TW202016116A - 作為a2a受體拮抗劑的吡唑並三唑並嘧啶衍生物 - Google Patents

作為a2a受體拮抗劑的吡唑並三唑並嘧啶衍生物 Download PDF

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Abstract

本文公開了一種用作A2A受體拮抗劑的吡唑並三唑並嘧啶衍生物或其立體異構物或其醫藥上可接受的鹽，以及一種包含吡唑並三唑並嘧啶衍生物或其立體異構物或其醫藥上可接受的鹽的醫藥組合物。本文還公開了一種使用所述吡唑並三唑並嘧啶衍生物或其立體異構物或其醫藥上可接受的鹽作為A2A受體拮抗劑治療癌症的方法。

Description

作為A2A受體拮抗劑的吡唑並三唑並嘧啶衍生物 【相關申請的交叉引用】
本申請要求2018年7月23日提交的國際專利申請號PCT/CN2018/096633的權益，出於所有目的將其公開內容通過引用以其全文特此結合。
本文公開了一種用作A2A受體拮抗劑的吡唑並三唑並嘧啶衍生物或其立體異構物或其醫藥上可接受的鹽，以及一種包含吡唑並三唑並嘧啶衍生物或其立體異構物或其醫藥上可接受的鹽的醫藥組合物。本文還公開了一種使用所述吡唑並三唑並嘧啶衍生物或其立體異構物或其醫藥上可接受的鹽作為A2A受體拮抗劑治療癌症的方法。
細胞外腺苷是許多生理活性的關鍵內源調節劑。它通過與四種腺苷受體A1、A2A、A2B和A3相互作用發揮其調節功能。所有四種受體都屬於G蛋白偶聯受體超家族，但具有不同的配位體親和力、組織分佈和效應子反應。通過與不同的G蛋白偶聯，它們可以刺激(A2A和A2B)或抑制(A1和A3)下游腺苷酸環化酶活性，並且也參與調節其他路徑，如磷脂酶C(PLC)、Ca2+和絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)。
免疫系統不僅負責保護其宿主抵抗微生物侵入，而且可以從其中存在抗腫瘤免疫機制的生物體中去除改變的宿主組分。當免疫監視功能由於免疫系統本身或腫瘤細胞而減弱時，為腫瘤的發展和進展提供了有利的條件。腺苷-A2A受體信號傳導作為一種新的代謝免疫檢查點路徑出現，所述路徑參與創建免疫耐受的腫瘤微環境。已經證明，腫瘤組織中的缺氧將誘導較高濃度的腺苷的積累(約10μM，相對于在生理水平下約20nM)。缺氧介導的腺苷產生是由非造血和造血細胞亞群二者中CD39和CD73外核苷酸酶的上調引起的，所述上調進而催化細胞外ATP向腺苷的轉化。
通過A2A(高親和力)和A2B(低親和力)受體(免疫細胞亞群中的主要腺苷受體)的腺苷信號傳導在保護癌組織免受免疫系統攻擊中發揮重要作用。T效應細胞上激活的A2A受體增加細胞內cAMP，這進而抑制TCR觸發的信號傳導和抗腫瘤效應子功能，包括降低的T細胞擴增，IFN-γ釋放，和增加的免疫抑制PD-1、LAG3、IL-10和TGF-β的表現。T細胞中增加的cAMP也促進cAMP反應元件(CRE)介導的轉錄如FoxP3，其驅動調節性T細胞表型。此外，腺苷還通過使自然殺傷(NK)細胞的細胞毒性效應子功能失效、調節免疫抑制性M2巨噬細胞極化和髓源抑制細胞(MDSC)擴增來抑制抗腫瘤免疫反應。因此，研究表現A2A受體的免疫細胞作為潛在目標以破壞腫瘤微環境中腺苷介導的免疫抑制。結果證明A2AR的遺傳缺失或藥理性拮抗作用可以增強已建立的免疫原性小鼠腫瘤中的內源性抗腫瘤免疫並且有效抑制腫瘤生長或轉移。
WO 0192264披露了用於治療中樞神經系統疾病、特別是帕金森病的5-胺基-吡唑並-[4,3-e]-1,2,4-三唑並[1,5-c]嘧啶腺苷A2a受體拮抗劑，其被證明具有高血腦障壁通透性。
然而，需要A2A受體的小分子拮抗劑作為用於抗癌療法的免疫調節劑(Robert D.Leone,Ying-Chun Lo,Jonathan D.Powell,Mini Review,A2aR antagonists：Next generation checkpoint blockade for cancer immunotherapy,Computational and Structural Biotechnology Journal 13(2015)265-272)。
出乎意料且令人驚奇的是，發現本文公開的吡唑並三唑並嘧啶衍生物在抗癌療法中具有免疫調節功效。諸位發明人發現，與其中R1和R2均為氫的化合物相比，式(Ia)或(Ib)中的R1和R2的取代顯著改善了作為A2A受體拮抗劑的化合物的活性。
在第一實施例中，本文公開了式(Ia)或(Ib)的吡唑並三唑並嘧啶衍生物。第一實施例包括以下態樣：
態樣1.一種式(Ia)或式(Ib)的化合物
Figure 108125875-A0101-12-0003-1
或其立體異構物、或其醫藥上可接受的鹽，其中：
R是芳基或包含1個或2個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的雜原子作為一個或多個環成員的5元或6元雜芳基，並且所述環視情況被至少一個取代基R8取代；
R1和R2，可以相同或不同，各自獨立地選自氫、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-C3-8環烷基、雜環基、芳基、或雜芳基，其中所述C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-C3-8環烷基、雜環基、芳基、或雜芳基各自獨立地視情況被至少一個取代基R8取代，條件是R1和R2中的至少一個不是氫；或者
R1和R2與它們所附接的碳原子一起形成3至12元飽和的、部分或完全不飽和的環，所述環包含0個、1個或2個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的雜原子作為一個或多個環成員，並且所述環視情況被至少一個取代基R8取代；
R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成3至12元環，所述環包含0個、1個或2個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的另外的雜原子作為一個或多個環成員，所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代；
R5獨立地是氫、鹵素、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-CN、-NO2、側氧基、-OR5a、-SO2R5a、-COR5a、-CO2R5a、-CONR5aR5b、-C(=NR5a)NR5bR5c、-NR5aR5b、-NR5aCOR5b、-NR5aCONR5bR5c、-NR5aCO2R5b、-NR5aSONR5bR5c、-NR5aSO2NR5bR5c、或-NR5aSO2R5b，其中，作為R5，所述-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8環烷基、雜環基、芳基、或雜芳基中的每一個獨立地並且視情況被一個或兩個或三個取代基R6取代；
R5a、R5b和R5c可以相同或不同，它們各自獨立地是氫、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中所述C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、環烷基、雜環基、芳基或雜 芳基各自獨立地視情況被一個或兩個取代基R5d取代；
R5d獨立地是氫、鹵素、氰基、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、鹵代C1-6烷基、鹵代C2-6烯基、鹵代C2-6炔基、-C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷氧基-、C2-6烯基氧基-、C2-6炔基氧基-、鹵代C1-6烷氧基-、鹵代C2-6烯基氧基-、鹵代C2-6炔基氧基-、C3-8環烷基氧基-、環烷基、雜環基、雜環基氧基-、芳基、芳基氧基-、雜芳基或雜芳基氧基-；
R6獨立地是氫、鹵素、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-CN、-NO2、側氧基、-OR6a、-SO2R6a、-COR6a、-CO2R6a、-CONR6aR6b、-C(=NR6a)NR6bR6c、-NR6aR6b、-NR6aCOR6b、-NR6aCONR6bR6c、-NR6aCO2R6b、-NR6aSONR6bR6c、-NR6aSO2NR6bR6c、或-NR6aSO2R6b；
R6a、R6b和R6c可以相同或不同，它們各自獨立地是氫、鹵素、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-C3-8環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中所述C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基各自獨立地視情況被一個或兩個或三個取代基R7取代；或
(R6a和R6b)、和/或(R6b和R6c)、和/或(R6c和R6a)與它們所附接的一個或多個原子一起形成3至12元飽和的、部分或完全不飽和的環，所述環包含0個、1個或2個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的另外的雜原子作為一個或多個環成員，並且所述環視情況被至少一個取代基R8取代；
R7獨立地是氫、鹵素、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-CN、-NO2、側氧基、-OR7a、-SO2R7a、-COR7a、-CO2R7a、-CONR7aR7b、-C(=NR7a)NR7bR7c、-NR7aR7b、-NR7aCOR7b、-NR7aCONR7bR7c、-NR7aCO2R7b、-NR7aSONR7bR7c、-NR7aSO2NR7bR7c、或-NR7aSO2R7b，其中所述-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8環烷基、雜環基、芳基、或雜芳基各自獨立地視情況被一個或兩個選自鹵素、羥基、-C1-6烷基、-C1-6烷氧基、側氧基、氰基和胺基的取代基取代；
R7a、R7b、和R7c各自獨立地是氫、-C1-6烷基、C1-6烷氧基-C1-6烷基-、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8環烷基、雜環基、芳基、或雜芳基；並且
R8獨立地是氫、鹵素、氰基、側氧基、胺基、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、鹵代C1-6烷基、鹵代C2-6烯基、鹵代C2-6炔基、-C1-6烷氧基、C3-8環烷基氧基、環烷基、雜環基、芳基、或雜芳基。
態樣2：如態樣1的化合物，其中R是含有1個或2個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的雜原子作為一個或多個環成員的C-連接的5元或6元雜芳基。
態樣3：如態樣5的化合物，其中R是呋喃基、吡嗪基或噻唑基；較佳是呋喃-2-基、3-甲基吡嗪-2-基或噻唑-2-基。
態樣4：如態樣1的化合物，其中R1是氫或C1-6烷基，較佳是氫、甲基、乙基；更佳是氫；並且R2是視情況被苯基或-C1-6烷氧基(較佳甲氧基)取代的C1-6烷基(較佳是甲基、異丙基、乙基、丙基、丁基、或異丁基)；視情況被鹵素或C1-6烷氧基(例如苯基、2-氟苯基、3-氟苯基、4-氟苯基、4-甲氧基苯基、2-甲氧基苯 基、3-甲氧基苯基、4-三氟甲基苯基、3,4-二氟苯基)取代的芳基(即苯基或萘基)；-C3-8環烷基(較佳環丙基)、或雜環基(較佳4至7元單環飽和雜環基，其包含一個選自氧、氮和視情況氧化的硫的雜原子作為環成員)。
態樣5：如態樣1至4中任一項的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成3元、4元、5元、6元、7元、8元、或9元單環，所述環包含0個、1個或2個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的另外的雜原子作為一個或多個環成員，所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
態樣6：如態樣5的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成3元、4元、5元、6元、7元、8元、或9元單環，所述環包含0個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的另外的雜原子作為一個或多個環成員，所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
態樣7：如態樣5的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成3元、4元、5元、6元、7元、8元、或9元單環，所述環包含1個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的另外的雜原子作為一個或多個環成員，所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
態樣8：如態樣7的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成3元、4元、5元、6元、7元、8元、或9元單環，所述環包含一個另外的氮雜原子作為環成員，所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
態樣9：如態樣5至9中任一項的化合物，其中所述環是飽和的。
態樣10：如態樣5的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成氮 雜環丁烷基(
Figure 108125875-A0101-12-0007-2
)、吡咯啶基(
Figure 108125875-A0101-12-0007-3
)、或六氫吡啶基(
Figure 108125875-A0101-12-0007-4
)環，所述環各自 視情況被如對式(Ia)或(Ib)所定義的R5取代。
態樣11：如態樣5的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成視 情況被如對式(Ia)或(Ib)所定義的R5取代的六氫吡嗪基環(即
Figure 108125875-A0101-12-0008-7
)。
態樣12：如態樣1至4中任一項的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成7元、8元、9元、10元、11元、或12元二環，所述環包含0個、1個或2個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的另外的雜原子作為一個或多個環成員，所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
態樣13：如態樣12的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成7元、8元、9元、10元、11元、或12元二環稠合環，所述環包含0個、1個或2個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的另外的雜原子作為一個或多個環成員，所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
態樣14：如態樣12的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成7元、8元、9元、10元、11元、或12元二環稠合環，所述環包含0個或1個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的另外的雜原子作為一個或多個環成員，所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
態樣15：如態樣12的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成10元二環稠合環，所述環包含0個或1個另外的氮雜原子作為環成員，所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
態樣16：如態樣15的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成
Figure 108125875-A0101-12-0008-8
、
Figure 108125875-A0101-12-0008-9
、
Figure 108125875-A0101-12-0008-10
、
Figure 108125875-A0101-12-0008-11
、或
Figure 108125875-A0101-12-0008-12
環，每個所述 環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
態樣17：如態樣12的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成7元、8元、9元、10元、11元、或12元二環螺環，所述環包含0個、1個或2個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的另外的雜原子作為一個或多個環成員，所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
態樣18：如態樣17的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成氮雜螺[3.3]庚烷、氮雜螺[3.5]壬烷、氮雜螺[3.4]辛烷、氮雜螺[5.5]十一烷、或氮雜螺[4.5]癸烷，每個包含0個或1個另外的氮原子或氧原子作為環成員，並且所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
態樣19：如態樣18的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成
Figure 108125875-A0101-12-0009-652
、
Figure 108125875-A0101-12-0009-653
、
Figure 108125875-A0101-12-0009-654
、或
Figure 108125875-A0101-12-0009-655
環，並且所述環視情況被 一個或兩個或三個取代基R5取代。
態樣20：如態樣5至19中任一項的化合物，其中所述環被一個R5取代。
態樣21：如態樣5至19中任一項的化合物，其中所述環被兩個R5取代。
態樣22：如態樣21的化合物，其中所述環被一個C1-6烷基(較佳甲基)取代並且進一步被一個R5取代。
態樣23：如態樣20至22中任一項的化合物，其中R5是鹵素、-C1-6烷基、芳基、-OR5a、或-CO2R5a，其中R5a是如對式(Ia)或(Ib)所定義的。
態樣24：如態樣23的化合物，其中R5是-CO2R5a，其中R5a是-C1-6烷基，較佳甲基。
態樣25：如態樣23的化合物，其中R5是-OR5a，其中R5a是視情況被一個R5d 取代的-C1-6烷基，其中R5d是氫、鹵素(較佳氟)、或-C1-6烷氧基。
態樣26：如態樣23的化合物，其中R5是-OR5a，其中R5a是三氟甲氧基、甲氧基、甲氧基乙氧基、或羥基。
態樣27：如態樣23的化合物，其中R5是視情況被一個或兩個或三個取代基R6取代的苯基，其中R6是如對式(Ia)或(Ib)所定義的。
態樣28：如態樣27的化合物，其中R5是苯基，視情況被一個或兩個或三個取代基R6取代，其中R6獨立地是鹵素(較佳氟)、-OR6a、或NR6aR6bC(O)-，其中R6a和R6b是如對式(Ia)或(Ib)所定義的。
態樣29：如態樣28的化合物，其中R5是視情況被一個取代基R6取代的苯基，其中
R6是NR6aR6bC(O)-，其中
R6a和R6b各自獨立地是氫、-C1-6烷基、或-C3-8環烷基，所述-C1-6烷基和-C3-8環烷基各自視情況被一個R7取代，其中
R7是雜環基，較佳3至8元雜環，其包含一個或兩個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的雜原子作為一個或多個環成員，視情況被羥基、-C1-6烷基、或-C1-6烷氧基取代。
態樣30：如態樣28的化合物，其中R5是視情況被一個取代基R6取代的苯基，其中
R6是NR6aR6bC(O)-，其中
R6a和R6b各自獨立地是氫、-C1-6烷基、或-C3-8環烷基，所述-C1-6烷基視情況被一個R7取代，其中
R7是3至8元飽和單環雜環，其包含一個選自氮或氧的雜原子作為環 成員(較佳氧雜環丁烷基)，視情況被羥基取代。
態樣31：如態樣28的化合物，其中R5是視情況被一個取代基R6取代的苯基，其中
R6是NR6aR6bC(O)-，其中
R6a和R6b與它們所附接的氮原子一起形成3至12元飽和環，所述環包含0個、1個或2個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的另外的雜原子作為一個或多個環成員。
態樣32：如態樣31的化合物，其中R6a和R6b與它們所附接的氮原子一起形成3至8元飽和單環，所述環包含0個或1個獨立地選自氮或氧的另外的雜原子作為環成員。
態樣33：如態樣32的化合物，其中R6a和R6b與它們所附接的氮原子一起形成6元飽和單環，所述環包含0個或1個另外的氮雜原子作為環成員。
態樣34：如態樣31的化合物，其中R6a和R6b與它們所附接的氮原子一起形成六氫吡啶基環。
態樣35：如態樣28的化合物，其中R5是視情況被一個或兩個鹵素取代並且進一步視情況被一個取代基R6取代的苯基，其中
R6是-OR6a，其中
R6a是視情況被一個R7取代的-C1-6烷基，其中
R7是雜環基、-OR7a、或-NR7aR7b，其中
R7a和R7b各自獨立地是氫、-C1-6烷基、C1-6烷氧基-C1-6烷基-；並且
所述雜環基視情況被鹵素、羥基、或-C1-6烷基取代。
態樣36：如態樣35的化合物，其中所述作為R7的雜環基是4元、5元、6元、7元、或8元雜環基，其包含一個或兩個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的雜原子作為一個或多個環成員，視情況被-C1-6烷基取代；較佳是5元或6元雜環基，其包含一個或兩個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的雜原子作為一個或多個環成員。
態樣37：如態樣36的化合物，其中R7是嗎啉基、嗎啉代(morpholino)、吡咯啶基、吡咯啶子基(pyrrolidino)、4-甲基六氫吡嗪基、或六氫吡啶基。
態樣38：如態樣35的化合物，其中R6是-OR6a，其中R6a是視情況被一個R7取代的-C1-6烷基，其中R7是-OR7a，其中R7a是氫、-C1-6烷基、C1-6烷氧基-C1-6烷基-。
態樣39：如態樣35的化合物，其中R6是-OR6a，其中R6a是視情況被一個R7取代的-C1-6烷基，其中R7是-NR7aR7b，其中R7a和R7b是氫、或-C1-6烷基。
態樣40：如態樣35的化合物，其中R6是甲氧基乙氧基-、甲氧基乙氧基乙氧基-、2-羥基乙氧基、2-羥基丙氧基-、胺基乙氧基-、N,N-二甲基胺基乙氧基-、或N-甲基胺基乙氧基-。
態樣41：如態樣1的化合物，其為化合物編號A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7、A8、A9、A10、A11、A12、A13、A14、A15、A16、A17、A18、A19、A20、A21、A22、A23、A24、A25、A26、A27、A28、A29、A30、A31、A32、A33、A34、A35、A36、A37、A38、A39、A40、A41、A42、A43、A44、A45、A46、A47、A48、A49、A50、A51、A52、A53、A54、A55、A56、A57、A58、A59、A60、A61、A62、A63、A64、A65、A66、A67、A68、A69、A70、A71、A72、A73、A74、A75、A76、A77、A78、A79、A80、A81、A82、A83、A84、A85、A86、A87、A88、A89、A90、A91、A92、A93、A94、A95、A96、A97、 A98、A99、A100、A101、A102、A103、A104、A105、A106、A107、A108、B1、B2、B3、B4、B5、B6、B7、B8、B9、B10、B11、B12、B13、B14、B15、B16、B17、B18、B19、B20、B21、B22、B23、B24、B25、B26、B27、B28、B29、B30、B31、B32、B33、B34、C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11、C12、C13、C14、C15、C16、C17、C18、C19、C20、C21、C22、C23、C24、C25、D1、或D2。
在第二實施例中，本文公開了一種醫藥組合物，其包含態樣1至41中任一項的化合物或其立體異構物或其醫藥上可接受的鹽、以及醫藥上可接受的賦形劑。
在第三實施例中，本文公開了一種治療癌症的方法，其包括向對其有需要的受試者投予態樣1至41中任一項的化合物或其立體異構物或其醫藥上可接受的鹽。
以下術語在整個說明書中具有指示的含義：
如本文(包括所附申請專利範圍)所使用的，除非上下文另外清楚地指示，否則單數形式的詞語例如“一個”、“一種”和“所述”包括它們對應的複數指代物。
除非上下文另外清楚地指示，否則術語“或”用於意指術語“和/或”，並且可與術語“和/或”互換使用。
本文的術語“烷基”是指選自包含1至18個(如1至12個，進一步如1至10個，更進一步如1至8個、或1至6個、或1至4個)碳原子的直鏈和支鏈飽和烴基團的烴基團。含有1至6個碳原子的烷基(即C1-6烷基)的例子包括但不限於甲基、乙基、 1-丙基或正丙基(“n-Pr”)、2-丙基或異丙基(“i-Pr”)、1-丁基或正丁基(“n-Bu”)、2-甲基-1-丙基或異丁基(“i-Bu”)、1-甲基丙基或第二丁基(“s-Bu”)、1,1-二甲基乙基或第三丁基(“t-Bu”)、1-戊基、2-戊基、3-戊基、2-甲基-2-丁基、3-甲基-2-丁基、3-甲基-1-丁基、2-甲基-1-丁基、1-己基、2-己基、3-己基、2-甲基-2-戊基、3-甲基-2-戊基、4-甲基-2-戊基、3-甲基-3-戊基、2-甲基-3-戊基、2,3-二甲基-2-丁基和3,3-二甲基-2-丁基。
本文的術語“鹵素”是指氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)和碘(I)。
本文的術語“鹵代烷基”是指其中一個或多個氫被一個或多個鹵素原子(如氟、氯、溴和碘)替代的烷基。鹵代烷基的例子包括鹵代C1-8烷基、鹵代C1-6烷基或鹵代C1-4烷基，但不限於-CF3、-CH2Cl、-CH2 CF3、-CCl2、CF3等。
本文的術語“烯基”是指選自包含至少一個C=C雙鍵和2至18個(如2至8個，進一步如2至6個)碳原子的直鏈和支鏈烴基團的烴基團。烯基(例如，C2-6烯基)的例子包括但不限於次乙基或乙烯基、丙-1-烯基、丙-2-烯基、2-甲基丙-1-烯基、丁-1-烯基、丁-2-烯基、丁-3-烯基、丁-1,3-二烯基、2-甲基丁-1,3-二烯基、己-1-烯基、己-2-烯基、己-3-烯基、己-4-烯基和己-1,3-二烯基。
本文的術語“炔基”是指選自直鏈和支鏈烴基的烴基，其包含至少一個C≡C三鍵和2至18個(如2至8個，進一步如2至6個)碳原子。炔基(例如，C2-6炔基)的例子包括但不限於乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基(炔丙基)、1-丁炔基、2-丁炔基和3-丁炔基。
本文中的術語“烷基氧基”或“烷氧基”是指通過氧原子附接至母體分子部分的如上定義的烷基。烷氧基例如C1-6烷氧基或C1-4烷氧基的例子包括但不限於甲氧基、乙氧基、異丙氧基、丙氧基、正丁氧基、第三丁氧基、戊氧基和己 氧基等。
術語“烷氧基-烷基-”是指進一步被如上定義的烷氧基取代的如上定義的烷基。烷氧基-烷基-例如C1-8烷氧基-C1-8烷基-或C1-6烷氧基-C1-6烷基-的例子包括但不限於甲氧基甲基、乙氧基甲基、乙氧基乙基、異丙氧基甲基、或丙氧基甲基等。
本文的術語“環烷基”是指選自包括單環和多環(例如，雙環和三環)基團的飽和和部分不飽和環狀烴基團的烴基團。例如，環烷基可含有3至12個(如3至10個，進一步如3至8個，進一步如3至6個、3至5個或3至4個)碳原子。甚至進一步例如，環烷基可選自含有3至12個(如3至10個，進一步如3至8個，3至6個)碳原子的單環基團。單環環烷基的例子包括環丙基、環丁基、環戊基、1-環戊-1-烯基、1-環戊-2-烯基、1-環戊-3-烯基、環己基、1-環己-1-烯基、1-環己-2-烯基、1-環己-3-烯基、環己二烯基、環庚基、環辛基、環壬基、環癸基、環十一烷基、和環十二烷基。具體地，飽和的單環的環烷基(例如，C3-8環烷基)的例子包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基和環辛基。在較佳的實施例中，環烷基是含有3至6個碳原子的單環(縮寫為C3-6環烷基)，其包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基和環己基。雙環環烷基的例子包括具有7至12個環原子的那些，這些環原子排列為選自[4,4]、[4,5]、[5,5]、[5,6]或[6,6]環系的雙環，或排列為選自雙環[2.2.1]庚烷、雙環[2.2.2]辛烷和雙環[3.2.2]壬烷的橋接雙環。雙環烷基的 其他例子包括排列為選自[5,6]和[6,6]環系的雙環(如
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和
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)的那些， 其中波浪線指示附接點。環可以是飽和的或者具有至少一個雙鍵(即部分不飽和的)，但不是完全共軛的，並且不是芳香族的，因為芳香族在本文中進行了定義。
單獨使用或與其他術語組合使用的術語“芳基”是指選自以下的基團：
°5元和6元碳環芳香族環，例如苯基；
°雙環環系，如7至12元雙環環系，其中至少一個環是碳環和芳香族的，例如萘基和茚滿基；以及
°三環環系，如10至15元三環環系，其中至少一個環是碳環和芳香族的，例如芴基。
術語“芳香族烴環”和“芳基”在本文的整個公開文本中可互換使用。在一些實施例中，單環或雙環芳香族烴環具有5至10個成環碳原子(即，C5-10芳基)。單環或雙環芳香族烴環的例子包括但不限於苯基、萘-1-基、萘-2-基、蒽基、菲基等。在一些實施例中，芳香族烴環是萘環(萘-1-基或萘-2-基)或苯環。在一些實施例中，芳香族烴環是苯環。
本文的術語“雜芳基”是指選自以下的基團：
°5元、6元或7元芳香族單環，其包含至少一個雜原子，例如1至4個、或在一些實施例中1至3個、在一些實施例中1至2個雜原子，這些雜原子選自氮(N)、硫(S)和氧(O)，其餘的環原子是碳；
°8至12元雙環，其包含至少一個雜原子例如1至4個雜原子，或在一些實施例中包含1至3個雜原子，或在其他實施例中包含1或2個雜原子，這些雜原子選自氮、氧或視情況氧化的硫(作為一個或多個環成員)，其餘環原子是碳，並且其中至少一個環是芳香族的且芳香族環中存在至少一個雜原子；以及
°11至14元三環，其包含至少一個雜原子例如1至4個雜原子，或在一些實施例中包含1至3個雜原子，或在其他實施例中包含1或2個雜原子，這些雜原子選自氮、氧或視情況氧化的硫(作為一個或多個環成員)，其餘環原子是碳，並且 其中至少一個環是芳香族的且芳香族環中存在至少一個雜原子。
當雜芳基中S和O原子的總數超過1時，那些雜原子彼此不相鄰。在一些實施例中，雜芳基中S和O原子的總數不大於2。在一些實施例中，芳香族雜環中S和O原子的總數不大於1。當雜芳基含有多於一個雜原子環成員時，雜原子可以相同或不同。雜芳基的一個或多個環中的氮原子可被氧化形成N-氧化物。
如本文所用的術語“C-連接的雜芳基”意指雜芳基通過來自所述雜芳基環的C原子的鍵與核心分子連接。
本文使用的術語“視情況氧化的硫”是指S、SO或SO2。
術語“芳香族雜環”和“雜芳基”在本文的整個公開文本中可互換使用。在一些實施例中，單環或雙環芳香族雜環具有5個、6個、7個、8個、9個或10個成環成員，其中1個、2個、3個或4個雜原子環成員獨立地選自氮(N)、硫(S)和氧(O)，並且其餘的環成員是碳。在一些實施例中，單環或雙環芳香族雜環是包含1或2個獨立地選自氮(N)、硫(S)和氧(O)的雜原子環成員的單環或雙環。在一些實施例中，單環或雙環芳香族雜環是5至6元雜芳基環，所述雜芳基環為單環並且具有1個或2個獨立地選自氮(N)、硫(S)和氧(O)的雜原子環成員。在一些實施例中，單環或雙環芳香族雜環是8至10元雜芳基環，所述雜芳基環為雙環並且具有1個或2個獨立地選自氮、硫和氧的雜原子環成員。
雜芳基或者單環或雙環芳香族雜環的例子包括但不限於(如從指定優先次序1的連接位置開始編號)吡啶基(如2-吡啶基、3-吡啶基、或4-吡啶基)、
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啉基、吡嗪基、2,4-嘧啶基、3,5-嘧啶基、2,4-咪唑基、咪唑並吡啶基、異噁唑基、噁唑基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基(如1,2,3-噻二唑基、1,2,4-噻二唑基、或1,3,4-噻二唑基)、四唑基、噻吩基(如噻吩-2-基、噻吩-3-基)、三嗪基、苯並噻吩基、 呋喃基(furyl或furanyl)、苯並呋喃基、苯並咪唑基、吲哚基、異吲哚基、吲哚啉基、噁二唑基(如1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、或1,3,4-噁二唑基)、呔嗪基、吡嗪基、噠嗪基、吡咯基、三唑基(如1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、或1,3,4-三唑基)、喹啉基、異喹啉基、吡唑基、吡咯並吡啶基(如1H-吡咯並[2,3-b]吡啶-5-基)、吡唑並吡啶基(如1H-吡唑並[3,4-b]吡啶-5-基)、苯並噁唑基(如苯並[d]噁唑-6-基)、
Figure 108125875-A0101-12-0018-656
啶基、嘌呤基、1-氧雜-2,3-二唑基、1-氧雜-2,4-二唑基、1-氧雜-2,5-二唑基、1-氧雜-3,4-二唑基、1-硫雜-2,3-二唑基、1-硫雜-2,4-二唑基、1-硫雜-2,5-二唑基、1-硫雜-3,4-二唑基、呋呫基(如呋呫-2-基、呋呫-3-基)、苯並呋呫基、苯並噻吩基、苯並噻唑基、苯並噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、呋喃並吡啶基、苯並噻唑基(如苯並[d]噻唑-6-基)、吲唑基(如1H-吲唑-5-基)和5,6,7,8-四氫異喹啉。
“雜環基”、“雜環”或“雜環的”是可互換的並且是指包含一個或多個選自氮、氧或視情況氧化的硫的雜原子作為環成員的非芳香族雜環基，其餘環成員是碳，包括單環、稠合、橋接和螺環，即包括單環雜環基、橋接雜環基、螺雜環基和稠合雜環基。本文使用的術語“視情況氧化的硫”是指S、SO或SO2。
術語“單環雜環基”是指單環基團，其中至少一個環成員是選自氮、氧或視情況氧化的硫的雜原子。雜環可以是飽和的或部分飽和的。
示例性的單環4至9元雜環基包括但不限於(如從指定優先級1的連接位置編號)吡咯啶-1-基、吡咯啶-2-基、吡咯啶-3-基、咪唑啶-2-基、咪唑啶-4-基、吡唑啶-2-基、吡唑啶-3-基、六氫吡啶-1-基、六氫吡啶-2-基、六氫吡啶-3-基、六氫吡啶-4-基、2,5-六氫吡嗪基、吡喃基、嗎啉基、嗎啉代、嗎啉-2-基、嗎啉-3-基、環氧乙烷基、氮丙啶-1-基、氮丙啶-2-基、氮雜環辛烷-1-基、氮雜環辛烷-2-基、 氮雜環辛烷-3-基、氮雜環辛烷-4-基、氮雜環辛烷-5-基、環硫乙烷基、氮雜環丁烷-1-基、氮雜環丁烷-2-基、氮雜環丁烷-3-基、氧雜環丁烷基、硫雜環丁烷基、1,2-二硫雜環丁烷基、1,3-二硫雜環丁烷基、二氫吡啶、四氫吡啶、硫代嗎啉基、噻噁烷基、六氫吡嗪基、高六氫吡嗪基、高六氫吡啶基、氮雜環庚烷-1-基、氮雜環庚烷-2-基、氮雜環庚烷-3-基、氮雜環庚烷-4-基、氧雜環庚烷基、硫雜環庚烷基、1,4-氧雜硫雜環己烷基、1,4-二氧雜環庚烷基、1,4-氧雜硫雜環庚烷基、1,4-氧雜氮雜環庚烷基、1,4-二硫雜環庚烷基、1,4-硫雜氮雜環庚烷基和1,4-二氮雜環庚烷基、1,4-二硫雜環己烷基、1,4-氮雜硫雜環己烷基、氧雜氮呯基、二氮呯基、硫雜氮呯基、二氫噻吩基、二氫吡喃基、二氫呋喃基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫吡喃基、四氫噻喃基、1-吡咯啉基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、二氫吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、1,4-二噁烷基、1,3-二氧戊環基、吡唑啉基、吡唑啶基、二硫雜環己烷基、二硫戊環基、吡唑啶基、咪唑啉基、嘧啶酮基、或1,1-二側氧基-硫代嗎啉基。
術語“螺雜環基”是指具有通過一個共同碳原子(稱為螺原子)連接的環的5至20元多環雜環基，其包含一個或多個選自氮、氧或視情況氧化的硫的雜原子作為環成員，其餘環成員是碳。螺雜環基的一個或多個環可含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子體系。較佳地，螺雜環基是6至14元，並且更佳是7至12元。根據常見的螺原子數量，螺雜環基被分為單螺雜環基、二螺雜環基、或聚螺雜環基，並且較佳是指單螺雜環基或二螺雜環基，並且更佳是4元/4元、3元/5元、4元/5元、4元/6元、5元/5元、或5元/6元單螺雜環基。螺雜環基的代表性例子包括但不限於以下基團：2,3-二氫螺[茚-1,2'-吡咯啶](如2,3-二氫螺[茚-1,2'-吡咯啶]-1'-基)、1,3-二氫螺[茚-2,2'-吡咯啶](如1,3-二氫螺[茚-2,2'-吡 咯啶]-1'-基)、氮雜螺[2.4]庚烷(如5-氮雜螺[2.4]庚烷-5-基)、氮雜螺[3.4]辛烷(如6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)、2-氧雜-6-氮雜螺[3.4]辛烷(如2-氧雜-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)、氮雜螺[3.4]辛烷(如6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)、氮雜螺[3.4]辛烷(如6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-基)、1,7-二氧雜螺[4.5]癸烷、2-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬烷(如2-氧雜-7-氮雜螺[4.4]壬-7-基)、7-氧雜-螺[3.5]壬基和5-氧雜-螺[2.4]庚基。
術語“稠合雜環基”是指5至20元多環雜環基，其中體系中的每個環與另一個環共有相鄰的一對原子(碳和碳原子或碳和氮原子)，包含一個或多個選自氮、氧或視情況氧化的硫的雜原子作為環成員，其餘環成員是碳。稠合雜環基團的一個或多個環可含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子體系。較佳地，稠合雜環基是6至14元，並且更佳是7至10元。根據環的元數，稠合雜環基分為二環、三環、四環或多環稠合雜環基，較佳指代二環或三環稠合雜環基，並且更佳為5元/5元、或5元/6元二環稠合雜環基。稠合雜環的代表性例子包括但不限於以下基團：八氫環戊[c]吡咯(例如，八氫環戊[c]吡咯-2-基)、八氫吡咯並[3,4-c]吡咯基、八氫異吲哚基、異吲哚啉基(例如，異吲哚啉-2-基)、八氫-苯並[b][1,4]二噁英。
術語“橋接雜環基”是指5至14元多環雜環烷基，其中體系中每兩個環共有兩個不連續的原子，其包含一個或多個選自氮、氧或視情況氧化的硫的雜原子作為環成員，其餘環成員是碳。橋接雜環基的一個或多個環可含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子體系。較佳地，橋接雜環基是6至14元，並且更佳是7至10元。根據環的元數，橋接雜環基分為二環、三環、四環或多環橋接雜環基，並且較佳指代二環、三環或四環橋接雜環基，更佳為二環或三環橋接雜環基。橋接雜環基的代表性例子包括但不限於以下基團：2-氮雜雙環 [2.2.1]庚基、氮雜雙環[3.1.0]己基、2-氮雜雙環[2.2.2]辛基和2-氮雜雙環[3.3.2]癸基。
本文公開的化合物可以含有不對稱中心，並且因此可以作為對映異構物存在。“對映異構物”是指化合物的兩種立體異構物，它們彼此是不可重疊的鏡像。在本文公開的化合物具有兩個或更多個不對稱中心的情況下，它們可以另外作為非對映異構物存在。對映異構物和非對映異構物屬於更廣泛的立體異構物類別。旨在包括作為基本上純的解析的對映異構物、其外消旋混合物、以及非對映異構物的混合物的所有這些可能的立體異構物。旨在包括本文公開的化合物和/或其醫藥上可接受的鹽的所有立體異構物。除非另外特別提及，否則提及一種異構物適用於任何可能的異構物。每當未指定異構物組成時，包括所有可能的異構物。
如本文所用的術語“基本上純的”意指目標立體異構物含有不超過35%(如不超過30%，進一步如不超過25%，甚至進一步如不超過20%)(按重量計)的任何其他一種或多種立體異構物。在一些實施例中，術語“基本上純的”意指目標立體異構物含有不超過10%(例如不超過5%，如不超過1%)(按重量計)的任何其他一種或多種立體異構物。
當本文公開的化合物含有烯屬雙鍵時，除非另有說明，否則此類雙鍵意在包括E和Z幾何異構物兩者。
當本文公開的化合物含有二取代的環己基或環丁基時，位於環己基或環丁基環上的取代基可以採用順式和反式形成。順式形式意指兩個取代基都存在於碳上2個取代基位置的上側，而反式意指它們位於相對側。
將反應產物彼此分離和/或與起始材料分離可能是有利的。通過本領域常用 的技術將每個步驟或一系列步驟的所需產物分離和/或純化(下文中分離)至所需的均勻度。通常，此類分離涉及多相提取、從溶劑或溶劑混合物中結晶、蒸餾、昇華或層析。層析可以涉及許多方法，包括例如：反相和正相；尺寸排阻；離子交換；高、中和低壓液相層析方法和設備；小規模分析型；模擬移動床(“SMB”)和製備型薄層或厚層層析；以及小規模薄層和急驟層析的技術。業內熟習此項技術者將應用最有可能實現所需分離的技術。
“非對映異構物”是指具有兩個或更多個對掌性中心的化合物的立體異構物，但它們不是彼此的鏡像。通過業內熟習此項技術者熟知的方法，諸如通過層析和/或分步結晶，可以基於非對映異構物混合物的物理化學差異將它們分離成其單獨的非對映異構物。對映異構物可以通過以下方式來分離：通過與適當的光學活性化合物(例如，對掌性助劑如對掌性醇或莫舍醯氯(Mosher's acid chloride))反應將對映異構物混合物轉化為非對映異構物混合物，分離非對映異構物並將各自的非對映異構物轉化(例如，水解)成相應的純的對映異構物。對映異構物也可以通過使用對掌性HPLC柱來分離。
單一立體異構物例如基本上純的對映異構物可以通過使用一種方法將外消旋混合物解析來獲得，所述方法例如使用光學活性解析劑形成非對映異構物(Eliel,E.和Wilen,S.Stereochemistry of Organic Compounds.New York：John Wiley & Sons,Inc.,1994；Lochmuller,C.H.，等人“Chromatographic resolution of enantiomers：Selective review.”J.Chromatogr.,113(3)(1975)：第283-302頁)。本發明的對掌性化合物的外消旋混合物可以通過任何合適的方法分離和分開，包括：(1)與對掌性化合物形成離子非對映異構物鹽並且通過分級結晶或其他方法分離；(2)用對掌性衍生化試劑形成非對映異構物化合物，分離非對映異構物並且轉化 為純立體異構物；以及(3)直接在對掌性條件下分離基本上純的或富集的立體異構物。參見：Wainer,Irving W.，編輯Drug Stereochemistry：Analytical Methods and Pharmacology.New York：Marcel Dekker,Inc.,1993。
“醫藥上可接受的鹽”是指在合理的醫學判斷範圍內適合於與人和低等動物的組織接觸使用而沒有過度毒性、刺激、過敏反應等並與合理的利益/風險比相稱的那些鹽。醫藥上可接受的鹽可以在本文公開的化合物的最終分離和純化期間原位製備，或者通過使游離鹼官能團與合適的有機酸反應或通過使酸性基團與合適的鹼反應而單獨製備。
另外，如果作為酸加成鹽獲得本文公開的化合物，則可以通過鹼化酸式鹽的溶液來獲得游離鹼。相反，如果產物是游離鹼，則可以按照用於從鹼化合物製備酸加成鹽的常規程序，通過將游離鹼溶解在合適的有機溶劑中並用酸處理所述溶液來產生加成鹽(如醫藥上可接受的加成鹽)。業內熟習此項技術者將認識到可以在無需過度實驗的情況下使用各種合成方法來製備無毒的醫藥上可接受的加成鹽。
如本文所定義，“其醫藥上可接受的鹽”包括至少一種式(Ia)或(Ib)的化合物的鹽和式(Ia)或(Ib)的化合物的立體異構物的鹽，如對映異構物的鹽和/或非對映異構物的鹽。
當應用於動物、人、實驗受試者、細胞、組織、器官或生物流體時，術語“投予”(administration，administering)、“治療”(treating和treatment)意指外源性藥劑、治療劑、診斷劑或組合物與所述動物、人、受試者、細胞、組織、器官或生物流體的接觸。細胞的治療涵蓋試劑與所述細胞的接觸，以及試劑與流體的接觸，其中所述流體與所述細胞接觸。術語“投予”和“治療”還意指通 過試劑、診斷劑、結合化合物或者通過另一種細胞對例如細胞的體外和離體治療。本文的術語“受試者”包括任何生物體，較佳動物，更佳哺乳動物(例如大鼠、小鼠、狗、貓、兔)且最佳人。
術語“有效量”或“治療有效量”是指活性成分(如化合物)的如下量，當所述化合物被投予受試者以治療疾病或者疾病或障礙的至少一種臨床症狀時所述量足以影響對所述疾病、障礙或症狀的這種治療。“治療有效量”可隨以下各項變化：化合物，疾病、障礙，和/或疾病或障礙的症狀，疾病、障礙和/或疾病或障礙的症狀的嚴重程度，待治療的受試者的年齡，和/或待治療的受試者的體重。在任何給定的例子中，適當的量對於業內熟習此項技術者來說是清楚的，或者可以通過常規實驗來確定。在一些實施例中，“治療有效量”是本文公開的至少一種化合物和/或其至少一種立體異構物和/或其至少一種其醫藥上可接受的鹽有效於“治療”(如上定義)受試者的疾病或障礙的量。在組合治療的情況下，“治療有效量”是指用於有效治療疾病、障礙或病症的組合對象的總量。
包含本文公開的化合物的醫藥組合物可以經由口服、吸入、直腸、腸胃外或局部投予投予至對其有需要的受試者。對於口服投予，醫藥組合物可以是常規固體調配物如錠劑、粉劑、顆粒劑、膠囊等，液體調配物如水或油懸浮液，或其他液體調配物如糖漿、溶液、懸浮液等；對於腸胃外投予，醫藥組合物可以是溶液、水溶液、油懸浮液濃縮物、凍幹粉末等。較佳地，醫藥組合物的調配物選自錠劑、包衣錠劑、膠囊、栓劑、鼻噴霧劑或注射劑，更佳錠劑或膠囊。醫藥組合物可以是具有準確劑量的單個單位投予。此外，醫藥組合物還可包含另外的活性成分。
本文公開的醫藥組合物的所有調配物可以通過製藥領域中的常規方法生產。 例如，可以將活性成分與一種或多種賦形劑混合，然後從而製造所需的調配物。“醫藥上可接受的賦形劑”是指適用於所需醫藥調配物的常規醫藥載劑，例如：稀釋劑、媒劑(如水、各種有機溶劑等)、填充劑(如澱粉、蔗糖等)、粘合劑(如纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠和聚乙烯吡咯啶酮(PVP))；潤濕劑如甘油；崩解劑如瓊脂、碳酸鈣和碳酸氫鈉；吸收促進劑如第四銨化合物；表面活性劑如十六醇；吸收載劑如高嶺土和皂土；潤滑劑，如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、聚乙二醇等。此外，所述醫藥組合物還包含其他醫藥上可接受的賦形劑，如分散劑、穩定劑、增稠劑、絡合劑、緩衝劑、滲透促進劑、聚合物、芳香劑甜味劑和染料。
術語“疾病”是指任何疾病、不適、病、症狀或適應症，並且可以與術語“障礙”或“病症”互換。
在整個說明書和隨後的申請專利範圍中，除非上下文另有要求，否則術語“包括”和變型如“包括”(“comprises”和“comprising”)旨在說明其後的特徵的存在，但不排除存在或添加一個或多個其他功能。當在本文中使用時，術語“包含”可以用術語“含有”、“包括”替代或有時用“具有”替代。
在整個說明書和隨後的申請專利範圍中，術語“Cn-m”指示包括端點的範圍，其中n和m是整數並且指示碳數。例子包括C1-8、C1-6等。
除非在本文件的其他地方明確定義，否則本文使用的所有其他技術和科學術語具有業內熟習此項技術者通常理解的含義。
通用合成
本文公開的化合物(包括其鹽)可以使用已知的有機合成技術製備，並且可以根據多種可能的合成途徑中的任何一種來合成。
用於製備本文公開的化合物的反應可以在可由有機合成領域的技術人員容易選擇的合適的溶劑中進行。合適的溶劑可以是在進行反應的溫度(例如可以在從室溫至溶劑的沸點範圍內的溫度)下與起始材料、中間物或產物基本上不反應的。給定的反應可以在一種溶劑或多種溶劑的混合物中進行。
業內熟習此項技術者可以容易地確定合適的保護基團的選擇。
可以根據本領域已知的任何合適的方法監測反應，這些方法如NMR、UV、HPLC、LC-MS和TLC。化合物可通過多種方法純化，這些方法包括HPLC和正相二氧化矽層析法。
對掌性分析型HPLC用於不同對掌性例子的滯留時間分析，根據所用的柱、移動相、溶劑比將條件分為以下方法。
本文公開的化合物可以按照反應圖I和反應圖II製備。
Figure 108125875-A0101-12-0026-16
其中R和R6是如對式(Ia)或(Ib)所定義的。
在反應圖I中，可商購的醛與碳醯肼1(如呋喃-2-碳醯肼)反應以形成式2，其在酸性條件的存在下重排以得到式3。然後使式3與2-鹵代-2-苯基乙酸酯(如2-溴 -2-苯基乙酸甲酯)反應以形成式4，其隨後通過使用鹼如氫氧化鈉或第三丁醇鉀水解成式5的游離酸。在本領域已知的標準條件下完成酸5的進一步偶聯以提供式6的化合物。
Figure 108125875-A0101-12-0027-17
其中R、R6和R3和R4是如對式(Ia)或(Ib)所定義的。
在反應圖II中，在本領域已知的標準條件下將可商購的酸(如2-苯丙酸)酯化以得到一種式7的化合物，使所述化合物與鹵化試劑如N-溴代琥珀醯亞胺反應以在α位引入一個鹵原子。使式8的化合物與水合肼反應以形成式9。使式9與可商購的2-胺基-4,6-二氯嘧啶-5-甲醛反應以得到式10，使其與碳醯肼(如呋喃-2-碳醯肼)反應，並且在酸性條件的存在下進一步重排以得到式12。隨後通過使用鹼如氫氧化鈉或第三丁醇鉀將酯12水解成式13的游離酸。在本領域已知的標準條件下完成酸13的進一步偶聯以提供式14的化合物。
實例
以下實例旨在僅僅是示例性的，並且不應被認為以任何方式進行限制。除非另有說明，否則以下所述實例中的實驗方法是常規方法。除非另有說明，否則試劑和材料均可商購。所用的全部溶劑和化學品均為分析級或化學純的。溶劑在使用前都要再蒸餾。無水溶劑均根據標準方法或參考方法製備。用於柱層析法的二氧化矽凝膠(100-200目)和用於薄層層析法(TLC)的二氧化矽凝膠(GF254)可從中國的Tsingdao Haiyang Chemical Co.,Ltd.或Yantai Chemical Co.,Ltd.商購；除非另有說明，否則全部用石油醚(60℃-90℃)/乙酸乙酯(v/v)溶離並且通過碘或磷鉬酸在乙醇中的溶液來可視化。除非另有說明，否則所有萃取溶劑均經無水Na2SO4乾燥。在Bruck-400核磁共振光譜儀上記錄1H NMR譜，其中TMS(四甲基矽烷)作為內標物。通過使用配備有在214nm和254nm處偵測的二極管陣列偵測器(DAD)和離子阱(ESI源)的Agilent1100高效液相層析-離子阱質譜儀(LC-MSD阱)記錄LC/MS數據。除試劑外的所有化合物名稱均由ChemDraw® 14.0版生成。
在以下實例中，使用以下縮寫：
Figure 108125875-A0101-12-0028-18
Figure 108125875-A0101-12-0029-19
Figure 108125875-A0101-12-0030-20
化合物A1：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0030-21
Figure 108125875-A0101-12-0031-22
步驟A：N'-(6-胺基-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-4-基)呋喃-2-碳醯肼
Figure 108125875-A0101-12-0031-23
向2-胺基-4,6-二氯嘧啶-5-甲醛(50g，0.26mol)和Et3N(28.9g，0.28mol)在DMSO(600mL)中的攪拌溶液中分批添加呋喃-2-碳醯肼(32.8g，0.26mol)。然後將反應混合物在室溫下攪拌過夜。LCMS顯示起始材料轉化為中間物。添加NH2NH2.H2O(14mL，0.31mol)並且將溶液在70℃下攪拌3小時。在減壓下蒸發(油泵，在65℃下)後，向殘餘物中添加水(500mL)，漿化並且過濾。將濾餅再次用水(300mL)漿化，過濾並且乾燥以得到呈黃色固體的產物。MS：M/e 260(M+1)+
步驟B：2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺
Figure 108125875-A0101-12-0031-24
將N'-(6-胺基-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-4-基)呋喃-2-碳醯肼(17g，65mmol)在BSA(136mL)和HMDS(160mL)中的溶液在110℃下加熱過夜。將溶液在60℃下在減壓下濃縮。向殘餘物中添加水(200mL)並且漿化1小時。將固體過濾，用水洗滌並且乾燥以獲得呈棕色固體的所需產物(13.1g，83%)。MS：M/e 242(M+1)+
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)丙酸乙酯
Figure 108125875-A0101-12-0032-25
室溫下，向2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(500mg，2.07mmol)在DMF(20mL)和K2CO3(344mg，2.49mmol)中的攪拌溶液中添加2-氯丙酸乙酯(339mg，2.49mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。將混合物用水(20mL)稀釋，並用EA(20mL x 2)萃取。將殘餘物(N1和N2位置化合物的混合物)直接用於下一步驟。MS：M/e 342(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0032-26
在室溫下向步驟C的產物(707mg，粗品，2.07mmol)在MeOH(12mL)中的攪拌溶液中添加NaOH水溶液(2.0M，4mL)。添加後，將混合物在60℃下攪拌3小時。將反應在減壓下濃縮。將殘餘物溶解在水(20mL)中並且通過HCl溶液(2M)中和至pH=3至4。在減壓下濃縮水相。將殘餘物(N1和N2位置化合物的混合物，含有NaCl)直接用於下一步驟。MS：M/e 314(M+1)+。
步驟E：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0033-29
將步驟D的產物(200mg，0.64mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(190mg，0.7mmol)、HATU(267mg，0.7mmol)和Et3N(322mg，3.19mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並用EA(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥並且在減壓下濃縮。通過製備型HPLC純化殘餘物，得到標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.20(s,1H),8.18-8.13(m,2H),7.99-7.90(m,1H),7.26-7.21(m,1H),6.96(d,J=8.0Hz,2H),6.85(d,J=8.0Hz,2H),6.77-6.71(m,1H),5.81-5.68(m,1H),4.04-3.96(m,2H),3.60-3.53(m,4H),3.52-3.37(m,2H),3.28(s,3H),3.20-2.93(m,4H),1.61(d,J=8.0Hz,3H)ppm。MS：M/e 532(M+1)+。
通過對掌性製備型HPLC將化合物A1分離成兩種對映體立體異構物(化合物A1a，較早的峰；和化合物A1b，較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0033-27
Figure 108125875-A0101-12-0033-28
Figure 108125875-A0101-12-0034-30
化合物A2：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-3-甲基丁-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0034-32
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-3-甲基丁酸甲酯和2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-3-甲基丁酸甲酯。
Figure 108125875-A0101-12-0034-31
將2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(330mg，1.37mmol)、2-溴-3-甲基丁酸甲酯(330mg，1.70mmol)和K2CO3(400mg，2.90mmol)在DMF(7mL)中的混合物在50℃加熱16小時。將混合物用EA(30mL)稀釋，並過 濾懸浮液。將濾液用鹽水(15mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮。通過製備型TLC純化所得殘餘物，得到呈白色固體的2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-3-甲基丁酸甲酯(70mg)，MS：M/e 356(M+1)+；以及呈白色固體的2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-3-甲基丁酸甲酯(170mg)，MS：M/e 356(M+1)+。
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-3-甲基丁酸
Figure 108125875-A0101-12-0035-34
在室溫下向步驟A的產物(60mg，0.17mmol)在MeOH(2mL)中的攪拌溶液中添加NaOH水溶液(2M，1mL)，並將所得混合物攪拌2小時。將混合物用HCl(1M)中和並濃縮至乾燥。添加5mL混合溶劑(CH2Cl2/MeOH=3：1)並攪拌10分鐘。將懸浮液過濾，並將濾液濃縮，得到呈白色固體的標題產物(52mg，90%)。MS：M/e 342(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-3-甲基丁-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0035-33
在室溫下向步驟B的產物(52mg，0.15mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(52mg，0.22mmol)、DIEA(100mg，0.78mmol)在DMF(2mL)中的混合物中添加HATU(70mg，0.18mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌2小時。添加20 mL的EA並且將混合物用鹽水(10mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮。將所得殘餘物通過製備型TLC(EA/MeOH=20：1)純化以得到標題產物(46.0mg，產率：55%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.40-8.10(m,3H),7.95(s,1H),7.23(d,J=3.6Hz,1H),6.82-6.71(m,5H),5.20(d,J=9.6Hz,1H),4.00-3.92(m,2H),3.80-3.71(m,1H),3.69-3.62(m,2H),3.61-3.56(m,2H),3.53-3.45(m,1H),3.27(s,3H),3.06-2.97(m,1H),2.97-2.90(m,1H),2.84-2.69(m,2H),2.32-2.23(m,1H),1.04(d,J=6.8Hz,3H),0.60(d,J=6.8Hz,3H)。MS：M/e 560(M+1)+。
化合物A3：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-甲基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0036-35
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-甲基丙酸甲酯和2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並 [1,5-c]嘧啶-8-基)-2-甲基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0037-37
將2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(1.5g，6.2mmol)、2-溴-2-甲基丙酸甲酯(1.3g，7.4mmol)和K2CO3(1.7g，12.4mmol)在DMF(80mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。向溶液中添加水(50mL)，用乙酸乙酯(50mL)萃取並且用鹽水(50mL)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=3：1至1：1)純化以得到2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-甲基丙酸甲酯(65mg，3%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.19(s,1H),8.06(br.s,2H),7.95(d,J=4.0Hz,1H),7.23(d,J=4.0Hz,1H),6.73(t,J=4.0Hz,1H),3.67(s,3H),1.87(s,6H)ppm。MS：M/e 342(M+1)+以及2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-甲基丙酸甲酯(1.2g，57%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.87(s,1H),7.95(s,1H),7.67(br.s,1H),7.18(s,1H),6.74(t,J=4.0Hz,1H),3.64(s,3H),1.87(s,6H)ppm。MS：M/e 342(M+1)+
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-甲基丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0037-36
將NaOH溶液(30mg，在2mL的水中)添加至2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑 並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-甲基丙酸甲酯(65mg，0.19mmol)在甲醇(5mL)中的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌過夜。將溶液濃縮，添加水(5mL)並且用1N HCl溶液酸化至pH=5。將沈澱的固體過濾並且乾燥以得到呈白色固體的所需產物(53mg，85%)。MS：M/e 328(M+1)+
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-甲基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0038-38
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-甲基丙酸(53mg，0.16mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(38mg，0.16mmol)、HATU(73mg，0.19mmol)和DIEA(42mg，0.32mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(5mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=2：1至EA)純化以得到所需產物(34mg，39%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.29(s,1H),8.07(br.s,2H),7.94(s,1H),7.21(d,J=4.0Hz,1H),6.73-6.66(m,5H),3.93(d,J=4.0Hz,2H),3.63(br.s,2H),3.56(d,J=4.0Hz,2H),3.31(s,3H),2.89(br.s,4H),2.42(br.s,2H),1.83(s,6H)ppm。MS：M/e 546(M+1)+
化合物A4：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丁-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0038-39
Figure 108125875-A0101-12-0039-40
步驟A：4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0039-41
向4-(4-羥基苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(10.0g，36mmol)在CH3CN(250mL)中的攪拌溶液中添加NaH(3.0g，125mmol)，將反應混合物在50℃下攪拌30分鐘。然後將1-溴-2-甲氧基乙烷(6.0g，43.5mmol)添加到反應中。添加後，將反應混合物在60℃下攪拌過夜。除去大部分溶劑，並將殘餘物用H2O(50mL)溶解，然後用HCl水溶液酸化至pH=6至7，用EtOAc(200mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮，得到呈黃色油狀物的4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(16g，粗品)。MS：M/e 337(M+1)+。
步驟B：1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪
Figure 108125875-A0101-12-0039-42
向4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(16.0g，粗品)在DCM(100mL)中的攪拌混合物中添加TFA(100mL)。添加後，將反應混合物在室 溫下攪拌3小時，除去大部分溶劑，並將所述殘餘物溶於H2O(50mL)中，用EtOAc(50mL)萃取，然後用NaOH水溶液調節至pH=9至10，並用EtOAc(200mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮得到呈灰色固體的1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(10g，88.8%)。MS：M/e 237(M+1)+
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)丁酸甲酯和2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)丁酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0040-43
向2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(300mg，1.25mmol)在DMF(30mL)中的攪拌溶液中添加K2CO3(345mg，2.5mmol)和2-溴-丁酸甲酯(270mg，1.5mmol)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(50mL)中並且用EtOAc(50mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=3：1至1：1)純化，得到呈白色固體的2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)丁酸甲酯(120mg，56.1%)和2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)丁酸甲酯(100mg，46.8%)。MS：M/e 342(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)丁酸
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)丁酸甲酯(120mg，0.35mmol)在MeOH/H2O(3mL/1mL)中的攪拌混合物中添加 NaOH水溶液(2.0M，1mL)。添加後，將反應混合物在室溫下攪拌5小時。去除大部分溶劑以得到水層，然後用HCl水溶液酸化至pH=3至4並且過濾，收集濾餅，乾燥以得到呈白色固體的目標化合物(100mg，87.1%)。MS：M/e 328(M+1)+。
Figure 108125875-A0101-12-0041-45
步驟E：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丁-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0041-44
將步驟D的產物(80mg，0.25mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(80mg，0.34mmol)、HATU(100mg，0.25mmol)和TEA(80mg，0.79mmol)在CH3CN(20mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(40mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(30mg，22.0%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.20(s,1H),8.18(br,2H),7.95(s,1H),7.24(d,J=2.7Hz,1H),6.83-6.76(m,4H),6.74(d,J=1.5Hz,1H),5.56-5.48(m,1H),3.98(d,J=3.7Hz,2H),3.69(s,1H),3.63-3.46(m,5H),3.27(s,3H),3.06-2.91(m,2H),2.80(s,1H),2.44(s,1H),2.21-2.09(m,2H),0.79(t,J=7.1Hz,3H)ppm。MS：M/e 546(M+1)+。
化合物A5：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0042-46
步驟A：N'-(6-胺基-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-4-基)呋喃-2-碳醯肼
Figure 108125875-A0101-12-0042-47
向2-胺基-4,6-二氯嘧啶-5-甲醛(50g，0.26mol)和Et3N(28.9g，0.28mol)在DMSO(600mL)中的攪拌溶液中分批添加呋喃-2-碳醯肼(32.8g，0.26mol)。然後將反應混合物在室溫下攪拌過夜。LCMS顯示起始材料轉化為中間物。添加NH2NH2.H2O(14mL，0.31mol)並且將溶液在70℃下攪拌3小時。在減壓下蒸發(油泵，在65℃下)後，向殘餘物中添加水(500mL)，漿化並且過濾。將濾餅再次用水(300mL)漿化，過濾並且乾燥以得到呈黃色固體的產物。MS：M/e 260(M+1)+
步驟B：2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺
Figure 108125875-A0101-12-0043-49
將N'-(6-胺基-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-4-基)呋喃-2-碳醯肼(17g，65mmol)在BSA(136mL)和HMDS(160mL)中的溶液在110℃下加熱過夜。將溶液在60℃下在減壓下濃縮。向殘餘物中添加水(200mL)並且漿化1小時。將固體過濾，用水洗滌並且乾燥以得到呈棕色固體的所需產物(13.1g，83%)。MS：M/e 242(M+1)+
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)戊酸乙酯和2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)戊酸乙酯
Figure 108125875-A0101-12-0043-48
將2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(2g，8.3mmol)、2-溴戊酸乙酯(2.1g，9.9mmol)和K2CO3(2.3g，16.6mmol)在DMF(50mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。向溶液中添加水(30mL)，用乙酸乙酯(50mL)萃取並且用鹽水(50mL)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，濃縮並通過柱層析(PE：EA=4：1至2：1)純化，得到2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)戊酸乙酯(600mg，20%)和2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)戊酸乙酯(810mg，25%)。MS：M/e 370(M+1)+
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7- 基)戊酸
Figure 108125875-A0101-12-0044-52
將NaOH溶液(324mg，在2mL水中)添加至2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)戊酸乙酯(600mg，1.6mmol)在乙醇(10mL)中的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌3小時。將溶液濃縮，添加水(10mL)並且用1N HCl溶液酸化至pH=5。將沈澱的固體過濾並且乾燥以得到呈白色固體的所需產物(475mg，86%)。MS：M/e 342(M+1)+
步驟E：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0044-51
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)戊酸(350mg，1mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(241mg，1mmol)、HATU(456mg，1.2mmol)和DIEA(258mg，2mmol)在DMF(20mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(15mL)，用乙酸乙酯(20mL)萃取並且用鹽水(20mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析法(PE：EA=1：1至EA)純化以得到所需產物(330mg，57%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.20(s,1H),8.17(br.s,2H),7.95(s,1H),7.23(d,J=4.0Hz,1H),6.79-6.73(m,5H),5.58(dd,J=8.0Hz,4.0Hz 1H),3.98-3.95(m,2H),3.69-3.52(m,6H),3.27(s,3H),3.00-2.79(m, 3H),2.16-2.02(m,3H),1.23-1.09(m,2H),0.87(t,J=8.0Hz,3H)ppm。MS：M/e 560(M+1)+
通過對掌性製備型HPLC將化合物A5分離成兩種對映體立體異構物(化合物A5a，較早的峰；和化合物A5b，較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0045-53
Figure 108125875-A0101-12-0045-54
化合物A6：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0045-55
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基) 戊酸(375mg，1.1mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪(338mg，1.2mmol)、HATU(502mg，1.3mmol)和DIEA(284mg，2.2mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=1：1至EA)純化以得到所需產物(480mg，73%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.20(s,1H),8.16(br.s,2H),7.95(s,1H),7.23(s,1H),6.82-6.73(m,5H),5.60-5.56(m,1H),4.04-3.96(m,2H),3.60-3.42(m,10H),3.23(s,3H),3.05-2.94(m,2H),2.67(br.s,1H),2.33(br.s,1H),2.06-1.99(m,2H),1.24-1.10(m,1H),0.92-0.85(m,3H)ppm。MS：M/e 604(M+1)+
通過對掌性製備型HPLC將化合物A6分離成兩種對映體立體異構物(化合物A6a，較早的峰；和化合物A6b，較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0046-56
Figure 108125875-A0101-12-0046-57
Figure 108125875-A0101-12-0047-58
化合物A7：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-胺基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0047-59
步驟A：4-(4-(2-溴乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0047-60
將4-(4-羥基苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯、1,2-二溴-乙烷和K2CO3在丙酮中的混合物在室溫下攪拌過夜。將混合物用水(300mL)稀釋，並用EA(300mL x 3)萃取。將合併的有機相用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥並且在減壓下濃縮。將殘餘 物通過矽膠層析(用EA：PE 1：5溶離)純化以得到呈黃色油狀物的標題化合物(3.2g，產率：32.3%)。MS：M/e 385(M+1)+。
步驟B：4-(4-(2-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0048-62
將步驟A的產物(6.2g，16.1mmol)和異吲哚啉-1,3-二酮(2.98g，16.1mmol)在DMF(100mL)中的混合物在80℃下攪拌2小時。用水(200mL)淬滅反應，並從體系中形成沈澱物。將混合物過濾並且收集固體。黃色固體在空氣中乾燥並且直接用於下一步驟。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 7.97-7.68(m,4H),6.94-6.70(m,4H),4.30-4.06(m,2H),3.99-3.84(m,2H),3.46-3.37(m,4H),2.97-2.84(m,4H),1.41(s,9H)ppm。MS：M/e 452(M+1)+。
步驟C：2-(2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙基)異吲哚啉-1,3-二酮
Figure 108125875-A0101-12-0048-61
將步驟B的產物(6.2g，16.1mmol)在HCl/1,4-二噁烷(100mL)中的混合物在室溫下攪拌3小時。從體系中形成固體。過濾混合物，並用EA(50mL)洗滌固體。將白色固體(3.7g，產率：93.7%)在空氣中乾燥並且直接用於下一步驟。MS：M/e 352(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7- 基)丙酸乙酯
Figure 108125875-A0101-12-0049-63
向2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(3g，12.4mmol)在DMF(50mL)中的攪拌溶液中添加K2CO3(2.06mg，14.9mmol)和2-氯丙酸乙酯(2.03mg，14.9mmol)。將反應用水(50mL)淬滅並且用EA(50mL x 3)萃取。將合併的有機相用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥並且在減壓下濃縮。將殘餘物通過矽膠層析(石油醚/EA=1：1)純化以得到呈白色固體的標題化合物(1g，47.2%)。MS：M/e 342(M+1)+。
步驟E：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0049-64
在室溫下向步驟D的產物(1g，2.9mmol)在MeOH(24mL)中的攪拌溶液中添加NaOH水溶液(2.0M，8mL)。將混合物在室溫下攪拌過夜。去除溶劑，並且將殘餘物溶解在水(20mL)中。將混合物用HCl水溶液(2M)酸化至pH=3至4。從體系中沈澱出固體。將混合物過濾並且收集固體。將白色固體(620mg，93.8%)在空氣中乾燥並且直接用於下一步驟。MS：M/e 314(M+1)+。
步驟F：2-(2-(4-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙基)異吲哚啉-1,3-二酮
Figure 108125875-A0101-12-0050-66
將步驟C的產物(564mg，1.6mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)丙酸(步驟E的產物，500mg，1.6mmol)、HATU(668mg，1.76mmol)和Et3N(1mL，過量)在DMF(20mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入水(40mL)中，並且從體系中沈澱出固體。將固體過濾並且在空氣中乾燥。將黃色固體(510mg，產率：49.1%)不經進一步純化而用於下一步驟。MS：M/e 647(M+1)+。
步驟G：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-胺基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0050-65
在室溫下向步驟F的產物在EtOH(10mL)中的攪拌溶液中添加水合肼(1mL)。將混合物在70℃下攪拌3小時。將反應冷卻至室溫並且過濾。將濾液在減壓下濃縮。將殘餘物通過製備型HPLC純化以得到標題化合物(120mg，產率：29.5%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.19(s,1H),7.95(s,1H),7.24(d,J=4Hz,1H),6.85-6.76(m,4H),6.75-6.72(m,1H),5.75(q,J=6.7Hz,1H),3.82(t,J=6Hz,2H),3.75-3.36(m,4H),3.08-2.78(m,6H),1.60(d,J=8Hz,3H)ppm。MS：M/e 517(M+1)+。
化合物A8：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丁-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0051-67
步驟A：2-(2-甲氧基乙氧基)乙基甲磺酸酯
Figure 108125875-A0101-12-0051-68
向2-(2-甲氧基乙氧基)乙-1-醇(10g，83.3mmol)和TEA(26g，257mmol)在DCM(300mL)中的攪拌混合物中添加MsCl(14g，122.8mmol)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。將大部分溶劑除去以得到水層，用NaHCO3水溶液洗滌，並用EtOAc(200mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮以得到呈黃色油狀物的目標化合物(11g，66.3%)。MS：M/e 199(M+1)+。
步驟B：4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0051-69
向4-(4-羥基苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(10.0g，36mmol)在CH3CN(200mL)中的攪拌溶液中添加NaH(3.0g，125mmol)，將反應混合物在50℃下攪拌30分鐘。然後將2-(2-甲氧基乙氧基)乙基甲磺酸酯(8.5g，43mmol)添加到反應中。 添加後，將反應混合物在60℃下攪拌過夜。除去大部分溶劑，並將殘餘物用H2O(50mL)溶解，然後用HCl水溶液酸化至pH=6至7，並用EtOAc(200mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=30% EtOAc)純化以得到呈黃色油狀物的目標化合物(13g，94.7%)。MS：M/e 381(M+1)+。
步驟C：1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪
Figure 108125875-A0101-12-0052-70
向4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(13.0g，34.1mmol)在DCM(100mL)中的攪拌混合物中添加TFA(100mL)。添加後，將反應混合物在室溫下攪拌3小時，除去大部分溶劑，並將所述殘餘物溶於H2O(50mL)中，然後用NaOH水溶液調節至pH=9至10，並用EtOAc(200mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮得到呈灰色固體的1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪(8g，83.5%)。MS：M/e 281(M+1)+
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丁-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0052-71
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)丁酸(50mg，0.15mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪(65mg，0.23mmol)、HATU(86mg，0.23mmol)和TEA(30mg，0.30mmol)在DMF(5mL) 中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(41mg，46.3%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.21(s,1H),8.18(br.,2H),7.95(s,1H),7.24(d,J=3.4Hz,1H),6.83-6.76(m,4H),6.74(dd,J=3.2,1.7Hz,1H),5.51(dd,J=8.4,6.0Hz,1H),3.99-3.95(m,2H),3.69-3.65(m,2H),3.60-3.53(m,4H),3.47-3.41(m,3H),3.26-3.20(m,4H),3.06-2.91(m,2H),2.81(s,1H),2.42(s,1H),2.24-2.06(m,2H),0.79(t,J=7.3Hz,3H)ppm。MS：M/e 590(M+1)+。
化合物A9：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0053-72
將1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪(30.8mg，0.11mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)丙酸(31mg，0.1mmol)、HATU(42mg，0.11mmol)和Et3N(0.2mL，過量)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入水(15mL)中並且用EA(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥並且在減壓下濃縮。將殘餘物通過製備型TLC(EA：100%)純化以得到標題化合物(8mg，產率：13.9%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.26-8.14(m,3H),7.96(s,1H),7.25(d,J=4Hz,1H),6.86-6.77(m,4H),6.76-6.71(m,1H),5.80-5.72(m,1H),4.03-3.93(m,2H),3.73-3.64(m,3H),3.60-3.52(m,4H),3.48-3.41(m,3H),3.24(s,3H),3.07-2.81(m,4H),1.61(d,J=8Hz,3H)ppm。MS：M/e 576(M+1)+。
化合物A10：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)己-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0054-74
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)己酸甲酯和2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)己酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0054-75
將2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(1.5g，6.2mmol)、2-溴己酸甲酯(1.5g，7.4mmol)和K2CO3(1.7g，12.4mmol)在DMF(50mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。向溶液中添加水(20mL)，用乙酸乙酯(40mL)萃取並且用鹽水(40mL)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=3：1至1：1)純化以得到2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)己酸甲酯(380mg，16%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.24(s,1H),8.16(br.s,2H),7.95(d,J=4.0Hz,1H),7.24(d,J=4.0Hz,1H),6.74(d,J=4.0Hz,1H),5.38-5.34(dd,J=12.0Hz,4.0Hz 1H),3.64(s,3H),2.72-2.16(m,2H),1.29-1.00(m,4H),0.82-0.79(m,3H)ppm。MS：M/e 370(M+1)+以及2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)己酸甲酯(310mg，13%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.77(s,1H),7.95(s,1H),7.68(br.s,2H),7.20(d,J=4.0Hz,1H),6.75-6.73(m,1H),5.31(dd,J=12.0Hz,4.0Hz 1H),3.64(s,3H),2.33-2.15(m,2H),1.28-1.02(m,4H),0.84-0.80(m,3H)ppm。MS：M/e 370(M+1)+
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)己酸
Figure 108125875-A0101-12-0055-76
將NaOH溶液(160mg，在2mL水中)添加至2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)己酸甲酯(380mg，1mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌過夜。將溶液濃縮，添加水(10mL)並且用1N HCl溶液酸化至pH=5。將沈澱的固體過濾並且乾燥以得到呈白色固體 的所需產物(355mg，97%)。MS：M/e 356(M+1)+
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)己-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0056-77
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)己酸(50mg，0.14mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(33mg，0.14mmol)、HATU(64mg，0.17mmol)和DIEA(36mg，0.28mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析法(PE：EA=1：1至EA)純化以得到所需產物(40mg，49%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.20(s,1H),8.17(br.s,2H),7.95(s,1H),7.23(d,J=4.0Hz,1H),6.80-6.73(m,5H),5.56(dd,J=8.0Hz,4.0Hz 1H),3.98-3.96(m,2H),3.69-3.48(m,6H),3.27(s,3H),3.00-2.79(m,3H),2.41-2.07(m,3H),1.28-1.02(m,4H),0.82(t,J=8.0Hz,3H)ppm。MS：M/e 574(M+1)+
通過對掌性製備型HPLC將化合物A10分離成兩種對映體立體異構物(化合物A10a，較早的峰；和化合物A10b，較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0056-78
Figure 108125875-A0101-12-0056-80
Figure 108125875-A0101-12-0057-81
化合物A11：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)己-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0057-82
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)己酸(320mg，0.9mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪(277mg，1.0mmol)、HATU(410mg，1.1mmol)和DIEA(233mg，1.8mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(20mL)萃取並且用鹽水(20mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析法(PE：EA=1：1至EA)純化以得到所需產物(350mg，63%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.20(s,1H),8.17(br.s,2H),7.95(s,1H),7.23(d,J=4.0Hz,1H),6.80-6.73(m,5H),5.56(dd,J=8.0Hz,4.0Hz,1H),3.97(t,J=4.0Hz,2H),3.68-3.42(m,13H), 3.00-2.73(m,3H),2.41-2.07(m,3H),1.35-1.19(m,3H),1.03-1.02(m,1H),0.81(t,J=4.0Hz,3H)ppm。MS：M/e 618(M+1)+
通過對掌性製備型HPLC將化合物A11分離成兩種對映體立體異構物(化合物A11a，較早的峰；和化合物A11b，較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0058-83
Figure 108125875-A0101-12-0058-84
化合物A12：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-3-甲基丁-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0058-85
在室溫下向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-3-甲基丁酸(85mg，0.25mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪(77mg，0.27mmol)、DIEA(150mg，1.16mmol)在DMF(3mL)中的混合物中添加HATU(105mg，0.27mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌4小時。添加20mL的EA並且將混合物用鹽水(10mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮。將所得殘餘物通過製備型TLC(EA/MeOH=20：1)純化以得到標題產物(66.0mg，產率：44%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.35-8.05(m,3H),7.95(s,1H),7.23(d,J=3.2Hz,1H),6.85-6.70(m,5H),5.20(d,J=10.0Hz,1H),4.00-3.91(m,2H),3.80-3.70(m,1H),3.70-3.60(m,3H),3.58-3.52(m,2H),3.52-3.45(m,1H),3.45-3.40(m,2H),3.23(s,3H),3.05-2.90(m,2H),2.85-2.70(m,2H),2.35-2.21(m,1H),1.04(d,J=6.4Hz,3H),0.61(d,J=6.8Hz,3H)。MS：M/e 604(M+1)+。
化合物A13：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0059-86
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7- 基)-2-苯基乙酸甲酯和2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-苯基乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0060-88
向2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(1.0g，4.2mmol)在DMF(50mL)中的攪拌溶液中添加K2CO3(1.3g，9.4mmol)和2-溴-2-苯基乙酸甲酯(1.0g，4.4mmol)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(50mL)中並且用EtOAc(100mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=2：1至1：3)純化得到呈白色固體的2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸甲酯(200mg，24.5%)和2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-苯基乙酸甲酯(360mg，44.0%)。MS：M/e 390(M+1)+。
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸
Figure 108125875-A0101-12-0060-87
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸甲酯(200mg，0.51mmol)在MeOH/H2O(3mL/1mL)中的攪拌混合物中添加NaOH水溶液(2.0M，2mL)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。去除大 部分溶劑以得到水層，然後用HCl水溶液酸化至pH=3至4並且過濾，收集濾餅，乾燥以得到呈白色固體的目標化合物(150mg，78.2%)。MS：M/e 376(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0061-89
將步驟B的產物(50mg，0.13mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(55mg，0.23mmol)、HATU(75mg，0.20mmol)和TEA(40mg，0.39mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌5小時。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(50mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(42mg，54.4%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.17(s,1H),7.92(s,1H),7.70(br.,2H),7.59-7.43(m,5H),7.15(d,J=3.4Hz,1H),7.11(s,1H),6.86-6.77(m,4H),6.75-6.69(m,1H),4.03-3.95(m,2H),3.80-3.71(m,1H),3.71-3.57(m,3H),3.50-3.40(m,1H),3.34(s,2H),3.28(s,3H),3.10-3.01(m,2H),2.98-2.87(m,2H)ppm。MS：M/e 594(M+1)+。
通過對掌性製備型HPLC將化合物A13分離成兩種對映體立體異構物(化合物A13a，較早的峰；和化合物A13b，較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0061-90
Figure 108125875-A0101-12-0061-91
Figure 108125875-A0101-12-0062-92
化合物A14：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0062-93
將步驟B的產物(50mg，0.13mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪(40mg，0.14mmol)、HATU(84mg，0.22mmol)和TEA(40mg，0.39mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌4小時。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(50mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(33mg，39.9%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.20(s,1H),8.16(br.,2H),7.95(s,1H),7.43-7.31(m,5H),7.24(d,J=2.9Hz,1H),6.86(s,1H),6.81-6.78(m,4H),6.74(dd,J=3.4,1.8Hz,1H),4.01-3.94(m,2H),3.70-3.65(m,2H),3.55(dd,J= 5.7,3.8Hz,2H),3.44(dd,J=5.7,3.7Hz,3H),3.35(s,3H),3.23(s,3H),3.05-2.87(m,2H),2.71-2.54(m,2H)ppm。MS：M/e 638(M+1)+。
化合物A15：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-環丙基-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0063-96
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-環丙基乙酸乙酯
Figure 108125875-A0101-12-0063-95
向2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(1.0g，4.2mmol)在DMF(50mL)中的攪拌溶液中添加K2CO3(1.3g，9.4mmol)和2-溴-2-環丙基乙酸乙酯(1.2g，5.8mmol)。添加後，將反應混合物在60℃下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(50mL)中並且用EtOAc(100mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=2：1至1：2)純 化得到呈白色固體的2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-環丙基乙酸乙酯(400mg，51.4%)和2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-環丙基乙酸乙酯(500mg，64.7%)。MS：M/e 368(M+1)+。
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-環丙基乙酸
Figure 108125875-A0101-12-0064-97
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-環丙基乙酸乙酯(400mg，1.1mmol)在MeOH/H2O(9mL/2mL)中的攪拌混合物中添加NaOH水溶液(4.0M，2mL)。添加後，將反應混合物在室溫下攪拌3小時。去除大部分溶劑以得到水層，然後用HCl水溶液酸化至pH=3至4並且過濾，收集濾餅，乾燥以得到呈白色固體的目標化合物(200mg，53.5%)。MS：M/e 340(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-環丙基-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0064-98
將步驟B的產物(50mg，0.15mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(45mg，0.19mmol)、HATU(84mg，0.22mmol)和TEA(30mg，0.30mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用 EtOAc(50mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(28mg，33.5%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.21(s,1H),8.18(d,2H),7.95(s,1H),7.24(d,J=2.6Hz,1H),6.79-6.76(m,4H),6.74(s,1H),4.87(d,J=9.5Hz,1H),4.05-3.89(m,2H),3.81-3.68(m,1H),3.64-3.56(m,3H),3.56-3.38(m,2H),3.27(s,3H),3.01(s,1H),2.93-2.74(m,2H),2.35-2.23(m,1H),1.86-1.74(m,1H),0.94-0.82(m,1H),0.74-0.61(m,1H),0.57-0.39(m,3H)。MS：M/e 558(M+1)+。
化合物A16：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-4-甲基戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0065-100
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-4-甲基戊酸甲酯和2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-4-甲基戊酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0065-99
向2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(482mg，2mmol)在DMF(10mL)中的攪拌溶液中添加K2CO3(552mg，4mmol)和2-溴-4-甲基 戊酸甲酯(418mg，2mmol)。添加後，將反應混合物攪拌一週末。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=3：1至1：1)純化得到呈白色固體的2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-4-甲基戊酸甲酯(280mg，37.9%)和2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-4-甲基戊酸甲酯(213mg，28.8%)。MS：M/e 370(M+1)+。
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-4-甲基戊酸
Figure 108125875-A0101-12-0066-101
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-4-甲基戊酸甲酯(200mg，0.54mmol)在MeOH/H2O(10mL/5mL)中的攪拌混合物中添加NaOH水溶液(2.0M，4mL)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。去除大部分溶劑以得到水層，然後用HCl水溶液酸化至pH=3至4並且過濾，收集濾餅，乾燥以得到呈白色固體的目標化合物(180mg，93.8%)。MS：M/e 356(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2.4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-4-甲基戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0067-103
將步驟B的產物(50mg，0.14mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(33mg，0.14mmol)、HATU(64mg，0.168mmol)和DIPEA(36mg，0.28mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(30mg，37.4%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.21(s,1H),8.18(s,2H),7.95(d,J=0.8Hz,1H),7.24(d,J=3.2Hz,1H),6.83-6.72(m,5H),5.64(m,1H),4.00-3.93(m,2H),3.70(m,1H),3.62-3.43(m,5H),3.27(s,3H),3.02(m,2H),2.77(m,1H),2.45-2.35(m,1H),2.29-2.17(m,1H),1.86-1.83(m,1H),1.32-1.21(m,1H),0.95(d,J=6.4Hz,3H),0.83(d,J=6.4Hz,3H)ppm。MS：M/e 574(M+1)+。
通過對掌性製備型HPLC將化合物A16分離成兩種對映體立體異構物(化合物A16a，較早的峰；和化合物A16b，較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0067-102
Figure 108125875-A0101-12-0067-104
Figure 108125875-A0101-12-0068-105
化合物A17：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-4-甲基戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0068-106
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-4-甲基戊酸(50mg，0.14mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪(39.4mg，0.14mmol)、HATU(64mg，0.168mmol)和DIPEA(36mg，0.28mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(30mg，34.7%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.21(s,1H),8.18(s,2H),7.95(d,J=0.8Hz,1H),7.24(d,J=3.2Hz,1H),6.85-6.75(m,4H),6.74(m,1H),5.64(dd,J=10.0,4.8Hz,1H),4.00-3.90(m,2H),3.68(m,3H),3.64-3.51(m,4H),3.48-3.40(m,3H),3.23(s,3H),3.11-2.92(m,2H),2.77(m,1H),2.46-2.35(m,1H), 2.30-2.16(m,1H),1.85(m,1H),1.28(m,1H),0.95(d,J=6.4Hz,3H),0.83(d,J=6.4Hz,3H)ppm。MS：M/e 618(M+1)+。
通過對掌性製備型HPLC將化合物A17分離成兩種對映體立體異構物(化合物A17a，較早的峰；和化合物A17b，較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0069-109
Figure 108125875-A0101-12-0069-110
化合物A18：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(二甲基胺基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0069-108
將N,N-二甲基-2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙-1-胺鹽酸鹽(100mg，0.35mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基) 丙酸(100mg，0.32mmol)、HATU(134mg，0.35mmol)和DIEA(1mL，過量)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入水(10mL)中，並且從體系中沈澱出固體。將固體過濾，並且通過製備型HPLC純化以得到標題化合物(5mg，產率：3%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.33-8.08(m,3H),7.96(s,1H),7.67-7.36(m,2H),7.24(d,J=4.0Hz,1H),7.07(d,J=8.0Hz,2H),6.74(s,1H),5.86-5.74(m,1H),4.42-4.31(m,4H),4.03-3.69(m,4H),3.54-3.32(m,4H),2.86-2.74(m,6H),1.64(d,J=8.0Hz,3H)ppm。MS：M/e 545(M+1)+。
化合物A19：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-3-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0070-111
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-3-苯基丙酸甲酯和2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-3-苯基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0071-113
將2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(300mg，1.25mmol)、2-溴-3-苯基丙酸甲酯(330mg，1.36mmol)和K2CO3(400mg，2.90mmol)在DMF(7mL)中的混合物在室溫下加熱20小時並且在50℃加熱5小時。將混合物用EA(30mL)稀釋，並過濾懸浮液。將濾液用鹽水(15mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮。通過製備型TLC純化所得殘餘物，得到呈白色固體的2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-3-苯基丙酸甲酯(130mg)，MS：M/e 404(M+1)+，以及2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-3-苯基丙酸甲酯(125mg)。MS：M/e 404(M+1)+。
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-3-苯基丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0071-112
在室溫下向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-3-苯基丙酸甲酯(120mg，0.25mmol)在MeOH(5mL)中的攪拌溶液中添加NaOH水溶液(2M，2mL)，並且將所得混合物攪拌2小時。將混合物用HCl(2M)中和並濃縮至乾燥，得到白色固體。添加20mL混合溶劑(CH2Cl2/MeOH=3：1)並攪拌10分鐘。將懸浮液過濾，並將濾液濃縮，得到呈白色固體的標題產物(95mg，96%)。MS：M/e390(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-3-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0072-114
在室溫下向步驟B的產物(45mg，0.12mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(45mg，0.19mmol)、DIEA(70mg，0.54mmol)在DMF(2mL)中的混合物中添加HATU(75mg，0.20mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。添加30mL的EA並且將混合物用鹽水(15mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮。將所得殘餘物通過製備型TLC(CH2Cl2/EA/MeOH=10：10：1)純化，並且將所得產物通過製備型HPLC純化以得到標題產物(32.0mg，產率：44%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.22(s,1H),8.15-8.0(m,2H),7.94(s,1H),7.22(d,J=3.2Hz,1H),7.18-7.11(m,2H),7.11-7.05(m,3H),6.77(s,4H),6.73(dd,J=3.2,1.6Hz,1H),5.82(t,J=7.6Hz,1H),4.01-3.91(m,2H),3.70-3.62(m,1H),3.62-3.57(m,2H),3.56-3.51(m,2H),3.46(d,J=7.6Hz,2H),3.30(s,1H),3.27(s,3H),2.95-2.87(m,1H),2.85-2.70(m,2H),2.45-2.35(m,1H)。MS：M/e 608(M+1)+。
化合物A20：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2,4-二氟苯基)六氫吡嗪-1-基)戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0072-115
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基) 戊酸(30mg，0.09mmol)、1-(2,4-二氟苯基)六氫吡嗪(19mg，0.09mmol)、HATU(41mg，0.1mmol)和DIEA(23mg，0.18mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌3小時。向溶液中添加水(5mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=1：1)純化以得到所需產物(26mg，56%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.21(s,1H),8.15(br.s,2H),7.95(s,1H),7.23-7.14(m,2H),6.96-6.93(m,2H),6.74(s,1H),5.60-5.57(m,1H),3.72-3.51(m,4H),2.93-2.69(m,3H),2.40(br.s,1H),2.18-1.99(m,2H),1.23-1.11(m,2H),0.89-0.86(m,3H)ppm。MS：M/e 522(M+1)+
化合物A21：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-環丙基-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0073-116
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-環丙基乙酸(50mg，0.15mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪(50mg，0.18mmol)、HATU(84mg，0.22mmol)和TEA(30mg，0.30mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌4小時。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(50mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(21mg，23.3%)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.16(s,1H),7.75(s,1H),7.25(d,J=3.4Hz,1H),6.85-6.75(m,4H),6.69-6.62(m,1H),5.00(d,J=9.7Hz,1H),4.06 -3.96(m,2H),3.94-3.83(m,1H),3.79-3.73(m,2H),3.71-3.56(m,4H),3.55-3.45(m,3H),3.33(s,3H),3.06(s,1H),2.90(s,2H),2.40(s,1H),1.88(t,J=8.9Hz,1H),0.78(t,J=8.5Hz,1H),0.57-0.46(m,3H)。MS：M/e 602(M+1)+。
化合物A22：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2,4-二氟苯基)六氫吡嗪-1-基)-4-甲基戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0074-117
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-4-甲基戊酸(35.5，0.1mmol)、1-(2,4-二氟苯基)六氫吡嗪(19.8mg，0.1mmol)、HATU(46mg，0.12mmol)和DIPEA(25.8mg，0.2mmol)在DMF(3mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(15mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=10：1至3：1)純化以得到目標化合物(40mg，74.6%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.21(s,1H),8.15(s,2H),7.95(m,1H),7.23(d,J=3.2Hz,1H),7.21-7.12(m,1H),7.02-6.91(m,2H),6.74(m,1H),5.64(dd,J=9.6,4.4Hz,1H),3.74(m,1H),3.62(m,2H),3.49(m,1H),2.94(m,2H),2.75(m,1H),2.39(m,1H),2.31-2.19(m,1H),1.91-1.80(m,1H),1.27(mz,1H),0.95(d,J=6.4Hz,3H),0.83(d,J=6.4Hz,3H)ppm。MS：M/e 536(M+1)+。
通過對掌性製備型HPLC將化合物A22分離成兩種對映體立體異構物(化合物A22a，較早的峰；和化合物A22b，較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0075-120
Figure 108125875-A0101-12-0075-122
化合物A23：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-4-甲基戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0075-119
步驟A：1-溴-2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯
Figure 108125875-A0101-12-0076-123
將4-溴-3-氟苯酚(5g，26.1mmol)、1-溴-2-甲氧基乙烷(4g，28.7mmol)和K2CO3(7.2g，52.2mmol)在CH3CN(50mL)中的混合物在60℃下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(200mL)中並且用EtOAc(100mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，在高真空下濃縮以得到呈黃色油狀物的目標化合物(5.7g，87.3%)。MS：M/e 249/251(M+1)+。
步驟B：4-(2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0076-124
將步驟A的產物(3.5g，14mm)、六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(2.6g，14mmol)、Pd(dba)3(1.28g，1.4mmol)、X-phos(1.3g，2.8mmol)和Cs2CO3(9.2g，28mmol)在甲苯(100mL)中的混合物在120℃下攪拌5小時。除去大部分甲苯以得到殘餘物，將所述殘餘物用EtOAc/H2O(100mL/50mL)處理。將有機層分離，用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=20：1至10：1)純化以得到呈黃色油狀物的目標化合物(2.5g，50.4%)。MS：M/e 355(M+1)+。
步驟C：1-(2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽
Figure 108125875-A0101-12-0076-125
向步驟B的產物(1.25g，3.53mmol)在CH2Cl2(10mL)中的攪拌混合物中添加EtOAc/HCl(g)(4.0M，5mL)。添加後，將反應混合物攪拌一週末。過濾反應混 合物，並收集濾餅，乾燥，得到呈褐色固體的目標化合物(500mg，48.8%)。MS：M/e 255(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-4-甲基戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0077-126
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-4-甲基戊酸(35.5mg，0.1mmol)、步驟C的產物(29mg，0.1mmol)、HATU(46mg，0.12mmol)和DIPEA(38.7mg，0.3mmol)在DMF(3mL)中的混合物攪拌3小時。將反應混合物倒入H2O(15mL)中並且用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=2：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(40mg，76.6%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.21(s,1H),8.16(s,2H),7.95(s,1H),7.23(d,J=2.8Hz,1H),6.89-6.64(m,4H),5.64(m,1H),4.01(m,2H),3.71(m,1H),3.60(m,4H),3.47(m,1H),3.27(s,3H),2.88(m,2H),2.69(m,1H),2.37-2.20(m,2H),1.86-1.84(m,1H),1.32-1.24(m,1H),0.94(d,J=6.4Hz,3H),0.83(d,J=6.4Hz,3H)ppm。MS：M/e 592(M+1)+。
化合物A24：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0077-127
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)戊酸(30mg，0.09mmol)、1-(2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(26mg，0.09mmol)、HATU(41mg，0.1mmol)和DIEA(23mg，0.18mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(5mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=1：1)純化以得到所需產物(23mg，43%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.21(s,1H),8.14(br.s,2H),7.95(s,1H),7.23(d,J=4.0Hz,1H),6.74-6.64(m,4H),5.60-5.56(m,1H),4.04-4.00(m,2H),3.60-3.53(m,6H),3.27(s,3H),2.89-2.67(m,3H),2.18-1.99(m,3H),1.23-1.11(m,2H),0.94-0.86(m,3H)ppm。MS：M/e 578(M+1)+
通過對掌性製備型HPLC將化合物A24分離成兩種對映體立體異構物(化合物A24a，較早的峰；和化合物A24b，較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0078-128
Figure 108125875-A0101-12-0078-129
化合物A25：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2,6-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0079-130
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)戊酸(40mg，0.12mmol)、1-(2,6-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪三氟乙酸鹽(51mg，0.13mmol)、HATU(55mg，0.14mmol)和DIEA(36mg，0.28mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=1：1)純化以得到所需產物(45mg，64%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.23(s,1H),8.16(br.s,2H),7.95(s,1H),7.24(d,J=4.0Hz,1H),6.75-6.65(m,3H),5.59-5.56(m,1H),4.03-4.00(m,2H),3.63-3.50(m,6H),3.26(s,3H),2.85-2.69(m,3H),2.39-1.99(m,3H),1.12-1.05(m,2H),0.93-0.86(m,3H)ppm。MS：M/e 596(M+1)+
化合物A26：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-3-甲氧基-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0079-131
Figure 108125875-A0101-12-0080-132
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-3-甲氧基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0080-133
向2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(1.0g，4.2mmol)在DMF(50mL)中的攪拌溶液中添加K2CO3(1.3g，9.4mmol)和2-溴-1,3-二甲氧基丙-1-酮(1.0g，5.5mmol)。添加後，將反應混合物在60℃下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(50mL)中並且用EtOAc(100mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=2：1至1：2)純化得到呈白色固體的2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-3-甲氧基丙酸甲酯(300mg，41.5%)和2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-3-甲氧基丙酸甲酯(80mg，11.1%)。MS：M/e 358(M+1)+。
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-3-甲氧基丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0081-135
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-3-甲氧基丙酸甲酯(400mg，1.2mmol)在MeOH/H2O(9mL/2mL)中的攪拌混合物中添加NaOH水溶液(4.0M，2mL)。添加後，將反應混合物在室溫下攪拌3小時。去除大部分溶劑以得到水層，然後用HCl水溶液酸化至pH=3至4並且過濾，收集濾餅，乾燥以得到呈白色固體的目標化合物(140mg，36.3%)。MS：M/e 344(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-3-甲氧基-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0081-134
將步驟B的產物(50mg，0.15mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(40mg，0.18mmol)、HATU(84mg，0.22mmol)和TEA(30mg，0.30mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(50mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(11mg，13.4%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.22(br.s,3H),7.95(d,J=0.9Hz,1H),7.24(d,J=2.9Hz,1H),6.82-6.72(m,6H),5.79(dd,J=8.4,5.3Hz,1H),4.06-3.94(m,4H),3.76-3.69(m,1H),3.61-3.56(m,2H),3.53-3.47(m,2H),3.27(s,3H),3.21(s,3H),3.08-3.01(m,1H),2.98-2.92(m,1H),2.80-2.73(m,1H),2.30-2.23 (m,1H)ppm。MS：M/e 562(M+1)+。
化合物A27：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-3-甲氧基-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0082-136
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-3-甲氧基丙酸(50mg，0.15mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪(45mg，0.19mmol)、HATU(84mg，0.22mmol)和TEA(30mg，0.30mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌16小時。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(50mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(19mg，20.9%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.22(br.s,3H),7.95(s,1H),7.24(d,J=2.9Hz,1H),6.82-6.72(m,6H),5.79(dd,J=8.4,5.3Hz,1H),4.07-3.94(m,4H),3.69-3.64(m,3H),3.57-3.53(m,4H),3.43(dd,J=5.8,3.7Hz,3H),3.22(s,3H),3.20(s,3H),3.07-3.00(m,1H),2.97-2.91(m,1H),2.81-2.72(m,1H),2.30-2.23(m,1H)ppm。MS：M/e 606(M+1)+。
化合物A28：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(4-氟苯基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0083-138
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(4-氟苯基)乙酸乙酯
Figure 108125875-A0101-12-0083-137
向2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(964mg，4mmol)在DMF(20mL)中的攪拌溶液中添加K2CO3(1.1g，8mmol)，然後逐滴添加2-溴-2-(4-氟苯基)乙酸乙酯(1g，4mmol)在DMF(2mL)中的溶液。添加後，將反應混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(50mL)中並且用EtOAc(50mL x 4)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮得到殘餘物，將殘餘物通過柱層析(石油醚/EtOAc=2：1至100% EtOAc)純化，得到呈白色固體的目標化合物(300mg，17.8%)。MS：M/e 422(M+1)+。
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(4-氟苯基)乙酸
Figure 108125875-A0101-12-0084-139
向步驟A的產物(300mg，0.71mmol)在MeOH(10mL)中的攪拌溶液中添加NaOH水溶液(4mL，2.0M)。添加後，將反應混合物攪拌3小時。除去大部分MeOH，得到水層，將水層用HCl水溶液酸化至pH=3至4並過濾。收集濾餅，將其乾燥以得到呈白色固體的目標化合物(172mg，61.6%)。MS：M/e 394(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(4-氟苯基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0084-140
將步驟B的產物(30mg，0.076mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(18mg，0.076mmol)、HATU(34.4mg，0.09mmol)和DIPEA(19.6mg，0.152mmol)在DMF(3mL)中的混合物攪拌2小時。將反應混合物倒入H2O(15mL)中並且用EtOAc(20mL x 2)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物，將其通過製備型TLC(EtOAc)進一步純化，得到目標化合物(5mg，10.7%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.22(s,1H),8.17(s,2H),7.95(s,1H),7.51-7.40(m,2H),7.27-7.15(m,3H),6.90(s,1H),6.80(m,4H),6.74(s,1H),3.97(m,2H),3.73-3.55(m,4H),3.38-3.32(m,2H),3.28(s,3H),2.96(m,2H),2.64(m,2H)ppm。MS：M/e 612(M+1)+。
化合物A29：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(4-甲氧基苯基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0085-142
步驟A：2-(5-胺基-2-(時喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(4-甲氧基苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0085-141
向2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(482mg，2mmol)在DMF(20mL)中的攪拌溶液中添加K2CO3(552mg，4mmol)，然後逐滴添加2-溴-2-(4-甲氧基苯基)乙酸甲酯(518mg，2mmol)在DMF(2mL)中的溶液。添加後，將反應混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(50mL)中並且用EtOAc(30mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮得到殘餘物，將殘餘物通過柱層析(石油醚/EtOAc=2：1至100% EtOAc)純化，得到呈白色固 體的目標化合物(100mg，11.9%)。MS：M/e 420(M+1)+。
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(4-甲氧基苯基)乙酸
Figure 108125875-A0101-12-0086-143
向步驟A的產物(100mg，0.238mmol)在MeOH(5mL)中的攪拌溶液中添加NaOH水溶液(3mL，2.0M)。添加後，將反應混合物攪拌3小時。除去大部分MeOH，得到水層，將水層用HCl水溶液酸化至pH=3至4並過濾。收集濾餅，將其乾燥以得到呈白色固體的目標化合物(68mg，70.5%)。MS：M/e 406(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(4-甲氧基苯基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0086-144
將步驟B的產物(30mg，0.074mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(17.48mg，0.074mmol)、HATU(34.4mg，0.09mmol)和DIPEA(19.6mg，0.152mmol)在DMF(3mL)中的混合物攪拌2小時。將反應混合物倒入H2O(15mL)中並且用EtOAc(20mL x 2)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(20mg，43.4%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.16(s,1H),8.14(s,2H),7.95(s,1H),7.38-7.35(d,J=8.4Hz,2H),7.24(d,J=3.2Hz,1H),6.94-6.92(d,J=8.8Hz,2H), 6.86-6.76(m,4H),6.74(m,1H),4.01-3.95(m,2H),3.75(s,3H),3.68(m,1H),3.63-3.54(m,3H),3.28(s,3H),3.0-2.90(m,2H),2.77-2.54(m,2H)ppm。MS：M/e 624(M+1)+。
化合物A30：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(甲基胺基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0087-146
步驟A：4-(4-(2-溴乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0087-145
在室溫下向4-(4-羥基苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(7g，25.2mmol)和K2CO3(7g，52.9mmol)在丙酮(150mL)中的攪拌溶液中添加1,2-二溴乙烷(10g，52.9mmol)。將混合物在60℃下攪拌4天。將混合物用水(200mL)淬滅並且用EA(200mL x 3)萃取。將合併的有機相用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥並且在減壓下濃縮。將殘餘物通過矽膠層析(石油醚/EA=3：1)純化以得到呈黃色油狀物的標題化合物(4g，產率：41.4%)。MS：M/e 385(M+1)+。
步驟B：4-(4-(2-(甲基胺基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0088-147
在室溫下向步驟A的產物(1g，粗品)在CH3CN中的攪拌溶液中添加甲胺(2.5mL，40%水溶液)。將混合物在密封管中加熱至95℃，保持12小時。將反應冷卻至室溫並且在減壓下濃縮。將殘餘物溶解在水(10mL)中並且用DCM(20mL x 2)萃取。將合併的有機相用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥並且在減壓下濃縮。將呈黃色油狀物的殘餘物(1g，粗品)直接用於下一步驟。MS：M/e 336(M+1)+。
步驟C：N-甲基-2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙-1-胺鹽酸鹽
Figure 108125875-A0101-12-0088-148
將步驟B的產物(1.2g，粗品)在HCl/1,4-二噁烷(4M，20mL)中的混合物在室溫下攪拌4小時。從體系中沈澱出固體。過濾混合物，並用EA(20mL)洗滌固體。將固體(750mg，兩個步驟的產率：87.2%)在空氣中乾燥並且直接用於下一步驟。MS：M/e 236(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(甲基胺基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0088-149
將步驟C的產物(294mg，0.96mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)丙酸(200mg，0.64mmol)、HATU(364mg，0.96mmol)和DIEA(1mL，過量)在DMF(20mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入水(20mL)中，並且從體系中沈澱出固體。將固體過濾，並且 通過製備型HPLC純化以得到標題化合物(25mg，產率：7.4%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 9.22(br.s,2H),8.81(s,1H),7.96(s,1H),7.80(br.s,2H),7.64-7.49(m,2H),7.24-7.15(m,1H),7.13-6.99(m,2H),6.74(s,1H),6.07-5.82(m,1H),4.37-4.20(m,2H),4.17-3.75(m,4H),3.56-3.23(m,6H),2.60(t,J=4Hz,3H),1.73(d,J=8Hz,3H)ppm。MS：M/e 531(M+1)+。
化合物A31：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(2-甲氧基苯基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0089-150
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-甲氧基苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0089-151
將2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(8g，33.1 mmol)、2-溴-2-(2-甲氧基苯基)乙酸甲酯(9.4g，36.4mmol)和K2CO3(9.1g，66.2mmol)在DMF(100mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。向溶液中添加水(60mL)，用乙酸乙酯(60mL)萃取並且用鹽水(60mL)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=3：1至1：1)純化以得到2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-甲氧基苯基)乙酸甲酯(1.4g，10%)。MS：M/e 420(M+1)+
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-甲氧基苯基)乙酸
Figure 108125875-A0101-12-0090-152
將NaOH溶液(240mg，在5mL的水中)添加至2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-甲氧基苯基)乙酸甲酯(650mg，1.5mmol)在甲醇(30mL)中的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌過夜。將溶液濃縮，添加水(20mL)並且用1N HCl溶液酸化至pH=5。將沈澱的固體過濾並且乾燥以得到呈白色固體的所需產物(450mg，72%)1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 13.22(br.s,1H),8.25-8.15(m,3H),7.95(s,1H),7.36(t,J=8.0Hz,1H),7.25-7.22(m,2H),7.07(d,J=8.0Hz,1H),6.96(t,J=8.0Hz,1H),6.76(s,1H),6.75-6.73(m,1H),3.80(s,3H)ppm。MS：M/e 406(M+1)+
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(2-甲氧基苯基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0091-154
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-甲氧基苯基)乙酸(450mg，1.1mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(314mg，1.3mmol)、HATU(494mg，1.30mmol)和DIEA(284mg，2.2mmol)在DMF(50mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(30mL)，用乙酸乙酯(30mL)萃取並且用鹽水(30mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=1：1至EA)純化以得到所需產物(480mg，70%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.20(br.s,3H),7.95(s,1H),7.38-7.34(m,1H),7.25(d,J=4.0Hz,1H),7.09-7.06(m,2H),7.00(s,1H),6.95(t,J=8.0Hz,1H),6.79(s,4H),6.75-6.73(m,1H),3.98(t,J=4.0Hz,2H),3.81(s,3H),3.80-3.74(m,1H),3.61-3.53(m,3H),3.37-3.35(m,1H),3.30-3.27(m,4H),3.05-2.95(m,1H),2.90-2.80(m,1H),2.73-2.65(m,1H),2.47-2.50(m,1H)ppm。MS：M/e 624(M+1)+
通過對掌性製備型HPLC將化合物A31分離成兩種對映體立體異構物(化合物A31a，較早的峰；和化合物A31b，較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0091-153
Figure 108125875-A0101-12-0091-156
Figure 108125875-A0101-12-0092-157
化合物A32：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(二甲基胺基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)己-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0092-158
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)己酸(50mg，0.14mmol)、N,N-二甲基-2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙-1-胺鹽酸鹽(40mg，0.14mmol)、HATU(64mg，0.17mmol)和DIEA(36mg，0.28mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(5mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過製備型HPLC純化以得到呈TFA鹽的所需產物(15mg，18%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 9.65(br.s,1H),8.20(s,1H),8.18(br.s,2H),7.95(s,1H),7.23(d,J=4.0Hz,1H),6.85-6.74(m,5H),5.56(dd,J=8.0Hz,4.0Hz,1H),4.20(t,J=4.0Hz,2H),3.74(br.s,1H),3.53-3.46(m,5H),3.05-2.96(m,2H),2.78-2.65(m,7H),2.33(br.s,1H),2.16-2.07(m,2H),1.28-1.23(m,3H),1.03-1.01(m,1H),0.81(t,J=8.0Hz,3H)ppm。MS：M/e 587(M+1)+
化合物A33：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(萘-2-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0093-160
步驟A：2-(萘-2-基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0093-161
在0℃向2-(萘-2-基)乙酸(5g，26.7mmol)在MeOH(100mL)中的攪拌溶液中逐滴添加SOCl2(4g，29.6mmol)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。除去大部分MeOH，得到殘餘物，然後用EtOAc(50mL)處理，並用K2CO3水溶液、鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮，得到呈黃色油狀物的目標化合物(4.5g，84.3%)。
步驟B：2-溴-2-(萘-2-基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0093-159
向步驟A的產物(1g，5mmol)在CCl4(10mL)中的攪拌溶液中添加NBS(0.95g，5.5mmol)並添加HBr水溶液(48%，2滴)。然後將混合物回流2小時。將反應混合物冷卻至室溫並過濾。將濾液濃縮，通過柱層析(石油醚/EtOAc=20：1)純化， 得到呈無色油狀物的目標化合物(0.72g，51.6%)。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1.5-c]嘧啶-7-基)-2-(萘-2-基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0094-163
向2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(0.62g，2.58mmol)在DMF(5mL)中的攪拌溶液中添加K2CO3(0.71g，5.16mmol)，然後添加步驟B的產物(0.72g，2.58mmol)。添加後，將反應混合物攪拌一週末。將反應混合物倒入H2O(25mL)中並且用EtOAc(15mL x 4)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到呈白色固體的目標化合物(80mg，7%)。MS：M/e 440(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(萘-2-基)乙酸
Figure 108125875-A0101-12-0094-162
向步驟C的產物(80mg，0.18mmol)在MeOH(15mL)中的攪拌溶液中添加NaOH水溶液(2.0M，3mL)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。除去大部分MeOH，得到水層，然後酸化至pH=3至4並過濾。收集濾餅，將其乾燥以得到呈白色固體的目標化合物(70mg，91.5%)。MS：M/e 426(M+1)+。
步驟E：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7- 基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(萘-2-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0095-164
將步驟D的產物(70mg，0.164mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(38.8mg，0.164mmol)、HATU(75mg，0.196mmol)和DIPEA(42.3mg，0.328mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=2：1至1：2)純化以得到目標化合物(60mg，56.8%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.22(s,1H),8.17(s,2H),7.92-7.87(m,5H),7.61-7.49(m,3H),7.24(d,J=3.2Hz,1H),7.04(s,1H),6.78(s,4H),6.74(s,1H),3.99-3.93(m,2H),3.71(m,2H),3.60(m,2H),3.40(m,2H),3.28(s,3H),2.99(m,2H),2.64(m,2H)ppm。MS：M/e 644(M+1)+。
化合物A34：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0095-165
Figure 108125875-A0101-12-0096-166
步驟A：2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0096-167
在0℃向2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸(5g，24.5mmol)在MeOH(50mL)中的攪拌溶液中逐滴添加SOCl2(3.45g，29.45mmol)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。除去大部分MeOH，得到殘餘物，然後用EtOAc(20mL x 2)處理，並用K2CO3水溶液、鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮，得到呈無色油狀物的目標化合物(5.3g，99%)。
步驟B：2-溴-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0096-168
向步驟A的產物(1g，4.58mmol)在CCl4(15mL)中的攪拌溶液中添加NBS(0.9g，5.04mmol)並添加HBr水溶液(48%，2滴)。然後將混合物回流3小時。將反應混合物冷卻至室溫並過濾。將濾液濃縮以得到呈無色油狀物的目標化合物(1.3g，95.6%)。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0097-170
向2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(0.482g，2mmol)在DMF(5mL)中的攪拌溶液中添加K2CO3(0.552g，4mmol)，然後添加步驟B的產物(0.594g，2mmol)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=2：1至1：2)純化以得到呈白色固體的目標化合物(140mg，15.3%)。MS：M/e 458(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙酸
Figure 108125875-A0101-12-0097-169
向步驟C的產物(140mg，0.3mmol)在MeOH(15mL)中的攪拌溶液中添加NaOH水溶液(2.0M，4mL)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。除去大部分MeOH，得到水層，然後酸化至pH=3至4並過濾。收集濾餅，將其乾燥以得到呈白色固體的目標化合物(109mg，80%)。MS：M/e 444(M+1)+。
步驟E：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(4-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0098-171
將步驟D的產物(44mg，0.1mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(23.6mg，0.1mmol)、HATU(45.8mg，0.12mmol)和DIPEA(25.8mg，0.2mmol)在DMF(3mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=2：1至1：1)純化以得到目標化合物(48mg，72.6%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.28(s,1H),8.19(s,2H),7.95(s,1H),7.74(d,J=8.0Hz,2H),7.56(d,J=8.0Hz,2H),7.24(d,J=3.2Hz,1H),7.01(s,1H),6.82-6.74-6.83(m,3H),6.74(s,1H),4.00-3.95(m,2H),3.75-3.58(m,4H),3.40(m,1H),3.28(s,3H),3.08-2.90(m,2H),2.76(m,1H),2.56(m,1H)ppm。M/e 662(M+1)+。
化合物A35：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(甲基胺基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)己-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0098-172
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)己酸(50mg，0.14mmol)、N-甲基-2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙-1-胺鹽酸鹽(38mg，0.14mmol)、HATU(64mg，0.17mmol)和DIEA(36mg，0.28mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌4小時。將溶液濃縮並通過製備型HPLC純化，得到呈TFA鹽的產物(5mg，6%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.54(br.s,2H),8.20 (s,1H),8.18(br.s,2H),7.95(s,1H),7.23(d,J=4.0Hz,1H),6.85-6.74(m,5H),5.56(dd,J=8.0Hz,4.0Hz,1H),4.10(t,J=4.0Hz,2H),3.74-3.53(m,4H),3.28-2.79(m,5H),2.62(t,J=4.0Hz,3H),2.33-2.07(m,3H),1.28-1.23(m,3H),1.02(br.s,1H),0.81(t,J=8.0Hz,3H)ppm。MS：M/e 573(M+1)+
化合物A36：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(3-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0099-173
步驟A：2-(3-(三氟甲基)苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0100-176
在室溫下向2-(3-(三氟甲基)苯基)乙酸(5.0g，24.5mmol)在MeOH(50mL)中的攪拌溶液中逐滴添加SOCl2(2mL)並將所得混合物攪拌3小時。濃縮混合物，用EA(50mL)稀釋，用NaHCO3水溶液(50mL x 2)、鹽水(50mL x 2)洗滌，用Na2SO4乾燥並濃縮，得到呈淡黃色油狀物的標題產物(5.05g，95%)。MS：M/e 219(M+1)+。
步驟B：2-溴-2-(3-(三氟甲基)苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0100-175
向2-(3-(三氟甲基)苯基)乙酸甲酯(2.0g，9.2mmol)在CCl4(20mL)中的攪拌溶液中添加NBS(1.9g，10.7mmol)並且然後添加HBr/AcOH(3滴)。將所得混合物回流4小時。過濾混合物，並濃縮濾液，用EA(30mL)稀釋，用鹽水(20mL x 2)洗滌，用Na2SO4乾燥並濃縮，得到呈淺黃色油狀物的標題產物(2.36g，粗品)。MS：M/e 297,299(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3-(三氟甲基)苯基)乙酸甲酯和2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-(3-(三氟甲基)苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0100-174
向2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(250mg，1.0mmol)在DMF(50mL)中的攪拌溶液中添加K2CO3(550Mg，3.6mmol)，並且然後添加2-溴-2-(3-(三氟甲基)苯基)乙酸甲酯(900mg，粗品，約1mmol)。將所得混合物在50℃下攪拌16小時。將混合物用CH2Cl2(30mL)稀釋，用鹽水(15mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並濃縮。通過柱層析純化所得殘餘物，得到呈淺黃色油狀物的2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3-(三氟甲基)苯基)乙酸甲酯(120mg，粗品)，以及呈淺黃色固體的2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-(3-(三氟甲基)苯基)乙酸甲酯(60mg，粗品)。MS：M/e 458(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3-(三氟甲基)苯基)乙酸
Figure 108125875-A0101-12-0101-177
在室溫下向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3-(三氟甲基)苯基)乙酸甲酯(120mg，粗品)在MeOH(4mL)中的攪拌溶液中添加NaOH水溶液(2M，1mL)，並且將所得混合物攪拌4小時。將混合物用HCl(1M)中和並濃縮至乾燥。添加5mL混合溶劑(CH2Cl2/MeOH=3：1)並攪拌10分鐘。將懸浮液過濾，並將濾液濃縮，得到呈白色固體的標題產物(90mg，粗品)。MS：M/e 444(M+1)+。
步驟E：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(3-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0102-179
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3-(三氟甲基)苯基)乙酸(90mg，0.2mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(58mg，0.24mmol)、DIEA(150mg，1.16mmol)在DMF(2mL)中的混合物中添加HATU(95mg，0.25mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。添加20mL的EA並且將混合物用鹽水(5mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮。將所得殘餘物通過製備型TLC純化以得到標題產物(18.0mg，產率：14%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.29(s,1H),8.27-8.08(m,2H),7.95(s,1H),7.81(s,1H),7.75-7.66(m,1H),7.65-7.56(m,2H),7.24(d,J=3.2Hz,1H),7.04(s,1H),6.83-6.75(m,4H),6.75-6.71(m,1H),4.00-3.94(m,2H),3.72-3.62(m,2H),3.62-3.56(m,2H),3.49-3.39(m,1H),3.28(s,3H),3.03-2.88(m,3H),2.74-2.68(m,1H),2.59-2.52(m,1H)。MS：M/e 662(M+1)+。
化合物A37：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(二甲基胺基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0102-178
將N,N-二甲基-2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙-1-胺鹽酸鹽(42mg，0.15mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(50mg，0.13mmol)、HATU(56mg，0.15mmol)和DIEA(0.5mL， 過量)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入水(10mL)中，並且從體系中沈澱出固體。將固體過濾，並且通過製備型HPLC純化以得到標題化合物(10mg，產率：12.4%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.23(s,1H),8.16(br.s,2H),7.95(s,1H),7.44-7.31(m,5H),7.24(d,J=4Hz,1H),7.16-7.03(m,2H),7.01-6.92(m,2H),6.88(s,1H),6.78-6.71(m,1H),4.30-4.21(m,2H),3.88-3.64(m,2H),3.60-3.42(m,4H),3.22-3.09(m,2H),2.88-2.80(m,6H),2.80-2.73(m,1H)ppm。MS：M/e 607(M+1)+。
化合物A38：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(2-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0103-180
步驟A：2-(2-(三氟甲基)苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0103-181
將含有5滴濃H2SO4的2-(2-(三氟甲基)苯基)乙酸(5g，24.5mmol)在甲醇(30mL)中的溶液加熱回流2小時。將反應混合物蒸發，用乙酸乙酯(20mL)稀釋，用 NaHCO3溶液(20mL)和鹽水(20mL)洗滌。將有機層乾燥並濃縮，得到呈油狀物的產物(4.7g，88%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 7.73-7.64(m,2H),7.54-7.49(m,2H),3.90(s,2H),3.62(s,3H)ppm。MS：M/e 219(M+1)+
步驟B：2-溴-2-(2-(三氟甲基)苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0104-183
將2-(2-(三氟甲基)苯基)乙酸甲酯(2g，9mmol)、N-溴代琥珀醯亞胺(1.7g，10mmol)和AIBN(150mg，0.9mmol)在CHCl3(15mL)中的混合物在80℃加熱過夜。將溶液濃縮並且通過柱層析(PE：EA=10：1)純化以得到產物(1.5g，56%)。MS：M/e 297(M+1)+
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-(三氟甲基)苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0104-182
將2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(0.5g，2mmol)、2-溴-2-(2-(三氟甲基)苯基)乙酸甲酯(733mg，2.5mmol)和K2CO3(552mg，4mmol)在DMF(15mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。向溶液中添加水(15mL)，用乙酸乙酯(15mL)萃取並且用鹽水(20mL)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=至2：1)純化以得到2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-(三氟甲基)苯基)乙酸甲酯(120mg，13%)。MS：M/e 458(M+1)+
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-(三氟甲基)苯基)乙酸
Figure 108125875-A0101-12-0105-184
將NaOH溶液(52mg，在1mL的水中)添加至2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-(三氟甲基)苯基)乙酸甲酯(120mg，0.26mmol)在甲醇(5mL)中的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌過夜。將溶液濃縮，添加水(5mL)並且用1N HCl溶液酸化至pH=5。將沈澱的固體過濾並且乾燥以得到呈白色固體的所需產物(100mg，86%)。MS：M/e 444(M+1)+
步驟E：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(2-(三氟甲基)苯基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0105-185
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-(三氟甲基)苯基)乙酸(50mg，0.11mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(32mg，0.14mmol)、HATU(53mg，0.14mmol)和DIEA(28mg，0.22mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(5mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並通過柱層析(PE：EA=1：1)和製備型TLC(EA)純化，得到產物(10mg，14%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.29(s,1H),8.21(br.s,2H),7.95(s,1H),7.83(d,J=8.0Hz,1H),7.70(t, J=8.0Hz,1H),7.61(t,J=8.0Hz,1H),7.39(d,J=8.0Hz,1H),7.24(d,J=4.0Hz,1H),7.02(s,1H),6.82-6.77(m,4H),6.75-6.73(m,1H),3.98(t,J=4.0Hz,2H),3.78-3.77(m,1H),3.65-3.51(m,3H),3.32-3.23(m,5H),3.07-3.05(m,1H),2.92-2.90(m,1H),2.69-2.59(m,2H)ppm。MS：M/e 662(M+1)+
化合物A39：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(二甲基胺基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0106-186
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)戊酸(212mg，0.62mmol)、N,N-二甲基-2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙-1-胺(178mg，0.62mmol)、HATU(284mg，0.74mmol)和DIPEA(160mg，1.24mmol)在DMF(5mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(20mL x 4)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(CH2Cl2/MeOH=10：1，包含5% NH3.H2O)純化以得到目標化合物(120mg，33.8%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.20(s,1H),8.16(s,2H),7.95(s,1H),7.23(d,J=3.2Hz,1H),6.86-6.75(m,4H),6.72(m,1H),5.58(m,1H),3.94(t,J=5.6Hz,2H),3.69(m,1H),3.51(m,3H),3.29(s,1H),3.05-2.94(m,2H),2.79(m,1H),2.58(m,2H),2.41(m,1H),2.20(s,6H),2.18-1.97(m,2H),1.11(m,1H),0.87(t,J=7.2Hz,3H)ppm。MS：M/e 573(M+1)+。
通過對掌性製備型HPLC將化合物A39分離成兩種對映體立體異構物：化合物A39a和化合物A39b(化合物A39a，較早的峰，和化合物A39b，較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0107-187
Figure 108125875-A0101-12-0107-188
化合物A40：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3,4-二氟苯基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0107-189
Figure 108125875-A0101-12-0108-190
步驟A：2-(3,4-二氟苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0108-191
向2-(3,4-二氟苯基)乙酸(5g，29mmol)在MeOH(50mL)中的攪拌溶液中添加SOCl2(3mL，116mmol)，將反應混合物在65℃攪拌5小時。除去大部分溶劑，並將此殘餘物用H2O(50mL)溶解，然後用NaHCO3水溶液調節至pH=7至8，並用EtOAc(50mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮得到呈黃色油狀物的2-(3,4-二氟苯基)乙酸甲酯(4.5g，粗品)。MS：M/e 1877(M+1)+。
步驟B：2-溴-2-(3,4-二氟苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0108-192
向2-(3,4-二氟苯基)乙酸甲酯(4.5g，粗品)在CCl4(50mL)中的攪拌混合物中添加NBS(6.0g，33.7mmol)和HBr/HOAc(1.0mL)。添加後，將反應混合物在85℃下攪拌3小時。濾出反應固體，濃縮濾液，並將此殘餘物用H2O(50mL)溶解，用EtOAc(50mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮得到 呈黃色油狀物的2-溴-2-(3,4-二氟苯基)乙酸甲酯(4.0g，粗品)。MS：M/e 266(M+1)+
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3,4-二氟苯基)乙酸甲酯和2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-(3,4-二氟苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0109-194
向2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(500mg，2.07mmol)在DMF(20mL)中的攪拌溶液中添加K2CO3(750mg，5.4mmol)和2-溴-2-(3,4-二氟苯基)乙酸甲酯(610mg，2.3mmol)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(50mL)中並且用EtOAc(50mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=3：1至1：1)純化得到呈黃色固體的2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3,4-二氟苯基)乙酸甲酯(200mg，45.3%)和2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-(3,4-二氟苯基)乙酸甲酯(240mg，54.4%)。MS：M/e 426(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3,4-二氟苯基)乙酸
Figure 108125875-A0101-12-0109-193
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3,4-二氟苯基)乙酸甲酯(200mg，0.47mmol)在MeOH/H2O(4.0mL/1.5mL)中的攪拌混合物中添加NaOH水溶液(2.0M，1mL)。添加後，將反應混合物在室溫下攪拌5小時。去除大部分溶劑以得到水層，然後用HCl水溶液酸化至pH=3至4並且過濾，收集濾餅，乾燥以得到呈白色固體的目標化合物(150mg，77.7%)。MS：M/e 412(M+1)+。
步驟E：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3,4-二氟苯基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0110-196
將步驟D的產物(50mg，0.12mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(40mg，0.17mmol)、HATU(50mg，0.13mmol)和DIEA(80mg，0.23mmol)在DMF(10mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(40mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(23mg，30.4%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.26(s,1H),8.18(br,2H),7.95(s,1H),7.52-7.38(m,2H),7.24(d,J=3.3Hz,1H),7.21(s,1H),6.93(s,1H),6.84-6.76(m,4H),6.74(dd,J=3.4,1.8Hz,1H),4.00-3.95(m,2H),3.68-3.57(m,4H),3.48-3.39(m,1H),3.32(s,3H),3.30(s,1H),3.03-2.91(m,2H),2.81-2.70(m,1H),2.62-2.54(m,1H)ppm。MS：M/e 630(M+1)+。
化合物A41：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c] 嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(3-甲氧基苯基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0111-198
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3-甲氧基苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0111-197
向2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(482mg，2mmol)在DMF(10mL)中的混合物中添加K2CO3(552mg，4mol)，然後添加2-溴-2-(3-甲氧基苯基)乙酸甲酯(518mg，2mmol)，然後將混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(30mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=3：1至1：1)純化以得到呈白色固體的目標化合物(186mg，22%)。MS：M/e 420(M+1)+。
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7- 基)-2-(3-甲氧基苯基)乙酸
Figure 108125875-A0101-12-0112-199
向步驟A的產物(186mg，0.44mmol)在MeOH(10mL)中的攪拌溶液中添加NaOH水溶液(2.0M，4mL)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。除去大部分MeOH，得到水層，然後用HCl水溶液酸化至pH=3至4並過濾。收集濾餅，將其乾燥以得到呈白色固體的目標化合物(133mg，74.6%)。MS：M/e 406(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(3-甲氧基苯基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0112-200
將步驟B的產物(133mg，0.328mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(77.5mg，0.328mmol)、HATU(150mg，0.393mmol)和DIEPA(84mg，0.626mmol)在DMF(3mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=2：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(120mg，58.7%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.21(s,1H),8.16(s,2H),7.95(m,1H),7.30-7.26(t,J=8.0Hz,1H),7.24(dd,J=3.2,0.8Hz,1H),6.97-6.89(m,3H),6.83(s,1H),6.78(m,4H),6.74(m,1H),4.00-3.94(m,2H),3.72(s,3H),3.69-3.63(m,2H),3.62-3.57(m,2H),3.49-3.41(m,2H),3.28(s,3H),3.03-2.87(m,2H),2.68-2.60(m, 2H)ppm。MS：M/e 624(M+1)+。
化合物A42：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3-氟苯基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0113-202
步驟A：2-(3-氟苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0113-201
在0℃向2-(3-氟苯基)乙酸(1.54g，10mmol)在MeOH(20mL)中的攪拌混合物中逐滴添加SOCl2(2.38g，20mmol)。添加後，將反應攪拌過夜。除去大部分溶劑，得到殘餘物，將其溶於EtOAc(30mL)，並用K2CO3水溶液、鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，並濃縮，得到呈無色油狀物的目標化合物(1.51g，90%)。
步驟B：2-溴-2-(3-氟苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0114-203
向步驟A的產物(1g，5.95mmol)在CCl4(10mL)中的攪拌溶液中添加NBS(1.16g，6.54mmol)，然後添加HBr水溶液(40%，2滴)。添加後，將反應混合物回流3天。將反應混合物冷卻至室溫並過濾，並收集濾液，得到呈無色油狀物的目標化合物(1.4g，99%)。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3-氟苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0114-204
向2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(482mg，2mmol)在DMF(5mL)中的攪拌溶液中添加K2CO3(552mg，4mmol)，然後添加步驟B的產物(494mg，2mmol)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(10mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=3：1至1：1)純化以得到呈白色固體的目標化合物(140mg，17.2%)。MS：M/e 408(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3-氟苯基)乙酸
Figure 108125875-A0101-12-0114-205
向步驟C的產物(140mg，0.18mmol)在MeOH(10mL)中的攪拌溶液中添加NaOH水溶液(2.0M，3mL)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。除去大部分MeOH，得到水層，然後酸化至pH=3至4並過濾。收集濾餅，將其乾燥以得到呈白色固體的目標化合物(100mg，74%)。MS：M/e 394(M+1)+。
步驟E：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3-氟苯基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0115-206
將步驟D的產物(46mg，0.117mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(27.6mg，0.17mmol)、HATU(53.6mg，0.14mmol)和DIPEA(30mg，0.234mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=2：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(32mg，44.7%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.26(s,1H),8.20(s,2H),7.97-7.94(m,1H),7.44-7.38(m,1H),7.27-7.14(m,4H),6.92(s,1H),6.79(s,4H),6.74(m,1H),4.00-3.95(m,2H),3.65(m,2H),3.62-3.57(m,2H),3.42(m,1H),3.31(m,1H),3.28(s,3H),2.96(m,2H),2.69(m,2H),2.55(m,1H)ppm。MS：M/e 612(M+1)+。
化合物A43：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-氟苯基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0116-208
步驟A：2-(2-氟苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0116-209
在室溫下，將亞硫醯氯(5mL)逐滴添加到2-(2-氟苯基)乙酸(5g，32.5mmol)在甲醇(20mL)中的溶液中。添加後，將混合物攪拌過夜。在減壓下蒸發溶劑，並將殘餘物直接用於下一步驟(5.4g，100%)MS：M/e 169(M+1)+。
步驟B：2-溴-2-(2-氟苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0116-210
將2-(2-氟苯基)乙酸甲酯(5.4g，32.5mmol)、N-溴代琥珀醯亞胺(6.4g，36mmol)和AIBN(267mg,1.6mmol)在CCl4(50mL)中的混合物在80℃下加熱3小時。將溶液濃縮並且通過柱層析(PE：EA=50：1)純化以得到產物(7.1g，92%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 7.60-6.43(m,2H),7.27-7.24(m,2H),6.18(s,1H),3.74(s,3H)ppm。MS：M/e 247(M+1)+
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7- 基)-2-(2-氟苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0117-212
將2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(3g，12.4mmol)、2-溴-2-(2-氟苯基)乙酸甲酯(3.6g，14.9mmol)和K2CO3(3.4g，24.8mmol)在DMF(30mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。向溶液中添加水(30mL)，用乙酸乙酯(30mL)萃取並且用鹽水(30mL)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=2：1)純化以得到2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-氟苯基)乙酸甲酯(1.05g，21%)。MS：M/e 408(M+1)+
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-氟苯基)乙酸
Figure 108125875-A0101-12-0117-211
將NaOH溶液(400mg，在5mL的水中)添加至2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-氟苯基)乙酸甲酯(1.05g，2.6mmol)在甲醇(15mL)中的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌過夜。將溶液濃縮，添加水(10mL)並且用1N HCl溶液酸化至pH=5。將沈澱的固體過濾並且乾燥以得到呈白色固體的所需產物(930mg，93%)。MS：M/e 394(M+1)+
步驟E：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7- 基)-2-(2-氟苯基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0118-213
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-氟苯基)乙酸(930mg，2.4mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(835mg，3.5mmol)、HATU(1.1g，2.8mmol)和DIEA(609mg，4.7mmol)在DMF(50mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(30mL)，用乙酸乙酯(50mL)萃取並且用鹽水(50mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=1：1)純化以得到產物(890mg，62%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.29(s,1H),8.25(br.s,2H),7.96(s,1H),7.45-7.41(m,1H),7.23-7.12(m,4H),6.97(s,1H),6.82-6.77(m,4H),6.75-6.73(m,1H),3.98(t,J=4.0Hz,2H),3.73-3.59(m,4H),3.92-3.89(m,2H),3.28(s,3H),2.98(br.s,2H),2.66-2.62(m,2H)ppm。MS：M/e 612(M+1)+
通過對掌性製備型HPLC將化合物A43分離成兩種對映體立體異構物(化合物A43a，較早的峰；和化合物A43b，較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0118-214
Figure 108125875-A0101-12-0118-215
Figure 108125875-A0101-12-0119-216
化合物A44：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0119-217
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(37.5mg，0.1mmol)、1-(2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(29mg，0.1mmol)和HATU(46mg，0.12mmol)在DMF(2mL)中的混合物攪拌過夜。將混合物傾倒到H2O(15mL)中並用EtOAc(10mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=2：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(34mg，55.6%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.21(s,1H),8.15(s,2H),7.95(s,1H),7.39-7.34(m,5H),7.24(d,J=3.2Hz,1H),6.90-6.63(m,5H),4.05-3.97(m,2H),3.68-3.59(m,4H),3.45-3.35(m,2H),3.28(s,3H),2.89-2.85(m,2H)ppm。MS：M/e 612(M+1)+。
通過對掌性製備型HPLC將化合物A44分離成兩種對映體立體異構物：化合物A44a、化合物A44b(化合物A44a，較早的峰，和化合物A44b，較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0120-218
Figure 108125875-A0101-12-0120-220
化合物A45：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-氟苯基)六氫吡嗪-1-基)戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0120-221
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)戊酸(60mg，0.18mmol)、1-(4-氟苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(42mg，0.19mmol)、HATU(82mg，0.22mmol)和DIEA(47mg，0.36mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=1：1)純化以 得到所需產物(58mg，66%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.21(s,1H),8.18(br.s,2H),7.95(s,1H),7.24(d,J=4.0Hz,1H),7.01-6.73(m,5H),5.60(dd,J=8.0Hz,4.0Hz,1H),3.71-3.49(m,4H),3.09-2.86(m,3H),2.48(br.s,1H),2.16-1.99(m,2H),1.28-1.20(m,2H),1.10-0.86(m,3H)ppm。MS：M/e 504(M+1)+
化合物A46：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-((S)-4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-3-甲基六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0121-223
步驟A：(S)-4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-3-甲基六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0121-224
將1-溴-4-(2-甲氧基乙氧基)苯(1.84g，8mmol)、(S)-3-甲基六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(1.76g，8.8mmol)、Pd2(dba)3(732mg，0.8mmol)、X-phos(761mg，1.6mmol)和Cs2CO3(5.2g，16mmol)在甲苯(50mL)中的混合物在90℃下在N2下攪拌16小時。將混合物用EA(20mL)稀釋，並且過濾得到的懸浮液。濃縮濾液，並通 過柱層析(用EA：PE=1：8溶離)純化殘餘物，得到呈淺黃色油狀物的標題產物(1.8g，粗品)。MS：M/e 351(M+1)+。
步驟B：(S)-1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-2-甲基六氫吡嗪鹽酸鹽
Figure 108125875-A0101-12-0122-226
在室溫下向(S)-4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-3-甲基六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(1.8g，5.12mmol)在CH2Cl2(30mL)中的溶液中添加2M HCl在二噁烷(15mL)中的溶液，並將所得溶液在室溫下攪拌16小時。將反應用水(50mL)淬滅，用CH2Cl2(40mL x 3)萃取。收集水層並濃縮，得到呈淺黃色泡沫狀物的標題產物(1.2g)，將其直接用於下一步驟。MS：M/e 251(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-((S)-4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-3-甲基六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0122-225
在室溫下向(S)-1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-2-甲基六氫吡嗪(388mg，1.2mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(412mg，1.1mmol)、DIPEA(425mg，3.3mmol)在DMF(5mL)中的混合物中添加HATU(420mg，1.1mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。用水(40mL)淬滅反應，形成懸浮液。過濾懸浮液，並通過柱層析(DCM：MeOH=50：1)純化固體，得到標題產物(330mg，產率：49%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.36-8.10(m,3H),7.95(s,1H),7.55-7.30(m,5H),7.24(d,J=2.0Hz, 1H),6.95-6.70(m,6H),4.04-3.95(m,2H),3.93-3.76(m,1H),3.76-3.64(m,1H),3.63-3.56(m,2H),3.53-3.45(m,1H),3.28(s,3H),3.24-3.12(m,1H),3.00-2.65(m,2H),2.41-2.29(m,1H),0.91-0.70(m,2H),0.55-0.42(m,1H)。MS：M/e 608(M+1)+。
通過對掌性製備型HPLC將化合物A46分離成兩種對映體立體異構物：化合物A46a(快異構物)和化合物A46b(慢異構物)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0123-227
Figure 108125875-A0101-12-0123-228
化合物A47：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-((R)-4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-3-甲基六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0124-231
步驟A：(R)-4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-3-甲基六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0124-230
將1-溴-4-(2-甲氧基乙氧基)苯(1.84g，8mmol)、(R)-3-甲基六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(1.76g，8.8mmol)、Pd2(dba)3(732mg，0.8mmol)、X-phos(761mg，1.6mmol)和Cs2CO3(5.2g，16mmol)在甲苯(50mL)中的混合物在100℃下在N2下攪拌16小時。將混合物用EA(20mL)稀釋，並且過濾得到的懸浮液。濃縮濾液，並通過柱層析(用EA：PE=1：8溶離)純化，得到呈淺黃色油狀物的標題產物(2.3g，粗品)。MS：M/e 351(M+1)+。
步驟B：(R)-1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-2-甲基六氫吡嗪鹽酸鹽
Figure 108125875-A0101-12-0124-229
在室溫下向(R)-4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-3-甲基六氫吡嗪-1-甲酸第三丁 酯(2.3g，粗品)在CH2Cl2(40mL)中的溶液中添加2M HCl在二噁烷(20mL)中的溶液，並將所得溶液在室溫下攪拌16小時。將反應用水(60mL)淬滅，用CH2Cl2(30mL x 3)萃取。收集水層並濃縮，得到呈HCl鹽的標題產物(1.8g)，將其直接用於下一步驟。MS：M/e 251(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-((R)-4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-3-甲基六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0125-232
在室溫下向(R)-1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-2-甲基六氫吡嗪(388mg，1.2mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(412mg，1.1mmol)、DIPEA(425mg，3.3mmol)在DMF(5mL)中的混合物中添加HATU(420mg，1.1mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。用水(40mL)淬滅反應，形成懸浮液。過濾懸浮液，並通過柱層析(DCM：MeOH=30：1)純化固體，得到標題產物(490mg，產率：80.7%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.30-8.05(m,3H),7.95(s,1H),7.55-7.30(m,5H),7.28-7.20(m,1H),6.89(s,1H),6.85-6.69(m,5H),4.04-3.94(m,2H),3.93-3.80(m,1H),3.75-3.64(m,1H),3.63-3.56(m,2H),3.53-3.45(m,1H),3.28(s,3H),3.24-3.12(m,1H),3.00-2.65(m,2H),2.42-2.29(m,1H),0.91-0.70(m,2H),0.55-0.41(m,1H)。MS：M/e 608(M+1)+。
通過製備型SFC將化合物A47分離成兩種對映體立體異構物：化合物A47a(快異構物)和化合物A47b(慢異構物)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0126-233
Figure 108125875-A0101-12-0126-235
化合物A48：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7基)-1-(4-(2,4-二氟苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0126-234
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(37.5，0.1mmol)、1-(2,4-二氟苯基)六氫吡嗪(19.8mg，0.1mmol)、HATU(46mg，0.12mmol)和DIPEA(25.8mg，0.2mmol)在DMF(3mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(15mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=4： 1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(42mg，75.6%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.21(s,1H),8.15(s,2H),7.95(d,J=0.8Hz,1H),7.45-7.30(m,5H),7.24(d,J=3.2Hz,1H),7.20-7.14(m,1H),6.98-6.95(m,2H),6.85(s,1H),6.74(m,1H),3.67(m,2H),3.44-3.40(m,2H),2.91(m,2H),2.58(m,2H)ppm。MS：M/e 556(M+1)+。
化合物A49：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-氟苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0127-236
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(50mg，0.133mmol)、1-(4-氟苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(28.9mg，0.133mmol)、HATU(61mg，0.159mmol)和DIPEA(34.3mg，0.266mmol)在DMF(3mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(20mg，28%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.20(s,1H),8.16(s,1H),7.95(s,1H),7.40-7.30(m,5H),7.24(d,J=3.2Hz,1H),7.02(t,J=8.8Hz,2H),6.89-6.82(m,3H),6.74-6.71(m,1H),3.71-3.55(m,2H),3.49-3.32(m,2H),3.01(m,2H),2.72(m,2H)ppm。MS：M/e 538(M+1)+。
化合物A50：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-((R)-4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-2-甲基六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0128-237
步驟A：1-溴-4-(2-甲氧基乙氧基)苯
Figure 108125875-A0101-12-0128-238
將1-溴-2-甲氧基乙烷(5.0g，36.0mmol)、4-溴苯酚(5.0g，29.1mmol)和K2CO3(8.0g，58.0mmol)在DMF(40mL)中的混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物用100mL PE稀釋，用NaOH(2M，30mL x 2)、鹽水(50mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並濃縮，得到呈無色油狀物的標題產物(7.5g，95%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.36(d,J=8.8Hz,2H),6.81(d,J=8.8Hz,2H),4.13-4.02(m,2H),3.77-3.71(m,2H),3.45(s,3H)。
步驟B：(R)-4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-2-甲基六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯。
Figure 108125875-A0101-12-0128-239
將1-溴-4-(2-甲氧基乙氧基)苯(650mg，2.83mmol)、(R)-2-甲基六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(650mg，3.25mmol)、Pd2(dba)3(250mg，0.27mmol)、X-phos(250 mg，0.52mmol)和Cs2CO3(1.85g，5.7mmol)在甲苯(10mL)中的混合物在90℃下在N2下攪拌16小時。將混合物濃縮，用EA(30mL)稀釋所得殘餘物，並且過濾得到的懸浮液。濃縮濾液，並通過柱層析純化，得到呈黃色油狀物的標題產物(580mg，粗品)。MS：M/e 351(M+1)+。
步驟C：(R)-1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-3-甲基六氫吡嗪鹽酸鹽。
Figure 108125875-A0101-12-0129-243
在室溫下向(R)-4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-2-甲基六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(570mg，1.62mmol)在CH2Cl2(5mL)中的溶液中添加CF3COOH(3mL)，並將所得紅色溶液在室溫下攪拌3小時。濃縮混合物。添加10mL HCl(2M，水溶液)，並用EA(10mL x 2)萃取溶液。除去有機層，並將水層濃縮至乾燥，得到呈淺棕色油狀物的標題產物(280mg，62%)。MS：M/e 251(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-((R)-4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-2-甲基六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮。
Figure 108125875-A0101-12-0129-244
在室溫下向(R)-1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-3-甲基六氫吡嗪鹽酸鹽(280mg，1.0mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(400mg，1.1mmol)、DIEA(500mg，3.9mmol)在DMF(5mL)中的混合物中添加HATU(460mg，1.2mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物倒入30mL的H2O中。沈澱出白色固體並且將其過濾。將濾餅用H2O(20 mL)洗滌，在空氣中乾燥。將所得固體通過柱層析純化以得到標題產物(315mg，產率：52%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.29-8.01(m,3H),7.95(s,1H),7.49-7.29(m,5H),7.24(s,1H),6.90-6.77(m,5H),6.74(s,1H),4.77-4.30(m,1H),4.00-3.94(m,2H),3.62-3.57(m,2H),3.55-3.41(m,1H),3.28(s,3H),3.24-2.61(m,3H),2.47-2.15(m,2H),1.22(d,J=7.2Hz,2H),1.12(d,J=6.4Hz,1H)。MS：M/e 608(M+1)+。
通過對掌性製備型HPLC將化合物A50分離成兩種對映體立體異構物：化合物A50a(較早的峰)，和化合物A50b(較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0130-245
Figure 108125875-A0101-12-0130-246
化合物A51：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2,3-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0131-248
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)戊酸(50mg，0.15mmol)、1-(2,3-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(50mg，0.16mmol)、HATU(61mg，0.16mmol)和DIEA(39mg，0.3mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=1：1)純化以得到所需產物(31mg，36%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.21(s,1H),8.15(br.s,2H),7.95(s,1H),7.23(d,J=4.0Hz,1H),6.87-6.66(m,3H),5.58(dd,J=8.0Hz,4.0Hz,1H),4.12-4.09(m,2H),3.62-3.50(m,6H),3.28(s,3H),2.89-2.67(m,3H),2.36(br.s,1H),2.03-1.99(m,2H),1.23-1.10(m,2H),0.87(t,J=4.0Hz,3H)ppm。MS：M/e 596(M+1)+
化合物A52：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-((S)-4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-2-甲基六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0131-247
Figure 108125875-A0101-12-0132-249
步驟A：(S)-4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-2-甲基六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯。
Figure 108125875-A0101-12-0132-250
將1-溴-4-(2-甲氧基乙氧基)苯(230mg，1.0mmol)、(S)-2-甲基六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(230mg，1.1mmol)、Pd2(dba)3(88mg，0.09mmol)、X-phos(90mg，0.20mmol)和Cs2CO3(650mg，2mmol)在甲苯(4mL)中的混合物在90℃下在N2下攪拌16小時。將混合物用EA(20mL)稀釋，並且過濾得到的懸浮液。濃縮濾液，並通過柱層析純化，得到呈淺黃色油狀物的標題產物(120mg，粗品)。MS：M/e 351(M+1)+。
步驟B：(S)-1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-3-甲基六氫吡嗪
Figure 108125875-A0101-12-0132-251
在室溫下向(S)-4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-2-甲基六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(120mg，0.34mmol)在CH2Cl2(5mL)中的溶液中添加CF3COOH(2mL)，並將所得溶液在室溫下攪拌16小時。將混合物濃縮至乾燥，得到呈淺黃色油狀物的標題產物(95mg，粗品)，將其直接用於下一步驟。MS：M/e 251(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7- 基)-1-((S)-4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-2-甲基六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮。
Figure 108125875-A0101-12-0133-253
在室溫下向(S)-1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-3-甲基六氫吡嗪(95mg，0.26mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(105mg，0.28mmol)、DIEA(150mg，1.2mmol)在DMF(2mL)中的混合物中添加HATU(120mg，0.32mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物用10mL EA稀釋，用NaHCO3(水溶液5mL x 2)、鹽水(5mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並濃縮，通過製備型TLC純化，得到標題產物(25mg，產率：15%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31-8.03(m,3H),7.95(s,1H),7.51-7.28(m,5H),7.24(s,1H),6.91-6.69(m,6H),4.74-4.29(m,1H),4.26-3.83(m,3H),3.70-3.49(m,3H),3.28(s,3H),3.15-2.85(m,2H),2.71-2.59(m,1H),2.35-2.14(m,1H),1.27-1.09(m,3H)。MS：M/e 608(M+1)+。
化合物A53：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(3-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0133-252
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)戊酸(50mg，0.15mmol)、1-(3-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(46mg，0.16mmol)、HATU(61mg，0.16mmol)和DIEA(39mg，0.32mmol)在DMF(5mL) 中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(5mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=1：1)純化以得到所需產物(43mg，51%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.20(s,1H),8.18(br.s,2H),7.95(s,1H),7.23(d,J=4.0Hz,1H),6.97-6.95(m,1H),6.73-6.57(m,3H),5.58(dd,J=8.0Hz,4.0Hz,1H),4.09-4.02(m,2H),3.61-3.51(m,6H),3.28(s,3H),3.01-2.83(m,3H),2.44(br.s,1H),2.16-2.00(m,2H),1.23-1.09(m,2H),0.91-0.85(m,3H)ppm。MS：M/e 578(M+1)+
化合物A54：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2,5-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0134-254
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)戊酸(50mg，0.15mmol)、1-(2,5-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(54mg，0.18mmol)、HATU(69mg，0.18mmol)和DIEA(39mg，0.3mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=1：1)純化以得到所需產物(49mg，56%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.21(s,1H),8.15(br.s,2H),7.95(s,1H),7.23(d,J=4.0Hz,1H),7.13-7.07(m,1H),6.94-6.88(m,1H),6.74-6.73(m,1H),5.58(dd,J=8.0Hz,4.0Hz,1H),4.09(t,J=4.0Hz,2H),3.61-3.51(m,6H),3.28(s,3H),2.89-2.73(m,2H),2.41(br.s,1H),2.21-1.99(m,2H),1.23-1.09(m,2H),0.90-0.86(m,3H)ppm。MS：M/e 596(M+1)+
化合物A55：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(3-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0135-255
步驟A：4-溴-2-氟-1-(2-甲氧基乙氧基)苯
Figure 108125875-A0101-12-0135-256
將4-溴-2-氟苯酚(2g，10.47mmol)、1-溴-2-甲氧基乙烷(1.6g，11.52mmol)和K2CO3(2.89g，20.94mmol)在DMF(10mL)中的混合物在60℃下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，在高真空下濃縮以得到呈無色油狀物的目標化合物(2.6g，99%)。
步驟B：4-(3-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0135-257
將步驟A的產物(2.6g，10.47mmol)、六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(2.6g，10.47mmol)、Pd2(dba)3(0.95g，1.04mmol)、X-phos(0.99g，2.08mmol)和Cs2CO3(6.8g， 20.94mmol)在甲苯(150mL)中的混合物在120℃下攪拌2小時。除去大部分甲苯以得到殘餘物，將所述殘餘物用EtOAc/H2O(60mL/30mL)處理。將有機層分離，用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=5：1至3：1)純化以得到呈黃色油狀物的目標化合物(2g，54%)。MS：M/e 355(M+1)+。
步驟C：1-(3-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽
Figure 108125875-A0101-12-0136-259
向步驟B的產物(2g，5.65mmol)在CH2Cl2(10mL)中的攪拌混合物中添加EtOAc/HCl(g)(4.0M，10mL)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。過濾反應混合物，並收集濾餅，乾燥，得到呈褐色固體的目標化合物(1.47g，90%)。MS：M/e 255(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(3-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0136-258
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(37.5mg，0.1mmol)、步驟C的產物(29mg，0.1mmol)、HATU(46mg，0.12mmol)和DIPEA(25.8mg，0.2mmol)在DMF(3mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=2：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(25mg，40.9%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.21(s,1H),8.16(s,2H),7.95(s,1H),7.43-7.31(m,5H),7.24(d,J=3.2Hz,1H),7.00-6.96(t,J=9.2Hz,1H),6.86(s,1H),6.81-6.73(m,2H),6.58-6.56(m,1H),4.07-4.00(m,2H),3.65-3.59(m,4H),3.41(m,2H),3.28(s,3H),3.01(m,2H),2.68(m,2H)ppm。MS：M/e 612(M+1)+。
化合物A56：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2,3-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0137-260
步驟A：1-溴-2,3-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯
Figure 108125875-A0101-12-0137-261
將4-溴-2,3-二氟苯酚(2g，9.56mmol)、1-溴-2-甲氧基乙烷(1.46g，10.52mmol)和K2CO3(2.6g，19.12mmol)在DMF(10mL)中的混合物在60℃下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(30mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，在高真空下濃縮以得到呈無色油狀物的目標化合物(2.55g，100%)。
步驟B：4-(2,3-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0138-264
將步驟A的產物(1g，3.73mmol)、六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(0.69g，3.73mmol)、Pd2(dba)3(0.34g，0.373mmol)、X-phos(0.35g，0.746mmol)和Cs2CO3(2.4g，7.46mmol)在甲苯(50mL)中的混合物在120℃下在N2下攪拌2小時。除去大部分甲苯以得到殘餘物，將所述殘餘物用EtOAc/H2O(60mL/30mL)處理。將有機層分離，用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=5：1至3：1)純化以得到呈黃色油狀物的目標化合物(620mg，44.7%)。MS：M/e 373(M+1)+。
步驟C：1-(2,3-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽
Figure 108125875-A0101-12-0138-263
向步驟B的產物(620mg，1.67mmol)在CH2Cl2(10mL)中的攪拌溶液中添加EtOAc/HCl(g)(4.0M，5mL)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。過濾反應混合物，並收集濾餅，乾燥，得到呈白色固體的目標化合物(323mg，62.7%)。MS：M/e 273(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2,3-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0138-262
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(37.5mg，0.1mmol)、步驟C的產物(30.8mg，0.1mmol)、HATU(46mg，0.12mmol)和DIPEA(25.8mg，0.2mmol)在DMF(3mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(30mL x 2)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=2：1至1：2)純化以得到目標化合物(20mg，31.7%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.21(s,1H),8.15(s,2H),7.95(s,1H),7.43-7.33(m,5H),7.24(d,J=3.2Hz,1H),6.92-6.85(m,2H),6.74(dd,J=3.2,1.6Hz,1H),6.68(m,1H),4.16-4.09(m,2H),3.74-3.59(m,4H),3.45-3.40(m,2H),3.29(s,3H),2.90(m,2H),2.55(m,2H)ppm。MS：M/e 630(M+1)+。
化合物A57：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2,5-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0139-265
步驟A：1-溴-2,5-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯
Figure 108125875-A0101-12-0140-268
將4-溴-2,5-二氟苯酚(2g，9.56mmol)、1-溴-2-甲氧基乙烷(1.46g，10.52mmol)和K2CO3(2.6g，19.12mmol)在DMF(10mL)中的混合物在60℃下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，在高真空下濃縮以得到呈無色油狀物的目標化合物(2.59g，99%)。
步驟B：4-(2,5-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0140-267
將步驟A的產物(1g，3.73mmol)、六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(0.69g，3.73mmol)、Pd2(dba)3(0.34g，0.373mmol)、X-phos(0.35g，0.746mmol)和Cs2CO3(2.4g，7.46mmol)在甲苯(50mL)中的混合物在120℃下在N2下攪拌2小時。除去大部分甲苯以得到殘餘物，將所述殘餘物用EtOAc/H2O(50mL/20mL)處理。將有機層分離，用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=5：1至3：1)純化以得到呈黃色油狀物的目標化合物(583mg，42%)。MS：M/e 373(M+1)+。
步驟C：1-(2,5-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽
Figure 108125875-A0101-12-0140-266
向步驟B的產物(583mg，1.56mmol)在CH2Cl2(10mL)中的攪拌混合物中添加EtOAc/HCl(g)(4.0M，5mL)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。過濾反應混 合物，並收集濾餅，乾燥，得到呈白色固體的目標化合物(300mg，62.3%)。MS：M/e 273(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2,5-二氟-4-(2-甲氫基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0141-269
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(37.5mg，0.1mmol)、步驟C的產物(30.8mg，0.1mmol)、HATU(46mg，0.12mmol)和DIPEA(25.8mg，0.2mmol)在DMF(3mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=2：1至1：2)純化以得到目標化合物(25mg，40.9%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.21(s,1H),8.15(s,2H),7.95(s,1H),7.41-7.32(m,5H),7.24-7.23(d,J=3.2Hz,1H),7.13-7.07(m,1H),6.91-6.84(m,2H),6.73(m,1H),4.09(m,2H),3.73-3.56(m,4H),3.39(m,2H),3.29(s,3H),2.89(m,2H),2.57(m,2H)ppm。MS：M/e 630(M+1)+。
化合物A58：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(六氫吡啶-4-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0142-270
步驟A：4-(1-溴-2-甲氧基-2-側氧基乙基)六氫吡啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0142-271
在-78℃下，將4-(2-甲氧基-2-側氧基乙基)六氫吡啶-1-甲酸第三丁酯(2.57g，10mmol)在THF(10mL)中的溶液逐滴添加到LHMDS(17.5mL，1.0M)中，然後將混合物攪拌2小時，在-78℃下逐滴添加TMSCl(1.89g，17.5mmol)。再攪拌2小時後，逐滴添加Br2(1.92g，12mmol)。將混合物在此溫度下攪拌1小時，並在0℃下攪拌30分鐘。將混合物用HCl水溶液淬滅，用EtOAc(30mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=5：1至1：1)純化以得到呈無色油狀物的目標化合物(1.9g，56%)。MS：M/e 336/338(M+1)+。
步驟B：4-(1-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-甲氧基-2-側氧基乙基)六氫吡啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0143-273
向2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(482mg，2mmol)在DMF(5mL)中的攪拌溶液中添加K2CO3(552mg，4mmol)，然後添加步驟A的產物(806.4mg，2.4mmol)。添加後，將反應混合物攪拌2天。將混合物傾倒到H2O(15mL)中並用EtOAc(30mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=4：1至1：1)純化以得到呈白色固體的目標化合物(168mg，16.9%)。MS：M/e 497(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(1-(第三丁氧基羰基)六氫吡啶-4-基)乙酸
Figure 108125875-A0101-12-0143-272
向步驟B的產物(168mg，0.338mmol)在MeOH(5mL)中的攪拌溶液中添加NaOH水溶液(2M，2mL)。添加後，將反應攪拌過夜。除去大部分MeOH，得到水層，將其酸化至pH=3至4並過濾。收集濾餅，將其乾燥以得到呈白色固體的目標化合物(150mg，92%)。MS：M/e 483(M+1)+。
步驟D：4-(1-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-側氧基乙基)六氫吡啶-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0144-274
將C的產物(336mg，0.72mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(170mg，0.72mmol)、HATU(330mg，0.864mmol)和DIPEA(186mg，1.44mmol)在DMF(3mL)中的混合物攪拌過夜。將混合物傾倒到H2O(15mL)中並用EtOAc(10mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=2：1至100% EtOAc)純化以得到粗產物，將其通過製備型TLC(EtOAc)進一步純化，得到呈白色固體的目標化合物(30mg，6%)。MS：M/e 701(M+1)+。
步驟E：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(六氫吡啶-4-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0144-275
向步驟D的產物(30mg，0.043mmol)在CH2Cl2(3mL)中的攪拌溶液中添加HCl(g)/EtOAc(4.0M，1mL)。添加後，將混合物攪拌過夜。將混合物濃縮以得到目標化合物(20mg，70%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.28(s,1H),8.24(s,2H),7.95(s,1H),7.52(s,2H),7.23(d,J=2.8Hz,1H),6.99(d,J=8.4Hz,2H),6.73(s,1H),5.37(d,J=9.6Hz,1H),4.16-3.74(m,6H),3.61(s,2H),3.44(m,2H),3.27(s,5H),3.14(m,1H),3.02-2.71(m,4H),2.07-1.97(m,1H),1.71-1.54(m,1H),1.47-1.29(m,1H),1.07(m,1H),0.91(m,1H)ppm。MS：M/e 601(M+1)+。
化合物A59：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-2,6-二甲基六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0145-277
步驟A：4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-2,6-二甲基六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0145-276
將1-溴-4-(2-甲氧基乙氧基)苯(1g，4.3mmol)、2,6-二甲基六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(930mg，4.3mmol)、X-Phos(409mg，0.76mmol)、Pd2(dba)3(394mg，0.4mmol)和Cs2CO3(2.8g，8.6mmol)在甲苯(20mL)中的混合物在95℃加熱過夜。蒸發溶劑。向殘餘物中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(20mL)萃取，並通過柱層析(PE：EA=10：1)純化，得到產物(1.1g，70%)。MS：M/e 365(M+1)+
步驟B：1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-3,5-二甲基六氫吡嗪
Figure 108125875-A0101-12-0146-278
在燒瓶中將HCl在乙酸乙酯(4M，10mL)中的溶液添加到4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-2,6-二甲基六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯中(1.1g，3mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌過夜。將溶液濃縮，添加水(10mL)，用NaHCO3溶液鹼化並用乙酸乙酯(10mL)萃取。將有機層乾燥並濃縮，得到產物，將其直接用於下一步驟。MS：M/e 265(M+1)+
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-2,6-二甲基六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0146-279
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(50mg，0.13mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-3,5-二甲基六氫吡嗪(48mg，0.16mmol)、HATU(61mg，0.16mmol)和DIEA(33mg，0.26mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=1：1)純化以得到產物(25mg，29%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.19(d,J=4.0Hz,1H),8.13(br.s,2H),7.95(br.s,1H),7.41-7.37(m,5H),7.26-7.24(m,1H),6.87-6.81(m,5H),6.74(br.s,1H),4.60(s,1H),4.01-3.98(m,3H),3.62-3.60(t,J=4.0Hz,2H),3.29(s,3H),3.22(d,J=8.0Hz,1H),2.69-2.43(m,2H),1.30-1.24(m,5H),1.04(d,J=8.0Hz,1H),0.94-0.91(m,1H)ppm。MS：M/e 622(M+1)+
化合物A60：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(1-甲基六氫吡啶-4-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0147-281
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(六氫吡啶-4-基)乙酸甲酯鹽酸鹽
Figure 108125875-A0101-12-0147-280
向4-(1-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-甲氧基-2-側氧基乙基)六氫吡啶-1-甲酸第三丁酯(246mg，0.496mmol)在CH2Cl2(10mL)中的攪拌溶液中添加HCl(g)/EtOAc(4.0M，4mL)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。將反應混合物在真空中濃縮，得到目標化合物(196mg，100%)，將其直接用於下一步驟。MS：M/e 397(M+1)+。
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7- 基)-2-(1-甲基六氫吡啶-4-基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0148-282
向步驟A的產物(196mg，0.496mmol)在MeOH(5mL)中的攪拌溶液中添加HCHO水溶液(37%，2mL)和AcOH(1mL)，然後將混合物攪拌30分鐘，然後添加NaBH3CN(62.5mg，0.992mmol)並攪拌2小時。除去大部分MeOH，得到殘餘物，然後用EtOAc(20mL)萃取。棄去有機層，並用K2CO3將水層鹼化至pH=11至12，然後用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮以得到呈白色固體的目標化合物(165mg，81.1%)。MS：M/e 411(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(1-甲基六氫吡啶-4-基)乙酸
Figure 108125875-A0101-12-0148-283
向步驟B的產物(165mg，0.402mmol)在MeOH(5mL)中的攪拌溶液中添加NaOH水溶液(2.0M，2mL)。添加後，將混合物攪拌過夜。用HCl水溶液將混合物酸化至pH=5至6，然後濃縮，得到殘餘物，將所述殘餘物用CH2Cl2/MeOH(10mL/2mL)洗滌並過濾。將濾液濃縮以得到呈白色固體的目標化合物(133mg，83.5%)。MS：M/e 397(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(1-甲基六氫吡啶-4-基)乙-1- 酮
Figure 108125875-A0101-12-0149-284
將步驟C的產物(133mg，0.336mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(80mg，0.336mmol)、HATU(154mg，0.403mmol)和DIPEA(87mg，0.672mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌2小時。將混合物倒入H2O(15mL)中並且過濾。收集濾餅，乾燥並通過製備型HPLC純化，得到目標化合物(25mg，12%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.22(s,3H),7.95(s,1H),7.23(d,J=2.8Hz,1H),6.87-6.67(m,5H),5.29(d,J=9.6Hz,1H),3.97(m,2H),3.79-3.74(m,1H),3.65-3.58(m,4H),3.48(m,1H),3.27(s,3H),3.06-2.92(m,4H),2.73(m,2H),2.32-2.24(m,4H),1.91-1.83(m,1H),1.45-1.09(m,3H),0.96-0.80(m,1H)ppm。MS：M/e 615(M+1)+。
化合物A61：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-羥基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0149-285
Figure 108125875-A0101-12-0150-286
步驟A：2-(4-溴苯氧基)乙基乙酸酯
Figure 108125875-A0101-12-0150-287
將2-溴乙基乙酸酯(5.8g，34.9mmol)、4-溴苯酚(5.0g，29.1mmol)和K2CO3(8.0g，58.0mmol)在DMF(50mL)中的混合物在60℃下攪拌24小時。將混合物過濾，並將濾液用100mL EA稀釋，用鹽水(50mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥。將所得殘餘物通過柱層析純化以得到呈淺黃色油狀物的標題產物(6.2g，69%)。MS：M/e 259,261(M+1)+。
步驟B：4-(4-(2-乙醯氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0150-288
將2-(4-溴苯氧基)乙基乙酸酯(2.0g，7.7mmol)、六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(2.0g，10.7mmol)、Pd2(dba)3(600mg，0.65mmol)、X-phos(650mg，1.36mmol)和Cs2CO3(5.5g，16.9mmol)在甲苯(20mL)中的混合物在90℃下在N2下攪拌16小 時。將混合物通過矽藻土墊過濾，並濃縮濾液，並通過柱層析純化，得到呈棕色油狀物的標題產物(1.85g，66%)。MS：M/e 365(M+1)+。
步驟C：4-(4-(2-羥基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0151-290
在室溫下向4-(4-(2-乙醯氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(600mg，1.65mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中添加NaOH水溶液(2M，5mL)並攪拌5小時。添加20mL EA並將所得溶液用鹽水(20mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並濃縮，得到呈淺黃色油狀物的標題產物(280mg，粗品)。MS：M/e 323(M+1)+。
步驟D：2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙-1-醇
Figure 108125875-A0101-12-0151-289
在室溫下向4-(4-(2-羥基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(280mg，0.87mmol)在CH2Cl2(10mL)中的攪拌溶液中添加CF3COOH(3mL)，並將所得溶液在室溫下攪拌5小時。將混合物濃縮至乾燥。添加5mL NaHCO3水溶液，並將所得混合物用CH2Cl2(5mL x 3)萃取。將合併的有機物用鹽水(5mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮以得到呈淺黃色油狀物的標題產物(120mg，粗品)。MS：M/e 223(M+1)+。
步驟E：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-羥基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0152-291
在室溫下向2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙-1-醇(40mg，0.18mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(50mg，0.13mmol)、DIEA(70mg，0.54mmol)在DMF(2mL)中的混合物中添加HATU(65mg，0.17mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。添加10mL的EA並且將混合物用鹽水(10mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮。將所得殘餘物通過製備型TLC(CH2Cl2/EA=1：2)純化以得到標題產物(9.5mg，產率：9%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.28-8.05(m,3H),7.95(s,1H),7.47-7.29(m,5H),7.24(d,J=3.2Hz,1H),6.92-6.76(m,5H),6.75-6.71(m,1H),3.87(t,J=4.8Hz,2H),3.79-3.52(m,6H),3.02-2.89(m,2H),2.68-2.58(m,2H)。MS：M/e 580(M+1)+。
化合物A62：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-羥基丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0152-292
步驟A：((1-溴丙-2-基)氧基)(第三丁基)二甲基矽烷
Figure 108125875-A0101-12-0153-296
向1-溴丙-2-醇(1.39g，10mmol)在CH2Cl2(20mL)中的攪拌溶液中添加1H-咪唑(0.8g，1.2mmol)，然後添加TBSCl(1.8g，1.2mmol)。添加後，將反應攪拌過夜。將混合物用H2O、鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥並在真空中濃縮，得到呈無色油狀物的目標化合物(2.1g，83%)。
步驟B：4-(4-(2-((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0153-294
將步驟A的產物(500mg，1.97mmol)、4-(4-羥基苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(547mg，1.97mmol)和K2CO3(544mg，3.94mmol)在DMF(5mL)中的混合物在60℃下攪拌過夜。將混合物傾倒到H2O(10mL)中並用EtOAc(10mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，並在真空中濃縮，得到殘餘物，將所述殘餘物通過柱層析(石油醚/EtOAc=5：1至1：1)純化，得到呈黃色油狀物的目標化合物(200mg，44.4%)。MS：M/e 451(M+1)+。
步驟C：1-(4-(2-((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪
Figure 108125875-A0101-12-0153-293
向步驟B的產物(80mg，0.177mmol)在CH2Cl2(10mL)中的攪拌溶液中添加TFA(1mL)。攪拌2小時後，用K2CO3將混合物鹼化至pH=10至12，用CH2Cl2(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮，得到目標化合物(粗產物，100%)，將其直接用於下一步驟。MS：M/e 351(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-((第三丁基二甲基甲矽烷基)氧基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0154-297
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(66mg，0.177mmol)、步驟C的產物(0.177mmol)、HATU(81mg，0.212mmol)和DIPEA(45mg，0.354mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(15mL)中然後用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=3：1至100% EtOAc)純化以得到呈白色固體的目標化合物(20mg，20%)。MS：M/e 708(M+1)+。
步驟E：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-羥基丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0154-298
向步驟D的產物(20mg，0.028mmol)在THF(10mL)中的攪拌溶液中添加TBAF(20mg)。添加後，將反應混合物攪拌2天。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(10mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮得到殘餘物，將其通過製備型HPLC純化，得到呈TFA鹽的目標化合物(10mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.20(s,1H),8.15(s,2H),7.95(s,1H),7.43- 7.30(m,5H),7.24-7.23(d,J=3.2Hz,1H),6.86(s,1H),6.79(m,4H),6.74(s,1H),3.88(m,1H),3.76-3.70(m,2H),2.96(m,4H),2.67(m,2H),2.04-1.94(m,1H),1.56-1.46(m,2H),1.12-1.10(d,J=6.0Hz,3H)ppm。MS：M/e 594(M+1)+。
中間物-I：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0155-967
步驟A：2-苯基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0155-300
在0℃下向2-苯基丙酸(5g，33.33mmol)在MeOH(15mL)中的溶液中逐滴添加氯化亞碸(5.15g，50mmol)。添加後，將反應混合物在室溫下攪拌3h。將混合物濃縮，用冰水(20mL)淬滅，用EtOAc(30mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽 水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=20：1至5：1)純化以得到呈黃色油狀物的2-苯基丙酸甲酯(5.22g，95.49%)。MS：M/e 165(M+1)+。
步驟B：2-溴-2-苯基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0156-302
將2-苯基丙酸甲酯(5.22g，31.83mmol)、NBS(6.80g，38.19mmol)、BPO(0.385g，1.591mmol)在四氯化碳(20mL)中的混合物在70℃下攪拌過夜。將混合物濃縮，將殘餘物用PE洗滌並且過濾，將濾液濃縮以得到呈黃色油狀物的2-溴-2-苯基丙酸甲酯(7.57g，97.87%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.55(d,J=7.5Hz,2H),7.40-7.27(m,3H),3.80(s,3H),2.30(s,3H)
步驟C：2-肼基-2-苯基丙酸甲酯鹽酸鹽
Figure 108125875-A0101-12-0156-301
向2-溴-2-苯基丙酸甲酯(15g，62.2mmol)在乙腈(200mL)中的攪拌溶液中添加水合肼(80%，15.5g，249mmol)。添加後，將反應混合物加溫至50℃並且攪拌3.5小時。將反應混合物在真空中濃縮。向殘餘物中添加H2O(300mL)並且用EA(200mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，並且在真空中濃縮。向殘餘物中添加EA(50mL)並且在0℃下添加至4M HCl/EA溶液(200mL)中。添加後，將混合物在0℃下攪拌1小時，然後過濾混合物，並且將濾餅用EA(50mL)洗滌，乾燥以得到呈白色固體的目標產物(9.8g，68.5%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 9.28(s,2H),7.43-7.38(m,5H),6.23(s,1H),3.73(s,3H),1.72(s,3H) ppm。MS：M/e 195(M+1)+。
步驟D：2-(6-胺基-4-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-苯基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0157-303
向2-肼基-2-苯基丙酸甲酯鹽酸鹽(2.38g，10.3mmol)在乙腈(30mL)中的攪拌混合物中添加2-胺基-4,6-二氯嘧啶-5-甲醛(1.96g，10.3mmol)。添加後，將反應混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物加溫至70℃並且攪拌2小時。向混合物中添加1M NaHCO3水溶液，並且將混合物用EA(50mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na2SO4乾燥並且在真空中濃縮。將粗產物通過柱層析(石油醚/EA=4：1)純化以得到呈白色固體的目標化合物(2.2g，64.3%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.05(s,1H),7.35-7.31(m,5H),7.13-7.11(m,2H),3.71(s,3H),3.25(s,3H)ppm。MS：M/e 332(M+1)+。
步驟E：2-(6-胺基-4-(2-(呋喃-2-羰基)肼基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-苯基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0157-304
向2-(6-胺基-4-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-苯基丙酸甲酯(2.03g，6.4mmol)在DMSO(20mL)中的攪拌混合物中添加呋喃-2-碳醯肼(0.85g，6.7mmol)和DIEA(2.36g，18.3mmol)。添加後，將反應混合物在120℃下攪拌過夜。在真空中濃縮大部分溶劑，並且向殘餘物中添加H2O(20mL)並且攪拌1小時。將混合 物過濾，並且將濾餅用水洗滌。將粗產物在40℃下乾燥，並且直接用於下一步驟(850mg，31.5%)。MS：M/e 422(M+1)+。
步驟F：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0158-305
將2-(6-胺基-4-(2-(呋喃-2-羰基)肼基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-苯基丙酸甲酯(750mg，1.78mmol)在BSA(7.5mL)和HMDS(7.5mL)中的混合物在110℃下攪拌過夜。將混合物在真空中濃縮以去除BSA和HMDS。向殘餘物中添加H2O並且用EA(20mL x 3)萃取。將合併的有機相用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，並且在真空中濃縮。將粗產物通過柱層析(石油醚/EA=4：1至2：1)純化以得到呈白色固體的目標化合物(150mg，20.9%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.31(s,1H),7.64(s,1H),7.31(m,5H),7.21(d,J=4.0Hz,1H),6.59-6.58(m,1H),3.76(s,3H),2.4(s,3H)ppm。MS：M/e 404(M+1)+。
步驟G：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(中間物-I)
Figure 108125875-A0101-12-0158-306
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸甲酯(150mg，0.34mmol)在EtOH(3mL)中的攪拌混合物中添加 NaOH水溶液(2.0M，3mL)。添加後，將反應混合物在70℃下攪拌1小時。去除大部分EtOH以得到水層，然後用HCl水溶液酸化至pH=3至4並且過濾，收集濾餅，乾燥以得到呈白色固體的目標化合物(130mg，98.3%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 13.31(s,1H),8.21(s,1H),7.99(s,2H),7.95(s,1H),7.33-7.21(m,6H),6.75-6.74(m,1H),2.32(s,3H)ppm。MS：M/e 390(M+1)+。
通過對掌性製備型HPLC將中間物-I分離成兩種對映體立體異構物(中間物-Ia，較早的峰；和中間物-Ib，較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0159-307
Figure 108125875-A0101-12-0159-308
使用以下路徑合成中間物-Ib：(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0160-309
步驟A：(R)-1-(1-側氧基-2-苯基丙-2-基)肼-1,2-二甲酸二第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0160-310
在0℃下向(S)-2-胺基-4-(第三丁氧基)-4-側氧基丁酸(15g，0.08mol)在幹THF(0.8L)中的攪拌溶液中添加2-苯基丙醛(53.6g，0.4mol)和偶氮二甲酸二第三丁酯(DTAD 92g，0.4mol)。添加後，將反應緩慢加溫至室溫並且在N2下攪拌過夜。將混合物用水/鹽水稀釋，用EA(600mL)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮以得到呈黃色油狀物的目標化合物(160g，粗品)。
步驟B：(R)-2-(1,2-二(第三丁氧基羰基)肼基)-2-苯基丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0160-311
向步驟A的產物(120g，0.3mol)在DCM(600mL)中的溶液中添加 NaH2PO4(10.08g，0.084mol)在水(150mL)中的溶液。在0℃下添加H2O2(150mL，1.46mol，約4.85當量)。然後逐滴添加75% NaClO2(46g，0.51mol，1.275當量)在水(300mL)中的溶液以保持溫度低於10℃。添加後，將反應加溫至室溫過夜。停止攪拌，並且棄去水層。將有機層轉移至10% NaHSO3溶液(300mL)中，並且將所得混合物在室溫下攪拌一小時。收集有機層並且將其用10% NaHSO3溶液(300mL)、鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，過濾並且濃縮。向殘餘物中添加CH3CN(200mL)並且將混合物再次濃縮。將所得殘餘物用EA/PE(1/3至200mL)漿化並且在室溫下攪拌過夜。將沈澱物過濾，用EA/PE(1/3，100mL)洗滌以得到呈白色固體的目標化合物(兩個步驟，47%、41%)。
步驟C：(R)-2-肼基-2-苯基丙酸甲酯鹽酸鹽
Figure 108125875-A0101-12-0161-313
在10℃至30℃下向步驟B的產物(299g，0.787mol)在MeOH(1.2L)中的混合物中逐滴添加SOCl2(187g，1.57mmol)。將所得混合物在65℃下加熱過夜。將混合物冷卻至室溫並且濃縮以得到殘餘物，向所述殘餘物中添加EA(100mL)並且再次濃縮。將殘餘物與EA(200mL)一起漿化並且過濾，收集濾餅以得到呈白色固體的目標化合物(176g，97%，ee%=99.3%)。
步驟D：(R)-2-(6-胺基-4-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-苯基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0161-312
在室溫下向步驟C的產物(11.5g，50mmol)和2-胺基-4,6-二氯嘧啶-5-甲醛(9.6 g，50mmol)在CH3CN(200mL)中的攪拌混合物中添加POCl3(7.7g，50mmol)。添加後，將反應混合物在30℃下攪拌過夜。然後將反應混合物逐滴添加到EtOAc(200mL)/K3PO4水溶液(37g，0.175mol)在H2O(200mL)中的體系中並攪拌2h。將有機層分離，用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮以得到殘餘物，將所述殘餘物溶解在EtOAc(40mL)中，添加活性炭(5g)並且逐滴添加石油醚(80mL)。將混合物攪拌半小時並且過濾。將濾液濃縮以得到呈淺黃色固體的目標化合物(15g，90%)。
步驟E：(R)-2-(6-胺基-4-(2-(呋喃-2-羰基)肼基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-苯基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0162-314
向步驟D的產物(114g，0.344mol)和呋喃-2-碳醯肼(65g，0.5166mol)在DMSO(115mL)中的混合物中添加DIPEA(88g，0.6888mol)。將所得混合物在80℃下在N2下加熱過夜。將混合物冷卻至室溫並且用PE稀釋。棄去PE層。在劇烈攪拌下將DMSO層緩慢添加至水(1.1L)中。形成懸浮液，過濾並且用水洗滌。在室溫下將固體與水(500mL)一起漿化2h，過濾並且用水洗滌，在烘箱中乾燥3天以得到呈棕色固體的目標化合物(125g，86%)。
步驟F：(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0163-316
向BSA(204g，1.072mol)和HMDS(161g，1.072mol)的混合物中添加步驟E的產物(90.3g，0.2144mol)。將所得混合物在115℃下加熱5小時。將混合物冷卻至室溫並且在減壓下濃縮至乾燥。在室溫下向殘餘物中緩慢添加EtOH(200mL)，並且將所得混合物在75℃下加熱1小時。將懸浮液冷卻至室溫，保持在攪拌下在室溫下過夜，過濾並且將濾餅用PE洗滌，乾燥以得到呈灰白色固體的目標化合物(66g，76%)。
步驟G：(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0163-315
向步驟F的產物(20.4g，50.62mmol)在MeOH/THF(50mL/150mL)中的混合物中添加4N NaOH(63mL，253mmol)。將所得混合物在30℃(內部溫度25℃至30℃)下攪拌過夜。將溶劑在減壓下濃縮(浴溫25℃至30℃)。向殘餘物中添加水(150mL)和2N HCl直至pH=約3。形成懸浮液，過濾並且用水洗滌。收集產物並且從EA(60mL)漿化以得到產物(10g)。將母液用EA萃取。濃縮有機層。將殘餘物用EA(20mL)漿化，得到產物(6.5g)。將濾液濃縮並且將殘餘物用EtOH漿化以得到產物(1.1g將三批產物合併，共得到目標化合物(17.6g，89%)。
化合物A63：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c] 嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0164-317
將中間物-I(137mg，0.35mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(88mg，0.37mmol)、HATU(136.8mg，0.36mmol)和DIPEA(91mg，0.7mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並用EA(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EA=1：2)純化以得到目標化合物(79mg，37.17%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(s,2H),7.95(s,1H),7.35-7.19(m,6H),6.76-6.70(m,5H),3.96-3.94(m,2H),3.70(m,2H),3.59-3.57(m,2H),3.27(s,3H),2.95(m,6H),2.33(s,3H)ppm。MS：M/e 608(M+1)+。
化合物A63a：(S)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0164-318
將(S)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(30mg，0.077mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(22mg，0.09mmol)、HATU(35mg，0.09mmol)和DIPEA(19mg，0.15mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(60mL)中並用EA(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，在真空中濃縮並且通過 柱層析(EA)純化以得到呈白色固體的目標化合物(30mg，64.2%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(s,2H),7.95(s,1H),7.36-7.14(m,6H),6.73(m,5H),3.99-3.91(m,2H),3.69(s,2H),3.59-3.52(m,2H),3.27(s,3H),2.95(m,4H),2.33(s,3H)。MS：M/e 608(M+1)+。
化合物A63b：(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0165-320
將(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(30mg，0.077mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(22mg，0.09mmol)、HATU(35mg，0.09mmol)和DIPEA(19mg，0.15mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(60mL)中並用EA(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，在真空中濃縮並且通過柱層析(EA)純化以得到呈白色固體的目標化合物(31mg，64.2%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(s,2H),7.95(s,1H),7.38-7.11(m,6H),6.73(m,5H),4.00-3.89(m,2H),3.69(s,2H),3.62-3.57(m,2H),3.27(s,3H),2.95(s,4H),2.33(s,3H)。MS：M/e 608(M+1)+。
化合物A64：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7基)-1-(4-(2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0165-319
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.128mmol)、1-(2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(37.3mg，0.128mmol)、HATU(58.3mg，0.154mmol)和DIPEA(33mg，0.256mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(10mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(石油醚/EtOAc=1：2)純化以得到目標化合物(23mg，28.75%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.30(s,1H),8.08(s,2H),7.95(s,1H),7.43-7.11(m,6H),6.85-6.66(m,3H),6.64-6.55(m,1H),4.02(m,2H),3.85-3.55(m,5H),3.26(s,3H),3.15-2.73(m,5H),2.34(s,3H)ppm。MS：M/e 626(M+1)+。
化合物A64a：(S)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0166-321
將(S)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.128mmol)、1-(2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(37.3mg，0.128mmol)、HATU(58.3mg，0.154mmol)和DIPEA(33mg，0.256mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(10mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(石油醚/EtOAc=1：2)純化以得到呈白色固體的目標化合物(30mg，37.5%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.30(s,1H),8.08(s,2H),7.95(s,1H),7.43-7.11(m,6H),6.85-6.66(m,3H),6.64-6.55(m,1H),4.02(m,2H), 3.85-3.55(m,5H),3.26(s,3H),3.15-2.73(m,5H),2.34(s,3H)ppm。MS：M/e 626(M+1)+。
化合物A64b：(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0167-968
將(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.128mmol)、1-(2-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(37.3mg，0.128mmol)、HATU(58.3mg，0.154mmol)和DIPEA(33mg，0.256mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(10mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(石油醚/EtOAc=1：2)純化以得到呈白色固體的目標化合物(30mg，37.5%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.30(s,1H),8.08(s,2H),7.95(s,1H),7.43-7.11(m,6H),6.85-6.66(m,3H),6.64-6.55(m,1H),4.02(m,2H),3.85-3.55(m,5H),3.26(s,3H),3.15-2.73(m,5H),2.34(s,3H)ppm。MS：M/e 626(M+1)+。
化合物A65：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2,5-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0167-323
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.128mmol)、1-(2,5-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(39.5mg，0.128mmol)、HATU(58.3mg，0.154mmol)和DIPEA(33mg，0.256mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(10mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(石油醚/EtOAc=1：2)純化以得到目標化合物(22mg，26.7%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(s,2H),7.95(s,1H),7.38-7.21(m,4H),7.18(d,J=7.2Hz,2H),7.10-7.04(m,1H),6.85-6.67(m,2H),4.17-4.02(m,2H),3.67(m,4H),3.27(s,3H),3.11-2.75(m,5H),2.34(s,3H)ppm。MS：M/e 644(M+1)+。
化合物A65a：(S)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2,5-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0168-324
將(S)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(70mg，0.18mmol)、1-(2,5-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(55.5mg，0.18mmol)、HATU(82mg，0.22mmol)和DIPEA(46mg，0.36mmol)在DMF(5mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(石油醚/EtOAc=1：2)純化以得到呈白色固體的目標化合物(50mg，43.2%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(s,2H),7.95(s, 1H),7.38-7.21(m,4H),7.18(d,J=7.2Hz,2H),7.10-7.04(m,1H),6.85-6.67(m,2H),4.17-4.02(m,2H),3.67(m,4H),3.27(s,3H),3.11-2.75(m,5H),2.34(s,3H)ppm。MS：M/e 644(M+1)+。
化合物A65b：(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2,5-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0169-969
將(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(70mg，0.18mmol)、1-(2,5-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(55.5mg，0.18mmol)、HATU(82mg，0.22mmol)和DIPEA(46mg，0.36mmol)在DMF(5mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(15mL)中並且用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(石油醚/EtOAc=1：2)純化以得到呈白色固體的目標化合物(45mg，38.9%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(s,2H),7.95(s,1H),7.38-7.21(m,4H),7.18(d,J=7.2Hz,2H),7.10-7.04(m,1H),6.85-6.67(m,2H),4.17-4.02(m,2H),3.67(m,4H),3.27(s,3H),3.11-2.75(m,5H),2.34(s,3H)ppm。MS：M/e 644(M+1)+。
化合物A66：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(3-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0169-326
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.128mmol)、1-(3-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(37.3mg，0.128mmol)、HATU(58.3mg，0.154mmol)和DIPEA(33mg，0.256mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(10mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(石油醚/EtOAc=1：2)純化以得到目標化合物(27mg，33.75%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.07(s,2H),7.95(s,1H),7.41-7.13(m,6H),6.93(t,J=9.6Hz,1H),6.78-6.65(m,2H),6.50(d,J=8.8Hz,1H),4.08-3.94(m,2H),3.82-3.55(m,5H),3.14-2.84(m,5H),2.33(s,3H)ppm。 MS：M/e 626(M+1)+。
化合物A66a：(S)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(3-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0170-658
將(S)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(70mg，0.18mmol)、1-(3-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(53mg，0.18mmol)、HATU(82mg，0.22mmol)和DIPEA(46mg，0.36mmol)在DMF(5mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(石油醚/EtOAc=1：2)純化以得到呈白色固體的目標化合物(35mg，31.1%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.07(s,2H),7.95(s,1H), 7.41-7.13(m,6H),6.93(t,J=9.6Hz,1H),6.78-6.65(m,2H),6.50(d,J=8.8Hz,1H),4.08-3.94(m,2H),3.82-3.55(m,5H),3.14-2.84(m,5H),2.33(s,3H)ppm。MS：M/e 626(M+1)+。
化合物A66b：(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(3-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0171-659
將(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(70mg，0.18mmol)、1-(3-氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(53mg，0.18mmol)、HATU(82mg，0.22mmol)和DIPEA(46mg，0.36mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(15mL)中並且用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(石油醚/EtOAc=1：2)純化以得到呈白色固體的目標化合物(38mg，33.8%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.07(s,2H),7.95(s,1H),7.41-7.13(m,6H),6.93(t,J=9.6Hz,1H),6.78-6.65(m,2H),6.50(d,J=8.8Hz,1H),4.08-3.94(m,2H),3.82-3.55(m,5H),3.14-2.84(m,5H),2.33(s,3H)ppm。MS：M/e 626(M+1)+。
化合物A67：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2,3-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0172-660
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.128mmol)、1-(2,3-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(39.5mg，0.128mmol)、HATU(58.3mg，0.154mmol)和DIPEA(33mg，0.256mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(10mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(石油醚/EtOAc=1：2)純化以得到目標化合物(33mg，41%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(s,2H),7.96(s,1H),7.42-7.13(m,6H),6.83(t,J=8.8Hz,1H),6.77-6.71(m,1H),6.56(t,J=8.8Hz,1H),4.12-4.05(m,2H),3.90-3.57(m,5H),3.18-2.78(m,5H),2.34(s,3H)ppm。MS：M/e 644(M+1)+。
化合物A68：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2,4-二氟苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0172-661
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、1-(2,4-二氟苯基)六氫吡嗪(25mg，0.13mmol)、HATU(59mg，0.16mmol)和DIEA(33mg，0.26mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=2：1)和製備 型TLC(DCM：MeOH=20：1)純化以得到所需產物(20mg，28%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(br.s,2H),7.95(d,J=4.0Hz,1H),7.30-7.11(m,7H),6.92-6.86(m,2H),6.74(d,J=4.0Hz,1H),3.71(br.s,2H),3.45-3.40(m,2H),3.16-2.90(m,4H),2.35(s,3H)ppm。MS：M/e 570(M+1)+
化合物A69：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2-氟苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0173-663
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、1-(2-氟苯基)六氫吡嗪(24mg，0.13mmol)、HATU(60mg，0.16mmol)和DIEA(34mg，0.26mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(DCM：MeOH=30：1)純化以得到所需產物(20mg，29%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(br.s,2H),7.95(d,J=4.0Hz,1H),7.31-7.18(m,6H),7.09-6.74(m,5H),3.73-3.39(m,4H),3.16-2.90(m,4H),2.35(s,3H)ppm。MS：M/e 552(M+1)+
化合物A70：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-氟苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0173-662
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7- 基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、1-(4-氟苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(28mg，0.13mmol)、HATU(60mg，0.16mmol)和DIEA(34mg，0.26mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(DCM：MeOH=30：1)和製備型HPLC純化以得到所需產物(16mg，23%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(br.s,2H),7.95(d,J=4.0Hz,1H),7.33-7.18(m,6H),6.96-6.94(m,2H),6.82-6.73(m,3H),3.72-3.36(m,4H),3.17-2.91(m,4H),2.35(s,3H)ppm。MS：M/e 552(M+1)+
化合物A70a：(S)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-氟苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0174-664
將(S)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、1-(4-氟苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(33mg，0.15mmol)、HATU(57mg，0.15mmol)和DIEA(50mg，0.39mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮，並且通過柱層析(PE：EA=1：1至EA)純化以得到呈白色固體的所需產物(32mg，46%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(br.s,2H),7.95(s,1H),7.34-7.18(m,6H),6.97(t,J=8.0Hz,2H),6.82-6.73(m,3H),3.75-3.45(m,4H),3.20-2.80(m,4H),2.34(s,3H)ppm。MS：M/e 552(M+1)+
化合物A70b：(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並 [1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-氟苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0175-665
將(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、1-(4-氟苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(33mg，0.15mmol)、HATU(57mg，0.15mmol)和DIEA(50mg，0.39mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮，並且通過柱層析(PE：EA=1：1至EA)純化以得到呈白色固體的所需產物(35mg，49%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.07(br.s,2H),7.95(s,1H),7.31-7.18(m,6H),6.96-6.93(m,2H),6.82-6.74(m,3H),3.75-3.45(m,4H),3.20-2.80(m,4H),2.34(s,3H)ppm。MS：M/e 552(M+1)+
化合物A71：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(二甲基胺基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0175-666
將N,N-二甲基-2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙-1-胺鹽酸鹽(113mg，0.45mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(177mg，0.45mmol)、HATU(172mg，0.45mmol)和Et3N(92mg，0.9mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入水(20mL)中，並且從體系中沈澱出固體。將固體過濾，並且通過製備型HPLC純化以 得到標題化合物(120mg，產率：42.7%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.32(s,1H),8.09(br.s,2H),7.95(s,1H),7.37-7.27(m,3H),7.24(d,J=4Hz,1H),7.21-7.13(m,2H),6.86-6.72(m,5H),4.19-4.11(m,4H),3.81-3.62(m,2H),3.48-3.39(m,2H),3.09-2.85(m,4H),2.85-2.73(m,6H),2.35-2.28(m,3H)ppm。MS：M/e 621(M+1)+。
通過對掌性製備型HPLC將化合物A71分離成兩種對映體立體異構物化合物A71a(較早的峰)，和化合物71b(較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0176-667
Figure 108125875-A0101-12-0176-668
化合物A72：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-((S)-4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-2-甲基六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0177-670
在室溫下向(S)-1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-3-甲基六氫吡嗪2,2,2-三氟乙酸酯(220mg，0.60mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(105mg，0.27mmol)、DIEA(200mg，1.5mmol)在DMF(4mL)中的混合物中添加HATU(130mg，0.34mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物用20mL EA稀釋，用NaHCO3(水溶液10mL x 2)、鹽水(10mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並濃縮，通過製備型TLC和製備型HPLC純化，得到標題產物(12mg，產率：6%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.36-8.23(m,1H),8.19-7.99(m,2H),7.95(s,1H),7.46-7.09(m,6H),6.83-6.62(m,5H),4.00-3.91(m,2H),3.61-3.49(m,4H),3.27(s,3H),3.08-2.63(m,4H),2.35-2.13(m,4H),1.34-1.08(m,3H)。MS：M/e 622(M+1)+。
化合物A73：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-((R)-4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-3-甲基六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0177-669
在室溫下向(R)-1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-2-甲基六氫吡嗪鹽酸鹽(100mg，0.35mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(88mg，0.23mmol)、DIEA(150mg，1.16mmol)在DMF(3mL)中的混合物中添加HATU(115mg，0.30mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。 將混合物用20mL EA稀釋，用NaHCO3(水溶液10mL x 2)、鹽水(10mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並濃縮，通過製備型TLC和製備型HPLC純化，得到標題產物(32mg，產率：19%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.34(d,J=18.0Hz,1H),8.26-7.99(m,2H),7.96(s,1H),7.39-7.14(m,6H),7.01-6.67(m,5H),4.08-3.90(m,2H),3.88-3.51(m,4H),3.27(d,J=1.6Hz,3H),3.22-2.58(m,4H),2.42-2.13(m,4H),0.96-0.40(m,3H)。MS：M/e 622(M+1)+。
化合物A74：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-((S)-4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-3-甲基六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0178-671
在室溫下向(S)-1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-2-甲基六氫吡嗪鹽酸鹽(100mg，0.35mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(88mg，0.23mmol)、DIEA(150mg，1.16mmol)在DMF(3mL)中的混合物中添加HATU(115mg，0.30mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物用20mL EA稀釋，用NaHCO3(水溶液10mL x 2)、鹽水(10mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並濃縮，通過製備型TLC和製備型HPLC純化，得到標題產物(28mg，產率：17%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.34(d,J=18.0Hz,1H),8.26-8.01(m,2H),7.96(s,1H),7.40-7.06(m,6H),6.96-6.52(m,5H),4.08-3.92(m,2H),3.92-3.45(m,4H),3.27(d,J=2.0Hz,3H),3.23-2.52(m,4H),2.44-2.11(m,4H),0.95-0.27(m,3H)。MS：M/e 622(M+1)+。
化合物A75：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c] 嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(間甲苯基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0179-673
步驟A：2-(間甲苯基)丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0179-672
在-78℃下在N2氣氛下向LDA(在THF中2M，10mL，20mmol)在THF(60mL)中的冷卻溶液中逐滴添加2-(間甲苯基)乙酸甲酯(3g，18mmol)在THF(5mL)中的溶液。添加後，將溶液再攪拌20分鐘，然後逐滴添加CH3I(7.8g，55mmol)。將混合物加溫至室溫保持2小時。TLC顯示反應完成。將反應混合物用水(5mL)淬滅，用乙酸乙酯(30mL)萃取並且用鹽水(20mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=50：1)純化以得到呈無色油狀物的產物(2.6g，81%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.26-7.20(m,1H),7.11-7.07(m,3H),3.70-3.68(m,1H),3.66(s,3H),2.35(s,3H),1.49(d,J=8.0Hz,3H)ppm。
步驟B：2-溴-2-(間甲苯基)丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0180-674
在-78℃下在N2氣氛下向LDA(在THF中2M，3.1mL，6.2mmol)在THF(30mL)中的冷卻溶液中逐滴添加2-(間甲苯基)丙酸甲酯(1g，5.6mmol)在THF(2mL)中的溶液。將溶液再攪拌30分鐘，然後逐滴添加TMSCl(671mg，6.2mmol)。將混合物加溫至室溫保持2小時，然後冷卻至-78℃。分批添加NBS(2g，11.2mmol)，並且將溶液在-78℃下攪拌1小時。使反應混合物經1小時達到室溫，然後用飽和NaHCO3溶液淬滅，並且用乙酸乙酯(20mL)萃取。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=50：1)純化以得到產物(1g，70%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.35-7.19(m,4H),3.79(s,3H),2.37(s,3H),2.29(s,3H)ppm。
步驟C：2-肼基-2-(間甲苯基)丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0180-675
將NH2NH2.H2O(625mg，10mmol)添加至2-溴-2-(間甲苯基)丙酸甲酯(500mg，2mmol)在CH3CN(5mL)中的溶液中。將反應混合物在60℃下加熱1小時。TLC顯示反應完成。將溶液濃縮，添加水(10mL)並且用乙酸乙酯(10mL)萃取。將有機相濃縮，添加HCl/EA(2M，2mL)並且蒸發以得到呈HCl鹽的產物(380mg，80%)。MS：M/e 209(M+1)+
步驟D：2-(6-胺基-4-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(間甲苯基)丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0180-676
將2-肼基-2-(間甲苯基)丙酸甲酯鹽酸鹽(380mg，1.5mmol)和2-胺基-4,6-二氯嘧啶-5-甲醛(300mg，1.5mmol)在CH3CN(10mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜，並且然後在50℃下加熱3小時。將反應混合物蒸發，添加水(10mL)並且用乙酸乙酯(10mL)萃取。將有機相乾燥，濃縮，並且通過柱層析(PE：EA=6：1)進一步純化以得到呈白色固體的所需產物(300mg，56%)。MS：M/e 346(M+1)+
步驟E：2-(6-胺基-4-(2-(呋喃-2-羰基)肼基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(間甲苯基)丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0181-678
將2-(6-胺基-4-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(間甲苯基)丙酸甲酯(300mg，0.87mmol)、呋喃-2-碳醯肼(109mg，0.87mmol)和DIEA(225mg，1.74mmol)在DMSO(10mL)中的混合物在120℃下加熱過夜。在油泵下蒸發溶劑。向殘餘物中添加水(10mL)，漿化並且過濾。將濾餅用水洗滌，乾燥以得到粗產物，將所述粗產物直接用於下一步驟(260mg，68%)。MS：M/e 436(M+1)+
步驟F：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(間甲苯基)丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0181-677
將2-(6-胺基-4-(2-(呋喃-2-羰基)肼基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(間甲苯基)丙酸甲酯(260mg，0.60mmol)在BSA(2mL)和HMDS(2mL)中的溶液在120℃ 下加熱3小時。將溶劑在油泵下蒸發。向殘餘物中添加水(5mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮，並且通過柱層析(PE：EA=5：1)純化以得到呈白色固體的所需產物(110mg，44%)。MS：M/e 418(M+1)+
步驟G：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(間甲苯基)丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0182-679
將NaOH溶液(50mg，1.25mmol，在1mL的水中)添加至2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(間甲苯基)丙酸甲酯(110mg，0.26mmol)在甲醇(5mL)中的溶液中。將溶液在室溫下攪拌過夜。蒸發溶劑。向殘餘物中添加水(5mL)，用2M HCl酸化至pH=2至3。將沈澱的固體過濾並且乾燥以得到呈白色固體的產物(40mg，38%)。MS：M/e 404(M+1)+
步驟H：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(間甲苯基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0182-680
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(間甲苯基)丙酸(25mg，0.06mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(18mg，0.07mmol)、HATU(27mg，0.07mmol)和DIEA(16mg，0.12mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL) 萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過製備型HPLC純化以得到所需產物(12mg，32%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.30(s,1H),8.08(br.s,2H),7.95(s,1H),7.25-7.19(m,2H),7.11(s,1H),7.09(s,1H),6.96(d,J=8.0Hz,1H),6.77-6.74(m,5H),4.30(br.s,4H),3.96(t,J=4.0Hz,2H),3.58(t,J=4.0Hz,2H),3.27(s,3H),2.99(br.s,4H),2.33(s,3H),2.28(s,3H)ppm。MS：M/e 622(M+1)+
化合物A76：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(3-嗎啉代丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0183-681
將4-(3-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)丙基)嗎啉(100mg，0.33mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(100mg，0.26mmol)、HATU(110mg，0.3mmol)和DIEA(100mg，0.78mmol)在DMF(10mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(30mL)中並且用EtOAc(50mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM/MeOH=0至5% MeOH)純化以得到目標化合物(13.5mg，6%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.40(s,1H),8.17(br,2H),8.04(s,1H),7.46-7.32(m,4H),7.31-7.25(m,2H),6.86-6.77(m,5H),3.95(t,J=6.3Hz,2H),3.88-3.71(m,2H),3.66-3.58(m,4H),3.39(s,1H),3.22-2.91(m,4H),2.50-2.36(m,10H),1.93-1.84(m,2H)ppm。MS：M/e 677(M+1)+。
化合物A76a：(S)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(3-嗎啉代丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0184-682
將4-(3-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)丙基)嗎啉(45mg，0.15mmol)、(S)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、HATU(55mg，0.15mmol)和DIEA(50mg，0.39mmol)在DMF(5mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(40mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM/MeOH=0至5% MeOH)純化以得到呈白色固體的目標化合物(34mg，38.6%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.09(br,2H),7.95(d,J=0.9Hz,1H),7.37-7.27(m,3H),7.24(d,J=3.4Hz,1H),7.22-7.14(m,2H),6.76-6.70(m,5H),3.86(t,J=6.3Hz,2H),3.79-3.62(m,2H),3.60-3.49(m,5H),3.11-2.86(m,4H),2.41-2.26(m,10H),1.78(dd,J=13.4,7.0Hz,2H)ppm。MS：M/e 677(M+1)+。
化合物A76b：(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(3-嗎啉代丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0184-683
將4-(3-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)丙基)嗎啉(45mg，0.15mmol)、(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、HATU(55mg，0.15mmol)和DIEA(50mg，0.39mmol)在DMF(5 mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(40mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM/MeOH=0至5% MeOH)純化以得到呈白色固體的目標化合物(26mg，29.5%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(br,2H),7.95(s,1H),7.36-7.27(m,3H),7.24(d,J=3.4Hz,1H),7.22-7.15(m,2H),6.77-6.68(m,5H),3.86(t,J=6.3Hz,3H),3.79-3.62(m,2H),3.61-3.50(m,5H),3.09-2.84(m,4H),2.41-2.25(m,10H),1.85-1.73(m,2H)ppm。MS：M/e 677(M+1)+。
化合物A77：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(3-甲氧基苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0185-684
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.128mmol)、1-(3-甲氧基苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(29.5mg，0.128mmol)、HATU(58.3mg，0.154mmol)和DIPEA(33mg，0.256mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(10mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(石油醚/EtOAc=1：2)純化以得到目標化合物(20mg，27.7%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.07(s,2H),7.95(s,1H),7.37-7.17(m,6H),7.06-7.0(m,1H),6.74(m,1H),6.40-6.27(m,3H),3.86-3.47(m,2H),3.64(s,3H),3.21-2.84(m,4H),2.76-2.55(m,1H),2.34(s,3H)ppm。MS：M/e 564(M+1)+。
化合物A78：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2-甲氧基苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0186-685
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.128mmol)、1-(2-甲氧基苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(29.5mg，0.128mmol)、HATU(58.3mg，0.154mmol)和DIPEA(33mg，0.256mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(10mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(石油醚/EtOAc=1：2)純化以得到目標化合物(23mg，31.9%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.32(d,J=15.4Hz,1H),8.09(s,2H),7.98-7.93(m,1H),7.37-7.17(m,6H),6.97-6.82(m,2H),6.81-6.71(m,2H),6.69-6.62(m,1H),3.89-3.58(m,2H),3.68(s,3H),3.14-2.78(m,4H),2.45-2.17(m,2H),2.34(s,3H)ppm。MS：M/e 564(M+1)+。
化合物A79：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基-1-(4-(4-(3-(吡咯啶-1-基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0186-686
Figure 108125875-A0101-12-0187-687
步驟A：1-(4-(4-(3-(吡咯啶-1-基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0187-688
將1-(4-(4-羥基苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮(1.5g，6.8mmol)、1-(3-氯丙基)吡咯啶(1.0g，6.8mmol)和Cs2CO3(4.4g，13.5mmol)在DMF(20ml)中的混合物在60℃下攪拌15h。完成後，將反應混合物倒入水(30ml)中，並且然後用DCM(20ml * 3)萃取。將合併的有機層用水(20ml)洗滌，用Na2SO4乾燥，然後濃縮以除去溶劑。將殘餘物用MTBE和PE漿化，然後過濾，得到呈白色固體的1-(4-(4-(3-(吡咯啶-1-基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮(1.8g，80%)。MS：M/e 332(M+1)+
步驟B：1-(4-(3-(吡咯啶-1-基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪
Figure 108125875-A0101-12-0187-689
將1-(4-(4-(3-(吡咯啶-1-基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮(1.65g，5.0mmol)在濃HCl(20mL)和H2O(20ml)中的溶液在70℃下攪拌3h。完成後，將反應 混合物用NaOH鹼化至pH=9至10，然後用DCM(25ml * 3)萃取。將合併的有機層用Na2SO4乾燥，過濾，並且然後在減壓下濃縮以得到呈黃色固體的1-(4-(3-(吡咯啶-1-基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪(1.5g，100%)。MS：M/e 290(M+1)+
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基-1-(4-(4-(3-(吡咯啶-1-基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0188-690
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(100mg，0.26mmol)、HATU(108mg，0.28mmol)和DIEA(100mg，0.78mmol)在THF(15ml)中的攪拌溶液中添加1-(4-(3-(吡咯啶-1-基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪(74mg，0.26mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌15h。完成後，將反應混合物用EA(30ml)稀釋，並且然後用H2O(15ml * 2)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，過濾，並且然後在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過製備型TLC用DCM：MeOH(20：1)純化以得到產物(11.3mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(s,2H),7.95(s,1H),7.33-7.18(m,6H),6.74-6.72(m,5H),3.87(t,J=4Hz,2H),3.80-3.52(m,2H),3.33-3.31(m,2H),3.23-2.62(m,6H),2.47-2.35(m,4H),2.33(s,3H),1.85-1.78(m,2H),1.71-1.58(m,4H)ppm。MS：M/e 661(M+1)+。
化合物A79a：(S)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基-1-(4-(4-(3-(吡咯啶-1-基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0189-691
向(S)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、HATU(54mg，0.14mmol)和DIEA(50mg，0.39mmol)在THF(10ml)中的攪拌溶液中添加1-(4-(3-(吡咯啶-1-基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪(37mg，0.13mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌15h。完成後，將反應混合物用EA(30ml)稀釋，並且然後用H2O(15ml * 2)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，過濾，並且然後在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過製備型TLC用DCM：MeOH(20：1)純化以得到呈白色固體的產物(54.9mg，65%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(s,2H),7.96(s,1H),7.33-7.18(m,6H),6.83-6.68(m,5H),3.92(t,J=4Hz,2H),3.83-3.60(m,2H),3.58-3.45(m,3H),3.25-3.18(m,2H),3.10-2.84(m,6H),2.68-2.61(m,1H),2.33(s,3H),2.10-1.92(m,4H),1.90-1.79(m,2H)ppm。MS：M/e 661(M+1)+。
化合物A79b：(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基-1-(4-(4-(3-(吡咯啶-1-基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0189-692
向(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、HATU(54mg，0.14mmol)和DIEA(50mg， 0.39mmol)在THF(10ml)中的攪拌溶液中添加1-(4-(3-(吡咯啶-1-基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪(37mg，0.13mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌15h。完成後，將反應混合物用EA(30ml)稀釋，並且然後用H2O(15ml * 2)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，過濾，並且然後在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過製備型TLC用DCM：MeOH(20：1)純化以得到呈白色固體的產物(49.2mg，58%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(s,2H),7.95(s,1H),7.33-7.18(m,6H),6.79-6.71(m,5H),3.92(t,J=4Hz,2H),3.83-3.60(m,2H),3.58-3.42(m,3H),3.25-3.17(m,2H),3.08-2.85(m,6H),2.70-2.61(m,1H),2.33(s,3H),2.10-1.93(m,4H),1.90-1.80(m,2H)ppm。MS：M/e 661(M+1)+。
化合物A80：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-嗎啉代乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0190-693
步驟A：1-(4-(4-(2-嗎啉代乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0190-694
將1-(4-(4-羥基苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮(5.5g，25mmol)、4-(2-氯乙基)嗎啉(4.5g，25mmol)和Cs2CO3(12g，37mmol)在DMF(150mL)中的混合物攪拌過夜。將混合物傾倒到H2O(150mL)中並用DCM(150mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮得到呈黃色固體的1-(4-(4-(2-嗎啉代乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮(4.5g，粗品)。MS：M/e 334(M+1)+。
步驟B：4-(2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙基)嗎啉
Figure 108125875-A0101-12-0191-696
將1-(4-(4-(2-嗎啉代乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮(1.5g，粗品)和HCl(6N，20mL)的混合物在60℃下攪拌3小時。然後用NaOH水溶液將反應酸化至pH=6至7，並用DCM(50mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮得到呈深紅色固體的4-(3-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)丙基)嗎啉(1.0g，粗品)。MS：M/e 292(M+1)+
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-嗎啉代乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0191-695
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(80mg，0.21mmol)、HATU(88mg，0.23mmol)和DIPEA(80mg，0.62mmol)在THF(10ml)中的攪拌溶液中添加4-(2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙基)嗎啉(80mg，0.26mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌16h。完成後，將反應 混合物用EA(30ml)稀釋，並且然後用H2O(15ml * 2)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，過濾，並且然後在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過製備型TLC用DCM：MeOH(20：1)純化以得到產物(12.4mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(s,2H),7.95(s,1H),7.38-7.26(m,3H),7.24(d,J=4Hz,1H),7.20(d,J=8Hz,2H),6.80-6.69(m,5H),3.94(t,J=4Hz,2H),3.87-3.50(m,6H),3.33-3.31(m,1H),3.11-2.82(m,4H),2.65-2.63(m,1H),2.62-2.55(t,J=4Hz,2H),2.45-2.42(m,4H),2.33(s,3H)ppm。MS：M/e 663(M+1)+。
化合物A80a：(S)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-嗎啉代乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0192-697
將4-(2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙基)嗎啉(50mg，0.17mmol)、(S)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、HATU(55mg，0.15mmol)和DIPEA(50mg，0.39mmol)在DMF(5mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(40mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM/MeOH=0至5% MeOH)純化以得到目標化合物(18mg，20.9%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.07(br.s,2H),7.95(s,1H),7.36-7.26(m,3H),7.24(d,J=2.9Hz,1H),7.22-7.14(m,2H),6.80-6.67(m,5H),3.94(t,J=5.8Hz,2H),3.81-3.63(m,1H),3.59-3.49(m,4H),3.30(s,1H),2.95(s,4H),2.60(t,J=5.8Hz,2H),2.46-2.37(m,5H),2.36-2.25(m,4H)ppm。MS：M/e 663 (M+1)+。
化合物A80b：(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-嗎啉代乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0193-698
將4-(2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙基)嗎啉(45mg，0.15mmol)、(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、HATU(55mg，0.15mmol)和DIPEA(50mg，0.39mmol)在DMF(5mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(40mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM/MeOH=0至5% MeOH)純化以得到目標化合物(10.6mg，12.3%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(br.s,2H),7.95(s,1H),7.37-7.26(m,3H),7.24(d,J=3.4Hz,1H),7.22-7.12(m,2H),6.80-6.69(m,5H),3.94(t,J=5.8Hz,2H),3.82-3.61(m,1H),3.59-3.50(m,4H),3.30(s,1H),3.12-2.80(m,4H),2.60(t,J=5.8Hz,2H),2.47-2.38(m,5H),2.33(s,4H)ppm。MS：M/e 663(M+1)+。
化合物A81：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(4-甲基六氫吡嗪-1-基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0194-700
步驟A：4-(4-(2-(4-甲基六氫吡嗪-1-基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0194-699
將DIAD(2.6g，13mmol)逐滴添加到4-(4-羥基苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(3g，11mmol)、2-(4-甲基六氫吡嗪-1-基)乙-1-醇(2.3g，16mmol)和PPh3(4.3g，16mmol)在THF(50mL)中的溶液中。將所得混合物在室溫下攪拌過夜。向溶液中添加水(20mL)，用乙酸乙酯(30mL)萃取並且用鹽水(20mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM：MeOH=20：1)純化以得到呈無色油狀物的所需產物(3.3g，75%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 6.90-6.81(m,4H),3.98(t,J=8.0Hz,2H),3.44(t,J=4.0Hz,4H),2.94(t,J=4.0Hz,4H),2.63(t,J=8.0Hz,2H),2.46-2.30(m,8H),2.13(s,3H),1.41(s,9H)ppm。MS：M/e 405(M+1)+
步驟B：1-甲基-4-(2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙基)六氫吡嗪鹽酸鹽
Figure 108125875-A0101-12-0194-701
將HCl/EA溶液(2M，5mL)添加到4-(4-(2-(4-甲基六氫吡嗪-1-基)乙氧基)苯基) 六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(3.3g，8.2mmol)在EA(20mL)中的溶液中。立即沈澱出白色固體。將混合物在室溫下攪拌過夜。過濾白色固體，用乙酸乙酯(10mL)洗滌並乾燥，得到呈HCl鹽的產物(3.5g，96%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 12.13(br.s,1H),9.46(s,2H),7.06-6.97(m,4H),5.84(br.s,4H),4.38(d,J=4.0Hz,2H),3.82-3.53(m,10H),3.32-3.23(m,8H),2.82(s,3H)ppm。MS：M/e 305(M+1)+
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(4-甲基六氫吡嗪-1-基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0195-702
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、1-甲基-4-(2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙基)六氫吡嗪鹽酸鹽(72mg，0.16mmol)、HATU(61mg，0.16mmol)和DIPEA(34mg，0.26mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM：MeOH=15：1)純化以得到所需產物(40mg，46%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(br.s,2H),7.95(s,1H),7.31-7.18(m,6H),6.75-6.70(m,5H),3.94(t,J=8.0Hz,2H),3.70(br.s,2H),2.94(br.s,4H),2.64-2.51(m,9H),2.49-2.30(m,9H)ppm。MS：M/e 676(M+1)+
化合物A82：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(3-(4-甲基六氫吡嗪-1-基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0196-703
步驟A：4-(4-(3-(4-甲基六氫吡嗪-1-基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0196-704
將DLAD(2.6g，13mmol)逐滴添加到4-(4-羥基苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(3g，11mmol)、3-(4-甲基六氫吡嗪-1-基)丙-1-醇(2.5g，16mmol)和PPh3(4.3g，16mmol)在THF(50mL)中的溶液中。將所得混合物在室溫下攪拌過夜。向溶液中添加水(20mL)，用乙酸乙酯(30mL)萃取並且用鹽水(20mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM：MeOH=15：1)純化以得到呈無色油狀物的所需產物(3.5g，78%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 6.88(d,J=8.0Hz,2H),6.81(d,J=8.0Hz,2H),3.90(t,J=8.0Hz,2H),3.44(t,J=4.0Hz,4H),2.94(t,J=4.0Hz,4H),2.38-2.30(m,10H),2.14(s,3H),1.82-1.79(m,2H),1.41(s,9H)ppm。MS：M/e 419(M+1)+
步驟B：1-甲基-4-(3-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)丙基)六氫吡嗪鹽酸鹽
Figure 108125875-A0101-12-0197-706
將HCl/EA溶液(2M，5mL)添加到4-(4-(3-(4-甲基六氫吡嗪-1-基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(3.5g，8.4mmol)在EA(20mL)中的溶液中。立即沈澱出白色固體。將混合物在室溫下攪拌過夜，並且TLC顯示反應完成。過濾白色固體，用乙酸乙酯(10mL)洗滌並乾燥，得到呈HCl鹽的產物(3.8g，100%)。MS：M/e 319(M+1)+
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(3-(4-甲基六氫吡嗪-1-基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0197-705
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、1-甲基-4-(3-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)丙基)六氫吡嗪鹽酸鹽(74mg，0.16mmol)、HATU(61mg，0.16mmol)和DIPEA(34mg，0.26mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM：MeOH=15：1)純化以得到所需產物(35mg，40%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(br.s,2H),7.95(s,1H),7.33-7.18(m,6H),6.75-6.72(m,5H),3.86(t,J=8.0Hz,2H),3.69(br.s,2H),2.94(br.s,4H),2.67-2.50(m,9H),2.45-2.33(m,9H),1.80(s,2H)ppm。MS：M/e 690(M+1)+
化合物A83：4-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並 [1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)-N-((3-羥基氧雜環丁烷-3-基)甲基)苯甲醯胺
Figure 108125875-A0101-12-0198-707
步驟A：4-(4-(甲氧基羰基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0198-708
向六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(1.0g，4.6mmol)和4-溴苯甲酸甲酯(0.85g，4.6mmol)在甲苯(30mL)中的溶液中添加x-phose(421mg，0.46mmol)、Pd(dba)2(438g，0.92mmol)和Cs2CO3(3.0g，9.2mmol)並將混合物在120℃下加熱2小時。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=2：1至1：2)純化以得到呈黃色固體的目標化合物(600mg，40.6%)。MS：M/e 321(M+1)+。
步驟B：4-(六氫吡嗪-1-基)苯甲酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0199-710
向4-(4-(甲氧基羰基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(600mg，1.9mmol)在EA(20mL)中的溶液中添加HCl/EA(20mL，4M)，並將混合物在室溫下攪拌過夜。過濾反應混合物，收集濾餅，乾燥，得到呈黃色固體的目標化合物(400mg，82.2%)。MS：M/e 221(M+1)+。
步驟C：4-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯甲酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0199-709
將步驟B的產物(80mg，0.32mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(100mg，0.26mmol)、HATU(100mg，0.26mmol)和DIEA(100mg，0.78mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(50mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到呈黃色固體的目標化合物(100mg，65%)。MS：M/e 592(M+1)+。
步驟D：4-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯甲酸
Figure 108125875-A0101-12-0200-711
向4-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯甲酸甲酯(100mg，0.17mmol)在MeOH/H2O(4mL/1mL)中的攪拌混合物中添加NaOH水溶液(4.0M，1mL)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。去除大部分溶劑以得到水層，然後用HCl水溶液酸化至pH=3至4並且過濾，收集濾餅，乾燥以得到呈白色固體的目標化合物(80mg，81.4%)。MS：M/e 578(M+1)+。
步驟E：4-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)-N-((3-羥基氧雜環丁烷-3-基)甲基)苯甲醯胺
Figure 108125875-A0101-12-0200-712
將步驟D的產物(40mg，0.07mmol)、3-(胺基甲基)氧雜環丁-3-醇(20mg，0.19mmol)、HATU(40mg，0.1mmol)和DIEA(30mg，0.23mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(50mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到呈黃色固體的目標化合物(20mg，43.1%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.32(s,1H),8.30(br,1H),8.08(br,2H), 7.96-7.93(m,1H),7.69(d,J=8.9Hz,2H),7.36-7.16(m,6H),6.82(d,J=9.0Hz,2H),6.74(dd,J=3.4,1.8Hz,1H),5.85(br,1H),4.45(d,J=6.5Hz,2H),4.34(d,J=6.5Hz,2H),3.83-3.56(m,2H),3.50(d,J=6.0Hz,2H),3.30(s,1H),3.27-3.14(m,2H),3.12-2.91(m,2H),2.86-2.72(m,1H),2.34(s,3H)ppm。MS：M/e 663(M+1)+。
化合物A84：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丁-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0201-714
步驟A：2-肼基-2-苯基丁酸甲酯鹽酸鹽
Figure 108125875-A0101-12-0201-713
向2-溴-2-苯基丁酸甲酯(2g，7.8mmol)和K2CO3(2.16mg，15.7mmol)在DMF(20ml)中的攪拌溶液中添加水合肼(1.95g，31.2mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌24h。完成後，將反應混合物倒入水(30ml)中，然後將其用EA(30ml X 3)萃取。將合併的有機層在減壓下濃縮以去除溶劑。將殘餘物用EA(50ml)稀釋， 並且然後用H2O(25ml x 2)洗滌以去除水合肼。將所得有機溶液濃縮以得到殘餘物。將殘餘物用HCl水溶液(4M)酸化，並且然後用EA(25ml X 2)洗滌以去除易溶於EA中的雜質。將水溶液在減壓下濃縮並且乾燥以得到呈白色固體的產物(1.0g，52.6%)，將所述產物不經進一步純化直接用於下一步驟。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 7.41(d,J=4Hz,4H),7.39-7.35(m,1H),3.72(s,3H),2.21-2.14(m,2H),0.74(t,J=8Hz,3H)ppm。MS：M/e 209(M+1)+。
步驟B：2-(6-胺基-4-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-苯基丁酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0202-716
向2-肼基-2-苯基丁酸甲酯鹽酸鹽(1g，4.09mmol)在乙腈(30ml)中的攪拌溶液中添加2-胺基-4,6-二氯嘧啶-5-甲醛(0.94g，4.90mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌15h，並且然後加熱至60℃，將其在60℃下攪拌2h。完成後，將反應混合物過濾。將濾液在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過柱層析用PE：EA(4：1)純化以得到呈黃色固體的產物(0.55g，39%)。MS：M/e 346(M+1)+。
步驟C：2-(6-胺基-4-(2-(呋喃-2-羰基)肼基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-苯基丁酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0202-715
將2-(6-胺基-4-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-苯基丁酸甲酯(0.55g，1.59mmol)、呋喃-2-碳醯肼(0.20g，1.59mmol)和DIEA(0.41g，3.18mmol)在DMSO(15 ml)中的溶液在110℃下攪拌15h。完成後，將反應混合物倒入H2O(15ml)中，並且然後用EA(20ml X 3)萃取。將合併的有機層用Na2SO4乾燥，過濾，並且然後在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過柱層析用PE：EA(1：2)純化以得到呈淺黃色固體的產物(0.57g，82%)。MS：M/e 436(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丁酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0203-717
將2-(6-胺基-4-(2-(呋喃-2-羰基)肼基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-苯基丁酸甲酯(0.57g，1.31mmol)在BSA(5ml)和HMDS(5ml)中的溶液在110℃下攪拌15h。完成後，將反應混合物濃縮。將殘餘物用NaHCO3水溶液(飽和，15ml)稀釋，並且然後用EA(20ml X 3)萃取。將合併的有機層用Na2SO4乾燥，過濾，並且然後在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過柱層析用PE：EA(10：1)純化以得到呈黃色固體的產物(0.28g，51%)。MS：M/e 418(M+1)+。
步驟E：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丁酸
Figure 108125875-A0101-12-0203-718
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丁酸甲酯(0.28g，0.67mmol)在乙醇(15ml)中的攪拌溶液中添加 NaOH(0.27g，6.75mmol)在H2O(5ml)中的溶液。將混合物在70℃下攪拌4h。完成後，將反應混合物濃縮以去除乙醇。將殘餘物用H2O(15ml)稀釋，並且然後用HCl水溶液(4M)酸化至pH=3至4。將沈澱物過濾。將濾餅用H2O(15ml)洗滌，並且然後乾燥以得到呈白色固體的產物(0.25g，92%)。MS：M/e 404(M+1)+。
步驟F：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丁-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0204-719
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丁酸(0.12g，0.30mmol)、HATU(0.12g，0.33mmol)和DIEA(0.12g，0.89mmol)在THF(10ml)中的攪拌溶液中添加1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(70mg，0.30mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌15h。完成後，將反應混合物用EA(30ml)稀釋，並且然後用H2O(15ml X 2)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，過濾，並且然後在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過製備型TLC用PE：EA(1：5)純化以得到產物(35.9mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.35(s,1H),8.07(s,2H),7.95(s,1H),7.44(d,J=4Hz,2H),7.38(d,J=4Hz,2H),7.34-7.22(m,2H),6.77-6.65(m,5H),3.94(t,J=4Hz,2H),3.56(t,J=4Hz,2H),3.51-3.40(m,2H),3.26(s,3H),3.15-2.86(m,3H),2.77(q,2H),2.70-2.63(m,1H),2.60-2.51(m,2H),0.63(t,J=8Hz,3H)ppm。MS：M/e 622(M+1)+。
化合物A85：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基-1-(4-(4-(3-(六氫吡啶-1-基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1- 酮
Figure 108125875-A0101-12-0205-720
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(70mg，0.18mmol)、HATU(75mg，0.20mmol)和DIEA(70mg，0.54mmol)在THF(10ml)中的攪拌溶液中添加1-(4-(3-(六氫吡啶-1-基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪(55mg，0.18mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌15h。完成後，將反應混合物用EA(30ml)稀釋，並且然後用H2O(15ml X 2)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，過濾，並且然後在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過製備型TLC用DCM：MeOH(10：1)純化以得到產物(33.4mg，28%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(s,2H),7.95(s,1H),7.35-7.27(m,3H),7.25(d,J=4Hz,1H),7.20(d,J=8Hz,2H),6.75-6.70(m,5H),3.85(t,J=4Hz,2H),3.78-3.52(m,2H),3.31-3.29(m,2H),3.10-2.85(m,4H),2.33(s,3H),1.86-1.76(m,2H),1.52-1.34(m,7H),1.24-1.06(m,5H)ppm。MS：M/e 675(M+1)+。
化合物A86：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3-氟苯基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0205-721
Figure 108125875-A0101-12-0206-722
步驟A：2-(3-氟苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0206-970
在0℃下向2-(3-氟苯基)乙酸(5g，32.47mmol)在MeOH(15mL)中的溶液中逐滴添加氯化亞碸(5.80g，48.70mmol)，添加後，將反應混合物在室溫下攪拌3h。將混合物濃縮，用冰水(20mL)淬滅，用EtOAc(30mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=20：1至5：1)純化以得到呈黃色油狀物的2-(3-氟苯基)乙酸甲酯(5.12g，93.87%)。MS：M/e 169(M+1)+。
步驟B：2-(3-氟苯基)丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0206-724
在-78℃下，向LDA(44.64mmol)在THF(20mL)中的溶液中逐滴添加2-(3-氟苯基)乙酸甲酯(5g，29.76mmol)。添加後，將反應混合物緩慢加溫至室溫並攪拌2h。然後在-40℃下向反應混合物中添加碘甲烷(12.68g，89.29mmol)。添加後，將反應混合物緩慢加溫至室溫並攪拌2h。將混合物用冰水(20mL)淬滅，用EtOAc(30mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=20：1至5：1)純化以得到呈黃色油狀物的2-(3-氟苯 基)丙酸甲酯(4.12g，76.07%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.30-7.25(m,1H),7.07(d,J=7.7Hz,1H),7.02(d,J=9.9Hz,1H),6.95(td,J=8.4,1.7Hz,1H),3.67(s,3H),1.50(d,J=7.2Hz,3H)。MS：M/e 183(M+1)+。
步驟C：2-溴-2-(3-氟苯基)丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0207-726
將2-(3-氟苯基)丙酸甲酯(4.12g，22.64mmol)、NBS(4.84g，27.16mmol)、BPO(0.274g，1.132mmol)在四氯化碳(20mL)中的混合物在70℃下攪拌過夜。將混合物濃縮，將殘餘物用PE洗滌並且過濾，將濾液濃縮以得到呈黃色油狀物的2-溴-2-(3-氟苯基)丙酸甲酯(5.32g，90.38%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.34-7.28(m,1H),7.07(d,J=7.7Hz,1H),7.02(d,J=9.3Hz,1H),6.95(td,J=8.4,2.3Hz,1H),3.81(s,3H),2.29(s,3H)。
步驟D：2-(3-氟苯基)-2-肼基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0207-725
將2-溴-2-(3-氟苯基)丙酸甲酯(5.32g，20.46mmol)、水合肼(4.84g，81.85mmol)在CH3CN(20mL)中的混合物在60℃下攪拌過夜。將混合物用EtOAc(30mL x 3)萃取。將合併的有機層用水(10mL x 3)和鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮以得到呈棕色油狀物的2-(3-氟苯基)-2-肼基丙酸甲酯(3.10g，71.46%)。MS：M/e 213(M+1)+。
步驟E：2-(6-胺基-4-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(3-氟苯基)丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0208-727
將2-(3-氟苯基)-2-肼基丙酸甲酯(3.10g，14.62mmol)、2-胺基-4,6-二氯嘧啶-5-甲醛(2.79g，14.62mmol)在CH3CN(20mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜，然後加溫至70℃並且攪拌2h。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=10：1至2：1)純化以得到呈黃色固體的產物(4.03g，78.97%)。MS：M/e 350(M+1)+。
步驟F：2-(6-胺基-4-(2-(呋喃-2-羰基)肼基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(3-氟苯基)丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0208-728
將2-(6-胺基-4-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(3-氟苯基)丙酸甲酯(4.03g，11.55mmol)、呋喃-2-碳醯肼(1.75g，13.86mmol)、DIPEA(2.98g，23.09mmol)在DMSO(5mL)中的混合物在120℃下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=10：1至1：1)純化以得到呈黃色固體的產物(4.39g，86.60%)。MS：M/e 440(M+1)+。
步驟G：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3-氟苯基)丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0209-730
將2-(6-胺基-4-(2-(呋喃-2-羰基)肼基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(3-氟苯基)丙酸甲酯(4.39g，9.95mmol)、(E)-N-(三甲基甲矽烷基)乙醯亞胺三甲基甲矽烷基酯(3mL)、六甲基二矽氮烷(HMDS，3mL)的混合物在120℃下攪拌過夜。將反應混合物濃縮，在50℃下在MeOH(10mL)和水(2mL)中攪拌1h。然後濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=10：1至1：1)純化以得到呈白色固體的產物(3.75g，89.5%)。MS：M/e 422(M+1)+。
步驟H：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3-氟苯基)丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0209-729
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3-氟苯基)丙酸甲酯(3.75g，8.91mmol)、氫氧化鋰(3.74g，89.07mmol)在MeOH(5mL)和水(2mL)中的混合物在50℃下攪拌過夜。將反應混合物用鹽酸酸化，用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=10：1至1：2)純化以得到呈白色固體的產物(3.45g，95.16%)。MS：M/e 408(M+1)+。
步驟G：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3-氟苯基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0210-731
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(3-氟苯基)丙酸(3.45g，8.48mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(2.40g，10.17mmol)、HATU(4.83g，12.71mmol)、DIPEA(3.28g，25.43mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM/MeOH=40：1至10：1)純化以得到呈白色固體的產物(3.75g，70.78%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.36(s,1H),8.13(s,2H),7.97-7.94(m,1H),7.33(dd,J=14.6,8.2Hz,1H),7.24(dd,J=3.4,0.7Hz,1H),7.12(td,J=8.3,2.1Hz,1H),7.05(d,J=11.1Hz,1H),6.88(d,J=8.2Hz,1H),6.84(s,1H),6.80(d,J=7.9Hz,3H),6.74(dd,J=3.4,1.8Hz,1H),4.00-3.94(m,3H),3.88-3.64(m,2H),3.62-3.56(m,3H),3.27(s,3H),3.18-2.65(m,6H),2.38(s,3H)。MS：M/e 626(M+1)+。
化合物A87：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-氟苯基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0210-732
Figure 108125875-A0101-12-0211-733
步驟A：2-(2-氟苯基)乙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0211-734
在0℃下向2-(2-氟苯基)乙酸(5g，32.47mmol)在MeOH(15mL)中的溶液中逐滴添加氯化亞碸(5.80g，48.70mmol)，添加後，將反應混合物在室溫下攪拌3h。將混合物濃縮，用冰水(20mL)淬滅，用EtOAc(30mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=20：1至5：1)純化以得到呈黃色油狀物的2-(2-氟苯基)乙酸甲酯(5.23g，95.88%)。MS：M/e 169(M+1)+。
步驟B：2-(2-氟苯基)丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0211-735
在-78℃下，向LDA(44.64mmol)在THF(20mL)中的溶液中逐滴添加2-(2-氟苯基)乙酸甲酯(5g，29.76mmol)。添加後，將反應混合物緩慢加溫至室溫並攪拌2h。然後在-40℃下向反應混合物中添加碘甲烷(12.68g，89.29mmol)。添加後，將反應混合物緩慢加溫至室溫並攪拌2h。將混合物用冰水(20mL)淬滅，用EtOAc(30mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且 通過柱層析(石油醚/EtOAc=20：1至5：1)純化以得到呈黃色油狀物的2-(2-氟苯基)丙酸甲酯(4.33g，79.94%)。MS：M/e 183(M+1)+。
步驟C：2-溴-2-(2-氟苯基)丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0212-737
將2-(2-氟苯基)丙酸甲酯(4.33g，23.79mmol)、NBS(5.08g，28.55mmol)、BPO(0.288g，1.190mmol)在四氯化碳(20mL)中的混合物在70℃下攪拌過夜。將混合物濃縮，將殘餘物用PE洗滌並且過濾，將濾液濃縮以得到呈黃色油狀物的2-溴-2-(2-氟苯基)丙酸甲酯(5.66g，91.50%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.76(td,J=8.1,1.6Hz,1H),7.37-7.30(m,1H),7.19(td,J=7.7,1.1Hz,1H),7.03(ddd,J=11.4,8.2,1.1Hz,1H),3.80(s,3H),2.25(s,3H)。
步驟D：2-(2-氟苯基)-2-肼基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0212-736
將2-溴-2-(2-氟苯基)丙酸甲酯(5.66g，21.77mmol)、水合肼(5.14g，87.08mmol)在CH3CN(20mL)中的混合物在60℃下攪拌過夜。將混合物用EtOAc(30mL x 3)萃取。將合併的有機層用水(10mL x 3)和鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮以得到呈棕色油狀物的2-(2-氟苯基)-2-肼基丙酸甲酯(2.95g，63.92%)。MS：M/e 213(M+1)+。
步驟E：2-(6-胺基-4-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(2-氟苯基)丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0213-738
將2-(2-氟苯基)-2-肼基丙酸甲酯(2.95g，13.92mmol)、2-胺基-4,6-二氯嘧啶-5-甲醛(2.69g，13.91mmol)在CH3CN(20mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜，然後加溫至70℃並且攪拌2h。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=10：1至2：1)純化以得到呈黃色固體的2-(6-胺基-4-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(2-氟苯基)丙酸甲酯(3.56g，73.33%)。MS：M/e 350(M+1)+。
步驟F：2-(6-胺基-4-(2-(呋喃-2-羰基)肼基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(2-氟苯基)丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0213-739
將2-(6-胺基-4-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(2-氟苯基)丙酸甲酯(3.56g，10.20mmol)、呋喃-2-碳醯肼(1.54g，12.24mmol)、DIPEA(2.63g，20.28mmol)在DMSO(5mL)中的混合物在120℃下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=10：1至1：1)純化以得到呈黃色固體的2-(6-胺基-4-(2-(呋喃-2-羰基)肼基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(2-氟苯基)丙酸甲酯(3.95g，88.21%)。MS：M/e 440(M+1)+。
步驟G：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7- 基)-2-(2-氟苯基)丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0214-741
將2-(6-胺基-4-(2-(呋喃-2-羰基)肼基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(2-氟苯基)丙酸甲酯(3.95g，8.997mmol)、(E)-N-(三甲基甲矽烷基)乙醯亞胺三甲基甲矽烷基酯(3mL)、HMDS(3mL)的混合物在120℃下攪拌過夜。將反應混合物濃縮，在50℃下在MeOH(10mL)和水(2mL)中攪拌1h。然後濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=10：1至1：1)純化以得到呈白色固體的2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-氟苯基)丙酸甲酯(3.30g，87.12%)。MS：M/e 422(M+1)+。
步驟H：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-氟苯基)丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0214-740
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-氟苯基)丙酸甲酯(3.30g，7.838mmol)、氫氧化鋰(3.14g，78.38mmol)在MeOH(5mL)和水(2mL)中的混合物在50℃下攪拌過夜。將反應混合物用鹽酸酸化，用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=10：1至1：2)純化以得到呈白色固體的2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-氟苯基)丙酸(2.87g，89.74%)。MS：M/e 408(M+1)+。
步驟G：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-氟苯基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0215-742
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-氟苯基)丙酸(2.87g，7.052mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(2.00g，8.462mmol)、HATU(4.02g，10.58mmol)、DIPEA(2.73g，21.15mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM/MeOH=40：1至10：1)純化以得到呈白色固體的產物(3.45g，78.16%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.09(s,2H),7.95(s,1H),7.39(dd,J=12.6,7.0Hz,1H),7.25(q,J=8.4Hz,2H),7.10(t,J=7.5Hz,1H),6.78-6.66(m,6H),3.96(m,2H),3.72(s,8H),3.58(m,2H),3.27(s,3H),2.44(s,3H)。MS：M/e 626(M+1)+。
化合物A88：3-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)-N,N-二甲基苯甲醯胺
Figure 108125875-A0101-12-0215-743
Figure 108125875-A0101-12-0216-744
步驟A：3-(六氫吡嗪-1-基)苯甲酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0216-745
向3-(六氫吡嗪-1-基)苯甲酸(1g，4.85mmol)在MeOH(10mL)中的攪拌溶液中逐滴添加SOCl2(1.15g，9.76mmol)。添加後，將反應混合物在60℃下攪拌過夜。除去大部分溶劑，得到殘餘物，將其用EtOAc/K2CO3水溶液處理，並用EtOAc(30mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮以得到呈無色油狀物的目標化合物(0.5g，46.8%)。MS：M/e 221(M+1)+。
步驟B：3-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯甲酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0216-746
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(300mg，0.77mmol)、步驟A的產物(170mg，0.77mmol)、HATU(353mg，0.92mmol)和DIPEA(199mg，1.54mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(15mL)中並用鹽水萃取，用Na2SO4乾燥，濃縮並通過柱層析(石油醚/EtOAc=4：1至1：1)純化，得到呈白色固體的目標化 合物(412mg，90.5%)。MS：M/e 592(M+1)+。
步驟C：3-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並]4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯甲酸
Figure 108125875-A0101-12-0217-748
向步驟C的產物(410mg，0.69mmol)在MeOH(10mL)中的攪拌溶液中添加NaOH水溶液(2.0M，10mL)。添加後，將反應攪拌過夜。除去大部分MeOH，得到水層，將水層用HCl水溶液酸化至pH=3至4並用EtOAc(30mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，並濃縮以得到呈白色固體的目標化合物(350mg，87.9%)。MS：M/e 578(M+1)+。
步驟D：3-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)-N,N-二甲基苯甲醯胺
Figure 108125875-A0101-12-0217-747
將步驟C的產物(50mg，0.087mmol)、二甲胺鹽酸鹽(7.1mg，0.087mmol)、HATU(40mg，0.104mmol)和DIPEA(22.4mg，0.174mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中然後用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(CH2Cl2/MeOH=10：1)純化以得到呈白色固體的目標化合物(21mg，40%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.32(s,1H),8.07(s,2H),7.95(s,1H),7.38-7.14(m,7H),6.85(d,J=8.4Hz,1H),6.77-6.68(m,3H),3.89-3.56(m,2H),325-2.95 (m,4H),2.91(s,3H),2.80(s,3H),2.76-2.56(m,2H),2.34(s,3H)ppm。MS：M/e 605(M+1)+。
化合物A89：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基-1-(4-(3-(六氫吡啶-1-羰基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0218-749
將3-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯甲酸(50mg，0.087mmol)、六氫吡啶(7.4mg，0.087mmol)、HATU(40mg，0.104mmol)和DIPEA(22.4mg，0.174mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中然後用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(PE/EA=1：2)純化以得到目標化合物(27mg，48.1%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.32(s,1H),8.07(s,2H),7.95(s,1H),7.40-7.13(m,7H),6.84(d,J=8.4Hz,1H),6.75-6.72(m,1H),6.70-6.63(m,2H),3.86-3.42(m,4H),3.26-2.86(m,6H),2.34(s,3H),1.64-1.21(m,8H)ppm。MS：M/e 645(M+1)+。
化合物A90：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基-1-(4-(3-(環己胺基羰基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0218-750
將3-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯甲酸(50mg，0.087mmol)、環己胺(8.6mg， 0.087mmol)、HATU(40mg，0.104mmol)和DIPEA(22.4mg，0.174mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中然後用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(EA)純化以得到目標化合物(28mg，48.8%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.32(s,1H),8.08(s,2H),8.01(d,J=8.0Hz,1H),7.95(s,1H),7.40-7.15(m,9H),6.95-6.86(m,1H),6.77-6.71(m,1H),3.80-3.62(mz,2H),3.26-2.92(m,4H),2.85-2.59(m,2H),2.35(s,3H),1.75(m,4H),1.66-1.53(m,1H),1.38-1.18(m,5H),1.19-1.03(m,1H)ppm。MS：M/e 659(M+1)+。
化合物A91：3-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)-N-((3-羥基氧雜環丁烷-3-基)甲基)苯甲醯胺
Figure 108125875-A0101-12-0219-751
將3-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯甲酸(50mg，0.087mmol)、3-(胺基甲基)氧雜環丁烷-3-醇(8.9mg，0.087mmol)、HATU(40mg，0.104mmol)和DIPEA(22.4mg，0.174mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中然後用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(CH2Cl2/MeOH=10：1)純化以得到目標化合物(27mg，46.9%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.47(t,J=6.0Hz,1H),8.32(s,1H),8.08(s,2H),7.95(s,1H),7.39-7.17(m,9H),6.97-6.92(m,1H),6.76-6.71(m,1H), 5.83(s,1H),4.45(d,J=6.4Hz,2H),4.36(d,J=6.4Hz,2H),3.86-3.58(m,2H),3.51(d,J=6.0Hz,2H),3.26-2.86(m,4H),2.85-2.62(m,2H),2.35(s,3H)ppm。MS：M/e 663(M+1)+。
化合物A92：4-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)-N-甲基苯甲醯胺
Figure 108125875-A0101-12-0220-752
將4-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯甲酸(40mg，0.07mmol)、甲胺鹽酸鹽(20mg，0.30mmol)、HATU(40mg，0.1mmol)和DIEA(30mg，0.23mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(50mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到呈黃色固體的目標化合物(8.5mg，20.5%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.32(s,1H),8.09(br,3H),7.95(d,J=0.9Hz,1H),7.63(d,J=8.9Hz,2H),7.38-7.15(m,6H),6.80(d,J=8.9Hz,2H),6.74(dd,J=3.4,1.8Hz,1H),3.87-3.54(m,2H),3.28-3.13(m,3H),3.10-2.92(m,2H),2.71(d,J=4.4Hz,4H),2.34(s,3H)ppm。MS：M/e 591(M+1)+。
化合物A93：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(2-甲氧基苯基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0221-753
步驟A：2-(2-甲氧基苯基)丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0221-754
在-78℃下在N2下向2-(2-甲氧基苯基)乙酸甲酯(5.0g，27.7mmol)在60mL的THF中的攪拌溶液中添加LDA(15mL，2.0M)。將所得混合物攪拌30min。逐滴添加MeI(12.0g，84.5mmol)。將反應混合物加溫至室溫並且攪拌5小時。將混合物用50mL的H2O淬滅，用EA(50mL x 3)萃取。將有機萃取物合併，用鹽水(50mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮。將殘餘物通過柱層析純化以得到呈淺黃色油狀物的標題產物(4.9g，91%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.27-7.16(m,2H),6.97-6.91(m,1H),6.87(d,J=8.0Hz,1H),4.05(q,J=7.2Hz,1H),3.82(s,3H),3.65(s,3H),1.45(d,J=7.2Hz,3H)。
步驟B：2-溴-2-(2-甲氧基苯基)丙酸甲酯。
Figure 108125875-A0101-12-0222-756
在-78℃下在N2下向2-(2-甲氧基苯基)丙酸甲酯(2.9g，14.9mmol)在30mL的THF中的攪拌溶液中添加LDA(8.5mL，2.0M)。將所得混合物攪拌30min。添加TMSCl(1.8g，16.5mmol)，並且將所得混合物在室溫下攪拌2小時。在-78℃下向混合物中添加NBS(4.2g，23.5mmol)。將所得混合物在-78℃下攪拌1小時。然後將反應混合物加溫至室溫並再攪拌1小時。將混合物用飽和NaHCO3水溶液(30mL)淬滅，用EA(50mL x 2)萃取。將合併的萃取物用鹽水(50mL x 2)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮以得到呈淺棕色油狀物的標題產物(3.3g，粗品)，將所述產物直接用於下一步驟。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.76(dd,J=7.6,1.2Hz,1H),7.37-7.30(m,1H),7.01(t,J=7.6Hz,1H),6.86(d,J=8.0Hz,1H),3.81(s,3H),3.74(s,3H),2.21(s,3H)。
步驟C：2-肼基-2-(2-甲氧基苯基)丙酸甲酯。
Figure 108125875-A0101-12-0222-755
在室溫下向2-溴-2-(2-甲氧基苯基)丙酸甲酯(3.3g，12.1mmol)在MeCN(20mL)中的攪拌溶液中添加水合肼(5mL，100mmol)，並在50℃下攪拌所得混合物16小時。添加20mL EA並將混合物用鹽水(20mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥，並濃縮至乾燥，得到呈棕色油狀物的標題產物(2.9g，粗品)。MS：M/e 225(M+1)+。
步驟D：2-(1-甲氧基-2-(2-甲氧基苯基)-1-側氧基丙烷-2-基)肼-1-甲酸第三丁 酯。
Figure 108125875-A0101-12-0223-757
在0℃下向2-肼基-2-(2-甲氧基苯基)丙酸甲酯(280mg，1.0mmol)和Et3N(5.0g，50mmol)在CH2Cl2(20mL)中的混合物中逐滴添加Boc2O(3.3g，15.1mmol)，並將所得混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物濃縮，用30mL EA稀釋，並用鹽水(20mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥，並濃縮。將殘餘物通過柱層析純化以得到呈淺棕色油狀物的標題產物(660mg，3個步驟8%)。MS：M/e 325(M+1)+。
步驟E：2-肼基-2-(2-甲氧基苯基)丙酸甲酯鹽酸鹽。
Figure 108125875-A0101-12-0223-758
向2-(1-甲氧基-2-(2-甲氧基苯基)-1-側氧基丙-2-基)肼-1-甲酸第三丁酯(660mg，2.04mmol)在EA(10mL)中的攪拌溶液中添加HCl/EA(3mL，4M)，並將所得混合物在室溫下攪拌24小時。將混合物濃縮至乾燥，添加10mL EA，並再次濃縮所得懸浮液，以除去過量的HCl，得到呈灰色固體的標題產物(520mg，粗品)。MS：M/e 225(M+1)+。
步驟F：2-(6-胺基-4-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(2-甲氧基苯基)丙酸甲酯。
Figure 108125875-A0101-12-0223-759
將2-肼基-2-(2-甲氧基苯基)丙酸甲酯鹽酸鹽(510mg，2.0mmol)和2-胺基-4,6-二氯嘧啶-5-甲醛(385mg，2.0mmol)在MeCN(14mL)中的混合物在室溫下攪拌16小時。然後將所得混合物在70℃下加熱1小時。冷卻至室溫。添加1.0mL DIEA。將混合物濃縮並用20mL EA稀釋，用鹽水(10mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並濃縮。通過柱層析(PE/EA=7：1至3：1)和製備型TLC(PE/EA=2：1)純化所得殘餘物，得到呈無色固體的標題產物(136mg，2個步驟19%)。MS：M/e 362(M+1)+。
步驟G：2-(6-胺基-4-(2-(呋喃-2-羰基)肼基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(2-甲氧基苯基)丙酸甲酯。
Figure 108125875-A0101-12-0224-760
將2-(6-胺基-4-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(2-甲氧基苯基)丙酸甲酯(136mg，0.37mmol)、呋喃-2-碳醯肼(70mg，0.55mmol)和DIEA(300mg，2.32mmol)在DMSO(2mL)中的混合物在110℃下加熱16小時。將混合物倒入20mL H2O中。沈澱出淡黃色固體，並將其過濾，用H2O(10mL)洗滌。將濾餅在燈下乾燥，得到呈淺黃色固體的標題產物(52mg，粗品)。MS：M/e 452(M+1)+。
步驟H：(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-甲氧基苯基)丙酸甲酯。
Figure 108125875-A0101-12-0224-761
將2-(6-胺基-4-(2-(呋喃-2-羰基)肼基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(2-甲氧 基苯基)丙酸甲酯(52mg，粗品)、HMDS(1.5mL)和BSA(1.5mL)的混合物在110℃下加熱16小時。將混合物濃縮至乾燥。將所得殘餘物用10mL EA稀釋，用鹽水(5mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮。將所得殘餘物通過製備型TLC(PE/EA=2：1)純化以得到呈淺黃色油狀物的標題產物(22mg，粗品)。M/e 434(M+1)+。
步驟I：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-甲氧基苯基)丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0225-763
在室溫下向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-甲氧基苯基)丙酸甲酯(22mg，粗品)在MeOH中的溶液中添加NaOH水溶液(4M，2mL)，並且將所得混合物在室溫下攪拌16小時。用HCl(2M)酸化至pH約5後濃縮混合物。將固體用CH2Cl2/MeOH(3：1，20mL)處理。將懸浮液過濾，並將濾液濃縮至乾燥，得到呈淺黃色固體的標題產物(20mg，粗品)。M/e 420(M+1)+。
步驟J：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(2-甲氧基苯基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0225-762
在室溫下向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧 啶-7-基)-2-(2-甲氧基苯基)丙酸(20mg，粗品)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(20mg，0.085mmol)、DIEA(50mg，0.38mmol)在DMF(1mL)中的混合物中添加HATU(27mg，0.071mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌3小時。將混合物用10mL EA稀釋，用NaHCO3(5mL x 2)、鹽水(5mL x 2)洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮，並通過製備型TLC(EA：100%)純化所得油狀物，凍幹後得到標題產物(19.0mg，產率：4個步驟8%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.25(s,1H),8.04(s,2H),7.96(s,1H),7.31(t,J=7.6Hz,1H),7.26(d,J=3.2Hz,1H),7.09(d,J=8.0Hz,1H),6.87(t,J=7.6Hz,1H),6.81-6.64(m,6H),4.00-3.93(m,2H),3.94-3.80(m,1H),3.77(s,3H),3.62-3.57(m,2H),3.51-3.35(m,1H),3.28(s,3H),3.24-2.90(m,3H),2.78-2.61(m,2H),2.39(s,3H),2.04-1.93(m,1H)。MS：M/e 638(M+1)+。
化合物A94：2-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)-N-環己基苯甲醯胺
Figure 108125875-A0101-12-0226-764
步驟A：2-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯甲酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0227-765
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(2-氟苯基)丙酸(500mg，1.285mmol)、2-(六氫吡嗪-1-基)苯甲酸甲酯(424mg，1.928mmol)、HATU(977mg，2.571mmol)、DIPEA(497mg，3.856mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(5mL)中並且用EtOAc(5mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM/MeOH=40：1至10：1)純化以得到呈白色固體的產物(603mg，79.2%)。MS：M/e 592(M+1)+。
步驟B：2-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯甲酸
Figure 108125875-A0101-12-0227-766
將2-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯甲酸甲酯(603mg，1.019mmol)、氫氧化鋰(204mg，5.093mmol)在MeOH(5mL)和水(2mL)中的混合物在50℃下攪拌過夜。將反應混合物用鹽酸酸化，用EtOAc(5mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM/MeOH=40：1至10：1)純化以得到呈白色固體的產物(490mg，83.4%)。MS：M/e 578(M+1)+。
步驟C：2-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,41三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)-N-環己基苯甲醯胺
Figure 108125875-A0101-12-0228-767
將2-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯甲酸(100mg，0.1733mmol)、環己胺(21mg，0.2080mmol)、HATU(79mg，0.2080mmol)、DIPEA(67mg，0.5199mmol)在DMF(3mL)中的混合物在室溫下攪拌3小時。將反應混合物倒入H2O(5mL)中並用DCM(5mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM/MeOH=40：1至10：1)純化以得到呈白色固體的產物(85mg，74.54%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.82(d,J=7.8Hz,1H),8.32(s,1H),8.14(s,2H),7.96(s,1H),7.59(d,J=7.6Hz,1H),7.37-7.27(m,4H),7.27-7.17(m,3H),7.09(t,J=7.4Hz,1H),7.01(d,J=8.0Hz,1H),6.74(dd,J=3.0,1.6Hz,1H),3.72(s,2H),3.62(dd,J=11.1,7.2Hz,2H),2.92(s,5H),2.33(s,3H),1.73(d,J=22.9Hz,2H),1.58(t,J=13.1Hz,2H),1.45(d,J=12.6Hz,1H),1.25-1.11(m,J=14.6,10.4Hz,2H),1.09-0.90(m,3H)。MS：M/e 659(M+1)+。
化合物A95：2-(5-胺基-2-(3-甲基吡嗪-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0228-768
Figure 108125875-A0101-12-0229-769
步驟A：3-甲基吡嗪-2-甲酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0229-770
在0℃下向MeOH(50mL)的攪拌溶液中逐滴添加SOCl2(8.6g，72.4mmol)。然後將3-甲基吡嗪-2-甲酸(5g，36.2mmol)添加至反應中。將混合物在60℃下攪拌過夜。將混合物在減壓下濃縮，並且將殘餘物溶解在EA(50mL)中。將有機相用飽和NaHCO3水溶液(50mL)洗滌。將有機相用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥並且在減壓下濃縮。將殘餘物通過矽膠層析(用EA/PE=1/1溶離)純化以得到呈黃色固體的標題化合物(3.9g，產率：70.9%)。MS：M/e 153(M+1)+。
步驟B：3-甲基吡嗪-2-碳醯肼
Figure 108125875-A0101-12-0229-771
在室溫下向步驟A的產物(0.9g，5.9mmol)在MeOH(20mL)中的攪拌溶液中添加水合肼(1.5g，23.7mmol)。將混合物在60℃下攪拌過夜。將混合物濃縮，並且將殘餘物溶解在EA(30mL)中。將有機相用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥並且在 減壓下濃縮。將殘餘物(460mg，產率：51.1%)直接用於下一步驟。MS：M/e 153(M+1)+。
步驟C：2-(6-胺基-4-(2-(3-甲基吡嗪-2-羰基)肼基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-苯基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0230-772
將2-(6-胺基-4-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-苯基丙酸甲酯(1g，3mmol)、步驟B的產物(460mg，3mmol)和Et3N(610mg，6mmol)在DMSO(10mL)中的混合物在100℃下攪拌過夜。將反應冷卻至室溫。將混合物倒入水(30mL)中。從體系中形成沈澱物。在室溫下攪拌30min後，將混合物過濾。收集固體並且在空氣中乾燥。將黃色固體(1.6g，粗品)直接用於下一步驟。MS：M/e 448(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(3-甲基吡嗪-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0230-773
將步驟C的產物(1g，2.2mmol)在BSA(5mL)和HMDS(5mL)中的混合物在100℃下攪拌過夜。將反應冷卻至室溫並且在減壓下濃縮。將殘餘物溶解在H2O(10mL)和MeOH(10mL)中。將混合物在80℃下攪拌2小時。去除MeOH，並且從體系中沈澱出固體。將固體過濾並且在空氣中乾燥。將棕色固體(300mg，兩個步驟的產率：37.5%)直接用於下一步驟。MS：M/e 430(M+1)+。
步驟E：2-(5-胺基-2-(3-甲基吡嗪-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0231-774
在室溫下向步驟D的產物在MeOH(6mL)中的攪拌溶液中添加NaOH水溶液(2mL)。將混合物在室溫下攪拌過夜。去除溶劑，並且將殘餘物溶解在水(20mL)中。將混合物用HCl水溶液(2M)酸化至pH=3至4。從體系中沈澱出固體。將混合物過濾並且收集固體。將白色固體在空氣中乾燥並且直接用於下一步驟。MS：M/e 416(M+1)+。
步驟F：2-(5-胺基-2-(3-甲基吡嗪-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0231-775
將1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(102mg，0.43mmol)、步驟E的產物(180mg，0.43mmol)、HATU(179mg，0.47mmol)和Et3N(0.1mL，過量)在DMF(2mL)中的混合物在0℃下攪拌2小時。然後將反應加溫至室溫並攪拌過夜。將反應混合物倒入水(10mL)中並且用EA(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥並且在減壓下濃縮。將殘餘物通過製備型TLC(EA：100%)純化以得到呈白色固體的標題化合物(15mg，產率：5.2%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.70(d,J=4Hz,2H),8.40(s,1H),8.26(br.s,2H),7.53-7.40(m,2H),7.38-7.26 (m,3H),7.17(d,J=8Hz,2H),7.00(d,J=8.0Hz,2H),4.11-4.02(m,2H),3.69-3.60(m,2H),3.54-3.36(m,2H),3.28(s,3H),3.23-2.97(m,2H),2.89(s,3H),2.56-2.50(m,4H),2.41(s,3H)ppm。MS：M/e 634(M+1)+。
化合物A96：2-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)-N,N-二甲基苯甲醯胺
Figure 108125875-A0101-12-0232-776
將2-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯甲酸(100mg，0.1733mmol)、二甲胺鹽酸鹽(17mg，0.2080mmol)、HATU(79mg，0.2080mmol)、DIPEA(67mg，0.5199mmol)在DMF(3mL)中的混合物在室溫下攪拌3小時。將反應混合物倒入H2O(5mL)中並用DCM(5mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM/MeOH=40：1至10：1)純化以得到產物(73mg，69.74%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.32(d,J=6.6Hz,1H),8.14(s,2H),7.96(s,1H),7.37-7.20(m,7.2Hz,6H),7.18(d,J=7.1Hz,1H),7.06-6.95(m,2H),6.86(t,J=8.9Hz,1H),6.74(s,1H),3.62-3.37(m,4H),3.13-2.69(m,8H),2.32(s,3H),1.47-1.26(m,6H)。MS：M/e 605(M+1)+。
化合物A97：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-甲基-3-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0233-777
步驟A：四氟硼酸重氮苯鹽(benzenediazonium tetrafluoroborate)
Figure 108125875-A0101-12-0233-779
在0℃下向苯胺(5g，0.054mol)在HBF4(水溶液，30%，20ml)和H2O(20ml)中的攪拌溶液中添加NaNO2(7.4g，0.11mol)在H2O(20ml)中的溶液。將反應混合物在0℃下攪拌1h。完成後，將沈澱物過濾。將濾餅用丙酮和MTBE重結晶，得到呈白色固體的產物(7.6g，74%)。
步驟B：2-碘-2-甲基-3-苯基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0233-778
在0℃至10℃下向四氟硼酸重氮苯鹽(7g，36.5mmol)和甲基丙烯酸甲酯(4.0g，40.0mmol)在DMF(30ml)中的攪拌溶液中添加KI(6.7g，40.4mmol)在H2O(15ml)中的溶液。將反應混合物在0℃至20℃下攪拌3h。完成後，將反應混合物倒入水(30ml)中，並且然後用EA(30ml X 3)萃取。將合併的有機層用水(20ml)洗滌，用Na2SO4乾燥，並在減壓下濃縮得到殘餘物。將殘餘物通過用PE：EA(20：1)的柱層析純化以得到呈淺黃色液體的產物(4.8g，43%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.32-7.26(m,3H),7.23-7.16(m,2H),3.79(s,3H),3.75(d,J=8Hz,1H),3.45(d,J=8Hz,1H),2.00(s,3H)ppm
步驟C：2-肼基-2-甲基-3-苯基丙酸甲酯鹽酸鹽
Figure 108125875-A0101-12-0234-781
將2-碘-2-甲基-3-苯基丙酸甲酯(4.2g，13.8mmol)和水合肼(3.45g，55.2mmol)在MeCN(35ml)中的溶液在25℃下攪拌24h。完成後，將反應混合物在減壓下濃縮。將殘餘物用EA(35ml)稀釋，並且然後用H2O(20ml x 2)洗滌以去除水合肼。將有機層濃縮以得到殘餘物。將殘餘物用HCl(水溶液，1M，30ml)稀釋，並且然後用EA(20ml X 2)洗滌。將水層凍幹，得到呈白色固體的產物(1.2g，36%)。MS：M/e 209(M+1)+。
步驟D：2-(6-胺基-4-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-甲基-3-苯基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0234-780
將2-肼基-2-甲基-3-苯基丙酸甲酯鹽酸鹽(1.1g，5.29mmol)和2-胺基-4,6-二氯嘧啶-5-甲醛(1.0g，5.29mmol)在MeCN(25ml)中的溶液在室溫下攪拌過夜，並且然後在70℃下攪拌3h。完成後，將反應混合物過濾。將濾液在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過柱層析用PE：EA(10：1)純化以得到呈黃色固體的產物(0.57g，31%)。MS：M/e 346(M+1)+。
步驟E：2-(6-胺基-4-(2-(呋喃-2-羰基)肼基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-甲基-3-苯基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0235-782
將2-(6-胺基-4-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-甲基-3-苯基丙酸甲酯(0.55g，1.59mmol)、呋喃-2-碳醯肼(0.22g,1.75mmol)和DIEA(0.41g，3.18mmol)在DMSO(10ml)中的溶液在110℃下攪拌過夜。完成後，將反應混合物在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過柱層析用PE：EA(1：10)純化以得到呈黃色固體的產物(0.30g，43%)。MS：M/e 436(M+1)+。
步驟F：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-甲基-3-苯基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0235-783
將2-(6-胺基-4-(2-(呋喃-2-羰基)肼基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-甲基-3- 苯基丙酸甲酯(0.30g，0.69mmol)在BSA(5ml)和HMDS(5ml)中的溶液在110℃下攪拌過夜。完成後，將反應混合物在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物用NaHCO3(水溶液，20ml)稀釋，並且然後用EA(20ml X 2)萃取。將合併的有機層用Na2SO4乾燥，過濾，濃縮，並且然後通過製備型TLC用PE：EA(1：1)純化，得到呈黃色固體的產物(0.15g，51%)。MS：M/e 418(M+1)+。
步驟G：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-甲基-3-苯基丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0236-785
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-甲基-3-苯基丙酸甲酯(0.15g，0.36mmol)和NaOH(0.14g，3.60mmol)在EtOH(10ml)和H2O(2ml)中的溶液在70℃下攪拌2h。完成後，將反應混合物在減壓下濃縮以去除EtOH。將殘餘物用H2O(10ml)稀釋，並且然後用HCl(水溶液，4M)酸化至pH=3至4。將沈澱物過濾，用水洗滌，並且然後乾燥以得到呈黃色固體的產物(0.10g，69%)。MS：M/e 404(M+1)+。
步驟H：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-甲基-3-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0236-784
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-甲基-3-苯基丙酸(0.10g，0.25mmol)、HATU(0.10g，0.26mmol)和DIEA(0.10g，0.78mmol)在THF(15ml)中的攪拌溶液中添加1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(0.059g，0.25mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌15h。完成後，將反應混合物用EA(30ml)稀釋，並且然後用H2O(15ml X 2)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，過濾，並且然後在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過製備型TLC用PE：EA(1：3)純化以得到產物(13mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.14(s,3H),7.95(s,1H),7.22(d,J=4Hz,1H),7.15-7.05(m,3H),6.78-6.63(m,7H),3.96-3.89(m,3H),3.81-3.58(m,2H),3.56(t,J=4Hz,2H),3.54-3.42(m,5H),3.25(s,3H),3.09-2.90(m,2H),1.79(s,3H)ppm。MS：M/e 622(M+1)+。
化合物A98：4-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)-N-環己基苯甲醯胺
Figure 108125875-A0101-12-0237-786
向4-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯甲酸(80mg，0.14mmol)、HATU(79mg，0.21mmol)和DIPEA(54mg，0.42mmol)在THF(15ml)中的攪拌溶液中添加環己胺(21mg，0.21mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌15h。完成後，將反應混合物用EA(30ml)稀釋，並且然後用H2O(15ml X 2)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，過濾，並且然後在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過製備型TLC用DCM：MeOH(10：1)純化以得到產物(15.3mg，17%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.32(s,1H),8.08(s,2H),7.95(s,1H),7.84(d,J=8Hz,1H),7.65(d,J=8Hz,2H),7.38-7.16(m,6H),6.79(d,J=8Hz,2H),6.74(s,1H),3.90-3.55(m,3H),3.25-3.11(m,2H),3.10-2.72(m,4H),2.34(s,3H),1.79-1.65(m,4H),1.60-1.54(m,1H),1.31-1.22(m,5H)ppm。MS：M/e 659(M+1)+。
化合物A99：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基-1-(4-(2-(六氫吡啶-1-羰基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0238-787
將2-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯甲酸(100mg，0.1733mmol)、六氫吡啶(18mg，0.2080mmol)、HATU(79mg，0.2080mmol)、DIPEA(67mg，0.5199mmol)在DMF(3mL)中的混合物在室溫下攪拌3小時。將反應混合物倒入H2O(5mL)中並用DCM(5mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM/MeOH=40：1至10：1)純化以得到呈白色固體的產物(82mg，73.447%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.32(d,J=6.6Hz,1H),8.14(s,2H),7.96(s,1H),7.37-7.20(m,6H),7.18(d,J=7.1Hz,1H),7.06-6.95(m,2H),6.86(t,J=8.9Hz,1H),6.74(s,1H),3.82(s,1H),3.62-3.37(m,4H),3.19-2.56(m,65.0Hz,10H),2.32(s,3H)。MS：M/e 645(M+1)+。
化合物A100：2-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)-N-((3-羥基氧雜環丁烷-3-基)甲基)苯甲醯胺
Figure 108125875-A0101-12-0239-789
將2-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯甲酸(100mg，0.1733mmol)、3-(胺基甲基)氧雜環丁烷-3-醇(21mg，0.2080mmol)、HATU(79mg，0.2080mmol)、DIPEA(67mg，0.5199mmol)在DMF(3mL)中的混合物在室溫下攪拌3小時。將反應混合物倒入H2O(5mL)中並用DCM(5mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM/MeOH=40：1至10：1)純化以得到呈白色固體的產物(82mg，73.47%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 9.49(s,1H),8.30(s,1H),8.10(s,2H),7.96(s,1H),7.77(d,J=7.5Hz,1H),7.39-7.26(m,7.1Hz,4H),7.26-7.17(m,3H),7.14(t,J=7.4Hz,1H),6.97(d,J=8.0Hz,1H),6.74(s,1H),5.97(s,1H),4.35-4.24(m,4H),3.76(s,2H),3.57(s,2H),3.05(s,2H),2.89(s,4H),2.35(s,3H)。MS：M/e 645(M+1)+。
化合物A101：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基-1-(4-(4-(2-(吡咯啶-1-基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0239-788
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(70mg，0.18mmol)、HATU(75mg，0.20mmol)和DIEA(70mg，0.54mmol)在THF(15ml)中的攪拌溶液中添加1-(4-(2-(吡咯啶-1-基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪(62mg，0.20mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌15h。完成後，將反 應混合物用EA(30ml)稀釋，並且然後用H2O(15ml X 2)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，過濾，並且然後在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過製備型TLC用DCM：MeOH(5：1)純化以得到產物(35.9mg，31%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.32(s,1H),8.09(s,2H),7.96(s,1H),7.37-7.28(m,3H),7.27-7.15(m,3H),6.82(d,J=8Hz,2H),6.76(d,J=8Hz,3H),4.17(t,J=4Hz,2H),3.91-3.60(m,2H),3.59-3.39(m,4H),3.31-3.29(m,1H),3.23-2.70(m,7H),2.33(s,3H),2.00-1.80(m,4H)ppm。MS：M/e 647(M+1)+。
化合物A102：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基-1-(4-(4-(六氫吡啶-1-羰基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0240-790
向4-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯甲酸(80mg，0.14mmol)、HATU(79mg，0.21mmol)和DIPEA(54mg，0.42mmol)在THF(15ml)中的攪拌溶液中添加六氫吡啶(18mg，0.21mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌15h。完成後，將反應混合物用EA(30ml)稀釋，並且然後用H2O(15ml X 2)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，過濾，並且然後在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過製備型TLC用DCM：MeOH(10：1)純化以得到產物(4.5mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.32(s,1H),8.08(s,2H),7.95(s,1H),7.35-7.29(m,3H),7.23(d,J=4Hz,1H),7.18(t,J=8Hz,4H),6.79(d,J=12Hz,2H),6.74(dd,J=4Hz,2Hz,1H),3.90-3.52(m,2H),3.42-3.37(m,3H),3.31(s,2H),3.27-2.85(m,5H),2.34(s,3H),1.60-1.55(m,2H),1.49-1.41(m,4H)ppm。MS：M/e 645(M+1)+。
化合物A103：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(鄰甲苯基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0241-792
步驟A：2-(鄰甲苯基)丙酸乙酯
Figure 108125875-A0101-12-0241-791
在-78℃下在N2氣氛下向LDA(在THF中2M，16.7mL，33.4mmol)在THF(80mL)中的冷卻溶液中逐滴添加2-(鄰甲苯基)乙酸乙酯(5.4g，30.3mmol)在THF(10mL)中的溶液。添加後，將溶液再攪拌20分鐘，然後逐滴添加CH3I(12.9g，90.9mmol)。將混合物加溫至室溫過夜，並且然後用水(30mL)淬滅。將水層用乙酸乙酯(100mL)萃取。將有機層用鹽水(80mL)洗滌，乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=50：1)純化以得到呈無色油狀物的產物(5.5g，95%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.27-7.13(m,4H),4.16-4.07(m,2H),3.96-3.91(m,1H),2.37(s,3H),1.46(d,J=8.0Hz,3H),1.19(t,J=8.0Hz,3H)ppm。
步驟B：2-溴-2-(鄰甲苯基)丙酸乙酯
Figure 108125875-A0101-12-0242-793
在-78℃下在N2氣氛下向LDA(在THF中2M，11.5mL，23mmol)在THF(130mL)中的冷卻溶液中逐滴添加2-(鄰甲苯基)丙酸乙酯(4g，20.8mmol)在THF(10mL)中的溶液。將溶液再攪拌30分鐘，然後逐滴添加TMSCl(2.5g，23mmol)。將混合物加溫至室溫保持2小時，然後冷卻至-78℃。分批添加NBS(7.4g，41.6mmol)，並且將溶液在-78℃下攪拌1小時。使反應混合物經1小時達到室溫並攪拌2小時。用飽和NaHCO3溶液淬滅後，將溶液用乙酸乙酯(100mL)萃取。將有機層乾燥，濃縮，得到粗產物(5.6g，粗品)，將其直接用於下一步驟。
步驟C：2-肼基-2-(鄰甲苯基)丙酸乙酯鹽酸鹽
Figure 108125875-A0101-12-0242-794
將NH2NH2.H2O(10mL，0.2mol)添加至2-溴-2-(鄰甲苯基)丙酸乙酯(5.6g，20.8mmol)在CH3CN(50mL)中的溶液中。將反應混合物在60℃下加熱過夜。將溶液濃縮，添加水(20mL)並且用乙酸乙酯(30mL x 3)萃取。將合併的有機層乾燥，濃縮，添加HCl/EA(2M，5mL)並蒸發，得到呈HCl鹽的產物(3.6g，67%)。MS：M/e 223(M+1)+
步驟D：2-(6-胺基-4-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(鄰甲苯基)丙酸乙酯
Figure 108125875-A0101-12-0242-795
將2-胺基-4,6-二氯嘧啶-5-甲醛(2.6g，13.8mmol)和2-肼基-2-(鄰甲苯基)丙酸乙酯(3.6g，13.8mmol)在CH3CN(35mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜，並且然後在50℃下加熱3小時。將反應混合物過濾。將濾液蒸發，添加水(20mL)並用乙酸乙酯(20mL)萃取。將有機相乾燥，濃縮，並且通過柱層析(PE：EA=5：1)進一步純化以得到呈白色固體的所需產物(1.2g，25%)。MS：M/e 360(M+1)+
步驟E：2-(6-胺基-4-(2-(呋喃-2-羰基)肼基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(鄰甲苯基)丙酸乙酯
Figure 108125875-A0101-12-0243-797
將2-(6-胺基-4-氯-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(鄰甲苯基)丙酸乙酯(1.2g，3.3mmol)、呋喃-2-碳醯肼(416mg，3.3mmol)和DIEA(852mg，6.6mmol)在DMSO(15mL)中的混合物在115℃下加熱過夜。在油泵下蒸發溶劑。向殘餘物中添加水(10mL)，漿化並且過濾。將濾餅用水洗滌，乾燥以得到粗產物，將所述粗產物直接用於下一步驟(1.1g，73%)。MS：M/e 450(M+1)+
步驟F：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(鄰甲苯基)丙酸乙酯
Figure 108125875-A0101-12-0243-796
將2-(6-胺基-4-(2-(呋喃-2-羰基)肼基)-1H-吡唑並[3,4-d]嘧啶-1-基)-2-(鄰甲苯基)丙酸乙酯(400mg，1mmol)在BSA(2mL)和HMDS(2mL)中的溶液在120℃下 加熱3小時。將溶劑在油泵下蒸發。向殘餘物中添加水(5mL)，用乙酸乙酯(15mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮，並且通過柱層析(PE：EA=10：1至3：1)純化以得到呈白色固體的所需產物(50mg，13%)。MS：M/e 432(M+1)+
步驟G：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(鄰甲苯基)丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0244-798
將NaOH溶液(24mg，0.6mmol，在1mL的水中)添加至2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(鄰甲苯基)丙酸乙酯(25mg，0.06mmol)在乙醇(2mL)中的溶液中。將溶液在70℃加熱3小時。將溶劑蒸發。向殘餘物中添加水(2mL)，用2M HCl酸化至pH=3至4。將溶液凍幹，得到粗產物，將其用於下一步驟(20mg，粗品)。MS：M/e 404(M+1)+
步驟H：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-(鄰甲苯基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0244-799
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-(鄰甲苯基)丙酸(20mg，0.05mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(12mg，0.05mmol)、HATU(23mg，0.06mmol)和DIPEA(13mg，0.10mmol)在 DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(EA)純化以得到所需產物(5mg，17%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.30(s,1H),8.11(br.s,2H),8.02(s,1H),7.31-7.18(m,4H),6.94(d,J=8.0Hz,1H),6.85-6.80(m,5H),4.03(t,J=4.0Hz,2H),3.90(br.s,1H),3.65(t,J=4.0Hz,2H),3.60(br.s,1H),3.34(s,3H),3.30-2.80(m,6H),2.52(s,3H),2.36(s,3H)ppm。MS：M/e 622(M+1)+
化合物A104：4-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)-N,N-二甲基苯甲醯胺
Figure 108125875-A0101-12-0245-800
向4-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯甲酸(80mg，0.14mmol)、HATU(79mg，0.21mmol)和DIPEA(54mg，0.42mmol)在THF(15ml)中的攪拌溶液中添加二甲胺鹽酸鹽(17mg，0.21mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌15h。完成後，將反應混合物用EA(30ml)稀釋，並且然後用H2O(15ml X 2)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，過濾，並且然後在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過製備型TLC用DCM：MeOH(10：1)純化以得到產物(13.5mg，16%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.32(s,1H),8.07(s,2H),7.95(s,1H),7.37-7.29(m,3H),7.25-7.18(m,5H),6.79(d,J=8Hz,2H),6.74(dd,J=4Hz,2Hz,1H),3.95-3.50(m,3H),3.24-2.95(m,5H),2.90(s,6H),2.34(s,3H)ppm。MS：M/e 605(M+1)+。
化合物A105：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c] 嘧啶-7-基)-1-(4-(2,4-二甲氧基苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0246-801
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(30mg，0.077mmol)、1-(2,4-二甲氧基苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(20mg，0.077mmol)、HATU(35.3mg，0.093mmol)和DIPEA(20mg，0.134mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(10mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(石油醚/EtOAc=1：2)純化以得到目標化合物(23mg，50.3%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.30(s,1H),8.09(s,2H),7.96(s,1H),7.37-7.17(m,6H),6.75(m,1H),6.56(d,J=8.4Hz,1H),6.45(d,J=2.4Hz,1H),6.32(dd,J=8.8,2.4Hz,1H),3.67(m,1H),3.65(d,J=4.4Hz,6H),3.31(s,1H),3.16-2.6(m,4H),2.33(s,3H),2.31-2.09(m,2H)ppm。MS：M/e 594(M+1)+。
化合物A106：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(2-甲氧基-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0246-802
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(30mg，0.077mmol)、1-(2-甲氧基-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(23.3mg，0.077mmol)、HATU(35.3mg，0.093mmol)和DIPEA(20mg， 0.134mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(10mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(石油醚/EtOAc=1：2)純化以得到目標化合物(25mg，50.9%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.30(s,1H),8.09(s,2H),7.96(s,1H),7.38-7.17(m,6H),6.78-6.72(m,1H),6.55(d,J=8.4Hz,1H),6.46(s,1H),6.33(d,J=8.4Hz,1H),4.07-3.91(m,2H),3.66(s,5H),3.62-3.57(m,2H),3.27(s,3H),3.12-2.69(m,4H),2.33(s,3H),2.31-2.07(m,2H)ppm。MS：M/e 638(M+1)+。
化合物A107：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(甲基胺基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0247-804
步驟A：4-(4-(2-溴乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0247-803
向4-(4-羥基苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(7g，25.1mmol)在乙腈(150mL)中的攪拌溶液中添加K2CO3(10g，72.4mmol)和1,2-二溴乙烷(10g，53.3mmol)。添加後，將反應混合物攪拌4天。將反應混合物過濾。將濾液傾倒到H2O(150mL) 中並用EtOAc(100mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=4：1)純化以得到呈白色固體的4-(4-(2-溴乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(1.5g，15.6%)。MS：M/e 385(M+1)+。
步驟B：4-(4-(2-(甲基胺基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0248-805
向4-(4-(2-溴乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(218mg，0.57mmol)在MeCN/H2O(10mL/1mL)中的混合物中添加甲胺鹽酸鹽(330mg，5mmol)和DIEA(774mg，6mmol)。添加後，將反應混合物密封並在90℃下攪拌過夜。將混合物冷卻至室溫，向混合物中添加H2O(20ml)，並用DCM(20mL x 3)萃取混合物。將合併的有機相用Na2SO4乾燥，在真空中濃縮，並通過柱層析(DCM/MeOH=20：1至5：1)純化，得到呈白色固體的目標化合物(130mg，68.4%)。MS：M/e 336(M+1)+。
步驟C：N-甲基-2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙-1-胺
Figure 108125875-A0101-12-0248-806
將步驟B的產物(130mg，0.39mmol)在HCl/EA(4M，10ml)中的混合物在室溫下攪拌2h。將混合物過濾，並將濾餅用EtOAc(10ml)洗滌，在40℃下乾燥，得到呈白色固體的產物(80mg，87.7%)。MS：M/e 236(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(甲基胺基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0249-808
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(30mg，0.077mmol)、HATU(35mg，0.092mmol)和DIPEA(90mg，0.697mmol)在DMF(3mL)中的混合物在室溫下攪拌0.5h。經15分鐘將N-甲基-2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙-1-胺(64mg，0.237mmol)在DMF(2ml)中的溶液緩慢添加到混合物中。將反應混合物在室溫下攪拌1h。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且過濾。將濾餅乾燥並通過製備型HPLC純化，得到目標化合物(8mg，17.1%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.53(s,1H),8.32(s,1H),8.09(s,2H),7.95(s,1H),7.26(m,6H),6.79(m,5H),4.08(m,2H),3.70(m,4H),3.27(s,3H),2.97(s,4H),2.61(s,2H),2.33(s,3H)ppm。MS：M/e 607.2(M+1)+。
化合物A108：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-羥基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0249-971
步驟A：(2-溴乙氧基)(第三丁基)二甲基矽烷
Figure 108125875-A0101-12-0250-809
向2-溴乙-1-醇(8.8mg，70.5mmol)在DCM(50mL)中的攪拌混合物中添加TBDMSCl(10.6g，70.5mmol)和咪唑(9.6g，141mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。向混合物中添加H2O(100ml)並且用DCM(50mL x 3)萃取。將合併的有機相用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥並且在真空中濃縮以得到呈無色液體的產物(16g，96.3%)。1H NMR(400MHz,CDCl3-d6)δ 3.80(t,J=6.5Hz,2H),3.30(t,J=6.5Hz,2H),0.82(s,9H)。MS：M/e 356(M+1)+。
步驟B：4-(4-(2-羥基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0250-810
在0℃下向4-(4-羥基苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(278mg，1mmol)在DMF(5ml)中的混合物中添加NaH(160mg，4mmol，60%在油中)。將混合物在室溫下攪拌30分鐘並添加(2-溴乙氧基)(第三丁基)二甲基矽烷(476mg，2mmol)。將所得溶液在70℃下攪拌過夜。將混合物冷卻至0℃並添加H2O。將混合物用EA(50mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na2SO4乾燥，在真空中濃縮，並通過柱層析(石油醚/EtOAc=2/1至1/1)純化，得到呈白色固體的目標化合物(110mg，34.2%)。MS：M/e 323(M+1)+。
步驟C：2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙-1-醇
Figure 108125875-A0101-12-0250-811
將4-(4-(2-羥基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(11mg，0.34mmol)在HCl/EA(4M，10ml)中的混合物在室溫下攪拌2h。將混合物過濾，並將濾餅用 EtOAc(10ml)洗滌，在40℃下乾燥，得到呈白色固體的產物(70mg，92.7%)。MS：M/e 223(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-羥基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0251-813
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(30mg，0.077mmol)、2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙-1-醇(40mg，0.18mmol)、HATU(35mg，0.092mmol)和DIPEA(60mg，0.46mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且過濾。將濾餅乾燥並通過製備型HPLC純化，得到目標化合物(20mg，43.8%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.32(s,1H),8.09(s,2H),7.95(s,1H),7.36-7.15(m,6H),6.75(dd,J=6.7,4.9Hz,5H),4.53(s,4H),3.85(t,J=5.0Hz,2H),3.71(s,1H),3.64(t,J=4.9Hz,2H),2.99(s,4H),2.34(s,3H)。MS：M/e 594(M+1)+。
化合物A81a：(S)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(4-甲基六氫吡嗪-1-基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0251-812
將(S)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7- 基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、1-甲基-4-(2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙基)六氫吡嗪鹽酸鹽(72mg，0.16mmol)、HATU(61mg，0.16mmol)和DIEA(50mg，0.39mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM：MeOH=20：1)和製備型HPLC純化以得到呈TFA鹽的所需產物(50mg，50%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.32(s,1H),8.09(br.s,2H),7.95(s,1H),7.31-7.18(m,6H),6.81-6.75(m,5H),4.08(s,2H),3.70-2.97(m,18H),2.80(s,3H),2.33(s,3H)ppm。MS：M/e 676(M+1)+
化合物A81b：(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-(4-甲基六氫吡嗪-1-基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0252-814
將(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、1-甲基-4-(2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙基)六氫吡嗪鹽酸鹽(72mg，0.16mmol)、HATU(61mg，0.16mmol)和DIEA(50mg，0.39mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM：MeOH=20：1)和製備型HPLC純化以得到呈TFA鹽的所需產物(40mg，40%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.32(s,1H),8.09(br.s,2H),7.95(s,1H),7.33-7.18(m,6H),6.81-6.74(m,5H),4.09(s,2H),3.70-2.97(m, 18H),2.80(s,3H),2.33(s,3H)ppm。MS：M/e 676(M+1)+
化合物A82a：(S)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(3-(4-甲基六氫吡嗪-1-基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0253-816
將(S)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、1-甲基-4-(3-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)丙基)六氫吡嗪鹽酸鹽(72mg，0.16mmol)、HATU(61mg，0.16mmol)和DIEA(50mg，0.39mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM：MeOH=15：1)和製備型HPLC純化以得到呈TFA鹽的所需產物(45mg，44%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.08(br.s,2H),7.95(s,1H),7.31-7.18(m,6H),6.75-6.72(m,5H),3.86(t,J=8.0Hz,2H),3.70(br.s,2H),2.93(br.s,4H),2.74-2.50(m,5H),2.50-2.33(m,9H),1.80(s,2H)ppm。MS：M/e 690(M+1)+
化合物A82b：(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(3-(4-甲基六氫吡嗪-1-基)丙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0253-815
將(R)-2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、1-甲基-4-(3-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)丙基)六氫吡嗪鹽酸鹽(72mg，0.16mmol)、HATU(61mg，0.16mmol)和DIPEA(50mg，0.39mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM：MeOH=15：1)和製備型HPLC純化以得到呈TFA鹽的所需產物(48mg，47%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.32(s,1H),8.09(br.s,2H),7.95(d,J=4.0Hz,1H),7.33-7.18(m,6H),6.75-6.74(m,5H),3.91(t,J=8.0Hz,2H),3.7-2.50(m,21H),2.33(s,3H),1.96(s,2H)ppm。MS：M/e 690(M+1)+
化合物B1：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-N,N-二甲基-2-苯基乙醯胺
Figure 108125875-A0101-12-0254-817
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(37.5mg，0.1mmol)、二甲胺(2M，6.75mL)和HATU(46mg，0.12mmol)在DMF(2mL)中的混合物攪拌過夜。將混合物傾倒到H2O(15mL)中並用EtOAc(10mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=2：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(10mg，24.8%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.18(s,1H),8.15(br.s,1H),7.95(s,1H),7.35(m,5H),7.24(d,J=3.2Hz,1H),6.79(s,1H),6.74(m,1H),2.88(s,3H),2.77(s,3H)ppm。MS：M/e 403(M+1)+。
化合物B2：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基-1-(六氫吡啶-1-基)乙-1-酮。
Figure 108125875-A0101-12-0255-819
在室溫下向六氫吡啶(10mg，0.12mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(30mg，0.08mmol)、DIEA(50mg，0.39mmol)在DMF(1mL)中的混合物中添加HATU(36mg，0.09mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。添加5mL的EA並且將混合物用NaHCO3(3mL x 2)、鹽水(3mL x 2)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮。將所得殘餘物通過製備型TLC(PE/EA=1：2)純化以得到標題產物(12.0mg，產率：34%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.17(s,1H),8.13(s,2H),7.95(s,1H),7.43-7.31(m,5H),7.24(d,J=3.2Hz,1H),6.78(s,1H),6.75-6.70(m,1H),3.63-3.50(m,1H),3.44-3.33(m,2H),3.27-3.18(m,1H),1.55-1.36(m,4H),1.12-1.00(m,1H),1.00-0.88(m,1H)。MS：M/e 443(M+1)+。
化合物B3：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0255-818
在室溫下向1,2,3,4-四氫異喹啉(200mg，1.5mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(400mg，1.07mmol)、DIPEA(620mg，4.8mmol)在DMF(5mL)中的混合物中添加HATU(460mg， 1.2mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物倒入20mL的H2O中。沈澱出白色固體並且將其過濾。將固體用H2O洗滌，在高真空下乾燥並且通過柱層析純化以得到標題產物(335.0mg，產率：46%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.38-8.02(m,3H),7.95(s,1H),7.46-6.92(m,11H),6.74(s,1H),4.75-4.32(m,2H),3.81-3.46(m,2H),2.84-2.63(m,1H),2.42-2.32(m,1H)。MS：M/e 491(M+1)+。
通過對掌性製備型HPLC將化合物B3分離成兩種對映體立體異構物：化合物B3a(較早的峰)，和化合物B3b(較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0256-820
Figure 108125875-A0101-12-0256-821
化合物B4：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(3,4-二氫喹啉-1(2H)-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0257-823
在室溫下向1,2,3,4-四氫喹啉(20mg，0.15mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(40mg，0.11mmol)、DIPEA(100mg，0.77mmol)在DMF(1mL)中的混合物中添加HATU(50mg，0.13mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。添加20mL的EA並且將混合物用鹽水(20mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮。將所得殘餘物通過製備型TLC(PE/EA=1：2)純化以得到標題產物(21.0mg，產率：39%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.34-7.99(m,3H),7.95(s,1H),7.72(d,J=7.6Hz,1H),7.56-7.17(m,6H),7.17-7.07(m,2H),7.04-6.78(m,2H),6.74(s,1H),3.80-3.49(m,2H),1.92-1.60m,2H),1.37-1.16(m,2H)。MS：M/e 491(M+1)+。
化合物B5：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(7-氯-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0257-822
在室溫下向7-氯-1,2,3,4-四氫異喹啉(20mg，0.12mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(40mg，0.11mmol)、DIPEA(100mg，0.77mmol)在DMF(1mL)中的混合物中添加HATU(50mg，0.13mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。添加20mL的EA並且將混合物 用鹽水(10mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮。將所得殘餘物通過製備型TLC(PE/EA=1：2)純化以得到標題產物(16.0mg，產率：28%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.24-8.03(m,3H),7.95(s,1H),7.50-7.26(m,6H),7.24(s,1H),7.21-7.03(m,2H),6.95-6.88(m,1H),6.74(s,1H),4.78-4.33(m,2H),3.80-3.49(m,2H),2.84-2.27(m,2H)。MS：M/e 525(M+1)+。
化合物B6：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基-1-(7-(三氟甲氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0258-824
在室溫下向7-(三氟甲氧基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(35mg，0.16mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(50mg，0.13mmol)、DIPEA(70mg，0.54mmol)在DMF(2mL)中的混合物中添加HATU(65mg，0.17mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。添加10mL的EA並且將混合物用鹽水(10mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮。將所得殘餘物通過製備型TLC(PE/EA=1：2)純化以得到標題產物(25.0mg，產率：36%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.34-8.01(m,3H),7.95(s,1H),7.50-6.59(m,11H),4.85-4.37(m,2H),3.89-3.47(m,2H),2.89-2.29(m,2H)。MS：M/e 575(M+1)+。
化合物B7：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(6-氟-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0258-825
在室溫下向6-氟-1,2,3,4-四氫異喹啉(200mg，1.32mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(400mg，1.1mmol)、DIEA(550mg，4.3mmol)在DMF(8mL)中的混合物中添加HATU(480mg，1.3mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。添加50mL的EA並且將混合物用鹽水(20mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮。將所得殘餘物通過柱層析純化以得到標題產物(175.0mg，產率：32%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.29-8.04(m,3H),7.95(s,1H),7.51-6.69(m,11H),4.81-4.28(m,2H),3.86-3.47(m,2H),2.86-2.71(m,1H),2.41-2.35(m,1H)。MS：M/e 509(M+1)+。
通過對掌性製備型HPLC將化合物B7分離成兩種對映體立體異構物：化合物B7a(較早的峰)，和化合物B7b(較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0259-826
Figure 108125875-A0101-12-0259-827
化合物B8：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(3,4-二氫-2,7-萘啶-2(1H)-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0260-828
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(50mg，0.13mmol)、1,2,3,4-四氫-2,7-萘啶(21.4mg，0.16mmol)、HATU(60.8mg，0.16mmol)和DIEA(0.1mL)在DMF(2mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應用水(5mL)稀釋並且用EA(10mL x 2)萃取。將合併的有機相用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥並且在減壓下濃縮。將殘餘物通過矽膠層析(EA：100%)純化以得到標題化合物(9mg，產率：14%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.42(s,1H),8.28(d,J=4Hz,1H),8.22-8.04(m,3H),8.00-7.83(m,1H),7.46-7.20(m,6H),7.08(d,J=4Hz,1H),6.95(s,1H),6.74(s,1H),4.84-4.61(m,1H),4.55-4.33(m,1H),3.83-3.70(m,1H),3.64-3.55(m,1H),2.87-2.74(m,1H),2.40-2.27(m,1H)ppm。MS：M/e 492(M+1)+。
化合物B9：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(5,8-二氫-1,7-萘啶-7(6H)-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0260-829
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(50mg，0.13mmol)、5,6,7,8-四氫-1,7-萘啶(21.4mg，0.16mmol)、 HATU(60.8mg，0.16mmol)和DIEA(0.1mL)在DMF(2mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應用水(5mL)稀釋並且用EA(10mL x 2)萃取。將合併的有機相用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥並且在減壓下濃縮。將殘餘物通過矽膠層析(EA：100%)純化以得到標題化合物(10mg，產率：15.6%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.41-8.32(m,1H),8.23-8.06(m,3H),7.95(s,1H),7.55-7.28(m,6H),7.24(d,1H),7.21-7.05(m,1H),7.01-6.91(m,1H),6.74(s,1H),4.78-4.62(m,1H),4.54-4.24(m,1H),3.87-3.71(m,1H),3.70-3.55(m,1H),2.88-2.73(m,1H),2.41-2.30(m,1H)ppm。MS：M/e 492(M+1)+。
化合物B10：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(8-氟-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0261-830
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(50mg，0.13mmol)、8-氟-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽(30mg，0.16mmol)、HATU(61mg，0.16mmol)和DIEA(34mg，0.26mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=1：1)純化以得到產物(15mg，23%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.19-8.05(m,2H),7.95(s,1H),7.44-7.17(m,7H),7.08-6.90(m,3H),6.74-6.71(m,1H),4.73-4.29(m,2H),3.82-3.54(m,1H),2.35(br.s,2H)ppm。MS：M/e 509(M+1)+
化合物B11：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(7-氟-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0262-831
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(50mg，0.13mmol)、7-氟-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽(30mg，0.16mmol)、HATU(61mg，0.16mmol)和DIEA(34mg，0.26mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=1：1)純化以得到產物(15mg，23%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.19-8.09(m,2H),7.95(s,1H),7.36-7.24(m,6H),7.11-6.90(m,4H),6.74(br.s,1H),4.74-4.39(m,2H),3.76-3.49(m,2H),2.98-2.75(m,2H),2.33(s,1H)ppm。MS：M/e 509(M+1)+
化合物B12：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(5-氟-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0262-832
在室溫下向5-氟-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽(30mg，0.16mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(50mg，0.13mmol)、DIEA(70mg，0.54mmol)在DMF(2mL)中的混合物中添加HATU(65mg，0.17mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。添加20mL的EA並且將混合物用鹽水(10mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮。將所得殘餘物通過製備型 TLC(PE/EA=1：2)純化以得到標題產物(26.0mg，產率：39%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.34-7.89(m,4H),7.49-7.04(m,7H),7.04-6.48(m,4H),4.81-4.34(m,2H),3.84-3.51(m,2H),2.88-2.21(m,2H)。MS：M/e 509(M+1)+。
化合物B13：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(7,8-二氫-1,6-萘啶-6(5H)-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0263-834
在室溫下向5,6,7,8-四氫-1,6-萘啶(23mg，0.17mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(50mg，0.13mmol)、DIEA(70mg，0.54mmol)在DMF(2mL)中的混合物中添加HATU(65mg，0.17mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。添加20mL的EA並且將混合物用鹽水(10mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮。將所得殘餘物通過製備型TLC(EA/MeOH=20：1)純化以得到標題產物(28.0mg，產率：44%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.40-8.23(m,1H),8.24-7.90(m,4H),7.69-6.70(m,10H),4.81-4.35(m,2H),4.00-3.56(m,2H),2.98-2.35(m,2H)。MS：M/e 492(M+1)+。
化合物B14：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(7-(2-甲氧基乙氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0263-833
Figure 108125875-A0101-12-0264-835
步驟A：7-羥基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0264-836
將1,2,3,4-四氫異喹啉-7-醇(300mg，2mmol)、(Boc)2O(480mg，2.2mmol)和三乙胺(404mg，4mmol)在DCM(10mL)中的溶液在室溫下攪拌過夜。將反應混合物用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮，得到粗產物，將其直接用於下一步驟(500mg，100%)。MS：M/e 250(M+1)+
步驟B：7-(2-甲氧基乙氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0264-837
將7-羥基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸第三丁酯(500mg，2mmol)、1-溴-2-甲氧基乙烷(558mg，4mmol)和K2CO3(552mg，4mmol)在DMF(10mL)中的溶液在室溫下攪拌過夜。向反應混合物中添加水(10mL)，用EA(10mL)萃取，並用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮，得到粗產物，將其通過柱層析(PE：EA=10：1)純化，得到產物(160mg，26%)。MS：M/e 308(M+1)+
步驟C：7-(2-甲氧基乙氧基)-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽
Figure 108125875-A0101-12-0264-838
向7-(2-甲氧基乙氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸第三丁酯(60mg，0.2mmol) 在EA(2mL)中的溶液中添加HCl/EA(4M，2mL)。將混合物在室溫下攪拌2小時，然後在減壓下蒸發並直接用於下一步驟。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(7-(2-甲氧基乙氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0265-839
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(72mg，0.2mmol)、7-(2-甲氧基乙氧基)-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽(40mg，0.2mmol)、HATU(114mg，0.3mmol)和DIEA(52mg，0.4mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=1：1)純化以得到產物(30mg，28%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.19(s,1H),8.17(br.s,2H),7.95(s,1H),7.39-7.24(m,6H),6.93-6.91(m,2H),6.80(s,1H),6.74-6.62(m,2H),4.69-4.59(m,1H),4.38(s,1H),4.04(t,J=4.0Hz,1H),3.83-3.75(m,1H),3.68-3.46(m,4H),3.29(s,2H),3.22(s,1H),2.72-2.68(m,1H),2.27(s,1H)ppm。MS：M/e 565(M+1)+
化合物B15：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(6-(2-甲氧基乙氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0266-840
步驟A：6-(2-甲氧基乙氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0266-841
向6-羥基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸第三丁酯(500mg，2mmol)在DMF(4mL)中的攪拌溶液中添加K2CO3(552mg，4mmol)和1-溴-2-甲氧基乙烷(305.8mg，2.2mmol)。添加後，將反應混合物攪拌2天。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮以得到呈棕色油狀物的目標化合物(0.62g，100%)。MS：M/e 308(M+1)+。
步驟B：6-(2-甲氧基乙氧基)-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽
Figure 108125875-A0101-12-0266-842
向步驟A的產物(0.62g，2mmol)在CH2Cl2(10mL)中的攪拌溶液中添加EtOAc/HCl(4.0M，4mL)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。過濾反應混合物，並收集濾餅，乾燥，得到呈白色固體的目標化合物(400mg，82.1%)。MS：M/e 208(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(6-(2-甲氧基乙氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0267-844
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(50mg，0.133mol)、步驟B的產物(27.6mg，0.133mmol)、HATU(60mg，0.16mmol)和DIPEA(34mg，0.266mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型HPLC純化以得到目標化合物(15mg，20%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.24-8.07(m,3H),7.95(s,1H),7.42-7.31(m,5H),7.25-7.24(m,1H),7.14-6.48(m,5H),4.69-4.27(m,2H),4.02-3.85(m,1H),3.81-3.47(m,4H),3.27(d,J=6.6Hz,3H),2.86-2.64(m,1H),2.34(m,1H)ppm。MS：M/e 565(M+1)+。
化合物B16：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(8-(2-甲氧基乙氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0267-843
Figure 108125875-A0101-12-0268-845
步驟A：8-(2-甲氧基乙氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0268-846
向8-羥基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-甲酸第三丁酯(500mg，2mmol)在DMF(4mL)中的攪拌溶液中添加K2CO3(552mg，4mmol)和1-溴-2-甲氧基乙烷(305.8mg，2.2mmol)。添加後，將反應混合物攪拌2天。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮以得到呈棕色油狀物的目標化合物(0.63g，100%)。MS：M/e 308(M+1)+。
步驟B：8-(2-甲氧基乙氧基)-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽
Figure 108125875-A0101-12-0268-847
向步驟A的產物(0.63g，2mmol)在CH2Cl2(10mL)中的攪拌溶液中添加EtOAc/HCl(4.0M，4mL)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。過濾反應混合物，並收集濾餅，乾燥，得到呈白色固體的目標化合物(350mg，71.8%)。MS：M/e 208(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7- 基)-1-(8-(2-甲氧基乙氧基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0269-849
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(50mg，0.133mol)、步驟B的產物(27.6mg，0.133mmol)、HATU(60mg，0.16mmol)和DIPEA(34mg，0.266mmol)在DMF(4mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型HPLC純化以得到呈白色固體的目標化合物(20mg，26.7%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.24-8.05(m,3H),7.95(s,1H),7.50-7.28(m,5H),7.24(d,J=2.8Hz,1H),7.17-6.28(m,5H),4.70-4.34(m,2H),4.03(m,2H),3.78-3.49(m,4H),3.28-3.24(d,J=32.4Hz,3H),2.70-2.60(m,1H),2.21(m,1H)ppm。MS：M/e 565(M+1)+。
化合物B17：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(7-甲基-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0269-848
在室溫下向7-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉(26mg，0.17mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基乙酸(50mg，0.13mmol)、DIPEA(80mg，0.62mmol)在DMF(2mL)中的混合物中添加HATU(65mg，0.17mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。添加20mL的EA並且將混合物 用鹽水(10mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮。將所得殘餘物通過製備型TLC(PE/EA=1：2)純化以得到標題產物(25.0mg，產率：28%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δ 8.27-7.96(m,1H),7.97-7.73(m,3H),7.46-7.37(m,2H),7.37-7.25(m,3H),7.20(d,J=3.2Hz,1H),7.07-6.75(m,4H),6.74-6.66(m,1H),4.75-4.28(m,2H),3.83-3.48(m,2H),2.94-2.59(m,2H),2.32-2.00(m,3H)。MS：M/e 505(M+1)+。
化合物B18：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0270-850
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.129mmol)、1,2,3,4-四氫異喹啉(17mg，0.129mmol)、HATU(50mg，0.129mmol)和DIPEA(33mg，0.258mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並用EA(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EA=1：2)純化以得到目標化合物(37mg，56.9%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.26(s,1H),8.03-7.83(m,3H),7.27-7.21(m,6H),6.96(s,1H),6.82(s,1H),6.73(s,1H),6.61-6.48(m,1H),6.20(s,1H),4.75-4.67(m,1H),4.00(d,J=16.0Hz,1H),3.76(d,J=16.0Hz,1H),3.55(s,1H),2.89(s,1H),2.70(d,J=17.7Hz,1H),2.31(s,3H)ppm。MS：M/e 505(M+1)+。
化合物B19：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c] 嘧啶-7-基)-1-(6-氟-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0271-852
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.129mmol)、6-氟-1,2,3,4-四氫異喹啉(24.2mg，0.129mmol)、HATU(50mg，0.129mmol)和DIPEA(33mg，0.258mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並用EA(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EA=1：2)純化以得到目標化合物(28mg，41.5%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.26(s,1H),7.94(s,3H),7.40-7.11(m,6H),6.99-6.82(m,1H),6.73(s,1H),6.62(s,1H),6.27-6.22(m,1H),4.74-4.64(m,1H),3.96(d,J=16.1Hz,1H),3.74-7.70(m,1H),3.52(s,1H),2.89(m,1H),2.73(m,1H),2.30(s,3H)ppm。MS：M/e 523(M+1)+。
化合物B20：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-N,N-二甲基-2-苯基丙醯胺
Figure 108125875-A0101-12-0271-851
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(30mg，0.077mmol)、二甲胺鹽酸鹽(6.3mg，0.077mmol)、HATU(35.3mg，0.092mmol)和DIPEA(20mg，0.154mmol)在DMF(3mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(10mL x 3)萃取。 將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過製備型TLC(CH2Cl2/MeOH=10：1)純化以得到目標化合物(17mg，53%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.27(d,J=1.7Hz,1H),8.05(s,2H),7.96(s,1H),7.37-7.23(m,4H),7.19-7.14(m,2H),6.79-6.70(m,1H),2.90(s,3H),2.32(s,6H)ppm。MS：M/e 417(M+1)+。
化合物B21：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基-1-(六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0272-853
步驟A：4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0272-854
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(100mg，0.2570mmol)、六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(57mg，0.3085mmol)、HATU(146mg，0.3856mmol)、DIPEA(99mg，0.7712mmol)在DMF(3mL)中的混合物在室溫下攪拌3小時。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM/MeOH=40：1至10：1)純化以得到呈白色固體的產物(96mg， 67.0%)。MS：M/e 558(M+1)+。
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基-1-(六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0273-856
將4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(96mg，0.1723mmol)在HCl於二噁烷(3mL，4mol/L)中的溶液中的混合物在室溫下攪拌3小時。將反應混合物濃縮並通過柱層析(DCM/MeOH=40：1至10：1)純化，得到呈白色固體的產物(63mg，79.98%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.31(s,1H),8.12(s,2H),7.96(s,1H),7.31(dd,J=15.9,8.3Hz,3H),7.25(d,J=3.2Hz,1H),7.17(d,J=7.1Hz,2H),6.75(d,J=1.4Hz,1H),3.58(s,2H),3.19-2.63(m,6H),2.30(s,3H)。MS：M/e 458(M+1)+。
化合物B22：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基-1-(2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚-6-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0273-855
將2-氧雜-6-氮雜螺[3.3]庚烷(15mg，0.15mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(40mg，0.1mmol)、HATU(43mg，0.11mmol)和DIPEA(0.2mL)在DMF(2mL)中的混合物在室溫下攪 拌過夜。將反應混合物倒入水(10mL)中並且用EA(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥並且在減壓下濃縮。將殘餘物通過製備型TLC(EA：100%)純化以得到呈白色固體的標題化合物(19mg，產率：39.3%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.30(s,1H),8.04(br.s,2H),7.97-7.89(m,1H),7.35-7.21(m,4H),7.07-6.90(m,2H),6.81-6.66(m,1H),4.69-4.42(m,3H),4.35(s,1H),4.24-4.03(m,2H),3.83-3.68(m,1H),3.10-2.93(m,1H),2.30(s,3H)ppm。MS：M/e 471(M+1)+。
化合物B23：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基-1-(吡咯啶-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0274-857
在室溫下向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(40mg，0.1mmol)、吡咯啶(10mg，0.14mmol)、DIEA(55mg，0.42mmol)在DMF(1mL)中的混合物中添加HATU(46mg，0.12mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物用10mL的EA稀釋，用鹽水(5mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且將所得油狀物通過製備型TLC(EA：100%)純化，以在凍幹後得到標題產物(8.0mg，產率18%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.25(d,J=1.6Hz,1H),8.05(s,2H),7.96(s,1H),7.38-7.21(m,4H),7.14(d,J=8.0Hz,2H),6.77-6.71(m,1H),3.55-3.38(m,2H),2.67-2.59(m,1H),2.40-2.30(m,4H),1.69-1.49(m,4H)。MS：M/e 443(M+1)+。
化合物B24：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c] 嘧啶-7-基)-1-(氮雜環丁烷-1-基)-2-苯基丙-1-酮。
Figure 108125875-A0101-12-0275-859
在室溫下向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(40mg，0.1mmol)、氮雜環丁烷(10mg，0.17mmol)、DIEA(55mg，0.42mmol)在DMF(1mL)中的混合物中添加HATU(46mg，0.12mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。將混合物用10mL的EA稀釋，用鹽水(5mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且將所得油狀物通過製備型TLC(EA：100%)純化，以在凍幹後得到標題產物(21mg，產率49%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.29(s,1H),8.05(s,2H),7.96(s,1H),7.39-7.18(m,4H),7.04(d,J=7.2Hz,2H),6.75(s,1H),4.11-3.77(m,2H),3.67-3.47(m,1H),3.04-2.80(m,1H),2.32(s,3H),2.07-1.90(m,2H)。MS：M/e 429(M+1)+。
化合物B25：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-羥基-4-甲基六氫吡啶-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0275-858
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(100mg，0.26mmol)、HATU(108mg，0.28mmol)和DIEA(100mg，0.78mmol)在THF(15ml)中的攪拌溶液中添加4-甲基六氫吡啶-4-醇(33mg，0.28mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌15h。完成後，將反應混合物用EA(30ml) 稀釋，並且然後用H2O(15ml X 2)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，過濾，並且然後在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過製備型TLC用PE：EA(1：5)純化以得到產物(6.65mg)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.28(s,1H),8.07(s,2H),7.96(s,1H),7.36-7.28(m,3H),7.24(d,J=4Hz,1H),7.19(d,J=8Hz,2H),6.74(dd,J=4Hz,2Hz,1H),4.22(s,1H),4.18-3.95(m,1H),3.16-3.01(m,1H),2.99-2.78(m,2H),2.28(s,3H),1.19-1.16(m,4H),0.92(s,3H)ppm。MS：M/e 487(M+1)+。
化合物B26：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基-1-(7-氧雜-2-氮雜螺[3.5]壬-2-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0276-860
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(100mg，0.2570mmol)、7-氧雜-2-氮雜螺[3.5]壬烷(39mg，0.3085mmol)、HATU(146mg，0.3856mmol)、DIPEA(99mg，0.7712mmol)在DMF(3mL)中的混合物在室溫下攪拌3小時。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM/MeOH=40：1至10：1)純化以得到呈白色固體的產物(62mg，48.43%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.28(s,1H),8.07(s,2H),7.96(s,1H),7.32-7.23(m,4H),7.04(d,J=6.5Hz,2H),6.75(dd,J=3.3,1.7Hz,1H),3.72(q,J=9.6Hz,2H),3.47-3.33(m,4H),2.33(s,3H),1.48(dd,J=12.5,6.0Hz,2H),1.36-1.20(m,4H)。MS：M/e 499(M+1)+。
化合物B27：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-甲基六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0277-862
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(100mg，0.2570mmol)、1-甲基六氫吡嗪(31mg，0.3085mmol)、HATU(146mg，0.3856mmol)、DIPEA(99mg，0.7712mmol)在DMF(3mL)中的混合物在室溫下攪拌3小時。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM/MeOH=40：1至10：1)純化以得到呈白色固體的產物(76mg，62.8%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.32(s,1H),8.10(s,2H),7.96(d,J=0.9Hz,1H),7.35-7.27(m,3H),7.25(d,J=3.3Hz,1H),7.13(s,2H),6.75(dd,J=3.4,1.8Hz,1H),3.59(dd,J=10.1,6.2Hz,2H),3.33(s,3H),3.11(dd,J=7.2,4.2Hz,2H),2.33(s,3H)。MS：M/e 472(M+1)+。
化合物B28：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-((S)-3-甲氧基六氫吡啶-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0277-861
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(30mg，0.077mmol)、(S)-3-甲氧基六氫吡啶(8.9mg，0.077mmol)、HATU(35mg，0.092mmol)和DIPEA(30mg，0.23mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(60mL)中並用EA(20mL x 3)萃取。 將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，在真空中濃縮並且通過柱層析(EA)純化以得到目標化合物(20mg，53.3%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.27(s,1H),8.07(s,2H),7.96(s,1H),7.31-7.20(m,6H),6.74(dd,J=3.1,1.7Hz,1H),3.97(s,1H),3.3-3.14(m,4H),2.82-2.67(m,3H),2.29(d,J=15.4Hz,3H),1.66(m,2H),1.23(m,2H)。MS：M/e 487(M+1)+。
化合物B29：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-((S)-3-甲氧基吡咯啶-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0278-863
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、HATU(54mg，0.14mmol)和DIEA(50mg，0.39mmol)在THF(15ml)中的攪拌溶液中添加(S)-3-甲氧基吡咯啶鹽酸鹽(18mg，0.13mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌15h。完成後，將反應混合物用EA(30ml)稀釋，並且然後用H2O(15ml X 2)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，過濾，並且然後在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過製備型TLC用PE：EA(1：5)純化以得到產物(30.1mg，50%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.30-8.22(m,1H),8.04(s,2H),7.96(s,1H),7.36-7.10(m,6H),6.81-6.70(m,1H),3.83-3.47(m,3H),3.32-3.23(m,2H),3.15-2.86(m,3H),2.40-2.24(m,4H),1.70-1.67(m,1H)ppm。MS：M/e 473(M+1)+。
化合物B30：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-((R)-3-甲氧基吡咯啶-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0279-865
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、HATU(54mg，0.14mmol)和DIEA(50mg，0.39mmol)在THF(15ml)中的攪拌溶液中添加(R)-3-甲氧基吡咯啶鹽酸鹽(18mg，0.13mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌15h。完成後，將反應混合物用EA(30ml)稀釋，並且然後用H2O(15ml X 2)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，過濾，並且然後在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過製備型TLC用PE：EA(1：5)純化以得到產物(26.5mg，44%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.30-8.22(m,1H),8.05(s,2H),7.95(s,1H),7.37-7.11(m,6H),6.80-6.70(m,1H),3.83-3.44(m,3H),3.32-3.30(m,2H),3.15-2.86(m,3H),2.40-2.28(m,4H),1.71-1.66(m,1H)ppm。MS：M/e 473(M+1)+。
化合物B31：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-((R)-3-甲氧基六氫吡啶-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0279-864
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、HATU(54mg，0.14mmol)和DIEA(50mg，0.39mmol)在THF(15ml)中的攪拌溶液中添加(R)-3-甲氧基六氫吡啶(15mg，0.13mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌15h。完成後，將反應混合物用EA(30ml)稀釋，並且然後用H2O(15ml X 2)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，過濾，並且然 後在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過製備型TLC用PE：EA(1：5)純化以得到產物(15.6mg，25%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.27(s,1H),8.07(s,2H),7.96(s,1H),7.38-7.12(m,6H),6.74(dd,J=4Hz,2Hz,1H),4.28-3.86(m,1H),3.28(s,3H),3.26-3.08(m,2H),2.85-2.70(m,2H),2.36-2.16(m,4H),1.73-1.59(m,1H),1.31-1.03(m,2H)ppm。MS：M/e 487(M+1)+。
化合物B32：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-((R)-3-羥基六氫吡啶-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0280-866
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(50mg，0.13mmol)、HATU(54mg，0.14mmol)和DIEA(50mg，0.39mmol)在THF(15ml)中的攪拌溶液中添加(R)-六氫吡啶-3-醇鹽酸鹽(18mg，0.13mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌15h。完成後，將反應混合物用EA(30ml)稀釋，並且然後用H2O(15ml X 2)洗滌。將有機層用Na2SO4乾燥，過濾，並且然後在減壓下濃縮以得到殘餘物。將殘餘物通過製備型TLC用PE：EA(1：5)純化以得到產物(40.5mg，67%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.28(s,1H),8.05(s,2H),7.96(s,1H),7.35-7.12(m,6H),6.74(dd,J=4Hz,2Hz,1H),4.97-4.00(m,2H),3.32-2.80(m,4H),2.40-2.20(m,4H),1.69-1.59(m,1H),1.28-1.01(m,2H)ppm。MS：M/e 473(M+1)+。
化合物B33：7-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙醯基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0281-868
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(100mg，0.2570mmol)、7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸甲酯(56mg，0.3085mmol)、HATU(146mg，0.3856mmol)、DIPEA(99mg，0.7712mmol)在DMF(3mL)中的混合物在室溫下攪拌3小時。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM/MeOH=40：1至10：1)純化以得到呈白色固體的產物(74mg，57.8%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.28(s,1H),8.05(s,2H),7.95(d,J=0.9Hz,1H),7.35-7.26(m,3H),7.25(d,J=3.4Hz,1H),7.18(d,J=7.1Hz,2H),6.74(dd,J=3.4,1.8Hz,1H),3.93(s,3H),3.53(s,3H),3.00(s,2H),2.79(s,2H),2.28(s,4H),1.97-1.65(m,J=46.8Hz,4H),1.44(d,J=40.8Hz,2H)。MS：M/e 555(M+1)+。
化合物B34：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基-1-(2-氧雜-7-氮雜螺[3.5]壬-7-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0281-867
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-苯基丙酸(100mg，0.2570mmol)、2-氧雜-7-氮雜螺[3.5]壬烷(39mg，0.3085mmol)、HATU(146mg，0.3856mmol)、DIPEA(99mg，0.7712mmol)在DMF(3mL)中的混合物在室溫下攪拌3小時。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用 EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM/MeOH=40：1至10：1)純化以得到呈白色固體的產物(74mg，57.8%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.28(s,1H),8.06(s,1H),7.96(s,1H),7.38-7.26(m,3H),7.25(d,J=3.3Hz,1H),7.18(d,J=7.0Hz,2H),6.74(dd,J=3.2,1.7Hz,1H),4.16(s,4H),3.47(s,2H),2.80(s,2H),1.68(s,2H),1.10(d,J=36.9Hz,2H)。MS：M/e 499(M+1)+。
化合物C1：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0282-869
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)丙酸乙酯
Figure 108125875-A0101-12-0282-870
室溫下，向2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(500 mg，2.07mmol)在DMF(20mL)和K2CO3(344mg，2.49mmol)中的攪拌溶液中添加2-氯丙酸乙酯(339mg，2.49mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜。將混合物用水(20mL)稀釋，並用EA(20mL x 2)萃取。將殘餘物(N1和N2位置化合物的混合物)直接用於下一步驟。MS：M/e 342(M+1)+。
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0283-872
在室溫下向步驟A的產物(707mg，粗品，2.07mmol)在MeOH(12mL)中的攪拌溶液中添加NaOH水溶液(2.0M，4mL)。添加後，將混合物在60℃下攪拌3小時。將反應在減壓下濃縮。將殘餘物溶解在水(20mL)中並且通過HCl溶液(2M)中和至pH=3至4。在減壓下濃縮水相。將殘餘物(N1和N2位置化合物的混合物，含有NaCl)直接用於下一步驟。MS：M/e 314(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0283-871
將步驟B的產物(200mg，0.64mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(190mg，0.7mmol)、HATU(267mg，0.7mmol)和Et3N(322mg，3.19mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並用EA(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥並且在減壓 下濃縮。通過製備型HPLC純化殘餘物，得到呈白色固體的標題化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.76(s,1H),7.98-7.89(m,1H),7.71(s,2H),7.23-7.15(m,1H),7.04(d,J=8.0Hz,2H),6.89(d,J=8.0Hz,2H),6.76-6.70(m,1H),5.86(q,J=6.8Hz,1H),4.07-4.00(m,2H),3.91-3.73(m,2H),3.72-3.66(m,2H),3.64-3.59(m,2H),3.30(s,3H),3.25-3.00(m,4H),1.71(d,J=6.9Hz,3H)ppm。MS：M/e 532(M+1)+。
通過對掌性製備型HPLC將化合物C1分離成兩種對呋體立體異構物：化合物C1a(較早的峰)，和化合物C1b(較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0284-873
Figure 108125875-A0101-12-0284-874
化合物C2：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-3-甲基丁-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0285-877
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-3-甲基丁酸
Figure 108125875-A0101-12-0285-876
在室溫下向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-3-甲基丁酸甲酯(150mg，0.42mmol)在MeOH(4mL)中的攪拌溶液中添加NaOH水溶液(2M，2mL)，並且將所得混合物攪拌2小時。將混合物用HCl(1M)中和並濃縮至乾燥。添加5mL混合溶劑(CH2Cl2/MeOH=3：1)並攪拌10分鐘。將懸浮液過濾，並將濾液濃縮，得到呈白色固體的標題產物(125mg，87%)。MS：M/e 342(M+1)+。
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-3-甲基丁-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0285-875
在室溫下向步驟A的產物(120mg，0.35mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(120mg，0.51mmol)和DIEA(250mg，1.94mmol)在DMF(3mL)中的混合物中添加HATU(160mg，0.42mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌2小時。添加30mL的EA並且將混合物用鹽水(10mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮。將所得殘餘物通過製備型TLC(EA/MeOH=20：1)純化以得到標題產物(57.0mg，產率：29%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.71(d,J=1.2Hz,1H),7.96(s,1H),7.67(s,2H),7.21(d,J=3.6Hz,1H),6.89(d,J=8.0Hz,2H),6.83(d,J=8.8Hz,2H),6.78-6.73(m,1H),5.42(d,J=10.0Hz,1H),4.04-3.98(m,2H),3.98-3.88(m,1H),3.82-3.67(m,2H),3.66-3.59(m,3H),3.31(s,3H),3.06-2.92(m,3H),2.88-2.80(m,1H),2.76-2.64(m,1H),1.03(d,J=6.4Hz,3H),0.77(d,J=6.8Hz,3H)。MS：M/e 560(M+1)+。
化合物C3：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-甲基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0286-878
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8- 基)-2-甲基丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0287-880
將NaOH溶液(352mg，在5mL的水中)添加至2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-甲基丙酸甲酯(750mg，2.2mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌過夜。將溶液濃縮，添加水(10mL)並且用1N HCl溶液酸化至pH=5。將沈澱的固體過濾並且乾燥以得到呈白色固體的所需產物(670mg，93%)。MS：M/e 328(M+1)+
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-甲基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0287-879
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-甲基丙酸(100mg，0.3mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(72mg，0.3mmol)、HATU(137mg，0.36mmol)和DIEA(78mg，0.6mmol)在DMF(15mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(20mL)萃取並且用鹽水(20mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮，並且通過柱層析(PE：EA=1：1至EA)純化以得到呈白色固體的所需產物(135mg，81%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δ 8.74(s,1H),7.87(s,1H),7.41(br.s,2H),7.15(d,J=4.0Hz,1H),6.76-6.74(m,4H),6.69(s,1H),3.97(t,J=4.0Hz,2H),3.58(t,J=4.0Hz,2H), 3.10-3.29(m,4H),3.28(s,3H),2.83(br.s,4H),1.83(s,6H)ppm。MS：M/e 546(M+1)+
化合物C4：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丁-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0288-881
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)丁酸
Figure 108125875-A0101-12-0288-882
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)丁酸甲酯(100mg，0.29mmol)在MeOH/H2O(3.0mL/0.5mL)中的攪拌混合物中添加NaOH水溶液(2.0M，0.5mL)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。去除大部分溶劑以得到水層，然後用HCl水溶液酸化至pH=3至4並且過濾，收集濾餅，乾燥以得到呈白色固體的目標化合物(80mg，84.1%)。MS：M/e 328(M+1)+。
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丁-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0289-884
將步驟A的產物(100mg，0.31mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(80mg，0.24mmol)、HATU(120mg，0.32mmol)和TEA(100mg，0.99mmol)在CH3CN(10mL)中的混合物在室溫下攪拌16小時。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到呈白色固體的目標化合物(21mg，15.5%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.74(s,1H),7.95(s,1H),7.65(br,2H),7.19(d,J=3.1Hz,1H),6.92-6.78(m,4H),6.74(d,J=1.3Hz,1H),5.73-5.60(m,1H),4.02-3.96(m,2H),3.76(d,J=12.8Hz,2H),3.66-3.58(m,4H),3.34(s,3H),3.10-2.83(m,4H),2.22-2.09(m,2H),0.87(t,J=7.1Hz,3H)。MS：M/e 546(M+1)+。
化合物C5：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0289-883
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)戊酸
Figure 108125875-A0101-12-0290-885
將NaOH溶液(304mg，在2mL水中)添加至2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)戊酸乙酯(700mg，1.9mmol)在乙醇(10mL)中的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌3小時。將溶液濃縮，添加水(10mL)並且用1N HCl溶液酸化至pH=5。將沈澱的固體過濾並且乾燥以得到呈白色固體的所需產物(600mg，92%)ppm。MS：M/e 342(M+1)+
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,41三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0290-886
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)戊酸(250mg，0.73mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(173mg，0.73mmol)、HATU(333mg，0.9mmol)和DIEA(181mg，1.4mmol)在DMF(20mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(20mL)萃取並且用鹽水(20mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮，並且通過柱層析(PE：EA=2：1至EA)純化以得到呈白色固體的所需產物(310mg，76%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.74(s,1H),7.94(s,1H),7.65(br.s,2H),7.18(d,J=4.0Hz,1H), 6.83-6.73(m,5H),5.70(dd,J=8.0Hz,4.0Hz,1H),4.01-3.98(m,2H),3.76-3.60(m,6H),3.29(s,3H),2.98-2.90(m,4H),2.16-1.99(m,2H),1.30-1.17(m,2H),0.91(t,J=8.0Hz,3H)ppm。MS：M/e 560(M+1)+
通過對掌性製備型HPLC將化合物C5分離成兩種對映體立體異構物：化合物C5a(較早的峰)，和化合物C5b(較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0291-887
Figure 108125875-A0101-12-0291-888
化合物C6：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-甲基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0291-889
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-甲基丙酸(50mg，0.15mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪(43mg，0.15mmol)、HATU(69mg，0.18mmol)和DIEA(39mg，0.3mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(5mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析法(PE：EA=1：1至EA)純化以得到所需產物(32mg，36%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.85(s,1H),7.94(s,1H),7.68(br.s,2H),7.16(d,J=4.0Hz,1H),6.76(s,1H),6.74-6.72(m,4H),3.95(t,J=4.0Hz,2H),3.65(t,J=4.0Hz,2H),3.54-3.52(m,2H),3.43-3.41(m,2H),3.36(br.s,3H),3.22(s,3H),2.80(br.s,5H),1.80(s,6H)ppm。MS：M/e 590(M+1)+
化合物C7：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0292-890
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)戊酸(50mg，0.15mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪(41mg，0.15mmol)、HATU(69mg，0.18mmol)和DIEA(390mg，0.3mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(5mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析法(PE：EA=1：1至EA)純化以得到所需產物(38mg，42%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.74(s,1H),7.94(s,1H),7.65(br.s,2H),7.18(d,J=4.0Hz,1H),6.84-6.73(m,5H), 5.70(dd,J=8.0Hz,4.0Hz,1H),3.99(m,2H),3.70-3.41(m,10H),3.24(s,3H),2.99-2.91(m,4H),2.17-1.99(m,2H),1.30-1.18(m,2H),0.91(t,J=8.0Hz,3H)ppm。MS：M/e 604(M+1)+
化合物C8：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丁-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0293-891
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)丁酸(50mg，0.15mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪(65mg，0.23mmol)、HATU(86mg，0.23mmol)和TEA(30mg，0.30mmol)在DMF(5mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(21mg，23.7%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.74(s,1H),7.94(d,J=1.0Hz,1H),7.67(br.,2H),7.19(d,J=3.4Hz,1H),6.94-6.83(m,4H),6.73(dd,J=3.4,1.8Hz,1H),5.64(dd,J=8.8,6.1Hz,1H),4.03-3.98(m,2H),3.80-3.76(m,2H),3.68-3.65(m,4H),3.56(dd,J=5.7,3.8Hz,2H),3.45(dd,J=5.7,3.7Hz,2H),3.24(s,3H),3.15-2.89(m,4H),2.25-2.06(m,2H),0.87(t,J=7.3Hz,3H)ppm。MS：M/e 590(M+1)+。
化合物C9：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0294-893
將1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪(60mg，0.21mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)丙酸(30mg，0.1mmol)、HATU(40mg，0.11mmol)和DIPEA(0.4mL，過量)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入水(20mL)中並且用EA(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥並且在減壓下濃縮。將殘餘物通過製備型TLC(EA：100%)純化以得到呈白色固體的標題化合物(5mg，產率：8.7%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.74(s,1H),7.94(s,1H),7.65(br.s,2H),7.19(s,1H),6.96-6.78(m,4H),6.73(s,1H),5.94-5.72(m,1H),4.09-3.92(m,2H),3.84-3.51(m,8H),3.49-3.42(m,2H),3.24(s,3H),3.10-2.87(m,4H),1.80-1.59(m,3H)ppm。MS：M/e 576(M+1)+。
化合物C10：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)己-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0294-892
Figure 108125875-A0101-12-0295-894
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)己酸
Figure 108125875-A0101-12-0295-895
將NaOH溶液(160mg，在2mL水中)添加至2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)己酸甲酯(380mg，1.0mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌過夜。將溶液濃縮，添加水(10mL)並且用1N HCl溶液酸化至pH=5。將沈澱的固體過濾並且乾燥以得到呈白色固體的所需產物(355mg，97%)。MS：M/e 356(M+1)+
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)己-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0295-896
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)己酸(50mg，0.14mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(33mg，0.14mmol)、 HATU(64mg，0.17mmol)和DIEA(36mg，0.28mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮，並且通過柱層析(PE：EA=1：1至EA)純化以得到呈白色固體的所需產物(16mg，20%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.74(s,1H),7.94(d,J=4.0Hz,1H),7.65(br.s,2H),7.18(d,J=4.0Hz,1H),6.87-6.73(m,5H),5.67(dd,J=8.0Hz,4.0Hz,1H),4.02-3.98(m,2H),3.75-3.60(m,6H),3.29(s,3H),3.00-2.89(m,4H),2.19-2.03(m,2H),1.35-1.13(m,4H),0.85(t,J=8.0Hz,3H)ppm。MS：M/e 574(M+1)+
化合物C11：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)己-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0296-897
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)己酸(50mg，0.14mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪(39mg，0.14mmol)、HATU(64mg，0.17mmol)和DIEA(36mg，0.28mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(10mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析法(PE：EA=1：1至EA)純化以得到所需產物(25mg，29%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.74(s,1H),7.94(s,1H),7.65(br.s,2H),7.18(d,J=4.0Hz,1H),6.88-6.73(m,5H),5.67(dd,J=8.0Hz,4.0Hz,1H),3.99(t,J=4.0Hz,2H),3.76-3.55(m,8H),3.46-3.43(m,5H),3.06-2.90(m,4H),2.19-2.06(m,2H),1.35-1.13(m,4H),0.85(t,J=8.0Hz, 3H)ppm。MS：M/e 618(M+1)+
化合物C12：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-3-甲基丁-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0297-898
在室溫下向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-3-甲基丁酸(55mg，0.16mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪(50mg，0.18mmol)、DIEA(100mg，0.77mmol)在DMF(2mL)中的混合物中添加HATU(68mg，0.18mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌4小時。添加20mL的EA並且將混合物用鹽水(10mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮。將所得殘餘物通過製備型TLC(EA/MeOH=20：1)純化以得到標題產物(35.0mg，產率：36%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.68(s,1H),7.94(d,J=1.2Hz,1H),7.65(s,2H),7.19(d,J=3.6Hz,1H),6.92-6.77(m,4H),6.73(dd,J=3.2,2.0Hz,1H),5.40(d,J=10.4Hz,1H),4.04-3.96(m,2H),3.95-3.85(m,1H),3.80-3.65(m,4H),3.64-3.52(m,3H),3.44-3.42(m,2H),3.23(s,3H),3.03-2.90(m,3H),2.85-2.78(m,1H),2.72-2.62(m,1H),1.01(d,J=6.4Hz,3H),0.75(d,J=6.4Hz,3H)。MS：M/e 604(M+1)+。
化合物C13：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-胺基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0298-900
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0298-899
在室溫下向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)丙酸乙酯(800g，2.35mmol)在MeOH(20mL)中的攪拌溶液中添加NaOH水溶液(2.0M，6.4mL)。將混合物在室溫下攪拌過夜。去除溶劑，並且將殘餘物溶解在水(20mL)中。將混合物用HCl水溶液(2M)酸化至pH=3至4。從體系中沈澱出固體。將混合物過濾並且收集固體。將白色固體(450mg，61.3%)在空氣中乾燥並且直接用於下一步驟。MS：M/e 314(M+1)+。
步驟B：2-(2-(4-(4-(2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)丙醯基)六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙基)異吲哚啉-1,3-二酮
Figure 108125875-A0101-12-0299-901
將步驟A的產物(150mg，0.48mmol)、2-(2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙基)異吲哚啉-1,3-二酮(185mg，0.53mmol)、HATU(200mg，0.53mmol)和DIEA(0.5mL，過量)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入水(20mL)中，並且從體系中沈澱出固體。將固體過濾並且在空氣中乾燥。將黃色固體(200mg，產率：64.5%)不經進一步純化而用於下一步驟。MS：M/e 647(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-胺基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0299-902
在室溫下向步驟B的產物在EtOH(30mL)中的攪拌溶液中添加水合肼(2mL)。將混合物在回流下攪拌過夜。從體系中沈澱出棕色固體。將混合物過濾並且收集固體。將固體溶解在EtOH中，並將混合物在回流下攪拌過夜。將混合物過濾並且將固體在空氣中乾燥。得到呈棕色固體的標題化合物(55mg，產率：34.4%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.74(s,1H),7.94(s,1H),7.65(s,2H),7.19(d,J=4Hz,1H),6.90(d,J=12Hz,2H),6.82(d,J=12Hz,2H),6.73(dd,J=4,2Hz,1H),5.99-5.71(m,1H),3.83(t,J=6Hz,2H),3.78-3.67(m,2H),3.68-3.56(m,2H), 3.12-2.88(m,4H),2.83(t,J=6Hz,2H),1.70(d,J=8Hz,3H)ppm。MS：M/e 517(M+1)+。
化合物C14：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0300-904
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-苯基乙酸
Figure 108125875-A0101-12-0300-903
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-苯基乙酸甲酯(360mg，0.92mmol)在MeOH/H2O(9mL/3mL)中的攪拌混合物中添加NaOH水溶液(2.0M，2mL)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。去除大部分溶劑以得到水層，然後用HCl水溶液酸化至pH=3至4並且過濾，收集濾餅，乾燥以得到呈白色固體的目標化合物(200mg，57.8%)。MS：M/e 376(M+1)+。
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0301-905
將步驟A的產物(50mg，0.13mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(55mg，0.23mmol)、HATU(75mg，0.20mmol)和TEA(40mg，0.39mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌5小時。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(50mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到呈白色固體的目標化合物(40mg，50.7%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.17(s,1H),7.92(s,1H),7.70(br.,2H),7.59-7.43(m,5H),7.15(d,J=3.4Hz,1H),7.11(s,1H),6.86-6.77(m,4H),6.75-6.69(m,1H),4.03-3.95(m,2H),3.80-3.71(m,1H),3.71-3.57(m,4H),3.50-3.40(m,1H),3.34(s,1H),3.28(s,3H),3.10-3.01(m,1H),2.98-2.87(m,2H)ppm。MS：M/e 594(M+1)+。
化合物C15：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0301-973
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-苯基乙酸(50mg，0.13mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪(40mg，0.14mmol)、HATU(84mg，0.22mmol)和TEA(40mg，0.39mmol) 在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌4小時。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(50mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(32mg，37.8%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.17(s,1H),7.93(s,1H),7.77-7.66(m,2H),7.59-7.46(m,5H),7.15(d,J=3.3Hz,1H),7.11(s,1H),6.86-6.78(m,5H),6.75-6.69(m,1H),4.02-3.96(m,2H),3.80-3.61(m,5H),3.60-3.54(m,2H),3.50-3.41(m,3H),3.24(s,3H),3.09-2.98(m,2H),2.98-2.88(m,2H)ppm。MS：M/e 638(M+1)+。
化合物C16：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-環丙基-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0302-907
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-環丙基乙酸乙酯和2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-環丙基乙酸乙酯
Figure 108125875-A0101-12-0303-909
將2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(5.0g，20.7mmol)、2-溴-2-環丙基乙酸乙酯(6.4g，31.1mmol)和K2CO3(7.1g，51.4mmol)在DMF(50mL)中的混合物在50℃加熱16小時。將混合物用EA(200mL)稀釋，並過濾懸浮液。將濾液用鹽水(50mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮。將所得油狀物通過用PE/EA(5：1至2：1)溶離的柱層析純化，得到呈淺黃色固體的2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-2-環丙基乙酸乙酯(1.4g)，MS：M/e 368(M+1)+，以及呈淺黃色固體的2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-環丙基乙酸乙酯(1.9g)，MS：M/e 368(M+1)+。
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-環丙基乙酸
Figure 108125875-A0101-12-0303-908
在室溫下向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-環丙基乙酸乙酯(1.8g，4.9mmol)在MeOH(30mL)中的攪拌溶液中添加NaOH水溶液(1M，15mL)，並且將所得混合物攪拌4小時。將混合物用HCl(1M)中和至pH=6。沈澱出白色固體並且將其過濾，並將濾餅在IR燈下乾燥，得到呈白色固體的標題產物(1.4g，84%)。MS：M/e340(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-環丙基-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0304-910
在室溫下向步驟B的產物(600mg，1.77mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(460mg，1.95mmol)、DIEA(550mg，4.26mmol)在DMF(10mL)中的混合物中添加HATU(750mg，2.0mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌14小時。將混合物倒入40mL H2O中，並將白色沈澱過濾。通過柱層析(DCM/MeOH=50：1至30：1)純化濾餅，得到標題產物(428mg，78%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.83(s,1H),7.94(s,1H),7.64(s,2H),7.19(d,J=3.2Hz,1H),6.87(dd,J=28.4,8.4Hz,4H),6.74(s,1H),5.13(d,J=9.6Hz,1H),4.08-3.96(m,2H),3.89-3.71(m,2H),3.70-3.55(m,4H),3.29(s,3H),3.07-2.91(m,4H),1.84-1.63(m,1H),0.80-0.62(m,3H),0.53-0.38(m,1H)。MS：M/e 558(M+1)+。
通過對掌性製備型HPLC將化合物C16分離成兩種對映體立體異構物；化合物C16a(較早的峰)，和化合物C16b(較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0304-911
Figure 108125875-A0101-12-0304-912
Figure 108125875-A0101-12-0305-913
化合物C17：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-4-甲基戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0305-914
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-4-甲基戊酸
Figure 108125875-A0101-12-0305-915
向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-4-甲基戊酸甲酯(270mg，0.73mmol)在MeOH/H2O(10mL/5mL)中的攪拌混合物中添加NaOH水溶液(2.0M，4mL)。添加後，將反應混合物攪拌過夜。去除大部分溶劑以得到水層，然後用HCl水溶液酸化至pH=3至4並且過濾，收集濾 餅，乾燥以得到呈白色固體的目標化合物(200mg，77%)。MS：M/e 356(M+1)+。
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-4-甲基戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0306-917
將步驟A的產物(50mg，0.14mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(33mg，0.14mmol)、HATU(64mg，0.168mmol)和DIPEA(36mg，0.28mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(20mg，24.9%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.77(s,1H),7.94(d,J=0.8Hz,1H),7.65(s,2H),7.26-7.10(m,1H),6.85(dd,J=25.6,9.2Hz,4H),6.74(dd,J=3.2,1.6Hz,1H),5.70(m,1H),4.05-3.95(m,2H),3.74(s,2H),3.67-3.53(m,4H),3.30(s,3H),3.13-2.96(m,2H),2.91(m,2H),2.28-2.15(m,1H),1.91-1.77(m,1H),1.43-1.27(m,1H),0.96(d,J=6.4Hz,3H),0.88(d,J=6.4Hz,3H)ppm。MS：M/e 574(M+1)+。
化合物C18：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-4-甲基戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0306-916
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-4-甲基戊酸(50mg，0.14mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪(39.4mg，0.14mmol)、HATU(64mg，0.168mmol)和DIPEA(36mg，0.28mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。將反應混合物倒入H2O(20mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並通過製備型HPLC純化，得到呈TFA鹽的目標化合物，將其用K2CO3水溶液處理，用EtOAc(15mL x 2)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，並濃縮以得到目標化合物(10mg，11.6%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.77(s,1H),7.94(s,1H),7.65(s,2H),7.18(d,J=3.2Hz,1H),6.85(dd,J=25.2,9.2Hz,4H),6.74(dd,J=3.2,1.6Hz,1H),5.70(dd,J=10.4,4.8Hz,1H),4.36(t,J=5.2Hz,1H),4.04-3.96(m,2H),3.81-3.52(m,8H),3.45(m,2H),3.24(s,3H),3.13-2.84(m,4H),2.22(m,1H),1.83(m,1H),1.35(m,1H),0.97(d,J=6.4Hz,3H),0.87(d,J=6.4Hz,3H)ppm。MS：M/e 618(M+1)+。
化合物C19：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(二甲基胺基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0307-918
步驟A：4-(4-(2-(二甲基胺基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯
Figure 108125875-A0101-12-0308-921
在0℃下向4-(4-羥基苯基)六氫吡嗪-1-甲酸第三丁酯(2g，7.2mmol)在DMF(20mL)中的攪拌溶液中添加NaH(0.36g，9.4mmol)。將混合物在0℃下攪拌30分鐘。然後將2-氯-N,N-二甲基乙-1-胺(1g，9.4mmol)添加至反應中。將反應在室溫下攪拌過夜。將反應用水(20mL)淬滅並且用DCM(20mL x 3)萃取。將合併的有機相用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥並且在減壓下濃縮。將殘餘物(粗品)直接用於下一步驟。MS：M/e 350(M+1)+。
步驟B：N,N-二甲基-2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙-1-胺鹽酸鹽
Figure 108125875-A0101-12-0308-920
在室溫下將步驟A的粗產物溶解在HCl/1,4-二噁烷(4M，20mL)中。將混合物在室溫下攪拌4小時。從體系中沈澱出棕色固體。將混合物過濾並且收集固體。將固體(500mg，產率：27.9%)在空氣中乾燥並且直接用於下一步驟。MS：M/e 250(M+1)+。
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(二甲基胺基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0308-919
將步驟B的產物(50mg，0.18mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)丙酸(50mg，0.16mmol)、HATU(67mg，0.18mmol)和DIEA(0.5mL，過量)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反 應混合物倒入水(10mL)中，並且從體系中沈澱出固體。將固體過濾，並且通過製備型HPLC純化以得到標題化合物(8mg，產率：9.8%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.82(s,1H),7.96(s,1H),7.89-7.68(m,2H),7.63-7.35(m,2H),7.20(d,J=4Hz,1H),7.10(d,J=8Hz,2H),6.74(s,1H),5.91(d,J=8Hz,1H),4.38(s,2H),3.96-3.78(m,6H),3.57-3.43(m,4H),2.90-2.72(m,6H),1.81-1.67(m,3H)ppm。MS：M/e 545(M+1)+。
化合物C20：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-3-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0309-922
步驟A：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-3-苯基丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0309-923
在室溫下向2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-3-苯基丙酸甲酯(115mg，0.28mmol)在MeOH(5mL)中的攪拌溶液中添加NaOH水溶液(2M，2mL)，並且將所得混合物攪拌2小時。將混合物用HCl(2M) 中和並濃縮至乾燥。添加20mL混合溶劑(CH2Cl2/MeOH=3：1)並攪拌2小時。將懸浮液過濾，並將濾液濃縮，得到呈白色固體的標題產物(90mg，81%)。MS：M/e 390(M+1)+。
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-3-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0310-924
在室溫下向步驟A的產物(45mg，0.12mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(45mg，0.19mmol)、DIEA(70mg，0.54mmol)在DMF(2mL)中的混合物中添加HATU(75mg，0.20mmol)，並且將混合物在室溫下攪拌16小時。添加30mL的EA並且將混合物用鹽水(15mL x 3)洗滌，用Na2SO4乾燥並且濃縮。將所得殘餘物通過製備型TLC(CH2Cl2/EA/MeOH=10：10：1)純化，並且將所得產物通過製備型HPLC純化以得到標題產物(45mg，產率：64%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.72(s,1H),7.94(s,1H),7.65(s,2H),7.31-7.20(m,4H),7.20-7.12(m,2H),6.89-6.77(m,4H),6.73(dd,J=3.2,1.6Hz,1H),6.01(t,J=7.2Hz,1H),4.07-3.93(m,2H),3.75-3.58(m,5H),3.58-3.52(m,1H),3.51-3.45(m,2H),3.29(s,3H),3.00-2.89(m,1H),2.89-2.74(m,2H),2.74-2.65(m,1H)。MS：M/e 608(M+1)+。
化合物C21：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(2,4-二氟苯基)六氫吡嗪-1-基)戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0311-925
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)戊酸(50mg，0.15mmol)、1-(2,4-二氟苯基)六氫吡嗪(32mg，0.16mmol)、HATU(69mg，0.18mmol)和DIEA(39mg，0.3mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室溫下攪拌2小時。向溶液中添加水(5mL)，用乙酸乙酯(10mL)萃取並且用鹽水(10mL)洗滌。將有機層乾燥，濃縮並且通過柱層析(PE：EA=1：1)純化以得到所需產物(49mg，64%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.76(s,1H),7.95(s,1H),7.66(br.s,2H),,7.19-6.96(m,4H),6.74-6.73(m,1H),5.71-5.67(m,1H),3.78-3.65(m,4H),2.94-2.83(m,4H),2.19-1.99(m,2H),1.33-1.17(m,2H),0.92(t,J=8.0Hz,3H)ppm。MS：M/e 522(M+1)+
化合物C22：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-環丙基-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0311-926
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-環丙基乙酸(50mg，0.15mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪(50mg，0.18mmol)、HATU(84mg，0.22mmol)和TEA(30mg，0.30mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室溫下攪拌4小時。將反應混合物倒入H2O(20mL) 中並且用EtOAc(50mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=1：1至100% EtOAc)純化以得到目標化合物(38mg，42.2%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.84(s,1H),7.95(s,1H),7.66(br,2H),7.20(d,J=3.1Hz,1H),6.90(d,J=9.0Hz,2H),6.83(d,J=8.9Hz,2H),6.76-6.72(m,1H),5.14(d,J=9.7Hz,1H),4.04-3.95(m,2H),3.85-3.75(m,2H),3.73-3.63(m,5H),3.60-3.53(m,2H),3.50-3.42(m,2H),3.37-3.31(m,1H),3.28-3.24(m,2H),3.01-2.92(m,3H),1.75(d,J=3.8Hz,1H),0.78-0.66(m,3H),0.46(d,J=5.5Hz,1H)。MS：M/e 602(M+1)+。
化合物C23：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(2,4-二氟苯基)六氫吡嗪-1-基)-4-甲基戊-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0312-927
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-4-甲基戊酸(35.5mg，0.1mmol)、1-(2,4-二氟苯基)六氫吡嗪(19.8mg，0.1mmol)、HATU(46mg，0.12mmol)和DIPEA(25.8mg，0.2mmol)在DMF(3mL)中的混合物攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(15mL)中並且用EtOAc(20mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=10：1至3：1)純化以得到目標化合物(20mg，37.3%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.78(s,1H),7.94(s,1H),7.65(s,2H),7.25-7.17(m,2H),7.03(m,2H),6.74(dd,J=3.2,1.6Hz,1H),5.69(m,1H),3.76(s,2H),3.64(m,2H),3.05-2.93(m,2H),2.91-2.79(m,2H),2.28-2.17(m,1H),1.89-1.78(m,1H),1.35(m,1H),0.97(d,J=6.4Hz,3H),0.88(d,J=6.4Hz,3H)ppm。MS：M/e 536 (M+1)+。
化合物C24：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(甲基胺基)乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0313-928
將N-甲基-2-(4-(六氫吡嗪-1-基)苯氧基)乙-1-胺鹽酸鹽(294mg，0.96mmol)、2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)丙酸(200mg，0.64mmol)、HATU(291mg，0.78mmol)和DIEA(1mL，過量)在DMF(20mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入水(20mL)中，並且從體系中沈澱出固體。將固體過濾，並且通過製備型HPLC純化以得到標題化合物(50mg，產率：14.8%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 9.31(br.s,2H),8.23(s,1H),8.18(br.s,1H),8.01-7.90(m,1H),7.75-7.52(m,2H),7.30-7.20(m,1H),7.16-7.03(m,2H),6.80-6.68(m,1H),5.87-5.69(m,1H),4.29(t,J=4Hz,2H),4.17-3.72(m,4H),3.64-3.24(m,5H),3.17-2.93(m,1H),2.59(t,J=4Hz,3H),1.65(d,J=8Hz,3H)ppm。MS：M/e 531(M+1)+。
化合物C25：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0313-929
Figure 108125875-A0101-12-0314-930
步驟A：2-苯基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0314-931
在0℃下向2-苯基丙酸(5g，33.33mmol)在MeOH(15mL)中的溶液中逐滴添加氯化亞碸(5.15g，50mmol)，添加後，將反應混合物在室溫下攪拌3h。將混合物濃縮，用冰水(20mL)淬滅，用EtOAc(30mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=20：1至5：1)純化以得到呈黃色油狀物的2-苯基丙酸甲酯(5.22g，95.49%)。MS：M/e 165(M+1)+。
步驟B：2-溴-2-苯基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0314-932
將2-苯基丙酸甲酯(5.22g，31.83mmol)、NBS(6.80g，38.19mmol)、BPO(0.385g，1.591mmol)在四氯化碳(20mL)中的混合物在70℃下攪拌過夜。將混合物濃縮，將殘餘物用PE洗滌並且過濾，將濾液濃縮以得到呈黃色油狀物的2-溴-2-苯基丙酸甲酯(7.57g，97.87%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.55(d,J=7.5Hz,2H),7.40-7.27(m,3H),3.80(s,3H),2.30(s,3H)
步驟C：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-苯基丙酸甲酯
Figure 108125875-A0101-12-0315-934
將2-溴-2-苯基丙酸甲酯(7.57g，31.15mmol)、2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(7.51g，31.15mmol)、碳酸鉀(8.60g，62.30mmol)在DMF(30mL)中的混合物在60℃下攪拌過夜。將混合物用EtOAc(30mL x 3)萃取。將合併的有機層用水(10mL x 3)和鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮以得到呈白色固體的產物(7.62g，60.70%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.36(s,1H),7.94(d,J=0.8Hz,1H),7.71(s,2H),7.46-7.40(m,3H),7.30-7.25(m,2H),7.15(d,J=3.4Hz,1H),6.72(dd,J=3.3,1.8Hz,1H),3.77(s,3H),2.30(s,3H)。MS：M/e 404(M+1)+。
步驟D：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-苯基丙酸
Figure 108125875-A0101-12-0315-933
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-苯基丙酸甲酯(7.62g，18.91mmol)、氫氧化鋰(7.563g，189.1mmol)在 MeOH(10mL)和水(5mL)中的混合物在50℃下攪拌過夜。將反應混合物用鹽酸酸化，用EtOAc(30mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(石油醚/EtOAc=10：1至1：2)純化以得到呈白色固體的產物(6.20g，84.29%)。MS：M/e 390(M+1)+。
步驟E：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0316-935
將2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-2-苯基丙酸(100mg，0.2571mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪(91mg，0.3856mmol)、HATU(146mg，0.3856mmol)、DIPEA(99mg，0.7712mmol)在DMF(3mL)中的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物倒入H2O(10mL)中並且用EtOAc(15mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，濃縮並且通過柱層析(DCM/MeOH=40：1至10：1)純化以得到產物(92mg，58.96%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.69(s,1H),7.94(s,1H),7.71(s,2H),7.39(dq,J=14.0,7.0Hz,3H),7.20(d,J=7.3Hz,2H),7.17(d,J=3.3Hz,1H),6.86-6.79(m,4H),6.73(dd,J=3.1,1.7Hz,1H),4.01-3.97(m,2H),3.83-3.69(m,4H),3.62-3.58(m,2H),3.28(s,3H),3.01(s,4H),2.29(s,3H)。MS：M/e 608(M+1)+。
通過對掌性製備型HPLC將化合物C25分離成兩種對映體立體異構物：化合物C25a(較早的峰)，和化合物C25b(較晚的峰)。對掌性分離條件如下所示。
Figure 108125875-A0101-12-0317-936
Figure 108125875-A0101-12-0317-937
化合物D2：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮和化合物D1：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0317-938
Figure 108125875-A0101-12-0318-939
步驟A：2-氯-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮(獲得)
Figure 108125875-A0101-12-0318-940
向1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪鹽酸鹽(135mg，0.5mmol)、2-溴乙酸(70mg，0.5mmol)和HATU(190mg，0.5mmol)在DMF(4mL)中的混合物中添加TEA(101mg，1mmol)。將反應在室溫下攪拌過夜。將混合物用水(30mL)淬滅，用DCM(30mL x 3)萃取，用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，過濾並且濃縮。通過柱層析(用EA：PE=1：1溶離)純化殘餘物，得到呈固體的產物(125mg，80%)。產物是2-氯-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮。MS：M/e 313(M+1)+。
步驟B：2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮和2-(5-胺基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)六氫吡嗪-1-基)乙-1-酮
Figure 108125875-A0101-12-0319-941
向步驟A的產物(125mg，0.4mmol)和2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑並[4,3-e][1,2,4]三唑並[1,5-c]嘧啶-5-胺(80mg，0.33mmol)在DMF(2mL)中的混合物中添加K2CO3(68mg，0.49mmol)。將反應在室溫下攪拌4天。將反應用水(30mL)淬滅，用DCM(50mL x 4)萃取，用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，過濾並且濃縮。通過製備型HPLC純化殘餘物，得到兩種異構物(13mg+5mg)。化合物D2：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.53(s,1H),7.94(s,1H),7.67(br.s,2H),7.21(d,J=3.6Hz,1H),6.97(d,J=8.8Hz,2H),6.87(d,J=8.8Hz,2H),6.76-6.72(m,1H),5.40(s,2H),4.03(t,J=4.8Hz,2H),3.80-3.67(m,4H),3.63(t,J=4.8Hz,2H),3.30(s,3H),3.17-3.11(m,2H),3.09-3.02(m,2H)；MS：M/e 518(M+1)+。
化合物D1：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 8.19(s,1H),8.10(br.s,2H),7.95(s,1H),7.25(d,J=3.2Hz,1H),6.95(d,J=8.8Hz,2H),6.86(d,J=8.8Hz,2H),6.76-6.72(m,1H),5.30(s,2H),4.02(t,J=4.0Hz,2H),3.80-3.70(m,4H),3.63(t,J=4.0Hz,2H),3.28(s,3H),3.16-3.108(m,2H),3.05-2.96(m,2H)；MS：M/e 518(M+1)+。
細胞培養和轉染
將HEK293細胞維持在含5% CO2的加濕的37℃環境中補充有10%胎牛血清(FBS，Thermo Scientific)、100單位/mL青黴素(Gibco)和0.1mg/mL鏈黴素(Gibco)的Dulbecco改進Eagle培養基(DMEM，Gibco)中。編碼野生型人A2A受體(A2AR)的質體(在pcDNA3.1中)由Genscript(南京，中國)合成。根據製造商的說明，使用 Lipofectamin 2000(ThermoFisher Scientific)在具有4×105個細胞的6孔板中進行質體的轉染。建立穩定表現A2AR的細胞克隆並且將其維持在除另外有G-418的與HEK293細胞相同的完全培養基(Gibico)中。使用免疫印跡和FACS方法測定每個單細胞克隆中A2AR的表現水平。然後用pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro](Promega)螢光素酶報告基因質體轉染HEK293-A2AR穩定細胞，以建立HEK293-A2AR-luc2p/CRE/Hygro穩定細胞株。
螢光素酶報告基因測定
將HEK293-A2AR-luc2p/CRE/Hygro細胞以5,000個細胞/孔的密度接種在含有1% FBS和1U/mL腺苷脫胺酶(ADA)的DMEM(Sigma)中。18h後，用3nM CGS21680加上A2AR拮抗劑的系列稀釋液處理細胞，所述拮抗劑的系列稀釋液是在含有1% FBS的DMEM中製備的濃度為0.1至10000nM的本文公開的化合物。孵育5h後，根據製造商的說明書使用Bright-Glo螢光素酶測定系統(Promega)量測細胞中的螢光素酶活性。使用PHERAstar FS讀板器(BMG Labtech)量測發光信號。將來自10μM preladenant處理的發光強度設定為0%。測定在3nM CGS21680存在下的最大發光強度，並且將其設定為100%。從整個化合物濃度範圍內的劑量依賴性抑制曲線計算IC50值。
腺苷受體結合測定
使用以下方案在放射性配位體競爭性結合測定(由法國Cerep進行)中測定測試化合物對四種人腺苷受體A1、A2A、A2B和A3的結合親和力。對於A1受體(A1R)，將來自用A1R轉染的CHO細胞的膜勻漿用1nM[3H]DPCPX在含有50mM Tris-HCl(pH 7.4)、5mM MgCl2、1mM EDTA/Tris和2UI/mL ADA的緩衝液中在不存在或存在所述測試化合物的情況下在22℃下孵育60分鐘。對於A2AR，將來 自用A2AR轉染的HEK293細胞的膜勻漿用6nM[3H]CGS21680在含有50mM Tris-HCl(pH 7.4)、10mM MgCl2和2UI/mL ADA的緩衝液中在不存在或存在測試化合物的情況下在22℃下孵育120min。對於A2B受體(A2BR)，將來自用A2BR轉染的HEK293細胞的膜勻漿用5nM[3H]CPX在含有10mM Hepes/Tris(pH 7)、1mM MgCl2和1mM EDTA的緩衝液中在不存在或存在測試化合物的情況下在22℃下孵育60min。對於A3受體(A3R)，將來自用A3R轉染的HEK293細胞的膜勻漿用0.15nM[125I]AB-MECA在含有50mM Tris-HCl(pH 7.4)、5mM MgCl2、1mM EDTA和2UI/mL ADA的緩衝液中在不存在或存在所述測試化合物的情況下在22℃下孵育120min。分別在A1R、A2AR、A2BR、A3R結合測定中，在未標記的1μM DPCPX、10μM NECA、100μM NECA和1μM IB-MECA的存在下測定非特異性結合。孵育後，將樣品急驟過濾並且用冰冷的50mM Tris-HCl洗滌。然後將過濾器乾燥並且使用閃爍混合物(Microscint 0，Packard)在閃爍計數器(Topcount，Packard)中計數以得到放射活性。對每個測定進行重複實驗。結果表示為對照放射性配位體特異性結合的抑制百分比。
小鼠BBB測定
使小鼠適應1周，然後以18至30g體重使用。將禁食小鼠以10mg/kg的劑量口服投予。在投予後1、2和4小時，將收集在含有作為抗凝血劑的K2EDTA的管中的來自心臟血液的血漿樣品和切除的大腦半球立即冷凍並且在-80℃下儲存直至進行生物分析。通過LC-MS/MS測定所述化合物的總濃度。將腦勻漿濃度轉換為腦濃度，用於計算腦與血漿的比率。
Figure 108125875-A0101-12-0321-942
Figure 108125875-A0101-12-0322-943
Figure 108125875-A0101-12-0323-944
Figure 108125875-A0101-12-0324-945
Figure 108125875-A0101-12-0325-946
Figure 108125875-A0101-12-0326-947
Figure 108125875-A0101-12-0327-948
Figure 108125875-A0101-12-0327-949
Figure 108125875-A0101-12-0328-950
Figure 108125875-A0101-12-0328-951
應當理解，如果在本文提到了任何現有技術公開案，則這一參考文獻並不構成承認所述公開案構成任何國家的本領域的一般常識的一部分。
通過標識引用而在本文提到的所有公開案、專利、專利申請和公開的專利申請的公開內容特此通過引用以其整體併入本文。
儘管為了理解清楚的目的，已經通過說明和實例詳細地描述了前述發明， 但是對於業內熟習此項技術者清楚的是，可以實施某些較小的改變和修改。因此，描述和實例不應解釋為限制本發明的範圍。

Claims (43)

  1. 一種式(I)的化合物
    Figure 108125875-A0101-13-0001-952
    或者
    Figure 108125875-A0101-13-0001-953
    或其立體異構物、或其醫藥上可接受的鹽，其中：
    R是芳基或包含1個或2個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的雜原子作為一個或多個環成員的5元或6元雜芳基，並且所述環視情況被至少一個取代基R8取代；
    R1和R2可以相同或不同，它們各自獨立地選自氫、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-C3-8環烷基、雜環基、芳基、或雜芳基，其中所述C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-C3-8環烷基、雜環基、芳基、或雜芳基各自獨立地視情況被至少一個取代基R8取代，條件是R1和R2中的至少一個不是氫；或者
    R1和R2與它們所附接的碳原子一起形成3至12元飽和的、部分或完全不飽和的環，所述環包含0個、1個或2個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的雜原子作為一個或多個環成員，並且所述環視情況被至少一個取代基R8取代；
    R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成3至12元環，所述環包含0個、1個或2個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的另外的雜原子作為一個或多個環成員，所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代；
    R5獨立地是氫、鹵素、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-CN、-NO2、側氧基、-OR5a、-SO2R5a、-COR5a、-CO2R5a、-CONR5aR5b、-C(=NR5a)NR5bR5c、-NR5aR5b、-NR5aCOR5b、-NR5aCONR5bR5c、-NR5aCO2R5b、-NR5aSONR5bR5c、-NR5aSO2NR5bR5c、或-NR5aSO2R5b，其中，作為R5，所述-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8環烷基、雜環基、芳基、或雜芳基中的每一個獨立地並且視情況被一個或兩個或三個取代基R6取代；
    R5a、R5b和R5c可以相同或不同，它們各自獨立地是氫、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中所述-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基各自獨立地視情況被一個或兩個取代基R5d取代；
    R5d獨立地是氫、鹵素、氰基、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、鹵代C1-6烷基、鹵代C2-6烯基、鹵代C2-6炔基、-C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷氧基-、C2-6烯基氧基-、C2-6炔基氧基-、鹵代C1-6烷氧基-、鹵代C2-6烯基氧基-、鹵代C2-6炔基氧基-、C3-8環烷基氧基-、環烷基、雜環基、雜環基氧基-、芳基、芳基氧基-、雜芳基或雜芳基氧基-；
    R6獨立地是氫、鹵素、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-CN、-NO2、側氧基、-OR6a、-SO2R6a、-COR6a、 -CO2R6a、-CONR6aR6b、-C(=NR6a)NR6bR6c、-NR6aR6b、-NR6aCOR6b、-NR6aCONR6bR6c、-NR6aCO2R6b、-NR6aSONR6bR6c、-NR6aSO2NR6bR6c、或-NR6aSO2R6b；
    R6a、R6b和R6c可以相同或不同，它們各自獨立地是氫、鹵素、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-C3-8環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中所述C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基各自獨立地視情況被一個或兩個或三個取代基R7取代；或
    (R6a和R6b)、和/或(R6b和R6c)、和/或(R6c和R6a)與它們所附接的一個或多個原子一起形成3至12元飽和的、部分或完全不飽和的環，所述環包含0個、1個或2個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的另外的雜原子作為一個或多個環成員，並且所述環視情況被至少一個取代基R8取代；
    R7獨立地是氫、鹵素、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-CN、-NO2、側氧基、-OR7a、-SO2R7a、-COR7a、-CO2R7a、-CONR7aR7b、-C(=NR7a)NR7bR7c、-NR7aR7b、-NR7aCOR7b、-NR7aCONR7bR7c、-NR7aCO2R7b、-NR7aSONR7bR7c、-NR7aSO2NR7bR7c、或-NR7aSO2R7b，其中所述-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8環烷基、雜環基、芳基、或雜芳基各自獨立地視情況被一個或兩個選自鹵素、羥基、-C1-6烷基、-C1-6烷氧基、側氧基、氰基和胺基的取代基取代；
    R7a、R7b、和R7c各自獨立地是氫、-C1-6烷基、C1-6烷氧基-C1-6烷基-、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8環烷基、雜環基、芳基、或雜芳基；並且
    R8獨立地是氫、鹵素、氰基、側氧基、胺基、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、鹵代C1-6烷基、鹵代C2-6烯基、鹵代C2-6炔基、-C1-6烷氧基、C3-8環烷基氧基、環烷基、雜環基、芳基、或雜芳基。
  2. 如請求項1的化合物，其中R是含有1個或2個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的雜原子作為一個或多個環成員的C-連接的5元或6元雜芳基。
  3. 如請求項2的化合物，其中R是呋喃基、吡嗪基或噻唑基；較佳是呋喃-2-基、3-甲基吡嗪-2-基或噻唑-2-基。
  4. 如請求項1的化合物，其中R1是氫或C1-6烷基，較佳氫、甲基、乙基；更佳氫；並且R2是視情況被苯基或-C1-6烷氧基(較佳甲氧基)取代的C1-6烷基(較佳甲基、異丙基、乙基、丙基、丁基、或異丁基)；視情況被鹵素或C1-6烷氧基取代的芳基(即苯基或萘基)；-C3-8環烷基(較佳環丙基)、或雜環基。
  5. 如請求項1至4中任一項的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成3元、4元、5元、6元、7元、8元、或9元單環，所述環包含0個、1個或2個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的另外的雜原子作為一個或多個環成員，所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
  6. 如請求項5的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成3元、4元、5元、6元、7元、8元、或9元單環，所述環包含0個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的另外的雜原子作為一個或多個環成員，所述環視情況被 一個或兩個或三個取代基R5取代。
  7. 如請求項5的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成3元、4元、5元、6元、7元、8元、或9元單環，所述環包含1個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的另外的雜原子作為一個或多個環成員，所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
  8. 如請求項7的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成3元、4元、5元、6元、7元、8元、或9元單環，所述環包含一個另外的氮雜原子作為環成員，所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
  9. 如請求項5至9中任一項的化合物，其中所述環是飽和的。
  10. 如請求項5的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形 成氮雜環丁烷基(
    Figure 108125875-A0101-13-0005-954
    )、吡咯啶基(
    Figure 108125875-A0101-13-0005-955
    )、或六氫吡啶基(
    Figure 108125875-A0101-13-0005-956
    )環，所述環 各自視情況被如對式(Ia)或(Ib)所定義的R5取代。
  11. 如請求項5的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形 成視情況被如對式(Ia)或(Ib)所定義的R5取代的六氫吡嗪基環(即
    Figure 108125875-A0101-13-0005-957
    )。
  12. 如請求項1至4中任一項的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成7元、8元、9元、10元、11元、或12元二環，所述環包含0個、1個或2個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的另外的雜原子作為一個或多個環成員，所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
  13. 如請求項12的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成7元、8元、9元、10元、11元、或12元二環稠合環，所述環包含0個、1個或2個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的另外的雜原子作為一個或多個環成員， 所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
  14. 如請求項12的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成7元、8元、9元、10元、11元、或12元二環稠合環，所述環包含0個或1個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的另外的雜原子作為一個或多個環成員，所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
  15. 如請求項12的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成10元二環稠合環，所述環包含0個或1個另外的氮雜原子作為環成員，所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
  16. 如請求項15的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起 形成
    Figure 108125875-A0101-13-0006-958
    、
    Figure 108125875-A0101-13-0006-959
    、
    Figure 108125875-A0101-13-0006-960
    、
    Figure 108125875-A0101-13-0006-961
    、或
    Figure 108125875-A0101-13-0006-962
    環，每個 所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
  17. 如請求項12的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成7元、8元、9元、10元、11元、或12元二環螺環，所述環包含0個、1個或2個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的另外的雜原子作為一個或多個環成員，所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
  18. 如請求項17的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起形成各自包含0個或1個另外的氮原子或氧原子作為環成員的氮雜螺[3.3]庚烷、氮雜螺[3.5]壬烷、氮雜螺[3.4]辛烷、氮雜螺[5.5]十一烷、或氮雜螺[4.5]癸烷，並且所述環視情況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
  19. 如請求項18的化合物，其中R3和R4與它們所附接的氮原子一起 形成
    Figure 108125875-A0101-13-0007-963
    、
    Figure 108125875-A0101-13-0007-964
    、
    Figure 108125875-A0101-13-0007-965
    、或
    Figure 108125875-A0101-13-0007-966
    環，並且所述環視情 況被一個或兩個或三個取代基R5取代。
  20. 如請求項5至19中任一項的化合物，其中所述環被一個R5取代。
  21. 如請求項5至19中任一項的化合物，其中所述環被兩個R5取代。
  22. 如請求項21的化合物，其中所述環被一個C1-6烷基(較佳甲基)取代並且進一步被一個R5取代。
  23. 如請求項20至22中任一項的化合物，其中R5是鹵素、-C1-6烷基、芳基、-OR5a、或-CO2R5a，其中R5a是如對式(Ia)或(Ib)所定義的。
  24. 如請求項23的化合物，其中R5是-CO2R5a，其中R5a是-C1-6烷基，較佳甲基。
  25. 如請求項23的化合物，其中R5是-OR5a，其中R5a是視情況被一個R5d取代的-C1-6烷基，其中R5d是氫、鹵素(較佳氟)、或-C1-6烷氧基。
  26. 如請求項23的化合物，其中R5是-OR5a，其中R5a是三氟甲氧基、甲氧基、甲氧基乙氧基、或羥基。
  27. 如請求項23的化合物，其中R5是視情況被一個或兩個或三個取代基R6取代的苯基，其中R6是如對式(Ia)或(Ib)所定義的。
  28. 如請求項27的化合物，其中R5是視情況被一個或兩個或三個取代基R6取代的苯基，其中R6獨立地是鹵素(較佳氟)、-OR6a、或NR6aR6bC(O)-，其中R6a和R6b是如對式(Ia)或(Ib)所定義的。
  29. 如請求項28的化合物，其中R5是視情況被一個取代基R6取代的苯基，其中
    R6是NR6aR6bC(O)-，其中
    R6a和R6b各自獨立地是氫、-C1-6烷基、或-C3-8環烷基，所述-C1-6烷基和-C3-8環烷基各自視情況被一個R7取代，其中
    R7是雜環基，較佳3至8元雜環，其包含一個或兩個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的雜原子作為一個或多個環成員，視情況被羥基、-C1-6烷基、或-C1-6烷氧基取代。
  30. 如請求項28的化合物，其中R5是視情況被一個取代基R6取代的苯基，其中
    R6是NR6aR6bC(O)-，其中
    R6a和R6b各自獨立地是氫、-C1-6烷基、或-C3-8環烷基，所述-C1-6烷基視情況被一個R7取代，其中
    R7是3至8元飽和單環雜環，其包含一個選自氮或氧的雜原子作為環成員(較佳氧雜環丁烷基)，視情況被羥基取代。
  31. 如請求項28的化合物，其中R5是視情況被一個取代基R6取代的苯基，其中
    R6是NR6aR6bC(O)-，其中
    R6a和R6b與它們所附接的氮原子一起形成3至12元飽和環，所述環包含0個、1個或2個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的另外的雜原子作為一個或多個環成員。
  32. 如請求項31的化合物，其中R6a和R6b與它們所附接的氮原子一起形成3至8元飽和單環，所述環包含0個或1個獨立地選自氮或氧的另外的雜原子作為環成員。
  33. 如請求項32的化合物，其中R6a和R6b與它們所附接的氮原子一起形成6元飽和單環，所述環包含0個或1個另外的氮雜原子作為環成員。
  34. 如請求項31的化合物，其中R6a和R6b與它們所附接的氮原子一起形成六氫吡啶基環。
  35. 如請求項28的化合物，其中R5是視情況被一個或兩個鹵素取代並且進一步視情況被一個取代基R6取代的苯基，其中
    R6是-OR6a，其中
    R6a是視情況被一個R7取代的-C1-6烷基，其中
    R7是雜環基、-OR7a、或-NR7aR7b，其中
    R7a和R7b各自獨立地是氫、-C1-6烷基、C1-6烷氧基-C1-6烷基-；並且
    所述雜環基視情況被鹵素、羥基、或-C1-6烷基取代。
  36. 如請求項35的化合物，其中所述作為R7的雜環基是4元、5元、6元、7元、或8元雜環基，其包含一個或兩個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的雜原子作為一個或多個環成員，視情況被-C1-6烷基取代；較佳是5元或6元雜環基，其包含一個或兩個獨立地選自氮、氧或視情況氧化的硫的雜原子作為一個或多個環成員。
  37. 如請求項36的化合物，其中R7是嗎啉基、嗎啉代、吡咯啶基、吡咯啶子基、4-甲基六氫吡嗪基、或六氫吡啶基。
  38. 如請求項35的化合物，其中R6是-OR6a，其中R6a是視情況被一個R7取代的-C1-6烷基，其中R7是-OR7a，其中R7a是氫、-C1-6烷基、C1-6烷氧基-C1-6烷基-。
  39. 如請求項35的化合物，其中R6是-OR6a，其中R6a是視情況被一個R7取代的-C1-6烷基，其中R7是-NR7aR7b，其中R7a和R7b是氫、或-C1-6烷基。
  40. 如請求項35的化合物，其中R6是甲氧基乙氧基-、甲氧基乙氧基乙氧基-、2-羥基乙氧基、2-羥基丙氧基-、胺基乙氧基-、N,N-二甲基胺基乙氧基-、或N-甲基胺基乙氧基-。
  41. 如請求項1的化合物，其為化合物編號A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7、A8、A9、A10、A11、A12、A13、A14、A15、A16、A17、A18、A19、A20、A21、A22、A23、A24、A25、A26、A27、A28、A29、A30、A31、A32、A33、A34、A35、A36、A37、A38、A39、A40、A41、A42、A43、A44、A45、A46、A47、A48、A49、A50、A51、A52、A53、A54、A55、A56、A57、A58、A59、A60、A61、A62、A63、A64、A65、A66、A67、A68、A69、A70、A71、A72、A73、A74、A75、A76、A77、A78、A79、A80、A81、A82、A83、A84、A85、A86、A87、A88、A89、A90、A91、A92、A93、A94、A95、A96、A97、A98、A99、A100、A101、A102、A103、A104、A105、A106、A107、A108、B1、B2、B3、B4、B5、B6、B7、B8、B9、B10、B11、B12、B13、B14、B15、B16、B17、B18、B19、B20、B21、B22、B23、B24、B25、B26、B27、B28、B29、B30、B31、B32、B33、B34、C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11、C12、C13、C14、C15、C16、C17、C18、C19、C20、C21、C22、C23、C24、C25、D1、或D2。
  42. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1-41中任一項的化合物或其立體異構物或其醫藥上可接受的鹽、以及醫藥上可接受的賦形劑。
  43. 一種治療癌症的方法，其包括向對其有需要的受試者投予如請 求項1-41中任一項的化合物或其立體異構物或其醫藥上可接受的鹽。
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