KR20110119641A

KR20110119641A - 프롤린 고리 구조를 갖는 이미다조티아졸 유도체

Info

Publication number: KR20110119641A
Application number: KR1020117016110A
Authority: KR
Inventors: 고우이치 우오토; 유우이치 스기모토; 히로유키 나이토; 마사키 미야자키; 게이스케 요시다; 마사시 아오누마
Original assignee: 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤
Priority date: 2009-01-16
Filing date: 2010-01-15
Publication date: 2011-11-02
Also published as: PT2380892E; US20110301176A1; EP2380892A4; PL2380892T3; SG173028A1; CY1115234T1; CA2750009A1; EP2380892B1; BRPI1007334A2; DK2380892T3; WO2010082612A1; SMT201400082B; SI2380892T1; ZA201105132B; JPWO2010082612A1; CO6420347A2; IL214117A0; AU2010205201A1; RU2011134283A; MX2011007598A

Abstract

Mdm2 (murine double minute 2) 단백질과 p53 단백질의 상호 작용을 저해하고, 항종양 활성을 나타내는 신규 화합물을 제공하는 것. 본 발명은, Mdm2 단백질과 p53 단백질의 상호 작용을 저해하고, 항종양 활성을 나타내는, 각종 치환기를 갖는 하기 식 (1) 로 나타내는 이미다조티아졸 유도체를 제공한다.

(여기서, 식 (1) 중의 R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, Ar₁ 및 Ar₂ 는, 각각 명세서 중의 정의와 동일한 의미이다)

Description

프롤린 고리 구조를 갖는 이미다조티아졸 유도체{IMIDAZOTHIAZOLE DERIVATIVE HAVING PROLINE RING STRUCTURE}

본 발명은 Mdm2 (murine double minute 2) 저해에 의한 항종양 활성을 갖는 프롤린 고리 구조를 갖는 화합물 또는 그 염에 관한 것이다.

세포의 암화를 억제하는 중요한 인자의 하나로서, p53 이 알려져 있다. p53 은, 세포 주기나 세포의 아포토시스에 관여하는 유전자의 발현을, 다양한 스트레스에 응답하여 유도하는 전사 인자이다. p53 은, 이 전사 조절 기능에 의해 세포의 암화를 억제하는 것으로 생각되고 있고, 실제, 인간의 암의 약 절반수에 p53 유전자의 결실 또는 변이가 관찰되고 있다.

한편, p53 이 정상임에도 불구하고 암화되어 있는 세포의 암화의 요인의 하나로서, E3 유비퀴틴 리가아제의 1 종인 Mdm2 (murine double minute 2) 의 과잉 발현이 알려져 있다. Mdm2 는, p53 에 의해 발현이 유도되는 단백질이다. Mdm2 는, p53 의 전사 활성 도메인에 결합하여 p53 의 전사 활성을 저하시킴과 함께, p53 을 핵 밖으로 배출하고, 나아가서는 p53 에 대한 유비퀴틴화 리가아제로서 작용하여 p53 의 분해를 매개함으로써, p53 을 부 (負) 로 제어하고 있다. 이 때문에, Mdm2 가 과잉 발현하고 있는 세포에서는, p53 기능의 불활화 및 분해가 촉진되어, 암화가 일어나는 것으로 생각되고 있다 (비특허문헌 1).

이러한 Mdm2 의 기능에 착안하여, Mdm2 에 의한 p53 의 기능 억제를 저해하는 물질을 항종양제의 후보로 하는 어프로치가 다수 이루어져 왔다. Mdm2 와 p53 의 결합 부위를 표적으로 한 Mdm2 저해제로는, 할로게노벤젠으로 2 지점 치환된 이미다졸린 유도체 (예를 들어, 비특허문헌 1, 2 및 특허문헌 1∼8 을 참조할 것), 할로게노벤젠으로 2 지점 치환된 이미다조티아졸 유도체 (특허문헌 9 를 참조할 것) 등이 보고되어 있는데, 이들 화합물에 관해서 실제로 임상에서 유효성이 얻어졌다는 보고는 아직 없다.

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Science, 2004, 303, 844-848 Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 2006, 103, 1888-1893

본 발명은 신규 Mdm2 저해 화합물을 제공하는 것이다. 또한, 본 발명은, 당해 Mdm2 저해 화합물을 함유하는 항종양제를 제공하는 것이다.

본 발명자들은 예의 검토한 결과, 하기 일반식 (1) 로 나타내는 구조를 갖는 화합물 또는 그 염이, 강한 Mdm2 저해 활성을 갖는 것을 알아내어, 본 발명을 완성시켰다.

즉, 본 발명은,

[1] 일반식 (1)

[화학식 1]

[식 (1) 중,

Ar₁ 은 할로겐 원자, 시아노기 및 C₁∼C₆ 알킬기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 페닐기를 나타내고,

Ar₂ 는 할로겐 원자, C₁∼C₆ 알킬기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 페닐기, 또는 할로겐 원자, C₁∼C₆ 알킬기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 피리딜기를 나타내고,

R¹ 은 할로겐 원자, 수산기, C₁∼C₆ 알콕시기, 카르바모일기, 아미노기, C₁∼C₆ 알카노일기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기, 할로겐 원자, 수산기, C₁∼C₆ 알콕시기, 카르바모일기, 아미노기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알카노일기, 수소 원자, 또는 수산기를 나타내고,

R² 및 R³ 은 각각 독립적으로 할로겐 원자, 수산기, C₁∼C₆ 알콕시기, 카르바모일기, 아미노기, C₁∼C₆ 알카노일기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기, 카르복시기 또는 수소 원자를 나타내거나, 또는 R² 와 R³ 이 하나가 되어 옥소기를 형성해도 되고, 또한 R² 및 R³ 이 각각 결합하는 탄소 원자와 함께 스피로형 또는 축합형의 3∼5 원자의 포화 탄화수소 고리를 형성해도 되고,

R⁴ 는 할로겐 원자, 수산기, C₁∼C₆ 알콕시기, 카르바모일기, 아미노기, C₁∼C₆ 알카노일기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기를 나타내고,

R⁵ 는 할로겐 원자, 수산기, C₁∼C₆ 알콕시기, 카르바모일기, 아미노기, C₁∼C₆ 알카노일기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기를 나타내고,

R⁶ 은 할로겐 원자 또는 수소 원자를 나타내고,

R⁷ 은 할로겐 원자를 나타낸다]

로 나타내는 화합물 또는 그 염.

[2] 일반식 (2)

[화학식 2]

[식 (2) 중,

R⁶ 은 할로겐 원자 또는 수소 원자를 나타내고,

R⁷ 은 할로겐 원자를 나타낸다]

로 나타내는 화합물 또는 그 염.

[3] R¹ 이 C₁∼C₆ 알킬기, 1 또는 복수 개의 할로겐 원자로 치환되어 있어도 되는 C₁∼C₆ 알카노일기 또는 수소 원자인 [1] 또는 [2] 에 기재된 화합물 또는 그 염.

[4] R⁴ 가 C₁∼C₆ 알킬기인 [1]∼[3] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염.

[5] R⁵ 가 C₁∼C₆ 알킬기인 [1]∼[4] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염.

[6] 하기 식

[화학식 3]

로 나타내는 화합물.

[7] 하기 식

[화학식 4]

로 나타내는 화합물.

[8] 하기 식

[화학식 5]

로 나타내는 화합물.

[9] 하기 식

[화학식 6]

로 나타내는 화합물.

[10] 하기 식

[화학식 7]

로 나타내는 화합물.

[11] [1]∼[10] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염을 포함하는 Mdm2 저해제.

[12] [1]∼[10] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염을 포함하는 p53 과 Mdm2 의 결합 저해제.

[13] [1]∼[10] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염을 유효 성분으로 하는 의약.

[14] [1]∼[10] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염 및 약학적으로 허용할 수 있는 담체를 함유하는 의약 조성물.

[15] [1]∼[10] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염의, 의약 제조를 위한 사용.

[16] [1]∼[10] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염을 유효 성분으로 하는 항암제.

[17] [1]∼[10] 중 어느 하나에 기재된 화합물 또는 그 염을 투여하는 것을 특징으로 하는 암의 치료 방법.

[18] 암이 폐암, 유방암, 전립선암, 대장암, 급성 골수성 백혈병, 악성 림프종, 망막 아세포종, 신경 아세포종 및 육종에서 선택되는 어느 것인 [16] 에 기재된 항암제.

[19] 암이 폐암, 유방암, 전립선암, 대장암, 급성 골수성 백혈병, 악성 림프종, 망막 아세포종, 신경 아세포종 및 육종에서 선택되는 어느 것인 [17] 에 기재된 암의 치료 방법.

본 발명에 의해, Mdm2 저해 활성을 갖는, 상기 식 (1) 로 나타내는 신규 이미다조티아졸 유도체가 제공된다. 이러한 신규 화합물은, 항종양제로서 유용하다.

본 발명에 있어서, 「Mdm2」란, murine double minute 2 유전자에 의해 코드되는 단백질을 말한다. 「Mdm2」는, 완전장의 Mdm2 유전자에 의해 코드되는 Mdm2 단백질 또는 Mdm2 유전자 변이체 (결손 변이체, 치환 변이체 또는 부가 변이체를 포함한다) 에 의해 코드되는 Mdm2 단백질 등을 포함한다. 본 발명에 있어서, 「Mdm2」란, 여러 가지 동물종 유래의 호모로그, 예를 들어 인간 Mdm2 호모로그 (HDM2) 도 포함한다.

본 발명에 있어서, 「p53」이란, p53 유전자에 의해 코드되는 단백질을 말한다. 「p53」이란, 완전장의 p53 유전자에 의해 코드되는 p53 단백질 또는 변이 (결손, 치환, 부가에 의한 변이를 포함한다) 를 갖지만, 정상으로 기능하는 p53 단백질을 의미한다.

본 발명에 있어서, 「Mdm2 저해제」란, Mdm2 및 p53 중 어느 것에 작용하거나, p53 및 Mdm2 의 양방에 작용하여, Mdm2 에 의해 억제되어 있는 p53 의 기능을 회복시키는 인자를 말한다. p53 의 기능이란, 정상인 p53 이 본래 갖는 기능이면 특별히 한정되지 않고, 예를 들어 세포 주기나 세포의 아포토시스에 관여하는 유전자의 발현을 유도하여 세포의 암화를 억제하는 것을 들 수 있다. Mdm2 저해제로는, 예를 들어 Mdm2 가 p53 에 결합하는 것을 저해하는 인자 (이하, p53 과 Mdm2 의 결합 저해제라고 한다) 또는 Mdm2 에 의한 p53 의 유비퀴틴화를 저해하는 인자 (이하, Mdm2 유비퀴틴 리가아제 저해제라고 한다) 를 들 수 있다.

본 발명에 있어서, 「p53 전사 활성 억제의 저해제」란, Mdm2 에 의해 억제되어 있는 p53 의 전사 인자로서의 기능을 회복시키는 인자를 말한다.

본 발명에 있어서, 「p53 분해의 저해제」란, Mdm2 에 의한 p53 의 유비퀴틴화를 저해함으로써, p53 의 프로테아좀에 있어서의 분해를 저해하는 인자를 말한다.

본 발명에 있어서, 용어 「종양」 및 「암」은 교환 가능하게 사용된다. 또한, 본 발명에 있어서, 종양, 악성 종양, 암, 악성 신생물, 암종, 육종 등을 총칭하여, 「종양」 또는 「암」이라고 표현하는 경우가 있다.

본 발명에 있어서,

「C₁∼C₆ 알킬기」란, 탄소수 1∼6 의 직사슬, 분기 사슬 또는 고리형의 알킬기를 의미한다. 「C₁∼C₆ 알킬기」로는, 예를 들어 메틸기, 에틸기, 프로필기, 이소프로필기, 시클로프로필기, 부틸기, tert-부틸기, 시클로부틸기, 시클로펜틸기, 또는 시클로헥실기 등을 들 수 있다.

「C₁∼C₆ 알콕시기」란, 탄소수 1∼6 의 직사슬, 분기 사슬 또는 고리형의 알킬기를 갖는 알콕시기를 의미한다. 「C₁∼C₆ 알콕시기」로는, 예를 들어 메톡시기, 에톡시기, 프로폭시기, 이소프로폭시기, 부톡시기, 또는 시클로펜틸옥시기 등을 들 수 있다.

「C₁∼C₆ 알카노일기」란, 탄소수 1∼6 의 직사슬, 분기 사슬 또는 고리형의 알킬기를 갖는 알카노일기를 의미한다. 「C₁∼C₆ 알카노일기」로는, 예를 들어 포르밀기, 아세틸기, 프로피오닐기, 또는 메틸프로피오닐기 등을 들 수 있다.

「할로겐 원자」로는, 불소 원자, 염소 원자, 브롬 원자, 요오드 원자 등을 들 수 있다.

「옥소기」란, 특별히 언급되지 않는 한, 「=O」로 나타내는 기를 의미한다.

이하에, 식 (1) 중의 각 치환기에 대해 설명한다.

하기 일반식 (1) 중,

[화학식 8]

R¹ 은 할로겐 원자, 수산기, C₁∼C₆ 알콕시기, 카르바모일기, 아미노기, C₁∼C₆ 알카노일기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기, 할로겐 원자, 수산기, C₁∼C₆ 알콕시기, 카르바모일기, 아미노기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알카노일기, 수소 원자, 또는 수산기를 나타낸다.

여기서, 「1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기」 및 「1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알카노일기」에 있어서의 치환기는, 0∼3 개가 바람직하고, 치환기로는, 할로겐 원자, 수산기, C₁∼C₆ 알콕시기, 카르바모일기, 아미노기, C₁∼C₆ 알카노일기, 또는 시아노기가 바람직하다. 할로겐 원자, 수산기 또는 C₁∼C₆ 알콕시기가 더욱 바람직하다.

「1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기」로는, 비치환 또는, 1 또는 복수 개의 할로겐 원자, 수산기 또는 C₁∼C₆ 알콕시기를 치환기로서 갖는 C₁∼C₆ 알킬기가 보다 바람직하고, 비치환 또는 1∼3 개의 불소 원자를 치환기로서 갖는 C₁∼C₆ 알킬기가 더욱 바람직하다.

「1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알카노일기」로는, 비치환 또는, 1∼3 개의 할로겐 원자를 치환기로서 갖는 C₁∼C₆ 알카노일기가 바람직하고, 포르밀기, 아세틸기, 트리플루오로메틸카르보닐기가 특히 바람직하다.

R¹로는, 비치환 또는 할로겐 원자로 치환된 C₁∼C₆ 알킬기, 비치환 또는 할로겐 원자로 치환된 C₁∼C₆ 알카노일기 또는 수소 원자가 바람직하다.

R² 및 R³ 은 각각 독립적으로 할로겐 원자, 수산기, C₁∼C₆ 알콕시기, 카르바모일기, 아미노기, C₁∼C₆ 알카노일기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기, 카르복시기 또는 수소 원자를 나타내거나, 또는 R² 와 R³ 이 하나가 되어 옥소기를 형성해도 되고, 또한 R² 및 R³ 이 각각 결합하는 탄소 원자와 함께 스피로형 또는 축합형의 3∼5 원자의 포화 탄화수소 고리를 형성해도 된다.

여기서, 「1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기」는, R¹에 있어서의 정의와 동일한 의미이고, 바람직한 예시도 동일하다.

R² 및 R³ 이 모두 카르복시기이거나, 또는 R² 및 R³ 중 어느 것이 카르복시기인 경우, 카르복시기가 에스테르화 또는 아미드화된 화합물도 본 발명의 범위에 포함된다. 예를 들어, 그 카르복시기가 에틸에스테르화, 페닐에스테르화, 카르복시메틸에스테르화, 디메틸아미노메틸에스테르화, 피발로일옥시메틸에스테르화, 에톡시카르보닐옥시에틸에스테르화, 아미드화 또는 메틸아미드화된 화합물 등을 그 예로서 들 수 있다.

「R² 및 R³ 이 각각 결합하는 탄소 원자와 함께 스피로형 또는 축합형의 3∼5 원자의 포화 탄화수소 고리를 형성해도 된다」란, R² 와 R³ 이 동일한 탄소 원자에 결합하고 있는 치환기인 경우, R² 및 R³ 이 결합하여 스피로형의 3∼5 원자의 포화 탄화수소 고리를 형성해도 되고, R² 및 R³ 이 상이한 탄소 원자 상에 결합하고 있는 경우, R² 및 R³ 이 결합하여 축합형의 3∼5 원자의 포화 탄화수소 고리를 형성해도 되는 것을 의미한다. 「3∼5 원자의 포화 탄화수소 고리」란, 시클로프로판 고리, 시클로부탄 고리, 시클로펜탄 고리 등을 들 수 있다.

R² 및 R³으로는, 각각 독립적으로 수소 원자, 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기, 또는 카르복시기가 바람직하고, C₁∼C₆ 알킬기에 치환하는 치환기로는 불소 원자 또는 수산기가 바람직하고, R² 및 R³ 이 각각 수소 원자이거나, R² 및 R³ 중 어느 것이 수소 원자이고 타방이 메틸기 또는 에틸기이거나, 또는 동일한 탄소 원자에 결합하고 있는 C₁∼C₆ 알킬기인 R² 및 R³이, 이들이 결합하고 있는 탄소 원자와 함께 스피로형의 3∼4 원자의 포화 탄화수소 고리를 형성하는 것이 보다 바람직하다. R² 및 R³ 은 모두 피페라진 고리 상의 6 위치의 치환기인 것이 바람직하다.

R⁴ 는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기를 나타낸다. 여기서, 「1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기」는, 상기 R¹에 있어서의 정의와 동일한 의미이다.

R⁴로는, 비치환의 C₁∼C₆ 알킬기가 바람직하고, 비치환의 C₁∼C₃ 알킬기가 보다 바람직하고, 이소프로필기가 더욱 바람직하다.

R⁵ 는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기를 나타낸다. 여기서, 「1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기」는, 상기 R¹에 있어서의 정의와 동일한 의미이다.

R⁵로는, 비치환의 C₁∼C₆ 알킬기가 바람직하고, 비치환의 C₁∼C₃ 알킬기가 보다 바람직하고, 메틸기 또는 에틸기가 더욱 바람직하다.

R⁶ 은 할로겐 원자 또는 수소 원자를 나타낸다. R⁶으로는, 불소 원자, 염소 원자, 브롬 원자, 또는 수소 원자가 바람직하고, 불소 원자 또는 수소 원자가 보다 바람직하다.

R⁷ 은 할로겐 원자를 나타낸다. R⁷로는, 불소 원자, 염소 원자, 또는 브롬 원자가 바람직하고, 불소 원자가 보다 바람직하다.

Ar₁ 은 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 페닐기를 나타낸다. Ar₁ 은 C₁∼C₆ 알킬기, 시아노기 또는 할로겐 원자를 치환기로서 1∼3 개 갖는 페닐기인 것이 바람직하고, 할로겐 원자를 치환기로서 1∼3 개 갖는 페닐기인 것이 보다 바람직하다. 치환기의 위치는 어느 위치이어도 되는데, 보다 바람직하게는, 4-클로로페닐기, 3-플루오로-4-클로로페닐기이다.

Ar₂ 는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 페닐기 또는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 피리딜기를 나타낸다. Ar₂ 는, 할로겐 원자, C₁∼C₆ 알킬기, 또는 시아노기를 치환기로서 1∼3 개 갖는 페닐기이거나, 할로겐 원자, C₁∼C₆ 알킬기 또는 시아노기를 치환기로서 1∼3 개 갖는 피리딜기인 것이 바람직하다. 치환기의 위치는 어느 위치이어도 되는데, 보다 바람직하게는, 4-클로로페닐기 또는 6-클로로피리딘-3-일기이다.

Ar₁과 Ar₂의 이미다조티아졸 골격에 있어서의 절대 배치는, 각각 5R, 6S 인 것이 바람직하다.

또한, 본 발명의 식 (1) 로 나타내는 화합물은, 하기 일반식 (2)

[화학식 9]

로 나타내는 화합물인 것이 바람직하다.

또한, 여기서, R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶및 R⁷의 정의, 예시, 바람직한 예에 관해서는, 상기 일반식 (1) 에서 서술한 것과 동일하다.

나아가서는, 본 발명의 화합물은, 하기 군

[화학식 10]

에서 선택되는 하나의 화합물인 것이 바람직하다.

본 발명의 식 (1) 로 나타내는 화합물에는, 입체 이성체 또는 부제 탄소 원자에서 유래되는 광학 이성체가 존재하는 경우도 있는데, 이들 입체 이성체, 광학 이성체 및 이들의 혼합물 모두 본 발명에 포함된다.

본 발명의 하나의 실시형태에 있어서, 식 (3)

[화학식 11]

(식 중, Ar₁, Ar₂, R¹∼R⁷ 은 상기와 동일한 의미이다) 로 나타내는 절대 배치를 갖는 화합물이 바람직하다.

또한, 일반식 (1) 의 화합물은, 실시예 중 어느 것 및/또는, 후술하는 표 1∼12 에 기재된 화합물, 그 염 또는 그들의 수화물이 바람직하다.

본 발명의 일반식 (1) 로 나타내는 화합물이, 아미노기 등의 염기성기를 갖는 경우, 원하는 바에 따라 의약적으로 허용되는 염으로 할 수 있다. 그와 같은 염으로는, 예를 들어 염산염, 요오드화수소산염 등의 할로겐화수소산염 ; 질산염, 과염소산염, 황산염, 인산염 등의 무기산염 ; 메탄술폰산염, 트리플루오로메탄술폰산염, 에탄술폰산염 등의 저급 알칸술폰산염 ; 벤젠술폰산염, p-톨루엔술폰산염 등의 아릴술폰산염 ; 포름산, 아세트산, 말산, 푸마르산염, 숙신산염, 시트르산염, 타르타르산염, 옥살산염, 말레산염 등의 유기산염 ; 및 오르니틴산염, 글루타민산염, 아스파르트산염 등의 아미노산염 ; 을 들 수 있고, 할로겐화수소산염 및 유기산염이 바람직하다.

본 발명의 일반식 (1) 로 나타내는 화합물이, 카르복시기 등의 산성기를 갖는 경우, 일반적으로 염기 부가염을 형성하는 것이 가능하다. 의약적으로 허용되는 염으로는, 예를 들어 나트륨염, 칼륨염, 리튬염 등의 알칼리 금속염 ; 칼슘염, 마그네슘염 등의 알칼리 토금속염 ; 암모늄염 등의 무기염 ; 디벤질아민염, 모르폴린염, 페닐글리신알킬에스테르염, 에틸렌디아민염, N-메틸글루카민염, 디에틸아민염, 트리에틸아민염, 시클로헥실아민염, 디시클로헥실아민염, N,N'-디벤질에틸렌디아민염, 디에탄올아민염, N-벤질-N-(2-페닐에톡시)아민염, 피페라진염, 테트라메틸암모늄염, 트리스(하이드록시메틸)아미노메탄염 등의 유기 아민염 등을 들 수 있다.

본 발명의 일반식 (1) 로 나타내는 화합물 또는 그 염은, 유리체 또는 용매화물로서 존재하는 경우도 있다. 공기 중의 수분을 흡수하는 것 등에 의해 수화물로서 존재하는 경우도 있다. 용매화물로는, 의약적으로 허용할 수 있는 것이면 특별히 한정되지 않지만, 구체적으로는, 수화물, 에탄올화물 등이 바람직하다. 또한, 일반식 (1) 로 나타내는 본 발명 화합물 중에 질소 원자가 존재하는 경우에는 N-옥사이드체로 되어 있어도 되고, 이들 용매화물 및 N-옥사이드체도 본 발명의 범위에 포함된다.

본 발명의 일반식 (1) 로 나타내는 화합물은, 치환기의 종류나 조합에 따라, 시스체, 트랜스체 등의 기하 이성체, 호변 이성체 또는 d 체, l 체 등의 광학 이성체 등의 각종 이성체가 존재할 수 있는데, 본 발명의 화합물은, 특별히 한정하지 않은 경우에는 그들 모든 이성체, 입체 이성체 및 어느 비율의 이들 이성체 및 입체 이성체 혼합물도 포함하는 것이다.

본 발명의 일반식 (1) 로 나타내는 화합물은, 구성하는 원자의 하나 또는 복수로 비천연의 비율의 원자 동위체를 포함하는 경우도 있다. 원자 동위체로는, 예를 들어 중수소 (²H), 트리튬 (³H), 요오드-125, (¹²⁵I) 또는 탄소-14 (¹⁴C) 등을 들 수 있다. 이들 화합물은, 치료 또는 예방제, 연구 시약, 예를 들어 어세이 시약, 및 진단제, 예를 들어 인비보 화상 진단제로서 유용하다. 일반식 (1) 로 나타내는 화합물의 모든 동위체 변종은, 방사성인지의 여부에 관계 없이, 본 발명의 범위 내에 포함된다.

또, 본 발명은 생체 내에서의 생리 조건하에서 효소나 위산 등에 의한 반응에 의해 본 발명의 의약 조성물의 유효 성분인 화합물 (1) 로 변환되는 화합물, 즉, 효소적으로 산화, 환원, 가수분해 등을 일으켜 화합물 (1) 로 변화되는 화합물 또는 위산 등에 의해 가수분해 등을 일으켜 화합물 (1) 로 변화되는 「의약적으로 허용되는 프로드러그 화합물」도 본 발명에 포함된다.

상기 프로드러그로는, 화합물 (1) 에 아미노기가 존재하는 경우에는, 그 아미노기가 아실화, 알킬화, 인산화된 화합물 (예를 들어, 그 아미노기가 에이코사노일화, 알라닐화, 펜틸아미노카르보닐화, (5-메틸-2-옥소-1,3-디옥솔렌-4-일)메톡시카르보닐화, 테트라하이드로푸라닐화, 피롤리딜메틸화, 피발로일옥시메틸화, tert-부틸화된 화합물 등이다) 등을 들 수 있고, 화합물 (1) 에 수산기가 존재하는 경우에는, 그 수산기가 아실화, 알킬화, 인산화, 붕산화된 화합물 (예를 들어, 그 수산기가 아세틸화, 팔미토일화, 프로파노일화, 피발로일화, 숙시닐화, 푸마릴화, 알라닐화, 디메틸아미노메틸카르보닐화된 화합물 등이다) 등을 들 수 있다. 또한, 화합물 (I) 에 카르복시기가 존재하는 경우에는, 그 카르복시기가 에스테르화, 아미드화된 화합물 (예를 들어, 그 카르복시기가 에틸에스테르화, 페닐에스테르화, 카르복시메틸에스테르화, 디메틸아미노메틸에스테르화, 피발로일옥시메틸에스테르화, 에톡시카르보닐옥시에틸에스테르화, 아미드화 또는 메틸아미드화된 화합물 등이다) 등을 들 수 있다.

본 발명의 화합물의 프로드러그는 공지된 방법에 의해 화합물 (1) 로부터 제조할 수 있다. 또한, 본 발명의 화합물의 프로드러그는, 히로카와 서점 1990 년 간행 「의약품의 개발」제 7 권 분자 설계 163 페이지∼198 페이지에 기재되어 있는, 생리적 조건에서 화합물 (1) 로 변화되는 것도 포함된다.

본 발명의 일반식 (1) 로 나타내는 화합물의 구체예로는, 예를 들어 하기의 화합물표 1∼12 에 기재된 화합물을 들 수 있다. 이들 화합물은 하기의 [제조법 1∼4] 또는 실시예에 기재된 방법에 따라서 합성할 수 있다. 표 중의 R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, Ar₁및 Ar₂는, 하기 일반식 (1a) 로 나타내는 기를 의미한다.

[화학식 12]

다음으로, 일반식 (1) 로 나타내는 화합물의 대표적인 제조법에 관해서 설명한다. 본 발명의 화합물은 여러 가지 제조법에 의해 제조할 수 있고, 이하에 나타내는 제조법은 일례로서, 본 발명은 이들에 한정하여 해석되어서는 안된다. 또, 반응시에는, 필요에 따라 치환기를 적당한 보호기로 보호하여 실시할 수 있고, 보호기의 종류는 특별히 한정되지 않는다.

[제조법 1]

[화학식 13]

[식 중, Z 는 염소 원자 또는 브롬 원자 등의 할로겐 원자를 의미한다. R¹¹ 은, 카르복시기의 보호기를 의미하고, R¹² 는, 아미노기의 보호기를 의미한다. 또한, 이들 「보호기」는, 「보호기」이면, 각 반응 공정을 거치는 동안에 동일해도 되고 상이해도 된다. Ar₁, Ar₂, 및 R¹∼R⁷ 은 상기와 동일한 의미이다]

카르복시기의 보호기로는, 메틸기, 에틸기, tert-부틸기, 벤질기 등의 치환, 비치환의 알킬기 또는 아르알킬기를 들 수 있다.

화합물 (4) 의 합성

표기 입체 배치를 갖는 광학 활성 디아민 화합물 (3) 을, 이황화탄소 또는 1,1'-티오카르보닐디이미다졸과 반응시킴으로써 얻을 수 있다. 여기서, 반응에 사용되는 용매는, 에탄올, 테트라하이드로푸란, 디옥산, 아세토니트릴, 디메틸포름아미드, 디클로로메탄, 클로로포름, 톨루엔 등, 또는 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 특별히 한정되지 않는다. 반응 온도는, 통상 -78 ℃ 내지 100 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는, 실온 부근에서 100 ℃ 까지의 범위이다.

화합물 (5) 의 합성

화합물 (4) 를, 화합물 (A) 와 반응시킴으로써 얻을 수 있다. 여기서, 반응에 사용되는 용매는, 에탄올, 테트라하이드로푸란, 디옥산, 아세토니트릴, 디메틸포름아미드, 클로로포름, 톨루엔 등, 또는 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 특별히 한정되지 않는다. 반응 온도는, 통상 -78 ℃ 내지 100 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는, 실온 부근에서 100 ℃ 까지의 범위이다.

화합물 (6) 의 합성

R¹¹의 탈보호 공정이다.

R¹¹의 종류에 따라 탈보호의 반응 조건은 상이한데, 가수분해하면 되고, R¹¹이, 메틸기, 에틸기, 벤질기 등인 경우, 화합물 (5) 를, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화리튬, 또는 칼륨 tert-부톡사이드 등의 염기, 또는 염산, p-톨루엔술폰산 등과 처리함으로써 얻을 수 있다. 여기서, 반응에 사용되는 용매는, 메탄올, 에탄올, 물, 테트라하이드로푸란, 디옥산 등, 또는 이들의 혼합 용매를 들 수 있는데, 물과 임의의 비율로 혼합 가능한 유기 용매가 바람직하다. 반응 온도는, 통상 -78 ℃ 내지 100 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는, 실온 부근에서 100 ℃ 까지의 범위이다. R¹¹이 tert-부틸기 등인 경우, 화합물 (5) 를, 트리플루오로아세트산 또는 염산 등과 처리하는 것이 바람직하다. 여기서, 반응에 사용되는 용매는, 디클로로메탄, 클로로포름 등, 또는 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 특별히 한정되지 않는다. 반응 온도는 통상 -78 ℃ 내지 100 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는 -20 ℃ 에서 실온 부근까지의 범위이다.

화합물 (7) 의 합성

화합물 (6) 을, 염화티오닐, 염화옥살릴, 옥시염화인, 1-클로로-N,N,2-트리메틸-1-프로페닐아민 등의 산할로겐화 시약과 반응시킴으로써 얻을 수 있다. 여기서, 반응에 사용되는 용매는, 디클로로메탄, 클로로포름, 톨루엔 등, 또는 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 특별히 한정되지 않는다. 또는, 무용매로 반응할 수 있다. 반응 온도는, 통상 -78 ℃ 내지 100 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는 0 ℃ 에서 100 ℃ 까지의 범위이다.

화합물 (8) 의 합성

화합물 (7) 과 화합물 (B) 를 염기 존재하, 반응시킴으로써 얻을 수 있다. 사용하는 염기로는, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, 4-디메틸아미노피리딘, N-메틸모르폴린, 피리딘, 2,6-루티딘, 디아자비시클로[5.4.0]운데카-7-엔과 같은 유기 염기, 또는 탄산칼륨, 탄산나트륨, 탄산수소나트륨 등의 무기 염기를 들 수 있다. 여기서, 반응에 사용되는 용매로는, 디클로로메탄, 클로로포름, 테트라하이드로푸란, 아세트산에틸, 톨루엔 등, 또는 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 특별히 한정되지 않지만, 건조시킨 것이 바람직하다. 반응 온도는, 통상 -78 ℃ 내지 100 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는 -10 ℃ 에서 실온 부근까지의 범위이다. 또한 다른 방법으로서, 본 화합물 (8) 은, 화합물 (6) 과 화합물 (B) 를, 축합제 존재하에 반응시켜도 얻을 수 있다. 여기서, 사용하는 축합제로는, N,N'-디시클로헥실카르보디이미드, 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 등을 들 수 있고, 반응에 사용되는 용매로는, 디클로로메탄, 디메틸포름아미드, 테트라하이드로푸란, 아세트산에틸 등, 또는 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 특별히 한정되지 않는다. 반응 온도는, 통상 -78 ℃ 내지 100 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는 0 ℃ 에서 50 ℃ 까지의 범위이다. 또한, 필요에 따라 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린, 또는 4-디메틸아미노피리딘 등의 염기를 첨가할 수 있다. 또한, 1-하이드록시벤조트리아졸, N-하이드록시숙신이미드 등을 반응 촉진제로서 첨가하는 것도 가능하다.

화합물 (9) 의 합성

상기 화합물 (6) 의 제조법에 사용한 반응 조건에 따라, 탈보호를 실시함으로써 얻을 수 있다.

화합물 (1) 의 합성

상기 화합물 (8) 의 제조법에서 다른 방법으로서 기재한, 축합제를 사용한 반응 조건에 따라, 화합물 (9) 와 화합물 (C) 로부터 얻을 수 있다. 또한 다른 방법으로서, 화합물 (9) 와 화합물 (C) 를 염기 존재하, 1-클로로-N,N,2-트리메틸-1-프로페닐아민 등의 산할로겐화 시약과 반응시킴으로써 얻을 수 있다. 여기서, 사용하는 염기로는, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, 4-디메틸아미노피리딘, N-메틸모르폴린, 피리딘, 2,6-루티딘, 디아자비시클로[5.4.0]운데카-7-엔과 같은 유기 염기, 또는 탄산칼륨, 탄산나트륨, 탄산수소나트륨 등의 무기 염기를 들 수 있다. 반응에 사용되는 용매로는, 디클로로메탄, 클로로포름, 톨루엔 등, 또는 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 특별히 한정되지 않는다. 반응 온도는, 통상 -78 ℃ 내지 100 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는 -20 ℃ 에서 50 ℃ 까지의 범위이다.

본 발명 화합물 (1) 은, 이하의 방법으로도 제조할 수 있다.

[제조법 2]

[화학식 14]

[식 중, R¹² 는, 아미노기의 보호기를 의미한다. R¹∼R³, R⁶및 R⁷은 상기와 동일한 의미이다]

아미노기의 보호기로는, 벤질옥시카르보닐기, tert-부틸옥시카르보닐기, 벤질기 등을 들 수 있다.

화합물 (10) 의 합성

상기 제조법 1 에서 기재한, 화합물 (1) (화합물 (9) 와 화합물 (C) 의 아미드화) 의 제조법에 사용한 반응 조건에 따라, 화합물 (B') 와 화합물 (C) 로부터 얻을 수 있다.

화합물 (11) 의 합성

R¹² 의 종류에 따라 탈보호의 반응 조건은 상이하다. 통상 이 분야에서 실시되는 반응 조건에서 실시하면 된다. R¹²가 벤질옥시카르보닐기 또는 벤질기 등인 경우, 팔라듐탄소 등의 환원 촉매를 첨가하고, 수소 분위기하, 또는 포름산암모늄 등의 수소원 공존하에서 반응시킴으로써, 탈보호할 수 있다. 여기서, 반응에 사용되는 용매로는, 메탄올, 에탄올 등의 알코올류, 테트라하이드로푸란, 디옥산, 아세트산에틸, 물 등, 또는 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 특별히 한정되지 않는다. 반응 온도는, 통상 -78 ℃ 내지 100 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는 0 ℃ 내지 실온 부근의 온도이다. 또한, R¹²가 tert-부틸옥시카르보닐기 등인 경우, 트리플루오로아세트산 또는 염산 등으로 처리함으로써 탈보호할 수 있다. 여기서, 반응에 사용되는 용매로는, 디클로로메탄, 클로로포름, 테트라하이드로푸란, 디옥산, 메탄올, 에탄올, 물 등, 또는 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 특별히 한정되지 않는다. 반응 온도는, 통상 -78 ℃ 내지 100 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는 0 ℃ 내지 실온 부근의 온도이다.

화합물 (1) 의 합성

상기 제조법 1 에서 기재한 화합물 (8) (화합물 (B) 와 화합물 (6) 또는 화합물 (7) 의 아미드화) 의 제조법에 사용한 반응 조건에 따라, 화합물 (11) 과 화합물 (6) 또는 화합물 (7) 로부터 얻을 수 있다.

본 발명 화합물 (1) 의 R¹이, 통상 보호기로서 사용되고 있는, tert-부톡시카르보닐기, 벤질옥시카르보닐기 또는 트리플루오로아세틸기 등인 경우, 상기 제조법 2 에서 기재한 화합물 (11) 의 제조법 (화합물 (10) 에 있어서의 R¹² 의 탈보호) 에 사용한 반응 조건, 또는 메탄올 또는 에탄올과 물의 혼합 용매 중, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 탄산나트륨 및 탄산칼륨 등의 염기로 처리함으로써, R¹ 이 수소 원자인 화합물 (1) 을 얻을 수 있다. 또한, R¹ 이 수소 원자인 경우, 통상의 유기 화학적 방법을 사용하여, 정의되어 있는 치환기로 변환할 수 있다. 예를 들어, 알데히드 유도체 공존하, 수소화시아노붕소나트륨 또는 트리아세톡시수소화붕소나트륨 등의 환원제로 처리함으로써, R¹을 알킬기 등으로 변환할 수 있다. 또한, 트리에틸아민 등의 염기 존재하, 산클로라이드 유도체와 반응시킴으로써, R¹을 알카노일기 또는 알킬술포닐기로 변환할 수 있다.

제조 원료인 화합물 (3) 은, 문헌 (Synlett, 1998, 623 또는 US2005/26916) 에 기재된 방법에 따라서 합성할 수 있다. 또한, 이하의 방법으로도 합성할 수 있다.

[제조법 3]

[화학식 15]

[식 중, Z 는 염소 원자 또는 브롬 원자 등의 할로겐 원자를 의미한다. R¹³은, 트리클로로에틸옥시술포닐기, p-톨루엔술포닐기 등을 의미한다. Ar₁, Ar₂, 및 R⁵ 는 상기와 동일한 의미이다]

화합물 (13) 의 합성

화합물 (12) 와 트리페닐포스핀 또는 아인산트리에틸 등의, 유기 인 화합물과의 반응으로부터 얻어지는 포스포늄염 또는 포스폰산에스테르를, 알킬리튬, 리튬디이소프로필아미드, 리튬비스(트리메틸실릴)아미드, 수소화나트륨, 칼륨tert-부톡사이드 등의 염기로 처리한 후, 화합물 (D) 와 반응시킴으로써 얻을 수 있다. 여기서, 반응에 사용되는 용매로는, 디에틸에테르, 테트라하이드로푸란, 톨루엔, 디메틸포름아미드, 디메틸술폭사이드 등, 또는 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 특별히 한정되지 않지만, 건조시킨 것이 바람직하다. 반응 온도는, 통상 -78 ℃ 내지 100 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는 -78 ℃ 에서 실온까지의 범위이다.

화합물 (14) 의 합성

화합물 (14) 는, 여러 가지 문헌 (예를 들어, Tetrahedron Lett., 2005, 46, 4031, J. Am. Chem. Soc., 2002, 124, 136672, J. Am. Chem. Soc., 2001, 123, 7707, Synlett, 2004, 525, 또는 일본 공개특허공보 2000-72743호) 에서 보고되어 있는 합성법에 준하여 합성할 수 있다. 예를 들어, 화합물 (13) 과, 알콕시술폰아미드 유도체 또는 아릴술폰아미드 유도체를, 로듐 촉매 존재하, 아세트산요도소벤젠 등의 산화제, 및 산화마그네슘 등의 염기를 첨가하고, 반응시킴으로써 얻을 수 있다. 여기서, 반응에 사용되는 용매로는, 디에틸에테르, 테트라하이드로푸란, 톨루엔, 아세토니트릴 등, 또는 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 특별히 한정되지 않지만, 건조시킨 것이 바람직하다. 반응 온도는, 통상 -78 ℃ 내지 100 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는 -20 ℃ 에서 80 ℃ 까지의 범위이다.

화합물 (15) 의 합성

화합물 (14) 를, 암모니아수와 처리함으로써 얻을 수 있다. 여기서, 반응에 사용되는 용매로는, 메탄올, 에탄올, 물, 테트라하이드로푸란, 디옥산 등, 또는 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 특별히 한정되지 않지만, 물과 임의의 비율로 혼합 가능한 유기 용매가 바람직하다. 반응 온도는, 통상 -78 ℃ 내지 100 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는 실온에서 80 ℃ 까지의 범위이다.

화합물 (3) 의 합성

화합물 (15) 를, 염산, 황산, 또는 트리플루오로아세트산 등으로 처리함으로써 얻을 수 있다. 여기서, 반응에 사용되는 용매로는, 메탄올, 에탄올, 물, 테트라하이드로푸란, 디옥산 등, 또는 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 특별히 한정되지 않지만, 물과 임의의 비율로 혼합 가능한 유기 용매가 바람직하다. 반응 온도는, 통상 -78 ℃ 내지 100 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는 실온에서 80 ℃ 까지의 범위이다.

[제조법 4]

[화학식 16]

[식 중, R¹¹ 은, 카르복실기의 보호기를 의미하고, Z 는 염소 원자 또는 브롬 원자 등 할로겐 원자를 의미한다. Ar₁, Ar₂, 및 R⁵ 는 상기와 동일한 의미이다]

화합물 (16) 의 합성

화합물 (D) 를, 시안화칼륨 또는 시안화나트륨, 염화암모늄 및 암모니아수와의 반응 (Strecker 반응) 에 의해 얻어지는 아미노니트릴체를, 염산 또는 황산 등의 광산, 또는 p-톨루엔술폰산 또는 메탄술폰산 등의 유기산과 처리함으로써 얻을 수 있다. 여기서, 반응에 사용되는 용매로는, 메탄올, 에탄올, 물, 테트라하이드로푸란, 디옥산 등, 또는 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 특별히 한정되지 않는다. 반응 온도는, 통상 -20 ℃ 내지 100 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는 실온 부근에서 100 ℃ 까지의 범위이다.

화합물 (17) 의 합성

화합물 (16) 의, 카르복실기 및 아미노기의 보호는, 각각 통상적인 방법에 의해 얻을 수 있다. 여기서, 보호기 도입 순서는 특별히 한정되지 않는다. 이하, 각 반응에 관해서 서술한다. 에스테르화는, 메탄올 또는 에탄올 등의 R¹¹에 대응하는 저급 알코올 중, 염화수소, 황산, 또는 염화티오닐 등의 할로겐화 시약으로 처리함으로써 얻을 수 있다. 반응 온도는, 통상 -78 ℃ 내지 100 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는 0 ℃ 에서 100 ℃ 까지의 범위이다. 또한, 아미노기의 tert-부톡시카르보닐화는, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, 또는 4-디메틸아미노피리딘 등의 염기 존재하, 2 탄산디-tert-부틸과 반응시킴으로써 얻을 수 있다. 여기서, 반응에 사용되는 용매로는, 디클로로메탄, 클로로포름, 테트라하이드로푸란, 아세트산에틸, 아세토니트릴, 톨루엔 등, 또는 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 특별히 한정되지 않지만, 건조시킨 것이 바람직하다. 반응 온도는, 통상 -78 ℃ 내지 100 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는 0 ℃ 에서 100 ℃ 까지의 범위이다.

화합물 (18) 의 합성

화합물 (17) 의 에스테르기의 환원은, 수소화리튬알루미늄 등의 금수성 시약을 사용한 반응에서는, 디에틸에테르, 테트라하이드로푸란, 디옥산 등의 비프로톤성 용매 중, 실온 이하의 온도 (바람직하게는 -40 ℃ 내지 0 ℃) 에서 반응시킴으로써 알코올체를 얻을 수 있다. 또한, 수소화붕소나트륨 등을 사용하여 실시하는 경우에는, 메탄올, 에탄올, 물 등의 프로톤성 용매, 또는 이들과 상기 비프로톤성 용매의 혼합 용매를 사용하여, 실온 이하의 온도 (바람직하게는 -20 ℃ 내지 실온 부근) 에서 반응시킴으로써 동일하게 알코올체를 얻을 수 있다. 이렇게 하여 얻어진 알코올체는, 크롬산 [클로로크롬산피리디늄 (PCC), 니크롬산피리디늄 (PDC) 등], 디메틸술폭사이드와 염화옥살릴 (Swern 산화), 디메틸술폭사이드와 무수 아세트산, 디메틸술폭사이드와 3 산화황피리딘 착물, 1,1,1-트리아세톡시-1,1-디하이드로-1,2-벤즈요오독솔-3(1H)-온 (Dess-Martin 시약), 또는 2,2,6,6-테트라메틸-1-피페리디닐옥시 (TEMPO) 와 하이포아염소산 등의 산화제와 반응시킴으로써, 화합물 (18) 을 얻을 수 있다. 여기서, 반응에 사용되는 용매로는, 디클로로메탄, 클로로포름, 테트라하이드로푸란, 아세트산에틸, 디메틸술폭사이드, 물, 톨루엔 등, 또는 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 특별히 한정되지 않는다. 반응 온도는, 통상 -78 ℃ 내지 100 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는 -78 ℃ 에서 실온 부근까지의 범위이다.

화합물 (19) 의 합성

화합물 (18) 을, 아릴리튬 화합물 (Ar₁Li) 또는 그리냐르 시약 (Ar₁MgZ) 과 반응시킴으로써 얻을 수 있다. 대응하는 아릴리튬 화합물 또는 그리냐르 시약은, 시판품이거나, 또는 통상적인 방법에 따라서 합성할 수 있다. 대응하는 아릴할로겐화물과 금속 마그네슘으로부터 그리냐르 시약을 합성할 수 있고, 대응하는 아릴할로겐화물과 시판되고 있는 알킬리튬 시약 등으로부터, 할로겐-메탈 교환에 의해, 유기 리튬 시약을 합성할 수 있다.

여기서, 반응에 사용되는 용매로는, 디에틸에테르, 테트라하이드로푸란, 디옥산, 톨루엔 등, 또는 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 특별히 한정되지 않지만, 건조시킨 것이 바람직하다. 반응 온도는, 통상 -78 ℃ 내지 100 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는 -78 ℃ 에서 실온 부근까지의 범위이다.

화합물 (20) 의 합성

상기 화합물 (19) 의 제조법에 기재한, 산화 반응의 반응 조건을 적절히 선택하여 사용함으로써 얻을 수 있다.

화합물 (21) 의 합성

상기 제조법 2 에서 기재한 화합물 (11) 의 제조법에 있어서, R¹²가 tert-부틸옥시카르보닐기인 경우의 반응 조건을 사용함으로써 얻을 수 있다.

화합물 (22) 의 합성

화합물 (21) 을, 술파미드와 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데카-7-엔 등의 염기 존재하, 가열함으로써 얻을 수 있다. 여기서, 반응에 사용되는 용매로는, 디에틸에테르, 테트라하이드로푸란, 디옥산, 아세트산에틸, 메탄올, 에탄올, 이소프로필알코올, 에틸렌글리콜, 아세토니트릴, 톨루엔 등, 또는 이들의 혼합 용매를 들 수 있고, 특별히 한정되지 않는다. 반응 온도는, 통상 -78 ℃ 내지 180 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는 70 ℃ 에서 150 ℃ 까지의 범위이다.

화합물 (23) 의 합성

화합물 (22) 를, 상기 화합물 (18) 의 제조법에 기재한, 환원 반응의 반응 조건을 적절히 선택하여 사용함으로써 얻을 수 있다.

화합물 (3) 의 합성

화합물 (23) 을, 문헌 (Synlett, 1998, 623-624, US2005/0026916) 에 기재되어 있는 방법에 준하여 합성할 수 있다. 또한 다른 방법으로서, 화합물 (23) 을, 피리딘 또는 에틸렌디아민 등의 염기 존재하, 가수분해함으로써 얻을 수 있다. 여기서, 반응에 사용되는 용매로는, 메탄올, 에탄올, 물, 테트라하이드로푸란, 디옥산, 에틸렌글리콜 등, 또는 이들의 혼합 용매를 들 수 있는데, 물과 임의의 비율로 혼합 가능한 유기 용매가 바람직하다. 반응 온도는, 통상 0 ℃ 내지 180 ℃ 또는 용매의 비점까지의 범위인데, 바람직하게는 60 ℃ 내지 120 ℃ 의 범위이다.

상기 제조법에 의해 얻은, 라세미체 화합물 (3) 은, 문헌 (US2005/26916, 일본 공개특허공보 2005-75754호, 또는 Tetrahedron Asymmetry, 1995, 6, 3) 에 기재된 방법에 준하여 광학 분할할 수 있다. 예를 들어, 라세미체 화합물 (3) 을, 메탄올 또는 에탄올과 물의 혼합 용매 중, 광학 분할제로서 L-(+)-타르타르산 등과 처리함으로써, 타르타르산염을 결정으로서 얻을 수 있다. 이 타르타르산염을, 수산화나트륨 등의 염기로 처리함으로써, 표기 입체 배치를 갖는 광학 활성 디아민 (3) 이 얻어진다.

제조 원료인 화합물 (A) 는, 시판품이거나, 또는 문헌 (Tetrahedron Asymmetry, 1995, 6, 2199) 에 기재된 방법에 따라서 합성할 수 있다.

제조 원료인 화합물 (B) 및 (C) 는, 시판품이거나, 또는 참고예에 기재된 방법에 따라서 합성할 수 있다.

제조 원료인 화합물 (D) 는, 시판품이거나, 또는 여러 가지 문헌 (예를 들어, J., Med., Chem., 2000, 43, 4781) 에 기재된 방법에 따라서 합성할 수 있다.

본 발명의 하나의 실시형태에 있어서, 본 발명의 화합물은, p53 과 Mdm2 의 결합을 저해하고, Mdm2 에 의한 p53 의 유비퀴틴화를 저해하기 때문에, p53 과 Mdm2 의 결합 저해제 및/또는 Mdm2 유비퀴틴 리가아제 저해제로서 사용할 수 있다.

p53 과 Mdm2 의 결합 상태는, 단백질간의 결합 상태를 조사하기 위해 당업자에 통상 사용되는 방법 (예를 들어, 면역학적 수법 또는 표면 플라즈몬 공명 기술 등) 을 사용하여 검출할 수 있다. 면역학적 수법을 사용하여 Mdm2 와 p53 의 결합 상태를 조사하는 방법으로는, 예를 들어 면역 침강법 또는 ELISA (Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay) 를 들 수 있다. 이러한 면역학적 수법에 사용하는 항체는, Mdm2 및/또는 p53 을 직접 검출할 수 있는 항 Mdm2 항체 및/또는 항 p53 항체이어도 되고, Mdm2 및/또는 p53 을 태그 (예를 들어, GST 태그 또는 히스티딘 태그) 등으로 표지하는 경우에는, 표지에 적합한 항체 (예를 들어 항 GST 항체 또는 항히스티딘 항체) 를 사용하면 된다. 면역학적 수법을 사용하여 p53 과 Mdm2 의 결합 상태를 조사하는 방법은, 예를 들어 국제공개 제2003/51359호 팜플렛, 국제공개 제2003/51360호 팜플렛, 미국특허출원공개 제2004/259867호 명세서 또는 미국특허출원공개 제2004/259884호 명세서 또는 국제공개 제2005/110996호 팜플렛에 기재되어 있다. 표면 플라즈몬 공명 기술을 사용하여 p53 과 Mdm2 의 결합 상태를 조사하는 방법에 관해서는, 예를 들어 Science, 제303권, 844-848 페이지, 2004 년에 기재되어 있다.

p53 에 대한 Mdm2 의 유비퀴틴 리가아제 활성은, 당업자에 통상 사용되는 유비퀴틴 리가아제 어세이를 사용하여 조사할 수 있다. 유비퀴틴 리가아제 활성은, 예를 들어 유비퀴틴 활성화 효소 (E1), 유비퀴틴 결합 효소 (E2) 및 유비퀴틴 리가아제 (E3) (Mdm2) 에 의한 p53 의 유비퀴틴화를, 시험 화합물의 존재하와 비존재하에서 비교함으로써 검출할 수 있다 (예를 들어, 국제공개 제2001/75145호 팜플렛 또는 국제공개 제2003/76608호 팜플렛).

다른 실시형태에 있어서, 본 발명의 화합물은, p53 전사 활성화 도메인에 대한 Mdm2 의 결합을 저해함으로써, Mdm2 에 의해 억제되어 있던 p53 의 전사 인자로서의 기능을 회복시키기 때문에, p53 전사 활성 억제의 저해제로서 사용할 수 있다. p53 전사 활성 억제의 저해제는, 예를 들어 시험 화합물의 존재하 또는 비존재하에서, p53 에 의해 전사가 제어되는 단백질 (예를 들어, p21^Waf1/Cip1) 의 mRNA 량 또는 단백질량을 당업자에 통상 사용되는 mRNA 측정법 (예를 들어, 노던 블롯법) 또는 단백질 측정법 (예를 들어, 웨스턴 블롯법) 을 사용하여 측정하고, 시험 화합물의 존재하에 있어서의 그 mRNA 량 또는 단백질량이 시험 화합물의 비존재하에 있어서의 경우와 비교하여 증가한 경우, 그 시험 화합물을 p53 전사 활성 억제의 저해제로서 선택함으로써 얻을 수 있다. 또한, p53 전사 활성 억제의 저해제는, p53 응답 배열을 포함하는 리포터 유전자의 리포터 활성을 지표로 한 리포터 어세이에 의해 동정할 수도 있다.

다른 실시형태에 있어서, 본 발명의 화합물은, Mdm2 에 의한 p53 의 유비퀴틴화를 저해하고, p53 의 프로테아좀에 있어서의 분해를 막기 때문에, p53 분해의 저해제로서 사용할 수 있다. p53 분해의 저해제는, 예를 들어 시험 화합물의 존재하 또는 비존재하에서, p53 의 단백질량을 당업자에 통상 사용되는 단백질 측정법 (예를 들어, 웨스턴 블롯법) 을 사용하여 측정하고, 시험 화합물의 존재하에 있어서의 그 단백질량이 시험 화합물의 비존재하에 있어서의 경우와 비교하여 증가한 경우, 그 시험 화합물을 p53 분해의 저해제로서 선택함으로써 얻을 수 있다.

다른 실시형태에 있어서, 본 발명의 화합물은, Mdm2 와 p53 의 결합 저해 및/또는 Mdm2 에 의한 p53 유비퀴틴화의 저해에 의해, p53 의 암 억제 유전자로서의 기능을 정상화시키기 때문에, 항종양제로서 사용할 수 있다.

세포의 증식 저해 활성은, 당업자에 통상 사용되는 증식 저해 시험법을 사용하여 조사할 수 있다. 세포의 증식 저해 활성은, 예를 들어 하기의 시험예 2 에 기재된 바와 같이, 시험 화합물의 존재하 또는 비존재하에 있어서의 세포 (예를 들어, 종양 세포) 의 증식 정도를 비교함으로써 실시할 수 있다. 증식의 정도는, 예를 들어 생세포를 측정하는 시험계를 사용하여 조사할 수 있다. 생세포의 측정 방법으로는, 예를 들어 [³H]-티미딘의 도입 시험, BrdU 법 또는 MTT 어세이 등을 들 수 있다.

또, in vivo 에서의 항종양 활성은, 당업자에 통상 사용되는 항종양 시험법을 사용하여 조사할 수 있다. 예를 들어, 마우스, 래트 등에 각종 종양 세포를 이식하고, 이식 세포의 생착이 확인된 후, 본 발명의 화합물을 경구 투여, 정맥내 투여 등을 하고, 수일∼수주간 후에, 약제 무투여군에 있어서의 종양 증식과 화합물 투여군에 있어서의 종양 증식을 비교함으로써 본 발명의 in vivo 에서의 항종양 활성을 확인할 수 있다.

본 발명의 화합물은, 종양 또는 암, 예를 들어 폐암, 소화기암, 난소암, 자궁암, 유방암, 간암, 두경부암, 혈액암, 신장암 또는 고환 종양 등, 보다 바람직하게는, 폐암, 유방암, 전립선암, 대장암, 급성 골수성 백혈병, 악성 림프종, 망막 아세포종, 신경 아세포종 및 육종의 치료에 사용할 수 있는데, 이들 암에 한정되지 않는다.

본 발명의 의약 조성물은, 본 발명의 화합물과 약학적으로 허용할 수 있는 담체를 포함하고, 정맥내 주사, 근육내 주사, 피하 주사 등의 각종 주사제로서, 또는 경구 투여 또는 경피 투여 등의 여러 가지 방법에 의해 투여할 수 있다. 약학적으로 허용할 수 있는 담체란, 본 발명의 화합물 또는 본 발명의 화합물을 포함하는 조성물을, 어떤 기관 또는 장기로부터 다른 기관 또는 장기에 수송하는 것에 관여하는, 약학적으로 허용되는 재료 (예를 들어, 부형제, 희석제, 첨가제, 용매 등) 를 의미한다.

제제의 조제 방법으로는 투여법에 따라 적당한 제제 (예를 들어, 경구제 또는 주사제) 를 선택하고, 통상 사용되고 있는 각종 제제의 조제법으로 조제할 수 있다. 경구제로는, 예를 들어 정제, 산제, 과립제, 캡슐제, 환제, 트로키제, 용액제, 시럽제, 엘릭시르제, 유제, 또는 유성 내지 수성의 현탁액 등을 예시할 수 있다. 경구 투여의 경우에는 유리체 그대로이어도 되고, 염의 형태 중 어느 것이어도 된다. 수성 제제는 약학적으로 허용되는 산과 산부가물을 형성시키거나, 나트륨 등의 알칼리 금속염으로 함으로써 조제할 수 있다. 주사제의 경우에는 제제 중에 안정제, 방부제 또는 용해 보조제 등을 사용할 수도 있다. 이들 보조제 등을 포함하는 경우도 있는 용액을 용기에 수납 후, 동결 건조 등에 의해 고형 제제로 하여 용시 조제의 제제로 해도 된다. 또, 1 회 투여량을 하나의 용기에 수납해도 되고, 또한 복수 회 투여량을 하나의 용기에 수납해도 된다.

고형 제제로는, 예를 들어 정제, 산제, 과립제, 캡슐제, 환제, 또는 트로키제를 들 수 있다. 이들 고형 제제는, 본 발명의 화합물과 함께 약학적으로 허용할 수 있는 첨가물을 포함해도 된다. 첨가물로는, 예를 들어 충전제류, 증량제류, 결합제류, 붕괴제류, 용해 촉진제류, 습윤제류 또는 활택제류를 들 수 있고, 이들을 필요에 따라 선택하여 혼합하고, 제제화할 수 있다.

액체 제제로는, 예를 들어 용액제, 시럽제, 엘릭시르제, 유제, 또는 현탁제를 들 수 있다. 이들 액체 제제는, 본 발명의 화합물과 함께 약학적으로 허용할 수 있는 첨가물을 포함해도 된다. 첨가물로는, 예를 들어 현탁화제 또는 유화제를 들 수 있고, 이들을 필요에 따라 선택하여 혼합하고, 제제화할 수 있다.

본 발명의 화합물은, 포유류, 특히 인간의 암 치료에 사용할 수 있다. 투여량 및 투여 간격은, 질환의 장소, 환자의 신장, 체중, 성별 또는 병력에 따라, 의사의 판단에 의해 적절히 선택될 수 있다. 본 발명의 화합물을 인간에게 투여하는 경우, 투여량의 범위는, 1 일당, 약 0.01 ㎎/㎏ 체중∼약 500 ㎎/㎏ 체중, 바람직하게는 약 0.1 ㎎/㎏ 체중∼약 100 ㎎/㎏ 체중이다. 인간에게 투여하는 경우, 바람직하게는 1 일당 1 회, 또는 2 내지 4 회에 나누어 투여되고, 적당한 간격으로 반복하는 것이 바람직하다. 또한, 1 일량은, 의사의 판단에 의해 필요에 따라서는 상기의 양을 초과해도 된다.

본 발명의 화합물은 다른 항종양제와 병용하여 사용해도 된다. 예를 들어, 항종양 항생 물질, 항종양성 식물 성분, BRM (생물학적 응답성 제어 물질), 호르몬, 비타민, 항종양성 항체, 분자 표적약, 그 밖의 항종양제 등을 들 수 있다.

보다 구체적으로, 알킬화제로는, 예를 들어 나이트로젠 머스터드, 나이트로젠 머스터드 N-옥사이드 또는 클로람부틸 등의 알킬화제, 카르보콘 또는 티오테파 등의 아지리딘계 알킬화제, 디브로모만니톨 또는 디브로모덜시톨 등의 에폭사이드계 알킬화제, 카무스틴, 로무스틴, 세무스틴, 니무스틴하이드로클로라이드, 스트렙토조신, 클로로조토신 또는 라니무스틴 등의 니트로소우레아계 알킬화제, 부술판, 토실산인프로술판 또는 다카르바진 등을 들 수 있다.

각종 대사 길항제로는, 예를 들어 6-메르캅토퓨린, 6-티오구아닌 또는 티오이노신 등의 퓨린 대사 길항제, 플루오로우라실, 테가풀, 테가풀·우라실, 카르모풀, 독시풀리딘, 브록스우리딘, 시타라빈 또는 에노시타빈 등의 피리미딘 대사 길항제, 메토트렉세이트 또는 트리메트렉세이트 등의 엽산 대사 길항제 등을 들 수 있다.

항종양성 항생 물질로는, 예를 들어 마이토마이신 C, 브레오마이신, 페프로마이신, 다우노루비신, 아크랄비신, 독소루비신, 피라루비신, THP-아도리아마이신, 4'-에피독소루비신 또는 에피루비신 등의 안트라사이클린계 항생 물질 항종양제, 크로모마이신 A3 또는 악티노마이신 D 등을 들 수 있다.

항종양성 식물 성분으로는, 예를 들어 빈데신, 빈크리스틴 혹은 빈브라스틴 등의 빈카알카로이드류, 파크리탁셀, 도세탁셀 등의 탁산류, 또는 에토포사이드 또는 테니포사이드 등의 에피포도필로톡신류를 들 수 있다.

BRM 으로는, 예를 들어 종양 괴사 인자 또는 인도메타신 등을 들 수 있다.

호르몬으로는, 예를 들어 하이드로콜티존, 덱사메타존, 메틸프레드니솔론, 프레드니솔론, 프라스테론, 베타메타존, 트리암시놀론, 옥시메트론, 난드롤론, 메테놀론, 포스페스트롤, 에티닐에스트라디올, 클로르마지논 또는 메드록시프로게스테론 등을 들 수 있다.

비타민으로는, 예를 들어 비타민 C 또는 비타민 A 등을 들 수 있다.

항종양성 항체, 분자 표적약으로는, 트라스투주마브, 리툭시마브, 세툭시마브, 니모투주마브, 데노스마브, 베바시즈마브, 인프릭시마브, 메실산이마티니브, 게피티니브, 엘로티니브, 수니티니브, 라파티니브, 솔라페니브 등을 들 수 있다.

그 밖의 항종양제로는, 예를 들어 시스플라틴, 카르보플라틴, 옥살리플라틴, 타목시펜, 캄프토테신, 이포스파미드, 시클로포스파미드, 멜파란, L-아스파라기나아제, 아세클라톤, 시조피란, 피시바닐, 프로카르바진, 피포브로만, 네오카르티노스타틴, 하이드록시우레아, 우베니멕스 또는 크레스틴 등을 들 수 있다.

본 발명에는, 본 발명 화합물 또는 그 염을 투여하는 것을 특징으로 하는 암의 예방 방법 및/또는 치료 방법도 포함된다.

또한, 본 발명에는, 상기 의약을 제조하기 위한 본 발명의 화합물, 그 염 또는 그들의 용매화물의 사용도 포함된다.

이하에 나타내는 실시예에 의해 본 발명을 구체적으로 설명하는데, 본 발명은 이들에 한정되는 것이 아니라, 이들은 어떠한 의미에 있어서도 한정적으로 해석되지 않는다. 또한, 본 명세서에 있어서, 특별히 기재가 없는 시약, 용매 및 출발 재료는, 시판되는 공급원에서 용이하게 입수할 수 있다.

실시예

실시예 1

[화학식 17]

공정 1 : 7-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

참고예 1 의 공정 13 에서 얻은 화합물 (470 ㎎, 1.00 mmol) 의 1,2-디클로로에탄 (10 ㎖) 현탁액에, 염화티오닐 (0.50 ㎖), 디메틸포름아미드 (2 방울) 를 첨가하고, 70 ℃ 에서 1 시간 가열 교반 후, 용매를 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 테트라하이드로푸란 (10 ㎖) 에 용해하고, 빙랭하, 참고예 3 의 공정 2 에서 얻은 화합물 (380 ㎎, 1.20 mmol) 및 트리에틸아민 (0.42 ㎖, 3.00 mmol) 의 테트라하이드로푸란 (10 ㎖) 용액에 적하하고, 실온에서 20 시간 교반하였다. 아세트산에틸로 희석하고, 유기층을 포화 중조수, 포화 식염수의 순서로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 NH-실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [n-헥산:아세트산에틸=1:5 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (399 ㎎, 51 %) 을 무색 고체로서 얻었다.

공정 2 : 7-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

상기 공정 1 에서 얻은 화합물 (390 ㎎, 0.51 mmol) 을 10 % 함수 메탄올 (8 ㎖) 에 용해하고, 탄산칼륨 (400 ㎎, 2.89 mmol) 을 첨가하고, 40 ℃ 에서 2 시간 가열 교반하였다. 용매를 감압 농축 후, 얻어진 잔사를 아세트산에틸로 희석하고, 포화 식염수로 세정 후, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름:메탄올=15:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (190 ㎎, 55 %) 을 무색 고체로서 얻었다.

실시예 2

[화학식 18]

공정 1 : (6S)-7-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-6-메틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

참고예 1 의 공정 13 에서 얻은 화합물 (200 ㎎, 0.43 mmol) 및 참고예 5 의 공정 2 에서 얻은 화합물 (159 ㎎, 0.47 mmol) 의 디메틸포름아미드 (3 ㎖) 용액에, 트리에틸아민 (0.12 ㎖, 0.86 mmol), 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드염산염 (100 ㎎, 0.52 mmol) 및 1-하이드록시벤조트리아졸 (53 ㎎, 0.43 mmol) 을 첨가하여 실온에서 24 시간 교반하였다. 반응액을 아세트산에틸로 희석하고, 포화 중조수, 물, 포화 식염수의 순차로 세정 후, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [n-헥산:아세트산에틸=1:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (286 ㎎, 85 %) 을 담황색 고체로서 얻었다.

공정 2 : (6S)-7-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-6-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

상기 공정 1 에서 얻은 화합물을, 실시예 1 의 공정 2 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

실시예 3

[화학식 19]

공정 1 : (6R)-7-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-6-메틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

참고예 1 의 공정 13 에서 얻은 화합물을, 참고예 5 의 공정 2 에서 얻은 화합물 대신에 참고예 7 의 공정 2 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 2 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 2 : (6R)-7-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-6-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

실시예 4

[화학식 20]

공정 1 : (6S)-7-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-6-에틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

참고예 1 의 공정 13 에서 얻은 화합물을, 참고예 5 의 공정 2 에서 얻은 화합물 대신에 참고예 9 의 공정 2 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 2 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 2 : (6S)-7-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-6-에틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

실시예 5

[화학식 21]

(6R)-7-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-6-에틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

참고예 1 의 공정 13 에서 얻은 화합물을, 참고예 5 의 공정 2 에서 얻은 화합물 대신에 참고예 11 의 공정 2 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 2 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

실시예 6

[화학식 22]

(6R)-7-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-6-에틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

실시예 5 에서 얻은 화합물을, 실시예 1 의 공정 2 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

실시예 7

[화학식 23]

(6R)-7-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-6-이소부틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

참고예 1 의 공정 13 에서 얻은 화합물을, 참고예 5 의 공정 2 에서 얻은 화합물 대신에 참고예 13 의 공정 2 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 2 의 공정 1 과 동일하게 반응시킨 후, 실시예 1 의 공정 2 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 담황색 고체로서 얻었다.

실시예 8

[화학식 24]

4-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-4,9-디아자스피로[2.2.2.2]데칸

참고예 1 의 공정 13 에서 얻은 화합물을, 참고예 5 의 공정 2 에서 얻은 화합물 대신에 참고예 15 의 공정 2 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 2 의 공정 1 과 동일하게 반응시킨 후, 실시예 1 의 공정 2 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

실시예 9

[화학식 25]

공정 1 : (6S)-7-(1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4,4-디플루오로-L-프롤릴)-6-메틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

참고예 1 의 공정 13 에서 얻은 화합물을, 참고예 5 의 공정 2 에서 얻은 화합물 대신에 참고예 16 의 공정 2 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 2 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 2 : (6S)-7-(1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4,4-디플루오로-L-프롤릴)-6-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

실시예 10

[화학식 26]

공정 1 : (6R)-7-(1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4,4-디플루오로-L-프롤릴)-6-메틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

참고예 1 의 공정 13 에서 얻은 화합물을, 참고예 5 의 공정 2 에서 얻은 화합물 대신에 참고예 17 의 공정 2 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 2 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

MS(ESI)m/z:803[(M+H)⁺].

공정 2 : (6R)-7-(1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4,4-디플루오로-L-프롤릴)-6-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

실시예 11

[화학식 27]

공정 1 : (6R)-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-7-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

참고예 1 의 공정 13 에서 얻은 화합물을, 참고예 5 의 공정 2 에서 얻은 화합물 대신에 참고예 19 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 2 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 2 : {(6R)-7-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-4,7-디아자스피로[2.5]옥타-6-일}메탄올

상기 공정 1 에서 얻은 화합물 (255 ㎎, 0.28 mmol) 의 테트라하이드로푸란 (4 ㎖) 용액에, 테트라-n-부틸암모늄플루오라이드 (1M 테트라하이드로푸란 용액) (0.42 ㎖, 0.42 mmol) 를 첨가하고, 실온에서 3 시간 교반하였다. 용매를 감압 농축 후, 얻어진 잔사를 아세트산에틸로 희석하고, 유기층을 포화 중조수, 포화 식염수의 순차로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 NH-실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름:메탄올=40:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (102 ㎎, 52 %) 을 무색 고체로서 얻었다.

실시예 12

[화학식 28]

공정 1 : (6S)-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-7-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

참고예 1 의 공정 13 에서 얻은 화합물을, 참고예 5 의 공정 2 에서 얻은 화합물 대신에 참고예 20 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 2 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 2 : {(6S)-7-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-4,7-디아자스피로[2.5]옥타-6-일}메탄올

상기 공정 1 에서 얻은 화합물을, 실시예 11 의 공정 2 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

실시예 13

[화학식 29]

공정 1 : tert-부틸(6R)-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-7-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-4,7-디아자스피로[2.5]옥타-4-카르복실레이트

참고예 1 의 공정 13 에서 얻은 화합물을, 참고예 3 의 공정 2 에서 얻은 화합물 대신에, 참고예 22 에서 얻은 화합물을 사용하여, 실시예 1 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 담황색 고체로서 얻었다.

공정 2 : tert-부틸(6R)-7-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-6-(하이드록시메틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥타-4-카르복실레이트

상기 공정 1 에서 얻은 화합물을, 실시예 11 의 공정 2 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 담갈색 고체로서 얻었다.

공정 3 : (6R)-4-(tert-부톡시카르보닐)-7-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-6-카르복실산

상기 공정 2 에서 얻은 화합물 (100 ㎎, 0.12 mmol) 을 아세토니트릴 (1.5 ㎖) 과 물 (1.5 ㎖) 의 혼합 용매에 용해하고, 요오드벤젠디아세테이트 (88 ㎎, 0.26 mmol), 2,2,6,6-테트라메틸피페리딘1-옥실 (20 ㎎, 0.12 mmol) 을 첨가하고, 실온에서 4 시간 교반하였다. 티오황산나트륨 수용액 (4 ㎖) 을 첨가하고, 아세트산에틸로 추출하였다. 유기층을 포화 식염수로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 크로마토그래피 [클로로포름:메탄올=40:1∼10:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (58 ㎎, 59 %) 을 무색 고체로서 얻었다.

공정 4 : (6R)-7-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-6-카르복실산 2 염산염

상기 공정 3 에서 얻은 화합물을, 참고예 3 의 공정 2 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 담황색 고체로서 얻었다.

참고예 1 의 공정 13 에서 얻은 화합물 및 참고예 23 에서 얻은 화합물을 사용하여, 상기 실시예 13 과 동일하게 반응시키고, 하기 표의 화합물을 얻었다.

실시예 15

[화학식 30]

7-[(4R)-1-{[(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-일]카르보닐}-4-플루오로-L-프롤릴]-4-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

실시예 1 의 공정 2 에서 얻은 화합물 (340 ㎎, 0.503 mmol) 및 37 % 파라포름알데히드 수용액 (0.41 ㎖, 5.05 mmol) 의 1,4-디옥산 (10 ㎖) 용액에, 실온에서 트리아세톡시하이드로붕산나트륨 (267 ㎎, 1.26 mmol) 을 첨가하여 17 시간 교반하였다. 포화 중조수 용액을 첨가하고, 아세트산에틸로 추출, 물, 포화 식염수의 순서로 세정, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 용매를 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 실리카겔 크로마토그래피 [클로로포름:메탄올=50:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (309 ㎎, 89 %) 을 무색 고체로서 얻었다.

실시예 2 의 공정 2 에서 얻은 화합물 또는, 실시예 3 의 공정 2 에서 얻은 화합물을 사용하여, 상기 실시예 15 와 동일하게 반응시키고, 하기 표의 화합물을 얻었다.

하기 화합물을 일반 제법의 기재 및 실시예 1∼12 에 준하여 합성하였다.

참고예 1

[화학식 31]

공정 1 : 에틸2-(6-클로로피리딘-3-일)프로파네이트

빙랭하, 시안화칼륨 (10.7 g, 161 mmol) 의 농암모니아 수용액 (100 ㎖) 에, 염화암모늄 (6.88 g, 129 mmol) 및 1-(6-클로로피리딘-3-일)에타논 (10.0 g, 64.3 mmol) 의 메탄올 (200 ㎖) 용액을 첨가하고, 실온으로 되돌리면서 3 일간 교반하였다. 반응액을 감압 농축하고, 잔사를 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 무수 황산마그네슘으로 건조 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 빙랭하, 얻어진 잔사에 농염산 (100 ㎖) 을 첨가한 후, 2 시간 가열 환류하였다. 반응액을 감압 농축 후, 톨루엔 공비하고, 얻어진 잔사의 에탄올 (100 ㎖) 용액에, 빙랭하, 염화티오닐 (10 ㎖) 을 적하하였다. 3 시간 가열 환류한 후, 반응액을 감압 농축하고, 얻어진 잔사를 디클로로메탄으로 희석 후, 포화 중조수 및 포화 식염수로 세정하였다. 유기층을 무수 황산마그네슘으로 건조시키고, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 (아세트산에틸) 로 정제하고, 표기 화합물 (7.24 g, 49 %) 을 담황색 유상물로서 얻었다.

공정 2 : 에틸2-[(tert-부톡시카르보닐)아미노]-2-(6-클로로피리딘-3-일)프로파네이트

상기 공정 1 에서 얻은 화합물 (1.00 g, 4.37 mmol) 의 테트라하이드로푸란 (20 ㎖) 용액에, 트리에틸아민 (1.22 ㎖, 8.75 mmol) 및 2 탄산디-tert-부틸 (1.12 ㎖, 4.81 mmol) 을 첨가하고, 18 시간 가열 환류하였다. 추가로 2 탄산디-tert-부틸 (0.51 ㎖, 2.19 mmol) 을 첨가하고, 18 시간 가열 환류하였다. 반응액을 감압 농축 후, 얻어진 잔사를 아세트산에틸로 희석하고, 10 % 시트르산수 및 포화 식염수로 세정 후, 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [n-헥산:아세트산에틸=2:18 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (1.20 g, 84 %) 을 담황색 유상물로서 얻었다.

공정 3 : tert-부틸[1-(6-클로로피리딘-3-일)-1-메틸-2-옥소에틸]카르바메이트

빙랭하, 수소화리튬알루미늄 (1.43 g, 34.7 mmol) 의 테트라하이드로푸란 (20 ㎖) 현탁액에, 상기 공정 2 에서 얻은 화합물 (5.70 g, 17.3 mmol) 의 테트라하이드로푸란 (100 ㎖) 용액을 적하하고, 동 온도에서 1 시간 교반하였다. 빙랭하, 반응액에 1 N 수산화나트륨수 (6 ㎖) 를 첨가하고, 석출된 불용물을 여과 제거하였다. 여과액을 감압 농축하고, 얻어진 잔사를 디메틸술폭사이드 (100 ㎖) 에 용해하고, 실온에서 트리에틸아민 (60 ㎖) 및 3 산화황피리딘 착물 (5.52 g, 34.7 mmol) 을 첨가하고, 2 시간 교반하였다. 반응액을 물에 부은 후, 아세트산에틸로 추출하고, 포화 식염수로 세정하였다. 유기층을 무수 황산마그네슘으로 건조시킨 후, 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [n-헥산:아세트산에틸=2:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (2.77 g, 56 %) 을 담황색 유상물로서 얻었다.

공정 4 : tert-부틸[2-(4-클로로-3-플루오로페닐)-1-(6-클로로피리딘-3-일)-2-하이드록시-1-메틸에틸]카르바메이트

빙랭하, 4-클로로-3-플루오로페닐마그네슘브로마이드 (0.5 M 테트라하이드로푸란 용액) (100 ㎖, 50.0 mmol) 에, 상기 공정 3 에서 얻은 화합물 (6.47 g, 22.7 mmol) 의 테트라하이드로푸란 (20 ㎖) 용액을 적하하고, 동 온도에서 1 시간 교반하였다. 반응액에 포화 염화암모늄수를 첨가하여 반응을 정지하고, 아세트산에틸로 추출하였다. 유기층을 무수 황산마그네슘으로 건조시킨 후, 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사에 n-헥산/아세트산에틸로 이루어지는 혼합 용매를 첨가하고, 생성된 침전을 여과 채취, 건조시키고, 표기 화합물 (7.92 g, 84 %) 을 백색 고체로서 얻었다.

공정 5 : tert-부틸[2-(4-클로로-3-플루오로페닐)-1-(6-클로로피리딘-3-일)-1-메틸-2-옥소에틸]카르바메이트

빙랭하, 상기 공정 4 에서 얻은 화합물 (1.14 g, 2.75 mmol) 의 디메틸술폭사이드 (8 ㎖) 용액에, 무수 아세트산 (2.3 ㎖, 24.7 mmol) 을 첨가하고, 서서히 실온으로 되돌리면서 18 시간 교반하였다. 반응액을 아세트산에틸로 희석하고, 6 % 과염소산나트륨 수용액, 10 % 티오황산나트륨 수용액, 및 포화 식염수로 세정 후, 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [n-헥산:아세트산에틸=4:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (1.10 g, 97 %) 을 담황색 고체로서 얻었다.

공정 6 : 2-아미노-1-(4-클로로-3-플루오로페닐)-2-(6-클로로피리딘-3-일)프로판-1-온

빙랭하, 4 N 염산/디옥산 용액 (5 ㎖) 에, 상기 공정 5 에서 얻은 화합물 (1.23 g, 2.55 mmol) 의 디옥산 (1 ㎖) 용액을 첨가하고, 서서히 승온시키고, 실온에서 2 시간 교반하였다. 반응액을 물로 희석하고, n-헥산/아세트산에틸로 이루어지는 혼합 용매로 세정 후, 수층에 15 % 수산화나트륨수를 첨가하여 알칼리성으로 한 후, 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기층을 무수 황산마그네슘으로 건조시킨 후, 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [n-헥산:아세트산에틸=1:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (0.75 g, 95 %) 을 담황색 고체로서 얻었다.

공정 7 : 2-클로로-5-[4-(4-클로로-3-플루오로페닐)-3-메틸-1,1-디옥사이드-2,3-디하이드로-1,2,5-티아디아졸-3-일]피리딘

상기 공정 6 에서 얻은 화합물 (2.99 g, 9.55 mmol) 의 디옥산 (60 ㎖) 용액에, 몰레큘러시브 4A (4.5 g), 술파미드 (2.75 g, 28.6 mmol) 및 1,8-디아자비시클로[5.4.0]운데카-7-엔 (1.45 g, 9.52 mmol) 을 첨가하고, 95 ℃ 에서 18 시간 가열 교반하였다. 술파미드 (2.75 g, 28.6 mmol) 를 추가로 첨가하고, 24 시간 가열 교반하였다. 반응액을 감압 농축한 후, 얻어진 잔사를 아세트산에틸로 희석하고, 10 % 시트르산수 및 포화 식염수로 세정 후, 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 얻어진 잔사에 디이소프로필에테르/아세트산에틸로 이루어지는 혼합 용매를 첨가하고, 생성된 침전을 여과 채취, 건조시키고, 표기 화합물 (2.86 g, 80 %) 을 무색 고체로서 얻었다.

공정 8 : 2-클로로-5-[(3R^*,4S^*)-4-(4-클로로-3-플루오로페닐)-3-메틸-1,1-디옥사이드-1,2,5-티아디아졸리딘-3-일]피리딘

빙랭하, 상기 공정 7 에서 얻은 화합물 (7.13 g, 19.1 mmol) 의 에탄올 (63 ㎖) 용액에, 수소화붕소나트륨 (1.00 g, 26.4 mmol) 을 서서히 첨가하고, 동 온도에서 2 시간 교반하였다. 반응액을 감압 농축한 후, 얻어진 잔사를 아세트산에틸로 희석하고, 1 N 염산수 및 포화 식염수로 세정 후, 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [n-헥산:아세트산에틸=1:2 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (4.36 g, 59 %) 을 담황색 고체로서 얻었다.

공정 9 : (1R^*,2S^*)-1-(4-클로로-3-플루오로페닐)-2-(6-클로로피리딘-3-일)프로판-1,2-디아민

상기 공정 8 에서 얻은 화합물 (4.15 g, 11.0 mmol) 의 디옥산 (80 ㎖) 용액에, 에틸렌디아민 (7.40 ㎖, 111 mmol) 을 첨가하고, 100 ℃ 에서 18 시간 가열 교반하였다. 반응액을 감압 농축하고, 얻어진 잔사를 클로로포름으로 희석, 1 N 수산화나트륨수 및 포화 식염수로 세정 후, 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름:메탄올=93:7 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (3.35 g, 97 %) 을 담황색 유상물로서 얻었다.

공정 10 : (1R,2S)-1-(4-클로로-3-플루오로페닐)-2-(6-클로로피리딘-3-일)프로판-1,2-디아민

상기 공정 9 에서 얻은 화합물 (12.6 g, 40.0 mmol) 의 에탄올 (200 ㎖) 용액에, L-(+)-타르타르산 (6.3 g, 42.0 mmol) 을 첨가하고, 110 ℃ 에서 30 분간 가열 환류하였다. 물 (8 ㎖) 을 첨가하고, 추가로 10 분간 과열 환류한 후에 실온으로 되돌려 하룻밤 방치 후, 석출된 고체를 여과 채취하였다. 얻어진 고체에 5 N 수산화나트륨수를 첨가하고, 액성을 알칼리성으로 한 후, 디에틸에테르로 추출하였다. 유기층을 탄산칼륨으로 건조 후, 용매를 감압 증류 제거하고, 표기 화합물 (5.68 g, 45 %) 을 무색 고체로서 얻었다.

공정 11 : (4S,5R)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-4-(6-클로로피리딘-3-일)-4-메틸이미다졸리딘-2-티온

상기 공정 10 에서 얻은 화합물 (1.93 g, 6.14 mmol) 의 에탄올 (30 ㎖) 용액에, 2 황화탄소 (0.58 ㎖, 9.21 mmol) 를 실온에서 첨가하고, 20 시간 가열 환류하였다. 방랭 후, 반응액을 감압 농축하고, 얻어진 잔사를 아세트산에틸로 희석하고, 포화 식염수로 세정 후, 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름:메탄올=40:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (1.94 g, 89 %) 을 무색 고체로서 얻었다.

공정 12 : 에틸(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-카르복실레이트

상기 공정 11 에서 얻은 화합물 (1.94 g, 5.45 mmol) 의 에탄올 (20 ㎖) 용액에, 에틸2-클로로-4-메틸-3-옥소펜타네이트 (1.36 g, 7.09 mmol) 를 실온에서 첨가하고, 16 시간 가열 환류하였다. 반응액을 실온으로 되돌리고, 반응 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 아세트산에틸로 희석하고, 유기층을 포화 중조수, 포화 식염수의 순서로 세정하고, 무수 황산마그네슘으로써 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [n-헥산:아세트산에틸=3:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (2.06 g, 76 %) 을 무색 고체로서 얻었다.

공정 13 : (5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-카르복실산

상기 공정 12 에서 얻은 화합물 (2.06 g, 4.17 mmol) 의 에탄올 (30 ㎖) 용액에, 1 N 수산화나트륨수 (6 ㎖) 를 첨가하고, 60 ℃ 에서 16 시간 가열 교반하였다. 방랭 후, 용매를 감압 농축하고, 얻어진 잔사를 물로 희석 후, 디에틸에테르로 세정하였다. 빙랭하, 수층에 1 N 염산수를 서서히 첨가하고, 액성을 산성으로 한 후, 아세트산에틸로 추출, 유기층을 포화 식염수로 세정 후, 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 잔사에 디에틸에테르/n-헥산으로 이루어지는 혼합 용매를 첨가하고, 생성된 석출물을 여과 채취, 건조시키고, 표기 화합물 (1.51 g, 87 %) 을 담황색 고체로서 얻었다.

참고예 2

[화학식 32]

공정 1 : 에틸N-벤질-N-[(1-{[(벤질옥시)카르보닐]아미노}시클로프로필)카르보닐]글리시네이트

1-{[(벤질옥시)카르보닐]아미노}시클로프로판카르복실산 (23.5 g, 100 mmol), 에틸N-벤질글리시네이트 (19.3 g, 100 mmol) 의 디클로로메탄 (235 ㎖) 용액에 빙랭하, 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드염산염 (21.0 g, 110 mmol) 및 1-하이드록시벤조트리아졸 (2.70 g, 20 mmol) 을 첨가하여 실온에서 24 시간 교반하였다. 용매를 감압 농축 후, 아세트산에틸로 희석하고, 1 N 염산수, 포화 중조수, 포화 식염수의 순서로 세정 후, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [n-헥산:아세트산에틸=2:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (35.7 g, 87 %) 을 무색 고체로서 얻었다.

공정 2 : 7-벤질-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-5,8-디온

상기 공정 1 에서 얻은 화합물 (35.5 g, 86.5 mmol) 의 에탄올 (700 ㎖) 용액에, 5 % 팔라듐탄소 (3.6 g) 를 첨가하여 수소 분위기하, 2 시간 접촉 환원을 실시하였다. 촉매를 세라이트 여과 후, 여과액을 감압 농축하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [아세트산에틸:n-헥산=1:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (20 g, 100 %) 을 무색 고체로서 얻었다.

공정 3 : 7-벤질-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

상기 공정 2 에서 얻은 화합물 (20 g, 86.8 mmol) 의 테트라하이드로푸란 (200 ㎖) 용액에, 빙랭하 보란-테트라하이드로푸란 착물 (0.93 M 테트라하이드로푸란 용액) (375 ㎖, 0.35 mol) 을 첨가하고, 이어서 19 시간 가열 환류하였다. 빙랭하, 반응 혼합액에 메탄올 (130 ㎖) 을 첨가하여 60 분간 교반한 후, 용매를 감압 농축하였다. 얻어진 잔사에 에탄올 (450 ㎖), 물 (150 ㎖) 및 트리에틸아민 (150 ㎖) 을 첨가하고, 2 시간 가열 환류 후, 용매를 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 아세트산에틸로 희석하고, 포화 중조수, 포화 식염수의 순서로 세정 후, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름:메탄올=10:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (10.4 g, 59 %) 을 무색 유상물로서 얻었다.

공정 4 : 7-벤질-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

상기 공정 3 에서 얻은 화합물 (10.3 g, 50.9 mmol) 및 트리에틸아민 (17 ㎖, 122 mmol) 의 디클로로메탄 (200 ㎖) 용액에, 빙랭하 무수 트리플루오로아세트산 (8.50 ㎖, 61.1 mmol) 을 적하하고, 동 온도에서 1 시간 교반하였다. 반응액에 포화 중조수를 첨가하고, 클로로포름으로 희석 후, 포화 식염수로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 표기 화합물 (15.5 g, 100 %) 을 무색 유상물로서 얻었다.

공정 5 : 4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄염산염

상기 공정 4 에서 얻은 화합물 (15.5 g, 51 mmol) 의 에탄올 (250 ㎖) 용액에, 1 N 염산/에탄올 (105 ㎖, 105 mmol) 및 5 % 팔라듐탄소 (3 g) 를 첨가하고, 수소 분위기하 15 시간 접촉 환원을 실시하였다. 촉매를 세라이트 여과한 후, 여과액을 감압 농축하고, 얻어진 잔사에 에탄올/디에틸에테르로 이루어지는 혼합 용매를 첨가하고, 석출된 고체를 여과 채취하고, 표기 화합물 (10.3 g, 83 %) 을 무색 고체로서 얻었다.

참고예 3

[화학식 33]

공정 1 : tert-부틸(2S,4R)-4-플루오로-2-{[4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥타-7-일]카르보닐}피롤리딘-1-카르복실레이트

(4R)-1-(tert-부톡시카르보닐)-4-플루오로-L-프롤린 (400 ㎎, 1.71 mmol) 의 디메틸포름아미드 (8 ㎖) 용액에, 1-하이드록시벤조트리아졸 (46 ㎎, 0.34 mmol), 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드염산염 (502 ㎎, 2.61 mmol) 을 첨가하고, 실온에서 15 분간 교반하였다. 이어서, 참고예 2 의 공정 5 에서 얻은 화합물 (460 ㎎, 2.05 mmol) 및 디이소프로필에틸아민 (0.45 ㎖, 2.57 mmol) 을 첨가하고, 실온에서 16 시간 교반하였다. 아세트산에틸로 희석하고, 유기층을 포화 중조수, 포화 식염수의 순서로 세정 후, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [n-헥산:아세트산에틸=1:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (560 ㎎, 77 %) 을 무색 고체로서 얻었다.

공정 2 : 7-[(4R)-4-플루오로-L-프롤릴]-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

상기 공정 1 에서 얻은 화합물 (560 ㎎, 1.32 mmol) 의 디클로로메탄 (10 ㎖) 용액에, 트리플루오로아세트산 (10 ㎖) 을 첨가하고, 실온에서 1 시간 교반하였다. 반응 용매를 감압 농축 후, 포화 중조수 (30 ㎖) 를 첨가하고, 클로로포름으로 3 회 추출하였다. 유기층을 포화 식염수로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 표기 화합물 (380 ㎎, 89 %) 을 담황색 고체로서 얻었다.

참고예 4

[화학식 34]

공정 1 : 메틸N-벤질-N-[(1-{[(벤질옥시)카르보닐]아미노}시클로프로필)카르보닐]-L-알라니네이트

빙랭하, 메틸N-벤질-L-알라니네이트 (5.20 g, 26.9 mmol) 및 1-{[(벤질옥시)카르보닐]아미노}시클로프로판카르복실산 (6.30 g, 26.7 mmol) 의 디클로로메탄 (150 ㎖) 용액에 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드 (6.0 g, 29.0 mmol) 를 첨가하고, 실온에서 하룻밤 교반하였다. 감압 농축 후, 아세트산에틸로 희석하고, 불용물을 여과 제거한 후, 여과액을 1 N 염산수 및 포화 식염수로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [n-헥산:아세트산에틸=1:3 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (7.80 g, 71 %) 을 무색 유상물로서 얻었다.

공정 2 : (6S)-7-벤질-6-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-5,8-디온

상기 공정 1 에서 얻은 화합물을, 참고예 2 의 공정 2 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 유상물로서 얻었다.

공정 3 : (6S)-7-벤질-6-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

상기 공정 2 에서 얻은 화합물을, 참고예 2 의 공정 3 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 4 : (6S)-7-벤질-6-메틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

상기 공정 3 에서 얻은 화합물을, 참고예 2 의 공정 4 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 유상물로서 얻었다.

공정 5 : (6S)-6-메틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄염산염

상기 공정 4 에서 얻은 화합물을, 참고예 2 의 공정 5 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

참고예 5

[화학식 35]

공정 1 : tert-부틸(2S,4R)-4-플루오로-2-{[(6S)-6-메틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥타-7-일]카르보닐}피롤리딘-1-카르복실레이트

참고예 2 의 공정 5 에서 얻은 화합물 대신에 참고예 4 의 공정 5 에서 얻은 화합물을 사용하여, 참고예 3 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 담황색 유상물로서 얻었다.

공정 2 : (6S)-7-[(4R)-4-플루오로-L-프롤릴]-6-메틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

상기 공정 1 에서 얻은 화합물을, 참고예 3 의 공정 2 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 담황색 유상물로서 얻었다.

참고예 6

[화학식 36]

공정 1 : 메틸 N-벤질-N-[(1-{[(벤질옥시)카르보닐]아미노}시클로프로필)카르보닐]-D-알라니네이트

메틸N-벤질-L-알라니네이트 대신에 메틸N-벤질-D-알라니네이트를 사용하여, 참고예 4 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 유상물로서 얻었다.

공정 2 : (6R)-7-벤질-6-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-5,8-디온

공정 3 : (6R)-7-벤질-6-메틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

공정 4 : (6R)-7-벤질-6-메틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

공정 5 : (6R)-6-메틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄염산염

참고예 7

[화학식 37]

공정 1 : tert-부틸(2S,4R)-4-플루오로-2-{[(6R)-6-메틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥타-7-일]카르보닐}피롤리딘-1-카르복실레이트

참고예 2 의 공정 5 에서 얻은 화합물 대신에 참고예 6 의 공정 5 에서 얻은 화합물을 사용하여, 참고예 3 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 2 : (6R)-7-[(4R)-4-플루오로-L-프롤릴]-6-메틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

참고예 8

[화학식 38]

공정 1 : 메틸(2S)-2-{벤질[(1-{[(벤질옥시)카르보닐]아미노}시클로프로필)카르보닐]아미노}부타네이트메틸N-벤질-L-알라니네이트 대신에 메틸(2S)-2-(벤질아미노)부타네이트를 사용하여, 참고예 4 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 2 : (6S)-7-벤질-6-에틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-5,8-디온

상기 공정 1 에서 얻은 화합물을, 참고예 2 의 공정 2 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 3 : (6S)-7-벤질-6-에틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

상기 공정 2 에서 얻은 화합물을, 참고예 2 의 공정 3 과 동일하게 반응시킨 후, 얻어진 화합물을 참고예 2 의 공정 4 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 유상물로서 얻었다.

공정 4 : (6S)-6-에틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄염산염

상기 공정 3 에서 얻은 화합물을, 참고예 2 의 공정 5 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

참고예 9

[화학식 39]

공정 1 : tert-부틸(2S,4R)-2-{[(6S)-6-에틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥타-7-일]카르보닐}-4-플루오로피롤리딘-1-카르복실레이트

빙랭하, (4R)-1-(tert-부톡시카르보닐)-4-플루오로-L-프롤린 (520 ㎎, 2.23 mmol) 의 디클로로메탄 (8 ㎖) 용액에, 1-클로로-N,N,2-트리메틸-1-프로페닐아민 (0.35 ㎖, 2.68 mmol) 을 첨가하였다. 동 온도에서 1 시간 교반한 후, 참고예 8 의 공정 4 에서 얻은 화합물 (730 ㎎, 2.68 mmol) 및 트리에틸아민 (0.78 ㎖, 5.58 mmol) 을 첨가하고, 실온에서 추가로 3 시간 교반하였다. 클로로포름으로 희석하고, 유기층을 포화 중조수, 포화 식염수의 순서로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [n-헥산:아세트산에틸=2:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (780 ㎎, 77 %) 을 무색 고체로서 얻었다.

공정 2 : (6S)-6-에틸-7-[(4R)-4-플루오로-L-프롤릴]-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

상기 공정 1 에서 얻은 화합물을, 참고예 3 의 공정 2 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

참고예 10

[화학식 40]

공정 1 : 메틸(2R)-2-{벤질[(1-{[(벤질옥시)카르보닐]아미노}시클로프로필)카르보닐]아미노}부타네이트메틸N-벤질-L-알라니네이트 대신에 메틸(2R)-2-(벤질아미노)부타네이트를 사용하여, 참고예 4 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 담황색 고체로서 얻었다.

공정 2 : (6R)-7-벤질-6-에틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-5,8-디온

공정 3 : (6R)-7-벤질-6-에틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

공정 4 : (6R)-6-에틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄염산염

참고예 11

[화학식 41]

공정 1 : tert-부틸(2S,4R)-2-{[(6R)-6-에틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥타-7-일]카르보닐}-4-플루오로피롤리딘-1-카르복실레이트

참고예 8 의 공정 4 에서 얻은 화합물 대신에 참고예 10 의 공정 4 에서 얻은 화합물을 사용하여, 참고예 9 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 2 : (6R)-6-에틸-7-[(4R)-4-플루오로-L-프롤릴]-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

상기 공정 1 에서 얻은 화합물을, 참고예 3 의 공정 2 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 담황색 고체로서 얻었다.

참고예 12

[화학식 42]

공정 1 : 메틸N-[(1-{[(벤질옥시)카르보닐]아미노}시클로프로필)메틸]-D-로이시네이트

벤질(1-포르밀시클로프로필)카르바메이트 (3.0 g, 13.7 mmol) 의 디클로로메탄 (200 ㎖) 용액에, 메틸D-로이시네이트염산염 (2.73 g, 15.1 mmol), 염화아연 (2.8 g, 20.5 mmol), 및 트리아세톡시하이드로붕산나트륨 (9.16 g, 41.1 mmol) 을 첨가하고, 실온에서 18 시간 교반하였다. 반응액을 감압하 농축하고, 얻어진 잔사를 아세트산에틸로 희석하고, 포화 중조수 및 포화 식염수로 세정 후, 유기층을 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 용매를 감압하 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [n-헥산:아세트산에틸=2:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (2.24 g, 47 %) 을 담황색 유상물로서 얻었다.

공정 2 : 메틸N-[(1-{[(벤질옥시)카르보닐]아미노}시클로프로필)메틸]-N-(tert-부톡시카르보닐)-D-로이시네이트

상기 공정 1 에서 얻은 화합물을, 참고예 1 의 공정 2 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 유상물로서 얻었다.

공정 3 : 벤질[1-({(tert-부톡시카르보닐)[(1R)-1-(하이드록시메틸)-3-메틸부틸]아미노}메틸)시클로프로필]카르바메이트

빙랭하, 수소화리튬알루미늄 (0.50 g, 12.2 mmol) 의 테트라하이드로푸란 (20 ㎖) 현탁액에, 상기 공정 2 에서 얻은 화합물 (1.95 g, 4.35 mmol) 의 테트라하이드로푸란 (30 ㎖) 용액을 적하하고, 동 온도에서 1 시간 교반하였다. 물 및 10 % 시트르산수를 첨가하여 반응을 정지한 후, 아세트산에틸로 희석하고, 포화 식염수로 세정 후, 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [n-헥산:아세트산에틸=2:3 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (1.26 g, 64 %) 을 무색 유상물로서 얻었다.

공정 4 : 4-벤질7-tert-부틸(6R)-6-이소부틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-4,7-디카르복실레이트

상기 공정 3 에서 얻은 화합물 (1.26 g, 3.00 mmol) 의 톨루엔 (100 ㎖) 용액에, 빙랭하 트리페닐포스핀 (1.57 g, 5.99 mmol) 및 아조디카르복실산디이소프로필 (0.93 ㎖, 4.49 mmol) 을 첨가하고, 서서히 실온으로 되돌리면서 18 시간 교반하였다. 또한, 트리페닐포스핀 (1.57 g, 5.99 mmol) 및 아조디카르복실산디이소프로필 (0.93 ㎖, 4.49 mmol) 을 첨가하고, 4 시간 가열 환류하였다. 반응액을 감압 농축하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [n-헥산:아세트산에틸=3:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (0.57 g, 47 %) 을 무색 유상물로서 얻었다.

공정 5 : 벤질(6R)-6-이소부틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-4-카르복실레이트염산염

상기 공정 4 에서 얻은 화합물 (0.57 g, 1.42 mmol) 의 디옥산 (10 ㎖) 용액에, 빙랭하 4 N 염산/디옥산 (8 ㎖) 을 첨가하고, 서서히 실온으로 되돌리면서 24 시간 교반하였다. 반응액을 감압 농축하고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

참고예 13

[화학식 43]

공정 1 : 벤질(6R)-7-{[(2S,4R)-1-(tert-부톡시카르보닐)-4-플루오로피롤리딘-2-일]카르보닐}-6-이소부틸-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-4-카르복실레이트

참고예 8 의 공정 4 에서 얻은 화합물 대신에 참고예 12 의 공정 5 에서 얻은 화합물을 사용하여, 참고예 9 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 담황색 유상물로서 얻었다.

공정 2 : tert-부틸(2S,4R)-4-플루오로-2-{[(6R)-6-이소부틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥타-7-일]카르보닐}피롤리딘-1-카르복실레이트

상기 공정 1 에서 얻은 화합물 (0.65 g, 1.25 mmol) 의 에탄올 (20 ㎖) 용액에, 5 % 팔라듐탄소 (0.10 g) 를 첨가하여 수소 분위기하, 실온에서 18 시간 접촉 환원을 실시하였다. 촉매를 세라이트 여과 후, 여과액을 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 디클로로메탄 (20 ㎖) 에 용해하고, 디이소프로필아민 (1.3 ㎖, 7.52 mmol) 을 첨가하고, 빙랭하 무수 트리플루오로아세트산 (0.53 ㎖, 3.76 mmol) 을 첨가하였다. 서서히 실온으로 되돌리면서 2 시간 교반하고, 반응액을 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 아세트산에틸로 희석하고, 포화 중조수, 10 % 시트르산수, 및 포화 식염수로 세정 후, 유기층을 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 디클로로메탄 (20 ㎖) 에 용해하고, 빙랭하 트리플루오로아세트산 (10 ㎖) 을 첨가하고, 실온에서 2 시간 교반하였다. 반응액을 감압 농축 후, 얻어진 잔사를 클로로포름으로 희석하고, 포화 중조수 및 포화 식염수로 세정 후, 유기층을 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [아세트산에틸:에탄올=4:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (0.28 g, 59 %) 을 담황색 유상물로서 얻었다.

참고예 14

[화학식 44]

4,9-디아자디스피로[2.2.2.2]데칸 2 염산염

빙랭하, 4,9-디아자디스피로[2.2.2.2]데칸-5,10-디온 (1.70 g, 10.4 mmol) 의 테트라하이드로푸란 (20 ㎖) 용액에, 보란-테트라하이드로푸란 착물 (1.02 M 테트라하이드로푸란 용액) (41 ㎖, 41.6 mmol) 을 적하한 후, 18 시간반 가열 환류하였다. 빙랭하, 반응 혼합액에 메탄올 (50 ㎖) 을 첨가하여 60 분간 교반한 후, 용매를 감압 농축하였다. 얻어진 잔사에 에탄올 (50 ㎖), 물 (25 ㎖) 및 트리에틸아민 (25 ㎖) 을 첨가하고, 4 시간 가열 환류 후, 용매를 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 테트라하이드로푸란 (20 ㎖) 에 용해하고, 빙랭하 트리에틸아민 (4.3 ㎖, 31.2 mmol) 및 2 탄산디-tert-부틸 (6.80 g, 31.2 mmol) 을 첨가하고, 실온에서 14 시간 교반하였다. 용매를 감압 농축하고, 얻어진 잔사를 아세트산에틸로 희석하고, 포화 염화암모늄수, 포화 식염수의 순서로 세정 후, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사의 클로로포름 (20 ㎖) 용액에, 트리플루오로아세트산 (20 ㎖) 을 첨가하고, 실온에서 1 시간 교반하였다. 용매를 감압 농축하고, 얻어진 잔사에 4 N 염산/디옥산 (50 ㎖) 을 첨가하고, 2 시간 교반하였다. 용매를 감압 증류 제거하고, 잔사에 디에틸에테르를 첨가하고, 석출된 고체를 여과 채취하고, 표기 화합물 (2.00 g, 91 %) 을 무색 고체로서 얻었다.

참고예 15

[화학식 45]

공정 1 : tert-부틸(2S,4R)-4-플루오로-2-{[9-(트리플루오로아세틸)-4,9-디아자디스피로[2.2.2.2]데칸-4-일]카르보닐}피롤리딘-1-카르복실레이트

빙랭하, (4R)-1-(tert-부톡시카르보닐)-4-플루오로-L-프롤린 (466 ㎎, 2.00 mmol) 및 참고예 14 에서 얻은 화합물 (422 ㎎, 2.00 mmol) 의 디메틸포름아미드 (10 ㎖) 용액에, 디이소프로필에틸아민 (1.15 ㎖, 6.60 mmol) 및 (벤조트리아졸-1-일옥시)트리피롤리디노포스포늄헥사플루오로포스페이트 (1.14 g, 2.20 mmol) 를 첨가하였다. 실온에서 19 시간 교반 후, 반응액을 아세트산에틸로 희석하고, 포화 염화암모늄수, 포화 중조수 및 포화 식염수로 세정 후, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거한 후, 얻어진 잔사를 디클로로메탄 (10 ㎖) 에 용해하고 트리에틸아민 (0.56 ㎖, 4.00 mmol) 을 첨가하고, 빙랭 후, 무수 트리플루오로아세트산 (0.28 ㎖, 2.00 mmol) 을 첨가하였다. 실온에서 7 시간 교반 후, 반응액을 감압 농축하고, 아세트산에틸로 희석하고, 포화 염화암모늄수 및 포화 식염수로 세정 후, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [n-헥산:아세트산에틸=1:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (349 ㎎, 39 %) 을 담황색 유상물로서 얻었다.

공정 2 : 4-[(4R)-4-플루오로-L-프롤릴]-9-(트리플루오로아세틸)-4,9-디아자디스피로[2.2.2.2]데칸

참고예 16

[화학식 46]

공정 1 : tert-부틸(2S)-4,4-디플루오로-2-{[(6S)-6-메틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥타-7-일]카르보닐}피롤리딘-1-카르복실레이트

(4R)-1-(tert-부톡시카르보닐)-4-플루오로-L-프롤린 대신에 1-(tert-부톡시카르보닐)-4,4-디플루오로-L-프롤린을, 또한 참고예 2 의 공정 5 에서 얻은 화합물 대신에 참고예 4 의 공정 5 에서 얻은 화합물을 사용하여, 참고예 3 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 2 : (6S)-7-(4,4-디플루오로-L-프롤릴)-6-메틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

상기 공정 1 에서 얻은 화합물을, 참고예 3 의 공정 2 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 유상물로서 얻었다.

참고예 17

[화학식 47]

공정 1 : tert-부틸(2S)-4,4-디플루오로-2-{[(6R)-6-메틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]-옥타-7-일]카르보닐}피롤리딘-1-카르복실레이트

(4R)-1-(tert-부톡시카르보닐)-4-플루오로-L-프롤린 대신에 1-(tert-부톡시카르보닐)-4,4-디플루오로-L-프롤린을, 또한 참고예 2 의 공정 5 에서 얻은 화합물 대신에 참고예 6 의 공정 5 에서 얻은 화합물을 사용하여, 참고예 3 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 2 : (6R)-7-(4,4-디플루오로-L-프롤릴)-6-메틸-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

참고예 18

[화학식 48]

공정 1 : 메틸N-벤질-O-tert-부틸세리네이트

메틸O-tert-부틸-L-세리네이트염산염 (12.0 g, 57.0 mmol) 의 메탄올 (300 ㎖) 용액에, 트리에틸아민 (9.5 ㎖, 68.0 mmol), 벤즈알데히드 (6.37 ㎖, 63.0 mmol) 를 첨가하고, 실온에서 6 시간 교반하였다. 빙랭하, 수소화붕소나트륨 (3.23 g, 86.0 mmol) 을 서서히 첨가한 후, 실온에서 2 시간 교반하였다. 반응액에 포화 염화암모늄수 (100 ㎖) 를 첨가하고, 감압 농축한 후, 잔사를 아세트산에틸로 희석하고, 석출된 불용물을 여과 제거하였다. 유기층을 포화 식염수로 세정 후, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 표기 화합물 (15.3 g, 100 %) 을 무색 유상물로서 얻었다.

공정 2 : 메틸N-벤질-N-[(1-{[(벤질옥시)카르보닐]아미노}시클로프로필)카르보닐]-O-tert-부틸세리네이트

메틸N-벤질-L-알라니네이트 대신에 상기 공정 1 에서 얻은 화합물을 사용하여, 참고예 4 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 3 : 7-벤질-6-(tert-부톡시메틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-5,8-디온

상기 공정 2 에서 얻은 화합물을, 참고예 2 의 공정 2 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 4 : 7-벤질-6-(하이드록시메틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-5,8-디온

상기 공정 3 에서 얻은 화합물 (10.5 g, 33.0 mmol) 의 클로로포름 (50 ㎖) 용액에, 트리플루오로아세트산 (30 ㎖) 을 첨가하여 실온에서 1 시간 교반한 후, 40 ℃ 에서 추가로 6 시간 가열 교반하였다. 용매를 감압 농축 후, 톨루엔 공비하고, 잔사를 아세트산에틸로 희석 후, 포화 중조수, 포화 식염수의 순서로 세정하고, 무수 황산마그네슘으로 건조시켰다. 용매를 감압 증류 제거하고, 얻어진 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [클로로포름:메탄올=15:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (7.15 g, 83 %) 을 무색 고체로서 얻었다.

공정 5 : 7-벤질-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-5,8-디온

상기 공정 4 에서 얻은 화합물 (7.15 g, 27.0 mmol) 및 트리에틸아민 (4.5 ㎖, 32.0 mmol) 의 디메틸포름아미드 (100 ㎖) 용액에, 4-디메틸아미노피리딘 (660 ㎎, 5.00 mmol), tert-부틸디메틸클로로실란 (4.90 g, 32.0 mmol) 을 첨가하였다. 실온에서 16 시간 교반한 후, 반응액에 빙수 (200 ㎖) 를 첨가하고, 석출된 고체를 쳐과 채취하였다. 얻어진 고체를, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [n-헥산:아세트산에틸=3:1 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (8.63 g, 85 %) 을 무색 고체로서 얻었다.

공정 6 : 7-벤질-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

상기 공정 5 에서 얻은 화합물을, 참고예 2 의 공정 3 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 유상물로서 얻었다.

공정 7 : 7-벤질-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

상기 공정 6 에서 얻은 화합물을, 참고예 2 의 공정 4 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 담황색 유상물로서 얻었다.

공정 8 : 6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

상기 공정 7 에서 얻은 화합물을, 참고예 2 의 공정 5 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 9 : tert-부틸(2S,4R)-2-{[(6R)-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥타-7-일]카르보닐}-4-플루오로피롤리딘-1-카르복실레이트 (이성체 A) 및 tert-부틸(2S,4R)-2-{[(6S)-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥타-7-일]카르보닐}-4-플루오로피롤리딘-1-카르복실레이트 (이성체 B)

참고예 8 의 공정 4 에서 얻은 화합물 대신에 상기 공정 8 에서 얻은 화합물을 사용하여, 참고예 9 의 공정 1 과 동일하게 반응시킨 후, 생성된 디아스테레오 혼합물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피 [n-헥산:아세트산에틸=3:1 (v/v)] 로 분리하고, 표기 화합물을 각각 무색 고체로서 얻었다.

참고예 19

[화학식 49]

(6R)-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-7-[(4R)-4-플루오로-L-프롤릴]-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

참고예 18 의 공정 9 에서 얻은 화합물 (이성체 A) 을, 참고예 3 의 공정 2 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

참고예 20

[화학식 50]

(6S)-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-7-[(4R)-4-플루오로-L-프롤릴]-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

참고예 18 의 공정 9 에서 얻은 화합물 (이성체 B) 을, 참고예 3 의 공정 2 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

참고예 21

[화학식 51]

공정 1 : tert-부틸7-벤질-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-4-카르복실레이트

참고예 18 의 공정 7 의 얻은 화합물을, 실시예 1 의 공정 2 과 동일하게 반응시킨 후, 참고예 1 의 공정 2 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 유상 물질로서 얻었다.

공정 2 : tert-부틸6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-4-카르복실레이트

상기 공정 1 에서 얻은 화합물을, 참고예 2 의 공정 5 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 담황색 유상 물질로서 얻었다.

공정 3 : tert-부틸(6R)-7-({(2S,4R)-1-[(벤질옥시)카르보닐]-4-플루오로피롤리딘-2-일카르보닐)-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-4-카르복실레이트 (이성체 A) 및 tert-부틸(6S)-7-({(2S,4R)-1-[(벤질옥시)카르보닐]-4-플루오로피롤리딘-2-일카르보닐)-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-4-카르복실레이트 (이성체 B)

참고예 8 의 공정 4 에서 얻은 화합물 대신에, 상기 공정 2 에서 얻은 화합물을 사용하여, 참고예 9 의 공정 1 과 동일하게 반응시킨 후, 참고예 18 의 공정 9 와 동일하게, 생성된 디아스테레오 혼합물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 분리하고, 표기 화합물을 각각 무색 고체로서 얻었다.

참고예 22

[화학식 52]

tert-부틸(6R)-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-7-[(4R)-4-플루오로-L-프롤릴]-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-4-카르복실레이트

참고예 21 의 공정 3 에서 얻은 화합물 (이성체 A) 을, 참고예 2 의 공정 5 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

참고예 23

[화학식 53]

tert-부틸(6S)-6-({[tert-부틸(디메틸)실릴]옥시}메틸)-7-[(4R)-4-플루오로-L-프롤릴]-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-4-카르복실레이트

참고예 21 의 공정 3 에서 얻은 화합물 (이성체 B) 을, 참고예 2 의 공정 5 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

참고예 24

[화학식 54]

공정 1 : 메틸N-벤질-O-tert-부틸-L-세리네이트

메틸O-tert-부틸-L-세리네이트염산염 (12 g, 56.7 mmol) 을 메탄올 (120 ㎖) 에 용해하고, 아세트산 (6.50 ㎖, 114 mmol), 벤즈알데히드 (6.25 ㎖, 61.8 mmol) 및 시아노수소화붕소나트륨 (1 M 테트라하이드로푸란 용액, 75 ㎖) 을 첨가하고, 실온에서 48 시간 교반하였다. 반응액을 농축, 물로 희석하여 빙랭하, 탄산수소나트륨으로 중화, 클로로포름으로 추출하여 무수 황산마그네슘으로 건조 후, 건조제를 여과 제거, 용매를 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 실리카겔 크로마토그래피 [아세트산에틸:n-헥산=1:4 (v/v)] 로 정제하고, 표기 화합물 (7.75 g, 52 %) 을 무색 고체로서 얻었다.

공정 2 : 메틸N-벤질-N-[(1-{[(벤질옥시)카르보닐]아미노}시클로프로필)카르보닐]-O-tert-부틸-L-세리네이트

메틸N-벤질-L-알라니네이트 대신에, 상기 공정 1 에서 얻은 화합물을 사용하여, 참고예 4 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 유상 물질로서 얻었다.

공정 3 : (6S)-7-벤질-6-(tert-부톡시메틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-5,8-디온

공정 4 : (6R)-7-벤질-6-(tert-부톡시메틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

상기 공정 3 에서 얻은 화합물을, 참고예 2 의 공정 3 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 5 : [(6R)-7-벤질-4,7-디아자스피로[2.5]옥타-6-일]메탄올

상기 공정 4 에서 얻은 화합물을, 참고예 18 의 공정 4 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 6 : tert-부틸(6R)-7-벤질-6-(하이드록시메틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-4-카르복실레이트

상기 공정 5 에서 얻은 화합물을, 참고예 1 의 공정 2 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 7 : tert-부틸(6R)-7-벤질-6-(플루오로메틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄-4-카르복실레이트

상기 공정 6 에서 얻은 화합물 (360 ㎎, 1.08 mmol) 의 디클로로메탄 (8 ㎖) 용액을 -78 ℃ 로 냉각시켰다. 이어서, 비스(2-메톡시에틸)아미노술파트리플루오라이드 (0.26 ㎖, 1.41 mmol) 를 적하, 서서히 승온시켜 20 시간 교반하였다. 반응액을 포화 중조수 용액으로 중화시키고 클로로포름으로 추출, 무수 황산나트륨으로 건조 후, 건조제를 여과 제거, 용매를 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 실리카겔 크로마토그래피 [아세트산에틸:n-헥산=1:10 (v/v)] 로 정제하여 표기 화합물 (325 ㎎, 90 %) 을 무색 유상 물질로서 얻었다.

공정 8 : (6R)-7-벤질-6-(플루오로메틸)-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄

상기 공정 7 에서 얻은 화합물을, 참고예 12 의 공정 5 와 동일하게 반응시킨 후, 참고예 2 의 공정 4 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 유상 물질로서 얻었다.

공정 9 : (6R)-6-(플루오로메틸)-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄염산염

상기 공정 8 에서 얻은 화합물을, 참고예 2 의 공정 5 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

참고예 25

[화학식 55]

공정 1 : tert-부틸(2S,4R)-4-플루오로-2-{[(6R)-6-(플루오로메틸)-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥타-7-일]카르보닐}-4-플루오로피롤리딘-1-카르복실레이트

참고예 8 의 공정 4 에서 얻은 화합물 대신에, 참고예 24 의 공정 9 에서 얻은 화합물을 사용하여, 참고예 9 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 2 : (6R)-6-(플루오로메틸)-7-[(4R)-4-플루오로-L-프롤릴]-4-(트리플루오로아세틸)-4,7-디아자스피로[2.5]옥탄염산염

상기 공정 1 에서 얻은 화합물을, 참고예 12 의 공정 5 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

참고예 26

[화학식 56]

공정 1 : 3,4-비스(4-클로로페닐)-1,2,5-티아디아졸1,1-디옥사이드

1,2-비스(4-클로로페닐)에탄-1,2-디온을 원료로 사용하고, 참고예 1 의 공정7 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 담황색 고체로서 얻었다.

공정 2 : 3,4-비스(4-클로로페닐)-3-메틸-2,3-디하이드로-1,2,5-티아디아졸1,1-디옥사이드

상기 공정 1 에서 얻은 화합물 (10.0 g, 29.5 mmol) 의 톨루엔 (200 ㎖) 현탁 용액에, 0 ℃ 에서 메틸마그네슘브로마이드 (0.89 M 테트라하이드로푸란 용액, 43.1 ㎖) 를 적하하였다. 실온에서 1 시간 교반 후, 1 N 염산 수용액을 첨가하고, 아세트산에틸로 추출 후, 포화 중조수 용액 및 포화 식염수로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조, 용매를 감압 증류 제거하고, 표기 화합물 (11.1 g, 정량적) 을 무색 유상 물질로서 얻었다.

공정 3 : (3S^*,4R^*)-3,4-비스(4-클로로페닐)-3-메틸-1,2,5-티아디아졸리딘1,1-디옥사이드

상기 공정 2 에서 얻은 화합물을, 참고예 1 의 공정 8 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 4 : (1R^*,2S^*)-1,2-비스(4-클로로페닐)프로판-1,2-디아민

상기 공정 3 에서 얻은 화합물을, 참고예 1 의 공정 9 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 5 : (1R,2S)-1,2-비스(4-클로로페닐)프로판-1,2-디아민

상기 공정 4 에서 얻은 화합물을, 참고예 1 의 공정 10 과 동일하게 광학 분할하고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

[α]_D=+69.2°(c = 1.05, 메탄올, 23 ℃)

공정 6 : (4S,5R)-4,5-비스(4-클로로페닐)-4-메틸이미다졸리딘-2-티온

상기 공정 5 에서 얻은 화합물을, 참고예 1 의 공정 11 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 7 : 에틸(5R,6S)-5,6-비스(4-클로로페닐)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-카르복실레이트

상기 공정 6 에서 얻은 화합물을, 참고예 1 의 공정 12 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 8 : (5R,6S)-5,6-비스(4-클로로페닐)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-카르복실산

상기 공정 7 에서 얻은 화합물을, 참고예 1 의 공정 13 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

참고예 27

[화학식 57]

공정 1 : 에틸2-아미노-2-(4-클로로페닐)프로파네이트

1-(6-클로로피리딘-3-일)에타논 대신에, 4'-클로로아세토페논을 사용하여, 참고예 1 의 공정 1 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 황색 유상 물질로서 얻었다.

MS(ESI)m/z:228[(M+1)]⁺.

공정 2 : 에틸2-[(tert-부톡시카르보닐)아미노]-2-(4-클로로페닐)프로파네이트

상기 공정 1 에서 얻은 화합물을, 참고예 1 의 공정 2 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 3 : tert-부틸[1-(4-클로로페닐)-1-메틸-2-옥소에틸]카르바메이트

상기 공정 2 에서 얻은 화합물을, 참고예 1 의 공정 3 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 4 : tert-부틸[2-(4-클로로-3-플루오로페닐)-1-(4-클로로페닐)-2-하이드록시-1-메틸에틸]카르바메이트

상기 공정 3 에서 얻은 화합물을, 참고예 1 의 공정 4 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 5 : tert-부틸[2-(4-클로로-3-플루오로페닐)-1-(4-클로로페닐)-1-메틸-2-옥소에틸]카르바메이트

상기 공정 4 에서 얻은 화합물을, 참고예 1 의 공정 5 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 6 : 2-아미노-1-(4-클로로-3-플루오로페닐)-2-(4-클로로페닐)프로판-1-온

상기 공정 5 에서 얻은 화합물을, 참고예 1 의 공정 6 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 7 : 4-(4-클로로-3-플루오로페닐)-3-(4-클로로페닐)-3-메틸-2,3-디하이드로-1,2,5-티아디아졸1,1-디옥사이드

상기 공정 6 에서 얻은 화합물을, 참고예 1 의 공정 7 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 8 : (3S^*,4R^*)-4-(4-클로로-3-플루오로페닐)-3-(4-클로로페닐)-3-메틸-1,2,5-티아디아졸1,1-디옥사이드

상기 공정 7 에서 얻은 화합물을, 참고예 1 의 공정 8 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 9 : (1R^*,2S^*)-1-(4-클로로-3-플루오로페닐)-2-(4-클로로페닐)프로판-1,2-디아민

상기 공정 8 에서 얻은 화합물을, 참고예 1 의 공정 9 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 10 : (1R,2S)-1-(4-클로로-3-플루오로페닐)-2-(4-클로로페닐)프로판-1,2-디아민

상기 공정 9 에서 얻은 화합물을, 참고예 1 의 공정 10 과 동일하게 광학 분할하고, 표기 화합물을 담황색 유상 물질로서 얻었다.

[α]_D=+67.4°(c=1.0, 클로로포름, 25 ℃)

공정 11 : (4S,5R)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-4-(4-클로로페닐)-4-메틸이미다졸리딘-2-티온

상기 공정 10 에서 얻은 화합물을, 참고예 1 의 공정 11 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 담황색 유상 물질로서 얻었다. 본 화합물은, 정제하지 않고 다음 반응에 사용하였다.

공정 12 : 에틸(5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(4-클로로페닐)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-카르복실레이트

상기 공정 11 에서 얻은 화합물을, 참고예 1 의 공정 12 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 담황색 고체로서 얻었다.

공정 13 : (5R,6S)-5-(4-클로로-3-플루오로페닐)-6-(4-클로로페닐)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-카르복실산

상기 공정 12 에서 얻은 화합물을, 실시예 1 의 공정 13 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

참고예 28

[화학식 58]

공정 1 : tert-부틸[2-(4-클로로페닐)-1-(6-클로로피리딘-3-일)-2-하이드록시-1-메틸에틸]카르바메이트

4-클로로-3-플루오로페닐마그네슘브로마이드 대신에, 4-클로로페닐마그네슘브로마이드를 사용하여, 참고예 1 의 공정 4 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 2 : tert-부틸[2-(4-클로로페닐)-1-(6-클로로피리딘-3-일)-1-메틸-2-옥소에틸]카르바메이트

상기 공정 1 에서 얻은 화합물을, 실시예 1 의 공정 5 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 3 : 2-아미노-1-(4-클로로페닐)-2-(6-클로로피리딘-3-일)프로판-1-온

상기 공정 2 에서 얻은 화합물을, 실시예 1 의 공정 6 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 유상 물질로서 얻었다.

공정 4 : 2-클로로-5-[4-(4-클로로페닐)-3-메틸-1,1-디옥사이드-2,3-디하이드로-1,2,5-티아디아졸-3-일]피리딘

상기 공정 3 에서 얻은 화합물을, 실시예 1 의 공정 7 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 5 : (3S^*,4R^*)-2-클로로-5-[(3S,4R)-4-(4-클로로페닐)-3-메틸-1,1-디옥사이드-1,2,5-티아디아졸리딘-3-일]피리딘

상기 공정 4 에서 얻은 화합물을, 실시예 1 의 공정 8 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 6 : (1R^*,2S^*)-1-(4-클로로페닐)-2-(6-클로로피리딘-3-일)프로판-1,2-디아민

상기 공정 5 에서 얻은 화합물을, 실시예 1 의 공정 9 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 담황색 유상 물질로서 얻었다.

공정 7 : (1R,2S)-1-(4-클로로페닐)-2-(6-클로로피리딘-3-일)프로판-1,2-디아민

상기 공정 6 에서 얻은 화합물을, 실시예 1 의 공정 10 과 동일하게 광학 분할하고, 표기 화합물을 황색 유상 물질로서 얻었다.

공정 8 : (4S,5R)-5-(4-클로로페닐)-4-(6-클로로피리딘-3-일)-4-메틸이미다졸리딘-2-티온

상기 공정 7 에서 얻은 화합물을, 실시예 1 의 공정 11 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 9 : 에틸(5R,6S)-5-(4-클로로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-카르복실레이트

상기 공정 8 에서 얻은 화합물을, 실시예 1 의 공정 12 와 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

공정 10 : (5R,6S)-5-(4-클로로페닐)-6-(6-클로로피리딘-3-일)-3-이소프로필-6-메틸-5,6-디하이드로이미다조[2,1-b][1,3]티아졸-2-카르복실산

상기 공정 9 에서 얻은 화합물을, 실시예 1 의 공정 13 과 동일하게 반응시키고, 표기 화합물을 무색 고체로서 얻었다.

(시험예 1 Mdm2/p53 결합 어세이)

단백질 완충액 (20 mM HEPES pH 7.4, 150 mM NaCl, 0.1 % BSA) 을 사용하여, His-p53 (p53 의 1∼132 번째의 아미노산으로 이루어지는 p53 부분 단백질과 히스티딘 단백질의 융합 단백질) 및 GST-Mdm2 (Mdm2 의 25∼108 번째의 아미노산으로서, 33 번째의 류신 잔기를 글루타민산으로 변환한 Mdm2 부분 단백질과 글루타티온트랜스페라아제의 융합 단백질) 의 단백질을 각각 6.25 nM 포함하는 단백질 희석 용액을 제조하였다. 이 단백질 희석 용액을, 384 웰 플레이트 (384-well low volume NBC, Corning, 카탈로그 번호 3676) 의 각 웰에 8 ㎕ 씩 첨가하였다.

다음으로, DMSO 를 사용하여 시험 화합물을 희석하고, 이 희석액을 10 % 포함하는 단백질 완충액을 제조하고, 각 웰에 4 ㎕ 씩 첨가하였다.

계속해서, 항체 희석 완충액 (20 mM HEPES pH 7.4, 150 mM NaCl, 0.1 % BSA, 0.5 M KF) 을 사용하고, XL665 표지 항 His 항체 (HTRF monoclonal anti-6HIS antibody labeled with XL665 (카탈로그 번호 61HISXLB), Schering/Cisboio Bioassays) 및 유로퓸 (Eu) 표지 항 GST 항체 (HTRF monoclonal anti-GST antibody labeled with europium cryptate, Schering/Cisboio Bioassays, 카탈로그 번호 61GSTKLB) 를 각각 2.5 ㎍/㎖ 및 0.325 ㎍/㎖ 의 농도로 포함하는 용액을 제조하고, 각 웰에 8 ㎕ 씩 첨가하였다 (반응액 총량 : 20 ㎕/웰). 그 후, 플레이트를 25 ℃ 에서 1 시간 방치하였다.

여기 파장 320 ㎚ 에서의 620 ㎚ 및 665 ㎚ 의 시간 분해 형광을 플레이트 리더 (ARVOsx, PerkinElmer, 또는 PHERAstar, BMGLABTECH) 를 사용하여 측정하였다. 계측값 (RFU 620 ㎚ 와 RFU 665 ㎚) 을 사용하여, 이하의 식으로 Ratio(R) 을 산출하였다.

R=(RFU 665 ㎚-BI-C×RFU 620 ㎚)/RFU 620 ㎚

BI : 각 단백질, 화합물, 및 항체를 첨가하지 않은 반응액 (각 완충액만) 의 665 ㎚ 의 계측값

C (보정 계수)=(A-BI)/D

A 및 D 는, Eu 표지 항 GST 항체 용액만을 첨가한 반응액의 665 ㎚ 및 620 ㎚ 의 각 계측값

His-p53, GST-Mdm2, 시험 화합물 및 각 항체를 첨가한 웰로부터 산출한 R 값을 R(sample) 로 하고, His-p53, GST-Mdm2 및 각 항체를 첨가했는데, 시험 화합물을 첨가하지 않은 웰로부터 산출한 R 값을 R(control) 로 하고, GST-Mdm2, 시험 화합물 및 각 항체를 첨가했는데, His-p53 을 첨가하지 않은 웰로부터 산출한 R 값을 R(background) 로 하여, 하기의 식으로부터 T/C 를 산출하고, 시그모이드 피팅을 실시하고, Mdm2/p53 결합에 대한 IC₅₀값을 산출하였다. 결과를 표 1 에 나타낸다.

T/C=(R(sample)-R(background))/(R(control)-R(background))

결과를 표 20 에 나타낸다.

(시험예 2 항세포 시험)

야성형 p53 을 갖는 인간 폐암 유래 세포주 NCI-H460 을 사용하여 항세포 시험을 실시하였다.

NCI-H460 세포를, 배지 (10 % 소 태아 혈청을 포함하는 RPMI1640 배지) 에 현탁하고, 96 웰의 멀티 웰 플레이트에 각각 500 세포/150 ㎕/웰로 파종하였다. 시험 화합물을 DMSO 에 용해하고, 이것을 배지에서 희석하여 검체 용액으로 하였다 (DMSO 농도 1 % 이하). 파종 다음날, 시험 화합물을 첨가하지 않은 배지 또는 검체 용액을, 각 웰에 50 ㎕ 씩 첨가하였다. 세포 파종 다음날에 배지를 50 ㎕ 씩 첨가한 직후와, 검체 용액 또는 배지를 세포에 첨가하고, 37 ℃, 5 % CO₂로 3 일간 배양한 후, MTT 어세이를 실시하였다. MTT 어세이는 이하와 같이 실시하였다.

인산 완충액 (Dulbecco's Phosphate-buffered Salines) 을 사용하여 5 ㎎/㎖ 의 MTT (3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐테트라졸륨브로마이드, Sigma, M-2128) 용액을 제조하고, 이 MTT 용액을 20 ㎕ 씩 각 웰에 첨가하였다. 그 후, 플레이트를 37 ℃, 5 % CO₂하에서 4 시간 배양하였다. 플레이트를 1200 rpm 으로 5 분간 원심 처리한 후, 배양 상청액을 디스펜서로 흡인 제거하였다. DMSO 를 각 웰에 150 ㎕ 씩 첨가하고, 생성된 포르마잔을 용해하였다. 플레이트 믹서를 사용하여 플레이트를 교반함으로써, 각 웰의 발색을 균일하게 하였다. 각 웰의 흡광도를 OD 540 ㎚, reference 660 ㎚ 의 조건하, 플레이트 리더 (SpectraMaxPLUS384, Molecular Devices, CA USA) 를 사용하여 측정하였다.

검체 용액 첨가 당일에 측정한 OD 값을 S 로 하고, 검체 용액 첨가 3 일 후에 측정한 OD 값을 T 로 하고, DMSO 희석액 첨가 3 일 후에 측정한 OD 값을 C 로 하고, 하기 계산식으로부터 각 농도에 있어서의 T/C (%) 를 구하여 용량 (用量) 반응 곡선을 그리고, 50 % 증식 억제 농도 (GI₅₀값) 를 산출하였다.

T/C(%)=(T-S)/(C-S)×100

실시예 1∼6, 8∼10, 15, 16, 18∼25, 27, 29, 31 의 화합물은 GI₅₀(μM)<0.4 의 항세포 효과를 나타냈다. 실시예 7, 11∼14, 17, 26, 28, 30 의 화합물은 0.4≤GI₅₀<2.5 (μM) 의 항세포 효과를 나타냈다.

(시험예 3 항종양 시험)

인간 골육종 세포주 SJSA-1 또는 SJSA-1-RE (SJSA-1 에 p53 리포터 유전자를 삽입한 세포) 를 누드 마우스 (BALB/C-nu/nu SLC, 수컷, 닛폰 SLC) 에 피하 이식하고, 종양의 크기가 100∼200 ㎣ 정도에 도달한 시점에서 군을 나눴다 (6 마리/군). 시험 화합물을 0.5 % 메틸셀룰로오스 용액에 현탁시키고, 50 ㎎/㎏ 으로 1 일 2 회 (bid), 4 일간 연속 경구 투여하였다. 2 일간 휴약 후에 마우스를 해부하고, 종양을 적출 후, 그 중량을 측정하였다.

항종양 효과 (IR(%)) 는 다음 식에 의해 산출하였다.

IR(%)=[1-(화합물 투여군의 평균 종양 중량/무처치 대조군의 평균 종양 중량)]×100

실시예 2 의 화합물은 50<IR(%)<70, 실시예 3, 4, 6, 9 의 화합물은 70<IR(%)<100 의 항종양 효과를 나타냈다.

(시험예 4 대사 안정성 시험)

100 mM pH 7.4 인산 완충액, 30 mM 글루코오스 6 인산, 10 mM MgCl₂·6H₂O, 3 unit/㎖ 글루코오스 6 인산1-데하이드로게나아제, 0.3-1.5 ㎎P/㎖ 의 인간 간 미크로솜을 포함하는 반응액 100 ㎕ 에 3 μM 의 시험 화합물을 포함하는 100 mM pH 7.4 인산 완충액 100 ㎕ 를 첨가하고, 37 ℃ 에서 20 분간 인큐베이트한 후, 3 mM 의 NADP+ 를 포함하는 100 mM pH 7.4 인산 완충액 70 ㎕ 를 첨가하고, 추가로 37 ℃ 에서 30 분간 인큐베이트함으로써 미크로솜 대사 시험을 실시하였다. 화합물은, 고속 액체 크로마토그래프 장치에 접속한 4 중 극형 질량 분석계를 사용한 내부 표준법에 의해 정량하고, 대사 안정성 (화합물의 잔존율 : MS %) 은 다음 식에 의해 구하였다.

MS 인간 %=(NADP+ 를 첨가하여 30 분간 인큐베이트 후의 시험 화합물의 피크 면적비)/(NADP+ 첨가 전의 시험 화합물의 피크 면적비)×100

(피크면적비=시험 화합물의 피크 면적을 내부 표준 물질의 피크 면적으로 나눈 것)

결과를 표 21 에 나타낸다.

(ND : Not Determined)

Claims

일반식 (1)
[화학식 1]

[식 (1) 중,
Ar₁ 은 할로겐 원자, 시아노기 및 C₁∼C₆ 알킬기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 페닐기를 나타내고,
Ar₂ 는 할로겐 원자, C₁∼C₆ 알킬기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 페닐기, 또는 할로겐 원자, C₁∼C₆ 알킬기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 피리딜기를 나타내고,
R¹ 은 할로겐 원자, 수산기, C₁∼C₆ 알콕시기, 카르바모일기, 아미노기, C₁∼C₆ 알카노일기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기, 할로겐 원자, 수산기, C₁∼C₆ 알콕시기, 카르바모일기, 아미노기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알카노일기, 수소 원자, 또는 수산기를 나타내고,
R² 및 R³ 은 각각 독립적으로 할로겐 원자, 수산기, C₁∼C₆ 알콕시기, 카르바모일기, 아미노기, C₁∼C₆ 알카노일기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기, 카르복시기 또는 수소 원자를 나타내거나, 또는 R² 와 R³ 이 하나가 되어 옥소기를 형성해도 되고, 또한 R² 및 R³ 이 각각 결합하는 탄소 원자와 함께 스피로형 또는 축합형의 3∼5 원자의 포화 탄화수소 고리를 형성해도 되고,
R⁴ 는 할로겐 원자, 수산기, C₁∼C₆ 알콕시기, 카르바모일기, 아미노기, C₁∼C₆ 알카노일기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기를 나타내고,
R⁵ 는 할로겐 원자, 수산기, C₁∼C₆ 알콕시기, 카르바모일기, 아미노기, C₁∼C₆ 알카노일기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기를 나타내고,
R⁶ 은 할로겐 원자 또는 수소 원자를 나타내고,
R⁷ 은 할로겐 원자를 나타낸다]
로 나타내는 화합물 또는 그 염.
일반식 (2)
[화학식 2]

[식 (2) 중,
R¹ 은 할로겐 원자, 수산기, C₁∼C₆ 알콕시기, 카르바모일기, 아미노기, C₁∼C₆ 알카노일기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기, 할로겐 원자, 수산기, C₁∼C₆ 알콕시기, 카르바모일기, 아미노기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알카노일기, 수소 원자, 또는 수산기를 나타내고,
R² 및 R³ 은 각각 독립적으로 할로겐 원자, 수산기, C₁∼C₆ 알콕시기, 카르바모일기, 아미노기, C₁∼C₆ 알카노일기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기, 카르복시기 또는 수소 원자를 나타내거나, 또는 R² 와 R³ 이 하나가 되어 옥소기를 형성해도 되고, 또한 R² 및 R³ 이 각각 결합하는 탄소 원자와 함께 스피로형 또는 축합형의 3∼5 원자의 포화 탄화수소 고리를 형성해도 되고,
R⁴ 는 할로겐 원자, 수산기, C₁∼C₆ 알콕시기, 카르바모일기, 아미노기, C₁∼C₆ 알카노일기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기를 나타내고,
R⁵ 는 할로겐 원자, 수산기, C₁∼C₆ 알콕시기, 카르바모일기, 아미노기, C₁∼C₆ 알카노일기 및 시아노기에서 선택되는 1 또는 복수 개의 치환기를 갖고 있어도 되는 C₁∼C₆ 알킬기를 나타내고,
R⁶ 은 할로겐 원자 또는 수소 원자를 나타내고,
R⁷ 은 할로겐 원자를 나타낸다]
로 나타내는 화합물 또는 그 염.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
R¹ 이 C₁∼C₆ 알킬기, 1 또는 복수 개의 할로겐 원자로 치환되어 있어도 되는 C₁∼C₆ 알카노일기 또는 수소 원자인 화합물 또는 그 염.
제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서,
R⁴ 가 C₁∼C₆ 알킬기인 화합물 또는 그 염.
제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서,
R⁵ 가 C₁∼C₆ 알킬기인 화합물 또는 그 염.
하기 식
[화학식 3]

로 나타내는 화합물.
하기 식
[화학식 4]

로 나타내는 화합물.
하기 식
[화학식 5]

로 나타내는 화합물.
하기 식
[화학식 6]

로 나타내는 화합물.
하기 식
[화학식 7]

로 나타내는 화합물.
제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그 염을 포함하는 Mdm2 저해제.
제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그 염을 포함하는 p53 과 Mdm2 의 결합 저해제.
제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그 염을 유효 성분으로 하는 의약.
제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그 염 및 약학적으로 허용할 수 있는 담체를 함유하는 의약 조성물.
제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그 염의, 의약 제조를 위한 사용.
제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그 염을 유효 성분으로 하는 항암제.
제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그 염을 투여하는 것을 특징으로 하는 암의 치료 방법.
제 16 항에 있어서,
암이 폐암, 유방암, 전립선암, 대장암, 급성 골수성 백혈병, 악성 림프종, 망막 아세포종, 신경 아세포종 및 육종에서 선택되는 어느 것인 항암제.
제 17 항에 있어서,
암이 폐암, 유방암, 전립선암, 대장암, 급성 골수성 백혈병, 악성 림프종, 망막 아세포종, 신경 아세포종 및 육종에서 선택되는 어느 것인 암의 치료 방법.