TWI252235B - Pectin having reduced calcium sensitivity - Google Patents
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Description
1252235 A7 B7 智 慧 財 產 局 員 工 消 費 社 印 製 五、發明說明( _本發明係有關一種果膠,其可提供蛋白質安定性而不 會k成非所欲的黏度增加。更詳細地,本發明係有關經酵 素或化學方式處理的果膠,以產生可提供蛋白質安定性同 時具有相當低的鈣敏感性之果膠。 果膠係自適宜的可食性植物物質,通常為柑橘類水果 與韻果,藉由水萃取作用而製得之一種純化的碳水化合物 產物。例如,在商業上,可在微酸的條件下自柑橘皮或蘋 果渣中萃取出果膠。典型的果膠生產方法包括三或四個主 要步驟,分別為植物物質之萃取作用、萃取物之純化作用 、自純化溶液中分離果膠及選擇性的去酯化作用。 就化學上而言,果膠係聚半乳糖醛酸之甲基化酯。其 主要包括由D-半乳糖醛酸與半乳糖醛酸甲基酯單元形成 2直鏈多驄鍵’ D_半乳祕酸單元係以配醣鍵連結 一起。一般亦存在一些中性的糖類,諸如鼠李糖與阿拉伯 糖。聚半乳糖酸酸係以甲基而加以偏醋化,游離酸基能以 鈉:鉀或銨離子而部份或完全中和。醋化的半乳糖駿酸基 相對於總半乳糖酸酸基之比值,稱作醋化程度⑽),其影 響果膠的性質,特別是溶解度與凝膠形成性質。一 果膠一般依其酉旨化程度而分類,在本内容中果膠可分 為二^類型··高(甲基)醋果膠_)與低(甲基旨果 。(就本發明的目的而言,低醋與低甲基酉旨可視作可互換 的詞彙’一如高酉旨與高甲基酯。)讀果膠係其中以甲基酉旨 形式存在的敌酸單元少於5〇%,而腹果膠係其中以= 酉旨形式存在的竣酸單元高於50%以上。為了管制之目的了 1 本紙張尺“用中國國家標準(CI^4規格⑵Q χ挪公着)- 五、發明說明(2 ) FCC定義係採用該命名》,在該定義下,酯化程度為5〇% 以上的任何果膠係為HM果膠,而酯化程度為50%以下的 任何果膠係為LM果膠。 HM果膠在大量的可溶性固體與低值存在下即可形 成凝膠,而LM果料徵性地係在二㈣離子諸如約及/或 叙存在下形成凝膠。雖然凝谬化係果膠之主要特徵,其亦 可用以增進食品與飲品之安純。尤其在低pH值下,果 膠特別適於安定含有蛋白質諸如乳蛋白之飲料。該等飲料 之一類型係酸化牛奶飲料,其可藉由發酵作用或直接酸化 作用而製成。在不受限於任—理論之下,果谬似乎可藉由 與該蛋白質表面上的離子電荷之交互作用,而安定蛋白質 ’諸如赂蛋白。若缺乏安定化作用,飲料中的蛋白質粒子 :彼此父互作用而聚集,造成混濁度及/或沈殿。果膠可 藉由沿著果膠主鏈之帶有負電荷的酸區域與該蛋白質表面 上之離子電荷交互作用,而安定蛋白f。因為路蛋白係含 有正負電荷,亦可經由沿著果膠主鏈之帶有負電荷的酸區 域與酪蛋白粒子表面上之帶有負電荷的區域之 作用,而發生衫作用。然而,在低PH值下,諸如低於 约PH 4.4’因路蛋白主要帶有正電荷,使㈣橋接作用變 得極小’及果谬的安定作用主要或完全為果膠與路 間的靜電互感作用的結果。 ’具有顯著的變異。在 ’包括優格與飲料,該 原料的變異或二者所產 在食品與飲品的製造原料方面 含有水果及/牛奶的產品之情況下 等變異可包括自加工處理的變異、 1252235
生之pH值、蛋白質濃度及㈣度方面之變化。當一特定 產品組成物之組成超過所用果膠量之安定化能力時,若該 等產品僅以安定典型的或標準化產品組成物之_果膠量^ 以安定化,則可能產生品質較差或甚至無法使用之產品。 該項風險可藉由,,過量添加,,果膠㈣以平衡,亦即藉由添 力曰口超過理論上安定-典型的或標準批料所需之果膠量。過 里添加之里依製造廠商與用途而異,但可為相當大量,例 如超過50%、麵或更多。然而,依特定產品或分批產 品,因子諸如pH值、固體含量或舞含量而定,該,額外的, 果膠可能造成黏度的顯著增加,其有時係稱作過量添加黏 度。例如,包括或以牛奶固體物為主的產品,諸如酸化牛 奶飲料,亦可能含有顯著的_子漢度。就此而言,食品 ,產廠商或加卫廠商可能面臨—困境,因為提供較佳的安 定作用之果膠,可能亦造成顯著的過量添加黏度。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製
曾嘗試或建議各種方法’以因應該問題。授予从心也 等人之美國專利第5,_,975號,論及用以製造富㈣型 發酵乳或發酵乳㈣之—方法。該方法規劃在乳酸發酵的 乳飲料之中添加HM果膠與”單獨與糖漿一起的鈣”,及將 所產生的混合物均質化;或以均質化作用處理乳酸發酵的 酸化物,添加糖漿與HM果膠,混合,添加鈣,及再度混 5在任種方法中,可使用一種,,聚集化類型的果勝,,作 為HM果膠。然而’自食品與飲料製造商之觀點,一般而 言將製程之變化減少至最低係為較佳。因此,較佳係獲得 -種可用於具有大量可溶性固體與低阳值的食品與飲料 J 1· l· — .裝--------訂---------線赢 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度刺巾關家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) 6 1252235 A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明(4 之果膠’及其可提供安定性而*會造成非所欲的黏度增加 ’即使在過量添加的條件下亦然。 本^明係有關一種果膠,其聚集化程度至少約為1〇% 、醋化程度至少約為55%及Δ(:8不大於則曜泊。 果膠的ACS可為不大於約3〇厘泊,或不大於約2〇厘 泊,或不大於約10厘泊,或不大於約5厘泊,及最佳約為〇 厘泊車乂佳,△以之範圍係介於約0與約20厘泊之間,及 較佳係介於約〇與約1〇厘泊之間。 果膠之聚集化程度至少約為2〇%。較佳,該聚集化程 度不大於約30%。更佳,該聚集化程度係介於約15%與约 25%之間。 果膠之酯化程度可至少約為6〇%,至少約為7〇%,或 至少約為80%。酯化程度之範圍可介於約55%與約8〇%之 間’及較佳介於約60%與約72%之間。 本發明的果膠之分子量至少約為4〇,〇〇〇,較佳至少約 為50,〇〇〇,更佳至少約為7〇 〇〇〇,及可至少約為2⑼,⑼〇。 。亥为子:!:之較佳範圍係介於約5〇,〇〇〇與約2〇〇,〇〇〇之間, 而特佳範圍係介於約7〇,〇〇〇與約9〇,〇〇〇之間。 在另一個具體例中,果膠具有介於約10與約15之間的 聚集化程度,具有介於約7〇與約75之間的酯化程度,及不 大於約18之ACS。任擇地,acs可為不大於約14,或不 大於約10,或不大於約6,或不大於約3,或不大於約2, 或不大於約1。 在另一個具體例中,本發明係有關一種用以製造果膠 !----- I----P '--^^裝--------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)
(210 X 297 公釐) 1252235 A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明( 之方法,其步驟包括在足以使所產生之加工果膠的△ cs 低於原料果膠的ACS之條件下,以果膠分解酶處理聚集 化私度至少約為10%、酯化程度至少約為55%及△ cs大於 約0厘泊之原料果膠。該原料果膠可具有至少約2〇%之聚 集化私度,另擇地,該原料果膠可具有至少約30%之聚集 化程度。較佳,該原料果膠之聚集化程度係介於約15%與 約25%之間。 原料果膠之酯化程度可至少約為55%,或至少約為7〇% ,或至少約為80%。原料果膠之酯化程度的較佳範圍係介 於約55%與約80%之間,及更佳範圍係介於約6〇%與約72〇/〇 之間。 原料果膠之ACS至少約為20,或至少約為2〇〇,或至 少約為300,或至少約為5〇〇。 以該方法所產生的加工果膠之△ cs係不大於約2〇厘 泊,較佳不大於約1〇厘泊,更佳不大於約5厘泊,及最佳 約為0厘泊。加工果膠之△ cs的較佳範圍係介於約〇與約2〇 厘泊之間’及最佳範圍係介於約〇與約丨〇厘泊之間。 原料果膠之分子量係不大於約24〇,〇〇〇,較佳不大於 約150,000,及至少應約為1〇〇 〇〇()。 在一另類的方法中,在足以使所產生之去酯化果膠具 有至少約為10%的聚集化程度、至少約為55%的酯化程度 及大於約0厘泊的ACS之條件下,以植物果膠甲基酯酶處 理聚集化程度至少約為1〇%、酯化程度至少約為7〇%及△ CS大於約〇厘泊之果膠;然後在足以使所產生之果膠具有 I J·裝--------訂---------線# (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)
經濟部智慧財產局員工消費合作社印制衣 I252235 A7 "" ' '—---____ 五、發明說明(6 ) 至J約為10%的聚集化程度及不大於約2〇厘泊的△ cs之條 件下,以果膠分解酶處理該去酯化果膠。 本發明涵蓋以上述方法製造的果膠。 在另一個具體例中,本發明係有關含有如上述之本發 月任果膠或加工果膠的一種可食性組成物。在一個具體 例中,該果膠之聚集化程度至少約為1〇%、酯化程度至少 、力為55 7°,及△ cs不大於約1 〇〇厘泊。該可食性組成物可 含有酪蛋白,及較佳為一種飲料,特別是一種酸化牛奶飲 料。 在另個具體例中,本發明係有關一種增加該可食性 組成物的儲存安定性之方法,其涉及以如上述之本發明任 一果膠或加工果膠而配方製造該可食性組成物。 藉由本發明之方式所得之果膠,即使以相當高的濃度 使用時,亦能提供良好的安定化能力而不會造成顯著的與 非所欲的黏度增加。 以前,蛋白質之安定作用與極微的黏度增加,對果膠 而言大致是相互衝突的目標。在不受限於理論之前提下, 此可來自果膠上主要以酸基的形式存在的負電荷所提供之 蛋白質安定作用,其亦造成二價陽離子橋接作用或或交聯 作用,其進而造成自黏度增加至凝膠化之發生,包括凝膠 化。因此,酸基量之增加可改良安定化作用,亦強化果膠 造成含有二價陽離子諸如鈣之液體的黏度增加之趨勢。反 之’選擇具有適宜的低酸含量之果膠,可避免黏度的顯著 增加’但亦產生不良的安定化能力。理論上,可選擇位於 本紙張尺度適用中_家標準(CNS)A4規格⑽x 297公釐) ——^-—— -9 - ·" _·裝--------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1252235
五、發明說明(7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 該二極端中間的果膠,而提供一些安定化能力及不致於顯 著地增加黏度。然而,實際上該等果膠之用途將被前述所 論及之過量添加的需求所否定,因為在過量添加的情況下 ’ a亥項在性質方面的妥協將會瓦解,而發生非所欲的黏度 增加。 本發明所發現之果膠,可提供良好的安定性而且意外 地未造成非所欲的或無法接受的黏度增加,即使在過量添 加的情況下亦然。本發明的果膠之特徵在於其各種的性質 ,包括酯化程度或DE%、聚集化程度或1)]5、鈣敏感性或 △ CS、分子量、蛋白質安定化能力或Y〇G、或vis/Y〇G 。該等參數及其測定方法,將進一步地討論或說明於後。 酯化程度(DE%):如前所說明,果膠之酯化程度係果 膠分子中以甲基酯形式存在的酸基百分比之一量度。就 HM果膠而言,至少50%的羧酸單元係以甲基酯形式存在 。當酯化程度增加時,鈣敏感性降低,及預期安定化能力 亦降低。本發明的果膠之特徵,在於其酯化程度至少約Μ ,及其較佳範圍係介於約60或70與約72之間,及其酯化程 度可咼達約8 0。尤其在该等較高的範圍,預期安定化能力 將較差,該項預期之一理論基礎在於所剩餘的較少的酸基 中之負電荷並不足以安定蛋白質。應暸解,當本發明的果 膠係藉由一果膠原料之酵素處理作用而製造時,原料之酯 化程度實質上未改變。 試樣t製備-°稱重200〇克的果膠及置入一個250毫升 的玻璃燒杯中’添加100亳升酸醇(100亳升6〇%異丙醇加 ! - ^ ^^裝---- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂---------線▲
1252235 、發明說明(8 ) 笔升lx煙的37/σ氫氯酸),在電磁檀拌器上授拌⑺分鐘 。將所產生的溶液過濾通過_個乾燥、經稱重的玻璃過濾 _。以6X15毫升酸醇完全地沖洗該燒杯,及過遽該沖 液。以60%異丙醇清洗該渡液,直至該濾液經測定不含 乳為止,該測定方法係將約10毫升據液移入一試管中,添 毫升之3_酸’及添加幾滴(諸如2或3滴)硝酸銀。 右洛液為澄清的,則該遽液可視為不含氯,反之則觀察到 氯化銀的沈殿。典型地,以約5〇〇毫升異丙醇清洗即為足 夠。-旦該遽液經測定不含氣,則以另外的1〇〇%異丙醇 清洗,及於1〇5t乾燥2.5小時。在乾燥後,稱重該甜禍。 麗A。稱重二個濾液試樣,各為0 4000克,及置入不 同的玻璃燒杯中;第二試樣係用以校驗第一試樣,及在各 試樣上進行相同的程序。以約2毫升異丙醇溼潤果膠,及 添加約100亳升去離子水,同時在電磁攪拌器上攪拌。此 時試樣即可供滴定之用。在第二試樣上進行相同的程序, 5己錄第二滴定量為B i。 滴定作用 1. 以0.1N氫氧化鈉滴定至ρΗ 8·5,記錄滴定量為%滴 定度。 1 2. 添加20.00毫升0·5N氫氧化鈉,以鋁箔覆蓋及讓其 靜置15分鐘。 消 五 3·添加20.00毫升〇·5Ν氫氯酸,及於電磁攪拌器上攪 拌直至pH值穩定為止。 4.以0.1N氫氧化鈉滴定至pH 8.5,記錄滴定量為%滴 本紙張尺度適时關家標準(CNS)A4規格(210 X 297公爱) 1252235 A7 ----~---__ 五、發明說明(9 ) 疋度。 盲目測試為: 1.100毫升之去離子及不含二氧化碳#水以〇iN氯氧 化鈉滴定至pH 8.5。 2.添加2G.GG亳升G.5N氫氧化納,以紹n覆蓋及讓其 靜置15分鐘整。 ^ 3·添加20.〇〇毫升0·5Ν氫氯酸,及於電磁攪拌器上攪 拌直至pH值穩定為止。 4.以0.1N氫氧化鈉滴定至阳8·5,記錄滴定量為匕滴 定度。 上述第4步驟中所容許的最大滴定量為丨毫升〇1N氫氧 化鈉。若需要超過1毫升的〇以氫氧化鈉,則重複該程序 ,以J里的去離子水稀釋第3步驟之〇.51^氫氯酸;類似地 ,在添加上述第3步驟之〇·5Ν氫氯酸後,試樣的pH值若非 8.5以下,則以少量的去離子水稀釋第2步驟之〇·ιν氫氧化 鈉。當需要稀釋時,所容許的最大稀釋作用係使得所產生 的溶液介於0.52與0.48 Ν之間。 。酯化程度係如下列公式計算:
Vt - V1 + (V2 . Bl) %DE = iYi-Bi)x100 Vt 聚集化程度(DB)。聚集化程度係沿著果膠分子之酸基 分布情形之一量度。聚集化係指酸基聚集一起而成一集體 之性質’其係相對於酸基沿著該聚合物以相當無規的方式 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(21〇 χ 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ·11111--^-------I . 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 12 I252235 五、 部 智 慧 局 員 工 消 費 發明說明(10 ) 分布。當酸基係以無規的方式分布時,其個別的負電荷係 相當地弱,及因此預期在安定蛋白質或增加黏度方面之效 應極微。然而,當酸基以集體的方式存在時,與該集體相 關之負電荷則相當大,強化果膠之安定化與增黏化的能力 。就本發明之目的而言’ %DB係以藉由胞内聚半乳糖醛 酸酶(PG,EC 3.2丄15)處理而釋出的非甲基化D-半乳糖搭 酸分子(單體、二聚體或三聚體)的量表示,係以每克果膠 之非酯化半乳糖醛酸分子總數之百分比表示。本發明的果 ,2%DB係介於約10與約3〇之範圍。如以%db表示時, 當本發明的果膠係藉由一果膠原料之酵素處理作用而製造 時,原料之%DB實質保存於產物中。 、 訂 缝射已知聚半乳祕酸酶係藉由水解切開半 乳糖搭酸鏈,而將果膠聚合物分開。其僅作用於非甲基化 半乳糖搭酸基,即係指自一果膠聚合物中釋出單半乳糖酸 酸、二半乳糖醛酸及三半乳糖醛酸之作用,依0)非甲基 辦乳祕酸基之存在量及⑻非甲基化半乳糖駿酸基: 分子内分布而定。若非甲基化半乳糖醛酸基之分子内分布 維持:變,存在於果膠中之非甲基化半乳糖盤酸基的量越 大,藉由聚半乳糖醛酸酶的引發作用而自果膠聚合物中釋 出的單體、一聚體或三聚體的量也越大。若非甲基化半乳 糖,酸基之分子内分布維持不變,非甲基化半乳糖酸酸基 越聚集或集體化,藉由聚半乳糖醛酸酶的引發作用而自果 膠聚合物中釋出的單體、二聚體或三聚體的量也越大。 就具有一特定的%DE之果膠而言,#%DB表示之聚 本紙張尺心財標準(CNS)A4規格咖X挪公羞厂
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1252235 五、發明說明(11 ) 集化私度,係藉由量化經聚半乳糖酸酸酶的處理後所釋出 的半礼糖醛酸非酯化單體、二聚體或三聚體的量,而加以 測里。1化作用係藉由WDaasRJH等人於Anal 第257(2)期第195-202頁(1988年)乙文中所述之高性能陰離 子父換色譜分析法(HPAEC)進行,其在此併入本案以為參 考資料。 。在此所用的聚半乳糖醛酸酶 製備物PG-1,係衍生自黑麴菌似⑴知幻。在此所 用的PG-1係於歐盟補助計畫,,AIR2_CT94丨345,,中選殖製造 的°玄酵素係天然存在於黑麴菌m.ger)中,及 能以前述以為參考資料之傳統的酵素分離與純化技術而自 黑麴菌m.ger)中分離。 的活性·。如下分析聚半乳糖醛酸酶的 活性:在210:1 (如用於此,,,:丨,,符號係指微升)5〇 mM乙酸 鈉中添加260微升聚半乳糖醛酸(聚_D_半乳糖醛酸 (C0H8〇6)n (n約為15〇)USB)溶液,將所產生的溶液之溫度 凋正為30 C。然後,添加5〇微升待分析之酵素。小心地混 合忒洛液。分別在1、2、3、4與5分鐘後,取5〇微升的試 樣。藉由將該試樣吸移至丨毫升碳酸鈉(26 5克/升)中,而 立即彳τ止反應。在小心地搖晃該試樣後,添加ο.〗毫升甘 油磷酸鈣溶液(於丨公升經離子交換的水中具有4⑽毫克甘 油磷酸鈣-氯化氫CR,Cl4Hl3Cm2i + 200毫克五水合硫酸銅) 。试樣於65 C培養15分鐘,及置於室溫中丨5分鐘。然後將 製備物置於小杯中,及於460 較於第〇分鐘所取的試 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4k格(210 X 297公愛) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ▼裝--------訂---------線赢 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 14 1252235 五、發明說明(I2 樣而測量吸光度。為測 、逻原性末*而基的量(微莫耳),自 D-半乳糖醛酸溶液(8 57毫 毛見/¾升)製備一標準曲線。以5〇 ηιΜ 乙酸鈉將 〇、15、n “ 5及60微升的半乳糖醛酸溶液 稀釋至1毫升。然後自,,藉由 稭由將5亥武樣吸移至1毫升碳酸鈉 而立即停止反應,,起’如上述地處理5〇微升的各試樣。藉 由將半乳糖酸酸的微莫耳數相對於於46〇⑽得的吸光度 繪圖,而製出一標準曲線。活性係如下表示: IU(單位卜所產生的還原性末端基微莫耳數X分鐘_V毫升 以40微升乙 醇將⑽毫克待分析之果膠澄潤,及藉由在電磁擾拌器上 攪拌而溶於70°c的50毫升經離子交換處理的水。將果膠試 樣冷卻至40°C,及將pH值調為42。然後,在3·5單位的聚 半乳糖駿酸酶-1中添加L5亳升果膠製備物。在怪定的擾 拌作用下,該試樣於鐵培養3G分鐘。藉由添加職升石肖 酸與加熱至80°C達10分鐘,而終止反應。 分析。經聚半乳糖醛酸酶處理後所得之果膠分解 物,以DaaS,P.J.H·所述之方法分析,該方法之細部修正如 後述。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------t--------- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 使用配備有一個GP40四梯度幫浦、一個AS35〇〇自動 取樣器與一個洗提脫氣(氦)模組之Di〇nex(美國加州桑尼 維爾(Sunnyvale))DX-500高性能液相色譜分析(HpLC)系統 。偵測作用係以氫氧化鈉支柱傳送系統及具有一電流測定 至之Dionex電化學採測器進行。該探測器係於脈波式電流 測疋(PAD)模式運作’及配備有一個金的運作電極盘一個 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) 1252235 A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明(I3 ) 金/氯化銀參考電極。該支柱傳送系統包括一個0(^)_1幫 浦、一個脈波阻尼器系統及一個保護管柱(GM_3)。出口 係藉由一m型接頭而與色譜分析管柱的出口連接,及於 1500微升的混合線圈中混合。在洗提液與氫氧化鈉(2·5Μ) 混合之後,該試樣進入該PAD探測器中。以Di〇nex peak 軟體第4.H版記錄色譜。在具有一 Carb〇pacpA-i保護管柱 之Dionex CarboPac PA」管柱上,分離寡聚物。洗提作用 係使用自0.05-0.07 Μ乙酸鈉(ρΗ 5·〇)之線性梯度以〇·5毫升 /分鐘之速率進行65分鐘,接著為丨]^乙酸鈉之線性梯度1〇 分鐘,及0.5毫升的清洗步驟。在以〇〇5 Μ乙酸鈉(ρΗ 5〇) 進行15分鐘的平衡步驟之後,注入8〇微升的試樣。調整支 柱幫浦,使得流至PAD室之最終流速為1〇毫升/分鐘。 乙酸鹽緩衝液之製備,係藉由在水中稀釋乙酸,以5〇% 氫氧化鈉溶液滴定至pH值為5·〇,及以水調整體積,使得 最終濃度為1 ·〇 Μ乙酸鹽。藉由將乙酸鹽緩衝液與微孔 (Millipore)系統的水混合,而製成梯度。 用於電流測定的三重脈波序列,包括下列的電位與寬 度:Ε1 = 0·05 伏特(tl = 0.4秒),E2=〇75 伏特(t2=〇 2 秒)及 E3=0.15伏特(t3=0.4秒)。在延遲〇2秒後,積分〇·2秒。 為量化所偵測之非酯化單半乳糖醛酸、二半乳糖醛酸 或三半乳糖醛酸的量,必須測定該等組成成份之pAD反應 係數(見 Hotchkiss,A.T.等人於 Anal· Biochemn84 期第 200-206頁(1990年)乙文)。首先,獲得二聚體與三聚體 (0.05-2.5毫莫耳)的各種量之尖峰面積,然後將其與等量 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) _ a^i ϋι —ϋ i.^ i^i 1·— 1 一-口、I ϋ ϋ >1 ·ϋ ϋ I I » 16 1252235
五、發明說明(14 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 卢^礼糖齡酸之尖峰面積比較。計算相對的反應係數。 在各糸列期間’㈣單半乳祕酸㈣毫莫耳)的標準量 之pad反應面積’以正確地計算該系列中之單半乳糖搭酸 、-+乳糖醛酸或三半乳糖醛酸的濃度。自單半乳糖醛酸 '二半⑽㈣或三半乳糖搭酸的量,可使用 算侧的公式,而計算聚集化程度。 ] 分子量(MW):依來源與所用的萃取方法而定,果膠 的(重量平均)分子量可介於一寬廣的範圍。就本發明的目 的而言,作為原料的果膠之分子量一般小於約240,〇0〇, 及較佳介於自約100,0〇〇至約150,000之大概範圍。(除非另 外說明,此述之分子量係以道爾頓為單位。)在酵素處理 之後,經加工的果膠之分子量當然會低於所選擇的原料果 膠之分子量’及一般而言將介於自約4〇,〇〇〇至約2〇〇,〇〇〇 道爾頓之範圍。在低於約4〇-5〇,〇〇〇之分子量,經加工的 果膠之效力似乎顯著地降低,而在自約40-50,〇〇〇與約 70,000之範圍,其效力有些降低但仍然適用。本發明的果 膠之較佳的分子量範圍,係自約7〇,〇〇〇至約9〇,〇〇〇。 I·歷樣之IJil。藉由使用六偏磷酸鈉測量〇· 1 〇/〇果 膠溶液的相對黏度,而估算果膠的分子量。首先,如有關 %DE測定部份所述地製備一試樣。六偏磷酸鈉溶液之製 備’係將20.0克六偏磷酸鈉溶於1800毫升經離子交換與脫 氣(經煮沸)的水中,以1M氫氣酸將pH值調整為4.50 土 〇.〇5 ’及以經離子交換與脫氣(經煮沸)的水稀釋至2000毫升。 在測量之前,將所需量之六偏磷酸鈉溶液過濾通過玻璃過 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) 17 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) _裝 ----訂---------▲ !252235 A7 五、發明說明(1S ) 慮器#3。然後’稱重約9〇克六偏磷酸鈉溶液及置入配衡燒 中及於燒杯中添加一磁鐵。 接著,在攪拌下,逐漸地將〇1〇〇〇克經酸清洗的果膠 、、夭 丄 外〇至燒杯中。在攪拌下,將溶液加熱至70°C,及繼續攪 拌直至果膠完全溶解為止。將溶液冷卻至25。〔,以六偏磷 次鈉/合液將重量增加至1〇〇〇克,及過濾通過玻璃過濾器 # 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 就各分子量之測量而言,係以下列 方法在二個+ $的黏度計上測量果膠/六偏冑酸鹽溶液、 :出時間。以在各黏度計上所測得之排出時間,而分別計 算以该黏度計所測得之分子量。若二個計算所得的分子量 之間之差異小於测,騎算平均值及四捨五人為最接近 之1〇〇〇的倍數。若二個計算所得的分子量之間之差異 3500以上,職清潔該黏度計,及重新測量六偏鱗酸鹽 液之排出時間。 為測量排㈣間,以試樣沖絲度計二:欠。然後, 5.〇:毫升試樣倒人黏度計中’及在測量之前置於配備有 酿:之25.〇±〇.3c水浴中15分鐘。排出時間係於二個出 測量。若該二時間之差異超過〇 2秒(當測量六偏碟酸 液時)或超過0.4秒(當測量試_),則重新測量直至 小於該適宜數值為止。用以敎分子量之排出時間 上述相同或實質相同的測量結果之平均值。 相對黏度係計算如下: 之 之 為溶 將恆 Π 鹽溶差異係如 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) _裝---- 111111· 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(2_1Q x 297公着了 1252235 A7 B7 五、發明說明(l6 其中,t。與“分別為果膠溶液與六偏碟酸鹽溶液之排出 時間。 使用Witeg-〇stwald黏度計,在 1」隹兄分的精確性下將 參數K固定於1〇7秒2。否則,K可計算如下: Κ
Qxtv Q + (〇.226xLxtv) :、中Q為以立方公分為單位之黏度計球形容器的體積,L 為以公分為單位之毛細管的長度,及、為以秒為單位之水 的排出時間。 果膠之分子量係計算如下: 訂
1P
kxC
xP
其中P係固定為6’ _固定為4.7x1g_5莫耳.克.! ; c為果 膠於試樣系統中之重量百分比。在置人數值後,該公式變 為: M= UWX l〇6(nr1/6-l)克/莫耳 約敏感性UCS):藉由本發明之方式,可實質降低經 加工的果膠之㈣感性,而本發明之方式在料聚集化程 度的實質恆定方面是特別令人意外的。如進一步說明於後 ,鈣敏感性係代表一種含有果膠與未含有鈣之參考溶液與 一種含有果膠與鈣之溶液之間的黏度差異,及因而以AcS 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(2lfr297公爱 1252235 A7 -----------B7 五、發"——^— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 表示。本發明的果膠之KS將小於約⑽,較佳小於約2〇 ,諸如介於自約5至約10之範圍,及較佳約為〇。原料之八 CS可為大於約20之任一數值,及可為非常大之數值,諸 如大於約300,或甚至大於約5〇0。 果膠之鈣敏感性,係於具有〇·5%果膠,較佳為純果 膠,的一溶液中測量。於低ρΗ值混合鈣鹽與果膠,以避 免鈣離子與果膠之強烈沈澱作用。然後藉由添加乙酸鈉及 /或乙酸緩衝液,而起始果膠與鈣離子之間的反應。比較 含鈣的果膠溶液之黏度與不含鈣之相同溶液之黏度,黏度 的差異即為鈣敏感性或,係以厘泊為測量單位。 更詳細地,以2.4克果膠製備400克的溶液(〇·6%溶液) 。若並非使用純果膠,該溶液應以自下列公式計算得之果 膠量加以校正: 0.6x400 ~Α~ 其中A為試樣之果膠百分比。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製
將所用之果膠量(純果膠則為2.4克,否則如上計算得 之),精確稱重至小數點第三位。在高剪切混合器(Waring 攪切器型號34BL99,美國康迺迪克州哈福特(Hanf〇rt)之 Waring Product Division Dynamic Corporation of America) 中,以高速將果膠分散於250毫升沸騰的去離子水中約4分 鐘。(在此所用的所有去離子水,係經離子交換處理的水 ,其導電度低於1.0微西門子(S)/公分。)將經剪切的果膠 溶液倒入一配衡燒杯中,及於燒杯中添加一磁鐵以於jK 20 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) 1252235 五、發明說明(I8 ) IKA-Combimag RE0電磁攪拌器(德國史都凡(以抓如^之 Janke & Kimkel(IKA)公司)上混合。以另外的1〇〇毫升去離 子水沖洗高剪切混合器,將沖洗液添加至燒杯中的果膠溶 液。將溶液冷卻至25t:±rc,然後在擾掉下,以刚氯氯 酸將pH值調整為丨.5。添加額外的去離子水,以將溶液的 重量增加為400克,及在二個5〇χ1〇〇毫米的黏度玻璃杯 (Holm & Halby公司)中,各置入⑷克± ι克果膠溶液。 在各黏度玻璃杯中,添加一磁鐵。然後在第丨步驟中,在ika MAG ΕΟΑ 9電磁板擾拌器上㈣下,在其中_個黏度玻 璃杯中置入5亳升去離子水,而於另一黏度玻璃杯中置入5 亳升250 mM鈣離子溶液(36.755〇克/公升之二水合氯化鈣) 。接著,在IKA MAG RET電磁攪拌器上劇烈攪拌,在各 黏度玻璃杯中添加25毫升1M乙酸鹽緩衝液(68 〇4克/公升 之500 mM三水合乙酸鈉,及28·6亳升/公升之5〇〇 mM乙酸 ,1〇〇%)。在第1步驟中繼續攪拌2分鐘,然後移除磁鐵, 以Parafilm@薄膜回收溶液,及於25它靜置過夜。然後於乃 c恆溫控制的水浴中,以Brookfield LV1^度計以6〇 經 濟 部 智 慧 財 產 局 員 工 消 費 合 作 社 印 製 測畺黏度。该二溶液之間以厘泊為單位之黏度差異,係為 主體果膠之鈣敏感性或ACS。 具 而 如進一步說明於此,可藉由在足以使所獲得的果膠 有所欲的性質之條件下,以果膠分解酶處理原料果膠 製造本發明的果膠。用以製造本發明的果膠之方法,並不 顯著地影響原料的聚集化程度或酯化程度。因為聚集化程 度係有關沿著果膠主鏈之酸基集中程度,而酸基的集中程 本紙張尺度適用中㈣_標準(CNS)G規格⑽χ 297公爱 1252235 A7 B7 五、發明說明(19 度一般係與鈣敏感性有關,非常意外地在未改變聚集化程 度之下,可降低鈣敏感性。 用於處理作用之特定果膠分解酶或作為原料之果膠來 源’似乎均非關鍵,因而可例行地加以選擇或調整,以最 κ方法果膠分解酶係為人熟知的,雖然可自其他來 、于’、般係自黑麵鹵m.ger)取得,其中 存在數個變種,如見荷蘭Wageningen農業大學第17期(1975 年)之Van Houdenhoven,F· Ε· A.的博士論文,,果膠分解酶 之研究,,;及荷蘭Utrecht州立大學(丨99丨年)之 之 質 S〇meren,Μ· A•的博士論文,,黑麴菌(柳⑽7/似果膠 分^酶基因族之特徵,,,其揭露内容在此併人本案以為參 考資料。分解酶製備物中污染物之存在,特別是生物活,· 万染物之存在,將損及進行該方法與獲得本發明的果膠 月匕力,因此應只使用以實質純的形式獲得或經純化至實 均一之分解酶製備物。 如刖所指出,果膠存在於及可萃取自廣泛圍的植物來 源。該等來源包括但不限於相當常見的商業來源,諸如檸 樣、萊姆、橘子、葡萄、蘋果及甜菜。 實例 四 菌 亦 酵素·使用含有果膠分解酶(PL,e. C. 4.2.2.10)之 種不同的酵素製備物。製備物A為衍生自黑麴 (hpergH/⑽吨之果膠分解酶A(pL A),製備物B為 衍生自黑麴菌之果勝分解酶D(pL 〇)。 雖然在下列實例中所用的PL A與pL D係於歐盟補助計畫 本紙張尺度適用ΐ國國家標準(CNS)A4規格咖χ 297公羞) 1252235 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明(2〇 ) ’’AIR2- CT941345”中選砝制、皮认 斗々人 — 、殖製造的,該等酵素係天然存在於 黑麴菌(抑吻//㈣㈣中,及能以諸如^ h。滅 所述之傳統的酵素分赫激扯儿 千于、刀離與純化技術而自黑麴菌 中分離。應將該等酵素純化至實質均一 的程度’以最大化其活性’及避免不純的製備物可能產生 之污染及/或非所欲的副作用。 製備物C係商品化的黴菌酵素製劑,《能自英國 Biocataiysts公司以品名,,果膠444 L,,取得,而製備物〇係 以品名”Rohapect PTE”取得之商品化酵素製劑,其係德國 Rohm公司自基因改良有機體(麴菌屬菌種製 備而得。 酵素活性:測試製備物八至〇之果膠分解酶活性。果 膠分解酶係催化果膠之非水解性分解作用,其係藉由在c_ 4反式消除性地分開聚合物主鏈,及同時自c_5消除氫,產 生C-4與C-5之間的一個雙鍵,其進而造成在235 nm吸光 度之增加。因此,果膠分解酶的活性係於3〇〇c藉由測量235 nm光密度之增加,而以分光光度方式加以分析。分析混 a物中含有1.4¾升麥克愛爾凡(Mcllvaine)緩衝液(36.85 mM擰檬酸、126.3 mM磷酸鈉,以0.5 N氫氧化鈉將pH值 調為5·5)、0.4毫升0.0625%果膠(丹麥之哥本哈根果膠A/s 公司之B-rapid組,其酯化程度為72%)及〇.2毫升酵素。使 用莫耳吸光係數Σ 235 5500而計算活性。一活性單位(IU) 係測定為每分鐘產生1毫莫耳不飽和產物之酵素量。 當此述之方法提及一”適宜量”之果膠分解酶(或相等 本紙張尺度適用中國國家標準(cns)A4規格(210 X 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) _裝--------訂---------^^_wi 23 1252235 A7 -------— B7_____ 五、發明綱(21 ) " "~''- 效,之文子)日寸,其係指以經分解酶處理的果膠之標的分 子量及所用分解酶之比活性為基礎,而計算而得之量。所 用之酵素量,可得自等式e(y.ab)=x,其中y為分子量之降 低(因此為AMW),X為每500克果膠之酵素量(單位)。在 使用該等式時,酵素處理時間為i小時,而咖為以該酵 素測試數次後所測定的酵素特定的常數。 酵素處理·一種不同的原料各以含有果膠分解酶之製 備物進行果膠酵素處理;三種原料各為以聰萃取作用自 乾秌果皮知生之果汁、經植物甲基酯酶(pME)處理之果汁 、及乾燥的果膠粉末。 在 17〇〇公升 、差離子換處理的水中,添加6〇〇公斤的檸檬皮。將製備物 加熱至70C及攪拌2小時,然後添加98公升的62%硝酸, 及進行萃取作用1小時。接著,在萃取物質中添加1〇〇公斤 、、、氏水以促進過濾、作用。將該製備物抽真空及與石夕藻土過 濾(空白過濾”)。經過濾的果汁在強陽離子交換器(irc 12〇 ,Bayer公司)上進行離子交換;蒸發至原來體積的5〇%, 而產生在重罝/重量乾重基礎上約3與約5%的果膠濃縮物 ,及冷卻至室溫。藉由添加氨而將pH值調整為5.5(以去離 子水自25%氨稀釋為2%溶液),及添加一適宜量之果膠分 解酶。 進行酵素反應,直至達到所欲的分子量。為終止反應 ’藉由添加稀釋的硝酸(10%體積/體積)而將pH值降至2.5 ,及使用加熱套將溫度自室溫升至8〇°C達10分鐘。在1:3 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) _裝--------訂---------· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 24 1252235 A7 ---------— B7 __ 五、發明說明(22 ) 的比例,果膠於80%的2-丙醇中沈澱。壓縮沈澱的果膠, 及以6〇%的丙醇清洗。在壓縮之後,果膠於70°C乾燥16- 20小時。將乾燥試樣磨碎,及過篩通過一個〇.25毫米的測 試篩。 里酶(PME)4理之畢汁。在25,500公升經 離子換處理的水與126公升62%硝酸中,添加以⑻公斤的 檸檬皮。進行萃取作用7小時。在萃取物質中添加1〇〇公斤 紙漿,以促進過濾作用。將該製備物真空過濾,接著空白 過遽。經過濾的果汁在強陽離子交換器(IRC 120)上進行 離子交換;蒸發至原來體積的5〇%,而產生在重量/重量 乾重基礎上約3與約5%的果膠濃縮物;及冷卻至45r,及 藉由添加2%氨而將pH值調整為5.5。 添加一適宜量的植物甲基酯酶,及進行反應直至達到 所欲的酯化程度。所欲的酯化程度係由關係式y = 16 乂所 決定’其中}^為%0£之變化(因此為,而X為每公斤 果膠之氨的克數(克氨/公斤果膠)。在反應期間,藉由自 動滴疋2%氨而維持ρΗ值之恆定。藉由添加硝酸至ρΗ值為 2.5及加熱至80它達10分鐘,而將植物甲基酯酶去活化。 在冷卻至室溫後,以2%體積/體積之氨溶液將?11值調為5.5 ,及添加一適宜量之果膠分解酶。進行酵素反應,直至達 到所欲的分子量。為終止反應,藉由添加稀釋的硝酸而將 ΡΗ值降至2.5,及將溫度升至8(TC達1〇分鐘。在果膠與丙 醇的比例為1:3之下’於80%的2-丙醇中沈澱果膠。壓縮沈 殿的果膠,及以60%的2-丙醇清洗。在壓縮之後,果膠於 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------^--------- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 25 1252235 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明(23 ) 70°C乾燥16-20小時。將乾燥試樣磨碎,及過篩通過一個 0.25毫米的測試篩。 乾燥的果膠粉末。在70°C與劇烈攪拌下,將500克果 膠溶於10公升經離子換處理的水中。將果膠溶液冷卻至室 溫,及藉由添加2%氨而將pH值調為5.5。添加一適宜量之 果膠分解酶。進行酵素反應,直至達到所欲的分子量。為 終止反應,藉由添加稀釋的硝酸而將pH值降至2.5,及將 溫度升至80°C達10分鐘。果膠(1:3)於80%的2-丙醇中沈澱 。壓縮沈澱的果膠,及以60%的2-丙醇清洗。在壓縮之後 ,果膠於70°C乾燥16_20小時。將乾燥試樣磨碎,及過篩 通過一個0.25毫米的測試篩。 結果如下所示:
第1例-PL D
物質 DB DE △ CS MW YOGC VIS C YOG/VIS 原料果膠 13 72 298 144 169 148 88 PLD-1A 13 72 1 81 101 66 65 PL D-2A 13 72 1 67 94 0 0 PL D-3A 13 72 2 42 48 0 0 PL D-4A 13 72 1 34 SEP SEP SEP PL D-5A 13 72 2 25 SEP SEP SEP
第2例-PL A
物質 DB DE △ CS MW YOGC VIS C YOG/VIS 原料果膠 13 72 298 144 169 148 88 PL A-1A 13 71 90 108.5 142 70 49 PL A-2A 13 71 30 95 88 63 72 PL A-3A 13 72 6 94.5 84 42 50 PL A-4A 13 72 1 71.5 37 0 0 PL A-5A 13 72 0 41.5 SEP SEP SEP 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) 26 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)
1252235 A7 B7 五、發明說明(24 ) 第3例-444 L 物質 DB DE △ CS MW YOGC VIS C YOG/VIS 原料果膠 13 72 298 144 169 148 88 444L-1A 13 71 14 106 126 104 82 444L-2A 13 72 3 96 112 94 83 444L-3A 13 71 1 83 96 52 54 444L-4A 13 72 2 70 75 39 52 444L-5A 13 72 3 70 72 35 49
第4例-PTE 物質 DB DE △ CS MW YOGC VIS C YOG/VIS 原料果膠 13 72 298 144 169 148 88 PTE-1A 13 71 18 102 117 91 78 PTE-2A 13 72 18 99 109 78 72 PTE-3A 13 72 10 71 75 52 69 PTE-4A 13 70 3 66 49 55 112 PTE-5A 13 72 1 48 SEP SEP SEP PTE-6A 13 71 1 37 SEP SEP SEP (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 雖然該等結果係使用酵素處理方式獲得,亦可使用化 學處理方式而獲得可相比較的結果,只要該處理並不改變 原料果膠之聚集化程度與酯化程度即可。更詳細地,可使 用任一經由/5消除作用而造成1,4-配醣鍵結分開之化學處 理方式,以製造具有能與上述酵素處理所得果膠相比較的 性質之果膠。例如,以鹼性試劑諸如氫氧化鈉處理果膠溶 液,同時將該溶液的pH值提高至7以上,應該能夠產生類 似的結果。 本發明在此處之討論必須參照一些特定的方法與材料 。該等方法與材料之列舉僅為說明性質,而非在任何方面 構成本發明範疇之任何限制。應預期嫻熟技藝者可辨識與 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) 27 A7 1252235 _B7__ 五、發明說明(25 ) 施行此處所提供特定教導之變化或替代方案,而不偏離本 發明之範®壽。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)
-ίχ 丁 . 11 mmKM ϋ 11 a_^i ϋ·- mmmmam 】 1_ ϋ· I tmmmm ϋ ϋ I 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 28 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐)
Claims (1)
1252235
A8 B8 C3 D8 申請專利範圍 第89105953號專利申請案申請 1 · 一種果膠’其聚集化程度係至少約為10%,酯化程度至 少約為55%,及不大於約1〇〇厘泊。 2·如申請專利範圍第1項之果膠,其△ CS係不大於約30厘 泊。 3·如申請專利範圍第2項之果膠,其ACS係不大於約20厘 泊。 4·如申請專利範圍第3項之果膠,其Ac:s係不大於約1〇厘 泊。 5. 如申請專利範圍第4項之果膠,其係不大於約⑽ 泊。 6. 如申印專利範圍第5項之果膠’其△匸§係約為〇厘泊。 7. 如申請專利範圍第3項之果膠,其ACS係介於約〇厘泊 與約20厘泊之間。 8. 如申請專利範圍第7項之果膠,其㈣係介於約〇厘泊 與約10厘泊之間。 9·如申請專利範圍第w之果膠,其聚集化程度係至少約 為 20%〇 ------.---— 裝--- (請先閱讀背面之注意事項寫本頁) •線- 經 濟 部 智 慧 財 產 局 員 工 消 費 合 作 社 印 製 10·如申請專利範圍第1項之果膠,其聚集· 約 30% 〇 11·如申請專利範圍第10項之果膠,其聚集 15%與約25%之間。 化程度係不大於 化程度係介於約 12.如申請專利範圍第1項 果I,其酯化程度係至少約為 60% 〇 29 1252235
、申請專利範圍 3·如申請專利範圍第12項 70% 〇 之果膠’其酯化程度係至少約為 1 4 .如申凊專利範圍第1 3項 δηο/ 果私,其酯化程度係至少約為 15 ·如申δ月專利範圍第1 只心果.,.其酯化程度係介於約 55%與約80%之間。 16.如申請專利範圍第15項 之果膠,其酯化程度係介於約 60%與約72%之間。 17·如申請專利範圍第1項之果 心禾I,其分子量係至少 40,〇〇〇 〇 18·如申請專利範圍第17 貝 < 果.,其分子量係至少 50,000 〇 19·如申請專利範圍第18項之果膠,其分子量係至少 70,〇〇〇 〇 約為 約為 約為 膠’其分子量係至少 約為 膠,其分子量,係介於約 膠,其分子量係介於約 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 2 0 ·如申請專利範圍第19項之果 200,〇〇〇 〇 2 1 ·如申請專利範圍第17項之果 50,000與約 2〇〇,〇〇〇之間。 22·如申請專利範圍第21項之果 70,000與約 9〇,〇〇〇之間。 ”·如申請專利範圍約項之果膠’其聚集化程度係介於約 10與約15之間,酯化程度係介於約7〇與約乃之間,及△ C S係不大於約18。 24.如申請專利範圍第23項之果膠, /'△cs係不大於約14 30 1252235 AS ^ B8 CS D8 六、申請專利範圍 Ο 25·如申請專利範圍第24項之果膠,其△ CS係不大於約i〇 〇 26·如申請專利範圍第25項之果膠,其△ CS係不大於約6。 27. 如申請專利範圍第26項之果膠,其係不大於約3。 28. 如申請專利範圍第27項之果膠,其△ cs係不大於約2。 29·如申請專利範圍第28項之果膠,其ACS係不大於約工。 3〇· —種用以製造一果膠之方法,其中該方法之步驟包括在 足以使所產生之加工果膠的△ C S低於該原料果膠的△ CS之條件下,以一果膠分解酶處理聚集化程度至少約 為10%、酯化程度至少約為55%及大於約〇厘泊之 一原料果膠。 31. 如申請專利範圍第30項之方法,其中該原料果膠之聚集 化程度係至少約為2〇〇/。。 32. 如申請專利範圍第3〇項之方法,其中該原料果膠之聚集 化程度係不大於約3〇〇/。。 33. 如申請專利範圍扣項之方法,其中該原料毛膠之聚集 化程度係介於約1 5 %與約2 5 %之間。 34. 如申請專利範圍第30項之方法,其中該原料果膠之醋化 程度係至少約為55%。 3 5 ·如申請專利範圍第3 4項之古、土甘击 貝之方法,其中該原料果膠之酯化 程度係至少約為70%。 36·如申請專利範圍第35項 只之方法其中该原料果膠之酯化 程度係至少約為80%。 本乡氏張巧適用中國國家標準(CNS)A4驗^__ ..-丨丨1丨——丨丨»!裝 (請先閱讀背面之注意事項 寫本頁) •線- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 I I I 1 _ -31 - 1252235 A8 B8 C8 D8 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 申請專利範圍 37·如申請專利範圍第3〇項 々床’其中該原料果膠之酯化 程度係介於約55%與約8〇%之間。 38·如申請專利範圍第37項 只 < 万法,其中該原料果膠之酯化 程度係介於約60%與約72%之間。 39·如申請專利範圍第3〇項之方法,其中該原料果膠之△ CS係至少約為20。 40.如申請專利範圍第39 J盲夕士、+ ^ A, ^ rr 固示項之方法,其中該原料果膠之△ CS係至少約為200。 41·如申請專利範圍第4〇項 ㈤术貝之方法,其中該原料果膠之△ CS係至少約為300。 42. 如申請專利範圍第41項之方法,其中該原料果 CS係至少約為500。 43. 如申請專利範圍第3〇項之方法,其中 CS係不大於約20厘泊。 44. 如申請專利範圍第43項之方法,其中該加 CS係不大於約10厘泊。 45. 如申請專利範圍第44項之方法,其中該加 C S係不大於約5厘泊。 46. 如申請專利範圍第45項之方法,其中該加 CS係約為0厘泊。 47. 如申請專利範圍第30項之方法,豆中 乃法/、中d亥加工果膠之△ CS係介於約0厘泊與約2〇厘泊之間。 ’ 48·如申請專利範圍第47項之豆 /2:,、甲邊加工果膠之△ CS係介於約0厘泊與約1〇厘泊之間。 膠之△ 該加工果膠之△ 工果膠之△ 气果膠之△ 工果膠之△ 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 297公釐) 32 1252235 、申請專利範圍 49.如申請專利範圍第3〇項之方法,其中該原料果膝之分子 量係不大於約240,〇〇〇。 5〇·如申明專利範圍第49項之方法,其中該原料果膠之分子 量係不大於約150,〇〇〇。 51.如申請專利範圍㈣項之方法,其中該原料果膠之分子 量係至少約為1〇〇,〇〇〇。 52·-種用以製造—果膠之方法,該方法之步驟包括·· a) 在足以使所產生之去酯化果膠具有至少約為1〇% 的聚集化程度、至少約為55%的酯化程度及大於約〇厘 泊的ACS之條件下,以植物果膠甲基酯酶處理一具有 至少約10%的聚集化程度、至少約7〇%的酯化程度及大 於約0厘泊的△ c S之果膠;及 b) 然後在足以使所產生之果膠具有至少約1〇%的聚 集化程度及不大於約20厘泊的Acs之條件下,以果膠 分解酶處理該去酯化果膠。 53 ·如申巧專利範圍第丨項之果膠,其可被用於一可食性組 成物中。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印制衣 54·如申明專利範圍第53項之果膠,其中該可食性組成物進 一步包括酪蛋白。 55·如申請專利範圍第54項之果膠,其中該可食性組成物係 為一飲料。 56. 如申請專利範圍第55項之果膠,其中該飲料係為一酸化 牛奶飲料。 57. 如申明專利範圍第53項之果膠,其中該果膠之△ cs係 本紙張尺度適用中國國家標準(〇Ν3)ϋ各⑽χ 297公£ 1252235 A8 B8 CS D8 申請專利範圍 不大於約20厘泊。 58.如申請專利範圍第53項之果膠,其中該果膠之聚集化程 度係介於約15%與約25%之間。 59·如申凊專利範圍第53項之果膠,其中該果膠之酯化程度 係介於約60%與約72%之間。 60. 如申請專利範圍第53項之果膠,其中該果膠之分子量係 介於約70,000與約90,000之間。 61. —種用以增加一可食性組成物的儲存安定性之方法,該 方法包括以聚集化程度至少約為丨〇%、酯化程度至少約 為55%及ACS不大於約1〇〇厘泊之一果膠,而配方製造 該可食性組成物。 (請先閱讀背面之注意事項β寫本頁) 费 裝 --線- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) 34
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