TWI236481B - Process for the preparation of acetyl-amidiniophenylalanyl-cyclohexylglycyl-pyridinioalaninamides - Google Patents

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1236481 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（1 ) 本發明有關一種製備具有式I，7 # ^八1之乙醯基-胨基苯基丙胺 酸基··環己基甘胺酸基-σ比ϋ定丙胺gf胺類的方、去

1〇其中陰離子X係生理上可接受之陰離子，及其同質物，其 係為有效之血液凝結因子Xa抑制劑，且可用於例如預防 血栓形成。本發明方法包括使2-[>乙酸胺基_3_(4.基苯 基）丙醯基胺基]-2-環己基乙酸—其係由孓[2_乙酸基胺基 (4-氰基苯基)-丙烯醯基胺基]-2-環己基乙酸藉著不對稱氫 15化且將乳基轉化成棘或其鹽而製得一與3-(2-胺基-2-胺基甲 醯基乙基)-1-甲基吡啶鎮鹽或其鹽進行偶聯。本發明另外 提出供此方法使用之起始物質及中間物、其製法及乙醯基 -(8)-4-诚基苯基丙胺醯基-(S)-環己基甘胺醯基#)__〇_曱基_ 3-吡啶基）丙胺醯胺類之二甲苯磺酸鹽。 2〇 特定臨床狀況下，可能在胎兒時期形成諸如例如深靜 脈血栓形成、心肌梗塞或穩定或不穩定之心絞痛的高風險 性、血液;旋結糸統之失调及血检形成。然而，血检形成之 預防中，不期望過度地抑制血液凝結系覺或甚至是完全地 抑制血液凝結系統，因為此種情況可能導致有危及生命之 '3" 90003a 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ----------I--- · I I (請先閱讀背面之注意事項寫本頁) 訂· _線·

五、發明說明（ 1236481 出血。目前使用之凝血抑制劑諸如諸如肝素、阿司匹靈或 水蛭素不具有最佳之性質曲線，因為出血而導致併發症， 所述之臨床狀況下，無法防止血管阻塞。動物實驗顯示如 液政結酶因子Xa之特異性抑制劑極具可信度地防止血检 5之形成，而不像使用直接凝血酶抑制劑時所發生之出如。 式ί之化合物及其同質物係為因子办之特異性高藥效抑 制劑，可使用靜脈内、皮下及經口投藥方式。 式1之化合物及其同質物係描述於WO-A-95/29189及 其對應之US-A·5849510中。根據WO-A-95.89，其係 10藉固相合成法使用保護基技術製傷，其中3_吼。定基分析係 使用Κηοπ:鍵合基偶聯於樹脂，之後與環己基甘胺酸偶 聯’射咬氮原子經季驗化，該二肽與乙醒基领基苯基 丙胺酸―由4_氰基苯基丙胺酸製備__偶聯，該產物在由樹 月旨切下之後，藉層析純化。此固相方法不適於製備研究工 1S作諸如毒性及臨床研究所需之數公斤用量，或甚至使用於 工業規模之合成。 |藥活性化合物僅有在可於所需之規模下進行製備且 具有適當之純度下’方可接受作為研究產物或稍後使用於 患者，其中純度--若為具有不對稱中心之化合物__特別亦 20包括立體化學純度。式I之化合物在臟翁基及队曱基吼唆 鑌基中含有具有正電荷之胜肽二陽離子。具有不同陰離子 X諸如乙酸根、氯基、反丁烯二酸根、苄酸根、酒石酸 根、順丁烯二酸根、三氟乙酸根、甲苯磺酸根、硫酸根或 帕莫酸根(pamoate)之式ϊ化合物中，發現僅有三氟乙酸鹽 -4- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -------------— (請先閱讀背面之注意事項寫本頁) - -線- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1236481 A7 B7 五、發明說明（3 ) (式I之化合物，X- = CF3C〇2-)係為結晶。然而，該三氟乙 酸鹽之熱安定性不足，其適用期無法令人滿意，就生理觀 點而言，該鹽較不利於長期使用。已發現化合物I之所有 其他鹽的X-射線粉末圖明顯地係非晶性。該鹽之非晶性 5 質對於大量製備式I之化合物而言為大問題，因為其無法 結晶，而分步析出係可使用於大量生產的唯一純化方法。 然而，析出之純化效率當然遠低於結晶，因此需於儘可能 穩定之反應中使用適當之陰離子X製備式I之（甚至是粗 製）化合物，以於最後藉由分步析出製得具有臨床可接受 10 純度之產物。然而，該製備方法自然亦需具有可接受之因 子諸如例如產率、步驟數目或起始物質之可利用性及成 本。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 ----------------- (請先閱讀背面之注意事項β寫本頁) 線· 製備式I化合物之方法—其中非於固相上進行—係描述 於WO-A-97/22712中。此方法中，式I化合物中所含之三 15 胺基酸單元係依與WO-A-96/29189相同之順序鍵合。胺基 被第三丁氧幾基(Boc)保護之(S)-3-°比唆丙胺酸先被轉化成 .醯胺，隨之在移除保護基之後，與二肽與乙醯基-(S)-4-氰 基苯基丙胺酸偶聯劑，形成之三肽中的氰基藉著與硫化 氫、曱基碘及氨進行反應而轉化成脎，而該產物氮原子經 20 季鹼化。產物於三氟乙酸鹽形式下藉蒸發最後反應步驟所 得之反應溶液、溶解殘留物、添加三氟乙酸、過濾並冷凍 -乾燥而單離。然而，發現此種方法所得之產物的純度， 包括位體化學純度，不符合需求，需要複雜之層析純化， 導致嚴重之損失，而在大規模進行該方法時令人無法接 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） !23648l

、發明說明（ 10 15 =。為自生理觀點上避免對於三！^酸根_子 f/卜需使_子交制析將該產物轉化成不 Λ方法具有相對程度之技術優勢，例 =恤或於低溫下操作、及使用昂貴之起始L;二 :ΓΙ化合物中之構建單元之該三種具有鏡像異構純: 自该乳基形成)係市售品，但此等化合物極為昂貴）。是 仍需要-種可穩定地進行以大職製備具有適當之陰 離子X的式I化合物的方法。 此項目的係藉由本發明製備式J化合物之方法達成， 其包枯藉催化氫化轉化式η之化合物，使用酸Ηχ將氛基 轉化成脒基轉化成式m化合物或其鹽，之後式ΠΙ化合物 或其鹽與式IV化合物或其鹽與酸Ηχ反應，產生式j之化 合物，其中陰離子X係生理上可接受之陰離子。 .I II — — — — — — — — - I I (請先閱讀背面之注意事項寫本頁) 訂： 經濟部智慧財產苟員工消費合作社印製 20

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3 A Η V ♦、cίν 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） i線· 1236481 五、發明說明（6

10 15 貫例有甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁美、显 第三丁基。 土 /、丁基及式！及IV之化合物與該酸HX中之生理上可接受 子X可為例如氯基、溴基、碘基、曱磺酸根、曱笨^辟 酸根、乙酸根、苄酸根等。若為多價陰離子， ^ 根，則X係、為陰離子同等物。XS示之較佳陰離子係為即 使式I化合物係於相對高劑量下使用且使用沐# 亦無生理上之無障礙，且/或其使式〗化合物具^較佳=醫 藥處理及醫藥作用性質，例如於水中之適當溶解产，^ 或其赋予式…V化合物較佳之進行本發：方法又之技術 的性質’例如方法的簡化、於所用溶射之適t溶解度， 其易於析妓/或祕等。本發日她佳具體實财，X係為 曱苯-4,磺酸根（ = 4-曱苯磺酸根=4 呀 LHrC6H4-S〇3- = TosO·) 或鐵基;特佳具體實例中，X係、為n 此特佳具體實例中，本發财_備二甲苯魏鹽形式之 式I化合物的方法，即式la之化合物， 裝--- Γ请先閱讀背面之注意事項寫本頁) . --線·

丁 osCT

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1236481 A7 經濟部智慧財產局員工消費合作祍印製 五、發明說明（ 其包括式η之化合物藉催化氣化轉π， 轉化成式111之化合物或其甲笨-4韻鹽，化合 物或其甲苯_鹽與式IVa之化合物或其甲笨_4_贿鹽反 應，產生式1匕合物。就生理觀點而言，式Ia化合物 5中所含之曱本石尹、酉义根陰離子性無障礙，且式^之化合物 在進行本發明方法時特別具有良好之性質。式Ia化合物 易於析出且易於過慮，而於特高產率及純度丁得到。本發 明亦提出式1a化入合物本身及其溶合物，例如盘水或醇之 加合物，式Ia化4作為因子χ&或用於治療包括治療及 預防錢性栓紐礙之用途，諸如血栓形成、心肌粳塞或 St及式二合物用於製備此等醫藥應用所使用之 樂物的用途，及包含有效量之式Ia化合物及率學上可接 受之載體H多學切接受之賦及 —之醫藥配製劑（或醫藥組合物）。式！化合物包括 1 Μ 合物之用途及包含彼者之醫藥配製劑之細節係描述於游 :=9 A US‘5_°中，其以引述方式併入本發 除了前述由式π^ν化合物或其 及製備式Ia化合物之方法之外 1化口物 一物之方法，其包括式卜 酸鹽與式Wa或其甲苯_4_石黃酸鹽進行反應，以、 之化合物。此方法巾，意㈣純佳料 定二甲苯石黃酸鹽形式之式j化合物，其特m 別穩定且可依簡單之方式進行，可對應地應用前 10 15 劑 化 --------------裝--- (請先閱讀背面之注意事項0寫本頁) ir°J·- •線. 20 -9- ^紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱

-n H I I 1236481 A7 B7 五、發明說明（8 ) 針對式III及IV化合物或其鹽之反應的所有說明，即前文 中使用於胜肽偶聯步驟者。 10 NH HX 〇

'NK OH III +

TosO' 、CH0 --------------裝--- (請先閱讀背面之注意事項寫本頁) 訂： 15 HX 〇-

TosO~ CH, la -·線· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 式I化合物亦可由式V表示，其顯示可為酸HX之酸 加成鹽及式V中所含之單陽離子性經脎基-取代吡啶鑌鹽 (=胺基曱醯醯亞胺基=胺基-亞胺基-曱基-C(二NH)-NH2取 代式I中經質子化、帶正電荷月米基-C(=NH2+)-NH2)。 -10- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1236481 A7 五、發明說明（9 5 NH HX 〇

X 一 CH.

V 10 15 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 + #該化合物亦可對應地依不同方式命名，例如含有帶正 電荷脒基以作為取代基及兩個帶負電荷陰離子X以作為配 衡離子的二陽離子性吼咬鑌鹽，或為酸之酸加成鹽及 含有游離職以作為取代基及帶有負電之_子X以作為 ^衡離子之單騎子㈣㈣鹽。視烟條件而定，其他 7名方式亦適用，例如由胜肽命名法所衍生之名稱，其中 V正電荷之脎鑌基（=脒基）或游離胨基及帶正電荷之吡啶 鑌吡啶基)被視為取代基。式Ϊ化合物例如可稱為二 甲笨J夂3-{(S)-2-((s)_2-乙醯胺基_3_(4_脎基苯基）丙醯胺 基己基6驢胺基]-2-胺基甲紅基}小甲基吼咬鑌或 曱本石頁酸3-{(S)_2-((S；j-2-乙酸胺基冬(‘月来基苯基）丙酿胺 基)-2-環己基乙醯胺基]_2_胺基甲醯乙基卜丨_曱基吡啶銪曱 笨-4-磺酸鹽，或為曱笨磺酸队乙醯(胺基-亞胺基-甲 基)-L-笨基丙胺醯基丄_2-環己基甘胺醯基_3_(^曱基吡啶鑌 -3-基)-L-丙胺醯胺曱苯磺酸鹽。、進仃本發明之方法時，可藉著先依立體選擇性方式氫 化式II之化合物以產生式VI化合物，之後將氰基轉化成

(請先閱讀背面之注意事項| --- π寫本頁) -·線· 1236481

、發明說明（ 月米基，或先將氰基轉化成脒基，之後進行立體選擇性氫 化，而轉化成式III之化合物。 二

---------------- (請先閱讀背面之注意事寫本頁) 以先進行氫似產生式VI之化合物，之後將氮基轉 化成肺為佳。 式II之脫氫二肽中的OC雙鍵的立體控制性氫化可 使用選擇性不均勻觸媒或對掌性過渡金屬錯合物進行。以 15使用铑⑴或釕（Π)之對掌性金屬錯合物進行為佳，以鍺（1) 特佳。該過渡金屬觸媒可為陽離子性或中性，可於單離形 式下使用或於氫化介質中由對掌性配位基及觸媒先質於原 位形成，例如铑鹽*如[Rh(c〇D)cl]2或[Rh(c〇D)2]+Y (COD係為1，5-環辛二烯，此情況下之γ係為例如四氟蝴 20酸根）。該氫化觸媒可在均勻溶解形式下存在於氫化介質 中，或其可藉著附著於固體載體上而不均勻化，結果可在 氫化結束之後藉過濾而輕易地取出，而再使用於後續氫化 批料中。就過渡金屬錯合物所使用之對掌性配位基而言， 適合使用數種不同之化合物。該對掌性配位體之評論可參 -12- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規袼（21〇 X 297公餐） 訂，· -線. 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1236481

五、發明說明（12 ) 如鹼金屬或鹼土金屬鹽，諸如鈉鹽或鉀鹽，前述其製備方 法及其作為中間物之用途，尤其是作為醫藥活性物質之中 間物。 式VI化合物中之氰基可藉各種本身為熟習此技藝者 5已知之方法轉化成脒，例如描述於WO-A-97/22712所述之 方法，然而，在工業規模上進行時具有數項缺點，例如使 用硫化氫。該轉化較佳係藉著先添加羥基胺於式VI化合 物中之氰基，而形成式VII之N老基腓中間物為佳。式 VII之化a物卩返之依簡單方式藉氫解，即藉與氫於氫化觸 10媒存在下反應，轉化成式m巾之縣。此種反應序列之原 理係描述於例如 H.Jendmlla 等人，Tetrahedr〇n 51(1995) 12047 中。 15 經 濟 部 智 慧 財 產 f 消 費 合 社 印 製 20 所需之羥基胺較佳係於原位自羥基銨鹽例如氯化羥基 銨或硫酸羥基銨及鹼例如鹼性鈉或鉀化合物或三級胺製 備。使用於式VI化合物與羥基銨鹽之反應中的鹼以碳酸 氫鈉為佳。該羥基胺或羥基銨鹽較佳係於過量下使用，例 如每莫耳式VI化合物約1至約2莫耳。適於_基胺或 ^基知:鹽反應之溶劑係為例如低級醇。特佳之溶劑係為曱 醇。式VII之化合物以於約20至約65t：溫度下製備為 佳，尤其是約40至約6(TC之溫度下。若採用羥基銨鹽， 則添加之鹼亦將式vi化合物中之羧酸官能基或式νπ化 合物中者轉化成對應之鹽。若需要式νπ之队羥基脒的中 間物單離，則此化合物可依較佳方式於羧酸官能基的鹽形 式下單離，即若所使用之鹼係為鈉化合物，羧酸之鈉^形 -14-

1236481 A7 _B7___ 五、發明說明（13 ) 式，其可藉著濃縮反應混合物及/或與相對非極性溶劑摻 合而析出，且藉過渡或離心取出。 式VII化合物或其鹽產生式III化合物之氫解反應可 在習用於催化氫化之條件下進行，例如於習用貴金屬觸媒 5 諸如碳上鈀存在下。該反應條件係視所使用之裝置而定。 氫壓可例如介於約1至約30巴之範圍内，尤其是約5至 約25巴，而反應溫度可由約20至約70°C，尤其是約40 至約60°C。該氫解以於酸性介質中進行為佳。使用於氫解 之較佳溶劑係為-尤其是使用鹽形式之N-羥基脒-極性溶 10 劑，例如低級醇或乙酸。特佳溶劑係為乙酸。形成之式III 化合物可原樣單離或可為酸加成鹽形式（式III之脎化合物 本身不為具有游離脎基及羧酸基之形式，其係以式III表 示，但係為式Ilia之互變異構形式，即甜菜鹼或兩性離 子，其中羧酸基解離成羧酸根陰離子，該胨單元係質子化 15 成胨錯陽離子）。 -------------.— (請先閱讀背面之注意事填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） •線· 1236481 A7 五、發明說明（1‘ B7 10 15 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 在酸存在下，其甚至 ^ 所使用之溶劑係為乙酸 ^於解過程中，例如，若 加成鹽形式之式化a /、可於加工期間添加，則得酸 成式之鹽，直中因此’使用式HX之酸，形 為佳’例如碟基或曱苯續酸根上可接受之陰離子 酸HX與式III化合物之_ ^ " 之化合物係為丽述 形式下單離，則酸111化合物係於酸加成鹽 物含有與欲製備之式！化:物=擇，使得式vm之化合 製備式之二甲苯續酸鹽° :=。因此’若欲 離，則較佳製備式观 =1化合物如鹽形式單 τ η· 之甲本石頁酸脎鑌，其中χ = Τ—!如於加工期間添加甲 就胜肽與式IV化合物之值胳 /、义如則文所述， τττπΜ，ρ、物之料而言，可使用原始狀態之式 二IIIa之甜菜驗（或兩性離子）或式vm之縣 知鹽（-HX與式m化合物之鹽），兩者皆產生相同之純度 及產率。式III化合物以式版之甜菜驗(或兩性離子)形式 單離為佳’且原樣使用於胜肽偶聯。若於乙酸中進行氫 解則原先形成之式III化合物的乙酸鹽（=式m化合 物，其中x-=乙酸根）可藉著自水再結晶而轉化成甜菜 驗。 本發明亦提出一種式III之化合物及其鹽，及式IIIa 及VIII化合物本身，即⑻[⑻1乙醯胺基冬(4_脎基苯 基）丙醯胺基]-2-環己基乙酸之甜菜鹼（兩性離子）及其鹽 式，前述製備方法及其作為中間物之用途，尤其是作為 藥活性化合物所使用的中間物。 -16- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） 形 醫

丨裝 (請先閱讀背面之注意事填寫本頁) 1236481 A7 B7 五、發明說明（ 10 式縣（鹽形式或以式ma之甜菜驗形式為佳)心 1之°比^丙胺酿胺或其鹽產生式1化合物之胜肽偶耳 藉熟習此技#者已知之習用偶聯方法進行。 該t定基丙胺酿胺較佳係於其與酸Ηχ之鹽的形式下 使用，即式IX之二陽離子鹽，其中陰離子χ係以生理上 可接受之陰離子為佳。

IX (請先閱讀背面之注意事填寫本頁) 裝 15 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 /式IV之化合物或式ιχ之化合物中的陰離子χ及… 採用式VIII之鹽形式的式m化合物—式νιπ化合物中 陰離子以欲製備之式I化合物的陰離子為佳，即若製備 la之化合物，則係為曱苯磺酸根陰離子。若式HI化合 或式IV之化合物皆非於其與HX酸的鹽形式下使用於, 胜版偶，，則第二當量之陰離子X—除由式IV化合物所 入之當量陰離子x以外，用以製備式I化合物所需者— ；田i & HX或其HX酸之鹽的形式下於胜狀偶聯的 應混合物加工期間添加。 、，適於活化式ΙΠ(或Ilia或VIII)化合物中羧酸官能基 ㈣根官能基之胜職聯劑實例可為碳化二亞胺，諸如 如二環己基碳化二亞胺（DCC)或的異丙基碳化二亞 (DIC)、或糖醛鑷鹽，諸如四氟硼酸〇·[(氰基-乙氧羰基_ -17- 4^1 1236481 A7 B7 五、發明說明（ 17 10 15 20 刀（；/產物析出之後）〇特佳狀況係於DMF中進行偶聯，因為此者較容县白 〇至約3〇 二:產物移除。該偶聯劑較佳係於由約 於約HTC下授料;^丁，4寸佳係約0至約坑，例如先 Π驟之料目1應混合物，之後使其溫至室溫。該偶 ^ 、體實例中，若式Ilia之兩性離子形式的式 111化^物f料IX之二陽離子鹽進行反應，則通常於^ 中顯現較佳pH(若式ιχ化合物中之X係為甲 本石頁酸根，則約3.3至峋，而不需添加附加之驗。該ρΗ 可視情/兄猎者添加驗諸如三級胺而適當地調整。若式ΠΙ 化口物及式iv化合物係於與酸Ηχ之鹽的形 偶聯1胜狀偶聯需添加至少一當量之驗，例如三級胺，' 諸如二乙基胺，或較佳Ν·乙基二異丙基胺。 、山偶聯步驟之較佳緒實财，其巾所制之活化劑係 為碳，二亞胺與Ν-經基苯并三4或Ν-經基苯并三唾試 d諸如例b HOObt，則此試劑可存在理想配比量或僅存 在催化里，因為該N㈣試劑係於式IV化合物與由式m 化合物與N_M基試卿成之中間活性㈣行反應的期間 再生。例如，若該偶聯係使用DCC/HOObt進行，則該 HOObt之較佳用量係為每莫耳式m化合物約〇」5至約^ 莫耳’特佳用量係為每莫耳式m化合物約〇 2至約〇 3莫 耳，例如約0.25莫耳。較佳係採用稍微過量之碳化二亞 胺。若該偶聯係使用DCC/H00bt進行，則較佳用量係每 莫耳式III化合物約U至約丨4莫耳，特佳係每莫耳式 m化合物約1.2至約1.3莫耳，例如約L25莫耳。反應ς •19- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 χ 297公釐

-181236481 A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 、發明說明 添加之順序可變化。較佳係先置入式III及IV之化合物或 其鹽、可*添加之任何驗及N-說基試劑，且量入碳化一亞 胺，例如使用於溶劑諸如DMF或NMP中之溶液形式，使 用數小時時間’例如約5至約1〇小時。此方法中，於約 io°c之反應溫度下’之後於至溫下攪拌所進行之偶聯通常 迅速地完成，實質上定量地進行，產生高純度之產物。 就加工而言，該反應混合物以先過濾為佳，該產物左 之藉著添加適當之有機浴劑而析出。若該偶聯係於 或NMP中進行，則該析出係使用過量之低級_或曱義 基酮進行為佳，特佳係逐滴添加或藉泵DMF溶液或 溶液至達到過量丙酮或曱基乙基酮。析出之產物藉過淚^ 離心單離，洗務，若需要增加純度，則依相同方式析， 二次或第三次(例如將該產物溶於DMF中，藉著將兮、、办第 泵入丙酮或甲基乙基’中而使其析出）。使用此方法，液 15部分副產物係保留於溶液中，在析出兩次之後，得到大 之化合物（二曱苯磺酸鹽），產率約91百分比，而纯 97百分比(+約2.4百分比之非鏡像異構物）。 \、'、勺 式II及IV之起始物質或其鹽一使用於前述本發 法中-可藉例如下述方法製備。前述本發明較佳方^方 20式11之起始物質及/或式1v之起始物質或其鹽係藉下、t， 法製備或部分藉下述方法製傷。 < 方 10 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格 (請先閱讀背面之注意事填寫本頁) --線. -20- 1236481 A7 B7 五、發明說明（2G ) 間物。式II化合物之鹽可列示實例有例如驗金屬及驗土金 屬鹽’绪如納鹽或卸鹽。 所而之具有光學純度之(s)-環己基甘胺酸（式XII)較佳 係藉以下二路徑中之一製備為佳。一路徑中，所使用之起 5始物質係為消旋苯基甘胺酸（式χπΐ)，其藉著於標準條件 下將芳族環轉化成消旋環己基甘胺酸（式χιν)，例如於貴 金屬觸媒諸如碳上铑存在下，於鹽酸中，於約8〇至約12〇 1下，例如約loot下，於約10至約3〇巴之氫壓下進行 氫化。該消旋環己基甘胺酸隨之於標準條件下，於胺基 10上，使用例如乙酸酐，於驗諸如氫氧化納存在下，於水 中，於約0至約30°c之溫度下，及於至少u的pH下進 行乙醯化。該消旋N-乙醯基_環己基甘胺酸（式χν)隨之使 用酸基轉移酶(L-特異性胺基驢基轉移酶，e.c.3.5.1.14)進 行酶催性消旋物離析，產生具有光學純度之(3)-環己基甘 15胺酸（式XII)及Ν-乙醯基環己基甘胺酸，含有高度過量之 (R)-對映體（式XVI)(參照例如K.Drauz等人之有機合成中 之酶催化 ’ VCH，Weinheim，1995; M. A· Verkhovskaya et al.? Russ. Chem. Rev. 60(1991) 1163; Η. K. Chenault et al.? J. 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

Am· Chem· Soc. 111(1989) 6354· (RS)混合物中之⑸-N-乙 20 醯基-環己基甘胺酸的選擇性酶催性脫乙醯基化可使用醯 基轉移_nAmano’’30 000於氯化鈷(II)存在下，於水中，於 pH約7.8下，於約38°C至40°C之溫度下進行。析出之環 己基甘胺酸基本上係為具有鏡像異構純度之(S)異構物。保 留於濾液中之(R)-N-乙醯基環己基甘胺酸可在消旋化―例 -22- 張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1236481 A7 B7 五、發明說明（21 ) 如藉著與乙酸及乙酸酐一起於約115°C下加熱一之後，再 次進行酶催性脫乙醯基化，使得最後實質所有消旋N-乙 醯基環己基甘胺酸皆轉化成具有光學純度之（S)-環己基甘 胺酸。 5

XVII XII XVI 製備（S)-環己基甘胺酸之第二種可能係包括於單階方 20 法中藉鈀催化醯胺羰基化自環己烷曱醛、一氧化碳及乙醯 胺製備消旋之N-乙醯基環己基甘胺酸（式XV)，之後使用 醯基轉移酶進行前述消旋物離析（參照M. Beller等人之 Chem.Eur.J.4(1998) 935)。 第三種製備（S)-環己基甘胺酸（式XII)之方法中，具有 -23- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事廉 --裝--- ▼填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1236481 Α7 Β7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（22 ) 鏡像異構純度之(S)-笨基甘胺酸（式XVII)中的苯基於消旋 化-游離條件下進彳于鼠化，產生環己基。適當之觸媒仍為 貴金屬觸媒，諸如例如碳上铑。該氫化較佳係於酸性介質 中進行，例如於叛酸諸如冰乙酸中，尤其是強酸中，諸如 5 例如2N鹽酸或硫酸中。在該強度中，氫化迅速地連行， 而不會在約60至約80°C之溫度下及例如約20巴之氫壓下 產生任何明顯之消旋化。形成之產物具有與藉前述方法得 自消旋苯基甘胺酸的產物相同之品質。起始物質（S)-苯基 甘胺酸較起始物質（RS)-苯基甘胺酸昂貴，但因為較低之製 10 造成本，故使用（S)-苯基甘胺酸作為起始物質之方法較為 有利。 式IV具有鏡像異構純度之起始物質或其式lx之鹽以 自吡啶-3-曱醛（式XVIII)開始製備為佳，其可於與前述式 X化合物轉化成式XI化合物所述者相同之條件下轉化成 15 為式XIX氮雜内醋，例如與N-乙酿基甘胺酸及乙酸辭一 起於丙酮中加熱。式XIX之氮雜内酯可使用水進行溶劍分 解，以產生N-乙醯基脫氫吡啶丙胺酸，即成為緩酸，或 以低級醇例如（CrC3)-烧醇諸如曱醇或乙醇進行，產生叛 酸酯，使用曱醇為佳，產生曱酯（與式XX比較）。後續之 20 不對稱氫化特佳情況係於醇中於酸性條件下進行，其中大 部分或所有羧酸官能基係轉化成酯，因為式χΙΧ2氮雜内 酯與醇之溶劑分解係較使用水的情況更為穩定，故式XIX 化合物較佳係使用低級醇進行溶劑分解，以曱醇特佳。該 醇解較佳係於弱鹼例如三級胺諸如三乙胺存在下，於約50 -24- (請先閱讀背面之注意事赢 -裝--- 资填寫本頁) 訂·- --線· 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1236481 A7 _B7__ 五、發明說明（23 ) 至約65°C之溫度下進行。甲酯較佳係於其與強酸之酸加成 鹽的形式下單離，即式XX之化合物的形式下，其中陰離 子Y係為強酸之陰離子，例如四氟硼酸根或曱苯磺酸根。 式XIX氮雜内酯之曱醇分解產物係藉著添加四氟硼酸例如 5 四氟硼酸水溶液直至pH約1.5至約2，例如約1.9，而以 四ll硼酸鹽形式析出，該產物在藉著添加非極性溶劑例如 醚，諸如曱基第三丁基醚，而完全析出之後，濾出或離心 取出。得到極高產率（90百分比）且極高純度(>99·5百分比) 之式XX化合物，其中Y = BF4。 請先閱讀背面之 裝—— 填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 10

XXI XX丨丨 -25- 訂： 線· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1236481 五、發明說明（24 A7 B7

經 濟 部 智 慧 財 產 局 員 工 消 費 合 作 社 印 製 後續步驟係為式XX之脫氫σ比唆基丙胺酸衍生物的不 10對稱催化氫化，產生式XXI之光學活性胺基酸衍生物。如 前文所述，為了得到高產率及短反應時間，此氫化以於酸 性條件下進行為佳，例如於乙酸中，特別是於強酸存在 下，例如曱苯-4-磺酸或四氟硼酸，其用量至少為理想配比 量，例如莫耳數之1-至2-倍，因此完全將吡啶基轉化成咄 15啶鑌鹽。就該氫化而言，較佳係使用式XX之咄啶鑰赜， 若適當，則使用附加之酸。特佳情況係於低級醇〜詳;之 為曱醇--中，於約15莫耳百分比強酸存在下進行式XX之 吡啶鑌鹽的氫化，尤其是其中Y = BF4之鹽。用以進行式 XX之鹽的氫化之較彳土酸係為四氟删酸及甲笨，尤 20其是四氟硼酸，其可於水溶液形式下使用。 一 針對於使式XX化合物進行不對稱之氫化轉化成式 XXI者之觸媒而言，對應地使用前文針對式u化合物氡化 產生式VI者所使用之觸媒。因此，式xx化合物中 雙鍵之立體控制氫化同樣可使用選擇性不均勻觸媒戋使用 -26-

1236481 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 "3 ' ---------—B7 五、發明說明（26 ) "" --- 產物，尤其是讀餐鹽，以藉結晶單離為佳，例 醇諸如異丙醇結晶。單離產率係由約％至約％百分 =像異構純度視所選擇之條件而定，係約7〇百分比 5 χχτ $刀比之〇異構物。將彳XX之化合物氫化成式 動之化合物日寺，可使用極高之基質/觸媒比例，由約 .1 至約 1〇〇〇〇:1，例如約 8〇〇〇:1。 後'’貝步驟中，式XXI化合物中甲醋基係水解產生緩酸 ^於°亥胺基上之乙醯基被移除，而胺基以適當之方式 10 使得其不在形成羧醯胺期間不產生任何副反應。乙 之移除及曱酯水解成游離驗可藉著以酸處理而同時 地進行，例如鹽酸水溶液，諸如1Ν鹽酸，或4Ν鹽酸， 溫^為例如約60至約85t，或約85至約贼。為利於 自3水之反應混合物單離產物，游離胺基較佳立即轉化成 醯胺基，後者可輕易地脫保護，例如成為午氧羰基胺基。 15卞氧縣保護基卜Z基)之導入較佳係使用时氧餘基 ^二醯亞胺（ = Z-〇Su)於溶劑水/THF中於弱鹼範圍内進 行尤其疋約8·0至約8.5之ρίί。反應結束之後，蒸餾去 除有機溶劑，建立弱酸性ρΗ，以約5 ipH為佳，濾出或 離心取出所析出之式ΧΧΠ化合物。若需要，則式χΧΙΙ之 20化合物的純度可藉著在製備式XXIII醯胺之前，先進行再 結晶而增加，例如自水再結晶。 若式ΧΧΙ之化合物或可由彼得到之式XXII之化合物 的鏡像異構純度不足時，較佳係自式IIX化合物中之胺基 切下乙醯基，不使用鹽酸，而使用酶催性方法，因此具有 -28- 本紙張尺度適國家標準（CNS)A4規格⑽x 297公髮） (請先閱讀背面之注意事jj -裝--- 『填寫本頁) . --線- 1236481 A7 B7 經 濟 部 智 慧 財 產 局 員 工 消 費 合 作 社 印 製 五、發明說明（2δ ) 情況下之化學純度及鏡像異構先度實質係約100百分比。 式ΧΧΐιι化合物中吡啶氮原子之曱基化形成式XXIV 之。比°定錯鹽，可穩定地使用數種曱基化劑例如甲基蛾、曱 基漠、曱基氯或曱苯-4-磺酸甲酯，於數種溶劑例如醇，諸 如異丙醇、醯胺諸如DMF、Ν，Ν，Ν’，Ν，-四曱基脲、酿]諸如 丙酮、或醚諸如THF中，較佳於約40至約6〇°C之溫度下 進行。式XXII化合物與曱基氯於DMF中於45°C下之反 應中’例如，於定量產率下得到式χχΓν化合物，其中χ =C1，且純度約98.4百分比。於工業規模下進行甲基化 時，較佳係使用較低揮發性之甲基化劑。因為儘可能^免 附加之陰離子交換，例如離子交換層析，甲基化劑:選擇 之另一方面係為式IV、IX及Ϊ化合物中所含且1自=其 化劑之陰離子X對於此等化合物的影響，例如對於式二 化合物或其鹽的溶解度之影響，其對於式in及Iv = 物的偶聯反應極為重要，或對於式τ化合物之 : 殿性質及生理相容性極為重要。整體言之 :: 因此係為甲基蛾及甲苯如《甲化甲苯=== =苯心_在式IV化合物或其甲苯俩鹽的情 ;明顯，因此易於單離’極易溶解且具有高胜肽㈣ 性質=合:：兄下’尤其具有意外良好之二殿 貝純度及產率。使用於式χΧΙΙΙ化合XXIV化合物的特佳甲基化劑係為甲苯冰石黃酸子酉旨化成式 式XXIII化合物使用甲苯_4_石黃酸曱醋進行之9甲美化# 5 10 15 20 -30- --------------裝—— (請先閱讀背面之注意事填寫本頁) i線· 本紙張尺度翻€^家鮮（cns)a^^^ X 297公釐） 1236481 A7 B7 五、發明說明（ 29 10 15 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 佳係於作為溶劑之低級醇中進行，例如於異丙醇中，於約 40至約60°C之溫度下，例如約50°C下。甲笨-4-續酸f g旨 之較佳用量係稍微過量，例如基於式XXIII化合物約！至 約1.2倍莫耳數量。式XXIII化合物之甲基化及後續之藉 氫解移除式XXIV化合物之苄氧羰基保護基可個別地進 行。該曱基化及氫解較佳係於單鍋反應中進行，而不需於 中間單離式XXIV化合物。結果，式XXIV化合物係例如 猎者添加水而浴解’方其自早體化之反應介質沉澱，則於 習用條件下氫化，例如於習用貴金屬觸媒諸如碳上鈀存在 下，於約20至約40°C之溫度下，較佳約2〇至約3(rc， 於約1至約20巴氫壓下，較佳約丨至約5巴下，特佳於 約1巴下’即不在過高氫壓下進行。該單陽離子鹽包含3_ ((S)-2-胺基-2-胺基曱酿基乙基)]_曱基。比。定錯陽離子㈤立 置上具有游離胺基ΝΑ)及陰離子x，例如甲苯石黃酸根、峨 基或氯細作為配娜子，即式IV之化合物可於原狀態 下单離。形成之吼咬基丙胺酿胺係於其與酸Ηχ之鹽的形 ::轉’即式DC之二陽離子鹽，結果，氫解之反應混 合_約-當量之酸HX摻合，即當為曱笨續酸瞒係約 一當量之曱苯-4-磺酸。濾出該氣化觸^ _.^ ^ 式化觸媒，產物可藉濃縮及 殘Θ物之結晶單離，例如自醇諸如異丙醇單離。 本發明亦提出一種式IV之化人你 _ y1匕。物，其中X-係為陰離 子或陰離子同質物，尤其是生理上 $ I 0 ^ 上丌接雙之陰離子，例如 =土、漠基、峨基或甲笨_4_石黃酸根，及式IX之二陽離子鹽）之鹽本身，前述其製法及其中進行前述 --------------裝11 (請先閱讀背面之注意事Φ填寫本頁) .- -丨線· •31. 尺度適用ϋ家標準(CNS)A4 297公釐） 1236481 A7 B7 五 、發明說明（ 33 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 2-5°C ’攪拌1小時。濾出所析出之(S)-環己基甘胺酸，以 水（約16升）洗務，於60°C下於減壓下乾燥。產量:2.79公 斤（44.5 百分比）。M.;p.>300 °C ;[ a ]D32.1(c二 1，1N HC1); ee=99.78%(於Chirasil L-Val上進行GC分析，使用丙醇 5 /HC1 及全氟丙酸酐衍化）；MS(DCI): m/z(%)=158([M++H]， 100); ^^^200 MHz? TFA)：5-l.M.6(m5 5H)? 1.7-2.1(m5 5H)，2·1-2·3(ιη，1H)，4.3(d，J二 4Hz，1H)，11.6(s，1H); IR(KBr):v=2927.7, 1583.9, 1508.8 cm' 回收未反應之(R)-N-乙酸基環己基甘胺酸時，母液於 10 2-5 °C内溫下使用鹽酸（30百分比強度，約4.3升）調至 pH=l，於2-5°C下攪拌1小時。濾出所析出之⑻乙醯 基環己基甘胺酸，以水（約16升）洗滌，於60°C減壓下乾 燥。產量:3.76 公斤（47.3 百分比 23.5(c=l，曱醇)；ee=98.39%(於 Chirasil L-Val 上進行 GC 分 15析，使用丙醇/HC1或曱醇/HC1衍化）。ih-NMR、MS及 IR數據與消旋起始物質4之數據相符。 實施例5:乙醯基-環己基甘胺酸藉消旋化產製（R，s)_ N-乙醯基環己基甘胺酸 20 (R)-N-乙酿基環己基甘胺酸（10.9公斤，54.7莫耳）於 氮下於授拌下與冰乙酸(24.5升）及乙酸酐（1.7升)摻合。内 溫增加至U5°C，混合物於此溫度下攪拌3.5小時。内溫 降至約20°C，添加水（73升）。反應混合物之pH係為 pH2。該混合物於0-3°C攪拌1小時，濾出形成之固體， -35- I紙張尺度國^標準（CNS)A4規格（210 x 297公爱） (請先閱讀背面之注意事ί --裝--- t填寫本頁) . --線- 1236481 Α7 Β7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（34 ) 以水（各25升）洗滌兩次，該物質於60°C下於減壓下乾 燥。產量:7.95公斤（理論值之百分比）之(R，S)-N-乙臨基 環己基甘胺酸。M.p.l95-196°C ;[ a ]D 〇° (c=i，甲醇）。 NMR、MS及IR數據與反應3所得之產物的數據相符。 5 母液含有另外約2公斤之(R，S)-N-乙醯基-環己基甘胺酸。 實施例6:藉由（S)-苯基甘胺酸之無消旋化氫化製得(S)-環己 基甘胺酸 由搪瓷或Hastelloy所製之氫化裝置中，於50°C於氮 10 下且於攪拌下添加(s)-苯基甘胺酸(90克，0.53莫耳;R-異 構物之含量<1百分比）於濃硫酸(97百分比強度，60克)於 去離子水(0.70升）中之溶液中。所有苯基甘胺酸皆溶解之 後（若需要，添加其他硫酸（約5毫升)），添加碳上铑（6.3 克，5百分比，以水潤溼(50百分比水），Engelhard所製， 15 型 5虎 5% RH Carb Polcere Escat 30M，Engelhard Code 8000)。關閉氫化裝置，並使用氮惰氣化。混合物加熱至 内溫80°C，施加20巴之氫壓。總氫化時間係為5-6小 時，而氫攝取量約37升。停止氫之攝取之後，混合物再 於20巴下鼠化30-60分鐘。該混合物冷卻至内溫， 2〇於％ C下使用壓;慮為濾出觸媒。該觸媒以去離子水(〇 π 升）洗滌，濾液於20 C下添加濃氫氧化鈉水溶液(33百分比 強度，約90毫升)調至PH = 4。持續攪拌30分鐘，抽氣 濾出沉澱之產物，以去離子水（總量約〇·85升）洗滌直至洗 液中不含硫酸根離子。潮溼之產物（約15〇克)於5〇艺於減 --------------裝--- (請先閱讀背面之注意填寫本頁) 訂： I I I - -I- n · -36>

1236481 Α7 Β7 五、發明說明（3δ ) 蒸I為上於5 0 C之浴溫下濃縮至無法再蒸館出冰乙酸，而 開始結晶。該混合物冷卻至約25°C，而混合物仍保持旋 轉，將乙酸乙酯（20升）浸潰於旋轉蒸發器之燒瓶中，此時 析出縣之乙酸鹽。再攪拌〇·5小時之後，藉紙濾器抽氣濾 5 出〉儿渴又物’抽氣以充分乾燥。 前述所得之粗製乙酸胨係於劇烈攪拌下導入已加熱至 40°C的去離子水(20升）中，混合物於8(TC下加熱至形成澄 清溶液。在劇烈攪拌下，混合物於30分鐘内冷卻至15 C ’使件彳示通化合物（甜采驗形式）沉丨殿。於下持續授 10拌1小時，經由壓濾器濾出沉澱之產物。濾渣以冰水(6升) 洗滌，於氮流中充分乾燥，移入容器中，於室溫及氣下與 40升丙酮一起攪拌1小時。經由壓濾器濾出沉澱之產物， 以丙酮（約10升）洗滌，於40°C於減壓下乾燥。產量:258 公斤（6.64莫耳，理論值之65.7百分比）之標題化合物。 15 MS (ESI+): m/z=389.3[M+H+]; ^-NMR(曱醇^:占吟队 1.38(m，5H)，1.58-1.78(m，6H)，1.96(s，3H)，3·10(2χ dd5 2H)， 4.02(d，1H)，4.61(dd，1H)，7.42 (d，2H)，7.68 (d，2H). ’ 貫施例10:2-曱基-4-[吡。定-3-基-(Z)-亞曱基]号。坐_5-_ 20 丙酮(40·0升）及後續之吡啶-3-曱醛(2〇·〇公斤，ι86·9 莫耳)於氮下添加於Ν-乙醯基甘胺酸(32·7公斤，280 0莫 耳）及乙酸納（15.3公斤’ 186.9莫耳）中。於攪拌下添加乙 酸肝(40.0升，429.0莫耳）。在30分鐘内，將反應混合物 加熱至回流溫度’之後於回流下攪拌1·5小時。產生稀薄 -40- (請先閱讀背面之注意事泰 裝--- t填寫本頁) --線· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

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IQ 五、發明說明（） 之偏紅色懸浮液。該懸浮液冷卻至50°C，之後添加甲基第 三丁基醚(80.0升）。於攪拌及冷卻下，儘速(<5分鐘）添加 冰水(<2°C，200.0升）該混合物於5-10°C下攪拌1小時。 灰褐色之懸浮液導入離心機中，其已使用氮惰氣化。該沉 5 澱物經離心，以去離子水(80.0升）洗滌，於40°C於減壓下 乾燥。產量:24.8公斤（131.9莫耳，理論值之70.6百分 NMR(200 MHz, DMSO-d6): 5=2.40(s3 3H)5 7.28(s? 1H)? 7.53 (dd，1H)，8.61(d，2H)，9.18 (br s，1H); IR(KBr):v=1799.9, 10 1777.4, 898.0 cm·1. 實施例11:四氟硼酸3-(2-乙醯胺基-2-甲氧羰基乙烯基）吡 啶鑕 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 --------------裝·-- (請先閱讀背面之注意事填寫本頁) -線· 2-曱基-4-[吡啶-3-基-(Z)-亞甲基]-4H-啐唑-5-酮（12.0公 15斤，63.83莫耳)於曱醇（120.0升）中之懸浮液於氮下於6〇 °C下加熱。泵入三乙胺（0.5升），該裝置以甲醇(0.5升）淋 洗(所取出之試樣的pH使用玻璃電極測量係為pH 8.15)。 在30分鐘期間内，將反應溶液冷卻至30°C。使用30分鐘 時間添加四氟棚酸溶液（於水中48百分比強度，11·8公 2〇 斤’ 64.5莫耳）。在1小時内，將混合物冷卻至i〇°c之内 溫’且（置入種晶之後若需要）懸浮液於10°C下攪拌另外3 小時。添加曱基第三丁基醚(4〇·〇升），混合物於l〇°C下授 拌1小時。懸浮液導入已使用氮惰氣化之離心機中，離 心，產物以曱基第三丁基趟(20.0升）洗務，於40°c於減壓 -41- 本紙張尺度適用中國國豕標準（CNS)A4規格（21〇 X 297公爱） 1236481 A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -BZ____五、發明說明（4Q ) 下乾燥。產量：18.7公斤（60.71莫耳，理論值之95.1百分 比）。Μ·ρ·: 179.4°C; MS(ESI+): m/z(%)=221([M+H+]游離鹼， 100); iH-NMRpOO MHz，DMSO-d6):5 二2.01(s，3H)，3.77(s， 3H)，7.21(s，1H)，7.89 (dd，1H)，8.48(d，1H)，8.76 (d，1H)， 5 8.98(s? 1H)5 9.92 (s5 1H); IR(KBr):v=1726.9? 1670.1, 1091.5 cm'1. 實施例12:四氟硼酸(S)-3-(2-乙醯胺基-2-曱氧羰基乙基）17比 啶鑌 10 在壓熱器中，將四氟硼酸3-(2-乙醯胺基-2-甲氧羰基 乙烯基)吡啶鑕（10.3公斤，33.44莫耳)溶於曱醇（120·0升） 中。添加四氟硼酸溶液(於水中50百分比，1.018公斤， 5·8莫耳），關閉壓熱器，謹慎地使用氮惰氣化。觸媒溶液 係It著在導入氬下於超音波浴中處理曱醇(3.0升）15分鐘 15 而製備。在排除空氣的情況下，依此方式脫氣之甲醇係與 (+)-笨基-CAPP(12.5 克，20.83 毫莫耳)及[Rh(C〇D)Cl]2(5.〇 克’ 10.10毫莫耳），橙黃色觸媒溶液於超音波浴中保持另 外30分鐘。於排除氧之下，該觸媒溶液被導入該壓熱器 中。於1小時期間，將該壓熱器之内容物加熱至40°C。施 20 加約3巴之氫三次，該壓熱器立即再次排氣。反應混合物 加熱至50°C之内溫，施加1.5巴之氫，混合物於50°C下於 攪拌下氫化。7小時後，終止氫化。取出之試樣的HPLC 分析顯示此時含有99.1百分比之標題化合物，而GC分析 (30米炼凝二氧化石夕毛細管柱chirasil Val，等溫160°C， -42- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事< 裝--- 『填寫本頁) Ίίόι、. -線- 411236481 五、發明說明（ 10 15 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 注射器220。。，偵測器_)26〇。。，載體氣體〇8巴之氫’u⑻鏡像異構物]12·64分鐘、t[⑸鏡像異構 物]13.64分鐘）顯示⑸_異構物之鏡像異構純度係為％百 «驗值。壓熱器以氮沖洗，使用氮經由㈣濾器將壓 熱為内容物壓人容H中，而歧係於氮下儲存於价下。 使用前述方法，進行四份其他不對稱氫化(批量8·〇公 斤⑺別毫莫耳)-10·3公斤（33·44莫耳);氫壓2_ι〇巴;溫度 40C;氫化時間4-6小時;產物含量98 〇-99·8百分比(HpLc); 粗產物於氫化溶液中之鏡像異構純度係為62〇_84·5百分 比實驗值之S異構物(GC))。 結合五批濾液，於套管溫度4(rc下，於減壓下濃縮成 殘留體積150升。添加異丙醇(2〇〇升），混合物於套管溫 度40°C及於減壓下濃縮成殘留體積25〇升。再多添加兩次 異丙醇（各100升），混合物於套管溫度4〇。〇下濃縮成殘留 體積250升。導致標題化合物之結晶。該白色懸浮液於1〇 °C下於氮下攪拌1小時。產物使用已使用氮惰氣化之離心 機離心，以異丙醇（100升）及甲基第三丁基醚（15〇升）洗 滌。產生45.0公斤（144.7莫耳，理論值之90.6百分比）之 標題化合物，71百分比實驗值之（S)-異構物（GC)。M.p.: 126.2°C (依 DSC); MS (ESI+): m/z(%)=223([M+H+]游離鹼， 100); 1H-NMR(200 MHz, DMSO-d6): 5 =1.78(s, 3H), 3.08 (dd? J=9.5 及 7Hz，1H)，3.29 (dd，J-9.5 及 4Hz，1H)，4.68 (m，1H)， 8.00 (dd，J二5.0 及 4·5 Hz，1H)，8.42 (t or 2 d，J 約 6 Hz, 2H)，8.80 (d，J 約 5Hz，1H)，8.82(s，1H); IR(KB〇:v=1740.9, -43- 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事ί 装— ^填寫本頁) --線· 1236481 A7 B7 五、發明說明（42 ) 1654.3 cm'1. 10 15 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 實施例叫S)_2_千氧幾基胺基_3十比。定_3_基）丙酸 氟爛酉文(S)-3-(2-乙酿胺基_2_曱氧 (71百分比實驗值;㈣公斤，216莫耳)於水(㈣）中2 液^復有活性碳(〇.5公斤）之壓濾器過濾。使用 3水2⑴Μ比強度，約3,〇升 ^尸11，該浴液於20·25Χ：下攪拌2小時，期間pH使 用/辰氮氧化鈉水溶液保持定值。TLC(移動相乙酸乙酉旨/甲 =/水/乙酸70/30/5/5)顯示曱酉旨已完全水解成羧酸。 濃鹽酸(約⑼毫升），將pH調整至？删。添加六水合^ 化始(ΠΧ11/7克，〇·_莫耳），反應混合物加熱至做之 内狐於39 C固定溫度下授拌i小時。在極緩慢授掉下， 於39°C下添加在去離子水（4〇〇毫升）中之醯基轉移酶 〇Amam> 30 〇〇〇(38·〇克），混合物於固定ρΗ7·9及定溫％ t：下攪拌40小時。TLC(前述移動相）確定約有％百分比 ㈣(對應於所使用之四氟職3必乙_基_2_甲氧幾美 乙基)口比咬鏽的⑻異構物)被脫乙酿基化。容器使用氮料 化，添加劑四氫呋喃（22 〇升），反應混合物使用丨小時冷 部至10C之内溫。在45分鐘内，添加N作氧幾氧基汀 、二醯亞胺(4.63公斤，18·6莫耳)於四氫呋喃(23 〇升)之溶 液^間PH藉著連續添加濃氫氧化納水溶液(33百分比 強度=保持於8_〇-8.5。混合物於2(rc下攪拌15小時。 丁LC(則述移動相）顯示游離胺基酸完全醯化。乙酸乙酯（6〇 (請先閱讀背面之注音：填寫本頁} 裝 J^T· .線-

-H I I 卜紙張^適用中國規格； -44- 1236481 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（43 ) 升）添加於該反應混合物中，其劇烈攪拌15分鐘。完全相 分離之後，分離乙酸乙酯相並丟棄。水相使用濃鹽酸（約 3.7升）調至pH5.0，添加具有鏡像異構純度之標題化合 物，懸浮液於5它下攪拌隔夜。在氮下經由壓濾器濾出結 5 晶，以去離子水(20升）洗滌，於48°C於減壓下乾燥。產 量:2·86公斤（9.52莫耳，理論值之51.9百分比）之標題化合 物，100 百分比實驗值（CSP Chiralpak AD 250x4.6 mm Diacel;移動相：異丙醇/乙醇/正己烷12/4/84+0.1%二乙 胺;trei14.16 分鐘，[a]D20-9.95 ° (c=1.0，曱醇）。Μ·ρ·: 10 173-174〇C(by DSC); MS(ESI+): m/z(%)=301([M+H+]? 100); ^-NMRQOO MHz，DMSO-d6):<5=2.85(dd，J=9.5 及 7.5Hz， 1H)，3.10(dd，J=9.5 及 3·5Ηζ，1H)，4.23(m，1Η)，4.98 (s，2H)， 7·15-7·40(ιη，6H)，7.62-7.78 (m，2H)，8.38-8.50(m，2H)，12.80 (br s，1H); IR(KBr):v=3369.7, 1707.4, 1504.7, 1046.9, 699.2 15 cm'1. 實施例14:(S)-[1-胺基曱醯基-2-(吡啶-3-基)-乙基]胺基曱酸 苄酯 (S)-2-苄氧羰基胺基-3-(吡啶-3-基）丙酸(2.60公斤， 20 8·65莫耳)於四氫呋喃（60升）中之懸浮液冷卻至_9°C。於此 溫度下，使用5分鐘添加N-乙基二異丙基胺（丨.33公斤， 10.29莫耳）。於-9°C下，於20分鐘内添加氯曱酸異丁酯 (1.36公斤，9.96莫耳），最後内溫增至-6°c。劇烈攪拌 分鐘之後，氨氣(2·1公斤，約123莫耳)於(_5)-(-6)°C之定 -45- 請先閱讀背面之注意事 裝--- 填寫本頁) 訂： -1線· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1236481 A7 B7 五、發明說明（ 45 10 15 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 壓热為中’將異丙醇（1.7升）添加於(s)-[i-胺基甲酿基_ 2-(吼°疋-3-基)-乙基]胺基曱酸辛|旨（1〇〇公斤，3·幻莫耳)及 曱苯-4-磺酸曱酯（0·67公斤，36莫耳）中，開動攪拌器， 反應混合物於密閉壓熱器中於5(rc及氮下攪拌5小時。反 應混合物於室溫下放置隔夜，經甲基化N_苄氧羰基化合 物澱積成黏稠淤漿。反應溶液以去離子水(〇·33升）稀釋， 添加鈀/碳（10百分比，5〇百分比水;5〇克）。藉著通經氫 (約ίο升/分鐘）而於大氣壓下進行氫化，於2(K25<t下使用 約3小時連續量測添加曱笨_4_磺酸單水合物(〇·63公斤， 3.33莫耳)於去離子水（ι·〇升）中之溶液。氫化結束之後， 壓熱器以氮沖洗，氫化溶液以Seitz濾器過濾，以去離子 水(0.5升)洗滌。濾液移至旋轉蒸發器中，於蒸汽喷射真空 下於40 C洛溫下濃縮成約2.5升。在劇烈攪拌下，吸入異 丙醇（10升），混合物於減壓下於4(rc浴溫下攪拌，濃縮成 約5升，此時標題化合物開始結晶。結晶懸浮液在攪拌下 於15°C下冷卻〇·5小時，抽氣經由紙濾器濾出產物，以i 升異丙醇洗滌，經由抽氣充分乾燥並乾燥。產量：i57公 斤（3.0莫耳，理論值之90百分比）。Μ·ρ ·· 219-220。(3 · MS(ESI ): m/z(%)- 180·1([Μ+Η+]，1〇〇); iH-NMR(DMSO-d6): (5 -2.30(s，3H)，3.10-3.40(m，2H)，4.08(dd，1H)，4.35(s，3H) 7.12(d，4H)，7.48(d，4H)，7.70(s，iH)，79〇(s，1H)，8〇5-8.22 (m，4H)，8.42 (m，1H)，8.95 (m，1H)· -47- (請先閱讀背面之注意· 事填 寫本頁) 裝 一一口、I . -n 4

Claims (1)

1236481 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 專利申請案第90101207號 ROC Patent Appln. No. 90101207 修正後無劃線之申請專利範圍中文本一附件(二） 5 ( Amended Claims in Chinese 一 Enel. (II) (民國94年1月Ϋ日送呈） (Submitted on January ? 2005) 10 一種製備式I之化合物的方法，其包括藉催化氳化轉 化式II之化合物，使用酸HX將氰基轉化成脒基轉化 成式III化合物或其鹽，之後式III化合物或其鹽與式 IV化合物或其鹽與酸HX反應，產生式I之化合物， 其中陰離子X係生理上可接受之陰離子 15

NH η30

III

本紙張尺度適財國國家標準(CNS)A4規格（210x297公爱） 90003B-接 1 1236481 A8 B8 C8 D8

10 15 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20 •如申請專利範圍第1項之方法， 单性鍺(I)錯合物作為觸媒而進行 3·如申請專利範圍第丨或2項之方法，其巾該氫化係使 用铑(I)-(+)-(2R，4R)_i-第三丁氧基羰基_4_二苯基膦基_ 2- (二苯基膦甲基)吡咯啶錯合物作為觸媒而進行。 4·如申請專利範圍第！或2項之方法，其中該氰基轉化 成脒基之過程係藉著與羥基胺或羥基銨鹽進行反應， 並使形成之N_羥基脒進行氫解而進行。 5.如申請專利範圍第！或2項之方法，其中該式m及 IV之化合物或其鹽之反應係於碳化二亞胺存在下進 行。 6·如申請專利範圍第】或2項之方法，其中該式冚及 IV之化合物或錢之錢胁二紅基碳化二亞胺及 3- 經基-4·合氧基_3,4_二氫]，2,3_笨并三俯在下進行。 7. 如申請專利範圍第i或2項之方法，其中該式z W之化合物與式IV化合物之反應係以其與酸取之蜂 的形式使用，而式m化合物係於原狀態下使用: 甜菜鹼形式。 8. 如t請專利範圍第1或2項之方法，其中該陰離子\-係為曱苯-4-績酸根。 9. -種式Ia之化合物，其中陰離子TQsa# 酸根 其中該氫化係使用對 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公复） 1236481 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 5

Tos〇_ CH, la 10 15 10.—種製備式la之化合物的方法，其中陰離子TosCX係 為甲苯-4-磺酸根，其包括式III化合物或其曱苯-4-磺 酸鹽與式(IVa)化合物或其甲苯-4-磺酸鹽進行反應’產 生式la之化合物 NH

IVa 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 20

Tos〇_ CH, la 53 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） 1236481 Α8 Β8 C8 D8 六、申請專利範圍 11·如申請專利範圍第10項之方法，其中式IVa化合物係 於其與甲苯-4-磺酸之鹽的形式下使用，而式III之化合 物係於原狀態一即甜菜鹼形式一下使用，且該反應係於 二環己基碳化二亞胺及3-羥基4-合氧基-3,4·二氳-1，2,3-苯并三畊存在下進行。 12·—種式II之化合物及其鹽

ΟΗ 10 13·—種式III之化合物及其鹽 ΝΗ 15 III 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

20 14· 一種式IV之化合物及其與酸HX之鹽，其中陰離子X 係為生理上可接受之陰離子

χ- CH, IV 25 54 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（2l〇x297公釐）