TW201030011A

TW201030011A - Imidazothiazole derivatives bearing the proline ring structure

Info

Publication number: TW201030011A
Application number: TW099101006A
Authority: TW
Inventors: Kouichi Uoto; Yuuichi Sugimoto; Hiroyuki Naito; Masaki Miyazaki; Keisuke Yoshida; Masashi Aonuma
Original assignee: Daiichi Sankyo Co Ltd
Priority date: 2009-01-16
Filing date: 2010-01-15
Publication date: 2010-08-16
Also published as: EP2380892A4; BRPI1007334A2; KR20110119641A; SMT201400082B; WO2010082612A1; US20110301176A1; US20130172362A1; EP2380892A1; ZA201105132B; SI2380892T1; IL214117A0; ES2463820T3; EP2380892B1; SG173028A1; CN102356085A; HRP20140409T1; DK2380892T3; CA2750009A1; PT2380892E; PL2380892T3

Description

201030011 六、發明說明：【發明所屬之技術領域】本發明係關於具有經由Mdm2 (鼠雙微基因2 ( murine double minute 2))阻礙而具有抗腫瘤活性之具有脯胺酸環構造之化合物或其鹽。【先前技術】已知p53爲抑制細胞癌化的重要因子之1。P53爲對於各種壓力反應而誘導參與細胞周期或細胞之細胞凋亡的基因表現的轉錄因子。p53被認爲經由其轉錄調節機能而抑制 @ 細胞之癌化，實際上，已觀察到約半數人類的癌症爲p5 3基因之欠缺或變異。另一方面，作爲儘管p5 3爲正常但仍癌化的細胞之癌化之要因之1，已知爲E3泛素連接酶（E3 ubiquitin ligase ) 之 1 種的 Mdm2 (鼠雙微基因 2 ( murine double minute 2)) 之過度表現。Mdm2爲經由p53而被誘導表現的蛋白質。

Mdm2於結合p53之轉錄活性功能域（domain)而使p53之轉錄活性降低的同時，將P53排出核外，再者，經由對於p53 Q 的泛素化連接酶的作用媒介p53之分解，而負向控制p5 3。因此，於Mdm2過度表現的細胞，會促進P53機能之不活化及分解，被認爲會引起癌化（非專利文獻1 )。著眼於此等Mdm2之機能，將經由Mdm2而阻礙p53之機能抑制的物質作爲抗腫瘤劑之候補的途徑已成爲多數。作爲將Mdm2與p5 3之結合部位作爲標的的Mdm2阻礙劑，已報告於鹵苯中2個位置經取代的咪唑啉衍生物（例如，參照非專利文獻1、2及專利文獻1〜8 )、於鹵苯中2個位置經取 -4- 201030011 代的咪唑并噻唑衍生物（參照專利文獻9)等，但關於此等化合物，實際上尙未於臨床上獲得有效性的報告。先前技術文獻專利文獻 ’ 專利文獻1國際公開第2003/5 1 3 59號小冊專利文獻2國際公開第2003/5 1 360號小冊專利文獻3國際公開第2005/3 097號小冊專利文獻4國際公開第2005/2 575號小冊 ❹ 專利文獻5國際公開第2005/110996號小冊專利文獻6國際公開第2005/12369 1號小冊專利文獻7國際公開第2007/63 0 1 3號小冊專利文獻8國際公開第2008/1 25487號小冊專利文獻9國際公開第2008/0 72655號小冊非專利文獻非專利文獻 1 Science，2004 > 303，844-848 非專利文獻 2 Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 2 0 0 6, 1 03, 1888-1893 【發明內容】發明槪要發明欲解決的課題本發明係提供新穎的Mdm2阻礙化合物。又，本發明爲提供含有該Mdm2阻礙化合物的抗腫瘤劑。用以解決課題之手段本發明者們專心檢討的結果，發現具有下述一般式（1) 201030011 所代表之構造的化合物或其鹽具有強的Mdm2阻礙活性，遂而完成本發明。即，本發明爲： [1] —種一般式（1)所代表之化合物或其鹽，

[式（1 )中， ◎ ΑΓ1表示可具有選自鹵素原子、氰基及烷基的1 或複數個取代基的苯基，

Ar2表示可具有選自鹵素原子、烷基及氰基的1 或複數個取代基的苯基：或可具有選自鹵素原子、烷基及氰基的1或複數個取代基的吡啶基， R1表示可具有選自鹵素原子、羥基、CrCe烷氧基、胺甲醯基、胺基、C^C 6烷醯基及氰基的1或複數個取代基的匕〜匕烷基；可具有選自鹵素原子、羥基、（^〜(：6烷氧基、 © 胺甲醯基、胺基及氰基的1或複數個取代基的烷醯基；氫原子；或羥基， R2及R3各自獨立表示爲可具有選自鹵素原子、羥基、烷氧基、胺甲醯基、胺基、（^~(：6烷醯基及氰基的1 或複數個取代基的烷基、羧基或氫原子，或者，R2 與R3可一起形成側氧基，又，R2及R3可與各自結合的碳原子一起形成螺型或縮合型之3~5員之飽和烴環， R4表示可具有選自鹵素原子、羥基、Cl〜C6烷氧基、胺 201030011 甲醯基、胺基、Ci〜C 6烷醯基及氰基的1或複數個取代基的 c 1〜C6院基， R5表示可具有選自鹵素原子、羥基、烷氧基、胺甲酿基、fl女基、Ci~C6院酶基及氰基的1或複數個取代基的 c 1〜院基， R6表示鹵素原子或氫原子， R7表示鹵素原子]。 [2]—種一般式（2)所代表之化合物或其鹽，

[式（2)中， R1表示可具有選自鹵素原子、羥基、Cl~C6烷氧基、胺甲醯基、胺基、Ci-Ce烷醯基及氰基的1或複數個取代基的匕~(：6烷基；可具有選自鹵素原子、羥基、Cl〜C6烷氧基、 ® 胺甲醯基、胺基及氰基的1或複數個取代基的Ci-C 6烷醯基；氫原子；或羥基， R2及R3各自獨立表示爲可具有選自鹵素原子、·羥基、 CrCe烷氧基、胺甲醯基、胺基、山~(：6烷醯基及氰基的1 或複數個取代基的CrQ烷基、羧基或氫原子，或者，R2 與R3可一起形成側氧基，又，R2及R3可與各自結合的碳原子一起形成螺型或縮合型之3〜5員之飽和烴環， R4表示可具有選自鹵素原子、羥基、CrCe烷氧基、胺甲醯基、胺基、醯基及氰基的1或複數個取代基的 201030011

CrCe烷基， R5表示可具有選自鹵素原子、羥基、Cl~C6烷氧基、胺甲醯基、胺基、（^〜(^烷醯基及氰基的1或複數個取代基的 Ci〜C6烷基， R6表不鹵素原子或氫原子， R7表示鹵素原子]。 [3] 如[1]或[2]項中記載之化合物或其鹽，其中R1爲 C^C：6烷基、可經1或複數個鹵素原子取代的Cl〜C6烷醯基或氫原子。 [4] 如[1]〜[3]項中任一項記載之化合物或其鹽，其中R4 爲c 1〜C 6院基。 [5] 如[1]~[4]項中任一項記載之化合物或其鹽，其中R5 爲Ci〜Ce院基。 [6] —種下述式所代表之化合物，

[7]—種下述式所代表之化合物，

[8]一種下述式所代表之化合物 201030011

[9] 一種下述式所代表之化合物

[11] 一種Mdm2阻礙劑，其含有[1]〜[10]中任一項記載之化合物或其鹽。 [12] —種p53與Mdm2之結合阻礙劑’其含有中任一項記載之化合物或其鹽。 [13] —種醫藥，其以中任一項記載之化合物或其鹽作爲有效成分。 [14] —種醫藥組成物，其含有中任—項記載之化合物或其鹽及藥學上可容許的載體。 [15] —種[1]〜[10]中任一項記載之化合物或其鹽用於醫藥製造之用途。 [16] —種抗癌劑，其以Π]〜[10]中任一項記載之化合物 201030011 或其鹽作爲有效成分。 [17] —種癌症之治療方法，其特徵爲投與[1]〜[10]中任一項記載之化合物或其鹽。 [18] 如[16]中記載之抗癌劑，其中癌症爲選自肺癌、乳癌、前列腺癌、大腸癌、急性骨髓性白血病、惡性淋巴瘤、視網膜芽細胞瘤、神經芽細胞瘤及肉瘤任一者。 [19] 如[17]中記載之癌症之治療方法，其中癌症爲選自肺癌、乳癌、前列腺癌、大腸癌、急性骨髓性白血病、惡性淋巴瘤、視網膜芽細胞瘤、神經芽細胞瘤及肉瘤任一者。 © 發明之效果依據本發明，提供具有Mdm2阻礙活性的上述式（1 ) 所代表之新穎咪唑并噻唑衍生物。此等新穎化合物有用於作爲抗腫瘤劑。【實施方式】用以實施發明形態於本發明’所謂「Mdm2」係指經由鼠雙微基因2( murine double minute 2)基因編碼的蛋白質。「Mdm2」包含經由完 Ο 全長度之Mdm2基因編碼的Mdm2蛋白質或經由Mdm2基因變異體（包含缺損變異體、取代變異體或附加變異體）編碼的Mdm2蛋白質等。於本發明’所謂r Mdm2」亦包含來自各種動物種的同系物，例如，人類Mdm2同系物（HDM2 )。於本發明，所謂「p53」係指經由P53基因編碼的蛋白質。所謂「P53」係指經由完全長度之p53基因所編碼的p53 蛋白質或具有變異（包含經由缺損、取代、附加的變異）但爲正常機能的p53蛋白質。 10 - 201030011 於本發明，所謂「Mdm2阻礙劑」係指對Mdm2及p53 任一者作用，或對p53及Mdm2雙方作用，而經由Mdm2被抑制使P53之機能回復的因子。所謂p53之機能，只要爲正常P53本來具有的機能即可，並未特別限定，例如，可列舉誘導參與細胞周期或細胞之細胞凋亡的基因之表現而抑制細胞之癌化者。作爲Mdm2阻礙劑，例如，可列舉阻礙Mdm2 結合於p53的因子（以下，稱爲P53與Mdm2之結合阻礙劑）或阻礙經由Mdm2使p53泛素化的因子（以下，稱爲Mdm2 φ 泛素連接酶阻礙劑）。於本發明，所謂「p53轉錄活性抑制之阻礙劑」，係指使經由Mdm2被抑制的P53之轉錄因子之機能回復的因子。於本發明，所謂「p5 3分解之阻礙劑」係指經由阻礙經 Mdm2的p53之泛素化，阻礙於P53之蛋白酶體（proteasome) 的分解的因子。於本發明’用語「腫瘤」及「癌」可交換使用。又，於本發明，將腫瘤、惡性腫瘤、癌、惡性新生物、癌腫、肉瘤 ® 等總稱’而有以「腫瘤」或「癌」表現的場合。於本發明，所謂「C^C：6烷基」係指碳數1〜6之直鏈、分枝鏈或環狀之烷基。作爲「C !〜C 6烷基」，例如，可列舉甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基、丁基、第三丁基、環丁基、環戊基、或環己基等。所謂「CrC6烷氧基」意指具有碳數1〜6之直鏈、分枝鏈或環狀之烷基的烷氧基。作爲「Cl~C6烷氧基」，例如，可列舉甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、或環戊 -11- 201030011 氧基等。所謂「CrCi烷醯基」意指具有碳數1〜6之直鏈、分枝鏈或環狀之烷基的烷醯基。作爲「C^C6烷醯基」，例如，可列舉甲醯基、乙醯基、丙醯基、或甲基丙醯基等。作爲「鹵素原子」，可列舉氟原子、氯原子、溴原子、碘原子等。所謂「側氧基」’只要未特別提及，意指「=〇」所表示之基。

以下，說明式（1 )中之各取代基。下述一般式（1 )中，

(1)

R表示可具有選自鹵素原子、羥基、Cl〜c6烷氧基、胺甲醯基、胺基、烷醯基及氰基的1或複數個取代基的 Ci~C6烷基；可具有選自鹵素原子、羥基、氧基、胺甲_基、胺基及氰基的丨或複數個取代基的Cl〜c6烷醯基、氫原子、或羥基。其中’「可具有1或複數個取代基的Cl〜C6烷基」及「可具有1或複數個取代基的€1〜(：6烷醯基」中的取代基以0〜3 個爲較佳’作爲取代基，以鹵素原子、羥基、氧基、胺甲釀基、胺基、Cl〜c6烷醯基、或氰基爲較佳。鹵素原子、經基或C^C：6院氧基爲更佳。 -12- .201030011 作爲「可具有1或複數個取代基的C^Ce烷基」，以無取代或具有1或複數個之作爲取代基之鹵素原子、羥基或烷氧基的Cl~C6烷基爲更佳，以無取代或具有u個之氟原子作爲取代基的烷基爲更佳。作爲「可具有1或複數個取代基的Ci-Ce烷醯基」，以無取代或具有1〜3個之鹵素原子作爲取代基的CrQ烷醯基爲較佳、甲醯基、乙醯基、三氟甲基羰基爲特佳。作爲R1，以無取代或鹵素原子取代的Ci-Ce烷基、無取 G 代或鹵素原子取代的CrCe烷醯基或氫原子爲較佳。 R2及R3各自獨立表示爲可具有選自鹵素原子、羥基、 CrG烷氧基、胺甲醯基、胺基、醯基及氰基的1 或複數個取代基的烷基、羧基或氫原子，或者，R2 與R3可一起形成側氧基，又，R2及R3可與各自結合的碳原子一起形成螺型或縮合型之3〜5員之飽和烴環。其中，「可具有1或複數個取代基的Cl~C6烷基」與R1 之定義相同，較佳例示亦相同。 ® R2及R3同時爲羧基，或者，R2及R3之任一者爲羧基的場合，羧基經酯化或醯胺化的化合物亦被包含於本發明之範圍。例如，可列舉其羧基經乙基酯化、苯基酯化、羧基甲基酯化、二甲基胺基甲基酯化、三甲基乙醯氧基甲基酯化、乙氧基羰基氧基乙基酯化、醯胺化或甲基醯胺化的化合物等作爲其例。所謂「R2及R3可與各自結合的碳原子一起形成螺型或縮合型之3〜5員之飽和烴環」係指R2與R3爲結合於相同碳原子的取代基的場合，R2及R3可結合而形成螺型之3〜5員 -13- 201030011 之飽和烴環，R2及R3結合於相異碳原子上的場合，112及R3 可結合而形成縮合型之3〜5員之飽和烴環者。所謂「3〜5貴之飽和烴環」，可列舉環丙烷環、環丁烷環、環戊烷環等。作爲R2及R3，各自獨立爲氫原子、可具有取代基的烷基或羧基爲較佳，作爲於CrCU烷基取代的取代基，以氟原子或羥基爲較佳，R2及R3各自爲氫原子，或R2 及R3之任一者爲氫原子，另一者爲甲基或乙基，或者，結合於相同碳原子的C^C 6烷基的R2及R3，與此等結合的碳原子一起形成螺型之3 ~4員之飽和烴環爲更佳。112及R3同時爲哌畊環上之第6位的取代基爲較佳。 R4表示可具有1或複數個取代基的Cl〜C6烷基。其中，「可具有1或複數個取代基的Cl〜C6烷基」與上述R1之定義相同。作爲R4,以無取代之烷基爲較佳，無取代之Cl〜C3 烷基爲更佳，異丙基爲更佳。 R5表示可具有1或複數個取代基的Cl~C6烷基。其中，「可具有1或複數個取代基的Cl〜C6烷基」與上述R1之定義相同。作爲R5’以無取代之烷基爲較佳，無取代之Cl~C3 烷基爲更佳，甲基或乙基爲更佳。 R6表示齒素原子或氫原子。作爲R6，以氟原子、氯原子、溴原子、或氫原子爲較佳，氟原子或氫原子爲更佳。 R7表示鹵素原子。作爲R7，以氟原子、氯原子、或溴原子爲較佳，氟原子爲更佳。

Ar!表示可具有1或複數個取代基的苯基。Ari具有1〜3 .201030011 個以烷基、氰基或鹵素原子作爲取代基的苯基爲較佳’具有1〜3個以鹵素原子作爲取代基的苯基爲更佳。取代基之位置可爲任一者，較佳爲4-氯苯基、3-氟-4-氯苯基。

Ar2表示可具有1或複數個取代基的苯基或可具有1或複數個取代基的吡啶基。Ar2爲具有1〜3個鹵素原子、烷基、或氰基作爲取代基的苯基，或具有1〜3個鹵素原子、烷基或氰基作爲取代基的吡啶基爲較佳。取代基之位置可爲任一者，更佳爲4-氯苯基或6-氯吡啶-3-基。〇 Ari與Ar2之咪唑并噻唑骨格之絶對構形，各自以5R、 6S爲較佳》 2)所示的化合物爲較佳

再者，本發明之式（1)所代表之化合物，爲下述一般式 CI ⑵

cK ® 又，其中，尺1、112、113、114、115、116及117之定義，其例示、較佳例與上述一般式（1)所述相同。再者，本發明之化合物，較佳爲選自下述群之1的化合物： -15- 201030011

本發明之式（1)所代表之化合物亦存有立體異構物或 © 來自不對稱碳原子的光學異構物，此等之立體異構物、光學異構物及此等之混合物任一者亦包含於本發明。於本發明之1個實施形態，以具有式（3 )所代表之絕對構形的化合物爲較佳：

(式中，An、Ar2、RLR7與上述同意義）。再者’ 一般式（1)之化合物較佳爲實施例任一者及/或後述表1〜12所記載的化合物、其鹽或此等之水合物。本發明之一般式（1)所代表之化合物於具有胺基等之驗性基的場合’依所欲可作成醫藥上可容許的鹽。作爲此等鹽’例如可列舉鹽酸鹽、氫碘酸鹽等之鹵化氫酸鹽；硝酸鹽、過氯酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽等之無機酸鹽；甲烷磺酸鹽、三 -16- 201030011 氟甲烷磺酸鹽、乙烷磺酸鹽等之低級烷磺酸鹽；苯磺酸鹽、 P-甲苯磺酸鹽等之芳基磺酸鹽；甲酸、乙酸、蘋果酸、反丁烯二酸鹽、丁二酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、草酸鹽、順丁烯二酸鹽等之有機酸鹽；及鳥胺酸鹽、麩胺酸鹽、天冬胺酸鹽等之胺基酸鹽；以鹵化氫酸鹽及有機酸鹽爲較佳。本發明之一般式（1)所代表之化合物於具有羧基等酸性基的場合，一般而言可形成鹼加成鹽。作爲醫藥上可容許的鹽，例如，可列舉鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽等之鹼金屬鹽；鈣鹽、〇鎂鹽等之鹼土類金屬鹽；銨鹽等之無機鹽；二苄基胺鹽、嗎福啉鹽、苯基甘胺酸烷基酯鹽、乙二胺鹽' N-甲基葡萄糖胺鹽、二乙基胺鹽、三乙基胺鹽、環己基胺鹽、二環己基胺鹽、 N，N’ -二苄基乙二胺鹽、二乙醇胺鹽、N-苄基- N-( 2-苯基乙氧基）胺鹽、哌阱鹽、四甲基銨鹽、參（羥基甲基）胺基甲烷鹽等之有機胺鹽等。本發明之一般式（1)所代表之化合物或其鹽亦存有游離體或溶劑合物。經由吸收空氣中之水分等，亦存有水合 ® 物。作爲溶劑合物，只要爲醫藥上可容許者即可，並未特別限定，具體而言，以水合物、乙醇合物等爲較佳。又，一般式（1)所代表之本發明化合物中存有氮原子的場合，可成爲N-氧化物體，此等溶劑合物及N-氧化物體亦包含於本發明之範疇。本發明之一般式（1)所代表之化合物，依據取代基的種類或組合，可存有順式體、反式體等之幾何異構物、互變異構物或d體、1體等之光學異構物等之各種異構物，本發明之化合物，於未特別限定的場合，亦包含此等全部異構 -17- 201030011 物、立體異構物及任一比率的此等異構物及立體異構物混合物。本發明之一般式（1)所代表之化合物，亦包含於構成的原子之一個或複數個爲非天然比率之原子同位素。作爲原子同位素，例如，可列舉氘（2H)、氚（3H)、碘-125、（ 1251) 或碳-14 ( 14C )等。此等化合物有用於作爲治療或預防劑、硏究試藥，例如，分析試藥及診斷劑，例如，活體內影像診斷劑。一般式（1)所代表之化合物之全部同位素變種，不論是否有放射性，皆包含於本發明之範疇.內。又，本發明爲於活體內之生理條件下經由酵素或胃酸等反應而變換成本發明之醫藥組成物之有效成分的化合物（1) 的化合物，即，產生酵素性氧化、還原、水解等而變成化合物（1)的化合物或經由胃酸等產生水解等而變成化合物（1) 的「醫藥上可容許的前藥化合物」亦包含於本發明。作爲上述前藥，於化合物（1)中存有胺基的場合，可列舉此胺基經醯基化、烷基化、磷酸化的化合物（例如，此胺基經二十醯基化、丙胺醯基化、戊基胺基羰基化、（5 -甲基-2-側氧基-1，3-二氧戊環-4-基）甲氧基羰基化、四氫呋喃基化、吡咯烷基甲基化、三甲基乙醯基氧基甲基化、第三丁基化的化合物等）等，於化合物（1)中存有羥基的場合，可列舉此羥基經醯基化、烷基化、磷酸化、硼酸化的化合物 (例如，此羥基經乙醯基化、棕櫚醯基化、丙醯基化、三甲基乙醯基化、琥珀醯基化、反丁烯二醯基化、丙胺醯基化、二甲基胺基甲基羰基化的化合物等）等。又，於化合物（I) 存有羧基的場合，可列舉此羧基經酯化、醯胺化的化合物（例 201030011 如，此羧基經乙基酯化、苯基酯化、羧基甲基酯化、二甲基胺基甲基酯化、三甲基乙醯基氧基甲基酯化、乙氧基羰基氧基乙基酯化、醯胺化或甲基醯胺化的化合物等）等。本發明之化合物之前藥依據公知方法可自化合物（1) 製造。又，本發明之化合物之前藥，亦包含如記載於廣川書店1 990年刊「醫藥品之開發」第7卷分子設計163頁〜198 頁，於生理條件下變化爲化合物（1 )者。作爲本發明之一般式（1 )所代表之化合物之具體例，〇例如，可列舉下述之化合物表1〜1 2所記載之化合物。此等化合物可依據下述之[製造法1〜4]或實施例所記載之方法合成。表中之 R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、ΑΓι 及 Ar2 意指下述一般式（la)所示

的基。 (la) ❹ -19- 201030011

No. Rl R2 R3 R4 R5 R6 R7 Ari Ar2 1 H H H CH(CH3)2 ch3 H F 2 H ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F F *-^^-Cl 3 H ch3 ch3 CH(CH3)2 ch3 H F 4 H ch2ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F F *-<〇>-CI 5 H CH(CH3)2 H CH(CH3)2 ch3 H F 6 H ch2ch(ch3)2 H CH(CH3)2 ch3 H F F 7 H ch2oh H ch(ch3)2 ch3 H F 8 H co2h H CH(CH3)2 ch3 H F *-<〇>-CI 9 H ch2f H CH(CH3)2 ch3 H F C^-01 10 H chf2 H ch(ch3)2 ch3 H F *^C5^ci 11 H 環丙基 ch(ch3)2 ch3 H F F *_hC^>_ci 12 H 環丁基 CH(CH3)2 ch3 H F F 13 ch3 Η H CH(CH3)2 ch3 H F F 14 ch3 ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F *~C~^~ci 15 ch3 ch3 ch3 CH(CH3)2 ch3 H F C~^~ci -20- 201030011 【表2】

No. Ri R2 R3 R4 R5 R6 R7 Ari Ar2 16 ch3 CH2CH3 H CH(CH3)2 ch3 H F C^~ci 17 ch3 CH(CH3)2 H CH(CH3)2 ch3 H F 18 ch3 ch2ch(ch3)2 H CH(CH3)2 ch3 H F F C3~cl 19 ch3 ch2f H CH(CH3)2 ch3 H F F 20 ch3 chf2 H CH(CH3)2 ch3 H F 〇~ci 21 ch3 環丙基 CH(CH3)2 ch3 H F F 22 ch3 環丁基 CH(CH3)2 ch3 H F C^~ci *~C^-01 23 CH2CH2OH ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F 24 CHO ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F *-<〇>-CI 25 CHO ch2ch3 H ch(ch3)2 ch3 H F F 26 COCH3 ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F *~C^-01 27 COCH3 ch2ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F F C^~ci 28 COCF3 ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F C^~ci 29 COCF3 ch2ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F F 30 H H H CH(CH3)2 ch3 F F -21 - 201030011

No. R1 R2 R3 R4 R5 R6 R7 An Ar2 31 H ch3 H CH(CH3)2 ch3 F F 32 H ch3 ch3 CH(CH3)2 ch3 F F F *~<C^~ci 33 H ch2ch3 H CH(CH3)2 ch3 F F 34 H CH(CH3)2 H CH(CH3)2 ch3 F F *'hC3~ci 35 H CH2CH(CH3)2 H CH(CH3)2 ch3 F F F *-<〇>-ci 36 H ch2oh H CH(CH3)2 ch3 F F *_hCD>~ci 37 H co2h H CH(CH3)2 ch3 F F 38 H ch2f H CH(CH3)2 ch3 F F F 39 H chf2 H CH(CH3)2 ch3 F F *-<C^_ci 40 H 環丙基 CH(CH3)2 ch3 F F F CZ^-01 41 H 環丁基 CH(CH3)2 ch3 F F F *~C^~ci 42 ch3 Η H CH(CH3)2 ch3 F F *~<C^-ci 43 ch3 ch3 H CH(CH3)2 ch3 F F 44 ch3 ch3 CH3 CH(CH3)2 CHj F F F c^~ci 45 ch3 CH2CH3 H CH(CH3)2 ch3 F F F -22- 201030011 【表4】

No. R1 R2 R3 R4 R5 R6 R7 Ari Ar2 46 ch3 CH(CH3)2 H CH(CH3)2 ch3 F F F 47 ch3 CH2CH(CH3)2 H CH(CH3)2 ch3 F F *-ζ^-CI 48 ch3 ch2f H CH(CH3)2 ch3 F F *~ 49 ch3 chf2 H ch(ch3>2 CHj F F F *~ 50 ch3 環丙基 CH(CH3)2 CHj F F F F 51 ch3 環丁基 CH(CH3)2 ch3 F F F F 52 ch2ch2oh ch3 H CH(CH3)2 ch3 F F F 53 CHO ch3 H CH(CH3)2 CHj F F F 54 CHO CH2CH3 H CH(CH3)2 ch3 F F 55 COCH3 ch3 H CH(CH3)2 ch3 F F *~ 56 COCH3 CH2CH3 H CH(CH3)2 ch3 F F *~ 57 COCF3 ch3 H ch(ch3)2 ch3 F F 58 cocf3 ch2ch3 H CH(CH3)2 ch3 F F *-ζ^-CI 59 H H H CH(CH3)2 ch3 H F F 60 H ch3 H CH(CH3>2 ch3 H F *-CZ^~ci *^Chcl -23- 201030011

No. Ri R2 R3 R4 R5 R6 R7 Ari Ar2 61 H ch3 ch3 CH(CH3)2 ch3 H F **-ci 62 H CH2CH3 H CH(CH3)2 ch3 H F F *C~S~ci 63 H CH(CH3)2 H CH(CH3)2 ch3 H F F 64 H ch2ch(ch3)2 H CH(CH3h ch3 H F F *—(ζ^-CI *^Q^ci 65 H CH2OH H CH(CH3h ch3 H F F 66 H co2h H CH(CH3)2 CH3 H F 67 H ch2f H CH(CH3h CH3 H F F *—CZ^~ci *-Cjhcl 68 H chf2 H CH(CH3)2 ch3 H F *^Q^ci 69 H 環丙基 CH(CH3)2 ch3 H F F F C^~ci 70 H 環丁基 CH(CH3)2 ch3 H F F 71 CH3 Η H CH(CH3)2 ch3 H F F *^Q^C, 72 ch3 ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F F *~ 73 ch3 ch3 CH3 CH(CH3)2 ch3 H F ·~ζΓ^~α *-"Q^ci 74 ch3 CH2CH3 H ch(ch3>2 ch3 H F F 75 CH3 ch(ch3)2 H CH(CH3)2 ch3 H F F C~^~ci *~Q~CI -24- 201030011 【表6】

No. R1 R2 R3 R4 R5 R6 R7 Ar, Ar2 76 ch3 CH2CH(CH3)2 H CH(CH3)2 ch3 H F *^Q^ci 77 ch3 ch2f H CH(CH3)2 ch3 H F *~ 78 ch3 chf2 H CH(CH3)2 ch3 H F 79 ch3 環丙基 CH(CH3)2 CH3 H F F F 80 ch3 環丁基 CH(CH3)2 ch3 H F F F 81 ch2ch2oh ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F F *^Chci 82 CHO ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F F *^Q^CI 83 CHO ch2ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F F *^Q^C, 84 COCH3 ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F *^Q^C| 85 COCH3 CH2CH3 H CH(CH3)2 ch3 H F F 86 COCF3 ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F *-C^~ci 87 cocf3 CH2CH3 H CH(CH3)2 ch3 H F F *^hcl 88 H H H CH(CH3)2 ch3 F F F 89 H ch3 H ch(ch3)2 ch3 F F 90 H ch3 ch3 CH(CH3)2 ch3 F F F *^Q^C| -25- 201030011 【表7】

No. Rl R2 R3 R4 R5 R6 R7 Ar, Ar2 91 Η CH2CH3 H CH(CH3)2 ch3 F F F 92 Η CH(CH3)2 H CHfCH^ ch3 F F F 93 Η CH2CH(CH3)2 H CH(CH3)2 ch3 F F F 94 Η ch2oh H CH(CH3)2 ch3 F F F 95 Η co2h H CH(CH3)2 ch3 F F *^Q^CI 96 Η ch2f H CH(CH3)2 ch3 F F *~<CZ^_ci *^Q^CI 97 Η chf2 H CH(CH3)2 ch3 F F *^Q^CI 98 Η 環丙基 CH(CH3)2 ch3 F F F *~C^~ci 99 Η 環丁基 ch(ch3)2 ch3 F F 100 ch3 Η H CH(CH3)2 ch3 F F 101 ch3 ch3 H CH(CH3)2 CHj F F *~ ^-N 102 ch3 ch3 ch3 ch(ch3)2 ch3 F F C^"c, 103 ch3 ch2ch3 H CH(CH3)2 ch3 F F *^ ^~~Cl 104 ch3 CH(CH3>2 H CH(CH3)2 ch3 F F 105 ch3 CH2CH(CH3)2 H CH(CH3)2 ch3 F F F *—^ ^—Cl ^-N -26- 201030011 【表8】

No. R1 R2 R3 R4 R5 R6 R7 Ar， Ar2 106 CH3 CH2F H CH(CH3)2 ch3 F F F *^Q^C| 107 ch3 chf2 H CH(CH3)2 ch3 F F 108 ch3 環丙基 CH(CH3)2 ch3 F F F F 109 ch3 環丁基 CH(CH3)2 ch3 F F F 110 ch2ch2oh ch3 H ch(ch3)2 ch3 F F *^Q^CI 111 CHO ch3 H CH(CH3)2 ch3 F F 丨 112 CHO ch2ch3 H CH(CH3)2 ch3 F F 113 COCH3 ch3 H CH(CH3)2 ch3 F F F *^Chci 114 COCH3 CH2CH3 H CH(CH3)2 ch3 F F *~<C^>-c, 115 COCF3 ch3 H CH(CH3)2 ch3 F F 116 COCF3 CH2CH3 H ch(ch〇2 ch3 F F *^Q^ci 117 H CH3 H CH(CH3)2 ch3 H F 118 H ch2ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F F 119 H CH(CH3 h H CH(CH3)2 ch3 H F F 120 H ch2f H CH(CH3)2 CHj H F -27- 201030011 【表9】

No. r| R2 R3 R4 R5 R6 R7 Arj Ar2 121 Η chf2 H CH(CH3)2 CHj H F 122 Η 環丙基 CH(CH3)2 ch3 H F F C 丨 123 ch3 ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F 124 ch3 ch2ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F F 125 ch3 CH(CH3)2 H CH(CH3)2 ch3 H F F 126 ch3 ch2f H CH(CH3)2 ch3 H F F 127 ch3 chf2 H CHiCHj^ ch3 H F F Cl ^-N 128 ch3 環丙基 CH(CH3)2 ch3 H F F *~C~~ci 129 H ch3 H CH(CH3)2 ch3 F F F *<ihcl 130 H CH2CH3 H CH(CH3)2 ch3 F F *^hci 131 H CH(CH3)2 H CH(CH3)2 ch3 F F *^hci 132 H ch2f H CH(CH3)2 ch3 F F F 133 H chf2 H CH(CH3)2 ch3 F F F 134 H 環丙基 CH(CH3)2 ch3 F F F *-〇-ci 135 ch3 ch3 H CH(CH3)2 ch3 F F F

-28- 201030011 【表10】

No. R1 R2 R3 R4 R5 R6 R7 Ari Ar2 136 Ctt3 CH2CH3 H CH(CH3)2 ch3 F F F 137 ch3 CH(CH3>2 H CH(CH3)2 ch3 F F 138 ch3 ch2f H CH(CH3)2 ch3 F F 139 ch3 chf2 H CH(CH3)2 ch3 F F 140 ch3 環丙基 CH(CH3)2 ch3 F F F 141 H ch3 H CH(CH3>2 ch3 H F *~〇_cn 142 H CH2CH3 H CH(CH3>2 ch3 H F F *-〇_cn 143 H ch3 H CH(CH3)2 ch3 F F F *-〇_cn 144 H CH2CH3 H CHiCH.h ch3 F F F *~〇_cn 145 H ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F F *~〇~ci 146 H ch2ch3 H ch(ch3)2 ch3 H F F 147 H ch3 H CH(CH3)2 ch3 F F F *~C^_CF3 *^〇~ci 148 H CH2CH3 H CH(CH3)2 ch3 F F F *-<(^>-CF3 149 H ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F F *^^CI 150 H ch2ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F F *-<(^-CF3 -29- 201030011 【表11】

No. R1 R2 R3 R4 R5 R6 R7 Ari Ar2 151 Η ch3 H CH(CH3)2 ch3 F F 152 Η CH2CH3 H CH(CH3)2 ch3 F F F *~·d^~CF3 153 Η ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F F *~〇~cn 154 Η ch2ch3 H CH(CH3)2 ch3 H F F C^"CF3 *^〇~cn 155 Η ch3 H ch(ch3)2 ch3 F F *~〇~cn 156 Η CH2CH3 H CH(CH3)2 ch3 F F F *^〇~cn 157 Η ch3 H CH(CHj)2 ch3 H F F C^CF3 *^hci 158 Η CH2CH3 H CH(CH3)2 ch3 H F F *-<C^_CF3 159 Η ch3 H CH(CHj)2 ch3 F F F *^Q^ci 160 Η ch2ch3 H CH(CH3)2 ch3 F F F -30- 201030011 【表12】

No. Ri R2 R3 R4 R5 R6 R7 Ατι Ar2 161 Η Η Η CH(CH3)2 ch3 H F *-ζ^-CI 162 Η ch3 Η ch(ch3)2 ch3 H F *~{3-01 163 Η ch2ch3 Η CH(CH3)2 ch3 H F α 164 Η Η Η CH(CH3)2 ch3 H F CD*-01 *^Q^ci 165 Η ch3 Η CH(CH3)2 ch3 H F C^~ci 166 Η CH2CH3 Η ch(ch3)2 ch3 H F ci 其次，說明一般式（1 )所代表之化合物之代表性製造法。本發明之化合物可依據各種製造法製造，以下所示的製造法爲一例，但本發明不應限定於此等來解釋。又，反應之際，視必要可以適當保護基進行保護取代基，保護基之種類並未特別限定。

-31- 201030011

[式中，Z意指氯原子或溴原子等之鹵素原子；R11意指羧基之保護基；R12意指胺基之保護基；又，此等之「保護基」，只要爲「保護基」即可，於經過各反應工程之間可爲相同亦可爲相異；An、Ar2、及R1〜R7與前述同意義]。作爲羧基之保護基，可列舉甲基、乙基、第三丁基、苄基等之取代、無取代之烷基或芳烷基。化合物（4 )之合成可經由將具有標記立體配置的光學活性二胺化合物 (3)，與二硫化碳或1，1'-硫羰基二咪唑反應而獲得。其中，反應所使用的溶劑可列舉乙醇、四氫呋喃、二曙烷、乙腈、二甲基甲醯胺、二氯甲烷、氯仿、甲苯等、或此等之混合溶 -32- 201030011 劑，但並未特別限定。反應溫度通常爲-78 °C至100。(：或至溶劑沸點之範圍，但較佳爲室溫附近至100 °C之範圍。化合物（5 )之合成可經由將化合物（4)與化合物（A)反應而獲得。其中，反應所使用的溶劑可列舉乙醇、四氫呋喃、二噚烷、乙腈、二甲基甲醯胺、氯仿、甲苯等、或此等之混合溶劑，但並未特別限定。反應溫度通常爲-7 8 °C至1 〇 0 °C或至溶劑沸點之範圍，但較佳爲室溫附近至100°C之範圍。 ® 化合物（6 )之合成 R·11之脫保護工程。依據R11之種類，脫保護之反應條件不同，但以水解爲宜，R11爲甲基、乙基、苄基等之場合，可經由將化合物（5) 與氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋰、或第三丁醇鉀等之鹼，或與鹽酸、P-甲苯磺酸等處理而獲得。其中，反應所使用的溶劑，可列舉甲醇·、乙醇、水 '四氫呋喃、二噚烷等，或此等之混合溶劑，可與水以任意比率混合的有機溶劑爲較佳。 ® 反應溫度通常爲-78°C至l〇〇°C或至溶劑沸點之範圍，但較佳爲室溫附近至100 °C之範圍。R11爲第三丁基等之場合，將化合物（5)與三氟乙酸或鹽酸等處理爲所欲的。其中，反應所使用的溶劑，可列舉二氯甲烷、氯仿等，或此等之混合溶劑，但並未特別限定。反應溫度通常爲-78°C至l〇〇°C或至溶劑沸點之範圍，但較佳爲-20°C至室溫附近之範圍化合物（7 )之合成可經由將化合物（6)與氯化亞硫醯、氯化草醯、氧氯化磷、卜氯-N,N，2-三甲基-1-丙烯基胺等之酸鹵化試藥反應 -33- 201030011 而獲得。等中，反應所使用的溶劑，可列舉二氯甲烷、氯仿、甲苯等，或此等之混合溶劑，但並未特別限定。或者，可於無溶劑下反應。反應溫度通常爲-78°C至l〇〇°C或至溶劑沸點之範圍，但較佳爲0°C至l〇〇°C之範圍。化合物（8 )之合成可經由使化合物（7)與化合物（B)於鹼存在下反應而獲得。作爲使用的鹼，可列舉三乙基胺、二異丙基乙基胺、 4-二甲基胺基耻啶、N-甲基嗎福啉、吡啶、2,6-二甲基吡啶、二氮雜雙環[5.4.0]十一烷·7-烯等有機驗、或碳酸鉀、碳酸 ❹ 鈉、碳酸氫鈉等之無機鹼。其中，作爲反應所使用的溶劑，可列舉二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、乙酸乙酯、甲苯等、或此等之混合溶劑，並未特別限定，但以經乾燥者爲較佳。反應溫度通常爲-78°C至100t或至溶劑沸點之範圍，但較佳爲 -10 °C至室溫附近之範圍。作爲其他方法，本化合物（8)可經由將化合物（6)與化合物（B)於縮合劑存在下反應而獲得。其中，作爲使用的縮合劑，可列舉Ν,Ν’-二環己基碳化二亞胺、1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基）碳化二亞胺等，作〇爲反應所使用的溶劑，可列舉二氯甲烷、二甲基甲醯胺、四氫呋喃、乙酸乙酯等、或此等之混合溶劑，但並未特別限定。反應溫度通常爲-78°C至100°C或至溶劑沸點之範圍，但較佳爲0°C至50°C之範圍。又，視必要可添加三乙基胺、二異丙基乙基胺、N -甲基嗎福啉、或4 -二甲基胺基吡啶等之鹼。再者’亦可添加1-羥基苯并三唑、N-羥基琥珀醯亞胺等作爲反應促進劑。化合物（9 )之合成 -34- 201030011 依據上述化合物（6)之製造法所使用的反應條件，可經由進行脫保護而獲得。化合物（1 )之合成上述，於化合物（8)之製造法中記載之其他方法，經由使用縮合劑，可自化合物（9 )與化合物（C )獲得。又作爲其他方法，可經由化合物（9)與化合物（C)於鹼存在下，使與1-氯-N，N，2-三甲基-1-丙烯基胺等之酸鹵化試藥反應而獲得。其中，作爲使用的鹼，可列舉三乙基胺、二異丙基乙 © 基胺、4-二甲基胺基吡啶、N-甲基嗎福啉、吡啶、2,6-二甲基吡啶、二氮雜雙環[5.4.0]十一烷-7-烯等有機鹼、或碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉等之無機鹼。作爲反應所使用的溶劑，可列舉二氯甲烷、氯仿、甲苯等、或此等之混合溶劑，但並未特別限定。反應溫度通常爲-78°C至100°C或至溶劑沸點之範圍，但較佳爲-2 0 °C至5 0 °C之範圍。本發明化合物（1 )亦可以下列方法製造。 [製造法2]

[式中，R12意指胺基之保護基；R1〜R3、R6及R7與前述同意義]。作爲胺基之保護基，可列舉苄基氧基羰基、第三丁基氧基羰基、苄基等。 -35- 201030011 化合物（1 〇)之合成經由上述製造法1中記載之化合物（1)(化合物（9) 與化合物（C)之醯胺化）之製造法所使用的反應條件，可獲得化合物（B ’）與化合物（C )。化合物（1 1 )之合成依據R12之種類，脫保護之反應條件不同。可以通常此領域所實施的反應條件進行。R12爲苄基氧基羰基或苄基等之場合，加入鈀碳等之還原觸媒，經由使於氫氣雰圍下、或甲酸銨等之氫源共存下反應，可作脫保護。其中，作爲反應 Q 所使用的溶劑，可列舉甲醇、乙醇等之醇類、四氫呋喃、二噚烷、乙酸乙酯、水等，或此等之混合溶劑，但並未特別限定。反應溫度，通常爲-78 t至100°C或至溶劑沸點之範圍，但較佳爲〇°C至室溫附近之溫度。又，R12爲第三丁基氧基羰基等之場合，經由以三氟乙酸或鹽酸等處理可作脫保護。其中，作爲反應所使用的溶劑，可列舉二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、二曙烷、甲醇、乙醇、水等，或此等之混合溶劑，但並未特別限定。反應溫度，通常爲-78°C至100°C或至溶劑 © 沸點之範圍，但較佳爲〇°C至室溫附近之溫度。化合物（1 )之合成經由以上述製造法1所記載的化合物（8 )(化合物（B ) 與化合物（6)或化合物（7)之醯胺化）之製造法所使用的反應條件，可獲得化合物（1 1 )與化合物（6 )或化合物（7 ) 獲得。本發明化合物（1)之R1爲使用作爲通常保護基的第三丁氧基羰基、苄基氧基羰基或三氟乙醯基等之場合，經由使 -36- 201030011 用上述製造法2所記載的化合物（π)之製造法（化合物（i〇) 中的R12之脫保護）的反應條件 '或於甲醇或乙醇與水之混合溶劑中以氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉及碳酸鉀等之鹼處理’可獲得R1爲氫原子的化合物（1)。再者，Ri爲氫原子之場合’使用通常有機化學的方法，可變換爲定義的取代基。例如’醛衍生物共存下’經由以氫化氰基硼鈉或三乙醯氧基氫化硼鈉等之還原劑處理，可將R1變換爲院基等。又，三乙基胺等之鹼存在下’經由使與酸氯化物衍生物反應，可 φ 將R1變換爲烷酿基或烷基磺醯基。製造原料化合物（3)可依據文獻（Synlett，1998，623 或US2005/26916)記載之方法合成。又，亦可以下列方法合成。 [製造法3]

Arr Αγ2^ .ΝΗ2 、N-R13

Ar2^R5 Ar 卜R13 (3) ⑼ a A、 Z Ar2^^R5 R5H (15 ) (14) (12) (13) ❹ [式中，z意指氯原子或溴原子等之鹵素原子；Rl3意指三氯乙基氧基擴酿基、P -甲苯擴醯基等；Ari、Ar2、及R5 與前述同意義]。化合物（1 3 )之合成可經由將由化合物（12)與三苯基膦或亞磷酸三乙酯等之有機磷化合物之反應所獲得的鳞鹽或膦酸酯，以烷基鋰、鋰二異丙基醯胺、鋰雙（三甲基矽烷基）醯胺、氫化鈉、第三丁醇鉀等之鹼處理後，與化合物（D)反應而獲得。其中， -37- 201030011 作爲反應所使用的溶劑，可列舉二乙醚、四氫呋喃、甲苯、二甲基甲醯胺、二甲基亞颯等、或此等之混合溶劑，並未特別限定，但經乾燥者爲較佳。反應溫度，通常爲-7TC至100°C 或至溶劑沸點之範圍，但較佳爲-78°C至室溫之範圍。化合物（14 )之合成化合物（14)可依據各種文獻（例如，Tetrahedron Lett.，_ 2005， 46， 403 1 ； J. Am. Chem . S o c., 2002,124， 1 36672 ； J. Am.Chem.Soc., 200 1,1 23, 7707 ； Synlett, 2004, 525 ；或特開2000-7 27 43)報告的合成法合成。例如，將由將化合物（13) Q 與烷氧基颯醯胺衍生物或芳基碾醯胺衍生物，於铑觸媒存在下，添加乙酸碘苯等之氧化劑、及氧化鎂等之鹼使反應而可獲得。其中，作爲反應所使用的溶劑，可列舉二乙醚、四氫呋喃、甲苯、乙腈等 '或此等之混合溶劑，並未特別限定，但經乾燥者爲較佳。反應溫度，通常爲-78 °C至100 °C或至溶劑沸點之範圍，但較佳爲-2 0 °C至8 (TC之範圍。化合物（15 )之合成經由將化合物（14)與氨水處理可獲得。其中，作爲反 © 應所使用的溶劑，可列舉甲醇、乙醇、水、四氫呋喃、二噚烷等、或此等之混合溶劑，並未特別限定，但與水可以任意比率混合的有機溶劑爲較佳。反應溫度，通常爲-78〇c至 100°C或至溶劑沸點之範圍，但較佳爲室溫至80°C之範圍。化合物（3 )之合成經由將化合物（15)以鹽酸、硫酸、或三氟乙酸等處理可獲得。其中，作爲反應所使用的溶劑，可列舉甲醇、乙醇、水、四氫呋喃、二噚烷等、或此等之混合溶劑，並未特別限 -38- 201030011 定，但與水可以任意比率混合的有機溶劑爲較佳。反應溫度，通常爲-78 °C至l〇〇°C或至溶劑沸點之範圍，但較佳爲室溫至80°C之範圍。 [製造法4] (D)

Ar^：NH2 R5 (16)

Rs 〇 (18) 0

A^Li 或 Ar,MgZ

Ra (20) R5 (21) 'NH, ..S':5r R5 (22) ιΗ SM C (19)

(3) [式中，R11意指羧基之保護基，Z意指氯原子或溴原子等鹵素原子；An、Αγ2、及R5與前述同意義]。化合物（16 )之合成

經由將化合物（D )與氰化鉀或氛化鈉、氯化銨及氨水反應（Strecker反應）所獲得的胺基腈體，與鹽酸或硫酸等之無機酸處理、或與P-甲苯磺酸或甲烷磺酸等之有機酸處理可獲得。其中，作爲反應所使用的溶劑，可列舉甲醇、乙醇、水、四氫呋喃、二曙烷等、或此等之混合溶劑，但並未特別限定。反應溫度，通常爲-20 °C至l〇〇°C或至溶劑沸點的範圍，較佳爲室溫附近至100 °C之範圍。化合物（17 )之合成 -39- 201030011 化合物（16)之羧基及胺基之保護各自可依常法獲得。其中，保護基導入之順序並未特別限定。以下，敘述各反應》酯化經由於甲醇或乙醇等之對應R11的低級醇中，以氯化氫、硫酸、或氯化亞硫醯等之鹵化試藥處理可獲得。反應溫度，通常爲-78°C至l〇0°C或至溶劑沸點之範圍，但較佳爲0°C 至l〇〇°C之範圍。又，胺基之第三丁氧基羰基化，可經由於三乙基胺、二異丙基乙基胺、或4-二甲基胺基吡啶等之鹼存在下，與二碳酸二-第三丁酯反應而獲得。其中，作爲反應所使用的溶劑，可列舉二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、乙酸乙酯、乙腈、甲苯等、或此等之混合溶劑，並未特別限定，但經乾燥者爲較佳。反應溫度，通常爲-7 VC至100 °C或至溶劑沸點之範圍，但較佳爲〇°C至l〇〇°C之範圍。化合物（1 8 )之合成化合物（17)之酯基之還原，以使用氫化鋰鋁等之禁水性試藥的反應，於二乙醚、四氫呋喃、二噚烷等之非質子性溶劑中，經由於室溫以下之溫度（較佳爲-40°C至Ot：)的反應可獲得醇體。又，使用氫化硼鈉等進行的場合，經由使用甲醇、乙醇、水等之質子性溶劑、或與此等上述非質子性溶劑之混合溶劑，使於室溫以下之溫度（較佳爲-2CTC至室溫附近）反應同樣地可獲得醇體。如此所獲得的醇體，經由使鉻酸[氯鉻酸吡啶鎗（PCC )，重鉻酸吡啶鎗（PDC )等]、二甲基亞颯與氯化草醯（Swern氧化）、二甲基亞楓與無水乙酸、二甲基亞碾與三氧化硫吡啶錯合物、1，1，1-三乙醯氧基 -1，1-二氫-1,2-苯碘醯-3 ( 1H)-酮（Dess-Martin 試藥）、或 2,2,6,6-四甲基-1-四甲基哌啶氧化物（TEMPO)與次亞氯酸 201030011 等之氧化劑反應，可獲得化合物（1 8 )。其中，作爲反應所使用的溶劑，可列舉二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、乙酸乙酯、二甲基亞颯、水、甲苯等、或此等之混合溶劑，並未特別限定。反應溫度，通常爲-78 °C至100 °C或至溶劑沸點之範圍，但較佳爲-7 8 °C至室溫附近之範圍。化合物（19 )之合成經由將化合物（18 )與芳基鋰化合物（AriLi )或格任亞（Grignard)試藥（AnMgZ)反應可獲得。對應的芳基鋰〇化合物或格任亞試藥可爲市售品、或依常法合成。由對應的芳基鹵化物與金屬鎂可合成格任亞試藥，由對應的芳基鹵化物與市售的烷基鋰試藥等，經由齒素-金屬交換，可合成有機鋰試藥。其中，作爲反應所使用的溶劑，可列舉二乙醚、四氫呋喃、二曙烷、甲苯等、或此等之混合溶劑，並未特別限定，但經乾燥者爲較佳。反應溫度，通常爲-78 °c至100 °C或至溶劑沸點之範圍，但較佳爲-7 8 °C至室溫附近之範圍。 © 化合物（2〇)之合成可經由使用適宜選擇上述化合物（19)之製造法記載的氧化反應之反應條件而獲得。化合物（21 )之合成於上述製造法2記載的化合物（11)之製造法，經由使用RU爲第三丁基氧基羰基時之反應條件而可獲得。化合物（22)之合成經由將化合物（21 )，於磺醯胺與1，8-二氮雜雙環[5.4.0] 十一烷-7-烯等之鹼存在下加熱可獲得。其中，作爲反應所 -41 - 201030011 使用的溶劑，可列舉二乙醚、四氫呋喃、二噚烷、乙酸乙酯、甲醇、乙醇、異丙基醇、乙二醇、乙腈、甲苯等、或此等之混合溶劑，並未特別限定。反應溫度，通常爲-78。(：至180。<：或至溶劑沸點之範圍，較佳爲701至1 5 0。(：之範圍。化合物（23)之合成經由將化合物（22)適宜選擇上述化合物（18)之製造法所記載的還原反應之反應條件來使用而可獲得。化合物（3 )之合成將化合物（23)依據文獻（Synlett, 1 998，623-624， 0 US2005/0026916)所記載的方法可合成。作爲其他方法，可經由將化合物（23)，於吡啶或乙二胺等之鹼存在下水解而獲得。其中，作爲反應所使用的溶劑，可列舉甲醇 '乙醇、水、四氫呋喃、二曙烷、乙二醇等、或此等之混合溶劑，但與水可以任意比率混合的有機溶劑爲較佳。反應溫度，通常爲〇°C至180°C或至溶劑沸點之範圍，但較佳爲60°C至120°C 之範圍。經上述製造法所獲得之外消旋體化合物（3)，依據文獻 (US2005/269 1 6 ，特開 2005-75754 ，或 Tetrahedron

Asymmetry，1 995, 6, 3 )記載之方法，可作光學分割。例如，將外消旋體化合物（3)，於甲醇或乙醇與水之混合溶劑中，經作光學分割劑之L-( + )-酒石酸等處理，可將酒石酸鹽結晶而獲得。經由將此酒石酸鹽以氫氧化鈉等之鹼處理，獲得具有表記之立體配置的光學活性二胺（3 )。製造原料化合物（A)爲市售品，或可依文獻（Tetrahedron Asymmetry, 1995，6，2199)記載之方法合成。 -42- 201030011 製造原料化合物（B)及（C)爲市售品，或可依據參考例記載之方法合成。製造原料化合物（D)爲市售品，或可依各種文獻（例如 ’ J.，Med.，Chem.，2000, 43, 478 1 )記載之方法合成。於本發明之1個實施形態，本發明之化合物，因阻礙p5 3 與Mdm2之結合，由於阻礙經由Mdm2之p53之泛素化，可用作爲P53與Mdm2之結合阻礙劑及/或M(im2泛素連接酶阻礙劑。 Ο P53與Mdm2之結合狀態，可使用調查蛋白質間之結合狀態用的本項技術領域者通常使用的方法（例如，免疫學的手法或表面電漿共振技術等）檢測出。作爲使用免疫學的手法來調査Mdm2與p53之結合狀態的方法，例如，可列舉免疫沉降法或ELISA(酵素連結免疫吸附試驗（Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay))。此等免疫學的手法所使用的抗體可爲直接檢測出Mdm2及/或p53的抗Mdm2抗體及/或抗p53 抗體’將Mdm2及/或p53以標誌（例如，GST標誌或組胺〇酸標誌）等標識的場合，可使用適合標識的抗體（例如，抗 GST抗體或抗組胺酸抗體）。使用免疫學的手法來調査p53 與Mdm2之結合狀的方法，例如，記載於國際公開第 2003/5 1 3 5 9號小冊、國際公開第2003/5 1 360號小冊、美國專利申請案公開第2004/2 59 8 67號說明書或美國專利申請案公開第2004/259884號說明書或國際公開第2005/1 1 0996號小冊。關於使用表面電漿共振技術來調查p53與Mdm2結合狀態的方法，記載於例如Science、第303卷、844-848頁、 2004 年。 -43- 201030011 對於p53之Mdm2的泛素連接酶活性，可使用熟習本項技術領域者通常使用的泛素連接酶分析來調查。泛素連接酶活性可經由例如，將經由泛素活性化酵素（E 1 )、泛素結合酵素（E2)及泛素連接酶（E3)( Mdm2 )之P53之泛素化，於試驗化合物之存在下與非存在下作比較來檢測（例如，國際公開第200 1 /75 1 45號小冊或國際公開第2003/76608號小冊）。關於其他實施形態，本發明之化合物經由阻礙Mdm2對 p53轉錄活性化功能域的結合，由於使經由Mdm2而被抑制 @ 的P53之轉錄因子的機能回復，可使用作爲P53轉錄活性抑制之阻礙劑。p53轉錄活性抑制之阻礙劑，例如，於試驗化合物之存在下或非存在下，使用熟習本項技術領域者通常使用之mRNA測定法（例如，北方墨點法）或蛋白質測定法（例如，西方墨點法）來測定經由p5 3而轉錄被控制的蛋白質（例如，p21Wafl/eipl)之mRNA量或蛋白質量，將於試驗化合物存在下之該mRNA量或蛋白質量與於試驗化合物之非存在下的情形作比較，其量增加的場合，可經由選擇該試驗化合 © 物作爲p53轉錄活性抑制之阻礙劑而獲得。又，P53轉錄活性抑制之阻礙劑，亦可經由將包含p53應答序列的報導基因之報導子活性作爲指標的報導子試驗來鑑定。關於其他實施形態，本發明之化合物，因阻礙經由Mdm2 之p53之泛素化，防止p53之蛋白酶體的分解，而可使用作爲p5 3分解之阻礙劑。p5 3分解之阻礙劑，例如，於試驗化合物之存在下或非存在下，將p5 3之蛋白質量使用熟習該項技術領域者通常使用的蛋白質測定法（例如，西方墨點法） -44- 201030011 來測定，於試驗化合物之存在下的該蛋白質量與試驗化合物非存在下之情形作比較而增加的場合，可經由選擇該試驗化合物作爲P53分解之阻礙劑而獲得。關於其他實施形態，本發明之化合物，經由Mdm2與p5 3 之結合阻礙及/或經由Mdm2的p53泛素化之阻礙，因使P53 之癌抑制基因之機能正常化，可作爲抗腫瘤劑使用。細胞之增殖阻礙活性可使用熟習本項技術領域者通常使用的增殖阻礙試驗法來調查。細胞之增殖阻礙活性，可經 Φ 由例如，如下述試驗例2所記載，經由比較試驗化合物之存在下或非存在下的細胞（例如，腫瘤細胞）之增殖程度來實施。增殖之程度，可使用例如測定活體細胞的試驗系統來調査。作爲活細胞之測定方法，例如，可列舉[3 H] ·胸苷之送入試驗、BrdU法或MTT分析等。又’活體內之抗腫瘤活性，可使用熟習本項技術領域者通常使用的抗腫瘤試驗法調查。例如，將各種腫瘤細胞移植至小鼠、大鼠等，確認移植細胞存活附著後，將本發明之化 ® 合物經口投與、靜脈內投與等，數日〜數週間後，經由將藥劑無投與組之腫瘤增殖與化合物投與組之腫瘤增殖作比較，可確認本發明之活體內之抗腫瘤活性。本發明之化合物可使用於腫瘤或癌症，例如，肺癌、消化器官癌、卵巢癌、子宮癌、乳癌、肝癌、頭頸部癌、血液癌、腎臟癌或睪九腫瘤等之治療，更佳爲肺癌、乳癌、前列腺癌、大腸癌、急性骨髓性白血病、惡性淋巴瘤、視網膜芽細胞瘤、神經芽細胞瘤及肉瘤之治療，但未限於此等癌症。本發明之醫藥組成物，包含本發明之化合物與藥學上可 -45- 201030011 容許的載體，可作爲靜脈內注射、肌肉內注射、皮下注射等之各種注射劑，或經口投與或經皮投與等經各種方法投與。所謂藥學上可容許的載體，意指參與將本發明之化合物或包含本發明之化合物的組成物’由某器官或臟器輸送到其他器官或臟器之藥學上可容許的材料（例如，賦形劑、稀釋劑、添加劑、溶劑等）。作爲製劑之調製方法，視投與法選擇適當的製劑（例如，經口劑或注射劑），可調製通常使用的各種製劑之調製法。作爲經口劑’例如，可例示錠劑、散劑、顆粒劑、膠囊 ◎ 劑、九劑、片劑（troche )、溶液劑、糖漿劑、酏劑、乳劑、或油性或水性之懸浮液等。經口投與之場合，可爲原本游離體的方式亦可爲鹽類型式。水性製劑可以與藥學上可容許的酸形成酸加成物，或可作成鈉等之鹼金屬鹽來調製。注射劑之場合，亦可於製劑中使用安定劑、防腐劑或溶解輔助劑等。亦可爲將包含此等之輔助劑等的溶液收容於容器後，經由凍結乾燥等作成固形製劑於使用時調製之製劑。又，可將一次投與量收容於一個容器，或將複數次投與量收容於一個 © 容器。作爲固形製劑，例如，可列舉錠劑、散劑、顆粒劑、膠囊劑、九劑、或片劑。此等之固形製劑可同時含有本發明之化合物與藥學上可容許的添加物。作爲添加物，例如，塡充劑類、增量劑類、結合劑類、崩解劑類、溶解促進劑類、濕潤劑類或潤滑劑類，視必要選擇此等來混合，可作製劑化。作爲液體製劑，例如，可列舉溶液劑、糖漿劑、酏劑、乳劑、或懸浮劑。此等液體製劑可同時含有本發明之化合物 -46- 201030011 與藥學上可容許的添加物。作爲添加物，例如，可列舉懸浮化劑或乳化劑，視必要選擇此等來混合，可作製劑化。本發明之化合物可使用於哺乳類，尤其是人類之癌症治療。投與量及投與間隔依疾病的位置、患者之身高、體重、性別或病歴，經由醫師判斷可作適宜選擇。將本發明之化合物投與人類的場合，投與量之範圍，每1日爲約0.01mg/kg 體重〜約 500mg/kg體重，較佳爲約 O.lmg/kg體重〜約 100mg/kg體重。投與人類的場合，較佳爲每1日1次、或 φ 分成2至4次投與，以適當間隔重複爲較佳。又，1日量視必要由醫師之判斷亦可超出上述量。本發明之化合物可與其他抗腫瘤劑倂用。例如，可列舉抗腫瘤抗生素、抗腫瘤性植物成分、BRM (生物學的反應性控制物質）、荷爾蒙、維生素、抗腫瘤性抗體、分子標的藥、其他抗腫瘤劑等。更具體而言，作爲烷基化劑，例如，可列舉氮芥類 (Nitrogen Mustard)、氮芥類N -氧化物或氯黴素（chloram) ® 丁基等之院基化劑.、卡波醒（carboquone )或塞替派 (Thiotepa)等之氮丙陡系院基化劑、二溴甘露醇 (dibromomannitol.)或二溴半乳糖醇（dibromogalactitol) 等之環氧化物系烷基化劑、卡氮芥（carmustine )、洛莫司丁 (lomustinum)、司莫司汀（semustine)、尼莫司汀鹽酸鹽 (nimustine hydrochloride)、鏈脲黴素（streptozocin)、氯脲黴素（chlorozotocin)或雷莫司汀（ranimustine)等之亞硝基脲系烷基化劑、白消安（Busulfanum )、英丙舒凡甲苯磺酸鹽（i m p r 〇 s u 1 f a n t 〇 s i 1 a t e )或達卡巴嗪（d a c a r b a z i n e ) 47 - 201030011 等。作爲各種代謝拮抗劑，例如，可列舉6-锍基嘌玲、6_ 硫鳥糞嘌呤或硫肌苷（thioinosine )等之嘌呤代謝拮抗劑、氟尿喃陡、替加氟（Tegafur)、替加氟•尿嘴陡、卡莫氟 (Carmofur )、去氧氟尿苷（doxifluridine )、溴去氧尿音 (bromodeoxyuridine)、阿糖胞苷（cytarabine)或伊洛胞音 (enocitabin ) 等之嘧陡代謝拮抗劑、甲氨蝶玲 (methotrexate)或三甲氨蝶哈（trimetrexate)等之葉酸代謝拮抗劑等。作爲抗腫瘤性抗生素，例如，可列舉絲裂黴素C (mitomycin C )、博來黴素（bleomycin )、培洛黴素 (peplomycin )、柔红黴素（daunorubicin )、阿克拉黴素 (aclarubicin )、阿黴素（doxorubicin )、啦柔比星 (pirarubicin)、THP -阿黴素（adriamycin)' 4’ -表阿黴素 (epidoxorubicin)或表阿黴素（epirubicin)等之恵環類 (anthracycline)抗生素抗腫瘤劑、色黴素類（chromomycin) A3或放線菌素D ( Actinomycin D)等。作爲抗腫瘤性植物成分，例如，可列舉長春地辛 (vindesine)、長春新驗（vincristine)或長春驗（vinblastine) 等之長春花生物鹼類（vinca alkaloid)、太平洋紫杉醇 (paclitaxel )、多烯紫杉醇（docetaxel )等之紫杉烷類 (taxane)、或依托泊（etoposide)或替尼泊试(teniposide) 等之鬼臼毒素（epipodophyllotoxin)類。作爲BRM，例如，可列舉腫瘤壞死因子或吲哚美辛 (indomethacin )等。 201030011 作爲荷爾蒙’例如，可列舉氫化可的松 (hydrocortisone)、地塞米松（dexarnethasone)、甲基氫化潑尼松（methylprednisolone )、氫化潑尼松、普拉酮 (prasteronum)、貝他美沙松（betamethasone)、曲安西隆 (triamcinolone)、H比哩甲基睾九素（〇xymetholone)、諾隆 (n a n d r ο 1 ο n e )、美替諾隆（m e t e η ο 1 ο n e )、磷雌酣 (fosfestrol)、乙块雌—醇（ethinyiestradiol)、氯地孕酮 (chlormadinone)或甲經孕嗣（medroxyprogesterone)等。 Ο 作爲維生素，例如’可列舉維生素C或維生素A等。作爲抗腫瘤性抗體、分子標的藥，可列舉翠滋單抗 (trastuzumab )、利崔單抗（Htuximab )、西崔單抗 (cetuximab )、尼莫單抗（nimotuzumab )、帝諾單抗 (denosmab)、貝伐單抗（bevacizumab)、英利單抗 (infliximab )、伊馬尼單抗（imatinib mesilate )、吉費尼單抗（gefitinib )、爾洛尼單抗（eri〇tinib )、蘇尼單抗 (sunitinib )、拉帕尼單抗（iapatinib )、索拉尼單抗 ® ( sorafenib)等。作爲其他之抗腫瘤劑，例如，可列舉順鈾（cisplatin)、卡鉑（carboplatin )、奧沙利鉑（oxaliplatin )、它莫西芬 (tamoxifen)、喜樹驗（Camptothecin)衍生物、異環磷醯胺（ifosfamide)、環鱗醯胺（cyclophosphamide)、美法侖 (melphalan)、L -天冬醯胺酶（L-asparaginase)、醋葡醒內醋（aceglatone)、西佐喃（sizofiran)、必醫你舒（Picibanil)、丙卡巴肼（procarbazine)、哌泊溴烷（pipobroma)、新制癌菌素（neocarzinostatin)、羥基脲、烏苯美司（ubenimex) -49- 201030011 或雲芝多糖（krestin)等。本發明亦包含投與本發明化合物或其鹽爲特徴之癌症之預防方法及/或治療方法。再者，本發明中亦包含用於製造前述醫藥之本發明之化合物、其鹽或此等之溶劑化物之用途。以下根據所示實施例具體說明本發明，但本發明不限於此等例，此等例亦未以任何意義被限定地解釋。又，於本說明書，未特別記載之試藥、溶劑及起始材料可由市售之供給源容易地獲得。 @ 【實施例】實施例1

工程 1: 7-[(4R) -1-{[(5R，6S) -5-(4-氯-3-氟苯基） -6- ( 6·氯吡啶-3-基）-3-異丙基-6 -甲基-5,6 -二氫咪唑并 [2，l-b][l，3]噻唑-2-基]羰基} -4-氟-L-脯胺醯基]-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷於參考例 1之工程13所獲得的化合物（ 470mg， l.OOmmol)之1，2-二氯乙烷（l〇ml )懸浮液中加入氯化亞硫醯（0.50ml)、二甲基甲醯胺（2滴），於70 °C加熱攪拌1小時後，將溶劑減壓濃縮。將所獲得的殘餘物溶解於四氫呋喃 (10ml )，冰冷下，將其滴入參考例3之工程2所獲得的化 -50- 201030011 合物（ 380mg，1.20mmol)及三乙基胺（0.42ml，3·〇〇mmol) 之四氫呋喃（l〇ml)溶液中，於室溫攪拌20小時。以乙酸乙酯稀釋，有機層依次以飽和碳酸氫鈉水、飽和食鹽水洗淨，以無水硫酸鈉乾燥。減壓餾除溶劑，將所獲得的殘餘物於NH-矽膠管柱層析[η-己烷：乙酸乙酯=1 : 5 ( Wv)]純化’ 獲得呈無色固體之標記化合物（399mg，51% )。 'H-NMR( 400MHz> DMSO-de» 90°C ) δ： 0.93( 3Η» d> J = 7.1Hz ) > 0.93 (3H，d，J = 7.1Hz)，0.98-1.12 (4H，m)’ ❹ 1.77 (3H，s)，2.0 5-2.15 ( 1H，m)，2.54-2.60 ( 1H，m)， 2.61-2.67 ( 1H，m)，3.49-3.57 ( 2H，m)，3.63-3.83 ( 5H， m)，3.87-3.97 ( 1H，m)，5.06-5.09 ( 1H，m)’ 5.36 ( 1H’ d > J = 5 3.7Hz ) > 5.51( 1 H > s)> 6.73 -6.77 ( 1 H> m)· 6.91-6.97 (1H，m)，7.17( 1H，d，J = 8.3Hz)，7.34( 1H，t’ J = 7.9Hz) ’ 7.65 ( 1H，dd，J = 8.3 > 2·7Ηζ)，8.26 ( 1H，d，J = 2.4Hz) MS ( ESI ) m/z ： 77 1 [ ( M + H ) + ]· 工程 2: 7-[(4R) -l-{ [(5R，6S) -5-(4-氯-3-氟苯基） ❹ -6- ( 6-氯吡啶-3-基）-3-異丙基-6-甲基-5,6-二氫咪唑并 [2，1-1?][1,3]噻唑-2-基]羰基}-4-氟-1^脯胺醯基]-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷將上述工程1所獲得的化合物（39〇mg，0.51mmol)溶解10%含水甲醇（8ml)，加入碳酸鉀（400mg’ 2_89mmol)，於40°C加熱攪拌2小時。將溶劑減壓濃縮後’將所獲得的殘餘物以乙酸乙酯稀釋，以飽和食鹽水洗淨後’以無水硫酸鈉乾燥。減壓餾除溶劑，獲得的殘渣經矽膠管柱層析[氯仿：甲醇=15: 1 (v/v)]純化，獲得呈無色固體之標記化合物 -51- 201030011 (190mg，5 5%)° h-NMEU 400MHz，DMSO-d6，90〇C ) δ: 0.44-0.52 ( 4H， m ) > 0.93( 3H> d> J = 6.8Hz)> 0.94( 3H> d> J = 6.8Hz)> 1.78 (3H > s ) > 2.05-2.15( 1H - m ) > 2.56-2.64 ( 1H，m)，2.61-2.69 (1H' m)> 2.73-2.79( 2H - m)> 3.31-3.39( 2H - m)> 3.43-3.50 (2H > m ) > 3.74( 1H，dd，J = 35.8 > 1 2. 1 Hz ) > 3.9 1 ( 1H > dd，J=19.2,12.6Hz ) > 5.02-5.06 (1H> m)> 5.35(1H> d>

J = 53.7Hz ) > 5.52 ( 1H > s ) > 6.73-6.7 8 ( 1 H > m ) > 6.92-6.99 (1H > m ) > 7.18 ( 1H > dd > J=8.3 > 0.7Hz ) > 7.35 ( 1H > t > J = 8.1 Hz ) > 7.66 ( 1H - dd，J = 8.3，2.7Hz)，8.27 ( 1H，d， J = 2.4Hz ). MS ( ESI ) m/z ： 675 [ ( M + H ) + ]·

元素分析：C32H34C12F2N602S· 0.25H2O 理論値：C，56.51; H’ 5.11; Ν’ 12.36 ； F’ 5.59; Cl’ 10.43 ； S ， 4.71. 實測値：C ， 56.33 ； H > 5.10； N > 12.20 ； F ， 5.55 ； Cl，

工程 1:(6S) -7-[ ( 4R) -1-{[(5R,6S) -5-(4-氯- 3-氟苯基）-6-(6-氯吡啶-3-基）-3-異丙基-6-甲基- 5,6-二氫咪 -52- 201030011 唑并[2，l-b][l，3]噻唑-2-基]羰基}-4-氟-L-脯胺醯基；|_6_甲基 -4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷於參考例1之工程13所獲得的化合物（2〇〇mg， 0.43mmol)及參考例5之工程2所獲得的化合物（i59mg， 0.47mmol )之二甲基甲醯胺（3ml )溶液中加入三乙基胺 (0.12ml，0.86mmol)、1-(3 -二甲基胺基丙基）-3 -乙基碳化二亞胺鹽酸鹽（l〇〇mg ’ 0.52mmol )及 1-羥基苯并三唑 (53mg，0_43mmol)，於室溫攪拌24小時。於乙酸乙酯稀釋 φ 反應液，依序以飽和碳酸氫鈉水、水、飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓餾除溶劑，將所獲得的殘餘物於矽膠管柱層析[η-己烷：乙酸乙酯=1 : 1 ( v/v )]純化，獲得呈淡黄色固體之標記化合物（286mg，85% )。 'H-NMRC 400MHz> DMSO-d6> 100°C )δ： 0.72-0.74( 2H> m)，0.92( 3H，d，J = 7.1Hz)，0.96( 3H，d，J = 7.1Hz)’ 1.12 (3H，brd，J = 6.1Hz)，1.30( 1H，m)，1.49( 1H，m)，1.78 (3H > s ) > 2.17 ( 1H，m)，2.58-2.65 (2H，m)，3.54-3.57 φ (3H，m)，3.78-3.92(3H，m)，4.69( 1H，m)，5.01( 1H’ m ) > 5.39( 1H，d，J = 53.1Hz)，5.51 (1H，s)，6.76 (1H， d，J = 8.3Hz)，6.95( 1H，d，J = 8.3Hz)，7.17( 1H，d，J = 8.3 Hz)’ 7.34 ( 1H > t，J = 8.3Hz )，7.65 ( 1H，dd，J = 8.3，2.7Hz )， 8.26 ( 1H，d，J = 2.7Hz ). MS ( ESI) m/z ： 785 [ ( M+ H) + ]· 工程 2:(6S) -7-[(4R) -1-{[(5R，6S) -5-(4-氯-3-氟苯基）-6-( 6-氯吡啶-3-基）-3-異丙基-6-甲基- 5,6-二氫咪唑并[2，1-1^[1，3]噻唑-2-基]羰基}-4-氟-1^脯胺醯基]-6-甲基 -53- 201030011 _4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷將上述工程1所獲得的化合物，使與實施例1之工程2 胃樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 'H-NMRC 400MHz> DMSO-d6; 100°C )δ： 0.35-0.41( 2H> m)，0.57-0.59( 2H，m)，0.92( 3H，d，J = 7.1Hz)，0.95( 3H， d’ J = 7.1Hz)，1.21-1.22 (3H，brd，J = 5.6Hz) > 1.28 (1H， m)，1.78( 3H，s)，2.14( 1H，m)，2.55-2.66 (3H，m)， 3.21-3.44( 2H - m)> 3.75( 1H> ddd> J = 36.6« 12.8 > 2.9Hz ) > 3.92( 1H，dd，J = 18.2,12.8Hz)，4.33( 1H，m)，4.97( 1H’ Q m)，5.36 ( 1H，d，J = 52.9Hz)，5·50 ( 1H，s)，6·75 ( 1H， d，J = 8.3Hz)，6.95( 1H，d，J = 8.3Hz)，7.17( 1H，dd，J = 8.3， 0.6Hz)，7.34 ( 1H，t，J=8.3Hz)，7.65 ( 1H，dd，J = 8.3 ’ 2·4Ηζ)，8.26 ( 1H，dd，J = 2.4 > 0.6Hz ). MS ( ESI ) m/z ： 689 [(M+H) +]. 元素分析：C33H36C12F2N602S. 1.25H20 理論値：C，55.65 ; H，5.45 ; N，11.80. 實測値：C，5 5.2 5 ; H，5.2 3 ; N，1 1 . 3 2 . © 實施例3

工程 1:(6R) -7-[ ( 4R) -1 - { [ ( 5R,6S ) -5-(4-氯- 3-氟苯基）-6-(6-氯吡啶-3-基）-3-異丙基-6-甲基-5，6-二氫咪 -54- 201030011 唑并[2，1-15][1，3]噻唑-2-基]羰基}-4-氟-1：-脯胺醯基]-6-甲基 -4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷將參考例1之工程1 3所獲得的化合物，使用參考例7 之工程2所獲得的化合物替換於參考例5之工程2所獲得的化合物’使與實施例2之工程1同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 ^-NMRC 400MHz« DMSO-de' 100 °C )δ： 0.71-0.73( 1H> m)，0.89-0.92( 1H，m)，0.93(6H，d，J = 7.1Hz)，1.10-1.13 e (3H，m)，1.30-1.32 ( 1H，m)，1.47-1.49 ( 1H，m)，1.77 (3H，s)，2.06-2.08( 1H，m)，2.61-2.68( 1H，m)，3.51-3.54 (3H，m)，3.71-3.81 ( 1H，m)，3.90-3.95 ( 2H，m)，4.61 (1H，brs)，5.0 4( 1H，t，J = 8.1Hz)，5.34( 1H，d，J = 54.0Hz)， 5.50( 1H，s)，6.7 4( 1H，d，J = 7.8Hz)，6.93( 1H，d，J = 7.8Hz)， 7.16 ( 1H > dd > J = 8.3 > 0.7Hz ) - 7.33 ( 1H，t > J = 7.8Hz )-7.64(1H，dd，J = 8.3 > 2.4Hz ) > 8.25 ( 1H > t > J=1 .3Hz ). 工程 2:(6R) -7-[ ( 4R) -1 - { [ ( 5R,6S ) -5-(4-氯-3-O 氟苯基）-6-( 6-氯吡啶-3-基），-3-異丙基-6-甲基-5，6-二氫咪唑并[2，l-b][l，3]唾唑-2-基]羰基} -4-氟-L-脯胺醯基]-6-甲基 -4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷將上述工程1所獲得的化合物，使與實施例1之工程2 同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 'H-NMRC 400MHz> DMSO-d6> 100 °C )δ： 0.35-0.37( 2H-m)» 0.55-0.57( 2H - m)> 0.92( 3H> d> J = 7.1Hz)> 0.93( 3H > d，J = 7.1Hz ) > 1.26 ( 3H > brs )，1.76 ( 3H > s)，1.99-2.02 (1H，m)，2.32-2.34( 1H，m)，2.61-2.68( 3H，m)，2.86-2.92 -55- 201030011 (1H> m)’ 3.30-3.32 ( 1H> m)’ 3.72 (1H，dd，J = 36.3, 11.9Hz)，3.90 ( 1H，dd，J=1 9.9，12.8HZ)，4.17-4.20 ( 1H， m)，5.00 ( 1H，t ’ J = 8.0Hz)，5.32 ( ih，d，J = 53.1HZ)， 5·48( 1H’ s)，6.7 3( 1H，d，J = 8.3 Hz)，6 92( ih，d，J = 8.3 Hz)， 7.15( 1H’ d’ J = 8.3Hz)，7.31( 1H，t，j = 7.9Hz)，7.63( 1H , dd，J=8.3 > 2,7Hz ) > 8.24 ( 1H > d，J = 2 7Hz )

MS ( ESI ) m/z ： 689[(M+H) + j 兀素分析：C 3 3 H 3 6 C 1 2 F 2 N 6 O 2 S . 1.2 5 H 2 O 理論値：c，5 5.65 ; H，5.45 ; N，li.8〇. 實測値：C，5 5.26 ; H，5.19 ; N，1i.85, 實施例4

工程 1 : ( 6S ) -7-[ ( 4R) -1- { [(5R,6S ) -5- 氟(苯基）-6- (6 -氯卩比陡-3-基）-3 -異丙基_6_甲基

4-氯-3

口坐并唾哩-2-基]親基卜4_氟·L_脯胺醯基]_6_乙基 -4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛院將於參考例丨之工程13所獲得的化合物，使用於參考例9之工程2所獲得的化合物替換參考例5之工程2所獲得= 的化合物，使與實施例2之工程1同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物》

^-NMRC 400MHz> DMSO-d6^ 90°C )δ： 0.67-0.74( 2H -56- 201030011 m)，0.80-0.85( 3H，m)，0.91( 3H，d，J = 7.1Hz)，0.94( 3H， d > J = 6.8Hz ) > 1.25-1.33( 1H，m)，1.43-1.53( 3H，m)，1.77 (3H，s)，2.17-2.27( 2H，m)，2.55-2.63( 1H，m)’ 3.37-3.97 (6H > m ) > 4.06-4.13 ( 1H，m)，4.49-4.53 ( 1H，m)，5,40 (1H> d> J = 52.2Hz)> 5.51 ( 1H> s)« 6.72-6.78( 1H> m)> 6.92-6.99( 1H，m)，7.17( 1H，d，J = 8.3Hz)，7.34( 1H > t > J = 8.1Hz)，7.65 ( 1H，dd，J = 8.4，2.6Hz)，8.26 ( 1H - d， « J = 2.2Hz). ❹ MS ( ESI ) m/z : 799[ ( M+ H ) + ]. 工程2:(68)-7-[(41〇-卜{[(511，63)-5-(4-氯-3-氟苯基）-6-(6-氯吡啶-3-基）-3-異丙基-6-甲基-5，6-二氫咪唑并[2,l-b][l，3]噻唑-2-基]羰基}-4-氟-L-脯胺醯基]-6-乙基 -4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷將上述工程1所獲得的化合物，使與實施例1之工程2 同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 "H-NMRC 400MHz - DMSO-d6· 90°C ) δ： 0.31-0.39( 2H > ❿ m)> 0.50-0.58 ( 2H> m)· 0.78-0.84 ( 3Η» m)> 0.91 (3H> d > J = 7.3Hz)，0.93( 3H，d，J = 7.1Hz)，1.6 5 - 1.7 3 ( 2 H > m ) > 1.77 ( 3H，s)，2.09-2.22 ( 1H，m)，2.30-2.36 ( 1H，m)， 2.56-2.63 ( 1 H，m)，2.72-2.77 ( 2H，m)，3.46-3.5 8 ( 2H， m)，3.70-3.95( 2H，m)，4.12-4.20( 1H，m)，4.89-4.95( 1H， m ) · 5.37 ( 1H，d，J = 53,2Hz ) > 5.50 ( 1H，s)，6.72-6.79 (1H，m)，6.91-6.99( 1H，m)，7.17( 1H，d，J = 8.3Hz)， 7.34 ( 1H，t，J = 7.9Hz)，7.65 ( 1H，dd，J = 8.4 > 2.6Hz ) > 8.26 ( 1H > d，J = 2.4Hz ). -57- 201030011 MS (ESI) m/z ： 703[ ( M + H) + ]. 元素分析：C34H38Cl2F2N6〇2S. 〇.25H20 理論値：C，57.66; H，5.48; N，11.87; F，5.37; Cl，10.01 ; S，4.53· 實測値：C，57.56; H，5.49; N，11.74; F,5.32; Cl，9.78; S，4.49.

(6R) -7-[ ( 4R) -1- { [ ( 5R，6S) -5- ( 4 -氯-3-氟苯基） -6- ( 6 -氯卩比陡-3-基）-3-異丙基-6 -甲基-5,6-二氨味哩并 [2，l-b][l，3]噻唑-2-基]羰基} -4-氟-L·脯胺醯基]-6-乙基-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷將於參考例1之工程1 3所獲得的化合物，使用參考例 1 1之工程2所獲得的化合物替代於參考例5之工程2所獲得 @ 的化合物，使與實施例2之工程1同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 ^-NMRC 400MHz> DMSO-d6> 90°C ) δ： 0.69-0.75( 2H > m)，0.79-0.86( 3H，m)，0.94( 6H，d，J = 7.1Hz)，1.05-1.14 (1H，m)，1.26-1.33 ( 1H，m)，1.45-1.53 ( 3H，m)，1·78 (3H> s)> 1.92-2.12( 1H> m)> 2.60-2.70( 1H> m)> 3.27-3.49 (2H，m)，3.64-3.84( 2H，m)，3.89-3.99( 1H，m)，4.14-4.25 (1H，m)，4.58-4.64 ( 1H，m)，5.06-5.12( 1H，m)，5.35 -58- 201030011 (1H > d，J = 55.7Hz) > 5.52( 1 H > s ) > 6.74-6.79 ( 1 H > m ) > 6.92-6.98( 1H，m)，7.18( 1H，d，J = 8.3Hz)，7.35( 1H，t， J = 7.9Hz )，7.66( 1H，dd，J=8.2,2.3Hz )，8.27( 1 H，d，J = 2.2 Hz ). MS ( ESI ) m/z ： 799[ ( M + H ) + ]. 元素分析：C36H37Cl2F5N6〇3S. 0.5H2O 理論値：C，53.47; H，4.74; N，10.39; F，11.75; Cl,8.77; S,3.97. 實測値：C，52.97; Η，4·52; N，10.37 ; F，12.45 ; Cl，7.90; ❹ S，3.94. 實施例6

(6R) -7-[(4R) -1-{[(5R，6S) -5-(4-氯-3-氟苯基） -6- ( 6-氯吡啶-3 -基）-3 -異丙基-6 -甲基-5,6 -二氫咪唑并 ® [2，l-bni，3]噻唑-2-基]羰基}-4-氟-L-脯胺醯基]-6-乙基-4,7- 二氮雜螺[2.5]辛烷將實施例5所獲得的化合物，使與實施例1之工程2同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 ^-NMRC 400MHz> DMSO-d6' 70 °C ) δ： 0.25-0.38( 2H -m ) > 0.49-0.5 5 ( 1 H > m ) - 0.57-0.64( 1H，m)，0.78-0.98( 3H， m ) > 0.93( 6H » d > J = 7.1Hz ) > 1.62- 1.72 ( 1 H > m ) > 1.77( 3H > s ) > 1.86-2.13( 1H，m)，2.40-2.45( 1H，m)，2.59-2.67( 1H， m ) > 2.69-2.84 ( 3 H * m ) > 3·49( 1H，dd > J=13.3 > 6.5Hz ) > -59- 201030011 3.63-3.82 ( 2H，m)，3.86-3.97 ( 1H，m)，4.17-4.24 ( 1H， m)，4.98-5.06 ( 1H，m)，5.33 ( 1H，dd，J = 53.1，20_lHz)， 5.53 ( 1H，s)，6.71-6.75 ( 1H，m)，6.93-6.99 ( 1H，m)， 7.19( 1H，d，J = 8.3Hz)，7.35( 1H，t，J = 7.4Hz)，7.66( 1H， dd - J=8.4，2.3Hz)，8.26 ( 1H - d，J = 2.2Hz) · MS ( ESI) m/z ： 703 [ ( M + H ) +]. 元素分析：C34H38C12F2N602S. 0.25H2O 理論値：C，57.66; H，5.48; N，11.87; F，5.36; Cl,10.01 ; S,4.53. 實測値：C，57.71 ; Η，5·40 ; N, 11.65 ; F，4.99; Cl,9.43 ; S，4.43. 實施例7

(6R) -7-[ ( 4R) -1 - { [ ( 5 R, 6 S ) -5- ( 4 -氯-3-氟苯基） -6- ( 6-氯吡啶-3-基）-3 -異丙基-6·甲基-5,6 -二氫咪唑并 [2，l-b][l，3]噻唑-2-基]羰基} -4-氟-L-脯胺醯基]-6-異丁基 -4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷將於參考例1之工程13所獲得的化合物，使用參考例 1 3之工程2所獲得的化合物替代於參考例5之工程2所獲得的化合物，使與實施例2之工程1同樣地反應後，使與實施例1之工程2同樣地反應，獲得呈淡黄色固體之標記化合物。 'H-NMRC 4〇〇MHz> DMSO-d6' l〇〇°C )δ： 0.22-0.76( 4Η> 201030011 m)，0.83-1.03 ( 13H’ m)，1.40-1,56 ( 1H，m)，1.59-1.76 (1H’ m)，1.79( 3H’ s)’ 1.81-3.04 (7H，m), 3.06-3.22 (1H，m)，3.44-3.63 ( 1H，m)，3.64-3.85 ( 1H，m)，3.92 (1H，dd’ J=19.9，12.8Hz)’ 4.92-5.10( 1H’ m)，5.22-5.46 (1H，m)，5.51 (1H，s)，6.76( 1H，d，J = 8.1Hz)，6.95 (1H，d’ J = 8.1Hz)’ 7.18( 1H’ d，J = 8.3Hz)，7.34( 1H， t’ J = 8.1Hz)，7.66( 1H’ dd，J = 8.3，2.4Hz), 8.27( 1H，d， J = 2.4Hz ).

MS ( ESI ) m/z ： 73 1 [ ( M + H ) +]. 元素分析：C36H42C12F2N602S. 〇.5H20 理論値：C，5 8.3 7; H，5.85; N,11.35. 實測値：C,5 8.42 ; H, 5.77; N,11.17. 實施例8

4-[(411)-1-{[(511,63)-5-(4-氯-3-氟苯基）-6-(6-氯啦陡-3-基）-3 -異丙基-6-甲基_5,6 -二氫咪哩并[2，l-b][l，3] 噻哩-2-基]碳基} -4-氟-L-脯胺醯基]_4,9-二氮雜螺[2.2.2.2] 癸烷將於參考例1之工程1 3所獲得的化合物，使用參考例 1 5之工程2所獲得的化合物替代於參考例5之工程2所獲得的化合物，使與實施例2之工程1同樣地反應後，使與實施例1之工程2同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 -61 - 201030011 iH-NMR( 400MHz, DMSO-d6, 100 〇C ) δ: 0.60( 4H，d， J = 5.1Hz)，0.87( 1H，t, J = 7.0Hz)，0.94( 6H，t，J = 6.8Hz)， 1·08-1·23(5Η’ m)，1.79( 3H，s)，2.13( 1H，dd，J = 36.3， 6·2Ηζ)，2.59-2.74( 3H，m)，3.58( 2H，dd，J = 34_9，12.9Hz), 3.79-4.00( 2H> m)» 5.21( 1H> s)> 5.39( 1H* d> J = 53.5Hz) > 5.51( 1Η» s)> 6.76( 1H> d> J = 7.8Hz)» 6.95( 1H> d> J = 9.3Hz)> 7.17( 1Η» d> J = 8.3Hz)» 7.34( 1H> t> J = 7.9Hz)> 7.65( 1H > dd，J = 8.4，2.3Hz )，8.26 ( 1 H，d，J = 2 · 4Hz ).

MS ( ESI ) m/z: 70 1 [ ( M + H ) + ]. 元素分析·· C34H36C12F2N602S. 1.75H20 理論値：C,55.69 ; H，5.43; N，11.46. 實測値·· C，5 5 . 5 8 ; H, 5.3 2 ; N，1 1 . 0 1 . 實施例9

工程 1:(6S) -7-(l-{[(5R，6S) -5-(4-氯-3-氟苯基） -6- ( 6 -氯卩比陡-3 -基）-3 -異丙基-6 -甲基-5,6 -二氫咪哩并 [2，l-b][l，3]噻唑-2-基]羰基} -4,4-二氟-L-脯胺醯基）-6_甲基-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷將於參考例1之工程1 3所獲得的化合物，使用參考例 16之工程2所獲得的化合物替換於參考例5之工程2所獲得的化合物’使與實施例2之工程1同樣地反應，獲得呈無色 -62- 201030011 固體之標記化合物。 W-NMR ( 400MHz，DMSO-d6，1 〇〇 °C ) δ : 0.73 ( 2H ’ brs) ，0.90-0.95 ( 6H，m) ，1.12(3H，brs) ，1.25-1.31 (1H，m)，1.48-1.50( 1H，m)，1.77( 3H，s)，2.31-2.45 (2H，m) > 2.58-2.65 ( 1 H > m ) - 2.9 1-2.96 ( 2H > m )， 3.3 8-3.5 8( 3 H，m)，3.93-4.19( 2H，m)，4.65( 1H，brs)， 5.10( 1H，br)，5.50( 1H，s)，6.77( 1H，d’ J = 7.5Hz) ’ 6.96( 1H，d，J = 10.0Hz) ，7.17( 1H，d，J = 8.2Hz) ，7.32 e (1H，t，J = 8.0Hz) ，7.64 ( 1H，dd ’ J = 8.2,2.2Hz ) ’ 8.25 (1H，d，J = 2.2Hz ). MS ( ESI) m/z ·· 803 [ ( M+ H) + ]. 工程 2:(6S) -7-( l-{ [(5R，6S) -5-(4-氯-3-氟苯基） -6- ( 6-氯吡啶-3-基）-3-異丙基-6-甲基-5,6-二氫咪唑并 [2，l-b][l，3]噻唑-2-基]羰基} ·4,4-二氟-L-脯胺醯基）-6-甲基-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷

將上述工程1所獲得的化合物，使與實施例1之工程2 同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 ^-NMRC 400MHz> DMSO-d6' l〇〇°C ) δ： 0.39( 2H> t> J-7.7Hz)> 0.57( 2H> t> J-7.7Hz)> 0.92( 6H> t> J = 7.6Hz)> 1.18-1.29 (5H> m)> 1.77 (3H> s)> 2.28-2.41 (1H> m)> 2.62-2.68 ( 2H > m ) > 3.39 ( 3H，br)，3.90-4.01 ( 1H，m)， 4.09( 1H> t> J=12.5Hz)> 4.28( 1H> br)> 5.10( 1H - br)> 5.50( 1H，s)，6.76( 1H，d，J = 7.8Hz)，6.96( 1H，d，J = 9.5Hz)， 7.16 ( 1H，dd，J = 8.3 > 0 · 5 H z )，7.3 2 ( 1 H，t，J = 8 · 0 H z )， -63- 201030011 7.64 ( 1H，dd，J = 8.3，2.5 Hz ) > 8_24 ( 1H ’ d ’ J = 2.0Hz) · MS (ESI) m/z： 7〇7[(M+H) + ]. 元素分析：C33H35Cl2F3N602S· 0·5Η2Ο 理論値：C,55.31 ; H，5.06; N，11·73· 實測値：C，55.69;H，5·28;N，11·52· 實施例10

工程 1:(6R) -7-(l-{[(5R，6S) -5-(4-氯-3-氟苯基） -6- ( 6-氯吡啶-3-基）-3-異丙基-6 -甲基-5,6-二氫咪唑并 [2，l-b][l，3]噻唑-2-基]羰基} -4,4-二氟-L-脯胺醯基）-6-甲基-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷將於參考例1之工程1 3所獲得的化合物，使用參考例 1 7之工程2所獲得的化合物替代於參考例5之工程2所獲得的化合物’使與實施例2之工程1同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 MS ( ESI) m/z ： 803[(M+H) + ]· 工程 2:(6R) -7-( l-{ [(5r，6S) -5·(4-氯-3-氟苯基） -6- (6-氯吡啶-3-基）-3_異丙基_6_甲基-5,6_二氫咪唑并 [2，l-b][l，3]噻哩-2-基]羰基} -4,4_二氟-^脯胺醯基）_6_甲基-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷將上述工程1所獲得的化合物，使與實施例1之工程2 -64 - 201030011 同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 1H-NMR ( 400MHz，DMS〇-d6， 100Ϊ： ) δ : 0.38 ( 1H， br)，0.58 ( 3H，br )，0.93 ( 6H，t，J = 7.3Hz)，1.23-1.28 (3H，m)，1.78( 3H> s)> 2.32( 1H* br)· 2.46-2.50( 2H> m)，2.66-2.72( 2H，m)，2.93-3.01( 3H，m)，3.94-4.12( 2H，

m)« 5.13 ( 1H> dd> J = 9.6> 5.1Hz)> 5.51 ( 1H> s)> 6.76 (1H> d> J = 8.0Hz)> 6.95 ( 1H> d> J = 9.8Hz)> 7.16 ( 1H> dd，J = 8.0，0.5Hz)，7.32 ( 1H ’ t，J = 8.0Hz)，7.64 ( 1H， dd，J=8.3，2.5Hz)，8.24 ( 1H ’ d ’ J-2.5Hz) · MS(ESI) m/z ： 7〇7[(M+H) +]. 元素分析：C33H35Cl2F3N602S. 0.5H2O 理論値：C，55.31 ; H，5·06; N’11·73· 實測値：C，55.49; Η，5·18Ι Ν’11·47·

實施例1 1

工程1 : ( 6R) -6- ({[第三丁基（二甲基）矽烷基]氧基} 甲基）_7_[ ( 4R) -1- { [ ( 5R，6S) -5_ ( 4_ 氯-3-氟苯基）-6_ (6-氯吡啶-3-基）_3-異丙基_6_甲基_5,6_二氫咪哩并 [2，1-1>][1，3]噻哩-2-基]鑛基}-4_氟-[_脯胺醯基]-4_(二氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2·5]辛院 -65- 201030011 將於參考例1之工程13所獲得的化合物，使用於參考例1 9所獲得的化合物替代參考例5之工程2所獲得的化合物’使與實施例2之工程i同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 'H-NMRC 400MHz« DMSO-d6> 9 0 °C ) δ： -0.01( 3H> s) > 0.00 ( 3H，s)，0.63-0.76 ( 2H，m)，0.83 ( 9H，s)，0.88 (3H，d，J = 7.1Hz)，0.92( 3H，d，J = 7.1Hz)，1.23-1.30( 1H， m)，1.38-1.47 ( 1H，m)，l_74(3H，s)，2.07-2.29 (2H， m)，2.52-2.62( 1H，m)，3.47-3.96( 7H，m)，4.10-4.22( 1H， m)’ 4.41-4.53(1H，m)，4.92-5.04(lH，m)，5.37(1H， d，J = 53.0Hz)，5.49( 1H，s)，6.70-6.74 ( 1H，m), 6.89-6.95 (1H，m)，7.14( 1H，d，J = 8.5Hz)，7.31( 1H，t，J = 8.1Hz)， 7.62 ( 1H，dd，J = 8.3，2.4Hz )，8.23 ( 1H，d，J = 2.4Hz ). MS ( ESI ) m/z ： 91 5[ ( M + 1 ) + ]. 工程 2: { (6R)-7-[(4R)-l-{[(5R，6S) -5-(4-氯 -3 -氟苯基）-6- (6-氯吡啶-3-基）-3 -異丙基-6-甲基-5,6 -二氫咪唑并[2，l-bHl，3]噻唑-2-基]羰基} -4-氟-L-脯胺醯基]-4,7-二氮雜螺[2.5]辛-6-基}甲醇於上述工程1所獲得的化合物（255mg，0.28mmol)之四氫呋喃（4ml)溶液中加入氟化四-η-丁基銨（1M四氫呋喃溶液）（〇.42ml，0_42mmol )，於室溫攪拌3小時。將溶劑減壓濃縮後，將所獲得的殘餘物以乙酸乙酯稀釋，有機層依次以飽和碳酸氫鈉水、飽和食鹽水洗淨，以無水硫酸鈉乾燥。減壓餾除溶劑，獲得的殘渣經NH-矽膠管柱層析[氯仿： 201030011 甲醇=40 : 1 ( v/v )]純化，獲得呈無色固體之標記化合物 (102mg，52% )。 ^-NMRC 400MHz» DMSO-d6> 90°C ) δ： 0.33-0.41( 2H > m)> 0.51-0.59( 2H> m) - 0.92( 3H> d> J = 7.1Hz)> 0.95( 3H -d，J = 7.1 Hz ) > 1.78( 3H，s)，2.11-2.31 (2H，m)，2.56-2.64 (1H，m)，3.50-3.97( 6H，m)，4.09-4.18( 1H，m)，4.47-4.64 (1H，m)，4.83-4.94 ( 1H，m)，5.08-5.19( 1H，m)，5.37 (1H，d > J = 53.2Hz)，5.5 1 ( 1 H > s ) > 6.72-6.7 8 ( 1 H > m ) > 〇 6.93-7.00( 1H，m)，7.18( 1H，d，J = 8.3Hz)，7.35( 1H，t， J = 7.9Hz)，7.66 ( 1H，dq，J = 8.4，1.2Hz)，8.27 ( 1H，d， J = 2.2Hz ). MS ( ESI ) m/z : 705 [(M+H) +].

元素分析：C33H36C12F2N603 S· 0.5H2O 理論値：C，55.46 ; H，5.22; N，11.60 ; F，5.32; Cl，9.92; S,4.49. 實測値：C，55.42 ; Η，5·24; N，11.73 ; F，5.28; Cl，9.77; O S，4.43. 實施例1 2

工程1:(6S) -6-({[第三丁基（二甲基）矽烷基]氧基} -67- 201030011 甲基）-7-[(4R) -1-{[(5r，6S) -5_(4-氯·3-氟苯基）-6-(6-氯吡啶-3 -基）-3-異丙基-6-甲基-5,6 -二氫咪唑并 [2，l-b][l，3]噻唑-2-基]羰基} -4-氟-L-脯胺醯基]-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷將於參考例1之工程1 3所獲得的化合物，使用參考例 20所獲得的化合物替代於參考例5之工程2所獲得的化合物，使與實施例2之工程1同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 ^-NMRC 400MHz* DMSO-d6* 90°C ) δ： 0.00( 3H> s) > 0.01 ( 3H，s ) > 0.67-0.75 ( 1H，m)，0.82-0.88 ( 1H，m)， 0.84 ( 9H，s)，0.87-0.94 ( 6H，m)，1.26-1.36 ( 1H，m)， 1.39-1.47( 1H，m)，1.74(3H，s)，1.90-2.10(2H，m)， 2.56-2.65 ( 1H，m)，3.40-3.95 ( 7H，m)，4.16-4.29 ( 1H， m)，4.44-4.56 ( 1H，m)，4.99-5.12 ( 1H，m)，5.32 ( 1H， d > J = 54.2Hz ) > 5.48( 1 H - s ) > 6.69-6.74 ( 1 H > m)，6.88-6.93 (1 H > m ) > 7.14( 1H，d，J = 8.3Hz)，7.30( 1H - t > J = 8.1Hz) > 7.62 ( 1H，dd，J = 8.3 > 2.7Hz ) > 8.23 ( 1H，d，J = 2_2Hz). MS ( ESI ) m/z ： 915[(M+H) + ]. 工程 2: { (6S)-7-[(4R)-l-{[(5R，6S) -5-(4-氯 -3-氟苯基）-6-(6-氯吡啶-3-基）-3-異丙基-6-甲基-5,6-二氫咪唑并[2,l-b][l,3]噻唑-2-基]羰基} -4-氟-L-脯胺醯基]-4,7-二氮雜螺[2.5]辛-6-基}甲醇將上述工程1所獲得的化合物，使與實施例1 1之工程2 同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 *H-NMR( 400MHz> DMSO-d6' 90 °C ) δ： 0.25-0.40( 2H > 201030011 m)> 0.48-0.66( 2H> m)> 0.93( 3H> d> J = 7.8Hz)> 0.94( 3H > d > J = 7. 1Hz ) > 1.78( 3H，s)，1.97-2.15( 2H，m)，2.64-2.69 (1H，m)，2.75-2.85( 2H，m)，3.45-3.53( 1H，m)，3.65-3.97 (4H，m)，4.20-4.30 ( 1H，m)，4.41-4.51 ( 1H，m)，5.06 (1H > t > J = 8. 1Hz ) - 5.34 ( 1H，d > J = 57.1Hz)，5.51( 1H， s ) > 6.71-6.77 ( 1 H > m ) > 6.9 1-6.98 ( 1 H > m)，7.18( 1H，d > J = 8.3Hz)，7.34( 1H，t，J = 8.1Hz)，7.66( 1H，dd，J = 8.3， 2.4Hz) > 8·26 ( 1H，d，J = 2.4Hz ). ⑩ MS ( ESI ) m/z ： 705 [ ( M + H ) + ]. 元素分析：C33H36C12F2N603S. 0·.75Η2Ο 理論値：C，55.11; Η，5·25; Ν，11·60; F，5.28; Cl，9.86; S，4.46. 實測値：C，55.00; H，5.14; N，11.62 ; F，5.27; Cl，9.75; S,4.45. 實施例1 3

工程1:第三丁基（6R) -6-({[第三丁基（二甲基）矽烷基]氧基}甲基）-7-[(4R) -1-{[(5R，6S) -5-(4-氯- 3-氟苯基）-6-( 6-氯吡啶-3-基）-3-異丙基-6-甲基-5,6-二氫咪 -69- 201030011 哩并[2，1-13][1，3]噻唑-2-基]羰基}-4-氟-]^-脯胺醯基]-4,7-二氮雜螺[2·5]辛-4-羧酸酯將於參考例1之工程1 3所獲得的化合物，使用參考例 22所獲得的化合物替代參考例3之工程2所獲得的化合物，使與實施例1之工程1同樣地反應’獲得呈淡黄色固體之標記化合物。 1h_NMR( 400MHz，DMSO_d6，90。。）δ: 0.05( 6Η，S), 0.46-0.54( 2Η，m)，0.88( 9Η，s)，0.92( 3Η, d> J = 7.1Hz)， 0.95( 3H’ d’ J = 6.8Hz)’ 1·〇3-1·1〇( 1H，m)，1.28-1.35( 1H， m)，1.42 (9H，s)，1.78 (3H，s)，2.17-2.36 (2H，m)， 2.57-2.63 ( 1 H ’ m)，3.14-3.26 ( 2H，m)，3.48-3.77 ( 2H， m)，3.84-3.99( 4H，m)，4.37-4.48( 1H，m)，4.99-5.13( 1H， m)，5.39 ( 1H > d，J = 52.5Hz)，5.52 ( 1H，s)，6.74-6.78 (1H，m)，6.93-6.99 ( 1H，m)，7.17( 1H，d，J = 8.3Hz)， 7.34( 1H，t，J = 8.1Hz)，7.66(1H，dd，J = 8.3，2.4Hz)， 8.26 ( 1H，d，J = 2.0Hz ). MS ( ESI ) m/z ： 920[ ( M + 1 ) ]+. 工程 2:第三丁基（6R) -7-[(4R) -l-{ [(5R，6S) -5-(4 -氯-3-氣苯基）-6-( 6 -氯耻陡-3-基）-3 -異丙基-6-甲基-5,6_ 二氫咪唑并[2，l-b][l，3]噻唑-2-基]羰基} -4-氟-L-脯胺醯基]-6-(羥基甲基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛-4-羧酸酯將上述工程1所獲得的化合物，使與實施例11之工程2 同樣地反應、獲得呈淡褐色固體之標記化合物。 h-NMRC 400MHz，DMSO-d6，90〇C ) δ: 0.43-0.53( 2H， m)，0.92( 3H，d，J = 5.1Hz)，0.96( 3H，d，J = 6.8Hz)，1.01-1.08 201030011 (1H，m)，1.29-1.34 ( 1H » m)，1·42(9Η，s)，1.78 ( 3H > s)，2.17-2.31( 2H，m)，2.56-2.61( 1H，m)，3.17-3.24( 1H， m)，3.46-3.54( 2H，m)，3.56-3.62( 1H，m)，3.70-3.77( 1H， m)，3.84-4.01( 2H，m)，4.32-4.36( 1H，m)，4.64-4.70( 1H， m)，5.09-5.15 ( 1H，m)，5.38 ( 1H，d，J = 51.3Hz)，5.51 (1H，s)，6.72-6.79 ( 1H，m)，6.93-6.99 ( 1H，m)，7.18 (1H> d> J = 7.8Hz)> 7.3 1- 7.38( 1H> m)> 7.62-7.68 ( 1H> m ) > 8.24-8.29 ( 1 H > m). φ MS ( ESI ) m/z ： 80 5 [ ( M + 1 ) ]+. 工程3:(6R) -4-(第三丁氧基羰基）-7-[(4R) -1-ί [(5R，6S) -5-(4-氯-3-氟苯基） -6-(6-氯吡啶 -3-基） -3-異丙基-6-甲基-5,6-二氫咪唑并[2, l-b][l，3]噻唑-2-基]羰基} -4-氟-L-脯胺醯基]-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷-6-羧酸將上述工程2所獲得的化合物（lOOmg，0.12mmol)溶解於乙腈（1.5ml)與水（1.5ml)之混合溶劑，加入碘苯二乙酸（88mg，0.26mmol)、2,2,6,6-四甲基哌淀1-氧自由基 ❹ (2 0mg，0.12mmol)，於室溫攪拌4小時。加入硫代硫酸鈉水溶液（4 ml)，以乙酸乙酯提取。有機層以飽和食鹽水洗淨，以無水硫酸鈉乾燥。減壓餾除溶劑，將所獲得的殘餘物經矽膠層析[氯仿：甲醇=40 : 1~10 : 1 ( Wv)]純化，獲得呈無色固體之標記化合物（58mg，59% )。 *Η-ΝΜΚ( 400ΜΗζ» DMSO-de» 90°C ) δ： 0.49-0.61( 2H > m)，0.9 2( 3H，d，J = 7.1Hz)，0.95( 3H，d，J = 7.1Hz)，1.07-1.16 (1H，m)，1.27-1.34( 1H，m)，1_39(9H，s)，1.78( 3H， s)，2.07-2.20( 2H，m)，2.59-2.65( 1 H » m ) > 3.16-3.22( 1 H > -71- 201030011 m ) > 3.33-3.41( 1H，m)，3.74( 1H，dd，J = 36.4，11.0Hz)， 3.8 7 - 4.0 4 ( 2 H，m )，4 · 3 5 - 4.4 8 ( 1 H，m )，4 · 6 7 - 4.7 4 ( 1 H， m ) > 5.03-5.10 ( 1H - m) > 5.35 ( 1H - d > J = 53.0Hz) > 5.51 (1H，s ) > 6.74-6.78 ( 1H，m)，6.93-6.99 ( 1H，m)，7.18 (1H > d - J = 8. 3Hz ) > 7.3 5 ( 1H，t > J = 8.1Hz)，7.66( 1H > dd，J=8.4，2.6Hz)，8.26 ( 1H，d，J = 2.2Hz ). MS ( ESI ) m/z ： 8 1 9[ ( M + 1 ) ]+. 工程 4:(6R) -7-[(4R) -1-{[(5R，6S) -5-(4-氯- 3-氟苯基）-6-(6-氯吡啶-3-基）-3-異丙基-6-甲基-5,6-二氫咪唑并[2，1-15][1，3]噻唑-2-基]羰基}-4-氟-1^脯胺醯基]-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷-6-羧酸 2鹽酸鹽將上述工程3所獲得的化合物，使與參考例3之工程2 同樣地反應，獲得呈淡黄色固體之標記化合物。 1H-NMR( 400MHz，DMSO-d6，90。(：）δ: 0.8 5 -0.90 ( 1 H， m)> 0.92( 3Η> d> J = 6.8Hz)> 0.98-1.02( 1 Η > m ) > 1.03( 3H， d > J = 7.1Hz ) > 1.10-1.19( 2H，m)，2.00 ( 3H - s ) - 2.17-2.23 (1H，m)，2.26-2.33( 1H，m)，2.61-2.68( 1H，m)，3.29-3.35 (2H> m)> 3.68-3.74(lH - m)> 3.77-3.86( 1H> m)> 4.02 (1H - dd > J=19.8 > 13.4Hz)，5.17-5.31( 2H，m)，5.42( 1H， d，J = 53.5Hz)，5.52-5.56 ( 1 H > m)，5.93( 1 H > s)，6.83-6.90 (1H > m)，7.11-7.17 ( 1H，m)，7.27( 1H，d，J = 8.5Hz)， 7.40 ( 1H，t，J = 7.9Hz ) > 7.68 ( 1H，dd，J = 8.4 > 2.6Hz)， 8.29 ( 1H，d，J = 2.2Hz ) · MS ( ESI ) m/z ： 7 1 9 [ ( M + 1 ) ]+· 使用於參考例1之工程1 3所獲得的化合物及參考例23 -72- 201030011 所獲得的化合物，使與上述實施例13同樣地反應，獲得下表之化合物。 lH-NMR(400MHz, DMS0-d6> 90°C) δ ： 0. 92(3H, d, J =6. 1Hz), 0. 98-1.03(2H, m), 1.04(3H, d, J=6. 1Hz ),1. 16-1. 23(2H, m), 2.05(3H, s), 2. 05-2. 10(1H α丄丫〇 2HCI ,m), 2. 13-2. 22 (1H, m), 2. 63-2. 72 (1H, m), 3.27 -3.35(1H, m), 3. 64-3. 80 (4H, m), 4. 00-4. 10 (1H, 實施例14 ra), 5. 25-5. 31 (2H, m), 5.39(1H, d, J=53. 2Hz), 6 C.V HO ^-N ,04(1H, s), 6. 87-6. 93 (1H, m), 7. 14-7. 21 (1H, m) ,7.28(1H, d, J=8.3Hz), 7. 40(1H, t, J=7.9Hz), 7. 69(1H, dd, J=8. 5, 2. 7Hz), 8. 30(1H, d, J=2. 2H z). MS(ESI)m/z： 719[(M+1)]+. 〇實施例1 5

C'^VF —Cl ci丄 / (|Λ<] ci 7 - [ ( 4 R ) -1- { [ ( 5R，6S) -5- ( 4 -氯-3-氣本基）-6-(6-氯吡啶-3-基）-3-異丙基-6-甲基-5,6-二氫咪唑并[2，l-b][l，3] 噻唑-2-基]羰基} -4-氟-L-脯胺醯基]-4-甲基-4，7-二氮雜螺 0 [2.5]辛烷於實施例1之工程2所獲得的化合物（340mg ’ 0.503mmol)及 3 7 % 三聚甲醛水溶液（〇 . 4 1 m 1，5.0 5 mmo 1 ) 之1，4-二噚烷（l〇ml)溶液中，室溫下加入三乙醯氧基氫硼酸鈉（267mg，1.26mmol )並攪拌17小時。加入飽和碳酸氫鈉水溶液，以乙酸乙酯提取，以水、飽和食鹽水的順序洗淨’ 以無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮溶劑。將所獲得的殘餘物以矽膠層析[氯仿：甲醇=50 : 1 ( v/v))純化’獲得呈無色固體之標記化合物（3 09mg、89% )。 -73- 201030011 / 2 Η， !H-NMR( 400ΜΗζ> de-DMSO· 100°〇δ： 0.43-0-48C m)，0.56-0.62( 2Η，m)，0.93( 6Η，d，J = 7.1Hz)，1·77( 3Η s)，2.03-2.18( 1H，m)，3.30( 3H，s)，2.60-2.67( 2H’ m) ’ 2.73-2.78( 2H，m)，3.3 4( 2H，brs)，3.54( 2H，brs)，3·“-3·78 (1H，m)，3.80-3.95 ( 1H，m)，5.04 ( 1H，t，J = 7.8Hz)’ 5.3 4( lH，d，J = 53.0Hz)，5.5 0( 1H，s)，6.75( lH，d，J = 8.〇Hz)’ 6.93( 1H，d，J = 9.0Hz)，7.16( 1H，d，J = 8.3Hz)，7.33( 1H ’ t，J = 8.0Hz)，7.64( 1H，dd，J = 8.3，2.3Hz)，8.25( 1H，d， J = 2.3Hz). ❹ MS ( ESI ) m/z ： 689[ ( M + 1 ) ]+· 使用實施例2之工程2所獲得的化合物或實施例3之工程2所獲得的化合物，與上述實施例1 5同樣地反應，獲得下表化合物。

-74- 201030011 【表14】

實施例1 6 俩F *H-NMR(400MHz, d6-DMS0, 100°C) δ ： 0.20-0.25(1 H, m), 0. 46-0. 51(1H, ra), 0. 61-0. 65 (1H, m), 0 .84-0. 90 (1H, m), 0. 9l(3H, d, J=7. 1Hz), 0.94( 3H, d, J=7. 1Hz), 1. 25-1. 28(3H, m), 1.77(3H, s), 2.08(3H, s), 2. 10-2. 21 (1H, m), 2.50-2.64 (4H, m), 3. 18-3. 26 (1H, m), 3. 53-3. 60 (1H, m), 3. 68-3. 78 (1H, m), 3. 80-3. 95 (1H, m), 4.37-4. 40 (1H, m), 4. 98(1H, t, J=7. 8Hz), 5. 34(1H, d, J=53Hz), 5.49(1H, s), 6. 75(1H, d, J=8.0Hz), 6. 93(1H, d, J=9. 0Hz), 7. 16(1H, d, J=8. 3Hz), 7.33(1H, t, J=8. 0Hz), 7.64(1H, dd, J=8. 3, 2 .4Hz), 8.25(1H, d, J=2.4Hz). MS(ESl)m/z： 703[(M+1)]+. 實施例1 7 。_娜 *H-NMR(400MHz, d6-DMSO, 100°C) δ ： 0. 30(1H, br ),0. 45-0. 50(1H, m), 0. 60-0. 64(1H, m), 0.85-0· 90 (1H, m), 0.92 (3H, d, J=7.1Hz), 0.93 (3H, d, J=7. 1Hz), 1. 25-1. 35(3H, m), 1.77(3H, s), 1. 92-2. 07(1H, m), 2. 09(3H, s), 2. 62-2. 68(4H, m), 3. 22-3. 34(1H, m), 3. 43-3. 51 (1H, m), 3.6 7-3. 79(1H, m), 3. 86-3. 95 (1H, m), 4.27-4.35(1 H, m), 5.00(1H, t, J=7. 8Hz), 5. 34(1H, d, J=5 3Hz), 5.49(1H, s), 6. 74(1H, d, J=8. 3Hz), 6.9 2(1H, d, J=9. 5Hz), 7.16(1H, d, J=8. 3Hz), 7.3 3(1H, t, J=8. OHz), 7. 64(1H, dd, J=8. 3, 2. 5Hz ),8.25(1H, d, J=2. 5Hz). MS(ESI)ra/z： 703[(M+1)]+.

-75- 201030011 下述化合物依據一般製法之記載及實施例1〜12合成。【表15】實施例1 8 MMR(400MHz, d6-DMS0, 100°C) δ ： 0.43-0.49(4 H, m), 0.88(3H, d, J=7. 1Hz), 0.91(3H, d, J=7 .1Hz), 1.73(3H, s), 2.01-2. 31 (1H, m), 2.55-2 .66(2H, m), 2. 71-2. 76 (2H, m), 3. 31-3. 36 (2H, m), 3.43-3. 47 (2H, m) , 3. 67-3. 80 (1H, m), 3.85 -3. 93(1H, m), 5. 03(1H, t, J=7. 8Hz), 5. 32(1H, d, J=53Hz), 5.39(1H, s), 6.89(2H, d, J=8. 5H z), 7. 03-7. 07 (2H, m), 7. ll(2H, d, J=8. 5Hz), 7. 22-7. 25 (2H, m). MS(ESI)m/z： 656[(M+1)]+. 實施例1 9 Ή-NMR(400MHz, d6-DMS0, 100°C) δ ： 0.35-0.39(2 H, m), 0.54-0. 59(2H, m), 0.86(3H, d, J=7. 1Hz ),0.92(3H, d, J=7. 1Hz), 1.20(3H, brd, J=6. 1 Hz), 1.73(3H, s), 2.05-2. 21 (1H, m), 2.51-2.6 5(3H, m)，2.88-2.91 (1H, m), 3.23 (1H, br), 3. 45 (1H, br), 3. 67-3. 71 (1H, m), 3. 76-3. 93 (1H, m), 4.31(1H, br), 4.96(1H, br), 5. 34(1H, d, J=53Hz)，5.38 (1H, s)，6.89 (2H, d，J=7.5Hz)， 7.04-7.07 (2H，m)，7.11 (2H，d, J=7.5Hz)，7.22 -7.25(2H, m). MS(ESI)m/z： 670[(M+1)]+. 實施例2 0 。>。4 'H-NMR(400MHz, d6-DMS0, 100°C) δ ： 0. 35(1H, br ),0.56(2H, br), 0.86(1H, br), 0. 88(3H, d, J =7. 1Hz), 0.90(3H, d, J=7. 1Hz), 1.25(3H, brs) ,1.73(3H, s), 2. 01(1H, br), 2. 57-2.69 (3H, in ),2. 87-2. 92 (1H, m), 3. 35 (2H, br), 3.66-3.78 (1H, m), 3. 85-3. 93 (1H, in), 4. 52(1H, br), 5.0 0(1H; t, J=8. 1Hz), 5.32(1H, d, J=53Hz), 5.38 (1H, s), 6.88(2H, d, J=8. 6Hz), 7. 03-7. 07 (2H, ra), 7. 10(2H, d, J=8. 6Hz), 7. 22-7. 25 (2H, m). MS(ESI)m/z： 670[(M+1)]+.

〇 -76- 201030011

實施例2 1 'H-NMR(400MHz, d6-DMS0, 100°C) 6 ： 0.33-0.38(2 H, m), 0. 52-0. 58(2H, m), 0. 80-0. 83 (3H, m), 0 • 86(3H, d, J=7.1Hz), 0. 92(3H, d, J=7. 1Hz), 1 .66-1. 70 (2H, m), 1.73(3H, s), 2. 10-2. 24 (1H, m), 2. 43-2. 65 (3H, m), 2. 73-2. 78 (1H, m), 3.65 (2H, br), 3. 70-3. 80 (1H, m), 3. 82-3. 94(1H, m) ,4.05(1H, br), 4. 98(1H, br), 5. 36(1H, d, J= 53Hz), 5. 38(1H, s), 6.90(2H, d, J=8. 3Hz), 7. 04-7. 07 (2H, m), 7. 11(2H, d, J=8. 3Hz), 7.22-7 ,25(2H, m). MS(ESI)m/z： 684[(M+1)]+. 實施例2 2 。濟F Η Ή-NMR (400MHz, d6-DMS0, 100°C) δ ： 0.32-0.36(1 H, ra), 0. 50-0. 57(3H, m), 0. 83-0. 86 (3H, m), 0 ,88(3H, d, J=7. 1Hz), 0. 91(3H, d, J=7. 1Hz), 1 .62-1. 68 (2H, m), 1.73(3H, s), 2. 09-2. 22 (1H, m), 2. 59-2. 64 (2H, m), 2. 81-2. 85 (2H, m), 3.10 (1H, br), 3.50(1H, br), 3. 66-3. 78 (1H, m), 3. 85-3.93 (1H, m), 4. 21(1H, br), 5.02(1H, t, J= 8.0Hz), 5.36(1H, d, J=53Hz), 5.38(1H, s), 6. 89 (2H, d, J=8.3Hz), 7. 03-7. 07 (2H, m), 7.10(2 H, d, J=8. 3Hz), 7. 22-7. 25 (2H, m). MS(ESI)m/z: 684[(M+1)]+. 實施例2 3 *H-NMR (400MHz, d6-DMS0, 100°C) δ ： 0.44-0.48(4 H, m), 0.91(3H, d, J=7. 1Hz), 0.93(3H, d, J=7 ,1Hz), 1.74(3H, s), 2.02-2. 34 (1H, m), 2.53-2 .66(2H, m), 2. 72-2. 76 (2H, m), 3. 32-3. 37 (2H, m), 3. 42-3. 48 (2H, m), 3. 67-3. 80 (1H, in), 3.86 -3.93(1H, m), 5.03(1H, t, J=7.8Hz), 5. 33(1H, d, J=53Hz), 5.43(1H, s), 6.71(1H, d, J=8. OH z), 6. 88(1H, d, J=10.0Hz), 7. 07-7. 10 (2H, m), 7. 24-7. 29 (3H, m). MS(ESI)m/z： 674[(M+1)]+. -77- 201030011 【表17】實施例2 4 C|X； "·〇< 'H-NMR(400MHz, d6-DMSO, 100°C) 5 ： 0.33-0.38(2 H, m), 0. 54-0. 58(2H, m), 0.89(3H, d, J=6. 8Hz ),0.93(3H, d, >6. 8Hz), 1.19(3H, brd, J=6. 5 Hz), 1.73(3H, s), 2. 07-2. 19 (1H, m), 2.54-2.6 4(3H, in), 2. 87-2. 91 (1H, m), 3. 19(1H, br), 3. 44(1H, br), 3. 67-3. 70 (1H, m), 3. 76-3. 93(1H, m), 4.31 (1H, br), 4.95(1H, br), 5.35 (1H, d, J=53.6Hz), 5.44(1H, s), 6.71(1H, d, J=7. 8Hz) ,6. 88(1H, d, J=9. 1Hz), 7. 07-7. 10 (2H, m), 7. 25-7.30 (3H, m). MS(ESI)m/z： 688[(M+1)]+. 實施例2 5 分:， Ή-NMR(400MHz, d6-DMS0, 100°C) δ ： 0.35(1H, br ),0. 55(2H, br), 0. 88(1H, br), 0.91(3H, d, J =6. 9Hz), 0. 92(3H, d, J=6.9Hz), 1.2〇(3H, brs) ,1.73(3H, s), 1.98(1H, br), 2.59-2. 68 (3H, m ),2. 87-2. 91 (1H, m), 3. 4l(2H, br), 3.68-3.78 (1H, m), 3. 85-3. 93 (1H, m), 4. 50(1H, br), 5.0 0(1H, t, J=8.2Hz), 5.33 (1H, d, J=53Hz), 5.38 (1H, s), 6. 71(1H, d, J=8.2Hz), 6. 88(1H, d, J = 10.0Hz), 7. 08-7. 11 (2H, m), 7. 24-7. 29 (3H, m) MS(ESI)m/z: 688[(Μ+1)Γ· 實施例2 6 c，^ftVF Ή-NMR (400MHz, d6-DMSO, 100°C) δ ： 0.44-0.48(4 H, m), 0.90(3H, d, J=7. 1Hz), 0. 9l(3H, d, J=7 .1Hz), 1.76 (3H，s), 2.01-2. 36 (1H, m), 2.53-2 ,66(2H, m), 2. 72-2. 76 (2H, m), 3. 28-3. 37 (2H, m), 3. 44-3. 48 (2H, ra), 3. 67-3. 79 (1H, ra), 3.86 -3.94(1H, m), 5.04(1H, t, J=7. 8Hz), 5. 33(1H, d, J=53Hz), 5.46(1H, s), 6.92(2H, d, J=8. 3H z), 7. 11-7. 18(3H, ra), 7.62(1H, dd, J=8. 3, 2. 4Hz), 8. 23(1H, d, J=2. 4Hz). MS(ESI)m/z: 657[(M+1)]+. -78- 201030011 【表18】

實施例2 7 'H-NMR(400MHz, d6-DMS0, 100°C) δ ： 0.36-0.38(2 H, m), 0. 54-0. 58(2H, m), 0.89(3H, d, J=7. 1Hz ),0. 92(3H, d, J=7. 1Hz), 1.20(3H, brd, J=5. 8 Hz), 1.76(3H, s), 2. 05-2. 21 (1H, m), 2.50-2.6 5(3H, m), 2. 88-2. 91 (1H, m), 3. 24(1H, br), 3. 44(1H, br), 3. 67-3. 71 (1H, m), 3. 76-3.94(1H, m), 4. 31(1H, br), 4. 97(1H, br), 5.34(1H, d, J=53Hz)，5.45 (1H，s), 6.92 (2H, d, J=8.3Hz), 7. 11-7. 17 (3H, m), 7.62(1H, dd, J=8. 3, 2. 7Hz) ,8.22(1H, d, J=2.7Hz). MS (ESlWz: 671 [(11+1) ]+. 實施例2 8 ciXnT lH-NMR(400MHz, d6-DMS0, 100°C) δ ： 0.36 (1H, b r) , 0.56 (2H, br), 0.85 (1H, br), 0.90 (6H, d, J = 7. 1 Hz), 1.25 (3H, brs), 1.76 (3H, s) , 2.17 (1H, br), 2.60-2.69 (3H, m), 2.88-2.92 (1H, ra), 3.39 (2H, br), 3.66-3.78 (1H, m), 3.86-3.94 (1H, in), 4.45 (1H, br), 5.00 (1H, t, J=8.3 Hz), 5.33 (1H, d, J=54Hz), 5 .45 (1H, s), 6.91 (2H, d, J=8.4Hz), 7.11-7 .17 (3H, m), 7.61 (1H, dd, J=8.4, 2. 7Hz), 8 • 23 (1H, d, J=2.7Hz). MS(ESl)m/z： 671[(M+1)]+. 實施例2 9 。濟F cA /〇< 'H-NMR(400MHz, d6-DMS0, 100°C) 6 ： 0.34-0.38(2 H, m), 0. 52-0. 57(2H, m), 0. 81-0. 83 (3H, m), 0 .88(3H, d, J=7. 1Hz), 0. 91 (3H, d, J=7. 1Hz), 1 .68-1. 72 (2H, in), 1.76(3H, s), 2. 12-2. 27 (1H, in), 2. 50-2. 65 (3H, m), 2. 73-2. 76 (1H, m), 3.69 (2H, br), 3. 70-3. 80(1H, m), 3. 82-3. 95 (1H, m) ,4. 12(1H, br), 4. 97(1H, br), 5.36(1H, d, J= 54Hz), 5.45(1H, s), 6.92(2H, d, J=8. 3Hz), 7. 11-7. 18 (3H, m), 7. 62(1H, dd, J=8. 3, 2. 2Hz), 8.23(1H, d, J=2.2Hz). MS(ESI)m/z： 685[(M+1)]+. -79- 201030011 【表19】

實施例3 0 〇'^>'F Ή-NMR(400MHz, d6-DMSO, 100°C) δ ： 0.33-0.37(1 H, m), 0. 51-0. 57(3H, m), 0. 82-0. 87 (3H, m), 0 • 90 (6H, d, J=7.1Hz), 1.68-1. 72 (2H, m), 1.76( 3H, s), 1.99-2. 13 (1H, ra)，2.60—2. 65 (2H, m)， 2. 81-2. 94(2H, m), 3. 11(1H, br), 3.49(1H, br) ,3. 66-3. 78 (1H, m), 3. 86-3. 95 (1H, ra), 4.21(1 H, br), 5.02(1H, t, J=8.0Hz), 5. 36(1H, d, J= 55Hz), 5. 45(1H, s), 6.92(2H, d, J=8.0Hz), 7. 11-7. 17 (3H, ra), 7. 61 (1H, dd, J=8. 0, 2.4Hz), 8. 22(1H, d, J=2. 4Hz). MS(ESI)m/z： 685[(M+1)]+. 實施例3 1 CI^V>V c>S；i Ή-NMR(400MHz, d6-DMS0, 100°C) δ ： 0.55(4H, br s), 0. 92(3H, d, J=7.2Hz), 0. 94(3H, d, J=7. 2H z), 1. 77(3H, s), 2. 10-2. 30 (2H, m), 2.53-2.66 (2H, m), 2. 86-2. 94 (1H, m), 3. 05-3. 20 (1H, m), 3.39(1H, br), 3. 51-3. 54(1H, ra), 3.76-3.98(3 H, m), 4. 97(1H, br), 5. 04(1H, t, J=7. 8Hz), 5 .37 (1H, d, J=54Hz), 5.48 (1H, s), 6.75 (1H, d, J=8.3Hz), 6.92 (1H，d, J=8.8Hz), 7.14 (1H, d, J=8.3Hz), 7. 31(1H, t, J=8.0Hz), 7.63(1H, dd ,J=8. 3, 2.5Hz), 8.24(1H, d, J=2.5Hz). MS(ESI)m/z： 707[(M+1)]+.

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參考例1

工程1:乙基2- (6-氯吡啶-3-基）丙酸酯冰冷下，於氰化鉀（l〇.7g，161mmol)之濃氨水溶液 (100ml)中，加入氯化錢（6.88g，129mmol)及 1-(6 -氯口比陡-3-基）乙酮（i〇.〇g，64.3mmol)之甲醇（200ml)溶液，一邊返回室溫一邊攪拌3日。將反應液減壓濃縮，殘餘物以 =氯甲烷提取。有機層以無水硫酸鎂乾燥後，減壓餾除溶劑。冰冷下，於獲得的殘渣中加入濃鹽酸（1 〇〇ml)後，加熱回流2小時。將反應液減壓濃縮後，甲苯共沸，於所得的殘渣之乙醇（1 00ml )溶液中，冰冷下，滴入氯化亞硫醯 (1 0ml )。3小時加熱回流後，將反應液減壓濃縮，將所獲得的殘餘物以二氯甲烷稀釋後，以飽和碳酸氫鈉水及飽和食鹽水洗淨。有機層以無水硫酸鎂乾燥，減壓餾除溶劑。將所 -81 - 201030011 獲得的殘餘物於矽膠管柱層析（乙酸乙酯）純化，獲得呈淡黄色油狀物標記化合物（7.24g，49%)。 h-NMRC 400MHz，CDC13) δ: 1.25( 3H，t，J = 7.1Hz)， 1.70(3H’ s)’ 1.98(2H，brs)，4·19(2Η，q，J = 7.1Hz)， 7.30 ( 1H ’ d ’ J = 8.3Hz )，7.85 ( 1H，dd，J = 8.3，2.4Hz )， 8.56 ( 1H，d，J = 2.4Hz ). 工程2 ·乙基2-[(第三丁氧基羰基）胺基]-2- ( 6-氯吡啶-3_基）丙酸酯於上述工程1所獲得的化合物（l.OOg，4.37mmol)之四氫呋喃（20ml)溶液中，加入三乙基胺（1.22m卜8.75mmol) 及二碳酸二-第三丁酯（1.12ml，4.81 mmol)，加熱回流18 小時。再次加入二碳酸二-第三丁酯（〇.51ml，2.1 9mmol)，加熱回流1 8小時。將反應液減壓濃縮後，將所獲得的殘餘物以乙酸乙酯稀釋，以1 0%檸檬酸水及飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鎂乾燥。減壓餾除溶劑，將所獲得的殘餘物以矽膠管柱層析[η-己烷：乙酸乙酯=2 : 18 ( v/v )]純化，獲得呈淡黄色油狀物之標記化合物（1.2〇g，84% )。 ^-NMRC 400MHz> CDC13) δ： 1.19( 3Η> t> J = 7.2Hz) > 1.38(9Η，brs)，1.99(3Η，s)，4·08-4·26(2Η，m)，7.30 (1Η，d，J = 8.5Hz)，7.74 ( 1H > dd，J = 8.5，2.7Hz )，8.47 (1H，d，J = 2.7Hz) 工程3:第三丁基[1-( 6-氯吡啶-3-基）-1-甲基-2-側氧基乙基]胺基甲酸酯冰冷下，於氫化鋰鋁（1.43g，34.7mmol )之四氫呋喃 (20ml)懸浮液中，滴入上述工程2所獲得的化合物（5.70g， 201030011 17.3mmol)之四氫呋喃（l〇〇ml)溶液，於同溫下攪拌1小時。冰冷下，於反應液中加入1N氫氧化鈉水（6ml)，濾除析出的不溶物。減壓濃縮濾液，將所獲得的殘餘物溶解於二甲基亞颯（100ml)，於室溫下加入三乙基胺（6 0ml)及三氧化硫吡啶錯合物（5.52g，34.7mm〇l)，攪拌2小時。將反應液注入水後，以乙酸乙酯提取，以飽和食鹽水洗淨。有機層以無水硫酸鎂乾燥後，減壓餾除溶劑，將所獲得的殘餘物以矽膠管柱層析[η-己烷：乙酸乙酯=2 : 1 ( v/v )]純化，獲得〇呈淡黄色油狀物之標記化合物（2.77g，56%)。 ^-NMRC 400MHz> CDC13)6： 1.43( 9H> s)> 1.79( 3H > s)，5.73(1H，brs)，7.36(1H，d，J = 8.5Hz)，7.69(1H， dd，J = 8.5，2.7Hz)，8.42 ( 1H，s)，9.34( 1H，s). 工程4:第三丁基[2-(4-氯-3-氟苯基）-1-(6-氯吡啶-3-基）-2-羥基-1-甲基乙基]胺基甲酸酯冰冷下，於溴化4-氯-3-氟苯基鎂（0.5M四氫呋喃溶液） (100ml，50.Ommol)中，滴入上述工程3所獲得的化合物 O ( 6.47g，22.7mmol )之四氫呋喃（20ml )溶液，於同溫度下攪拌1小時。反應液中加入飽和氯化銨水而停止反應，以乙酸乙酯提取。有機層以無水硫酸鎂乾燥後，減壓餾除溶劑，於所獲得的殘餘物加入由η-己烷/乙酸乙酯而成的混合溶劑，濾取生成的沉澱物，使乾燥，獲得呈白色固體之標記化合物（7.92g，84% )。 *H-NMR ( 400MHz > CDC13) δ ： 1.45 ( 9H · brs ) » 1.56 (3H，brs)，5.08(2H，brs)，6.86( 1H，brs)，7.09( 1H， d，J = 8.8Hz ) > 7.31·7·35( 2H，m)，7.68( 1H，d，J = 7.3Hz)， -83- 201030011 8.44 ( 1H « s ). MS ( API ) m/z ： 415[ ( M+ 1 ) + ]. 工程5 :第三丁基[2-( 4-氯-3-氟苯基）-1-( 6-氯吡啶-3-基）-1-甲基-2-側氧基乙基]胺基甲酸酯冰冷下，於上述工程4所獲得的化合物（1 . 14g ’ 2.75mmol)之二甲基亞楓（8ml)溶液中，加入無水乙酸 (2.3ml，24.7mmol )，一邊緩慢地回到室溫，一邊攪拌1 8 小時。反應液以乙酸乙酯稀釋，以6 %過氯酸鈉水溶液、1 〇 %硫代硫酸鈉水溶液、及飽和食鹽水洗淨後’以無水硫酸鎂 © 乾燥。減壓餾除溶劑，將所獲得的殘餘物以矽膠管柱層析[n-己烷：乙酸乙酯=4 ·· 1 ( v/v )]純化，獲得呈淡黄色固體之標記化合物（1.10g，97% )。 4-NMR( 400MHz，CDC13) δ: 1.31( 9H，s)’ 2.03( 3H， s)，6.28 ( 1Η，brs)，7.26-7.37 (3Η，m)，7.49( 1Η，d， J = 9.5Hz)，7.7 1 ( 1H，d，J = 6.3Hz) > 8.45 ( 1H * s ). 工程6: 2-胺基-1-( 4-氯-3-氟苯基）-2- (6-氯吡啶-3-基）丙院-1-酮〇冰冷下，於4N鹽酸/二曙烷溶液（5ml )中，加入上述工程5所獲得的化合物（1.23g，2.55mmol )之二曙烷（lml ) 溶液，緩慢地昇溫，於室溫攪拌2小時。反應液以水稀釋，以η-己烷/乙酸乙酯而成的混合溶劑洗淨後，於水層加入15 %氫氧化鈉水作成鹼性後，以二氯甲烷提取。有機層以無水硫酸鎂乾燥後，減壓餾除溶劑，將所獲得的殘餘物以矽膠管柱層析[η-己烷：乙酸乙酯=1 : 1 ( ν/ν )]純化，獲得呈淡黄色固體之標記化合物（〇.75g，95%)。 -84- 201030011 MS ( API ) m/z ： 3 1 3 [ ( M + 1 ) + ]· 工程7: 2-氯-5-[4-( 4-氯-3-氟苯基）-3-甲基-1，1-二氧離子基-2,3-二氫-1，2,5-噻二唑-3-基]吡啶於上述工程6所獲得的化合物（2.99g，9.55mmol)之二噚烷（60ml )溶液中，加入分子篩4A ( 4.5g )、磺醯胺 (2.75g - 28.6mmol )及 1，8 -二氮雜雙環[5 · 4 _ 0 ]十一烷-7 -烯 (1.45g，9.52mmol)，於95°C加熱攪拌18小時。再加入磺醯胺（2.75g，28.6mm〇l)，加熱攪拌24小時。將反應液減 φ 壓濃縮後，將所獲得的殘餘物以乙酸乙酯稀釋，以10%檸檬酸水及飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸錶乾燥。於所獲得的殘餘物中加入二異丙基醚/乙酸乙酯而成的混合溶劑’濾取生成的沉澱物，乾燥，獲得呈無色固體之標記化合物 (2.86g，80% ) ° •H-NMRC 400ΜΗζ» CDC13 ) δ： 2.25( 3Η- s)> 7.29-7.47 (3Η，m)，7.59( 1Η，dd，J = 9.5，2.0Hz)，7.68( 1Η，dd， J=8.5，2.9Hz)，8.53 ( 1H，d，J = 2.9Hz ). © 工程 8:2-氯- 5-[(3R*，4S*) -4-(4-氯-3-氟苯基）-3- 甲基-1，1-二氧離子基-1，2,5-噻二唑啶-3-基]吡啶冰冷下，於上述工程7所獲得的化合物（7· 13g ’ 19.1mmol )之乙醇（63ml )溶液中，緩慢加入氫化硼鈉 (l.OOg，2 6.4mmol)，於同溫度攪拌2小時。減壓濃縮反應液後，將所獲得的殘餘物以乙酸乙酯稀釋，以1 N鹽酸水及飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鎂乾燥。減壓餾除溶劑’將所獲得的殘餘物經矽膠管柱層析[η-己烷：乙酸乙酯2 (ν/ν)]純化，獲得呈淡黄色固體之標記化合物（4.36g ’ 59 -85- 201030011 % )。 *H-NMR( 400ΜΗζ» CDC13) δ： 1.85( 3H> s)> 3.23-3.32 (4H，m)，4.92( 1H，d，J = 5.6Hz)，6.74-6.76 ( 1H’ m)， 6.80-6.83 ( 1H > m) > 7.23-7.26 ( 2H > m) > 7.55-7.60 ( 1H > m )，7.94-7.95 ( 1H，m ) · 工程 9 : ( 1R*，2S* ) -1- ( 4-氯-3-氟苯基）-2- ( 6-氯吡啶-3-基）丙烷-1，2-二胺於上述工程8所獲得的化合物（4.15g，ll.Ommol)之二噚烷（80ml)溶液中加入乙二胺（7.40ml，lllmmol)’於 0 1 00°C加熱攪拌1 8小時。減壓濃縮反應液，將所獲得的殘餘物以氯仿稀釋，以1 N氫氧化鈉水及飽和食鹽水洗淨後’以無水硫酸鎂乾燥。減壓餾除溶劑’將所獲得的殘餘物經矽膠管柱層析[氯仿：甲醇=93 : 7 ( v/v)]，獲得呈淡黄色油狀物之標記化合物（3.35g，97% )。 •H-NMRC 400MHz > CDC13) δ： 1.54( 3H> s) - 1.58( 4H > brs)，4.08 ( 1H，s)，6.72 ( 1H 5 dd，J = 8.3 » 2.0Hz)，6.96 (1H，dd，J=10.3，2.0Hz)，7.21 ( 1H，t，J = 7.9Hz)，7.23 ❹ (1H，dd，J = 8.3 > 0.7Hz)，7.59( 1H，dd，J = 8.5，2.7Hz)， 8.36 ( 1H，dd，J = 2.7，0.7Hz). MS ( ESI ) m/z ： 3 1 4[ ( M + 1 ) + ]. 工程10:(1 R，2S) -1-(4-氯-3-氟苯基）-2-(6-氯吡啶 -3-基）丙烷-1，2-二胺於上述工程9所獲得的化合物（12.6g，4〇.〇mmol)之乙醇（200ml )溶液中，加入L-( + )-酒石酸（6.3g， 42.Ommol)，於110 °C加熱回流30分鐘。加入水（8ml)，再 -86- 201030011 過熱回流1 〇分鐘後，回到室溫放置一晚後’濾取析出的固體。於所獲得的固體中加入5Ν氫氧化鈉水’將液性作成鹼性後，以二乙醚提取。以碳酸鉀乾.燥有機層後，減壓餾除溶劑，獲得呈無色固體之標記化合物（5.68g，45%)。 •H-NMRC 400MHz - CDC13) δ： 1.54( 3H> s)> 1.56( 4H -brs ) > 4.08 ( 1H > s ) > 6.72 ( 1H - dd > J = 8.3，2.0Hz ) > 6.96 (1H，dd，J=10.4 > 2.1Hz) > 7.20-7.24( 2H，m)，7.59( 1H， dd，J = 8.4，2.6Hz)，8.36 ( 1H，dd，J = 2.7，0.7Hz). ❹ MS ( ESI ) m/z ： 3 14[ ( M + 1 ) +].

[a]D=+ 55.5。（ C=1.00，氯仿，20°C ) · 工程11 :(4S，5R) -5-(4-氯-3-氟苯基）-4-(6-氯吡啶 -3-基）-4-甲基咪唑啶-2-硫酮於上述工程10所獲得的化合物（1.93g，6.14mmol)之乙醇（30ml )溶液中，室溫下加入二硫化碳（〇.58ml， 9.21mmol)，加熱回流20小時。放冷後，減壓濃縮反應液，將所獲得的殘餘物以乙酸乙酯稀釋，以飽和食鹽水洗淨後，〇以無水硫酸鎂乾燥。減壓餾除溶劑，將所獲得的殘餘物經矽膠管柱層析[氯仿：甲醇=40 : 1 ( v/v )]純化’獲得呈無色固體之標記化合物（1.94g，89% )。 •H-NMRC 400ΜΗζ» CDC13)6： 1.94( 3H> s)> 5.00( 1H > s)，6.67( 1H，d，J = 7.8Hz)，6.68 ( 1H，brs)，6.75 ( 1H， dd，J = 9.5，2.0Hz)，7.10( 1H，brs)，7.15( 1H，d，J = 8.3Hz)， 7.21 ( 1H，t，J = 7.8Hz)，7.31 ( 1H，dd，J = 8.5，2.7Hz)， 8.01 ( 1H，d，J = 2.2Hz ). MS ( ESI ) m/z: 356 [ ( M + 1 ) + ]. -87- 201030011 工程 1 2 :乙基（5R，6S ) -5- ( 4-氯-3-氟苯基）-6- ( 6- 氯吡啶-3-基）-3-異丙基-6-甲基-5,6-二氫咪唑并[2, l-b][l，3] 噻唑-2-羧酸酯於上述工程11所獲得的化合物（1.94^ 5.45 mm〇l)之乙醇（20ml)溶液中，室溫下加入乙基2_氯_4_甲基-3-側氧基戊酸酯（1.36g’ 7.09mmol)，加熱回流16小時。將反應液回到室溫，減壓餾除反應溶劑。將所獲得的殘餘物以乙酸乙酯稀釋，有機層依次以飽和碳酸氫鈉水、飽和食鹽水洗淨，以無水硫酸鎂乾燥。減壓餾除溶劑’將所獲得的殘餘物經矽膠管柱層析[η-己烷：乙酸乙酯=3 : 1 ( v/v )]純化’獲得呈無色固體之標記化合物（2.06g，76%)。 ]H-NMR( 400ΜΗζ· CDC13) δ： 0.90( 3Η· d> J = 7.3Hz) » 1.04( 3H，d，J = 7.1Hz)，1.34( 3H，t，J = 7.2Hz)，1.83( 3H， s)，4.26( 2H，q，J = 7.2Hz)，5.10( 1H，s)，6.51-6.62( 2H， m)> 7.04( 1H> d> J = 8.3Hz)> 7.16( 1H> t - J = 7.7Hz)> 7.51-7.55 (1H > m ) > 8.20-8.22 ( 1 H - m ). MS ( ESI ) m/z: 494[ ( M + 1 ) + ]. 工.程13:( 5R，6S) -5- (4 -氯-3-氟苯基）_6- (6 -氯耻陡 -3-基）-3-異丙基-6-甲基-5,6-二氫咪哩并[2,噻哩 -2-羧酸於上述工程12所獲得的化合物（2.〇6g，4.17inmol)之乙醇（30ml )溶液中’加入IN氫氧化鈉水（6ml )，於60°C 加熱攪拌1 6小時。放冷後’減壓濃縮溶劑，將所獲得的殘餘物以水稀釋後’以一乙酸洗淨。冰冷下，於水層緩慢加入 1N鹽酸水’將液性作成酸性後’以乙酸乙酯提取，有機層 201030011 以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鎂乾燥。減壓餾除溶劑，於殘餘物中加入由二乙醚/η-己烷而成的混合溶劑，濾取生成的析出物，乾燥，獲得呈淡黄色固體之標記化合物（1.51g， 87% )。 j-NMlU 400MHz，DMSO-d6)S: 0.79( 3H，d，J = 7.1Hz)， 0.98( 3H > d » J = 7.1 Hz ) > 1.73( 3H > s ) - 3.3 2-3.40 ( 1 H > m ) > 5.71( 1H，s)，6.38-6.48( 1H，m)，7.23( 1H，d，J = 8.3Hz)， 7.34-7.46 ( 2H，m)，7·66 ( 1H，dd，J = 8.3，2.4Hz)，8.25 (1H，d，J = 2.4Hz ). MS ( ESI ) m/z ： 466 [ ( M + 1 ) + ].

[a]D= + 120.5。（C=l.00，甲醇，25 °C). 參考例2

工程1 :乙基N-节基·Ν-[ ( 1- {[(苄基氧基）羰基]胺基}環丙基）羰基]甘胺酸酯於卜{[(苯基氧基）羰基]胺基}環丙烷羧酸（23.5g， lOOmmol )，乙基N-节基甘胺酸酯（193g，1〇〇mm〇1 )之二氯甲烷（235ml)溶液，冰冷下，加入卜（3_二甲基胺基丙基）-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽（2i.〇g, iiommol)及1-羥 -89- 201030011 基苯并三唑（2.7〇g’ 20mmol)’於室溫攪拌24小時。將溶劑減壓濃縮後，以乙酸乙酯稀釋’以1 N鹽酸水、飽和碳酸氫鈉水、飽和食鹽水之順序洗淨後’以無水硫酸鈉乾燥。減壓餾除溶劑，將所獲得的殘餘物經砂膠管柱層析[n_己烷：乙酸乙酯=2 : 1 ( ν/ν )]純化’獲得呈無色固體之標記化合物（35.7g，87% ) ° JH-NMR ( 4〇〇MHz * CDC13 ) δ ： 1.13 ( 2Η > br) > 1.22 (3Η > t > J = 7.4Hz ) ’ 1.25( 2H > br ) ’ 1·66(2Η，s ) ’ 3.91 (lH，br) ，4.l2(2H，q’J = 7.4Hz) > 4.91 ( 2H > brs )， 5.3 6 ( 2H > brs ) ，7.19-7.31 ( 10H，m). 工程2: 7-苄基-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷-5,8-二酮上述工程1所獲得的化合物（35.5g，86.5mmol)之乙醇（70 0ml)溶液中，加入5%鈀碳（3.6g)，於氫氣雰圍下進行2小時接觸還原。以塞利特（Celite )過濾觸媒後，減壓濃縮濾液，將所獲得的殘餘物經矽膠管柱層析[乙酸乙酯：η-己烷=1 : 1 ( v/v)]純化，獲得呈無色固體之標記化合物（20g，100% ) 〇 'H-NMR ( 400MHz » CDC13) δ ： 0.93- 1.00 ( 2Η > m)， 1.55-1.5 9( 2Η，m)，3.91( 2Η，s)，4.6 0( 2Η，s)，7.25-7.37 (5H，m) ，7.86 ( 1H，brs ). MS ( ESI ) m/z ： 23 1 [ ( M + H ) + ]. 工程3: 7-苄基-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷於上述工程2所獲得的化合物（20g，86.8mmol)之四氫呋喃（200ml)溶液中，冰冷下加入硼烷-四氫呋喃錯合物 201030011 (0.93M四氫呋喃溶液）（3 75mi，〇.35mol )，接著加熱回流 19小時。冰冷下，於反應混合液中加入甲醇（130ml )並攪拌60分鐘後，將溶劑減壓濃縮。所獲得的殘餘物中加入乙醇（45 0ml)、水（150ml)及三乙基胺（150ml )，加熱回流 2小時後’將溶劑減壓濃縮。將所獲得的殘餘物以乙酸乙酯稀釋’以飽和碳酸氫鈉水、飽和食鹽水之順序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓餾除溶劑，將所獲得的殘餘物經矽膠管柱層析[氯仿：甲醇=10 : 1 ( v/v)]純化，獲得呈無色油狀物 φ 之標記化合物（10.4g，59%)。 h-NMR ( 400MHz，CDC13) δ : 0_4 卜 0.44 ( 2H，m)， 0.57-0.60 ( 2H > m )，1.49 ( 1 Η > br ) > 2.22 ( 2H - s ) > 2.45 (2H，brs ) ，2.97 ( 2H，t，J = 4.9Hz ) ，3.50 ( 2H > s )， 7.22,7.32 ( 5H > m ). 工程4: 7-苄基-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5] 辛烷 ❾ 於上述工程3所獲得的化合物（10.3g，50.9mmol)及三乙基胺（17ml，122mmol)之二氯甲烷（ 200ml)溶液中，冰冷下滴入無水三氟乙酸（8.50ml，6 1.1 mmol)，同溫度下攪拌1小時。於反應液中加入飽和碳酸氫鈉水，於氯仿稀釋後，以飽和食鹽水洗淨，以無水硫酸鈉乾燥。減壓餾除溶劑，獲得呈無色油狀物之標記化合物（15.5g，100%)。 MS (ESI) m/z ： 299 [ ( Μ + Η ) + ]. 工程5: 4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷鹽酸鹽 -91 - 201030011 於上述工程4所獲得的化合物（15.5g，5 1mm〇l )之乙醇（ 250ml)溶液中，加入IN鹽酸/乙醇（105ml，105 mmol) 及5%鈀碳（3g)，氫氣雰圍下進行15小時接觸還原。以塞利特過濾觸媒後，減壓濃縮濾液，於獲得的殘餘物中加入由乙醇/二乙醚而成的混合溶劑，濾取析出的固體，獲得呈無色固體之標記化合物（10.3g，83%)。 W-NMRX 400MHz，DMSO-d6，80°C )δ : 1.18( 4H，s)， 3.16( 2H > s )，3.25 ( 2H，t，J = 5 · 1 Hz ) > 3.89( 2H - brs )， 9.71 ( 2H > br). MS ( ESI ) m/z : 209[(M+H) + ].

工程1 :第三丁基（2S，4R) -4-氟-2- { [4-(三氟乙醯基） -4,7-二氮雜螺[2.5]辛·7-基]羰基}吡咯啶-1-羧酸酯 ◎ 於（4R)-l-(第三丁氧基羰基）-4-氟-L-脯胺酸（400mg， 1.71mmol)之二甲基甲醯胺（8ml)溶液中，加入1-羥基苯并三唑（46mg，0_34mmol)、1-(3-二甲基胺基丙基）-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽（ 502mg，2.61mm〇l)，於室溫攪拌15 分鐘。其次，加入參考例2之工程5所獲得的化合物（46 Omg， 2.05mmol)及二異丙基乙基胺（〇,45ml，2.57mmol)，於室溫攪拌16小時。以乙酸乙酯稀釋，有機層以飽和碳酸氫鈉水、飽和食鹽水之順序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓餾 -92- 201030011 除溶劑，將所獲得的殘餘物經矽膠管柱層析乙酯=1: 1 (V/V)]純化，獲得呈無色固龍 ( 560mg，11% ) ° W-NMRC 400MHz，DMSO-d6，90〇C )δ: m)，1.37( 9H，s)，1.95-2.09 ( 1H，m)，2 m)> 3.41-3.54( 3H> m)> 3.60-3.75( 5H - m)« m)，5.26 ( 1H > d，J = 53.7Hz ). MS ( ESI ) m/z : 424[(M+H) + ]· e 工程2: 7-[(4R) -4-氟-L-脯胺醯基]-4 -4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷於上述工程1所獲得的化合物（560mg 二氯甲烷（l〇ml)溶液中加入三氟乙酸（1C 拌1小時。反應將溶劑減壓濃縮後，加入ί (3 0ml)，以氯仿提取3次。有機層以飽和: 無水硫酸鈉乾燥。減壓餾除溶劑，獲得呈淡: 化合物（3 80mg，89% ) 〇 ❹ "H-NMRC 400MHz* DMSO-d6* 90°C )δ： m)，2.00-2.07( 1H，m)，2.10-2.16( 1H，m)， m)，3.04-3.14 ( 1H，m)，3.51 (2H，s)，3 m)，4.05-4.13 ( 1H，m)，5.23 ( 1H，d，J = MS ( ESI ) m/z ： 324[ ( M + H ) + ]. 參考例4 :[n-己垸：乙酸 !之標記化合物 0.98-1 .10( 4H > • 49-2.54 ( 1 H， 4.73-4.80 ( 1 H， -(三氟乙醯基），1 . 3 2 mmo 1 )之 )，於室溫攪泡和碳酸氫鈉水食鹽水洗淨，以黄色固體之標記 0.98-1 .11 ( 4H ’ 2.68-2.77 ( 1 H - • 63 -3.78 ( 4H ’ 53.5Hz ). -93- 201030011

工程1:甲基 N-苄基-N-[(l-{[(苄基氧基）羰基]胺基}環丙基）羰基]-L-丙胺酸酯冰冷下，於甲基 N-苄基-L-丙胺酸酯（5.20g，26.9mmol) ® 及1-U(苄基氧基）羰基]胺基}環丙烷羧酸（6.30g，26.7mmol ) 之二氯甲烷（150ml)溶液中加入N，N’-二環己基碳化二亞胺 (6.0g，29.0mm〇l)，於室溫攪拌一晚。減壓濃縮後，以乙酸乙酯稀釋，濾去不溶物後，濾液以1N鹽酸水及飽和食鹽水洗淨，以無水硫酸鈉乾燥。減壓餾除溶劑，將所獲得的殘餘物經矽膠管柱層析[η-己烷：乙酸乙酯=1 : 3 ( v/v )]純化，獲得呈無色油狀物之標記化合物（7.8〇g，71% ),。 'H-NMR ( 400MHz > CDC13 > 70°C ) δ ： 1.03-1.11 ( 2Η - ❹ m)> 1.37( 3H> d> J = 7.1Hz)> 1.43-1.47( 2H> m)> 3.72( 3H > s)，4.48( 1H，brs)，4.61 ( 1H，d，J=16.6Hz)，4.91 ( 1H， d，J=16.6Hz)，4.99 ( 2H，s)，5.20 ( 1H，brs )，7.20-7.34 (1 0 H，m ). 工程2:(6S) -7-苄基-6-甲基-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷 -5,8-二酮使上述工程1所獲得的化合物與參考例2之工程2同樣 •94- 201030011 地反應，獲得呈無色油狀物之標記化合物。 'H-NMR ( 400MHz * CDC13 ) δ ： 0.98-1-07 ( 2Η » m) > 1.36 ( 1H，m)，1.47 (3H，d，J = 7.1Hz)，85 (1H，m)’ 3.91 ( 1H，q，J = 7.1Hz )，4.06 ( 1H，d，J=14-9Hz )，5.21 (1H，d，J=14.9Hz)，7.26-7.37 ( 5H > m) · 工程3:( 6S) -7 -苄基-6-甲基-4,7 -二氮雜螺[2·5]辛烷使上述工程2所獲得的化合物與參考例2之工程3同樣地反應，*獲得呈無色固體之標記化合物。

W-NMR ( 400MHz，CDC13) δ : 0.30-0.34 ( 1H，m)， 0.36-0.40 ( 1H，m)，0.48-0.53 ( 1H，m)，0.55-0.61 ( 1H， m)，1.16 (3H，d，J = 6.3Hz)，2.12( 1H，d，J= 11.7Hz)， 2.26-2.33 ( 2H，m)，2.74 ( 1H，dd，J=13.2，9.3Hz)，2.90 (1H，dd，J=13.2,3.4Hz)，3_15 ( 1H，d，J=13.4Hz)，4.07 (1H > d > J=13.4Hz)，7.20-7.3 4 ( 6H > m). 工程4:(63)-7-苄基-6-甲基-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷使上述工程3所獲得的化合物與參考例2之工程4同樣地反應，獲得呈無色油狀物之標記化合物。 ^-NMRC 400MHz> CDC13)5： 0.68( 1H> m)» 0.79( 1H > m)，0.93 ( 1H，m)，1.21 (3H，d，J = 6.1Hz)，1.33 ( 1H， m)，2.17 ( 1H，d，J=12.0Hz)，2.49 (1H，d，J= 12.0Hz)， 2.59 ( 1H « m)，3.16( 1H，d，J=1 3.4Hz ) - 3.33 ( 1H * dd > J= 13.4,9.3Hz ) > 3.77 ( 1H，d，J=13.4Hz)，4.04 ( 1H，d， J=13.4Hz) > 7.2 3 -7.34 ( 5H - m). 工程5:(6S) -6-甲基-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺 -95- 201030011 [2.5]辛烷鹽酸鹽使上述工程4所獲得的化合物與參考例2之工程5同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 *H-NMR( 400MHz · DMSO-d6 ) δ： 0.95( 1Η> brs)> 1.12 (1Η，brs)，1.27( 1H > m)，1.33 ( 3H « d，J = 6.3Hz ) > 1.41 (1H > brs ) > 2.90 ( 1H > m ) > 3.38-3.59( 3H，m)，4.03( 1H， brs ). MS ( ESI ) m/z ： 223 [ ( M + H ) + ]· 參考例5

工程1:第三丁基（23,4尺）-4-氟-2-{[(68)-6-甲基 -4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2 ·5]辛-7-基]羰基}吡咯啶 -1-羧酸酯使用參考例4之工程5所獲得的化合物替代參考例2之工程5所獲得的化合物，與參考例3之工程1同樣地反應，獲得呈淡黄色油狀物之標記化合物。 ^-NMRC 400MHz> DMSO-d6> 100°C )δ： 0.69-0.71( 2H^ m)，1.11( 3H，d，J = 6.6Hz)，1.28- 1.32( 2H> m)> 1.37( 9H > s)，1.49( 1H，m)，2.05( 1H，m)，3.49-3.68 ( 5H，m)， 3.88( 1H，brs)，4.67-4.75( 2H，m)，5.27( 1H，d，J = 54.〇Hz). MS ( ESI ) m/z ： 460[ ( M + Na ) + ]. 工程2:(6S) -7-[(4R) -4-氟-L-脯胺醯基]_6_甲基-4- 201030011 (三氟乙醯基）-4,7 -二氮雜螺[2.5]辛烷使上述工程1所獲得的化合物與參考例3之工程2同樣地反應’獲得呈淡黄色油狀物之標記化合物。 ^-NMRC 400ΜΗζ» DMSO-d6> 1〇〇°ς )δ： 0.68-0-77( 2Η> m)，1.12( 3Η，d’ J = 6.6Hz)，1.28( 1Η，dd，J=17.0，7·ΐΗζ)， 1,49( 1H，dd，J= 17.0, 7.1Hz)，2.01-2.24( 2H，m)，2.65-2.68 (1H，m)’ 3.00-3.14( 1H’ m)，3.42-3.61 (3H，m)，3.90 (1H’ brs)，4·08( 1H’ t，J = 7.6Hz)，4.66-4.69( 1H，m)， ❹ 5.25 ( 1H，dt，J = 55.6，4.5Hz ). 參考例6

工程1 :甲基N-苄基-N-[ ( 1- {[(苄基氧基）羰基]胺基}環丙基）羰基]-D-丙胺酸酯使用甲基 N-苄基-D-丙胺酸酯替代甲基 N_苄基-L_丙胺酸酯，與參考例4之工程1同樣地反應，獲得呈無色油狀物之標記化合物。 •H-NMR ( 400MHz > CDC13) δ ： 1.07 ( 2H > brs ) > 1.36 (3H，d，J = 7_l Hz)，1.43( 2H，brs)，3.61( 3H, s)，4.48-4.52 (1H’ m)’ 4.61( 1H，d，J=17.4Hz)，4.87( 1H，d，J=17.4Hz)， -97- 201030011 4.98 (2H，s)，5.12 ( 1H，brs)，7.20-7.32 ( 10H，m). MS ( ESI ) m/z ： 411[ ( M+ H) + ]. 工程2:(6尺）-7-苄基-6-甲基-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷 -5，8-二酮使上述工程1所獲得的化合物與參考例2之工程2同樣地反應，獲得呈無色油狀物之標記化合物。

•H-NMR ( 400MHz · CDC13) δ ： 0.97- 1.03 ( 2Η ' m) > 1.34-1.41( 2H，m)，1.47( 3H，d，J = 7.1Hz)，1.81-1.88( 1H， m ) > 4.06 ( 1H，d > J = 14.9Hz)，5.19 ( 1H，d，J=14.9Hz)， 6·74 ( 1H，brs)，7.2 5 -7.37 ( 5 H，m). 工程3:( 6R) -7-苄基-6-甲基-4，7-二氮雜螺[2.5]辛烷使上述工程2所獲得的化合物與參考例2之工程3同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 o ^-NMR ( 400MHz > CDC13) δ ： 0.3 0-0.40 ( 2Η > m) > 0.48-0.61 (2H，m)，1.16( 3H，d，J = 6.3Hz)，1.58( 1H， brs)，2.12 ( 1H，d’ J= 1 1 .5 Hz ) > 2.25 -2.3 3 ( 2H > m ) 1 2.73 (1H> dd - J=13.1 > 9.3Hz)> 2.90( 1H - dd - J = 13.1,3.0Hz)> 3,15( 1H，d, J=13.4Hz)，4.08( 1H> d，J=13.4Hz), 7.20-7.33 (5H > m ). 工程4:( 6R) -7-苄基-6-甲基- 4-(三氟乙醯基）-4，7-二氮雜螺[2.5]辛烷使上述工程3所獲得的化合物與參考例2之工程4同樣地反應，獲得呈無色油狀物之標記化合物。 ^-NMR ( 400MHz > CDC13 ) δ ： 0.64-0.92 ( 3H > m)-1.20( 3H，d，J = 6.1Hz)，1.30-1.36( 1H，m)，2.16( 1H，d， •98- 201030011 J=12.〇Hz)> 2.48( 1H - d* J=12.0Hz)> 2.58( 1H> brs)> 3.15 (1H > d，J = 1 3.4Hz ) > 3.3 1 ( 1H > dd > J=13.4,9.5Hz)，3.76 (1H > d . J=13.4Hz)，4.02 ( 1H，d，J= 13.4Hz)，7.23-7.33 (5 H > m ). 工程5 : ( 6R) -6-甲基-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺 [2·5]辛烷鹽酸鹽使上述工程4所獲得的化合物與參考例2之工程5同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 ® h-NMR ( 400MHz，DMSO-d6，7 0°C ) δ ： 0.93 ( 1H， brs)，1.17( lH，brs)，1.24-1.30(lH，m)，1_34(3H， d ’ J = 6.3Hz ) » 1.40( 1 H ’ brs )，2 · 89( 1 H，d，J= 1 2.0Hz )， 3.14( lH，brs) ，3.40-3.46(2H，m) ，4.04( 1H，brs)， 9.84 ( 2H，brs ). MS (ESI) m/z: 223 [ ( Μ + Η ) 參考例7

工程1:第三丁基（2S，4R) -4 -氟- 2-{[(6R)冬甲基 -4-(三氟乙醯基）_4,7 -—氮雜螺[2.5]辛·7 -基]幾基丨卩比咯啶 •1-羧酸酯使用參考例6之工程5所獲得的化合物替代參考例2之工程5所獲得的化合物’與參考例3之工程1同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物° -99- 201030011 4-NMR( 400MHz，DMSO-d6，100 〇C )δ: 0.68-0.71( 2H， m)，1.09( 3H，brs)，1.28-1.31 (2H，m)，1.36( 9H，s)， 1.47( 1H> m)> 1.95 ( 1H> brs)> 3.46-3.68 ( 5H> m) - 3.91 (1H · brs)，4.69-4.71( 2H，m ) > 5.23( 1H - d，J = 54.6Hz). 工程2:(6R) -7-[(4R) -4-氟-L-脯胺醯基]-6-甲基-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷使上述工程1所獲得的化合物與參考例3之工程2同樣地反應，獲得呈淡黄色油狀物之標記化合物。

!H-NMR( 400MHz* DMSO-d6> 100°C )δ： 0.67-0.73( 1H-m ) - 0.86 ( 1H，brs)，1.12 ( 3H > d > J = 5.9Hz)，1.28( 1H， dt，J=12.4,5.0Hz)，1 .49 ( 1H，dt，J=12.4,5.2Hz )，1.94-2.22 (2H，m)，2.65-2.68 ( 1H’ m)，3.13 ( 1H，ddd，J = 32.5, 13.0, 4.2Hz)，3.43-3.61( 3H，m)，3.92( 1H，brs)，4.04-4.06 (1H，m)，4.65( 1H，brs)，5.24( 1H，dt，J = 55.6，4.6Hz). 參考例8

工程1:甲基（2S) -2-{苄基[(1-{[(苄基氧基）羰基]胺基}環丙基）羰基]胺基} 丁酸酯使用甲基（2S) -2-(苄基胺基）丁酸酯替代甲基Ν· -100- •201030011 苄基-L-丙胺酸酯，與參考例4之工程1同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 j-NMR ( 400MHz，DMSO-d6 ’ 90〇C ) δ : 0.70 ( 3H，t， J = 7.4Hz)，0.83-0.89( 1H，m)，1.00-1.06( 1H，m)，1.09-1.16 (1H，m)，1.30-1.37( 1H，m)，1.58-1.68( 1H，m)，1.83-1.92 (1H > m)，2.87-2.92 ( 1H，m)，3.48( 3H’ s)，4.50-4.56 (1H，m)，4.64( 1H，d，J=15.9Hz)，5.00( 2H，q’ J=12.1 Hz)， 7.17-7.33 ( 10H，m)，7.76 ( 1H，brs). 〇 MS (ESI) m/z： 425[(M+H) + ]· 工程2: (68)-7-苄基-6-乙基-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷 5,8-二酮使上述工程1所獲得的化合物與參考例2之工程2同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 W-NMR ( 400MHz，CDC13) δ : 0.93-0.98 ( 2H，m)， 0.99( 3H> t> J = 7.4Hz)> 1.35-1.40( 1H> m)> 1.79-1.86( 1H · m)，1.91-1.97( 2H，m)，3.90( 1H，t’ J = 5.4Hz)，3·94( 1H， ❹ d，J = 1 4.9Hz ) > 5.35 ( 1H > d > J=14.9Hz ) > 7.25 -7.3 6 ( 5H · m ) - 7.39 ( 1H > brs ). MS (ESI) m/z ： 259 [ ( M + H ) + ]· 工程3: ( 6S) -7-苄基-6-乙基- 4-(三氟乙醯基）-4，7- 二氮雜螺[2.5]辛烷使上述工程2所獲得的化合物與參考例2之工程3同樣地反應後，將所獲得的化合物與參考例2之工程4同樣地反應，獲得呈無色油狀物之標記化合物。 !Η-ΝΜΚ( 400MHz> DMSO-de' 90°C ) δ： 0.65-0.70 ( 1 H > -101- m ) 201030011 m)，0.85-0.90( 2H，m)，0.91( 3H，t，J = 7.4Hz) (lH，m)，1.46-1.53( lH，m)，1.66-1.75( lH，m) (1H> m)» 2.38-2.45(2H> m)> 3.32( 1H> d> J 3.40-3.47( 1H，m)，3.84( 1H，d，J=11.7Hz)， d ’ J=13.9Hz)，7.18-7.23 ( 1H，m)，7.27-7.31 ( MS ( ESI ) m/z: 327[(M+H) + ]. 工程4: (6S) -6-乙基-4·(三氟乙醯基）- 螺[2.5]辛烷鹽酸鹽使上述工程3所獲得的化合物與參考例2之地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 *H-NMR( 400MHz* DMSO-d6> 90°C )δ：〇·89 m ) > 0.99( 3Η，t，J = 7.6Hz)，1.16-1.21( 1Η，m) (lH，m)，1.41-1.48( lH，m)，1.66-1.74( lH’m〕 (1H，m)，2.86( 1H，d’ J=12.9Hz)’ 3.24-3.32 3.37-3.44 ( 1 H，m)，3.45 ( 1H，d，J=12.9Hz) 1H， MS ( ESI ) m/z : 23 7 [(M+H) +]_ 參考例9 ,1.18-1-23 ,2.31-2.36 = 13.9Hz ) ’ 3.97 ( 1H . 4H，m) 二氮雜工程5同樣 .0.94( 1H ,1.25-1-31 ,,1.77-1-85 (1H，m )，，4〇6-4·14 o 0

工程1 OH

工程2

工程 1 :第三丁基（2S，4R) -2· { [( 6S) -6-氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛-7-基]羰基}_4- 201030011 冰冷下，於（4R) -1-(第三丁氧基羰基）-4-氟-L-脯胺酸（ 520mg，2.23mmol)之二氯甲烷（8ml)溶液中，加入 1-氯-N，N，2-三甲基-1-丙烯基胺（0.35ml，2.68mmol)。同溫度攪拌1小時後，加入參考例8之工程4所獲得的化合物 (730mg 5 2.68mmol)及三乙基胺（0.78ml，5.5 8 mmol )'於室溫再攪拌3小時。以氯仿稀釋，有機層依次以飽和碳酸氫鈉水、飽和食鹽水洗淨，以無水硫酸鈉乾燥。減壓餾除溶劑，將所獲得的殘餘物經矽膠管柱層析[η-己烷：乙酸乙酯=2 : 1 〇 ( V/V)]純化，獲得呈無色固體之標記化合物（780mg，77 % )。 'H-NMRC 400MHz> DMSO-d6> 90°C ) δ： 0.67-0.73( 2H > m)> 0.83-0.88 (3H - m)> 1.29-1.33 ( 1H> m)> 1.39 (9H-s ) > 1.45-1.52( 3H，m)，2.07-2.17( 1H，m)，2.43-2.47( 1H， m)，3.36-3.77( 6H，m)，4.40-4.55( 1H，m)，4.70-4.86( 1H， hi)，5.30 ( 1H，d，J = 54.9Hz ). MS ( ESI ) m/z ： 452[ ( M + H ) + ]. O 工程 2 : ( 6S) -6-乙基-7-[ ( 4R) -4-氟-L-脯胺醯基]-4- (三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷使上述工程1所獲得的化合物與參考例3之工程2同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 •H-NMRC 400ΜΗζ· DMSO-d6> 90°C ) δ： 0.66-0.75( 2H > m)，0·83(3Η，t > J = 7.2Hz) > 1.24-1.31( 1H，m)，1.43-1.53 (3H，m )，1.96-2.08( 1H，m)，2.16-2.32( 1 H > m ) > 2.67-2.74 (1H，m)，2.91-2.99( 1H，m)，3.38-3.57( 4H，m)，4.05-4.16 (1H> m)> 4.43-4.53 ( 1H> m)> 5.24( 1H> d> J = 56.1Hz). -103- 201030011 MS (ESI) m/z: 352[(M+H) + ]. 參考例1 0

工程1:甲基（2R) -2-丨苄基[(l-{[(苄基氧基）羰基]胺基}環丙基）羰基]胺基} 丁酸酯使用甲基（2R )-2-(苄基胺基）丁酸酯替代甲基 N_ 苄基-L-丙胺酸酯，與參考例4之工程1同樣地反應，獲得呈淡黄色固體之標記化合物。 W-NMRC 400MHz，DMSO-d6，90。。）δ: 0.71( 3H，t， J = 7.4Hz)，0.85-0.90( 1Η，m)，1.02-1.08( 1Η，m)，l.uq 16 (1H’ m)，1.32-1.38( 1H，m)，1.59-1.68( 1H，m)，I."] 93 (1H> m)» 3.49 (3H- s)> 4.30-4.38 ( 1H> m). 4.49.4 5? (1H，m)，4.65( 1H，d，J=16.1Hz)，5.01( 2H，q，j=12.2HZ), 7.18-7.34 ( 10H，m)，7.77 ( 1H，brs) · MS (ESI) m/z ： 425 [ ( M + H ) + ]. 工程2: ( 6R) -7-苄基-6-乙基-4,7-二氮雜螺[2 5]辛院 -5,8-二酮使上述工程1所獲得的化合物與參考例2之工程2同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 -104- 201030011 'H-NMR ( 400MHz，CDC13) δ : 0.93-0.98 ( 2H ’ m)， 0.99( 3H, t，J = 7.6Hz)，1.35-1.40( 1H，m)，1.80-1.86( 1H， m)，1.91-1,98( 2H，m)，3.89( 1H，t，J = 5.2Hz)，3.94( 1H ’ d，J = 14.9Hz)，5.35 ( 1H，d，J=14.9Hz)，7.25 -7.3 5 ( 5H ’ m)，7,5 1 ( 1 H，brs). MS ( ESI ) m/z ： 259[ ( M + 1 ) + ]· 工程3:(6R) -7-苄基-6-乙基-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷〇使上述工程2所獲得的化合物與參考例2之工程3同樣地反應後，所獲得的化合物與參考例2之工程4同樣地反應，獲得呈無色油狀物之標記化合物。 ^-NMRC 400MHz> DMSO-d6* 90°C ) δ： 0-65-0.70( 1H > m)> 0.85-0.90( 2H> m)> 0.91 (3H> t» J = 7.4Hz)> 1.18-1.23 (1H，m)，1.46-1.53( 1H，m)，1.66-1.75( 1H’ m)’ 2.3 卜 2.36 (1H，m)，2.38-2.45( 2H，m)，3.32( 1H’ d’ J=13.9Hz)’ 3.40-3.47( 1H> m)> 3.84( 1H> d - J=11.7Hz)> 3.97( 1H> © d，J= 13.9Hz)，7.18-7.23 ( 1H，m)，7.27-7.31 (4H，m) · MS ( ESI ) m/z : 327 [ ( M + H ) + ]· 工程4:( 6R) -6-乙基- 4-(三氟乙醯基）_4,7·二氮雜螺 [2.5]辛烷鹽酸鹽使上述工程3所獲得的化合物與參考例2之工程5同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物° •H-NMIU 400MHz，DMSO-d6，70。。）δ : 0.89-0.94 ( 1H， m)，0.99(3Η，t，J = 7.6Hz)，1.16-1.21 ( 1Η，m)’ 1.25-1.31 (1H，m)，1.41-1.48( 1H，m)，1.66-1.74( 1H’ m)’ 1.77-1.85 -105- 201030011 (1Η > m)，2.86( 1Η，d，J=12.9Hz ) > 3.24-3.3 2 ( 1 H > m ) > 3.37-3.44 ( 1H > m) > 3.45 ( 1H > d - J=12.9Hz) - 4.06-4.14 (1 H > m ). MS ( ESI) m/z ： 237[ ( M + H ) + ]. 參考例1 1

工程 1 :第三丁基（2S，4R) -2- { [ ( 6R) -6-乙基-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛-7-基]羰基}-4-氟吡咯啶-1- 羧酸酯使用參考例1 〇之工程4所獲得的化合物替代參考例8 之工程4所獲得的化合物，與參考例9之工程1同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 4-NMR( 400MHz，DMSO-d6，100〇C )δ: 0.69-0.73( 1H’ m)，0.76-0.84( 2H，m)，0.93-0.98( 1H，m)，1.30-1.38( 3H， m)，1.39( 9H，s)，1.44-1.51 (2H，m)，1.85-2.08 (2H， m)，3.25-3.61( 4H，m)，3.66-3.77( 1H，m)，4.00-4.07( 1H， m)，4.58-4.80 (2H，m)，5.25( 1H，d，J = 51.3Hz) · MS ( ESI ) m/z ： 474[ ( M + Na ) + ]. 工程2: (6R) -6-乙基- 7-[(4R) -4-氟-L-脯胺醯基]-4- (三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷使上述工程1所獲得的化合物與參考例3之工程2同樣地反應，獲得呈淡黄色固體之標記化合物。 -106- 201030011 4-NMR( 400MHz，DMSO-d6，100。。）δ: 0.65-0.72( 1H， m ) > 0.79-0.8 5 ( 3H > m ) - 1.24- 1.32( 1H，m)，1.42-1.55( 4H， m)，1.89-2.05( 1H，m)，2.12-2.20( 1H，m)，2.64-2.69( 1H， m)，2.91( 1H，t，J=12.5Hz)，3.07-3.20( 1H，m)，3.38-3.58 (3H，m)，3.97-4.09 ( 1H，m)，4.51-4.64 ( 1H，m)，5.23 (1H，d，J = 55.7Hz ). MS ( ESI ) m/z ： 3 52[ ( M + H ) +]. 參考例1 2

工程1:甲基 N-[(l-{[(苄基氧基）羰基]胺基}環丙基）甲基]-D-白胺酸酯於苄基（1-甲醯基環丙基）胺基甲酸酯（3.0g，13.7 mmol) 之二氯甲烷（200ml )溶液中加入甲基 D-白胺酸酯鹽酸鹽 C 2.7 3 g > 15.1mmol)、氯化鲜（2.8g，20_5mmol)、及三乙醯氧基氫硼酸鈉（9.16g，4 1.1 mmol)，於室溫攪拌18小時。減壓下濃縮反應液，將所獲得的殘餘物以乙酸乙酯稀釋，以飽和碳酸氫鈉水及飽和食鹽水洗淨後，有機層以無水硫酸鎂乾燥。減壓下餾除溶劑，將所獲得的殘餘物經矽膠管柱層析 -107- 201030011 [η-己烷：乙酸乙酯=2 : 1 ( v/v )]純化，獲得呈淡黄色油狀物之標記化合物（2.24g，47% )。 W-NMR ( 400MHz，CDC13) δ : 0.62-0.94 ( 4H ’ m)， 0.88( 3H，d，J = 6.6Hz)，0.91( 3H，d，J = 6.6Hz)，1.37-1.66 (2H，m)，1.70-1.77( 1H，m)，2.46( 1H，d，J=12.9Hz ) > 2.82( 1H，d，J=12.9Hz)，3.24( 1H，t，J = 7.4Hz)，3.68( 3H， s ) - 5.08 ( 1H > brs ) » 5·11 (2H，s)，7.22-7.42 (5H，m) · 工程2:甲基 N-[(l-{[(苄基氧基）羰基]胺基}環丙基）甲基]-N-(第三丁氧基羰基）-D-白胺酸酯使上述工程1所獲得的化合物與參考例1之工程2同樣地反應，獲得呈無色油狀物之標記化合物。 W-NMR ( 400MHz，CDC13) δ : 0.64-0.76 ( 1 H，m)， 0.78-0.97( 2H，m)，0.87( 3H，d，J = 6.6Hz)，0.90( 3H，d， J = 6.6Hz)，1.32- 1.40 ( 1 H，m)，1.4 1 ( 9H，s)，1.42-1.67 (1H，m)，1.72- 1.89( 2H > m ) > 3.00-3.19( 1H，m)，3.39-3.72 (1H，m)，3.73 (3H，s)，3.74-4.18 ( 1H，m)，5.03( 1H， d > J=11.7Hz) > 5.13 ( 1H，d，J = 11.7Hz)，5.92-6.08 ( 1H， m)，7.25-7.41 (5H，m) · 工程3:苄基[l-({(第三丁氧基羰基）[(1R) (經基甲基）-3-甲基丁基]胺基}甲基）環丙基]胺基甲酸醋冰冷下，於氫化鋰銘（0.50g，12.2mmol)之四氫咲喃 (20ml )懸浮液中，滴入上述工程2所獲得的化合物（195g， 4.35mmol)之四氫呋喃（30ml)溶液，於同溫度下攪拌1小時。加入水及10%檸檬酸水而停止反應後，以乙酸乙_稀釋，以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鎂乾燥。減壓餾除溶 -108- 201030011 劑，將所獲得的殘餘物經矽膠管柱層析[η-己烷：乙酸乙酯 =2: 3( ν/ν)]純化，獲得呈無色油狀物之標記化合物（i.2 6g， 64% )。 W-NMR ( 400MHz，CDC13) δ : 0.69-1.01 ( 10H，m)， 1.35-1.43 ( 1H> m)> 1.44(9H> s)> 1.45-1.53 ( 1H> m)> 1.56-1.63 ( 2H，m)，3.09-4.00 ( 5H，m)，4.98-5.13 ( 2H， m)，5.60 ( 1H，brs)，7.24-7.38 ( 5H，m). 工程4: 4-苄基7-第三丁基（6R) -6-異丁基-4,7-二氮雜 φ 螺[2.5]辛烷-4,7-二羧酸酯於上述工程3所獲得的化合物（1.26g，3.00mmol)之甲苯（100ml)溶液中，冰冷下加入三苯基膦（1.57g， 5.99mmol)及偶氮二羧酸二異丙酯（〇.93ml，4.49mmol)， —邊緩慢地回到室溫一邊攪拌1 8小時。再者，加入三苯基膦（1.57g，5.9 9mmol )及偶氮二殘酸二異丙酯（〇_93ml， 4.49mmol )，加熱回流4小時。減壓濃縮反應液，將所獲得的殘餘物經矽膠管柱層析[η-己烷：乙酸乙酯=3 : 1 ( v/v) j ❹ 純化，獲得呈無色油狀物之標記化合物（0.57g，47% )。 *H-NMR ( 400MHz - CDC13 » 60°C ) δ ： 0.45-0.54 ( 1 H > m)，0.61-0.71( 1H，m)，0.85( 3H，d，J = 6.6Hz)，0.86( 3H， d，J = 6.6 Hz ) > 0.96-1.05 ( 1H > m) > 1.21-1.62 ( 13H > m) > 3.11-3.26 ( 2H，m)’ 3.42( 1H，d，J=14.0Hz)，3.99( 1H， d，J=14.0Hz)，4.19( 1H，s)，5·12( 2H，s)，7.23-7.39( 5H， m ). 工程5:节基（6R)-6-異丁基-4,7-二氮雜螺[2._5]辛院-4-羧酸酯鹽酸鹽 -109- 201030011 於上述工程4所獲得的化合物（〇 57g，丨42mm〇i )之二噚烷（10ml)溶液中’冰冷下加入4N鹽酸/二噚院（8ml)，一邊緩慢地回到室溫一邊攪拌24小時。減壓濃縮反應液，獲得呈無色固體之標記化合物。參考例1 3

工程 1.节基（6R) -7-{[(2S，4R) _1-(第二丁氧基幾基）-4 -氣卩比略B定-2-基]幾基}-6 -異丁基-4,7 -二氮雜螺[2.5] 辛烷-4-羧酸酯使用參考例12之工程5所獲得的化合物替代參考例8 之工程4所獲得的化合物，與參考例9之工程1同樣地反應，獲得呈淡黄色油狀物之標記化合物。 4-NMR( 400MHz，DMSO-d6，100〇C )δ: 0.44-0.59( 1H， m)，0.76-0.96 ( 7H，m)，1.04-1.58 ( 15H，m)，ι·65-2_23 (1H，m)，2.86-3.09 ( 2H > m ) > 3.17( 1H，d，J=1 1 .2Hz ) > 3.34-3.80 ( 3H，m)，4_01 ( 1H，d，J=13.2Hz)，4.45-4.82 (1H，m)，5.03-5.39 ( 1H，m)，5.11 (2H，s)，7.28-7.45 (5H - m). 工程 2:第三丁基（2S，4R) -4-氟- 2-{[(6R) -6-異丁基-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛-7-基]羰基}吡咯啶-1-羧酸酯於上述工程1所獲得的化合物（〇.65g，i.Wmmol)之 -110- 201030011 乙醇（20ml)溶液中，加入5%鈀碳（〇.i〇g)，於氫氣雰圍下’於室溫進行18小時接觸還原。以塞利特過濾觸媒後，減壓濃縮濾液。將獲得的殘渣溶解於二氯甲烷（20ml)，加入二異丙基胺（1.3ml’ 7.52 mm 〇1)，冰冷下加入無水三氟乙酸（0,53ml，3.76 mmol)。一邊緩慢地回到室溫一邊攪拌2 小時，減壓濃縮反應液。將所獲得的殘餘物以乙酸乙酯稀釋，以飽和碳酸氫鈉水、10%檸檬酸水、及飽和食鹽水洗淨後，有機層以無水硫酸鎂乾燥。減壓餾除溶劑，將所獲得的 © 殘餘物溶解於二氯甲烷（20ml )，冰冷下加入三氟乙酸 (10ml)，於室溫攪拌2小時。減壓濃縮反應液後，將所獲得的殘餘物以氯仿稀釋，以飽和碳酸氫鈉水及飽和食鹽水洗淨後，有機層以無水硫酸鎂乾燥。減壓餾除溶劑，獲得的殘渣經矽膠管柱層析[乙酸乙酯：乙醇=4 : 1 ( v/v)]純化，獲得呈淡黄色油狀物之標記化合物（0 · 2 8 g，5 9 % )。 MS ( ESI ) m/z ： 3 8 0 [(M+H) +]. 參考例1 4

4,9-二氮雜二螺[2.2.2.2]癸烷二鹽酸鹽冰冷下，於4,9-二氮雜二螺[2.2.2.2]癸烷-5，10-二酮 (1.70g ’ 1 〇_4mmol )之四氫呋喃（20ml)溶液中，滴入硼烷-四氫呋喃錯合物（1.02M四氫呋喃溶液）（41ml’ 41.6mm〇l) 後’加熱回流1 8小時半。冰冷下，於反應混合液中加入甲醇（50ml)並攪拌60分鐘後，將溶劑減壓濃縮。於獲得的 -111- 201030011 殘餘物中加入乙醇（5 0ml)、水（25ml)及三乙基胺（25ml)，加熱回流4小時後’將溶劑減壓濃縮。將獲得的殘渣溶解於四氫呋喃（20ml)，冰冷下加入三乙基胺（4.3ml，31.2 mmol) 及二碳酸二-第三丁酯（6.80g，31. 2mmol)，於室溫攪拌14 小時。減壓濃縮溶劑，將所獲得的殘餘物以乙酸乙酯稀釋，以飽和氯化銨水、飽和食鹽水的順序洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓餾除溶劑，獲得的殘渣之氯仿（20ml )溶液中加入三氟乙酸（20ml)，於室溫攪拌1小時。減壓濃縮溶劑，於獲得的殘餘物中加入4N鹽酸/二噚烷（50ml )，攪拌2小時。減壓餾除溶劑，於殘渣中加入二乙醚，濾取析出的固體，獲得呈無色固體之標記化合物（2.00g，91% )。 ^-NMRC 400MHz> DMSO-d6)5： 1.02( 4Η» t> J = 6.5Hz)> 1.24 (4H，t，J = 6.3Hz)，3.41 (4H，s)，10.30 (2H，s). MS ( ESI ) m/z: 212[(M+H) + ]. 參考例15

工程1:第三丁基（28,41〇-4-氟-2-{[9-(三氟乙醯基） -4,9-二氮雜二螺[2.2.2.2]癸烷-4-基]羰基}吡咯啶-1-羧酸酯冰冷下，於（4R) -1-(第二丁氧基羰基）-4 -氟-L-脯胺酸（466mg，2.00mmol)及參考例14所獲得的化合物（422mg， 2.00mmol )之二甲基甲醯胺（溶液中加入二異丙基乙基胺（1.15ml，6.60mm〇l)及（苯并三唑-1-基氧基）吡咯阱 -112- 201030011 鍈六氟磷酸酯（1.14g，2.20mm〇l)。於室溫攪拌19小時後，反應液以乙酸乙酯稀釋，以飽和氯化銨水、飽和碳酸氫鈉水及飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓餾除溶劑後，將所獲得的殘餘物溶解於二氯甲烷（lOrnl)，加入三乙基胺（0.56ml，4.00mm〇1 )，冰冷後，加入無水三氟乙酸 (0.28ml，2.00mmol )。於室溫攪拌7小時後，減壓濃縮反應液，以乙酸乙酯稀釋，以飽和氯化銨水及飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓餾除溶劑，殘渣經矽膠管柱層析[η-己烷：乙酸乙酯=1 : 1 ( ν/ν)]純化，獲得呈淡黄色油狀物之標記化合物（ 349mg，39%)。 h-NMlU 400MHz，DMSO-d6, 100〇C )δ： 1.15-1.33( 18H > m)，2.04( 1H，dt，J = 35.5, 7.0Hz)，2.53( 1H，s)，3.59-3.69 (5H，m)，4.97( 1H，s)，5.31 ( 1H，d > J = 54.2Hz). MS ( ESI ) m/z ： 472[ ( M + Na ) + ]. 工程2: 4-[(4R) -4-氟-L-脯胺醯基]-9-(三氟乙醯基） -4,9-二氮雜二螺[2.2.2.2]癸烷〇使上述工程1，所獲得的化合物與參考例3之工程2同樣地反應，獲得呈淡黄色固體之標記化合物。 •H-NMR ( 400MHz > CDC13) δ ： 1.08- 1.23 ( 8Η > m). 2.13 ( 1H，s)，2.63 ( 1H，s)，3.67-3.73 ( 5H，m)，5.16 (1H - s ) > 5.41 ( 1H > d，J = 53.5Hz)，5.91 (2H，s ) · MS ( ESI ) m/z ： 3 5 0 [ ( M + H ) +]. 參考例1 6 -113- 201030011

-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛-7-基]羰基}吡咯啶 -1-羧酸酯使用1-(第三丁氧基羰基）-4,4-二氟-L-脯胺酸替代（4R) -1-(第三丁氧基羰基）-4-氟-L-脯胺酸，又使用參考例4之工程5所獲得的化合物替代參考例2之工程5所獲得的化合物，與參考例3之工程1同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 *H-NMR ( 400MHz > DMSO-d6 > 80°C ) δ ： 0.72 ( 2H > brs) > 1 .1 1 ( 3 Η > brs ) ’ 1.2 5 -1.2 9 ( 2 Η，m ) ，1 · 3 8 ( 9H， s) > 1.48 ( 1H' brs) > 2.21-2.33 ( 1H > m ) ，2.87 ( 1H， brs) ，3.02-3.10 ( 2H，m) ，3.54 ( 2H，brs) ，3.65-3.75 (lH，m) > 3.79-3.8 7 ( 1 H - m ) > 4.64 ( 1H > brs ). MS ( ESI ) m/z ： 45 6 [(M+H) + ].，工程2:(68)-7-(4,4-二氟-：1-脯胺醯基）-6-甲基-4-(三氟乙醯基）二氮雜螺[2.5]辛烷使上述工程1所獲得的化合物與參考例3之工程2同樣地反應，獲得呈無色油狀物之標記化合物。 *H-NMR ( 400MHz > DMSO-d6 > 8 0 °C ) δ ： 0.70-0.74 (2Η，m)，1.1U3H’ d’ J = 6.6Hz)，1.23-1.2 9( 1Η，m)， 1.45-1.51( 1H- m) - 2.32-2.45( 2H> m) > 2.92-3.08( 2H* -114- .201030011 1H， m) > 3.16-3.26 ( 1H » m) ，3.56(3H，brs) ，3.88( brs) ，4.02-4.07 ( 1H，m ) ，4.64 ( 1H，brs ). MS ( ESI ) m/z : 356[(M+H) + ]. 參考例1 7

© 工程 1:第三丁基（2S) -4,4-二氟-2- { [ ( 6R) _6_ -4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]-辛-7-基]幾基} 啶-1-羧酸酯使用1-(第三丁氧基羰基）-4,4-二氟-L-脯胺酸替代, -1-(第三丁氧基羰基）-4 -氟-L-脯胺酸，又使用參考例工程5所獲得的化合物替代參考例2之工程5所獲得的物，與參考例3之工程1同樣地反應，獲得呈無色固體記化合物。 ❹ lH-NMR ( 400MHz > DMSO-d6 > 100°C ) δ ： 0.72 ( brs ) ’ 1.11 ( 3H » brs ) ，1.2 5 -1. 3 1 ( 2 Η，m ) ，1.38( s )，1.46-1.52( 2H，m )，2.07( 1H，brs ) ’ 2.82-2.92( m ) ，3.5 3 ( 2H，br s ) ，3 · 6 4 - 3 · 8 6 ( 3 H，m ) > 4.82 ( brs ). MS ( ESI ) m/z ： 478[(M+Na) + ]_ 工程2:(6R) -7- ( 4,4·二氟-L-脯胺醯基）-6-甲 (三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷使上述工程1所獲得的化合物與參考例3之工程2 甲基吡咯〔4R) 6之化合之標 2H， 9H， 1H， 1H，基-4- 同樣 -115- 201030011 地反應，獲得呈無色油狀物之標記化合物。 !H-NMR ( 400MHz > DMSO-d6 > 100°C ) δ ： 0.66-0.83 (2H，m )，1.10( 3H > d，J = 6.5Hz)，1.22-1.28( 1 H - m )， 1.44-1.5 1 ( 1H > m )，2.23-2.46 ( 2H > m )，2.92-3.01( 2H， m) > 3.22-3.26( 1H> m) > 3.43-3.60( 3H> m) > 4.14( 1H> brs ) ，4.61 ( 1H，brs ) · MS ( ESI) m/z ： 3 5 6 [ ( M + H ) + ]. 參考例1 8

工程1 :甲基 N-苄基-O-第三丁基絲胺酸酯於甲基〇-第三丁基-L-絲胺酸酯鹽酸鹽（12.0g， 57.Ommol)之甲醇（ 300ml)溶液中加入三乙基胺（9.5ml， 68.0mmol)、苯甲酸（6.37ml，63_0mmol)，於室溫攪拌 6 小時。冰冷下，緩慢地加入氫化硼鈉（3.23g，86.0mmol)後，於室溫攪拌 2小時。於反應液中加入飽和氯化銨水 -116- 201030011 (100ml)’減壓濃縮後，以乙酸乙酯稀釋殘渣，濾除析出的不溶物。有機層以飽和食鹽水洗淨後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓餾除溶劑，獲得呈無色油狀物之標記化合物（15.3 g， 100% )。 ^-NMRC 400MHz> CDC13) δ： 1.14( 9Η> s)> 2.09( 1Η > brs)> 3.44( 1H> t> J = 5.0Hz)> 3.55-3.63( 2H> m)« 3.70-3.73 (1H，m)，3.72( 3H，s)，3·91( 1H，d，J= 13.2Hz), 7.23-7.38 (5H > m). ❹ MS (ESI) m/z： 266[(M+H) + ], 工程2:甲基 N-苄基-N-[(l-{[(苄基氧基）羰基]胺基}環丙基）羰基]-〇-第三丁基絲胺酸酯使用上述工程1所獲得的化合物替代甲基 N-苄基-L-丙胺酸酯，與參考例4之工程1同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 ^-NMRC 400MHz> DMSO-d6» 90°C ) δ： 0.94-0.97( 2H · m)，0.98( 9H，s), 1.16-1.24(2H，m)，3.53( 3H，s)，〇 3.63-3.72 ( 2H，m)，4.46-4.53 ( 1 H，m)，4.60-4.70 ( 1 H， m)，4.83 ( 1H，d，J= 17.3Hz)，4.94-5.01 ( 2H，m)，7.16-7.3 5 (10H，m )，7.66 ( 1H，brs ) · MS ( ESI ) m/z ： 48 3 [ ( M + H ) + ]. 工程3: 7•苄基-6-(第三丁氧基甲基）-4,7-二氮雜螺[2.5] 辛烷-5,8·二酮使上述工程2所獲得的化合物與參考例2之工程2同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 h-NMR ( 400MHz，CDC13，50°C ) δ : 0.88-0.97 ( 2Η， -117- 201030011 m)，1.15(9H，s)，1.36-1.41 (1H，m)，1.77-1.83 (1H， m)，3.69 (2H，ddd，J = 20.5 - 9.6，3. 1 Hz ) > 3.96( 1H > t . J = 3.1Hz)，4.07( 1H，d，J = 15.1Hz)，5.29( 1H，d，J=14.9Hz)， 6.64 ( 1H > brs ) > 7.24-7.34 ( 5H - m ). MS ( ESI ) m/z ： 261 [ ( M-tBu ) + ]. 工程4: 7-苄基-6-(羥基甲基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷 -5,8-二酮於上述工程3所獲得的化合物（10.5g，33.0mmol)之氯仿（50ml )溶液中加入三氟乙酸（30ml )並於室溫攪拌1 小時後，於40°C再加熱攪拌6小時。將溶劑減壓濃縮後，作甲苯共沸，殘渣以乙酸乙酯稀釋後，以飽和碳酸氫鈉水、飽和食鹽水之順序洗淨，以無水硫酸鎂乾燥。減壓餾除溶劑，獲得的殘渣經矽膠管柱層析[氯仿：甲醇=15 : 1( v/v)]純化，獲得呈無色固體之標記化合物（7.15g，83%)。 W-NMR ( 400MHz，CDC13) δ : 0.96-1.06 ( 2H，m)， 1.36-1.42 ( 1H，m)，1.74-1.80 ( 1H，m)，2.9 8-3.0 5 ( 1H， m)，3.91( lH，s)，3.91-4.0 0( lH，m)，4.11( lH，d，J=15.1Hz)， 5,28 (1H，d > J=15.1Hz)，7.2 5 - 7.4 2 ( 6 H > m ). MS ( ESI ) m/z ： 26 1 [ ( M + H ) + ]. 工程5:7-苄基- 6-({[第三丁基（二甲基）矽烷基]氧基} 甲基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷-5,8-二酮於上述工程4所獲得的化合物（7.15g，27.0mmol)及三乙基胺（4.5ml，32.0mmol)之二甲基甲醯胺（l〇〇ml)溶液中，加入4-二甲基胺基吡啶（ 660mg，5.00mmol)、第三丁基二甲基氯矽烷（4.90g，32.0mmol)。於室溫攪拌16小 -118- 201030011 時後，於反應液中加入冰水（200ml )，瀘取析出的固體。所獲得的固體經矽膠管柱層析[η-己烷：乙酸乙酯=3 : 1 ( v/v )] 純化，獲得呈無色固體之標記化合物（8.63g，85% )。 ^-NMRC 400MHz> CDC13) δ： 0.04( 3Η> s)> 0.05( 3Η > s)，0.89( 9Η，s)，0.91-1.00( 2Η，m)，1.40-1.46( 1Η，m)， 1.74-1.81 ( 1H- m)> 3.90-3.94 ( 2H> m)> 4.00 (1H* dd> J=ll.l，3.5Hz)，4.08 ( 1H，d，J=15.1Hz)，5.32 ( 1H，d， J=15.1Hz)> 7.25-7.38 ( 5H> m). ❹ MS ( ESI) m/z： 375[(M+H) + ]. 工程6: 7-苄基-6-({[第三丁基（二甲基）矽烷基]氧基} 甲基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷使上述工程5所獲得的化合物與參考例2之工程3同樣地反應，獲得呈無色油狀物之標記化合物。 ^-NMRC 400MHz> CDC13) δ： 0.05( 3Η> s)> 0.06( 3Η > s)，0.31-0.38( 2Η，m)，0.51-0.59( 2Η，m)，0.89( 9Η，s)， 2.23( 1H，d，J=11.7Hz)，2.30( 1H，d，J=11.7Hz)，2.40-2.45 O ( 1H，m)，2.81( 1H，dd，J=13.2，8.3Hz)，3.16( 1H，dd， J=13.2,3.4Hz)，3,34 ( 1H，d，J=13.9Hz)，3.65 ( 1H，dd， J=10.4’ 6.5Hz)，3.96( 1H，dd，J=10.3,4.4Hz)，4.10( 1H， d，J=13.7Hz)，7.21-7.37 ( 5H，m) ·. MS ( ESI) m/z ： 347f ( M+ H) + ]. 工程7: 7·苄基-6-( {[第三丁基（二甲基）矽烷基]氧基}甲基）-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷使上述工程6所獲得的化合物與參考例2之工程4同樣地反應，獲得呈淡黄色油狀物之標記化合物。 -119- 201030011 1H-NMR( 400MHz，DMSO-d6，90°C ) δ: 0.00( 3H，s)， 0.01( 3H> s)> 0.61-0.68( 1H> m)> 0.84( 9H> s)> 0.85-0.90 (2H，m ) > 1.18-1.25 ( 1H - m ) > 2.28( 1 H > d > J= 1 1 ,7Hz ) > 2.45-2.49 ( 1 H > m) > 2.54-2.5 8 ( 1 H > m) > 3.34-3.41 ( 2H > m)，3.50( 1H> dd > J=1 0.3 > 7.8Hz)，3.91( 1 H - dd > J=1 1 . 5 > 5.1Hz)> 3.95( 1H> d - J=14.2Hz)' 4.03( 1H> d - J=14.2Hz) > 7.16-7.20 ( 1H，m)，7.24-7.28 ( 4H，m ). MS ( ESI ) m/z ： 443 [ ( M + H ) + ]· 工程8: 6-({[第三丁基（二甲基）矽烷基]氧基}甲基） -4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷使上述工程7所獲得的化合物與參考例2之工程5同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 !H-NMR( 400MHz> DMSO-dfi' 90 °C ) δ： 0.08( 6H> s) > 0.76-0.80 ( 1H，m)，0.90 ( 9H，s)，0.91-0.94 ( 1H，m)， 1.10-1.16 ( 1H，m)，1.36-1.42 ( 1H，m)，2.54 ( 1H，d， J=12.9Hz)，3.04-3.09 ( 1 H > m ) > 3.22-3.29 ( 2H，m)，3.66 (1 H - dd，J=1 0.4,7.0Hz ) > 3.74( 1 H > dd - J=10.5，4.9Hz)， 4.04-4.12 ( 1H > m ). MS ( ESI ) m/z ： 3 5 3 [ ( M + H ) +]. 工程 9:第三丁基（2S，4R) -2-{ [(6R) -6-({[第三丁基（二甲基）矽烷基]氧基}甲基）-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛-7-基]羰基} -4-氟吡咯啶-1-羧酸酯（異構物 A)及第三丁基（2S，4R)-2-{[(6S)-6-({[第三丁基（二甲基）矽烷基]氧基}甲基）-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛-7-基]羰基} -4-氟吡咯啶-1-羧酸酯（異構物B) -120- 201030011 使用上述工程8所獲得的化合物替代參考例8之工程4 所獲得的化合物，與參考例9之工程1同樣地反應後，將生成的非對映異構物混合物經矽膠管柱層析[n_己烷：乙酸乙酯=3: l(v/v)]分離，各自獲得呈無色固體之標記化合物。異構物 A: W-NMRC 400MHz，DMSO-d6，90。(：）δ: 0.00 (3Η，s)，0.01 (3Η，s)，0.68-0.76( 1Η，m)，0·84(9Η， s)，0.85-0.87( 1H，m)，1.23-1.30( 1H，m)，1.35( 9H，s)， 1.40-1.45 ( 1H，m)，1.99-2.16 ( 1H，m)，2.31-2.49 ( 1H， ❹ m)，3.33-3.77( 7H，m)，4.12-4.28( 1H，m)，4.34-4.48( 1H， m)，4.60-4.76 ( 1H，m )，5.26 ( 1H，d，J = 52.7Hz ). MS ( ESI ) m/z ： 590[(M+Na) + ]· 異構物 B: 1H-NMR( 400MHz，DMSO-d6，90°C ) δ: -0.01 (3H，s ) > 0.01 (3H，s)，0.66-0.75 ( 1H，m)，0.83( 9H’ s ) . 1.26-1.34( 3H，m)，1.35( 9H，s)，1.74-1.96( 2H，m)， 3.27-3.73 ( 7H，m)，4.12-4.28 ( 1H，m)，4.38-4.52 ( 1H ’ m)，4.68-4.78 ( 1H，m)，5.20( 1H，d，J = 55.2Hz) · ® MS ( ESI ) m/z : 590 [ ( M + Na ) + ]. 參考例19

(6R) -6-({[第三丁基（二甲基）矽烷基]氧基}甲基） -7-[(41〇-4-氟-1^-脯胺醯基]-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷 -121 - 201030011 使參考例18之工程9所獲得的化合物（異構物A)與參考例3之工程2同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 ^-NMRC 400MHz> DMSO-d6> 90°C ) δ： 0.01( 6H - s)> 0.66-0.79 ( 2H，m)，0.83 (9H，s)，1.20-1.31 ( 1H，m)， 1.37-1.47 ( 1H « m) > 1.92-2.07 ( 1H > m) » 2.09-2.26 ( 1H -m)，2.80-2.92( 2H，m)，3.39-3.71( 6H，m)，3.98-4.18( 1H， m)，4.35-4.53 (lH,m)，5.22(lH，d，J = 55.4Hz). MS ( ESI ) m/z ： 468[ ( M + H ) + ]. 參考例2 0

(6S) -6-({[第三丁基（二甲基）矽烷基]氧基}甲基） -7-[(4R) -4-氟-L-脯胺醯基]-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷使參考例18之工程9所獲得的化合物（異構物B)與參考例3之工程2同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 'H-NMRC 400MHz» DMSO-d6· 90°C ) δ： 0.01( 6H> s)> 0.67-0.73 ( 1H，m)，0.83 (9H，s)，1.20-1.28 (2H，m)， 1.38-1.47 ( 1H，m)，1.89-2.15 ( 2H，m)，2.68-2.80 ( 1H， m)，2.85-2.92( 1H，m)，3.08-3.18( 1H，m)，3.39-3.72( 4H， m)，4.02-4.19 (2H，m)，4.39-4.53 ( 1H，m)，5.21 ( 1H， -122- 201030011 d，J = 55.7Hz). MS ( ESI ) m/z ： 468[ ( M + H ) + ]. 參考例2 1

工程1:第三丁基 7-苄基·6- ({[第三丁基（二甲基）矽烷基]氧基}甲基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷-4-羧酸酯使參考例18之工程7所獲得的化合物與實施例1之工程2同樣地反應後，與參考例1之工程2同樣地反應，獲得呈無色油狀物質之標記化合物。 1H-NMR( 400MHz> DMSO-d6> 90°C ) δ： 0.00( 6Η> s)> ❿ 0·39_0.46 ( 1Η，m)，0.60-0.70 ( 2Η，m)，0.84 ( 9Η，s)， 0.97- 1.02 ( 1 H > m ) > 1.35( 9H> s)> 2.16( 1H> d> J=11.7Hz)-2.27 ( 1H > d，J=11.7Hz)，3.08( 1H > dd，J=12.9 > 8.3Hz )-3.32 (1H，d > J=14.2Hz ) > 3.49 (1H，dd > J = 1 0.5,6.6 Hz )-3.79-3.88 ( 2H，m)，3.95 ( 1H，d，J=14.2Hz)，7.13-7.16 (1H，m )，7.21-7.27 ( 4H，m ). MS ( ESI) m/z ： 447[ ( M + 1 ) ]+ . 工程2:第三丁基 6- ({[第三丁基（二甲基）矽烷基] -123- 201030011 氧基}甲基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷-4-羧酸酯使上述工程1所獲得的化合物與參考例2之工程5同樣地反應，獲得呈淡黄色油狀物質之標記化合物。 h-NMR ( 400MHz，DMSO-d6，90。。）δ: 0.06( 6H，s) ’ 0.48-0.57(2Η，m)，0.78-0.83 (1Η，m)，0.89(9Η，s)， 1.14-1.20( 1H，m)，1.40( 9H，s)，2.16( 1H，d，J=12.5Hz)， 2.62-2.68 ( 1H，m)，2.75 ( 1H，dd，J=12.5，10.0Hz)，2.96 (1H，dd，J=12.5，2.0Hz)，3.47( 1H，dd，J= 10」，6.2Hz)， 3.54 ( 1H，dd，J=10.0，5.1Hz)，3.87 ( 1H，dd，J=12.5， 2.9Hz). MS ( ESI) m/z ： 3 5 7[ ( M + 1 ) ]+. 工程3:第三丁基（6R) -7-({(2S，4R) -l-[(苄基氧基）羰基]-4-氟吡咯啶-2-基羰基）-6·({[第三丁基（二甲基）砂院基]氧基}甲基）-4,7 - 一氮雜螺[2.5]辛院-4-殘酸醋（異構物Α)及第三丁基（6S) -7-({(2S，4R) -1-[(苄基氧基）羰基]-4-氟吡咯啶-2-基羰基）-6-({[第三丁基（二甲基）矽烷基]氧基}甲基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷-4-羧酸酯（異構物B) 使用上述工程2所獲得的化合物替代參考例8之工程4 所獲得的化合物，與參考例9之工程1同樣地反應後，與參考例1 8之工程9同樣地，將生成的非對映異構物混合物經砂膠管柱層析分離，各自獲得呈無色固體之標記化合物。異構物 A: 'H-NMRC 400MHz，DMS〇-d6, 90°C )δ: -〇〇6 (3H’ brs)，〇.〇〇( 3H，s)，0.46-0.52( 1H> m)，0.82( 9H， s)’ 0.94-1.04 ( 1H，m)’ 1.15-1.28( 2H，m)，1.36( 9H，s)， -124- 201030011 1.92-2.12 ( 2H，m)，2.71-2.83 ( 1H，m)，3.21-3.29 ( 1H， m)，3.42-3.64( 4H，m)，3·69-3_78( 1H，m)，4.10-4.24( 1H， m)> 4.57-5.12( 4H> m)> 5.28( 1H> d> J = 52.7Hz)> 7.24-7.33 (5H > m). MS ( ESI) m/z ： 62 8 [ ( M + Na ) ] + . 異構物 B: iH-NMlU 400MHz，DMSO-d6，90 °C ) δ: -0.01 (3H - s)，0.00 (3H> s)> 0.74-0.79 ( 1H> m)> 0.79-0.85 (1H，m)，0.82 ( 9H - s ) > 0.95-1.04 ( 1H，m)，1.22-1.30 φ ( 1H，m)，1.37 (9H> s)> 1.80-2.01 (2H> m)> 3.19-3.26 (1H* m)> 3.34-3.60( 4H> m)> 3.67-3.83( 2H> m)> 3.98-4.13 (1H，m)，4.31-4.45( 1H，m)，4.78-4.84( 1H，m)，4.87-5.10 (2H，m)，5.21，5.28( 1H，各 d > J = 5 5.2,5 4.2 H z ) > 7.23-7.34 (5H > m). MS (ESI) m/z ： 628 [ ( Μ + Na )] 參考例22

第三丁基（6R) -6-({[第三丁基（二甲基）矽烷基]氧基}甲基）-7-[(41〇-4-氟-1^脯胺醯基]-4,7-二氮雜螺[2.5] 辛烷-4-羧酸酯使參考例2 1之工程3所獲得的化合物（異構物A)與參考例2之工程5同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 -125- 201030011 ^-NMRC 400MHz> DMSO-d6> 90 °C ) δ： 0.06( 6H> s) > 0.49-0.59 ( 2H，m)，0.87 ( 9H，s)，1.07-1.14 ( 1H，m)， 1.3 1-1.39 ( 1H > m)，1.42 ( 9H > s ) > 2 . 1 6 - 2.3 4 ( 2 H > m ) > 3.00-3.43 ( 6H，m)，3.55-3.77 ( 2H，m)，3.95-4.17 ( 1H， m)，4.29-4.38 ( 1H> m)> 5.37 (1H> d> J = 54.4Hz). MS ( ESI ) m/z ： 472[ ( M + 1 ) ] + . 參考例23

第三丁基（6S) -6-({[第三丁基（二甲基）矽烷基]氧基}甲基）-7-[(4R) -4-氟-L-脯胺醯基]-4,7-二氮雜螺[2_5] 辛烷-4-羧酸酯使參考例21之工程3所獲得的化合物（異構物B)與參考例2之工程5同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 •H-NMRC 400MHz> DMSO-d6 - 90°C ) δ： 0.05( 6H> s) > 0.51-0.58 ( 1H，m)，0.87 (9H，s)，1.07-1.16( 1H，m)， 1.3 0- 1 .40 ( 2H « m ) > 1.43 ( 9H > s ) > 1.94-2. 13 ( 2H - m )-3.03-3.20 ( 3H，m)，3.27-3.41 ( 1H，m)，3.45-3.56 ( 1H， m)> 3.59-3.74( 1H> m)> 3.90-4.11( 2H> m)> 4.43-4.63( 2H > m )，5.39 ( 1H，d，J = 53.5Hz ). MS ( ESI ) m/z ： 472 [ ( M + 1 ) ]+ 參考例24 -126- 201030011

ο, %主％不0 © 工程1 :甲基 Ν-苄基-Ο-第三丁基-L-絲胺酸酯將甲基0-第三丁基-L-絲胺酸酯鹽酸鹽（12g，56.7mmol) 溶解於甲醇（120ml)，加入乙酸（6.50ml，114mmol)、苯甲醆（6.25 ml，61.8mmol)及氰基氫化硼鈉（1M四氫呋喃溶液、75ml)，於室溫攪拌48小時。濃縮反應液，以水稀釋，冰冷下，以碳酸氫鈉中和，以氯仿提取並以無水硫酸鎂乾燥後’濾除乾燥劑，將溶劑減壓濃縮。將所獲得的殘餘物經矽膝層析[乙酸乙酯：η-己烷=1: 4(v/v)]純化，獲得呈無色固體之標記化合物（7.75g，52%)。 'H-NMR( 400MHz> CDC13)6： 1.14( 9H> s)> 2.09( 1H > brs ) > 3.44( 1H，t，J = 5.0Hz)，3.55-3.63( 2H，m)，3.70-3.73 (1H，m)，3.72( 3H，s)，3.91( 1H，d，J=13.2Hz)，7.23-7.38 (5 H，m ) · MS ( ESI ) m/z ： 266[ ( M + 1 ) ] + . 工程2:甲基N-苄基-N-[ ( 1- {[(苄基氧基）羰基]胺基}環丙基）羰基]-0-第三丁基-L-絲胺酸酯使用上述工程1所獲得的化合物替代甲基 N -苄基- L- -127- 201030011 丙胺酸酯，與參考例4之工程1同樣地反應，獲狀物質之標記化合物。 ^-NMRC 400MHz « DMSO-d6) δ： 0.94-0.98 0.98( 9Η，s)，1.16-1.24( 2Η，m)，3.53( 3H - s ) (2H > m ) > 4.46-4.53 ( 1H，m)，4.60-4.70 ( 1H (1H > d > J=17.3Hz ) > 4.94-5.01( 2H，m)，7.16, m )，7.66 ( 1H，brs ). MS ( ESI ) m/z: 48 3 [ ( M + 1 ) ]+· 工程3: ( 6S ) -7-苄基-6-(第三丁氧基甲; 氮雜螺[2.5]辛烷-5,8-二酮使上述工程2所獲得的化合物與參考例2之地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 ^-NMR ( 400MHz - CDC13) δ ： 0.88-0.97 ( 1.15 (9Η> s)> 1.36-1.41 (1Η> m)> 1.77-1.83 3.69( 2Η，ddd，J = 20.5, 9.6, 3.1Hz)，3.96( 1Η，t’ 4.07 ( 1H > d > J = 15. 1 Hz ) » 5.29 ( 1H，d，J=14. (1H > brs ) > 7.24-7.34 ( 5H > m ). MS ( ESI ) m/z ： 3 17[ ( M + 1 ) ]+ . 工程4:(6R) -7-苄基- 6-(第三丁氧基甲基雜螺[2.5]辛烷使上述工程3所獲得的化合物與參考例2之地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 *H-NMR ( 400MHz > CDC13) δ ： 0.30-0.38 0.48-0.59 ( 2Η，m)，1.19 ( 9Η，s)，1.62 ( 1Η (2H，AB 型 d，J=11.9Hz)，2.40-2.48( 1H，m) 得呈無色油 (2H，m)，，3.63-3.72 ，m )，4.8 3 7.35 ( 10H，基）-4,7-二工程2同樣 :2H，m )， (1 Η，m )， 'J = 3.1 Hz ) * 9Hz )，6.64 )-4,7-二氮工程3同樣 (2H，m )，，br) ， 2.27 ，2.80 ( 1 H， -128- 201030011 dd，J=13.3, 8.2Hz)，3.14( 1H，dd，J = 7.3，3.2Hz)，3.34-3.41 (2H，m)，3.69 ( 1H，dd，J = 9.3,4.6Hz )，4.12 ( 1H，d， J=13.7Hz)，7.21-7.35 (5H，m). MS ( ESI ) m/z ： 28 9 [ ( M + 1 ) ] + . 工程5: [(6R) -7-苄基-4,7-二氮雜螺[2.5]辛-6-基]甲醇使上述工程4所獲得的化合物與參考例18之工程4同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。

!H-NMR ( 400MHz > CDC13) δ ： 0.33-0.43 ( 2Η > m) > 0.52-0.61 (2H，m)，1.71 ( 1H，br)，2.36-2.45 ( 3H，m)， 3.06 ( 2H，d，J = 6.0Hz)，3.36 ( 1H，d，J= 13.7Hz ) > 3.60 (1H，dd，J=ll.〇，3.5Hz)，3.95( 1H，dd，J=U.〇，4.5Hz)’ 4.15 (1H' d> J=13.7Hz)> 7.24-7.32 ( 5H> m). MS ( ESI ) m/z ： 233[(M+1) ]+ . 工程6:第三丁基（6R) -7-苄基- 6-(羥基甲基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷-4-羧酸酯使上述工程5所獲得的化合物與參考例1之工程2同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 4_NMR( 400MHz，d6-DMSO，100oC)5: 0.44-0.49( 1H, m)，0.62-0.72 (2Η> m)，1.00-1.05 ( 1Η，m)，ι·39(9Η， s)，2.18( 1H，d，J=11.7Hz)，2.28( 1H，dd，J=11.7，丄 2Hz)， 2.41-2.46 ( 1H，m)，3.13( 1H，dd，J=13.2，8.5HZ)，3 34 (1H’ d，J=14.0Hz)，3.40-3.46( 1H，m)，3.66-3.72( m)* 3.82( 1H> dd> J=13.2,3.5Hz)> 4.02( 1H - d> J=i4 Λττ 、 1 H . U H z )， 4.14 (1H，t，J = 5.4 Hz ) » 7.16-7.30 (5H，m ) · -129- 201030011 MS ( ESI ) m/z ： 33 3 [ ( M+ 1 ) ]+ . 工程7:第三丁基（6R)-7-苄基-6-(氟甲基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷-4-羧酸酯

將上述工程6所獲得的化合物（360mg，1.0 8 mmol )之二氯甲烷（8ml )溶液冷卻至-78t。其次，滴入雙（2-甲氧基乙基）胺基三氟化硫（〇.26ml，1.41 mmol )，緩慢地昇溫並攪拌20小時。反應液以飽和碳酸氫鈉水溶液中和並以氯仿提取，以無水硫酸鈉乾燥後，濾除乾燥劑，將溶劑減壓濃縮。將所獲得的殘餘物經矽膠層析[乙酸乙酯：η-己烷=1: Q 10( ν/ν)]純化，獲得呈無色油狀物質之標記化合物（3 25mg， 90% )。 'H-NMR( 400MHz> d6-DMSO> 100°C )δ： 0.60-0.67( 2H> m)，〇.79-0.9 0( 2H，m)，1.4 0( 9H，s)，2.45( lH，d，J=12.7Hz)， 2.64 ( 1H，d，J=12.7Hz)，2.83-2.93 ( 2H * m ) » 3.35-3.45 (1H，m)，3.71 (2H，d，J = 3,2Hz ) > 3.72-3.79 ( 1 H - m ) > 4.66-4.81 ( 1H，m)，7.19-7.31 (5H，m) · MS ( ESI ) m/z ： 3 3 5 [ ( M + 1 ) ] + . o 工程8:(6R) -7-苄基-6-(氟甲基）-4-(三氟乙醯基） -4,7-二氮雜螺[2.5]辛烷使上述工程7所獲得的化合物與參考例1 2之工程5同樣地反應後，與參考例2之工程4同樣地反應，獲得呈無色油狀物質之標記化合物。 'H-NMR ( 400MHz > d6-DMSO > 100°〇 δ ： 0.84 ( 2Η > brs)，0·92(2Η，br)，2.55，2.76( 1Η，各 br)，2.94(2Η， s)，2.95-2.98( 1H，m)，3.72( 2H，s)，3.73-3.94( 2H，m)， -130- 201030011 4·74,4.86 ( 1H，各 br)，7.20-7.31 ( 5H，m) 工程9 : ( 6R) -6-(氟甲基）-4-(三氟乙醯基）-4,7_ 二氮雜螺[2.5]辛烷鹽酸鹽使上述工程8所獲得的化合物與參考例2之工程5同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 !H-NMR( 400MHz> d6-DMSO> 100°〇δ： 1.06-1.11( 4Η > m)，2.65-2.90 ( 3Η，m)，3.37-3.65 ( 2Η，m), 3.92( 1Η， br)，5.21-5.34 (1H - m)> 9.55 (2H> br). ❹ MS ( ESI ) m/z ： 24 1 [ ( M + 1 ) ] + . 參考例2 5

工程 1 :第三丁基（2S，4R) -4-氟-2- { [ ( 6R) -6_ (氟甲基）-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2.5]辛-7_基]簾基} -4-氟吡咯啶-1-羧酸酯〇使用參考例24之工程9所獲得的化合物替代參考例8 之工程4所獲得的化合物，與參考例9之工程1同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 MS (ESI) m/z: 456[ ( Μ + 1 ) ]+. 工程2:(6R) -6-(氟甲基）-7-[(4R) -4-氟-L-脯胺醯基]-4-(三氟乙醯基）-4,7-二氮雜螺[2·5]辛烷鹽酸鹽使上述工程1所獲得的化合物與參考例12之工程5同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 W-NMIU 400MHz，d6-DMSO，1000〇δ: 1.07-1.11( 4Η， -131- 201030011 m)，2.04-2.31( 1H，m)，2.65-2.73( 1H，m)，3.13-3.23( 2H， m)» 3.43-3.58( 2H> m)> 3.62-3.75( 2H> m)> 4.20-4.37( 2H > m)，4.57-4.78 ( 1H，m)，4.92-4.98 ( 1H，m)，5.46 ( 1H， d，J = 53.2Hz )，9.77 ( 2H，br ). MS ( ESI ) m/z ： 3 56[ ( M + 1 ) ] + . 參考例26

工程1:3,4-雙（4-氯苯基）-1，2,5-噻二唑1，1_二氧化物使用1，2-雙（4-氯苯基）乙烷-1，2·二酮作爲原料，與參考例1之工程7同樣地反應，獲得呈淡黄色固體之標記化合物。 ^-NMRC 400MHz> CDC13) δ： 7.47( 4Η· d> J = 8.8Hz) > 7.53 ( 4Η，d，J = 8.8Ηz ). 工程2: 3,4-雙（4-氯苯基）-3-甲基-2,3-二氫-i，2,5-噻二唑1，1-二氧化物於上述工程1所獲得的化合物（lO.Og，2 9.5mmol )之甲苯（200 ml)懸浮溶液中，於〇°C滴入溴化甲基鎂（0.89M 四氫呋喃溶液、43.1ml)。於室溫攪拌1小時後，加入1N鹽酸水溶液，以乙酸乙酯提取後，以飽和碳酸氫鈉水溶液及飽 -132- 201030011 和食鹽水洗淨，以無水硫酸鈉乾燥，減壓餾除溶劑’獲得呈無色油狀物質之標記化合物（11.lg、定量的）。 *H-NMR( 400MHz >CDC13)6： 2.06( 3H »s) - 4.70( 1H > s)，7.3 0-7.48 ( 6H > m) > 7.63 ( 2H - d - J = 9.0Hz). 工程3:(38*，411*)-3,4-雙（4-氯苯基）-3-甲基-1，2,5-噻二唑啶 1，1-二氧化物使上述工程2所獲得的化合物與參考例1之工程8同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 0 iH-NMRHOOMHz，CDC13)S: 1.85(3H，s)，4.63( 1H， d，J = 6.8Hz)，4_72( 1H，s)，4.93( 1H，d，J = 6.8Hz)，6.77 (2H - d，J = 8.5Hz)，7.01 (2H，d，J = 8.5Hz)，7.17( 2H， d，J = 8.5Hz)，7.18 ( 2H，d，J = 8.5Hz). 工程4 : ( 1R*，2S* ) -1,2-雙（4-氯苯基）丙烷-1，2-二胺使上述工程3所獲得的化合物與參考例1之工程9同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 4-NMR( 400MHz，CDC13) δ: 1.49( 3H，s)，4.08( 1H， ❹ s)> 6.98( 2H> d> J = 8.5Hz)> 7.17( 2H - d> J = 8.3Hz)> 7.25-7.28 (4 H，m ). 工程5:( 1R,2S) -1，2-雙（4-氯苯基）丙烷-1，2-二胺使上述工程4所獲得的化合物與參考例1之工程1 〇同樣地作光學分割，獲得呈無色固體之標記化合物。 [a]D=+69.2°(c.l.05，甲醇，23°C ) 工程6:(43,5尺）-4,5-雙（4-氯苯基）-4-甲基咪唑啶_2- 硫酮使上述工程5所獲得的化合物與參考例1之工程11同 -133- 201030011 樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 ^-NMR ( 400MHz > DMSO-d6) δ ： 1.71 ( 3Η > s) - 4.94 (1Η > s)，6.89 ( 2H > dt » J = 8.9 > 2.1Hz ) > 6.97 ( 2H > dt > J=8.9，2.1Hz)，7.17-7.12 ( 4H，m)，8.74 ( 1H，s)，8.92. (1H，s). 工程7 :乙基（5R，6S) -5,6-雙（4-氯苯基）-3-異丙基 -6-甲基-5,6-二氫咪唑并[2, l-b][l，3]噻唑-2-羧酸酯使上述工程6所獲得的化合物與參考例1之工程12同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 !H-NMR( 400MHz» CDC13) δ： 1.03( 3Η> d« J = 7.0Hz) > 1.03( 3Η，d，J = 7.0Hz)，1.37( 3Η，t，J = 7.1Hz)，2.10( 3Η， s)，3.28_3·47( 1H，m)，4.33( 2H，q，J = 7.1Hz)，5.57( 1H， s )，6.45-7. 1 8 ( 8H，m ) · 工程8:(511，68)-5,6-雙（4-氯苯基）-3-異丙基-6-甲基 -5，6-二氫咪唑并[2,1-b] [1,3]噻唑-2-羧酸使上述工程7所獲得的化合物與參考例1之工程13同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 *H-NMR( 400MHz* DMSO-d6)5： 0.83( 3H> d> J = 7.1Hz)> 0.93( 3H，d，J = 7.1Hz)，1.78( 3H，s)，2.99-3.67( 1H，m)， 5.79 ( 1H > s)，6.44-7.43 ( 8H · m ). MS ( ESI ) m/z ： 447[ ( M + 1 ) ]+ . 參考例2 7 -134- 201030011

工程1:乙基2-胺基-2-(4-氯苯基）丙酸酯使用4’-氯苯乙酮替代1-(6-氯吡啶-3-基）乙酮，使與參考例1之工程1同樣地反應，獲得呈黄色油狀物質之標記化合物。 MS (ESI) m/z ： 228[(M+l) ]+. 工程2:乙基2-[(第三丁氧基羰基）胺基]-2-( 4-氯苯 φ 基）丙酸酯使上述工程1所獲得的化合物與參考例1之工程2同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 •H-NMRC 400MHz > CDC13)6 ： 1.17( 3H > t > J = 7.3Hz) > 1 .37 ( 9H - brs ) > 1 .97 ( 3H > s ) > 4.08-4.2 1 ( 2H » m )， 5.92( 1H，br)，7.29-7.33( 2H，m ) ’ 7.36-7.41 ( 2H > m ) MS ( ESI ) m/z ： 3 5 0 [ ( M + Na ) ]+. 工程3:第三丁基[1-(4-氯苯基）-1-甲基-2-側氧基乙基]胺基甲酸酯 -135- 201030011 使上述工程2所獲得的化合物與參考例1之工程3同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 !H-NMR ( 400MHz > CDCls) δ ： 1.42 ( 9H - brs ) > 1.81 (3H，s)，5.71( 1H，br)，7.31-7.39(4H，m), 9.27( 1H， s ) · 工程4:第三丁基[2-(4-氯-3-氟苯基）-1-(4-氯苯基） -2-羥基-1-甲基乙基]胺基甲酸酯使上述工程3所獲得的化合物與參考例1之工程4同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 W-NMR ( 400MHz，CDC13) δ : 1.43 ( 9H , brs)，1.55 (3H，brs)，5.08 (2H，br)，5.40 ( 1H，br)，6.80( 1H， br ) > 7.02-7.07 ( 1H，m)，7.24-7.35 ( 5H，m). MS ( ESI) m/z ： 436[(M+Na) ]+ . 工程5 :第三丁基[2- ( 4-氯-3-氟苯基）-1- ( 4-氯苯基） -1-甲基-2-側氧基乙基]胺基甲酸酯使上述工程4所獲得的化合物與參考例1之工程5同樣地反應，獲得呈無色囿體之標記化合物。 ^-NMR ( 400MHz > CDC13 ) δ ： 1.29 ( 9H > brs) > 1.96 (3H，s)，6.19 ( 1H - br)，7.28-7.42 ( 7H > m ). MS ( ESI) m/z ： 434[ ( M + Na ) ]+. 工程6: 2-胺基-1-( 4-氯-3-氟苯基）-2-(4-氯苯基）丙院-1 -嗣使上述工程5所獲得的化合物與參考例1之工程6同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 MS ( ESI ) m/z ： 3 12[ ( Μ + 1 ) ]+· -136- 201030011 工程7 : 4-( 4-氯-3-氟苯基）-3-( 4-氯苯基）-3-甲基-2,3-二氫-1，2,5-噻二唑1,1-二氧化物使上述工程6所獲得的化合物與參考例1之工程7同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 •H-NMRC 400MHz> CDC13) δ： 2.06( 3Η> s)> 4.74( 1Η > br )，7.34-7.54 ( 7H，m ). 工程 8:(3S*，4R*) -4-(4-氯-3-氟苯基）-3-(4-氯苯基）-3-甲基-1,2,5-噻二唑1，1-二氧化物〇使上述工程7所獲得的化合物與參考例1之工程8同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 4-NMR( 400MHz，CDC13) δ: 1.78( 3H，s)，4.93( 1H， d，J = 2.3Hz)，6.95( 1Η，d，J = 8.5Hz)，7.07-7.14( 3Η，m)， 7.21 ( 2H > d，J = 8.8Hz)，7.35( 1H，t，J = 8.1Hz)，7.94-7.97 (2H - m). MS ( ESI ) m/z ： 375 [ ( M + 1 ) ] + . 工程 9:(1R*，2S*) -1-(4-氯-3-氟苯基）-2-(4-氯苯 G 基）丙烷-1，2-二胺使上述工程8所獲得的化合物與參考例1之工程9同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 *H-NMR( 400MHz> CDC13) δ： 1.49( 3Η - s)> 1.50( 4Η > rbs ) > 4.08 ( 1H，s)，6.75 ( 1H，d，J = 8.2Hz)，6.94 ( 1H， dd，J=10.5，1.3Hz)，7.19 ( 1H，t，J = 7.8Hz)，7.26 ( 4H， s ) · MS ( ESI ) m/z ： 313[ ( M+ 1 ) ] + . 工程10:( 1R，2S) -1-( 4-氯-3-氟苯基）-2-( 4-氯苯基） -137- 201030011 丙烷-1，2-二胺使上述工程9所獲得的化合物與參考例1之工程10同樣地作光學分割，獲得呈淡黄色油狀物質之標記化合物° MS (ESI) m/z ： 3 1 3 [ ( Μ + 1 ) ]+· [a]D=+ 67·4° ( c=1.0，氯仿，25°C ) 工程11 :( 4S，5R) -5-( 4-氯-3-氟苯基）-4-( 4-氯苯基） -4 -甲基咪唑啶-2-硫酮使上述工程1 〇所獲得的化合物與參考例1之工程11胃樣地反應，獲得呈淡黄色油狀物質之標記化合物。本化合％ 0 並未純化而用於下一反應工程 12 :乙基（5R，6S ) -5- ( 4-氯-3-氟苯基）-6- ( 4- 氯苯基）-3-異丙基-6-甲基-5,6-二氫咪唑并[2, l-b][l，3]噻唑 -2-羧酸酯使上述工程11所獲得的化合物與參考例1之工程12同樣地反應，獲得呈淡黄色固體之標記化合物。 'H-NMRC 400MHz> CDC13) δ： 0.90( 3Η> d> J = 7.3Hz) · 1.02( 3Η » d > J = 7. 1Hz ) « 1·34( 3H，t，J = 7.2Hz)，1.80( 3H， o s)> 3.35-3.37( 1H - m)> 4.25( 2H> q> J = 7.1Hz)> 5.03( 1H -s ) > 6.54 ( 2H > brs ) > 7.07-7.12 ( 5H，m). 工程13:(5 R，6S) -5-(4-氯-3-氟苯基）-6-( 4-氯苯基） -3-異丙基-6-甲基-5,6-二氫咪唑并[2, l-b][l，3]噻唑-2-羧酸使上述工程1 2所獲得的化合物與實施例1之工程1 3同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 ^-NMRC 400MHz> DMSO-d6)5： 0.91( 3H> d> J = 7.3Hz)> 0.98 ( 3H，d，J = 7.1Hz)，1.18 ( 1H，td，J = 7.1，0.9Hz)， -138- 201030011 1.89 ( 3H > s)，5.98 ( 1H > s ) > 7.20-7.3 8 ( 7H > m ) 參考例2 8

工程1:第三丁基[2-(4-氯苯基）-1-(6-氯吡啶--2-羥基-1-甲基乙基]胺基甲酸酯使用溴化4-氯苯基鎂替代溴化4-氯-3-氟苯基鎂，參考例1之工程4同樣地反應，獲得呈無色固體之標記物。 'H-NMR ( 400MHz > CDC13) δ ： 1.45 ( 9H > brs) > (3H > s ) > 4.89( 1 H > br)，5.01( 1H，br)，5.17( 1H， ❹ 6.74-6.81 ( 1H，m)，7.09 ( 1H，brs)，7.17-7.21 ( 1H， 7.28-7.36 ( 2H，m)，7.64 ( 1H，br)，8.40 ( 1H，br) > 工程2:第三丁基[2-(4-氯苯基）-1-(6-氯吡啶--1-甲基-2-側氧基乙基]胺基甲酸酯使上述工程1所獲得的化合物與實施例1之工程5 地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 !H-NMR ( 400MHz > CDCI3) δ ： 1.31 ( 9H > brs)， (3H，s)，6.45( 1H，br)，7.28-7.35 ( 3H，m)，7.54( 3-基）使與化合 1.57 b r )， m ) > 3-基）同樣 2.04 2H， -139- 201030011 d，J = 7.6Hz)，7.71 ( 1H > br)，8.46 ( 1H » s ). 工程3 : 2-胺基-1- ( 4-氯苯基）-2 - ( 6-氯吡啶-3-基）丙烷酮使上述工程2所獲得的化合物與實施例1之工程6同樣地反應，獲得呈無色油狀物質之標記化合物。 MS (ESI) m/z ： 295 [ ( Μ + 1 ) ] + . 工程4: 2-氯-5-[4-(4-氯苯基）-3-甲基-1，1-二氧化物 -2,3-二氫-1，2,5-噻二唑-3-基]吡啶使上述工程3所獲得的化合物與實施例1之工程7同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 •H-NMRC 400MHz« CDC13) δ： 2.07( 3Η> s)> 7.53-7.62 (3Η，m)，7.72-7.80 ( 3Η，m)，8.53( 1Η，d，J = 2.2Hz)， 9.11 ( 1H，br). MS ( ESI ) m/z ： 3 5 6 [ ( M + H ) ]+. 工程 5:(3S*，4R*) -2-氯- 5-[(3S，4R) -4-(4-氯苯基） -3 -甲基-1，1-二氧化物-1，2,5 -噻二唑啶-3-基]吡啶使上述工程4所獲得的化合物與實施例1之工程8同樣地反應，獲得呈無色固體之標記化合物。 *H-NMR( 400ΜΗζ» CDC13)6： 1.77( 3H* s)> 4.95( 1H > d，J = 5.0Hz)，7.09( 2H，d，J = 8.2Hz)，7.25( 2H，d，J = 8.2Hz)， 7.32( 1H，d，J = 8.5Hz)，7.48-7.50( 1H，m)，7.95( 1H，d， J= 5.0Hz ) > 8.01-8.06 ( 2H j m). MS ( ESI ) m/z ： 358[(M+1) ]+. 工程6:(111*，23*)-1-(4-氯苯基）-2-(6-氯吡啶-3-基）丙烷-1，2-二胺 -140- 201030011 使上述工程5所獲得的化合物與實施例1之工程9同樣地反應，獲得呈淡黄色油狀物質之標記化合物。 !H-NMR( 400MHz > CDC13) δ： 1.52( 3Η* s)» 1.58( 4Η > brs)，4.08 ( 1H，s)，6.96 ( 2H - d，J = 8.3Hz)，7.17-7.22 (3H，m)，7.57( 1H，dd > J = 8.4，2·6Ηζ)，8.33 ( 1H，d， J = 2.4Hz ). MS ( ESI ) m/z ： 296[ ( M + 1 ) ]+. 工程7:(1 R，2S) -1-(4-氯苯基）-2-(6-氯吡啶-3-基）〇丙烷-1，2 -二胺使上述工程6所獲得的化合物與實施例1之工程10同樣地作光學分割，獲得呈無黄色油狀物質之標記化合物。 iH-NMlU 400MHz，CDC13) δ: 1.52( 3Η，s)，1.58( 4Η， brs)，4.08 ( 1Η，s)，6.96 ( 2H，d，J = 8.3Hz)，7.17-7.22 (3H，m)，7.57( 1H，dd，J = 8.4，2.6Hz)，8.33( 1H，d， J = 2.4 H z ) [a]D=+ 69.4。（ c = 2.0，氯仿，24°C) © 工程8:(4S，5R) -5-(4-氯苯基）-4-(6-氯吡啶-3-基） -4-甲基咪唑啶-2-硫酮使上述工程7所獲得的化合物與實施例1之工程11同樣地反應，獲得呈無固體之標記化合物。 4-NMR( 400MHz，CDC13) δ: 1.93( 3H，s)，5.02( 1H， s ) 1 6.36( 1Η，brs)，6.70( 1Η，brs)，6.85( 2Η，d，J = 8.5Hz)， 7.12( 1H，d，J = 8.3Hz)，7.1 5 ( 2H > d，J = 8 · 3 Hz )，7.2 5 - 7.3 0 (1H，m )，7.97 ( 1H，d，J = 2.7Hz ). MS ( ESI ) m/z ： 33 8 [ ( M + 1 ) ]+. -141- 201030011 工程9:乙基（5R，6S) -5-(4-氯苯基）-6-(6-氯吡啶 -3 -基）-3 -異丙基-6-甲基-5,6-二氫咪唑并[2，1-13][1，3]噻唑 -2-羧酸酯使上述工程8所獲得的化合物與實施例1之工程12同樣地反應，獲得呈無固體之標記化合物。 W-NMIK 400MHz，CDC13) δ: 0.88( 3H，d，J = 7.1Hz)， 1.01( 3H，d，J = 7.1Hz)，1.33( 3H，t，J = 7.1Hz)，1.83( 3H， s)，3.32-3.43( 1H，m)，4.26( 2H，q，J = 7.2Hz)，5.12( 1H， s)，6.68-6.81 ( 2H，brm )，7.00 ( 1H，d，J = 8.3Hz )，7.09 (2H，d，J = 8.8Hz)，7.49 ( 1H，dd，J = 8.3 > 2.7Hz ) > 8.20 (1H > d > J = 2.7Hz) MS ( ESI ) m/z ： 476[ ( M + 1 ) ]+· 工程10:( 5R，6S) -5-( 4-氯苯基）-6-( 6-氯吡啶-3-基） -3-異丙基-6-甲基-5,6-二氫咪唑并[2，14][1，3]噻唑-2-羧酸使上述工程9所獲得的化合物與實施例1之工程13同樣地反應，獲得呈無固體之標記化合物。 iH-NMRX 400MHz，DMSO-d6)5: 0.76( 3H，d，J = 7.1Hz)， 0.96( 3H，d，J = 7.1Hz)，1.72( 3H，s)，5.70( 1H，s)，6.46-6.62 (2H，m)，7.15-7.29( 3H，m)，7.65( 1H，dd，J = 8.2,2.3Hz)， 8.25 ( 1H，s ). MS ( ESI) m/z ： 448[ ( M + 1 ) ]+ . (試驗例1 Mdm2/p53結合試驗）使用蛋白質緩衝液（20mMHEPES ρΗ7·4，150mMNaCl， 0.1% BSA)，作成各自含 6·25ηΜ 之 His-p53( p53 之第 1 〜132 個胺基酸而成的p5 3部分蛋白質與組胺酸蛋白質之融合蛋白 -142- 201030011 質）及GST-Mdm2 ( Mdm2之第25〜108個胺基酸，將第33 個白胺酸殘基變換爲麩胺酸的Mdm2部分蛋白質與穀胱甘肽轉化酶（glutathione transferase)之融合蛋白質）之蛋白質的蛋白質稀釋溶液。將此蛋白質稀釋溶液各添加ML至384 孑L 盤(3 84-well low volume NBC > Corning > 目錄編號 3676) 之各孔。其次，使用DM SO稀釋試驗化合物，將此稀釋液製作含 10%蛋白質緩衝液，各孔各添加4pL。〇接著，使用抗體稀釋緩衝液（20mM HEPES PH7.4， 150mM NaCM，0.1% BSA，0.5M KF)，製作各含有 2.5pg/mL 及0.3 25pg/mL濃度之XL665標識抗His抗體（以XL665標示之HTRF單株抗-6HIS抗體（目錄編號61HISXLB )、 Schering/Cisboio Bioassays)及銪（Eu)標識抗 GST 抗體（以銪穴狀化合物（europium cryptate)標示之HTRF單株抗- GST 抗體、Schering/Cisboio Bioassays、目錄編號 61GSTKLB) 的溶液，各孔各添加8μί (反應液總量：20μ1/孔）。之後， ❹ 將平盤於25°C放置1小時。使用平盤讀取器（ARV Osx、PerkinElmer、或 PHERAstar， BMGLABTECH)測量於激發波長3 20nm之620nm及665nm 的時間分解螢光。使用計測値（RFU 620nm與RFU 665nm )，以下式算出比率（R )。 R= ( RFU 665nm-BI-C xRFU 620nm) /RFU 620nm BI:未添加各蛋白質、化合物、及抗體的反應液（僅各緩衝液）之6 6 5 n m之計測値

C (補正係數）=(A-BI) /D -143- 201030011 A及D爲僅添加Eu標識抗GST抗體溶液的反應液之 665nm及620nm之各計測値由添加His-p53、GST-Mdm2、試驗化合物及各抗體的孔算出的R値作爲R (樣品），由添加His-p53、GST-Mdm2及各抗體但未添加試驗化合物的孔算出的R値作爲R (對照組），由添加GST-Mdm2、試驗化合物及各抗體但未添加 His-P53的孔算出的R値作爲R(背景），由下述式算出T/C，進行Sigmoid fitting，算出對Mdm2/p53結合的IC5〇値。結果示於表20。 T/C=( R(樣品）-R(背景））/ ( R(對照組）-R(背景））結果示於表20。 -144- 201030011 【表20】 IC50 (iiH) 罝施例1之化合物 0J028 實施例2·之化合物 0J022 實旆例3·之fk合物 0*0039 實施例4之化合物 0D025 貧施例5之化合物 0J3053 資旆例6之仆合物 OH 024 寶施例7之化合物 0U036 會施例8^化合物 0D022 寶旆例9之仆合物 OJ]〇41 寶施例10之化含物 0ΰ14 賨旆例11之化合物 0X1032 實旆《12之仆合物 0J050 寶施例13之化合物 0Λ054 査施例14«之化合物 OJ316 音旆例15之化合物 0J)027 寳蹦例16·之化合物 0ΰ023 實施例17之化合物 0Λ033 寶旆例18之化合物 0ΰ016 資施例19之化合物 0ΰ016 資施例20之化合物 0ΰ014 寶旆例21之化合物 0ΰ022 實li例22之化合物 0ΰ026 實施例23^化合物 0ΰ016 寶施例化合物 0Λ012 寶菇鈿25之化合物 0J1017 蜜施例26·之化合物 0Λ027 寶:旆例2 7之化合物 0D019 音施例28之化合物 0JD031 實施例2 9之化合物 0ΰ026 資旆例30^化合协 0ΰ031 貿施例31之化合物 0J3031

(試驗例2抗細胞試驗）使用具有野生型 P53的來自人類肺癌的細胞株 NCI-H460實施抗細胞試驗。

將NCI-H460細胞懸浮於培養基（含10%牛胎兒血清的 RPMI 1 640培養基），各自以500個細胞/150μί/孔接種於96 孔之多孔平盤中。將試驗化合物溶解於DMSO，將其以培養基稀釋作成檢體溶液（DMSO濃度1%以下）。接種次日，將未添加試驗化合物的培養基或檢體溶液各添加5〇kL於各孔。細胞接種次日各添加50pL培養基後立即添加檢體溶液或培養基於細胞，於37°C、5%C02下培養3曰後，實施MTT -145- 201030011 試驗。MTT試驗如以下方式實施。使用碟酸緩衝液（Dulbecco’s Phosphate-buffered Salines)製作 5mg/mL 之 ΜΤΤ (3·(4,5-二甲基噻唑-2-基） -2,5-二苯基溴化四唑鑰，Sigma，Μ-2128)溶液’於各孔各添加此MTT溶液20pL。之後，將平盤於37°C、5%<：02下培養4小時。平盤以120Orpin離心處理5分鐘後’將培養上清液以分配器吸引除去。於各孔各添加D M s 0 1 5 0 Ai L ’溶解生成的甲臢（formazan )。經由使用平盤混合器而攪拌平盤’ 各孔的發色成爲均一。各孔之吸光度於0D 540 nm、參考 660nm之條件下，使用平盤讀取器（SpectraMaxPLUS384， Molecular Devices，CA USA)測量。檢體溶液添加當日測定的〇D値作爲S，檢體溶液添加 3日後測定的OD値作爲T，DM SO稀釋液添加3日後測定的 OD値作爲C，經下述計算式求得各濃度之T/C ( % )來描繪用量反應曲線，算出50%增殖抑制濃度（GI5〇値）。 T/C ( % ) = ( T-S ) / ( C-S ) X 100 實施例 1 〜6、8-10' 15、16、18~25、27，29、31 之化合物顯示GI5o(μM)<0.4之抗細胞效果。實施例7、ll〜14、 17、26、28、30之化合物顯示〇.4‘GI5〇<2.5( μΜ)之抗細胞效果。 (試驗例3抗腫瘤試驗）將人類骨肉瘤細胞株SJSA-1或SJSA-1-RE (於SJSA-1 倂入 ρ5 3 報導子基因的細胞）皮下移植於裸鼠 (BALB/C-nu/nu SLC、雄、曰本 SLC )，於腫瘤大小達到 10 0~200mm3左右的時點分組（6隻/組）。將試驗化合物懸浮 -146- 201030011 於0.5%甲基纖維素溶液，以50mg/kg —日二次（bid)、4 曰間連續經口投與。2日停藥後解剖小鼠，摘出腫瘤後，測量其重量。抗腫瘤效果（IR(%))由下式算出。 IR(%) =[1—（化合物投與組之平均腫瘤重量/無處置對照組之平均腫瘤重量）]χ 100 實施例2之化合物顯示50 < IR ( % ) < 70、實施例3、 4、6、9之化合物顯示70<IR(%) <1〇〇之抗腫瘤效果。 ^ (試驗例4代謝安定性試驗）於含100mMPH7.4磷酸緩衝液、30mM葡萄糖6磷酸、 10mM MgCl2. 6H20、3單位/mL葡萄糖6磷酸1-脫氫酶、 0.3-1.5mgP/mL之人類肝微粒體（microsome)的反應液 lOOyL中添加含3从Μ之試驗化合物的100mM ρΗ7·4磷酸緩衝液ΙΟΟμΙ^，於37°C培育20分鐘後，添加含3mM之NADP +的100mM ρΗ7·4磷酸緩衝液70pL，再於37°C培育30分鐘實施微粒體代謝試驗。化合物使用接續四重極型質量分析 G 計的高速液體層析裝置依內部標準法定量，由下式求出代謝安定性（化合物之殘存率：MS % )。 MS人類％ =(添加NADP +並培育30分鐘後之試驗化合物之高峰面積比）/ (NADP +添加前之試驗化合物之高峰面積比）X 1 〇〇 (高峰面積比=試驗化合物之高峰面積除以內部標準物質之高峰面積）結果示於表2 1。 -147- 201030011 【表21】 MS (人類)％實施例1之化合物 77 耷施例2之化合物 100 窗旆例3之化合协 68 音旆例4之化合协 100 音施例5之化合拗 ND 音施例6之化含物 69 音旆例7之化合物 100 音旆例8之化合物 95 會施例9之化合物 80 音旆例1C之仆合物 48 音施例112化合物 100 會施例12之化合物 69 音摘俐13之仆合物 100 音榆Μ 14之仆合物 100 音施例15之化合物 44 音施例16之化合物 56 音旆例17之化含物 44 音施例18之化合物 6 會施例19之化合物 93 音榆例2 C之化合物 36 音施例21之化合物 96 資施例2 2之化合物 60 眘:揄例2 3之化合物 24 啻施例2 4之化合物 89 音旆例2 5 2化合物 47 音旆例26之化合物 57 眘榆例2 7之:化合物 91 音施例2 8之化合物 51 音施例2 9之化合物 96 齎旆例30之化合物 62 音施例31之化合物 6 (ND :未測量）

【圖式簡單說明】 Μ 。 j\\\ 【主要元件符號說明】 Μ 。 /ηΝ -148-

Claims

201030011 七、申請專利範圍： 1. 一種一般式（1)所代表之化合物或其鹽，

[式（1 )中， Ari表不可具有選自鹵素原子、氰基及Ci~C6院基的1或 Q 複數個取代基的苯基， Ar2表示可具有選自鹵素原子、C^C 6烷基及氰基的1或複數個取代基的苯基；或可具有選自鹵素原子、Ci-Ce烷基及氰基的1或複數個取代基的吡啶基， R1表示可具有選自鹵素原子、羥基、烷氧基、胺甲醯基' 胺基、烷醯基及氰基的1或複數個取代基的 C!〜C6烷基、可具有選自鹵素原子、羥基、（^〜(^烷氧基、胺甲醯基、胺基及氰基的1或複數個取代基的烷醯〇基；氫原子；或羥基， R2及R3各自獨立表示爲可具有選自鹵素原子、羥基、Cl〜C6 烷氧基、胺甲醯基、胺基、〇^〜(：6烷醯基及氰基的1或複數個取代基的烷基、羧基或氫原子，或者，R2與 R3可一起形成側氧基，又，R2及R3可與各自結合的碳原子一起形成螺型或縮合型之3〜5員之飽和烴環， R4表示可具有選自齒素原子、羥基、烷氧基、胺甲醯基、胺基、烷醯基及氰基的1或複數個取代基的 Ci-Cs烷基， -149- 201030011 R5表示可具有選自鹵素原子、羥基、CrC6烷氧基、胺甲醯基、胺基、Ci-C：6烷醯基及氰基的1或複數個取代基的 CrCe烷基， R6表示鹵素原子或氫原子， R7表不鹵素原子]。 2.—種一般式（2)所代表之化合物或其鹽，

[式（2)中， R1表示可具有選自鹵素原子、羥基、d-C6烷氧基、胺甲醯基、胺基、C^C6烷醯基及氰基的1或複數個取代基的 C rC6烷基；可具有選自鹵素原子、羥基、（^〜(^烷氧基、胺甲醢基、胺基及氰基的1或複數個取代基的基；氫原子；或羥基， R2及R3各自獨立表示爲可具有選自鹵素原子、羥基、Cl〜C6 Q 烷氧基、胺甲醯基、胺基、Ci-C：6烷醯基及氰基的1或複數個取代基的烷基、羧基或氫原子，或者，R2與 R3可一起形成側氧基，又，R2及R3可與各自結合的碳原子一起形成螺型或縮合型之3-5員之飽和烴環， R4表示可具有選自鹵素原子、經基、C^C：6院氧基、胺甲醯基、胺基、烷醯基及氰基的1或複數個取代基的 Ci~C6烷基， R5表示可具有選自鹵素原子、經基、院氧基、胺甲 -150- 201030011 醢基、胺基、（^~(：6烷醯基及氰基的1或複數個取代基的 c 1〜C 6院基， R6表示鹵素原子或氫原子， R7表示鹵素原子]。 3.如申請專利範圍第1或2項之化合物或其鹽，其中R1爲烷基、可經1或複數個鹵素原子取代的烷醯基或氫原子。 4·如申請專利範圍第1至3項中任一項之化合物或其鹽，其〇中R4爲CrCs烷基。 5. 如申請專利範圍第1至4項中任一項之化合物或其鹽，其中R5爲烷基。 6. —種下述式所代表之化合物，

G 7·—種下述式所代表之化合物，

式所代表之化合物 -151- 201030011 F

9.一種下述式所代表之化合物， F

10.—種下述式所代表之化合物，

1 1 . 一種Mdm2阻礙劑，其含有如申請專利範圍第1至1 0項中任一項之化合物或其鹽。 12. —種p5 3與Mdm2之結合阻礙劑，其含有如申請專利範圍第1至10項中任一項之化合物或其鹽。 13. —種醫藥，其含有如申請專利範圍第1至10項中任一項之化合物或其鹽作有效成分。 1 4. 一種醫藥組成物，其含有如申請專利範圍第1至1 0項中任一項之化合物或其鹽及藥學上可容許的載體。 1 5 . —種如申請專利範圍第1至1 0項中任一項之化合物或其鹽之用途，其用於醫藥製造。 1 6 . —種抗癌劑，其含有如申請專利範圍第1至1 〇項中任一 -152- 201030011 項之化合物或其鹽作有效成分。 17. —種癌症之治療方法，其特徵爲投與如申請專利範圍第1 至10項中任一項之化合物或其鹽。 18. 如申請專利範圍第16項之抗癌劑，其中癌症爲選自肺癌、乳癌、前列腺癌、大腸癌、急性骨髓性白血病、惡性淋巴瘤、視網膜芽細胞瘤、神經芽細胞瘤及肉瘤任一者。 19. 如申請專利範圍第17項之癌症之治療方法，其中癌症爲 φ 選自肺癌、乳癌、前列腺癌、大腸癌、急性骨髓性白血病、惡性淋巴瘤、視網膜芽細胞瘤、神經芽細胞瘤及肉瘤任一者。 ❹ -153- 201030011 四、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：無。 (二) 本代表圖之元件符號簡單說明：姐。 y\\\

五、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

201030011 發gg邊:利說明書 PD1106099⑺ 年月曰修if '補乞 ※申，案號明書格式順序’請勿任意更動※記號部分請勿填寫） ※申味日：※IPC分類：發明名稱：（中文/英文）具有脯胺酸環構造之咪唑并噻唑衍生物 IMIDAZOTHIAZOLE DERIVATIVES BEARING THE PROLINE RING STRUCTURE 二、中文發明摘要：提供阻礙Mdm2 (鼠雙微基因2 ( murine double minute 2))蛋白質與p5 3蛋白質之相互作用’並顯示抗腫瘤活性的新穎化合物。本發明係提供阻礙Mdm2蛋白質與p53蛋白質之相互作用，並顯示抗腫瘤活性之具有各種取代基的下述式（1)所代表之咪唑并噻唑衍生物（其中，式（1)中之r1、r2、r3、 R4、R5、R6、R7、An及Ar2各自與說明書中之定義同意義）。

201030011 發gg邊:利說明書 PD1106099⑺ 年月曰修if '補乞 ※申，案號明書格式順序’請勿任意更動※記號部分請勿填寫） ※申味日：※IPC分類：發明名稱：（中文/英文）具有脯胺酸環構造之咪唑并噻唑衍生物 IMIDAZOTHIAZOLE DERIVATIVES BEARING THE PROLINE RING STRUCTURE 二、中文發明摘要：提供阻礙Mdm2 (鼠雙微基因2 ( murine double minute 2))蛋白質與p5 3蛋白質之相互作用’並顯示抗腫瘤活性的新穎化合物。本發明係提供阻礙Mdm2蛋白質與p53蛋白質之相互作用，並顯示抗腫瘤活性之具有各種取代基的下述式（1)所代表之咪唑并噻唑衍生物（其中，式（1)中之r1、r2、r3、 R4、R5、R6、R7、An及Ar2各自與說明書中之定義同意義）。