇〇 uM原釩酸鈉及20%甘油脂激酶緩衝液終滲析隔夜。酵素整份在-70°C 儲存。體外激酶分析：於低蛋白質結合之96-洞盤（Corning公司，Corning，紐約）中進行週期素E/CDK2激酶分析》酵素於含 50 mM Tris pH 8.0、10 mM MgCl2、1 mM DTT及 0.1 mM 原釩酸鈉之激酶緩衝液中稀釋至終濃度50微克/毫升。該等反應中所用之受質為衍生自Histon H1 (購自Amersham，英國）之生物素化之肽。該受質在冰上解凍並於激酶緩衝液中稀釋至2 μΜ。化合物於10% DMSO中稀釋至所需濃度。對各激酶反應而言，使20微升50微克/毫升之酵素溶液（1微克酵素）及20微升2 μΜ受質溶液混合，接著於各洞中與10微升稀釋化合物混合供測試。激酶反應藉添加50微升2 μΜ ΑΤΡ 及0.1 μΟί之33Ρ-ΑΤΡ (購自Amersham，英國）起始。反應在室溫進行1小時。反應藉添加200微升含0.1% Triton X-100 、1 mM ATP、，5 mM EDTA及5毫克/毫升鏈黴肽塗佈之SPA 珠粒（購自Amersham，英國）之終止緩衝液停止15分鐘。該 SPA珠粒接著使用Filtermate環球收取機（Packard/Perkin Elmer生命科學公司）捕捉至96-洞GF/B過濾盤（Packard/ Perkin Elmer生命科學公司）上。藉2 M NaCl洗滌該珠粒2次接著以含1%磷酸之2 M NaCl洗滌2次而消除非專一訊號。接著使用TopCount 96洞液體閃爍計數器（購自Packard/Perkin Elmer生命科學公司）測量放射活性訊號。 87250.doc -80- 1329645 自所產生之抑制數據（各重複2次）自8個連續稀釋抑制化合物之點繪製劑量-相關曲線。化合物濃度相對％激酶活性（藉經處理樣品之CPM除以未經處理樣品之CpM 所計算）作圖。為了產生ICw值，接著將劑量相關曲線套入標準S型曲線並藉非線性回歸分析衍生％。值。對本發明有些化合物所得之IC5G值示於下表14。

MJA

-______化合物 ci ΗΝΌ 實例 2 ICs〇 (μΜ) 0.51 Cl p「 1 0.4 1.4 3 0.042 ΗΌ ------—-- . - --- 22 0.082 87250.doc 1329645 Λ 28 0.080 HN^Pi H 30 0.029 HNuc 31 0.045 32 0.057 38 0.040 HNY^ 1¾ 一 42 0.070

87250.doc -82- 43 0.034 °x^ ηνίπ ^οη 47 0.034 Λ 48 0.025 50 0.030 〜一 53 0.011 1329645 如上述分析值所證明，本發明化合物展現優異之CDK抑制性質。雖然本發明已藉上述特定具體例加以描述，但對熟知本技藝者而言之許多選擇、改質及其他變化將為易於推知者。所有該等選擇、改質及其他變化欲落入本發明之精神及範圍内。 87250.doc •83-

Claims

1329645 第092124336號專利申請案 —一·——一一中文申請專利範圍替換本年8月公告太: 拾、申請專利範園：匕一？沐/月/曰修正補充 1. 種下列結構式所示之化合物，

式III 或該化合物之醫藥可接受性鹽，其中： ® R為未經取代之芳基或經一或多個基團取代之芳基，該基團可相同或不同，各基團獨立選自由南素、CN、_〇R5 、SR5、-CH2OR5、-C(0)R5、-S03H、-S(〇2)r6、_s(〇2)nr5r6 、-NR5R6、-C(〇)NR5R6、-CF3、七CF3及雜環基所組成之組群； R係選自由函素、C1—6 k基及C3 _ 1 〇環燒基所組成之組群； r3係選自由下列所組成之組群：Η、函素、_NR5R6、鲁 -C(〇)NR5R6、Ci-6烷基、C2-6炔基、Cy。環烷基、芳基、芳基烷基、雜環基、雜芳基及雜芳基烷基、

其中R3之該Cm烷基、環烷基、芳基 '芳基Cw燒基 87250-960801.doc 、雜環基、雜芳基及雜芳基Cw烷基及對上述R3剛顯示之結構之雜環基图各可經或視情況可獨立經一或多個可相同或不同之基團取代，各基團獨立選自下列所組成之組群：鹵素、CU6烷基、芳基、（：3.10環烷基、CF3、CN 、-OCF3、-(CR4R5)n〇R5、-OR5、-NR5R6、-(CR4R5)nNR5R6 、-C(02)R5、-C(0)R5、-C(0)NR5R6、-SR6、-S(02)R6、 -s(〇2)nr5r6 、_n(r5)s(o2)r7 、 _N(R5)C(0)R7 及 -N(R5)C(0)NR5R6 ； R4為H、鹵基或(^_6燒基； R5為H或Cw烷基； R係選自由H、Ci_6燒基、芳基、芳基c1-6燒基、C3.i〇環燒基、雜環基、雜芳基及雜芳基Cl_6烷基所組成之組群，其中該匕.6烷基、芳基、芳基烷基、c3_1G環烷基、雜環基、雜芳基及雜芳基Cl.6烷基可為未經取代或視情況經一或多個可相同或不同之基團取代，各基團獨立選自下列所組成之組群：鹵素、Cw烷基、芳基、C3-10 環烷基、CF3、〇CF3、CN、-OR5、-NR5R1()、-N(R5)Boc 、-(CR4R5)n〇R5、_c(〇2)rs、_c(〇)r5、_c(〇)nr5r1。s〇3H 、-SR10、_S(〇2)R7、_s(〇2)NR5Rl〇、n(r5)s(〇2)r7、 -n(r5)c(o)r7及-N(R5)C(0)NR5R10 ; Rl0係選自由H、Cw烷基、芳基、芳基Cl.6烷基、C3.1〇環娱•基、雜環基、雜芳基及雜芳基Cl_6烷基所組成之組群’其中該（^·6烷基、芳基、芳基Cl-6烷基、C31()環烷基、雜環基、雜芳基及雜芳基Cl_6烷基可為未經取代或視 87250-960801.doc •2· 情況經一或多個可相同或不同之基團取代，各基團獨立選自下列所組成之組群：鹵素、Cw烷基、芳基、c3_10 環烷基、CF3、OCF3、CN、-OR5、-NR4R5、-N(R5)Boc、 -(CR4R5)n〇R5、_c(〇2)R5、-C(〇)NR4R5、-C(0)R5、-S03H 、-SR5、-S(〇2)R7、-S(02)NR4R5、-N(R5)S(02)R7、 -n(r5)c(o)r7及-N(R5)C(0)NR4R5 ; 或視情況（i)基團-NR5R10中之R5及R10或（ii)基團 -NR5R6中之R5及r6可一起形成C3 1〇環烷基或雜環基基團 ’該C3_1G環烷基或雜環烷基基團各為未經取代或視情況獨立經一或多個R9基取代； R係選自由Ci-6燒基、C3-IO環燒基、芳基、雜芳基、芳基Cw烷基及雜芳基烷基所組成之組群，其中該基、C3-1G餐燒基、雜芳基Ci.6坑基、芳基、雜芳基及芳基Cw烷基可為未經取代或視情況獨立經一或多個可相同或不同之基團取代，各基團獨立選自下列所組成之組群：鹵素、Cu烷基、芳基、c3_10環烷基、cf3、ocf3 、CN、-OR5、NRSr1。、-CH2OR5、-C(〇2)R5、-C(0)NR5R10 > -C(0)R5' -SR10' -S(02)R10^ -S(02)NR5R10' -N(R5)S(02)R10 、-n(r5)c(o)r1(>及 _n(r5)c(o)nr5r10 ; R8係選自由 R6、-C(0)NR5R10、-S(〇2)NR5R10、-C(0)R7 及-S(〇2)R7所組成之組群； R9係選自自素、CN、-NR^R1。、-C(02)R6、-C(0)NR5R10 、-OR6、-SR6、-S(02)R7、-S(02)NR5R1()、-N(R5)S(02)R7 、-n(r5)c(o)r7及 _n(R5)C(0)NR5R10 ; 87250-960801.doc m為0至4，及 η為1至4，其中芳基意指包括6至14個碳原子之芳族單環或多環系統；雜芳基意指包括5至14個環原子且其中一或多個環原子為非碳〈元素例如氮、氧或硫之單獨或組合狀況之芳族單環或多環系統；及雜環基意指包括3至10個環原子之非芳族飽和單環或多環系統，其中環系統中一或多個原子為碳以外之元素，例如氮、氧或硫（單獨或組合），且該環系統中不存在相鄭氧及/或硫原子；但條件為：⑴當R為未經取代之苯基時，R2不為Cw烷基 C(〇2)R、芳基或Cm環燒基，及（丨丨）當尺經禮基取代之苯基時，R2僅為鹵素。 2·如申請專利範圍第1項之化合物，其中尺為未經取代之芳基或經一或多個基團取代之芳基，該基團可相同或不同 ’各基團獨立選自由自素、CN、-OR5、-S(〇2)NR5R6、、CH2OR5、-S(〇2)R6、-C(0)NR5R6、-CF3、-〇CF3及雜環基所組成之組群； R2為鹵素、Ci_6烷基或〇3_10環烷基； R3為Η、未經取代之芳基、未經取代之雜芳基、經— 或多個選自鹵素、CN、-OR5、CF3、-OCF3、Cb6燒基及 C 3 -10稼坑基之所組成之·組群·基團取·代之芳基、雜環基、經一或多個選自鹵素、CN、-OR5、CF3、_〇CF、c 87250-960801.doc -4- 1329645 炫基及C3·!Qj裒境基之所組成之組群之基圏取代之雜芳基、

• R4為Η或（^.6烷基； R5為Η或Cb6垸基；及 η為1或2。 3·如申請專利範圍第2項之化合物，其中R為未經取代之苯基。 4.如申請專利範圍第2項之化合物，其中R為經一或多個選 •自 F、C卜 Br、CN、-S03H、-S(02)NR5r6、_s(〇2)CH3、 -NR5R6、-OH、羥基甲基、CFs及嗎啉基所組成組群之取代基取代之苯基。 5·如申請專利範圍第2項之化合物，其中r2為ρ、ci、Br、基及C3-IG環说基。 6.如申請專利範圍第2項之化合物’其中R3為η、Cl_6烷基、未經取代之芳基、經一或多個可相同或不同之基團取代之芳基’各基團獨立選自？、（21、81'、0?3、016燒基 87250-960801.doc 1329645 甲氧基及CN所組成之組群，或為

7_如申請專利範圍第6項之化合物’其中該Cl_6烷基為甲基、乙基、異丙基或第三丁基。 8. 如申請專利範圍第2項之化合物，其中R4為Η。 9. 如申請專利範圍第2項之化合物，其中R5為Η。 10. 如申請專利範圍第2項之化合物，其中R為4-(甲基磺醯基）苯基。 11. 如申請專利範圍第2項之化合物，其中R2為、Br、異丙基、乙基、環丙基、環丁基或環戊基。 12. 如申請專利範圍第6項之化合物，其中R3為未經取代之苯基、或-s(o2)nr5r6取代之苯基。 13. 如申請專利範圍第6項之化合物，其中R3為第三丁基或異丙基。 14. 如申請專利範圍第6項之化合物，其中R3為2-氟苯基、2_ 氯苯基、2,3-二氯苯基、2-曱基苯基、2-甲氧基苯基、

15.如申請專利範圍第6項之化合物，其中R3為3_(三氟甲基）苯基。 87250-960801.doc -6 - 1329645 16.如申請專利範圍第14項之化合物，其中R3為

17. 如申請專利範圍第16項之化合物，其中R8為（CH2)nOH或 (CH2)nOCH3 其中 η為 1或 2。 18. —種選自下列所成組群之化合物：

87250-960801.doc 1329645

87250-960801.doc -9- 1329645

87250-960801.doc -10· 1329645

87250-960801.doc 1329645

87250-960801.doc -12- 1329645

或其醫藥可接受性鹽。 19. 如申請專利範圍第1項之化合物，係呈單離及純化態。 20. —種用於抑制一或多種週期素倚賴性激酶之醫藥組合物，其包括治療有效量之至少一種如申請專利範圍第1 項之化合物以及至少一種藥可接受性載劑。 87250-960801.doc -13- 21. —種用於治療一或多種與週期素倚賴性激酶有關之疾病之醫藥組合物，其包括治療有效量之至少一種如申請專利範圍第1項之化合物以及至少一種藥可接受性載劑。 22. 如申請專利範圍第21項之醫藥組合物，其中該週期素依賴性激酶為CDK2。 23. 如申請專利範圍第21項之醫藥組合物，其中該疾病係選自膀胱癌、乳癌、結腸癌、腎癌、肝癌、肺、小細胞肺癌、食道癌、膽囊癌、卵巢癌、姨癌、胃癌、頸癌、甲狀腺癌、前列腺癌及皮膚癌、鱗狀細胞癌；白血癌、急性淋巴白血癌、急性淋巴胚細胞白血癌、B_細胞淋巴癌、τ-細胞淋巴癌、霍金氏（Hodgkins)淋巴癌、非霍金氏淋巴癌、髮細胞淋巴癌及布克特氏（Burkett's)淋巴癌；急性及慢性骨髓性白血癌、脊髓發育不良徵候群及前骨髓細胞白血癌；纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤；星細胞瘤、神經母細胞瘤、神經膠瘤及神經鞘瘤；黑色瘤、精細胞瘤、畸胎瘤、骨肉瘤、外生性色素頸瘤、keratoctanthoma、甲狀腺#胞癌及卡波西氏（Kaposi's)肉瘤。 24. —種用於治療一或多種與週期素倚賴性激酶有關之疾病之醫藥組合，其包括某量之第一種化合物，其為申請專利範圍第1項之化合物或其醫藥可接受鹽；及某量之至少一種第二種化合物，該第二種化合物為抗癌劑；其中邊f之第一種化合物及該第二種化合物可產生 87250-960801.doc 14- 1329645 治療效果；與至少一種醫藥可接受性載劑》 25.如申請專利範園第24項之醫藥組合，另包括放射療法。

26·如申請專利範園第24項之醫藥組合，其中該抗癌劑係選自下列所組成之組群：制細胞劑、順氯胺鉑、多索鹵賓 (doxorubicin)、坦羅特（taxotere)、坦醇（taxol)、依托塞 (etoposide)、艾諾泰肯（irinotecan)(或 CPT-11)' 肯技斯塔 (camptostar)、技譜泰肯（topotecan)、帕克利坦（paclitaxel) 、多塞坦（docetaxel)、艾譜塞酿l(epothilone)、坦墨希分 (tamoxifen)、5-氟尿π密淀、胺甲噪呤（methoxtrexate)、泰默醯胺（temozolomide)、環磷醯胺、4-[2-[4-[(llR)-3，10-二溴-8-氯-6，11-二氫-511-苯并[5,6]環庚并[1，2-13]吡啶-11· 基]-1-旅淀基]-2-氧代乙基]-1-喊啶叛酿胺、替普法尼 (tipifarnib)、L778，123 (法呢基蛋白質轉移酶抑制劑）、 BMS 214662 (法呢基蛋白質轉移酶抑制劑）、愛利沙 (Iressa)、塔希瓦（Tarceva)、對 EGFR之抗體（如 C225)、 GLEEVEC、干擾酮（intron)、ara-C、阿霉素（adriamycin) 、胞色燒（cytoxan)、葛希塔賓（gemcitabine)、尿卩密咬氮齐、氮芥（Chlormethine)、艾法酿胺（Ifosfamide)、美法侖 (Melphalan)、苯丁酸氮芬（Chlorambucil)、柏溪燒 (Pipobroman)、曲他胺（Triethylenemelamine)、三伸乙基硫代轉酿胺（Triethylenethiophosphoramine)、馬利蘭 (Busulfan)、卡默斯；丁（Carmustine)、羅姆斯；丁（Lomustine) 、斯特吐辛（Streptozocin)、達卡貝 _ (Dacarbazine)、氟索利淀（Floxuridine)、塞塔賓（Cytarabine)、6-氫硫基嗓呤 87250-960801.doc -15 - 1329645 、6-硫代胍、磷酸氟達賓（Fludarabine phosphate)、〃号利舶（oxaliplatin)、雷可瓦寧（leucovorin)、分妥斯達、;丁 (Pentostatine)、長春驗、長春新驗、長春地辛（Vindesine)

、平陽黴素（Bleomycin)、更生黴素（Dactinomycin)、柔紅黴素（Daunorubicin)、多索鹵賓（Doxorubicin)、艾比鹵賓 (Epirubicin)、艾達鹵賓（Idarubicin)、光輝黴素 (Mithramycin)、去氧助間型徽素（Deoxycoformycin)、絲裂黴素-C(Mitomycin-C)、L-門冬醯胺酶、替尼泊 (Teniposide) 17α-乙炔基雌二醇、已烯雌酚、睪酮、潑 ® 尼松（Prednisone)、說曱睪綱（Fluoxymesterone)、多莫斯

坦酉同丙酸鹽（Dromostanolone propionate)、睪内酉旨 (Testolactone)、曱地孕酮乙酸鹽（Megestrol acetate)、曱基潑尼松、曱基睪丸酮、強的松（Prednisolone)、鼻浪花 (TriamcinolQne)、氯埽雌酸（Chjorotrianisene)、幾孕酮 (Hydroxyprogesterone)、胺鹵米特（Aminoglutethimide) 、雌莫斯汁（Estramustine)、甲經孕酮乙酸鹽 (Medroxyprogesteroneacetate)、利普胺（Leuprolide)、福特胺（Flutamide)、托瑞米分（Toremifene)、高瑞林（goserelin) 、順氯胺鉑、碳胺鉑（Carboplatin)、輕基尿素、胺沙林 (Amsacrine)、普卡貝口井（Procarbazine)、米多坦（Mitotane) 、米技山酮（Mitoxantrone)、左米梭（Levamisole)、納瓦賓 (Navelbene)、胺斯塔峻（Anastrazole)、雷塔也（Letrazole) 、卡配綿塔賓（Capecitabine)、雷羅色分（Reloxaflne)、多羅塞分（DroloxaHne)或六曱蜜胺。 87250-960801.doc -16-