TW201823468A - 動物用免疫賦活劑的製造方法、動物用免疫賦活劑及動物用飼料 - Google Patents

動物用免疫賦活劑的製造方法、動物用免疫賦活劑及動物用飼料 Download PDF

Info

Publication number
TW201823468A
TW201823468A TW106129501A TW106129501A TW201823468A TW 201823468 A TW201823468 A TW 201823468A TW 106129501 A TW106129501 A TW 106129501A TW 106129501 A TW106129501 A TW 106129501A TW 201823468 A TW201823468 A TW 201823468A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
animal
activating agent
animal immune
polysaccharides
molecular weight
Prior art date
Application number
TW106129501A
Other languages
English (en)
Inventor
矢師正義
川上茂樹
Original Assignee
日商瑪雅產業有限公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 日商瑪雅產業有限公司 filed Critical 日商瑪雅產業有限公司
Publication of TW201823468A publication Critical patent/TW201823468A/zh

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K10/00—Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/80—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for aquatic animals, e.g. fish, crustaceans or molluscs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/04—Polysaccharides, i.e. compounds containing more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic bonds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Marine Sciences & Fisheries (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本發明將提供能夠提升動物之免疫力的動物用免疫賦活劑的製造方法、動物用免疫賦活劑及使用此動物用免疫賦活劑之動物用飼料作為目的。本發明之動物用免疫賦活劑的製造方法，包括在包含碳源與氮源的培養基中，在超過25℃且35℃以下培養多黏芽孢桿菌(Bacillus polymyxa)的發酵前期步驟、將在前述發酵前期步驟中獲得的培養物於25℃以下保存30日以上的發酵後期步驟，以及藉由在前述發酵後期步驟後的培養物中添加有機酸，來調整經由前述多黏芽孢桿菌所生產之多醣類及蛋白質的分子量的分子量調整步驟。

Description

動物用免疫賦活劑的製造方法、動物用免疫賦活劑及動物用飼料
本發明為關於動物用免疫賦活劑的製造方法、動物用免疫賦活劑以及使用此動物用免疫賦活劑的動物用飼料。
在畜產業與水產業，每年發生起因於細菌與病毒之感染症的流行、蔓延。作為具體的疾病，有豬的大腸菌症和沙門氏菌症，牛的口蹄疫，雞的沙門氏菌症，香魚的冷水病等。
特別是關於香魚的冷水病，因細菌性傳染性強，不僅僅是在養殖香魚還有在天然香魚也變得可以看到。冷水病發病的香魚，除了產生體表的白濁也能看到鰓蓋下部的出血與體表的潰瘍等的症狀。
為了預防、治療這些感染症，從過去以來使用抗生素，然而，起因於在畜肉和養殖魚等之藥劑殘留的公共衛生上的問題與多重抗藥性菌的出現的問題被指出。又，已知由於抗生素的長期投予，對此藥劑有抗性的菌選擇性增加的特異菌叢被形成，而引起新的疾病。由於這些狀況，抗生素的使用朝被禁止的方向。
作為抗生素投予之替代方法，藉由將調配有將賦活免疫之成分(免疫賦活劑)的動物用飼料給餌來提高動物的 免疫預防疾病的方法被研究(參照專利文獻1)。然而，針對如上述香魚之冷水病傳染性強的疾病，在以前之免疫賦活劑，無法獲得充分的效果。
另一方面，將飼育動物之肥育的促進等作為目的，研究調配有為屬於芽孢桿菌屬之多黏芽孢桿菌(Bacillus polymyxa)之動物用飼料(參見專利文獻2)。已知多黏芽孢桿菌藉由以包含蔗糖與氮源(酵母萃取物等)之培養基來培養，產生高分子量的聚果糖與蛋白質。
[先前技術文獻]
[專利文獻]
【專利文獻1】日本特開2015-172019號公報
【專利文獻2】日本特開2008-253226號公報
然而，專利文獻2中所記載包含多黏芽孢桿菌的動物用飼料，係為將飼育動物之肥育的促進作為目的者，針對多黏芽孢桿菌與免疫力提升的關係，完全沒有被研究。
在本發明中，將提供能夠提升動物之免疫力的動物用免疫賦活劑的製造方法、動物用免疫賦活劑及使用此動物用免疫賦活劑之動物用飼料作為目的。
(1)本發明之動物用免疫賦活劑的製造方法，包括在包含碳源與氮源的培養基中，在超過25℃且35℃以下培養 多黏芽孢桿菌(Bacillus polymyxa)的發酵前期步驟、將在前述發酵前期步驟中獲得的培養物於25℃以下保存30日以上的發酵後期步驟，以及藉由在前述發酵後期步驟後的培養物中添加有機酸，來調整經由前述多黏芽孢桿菌所生產之多醣類及蛋白質的分子量的分子量調整步驟。
藉由前述(1)之動物用免疫賦活劑的製造方法，藉由在發酵後的培養物中添加有機酸，由於經由多黏芽孢桿菌產生的多醣類與蛋白質的高分子鏈被分解，其分子量適度地被調整，所以能夠獲得包含相對低分子量的多醣類與胜肽的動物用免疫賦活劑。此包含相對低分子量的多醣類與胜肽的動物用免疫賦活劑，能夠提升動物的免疫力。儘管原因尚不清楚，但是，由於相對低分子量的多醣與胜肽改善了動物的腸內菌叢同時活化了自然殺手細胞，因此推測能夠預防感染。又，前述「多醣類」指單醣分子3個以上聚合的醣類。
(2)在前述(1)之動物用免疫賦活劑的製造方法的分子量調整步驟中，藉由在前述培養物中添加有機酸使前述培養物的pH為5.0以下較佳。藉由此構成，能夠獲得包含適合進一步提升動物之免疫力之分子量的多醣類與胜肽的動物用免疫賦活劑。
(3)在前述(1)或(2)項之動物用免疫賦活劑的製造方法中，前述培養基更包含維生素、礦物質或其組合為佳。藉由此構成，能夠促進發酵。
(4)在前述(1)至(3)之動物用免疫賦活劑的製造方法中，前述分子量調整步驟後之培養物包含分子量1000以下 的低分子多醣類，且相對於前述培養物中之多醣類總量，前述低分子多醣類的含有量為80質量%以上為佳。藉由此構成，能夠獲得包含具有適合進一步提升動物之免疫力之分子量分佈的多醣類的動物用免疫賦活劑。
(5)在前述(4)之動物用免疫賦活劑的製造方法之前述分子量調整步驟後，相對於前述培養物中之多醣類總量，前述低分子多醣類的含有量為99質量%以下為佳。藉由此構成，能夠獲得包含具有適合更提升動物之免疫力之分子量分佈的多醣類的動物用免疫賦活劑。
(6)在前述(4)或(5)之動物用免疫賦活劑的製造方法中，前述低分子多醣類為分子量1000以下之聚果糖(levan)(以下也稱為「寡聚聚果糖」)為佳。藉由此構成，能夠獲得包含適合更提升動物之免疫力的多醣類的動物用免疫賦活劑。
(7)在前述(1)至(6)之動物用免疫賦活劑的製造方法中，前述有機酸為檸檬酸為佳。由於檸檬酸安全性高，並能夠容易地進行培養物之pH的調整，所以多醣類與蛋白質的分子量調整變得容易。
(8)在前述(1)至(7)之動物用免疫賦活劑的製造方法之發酵後期步驟中，前述培養物的保存期間為100日以下為佳。藉由此構成，能夠降低製造成本。
(9)在前述(1)至(8)項之動物用免疫賦活劑的製造方法之發酵後期步驟中，將前述培養物保存於6℃以上為佳。藉由此構成，由於在發酵後期步驟中多醣類與蛋白質的分子量被適度地調整，所以藉由添加有機酸的分子量調整變得容易。
(10)在前述(1)至(9)之動物用免疫賦活劑的製造方法中，前述碳源包含醣類為佳。藉由此構成，能夠促進經由多黏芽孢桿菌之多醣類的產生。
(11)在前述(10)之動物用免疫賦活劑的製造方法中，前述醣類為雙糖類為佳。藉由此構成，能夠進一步促進經由多黏芽孢桿菌之多醣類的產生。
(12)在前述(11)之動物用免疫賦活劑的製造方法中，前述雙糖類為蔗糖為佳。藉由此構成，能夠更促進經由多黏芽孢桿菌之多醣類(聚果糖)的產生。
(13)在前述(1)至(12)之動物用免疫賦活劑的製造方法中，前述氮源包含酵母萃取物為佳。藉由此構成，能夠促進經由多黏芽孢桿菌之蛋白質的產生。
(14)本發明之動物用免疫賦活劑，為包含多醣類與胜肽之動物用免疫賦活劑，其特徵在於，包含作為前述多醣類之分子量1000以下的低分子多醣類，且相對於前述多醣類總量，前述低分子多醣類的含有量為80質量%以上。
藉由前述(14)之動物用免疫賦活劑，能夠提供包含具有適合提升動物之免疫力之分子量分佈的多醣類與胜肽的動物用免疫賦活劑。
(15)在前述(14)之動物用免疫賦活劑中，相對於前述多醣類總量，前述低分子多醣類的含有量為99質量%以下為佳。藉由此構成，能夠提供包含具有適合更提升動物之免疫力之分子量分佈的多醣類的動物用免疫賦活劑。
(16)在前述(14)或(15)之動物用免疫賦活劑中，相 對於前述多醣類100質量部，前述胜肽的含有量為1質量部以上20質量部以下為佳。藉由此構成，能夠提供以適合更提升動物之免疫力的比例來包含多糖類與胜肽的動物用動物用免疫賦活劑。
(17)在前述(14)至(16)之動物用免疫賦活劑中，前述低分子多醣類為分子量1000以下之聚果糖為佳。藉由此構成，能夠提供包含具有適合進一步提升動物之免疫力之多醣類的動物用免疫賦活劑。
(18)前述(14)至(17)之動物用免疫賦活劑，也可以是魚貝類用之免疫賦活劑。
(19)前述(18)之動物用免疫賦活劑，也可以是適用於香魚、鮪魚類、鮭魚類、鰻魚類、河豚類、青甘鰺、紅甘鰺、真鯛或其組合之免疫賦活劑。
(20)本發明之動物用飼料，為包含前述(14)至(19)之任一中所記載的動物用免疫賦活劑的動物用飼料。
藉由前述(20)之動物用飼料，由於調配有包含具有適合提升動物之免疫力的分子量分佈的多醣類與胜肽的動物用免疫賦活劑，因此能夠提升動物之免疫力。
藉由本發明之動物用免疫賦活劑的製造方法，能夠製造可以提升動物之免疫力的動物用免疫賦活劑。又，藉由本發明之動物用免疫賦活劑與動物用飼料，能夠提升動物之免疫力。
以下，對本發明之較佳實施形態進行說明。
<動物用免疫賦活劑的製造方法>
本實施形態之動物用免疫賦活劑的製造方法，包括在包含碳源與氮源的培養基中，在超過25℃且35℃以下培養多黏芽孢桿菌(Bacillus polymyxa)的發酵前期步驟、將在前述發酵前期步驟中獲得的培養物於25℃以下保存30日以上的發酵後期步驟，與藉由在前述發酵後期步驟後的培養物中添加有機酸，來調整經由前述多黏芽孢桿菌所產生之多醣類及蛋白質的分子量的分子量調整步驟。藉由本實施形態之動物用免疫賦活劑的製造方法，藉由在發酵後的培養物中添加有機酸，由於經由多黏芽孢桿菌產生的多醣類與蛋白質的分子量適度地被調整，能夠獲得包含相對低分子量的多醣類與胜肽的動物用免疫賦活劑。此包含相對低分子量的多醣類與胜肽的動物用免疫賦活劑，能夠提升動物的免疫力。以下，對本實施形態之動物用免疫賦活劑的製造方法進行詳述。
[發酵前期步驟]
發酵前期步驟為，在包含碳源與氮源的培養基中，在超過25℃且35℃以下培養多黏芽孢桿菌(Bacillus polymyxa)的步驟。在本步驟中，多黏芽孢桿菌產生高分子量之多醣類與蛋白質。
(培養基)
本步驟中使用之培養基包含碳源與氮源。作為碳源，從促 進經由多黏芽孢桿菌之多醣類的產生的觀點，醣類為較佳，例如，可舉出葡萄糖、果糖等之單醣類，與蔗糖、乳糖、麥芽糖等之雙醣類，或澱粉、寡醣(oligosaccharide)、肝糖(glycogen)、澱粉等之多醣類。在醣類之中，包含雙醣類者為較佳，包含蔗糖者為更佳。當在本步驟中使用蔗糖作為碳源時，經由多聚芽孢桿菌，聚果糖被產生。
作為上述氮源，只要是經由多黏芽孢桿菌而產生之蛋白質的氮源者，就沒有特別限制，可以使用酵母萃取物、蛋白腖(peptone)等，從促進經由多黏芽孢桿菌之蛋白質的產生的觀點，使用酵母萃取物為佳。
培養基為，例如藉由將上述碳源與氮源加入純化水中後，經由滅菌來製備。培養基中之碳源之含有量為，例如1質量%以上20質量%以下左右。又，培養基中之氮源的含有量為，例如0.1質量%以上10質量%以下左右。
再者，在本步驟之培養基中，在不妨礙本發明效果的程度下，可以添加其他成分。例如，作為其他成分，添加維他命、礦物質或其組合的話，可以促進發酵。在添加維他命的情況，培養基中之維他命的含有量為，例如0.1質量%以上5質量%以下左右。又，在添加礦物質的情況，培養基中之礦物質的含有量為，例如0.01質量%以上1質量%以下左右。
(發酵條件)
在本步驟中，於超過25℃且35℃以下培養多黏芽孢桿菌。作為溫度條件，從促進發酵的觀點，27℃以上32℃以下為佳。又，在本步驟中之發酵時間並無特別限定，例如，1週以上100 日以下左右。
[發酵後期工程]
發酵後期步驟為，將在上述發酵前期步驟中獲得的培養物於25℃以下保存30日以上的步驟。於本步驟中，上述發酵前期步驟中經由多黏芽孢桿菌產生之多醣類與蛋白質的分子量被適度地調整。
(發酵條件)
在發酵後期步驟中，將培養物於25℃以下保存30日以上。作為溫度條件，從在後述之分子量調整步驟中容易進行多醣類與蛋白質的分子量調整的觀點，6℃以上為佳，10℃以上為較佳，20℃以上更佳。又，作為在本步驟中之發酵期間(保存時間)，從降低製造成本的觀點，100日以下為佳。又，在本步驟中，在不妨礙本發明效果下，也可以將酵素製劑等無菌地添加至培養基中。
[分子量調整步驟]
分子量調整步驟為，藉由在上述發酵後期步驟後的培養物中添加有機酸，來適度地調整經由多黏芽孢桿菌所產生之多醣類及蛋白質的分子量的步驟。於本步驟中，從培養物之污染防止的觀點，將經滅菌之有機酸無菌地添加於培養物中為佳。
(有機酸)
作為於本步驟中所使用的有機酸，例如可以舉出醋酸、蘋果酸、檸檬酸等，而使用檸檬酸為佳。由於檸檬酸安全性高，並能夠容易地進行培養物之pH的調整，所以多醣類與蛋白質的分子量調整變得容易。
(培養物的pH)
在本步驟中，藉由於在培養物中添加有機酸，使培養物之pH為5.0以下為佳。藉由使培養物之pH為5.0以下，能夠獲得包含適合進一步提升動物之免疫力之分子量的多醣類與胜肽的動物用免疫賦活劑。從同樣的觀點，作為本步驟後之培養物的pH的下限，為4.0為佳。
[其他步驟]
本實施形態之動物用免疫賦活劑的製造方法，除了上述步驟以外，也可包括固液分離步驟等之其他步驟。作為上述固液分離步驟，例如，可列舉出將分子量調整步驟後之培養物於15℃以下冷卻後，進行過濾的步驟。
[培養物(動物用免疫賦活劑)]
經由上述各步驟，可獲得包含相對低分子量的多醣類與胜肽的培養物(動物用免疫賦活劑)。此包含相對低分子量的多醣類與胜肽的培養物(動物用免疫賦活劑)，能夠提升動物之免疫力。
(多醣類)
作為多醣類，依據培養基之碳源等而不同，例如，將蔗糖作為碳源時，可以獲得低分子量的聚果糖。關於多醣類之分子量分佈，相對於培養物中之多醣類總量，分子量1000以下之低分子多醣類(以下，也簡稱為「低分子多醣類」)的含有量為80質量%以上為佳，85質量%以上為更佳。於此情況，能夠作為包含具有適合進一步提升動物之免疫力之分子量分佈的多醣類的動物用免疫賦活劑。從同樣的觀點，相對於多醣類總 量，低分子多醣類的含有量為99質量%以下為佳，95質量%以下為更佳。又，多醣類之分子量分佈，可以藉由在上述分子量調整步驟中添加之有機酸的種類與添加量等來控制。
(胜肽)
胜肽為經由多黏芽孢桿菌所產生之蛋白質的高分子鏈在上述分子量調整步驟等中被分解所獲得。關於胜肽之分子量分佈，從與上述多醣類相同的觀點，相對於培養物中之胜肽總量，分子量1000以下之胜肽的含有量為80質量%以上為佳，85質量%以上為更佳。從同樣的觀點，相對於胜肽總量，分子量1000以下之胜肽的含有量為99質量%以下為佳，95質量%以下為更佳。又，胜肽之分子量分佈，可以藉由在上述分子量調整步驟中添加之有機酸的種類與添加量等來控制。
(多醣類與胜肽的比例)
關於培養物(動物用免疫賦活劑)中多醣類與胜肽的比例，從更提升動物之免疫力的觀點，相對於多醣類100質量部，胜肽的含有量為1質量部以上20質量部以下為佳，1質量部以上10質量部以下更佳。多醣類與胜肽的比例，例如，可以藉由調整培養基中之碳源與氮源之比例等來控制。
(其他成分)
培養物(動物用免疫賦活劑)中，除上述成分以外，也可以包含，例如多黏芽孢桿菌的殘渣、培養基中所含的成分，或在發酵後期步驟、分子量調整步驟等中，根據需要所添加的成分。
<動物用免疫賦活劑>
接著，對本發明之動物用免疫賦活劑的較佳實施形態進行說明。本實施形態之動物用免疫賦活劑，為包含多醣類與胜肽之動物用免疫賦活劑，其特徵在於，包含作為多醣類之分子量1000以下的低分子多醣類，且相對於多醣類總量，前述低分子多醣類的含有量為80質量%以上。藉由本實施形態之動物用免疫賦活劑，能夠提供包含具有適合提升動物之免疫力之分子量分佈的多醣類與胜肽的動物用免疫賦活劑。本實施形態之動物用免疫賦活劑，由於與藉由上述動物用免疫賦活劑的製造方法所能獲得之較佳培養物(動物用免疫賦活劑)相同，因此省略重複說明。
本實施形態之動物用免疫賦活劑所適用的動物並無特別限制，但適用於魚貝類時，能夠進一步發揮提升免疫力的效果。作為魚貝類，可以舉出香魚、鮪魚類、鮭魚類、鰻魚類、河豚類、青甘鰺、紅甘鰺、真鯛等，也可以適用於將這些之複數種組合的魚貝類。其中，對於香魚之冷水病之發生防止是有效果的。
<動物用飼料>
接著，對本發明之動物用飼料的較佳實施形態進行說明。本實施形態之動物用飼料，為調配有上述實施形態之動物用免疫賦活劑的動物用飼料。藉由本實施形態之動物用飼料，由於調配有包含具有適合提升動物之免疫力的分子量分佈的多醣類與胜肽的動物用免疫賦活劑，因此能夠提升動物之免疫力。本實施形態之動物用飼料中所使用之動物用免疫賦活劑，由於與上述實施形態之動物用免疫賦活劑相同，因此省略重複說 明。
本實施形態之動物用飼料，能夠以任意之量來包含上述動物用免疫賦活劑，但相對於飼料總質量以乾燥質量較佳為0.1質量%以上30質量%以下，更佳為包含0.2質量%以上20質量%以下之上述動物用免疫賦活劑。例如，可以將上述適合之量的動物用免疫賦活劑與飼料原料混合，而製造動物用飼料。
[實施例]
以下，將本發明根據實施例具體地說明，但本發明並非限於這些實施例者。
關於香魚之冷水病的預防效果，藉由以下所示之方法，對本發明之實施例與比較例進行研究。
<免疫賦活劑1之調製>
於純化水中調配碳源(蔗糖5質量%、葡萄糖1質量%及α-澱粉1質量%)、氮源(酵母萃取物0.5質量%)、維他命(蔬菜抽出萃取物3質量%)與礦物質(備長炭灰抽出礦物質0.02質量%及磷酸鹽0.02質量%)後，於120℃滅菌15分鐘並進行冷以調製培養基。將馴養之多黏芽孢桿菌植菌於此培養基中，於30℃培養60日(發酵前期步驟)，之後，並在20℃~25℃的室溫保存90日(發酵後期步驟)。接著，藉由將經殺菌之50質量%檸檬酸水溶液無菌地添加於培養物中，使培養物之pH為4.5後(分子量調整的步驟)、冷卻至15℃以下並過濾(固液分離步驟)、將所得到之過濾液作為於後述之實施例1中所使用之免疫賦活劑1。關於所獲得之免疫賦活劑1藉由公知之 方法進行組成分析的結果，聚果糖之含有量為7.8g/100mL，胜肽之含有量為0.3g/100mL。因此，得知免疫賦活劑1，相對於聚果糖100質量部，包含胜肽3.8質量部。
<免疫賦活劑2之調製>
在上述免疫賦活劑1之調製中，除了不進行分子量調整步驟以外，係進行同樣的程序來調製於後述之比較例1中所使用的免疫賦活劑2。又，關於所獲得之免疫賦活劑2與免疫賦活劑1同樣地進行組成分析的結果，得知相對於聚果糖100質量部，包含蛋白質與胜肽合計3.8質量部。
<免疫賦活劑中之聚果糖的分子量分佈>
於上述免疫賦活劑1與免疫賦活劑2中含有之聚果糖的分子量分佈，係藉由以下所示之方法來測定。
[標準溶液之調製]
將下方表1中所示之分子量標準品溶解於水、乙腈與三氟乙酸的混合液(容量比55：45：0.1)來調製0.05~0.1W/V%之標準溶液。
試驗溶液的調製
取各免疫賦活劑0.2g，加入水、乙腈與三氟乙酸的混合液(容量比55：45：0.1)10mL。將此溶液於25℃放置一晚後，以孔徑0.45μm之膜過濾器進行過濾，將所獲得之溶液作為試驗溶液。
[分子量分佈的測定]
關於上述標準溶液及試驗溶液，以下方所示之高效液相層析操作條件來測定，且將所得到的結果藉由島津製作所公司之「CLASS-VP用GPC選項軟體」來解析。又，各波峰之分子量的推定，為使用基於分子量標準品之溶出時間及分子量所做成的檢量線來進行。
(高效液相層析操作條件)
機種：昭和電工公司之「Shodex GPC-101」
偵測器：昭和電工公司之紫外分光光度計「UV-41」
管柱：TOSOH公司之「TSKgel G2500PWXL( 7.8mm×300mm)」
管柱溫度：40℃
移動相：水、乙腈與三氟乙酸的混合液(容量比55：45：0.1)
液量：0.5mL/分
測定波長：220nm
測定範圍：0.032AUFS
注入量：20μL
<香魚用飼料的調製>
相對於市售之飼料(日本配合飼料公司之「EP-2C」)100質量部，分別將上述之免疫賦活劑1與免疫賦活劑2混合10質量部，調製實施例1與實施例2之香魚用飼料。又，將不混合免疫賦活劑之香魚用飼料(日本配合飼料公司之「EP-2C」)作為比較例2之香魚用飼料來使用。將這些飼料於4℃進行冷藏保存。
<試驗區的設定>
試驗中所使用之香魚(稚魚期)的飼育，係藉由在室外，於水泥製之2t水槽(2m×3m×0.35m)中，以將地下水(20℃)1日4次換水的方式注水來進行。將此水槽劃分成第1試驗區、第2試驗區與第3試驗區之3個試驗區，於各試驗區中各導入沒有感染冷水病之香魚(稚魚期)100隻。又，此時，經由統 計分析來確認各試驗區之間的體重無產生顯著性差異。
<對香魚的給餌方法>
作為將上述之香魚用飼料朝各試驗區給餌的方法，為使用Yamaha公司之自動給餌器「YDF-160SO」、使用計時器1日3次(9時、13時、17時)，並採用一邊經由目視觀察一邊使其吃到飽的方法(飽食攝餌)。此時，分別於第1試驗區中給餌實施例1之香魚用飼料，於第2試驗區中給餌比較例1之香魚用飼料，於第3試驗區中給餌比較例2之香魚用飼料。經由此給餌方法飼育60日。
<冷水病的確認方法>
60日的飼育期間中，能夠以目視確認香魚之體表產生白濁的情況，判斷該香魚為冷水病感染者。將此目視確認於各試驗區進行，並計數於飼育期間中感染了冷水病之香魚的個體數。將結果顯示於表2。又，在表2中，相對於聚果糖之總量，寡聚聚果糖(分子量1000以下之聚果糖)的含有量，係由聚果糖與胜肽(或蛋白質)之比例及上述分子量分佈的測定結果所算出者。
如表2中所示，針對藉由進行分子量調整步驟而 使寡聚聚果糖之含有量相對於聚果糖總量成為適合之範圍的實施例1，沒有看到感染冷水病的香魚。另一方面，針對不進行分子量調整步驟的比較例1，由於寡聚聚果糖的含有量少，8隻的香魚感染了冷水病。又，針對沒有混合免疫賦活劑之比較例2，27隻的香魚感染了冷水病。由此結果可以得知，藉由本發明，可以製造能夠提升動物之免疫力的動物用免疫賦活劑。
[產業上之利用可能性]
本發明之動物用免疫賦活劑的製造方法，適合作為，例如在畜產業、水產業等，為了提升飼育動物之免疫力的免疫賦活劑的製造方法為佳。又，本發明之動物用免疫賦活劑與動物用飼料適用於，例如在畜產業、水產業等，為了提升飼育動物之免疫力的飼料。

Claims (20)

  1. 一種動物用免疫賦活劑的製造方法，包括：在包含碳源與氮源的培養基中，在超過25℃且35℃以下培養多黏芽孢桿菌( Bacillus polymyxa)的發酵前期步驟；將在前述發酵前期步驟中獲得的培養物於25℃以下保存30日以上的發酵後期步驟；以及藉由在前述發酵後期步驟後的培養物中添加有機酸，來調整經由前述多黏芽孢桿菌所產生之多醣類及蛋白質的分子量的分子量調整步驟。
  2. 如申請專利範圍第1項所述之動物用免疫賦活劑的製造方法，其中在前述分子量調整步驟，藉由在前述培養物中添加有機酸使前述培養物的pH為5.0以下。
  3. 如申請專利範圍第1或2項所述之動物用免疫賦活劑的製造方法，其中前述培養基更包含維生素、礦物質或其組合。
  4. 如申請專利範圍第1至3項之任一項所述之動物用免疫賦活劑的製造方法，其中前述分子量調整步驟後之培養物包含分子量1000以下的低分子多醣類，且相對於前述培養物中之多醣類總量，前述低分子多醣類的含有量為80質量%以上。
  5. 如申請專利範圍第4項所述之動物用免疫賦活劑的製造方法，其中在前述分子量調整步驟後，相對於前述培養物中之多醣類總量，前述低分子多醣類的含有量為99質量%以下。
  6. 如申請專利範圍第4或5項所述之動物用免疫賦活劑的製造方法，其中前述低分子多醣類為分子量1000以下之聚果糖(levan)。
  7. 如申請專利範圍第1至6項之任一項所述之動物用免疫賦活劑的製造方法，其中前述有機酸為檸檬酸。
  8. 如申請專利範圍第1至7項之任一項所述之動物用免疫賦活劑的製造方法，其中在前述發酵後期步驟中，前述培養物的保存期間為100日以下。
  9. 如申請專利範圍第1至8項之任一項所述之動物用免疫賦活劑的製造方法，其中在前述發酵後期步驟中，將前述培養物保存於6℃以上。
  10. 如申請專利範圍第1至9項之任一項所述之動物用免疫賦活劑的製造方法，其中前述碳源包含醣類。
  11. 如申請專利範圍第10項所述之動物用免疫賦活劑的製造方法，其中前述醣類為雙糖類。
  12. 如申請專利範圍第11項所述之動物用免疫賦活劑的製造方法，其中前述雙糖類為蔗糖。
  13. 如申請專利範圍第1至12項之任一項所述之動物用免疫賦活劑的製造方法，其中前述氮源包含酵母萃取物。
  14. 一種動物用免疫賦活劑，為包含多醣類與胜肽之動物用免疫賦活劑，其特徵在於：包含作為前述多醣類之分子量1000以下的低分子多醣類，且相對於前述多醣類總量，前述低分子多醣類的含有量為80 質量%以上。
  15. 如申請專利範圍第14項所述之動物用免疫賦活劑，其中相對於前述多醣類總量，前述低分子多醣類的含有量為99質量%以下。
  16. 如申請專利範圍第14或15項所述之動物用免疫賦活劑，其中相對於前述多醣類100質量部，前述胜肽的含有量為1質量部以上20質量部以下。
  17. 如申請專利範圍第14至16項之任一項所述之動物用免疫賦活劑，其中前述低分子多醣類為分子量1000以下之聚果糖。
  18. 如申請專利範圍第14至17項之任一項所述之動物用免疫賦活劑，係為魚貝類用之免疫賦活劑。
  19. 如申請專利範圍第18項之所述之動物用免疫賦活劑，其中前述魚貝類為香魚、鮪魚類、鮭魚類、鰻魚類、河豚類、青甘鰺、紅甘鰺、真鯛或其組合。
  20. 一種動物用飼料，其調配有如申請專利範圍第14至19項之任一項所述之動物用免疫賦活劑。
TW106129501A 2016-09-12 2017-08-30 動物用免疫賦活劑的製造方法、動物用免疫賦活劑及動物用飼料 TW201823468A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/JP2016/076798 WO2018047338A1 (ja) 2016-09-12 2016-09-12 動物用免疫賦活剤の製造方法、動物用免疫賦活剤及び動物用飼料
??PCT/JP2016/076798 2016-09-12

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW201823468A true TW201823468A (zh) 2018-07-01

Family

ID=61562376

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW106129501A TW201823468A (zh) 2016-09-12 2017-08-30 動物用免疫賦活劑的製造方法、動物用免疫賦活劑及動物用飼料

Country Status (3)

Country Link
KR (1) KR20190053815A (zh)
TW (1) TW201823468A (zh)
WO (1) WO2018047338A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112425692A (zh) * 2020-12-28 2021-03-02 苏州科宁多元醇有限公司 左聚糖作为饲料添加剂的应用

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113729109B (zh) * 2021-07-20 2023-04-28 华南农业大学 一种富含抗菌物质的发酵饲料及其制备方法
KR20240049724A (ko) * 2022-10-07 2024-04-17 농업회사법인 주식회사 배려이노베이션 신규 산화질소 공여전달체 및 그의 용도

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4052534B2 (ja) * 1997-11-27 2008-02-27 コーア株式会社 魚介類用薬剤及び飼料
KR100440357B1 (ko) * 2001-10-25 2004-07-15 주식회사 바이오랜드 세포증식 및 피부 보습에 의한 탄력 증강 효능을 갖는레반 추출물을 함유한 화장료 조성물
JP2006298783A (ja) * 2005-04-18 2006-11-02 Nisshin Sugar Mfg Co Ltd 免疫賦活組成物
JP5044261B2 (ja) 2007-04-09 2012-10-10 茂 中野 動物用飼料
JP2011024453A (ja) * 2009-07-23 2011-02-10 Mitsubishi Rayon Co Ltd 多糖類の製造方法
JP2015172019A (ja) 2014-03-12 2015-10-01 株式会社鎌田工業 魚介類用の免疫賦活剤

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112425692A (zh) * 2020-12-28 2021-03-02 苏州科宁多元醇有限公司 左聚糖作为饲料添加剂的应用

Also Published As

Publication number Publication date
WO2018047338A1 (ja) 2018-03-15
KR20190053815A (ko) 2019-05-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TW201823468A (zh) 動物用免疫賦活劑的製造方法、動物用免疫賦活劑及動物用飼料
CN103432158B (zh) 一种防治猪腹泻的多糖复合剂及用途
CN106417989A (zh) 用于水产动物饲料的益生菌组合物及其制备方法与应用
US8097288B1 (en) Composition and method for providing nutritional immunology for production animals
JP2013066399A (ja) 魚介類の免疫賦活方法、魚介類の飼育方法
KR100857771B1 (ko) 바실러스 폴리퍼멘티쿠스, 바실러스 리케니포르미스 및사카로마이세스 세르비지에를 포함하는 어류사료첨가용조성물
JP5128020B2 (ja) 海洋由来のＢａｃｉｌｌｕｓｂａｒｂａｒｉｃｕｓＳＣＳＩＯ０２４２９及びこれを用いたイカオリゴペプチドの調製方法
KR102541470B1 (ko) 버섯 유래 키토산을 이용한 가축 및 반려동물용 음수첨가제 및 이의 제조방법
KR100435981B1 (ko) 자연 면역력 및 성장촉진 작용을 가지는 버섯 첨가 유산균발효유 함유 뱀장어 양식 사료 첨가제 및 이를 포함하는뱀장어 양식 사료
JP4498924B2 (ja) ラクトバシラス・カゼイ亜種カゼイ増殖促進用組成物
JP2009292785A (ja) 免疫調節剤およびそれを含む抗アレルギー剤
KR20180122380A (ko) 피칼리박테리움속 세균증식제
JPH06181656A (ja) 魚類・甲殻類のウイルス病予防治療剤及び飼料
JP2526733B2 (ja) 魚類、甲殻類の細菌病予防治療剤
CN109982575A (zh) 饲料及其制造方法
RU2725801C1 (ru) Способ повышения эффективности выращивания молоди осетровых рыб
CN109675024B (zh) 一种草鱼细菌性败血症及赤皮病联合疫苗及其制备方法
CN102987501A (zh) 用蛹虫草、茧提取物制备保健食(疗)品之营养（液）饮料及冲剂的方法
EP1133991A1 (en) Bacteriostatic compositions for salmonellae
JP4294326B2 (ja) 魚介類の感染予防及び／又は治療剤
WO2021230252A1 (ja) 魚介類の免疫を賦活させる組成物及びその方法
KR102581570B1 (ko) 신규 바실러스 벨레젠시스 균주를 포함하는 면역증강용 조성물
JPWO2004084922A1 (ja) 魚介類用感染防御剤
Perdana et al. Effect of adding β-glucan in feed on the growth rate of White Snapper (Lates calcarifer) fingerling
JPH06263649A (ja) 免疫賦活剤