TW201922224A - 包含胚芽乳酸桿菌培養物的抗菌化粧品組成物 - Google Patents

Abstract

本發明係關於一種包含胚芽乳酸桿菌培養物的皮膚用抗菌化粧品組成物。

Description

包含胚芽乳酸桿菌培養物的抗菌化粧品組成物

本發明係關於一種具抗菌效果的化粧品組成物，其含有單一乳酸菌培養物，具體而言，係關於一種含有胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)CJLP133培養物的皮膚用抗菌化粧品組成物。

人體皮膚能保護身體免受各種氧化物、空氣污染、重金屬及紫外線(UV)等傷害，且能防止細菌、真菌及病毒等侵入皮膚，並扮演防止水分流失的保護屏障的角色。皮膚的結構大致分為三層之表皮、真皮和皮下脂肪，且該真皮層包含皮膚的90%，由膠原蛋白、彈性蛋白、玻尿酸和糖蛋白所組成。膠原蛋白係皮膚的主要成分，是一種重要的纖維蛋白，約佔人體蛋白質總重量的25%。膠原蛋白構成了大部分結締組織並扮演重要角色如細胞間基質功能、結構支持功能、誘導細胞分裂和分化、提供皮膚拉伸強度等。

此外，已知從體內釋放的皮脂與汗液成分 中的脂肪酸、高級醇、蛋白質等，和化粧品成分會被存在於皮膚的皮膚菌群分解成毒性物質，從而引起皮膚發炎；進一步地，由於來自太陽光的紫外線損害了皮膚屏障，暴露於病原微生物引起的繼發感染誘發了各種皮膚病(例如，痤瘡、搔癢、皮膚炎、過敏等)。

因此，最大化化粧品中每種成分的效果並最小化其副作用以防止皮膚老化是非常重要的問題。在這方面，必須開發一種成本效益的材料，其抑制有害細菌生長且沒有副作用，以及一種含有該材料且方便使用的化粧品。

乳酸菌是一種藉由碳水化合物或纖維的發酵來產生乳酸，且在人體中具有益作用的細菌。到目前為止，已經發現了約400種乳酸菌，且已將約18個品種開發成商業產品。

一旦乳酸菌進入體內腸道，它們經由自身的代謝活性分泌特定的材料。由於這些材料對人體有益，因此已經對乳酸菌進行了許多研究。乳酸菌在抗菌、抗氧化劑和免疫活性的效果已經被報導。近年來，研究集中於乳酸菌的美白和保濕效果，且用作化粧品材料的可能性已經增加。在乳酸菌之中，已經對乳酸桿菌的效果進行許多研究，並且免疫力、抗菌效果、皮膚美白的增強、異位性皮膚炎的改善等已經被報導。

其中，植物來源的乳酸菌(POLAB)是從植物原料的發酵食品(例如醃菜、泡菜等)中分離的乳酸菌，並 且和乳品來源的乳酸菌有所區別。

與動物性乳酸菌相比，植物來源的乳酸菌不僅包括至少多10倍的類型，並且它們對外部環境具有極佳的適應性。特別是從泡菜中分離的植物性乳酸菌，其具有高含量的鹽、低pH值和高含量的天然抗菌材料，可以在極端環境中生長，因此植物來源的乳酸菌具有多種不同生理活性材料的優異生產力。

代表性的生理活性材料包括抗菌肽、免疫刺激劑、γ-胺基丁酸(GABA)，其表現包括消炎和免疫抑制效果等各種生理功能。另外，乳酸菌是熱穩定肽，且產生作為抗菌劑的細菌素。細菌素是由各種微生物產生的天然抗微生物蛋白質或蛋白質材料，通常指稱具有針對細菌菌株的滅菌機制的材料，該細菌菌株在形態學和譜系學上類似於產生細菌素的微生物。因此，正在積極地開發使用含有這些材料的乳酸菌培養物或乳酸菌發酵植物萃取物的化粧品材料，且這個進展符合近期有利於環保和安全材料的趨勢。

目前，消費者不僅期望化粧品中的一般照護效果，還需要各種不同功能(例如，抗老化、改良細紋、抗刺激、消炎、美白效果等)。

近年來，基於上述目的，已經將各種植物萃取物用於化粧品中，並且對以新概念為基礎之產品的期望越來越高，該新概念係藉由結合各種特性，顯示出改進的性能特徵範圍。

[先前技術文獻] [專利文獻]

[專利文獻1]KR10-1486999 B1(2015.01.21)

為符合環保的時代，本發明的發明人已經努力研究來自泡菜的乳酸菌培養物的化粧品，該培養物對皮膚是安全而沒有任何副作用的，並且可以有效地經由抗菌活性用於抗菌護膚，此外，還要研究其在國內工業化中發展的可能性。其結果，發明人已經證實胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物對皮膚具有抗菌活性，從而完成了本發明的內容。

本發明的目的係提供一種包含以登錄號KCTC 11403BP寄存的胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物的皮膚用抗菌化粧品組成物，其中，該胚芽乳酸桿菌CJLP133的細菌體經移除。

本發明提供一種使用胚芽乳酸桿菌菌株(即，皮膚有益菌)製備胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物的方法，該培養物對皮膚是安全且沒有任何副作用的，還提供一種具抗菌活性的化粧品組成物，其含有胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物。

第1圖係顯示胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物的抗菌活性之實驗結果。2a：金黃色葡萄球菌，2b：表皮葡萄球菌，2c：大腸桿菌O157：H7型，2d：綠膿桿菌，和2e：痤瘡丙酸桿菌。

為達上述目的，本發明的一態樣為提供一種包含以登錄號KCTC 11403BP寄存的胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物的皮膚用抗菌化粧品組成物，其中，該胚芽乳酸桿菌的細菌體經移除。

在下文中，詳細解釋了本發明所提供含有胚芽乳酸桿菌培養物的皮膚用抗菌化粧品組成物。

在本文中，術語「胚芽乳酸桿菌」是指一種乳酸桿菌屬的微生物，其是一種能夠製造乳酸的革蘭氏陰性細菌。該細菌係可在發酵食品如酸菜、醃菜、泡菜等中發現。

胚芽乳酸桿菌菌株，尤指胚芽乳酸桿菌CJLP133菌株，其是以登錄號KCTC 11403BP寄存的菌株。

具體而言，胚芽乳酸桿菌CJLP133菌株係以登錄號KCTC 11403BP於2008年10月16日寄存於韓國生命科學及生物技術研究院(KRIBB)的韓國微生物保存中心(KCTC)，該組織是布達佩斯條約下的國際保存機構。

在本文中，術語「培養物」是指含有在培養基中培養微生物菌株時產生的副產物的培養基，其中， 該菌株允許攝入和代謝培養基所含之營養物。術語「培養物」包括所有使用培養基可形成的調配物(例如，培養基的稀釋物或濃縮物、藉由乾燥培養基獲得的乾燥產物、培養基的粗製物或純化產物、其等之混合物等)。

具體而言，培養物可為藉由通過培養胚芽乳酸桿菌CJLP133菌株所獲得者，或者可為藉由培養菌株所獲得者，其中，該細菌體在培育後經移除。也就是說，其中該細菌體經移除的培養基可以使用作為培養物。

更具體而言，培養物可以下述方法獲得，該方法包括：(a)藉由接種培養基來培養胚芽乳酸桿菌CJLP133菌株；(b)離心(a)步驟所得之產物；以及(c)從(b)步驟所得之產物回收上澄部分。

在(a)步驟中，培養基可以是本領域中所使用的任何培養基，只要該培養基可以培育菌株，並在培育後回收培養物，具體地為液體培養基，更具體地為MRS液體培養基。

為了獲得純的分離菌株，步驟(a)可進一步包括在步驟(a)之前，平板培養胚芽乳酸桿菌菌株在固體培養基及培養並收集菌落的步驟，其中，該菌落被證實為純的分離菌株。

在步驟(b)中，係使用高速離心機在1℃至7℃離心，具體地為2℃至6℃，更具體地為3℃至5℃；旋轉速率為1,500rpm至3,500rpm，具體地為2,000rpm至3,000rpm，更具體地為2,200rpm至2,800rpm；進行10至 30分鐘，具體地為15至25分鐘，更具體地為17至23分鐘。

步驟(c)可進一步包括過濾上澄部分的步驟。此外，步驟(c)可進一步包括另一步驟，該步驟係使用冷凍乾燥機將過濾後的上澄液粉末化。

在本文中，術語「抗菌」係指抑制微生物(例如，與皮膚病相關的細菌)生長的效果。

本發明中，培養物針對選自下述所成群組的至少一細菌可具有抗菌活性：金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大腸桿菌O157：H7型、綠膿桿菌及痤瘡丙酸桿菌，但不以該等為限。

此外，經由抗菌活性，本發明的組成物可為可改善藉由微生物所誘發的皮膚疾病者。

在本文中，術語「改良」係指使用本發明的組成物遏止或抑制由細菌所引起的皮膚病症狀，或減輕已經出現在皮膚的皮膚病症狀。

在本發明中，化粧品組成物可調配為下述形式：溶液、外用軟膏、乳膏、泡沫、營養護膚霜、柔軟護膚霜、敷料、軟水、乳液、打底霜、香精、肥皂、液體清潔劑、沐浴劑、防曬霜、防曬油、懸浮液、乳化物、糊、凝膠、洗劑、粉末、肥皂、含界面活性劑的清潔劑、油、粉狀粉底、乳化粉底、蠟狀粉底、貼片及噴霧，但調配物以該等為限。

在本發明中，化粧品組成物可進一步含有 至少一種化粧品可接受的載劑，該載劑係用來加入一般的皮膚化粧品。作為化粧品可接受載劑的常規組分，例如可以適當地混合油、水、界面活性劑、保濕劑、低級醇、增稠劑、螯合劑、色素、防腐劑、香料等，但該組分不以該等為限。

加入本發明的化粧品組成物之化粧品可接受載劑，可以根據化粧品組成物的調配物而改變。

當本發明的調配物為軟膏、糊、乳膏或凝膠等時，作為載劑組分可以使用動物油、植物油、蠟、石蠟、澱粉、紫雲英樹膠、纖維素衍生物、聚乙二醇、矽氧樹指、皂土、二氧化矽、滑石、氧化鋅等，但該載劑組分不以該等為限。該載劑組分可以單獨或以兩種以上組合使用。

當本發明的調配物為粉末或噴霧時，作為載劑組分可以使用乳糖、滑石、二氧化矽、氫氧化鋁、矽酸鈣、聚醯胺粉末等；特別在使用噴霧的情況下，調配物可以進一步含有推進劑，例如氯氟烴、丙烷/丁烷和二甲醚，但該載劑組成不以該等為限。該載劑組分可以單獨或以兩種以上的組合使用。

當本發明的調配物為溶液或乳化物時，作為載劑組成可以使用溶劑、助溶劑或乳化劑(例如，水、乙醇、異丙醇、碳酸乙基酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸芐酯、丙二醇、1,3-丁二醇油等)，及特別可使用棉籽油、花生油、玉米籽油、橄欖油、蓖麻油、芝麻油、甘油脂肪族 酯、聚乙二醇或去水山梨醇脂肪酸酯，但該載劑組分不以該等為限。該載劑組分可以單獨或以兩種以上的組合使用。

當本發明的調配物為懸浮液時，作為載劑成分可以使用液體稀釋劑(例如，水、乙醇或丙二醇)、懸浮劑(例如，乙氧化異硬脂醇、山梨糖醇聚氧乙烯酯和脫水山梨糖醇聚氧乙烯酯)、微晶型纖維素、羥基氧化鋁、皂土、瓊脂、紫雲英樹膠等，但載劑組分不以該等為限。該載劑組分可以單獨或以兩種以上的組合使用。

當本發明的調配物為肥皂時，作為載劑組分可以使用脂肪酸的鹼金屬鹽、脂肪酸的半酯鹽、脂肪酸蛋白質水解物、羥乙基磺酸、羊毛酯衍生物、脂肪族醇、植物油、甘油、醣類等，但載劑組分不以該等為限。該載劑組分可以單獨或以兩種以上的組合使用。

本發明的另一方面為提供一種皮膚用的抗菌方法，該方法係對個體施用一種其中細菌體經移除的胚芽乳酸桿菌培養物。

皮膚用的抗菌方法可為包括對需要抗菌皮膚的個體施用一種含有胚芽乳酸桿菌培養物，及額外地化粧品可接受載劑的化粧品組成物。該化粧品可接受的載劑係如上文所述。

個體可能包括也可不包括人類。具體而言，個體可以是哺乳動物，包括牛、豬、羊、雞、狗人類等；鳥類等，且可包括但不限於藉由施用上述組成物而具有抗菌活性的任何個體者。

本發明的另一方面為提供了一種組成物之用途，其係用於製備含有胚芽乳酸桿菌培養物的具抗菌活性化粧品，其中，該胚芽乳酸桿菌的細菌體經移除。

後文中，將參考下述實施例更詳細揭示本發明內容。惟，對本發明所屬技術領域者，此等實施例係僅用於例示性說明之目的，且本發明不欲為此等實施例所限。

實施例1：製備胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物

將以登錄號KCTC 11403BP寄存的胚芽乳酸桿菌CJLP133菌株平板培養在固體MRS培養基(BD Difco，乳酸桿菌屬MRS瓊脂)，並在37℃培養約18小時。確認之後，收集純的分離菌落並使用鉑環接種到液態MRS培養基(BD Difco，乳酸桿菌屬MRS broth)，並在37℃培養大約18小時。培養完成後，培養物濃度為1.0×10⁹CFU/mL。為了將細菌體從培養物中分離，該培養物在4℃及2,500rpm的條件下使用高速離心機(LABOGENE 1248R)離心20分鐘。過濾該培養物的上澄部分之後，使用冷凍乾燥機(HETO PL90000)將過濾後的上澄部分粉末化。由此方法製備成的培養物稱為「胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物」

實施例2：確認胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物的抗菌活性

為了確認實施例1所製備的胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物針對皮膚病原體的抗菌活性，以圓盤擴散法測量有關皮膚病原體的抑制圈。

總共使用五種皮膚病原體菌株，金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大腸桿菌O157：H7型、綠膿桿菌和痤瘡丙酸桿菌，其等經常在皮膚中檢測到。所有這五種皮膚病原體菌株均係來自韓國生命科學及生物技術研究所(KRIBB)的韓國微生物保存中心(KCTC)。每種菌株的登錄號、培養基、培養溫度和育成時間的細節如下表1所示。

使用氣體包裝系統(三菱瓦斯化學株式會社，厭氧產氣袋)將痤瘡丙酸桿菌密封在厭氧培養罐中，並厭氧地培養。

作為對照組，使用材料係經由冷凍乾燥法將液體MRS培養基粉碎之後加入無菌蒸餾水製備至濃度0.5g/mL而製備。作為試驗組，使用材料係藉由添加無菌蒸餾水到胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物至濃度0.1g/mL、0.5g/mL及2.5g/mL而製備。

將每種皮膚病原體菌株以1.6×10⁶CFU/mL的濃度接種在培養基(TSA；BD Difco，胰蛋白酶大豆瓊脂，RCM；BD Difco，強化梭菌培養基)。將無菌紙圓盤(ADVANTEC，8mm)放置在其中每種菌株經平板培養的平板上後，分別添加50μL的試驗材料及對照材料。根據各自的培養條件(表1)培養每個菌株後，測量圓盤周圍抑制圈(即，指示菌株的凋亡區域)的直徑。較大的抑制圈表示抗菌活性較佳，且在沒有抗微生物活性下不會形成抑制圈。

試驗結果顯示，對照組沒有形成抑制圈，而使用胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物的試驗組在五種菌株中皆形成了抑制圈，從而證實了胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物具有對皮膚病原體的抗菌活性。此外，隨著胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物濃度的增加，抑制圈的尺寸亦增加，從而證實了抗菌活性是以濃度依賴性的方式增加。試驗結果如表2及第1圖所示。

根據這些結果可以發現胚芽乳酸桿菌CJLP133菌株的培養物具有抗菌活性，因此可用於皮膚抗菌。

本發明所屬技術領域者能夠自前述內容理解，本發明可藉由其他具體形式例式之而不改變本街露內容之技術概念或本質特徵。就此而言，本文中揭露之例示性態樣係僅用於例示性說明之用，且不應解釋為限制本揭露內容之範疇。反之，本揭露內容係傾向於不僅涵蓋該等例示性態樣，亦涵蓋可包括於如後所附申請專利範圍定義者之本發明內容之精神及範疇內的多種變更、修飾、均等物、及其他態樣。

【生物材料寄存】 國外寄存資訊【請依寄存國家、機構、日期、號碼順序註記】

大韓民國、韓國微生物保存中心、2008年10月09日、KCTC11403BP。

Claims (5)

1. 一種皮膚用抗菌化粧品組成物，其包含以登錄號KCTC 11403BP寄存的胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物，其中，該胚芽乳酸桿菌CJLP133的細菌體經移除。
2. 如申請專利範圍第1項所述的化粧品組成物，其中，該培養物係以包括下述之方法獲得：(a)藉由接種培養基來培養胚芽乳酸桿菌CJLP133菌株；(b)將(a)步驟所得之產物離心；以及(c)從(b)步驟所得之產物回收上澄部分。
3. 如申請專利範圍第1項所述的化粧品組成物，其中，該培養物針對選自下述所成群組之至少一細菌具有抗菌活性：金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大腸桿菌O157：H7型、綠膿桿菌及痤瘡丙酸桿菌。
4. 一種皮膚用的抗菌方法，該方法係對個體施用胚芽乳酸桿菌培養物，其中，該胚芽乳酸桿菌的細菌體經移除。
5. 一種組成物之用途，其係用於製備具抗菌活性的皮膚用化粧品，該組成物包含其中胚芽乳酸桿菌的細菌體經移除的胚芽乳酸桿菌培養物。