TWI275594B

TWI275594B - Process for preparing vancomycin phosphonate derivatives

Info

Publication number: TWI275594B
Application number: TW091118801A
Authority: TW
Inventors: Michael R Leadbetter; Martin S Linsell; Junning Lee; Jyanwei Liu
Original assignee: Theravance Inc
Priority date: 2001-08-24
Filing date: 2002-08-20
Publication date: 2007-03-11
Also published as: NO20040766L; US20110060122A1; US7728104B2; EP1418933A2; EP1418933A4; KR100909438B1; CA2457863A1; US20080227963A1; US20060264607A1; US6979723B2; US20050020488A1; WO2003029270A2; CN1246036C; US7074890B2; JP2005526000A; EP1418933B1; US20030069391A1; NO331661B1; CA2457863C; BRPI0211997B1

Description

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相關申請案之交又參考本申請案主張在顧年8月24曰提出申請之美國臨時申请案第60/314,83 1號的利益，將其整個揭示文以其全文併入本文以供參考。發明背景本發明的蓺圚本發明係針對-種製備醣肽抗生素之衍生物的新顆方法。更具體而言’本發明更係針對—種製備具有含胺基之側鏈的醣肽抗生素之磷酸酯衍生物之多步驟法，在不分離中間物反應產物之單一反應容器中進行前兩步驟。背景醣肽（例如，dalbaheptide)係一種熟知的抗生素種類，其係以各種Μ生物生產（參考紐約公司以R納加拉珍（Nagarajan)編輯之聽肽抗生素（(Hyc〇peptide Antibiotics))。在此項技藝中也已知許多這些醣肽的合成衍生物，並典型係提出這些衍生物具有比天然生成之醣肽更改進的特性，包括增強之抗細菌活性。例如，在2〇〇1年 5月1曰提出申請的美國專利申請序號第〇9/847,〇42號說明各種醣肽磷酸酯衍生物，部份包括含胺基之側鏈。以這些每牛酉文S曰衍生物作為治療革蘭氏陽性感染的抗生素特別有用〇因此’對製備具有含胺基之側鏈的醣肽抗生素之磷酸酯衍生物有用的新有效法仍有需求。本發明的概述 -5-本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1275594 五、發明説明（ &本魚月係提供製備具有含胺基之侧鏈的醣欣抗生素之鱗 2酉曰何生物的新穎方法。其中的優點係在不分離中間物反一 T進仃本發明的前兩步驟，因此與先前的方法比較所產生的浪#爭，丨、、，卞竹幻，艮賈更；，並改進該方法的總效率及產量。在本發明的觀點中，本於明女、甘 ^ ^ + 尽I明尤其專注於製備式I化合物或其鹽之方法： H3C,, ,Ν—CHj~R1—Ν'

3 H〇一、〇H OH

II N—R4—P-OH OH 其中 R1係選自由Cm伸烷基 C2M伸缔基及C2_1G伸炔基所構 -6 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐） 1275594 A7 B7

成的群組； ,2 R係選自由。，烷基、c2.2。烯基、C2-2。炔基、c3 8環烷基、c5.8環烯基、c6.10芳基、c29雜芳基、環系、 -Ra-Cy1、-RW_Ar2、_Ra_Arl_Rb,Ar2、_Ra_Arl_〇 Rb士2 所構成的群組； R4係C^O伸烷基； C1^伸烯基及Cl_1()伸炔基所構

Ra係選自由ChM伸烷基成的群組；

Rb係選自由Cw伸烷基、c 的群組； I-6伸烯基及Cl-0伸炔基所構成

Cy1係選自由c3:8環烷基、c5-8環烯基、C6，芳基、匕$ 雜务基、C2_9雜環系所構成的群組； Αι:1及Ar2係獨立選自CV1()芳基及c2-9雜芳基；其中將每一個芳基、雜芳基及雜環系基視需要以丨至3個獨立選自由Cw烷基、Ci_6烷氧基、鹵基、羥基、硝美及三氟甲基所構成的群組之取代基取代，及每一個雜芳美及雜環系基包括從1至3個選自氮、氧或硫之雜原子；該方法包含： Ο)將萬古黴素或其鹽與式π化合物：

R1—N—R2 Π (其中R及R係如本文的定義；及R3係胺不穩定性保護基）及還原劑反應，以形成式ΙΠ化合物或其鹽：本紙張尺度適用中國國家鮮(CNS) M規格(21GX297公爱) 1275594 A7 B7

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HO H3C,J〜CHrR1—$

h3c，、〇/ •R2 OH '〇

OH .、、、 ΌΗ

(其中R1及R2係如本t沾〜装、^ t +文的疋義），其中步驟（a)及步驟（b) 係在相同的反應混合物中淮分 JU w T進仃，不分離來自步驟（a)之中間物；及 (C)將式IV化合物與甲醛及式V化合物·· 0 H2N —R4—·ρ—〇Η

I V

OH 在鹼的存在下反應，以提供式][化合物或其鹽。在以上的方法中，R1係以Cu伸烷基較佳。Rl係以C卜2 伸烷基更佳。R1係以_CH2-還更佳。 R2係以CV〗4烷基較佳。R2係以C8 U烷基更佳。R2係以正 -9 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1275594 A7 ------- Β7 五、發明説明（6 ) 癸基還更佳。在本發明的方法中，R3係胺基-保護基，將其以胺（即親核胺）處理方式除去。R3係以式（A)之基較佳： W-OC(O)- (A) 其中W係選自由9-芴基甲基、3-茚基曱基、苯并[f]茚-3-基甲基、17-四苯并[a，c，g，i]芴基甲基、2,7-二第三丁基[9-(ιο，ιο_二氧基_10，10，1010_四氫噻嘮烷基）]甲基、11_二氧苯并[b]噻吩-2-基甲基，其中將9-芴基甲基視需要以1至3個遥自由C i_6烧基、鹵基、硝基及石黃基所構成的群組取代。 W係以9-芴基甲基較佳，其中將9_芴基甲基視需要以1至 3個遠自由c i_6烧基、鹵基、确基及磧基所構成的群組取代。W係以9_芴基甲基更佳。 R4係Cw伸烷基較佳。R4係Cl-4伸烷基更佳。R4係-CH2-還更佳。在步驟（a)中，還原劑係以胺/甲硼烷複合物較佳。還原劑係以吡啶/甲硼烷或第三丁胺/甲硼烷更佳，並且還原劑係以第三丁胺/甲硼烷還更佳。在本發明較佳的具體實施例中，步驟（a)包含步驟： (i) 將萬古黴素或其鹽與式II化合物在驗的存在下組合，以形成反應混合物； (ii) 將來自步驟（i)之反應混合物以酸酸化；及 (iii) 將來自步驟（Π)之反應混合物與還原劑接觸。在該較佳的具體實施例中，在步驟⑴中的鹼係以三級胺較佳，鹼係以二異丙基乙胺更佳。 -10- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1275594

在步驟（u)中使用的酸係以三氟醋酸或醋酸較佳。 f步驟（b)中，所使用的胺係以氫氧化銨或一級胺較佳胺係以氫氧化銨、甲胺或第三丁胺更佳，並且胺係三丁胺還更佳。一在步驟（c)中，所使用的胺係以三級胺較佳。所使用的一及胺係以一異丙基乙胺較佳。在較佳的具體實施例中，三級胺對式v化合物之莫耳比係約3:1至約5:1，以約4:1更佳。本發明的詳細說明本發明係關於製備具有含胺基之側鏈的醣肽磷酸酯衍生物之新穎方法。在說明這些方法時，以下的術語具有以下的意義，除非有其它另外的指示。定義 “烷基”術語表示可以是直鏈或支鏈之單價飽和烴基。除卜有/、匕另外的疋義，這些烧基典型係包括從^至個碳原子。以貫例方式的代表性烷基包括例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、第二丁基、異丁基、第三丁基、正戊基正己基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基及類似物。 “烯基”術語表示可以是直鏈或支鏈及具有至少一個（及典型係1、2或3個）碳-碳雙鍵之單價不飽和烴基。除非有 ,、匕另外的疋義，這些烯基典型係包括從2至2〇個碳原子以灵例方式的代表性烯基包括例如乙烯基、正丙烯基、異丙烯基、正丁 ·2-烯基、正己基及類似物。 -11 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) χ 复) 1275594 A7

“炔基”術語表示可]^直鏈或支鏈及具有至少— 典型係1、2或3個）碳-碳參鍵之單價不飽和烴基。除其它另外的定義，這些炔基典型係包括從2至2〇個碳原子。以實例方式的代表性炔基包括例如乙炔基、〖丙炔基、正丁-2-炔基、正己_3_炔基及類似物。 “伸烷基”術語表示可以是直鏈或支鏈之二價飽和烴基。除非有其它另外的定義，這些伸烷基典型係包括從1至W 個碳原子。以實例方式的代表性伸烷基包括例如亞甲基、乙烷-1，2-二基伸乙基，，）、丙烷β1，2_二基、丙烷·-二基、丁烷-1，4·二基、戊烷二基及類似物。伸稀基術語表示可以是直鏈或支鏈及具有至少一個（及典型係1、2或3個）碳-碳雙鍵之二價不飽和烴基。除非有其它另外的定義’這些伸烯基典型係包括從2至丨〇個碳原子。以實例方式的代表性伸烯基包括乙烯_丨，2_二基、丙-1-烯-1，2-二基、丙-1·烯-ΐ，3-二基、丁-2-烯-1,4-二基及類似物。 “伸炔基”術語表示可以是直鏈或支鏈及具有至少一個（及典型係1、2或3個）碳-碳參鍵之二價不飽和烴基。除亦有其它另外的定義，這些伸炔基典型係包括從2至1 0個碳原子。以實例方式的代表性伸炔基包括乙炔-1，2-二基、丙-1-炔-1，2_ 二基、丙-1-炔-1，3_ 二基、丁-2-炔-1，4-二基及類似物。 “烷氧基，，術語表示式-0-R之基，在此R係如本文定義之烷基。以實例方式的代表性烷氧基包括甲氧基、乙氧基、 -12- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210X 297公釐)

裝訂

線 1275594 五發明説明（ 9 正：氧基、異丙氧基、正丁氧基、第二丁氧基氧、‘匕三丁氧基及類似物。，、丁乳基單严方—基^语表示具有單環（即苯基）或稠合環（即萘基）之 :方矢烴。除非有其它另外的定義，這些芳基典型俜包括從6至1 〇個破谔店2 i你匕 .„^ 1 # "衣原子。以貫例方式的代表性芳基包括苯土不、-土、奈-2-基及類似物。基”術語表示單價飽和碳㈣烴基。除非有其它另二的疋義，廷些環烷基典型係包括從3至1〇個碳原子。以實例方式的代表性環烧基包括環丙基、環環己基及類似物。衣戍基 “環稀基，，術語表示在碳環系環中具有至少—個碳-碳雙鍵之早價不飽和碳環系烴基。除非有其它另外的定義，这 =烯基典型係包括從5至10個碳原子。以實代 :性環婦基包括環戊_3-稀小基、環己…基及類似 “齒基”術語表示氟基 '氯基1基及填基；以氯基、漠基及埃基較佳。、 “雜芳基”術語表示具有單環或兩個稍合環及包括在環中至少-個選自II、氧或硫之雜原子(典型係U 3個雜原子）之單價芳族基。除非有其它另外的定義，這些雜芳基典型係包括從5至10個總環原子。以實例方式的代表性雜芳基包括吡咯、咪唑、噻唑、嘮唑、呋喃、噻吩、三唑、吡唑、異噚唑、異噻唑、吡啶、吡嗪、噠嗪、嘧啶、三嗪"引嗓、苯并。夫喃、苯并嗟吩、苯并㈣、苯并料”奎琳、 -13- 本纸張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公羡） 1275594 A7

異喳啉、喹嗤啉、異崎啉及類似物之單價種類，在此附著點係在任何有效的碳或氮環原子上。

裝 “雜環，，或“雜環系，，術語表*具有單環或多濃縮環及包括在環中至少一個選自氮、氧或硫之雜原子（典型係丨至3個雜原子）之單價飽和或不飽和（非芳族）基。除非有其它另外的定義，這些雜環系基典型係包括從2至9個總環原子。以實例方式的代表性雜環系基包括吡咯啶、咪唑啶、吡唑啶、哌啶、1，4-二嘮烷、嗎啉、硫代嗎啉、六氫吡畊、3_吡咯啉及類似物之單價種類，在此附著點係在任何有效的碳或鼠環原子上。在本文以此項技藝認知的方式使用的‘‘萬古黴素”術語表示已知係萬古彳放素之醣肽抗生素。參考例如Dekker 公司以R·納加拉珍（Nagarajan)編輯之醣肽抗生素

(GlyCOpeptide Antibi〇tiCS)(1994年）及在本文引證參考。以 N -命名表示在萬古黴素的萬古胺氮上的取代作用。也將該位置稱為萬古黴素之N3 ’’位置。此外，使用熟知的萬古黴素編號系統，以“29-，，命名表示介於兩個在胺基酸7 (AA-7)的苯基環上的羥基之間的碳原子位置。有時也將該位置稱為萬古黴素之“7d”或“間苯二酚位置”。在與本文提及的化合物連結使用時的“鹽”術語表示自無機或有機鹼或自無機或有機酸衍生之化合物的鹽。自無機驗衍生之鹽類包括鋁、銨、鈣、銅、三價鐵、二價鐵、鋰、鎂、三價猛、二價錳、鉀、鈉、鋅及類似物。以銨、鈣、鎂、钟及納鹽特別佳。自有機驗衍生之鹽類包括一級、 -14- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1275594 A7 _B7 五、發明説明（11 ) 二級及三級胺之鹽類，包括取代之胺、環系胺、天然生成的胺及類似物，如精胺酸、甜菜驗、咖啡因、膽驗、 N，N’-二苄基乙撐二胺、二乙胺、2-二乙胺基乙醇、2-二曱胺基乙醇、乙醇胺、乙撐二胺、N-乙基嗎啉、N-乙基哌啶、甲葡胺、葡糖胺、組胺酸、哈胺（hydrabamine)、異丙胺、賴胺酸、甲基甲葡胺、嗎啉、六氫吡畊、piperadine、多胺樹脂、普魯因 '嘌吟、可可驗、三乙胺、三甲胺、.三丙胺、胺基丁二醇及類似物。自酸驗衍生之鹽類包括醋酸、抗壞血酸、苯磺酸、苯甲酸、樟腦磺酸、檸檬酸、乙烧石黃酸、富馬酸、葡糖酸、glucoronic、谷胺酸、馬尿酸、’ 氫溴酸、氫氣酸、羥乙磺酸、乳酸、乳糖醛酸、馬來酸、蘋果酸、扁桃酸、甲烷磺酸、黏酸、萘磺酸、煙酸、硝酸、雙羥萘酸、泛酸、磷酸、丁二酸、硫酸、酒石酸、對· 甲苯磺酸及類似物。以擰檬酸、氫溴酸、氫氯酸、馬來酸、磷酸、硫酸及酒石酸特別佳。 “保護基’’或“封閉基”術語表示以在以共價附著於如胺基、經基、硫赶基、敌基、羰基及類似物之類的官能基時的基避免官能基進行非預期反應，但是其允許官能基在以適合的試劑處理保護基時再生（即去保護或去封閉）。例如，在紐约 John Wiley and Sons 之T. W·葛林（Greene)及p G M 烏兹（Wuts)的第三版“Protective Gr〇ups in 〇职*々義仏,·， (1999年）中揭示代表性保護基。胺不％疋性保護基”術語表示在以適合的胺處理時除去的保護基。 μ -15-

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本方法的彳以萬古黴素或其鹽開始的三步驟進行本發明的方法。本方法，的第一個步驟係還原烷基化步驟，其包含先將丨當量萬古黴素或其鹽與1或更多當量之式II之駿組合： Η

R1—N—R2 Π (其中R1、R2及R3係如本文的定義）’當場形成亞胺及胺中間物。在此項技藝中熟知在本發明的方法中使用的式j〗之醛，其或是市場商品，或可以使用市售原料及熟知的試劑以孰知的步驟製備。例如，參考在2000年7月6日發表的w〇 00/39156，其說明各種製備這些醛之方法。典型係將萬古黴素或其鹽與醛在惰性稀釋劑中以過量適合的鹼存在下組合，以形成反應混合物。惰性稀釋劑係以 N，N-二乙基甲醯胺、N，N二甲基乙醯胺、冰甲基環吡啶酮、乙腈/水及類似物或彼之混合物較佳。以使用從約丨至約 2當量醛較佳，以約u至約當量更佳。在該反應混合物中，咸信在醛與萬古黴素之基本氮原子（即萬古胺氮原子及N-末端（π胺酸基）氮原子）之間形成亞胺及/或半胺之混合物。胺及/或半胺中間物的形成作用典型係在從約ot:至約 75C為範圍之溫度下（以室溫較佳，即約2〇-25。〇)進行約i 至約24小時（以約6至12小時較佳），或直到幾乎完成胺及/ 或半胺的形成作用為止。 -16- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1275594 A7 B7

五、發明説明（可以使用任何適合的鹼中和萬古黴素鹽及加速胺及/或半胺的形成作用’其包括有機驗（如胺、驗金屬羧酸酯鹽 (即醋酸納及類似物））及無機驗（如驗金屬破酸鹽（即碳酸叙、碳酸鉀及類似物））。鹼係以三級胺較佳，其包括以例證方式的三乙胺、二異丙基乙胺、N_甲基嗎啉及類似物。較佳的鹼係二異丙基乙胺。典型係使用相對於萬古黴素過量的鹼莫耳量。以使用以萬古黴素為基準計從約i ·5至約3當 1為範圍之驗量較佳，以約1 · 8至2 · 2當量更佳。在幾乎完成胺及/或半胺的形成作用時，則將反應混合物以過量的酸酸化。可以使用任何適合的酸，其包括以例證方式的羧酸（例如，醋酸、三氯醋酸、檸檬酸、曱酸、三氟醋酸、甲烷磺酸、甲苯磺酸及類似物）、無機酸（例如 ’氫氯酸、硫酸或磷酸）及類似物。酸係以三氟醋酸或醋酸較佳。典型係加入相對於萬古黴素（及鹼）過量的酸莫耳里。以使用以萬古黴素為基準計從約3至約6當量為範圍之酸量較佳，以約3.5至5.5當量更佳。雖然不想以理論限制，但是咸信酸以選擇性水解在萬古徽素之Ν-末端胺上形成的亞胺及/或半胺，以偏向在萬古私氮原子上开^成的亞胺及/或半胺。反應混合物的酸化作用典型係在從約〇 °c至約3 0 °c為範圍之溫度下（以約2 5 °c較佳）進行約0.25至約2.0小時（以約〇·5至約小時較佳）。以在該步驟期間加入極性質子溶劑較佳，其包括以實例方式的甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇、乙二醇及類似物。或者可以使用混合的極性質子/非質子溶劑，如甲醇/四氫 -17- 本紙張尺度適财® ®轉準(CNS) A4規格(21GX297公I) 1275594 A7 B7 五、發明説明（呋喃、甲醇/1，2-二甲氧基乙烷及類似物。在酸化之後，將反應混合物與還原劑接觸，以還原亞胺及/或半胺。可以使用任何與在醣肽中存在的官能性相容的適合的還原劑。例如，適合的還原劑包括硼氫化鈉、氰基硼氫化鈉、硼氫化鋅、三乙醯氧基硼氫化鈉、吡啶/甲硼烷、第三丁胺/曱硼烷、N-甲基嗎啉/甲硼烷、氨/甲硼烷、二甲胺/甲硼烷、三乙胺/甲硼烷、三甲胺/甲硼烷及類似物。較佳的還原劑係胺/甲硼烷複合物，如吡啶/甲爛烧及第三丁胺/甲硼烷。該反應的還原相典型係在從約〇°c至約3〇°c為範圍之溫度下（以約25 °C較佳）進行約〇·5至約24小時（以約1至約6小時較佳）’或直到幾乎完成還原作用為止。在該還原步驟期間有極性質子溶劑的存在較佳。以在上述的酸化期間加入極性質子溶劑較佳。與先前的步驟比較，不將還原烷基化法的產物分離，但是將反應混合物與胺接觸，以除去中間產物的保護基（即 R3)。可在本方法的該步驟中使用任何適合的胺。適用的代表性胺包括以實例方式的甲胺、乙胺、第三丁胺、三乙胺、哌啶、嗎啉、氫氧化銨、：1，4_二氮雜雙環[2·2·2]辛烷 (DABCO)及類似物。較佳的胺係曱胺、第三丁胺、氫氧化銨及1，4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷。該去保護步驟典型係在從約〇t：至約6〇t為範圍之溫度下（以約40°C至約45°C較佳）進行約2至約60小時（以約3至約 10小時較佳）’或直到反應幾乎完成。該步驟典型係在惰 -18- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐) 1275594 A7 _ B7 五、發明説明^15 ^ " --- 性稀釋劑中進行，如N，N-二甲基曱醯胺、二甲基乙酿胺、N-甲基環吡啶酮及類似物。可以熟知的步驟輕易分離及純化生成之式IV化合物。在本發明以下的步驟中，將式IV化合物與曱醛及式▽化合物： 0 …'

HA—R4—P-OH V

I

OH (其中R4係如本文的定義）在鹼的存在下反應，以提供式I 化合物或其鹽。典型係以1當量式IV化合物或其鹽與1或更多當量之式V 化合物（以約2至約10當量較佳）及過量的醛（以約4至約5當量較佳）在鹼的存在下接觸，以進行本方法的該步驟。式V之磷酸酯化合物係或市售商品，或可以使用市售原料及試劑以熟知的步驟製備。參考例如紐約j〇hn Wiley & Sons第四版的 jerry March 之 Advanced Organic Chemistry (1992年），第 959頁；及紐約 j〇hn wiley & Sons 第 1·4 冊的法蘭克（Ft*ank) R.哈特雷（Hartley)編輯之 The Chemistry of Organophosphorous Compounds (1996年）。胺基甲基磷酸係威斯康辛州米爾瓦基（Milwaukee)之Aldrich Chemical Company的市售商品〇典型係將在本方法的該步驟中使用的甲酸以水溶液加入，例如，成為在視需要包括約5至約1 5重量％之甲醇的水中的37%溶液（即福馬林）。 -19- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公爱) 1275594 A7 ______ B7 五、發明説明（16 ) 一可在該反應中使用任何適合的驗，其包括例如有機驗（如三級胺）及無機鹼（如鹼金屬氫氧化物（即氫氧化鈉）。鹼係以三級胺較佳，其包括以實例方式的三乙胺、二異丙基乙胺及類似物。較佳的三級胺係二異丙基乙胺。三級胺對化合物V之莫耳比係以約3 :丨至約5 :丨較佳，以約3 5 :丨至約 4.5.1更佳，亚以約4:1還更佳。反應混合物之？11係以約1〇至約11較佳。該反應以在惰性稀釋劑中進行較佳，如水、乙腈/水及類似物。在較佳的具體實施例中，本方法的該步驟係在具有從約3 :2至全是水為範圍之體積/體積比之乙腈/水或水中進行。本方法的該步驟典型係在從約_2〇至約2〇它為範圍之溫度下（以約_1〇。(：至約·5^較佳）進行約6至約48小時，或直到反應幾乎完成為止。以熟知的步驟分離生成之式Ϊ化合物或其鹽，包括以沉澱、過濾及類似作用。在較佳的分離步驟中，將反應混合物之pH以加入適合的酸（如水性氫氣酸）調整成約2至約3。將酸化期間的反應混合物溫度以維持在小於約5它較佳。接著加入乙腈，以促進反應產物（即式I化合物）的沉澱作用，並以過濾收集生成之沉澱物及視需要將其以另外的乙腈清洗。若必要，可以使用反相HPLC或其它色層分離法進一步純化反應產物。在較佳的具體實施例中，使用如在與本文同一天提出申請的共同審理之美國專利申請序號第 -20 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1275594 A7 B7 五、發明説明（ -號（代理人待審案件第)說明的樹脂純化產物’ I亥申請案主張在2〇〇1年8月24日提出申請之美國臨時中請案第60/314,712號的利&，將該揭示文以其全文併入本文以供參考。其中的優點係以本發明的方法提供改進的產量、純度及選擇性，即在萬古胺胺基上的還原烷基化作用以至少ι〇:ι (以20.1較佳）的優勢超越在N-末端上（例如，亮胺酸基）的還原烷基化作用。此外，因為還原烷基化及去保護步驟係在不分離反應中間物的單一反應容器中進行，故使本發明的方法更有效，提供比先前的方法更高的產量及產生的浪費更少。以本發明的方法產製的醣肽衍生物用作抗生素。參考例如在2001年5月1日提出申請的美國專利申請序號第 09/847,042號；將該揭示文以其全文併入本文以供參考。以提供例證本發明的以下實例說明本發明的方法另外的細節’並不是以任何方式將以下的實例解釋成對本發明範圍的限制。實例在以下的實例中，以下的縮寫具有以下的意義。任何未定義的縮寫具有彼等一般所公認的意義。除非有其它另外的說明，否則所有的溫度係以攝氏度數fC )計。 DIPEA = 二異丙基乙胺 DMF = N，N-二甲基甲醯胺 DMSO = 二甲基亞颯 -21 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(21〇χ297公釐)

裝訂

線 A7 B7 1275594 五、發明説明（18 ) eq. = 當量 Fmoc =9-苟基甲氧基羰基 TFA = 三氟醋酸在以下的實例中，萬古黴素氫氯酸鹽半水合物係購自 Alpharma, Inc. Fort Lee, NJ 07024 (Alpharma AS5 Oslo Norway)。其它的試劑及反應物可取自威斯康辛州米爾瓦基 WI 53201 之 Aldrich Chemical Co.。

實例A N-Fmoc·癸胺基乙醛之製備作用。步驟A - N_Fmoc_2-(正癸胺基）乙醇之製備作用將2-(正癸胺基）乙醇（2.3公克，11亳莫耳，υ當量）及 DIPEA (2.0毫升，11毫莫耳，1.1當量）溶解在二氣甲烧（15 毫升）中及在冰浴中冷卻。加入在二氧甲烷（15毫升）中的氯基甲酸9 -芴基甲酯（2.6公克，10亳莫耳，1 ·〇當量），將混合物攪拌30分鐘，接著以3當量氫氯酸（50毫升）清洗兩次及以飽和碳酸氫納（50毫升）清洗。將有機物經硫酸鎖乾燥及在減壓下除去溶劑。使用未進一步純化之N-Fmoc-2_(正癸胺基）乙醇（4.6公克，11毫莫耳，108%)。步驟B _ Ν-Fmoc·2-(正癸胺基）乙醛之製備作用將在二氯曱烷（25毫升）中的DMSO (14.75公克）在-3 5至 -4 5 °C下經20分鐘加入草醯氯（12.24亳升）及二氯甲烧（5〇毫升）之溶液中。將反應混合物在-3 5至-45°C下攪拌10分鐘。經25分鐘加入在二氯甲烷（70毫升）中的N-Fmoc-2-(正癸胺基）乙醇（20.0公克）之溶液及接著在-35至-45。(：下攪拌40分 -22- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 裝訂

線 1275594 A7 B7 五、發明説明（鐘。接著加入三乙胺（2 1.49公克）及將混合物在-10至-20 °C 下攪拌30分鐘。將反應混合物以水（120毫升）及接著以濃縮硫酸（20.0公克）中止，同時將内溫維持在0-5°C。將有機層分離，並以2%硫酸（100毫升）及接著以水（2x100亳升）清洗。將有機溶液在60°C之真空下蒸餾成約100毫升。加入庚烷（100毫升），將油浴溫度上升至80°C，並持續蒸顧，直到具有100毫升的殘餘體積為止。再加入庚烧（1〇〇毫升），並重複蒸餾至體積約100毫升。以15t的冷水浴代替加熱浴。將浴經2 0分鐘緩慢冷卻至5 °C，產物開始沉殿。接著將泥漿冷卻至-5至-10°C及將泥漿攪拌2小時。接著在究漏斗上收集固體及以冷（-5°C )庚烷（2χ 15毫升）清洗。在真空中乾燥濕固體，以產生醛。實例1 訂

線

Nvan-2-(正癸胺基）乙基萬古擻素氩氣酸鹽之製備作用將130亳升N，N-二甲基甲醯胺及4.7毫升（26.92毫莫耳） N，N-二異丙基乙胺加入20公克（13.46亳莫耳）萬古黴素氫氣酸鹽與6.526公克（15·48毫莫耳）N-Fm〇c_2-(正癸胺基）乙酸之攪拌混合物中。將所得混合物在室溫的氮氣下攪拌丨5小時，並在0°C下連續加入75毫升甲醇及4·15毫升三氟醋酸 (5 3 · 8 4晕莫耳）。將混合物擾拌1小時，並加入1 · 9 3毫升 (15.48毫莫耳）甲硼烷·吡啶複合物。將所得混合物在下攪拌4小時，並加入在甲醇中的8〇毫升（161·52亳莫耳^之〕克分子置甲胺。將所得混合物溫熱至室溫及攪拌5〇小時，冷卻至〇°C，並逐滴加入水（350毫升）。將混合物以緩慢加 -23-

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入的11亳升濃縮氫氣酸酸化成阳3·60，並發生沉澱。將混合物再it拌30分鐘及接著經n漏斗過濾、。將所得以水（2x200毫升）清洗及在真空中以16小時乾燥，以得到 9·8 a克粗N _2’（正癸胺基）乙基萬古黴素氫氯酸鹽。接著可在如實例3說明的該方法之步驟（c)中使用該中間物。實例2 N _2_(正癸胺基）乙基萬古黴素氫氣酸鹽之製備作用將180毫升N，N-一甲基甲醯胺（DMF)加入配備機械攪拌器、溫度計及I氣泡器公升三頸圓底燒瓶中。在授掉的同時連續加入6.75公克（0·016〇莫耳）N-Fm〇c_2_(正癸胺基）乙醛及25公克（0·0168莫耳）萬古黴素氫氣酸鹽。以2〇亳升DMF沖洗加料漏斗，並接著加入5·85亳升（〇〇336莫耳） Ν，Ν-一異丙基乙胺。將所得混合物在室溫的氮氣下攪拌 8小時，同時將溫度維持在2〇-25它。加入一份甲醇（95毫升）及接著在1分鐘之内加入5.2毫升（〇〇672莫耳）三氟醋酸 :將混合物攪拌〇·25小時，並接著將一份丨39公克（〇〇16 莫耳）甲硼烷-第三丁胺複合物加入反應混合物中。以5毫升甲醇沖洗加料漏斗，並將所得混合物在室溫下攪拌2小 %。加入一份第三丁胺（1〇·6亳升，〇1〇1莫耳），並將所得混合物在40-42°C下攪拌約7小時。接著將混合物冷卻至室溫’並在室溫下加入140亳升之〇·5當量HC1及接著加入600 笔升之10%食鹽水溶液。將所得混合物在2〇-25。(：下攪拌2 小時，並接著冷卻至1(TC及攪拌1小時。將反應混合物經約90分鐘過濾，使用12·5公分瓷漏斗收集所得沉澱物。將 I275594 A7 B7 五、發明説明（ 21 濕塊以冷水（2χ50毫升）清洗及以5小時㈣。.將所得物質 ^入2，升乙腈中，同時在爪抓下授拌2小時。 :泥水經8公分瓷漏斗過濾，並將收集的濕塊以乙腈（2a? 宅升）清洗及在室内真空下（約25毫米果柱）以…、時乾於，公克粗N〜_(正癸胺基）乙基萬古黴素氯氯酸 =接耆可在如實例3說明的該方法之步驟⑷中使用該中間物。實例3 正癸胺基）乙基29_{[(亞磷羧基甲基）胺基】甲基}萬古擻素之製備作用將5公克！srih(正癸胺基）乙基萬古黴素及16公克胺基 .甲基碟酸與30毫升乙猜裝入配備機械授摔器、溫度計及之2 5 0亳升二頸圓底燒瓶中。將泥漿攪拌1 5分鐘，允許在20-3(TC下分散固體，並接著加入2〇亳升水。將合物攪動15分鐘，並加入7·5公克二異丙基乙胺。將所侍混合物攪動，直到固體溶解為止。接著將反應混合物冷卻 =_5至-lot，裝入25公克之37%水性甲醛，並將所得合，在-5至-10。(；下攪動24小時。以Ηριχ監控反應。在 μ凡成之後，將反應混合物以3克分子量氫氣酸溶液調成ΡΗ 2-3，同時將反應溫度維持在-1()至5。〇。以中度擾將125耄升乙腈經1〇分鐘加入在2〇至25C>c的反應混合物、。將所得混合物在20至25 t下攪拌2小時及接著過濾。濕塊以20亳升乙腈清洗兩次，並在20至25 °C之真空烘箱乂 1 8小日守乾燥，以得到5 ·3公克成為二或三氫氣酸鹽之

N 裝氮以混得 m 反整拌中將中混 -25- 紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1275594 A7 B7 五、發明説明（22 合物的標題化合物，〜100%產量，具有約80%純度（HPLC 面積）（即在R1係-CH2CH2-，R2係正癸基及R4係- CH〗 -之式Ϊ 化合物）。實例4

Nvan-2-(正癸胺基）乙基29-{[(亞磷羧基甲基）胺基】甲基}萬古黴素之製備作用將117公克（約60毫莫耳）Nvan-2-(正癸胺基）乙基萬古黴素（約80%純度）加入配備機械攪拌器、氮氣入口及溫度探針之12公升之套層三頸燒瓶中。接著加入胺基曱基磷酸 (3 0公克，320毫莫耳），揍著加入420亳升乙腈。將所得泥漿攪拌15分鐘及接著加入426公克水，並持續攪拌15分鐘。加入二異丙基乙胺（144公克，1500毫莫耳），並將混合物在室溫下攪拌1小時。將所得淺粉紅色溶液冷卻至-7°C (内溫），並加入4.51公克（60毫莫耳）之在33毫升乙腈中的 3 7%水性甲醛。將所得混合物在_7。(：（内溫）下攪拌12小時 ’同時以HPLC監控反應。在反應完成之後（即在12小時之後，<1 %原料），將反應混合物之pH以加入的3當量氫氯酸水溶液自10_4調整成2_59，同時將内反應溫度維持在-4至 -5 C。所使用的3當量水性氫氯酸量係4 5 5公克。將3 · 1公斤之95%乙醇在5 °C下加入所得混合物中，將混合物攪拌3 小時，並接著經由瓷漏斗過濾。將所得濕塊以500公克醋酸乙酯清洗，以得到135公克顆粒固體。將該固體在3〇毫米汞柱及室溫下以20小時乾燥，以得到11 6公克成為二或二氫氯酸鹽之混合物的標題化合物。以該物質之卡爾菲雪 -26- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1275594 A7

爾（Karl Fisher)檢定顯示11%之水含量；及HpLc分析顯示與標題化合物比較的17%未反應之醣肽及3 6%雙-曼里I (Mannich)副產物。雖然以參考其特殊的具體實施例說明本發明，但是那些熟悉此項技藝的人應瞭解可以不違背本發明實際的精神及範圍下進行各種改變及以同等物取代。此外，可以進行許多修改，以適應本發明的特殊情況、材料、組成物物質、方法、本方法的步驟或步驟等、目的、精神及範圍。計劃將所有的這些修改納入本文所附的申請專利範圍内。此外，將本文以上引證的所有發表案及專利文件詳細併入本文以供參考，雖然以單獨併入以供參考。 -27- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐)

Claims

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ττ、申請專利祀圍 i. 1.一種製備式I化合物或其鹽之方法：

N—R4—P~OH Η I r 〇H 1 其中 R1係選自由C^o伸烷基、（：2-10伸烯基及C2_10伸炔基所構成的群組， R2係選自由Cwo烷基、C2_20烯基、C2_2〇炔基、03_8環烷基、C5_8環烯基、C6_10芳基、C2_9雜芳基、C2_9雜環系、-Ra-Cy1、-ΚΛΑ^-Αγ2、-ΚΛΑι^-ΚΛΑι·2、-ΚΛΑ^-Ο-Rb-Ar2所構成的群組； R4係C^o伸烷基； Ra*選自由Cm伸烷基、C^o伸烯基及C^o伸炔基本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐〉 1275594 A8 B8

所構成的群組； Cl-6伸烯基及（^·6伸炔基所構 …係選自由Cw伸烷基成的群組； cy係選自由c3-8環烧基、c ^ C雜—盆 38衣烷暴烯基、C6_10芳基、 2-9”方土、C2.9雜環系所構成的群組；斛1及Ar2係獨立選自C6]〇芳基及c29雜芳基；其中將每一個芳基、雜芳基及雜環系基視需要以丨至3 個獨立選自由Cw烷基、Cw烷氧基、鹵基、羥基、硝基及二氟甲基所構成的群組之取代基取代，及每一個雜芳基及雜環系基包括從1至3個選自氮、氧或硫之雜原該方法包含： (a)將萬古黴素或其鹽與式]^化合物··

R3 R1——N——R2 II (其中R1及R2係如本文的定義；及R3係胺不穩定性保護基）及還原劑反應，以形成式III化合物或其鹽： -2- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1275594 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍

III (其中R1、R2及R3係如本文的定義）； b)將式III化合物與胺反應，以提供式IV化合物或其 -3- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1275594 A8 B8 C8

〇H H ycH3 CH3 IV 其中步驟（a)及步驟不分離來自步驟（a) (其中R1及R2係如本文的定義）； (b)係在相同的反應混合物中進行，之中間物；及 (c)將式IV化合物與甲醛及式v化合物： HA—R4—p—〇H γ OH 在驗的存在下反應’以提供式I化合物或其鹽。 2.根據申請專利範圍第1項之方法，其中Ri係Cl_6伸烷基。 3·根據申請專利範圍第2項之方法，其中R1係-CH2-。 -4 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公董) 1275594

其中R2係C6_14烷基。其中R2係正癸基。其中R3係式（A)之基：. 4·根據申請專利範圍第1項之方法 5·根據申請專利範圍第4項之方法 6·根據申請專利範圍第1項之方法 /、中〜係選自由9-苟基甲基、3-雖基甲基、苯并[f] P 3基甲基、17·四苯并[a，c，g，i]芴基甲基、2,7-二第三丁基[9-(1〇，1〇_二氧基_1〇，1〇，1〇1〇_四氫噻呤烷基）]甲基、1’1 一氧苯并[b]噻吩_2_基甲基，其中將苟基甲基視需要以1至3個選自由烷基、_基、硝基及磺基所構成的群組取代。 7·根據中請專利範圍第"之方法，MW係91基曱基，其中將9_芴基甲基視需要以ί至3個選自由Cw烷基、鹵基、硝基及磺基所構成的群組取代。 8.根據申睛專利範圍第7項之方法，其中1係9•芴基甲基。 9·根據申請專利範圍第1項之方法，其中R4係伸烷基。 10·根據申請專利範圍第9項之方法，其中R4係-CH^。 H·根據申請專利範圍第丨項之方法，其中在步驟（a)中的還原劑係胺/甲硼烷複合物。 12.根據申請專利範圍第丨丨項之方法，其中在步驟（a)中的還原劑係吡啶/甲硼烷或第三丁胺/甲硼烷。 13 .根據申請專利範圍第丨項之方法，其中步驟包含步驟： (i)將萬古黴素或其鹽與式Π化合物在鹼的存在下組合 "以形成反應混合物； (ii)將來自步驟⑴之反應混合物以酸酸化；及 -5- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) a4規格(210 x 297公釐) 1275594

(in)將來自步驟（π)之反應混合物與還原劑接觸。 14·根據中請專利範圍第13項之方法，其中在步驟⑴中的鹼係三級鹼。 15·根據申請專利範圍第14項之方法，其中在步驟⑴中的鹼係二異丙基乙胺。根據申明專利範圍第丨3項之方法，其中在步驟（ϋ)中的酸係三氟醋酸或醋酸。 Π.根據申請專利範圍第1項之方法，其中在步驟（b)中的胺係氫氧化銨或一級胺。 18·根據申請專利範圍第17項之方法，其中在步驟0)中的胺係氫氧化銨、甲胺或第三丁胺。 19·根據申請專利範圍第18項之方法，其中在步驟（b)中的胺係第三丁胺。 0·根據申6月專利範圍第丨項之方法，其中在步驟（C)中的鹼係三級胺。 21·根據申請專利範圍第2〇項之方法，其中在步驟⑷中的鹼係二異丙基乙胺。 22. 根據申請專利範圍第2〇項之方法，其中三級胺對式v化合物之莫耳比係約3 :1至约5 :1。 23. 根據申請專利範圍第22項之方法，其中莫耳比係約4··}。 24·根據申請專利範圍第1項之方法，其中 R1 係-ch2-; R2係正癸基； R3係W-OC(O)-，其中w係9-苟基甲基； -6 - m ^#i(CNs7A4 ^210 x 297/Ji)

裝訂 t 8 8 8 8 A BCD 1275594 々、申請專利範圍 R4 係-CH2-; 在步驟（a)中的還原劑係第三丁胺/甲硼烷；及在步驟（b)中的胺係第三丁胺。本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐)