TWI734048B - 包含胚芽乳酸桿菌培養物的改良皮膚皺紋用化粧品組成物 - Google Patents

包含胚芽乳酸桿菌培養物的改良皮膚皺紋用化粧品組成物 Download PDF

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辛民景
徐溶基
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Abstract

本發明係關於一種包含胚芽乳酸桿菌培養物的改良皮膚皺紋用化粧品組成物。

Description

包含胚芽乳酸桿菌培養物的改良皮膚皺紋用化粧品組成物
本發明關於一種具有膠原蛋白合成功效的含有單一乳酸培養物的化粧品組成物，具體來說，關於一種用於促進膠原蛋白合成及改良皮膚皺紋的含有胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)CJLP133培養物的化粧品組成物。
人體皮膚保護身體免受各種氧化物、空氣汙染、重金屬及紫外線(UV)等傷害，且防止細菌、真菌及病毒等侵入皮膚，並扮演防止水分流失的保護屏障的角色。皮膚的結構大致分為三層之表皮、真皮和皮下脂肪，以及包含90%皮膚的真皮層，由膠原蛋白、彈性蛋白、玻尿酸和糖蛋白所組成。膠原蛋白係皮膚的主要成分，是一種重要的纖維蛋白，約佔人體蛋白質總重量的25%。膠原蛋白構成了大部分結締組織並扮演重要角色如細胞間基質功能、結構支持功能、誘導細胞分裂和分化、提供皮膚拉伸強度等。已知老化、紫外線及有毒氧等會引起膠原蛋白產量減少並損害其 結構，且因此其與皮膚皺紋的形成密切相關。近年來，惡化的環境因素(例如粉塵等)導致皮膚屏障的毀壞，且藉此經由膠原蛋白合成量的減少和分解作用的增加，持續地促進皮膚老化。
因此，極大化每種成分的效果並極小化其副作用以防止皮膚老化，在化粧品中是非常重要的問題。在這方面，必須開發一種成本效益的材料，其促進膠原蛋白合成且沒有副作用，以及一種含有該材料之方便使用的化粧品。
乳酸菌是藉由碳水化合物或纖維的發酵來產生乳酸，且在人體中具有益作用的細菌。到目前為止，已發現約400種乳酸菌，並且已將約18種品種開發成商業產品。
一旦乳酸菌進入身體腸道，它們經由自身的代謝活性分泌特定的材料。由於這些材料對人體有益，因此已經對乳酸菌進行了許多研究。乳酸菌在抗菌、抗氧化物和免疫活性的效果已經被報導了。近年來，研究集中於乳酸菌的美白和保濕效果，且用作化粧品材料的可能性已經增加。在乳酸菌之中，已經對乳酸桿菌的效果進行了許多研究，並且免疫力、抗菌效果、皮膚美白的增強及異位性皮膚炎的改善等已經被報導了。
其中，植物來源的乳酸菌(POLAB)是從植物原料的發酵食品(例如醃菜、泡菜等)中分離的乳酸菌，並且和乳品來源的乳酸菌有所區別。
與動物性乳酸菌相比，植物來源的乳酸菌不僅包括至少多10倍的類型，並且它們對外部環境具有極佳的適應性。特別是從泡菜分離的植物性乳酸菌，其具有高含量的鹽、低pH值和高含量的天然抗菌材料， 可以在極端環境中生長，因此植物來源的乳酸菌具有多種不同生理活性材料的優異生產力。
代表性的生理活性材料包括抗菌肽、免疫刺激劑及γ-胺基丁酸(GABA)，其表現包括消炎和免疫抑制效果等各種生理功能。另外，乳酸菌是熱穩定肽，且產生作為抗菌劑的細菌素。細菌素是由各種微生物產生的天然抗微生物蛋白質或蛋白質材料，通常指稱具有針對細菌菌株的滅菌機制的材料，該細菌菌株在形態學和譜系學上類似於產生細菌素的微生物。因此，正在積極地開發使用含有這些材料的乳酸菌培養物或經乳酸菌發酵的植物萃取物的化粧品材料，且這個進展符合近期偏愛環保和安全材料的趨勢。
目前，消費者不僅期望化粧品中的一般照護效果，還需要其各種不同功能(例如，抗老化、改良細紋、抗刺激、消炎及美白效果等)。
近年來，基於上述目的，已經將各種植物萃取物用於化粧品中，並且對以新概念為基礎之產品的期望越來越高，該新概念係藉由組合各種特性，顯示出改良的性能特徵範圍。
[先前技術文獻] [專利文獻]
(專利文件1) KR 10-1486999 B1 (2015.01.21)。
為符合環保的時代，本發明的發明人已經努力研究來自泡菜的乳酸菌培養物的化粧品的效果，其對皮膚是安全而沒有任何副作用的，並且可以藉由增加膠原蛋白的生物合成有效地使用於預防老化、改良皮膚彈性和改良皮膚皺紋，此外，還要研究其在國內工業化中發展的可能性。其結果，發明人已經證實胚芽乳酸桿菌(Lactobacillus plantarum)CJLP133培養物具有改良皮膚皺紋的活性，從而完成本發明的內容。
本發明的目的係提供一種包含胚芽乳酸桿菌培養物的改良皮膚皺紋用化粧品組成物，其中，該細菌體經移除。
本發明的另一個目的係提供一種預防或改良皮膚皺紋的方法，包括給個體施用胚芽乳酸桿菌培養物，其中，該胚芽乳酸桿菌的細菌體經移除。
本發明的又另一個目的係提供一種組成物之用途，其係用於製備含有胚芽乳酸桿菌培養物的改良皮膚皺紋用化粧品，其中，該胚芽乳酸桿菌的細菌體經移除。
本發明提供一種使用胚芽乳酸桿菌菌株(即，對皮膚有益的細菌)製備胚芽乳酸桿菌培養物的方法，該培養物對皮膚是安全且沒有任何副作用的，並且還提供一種含有胚芽乳酸桿菌培養物的改良皮膚皺紋用化粧品組成物。
第1圖係顯示胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物的膠原蛋白合成能力的實驗結果。
為達上述目的，本發明的一態樣為提供一種含有胚芽乳酸桿菌培養物的改良皮膚皺紋用化粧品組成物，其中，該細菌體經移除。
在下文中，詳細解釋了本發明所提供之含有胚芽乳酸桿菌培養物的改良皮膚皺紋用化粧品組成物。
在本文中，術語「胚芽乳酸桿菌」是指一種乳酸桿菌屬的微生物，其是一種能夠產生乳酸的革蘭氏陰性細菌。該細菌係可在發酵食品如酸菜、醃菜及泡菜等中發現。
胚芽乳酸桿菌菌株，尤指胚芽乳酸桿菌CJLP133菌株，是以登錄號KCTC 11403BP寄存的菌株。
具體而言，胚芽乳酸桿菌CJLP133菌株係以登錄號KCTC 11403BP於2008年10月16日寄存於韓國生物科學及生物技術研究院(KRIBB)的韓國菌種中心(KCTC)，該組織是布達佩斯條約下的國際保存機構。
在本文中，術語「培養物」是指含有在培養基中培養微生物菌株時產生的副產物的培養基，其中，該菌株可以攝入和代謝培養基所含之營養物。術語「培養物」包括所有使用培養基所形成的調配物(例如，培養基的稀釋劑或濃縮物、藉由乾燥培養基獲得的乾燥產物、培養基的粗製品或純化產物、其混合物等)。
具體而言，培養物可為藉由培養胚芽乳酸桿菌菌株所獲得 者，或者可為藉由培養菌株所獲得者，其中，該組菌體在培育後經移除。也就是說，其中細菌體經移除的經培養的培養基可以使用作為培養物。
更具體而言，培養物可為包括下述之方法獲得：(a)藉由接種培養基來培養胚芽乳酸桿菌；將(a)步驟所得之產物離心；以及(c)從(b)步驟所得之產物中回收上澄部分。
在(a)步驟中，培養基可以是本領域中所使用的任何培養基，只要該培養基可以培育菌株，並在培育後回收培養物，較佳為液體培養基，更佳為MRS液體培養基。
為了獲得純的分離菌株，步驟(a)可進一步包括在步驟(a)之前將胚芽乳酸桿菌菌株平板培養在固體培養基，培養並收集該等菌落的步驟，該菌落被證實為純的分離菌株。
在步驟(b)中，係使用高速離心機在1℃至7℃進行離心，較佳為2℃至6℃，更佳為3℃至5℃；旋轉速率為1,500rpm至3,500rpm，較佳為2,000rpm至3,000rpm，更佳為2,200rpm至2,800rpm；離心10至30分鐘，較佳為15至25分鐘，更佳為17至23分鐘。
步驟(c)可進一步包括過濾上澄部分的步驟。此外，步驟(c)可進一步包括使用冷凍乾燥機將過濾後的上澄部分粉末化的步驟。
在本文中，術語「皺紋」係指皮膚老化形成的細紋，該皺紋也可能由基因、皮膚真皮中存在的膠原蛋白含量減少、或外界環境等所引起。
在本發明中，組成物可藉由增加膠原蛋白合成量的方法來改良皮膚皺紋，藉此預防膠原蛋白的減少。
膠原蛋白是一種重要的纖維蛋白，約佔人體蛋白質總重量的25%。膠原蛋白構成了大部分結締組織並具有如細胞間基質、結構支持、誘導細胞分裂和分化、提供皮膚拉伸強度等重要角色。
在本文中，術語「改良」係指使用本發明的組成物遏止或抑制皮膚皺紋的症狀，或緩和已經出現在皮膚之皮膚皺紋的症狀。
在本發明中，化粧品組成物可調配為下述形式：溶液、外用軟膏、乳膏、泡沫、營養護膚霜、柔軟護膚霜、敷料、軟水、乳液、打底霜、香精、肥皂、液體清潔劑、沐浴劑、防曬霜、防曬油、懸浮液、乳化物、糊、凝膠、洗劑、粉末、肥皂、含界面活性劑的清潔劑、油、粉狀粉底、乳化粉底、蠟狀粉底、貼片及噴霧，但調配物不以上述為限。
在本發明中，化粧品組成物可進一步含有至少一種化粧品可接受的載劑，該載劑係用來加入一般的皮膚化粧品中。作為化粧品可接受載劑的常規組分，例如可以適當地混合油、水、界面活性劑、保濕劑、低級醇、增稠劑、螯合劑、色素、防腐劑及香料等，但該組分不以上述為限。
加入本發明的化粧品組成物中之化粧品可接受載劑，可以根據化粧品組成物的調配物而改變。
當本發明的調配物為軟膏、糊、乳膏或凝膠時，作為載劑組分可以使用動物油、植物油、蠟、石蠟、澱粉、紫雲英樹膠、纖維素衍生物、聚乙二醇、矽氧樹指、皂土、二氧化矽、滑石及氧化鋅等，但不以上述為限。該載劑組分可以單獨或以兩種或更多種組合使用。
當本發明的調配物為粉末或噴霧時，作為載劑組分可以使用乳糖、滑石、二氧化矽、氫氧化鋁、矽酸鈣及聚醯胺粉末等；特別在噴霧 的情況，調配物可以進一步含有推進劑，例如氯氟烴、丙烷/丁烷和二甲醚，但不以上述為限。該載劑組分可以單獨或以兩種或更多種的組合使用。
當本發明的調配物為溶液或乳化物時，作為載劑組分可以使用溶劑、助溶劑或乳化劑(例如，水、乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸芐酯、丙二醇及1,3-丁二醇油等)，較佳為棉籽油、花生油、玉米籽油、橄欖油、蓖麻油及芝麻油、甘油脂肪族酯、及聚乙二醇或去水山梨醇脂肪酸酯，但不以上述為限。該載劑組分可以單獨或以兩種或更多種的組合使用。
當本發明的調配物為懸浮液時，作為載劑組分可以使用液體稀釋劑(例如，水、乙醇或丙二醇)、懸浮劑(例如，乙氧化異硬脂醇、山梨糖醇聚氧乙烯酯和脫水山梨糖醇聚氧乙烯酯)、微晶型纖維素、羥基氧化鋁、皂土、瓊脂及紫雲英樹膠等，但不以上述為限。該載劑組分可以單獨或以兩種或更多種的組合使用。
當本發明的調配物為肥皂時，作為載劑組分可以使用脂肪酸的鹼金屬鹽、脂肪酸的半酯鹽、脂肪酸蛋白質水解物、羥乙基磺酸、羊毛酯衍生物、脂肪族醇、植物油、甘油及醣類等，但不以上述為限。該載劑組分可以單獨或以兩種或更多種的組合使用。
本發明的另一態樣為提供一種用於預防或改良皮膚皺紋的方法，該方法係對個體施用一種胚芽乳酸桿菌培養物，其中該細菌體經移除。
用於改良皮膚皺紋的方法可為包括對需要改良皮膚皺紋的個體施用一種含有胚芽乳酸桿菌培養物及附加地，化粧品可接受的載劑的 化粧品組成物的方法。該化粧品可接受的載劑係如上文所述。
個體可包括也可不包括人類。具體而言，個體可以是哺乳動物，包括牛、豬、羊、雞、狗、人類等；鳥類等，及包括但不限於可以藉由施用上述組成物改良皮膚皺紋的任何個體。
本發明的另一態樣為提供了一種組成物之用途，其係用於製備含有胚芽乳酸桿菌培養物的改良皮膚皺紋用化粧品，其中，該胚芽乳酸桿菌的細菌體經移除。
後文中，將參考下述實施例更詳細揭示本發明內容。惟，對本發明所屬技術領域者，此等實施例係僅用於例示性說明之目的，且本發明不欲為此等實施例所限。
實施例1：製備胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物
將以登錄號KCTC 11403BP寄存的胚芽乳酸桿菌CJLP133菌株平板接種在固體MRS培養基(BD Difco，乳酸桿菌屬MRS瓊脂)，並在37℃培養約18小時。確認之後，收集純的分離菌落並使用鉑環接種到液態MRS培養基(BD Difco，乳酸桿菌屬MRS Broth)，並在37℃培養大約18小時。培育完成後，培養物具有濃度1.0×109CFU/mL。為了將細菌體從培養物分離，該培養物在4℃及2500rpm的條件使用高速離心機(LABOGENE 1248R)接受離心20分鐘。過濾該培養物的上澄部分之後，使用冷凍乾燥機(HETO PL90000)將過濾後的上澄部分粉末化。由此製備成的培養物稱為「胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物」。
實施例2：確認胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物的膠原蛋白合成能力
為了確認實施例1所製備的胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物的膠原蛋白合成能力，測量皮膚纖維母細胞中膠原蛋白表現量。
將新生兒人類真皮纖維母細胞(NHDF)(5×104細胞/皿(dish))加入於24孔盤的含有10%胎牛血清的杜氏改良伊格爾培養基(DMEM,Gibco)，並在37℃培養48小時。以經TGF-β(10ng/mL)處理的無血清DMEM作為陽性對照組，以及對於實驗組，MRS培養基和胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物分別以0.25mg/mL、0.5mg/mL及1.0mg/mL的濃度處理，並培養48小時。之後，收集每個培養物，並使用PICP EIA試劑盒(Procollagen Type I C-Peptide Enzyme ImmunoAssay KIT,Takara Bio Inc.,Japan)在分光光度計於450nm測量。
結果，證實了以胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物處理的組中，膠原蛋白表現量以濃度依賴性的方式增加。特別地，當於濃度3(1.0mg/mL)處理時，與以MRS培養基處理的實驗組相比，以胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物處理的組的膠原蛋白表現量增加約1.6倍。上述的增加量相當於陽性對照組(TGF-β)所達成的結果，因此，證實了胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物對皮膚纖維母細胞具有優異的膠原蛋白合成能力。實驗結果如表1和第1圖所示。
Figure 107140822-A0202-12-0011-1
從以上結果可以證實，本發明的胚芽乳酸桿菌CJLP133培養物可以增加膠原蛋白的合成，膠原蛋白已知在皮膚老化的機制中扮演重要的角色，其中，皺紋係藉由組成皮膚的基質蛋白質減少或分解基質蛋白質的酶增加而形成，從而有效地改良皮膚皺紋。
本發明所屬技術領域者能夠自前述內容理解，本發明可藉由其他具體形式例式之而不改變本揭露內容之技術概念或本質特徵。就此而言，本文中揭露之例示性態樣係僅用於例示性說明之用，且不應解釋為限制本揭露內容之範疇。反之，本揭露內容係傾向於不僅涵蓋該等例示性態樣，亦涵蓋可包括於如後所附申請專利範圍定義者之本發明內容之精神及範疇內的多種變更、修飾、均等物、及其他態樣。
【生物材料寄存】
大韓民國、韓國生命科學及生物技術研究院(KRIBB)、2008年10月09日、KCTC 11403BP。
該代表圖無元件符號及其所代表之意義。

Claims (2)

  1. 一種預防或改良皮膚皺紋的方法，包括對個體施用胚芽乳酸桿菌培養物，其中，該胚芽乳酸桿菌的細菌體經移除，其中，該胚芽乳酸桿菌的菌株是以登錄號KCTC 11403BP寄存的胚芽乳酸桿菌CJLP133菌株，其中，該胚芽乳酸桿菌CJLP133菌株是植物來源的乳酸菌，以及該改良皮膚皺紋係改良已經出現在皮膚之皮膚皺紋的症狀。
  2. 一種組成物之用途，係用於製備包含胚芽乳酸桿菌培養物的改良皮膚皺紋用化粧品，其中，該胚芽乳酸桿菌的細菌體經移除，其中，該胚芽乳酸桿菌的菌株是以登錄號KCTC 11403BP寄存的胚芽乳酸桿菌CJLP133菌株，其中，該胚芽乳酸桿菌CJLP133菌株是植物來源的乳酸菌，以及該改良皮膚皺紋係改良已經出現在皮膚之皮膚皺紋的症狀。
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