CN110742893A - A2a受体拮抗剂治疗癌症的方法 - Google Patents

A2a受体拮抗剂治疗癌症的方法 Download PDF

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Abstract

本文公开了具有式(Ib)的吡唑并三唑并嘧啶衍生物或其立体异构体或其药学上可接受的盐作为A2A受体拮抗剂治疗癌症的方法。

Description

A2A受体拮抗剂治疗癌症的方法
技术领域
本文还公开了使用吡唑并三唑并嘧啶衍生物或其立体异构体或其药学上可接受的盐作为A2A受体拮抗剂治疗癌症的方法。
背景技术
细胞外腺苷是许多生理活动的关键内源性调节剂。它通过与四种腺苷受体A1、A2A、A2B和A3相互作用发挥其调节功能。所有这四种受体都属于G蛋白偶联受体超家族，但具有不同的配体亲和力、组织分布和效应子应答。通过与不同的G蛋白偶联，它们可以刺激(A2A和A2B)或抑制(A1和A3)下游的腺苷酸环化酶活性，并且还可以参与调节其他途径，例如磷脂酶C(PLC)、Ca2+和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)。
免疫系统不仅负责保护其宿主免受微生物入侵，还可以从存在抗肿瘤免疫机制的生物体中去除改变的宿主组分。当免疫监视功能由于免疫系统本身或肿瘤细胞而减弱时，为肿瘤的发展和进展提供了有利的条件。腺苷-A2A受体信号传导作为一种新的代谢免疫检查点途径出现，其参与免疫耐受性肿瘤微环境的产生。已经证明，肿瘤组织中的缺氧将诱导更高浓度的腺苷的积累(～10μM对比在生理水平的～20nM)。缺氧介导的腺苷产生是由非造血和造血细胞亚群中CD39和CD73胞外核苷酸酶的上调造成的，其顺序催化细胞外ATP向腺苷的转化。
通过A2A(高亲和性)和A2B(低亲和性)受体-免疫细胞亚群中的主要腺苷受体的腺苷信号传导在保护癌组织免受免疫系统攻击中起重要作用。效应T细胞上的激活的A2A受体增加细胞内cAMP，进而抑制TCR触发的信号传导和抗肿瘤效应子功能，包括减少T细胞扩增，IFN-γ释放，和增加免疫抑制性PD-1、LAG3、IL-10和TGF-β的表达。T细胞中增加的cAMP还促进cAMP应答元件(CRE)介导的转录，例如FoxP3，其驱动调节性T细胞表型。此外，腺苷还通过禁用自然杀伤(NK)细胞的细胞毒性效应子功能、调节免疫抑制性M2巨噬细胞极化和髓源性抑制细胞(MDSC)扩增来抑制抗肿瘤免疫应答。因此，研究表达A2A受体的免疫细胞作为破坏肿瘤微环境中腺苷介导的免疫抑制的潜在靶标。证明了，A2AR的遗传缺失或药理学拮抗作用能够增强内源性抗肿瘤免疫，并且有效抑制已确立的免疫原性小鼠肿瘤中的肿瘤生长或转移。
WO0192264公开了5-氨基-吡唑并-[4，3-e]-1，2，4-三唑并[1，5-c]嘧啶腺苷A2a受体拮抗剂用于治疗中枢神经系统疾病，特别是帕金森氏病，证明其具有高的血脑屏障通透性。
然而，需要A2A受体的小分子拮抗剂作为抗癌治疗的免疫调节剂(RobertD.Leone，Ying-Chun Lo，Jonathan D.Powell，Mini Review，A2aR antagonists：Nextgeneration checkpoint blockade for cancer immunotherapy，Computational andStructural Biotechnology Journal 13(2015)265-272)。
发明内容
出乎意料且令人惊讶地，发现本文公开的吡唑并三唑并嘧啶衍生物在抗癌治疗中具有免疫调节功效。本发明人已发现，与其中R1和R2都是氢的化合物相比，式(Ib)中R1和R2的取代显著改善了作为A2A受体拮抗剂的化合物的活性。
在第一实施方案中，本文公开了式(Ib)的吡唑并三唑并嘧啶衍生物。第一实施方案包括以下方面：
方面1.式(Ib)的化合物
Figure BDA0002070627070000021
或其立体异构体或其药学上可接受的盐，
其中：
R为芳基或含有1或2个杂原子作为一个或多个环成员的5或6元杂芳基，所述杂原子独立地选自氮、氧或任选氧化的硫，并且所述环任选地被至少一个取代基R8取代；
R1和R2相同或不同，各自独立地选自氢、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-C3-8环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，其中所述-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-C3-8环烷基、杂环基、芳基或杂芳基各自独立地任选地被至少一个取代基R8取代。，条件是R1和R2中的至少一个不是氢；或者
R1和R2与它们所连接的碳原子一起形成3-至12-元饱和、部分或完全不饱和的环，其包含0，1或2个独立地选自氮、氧或任选被氧化的硫作为环成员的杂原子；并且所述环任选地被至少一个取代基R8取代；
R3和R4与它们所附接的氮原子一起形成3至12元环，所述环包含0、1或2个额外的独立地选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子作为一个或多个环成员，所述环任选地被一个或两个或三个取代基R5取代；
R5独立地为氢、卤素、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-CN、-NO2、氧代、-OR5a、-SO2R5a、-COR5a、-CO2R5a、-CONR5aR5b、-C(＝NR5a)NR5bR5c、-NR5aR5b、-NR5aCOR5b、-NR5aCONR5bR5c、-NR5aCO2R5b、-NR5aSONR5bR5c、-NR5aSO2NR5bR5c、或-NR5aSO2R5b，其中作为R5，所述-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8环烷基、杂环基、芳基、或杂芳基各自独立地且任选地被一个或两个或三个取代基R6取代；
R5a、R5b和R5c可以相同或不同，各自独立地为氢、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，其中所述-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基各自独立地任选地被一个或两个取代基R5d取代；
R5d独立地为氢、卤素、氰基、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、卤代C1-6烷基、卤代C2-6烯基、卤代C2-6炔基、-C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷氧基-、C2-6烯氧基-、C2-6炔氧基-、卤代C1-6烷氧基-、卤代C2-6烯氧基-、卤代C2-6炔氧基-、C3-8环烷氧基-、环烷基、杂环基、杂环氧基-、芳基、芳氧基-、杂芳基或杂芳基氧基-；
R6独立地为氢、卤素、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-CN、-NO2、氧代、-OR6a、-SO2R6a、-COR6a、-CO2R6a、-CONR6aR6b、-C(＝NR6a)NR6bR6c、-NR6aR6b、-NR6aCOR6b、-NR6aCONR6bR6c、-NR6aCO2R6b、-NR6aSONR6bR6c、-NR6aSO2NR6bR6c、或-NR6aSO2R6b；
R6a、R6b和R6c可以相同或不同，各自独立地为氢、卤素、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-C3-8环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，其中所述C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基各自独立地任选地被一个或两个或三个取代基R7取代；或者
(R6a和R6b)和/或(R6b和R6c)和/或(R6c和R6a)与它们所附接的原子一起形成3至12元饱和、部分或完全不饱和环，所述环包含0、1或2个额外的独立地选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子作为一个或多个环成员，并且所述环任选地被至少一个取代基R8取代；
R7独立地为氢、卤素、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-CN、-NO2、氧代、-OR7a、-SO2R7a、-COR7a、-CO2R7a、-CONR7aR7b、-C(＝NR7a)NR7bR7c、-NR7aR7b、-NR7aCOR7b、-NR7aCONR7bR7c、-NR7aCO2R7b、-NR7aSONR7bR7c、-NR7aSO2NR7bR7c、或-NR7aSO2R7b，其中所述-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8环烷基、杂环基、芳基、或杂芳基各自独立地且任选地被一个或两个选自氢、卤素、-C1-6烷基、-C1-6烷氧基、氧代、氰基和氨基的取代基取代；
R7a、R7b和R7c可以相同或不同，各自独立地为氢、-C1-6烷基、C1-6烷氧基-C1-6烷基-、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8环烷基、杂环基、芳基、或杂芳基；并且
R8独立地为氢、卤素、氰基、氧代、氨基、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、卤代C1-6烷基、卤代C2-6烯基、卤代C2-6炔基、-C1-6烷氧基、C3-8环烷氧基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基。
方面2：根据方面1的化合物，其中R为含有1或2个杂原子作为一个或多个环成员的C-连接的5或6元杂芳基，所述杂原子独立地选自氮、氧或任选氧化的硫。
方面3：根据方面2的化合物，其中R为呋喃基、吡嗪基或噻唑基；优选为呋喃-2-基、3-甲基吡嗪-2-基或噻唑-2-基。
方面4：根据方面1的化合物，其中R1为氢或C1-6烷基，优选氢、甲基、乙基；更优选氢；并且R2为C1-6烷基(优选甲基、异丙基、乙基、丙基、丁基或异丁基)，任选地被苯基或-C1-6烷氧基(优选甲氧基)取代；芳基(即，苯基或萘基)，任选地被卤素或C1-6烷氧基(例如，苯基、2-氟苯基、3-氟苯基、4-氟苯基、4-甲氧基苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-三氟甲基苯基、3，4-二氟苯基)取代；-C3-8环烷基(优选环丙基)或杂环基(优选4至7元单环饱和杂环基，其包含一个选自氧、氮和任选氧化的硫的杂原子作为环成员)。
方面5：根据方面1-4中任一项的化合物，其中R3和R4与它们所附接的氮原子一起形成3、4、5、6、7、8或9元单环，所述环包含0、1或2个额外的独立地选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子作为一个或多个环成员，所述环任选地被一个或两个或三个取代基R5取代。
方面6：根据方面5的化合物，其中R3和R4与它们所附接的氮原子一起形成3、4、5、6、7、8或9元单环，所述环包含0个额外的独立地选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子作为一个或多个环成员，所述环任选地被一个或两个或三个取代基R5取代。
方面7：根据方面5的化合物，其中R3和R4与它们所附接的氮原子一起形成3、4、5、6、7、8或9元单环，所述环包含1个额外的独立地选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子作为一个或多个环成员，所述环任选地被一个或两个或三个取代基R5取代。
方面8：根据方面7的化合物，其中R3和R4与它们所附接的氮原子一起形成3、4、5、6、7、8或9元单环，所述环包含一个额外的氮杂原子作为环成员，所述环任选地被一个或两个或三个取代基R5取代。
方面9：根据方面5-9中任一项的化合物，其中所述环是饱和的。
方面10：根据方面5的化合物，其中R3和R4与它们所附接的氮原子一起形成氮杂环丁烷基
Figure BDA0002070627070000041
吡咯烷基
Figure BDA0002070627070000042
或哌啶基环，其各自任选地被如式(Ib)所定义的R5取代。
方面11：根据方面5的化合物，其中R3和R4与它们所附接的氮原子一起形成任选地被如式(Ib)所定义的R5取代的哌嗪基环(即，
Figure BDA0002070627070000044
)。
方面12：根据方面1-4中任一项的化合物，其中R3和R4与它们所附接的氮原子一起形成7、8、9、10、11或12元双环，所述环包含0、1或2个额外的独立地选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子作为一个或多个环成员，所述环任选地被一个或两个或三个取代基R5取代。
方面13：根据方面12的化合物，其中R3和R4与它们所附接的氮原子一起形成7、8、9、10、11或12元双稠合环，所述环包含0、1或2个额外的独立地选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子作为一个或多个环成员，所述环任选地被一个或两个或三个取代基R5取代。
方面14：根据方面12的化合物，其中R3和R4与它们所附接的氮原子一起形成7、8、9、10、11或12元双稠合环，所述环包含0或1个额外的独立地选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子作为一个或多个环成员，所述环任选地被一个或两个或三个取代基R5取代。
方面15：根据方面12的化合物，其中R3和R4与它们所附接的氮原子一起形成10元双稠合环，所述环包含0或1个额外的氮杂原子作为环成员，所述环任选地被一个或两个或三个取代基R5取代。
方面16：根据方面15的化合物，其中R3和R4与它们所附接的氮原子一起形成环，所述环中的每个任选地被一个或两个或三个取代基R5取代。
方面17：根据方面12的化合物，其中R3和R4与它们所附接的氮原子一起形成7、8、9、10、11或12元双螺环，所述环包含0、1或2个额外的独立地选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子作为一个或多个环成员，所述环任选地被一个或两个或三个取代基R5取代。
方面18：根据方面17的化合物，其中R3和R4与它们所附接的氮原子一起形成氮杂螺[3.3]庚烷、氮杂螺[3.5]壬烷、氮杂螺[3.4]辛烷、氮杂螺[5.5]十一烷或氮杂螺[4.5]癸烷，其各自包含0或1个额外的氮或氧原子作为环成员，并且所述环任选地被一个或两个或三个取代基R5取代。
方面19：根据方面18的化合物，其中R3和R4与它们所附接的氮原子一起形成
Figure BDA0002070627070000052
环，并且所述环任选地被一个或两个或三个取代基R5取代。
方面20：根据方面5-19中任一项的化合物，其中所述环被一个R5取代。
方面21：根据方面5-19中任一项的化合物，其中所述环被两个R5取代。
方面22：根据方面21的化合物，其中所述环被一个C1-6烷基(优选甲基)取代并且进一步被一个R5取代。
方面23：根据方面20-22中任一项的化合物，其中R5为卤素、-C1-6烷基、芳基、-OR5a或-CO2R5a，其中R5a为如式(Ib)所定义。
方面24：根据方面23的化合物，其中R5为-CO2R5a，其中R5a为-C1-6烷基，优选甲基。
方面25：根据方面23的化合物，其中R5为-OR5a，其中R5a为-C1-6烷基，任选地被一个R5d取代，其中R5d为氢、卤素(优选氟)或-C1-6烷氧基。
方面26：根据方面23的化合物，其中R5为-OR5a，其中R5a为三氟甲氧基、甲氧基、甲氧基乙氧基或羟基。
方面27：根据方面23的化合物，其中R5为苯基，任选地被一个或两个或三个取代基R6取代，其中R6为如式(Ib)所定义。
方面28：根据方面27的化合物，其中R5为苯基，任选地被一个或两个或三个取代基R6取代，其中R6独立地为卤素(优选氟)、-OR6a或NR6aR6bC(O)-，其中R6a和R6b为如式(Ib)所定义。
方面29：根据方面28的化合物，其中R5为苯基，任选地被一个取代基R6取代，其中
R6为NR6aR6bC(O)-，其中
R6a和R6b各自独立地为氢、-C1-6烷基或-C3-8环烷基，所述-C1-6烷基和-C3-8环烷基各自任选地被一个R7取代，其中
R7为杂环基(优选3至8元杂环)，其包含一个或两个独立地选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子作为一个或多个环成员，任选地被羟基、-C1-6烷基或-C1-6烷氧基取代。
方面30：根据方面28的化合物，其中R5为苯基，任选地被一个取代基R6取代，其中
R6为NR6aR6bC(O)-，其中
R6a和R6b各自独立地为氢、-C1-6烷基或-C3-8环烷基，所述-C1-6烷基任选地被一个R7取代，其中
R7为3至8元饱和单杂环，其包含一个选自氮或氧的杂原子作为环成员(优选氧杂环丁烷基)，任选地被羟基取代。
方面31：根据方面28的化合物，其中R5为苯基，任选地被一个取代基R6取代，其中
R6为NR6aR6bC(O)-，其中
R6a和R6b与它们所附接的氮原子一起形成3至12元饱和环，所述环包含0、1或2个额外的独立地选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子作为一个或多个环成员。
方面32：根据方面31的化合物，其中R6a和R6b与它们所附接的氮原子一起形成3至8元饱和单环，所述环包含0或1个额外的独立地选自氮或氧的杂原子作为环成员。
方面33：根据方面32的化合物，其中R6a和R6b与它们所附接的氮原子一起形成6元饱和单环，所述环包含0或1个额外的氮杂原子作为环成员。
方面34：根据方面31的化合物，其中R6a和R6b与它们所附接的氮原子一起形成哌啶基环。
方面35：根据方面28的化合物，其中R5为苯基，任选地被一个或两个卤素取代并且进一步任选地被一个取代基R6取代，其中
R6为-OR6a，其中
R6a为任选地被一个R7取代的-C1-6烷基，其中
R7为杂环基、-OR7a或-NR7aR7b，其中
R7a和R7a各自独立地为氢、-C1-6烷基、C1-6烷氧基-C1-6烷基-；并且所述杂环基任选地被卤素、羟基或-C1-6烷基取代。
方面36：根据方面35的化合物，其中作为R7的所述杂环基为4、5、6、7或8元杂环基，其包含一个或两个独立地选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子作为一个或多个环成员，任选地被-C1-6烷基取代；优选5或6元杂环基，其包含一个或两个独立地选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子作为一个或多个环成员。
方面37：根据方面36的化合物，其中R7为吗啉基、吗啉代基、吡咯烷基、吡咯烷子基(pyrrolidino)、4-甲基哌嗪基或哌啶基。
方面38：根据方面35的化合物，其中R6为-OR6a，其中R6a为任选地被一个R7取代的-C1-6烷基，其中R7为-OR7a，其中R7a为氢、-C1-6烷基、C1-6烷氧基-C1-6烷基-。
方面39：根据方面35的化合物，其中R6为-OR6a，其中R6a为任选地被一个R7取代的-C1-6烷基，其中R7为-NR7aR7b，其中R7a和R7b为氢、或-C1-6烷基。
方面40：根据方面35的化合物，其中R6为甲氧基乙氧基-、甲氧基乙氧基乙氧基-、2-羟基乙氧基、2-羟基丙氧基-、氨基乙氧基-、N，N-二甲基氨基乙氧基-或N-甲基氨基乙氧基-。
方面41：根据方面1的化合物，其为化合物编号C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9、C10、C11、C12、C13、C14、C15、C16、C17、C18、C19、C20、C21、C22、C23、C24、C25、D1或D2。
在第二实施方案中，本文公开了一种药物组合物，其包含方面1-41中任一项的化合物或其立体异构体、或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂。
在第三实施方案中，本文公开了一种治疗癌症的方法，其包括向有需要的受试者给予方面1-41中任一项的化合物或其立体异构体、或其药学上可接受的盐。
具体实施方式
以下术语在整个说明书中具有指示的含义：
如本文(包括所附权利要求书)所使用的，除非上下文另外清楚地指示，否则单数形式的词语例如“一个”、“一种”和“该”包括它们对应的复数指示物。
除非上下文另外清楚地指示，否则术语“或”用于意指术语“和/或”，并且可与术语“和/或”互换使用。
本文的术语“烷基”是指选自直链饱和烃基和支链饱和烃基的烃基，其包含1至18个(如1至12个，进一步如1至10个，更进一步如1至8个或1至6个或1至4个)碳原子。含有1至6个碳原子的烷基(即C1-6烷基)的实例包括但不限于甲基、乙基、1-丙基或正丙基(“n-Pr”)、2-丙基或异丙基(“i-Pr”)、1-丁基或正丁基(“n-Bu”)、2-甲基-1-丙基或异丁基(“i-Bu”)、1-甲基丙基或仲丁基(“s-Bu”)、1，1-二甲基乙基或叔丁基(“t-Bu”)、1-戊基、2-戊基、3-戊基、2-甲基-2-丁基、3-甲基-2-丁基、3-甲基-1-丁基、2-甲基-1-丁基、1-己基、2-己基、3-己基、2-甲基-2-戊基、3-甲基-2-戊基、4-甲基-2-戊基、3-甲基-3-戊基、2-甲基-3-戊基、2，3-二甲基-2-丁基和3，3-二甲基-2-丁基。
本文的术语“卤素”是指氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)和碘(I)。
本文的术语“卤代烷基”是指其中一个或多个氢被一个或多个卤素原子(如氟、氯、溴和碘)替代的烷基。卤代烷基的实例包括卤代C1-8烷基、卤代C1-6烷基或卤代C1-4烷基，但不限于-CF3、-CH2Cl、-CH2CF3、-CCl2、CF3等。
本文的术语“烯基”是指选自直链烃基和支链烃基的烃基，其包含至少一个C＝C双键和2至18个(如2至8个，进一步如2至6个)碳原子。烯基的实例例如C2-6烯基包括但不限于乙烯基(ethenyl或vinyl)、丙-1-烯基、丙-2-烯基、2-甲基丙-1-烯基、丁-1-烯基、丁-2-烯基、丁-3-烯基、丁-1，3-二烯基、2-甲基丁-1，3-二烯基、己-1-烯基、己-2-烯基、己-3-烯基、己-4-烯基和己-1，3-二烯基。
本文的术语“炔基”是指选自直链烃基和支链烃基的烃基，其含有至少一个C≡C三键和2至18个(如2至8个，进一步如2至6个)碳原子。炔基的实例例如C2-6炔基包括但不限于乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基(炔丙基)、1-丁炔基、2-丁炔基和3-丁炔基。
本文中的术语“烷基氧基”或“烷氧基”是指通过氧原子附接到母体分子部分上的如上定义的烷基。烷氧基的实例例如C1-6烷氧基或C1-4烷氧基包括但不限于甲氧基、乙氧基、异丙氧基、丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、戊氧基和己氧基等。
术语“烷氧基-烷基-”是指进一步被如上定义的烷氧基取代的如上定义的烷基。烷氧基-烷基-例如C1-8烷氧基-C1-8烷基-或C1-6烷氧基-C1-6烷基-的实例包括但不限于甲氧基甲基、乙氧基甲基、乙氧基乙基、异丙氧基甲基或丙氧基甲基等。
本文的术语“环烷基”是指选自饱和的和部分不饱和的环状烃基的烃基，其包含单环和多环(例如双环和三环)基团。例如，环烷基可含有3至12个(如3至10个，进一步如3至8个，进一步如3至6个、3至5个或3至4个)碳原子。甚至进一步例如，环烷基可选自含有3至12个(如3至10个，进一步如3至8个，3至6个)碳原子的单环基团。单环环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、1-环戊-1-烯基、1-环戊-2-烯基、1-环戊-3-烯基、环己基、1-环己-1-烯基、1-环己-2-烯基、1-环己-3-烯基、环己二烯基、环庚基、环辛基、环壬基、环癸基、环十一基和环十二基。特别地，饱和单环环烷基的实例例如C3-8环烷基包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。在优选的实施方案中，环烷基是含有3至6个碳原子的单环(缩写为C3-6环烷基)，其包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基和环己基。双环环烷基的实例包括具有7至12个环原子的那些，其排列成选自[4，4]、[4，5]、[5，5]、[5，6]或[6，6]环系的双环，或选自双环[2.2.1]庚烷、双环[2.2.2]辛烷和双环[3.2.2]壬烷的桥连双环。双环环烷基的其他实例包括排列为选自[5，6]和[6，6]环体系的双环的那些双环环烷基，如
Figure BDA0002070627070000091
其中波浪线表示附接点。环可以是饱和的或具有至少一个双键(即部分不饱和的)，但不是完全共轭的，并且不是芳香族的，因为本文中定义了芳香族。
单独使用或与其他术语组合使用的术语“芳基”是指选自以下各项的基团：
ο5和6元碳环芳香环，例如苯基；
ο双环体系，如7至12元双环体系，其中至少一个环是碳环和芳香族的，例如萘基和茚满基；以及，
ο三环体系，如10至15元三环体系，其中至少一个环是碳环和芳香族的，例如芴基。
术语“芳香烃环”和“芳基”在本文的公开内容中可互换使用。在一些实施方案中，单环或双环芳香烃环具有5至10个成环碳原子(即，C5-10芳基)。单环或双环芳香烃环的实例包括但不限于苯基、萘-1-基、萘-2-基、蒽基、菲基等。在一些实施方案中，芳香烃环是萘环(萘-1-基或萘-2-基)或苯环。在一些实施方案中，芳香烃环是苯环。
本文的术语“杂芳基”是指选自以下项的基团：
ο5、6或7元芳香族单环，其包含至少一个杂原子例如1至4个杂原子，或在一些实施方案中包含1至3个杂原子，在一些实施方案中包含1至2个杂原子，这些杂原子选自氮(N)、硫(S)和氧(O)，其余的环原子是碳；
ο8至12元双环，其包含至少一个杂原子例如1至4个杂原子，或在一些实施方案中包含1至3个杂原子，或在其他实施方案中包含1或2个杂原子，这些杂原子选自氮、氧或任选氧化的硫(作为一个或多个环成员)，其余环原子是碳，并且其中至少一个环是芳香族的且芳香族环中存在至少一个杂原子；以及
ο11至14元三环，其包含至少一个杂原子例如1至4个杂原子，或在一些实施方案中包含1至3个杂原子，或在其他实施方案中包含1或2个杂原子，这些杂原子选自氮、氧或任选氧化的硫(作为一个或多个环成员)，其余环原子是碳，并且其中至少一个环是芳香族的且芳香环中存在至少一个杂原子。
当杂芳基中S和O原子的总数超过1时，那些杂原子彼此不相邻。在一些实施方案中，杂芳基中S和O原子的总数不大于2。在一些实施方案中，芳香族杂环中S和O原子的总数不大于1。当杂芳基含有多于一个杂原子环成员时，杂原子可以相同或不同。杂芳基的一个或多个环中的氮原子可被氧化形成N-氧化物。
本文所用的术语“C连接的杂芳基”意指杂芳基通过来自杂芳基环的C原子的键与核心分子连接。
本文所用的术语“任选氧化的硫”是指S、SO或SO2。
术语“芳香族杂环”和“杂芳基”在本文的公开内容中可互换使用。在一些实施方案中，单环或双环芳香族杂环具有5、6、7、8、9或10个成环成员，其中1、2、3或4个杂原子环成员独立地选自氮(N)、硫(S)和氧(O)，其余的环成员是碳。在一些实施方案中，单环或双环芳香族杂环是包含独立地选自氮(N)、硫(S)和氧(O)的1或2个杂原子环成员的单环或双环。在一些实施方案中，单环或双环芳香族杂环是5至6元杂芳基环，其为单环并且具有独立地选自氮(N)、硫(S)和氧(O)的1或2个杂原子环成员。在一些实施方案中，单环或双环芳香族杂环是8至10元杂芳基环，其为双环并且具有独立地选自氮、硫和氧的1或2个杂原子环成员。
杂芳基或单环或双环芳香族杂环的实例包括但不限于(从指定为优先级1的连接位置开始编号)吡啶基(如2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基)、噌啉基、吡嗪基、2，4-嘧啶基、3，5-嘧啶基、2，4-咪唑基、咪唑并吡啶基、异噁唑基、噁唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基(如1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基或1，3，4-噻二唑基)、四唑基、噻吩基(如噻吩-2-基、噻吩-3-基)、三嗪基、苯并噻吩基、呋喃基(furyl或furanyl)、苯并呋喃基、苯并咪唑基、吲哚基、异吲哚基、二氢吲哚基、噁二唑基(如1，2，3-噁二唑基、1，2，4-噁二唑基或1，3，4-噁二唑基)、酞嗪基、吡嗪基、哒嗪基、吡咯基、三唑基(如1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基或1，3，4-三唑基)、喹啉基、异喹啉基、吡唑基、吡咯并吡啶基(如1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)、吡唑并吡啶基(如1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-基)、苯并噁唑基(如苯并[d]噁唑-6-基)、蝶啶基、嘌呤基、1-氧杂-2，3-二唑基、1-氧杂-2，4-二唑基、1-氧杂-2，5-二唑基、1-氧杂-3，4-二唑基、1-硫杂-2，3-二唑基、1-硫杂-2，4-二唑基、1-硫杂-2，5-二唑基、1-硫杂-3，4-二唑基、呋咱基(如呋咱-2-基、呋咱-3-基)、苯并呋咱基、苯并苯硫基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、呋喃并吡啶基、苯并噻唑基(如苯并[d]噻唑-6-基)、吲唑基(如1H-吲唑-5-基)和5，6，7，8-四氢异喹啉。
“杂环基”、“杂环”或“杂环的”是可互换的并且是指包含一个或多个选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子作为环成员(其余的环成员是碳)的非芳族杂环基团，包括单环、稠合环、桥环和螺环，即含有单环杂环基、桥连杂环基、螺杂环基和稠合杂环基。本文所用的术语“任选氧化的硫”是指S、SO或SO2。
术语“单环杂环基”是指单环基团，其中至少一个环成员是选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子。杂环可以是饱和的或部分饱和的。
示例性单环4至9元杂环基团包括但不限于(从指定为优先级1的连接位置开始编号)吡咯烷-1-基、吡咯烷-2-基、吡咯烷-3-基、咪唑烷-2-基、咪唑烷-4-基、吡唑烷-2-基、吡唑烷-3-基、哌啶-1-基、哌啶-2-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基、2，5-哌嗪基、吡喃基、吗啉基、吗啉代基、吗啉-2-基、吗啉-3-基、环氧乙烷基、氮丙啶-1-基、氮丙啶-2-基、氮杂环辛烷-1-基、氮杂环辛烷-2-基、氮杂环辛烷-3-基、氮杂环辛烷-4-基、氮杂环辛烷-5-基、硫杂环丙烷基、氮杂环丁烷-1-基、氮杂环丁烷-2-基、氮杂环丁烷-3-基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、1，2-二硫杂环丁烷基、1，3-二硫杂环丁烷基、二氢吡啶基、四氢吡啶基、硫代吗啉基、噻噁烷基(thioxanyl)、哌嗪基、高哌嗪基、高哌啶基、氮杂环庚烷-1-基、氮杂环庚烷-2-基、氮杂环庚烷-3-基、氮杂环庚烷-4-基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基(thiepanyl)、1，4-氧硫杂环己烷基(1，4-oxathianyl)、1，4-二氧杂环庚烷基、1，4-氧硫杂环庚烷基、1，4-氧氮杂环庚烷基、1，4-二硫杂环庚烷基、1，4-硫氮杂环庚烷基和1，4-二氮杂环庚烷基、1，4-二硫杂环己烷基(1，4-dithianyl)、1，4-氮硫杂环己烷基(1，4-azathianyl)、氧氮杂卓基(oxazepinyl)、二氮杂卓基(diazepinyl)、硫氮杂卓基(thiazepinyl)、二氢噻吩基、二氢吡喃基、二氢呋喃基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、1-吡咯啉基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、二氢吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、1，4-二噁烷基、1，3-二氧戊环基、吡唑啉基、吡唑烷基、二硫杂环己烷基(dithianyl)、二硫戊环基(dithiolanyl)、吡唑烷基、咪唑啉基、嘧啶酮基、或1，1-二氧代-硫代吗啉基。
术语“螺杂环基”是指5至20元多环杂环基，其环通过一个共有的碳原子(称为螺原子)连接，包含一个或多个选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子作为环成员，其余的环成员是碳。螺杂环基的一个或多个环可含有一个或多个双键，但这些环都不具有完全共轭的π电子体系。优选地，螺杂环基为6至14元，更优选为7至12元。根据共有的螺原子数目，螺杂环基分为单螺杂环基、二螺杂环基或多螺杂环基，并且优选是指单螺杂环基或二螺杂环基，并且更优选4元/4元、3元/5元、4元/5元、4元/6元、5元/5元、或5元/6元单螺杂环基。螺杂环基的代表性实例包括但不限于以下基团：2，3-二氢螺[茚-1，2′-吡咯烷](例如，2，3-二氢螺[茚-1，2′-吡咯烷]-1′-基)、1，3-二氢螺[茚-2，2′-吡咯烷](例如，1，3-二氢螺[茚-2，2′-吡咯烷]-1′-基)、氮杂螺[2.4]庚烷(例如，5-氮杂螺[2.4]庚烷-5-基)、氮杂螺[3.4]辛烷(例如，6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基)、2-氧杂-6-氮杂螺[3.4]辛烷(例如，2-氧杂-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基)、氮杂螺[3.4]辛烷(例如，6-氮杂螺[3.4]辛-6-基)、氮杂螺[3.4]辛烷(例如，6-氮杂螺[3.4]辛-6-基)、1，7-二氧杂螺[4.5]癸烷、2-氧杂-7-氮杂-螺[4.4]壬烷(例如，2-氧杂-7-氮杂-螺[4.4]壬-7-基)、7-氧杂-螺[3.5]壬基和5-氧杂-螺[2.4]庚基。
术语“稠合杂环基”是指5至20元多环杂环基，其中体系中的每个环与另一个环共享相邻的一对原子(碳和碳原子或碳和氮原子)，包含一个或多个选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子作为环成员，其余的环成员是碳。稠合杂环基的一个或多个环可含有一个或多个双键，但这些环都不具有完全共轭的π电子体系。优选地，稠合杂环基为6至14元，并且更优选7至10元。根据元环(membered rings)的数目，稠合杂环基分为双环、三环、四环或多环稠合杂环基，优选是指双环或三环稠合杂环基，并且更优选5元/5元、或5元/6元双环稠合杂环基。稠合杂环的代表性实例包括但不限于以下基团：八氢环戊烷并[c]吡咯(例如，八氢环戊烷并[c]吡咯-2-基)、八氢吡咯并[3，4-c]吡咯基、八氢异吲哚基、异吲哚啉基(例如，异吲哚啉-2-基)、八氢-苯并[b][1，4]二噁英。
术语“桥连杂环基”是指5至14元多环杂环烷基，其中体系中的每两个环共享两个不连接的原子，包含一个或多个选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子作为环成员，其余的环成员是碳。桥连杂环基的一个或多个环可含有一个或多个双键，但这些环都不具有完全共轭的π电子体系。优选地，桥连杂环基为6至14元，并且更优选7至10元。根据元环的数目，桥连杂环基分为双环、三环、四环或多环桥连杂环基，并且优选是指双环、三环或四环桥连杂环基，并且更优选双环或三环桥连杂环基。桥连杂环基的代表性实例包括但不限于以下基团：2-氮杂双环[2.2.1]庚基、氮杂双环[3.1.0]己基、2-氮杂双环[2.2.2]辛基和2-氮杂双环[3.3.2]癸基。
本文公开的化合物可含有不对称中心，并且因此可以作为对映异构体存在。“对映异构体”是指化合物的两种立体异构体，它们彼此是不可重叠的镜像。当本文公开的化合物具有两个或更多个不对称中心时，它们可以另外作为非对映异构体存在。对映异构体和非对映异构体属于更广泛的立体异构体类别。旨在包括作为基本上纯的拆分对映异构体、其外消旋混合物，以及非对映异构体混合物的所有这些可能的立体异构体。旨在包括本文公开的化合物的所有立体异构体和/或其药学上可接受的盐。除非另外明确提及，否则对一种异构体的提及适用于任何可能的异构体。每当异构体组合物未指明时，则包括所有可能的异构体。
如本文所用，术语“基本上纯的”意指目标立体异构体含有按重量计不超过35％(诸如不超过30％，进一步诸如不超过25％，甚至进一步诸如不超过20％)的非任何其他立体异构体。在一些实施方案中，术语“基本上纯的”意指目标立体异构体含有按重量计不超过10％(例如不超过5％，诸如不超过1％)的任何其他立体异构体。
当本文公开的化合物含有烯属双键时，除非另外指明，否则此类双键意在包括E和Z几何异构体。
当本文公开的化合物含有二取代的环己基或环丁基时，在环己基或环丁基环上发现的取代基可以采用顺式和反式构造。顺式构造意指发现两个取代基位于碳上2个取代基位置的上侧，而反式意指它们位于相对侧。
将反应产物互相分离和/或从起始材料中分离可能是有利的。通过本领域中常用的技术，将每一步或一系列步骤的所需产物分离和/或纯化(在下文中分离)至所需的均质程度。通常，此类分离涉及多相提取、从溶剂或溶剂混合物中结晶、蒸馏、升华或色谱法。色谱法可以包括许多方法，包括例如：反相和正相；尺寸排除；离子交换；高、中、低压液相色谱法和装置；小规模分析；模拟移动床(SMB)和制备型薄层或厚层色谱法、以及小规模薄层和快速色谱技术。本领域技术人员将应用最可能实现所需分离的技术。
“非对映异构体”是指具有两个或更多个手性中心的化合物的立体异构体，但它们不是彼此的镜像。通过本领域技术人员熟知的方法，诸如通过色谱法和/或分步结晶，可以基于非对映异构体混合物的物理化学差异将它们分离成其单独的非对映异构体。对映异构体可以通过以下方式来分离：通过与适当的光学活性化合物(例如，手性助剂如手性醇或莫舍酰氯(Mosher′s acid chloride))反应将对映异构体混合物转化为非对映异构体混合物，分离非对映异构体并将各自的非对映异构体转化(例如，水解)成相应的纯的对映异构体。也可以使用手性HPLC柱来分离对映异构体。
通过使用诸如用光学活性拆分剂形成非对映异构体的方法拆分外消旋混合物可以获得单一立体异构体(例如基本上纯的对映异构体)(Eliel，E.和Wilen，S.Stereochemistry of Organic Compounds.New York：John Wiley&Sons，Inc.，1994；Lochmuller，C.H.，等认”Chromatographic resolution of enantiomers：Selectivereview.″J.Chromatogr.，113(3)(1975)：第283-302页)。本发明的手性化合物的外消旋混合物可以通过任何合适的方法分开和分离，包括：(1)用手性化合物形成离子、非对映异构体盐并通过分级结晶或其他方法分离，(2)用手性衍生剂形成非对映异构体化合物，分离非对映异构体，并转化为纯的立体异构体，以及(3)在手性条件下直接分离基本上纯的或富集的立体异构体。参见：Wainer，Irving W.，Ed.Drug Stereochemistry：Analyfical Methodsand Pharmacology.New York：Marcel Dekker，Inc.，1993。
“药学上可接受的盐”是指如下所述的盐，该盐在可靠的医学判断范围内适用于与人和低等动物的组织接触而没有过度毒性、刺激，过敏反应等，并且具有相称的合理的效益/风险比。药学上可接受的盐可以在本文公开的化合物的最终分离和纯化过程中原位制备，或者通过使游离碱官能团与合适的有机酸反应或通过使酸性基团与合适的碱反应来单独制备。
此外，如果本文公开的化合物是作为酸加成盐获得，则游离碱可以通过碱化酸盐的溶液获得。相反地，如果产物是游离碱，则可以根据用于从碱性化合物制备酸加成盐的常规程序通过将游离碱溶解在合适的有机溶剂中并且用酸处理溶液产生加成盐，诸如药学上可接受的加成盐。本领域的技术人员将认识到可用于在无需过度实验的情况下制备无毒的药学上可接受的加成盐的各种合成方法。
如本文所定义，“其药学上可接受的盐”包括至少一种式(I)的化合物的盐和式(I)的化合物的立体异构体的盐，如对映异构体的盐和/或非对映异构体的盐。
当应用于动物、人、实验受试者、细胞、组织、器官或生物流体时，术语“给予”(administration，administering)、“治疗”(treating和treatment)意指外源性药剂、治疗剂、诊断剂或组合物与该动物、人、受试者、细胞、组织、器官或生物流体的接触。细胞的治疗涵盖试剂与该细胞的接触，以及试剂与流体的接触，其中该流体与该细胞接触。术语“给予”和“治疗”还意指通过试剂、诊断剂、结合化合物或者通过另一种细胞对例如细胞的体外和离体治疗。本文中的术语“受试者”包括任何生物体，优选地动物、更优选地哺乳动物(例如，大鼠、小鼠、狗、猫、兔子)且最优选地人。
术语“有效量”或“治疗有效量”是指活性成分(如化合物)的如下量，当该化合物被给予受试者以治疗疾病或者疾病或病症的至少一种临床症状时该量足以影响对该疾病、病症或症状的这种治疗。“治疗有效量”可随以下各项变化：化合物，疾病、病症和/或疾病或病症的症状，疾病、病症和/或疾病或病症的症状的严重程度，待治疗的受试者的年龄和/或待治疗的受试者的体重。在任何给定的实例中，适当的量对于本领域技术人员来说是清楚的，或者可以通过常规实验来确定。在一些实施方案中，“治疗有效量”是本文公开的至少一种化合物和/或其至少一种立体异构体和/或其至少一种其药学上可接受的盐有效于“治疗”(如上定义)受试者的疾病或病症的量。在组合治疗的情况下，“治疗有效量”是指用于有效治疗疾病、病症或病状的组合对象的总量。
包含本文公开的化合物的药物组合物可以经由口服、吸入、直肠、肠胃外或局部给药给予至对其有需要的受试者。对于口服给药，药物组合物可以是常规固体配制品如片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊等，液体配制品如水或油悬浮液，或其他液体配制品如糖浆、溶液、悬浮液等；对于肠胃外给药，药物组合物可以是溶液、水溶液、油悬浮液浓缩物、冻干粉末等。优选地，药物组合物的配制品选自片剂、包衣片剂、胶囊、栓剂、鼻喷雾剂或注射剂，更优选片剂或胶囊。药物组合物可以是具有准确剂量的单个单位给药。此外，药物组合物还可包含另外的活性成分。
本文公开的药物组合物的所有配制品可以通过制药领域中的常规方法制备。例如，可以将活性成分与一种或多种赋形剂混合，然后制备所需的配制品。“药学上可接受的赋形剂”是指适用于所需药物配制品的常规药物载体，例如：稀释剂、媒介物(如水、各种有机溶剂等)、填充剂(如淀粉、蔗糖等)、粘合剂(如纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮(PVP))；润湿剂如甘油；崩解剂如琼脂、碳酸钙和碳酸氢钠；吸收促进剂如季铵化合物；表面活性剂如十六醇；吸收载体如高岭土和皂土；润滑剂，如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、聚乙二醇等。此外，该药物组合物还包含其他药学上可接受的赋形剂，如分散剂、稳定剂、增稠剂、络合剂、缓冲剂、渗透促进剂、聚合物、芳香剂甜味剂和染料。
术语“疾病”是指任何疾病、不适、病、症状或适应症，并且可以与术语“病症”或“病状”互换。
在整个说明书和随后的权利要求书中，除非上下文另有要求，否则术语“包括”和变型如“包括”(“comprises”和“comprising”)旨在说明其后的特征的存在，但不排除存在或添加一个或多个其他功能。当在本文中使用时，术语“包括”可以用术语“含有”、“包含”代替或有时用“具有”代替。
在整个说明书和随后的权利要求书中，术语“Cn-m”表示包括端点的范围，其中n和m是整数并表示碳数。实例包括C1-8、C1-6等。
除非在本文件的其他地方明确定义，否则本文使用的所有其他技术和科学术语具有本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义。
一般合成
本文公开的化合物(包括其盐)可以使用已知的有机合成技术来制备，并且可以根据许多可能的合成途径中的任何一种合成。
用于制备本文公开的化合物的反应可以在合适的溶剂中进行，所述溶剂可以由有机合成领域的技术人员容易地选择。合适的溶剂在进行反应的温度下可以与起始材料、中间体或产物基本上不反应，例如，所述温度的范围可以从室温到溶剂的沸腾温度。给定的反应可以在一种溶剂或溶剂混合物中进行。
本领域技术人员可以容易地确定适当的保护基团的选择。
可以根据本领域已知的任何合适的方法监测反应，例如NMR、UV、HPLC、LC-MS和TLC。化合物可通过多种方法纯化，包括HPLC和正相硅胶色谱法。
手性分析HPLC用于不同手性实例的保留时间分析，根据所用的柱、流动相、溶剂比将条件分为以下方法。
本文公开的化合物可以按照方案I和方案II制备。
方案I
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其中R和R6为如式(I)所定义。
在方案I中，可商购的醛与碳酰肼1(例如呋喃-2-碳酰肼)反应形成式2，其在酸性条件下重排以得到式3。然后使式3与2-卤代-2-苯乙酸酯(例如2-溴-2-苯乙酸甲酯)反应形成式4，随后通过使用碱如氢氧化钠或叔丁醇钾将其水解成式5的游离酸。酸5的进一步偶联在本领域已知的标准条件下完成，以得到式6的化合物。
方案II
Figure BDA0002070627070000152
其中R、R6和R3和R4为如式(I)所定义。
在方案II中，在本领域已知的标准条件下将可商购的酸(例如2-苯基丙酸)酯化，得到一种式7的化合物，使其与卤化试剂如N-溴代琥珀酰亚胺反应，以在其α位引入一个卤原子。使式8的化合物与水合肼反应，以形成式9。使式9与可商购的2-氨基-4，6-二氯嘧啶-5-甲醛反应得到式10，使其与碳酰肼(例如呋喃-2-碳酰肼)反应并且在酸性条件存在下进一步重排，以得到式12。随后通过使用碱如氢氧化钠或叔丁醇钾将酯12水解成式13的游离酸。酸13的进一步偶联在本领域已知的标准条件下完成，以得到式14的化合物。
实施例
以下实施例旨在是仅仅示例性的，并且不应认为是以任何方式进行限制。除非另有说明，下述实施例中的实验方法是常规方法。除非另有说明，试剂和材料均可商购。所用的所有溶剂和化学品均为分析级或化学纯。溶剂在使用前都要再蒸馏。无水溶剂都根据标准方法或参考方法制备。用于柱色谱法的硅胶(100-200目)和用于薄层色谱法(TLC)的硅胶(GF254)可从中国的青岛海洋化工有限责任公司(Tsingdao Haiyang Chemical Co.，Ltd.)或烟台化学有限责任公司(Yantai Chemical Co.，Ltd)商购获得；除非另有说明，否则所有均用石油醚(60-90℃)/乙酸乙酯(v/v)洗脱，并用碘或磷钼酸在乙醇中的溶液显色。除非另有说明，所有萃取溶剂均经无水Na2SO4干燥。在具有TMS(四甲基硅烷)作为内标的Bruck-400核磁共振光谱仪上记录1H NMR谱。通过使用配备有在214nm和254nm处检测的二极管阵列检测器(DAD)的Agilentl 100高效液相色谱-离子阱质谱仪(LC-MSD Trap)和离子阱(ESI源)记录LC/MS数据。除试剂外的所有化合物名称均由14.0版本生成。
在以下实例中，使用以下缩写：
AcOH 乙酸
Aq 水性
盐水(Brine) 饱和氯化钠水溶液
Bn 苄基
BnBr 苄基溴
BPO 过氧化苯甲酰
BSA N，O-双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺
CH2Cl2或DCM 二氯甲烷
DMF N，N-二甲基甲酰胺
Dppf 1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁
DBU 1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯
DIEA或DIPEA N，N-二异丙基乙胺
DMAP 4-N，N-二甲氨基吡啶
DMF N，N-二甲基甲酰胺
DMSO 二甲亚砜
EtOAc 乙酸乙酯
EtOH 乙醇
Et2O或醚 二乙醚
g 克
h或hr 小时
HATU O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸酯
Hex 己烷
HCl 盐酸
HMDS 六甲基二硅氮烷
HPLC 高效液相色谱法
IPA 异丙醇
i-PrOH 异丙醇
LCMS 液相色谱-质谱法
mg 毫克
mL 毫升
mmol 毫摩尔
MeCN 乙腈
MeOH 甲醇
Min 分钟
ms或MS 质谱
Na2SO4 硫酸钠
NBS N-溴代琥珀酰亚胺
PE 石油醚
prep 制备
Rt 保留时间
Rt或rt 室温
TBAF 四丁基氟化铵
TBSCl 叔丁基二甲基甲硅烷基氯
TFA 三氟乙酸
THF 四氢呋喃
TLC 薄层色谱法
μL 微升
化合物C1：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)丙-1-酮
步骤A：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)丙酸乙酯
Figure BDA0002070627070000182
在室温下向2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-5-胺(500mg，2.07mmol)和K2CO3(344mg，2.49mmol)在DMF(20mL)中的经搅拌的溶液中加入2-氯丙酸乙酯(339mg，2.49mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。将混合物用水(20mL)稀释并且用EA(20mL x 2)萃取。残余物(N1和N2位置化合物的混合物)直接用于下一步骤。MS：M/e 342(M+1)+。
步骤B：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e们，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)丙酸
Figure BDA0002070627070000183
在室温下向步骤A的产物(707mg，粗产物，2.07mmol)在MeOH(12mL)中的经搅拌的溶液中加入NaOH水溶液(2.0M，4mL)。加完后，将混合物在60℃下搅拌3小时。减压浓缩该反应。将残余物溶于水(20mL)中并用HCl(2M)中和至pH＝3-4。减压浓缩水相。残余物(N1和N2位置化合物的混合物，含有NaCl)直接用于下一步骤。MS：M/e 314(M+1)+。
步骤C：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)丙-1-酮
Figure BDA0002070627070000191
将步骤B的产物(200mg，0.64mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪(190mg，0.7mmol)、HATU(267mg，0.7mmol)和Et3N(322mg，3.19mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物倒入H2O(20mL)中并用EA(15mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并减压浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物，以得到呈白色固体的标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.76(s，1H)，7.98-7.89(m，lH)，7.71(s，2H)，7.23-7.15(m，1H)，7.04(d，J＝8.0Hz，2H)，6.89(d，J＝8.0Hz，2H)，6.76-6.70(m，1H)，5.86(q，J＝6.8Hz，1H)，4.07-4.00(m，2H)，3.91-3.73(m，2H)，3.72-3.66(m，2H)，3.64-3.59(m，2H)，3.30(s，3H)，3.25-3.00(m，4H)，1.71(d，J＝6.9Hz，3H)ppm。MS：M/e 532(M+1)+。
通过手性制备型HPLC将化合物C1分离成两种对映体立体异构体：化合物C1a(较早的峰)和化合物C1b(较晚的峰)。手性分离条件如下所示。
Figure BDA0002070627070000192
Figure BDA0002070627070000193
化合物C2：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)-3-甲基丁-1-酮
Figure BDA0002070627070000201
步骤A：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-3-甲基丁酸
Figure BDA0002070627070000202
在室温下向2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-3-甲基丁酸甲酯(150mg，0.42mmol)在MeOH(4mL)中的经搅拌的溶液中加入NaOH水溶液(2M，2mL)并且将所得混合物搅拌2小时。将混合物用HCl(1M)中和并浓缩至干燥。加入5mL混合溶剂(CH2Cl2/MeOH＝3∶1)并搅拌10分钟。过滤悬浮液并且浓缩滤液以得到呈白色固体的标题产物(125mg，87％)。MS：M/e 342(M+1)+。
步骤B：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)-3-甲基丁-1-酮
Figure BDA0002070627070000203
在室温下向来自步骤A的产物(120mg，0.35mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪(120mg，0.51mmol)和DIEA(250mg，1.94mmol)在DMF(3mL)中的混合物中添加HATU(160mg，0.42mmol)并且将混合物在室温下搅拌2小时。加入30mL的EA并将混合物用盐水(10mL×3)洗涤、经Na2SO4干燥并浓缩。通过制备型TLC(EA/MeOH＝20：1)纯化得到的残余物以得到标题产物(57.0mg，产率：29％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.71(d，J＝1.2Hz，1H)，7.96(s，1H)，7.67(s，2H)，7.21(d，J＝3.6Hz，1H)，6.89(d，J＝8.0Hz，2H)，6.83(d，J＝8.8Hz，2H)，6.78-6.73(m，lH)，5.42(d，J＝10.0Hz，1H)，4.04-3.98(m，2H)，3.98-3.88(m，1H)，3.82-3.67(m，2H)，3.66-3.59(m，3H)，3.31(s，3H)，3.06-2.92(m，3H)，2.88-2.80(m，1H)，2.76-2.64(m，1H)，1.03(d，J＝6.4Hz，3H)，0.77(d，J＝6.8Hz，3H)。MS：M/e 560(M+1)+。
化合物C3：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)-2-甲基丙-1-酮
Figure BDA0002070627070000211
步骤A：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-2-甲基丙酸
将NaOH溶液(352mg，在5mL水中)添加到2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-2-甲基丙酸甲酯(750mg，2.2mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将溶液浓缩、加入水(10mL)并用1N HCl溶液酸化至pH＝5。将沉淀的固体过滤并干燥以得到呈白色固体的所需产物(670mg，93％)。MS：M/e 328(M+1)+
步骤B：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[43-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)-2-甲基丙-1-酮
Figure BDA0002070627070000213
将2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-2-甲基丙酸(100mg，0.3mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪(72mg，0.3mmol)、HATU(137mg，0.36mmol)和DIEA(78mg，0.6mmol)在DMF(15mL)中的混合物在室温下搅拌2小时。向溶液中加入水(10mL)、用乙酸乙酯(20mL)萃取并用盐水(20mL)洗涤。将有机层干燥、浓缩并通过柱色谱法(PE∶EA＝1∶1至EA)纯化以得到呈白色固体的所需产物(135mg，81％)。1HNMR(400MHz，DMSO-d6，80℃)δ8.74(s，1H)，7.87(s，lH)，7.41(br.s，2H)，7.15(d，J＝4.0Hz，1H)，6.76-6.74(m，4H)，6.69(s，1H)，3.97(t，J＝4.0Hz，2H)，3.58(t，J＝4.0Hz，2H)，3.10-3.29(m，4H)，3.28(s，3H)，2.83(br.s，4H)，1.83(s，6H)ppm。MS：M/e 546(M+1)+
化合物C4：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)丁-1-酮
Figure BDA0002070627070000221
步骤A：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)丁酸
Figure BDA0002070627070000222
向2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)丁酸甲酯(100mg，0.29mmol)在MeOH/H2O(3.0mL/0.5mL)中的经搅拌的混合物中加入NaOH水溶液(2.0M，0.5mL)。加完后，将反应混合物搅拌过夜。除去大部分溶剂以得到水层，然后用HCl水溶液将其酸化至pH＝3-4并过滤，收集滤饼、干燥以得到呈白色固体的目标化合物(80mg，84.1％)。MS：M/e 328(M+1)+。
步骤B：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)丁-1-酮
Figure BDA0002070627070000223
将步骤A的产物(100mg，0.31mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪(80mg，0.24mmol)、HATU(120mg，0.32mmol)和TEA(100mg，0.99mmol)在CH3CN(10mL)中的混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物倒入H2O(20mL)中并用EtOAc(20mL x3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤、经Na2SO4干燥、浓缩并通过柱色谱法纯化(石油醚/EtOAc＝1∶1-100％EtOAc)以得到呈白色固体的目标化合物(21mg，15.5％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.74(s，1H)，7.95(s，1H)，7.65(br，2H)，7.19(d，J＝3.1Hz，1H)，6.92-6.78(m，4H)，6.74(d，J＝1.3Hz，1H)，5.73-5.60(m，1H)，4.02-3.96(m，2H)，3.76(d，J＝12.8Hz，2H)，3.66-3.58(m，4H)，3.34(s，3H)，3.10-2.83(m，4H)，2.22-2.09(m，2H)，0.87(t，J＝7.1Hz，3H)。MS：M/e546(M+1)+。
化合物C5：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)戊-1-酮
Figure BDA0002070627070000231
步骤A：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)戊酸
Figure BDA0002070627070000232
将NaOH溶液(304mg，在2mL水中)添加到2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)戊酸乙酯(700mg，1.9mmol)在乙醇(10mL)中的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌3小时。将溶液浓缩、加入水(10mL)并用1N HCl溶液酸化至pH＝5。将沉淀的固体过滤并干燥以得到呈白色固体的所需产物(600mg，92％)ppm。MS：M/e342(M+1)+
步骤B：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)戊-1-酮
Figure BDA0002070627070000233
将2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)戊酸(250mg，0.73mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪(173mg，0.73mmol)、HATU(333mg，0.9mmol)和DIEA(181mg，1.4mmol)在DMF(20mL)中的混合物在室温下搅拌2小时。向溶液中加入水(10mL)、用乙酸乙酯(20mL)萃取并用盐水(20mL)洗涤。将有机层干燥、浓缩并通过柱色谱法(PE∶EA＝2∶1至EA)纯化以得到呈白色固体的所需产物(310mg，76％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.74(s，1H)，7.94(s，1H)，7.65(br.s，2H)，7.18(d，J＝4.0Hz，1H)，6.83-6.73(m，5H)，5.70(dd，J＝8.0Hz，4.0Hz，1H)，4.01-3.98(m，2H)，3.76-3.60(m，6H)，3.29(s，3H)，2.98-2.90(m，4H)，2.16-1.99(m，2H)，1.30-1.17(m，2H)，0.91(t，J＝8.0Hz，3H)ppm。MS：M/e 560(M+1)+
通过手性制备型HPLC将化合物C5分离成两种对映体立体异构体：化合物C5a(较早的峰)和化合物C5b(较晚的峰)。手性分离条件如下所示。
Figure BDA0002070627070000241
化合物C6：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)-2-甲基丙-1-酮
将2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-2-甲基丙酸(50mg，0.15mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)哌嗪(43mg，0.15mmol)、HATU(69mg，0.18mmol)和DIEA(39mg，0.3mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温下搅拌2小时。向溶液中加入水(5mL)、用乙酸乙酯(10mL)萃取并用盐水(10mL)洗涤。将有机层干燥、浓缩并通过柱色谱法(PE∶EA＝1∶1至EA)纯化以得到所需产物(32mg，36％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.85(s，1H)，7.94(s，1H)，7.68(br.s，2H)，7.16(d，J＝4.0Hz，1H)，6.76(s，1H)，6.74-6.72(m，4H)，3.95(t，J＝4.0Hz，2H)，3.65(t，J＝4.0Hz，2H)，3.54-3.52(m，2H)，3.43-3.41(m，2H)，3.36(br.s，3H)，3.22(s，3H)，2.80(br.s，5H)，1.80(s，6H)ppm。MS：M/e 590(M+1)+
化合物C7：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)戊-1-酮
Figure BDA0002070627070000251
将2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)戊酸(50mg，0.15mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)哌嗪(41mg，0.15mmol)、HATU(69mg，0.18mmol)和DIEA(390mg，0.3mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温下搅拌2小时。向溶液中加入水(5mL)、用乙酸乙酯(10mL)萃取并用盐水(10mL)洗涤。将有机层干燥、浓缩并通过柱色谱法(PE∶EA＝1∶1至EA)纯化以得到所需产物(38mg，42％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.74(s，1H)，7.94(s，1H)，7.65(br.s，2H)，7.18(d，J＝4.0Hz，1H)，6.84-6.73(m，5H)，5.70(dd，J＝8.0Hz，4.0Hz，1H)，3.99(m，2H)，3.70-3.41(m，10H)，3.24(s，3H)，2.99-2.91(m，4H)，2.17-1.99(m，2H)，1，30-1.18(m，2H)，0.91(t，J＝8.0Hz，3H)ppm。MS：M/e 604(M+1)+
化合物C8：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)丁-1-酮
Figure BDA0002070627070000252
将2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)丁酸(50mg，0.15mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)哌嗪(65mg，0.23mmol)、HATU(86mg，0.23mmol)和TEA(30mg，0.30mmol)在DMF(5mL)中的混合物搅拌过夜。将反应混合物倒入H2O(20mL)中并用EtOAc(20mL x3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤、经Na2SO4干燥、浓缩并通过柱色谱法纯化(石油醚/EtOAc＝1∶1-100％EtOAc)以得到目标化合物(21mg，23.7％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.74(s，1H)，7.94(d，J＝1.0Hz，1H)，7.67(br.，2H)，7.19(d，J＝3.4Hz，1H)，6.94-6.83(m，4H)，6.73(dd，J＝3.4，1.8Hz，1H)，5.64(dd，J＝8.8，6.1Hz，1H)，4.03-3.98(m，2H)，3.80-3.76(m，2H)，3.68-3.65(m，4H)，3.56(dd，J＝5.7，3.8Hz，2H)，3.45(dd，J＝5.7，3.7Hz，2H)，3.24(s，3H)，3.15-2.89(m，4H)，2.25-2.06(m，2H)，0.87(t，J＝7.3Hz，3H)ppm。MS：M/e590(M+1)+。
化合物C9：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)丙-1-酮
Figure BDA0002070627070000261
将1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)哌嗪(60mg，0.21mmol)、2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)丙酸(30mg，0.1mmol)、HATU(40mg，0.11mmol)和DIPEA(0.4mL，过量)在DMF(10mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物倒入水(20mL)中并用EA(15mL x3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并减压浓缩。通过制备型TLC(EA：100％)纯化残余物以得到呈白色固体的标题化合物(5mg，产率：8.7％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.74(s，1H)，7.94(s，1H)，7.65(br.s，2H)，7.19(s，1H)，6.96-6.78(m，4H)，6.73(s，1H)，5.94-5.72(m，1H)，4.09-3.92(m，2H)，3.84-3.51(m，8H)，3.49-3.42(m，2H)，3.24(s，3H)，3.10-2.87(m，4H)，1.80-1.59(m，3H)ppm。MS：M/e 576(M+1)+。
化合物C10：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)己-1-酮
Figure BDA0002070627070000262
步骤A：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)己酸
Figure BDA0002070627070000271
将NaOH溶液(160mg，在2mL水中)添加到2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)己酸甲酯(380mg，1.0mmol)在甲醇(10mL)中的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将溶液浓缩、加入水(10mL)并用1N HCl溶液酸化至pH＝5。将沉淀的固体过滤并干燥以得到呈白色固体的所需产物(355mg，97％)。MS：M/e 356(M+1)+
步骤B：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4.3-e][1，2.4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)己-1-酮
Figure BDA0002070627070000272
将2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)己酸(50mg，0.14mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪(33mg，0.14mmol)、HATU(64mg，0.17mmol)和DIEA(36mg，0.28mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温下搅拌2小时。向溶液中加入水(10mL)、用乙酸乙酯(10mL)萃取并用盐水(10mL)洗涤。将有机层干燥、浓缩并通过柱色谱法(PE：EA＝1∶1至Ea)纯化以得到呈白色固体的所需产物(16mg，20％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.74(s，1H)，7.94(d，J＝4.0Hz，1H)，7.65(br.s，2H)，7.18(d，J＝4.0Hz，1H)，6.87-6.73(m，5H)，5.67(dd，J＝8.0Hz，4.0Hz，1H)，4.02-3.98(m，2H)，3.75-3.60(m，6H)，3.29(s，3H)，3.00-2.89(m，4H)，2.19-2.03(m，2H)，1.35-1.13(m，4H)，0.85(t，J＝8.0Hz，3H)ppm。MS：M/e 574(M+1)+
化合物C11∶2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)己-1-酮
Figure BDA0002070627070000273
将2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)己酸(50mg，0.14mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)哌嗪(39mg，0.14mmol)、HATU(64mg，0.17mmol)和DIEA(36mg，0.28mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室温下搅拌2小时。向溶液中加入水(10mL)、用乙酸乙酯(10mL)萃取并用盐水(10mL)洗涤。将有机层干燥、浓缩并通过柱色谱法(PE∶EA＝1∶1至EA)纯化以得到所需产物(25mg，29％)。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.74(s，1H)，7.94(s，1H)，7.65(br.s，2H)，7.18(d，J＝4.0Hz，1H)，6.88-6.73(m，5H)，5.67(dd，J＝8.0Hz，4.0Hz，1H)，3.99(t，J＝4.0Hz，2H)，3.76-3.55(m，8H)，3.46-3.43(m，5H)，3.06-2.90(m，4H)，2.19-2.06(m，2H)，1.35-1.13(m，4H)，0.85(t，J＝8.0Hz，3H)ppm。MS：M/e 618(M+1)+
化合物C12：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)-3-甲基丁-1-酮
在室温下向2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-3-甲基丁酸(55mg，0.16mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)哌嗪(50mg，0.18mmol)、DIEA(100mg，0.77mmol)在DMF(2mL)中的混合物加入HATU(68mg，0.18mmol)并且将混合物在室温下搅拌4小时。加入20mL的EA并将混合物用盐水(10mL×3)洗涤、经Na2SO4干燥并浓缩。通过制备型TLC(EA/MeOH＝20∶1)纯化得到的残余物以得到标题产物(35.0mg，产率：36％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.68(s，1H)，7.94(d，J＝1.2Hz，1H)，7.65(s，2H)，7.19(d，J＝3.6Hz，1H)，6.92-6.77(m，4H)，6.73(dd，J＝3.2，2.0Hz，1H)，5.40(d，J＝10.4Hz，1H)，4.04-3.96(m，2H)，3.95-3.85(m，1H)，3.80-3.65(m，4H)，3.64-3.52(m，3H)，3.44-3.42(m，2H)，3.23(s，3H)，3.03-2.90(m，3H)，2.85-2.78(m，1H)，2.72-2.62(m，1H)，1.01(d，J＝6.4Hz，3H)，0.75(d，J＝6.4Hz，3H)。MS：M/e 604(M+1)+。
化合物C13：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-氨基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)丙-1-酮
Figure BDA0002070627070000282
Figure BDA0002070627070000291
步骤A：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[15-c]嘧 啶-8-基)丙酸
Figure BDA0002070627070000292
在室温下向2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)丙酸乙酯(800g，2.35mmol)在MeOH(20mL)中的经搅拌的溶液中加入NaOH水溶液(2.0M，6.4mL)。将混合物在室温下搅拌过夜。除去溶剂并且将残余物溶于水(20mL)中。用HCl水溶液(2M)将混合物酸化至pH＝3-4。固体从体系中沉淀出来。过滤混合物并且收集固体。将白色固体(450mg，61.3％)在空气中干燥并直接用于下一步骤。MS：M/e 314(M+1)+。
步骤B：2-(2-(4-(4-(2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑 并[1，5-c]嘧啶-8-基)丙酰基)哌嗪-1-基)苯氧基)乙基)异吲哚啉-1.3-二酮
Figure BDA0002070627070000293
将步骤A的产物(150mg，0.48mmol)、2-(2-(4-(哌嗪-1-基)苯氧基)乙基)异吲哚啉-1，3-二酮(185mg，0.53mmol)、HATU(200mg，0.53mmol)和DIEA(0.5mL，过量)在DMF(10mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物倒入水(20mL)中，并且从体系中沉淀出固体。将固体过滤并在空气中干燥。将黄色固体(200mg，产率：64.5％)不经进一步纯化用于下一步。MS：M/e 647(M+1)+。
步骤C：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-1-(4-(4-(2-氨基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)丙-1-酮
Figure BDA0002070627070000301
在室温下向步骤B的产物在EtOH(30mL)中的经搅拌的溶液中加入水合肼(2mL)。将混合物在回流下搅拌过夜。棕色固体从体系中沉淀出来。过滤混合物并且收集固体。将固体溶解在EtOH中，并将混合物在回流下搅拌过夜。过滤混合物并且将固体在空气中干燥。得到呈棕色固体的标题化合物(55mg，产率：34.4％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.74(s，1H)，7.94(s，1H)，7.65(s，2H)，7.19(d，J＝4Hz，1H)，6.90(d，J＝12Hz，2H)，6.82(d，J＝12Hz，2H)，6.73(dd，J＝4，2Hz，1H)，5.99-5.71(m，1H)，3.83(t，J＝6Hz，2H)，3.78-3.67(m，2H)，3.68-3.56(m，2H)，3.12-2.88(m，4H)，2.83(t，J＝6Hz，2H)，1.70(d，J＝8Hz，3H)ppm。MS：M/e517(M+1)+。
化合物C14：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure BDA0002070627070000302
步骤A：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-2-苯基乙酸
Figure BDA0002070627070000303
向2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-2-苯乙酸甲酯(360mg，0.92mmol)在MeOH/H2O(9mL/3mL)中的经搅拌的混合物中加入NaOH水溶液(2.0M，2mL)。加完后，将反应混合物搅拌过夜。除去大部分溶剂以得到水层，然后用HCl水溶液将其酸化至pH＝3-4并过滤，收集滤饼、干燥以得到呈白色固体的目标化合物(200mg，57.8％)。MS：M/e 376(M+1)+。
步骤B：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure BDA0002070627070000311
将步骤A的产物(50mg，0.13mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪(55mg，0.23mmol)、HATU(75mg，0.20mmol)和TEA(40mg，0.39mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室温下搅拌5小时。将反应混合物倒入H2O(20mL)中并用EtOAc(50mL x3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤、经Na2SO4干燥、浓缩并通过柱色谱法纯化(石油醚/EtOAc＝1∶1-100％EtOAc)以得到呈白色固体的目标化合物(40mg，50.7％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.17(s，1H)，7.92(s，1H)，7.70(br.，2H)，7.59-7.43(m，5H)，7.15(d，J＝3.4Hz，1H)，7.11(s，1H)，6.86-6.77(m，4H)，6.75-6.69(m，1H)，4.03-3.95(m，2H)，3.80-3.71(m，1H)，3.71-3.57(m，4H)，3.50-3.40(m，1H)，3.34(s，1H)，3.28(s，3H)，3.10-3.01(m，1H)，2.98-2.87(m，2H)ppm。MS：M/e594(M+1)+。
化合物C15：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
Figure BDA0002070627070000312
将2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-2-苯乙酸(50mg，0.13mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)哌嗪(40mg，0.14mmol)、HATU(84mg，0.22mmol)和TEA(40mg，0.39mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室温下搅拌4小时。将反应混合物倒入H2O(20mL)中并用EtOAc(50mL x3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤、经Na2SO4干燥、浓缩并通过柱色谱法纯化(石油醚/EtOAc＝1∶1-100％EtOAc)以得到目标化合物(32mg，37.8％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.17(s，1H)，7.93(s，1H)，7.77-7.66(m，2H)，7.59-7.46(m，5H)，7.15(d，J＝3.3Hz，1H)，7.11(s，1H)，6.86-6.78(m，5H)，6.75-6.69(m，1H)，4.02-3.96(m，2H)，3.80-3.61(m，5H)，3.60-3.54(m，2H)，3.50-3.41(m，3H)，3.24(s，3H)，3.09-2.98(m，2H)，2.98-2.88(m，2H)ppm。MS：M/e 638(M+1)+。
化合物C16：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-2-环丙基-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙-1-酮
Figure BDA0002070627070000321
步骤A：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-7-基)-2-环丙基乙酸乙酯和2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三 唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-2-环丙基乙酸乙酯
Figure BDA0002070627070000322
将2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-5-胺(5.0g，20.7mmol)、2-溴-2-环丙基乙酸乙酯(6.4g，31.1mmol)和K2CO3(7.1g，51.4mmol)在DMF(50mL)中的混合物在50℃下加热16小时。将混合物用EA(200mL)稀释，并且过滤悬浮液。将滤液用盐水(50mL×3)洗涤、经Na2SO4干燥并浓缩。通过柱色谱法用PE/EA(5∶1-2∶1)洗脱纯化得到的油状物以得到呈淡黄色固体的2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-7-基)-2-环丙基乙酸乙酯(1.4g)，MS：M/e 368(M+1)+，和呈淡黄色固体的2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-2-环丙基乙酸乙酯(1.9g)，MS：M/e 368(M+1)+。
步骤B：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-2-环丙基乙酸
在室温下向2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-2-环丙基乙酸乙酯(1.8g，4.9mmol)在MeOH(30mL)中的经搅拌的溶液中加入NaOH水溶液(1M，15mL)并且将所得混合物搅拌4小时。将混合物用HCl(1M)中和至pH＝6。沉淀出白色固体，并且将其过滤，并且将滤饼在IR灯下干燥以得到呈白色固体的标题产物(1.4g，84％)。MS：M/e340(M+1)+。
步骤C：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-2-环丙基-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙-1-酮
Figure BDA0002070627070000332
在室温下向来自步骤B的产物(600mg，1.77mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪(460mg，1.95mmol)、DIEA(550mg，4.26mmol)在DMF(10mL)中的混合物中添加HATU(750mg，2.0mmol)并且将混合物在室温下搅拌14小时。将混合物倒入40mL的H2O中，并且过滤白色沉淀物。通过柱色谱法(DCM/MeOH＝50∶1-30∶1)纯化滤饼以得到标题产物(428mg，78％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.83(s，1H)，7.94(s，1H)，7.64(s，2H)，7.19(d，J＝3.2Hz，1H)，6.87(dd，J＝28.4，8.4Hz，4H)，6.74(s，1H)，5.13(d，J＝9.6Hz，1H)，4.08-3.96(m，2H)，3.89-3.71(m，2H)，3.70-3.55(m，4H)，3.29(s，3H)，3.07-2.91(m，4H)，1.84-1.63(m，1H)，0.80-0.62(m，3H)，0.53-0.38(m，1H)。MS：M/e 558(M+1)+。
通过手性制备型HPLC将化合物C16分离成两种对映体立体异构体：化合物C16a(较早的峰)和化合物C16b(较晚的峰)。手性分离条件如下所示。
Figure BDA0002070627070000333
Figure BDA0002070627070000334
Figure BDA0002070627070000341
化合物C17：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)-4-甲基戊-1-酮
步骤A：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[43-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-4-甲基戊酸
Figure BDA0002070627070000343
向2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-4-甲基戊酸甲酯(270mg，0.73mmol)在MeOH/H2O(10mL/5mL)中的经搅拌的混合物中加入NaOH水溶液(2.0M，4mL)。加完后，将反应混合物搅拌过夜。除去大部分溶剂以得到水层，然后用HCl水溶液将其酸化至pH＝3-4并过滤，收集滤饼、干燥以得到呈白色固体的目标化合物(200mg，77％)。MS：M/e 356(M+1)+。
步骤B：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)-4-甲基戊-1-酮
将步骤A的产物(50mg，0.14mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪(33mg，0.14mmol)、HATU(64mg，0.168mmol)和DIPEA(36mg，0.28mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物倒入H2O(20mL)中并用EtOAc(20mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤、经Na2SO4干燥、浓缩并通过柱色谱法纯化(石油醚/EtOAc＝1∶1-100％EtOAc)以得到目标化合物(20mg，24.9％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.77(s，1H)，7.94(d，J＝0.8Hz，1H)，7.65(s，2H)，7.26-7.10(m，1H)，6.85(dd，J＝25.6，9.2Hz，4H)，6.74(dd，J＝3.2，1.6Hz，1H)，5.70(m，1H)，4.05-3.95(m，2H)，3.74(s，2H)，3.67-3.53(m，4H)，3.30(s，3H)，3.13-2.96(m，2H)，2.91(m，2H)，2.28-2.15(m，1H)，1.91-1.77(m，1H)，1.43-1.27(m，1H)，0.96(d，J＝6.4Hz，3H)，0.88(d，J＝6.4Hz，3H)ppm。MS：M/e 574(M+1)+。
化合物C18：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)-4-甲基戊-1-酮
Figure BDA0002070627070000352
将2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-4-甲基戊酸(50mg，0.14mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)哌嗪(39.4mg，0.14mmol)、HATU(64mg，0.168mmol)和DIPEA(36mg，0.28mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物倒入H2O(20mL)中并用EtOAc(20mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤、经Na2SO4干燥、浓缩并通过制备型HPLC纯化以得到呈TFA盐的目标化合物，将其用K2CO3水溶液处理，并用EtOAc(15mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤、经Na2SO4干燥并浓缩以得到目标化合物(10mg，11.6％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.77(s，1H)，7.94(s，1H)，7.65(s，2H)，7.18(d，J＝3.2Hz，1H)，6.85(dd，J＝25.2，9.2Hz，4H)，6.74(dd，J＝3.2，1.6Hz，1H)，5.70(dd，J＝10.4，4.8Hz，1H)，4.36(t，J＝5.2Hz，1H)，4.04-3.96(m，2H)，3.81-3.52(m，8H)，3.45(m，2H)，3.24(s，3H)，3.13-2.84(m，4H)，2.22(m，1H)，1.83(m，1H)，1.35(m，1H)，0.97(d，J＝6.4Hz，3H)，0.87(d，J＝6.4Hz，3H)ppm。MS：M/e 618(M+1)+。
化合物C19：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)丙-1-酮
Figure BDA0002070627070000361
步骤A：4-(4-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure BDA0002070627070000362
在0℃下向4-(4-羟基苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2g，7.2mmol)在DMF(20mL)中的经搅拌的溶液中加入NaH(0.36g，9.4mmol)。将混合物在0℃下搅拌30分钟。然后将2-氯-N，N-二甲基乙-1-胺(1g，9.4mmol)加入该反应中。将反应在室温下搅拌过夜。将反应用水(20mL)淬灭并用DCM(20mL×3)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤、经Na2SO4干燥并减压浓缩。将残余物(粗品)直接用于下一步骤。MS：M/e 350(M+1)+。
步骤B：N，N-二甲基-2-(4-(哌嗪-1-基)苯氧基)乙-1-胺盐酸盐
Figure BDA0002070627070000363
在室温下将步骤A的粗产物溶解在HC1/1，4-二噁烷(4M，20mL)中。将混合物在室温下搅拌4小时。棕色固体从体系中沉淀出来。过滤混合物并且收集固体。将固体(500mg，产率：27.9％)在空气中干燥并直接用于下一步骤。MS：M/e 250(M+1)+。
步骤C：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)丙-1-酮
Figure BDA0002070627070000364
将步骤B的产物(50mg，0.18mmol)、2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)丙酸(50mg，0.16mmol)、HATU(67mg，0.18mmol)和DIEA(0.5mL，过量)在DMF(5mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物倒入水(10mL)中，并且从体系中沉淀出固体。将固体过滤并且通过制备型HPLC纯化，以得到标题化合物(8mg，产率：9.8％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)68.82(s，1H)，7.96(s，1H)，7.89-7.68(m，2H)，7.63-7.35(m，2H)，7.20(d，J＝4Hz，1H)，7.10(d，J＝8Hz，2H)，6.74(s，1H)，5.91(d，J＝8Hz，1H)，4.38(s，2H)，3.96-3.78(m，6H)，3.57-3.43(m，4H)，2.90-2.72(m，6H)，1.81-1.67(m，3H)ppm。MS：M/e 545(M+1)+。
化合物C20：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)-3-苯基丙-1-酮
Figure BDA0002070627070000371
步骤A：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-3-苯基丙酸
Figure BDA0002070627070000372
在室温下向2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-3-苯基丙酸甲酯(115mg，0.28mmol)在MeOH(5mL)中的经搅拌的溶液中加入NaOH水溶液(2M，2mL)并且将所得混合物搅拌2小时。将混合物用HCl(2M)中和并浓缩至干燥。加入20mL混合溶剂(CH2Cl2/MeOH＝3∶1)并搅拌2小时。过滤悬浮液并且浓缩滤液以得到呈白色固体的标题产物(90mg，81％)。MS：M/e 390(M+1)+。
步骤B：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)-3-苯基丙-1-酮
Figure BDA0002070627070000381
在室温下向来自步骤A的产物(45mg，0.12mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪(45mg，0.19mmol)、DIEA(70mg，0.54mmol)在DMF(2mL)中的混合物中添加HATU(75mg，0.20mmol)并且将混合物在室温下搅拌16小时。加入30mL的EA并将混合物用盐水(15mL×3)洗涤、经Na2SO4干燥并浓缩。通过制备型TLC(CH2Cl2/EA/MeOH＝10∶10∶1)纯化得到的残余物，并通过制备型HPLC纯化所得产物以得到标题产物(45mg，产率：64％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.72(s，1H)，7.94(s，1H)，7.65(s，2H)，7.31-7.20(m，4H)，7.20-7.12(m，2H)，6.89-6.77(m，4H)，6.73(dd，J＝3.2，1.6Hz，1H)，6.01(t，J＝7.2Hz，1H)，4.07-3.93(m，2H)，3.75-3.58(m，5H)，3.58-3.52(m，1H)，3.51-3.45(m，2H)，3.29(s，3H)，3.00-2.89(m，1H)，2.89-2.74(m，2H)，2.74-2.65(m，1H)。MS：M/e 608(M+1)+。
化合物C21：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(2，4-二氟苯基)哌嗪-1-基)戊-1-酮
Figure BDA0002070627070000382
将2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)戊酸(50mg，0.15mmol)、1-(2，4-二氟苯基)哌嗪(32mg，0.16mmol)、HATU(69mg，0.18mmol)和DIEA(39mg，0.3mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温下搅拌2小时。向溶液中加入水(5mL)、用乙酸乙酯(10mL)萃取并用盐水(10mL)洗涤。将有机层干燥、浓缩并通过柱色谱法(PE∶EA＝1∶1)纯化以得到所需产物(49mg，64％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.76(s，1H)，7.95(s，1H)，7.66(br.s，2H)，，7.19-6.96(m，4H)，6.74-6.73(m，1H)，5.71-5.67(m，1H)，3.78-3.65(m，4H)，2.94-2.83(m，4H)，2.19-1.99(m，2H)，1.33-1.17(m，2H)，0.92(t，J＝8.0Hz，3H)ppm。MS：M/e 522(M+1)+
化合物C22：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-2-环丙基-1-(4-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙-1-酮
Figure BDA0002070627070000391
将2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-2-环丙基乙酸(50mg，0.15mmol)、1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)哌嗪(50mg，0.18mmol)、HATU(84mg，0.22mmol)和TEA(30mg，0.30mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室温下搅拌4小时。将反应混合物倒入H2O(20mL)中并用EtOAc(50mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤、经Na2SO4干燥、浓缩并通过柱色谱法纯化(石油醚/EtOAc＝1∶1-100％EtOAc)以得到目标化合物(38mg，42.2％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.84(s，1H)，7.95(s，1H)，7.66(br，2H)，7.20(d，J＝3.1Hz，1H)，6.90(d，J＝9.0Hz，2H)，6.83(d，J＝8.9Hz，2H)，6.76-6.72(m，1H)，5.14(d，J＝9.7Hz，1H)，4.04-3.95(m，2H)，3.85-3.75(m，2H)，3.73-3.63(m，5H)，3.60-3.53(m，2H)，3.50-3.42(m，2H)，3.37-3.31(m，1H)，3.28-3.24(m，2H)，3.01-2.92(m，3H)，1.75(d，J＝3.8Hz，1H)，0.78-0.66(m，3H)，0.46(d，J＝5.5Hz，1H)。MS：M/e 602(M+1)+。
化合物C23：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(2，4-二氟苯基)哌嗪-1-基)-4-甲基戊-1-酮
Figure BDA0002070627070000392
将2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-4-甲基戊酸(35.5mg，0.1mmol)、1-(2，4-二氟苯基)哌嗪(19.8mg，0.1mmol)、HATU(46mg，0.12mmol)和DIPEA(25.8mg，0.2mmol)在DMF(3mL)中的混合物搅拌过夜。将反应混合物倒入H2O(15mL)中并用EtOAc(20mL x3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤、经Na2SO4干燥、浓缩并通过柱色谱法纯化(石油醚/EtOAc＝10∶1-3∶1)以得到目标化合物(20mg，37.3％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.78(s，1H)，7.94(s，1H)，7.65(s，2H)，7.25-7.17(m，2H)，7.03(m，2H)，6.74(dd，J＝3.2，1.6Hz，1H)，5.69(m，1H)，3.76(s，2H)，3.64(m，2H)，3.05-2.93(m，2H)，2.91-2.79(m，2H)，2.28-2.17(m，1H)，1.89-1.78(m，1H)，1.35(m，1H)，0.97(d，J＝6.4Hz，3H)，0.88(d，J＝6.4Hz，3H)ppm。MS：M/e 536(M+1)+。
化合物C24：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-(甲基氨基)乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)丙-1-酮
Figure BDA0002070627070000401
将N-甲基-2-(4-(哌嗪-1-基)苯氧基)乙-1-胺盐酸盐(294mg，0.96mmol)、2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)丙酸(200mg，0.64mmol)、HATU(291mg，0.78mmol)和DIEA(1mL，过量)在DMF(20mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物倒入水(20mL)中，并且从体系中沉淀出固体。将固体过滤并且通过制备型HPLC纯化，以得到标题化合物(50mg，产率：14.8％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.31(br.s，2H)，8.23(s，1H)，8.18(br.s，1H)，8.01-7.90(m，1H)，7.75-7.52(m，2H)，7.30-7.20(m，1H)，7.16-7.03(m，2H)，6.80-6.68(m，1H)，5.87-5.69(m，1H)，4.29(t，J＝4Hz，2H)，4.17-3.72(m，4H)，3.64-3.24(m，5H)，3.17-2.93(m，1H)，2.59(t，J＝4Hz，3H)，1.65(d，J＝8Hz，3H)ppm。MS：M/e 531(M+1)+。
化合物C25：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure BDA0002070627070000402
步骤A：2-苯基丙酸甲酯
Figure BDA0002070627070000411
在0℃下，向2-苯基丙酸(5g，33.33mmol)在MeOH(15mL)的溶液中滴加氯化亚砜(5.15g，50mmol)，加完后，将反应混合物在室温下搅拌3小时。将混合物浓缩、用冰水(20mL)淬灭，用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤、经Na2SO4干燥、浓缩并通过柱色谱法(石油醚/EtOAc＝20∶1-5∶1)纯化以得到呈黄色油状物的2-苯基丙酸甲酯(5.22g，95.49％)。MS：M/e 165(M+1)+。
步骤B：2-溴-2-苯基丙酸甲酯
Figure BDA0002070627070000412
将2-苯基丙酸甲酯(5.22g，31.83mmol)、NBS(6.80g，38.19mmol)、BPO(0.385g，1.591mmol)在四氯化碳(20mL)中的混合物在70℃下搅拌过夜。将混合物浓缩，将残余物用PE洗涤并过滤，浓缩滤液以得到呈黄色油状物的2-溴-2-苯基丙酸甲酯(7.57g，97.87％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.55(d，J＝7.5Hz，2H)，7.40-7.27(m，3H)，3.80(s，3H)，2.30(s，3H)
步骤C：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-2-苯基丙酸甲酯
Figure BDA0002070627070000413
将2-溴-2-苯基丙酸甲酯(7.57g，31.15mmol)，2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-5-胺(7.51g，31.15mmol)、碳酸钾(8.60g，62.30mmol)在DMF(30mL)中的混合物在60℃下搅拌过夜。用EtOAc(30mL×3)萃取混合物。将合并的有机层用水(10mL×3)和盐水洗涤、经Na2SO4干燥、浓缩以得到呈白色固体的产物(7.62g，60.70％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.36(s，1H)，7.94(d，J＝0.8Hz，1H)，7.71(s，2H)，7.46-7.40(m，3H)，7.30-7.25(m，2H)，7.15(d，J＝3.4Hz，1H)，6.72(dd，J＝3.3，1.8Hz，1H)，3.77(s，3H)，2.30(s，3H)。MS：M/e 404(M+1)+。
步骤D：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-2-苯基丙酸
Figure BDA0002070627070000421
将2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-2-苯基丙酸甲酯(7.62g，18.91mmol)、氢氧化锂(7.563g，189.1mmol)在MeOH(10mL)和水(5mL)中的混合物在50℃下搅拌过夜。将反应混合物用盐酸酸化、用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤、经Na2SO4干燥、浓缩并通过柱色谱法(石油醚/EtOAc＝10∶1-1∶2)纯化以得到呈白色固体的产物(6.20g，84.29％)。MS：M/e 390(M+1)+。
步骤E：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)-2-苯基丙-1-酮
Figure BDA0002070627070000422
将2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-2-苯基丙酸(100mg，0.2571mmol)、1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪(91mg，0.3856mmol)、HATU(146mg，0.3856mmol)、DIPEA(99mg，0.7712mmol)在DMF(3mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物倒入H2O(10mL)中并用EtOAc(15mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤、经Na2SO4干燥、浓缩并通过柱色谱法(DCM/MeOH＝40∶1-10∶1)纯化以得到产物(92mg，58.96％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.69(s，1H)，7.94(s，1H)，7.71(s，2H)，7.39(dq，J＝14.0，7.0Hz，3H)，7.20(d，J＝7.3Hz，2H)，7.17(d，J＝3.3Hz，1H)，6.86-6.79(m，4H)，6.73(dd，J＝3.1，1.7Hz，1H)，4.01-3.97(m，2H)，3.83-3.69(m，4H)，3.62-3.58(m，2H)，3.28(s，3H)，3.01(s，4H)，2.29(s，3H)。MS：M/e 608(M+1)+。
通过手性制备型HPLC将化合物C25分离成两种对映体立体异构体：化合物C25a(较早的峰)和化合物C25b(较晚的峰)。手性分离条件如下所示。
Figure BDA0002070627070000431
Figure BDA0002070627070000432
化合物D2：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙-1-酮和化合物D1：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙-1-酮
Figure BDA0002070627070000433
步骤A：2-氯-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙-1-酮(获得的)
Figure BDA0002070627070000441
向1-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪盐酸盐(135mg，0.5mmol)、2-溴乙酸(70mg，0.5mmol)和HATU(190mg，0.5mmol)在DMF(4mL)中的混合物中加入TEA(101mg，1mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将混合物用水(30mL)淬灭、用DCM(30mL×3)萃取、用盐水洗涤、经Na2SO4干燥、过滤并浓缩。通过柱色谱法(用EA∶PE＝1∶1洗脱)纯化残余物以得到呈固体的产物(125mg，80％)。产物是2-氯-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙-1-酮。MS：M/e 313(M+1)+。
步骤B：2-(5-氨基-2-(呋喃-2-基)-8H-吡唑并[4，3-e们，2，4]三唑并[1，5-c]嘧 啶-8-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)哌嗪-1-基)乙-1-酮和2-(5-氨基-2-(呋喃-2- 基)-7H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-7-基)-1-(4-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯 基)哌嗪-1-基)乙-1-酮
Figure BDA0002070627070000442
向步骤A的产物(125mg，0.4mmol)和2-(呋喃-2-基)-7H-吡唑并[4，3-e][1，2，4]三唑并[1，5-c]嘧啶-5-胺(80mg，0.33mmol)在DMF(2mL)中的混合物中加入K2CO3(68mg，0.49mmol)。将反应在室温下搅拌4天。将反应用水(30mL)淬灭、用DCM(50mL×4)萃取、用盐水洗涤、经Na2SO4干燥、过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物以得到两种异构体(13mg+5mg)。化合物D2：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.53(s，1H)，7.94(s，1H)，7.67(br.s，2H)，7.21(d，J＝3.6Hz，1H)，6.97(d，J＝8.8Hz，2H)，6.87(d，J＝8.8Hz，2H)，6.76-6.72(m，1H)，5.40(s，2H)，4.03(t，J＝4.8Hz，2H)，3.80-3.67(m，4H)，3.63(t，J＝4.8Hz，2H)，3.30(s，3H)，3.17-3.11(m，2H)，3.09-3.02(m，2H)；MS：M/e 518(M+1)+。
化合物D1：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.19(s，1H)，8.10(br.s，2H)，7.95(s，1H)，7.25(d，J＝3.2Hz，1H)，6.95(d，J＝8.8Hz，2H)，6.86(d，J＝8.8Hz，2H)，6.76-6.72(m，1H)，5.30(s，2H)，4.02(t，J＝4.0Hz，2H)，3.80-3.70(m，4H)，3.63(t，J＝4.0Hz，2H)，3.28(s，3H)，3.16-3.108(m，2H)，3.05-2.96(m，2H)；MS：M/e 518(M+1)+。
细胞培养和转染
在具有5％CO2的潮湿的37℃环境中将HEK293细胞维持在Dulbecco改良的Eagle培养基(DMEM，Gibco公司)中，其中补充有10％胎牛血清(FBS，赛默科技公司(ThermoScientific))，100单位/mL盘尼西林(Gibco公司)和0.1mg/mL链霉素(Gibco公司)。编码野生型人A2A受体(A2AR)(在pcDNA3.1中)的质粒由金斯瑞公司(Genscript)(南京，中国)合成。根据制造商的说明，使用Lipofectamin2000(赛默飞世尔科技公司(ThermoFisherScientific))在具有4×105个细胞的6孔板中进行质粒的转染。建立稳定表达A2AR的细胞克隆，并将其维持在除了G-418(Gibico公司)与HEK293细胞相同的完全培养基中。使用免疫印迹和FACS方法确定每个单细胞克隆中A2AR的表达水平。然后用pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro](普洛麦格公司(Promega))萤光素酶报告基因质粒转染HEK293-A2AR稳定细胞，以建立HEK293-A2AR-luc2p/CRE/Hygro稳定细胞系。
荧光素酶报告基因测定
将HEK293-A2AR-luc2p/CRE/Hygro细胞以5,000个细胞/孔的密度接种在含有1％FBS和1U/mL腺苷脱氨酶(ADA)(西格玛公司(Sigma))的DMEM中。18小时后，用3nM CGS21680加上一系列稀释的A2AR拮抗剂处理细胞，本文披露的化合物浓度为0.1-10000nM，在含有1％FBS的DMEM中制备。孵育5小时后，使用Bright-Glo荧光素酶测定系统(普洛麦格公司)根据制造商的说明测量细胞中的荧光素酶活性。使用PHERAstar FS板式读数器(BMG Labtech公司)测量发光信号。将来自10μM preladenant处理的发光强度设定为0％。最大发光强度在3nM CGS21680存在下确定，并设定为100％。从化合物浓度范围内的剂量依赖性抑制曲线计算IC50值。
腺苷受体结合测定
使用以下方案在放射性配体竞争性结合测定(由法国Cerep公司进行)中确定测试化合物与四种人腺苷受体A1、A2A、A2B和A3的结合亲和力。对于A1受体(A1R)，将来自转染有A1R的CHO细胞的膜匀浆在22℃下用1nM[3H]DPCPX在不存在或存在测试化合物的情况下在含有50mM Tris-HCl(pH 7.4)、5mM MgCl2、1mM EDTA/Tris和2UI/mL ADA的缓冲液中孵育60分钟。对于A2AR，将来自转染有A2AR的HEK293细胞的膜匀浆在22℃下用6nM[3H]CGS21680在不存在或存在测试化合物的情况下在含有50mM Tris-HC1(pH7.4)、10mM MgCl2、和2UI/mLADA的缓冲液中孵育120分钟。对于A2B受体(A2BR)，将来自转染有A2BR的HEK293细胞的膜匀浆在22℃下用5nM[3H]CPX在不存在或存在测试化合物的情况下在含有10mM Hepes/Tris(pH7)、1mM MgCl2、和1mM EDTA的缓冲液中孵育60分钟。对于A3受体(A3R)，将来自转染有A3R的HEK293细胞的膜匀浆在22℃下用0.15nM[125I]AB-MECA在不存在或存在测试化合物的情况下在含有50mM Tris-HCl(pH 7.4)、5mM MgCl2、1mM EDTA和2UI/mL ADA的缓冲液中孵育120分钟。在A1R、A2AR、A2BR、A3R结合测定中，分别在未标记的1μM DPCPX、10μM NECA、100μM NECA、和1μM IB-MECA存在下确定非特异性结合。孵育后，将样品快速过滤并用冰冷的50mM Tris-HCl洗涤。然后将过滤器干燥并使用闪烁混合液(Microscint0，惠普公司(Packard))在闪烁计数器(Topcount，惠普公司)中计数放射性。对每个测定进行重复实验。结果表示为对照放射性配体特异性结合的抑制百分比。
小鼠BBB测定
在以18-30g体重使用前使小鼠适应1周。禁食小鼠以10mg/kg剂量口服给药。在给药后1、2和4小时，将来自心脏血液的血浆样品收集在含有K2EDTA作为抗凝血剂的管中，并且切除的大脑半球立即冷冻并储存在-80℃直至生物分析。通过LC-MS/MS确定化合物的总浓度。将脑匀浆浓度转换为脑浓度用于计算脑与血浆比率。
表1：荧光素酶报告基因测定的结果
化合物编号 IC50(nM) 化合物编号 IC50(nM)
C1 28.4 C2 648.5
C3 1874.0 C4 140.5
C5 132.0 C6 3178.0
C7 185.9 C8 242.5
C9 39.8 C10 125.9
C11 118.2 C12 336.5
C13 12.7 C14 9.5
C15 17.0 C16 4.9
C17 88.4 C18 90.2
C19 46.3 C20 2065.0
C21 100.2 C22 12.8
C23 69.6 C24 35.5
C25 21.7
D1 27.0 D2 66.8
化合物编号 IC50(nM) 化合物编号 IC50(nM)
C1a 57.1 C1b 12.7
C5a 55.0 C5b 209.4
C16a 4.1 C16b 167.9
C25a 79.8 C25b 21.2
D1 27 D2 66.8
表2：结合测定的结果
Figure BDA0002070627070000461
应理解，如果在此引用任何现有技术出版物；这样的引用并不构成承认该出版物形成任何国家的本领域公知常识的一部分。
在此通过确认引用而引用的所有出版物、专利、专利申请和公开的专利申请的披露内容均通过引用以其整体并入本文。
尽管为了清楚理解的目的已经通过例证和实例相当详细地描述了前述发明，但是对于本领域技术人员显而易见的是，将实施某些微小的改变和修改。因此，说明和实例不应解释为限制本发明的范围。

Claims (11)

1.一种治疗癌症的方法，其包括向有需要的受试者给予式(Ib)的化合物、或其立体异构体、或其药学上可接受的盐，
Figure FDA0002070627060000011
其中：
R为芳基或含有1或2个杂原子作为一个或多个环成员的5或6元杂芳基，所述杂原子独立地选自氮、氧或任选氧化的硫，并且所述环任选地被至少一个取代基R8取代；
R1和R2相同并且选自-C1-6烷基；
R3和R4与它们所附接的氮原子一起形成3至12元环，所述环包含0、1或2个额外的独立地选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子作为一个或多个环成员，所述环任选地被一个或两个或三个取代基R5取代；
R5独立地为氢、卤素、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-CN、-NO2、氧代、-OR5a、-SO2R5a、-COR5a、-CO2R5a、-CONR5aR5b、-C(＝NR5a)NR5bR5c、-NR5aR5b、-NR5aCOR5b、-NR5aCONR5bR5c、-NR5aCO2R5b、-NR5aSONR5bR5c、-NR5aSO2NR5bR5c、或-NR5aSO2R5b，其中作为R5，所述-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8环烷基、杂环基、芳基、或杂芳基各自独立地且任选地被一个或两个或三个取代基R6取代；
R5a、R5b和R5c可以相同或不同，各自独立地为氢、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，其中所述-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基各自独立地任选地被一个或两个取代基R5d取代；
R5d独立地为氢、卤素、氰基、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、卤代C1-6烷基、卤代C2-6烯基、卤代C2-6炔基、-C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-C1-6烷氧基-、C2-6烯氧基-、C2-6炔氧基-、卤代C1-6烷氧基-、卤代C2-6烯氧基-、卤代C2-6炔氧基-、C3-8环烷氧基-、环烷基、杂环基、杂环氧基-、芳基、芳氧基-、杂芳基或杂芳基氧基-；
R6独立地为氢、卤素、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-CN、-NO2、氧代、-OR6a、-SO2R6a、-COR6a、-CO2R6a、-CONR6aR6b、-C(＝NR6a)NR6bR6c、-NR6aR6b、-NR6aCOR6b、-NR6aCONR6bR6c、-NR6aCO2R6b、-NR6aSONR6bR6c、-NR6aSO2NR6bR6c、或-NR6aSO2R6b；
R6a、R6b和R6c可以相同或不同，各自独立地为氢、卤素、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、-C3-8环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，其中所述C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基各自独立地任选地被一个或两个或三个取代基R7取代；或者
(R6a和R6b)和/或(R6b和R6c)和/或(R6c和R6a)与它们所附接的原子一起形成3至12元饱和、部分或完全不饱和环，所述环包含0、1或2个额外的独立地选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子作为一个或多个环成员，并且所述环任选地被至少一个取代基R8取代；
R7独立地为氢、卤素、-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、-CN、-NO2、氧代、-OR7a、-SO2R7a、-COR7a、-CO2R7a、-CONR7aR7b、-C(＝NR7a)NR7bR7c、-NR7aR7b、-NR7aCOR7b、-NR7aCONR7bR7c、-NR7aCO2R7b、-NR7aSONR7bR7c、-NR7aSO2NR7bR7c、或-NR7aSO2R7b，其中所述-C1-6烷基、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8环烷基、杂环基、芳基、或杂芳基各自独立地且任选地被一个或两个选自氢、卤素、-C1-6烷基、-C1-6烷氧基、氧代、氰基和氨基的取代基取代；
R7a、R7b和R7c可以相同或不同，各自独立地为氢、-C1-6烷基、C1-6烷氧基-C1-6烷基-、-C2-6烯基、-C2-6炔基、C3-8环烷基、杂环基、芳基、或杂芳基。
2.权利要求1的方法，其中R为含有1或2个杂原子作为一个或多个环成员的C-连接的5或6元杂芳基，所述杂原子独立地选自氮、氧或任选氧化的硫。
3.权利要求2的方法，其中R为呋喃基、吡嗪基或噻唑基；优选地，呋喃-2-基、3-甲基吡嗪-2-基或噻唑-2-基。
4.权利要求1的方法，其中R1为甲基；并且R2为甲基。
5.权利要求1-4中任一项的方法，其中R3和R4与它们所附接的氮原子一起形成3、4、5、6、7、8或9元单环，所述环包含0、1或2个额外的独立地选自氮、氧或任选氧化的硫的杂原子作为一个或多个环成员，所述环任选地被一个或两个或三个取代基R5取代。
6.权利要求5的方法，其中R3和R4与它们所附接的氮原子一起形成任选地被如式(Ib)所定义的R5取代的哌嗪基环(即，
Figure FDA0002070627060000021
)。
7.权利要求5的方法，其中R5为苯基，任选地被一个或两个或三个取代基R6取代，其中R6为如式(Ib)所定义。
8.权利要求5的方法，其中R5为苯基，任选地被一个或两个卤素取代并且进一步任选地被一个取代基R6取代，其中
R6为-OR6a，其中
R6a为任选地被一个R7取代的-C1-6烷基，其中
R7为杂环基、-OR7a或-NR7aR7b，其中
R7a和R7a各自独立地为氢、-C1-6烷基、C1-6烷氧基-C1-6烷基-；并且
所述杂环基任选地被卤素、羟基或-C1-6烷基取代。
9.权利要求5的方法，其中R6为-OR6a，其中R6a为任选地被一个R7取代的-C1-6烷基，其中R7为-OR7a，其中R7a为氢、-C1-6烷基、C1-6烷氧基-C1-6烷基-。
10.权利要求5的方法，其中R6为甲氧基乙氧基-、甲氧基乙氧基乙氧基-、2-羟基乙氧基、2-羟基丙氧基-、氨基乙氧基-、N，N-二甲基氨基乙氧基-或N-甲基氨基乙氧基-。
11.权利要求1的方法，其中所述化合物是化合物C3或C6。
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