KR20210125026A

KR20210125026A - Tlr7 작용제로서의 이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 유도체

Info

Publication number: KR20210125026A
Application number: KR1020217027572A
Authority: KR
Inventors: 구오리앙 장; 지안추앙 미아오; 창유 조우; 강 첸; 징 리
Original assignee: 베이진 엘티디
Priority date: 2019-02-07
Filing date: 2020-02-06
Publication date: 2021-10-15
Also published as: ZA202105338B; EP3921319A4; SG11202108284TA; EP3921320B1; JP2022519374A; CN113423708A; IL285311A; EP3921319B1; EP3921320C0; TWI835999B; EP3921319A1; MX2021009444A; KR20210125025A; EP3921320A1; US20230167117A1; MX2021009439A; WO2020160711A1; CA3129178A1; WO2020160710A1; IL285315A

Abstract

본 발명은 TLR7 작용제로 유용한 이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 유도체 또는 이의 입체이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 이를 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다. 또한, 이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 유도체 또는 이의 입체이성체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 TLR7 작용제로 사용하여 암을 치료하는 방법이 개시된다.

Description

TLR7 작용제로서의 이미다조[2,1-F][1,2,4]트리아진-4-아민 유도체

본 발명은 TLR7 작용제(agonist)로 유용한 이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine) 유도체 또는 이의 입체이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 이를 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다. 또한, 이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 유도체 또는 이의 입체이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 TLR7 작용제로 사용하여 암을 치료하는 방법이 개시된다.

톨-유사 수용체(Toll-like receptors, TLR)는 다양한 병원체의 고도로 보존된 분자 패턴((PAMPs)과 내인성 위험 관련 분자 패턴(danger-associated molecular patterns, DAMPs)을 감지하여 초기 선천성 면역 반응에 중요한 역할을 하는 패턴 인식 수용체(pattern recognition receptors, PRRs) 계열에 속한다(Barton, G. M. and R. Medzhitov (2002). "Toll-like receptors and their ligands." Curr Top Microbiol Immunol 270: 81-92.).

10개의 다른 TLRs이 인간에서 확인되었다. 그 중 TLR7, TLR8 및 TLR9는 게놈 구조, 서열 유사성 및 엔도솜 위치에 따라 동일한 TLR 서브패밀리에 속한다. 그들은 특정 유형의 면역 세포로 제한된 발현 패턴을 가지고 있습니다. TLR7은 B 세포 및 형질세포양 수지상 세포(plasmacytoid dendritic cells, pDC)에서 발현되고; TLR8은 단핵구 및 골수성 수지상 세포(monocytes and myeloid dendritic cells, mDC)에서 발현된다(Iwasaki, A. and R. Medzhitov (2004). "Toll-like receptor control of the adaptive immune responses." Nat Immunol 5(10): 987-995.).

천연 리간드 단일 가닥 RNA 외에도 이미다조퀴놀론(imidazoquinolones)(또는 '이미퀴모드 유사' 리간드) 및 구아노-신 유사체는 다양한 특이성으로 TLR7 및/또는 8을 활성화하는 것으로 나타났다. TLR7 및/또는 TLR8의 활성화는 수지상 세포(dendritic cells, DC)의 성숙 및 전염증성 사이토카인의 분비를 유발한다(van Duin, D., et al. (2006). "Triggering TLR signaling in vaccine." Trends Immunol 27(1): 49-55). CTL 및 NK 세포는 사이토카인 및 항원 제시를 통해 자극된 DC에 의해 추가로 활성화되고 증식된다. 따라서 TLR 작용제의 특성은 항암 면역을 강화하기 위한 효율적인 전략을 구성한다(Adams, S. (2009). "Toll-like receptor agonists in cancer therapy." Immunotherapy 1(6): 949-964).

이미퀴모드(Imiquimod, TLR7 작용제)는 면역자극 능력을 갖는 단일 항종양제로서 많은 원발성 피부 종양 및 피부 전이의 치료에 성공적으로 사용되고 있다(Stary, G., et al. (2007). "Tumoricidal activity of TLR7/8-activated inflammatory dendritic cells." J Exp Med 204(6): 1441-1451., Aranda, F., et al. (2014). "Trial Watch: Toll-like receptor agonists in oncological indications." Oncoimmunology 3: e29179.).

WO2016023511은 항바이러스 약물 치료를 위한 TLR7 작용제로서 피롤로피리미딘 화합물을 개시하고 있다.

현재, 암 치료를 위한 TLR 작용제의 전임상 및 임상 개발에 집중적인 노력을 기울이고 있다. 따라서, 암 치료를 위한 보다 강력한 TLR 작용제의 개발이 필요하다.

예상외로 놀랍게도, 본 발명자들은 본원에 개시된 이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 유도체가 특히 화학식 (I)의 고리 A가 헤테로사이클릴 고리로 직접 치환될 때, 보다 강력한 TLR7 작용제 활성을 나타내는 것을 발견하였다. 본 발명자들은 또한 이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민 유도체의 위치 2에 있는 알킬 모이어티의 분지화가 TLR7 작용제 활성을 예기치 않게 개선함을 발견하였다.

일 관점에서 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 입체 이성질체에 관한 것이다.

(I)

여기서, X는 N 또는 CR⁷이고;

R⁷은 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이며;

L¹은 -(CR^aR^b)_m-, -O-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -NR^a-, -C(O)NR^a-, -NR^aC(O)-, -NR^aC(O)O-, -NR^aC(O)NR^b-, -SO₂NR^a-, -NR^aSO₂-, -NR^aS(O)₂NR^b-, -NR^aS(O)NR^b-, -C(O)NR^aSO₂-, -C(O)NR^aSO-, 또는 -C(=NR^a)NR^b-이고,

여기서 m은 1 내지 8의 수이고, -(CR^aR^b)_m-에서 1개 또는 2개의 CR^aR^b 모이어티는 O, S, SO, SO₂, C(O) 및 NR^a로부터 선택된 하나 이상의 모이어티로 대체되지 않거나 대체되며;

R^a 및 R^b는 각각의 경우에 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴, 헤테로아릴 또는 -OR^c이고;

여기서 R^c는 수소, 알킬, 알콕시-알킬-, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로사이클릴 또는 헤테로아릴이며;

R¹은 -OR^1a, -SR^1a, -NR^1aR^1b, -COR^1a, -SO₂R^1a, -C(=O)OR^1a, -C(=O)NR^1aR^1b, -C(=NR^1a)NR^1bR^1c, -N(R^1a)C(=O)R^1b, -N(R^1a)C(=O)OR^1b, -N(R^1a)C(O)NR^1bR^1c, -N(R^1a)S(O)NR^1bR^1c, -N(R^1a)S(O)₂NR^1bR^1c, -NR^1aSO₂R^1b, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴, 또는 헤테로아릴이고, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴, 또는 헤테로아릴 각각은 독립적으로 그리고 임의로 1 또는 2 또는 3개의 치환기 R^1d로 치환되며;

R^1a, R^1b, 및 R^1c는 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴, 또는 헤테로아릴 각각은 할로겐, R^1e로 임의로 치환된 -C_1-8알킬, R^1e로 임의로 치환된 사이클로알킬, R^1e로 임의로 치환된 헤테로사이클릴, R^1e로 임의로 치환된 아릴, R^1e로 임의로 치환된 헤테로아릴, CH₃-(OCH₂CH₂)_n-(여기서, n은 3 내지 10의 수) 또는 -OR^1f로부터 선택된 1 또는 2 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되며;

여기서 R^1e는 할로겐, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노(-NH₂), 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 할로겐으로 임의로 치환된 -C_1-6알킬이고;

여기서 R^1f는 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이들 각각은 -C_1-4알킬 또는 할로겐으로 임의로 치환되며;

R^1d는 각각의 경우에 독립적으로 수소, 옥소, -CN, -NO₂, 아미노(-NH₂), 알킬아미노, 디알킬아미노, 할로겐, 할로알킬, 알킬, 할로알콕시, 알콕시, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴, 또는 헤테로아릴이고;

R²및 R³은 각각의 경우에 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 여기서 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴, 또는 헤테로아릴은 옥소, -CN, -NO₂, 아미노(-NH₂), 알킬아미노, 디알킬아미노, 할로겐, 하이드록시, 할로알킬, 알킬, 할로알콕시, 알콕시, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴로부터 선택된 1-3개의 치환기로 임의로 치환되며;

R⁴는 수소, 할로겐, 시아노, -NO₂, -OR^4a, -SR^4a, -NR^4aR^4b, -COR^4a, -SO₂R^4a, -C(=O)OR^4a, -C(=O)NR^4aR^4b, -C(=NR^4a)NR^4bR^4c, -N(R^4a)C(=O)R^4b, -N(R^4a)C(=O)OR^4b, -N(R^4a)C(O)NR^4bR^4c, -N(R^4a)S(O)NR^4bR^4c, -N(R^4a)S(O)₂NR^4bR^4c, -NR^4aSO₂R^4b, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 헤테로사이클릴 각각은 독립적으로 1 또는 2 또는 3개의 치환기 R^4d로 임의로 치환되며;

R^4a, R^4b, 및 R^4c는 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴 각각은 할로겐, 하이드록시, NH₂-, 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 알콕시로 임의로 치환되고;

R^4d는 각각의 경우에 독립적으로 수소, 옥소, -CN, -NO₂, 할로겐, NH₂-, 알킬아미노, 디알킬아미노, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴, 또는 헤테로아릴 각각은 할로겐, 하이드록시, NH₂-, 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 알콕시로 임의로 치환되며;

고리 A는 아릴 또는 헤테로아릴이고;

R⁵는 할로겐, 하이드록시, 알킬, 할로알킬, 알콕시, 할로알콕시, -옥소-, 또는 -C(=O)OR^5a이며, 여기서 R^5a는 수소, 알킬 또는 할로알킬이고;

p는 0, 1,2 또는 3의 수이며;

L²는 직접 결합, -(CR^fR^g)_t-, -O-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, 또는 -NR^d-이고, 여기서 R^d는 -C_1-6알킬이고, 여기서 t는 1 내지 8의 수이고, -(CR^fR^g)_t-에서 1개 또는 2개의 CR^fR^g 모이어티는 대체되지 않거나 O, S, SO, SO₂, C(O) 및 NR^f로부터 선택된 하나 이상의 모이어티로 대체되며;

R^f및 R^g는 각각의 경우에 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고;

R⁶은 -NR^6aR^6b, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴 각각은 독립적으로 1 또는 2 또는 3개의 치환기 R^6c로 임의로 치환되며;

R^6a 및 R^6b는 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴, 또는 헤테로아릴이고, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴 각각은 할로겐, 하이드록시, NH₂-, 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 알콕시로 임의로 치환되며;

R^6c는 독립적으로 수소, 할로겐, 시아노, -NO₂, -OR^6d, -SR^6d, -NR^6dR^6e, -COR^6d, -SO₂R^6d, -C(=O)OR^6d, -C(=O)NR^6dR^6e, -C(=NR^6d)NR^6eR^6f, -N(R^6d)C(=O)R^6e, -N(R^6d)C(=O)OR^6e, -N(R^6d)C(O)NR^6eR^6f, -N(R^6d)S(O)NR^6eR^6f, -N(R^6d)S(O)₂NR^6eR^6f, -NR^6dSO₂R^6e, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로아릴 각각은 독립적으로 1 또는 2 또는 3개의 치환기 R^6g로 임의로 치환되며;

R^6d, R^6e 및 R^6f는 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴 각각은 1 또는 2 또는 3개의 치환기 R^6g로 임의로 치환되며;

R^6g는 각각의 경우에 독립적으로 수소, 할로겐, 시아노, -NO₂, -OR^6h, -SR^6h, -NR^6hR⁶ⁱ, -COR^6h, -SO₂R^6h, -C(=O)OR^6h, -C(=O)NR^6hR⁶ⁱ, -C(=NR^6h)NR⁶ⁱR^6j, -N(R^6h)C(=O)R⁶ⁱ, -N(R^6h)C(=O)OR⁶ⁱ, -N(R^6h)C(O)NR⁶ⁱR^6j, -N(R^6h)S(O)NR⁶ⁱR^6j, -N(R^6h)S(O)₂NR⁶ⁱR^6h, -NR^6hSO₂R⁶ⁱ, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고,

R^6h, R⁶ⁱ 및 R^6j는 독립적으로 수소, 알킬, 알콕시, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴 각각은 독립적으로 할로겐, -C_1-4알킬, -C_1-4알콕시, 하이드록시, 니트로, -NH₂, 알킬아미노, 디알킬아미노, 또는 시아노로 임의로 치환된다.

X의 정의

일부 실시예에서, X는 N이다. 일부 실시예에서, X는 CR⁷이고, 여기서 R⁷은 화학식 (I)에 대해 정의된 바와 같다. 일부 실시예에서, X는 CH이다.

L ¹ 의 정의

일부 실시예에서, m은 1 내지 5의 수, 또는 1 내지 3의 수, 또는 1의 수이다.

일부 실시예에서, L¹은 -CR^aR^b-, -O-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, 또는 -C(O)-이고, 여기서 R^a 및 R^b는 각각의 경우에 독립적으로 수소, -C_1-8알킬, 또는 -OR^c이고, 여기서, R^c는 수소 또는 -C_1-4알킬이다. 다른 실시예에서, L¹은 -CR^aR^b-이고, 여기서 R^a 및 R^b는 각각의 경우에 독립적으로 수소, -C_1-8알킬(바람직하게는 -C_1-4알킬, 보다 바람직하게는 메틸) 또는 -OH이다. 일부 실시예에서, L¹은 -CH₂-, -CH(OH)- 또는 -CH(CH₃)-이다. 다른 실시예에서, L¹은 -CH₂-이다.

R ¹ 의 정의

일부 실시예에서, R¹은 -OR^1a 또는 -NR^1aR^1b이고, 여기서 R^1a 및 R^1b는 화학식 (I)에 대해 정의된 바와 같다.

일부 실시예에서, R¹은 -OR^1a, 또는 -NR^1aR^1b이고; 여기서, R^1a, R^1b는 독립적으로 수소, -C_1-8알킬, 또는 -C_2-8알케닐이고, 상기 -C_1-8알킬의 각각은 R^1e로 임의로 치환된 헤테로사이클릴, R^1e로 임의로 치환된 아릴, CH₃-(OCH₂CH₂)_n- (여기서, n은 3 내지 10의 수, 바람직하게는 4 내지 8, 보다 바람직하게는 5 내지 7의 수) 또는 -OR^1f로부터 선택된 1 또는 2 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되고;

여기서 R^1e는 할로겐, 또는 할로겐으로 임의로 치환된 -C_1-6알킬이며;

여기서 R^1f는 -C_1-8알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이들 각각은 -C_1-4알킬 또는 할로겐으로 임의로 치환된다.

일부 실시예에서, R¹은 -OR^1a이고, 여기서 R^1a는 수소이다.

일부 실시예에서, R¹은 -OR^1a이고, 여기서 R^1a는 할로겐, R^1e로 임의로 치환된 -C_1-8알킬, R^1e로 임의로 치환된 사이클로알킬, R^1e로 임의로 치환된 헤테로사이클릴, R^1e로 임의로 치환된 아릴, R^1e로 임의로 치환된 헤테로아릴, CH₃-(OCH₂CH₂)_n- (여기서, n은 3 내지 10의 수) 또는 -OR^1f에서 선택되는 1 또는 2 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되고, 여기서, R^1e 및 R^1f는 화학식 (I)에 대해 정의된 바와 같다.

일부 실시예에서, R¹은 -OR^1a이고, 여기서 R^1a는 비치환된 C_1-8알킬이다. 일부 실시예에서, R¹은 -OR^1a이고, 여기서 R^1a는 선형이다. 일부 실시예에서, R¹은 -OR^1a이고, 여기서 R^1a는 분지형 알킬이다. 일부 실시예에서, R¹은 -OR^1a이고, 여기서 R^1a는 분지형 알킬, 바람직하게는 -C_4-8알킬이고, 여기서 분지형 치환기는 산소 원자에 대해 알파 위치에 있고, 부탄-2-일, 펜탄-2-일, 펜탄-3-일, 헵탄-2-일, 헵탄-3-일, 헵탄-4-일, 옥탄-2-일, 옥탄-3-일, 옥탄-4-일, 또는 옥탄 -5-일을 포함하지만 이에 제한되는 것은 아니다. 일부 실시예에서, R¹은 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 부톡시, 펜톡시, 헥속시, 헵톡시 또는 옥톡시이다. 일부 실시예에서, R¹은 바람직하게는 프로폭시, 이소프로폭시, n-부톡시, 이소부톡시, 부탄-2-일옥시(sec-부톡시), 펜탄-2-일옥시, 펜탄-3-일옥시, 2-메틸부톡시, 헵탄-2-일옥시, 헵탄-3-일옥시, 헵탄-4-일옥시, 옥탄-2-일옥시, 옥탄-3-일옥시, 옥탄-4-일옥시, 또는 옥탄-5-일옥시이다. 일부 실시예에서, R¹은 n-부톡시, 부탄-2-일옥시(sec-부톡시), 펜탄-2-일옥시, 펜탄-3-일옥시, 헵탄-2-일옥시, 헵탄-3-일옥시, 헵탄-4-일옥시, 옥탄-2-일옥시, 옥탄-3-일옥시, 옥탄-4-일옥시, 또는 옥탄-5-일옥시이다.

일부 실시예에서, R¹은 -OR^1a이고, 여기서 R^1a는 -C_1-8알킬, 바람직하게는 -C_4-5알킬이고, 상기 알킬은 1 내지 3개의 할로겐, 예를 들어 플루오로로 치환된다.

일부 실시예에서, R¹은 -OR^1a이고, 여기서 R^1a는 -C_1-8알킬, 바람직하게는 -C_1-3알킬이고, 상기 알킬은 R^1e로 임의로 치환된 사이클로알킬, R^1e로 임의로 치환된 헤테로사이클릴, R^1e로 임의로 치환된 아릴, 또는 R^1e로 임의로 치환된 헤테로아릴로 치환되며, 여기서 R^1e는 화학식 (I)에 대해 정의된 바와 같다.

일부 실시예에서, R¹은 -OR^1a이고, 여기서 R^1a는 -C_1-8알킬, 바람직하게는 -C_1-3알킬이고, 상기 알킬은 헤테로아릴, 예를 들어 고리 구성원으로 산소, 질소 또는 임의로 산화된 황에서 선택된 1 또는 2 또는 3개의 헤테로원자를 포함하는 5- 내지 6-원 헤테로아릴이고, 상기 헤테로아릴은 -C_1-6알킬, 바람직하게는 -C_1-4알킬, 보다 바람직하게는 메틸로 임의로 치환된다. 일부 실시예에서, 헤테로아릴은 피리디닐, 이미다졸릴 또는 이속사졸릴이다. 일부 실시예에서, R¹은 피리딘-3-일메톡시, 2-(1H-이미다졸-1-일)에톡시, 또는 (5-메틸이속사졸-3-일)메톡시이다.

일부 실시예에서, R¹은 -OR^1a이고, 여기서 R^1a는 -C_1-8알킬, 바람직하게는 -C_1-3알킬이고, 상기 알킬은 아릴, 예를 들어 페닐로 치환된다. 일부 실시예에서, R¹은 2-페네톡시 또는 3-페닐프로폭시이다.

일부 실시예에서, R₁은 -OR^1a이고, 여기서 R^1a는 -C_1-8알킬, 바람직하게는 -C_1-3알킬이고, 상기 알킬은 -OR^1f로 치환되고, 여기서 R^1f는 -C_1-8알킬 또는 아릴(예를 들어, 페닐)이다. 일부 실시예에서, R¹은 2-메톡시에톡시 또는 2-페녹시에톡시이다.

일부 실시예에서, R¹은 -OR^1a이고, 여기서 R^1a는 -C_1-8알킬, 바람직하게는 -C_1-3알킬이고, 상기 알킬은 CH₃-(OCH₂CH₂)_n-으로 치환되고, 여기서 n은 3 내지 10, 바람직하게는 3 또는 4 또는 5의 수이다. 일부 실시예에서, R¹은 2,5,8,11-테트라옥사트리데칸-13-일옥시(,5,8,11-tetraoxatridecan-13-yloxy)이다.

일부 실시예에서, R¹은 -OR^1a이고, 여기서 R^1a는 -C_2-8알케닐이고; 바람직하게는 -C_2-6알케닐; 가장 바람직하게는 -C_4-6알케닐이다. 일 실시예에서, R¹은 부트-3-에닐옥시(but-3-enyloxy)이다.

일부 실시예에서, R¹은 -NR^1aR^1b이고, 여기서 R^1a 및 R^1b는 각각 수소, 또는 -C_1-8알킬, 바람직하게는 -C_1-6알킬이고, 상기 알킬은 임의로 할로겐, R^1e로 치환된 -C_1-8알킬, R^1e로 임의로 치환된 사이클로알킬, R^1e로 임의로 치환된 헤테로사이클릴, R^1e로 임의로 치환된 아릴, 또는 R^1e로 임의로 치환된 헤테로아릴에서 선택되는 1 또는 2 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되고, 여기서, R^1e는 -C_1-6알킬, 예를 들어 메틸이다.

일부 실시예에서, R¹은 -NR^1aR^1b이고, 여기서 R^1a는 수소이고, R^1b는 선형 또는 분지형 -C_1-8알킬이다. 일부 실시예에서, R¹은 -NR^1aR^1b이고, 여기서 R^1a는 수소이고, R^1b는 분지형 알킬, 바람직하게는 -C_4-8알킬이고, 여기서 분지형 치환기는 산소 원자에 대해 알파 위치에 있고, 부탄- 2-일, 펜탄-2-일, 펜탄-3-일, 헵탄-2-일, 헵탄-3-일, 헵탄-4-일, 옥탄-2-일, 옥탄-3-일, 옥탄-4- 일, 또는 옥탄-5-일을 포함하나, 이에 제한되는 것은 아니다.

일부 실시예에서, R¹은 부틸아미노, N-부틸-N-메틸아미노, 또는 이소펜틸아미노이다.

일부 실시예에서, R¹은 임의로 부분적으로 또는 완전히 중수소화되며, 즉, R¹의 정의에서 하나 이상의 탄소 결합 수소(들)는 하나 이상의 중수소(들)로 대체된다.

R ² 및 R ³ 의 정의

일부 실시예에서, R²및 R³은 각각의 경우에 독립적으로 수소 또는 C_1-8알킬, 바람직하게는 C_1-6알킬이다. 일부 실시예에서, R² 및 R³은 둘 다 수소이다.

R ⁴ 의 정의

일부 실시예에서, R⁴는 수소이다.

R ⁵ 의 정의

일부 실시예에서, R⁵는 할로겐, 하이드록시, C_1-8알킬, 할로C_1-8알킬, C_1-8알콕시, 할로C_1-8알콕시, 또는 -C(=O)OR^5a이고, 여기서 R^5a는 수소, C_1-8알킬 또는 할로C_1-8알킬이고; p는 0, 1 또는 2의 수이다.

일부 실시예에서, R⁵는 할로겐, C_1-3알킬, 할로C_1-3알킬, C_1-3알콕시, 또는 할로C_1-8알콕시이다. 일부 실시예에서, R⁵는 메틸, 에틸, 프로필, 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 이소프로폭시, 트리플루오로메톡시, 또는 트리플루오로메틸이다. 일부 실시예에서, R⁵는 메틸이다.

일부 실시예에서, p는 1의 수이다.

일부 실시예에서, R⁵및 L²-R⁶은 고리 A의 오르토 위치에 있다.

고리 A의 정의

일부 실시예에서, 고리 A는 페닐이다.

일부 실시예에서, 고리 A는 고리 구성원으로서 산소, 질소 또는 임의로 산화된 황으로부터 선택된 1 또는 2 또는 3개의 헤테로원자를 포함하는 5- 내지 8-, 바람직하게는 5- 내지 6-원 헤테로아릴, 바람직하게는 고리 구성원으로서 하나 또는 두 개의 질소 원자를 포함하는 5- 내지 6-원 헤테로아릴이다. 일부 실시예에서, 고리 A는 피리딜, 예를 들어 피리딘-2-일, 피리딘-3-일, 피리딘-4-일, 피리딘-5-일 또는 피리딘-6-일, 바람직하게는 피리딘-2-일 또는 피리딘-3-일이다. 일부 실시예에서, 고리 A는 피라졸릴, 즉 1H-피라졸-4-일이다.

일부 실시예에서, 고리 A는 1,2,3,4-테트라하이드로이소퀴놀린일, 예를 들어 1,2,3,4-테트라하이드로이소퀴놀린-6-일 또는 1,2,3,4-테트라하이드로이소퀴놀린-7-일이다.

L ² -R ⁶ 의 정의

일부 실시예에서, L²는 직접 결합, -(CH₂)_t-, -O-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, -C(O)-, -C(O)O- , -OC(O)-, 또는 -NR^d-이고, 여기서, R^d는 -C_1-6알킬이고, 여기서 t는 1 내지 8, 바람직하게는 1 내지 5, 더욱 바람직하게는 1 또는 2 또는 3의 수이고; R^d는 -C_1-6알킬이다.

일부 실시예에서, L²는 직접 결합, CH₂-, -CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-, -O-, 또는 -NR^d-이고, 여기서 R^d는 -C_1-6알킬, 바람직하게는 -C_1-4알킬, 더욱 바람직하게는 메틸이다.

일부 실시예에서, R⁶은 -NR^6aR^6b, -C_1-8알킬, -C_2-8알케닐, -C_2-8알키닐, -사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 -C_1-8알킬, -C_2-8알케닐, -C_2-8알키닐, -사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴 각각은 독립적으로 1 또는 2 또는 3개의 치환기 R^6c로 임의로 치환되고;

R^6a및 R^6b는 독립적으로 수소 또는 -C_1-8알킬이며;

R^6c는 독립적으로 수소, 할로겐, -OR^6d, -SR^6d, -NR^6dR^6e, -COR^6d, -SO₂R^6d, -C(=O)NR^6dR^6e, 또는 -C_1-8알킬이고, 상기 -C_1-8알킬은 독립적으로 1 또는 2 또는 3개의 치환기 R^6g로 임의로 치환되고;

R^6d 및 R^6e는 독립적으로 수소, -C_1-8알킬, -C_2-8알케닐, 헤테로사이클릴 또는 아릴이고, 상기 -C_1-8알킬, -C_2-8알케닐, 헤테로사이클릴 또는 아릴 각각은 1 또는 2 또는 3개의 치환기 R^6g로 임의로 치환되며;

R^6g는 각각의 경우에 독립적으로 수소, 할로겐, -OR^6h, -SR^6h, -NR^6hR⁶ⁱ, -N(R^6h)C(=O)OR⁶ⁱ, -C_1-8알킬, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 여기서 R^6h 및 R⁶ⁱ는 독립적으로 수소 또는 -C_1-8알킬이다.

L ² -R ⁶ 의 정의(여기서, L ² 는-(CR ^f R ^g ) _t -이고 R ⁶ 은 헤테로사이클릴임)

일부 실시예에서, L²는 -(CRfRg)t-(여기서, t, Rf 및 Rg는 화학식 (I)에 대해 정의된 바와 같다), 바람직하게는 -CH₂- 또는 -CH₂CH₂-이고, R⁶은 1개 또는 2개의 치환기 R^6c로 임의로 치환된 헤테로사이클릴이며, 여기서, R^6c는 화학식 (I)에 대해 정의된 바와 같다.

일부 실시예에서, R⁶으로서의 헤테로사이클릴은 모노사이클릭이다. 일부 실시예에서, 헤테로사이클릴은 바이사이클릭이다. 일부 실시예에서, 헤테로사이클릴은 포화된다. 일부 실시예에서, 헤테로사이클릴은 고리 구성원으로서 산소, 질소 또는 임의로 산화된 황으로부터 선택된 1,2 또는 3개의 헤테로원자를 포함하는 5- 내지 8-원 포화 모노사이클릭 고리이다. 일부 실시예에서, 헤테로사이클릴은 고리 구성원으로서 1 또는 2 또는 3개의 질소 헤테로원자를 포함하는 5-, 6-, 7- 또는 8-원 포화 모노사이클릭 고리이다.

일부 실시예에서, R⁶으로서의 헤테로사이클릴은 피롤리디닐(예를 들어, 피롤리딘-1-일, 피롤리딘-2-일, 피롤리딘-3-일), 피페리디닐(예를 들어, 피페리딘-1-일, 피페리딘-2-일, 피페리딘- 3-일, 피페리딘-4-일, 피페리딘-5-일), 트리아졸릴(예를 들어, 1H-1,2,4-트리아졸-1-일), 아제파닐(예를 들어, 아제판-2-일, 아제판-3-일, 아제판-4-일, 아제판-5-일), 피페라지닐(예를 들어, 피페라진-1-일, 피페라진-2-일, 피페라진-3-일) 또는 모르폴리노이다. 일부 실시예에서, 헤테로사이클릴은 고리 구성원으로서 산소, 질소 또는 임의로 산화된 황으로부터 선택된 1,2 또는 3개의 헤테로원자를 포함하는 바이사이클릭 고리이다. 일부 실시예에서, 헤테로사이클릴은 (1S,4S)-2,5-디아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일이다. 상기 실시예에서, R⁶으로서의 헤테로사이클릴은 1개 또는 2개의 치환기 R^6c로 추가로 임의로 치환된다. 일부 실시예에서, R^6c는 -NR^6dR^6e, -COR^6d, -OR^6d, 또는 하이드록시로 임의로 치환된 -C_1-8알킬이고, 여기서 R^6d 및 R^6e는 독립적으로 수소 또는 -C_1-8알킬(바람직하게는 -C_1-3알킬) 또는 페닐이고, 여기서 상기 알킬은 NH₂-, 알킬아미노 또는 디알킬아미노로 임의로 치환된다. 일부 실시예에서, R^6c는 아미노, 디메틸아미노, 2-(디메틸아미노)아세틸, 메틸, 3-하이드록시프로필 또는 페녹시이다. 일부 실시예에서, L²는 -CH₂- 또는 -CH₂CH₂-이다. 일부 실시예에서, R⁶은 피롤리딘-1-일, 모르폴리노, 피페리딘-1-일, 4-메틸피페라진-1-일, 피페라진-1-일, 피페리딘-4-일, 4-(2-(디메틸아미노)아세틸)피페라진-1-일, (1S,4S)-2,5-디아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일, 4-아미노피페리딘-1-일, 3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일, 4-페녹시피페리딘-1-일, 1H-1,2,4-트리아졸-1-일, 4-(3-하이드록시프로필)피페라진-1-일, 또는 피페리딘-3-일이다.

일부 실시예에서, L²-R⁶은 피롤리딘-1-일메틸, 모르폴리노메틸, 피페리딘-1-일메틸, (4-메틸피페라진-1-일)메틸, 피페라진-1-일메틸, 피페리딘-4-일메틸, (4-(2)-(디메틸아미노)아세틸)피페라진-1-일)메틸, (1S,4S)-2,5-디아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일메틸, 2-(피롤리딘-1-일)에틸, (4-아미노피페리딘-1-일)메틸, (3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)메틸, (4-페녹시피페리딘-1-일)메틸, (1H-1,2,4-트리아졸-1-일)메틸, (4-(3-하이드록시프로필)피페라진-1-일)메틸, 또는 피페리딘-3-일메틸이다.

L ² -R ⁶ 의 정의(여기서 L ² 는 -(CR ^f R ^g ) _t --이고 R ⁶ 은 -NR ^6a R ^6b 임)

일부 실시예에서, L²는 -(CR^fR^g)_t- (여기서 t, R^f 및 R^g는 화학식 (I)에 대해 정의된 바와 같음), 바람직하게는 -CH₂- 또는 -CH₂CH₂-이고, R⁶은 -NR^6aR^6b이고, 여기서 R^6a 및 R^6b는 화학식 (I)에 대해 다음과 같이 정의된다: 일부 실시예에서, L²는 -(CH₂)_t- (여기서, t는 1 내지 8, 바람직하게는 1 내지 5, 더욱 바람직하게는 1 또는 2 또는 3의 수), 바람직하게는 -CH₂- 또는 -CH₂CH₂-이고, R⁶은 -NR^6aR^6b이고, 여기서, R^6a 및 R^6b는 독립적으로 수소 또는 C_1-8알킬, 바람직하게는 C_1-6알킬이다. 일부 실시예에서, L²-R⁶은 아미노메틸이다.

L ² -R ⁶ 의 정의(여기서, L ² 는 직접 결합이고 R ⁶ 은 알킬, 알케닐 또는 알키닐임)

일부 실시예에서, L²는 직접 결합이고 R⁶은 -C_1-8알킬, -C_2-8알케닐, 또는 -C_2-8알키닐이다.

L ² -R ⁶ 의 정의(여기서, L ² 는 -O- 또는 -NR ^d -이고 R ⁶ 은 알킬, 알케닐, 알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴임)

일부 실시예에서, L²는 -O-이고 R⁶은 -C_1-8알킬 또는 헤테로사이클릴이고, 상기 -C_1-8알킬 및 헤테로사이클릴은 1 또는 2개의 R^6c로 임의로 치환된다. 일부 실시예에서, R^6c는 -C_1-8알킬, -NR^6dR^6e 및 -COR^6d이고, 여기서 R_6d및 R_6e는 독립적으로 NH₂-, 알킬아미노 또는 디알킬아미노로 임의로 치환된 -C_1-8알킬(바람직하게는 -C^1-3알킬)이다. 일부 실시예에서, L²-R⁶은 3-(메틸아미노)프로폭시, 3-(디메틸아미노)프로폭시, 3-(디에틸아미노)프로폭시, 2-아미노에톡시, 3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸프로폭시, 메톡시, 2-(메틸아미노)에톡시, 2-(N-메틸아세트아미도)에톡시, 3-(피페리딘-1-일)프로폭시, 3-모르폴리노프로폭시, 3-(피롤리딘-1-일)프로폭시, 3-아미노프로폭시, (1R,5S)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일옥시, 피페리딘-4-일옥시, (1R,5S)-8-에틸-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일옥시, 1-에틸피롤리딘-3-일옥시 또는 피롤리딘-3-일옥시이다.

일부 실시예에서, L²는 -NR^d-이고, 여기서 R^d는 -C_1-6알킬이고, R⁶은 -C_1-8알킬, -C_2-8알케닐 또는 -C_2-8알키닐이며, 이들 각각은 1개 또는 2개의 R^6c로 임의로 치환된다. 일부 실시예에서, R^6c는 -C_1-8알킬 또는 -NR^6dR^6e이고, 여기서 R^6d 및 R^6e-는 독립적으로 -C_1-8알킬(바람직하게는 -C_1-3알킬)이다. 일부 실시예에서, L²-R⁶은 (2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노이다.

L ² -R ⁶ 의 정의(여기서, L ² 는 직접 결합이고 R ⁶ 은 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴임)

일부 실시예에서, L²는 직접 결합이고 R⁶은 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이며, 이들 각각은 독립적으로 1 또는 2 또는 3개의 치환기 R^6c로 임의로 치환된다.

일부 실시예에서, L²는 직접 결합이고 R⁶은 헤테로사이클릴이며, 이는 1 또는 2 또는 3개의 치환기 R^6c로 임의로 치환된다.

R⁶으로서, 일부 실시예에서, 헤테로사이클릴은 모노사이클릭이고; 일부 실시예에서, 헤테로사이클릴은 융합된 바이사이클릭 헤테로사이클릴이고; 일부 실시예에서, 헤테로사이클릴은 스피로 바이사이클릭 헤테로사이클릴이다.

일부 실시예에서, 헤테로사이클릴은 포화된다. 일부 실시예에서, 헤테로사이클릴은 고리 구성원으로서 산소, 질소 또는 임의로 산화된 황으로부터 선택된 1,2 또는 3개의 헤테로원자를 포함하는 4-, 5-, 6-, 7- 또는 8-원 포화 모노사이클릭 고리이다. 일부 실시예에서, 헤테로사이클릴은 고리 구성원으로서 1 또는 2 또는 3개의 질소 헤테로원자를 포함하는 5-, 6-, 7- 또는 8-원 포화 모노사이클릭 고리이다. 일부 실시예에서, 헤테로사이클릴은 고리 구성원으로서 1 또는 2개의 질소 헤테로원자를 포함하는 5- 또는 6-원 포화 모노사이클릭 고리이다. 일부 실시예에서, 헤테로사이클릴은 피롤리디닐(예를 들면, 피롤리딘-1-일, 피롤리딘-2-일, 피롤리딘-3-일), 피페리디닐(예를 들면, 피페리딘-1-일, 피페리딘-2-일, 피페리딘-3-일, 피페리딘-4-일, 피페리딘-5-일), 트리아졸릴(예를 들면, 1H-1,2,4-트리아졸-1-일), 아제파닐(예를 들면, 아제판-2-일, 아제판-3-일, 아제판-4-일, 아제판-5-일), 디아제파닐(예를 들면, 1,4-디아제판-1-일, 1,4-디아제판-2-일, 1,4-디아제판-3-일, 1, 4-디아제판-4-일), 피페라지닐(예를 들어, 피페라진-1-일, 피페라진-2-일, 피페라진-3-일) 또는 모르폴리노이다.

일부 실시예에서, 헤테로사이클릴은 고리 구성원으로서 산소, 질소 또는 임의로 산화된 황으로부터 선택된 1,2 또는 3개의 헤테로원자를 포함하는 바이사이클릭 고리이다. 일부 실시예에서, 헤테로사이클릴은 2,5-디아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일이다.

일부 실시예에서, 헤테로사이클릴은 6- 내지 14-원, 보다 바람직하게는 7- 내지 10-원 스피로 바이사이클릭 헤테로사이클릴이다. 일부 실시예에서, 헤테로사이클릴은 고리 구성원으로서 1개 또는 2개의 질소 원자를 포함하는 스피로헵타닐(spiroheptanyl), 스피오데칸일(spriodecanyl) 또는 스피로노난일(spirononanyl)이다. 일부 실시예에서, 헤테로사이클릴은 8-아자스피로[4.5]데칸-8-일, 2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-일, 2,8-디아자스피로[4.5]데칸-2-일, 2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-일, 2,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-일이다.

상기 실시예에서, R⁶으로서의 헤테로사이클릴은 1개 또는 2개의 치환기 R^6c로 추가로 임의로 치환된다.

일부 실시예에서, R^6c는 -COR^6d이고, 여기서 R^6d는 1개 또는 2개의 치환기 R_6g로 임의로 치환된 -C_1-8알킬이고, 여기서 R^6g는 -NR^6hR⁶ⁱ, -N(R^6h)C(=O)R⁶ⁱ, -C_1-8알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 여기서 R^6h 및 R⁶ⁱ는 화학식 (I)에 대해 정의된 바와 같다. 일부 실시예에서, R^6c는 -COR^6d이고, 여기서 R^6d는 1개 또는 2개의 치환기 R^6g로 임의로 치환된 -C_1-8알킬(바람직하게는 C_1-6알킬, 더욱 바람직하게는 C_1-4알킬)이고, 여기서 R^6g는 -NR^6hR⁶ⁱ, -N(R^6h)C(=O)R⁶ⁱ, -C_1-8알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 여기서 R^6h 및 R⁶ⁱ는 각각 독립적으로 수소 또는 -C_1-8알킬(바람직하게는 C_1-6알킬, 보다 바람직하게는 C_1-4알킬임)이다.

일부 실시예에서, R^6c는 -COR^6d이고, 여기서 R^6d는 -C_2-8알케닐이다.

일부 실시예에서, R^6c는 -COR^6d이고, 여기서 R^6d는 헤테로사이클릴이다.

일부 실시예에서, R^6c는 아세틸, 2-(디메틸아미노)아세틸, 2-(디메틸아미노)아세틸, 아미노아세틸, 2-(메틸아미노)아세틸, 3-(디메틸아미노)프로파노일, 4-(디메틸아미노)부타노일, 5-(디메틸아미노)펜타노일, (2S,3S)-2-아미노-3-메틸펜타노일, 2-(메틸아미노)아세틸, 2-아미노-4-메틸펜타노일, 2-아미노-3-메틸부타노일, 2-(디메틸아미노)아세틸, 페닐프로파노일, 2-(피페라진-1-일)아세틸, 아크릴로일, 피페라진-2-카르보닐, 피페리딘-4-카르보닐, 피롤리딘-2-카르보닐, 또는 2-(N-메틸아세트아미도)아세틸이다.

일부 실시예에서, R^6c는 -C_1-8알콕시, 바람직하게는 -C_1-6알콕시, 예를 들어 메톡시이다.

일부 실시예에서, R^6c는 -C_1-8알킬, 바람직하게는 -C_1-6알킬이고, 1 또는 2개의 치환기 R^6g로 임의로 치환되고, 여기서 R^6g는 -OR^6h, -NR^6hR⁶ⁱ, 헤테로사이클릴, 아릴이고, 여기서 R^6h 및 R⁶ⁱ는 화학식 (I)에 대해 정의된 바와 같다. 일부 관점에서, R^6c는 -C_1-8알킬, 바람직하게는 1개의 치환기 R^6g로 임의로 치환된 -C_1-6알킬이고, 여기서 R^6g는 -OR^6h, -NR^6hR⁶ⁱ, 헤테로사이클릴(예를 들어, 모르폴리노), 아릴(예를 들어, 페닐)이고, 여기서 R^6h 및 R⁶ⁱ는 -C_1-4알킬, 바람직하게는 메틸이다. 일부 실시예에서, R^6c는 메틸, 에틸, 이소부틸, 메톡시메틸, 2-메톡시에틸, (메틸아미노)메틸, 2-(디메틸아미노)에틸, (디메틸아미노)메틸, 2-아미노에틸, 2-(메틸아미노)에틸, 2-(디메틸아미노)에틸, 모르폴리노메틸, 또는 페네틸이다.

일부 실시예에서, R^6c는 1개의 치환기 R^6g로 임의로 치환된 헤테로사이클릴이다. 일부 실시예에서, R^6c는 헤테로사이클릴인 1개의 치환기 R^6g로 임의로 치환된 헤테로사이클릴이다. 일부 실시예에서, R^6c는 4-모르폴리노피페리딘-1-일이다.

일부 실시예에서, R^6c는-C(=O)NR^6dR^6e이고, 여기서 R^6d 및 R^6e는 독립적으로 수소, -C_1-8알킬(바람직하게는 -C_1-3알킬), 또는 아릴이고, 상기 -C_1-8알킬 또는 아릴은 할로겐 또는 -C_1-4알킬로 독립적이고 임의로 치환된다. 일부 실시예에서, R^6c는 -C(=O)NR^6dR^6e이고, 여기서 R^6d및 R^6e는 독립적으로 수소 및 -C_1-4알킬이다. 일부 실시예에서, R^6c는 -C(=O)NR^6dR^6e이고, 여기서 R^6d및 R^6e는 독립적으로 수소 및 임의로 할로겐으로 치환된 아릴이다. 일부 실시예에서, R^6c는 디메틸카르바모일, 이소프로필카르바모일, 또는 2,4,5-트리플루오로페닐카르바모일이다.

일부 실시예에서, R^6c는 -NR^6dR^6e이고, 여기서 R^6d 및 R^6e는 독립적으로 수소, 또는 -C_1-8알킬(바람직하게는 -C_1-6알킬, 보다 바람직하게는 -C_1-3알킬, 가장 바람직하게는 메틸)이다. 일부 실시예에서, R^6c는 디메틸아미노 또는 아미노이다.

일부 실시예에서, R^6c는 -SO₂R^6d이고, 여기서 R^6d는 -C_1-8알킬, -C_2-8알케닐, -C_2-8알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴, 또는 헤테로아릴이다. 일부 실시예에서, R^6c는 -SO₂R^6d이고, 여기서 R^6d는 -C_1-8알킬(바람직하게는 -C_1-6알킬)이다. 일부 실시예에서, R^6c는 프로필술포닐이다.

일부 실시예에서, L²는 직접 결합이고, R⁶은 메틸, (디메틸아미노)메틸 또는 디메틸아미노로부터 선택된 1 또는 2 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된 피롤리디닐이다. 일부 실시예에서, L²-R⁶은 1-메틸피롤리딘-3-일, 피롤리딘-1-일, 3-((디메틸아미노)메틸)피롤리딘-1-일, 또는 3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일이다.

일부 실시예에서, L²는 직접 결합이고, R⁶은 아크릴로일, 2-(디메틸아미노)아세틸, 아미노아세틸, 2-(메틸아미노)아세틸, 3-(디메틸아미노)프로파노일, 2-(피페라진-1-일)아세틸, 피페라진-2-카르보닐, 4-(디메틸아미노)부타노일, 5-(디메틸아미노)펜타노일, 메틸, 피페리딘-4-카르보닐, 아세틸, 2-(N-메틸아세트아미도)아세틸, 이소프로필카르바모일, 2,4,5-트리플루오로페닐카르바모일, (2S,3S)-2-아미노-3-메틸펜타노일, 2-메톡시에틸, 2-(메틸아미노)아세틸, 에틸, 이소부틸, 피롤리딘-2-카르보닐, 2-아미노-4-메틸펜타노일, 2-아미노-3-메틸부타노일, 2-(디메틸아미노)아세틸, 2-(메틸아미노)에틸, 2-(디메틸아미노)에틸, 아미노, 페닐프로파노일, 프로필설포닐, 또는 2-아미노에틸에서 선택된 1 또는 2 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다. 일부 실시예에서, L²-R⁶은 피페라진-1-일, 4-아크릴로일피페라진-1-일, 4-(2-(디메틸아미노)아세틸)피페라진-1-일, (4-아미노아세틸)피페라진-1-일, 피페라진-1-일, 4-(2-(메틸아미노)아세틸)피페라진-1-일), 4-(3-(디메틸아미노)프로파노일)피페라진-1-일, 4-(2-(피페라진-1-일)아세틸)피페라진-1-일, 4-(피페라진-2-카르보닐)피페라진-1-일, 4-아크릴로일피페라진-1-일, 4-(4-(디메틸아미노)부타노일)피페라진-1-일, 4-(5-(디메틸아미노)펜타노일)피페라진-1-일, 3,5-디메틸피페라진-1-일, 4-(피페리딘-4-카르보닐)피페라진-1-일, 4-아세틸피페라진-1-일, 4-(2 -(N-메틸아세트아미도)아세틸)피페라진-1-일, 4-(이소프로필카르바모일)피페라진-1-일, 4-(2,4,5-트리플루오로페닐카르바모일)피페라진-1-일, 4-(3,5-디메틸피페라진-1-일, 4-((2S,3S)-2-아미노-3-메틸펜타노일)피페라진-1-일, 4-(2-메톡시에틸)피페라진-1-일, 4-(2-(메틸아미노)아세틸)피페라진-1-일, 4-에틸피페라진-1-일, 4-이소부틸피페라진-1-일, 4-(피롤리딘-2-카르보닐)피페라진-1-일, 4-(2-아미노-4-메틸펜타노일)피페라진-1-일, 4-(2-아미노-3-메틸부타노일)피페라진-1-일, 4-(2-(디메틸아미노)아세틸)피페라진-1-일, (S)-2-메틸피페라진-1-일, (R)-2-메틸피페라진-1-일, 4-(2-(메틸아미노)에틸)피페라진-1-일, 4-(2-(디메틸아미노)에틸)피페라진-1-일, 4-(2-아미노-3-페닐프로파노일)피페라진-1-일, 4-(프로필설포닐)피페라진-1-일, 4-(2-아미노에틸)피페라진-1-일, 또는 3-메틸피페라진-1-일이다.

일부 실시예에서, L²는 직접 결합이고, R⁶은 2-(디메틸아미노)아세틸, 메톡시, 메톡시메틸, (메틸아미노)메틸, 4-모르폴리노피페리딘-1-일, 모르폴리노메틸로, 2-(디메틸아미노)에틸, 페네틸, (디메틸아미노)메틸, 아미노, 디메틸아미노, 또는 디메틸카르바모일로부터 선택된 1 또는 2 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된 피페리디닐이다. 일부 실시예에서, L²-R⁶은 피페리딘-4-일, 4-(2-(디메틸아미노)아세틸)피페리딘-1-일, 피페리딘-3-일, 피페리딘-4-일, 피페리딘-1-일, 피페리딘- 4-일, 4-메톡시피페리딘-1-일, 4-(메톡시메틸)피페리딘-1-일, 4-((메틸아미노)메틸)피페리딘-1-일, (4-모르폴리노피페리딘-1-일)피리딘-3-일, 4-(모르폴리노메틸)피페리딘-1-일, 4-(2-(디메틸아미노)에틸)피페리딘-1-일, 1-페네틸피페리딘-4-일, 4-((디메틸아미노)메틸)피페리딘-1-일 , 4-아미노피페리딘-1-일, 4-(디메틸아미노)피페리딘-1-일, 또는 4-(디메틸카르바모일)피페리딘-1-일이다.

일부 실시예에서, L²-R⁶은 아제판-1-일 또는 1,4-디아제판-1-일이다.

일부 실시예에서, L²-R⁶은 옥타하이드로-2H-이소인돌-2-일이다.

일부 실시예에서, L²-R⁶은 모르폴리노이다.

일부 실시예에서, L²-R⁶은 8-아자스피로[4.5]데칸-8-일, 2,7-디아자스피로[3.5]노난-7-일, 2,8-디아자스피로[4.5]데칸-2-일, 2,7-디아자스피로[3.5]노난-2-일, 2,8-디아자스피로[4.5]데칸-8-일, (1R,4R)-2,5-디아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일이다.

일부 실시예에서, 고리 A는 페닐이고, L¹ 및 L²-R⁶은 페닐 고리의 파라 위치에 있고, 상기 페닐 고리는 1개의 R⁵로 추가로 임의로 치환되며, 여기서 L¹, L², R⁵ 및 R⁶은 상기 각 실시예에서와 같이 정의된다. 일부 실시예에서, 고리 A는 피리딜이고, L¹ 및 L²-R⁶은 피리딜 고리의 파라 위치에 있고, 상기 피리딜 고리는 1개의 R⁵로 추가로 임의로 치환되며, 여기서 L¹, L², R⁵ 및 R⁶ 은 상기 각 실시예에서와 같이 정의된다.

일부 실시예에서, 본원에 예시된 특정 화합물로부터 선택된 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 그의 입체이성질체가 본원에 개시된다:

제3 관점에서, 화학식 (I)의 화합물 또는 본원에 예시된 특정 화합물을 포함하는 본원에 개시된 화합물, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염, 및 1종 이상의 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물이 본원에 개시된다.

제4 관점에서, 본원에 개시된 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염, 예를 들어 화학식 (I)의 화합물 또는 본원에 예시된 특정 화합물을 개체에게 투여하는 것을 포함하는, TLR7을 조절하는 방법이 본원에 개시된다.

제5 관점에서, TLR7 작용제로서 치료 유효량의 본원에 개시된 화합물 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염을 환자에게 투여하는 것을 포함하는 환자의 질환 또는 장애를 치료하는 방법이 개시되어 있고, 여기서 본원에 개시된 화합물은 화학식 (I)의 화합물 또는 본원에 예시된 특정 화합물을 포함한다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 TLR, 예를 들어 TLR-7, 예를 들어 작용성 TLR-7의 조절과 연관된다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 뎅기열 바이러스(dengue virus), 황열병 바이러스(yellow fever virus), 웨스트 나일 바이러스(West Nile virus), 일본 뇌염 바이러스(Japanese encephalitis virus), 진드기 매개 뇌염 바이러스(tick-borne encephalitis virus), 쿤진 바이러스(Kunjin virus), 머레이 밸리 뇌염 바이러스(Murray Valley encephalitis virus), 세인트루이스 뇌염 바이러스(St. Louis encephalitis virus), 옴스크 출혈열 바이러스(Omsk hemorrhagic fever virus), 소 바이러스 설사 바이러스, 지카 바이러스(Zika virus) 및 C형 간염으로 구성된 군에서 선택된 바이러스에 의해 유발된 바이러스 감염을 포함한다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 흑색종, 비-소세포 폐 암종, 간세포 암종, 기저 세포 암종, 신장 세포 암종, 골수종, 알레르기성 비염, 천식, COPD, 궤양성 대장염, 간 섬유증, HBV, HCV, HPV, RSV, SARS, HIV 또는 인플루엔자를 포함한다. 바람직하게는, 질환 또는 장애는 암이다.

다음 용어는 명세서 전체에서 기재된 의미를 갖는다:

본원에 사용된 바와 같이, 첨부된 청구범위를 포함하여 "하나의(a, an)" 및 "그(the)"와 같은 단어의 단수 형태는 문맥상 달리 명확하게 지시하지 않는 한 대응하는 복수를 포함한다.

용어 "또는(or)"는 문맥상 달리 명확하게 지시하지 않는 한 "및/또는(and/or)"이라는 용어를 의미하는데 사용되며 그와 상호교환적으로 사용된다.

본 명세서에서 사용된 용어 "알킬(alkyl)"은 1 내지 18개, 예컨대 1 내지 12개, 추가로 예컨대 1 내지 10개, 더욱 추가로 예컨대 1 내지 8개, 1 내지 6개, 또는 1 내지 4개의 탄소 원자를 포함하는 선형 및 분지형 포화 탄화수소기로부터 선택된 탄화수소기를 지칭한다. 1 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 알킬기(즉, C_1-6알킬)의 예는 메틸, 에틸, 1-프로필 또는 n-프로필("n-Pr"), 2-프로필 또는 이소프로필("i-Pr"), 1-부틸 또는 n-부틸("n-Bu"), 2-메틸-1-프로필 또는 이소부틸("i-Bu"), 1-메틸프로필 또는 s-부틸("s-Bu"), 1,1-디메틸에틸 또는 t-부틸("t-Bu"), 1-펜틸, 2-펜틸, 3-펜틸, 2-메틸-2-부틸, 3-메틸-2-부틸, 3-메틸-1-부틸, 2-메틸-1-부틸, 1-헥실, 2-헥실, 3-헥실, 2-메틸-2-펜틸, 3-메틸-2-펜틸, 4-메틸-2-펜틸, 3-메틸-3-펜틸, 2-메틸-3-펜틸, 2,3-디메틸-2-부틸 및 3,3-디메틸-2-부틸기를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.

용어 "알콕시(alkoxy)" 또는 "알킬옥시(alkyloxy)"는 산소 원자를 통해 모 분자 모이어티에 부착된, 앞서 정의된 바와 같은 알킬기를 지칭한다.

용어 "아미노(amino)"는 -NH-₂를 의미한다. 용어 "알킬아미노(alkylamino)"는 -NH(알킬)을 지칭한다. 용어 "디알킬아미노(diakylamino)"는 -N(알킬)₂를 지칭한다. 본원에서 용어 "할로겐(halogen)"은 플루오로(F), 클로로(Cl), 브로모(Br) 및 요오도(I)를 지칭한다.

본 명세서에서 사용된 용어 "할로알킬(haloalkyl)"은 하나 이상의 수소가 플루오로, 클로로, 브로모 및 요오도와 같은 하나 이상의 할로겐 원자로 대체된 알킬기를 지칭한다. 할로알킬의 예는 할로C_1-8알킬, 할로C_1-6알킬 또는 할로C_1-4알킬, -CF₃, -CH₂Cl, -CH₂ CF₃, -CCl₂, CF₃ 등을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.

본 명세서에서 사용된 용어 "알케닐(alkenyl)"은 하나 이상의 C=C 이중 결합을 포함하고, 2 내지 18개, 예컨대 2 내지 8개, 추가로 예컨대 2 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 선형 및 분지형 탄화수소기로부터 선택된 탄화수소기를 지칭한다. 알케닐기, 예컨대 C_2-6 알케닐의 예는 에테닐 또는 비닐, 프로프-1 에닐, 프로프-2-에닐, 2-메틸프로프-1-에닐, 부트-1-에닐, 부트-2-에닐, 부트-3-에닐, 부타-1,3-디에닐, 2-메틸부타-1,3-디에닐, 헥스-1-에닐, 헥스-2-에닐, 헥스-3-에닐, 헥스-4-에닐 및 헥사-1,3-디에닐기를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.

본 명세서에서 사용된 용어 "알키닐(alkynyl)"은 하나 이상의 C≡C 삼중 결합을 포함하고, 2 내지 18개, 예컨대 2 내지 8개, 추가로 예컨대 2 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 선형 및 분지형 탄화수소기로부터 선택된 탄화수소기를 지칭한다. 알키닐기, 예컨대 C_2-6 알키닐의 예는 에티닐, 1-프로피닐, 2-프로피닐(프로파길(propargyl)), 1-부티닐, 2-부티닐 및 3-부티닐기를 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.

본 명세서에서 사용된 용어 "알킬옥시(alkyloxy)" 또는 "알콕시(alkoxy)"는 산소 원자를 통해 모분자 모이어티에 부착된 상기 정의된 바와 같은 알킬기를 지칭한다. 알킬옥시, 예를 들어 C_1-6 알킬옥시 또는 C_1-4 알킬옥시의 예는 메톡시, 에톡시, 이소프로폭시, 프로폭시, n-부톡시, tert-부톡시, 펜톡시 및 헥속시 등을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.

용어 "알콕시-알킬-(alkoxy-alkyl-)"은 상기 정의된 바와 같은 알콕시로 추가로 치환된 상기 정의된 바와 같은 알킬기를 지칭한다. 알콕시-알킬-, 예를 들어, C1-8알콕시-C1-8알킬- 또는 C1-6알콕시-C1-6알킬-의 예는 메톡시메틸, 에톡시메틸, 에톡시에틸, 이소프로폭시메틸, 또는 프로폭시메틸 등을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다.

용어 "사이클로알킬(cycloalkyl)"은 융합, 가교 또는 스피로 사이클로알킬을 포함하는 모노사이클릭 및 폴리사이클릭(예를 들어, 바이사이클릭 및 트리사이클릭)기를 포함하는 포화 사이클릭 탄화수소 군에서 선택된 탄화수소기를 지칭한다.

예를 들어, 사이클로알킬기는 3 내지 12, 예컨대 3 내지 10, 추가로 3 내지 8, 추가로 3 내지 6, 3 내지 5, 또는 3 내지 4개의 탄소 원자를 포함할 수 있다. 더욱더 예를 들어, 사이클로알킬기는 3 내지 12, 예컨대 3 내지 10, 추가로 3 내지 8, 3 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 모노사이클릭기로부터 선택될 수 있다. 모노사이클릭 사이클로알킬기의 예는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 1-사이클로펜트-1-에닐, 1-사이클로펜트-2-에닐, 1-사이클로펜트-3-에닐, 사이클로헥실, 1-사이클로헥스-1-에닐, 1-사이클로헥스-2-에닐, 1-사이클로헥스-3-에닐, 사이클로헥사디에닐, 사이클로헵틸, 사이클로옥틸, 사이클로노닐, 사이클로데실, 사이클로운데실 및 사이클로도데실기를 포함한다. 특히, 포화 모노사이클릭 사이클로 알킬기, 예를 들어 C_3-8사이클로알킬의 예는 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸 및 사이클로옥틸기를 포함하나, 이에 한정되지는 않는다. 바람직한 실시예에서, 사이클로알킬은 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸 및 사이클로헥실을 포함하지만 이에 한정되지 않는 3 내지 6개의 탄소 원자를 포함하는 모노사이클릭 고리(C_3-6 사이클로알킬로 약칭됨)이다. 바이사이클릭 사이클로알킬기의 예는[4,4],[4,5], [5,5], [5,6] 및 [6,6] 고리 시스템에서 선택된 바이사이클릭 고리로서 배열된 7 내지 12개의 고리 원자를 갖거나 또는 바이사이클로[2.2.1]헵탄, 바이사이클로[2.2.2]옥탄 및 바이사이클로[3.2.2]노난에서 선택된 가교된 바이사이클릭 고리를 포함한다. 바이사이클릭 사이클로알킬기의 추가 실시예는 [5,6] 및 [6,6] 고리 시스템으로부터 선택되는 바이사이클릭 고리로서 배열된 것들을 포함한다.

용어 "사이클로알케닐(cycloalkenyl)"은 단일 또는 다중 고리를 갖고 적어도 하나의 이중 결합, 바람직하게는 1 내지 2개의 이중 결합을 갖는 3 내지 10개의 탄소 원자의 비방향족 사이클릭 알킬기를 지칭한다. 일 실시예에서 사이클로알케닐은 사이클로펜테닐 또는 사이클로헥세닐, 바람직하게는 사이클로헥세닐이다.

용어 "사이클로알키닐(cycloalkynyl)"은 단일 또는 다중 고리를 갖고 하나 이상의 삼중 결합을 갖는 5 내지 10개의 탄소 원자의 비방향족 사이클로알킬기를 지칭한다.

용어 "중수소화(deuterated)"는 화학 구조 또는 유기기 또는 라디칼을 변형하기 위해 본원에서 사용되며, 여기서 하나 이상의 탄소 결합 수소(들)는 하나 이상의 중수소(들), 예를 들어 "중수소화-알킬(deuterated-alkyl)", "중수소화-사이클로알킬(deuterated-cycloalkyl)", "중수소화-헤테로사이클로알킬(deuterated-heterocycloalkyl)", "중수소화-아릴(deuterated-aryl)", "중수소화-모르폴리닐(deuterated-morpholinyl)" 등으로 대체된다. 예를 들어, 상기 정의된 용어 "중수소화-알킬"은 탄소에 결합된 하나 이상의 수소 원자가 중수소로 대체된 본원에 정의된 바와 같은 알킬기를 지칭한다. 중수소화 알킬기에서, 적어도 하나의 탄소 원자는 중수소에 결합되고; 탄소 원자가 하나 이상의 중수소에 결합하는 것이 가능하며; 알킬기에서 하나를 초과하는 탄소 원자가 중수소에 결합되어 있을 수도 있다.

단독으로 또는 다른 용어와 조합하여 사용되는 용어 "아릴(aryl)"은 다음으로부터 선택된 기를 지칭한다:

- 5-및 6-원 카복사이클릭 방향족 고리, 예를 들어 페닐;

- 하나 이상의 고리가 카보사이클릭 및 방향족, 예를 들어 나프틸 및 인다닐인 바이사이클릭 고리 시스템, 예컨대 7 내지 12원 바이사이클릭 고리 시스템; 및

- 하나 이상의 고리가 카보사이클릭 및 방향족, 예를 들어 플루오레닐인 10 내지 15원 트리사이클릭 고리 시스템과 같은 트리사이클릭 고리 시스템.

용어 "방향족 탄화수소 고리(aromatic hydrocarbon ring)" 및 "아릴(aryl)"은 본 명세서 전체에 걸쳐 상호교환적으로 사용된다. 일부 실시예에서, 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 방향족 탄화수소 고리는 5 내지 10개의 고리-형성 탄소 원자 (즉, C_5-10 아릴)를 갖는다. 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 방향족 탄화수소 고리의 예는 페닐, 나프-1-일, 나프트-2-일, 안트라세닐, 페난트레닐 등을 포함하지만, 이에 한정되지는 않는다. 일부 실시예에서, 방향족 탄화수소 고리는 나프탈렌 고리(나프트-1-일 또는 나프트-2-일) 또는 페닐 고리이다. 일부 실시예에서, 방향족 탄화수소 고리는 페닐 고리이다.

본 명세서에서 사용된 용어 "헤테로아릴(heteroaryl)"은 하기로부터 선택된 기를 지칭한다:

- 질소(N), 황(S) 및 산소(O)로부터 선택된 하나 이상의 헤테로 원자, 예를 들어 1 내지 4개, 또는 일부 실시예에서 1 내지 3개, 일부 실시예에서 1 내지 2개의 헤테로 원자를 포함하고, 나머지 고리 원자는 탄소인 5-, 6- 또는 7-원 방향족 모노사이클릭 고리;

- 고리 구성원(들)로서 질소, 산소 또는 임의로 산화된 황으로부터 선택된 하나 이상의 헤테로 원자, 예를 들어 1 내지 4개, 또는 일부 실시예에서 1 내지 3개, 일부 실시예에서 1 내지 2개의 헤테로 원자를 포함하고, 나머지 고리 원자는 탄소이고, 여기서 하나 이상의 고리는 방향족이고, 하나 이상의 헤테로 원자는 방향족 고리에 존재하는 7- 내지 12-원 바이사이클릭 고리; 및

- 고리 구성원(들)로서 질소, 산소 또는 임의로 산화된 황으로부터 선택된 하나 이상의 헤테로 원자, 예를 들어 1 내지 4개, 또는 일부 실시예에서 1 내지 3개, 일부 실시예에서 1 내지 2개의 헤테로 원자를 포함하고, 나머지 고리 원자는 탄소이고, 여기서 하나 이상의 고리는 방향족이고, 하나 이상의 헤테로 원자는 방향족 고리에 존재하는 11- 내지 14-원 트리사이클릭 고리.

헤테로아릴기에서 S 및 O 원자의 총수가 1을 초과하면, 이들 헤테로 원자는 서로 인접하지 않는다. 일부 실시예에서, 헤테로아릴기에서 S 및 O 원자의 충수는 2 이하이다. 일부 실시예에서, 방향족 헤테로사이클에서 S 및 O 원자의 충수는 1 이하이다. 헤테로아릴기가 하나를 초과하는 헤테로 원자 고리 멤버를 포함할 때, 헤테로 원자는 동일하거나 상이할 수 있다. 헤테로아릴기의 고리(들) 내의 질소 원자는 산화되어 N-옥사이드를 형성할 수 있다.

본원에서 사용된 용어 "임의로 산화된 황(optionally oxidized sulfur)"은 S, SO 또는 SO₂를 지칭한다.

용어 "방향족 헤테로사이클릭 고리(aromatic heterocyclic ring)" 및 "헤테로아릴(heteroaryl)"은 본 명세서 전체에 걸쳐 상호교환적으로 사용된다. 일부 실시예에서, 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 방향족 헤테로사이클릭 고리는 질소(N), 황(S) 및 산소(O)로부터 독립적으로 선택된 1,2, 3 또는 4개의 헤테로 원자 고리 멤버를 갖고 나머지 고리 멤버는 탄소인 5-, 6-, 7-, 8-, 9- 또는 10-고리 형성 멤버를 갖는다. 일부 실시예에서, 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 방향족 헤테로사이클릭 고리는 질소(N), 황(S) 및 산소(O)로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 헤테로 원자 고리 멤버를 포함하는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 고리이다. 일부 실시예에서, 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 방향족 헤테로사이클릭 고리는 5-내지 6-원 헤테로 아릴 고리이며, 이는 모노사이클릭이고, 질소(N), 황(S) 및 산소(O)로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 헤테로 원자 고리 멤버를 갖는다. 일부 실시예에서, 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 방향족 헤테로사이클릭 고리는 바이사이클릭이고 질소, 황 및 산소로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 헤테로 원자 고리 구성원을 갖는 8 내지 10-원 헤테로아릴 고리이다.

헤테로 아릴기 또는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 방향족 헤테로사이클릭 고리의 예는 (우선순위 1로 지정된 연결 위치로부터 번호가 정해지는 바와 같이) (2-피리딜, 3-피리딜 또는 4-피리딜과 같은) 피리딜, 시놀리닐, 피라지닐, 2,4-피리미디닐, 3,5-피리미디닐, 2,4-이미다졸릴, 이미다조피리디닐, 이속사졸릴, 옥사졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, (1,2,3-티아디아졸릴, 1,2,4-티아디아졸릴 또는 1,3,4-티아디아졸릴과 같은) 티아디아졸릴, 테트라졸릴, (티엔-2-일, 티엔-3-일과 같은) 티에닐, 트리아지닐, 벤조티에닐, 푸릴 또는 푸라닐, 벤조푸릴, 벤조이미다졸릴, 인돌릴, 이소인돌릴, 인돌리닐, (1,2,3-옥사디아졸릴, 1,2,4-옥사디아졸릴 또는 1,3,4-옥사디아졸릴과 같은) 옥사디아졸릴, 프탈라지닐, 피라지닐, 피리다지닐, 피롤릴, (1,2,3-트리아졸릴, 1,2,4-트리아졸릴 또는 1,3,4-트리아졸릴과 같은) 트리아졸릴, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 피라졸릴, (1H-피롤로[2,3-b]피리딘-5-일과 같은) 피라졸로피리디닐, (1H-피라졸로[3,4-b]피리딘-5-일과 같은) 피롤로피리디닐, (벤조[d]옥사졸-6-일과 같은) 벤조옥사졸릴, 프테리디닐, 퓨리닐, 1-옥사-2,3-디아졸릴, 1-옥사-2,4-디아졸릴, 1-옥사-2,5-디아졸릴, 1-옥사-3,4-디아졸릴, 1-티아-2,3-디아졸릴, 1-티아-2,4-디아졸릴, 1-티아-2,5-디아졸릴, 1-티아-3,4-디아졸릴, (푸라잔-2-일, 푸라잔-3-일과 같은) 푸라잔일, 벤조푸라자닐, 벤조티오페닐, 벤조티아졸릴, 벤조옥사졸릴, 퀴나졸리닐, 퀴녹살리닐, 나프티리디닐, 푸로피리디닐, (벤조[d]티아졸-6-일과 같은) 벤조티아졸릴, (1H-인다일-5-일과 같은) 인다졸릴 및 5,6,7,8-테트라하이드로이소퀴놀린을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.

"헤테로사이클릴(heterocyclyl)", "헤테로사이클(heterocycle)" 또는 "헤테로사이클릭(heterocyclic)"은 상호교환가능하고 질소, 산소 또는 임의로 산화된 황으로부터 선택된 하나 이상의 헤테로원자를 고리 구성원으로 포함하고 나머지 고리 구성원은 탄소인 비방향족 헤테로사이클릴기를 지칭하는데, 모노사이클릭, 융합, 가교 및 스피로 고리, 즉 모노사이클릭 헤테로사이클릴, 가교 헤테로사이클릴, 스피로 헤테로사이클릴 및 융합 헤테로사이클릭기를 포함한다.

용어 "모노사이클릭 헤테로사이클릴(monocyclic heterocyclyl)"은 적어도 하나의 고리 구성원이 질소, 산소 또는 임의로 산화된 황으로부터 선택된 헤테로원자인 모노사이클릭기를 지칭한다. 헤테로사이클은 포화되거나 부분적으로 포화될 수 있다.

모노사이클릭 4 내지 9-원 헤테로사이클릴기의 예로는 (우선순위 1로 지정된 연결 위치로부터 번호가 정해지는 바와 같이) 피롤리딘-1-일, 피롤리딘-2-일, 피롤리딘-3-일, 이미다졸리딘-2-일, 이미다졸리딘-4-일, 피라졸리딘-2-일, 피라졸리딘-3-일, 피페리딘-1-일, 피페리딘-2-일, 피페리딘-3-일, 피페리딘-4-일, 2,5-피페라지닐, 피라닐, 모르폴리닐, 모르폴리노, 모르폴린-2-일, 모르폴린-3-일, 옥시라닐, 아지리딘-1-일, 아지리딘-2-일, 아조칸-1-일, 아조칸-2-일, 아조칸-3-일, 아조칸 -4-일, 아조칸-5-일, 티라닐, 아제티딘-1-일, 아제티딘-2-일, 아제티딘-3-일, 옥세타닐, 티에타닐, 1,2-디티에타닐, 1,3-디티에타닐, 디하이드로피리디닐, 테트라하이드로피리디닐 , 티오모르폴리닐, 티옥사닐, 피페라지닐, 호모피페라지닐, 호모피페리디닐, 아제판-1-일, 아제판-2-일, 아제판-3-일, 아제판-4-일, 옥세파닐, 티에파닐, 1,4-옥사티아닐, 1,4-디옥세파닐 , 1,4-옥사티에파닐, 1,4-옥사아제파닐, 1,4-디티에파닐, 1,4-티아제파닐 및 1,4-디아제파닐, 1,4-디티아닐, 1,4-아자티아닐, 옥사제피닐, 디아제피닐, 티아제피닐, 디하이드로티에닐, 디하이드로피라닐, 디하이드로푸라닐, 테트라하이드로푸라닐, 테트라하이드로티에닐, 테트라하이드로피라닐, 테트라하이드로티오피라닐, 1-피롤리닐, 2-피롤리닐, 3-피롤리닐, 인돌리닐, 2H-피라닐, 4H-피라닐, 1,4-디옥사닐, 1,3-디옥솔라닐, 피라졸리닐, 피라졸리디닐, 디티아닐, 디티올라닐, 피라졸리디닐, 이미다졸리닐, 피리미디노닐, 또는 1,1-디옥소-티오모르폴리닐을 포함하지만 이에 제한되지는 않는다,

용어 "스피로 헤테로사이클릴(spiro heterocyclyl)"은 고리 구성원으로서 질소, 산소 또는 임의로 산화된 황으로부터 선택된 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는, 하나의 공통 탄소 원자(스피로 원자로 지칭됨)를 통해 연결된 고리를 갖고 나머지 고리 구성원은 탄소인 5 내지 20-원 폴리사이클릭 헤테로사이클릴을 지칭한다. 스피로 헤테로사이클릴기의 하나 이상의 고리는 하나 이상의 이중 결합을 포함할 수 있지만, 고리 중 어느 것도 완전히 공액된 파이-전자 시스템을 갖지 않는다. 바람직하게는 스피로 헤테로사이클릴은 6 내지 14원, 보다 바람직하게는 7 내지 12원이다. 스피로 헤테로사이클릴은 공통 스피로 원자의 수에 따라 모노-스피로 헤테로사이클릴, 디-스피로 헤테로사이클릴 또는 폴리-스피로 헤테로사이클릴로 나뉘며, 바람직하게는 모노-스피로 헤테로사이클릴 또는 디-스피로 헤테로사이클릴, 보다 바람직하게는 4-원/4-원, 3-원/5-원, 4-원/5-원, 4-원/6-원, 5-원/5-원, 또는 5-원/6-원 모노-스피로 헤테로사이클릴을 지칭한다.

용어 "융합된 헤테로사이클릭기(fused heterocyclic group)"는 5 내지 20-원 폴리사이클릭 헤테로사이클릴기를 지칭하며, 여기서 시스템의 각 고리는 인접한 원자 쌍(탄소 및 탄소 원자 또는 탄소 및 질소 원자)을 하나 이상의 질소, 산소 또는 선택적으로 산화된 황으로부터 선택되는 헤테로원자를 고리 구성원으로 하고, 나머지 고리원은 탄소를 포함하는 나머지 고리는 탄소이다. 융합된 헤테로사이클릭기의 하나 이상의 고리는 하나 이상의 이중 결합을 포함할 수 있지만 고리 중 어느 것도 완전히 공액된 파이-전자 시스템을 갖지 않는다. 바람직하게는, 융합된 헤테로사이클릴은 6 내지 14-원, 보다 바람직하게는 7 내지 10-원이다. 융합된 헤테로사이클릴은 구성원 고리의 수에 따라 바이사이클릭, 트리사이클릭, 테트라사이클릭 또는 폴리사이클릭 융합 헤테로사이클릴로 나뉘며, 바람직하게는 바이사이클릭 또는 트리사이클릭 융합 헤테로사이클릴, 보다 바람직하게는 5-원/5-원 또는 5-원/ 6원 바이사이클릭 융합 헤테로사이클릴을 지칭한다. 융합된 헤테로사이클의 대표적인 예에는 옥타하이드로사이클로펜타[c]피롤(예를 들어, 옥타하이드로사이클로펜타[c]피롤-2-일), 옥타하이드로피롤로[3,4-c]피롤릴, 옥타하이드로이소인돌릴, 이소인돌릴(예를 들어, 이소인돌린-2-일), 옥타하이드로-벤조[b][1,4]다이옥신을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.

용어 "가교된 헤테로사이클릴(bridged heterocyclyl)"은 5 내지 14-원 폴리사이클릭 헤테로사이클릭 알킬기를 지칭하며, 여기서 시스템의 모든 2개의 고리는 고리 구성원으로서 질소, 산소 또는 임의로 산화된 황으로부터 선택된 하나 이상의 헤테로원자를 포함하는 2개의 연결되지 않은 원자를 공유하고, 나머지 고리 구성원은 탄소이다. 가교된 헤테로사이클릴기의 하나 이상의 고리는 하나 이상의 이중 결합을 포함할 수 있지만 고리 중 어느 것도 완전히 공액된 파이 전자 시스템을 갖지 않는다. 바람직하게는, 가교된 헤테로사이클릴은 6 내지 14원, 더욱 바람직하게는 7 내지 10원이다. 가교된 헤테로사이클릴은 구성원 고리의 개수에 따라 바이사이클릭, 트리사이클릭, 테트라사이클릭 또는 폴리사이클릭 가교 헤테로사이클릴로 구분되며, 바람직하게는 바이사이클릭, 트리사이클릭, 테트라사이클릭 가교 헤테로사이클릴, 보다 바람직하게는 바이사이클릭 또는 트리사이클릭 가교 헤테로사이클릴을 지칭한다. 가교된 헤테로사이클릴의 대표적인 예에는 2-아자바이사이클로[2.2.1]헵틸, 아자바이사이클로[3.1.0]헥실, 2-아자바이사이클로[2.2.2]옥틸 및 2-아자바이사이클로[3.3,2]데실기가 포함되지만 이에 제한되지는 않는다.

본 명세서에 개시된 화합물은 비대칭 중심을 함유할 수 있고 따라서 거울상 이성질체로서 존재할 수 있다. "거울상 이성질체(enantiomers)"는 서로 중첩될 수 없는 거울상인 화합물의 2개의 입체 이성질체를 지칭한다. 본 명세서에 개시된 화합물이 둘 이상의 비대칭 중심을 갖는 경우, 이들은 부분 입체 이성질체로서 추가로 존재할 수 있다. 거울상 이성질체 및 부분 입체 이성질체(diastereomers)는 광범위한 부류의 입체 이성질체에 속한다. 실질적으로 순수한 분해된 거울상 이성질체, 라세미 혼합물 및 부분 입체 이성질체 혼합물과 같은 모든 가능한 입체 이성질체가 포함되는 것으로 의도된다. 본 명세서에 개시된 화합물의 모든 입체 이성질체 및/또는 그의 약학적으로 허용가능한 염이 포함되는 것으로 의도된다. 달리 구체적으로 언급되지 않는 한, 하나의 이성질체에 대한 언급은 가능한 모든 이성질체에 적용된다. 이성질체 조성물이 특정되지 않을 때마다, 모든 가능한 이성질체가 포함된다.

본 명세서에서 사용된 용어 "실질적으로 순수한(substantially pure)"은 표적 입체 이성질체가 중량 기준으로 35% 이하, 예를 들어 30% 이하, 추가로 25% 이하, 더욱 추가로 20% 이하의 임의의 다른 입체 이성질체를 함유함을 의미한다. 일부 실시예에서, 용어 "실질적으로 순수한(substantially pure)"은 표적 입체 이성질체가 중량을 기준으로 10% 이하, 예를 들어 5% 이하, 예컨대 1% 이하의 임의의 다른 입체 이성질체(들)를 함유함을 의미한다.

본 명세서에 개시된 화합물이 올레핀성 이중결합을 함유하는 경우, 달리 명시되지 않는 한, 이러한 이중결합은 E 및 Z 기하 이성질체 모두를 포함하는 것으로 의미된다.

본원에 개시된 화합물이 이치환된 사이클로헥실 또는 사이클로부틸기를 함유하는 경우, 사이클로헥실 또는 사이클로부틸 고리에서 발견되는 치환기는 시스(cis) 및 트랜스(trans) 형성을 채택할 수 있다. 시스 형성은 두 치환기가 고리에 있는 2개의 치환기 배치가 위쪽에서 발견된다는 것을 의미하며 트랜스는 이들이 고리의 반대쪽에 있음을 의미한다.

반응 생성물을 서로 및/또는 출발 물질로부터 분리하는 것이 유리할 수 있다. 각 단계 또는 일련의 단계의 원하는 생성물은 당업계의 일반적인 기술에 의해 원하는 균질도로 분리 및/또는 정제(이하 분리)된다. 전형적으로 이러한 분리는 다상 추출, 용매 또는 용매 혼합물로부터의 결정화, 증류, 승화 또는 크로마토그래피를 포함한다. 크로마토그래피는 예를 들어 역상 및 정상 상; 크기 배제; 이온 교환; 고압, 중압 및 저압 액체 크로마토그래피 방법 및 장치; 소규모 분석; 모의 이동 층(simulated moving bed, "SMB") 및 제조용 박층 또는 후층 크로마토그래피뿐만 아니라 소규모 박층 및 플래시 크로마토그래피 기술을 포함한다. 당업자는 원하는 분리를 달성할 가능성이 가장 높은 기술을 적용할 것이다.

"부분 입체 이성질체(diastereomers)"는 2개 이상의 키랄 중심을 갖지만 서로 거울상이 아닌 화합물의 입체 이성질체를 지칭한다. 부분 입체 이성질체 혼합물은 크로마토그래피 및/또는 분별 결정화와 같은 당업자에게 공지된 방법에 의해 물리적 화학적 차이에 기초하여 개별의 부분 입체 이성질체로 분리될 수 있다. 거울상 이성질체는 적절한 광학 활성 화합물(예를 들어, 키랄 보조제, 예컨대 키랄 알코올 또는 모셔 산 클로라이드(Mosher's acid chloride))과의 반응에 의해 거울상 이성질체 혼합물을 부분 입체 이성질체 혼합물로 전환시키고, 부분 입체 이성질체를 분리하고 순수한 거울상 이성질체에 상응하는 개별 부분 입체 이성질체를 전환(예를 들어, 가수분해)함으로써 거울상 이성질체를 분리할 수 있다. 거울상 이성질체는 또한 키랄 HPLC 컬럼을 사용하여 분리될 수 있다.

단일 입체 이성질체, 예를 들어 실질적으로 순수한 거울상 이성질체는 광학 활성 분해제를 사용하는 부분 입체 이성질체의 형성과 같은 방법을 사용하여 라세미 혼합물의 분해에 의해 수득될 수 있다[Eliel, E. and Wilen, S. Stere℃hemistry of Organic Compounds. New York: John Wiley & Sons, Inc., 1994; L℃hmuller, C. H., et al. "Chromatographic resolution of enantiomers: Selective review." J. Chromatogr., 113(3) (1975): pp. 283-302]. 본 발명의 키랄 화합물의 라세미 혼합물은 (1) 키랄 화합물과 이온성, 부분 입체 이성질체 염의 형성 및 분별 결정화 또는 다른 방법에 의한 분리, (2) 키랄 유도체화제를 이용한 부분 입체 이성질체 화합물의 형성, 부분 입체 이성질체의 분리 및 순수한 입체 이성질체로의 전환, (3) 키랄 조건하에서 직접적으로 순수하거나 농축된 입체 이성질체의 분리를 포함한 임의의 적합한 방법에 의해 분리 및 단리될 수 있다. See: Wainer, Irving W., Ed. Drug Stereochemistry: Analytical Methods and Pharmacology. New York: Marcel Dekker, Inc., 1993.

"약학적으로 허용가능한 염(Pharmaceutically acceptable salts)"은 건전한 의학적 판단의 범위 내에서 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응 등이 없이 인간 및 하등 동물의 조직과의 접촉에 사용하기에 적합하고, 합리적인 이익/위험 비율에 부합된다. 약학적으로 허용가능한 염은 본 명세서에 개시된 화합물의 최종 단리 및 정제 동안 인시츄(in situ) 제조될 수 있거나 자유 염기 기능을 적합한 유기산과 반응시키거나 산성기를 적합한 염기와 반응시킴으로써 제조될 수 있다.

또한, 본 명세서에 개시된 화합물이 산부가염으로서 수득되는 경우, 유리 염기는 산염의 용액을 염기성화함으로써 수득될 수 있다. 반대로, 생성물이 유리 염기인 경우, 유리 염기를 적합한 유기용매에 용해시키고 상기 용액을 산으로 처리함으로써, 염기 화합물로부터의 산 부가염을 제조하는 통상적인 제조방법에 따라 부가염, 예컨대 약학적으로 허용가능한 부가염이 제조될 수 있다. 당업자는 비독성의 약학적으로 허용가능한 부가염을 제조하기 위해 과도한 실험 없이 사용될 수 있는 다양한 합성방법을 인식할 것이다.

본 명세서에 정의된 "약학적으로 허용가능한 그 염(a pharmaceutically acceptable salt thereof)"은 하나 이상의 화학식 (I)의 화합물의 염 및 화학식 (I)의 화합물의 입체 이성질체의 염, 예컨대 거울상 이성질체의 염 및/또는 부분 입체 이성질체의 염을 포함한다.

본 명세서에서 사용된 용어 "투여(administration)", "투여하는(administering)", "치료(treating)" 및 "치료하는(treating)"는 동물, 인간, 실험 대상체, 세포, 조직, 기관 또는 생물학적 유체에 적용될 때 외인성 약제, 치료제, 진단제의 접촉을 의미한다. 세포의 처리는 시약이 세포에 접촉할 뿐만 아니라 시약이 유체에 접촉하는 것을 포함하며, 여기서 유체는 세포와 접촉한다. 용어 "투여(administration)" 및 "치료(treatment)"는 또한 예를 들어 시약, 진단, 결합 화합물 또는 다른 세포에 의한 세포의 시험관내(in vitro) 및 생체외(ex vivo) 치료를 의미한다. 본원에서 용어 "개체(subject)"는 임의의 유기체, 바람직하게는 동물, 보다 바람직하게는 포유동물(예를 들어, 랫트, 마우스, 개, 고양이, 토끼) 및 가장 바람직하게는 인간을 포함한다.

용어 "유효량(effective amount)" 또는 "치료적 유효량(therapeutically effective amount)"은 질환, 또는 질병 또는 질환의 임상 증상 중 하나 이상을 치료하기 위해 대상체에게 투여될 때, 질병, 질환 또는 증상의 치료에 영향을 주기에 충분한 화합물과 같은 활성성분의 양을 지칭한다. "치료적 유효량(therapeutically effective amount)"은 화합물, 질병, 질환 및/또는 질병 또는 질환의 증상, 치료 대상체의 나이 및/또는 치료 대상체의 체중에 따라 달라질 수 있다. 임의의 주어진 예에서 적절한 양은 당업자에게 명백하거나 일상적인 실험에 의해 결정될 수 있다. 일부 실시예에서, "치료적 유효량(therapeutically effective amount)"은 상기 정의된 바와 같은 대상체의 질병 또는 질환을 "치료(treat)"하기에 효과적인 본원에 개시된 하나 이상의 화합물 및/또는 하나 이상의 입체 이성질체 및/또는 그의 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 염의 양이다. 병용 요법의 경우, "치료적 유효량(therapeutically effective amount)"은 질병, 질환 또는 상태의 효과적인 치료를 위한 병용 대상체의 총량을 지칭한다.

본 명세서에 개시된 화합물을 포함하는 약제학적 조성물은 이를 필요로 하는 대상체에게 경구, 흡입, 직장, 비경구 또는 국소 투여를 통해 투여될 수 있다. 경구 투여를 위해, 약학 조성물은 정제, 분말, 과립, 캡슐 등과 같은 규칙적인 고체 제형, 물 또는 오일 현탁액과 같은 액체 제형 또는 시럽, 용액, 현탁액 등과 같은 다른 액체 제형; 비경구 투여를 위해, 약학 조성물은 용액, 수용액, 오일 현탁액 농축물, 동결건조된 분말 등일 수 있다. 바람직하게는, 약학 조성물의 제형은 정제, 코팅 정제, 캡슐, 좌제, 코 스프레이 또는 주사, 보다 바람직하게는 정제 또는 캡슐로부터 선택된다. 약학적 조성물은 정확한 투여량으로 단일 단위 투여일 수 있다. 또한, 약학 조성물은 추가의 활성 성분을 추가로 포함할 수 있다.

본 명세서에 개시된 약학 조성물의 모든 제형은 약학 분야의 통상적인 방법에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, 활성 성분을 하나 이상의 부형제와 혼합한 다음, 원하는 제형을 제조할 수 있다. "약학적으로 허용가능한 부형제(pharmaceutically acceptable excipient)"는 원하는 약학적 제형에 적합한 통상적인 약학적 담체, 예를 들어 희석제, 물, 다양한 유기용매 등과 같은 비히클, 전분, 수크로스 등과 같은 충전제, 셀룰로오스 유도체, 알지네이트, 젤라틴 및 폴리비닐피롤리돈(PVP)와 같은 결합제; 글리세롤과 같은 습윤제; 아가, 탄산칼슘 및 중탄산나트륨과 같은 붕해제; 4차 암모늄 화합물과 같은 흡수증강제; 헥사데칸올과 같은 계면활성제; 카올린 및 비누 점토와 같은 흡수 담체; 탈크, 스테아르산 칼슘, 스테아르산 마그네슘, 폴리에틸렌 글리콜 등과 같은 윤활제를 지칭한다. 또한, 약학적 조성물은 분산제(decentralized agent), 안정화제, 증점제, 착화제, 완충제, 침투증강제, 중합체, 방향족 물질, 감미제 및 염료와 같은 기타 약제학적으로 허용가능한 부형제를 추가로 포함한다.

용어 "질병(disease)"은 임의의 질병, 불편함, 질병, 증상 또는 적응증을 나타내며, "질환(disorder)" 또는 "조건(condiction)"이라는 용어와 호환될 수 있다.

문맥상 달리 요구되지 않는 한, 본 명세서 및 하기 청구범위를 통틀어 용어 "포함하다(comprise)" 및 "포함하다(comprises)" 및 "포함하는(comprising)"과 같은 변형은 그 이후에 특징의 존재를 특정하도록 의도되지만, 존재 또는 하나 이상의 다른 기능 추가를 배제하지는 않는다. 본 명세서에서 사용될 때, 용어 "포함하는(comprising)"는 "함유하는(containing)", "포함하는(including))" 또는 때때로 "갖는(having)"이라는 용어로 치환될 수 있다.

본 명세서 및 하기 청구범위에서, 용어 "C_n-m"은 종점을 포함하는 범위를 나타내며, 여기서 n 및 m은 정수이고 탄소수를 나타낸다. 예는 C_1-8, C_1-6 등을 포함한다.

본 문서의 다른 곳에서 구체적으로 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용된 다른 모든 기술 및 과학 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자에 의해 일반적으로 이해되는 의미를 갖는다.

일반 합성

그의 염을 포함하여 본원에 개시된 화합물은 공지된 유기합성기술을 사용하여 제조될 수 있고, 수많은 가능한 합성 경로 중 임의의 것에 따라 합성될 수 있다.

본원에 개시된 화합물을 제조하기 위한 반응은 유기합성 분야의 당업자에 의해 용이하게 선택될 수 있는 적합한 용매에서 수행될 수 있다. 적합한 용매는 반응이 수행되는 온도, 예를 들어 용매의 비등점 범위일 수 있는 온도에서 출발 물질, 중간체 또는 생성물과 실질적으로 비반응성일 수 있다. 주어진 반응은 하나의 용매 또는 용매의 혼합물에서 수행될 수 있다.

적절한 보호기의 선택은 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.

NMR, UV, HPLC, LC-MS 및 TLC와 같은 당업계에 공지된 임의의 적합한 방법에 따라 반응을 모니터링할 수 있다. 화합물은 HPLC 및 정상 상 실리카 크로마토그래피를 비롯한 다양한 방법에 의해 정제될 수 있다.

키랄 분석 HPLC는 상이한 키랄 실시예의 체류시간의 분석을 위해 사용되었고, 조건은 사용된 칼럼, 이동상, 용매 배급량에 따라 하기와 같은 방법으로 분류되었다.

본 명세서에 개시된 화합물은 반응식 I에 따라 제조될 수 있다.

[반응식 I]

여기서 -W-R^1A는 -OR^1a 또는 -NR^1aR^1b이고, L², R⁵, R⁶, R^1a 및 R^1b 는 화학식 (I)에 대해 정의된 바와 같으며, X 및 Y는 독립적으로 CH 또는 N이고; W는 독립적으로 N 또는 O이다.

반응식 I에서, 시판되는 에틸 1H-이미다졸-2-카르복실레이트를 2-O-(4-니트로벤조일)히드록실아민과 반응시켜 화합물 2를 형성하고, 이를 에틸 카르보노클로리데이트와 반응시킨 다음 수산화암모늄의 존재하에 고리를 닫아 이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2,4(1H,3H)-디온을 수득하였다. 브롬화 시약을 사용하여 하나의 Br 원자를 도입한 후 중간체 5를 얻은 다음 디온을 염소화하여 중간체 6을 형성하였다. 하나의 염소 원자를 보호된 아민으로 대체하여 중간체 7을 얻었고, 이를 R^1A-W와 반응시켜 핵심 중간체 8을 수득하였으며, 이를 염기성 조건하에서 다른 알데하이드와 반응시켜 중간체 10을 형성하였다. 아민 및 하이드록실기 상의 보호기를 제거하여 화학식 I을 수득하였다.

중간체 10은 또한 반응식 II에 따라 제조될 수 있다.

[반응식 II]

반응식 II에서, 화합물 4는 염소화되어 중간체 6'을 형성하였다. 하나의 염소 원자를 보호된 아민으로 대체하여 중간체 7'을 얻었고, 이를 R^1A-W와 반응시켜 핵심 중간체 8'을 얻었고, 이어서 염기성 조건에서 다른 알데하이드와 반응하여 중간체 10을 형성하였다.

실시예

하기 실시예는 순전히 예시를 위한 것이며 어떤 식으로든 제한하는 것으로 간주되어서는 안된다. 달리 명시되지 않는 한, 하기 실시예의 실험 방법은 통상적인 방법이다. 달리 명시되지 않는 한, 시약과 재료는 모두 시판 중인 것들이다. 사용되는 모든 용매 및 화학 물질은 분석 등급 또는 화학적 순도를 갖는다. 용매는 사용하기 전에 모두 재증류된다. 무수 용매는 모두 표준 방법 또는 참조 방법에 따라 준비된다. 컬럼 크로마토그래피용 실리카겔(100-200 메쉬) 및 박층 크로마토그래피(TLC)용 실리카겔(GF254)은 Tsingdao Haiyang Chemical Co., Ltd. 또는 Yantai Chemical Co., Ltd.에서 시판되고 있다. 모두 석유 에테르 (60-90 ℃)/에틸아세테이트(v/v)로 용출되고, 달리 명시되지 않는 한 요오드 또는 에탄올의 몰리브드인산(molybdphosphoric acid) 용액으로 시각화된다. 달리 명시되지 않는 한 모든 추출 용매는 무수 Na₂SO₄로 건조된다. ¹H NMR 스펙트럼은 TMS (tetramethylsilane)를 내부 표준으로 사용하여 Bruck-400 핵 자기 공명 분광계에 기록된다. LC/MS 데이터는 214 nm 및 254 nm에서 감지된 다이오드 어레이 검출기(diode array detector, DAD)와 이온 트랩(ion trap, ESI 소스)이 장착된 Agilent1100 고성능 액체 크로마토그래피-이온 트랩 질량 분석기(LC-MSD 트랩)를 사용하여 기록된다. 시약을 제외한 모든 화합물 이름은 ChemDraw® 버전 14.0에서 생성되었다.

하기 실시예에서는 다음 약어가 사용된다.

AcOH 아세트산(Acetic acid)

Aq 수용성(Aqueous)

BINAP 2,2'-비스(디페닐포스피노)-1,1'-바이나프탈렌(2,2'-bis(diphenylphosphino)-1,1'-binaphthalene)

염수(Brine) 포화 염화나트륨 수용액(Saturated aqueous sodium chloride solution)

Bn 벤질(Benzyl)

BnBr 벤질브로마이드(Benzyl Bromide)

BPO 벤조일 퍼옥사이드(Benzoyl peroxide)

BSA N,O-비스(트리메틸실릴)아세트아미드(N,O-Bis(trimethylsilyl) acetamide)

CH₂Cl₂ 또는 DCM 디클로로메탄(Dichloromethane)

DIAD 디이소프로필아조디카르복실레이트(Diisopropyl azodicarboxylate)

DMF N,N-디메틸포름아마이드(N,N-Dimethylformamide)

Dppf 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센(1,1"-bis(diphenylphosphino) ferrocene)

DBU 1,8-디아자바이사이클로[5,4,O]운덱-7-엔(1,8-diazabicyclo [5.4.0]undec-7-ene)

DIEA or DIPEA N,N-디이소프로필에틸아민(N,N-diisopropylethylamine)

DMAP 4-N,N-디메틸아미노피리딘(4-N,N-dimethylaminopyridine)

DMF N, N- 디메틸포름아미드(N,N-dimethylformamide)

DMSO 디메틸 설폭사이드(Dimethyl sulfoxide)

EtOAc 또는 EA 에틸 아세테이트(Ethyl acetate)

EtOH 에탄올(Ethanol)

Et₂O 또는 에테르 디에틸에테르(Diethyl ether)

g 그램(Grams)

h 또는 hr 시간(Hour)

HATU O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄헥사플루오로포스페이트(O-(7-Azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluorophosphate)

Hex 헥산(Hexane)

HCl 염산(Hydrochloric acid)

HMDS 헥사메틸디실라잔(Hexamethyldisilazane)

HPLC 고성능 액체 크로마토그래피(High-performance liquid chromatography)

IBX 2-요오도시벤조산(2-Iodoxybenzoic acid)

IPA 이소프로필 알코올(Isopropyl alcohol)

i-PrOH 이소프로필 알코올(Isopropyl alcohol)

LCMS Liquid chromatography mass spectrometry

mg 밀리그램(milligrams)

mL 밀리리터(milliliters)

mmol 밀리몰(millimole)

MeCN 아세토니트릴(Acetonitrile

MeOH 메탄올(Methanol)

Min 분(minutes)

ms or MS 질량 스펙트럼(Mass spectrum)

MTBE 메틸 tert-부틸 에테르(methyl tert-butyl ether)

Na₂SO₄ 소듐 설페이트(Sodium sulfate)

NBS N-브로모숙신이미드(N-Bromosuccinimide)

NMP N-메틸 피롤리돈(N-Methyl Pyrrolidone)

PE 석유 에테르(petroleum ether)

PMB (4-메톡시페닐)메탄아민((4-methoxyphenyl)methanamine)

prep 분취(preparative)

Rt 체류시간(Retention time)

RT or rt 실온(Room temperature)

sat. 포화(Saturated)

TBAF 테트라-부틸 암모늄 플루오라이드(Tetra-butyl ammonium fluoride)

TBSCl tert-부틸디메틸실릴 클로라이드(tert-Butyldimethylsilyl chloride)

t-BuOK 칼륨 tert-부톡사이드(Potassium tert-butoxide)

TFA 트리플루오로아세트산(Trifluoroacetic acid)

THF 테트라하이드로푸란(tetrahydrofuran)

TLC 박막 크로마토그래피(thin layer chromatography)

μL 마이크로리터(Microliters)

중간체-I의 합성

7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(7-bromo-2-butoxy-N,N-bis(4-methoxybenzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 에틸 1-아미노-1H-이미다졸-2-카르복실레이트 염산염

NMP(1.2L) 중 에틸 1H-이미다졸-2-카복실레이트(56g, 0.4mol)의 교반된 용액에 t-BuOK(THF 중 1M, 440ml, 0.44mol)를 20~30℃에서 첨가하였다. 혼합물을 0.5시간 동안 교반하였다. NMP(0.4L) 중 O-(4-니트로벤조일)히드록실아민(80.08g, 0.44mol)의 용액을 30℃ 미만에서 적가하였다. 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 용액을 MTBE(500ml)로 희석하였다. HCl (EA 중 4M, 100ml)을 첨가하여 반응을 켄칭하였다. 규조토(20g)를 상기 혼합물에 첨가한 다음, 0.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하였다. 여액을 MTBE(2L)로 희석하고 HCl (EA 중 4M, 200ml)을 적가하였다. 현탁액을 0.5시간 동안 교반하고 여과하였다. 여과 케이크를 MTBE로 헹구고 오븐에서 건조시켜 생성물(70g, 91%)을 수득하였다. MS: M/e 156 (M+1)+.

단계 B: 에틸 1-((에톡시카르보닐)아미노)-1H-이미다졸-2-카르복실레이트 및 에틸 1-(디(에톡시카르보닐)아미노)-1H-이미다졸-2-카르복실레이트 (1:1)의 혼합물

THF(900ml) 및 H₂O(900ml) 중의 에틸 1-아미노-1H-이미다졸-2-카복실레이트 염산염(80g, 0.42mol)의 교반된 용액에 NaHCO₃(178.9g, 2.1mol)를 여러 부분으로 나뉘어 첨가하였다. 에틸 클로로포르메이트(98.55g, 0.9mol)를 30℃ 미만에서 적가하였다. 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EA(1 L)로 희석한 다음 분리하였다. 수층을 EA(800ml)로 추출하였다. 수집된 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하여 조 생성물(113g)을 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. MS: M/e 228(M+1)+ & M/e 300(M+1)+.

단계 C: 이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2,4(1H,3H)-디온

밀봉된 튜브에, 암모늄 수산화물(400ml, 3.6V) 및 IPA(200ml, 1.8V) 중에 에틸 1-((에톡시카르보닐)아미노)-1H-이미다졸-2-카르복실레이트 및 에틸 1-(디(에톡시카르보닐)아미노)-1H-이미다졸-2-카르복실레이트(110 g)의 혼합물을 채웠다. 혼합물을 120℃에서 밤새 교반하였다. 냉각 후, 혼합물을 여과하였다. 여과 케이크를 MeOH로 헹구었다. 여액을 감압하에 농축하였다. 생성된 잔류물을 MeOH에서 슬러리화하고, 여과하고, MeOH로 헹구었다. 생성된 여과 케이크 및 이전의 여과 케이크를 혼합하고 오븐에서 건조시켜 생성물(56g)을 백색 고체로서 수득하였다. MS: M/e 153 (M+1)+.

단계 D: 7-브로모이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2,4(1H,3H)-디온

H₂O(1.2L) 중 이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2,4(1H,3H)-디온(30g, 0.20mol)의 용액에 NBS(24.6g, 0.14mol)를 25℃ 미만에서 여러 부분으로 나누어 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하였다. 여액을 농축하여 용매를 제거하였다. 생성된 잔류물 및 이전의 여과 케이크를 혼합하고 MeOH(20V)에 이어서 MeOH:H₂O(1:1,20V)에서 슬러리화하여 생성물(30.4g, 94%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS: M/e 231(M+1)+.

단계 E: 7-브로모-2,4-디클로로이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진

350ml의 밀봉된 튜브에 7-브로모이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2,4(1H,3H)-디온(10g, 43mmol), 트리에틸아민 염산염(12g, 88mmol) 및 POCl₃(100ml)를 충전하였다. 혼합물을 120℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 농축하여 POCl₃를 제거하였다. 잔류물을 EA(200ml)로 희석시키고 pH 값이 7보다 높아질 때까지 포화 NaHCO₃ (aq.)를 20℃ 미만에서 적가하였다. 용액을 분리하였다. 유기층을 H₂O로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성된 잔류물을 PE 중 0-20% EA를 사용하는 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물(8.5g, 73%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS: M/e 267(M+1)+.

단계 F: 7-브로모-2-클로로-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민

THF(500ml) 중의 7-브로모-2,4-디클로로이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진(30g, 0.11mol)의 교반 용액에 TEA(22.6g, 0.22mol)을 적가하였다. 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. THF(80ml) 중의 비스(4-메톡시벤질)아민(31.6g, 0.12mol)의 용액을 상기 용액에 적가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 용액을 H₂O(300ml)로 켄칭한 다음 EA(200ml X 2)로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성된 잔류물을 PE(300ml)에 슬러리화하고 여과하여 생성물(41.4g, 76%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS: M/e 488(M+1)+.

단계 G: 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민

7-브로모-2-클로로-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(35g, 71.6mmol) 및 n-BuONa/n-BuOH(20%, 200ml)의 혼합물을 N₂하에 80℃에서 1시간 동안 교반하였다. 용액을 H₂O(200ml)로 켄칭하였다. 수용액을 EA(150ml X 2)로 추출하였다. 수집된 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성된 잔류물을 PE 중 0-20% EA를 사용하는 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물(33g, 88%)을 무색 오일로서 수득하고, 이는 몇 시간 후에 고화될 것이다. MS: M/e 526(M+1)+.

화합물 A1: 2-부톡시-7-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(4-(pyrrolidin-1-ylmethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 7-브로모-2-클로로이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민

7-브로모-2,4-디클로로이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진(2.37g, 8.84mmol) 및 수산화암모늄(30mL)의 반응 혼합물을 80℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 침전물을 여과하여 조 생성물(1.7g, 77%)을 얻었다. MS: M/e 248(M+1)+.

단계 B: 7-브로모-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민

단계 A의 생성물(1.7g, 6.84mmol) 및 부탄올산나트륨(sodium butanolate, 50mL, 1-부탄올 중 1M)의 혼합물을 70℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 증발시키고 잔류물을 메탄올로 희석하였다. 침전물을 여과하여 조 생성물(1g, 51%)을 얻었다. ¹H NMR(400MHz, DMSO-d6) δ 8.31(s, 1H), 8.24(s, 1H), 7.60(s, 1H), 4.24 (t, J = 6.5Hz, 2H), 1.81 - 1.62(m, 2H), 1.53 - 1.34(m, 2H), 0.94(t, J = 7.4Hz, 3H) ppm. MS: M/e 286 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸(7-브로모-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-일)(tert-부톡시카르보닐)카르바메이트

디클로로메탄(20mL) 중 단계 B의 생성물(525mg, 1.84mmol) 및 DMAP(224mg, 1.84mmol)의 용액에 디-tert-부틸 디카보네이트(1.2g, 5.51mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 디클로로메탄(20mL)으로 희석하고, 물 및 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 조 생성물(650mg, 72%)을 얻었고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS: M/e 486 (M+1)⁺.

단계 D: tert-부틸 (2-부톡시-7-(하이드록시(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-일)(tert-부톡시카르보닐)카르바메이트

질소 하에 THF(30mL) 중 단계 C(650mg, 1.33mmol)의 생성물 용액에 n-BuLi(0.8mL, 2.00mmol, 헥산 중 2.5M)를 -78℃에서 첨가하고 0.5시간 동안 교반하였다. 4-(피롤리딘-1-일메틸)벤즈알데히드(378 mg, 2.00 mmol)를 첨가한 후, 혼합물을 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 NH₄Cl의 포화 수용액으로 켄칭하고 생성된 혼합물을 에틸 아세테이트(30 mL X3)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 증발시켰다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(용리액: MeOH/DCM = 0.1% 내지 5%)로 정제하여 생성물(200 mg, 30%)을 얻었다. MS: M/e 597 (M+1)⁺.

단계 E: 2-부톡시-7-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A1 )

단계 D의 생성물(140mg, 0.28mmol), 트리플루오로아세트산(2mL), 트리에틸실란(2mL) 및 디클로로메탄(1mL)의 반응 혼합물을 40℃에서 밤새 교반하였다. 완료 후, 혼합물을 증발시키고 염기성화시켰다. 잔류물을 콤비-플래시(combi-flash, 용리액: MeOH/DCM = 0% 내지 10%)로 정제하여 생성물(50 mg, 47%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 8.15 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.29 - 7.18 (m,4H), 4.19 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 4.11 (s, 2H), 3.59 (s, 2H), 2.49 - 2.33(m, 4H), 1.70 - 1.61 (m, 6H), 1.50 - 1.32 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.4 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 381 (M+1)⁺.

화합물 A2: 2-부톡시-7-(4-(3-(디메틸아미노)프로폭시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(4-(3-(dimethylamino)propoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 4-(3-(디메틸아미노)프로폭시)벤즈알데히드

DIAD(2.5g, 12.3mmol)를 THF(20mL) 중의 4-하이드록시 벤즈알데히드(1g, 8.2mmol), 3-(디메틸아미노)프로판-1-올(1.2g, 12.3mmol) 및 트리페닐포스판(3.2g, 12.3mmol)의 혼합물을 N₂분위기 하에 0℃에서 적가하였다. 혼합물을 실온으로 가온하고 6시간 동안 교반하였다. 반응물을 물(20mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(20mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 건조하고 농축하고 CombiFlash로 정제하여 생성물(1.1g, 65%)을 무색 오일로 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.88 (s, 1H), 7.82 (d, J=8.0Hz, 2H), 7.00 (d, J=8.0Hz, 2H), 4.11 (t, J=8.0Hz, 2H), 2.46 (t, J=8.0Hz, 2H), 2.26 (s, 6H), 2.02 - 1.96 (m, 2H) ppm. MS: M/e 208 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-부톡시-7-((4-(3-(디메틸아미노)프로폭시)페닐)(하이드록시)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-일)(tert-부톡시카르보닐)카르바메이트

-78℃에서 THF(3mL) 중 브로마이드(100mg, 0.2mmol)의 냉각된 용액을 N₂로 퍼징한 다음, n-BuLi(1.6M, 0.3mL)를 적가하였다. -78℃에서 30분 동안 교반한 후, THF(1 mL) 중 4-(3-(디메틸아미노)프로폭시)벤즈알데히드(83 mg, 0.4 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 이 온도에서 30분 동안 교반한 다음, 밤새 실온으로 가온하였다. 용액을 NH₄Cl 용액(5mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 prep-TLC(DCM:MeOH=10:1)로 추가 정제하여 순수한 생성물을 백색 고체(35 mg, 33%)로 얻었다. MS: M/e 615 (M+1)⁺.

단계 C: 2-부톡시-7-(4-(3-(디메틸아미노)프로폭시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A2 )

트리에틸실란(0.5mL) 및 트리플루오로아세트산(0.5mL)을 DCM(2mL) 중 생성물 단계 B(35mg, 0.07mmol)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 가열한 다음, 농축시켰다. 잔류물에 물(5mL)을 첨가하고, 에틸 아세테이트(5mL)로 추출하고, NaHCO₃(5mL) 및 염수(5mL)로 세척하였다. 유기층을 건조하고 농축하고 prep-TLC(DCM:MeOH=6:1)로 정제하여 생성물(9mg, 33%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.75 (br.s, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.23 (d, J=8.0Hz, 2H), 6.86 (d, J=8.0Hz, 2H), 4.20 (t, J=8.0Hz, 2H), 4.07 (s, 2H), 3.99 (t, J=8.0Hz, 2H), 3.11 (t, J=4.0Hz, 2H), 2.74 (s, 6H), 2.10 - 2.03 (m, 2H), 1.71 - 1.64 (m, 2H), 1.45 - 1.36 (m, 2H), 0.93 (t, J=8.0Hz, 3H) ppm. MS: M/e 399 (M+1)⁺.

화합물 A3: 2-부톡시-7-(4-(모르폴리노메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(4-(morpholinomethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 4-(브로모메틸)벤즈알데히드

DCM(400mL) 중 4-(하이드록시메틸)벤즈알데히드(7g, 50.7mmol)의 교반된 용액에 NBS(17.8g, 100mmol) 및 PPh₃(27.3g, 104mmol)를 첨가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 H₂O(150mL x 3)로 세척하였다. 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 농축하고, 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=5:1)로 정제하여 4-(브로모메틸)벤즈알데히드(9.5g, 95%)를 백색 고체로서 얻었다. MS: M/e 199 (M+1)⁺.

단계 B: 4-(모르폴리노메틸)벤즈알데히드

MeCN(40mL) 중 4-(브로모메틸)벤즈알데히드(3 g, 15 mmol)의 교반된 용액에 모르폴린(1.39 g, 16 mmol) 및 K₂CO₃ (4.17g, 30mmol)를 첨가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과하였다. 여액을 H₂O에 붓고 EtOAc(15mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=1:1)로 정제하여 4-(모르폴리노메틸)벤즈알데히드(2g, 66.7%)를 황색 오일로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.00 (s, 1H), 7.84 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.52 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 3.74 - 3.67 (m, 4H), 3.57 (s, 2H), 2.50 - 2.42 (m, 4H) ppm. MS: M/e 206 (M+1)⁺.

단계 C: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(모르폴리노메틸)페닐)메탄올

질소 분위기 하에 -78℃로 냉각된 THF(10mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.3mmol)의 교반된 용액에 n-BuLi(헥산 중, 1.6M, 0.75mmol, 0.47mL)를 적가하였다. 20분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 4-(모르폴리노메틸)벤즈알데히드(114mg, 0.45mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액에 붓고 EtOAc(15mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 농축하여 표제 생성물(220mg, 100%)을 얻었고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다. MS: M/e 653 (M+1)⁺.

단계 D: 2-부톡시-7-(4-(모르폴리노메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A3 )

TFA(3mL) 및 Et₃SiH(3mL) 중의 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(모르폴리노메틸)페닐)메탄올(220mg, 0.3mmol) 용액을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 TFA 및 Et₃SiH를 제거하였다. 잔류물에 TFA(5mL)를 첨가하고 85℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=5:1)로 정제하여 생성물(40mg, 33.6%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.13 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.57 -7.25 (m, 5H), 4.23 - 4.15 (m, 2H), 3.83 - 3.65 (m, 2H), 3.62 - 3.49 (m, 4H), 2.43 - 2.29 (m, 4H). 1.71 - 1.57 (m, 2H), 1.47 - 1.33 (m, 2H), 0.90 (t, J=7.6 3H) ppm. MS: M/e 397 (M+1)⁺.

화합물 A4: N¹-(5-((4-아미노-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)피리딘-2-일)-N¹,N²,N²-트리메틸에탄-1,2-디아민(N¹-(5-((4-amino-2-butoxyimidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-7- yl)methyl)pyridin-2-yl)-N¹,N²,N²-trimethylethane-1,2-diamine)

단계 A: 6-((2-(디메틸아미노)에틸)아미노)니코틴알데히드

DMSO(10mL) 중 6-클로로니코틴알데히드(1g, 7.1mmol), N¹,N¹,N²-트리메틸 에탄-1,2-디아민(0.87g, 8.5mmol) 및 DIEA(1.8g, 14.2mmol)의 혼합물 90℃에서 밤새 가열하였다. 용액을 냉각시키고 물(10mL)을 첨가하고, 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 건조시키고, 농축시키고, CombiFlash (DCM:MeOH=4%)에 의해 정제하여 생성물을 적색 오일(0.8g, 57%)로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.76 (s, 1H), 8.54 (d, J=4.0Hz, 1H), 7.90 (dd, J=8.0, 4.0Hz, 1H), 6.55 (d, J=4.0Hz, 1H), 3.77 (t, J=8.0Hz, 2H), 3.17 (s, 3H), 2.53 (t, J=8.0Hz, 2H), 2.30 (s, 6H) ppm. MS: M/e 208 (M+1)⁺.

단계 B: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(6-((2-(디메틸아미노)에틸))(메틸)아미노)피리딘-3-일)메탄올

THF(8 mL)(N₂로 퍼징됨) 중의 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.29mmol)의 냉각된 용액에 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 0.5mL)를 적가하였다. -78℃에서 30분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 6-((2-(디메틸아미노)에틸)아미노)니코틴알데히드(88mg, 0.43mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 이 온도에서 30분 동안 교반한 다음, 실온으로 1시간 동안 가온하였다. 용액을 NH₄Cl 용액(5mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 Combiflashn (DCM:MeOH=20%)로 추가 정제하여 순수한 생성물을 백색 고체(130mg, 70%)로 얻었다. MS: M/e 655 (M+1)⁺.

단계 C: N ¹ -(5-((4-아미노-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)피리딘-2-일)-N ¹ ,N ² ,N ² -트리메틸에탄-1,2-디아민( 화합물 A4 )

트리에틸실란(1mL) 및 트리플루오로아세트산(1mL)을 DCM(2mL) 중의 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(6-((2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노)피리딘-3-일)메탄올(130mg, 0.2mmol) 용액에 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 증발시켜 잔류물을 얻고, 이를 NaHCO₃(5mL)로 처리하고, 에틸 아세테이트(5mL)로 추출하고, 염수(5mL)로 세척하였다. 유기층을 건조시키고, 농축시키고, CombiFlash (DCM:MeOH=8:1)로 정제하여 생성물(28mg, 35%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.13 - 8.05 (m, 3H), 7.52 (dd, J=8.0, 4.0Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.85 (d, J=8.0Hz, 1H), 4.22 (t, J=8.0Hz, 2H), 4.01 (s, 2H), 3.83 (t, J=8.0Hz, 2H), 3.22 (s, 2H), 2.95 (s, 3H), 2.79 (s, 6H), 1.70 - 1.67 (m, 2H), 1.44 - 1.39 (m, 2H), 0.93 (t, J=8.0Hz, 3H) ppm. MS: M/e 399 (M+1)⁺.

화합물 A5: 2-부톡시-7-(4-(피페리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(4-(piperidin-1-ylmethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 4-(피페리딘-1-일메틸)벤즈알데히드

MeCN(40mL) 중 4-(브로모메틸)벤즈알데히드(3g, 15mmol)의 교반된 용액에 피페리딘(1.36g, 16mmol) 및 K₂CO₃(4.17g, 30mmol)를 첨가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과하였다. 여액을 H₂O에 붓고 EtOAc(15mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=1:1)로 정제하여 표제 생성물(2.7g, 88%)을 황색 오일로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.99 (s, 1H), 7.83 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.50 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 3.53 (s, 2H), 2.38 (s, 4H), 1.62 - 1.54 (m, 4H), 1.45 (d, J = 4.9 Hz, 2H) ppm. MS: M/e 204 (M+1)⁺.

단계 B: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(피페리딘-1-일메틸)페닐)메탄올

THF(10 mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150 mg, 0.3 mmol)의 교반된 용액에 -78℃로 냉각하고 질소 분위기 하에 n-BuLi(헥산 중 1.6M, 0.75mmol, 0.47mL)를 적가하였다. 20분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 4-(피페리딘-1-일메틸)벤즈알데히드(114mg, 0.45mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액에 붓고 EtOAc(15mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 농축시켜 생성물(270mg, 100%)을 얻었고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다. MS: M/e 651 (M+1)⁺.

단계 C: 2-부톡시-7-(4-(피페리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A5 )

TFA(3mL) 및 Et₃SiH(3mL) 중의 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(피페리딘-1-일메틸)페닐)메탄올(270mg, 0.3mmol) 용액을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 TFA 및 Et₃SiH를 제거하였다. 잔류물에 TFA(5 mL)를 첨가하고 85℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 생성물(50mg, 42%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.12 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.24 - 7.17 (m, 4H), 4.19 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 4.11 (s, 2H), 3.35 (s, 2H), 2.31 - 2.21 (m, 4H), 1.70 - 1.61 (m, 2H), 1.45 (m, 4H), 1.42 - 1.31 (m, 4H), 0.91 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 395 (M+1)⁺.

화합물 A6: 2-부톡시-7-(4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(4-((4-methylpiperazin-1-yl)methyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)벤즈알데히드

MeCN(40mL) 중 4-(브로모메틸)벤즈알데히드(3g, 15mmol)의 교반된 용액에 피페리딘(1.6g, 16mmol) 및 K₂CO₃(4.17g, 30mmol)를 첨가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과하였다. 여액을 H₂O에 붓고 EtOAc(15mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc = 1:1)로 정제하여 4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)벤즈알데히드(2.3g, 71.8%)를 황색 오일로서 얻었다. MS: M/e 219 (M+1)⁺.

단계 B: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)페닐)메탄올

THF(10mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.3mmol)의 교반된 용액에 -78℃로 냉각하고 질소 분위기 하에 n-BuLi(헥산 중 1.6M, 0.75mmol, 0.47mL)를 적가하였다. 20분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)벤즈알데히드(122mg, 0.45mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액에 붓고 EtOAc(15mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 농축시켜 생성물(300mg, 100%)을 얻었고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다. MS: M/e 666 (M+1)⁺.

단계 C: 2-부톡시-7-(4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A6 )

TFA(3 mL) 및 Et₃SiH(3 mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)페닐)메탄올(300mg, 0.3mmol)을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 TFA 및 Et₃SiH를 제거하였다. 잔류물에 TFA(5mL)를 첨가하고 85℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 생성물(60mg, 49.1%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6)) δ 8.13 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.24 (d, J =7.9 Hz, 2H), 7.19 (d, J =7.9 Hz, 2H), 4.19 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 4.11 (s, 2H), 3.38 (s, 2H), 3.21 - 2.17 (m, 8H), 2.12 (s, 3H), 1.71 - 1.59 (m, 2H), 1.45 - 1.33 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.4 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 410 (M+1)⁺.

화합물 A7: 2-부톡시-7-(3-(피페리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(3-(piperidin-1-ylmethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(3-(피페리딘-1-일메틸)페닐)메탄올

THF(10ml) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(200mg, 0.38mmol)의 교반된 용액에 N₂ 분위기 하에 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 0.60ml, 0.96mmol)를 첨가하였다. 용액을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. THF(2ml) 중 3-(피페리딘-1-일메틸)벤즈알데히드(116mg, 0.57mmol)를 상기 용액에 적가하였다. 첨가 후, 용액을 자연적으로 실온으로 가온한 다음, 3시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 H₂O(20ml)로 켄칭한 다음, DCM(20ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 H₂O(10ml)로 세척하고, 건조하고 감압하에 농축하여 조 생성물을 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. MS: M/e 651 (M+1)⁺.

단계 B: 2-부톡시-7-(3-(피페리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A7 )

TFA(2ml) 및 트리에틸실란(2ml) 중(4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(3-(피페리딘-1-일메틸)페닐)메탄올(조 물질, crude)을 80℃에서 15시간 동안 교반하였다. 용액을 감압 농축하여 트리에틸실란을 제거하였다. 잔류물을 TFA(2ml)에 용해시키고 80℃에서 밤새 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 aq. NaHCO₃(포화, 25ml)으로 케닝하고 난 다음, DCM(20ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 감압 하에 농축하고 생성된 잔류물을 DCM:MeOH(10:1)를 포함하는 prep-TLC에 의해 정제하여 생성물(81.54mg)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.16 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.40 (d, J = 8Hz, 4H), 7.32 (s, 1H), 4.31 - 4.09 (m, 6H), 3.31 - 3.12 (m, 2H), 2.90 - 2.70 (m, 2H), 1.87 - 1.60 (m, 7H), 1.45 - 1.28 (m, 3H), 0.91 (t, J = 8Hz, 3H) ppm. MS: M/e 395 (M+1)⁺.

화합물 A8: 2-부톡시-7-((2-이소프로필-1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀린-6-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-((2-isopropyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 6-브로모-2-이소프로필-1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀린

MeOH(3mL) 중 6-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로이소퀴놀린(1.06g, 5mmol)의 용액에 아세톤(3mL) 및 AcOH(10방울)를 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 80℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하고, NaBH₃CN(0.93g, 15mmol)을 조금씩 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 농축하고, 물(30mL)로 희석하고, EtOAc(50mL x 2)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 콤비 플래시(combi flash)로 정제하여 목적 화합물(450mg, 36%)을 오일로서 얻었다. MS: M/e 254 (M+1)⁺.

단계 B: 2-이소프로필-1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀린-6-카르브알데히드

THF(5mL) 중 단계 A의 생성물(450mg, 1.77mmol)의 용액에 n-BuLi(2.2mL, 1.6mol/L, 3.54mmol)를 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 30분 후, DMF(258mg, 3.54mmol)를 적가하고 생성된 혼합물을 -65℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(60mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 플래시 크로마토그래피(flash chromatography)로 정제하여 목적 화합물(250 mg, 69%)을 오일로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.94 (s, 1H), 7.68 - 7.60 (m, 2H), 7.20 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.90 - 3.78 (m, 2H), 3.11 - 2.95 (m, 3H), 2.90 - 2.80 (m, 2H), 1.18 (d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm. MS: M/e 204 (M+1)⁺.

단계 C: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(2-이소프로필-1,2,3,4-테트라하이드로이소퀴놀린-6-일)메탄올

THF(5mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.285mmol)의 용액에 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 n-BuLi(0.44mL, 0.71mmol)를 적가하였다. 30분 후, THF(4mL) 중 단계 B의 생성물(87mg, 0.423mmol)의 혼합물을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 실온으로 1시간 동안 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(80 mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH = 50/1)로 정제하여 목적 화합물(60mg, 32%)을 얻었다. MS: M/e 651 (M+1)⁺.

단계 D: 2-부톡시-7-((2-이소프로필-1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀린-6-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A8 )

TFA(2mL) 중 단계 C의 생성물(60mg, 0.092mmol)의 혼합물에 Et₃SiH(2mL)를 첨가하였다. 반응물을 80℃에서 2시간 동안 가열하였다. 혼합물을 농축 건조시키고 잔류물을 TFA(4mL)로 처리하였다. 반응물을 85℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 농축하고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하였다. 수집된 분획을 NaHCO₃용액으로 염기성화하고, DCM(60mL)으로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하여 생성물(20mg, 55%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.11 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.85 - 6.15 (m, 3H), 4.20 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.05 (s, 2H), 3.57 (s, 2H), 2.91 - 2.76 (m, 1H), 2.74 - 2.60 (m, 4H), 1.74 - 1.62 (m, 2H), 1.47 - 1.34(m, 2H), 1.03 (d, J = 5.6 Hz, 6H), 0.92 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 395 (M+1)⁺.

화합물 A9: 2-부톡시-7-((2-이소프로필-1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀린-7-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-((2-isopropyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-7-yl)methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 7-브로모-2-이소프로필-1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀린

MeOH(3mL) 중 7-브로모-1,2,3,4-테트라하이드로이소퀴놀린(1.06g, 5mmol)의 용액에 아세톤(3mL) 및 AcOH(10방울)를 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 80℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하고, NaBH₃CN(0.93g, 15mmol)을 조금씩 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 농축하고, 물(30mL)로 희석하고, EtOAc(50mL x 2)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축하고, 잔류물을 플래시 크로마토그래피로 정제하여 목적 화합물(930mg, 73%)을 오일로서 얻었다. MS: M/e 254 (M+1)⁺.

단계 B: 2-이소프로필-1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀린-7-카르브알데히드

THF(20mL) 중 단계 A의 생성물(930mg, 3.64mmol)의 용액에 n-BuLi(4.5mL, 7.2mmol)의 용액을 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 30분 후, DMF(532mg, 7.3mmol)를 적가하고 생성된 혼합물을 -65℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(60 mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 플래시 크로마토그래피로 정제하여 목적 화합물(80mg, 11%)을 오일로서 얻었다. MS: M/e 204 (M+1)⁺.

단계 C: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(2-이소프로필-1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀린-7-일)메탄올

THF(5mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.285mmol)의 용액에 n-BuLi(0.44mL, 0.71mmol)의 용액을 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 30분 후, THF(4mL) 중 단계 B의 생성물(80mg, 0.42mmol)의 혼합물을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 실온으로 1시간 동안 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(80 mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH = 40/1)로 정제하여 목적 화합물(50mg, 조 물질)을 얻었다. MS: M/e 651 (M+1)⁺.

단계 D: 2-부톡시-7-((2-이소프로필-1,2,3,4-테트라히드로이소퀴놀린-7-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A9 )

TFA(3mL) 중 단계 C의 생성물(50mg, 조 물질)의 혼합물에 Et₃SiH(1mL)를 첨가하였다. 반응물을 85℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 농축하고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하였다. 수집된 분획을 NaHCO₃용액으로 염기성화하고, DCM(60mL)으로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하여 생성물을 수득하였다(20mg, 2단계에 대해 12%). ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.19 - 7.98 (m, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.10 - 6.65 (m, 3H), 4.20 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.05 (s, 2H), 3.56 (s, 2H), 2.85 - 2.76 (m, 1H), 2.74 - 2.62 (m, 4H), 1.74 - 1.62 (m, 2H), 1.49 - 1.34(m, 2H), 1.02 (d, J = 6.4 Hz, 6H), 0.92 (t, J = 7.6 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 395 (M+1)⁺.

화합물 A10: 2-부톡시-7-(4-(피페라진-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(4-(piperazin-1-ylmethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸 4-(4-포르밀벤질)피페라진-1-카르복실레이트

THF(40mL) 중 4-(브로모메틸)벤즈알데히드(4g, 20mmol)의 교반된 용액에 tert-부틸 피페라진-1-카르복실레이트(4.6g, 25mmol) 및 DIEA(5.04g, 40mmol)를 첨가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과하였다. 여액을 H₂O에 붓고 EtOAc(15 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc = 1:1)로 정제하여 tert-부틸 4-(4-포르밀벤질)피페라진-1-카르복실레이트(4.1g, 68%)를 황색 오일로서 얻었다. MS: M/e 305 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 4-(4-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)벤질)피페라진-1-카르복실레이트

THF(10mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.3mmol)의 교반된 용액에 -78℃로 냉각하고 질소 분위기 하에 n-BuLi(헥산 중 1.6M, 0.75mmol, 0.47mL)를 적가하였다. 20분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 4-(4-포르밀벤질)피페라진-1-카르복실레이트(137mg, 0.45mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액에 붓고 EtOAc(15mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 농축시켜 생성물(270mg, 100%)을 얻었고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다. MS: M/e 752 (M+1)⁺.

단계 C: 2-부톡시-7-(4-(피페라진-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A10 )

TFA(3mL) 및 Et₃SiH(mL) 중 tert-부틸 4-(4-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)벤질)피페라진-1-카르복실레이트(270mg, 0.3mmol) 용액을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 TFA 및 Et₃SiH를 제거하였다. 잔류물에 TFA(5mL)를 첨가하고 85℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 생성물(40mg, 33.8%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.13 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.24 (d, J = 8 Hz, 2H), 7.19 (d, J = 8 Hz, 2H), 4.19 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.11 (s, 2H), 3.40 (s, 2H), 2.71 - 2.61 (m, 4H), 2.32 - 2.28 (m, 4H), 1.65 (dd, J = 14.2, 6.8 Hz, 2H), 1.42 - 1.36 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 396 (M+1)⁺.

화합물 A11: 2-부톡시-7-(3-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(3-(pyrrolidin-1-ylmethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(3-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올

THF(10ml) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(170mg, 0.32mmol)의 교반된 용액에 N₂분위기 하에 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 0.51ml, 0.82mmol)를 첨가하였다. 용액을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. THF(2ml) 중 3-(피롤리딘-1-일메틸)벤즈알데히드(92mg, 0.49mmol)를 상기 용액에 적가하였다. 첨가 후, 용액을 자연적으로 실온으로 가온한 다음, 3시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 H₂O(20ml)로 켄칭한 다음, DCM(20ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 H₂O(10ml)로 세척하고, 건조시키고 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 PE:EA(1:1)를 사용하는 prep-TLC에 의해 정제하여 생성물(120mg, 58%)을 회백색 오일로서 수득하였다. MS: M/e 637 (M+1)⁺.

단계 B: 2-부톡시-7-(3-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A11 )

TFA(2ml) 및 트리에틸실란(2ml) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(3-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올(120mg, 0.19mmol)의 용액을 80℃에서 15시간 동안 교반하였다. 용액을 감압 농축하여 트리에틸실란을 제거하였다. 잔류물을 TFA(2ml)에 용해시키고 80℃에서 밤새 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 aq. NaHCO₃(포화, 25ml) 및 DCM(20ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 감압 하에 농축하고 생성된 잔류물을 DCM:MeOH(10:1)를 포함하는 prep-TLC에 의해 정제하여 생성물(15.11mg, 21%)을 수득하였다.¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.11 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.43 - 7.11 (m, 5H), 4.26 (s, 2H), 4.18 (t, J = 8Hz, 2H), 3.65 (s, 2H), 2.40 (s, 4H), 1.73 - 1.60 (m, 6H), 1.42 - 1.35 (m, 2H), 0.91 (t, J = 8Hz, 3H) ppm. MS: M/e 381 (M+1)⁺.

화합물 A12: 2-부톡시-7-(3-(모르폴리노메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(3-(morpholinomethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(3-(모르폴리노메틸)페닐)메탄올

THF(10ml) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(200mg, 0.38mmol)의 교반된 용액에 N₂ 분위기 하에 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 0.60ml, 0.96mmol)를 첨가하였다. 용액을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. THF(2ml) 중의 3-(모르폴리노메틸)벤즈알데히드(117mg, 0.57mmol)를 상기 용액에 적가하였다. 첨가 후, 용액을 자연적으로 실온으로 가온한 다음, 3시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 H₂O(20ml)로 켄칭한 다음, DCM(20ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 H₂O(10ml)로 세척하고, 건조하고 감압하에 농축하여 조 생성물을 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. MS: M/e 653 (M+1)⁺.

단계 B: 2-부톡시-7-(3-(모르폴리노메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A12 )

TFA(2ml) 및 트리에틸실란(2ml) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(3-(모르폴리노메틸)페닐)메탄올(조 물질) 을 80℃에서 15시간 동안 교반하였다. 용액을 감압 농축하여 트리에틸실란을 제거하였다. 잔류물을 TFA(2ml)에 용해시키고 80℃에서 밤새 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 aq. NaHCO₃(포화, 25ml) 및 DCM(20ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 감압 하에 농축하고 생성된 잔류물을 DCM:MeOH(10:1)를 포함하는 prep-TLC에 의해 정제하여 생성물(59.43mg)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.13 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.30 - 7.13 (m, 5H), 4.19 (t, J = 8Hz, 2H), 4.13 (s, 2H), 3.53 (s, 4H), 3.40 (s, 2H), 2.30 (s, 4H), 1.74 - 1.63 (m, 2H), 1.45 - 1.34 (m, 2H), 0.92 (t, J = 8Hz, 3H) ppm. MS: M/e 397 (M+1)⁺.

화합물 A13: 2-부톡시-7-(3-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(3-((4-methylpiperazin-1-yl)methyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(3-((4-메틸피페라진-1-)일)메틸)페닐)메탄올

THF(10ml) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(200mg, 0.38 mmol)의 교반된 용액에 N₂분위기 하에 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 0.60ml, 0.96mmol)를 첨가하였다. 용액을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. THF(2ml) 중 3-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)벤즈알데히드(124 mg, 0.57 mmol)를 상기 용액에 적가하였다. 첨가한 후, 용액을 자연적으로 실온으로 가온한 다음, 3시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 H₂O(20ml)로 켄칭한 다음, DCM(20ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 H₂O(10ml)로 세척하고, 건조하고 감압하에 농축하여 조 생성물을 녹색 오일로 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. MS: M/e 666 (M+1)⁺.

단계 B: 2-부톡시-7-(3-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A13 )

TFA(2ml) 및 트리에틸실란(2ml) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(3-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)페닐)메탄올(조 물질)을 80℃에서 15시간 동안 교반하였다. 용액을 감압 농축하여 트리에틸실란을 제거하였다. 잔류물을 TFA(2ml)에 용해시키고 80℃에서 밤새 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 aq. NaHCO₃(포화, 25ml) 및 DCM(20ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 감압 하에 농축하고 생성된 잔류물을 DCM:MeOH(10:1)를 포함하는 prep-TLC에 의해 정제하여 생성물(49.03mg)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.13 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.31 - 7.15 (m, 5H), 4.20 (t, J = 8Hz, 2H), 4.13 (s, 2H), 3.50 (s, 2H), 3.31 - 2.82 (m, 6H), 2.72 (s, 3H), 2.43 - 2.13 (m, 2H), 1.73 - 1.61 (m, 2H), 1.48 - 1.34 (m, 2H), 0.92 (t, J = 8Hz, 3H) ppm. MS: M/e 410 (M+1)⁺.

화합물 A14: 2-부톡시-7-(2-(모르폴리노메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(2-(morpholinomethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(2-(모르폴리노메틸)페닐)메탄올

THF(5mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.29mmol)의 용액에 n-부틸리튬(0.27ml, 0.43mmol)을 -78℃에서 적가하고 1시간 동안 교반하였다. 이어서, THF(2mL) 중 2-(모르폴리노메틸)벤즈알데히드(88mg, 0.43mmol)의 용액을 -78℃에서 적가하고, 첨가 후, 혼합물을 60℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 포화 염화암모늄 용액(5 mL)으로 켄칭하고, DCM(30mL x 3)으로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=20:1~5:1)로 정제하여 표적 생성물(83 mg, 44.6%)을 황색 오일로서 얻었다. MS: M/e 653 (M+1)⁺.

단계 B: 2-부톡시-7-(2-(모르폴리노메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A14 )

TFA(2mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(2-(모르폴리노메틸)페닐)메탄올(83mg, 0.13mmol) 및 트리에틸실란(1 mL)의 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 농축하고 prep-HPLC로 정제하여 표적 생성물(23mg, 46%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.12 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.29 - 7.15 (m, 4H), 7.09 (s, 1H), 4.27 (s, 2H), 4.18 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 3.51 (s, 2H), 3.40 (s, 4H), 2.28 (s, 4H), 1.71 - 1.60 (m, 2H), 1.46 - 1.32 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.4 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 397 (M+1)⁺.

화합물 A15: 2-부톡시-7-(2-(피페리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(2-(piperidin-1-ylmethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(2-(피페리딘-1-일메틸)페닐)메탄올

THF(5mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.29mmol)의 용액에 n-부틸리튬(0.27 ml, 0.43mmol)을 -78℃에서 적가하고 1시간 동안 교반하였다. 이어서, THF(2mL) 중의 2-(피페리딘-1-일메틸)벤즈알데히드(87mg, 0.43mmol)의 용액을 -78℃에서 적가하고, 첨가 후, 혼합물을 60℃로 교반하고 밤새 교반하였다. 혼합물을 포화 염화암모늄 용액(5mL)으로 켄칭하고, DCM(30mL x 3)으로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=20:1~5:1)로 정제하여 생성물(79 mg, 43%)을 황색 오일로서 얻었다. MS: M/e 651 (M+1)⁺.

단계 B: 2-부톡시-7-(2-(피페리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A15 )

TFA(2mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(2-(피페리딘-1-일메틸)페닐)메탄올(79mg, 0.12mmol) 및 트리에틸실란(1mL)의 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 농축하고 정제용 HPLC로 정제하여 표적 생성물(19mg, 40%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.10 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.25 - 7.15 (m, 4H), 7.09 (s, 1H), 4.26 (s, 2H), 4.18 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 3.45 (s, 2H), 2.28 - 2.13 (m, 4H), 1.70 - 1.62 (m, 2H), 1.47 - 1.30 (m, 8H), 0.91 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 395 (M+1)⁺.

화합물 A16: 2-이소부톡시-7-(3-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-isobutoxy-7-(3-(pyrrolidin-1-ylmethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-이소부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(3-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올

THF(10ml) 중 7-브로모-2-이소부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(180mg, 0.34mmol)의 교반된 용액에 N₂ 분위기 하에 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 0.54ml, 0.86mmol)를 첨가하였다. 용액을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. THF(2ml) 중 3-(피롤리딘-1-일메틸)벤즈알데히드(97mg, 0.51mmol)를 상기 용액에 적가하였다. 첨가한 후, 용액을 자연적으로 실온으로 가온한 다음, 3시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 H₂O(20ml)로 켄칭한 다음, DCM(20ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 H₂O(10ml)로 세척하고, 건조하고 감압하에 농축하여 조 생성물을 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. MS: M/e 637 (M+1)⁺.

단계 B: 2-이소부톡시-7-(3-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A16 )

TFA(2ml) 및 트리에틸실란(2ml) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-이소부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(3-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올(조 물질)을 80℃에서 15시간 동안 교반하였다. 용액을 감압 농축하여 트리에틸실란을 제거하였다. 잔류물을 TFA(2ml)에 용해시키고 80℃에서 밤새 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 aq. NaHCO₃(포화, 25ml) 및 DCM(20ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 감압 하에 농축하고 생성된 잔류물을 DCM:MeOH(10:1)를 포함하는 prep-TLC에 의해 정제하여 생성물(24.30 mg)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.12 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.32 - 7.14 (m, 5H), 4.27 (s, 2H), 3.96 (d, J = 4Hz, 2H), 3.67 (s, 2H), 2.41 (s, 4H), 2.05 - 1.94 (m, 1H), 1.63 (s, 4H), 0.96 (s, 3H), 0.94 (s, 3H) ppm. MS: M/e 381 (M+1)⁺.

화합물 A17: 2-(2-메톡시에톡시)-7-(3-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-(2-methoxyethoxy)-7-(3-(pyrrolidin-1-ylmethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 7-브로모-N,N-비스(4-메톡시벤질)-2-(2-메톡시에톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민

2-메톡시에탄-1-올(6g, 79mmol)의 용액에 작은 조각의 Na(약 0.6g)를 첨가하였다. 생성된 혼합물(5mL)에 7-브로모-2-클로로-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(250 mg, 0.51mmol)을 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 물(30 mL)로 희석하고, EtOAc(80 mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하고, 잔류물을 콤비-플래시(combi-flash)로 정제하여 목적 화합물(200mg, 75 %)을 수득하였다. ¹HNMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.47 (s, 1H), 7.20 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.85 (d, J = 8.8 Hz, 4H), 5.60 (s, 2H), 4.86 (s, 2H), 4.52 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.80 (s, 6H), 3.77 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.42 (s, 3H) ppm. MS: M/e 528 (M+1)⁺.

단계 B: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-(2-메톡시에톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(3-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올

THF(10mL) 중 단계 A의 생성물(200mg, 0.38mmol)의 용액에 n-BuLi(0.6mL, 0.9mmol)의 용액을 온도를 -75 ~ -65℃로 유지하면서 적가하였다. 1.5시간 후, THF(2mL) 중 3-(피롤리딘-1-일메틸)벤즈알데히드(107mg, 0.57mmol)의 용액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 실온으로 1시간 동안 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(50mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 콤비 플래시로 정제하여 고체(150mg, 62%)를 얻었다. MS: M/e 639 (M+1)⁺.

단계 C: 2-(2-메톡시에톡시)-7-(3-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A17 )

TFA(6mL) 중 단계 B의 생성물(150mg, 0.235mmol)의 혼합물에 Et₃SiH(2mL)를 첨가하였다. 반응물을 80℃에서 16시간 동안 가열하였다. 혼합물을 농축 건조시키고 잔류물을 TFA(6mL)로 처리하였다. 반응물을 85℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 농축하고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하였다. 수집된 분획을 NaHCO₃용액으로 염기성화하고, DCM(60mL)으로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하여 생성물(48mg, 53%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.37 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 7.30 - 7.15 (m, 4H), 4.42 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 4.33 (s, 2H), 4.05 - 3.88 (m, 2H), 3.69 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.38 (s, 3H), 3.01 - 2.61 (m, 4H), 1.95 - 1.71(m, 4H) ppm. MS: M/e 383 (M+1)⁺.

화합물 A18: 7-(3-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)-2-(4,4,4-트리플루오로부톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(7-(3-(pyrrolidin-1-ylmethyl)benzyl)-2-(4,4,4-trifluorobutoxy)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-(4,4,4-트리플루오로부톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(3-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올

THF(10ml) 중 7-브로모-N,N-비스(4-메톡시벤질)-2-(4,4,4-트리플루오로부톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(130mg, 0.22mmol)의 교반 용액에 -78℃에서 분위기 하에, n-BuLi(1.6M, 0.35ml, 0.56mmol)를 첨가하였다. 용액을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. THF(2ml) 중 3-(피롤리딘-1-일메틸)벤즈알데히드(64mg, 0.34mmol)를 상기 용액에 적가하였다. 첨가한 후, 용액을 자연적으로 실온으로 가온한 다음, 3시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 H₂O(20ml)로 켄칭한 다음, DCM(20ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 H₂O(10ml)로 세척하고, 건조하고 감압하에 농축하여 조 생성물을 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. MS: M/e 691 (M+1)⁺.

단계 B: 7-(3-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)-2-(4,4,4-트리플루오로부톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A18 )

TFA(6ml) 및 트리에틸실란(2ml) 중(4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-(4,4,4-트리플루오로부톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(3-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올(조 물질)의 용액을 80℃에서 24시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 aq. NaHCO₃(포화, 25ml) 및 DCM(20ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 감압 하에 농축하고 생성된 잔류물을 DCM:MeOH(10:1)를 포함하는 prep-TLC에 의해 정제하여 생성물(19.75mg)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.18 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.28 - 7.13 (m, 5H), 4.26 (s, 4H), 3.63 (s, 2H), 2.48 - 2.25 (m, 6H), 2.01 -1.89 (m, 2H), 1.88 - 1.51 (m, 4H) ppm. MS: M/e 435 (M+1)⁺.

화합물 A19: 2-부톡시-7-(2-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(2-(pyrrolidin-1-ylmethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(2-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올

THF(5mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150 mg, 0.29 mmol)의 용액에 n-부틸리튬(0.27ml, 0.43mmol)을 -78℃에서 적가하고 1시간 동안 교반하였다. 이어서, THF(2mL) 중 2-(피롤리딘-1-일메틸)벤즈알데히드(81mg, 0.43mmol)의 용액을 -78℃에서 적가하고, 첨가 후, 혼합물을 60℃로 가온하고 밤새 교반하였다. 혼합물을 포화 염화암모늄 용액(5 mL)으로 켄칭하고, DCM(30mL x 3)으로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=20:1~5:1)로 정제하여 표적 생성물(67mg, 37%)을 황색 오일로서 수득하였다. MS: M/e 637 (M+1)⁺.

단계 B: 2-부톡시-7-(2-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A19 )

TFA(2mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(2-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올(67mg, 0.11 mmol) 및 트리에틸실란(1mL)의 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 농축하고 정제용 HPLC로 정제하여 표적 생성물(15mg, 38%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.22 - 8.03 (m, 2H), 7.44 - 7.15(m, 5H), 4.55 (s, 1H), 4.28 (s, 2H), 4.17 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 3.71 - 3.38 (m, 2H), 3.17 (s, 1H), 2.42 - 2.32 (m, 2H), 2.05 - 1.74 (m, 2H), 1.70 - 1.56 (m, 4H), 1.38 (dt, J = 14.6, 7.4 Hz, 2H), 0.91 (t, J = 7.4 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 381 (M+1)⁺.

화합물 A20: 2-부톡시-7-(2-플루오로-4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(2-fluoro-4-(pyrrolidin-1-ylmethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 2-플루오로-4-(피롤리딘-1-일메틸)벤조니트릴

MeOH(5mL) 중 2-플루오로-4-포르밀벤조니트릴(447mg, 3mmol)의 교반된 용액에 피롤리딘(234mg, 3.3mmol)을 첨가한 다음, 혼합물을 2시간 동안 교반한 다음 NaBH₃CN(378mg, 6mmol)을 첨가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 농축하여 잔류물을 얻었고, 이것을 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=2:1)로 정제하여 목적 화합물(400mg, 65.4%)을 황색 오일로서 얻었다. MS: M/e 205 (M+1)⁺.

단계 B: 2-플루오로-4-(피롤리딘-1-일메틸)벤즈알데히드

건조 THF(10mL) 중 단계 A의 생성물(400mg, 1.96mmol)의 교반된 용액에 DIBAL-H(1.2M, 4mL, 4.9mmol)를 -20℃에서 적가하였다. 첨가 후, 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응을 aq.NH₄Cl로 켄칭하고, EtOAc(20mL x 3)로 추출하고, 여과하였다. 여액을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=3:1~1:1)로 정제하여 목적 화합물(182mg, 44.3%)을 밝은 황색 오일로서 수득하였다. MS: M/e 208 (M+1)⁺.

단계 C: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(2-플루오로-4-(피롤리딘-1)-일메틸)페닐)메탄올

THF(10mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.285mmol)의 교반된 용액에 n-BuLi(0.44mL, 0.71mmol)를 -78℃에서 적가하였다. 1시간 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 단계 B의 생성물(88.7mg, 0.428mmol)의 용액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 실온으로 1시간 동안 가온하였다. 반응을 sat.aq. NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(10mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 Pre-TLC(석유 에테르/EtOAc=1:1)로 정제하여 목적 화합물(60mg, 32%)을 얻었다. MS: M/e 655 (M+1)⁺.

단계 D: 2-부톡시-7-(2-플루오로-4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A20 )

Et₃SiH/TFA(0.5mL/2mL) 중 단계 C의 생성물(60mg, 0.092mmol)의 혼합물에 80℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여 잔류물을 얻었고, 이를 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(23mg, 62.8%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.16 (s, 1H), 8.05(s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.23 - 7.19 (m, 1H), 7.11 - 7.04 (m, 2H), 4.19 - 4.13 (m, 4H), 3.53 (s, 2H), 2.42 - 2.31 (m, 4H), 1.72 - 1.61 (m, 6H), 1.42 - 1.36 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.6 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 399 (M+1)⁺.

화합물 A21: 2-부톡시-7-(4-(3-(피페리딘-1-일)프로폭시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(4-(3-(piperidin-1-yl)propoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 4-(3-브로모프로폭시)벤즈알데히드

0℃에서 건조 THF(60mL) 중 4-하이드록시벤즈알데히드(2g, 16mmol), 3-브로모프로판-1-올(2.3g, 16mmol) 및 트리페닐포스판(6.3g, 24mmol)의 용액을 DTAD(5.5g, 24mmol)으로 소량씩 처리하였다. 반응 혼합물을 밤새 실온으로 천천히 가온하였다. 용액을 물(20mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(20mL)로 추출하고, 염수(20mL)로 세척하였다. 유기층을 건조하고 농축하고 CombiFlash(PE:EA=15:1)로 정제하여 생성물(1.3g, 33%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.88 (s, 1H), 7.88 (d, J=8.0Hz, 2H), 7.16 (d, J=12.0Hz, 2H), 4.21 (t, J=8.0Hz, 2H), 3.68 (t, J=8.0Hz, 2H), 2.32 - 2.27 (m, 2H) ppm. MS: M/e 243 (M+1)⁺.

단계 B: 4-(3-(피페리딘-1-일)프로폭시)벤즈알데히드

n-BuOH (5mL) 중 4-(3-브로모프로폭시)벤즈알데히드(200mg, 0.8mmol), 피페리딘(136mg, 1.6mmol), 탄산나트륨(170mg, 1.6mmol) 및 요오드화칼륨(17mg, 0.1mmol)의 혼합물을 105℃에서 4시간 동안 가열하였다. 용액을 냉각시키고, 물(10mL)로 켄칭하고, 디클로로메탄(10mL)으로 추출하였다. 유기층을 건조하고, 농축하고, CombiFlash(DCM:MeOH=8%)로 정제하여 생성물(190mg, 93%)을 얻었다. MS: M/e 248 (M+1)⁺.

단계 C: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(3-(피페리딘-1-) 일)프로폭시)페닐)메탄올

THF(8mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(200mg, 0.4 mmol)의 냉각된 용액에 -78℃에서(N₂로 퍼징됨) n-BuLi(1.6M, 0.7mL)를 적가하였다. -78℃에서 30분 동안 교반한 후, THF(2 mL) 중 4-(3-(피페리딘-1-일)프로폭시)벤즈알데히드(148mg, 0.6mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 이 온도에서 30분 동안 교반한 다음, 실온으로 1시간 동안 가온하였다. 용액을 NH₄Cl 용액(5mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 Combiflash(DCM:MeOH=5%)로 추가 정제하여 순수한 생성물(140mg, 37%)을 얻었다. MS: M/e 695 (M+1)⁺.

단계 D: 2-부톡시-7-(4-(3-(피페리딘-1-일)프로폭시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A21 )

트리플루오로아세트산(3mL) 및 트리에틸실란(1mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(3-(피페리딘-1-)일)프로폭시)페닐)메탄올트리에틸실란(140mg, 0.2mmol)의 용액을 80℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 증발시켜 잔류물을 얻고, 이것을 NaHCO₃용액으로 염기성화하고, 에틸 아세테이트(5mL)로 추출하고, 염수(5mL)로 세척하였다. 유기층을 건조하고, 농축하고, CombiFlash(DCM:MeOH=8%)로 정제하여 생성물(35mg, 40%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.12 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.21 (d, J=8.0Hz, 2H), 6.84 (d, J=8.0Hz, 2H), 4.20 (t, J=8.0Hz, 2H), 4.06 (s, 2H), 3.97 - 3.95 (m, 2H), 2.49 - 2.20 (m, 4H), 2.18 - 1.75 (m, 3H), 1.67 - 1.38 (m, 11H), 0.91 (t, J=7.6Hz, 3H) ppm. MS: M/e 439 (M+1)⁺.

화합물 A22: 2-부톡시-7-(4-(3-모르폴리노프로폭시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(4-(3-morpholinopropoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 4-(3-모르폴리노프로폭시)벤즈알데히드

아세토니트릴(10mL) 중의 4-(3-브로모프로폭시)벤즈알데히드(300mg, 1.2mmol), 모르폴린(209mg, 2.4mmol) 및 탄산칼륨(193mg, 2.4mmol)의 혼합물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 용액을 냉각시키고, 농축시키고, 물(10mL)을 첨가하고, 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하였다. 유기층을 건조하고 농축하고 CombiFlash(DCM:MeOH=8%)로 정제하여 생성물을 무색 오일(260mg, 84%)로 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.87 (s, 1H), 7.86 (d, J=8.0Hz, 2H), 7.12 (d, J=8.0Hz, 2H), 4.13 (t, J=8.0Hz, 2H), 3.59 - 3.51(m, 4H), 2.44 - 2.36 (m, 6H), 1.99 - 1.87 (m, 2H) ppm. MS: M/e 250 (M+1)⁺.

단계 B: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(3-모르폴리노프로폭시)페닐)메탄올

THF(8mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(200mg, 0.4mmol)의 냉각된 용액에 -78℃에서(N₂로 퍼징됨) n-BuLi(1.6M, 0.7mL)를 적가하였다. -78℃에서 30분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 4-(3-모르폴리노프로폭시)벤즈알데히드(150mg, 0.6mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 이 온도에서 30분 동안 교반한 다음, 실온으로 1시간 동안 가온하였다. 용액을 NH₄Cl 용액(5mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 Combiflash(DCM:MeOH=6%)에 의해 추가로 정제하여 순수한 생성물(190mg, 71%)을 얻었다. MS: M/e 697 (M+1)⁺.

단계 C: 2-부톡시-7-(4-(3-모르폴리노프로폭시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A22 )

트리플루오로아세트산(2mL) 및 트리에틸실란(2mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(3-모르폴리노프로폭시)페닐)메탄올(190mg, 0.27mmol)의 용액을 80℃에서 1시간 동안 가열하였다. 농축 후, 트리플루오로아세트산(2mL)을 잔류물에 첨가하고 혼합물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 증발시켜 잔류물을 얻고, 이것을 NaHCO₃용액으로 염기성화하고, 에틸 아세테이트(5mL)로 추출하고, 염수(5mL)로 세척하였다. 유기층을 건조하고, 농축하고, CombiFlash(DCM:MeOH=8%)로 정제하여 생성물(84mg, 70%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.12 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.20 (d, J=8.0Hz, 2H), 6.83 (d, J=8.0Hz, 2H), 4.20 (t, J=8.0Hz, 2H), 4.05 (s, 2H), 3.95 (t, J=8.0Hz, 2H), 3.55 (t, J=4.0Hz, 4H), 2.40 - 2.34 (m, 6H), 1.87 - 1.81 (m, 2H), 1.68 - 1.63 (m, 2H), 1.43 - 1.37 (m, 2H), 0.92 (t, J=8.0Hz, 3H) ppm. MS: M/e 441 (M+1)⁺.

화합물 A23: 2-부톡시-7-(3-(3(디메틸아미노)프로폭시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(3-(3(dimethylamino)propoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(3-(3-(디메틸아미노)프로폭시)페닐)메탄올

THF(10ml) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(180mg, 0.34mmol)의 교반된 용액에 N₂ 분위기 하에 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 0.54ml, 0.86mmol)를 첨가하였다. 용액을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. THF(2ml) 중 3-(3-(디메틸아미노)프로폭시)벤즈알데히드(71mg, 0.34mmol)를 상기 용액에 적가하였다. 첨가한 후, 용액을 자연적으로 실온으로 가온한 다음, 3시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 H₂O(20ml)로 켄칭한 다음, DCM(20ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 H₂O(10ml)로 세척하고, 건조하고 감압하에 농축하여 조 생성물을 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. MS: M/e 655 (M+1)⁺.

단계 B: 2-부톡시-7-(3-(3-(디메틸아미노)프로폭시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민

TFA(6ml) 및 트리에틸실란(2ml) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(3-(3-(디메틸아미노)프로폭시)페닐)메탄올(조 물질)의 용액을 80℃에서 24시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 aq. NaHCO₃(포화, 25ml) 및 DCM(20ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 감압 하에 농축하고 생성된 잔류물을 DCM:MeOH(10:1)를 포함하는 prep-TLC에 의해 정제하여 생성물(18.32mg)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.15 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.23 (t, J = 8Hz, 1H), 6.91 (d, J = 8Hz, 1H), 6.85 (s, 1H), 6.80 (d, J = 8Hz, 1H), 4.21 (t, J = 8Hz, 2H), 4.12 (s, 2H), 4.00 (t, J = 8Hz, 2H), 3.17 (t, J = 8Hz, 2H), 2.78 (s, 6H), 2.13 - 2.03 (m, 2H), 1.72 - 1.64 (m, 2H), 1.45 - 1.36 (m, 2H), 0.93 (t, J = 8Hz, 3H) ppm. MS: M/e 399 (M+1)⁺.

화합물 A24: 2-부톡시-7-(3-(3-(디메틸아미노)프로폭시)-4-플루오로벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(3-(3-(dimethylamino)propoxy)-4-fluorobenzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(3-(3-(디메틸아미노)프로폭시-4-플루오로페닐)메탄올

THF(10ml) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(257mg, 0.49mmol)의 교반된 용액에 N₂ 분위기 하에 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 0.76ml, 1.22mmol)를 첨가하였다. 용액을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. THF(2ml) 중 3-(3-(디메틸아미노)프로폭시)-4-플루오로벤즈알데히드(110mg, 0.49mmol)를 상기 용액에 적가하였다. 첨가한 후, 용액을 자연적으로 실온으로 가온한 다음, 3시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 H₂O(20ml)로 켄칭한 다음, DCM(20ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 H₂O(10ml)로 세척하고, 건조하고 감압하에 농축하여 조 생성물을 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. MS: M/e 673 (M+1)⁺.

단계 B: 2-부톡시-7-(3-(3-(디메틸아미노)프로폭시)-4-플루오로벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A24 )

TFA(6ml) 및 트리에틸실란(2ml) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(3-(3-(디메틸아미노)프로폭시)-4-플루오로페닐)메탄올(조 물질)의 용액을 80℃에서 24시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 aq. NaHCO₃(포화, 25ml) 및 DCM(20ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 감압 하에 농축하고 생성된 잔류물을 DCM:MeOH(10:1)를 포함하는 prep-TLC에 의해 정제하여 생성물(43.52mg)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.14 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.22 - 7.08 (m, 2H), 6.92 - 6.83 (m, 1H), 4.20 (t, J = 8Hz, 2H), 4.11 (s, 2H), 4.08 (t, J = 8Hz, 2H), 3.15 (t, J = 8Hz, 2H), 2.75 (s, 6H), 2.18 - 2.06 (m, 2H), 1.72 - 1.61 (m, 2H), 1.45 - 1.34 (m, 2H), 0.92 (t, J = 8Hz, 3H) ppm. MS: M/e 417 (M+1)⁺.

화합물 A25: 2-부톡시-7-((4'-(피롤리딘-1-일메틸)-[1,1'-비페닐]-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2, 4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-((4'-(pyrrolidin-1-ylmethyl)-[1,1'-biphenyl]-3-yl)methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4'-(피롤리딘-1-일메틸)-[1,1'-비페닐]-3-일)메탄올

THF(5mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.29mmol)의 용액에 n-부틸리튬(0.27ml, 0.43mmol)을 N₂하에 -78℃에서 적가하고 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, THF(2mL) 중 4'-(피롤리딘-1-일메틸)-[1,1'-비페닐]-3-카브알데하이드(114 mg, 0.4278mmol)의 용액을 -78℃에서 적가한 후, 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 염화암모늄 용액(5 mL)으로 켄칭하고, DCM(30 mL x 3)으로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄상에서 건조시키고, 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=20:1~5:1)로 정제하여 표제 생성물(103mg, 51%)을 황색 오일로서 수득하였다. MS: M/e 713 (M+1)⁺.

단계 B: 2-부톡시-7-((4'-(피롤리딘-1-일메틸)-[1,1'-비페닐]-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A25 )

TFA(2mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4'-(피롤리딘-1-일메틸)-[1,1'-비페닐]-3-일)메탄올(103mg, 0.1447mmol) 및 트리에틸실란(1 mL)의 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 농축하고 prep-HPLC로 정제하여 표적 생성물(50mg, 75.63%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.80 (br.s, 1H), 8.13(1H), 8.09 (s, 1H), 7.73 - 7.54 (m, 6H), 7.39 - 7.28 (m, 3H), 4.39 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 4.23 (s, 2H), 4.18 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.43 - 3.35 (m, 2H), 3.16 - 3.11 (m, 2H), 2.08 - 2.03 (m, 2H), 1.94 - 1.78 (m, 2H), 1.69 - 1.57 (m, 2H), 1.41 - 1.28 (m, 2H), 0.88 (t, J = 7.4 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 457 (M+1)⁺.

화합물 A26: 2-부톡시-7-(2-플루오로-5-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(2-fluoro-5-(pyrrolidin-1-ylmethyl)benzyl)Imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 2-플루오로-5-(피롤리딘-1-일메틸)벤조니트릴

MeOH(5mL) 중 2-플루오로-5-포르밀벤조니트릴(447mg, 3mmol)의 교반된 용액에 피롤리딘(234mg, 3.3mmol)을 첨가한 다음, 혼합물을 2시간 동안 교반한 다음 NaBH₃CN(378 mg, 6mmol))을 첨가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 농축하여 잔류물을 얻었고, 이것을 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=2:1)로 정제하여 목적 화합물(350mg, 57.2%)을 황색 오일로서 얻었다. MS: M/e 205 (M+1)⁺.

단계 B: 2-플루오로-5-(피롤리딘-1-일메틸)벤즈알데히드

건조 THF(10mL) 중 단계 A의 생성물(350mg, 1.7mmol)의 교반된 용액에 DIBAL-H(1.2M, 3.57mL, 4.3mmol)를 -20℃에서 적가하였다. 첨가 후, 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응을 aq.NH₄Cl로 켄칭하고, EtOAc(20 mL x 3)로 추출하고, 여과하였다. 여액을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=3:1~2:1)로 정제하여 목적 화합물(180mg, 51.1%)을 밝은 황색 오일로서 수득하였다. MS: M/e 208 (M+1)⁺.

단계 C: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(2-플루오로-5-(피롤리딘-1)-일메틸)페닐)메탄올

THF(10mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.285mmol)의 용액에 -78℃에서 n-BuLi(0.44mL, 0.71mmol)를 적가하였다. 1시간 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 단계 B의 생성물(88.7mg, 0.428mmol)의 용액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 실온으로 1시간 동안 가온하였다. 반응을 sat.aq. NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(10 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 prep-TLC(석유 에테르/EtOAc=1:1)로 정제하여 목적 화합물(55mg, 29.4%)을 얻었다. MS: M/e 655 (M+1)⁺.

단계 D: 2-부톡시-7-(2-플루오로-5-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A26 )

Et₃SiH/TFA(0.5mL/3mL) 중 단계 C의 생성물(55mg, 0.084mmol)의 혼합물에 85℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여 잔류물을 얻었고, 이를 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(20mg, 59.8%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 8.13(s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.24 - 7.04 (m, 3H), 4.18 - 4.13 (m, 4H), 3.45 (s, 2H), 2.35 - 2.28 (m, 4H), 1.66 - 1.61 (m, 6H), 1.37 - 1.29 (m, 2H), 0.90 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 399 (M+1)⁺.

화합물 A27: 2-부톡시-7-(2-플루오로-5-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(2-fluoro-5-(pyrrolidin-1-ylmethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 2-(3-(디메틸아미노)프로폭시)벤즈알데히드

DMF(10mL) 중 2-하이드록시벤즈알데히드(1.73g, 10mmol), 3-클로로-N,N-디메틸프로판-1-아민 염산염(1.74g, 1.1mmol) 및 K₂CO₃(2.76g, 20mmol)의 혼합물을 60℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 H₂O(50mL)에 붓고 EtOAc(20mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄상에서 건조시키고, 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc = 5:1~100% EtOAc)로 정제하여 목적 화합물(1.96g, 76%)을 밝은 황색 오일로서 수득하였다. MS: M/e 208 (M+1)⁺.

단계 B: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(2-(3-(디메틸아미노)프로폭시)페닐)메탄올

THF(10mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.285mmol)의 용액에 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 0.44mL, 0.71mmol)를 적가하였다. 1시간 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 단계 A의 생성물(88.7mg, 0.428mmol)의 용액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 실온으로 1시간 동안 가온하였다. 반응을 sat.aq. NH₄Cl 용액, EtOAc(10mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 prep-TLC(CH₂Cl₂/MeOH=10:1)로 정제하여 목적 화합물(62mg, 33%)을 백색 고체로 얻었다. MS: M/e 655 (M+1)⁺.

단계 C: 2-부톡시-7-(2-(3-(디메틸아미노)프로폭시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A27 )

Et₃SiH/TFA(0.5mL/3mL) 중 단계 B의 생성물(62mg, 0.095mmol)의 혼합물에 85℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여 잔류물을 얻었고, 이를 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(24mg, 63.4%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.09 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.22 - 7.18 (m, 2H), 7.10 (s, 1H), 6.95 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.85 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 4.21(t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.07 (s, 2H), 3.96 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.23 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.08 (s, 6H), 1.85 - 1.61 (m, 4H), 1.48 - 1.35 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 399 (M+1)⁺.

화합물 A28: 2-부톡시-7-(4-(3-(피롤리딘-1-일)프로폭시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(4-(3-(pyrrolidin-1-yl)propoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 4-(3-(피롤리딘-1-일)프로폭시)벤즈알데히드

아세토니트릴(10mL) 중 4-(3-브로모프로폭시)벤즈알데히드(300mg, 1.2mmol), 피롤리딘(170mg, 2.4mmol), 탄산나트륨(254mg, 2.4mmol) 및 요오드화칼륨(17mg, 0.1mmol)의 용액을 80℃에서 밤새 가열하였다. 용액을 농축하고, 물(10mL)로 처리하고, 디클로로메탄(10mL)으로 추출하였다. 유기층을 건조하고 농축하고 CombiFlash(DCM:MeOH=8%)로 정제하여 생성물(200mg, 70%)을 무색 오일로 얻었다. MS: M/e 234 (M+1)⁺.

단계 B: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(3-(피롤리딘-1-)일)프로폭시)페닐)메탄올

THF(8mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(210mg, 0.4mmol)의 냉각된 용액에 -78℃에서(N₂로 퍼징됨)에 n-BuLi(1.6M, 0.7mL)를 적가하였다. -78℃에서 30분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 4-(3-(피롤리딘-1-일)프로폭시)벤즈알데히드(140mg, 0.6mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 이 온도에서 30분 동안 교반한 다음, 실온으로 1시간 동안 가온하였다. 용액을 NH₄Cl 용액(5mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 Combiflash(DCM:MeOH=7%) 및 prep-TLC(DCM:MeOH=6:1)로 추가 정제하여 순수한 생성물(108mg, 40%). MS: M/e 681 (M+1)⁺.

단계 C: 2-부톡시-7-(4-(3-(피롤리딘-1-일)프로폭시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A28 )

트리플루오로아세트산(2mL) 및 트리에틸실란(2mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(3-(피롤리딘-1-일)프로폭시)페닐)메탄올(108mg, 0.16mmol)의 용액을 80℃에서 1시간 동안 가열하였다. 농축 후, 트리플루오로아세트산(1mL)을 잔류물에 첨가하고 혼합물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 증발시켜 잔류물을 얻고, 이를 NaHCO₃로 염기성화하고, 에틸 아세테이트(5mL)로 추출하고, 염수(5mL)로 세척하였다. 유기층을 건조하고, 농축하고, CombiFlash(DCM:MeOH=18%)로 정제하여 생성물(25mg, 37%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.11 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.20 (d, J=8.0Hz, 2H), 6.83 (d, J=8.0Hz, 2H), 4.20 (t, J=8.0Hz, 2H), 4.05 (s, 2H), 3.95 (t, J=8.0Hz, 2H), 2.51 (s, 2H), 2.43 (s, 4H), 1.88 - 1.81 (m, 2H), 1.70 - 1.63 (m, 6H), 1.43 - 1.37 (m, 2H), 0.92 (t, J=8.0Hz, 3H) ppm. MS: M/e 425 (M+1)⁺.

화합물 A29: 2-부톡시-7-(4-(3-(디에틸아미노)프로폭시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(4-(3-(diethylamino)propoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 4-(3-(디에틸아미노)프로폭시)벤즈알데히드

DEAD(1g, 6mmol)를 THF(10mL) 중 4-하이드록시벤즈-알데하이드(0.5g, 4mmol), 3-(디에틸아미노)프로판-1-올(0.5g, 4mmol) 및 트리페닐포스판(1.6g, 6mmol)의 용액에 N₂ 분위기 하에 0℃에서 적가하였다. 혼합물을 실온으로 가온하고 밤새 교반하였다. 용액을 농축하고 CombiFlash(PE:EA=80%)로 정제하여 생성물(0.4g, 42%)을 무색 오일로 얻었다. MS: M/e 236 (M+1)⁺.

단계 B: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(3-(디에틸아미노)프로폭시)페닐)메탄올

THF(8mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(200 mg, 0.4 mmol)의 냉각된 용액에 -78℃에서(N₂로 퍼징됨) n-BuLi(1.6M, 0.6mL)를 적가하였다. -78℃에서 30분 동안 교반한 후, THF(2 mL) 중 4-(3-(디에틸아미노)프로폭시)벤즈알데히드(134mg, 0.6mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 이 온도에서 30분 동안 교반한 다음, 실온으로 1시간 동안 가온하였다. 용액을 NH₄Cl 용액(5mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 Combiflash(DCM:MeOH=8%) 및 prep-TLC(DCM:MeOH=7:1)로 추가 정제하여 순수한 생성물(150mg, 58%)을 얻었다. MS: M/e 683 (M+1)⁺.

단계 C: 2-부톡시-7-(4-(3-(디에틸아미노)프로폭시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A29 )

트리플루오로아세트산(2mL) 및 트리에틸실란(2mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(3-(디에틸아미노)프로폭시)페닐)메탄올(150mg, 0.22mmol)의 용액을 80℃에서 1시간 동안 가열하였다. 농축 후, 트리플루오로아세트산(2mL)을 잔류물에 첨가하고 혼합물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 증발시켜 잔류물을 얻고, 이를 NaHCO₃로 염기성화하고, 에틸 아세테이트(5 mL)로 추출하고, 염수(5 mL)로 세척하였다. 유기층을 건조시키고, 농축시키고, prep-TLC(DCM:MeOH=7:1)로 정제하여 생성물(50mg, 54%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.12 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.23 (d, J=8.0Hz, 2H), 6.86 (d, J=12.0Hz, 2H), 4.20 (t, J=8.0Hz, 2H), 4.07 (s, 2H), 4.02 (t, J=8.0Hz, 2H), 3.13 (s, 6H), 2.08 (br.s, 2H), 1.71 - 1.64 (m, 2H), 1.45 - 1.36 (m, 2H), 1.20 (t, J=8.0Hz, 6H), 0.93 (t, J=8.0Hz, 3H) ppm. MS: M/e 427 (M+1)⁺.

화합물 A30: 2-부톡시-7-((4'-(피롤리딘-1-일메틸)-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2, 4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-((4'-(pyrrolidin-1-ylmethyl)-[1,1'-biphenyl]-4-yl)methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4'-(피롤리딘-1-일메틸)-[1,1'-비페닐]-4-일)메탄올

THF(5mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.23mmol)의 용액에 n-부틸리튬(0.27ml, 0.43mmol)을 -78℃에서 적가하고 1시간 동안 교반하였다. 이어서, THF(2mL) 중 4'-(피롤리딘-1-일메틸)-[1,1'-비페닐]-4-카브알데하이드(114mg, 0.43mmol)의 용액을 -78℃에서 적가한 후, 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온하고 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 염화암모늄 용액(5mL)으로 켄칭하고, DCM(30mL x 3)으로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄상에서 건조시키고, 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=20:1~5:1)로 정제하여 표제 생성물(124mg, 61%)을 황색 오일로서 얻었다. MS: M/e 713 (M+1)⁺.

단계 B: 2-부톡시-7-((4'-(피롤리딘-1-일메틸)-[1,1'-바이페닐]-4-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A30 )

TFA(2mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4'-(피롤리딘-1-일메틸)-[1,1'-비페닐]-4-일)메탄올(124mg, 0.17mmol) 및 트리에틸실란(1mL)의 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 농축하고 prep-HPLC로 정제하여 2-부톡시-7-((4'-(피롤리딘-1-일메틸)-[1,1'-비페닐]-4-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(58mg, 73%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.74 (br.s, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.78 - 7.75 (m, 2H), 7.64 - 7.53 (m, 4H), 7.43 - 7.38 (m, 2H), 7.36 (s, 1H), 4.38 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 4.26 - 4.18 (m, 4H), 3.42 - 3.35 (m, 2H), 3.21 - 3.12 (m, 2H), 2.14 - 2.02 (m, 2H), 1.92 - 1.83 (m, 2H), 1.72 - 1.61 (m, 2H), 1.42 - 1.33 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.4 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 457 (M+1)⁺.

화합물 A31: 7-(4-(3-아미노프로폭시)벤질)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(7-(4-(3-aminopropoxy)benzyl)-2-butoxyimidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸(3-(4-포르밀페녹시)프로필)카바메이트

THF(15mL) 중 4-하이드록시벤즈알데하이드(1.22g, 10mmol), tert-부틸(3-하이드록시프로필)카바메이트(2.62g, 15mmol) 및 PPh₃(3.93g, 15mmol)의 용액에 DIAD(7.57g, 15 mmol, 톨루엔 용액 중 40%)를 적가하였다. 그 다음 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물(50mL)로 희석하고, EtOAc(60mL x 2)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축하고, 잔류물을 콤비 플래시로 정제하여 목적 화합물(2.53g, 90%)을 얻었다. MS: M/e 224 (M+H - t-Bu)⁺.

단계 B: tert-부틸(3-(4-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)페녹시)프로필)카르바메이트

THF(8mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(300mg, 0.57mmol)의 용액에 n-BuLi(0.9mL, 1.42mmol) 용액을 적가하고 온도를 -75 ~ -65℃로 유지하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 단계 A의 생성물(238mg, 0.855mmol)의 혼합물을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 0.5시간 동안 교반한 다음, 2시간 동안 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(50 mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC(EA/PE = 1/3)로 정제하여 목적 화합물(100mg, 조 물질)을 얻었다. MS: M/e 727 (M+1)⁺.

단계 C: 7-(4-(3-아미노프로폭시)벤질)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A31 )

TFA(3mL) 중 단계 B의 생성물(100mg, 조 물질)의 혼합물에 Et₃SiH(1mL)를 첨가하였다. 반응물을 85℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 TFA(3mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 85℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 농축 건조시키고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하였다. 수집된 분획을 NaHCO₃용액으로 염기성화하고, DCM(50mL x 2)으로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하여 목적 화합물(30mg, 2단계에 대해 15%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.11 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.20 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.84 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.20 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.05 (s, 2H), 3.97 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.05 - 2.90 (m, 2H), 2.68 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.86 - 1.59(m, 4H), 1.49 - 1.35 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.6 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 371 (M+1)⁺.

화합물 A32: 2-부톡시-7-((6-(3-(디메틸아미노)프로폭시)이리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]이리딘-4-아민(2-butoxy-7-((6-(3-(dimethylamino)propoxy)yridine-3-yl) methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]yridine-4-amine)

단계 A: 6-(3-(디메틸아미노)프로폭시)니코틴알데히드

DEAD(2.1g, 12mmol)를 THF(20mL) 중 6-하이드록시 니코틴 알데히드(1g, 8.1mmol), 3-(디메틸아미노)프로판-1-올(837mg, 8.1mmol) 및 트리페닐포스판(3.1g, 12mmol)의 용액에 N₂분위기 하에 0℃에서 적가하였다. 혼합물을 실온으로 가온하고 밤새 교반하였다. 용액을 물(20mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(20mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 건조하고, 농축하고, CombiFlash(EA to DCM:MeOH=10%)로 정제하여 생성물(0.5g, 30%)을 무색 오일로 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.95 (s, 1H), 8.74 (d, J=4.0Hz, 1H), 8.10 (dd, J=8.0, 4.0Hz, 1H), 6.96 (d, J=8.0Hz, 1H), 4.40 (t, J=8.0Hz, 2H), 2.37 - 2.35 (m, 2H), 2.13 (s, 6H), 1.88 -1.85 (m, 2H) ppm. MS: M/e 209 (M+1)⁺.

단계 B: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(6-(3-(디메틸아미노)프로폭시)피리딘-3-일)메탄올

THF(12mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(420mg, 0.8mmol)의 냉각된 용액에 -78℃에서(N₂로 퍼징됨)에서, n-BuLi(1.6M, 1.3mL)를 적가하였다. -78℃에서 30분 동안 교반한 후, THF(3mL) 중 6-(3-(디메틸아미노)프로폭시)니코틴알데히드(250mg, 1.2mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 이 온도에서 30분 동안 교반한 다음, 밤새 실온으로 가온하였다. 용액을 NH₄Cl 용액(5mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 Combiflash(DCM:MeOH=8%)로 추가 정제하여 순수한 생성물을 백색 고체(133mg, 46%)로 얻었다. MS: M/e 656 (M+1)⁺.

단계 C: 2-부톡시-7-((6-(3-(디메틸아미노)프로폭시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A32 )

트리플루오로아세트산(2mL) 및 트리에틸실란(2mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(6-(3-(디메틸아미노)프로폭시)피리딘-3-일)메탄올(78mg, 0.12mmol)의 용액을 80℃에서 1시간 동안 가열하였다. 농축 후, 트리플루오로아세트산(2mL)을 잔류물에 첨가하고 혼합물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 증발시켜 잔류물을 얻고, 이를 NaHCO₃로 염기성화하고, 에틸 아세테이트(5mL)로 추출하고, 염수(5mL)로 세척하였다. 유기층을 건조하고 농축하고 prep-TLC(DCM:MeOH=8:1)로 정제하여 생성물(10mg, 21%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.13 (s, 2H), 8.06 (s, 1H), 7.65 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.75 (d, J=8.0Hz, 1H), 4.27 (t, J=8.0Hz, 2H), 4.20 (t, J=8.0Hz, 2H), 4.09 (s, 2H), 3.14 (t, J=8.0Hz, 2H), 2.74 (s, 6H), 2.12 - 2.05 (m, 2H), 1.71 - 1.64 (m, 2H), 1.45 - 1.36 (m, 2H), 0.93 (t, J=8.0Hz, 3H) ppm. MS: M/e 400 (M+1)⁺.

화합물 A33: 2-부톡시-7-(4-(피페리딘-4-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(4-(piperidin-4-ylmethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 메틸 4-((디에톡시포스포릴)메틸)벤조에이트

트리에틸 포스파이트(15mL) 중 메틸 4-(브로모메틸)벤조에이트(5.5g, 24mmol)의 용액을 115℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하고, 농축하고, 잔류물을 콤비 플래시로 정제하여 목적 화합물(6.16g, 90%)을 얻었다. MS: M/e 287 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 4-(4-(메톡시카르보닐)벤질리덴)피페리딘-1-카르복실레이트

THF(60mL) 중 단계 A의 생성물(6.16g, 21.54mmol)의 용액에 LDA(12mL, 23.69mmol)를 -70℃에서 적가하였다. 이 온도에서 30분 동안 교반한 후, THF(10 mL) 중 tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트(4.7g, 23.69mmol)의 용액을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 실온으로 천천히 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(80mL x 2)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 콤비 플래시로 정제하여 목적 화합물(4.5g, 63%)을 얻었다. MS: M/e 276 (M+H-tBu)⁺.

단계 C: tert-부틸 4-(4-(메톡시카르보닐)벤질)피페리딘-1-카르복실레이트

MeOH(40mL) 중 단계 B의 생성물(4.5g, 13.6mmol)의 용액에 10% Pd/C(450mg)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 H₂분위기(풍선)하에 4시간 동안 교반하였다. 촉매를 여과하고 여액을 농축하여 목적 화합물(4g, 88%)을 얻었다. MS: M/e 278 (M+H-tBu)⁺.

단계 D: tert-부틸 4-(4-(하이드록시메틸)벤질)피페리딘-1-카르복실레이트

THF(10 mL) 중 LiAlH₄(273mg, 7.2mmol)의 용액에 THF(10mL) 중 단계 C의 생성물(2g, 6mmol)을 0℃에서 적가하였다. 첨가 후, 생성된 혼합물을 밤새 실온으로 천천히 가온하였다. 반응을 포화 물(0.3mL), 10% NaOH 용액(0.3mL) 및 물(0.9mL)로 켄칭하였다. 생성된 혼합물을 여과하고 여액을 농축하여 목적 화합물(1.65g, 90%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, CD₃Cl) δ 7.28 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.66 (s, 2H), 4.06 (d, J = 12.8 Hz, 2H), 2.71 - 2.57 (m, 2H), 2.53 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 1.73 - 1.54 (m, 5H), 1.44 (s, 9H) ppm.

단계 E: tert-부틸 4-(4-포르밀벤질)피페리딘-1-카르복실레이트

THF(30mL) 중 단계 D의 생성물(1.65g, 5.4mmol)의 용액에 0℃에서 데스-마틴 시약(Dess-Martin reagent, 4.58g, 10.8mmol)을 일부 부분적으로 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응을 포화 K₂CO₃용액으로 켄칭하고, 셀라이트 패드를 통해 여과하고, EA(50mL)로 세척하였다. 여액을 물 및 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 콤비 플래시로 정제하여 목적 화합물(475mg, 29%)을 얻었다. MS: M/e 248 (M+H-tBu)⁺.

단계 F: tert-부틸 4-(4-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)벤질)피페리딘-1-카르복실레이트

THF(8mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(200mg, 0.38mmol)의 용액에 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 n-BuLi(0.6mL, 0.95mmol) 용액을 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 단계 E의 생성물(172mg, 0.57mmol)의 혼합물을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 0.5시간 동안 교반한 다음, 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(50 mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC(EA/PE = 1/2)로 정제하여 목적 화합물(60 mg, 조 물질)을 얻었다. MS: M/e 751 (M+1)⁺.

단계 G: 2-부톡시-7-(4-(피페리딘-4-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A33 )

TFA(3mL) 중 단계 F의 생성물(60mg, 0.08mmol)의 혼합물에 Et₃SiH(0.5mL)를 첨가하였다. 반응물을 85℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 농축 건조시키고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하였다. 수집된 분획을 NaHCO₃용액으로 염기성화하고, DCM(60mL)으로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하여 목적 화합물(4mg, 2단계에 대해 3%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.12 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.21 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.07 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 4.19 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.09 (s, 2H), 3.00 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 2.53 - 2.49 (m, 2H), 2.44 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 1.75 - 1.49 (m, 5H), 1.48 - 1.34 (m, 2H), 1.18- 1.04 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 395 (M+1)⁺.

화합물 A34: 2-부톡시-7-((5-클로로-6-(3-(디메틸아미노)프로폭시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진- 4-아민(2-butoxy-7-((5-chloro-6-(3-(dimethylamino)propoxy)pyridin-3-yl)methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 5-클로로-6-(3-(디메틸아미노)프로폭시)니코틴알데히드

DMF(20mL) 중 5,6-디클로로니코틴알데히드(1.76g, 10mmol) 및 K₂CO₃(1.65g, 12mmol)의 용액에 3-(디메틸아미노)프로판-1-올(1.13g, 11mmol)을 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 N₂하에 80℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(50mL)로 희석하고, EtOAc(50mL x 2)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축하고, 잔류물을 플래시 크로마토그래피로 정제하여 목적 화합물(0.5g, 21%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.93 (s, 1H), 8.50 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 4.56 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.56 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.33 (s, 6H), 2.15 - 2.03 (m, 2H) ppm. MS: M/e 243 (M+1)⁺.

단계 B: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(5-클로로-6-(3-(디메틸아미노)프로폭시)피리딘-3-일)메탄올

THF(8mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(200mg, 0.38mmol)의 용액에 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 n-BuLi(0.6mL, 0.95mmol) 용액을 적가하였다. 1시간 후, THF(2 mL) 중 단계 A의 생성물(138mg, 0.57mmol)의 혼합물을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(50mL x 2)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC(DCM/MeOH = 10/1)로 정제하여 목적 화합물(60 mg, 조 물질)을 얻었다. MS: M/e 690 (M+1)⁺.

단계 C: 2-부톡시-7-((5-클로로-6-(3-(디메틸아미노)프로폭시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A34 )

TFA(3mL) 중 단계 B의 생성물(60mg, 미정제)의 혼합물에 Et₃SiH(0.5 mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 TFA(3mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 85℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 농축 건조시키고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하였다. 수집된 분획을 NaHCO₃용액으로 염기성화하고, DCM(50mL x 2)으로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하여 목적 화합물(8mg, 2단계에 대해 5%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, CD₃OD) δ 8.02 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.36 (s, 1H), 4.38 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.28 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.15 (s, 2H), 2.59 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 2.32 (s, 6H), 2.05 - 1.94 (m, 2H), 1.82 - 1.70 (m, 2H), 1.56 - 1.43(m, 2H), 0.98 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 434 (M+1)⁺.

화합물 A35: 2-부톡시-7-(4-(3-(디메틸아미노)프로폭시)-3-플루오로벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(4-(3-(dimethylamino)propoxy)-3-fluorobenzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(3-(디메틸아미노)프로폭시)-3-플루오로페닐)메탄올

THF(5mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.29mmol)의 용액에 n-부틸리튬(0.27ml, 0.43mmol)을 N₂하에서 -78℃에서 적가하고 1시간 동안 교반하였다. 이어서, THF(2mL) 중 4-(3-(디메틸아미노)프로폭시)-3-플루오로벤즈알데히드(96mg, 0.43mmol)의 용액을 -78℃에서 적가한 다음, 혼합물을 실온으로 가온하고 1시간 동안 교반하였다. 3시간 혼합물을 포화 염화암모늄 용액(5mL)으로 켄칭하고, DCM(30mL x 3)으로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄상에서 건조시키고, 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=20:1~5:1)로 정제하여 생성물(136mg, 70.86%)을 황색 오일로서 수득하였다. MS: M/e 673 (M+1)⁺.

단계 B: 2-부톡시-7-(4-(3-(디메틸아미노)프로폭시)-3-플루오로벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A35 )

TFA(2 mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(3-(디메틸아미노)프로폭시)-3-플루오로페닐)메탄올(136mg, 0.2mmol) 및 트리에틸실란(1mL)을 90℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 농축하고 prep-HPLC로 정제하여 생성물(34mg, 40%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.36 (br.s, 1H), 8.14 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.19 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 7.13 - 7.02 (m, 2H), 4.20 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 4.11 - 4.02 (m, 4H), 3.20 (dd, J = 15.2, 5.5 Hz, 2H), 2.81 (d, J = 4.8 Hz, 6H), 2.09 (dt, J = 12.3, 6.1 Hz, 2H), 1.76 - 1.57 (m, 2H), 1.47 - 1.33 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.4 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 417 (M+1)⁺.

화합물 A36: 2-부톡시-7-(4-(3-(디메틸아미노)프로폭시)-2-플루오로벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(4-(3-(dimethylamino)propoxy)-2-fluorobenzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(3-(디메틸아미노)프로폭시)-2-플루오로페닐)메탄올

THF(5mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.29mmol)의 용액에 n-부틸리튬(0.27ml, 0.43mmol)을 -78℃에서 적가하고 1시간 동안 교반하였다. 이어서, THF(2mL) 중 4-(3-(디메틸아미노)프로폭시)-2-플루오로벤즈알데히드(96mg, 0.43mmol)의 용액을 -78℃에서 적가하고, 첨가 후, 혼합물을 실온으로 가온하고, 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 염화암모늄 용액(5mL)으로 켄칭하고, DCM(30mL x 3)으로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄상에서 건조시키고, 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH=20:1~5:1)로 정제하여 생성물(107mg, 55.8%)을 황색 오일로서 수득하였다. MS: M/e 673 (M+1)⁺.

단계 B: 2-부톡시-7-(4-(3-(디메틸아미노)프로폭시)-2-플루오로벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A36 )

TFA(2mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(3-(디메틸아미노)프로폭시)-2-플루오로페닐)메탄올(107mg, 0.16mmol) 및 트리에틸실란(1mL)의 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 농축하고 prep-HPLC로 정제하여 표제 생성물(48mg, 72.6%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.32 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.37 - 7.07 (m, 2H), 6.82 (dd, J = 11.9, 2.1 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.19 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 4.08 (s, 2H), 4.02 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.25 - 3.17 (m, 2H), 2.80 (s, 6H), 2.12 - 2.00 (m, 2H), 1.74 - 1.59 (m, 2H), 1.47 - 1.34 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.4 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 417 (M+1)⁺.

화합물 A37: 7-((6-(2-아미노에톡시)피리딘-3-일)메틸)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(7-((6-(2-aminoethoxy)pyridin-3-yl)methyl)-2-butoxyimidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸 (2-((5-포르밀피리딘-2-일)옥시)에틸)카르바메이트

K₂CO₃(2.76g, 20mmol)를 DMA(20mL) 중 6-클로로니코틴알데하이드(1.41g, 10mmol) 및 tert-부틸(2-하이드록시에틸)카바메이트(1.61g, 10mmol)의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 밤새 80℃에서 실온으로 냉각시켰다. 용액을 H₂O(10 ml)로 켄칭하였다. 수용액을 EA(20ml X 4)로 추출하였다. 수집된 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성된 잔류물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물(120mg, 4%)을 수득하였다. MS: M/e 267 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-((5-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)피리딘-2-일)옥시)에틸)카르바메이트

THF(2mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(158mg,0.3mmol)의 용액에 를 -75 ~ -65℃의 온도를 유지하면서 n-BuLi(0.38mL, 0.6mmol) 용액에 적가하였다. 10분 후, THF(3mL) 중 단계 A의 생성물(120mg, 0.45mmol)의 용액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 20분 동안 교반하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(5mL x 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 목적 화합물(80mg, 37%)을 얻었다. MS: M/e 714 (M+1)⁺.

단계 C: 7-((6-(2-아미노에톡시)피리딘-3-일)메틸)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A37 )

TFA(1mL) 중 단계 B의 생성물(80mg, 0.11 mmol)의 혼합물에 Et₃SiH(1 mL)를 첨가하였다. 반응물을 80℃에서 3시간 동안 가열하였다. 혼합물을 농축 건조시키고 잔류물을 TFA(2mL)로 처리하였다. 반응물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 농축하고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하였다. 수집된 분획을 NaHCO₃용액으로 염기성화하고, DCM(30mL)으로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하여 표제 생성물(12mg, 33%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.12(s, 1H) 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.25(s, 1H) , 6.70 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.35 - 4.21 (m, 4H), 4.11 (s, 2H), 3.06 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 1.62 - 1.51 (m, 2H), 1.47 - 1.35 (m, 4H), 0.98 (t, J = 8.0 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 358 (M+1)⁺.

화합물 A38: 7-(4-(((1R,5S)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)옥시)-2-플루오로벤질)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(7-(4-(((1R,5S)-8-azabicyclo[3.2.1]octan-3-yl)oxy)-2- fluorobenzyl)-2-butoxyimidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸 (1R,5S)-3-(3-플루오로-4-포르밀페녹시)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트

DIAD(3.8mL, 7.2mmol)를 THF(20mL) 중 2-플루오로-4-하이드록시벤즈알데히드(500mg, 3.6mmol), tert-부틸(1R,5S)-3-하이드록시-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트(817mg, 3.6mmol) 및 트리페닐포스판(1.8g, 7.2mmol)의 용액에 N₂ 분위기 하에 0℃에서 적가하였다. 혼합물을 실온으로 가온하고 밤새 교반하였다. 용액을 물(20mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(20mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 건조하고 농축하고 CombiFlash(PE:EA=10%)로 정제하여 생성물(330mg, 27%)을 무색 오일로 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 10.21 (s, 1H), 7.83 (t, J=8.0Hz, 1H), 6.72 (dd, J=8.0, 4.0Hz, 1H), 6.57 (dd, J=12, 4.0Hz, 1H), 4.70 (t, J=4.0Hz, 1H), 4.24 (s, 2H), 2.20 (d, J=12.0Hz, 2H), 2.08 - 1.94 (m, 6H), 1.49 (s,9H) ppm. MS: M/e 350 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸(1R,5S)-3-(4-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-3-플루오로페녹시)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트

THF(8mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(200mg, 0.38mmol)의 냉각된 용액에 -78℃에서(N₂로 퍼징됨) n-BuLi(1.6M, 0.6mL)를 적가하였다. -78℃에서 30분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 tert-부틸 (1R,5S)-3-(3-플루오로-4-포르밀페녹시)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트(199mg, 0.57mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 이 온도에서 30분 동안 교반한 다음, 밤새 실온으로 가온하였다. 용액을 NH₄Cl 용액(5mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 CombiFlash(PE:EA=30%)로 추가 정제하여 순수한 생성물을 적색 오일(190mg, 63%)로 얻었다. MS: M/e 797 (M+1)⁺.

단계 C: 7-(4-(((1R,5S)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)옥시)-2-플루오로벤질)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A38 )

트리에틸실란(3mL) 및 트리플루오로아세트산(3mL) 중 tert-부틸 (1R,5S)-3-(4-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-3-플루오로페녹시)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트트리에틸실란(190mg, 0.24mmol)의 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 가열하였다. 용액을 농축하고, 트리플루오로아세트산(2mL)을 첨가하고, 80℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 증발시켜 잔류물을 얻고, 이를 NaHCO₃수(5mL)로 염기성화하고, 에틸 아세테이트(5mL)로 추출하고, 염수(5mL)로 세척하였다. 유기층을 건조시키고, 농축시키고, prep-HPLC로 정제하여 생성물(30mg, 33%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.14 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.18 (t, J=8.0Hz, 1H), 6.72 (d, J=12.0Hz, 1H), 6.62 (d, J=8.0Hz, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.19 (t, J=8.0Hz, 2H), 4.06 (s, 2H), 3.37 (s, 2H), 1.99 - 1.91 (m, 4H), 1.77 (s, 1H), 1.74 (s, 1H), 1.68 - 1.64 (m, 4H), 1.44 - 1.35 (m, 2H), 0.92 (t, J=8.0Hz, 3H) ppm. MS: M/e 441 (M+1)⁺.

화합물 A39: 1-(4-(4-((4-아미노-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)벤질)피페라진-1-일)-2-(디메틸아미노)에탄-1-온(1-(4-(4-((4-amino-2-butoxyimidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)benzyl)piperazin-1-yl)-2-(dimethylamino)ethan-1-one)

THF(4mL) 중 2-부톡시-7-(4-(피페라진-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(20mg, 0.052mmol), 디메틸글리신(5mg, 0.05mmol) 및 DIEA(12mg, 0.1mmol)의 혼합물에 HATU(19mg, 0.05mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 물로 희석하고, DCM(20mL x 2)으로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(2mg, 8.3%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.34 - 7.24 (m, 5H), 4.28 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.19 (s, 2H), 4.09 (s, 2H), 3.66 - 3.58 (m, 2H), 3.54 (s, 2H), 3.43 - 3.36 (m, 2H), 2.84 (s, 6H), 2.55 - 2.40 (m, 4H), 1.83 - 1.70 (m, 2H), 1.55 - 1.45 (m, 2H), 0.98 (t, J = 7.6 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 481 (M+1)⁺.

화합물 A40: 2-부톡시-7-((5-클로로-6-(피페리딘-4-일옥시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-((5-chloro-6-(piperidin-4-yloxy)pyridin-3-yl)methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸 4-((5-브로모-3-클로로피리딘-2-일)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트

DMA(15mL) 중 NaH(0.6g, 15mmol)의 용액에 tert-부틸 4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트(2.2g, 11mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, DMA(5mL) 중 5-브로모-2,3-디클로로피리딘(2.26g, 10mmol)의 용액을 첨가하고 생성 혼합물을 N₂ 보호 하에 80℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(50mL)로 희석하고, EtOAc(60mL x 2)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축하고, 잔류물을 콤비-플래시로 정제하여 목적 화합물(2.23g, 57%)을 얻었다. MS: M/e 335 (M+H - t-Bu)⁺.

단계 B: tert-부틸 4-((3-클로로-5-포르밀피리딘-2-일)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트

THF(15mL) 중 단계 A의 생성물(2.23g, 5.7mmol)의 용액에 n-BuLi(5.3mL, 8.55mmol)의 용액을 온도를 -75 ~ -65℃로 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, DMF(500mg, 6.3mmol)를 적가하고 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(40 mL x 2)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 콤비-플래시로 정제하여 목적 화합물(350mg, 18%)을 오일로서 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.93 (s, 1H), 8.49 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.49 - 5.41 (m, 1H), 3.79 - 3.65 (m, 2H), 3.49 - 3.38 (m, 2H), 2.05 - 1.92 (m, 2H), 1.91 - 1.78 (m, 2H), 1.47 (s, 9H) ppm. MS: M/e 341 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 4-((5-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-3-클로로피리딘-2-일)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트

THF(8mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(200mg, 0.38mmol)의 용액에 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 n-BuLi(0.6mL, 0.95mmol) 용액을 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 단계 B의 생성물(155mg, 0.456mmol)의 혼합물을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 실온으로 5시간 동안 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(60 mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC(EA/PE = 1/2)로 정제하여 목적 화합물(80mg, 조 물질)을 얻었다. MS: M/e 788 (M+1)⁺.

단계 D: 2-부톡시-7-((5-클로로-6-(피페리딘-4-일옥시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A40 )

TFA(3mL) 중 단계 C의 생성물(80mg, 조 물질)의 혼합물에 Et₃SiH(0.5mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 85℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물을 prep-HPLC로 정제하였다. 수집된 분획을 NaHCO₃용액으로 염기성화하고, DCM(50mL)으로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하여 목적 화합물(20mg, 2단계에 대해 45%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.15 (s, 1H), 8.10 - 8.01 (m, 2H), 7.84 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.34 (s, 1H), 5.15 - 5.04 (m, 1H), 4.19 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.09 (s, 2H), 3.02 - 2.90 (m, 2H), 2.64 - 2.53 (m, 2H), 1.98 - 1.86 (m, 2H), 1.72 - 1.60 (m, 2H), 1.59 - 1.46 (m, 2H), 1.44 - 1.32 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 432 (M+1)⁺.

화합물 A41: 7-(4-(((1S,4S)-2,5-디아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)메틸)벤질)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(7-(4-(((1S,4S)-2,5-diazabicyclo[2.2.1]heptan-2-yl)methyl)benzyl)-2-butoxyimidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸 (1S,4S)-5-(4-포르밀벤질)-2,5-디아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-카르복실레이트

CH₃CN(30mL) 중 4-(클로로메틸)벤즈알데히드(2g, 12.9mmol), tert-부틸 (1S,4S)-2,5-디아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-카르복실레이트(3.06g, 15.5mmol) 및 K₂CO₃(3.56g, 25.8mmol)의 혼합물을 50℃에서 밤새 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 물(50mL)로 희석하고 EA(30mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 콤비플래시로 정제하여 표제 화합물(3.8g, 수율: 93.1%)을 갈색 오일 형태로 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ9.98 (s, 1H), 7.86 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.56 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 3.79 (s, 2H), 3.42 - 3.37 (m, 2H), 3.19 - 3.00 (m, 1H), 2.83 - 2.70 (m, 1H), 2.53 - 2.38 (m, 1H), 1.85 - 1.75 (m, 1H), 1.72 - 1.55 (m, 1H), 1.48 - 1.32 (m, 10H)ppm. MS: M/e 317 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (1S,4S)-5-(4-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)벤질)-2,5-디아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-카르복실레이트

THF(10mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.29mmol)의 교반된 용액에 n-BuLi(1.6M, 0.45mL)를 -78℃에서 N₂ 분위기 하에 첨가하였다. 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, THF(0.5mL) 중 단계 A의 생성물(135mg, 0.43mmol)을 -78℃에서 시스템에 첨가하였다. 반응물을 실온으로 가온하고 밤새 교반하였다. 반응을 실온에서 포화 NH₄Cl 수용액으로 켄칭하였다. 혼합물을 EA(20mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 콤비플래시로 정제하여 표제 화합물(140mg, 수율: 63.3%)을 황색 오일로서 수득하였다. MS: M/e 764 (M+1)⁺.

단계 C: 7-(4-(((1S,4S)-2,5-디아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일)메틸)벤질)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A41 )

Et₃SiH(4mL) 중 단계 B의 생성물(140mg, 0.18mmol)의 교반된 용액에 CF₃COOH(4mL)를 실온에서 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 CF₃COOH(4mL)에 용해시켰다. 그리고 혼합물을 80℃에서 밤새 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 prep-HPLC로 정제하여 표제 화합물(12mg, 수율: 16.1%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ8.19 - 7.97 (m, 2H), 7.30 (s, 1H), 7.25 - 7.19 (m, 4H), 4.20 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.11 (s, 2H), 3.67 - 3.55 (m, 2H), 3.31 - 3.18 (m, 2H), 3.03 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 2.68 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 2.36 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 1.77 - 1.60 (m, 3H), 1.49 - 1.33 (m, 3H), 0.92 (t, J = 7.2 Hz, 3H)ppm. MS: M/e 408 (M+1)⁺.

화합물 A42: 2-부톡시-7-(4-(2-(피롤리딘-1-일)에틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(4-(2-(pyrrolidin-1-yl)ethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 4-브로모페네틸 4-메틸벤젠설포네이트

DCM(40mL) 중 2-(4-브로모페닐)에탄-1-올(4g, 20mmol)의 교반된 용액에 4-메틸벤젠설포닐 클로라이드(4.12g, 20.14mmol) 및 Et₃N(2.18g, 20.14mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물에 1N HCl 수용액(40mL)을 첨가하고 DCM(20ml x 3)으로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 진공에서 농축시켜 생성물(7.7g, 100%)을 황색 오일로서 수득하였다. 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.

단계 B: 1-(4-브로모페네틸)피롤리딘

MeCN(50mL) 중 4-브로모페네틸 4-메틸벤젠설포네이트(7g, 20mmol)의 교반된 용액에 피롤(5.6g, 77mmol) 및 Et₃N(8g, 80mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔류물에 H₂O(40mL)를 첨가하고 DCM(20ml x 3)으로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물(4.3g, 86%)을 황색 오일로서 수득하였다. MS: M/e 254 (M+1)⁺.

단계 C: 4-(2-(피롤리딘-1-일)에틸)벤즈알데히드

THF(20mL) 중 1-(4-브로모페네틸)피롤리딘(1g, 4mmol)의 교반된 용액에 -78℃로 냉각하고 질소 분위기 하에 n-BuLi(헥산 중 1.6M, 4.4mmol, 2.7mL)를 적가하였다. 60분 동안 교반한 후, THF(3mL) 중 DMF(876mg, 12mmol) 용액을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액에 붓고 EtOAc(15 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(600mg, 73.8%)을 얻었다. MS: M/e 204 (M+1)⁺.

단계 D: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(2-(피롤리딘-1-)일)에틸)페닐)메탄올

THF(10mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.29mmol)의 교반된 용액에 질소 분위기 하에 -78℃로 냉각하고 n-BuLi(헥산 중 1.6M, 0.71mmol, 0.47mL)를 적가하였다. 20분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 4-(2-(피롤리딘-1-일)에틸)벤즈알데히드(87.5mg, 0.43mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액에 붓고 EtOAc(15mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(80mg, 43%)을 얻었다. MS: M/e 651 (M+1)⁺.

단계 E: 2-부톡시-7-(4-(2-(피롤리딘-1-일)에틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A42 )

TFA(3mL) 및 Et₃SiH(3mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(2-(피롤리딘-1-)일)에틸)페닐)메탄올(80mg, 0.123 mmol)을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 TFA 및 Et₃SiH를 제거하였다. 잔류물에 TFA(5 mL)를 첨가하고 85℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 생성물(14mg, 29%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6)) δ 8.12 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.21 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 4.20 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 4.09 (s, 2H), 2.71 - 2.59 (m, 2H), 2.65 (s, 2H), 2.50 (s, 4H), 1.68 - 1.57(m, 6H), 1.45 - 1.36 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 395 (M+1)⁺.

화합물 A43: 7-(4-((4-아미노피페리딘-1-일)메틸)벤질)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(7-(4-((4-aminopiperidin-1-yl)methyl)benzyl)-2-butoxyimidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸 (1-(4-포르밀벤질)피페리딘-4-일)카르바메이트

THF(10mL) 중 4-(브로모메틸)벤즈알데히드(0.4g, 2mmol) 및 DIEA(0.52g, 4mmol)의 용액에 tert-부틸 피페리딘-4-일카바메이트(0.44g, 2.2mmol)를 첨가하였다. 그 다음 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 물(50mL)로 희석하고, EtOAc(80mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축하고, 잔류물을 콤비-플래시로 정제하여 목적 화합물(0.6g, 94%). MS: M/e 319 (M+1)⁺

단계 B: tert-부틸 (1-(4-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)벤질)피페리딘-4-일)카르바메이트

THF(12mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(380mg, 0.72mmol)의 용액에 n-BuLi(1mL, 1.6mmol)의 용액을 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(3mL) 중 단계 A의 생성물(276 mg, 0.868 mmol)의 혼합물을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(50 mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(60mg, 조 물질)을 얻었다. MS: M/e 766 (M+1)⁺.

단계 C: 7-(4-((4-아미노피페리딘-1-일)메틸)벤질)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A43 )

TFA(3mL) 중 단계 B의 생성물(60 mg, 미정제)의 혼합물에 Et₃SiH(0.5 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 85℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 농축 건조시키고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하였다. 수집된 분획을 NaHCO₃용액으로 염기성화하고, DCM(50mL)으로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하여 목적 화합물(7mg, 2단계에 대해 2.3%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 8.12 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.23 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 4.19 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.11 (s, 2H), 3.36 (s, 2H), 3.15 - 2.80 (m, 2H), 2.74 - 2.61 (m, 2H), 2.60 - 2.51 (m, 1H), 1.89 (t, J = 10.4 Hz, 2H), 1.72 - 1.58 (m, 4H), 1.49 - 1.34 (m, 2H), 1.29 - 1.15 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.6 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 410 (M+1)⁺.

화합물 A44: 2-부톡시-7-(4-((3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(4-((3-(dimethylamino)pyrrolidin-1-yl)methyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 4-((3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)메틸)벤즈알데히드

MeCN(15mL) 중 4-(브로모메틸)벤즈알데히드(459mg, 2.3mmol)의 교반된 용액에 N,N-디메틸피롤리딘-3-아민(319mg, 2.8mmol) 및 Et3N(929mg, 9.2mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔류물을 prep-HPLC로 정제하여 생성물(100mg, 18.7%)을 황색 오일로서 얻었다. MS: M/e 233 (M+1)⁺.

단계 B: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-((3-(디메틸아미노)피롤리딘)-1-일)메틸)페닐)메탄올

THF(10mL) 중 4-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-7-브로모이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)부탄-2-일륨(150mg, 0.28mmol)의 교반 용액에 질소 분위기 하에 -78℃로 냉각시키고 n-BuLi(헥산 중 1.6M, 0.7mmol, 0.43mL)를 적가하였다. 60분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 4-((3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)메틸)벤즈알데히드(80mg, 0.34mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액에 붓고 EtOAc(15mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 진공에서 농축하여 미정제 생성물(110mg, 57.8%)을 얻었으며, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다. MS: M/e 680 (M+1)⁺.

단계 C: 2-부톡시-7-(4-((3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A44 )

TFA(3mL) 및 Et₃SiH(3mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-((3-(디메틸아미노)피롤리딘)-1-일)메틸)페닐)메탄올(110mg, 0.162mmol)의 용액을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 TFA 및 Et₃SiH를 제거하였다. 잔류물에 TFA(5mL)를 첨가하고 85℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 생성물(30mg, 43.5%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6)) δ 8.12 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.25 - 7.19 (m, 4H), 4.19 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 4.11 (s, 2H), 3.52 - 3.38 (m, 2H), 2.74 - 2.65 (m, 1H), 2.61 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 2.53 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 2.38 (dd, J = 14.7, 8.5 Hz, 1H), 2.27 - 2.16 (m, 1H), 2.07 (s, 6H), 1.81 (dd, J = 13.3, 6.0 Hz, 1H), 1.72 - 1.53 (m, 3H), 1.42 - 1.33 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.4 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 424 (M+1)⁺.

화합물 A45: 2-부톡시-7-((5-클로로-6-(3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸프로폭시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-((5-chloro-6-(3-(dimethylamino)-2,2-dimethylpropoxy)pyridin-3-yl)methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 3-((5-브로모-3-클로로피리딘-2-일)옥시)-N,N,2,2-테트라메틸프로판-1-아민

DMA(15mL) 중 NaH(60%, 600mg, 15mmol)의 교반된 현탁액에 DMA(2mL) 중 3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸프로판-1-올(1.44g, 1.1mmol)의 용액을 첨가하였다. 30분 동안 교반한 후, DMA(2mL) 중 5-브로모-2,3-디클로로피리딘(2.26g, 10mmol)의 용액을 첨가하였다. 첨가 후, 반응물을 80℃에서 밤새 교반하였다. 반응을 H₂O(10 mL)로 켄칭하고 EtOAc(20 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=20:1~5:1)로 정제하여 목적 화합물(2.3g, 71.5%)을 무색 오일로서 수득하였다. MS: M/e 321 (M+1)⁺.

단계 B: 5-클로로-6-(3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸프로폭시)니코틴알데히드

건조 THF(10mL) 중 단계 A의 생성물(961.5mg, 3mmol)의 교반된 용액에 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 2.8mL, 4.5mL)를 적가하였다. 30분 동안 교반한 후, DMF(337mg, 4.5mmol)를 첨가하고 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 aq.NH₄Cl로 켄칭하고 EtOAc(10mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=5:1~1:1)로 정제하여 목적 화합물(550mg, 68%)을 무색 오일로서 얻었다. MS: M/e 271 (M+1)⁺.

단계 C: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(5-클로로-6-(3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸프로폭시)피리딘-3-일)메탄올

THF(10mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.286mmol)의 용액에 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 0.44mL, 0.71mmol)를 적가하였다. 1시간 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 단계 B의 생성물(115mg, 0.428mmol)의 용액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응을 sat.aq. NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(10mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 prep-TLC(100% EtOAc)로 정제하여 목적 화합물(60mg, 29.3%)을 얻었다. MS: M/e 718 (M+1)⁺.

단계 D: 2-부톡시-7-((5-클로로-6-(3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸프로폭시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A45 )

Et₃SiH/TFA(0.5mL/3mL) 중 단계 C의 생성물(70mg, 0.095mmol)의 혼합물에 85℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여 잔류물을 얻었고, 이를 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(20mg, 54.1%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.15 (s, 1H), 8.07 (s, 2H), 7.85 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.34 (s, 1H), 4.19 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.10 (s, 2H), 4.04 (s, 2H), 2.30 - 2.15 (m, 8H), 1.73 - 1.61 (m, 2H), 1.44 - 1.35 (m, 2H), 0.98 - 0.88 (m, 9H) ppm. MS: M/e 462 (M+1)⁺.

화합물 A46: 7-(4-(아미노메틸)벤질)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(7-(4-(aminomethyl)benzyl)-2-butoxyimidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸 (4-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)벤질)카바메이트

THF(8mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(200mg, 0.38mmol)의 용액에 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 n-BuLi(0.5mL, 0.76mmol) 용액을 적가하였다. 1.5시간 후, THF(1mL) 중의 tert-부틸(4-포르밀벤질)카바메이트(107mg, 0.456mmol)의 용액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 실온으로 1시간 동안 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(50 mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(90mg, 조 물질)을 얻었다. MS: M/e 683 (M+1)⁺.

단계 B: 7-(4-(아미노메틸)벤질)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A46 )

TFA(3 mL) 중 단계 A의 생성물(90mg, 조 물질)의 혼합물에 Et₃SiH(0.5mL)를 첨가하였다. 반응물을 85℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 농축 건조시키고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하였다. 수집된 분획을 NaHCO₃용액으로 염기성화하고, DCM(60mL)으로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하여 생성물을 얻었다(10mg, 2단계에 대해 10%). ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.11 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.25 - 7.22 (m, 4H), 4.42 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.10 (s, 2H), 3.67 (s, 2H), 1.75 -1.60 (m, 2H), 1.50 - 1.30 (m, 2H), 0.93 (t, J = 7.6 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 327 (M+1)⁺.

화합물 A47: 2-부톡시-7-(4-((4-페녹시피페리딘-1-일)메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(4-((4-phenoxypiperidin-1-yl)methyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 4-((4-페녹시피페리딘-1-일)메틸)벤즈알데히드

THF(10mL) 중 4-(브로모메틸)벤즈알데히드(0.4g, 2mmol) 및 DIPEA(0.36g, 3mmol)의 용액에 4-페녹시피페리딘(0.35g, 2mmol)을 첨가하였다. 그 다음 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 물(50mL)로 희석하고, EtOAc(60mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축하고, 잔류물을 플래시 크로마토그래피로 정제하여 목적 화합물(0.22g, 37%)을 얻었다. MS: M/e 296 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-((4-페녹시피페리딘)-1-일)메틸)페닐)메탄올

THF(5mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.285mmol)의 용액에 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 n-BuLi(0.4mL, 0.64mmol) 용액을 적가하였다. 1시간 후, THF(1mL) 중 단계 A의 생성물(100mg, 0.34mmol)의 혼합물을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 다음, 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(50 mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC(EA/PE = 1/1)로 정제하여 목적 화합물(95mg, 조 물질)을 얻었다. MS: M/e 743 (M+1)⁺.

단계 C: 2-부톡시-7-(4-((4-페녹시피페리딘-1-일)메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A47 )

TFA(3mL) 중 단계 B의 생성물(95mg, 조 물질)의 혼합물에 Et₃SiH(1 mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 85℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 TFA(3mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 85℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 농축 건조시키고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하였다. 수집된 분획을 NaHCO₃용액으로 염기성화하고, DCM(60mL)으로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하여 목적 화합물(15mg, 2단계에 대해 11%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.13 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.29 - 7.18 (m, 6H), 6.96 - 6.85 (m, 3H), 4.42 - 4.28 (m, 1H), 4.19 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.12 (s, 2H), 3.43 (s, 2H), 2.70 - 2.58 (m, 2H), 2.25 - 2.10 (m, 2H), 1.98 - 1.82 (m, 2H), 1.72 - 1.50 (m, 4H), 1.46 - 1.32 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.8 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 487 (M+1)⁺.

화합물 A48: 2-((5-메틸이속사졸-3-일)메톡시)-7-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4 -아민(2-((5-methylisoxazol-3-yl)methoxy)-7-(4-(pyrrolidin-1-ylmethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 7-브로모-N,N-비스(4-메톡시벤질)-2-((5-메틸이속사졸-3-일)메톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민

THF(5mL) 중 NaH(80 mg, 2 mmol)의 현탁액에 (5-메틸이속사졸-3-일)메탄올(226mg, 2mmol)을 첨가하였다. 실온에서 30분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 7-브로모-2-클로로-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(240 mg, 0.5mmol)의 용액을 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 80℃에서 6시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하고, 물(30mL)로 희석하고, EtOAc(60mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하고, 잔류물을 콤비-플래시로 정제하여 목적 화합물(200mg, 71%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.50 (s, 1H), 7.18 (d, J = 8.4 Hz, 4H), 6.88 - 6.82 (m, 4H), 6.18 (s, 1H), 5.61 (s, 2H), 5.43 (s, 2H), 4.85 (s, 2H), 3.80 (s, 6H), 2.40 (s, 3H) ppm. MS: M/e 565 (M+1)⁺.

단계 B: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-((5-메틸이속사졸-3-일)메톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올

THF(3mL) 중 단계 A의 생성물(100mg, 0.177mmol)의 용액에 n-BuLi(0.3mL, 0.44mmol)의 용액을 온도를 -75 ~ -65℃로 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(1mL) 중 4-(피롤리딘-1-일메틸)벤즈알데히드(80mg, 0.424mmol)의 용액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 실온으로 4시간 동안 가온하였다. 반응물을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(50 mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(50mg, 조 물질)을 얻었다. MS: M/e 676 (M+1)⁺.

단계 C: 2-((5-메틸이속사졸-3-일)메톡시)-7-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A48 )

TFA(3mL) 중 단계 B의 생성물(50mg, 조 물질)의 혼합물에 Et₃SiH(0.5 mL)를 첨가하였다. 반응물을 85℃에서 16시간 동안 가열하였다. 혼합물을 농축 건조시키고 잔류물을 TFA(3 mL)로 처리하였다. 반응물을 85℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 농축하고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하였다. 수집된 분획을 NaHCO₃용액으로 염기성화하고, DCM(60mL)으로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하여 목적 화합물(10mg, 2단계에 대해 13%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.28 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.30 - 7.15 (m, 4H), 6.27 (s, 1H), 5.31 (s, 2H), 4.12 (s, 2H), 3.51 (s, 2H), 2.44 - 2.33 (m, 7H), 1.75 - 1.62(m, 4H) ppm. MS: M/e 420 (M+1)⁺.

화합물 A49: 2-부톡시-7-(4-(((1R,5S)-8-에틸-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)옥시)-2-플루오로벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(4-(((1R,5S)-8-ethyl-8-azabicyclo[3.2.1] octan-3-yl)oxy)-2-fluorobenzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 4-(((1R,5S)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)옥시)-2-플루오로벤즈알데히드 염산염

HCl/디옥산(4M , 4 mL) 중 tert-부틸 (1R,5S)-3-(3-플루오로-4-포르밀페녹시)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-8-카르복실레이트(330mg, 1mmol)의 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 농축하여 HCl 염의 생성물을 백색 고체로서 얻었다(250mg, 92%). MS: M/e 252 (M+1)⁺.

단계 B: 4-(((1R,5S)-8-에틸-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)옥시)-2-플루오로벤즈알데히드

요오도에탄(156mg, 1mmol)을 THF(3mL) 및 DMF(3mL) 중 4-(((1R,5S)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)옥시)-2-플루오로벤즈알데히드 염산염(150mg, 0.5mmol) 및 K₂CO₃(138mg, 1mmol)의 용액에 첨가하였다. 용액을 실온에서 밤새 교반하고, 물(10mL)을 첨가하고, 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 정제용 TLC(DCM:MeOH=7:1)로 추가 정제하여 순수한 생성물(60mg, 41%)을 얻었다. MS: M/e 278 (M+1)⁺.

단계 C: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(((1R,5S)-8-에틸-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)옥시)-2-플루오로페닐)메탄올

THF(8mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(100mg, 0.19mmol)의 냉각된 용액에 -78℃에서(N₂로 퍼징됨) n-BuLi(1.6M, 0.3mL)를 적가하였다. -78℃에서 30분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 4-(((1R,5S)-8-에틸-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)옥시)-2-플루오로벤잘데하이드(58mg, 0.21mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 이 온도에서 30분 동안 교반한 다음, 실온으로 2시간 동안 가온하였다. 용액을 NH₄Cl 용액(5mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(5 mL)로 추출하고, 염수(5 mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이것을 prep-TLC(DCM:MeOH=8:1)에 의해 추가로 정제하여 생성물(30mg, 22%)을 얻었다. MS: M/e 725 (M+1)⁺.

단계 D: 2-부톡시-7-(4-(((1R,5S)-8-에틸-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)옥시)-2-플루오로벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A49 )

트리에틸실란(2mL) 및 트리플루오로아세트산(2mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(((1R,5S)-8-에틸-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)옥시)-2-플루오로페닐)메탄올(28mg, 0.04mmol)의 용액을 80℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 증발시켜 잔류물을 얻었고, 이를 prep-HPLC로 정제하여 생성물(15 mg, 83%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.22 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.28 (s,1H), 7.24 (t, J=8.0Hz, 1H), 6.91 (dd, J=12.0, J=4.0Hz, 1H), 6.75 (d, J=8.0Hz, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.20 (t, J=8.0Hz, 2H), 4.08 (s, 2H), 3.96 (s, 2H), 3.03 - 2.96 (m, 2H), 2.34 - 2.30 (m, 2H), 2.21 - 2.08 (m, 6H), 1.70 - 1.63 (m, 2H), 1.45 - 1.36 (m, 2H), 1.24 - 1.21 (m, 3H), 0.92 (t, J=8.0Hz, 3H) ppm. MS: M/e 469 (M+1)⁺.

화합물 A50: 2-부톡시-7-((5-메톡시피리딘-2-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-((5-methoxypyridin-2-yl)methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(5-메톡시피리딘-2-일)메탄올

THF(10mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.28mmol)의 교반된 용액에 -78℃로 냉각하고 질소 분위기 하에 n-BuLi(헥산 중 1.6M, 0.7mmol, 0.43mL)를 적가하였다. 60분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 5-메톡시피콜린알데히드(50mg, 0.34mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액에 붓고 EtOAc(15mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 진공에서 농축하여 표제 생성물(200mg, 100%)을 얻었고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다. MS: M/e 585 (M+1)⁺.

단계 B: 2-부톡시-7-((5-메톡시피리딘-2-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A50 )

TFA(3mL) 및 Et₃SiH(3mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(5-메톡시피리딘-2-일)메탄올(200mg, 0.28mmol)의 용액을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 TFA 및 Et₃SiH를 제거하였다. 잔류물에 TFA(5mL)를 첨가하고 85℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 생성물(10mg, 10.8%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6)) δ 8.18 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.31 (dd, J = 8.5, 2.8 Hz, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.24 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.23 (s, 2H), 4.15 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.78 (s, 3H), 1.68 - 1.57 (m, 2H), 1.43 - 1.30 (m, 2H), 0.90 (t, J = 7.4 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 329 (M+1)⁺.

화합물 A51: 2-부톡시-7-((6-메톡시피리딘-2-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-((6-methoxypyridin-2-yl)methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(6-메톡시피리딘-2-일)메탄올

THF(10mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.28mmol)의 교반된 용액에 -78℃로 냉각하고 질소 분위기 하에 n-BuLi(헥산 중 1.6M, 0.7mmol, 0.43mL)를 적가하였다. 60분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 6-메톡시피콜린알데히드(50mg, 0.34mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액에 붓고 EtOAc(15mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 진공에서 농축하여 표제 생성물(250mg, 100%)을 얻었고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다. MS: M/e 585 (M+1)⁺.

단계 B: 2-부톡시-7-((6-메톡시피리딘-2-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A51 )

TFA(3mL) 및 Et₃SiH(3mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(6-메톡시피리딘-2-일)메탄올(250mg, 0.28mmol)의 용액을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 TFA 및 Et₃SiH를 제거하였다. 잔류물에 TFA(5 mL)를 첨가하고 85℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 생성물(25mg, 27.2%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6)) δ 8.15 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.60 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.35 (s, 1H), 6.80 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.21 (s, 2H), 4.15 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 3.79 (s, 3H), 1.68 - 1.56 (m, 2H), 1.37 (dd, J = 15.0, 7.5 Hz, 2H), 0.90 (t, J = 7.4 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 329 (M+1)⁺.

화합물 A52: 7-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2,4-디아민(7-(4-(pyrrolidin-1-ylmethyl)benzyl)imidazo[2,1-f] [1,2,4]triazine-2,4-diamine)

단계 A: 7-브로모-N2-(푸란-2-일메틸)-N4,N4-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2,4-디아민

n-BuOH(5mL) 중 7-브로모-2-클로로-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(200mg, 0.41mmol), 푸란-2-일메탄아민(80mg, 0.28mmol) 및 DIEA(106mg, 0.82mmol)의 용액을 밀봉된 튜브에서 48시간 동안 120℃에서 가열하였다. 용액을 냉각하고, 농축하고, prep-TLC(PE:EA=2:1)로 추가 정제하여 순수한 생성물(70mg, 31%)을 얻었다. MS: M/e 549 (M+1)⁺.

단계 B: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-((푸란-2-일메틸)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올

THF(5mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-((푸란-2-일메틸)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올(70mg, 0.13mmol)의 냉각된 용액에 -78℃에서(N₂로 퍼징됨) n-BuLi(1.6M, 0.2mL)를 적가하였다. -78℃에서 30분 동안 교반한 후, THF(1mL) 중 4-(피롤리딘-1-일메틸)벤즈알데히드(37mg, 0.20mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 이 온도에서 30분 동안 교반한 다음, 밤새 실온으로 가온하였다. 용액을 NH₄Cl 용액(2mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 prep-TLC(DCM:MeOH=7:1)로 추가 정제하여 생성물(15mg, 18%)을 얻었다. MS: M/e 660 (M+1)⁺.

단계 C: 7-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2,4-디아민( 화합물 A52 )

트리에틸실란(2mL) 및 트리플루오로아세트산(2mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-((푸란-2-일메틸)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올(15mg, 0.02mmol)의 용액을 80℃에서 밤새 가열하였다. 용액을 증발시켜 잔류물을 얻었고, 이를 prep-HPLC로 정제하여 생성물(5mg, 50%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.86 (br.s, 1H), 7.86 (br.s, 1H), 7.44 (d, J=8.0Hz, 2H), 7.35 (d, J=8.0Hz, 2H), 7.31 (s, 1H), 4.31 (d, J=8.0Hz, 2H), 4.15 (s, 2H), 3.35 - 3.31 (m, 2H), 3.12 - 3.05 (m, 2H), 2.05 - 2.02 (m, 2H), 1.86 - 1.81 (m,2H) ppm. MS: M/e 324 (M+1)⁺.

화합물 A53: 2-부톡시-7-((6-(3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸프로폭시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-((6-(3-(dimethylamino)-2,2-dimethylpropoxy)pyridin-3-yl)methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 6-(3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸프로폭시)니코티노니트릴

DMA(15mL) 중 NaH(60%, 600mg, 15mmol)의 교반된 현탁액에 DMA(2mL) 중 3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸프로판-1-올(1.44g, 1.1mmol)의 용액을 첨가하였다. 30분 동안 교반한 후, DMA(2 mL) 중 6-클로로니코티노니트릴(1.38g, 10mmol)의 용액을 첨가하였다. 첨가 후, 반응물을 80℃에서 밤새 교반하였다. 반응을 aq. NH₄Cl로 켄칭하고 EtOAc(20mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄상에서 건조시키고, 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=20:1)로 정제하여 목적 화합물(240mg, 10.3%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS: M/e 234 (M+1)⁺.

단계 B: 6-(3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸프로폭시)니코틴알데히드

건조 THF(10mL) 중 단계 A의 생성물(233mg, 1mmol)의 교반된 용액에 DIBAL-H(1.2M, 2mL, 2.5mmol)를 -20℃에서 적가하였다. 첨가 후, 반응물을 3시간 동안 교반하였다. 반응을 aq. NH₄Cl로 켄칭하고 EtOAc(10mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=10:1~2:1)로 정제하여 목적 화합물(120mg, 50.8%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS: M/e 237 (M+1)⁺.

단계 C: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(6-(3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸프로폭시)피리딘-3-일)메탄올

THF(10mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.286mmol)의 용액에 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 0.44mL, 0.71mmol)를 적가하였다. 1시간 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 단계 B의 생성물(115mg, 0.428mmol)의 용액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응을 sat.aq. NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(10mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 prep-TLC(100% EtOAc)로 정제하여 목적 화합물(45mg, 23%)을 무색 오일로서 얻었다. MS: M/e 684 (M+1)⁺.

단계 D: 2-부톡시-7-((5-클로로-6-(3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸프로폭시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A53 )

Et₃SiH/TFA(0.5mL/3mL) 중 단계 C의 생성물(45mg, 0.066mmol)의 혼합물에 85℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여 잔류물을 얻었고, 이를 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(10mg, 35.4%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.14 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.59 (dd, J = 8.4, 2.4 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.73 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.19 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 4.07 (s, 2H), 3.94 (s, 2H), 2.18 (s, 8H), 1.72 - 1.59 (m, 2H), 1.47 - 1.34 (m, 2H), 0.96 - 0.86 (m, 9H) ppm. MS: M/e 428 (M+1)⁺.

화합물 A54: 2-이소부톡시-7-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-isobutoxy-7-(4-(pyrrolidin-1-ylmethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 7-브로모-2-이소부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민

나트륨(1g)을 교반된 2-메틸프로판-1-올(10g)에 여러 부분으로 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 상기 투명한 용액을 7-브로모-2-클로로-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(0.25g, 0.51mmol)에 첨가하였다. 혼합물을 80℃로 가열하고 1시간 동안 교반하였다. 완료 후, 혼합물을 H₂O(20 ml)로 켄칭한 다음, DCM(20 ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 H₂O(10ml)로 세척하고, 건조시키고 감압하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 PE 중 0-20% EA를 사용하는 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물(0.18g, 67%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS: M/e 526 (M+1)⁺.

단계 B: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-이소부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올

THF(10ml) 중 7-브로모-2-이소부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(180mg, 0.34mmol)의 교반된 용액에 N₂ 분위기 하에 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 0.54ml, 0.86mmol)를 첨가하였다. 용액을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. THF(2ml) 중 4-(피롤리딘-1-일메틸)벤즈알데히드(97mg, 0.51mmol)를 상기 용액에 적가하였다. 첨가한 후, 용액을 자연적으로 실온으로 가온한 다음, 3시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 H₂O(20ml)로 켄칭한 다음, DCM(20ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 H₂O(10ml)로 세척하고, 건조하고 감압하에 농축하여 조 생성물을 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. MS: M/e 637 (M+1)⁺.

단계 C: 2-이소부톡시-7-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A54 )

TFA(6ml) 및 트리에틸실란(2ml) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-이소부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올(조 물질)의 용액을 80℃에서 24시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 EA(30ml)에 용해시키고 aq. NaHCO₃(포화, 25ml) 및 염수(20ml)로 세척하였다. 유기상을 Na₂SO₄상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성된 잔류물을 DCM:MeOH(10:1)를 사용한 prep-TLC에 의해 정제하여 생성물(13.83mg)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.49 - 7.42 (m, 4H), 7.33 (s, 1H), 4.65 (s, 1H), 4.38 -4.34 (m, 1H), 4.33 (s, 2H), 4.26 (s, 2H), 4.04 (d, J = 4Hz, 2H), 2.16 - 1.98 (m, 7H), 1.02 (d, J = 8Hz, 6H) ppm. MS: M/e 381 (M+1)⁺.

화합물 A55: 2-부톡시-7-((3-메톡시피리딘-2-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-((3-methoxypyridin-2-yl)methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸 (2-부톡시-7-(하이드록시(3-메톡시피리딘-2-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-일)(tert-부톡시카르보닐)카르바메이트

THF(5mL) 중 tert-부틸 (2-부톡시-7-(하이드록시(3-메톡시피리딘-2-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-일)(tert-부톡시카르보닐)카바메이트(150mg, 0.3mmol)의 용액을 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 n-BuLi(0.4mL, 0.6mmol) 용액을 적가하였다. 1시간 후, THF(1mL) 중 3-메톡시피콜린알데히드(55mg, 0.45mmol)의 용액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 밤새 실온으로 가온하였다. 반응물을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(60 mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(20mg, 조 물질)을 얻었다. MS: M/e 545 (M+1)⁺.

단계 B: 2-부톡시-7-((3-메톡시피리딘-2-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A55 )

TFA(3mL) 중 단계 A의 생성물(20mg, 조 물질)의 혼합물에 Et₃SiH(0.5mL)를 첨가하였다. 반응물을 85℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 농축 건조하고, 잔류물을 prep-HPLC로 정제하여 표제 생성물을 얻었다(8mg, 2단계에 대해 6%). ¹HNMR (400 MHz, CD₃OD) δ 8.23 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.80 (dd, J = 8.0, 5.4, Hz, 1H), 7.54 (s, 1H), 4.60 (s, 2H), 4.14 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.03(s, 3H), 175 - 1.62 (m, 2H), 1.50 - 1.38 (m, 2H), 0.96 (t, J = 7.6 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 329 (M+1)⁺.

화합물 A56: (4-아미노-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(3-메톡시피리딘-2-일)메탄올((4-amino-2-butoxyimidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)(3-methoxypyridin-2-yl)methanol)

DCM(3mL) 중 tert-부틸 (2-부톡시-7-(하이드록시(3-메톡시피리딘-2-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-일)(tert-부톡시카르보닐)카바메이트(35mg, 조 물질)의 혼합물에 TFA(1mL) 및 Et₃SiH(1mL)을 첨가하였다. 반응물을 40℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 농축 건조하고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하여 표제 생성물(20mg, 68%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.25 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.81 (d, J = 6.0 Hz, 1H) , 7.66 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 6.43 (s, 1H), 4.10 - 3.98 (m, 1H), 3.96 - 3.86 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 1.66 - 1.52 (m, 2H), 1.45 - 1.26 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.6 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 345 (M+1)⁺.

화합물 A57: 메틸 5-((4-아미노-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-2-(3-(디메틸아미노)프로폭시)벤조에이트(methyl 5-((4-amino-2-butoxyimidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)-2-(3-(dimethylamino)propoxy)benzoate)

단계 A: 메틸 2-(3-(디메틸아미노)프로폭시)-5-포르밀벤조에이트

DMF(20mL) 중 메틸 5-포르밀-2-하이드록시벤조에이트(500mg, 2.7mmol), 3-클로로-N,N-디메틸프로판-1-아민 염산염(512mg, 3.2mmol) 및 Cs₂CO₃(1.7g, 5.4mmol)의 혼합물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 용액을 물(20mL)로 용리하고, 에틸 아세테이트(20mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 건조하고, 농축하고, CombiFlash(DCM:MeOH=10%, 10%의 NH₃·MeOH 포함)로 정제하여 생성물(400mg, 54%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.91 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.06 (dd, J=8.0, 4.0Hz, 1H), 7.35 (d, J=12.0Hz, 1H), 4.20 (t, J=8.0Hz, 2H), 3.84 (s, 3H), 2.42 (t, J=8.0Hz, 2H), 2.16 (s, 6H), 1.91 - 1.85 (m, 2H) ppm. MS: M/e 266 (M+1)⁺.

단계 B: 메틸 5-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-2-(3-(디메틸아미노)프로폭시)벤조에이트

THF(8mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.29mmol)의 냉각된 용액에 -78℃에서(N₂로 퍼징됨) n-BuLi(1.6M, 0.5mL)를 적가하였다. -78℃에서 30분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 메틸 2-(3-(디메틸아미노)프로폭시)-5-포르밀벤조에이트(115mg, 0.44mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 이 온도에서 30분 동안 교반한 다음, 실온으로 2시간 동안 가온하였다. 용액을 NH₄Cl 용액(5mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이것을 prep-TLC(DCM:MeOH=7:1)에 의해 추가로 정제하여 생성물(54mg, 27%)을 얻었다. MS: M/e 713 (M+1)⁺

단계 C: 메틸 5-((4-아미노-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-2-(3-(디메틸아미노)프로폭시)벤조에이트( 화합물 A57 )

트리에틸실란(2mL) 및 트리플루오로아세트산(2mL) 중 메틸 5-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-2-(3-(디메틸아미노)프로폭시)벤조에이트(54mg, 0.08mmol)의 용액을 80℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 증발시켜 잔류물을 얻었고, 이를 prep-HPLC로 정제하여 생성물(23mg, 67%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.50 (br.s, 1H), 8.14 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.73 (s,1H), 7.50 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.10 (d, J=8.0Hz, 1H), 4.20 (t, J=8.0Hz, 2H), 4.12 - 4.09 (m, 4H), 3.80 (s, 3H), 3.27 - 3.23 (m, 2H), 2.82 (d, J=4.0Hz, 6H), 2.14 - 2.10 (m, 2H), 1.70 - 1.65 (m, 2H), 1.43 - 1.38 (m, 2H), 0.92 (t, J=8.0Hz, 3H) ppm. MS: M/e 457 (M+1)⁺.

화합물 A58: 2-부톡시-7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-((6-(2-(methylamino)ethoxy)pyridin-3-yl)methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A tert-부틸 (2-((5-포르밀피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트

K₂CO₃(5.52g, 40mmol)를 DMA(40mL) 중 6-클로로니코틴알데히드(2.82g, 20mmol) 및 tert-부틸(2-하이드록시에틸)(메틸)카바메이트(4.2g, 24mmol)의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃에서 밤새 가열하고, 실온으로 냉각시켰다. 용액을 H₂O(40ml)로 켄칭하였다. 수용액을 EA(40ml X 3)로 추출하였다. 수집된 유기 층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성된 잔류물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물(560mg, 10%)을 얻었다. MS: M/e 281 (M+1)⁺

단계 B: tert-부틸 (2-((5-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(1mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(158mg,0.3mmol)의 용액에 n-BuLi(0.28 mL, 0.45 mmol)의 용액에 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 10분 후, THF(1mL) 중 단계 A의 생성물(126 mg, 0.45 mmol)의 용액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 30분 동안 교반하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(10mL x 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 목적 화합물(200 mg, 91%)을 얻었다. MS: M/e 728 (M+1)⁺.

단계 C: 2-부톡시-7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A58 )

TFA(1mL) 중 단계 B의 생성물(180mg, 0.25 mmol)의 혼합물에 Et₃SiH(1mL)를 첨가하였다. 반응물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 농축 건조시키고 잔류물을 TFA(1mL)로 처리하였다. 반응물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 농축하고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하였다. 수집된 분획을 NaHCO₃용액으로 염기성화하고, DCM(30mL)으로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하여 표제 생성물(20mg, 22%)을 제공하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.11(s, 1H) 7.52 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.25(s, 1H) , 6.70 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.40 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.28 (t, J = 6.0 Hz, 2H),, 4.11 (s, 2H), 2.99 (t, J = 8.3 Hz, 2H), 2.52 (s, 3H), 1.82 - 1.71 (m, 4H), 1.53 - 1.42 (m, 2H), 0.98 (t, J = 6.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 372 (M+1)⁺.

화합물 A59: N-(2-((5-((4-아미노-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)피리딘-2-일)옥시)에틸)-N-메틸아세트아미드(N-(2-((5-((4-amino-2-butoxyimidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)pyridin-2-yl)oxy)ethyl)-N-methylacetamide)

Ac₂O(4mg, 0.04mmol)를 DCM(0.5mL) 중 2-부톡시-7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(11mg, 0.03mmol) 및 Et₃N을 첨가하고, 반응 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하였다. 수집된 분획을 NaHCO₃용액으로 염기성화하고, DCM(30mL)으로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하여 표제 생성물(10mg, 80%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.11(s, 1H) 7.50 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.31(s, 1H) , 6.69 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.45 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.33 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 4.15 (s, 2H), 3.74 - 3.68 (m, 2H), 3.11 (s, 2H), 2.99 (s, 2H), 2.15 - 2.10 (m, 3H), 1.78 - 1.69 (m, 2H), 1.39 - 1.26 (m, 2H), 0.98 (t, J = 6.0 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 414 (M+1)⁺.

화합물 A60: 2-부톡시-7-(4-((1-에틸피롤리딘-3-일)옥시)-2-플루오로벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(4-((1-ethylpyrrolidin-3-yl)oxy)-2- fluoro benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 2-플루오로-4-(피롤리딘-3-일옥시)벤즈알데히드 하이드로클로라이드

HCl/디옥산(4M, 3 mL) 중 tert-부틸 3-(3-플루오로-4-포르밀페녹시)피롤리딘-1-카르복실레이트(500 mg, 1.6 mmol)의 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 농축하여 HCl 염의 생성물을 백색 고체로서 얻었다(400mg, 100%). MS: M/e 210 (M+1)⁺.

단계 B: 4-((1-에틸피롤리딘-3-일)옥시)-2-플루오로벤즈알데히드

요오도에탄(500mg, 1.6mmol)을 DMF(10mL) 중 2-플루오로-4-(피롤리딘-3-일옥시)벤즈알데히드 염산염(400mg, 1.6mmol) 및 K₂CO₃(442mg, 3.2mmol)의 혼합물에 첨가하였다. 용액을 실온에서 밤새 교반하고, 물(10mL)로 용리하고, 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 CombiFlash(PE:EA=1:1에서 EA)로 추가 정제하여 순수한 생성물(133mg, 34%)을 얻었다. MS: M/e 238 (M+1)⁺.

단계 C: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-((1-에틸피롤리딘-3-일)옥시)-2-플루오로페닐)메탄올

THF(8mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(100mg, 0.2mmol)의 냉각된 용액에 -78℃에서(N₂로 퍼징됨) n-BuLi(1.6M, 0.3mL)를 적가하였다. -78℃에서 30분 동안 교반한 후, THF(2 mL) 중 4-((1-에틸피롤리딘-3-일)옥시)-2-플루오로벤즈알데히드(68mg, 0.3mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 이 온도에서 30분 동안 교반한 다음, 실온으로 2시간 동안 가온하였다. 용액을 NH₄Cl 용액(5mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 prep-TLC(DCM:MeOH=8:1)로 추가 정제하여 생성물(78mg, 60%)을 얻었다. MS: M/e 685 (M+1)⁺.

단계 D: 2-부톡시-7-(4-((1-에틸피롤리딘-3-일)옥시)-2-플루오로벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A60 )

트리에틸실란(2mL) 및 트리플루오로아세트산(2mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-((1-에틸피롤리딘-3- 일)옥시)-2-플루오로페닐)메탄올(78mg, 0.1mmol)의 용액을 80℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 증발시켜 잔류물을 얻었고, 이를 prep-TLC(DCM:MeOH=8:1)로 정제하여 생성물(18mg, 38%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.15 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.18 (t, J=8.0Hz, 1H), 6.75 (dd, J=12.0Hz, J ₂=4.0Hz, 1H), 6.66 (d, J=8.0Hz, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.19 (t, J=8.0Hz, 2H), 4.07 (s, 2H), 2.79 (s, 1H), 2.71 - 2.65 (m, 2H), 2.44 - 2.30 (m, 3H), 2.29 - 2.21 (m, 1H), 1.75 - 1.63 (m, 3H), 1.44 - 1.35 (m, 2H), 1.02 (t, J=8.0Hz, 3H), 0.92 (t, J=8.0Hz, 3H) ppm. MS: M/e 429 (M+1)⁺.

화합물 A61: 2-부톡시-7-(2-플루오로-4-(피롤리딘-3-일옥시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(2-fluoro-4-(pyrrolidin-3-yloxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸 3-(3-플루오로-4-포르밀페녹시)피롤리딘-1-카르복실레이트

DMF(20mL) 중 2-플루오로-4-하이드록시벤즈알데히드(1g, 7.1mmol), tert-부틸 3-브로모피롤리딘-1-카르복실레이트(2.7g, 10.7mmol) 및 Cs₂CO₃(4.6g, 14.2mmol)의 용액을 80℃에서 밤새 가열하였다. 용액을 여과하고, 여액에 물(10mL)을 첨가하고, 에틸 아세테이트(20mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 건조하고 농축하고 CombiFlash(PE:EA=20%)로 정제하여 생성물을 무색 오일(1.1g, 50%)로 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 10.21 (s, 1H), 7.83 (t, J=8.0Hz, 1H), 6.75 (dd, J=8.0, 4.0Hz, 1H), 6.62 (dd, J=12.0, 4.0Hz, 1H), 4.95 (s, 1H), 3.67 - 3.50 (m, 4H), 2.20 (d, J=8.0Hz, 2H), 1.48 (s, 9H) ppm. MS: M/e 310 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 3-(4-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-3-플루오로페녹시)피롤리딘-1-카르복실레이트

THF(8mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.29mmol)의 냉각된 용액에 -78℃에서(N₂로 퍼징됨)에서, n-BuLi(1.6 M, 0.5 mL)를 적가하였다. -78℃에서 30분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 tert-부틸 3-(3-플루오로-4-포르밀페녹시)피롤리딘-1-카르복실레이트(132mg, 0.43mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 이 온도에서 30분 동안 교반한 다음, 밤새 실온으로 가온하였다. 용액을 NH₄Cl 용액(5mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 CombiFlash(PE:EA=1:1)로 추가 정제하여 생성물(110mg, 51%)을 얻었다. MS: M/e 757 (M+1)⁺.

단계 C: 2-부톡시-7-(2-플루오로-4-(피롤리딘-3-일옥시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A61 )

트리에틸실란(2mL) 및 트리플루오로아세트산(2mL) 중 tert-부틸 3-(4-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-3-플루오로페녹시)피롤리딘-1-카르복실레이트(110mg, 0.15mmol)의 용액을 80℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 증발시켜 잔류물을 얻었고, 이를 prep-HPLC로 정제하여 생성물(33mg, 57%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.15 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.18 (t, J=8.0Hz, 1H), 6.77 - 6.66 (m, 2H), 4.81 (s, 1H), 4.19 (t, J=8.0Hz, 2H), 4.06 (s, 2H), 3.04 - 3.01 (m, 1H), 2.82 - 2.71 (m, 3H), 1.98 - 1.95 (m, 1H), 1.72 - 1.63 (m, 3H), 1.41 - 1.37 (m, 2H), 0.92 (t, J=8.0Hz, 3H) ppm. MS: M/e 401 (M+1)⁺.

화합물 A62: 7-(4-((1H-1,2,4-트리아졸-1-일)메틸)벤질)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(7-(4-((1H-1,2,4-triazol-1-yl)methyl)benzyl)-2-butoxyimidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 4-((1H-1,2,4-트리아졸-1-일)메틸)벤즈알데히드

아세톤(5mL) 중 4-(브로모메틸)벤즈알데히드(200mg, 1mmol) 및 K₂CO₃(200mg, 1.5mmol)의 용액에 1H-1,2,4-트리아졸(75mg, 2.2mmol)을 첨가하였다. 그 다음 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 물(50mL)로 희석하고, EtOAc(60mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하고, 잔류물을 콤비-플래시로 정제하여 목적 화합물(130mg, 69%)을 얻었다. MS: M/e 188 (M+1)⁺.

단계 B: (4-((1H-1,2,4-트리아졸-1-일)메틸)페닐)(4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메탄올

THF(8mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(200mg, 0.38mmol)의 용액에 n-BuLi(0.48mL, 1.6mmol)의 용액을 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(1 mL) 중 단계 A의 생성물(107mg, 0.57mmol)의 혼합물을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(40mL x 2)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(130mg, 조 물질)을 얻었다. MS: M/e 635 (M+1)⁺.

단계 C: 7-(4-((1H-1,2,4-트리아졸-1-일)메틸)벤질)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A62 )

TFA(3mL) 중 단계 B의 생성물(60mg, 조 물질)의 혼합물에 Et₃SiH(0.5 mL)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 85℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 농축 건조시키고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하였다. 수집된 분획을 NaHCO₃용액으로 염기성화하고, DCM(50mL)으로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하여 목적 화합물(25mg, 2단계에 대해 17%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.62 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.34 - 7.27 (m, 3H), 7.19 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.36 (s, 2H), 4.17 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.12 (s, 2H), 1.72 - 1.59 (m, 2H), 1.46 - 1.30 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 379 (M+1)⁺.

화합물 A63: 2-부톡시-7-(4-(3-(메틸아미노)프로폭시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(4-(3-(methylamino)propoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸 (3-(4-포르밀페녹시)프로필)(메틸)카르바메이트

THF(8mL) 중 4-하이드록시벤즈알데하이드(0.61g, 5mmol), tert-부틸(3-하이드록시프로필)(메틸)카바메이트(0.95g, 5mmol) 및 PPh₃(1.96g, 7.5mmol)의 용액에 톨루엔 용액(3.7g, 7.5mmol) 중 40% DIAD를 적가하였다. 그 다음 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 물(50mL)로 희석하고, EtOAc(40mL x 2)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하고, 잔류물을 콤비 플래시로 정제하여 목적 화합물(0.71g, 48%)을 얻었다. MS: M/e 238 (M+H - t-Bu)⁺.

단계 B: tert-부틸(3-(4-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)페녹시)프로필)(메틸)카르바메이트

THF(8mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(200mg, 0.38mmol)의 용액에 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 n-BuLi(0.4mL, 0.57mmol) 용액을 적가하였다. 1시간 후, THF(1mL) 중 단계 A의 생성물(168mg, 0.57mmol)의 혼합물을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 0.5시간 동안 교반한 다음, 밤새 실온으로 가온하였다. 반응물을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(50 mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC(EA/PE = 1/2)로 정제하여 목적 화합물(130mg, 조 물질)을 얻었다. MS: M/e 741 (M+1)⁺.

단계 C: 2-부톡시-7-(4-(3-(메틸아미노)프로폭시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A63 )

TFA(3mL) 중 단계 B의 생성물(130mg, 조 물질)의 혼합물에 Et₃SiH(1mL)를 첨가하였다. 반응물을 85℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물을 prep-HPLC로 정제하였다. 수집된 분획을 NaHCO₃용액으로 염기성화하고, DCM(60mL x 2)으로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하여 목적 화합물(36mg, 2단계에 대해 25%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.12 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.20 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.83 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.20 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.05 (s, 2H), 3.96 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.63 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.30 (s, 3H), 1.90 - 1.79 (m, 2H), 1.73 - 1.62 (m, 2H), 1.46 - 1.34 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.6 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 385 (M+1)⁺.

화합물 A64: N²-(푸란-2-일메틸)-7-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2,4-디아민(N²-(furan-2-ylmethyl)-7-(4-(pyrrolidin-1-ylmethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazine-2,4-diamine)

단계 A: 7-브로모-N2-(푸란-2-일메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2,4-디아민

n-BuOH(10mL) 중 7-브로모-2-클로로이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(500mg, 2mmol), 푸란-2-일메탄아민(388mg, 4mmol) 및 DIEA(516mg, 4mmol)를 120℃의 밀봉된 튜브에서 밤새 가열하였다. 감압 농축한 후, 잔류물을 물(10mL)로 희석하고 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하였다. 유기층을 건조하고, 농축하고, CombiFlash(PE:EA=50%)로 정제하여 생성물(180mg, 29%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.86 (br.s, 2H), 7.54 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.02 (t, J=8.0Hz, 1H), 6.37 (d, J=4.0Hz, 1H), 6.30 (d, J=4.0Hz, 1H), 4.38 (d, J=4.0Hz, 2H) ppm. MS: M/e 309 (M+1)⁺

단계 B: tert -부틸 (7-브로모-2-((tert-부톡시카르보닐)(푸란-2-일메틸)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-일)(tert-부톡시카르보닐)카르바메이트

DCM(10mL) 중 7-브로모-N²-(푸란-2-일메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2,4-디아민(150mg, 0.5mmol), (Boc)₂O(327mg, 1.5mmol) 및 DMAP(31mg, 0.25mmol)의 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 용액을 농축하고 CombiFlash(PE:EA=20%)로 정제하여 순수한 생성물(270mg, 91%)을 얻었다. MS: M/e 609 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (tert-부톡시카르보닐)(2-((푸란-2-일메틸)아미노)-7-(하이드록시(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-일)카바메이트

THF(8mL) 중 tert-부틸 (7-브로모-2-((tert-부톡시카르보닐)(푸란-2-일메틸)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-일)(tert-부톡시카보닐)카바메이트(150mg, 0.25mmol)의 냉각된 용액에 -78℃에서(N₂로 퍼징됨)에서 n-BuLi(1.6M, 0.4mL)를 적가하였다. -78℃에서 30분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 4-(피롤리딘-1-일메틸)벤즈알데히드(70mg, 0.37mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 이 온도에서 30분 동안 교반한 다음, 밤새 실온으로 가온하였다. 용액을 NH₄Cl 용액(5mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 CombiFlash(DCM:MeOH=7:1)로 추가 정제하여 순수한 생성물(15mg, 10%)을 얻었다. MS: M/e 620 (M+1)⁺.

단계 D: N2-(푸란-2-일메틸)-7-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2,4-디아민( 화합물 A64 )

트리에틸실란(0.5mL) 및 트리플루오로아세트산(0.5mL)을 DCM(1mL) 중 tert-부틸(tert-부톡시카르보닐)(2-((푸란-2-일메틸)아미노)-7-(히드록실(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-일)카바메이트(15mg, 0.02mmol)의 혼합물에 첨가하고 40℃에서 2시간 동안 가열하였다. 용매를 증발시켜 잔류물을 얻었고, 이를 prep-HPLC로 정제하여 생성물(3mg, 31%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.47 - 7.41 (m, 6H), 6.32 (d, J=4.0Hz, 1H), 6.21 (d, J=4.0Hz, 1H), 4.46 (s, 2H), 4.33 (s, 2H), 4.26 (s, 2H), 3.19 - 3.44 (m, 2H), 3.17 - 3.13 (m, 2H), 2.22 - 2.15 (m, 2H), 2.02 - 1.93 (m, 2H) ppm. MS: M/e 404 (M+1)⁺.

화합물 A65: 4-아미노-7-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-올(4-amino-7-(4-(pyrrolidin-1-ylmethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-ol)

단계 A: 7-브로모-2-(푸란-2-일메톡시)-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민

THF(20mL) 중 푸란-2-일메탄올(73mg, 0.75mmol)의 교반된 용액에 NaH(80mg, 2mmol, 오일 중 60%)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 7-브로모-2-클로로-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(243mg, 0.5mmol)을 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 6시간 동안 교반하였다. 혼합물을 H₂O(20 mL)로 희석하고 EtOAc(10ml X3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물(150mg, 57.4%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS: M/e 550 (M+1)⁺.

단계 B: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-(푸란-2-일메톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올

THF(10mL) 중 7-브로모-2-(푸란-2-일메톡시)-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(120mg, 0.22mmol)의 교반된 용액에 -78℃로 냉각하고 질소 분위기 하에 n-BuLi(헥산 중 1.6M, 0.55mmol, 0.34mL)를 적가하였다. 50분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 4-(피롤리딘-1-일메틸)벤즈알데히드(66mg, 0.33mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액에 붓고 EtOAc(15 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(30mg, 20.6%)을 얻었다. MS: M/e 661(M+1)⁺.

단계 C: 4-아미노-7-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-올

TFA(3mL) 및 Et₃SiH(3mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-(푸란-2-일메톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올(30mg, 0.045mmol)을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 TFA 및 Et₃SiH를 제거하였다. 잔류물에 TFA(5mL)를 첨가하고 85℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 생성물(13mg, 88%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6)) δ 9.83 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.44 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.34 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.26 (s, 1H), 4.32 (s, 2H), 4.17 (s, 2H), 3.34 (s, 2H), 3.07 (s, 2H), 1.96 - 1.91 (m, 2H), 1.86 - 1.75 (m, 2H) ppm. MS: M/e 325 (M+1)⁺.

화합물 A66: 2-부톡시-7-(4-(1-메틸피롤리딘-3-일)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(4-(1-methylpyrrolidin-3-yl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(1-메틸피롤리딘-3-일))페닐)메탄올

THF(10mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(105mg, 0.2mmol)의 교반된 용액에 질소 분위기 하에 -78℃로 냉각하고 n-BuLi(헥산 중 1.6M, 0.5mmol, 0.31mL)를 적가하였다. 50분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 4-(1-메틸피롤리딘-3-일)벤즈알데히드(43mg, 0.2mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액에 붓고 EtOAc(15mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 진공에서 농축시켜 생성물(30mg, 23.5%)을 얻었다. MS: M/e 638 (M+1)⁺.

단계 B: 2-부톡시-7-(4-(1-메틸피롤리딘-3-일)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A66 )

TFA(3mL) 및 Et₃SiH(3mL) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(1-메틸피롤리딘-3-일)페닐)메탄올(30mg, 0.047mmol)의 용액을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 TFA 및 Et₃SiH를 제거하였다. 잔류물에 TFA(5mL)를 첨가하고 85℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 생성물(5mg, 28%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6)) δ 8.12 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.25 - 7.19 (m, 4H), 4.20 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.09 (s, 2H), 3.11- 2.95 (m, 1H), 2.82- 2.75 (m, 2H), 2.59 - 5.52 (m, 2H), 2.44 (s, 3H), 2.26 - 2.18 (m, 1H), 1.79 - 1.61 (m, 3H), 1.42- 1.37 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.4 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 381 (M+1)⁺.

화합물 A67: N²-부틸-7-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2,4-디아민(N²-butyl-7-(4-(pyrrolidin-1-ylmethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazine-2,4-diamine)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-(부틸아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올

THF(10mL) 중 7-브로모-N²-부틸-N4,N4-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2,4-디아민(150mg, 0.285mmol)의 교반된 용액에 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 0.35mL, 0.428mmol)를 적가하였다. N₂하에서 1시간 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 4-(피롤리딘-1-일메틸)벤즈알데히드(87.4mg, 0.428mmol)의 용액을 -78℃에서 적가하였다. 첨가 후, 반응물을 3시간 동안 교반하였다. 반응을 aq. NH₄Cl로 켄칭하고, EtOAc(10mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 농축시키고, 정제용 TLC(CH₂Cl₂:MeOH=10:1)로 정제하여 목적 화합물(65mg, 35.8%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS: M/e 636 (M+1)⁺.

단계 B: N ² -부틸-7-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2,4-디아민

Et₃SiH/TFA(0.5mL/3mL) 중 단계 A의 생성물(65mg, 0.102mmol)의 혼합물에 85℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여 잔류물을 얻었고, 이를 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(26mg, 67.1%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 9.72 (br.s, 1H), 7.69 (s, 2H), 7.46 - 7.37 (m, 4H), 7.36 - 7.28 (m, 1H), 6.45 (s, 1H), 4.30 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.14 (s, 2H), 3.38 - 3.26 (m, 2H), 3.16 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.15 - 3.02 (m, 2H), 2.05 - 1.96 (m, 2H), 1.90 - 1.76 (m, 2H), 1.56 - 1.45 (m, 2H), 1.39 - 1.26 (m, 2H), 0.89 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 380 (M+1)⁺.

화합물 A68: 2-(피리딘-3-일메톡시)-7-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-(pyridin-3-ylmethoxy)-7-(4-(pyrrolidin-1-ylmethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 7-브로모-N,N-비스(4-메톡시벤질)-2-(피리딘-3-일메톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민

THF(8mL) 중 NaH(80mg, 2mmol)의 현탁액에 피리딘-3-일메탄올(218mg, 2mmol)을 첨가하였다. 실온에서 30분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 7-브로모-2-클로로-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(240mg, 0.5mmol)의 용액을 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 80℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하고, 물(30mL)로 희석하고, EtOAc(50mL x 2)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하고, 잔류물을 콤비-플래시로 정제하여 표적을 제공하였다. 화합물(250mg, 89%). ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.84 (s, 1H), 8.59 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.51 - 7.45 (m, 2H), 7.17 (d, J = 8.4 Hz, 4H), 6.85 (d, J = 8.0 Hz 4H), 5.60 (s, 2H), 5.46 (s, 2H), 4.83 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.80 (s, 3H) ppm. MS: M/e 561 (M+1)⁺.

단계 B: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-(피리딘-3-일메톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올

THF(8mL) 중 단계 A의 생성물(250mg, 0.44mmol)의 용액에 n-BuLi(0.41mL, 0.66mmol)의 용액을 온도를 -75 ~ -65℃로 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(1mL) 중 4-(피롤리딘-1-일메틸)벤즈알데히드(100mg, 0.53mmol)의 용액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 실온으로 5시간 동안 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(50 mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(80mg, 조 물질)을 얻었다. MS: M/e 672 (M+1)⁺.

단계 C: 2-(피리딘-3-일메톡시)-7-(4-(피롤리딘-1일메틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A68 )

TFA(3mL) 중 단계 B의 생성물(80mg, 조 물질)의 혼합물에 Et₃SiH(1 mL)를 첨가하였다. 반응물을 85℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 농축하고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하였다. 수집된 분획을 NaHCO₃용액으로 염기성화하고, DCM(60mL)으로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하여 목적 화합물(8mg, 2단계에 대해 5%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, CD₃OD) δ 8.66 (s, 1H), 8.49 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.94 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.50 - 7.39 (m, 1H), 7.37 - 7.20 (m, 5H), 5.39 (s, 2H), 4.21 (s, 2H), 3.67 (s, 2H), 2.71 - 2.50 (m, 4H), 1.91 - 1.75 (m, 4H) ppm. MS: M/e 416 (M+1)⁺.

화합물 A69: 7-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)-2-(4,4,4-트리플루오로부톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(7-(4-(pyrrolidin-1-ylmethyl)benzyl)-2-(4,4,4-trifluorobutoxy)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 7-브로모-N,N-비스(4-메톡시벤질)-2-(4,4,4-트리플루오로부톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민

나트륨(0.4g)을 교반된 4,4,4-트리플루오로부탄-1-올(5g)에 여러 부분으로 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 위의 투명한 용액을 취하여 7-브로모-2-클로로-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(0.3 g, 0.61mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 80℃로 가열하고 1시간 동안 교반하였다. 완료 후, 혼합물을 H₂O(20 ml)로 켄칭한 다음, DCM(20ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 H₂O(10ml)로 세척하고, 건조시키고 감압하에 농축시켰다. 생성된 잔류물을 PE 중 0-15% EA를 사용하는 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물(0.2g, 56%)을 밝은 황색 고체로서 수득하였다. MS: M/e 580 (M+1)⁺.

단계 B: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-(4,4,4-트리플루오로부톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올

THF(15ml) 중 7-브로모-N,N-비스(4-메톡시벤질)-2-(4,4,4-트리플루오로부톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(200mg, 0.34mmol)의 교반된 용액에 -78℃, N₂ 분위기 하에, n-BuLi(1.6M, 0.54ml, 0.86mmol)를 첨가하였다. 용액을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. THF(2ml) 중 4-(피롤리딘-1-일메틸)벤즈알데히드(97mg, 0.51mmol)를 상기 용액에 적가하였다. 첨가한 후, 용액을 자연적으로 실온으로 가온한 다음, 3시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 H₂O(20ml)로 켄칭한 다음, DCM(20ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 H₂O(10ml)로 세척하고, 건조하고 감압하에 농축하여 조 생성물을 황색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. MS: M/e 691 (M+1)⁺.

단계 C: 7-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)-2-(4,4,4-트리플루오로부톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A69 )

TFA(6ml) 및 트리에틸실란(2ml) 중 (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-(4,4,4-트리플루오로부톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올(조 물질)의 용액을 80℃에서 24시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 EA(30 ml)에 용해시키고 aq. NaHCO₃(포화, 25ml) 및 염수(20ml)로 세척하였다. 유기상을 Na₂SO₄상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성된 잔류물을 DCM:MeOH(10:1)를 사용한 prep-TLC에 의해 정제하여 생성물(15.11mg)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.21 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.55 - 7.30 (m, 5H), 4.47 - 3.86 (m, 6H), 3.30 - 2.70 (m, 4H), 2.46 - 2.32 (m, 2H), 2.03 - 1.71 (m, 6H) ppm. MS: M/e 435 (M+1)⁺.

화합물 A70: 7-(3-(아미노메틸)벤질)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(7-(3-(aminomethyl)benzyl)-2-butoxyimidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 3-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)벤조니트릴

THF(15ml) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.29mmol)의 교반된 용액에 N₂분위기 하에 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 0.22ml, 0.35mmol)를 첨가하였다. 용액을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. THF(2ml) 중 3-포르밀벤조니트릴(37.4mg, 0.29mmol)을 상기 용액에 적가하였다. 첨가 후, 용액을 자연적으로 실온으로 가온한 다음, 3시간 동안 교반하였다. 완료된 후, 반응 혼합물을 H₂O(20ml)로 켄칭한 다음, DCM(20ml X 3)으로 추출하였다. 유기상을 H₂O(10ml)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 감압하에 농축하여 조 생성물을 회백색 반고체(180mg)로 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. MS: M/e 579 (M+1)⁺.

단계 B: (3-(아미노메틸)페닐)(4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메탄올

THF(15ml) 중 3-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)벤조니트릴(180mg, 0.31mmol)의 교반된 용액에 LiAlH₄(24mg, 0.63mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 66℃에서 밤새 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 얼음물에 붓고 EA(15ml X 2)로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축하여 조 생성물을 밝은-황색 반고체로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. MS: M/e 583 (M+1)⁺.

단계 C: 7-(3-(아미노메틸)벤질)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A70 )

TFA(6ml) 및 트리에틸실란(2ml) 중 (3-(아미노메틸)페닐)(4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메탄올(조 물질)의 용액을 80℃에서 24시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 EA(30 ml)에 용해시키고 aq. NaHCO₃(포화, 25ml) 및 염수(20ml)로 세척하였다. 유기상을 Na₂SO₄상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성된 잔류물을 DCM:MeOH(10:1)를 사용하는 prep-TLC에 의해 정제한 다음, prep-HPLC로 정제하여 생성물(5.04mg)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.25 - 7.98 (m, 4H), 7.41 - 7.27 (m, 5H), 4.20 (t, J = 8Hz, 2H), 4.16 (s, 2H), 4.02 - 3.94 (m, 2H), 1.72 - 1.53 (m, 2H), 1.47 - 1.28 (m, 2H), 0.97 - 0.84 (m, 3H) ppm. MS: M/e 327 (M+1)⁺.

화합물 A71: 3-(4-(4-((4-아미노-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)벤질)피페라진-1-일)프로판-1-올(3-(4-(4-((4-amino-2-butoxyimidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)benzyl)piperazin-1-yl)propan-1-ol)

단계 A: 에틸 tert-부틸 4-(4-포르밀벤질)피페라진-1-카르복실레이트

CH₃CN (50mL) 중 4-(클로로메틸)벤즈알데히드(1.8g, 11.6mmol), tert-부틸 피페라진-1-카르복실레이트(2.6g, 13.9mmol) 및 K₂CO₃ (3.2g, 23.2mmol)의 혼합물을 50℃에서 밤새 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 물(100mL)로 희석하고 EA(80mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔사를 콤비플래시로 정제하여 표제 화합물(2g, 수율: 56.7%)을 황색 오일 형태로 얻었다. MS: M/e 305 (M+1)⁺.

단계 B: 4-(피페라진-1-일메틸)벤즈알데히드 염화수소염

단계 A의 생성물(2g, 6.6mmol)을 실온에서 HCl/EA(4M, 20mL)에 용해시켰다. 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 황색 고체로서의 잔류물(2HCl 염)을 다음 단계에 직접 사용하였다. MS: M/e 205 (M+1)⁺.

단계 C: 4-((4-(3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로필)피페라진-1-일)메틸)벤즈알데히드

DMF(10mL) 중 단계 B의 생성물(508mg, 1.84mmol), tert-부틸(3-클로로프로폭시)디메틸실란(574mg, 2.76mmol), K₂CO₃(1.02g, 7.36mmol) 및 KI(61mg, 0.37mmol)의 혼합물을 12시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 물(20mL)로 켄칭하고 EA(20mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 콤비플래쉬로 정제하여 표제 화합물(440mg, 수율: 63.6%)을 황색 오일로서 수득하였다. MS: M/e 377 (M+1)⁺.

단계 D: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-((4-(3-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)프로필)피페라진-1-일)메틸)페닐)메탄올

THF(2mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(140mg, 0.27mmol)의 교반된 용액에 n-BuLi(1.6M, 0.21mL)를 N₂ 분위기 하에 -78℃에서 첨가하였다. 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, THF(0.3 mL) 중 단계 C의 생성물(150mg, 0.40mmol)을 -78℃에서 시스템에 첨가하였다. 반응물을 -78℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온으로 가온하고 밤새 교반하였다. 반응을 실온에서 포화 NH₄Cl 수용액으로 켄칭하였다. 혼합물을 EA(10mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 콤비플래시로 정제하여 표제 화합물(160mg, 수율: 72.1%)을 황색 오일로서 수득하였다. MS: M/e 824 (M+1)⁺.

단계 E: 3-(4-(4-((4-아미노-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)벤질)피페라진-1-일)프로판-1-올( 화합물 A71 )

단계 D의 생성물(80mg, 0.10mmol)을 Et₃SiH(0.5mL) 및 CF₃COOH(0.1mL)에 용해시켰다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 실온에서 CF₃COOH(0.5mL)에 용해시켰다. 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 prep-HPLC로 정제하여 표제 화합물(6.5mg, 수율: 14.4 %)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.25 - 7.95 (m, 2H), 7.36 - 7.13 (m, 5H), 4.31 - 4.17 (m, 2H), 4.12 (s, 2H), 3.51 - 3.41 (m, 4H), 2.50 - 2.28 (m, 8H), 1.73 - 1.54 (m, 4H), 1.46 - 1.34 (m, 2H), 1.29 - 1.06 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 454 (M+1)⁺.

화합물 A72: 2-부톡시-7-((5-메틸-6-(피페리딘-4-일옥시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-((5-methyl-6-(piperidin-4-yloxy)pyridin-3-yl)methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸 4-((5-브로모-3-메틸피리딘-2-일)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트

DMA(15mL) 중 NaH(0.3g, 7.5mmol)의 용액에 tert-부틸 4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트(1.1g, 5.5mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 이어서, DMA(5mL) 중 5-브로모-2-클로로-3-메틸피리딘(1.1g, 5mmol)의 용액을 첨가하고 생성 혼합물을 N₂ 보호 하에 80℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(50mL)로 희석하고, EtOAc(60mL x 2)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축하고, 잔류물을 콤비-플래시로 정제하여 목적 화합물(1.3g, 70%)을 얻었다. MS: M/e 371 (M+H)⁺.

단계 B: tert-부틸 4-((5-포르밀-3-메틸피리딘-2-일)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트

THF(15mL) 중 단계 A의 생성물(1.1g, 3mmol)의 교반된 용액에 온도를 -75~-65℃로 유지하면서 n-BuLi(2.81mL, 4.5mmol) 용액을 적가하였다. 1시간 후, THF(1mL) 중 DMF(266mg, 3.6mmol)의 용액을 적가하고 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(60 mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 콤비-플래시로 정제하여 목적 화합물(900mg, 93%)을 얻었다. MS: M/e 321 (M+H)⁺.

단계 C: tert-부틸4-((5-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-3-메틸피리딘-2-일)옥시)피페리딘-1-카르복실레이트

THF(8mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(200mg, 0.38mmol)의 용액에 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 n-BuLi(0.6mL, 0.95mmol) 용액을 적가하였다. 1시간 후, THF(1mL) 중 단계 B의 생성물(150mg, 0.456mmol)의 혼합물을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 실온으로 5시간 동안 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(50 mL)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 콤비-플래시로 정제하여 목적 화합물(180mg, 조 물질)을 얻었다. MS: M/e 768 (M+1)⁺.

단계 D: 2-부톡시-7-((5-메틸-6-(피페리딘-4-일옥시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A72 )

TFA(12mL) 중 단계 C의 생성물(180mg, 조 물질)의 혼합물에 Et₃SiH(4mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 85℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 TFA(8mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 85℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물을 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(120mg, 2단계에 대해 60%)을 얻었다. ¹HNMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.71 - 8.35 (m, 2H), 8.17 (s, 2H), 7.94 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.45 - 7.30 (m, 1H), 5.31 - 5.16 (m, 1H), 4.21 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.06 (s, 2H), 3.35 - 3.05 (m, 4H), 2.11 (s, 3H), 2.11 - 2.01 (m, 2H), 1.95 - 1.80 (m, 2H), 1.74 - 1.60 (m, 2H), 1.44 - 1.32 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.6 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 412 (M+1)⁺.

화합물 A73: (4-아미노-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-메톡시피리딘-2-일)메탄올((4-amino-2-butoxyimidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)(4-methoxypyridin-2-yl)methanol)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-메톡시피리딘-2-일)메탄올

THF(10mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.286mmol)의 교반된 용액에 n-BuLi(1.6M, 0.45mL, 0.715mmol)를 -78℃에서 적가하였다. N₂하에서 1시간 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 4-메톡시피콜린알데히드(58.6mg, 0.48mmol)의 용액을 -78℃에서 적가하고 반응물을 4시간 동안 교반하였다. 반응물을 aq. NH₄Cl로 켄칭하고, EtOAc(10mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 농축시키고, prep-TLC(석유 에테르/EtOAc=2:1)로 정제하여 목적 화합물(42mg, 25%)을 무색 오일로서 수득하였다. MS: M/e 585 (M+1)⁺.

단계 B: (4-아미노-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-메톡시피리딘-2-일)메탄올( 화합물 A73 )

TFA/Et₃SiH(3mL/0.5mL) 중 단계 A의 생성물(42mg, 0.072mmol)의 혼합물을 85℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여 잔류물을 얻었고, 이를 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(5mg, 20%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.25 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.26 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.88 - 6.86 (m, 1H), 6.14 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 6.02 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 4.18 - 4.04 (m, 2H), 3.85 (s, 3H), 1.71 - 1.53 (m, 2H), 1.43 - 1.31 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 345 (M+1)⁺.

화합물 A74: (4-아미노-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(피리딘-2-일)메탄올((4-amino-2-butoxyimidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)(pyridin-2-yl)methanol)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(피리딘-2-일)메탄올

THF(15mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(300mg, 0.572mmol)의 교반된 용액에 n-BuLi(1.6M, 0.9mL, 1.43mmol)를 -78℃에서 적가하였다. N₂하에서 1시간 동안 교반한 후, THF(2 mL) 중 피콜린알데하이드(92mg, 0.856mmol)의 용액을 -78℃에서 적가하고 반응물을 3시간 동안 교반하였다. 반응을 aq. NH₄Cl로 켄칭하고, EtOAc(30mL x 2)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄상에서 건조시키고, 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=3:1)로 정제하여 목적 화합물(240mg, 75.7%)을 무색 시럽으로서 수득하였다. MS: M/e 585 (M+1)⁺.

단계 B: (4-아미노-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(피리딘-2-일)메탄올( 화합물 A74 )

TFA/Et₃SiH(3mL/0.5mL) 중 단계 A의 생성물(100mg, 0.18mmol)의 혼합물을 85℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여 잔류물을 얻었고, 이를 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(6mg, 10.6%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) 8.45 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.17 - 8.09 (m, 2H), 7.84 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.31 - 7.25 (m, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.17 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 6.06 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 4.16 - 4.02 (m, 2H), 1.69 - 1.52 (m, 2H), 1.47 - 1.29 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.4 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 315 (M+1)⁺.

화합물 A75: 2-부톡시-7-(1-(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)에틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-(1-(4-(pyrrolidin-1-ylmethyl)phenyl)ethyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올

THF(8mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(200mg, 0.38mmol)의 냉각된 용액에 -78℃에서(N₂로 퍼징됨) n-BuLi(1.6M, 0.6mL)를 적가하였다. -78℃에서 30분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 4-(피롤리딘-1-일메틸)벤즈알데히드(100mg, 0.57mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 이 온도에서 30분 동안 교반한 다음, 실온으로 2시간 동안 가온하였다. 반응물을 NH₄Cl 용액(2mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(10 mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 Combi-Flash(DCM:MeOH=6%)에 의해 추가로 정제하여 순수한 생성물(170mg, 70%)을 얻었다. MS: M/e 637 (M+1)⁺.

단계 B: (4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄온

데스-마틴 시약(229mg, 0.54mmol)을 0℃에서 THF(3mL) 중 단계 A의 생성물(170mg, 0.27mmol)의 용액에 조금씩 첨가하였다. 실온에서 4시간 동안 교반한 후, TLC는 반응이 완료된 것으로 나타났다. 용액을 NH₄Cl 용액(5mL)으로 켄칭하고 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 CombiFlash(DCM:MeOH=5%)에 의해 추가로 정제하여 생성물(130mg, 76%)을 얻었다. MS: M/e 635 (M+1)⁺.

단계 C: 1-(4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)-1-(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)에탄-1-올

N₂ 분위기 하에 0℃에서 THF(3mL) 중의 단계 B의 생성물(30mg, 0.05mmol)의 용액을 CH₃MgBr(에테르 중의 3M, 0.2mL)로 적가하여 처리하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반한 다음, NH₄Cl 용액(5 mL)으로 켄칭하였다. 용액을 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하고, 염수(10mL)로 세척하고, 건조 및 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다. MS: M/e 651 (M+1)⁺.

단계 D: 2-부톡시-7-(1-(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)에틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A75 )

트리에틸실란(1mL) 및 트리플루오로아세트산(1mL) 중 1-(4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)-1-(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)에탄-1-올(25mg, 0.04mmol)의 용액을 80℃에서 1시간 동안 가열하였다. 용액을 농축하고, 트리플루오로아세트산(1mL)을 첨가하고, 80℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 증발시켜 잔류물을 얻고, 이를 NaHCO₃로 염기성화하고, 에틸 아세테이트(5mL)로 추출하고, 염수(5mL)로 세척하였다. 유기층을 건조시키고, 농축시키고, prep-HPLC로 정제하여 생성물(6mg, 40%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.74 (br.s, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.46 - 7.37 (m, 5H), 4.48 (q, J=8.0Hz, 1H), 4.29 (s, 2H), 4.14 - 4.08 (m, 2H), 3.33 (s, 2H), 3.07 - 3.04 (m, 2H), 2.03 - 2.01 (m, 2H), 1.85 - 1.82 (m, 2H), 1.68 - 1.59 (m, 5H), 1.42 - 1.32 (m, 2H), 0.91 (t, J=8.0Hz, 3H) ppm. MS: M/e 395 (M+1)⁺.

화합물 A76: 2-부톡시-7-((1-(피페리딘-3-일메틸)-1H-피라졸-4-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-butoxy-7-((1-(piperidin-3-ylmethyl)-1H-pyrazol-4-yl)methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸 3-(브로모메틸)피페리딘-1-카르복실레이트

tert-부틸 3-(하이드록시메틸)피페리딘-1-카르복실레이트(2.15g, 10mmol) 및 CBr₄(4.98g, 15mmol)를 실온에서 CH₂Cl₂(50mL)에 용해시키고 PPh₃(3.1g, 12mmol)를 첨가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 농축하여 잔류물을 얻었고, 이를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc = 20:1)로 정제하여 목적 화합물(2.3g, 82.7%)을 무색 오일로 얻었다. MS: M/e 278 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 3-((4-포르밀-1H-피라졸-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트

DMF(5 mL) 중 NaH(60%, 0.6g, 5mmol)의 교반된 현탁액에 DMF(3 mL) 중 1H-피라졸-4-카브알데히드(0.32 g, 3.3 mmol)의 용액을 0℃에서 첨가하였다. 30분 동안 교반한 후, DMF(3mL) 중 단계 A의 생성물(1.1g, 4mmol)의 용액을 첨가하였다. 그 다음 혼합물을 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 H₂O(20 mL)로 켄칭하고 EtOAc(20 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=10:1~1:1)로 정제하여 목적 화합물(420mg, 43.4%)을 무색 오일로서 수득하였다. MS: M/e 294 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 3-((4-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-부톡시이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-1H-피라졸-1-일)메틸)피페리딘-1-카르복실레이트

THF(10mL) 중 7-브로모-2-부톡시-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(150mg, 0.286mmol)의 용액에 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 0.44mL, 0.71mmol)를 적가하였다. 1시간 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 단계 B의 생성물(125mg, 0.428mmol)의 용액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 실온으로 1시간 동안 가온하였다. 반응을 sat.aq. NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(10mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 잔류물을 정제용 TLC(석유 에테르/EtOAc = 2:1)로 정제하여 목적 화합물(70mg, 33%)을 회백색 고체로서 수득하였다. MS: M/e 741 (M+1)⁺.

단계 D: 2-부톡시-7-((1-(피페리딘-3-일메틸)-1H-피라졸-4-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A76 )

Et₃SiH/TFA(0.5mL/3mL) 중 단계 C의 생성물(70mg, 0.095mmol)의 혼합물에 85℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여 잔류물을 얻었고, 이를 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(24mg, 63.4%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.10 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 4.22 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.93 (s, 2H), 3.88 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.80 - 2.76 (m, 1H), 2.70 - 2.66 (m, 1H), 2.44 - 2.34 (m, 1H), 2.23 - 2.13 (m, 1H), 1.92 - 1.83 (m, 1H), 1.75 - 1.63 (m, 2H), 1.56 - 1.46 (m, 2H), 1.48 - 1.36 (m, 2H), 1.33-1.22 (m, 1H), 1.06 - 0.96 (m, 1H), 0.93 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 385 (M+1)⁺.

화합물 A77: 7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)-2-(펜탄-2-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(7-((6-(2-(methylamino)ethoxy)pyridin-3-yl)methyl)-2-(pentan-2-yloxy)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸 (2-((5-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-(펜탄-2-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트

건조 THF(15mL) 중 N,N-비스(4-메톡시벤질)-2-(펜탄-2-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(754mg, 1.64mmol)의 교반된 용액에 -78℃에서 n-BuLi(2.05mL, 3.28mmol)를 적가하였다. 30분 동안 교반한 후, THF(5mL) 중 tert-부틸 (2-((5-포르밀피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트(550mg, 1.96mmol)의 용액을 적가하였다. 첨가 후, 반응물을 2시간 동안 교반하였다. 반응을 aq. NH₄Cl로 켄칭하고, EtOAc(30mL x 2)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄상에서 건조시키고, 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=2:1)로 정제하여 목적 화합물(256mg, 21%)을 갈색 시럽으로서 수득하였다. MS: M/e 742 (M+1)⁺.

단계 B: 7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)-2-(펜탄-2-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A77 )

TFA/Et₃SiH(3mL/3mL) 중 단계 A의 생성물(256mg, 0.345mmol)의 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여 잔류물을 얻었고, 이를 Prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(20mg)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.21 - 7.94 (m, 4H), 7.65 (dd, J = 8.5, 2.0 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.78 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.03 - 4.89 (m, 1H), 4.41 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 4.09 (s, 2H), 3.24 - 3.12 (m, 2H), 2.55 (s, 3H), 1.70 - 1.47 (m, 2H), 1.43 - 1.29 (m, 2H), 1.25 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.89 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 386 (M+1)⁺.

화합물 A78: 7-((5-메틸-6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)-2-(펜탄-2-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(7-((5-methyl-6-(2-(methylamino)ethoxy)pyridin-3-yl)methyl)-2-(pentan-2-yloxy)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸 (2-((5-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-(펜탄-2-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-3-메틸피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트

건조 THF(10mL) 중 N,N-비스(4-메톡시벤질)-2-(펜탄-2-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(461mg, 1mmol)의 교반된 용액에 -78℃에서 n-BuLi(1.25mL, 2mmol)를 적가하였다. 30분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 tert-부틸(2-((5-포르밀-3-메틸피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카바메이트(353mg, 1.2mmol)의 용액을 적가하였다. 첨가 후, 반응물을 밤새 교반하였다. 반응을 aq. NH₄Cl로 켄칭하고, EtOAc(30mL x 2)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=5:1~2:1)로 정제하여 목적 화합물(340mg, 45%)을 갈색 시럽으로 수득하였다. MS: M/e 756 (M+1)⁺.

단계 B: 7-((5-메틸-6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)-2-(펜탄-2-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A78 )

단계 A의 생성물(340mg, 0.45mmol)과 TFA/Et₃SiH(3mL/3mL)의 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여 잔류물을 얻었고, 이를 Prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(42mg)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆) δ 8.58 (br.s, 2H), 8.16 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.95 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.37 (s, 1H), 5.03-4.94(m, 1H), 4.49 - 4.44 (m, 2H), 4.07 (s, 2H), 3.38 - 3.29 (m, 2H), 2.64 (t, J = 5.6 Hz, 3H), 2.15 (s, 3H), 1.71 - 1.48 (m, 2H), 1.45 - 1.30 (m, 2H), 1.26 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.89 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 400 (M+1)⁺.

화합물 A79: 3-((4-아미노-7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2 -일)옥시)헥산-1-올(3-((4-amino-7-((6-(2-(methylamino)ethoxy)pyridin-3 yl)methyl) imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: 헥산-1,3-디올

THF(10mL) 중 LAH(0.76g, 20mmol)의 교반된 현탁액에 THF(5mL) 중 메틸 3-하이드록시헥사노에이트(1.46g, 10mmol)의 용액을 0℃에서 적가하였다. 첨가 후, 반응물을 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 H₂O(0.76mL), aq. NaOH(15%, 0.76mL)에 이어 H₂O(2.28mL)로 켄칭한 다음, 여과하였다. 여액을 농축하고 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=2:1~1:1)로 정제하여 목적 화합물(634mg, 53.7%)을 무색 오일로 얻었다.

단계 B: 1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)헥산-3-올

CH²Cl₂(15mL) 중의 단계 A의 생성물(634mg, 5.37mmol)의 교반된 용액에 이미다졸(730mg, 10.74mmol)을 첨가한 다음, CH₂Cl₂(3mL) 중의 TBS-Cl(730mg, 4.83mmol) 용액을 0℃에서 적가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여 잔류물을 얻었고, 이를 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc = 1:1)로 정제하여 목적 화합물(1.1g, 88.2%)을 무색 오일로 얻었다.

단계 C: 7-브로모-2-((1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민

THF(10mL) 중 단계 B의 생성물(464mg, 2mmol)의 교반된 용액에 NaH(60%, 80mg)를 첨가하였다. 30분 동안 교반한 후, 7-브로모-2-클로로-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(488mg, 1mmol)가 추가되었다. 첨가 후, 반응물을 60℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 H₂O(20mL)로 처리하고, EtOAc(15mL x 2)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄상에서 건조시키고, 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/EtOAc=10:1)로 정제하여 목적 화합물(530mg, 77.5%)을 무색 오일로서 수득하였다. MS: M/e 684 (M+1)⁺.

단계 D: tert-부틸 (2-((5-((4-(비스(3,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(10mL) 중 7-브로모-2-((1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(700mg, 0.939mmol)의 용액에 N₂하에 -78℃에서 n-BuLi(1.8mL, 2.88mmol)을 첨가하였다. -78℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, tert-부틸 (2-((5-포르밀피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트(400mg, 1.429mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 수성 NH₄Cl(30mL)로 켄칭하고 DCM(3 x 30mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(60%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(590mg, 66%)을 수득하였다. MS: M/e 946 (M+1)⁺.

단계 E: 3-((4-아미노-7-(하이드록시(6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올

TFA(9mL) 및 H₂O(1mL) 중 단계 D의 생성물(800mg, 0.846mmol)을 N₂하에서 용해시켰다. 반응 혼합물을 35℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료 후, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 물(20mL) 및 DCM(20mL)으로 희석하고 수성상은 1N HCl의 산을 사용하여 pH=2~3으로 조정하였다. 수성상을 DCM(3 x 30 mL)으로 세척하고 2 N NaOH를 기반으로 pH=13~14로 조정하고 DCM/i-PrOH(5/1, 3 x 100mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄상에서 건조시키고 진공하에 농축하여 표제 화합물(320mg, 조 물질)을 수득하였다. MS: M/e 432 (M+1)⁺.

단계 F: 3-((4-아미노-7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A79 )

단계 E의 생성물(320mg)을 N₂하에서 TFA(5mL) 및 Et₃SiH(5mL)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료 후, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 물(20mL) 및 DCM(20mL)으로 희석하고 수성상은 pH=2~3으로 조정하기 위한 1N HCl의 산이었다. 수성상을 DCM(3 x 20mL)으로 세척하고 2 N NaOH를 기반으로 pH=13~14로 조정하고 DCM/i-PrOH(5/1, 3 x 60mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 prep-HPLC로 정제하여 표제 화합물(15mg)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 8.09 (s, 1H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.24-5.10 (m, 1H), 4.37 (s, 2H), 4.15 (s, 2H), 3.70-3.56 (m, 2H), 2.99 (s, 2H), 2.47 (s, 3H), 1.98-1.79 (m, 2H), 1.77-1.53 (m, 2H), 1.50-1.33 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 416 (M+1)⁺.

화합물 A80: 7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)-2-((테트라히드로푸란-3-일)메톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(7-((6-(2-(methylamino)ethoxy)pyridin-3-yl)methyl)-2-((tetrahydrofuran-3-yl)methoxy)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸 (2-((5-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-((테트라히드로푸란-3-일)메톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(8mL) 중 7-브로모-N,N-비스(4-메톡시벤질)-2-((테트라히드로푸란-3-일)메톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(134mg, 0.24mmol)의 용액에 n-BuLi(1.6M, 0.3mL, 0.48mmol) 용액을 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 tert-부틸 (2-((5-포르밀피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트(100mg, 0.36mmol)의 현탁액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 다음, 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(20mL X 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(160mg, 88%)을 얻었다. MS: M/e 756.9 (M+1)⁺.

단계 B: 7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)-2-((테트라히드로푸란-3-일)메톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A80 )

단계 A의 생성물(160mg, 0.21mmol)과 TFA(4mL)의 혼합물에 Et₃SiH(4mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 85℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 TFA(5mL)를 첨가하고 반응물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 농축하고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(19mg, 22.6%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.18 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.63 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.29 (s, 1H), 6.74 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.27 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 4.23 - 4.16 (m, 1H), 4.13 - 4.08(m, 3H), 3.77 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 3.68 - 3.61 (m, 1H), 3.54 - 3.48 (m, 1H), 2.86 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 2.64 (dd, J = 13.6, 6.9 Hz, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.03 - 1.95 (m, 1H), 1.66 - 1.61 (m, 1H) ppm. MS: M/e 400 (M+1)⁺.

화합물 A81 및 화합물 A82: (R 또는 S) 3-((4-아미노-7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올(3-((4-amino-7-((6-(2-(methylamino)ethoxy)pyridin-3-yl)methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol), 및 (S 또는 R) 3-((4-아미노-7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올(3-((4-amino-7-((6-(2-(methylamino)ethoxy)pyridin-3-yl)methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

화합물 A79 3-((4-아미노-7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2 -일)옥시)헥산-1-올(70mg, 0.168mmol)을 prep-SFC에 의해 2개의 광학 이성질체 화합물 A81 및 화합물 A82로 분리하여 화합물 A 81(18mg) 및 화합물 A82(38mg)를 수득하였다. prep-SFC의 조건은 아래와 같다.

화합물 A81 (R or S 광학 이성질체 1): ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 8.09 (s, 1H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.24-5.08 (m, 1H), 4.37 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 4.15 (s, 2H), 3.65 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 2.99 (s, 2H), 2.45 (s, 3H), 1.95-1.82 (m, 2H), 1.78-1.56 (m, 2H), 1.49-1.32 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 416 (M+1)⁺.

화합물 A82 (S or R 광학 이성질체 2): ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 8.09 (s, 1H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.22-5.13 (m, 1H), 4.36 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 4.15 (s, 2H), 3.66 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 2.96 (s, 2H), 2.45 (s, 3H), 1.97-1.77 (m, 2H), 1.77-1.54 (m, 2H), 1.49-1.32 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 416 (M+1)⁺.

화합물 A83: 7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)-2-(펜탄-3-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(7-((6-(2-(methylamino)ethoxy)pyridin-3-yl)methyl)-2-(pentan-3-yloxy)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: N,N-비스(4-메톡시벤질)-2-(펜탄-3-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민

THF(10mL) 중 펜탄-3-올(88mg, 1mmol)의 용액에 NaH(60%, 80mg, 2mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 2-클로로-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(204mg, 0.5mmol)을 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 밤새 교반하였다. 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(220mg, 95.6%)을 얻었다. MS: m/e: 462(M+1)+.

단계 B: tert-부틸 (2-((5-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-(펜탄-3-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(8mL) 중 N,N-비스(4-메톡시벤질)-2-(펜탄-3-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(220mg, 0.48mmol)의 용액에 n-BuLi(1.6M, 0.44mL, 0.72mmol) 용액을 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 tert-부틸 (2-((5-포르밀피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트(200mg, 0.72mmol)의 현탁액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 후 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(20mL X 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(120mg, 47%)을 얻었다. MS: M/e 742 (M+1)⁺.

단계 C: 7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)-2-(펜탄-3-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A83 )

TFA(4mL) 중 단계 B의 생성물(120mg, 0.161mmol)의 혼합물에 Et₃SiH(4mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 85℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 TFA(5mL)를 첨가하고 반응물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(25mg, 38.6%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.11 (s, 2H), 8.00 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.74 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.82 - 4.74 (m, 1H), 4.28 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 4.07 (s, 2H), 2.89 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 2.37 (s, 3H), 1.64 - 1.58 (m, 4H), 0.87 (t, J = 7.3 Hz, 6H) ppm. MS: M/e 386 (M+1)⁺.

화합물 A84: 2-(헥산-3-일옥시)-7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민

단계 A: 2-(헥산-3-일옥시)-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민

THF(10mL) 중 헥산-3-올(102mg, 1mmol)의 용액에 NaH(60%, 80mg, 2mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 2-클로로-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(204mg, 0.5mmol)을 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 밤새 교반하였다. 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(260mg, 100%)을 얻었다. MS: m/e: 476 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-((5-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-(헥산-3-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(8mL) 중 2-(헥산-3-일옥시)-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(260mg, 0.5mmol)의 용액에 n-BuLi(1.6M, 0.44mL, 0.72mmol) 용액을 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 tert-부틸(2-((5-포르밀피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트(200mg, 0.72mmol)의 현탁액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 후 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(20mL X 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(130mg, 34.4%)을 얻었다. MS: M/e 756 (M+1)⁺.

단계 C: 2-(헥산-3-일옥시)-7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(화합물 A84)

TFA(4mL) 중 단계 B의 생성물(130mg, 0.172mmol)의 혼합물에 Et³SiH(4mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 85℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 TFA(5mL)를 첨가하고 반응물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(12mg, 16.9%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.11 (s, 2H), 8.00 (s, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.74 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.89 - 4.83 (m, 1H), 4.30 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 4.07 (s, 2H), 2.94 (s, 2H), 2.39 (s, 3H), 1.61 - 1.54(m, 4H), 1.38 - 1.26 (m, 2H), 0.87 (t, J = 6.9 Hz, 6H) ppm. MS: M/e 400 (M+1)⁺.

화합물 A85: 3-((4-아미노-7-(4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산 -1-올(3-((4-amino-7-(4-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo [2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: 2-((tert-부톡시카르보닐)(메틸)아미노)에틸 메탄술포네이트

THF(40mL) 중 tert-부틸(2-하이드록시에틸)(메틸)카바메이트(3.5g, 20mmol)의 0℃ 용액에 DIEA(7.8g, 60mmol)를 첨가한 다음 MsCl(3.4g, 30mmol)을 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 현탁액을 여과하고, 여액을 EA(100mL)로 희석하고, 염수(100mL x 3)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(PE/EA=3:1)로 정제하여 표제 화합물(3.1g, 조 물질)을 얻었다. MS: M/e 254 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-(4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

DMF(10mL) 중 2-((tert-부톡시카르보닐)(메틸)아미노)에틸메탄설포네이트(1.5g, 조 물질), 4-하이드록시벤즈알데히드(800mg, 6.5mmol) 및 K₂CO₃(2.5g, 18.1mmol)의 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EA(50mL)로 희석하고 여과하였다. 여액을 염수(20mL x 3)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(PE/EA=4:1)로 정제하여 표제 화합물(105mg, 수율: 4% for 2 steps)을 얻었다. MS: M/e 280 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (2-(4-((2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(2mL) 중 2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(156mg, 0.24mmol)의 용액을 N₂ 분위기에서 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 0.3mL, 0.48mmol)에 첨가하였다. 혼합물을 -78℃에서 20분 동안 교반하였다. 그 다음, THF(2mL) 중 tert-부틸(2-(4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(102mg, 0.36mmol)의 용액을 -78℃에서 시스템에 첨가하였다. 반응물을 30분 동안 교반한 다음, 실온으로 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 실온에서 포화 NH₄Cl(20mL)로 켄칭하고 EA(10mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수(10mL x 3)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(80mg, 수율: 36%)을 얻었다. MS: M/e 921 (M+1)⁺.

단계 D: tert-부틸 (2-(4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트.

MeOH(2mL) 중 tert-부틸(2-(4-((2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트(60mg, 0.065mmol) 및 Pd/C(습윤, 60mg)의 혼합물을 실온에서 H₂하에 2일 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 농축하여 표제 생성물(50mg, 수율: 94%)을 얻었다. MS: M/e 815 (M+1)⁺.

단계 E: 3-((4-아미노-7-(4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A85 ).

TFA/H2O(9:1, 5mL) 중 tert-부틸 (2-(4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1, 2,4]트리아진-7-일)메틸)페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(50mg, 0.06mmol)를 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 감압하에 농축시켰다. 2mL H₂O를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반한 다음, 여과하였다. 여액을 DCM(20mL x 2)으로 추출하여 불순물을 제거하였다. 수성 층을 NaOH(4M)에 의해 aq. pH>10으로 염기성화하고, DCM/IPA(5:1, 3mL x 5)로 추출하였다. 합한 추출물을 염수(5mL x 3)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 농축하고, prep-TLC(DCM/MeOH(NH₃)= 10:1)로 정제하여 표제 화합물(5mg, 수율: 12%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.32 - 7.23 (m, 3H), 6.94 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 5.26 - 5.11 (m, 1H), 4.26 - 4.19 (m, 2H), 4.18 - 4.11 (m, 2H), 3.75 - 3.54 (m, 2H), 3.46 - 3.37 (m, 2H), 2.77 (s, 3H), 1.95 - 1.82 (m, 2H), 1.77 - 1.61 (m, 2H), 1.49 - 1.37 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 415 (M+1)⁺.

화합물 A86: 3-((4-아미노-7-((6-(3-(메틸아미노)프로폭시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진- 2-일)옥시)헥산-1-올3-((4-amino-7-((6-(3-(methylamino)propoxy)pyridin-3-yl)methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: tert-부틸 (3-((5-포르밀피리딘-2-일)옥시)프로필)(메틸)카르바메이트.

디옥산(5mL) 중 6-클로로니코틴알데하이드(400mg, 2.84mmol), tert-부틸(3-하이드록시프로필)(메틸)카바메이트(600mg, 3.17mmol), Pd₂(dba)₃(180mg, 0.20mmol), RuPhos(187)의 혼합물 mmol, 0.40 mmol) 및 Cs₂CO₃(2.3 g, 7.0 mmol)의 혼합물을 100℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 20mL의 EA 및 20mL의 H₂O로 처리하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 수성 층을 EA(20mL x 2)로 추출하였다. 합한 유기물을 염수(30mL x 3)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(PE/EA=2:1)로 정제하여 표제 화합물(490mg, 수율: 59%)을 얻었다. MS: M/e 295 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (3-((5-((2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)피리딘-2-일)옥시)프로필)(메틸)카르바메이트

THF(5mL) 중 2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(642mg, 1.0mmol)의 용액을 N₂ 분위기에서 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 1.5mL, 2.4mmol)에 첨가하였다. 혼합물을 -78℃에서 20분 동안 교반하였다. 이어서, THF(3mL) 중 tert-부틸(3-((5-포르밀피리딘-2-일)옥시)프로필)(메틸)카바메이트(480mg, 1.6mmol)의 용액을 -78℃에서 시스템에 첨가하였다. 반응물을 30분 동안 교반한 다음, 실온으로 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온에서 포화 NH₄Cl(20mL)로 켄칭하고 EA(10mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수(10mL x 3)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(510mg, 수율: 54%)을 얻었다. MS: M/e 936 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (3-((5-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)피리딘-2-일)옥시)프로필)(메틸)카르바메이트

MeOH(4mL) 중 tert-부틸 (3-((5-((2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)피리딘-2-일)옥시)프로필)(메틸)카르바메이트(120mg, 0.128mmol) 및 Pd/C(습식, 120mg)의 혼합물을 실온에서 H₂하에 5일 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 농축하여 다음 단계에 직접 사용되는 표제 생성물(100mg, 조 물질)을 얻었다. MS: M/e 846 (M+1)⁺.

단계 D: 3-((4-아미노-7-(하이드록시(6-(3-(메틸아미노)프로폭시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올

TFA/H₂O(9:1, 5 mL) 중 tert-부틸 (3-((5-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)피리딘-2-일)옥시)프로필)(메틸)카르바메이트(100mg, 조 물질)를 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 2mL H₂O를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반한 다음, 여과하였다. 여액을 DCM(5mL x 2)으로 추출하여 불순물을 제거하였다. 수성 층을 aq. NaOH(4M)를 이용하여 pH>10으로 염기성화하고, DCM/IPA(5:1, 10mL x 3)로 추출하였다. 합한 추출물을 염수(10mL x 3)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 농축하여 표제 화합물(45mg, 조 물질)을 얻었다. MS: M/e 446 (M+1)⁺.

단계 E: 3-((4-아미노-7-((6-(3-(메틸아미노)프로폭시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진- 2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A86 )

3-((4-아미노-7-(하이드록시(6-(3-(메틸아미노)프로폭시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올(45mg, 조 물질), TFA(2.5mL) 및 Et₃SiH(2.5mL)의 혼합물을 70℃에서 20시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 H₂O(2mL)에 용해시키고 DCM(2mL x 2)으로 추출하였다. 유기상을 버렸다. 무기상은 aq. NaOH(4M)를 이용하여 pH>10으로 염기성화하고, 혼합물을 DCM/iPrOH(5:1, 3mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수(5mL x 2)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고 농축시켰다. 잔류물을 prep-TLC(DCM/MeOH(NH₃)=9:1)로 정제하여 표제 화합물(3.2mg, 수율: 3단계에서 6%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 8.12 (s, 1H), 7.66 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.36 (s, 1H), 6.78 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.23 - 5.11 (m, 1H), 4.37 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 4.16 (s, 2H), 3.69 - 3.60 (m, 2H), 3.20 - 3.12 (m, 2H), 2.71 (s, 3H), 2.21 - 2.10 (m, 2H), 1.95 - 1.83 (m, 2H), 1.76 - 1.62 (m, 2H), 1.49 - 1.36 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.6 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 430 (M+1)⁺.

화합물 A87: 2-(헵탄-4-일옥시)-7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(2-(heptan-4-yloxy)-7-((6-(2-(methylamino)ethoxy)pyridin-3-yl)methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 2-(헵탄-4-일옥시)-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민

THF(10mL) 중 헵탄-4-올(116mg, 1mmol)의 용액에 NaH(60%, 80mg, 2mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 2-클로로-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(204mg, 0.5mmol)을 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 밤새 교반하였다. 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(160mg, 65.5%)을 얻었다. MS: m/e: 490 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-((5-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-(헵탄-4-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(8mL) 중 2-(헵탄-4-일옥시)-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(160mg, 0.327mmol)의 용액에 n-BuLi(1.6M, 0.31mL, 0.5mmol) 용액을 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 tert-부틸 (2-((5-포르밀피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트 (130mg, 0.46mmol)의 현탁액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 다음, 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(20mL X 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(100mg, 39.8%)을 얻었다. MS: M/e 770 (M+1)⁺.

단계 C: 2-(헵탄-4-일옥시)-7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A87 )

TFA(4mL) 중 단계 B의 생성물(100mg, 0.13mmol)의 혼합물에 Et₃SiH(4mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 85℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 TFA(5mL)를 첨가하고 반응물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(3mg, 5.4%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.69 (s, 2H), 8.13 (s, 2H), 8.01 (s, 1H), 7.65 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.78 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.04 - 4.92 (m, 1H), 4.44 (s, 2H), 4.09 (s, 2H), 2.98 (s, 2H), 2.60 (s, 3H), 1.61 - 1.54 (m, 4H), 1.42 - 1.33 (m, 4H), 0.87 (t, J = 7.3 Hz, 6H) ppm. MS: M/e 414 (M+1)⁺.

화합물 A88: 7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)-2-((테트라히드로푸란-2-일)메톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(7-((6-(2-(methylamino)ethoxy)pyridin-3-yl)methyl)-2-((tetrahydrofuran-2-yl)methoxy)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 7-브로모-N,N-비스(4-메톡시벤질)-2-((테트라히드로푸란-2-일)메톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민

THF(10mL) 중 (테트라히드로푸란-2-일)메탄올(204mg, 2mmol)의 용액에 NaH(60%, 160mg, 4mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 7-브로모-2-클로로-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(487mg, 1mmol)을 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 밤새 교반하였다. 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(440mg, 79.4%)을 얻었다. MS: m/e: 554 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-((5-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-((테트라히드로푸란-2-일)메톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(8mL) 중 7-브로모-N,N-비스(4-메톡시벤질)-2-((테트라히드로푸란-2-일)메톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(220mg, 0.39mmol)의 용액에 n-BuLi(1.6M, 0.45mL, 0.72mmol) 용액을 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 tert-부틸 (2-((5-포르밀피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트(151mg, 0.54mmol)의 현탁액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 다음, 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(20mL X 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(130mg, 44.2%)을 얻었다. MS: M/e 756 (M+1)⁺.

단계 C: 7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)-2-((테트라히드로푸란-2-일)메톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A88 )

TFA(4mL) 중 단계 B의 생성물(130mg, 0.172mmol)의 혼합물에 Et₃SiH(4mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 85℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 TFA(5mL)를 첨가하고 반응물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 농축하고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(5mg, 7.2%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.18 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.66 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.78 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.38 (t, J = 4.9 Hz, 2H), 4.17 (t, J = 8.3 Hz, 2H), 4.14 (s, 1H), 4.10 (s, 2H), 3.76 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 3.72 - 3.62 (m, 1H), 3.14 (s, 2H), 2.51 (s, 3H), 1.99 (s, 1H), 1.84 (dd, J = 13.9, 6.8 Hz, 2H), 1.66 (d, J = 8.0 Hz, 1H) ppm. MS: M/e 400 (M+1)⁺.

화합물 A89: (S)-2-(sec-부톡시)-7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민((S)-2-(sec-butoxy)-7-((6-(2-(methylamino)ethoxy)pyridin-3-yl)methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: 2-클로로-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민

이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2,4(1H,3H)-디온(10g, 65.8mmol), POCl₃(50g, 0.33mol) 및 톨루엔(60mL)의 혼합물에 DIPEA(25.5g, 0.20mmol)를 60℃에서 30분 동안 첨가하였다. 이때 발열이 관찰되었고 온도는 90℃로 상승하였다. (고체는 점차적으로 용해됨). 첨가가 완료된 후, 반응물을 100℃(내부 온도는 약 95℃)로 가온하고 밤새 교반하였다. 그 다음, 반응물을 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 THF(100mL)에 용해시킨 다음, DIPEA(25.5g, 0.20mmol)를 혼합물에 적가하였다. 이 혼합물을 비스(2,4-디메톡시벤질)아민(31.3g, 0.10mol), K₂CO₃(18g, 1.32mol), THF(260mL) 및 물(260mL)의 용액에 0℃에서 1시간 동안 첨가하였다. 첨가가 완료된 후, 혼합물을 EA(300mL x3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 EA(400mL)에 용해시키고, 혼합물을 환류하에 1시간 동안 교반하고 이 온도에서 여과하였다. 여액을 감압하에 농축하였다. EA를 MeOH로 교환하고 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과하고 고체(회백색)를 수집하였다. 생성물을 다음 단계에 직접 사용하였다(20g, HPLC: 98.87%, 수율: 54.4%).

단계 B: (S)-2-(sec-부톡시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민

THF(20mL) 중 (S)-부탄-2-올(236mg, 3.19mmol)의 용액에 N₂하에 0℃에서 NaH(128mg, 3.2mmol)를 첨가하였다. 25℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, 2-클로로-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(500mg, 1.06mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 6시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 물(20mL)로 켄칭하고 EtOAc(3 x 30mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(40%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(540mg, 조 물질)을 수득하였다. MS: M/e 508 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (2-((5-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((R)-sec-부톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(15mL) 중의 단계 B의 생성물(540mg, 1.06mmol)의 용액에 -78℃에서 N₂하에 n-BuLi(1.4mL, 2.24mmol)를 첨가하였다. -78℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, tert-부틸 (2-((5-포르밀피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트(445mg, 1.59mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 수성 NH₄Cl(30mL)로 켄칭하고 DCM(3 x 30mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(70%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(340mg, 41%)을 수득하였다. MS: M/e 788 (M+1)⁺.

단계 D: (4-아미노-2-((S)-sec-부톡시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(6-(2-(메틸아미노)에톡시))피리딘-3-일)메탄올

단계 C의 생성물(340mg, 0.431mmol)을 N₂하에서 TFA(6mL) 및 H₂O(0.6mL)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료 후, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 물(20mL) 및 DCM(20mL)으로 희석하고 수성상은 pH=1~2를 조정하기 위한 1N HCl의 산이었다. 수성상을 DCM(3 x 20mL)으로 세척하고 2 N NaOH를 기본으로 하여 pH=13~14로 조정하고 DCM/i-PrOH(5/1, 3 x 100mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공 하에 농축시켜 표제 화합물(120mg, 조 물질)을 수득하였다. MS: M/e 388 (M+1)⁺.

단계 E: (S)-2-(sec-부톡시)-7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A89 )

단계 D의 생성물(120mg, 0.31mmol)을 N₂하에서 TFA(4mL) 및 Et₃SiH(4mL)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료 후, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 물(20mL) 및 DCM(20mL)으로 희석하고 수성상은 pH=1~2를 조정하기 위한 1N HCl의 산이었다. 수성상을 DCM(3 x 20mL)으로 세척하고 2 N NaOH를 기반으로 pH=13~14로 조정하고 DCM/i-PrOH(5/1, 3 x 100mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 Prep-TLC (DCM/CH₃OH (NH₃) = 15/1)로 정제하여 표제 화합물(17mg)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 8.13 (s, 1H), 7.67 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.82 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.99 - 4.94 (m, 1H), 4.55-4.44 (m, 2H), 4.16 (s, 2H), 3.32 (s, 2H), 2.68 (s, 3H), 1.80-1.59 (m, 2H), 1.31 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.97 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 372 (M+1)⁺.

화합물 A90: (S)-7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)-2-(펜탄-2-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민((S)-7-((6-(2-(methylamino)ethoxy)pyridin-3-yl)methyl)-2-(pentan-2-yloxy)imidazo [2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸 (2-((5-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-(((R)-펜탄-2-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)피리딘-2일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(10mL) 중 (S)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)-2-(펜탄-2-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(600mg, 1.15mmol)의 용액을 -78℃에서 N₂하에 n-BuLi(1.4mL, 2.24mmol)에 첨가하였다. -78℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, tert-부틸 (2-((5-포르밀피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트(480mg, 1.71mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 수성 NH₄Cl(30mL)로 켄칭하고 DCM(3 x 30mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(40%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(720mg, 78%)을 수득하였다. MS: M/e 802 (M+1)⁺.

단계 B: (4-아미노-2-(((S)-펜탄-2-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(6-(2)-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메탄올

tert-부틸 (2-((5-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-(((R)-펜탄-2-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)피리딘-2일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트(720mg, 0.898mmol)를 N₂하에서 TFA(9mL) 및 H₂O(1mL)에서 용해시켰다. 반응 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료 후, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 물(20mL) 및 DCM(30mL)으로 희석하고 수성상은 pH=1~2를 조정하기 위한 1N HCl의 산이었다. 수성상을 DCM(3 x 20mL)으로 세척하고 2 N NaOH를 기반으로 pH=13~14로 조정하고 DCM/i-PrOH(5/1, 3 x 120 mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄상에서 건조시키고 진공하에 농축하여 표제 화합물(290mg, 조 물질)을 수득하였다. MS: M/e 402 (M+1)⁺.

단계 C: (S)-7-((6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)-2-(펜탄-2-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A90 )

(4-아미노-2-(((S)-펜탄-2-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(6-(2-(메틸아미노))에톡시)피리딘-3-일)메탄올(290mg, 조 물질)을 N₂하에 TFA(5mL) 및 Et₃SiH(5mL)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 90℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료 후, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 물(20mL) 및 DCM(20mL)으로 희석하고 수성상은 pH=1~2를 조정하기 위한 1N HCl의 산이었다. 수성상을 DCM(3 x 20mL)으로 세척하고 2 N NaOH를 기반으로 pH=13~14로 조정하고 DCM/i-PrOH(5/1, 3 x 120mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 Prep-TLC(DCM/CH3OH(NH3) = 20/1 내지 15/1)로 정제하여 표제 화합물(70mg)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 8.01 (s, 1H), 7.54 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.69 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.95 (qt, J = 12.0, 6.4 Hz, 1H), 4.37-4.27 (m, 2H), 4.05 (s, 2H), 3.08-2.98 (m, 2H), 2.47 (s, 3H), 1.71-1.55 (m, 1H), 1.54-1.25 (m, 3H), 1.21 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.84 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 386 (M+1)⁺.

화합물 A91: 3-((4-아미노-7-(3-플루오로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올(3-((4-amino-7-(3-fluoro-4-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: tert-부틸 (2-(2-플루오로-4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(10mL) 중 3-플루오로-4-하이드록시벤즈알데하이드(280mg, 2mmol)의 용액에 tert-부틸(2-하이드록시에틸)(메틸)카바메이트(350mg, 2mmol) 및 PPh₃(628mg, 2.4mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 보호하고 0℃까지 냉각시켰다. THF(2ml) 중 DIAD(552mg, 2.4mmol)의 용액을 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(400mg, 67.3%)을 얻었다. MS: m/e: 298 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-(4-((2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-2-플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(8mL) 중 2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(291mg, 0.5mmol)의 용액에 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 n-BuLi(1.6M, 0.44mL, 0.72mmol) 용액을 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 tert-부틸(2-(2-플루오로-4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(400mg, 1.3mmol)의 현탁액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 후 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(20mL X 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(340mg, 77%)을 얻었다. MS: M/e 879 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (2-(4-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-2-플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

MeOH(20mL) 중 단계 B의 생성물(340mg, 0.38mmol)의 용액에 Pd/C(800mg)를 첨가하였다. 혼합물을 수소로 보호하고 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 진공에서 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(230mg, 75.4%)을 얻었다. MS: m/e: 789 (M+1)⁺.

단계 D: 3-((4-아미노-7-(3-플루오로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A91 )

TFA(4mL) 중 단계 C의 생성물(230mg, 0.291mmol)의 혼합물에 Et₃SiH(4mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 85℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 TFA(5mL)를 첨가하고 반응물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(8mg, 6.4%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.13 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.19 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 5.04 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 4.17 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 4.08 (s, 2H), 3.55 - 3.39 (m, 5H), 3.11 (s, 2H), 1.82 - 1.70 (m, 2H), 1.61 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 1.31 (dd, J = 14.8, 7.3 Hz, 2H), 1.23 (s, 1H), 0.86 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 433 (M+1)⁺.

화합물 A92 및 화합물 A93: (R 또는 S) 3-((4-아미노-7-(4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올(3-((4-amino-7-(4-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol) 및 (S 또는 R) 3-((4-아미노-7-(4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올(3-((4-amino-7-(4-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

화합물 A85 3-((4-아미노-7-(4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올(1.1g, 2.66mmol)을 prep-SFC에 의해 두 개의 광학 이성질체 화합물 A92(441mg) 및 화합물 A93(410mg)으로 분리하였다. prep-SFC의 조건은 아래와 같다.

화합물 A92(R 또는 S 광학 이성질체 1): ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.25 (s, 1H), 7.20 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.87 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.27 - 5.08 (m, 1H), 4.12 (s, 2H), 4.04 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.65 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.92 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 2.43 (s, 3H), 1.98 - 1.81 (m, 2H), 1.78 - 1.57 (m, 2H), 1.51 - 1.32 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 415 (M+1)⁺.

화합물 A93: (S 또는 R 광학 이성질체 2): ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.25 (s, 1H), 7.20 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.87 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.24 - 5.09 (m, 1H), 4.12 (s, 2H), 4.05 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.65 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.92 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 2.44 (s, 3H), 2.00 - 1.82 (m, 2H), 1.80 - 1.58 (m, 2H), 1.50 - 1.31 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 415 (M+1)⁺.

화합물 A94: 3-((4-아미노-7-(4-(메틸(2-(메틸아미노)에틸)아미노)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올(3-((4-amino-7-(4-(methyl(2-(methylamino)ethyl)amino)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: tert-부틸(2-((4-포르밀페닐)(메틸)아미노)에틸)(메틸)카바메이트

다이옥산(10mL) 중 4-클로로벤즈알데하이드(500mg, 3.57mmol), tert-부틸 메틸(2-(메틸아미노)에틸)카바메이트(740mg, 3.94mmol)의 용액에 N₂하에서 Pd(OAc)₂(100 mg, 0.446mmol), BINAP(350mg, 0.562mmol) 및 Cs₂CO₃(2.4g, 7.36mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 1시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 물(30mL)로 켄칭하고 EtOAc(3 x 30mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(50%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(510mg, 49%)을 수득하였다. MS: M/e 293. (M+H)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-((4-((2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7일)(하이드록시)메틸)페닐)(메틸)아미노)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(20mL) 중 2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(480mg, 0.748mmol)의 용액에 -78℃에서 N₂하에 n-BuLi(0.7mL, 1.12mmol)를 첨가하였다. -78℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, THF(5mL) 중 tert-부틸(2-((4-포르밀페닐)(메틸)아미노)에틸)(메틸)카바메이트(260mg, 0.89mmol)의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 수성 NH₄Cl(30mL)로 켄칭하고 DCM(3 x 30mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(50%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(470 mg, 67%)을 수득하였다. MS: M/e 934 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (2-((4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7일)메틸)페닐)(메틸)아미노)에틸)(메틸)카바메이트

MeOH(20mL) 중 tert-부틸 (2-((4-((2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7일)(하이드록시)메틸)페닐)(메틸)아미노)에틸)(메틸)카르바메이트(470mg, 0.503mmol)의 용액에 Pd/C(500mg)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 H₂(1 atm) 하에 40℃에서 48시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 함께 합하고 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(80%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(90mg, 22%)을 수득하였다. MS: M/e 828 (M+1)⁺.

Step D: 3-((4-amino-7-(4-(methyl(2 (methylamino)ethyl)amino)benzyl)imidazo [2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol (Compound A94)

단계 D: 3-((4-아미노-7-(4-(메틸(2(메틸아미노)에틸)아미노)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A94 )

tert-부틸 (2-((4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)페닐)(메틸)아미노)에틸)(메틸)카바메이트(90mg, 0.109mmol)를 N₂하에서 TFA(4mL) 및 H₂O(0.4mL)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료 후, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 물(20mL) 및 DCM(20mL)으로 희석하고 수성상은 pH=1~2를 조정하기 위한 1N HCl의 산이었다. 수성상을 DCM(3 x 30mL)으로 세척하고 2 N NaOH를 기본으로 하여 pH=13~14로 조정하고 DCM/i-PrOH(5/1, 3 x 100mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 정제용 TLC(DCM/CH₃OH(NH₃) = 20/1 내지 10/1)로 정제하여 표제 화합물(16mg, 35%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.23 (s, 1H), 7.14 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.74 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.25-5.13 (m, 1H), 4.07 (s, 2H), 3.65 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.44 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.90 (s, 3H), 2.83 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.46 (s, 3H), 1.95-1.84 (m, 2H), 1.79-1.59 (m, 2H), 1.51-1.32 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 428 (M+1)⁺.

화합물 A95: 3-((4-아미노-7-(4-(2-(메틸아미노)에틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올(3-((4-amino-7-(4-(2-(methylamino)ethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: 메틸 4-(2-((tert-부톡시카르보닐)(메틸)아미노)에틸)벤조에이트

DMF(30mL) 중 4-(2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)에틸)벤조산(2.5g, 9.43mmol)의 용액에 N₂하에 0℃에서 NaH(1.5g, 37.5mmol)를 첨가하였다. 25℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, DMF(10mL) 중 CH₃I(5.4g, 38.03mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 0℃에서 얼음물(50mL)로 켄칭하고 EtOAc(3 x 100mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물(3 x 50mL), 염수(3 x 50mL)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 진공 하에 농축하여 조 생성물(2.2g)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.96 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.25 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.45 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.87 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.80 (s, 3H), 1.41 (s, 9H) ppm. MS: M/e 316. (M+H)⁺.

단계 B: tert-부틸 (4-(하이드록시메틸)페네틸)(메틸)카르바메이트

THF(20mL) 중 메틸 4-(2-((tert-부톡시카르보닐)(메틸)아미노)에틸)벤조에이트(2.1g, 7.17mmol)의 용액에 N₂하에서 LiAlH4(1.1g, 28.94mmol)를 첨가하였다. 0℃ 반응 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 0℃에서 물(1.1mL), 15% NaOH(1.1mL) 및 물(3.3mL)로 켄칭하고 Na₂SO₄를 첨가하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 함께 합하고 진공에서 농축하여 조 생성물(2.2g)을 얻었다. MS: M/e 288. (M+Na)⁺.

단계 C: tert-부틸(4-포르밀페네틸)(메틸)카바메이트

DCM(20mL) 중 tert-부틸(4-(하이드록시메틸)페네틸)(메틸)카바메이트(2.15g, 8.11mmol)의 용액에 N₂하에 0℃에서 DMP(4.1g, 9.67mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 수성 Na2S2O3(50mL)로 켄칭하고 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 수성 NaHCO3(50mL), 염수(50mL)로 세척하고 Na₂SO₄로 건조하고 진공 하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(40%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(1.1g, 3단계에 대해 44%)을 수득하였다.¹H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.97 (s, 1H), 7.84 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.43 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 3.43 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.86 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.74 (s, 3H), 1.43-1.16 (m, 9H) ppm.

단계 D: tert-부틸 (4-((2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)페네틸)(메틸)카르바메이트

THF(15mL) 중 2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(500mg, 0.78mmol)의 용액에 -78℃에서 N₂하에 n-BuLi(0.73mL, 1.17mmol)를 첨가하였다. -78℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, THF(5mL) 중 tert-부틸(4-포르밀페네틸)(메틸)카바메이트(246mg, 0.935mmol)의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 수성 NH₄Cl(50mL)로 켄칭하고 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(50%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(430mg, 61%)을 수득하였다. MS: M/e 905 (M+1)⁺.

단계 E: tert-부틸 (4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)페네틸)(메틸)카바메이트

MeOH(20mL) 중 tert-부틸 (4-((2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)페네틸)(메틸)카르바메이트(430mg, 0.475mmol)의 용액에 Pd/C(500mg)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 H₂(1 atm) 하에 40℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 함께 합하고 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(80%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(190mg, 50%)을 수득하였다. MS: M/e 799 (M+1)⁺.

단계 F: 3-((4-아미노-7-(4-(2-(메틸아미노)에틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A95 )

tert-부틸 (4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)페네틸)(메틸)카바메이트(190mg, 0.238mmol)를 N₂하에서 TFA(4mL) 및 H₂O(0.4mL)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료 후, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 물(20mL) 및 DCM(20mL)으로 희석하고 수성상은 pH=1~2로 조정하기 위한 1N HCl의 산이었다. 수성상을 DCM(3 x 30mL)으로 세척하고 2 N NaOH를 기반으로 pH=13~14로 조정하고 DCM/i-PrOH(5/1, 3 x 100mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 prep-TLC(DCM/CH₃OH(NH₃) = 20/1 내지 15/1)로 정제하여 표제 화합물(50mg, 53%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.31-7.25 (m, 3H), 7.18 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 5.24-5.11 (m, 1H), 4.18 (s, 2H), 3.68-3.58 (m, 2H), 3.00 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 2.86 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.54 (s, 3H), 1.95-1.88 (m, 2H), 1.78-1.56 (m, 2H), 1.51-1.31 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 399 (M+1)⁺.

화합물 A96: 3-((4-아미노-7-(4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산 -1-올(3-((4-amino-7-(4-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo [2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: tert-부틸 (2-((5-((2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-6-메톡시피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(3mL) 중 2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진의-4-아민(250mg, 0.39mmol)의 용액을 N₂ 분위기에서 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 1.0mL, 1.6mmol)에 첨가하였다. 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. 이어서, THF(2mL) 중 tert-부틸 (2-((5-포르밀-6-메톡시피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트(170 mg, 0.55 mmol)의 용액을 -78℃에서 시스템에 첨가하였다. 반응물을 30분 동안 교반한 다음, 실온으로 가온하고 16시간 동안 교반하였다. 반응을 실온에서 포화 NH₄Cl(10mL)로 켄칭하고 EA(10mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수(10mL x 2)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 감압 하에 농축하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(120mg, 수율: 32%)을 얻었다. MS: M/e 952 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-((5-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-6-메톡시피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트

MeOH(5mL) 중 tert-부틸 (2-((5-((2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-6-메톡시피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트(120mg, 0.126 mmol) 및 Pd/C(습식, 200mg)의 혼합물을 H₂하에 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 농축하였다. 생성된 잔류물을 prep-TLC(PE/EA=1:1)로 정제하여 표제 생성물(65mg, 수율: 60%)을 얻었다. MS: M/e 846 (M+1)⁺.

단계 C: 3-((4-아미노-7-((2-메톡시-6-(2-(메틸아미노)에톡시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A96 )

TFA(2mL) 중 tert-부틸 (2-((5-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-6-메톡시피리딘-2-일)옥시)에틸)(메틸)카바메이트(65mg, 0.077mmol)를 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 NaOH(2mL, 4M)로 처리하고 DCM/IPA(5:1, 3mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기물을 염수(5mL x 3)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 농축하고, prep-TLC(DCM/MeOH(NH₃)=8:1)로 정제하여 표제 화합물(5mg, 수율: 15%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.37 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.24 - 5.15 (m, 1H), 4.60 - 4.54 (m, 2H), 4.07 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.68 - 3.61 (m, 2H), 3.46 - 3.42 (m, 2H), 2.76 (s, 3H), 2.07 - 1.98 (m, 2H), 1.96 - 1.82 (m, 2H), 1.75 - 1.64 (m, 2H), 0.94 - 0.89 (m, 3H) ppm. MS: M/e 446 (M+1)⁺.

화합물 A97: 3-((4-아미노-7-(2-플루오로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올(3-((4-amino-7-(2-fluoro-4-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: tert-부틸 (2-(3-플루오로-4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(20mL) 중 2-플루오로-4-하이드록시벤즈알데하이드(1.4g, 10mmol)의 용액에 tert-부틸 (2-하이드록시에틸)(메틸)카바메이트(1.75g, 10mmol) 및 PPh₃(3.1g, 12mmol))를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 보호하고 0℃까지 냉각시켰다. THF(5ml) 중 DIAD(2.4g, 12mmol)의 용액을 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(867mg, 29.2%)을 얻었다. MS: m/e: 298 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-(4-((2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-3-플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(10mL) 중 2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(867mg, 1.35mmol)의 용액에 n-BuLi(1.6M, 2.1mL, 3.3mmol)의 용액을 -75~-65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 tert-부틸(2-(3-플루오로-4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(400mg, 1.34mmol)의 현탁액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 후 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(20mL X 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(670mg, 52.9%)을 얻었다. MS: M/e 939 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (2-(4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-3-플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

MeOH(20mL) 중 tert-부틸 (2-(4-((2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-3-플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트(670mg, 0.71mmol)의 용액에 Pd/C(600mg)를 첨가하였다. 혼합물을 수소로 보호하고 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 진공에서 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(100mg, 16.9%)을 얻었다. MS: m/e: 834 (M+1)⁺.

단계 D: 3-((4-아미노-7-(2-플루오로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A97 )

TFA(9mL) 중 단계 C의 생성물(100mg, 0.12mmol)의 혼합물에 H₂O(1mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 40℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 2N NaOH(10mL) 용액 및 DCM(20mL)을 첨가하고 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 분리하였다. 유기상을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(10mg, 19.2%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.11 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.29 - 7.14 (m, 2H), 6.82 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.43 (s, 1H), 4.03 (dd, J = 14.1, 8.4 Hz, 4H), 3.48 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.89 (s, 2H), 2.37 (s, 3H), 1.77 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 1.59 (s, 2H), 1.37 - 1.26 (m, 2H), 0.86 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 433 (M+1)⁺.

화합물 A98: 3-((4-아미노-7-(3-메톡시-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올(3-((4-amino-7-(3-methoxy-4-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: tert-부틸 (2-(4-포르밀-2-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(20mL) 중 4-하이드록시-3-메톡시벤즈알데하이드(1.52g, 10mmol)의 용액에 tert-부틸(2-하이드록시에틸)(메틸)카바메이트(1.75g, 10mmol) 및 PPh₃(3.4g, 13mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 보호하고 0℃까지 냉각시켰다. THF(5ml) 중 DIAD(2.6g, 13mmol)의 용액을 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(1.6g, 51.7%)을 얻었다. MS: m/e: 310 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-(4-((2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-2-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(10mL) 중 2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(867mg, 1.35mmol)의 용액에 n-BuLi(1.6M, 2.1mL, 3.3mmol)의 용액을 -75~-65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 tert-부틸(2-(4-포르밀-2-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(618mg, 2mmol)의 현탁액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 후 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(20mL X 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 HPLC로 정제하여 목적 화합물(650mg, 50.7%)을 얻었다. MS: M/e 951 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (2-(4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-2-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

MeOH(20mL) 중 tert-부틸 (2-(4-((2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-2-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(650mg, 0.68mmol)의 용액에 Pd/ C(600mg)를 첨가하였다. 혼합물을 수소로 보호하고 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 진공에서 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(200mg, 34.7%)을 얻었다. MS: m/e: 845 (M+1)⁺.

단계 D: 3-((4-아미노-7-(3-메톡시-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A98 )

TFA(9mL) 중 단계 C의 생성물(200mg, 0.24mmol)의 혼합물에 H₂O(1mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 40℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 2N NaOH(10mL) 용액 및 DCM(20mL)을 첨가하고 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 분리하였다. 유기상을 Na₂SO4로 건조시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(50mg, 47.6%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.09 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 6.86 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 5.06 - 5.01(m, 1H), 4.44 (s, 1H), 4.05 (s, 2H), 3.95 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.72 (s, 3H), 3.48 (s, 2H), 2.82 (s, 2H), 2.34 (s, 3H), 1.78 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 1.60 (s, 2H), 1.41 - 1.26 (m, 2H), 0.86 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 445 (M+1)⁺.

화합물 A99: (S)-7-(3-플루오로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)-2-(펜탄-2-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민((S)-7-(3-fluoro-4-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)-2-(pentan-2-yloxy)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸 (2-(4-((4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-2-(((S)-펜탄-2-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-2-플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(10mL) 중 (S)-N,N-비스(4-메톡시벤질)-2-(펜탄-2-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(234 mg, 0.5 mmol)의 용액에 n-BuLi(1.6M, 0.9mL, 1.5mmol) 용액을 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 tert-부틸(2-(2-플루오로-4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(297mg, 1mmol)의 현탁액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 후 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(20mL X 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(120mg, 31.6%)을 얻었다. MS: M/e 759 (M+1)⁺.

단계 B: (S)-7-(3-플루오로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)-2-(펜탄-2-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A99 )

TFA(4mL) 중 단계 C의 생성물(120mg, 0.158mmol)의 혼합물에 Et₃SiH(4mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 85℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 TFA(5mL)를 첨가하고 반응물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(22mg, 34.9%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.11 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.16 (m, 1H), 7.09 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.03 - 4.88 (m, 1H), 4.07 (s, 4H), 2.90 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 2.38 (s, 3H), 1.62 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 1.51 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 1.35 (dd, J = 14.8, 7.5 Hz, 2H), 1.24 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.88 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 403 (M+1)⁺.

화합물 A100: (S)-7-(4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)-2-(펜탄-2-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민((S)-7-(4-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)-2-(pentan-2-yloxy)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸 (2-(4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-(((S)-펜탄-2-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(5mL) 중 (S)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)-2-(펜탄-2-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(521mg, 1.0mmol)의 용액에 N₂분위기에서 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 3.1mL, 5.0mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, THF(5mL)에 녹인 tert-부틸(2-(4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(500mg, 2.0mmol) 용액을 -78℃에서 시스템에 첨가하였다. 반응물을 30분 동안 교반한 다음, 실온으로 가온하고 16시간 동안 교반하였다. 반응을 실온에서 포화 NH₄Cl(10mL)로 켄칭하고 EA(10mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수(10mL x 3)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(265mg, 수율: 33%)을 얻었다. MS: M/e 801 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (S)-(2-(4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-(펜탄-2-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

MeOH(20mL) 중 tert-부틸 (2-(4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-(((S)-펜탄-2-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트(210mg, 0.26mmol), Pd/C(습식, 200mg) 및 AcOH(0.5mL)의 혼합물을 H₂하에 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 고진공하에 농축하여 표제 생성물(205mg, 조 물질)을 얻었다. MS: M/e 785 (M+1)+.

단계 C: (S)-7-(4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)-2-(펜탄-2-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민( 화합물 A100 )

TFA(5mL) 중 tert-부틸 (S)-(2-(4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-(펜탄-2-일옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(205 mg, 0.26 mmol)를 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 NaOH(2mL, 4M)로 처리하고 DCM/IPA(5:1, 3mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기물을 염수(5 mL x 3)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 농축하고, prep-TLC(DCM/MeOH(NH₃)=10:1)로 정제하여 표제 화합물(5mg, 수율: 15%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.26 (s, 1H), 7.20 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.87 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.13 - 4.99 (m, 1H), 4.12 (s, 2H), 4.05 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.98 - 2.88 (m, 2H), 2.44 (s, 3H), 1.80 - 1.66 (m, 1H), 1.64 - 1.50 (m, 1H), 1.50 - 1.35 (m, 2H), 1.30 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.93 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 385 (M+1)⁺.

화합물 A101: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(2-메톡시-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올

((R or S)-3-((4-amino-7-(2-methoxy-4-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: (R 또는 S)-2-(2-(벤질옥시)에틸)옥시란

교반기가 있는 반응기 R-1을 설정. (참고: 반응기 R-1: 500mL 병), NaH(19.1g, 0.54X 중량 기준, 60% 순도)를 반응기 R-1에 충전. THF(210mL, 6.00X 부피 기준)를 반응기 R-1에 충전. (R 또는 S)-2-(옥시란-2-일)에탄-1-올(35.0g, 1.00X 중량 기준)을 반응기에 0℃에서 충전. 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반. 0℃에서 반응기 R-1에 BnBr(81.5g, 2.33X 중량 기준) 및 TBAI(14.7g, 0.42X 중량 기준)를 충전. 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반. TLC(석유 에테르/에틸 아세테이트 = 3/1, R_f = 0.42)는 반응이 완료된 것으로 나타났다. 혼합물에 H₂O(150mL, 4.29X 부피 기준)를 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc(200mL x 2, 11.4X 부피 기준)로 추출. 유기층을 합하고 유기층을 염수로 세척. 유기층을 Na₂SO₄로 건조. 유기층을 농축하여 조 생성물을 얻었다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(SiO₂, 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 50/1 내지 5/1)로 정제하였다. 노란색 오일로 목적 화합물(40.0g, 56.5% 수율)을 얻었다. ¹ HNMR:400 MHz CDCl_3: δ 7.30 - 7.36 (m, 5H), 4.55 (s, 2H), 3.62 - 3.66 (m, 2H), 3.08 - 3.09 (m, 1H), 2.78 - 2.81 (m, 1H), 2.53 - 2.55 (m, 1H), 1.90 - 1.92 (m, 1H), 1.81 - 1.82 (m, 1H) ppm.

단계 B: (R 또는 S)-1-(벤질옥시)헥산-3-올

교반기가 있는 반응기 R-1을 설정. (참고: 반응기 R-1: 1L 병), 반응기 R-1에 EtMgBr(150mL, 3.75X 부피 기준)을 충전. 반응기 R-1에 THF(240mL, 6.00X 부피 기준)를 충전. CuI(0.85g, 0.02X 중량 기준)를 0℃에서 반응기 R-1에 충전. 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반. (R 또는 S)-2-(2-(벤질옥시)에틸)옥시란(40.0g, 1.00X 중량 기준)을 반응기 R-1에 충전. 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반. TLC(석유 에테르/에틸 아세테이트 = 3/1, R_f = 0.35)는 반응이 완료된 것으로 나타났다. aq.NH₄Cl(200mL, 5.00X 부피 기준)을 혼합물에 첨가. 혼합물을 EtOAc(200mL x 2, 10.0X 부피 기준)로 추출. 유기층을 합하고 유기층을 염수로 세척. Na₂SO₄로 유기층을 건조. 조 생성물을 얻기 위해 유기층을 농축. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(SiO₂, 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 50/1 내지 5/1)로 정제하였다. 노란색 오일로 목적 생성물(22.7g, 47.1% 수율, 97.0% 순도)을 얻었다. ¹ HNMR: 400 MHz CDCl_3: δ 7.30 - 7.38 (m, 5H), 4.54 (s, 2H), 3.74 - 3.83 (m, 1H), 3.69 - 3.73 (m, 1H), 3.65 - 3.67 (m, 1H), 2.87 (s, 1H), 1.75 - 1.77 (m, 2H), 1.36 - 1.48 (m, 4H), 0.92 - 0.95 (m, 3H) ppm.

단계 C: (R 또는 S)-2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민

DMF(100mL) 중 (R 또는 S)-1-(벤질옥시)헥산-3-올(10.0g, 48.07mmol)의 용액에 N₂하에 0℃에서 NaH(3.8g, 95.0mmol)를 첨가하였다. 25℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, 2-클로로-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(18.8g, 40.0mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 aq NH₄Cl(80mL)로 켄칭하고 EtOAc(3 x 100mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물(3 x 50mL), 염수(3 x 50mL)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 진공 하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(50%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(24.9g, 97%)을 수득하였다. MS: M/e 642 (M+1)⁺.

단계 D: tert-부틸 (2-(4-포르밀-3-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(20mL) 중 4-하이드록시-2-메톡시벤즈알데하이드(304g, 2mmol)의 용액에 tert-부틸(2-하이드록시에틸)(메틸)카바메이트(350g, 2mmol) 및 PPh₃(665g, 2.5mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 보호하고 0℃까지 냉각시켰다. THF(5ml) 중 DIAD(505 mg, 2.5 mmol)의 용액을 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(300mg, 48.5%)을 얻었다. MS: m/e: 310 (M+1)⁺.

단계 E: tert-부틸 (2-(4-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-3-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(10mL) 중 (R 또는 S)-2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(237mg, 0.37mmol)의 용액에 n-BuLi(1.6M, 0.7mL, 1.1mmol)의 용액을 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 tert-부틸(2-(4-포르밀-3-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(340mg, 1mmol)의 현탁액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 후 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(20 mL X 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(100mg, 28.4%)을 얻었다. MS: M/e 951 (M+1)⁺.

단계 F: tert-부틸 (R 또는 S)-(2-(4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-3-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카바메이트

MeOH(20mL) 중 tert-부틸 (2-(4-((2-(((R 또는 S)-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)의 용액에 Pd/C(200mg)를 첨가하였다. 혼합물을 수소로 보호하고 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 진공에서 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(60mg, 67.6%)을 얻었다. MS: m/e: 845 (M+1)⁺.

단계 G: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(2-메톡시-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A101 )

TFA(9mL) 중 단계 F의 생성물(60mg, 0.071mmol)의 혼합물에 H₂O(1mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 40℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 2N NaOH(10mL) 용액 및 DCM(20mL)을 첨가하고 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 분리하였다. 유기상을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 정제용-HPLC로 정제하여 목적 화합물(8mg, 25.3%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.88 (br.s, 2H), 8.38 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.10 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.61 (s, 1H), 6.49 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.08 (m, 1H), 4.21 (s, 2H), 4.00 (s, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.49 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.30 (s, 2H), 2.62 (s, 3H), 1.78 (s, 2H), 1.62 (s, 2H), 1.41 - 1.28 (m, 2H), 0.87 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 445 (M+1)⁺.

화합물 A102: 3-((4-아미노-7-(3-클로로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올(3-((4-amino-7-(3-chloro-4-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: tert-부틸(2-(2-클로로-4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카바메이트

THF(20mL) 중 3-클로로-4-하이드록시벤즈알데하이드(1.56g, 10mmol)의 용액에 tert-부틸(2-하이드록시에틸)(메틸)카바메이트(1.75g, 10mmol) 및 PPh₃(3.4g, 13mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 보호하고 0℃까지 냉각시켰다. THF(5ml) 중 DIAD(2.6g, 13mmol)의 용액을 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(1.6g, 49.8%)을 얻었다. MS: m/e: 314 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-(4-((2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-2-클로로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(10mL) 중 2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(288mg, 0.5mmol)의 용액에 n-BuLi(1.6M, 1.25mL, 2mmol)의 용액을 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 tert-부틸(2-(2-클로로-4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(313mg, 1mmol)의 현탁액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 후 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(20 mL X 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(320mg, 71.8%)을 얻었다. MS: M/e 896 (M+1)⁺.

단계 C: 3-((4-아미노-7-(3-클로로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A102 )

TFA(4mL) 중 단계 C의 생성물(320mg, 0.357mmol)의 혼합물에 Et₃SiH(4 mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 85℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 TFA(5 mL)를 첨가하고 반응물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(25mg, 15.6%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.12 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.21 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.07-5.01 (m, 1H), 4.44 (s, 1H), 4.07 (s, 4H), 3.49 (s, 2H), 2.93 (d, J = 4.5 Hz, 2H), 2.41 (s, 3H), 1.83 - 1.71 (m, 2H), 1.60 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 1.38 - 1.25 (m, 2H), 0.85 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 449 (M+1)⁺.

화합물 A103: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(3-메틸-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올((R or S)-3-((4-amino-7-(3-methyl-4-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: tert-부틸 (2-(4-포르밀-2-메틸페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(20mL) 중 4-하이드록시-3-메틸벤즈알데하이드(1.36g, 10mmol)의 용액에 tert-부틸 (2-하이드록시에틸)(메틸)카바메이트(1.75g, 10mmol) 및 PPh₃(3.4g, 13mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 보호하고 0℃까지 냉각시켰다. THF(5ml) 중 DIAD(2.6g, 13mmol)의 용액을 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(1.7g, 58%)을 얻었다. MS: m/e: 294 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-(4-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-2-메틸페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(10mL) 중 (R 또는 S)-2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(384mg, 0.6mmol)의 용액에 n-BuLi(1.6M, 0.75mL, 1.2mmol)의 용액을 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 tert-부틸(2-(4-포르밀-2-메틸페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(300mg, 1mmol)의 현탁액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 후 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(20mL X 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 HPLC로 정제하여 목적 화합물(400mg, 71.4%)을 얻었다. MS: M/e 935 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (R 또는 S)-(2-(4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-2-메틸페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

MeOH(20mL) 중 tert-부틸 (2-(4-((2-(((R 또는 S)-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-2-메틸페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트(400mg, 0.428mmol)의 용액에 Pd/C(400mg)를 첨가하였다. 혼합물을 수소로 보호하고 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 진공에서 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(200mg, 56.4%)을 얻었다. MS: m/e: 829 (M+1)⁺.

단계 D: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(3-메틸-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A103 )

TFA(9mL) 중 단계 C의 생성물(200mg, 0.24mmol) 혼합물에 H₂O(1mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 40℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 2N NaOH(10mL) 용액 및 DCM(20mL)을 첨가하고 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 분리하였다. 유기상을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(40mg, 38.8%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.08 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.07 (d, J = 10.3 Hz, 2H), 6.82 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 5.11 - 5.02 (m, 1H), 4.45 (s, 1H), 4.01 (s, 2H), 3.96 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.49 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 2.84 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.79 (dd, J = 12.5, 6.1 Hz, 2H), 1.65 - 1.58 (m, 2H), 1.33 (dt, J = 14.5, 7.1 Hz, 2H), 0.86 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 429 (M+1)⁺.

화합물 A104: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(3-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올((R or S)-3-((4-amino-7-(3-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: tert-부틸 (2-(3-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(60mL) 중 3-하이드록시벤즈알데하이드(2g, 16.39mmol), tert-부틸(2-하이드록시에틸)(메틸)카바메이트(2.9g, 16.57mmol) 및 PPh₃(6.4g, 24.4mmol)의 용액에 0℃에서 N₂하에 THF(20mL) 중 DTAD(4.1g, 17.83mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 물(50mL)로 켄칭하고 EtOAc(3 x 80mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 수성 NaHCO₃(3 x 50mL), 염수(50mL)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 진공 하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(20%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(4.3g, 조 물질)을 수득하였다. MS: M/e 302(M+Na)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-(3-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7일)(하이드록시)메틸)페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(20mL) 중(R 또는 S)-2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(500mg, 0.78mmol)의 용액에 -78℃에서 N₂하에 n-BuLi(2mL, 3.2mmol)에 첨가하였다. -78℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, tert-부틸(2-(3-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(870mg, 조 물질)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 수성 NH₄Cl(30mL)로 켄칭하고 DCM(3 x 30mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(50%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(150mg, 21%)을 수득하였다. MS: M/e 921(M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (R 또는 S)-(2-(3-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)페녹시)에틸)(메틸)카바메이트

MeOH(20mL) 중 tert-부틸 (2-(3-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7일)(하이드록시)메틸)페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트(150mg, 0.163mmol)의 용액에 Pd/C(150mg) 및 AcOH(0.1mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 H₂(1 atm) 하에 40℃에서 24시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 함께 합하고 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(90%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(120mg, 90%)을 수득하였다. MS: M/e 815 (M+1)⁺.

단계 D: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(3-(2(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1,f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A104 )

tert-부틸 (R 또는 S)-(2-(3-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(120mg, 0.147mmol)를 N₂하에서 TFA(3mL) 및 H₂O(0.3mL)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료 후, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 물(20mL) 및 DCM(20mL)으로 희석하고 수성상은 pH=1~2를 조정하기 위한 1N HCl의 산이었다. 수성상을 DCM(3 x 30mL)으로 세척하고 2 N NaOH를 기본으로 하여 pH=13~14로 조정하고 DCM/i-PrOH(5/1, 3 x 100mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 정제용 TLC(DCM/CH₃OH(NH₃) = 15/1 내지 10/1)로 정제하여 표제 화합물(30mg)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.29 (s, 1H), 7.23 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.99-6.79 (m, 3H), 5.17 (s, 1H), 4.18 (s, 2H), 4.13 (s, 2H), 3.64 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 3.19 (s, 2H), 2.61 (s, 3H), 1.96-1.83 (m, 2H), 1.77-1.56 (m, 2H), 1.48-1.31 (m, 2H), 0.90 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 415 (M+1)⁺.

화합물 A105 및 화합물 A106: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(3-플루오로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올((R or S)-3-((4-amino-7-(3-fluoro-4-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol), 및 (S 또는 R)-3-((4-아미노-7-(3-플루오로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올((S or R)-3-((4-amino-7-(3-fluoro-4-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

및

화합물 A91 3-((4-아미노-7-(3-플루오로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올을 prep-SFC에 의해 2개의 광학 이성질체 화합물 A105 및 화합물 A106으로 분리하였다. prep-SFC의 조건은 아래와 같다.

화합물 A105 (R or S 광학 이성질체 1):¹HNMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.31 (s, 1H), 7.12 - 6.99 (m, 3H), 5.21 - 5.10 (m, 1H), 4.18 - 4.08 (m, 4H), 3.70 - 3.58 (m, 2H), 3.03 - 2.92 (m, 2H), 2.47 (s, 3H), 1.96 - 1.82 (m, 2H), 1.80 - 1.60 (m, 2H), 1.45 - 1.30 (m, 2H), 0.90 (t, J = 6.8 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 433 (M+1)⁺.

화합물 A106 (S or R 광학 이성질체 2):¹HNMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.31 (s, 1H), 7.12 - 6.98 (m, 3H), 5.22 - 5.12 (m, 1H), 4.19 - 4.11 (m, 4H), 3.70 - 3.59 (m, 2H), 3.04 - 2.97 (m, 2H), 2.49 (s, 3H), 1.96 - 1.81 (m, 2H), 1.79 - 1.58 (m, 2H), 1.50 - 1.30 (m, 2H), 0.90 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 433 (M+1)⁺.

화합물 A107: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(2-메틸-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올((R or S)-3-((4-amino-7-(2-methyl-4-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: tert-부틸 (2-(4-포르밀-3-메틸페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(20mL) 중 4-하이드록시-2-메틸벤즈알데히드(1.36g, 10mmol)의 용액에 tert-부틸 (2-하이드록시에틸)(메틸)카르바메이트(1.7g, 10mmol) 및 PPh₃(3.4g, 13 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 보호하고 0℃까지 냉각시켰다. THF(5ml) 중 DIAD(2.6g, 13mmol)의 용액을 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(1.5g, 51.2%)을 얻었다. MS: m/e: 294 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-(4-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-3-메틸페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(10mL) 중 (R 또는 S)-2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(530mg, 0.82mmol)의 용액에 n-BuLi(1.6M, 1mL, 1.6mmol)의 용액을 -75 ~ -65℃의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 tert-부틸(2-(4-포르밀-3-메틸페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(400mg, 1.36mmol)의 현탁액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 후 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(20mL X 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(400mg, 52.2%)을 얻었다. MS: M/e 935 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (R 또는 S)-(2-(4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-3-메틸페녹시)에틸)(메틸)카바메이트

MeOH(20mL) 중 tert-부틸 (2-(4-((2-(((R 또는 S)-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질) 아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-3-메틸페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트(400mg, 0.42mmol)의 용액에 Pd/C(400mg)를 첨가하였다. 혼합물을 수소 하에 두고 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 진공에서 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(200mg, 57.6%)을 얻었다. MS: m/e: 829 (M+1)⁺.

단계 D: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(2-메틸-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A107 )

TFA(9mL) 중 단계 C의 생성물(200mg, 0.24mmol)의 혼합물에 H₂O(1mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 40℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 2N NaOH(10mL) 용액 및 DCM(20mL)을 첨가하고 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 분리하였다. 유기상을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(36mg, 34.9%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.10 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 7.08 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.77 (s, 1H),6.68 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.5 (br.s, 1H), 4.02 (s, 2H), 3.96 (s, 2H), 3.48 (s, 2H), 2.83 (d, J = 3.3 Hz, 2H), 2.34 (d, J = 2.7 Hz, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.77 (s, 2H), 1.60 (s, 2H), 1.39 - 1.26 (m, 2H), 0.86 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 429 (M+1)⁺.

화합물 A108: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(2-클로로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올((R or S)-3-((4-amino-7-(2-chloro-4-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: tert-부틸 (2-(3-클로로-4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(20 mL) 중 2-클로로-4-하이드록시벤즈알데하이드(1.56g, 10mmol)의 용액에 tert-부틸 (2-하이드록시에틸)(메틸)카바메이트(1.75g, 10mmol) 및 PPh₃(3.4g, 13mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 보호하고 0℃까지 냉각시켰다. THF(5ml) 중 DIAD(2.6g, 13mmol)의 용액을 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(0.8g, 25.6%)을 얻었다. MS: m/e: 314 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-(4-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(4-메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-3-클로로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(10mL) 중 (R 또는 S)-2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(288mg, 0.5mmol)의 용액에 n-BuLi(1.6M, 1.25mL, 2mmol)의 용액을 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 tert-부틸(2-(3-클로로-4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(313mg, 1mmol)의 현탁액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 후 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(20mL X 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(120mg, 26.8%)을 얻었다. MS: M/e 895 (M+1)⁺.

단계 C: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(2-클로로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A108 )

TFA(4mL) 중 단계 C의 생성물(120mg, 0.134mmol)의 혼합물에 Et₃SiH(4mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 85℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 TFA(5mL)를 첨가하고 반응물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 진공에서 농축하고 잔류물을 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(15mg, 25%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.13 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.25 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.86 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.09 - 5.01 (m, 1H), 4.5 (br.s, 2H), 4.14 (s, 2H), 4.02 (t, J = 4.9 Hz, 2H), 3.48 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 2.85 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H), 1.77 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 1.59 (d, J = 4.6 Hz, 2H), 1.31 (dt, J = 14.5, 7.0 Hz, 2H), 0.85 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 449 (M+1)⁺.

화합물 A109: (3R 또는 S)-3-((4-아미노-7-((6-((1-(메틸아미노)프로판-2-일)옥시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올((3R or S)-3-((4-amino-7-((6-((1-(methylamino)propan-2-yl)oxy)pyridin-3-yl)methyl)imidazo [2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: tert-부틸 (2-하이드록시프로필)(메틸)카르바메이트

THF(80mL) 중 tert-부틸 메틸(2-옥소에틸)카바메이트(3.9g, 22.5mmol)의 용액에 -0℃에서 N₂하에 CH₃BrMg(24.8mL, 24.8mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 수성 NH₄Cl(50mL)로 켄칭하고 EtOAc(3 x 50mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(50%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(3.87g, 91%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 4.64 (s, 1H), 3.77 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 3.14 (dd, J = 13.6, 5.2 Hz, 1H), 2.97 (dd, J = 13.6, 6.8 Hz, 1H), 2.89-2.75 (m, 3H), 1.36 (s, 9H), 1.00 (d, J = 5.6 Hz, 3H) ppm.

단계 B: tert-부틸(2-(4-포르밀페녹시)프로필)(메틸)카바메이트

디옥산(10mL) 중 6-클로로니코틴알데하이드(500mg, 3.52mmol), tert-부틸(2-하이드록시프로필)(메틸)카바메이트(800mg, 4.23mmol), Pd₂(dba)₃₍240mg, 0.262mmol) 및 Cs₂CO₃(2.3g, 7.05mmol)의 용액에 N₂하에 RuPhos(247g, 0.528mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 95℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 함께 합하고 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(30%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(600mg, 58%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 9.95 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.11 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.91 (s, 1H), 5.57 (s, 1H), 3.43 (s, 2H), 2.80 (d, J = 9.2 Hz, 3H), 1.35 (s, 9H), 1.27 (d, J = 5.6 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 295(M+H)⁺.

단계 C: tert-부틸 (2-((5-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)피리딘-2-일)옥시)프로필)(메틸)카르바메이트

THF(15mL) 중 (R 또는 S)-2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(600mg, 0.934mmol)을 -78℃에서 N₂하에 n-BuLi(0.88mL, 1.41mmol)를 첨가하였다. -78℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, tert-부틸(2-(4-포르밀페녹시)프로필)(메틸)카바메이트(328mg, 1.12mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 수성 NH₄Cl(30mL)로 켄칭하고 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(50%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(510mg, 58%)을 수득하였다. MS: M/e 936 (M+H)⁺.

단계 D: tert-부틸 (2-((5-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-(((R 또는 S)-1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)피리딘-2-일)옥시)프로필)(메틸)카르바메이트

MeOH(30mL) 중 tert-부틸 (2-((5-((2-(((R 또는 S)-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)피리딘-2-일)옥시)프로필)(메틸)카르바메이트(410mg, 0.438mmol)의 용액에 Pd/C(410mg) 및 AcOH(0.4mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 H₂(1atm) 하에 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 함께 합하고 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(70%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(180mg, 50%)을 수득하였다. MS: M/e 830 (M+H)⁺.

단계 E: (3R 또는 S)-3-((4-아미노-7-((6-((1-(메틸아미노)프로판-2-일)옥시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올(화합물 A109)

tert-부틸 (2-((5-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-(((R 또는 S)-1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)피리딘-2-일)옥시)프로필)(메틸)카바메이트(180mg, 0.217mmol)를 N₂하에 TFA(3mL) 및 H₂O(0.3mL)에서 용해시켰다. 반응 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료 후, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 물(20mL) 및 DCM(20mL)으로 희석하고 수성상은 pH=1~2로 조정하기 위한 1N HCl의 산이었다. 수성상을 DCM(3 x 20mL)으로 세척하고 2 N NaOH를 기반으로 pH = 13~14로 조정하고 DCM/i-PrOH(5/1, 3 x 100mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 prep-TLC(DCM/CH₃OH(NH₃) = 15/1)로 정제하여 표제 화합물(50mg, 53%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 8.09 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 7.66-7.54 (m, 1H), 7.33 (s, 1H), 6.72 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.30-5.13 (m, 2H), 4.14 (s, 2H), 3.65 (s, 2H), 2.94-2.69 (m, 2H), 2.41 (s, 3H), 1.98-1.80 (m, 2H), 1.80-1.55 (m, 2H), 1.53-1.34 (m, 2H), 1.29 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.92 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 430 (M+H)⁺.

화합물 A110: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(4-(3-(메틸아미노)프로필)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올((R or S)-3-((4-amino-7-(4-(3-(methylamino)propyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: 3-(4-브로모페닐)-N-메틸프로판아미드

DMF(20mL) 중 3-(4-브로모페닐)프로판산(2g, 8.73mmol) 및 CH₃NH₂HCl(712mg, 10.47mmol) 및 HATU(3.98g, 10.47mmol)의 용액에 DIEA(2.7g, 20.93mmol)를 N₂하에 -0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 냉수(50mL)로 켄칭하고 EtOAc(3 x 80 mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 물(50mL), 염수(3 x 50mL)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 진공 하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(60%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(3 g, 조 물질)을 수득하였다. MS: M/e 242, 244. (M+H)⁺.

단계 B: 3-(4-브로모페닐)-N-메틸프로판-1-아민

THF(50mL) 중 3-(4-브로모페닐)-N-메틸프로판아미드(2.6g, 조 물질)의 용액에 THF(42mL, 42.0mmol) 중 BH₃를 N₂하에 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하고 70℃에서 추가로 4시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고 MeOH(20mL) 및 6N HCl(20mL)을 적가하였다. 혼합물을 0.5시간 동안 환류시키고 용매를 진공에서 제거하였다. 수성상은 50% NaOH를 기본으로 하고 MTBE(3 x 80mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 조 생성물(2.5g)을 얻었다. MS: M/e 228, 230. (M+H)⁺.

단계 C: tert-부틸 (3-(4-브로모페닐)프로필)(메틸)카르바메이트

DCM(30mL) 중 3-(4-브로모페닐)-N-메틸프로판-1-아민(2.5g, 조 물질)의 용액에 Et₃N(1.8g, 17.82mmol) 및 (Boc)₂O(2.3g, 10.55mmol)을 N₂하에 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 물(30mL)로 켄칭하고 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(20%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(1.8g, 3단계에 대해 63%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 7.46 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 7.19 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 3.15 (s, 2H), 2.76 (s, 3H), 2.52 (s, 2H), 1.73 (s, 2H), 1.35 (s, 9H) ppm. MS: M/e 350, 352 (M+H)⁺.

단계 D: tert-부틸 (3-(4-포르밀페닐)프로필)(메틸)카르바메이트

THF(25mL) 중 tert-부틸(3-(4-브로모페닐)프로필)(메틸)카바메이트(1.7g, 5.18mmol)의 용액에 n-BuLi(4.8mL, 7.68mmol)를 N₂하에 - 78℃에서 첨가하였다. 0.5시간 동안 교반한 후, DMF(570mg, 7.8mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 25℃로 가온하고 0.5시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 aq NH₄Cl(50mL)로 켄칭하고 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(40%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(1.2g, 84%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 9.97 (s, 1H), 7.84 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.46 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 3.18 (s, 2H), 2.77 (s, 3H), 2.64 (s, 2H), 1.80 (s, 2H), 1.36 (s, 9H) ppm. MS: M/e 300 (M+Na)⁺.

단계 E: tert-부틸 (3-(4-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)페닐)프로필)(메틸)카르바메이트

THF(15mL) 중 (R 또는 S)-2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(600mg, 0.934 mmol)의 용액에 N₂하에 -78℃에서 n-BuLi(0.88 mL, 1.41 mmol)를 첨가하였다. -78℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, tert-부틸(3-(4-포르밀페닐)프로필)(메틸)카바메이트(310mg, 1.12mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 수성 NH₄Cl(30mL)로 켄칭하고 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(50%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(660mg, 77%)을 수득하였다. MS: M/e 919 (M+H)⁺.

단계 F: tert-부틸 (R 또는 S)-(3-(4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)페닐)프로필)(메틸)카르바메이트

MeOH(30mL) 중 tert-부틸 (3-(4-((2-(((R 또는 S)-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)페닐)프로필)(메틸)카르바메이트(560mg, 0.609mmol)의 용액에 Pd/C(560mg) 및 AcOH(0.5mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 H₂(1atm) 하에 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 함께 합하고 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(60%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(470mg, 94%)을 수득하였다. MS: M/e 813 (M+H)⁺.

단계 G: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(4-(3-(메틸아미노)프로필)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A110 )

tert-부틸 (R 또는 S)-(3-(4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)페닐)프로필)(메틸)카르바메이트(470mg, 0.578mmol)를 N₂하에서 TFA(5mL) 및 H₂O(0.5mL)에서 용해시켰다. 반응 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료 후, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 물(20mL) 및 DCM(20mL)으로 희석하고 수성상은 pH = 1~2로 조정하기 위한 1N HCl의 산이었다. 수성상을 DCM(3 x 20mL)으로 세척하고 2 N NaOH를 기반으로 pH = 13~14로 조정하고 DCM/i-PrOH(5/1, 3 x 100mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 정제용 TLC(DCM/CH₃OH(NH₃) = 15/1)로 정제하여 표제 화합물(125mg, 53%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.27 (s, 1H), 7.21 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 5.18 (s, 1H), 4.16 (s, 2H), 3.65 (s, 2H), 2.63 (dd, J = 13.6, 6.8 Hz, 4H), 2.41 (s, 3H), 1.95-1.76 (m, 4H), 1.76-1.58 (m, 2H), 1.41 (s, 2H), 0.91 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 413 (M+H)⁺.

화합물 A111: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(2,3-디플루오로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올((R or S)-3-((4-amino-7-(2,3-difluoro-4-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: tert-부틸 (2-(2,3-디플루오로-4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(20mL) 중 2,3-디플루오로-4-하이드록시벤즈알데히드(1.58g, 10mmol)의 용액에 tert-부틸 (2-하이드록시에틸)(메틸)카르바메이트(1.75g, 10mmol) 및 PPh₃(3.4g, 13mmol)을 첨가하였다, 혼합물을 질소로 보호하고 0℃까지 냉각시켰다. THF(5ml) 중 DIAD(2.6g, 13mmol)의 용액을 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(1.1g, 34.9%)을 얻었다. MS: m/e: 316 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-(4-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-2,3-디플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(10mL) 중 (R 또는 S)-2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(320mg, 0.5mmol)의 용액에 n-BuLi(1.6M, 0.7mL, 1.1mmol)의 용액을 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 tert-부틸(2-(2,3-디플루오로-4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(315mg, 1mmol)의 현탁액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 후 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(20mL X 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 HPLC로 정제하여 목적 화합물(100mg, 23.3%)을 얻었다. MS: M/e 957 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (R 또는 S)-(2-(4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-2,3-디플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

MeOH(20mL) 중 tert-부틸 (2-(4-((2-(((R 또는 S)-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-2,3-디플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트(100mg, 0.104mmol)의 용액에 Pd/C(100mg)를 첨가하였다. 혼합물을 수소로 보호하고 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 진공에서 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(60 mg, 68.1%)을 얻었다. MS: m/e: 851 (M+1)⁺.

단계 D: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(2,3-디플루오로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A111 )

TFA(9mL) 중 단계 C의 생성물(60mg, 0.07mmol)의 혼합물에 H₂O(1mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 40℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 2N NaOH(10mL) 용액 및 DCM(20mL)을 첨가하고 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 분리하였다. 유기상을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(4mg, 12.9%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.32 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.88 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 5.17 (s, 1H), 4.20 (s, 4H), 3.63 (s, 2H), 3.14 (s, 2H), 2.57 (s, 3H), 1.89 (s, 2H), 1.68 (d, J = 5.7 Hz, 2H), 1.40 (s, 2H), 0.91 (t, J = 7.1 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 451 (M+1)⁺.

화합물 A112: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(2,5-디플루오로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올((R or S)-3-((4-amino-7-(2,5-difluoro-4-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: tert-부틸 (2-(2,5-디플루오로-4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF (20mL) 중 2,5-디플루오로-4-하이드록시벤즈알데히드(316 mg, 2 mmol)의 용액에 tert-부틸 (2-하이드록시에틸)(메틸)카르바메이트(350mg, 2mmol) 및 PPh₃(655mg, 2.5mmol)를 첨가하였다, 혼합물을 질소로 보호하고 0℃까지 냉각시켰다. THF(5ml) 중 DIAD(505mg, 2.5mmol)의 용액을 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(448g, 71.1%)을 얻었다. MS: m/e: 316 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-(4-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-2,5-디플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(10mL) 중 (R 또는 S)-2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(448 mg, 0.7 mmol)의 용액에 n-BuLi(1.6M, 0.9mL, 1.4mmol)의 용액을 -75 ~ -65℃의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 tert-부틸(2-(2,5-디플루오로-4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(310mg, 1mmol)의 현탁액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 후 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(20mL X 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 HPLC로 정제하여 목적 화합물(280mg, 41.8%)을 얻었다. MS: M/e 957 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (R 또는 S)-(2-(4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-2,5-디플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

MeOH(20mL) 중 tert-부틸 (2-(4-((2-(((R 또는 S)-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-2,5-디플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트(280mg, 0.295mmol)의 용액에 Pd/C(300mg)를 첨가하였다. 혼합물을 수소로 보호하고 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 진공에서 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(110mg, 44%)을 얻었다. MS: m/e: 851 (M+1)⁺.

단계 D: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(2,5-디플루오로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A112 )

TFA(9mL) 중 단계 C의 생성물(110mg, 0.129mmol)의 혼합물에 H₂O(1mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 40℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 2N NaOH(10mL) 용액 및 DCM(20mL)을 첨가하고 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 분리하였다. 유기상을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(22mg, 37.9%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.30 (s, 1H), 7.09 - 7.01 (m, 1H), 7.01 - 6.88 (m, 1H), 5.25 - 5.10 (m, 1H), 4.14 (s, 4H), 3.65 (s, 2H), 2.99 (s, 2H), 2.47 (s, 3H), 1.91 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 1.74 - 1.63 (m, 2H), 1.40 (s, 2H), 0.90 (d, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 451(M+1)⁺.

화합물 A113: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(2-메톡시-5-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올((R or S)-3-((4-amino-7-(2-methoxy-5-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: tert-부틸 (2-(3-포르밀-4-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(20 mL) 중 5-하이드록시-2-메톡시벤즈알데히드(1g, 6.58mmol), tert-부틸 (2-하이드록시에틸)(메틸)카바메이트(1.15g, 6.57mmol) 및 PPh₃(2.6g, 9.92mmol)의 용액에 N₂하에서 0℃에서 DTAD(1.7g, 7.39mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 물(50mL)로 켄칭하고 EtOAc(3 x 50mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 수성 NaHCO₃(3 x 50mL), 물(30mL), 염수(50mL)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 진공 하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(20%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(1.7 g, 조 물질)을 수득하였다. MS: M/e 332 . (M+Na)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-(3-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-4-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(20mL) 중 (R 또는 S)-2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(500mg, 0.78mmol)의 용액에 N₂하에 -78℃에서 n-BuLi(2.4mL, 3.84mmol)에 첨가하였다. -78℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, tert-부틸(2-(3-포르밀-4-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(720mg, 조 물질)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 수성 NH₄Cl(50mL)로 켄칭하고 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(60%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(370mg, 50%)을 수득하였다. MS: M/e 952 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (R 또는 S)-(2-(3-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-4-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카바메이트

MeOH(20mL) 중 tert-부틸 (2-(3-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-4-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트(370mg, 0.389mmol)의 용액에 Pd/C(370mg) 및 AcOH(0.3mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 H₂(1atm) 하에 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 함께 합하고 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(80%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(200 mg, 61%)을 수득하였다. MS: M/e 845 (M+1)⁺.

단계 D: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(2-메톡시-5-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A113 )

tert-부틸 (R 또는 S)-(2-(3-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-4-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(200mg, 0.237mmol)를 N₂하에 TFA(5mL) 및 H₂O(0.5mL)에서 용해시켰다. 반응 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료 후, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 물(20mL) 및 DCM(20mL)으로 희석하고 수성상은 pH = 1~2로 조정하기 위한 1N HCl의 산이었다. 수성상을 DCM(3 x 20mL)으로 세척하고 2 N NaOH를 기반으로 pH = 13~14로 조정하고 DCM/i-PrOH(5/1, 3 x 100mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 정제용 TLC(DCM/CH₃OH(NH₃) = 15/1)로 정제하여 표제 화합물(60mg, 57%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.20 (s, 1H), 6.89 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.84-6.78 (m, 1H), 6.75 (s, 1H), 5.27-5.09 (m, 1H), 4.20-4.04 (m, 2H), 3.99 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.65 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.95 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 2.45 (s, 3H), 1.90 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 1.81-1.56 (m, 2H), 1.52-1.30 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 445 (M+1)⁺.

화합물 A114: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(3,5-디플루오로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올((R or S)-3-((4-amino-7-(3,5-difluoro-4-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: tert-부틸 (2-(2,6-디플루오로-4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(20mL) 중 3,5-디플루오로-4-하이드록시벤즈알데히드(1.58g, 10mmol)의 용액에 tert-부틸 (2-하이드록시에틸)(메틸)카르바메이트(1.7g, 10mmol) 및 PPh₃(3.4g, 13mmol)을 첨가하였다, 혼합물을 질소로 보호하고 0℃까지 냉각시켰다. THF(5 ml) 중 DIAD(2.6g, 13mmol)의 용액을 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(1g, 31.7%)을 얻었다. MS: m/e: 316 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-(4-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(3,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-2,6-디플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(10mL) 중 (R 또는 S)-2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(300mg, 0.5mmol)의 용액에 n-BuLi(1.6M, 0.9mL, 1.5mmol)의 용액을 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(2 mL) 중 tert-부틸(2-(2,6-디플루오로-4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(315mg, 1mmol)의 현탁액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 후 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(20mL X 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(280mg, 58.5%)을 얻었다. MS: M/e 957 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (R 또는 S)-(2-(4-((4-(비스(3,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-2,6-디플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

MeOH(20mL) 중 tert-부틸 (2-(4-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(3,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-2,6-디플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트(280mg, 0.292mmol)의 용액에 Pd/C(300mg)를 첨가하였다. 혼합물을 수소로 보호하고 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 진공에서 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(140mg, 56.4%)을 얻었다. MS: m/e: 851 (M+1)⁺.

단계 D: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(3,5-디플루오로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A114 )

TFA(9mL) 중 단계 C의 생성물(140mg, 0.164mmol)의 혼합물에 H₂O(1mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 40℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 2N NaOH(10mL) 용액 및 DCM(20mL)을 첨가하고 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 분리하였다. 유기상을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(9mg, 12.1%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.38 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 5.20 - 5.15 (m, 1H), 4.19 (d, J = 9.4 Hz, 4H), 3.64 (s, 2H), 3.00 (s, 2H), 2.52 (s, 3H), 1.96 - 1.84 (m, 2H), 1.75 - 1.59 (m 2H), 1.52 - 1.39 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.4 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 451 (M+1)⁺.

화합물 A115: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(2-플루오로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올((R or S)-3-((4-amino-7-(2-fluoro-4-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

THF(20mL) 중 2-플루오로-4-하이드록시벤즈알데하이드(1.4g, 10mmol)의 용액에 tert-부틸 (2-하이드록시에틸)(메틸)카바메이트(1.75g, 10mmol) 및 PPh³(3.4g, 13mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 보호하고 0℃까지 냉각시켰다. THF(5ml) 중 DIAD(2.6g, 13mmol)의 용액을 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(0.9g, 30.3%)을 얻었다. MS: m/e: 298 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-(4-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(3,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-3-플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(10mL) 중 (R 또는 S)-2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(641mg, 1mmol)의 용액에 n-BuLi(1.6M, 1.25mL, 2mmol)의 용액을 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 tert-부틸(2-(3-플루오로-4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(450mg, 1.5mmol)의 현탁액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 후 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(20mL X 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(700mg, 74.6%)을 얻었다. MS: M/e 939 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (R 또는 S)-(2-(4-((4-(비스(3,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-3-플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

MeOH(20mL) 중 tert-부틸 (2-(4-((2-(((R 또는 S)-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(3,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-3-플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트(700mg, 0.746mmol)의 용액에 Pd/C(700mg)를 첨가하였다. 혼합물을 수소로 보호하고 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 진공에서 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(350mg, 56.4%)을 얻었다. MS: m/e: 833 (M+1)⁺.

단계 D: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(2-플루오로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A115 )

TFA(18mL) 중 단계 C의 생성물(2.2g, 2.6mmol)의 혼합물에 H₂O(2mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 40℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 2N NaOH(20mL) 용액 및 DCM(60ml)을 첨가하고 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 분리하였다. 유기상을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(0.8g, 70%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.25 (s, 1H), 7.19 - 7.14 (m, 1H), 6.78 - 6.64 (m, 2H), 5.25 - 5.13 (m, 1H), 4.14 - 4.06 (m, 4H), 3.76 - 3.59 (m, 2H), 2.94 (d, J = 4.3 Hz, 2H), 2.44 (d, J = 3.1 Hz, 3H), 1.90 (s, 2H), 1.75 - 1.56 (m, 2H), 1.48 - 1.36 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 433 (M+1)⁺.

화합물 A116: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(3-메톡시-5-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올((R or S)-3-((4-amino-7-(3-methoxy-5-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: tert-부틸 (2-(3-포르밀-5-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(20mL) 3-하이드록시-5-메톡시벤즈알데히드(1g, 6.58mmol), tert-부틸(2-하이드록시에틸)(메틸)카바메이트(1.15g, 6.57mmol) 및 PPh₃(2.6g, 9.92mmol)의 용액에 DTAD(1.7g, 7.39mmol)의 용액을 N₂하에 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 물(50mL)로 켄칭하고 EtOAc(3 x 50mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 수성 NaHCO₃(3 x 50mL), 물(50mL), 염수(50mL)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 진공 하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(33%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(2g, 조 물질)을 수득하였다. MS: M/e 332 (M+Na)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-(3-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-5-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(20mL) 중 (R 또는 S)-2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(500mg, 0.78mmol)의 용액에 N₂하에 -78℃에서 n-BuLi(3.2mL, 5.12mmol)를 첨가하였다. -78℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, tert-부틸(2-(3-포르밀-5-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(1.1g, 조 물질)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 수성 NH₄Cl(30mL)로 켄칭하고 DCM(3 x 50mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(60%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(250mg, 34%)을 수득하였다. MS: M/e 951 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (R 또는 S)-(2-(3-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-5-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카바메이트

MeOH(20mL) 중 tert-부틸 (2-(3-((2-(((R 또는 S)-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-5-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트(250mg, 0.263mmol)의 용액에 Pd/C(250mg) 및 AcOH(0.26mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 H₂(1atm) 하에 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 함께 합하고 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(80%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(120mg, 54%)을 수득하였다. MS: M/e 845 (M+1)⁺.

단계 D: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(3-메톡시-5-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질) 이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A116 )

tert-부틸 (R 또는 S)-(2-(3-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-5-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(120mg, 0.142mmol)를 N₂하에 TFA(4mL) 및 H₂O(0.4mL)에서 용해시켰다. 반응 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료 후, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 물(20mL) 및 DCM(20mL)으로 희석하고 수성상은 PH=1~2로 조정하기 위한 1N HCl의 산이었다. 수성상을 DCM(3 x 20mL)으로 세척하고 2 N NaOH를 기본으로 하여 pH=13~14로 조정하고 DCM/i-PrOH(5/1, 3 x 100mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 prep-TLC(DCM/CH3OH(NH3) = 15/1)로 정제하여 표제 화합물(45mg, 71%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.31 (s, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.46 (s, 1H), 6.42 (s, 1H), 5.21-5.13 (m, 1H), 4.15 (s, 4H), 3.75 (s, 3H), 3.64 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.32 (s, 2H), 2.70 (s, 3H), 1.96-1.79 (m, 2H), 1.78-1.56 (m, 2H), 1.49-1.31 (m, 2H), 0.90 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 445 (M+1)⁺.

화합물 A117: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(4-메톡시-3-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올((R or S)-3-((4-amino-7-(4-methoxy-3-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: tert-부틸 (2-(5-포르밀-2-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(20mL) 중 3-하이드록시-4-메톡시벤즈알데하이드(1g, 6.58mmol), tert-부틸(2-하이드록시에틸)(메틸)카바메이트(1.15g, 6.57mmol) 및 PPh₃(2.6g, 9.92mmol)

DIAD(1.7 g, 8.42 mmol)의 용액을 N2하에 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 물(50mL)로 켄칭하고 EtOAc(3 x 50mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 수성 Na₂CO₃(3 x 50mL), 물(50mL), 염수(50mL)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 진공 하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(33%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(2.8g, 조 물질)을 수득하였다. MS: M/e 332. (M+Na)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-(5-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-2-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(20mL) 중 (R 또는 S)-2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(500mg, 0.78mmol)의 용액에 -78℃에서 N₂하에 n-BuLi(3.2mL, 5.12mmol)를 첨가하였다. -78℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, tert-부틸(2-(5-포르밀-2-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(830mg, 조 물질)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 aq NH₄Cl(30mL)로 켄칭하고 DCM(3 x 30mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(60%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(240mg, 32%)을 수득하였다. MS: M/e 951 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (R 또는 S)-(2-(5-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-2-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카바메이트

MeOH(20mL) 중 tert-부틸 (2-(5-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-2-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트(240mg, 0.252mmol)의 용액에 Pd/C(240 mg) 및 AcOH(0.24 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 H₂(1atm) 하에 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 함께 합하고 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(80%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(100mg, 54%)을 수득하였다. MS: M/e 845 (M+1)⁺.

단계 D: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(4-메톡시-3-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A117 )

tert-부틸 (R 또는 S)-(2-(5-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-2-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(100mg, 0.118mmol)를 N₂하에 TFA(4mL) 및 H₂O(0.4mL)에서 용해시켰다. 반응 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료 후, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 물(20mL) 및 DCM(20mL)으로 희석하고 수성상은 pH=1~2로 조정하기 위한 1N HCl의 산이었다. 수성상을 DCM(3 x 20mL)으로 세척하고 2 N NaOH를 기본으로 하여 pH=13~14로 조정하고 DCM/i-PrOH(5/1, 3 x 100mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 Prep-TLC(DCM/CH₃OH(NH₃) = 15/1)로 정제하여 표제 화합물(30mg, 58%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.27 (s, 1H), 6.99-6.86 (m, 3H), 5.22-5.18 (m, 1H), 4.18-4.04 (m, 4H), 3.83 (s, 3H), 3.70-3.61 (m, 2H), 3.08 (s, 2H), 2.61-2.49 (m, 3H), 1.96-1.79 (m, 2H), 1.78-1.54 (m, 2H), 1.51-1.34 (m, 2H), 0.90 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 445 (M+1)⁺.

화합물 A118: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(2-메톡시-3-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올((R or S)-3-((4-amino-7-(2-methoxy-3-(2-(methylamino)ethoxy)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: tert-부틸 (2-(3-포르밀-2-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(20mL) 중 3-하이드록시-2-메톡시벤즈알데히드(1g, 6.58mmol), tert-부틸 (2-하이드록시에틸)(메틸)카바메이트(1.15g, 6.57mmol) 및 PPh₃(2.6g, 9.92mmol)의 용액에 DTAD(1.7g, 7.39mmol)의 용액을 N₂하에 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 물(50mL)로 켄칭하고 EtOAc(3 x 50mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 aq NaHCO₃(3 x 50mL), 물(50mL), 염수(50mL)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 진공 하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(20%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(2.3g, 조 물질)을 수득하였다. MS: M/e 332 (M+Na)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-(3-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-2-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(20mL) 중 (R 또는 S)-2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(500mg, 0.78mmol)의 용액에 -78℃에서 N₂하에 n-BuLi(3.2mL, 5.12mmol)를 첨가하였다. -78℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, tert-부틸(2-(3-포르밀-2-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(1.1g, 조 물질)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 수성 NH₄Cl(30mL)로 켄칭하고 DCM(3 x 30mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(60%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(260mg, 35%)을 수득하였다. MS: M/e 951 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (R 또는 S)-(2-(3-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-2-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카바메이트

MeOH(20mL) 중 tert-부틸 (2-(3-((2-(((R 또는 S)-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(히드록시)메틸)-2-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트(260mg, 0.273mmol)의 용액에 Pd/C(260mg) 및 AcOH(0.26mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 H₂(1atm) 하에 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 함께 합하고 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(80%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(150mg, 65%)을 수득하였다. MS: M/e 845 (M+1)⁺.

단계 D: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(2-메톡시-3-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A118 )

tert-부틸 (R 또는 S)-(2-(3-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-2-메톡시페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(150mg, 0.177mmol)를 N₂하에 TFA(5mL) 및 H₂O(0.5mL)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료 후, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 물(20mL) 및 DCM(20mL)으로 희석하고 수성상은 pH=1~2로 조정하기 위한 1N HCl의 산이었다. 수성상을 DCM(3 x 20mL)으로 세척하고 2 N NaOH를 기본으로 하여 pH=13~14로 조정하고 DCM/i-PrOH(5/1, 3 x 100mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 Prep-TLC(DCM/CH₃OH(NH₃) = 15/1)로 정제하여 표제 화합물(48mg, 61%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.20 (s, 1H), 7.02-6.91 (m, 2H), 6.85 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.25-5.15 (m, 1H), 4.24-4.11 (m, 4H), 3.79 (s, 3H), 3.65 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.10 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.56 (s, 3H), 1.97-1.81 (m, 2H), 1.79-1.57 (m, 2H), 1.50-1.22 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 445 (M+1)⁺.

화합물 A119 및 화합물 A120: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(4-(2-(메틸아미노)에틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4] 트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올((R or S)-3-((4-amino-7-(4-(2-(methylamino)ethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol) 및 (S 또는 R)-3-((4-아미노-7-(4-(2-(메틸아미노)에틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올((S or R)-3-((4-amino-7-(4-(2-(methylamino)ethyl)benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

화합물 A95 3-((4-아미노-7-(4-(2-(메틸아미노)에틸)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올(45mg, 0.168mmol)을 Prep-SFC(Chiral PAK AD-H 컬럼, 3cm*25cm, 5㎛, 유속 45mL/분, 상: 헥산(2mM NH₃-MeOH) : IPA = 80:20, UV: 220 nm, 25℃)로 정제하여 화합물 A119(20mg) 및 화합물 A120(23mg)을 수득하였다.

화합물 A119 (광학 이성질체 1): ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.29 (s, 1H), 7.24 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.16 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 5.18 (s, 1H), 4.17 (s, 2H), 3.64 (s, 2H), 2.80 (s, 4H), 2.40 (s, 3H), 1.90 (s, 2H), 1.78-1.55 (m, 2H), 1.49-1.34 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 399 (M+1)⁺.

화합물 A120 (광학 이성질체 2): ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.31-7.25 (m, 3H), 7.19 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 5.25-5.10 (m, 1H), 4.18 (s, 2H), 3.62 (s, 2H), 3.04 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.87 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.56 (s, 3H), 1.94-1.81 (m, 2H), 1.79-1.56 (m, 2H), 1.49-1.34 (m, 2H), 0.92 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 399 (M+1)⁺.

화합물 A121: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(2-에톡시-4-(2-(메틸아미노)에톡시) 벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올((R or S)-3-((4-amino-7-(2-ethoxy-4-(2-(methylamino)ethoxy) benzyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: 4-클로로-2-에톡시벤즈알데히드

DMF(10mL) 중 4-클로로-2-하이드록시벤즈알데히드(1.56g, 10mmol) 및 K²CO₃(3.45g, 25mmol)의 혼합물에 요오도에탄(2.34g, 15mmol)을 실온에서 첨가하고 생성된 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EA(50 mL)로 희석하고 여과하였다. 여액을 염수(50mL x 3)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고 농축시켰다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(1.70g, 수율: 92%)을 얻었다. MS: M/e 185 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-(3-에톡시-4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카바메이트

디옥산(10mL) 중 4-클로로-2-에톡시벤즈알데히드(736mg, 4mmol), tert-부틸(2-하이드록시에틸)(메틸)카르바메이트(1.05g, 6mmol), Pd₂(dba)₃(183mg, 0.2mmol)의 혼합물에 RuPhos(186 mg, 0.4 mmol) 및 Cs₂CO₃(2.6 g, 8 mmol)를 N₂하에 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 냉각하고 EA(20mL)로 희석하고, 여과하고, 여액을 염수(10mL x 3)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고 농축시켰다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(500mg, 수율: 38%)을 얻었다. MS: M/e 324 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (2-(4-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-3-에톡시페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(5mL) 중 (R 또는 S)-2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(340mg, 0.53mmol)의 용액에 N₂ 분위기하에 -78℃에서 n-BuLi(1.6M, 2.0mL, 3.2mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반하였다. 그 다음, THF(3mL) 중 tert-부틸(2-(3-에톡시-4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(340mg, 1.05mmol)의 용액을 -78℃에서 시스템에 첨가하였다. 반응물을 30분 동안 교반한 다음, 실온으로 가온하고 16시간 동안 교반하였다. 반응을 실온에서 포화 NH₄Cl(00mL)로 켄칭하고 EA(10mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수(10mL x 3)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 감압하에 농축시켰다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(125mg, 수율: 25%)을 얻었다. MS: M/e 965 (M+1)⁺.

단계 D: tert-부틸 (R 또는 S)-(2-(4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-3-에톡시페녹시)에틸)(메틸)카바메이트

MeOH(5mL) 중 tert-부틸 (2-(4-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-3-에톡시페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트(180mg, 0.187mmol), Pd/C(습윤, 200mg) 및 AcOH(5 방울)의 혼합물을 실온에서 16시간 동안 H₂하에 40℃에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 고진공 하에 농축하여 표제 생성물(85mg, 조 물질)을 얻었다. MS: M/e 859 (M+1)⁺.

단계 E: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(2-에톡시-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A121 )

TFA(3mL) 중 tert-부틸 (R 또는 S)-(2-(4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-3-에톡시페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(85mg, 조 물질)를 실온에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하에 농축하였다. 잔류물을 MeOH(3mL)로 희석하고, NaOH(1mL, 4M)로 처리하고, 실온에서 1시간 동안 교반하고, 농축하여 MeOH를 제거하였다. 생성된 수용액을 DCM(3mL x 3)으로 추출하였다. 합한 유기물을 염수(5mL x 2)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 농축하고, prep-HPLC로 정제하여 표제 화합물(5.5mg, 수율: 2단계에 대해 6%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) 7.20 - 7.11 (m, 2H), 6.59 (s, 1H), 6.50 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.29 - 5.13 (m, 1H), 4.25 - 4.16 (m, 2H), 4.09 (s, 2H), 4.07 - 3.97 (m, 2H), 3.70 - 3.60 (m, 2H), 3.41 - 3.34 (m, 2H), 2.73 (s, 3H), 1.96 - 1.85 (m, 2H), 1.78 - 1.61 (m, 2H), 1.51 - 1.39 (m, 2H), 1.37 (t, J = 6.8 Hz, 3H), 0.93 (t, J = 7.2 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 459 (M+1)⁺.

화합물 A122: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-((6-(2-(메틸아미노)프로폭시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올

단계 A: tert-부틸 (1-하이드록시프로판-2-일)(메틸)카르바메이트

THF(20mL) 중 N-(tert-부톡시카르보닐)-N-메틸알라닌(1g, 4.93mmol)의 용액에 N₂하에 -0℃에서 BH₃(7.5mL, 7.5mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 그런 다음 물(5mL)을 0℃에서 적가하였다. 10분 동안 교반한 후, 10% Na₂CO₃(10mL)를 적가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 EtOAc(3 x 50mL)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수(3 x 20mL)로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고 진공 하에 농축하여 조 생성물(900mg, 96%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 4.66 (s, 1H), 4.14-3.86 (m, 1H), 3.43-3.26 (m, 2H), 2.64 (s, 3H), 1.39 (s, 9H), 0.97 (s, 3H).

단계 B: tert-부틸 (1-((5-포르밀피리딘-2-일)옥시)프로판-2-일)(메틸)카르바메이트

6-클로로니코틴알데하이드(570mg, 4.01mmol), tert-부틸(1-하이드록시프로판-2-일)(메틸)카바메이트(900mg, 4.76mmol), Pd₂(dba)₃·CHCl₃(311mg, 디옥산(20mL) 중 0.3mmol) 및 Cs₂CO₃(2.6g, 7.97mmol)를 N₂하에 RuPhos(280mg, 0.599mmol)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 95℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 함께 합하고 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(25%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(1g, 85%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ) δ 9.97 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 4.60-4.16 (m, 3H), 2.69 (s, 3H), 1.47-1.06 (m, 12H) ppm. MS: M/e 295. (M+H)⁺.

단계 C: tert-부틸 (1-((5-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)피리딘-2-일)옥시)프로판-2-일)(메틸)카르바메이트

THF(10mL) 중 (R 또는 S)-2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(600mg, 0.934mmol)의 용액에 -78℃에서 N₂하에 n-BuLi(0.88mL, 1.41mmol)를 첨가하였다. -78℃에서 0.5시간 동안 교반한 후, tert-부틸 (1-((5-포르밀피리딘-2-일)옥시)프로판-2-일)(메틸)카르바메이트(328mg, 1.12mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 2.5시간 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 수성 NH₄Cl(30mL)로 켄칭하고 DCM(3 x 30mL)으로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(70%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(700mg, 80%)을 수득하였다. MS: M/e 936 (M+H)⁺.

단계 D: tert-부틸 (1-((5-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-(((R 또는 S)-1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)피리딘-2-일)옥시)프로판-2-일)(메틸)카르바메이트

MeOH(40mL) 중 tert-부틸 (1-((5-((2-(((R 또는 S)-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)피리딘-2-일)옥시)프로판-2-일)(메틸)카르바메이트(700mg, 0.748mmol)의 용액에 Pd/C(700mg) 및 AcOH(0.8mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 H₂(1atm) 하에 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 함께 합하고 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 석유 에테르 중 에틸 아세테이트(70%)로 용리하는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물(200 mg, 32%)을 얻었다. MS: M/e 830 (M+H)⁺.

단계 E: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-((6-(2-(메틸아미노)프로폭시)피리딘-3-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A122 )

tert-부틸 (1-((5-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-(((R 또는 S)-1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)피리딘-2-일)옥시)프로판-2-일)(메틸)카르바메이트(200mg, 0.241mmol)를 N₂하에서 TFA(4mL) 및 H₂O(0.4mL)에서 용해시켰다. 반응 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. 완료 후, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 물(20mL) 및 DCM(20mL)으로 희석하고 수성상은 1N HCl을 사용하여 산이 되어 pH=1~2로 조정하였다. 수성상을 DCM(3 x 20mL)으로 세척하고 2N NaOH를 기본으로 하여 pH=13~14로 조정하고 DCM/i-PrOH(5/1, 3 x 100mL)로 추출하였다. 합한 유기층을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공하에 농축하여 잔류물을 얻었다. 잔류물을 prep-TLC(DCM/CH₃OH(NH₃) = 15/1)로 정제하여 표제 화합물(60mg, 58%)을 수득하였다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 8.13 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 6.81 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 5.20 (s, 1H), 4.32 (s, 1H), 4.18 (s, 3H), 3.67 (s, 2H), 3.16 (s, 1H), 2.51 (s, 3H), 1.91 (s, 2H), 1.80-1.60 (m, 2H), 1.54-1.31 (m, 2H), 1.23 (s, 3H), 0.94 (s, 3H) ppm. MS: M/e 430 (M+H)⁺.

단계 A: tert-부틸 (2-(3,5-디플루오로-4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(10mL) 중 3,5-디플루오로-4-하이드록시벤즈알데히드(316mg, 2mmol)의 용액에 tert-부틸 (2-하이드록시에틸)(메틸)카르바메이트(350mg, 2mmol) 및 PPh₃(655mg, 2.5mmol)를 첨가하였다, 혼합물을 질소로 보호하고 0℃까지 냉각시켰다. THF(5ml) 중 DIAD(505mg, 2.5mmol)의 용액을 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(180mg, 28.5%)을 얻었다. MS: m/e: 316 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-(4-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-3,5-디플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(10mL)에 (R 또는 S)-2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(2,4-디메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(300mg, 0.5mmol)의 용액에 n-BuLi(1.6M, 0.9mL, 1.5mmol)의 용액을 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 tert-부틸(2-(3,5-디플루오로-4-포르밀페녹시)에틸)(메틸)카바메이트(180mg, 0.57mmol)의 현탁액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 후 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(20mL X 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(120mg, 25.1%)을 얻었다. MS: M/e 957 (M+1)⁺.

Step C: tert-butyl (R or S)-(2-(4-((4-(bis(2,4-dimethoxybenzyl)amino)-2-((1-hydroxyhexan-3-yl)oxy)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl)methyl)-3,5-difluorophenoxy)ethyl)(methyl)carbamate

단계 C: tert-부틸 (R 또는 S)-(2-(4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)-3,5-디플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트

MeOH(20mL) 중 tert-부틸 (2-(4-((2-(((R 또는 S)-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)-3,5-디플루오로페녹시)에틸)(메틸)카르바메이트(120mg, 0.125mmol)의 용액에 Pd/C(200mg)를 첨가하였다. 혼합물을 수소로 보호하고 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 진공에서 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(60mg, 56.2%)을 얻었다. MS: m/e: 851 (M+1)⁺.

단계 D: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-(2,6-디플루오로-4-(2-(메틸아미노)에톡시)벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올( 화합물 A123 )

단계 C의 생성물(60mg, 0.07mmol)과 TFA(9mL)의 혼합물에 H2O(1mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 40℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 2N NaOH(10mL) 용액 및 DCM(20mL)을 첨가하고 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 분리하였다. 유기상을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(8 mg, 25.2%)을 얻었다.

To a mixture of the product of step C (60 mg, 0.07 mmol) in TFA (9 mL) was added H₂O (1 mL) and the resulting mixture was stirred at 40^oC for overnight. The mixture was cooled to room temperature and concentrated to dryness. To the residue was added 2N NaOH (10 mL) solution and DCM (20 ml) and stirred at rt for 30 mins. The mixture was separated. The organic phase was dried over Na₂SO₄ and concentrated in vacuo. The crude product was purified by prep-HPLC to give the target compound (8 mg, 25.2%). 1H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.21 (s, 1H), 6.68 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 5.26 (s, 1H), 4.15 (dd, J = 12.0, 7.3 Hz, 4H), 3.67 (s, 2H), 3.09 (s, 2H), 2.56 (s, 3H), 1.94 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 1.72 (s, 2H), 1.45 (s, 2H), 0.97 (t, J = 7.4 Hz, 3H)ppm. MS: M/e 451 (M+1)⁺.

화합물 A124: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-((4-(2-(메틸아미노)에톡시)나프탈렌-1-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올((R or S)-3-((4-amino-7-((4-(2-(methylamino)ethoxy)naphthalen-1-yl)methyl)imidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-yl)oxy)hexan-1-ol)

단계 A: tert-부틸 (2-((4-포르밀나프탈렌-1-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(10mL) 중 4-하이드록시-1-나프트알데히드(344mg, 2mmol)의 용액에 tert-부틸 (2-하이드록시에틸)(메틸)카르바메이트(350mg, 2mmol) 및 PPh₃(655mg, 2.5mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소로 보호하고 0℃까지 냉각시켰다. THF(5ml) 중 DIAD(505mg, 2.5mmol)의 용액을 혼합물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고, 증발시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(400mg, 60.7%)을 얻었다. MS: m/e: 330 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (2-((4-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)나프탈렌-1-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트

THF(10mL) 중 (R 또는 S)-2-((1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-4-아민(519mg, 0.8mmol)의 용액에 n-BuLi(1.6M, 1.5mL, 2.4mmol)의 용액을 -75 ~ -65℃ 사이의 온도를 유지하면서 적가하였다. 1시간 후, THF(2mL) 중 tert-부틸 (2-((4-포르밀나프탈렌-1-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트(400mg, 1.2mmol)의 현탁액을 적가하였다. 생성된 혼합물을 -70℃에서 2시간 동안 교반한 후 밤새 실온으로 가온하였다. 반응을 포화 NH₄Cl 용액으로 켄칭하고, EtOAc(20mL X 3)로 추출하고, 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 prep-TLC로 정제하여 목적 화합물(220mg, 22.6%)을 얻었다. MS: M/e 971 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (R 또는 S)-(2-((4-((4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)-2-((1-하이드록시헥산-3-일)옥시)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)메틸)나프탈렌-1-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트

MeOH(20mL) 중 tert-부틸 (2-((4-((2-(((R 또는 S))-1-(벤질옥시)헥산-3-일)옥시)-4-(비스(2,4-디메톡시벤질)아미노)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-7-일)(하이드록시)메틸)나프탈렌-1-일)옥시)에틸)(메틸)카르바메이트(220mg, 0.226mmol)의 용액에 Pd/C(300mg)를 첨가하였다. 혼합물을 수소로 보호하고 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과하고 여액을 진공에서 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(60mg, 30%)을 얻었다. MS: m/e: 865 (M+1)⁺.

단계 D: (R 또는 S)-3-((4-아미노-7-((4-(2-(메틸아미노)에톡시)나프탈렌-1-일)메틸)이미다조[2,1-f][1,2,4]트리아진-2-일)옥시)헥산-1-올

TFA(18mL) 중 단계 C의 생성물(60g, 0.069mmol)의 혼합물에 H₂O(2mL)를 첨가하고 생성된 혼합물을 40℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축 건조시켰다. 잔류물에 2N NaOH(20mL) 용액 및 DCM(60ml)을 첨가하고 실온에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물을 분리하였다. 유기상을 Na₂SO₄로 건조시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 목적 화합물(10mg, 31.1%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 8.41 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.53 (s, 2H), 7.33 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.91 (s, 1H), 5.22 (s, 1H), 4.58 (s, 2H), 4.33 (s, 2H), 3.68 (s, 2H), 3.23 (s, 2H), 2.61 (s, 3H), 1.93 (s, 2H), 1.74 (s, 2H), 1.41 (s, 2H), 0.91 (s, 3H) ppm. MS: M/e 465 (M+1)⁺.

화합물 C1: 2-부톡시-8-(3-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)피라졸로[1,5-a][1,3,5]트리아진-4-아민(2-butoxy-8-(3-(pyrrolidin-1-ylmethyl)benzyl)pyrazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸 (2-부톡시피라졸로[1,5-a][1,3,5]트리아진-4-일)카르바메이트

THF(15mL) 중 2-부톡시피라졸로[1,5-a][1,3,5]트리아진-4-아민(50mg, 0.24mmol)의 교반된 용액에, 디-tert-부틸 디카보네이트(130mg, 0.6mmol) 및 DMAP(10mg, 0.08mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 H₂O(20mL)로 희석하고 EtOAc(10ml x 3)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물(100mg, 100%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS: M/e 308 (M+1)⁺.

단계 B: tert-부틸 (8-브로모-2-부톡시피라졸로[1,5-a][1,3,5]트리아진-4-일)카르바메이트

MeCN(10mL) 중 tert-부틸(2-부톡시피라졸로[1,5-a][1,3,5]트리아진-4-일)카바메이트(100mg, 0.3mmol)의 교반된 용액에 NBS(115mg, 0.6mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공에서 농축하였다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물(150mg, 100%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS: M/e 386 (M+1)⁺.

단계 C: tert-부틸 (2-부톡시-8-(하이드록시(3-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메틸)피라졸로[1,5-a][1,3,5]트리아진-4-일)카바메이트

THF(10mL) 중 tert-부틸(8-브로모-2-부톡시피라졸로[1,5-a][1,3,5]트리아진-4-일)카바메이트(150 mg, 0.3 mmol)의 교반된 용액에 -78℃로 냉각하고 질소 분위기 하에 n-BuLi(헥산 중 1.6M, 0.75mmol, 0.47mL)를 적가하였다. 20분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 3-(피롤리딘-1-일메틸)벤즈알데히드(85mg, 0.45mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액에 붓고 EtOAc(15mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 생성물(100mg, 67%)을 얻었다. MS: M/e 498 (M+1)⁺.

단계 D: 2-부톡시-8-(3-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)피라졸로[1,5-a][1,3,5]트리아진-4-아민

tert-부틸 (2-부톡시-8-(하이드록시(3-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메틸)피라졸로[1,5-a][1,3,5]트리아진-4-일)카바메이트(100mg, 0.2mmol)의 용액을 TFA(3mL) 및 Et₃SiH(3mL)에서 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 TFA 및 Et₃SiH를 제거하였다. 잔류물에 TFA(5mL)를 첨가하고 85℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 생성물(10mg, 13.1%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6)) δ 8.45 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.35 - 7.02 (m, 4H), 4.27 (s, 2H), 3.95 (s, 2H), 3.67 (s, 2H), 2.38 - 2.32 (m, 4H), 1.68 - 1.62 (m, 4H), 1.40 (s, 2H), 1.19 - 1.15 (m, 2H), 0.90 - 0.85 (m, 3H) ppm. MS: M/e 381 (M+1)⁺.

화합물 C2: 2-부톡시-8-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)피라졸로[1,5-a][1,3,5]트리아진-4-아민(2-butoxy-8-(4-(pyrrolidin-1-ylmethyl)benzyl)pyrazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amine)

단계 A: tert-부틸 (2-부톡시-8-(하이드록시(4-(피롤리딘-1일메틸)페닐)메틸)피라졸로[1,5-a][1,3,5]트리아진-4-일)카르바메이트

THF(10mL) 중 tert-부틸 (8-브로모-2-부톡시피라졸로[1,5-a][1,3,5]트리아진-4-일)카르바메이트(100 mg, 0.26 mmol)의 교반된 용액에 -78℃로 냉각하고 질소 분위기 하에 n-BuLi(헥산 중 1.6M, 0.75mmol, 0.47mL)를 적가하였다. 20분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 4-(피롤리딘-1-일메틸)벤즈알데히드(100mg, 0.52mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액에 붓고 EtOAc(15 mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 진공에서 농축하여 조 생성물(220mg, 100%)을 수득하고 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다. MS: M/e 497 (M+1)⁺.

단계 B: 2-부톡시-8-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)피라졸로[1,5-a][1,3,5]트리아진-4-아민

tert-부틸 (2-부톡시-8-(하이드록시(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메틸)피라졸로[1,5-a][1,3,5]트리아진-4-일카바메이트(220mg, 0.26mmol)의 용액을 TFA(3mL) 및 Et₃SiH(3mL)에서 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 TFA 및 Et³SiH를 제거하였다. 잔류물에 TFA(5mL)를 첨가하고 85℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 생성물(10mg, 10.1%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6)) δ 8.47 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.19 (s, 4H), 4.26 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.50 (s, 2H), 2.39 - 2.31 (m, 4H), 1.72 - 1.61 (m, 6H), 1.40 (dq, J = 14.3, 7.2 Hz, 2H), 0.98 - 0.87 (m, 3H) ppm. MS: M/e 381 (M+1)⁺.

화합물 C3: 5-부톡시-3-((5-클로로-6-(피페라진-1-일)피리딘-3-일)메틸)피라졸로[1,5-c]피리미딘-7-아민(5-butoxy-3-((5-chloro-6-(piperazin-1-yl)pyridin-3-yl)methyl)pyrazolo[1,5-c]pyrimidin-7-amine)

단계 A: 메틸 7-아미노-5-하이드록시피라졸로[1,5-c]피리미딘-3-카르복실레이트

에탄올(500mL) 중 디메틸 3-옥소펜탄디오에이트(50g, 0.29mol)의 용액에 DMF-DMA(34.5g, 0.29mol)를 첨가하고 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 그 다음, 히드라진카복시이미드아미드 염산염(35.4g, 0.32mol)을 첨가하고 용액을 80℃에서 3시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각한 후, 침전된 고체를 여과하고 건조하여 생성물을 황색 고체로서 얻었다(24g, 40%). ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.99 (br.s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.82 (br.s, 2H), 6.27 (s, 1H), 3.76 (s, 3H) ppm. MS: M/e 209 (M+1)⁺

단계 B: 메틸 7-아미노-5-부톡시피라졸로[1,5-c]피리미딘-3-카르복실레이트

1-요오도부탄(6.6g, 36mmol)을 DMF(100mL) 중 메틸 7-아미노-5-하이드록시피라졸로[1,5-c]피리미딘-3-카복실레이트(5g, 24mmol)의 용액에 첨가하였다. 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 물(50mL)을 첨가하고 침전된 고체를 여과하고 건조하여 원하는 생성물을 황색 고체(6.1g, 96%)로 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.30 (s, 1H), 8.01 (br.s, 1H), 6.35 (s, 1H), 4.20 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.77 (s, 3H), 1.71 - 1.66 (m, 2H), 1.45 - 1.38 (m, 2H), 0.89 (t, J=8.0 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 265 (M+1)⁺.

단계 C: 메틸 7-(비스(tert-부톡시카르보닐)아미노)-5-부톡시피라졸로[1,5-c]피리미딘-3-카르복실레이트

(Boc)₂O(7.7g, 35.2mmol)를 THF(250mL) 중 메틸 7-아미노-5-부톡시피라졸로[1,5-c]피리미딘-3-카르복실레이트(3.1g, 11.7mmol) 및 DMAP(714mg, 5.9mmol)의 용액에 적가하였다. 추가 후 서스펜션이 투명해졌다. 이를 실온에서 2시간 동안 계속 교반한 다음, 농축하고 CombiFlash(PE:EA=25%)로 정제하여 생성물(4.2g, 78%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.37 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 4.30 (t, J=8.0 Hz, 2H), 3.91 (s, 3H), 1.80 - 1.76 (m, 2H), 1.54 - 1.45 (m, 2H), 1.29 (s, 9H), 0.97 (t, J=8.0 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 465 (M+1)⁺.

Step D: tert-butyl (5-butoxy-3-(hydroxymethyl)pyrazolo[1,5-c]pyrimidin-7-yl) carbamate

단계 D: tert-부틸 (5-부톡시-3-(하이드록시메틸)피라졸로[1,5-c]피리미딘-7-일)카르바메이트

0℃에서 THF(60mL) 중 리튬 알루미늄 하이드라이드(782mg, 20.6mmol)의 용액에 THF(20mL) 중 메틸 7-(비스(tert-부톡시카르보닐)아미노)-5-부톡시피라졸로[1,5-c]피리미딘-3-카르복실레이트(4.2g, 10.3mmol)를 적가하였다. 생성된 혼합물을 2시간에 걸쳐 실온으로 서서히 교반하였다. 그런 다음 0.8mL의 물로 켄칭하고 0.8mL의 NaOH 용액(15%) 및 2.4mL의 물을 사용하여 켄칭하였다. 고체를 여과하고 케이크를 1시간 동안 100mL의 메탄올로 슬러리화하였다. 여과 후, 여과된 케이크를 메탄올 100mL로 다시 한번 슬러리화하였다. 여과 후, 합한 여액을 증발시켜 원하는 생성물을 얻었다(1.9g, 50%). ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 7.76 (s, 1H), 6.14 (s, 1H), 4.64 (s, 1H), 4.04 (t, J=8.0 Hz, 2H), 1.79 - 1.75 (m, 2H), 1.54 - 1.44 (m, 12H), 0.97 (t, J=8.0 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 337 (M+1)⁺.

단계 E: tert-부틸 (5-부톡시-3-포르밀피라졸로[1,5-c]피리미딘-7-일)카르바메이트

0℃에서 THF(110mL) 중 tert-부틸 (5-부톡시-3-(하이드록시메틸)피라졸로[1,5-c]피리미딘-7-일)카르바메이트(1.2g, 3.6mmol)의 냉각된 용액에 데스-마틴 시약(3.1g, 7.2mmol)을 첨가하였다. 이를 0℃에서 30분 동안 교반한 다음, 30분 동안 실온으로 점차적으로 교반하였다. 용액을 0℃에서 물로 켄칭하여 투명한 용액으로 만들고 에틸 아세테이트(80mL)로 추출하였다. 유기층을 농축하고 CombiFlash(PE:EA=25%)로 정제하여 생성물을 무색 오일(270 mg, 23%)로 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.19 (s, 1H), 9.91 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.31 (t, J=8.0 Hz, 2H), 1.76 - 1.70 (m, 2H), 1.52 - 1.40 (m, 12H), 0.95 (t, J=8.0 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 335 (M+1)⁺.

단계 F: tert-부틸 4-(5-((5-부톡시-7-((tert-부톡시카르보닐)아미노)피라졸로[1,5-c]피리미딘-3-일)(하이드록시)메틸)-3-클로로피리딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트

THF(15mL) 중 tert-부틸 4-(5-브로모-3-클로로피리딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트(289mg, 0.8mmol)의 냉각된 용액에 -78℃에서(N₂로 퍼징됨) n-BuLi(1.6M, 1.2mL)를 적가하였다. -78℃에서 30분 동안 교반한 후, THF(5mL) 중 tert-부틸(5-부톡시-3-포르밀피라졸로[1,5-c]피리미딘-7-일)카바메이트(270mg, 0.8mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 이 온도에서 30분 동안 교반한 다음, 실온으로 2시간 동안 가온하였다. 용액을 NH₄Cl 용액(10mL)으로 켄칭하고 에틸 아세테이트(10mL)로 추출하였다. 유기층을 Na₂SO₄로 건조하고 여과하고 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 CombiFlash(PE:EA=50%) 및 prep-TLC(PE:EA=1:1)로 추가 정제하여 순수한 생성물(80mg, 16%)을 얻었다. MS: M/e 632 (M+1)⁺.

단계 G: 5-부톡시-3-((5-클로로-6-(피페라진-1-일)피리딘-3-일)메틸)피라졸로[1,5-c]피리미딘-7-아민

트리에틸실란(0.5mL) 및 트리플루오로아세트산(0.5mL) 중 tert-부틸 4-(5-((5-부톡시-7-((tert-부톡시카르보닐)아미노)피라졸로[1,5-c]피리미딘-3-일)(하이드록시)메틸)-3-클로로피리딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트(20mg, 0.03mmol)의 혼합물을 30℃에서 2시간 동안 가열하였다. 그 다음, 이를 오일 펌프 하에 60℃에서 농축하여 조 생성물을 얻었고, 이를 prep-TLC(DCM:MeOH=7:1)로 정제하여 생성물(5mg, 38%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 8.12 (t, J=8.0Hz, 1H), 7.75 (d, J=4.0Hz, 1H), 7.64 (s, 1H), 6.97 (d, J=4.0Hz, 1H), 5.97 (d, J=8.0Hz, 1H), 4.12 -4.09 (m, 3H), 3.51 - 3.38 (m, 4H), 2.91 - 2.65 (m, 4H), 1.76 - 1.72 (m, 2H), 1.49 - 1.45 (m, 2H), 0.98 (t, J=8.0Hz, 3H) ppm. MS: M/e 416 (M+1)⁺.

화합물 C4: 6-프로폭시-3-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[1,2-b]피리다진-8-아민(6-propoxy-3-(4-(pyrrolidin-1-ylmethyl)benzyl)imidazo[1,2-b]pyridazin-8-amine)

단계 A: 6-클로로-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[1,2-b]피리다진-8-아민

DMF(20mL) 중 8-브로모-6-클로로이미다조[1,2-b]피리다진(2g, 8.7mmol)의 교반된 용액에 비스(4-메톡시벤질)아민(2.7g, 10.44mmol) 및 DIEA(2.3g, 17.4mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 H₂O(50mL)로 희석하고 EtOAc(20ml x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물(2.8mg, 80%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS: M/e 308 (M+1)⁺.

단계 B: N,N-비스(4-메톡시벤질)-6-프로폭시이미다조[1,2-b]피리다진-8-아민

부틸 알코올(10mL) 중 6-클로로-N,N-비스(4-메톡시벤질)이미다조[1,2-b]피리다진-8-아민(2.2g, 5.4mmol)의 교반된 용액에 부탄산나트륨(sodium butanolate, 50ml, 부틸 알코올 중 4M)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 95℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 진공에서 농축하였다. 잔류물에 H₂O(50mL)를 첨가하고 EtOAc(20ml x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물(2g, 85.8%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS: M/e 437 (M+1)⁺.

단계 C: 8-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-6-프로폭시이미다조[1,2-b]피리다진-3-카브알데하이드

100ml 둥근 바닥 플라스크에 DMF(5ml)를 첨가하고, POCl₃(900mg, 5.88mmol)를 0℃에서 DMF에 첨가하였다. 반응물을 0℃에서 30분 동안 교반하였다. 이 용액에 N,N-비스(4-메톡시벤질)-6-프로폭시이미다조[1,2-b]피리다진-8-아민(300mg, 0.69mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물에 H₂O(50 mL)를 첨가하고 EtOAc(20ml x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물(300 mg, 94%)을 황색 고체로서 수득하였다. MS: M/e 475 (M+1)⁺.

단계 D: (8-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-6-프로폭시이미다조[1,2-b]피리다진-3-일)(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올

THF(10mL) 중 1-(4-브로모벤질)피롤리딘(140mg, 0.55mmol)의 교반된 용액에 -78℃ 및 질소 분위기 하에 냉각시키고, n-BuLi(헥산 중 1.6M, 0.93mmol, 0.58mL)를 적가하였다. 50분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 8-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-6-프로폭시이미다조[1,2-b]피리다진-3-카브알데히드(150mg, 0.37mmol)의 용액을 천천히 추가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액에 붓고 EtOAc(15mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 진공에서 농축하여 생성물(60mg, 25.6%)을 얻었다. MS: M/e: 636 (M+1)⁺.

단계 E: 6-부톡시-3-(4-(피롤리딘-1-일메틸)벤질)이미다조[1,2-b]피리다진-8-아민

TFA(3mL) 및 Et₃SiH(3mL) 중 (8-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-6-프로폭시이미다조[1,2-b]피리다진-3-일)(4-(피롤리딘-1-일메틸)페닐)메탄올(60mg, 0.09mmol)의 용액을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 TFA 및 Et₃SiH를 제거하였다. 잔류물에 TFA(5 mL)를 첨가하고 85℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 분취-HPLC로 정제하여 생성물(5mg, 14.2%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.83 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.39 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.30 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 7.04 (s, 2H), 4.29 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 4.20 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 3.95 (s, 2H), 3.30 (s, 2H), 3.06 (s, 2H), 2.01 (s, 2H), 1.91 - 1.77 (m, 2H), 1.69 - 1.56 (m, 2H), 1.35 - 1.19 (m, 2H), 0.85 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 380 (M+1)⁺.

화합물 C5: 6-부톡시-3-((5-메틸-6-(피페라진-1-일)피리딘-3-일)메틸)이미다조[1,2-b]피리다진-8-아민(6-butoxy-3-((5-methyl-6-(piperazin-1-yl)pyridin-3-yl)methyl)imidazo[1,2-b]pyridazin-8-amine)

단계 A: tert-부틸 4-(5-((8-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-6-부톡시이미다조[1,2-b]피리다진-3-일)(하이드록시)메틸)-3-메틸피리딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트

THF(10mL) 중 tert-부틸 4-(5-브로모-3-메틸피리딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트(180mg, 0.44mmol)의 교반된 용액에 -78℃로 질소 분위기에서 냉각시키고 n-BuLi(헥산 중 1.6M, 0.99mmol, 0.618mL)를 적가하였다. 50분 동안 교반한 후, THF(2mL) 중 8-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-6-프로폭시이미다조[1,2-b]피리다진-3-카브알데히드(201mg, 0.66mmol)의 용액을 천천히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 천천히 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 포화 염화암모늄 용액에 붓고 EtOAc(15mL x 3)로 추출하였다. 합한 유기상을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조하고, 진공에서 농축하여 생성물(120mg, 24.2%)을 얻었다. MS: M/e: 752 (M+1)⁺.

단계 B: 6-부톡시-3-((5-메틸-6-(피페라진-1-일)피리딘-3-일)메틸)이미다조[1,2-b]피리다진-8-아민

TFA(3mL) 및 Et₃SiH(3mL) 중 tert-부틸 4-(5-((8-(비스(4-메톡시벤질)아미노)-6-부톡시이미다조[1,2-b]피리다진-3-일)(하이드록시)메틸)-3-메틸피리딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트(120mg, 0.16mmol)의 용액을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공에서 농축하여 TFA 및 Et₃SiH를 제거하였다. 잔류물에 TFA(5mL)를 첨가하고 85℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 진공에서 농축시켰다. 조 생성물을 prep-HPLC로 정제하여 생성물(10mg, 15.8%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.68 (br.s, 2H), 8.14 - 8.10 (m, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.89 - 7.83 (m, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.16 - 7.11 (m, 2H), 4.24 (br.s, 2H), 3.84 (s, 2H), 3.26 - 3.14 (m, 8H), 2.18 (s, 3H), 1.72 - 1.59 (m, 2H), 1.33 - 1.27 (m, 2H), 0.86 (t, J = 7.6, 3H) ppm. MS: M/e 396 (M+1)⁺.

화합물 C6: 2-부톡시-7-((5-메틸-6-(피페라진-1-일)피리딘-3-일)메틸)-5H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-아민(2-butoxy-7-((5-methyl-6-(piperazin-1-yl)pyridin-3-yl)methyl)-5H-pyrrolo [3,2-d]pyrimidin-4-amine)

단계 A: 2,4-디클로로-5-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-d]피리미딘

DMF(40mL) 중 2,4-디클로로-5H-피롤로[3,2-d]피리미딘(3.76g, 20mmol)의 용액에 DIPEA(4.2mL, 24mmol) 및 (2-(클로로메톡시)에틸)트리메틸실란(4.3mL, 24mmol)을 첨가하였다. 그 다음 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 농축하고, 물(5mL)로 희석하고, EtOAc(30mL x 5)로 추출하였다. 합한 유기 층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 농축시키고, 잔류물을 플래시 크로마토그래피로 정제하여 목적 화합물(3g, 47%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS: M/e 318 (M+1)⁺.

단계 B: 2-클로로-5-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-아민

수성 암모니아(20mL)를 프로판-2-올(20mL) 중 2,4-디클로로-5-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-d]피리미딘(5g, 15.8mmol)의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 오토클레이브에서 95℃에서 7시간 동안 교반하고, EtOAc(25 mL x 4)로 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄상에서 건조시키고, 농축시키고, 잔류물을 플래시 크로마토그래피로 정제하여 목적 화합물(3.2g, 68%)을 백색 고체로서 수득하였다. MS: M/e 299 (M+1)⁺.

단계 C: 2-부톡시-5-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-아민

2-클로로-5-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-아민(3g, 10mmol) 및 n-BuONa/n-BuOH(20%, 9.6ml)의 혼합물을 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 용액을 H₂O(10ml)로 켄칭하였다. 수용액을 EA(20ml X 4)로 추출하였다. 수집된 유기 층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성된 잔류물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물(3.3g, 95%)을 얻었다. MS: M/e 337 (M+1)⁺.

단계 D: 2-부톡시-5H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-아민

2-부톡시-5-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-5H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-아민(3.3g, 10mmol) 및 CF₃COOH의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응을 포화 NaHCO₃용액으로 켄칭하였다. 수용액을 EA(20ml X 3)로 추출하였다. 수집된 유기 층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성된 잔류물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물(1.53g, 74%)을 얻었다. MS: M/e 207 (M+1)⁺.

단계 E: tert-부틸 4-(5-((4-아미노-2-부톡시-5H-피롤로[3,2-d]피리미딘-7-일)(하이드록시)메틸)-3-메틸피리딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트

CH₃OH(1mL) 및 H₂O(1mL) 중 2-부톡시-5H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-아민(206mg, 1mmol), tert-부틸 4-(5-포르밀-3-메틸피리딘-2-일)피페라진-1-카르복실레이트(458mg, 1.5mmol) 및 K₂CO₃(166mg, 1.5mmol)의 혼합물을 실온에서 2일 동안 교반하였다. 반응을 포화 NaHCO₃용액으로 켄칭하였다. 수용액을 EA(25ml X 4)로 추출하였다. 수집된 유기 층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성된 잔류물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물(203mg, 40%)을 얻었다. MS: M/e 512 (M+1)⁺.

단계 F: 2-부톡시-7-((5-메틸-6-(피페라진-1-일)피리딘-3-일)메틸)-5H-피롤로[3,2-d]피리미딘-4-아민

-15℃에서 DCM(5mL) 중 생성물 단계 A(206mg, 0.5mmol)의 교반된 용액에 Et₃SiH(0.5mL) 및 TFA(0.5mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 밤새 교반하였다. 용액을 포화 NaHCO₃용액(5mL)으로 켄칭하였다. 수용액을 EA(10ml X 4)로 추출하였다. 수집된 유기 층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성된 잔류물을 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 생성물(82mg, 41%)을 얻었다. ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 10.45(s, 1H), 8.04 (d, J = 4 Hz, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.16 (d, J = 4 Hz, 1H), 6.65 (s, 2H), 4.19 (t, J = 4 Hz, 2H), 3.77 (s, 2H) , 2.91 - 2.75 (m, 8H) , 1.68 - 1.61 (m, 2H), 1.42 - 1.35 (m, 2H), 0.93 (t, J = 8.0 Hz, 3H) ppm. MS: M/e 396 (M+1)⁺.

HEK293-블루 hTLR7 리포터 분석(HEK293-Blue hTLR7 reporter assay):

HEK-Blue-hTLR7 세포주(Invivogen, Cat. No. hkb-htlr7)를 TLR7 작용제로 인간 TLR7을 자극하여 NF-κ와 AP-1을 활성화하여 SEAP(secreted embryonic alkaline phosphatase)의 발현을 유도하도록 설계하였다.

HEK-Blue-hTLR7 세포를 10%(v/v) 열-불활성화 소태아혈청(FBS)(Gibco, 10099-1441), 100U/ml 페니실린 및 50U/mL 페니실린을 함유한 100㎍/ml 스트렙토마이신(Gibco, 15140122), 50mg/mL 스트렙토마이신 및 10%(v/v) 열- 비활성화 소태아혈청으로 보충된 DMEM(Cat. No. 11965-092)의 96웰 플레이트에 180㎕의 부피로 4×10⁴ cells/well의 밀도로 시딩하였다. 세포를 5시간 동안 침강시킨 다음, 37℃에서 24시간 동안 시험 화합물의 양을 증가시켜 처리하였다. 그런 다음 각 웰의 상층액 20㎕를 37℃에서 10-30분 동안 180uL Quanti-blue 기질 용액과 함께 인큐베이션한 후 SEAP의 활성을 분광 광도계를 사용하여 620-655nm에서 측정하였다. 각 화합물에 대한 EC50 값은 시그모이달 용량-반응 함수(sigmoidal dose-response function)를 사용하여 GraphPad Prism 소프트웨어로 계산되었다.

HEK-Blue 감지를 사용하여 결정된 TLR7 자극

이 분석은 NF-κB의 활성화를 모니터링하여 HEK-Blue hTLR7 도구 세포주에서 인간 TLR7 단백질의 자극을 연구하기 위해 설계되었다. hTLR7 유전자와 최적화된 SEAP (secreted embryonic alkaline phosphatase) 리포터 유전자를 HEK293 세포에 동시 형질감염시켜 HEK-Blue hTLR7 세포를 얻었다. SEAP 리포터 유전자는 5개의 NF-κB 및 AP-1 결합 부위에 융합된 IFN-β 최소 프로모터의 제어 하에 놓였다. TLR7 리간드로 자극하면 SEAP의 발현을 유도하는 NF-κB와 AP-1이 활성화된다. SEAP의 수준은 SEAP를 실시간으로 검출할 수 있는 세포 배양 배지인 HEK-Blue Detection을 사용하여 쉽게 결정할 수 있다. HEK-Blue Detection에는 세포 성장에 필요한 모든 영양소와 특정 SEAP 색상 기질이 포함되어 있다. SEAP에 의한 기질의 가수분해는 분광광도계로 측정할 수 있는 보라색/파란색을 생성한다.

50-80% 컨플루언시(confluency)로 성장할 때, HEK-Blue hTLR7 세포를 40000 cells/well의 밀도로 96-웰 플레이트(costar 3599)에 플레이팅하였다. 그런 다음 화합물을 0.1% DMSO/HEK-Blue Detection에서 0.04nM-10μM 최종 농도 범위로 10점에 걸쳐 연속 희석하여 첨가하였다. 그런 다음 플레이트를 37℃, 5% CO₂에서 16시간 동안 인큐베이션하고 30초 동안 볼텍싱하고 측정하였다. 620-655nm에서의 광학 밀도는 BMG PHERAstar FSX 기기에서 판독되었다. 각 화합물에 대한 EC50은 Resiquimod로 확인된 최대 활성화의 백분율을 계산하여 결정하였다.

표 1: 화합물 A 시리즈("D"는 EC50 >10 μmol을 나타냄; A1-A76은 QUANTI-BLUE 분석에 의해 테스트되었으며, A77-A124는 HEK-Blue Detection에 의해 테스트됨)

표 2: 화합물 C 시리즈("D"는 EC50 >10 μmol을 나타냄; C1-C6은 QUANTI-BLUE 분석에 의해 테스트됨)

HEK-Blue Detection을 사용하여 결정된 TLR8 자극

이 분석은 NF-κB의 활성화를 모니터링하여 HEK-Blue hTLR8 도구 세포주에서 인간 TLR8 단백질의 자극을 연구하기 위해 설계되었다. hTLR8 유전자와 최적화된 SEAP (secreted embryonic alkaline phosphatase) 리포터 유전자를 HEK293 세포에 동시 형질감염시켜 HEK-Blue hTLR8 세포를 얻었다. SEAP 리포터 유전자는 5개의 NF-κB 및 AP-1 결합 부위에 융합된 IFN-β 최소 프로모터의 제어 하에 놓였다. TLR8 리간드로 자극하면 SEAP의 발현을 유도하는 NF-κB와 AP-1이 활성화된다. SEAP의 수준은 SEAP를 실시간으로 검출할 수 있는 세포 배양 배지인 HEK-Blue Detection을 사용하여 쉽게 결정할 수 있다. HEK-Blue Detection에는 세포 성장에 필요한 모든 영양소와 특정 SEAP 색상 기질이 포함되어 있다. SEAP에 의한 기질의 가수분해는 분광광도계로 측정할 수 있는 보라색/파란색을 생성한다.

50-80% 컨플루언시(confluency)로 성장할 때, HEK-Blue hTLR7/8 세포를 40000 cells/well의 밀도로 96-웰 플레이트(costar 3599)에 플레이팅하였다. 그런 다음 화합물을 0.1% DMSO/HEK-Blue Detection에서 1nM-10μM 최종 농도 범위로 10점에 걸쳐 연속 희석하여 첨가하였다. 그런 다음 플레이트를 37℃, 5% CO₂에서 16시간 동안 인큐베이션하였다. 620-655nm에서의 광학 밀도는 BMG PHERAstar FSX 기기에서 판독되었다. 각 화합물에 대한 EC50은 Resiquimod 또는 Motolimod로 확인된 최대 활성화의 백분율을 계산하여 결정하였다.

표 3: HEK-Blue hTLR8 세포용 화합물("D"는 EC50 >10 μmol을 나타냄)

본 개시내용이 위에 기재된 특정 실시예와 관련하여 설명되었지만, 그 많은 대안, 수정 및 다른 변형이 당업자에게 명백할 것이다. 그러한 모든 대안, 수정 및 변형은 본 개시내용의 사상 및 범위 내에 속하는 것으로 의도된다.

Claims

화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 입체 이성질체:

(I)
여기서, X는 N이고;
R⁷은 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이며;
L¹은 -(CR^aR^b)_m-, -O-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -NR^a-, -C(O)NR^a-, -NR^aC(O)-, -NR^aC(O)O-, -NR^aC(O)NR^b-, -SO₂NR^a-, -NR^aSO₂-, -NR^aS(O)₂NR^b-, -NR^aS(O)NR^b-, -C(O)NR^aSO₂-, -C(O)NR^aSO-, 또는 -C(=NR^a)NR^b-이고,
여기서 m은 1 내지 8의 수이고, -(CR^aR^b)_m-에서 1개 또는 2개의 CR^aR^b 모이어티는 O, S, SO, SO₂, C(O) 및 NR^a로부터 선택된 하나 이상의 모이어티로 대체되지 않거나 대체되며;
R^a 및 R^b는 각각의 경우에 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴, 헤테로아릴 또는 -OR^c이고;
여기서 R^c는 수소, 알킬, 알콕시-알킬-, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 아릴, 헤테로사이클릴 또는 헤테로아릴이며;
R¹은 -OR^1a, -SR^1a, -NR^1aR^1b, -COR^1a, -SO₂R^1a, -C(=O)OR^1a, -C(=O)NR^1aR^1b, -C(=NR^1a)NR^1bR^1c, -N(R^1a)C(=O)R^1b, -N(R^1a)C(=O)OR^1b, -N(R^1a)C(O)NR^1bR^1c, -N(R^1a)S(O)NR^1bR^1c, -N(R^1a)S(O)₂NR^1bR^1c, -NR^1aSO₂R^1b, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴, 또는 헤테로아릴이고, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴, 또는 헤테로아릴 각각은 독립적으로 그리고 임의로 1 또는 2 또는 3개의 치환기 R^1d로 치환되며;
R^1a, R^1b, 및 R^1c는 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴, 또는 헤테로아릴 각각은 할로겐, R^1e로 임의로 치환된 -C_1-8알킬, R^1e로 임의로 치환된 사이클로알킬, R^1e로 임의로 치환된 헤테로사이클릴, R^1e로 임의로 치환된 아릴, R^1e로 임의로 치환된 헤테로아릴, CH₃-(OCH₂CH₂)_n-(여기서, n은 3 내지 10의 수) 또는 -OR^1f로부터 선택된 1 또는 2 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되며;
여기서 R^1e는 할로겐, 니트로, 시아노, 하이드록시, 아미노(-NH₂), 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 할로겐으로 임의로 치환된 -C_1-6알킬이고;
여기서 R^1f는 알킬, 사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이들 각각은 -C_1-4알킬 또는 할로겐으로 임의로 치환되며;
R^1d는 각각의 경우에 독립적으로 수소, 옥소, -CN, -NO₂, 아미노(-NH₂), 알킬아미노, 디알킬아미노, 할로겐, 할로알킬, 알킬, 할로알콕시, 알콕시, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴, 또는 헤테로아릴이고;
R²및 R³은 각각의 경우에 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 여기서 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴, 또는 헤테로아릴은 옥소, -CN, -NO₂, 아미노(-NH₂), 알킬아미노, 디알킬아미노, 할로겐, 하이드록시, 할로알킬, 알킬, 할로알콕시, 알콕시, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴로부터 선택된 1-3개의 치환기로 임의로 치환되며;
R⁴는 수소, 할로겐, 시아노, -NO₂, -OR^4a, -SR^4a, -NR^4aR^4b, -COR^4a, -SO₂R^4a, -C(=O)OR^4a, -C(=O)NR^4aR^4b, -C(=NR^4a)NR^4bR^4c, -N(R^4a)C(=O)R^4b, -N(R^4a)C(=O)OR^4b, -N(R^4a)C(O)NR^4bR^4c, -N(R^4a)S(O)NR^4bR^4c, -N(R^4a)S(O)₂NR^4bR^4c, -NR^4aSO₂R^4b, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 헤테로사이클릴 각각은 독립적으로 1 또는 2 또는 3개의 치환기 R^4d로 임의로 치환되며;
R^4a, R^4b, 및 R^4c는 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴 각각은 할로겐, 하이드록시, NH₂-, 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 알콕시로 임의로 치환되고;
R^4d는 각각의 경우에 독립적으로 수소, 옥소, -CN, -NO₂, 할로겐, NH₂-, 알킬아미노, 디알킬아미노, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴, 또는 헤테로아릴 각각은 할로겐, 하이드록시, NH₂-, 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 알콕시로 임의로 치환되며;
고리 A는 아릴 또는 헤테로아릴이고;
R⁵는 할로겐, 하이드록시, 알킬, 할로알킬, 알콕시, 할로알콕시, -옥소-, 또는 -C(=O)OR^5a이며, 여기서 R^5a는 수소, 알킬 또는 할로알킬이고;
p는 0, 1,2 또는 3의 수이며;
L²는 직접 결합, -(CR^fR^g)_t-, -O-, -S-, -S(O)-, -SO₂-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, 또는 -NR^d-이고, 여기서 R^d는 -C_1-6알킬이고, 여기서 t는 1 내지 8의 수이고, -(CR^fR^g)_t-에서 1개 또는 2개의 CR^fR^g 모이어티는 대체되지 않거나 O, S, SO, SO₂, C(O) 및 NR^f로부터 선택된 하나 이상의 모이어티로 대체되며;
R^f및 R^g는 각각의 경우에 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
R⁶은 -NR^6aR^6b, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴 각각은 독립적으로 1 또는 2 또는 3개의 치환기 R^6c로 임의로 치환되며;
R^6a 및 R^6b는 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴, 또는 헤테로아릴이고, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴 각각은 할로겐, 하이드록시, NH₂-, 알킬아미노, 디알킬아미노 또는 알콕시로 임의로 치환되며;
R^6c는 독립적으로 수소, 할로겐, 시아노, -NO₂, -OR^6d, -SR^6d, -NR^6dR^6e, -COR^6d, -SO₂R^6d, -C(=O)OR^6d, -C(=O)NR^6dR^6e, -C(=NR^6d)NR^6eR^6f, -N(R^6d)C(=O)R^6e, -N(R^6d)C(=O)OR^6e, -N(R^6d)C(O)NR^6eR^6f, -N(R^6d)S(O)NR^6eR^6f, -N(R^6d)S(O)₂NR^6eR^6f, -NR^6dSO₂R^6e, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로아릴 각각은 독립적으로 1 또는 2 또는 3개의 치환기 R^6g로 임의로 치환되며;
R^6d, R^6e 및 R^6f는 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴 각각은 1 또는 2 또는 3개의 치환기 R^6g로 임의로 치환되며;
R^6g는 각각의 경우에 독립적으로 수소, 할로겐, 시아노, -NO₂, -OR^6h, -SR^6h, -NR^6hR⁶ⁱ, -COR^6h, -SO₂R^6h, -C(=O)OR^6h, -C(=O)NR^6hR⁶ⁱ, -C(=NR^6h)NR⁶ⁱR^6j, -N(R^6h)C(=O)R⁶ⁱ, -N(R^6h)C(=O)OR⁶ⁱ, -N(R^6h)C(O)NR⁶ⁱR^6j, -N(R^6h)S(O)NR⁶ⁱR^6j, -N(R^6h)S(O)₂NR⁶ⁱR^6h, -NR^6hSO₂R⁶ⁱ, 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고,
R^6h, R⁶ⁱ 및 R^6j는 독립적으로 수소, 알킬, 알콕시, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 사이클로알킬, 사이클로알케닐, 사이클로알키닐, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴 각각은 독립적으로 할로겐, -C_1-4알킬, -C_1-4알콕시, 하이드록시, 니트로, -NH₂, 알킬아미노, 디알킬아미노, 또는 시아노로 임의로 치환된다.
제1항에 있어서, R¹이 -OR^1a또는 -NR^1aR^1b이고; 여기서, R^1a, R^1b는 독립적으로 수소, -C_1-8알킬, 또는 -C_2-8알케닐이고, 상기 -C_1-8알킬 각각은 R^1e로 임의로 치환된 헤테로사이클릴, R^1e로 임의로 치환된 아릴, CH₃-(OCH₂CH₂)_n-(여기서, n은 3 내지 10의 수), 또는 -OR^1f로부터 선택된 1 또는 2 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되며;
여기서 R^1e는 할로겐, 또는 할로겐으로 임의로 치환된 -C_1-6알킬이고;
여기서 R^1f는 -C_1-8알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 이들 각각은 -C_1-4알킬 또는 할로겐으로 임의로 치환된 것을 특징으로 하는 화합물.
제1항에 있어서, R¹이 -OR^1a이고, 여기서 R^1a는 할로겐, R^1e로 임의로 치환된 -C_1-8알킬, R^1e로 임의로 치환된 사이클로알킬, R^1e로 임의로 치환된 헤테로사이클릴, CH₃-(OCH₂CH₂)_n-(여기서, n은 3 내지 10의 수), 또는 -OR^1f로부터 선택된 1 또는 2 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된 -C_1-8알킬이고, R^1e 및 R^1f는 제1항에 정의된 바와 같은 것을 특징으로 하는 화합물.
제1항에 있어서, R¹이 -OR^1a 또는 -NHR^1a이고, 여기서 R^1a는 분지형 -C_4-8알킬이고, 여기서 분지형 치환기는 산소 원자에 대해 알파 위치에 있는 것을 특징으로 하는 화합물.
제1항에 있어서, R¹이 -OR^1a 또는 -NHR^1a이고, 여기서 R^1a는 부탄-2-일, 펜탄-2-일, 펜탄-3-일, 헵탄-2-일, 헵탄-3-일, 헵탄-4-일, 옥탄-2-일, 옥탄-3-일, 옥탄-4-일, 또는 옥탄-5-일인 것을 특징으로 하는 화합물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, R⁵가 할로겐, 하이드록시, -C_1-8알킬, -할로C_1-8알킬, -C_1-8알콕시, -할로C_1-8알콕시, 또는 -C(=O)OR^5a이고, 여기서 R^5a는 수소, -C_1-8알킬 또는 -할로C_1-8알킬이고; p는 0, 1 또는 2의 수인 것을 특징으로 하는 화합물.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 고리 A가 고리 구성원으로서 산소, 질소 또는 임의로 산화된 황으로부터 선택된 1 또는 2 또는 3개의 헤테로원자를 포함하는 페닐 또는 5- 내지 8-원 헤테로아릴인 것을 특징으로 하는 화합물.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, L²가 직접 결합, -CH₂-, -CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-, -O-, 또는 -NR^d-이고, 여기서 R^d는 -C_1-6알킬인 것을 특징으로 하는 화합물.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, R⁶이 -NR^6aR^6b, -C_1-8알킬, -C_2-8알케닐, -C_2-8알키닐, -사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이고, 상기 -C_1-8알킬, -C_2-8알케닐, -C_2-8알키닐, -사이클로알킬, 헤테로사이클릴, 아릴, 또는 헤테로아릴 각각은 독립적으로 1 또는 2 또는 3개의 치환기 R^6c로 임의로 치환되고;
R^6a 및 R^6b는 독립적으로 수소 또는 -C_1-8알킬이며;
R^6c는 독립적으로 수소, 할로겐, -OR^6d, -SR^6d, -NR^6dR^6e, -COR^6d, -SO₂R^6d, -C(=O)NR^6dR^6e, 또는 -C_1-8알킬이고, 상기 -C_1-8알킬은 독립적으로 1 또는 2 또는 3개의 치환기 R^6g로 임의로 치환되며;
R^6d 및 R^6e는 독립적으로 수소, -C_1-8알킬, -C_2-8알케닐, 헤테로사이클릴 또는 아릴이고, 상기 -C_1-8알킬, -C_2-8알케닐, 헤테로사이클릴 또는 아릴 각각은 1 또는 2 또는 3개의 치환기 R^6g로 임의로 치환되고;
R^6g는 각각의 경우에 독립적으로 수소, 할로겐, -OR^6h, -SR^6h, -NR^6hR⁶ⁱ, -N(R^6h)C(=O)OR⁶ⁱ, -C_1-8알킬, 헤테로사이클릴, 아릴 또는 헤테로아릴이며, 여기서 R^6h및 R⁶ⁱ는 독립적으로 수소 또는 -C_1-8알킬인 것을 특징으로 하는 화합물.
제9항에 있어서, L²-R⁶이 하기로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물:
a) L²는 -CH₂- 또는 -CH₂CH₂-이고, R⁶은 고리 구성원으로서 1 또는 2 또는 3개의 질소 헤테로원자를 포함하는 5-, 6-, 7- 또는 8-원 포화 모노사이클릭 고리 또는 고리 구성원으로서 산소, 질소 또는 임의로 산화된 황으로부터 선택된 1,2, 3개의 헤테로원자를 포함하는 바이사이클릭 고리이고, 이들 각각은 1 또는 2개의 치환기 R^6c로 임의로 치환되며, 여기서 R^6c는 -NR^6dR^6e, -COR^6d, -OR^6d, 또는 하이드록시로 임의로 치환된 -C_1-8알킬이고, 여기서 R^6d및 R^6e는 독립적으로 수소 또는 -C_1-8알킬 또는 페닐이고, 여기서 상기 알킬은 NH_2-, 알킬아미노 또는 디알킬아미노로 임의로 치환되며;
b) L²는 -CH₂- 또는 -CH₂CH₂-이고, R⁶은 R6이 -NR^6aR^6b이며, 여기서 R^6a 및 R6b는 독립적으로 수소 또는 C_1-8알킬이고;
c) L²는 직접 결합이고 R⁶은 -C_1-8알킬, -C_2-8알케닐 또는 -C_2-8알키닐이며;
d) L²는 -O-이고, R⁶은 -C_1-8알킬 또는 헤테로사이클릴이고, 상기 -C_1-8알킬 및 헤테로사이클릴은 1 또는 2개의 R^6c로 임의로 치환되며, 여기서 R^6c는 -C_1-8알킬, NR^6dR^6e및 -COR^6d이고, 여기서 R^6d 및 R^6e는 독립적으로 NH₂-, 알킬아미노 또는 디알킬아미노로 임의로 치환된 -C_1-8알킬이고;
e) L²는 -NR^d-이고, 여기서 R^d는 -C_1-6알킬이며, R⁶은 -C_1-8알킬, -C_2-8알케닐 또는 -C_2-8알키닐이고, 이들 각각은 1 또는 2개의 R^6c로 임의로 치환되고, 여기서 R^6c는 -C_1-8알킬 또는 -NR^6dR^6e이고, 여기서, R^6d 및 R6e는 독립적으로 -C_1-8알킬이며; 또는
f) L²는 직접 결합이고 R⁶은 사이클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이며, 이들 각각은 독립적으로 1 또는 2 또는 3개의 치환기 R^6c로 임의로 치환됨.
제10항에 있어서, L²가 -CH₂- 또는 -CH₂CH₂-이고, R⁶이 피롤리디닐, 피페리디닐, 트리아졸릴, 아제파닐, 피페라지닐 또는 모르폴리노 또는 (1S,4S)-2,5-디아자바이사클로[2.2.1]헵탄-2-일((1S,4S)-2,5-diazabicyclo[2.2.1]heptan-2-yl)이고, 이들 각각은 1 또는 2개의 치환기 R^6c로 추가로 임의로 치환되고, 여기서 R^6c는 -NR^6dR^6e, -COR^6d, -OR^6d, 또는 하이드록시로 임의로 치환된 -C_1-8알킬이고, 여기서 R^6d 및 R^6e는 독립적으로 수소 또는 -C_1-8알킬 또는 페닐이며, 여기서 상기 알킬은 NH₂-, 알킬아미노 또는 디알킬아미노로 임의로 치환되는 것을 특징으로 하는 화합물.
제10항에 있어서, L²가 -CH₂- 또는 -CH₂CH₂-이고, R⁶이 피롤리딘-1-일, 모르폴리노, 피페리딘-1-일, 4-메틸피페라진-1-일, 피페라진-1-일, 피페리딘-4-일, 4-(2-(디메틸아미노)아세틸)피페라진-1-일, (1S,4S)-2,5-디아자바이사이비클로[2.2.1]헵탄-2-일, 4-아미노피페리딘-1-일, 3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일, 4-페녹시피페리딘-1-일, 1H-1,2,4-트리아졸-1-일, 4-(3-하이드록시프로필)피페라진-1-일, 또는 피페리딘-3-일인 것을 특징으로 하는 화합물.
제10항에 있어서, L²-R⁶이 하기로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물:
a) 피롤리딘-1-일메틸, 모르폴리노메틸, 피페리딘-1-일메틸, (4-메틸피페라진-1-일)메틸, 피페라진-1-일메틸, 피페리딘-4-일메틸, (4-(2-(디메틸아미노)아세틸)피페라진-1-일)메틸, (1S,4S)-2,5-디아자바이사이클로[2.2.1]헵탄-2-일메틸, 2-(피롤리딘-1-일)에틸, (4-아미노피페리딘-1-일)메틸, (3-(디메틸아미노)피롤리딘-1-일)메틸, (4-페녹시피페리딘-1-일)메틸, (1H-1,2,4-트리아졸-1-일)메틸, (4-(3- 하이드록시프로필)피페라진-1-일)메틸, 또는 피페리딘-3-일메틸;
b) 아미노메틸;
d) 3-(메틸아미노)프로폭시, 3-(디메틸아미노)프로폭시, 3-(디에틸아미노)프로폭시, 2-아미노에톡시, 3-(디메틸아미노)-2,2-디메틸프로폭시, 메톡시, 2-(메틸아미노)에톡시, 2-(N-메틸아세트아미도)에톡시, 3-(피페리딘-1-일)프로폭시, 3-모르폴리노프로폭시, 3-(피롤리딘-1-일)프로폭시, 3-아미노프로폭시, (1R,5S)-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일옥시, 피페리딘-4-일옥시, (1R,5S)-8-에틸-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일옥시, 1-에틸피롤리딘-3-일옥시, 또는 피롤리딘-3- 일옥시; 또는
e) (2-(디메틸아미노)에틸)(메틸)아미노.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 고리 A가 페닐이고, L¹ 및 L²-R⁶이 페닐 고리의 파라 위치에 있으며, 상기 페닐 고리가 하나의 R⁵로 추가로 임의로 치환되고, 여기서 L¹, L², R⁵ 및 R⁶은 제1항에 정의된 바와 같은 것을 특징으로 하는 화합물.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 고리 A가 피리딜이고, 피리딜 고리 상의 메틸렌기 및 Het가 피리딜 고리의 파라 위치에 있으며, L¹ 및 L²-R⁶이 피리딜 고리의 파라 위치에 있고, 상기 피리딜 고리는 하나의 R⁵로 임의로 치환되며, 여기서 L¹, L², R⁵ 및 R⁶은 제1항에 정의된 바와 같은 것을 특징으로 하는 화합물.
실시예 A1 내지 A124 중 어느 하나로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 또는 입체 이성질체.
제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 따른 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 및 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물.
제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 TLR7을 조절하는 방법.
TLR7 작용제로서 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 치료 유효량을 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 환자의 질환 또는 장애를 치료하는 방법.
제19항에 있어서, 상기 질환 또는 장애가 암인 것을 특징으로 하는 방법.