TW201026322A - Methods and compositions for use of a coccidiosis vaccine - Google Patents

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201026322 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於一種用於鳥類疫苗接種的方法及組合物。 本申請案主張申請於2008年12月15日之美國臨時專利申 凊案第61/122,596號之優先權。上述申請案之所有内容以 引用的方式全部併入本文中。 【先前技術】 球蟲病為全球極其重要之雞病.其每年僅對於肉雞 斤⑺士”業所造成之損失預計就大於十億美元。球蟲病係 由七個種類之頂覆蟲門（apicomplexan)寄生性原生蟲艾美 球蟲CEiweria)之感染造成。在此等七個種類中，認為柔嫩 艾美球蟲（五.巨型艾美球蟲（五.幻及堆型艾 美球蟲（五.acervM/Zwof)最成問題。球蟲病之症狀包括精神 不振、貧血、水樣或血樣腹瀉（視感染種類而定）、體重減 輕及飼料轉化率不良。 艾美球蟲寄生蟲之生長及傳播在雞中尤其盛行，此係由 於此等烏類通常在擁擠條件下飼養，使得非常難以保持衛 生控制。由於抗藥性生成以及在狹促飼養環境中該等藥物 持續投與之困難，所以在此等條件下使用球蟲抑制藥物係 無效的。此外，球蟲抑制劑亦具有抗細菌作用且使用飼用 抗生素（in-feed antibiotics)視為不當。 美國農業部（United States Department of Agriculture， USDA)已認識到美國及全球肉雞業嚴重依賴於抗球毒藥物 之使用’將抗球蟲藥物添加至家禽飼料中且預防艾美球蟲 144841.doc 201026322 在雞腸道内部之細胞内發育階段。在將雞發送至市場之前 約1週自飼料中移除藥物作為防止肉製品中藥物殘留之手 段。當抗球蟲藥物續成為預防禽類球蟲病《首要方式 時，USDA聲稱艾美球蟲寄生蟲變得對該等藥物有抗性: 能力需要開發其他控制手段。 抗擊球蟲狀另-解決方法將為開發有效疫苗。當已涵 蓋投與低劑量有毒或減毒艾美球蟲種類㈣之混合物時， 仍需迅實其實際上為—種有效干預。由於雞變得對艾美球 蟲有免疫性，所以要耗費巨大精力開發針對球蟲病之「'次 單位」疫苗。該等疫苗將使㈣傳卫程技術產生艾美球蟲 寄生蟲之蛋白質組份。此方法之基本原理係可使用無害的 實驗室細gg株產纟「重組」蛋白f，其可用以卵内（在 蛋中)或在醉出時使雞免疫。若此方法成功，則雞將對隨 後之艾美球蟲感染有抵抗力，因為其已用通常存在於寄生 蟲表面上之蛋白質來免疫。然而，根據USDA，迄今為止 未能實現成果且至今仍無可用以預防禽類球蟲病之商用次 單位疫苗。 (：敗八1^^為在該產業中獲得一些接受度之疫苗且係基 於使用三個主要親和力純化的全長天然抗原（56咖、Μ kDa及230 kDa)，其係自巨型艾美球蟲屬之大配子細胞（雌 性）發育階段分離出以在產卵母雞即將開始產蛋期之前對 該等母雞進行疫苗接種。CoxAbic(S引發針對影響肉雞之 球蟲種類的交叉免疫力，包括針對堆型艾美球蟲、巨型艾 美球蟲及柔嫩艾美球蟲之免疫力。其係用以使產卵開始之 I4484I.doc 201026322 前的新母雞免疫。免疫的種雞（breeders)將特異性抗體經由 蛋黃轉移至肉雞且當其天然地暴露於農場上之球蟲時，將 保護在孵出之後早年期間的肉雞。此暴露在母體保護期間 產生免疫力且在肉雞生命週期早期將其轉移至肉雞。經由 蛋黃將保護性母體抗體轉移至後代小雞，該等孵出之小雞 具有高效價之母體抗體。此等母體抗體起作用從而減少雞 生長期之頭2-3週中卵囊排出。此又導致同窩仔卵囊數峰 值降低60-80%，其通常出現在3 ·5週大時。 然而，儘管此疫苗為能將母體免疫力轉移至肉雞之疫 苗，且可在不添加球蟲抑制劑於飼料中之情況下飼養肉 雞，但該免疫力為間接免疫力，此係由於免疫力係在肉雞 生命週期早期由其母親轉移而來。不存在確保肉雞保留免 疫力之機制且目前尚無可在孵出之後直接投與肉雞或小雞 的有用疫苗。此使知球蟲病可在並未充分接受來自母體之 免疫力的肉雞或已失去免疫力且需要加強免疫力之年長肉 雞中傳播。實際上，CoxAbie®之製造商指出CgxAMc係用 以接種種畜且僅保護其肉雞小雞。母體免疫力持續大㈣ 天或稍微更長時間，如藉*EUSA方法所確定。若鳥類在 生命週期晚期暴露於艾美球蟲之各個種類，則母體免疫力 不再存在且年長烏類仍不受保護。

CoxAbie®疫苗亦具有其他缺陷，其係藉由注射種雞來 投與。在C〇xAbic⑨疫苗接種時程中，在飼養期間必須給 新母雞注射該疫苗兩次，兩次注射之間間隔至少4週。可 在12至15週大時進行首纽射；以錢週大時進行第二次 144841.doc 201026322 注射。因此’此疫苗投與模式不易適應於直接投與大群肉 雞。 如上所述，存在獲得用於治療肉雞之疫苗的較大商業動 機。必須注入雞中之疫苗對於投與大的雞群而言不切實 際。因此，需要可易於投與肉雞之疫苗以實現針對球蟲病 - 之有害作用的保護。 . 【發明内容】 在某些態樣中，本發明闡明對球蟲病疫苗之需要，藉由 提供球蟲病疫苗來保護家禽免於艾美球蟲屬感染，該疫苗 ❹ 包含重組禽類腺病毒載體，該載體包含啟動子可操作地連 接於包含編碼膜銷定結構域之核酸的疏水性信號序列用 於插入開放閱讀框架（〇RF)以使〇RF與該疏水性信號序列 同框插入之多重選殖位點、聚腺苷酸化信號；及禽類腺病 毒基因組。 在特定實施例中，相關〇RF編碼巨型艾美球蟲之截短 r56抗原。在其他實施例中，相關〇RF編碼巨型艾美球蟲之 截短TFP250抗原。在其他實施例中，相關〇RF編碼巨型艾 〇 美球蟲之截短82 kDa抗原。在某些其他例示性實施例中， 多重選殖位點含有編碼巨型艾美球蟲之截短r56抗原以及

巨型艾美球蟲之載短TFP250抗原及/或巨型艾美球蟲之截 短82 kDa抗原的ORF 〇 J 球蟲病疫苗可自任何禽類病毒製備。球蟲病疫苗較佳採 用選自由以下組成之群的禽類腺病毒基因組·· FAv 1、 FAV 2、FAV 3、FAV 4、FAV 5、FAV 6、FAV 7、FAV 8、 I44841.doc 201026322 FAV 9、FAV 10、FAV 11及FAV 12之基因組。在特定實施 例中，禽類腺病毒基因組為FAV 8基因組。 重組禽類腺病毒載體可進一步包含緊鄰用於插入相關 • ORF之選殖位點上游的裂解序列，其中該載體之表現產物 產生可溶性產物。 在例示性實施例中，編碼截短r56之核酸包含SEQ ID NO:14中所示全長r56序列之核苷酸70-1035的序列，但不 編碼SEQ ID NO:2中所示之完整r56蛋白序列。由殘基 70-1035所編碼之核苷酸序列展示於SEQ ID NO:13中。全 長巨型艾美球蟲R56編碼序列亦展示於SEQ ID ΝΟ·_14中， ' 其序列係包含於SEQ ID NO: 1之序列中，其中atg起始位點 • 見於殘基103-1 06處。在其他實施例中，編碼截短r56之核 酸編碼由SEQIDNO:2之胺基酸24-345或SEQIDNO:2之胺 基酸24-345之片段組成的截短r56片段。在另一特定實施例 中，編碼截短TFP250之核酸包含SEQ ID NO:16中所示之 φ 全長TFP250序列之核苷酸6448-7083的序列，但不編碼 SEQ ID NO:4中所示之完整TFP250蛋白序列。更特定言 之，編碼截短TFP250之核酸係由SEQ ID ΝΟ·.16之核苷酸 - 6448-7083之核酸序列組成。由殘基6448-7083所編碼之核 t 苷酸序列展示於SEQ ID NO: 15中。全長巨型艾美球蟲 TFP250編碼序列亦展示於SEQ ID NO:16中，其序列係包 含於SEQ ID NO:3之序列中，其中atg起始位點見於殘基 231-233處。 亦涵蓋使用球蟲病疫苗來保護家禽免於艾美球蟲感染之 144841.doc 201026322 組合物及方法，該疫苗包含重組禽類腺病毒載體，該載體 包含啟動子可操作地連接於包含編碼膜錨定結構域之核酸 的疏水性信號序列、及編碼由SEQ ID NO:2之胺基酸 24-345或SEQ ID NO:2之胺基酸24-345之片段組成的截短 r56與該疏水性信號序列同框插入之核酸、聚腺苷酸化信 號；及禽類腺病毒基因組。 另一實施例教示球蟲病疫苗之製備及使用以便保護家禽 免於艾美球蟲感染，該疫苗包含重組禽類腺病毒載體，該 載體包含啟動子可操作地連接於包含編碼膜錨定結構域之 核酸的疏水性信號序列、及編碼由SEQ ID NO: 16之核苷酸 6448-7083之核酸序列組成的截短TFP250與該疏水性信號 序列同框插入之核酸、聚腺苷酸化信號；及禽類腺病毒基 因組。 另一實施例係關於使用球蟲病疫苗保護家禽免於艾美球 蟲感染之組合物及方法，該疫苗包含重組禽類腺病毒載 趙’該載體包含啟動子可操作地連接於包含編碼膜錨定結 構域之核酸的疏水性信號序列、及編碼巨型艾美球蟲之截 短82 kDa抗原與該疏水性信號序列同框插入的核酸、聚腺 苦酸化號；及禽類腺病毒基因組。 本發明亦涵蓋包含上述球蟲病疫苗組合物之組合的多價 球蟲病疫苗製劑。 另外’多價球蟲病疫苗製劑可進一步包含選自由以下組 成之群的免疫原：馬立克病病毒（Marek丨s Disease virus, MDV)、新城雞痕病毒（Newcastle 〇&咖 v卜us，NDV)、 201026322 傳染性支氣管炎病毒（IBV)、雞貧血病毒（CAV)、傳染性法 氏囊病病毒（IBDV)、禽流感（AI)、Reo病毒、禽類Retro病 毒、禽腺病毒、火雞鼻氣管炎病毒、沙氏桿菌屬及大腸桿 菌。 本發明之例示性方法係關於使個體免疫免於由柔嫩艾美 球蟲、巨型艾美球蟲、堆型艾美球蟲、毒害艾美球蟲 (Eimeria necatrix)、早熟艾美球蟲（Eimeria praecox)、和緩 艾美球蟲（Eimeria mitis)或布氏艾美球蟲（Eimeria brunetti) 引起之感染，其包含向個體投與本發明疫苗之步驟。在特 定實施例中，與以包含全長r56或全長TFP 250抗原或全長 82 kDa抗原之FAV載體使該個體免疫時所見之免疫力相 比，投藥引發增強水準之免疫力。 較佳使用該等方法來治療選自由以下組成之群的禽類： 雞、火雞、鵝、鴨、矮雞、鵪鶉及鴿子。禽類較佳為雞。 在特定實施例中，雞為成年肉雞。 投藥可經由以下任何習知投藥途徑進行，包括例如以該 疫苗對該個體進行喷霧、在食物中向該個體餵食該疫苗、 及在該個體之飲料供應中提供該疫苗。 本發明之另一方法包含用於向雞群體提供針對柔嫩艾美 球蟲、巨型艾美球蟲、堆型艾美球蟲、毒害艾美球蟲、早 熟艾美球蟲、和緩艾美球蟲或布氏艾美球蟲之保護性免疫 力的組合疫苗接種療法，其包含向個體投與本發明之任一 疫苗及向該雞群體投與CoxAbic®之步驟。 組合療法係使得向種母雞投與CoxAbic®以對孵出後之 144841.doc 201026322 小雞賦予免疫力且向孵出後第一天及稍晚的小雞及該群體 之成年肉母雞（broiler hens)投與該本發明疫苗。 本發明之其他態樣描述禽類腺病毒載體，其包含禽類腺 病毒基因組，該基因組包含異源啟動子、異源疏水性信號 序列、多重選殖位點及聚腺苷酸化序列，其中該啟動子及 該疏水性信號序列位於多重選殖位點之上游，其中插入相 關ORF至該多重選殖位點中將產生能夠表現受該啟動子控 制且與該信號序列同框的該相關〇RF之表現載體。 在特定實施例中，疏水性信號序列包含裂解位點以便自 表現相關0RF之宿主細胞分泌該相關〇RF之表現產物。在 其他實施例中，信號序列不含有裂解位點，藉此導致固定 於伤主細胞之細胞表面上的該相關QRF之融合表現產物的 表現。 亦涵蓋重組禽類腺病毒載體，其包含啟動子可操作地連 接於包含編碼膜錯定結構域之核睃的疏水性信號序列、用 於插入相關0RF以使相關〇RF與該疏水性信號序列同框插 入之多重選殖位點、聚腺苷酸化信號；及禽類腺病毒基因 組。在一些實施例中，載體可進一步包含緊鄰用於插入相 關0RF之選殖位點上游的裂解序列，其中該載體之表現產 物產生可溶性0RF產物》 亦揭示重組禽類腺病毒載體，其包含啟動子可操作地連 接於疏水性分泌信號序列及裂解位點、編碼巨型艾美球蟲 之戴短r56蛋白之核酸、聚腺苷酸化信號及禽類腺病毒基 因組。 144841.doc -10- 201026322 另一實施例係關於重組禽類腺病毒載體，其包含啟動子 可操作地連接於疏水性分泌信號序列及裂解位點、編碼巨 型艾美球蟲之截短TFP250蛋白之核酸、聚腺苷酸化信號及 禽類腺病毒基因組。 又一實施例係關於重組禽類腺病毒載體，其包含啟動子 可操作地連接於疏水性分泌信號序列及裂解位點、編碼巨 型艾美球蟲之截短82 kDa蛋白之核酸、聚腺苷酸化信號及 禽類腺病毒基因組。 又一實施例係關於重組禽類腺病毒載體’其包含啟動子 可操作地連接於包含編碼膜錨定結構域之核酸的信號序 列、編碼巨型艾美球蟲之載短r56蛋白之核酸、聚腺苷酸 化"is號及禽類腺病毒基因組。 其他實施例描述重組禽類腺病毒載體，其包含啟動子可 操作地連接於包含編碼膜錫定結構域之核酸的信號序列、 編碼巨型艾美球蟲之截短TFP250蛋白之核酸、聚腺苷酸化 信號；及禽類腺病毒基因組。 亦涵蓋重組禽類腺病毒載體，其包含啟動子可操作地連 接於包含編碼膜錨定結構域之核酸的信號序列、编碼巨型 艾美球蟲之截短82 kDa蛋白之核酸、聚腺苷酸化信號及禽 類腺病毒基因組。 在上述疫苗中’編碼截短Γ56之核酸包含SEQ ID NO:14 中所示全長r56序列之核苷酸7〇-1 〇3 5的序列，但不編碼 SEQ ID NO:2中所示之完整r56蛋白序列。更特定言之，編 碼截短r56之核酸係由SEQ ID NO: 14之核芽酸70-1035之核 144841.doc 201026322 酸序列或SEQ ID NO: 14之核苷酸70-1035之片段組成。例 如，編碼截短r56之核酸編碼由SEQ ID NO:2之胺基酸 24-345或SEQ ID NO:2之胺基酸24-345之片段組成的截短 r56片段。 在其他實施例中中，編碼截短TFP250之核酸包含SEQ ID NO:3中所示之全長TFP250序列之核苷酸6448-7083的序 列，但不編碼SEQ ID NO:4中所示之完整TFP250蛋白序 列。更特定言之，編碼截短TFP250之核酸係由SEQ ID NO:16之核苷酸6448-7083之核酸序列組成。 產生分泌產物之重組禽類腺病毒載體可包含任何分泌信 號序列。在特定實施例中，分泌信號序列係選自由雞γ干 擾素、豬γ干擾素及人類流感Η1Ν2之分泌信號序列組成之 群。 產生固定產物之重組禽類腺病毒載體可包含任何膜錨定 信號序列。在特定實施例中，該膜錨定信號序列係選自由 禽流感ΗΑ抗原之分泌信號序列組成之群。 任一所述表現載體可易於調配至用於本文所述方法中的 疫苗中。 例示性方法包含引發禽類群體之免疫反應的方法，其包 含向該群體投與該疫苗。 針對球蟲病疫苗接種鳥禽群體之較佳方法包含投與包含 本發明之重組禽類腺病毒載體之疫苗，其中與投與包含全 長r56或全長TFP250之疫苗相比，投與該疫苗引發提高的 免疫反應。 144841.doc -12- 201026322 亦涵蓋分離的細胞，其包含本文中所描述之重組禽類腺 病毒載體。 任一重組禽類腺病毒載體宜與適當賦形劑組合從而產生 用於治療動物且詳言之鳥類之醫藥調配物。 【實施方式】 本發明係關於製備及使用重組病毒疫苗組合物之方法， 可將重組病毒疫苗組合物投與肉雞群體以使該等鳥類產生 • 針對球蟲病之保護性免疫力。可將此疫苗投與孵出後之鳥 類’無需藉由注射投與，而是可經口投與，經由食物供 應、飲料供應，或甚至以氣溶膠喷霧。本發明之疫苗構築 體之一個優勢在於彼等使免疫原之表現傳遞至受感染細胞 上之細胞外位點而非内部表現免疫原。在本文所述疫苗之 情況下，免疫原由此傳遞至黏膜細胞（例如鼻通道、呼吸 道、胃腸道、腸黏膜及其類似物中之黏膜細胞）之外表 面，藉此呈遞免疫原於可迅速發動免疫反應之位點，與傳 ❼ 遞免疫原於細胞内之表現相反，在細胞中其不可有效接觸 適當免疫反應機構。 現有疫苗並不滿足此項技術中對有效球蟲病疫苗之長期 需要有許多原因。首先，C0xAbic(g)(目前可用於治療球蟲 病之疫苗）僅對母體賦予免疫力且依賴經由蛋黃將此免疫 力轉移至肉雞群。母體免疫力在卵孵出之後持續大約頭14 天之相當短時間。因此，其並非用於引發尤其肉雞之長期 反應的有效疫苗。此外，疫苗係經由注射投與。再者，此 致使疫苗對於治療大群年長鳥類無效。 144841.doc 13 201026322 為解決現有關於球蟲病治療的問題，本發明者已開發一 種用於賦予肉雞保護性免疫力之新穎疫苗。該疫苗係基於 禽類腺病毒表現系統，其提供艾美球蟲抗原之表現於次單 位疫苗中。該抗原表現於疏水性信號序列框内，且呈遞於 已才又與疫涪之雞中夂病毒感染細胞之細胞表面上，或在表 現載體為疏水性信號序列亦包含裂解信號者之情況下分泌 至該等受感染雞之胞外域中。在下文中進—步詳細描述使 用重組禽類腺病毒球蟲病疫苗之此等特徵及方法及組合 物。 一般而言，本發明之疫苗包含由禽類腺病毒基因組構成 且如圖1中所示構造之表現載體。禽類或禽腺病毒（FAV)為 熟習此項技術者所熟知且已經廣泛表徵。舉例而言，稱為 禽腺病毒1型CELO(雞胚致死性孤兒（chick embry〇 lethal orphan))株之禽類腺病毒已經描述（Chi〇cca, §等人，】 Virol. 70:2939_49 (1996) ; Li，p 等人，j — %〇1 65(pt 10):1817-25 (1984广 May，J. T.等人，Vir〇1〇gy 68:483_9 (1975) , Lehrmann, H.，Cotton，M.，J. Virol. 73:6517-25 (1999) ; Chiocca，S.等人，J· Virol. 71· 3168_77 (1997)) 〇 操縱CELO以形成用於基因療法且用於針對人類及動物且 尤其鳥類傳染性疾病之疫苗的載體之用途及方法亦已廣泛 描述於例如美國專利6,335,016中。CEL〇之完整基因組序 列（FAV 1或FAV A)可以Genbank寄存編號U46933 ; NC_001720及 AC_000014找到。 在特定實施例中，用於本文所述之方法及組合物之禽腺 144841.doc •14- 201026322 病毒載體為諸如美國專利第08/448,617號及第09/272,03 2號 (其内谷以引用的方式併入本文中）中所述之禽腺病毒載體 (FAV)。在一尤其較佳實施例中，該載體包含FAV血清型8 之右手末端（在下文中「FAV8」）。FAV8之完整核苷酸序列 在本文中以SEQ ID NO: 5形式闡明。FAV8表現載體之完整 核普酸序列亦包含於GenBank寄存編號AF155911中。用於 分離及產生FAV 8之方法在美國專利6,296,852(以引用的方 式全部併入本文中）中描述。 FAV 9(亦稱為 FAV D)係在 Cao等人，j_ Gen. Virol. 79 (Pt 10)，2507-2516 (1998)中描述且其完整基因組以GenBank寄 存編號AF083975及NC_000899展示。 倘若FAV之序列之教示為熟習此項技術者所知，則本發 明之疫苗可易於使用FAV 1'、FAV 2、FAV 3、FAV 4、FAV 5、FAV 6、FAV 7、FAV 8、FAV 9、FAV 10、FAV 11、 FAV 12或禽腺病毒之任一隨後分離之血清型（參見Monreal， G. Adenoviruses and adeno-associated viruses of Poultry. Poultry Science Rev. 4，第 1-27 頁（1992)關於病毒分類）製 備。如美國專利6,296,852中所述，FAV CFA20(其為FAV血 清型10)、CFA15(血清型10)及CFA 40及CFA 44(都為血清 型8)及FAV CFA15及CFA19(血清型9)可尤其適用於疫苗生 產。 在本文中所製備之疫苗中，所用啟動子可為任何可驅動 相關異源編碼區在FAV構築體中之表現的啟動子。該等啟 動子包括（但不限於）禽類腺病毒主要晚期啟動子（MLP)、 144841.doc -15- 201026322 CMVp、PGK-、El-、SV40 早期啟動子（SVG2)、SV4〇 晚期 啟動子、SV-40即刻早期啟動子、T4晚期啟動子及hsu TK(痕療病毒1型胸苦激酶）基因啟動子、rSV(r〇us肉瘤病 毒）LTR(長末端重複序列）及PGK(磷酸甘油酸激酶）基因啟 動子。FAV MLP之DNA序列展示於美國專利6,296,852之圖 5中。許多其他哺乳動物或禽類啟動子為熟習此項技術者 所知且亦可使用。 本文所述之疫苗中所用啟動子驅動與開放閱讀框架或相 關編碼區之核酸序列同框連接的疏水性信號序列之同框融 合物之表現。疏水性信號序列可為可用於靶向或尤其指導 pen閱讀框架或相關編碼區表現於受禽腺病毒表現載體感 染之宿主細胞外膜上的任何序列。在本發明中，基於FAv 之表現載體意欲感染雞。FAV通常感染雞之黏膜、肝臟及 上皮細胞，其可例如在雞之腸道、呼吸道或胃腸道中找 到》因此’疏水性信號序列為將開放閱讀框架或相關編碼 區之表現物運輸至此等黏膜細胞之細胞表面上的序列。藉 由由此在動物中之黏膜細胞之細胞表面上呈遞開放閱讀框 架或相關編碼區’本發明之疫苗能夠最有效傳遞該抗原至 可有效發動免疫反應之内部位點，與在動物細胞内（其不 太會有效地促進發動免疫反應）之表現相反。與疫苗用野 生型免疫原來製備時所見相比，經由使用目前描述之疫苗 進行的此表現產物之細胞外分泌導致較強之抗體免疫反應 及較多之抗體產生。 在真核細胞中，分泌性蛋白質藉由疏水性信號序列把向 144841.doc -16- 201026322 内質網膜。本發明利用此特性將異源疏水性信號序列用於 指導疫苗中指定蛋白質於細胞表面上之表現。 本文中所用病毒載體為重組載體在於：其包含含有編碼 經修飾之ORF的核酸之聚核苷酸構築體，其中一旦蛋白質 表現或直接表現於受感染細胞表面上後，0RF之表現產物 則允許（自受感染細胞）分泌截短ORF蛋白。舉例而言，相 關ORF與來自雞γ干擾素、豬γ干擾素或流感病毒之HA蛋白 之信號序列同框表現。可使用之其他信號序列包括例如以 下之信號序列··乳清磷蛋白信號序列；α-1酸性醣蛋白； α-促甲狀腺素；來自盲鰻之胰島素；來自餘鳙魚之胰島 素；人類胰島素；大鼠胰島素1或11 ;綿羊Ρ酪蛋白；綿羊 χ-赂蛋白；綿羊α·乳白蛋白；綿羊卜乳球蛋白；绵羊 蛋白及綿羊a_S2路蛋白；VS病毒糖蛋白；小公雞VLDL-11 ; 蜜蜂蜂毒肽；纟鼠乳糖；人胎盤催乳激素；人類β.絨膜促 性腺激素；人類α·絨膜促性腺激素；兔子宮珠蛋白；大鼠 生長激素，人類生長激素，人類；牛生長激素；牛副甲狀 腺素；大鼠鬆他素；大鼠企清白蛋白；人盗清白蛋白；大 鼠肝臟白蛋白；雜盾探Μ $ 雞原彈性蛋白B ;雞類卵黏蛋白；雞溶菌 軸；雞伴白蛋白.λ,, 疋占. 人類W抗胰蛋白酶；大鼠前列腺結合 蛋白，大鼠前列腺結合 蛋白元A1;狂犬病症盖’AD病毒糖蛋白；大鼠脂 rv. 病毒醣蛋白；人類流感維多利亞 (V1Ct〇na)血球凝集 ’ ㈣血球凝集素；人類白血類球;血球凝集素；禽流感 人類成纖擾素；人類免疫干擾素； 、，、鼠χ_免疫球蛋白；小鼠λ-免疫 144841.doc 17- 201026322 白 體 球蛋白免疫球蛋自；小以鏈免疫球蛋白；小鼠 胚胎VH·免疫球蛋白；，〗、鼠H_鏈免疫球蛋白；犬姨蛋白酶 原犬胰蛋白酶原2+3;犬狹凝乳蛋白酶原2;犬叛狀酶 A1 ;犬澱粉酶；小鼠澱粉酶；大鼠澱粉酶；兔&乳白蛋 豬乳白蛋白；大鼠緩肽酶Α;牛ACTH_p_LpH前駆 豬ACTH-P-LPH前驅體；人類肅叫姻前驅體； 緒胃泌素；小鼠腎素；㈣蟲糖蛋白；餘魚體抑素；餘鱗 魚體抑素；大鼠降血辑素；及鞍鳙魚升糖素。此等信號序 列之每一者在 von Heijne 等人 Eur. j. Bi〇chem 133 17 21 (1983)之圖1中展示且可易於適用於本文中。來自上述參考 文獻之圖1之信號序列在本文中之圖4中再現。 可易於使用熟習此項技術者已知之方法測定指定蛋白質 之此等及其他信號肽位點。例如，可使用signalp 3 〇伺服 S(Bendtsen，J.D.，Nielsen，H.，vonHeijne，G.&Brunak，S· (2004) Improved prediction of signal peptides: SignalP 3.0. J· Mol· Biol· 340，783-795)預測信號肽位點。另外，存在 可用以使信號序列之測定更容易的網站，參見例如 http://www.cbs.dtu.dk/services/SignalP/。所用信號序列之 精確一致性不重要，只要其為能夠將表現產物運輸至細胞 表面之疏水性序列。

在較佳實施例中，信號序列含有允許信號序列裂解且允 許連接蛋白分泌至該等細胞之細胞外間隙中的裂解位點。 在尤其較佳實施例中，使用以下證明本發明之此態樣：雞 ylFN之信號序列，其含有由ATG ACT TGC CAG ACT TAC • 18 · 14484丨.doc 201026322 AAC TTG TTT GTT CTG TCT GTC ATC ATG ATT TAT TAT GGA CAT ACT GCA AGT AGT CTA AAT CTT之DNA序列（SEQ ID NO:7)所編碼之序列：MTCQTYNLFVLSVIMIYYGHTASSLNL (SEQ ID NO:6);豬yIFN之疏水性信號序列，其為由DNA 序列：ATG AGT TAT ACA ACT TAT TTC TTA GCT TTT CAG CTT TGC GTG ACT TTG TGT TTT TCT GGC TCT TAC TGC(SEQ ID NO:9)所編碼之MSYTTYFLAFQLCVTLCFSGSYC (SEQ ID NO:8);人類流感病毒H1N2之疏水性信號序列， 其為由序歹1J : atg aaa gta aaa eta ctg ate ctg tta tgt aca ttt MKVKLLILLCTFTATYADTI(SEQ ID NO:10)。每一此等例 示性序列亦皆含有裂解位點，信號肽酶在此處起作用且導 致表現ORF之釋放。 除啟動子及可能或可能不含裂解位點之疏水性信號序列 之外，表現載體進一步包含聚腺苷酸化序列。P〇lyA尾保 護mRNA分子免於在細胞質中受外切核酸酶降解且幫助轉 錄終止、自細胞核排出mRNA及轉譯。幾乎所有真核 mRNA均經聚腺苷酸化。熟習此項技術者通常添力口 polyA尾 序列用於蛋白質之重組表現。 插入本發明之載體中的ORF或其他外源序列可為需要經 由使用本文所述之FAV載體表現之任何ORF或其他外源序 列。此等其他外源序列可由一或多個ORF或相關表現產物 或其他不為基因但具有其他相關治療功能之核苷酸序列組 成。 144841.doc -19- 201026322 然而，在特定實施例中，本發明描述欲以次單位疫苗形 式用於接種雞以對抗球蟲病之載體。在本文中，相關ORF 為編碼頂覆蟲門寄生性原生蟲艾美球蟲之抗原者。更詳言 之，ORF係選自由美國專利第7,423,137號（以引用的方式 併入本文中）中所述之56 kDa、82 kDa及230 kDa之抗原組 成之群。更特定言之，本發明者已發現併入56 kDa(本文 中或稱為r56)或23 0 kDa(本文中或稱為TPF250)抗原之全長 序列至FAV中不產生有效疫苗。然而，當使用截短r56序列 時，疫苗有效地引發免疫反應。r56之全長胺基酸序列展 示於SEQ ID NO:2中，此蛋白序列係由SEQ ID ΝΟ··1之序 列編碼’編碼全長gen之r56亦描述於SEQ ID ΝΟ:14中。另 外，編碼56 kDa抗原之質體可由Australian Government Analytical Laboratories, Pymble，Australia 以寄存編號 NMO1/22400公開獲得。以56 kDa抗原轉型之細菌細胞亦可 自同一儲藏所以寄存編號ΝΜ01/22401獲得。因此，在特 定實施例中，截短r56係用於製備球蟲病疫苗。r56之序列 為包含SEQ ID NO:2之胺基酸24-345之序列，其可由SEQ ID NO:14之序列70-1035編碼。在本發明之一較佳球蟲病 疫苗中，r56之截短序列與將截短r56固定至受感染細胞之 細胞表面上的疏水性信號序列同框。在本發明之另一較佳 球蟲病疫苗中，r56之截短序列與包含裂解位點之疏水性 信號序列同框，以便一旦運輸至膜之細胞外側後，截短 r56釋放至細胞之細胞外間隙中。在特定實施例中，球蟲 病疫苗係在固定r5 6蛋白經由禽流感HA抗原之疏水性信號 144841.doc •20- 201026322 序列固定至細胞表面時提供。在其他特定實施例中，球蟲 病疫苗係在含有裂解位點之疏水性信號序列選自由雞γ干 擾素、豬γ干擾素及人類流感病毒Η1Ν2組成之群時提供。 在某些實施例中，可製備包含兩種類型之疫苗的球蟲病疫 苗組合物，亦即允許截短r56之細胞表面表現的疫苗及將 所表現r56釋放至細胞外間隙中的疫苗。 在其他例示性實施例中，截短TFP250係用於製備球蟲病 疫苗。TFP250之全長序列展示於SEQ ID NO:4中且由SEQ ID NO :3或SEQ ID NO: 16編碼。編碼250 kDa抗原之質體可 由 Australian Government Analytical Laboratories，Pymble， Australia以寄存編號NM01/22396公開獲得。以此抗原轉型 之細菌細胞可自同一儲藏所以寄存編號NM01/22397獲 得。在本文之較佳疫苗中所用之TFP250序列為包含SEQ ID NO:4之胺基酸2149-2361或胺基酸2150-2361之序列， 其可分別由SEQ ID NO:16之序列6444-7083及序列 2149-2361編碼。在本發明之一較佳球蟲病疫苗中， TFP250之截短序列與將截短TFP250固定至受感染細胞之 細胞表面上的疏水性信號序列同框。在本發明之另一較佳 球蟲病疫苗中，TFP250之截短序列與包含裂解位點之疏水 性信號序列同框，以便一旦運輸至膜之細胞外側後’截短 TFP250釋放至細胞之細胞外間隙中。在特定實施例中’球 蟲病疫苗係在固定r56蛋白經由禽流感HA抗原之疏水性信 號序列固定至細胞表面時提供。在其他特定實施例中’球 蟲病疫苗係在含有裂解位點之疏水性信號序列選自由雞γ 144841.doc •21· 201026322 干擾素、豬γ干擾素及人類流感病毒H1N2組成之群時提 供。在某些實施例中，可製備包含兩種類型之疫苗的球蟲 病疫苗組合物，亦即允許截短TFP250之細胞表面表現的疫 苗及將所表現TFP250釋放至細胞外間隙中的疫苗。 同樣亦涵蓋以下情況：疫苗亦可連同表現艾美球蟲之82 kDa抗原之疫苗一起製備。82 kDa(本文中亦稱為gam82)抗 原可由 Australian Government Analytical Laboratories, Pymble, Australia以寄存編號NMO 1/22398公開獲得且以82 kDa抗原轉型之細菌細胞係自同一儲藏所以寄存編號 NM01/22399獲得（且展示於本文之附錄中）。任一本發明之 疫苗可與現有疫苗接種方案組合使用。舉例而言，本文所 述之疫苗可與CoxAbic®組合使用以在種畜、小雞及年長 的雞中產生保護性免疫力。 當本文所述之許多實例係關於自巨型艾美球蟲之抗原製 備之疫苗時，熟習此項技術者將易於知曉可使用來自其他 艾美球蟲種類之同源序列製備該等疫苗。熟習此項技術者 可易於使用習知分子生物學技術經由與來自巨型艾美球蟲 之上述開放閱讀框架序列之同源性來鑑別該等適當DNA序 列。因此，尤其涵蓋來自其他艾美球蟲種類（例如柔嫩艾 美球蟲、堆型艾美球蟲、毒害艾美球蟲、早熟艾美球蟲、 和緩艾美球蟲或布氏艾美球蟲）之巨型艾美球蟲r56、 TFP25及82 kDa ORF之同源物用於製備本文所述之球蟲病 疫苗。就此而言，SEQ ID NO:12提供柔嫩艾美球蟲之r56 序列。倘若柔嫩艾美球蟲及巨型艾美球蟲之r56序列顯示 144841.doc -22- 201026322 有效’則熟習此項技術者將易於能鑑別適用於本文所述之 、、及、’且α物中的來自其他艾美球蟲種類之I%的同源 物。 在較佳實施財，本發明之疫苗制於提供對個體進行 免疫U免於柔嫩艾美球蟲、巨型艾美球蟲、堆型艾美球 f、毒Μ美球蟲、早熟Μ球蟲、和緩艾美球蟲或布氏 又美球蟲或表現免疫上可交又反應的抗原之微生物之感染 φ 的方法其包含向個體投與本發明之疫苗的步驟。在尤其 較佳實施例中，個體為包括（但不限於）選自由雞、火雞、 冑、鴨、矮雞、鵪鶉及鴿子組成之群的禽類之禽類。在尤 其較佳實施例中，禽類為雞，且更詳言之為肉雞。 疫苗可經由疫苗接種通常所用之任何途徑來投與，包括 (但不限於）全身地（例如靜脈内、氣管内、血管内、肺内、 腹膜内 '鼻内、非經腸、經腸、肌肉内、皮下、瘤内或顧 内）、藉由經口投與、藉由氣溶膠化或肺内滴注。投藥可 • 以單一劑量或以在特定時間間隔之後重複一或多次之劑量 進行。適當投藥途徑及劑量將根據情況（例如，所治療個 體、所治療之病症或相關ORF或多肽片段）變化，但可由熟 習此項技術者判定。 可根據習知投藥方案投與疫苗，例如以與劑量調配物相 谷之方式且以預防上有效之量單一或重複投藥預防上有 效之量亦即免疫抗原或能夠表現將會在鳥類（尤其家禽）中 誘導對抗強毒性艾美球蟲寄生蟲之攻擊的免疫力之抗原的 重組微生物之量。將免疫力定義為在疫苗接種之後的鳥類 144841.doc -23· 201026322 群體中誘導與未接種疫苗組相比之顯著保護水準。在特定 實施例中，所賦予之免疫力為增強的免疫力，其中本發明 之疫苗在疫苗接種之後的烏類群體中誘導之保護水準比當 以次單位FAV載體（包含全長r56或全長TFP 250抗原或全長 82 kDa抗原）接種烏類時所見的保護更有效。由於當前次 單位疫苗與自全長序列製備之次單位疫苗相比具有更大穩 定性所以觀察到此更有效之疫苗接種。 本發明之疫苗可減少由受感染動物排出之卵囊數目。通 常’排出之卵囊將感染群中之其他動物。排出印囊數目之 減少亦將使得隨後受感染之動物數目減少且排出卵囊數目 之減少亦將產生較少傳染性負載量。在特定實施例中，本 發明之疫苗在鳥類中減少當受隨後艾美球蟲感染攻擊時盲 腸病變之數量。 通常，每隻雞之活病毒載體疫苗劑量率可在1〇2至丨〇1〇 pfu之範圍内（而<i〇〇〇 pfu可能已足夠，例如對於。 本發明之疫苗亦可與同一及/或其他艾美球蟲種類之其 他抗原成份，及/或與源自家禽病原性病毒或微生物之其 他免疫原及/或編碼此免疫原之核酸序列有效混合。該組 合疫苗可降低鳥群中之寄生蟲負載量且可提高對抗球蟲病 之保護水準，及另外對抗其他家禽病原體之保護水準。該 等其他免疫原可包括例如選自由以下組成的家禽病原性病 毒或微生物之群··馬立克病病毒（MDV)、新城雞瘟病毒 (NDV)、傳染性支氣管炎病毒（IBV)、雞貧血因子、 Reo病毒、禽類Retr〇病毒、禽腺病毒、火雞鼻氣管炎病 144841.doc -24- 201026322 毒、沙氏桿菌屬或大腸桿菌。因此，本發明涵蓋多價疫 為。尤佳之多價疫苗為彼等本發明之球蟲病疫苗，其包含 上述表現r56之載體及上述表現TFP250之禽腺病毒載體及/ 或上述表現82 kDa抗原之禽腺病毒載體。 自表現於基於FAV之次單位疫苗中的巨型艾美球蟲之截 短抗原製備的本發明之疫苗之一特殊優勢在於其可經由氣 溶膠喷霧或經由滴眼劑投與或甚至在飲用水中、卵内或肉 ^ 種鳥類（br〇iler bh)之鳥飼料中投與或經調配為凝膠基質 以由鳥類攝取，藉此使此等疫苗適用於甚至在典型過度擁 擠條件下的大規模肉種鳥類之疫苗接種。因此，該疫苗較 佳可與賦形劑一起製備，賦形劑有助於疫苗之噴霧以達成 • 其投藥。 本發明之此等疫苗可噴霧或饒食於剛脬出之小雞且其同 樣可噴霧及餵食於年長鳥類。 本發明之疫苗能夠以與諸如用r56之全長序列或TFp25〇 籲 <全長序列產生之類似疫苗相比產生更顯著免疫反應且賦 予更佳免疫力的方式保護家禽對抗艾美球蟲感染之病原性 作用。 可例如僅藉由將上述禽腺病毒載體與醫藥學上可接受之 ._混合來製備本發明之疫苗。應將醫藥學上可接受之載 劑理解為不會不利地影響欲接種動物之健康，至少不利影 響要小於未接種動物之疾病所見到的影響之化合物。㈣ 學上可接受之載劑可為例如無菌水或無菌生理食鹽溶液。、 在更複雜之形式中，載劑可為例如緩衝液。 144841.doc •25- 201026322 或者’本發明之球蟲病疫苗亦可含有佐劑…般而言， 佐劑匕3以非特異性方式加強宿主之免疫反應的物質。在 此項技術中已知許多不同佐劑。佐劑之實例為弗氏 (eunds)疋王及不兀全佐劑、維生素E、非離子型嵌段聚 及多元胺諸如硫酸葡聚糖、卡波莫（咖—⑷及旅 味。表面活性物質，諸如Span、Tween、十六烧基胺、溶 血卵磷脂、甲氧基+六、检A_y_.丄 „ ^ 虱丞十八说基甘油，及皂苷，諸如Quill A® 亦非常合適。此外’通常使用肽，諸如胞壁醯二肽、二甲 基甘胺酸、促吞錄㈣sin)1 了此等佐劑宜使用免 疫刺激性複合物（ISCOMS)、礦物油（例如⑧或 Markol®)、植物油或其乳液、及如請^⑧卩〇以。疫苗亦 可包含「媒劑」。媒劑為多肽所黏附（不共價結合）之化合 物。通常使用之媒劑化合物為例如氫氧化鋁、磷酸鋁、： 酸鋁或氧化鋁、二氧化矽、高嶺土及膨潤土。該媒劑之二 特殊形式（其中抗原部分嵌埋人媒劑中）為所謂肌⑽⑽ 109.942 ' EP 180.564 ' EP 242.380) 〇 疫苗組合物可進一步包含穩定劑，例如以保護有降解趨 勢之多肽免於降解，提高疫苗之儲存期，灰 ^ α次改善冷凍乾燥 效敗*。適用之穩定劑包括脫脂乳、明膠、牛血清白蛋 =水化合物，例如山裂糖醇、甘露糖醇、海藻糖、殿^ :糖、葡聚糖或葡萄糖，蛋白質’諸如白蛋白或路蛋白或 八降解產物，及緩衝劑，諸如鹼金屬璘酸鹽。 冷束乾燥材料可儲存及保持活性多年。冷;東乾燥材料 儲存溫度可在零度以上，不會對該材料 ’、之 在某些態樣 144841.doc • 26- 201026322 中，疫苗經凍乾。 實例 以下實例說明本發明疫苗之產生。在此等實例中，使用 禽腺病毒血清型8(FAV8)。使用此傳遞系統之一個主要益 處在於使用減毒FAV8作為載體可將次單位疫苗傳遞至適當 標靶組織（在此情況下為腸黏膜）。 實例1:製備及分析構築體 在本實例中，將來自艾美球蟲寄生蟲之大配子細胞階段 的免疫原性最強蛋白質（重組蛋白-r56)之一者選殖至FAV8 載體中。另外，將來自艾美球蟲卵片發育階段之另一免疫 原性蛋白（重組蛋白-TFP250)獨立選殖至另一 FAV8載體 ' 中。此TFP250 ORF編碼一部分短菌絲族蛋白（涉及寄生蟲 侵襲之細胞器），在先前研究中展示其亦誘導對抗艾美球 蟲之攻擊感染的部分保護性免疫力。 所形成之表現構築體展示於以下兩個表中 用於球蟲病構築體中之一部分R56基因： 構築體 編碼R56之核酸插入物 所編碼之R56胺基酸 1222 CMVp-R56-pA 分泌型 SEQIDNO:14之核苷酸 70-1035 ID NO:2之胺基酸 24-345 1224 CMVp-R56-pA 膜型 SEQIDNO:14之核苷酸 73-1035 SEQ ID NO:2之胺基酸 25-345 1228 CMVp-R56-pA 天然型 SEQIDNO:14之核苷酸 70-1035 SEQ ID NO:2之胺基酸 24-345 1223 MLP-R56-pA 分 泌型 SEQIDNO:14之核苷酸 70-1035 SEQ ID NO:2之胺基酸 24-345 1225 MLP-R56-pA 膜 型 SEQ ID NO: 14之核苷酸 73-1035 SEQ ID NO:2之胺基酸 25-345 1229 MLP-R56-pA 天 然型 SEQ ID NO: 14之核苷酸 70-1035 SEQ ID NO:2之胺基酸 24-345 144841.doc • Π· 201026322 用於球蟲病構築體中之一部分TFP250基因 構築體 編碼TFP250之 核酸插入物 所編碼之TFP250 胺基酸 1230 CMVp-TFP250-pA天然型 SEQ ID NO: 16 之核苷 酸6436-7083 SEQ ID NO:4之胺基酸 2146-2361 1232 CMVp-TFP250-pA分泌型 SEQ ID NO: 16之核苷 酸6444-7083 SEQ ID NO:4之胺基酸 2149-2361 1234 CMVp-TFP250-pA膜型 SEQ ID NO: 16之核苷酸 6448-7083 SEQ ID NO:4之胺基酸 2150-2361 1231 MLP-TFP250-pA 天然型 SEQ ID NO: 16之核苷酸 6436-7083 SEQ ID NO:4之胺基酸 2146-2361 1233 MLP-TFP250-pA 分泌型 SEQ ID NO: 16之核苷 酸6444-7083 SEQ ID NO:4之胺基酸 2149-2361 1235 MLP-TFP250-pA 膜型 SEQ ID NO: 16之核苷 酸6448-7083 SEQ ID NO:4之胺基酸 2150-2361 為了最大化使用此載體系統之雞中的免疫反應，將編碼 該兩種蛋白質之各ORF獨立選殖至三個FAV8表現構築體 中，導致天然蛋白質、膜錨定型蛋白質及分泌型抗原之表 現。藉由融合相關ORF上游之適當信號序列獲得最後兩個 FAV8構築體。使用FAV8作為傳遞載體提供最終產物’其 可能得以引入大得多之肉雞市場中，此係由於能夠大規模 地經濟地投與該疫苗。 令人驚訝地發現當將全長r56選殖至FAV8載體中時’其 在載體中不穩定且因而當以次單位疫苗形式傳遞時$ # & 供適當保護性免疫力。然而，當使用抗原之截短形式# ’ 明顯證明有免疫力。 產生三個形式之r56及三個形式之TFP250。形式1為由 UTS供應之天然ORF且除將其編碼區插入FAV表現卡E中 以外未經修飾。形式2為添加信號序列，由此自細胞分泌 144841.doc • 28 - 201026322 r56或TFP250。形式3亦具有信號序列，其連接且引導r56 或TFP250至細胞膜。 下表概括首次研究之結果： 所產生之重組 FAV8 插入DNA之 PCR證實 插入DNA之 序列證實 蛋白質表現之 證實 r56-Vl (天然型） + + + + r56-V2 (分泌型） + + + + 1-56-V3 (膜型） + + + + TF250-V1 (天然型） + + + + TF250-V2 (分泌型） + + + + TF250-V3 (膜型） + + + - 為了證實獲得重組病毒，使用習知方式分離病毒及純化 斑塊。另外，PCR係用以證實完整插入r56或TFP250 DNA 及自重組FAV DNA分離之polyA以及各部分（啟動子、r56 或TFP250及polyA)的擴增。自含有由啟動子、Γ56或 TFP25 0 DNA及polyA組成的完整插入表現卡匣之重組FAV 分離的DNA亦以雙向定序以證實序列插入物之保真性。使 用抗r56或抗TFP250血清證實蛋白質表現。 圖2及3展示來自各個構築體之r56及TFP250的蛋白質分 析。藉由以不同FAV8構築體感染LMH細胞株執行蛋白質 表現實驗。此等構築體經設計具有所有蛋白質表現形式 (天然型、分泌型及膜錨定型）且在不同啟動子（MLP或 CMVp)之控制下。使用未受感染LMH細胞及僅受FAV8載 144841.doc -29- 201026322 趙感染之細胞作為陰性對照組。使用針對重組56提出之多 株抗血清偵測r56抗原且使用重組肽之小鼠抗血清偵測 TFP250。蛋白質條帶出現在其適當分子量處（基於自選殖 之部分基因片段預測的肽之預期尺寸）。重組TFP25〇之3泳 道及4泳道中所見塗片（圖3)可能係由於具有宿主細胞材料 之肽的聚集。 自該等結果來看，除TFP250膜錨定構築體（其並未展示 清晰條帶）以外’所有構築體似乎良好地表現。此可歸因 於表現蛋白質之膜錫定及在自膜萃取之後的潛在構形變 化。 熟習此項技術者可利用許多不同的可能性。三個實例係 如下以製造必需的構築體。在圖5中，描繪用於化學合成 限制酶位點、與相關ORF(例如，截短r56、82 kDa蛋白或 TFP 250)同框之信號序列及用於指導構築體插入fav右手 末端表現卡匣中的第二限制酶位點之流程。 或者’（圖6)熟習此項技術者可使用具有適當RE位點之 引物以及同框信號序列PCR擴增來自相關ORF之所需序 列。 在其他實例中，熟習此項技術者可構築FAV RHE表現卡 S以含有具有信號序列以及用於與信號序列同框插入相關 ORF之MCS的啟動子（圖7)。 實例2:誘導保護性免疫反應 本實例檢驗FAV8-r56及FAV8-TFP250載體誘導阻斷巨型 艾美球蟲發育及預防寄生蟲病變的保護性免疫反應之能 144841.doc -30- 201026322 力。 表2 : 組 處理 A 未接種疫苗 B 每隻雞20,000個巨型艾美球蟲卵囊 C 每隻雞40,000個巨型艾美球蟲卵囊 D 每隻雞80,000個巨型艾美球蟲卵囊 為了評估產生病變所需卵囊之數目，進行預試驗，在便 i 攜式潔淨的籠子中，在無球蟲病條件下（乾淨、水及飼料）

W 飼養30個SPF雞。每週處理雞以藉由經由其飲用水投與安 普羅銨（amprolium)來預防攻擊之前的球蟲感染。在第28 天，以適當數目之巨型艾美球蟲卵囊經口攻擊雞（參見表 2)。在第34天，進行病變計分（每劑量水準至少5隻雞）。將 最一致病變計分平均值3-4之組選作用於該試驗之高攻擊 劑量。將用於預試驗之同一批卵囊在4°C下儲存於2%二鉻 酸鉀中且用於試驗中。 φ 隨後對自Armidale附近之孵化場獲得的400個SPF雞進行 預試驗（允許在頭三週達到10%之死亡率）且將孵化18天之 180個受精蛋用於卵内免疫。 將使用以下疫苗及對照組： 對照組：未接種疫苗（陰性對照組）；僅FAV8載體（陰性 對照組）；r56蛋白接種；及TFP250蛋白接種。待要檢驗之 疫苗為基於FAV8構築體之如下疫苗：FAV8-r56天然蛋白 質；FAV8-r56 N末端膜錨定型；FAV8-r56分泌型； FAV8-TFP250天然蛋白質；FAV8-TFP250 N末端膜錨定及 144841.doc -31- 201026322 FAV8-TFP250分泌型 ° FAV8構築體之效價將為每劑量1 X 108。如下所述，疫苗 將經口、卵内或以皮下接種方式投與。 對於經口疫苗投與，使用與21號鈍頭針連接之1 ml注射 器。將鳥保持直立且輕輕地使其嘴張開且將鈍尖針插入鼻 後孔裂之前部中。緩慢投與疫苗以使疫苗在吞咽之前浸潤 鼻後孔裂及口咽。以此方式，大部分鼻咽及幾乎全部口腔 與所投與之疫苗原樣接觸。 對於孵化1 8天時之卵内疫苗接種，1 80個蛋以用於年長 小雞中之相同劑量水準接受病毒注射至尿囊液中（第5、 6、17、18、23及24組蛋各參見以下表3)。 對於使用重組抗原細菌進行皮下及肌肉内疫苗接種，將 重組抗原細菌以10倍醱酵濃度濃縮，藉由超音波在尿素緩 衝液（25 mM Tris pH 8.0，6 Μ尿素、100 mM NaCl)中溶解 且經由0.8 μΜ過濾器過濾。自各25 ml CE樣品及自尿素緩 衝液及PBS製備100 ml乳液（25%水相）。傅氏完全佐劑係用 於試驗且在即將注射之前製備乳液。 各雞將首先在第1天以0.5 ml/劑皮下接種且隨後在第14 天以0.5 ml/劑肌肉内加強。 下表概括用於疫苗接種之實驗設計。 組編號 測試類型 難之數量 疫苗 1 卵囊計數 20 未接種疫苗(陰性對照組） 2 病變計分 20 未接種疫苗(陰性對照組） 3 卵囊計數 20 在傳氏佐劑中之PBS(陰性對照組） 4 病變計分 20 在傳氏佐劑中之PBS(陰性對照組） 144841.doc -32- 201026322 5* 卵囊計數 20 僅FAV8載體(陰性對照組)卵内疫苗接種 6* 病變計分 20 僅FAV8載體(陰性對照組)印内疫苗接種 7 卵囊計數 20 在傅氏佐劑中之r56疫苗接種 8 病變計分 20 在傅氏佐劑中之r56疫苗接種 9 卵囊計數 20 在傅氏佐劑中之TFP250疫苗接種 10 病變計分 20 在傅氏佐劑中之TFP250疫苗接種 11 卵囊計數 20 FAV8-r56天然蛋白質 12 病變計分 20 FAV8-r56天然蛋白質 13 卵囊計數 20 FAV8-r56 N末端膜錨定型 14 病變計分 20 FAV8-r56 N末端膜錨定型 15 卵囊計數 20 FAV8-r56分泌型 16 病變計分 20 FAV8-r56分泌型 17* 卵囊計數 20 FAV8-r56分泌型。卵内疫苗接種 18* 病變計分 20 FAV8-r56分泌型。卵内疫苗接種 19 卵囊計數 20 FAV8-EmTFP250天然蛋白質 20 病變計分 20 FAV8-EmTFP250天然蛋白質 21 卵囊計數 20 FAV8-EmTFP250膜型 22 病變計分 20 FAV8-EmTFP250膜型 23* 卵囊計數 20 FAV8-EmTFP250分泌型。卵内疫苗接種 24* 病變計分 20 FAV8-EmTFP250分泌型。卵内疫苗接種 φ 為避免球蟲病污染，每週處理雞，在第7天、第14天及 第21天在其飲用水中投與安普羅銨。此外，藉由澈底清潔 隔離器、設施等避免球蟲感染且所有工作人員將在進入後 換衣服。在第26天，開始檢驗糞便樣品中艾美球蟲卵囊之 存在。在第28天，以100個巨型艾美球蟲芽孢化卵囊經口 攻擊雞用以量測卵囊排出且彼等進行病變計分之雞將接受 如預試驗中所確定的造成顯著病變之數目（20-50,000)的芽 孢化卵囊。 144841.doc •33· 201026322 上述試驗將遵循以下時程。 在蛋孵化第18天，首次卵内疫苗接種第3、9及12組。 在蛋畔化第21天，在3個獨立的蛋解化箱中孵出來自印 内疫苗接種組之小雞。 在第1天，所有其他組進行首次疫苗接種。 在第u天’所有小雞（包括第3、9及12組）進行二次疫苗 接種。 在第28天，採集雞血用於血清學檢查且隨後以巨型艾美 球蟲進行攻擊，每隻雞需要適當數目之印囊用於病變計分 (基於來自預試驗之結果）或每隻雞1〇〇個卵囊用於卵囊計 數。 在第34天，接受大劑量卵囊之組進行病變計分。 在第34-37天，在來自以1〇〇個卵囊感染之各小雞組之單 一池中收集糞便，且在第37天，對所有樣品進行卵囊計 數。 在第42天（感染後14天），採集鳥血用於血清學檢查且將 其宰殺。 進行用於評估免疫反應之活體外測試，在免疫後四週 (第28天），在經FAV8塗布之平板（TropBio Ltd)上進行血清 學檢查以確保FAV8構築體感染（對於所有群而言）。elisa 檢定亦將在免疫血清後四週以及攻擊血清後14天在經 APGA、r56及TFP250塗布之平板上進行（對於所有組而 言）。此外’利用西方墨點法以製備型配子細胞及含有重 組TFP 250之墨點’使用抗r56/APGA/抗TFP250/作為陽性 144841.doc 34- 201026322 對照組血清以及正常雞血清作為陰性對照組來進行蛋 分析。 在如上文所述進行之初期試驗中，發現具有最高保護之 疫田接種組為r56分泌組及r56天然組，其平均病變計分分 別為1.31及1.36，其中將1分視為肉雞中獲得良好效能結果 所接受的。對照組中之平均病變計分2.37與疫苗接種組中 1 ·3 1之間的差異明確地指定患病雞與受保護雞之間的差 距。 基於病變計分及卵囊計數推斷含有r56分泌型構築體之 FAV8載體在誘導1天大之小雞的保護中起到極好作用。以 此構築體藉由卵内免疫接種疫苗之組並未展示如此高水準 之保護。咸信原因在於由於及早孵出，小雞並未具有足夠 的暴露於病毒之時間。儘管如此，卵内疫苗接種仍為—種 用於未來疫苗接種之可行及經濟的方法。經口疫苗接種】 天大之小雞經證實有效且因而預期向該等鳥類喷霧或餵食 疫苗將為適用於對肉雞提供長期免疫力之方法。 除提供r56構築體之良好結果外，由病變計分及卵囊計 數均發現TFP250分泌型構築體亦誘導顯著（即使降低 20-30%)水準之保護性免疫力。 【圖式簡單說明】 圖1展示本發明之基於FAV之載體的圖解。 圖2展示包含天然型、膜錨定型或分泌型之蛋白的各 種FAV構築體之西方墨點分析。 圖3展示包含天然型、膜錨定型或分泌型之TFp25〇蛋白 144841.doc •35· 201026322 的各種FAV構築體之西方墨點分析。 圖 4展示自 Heijne Eur. J. Biochem 133，17-21 (1983)之圖 1再現之真核信號序列集合。基於序列由星號（*)指示之已 知或預測裂解位點使其對準。本文中所示序列為SEQ ID NO:35-124。 圖5展示表現卡匣之化學合成流程。 圖6展示用於製備構築體之PCR擴增流程。 圖7展示使用多重選殖位點來插入序列之流程。 圖8展示具有γ干擾素之分泌信號的CMVP-TFP250- © pA/1054(FAV RHE)之質體結構，先前以「ρ1232_完整」形 式展示於附錄中。完整序列在本文中描述為SEQ ID NO:17。在彼序歹ij中，分泌信號序歹ij由位於SEQ ID NO:17 之核苷酸5629..5712處的SEQ ID NO:18編碼且轉譯為SEQ · ID NO: 19之蛋白質。截短TFP250插入物係由位於SEQ ID NO:17之核苷酸5713至6348處的SEQ ID NO:20之序列編碼 且轉譯為SEQ ID NO:21之序列。質體在位置4965··.5623處

Q 具有CMV啟動子序列。此圖中描述之資訊及相關序列資訊 先前呈現於優先申請案（申請於2008年12月15日之美國臨 時專利申請案第61/122,596號，以引用的方式將其全部併 入本文中）之附錄中。 圖9展示具有γ干擾素之分泌信號的MLP-R56-pA-pA/1054(FAV RHE)之質體結構，先前以「p1223_完整」形 式展示於附錄中。完整序列在本文中描述為SEQ ID NO:22。在彼序列中，分泌信號序列由位於SEQ ID NO:22 144841.doc • 36 - 201026322 之核苷酸53 81 ..5461之SEQ ID NO :23編碼且轉譯為SEQ ID NO:6之蛋白質。截短R56插入物係由位於SEQ ID NO:22之 核苷酸5462至6430處的SEQ ID NO:24之序列編碼且轉譯為 SEQIDNO:25之序列。質體具有在核苷酸5381 …5461處的 MLP序列。此圖中描述之資訊及相關序列資訊先前呈現於 優先申請案（申請於2008年12月15曰之美國臨時專利申請 案第61/122,596號，以引用的方式將其全部併入本文中）之 附錄中。 圖10A至圖10C展示巨型艾美球蟲之82 kDa蛋白之序 列。展示於此圖中之序列為SEQ ID NO:26(上股）；SEQ ID NO:27(下股）及SEQ ID NO:28(蛋白序列）。 圖11展示巨型艾美球蟲之R56序列（SEQ ID NO:2)與柔嫩 艾美球蟲之R56序列（SEQ ID NO:29)之比較。亦描述缺少 信號序列之截短R56序列（SEQ ID NO:3 0)。該圖下部展示 柔嫩艾美球蟲之截短R56(SEQ ID NO:31)與巨型艾美球蟲 之截短R56(SEQ ID NO:32)之對準。此序列資訊圖先前呈 現於優先申請案（申請於2008年12月15曰之美國臨時專利 申請案第61/122,596號，以引用的方式將其全部併入本文 中）之附錄中。 圖12展示巨型艾美球蟲的R56之縮短形式（SEQ ID NO:33)及柔嫩艾美球蟲的R56之縮短形式（SEQ ID NO:34)。此序列資訊圖先前呈現於優先申請案（申請於 2008年12月15日之美國臨時專利申請案第61/122,596號， 以引用的方式將其全部併入本文中）之附錄中。 144841.doc -37- 201026322 序列表

<110> 澳大利亞商維托基有限公司 <120> 使用球蟲病疫苗之方法及組合物 <130> 02937-20026US01 <140〉 098142361 <141> 2009-12-10 <150> 61/122,596 <151> 2008-12-15 <160> 124 <170> Patentln version 3,5 <210> 1 <211> 1754 <212> DNA <213> 巨型艾美球蟲 <400> 1

agcagaacat agggagttca tctgttcctt cttttcatca tttattcctc gtttctcacc 60 gttttatttt ttttgtgtaa ccctctccgc tgttgagtcc caatgacccg cctcggcctc 120 gctgctgtcg cgctggctct cgccgtgggc ccttccatgg cagtgcccag caccactcct 180 gttgagaacc aggttcaccc ttacagcgag atgagtacct accaggaggg gagtgccccg 240 ggggctccgg aggacaccac caccaccact acgtcgtccc ctgtttccga tggagccgag 300 cagtggcttg agagctttgt tcgtgctgtg cagcgccagc tgcagcttca ggaccaaatg 360 atgcgtcagc tcatgaggga cattcaggag tacctgagca ctgcgttcaa ctgggcagag 420 aaccagtcta ctgcctacac ccgtgttacc gagatgatgg acatgatctc caacagaatg 480 aacgctgcca tggacagctc aaacgaactc atgaccacta gcgacaccac agaccccgag 540 accctccgcc gtgcaactcg caagtacatg aaggaggttc gcgttcagga cgtcctggta 600 gatgctctct gggcctctct ccgcggtgta cagacagctg cctggatgaa tggagtgacc 660 gctattgaga aggaggagac gactcccatg gctagccgcg ctgctgagga gttcctccac 720 cgcatgtacc ataacctgag ggcagcaggt atgtctgaag aagatgttgc caagttcatc 780 cctagagccg agtacaaccc ctccgagcag tcaagaaata tgggcagaaa gggcaggagc 840 ttctactacg gcggctatcc cagctactac aactccccct actacagcta cagcagctac 900 cccagctact acaactacag ctacccgtca tacagctaca gcagctaccc cagctactac 960 cgctacagca gctaccccta ctacaactac agctatccca gctactacaa ctacggcagc 1020 tacccctact acagttatag cagctacccc agctggtact ggcgccgtct ccgctctttg 1080 144841-序列表.doc 1140 201026322 gcaacagcaa cttgcccaga ctgccctcct ctcaccactc ccagcatgat cccaactccc cccccaatga tgaacatgat gaacacccca ccccccatgg caaacatgat gaccagcatg atgatgaaca ctcccatggt tcctcctccc cgcaccctcg gaactgaagc catgagcctc ggcttggccc ccatcggtat caccggcgcc cccatgacag gtttcggtgt tcctcctgag ttcggtccct ttggagccga aggtatcggc ctccccaccg atgccctcgg cagcaccccc gaaatgacac cattcgaccc aactaccccc tacagaactc tcgcccccat ggacctcccc cccatccccc ctcctgtctt ccctgaaacc cctatgaggc cacctactcc cttcggcttc ggacctgcac ctgttcctcc catgcccttc taaacgacct accatccctc aatccatagc tcacatttcg tagcctcaaa acagtttttt gttcatttca cttccaggac tcatgctgcg acatttgcat tcgtacctcg aaaccgtcaa cctcaaaccc caaaccattc tgtgacctcc cctcgcaaac gcggaaggcg gaacattttt tctgaagtat attactacgt taaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaa <210> 2 <211> 476 <212> PRT <213>巨型艾美球蟲 <400> 2

Met Thr Arg Leu Gly Leu Ala Ala Val Ala Leu Ala Leu Ala Val Gly 1 5 10 15 Pro Ser Met Ala Val Pro Ser Thr Thr Pro Val Glu Asn Gin Val His 20 25 30

Pro Tyr Ser Glu Met Ser Thr Tyr Gin Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ala 35 40 45

Pro Glu Asp Thr Thr Thr Thr Thr Thr Ser Ser Pro Val Ser Asp Gly 50 55 60

Ala Glu Gin Trp Leu Glu Ser Phe Val Arg Ala Val Gin Arg Gin Leu 65 70 75 80

Gin Leu Gin Asp Gin Met Met Arg Gin Leu Met Arg Asp lie Gin Glu 85 90 95

Tyr Leu Ser Thr Ala Phe Asn Trp Ala Glu Asn Gin Ser Thr Ala Tyr -2 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1754 144841-序列表.doc 201026322 100 105 110

Thr Arg Val Thr Glu Met Met Asp Met He Ser Asn Arg Met Asn Ala 115 120 125

Ala Met Asp Ser Ser Asn Glu Leu Met Thr Thr Ser Asp Thr Thr Asp 130 135 140

Pro Glu Thr Leu Arg Arg Ala Thr Arg Lys Tyr Met Lys Glu Val Arg 145 150 155 160

Val Gin Asp Val Leu Val Asp Ala Leu Trp Ala Ser Leu Arg Gly Val 165 170 175

Gin Thr Ala Ala Trp Met Asn Gly Val Thr Ala lie Glu Lys Glu Glu 180 185 190

Thr Thr Pro Met Ala Ser Arg Ala Ala Glu Glu Phe Leu His Arg Met 195 200 205

Tyr His Asn Leu Arg Ala Ala Gly Met Ser Glu Glu Asp Val Ala Lys 210 215 220

Phe lie Pro Arg Ala Glu Tyr Asn Pro Ser Glu Gin Ser Arg Asn Met 225 230 235 240

Gly Arg Lys Gly Arg Ser Phe Tyr Tyr Gly Gly Tyr Pro Ser Tyr Tyr 245 250 255

Asn Ser Pro Tyr Tyr Ser Tyr Ser Ser Tyr Pro Ser Tyr Tyr Asn Tyr 260 265 270

Ser Tyr Pro Ser Tyr Ser Tyr Ser Ser Tyr Pro Ser Tyr Tyr Arg Tyr 275 280 285

Ser Ser Tyr Pro Tyr Tyr Asn Tyr Ser Tyr Pro Ser Tyr Tyr Asn Tyr 290 295 300

Gly Ser Tyr Pro Tyr Tyr Ser Tyr Ser Ser Tyr Pro Ser Trp Tyr Trp 305 310 315 320

Arg Arg Leu Arg Ser Leu Ala Thr Ala Thr Cys Pro Asp Cys Pro Pro 325 330 335 144841 ·序列表.doc 201026322

Leu Thr Thr Pro Ser Met lie Pro Thr Pro Pro Pro Met Met Asn Met 340 345 350

Met Asn Thr Pro Pro Pro Met Ala Asn Met Met Thr Ser Met Met Met 355 360 365

Asn Thr Pro Met Val Pro Pro Pro Arg Thr Leu Gly Thr Glu Ala Met 370 375 380

Ser Leu Gly Leu Ala Pro lie Gly lie Thr Gly Ala Pro Met Thr Gly 385 390 395 '400

Phe Gly Val Pro Pro Glu Phe Gly Pro Phe Gly Ala Glu Gly lie Gly 405 410 415

Leu Pro Thr Asp Ala Leu Gly Ser Thr Pro Glu Met Thr Pro Phe Asp 420 425 430

Pro Thr Thr Pro Tyr Arg Thr Leu Ala Pro Met Asp Leu Pro Pro lie 435 440 445

Pro Pro Pro Val Phe Pro Glu Thr Pro Met Arg Pro Pro Thr Pro Phe 450 455 460

Gly Phe Gly Pro Ala Pro Val Pro Pro Met Pro Phe 465 470 475 <210> 3 <211> 7990

<212> DNA <213>巨型艾美球蟲 <400> 3 caacatttct tcttcctttt tcttcttcga gcttctttag ctcgattttc tggcccttgc agctctccgc gggtgcaggg cgcagccagc tcactactgc ctttcacagc gtcgttcccc accttggccc atgtgccaca tggtcatttt tcttcagttt gttcatgaga agagctgcta cagtgtagct cgaactcaac tttaaacgca gccgtttcag cggcgacaat atgctgcatc gcaacccgcg gtgggcgctt tgtgcagccc tcgctgcact ctatggcgga acaggaatcg ccagcgccga agttaacaat gaattgagca agtgcgaatc tgggtggaca ccctggacta cctgcaaccc gcaaactggt ctgcgggaga ggcacaatgc acagtgcgag acatgggtgg 4- 144841-序列表.doc 201026322

aggttgagga atatgtcgtg aggaagtgag caatgtgcga tccgcgagtg atccccctat gcccagaccg acgccacttg ggaagacctg ccatctgcac attccggagc cccaccagtg gcaaccaggg acggagagca gccgctgcga acgaatgcgc ccttcacctg ccaagatcga tgaacaccct gcgagagccc acagaaacgc tctctggcga agtccccctg gcaacaccgg gcgccaccgg acgagtgcaa agtgcgctgc gctacgagtg atgccagaag tgtggtggga ggcatgcagg caccaaccgc caacatggac gaatggagac caaagacfgtg cgatcccatt cgaggccttc cccagacggc aggcagcagc cccggcacac atacgtcaag cacctgcccc cactgggtac caaccccaac cagctgcccc cttctgcgca cacatctttc gtgcgtggac aaactgcacc cggcatgggt cgaccctcac ctacgagcca tgcagctggg gtgtcttgag ggcgacatct cgagtgcaag ctgacaggat cagtttcaaa cctgtacttc gtccaggaaa gacgcagaga tgcgtacgcg cgggtgtgcg ggtgcatcct aacccctgcg aatgacgcca aagaagcctt tccacatgca ggagaggacg gctcactcca agcggaaatg gcctgctcgg gaagggtaca gacccctcac aagtgcatct gtgaacgagt aacaccgagg cccaacgggt gcctcctgca gcttcaaccg tgccacgtgt ggcttcgtcg ccttgcggtg gctggctatg gtggcaactg cccgcaacag tagaatgcaa gatacaactc tcgagaaatg ggggtaccca gagcctttga gcgaatgcaa aagatacccc aatgccagtg gcgttgaggt tcaacaccaa gacagtgtca cttgtttgaa caactgcaga ccaacgctat gcggccaggg tcaatacatg gcgatgcggg gctcgaacga gatcctacac gtaccgacat gcaacactga acgggcatgc cagcacagtg gcgacggaaa acaacactca gcaacatgca gactccttgg ggagggctgc cgatcaatgg aaagtgcgga cggcgagttc cacgcgttac ttgcagtagc gcctggtttc tgcaccttgc caaggcaggc cgacgagtgc gggctcttat tgacgtcgat tacagctggc cagcccttgc ctgcacagac aacccatgac cggagcccac atatgaaggc gaagcccaca ttgcgaatgc cgacgagtgc gggctcgtat atgcaaagat tctgaacacg gacctgcaac ctgccagaac agacaacgca tctcccggcg ccagaggtgc accccctgga cccgtcgaag gtggaatggg cgtcaaaact tgctctgtaa cgcggcaatg gacagcaacg tgggacgcag gcatccaaca aagtgcgact gaatgcacca agctacgagt aagaacattg accgacggct tctccctgct tccacttgcg gccggcactc aacaactgca aagcccggtt gcggcggagc gtatgcacct atcgacgagt gacggcagct gacgtcgatg acaattggca tgcagcgaca 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1860 1920 1980 2040 2100 144841-序列表.doc 201026322 ttgacgagtg caaggatgcg aacaccaaga tccctgacaa ctgtctttgc gtgaacaatg 2160 atggcagcta ctcccttgag gcgaaggctg gatacgaatt ggtgaacggc gagtgcatca 2220 agatcgactt ctgcgcccgc ggcgcatgca actcgctggc ctcctgcaag gagaatgaag 2280 aaggcacagc ggcgatctgc acctgcctgc caggctacag cggcgacggc actgctgaag 2340 gccactgcaa cgacattgac gaqtgtgcag gtcagaatga ctgtgctcct gccgagcagg 2400 gaggcatctg cgagaacact gtcggctcgt acacctgcaa gtgcaaagag gggtacaggc 2460 aagatggaaa ctcatgcact gagatcgacg agtgcgctga gggaacccac aactgccacc 2520 cttccgccac ctgcagcaac acccccggaa gcttcacctg ccaatgcaac agtggattca 2580 ctggcagcgg tgtggagtgc gaagacattg acgagtgctc aactgaggca gatgattgtg 2640 gtgcaaacac catctgcagc aacaccattg gtgctttcga gtgcaactgc cgtgaaggct 2700 atgaacgcgc agacgcaaag acgtgcgtcg acatcgacga atgcgcgaca ggcacacaca 2760 cttgctcgaa ccacgccacc tgcaccaata ccgatgggtc attcacatgc cagtgcaacc 2820 ccggcttcga aggtgacggc cacaagtgcg aggacatcga cttctgcggt gctggacagc 2880 acgactgcaa tgtgcatgcc gagtgctctg agagcgagga caacaccact ttcaagtgca 2940 cctgtataac agggtacgct ggagacggcc atggcgaggc aggctgccaa gacattgatg 3000 agtgcgcaga agaaaacatc tgcggaagca acgctgtctg cacaaacacc gcaggaagct 3060 accaatgcgc atgccgtgag ggcttcgttg catcagctga acagcagcag cagggaaccc 3120 cagcactggt ttgcgtggac gtcgacgagt gcagcgacgc ttcgaagaac acatgtgcca 3180 agccagccga cggaggcatt tgcacaaaca ctgaaggcag ctacgaatgc gcttgcaagc 3240 caggctacca aggtgacggc cacagctgcg cagacatcaa cgaatgcact gcacagggca 3300 cctgcggcga acacacaact tgcaagaaca cacccggatc cttccagtgc gactgcgttg 3360 agggattcga gcgcgctgat gaacgcacct gccgtgacat caacgagtgc gagacaggag 3420 cagtcgtgct gccaccgaac tccacctgcg tcaacactga aggcagctac gacttcgact 3480 gcgttgctgg gtaccgccgc actgatggag cttgtgtgaa gatcgacttc tgcaaggaga 3540 agggatgcaa cgcaaacgcc acatgccgcg aaaacgatgc cggcaccgag gccatctgca 3600 cttgcaagga aggctatgaa ggcagcggag aaggcgaaga tggttgccag aacatcaatg 3660 agtgcgagag aggcgaaccc tgcaaggact tcggcgaagg cggtgtttgc gtcgacacac 3720 caggatcatt cacttgcgag tgcgctgctg gattcattca acgccgctcc gtttgccaag 3780 atgttgacga atgtctcgac ggaaagctga acacctgcgc tgccaccgga ggcgtctgct 3840 144841·序列表.doc

201026322 ccaacaccgt cggttccttc acctgctcgt gcgccagcgg cttcgaaggc gatggccaca cctgcaatga tgtcgacgaa tgcgcaacag cacagcacac ctgtgacccg aatgccactt gcgtcaacac cgaaggcagc ttcgagtgcc gctgcaatgc cggattcgag ggcgacggac acacctgcgc agacatcgac gaatgcgcag acccagccaa aaacacatgc gatacacaca agggtgtatg ccaaaacacc acagggtcct acacctgcgg ctgcaagacc ggattcagtc ttgcagctga cggaagcaca tgcgaaaacg tcgacgagtg cgcggcggga actgcaaact gcaacgagcg aagcttctgt aaggacacag agggttccta ccaatgcgag tgcaagaacg gctacaaggc tgcaggagag gactgtgtgg acgttgacga gtgcgaggct ggcgtgcatg gatgcagcga gcacgcaatc tgcacaaata cagacggcag ctactcctgc gaatgcatgg agggatacca gggagacggc aaggcttgcg agaagacagt cggcgtctgc gactccgctc cctgcggtgc ccacgccacc tgcgagcctg caggggacaa ctacacttgc acatgccacc caggctacga gatgcgcgaa ggagcctgcg ttgacatcga tgagtgcaca gcaggcagcc tcaactgcga ccctcatgcc atttgcacaa acaccgacgg ctccttcact tgcgtctgtg gcagcggcta taccggcctt ggcacatcct gcgaagacat cgacgagtgc gcgggtaacg cagcaggctg cgacatccac gccgtctgca cgaacactcc cggatcgttc aagtgcgagt gcaagagcgg cttcgaaggc gatggcacgc aatgcacgga gaaggtgttg ctccccggac agattcactg cgaagcctgg actgcatgga cagagtgtac cgacggcgcc aaaaccagca cacgcagctg ccttgcactg ccgcttaaga aggagatgcg cgcctgccct gcagctgact tctcccagtg cggagagttc actgaatgga ctgcctgccc tggaaccaac aataacctgt ctcataggcg cactgaaaga ttcggagaac ccggatgcga agatgcagag gaagtccgcg aatgcccaga tgaagagacc gagcagaaat gcggcgcctg gggtgagtgg accgcctgcg gcgacccatc ccctggcctg agaactcgcg cacgcgagaa ctgccccgat gtggtagagt tcgagcgttg cactatgccc agtgagcctg aggctggcga agtgactgag cctcacacag aaggaggagc cggagttggt ggcgaagtga ctgagcctga cacggaagaa ggagccggag ttggtggtga agtgcagccc ggtacagaag aaggagcagg agttggtggt gaagtgcagc ccggtacaga agaaggagcc ggagttggtg gtgaagtgca gcccggtaca gaagaaggag ccggagttgg tggtgaagtg cagcccggta cggaagaagg agccggcatt ggtggcgaag tgactgagcc tgacaccgaa ggaggagccg gagttagtgg cgaaccgacc gaagaagagg 144841-序列表.doc 3900 3960 4020 4080 4140 4200 4260 4320 4380 4440 4500 4560 4620 4680 4740 4800 4860 4920 4980 5040 5100 5160 5220 5280 5340 5400 5460 5520 201026322 gcaccgaaag caccggtcca tgcaaagagt tcggaccctg gacggcctgc aaggaggacg 5580 agaacggagt cggcatccaa cgccgtatgt gcgccggcag agaagacatc atcgaatcca 5640 gaatttgcac tgtcacggat gactgcggag aatggacccc ctggtcaact tgcactaacg 5700 gcagccaggc cagaaacaaa cgcttctgca ccaacgttag ggaagtccgt ctctgcggag 5760 ctgacattcc agttacagac ggatgcacgt ggagcgagtg gacttcttgc agtctagtca 5820 atgaggaggg cggctacttc cgcacgcgca catcctctga ctgcaacatg aatgaagtgc 5880 aggcctgctc tcccagcagc agcacaaccg cagacagcga aacagaaggc acctgctctg 5940 catggaaccc ctggacggag tgctcgaacg gccaccagac acgcaagtgt gccacaatgg 6000 aagcagaaga atcgcgcact tgcggagaga ctccagagaa ctgcggagaa ttcggcccct 6060 tcgaacccgc aaactgcacg gccggccaaa tggtcaccag gacgcgcacc tgcggagaaa 6120 ccgagcagaa ggaaaccaaa ctgtgcgacg tcagctccac cgaagaagga aaacaatgcg 6180 gtcagtgggg cccatggagc gaatgcaaca tccacctggg ctcagaggac aatgtgcgtg 6240 ttcgtgagga caccgcttgc ggcgtgacgg agtacgagga gtgcagcaag ccggcgaaca 6300 acgcctttgt ctgcacacct tggagtgaat gctcggacaa gaaggagcgg agaacgtgca 6360 ccatccgcaa aaacggtctt gttcagacac gtcaagaatt cagaacatgc agtgtagaca 6420 tcgccacaac ttgcggcgat ttcggcgcat ggtctgaatg caacgctgag ggcttgcatc 64Θ0 agcgcagtct cgagaaatgc cccgacgtca tcgaggtcgc aacttgcggc agtgaggatt 6540 gcccgccatt cggcgagtgg actgaatgcg gcgttccaga 99agg9cat9 cgttctcgcc 6600 aacgcattga ctgcgttgaa tctgcagcct gccagtgcac agaagtggag agctgcttcg 6660 acaccgaatt gcaccccatt ccagcccccg gtacggaaac aggcgaagga gagggagaga 6720 ccgagacagg cgaaggcgaa actggtgaag caggtggcga ggaaggcgag caaacaggag 6780 aaggcgaagt gcagccccca gaagaagagc ttcctgggga gagtgtaact gagcctgagg 6840 agaagcctga ggaggagcta cctgaggagg aggttactga gcctgaggag aagcctgagg 6900 agggtgtgac tcagcctgag gagacacctg agcagcctgt tgagggtacc gaagaagagg 6960 gcaagcagga gtctgaggct gcccccgaaa ctcctgccgt ccagccaaaa ccagaggagg 7020 gtcacgaacg cccagaaccc gaagaggagg aggagaagaa ggaagaaggc ggcggcttcc 7080 caacagctgc agtggcagga ggtgttggtg gtgtgttgct catagctgct gtaggtggtg 7140 gtgttgcagc cttcactagc ggcggaggtg gcgctggcgc acaggaggca gaacaggtcg 7200 agttcgaagg agaagatacc ggagcagcaa ctgccgagac acctgaagcc gatacagtta 7260 -8 - 14484丨-序列表.doc

201026322 tcgacatcac agacgaagac gactactggg ccgacagcgg cgacattcag taaagttgaa tgtctgtttt cttccaagga gaagatacaa aaccaaaatc ttaacaaaac gaaggatgcg aaggcgaaac aggccaaagt cgacctgttt tctcattcaa tcaatggttg cagtcgtgaa ggagctggac tcagttgcat ctccacccca agagctcgcc gttagtgggc aagttggata gggtgaatgc attttcatct ccgcaggcga aagtcacgac gagggcctgt tcttgtttgt ttgtttgaat tggttggttg gtgcatcctg ctggatttca acgacggcaa tcatcacgca gtgagacgga gcagcagcgc atactatttt ctgagcaagt tcatcgttta tttttcgctg tatctcgtag cgccgaggaa gcaaacaagc aaacgcccac caactgacca accaatgaga gagccgtcct ttaatttcca cccctcttct gtcttccgaa gattcggcgg ggtttcggat gggggagaaa ttgtggttgg attggtcggg tgttttcgtt ttctttgatt gatgcaacaa tatctgctag ccagcgtaca aagaatagct gcagttcaaa tgaatgcatc ttaattattc cacaccgcgg tgcctcttct ttgccgtggc acaccttccg tttattacct ccactcaaga ttttctcccc <210> 4 <211> 2360 <212> PRT <213>巨型艾美球蟲 <400> 4

Met Leu His Arg*Asn Pro Arg Trp Ala Leu Cys Ala Ala Leu Ala Ala 1 5 10 15

Leu Tyr Gly Gly Thr Gly lie Ala Ser Ala Glu Val Asn Asn Glu Leu 20 25 30

Ser Lys Cys Glu Ser Gly Trp Thr Pro Trp Thr Thr Cys Asn Pro Gin 35 40 45

Thr Gly Leu Arg Glu Arg His Asn Ala Gin Cys Glu Thr Trp Val Glu 50 55 60

Val Glu Glu Cys Gin Lys Leu Thr Gly Cys Gly Asn Trp Thr Pro Trp 65 70 75 80

Ser Pro Gly Asp Met Ser Cys Val Val Gly Gin Phe Gin Thr Arg Asn 85 90 95 144841-序列表.doc -9- 7320 7380 7440 7500 7560 7620 7680 7740 7800 7860 7920 7980 7990 201026322

Arg Glu Gly Cys Pro Glu Val Gin Glu Val Arg Ala Cys Arg Pro Val 100 105 110

Leu Leu Glu Cys Asn Asp Gin Trp Thr Pro Trp Thr Met Cys Asp Thr 115 120 125

Asn Arg Val Gin Glu Arg Tyr Asn Ser Lys Cys Gly Pro Val Glu Val 130 135 140

Arg Glu Cys Asn Met Asp Asp Ala Glu lie Glu Lys Cys Gly Glu Phe 145 150 155 160

Val Glu Trp Asp Pro Pro Met Asn Gly Asp Cys Val Arg Gly Gly Thr 165 170 175

His Thr Arg Tyr Arg Gin Asn Cys Pro Asp Arg Lys Glu Val Arg Val 180 185 190

Cys Gly Ala Phe Asp Cys Ser Ser Cys Ser Val Asn Ala Thr Cys Asp 195 200 205

Pro lie Gly Ala Ser Cys Glu Cys Lys Pro Gly Phe Arg Gly Asn Gly 210 215 220

Lys Thr Cys Glu Ala Phe Asn Pro Cys Glu Asp Thr Pro Ala Pro Cys 225 230 235 240

Asp Ser Asn Ala lie Cys Thr Pro Asp Gly Asn Asp Ala Lys Cys Gin 245 250 255

Cys Lys Ala Gly Trp Asp Ala Asp Ser Gly Ala Gly Ser Ser Lys Lys 260 265 270

Pro Cys Val Glu Val Asp Glu Cys Ala Ser Asn Thr His Gin Cys Pro 275 280 285

Ala His Ser Thr Cys lie Asn Thr Lys Gly Ser Tyr Lys Cys Asp Cys 290 295 300

Asn Gin Gly Tyr Val Lys Gly Glu Asp Gly Gin Cys His Asp Val Asp 305 310 315 320 10· 144841·序列表.doc 201026322

Glu Cys Thr Asn Gly Glu His Thr Cys Pro Ala His Ser Thr Cys Leu 325 330 335

Asn Thr Ala Gly Ser Tyr Glu Cys Arg Cys Asp Thr Gly Tyr Ser Gly 340 345 350

Asn Ala Thr Ala Asp Ser Pro Cys Lys Asn lie Asp Glu Cys Ala Asn 355 360 365

Pro Asn Ala Cys Ser Ala Asn Ala lie Cys Thr Asp Thr Asp Gly Ser 370 375 380

Phe Thr Cys Ser Cys Pro Glu Gly Tyr Ser Gly Gin Gly Thr His Asp 385 390 395 400

Ser Pro Cys Ser Lys lie Asp Phe Cys Ala Asp Pro Ser Leu Asn Thr 405 410 415

Cys Gly Ala His Ser Thr Cys Val Asn Thr Leu Thr Ser Phe Lys Cys 420 425 430 lie Cys Asp Ala Gly Tyr Glu Gly Ala Gly Thr Arg Glu Ser Pro Cys 435 440 445

Val Asp Val Asn Glu Cys Ser Asn Glu Lys Pro Thr Asn Asn Cys Asn 450 455 460

Arg Asn Ala Asn Cys Thr Asn Thr Glu Gly Ser Tyr Thr Cys Glu Cys 465 470 475 480

Lys Pro Gly Phe Ser Gly Asp Gly Met Gly Pro Asn Gly Cys Thr Asp 485 490 495 lie Asp Glu Cys Ala Ala Glu Gin Ser Pro Cys Asp Pro His Ala Ser 500 505 510

Cys Ser Asn Thr Glu Gly Ser Tyr Val Cys Thr Cys Asn Thr Gly Tyr 515 520 525

Glu Pro Ala Ser Thr Asp Gly His Ala Cys Lys Asp lie Asp Glu Cys 530 535 540 -11 - 144841·序列表.doc 201026322

Ala Thr Gly Ala Ala Gly Cys His Val Ser Ala Gin Cys Leu Asn Thr 545 550 555 560

Asp Gly Ser Tyr Glu Cys Lys Cys Leu Glu Gly Phe Val Gly Asp Gly 565 570 575

Lys Thr Cys Asn Asp Val Asp Glu Cys Ala Ala Ala Thr Ser Pro Cys 580 585 590

Gly Asp Asn Thr His Cys Gin Asn Thr lie Gly Ser Tyr Glu Cys Glu 595 600 605

Cys Lys Ala Gly Tyr Gly Asn Met Gin Asp Asn Ala Cys Ser Asp lie 610 615 620

Asp Glu Cys Lys Asp Ala Asn Thr Lys lie Pro Asp Asn Cys Leu Cys 625 630 635 640

Val Asn Asn Asp Gly Ser Tyr Ser Leu Glu Ala Lys Ala Gly Tyr Glu 645 650 655

Leu Val Asn Gly Glu Cys lie Lys lie Asp Phe Cys Ala Arg Gly Ala 660 665 670

Cys Asn Ser Leu Ala Ser Cys Lys Glu Asn Glu Glu Gly Thr Ala Ala 675 680 685

He Cys Thr Cys Leu Pro Gly Tyr Ser Gly Asp Gly Thr Ala Glu Gly 690 695 700

His Cys Asn Asp lie Asp Glu Cys Ala Gly Gin Asn Asp Cys Ala Pro 705 710 715 720

Ala Glu Gin Gly Gly lie Cys Glu Asn Thr Val Gly Ser Tyr Thr Cys 725 730 735

Lys Cys Lys Glu Gly Tyr Arg Gin Asp Gly Asn Ser Cys Thr Glu lie 740 745 750

Asp Glu Cys Ala Glu Gly Thr His Asn Cys His Pro Ser Ala Thr Cys 755 760 765

Ser Asn Thr Pro Gly Ser Phe Thr Cys Gin Cys Asn Ser Gly Phe Thr -12- 144841-序列表.doc 201026322 770 775 780

Gly Ser Gly Val Glu Cys Glu Asp lie Asp Glu Cys Ser Thr Glu Ala 785 790 795 800

Asp Asp Cys Gly Ala Asn Thr lie Cys Ser Asn Thr He Gly Ala Phe 805 810 815

Glu Cys Asn Cys Arg Glu Gly Tyr Glu Arg Ala Asp Ala Lys Thr Cys 820 825 830

Val Asp lie Asp Glu Cys Ala Thr Gly Thr His Thr Cys Ser Asn His 835 840 845

Ala Thr Cys Thr Asn Thr Asp Gly Ser Phe Thr Cys Gin Cys Asn Pro 850 855 860

Gly Phe Glu Gly Asp Gly His Lys Cys Glu Asp lie Asp Phe Cys Gly 865 870 875 880

Ala Gly Gin His Asp Cys Asn Val His Ala Glu Cys Ser Glu Ser Glu 885 890 895

Asp Asn Thr Thr Phe Lys Cys Thr Cys lie Thr Gly Tyr Ala Gly Asp 900 905 910

Gly His Gly Glu Ala Gly Cys Gin Asp lie Asp Glu Cys Ala Glu Glu 915 920 925

Asn He Cys Gly Ser Asn Ala Val Cys Thr Asn Thr Ala Gly Ser Tyr 930 935 940

Gin Cys Ala Cys Arg Glu Gly Phe Val Ala Ser Ala Glu Gin Gin Gin 945 950 955 960

Gin Gly Thr Pro Ala Leu Val Cys Val Asp Val Asp Glu Cys Ser Asp 965 970 975

Ala Ser Lys Asn Thr Cys Ala Lys Pro Ala Asp Gly Gly He Cys Thr 980 985 990

Asn Thr Glu Gly Ser Tyr Glu Cys Ala Cys Lys Pro Gly Tyr Gin Gly 995 1000 1005 13- 144841-序列表.doc 201026322

Asp Gly His Ser Cys Ala Asp lie Asn Glu Cys Thr Ala Gin Gly 1010 1015 1020

Thr Cys Gly Glu His Thr Thr Cys Lys Asn Thr Pro Gly Ser Phe 1025 1030 1035

Gin Cys Asp Cys Val Glu Gly Phe Glu Arg Ala Asp Glu Arg Thr 1040 1045 1050

Cys Arg Asp lie Asn Glu Cys Glu Thr Gly Ala Val Val Leu Pro 1055 1060 1065

Pro Asn Ser Thr Cys Val Asn Thr Glu Gly Ser Tyr Asp Phe Asp 1070 1075 1080

Cys Val Ala Gly Tyr Arg Arg Thr Asp Gly Ala Cys Val Lys lie 1085 1090 1095

Asp Phe Cys Lys Glu Lys Gly Cys Asn Ala Asn Ala Thr Cys Arg 1100 1105 1110

Glu Asn Asp Ala Gly Thr Glu Ala lie Cys Thr Cys Lys Glu Gly 1115 1120 1125

Tyr Glu Gly Ser Gly Glu Gly Glu Asp Gly Cys Gin Asn lie Asn 1130 1135 1140

Glu Cys Glu Arg Gly Glu Pro Cys Lys Asp Phe Gly Glu Gly Gly 1145 1150 1155

Val Cys Val Asp Thr Pro Gly Ser Phe Thr Cys Glu Cys Ala Ala 1160 1165 1170

Gly Phe lie Gin Arg Arg Ser Val Cys Gin Asp Val Asp Glu Cys 1175 1180 1185

Leu Asp Gly Lys Leu Asn Thr Cys Ala Ala Thr Gly Gly Val Cys 1190 1195 1200

Ser Asn Thr Val Gly Ser Phe Thr Cys Ser Cys Ala Ser Gly Phe 1205 1210 1215 -14- 144841-序列表-doc 201026322

Glu Gly Asp Gly His Thr Cys Asn Asp Val Asp Glu Cys Ala Thr 1220 1225 1230

Ala Gin His Thr Cys Asp Pro Asn Ala Thr Cys Val Asn Thr Glu 1235 1240 1245

Gly Ser Phe Glu Cys Arg Cys Asn Ala Gly Phe Glu Gly Asp Gly 1250 1255 1260

His Thr Cys Ala Asp lie Asp Glu Cys Ala Asp Pro Ala Lys Asn 1265 1270 1275

Thr Cys Asp Thr His Lys Gly Val Cys Gin Asn Thr Thr Gly Ser 1280 1285 1290

Tyr Thr Cys Gly Cys Lys Thr Gly Phe Ser Leu Ala Ala Asp Gly 1295 1300 1305

Ser Thr Cys Glu Asn Val Asp Glu Cys Ala Ala Gly Thr Ala Asn 1310 1315 1320

Cys Asn Glu Arg Ser Phe Cys Lys Asp Thr Glu Gly Ser Tyr Gin 1325 1330 1335

Cys Glu Cys Lys Asn Gly Tyr Lys Ala Ala Gly Glu Asp Cys Val 1340 1345 1350

Asp Val Asp Glu Cys Glu Ala Gly Val His Gly Cys Ser Glu His 1355 1360 1365

Ala lie Cys Thr Asn Thr Asp Gly Ser Tyr Ser Cys Glu Cys Met 1370 1375 1380

Glu Gly Tyr Gin Gly Asp Gly Lys Ala Cys Glu Lys Thr Val Gly 1385 1390 1395

Val Cys Asp Ser Ala Pro Cys Gly Ala His Ala Thr Cys Glu Pro 1400 1405 1410

Ala Gly Asp Asn Tyr Thr Cys Thr Cys His Pro Gly Tyr Glu Met 1415 1420 1425 15- 144841 ·序列表.doc 201026322

Arg Glu Gly Ala Cys Val Asp lie Asp Glu Cys Thr 1430 1435 1440

Ala Gly Ser

Leu Asn Cys Asp Pro His Ala lie Cys Thr Asn Thr 1445 1450 1455

Asp Gly Ser

Phe Thr Cys Val Cys Gly Ser Gly Tyr Thr Gly Leu 1460 1465 1470

Gly Thr Ser

Cys Glu Asp He Asp Glu Cys Ala Gly Asn Ala Ala 1475 1480 1485

Gly Cys Asp lie His Ala Val Cys Thr Asn Thr Pro Gly Ser Phe 1490 1495 1500

Lys Cys Glu

Cys Lys Ser Gly Phe Glu Gly Asp Gly Thr Gin Cys 1505 1510 1515

Thr Glu Lys

Val Leu Leu Pro Gly Gin lie His Cys Glu Ala Trp 1520 1525 1530

Thr Ala Trp

Thr Glu Cys Thr Asp Gly Ala Lys Thr Ser Thr Arg 1535 1540 1545

Ser Cys Leu

Ala Leu Pro Leu Lys Lys Glu Met Arg Ala Cys Pro 1550 1555 1560

Ala Ala Asp

Phe Ser Gin Cys Gly Glu Phe Thr Glu Trp Thr Ala 1565 1570 1575

Cys Pro Gly

Thr Asn Asn Asn Leu Ser His Arg Arg Thr Glu Arg 1580 1585 1590

Phe Gly Glu

Pro Gly Cys Glu Asp Ala Glu Glu Val Arg Glu Cys 1595 1600 1605

Pro Asp Glu

Glu Thr Glu Gin Lys Cys Gly Ala Trp Gly Glu Trp 1610 1615 1620

Thr Ala Cys

Gly Asp Pro Ser Pro Gly Leu Arg Thr Arg Ala Arg 1625 1630 1635

Glu Asn Cys

Pro Asp Val Val Glu Phe Glu Arg Cys Thr Met Pro

Ser Glu Pro 144841-序列表.doc -16- 201026322 1640 1645 1650

Glu Ala Gly Glu Val Thr Glu Pro His Thr Glu Gly Gly Ala Gly 1655 1660 1665

Val Gly Gly Glu Val Thr Glu Pro Asp Thr Glu Glu Gly Ala Gly 1670 1675 1680

Val Gly Gly Glu Val Gin Pro Gly Thr Glu Glu Gly Ala Gly Val 1685 1690 1695

Gly Gly Glu Val Gin Pro Gly Thr Glu Glu Gly Ala Gly Val Gly 1700 1705 1710

Gly Glu Val Gin Pro Gly Thr Glu Glu Gly Ala Gly Val Gly Gly 1715 1720 1725

Glu Val Gin Pro Gly Thr Glu Glu Gly Ala Gly lie Gly Gly Glu 1730 1735 1740

Val Thr Glu Pro Asp Thr Glu Gly Gly Ala Gly Val Ser Gly Glu 1745 1750 1755

Pro Thr Glu Glu Glu Gly Thr Glu Ser Thr Gly Pro Cys Lys Glu 1760 1765 1770

Phe Gly Pro Trp Thr Ala Cys Lys Glu Asp Glu Asn Gly Val Gly 1775 1780 1785 lie Gin Arg Arg Met Cys Ala Gly Arg Glu Asp lie lie Glu Ser 1790 1795 1800

Arg lie Cys Thr Val Thr Asp Asp Cys Gly Glu Trp Thr Pro Trp 1805 1810 1815

Ser Thr Cys Thr Asn Gly Ser Gin Ala Arg Asn Lys Arg Phe Cys 1820 1825 1830

Thr Asn Val Arg Glu Val Arg Leu Cys Gly Ala Asp lie Pro Val 1835 1840 1845

Thr Asp Gly Cys Thr Trp Ser Glu Trp Thr Ser Cys Ser Leu Val 1850 1855 1860 17- 144841-序列表.doc 201026322

Asn Glu Glu Gly Gly Tyr Phe Arg Thr Arg Thr Ser Ser Asp Cys 1865 1870 1875

Asn Met Asn Glu Val Gin Ala Cys Ser Pro Ser Ser Ser Thr Thr 1880 1885 1890

Ala Asp Ser Glu Thr Glu Gly Thr Cys Ser Ala Trp Asn Pro Trp 1895 1900 1905

Thr Glu Cys Ser Asn Gly His Gin Thr Arg Lys Cys Ala Thr Met 1910 1915 1920

Glu Ala Glu Glu Ser Arg Thr Cys Gly Glu Thr Pro Glu Asn Cys 1925 1930 1935

Gly Glu Phe Gly Pro Phe Glu Pro Ala Asn Cys Thr Ala Gly Gin 1940 1945 1950

Met Val Thr Arg Thr Arg Thr Cys Gly Glu Thr Glu Gin Lys Glu 1955 I960 1965

Thr Lys Leu Cys Asp Val Ser Ser Thr Glu Glu Gly Lys Gin Cys 1970 1975 1980

Gly Gin Trp Gly Pro Trp Ser Glu Cys Asn lie His Leu Gly Ser 1985 1990 1995

Glu Asp Asn Val Arg Val Arg Glu Asp Thr Ala Cys Gly Val Thr 2000 2005 2010

Glu Tyr Glu Glu Cys Ser Lys Pro Ala Asn Asn Ala Phe Val Cys 2015 2020 2025

Thr Pro Trp Ser Glu Cys Ser Asp Lys Lys Glu Arg Arg Thr Cys 2030 2035 2040

Thr lie Arg Lys Asn Gly Leu Val Gin Thr Arg Gin Glu Phe Arg 2045 2050 2055

Thr Cys Ser Val Asp lie Ala Thr Thr Cys Gly Asp Phe Gly Ala 2060 2065 2070 -18 - 144841·序列表.doc 201026322

Trp Ser 2075

Glu Cys Asn Ala Glu Gly Leu His Gin Arg Ser Leu Glu 2080 2085

Lys Cys 2090

Pro Asp Val lie Glu Val Ala Thr Cys Gly Ser Glu Asp 2095 2100

Cys Pro 2105

Pro Phe Gly Glu Trp Thr Glu Cys Gly Val Pro Glu Glu 2110 2115

Gly Met 2120

Arg Ser Arg Gin Arg lie Asp Cys Val Glu Ser Ala Ala 2125 2130

Cys Gin 2135

Cys Thr Glu Val Glu Ser Cys Phe Asp Thr Glu Leu His 2140 2145

Pro lie φ 2150 Thr Glu 2165

Pro Ala Pro Gly Thr Glu Thr Gly Glu Gly Glu Gly Glu 2155 2160

Thr Gly Glu Gly Glu Thr Gly Glu Ala Gly Gly Glu Glu 2170 2175

Gly Glu 2180

Gin Thr Gly Glu Gly Glu Val Gin Pro Pro Glu Glu Glu 2185 2190

Leu Pro 2195

Gly Glu Ser Val Thr Glu Pro Glu Glu Lys Pro Glu Glu 2200 2205

Glu Leu 2210

Pro Glu Glu Glu Val Thr Glu Pro Glu Glu Lys Pro Glu 2215 2220

Glu Gly 2225

Val Thr Gin Pro Glu Glu Thr Pro Glu Gin Pro Val Glu 2230 2235

Gly Thr 2240

Glu Glu Glu Gly Lys Gin Glu Ser Glu Ala Ala Pro Glu 2245 2250

Thr Pro 2255

Ala Val Gin Pro Lys Pro Glu Glu Gly His Glu Arg Pro 2260 2265

Glu Pro 2270

Glu Glu Glu Glu Glu Lys Lys Glu Glu Gly Gly Gly Phe 2275 2280 144841-序列表.doc 19- 201026322

Pro Thr 2285

Ala Ala Val Ala Gly 2290

Gly Val Gly Gly Val Leu Leu He 2295

Ala Ala 2300

Val Gly Gly Gly Val Ala Ala 2305

Phe Thr Ser Gly Gly Gly 2310

Gly Ala Gly Ala Gin 2315

Glu Ala Glu 2320

Gin Val Glu Phe Glu Gly Glu 2325

Asp Thr Gly Ala Ala 2330

Thr Ala 2335

Glu Thr Pro Glu Ala Asp Thr Val 2340 工le Asp 2345 lie Thr Asp Glu Asp 2350

Asp Tyr Trp Ala Asp Ser Gly Asp 2355 lie Gin 2360 <210> 5 <211> 19056 <212> DNA <213>禽腺病毒8 <400> 5 agacctcgtc ttcgccacgg tcaaggagaa gatcggctgg cggcggttcg tggaagctat 60 ccaacggtac gtggctgacg cctacggtgc tttcctgaca ctcaatgcgg aaaccgcacc 120 cgtcgggggt gacgaagata acgccgtcag tgtgctcatt gacactttag gcgaagaaag 180 ggctatttta gcagcttatc gggtggcgga aaagctatta gacgataagc cgctgccaaa 240 cgacggcgag aacaatgggt ccgaaaatcc ccgggacgcc gcgcatactt ttgcggagag 300 tcccgaatcg gacgaggacg tacaaaaggc gtccgccgag agctctcccg acacaccagc 360 tcgagacttt accgcggaag ccgtaaccgt gtacatcgac tcggacggcg gttgcgagga 420 cagcagcgaa gaagatcagg aggaagagga ggaggacgat gaagaagaag acgaagaaga 480 agaagacgaa gaggaggagg aggaagagga ggaggaggag gacgacggaa cacccgagtc 540 taccccttct accgtcatcg aagcggcgaa tctctcgccg gtcggcaccg acgaaaagca 600 cggggaaccc gacggcgagc ccgatgatgg tgacaatgac gacggagagg acgagggaag 660 aaattctgac gaggatagcg gatactattg gggggatgac acccccctgg aattggttcg 720 cgatcgcggg acaggcgatc acggtgagcc agatagcacc gctccttccg acggtcctgg 780 ggaagctccg tcggccgacg gggtagacga ggagcaggag caagacgaac aagagggaga 840 •20- 144841-序列表.doc 201026322

gaccgccgtc cccgccgcca ccgctcagcc cgctttcgac aaatgcctcc aacggcaagc 900 catgatgctc accggcgctt tgaaagacgc cttacccgag caggaacgcg acgtgcccct 960 ctgcgtcgat agcgtgcaat accagctcga gcgctacatc tttaaccccg atatgcgtgt 1020 ccctccggaa taccgcgaag tgcgctttaa cttctatccg cccttcatgc gccccaaagc 1080 gatcgcgaac taccacattt tcgccgtcac ggcgcccatt ccggcaagtt gcaaagccaa 1140 ccgcagcggg agccagctct tagaagcttg tcgcgacatg aaagtgttca agcgcttacc 1200 tcgttggcgc ctcaacgtcc aatccgacga cgggctcggg gacgaagtgg tacctgtaac 1260 agagctgaca gatgccaaat tagtccctct caaggacgac atctcgcggt tgcagtgggc 1320 taaaatgcgc ggtgaacaca tccgcttttt tagctaccct tccctgcaca tgcctcccaa 1380 gatctcacgt atgctcatgg agtgtctgct ccaacctttc gcaaacgaaa acgacaaggc 1440 ggaacaggtc gccccctgcg tgagcgaaga ggaaatgcgt tttattgtag atccggagca 1500 gagaatgaga ggcgaggaac tctacaaggc catgctcaaa aggagggccg tcgttaccat 1560 ggccgtgcgg tacaccgctt tgctcgagct catggaacgc gtcttccgag agccttcctc 1620 cgtcaaaaaa gcccaagaag tgctccatca cacccttcat cacggcttcg tggcccaagt 1680 gcgcgaaacg gccaaagtga acctgagcaa ctacgccacc taccacggcg tcacctacaa 1740 cgacccgctc aacaactgca cgtcagccaa gcttttcgaa ggcagggaca aggaggatta 1800 cgtgctcgac accgtctacc ttttcttggt cctcaattgg caaaccgcga tgggtatgtg 1860 gcagcaagcc atcgatgata ccaccctgga catctacgcg aaagccttta cgcgccagcg 1920 acgcgccatt tacggcctcg gaagcgtcac cgaggtcagc aaggccatcg tcgacatcct 1980 gatggacggg gacaggctca cggaggaaat gcggaaagcc ctccccaact tcgtgacgca 2040 gagccagatc tccgattttc ggcactttgt caccgaaagg tcgaacgtcc cctccatggc 2100 cgccccgttc tacccctccg atttcgtccc gttggctttc cggcaaagcg cccctctgct 2160 ctgggaccag gtctacctcc tccagatcgc ctttttcctc accaaccacg gaggatacct 2220 gtgggaaccg cccgagagcg aagcggaggt gccgcagcac cgcacttact gcccctgcaa 2280 tctctgcagc ccgcaccgca tgccggcgga taacgtcgct ctgcacaacg aagtgctcgc 2340 catcggcact ttcgagattc gcagcgccga aggcaaatct ttcaggctca cgcccgaact 2400 ctgggccaac gcctatctcg ataaattcgt gcccgaggac ttccatcctt tcaccgtgtt 2460 ccactttccc gaaaaccgct cttccttcac caaaaatcac accggttgcg tcacggaaag 2520 144841·序列表.doc -21 · 201026322 tccggaaatc ctctctctga ttcgtcagat ccaggcctcc agggaggagt ttctcctccc 2580 cgagcaaggg gctctacaaa gacccgcaga ccggcgaaac gctcaccact tcggtcgggg 2640 cagagaaccg tcctggagcc tccggcggag cgcctctacc gcccgctgcc gccagtacct 2700 gcggaggagc tcgagcgccg ccgaaacctc ctagggctct acggtctgcc tgccctgctg 2760 cagacccgga ctcccagagc gactacgggg aagctgctct cgcgtccaac tacggccgat 2820 atggctcaga ggatgctgga cgagaaaatc agagttaccg aagaccctcc ggaacccgag 2880 aacgccgttc ccttccctac ggacgcccgg ttcgtggggg ttcgcccgtg cggaggacct 2940 gaagtgagcg aatcagacgg agaaacgtta gaagccggac accgagagat ctgagtacca 3000 tctcggagag gaggaggacc tcgaagagat ggagaaagag aatatcccac cgcggccctc 3060 ctogctgcct ctggacggga cgcggaaccg caagcgccgc tccgcatcct cgcccgggaa 3120 ggagctgaag aggcctccga tccgaaagag agccaaatcc gataaagacg cggagaccgc 3180 gcccgcgtcc aaaaagcgcc gtcctcgagg taactataga agctgggtca ggcaccgcgt 3240 ggcgatctgc caagcgctcc gcgacgccgt tttcgaccga aggctggcgg ccgaaatcct 3300 aaagagagcg cgcggtatct tcgtaccgcc caccgtattg ggctactacg cccgcaaact 3360 cctagaactt cccgacgaag atcactgatc gtcggctttt tctttctcct ttccttctta 3420 gcggctcccg ctaccgcctc tgacacgctc cctccgcctc tcccgccgaa aaaacgcccc 3480 aaaaatacgc cgcggaccga ctcgtccttc gaattggtcc ctcccgaggt cgcagacttg 3540 aaagccaaca tcctcgacgt gctcgtcgaa atcgaaaata tcgccaaaaa cgacccttca 3600 cggcgcgttt ccatccgcaa ccgcacccgg gaaagcatca ctcggcagtt acactacgtc 3660 aaggacgagc aaaaactcac caagcttaag gcagatgcgg aaaaaatcct gcacctgtgg 3720 aaatcccttt cctaatcccg cttcttttat agcgctacag accgcgtgac tgagcccgcg 3780 gcaacatcat gaacctcctc gaagccactc ctaccgagta cgtgtggaaa tacaaccccc 3840 tctccgggat tcccgccggc gcgcaacaga attacggagc gaccataaac tgggtggtgc 3900 ccggaggtaa cagtttcgct tacgcggcgg acgagataag acggcacacc ctaagccctg 3960 ccgccacccg cgcgatcacc gaacgtttcg aagctgagtc agaccagcaa cccttcgcca 4020 acgcccggga aaccgcctac atcaccgcca acgtgctgga ctctggcttt ccaaagtccg 4080 ccgtgtaccc cgtggaccct tccggagttc aacgggttca gctctcgggc ggcgccgagg 4140 gccggatgca actcgcgggt ggcctcaccg aaggtcgagt gcaactttcg ggaggtgtcc 4200 taggacacgt cgtgcctcct ggggggagaa gacgcgccgg cgggcgtccg ccgcgatggt 4260 22- 144841_ 序列表.doc

201026322 gtgggaccgc tctcgcggga aacgggcttc ccgaggacgc cgaagtggtt tcggatacct acaagtactt cctccgcacc cagggaccca gccaagtcgt gcaagaaccc ggcgtgtact cgcggaggca gttcatgacc accttcctgc cggccgtggt gccccgacct ttcagcagtc ccaatccgcg cgactttccc gcgcagtaca gcgccatcta caaaggcacc aacgcgtacg aggacgtatt ttgggactgg tgaagtccct cttcgcggct tacccgttgc tgacggtgct ctgtttcgca ataaagttct tccaattcag cctcgctgaa cggttcccgc ctcgttattg tcacgcgttc gcctccgtcg ctcaccacgc gcgcgcgaaa ccgtcttttg atccaaaaga cgtaaccggg gtttaggggt tgcgcaaacc tcacgatcgc ctggtcgttg actttcaacc aatatttttt aggagcctgc gactccgtct ccgacatggc gacctcgact cctcacgcct tctcctttgg ccaaatcggc tcccgaaaac gccctgcggg tggcgatggc gagcgagacg cctccaaagt gccgaaaatg cagacccccg ctccgagcgc gaccgccaac ggaaatgacg agctggacct ggtctacccc ttttggctcc aaaacggctc taccggagga ggcggcggcg gcggttccgg tggaaacccg tccctcaacc cgccgttttt ggaccccaac ggacccctgg ccgtccaaaa cagcctcctg aaggtcaata ccgcagcccc catcaccgtc accaataagg ccctgacact cgcctatgaa ccggagagtc tcgagctcac taaccaacag caactggcgg tcaaaatcga ccccgaagga cctctgaaag ccacgaccga gggaatacag ctgtcggtcg accctacgac gttggaggtt gatgacgtcg actgggagtt aaccgtgaaa ctcgaccccg atggccccct ggattcctca gccgcaggaa tcacggtccg agtcgatgag accttgctca tcgaagatgc tggatccgga cagggcaaag aactcggagt caatctcaac cccacgggac cgattacggc cgacgaacag ggcctggact tagaaataga caaccagaca ctcaaggtca acagtgtcac cggcgggggc gtcctagctg tacaactcaa atcccaaggt ggacttaccg tacagactga cggtatccaa gtgaacactc aaaacagcat caccgttact aacggagctc tggacgtgaa agtagccgcc aacggacctt tggaatcaac cgacaccggg ctcacactta attatgaccc cggagacttc acagttaatg cgggcacgtt gagcattatt agggacccgg ctctcgtagc caatgcgtac ctcacatccg gcgcctccac ccttcagcaa tttacagcta agagtgaaaa ttccagtcaa ttttctttcc catgcgcata ctatctgcaa cagtggcttt ccgatgggtt gatttttagc tccctctatc tgaagctcga caggcacagt tcacgaacat accaacgggt gaaaattatc agaacgccaa gtactttacc ttctgggttg gagcgggcac 144841-序列表.doc 23· 4320 4380 4440 4500 4560 4620 4680 4740 4800 4860 4920 4980 5040 5100 5160 5220 5280 5340 5400 5460 5520 5580 5640 5700 5760 5820 5880 5940 201026322 ttcatttaat ctttctaccc ttacccaacc cactattaca cccaacacca cacaatggaa 6000 tgcattcgca cctgctcttg attactcagg tgctcctccc ttcatctacg acgcgtcttc 6060 cgtagttaca atttattttg aacccaccag tggtcgactg gaaagctatc tccccgtcct 6120 taccgataac tggagccaaa caacctacaa ccccggcacc atcaccctgt gtgtaagaac 6180 ggtaagggtt caattgagat cgcaagggac cttcagcact ctagtctgtt acaacttccg 6240 ctgtcagaac gcgggcattt ttaacagcaa cgctacaacg ggaaccatga ccctgggtcc 6300 tatcttctgt agttatcctg ccttgagcac cgccaacgct ccttaattca ataaaaaatg 6360 atccacacaa tatgaaggtc tactgtgatt ttttattaaa gcagccatac taattctcct 6420 ggatafcccat cagtctgtcc cactctccgc gttgccagta gtacaggcag ttcacggcgt 6480 ccacgtacca cgattcgctc accagaaaga cccgctgctc gggaaaatcc accatcattc 6540 tgcggatgta gtgacaaggg agcgccccca tctggccgag cgtggccacc gcttccacga 6600 acacaccggt gttgtgcgga gggacataga tgatcatgcc cagaactcct ccgcgggcgc 6660 ggcgcagaag acgggataaa attcggtaaa catgacagag gcccacgccg ctacgaagta 6720 caccccttcc agactagggt cgccttccag cctgctccaa aggtacacgg agagaccact 6780 gctgtcgggt tgactgcaca cggccatcgg cacgcgtctc atctcgaatc cgtggcagtg 6840 acaccgctcc ggaatcatct cgaattcttc caaacataga aactggtgcg cgtggacggc 6900 cggcacgaaa cgcaaatctc cttcccctgc tcccaccgcg ggttgatgtt cccctatgtc 6960 ttcgccccat aacctctgag cggccatgat ctacacctgg gattcttcgc gctctatctc 7020 agtatacacg tgttccacag agccgccgta gacctcttcc tcgtcgctac ctgccggtgg 7080 cgctctcagc aacgacagtt ccagtggtgt cggcggcggt ggaacagaag gaggcggtga 7140 acgggtatcc gagcgggagt cgtaaaacgg attgctgctc acagtccaat tgggggaacg 7200 agcgggaaac tgagacaggg aacgcagcca ggagaaccga cgtgatggct cgcggttatt 7260 aggcaatggt gggggtaaag cagaacaccg gcgacggata ctccaacggt gtcctcggat 7320 gctcttgagg acctcccgca atgattctcc gccactgcgc gatcagcaat acaaacgcga 7380 tcgtggctag aagagtgcaa cagccaaaca tcataaacac gtagggaacg gcatgtaaat 7440 attgactgag gaagagataa ctggcggcca ccgcaccgca gtgaatgact cccacggtca 7500 cagccagaag cagcagaagg catgcctctc tgcggcgccg gcggatccgc acctatcaat 7560 agaaaaaagg ggactttcta tcaccctcca cgcgtgcccg gcgcttggac atgcaattcc 7620 gcaaatagga caactgagct atagtggcta ggggcaaggg ctgtctaaga gggcatccgg 7680 ·24· 144841-序列表.doc 201026322

ggcaagaagc ctacatccac gctccagcaa cacgggactg cgcacccaga ggaaacctca gagtcccgta tttctctatc ctccttttcc aacgcacggt cagggactcg acggctcgtg caggatgctg aaccacctcc aaatcggggc ctaagacagc tacggtaaga ctgctgtcgt cgtcttccca ggaaggatcc agctaccata acccgaggcc ttcggtttcg ccaaaaatcg ggagtctgtc gggttccagt cagttcgaat ttggaagaca ttcggggtga aaacgtggcg gcggggtcgg cccttcccgc tagagaacgg taacataatg tctacaaaca agaggttccc gcgggtgata cccgtcttga tgccacgagt tgatactcca aaccatatgg tacacgaaag aatgaaaagc tcttttattg gtcaccgcgg gaacagagca aaattcacgg cgtagaccca gccaaaaaca gctactcgag tttagctgga cttgaactcg gatgtagagt gggcttaccg acgtcggcat cactgcgcag tggtcgcagt gtacgggaag ccatctcttt aagttttaag gatatttcaa attgaagagc gaaagtcggt gcgctacgaa aagacaaccg gtctgagata aatgctgggg tcatgcgttc ctccgcattc aaaggggcgc tatcactcac atcaggtacc taacaccgac gctacgacac atcagagagt ttgctacttt caagccccac agccctcgtc cggtcactac gtgtagctgc tcaaagacgc ttaccttcaa taaagaaggt ctgtctgaca acgtgccgtg cggaatgtag cagcatggat aatgacggtc aaaaggcagg caaccgaaag tttgtttttg cagacgcctc agactgcagt cttcgaacac tttatcgaag cgctgcttct gttttgatag cttaagttac cgaatcagaa gtcacctgta atcggtagtg cacccgtaac agaactctcc tttccgtcgg aaccgttaaa tatggctcgc ctcctcttct tgagaaattc agtaggttct ttttataact gacggtaaat cacgtcccag aacatgcagt cataaccccc cgggtcatca gctaccacat tgctcaggca gcaacaccgg cgaaccatcc gaaaccgctc ctcagtatga ctgcagctca agactaatgg tgggacggac ccgcaaccgc tcaaggaaac cacagaggca aagatacaca gcagaatata aatcgcgagg tccgagctga atagcggtag aaaagagttc aaggcgacgg gacgcggttt caggtcgaaa ggcgggaact tcaaattcaa tctttcttca aaactgtaca acccattctt gcgacaccat gaggctgggt tggtgcgaca cgaccgtctg tctctagaac attcccgatg gcaggatctc cgttcaacag ctaccgtata aggctacgga cctgtctgac gggtaacggc cgcccgggaa tgatgcgtaa cattaaacga tagagcacga cgcgcggcat ggagacgtag agaccaacac cggtagatgc cttgaaccgg ccgaagtgct cggtcgatgc ccacagaaac gaaagaattc ttctgtccaa gtttatgggt 7740 7800 7860 7920 7980 8040 8100 8160 8220 8280 8340 8400 8460 8520 8580 8640 8700 8760 8820 8880 8940 9000 9060 9120 9180 9240 9300 9360 -25- 144841·序列表.doc 201026322 ccccgaagaa tccgtaagtt ggatactcgt cagccagaaa ggagacttgc taagatctac 9420 cttgagtcca tgtcccactt tcacttctac atcagccagc tggatcggaa tcatagctat 9480 cgaggcatct ctatccgcca ggcaaccaga ctgaggagga acactgactt gagatccgcc 9540 gttcggattt aacatcgtgc gataactcat tagggggaat cgctccttgg ttaccatgca 9600 gtagtgcgca ggccgaccga acggatctct tgtagggtta cagtgcatgg tacgcacaca 9660 ccctccagtc attactttac ggtcctttat cgagggagcg cttgacgaat cctgatagaa 9720 tccctgtggt gtgatcacgt acaccaggta gatacttgca gaaggattcc agtgacggat 9780 ccacaacacc tcttctgcaa gctcggtgta acccaccgcg gtaagtacat catacctccc 9840 ataccgaagt gtttgctcac tgtaacctcc gatgaacatt cgactcccac tagaagctac 9900 tactatgatc atgatcggag ttacaaagtc ctgcttgagt acgggtgagt acgtaatctc 9960 agtcatgtag ctaatgctaa tatgattgaa gtagctagcg tatctgtaat ctcgactcat 10020 agtataccca ttccaagtgc tccggacagg acccactttg aaaccctcat taagcaagtg 10080 aaacatgggt aacccagttc tcacatccaa agtctttaga aacttcggta ctatcaatct 10140 atgaaaacag ccgcttttac tccacgtatc cctccatgag aattcttcgc agaccgtctg 10200 tccccataca ctttctgcac acactcttcc cgaccatccc ccatgaatcc cacaacctct 10260 accgccctta tcctccaaca tgatatcctc agaagccgta taccctcctg taatccacga 10320 cccttccgtt ttcaggactg ccacgtaatc cgcatcattt ttatctaagc ctccggtaac 10380 aaacgtgggc tctaacccga ctattctggt acaccgtcta tccccagaaa tatatgtcca 10440 ctgtctgcag atagtagagc aagcgtgagc gccggcagaa tgtcctatac agtgtaacct 10500 tttcgaatgt ggtatgtccg acagaaactt cccgaaatca acatacagac cgtcatagtc 10560 gtagtacagg ttccagtcca ccaggagcag cgcgactgca ggcgtcatat tctgatggac 10620 acgcaacacc tgtctaaaac tttgatagcc catgtaatac cccggtataa gcacaatgat 10680 atcggtcttg ccggctaaag cactgtgcaa tcgatggtag acaccgtact ggtacgtcac 10740 gtcgtgaaat ttcggcacac ccccgtgagc tccataccac gtaatcttcg atggcggtcg 10800 gctcaatctt ccaacgcctc tcggagcatc aagttttaga gaatccggtc tcgccacgca 10860 tgaccgattg cccgaatcgg gacatgcaac tgccgatttc gcacacgaaa gcacggaggc 10920 tccgaagagc accccgacca actgaaacag aacgcatgat ttagacccac tcccgacaga 10980 ggattaacgc gacccaatca agggatatca aaaaagaatc cttaccgcgg agagattcat 11040 agaccgaaga gttgagagcg ctcctgtttc tctgaagatc tctcaccccg actgtgacag 11100 -26- 144841-序列表.doc 201026322

atccacaaag gctgacaccc tggacaaaaa tcccggtaca tggtgtttca cgccggtaag cctggttcgt tatggttaac gattaactcg atgattaact aatctattac ttacgtcact tatgcatgag atattcacga tgtatgttta ccaggtaaat atatatggac gctctccccc tataggtaga cctctacggg aataatcaac agcccacccc acacccccct ctatggacac tgtacaggcg ataggctaca gggcgccatt agaccgcata cagcactcaa agtaaatatt ccacagataa aagtccaaaa gaagaacaca aacatcttaa gcacgtacgc tattaactat ggctagttaa agaagttaat gtcactcgtt cgttatacat gagctactga cactcatgca cgttgcctag catttacctg atccgactcc attggctctc gcaggtagac ctctccatac tcaatgctgt ccttggcacc gtacaggcga ccccctgtac accaccccct atggaatact acctttgcca gagagcctag tttatactgt tacttagttt gatgttccat atagaactag gacgatctac tttttacttt ggaaacgaag atgacgtcac tgattaacta gattaactag atatattaac taactagtga atatgcatga tatgcatgca caacgttaat aactttgttc gcctcccccg aatgacgtag ccggaacacc cggtaaatat gattctgcct cccctgtaca ccacccccta acccccctgt atggacaccc gccccctagt ctatggagct ccaatggggt caaatggtta gcagttccac tcaagggaac gtgctttata aaacaggatg gtatgatttt ttcgaaaaat ttagttaatt tacctggtta aagttaatga tagtgacgtc cgtcatgagt gagcctcata ttggttaaag gatttacctg tttatgttta ttatacatta ttcaggttaa attcccatcc tttattccat caaattcaat cccccctgta tggacacccc acaggcgacc ccctgtacac gtctcctgct ccttcacgag gctttggaat atgtttaatg tgtttcctta ccgatgttcc aatactaaga aacctcggaa caattctgaa cagagttgga attaacgata atgattaact ttaactagaa actcgttata aaatcattaa catatgcatg agtaacccta ctgacgtggc ttcaccatgg acgatggcgt ccataagcca ggacctccat ttaatccaat ggtgattttc caggcgacca cctgtacagg accccctatg ccccctgtac gtatgggacc ggggcgccat ccggatatcc ctagaaaagc ttgccatgac ctcgataact gtcgactcct gactcaacac aaacacgttt attttccagc taaagtaaat gacttagtta gttaatgatt cattaaccca ccttcatgca gaacttatgc tgactcagtg agctccgcct caacgctacc gataggcgga gaaccgccta agagtgcgga cgaataaatc tttaataaaa ccccctatgg cgaccacccc gacacccccc attttctccc cctatgatgt tgaaattggg ccgtccaact 11160 11220 11280 11340 11400 11460 11520 11580 11640 11700 11760 11820 11880 11940 12000 12060 12120 12180 12240 12300 12360 12420 12480 12540 12600 12660 12720 12780 27- 144841·序列表.doc 201026322 cttcaactgc ctttccattc gctcatgggg atcacatggg aagcgcgtca tgtaccgtgg 12840 ccacacctac cggatgtacc acgcccagtt acgggtccga agctccgccc ccgttactag 12900 gaaacaggcc ggaagcctgc tcctcagcct atcacagaag ctcctctgtt tcgccgcccg 12960 ctttaatacc catcccctcg tgatgcaatt gggggtggag tctaacccta tgggcctacc 13020 tgtatatacc aagagggccc tccagatggc gctacagagt atgcgggtgc gcattgcccc 13080 tgacggccag aaggtggcgc caccggagat aggcaagacc tgtacggtga agcccctcaa 13140 gaccccggag accctccagc agggggtctt cagtaccacc gatttaaaaa agacacttcc 13200 agattgggct tttcgccgac tttttaacca aaccccctat atttgtggat ggaagattgg 13260 caccgcgcca gaaggggcgg agagttggat cgttacgctc cacccccagc cttcgactcc 13320 gccccccaca gggaccaaga ctccgcccac tctgcaggac cttgcccggc tgggcgtggt 13380 cgagcaatgc ctcaagatga ggaggcgtgg cctggaccgc aggcaccacc cctatgctca 13440 ataaaccaat cagattccag tacttggctc ctcctatttg tgggcgggac tttgcacgcc 13500 tcttagcggc gccccctggc ggccgagggc cgccactgca cccctgtcgg acttagtctc 13560 tggcgcgggg ccggtcaatc attaacccga cggccggcac gggcgccccc tggcggcggg 13620 cgcccgccac tgcaccctgc gcctcttagc ggcgccccct ggcggccgag ggccgccact 13680 gcacccctgt cggacttagt ctctggcgcg gggccggtca atcattaacc cgacggccgg 13740 cacgggcgcc ccctggcggc gggcgcccgc cactgcaccc tgcgcctctt agcggcgccc 13800 cctggcggcc gagggccgcc actgcacccc tgtcggactt agtctctggc gcggggccgg 13860 tcaatcatta acccgacggc cggcacgggc gccccctggc ggcgggcgcc cgccactgca 13920 ccctgcgcct cttagcggcg ccccctggcg gccgagggcc gccactgcac ccctgtcgga 13980 cttagtctct ggcgcggggc cggtcaatca ttaacccgac ggccggcacg ggcgccccct 14040 ggcggcgggc gcccgccact gcaccctgcg cctcttagcg gcgccccctg gcggccgagg 14100 gccgccactg cacccctgtc ggacttagtc tctggcgcgg ggccggtcaa tcattaaccc 14160 gacggccggc acgggcgccc cctggcggcg ggcgcccgcc actgcaccct gcgcctctta 14220 gcggcgcccc ctggcggccg agggccgcca ctgcacccct gtcggactta gtctctggcg 14280 cggggccggt caatcattaa cccgacggcc ggcacgggcg ccccctggcg gcgggcgccc 14340 gccactgcac cctgcgcctc ttagcggcgc cccctggcgg ccgagggccg ccactgcacc 14400 cctgtcggac ttagtctctg gcgcggggcc ggtcaatcat taacccgacg gccggcacgg 14460 gcgccccctg gcggcgggcg cccgccactg caccctgcgc ctcttagcgg cgccccctgg 14520 28 · 144841·序列表.doc 201026322

cggccgaggg ccgccactgc acccctgtcg gacttagtct ctggtgcggg cccgagtcac 14580 ggatggagta gtttcccttg cggccagcag agggcatacc tttattctca gctcgcaagt 14640 ctcaatagat acacacctca tcggtgtaca gcgtgtccgc gtagcgcagc cccgtgcacc 14700 tcacccaacc acctatatcg cgaacggctc cggtactcac tatgtatttc ccgacgcgat 14760 agttcggatc attgcaccac ttattcaagt acattctaaa ccattgccct tcggggactt 14820 ggcgctgata aaaacattcc ctgaagtacc gtttcaccgc gcgagaacac ttatacaagt 14880 atctgtcccg caggttgaac atggttaagc acagaagcaa ggtcatgtgg caggaacaag 14940 aaccgccagg ctgcaacccc acgcagtatc ccatcggatg accgatctcc gagttcgcct 15000 cctcgtggaa cgggtaccat agctgcttca cgtcttgaac cagcttccag aacactgcat 15060 cgtgcataca ccacggcggc acggcaactc cgaagatcac gtacagtggc atgttccgga 15120 tacatctacg acacaggtac tgtgacacct tgcgcgtacg cgaaaaggga acccgaccct 15180 cccccgtaac gctccactta cggacagccg gcgatgcgca ctgcgaacga aaaataaatc 15240 tgcgccgttg tgcgctccag gcggaaacag gggaatatat aagccaactc ttatctttat 15300 tgttgccacg cccgacacta tccagatttc gagacctgct gacaccaccg gaacacgcga 15360 cctcgccctc tctttatcat ccatacgccc aggtgactca gtcaaatccc ttatataaag 15420 accgttttta cctgaccgct tccacgtaca caaggcggca catgaaagca ccatgctgcg 15480 ccccgtatcc gccatcgcgt tcctctcgtg cctatgtctc acgcggaccg cgcaacaggt 15540 cggtaagtcc tttaatctta cgacccactc caacctcact gtgcacccgc agaccaaagg 15600 aacctcaaag caagagtggc ggctagggcg cgataccaag attgcgatgt gggagaaagg 15660 ctacgggtac agctacccgt cgggaccctt taaaggccgc gtagaaatga acgagaccag 15720 tgtcaccttt tttgacctcc gtcccaacga ttctgccata ctgacttact tctccgaaga 15780 tagctccggc acggagagtg aatatccgta cgccatcagc gtaagaggtg agcccttccc 15840 tacctttgtt ccattccgcc catcgagcac ctcagccgac accacacatt ttcagatccc 15900 ctccgccctc ccattctacg gctgatgact aacaattccc gtccgcggac cgagagccgc 15960 atgagcttgc agtgcatcgc gctcgataac gatagttcca ttacgtacgc ctggtacact 16020 gacaccttag agagcgggga caacatccga gaagtaaccg tccgaacgga ttctgaggta 16080 gcagttacct gtcggatatc ggatggacat tccaccaatt ccgcgactct cgtcgtgccg 16140 ctaaaccgag gtcagtaata tcccctccct caccgcaaca gatccgcaca gtcaggatcc 16200 144841-序列表.doc -29- 201026322 caggctttca cgatcctttc cccactcctt tagaacctgc cgctccctac ggcgcggata 16260 tgactacggt gttcctggcc atcttagccc ttattcttct aaccgtcatc ggcggctacg 16320 ccctcagaaa gctgtgtatg cgaaacgagc gcgtttttat ttgtaacccg tacagagaat 16380 gttttggcgg tcatctctag gacaaataaa cttctacttg aaatgagttt atttttcccc 16440 ctgcctgttt gtgatgggaa atgatcggtg ctgcttatgg accgagatag atggaaggga 16500 cgggggcatt caaatttcta ggtccaggga cataaaaaag agatcaaatt tacatctccg 16560 gtaaagatca cctctataac cccgctgtga atcccagcac tcccttccga tacgcaaact 16620 gactagcagt tcctgtgtat agacaaacgg aatcctggtg tacagacaaa cggaatcctg 16680 agttcccaac gcattcattt atttgaatat ttacacattt acacactgta cacggtcatt 16740 cgatttcatt gccaacagaa agactaatcg atgtcccctt tcagtatgtg gactgtgaca 16800 gcagggtctt cgctcacttc actgtccgtg tcatcctctg tacgcccaca cagcatcgcc 16860 cgatagtgaa agctgacact cagcatggag aaccaaacag cagggagcaa tgtgagaggc 16920 agccaacaca gggaaacttt tttcttctcc cttcagaccc cctcccgtcg agacattgtg 16980 atggactact ggtacttcgc cctgatgttc ccaggtagga acgaccgtaa gggtgaacct 17040 ctgaacgctg ttctgcatca ggtcccgtgt cacttgatac atgccggaat ccgcgccact 17100 taagttcttg atagtcacgc agttctcgga tctgttatac gacagcctcc cttgatacgc 17160 cccgtagacc atcggctcct tcagcgcctg gtagtcctgc agcacgaact tgcgcacggc 17220 gcccgcatcc accgcggtca cttcccattc tctgatctga aaactctcgg tagaaccgca 17280 cagagtcaca gcgtcccgtt cgttagccac gacccgggat acgttctcca ttttcaccgt 17340 accgttctcg ggaagccccg acacggtgaa atatacagtc tcgggcttgg aacccaccgc 17400 gaatgattgt gatagccagc acccgttatt agctttgatt gcttcgacat gcattgaatt 17460 acaggatgaa tttagccgcg ccctcgtcat atagcccaga tccagcccct ctttgatcga 17520 aggaatcacg aaagccactt tctgccatct gttacagacc ttccccggag cgtggtacca 17580 tagcagcagc gtgaaatcag cgcatctgcc cgtagtcaga gtcacctcct tacggcccct 17640 cacggcggca ccggagacgg tggcagacaa gcagaggacg gcggcacaca gcaggagcga 17700 gccatgactg cggagtccga gccgagcggt gtgctgctcg atcctccgct acctttttat 17760 gcaccaccca cctttattgt cggtcacaca ttaattcgcc ccgtcagcaa acacgtgagt 17820 aacgtatgcc gttgttctga tcggtcagca ccgcgcccgc gacgtttgaa cgaagacgta 17880 cggtgacttc cgcataggga gctataagga agtcagttag gaaaaatcga tcctcgacac 17940 ·30· 144841-序列表.doc 201026322

accccacgga acgcgttgaa gatcaggacg caagaattcc ctttttttac gcctttgccc actccgtgtt actccgaaac cgacttgctg ctggaacacc gcagtccact agcctccagc catactcatt ccgctccatc ataaagattt ccgtccgcgg ttcctgggcg tgattcgaaa ggggagtgta aacgctgacc taaacagtta cgtccacaga ataaccatgc gctactcaac tctgatgggc cggatccggo cgcggttccc gaagaggact aaagagaata actccccctg aaggatcaca gccctcgtca tacctgggcg ggccgccaca gaaaaggtta tcgccgaaaa aacgattcgc ttttaagtag taggcgaaac acccatacgg gagatccgtg aggtaagaac cgcaacccgt agcggaacac aaacccccac gaaaactctt gctggttcgc cgtccgtggt cggtcatgct cgtcccatat tcatagcctt tgcctccccc tcgcacaaga acgcggaatc tgctcacgga gagcgccctc atatatatag ctatcaggta ggtatatatt cgcgaccgcc tcctttctct ttcttccacc tagcacccct tttctacctc acccccatcc ggagagcagc tatcccggca cggcatcgca cgccacgggc ccgtacaaag tgacgttaga atctttccgt tatttccctg agacacgccc tgccggcggc atgatg aaacattcac ctaccccgac tgtccgggct tcctcctatt acagttactg cgtctcggta cgaatccgcc gaagccacca gcggactacg caggtagccg cagaaagccg gttaccgtag gttaaggaac ccttaccgta gtcctgtgtc cggatttccg atgcgggcgt ggcgggaata tatacgcacc tgcagtcagc cctctagaat tgatccgagc ctccttctat gacaactcct accaccgcct cgccctgcga cacccatacc tctcgccatc taaaccgcgg ccggaatagt cgcgcccaac taatagagca tgtctcggcg tatccgtcag ggctaaccga gggggtgtgg 18000 18060 18120 18180 18240 18300 18360 18420 18480 18540 18600 18660 18720 18780 18840 18900 18960 19020 19056 <210> 6 <211> 27

<212> PRT <213> 雞 <400> 6

Met Thr Cys Gin Thr Tyr Asn Leu Phe Val Leu Ser Val lie Met lie 15 10 15

Tyr Tyr Gly His Thr Ala Ser Ser Leu Asn Leu 20 25 <210> 7 <211> 78 •31 · 144841-序列表.doc 201026322 <212> DNA <213> 雞 <400> 7 acttgccaga cttacaactt gtttgttctg tctgtcatca tgatttatta tggacatact gcaagtagtc taaatctt <210> B <211> 23 <212> PRT <213> 豬 <400> 8

Met Ser Tyr Thr Thr Tyr Phe Leu Ala Phe Gin Leu Cys Val Thr Leu 15 10 15

Cys Phe Ser Gly Ser Tyr Cys 20 <210> 9 <211> 69 <212> DNA <213> 諸 <400> 9 atgagttata caacttattt cttagctttt cagctttgcg tgactttgtg tttttctggc tcttactgc <210> 10 <211> 20 <212> PRT <213> 流感A病毒 <400> 10

Met Lys Val Lys Leu Leu lie Leu Leu Cys Thr Phe Thr Ala Thr Tyr 15 10 15

Ala Asp Thr lie 20 <210> 11 <211> 60 <212> DNA <213> 流感A病毒 <400> 11 atgaaagtaa aactactgat cctgttatgt acatttacag ctacatatgc agacacaata 32· 3 44841-序列表.doc 201026322 <210> 12 <211> 335 <212> PRT <213>柔嫩艾美球蟲 <400> 12

Met Thr Arg Leu Ser Leu Cys Ala Leu Ala Val Ala Leu Ala Val Gly 1 5 10 15

Gin Ser Leu Ala Val Pro Thr Thr Val Glu Asn Thr Val His Pro Tyr 20 25 30

Ser Glu Met Gly Thr Tyr Gin Glu Gly Glu Ala Pro Gly Ala Pro Asp 35 40 45

Glu Ser Ser Thr Thr Thr Thr Thr Pro Ser Pro Ser Pro Glu Ala Pro 50 55 60 參

Asp Gin Trp Leu Glu Asn Phe Val Arg Ala Val Gin Arg Gin Leu Gin 65 70 75 80

Leu Gin Glu Ser Met Met Arg Gin Leu Val Lys Glu He Gin Glu Tyr 85 90 95

Leu Ser Arg Ala Phe Asn Trp Asp Glu Asn Gin Ser Ala Ala Tyr Asn 100 105 110

Arg Val Asn Glu Met Met Asp Met lie Thr Asn Arg Met Thr Thr Ala 115 120 125

Leu Asp Gly Ala Asn Glu Leu Met Ala Thr Ser Glu Thr Met Asp Pro 130 135 140

Glu Thr Leu Arg Arg Ala Thr Arg Lys Tyr Met Lys Glu Val Arg Val 145 150 155 160

Gin Asp Val Val Val Asp Ser Leu Trp Ala Ser Leu Arg Gly Gly Val 165 170 175

Gin Thr Ser Ala Trp Met Ser Gly Val Thr Ala Val Glu Lys Glu Glu 180 185 190 -33- 144841·序列表.doc 201026322

Thr Thr Pro Met Ala Gly Arg Ala Ala Glu Glu Phe Met His Arg Met 195 200 205

Tyr His Asn Leu Arg Ala Ala Gly Met Ala Glu Glu Asp lie Thr Arg 210 215 220

Phe Met Pro Lys Thr Glu Tyr Thr Thr Pro Arg Glu Gin Thr Arg Asn 225 230 235 240

Met Gly Arg Lys Gly Arg Tyr Gly Tyr Gly Tyr Ser Tyr Gly Tyr Pro 245 250 255

Leu Tyr Ser Tyr Gly Tyr Ser Tyr Pro Ser Tyr Ser Tyr Ser Tyr Pro 260 265 270

Tyr Tyr Ser Tyr Pro Ser Tyr Ser Tyr Pro Leu Tyr Ser Tyr Ser Tyr 275 280 285

Arg Tyr Pro Ser Tyr Ser Tyr Ser Tyr Pro Leu Tyr Ser Tyr Ser Ser 290 295 300

Tyr Ser Tyr Pro Tyr Tyr Ser Tyr Ser Tyr Pro Tyr Tyr Ser Ser Ser 305 310 315 320

Trp Tyr Trp Arg Arg Leu Arg Thr Ala Ser Cys Pro Asp Cys Pro 325 330 335 <210> 13 <211> 966 <212> DNA <213>巨型艾美球蟲 <400> 13 accactcctg ttgagaacca ggttcaccct tacagcgaga tgagtaccta ccaggagggg agtgccccgg gggctccgga ggacaccacc accaccacta cgtcgtcccc tgtttccgat ggagccgagc agtggcttga gagctttgtt cgtgctgtgc agcgccagct gcagcttcag gaccaaatga tgcgtcagct catgagggac attcaggagt acctgagcac tgcgttcaac tgggcagaga accagtctac tgcctacacc cgtgttaccg agatgatgga catgatctcc aacagaatga acgctgccat ggacagctca aacgaactca tgaccactag cgacaccaca gaccccgaga ccctccgccg tgcaactcgc aagtacatga aggaggttcg cgttcaggac gtcctggtag atgctctctg ggcctctctc cgcggtgtac agacagctgc ctggatgaat 34· 144841·序列表.doc 201026322

ggagtgaccg ctattgagaa ggaggagacg actcccatgg ctagccgcgc tgctgaggag 540 ttcctccacc gcatgtacca taacctgagg gcagcaggta tgtctgaaga agatgttgcc 600 aagttcatcc ctagagccga gtacaacccc tccgagcagt caagaaatat gggcagaaag 660 ggcaggagct tctactacgg cggctatccc agctactaca actcccccta ctacagctac 720 agcagctacc ccagctacta caactacagc tacccgtcat acagctacag cagctacccc 780 agctactacc gctacagcag ctacccctac tacaactaca gctatcccag ctactacaac 840 tacggcagct acccctacta cagttatagc agctacccca gctggtactg gcgccgtctc 900 cgctctttgg caacagcaac ttgcccagac tgccctcctc tcaccactcc cagcatgatc 960 ccaact 966 <210> 14 <211> 1431 <212> DNA <213>巨型艾美球蟲 <400> 14 atgacccgcc tcggcctcgc tgctgtcgcg ctggctctcg ccgtgggccc ttccatggca 60 gtgcccagca ccactcctgt tgagaaccag gttcaccctt acagcgagat gagtacctac 120 caggagggga gtgccccggg ggctccggag gacaccacca ccaccactac gtcgtcccct 180 gtttccgatg gagccgagca gtggcttgag agctttgttc gtgctgtgca gcgccagctg 240 cagcttcagg accaaatgat gcgtcagctc atgagggaca ttcaggagta cctgagcact 300 gcgttcaact gggcagagaa ccagtctact gcctacaccc gtgttaccga gatgatggac 360 atgatctcca acagaatgaa cgctgccatg gacagctcaa acgaactcat gaccactagc 420 gacaccacag accccgagac cctccgccgt gcaactcgca agtacatgaa ggaggttcgc 480 gttcaggacg tcctggtaga tgctctctgg gcctctctcc gcggtgtaca gacagctgcc 540 tggatgaatg gagtgaccgc tattgagaag gaggagacga ctcccatggc tagccgcgct 600 gctgaggagt tcctccaccg catgtaccat aacctgaggg cagcaggtat gtctgaagaa 660 gatgttgcca agttcatccc tagagccgag tacaacccct ccgagcagtc aagaaatatg 720 ggcagaaagg gcaggagctt ctactacggc ggctatccca gctactacaa ctccccctac 780 tacagctaca gcagctaccc cagctactac aactacagct acccgtcata cagctacagc 840 agctacccca gctactaccg ctacagcagc tacccctact acaactacag ctatcccagc 900 tactacaact acggcagcta cccctactac agttatagca gctaccccag ctggtactgg 960 144841-序列表.doc 35- 201026322 cgccgtctcc gctctttggc aacagcaact tgcccagact gccctcctct caccactccc 1020 agcatgatcc caactccccc cccaatgatg aacatgatga acaccccacc ccccatggca 1080 aacatgatga ccagcatgat gatgaacact cccatggttc ctcctccccg caccctcgga 1140 actgaagcca tgagcctcgg cttggccccc atcggtatca ccggcgcccc catgacaggt 1200 ttcggtgttc ctcctgagtt cggtcccttt ggagccgaag gtatcggcct ccccaccgat 1260 gccctcggca gcacccccga aatgacacca ttcgacccaa ctacccccta cagaactctc 1320 gcccccatgg acctcccccc catcccccct cctgtcttcc ctgaaacccc tatgaggcca 1380 cctactccct tcggcttcgg acctgcacct gttcctccca tgcccttcta a 1431 <210> 15 <211> 653 <212> DNA <213>巨型艾美球蟲 <400> 15 acaccgaatt gcaccccatt ccagcccccg gtacggaaac aggcgaagga gagggagaga 60 ccgagacagg cgaaggcgaa actggtgaag caggtggcga ggaaggcgag caaacaggag 120 aaggcgaagt gcagccccca gaagaagagc ttcctgggga gagtgtaact gagcctgagg 180 agaagcctga ggaggagcta cctgaggagg aggttactga gcctgaggag aagcctgagg 240 agggtgtgac tcagcctgag gagacacctg agcagcctgt tgagggtacc gaagaagagg 300 gcaagcagga gtctgaggct gcccccgaaa ctcctgccgt ccagccaaaa ccagaggagg 360 gtcacgaacg cccagaaccc gaagaggagg aggagaagaa ggaagaaggc ggcggcttcc 420 caacagctgc agtggcagga ggtgttggtg gtgtgttgct catagctgct gtaggtggtg 480 gtgttgcagc cttcactagc ggcggaggtg gcgctggcgc acaggaggca gaacaggtcg 540 agttcgaagg agaagatacc ggagcagcaa ctgccgagac acctgaagcc gatacagtta 600 tcgacatcac agacgaagac gactactggg ccgacagcgg cgacattcag taa 653 <210> 16 <211> 7083 <212> DNA <213>巨型艾美球蟲 <400> 16 atgctgcatc gcaacccgcg gtgggcgctt tgtgcagccc tcgctgcact ctatggcgga 60 acaggaatcg ccagcgccga agttaacaat gaattgagca agtgcgaatc tgggtggaca 120 36- 144841-序列表.doc 180 180

201026322 ccctggacta cctgcaaccc gcaaactggt ctgcgggaga ggcacaatgc acagtgcgag acatgggtgg aggttgagga atgccagaag ctgacaggat gtggcaactg gactccttgg tctcccggcg atatgtcgtg tgtggtggga cagtttcaaa cccgcaacag ggagggctgc ccagaggtgc aggaagtgag ggcatgcagg cctgtacttc tagaatgcaa cgatcaatgg accccctgga caatgtgcga caccaaccgc gtccaggaaa gatacaactc aaagtgcgga cccgtcgaag tccgcgagtg caacatggac gacgcagaga tcgagaaatg cggcgagttc gtggaatggg atccccctat gaatggagac tgcgtacgcg ggggtaccca cacgcgttac cgtcaaaact gcccagaccg caaagaggtg cgggtgtgcg gagcctttga ttgcagtagc tgctctgtaa acgccacttg cgatcccatt ggtgcatcct gcgaatgcaa gcctggtttc cgcggcaatg ggaagacctg cgaggccttc aacccctgcg aagatacccc tgcaccttgc gacagcaacg ccatctgcac cccagacggc aatgacgcca aatgccagtg caaggcaggc tgggacgcag attccggagc aggcagcagc aagaagcctt gcgttgaggt cgacgagtgc gcatccaaca cccaccagtg cccggcacac tccacatgca tcaacaccaa gggctcttat aagtgcgact gcaaccaggg atacgtcaag ggagaggacg gacagtgtca tgacgtcgat gaatgcacca acggagagca cacctgcccc gctcactcca cttgtttgaa tacagctggc agctacgagt gccgctgcga cactgggtac agcggaaatg caactgcaga cagcccttgc aagaacattg acgaatgcgc caaccccaac gcctgctcgg ccaacgctat ctgcacagac accgacggct ccttcacctg cagctgcccc gaagggtaca gcggccaggg aacccatgac tctccctgct ccaagatcga cttctgcgca gacccctcac tcaatacatg cggagcccac tccacttgcg tgaacaccct cacatctttc aagtgcatct gcgatgcggg atatgaaggc gccggcactc gcgagagccc gtgcgtggac gtgaacgagt gctcgaacga gaagcccaca aacaactgca acagaaacgc aaactgcacc aacaccgagg gatcctacac ttgcgaatgc aagcccggtt tctctggcga cggcatgggt cccaacgggt gtaccgacat cgacgagtgc gcggcggagc agtccccctg cgaccctcac gcctcctgca gcaacactga gggctcgtat gtatgcacct gcaacaccgg ctacgagcca gcttcaaccg acgggcatgc atgcaaagat atcgacgagt gcgccaccgg tgcagctggg tgccacgtgt cagcacagtg tctgaacacg gacggcagct acgagtgcaa gtgtcttgag ggcttcgtcg gcgacggaaa gacctgcaac gacgtcgatg agtgcgctgc ggcgacatct ccttgcggtg acaacactca ctgccagaac acaattggca gctacgagtg cgagtgcaag gctggctatg gcaacatgca agacaacgca 144841-序列表.doc -37- 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1860 201026322 tgcagcgaca ttgacgagtg caaggatgcg aacaccaaga tccctgacaa ctgtctttgc 1920 gtgaacaatg atggcagcta ctcccttgag gcgaaggctg gatacgaatt ggtgaacggc 1980 gagtgcatca agatcgactt ctgcgcccgc ggcgcatgca actcgctggc ctcctgcaag 2040 gagaatgaag aaggcacagc ggcgatctgc acctgcctgc caggctacag cggcgacggc 2100 actgctgaag gccactgcaa cgacattgac gagtgtgcag gtcagaatga ctgtgctcct 2160 gccgagcagg gaggcatctg cgagaacact gtcggctcgt acacctgcaa gtgcaaagag 2220 gggtacaggc aagatggaaa ctcatgcact gagatcgacg agtgcgctga gggaacccac 2280 aactgccacc cttccgccac ctgcagcaac acccccggaa gcttcacctg ccaatgcaac 2340 agtggattca ctggcagcgg tgtggagtgc gaagacattg acgagtgctc aactgaggca 2400 gatgattgtg gtgcaaacac catctgcagc aacaccattg gtgctttcga gtgcaactgc 2460 cgtgaaggct atgaacgcgc agacgcaaag acgtgcgtcg acatcgacga atgcgcgaca 2520 ggcacacaca cttgctcgaa ccacgccacc tgcaccaata ccgatgggtc attcacatgc 2580 cagtgcaacc ccggcttcga aggtgacggc cacaagtgcg aggacatcga cttctgcggt 2640 gctggacagc acgactgcaa tgtgcatgcc gagtgctctg agagcgagga caacaccact 2700 ttcaagtgca cctgtataac agggtacgct ggagacggcc atggcgaggc aggctgccaa 2760 gacattgatg agtgcgcaga agaaaacatc tgcggaagca acgctgtctg cacaaacacc 2820 gcaggaagct accaatgcgc atgccgtgag ggcttcgttg catcagctga acagcagcag 2880 cagggaaccc cagcactggt ttgcgtggac gtcgacgagt gcagcgacgc ttcgaagaac 2940 acatgtgcca agccagccga cggaggcatt tgcacaaaca ctgaaggcag ctacgaatgc 3000 gcttgcaagc caggctacca aggtgacggc cacagctgcg cagacatcaa cgaatgcact 3060 gcacagggca cctgcggcga acacacaact tgcaagaaca cacccggatc cttccagtgc 3120 gactgcgttg agggattcga gcgcgctgat gaacgcacct gccgtgacat caacgagtgc 3180 gagacaggag cagtcgtgct gccaccgaac tccacctgcg tcaacactga aggcagctac 3240 gacttcgact gcgttgctgg gtaccgccgc actgatggag cttgtgtgaa gatcgacttc 3300 tgcaaggaga agggatgcaa cgcaaacgcc acatgccgcg aaaacgatgc cggcaccgag 3360 gccatctgca cttgcaagga aggctatgaa ggcagcggag aaggcgaaga tggttgccag 3420 aacatcaatg agtgcgagag aggcgaaccc tgcaaggact tcggcgaagg cggtgtttgc 3480 gtcgacacac caggatcatt cacttgcgag tgcgctgctg gattcattca acgccgctcc 3540 38* 144841-序列表.doc

201026322 gtttgccaag atgttgacga atgtctcgac ggaaagctga acacctgcgc tgccaccgga ggcgtctgct ccaacaccgt cggttccttc acctgctcgt gcgccagcgg cttcgaaggc gatggccaca cctgcaatga tgtcgacgaa tgcgcaacag cacagcacac ctgtgacccg aatgccactt gcgtcaacac cgaaggcagc ttcgagtgcc gctgcaatgc cggattcgag ggcgacggac acacctgcgc agacatcgac gaatgcgcag acccagccaa aaacacatgc gatacacaca agggtgtatg ccaaaacacc acagggtcct acacctgcgg ctgcaagacc ggattcagtc ttgcagctga cggaagcaca tgcgaaaacg tcgacgagtg cgcggcggga actgcaaact gcaacgagcg aagcttctgt aaggacacag agggttccta ccaatgcgag tgcaagaacg gctacaaggc tgcaggagag gactgtgtgg acgttgacga gtgcgaggct ggcgtgcatg gatgcagcga gcacgcaatc tgcacaaata cagacggcag ctactcctgc gaatgcatgg agggatacca gggagacggc aaggcttgcg agaagacagt cggcgtctgc gactccgctc cctgcggtgc ccacgccacc tgcgagcctg caggggacaa ctacacttgc acatgccacc caggctacga gatgcgcgaa ggagcctgcg ttgacatcga tgagtgcaca gcaggcagcc tcaactgcga ccctcatgcc atttgcacaa acaccgacgg ctccttcact tgcgtctgtg gcagcggcta taccggcctt ggcacatcct gcgaagacat cgacgagtgc gcgggtaacg cagcaggctg cgacatccac gccgtctgca cgaacactcc cggatcgttc aagtgcgagt gcaagagcgg cttcgaaggc gatggcacgc aatgcacgga gaaggtgttg ctccccggac agattcactg cgaagcctgg actgcatgga cagagtgtac cgacggcgcc aaaaccagca cacgcagctg ccttgcactg ccgcttaaga aggagatgcg cgcctgccct gcagctgact tctcccagtg cggagagttc actgaatgga ctgcctgccc tggaaccaac aataacctgt ctcataggcg cactgaaaga ttcggagaac ccggatgcga agatgcagag gaagtccgcg aatgcccaga tgaagagacc gagcagaaat gcggcgcctg gggtgagtgg accgcctgcg gcgacccatc ccctggcctg agaactcgcg cacgcgagaa ctgccccgat gtggtagagt tcgagcgttg cactatgccc agtgagcctg aggctggcga agtgactgag cctcacacag aaggaggagc cggagttggt ggcgaagtga ctgagcctga cacggaagaa ggagccggag ttggtggtga agtgcagccc ggtacagaag aaggagcagg agttggtggt gaagtgcagc ccggtacaga agaaggagcc ggagttggtg gtgaagtgca gcccggtaca gaagaaggag ccggagttgg tggtgaagtg cagcccggta cggaagaagg agccggcatt ggtggcgaag tgactgagcc tgacaccgaa ggaggagccg gagttagtgg cgaaccgacc 144841-序列表.doc •39· 3600 3660 3720 3780 3840 3900 3960 4020 4080 4140 4200 4260 4320 4380 4440 4500 4560 4620 4680 4740 4800 4860 4920 4980 5040 5100 5160 5220 5280 201026322 gaagaagagg gcaccgaaag caccggtcca tgcaaagagt tcggaccctg gacggcctgc 5340 aaggaggacg agaacggagt cggcatccaa cgccgtatgt gcgccggcag agaagacatc 5400 atcgaatcca gaatttgcac tgtcacggat gactgcggag aatggacccc ctggtcaact 5460 tgcactaacg gcagccaggc cagaaacaaa cgcttctgca ccaacgttag ggaagtccgt 5520 ctctgcggag ctgacattcc agttacagac ggatgcacgt ggagcgagtg gacttcttgc 5580 agtctagtca atgaggaggg cggctacttc cgcacgcgca catcctctga ctgcaacatg 5640 aatgaagtgc aggcctgctc tcccagcagc agcacaaccg cagacagcga aacagaaggc 5700 acctgctctg catggaaccc ctggacggag tgctcgaacg gccaccagac acgcaagtgt 5760 gccacaatgg aagcagaaga atcgcgcact tgcggagaga ctccagagaa ctgcggagaa 5820 ttcggcccct tcgaacccgc aaactgcacg gccggccaaa tggtcaccag gacgcgcacc 5880 tgcggagaaa ccgagcagaa ggaaaccaaa ctgtgcgacg tcagctccac cgaagaagga 5940 aaacaatgcg gtcagtgggg cccatggagc gaatgcaaca tccacctggg ctcagaggac 6000 aatgtgcgtg ttcgtgagga caccgcttgc ggcgtgacgg agtacgagga gtgcagcaag 6060 ccggcgaaca acgcctttgt ctgcacacct tggagtgaat gctcggacaa gaaggagcgg 6120 agaacgtgca ccatccgcaa aaacggtctt gttcagacac gtcaagaatt cagaacatgc 6180 agtgtagaca tcgccacaac ttgcggcgat ttcggcgcat ggtctgaatg caacgctgag 6240 ggcttgcatc agcgcagtct cgagaaatgc cccgacgtca tcgaggtcgc aacttgcggc 6300 agtgaggatt gcccgccatt cggcgagtgg actgaatgcg gcgttccaga ggagggcatg 6360 cgttctcgcc aacgcattga ctgcgttgaa tctgcagcct gccagtgcac agaagtggag 6420 agctgcttcg acaccgaatt gcaccccatt ccagcccccg gtacggaaac aggcgaagga 6480 gagggagaga ccgagacagg cgaaggcgaa actggtgaag caggtggcga ggaaggcgag 6540 caaacaggag aaggcgaagt gcagccccca gaagaagagc ttcctgggga gagtgtaact 6600 gagcctgagg agaagcctga ggaggagcta cctgaggagg aggttactga gcctgaggag 6660 aagcctgagg agggtgtgac tcagcctgag gagacacctg agcagcctgt tgagggtacc 6720 gaagaagagg gcaagcagga gtctgaggct gcccccgaaa ctcctgccgt ccagccaaaa 6780 ccagaggagg gtcacgaacg cccagaaccc gaagaggagg aggagaagaa ggaagaaggc 6840 ggcggcttcc caacagctgc agtggcagga ggtgttggtg gtgtgttgct catagctgct 6900 gtaggtggtg gtgttgcagc cttcactagc ggcggaggtg gcgctggcgc acaggaggca 6960 40- 144841-序列表.doc

201026322 gaacaggtcg agttcgaagg agaagatacc ggagcagcaa ctgccgagac acctgaagcc gatacagtta tcgacatcac agacgaagac gactactggg ccgacagcgg cgacattcag taa <210> 17 <211> 13891 <212> DNA <213>人造序列 <220> <223> 質體 <400> 17 cggatccctc gaggtcgacg aattcgagct cggccgactt ggccaattcg ccctatagtg agtcgtatta caattcactg gccgtcgttt tacaacgtcg tgactgggaa aaccctggcg ttacccaact taatcgcctt gcagcacatc cccctttcgc cagctggcgt aatagcgaag aggcccgcac cgatcgccct tcccaacagt tgcgcagcct gaatggcgaa tggacgcgcc ctgtagcggc gcattaagcg cggcgggtgt ggtggttacg cgcagcgtga ccgctacact tgccagcgcc ctagcgcccg ctcctttcgc tttcttccct tcctttctcg ccacgttcgc cggctttccc cgtcaagctc taaatcgggg gctcccttta gggttccgat ttagtgcttt acggcacctc gaccccaaaa aacttgatta gggtgatggt tcacgtagtg ggccatcgcc ctgatagacg gtttttcgcc ctttgacgtt ggagtccacg ttctttaata gtggactctt gttccaaact ggaacaacac tcaaccctat ctcggtctat tcttttgatt tataagggat tttgccgatt tcggcctatt ggttaaaaaa tgagctgatt taacaaaaat ttaacgcgaa ttttaacaaa atattaacgc ttacaatttc ctgatgcggt attttctcct tacgcatctg tgcggtattt cacaccgcat atggtgcact ctcagtacaa tctgctctga tgccgcatag ttaagccagc cccgacaccc gccaacaccc gctgacgcgc cctgacgggc ttgtctgctc ccggcatccg cttacagaca agctgtgacc gtctccggga gctgcatgtg tcagaggttt tcaccgtcat caccgaaacg cgcgagacga aagggcctcg tgatacgcct atttttatag gttaatgtca tgataataat ggtttcttag acgtcaggtg gcacttttcg gggaaatgtg cgcggaaccc ctatttgttt atttttctaa atacattcaa atatgtatcc gctcatgaga caataaccct gataaatgct tcaataatat tgaaaaagga agagtatgag tattcaacat ttccgtgtcg cccttattcc cttttttgcg gcattttgcc ttcctgtttt tgctcaccca gaaacgctgg tgaaagtaaa agatgctgaa gatcagttgg gtgcacgagt gggttacatc 144841-序列表.doc -41 - 7020 7080 7083 60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 201026322 gaactggatc tcaacagcgg taagatcctt gagagttttc gccccgaaga acgttttcca 1320 atgatgagca cttttaaagt tctgctatgt ggcgcggtat tatcccgtat tgacgccggg 1380 caagagcaac tcggtcgccg catacactat tctcagaatg acttggttga gtactcacca 1440 gtcacagaaa agcatcttac ggatggcatg acagtaagag aattatgcag tgctgccata 1500 accatgagtg ataacactgc ggccaactta cttctgacaa cgatcggagg accgaaggag 1560 ctaaccgctt ttttgcacaa catgggggat catgtaactc gccttgatcg ttgggaaccg 1620 gagctgaatg aagccatacc aaacgacgag cgtgacacca cgatgcctgt agcaatggca 1680 acaacgttgc gcaaactatt aactggcgaa ctacttactc tagcttcccg gcaacaatta 1740 atagactgga tggaggcgga taaagttgca ggaccacttc tgcgctcggc ccttccggct 1800 ggctggttta ttgctgataa atctggagcc ggtgagcgtg ggtctcgcgg tatcattgca I860 gcactggggc cagatggtaa gccctcccgt atcgtagtta tctacacgac ggggagtcag 1920 gcaactatgg atgaacgaaa tagacagatc gctgagatag gtgcctcact gattaagcat 1980 tggtaactgt cagaccaagt ttactcatat atactttaga ttgatttaaa acttcatttt 2040 taatttaaaa ggatctaggt gaagatcctt tttgataatc tcatgaccaa aatcccttaa 2100 cgtgagtttt cgttccactg agcgtcagac cccgtagaaa agatcaaagg atcttcttga 2160 gatccttttt ttctgcgcgt aatctgctgc ttgcaaacaa aaaaaccacc gctaccagcg 2220 gtggtttgtt tgccggatca agagctacca actctttttc cgaaggtaac tggcttcagc 2280 agagcgcaga taccaaatac tgttcttcta gtgtagccgt agttaggcca ccacttcaag 2340 aactctgtag caccgcctac atacctcgct ctgctaatcc tgttaccagt ggctgctgcc 2400 agtggcgata agtcgtgtct taccgggttg gactcaagac gatagttacc ggataaggcg 2460 cagcggtcgg gctgaacggg gggttcgtgc acacagccca gcttggagcg aacgacctac 2520 accgaactga gatacctaca gcgtgagcta tgagaaagcg ccacgcttcc cgaagggaga 2580 aaggcggaca ggtatccqgt aagcggcagg gtcggaacag gagagcgcac gagggagctt 2640 ccagggggaa acgcctggta tctttatagt cctgtcgggt ttcgccacct ctgacttgag 2700 cgtcgatttt tgtgatgctc gtcagggggg cggagcctat ggaaaaacgc cagcaacgcg 2760 gcctttttac ggttcctggc cttttgctgg ccttttgctc acatgttctt tcctgcgtta 2820 tcccctgatt ctgtggataa ccgtattacc gcctttgagt gagctgatac cgctcgccgc 2880 agccgaacga ccgagcgcag cgagtcagtg agcgaggaag cggaagagcg cccaatacgc 2940 42- 14484〗-序列表.doc 201026322

aaaccgcctc gactggaaag ccccaggctt caatttcaca agaatactca tagtataccc gaaacatggg tatgaaaaca gtccccatac taccgccctt acccttccgt caaacgtggg actgtctgca ttttcgaatg cgtagtacag cacgcaacac tatcggtctt cgtcgtgaaa ggctcaatct atgaccgatt ctccgaagag aggattaacg tagaccgaag gatccacaaa cgctgacacc ctggacaaaa ttcccggtac ttggtgtttc ccgccggtaa tccccgcgcg cgggcagtga tacactttat caggaaacag agcttatgca attccaagtg taacccagtt gccgctttta actttctgca atcctccaac tttcaggact ctctaacccg gatagtagag tggtatgtcc gttccagtcc ctgtctaaaa gccggctaaa tttcggcaca tccaacgcct gcccgaatcg caccccgacc cgacccaatc agttgagagc gcagcactca cagtaaatat accacagata aaagtccaaa agaagaacac gaacatctta ttggccgatt gcgcaacgca gcttccggct ctatgaccat tgcggccggc ctccggacag ctcacatcca ctccacgtat cacactcttc atgatatcct gccacgtaat actattctgg caagcgtgag gacagaaact accaggagca ctttgatagc gcactgtgca cccccgtgag ctcggagcat ggacatgcaa aactgaaaca aagggatatc gctcctgttt atttatactg ttacttagtt agatgttcca aatagaacta agacgatcta atttttactt cattaatgca attaatgtga cgtatgttgt gattacgcca cgcagctagc gacccacttt aagtctttag ccctccatga ccgaccatcc cagaagccgt ccgcatcatt tacaccgtct cgccggcaga tcccgaaatc gcgcgactgc ccatgtaata atcgatggta ctccatacca caagttttag ctgccgattt gaacgcatga aaaaaagaat ctctgaagat tcaaatggtt tgcagttcca ttcaagggaa ggtgctttat caaacaggat tgtatgattt gctggcacga gttagctcac gtggaattgt agctatttag gtatctgtaa gaaaccctca aaacttcggt gaattcttcg cccatgaatc ataccctcct tttatctaag atccccagaa atgtcctata aacatacaga aggcgtcata ccccggtata gacaccgtac cgtaatcttc agaatccggt cgcacacgaa tttagaccca ccttaccgcg ctctcacccc aatgtttaat ctgtttcctt cccgatgttc aaatactaag gaacctcgga tcaattctga caggtttccc tcattaggca gagcggataa gtgacactat tctcgactca ttaagcaagt actatcaatc cagaccgtct ccacaacctc gtaatccacg cctccggtaa atatatgtcc cagtgtaacc ccgtcatagt ttctgatgga agcacaatga tggtacgtca gatggcggtc ctcgccacgc agcacggagg ctcccgacag gagagattca gactgtgaca gctagaaaag attgccatga cctcgataac agtcgactcc agactcaaca aaaacacgtt 3000 3060 3120 3180 3240 3300 3360 3420 3480 3540 3600 3660 3720 3780 3840 3900 3960 4020 4080 4140 4200 4260 4320 4380 4440 4500 4560 4620 4680 •43- 144841-序列表.doc 201026322 tcctggttcg tgcacgtacg cggaaacgaa gttcgaaaaa tcagagttgg aattttccag 4740 ctatggttaa ctattaacta tatgacgtca cttagttaat tattaacgat ataaagtaaa 4800 tgattaactc gggctagtta atgattaact atacctggtt aatgattaac tgacttagtt 4860 aatgattaac tagaagttaa tgattaacta gaagttaatg attaactaga agttaatgat 4920 taatctatta cgtcactcgt tatatattaa ctagatttaa atgcggccgc gaattcacta 4980 gtgattaccg tattaccgcc atgcattagt tattaatagt aatcaattac ggggtcatta 5040 gttcatagcc catatatgga gttccgcgtt acataactta cggtaaatgg cccgcctggc 5100 tgaccgccca acgacccccg cccattgacg tcaataatga cgtatgttcc catagtaacg 5160 ccaataggga ctttccattg acgtcaatgg gtggagtatt tacggtaaac tgcccacttg 5220 gcagtacatc aagtgtatca tatgccaagt acgcccccta ttgacgtcaa tgacggtaaa 5280 tggcccgcct ggcattatgc ccagtacatg accttatggg actttcctac ttggcagtac 5340 atctacgtat tagtcatcgc tattaccatg gtgatgcggt tttggcagta catcaatggg 5400 cgtggatagc ggtttgactc acggggattt ccaagtctcc accccattga cgtcaatggg 5460 agtttgtttt ggcaccaaaa tcaacgggac tttccaaaat gtcgtaacaa ctccgcccca 5520 ttgacgcaaa tgggcggtag gcgtgtacgg tgggaggtct atataagcag agctggttta 5580 gtgaaccgtc agatccgcta gcgctaccgg actcagatcc gatatcaaat gacttgccag 5640 acttacaact tgtttgttct gtctgtcatc atgatttatt atggacatac tgcaagtagt 5700 ctaaatctcc ccattccagc ccccggtacg gaaacaggcg aaggagaggg agagaccgag 5760 acaggcgaag gcgaaactgg tgaagcaggt ggcgaggaag gcgagcaaac aggagaaggc 5820 gaagtgcagc ccccagaaga agagcttcct ggggagagtg taactgagcc tgaggagaag 5880 cctgaggagg agctacctga ggaggaggtt actgagcctg aggagaagcc tgaggagggt 5940 gtgactcagc ctgaggagac acctgagcag cctgttgagg gtaccgaaga agagggcaag 6000 caggagtctg aggctgcccc cgaaactcct gccgtccagc caaaaccaga ggagggtcac 6060 gaacgcccag aacccgaaga ggaggaggag aagaaggaag aaggcggcgg cttcccaaca 6120 gctgcagtgg caggaggtgt tggtggtgtg ttgctcatag ctgctgtagg tggtggtgtt 6180 gcagccttca ctagcggcgg aggtggcgct ggcgcacagg aggcagaaca ggtcgagttc 6240 gaaggagaag ataccggagc agcaactgcc gagacacctg aagccgatac agttatcgac 6300 atcacagacg aagacgacta ctgggccgac agcggcgaca ttcagtgaag atctaggccg 6360 44. 144841-序列表.doc 201026322

cgactctaga ctcccacacc tttattgcag gcattttttt attcccgcgg gagctactga cactcatgca cgttgcctag catttacctg atccgactcc attggctctc gcaggtagac ctctccatac tcaatgctgt ccttggcacc gtacaggcga ccccctgtac accaccccct atggaatact acctttgcca gagagcctag ctttccattc cggatgtacc ggaagcctgc catcccctcg aagagggccc aaggtggcgc accctccagc tttcgccgac tcataatcag tccccctgaa cttataatgg cactgcattc ccgctagtga atatgcatga tatgcatgca caacgttaat aactttgttc gcctcccccg aatgacgtag ccggaacacc cggtaaatat gattctgcct cccctgtaca ccacccccta acccccctgt atggacaccc gccccctagt ctatggagct ccaatggggt gctcatgggg acgcccagtt tcctcagcct tgatgcaatt tccagatggc caccggagat agggggtctt tttttaacca ccataccaca cctgaaacat ttacaaataa tagttgtggt cgtcatgagt gagcctcata ttggttaaag gatttacctg tttatgttta ttatacatta ttcaggttaa attcccatcc tttattccat caaattcaat cccccctgta tggacacccc acaggcgacc ccctgtacac gtctcctgct ccttcacgag gctttggaat atcacatggg acgggtccga atcacagaag gggggtggag gctacagagt aggcaagacc cagtaccacc aaccccctat tttgtagagg aaaatgaatg agcaatagca ttgtccaaac aaatcattaa catatgcatg agtaacccta ctgacgtggc ttcaccatgg acgatggcgt ccataagcca ggacctccat ttaatccaat ggtgattttc caggcgacca cctgtacagg accccctatg ccccctgtac gtatgggacc ggggcgccat ccggatatcc aagcgcgtca agctccgccc ctcctctgtt tctaacccta atgcgggtgc tgtacggtga gatttaaaaa atttgtggat ttttacttgc caattgttgt tcacaaattt tcatcaatgt ccttcatgca gaacttatgc tgactcagtg agctccgcct caacgctacc gataggcqga gaaccgccta agagtgcgga cgaataaatc tttaataaaa ccccctatgg cgaccacccc gacacccccc attttctccc cctatgatgt tgaaattggg ccgtccaact tgtaccgtgg ccgttactag tcgccgcccg tgggcctacc gcattgcccc agcccctcaa agacacttcc ggaagattgg tttaaaaaac tgttaacttg cacaaataaa atctaatcga tatgcatgag atattcacga tgtatgttta ccaggtaaat atatatggac gctctccccc tataggtaga cctctacggg aataatcaac agcccacccc acacccccct ctatggacac tgtacaggcg ataggctaca gggcgccatt agaccgcata cttcaactgc ccacacctac gaaacaggcc ctttaatacc tgtatatacc tgacggccag gaccccggag agattgggct caccgcgcca 6420 6480 6540 6600 6660 6720 6780 6840 6900 6960 7020 7080 7140 7200 7260 7320 7380 7440 7500 7560 7620 7680 7740 7800 7860 7920 7980 8040 8100 • 45- 144841·序列表.doc 201026322 gaaggggcgg agagttggat cgttacgctc cacccccagc cttcgactcc gccccccaca gggaccaaga ctccgcccac tctgcaggac cttgcccggc tgggcgtggt cgagcaatgc ctcaagatga ggaggcgtgg cctggaccgc aggcaccacc cctatgctca ataaaccaat cagattccag tacttggctc ctcctatttg tgggcgggac tttgcacgcc tcttagcggc gccccctggc ggccgagggc cgccactgca cccctgtcgg acttagtctc tggcgcgggg ccggtcaatc attaacccga cggccggcac gggcgccccc tggcggcggg cgcccgccac tgcaccctgc gcctcttagc ggcgccccct ggcggccgag ggccgccact gcacccctgt cggacttagt ctctggcgcg gggccggtca atcattaacc cgacggccgg cacgggcgcc ccctggcggc gggcgcccgc cactgcaccc tgcgcctctt agcggcgccc cctggcggcc gagggccgcc actgcacccc tgtcggactt agtctctggc gcggggccgg tcaatcatta acccgacggc cggcacgggc gccccctggc ggcgggcgcc cgccactgca ccctgcgcct cttagcggcg ccccctggcg gccgagggcc gccactgcac ccctgtcgga cttagtctct ggcgcggggc cggtcaatca ttaacccgac ggccggcacg ggcgccccct ggcggcgggc gcccgccact gcaccctgcg cctcttagcg gcgccccctg gcggccgagg gccgccactg cacccctgtc ggacttagtc tctggcgcgg ggccggtcaa tcattaaccc gacggccggc acgggcgccc cctggcggcg ggcgcccgcc actgcaccct gcgcctctta gcggcgcccc ctggcggccg agggccgcca ctgcacccct gtcggactta gtctctggcg cggggccggt caatcattaa cccgacggcc ggcacgggcg ccccctggcg gcgggcgccc gccactgcac cctgcgcctc ttagcggcgc cccctggcgg ccgagggccg ccactgcacc cctgtcggac ttagtctctg gcgcggggcc ggtcaatcat taacccgacg gccggcacgg gcgccccctg gcggcgggcg cccgccactg caccctgcgc ctcttagcgg cgccccctgg cggccgaggg ccgccactgc acccctgtcg gacttagtct ctggtgcggg cccgagtcac ggatggagta gtttcccttg cggccagcag agggcatacc tttattctca gctcgcaagt ctcaatagat acacacctca tcggtgtaca gcgtgtccgc gtagcgcagc cccgtgcacc tcacccaacc acctatatcg cgaacggctc cggtactcac tatgtatttc ccgacgcgat agttcggatc attgcaccac ttattcaagt acattctaaa ccattgccct tcggggactt ggcgctgata aaaacattcc ctgaagtacc gtttcaccgc gcgagaacac ttatacaagt atctgtcccg caggttgaac atggttaagc acagaagcaa ggtcatgtgg caggaacaag aaccgccagg 144841-序列表.doc -46- 8160 8220 8280 8340 8400 8460 8520 8580 8640 8700 8760 8820 8880 8940 9000 9060 9120 9180 9240 9300 9360 9420 9480 9540 9600 9660 9720 9780 201026322

ctgcaacccc cgggtaccat ccacggcggc acacaggtac gctccactta tgcgctccag cccgacacta tctttatcat cctgaccgct gccatcgcgt tttaatctta caagagtggc agctacccgt tttgacctcc acggagagtg ccattccgcc ccattctacg agtgcatcgc agagcgggga gtcggatatc gtcagtaata cgatcctttc gttcctggcc gctgtgtatg tcatctctag gtgatgggaa caaatttcta cctctataac tcctgtgtat acgcagtatc agctgcttca acggcaactc tgtgacacct cggacagccg gcggaaacag tccagatttc ccatacgccc tccacgtaca tcctctcgtg cgacccactc ggctagggcg cgggaccctt gtcccaacga aatatccgta catcgagcac gctgatgact gctcgataac caacatccga ggatggacat tcccctccct cccactcctt atcttagccc cgaaacgagc gacaaataaa atgatcggtg ggtccaggga cccgctgtga agacaaacgg ccatcggatg cgtcttgaac cgaagatcac tgcgcgtacg gcgatgcgca gggaatatat gagacctgct aggtgactca caaggcggca cctatgtctc caacctcact cgataccaag taaaggccgc ttctgccata cgccatcagc ctcagccgac aacaattccc gatagttcca gaagtaaccg tccaccaatt caccgcaaca tagaacctgc ttattcttct gcgtttttat cttctacttg ctgcttatgg cataaaaaag atcccagcac aatcctggtg accgatctcc cagcttccag gtacagtggc cgaaaaggga ctgcgaacga aagccaactc gacaccaccg gtcaaatccc catgaaagca acgcggaccg gtgcacccgc attgcgatgt gtagaaatga ctgacttact gtaagaggtg accacacatt gtccgcggac ttacgtacgc tccgaacgga ccgcgactct gatccgcaca cgctccctac aaccgtcatc ttgtaacccg aaatgagttt accgagatag agatcaaatt tcccttccga tacagacaaa gagttcgcct aacactgcat atgttccgga acccgaccct aaaataaatc ttatctttat gaacacgcga ttatataaag ccatgctgcg cgcaacaggt agaccaaagg gggagaaagg acgagaccag tctccgaaga agcccttccc ttcagatccc cgagagccgc ctggtacact ttctgaggta cgtcgtgccg gtcaggatcc ggcgcggata ggcggctacg tacagagaat atttttcccc atggaaggga tacatctccg tacgcaaact cggaatcctg cctcgtggaa cgtgcataca tacatctacg cccccgtaac tgcgccgttg tgttgccacg cctcgccctc accgttttta ccccgtatcc cggtaagtcc aacctcaaag ctacgggtac tgtcaccttt tagctccggc tacctttgtt ctccgccctc atgagcttgc gacaccttag gcagttacct ctaaaccgag caggctttca tgactacggt ccctcagaaa gttttggcgg ctgcctgttt cgggggcatt gtaaagatca gactagcagt agttcccaac 9840 9900 9960 10020 10080 10140 10200 10260 10320 10380 10440 10500 10560 10620 10680 10740 10800 10860 10920 10980 11040 11100 11160 11220 11280 11340 11400 11460 11520 -47- 144841·序列表.doc 201026322 gcattcattt atttgaatat ttacacattt acacactgta cacggtcatt cgatttcatt 11580 gccaacagaa agactaatcg atgtcccctt tcagtatgtg gactgtgaca gcagggtctt 11640 cgctcacttc actgtccgtg tcatcctctg tacgcccaca cagcatcgcc cgatagtgaa 11700 agctgacact cagcatggag aaccaaacag cagggagcaa tgtgagaggc agccaacaca 11760 gggaaacttt tttcttctcc cttcagaccc cctcccgtcg agacattgtg atggactact 11820 ggtacttcgc cctgatgttc ccaggtagga acgaccgtaa gggtgaacct ctgaacgctg 11880 ttctgcatca ggtcccgtgt cacttgatac atgccggaat ccgcgccact taagttcttg 11940 atagtcacgc agttctcgga tctgttatac gacagcctcc cttgatacgc cccgtagacc 12000 atcggctcct tcagcgcctg gtagtcctgc agcacgaact tgcgcacggc gcccgcatcc 12060 accgcggtca cttcccattc tctgatctga aaactctcgg tagaaccgca cagagtcaca 12120 gcgtcccgtt cgttagccac gacccgggat acgttctcca ttttcaccgt accgttctcg 12180 ggaagccccg acacggtgaa atatacagtc tcgggcttgg aacccaccgc gaatgattgt 12240 gatagccagc acccgttatt agctttgatt gcttcgacat gcattgaatt acaggatgaa 12300 tttagccgcg ccctcgtcat atagcccaga tccagcccct ctttgatcga aggaatcacg 12360 aaagccactt tctgccatct gttacagacc ttccccggag cgtggtacca tagcagcagc 12420 gtgaaatcag cgcatctgcc cgtagtcaga gtcacctcct tacggcccct cacggcggca 12480 ccggagacgg tggcagacaa gcagaggacg gcggcacaca gcaggagcga gccatgactg 12540 cggagtccga gccgagcggt gtgctgctcg atcctccgct acctttttat gcaccaccca 12600 cctttattgt cggtcacaca ttaattcgcc ccgtcagcaa acacgtgagt aacgtatgcc 12660 gttgttctga tcggtcagca ccgcgcccgc gacgtttgaa cgaagacgta cggtgacttc 12720 cgcataggga gctataagga agtcagttag gaaaaatcga tcctcgacac accccacgga 12780 aacgctgacc taggcgaaac ctatcaggta aaacattcac tatacgcacc acgcgttgaa 12840 taaacagtta acccatacgg ggtatatatt ctaccccgac tgcagtcagc gatcaggacg 12900 cgtccacaga gagatccgtg cgcgaccgcc tgtccgggct cctctagaat caagaatcca 12960 taaccatgca ggtaagaact cctttctctt cctcctattt gatccgagcc tttttttacg 13020 ctactcaacc gcaacccgtt tcttccacca cagttactgc tccttctatg cctttgccct 13080 ctgatgggca gcggaacact agcacccctc gtctcggtag acaactccta ctccgtgttc 13140 ggatccggca aacccccact ttctacctcc gaatccgcca ccaccgccta ctccgaaacc 13200 -48- 144841-序列表.doc 201026322

gcggttcccg aaaactctta cccccatccg aagccaccac gccctgcgac gacttgctgg aagaggactg ctggttcgcg gagagcagcg cggactacgc acccataccc tggaacacca aagagaatac gtccgtggtt atcccggcac aggtagccgt ctcgccatcg cagtccacta ctccccctgc ggtcatgctc ggcatcgcac agaaagccgt aaaccgcgga gcctccagca aggatcacac gtcccatatc gccacgggcg ttaccgtagc cggaatagtc atactcattg ccctcgtcat catagccttc cgtacaaagg ttaaggaacc gcgcccaacc cgctccatct acctgggcgt gcctccccct gacgttagac cttaccgtat aatagagcaa taaagatttg gccgccacat cgcacaagaa tctttccgtg tcctgtgtct gtctcggcgc cgtccgcggg aaaaggttaa cgcggaatct atttccctgc ggatttccgt atccgtcagt tcctgggcgt cgccgaaaat gctcacggaa gacacgccca tgcgggcgtg gctaaccgat gattcgaaaa acgattcgcg agcgccctct gccggcggcg gcgggaatag ggggtgtggg gggagtgtat tttaagtaga tatatataga tgatgctaga g 13260 13320 13380 13440 13500 13560 13620 13680 13740 13800 13860 13891 <210> 18 <211> 84 <212> DNA <213> 人造序列 <220> <223> γ干擾素之分泌信號 <400> 18 atgacttgcc agacttacaa cttgtttgtt ctgtctgtca tcatgattta ttatggacat actgcaagta gtctaaatct cccc 60 84

<210> 19 <211> 28 <212> PRT <213>人造序列 <220> <223> γ干援素之分泌信號 <400> 19 Met Thr Cys Gin Thr Tyr Asn Leu Phe Val Leu Ser Val lie Met lie 15 10 15

Tyr Tyr Gly His Thr Ala Ser Ser Leu Asn Leu Pro 20 25 144841·序列表.doc -49- 201026322 <210> 20 <211> 636 <212> DNA <213>巨型艾美球蟲 <400> 20 attccagccc ccggtacgga aacaggcgaa ggagagggag agaccgagac aggcgaaggc 60 gaaactggtg aagcaggtgg cgaggaaggc gagcaaacag gagaaggcga agtgcagccc 120 ccagaagaag agcttcctgg ggagagtgta actgagcctg aggagaagcc tgaggaggag 180 ctacctgagg aggaggttac tgagcctgag gagaagcctg aggagggtgt gactcagcct 240 gaggagacac ctgagcagcc tgttgagggt accgaagaag agggcaagca ggagtctgag 300 gctgcccccg aaactcctgc cgtccagcca aaaccagagg agggtcacga acgcccagaa 360 cccgaagagg aggaggagaa gaaggaagaa ggcggcggct tcccaacagc tgcagtggca 420 ggaggtgttg gtggtgtgtt gctcatagct gctgtaggtg gtggtgttgc agccttcact 480 agcggcggag gtggcgctgg cgcacaggag gcagaacagg tcgagttcga aggagaagat 540 accggagcag caactgccga gacacctgaa gccgatacag ttatcgacat cacagacgaa 600 gacgactact gggccgacag cggcgacatt cagtga 636 <210> 21 <211> 211 <212> PRT <213>巨型艾美球蟲 <400> 21 lie Pro Ala Pro Gly Thr Glu Thr Gly Glu Gly Glu Gly Glu Thr Glu 15 10 15

Thr Gly Glu Gly Glu Thr Gly Glu Ala Gly Gly Glu Glu Gly Glu Gin 20 25 30

Thr Gly Glu Gly Glu Val Gin Pro Pro Glu Glu Glu Leu Pro Gly Glu 35 40 45

Ser Val Thr Glu Pro Glu Glu Lys Pro Glu Glu Glu Leu Pro Glu Glu 50 55 60

Glu Val Thr Glu Pro Glu Glu Lys Pro Glu Glu Gly Val Thr Gin Pro 65 70 75 80

Glu Glu Thr Pro Glu Gin Pro Val Glu Gly Thr Glu Glu Glu Gly Lys •50· 144841-序列表.doc 201026322 85 90 95

Gin Glu Ser Glu Ala Ala Pro Glu Thr Pro Ala Val Gin Pro Lys Pro 100 105 110

Glu Glu Gly His Glu Arg Pro Glu Pro Glu Glu Glu Glu Glu Lys Lys 115 120 125

Glu Glu Gly Gly Gly Phe Pro Thr Ala Ala Val Ala Gly Gly Val Gly 130 135 140

Gly Val Leu Leu lie Ala Ala Val Gly Gly Gly Val Ala Ala Phe Thr 145 150 155 160

Ser Gly Gly Gly Gly Ala Gly Ala Gin Glu Ala Glu Gin Val Glu Phe 165 170 175

Glu Gly Glu Asp Thr Gly Ala Ala Thr Ala Glu Thr Pro Glu Ala Asp 180 185 190

Thr Val lie Asp lie Thr Asp Glu Asp Asp Tyr Trp Ala Asp Ser Gly 195 200 205

Asp lie Gin 210 <210> 22 <211> 13869 <212> DNA <213>人造序列 <220> <223>質體 <400> 22 cggatccctc gaggtcgacg aattcgagct cggccgactt ggccaattcg ccctatagtg agtcgtatta caattcactg gccgtcgttt tacaacgtcg tgactgggaa aaccctggcg ttacccaact taatcgcctt gcagcacatc cccctttcgc cagctggcgt aatagcgaag aggcccgcac cgatcgccct tcccaacagt tgcgcagcct gaatggcgaa tggacgcgcc ctgtagcggc gcattaagcg cggcgggtgt ggtggttacg cgcagcgtga ccgctacact tgccagcgcc ctagcgcccg ctcctttcgc tttcttccct tcctttctcg ccacgttcgc cggctttccc cgtcaagctc taaatcgggg gctcccttta gggttccgat ttagtgcttt -51 - 144841-序列表.doc 201026322 acggcacctc gaccccaaaa aacttgatta gggtgatggt tcacgtagtg ggccatcgcc 480 ctgatagacg gtttttcgcc ctttgacgtt ggagtccacg ttctttaata gtggactctt 540 gttccaaact ggaacaacac tcaaccctat ctcggtctat tcttttgatt tataagggat 600 tttgccgatt tcggcctatt ggttaaaaaa tgagctgatt taacaaaaat ttaacgcgaa 660 ttttaacaaa atattaacgc ttacaatttc ctgatgcggt attttctcct tacgcatctg 720 tgcggtattt cacaccgcat atggtgcact ctcagtacaa tctgctctga tgccgcatag 780 ttaagccagc cccgacaccc gccaacaccc gctgacgcgc cctgacgggc ttgtctgctc 840 ccggcatccg cttacagaca agctgtgacc gtctccggga gctgcatgtg tcagaggttt 900 tcaccgtcat caccgaaacg cgcgagacga aagggcctcg tgatacgcct atttttatag 960 gttaatgtca tgataataat ggtttcttag acgtcaggtg gcacttttcg gggaaatgtg 1020 cgcggaaccc ctatttgttt atttttctaa atacattcaa atatgtatcc gctcatgaga 1080 caataaccct gataaatgct tcaataatat tgaaaaagga agagtatgag tattcaacat 1140 ttccgtgtcg cccttattcc cttttttgcg gcattttgcc ttcctgtttt tgctcaccca 1200 gaaacgctgg tgaaagtaaa agatgctgaa gatcagttgg gtgcacgagt gggttacatc 1260 gaactggatc tcaacagcgg taagatcctt gagagttttc gccccgaaga acgttttcca 1320 atgatgagca cttttaaagt tctgctatgt ggcgcggtat tatcccgtat tgacgccggg 1380 caagagcaac tcggtcgccg catacactat tctcagaatg acttggttga gtactcacca 1440 gtcacagaaa agcatcttac ggatggcatg acagtaagag aattatgcag tgctgccata 1500 accatgagtg ataacactgc ggccaactta cttctgacaa cgatcggagg accgaaggag 1560 ctaaccgctt ttttgcacaa catgggggat catgtaactc gccttgatcg ttgggaaccg 1620 gagctgaatg aagccatacc aaacgacgag cgtgacacca cgatgcctgt agcaatggca 1680 acaacgttgc gcaaactatt aactggcgaa ctacttactc tagcttcccg gcaacaatta 1740 atagactgga tggaggcgga taaagttgca ggaccacttc tgcgctcggc ccttccggct 1800 ggctggttta ttgctgataa atctggagcc ggtgagcgtg ggtctcgcgg tatcattgca 1860 gcactggggc cagatggtaa gccctcccgt atcgtagtta tctacacgac ggggagtcag 1920 gcaactatgg atgaacgaaa tagacagatc gctgagatag gtgcctcact gattaagcat 1980 tggtaactgt cagaccaagt ttactcatat atactttaga ttgatttaaa acttcatttt 2040 taatttaaaa ggatctaggt gaagatcctt tttgataatc tcatgaccaa aatcccttaa 2100 52- 144841 ·序列表.doc 201026322

cgtgagtttt gatccttttt gtggtttgtt agagcgcaga aactctgtag agtggcgata cagcggtcgg accgaactga aaggcggaca ccagggggaa cgtcgatttt gcctttttac tcccctgatt agccgaacga aaaccgcctc gactggaaag ccccaggctt caatttcaca agaatactca tagtataccc gaaacatggg tatgaaaaca gtccccatac taccgccctt acccttccgt caaacgtggg actgtctgca ttttcgaatg cgtagtacag cgttccactg ttctgcgcgt tgccggatca taccaaatac caccgcctac agtcgtgtct gctgaacggg gatacctaca ggtatccggt acgcctggta tgtgatgctc ggttcctggc ctgtggataa ccgagcgcag tccccgcgcg cgggcagtga tacactttat caggaaacag agcttatgca attccaagtg taacccagtt gccgctttta actttctgca atcctccaac tttcaggact ctctaacccg gatagtagag tggtatgtcc gttccagtcc agcgtcagac aatctgctgc agagctacca tgttcttcta atacctcgct taccgggttg gggttcgtgc gcgtgagcta aagcggcagg tctttatagt gtcagggggg cttttgctgg ccgtattacc cgagtcagtg ttggccgatt gcgcaacgca gcttccggct ctatgaccat tgcggccggc ctccggacag ctcacatcca ctccacgtat cacactcttc atgatatcct gccacgtaat actattctgg caagcgtgag gacagaaact accaggagca cccgtagaaa ttgcaaacaa actctttttc gtgtagccgt ctgctaatcc gactcaagac acacagccca tgagaaagcg gtcggaacag cctgtcgggt cggagcctat ccttttgctc gcctttgagt agcgaggaag cattaatgca attaatgtga cgtatgttgt gattacgcca cgcagctagc gacccacttt aagtctttag ccctccatga ccgaccatcc cagaagccgt ccgcatcatt tacaccgtct cgccggcaga tcccgaaatc gcgcgactgc agatcaaagg aaaaaccacc cgaaggtaac agttaggcca tgttaccagt gatagttacc gcttggagcg ccacgcttcc gagagcgcac ttcgccacct ggaaaaacgc acatgttctt gagctgatac cggaagagcg gctggcacga gttagctcac gtggaattgt agctatttag gtatctgtaa gaaaccctca aaacttcggt gaattcttcg cccatgaatc ataccctcct tttatctaag atccccagaa atgtcctata aacatacaga aggcgtcata atcttcttga gctaccagcg tggcttcagc ccacttcaag ggctgctgcc ggataaggcg aacgacctac cgaagggaga gagggagctt ctgacttgag cagcaacgcg tcctgcgtta cgctcgccgc cccaatacgc caggtttccc tcattaggca gagcggataa gtgacactat tctcgactca ttaagcaagt actatcaatc cagaccgtct ccacaacctc gtaatccacg cctccggtaa atatatgtcc cagtgtaacc ccgtcatagt ttctgatgga 2160 2220 2280 2340 2400 2460 2520 2580 2640 2700 2760 2820 2880 2940 3000 3060 3120 3180 3240 3300 3360 3420 3480 3540 3600 3660 3720 3780 3840 -53· 144841-序列表.doc 201026322 cacgcaacac ctgtctaaaa ctttgatagc ccatgtaata ccccggtata agcacaatga 3900 tatcggtctt gccggctaaa gcactgtgca atcgatggta gacaccgtac tggtacgtca 3960 cgtcgtgaaa tttcggcaca cccccgtgag ctccatacca cgtaatcttc gatggcggtc 4020 ggctcaatct tccaacgcct ctcggagcat caagttttag agaatccggt ctcgccacgc 4080 atgaccgatt gcccgaatcg ggacatgcaa ctgccgattt cgcacacgaa agcacggagg 4140 ctccgaagag caccccgacc aactgaaaca gaacgcatga tttagaccca ctcccgacag 4200 aggattaacg cgacccaatc aagggatatc aaaaaagaat ccttaccgcg gagagattca 4260 tagaccgaag agttgagagc gctcctgttt ctctgaagat ctctcacccc gactgtgaca 4320 gatccacaaa gcagcactca atttatactg tcaaatggtt aatgtttaat gctagaaaag 4380 cgctgacacc cagtaaatat ttacttagtt tgcagtgcca ctgtttccat attgccatga 4440 ctggacaaaa accacagata agatgtgcca ttcaagggaa cccgatgttc cctcgataac 4500 ttcccggtac aaagtccaaa aatagaacta ggtgctttat aaatactaag agtcgactcc 4560 ttggtgtttc agaagaacac agacgatcta caaacaggat gaacctcgga agactcaaca 4620 ccgccggtaa gaacatctta atttttactt tgtatgattt tcaattctga aaaacacgtt 4680 tcctggttcg tgcacgtacg cggaaacgaa gttcgaaaaa tcagagttgg aattttccag 4740 ctatggttaa ctattaacta tatgacgtca cttagttaat tattaacgat ataaagtaaa 4800 tgattaactc gggctagtta atgattaact atacctggtt aat.gattaac tgacttagtt 4860 aatgattaac tagaagttaa tgattaacta gaagttaatg attaactaga agttaatgat 4920 taatctatta cgtcactcgt tatatattaa ctagatttaa atgcggccgc tgctcgtgac 4980 cagcccaaaa caaagcatgc tatttgggtg gcataacgtt tgttttcgac ttgtttgtcc 5040 aggctttcta ggtggagtac ggtgagcgcc tccggtggcg cgtcgaggaa tcgaacgggc 5100 ttgaatgcgg tctcggtggc tcgcgagtgg gcggggtttg tttctgccgg cggtcgcccg 5160 tcatctatat aaaggccgca ggtgagcgct tcttccagct cctgatcgac ttcggagagg 5220 tctgcctcct cggcggatcc tgtccgagcc atcccgcttg aggatcgttt tcgaccgcgc 5280 ggacgagccg ctgagtgtct agctcgccaa aggcttcgac gaagaggttg agccaatcgt 5340 cttcagcgaa cacttccgat ccaggtgatg tagatatcaa atgacttgcc agacttacaa 5400 cttgtttgtt ctgtctgtca tcatgattta ttatggacat actgcaagta gtctaaatct 5460 taccactcct gttgagaacc aggttcaccc ttacagcgag atgagtacct accaggaggg 5520 54- 144841·序列表-doc

201026322 gagtgccccg ggggctccgg aggacaccac caccaccact acgtcgtccc ctgtttccga tggagccgag cgttggcttg agagctttgt tcgtgctgtg cagcgccagc tgcagcttca ggaccaaatg atgcgtcagc tcatgaggga cattcaggag tacctgagca ctgcgttcaa ctgggcagag aaccagtcta ctgcctacac ccgtgttacc gagatgatgg acatgatctc caacagaatg aacgctgcca gggacagctc aaacgaactc atgaccacta gcgacaccac agaccccgag accctccgcc gtgcaactcg caagtacatg aaggaggttc gcgttcagga cgtcctggta gatgctctct gggcctctct ccgcggtgta cagacagctg cctggatgaa tggagtgacc gctattgaga aggaggagac gactcccatg gctagccgcg ctgctgagga gttcctccac cgcatgtacc ataacctgag ggcagcaggt atgtctgaag aagatgttgc caagttcatc cctagagccg agtacaaccc ctccgagcag tcaagaaata tgggcagaaa gggcaggagc ttctactacg gcggctatcc cagctactac aactccccct actacagcta cagcagctac cccagctact acaactacag ctacccgtca tacagctaca gcagctaccc cagctactac cgctacagca gctaccccta ctacaactac agctatccca gctactacaa ctacggcagc tacccctact acagttatag cagctacccc agctggtact ggcgccgtct ccgctctttg gcaacagcaa cttgcccaga ctgccctcct ctcaccactc ccagcatgat cccaacttaa agatcttatt aaagcagaac ttgtttattg cagcttataa tggttacaaa taaagcaata gcatcacaaa tttcacaaat aaagcatttt tttcactgca ttctagttgt ggtttgtcca aactcatcaa tgtatctaat catgtctggt cgacgcggcc gctagtgacg tcatgagtaa atcattaacc ttcatgcata tgcatgagga gctactgaat atgcatgaga gcctcataca tatgcatgga acttatgcat attcacgaca ctcatgcata tgcatgcatt ggttaaagag taaccctatg actcagtgtg tatgtttacg ttgcctagca acgttaatga tttacctgct gacgtggcag ctccgcctcc aggtaaatca tttacctgaa ctttgttctt tatgtttatt caccatggca acgctaccat atatggacat ccgactccgc ctcccccgtt atacattaac gatggcgtga taggcggagc tctcccccat tggctctcaa tgacgtagtt caggttaacc ataagccaga accgcctata taggtagagc aggtagaccc ggaacaccat tcccatccgg acctccatag agtgcggacc tctacgggct ctccataccg gtaaatattt tattccattt aatccaatcg aataaatcaa taatcaactc aatgctgtga ttctgcctca aattcaatgg tgattttctt taataaaaag cccacccccc ttggcacccc cctgtacacc cccctgtaca ggcgaccacc ccctatggac acccccctgt acaggcgacc accccctatg 144841-序列表.doc -55- 5580 5640 5700 5760 5820 5880 5940 6000 6060 6120 6180 6240 6300 6360 6420 6480 6540 6600 6660 6720 6780 6840 6900 6960 7020 7080 7140 7200 7260 201026322 gacacccccc tgtacaggcg accaccccct atggacaccc ccctgtacac ccccctgtac aggcgaccac cccctatgga cacccccctg tacaggcgac caccccctat ggacaccccc ctgtacaccc ccctgtacat tttctcccat aggctacaat ggaatactgc cccctagtgt ctcctgctgt atgggacccc tatgatgtgg gcgccattac ctttgccact atggagctcc ttcacgaggg ggcgccattg aaattgggag accgcataga gagcctagcc aatggggtgc tttggaatcc ggatatcccc gtccaactct tcaactgcct ttccattcgc tcatggggat cacatgggaa gcgcgtcatg taccgtggcc acacctaccg gatgtaccac gcccagttac gggtccgaag ctccgccccc gttactagga aacaggccgg aagcctgctc ctcagcctat cacagaagct cctctgtttc gccgcccgct ttaataccca tcccctcgtg atgcaattgg gggtggagtc taaccctatg ggcctacctg tatataccaa gagggccctc cagatggcgc tacagagtat gcgggtgcgc attgcccctg acggccagaa ggtggcgcca ccggagatag gcaagacctg tacggtgaag cccctcaaga ccccggagac cctccagcag ggggtcttca gtaccaccga tttaaaaaag acacttccag attgggcttt tcgccgactt tttaaccaaa ccccctatat ttgtggatgg aagattggca ccgcgccaga aggggcggag agttggatcg ttacgctcca cccccagcct tcgactccgc cccccacagg gaccaagact ccgcccactc tgcaggacct tgcccggctg ggcgtggtcg agcaatgcct caagatgagg aggcgtggcc tggaccgcag gcaccacccc tatgctcaat aaaccaatca gattccagta cttggctcct cctatttgtg ggcgggactt tgcacgcctc ttagcggcgc cccctggcgg ccgagggccg ccactgcacc cctgtcggac ttagtctctg gcgcggggcc ggtcaatcat taacccgacg gccggcacgg gcgccccctg gcggcgggcg cccgccactg caccctgcgc ctcttagcgg cgccccctgg cggccgaggg ccgccactgc acccctgtcg gacttagtct ctggcgcggg gccggtcaat cattaacccg acggccggca cgggcgcccc ctggcggcgg gcgcccgcca ctgcaccctg cgcctcttag cggcgccccc tggcggccga gggccgccac tgcacccctg tcggacttag tctctggcgc ggggccggtc aatcattaac ccgacggccg gcacgggcgc cccctggcgg cgggcgcccg ccactgcacc ctgcgcctct tagcggcgcc ccctggcggc cgagggccgc cactgcaccc ctgtcggact tagtctctgg cgcggggccg gtcaatcatt aacccgacgg ccggcacggg cgccccctgg cggcgggcgc ccgccactgc accctgcgcc tcttagcggc gccccctggc ggccgagggc cgccactgca cccctgtcgg acttagtctc 144841-序列表.doc -56- 7320 7380 7440 7500 7560 7620 7680 7740 7800 7860 7920 7980 8040 8100 8160 8220 8280 8340 8400 8460 8520 8580 8640 8700 8760 8820 8880 8940 201026322

tggcgcgggg cgcccgccac gcacccctgt cacgggcgcc cctggcggcc tcaatcatta ccctgcgcct cttagtctct ggcatacctt gtgtccgcgt gtactcacta attctaaacc ttcaccgcgc agaagcaagg atcggatgac tcttgaacca aagatcacgt cgcgtacgcg gatgcgcact gaatatataa gacctgctga gtgactcagt aggcggcaca tatgtctcac acctcactgt ataccaagat aaggccgcgt ctgccatact ccatcagcgt ccggtcaatc tgcaccctgc cggacttagt ccctggcggc gagggccgcc acccgacggc cttagcggcg ggtgcgggcc tattctcagc agcgcagccc tgtatttccc attgcccttc gagaacactt tcatgtggca cgatctccga gcttccagaa acagtggcat aaaagggaac gcgaacgaaa gccaactctt caccaccgga caaatccctt tgaaagcacc gcggaccgcg gcacccgcag tgcgatgtgg agaaatgaac gacttacttc aagaggtgag attaacccga gcctcttagc ctctggcgcg gggcgcccgc actgcacccc cggcacgggc ccccctggcg cgagtcacgg tcgcaagtct cgtgcacctc gacgcgatag ggggacttgg atacaagtat ggaacaagaa gttcgcctcc cactgcatcg gttccggata ccgaccctcc aataaatctg atctttattg acacgcgacc atataaagac atgctgcgcc caacaggtcg accaaaggaa gagaaaggct gagaccagtg tccgaagata cccttcccta cggccggcac ggcgccccct gggccggtca cactgcaccc tgtcggactt gccccctggc gccgagggcc atggagtagt caatagatac acccaaccac ttcggatcat cgctgataaa ctgtcccgca ccgccaggct tcgtggaacg tgcatacacc catctacgac cccgtaacgc cgccgttgtg ttgccacgcc tcgccctctc cgtttttacc ccgtatccgc gtaagtcctt cctcaaagca acgggtacag tcaccttttt gctccggcac cctttgttcc gggcgccccc ggcggccgag atcattaacc tgcgcctctt agtctctggc ggcgggcgcc gccactgcac ttcccttgcg acacctcatc ctatatcgcg tgcaccactt aacattccct ggttgaacat gcaaccccac ggtaccatag acggcggcac acaggtactg tccacttacg cgctccaggc cgacactatc tttatcatcc tgaccgcttc catcgcgttc taatcttacg agagtggcgg ctacccgtcg tgacctccgt ggagagtgaa attccgccca tggcggcggg ggccgccact cgacggccgg agcggcgccc gcggggccgg cgccactgca ccctgtcgga gccagcagag ggtgtacagc aacggctccg attcaagtac gaagtaccgt ggttaagcac gcagtatccc ctgcttcacg ggcaactccg tgacaccttg gacagccggc ggaaacaggg cagatttcga atacgcccag cacgtacaca ctctcgtgcc acccactcca ctagggcgcg ggacccttta cccaacgatt tatccgtacg tcgagcacct 9000 9060 9120 9180 9240 9300 9360 9420 9480 9540 9600 9660 9720 9780 9840 9900 9960 10020 10080 10140 10200 10260 10320 10380 10440 10500 10560 10620 10680 -57- 144841·序列表.doc 201026322 cagccgacac cacacatttt cagatcccct ccgccctccc attctacggc tgatgactaa caattcccgt ccgcggaccg agagccgcat gagcttgcag tgcatcgcgc tcgataacga tagttccatt acgtacgcct ggtacactga caccttagag agcggggaca acatccgaga agtaaccgtc cgaacggatt ctgaggtagc agttacctgt cggatatcgg atggacattc caccaattcc gcgactctcg tcgtgccgct aaaccgaggt cagtaatatc ccctccctca ccgcaacaga tccgcacagt caggatccca ggctttcacg atcctttccc cactccttta gaacctgccg ctccctacgg cgcggatatg actacggtgt tcctggccat cttagccctt attcttctaa ccgtcatcgg cggctacgcc ctcagaaagc tgtgtatgcg aaacgagcgc gtttttattt gtaacccgta cagagaatgt tttggcggtc atctctagga caaataaact tctacttgaa atgagtttat ttttccccct gcctgtttgt gatgggaaat gatcggtgct gcttatggac cgagatagat ggaagggacg ggggcattca aatttctagg tccagggaca taaaaaagag atcaaattta catctccggt aaagatcacc tctataaccc cgctgtgaat cccagcactc ccttccgata cgcaaactga ctagcagttc ctgtgtatag acaaacggaa tcctggtgta cagacaaacg gaatcctgag ttcccaacgc attcatttat ttgaatattt acacatttac acactgtaca cggtcattcg atttcattgc caacagaaag actaatcgat gtcccctttc agtatgtgga ctgtgacagc agggtcttcg ctcacttcac tgtccgtgtc atcctctgta cgcccacaca gcatcgcccg atagtgaaag ctgacactca gcatggagaa ccaaacagca gggagcaatg tgagaggcag ccaacacagg gaaacttttt tcttctccct tcagaccccc tcccgtcgag acattgtgat ggactactgg tacttcgccc tgatgttccc aggtaggaac gaccgtaagg gtgaacctct gaacgctgtt ctgcatcagg tcccgtgtca cttgatacat gccggaatcc gcgccactta agttcttgat agtcacgcag ttctcggatc tgttatacga cagcctccct tgatacgccc cgtagaccat cggctccttc agcgcctggt agtcctgcag cacgaacttg cgcacggcgc ccgcatccac cgcggtcact tcccattctc tgatctgaaa actctcggta gaaccgcaca gagtcacagc gtcccgttcg ttagccacga cccgggatac gttctccatt ttcaccgtac cgttctcggg aagccccgac acggtgaaat atacagtctc gggcttggaa cccaccgcga atgattgtga tagccagcac ccgttattag ctttgattgc ttcgacatgc attgaattac aggatgaatt tagccgcgcc ctcgtcatat agcccagatc cagcccctct ttgatcgaag gaatcacgaa agccactttc tgccatctgt 144841-序列表.doc -58 - 10740 10800 10860 10920 10980 11040 11100 11160 11220 11280 11340 11400 11460 11520 11580 11640 11700 11760 11820 11880 11940 12000 12060 12120 12180 12240 12300 12360

201026322 tacagacctt ccccggagcg tggtaccata gcagcagcgt gaaatcagcg catctgcccg tagtcagagt cacctcctta cggcccctca cggcggcacc ggagacggtg gcagacaagc agaggacggc ggcacacagc aggagcgagc catgactgcg gagtccgagc cgagcggtgt gctgctcgat cctccgctac ctttttatgc accacccacc tttattgtcg gtcacacatt aattcgcccc gtcagcaaac acgtgagtaa cgtatgccgt tgttctgatc ggtcagcacc gcgcccgcga cgtttgaacg aagacgtacg gtgacttccg catagggagc tataaggaag tcagttagga aaaatcgatc ctcgacacac cccacggaaa cgctgaccta ggcgaaacct atcaggtaaa acattcacta tacgcaccac gcgttgaata aacagttaac ccatacgggg tatatattct accccgactg cagtcagcga tcaggacgcg tccacagaga gatccgtgcg cgaccgcctg tccgggctcc tctagaatca agaatccata accatgcagg taagaactcc tttctcttcc tcctatttga tccgagcctt tttttacgct actcaaccgc aacccgtttc ttccaccaca gttactgctc cttctatgcc tttgccctct gatgggcagc ggaacactag cacccctcgt ctcggtagac aactcctact ccgtgttcgg atccggcaaa cccccacttt ctacctccga atccgccacc accgcctact ccgaaaccgc ggttcccgaa aactcttacc cccatccgaa gccaccacgc cctgcgacga cttgctggaa gaggactgct ggttcgcgga gagcagcgcg gactacgcac ccataccctg gaacaccaaa gagaatacgt ccgtggttat cccggcacag gtagccgtct cgccatcgca gtccactact ccccctgcgg tcatgctcgg catcgcacag aaagccgtaa accgcggagc ctccagcaag gatcacacgt cccatatcgc cacgggcgtt accgtagccg gaatagtcat actcattgcc ctcgtcatca tagccttccg tacaaaggtt aaggaaccgc gcccaacccg ctccatctac ctgggcgtgc ctccccctga cgttagacct taccgtataa tagagcaata aagatttggc cgccacatcg cacaagaatc tttccgtgtc ctgtgtctgt ctcggcgccg tccgcgggaa aaggttaacg cggaatctat ttccctgcgg atttccgtat ccgtcagttc ctgggcgtcg ccgaaaatgc tcacggaaga cacgcccatg cgggcgtggc taaccgatga ttcgaaaaac gattcgcgag cgccctctgc cggcggcggc gggaataggg ggtgtggggg gagtgtattt taagtagata tatatagatg atgctagag <210> 23 <211> 81 <212> DNA <213>人造序列 144841·序列表.doc -59- 12420 12480 12540 12600 12660 12720 12780 12840 12900 12960 13020 13080 13140 13200 13260 13320 13380 13440 13500 13560 13620 13680 13740 13800 13860 13869 201026322 <220> <223>分泌信號序列 <400> 23 atgacttgcc agacttacaa cttgtttgtt ctgtctgtca tcatgattta ttatggacat 60 actgcaagta gtctaaatct t 81 <210> 24 <211> 969 <212> DNA <213>巨型艾美球蟲 <400> 24 accactcctg ttgagaacca ggttcaccct tacagcgaga tgagtaccta ccaggagggg 60 agtgccccgg gggctccgga ggacaccacc accaccacta cgtcgtcccc tgtttccgat 120 ggagccgagc gttggcttga gagctttgtt cgtgctgtgc agcgccagct gcagcttcag 180 gaccaaatga tgcgtcagct catgagggac attcaggagt acctgagcac tgcgttcaac 240 tgggcagaga accagtctac tgcctacacc cgtgttaccg agatgatgga catgatctcc 300 aacagaatga acgctgccag ggacagctca aacgaactca tgaccactag cgacaccaca 360 gaccccgaga ccctccgccg tgcaactcgc aagtacatga aggaggttcg cgttcaggac 420 gtcctggtag atgctctctg ggcctctctc cgcggtgtac agacagctgc ctggatgaat 480 ggagtgaccg ctattgagaa ggaggagacg actcccatgg ctagccgcgc tgctgaggag 540 ttcctccacc gcatgtacca taacctgagg gcagcaggta tgtctgaaga agatgttgcc 600 aagttcatcc ctagagccga gtacaacccc tccgagcagt caagaaatat gggcagaaag 660 ggcaggagct tctactacgg cggctatccc agctactaca actcccccta ctacagctac 720 agcagctacc ccagctacta caactacagc tacccgtcat acagctacag cagctacccc 780 agctactacc gctacagcag ctacccctac tacaactaca gctatcccag ctactacaac 840 tacggcagct acccctacta cagttatagc agctacccca gctggtactg gcgccgtctc 900 cgctctttgg caacagcaac ttgcccagac tgccctcctc tcaccactcc cagcatgatc 960 ccaacttaa 969 <210> 25 <211> 322 <212> PRT <213> 巨型艾美球蟲 <400> 25 -60· 144841 -序列表,doc 201026322

Thr Thr Pro Val Glu Asn Gin Val His Pro Tyr Ser Glu Met Ser Thr 15 10 15

Tyr Gin Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ala Pro Glu Asp Thr Thr Thr Thr 20 25 30

Thr Thr Ser Ser Pro Val Ser Asp Gly Ala Glu Arg Trp Leu Glu Ser 35 40 45

Phe Val Arg Ala Val Gin Arg Gin Leu Gin Leu Gin Asp Gin Met Met 50 55 60

Arg Gin Leu Met Arg Asp lie Gin Glu Tyr Leu Ser Thr Ala Phe Asn 65 70 75 80

Trp Ala Glu Asn Gin Ser Thr Ala Tyr Thr Arg Val Thr Glu Met Met 85 90 95

Asp Met lie Ser Asn Arg Met Asn Ala Ala Arg Asp Ser Ser Asn Glu 100 105 110

Leu Met Thr Thr Ser Asp Thr Thr Asp Pro Glu Thr Leu Arg Arg Ala 115 120 125

Thr Arg Lys Tyr Met Lys Glu Val Arg Val Gin Asp Val Leu Val Asp 130 135 140

Ala Leu Trp Ala Ser Leu Arg Gly Val Gin Thr Ala Ala Trp Met Asn 145 150 155 160

Gly Val Thr Ala lie Glu Lys Glu Glu Thr Thr Pro Met Ala Ser Arg 165 170 175 ❿

Ala Ala Glu Glu Phe Leu His Arg Met Tyr His Asn Leu Arg Ala Ala 180 185 190

Gly Met Ser Glu Glu Asp Val Ala Lys Phe lie Pro Arg Ala Glu Tyr 195 200 205

Asn Pro Ser Glu Gin Ser Arg Asn Met Gly Arg Lys Gly Arg Ser Phe 210 215 220 •61 · 144841-序列表.doc 201026322

Tyr Tyr Gly Gly Tyr Pro Ser Tyr Tyr Asn Ser Pro Tyr Tyr Ser Tyr 225 230 235 240

Ser Ser Tyr Pro Ser Tyr Tyr Asn Tyr Ser Tyr Pro Ser Tyr Ser Tyr 245 250 255

Ser Ser Tyr Pro Ser Tyr Tyr Arg Tyr Ser Ser Tyr Pro Tyr Tyr Asn 260 265 270

Tyr Ser Tyr Pro Ser Tyr Tyr Asn Tyr Gly Ser Tyr Pro Tyr Tyr Ser 275 280 285

Tyr Ser Ser Tyr Pro Ser Trp Tyr Trp Arg Arg Leu Arg Ser Leu Ala 290 295 300

Thr Ala Thr Cys Pro Asp Cys Pro Pro Leu Thr Thr Pro Ser Met lie 305 310 315 320

Pro Thr <210> 26 <211> 1515 <212> DNA <213>巨型艾美球蟲 <400> 26 atacaaatcc tttttatctg gttccaacac gctcactcaa ccaccacctg gacacaccct ccccatacat acaggagcag cagcaacacc agcatcaaga tgacgcgtgc ggcagcgctt gccggggttt tggccctggc tgcagcaggc agcagccttg ctctacctac tgtattggac acaacgactg gcacccaagt ggagtggact gagaccccct tagacacaac agaggtaact atgggggaga tgggcagcac caccagcggc acgactccaa ccagcactgg tgtgcgaatg atggaggctg aaactacaac cccatcaacc cctgaggctc cccagcagca gcagcagatg cctcagcctc aacctcagcc acagcaaaca actcccgttc ctgaggccgt attagaggca attatgcaag aaatgcaaaa tattttccgt tcttctcttg taccaggttg ggatactgtc ggtacagcag cagatgctgt acgtcagatt gtaacccgtg taagagaacg tcttacagga ccattaatga tgacagagat ggatactggt cttggtagaa caggaccttt atcaaccaca ggtgcaacag gagcaacaac aggtcctgtt gctgcattac gcggtgtaac aaatgatttc cttagggaaa taatgattca agaagcagta cttgagacat tatgggcagt tgtacgtgat -62· 60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 J44841-序列表.doc 720 201026322

gcacaagaaa gctgtacaag gaagaagtca ctctttgatc actggatatt tattcacatt tatggcagcg cctattaccc tatacacccg accctaaacc ttttagggaa ataaacaatt tatacaaact aaaaaaaaaa gaccatggct gtttccttgg tgagacttct aatgtaacga atggttatgg atcctgtttc gatactatgg ctacacaaag aaaatcttac ctaaacccta cactaacctg tttatttacc actactattt aaaaa agttaatgaa tcgcatgcat acctaggtca tgcccctccc atatccttct ttatccttac taaacatgga aactttttat agaagatgaa aaccctcaac cctgccttgc tctagtcgtc ttacccaata caggaagtat gatcgtcttc cgtaatggtg tctcgtcttc tattatagct tatgggtata tataagtacg aataatacag ccacaaactg cctaacattt catcgtttat tttttattaa atacttgtac tgcatgcagt gtgcaacagg gttgtacccg ttggtaagag atggatatag gctggggccc gagtaggaga aaggtactaa tatgggaaac ctcatttttt atatatccat cagcgcttat aggcattttt aacagcagat tttctctgag tacagggggc gatgtatagt ttatccagct ctcatactac aagatatgag caaccctgtc atacaactaa tatagagaaa ttgtttatta tcgcgttgtt taaaaaaaaa 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1515

<210> 27 <211> 1515 <212> DNA <213>巨型艾美球蟲 <400> 27 tatgtttagg aaaaatagac caaggttgtg cgagtgagtt ggtggtggac ctgtgtggga ggggtatgta tgtcctcgtc gtcgttgtgg tcgtagttct actgcgcacg ccgtcgcgaa cggccccaaa accgggaccg acgtcgtccg tcgtcggaac gagatggatg acataacctg tgttgctgac cgtgggttca cctcacctga ctctggggga atctgtgttg tctccattga taccccctct acccgtcgtg gtggtcgccg tgctgaggtt ggtcgtgacc acacgcttac tacctccgac tttgatgttg gggtagttgg ggactccgag gggtcgtcgt cgtcgtctac ggagtcggag ttggagtcgg tgtcgtttgt tgagggcaag gactccggca taatctccgt taatacgttc tttacgtttt ataaaaggca agaagagaac atggtccaac cctatgacag ccatgtcgtc gtctacgaca tgcagtctaa cattgggcac attctcttgc agaatgtcct ggtaattact actgtctcta cctatgacca gaaccatctt gtcctggaaa tagttggtgt ccacgttgtc ctcgttgttg tccaggacaa cgacgtaatg cgccacattg tttactaaag 144841-序列表.doc 60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 63- 660 201026322 gaatcccttt attactaagt tcttcgtcat gaactctgta atacccgtca acatgcacta 720 cgtgttcttt ctggtaccga tcaattactt gtccttcata acgtacgtca ttgtcgtcta 780 cgacatgttc caaaggaacc agcgtacgta ctagcag^ag cacgttgtcc aaagagactc 840 cttcttcagt actctgaaga tggatccagt gcattaccac caacatgggc atgtcccccg 900 gagaaactag ttacattgct acggggaggg agagcagaag aaccattctc ctacatatca 960 tgacctataa taccaatacc tataggaaga ataatatcga tacctatatc aataggtcga 1020 ataagtgtaa taggacaaag aataggaatg atacccatat cgaccccggg gagtatgatg 1080 ataccgtcgc ctatgatacc atttgtacct atattcatgc ctcatcctct ttctatactc 1140 ggataatggg gatgtgtttc ttgaaaaata ttattatgtc ttccatgatt gttgggacag 1200 atatgtgggc ttttagaatg tcttctactt ggtgtttgac ataccctttg tatgttgatt 1260 tgggatttgg gatttgggat ttgggagttg ggattgtaaa gagtaaaaaa atatctcttt 1320 aaaatccctt gtgattggac ggacggaacg gtagcaaata tatataggta aacaaataat 1380 tatttgttaa aaataaatgg agatcagcag aaaaataatt gtcgcgaata agcgcaacaa 1440 atatgtttga tgatgataaa aatgggttat tatgaacatg tccgtaaaaa attttttttt 1500 tttttttttt ttttt 1515 <210〉 28 <211> 386 <212> PRT <213>巨型艾美球蟲 <400> 28

Met Thr Arg Ala Ala Ala Leu Ala Gly Val Leu Ala Leu Ala Ala Ala 15 10 15

Gly Ser Ser Leu Ala Leu Pro Thr Val Leu Asp Thr Thr Thr Gly Thr 20 25 30

Gin Val Glu Trp Thr Glu Thr Pro Leu Asp Thr Thr Glu Val Thr Met 35 40 45

Gly Glu Met Gly Ser Thr Thr Ser Gly Thr Thr Pro Thr Ser Thr Gly 50 55 60

Val Arg Met Met Glu Ala Glu Thr Thr Thr Pro Ser Thr Pro Glu Ala 65 70 75 80 -64- 144841·序列表.doc 201026322

Pro Gin Gin Gin Gin Gin Met Pro Gin Pro Gin Pro Gin Pro Gin Gin 85 90 95

Thr Thr Pro Val Pro Glu Ala Val Leu Glu Ala lie Met Gin Glu Met 100 105 110

Gin Asn lie Phe Arg Ser Ser Leu Val Pro Gly Trp Asp Thr Val Gly 115 120 125

Thr Ala Ala Asp Ala Val Arg Gin lie Val Thr Arg Val Arg Glu Arg 130 135 140

Leu Thr Gly Pro Leu Met Met Thr Glu Met Asp Thr Gly Leu Gly Arg 145 150 155 160

Thr Gly Pro Leu Ser Thr Thr Gly Ala Thr Gly Ala Thr Thr Gly Pro 165 170 175

Val Ala Ala Leu Arg Gly Val Thr Asn Asp Phe Leu Arg Glu lie Met 180 185 190 lie Gin Glu Ala Val Leu Glu Thr Leu Trp Ala Val Val Arg Asp Ala 195 200 205

Gin Glu Arg Pro Trp Leu Val Asn Glu Gin Glu Val Leu His Ala Val 210 215 220

Thr Ala Asp Ala Val Gin Gly Phe Leu Gly Arg Met His Asp Arg Leu 225 230 235 240

Arg Ala Thr Gly Phe Ser Glu Glu Glu Val Met Arg Leu Leu Pro Arg 245 250 255

Ser Arg Asn Gly Gly Cys Thr Arg Thr Gly Gly Leu Phe Asp Gin Cys 260 265 270

Asn Asp Ala Pro Pro Ser Arg Leu Leu Gly Lys Arg Met Tyr Ser Thr 275 280 285

Gly Tyr Tyr Gly Tyr Gly Tyr Pro Ser Tyr Tyr Ser Tyr Gly Tyr Ser 290 295 300 65- 144841-序列表,doc 201026322

Tyr Pro Ala Tyr Ser His Tyr Pro Val Ser Tyr Pro Tyr Tyr Gly Tyr 305 310 315 320

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Gly Tyr Lys Tyr Arg Val Gly Glu Arg Tyr Glu Pro lie Thr Pro Thr 340 345 350

Gin Arg Thr Phe Tyr Asn Asn Thr Glu Gly Thr Asn Asn Pro Val Tyr 355 360 365

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Tyr Asn 385 0 12 3 X 1 1 1 2 2 2 2 < < < < 29 335

PRT 柔嫩艾美球蟲 <400> 29

Met Thr Arg Leu Ser Leu Cys Ala Leu Ala Val Ala Leu Ala Val Gly 1 5 10 15

Gin Ser Leu Ala Val Pro Thr Thr Val Glu Asn Thr Val His Pro Tyr 20 25 30

Ser Glu Met Gly Thr Tyr Gin Glu Gly Glu Ala Pro Gly Ala Pro Asp 35 40 45

Glu Ser Ser Thr Thr Thr Thr Thr Pro Ser Pro Ser Pro Glu Ala Pro 50 55 60

Asp Gin Trp Leu Glu Asn Phe Val Arg Ala Val Gin Arg Gin Leu Gin 65 70 75 80

Leu Gin Glu Ser Met Met Arg Gin Leu Val Lys Glu lie Gin Glu Tyr 85 90 95

Leu Ser Arg Ala Phe Asn Trp Asp Glu Asn Gin Ser Ala Ala Tyr Asn -66· 144841·序列表.doc 201026322 100 105 no

Arg Val Asn Glu Met Met Asp Met lie Thr Asn Arg Met Thr Thr Ala 115 120 125

Leu Asp Gly Ala Asn Glu Leu Met Ala Thr Ser Glu Thr MetfAsp Pro 130 135 140

Glu Thr Leu Arg Arg Ala Thr Arg Lys Tyr Met Lys Glu Val Arg Val 145 150 155 160

Gin Asp Val Val Val Asp Ser Leu Trp Ala Ser Leu Arg Gly Gly Val 165 170 175

Gin Thr Ser Ala Trp Met Ser Gly Val Thr Ala Val Glu Lys Glu Glu 180 185 19Q

Thr Thr Pro Met Ala Gly Arg Ala Ala Glu Glu Phe Met His Arg Met 195 200 205

Tyr His Asn Leu Arg Ala Ala Gly Met Ala Glu Glu Asp lie Thr Arg 210 215 220

Phe Met Pro Lys Thr Glu Tyr Thr Thr Pro Arg Glu Gin Thr Arg Asn 225 230 235 240

Met Gly Arg Lys Gly Arg Tyr Gly Tyr Gly Tyr Ser Tyr Gly Tyr Pro 245 250 255

Leu Tyr Ser Tyr Gly Tyr Ser Tyr Pro Ser Tyr Ser Tyr Ser Tyr Pro 260 265 270

Tyr Tyr Ser Tyr Pro Ser Tyr Ser Tyr Pro Leu Tyr Ser Tyr Ser Tyr 275 280 285

Arg Tyr Pro Ser Tyr Ser Tyr Ser Tyr Pro Leu Tyr Ser Tyr Ser Ser 290 295 300

Tyr Ser Tyr Pro Tyr Tyr Ser Tyr Ser Tyr Pro Tyr Tyr Ser Ser Ser 305 310 315 320

Trp Tyr Trp Arg Arg Leu Arg Thr Ala Ser Cys Pro Asp Cys Pro 325 330 335 67- U4841·序列表.doc 201026322 <210> 30 <211> 322 <212> PRT <213>巨型艾美球蟲 <400> 30

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Tyr Gin Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ala Pro Glu Asp Thr Thr Thr Thr 20 25 30

Thr Thr Ser Ser Pro Val Ser Asp Gly Ala Glu Gin Trp Leu Glu Ser 35 40 45

Phe Val Arg Ala Val Gin Arg Gin Leu Gin Leu Gin Asp Gin Met Met 50 55 60

Arg Gin Leu Met Arg Asp lie Gin Glu Tyr Leu Ser Thr Ala Phe Asn 65 70 75 80

Trp Ala Glu Asn Gin Ser Thr Ala Tyr Thr Arg Val Thr Glu Met Met 85 90 95

Asp Met lie Ser Asn Arg Met Asn Ala Ala Met Asp Ser Ser Asn Glu 100 105 110

Leu Met Thr Thr Ser Asp Thr Thr Asp Pro Glu Thr Leu Arg Arg Ala 115 120 125

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Ala Leu Trp Ala Ser Leu Arg Gly Val Gin Thr Ala Ala Trp Met Asn 145 150 155 160

Gly Val Thr Ala He Glu Lys Glu Glu Thr Thr Pro Met Ala Ser Arg 165 170 175

Ala Ala Glu Glu Phe Leu His Arg Met Tyr His Asn Leu Arg Ala Ala 180 185 190 -68- 144841-序列表.doc 201026322 GXy Met Ser Glu Glu Asp Val Ala Lys Phe lie Pro Arg Ala Glu Tyr 195 200 205

Asn Pro Ser Glu Gin Ser Arg Asn Met Gly Arg Lys Gly Arg Ser Phe 210 215 220

Tyr Tyr Gly Gly Tyr Pro Ser Tyr Tyr Asn Ser Pro Tyr Tyr Ser Tyr 225 230 235 240

Ser Ser Tyr Pro Ser Tyr Tyr Asn Tyr Ser Tyr Pro Ser Tyr Ser Tyr 245 250 255

Ser Ser Tyr Pro Ser Tyr Tyr Arg Tyr Ser Ser Tyr Pro Tyr Tyr Asn 260 265 270

Tyr Ser Tyr Pro Ser Tyr Tyr Asn Tyr Gly Ser Tyr Pro Tyr Tyr Ser 275 280 285

Tyr Ser Ser Tyr Pro Ser Trp Tyr Trp Arg Arg Leu Arg Ser Leu Ala 290 295 300

Thr Ala Thr Cys Pro Asp Cys Pro Pro Leu Thr Thr Pro Ser Met lie 305 310 315 320

Pro Thr <210 31 <211> 249

<212> PRT <213>柔嫩艾美球蟲 <400> 31

Met Thr Arg Leu Ser Leu Cys Ala Leu Ala Val Ala Leu Ala Val Gly 1 5 10 15

Gin Ser Leu Ala Val Pro Thr Thr Val Glu Asn Thr Val His Pro Tyr 20 25 30

Ser Glu Met Gly Thr Tyr Gin Glu Gly Glu Ala Pro Gly Ala Pro Asp 35 40 45

Glu Ser Ser Thr Thr Thr Thr Thr Pro Ser Pro Ser Pro Glu Ala Pro 50 55 60 69- 144841-序列表.doc 201026322

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Leu Gin Glu Ser Met Met Arg Gin Leu Val Lys Glu lie Gin Glu Tyr 85 90 95

Leu Ser Arg Ala Phe Asn Trp Asp Glu Asn Gin Ser Ala Ala Tyr Asn 100 105 110

Arg Val Asn Glu Met Met Asp Met lie Thr Asn Arg Met Thr Thr Ala 115 120 125

Leu Asp Gly Ala Asn Glu Leu Met Ala Thr Ser Glu Thr Met Asp Pro 130 135 140

Glu Thr Leu Arg Arg Ala Thr Arg Lys Tyr Met Lys Glu Val Arg Val 145 150 155 160

Gin Asp Val Val Val Asp Ser Leu Trp Ala Ser Leu Arg Gly Gly Val 165 170 175

Gin Thr Ser Ala Trp Met Ser Gly Val Thr Ala Val Glu Lys Glu Glu 180 185 190

Thr Thr Pro Met Ala Gly Arg Ala Ala Glu Glu Phe Met His Arg Met 195 200 205

Tyr His Asn Leu Arg Ala Ala Gly Met Ala Glu Glu Asp lie Thr Arg 210 215 220

Phe Met Pro Lys Thr Glu Tyr Thr Thr Pro Arg Glu Gin Thr Arg Asn 225 230 235 240

Met Gly Arg Lys Gly Arg Tyr Gly Tyr 245 <210> 32 <211> 248 <212> PRT <213>巨型艾美球蟲 <400> 32 -70- 144841-序列表.doc 201026322

Met Thr Arg Leu Gly Leu Ala Ala Val Ala Leu Ala Leu Ala Val Gly 15 10 15

Pro Ser Met Ala Val Pro Ser Thr Thr Pro Val Glu Asn Gin Val His 20 25 30

Pro Tyr Ser Glu Met Ser Thr Tyr Gin Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ala 35 40 45

Pro Glu Asp Thr Thr Thr Thr Thr Thr Ser Ser Pro Val Ser Asp Gly 50 55 60

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Gin Leu Gin Asp Gin Met Met Arg Gin Leu Met Arg Asp lie Gin Glu 85 90 95

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Thr Arg Val Thr Glu Met Met Asp Met lie Ser Asn Arg Met Asn Ala 115 120 125

Ala Met Asp Ser Ser Asn Glu Leu Met Thr Thr Ser Asp Thr Thr Asp 130 135 140

Pro Glu Thr Leu Arg Arg Ala Thr Arg Lys Tyr Met Lys Glu Val Arg 145 150 155 160

Val Gin Asp Val Leu Val Asp Ala Leu Trp Ala Ser Leu Arg Gly Val 165 170 175

Gin Thr Ala Ala Trp Met Asn Gly Val Thr Ala lie Glu Lys Glu Glu 180 185 190

Thr Thr Pro Met Ala Ser Arg Ala Ala Glu Glu Phe Leu His Arg Met 195 200 205

Tyr His Asn Leu Arg Ala Ala Gly Met Ser Glu Glu Asp Val Ala Lys 210 215 220

Phe lie Pro Arg Ala Glu Tyr Asn Pro Ser Glu Gin Ser Arg Asn Met 71- 144841-序列表.doc 201026322 225 230 235 240

Gly Arg Lys Gly Arg Ser Phe Tyr 245 <210> 33 <211> 225 <212> PRT <213> 柔嫩艾美球蟲 <400> 33

Val Glu Asn Thr Val His Pro Tyr Ser Glu Met Gly Thr Tyr Gin Glu 15 10 15

Gly Glu Ala Pro Gly Ala Pro Asp Glu Ser Ser Thr Thr Thr Thr Thr 20 25 30

Pro Ser Pro Ser Pro Glu Ala Pro Asp Gin Trp Leu Glu Asn Phe Val 35 40 45

Arg Ala Val Gin Arg Gin Leu Gin Leu Gin Glu Ser Met Met Arg Gin 50 55 60

Leu Val Lys Glu lie Gin Glu Tyr Leu Ser Arg Ala Phe Asn Trp Asp 65 70 75 80

Glu Asn Gin Ser Ala Ala Tyr Asn Arg Val Asn Glu Met Met Asp Met 85 90 95 lie Thr Asn Arg Met Thr Thr Ala Leu Asp Gly Ala Asn Glu Leu Met 100 105 110

Ala Thr Ser Glu Thr Met Asp Pro Glu Thr Leu Arg Arg Ala Thr Arg 115 120 125

Lys Tyr Met Lys Glu Val Arg Val Gin Asp Val Val Val Asp Ser Leu 130 135 140

Trp Ala Ser Leu Arg Gly Gly Val Gin Thr Ser Ala Trp Met Ser Gly 145 150 155 160

Val Thr Ala Val Glu Lys Glu Glu Thr Thr Pro Met Ala Gly Arg Ala 165 170 175 -72- 144841-序列表.doc 201026322

Ala Glu Glu Phe Met His Arg Met Tyr His Asn Leu Arg Ala Ala Gly 180 185 190

Met Ala Glu Glu Asp lie Thr Arg Phe Met Pro Lys Thr Glu Tyr Thr 195 200 205

Thr Pro Arg Glu Gin Thr Arg Asn Met Gly Arg Lys Gly Arg Tyr Gly 210 215 220

Tyr 225 <210> 34 <211> 222 <212> PRT <213> 巨型艾美球蟲

<400> 34

Val Glu Asn Gin Val His Pro Tyr Ser Glu Met Ser Thr Tyr Gin Glu 1 5 10 15

Gly Ser Ala Pro Gly Ala Pro Glu Asp Thr Thr Thr Thr Thr Thr Ser 20 25 30

Ser Pro Val Ser Asp Gly Ala Glu Gin Trp Leu Glu Ser Phe Val Arg 35 40 45

Ala Val Gin Arg Gin Leu Gin Leu Gin Asp Gin Met Met Arg Gin Leu 50 55 60

Met Arg Asp lie Gin Glu Tyr Leu Ser Thr Ala Phe Asn Trp Ala Glu 65 70 75 80

Asn Gin Ser Thr Ala Tyr Thr Arg Val Thr Glu Met Met Asp Met lie 85 90 95

Ser Asn Arg Met Asn Ala Ala Met Asp Ser Ser Asn Glu Leu Met Thr 100 105 110

Thr Ser Asp Thr Thr Asp Pro Glu Thr Leu Arg Arg Ala Thr Arg Lys 115 120 125

Tyr Met Lys Glu Val Arg Val Gin Asp Val Leu Val Asp Ala Leu Trp 73- 144841-序列表.doc 201026322 130 135 140

Ala Ser Leu Arg Gly Val Gin Thr Ala Ala Trp Met Asn Gly Val Thr 145 150 155 160

Ala lie Glu Lys Glu Glu Thr Thr Pro Met Ala Ser Arg Ala Ala Glu 165 170 175

Glu Phe Leu His Arg Met Tyr His Asn Leu Arg Ala Ala Gly Met Ser 180 185 190

Glu Glu Asp Val Ala Lys Phe lie Pro Arg Ala Glu Tyr Asn Pro Ser 195 200 205

Glu Gin Ser Arg Asn Met Gly Arg Lys Gly Arg Ser Phe Tyr 210 215 220 <210> 35 <211> 29 <212> PRT <213> 褐鼠 <400> 35

Met Arg Cys Phe lie Ser Leu Val Leu Gly Leu Leu Ala Leu Glu Val 15 10 15

Ala Leu Ala Arg Asn Leu Gin Glu His Val Phe Asn Ser 20 25 <210> 36 <211> 28 <212> PRT <213> 褐鼠 <400> 36

Met Ala Leu His Met Val Leu Val Val Leu Ser Leu Leu Pro Leu Leu 15 10 15

Glu Ala Gin Asn Pro Glu Pro Ala Asn lie Thr Leu 20 25 <210> 37 <211> 34 <212> PRT <213> 小鼠 •74- 144841·序列表.doc 201026322 <400> 37

Met Asp Tyr Tyr Arg Lys Tyr Ala Ala Val lie Leu Val Met Leu Ser 15 10 15

Met Phe Leu His lie Leu His Ser Leu Pro Asp Gly Asp Phe lie lie 20 25 30

Gin Gly <210> 38 <211> 36 <212> PRT <213>盲鰻 <400> 38

Met Ala Leu Ser Pro Phe Leu Ala Ala Val lie Pro Leu Val Leu Leu 1 5 10 15

Leu Ser Arg Ala Pro Pro Ser Ala Asp Thr Arg Thr Thr Gly His Leu 20 25 30

Cys Gly Lys Asp 35 <210> 39 <211> 34 <212> PRT <213> 鍵鱗 <400> 39

Met Ala Ala Leu Trp Leu Gin Ser Phe Ser Leu Leu Val Leu Leu Val 1 5 10 15

Val Ser Trp Pro Gly Ser Gin Ala Val Ala Pro Ala Gin His Leu Cys 20 25 30

Gly Ser <210> 40 <211> 34 <212> PRT <213> 智人 -75· 144841-序列表 doc 201026322 <400> 40

Met Ala Leu Trp Met Acg Leu Leu Pro Leu Leu Ala Leu Leu Ala Leu 15 10 15

Trp Gly Pro Asp Pro Ala Ala Ala Phe Val Asn Gin His Leu Cys Gly 20 25 30

Ser His <210> 41 <211> 34 <212> PRT <213>褐鼠 <400> 41

Met Ala Leu Trp Met Arg Phe Leu Pro Leu Leu Ala Leu Leu Val Leu 15 10 15

Trp Glu Pro Lys Pro Ala Gin Ala Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly 20 25 30

Pro His <210> 42 <211> 34 <212> PRT <213> 褐鼠 <400> 42

Met Ala Leu Trp lie Arg Phe Leu Pro Leu Leu Ala Leu Leu lie Leu 1 5 10 15

Trp Glu Pro Arg Pro Ala Gin Ala Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly 20 25 30

Ser His <210> 43 <211> 25 <212> PRT <213> 綿羊 -76· 144841·序列表doc 201026322 <400> 43

Met Lys Val Leu lie Leu Ala Cys Leu Val Ala Leu Ala Leu Ala Arg 15 10 15

Glu Gin Glu Glu Leu Asn Val Val Gly 20 25 <210> 44 <211> 31 <212> PRT <213> 錦羊 <400> 44

Met Arg Lys Ser lie Leu Leu Val Val Thr lie Leu Ala Leu Thr Leu 15 10 15

Pro Phe Leu lie Ala Gin Glu Gin Asn Gin Glu Gin Arg lie Cys 20 25 30 <210> 45 <211> 29 <212> PRT <213> 錦羊 <400> 45

Met Met Ser Phe Val Ser Leu Leu Leu Val Gly lie Leu Phe Trp Ala 15 10 15

Thr Gin Ala Glu Gin Leu Thr Lys Cys Glu Val Phe Gin 20 25 <210> 46 <211> 28 <212> PRT <213> 綿羊 <400> 46

Met Lys Cys Leu Leu Leu Ala Leu Gly Leu Ala Leu Ala Cys Gly Val 15 10 15

Gin Ala lie lie Val Thr Gin Thr Met Lys Gly Leu 20 25 <210> 47 14484卜序列表.doc -77- 201026322 <211> 25 <212> PRT <213> 綿羊 <220> <221> misc一feature <222> (24)7. (24) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <400> 47

Met Lys Leu Leu lie Leu Thr Cys Leu Val Ala Val Ala Leu Ala Arg 15 10 15

Pro Lys His Pro lie Lys His Xaa Gly 20 25 <210> 48 <211> 25 <212> PRT <213> 綿羊 <400> 48

Met Lys Val Leu Met Lys Ala Cys Leu Val Ala Val Ala Leu Ala Lys 15 10 15

Asn Thr Met Glu His Val Ser Ser Ser 20 25 <210> 49 <211> 26 <212> PRT <213> VS 病毒 <220> <221> misc一feature <222> (24)7.(26) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <400> 49

Met Lys Cys Leu Leu Tyr Leu Ala Phe Leu Phe lie His Val Asn Cys 1 5 10 15

Lys Phe Thr lie Val Phe Pro Xaa Xaa Xaa 20 25 <210> 50 -78- 144841-序列表.doc 201026322 <211> 33 <212> PRT <213> 難 <400> 50

Met Gin ?yr Arg Ala Leu Val lie Ala Val lie Leu Leu Leu Ser Thr 15 10 15

Thr Val Pro Glu Val Cys Ser Lys Ser lie lie Asp Arg Glu Arg Arg 20 25 30

Asp <210> 51 <211> 31

<212> PRT <213> 西方蜂 <400> 51

Met Lys Phe Leu Val Asn Val Ala Leu Val Phe Met Val Val Tyr lie 15 10 15

Ser Tyr lie Tyr Ala Ala Pro Glu Pro Glu Pro Ala Pro Glu Pro 20 25 30 <210> 52 <211> 39 <212> PRT <213>褐鼠 <220> <221> raise 一 feature <222> (31)7.(32) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <220> <221> misc一feature <222> (34)7.(37) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <220> <221> misc_feature <222> (39)7.(39) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <400> 52

Met Asn Ser Gin Val Ser Ala Arg Lys Ala Gly Thr Leu Leu Leu Leu 79- 144841 -序列表.doc 201026322 5 10 15

Met Met Ser Asn Leu Leu Phe Cys Gin Asn Val Gin Thr Leu Xaa Xaa 20 25 30

Cys Xaa Xaa Xaa Xaa Cys Xaa 35 <210> 53 <211> 35 <212> PRT <213> 智人 <400> 53

Met Pro Gly Ser Arg Thr Ser Leu Leu Leu Ala Phe Ala Leu Leu Cys 15 10 15

Leu Pro Trp Leu Gin Glu Ala Gly Ala Val Gin Thr Val Pro Leu Ser 20 25 30

Arg Leu Phe 35 <210> 54 <211> 30 <212> PRT <213> 智人 <400> 54

Met Glu Met Phe Gin Gly Leu Leu Leu Leu Leu Leu Leu Ser Met Gly 15 10 15

Gly Thr Trp Ala Ser Lys Glu Pro Leu Arg Pro Arg Cys Arg 20 25 30 <210> 55 <211> 34 <212> PRT <213> 智人 <400> 55

Met Asp Tyr Tyr Arg Lys Tyr Ala Ala lie Phe Leu Val Thr Leu Ser 15 10 15

Val Phe Leu His Val Leu His Ser Ala Pro Asp Val Gin Asp Cys Pro •80· 144841 -序列表.d〇c 201026322 20 25 30

Glu Cys <210> 56 <211> 31 <212> PRT <213> 穴兔 <220> <221> raise—feature <222> (29)7.(29) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <400> 56

Met Lys Leu Ala lie Thr Leu Ala Leu Val Thr Leu Ala Leu Leu Cys 15 10 15

Ser Pro Ala Ser Ala Gly lie Cys Pro Arg Phe Ala Xaa Val lie 20 25 30 <210> 57 <211> 36 <212> PRT <213> 褐鼠 <400> 57

Met Ala Ala Asp Ser Gin Thr Pro Trp Leu Leu Thr Phe Ser Leu Leu 15 10 15

Cys Leu Leu Trp Pro Gin Glu Ala Gly Ala Leu Pro Ala Met Pro Leu 20 25 30

Ser Ser Leu Phe 35 <210> 58 <211> 36 <212> PRT <213> 智人 <400> 58

Met Ala Thr Gly Ser Arg Thr Ser Leu Leu Leu Ala Phe Gly Leu Leu 15 10 15 81- 144841·序列表.doc 201026322

Cys Leu Pro Trp Leu Gin Glu Gly Ser Ala Phe Pro Thr lie Pro Leu 20 25 30

Ser Arg Leu Phe 35 <210> 59 <211> 37 <212> PRT <213> 家牛 <400> 59

Met Met Ala Ala Gly Pro Arg Thr Ser Leu Leu Leu Ala Phe Ala Leu 15 10 15

Leu Cys Leu Pro Trp Thr Gin Val Val Gly Ala Phe Pro Ala Met Ser 20 25 30

Leu Ser Gly Leu Phe 35 <210> 60 <211> 35 <212> PRT <213>家牛 <400> 60

Met Met Ser Ala Lys Asp Met Val Lys Val Met lie Val Met Leu Ala 15 10 15 lie Cys Phe Leu Ala Arg Ser Asp Gly Lys Ser Val Lys Lys Arg Ala 20 25 30

Val Ser Glu 35 <210> 61 <211> 32 <212> PRT <213>褐鼠 <400> 61

Met Ser Ser Arg Leu Leu Leu Gin Leu Leu Gly Phe Trp Leu Phe Leu 15 10 15 82· U4841-序列表.doc 201026322

Ser Gin Pro Cys Arg Ala Arg Val Ser Glu Glu Trp Met Asp Gin Val 20 25 30 <210> 62 <211> 28 <212> PRT <213> 褐鼠 <400> 62

Met Lys Trp Val Thr Phe Leu Leu Leu Leu Phe lie Ser Gly Ser Ala 15 10 15

Phe Ser Arg Gly Val Phe Arg Arg Glu Ala His Lys 20 25 <210> 63

<211> 28 <212> PRT <213> 智人 <400> 63

Met Lys Trp Val Thr Phe lie Ser Leu Leu Phe Leu Phe Ser Ser Ala 15 10 15

Tyr Ser Arg Gly Val Phe Arg Arg Asp Ala His Lys 20 25 <210> 64 <211> 28 <212> PRT <213> 褐鼠 <400> 64

Met Lys Trp Val Thr Phe Leu Leu Leu Leu Phe lie Ser Gly Ser Ala φ 1 5 !〇 15

Phe Ser Arg Gly Val Phe Arg Arg Glu Ala His Lys 20 25 <210> 65 <211> 34 <212> PRT <213> 雞 <400> 65 -83 · 144841 ·序列表.doc 201026322

Met Arg Gin Ala Ala Ala Pro Leu Leu Pro Gly Val Leu Leu Leu Phe 15 10 15

Ser lie Leu Pro Ala Ser Gin Gin Gly Gly Val Pro Gly Ala lie Pro 20 25 30

Gly Gly <210> 66 <211> 34 <212> PRT <213> 雞 <220> <221> misc一feature <222> (32)7.(34) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基睃 <400> 66

Met Ala Met Ala Gly Val Phe Val Leu Phe Ser Phe Val Leu Cys Gly 15 10 15

Phe Leu Pro Asp Ala Ala Phe Gly Ala Glu Val Asp Cys Ser Arg Xaa 20 25 30

Xaa Xaa <210> 67 <211> 28 <212> PRT <213> 難 <220> <221> misc_feature <222> (26)7.(28) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <400> 67

Met Arg Ser Leu Leu lie Leu Val Leu Cys Phe Leu Pro Leu Ala Ala 1 5 10 15

Leu Gly Lys Val Phe Gly Arg Cys Glu Xaa Xaa Xaa 20 25 • 84 - 144841·序列表.doc 201026322 <210> 68 <211> 29 <212> PRT <213〉難 <220> <221> xaisc_feature <222> (27)7.(29) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <400> 68

Met Lys Leu lie Leu Cys Thr Val Leu Ser Leu Gly lie Ala Ala Val 15 10 15

Cys Phe Ala Ala Pro Pro Lys Ser Val lie Xaa Xaa Xaa 20 25

<210> 69 <211> 34 <212> PRT <213> 智人 <400> 69

Met Pro Ser Ser Val Ser Trp Gly lie Leu Leu Leu Ala Gly Leu Cys 15 10 15

Cys Leu Val Pro Val Ser Leu Ala Glu Asp Pro Gin Gly Asp Ala Ala 20 25 30

Gin Lys <210> 70 <211> 33 <212> PRT <213> 褐鼠 <400> 70

Met Ser Thr Val Glu Leu Ser Leu Cys Leu Leu He Met Leu Ala Val 1 5 10 15

Cys Cys Tyr Glu Ala Asn Ala Ser Gin lie Cys Glu Leu Val Ala His 20 25 30

Glu •85· 144841 ·序列表.doc 201026322 <210> <211> <212> <213> 71 30 PRT 褐鼠 <400> 71

Met Arg Leu Ser Leu Cys Leu Leu Thr lie Leu Val Val Cys Cys Tyr 1 5 10 15

Glu Ala Asn Gly Gin Thr Leu Ala Gly Val Cys Gin Ala Leu 20 25 30 <210> <211> <212> <213> 72 27 PRT AD病毒 <400> 72

Met Arg Tyr Met lie Leu Gly Leu Leu Ala Leu Ala Ala Val Cys Ser 15 10 15

Ala Ala Lys Lys Val Glu Phe Lys Glu Pro Ala 20 25 <210> <211> <212> <21.3> 73 28 PRT 褐鼠 <220> <221> <222> <223> misc feature (16)7.(17) Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <220> <221> <222> <223> misc feature (19)7.(19) Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <220> <221> <222> <223> misc feature (22)7. (24) Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <220> <221> <222> misc feature (28)7.(28) 86- 144841_ 序列表.doc 201026322 <223〉Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <400> 73

Met Lys Ala Ala Val Leu Ala Val Ala Leu Val Phe Leu Thr Gly Xaa 15 10 15

Xaa Ala Xaa Glu Phe Xaa Xaa Xaa Asp Glu Pro Xaa 20 25 <210> 74 <211> 29 <212> PRT <213>狂犬病秦 <400> 74

Met Val Pro Gin Ala Leu Leu Phe Val Pro Leu Leu Val Phe Pro Leu 15 10 15

Cys Phe Gly Lys Phe Pro lie Tyr Thr lie Leu Asp Lys 20 25 <210> 75 <211> 26 <212> PRT <213>流感病秦 <400> 75

Met Lys Thr lie lie Ala Leu Ser Tyr lie Phe Cys Leu Val Phe Ala 1 5 10 15

Gin Asp Leu Pro Gly Asn Asp Asn Asn Ser 20 25

<210> IS <211> 25 <212> PRT <213> 流感病毒 <400> 76

Met Ala lie He Tyr Leu He Leu Leu Phe Thr Ala Val Arg Gly Asp 1 5 10 15

Gin He Cys He Gly Tyr His Ala Asn 20 25 • 87- 144841-序列表.doc 201026322 <210> <211> <212> <213> 77 28 PRT 流感病毒 <400> 77

Met Asn Thr Gin lie Leu Val Phe Ala Leu Val Ala Val lie Pro Thr 15 10 15

Asn Ala Asp Lys lie Cys Leu Gly His His Ala Val 20 25 <210> <211> <212> <213> 78 33 PRT 智人 <400> 78

Met Ala Leu Thr Phe Ala Leu Leu Val Ala Leu Leu Val Leu Ser Cys 15 10 15

Lys Ser Ser Cys Ser Val Gly Cys Asp Leu Pro Gin Thr His Ser Leu 20 25 30 Gly <210> <211> <212> <213> 79 33 PRT 智人 <400> 79

Met Ala Leu Thr Phe Tyr Leu Met Val Ala Leu Val Val Leu Ser Tyr 1 5 10 15

Lys Ser Phe Ser Ser Leu Gly Cys Asp Leu Pro Gin Thr His Ser Leu 20 25 30 Gly <210> <211> <212> <213> 80 33 PRT 智人 144841 -序列表.doc - 88 - 201026322 <400> 80

Met Ala Leu Ser Phe Ser Leu Leu Met Ala Val Leu Val Leu Ser Tyr 1 5 10 15

Lys Ser lie Cys Ser Leu Gly Cys Asp Leu Pro Gin Thr His Ser Leu 20 25 30

Gly <210> 81 <211> 33 <212> PRT <213〉智人 <400> 81

Met Ala Ser Pro Phe Ala Leu Leu Met Val Leu Val Val Leu Ser Cys 15 10 15

Lys Ser Ser Cys Ser Leu Gly Cys Asp Leu Pro Glu Thr His Ser Leu 20 25 30

Gly <210> 82 <211> 33 <212> PRT <213> 智人 <400> 82

Met Ala Leu Ser Phe Ser Leu Leu Met Ala Val Leu Val Leu Ser Tyr 15 10 15

Lys Ser lie Cys Ser Leu Gly Cys Asp Leu Pro Gin Thr His Ser Leu 20 25 30

Gly <210> 83 <211> 33 <212> PRT <213> 智人 -89- 144841·序列表.doc 201026322 <400> 83

Met Ala Leu Pro Phe Ser Leu Met Met Ala Leu Val Val Leu Ser Cys 15 10 15

Lys Ser Ser Cys Ser Leu Gly Cys Asn Leu Ser Gin Thr His Ser Leu 20 25 30

Asn <210> 84 <211> 33 <212> PRT <213〉智人 <400> 84

Met Ala Leu Pro Phe Ala Leu Met Met Ala Leu Val Val Leu Ser Cys 15 10 15

Lys Ser Ser Cys Ser Leu Gly Cys Asn Leu Ser Gin Thr His Ser Leu 20 25 30

Asn <210> 85 <211> 30 <212> PRT <213> 智人 <400> 85

Met Lys Tyr Thr Ser Tyr lie Leu Ala Phe Gin Leu Cys lie Val Leu 1 5 10 15

Gly Ser Leu Gly Cys Tyr Cys Gin Asp Pro Tyr Val Lys Glu 20 25 30 <210> 86 <211> 31 <212> PRT <213> 智人 <400> 86

Met Thr Asn Lys Cys Leu Leu Gin lie Ala Leu Leu Leu Cys Phe Ser 90- 144841·序列表.doc 201026322 15 10 15

Thr Thr Ala Leu Ser Met Ser Tyr Asn Leu Leu Gly Phe Leu Gin 20 25 30 <210> 87 <211> 30 <212> PRT <213> 小鼠 <400> 87

Met Arg Ala Pro Ala Gin lie Phe Gly Phe Leu Leu Leu Leu Phe Pro 1 5 10 15

Gly Thr Arg Cys Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser 20 25 30

<210> 88 <211> 30 <212> PRT <213> 小鼠 <400> 88

Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro 15 10 15

Gly Ser Thr Gly Asp lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Ala Ser 20 25 30 <210> 89 <211> 30 <212> PRT <213> 小鼠 <400> 89

Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro 15 10 15

Gly Ser Thr Gly Asn lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Ala Ser 20 25 30 <210> 90 <211> 30 <212> PRT <213> 小鼠 -91 · 144841·序列表.doc 201026322 <400> 90

Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro 1 5 l〇 15

Gly Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser lie Phe Pro Pro Ser 20 25 30 <210> <211> <212> <213> 91 29 PRT 小鼠 <400> 91

Met Ala Trp lie Ser Leu lie Leu Ser Leu Leu Ala Leu Ser Ser Gly 15 10 15

Ala lie Ser Gin Ala Val Val Thr Gin Glu Ser Ala Leu 20 25 <210> <211> <212> <213> 92 29 PRT 小鼠 <400> 92

Met Ala Trp lie Ser Leu lie Leu Ser Leu Leu Ala Leu Ser Ser Gly 15 10 15

Ala lie Ser Gin Ala Val Val Thr Gin Glu Ser Ala Leu 20 25 <210> <211> <212> <213> 93 29 PRT 小鼠 <400> 93

Met Ala Trp Thr Ser Leu lie Leu Ser Leu Leu Ala Leu Cys Ser Gly 15 10 15

Ala Ser Ser Gin Ala Val Val Thr Gin Glu Ser Ala Leu 20 25 <210> <211> 94 34 -92- 144841-序列表.doc 201026322 <212> PRT <213>小鼠 <220> <221> misc一feature <222> (28)7.<34) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基睃 <400> 94

Met Gly Val Arg Met Glu Ser His Thr Arg Val Phe lie Phe Leu Leu 15 10 15

Leu Trp Leu Ser Gly Thr Asp Gly Asp He Val Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 20 25 30

Xaa Xaa

<210> 95 <211> 32 <212> PRT <213> 小鼠 <400> 95

Met Asp Met Arg Ala Pro Ala Gin He Phe Gly Phe Leu Leu Leu Leu 15 10 15

Phe Pro Gly Thr Arg Cys Asp He Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser 20 25 30 <210> 96 <211> 28 <212> PRT <213>小鼠

<400> 96

Met Lys Val Leu Ser Leu Leu Tyr Leu Leu Thr Ala lie Pro Gly lie 1 5 10 15 .

Met Ser Asp Val Gin Leu Gin Glu Ser Gly Pro Gly 20 25 <210> 97 <211> 29 <212> PRT <213>小鼠 •93- 144841-序列表.doc 201026322 <220> <221> misc一feature <222> (20)7. (29) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <400> 97

Met Gly Trp Ser Trp lie Phe Leu Phe Leu Leu Ser Gly Thr Ala Gly 1 5 10 15

Val His Ser Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 20 25 <210> 98 <211> 29 <212> PRT <213> 小鼠 <220> <221> misc一feature <222> (20)7.(29) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <400> 98 lie Lys Trp Ser Trp lie Ser Leu Phe Leu Leu Ser Gly Thr Ala Gly 15 10 15

Val His Ser Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 20 25 <210> 99 <211〉 29 <212> PRT <213> 小鼠 <220> <221> misc一feature <222> (20)7·(29) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <400> 99

Met Glu Cys Ser Trp Val Phe Leu Phe Leu Leu Ser Leu Thr Ala Gly 15 10 15 lie His Cys Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 20 25 •94- 14484卜序列表.doc 201026322 <210> 100 <211> 29 <212> PRT <213> 小鼠 <220> <221> misc_feature <222> ί20厂 f29) <223> 任何天然產生之胺基酸 <400> 100

Met Glu Trp Ser Gly Val Phe lie Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly 15 10 15

Val Tyr Ser Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 20 25

<210> 101 <211> 29 <212> PRT <213>小鼠 <400> 101

Met Gly Trp Ser Phe lie Phe Leu Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly 15 10 15

Val His Ser Glu Val Gin Leu Gin Gin Ser Gly Ala Glu 20 25 <210> 102 <211> 25 <212> PRT <213>灰狼 <220> <221> misc_feature <222> (1).7(2) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <220> <221> misc^feature <222> (11)7.(11) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <400> 102

Xaa Xaa Pro Leu Leu lie Leu Ala Phe Leu Xaa Ala Ala Val Ala Thr -95- 144841-序列表,doc 201026322 5 10 15

Pro Thr Asp Asp Asp Asp Lys lie Val 20 25 <210> 103 <211> 25 <212> PRT <213> 灰狼 <220> <221> misc一feature <222> (3).7(3) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <220> <221> misc一feature <222> (11)7.(11) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <220> <221> misc一feature <222> (13)7- (13) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <400> 103

Ala Leu Xaa lie lie Phe Leu Ala Leu Leu Xaa Ala Xaa Val Ala Phe 15 10 15

Pro lie Asp Asp Asp Asp Lys lie Val 20 25 <210> 104 <211> 27 <212> PRT <213> 灰狼 <220> <221> misc feature <222> (7).7(7) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <220> <221> misc feature <222> (12)7.(13) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <220〉 <221> misc feature <222> (17)7.(19) 144841·序列表.doc -96- 201026322 <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <22〇> <221> misc一feature <222> {24)7. (24) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <220> <221> misc—feature <222> (27)7.(27) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <400> 104

Ala 1 Phe Leu lie Leu 5 Val Xaa Ala Phe Ala 10 Leu Xaa Xaa Val Ala Phe 15 Xaa Xaa Xaa Val Pro Ala He Xaa Pro Val Xaa 20 25 <210> 105 <211> 26 <212> PRT <213> 灰狼 <220> <221> misc feature <222> Cl).T(2) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <220> <221> misc feature <222> (12)7.(12) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <220> <221> misc feature <222> (16)7.(16) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <220> <221> misc feature <222> (18)7.(18) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <220> <221> misc feature <222> (22)7.(26) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <400> 105

Xaa Xaa Leu lie Leu Val Phe Gly Ala Leu Leu Xaa Ala lie Tyr Xaa 15 10 15 •97· 144841-序列表.doc 201026322

Gin Xaa Ala Phe Val Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 20 25 <210> 106 <211> 25 <212> PRT <213>灰狼 <220> <221> misc一feature <222> (1)..(2) <223> Xaa可λ任何天然產生之胺基酸 <220> <221> misc_feature <222> (8).7(8) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <220> <221> misc_feature <222> (13)7.(13) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <220> <221> raise 一 feature <222> (21)7.(25) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸 <400> 106

Xaa Xaa Phe Phe Leu Leu Leu Xaa Val lie Gly Phe Xaa Val Ala Gin 15 10 15

Tyr Ala Pro His Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa 20 25 <210> 107 <211> 25 <212> PRT <213> 小鼠 <400> 107

Met Lys Phe Phe Leu Leu Leu Ser Leu lie Gly Phe Cys Trp Ala Gin 15 10 15

Tyr Asp Pro His Thr Gin Tyr Gly Arg 20 25 • 98 · 144841-序列表.doc 201026322 <210> 108 <211> 25 <212> PRT <213> 小鼠 <400> 108

Met Lys Phe Val Leu Leu Leu Ser Leu He Gly Phe Cys Trp Ala Gin 15 10 15

Tyr Asp Pro His Thr Ser Asp Gly Arg 20 25 <210> 109 <211> 20 <212> PRT <213>褐鼠 <400> 109

Leu Leu Ser Leu lie Gly Phe Cys Tyr Ala Gin Tyr Asp Pro His Thr 1 5 10 15

Ala Asp Gly Arg 20 <210> 110 <211> 29 <212> PRT <213〉穴兔 <400> 110

Met Met Pro Leu Val Pro Leu Leu Leu Val Ser lie Val Phe Pro Gly 1 5 10 15 lie Gin Ala Thr Gin Leu Thr Arg Cys Glu Leu Thr Glu 20 25 <210> 111 <211> 29 <212> PRT <213> 豬 <400> 111

Met Met Ser Phe Val Ser Leu Leu Val Val Gly lie Leu Phe Pro Ala 1 5 10 15 lie Gin Ala Lys Gin Phe Thr Lys Cys Glu Leu Ser Gin •99- 144841-序列表.doc 201026322 25 20 <210> 112 <211> 26 <212> PRT <213> 褐鼠 <400> 112

Met Lys Arg Leu Leu lie Leu Ser Leu Leu Leu Glu Ala Val Cys Gly 1 5 10 15

Asn Glu Asn Phe Val Gly His Gin Val Leu 20 25 <210> 113 <211> 36 <212> PRT <213> 家牛 <400> 113

Met Pro Arg Leu Cys Ser Ser Arg Ser Gly Ala Leu Leu Leu Ala Leu 15 10 15

Leu Leu Gin Ala Ser Met Glu Val Arg Gly Trp Cys Leu Glu Ser Ser 20 25 30 Gin Cys Gin Asp 35 <210> 114 <211> 30 <212> PRT <213> 豬 <400> 114 Met Ala Trp Gin Gly Leu Leu Leu Ala Ala Cys Leu Leu Val Leu Pro 1 5 10 15

Ser Thr Met Ala Asp Cys Leu Ser Gly Cys Ser Leu Cys Ala 20 25 30 <210 115 <211> 30 <212> PRT <213> 智人 •100· 144841-序列表.doc 201026322 <400> 115

Met Ala Arg Phe Leu Thr Leu Cys Thr Trp Leu Leu Leu Leu Gly Pro 15 10 15

Gly Leu Leu Ala Thr Val Arg Ala Glu Cys Ser Gin Asp Cys 20 25 30 <210> 116 <211> 31 <212> PRT <213> 豬 <220> <221> misc一feature <222> (30)7·(31) <223> Xaa可為任何天然產生之胺基酸

<400> 116

Met Gin Arg Leu Cys Ala Tyr Val Leu lie His Val Leu Ala Leu Ala 15 10 15

Ala Cys Ser Glu Ala Ser Trp Lys Pro Gly Phe Gin Leu Xaa Xaa 20 25 30 <210> 117 <211> 31 <212> PRT <213> 小鼠 <400> 117

Met Asp Arg Arg Arg Met Pro Leu Trp Ala Leu Leu Leu Leu Trp Ser 15 10 15

Pro Cys Thr Phe Ser Leu Pro Thr Gly Thr Thr Phe Glu Arg lie 20 25 30 <210> 118 <211> 31 <212> PRT <213> 錐體蟲 <400> 118

Met Val Lys Ala lie Ala Ser Leu Met Leu Leu His lie Trp Ala lie 15 10 15 101- 144841·序列表.doc 201026322

Glu Glu lie Lys Ala Glu Arg Gin Ala Pro Ser Val Ser Arg Thr 20 25 30 <210> 119 <211> 33 <212> PRT <213> 河内鯰魚 <400> 119

Met Ser Ser Ser Pro Leu Arg Leu Ala Leu Ala Leu Met Cys Leu Val 1 5 10 15

Ser Ala Val Gly Val lie Ser Cys Gly Arg Pro His Val Val Leu Asn 20 25 30

Ser <210> 120 <211> 36 <212> PRT <213> ,餘錄 <400> 120

Met Val Ser Ser Ser Arg Leu Arg Cys Leu Leu Val Leu Leu Leu Ser 15 10 15

Leu Thr Val Ser lie Ser Cys Ser Phe Ala Gly Gin Arg Asp Ser Lys 20 25 30

Leu Arg Leu Leu 35 121 38 PRT 銨鰊 <210> <211> <212> <213> <400> 121

Met Lys Met Val Ser Ser Ser Arg Leu Arg Cys Leu Leu Val Leu Leu 15 10 15

Leu Ser Leu Thr Ala Ser lie Ser Cys Ser Phe Ala Gly Gin Arg Asp 20 25 30 -102- 144841·序列表.doc 201026322

Ser Lys Leu Arg Leu Leu 35 <210> 122 <211> 33

<212> PRT <2i3> mm <400> 122

Met Gin Cys lie Arg Cys Pro Ala lie Leu Ala Leu Leu Ala Leu Val 15 10 15

Leu Cys Gly Pro Ser Val Ser Ser Gin Leu Asp Arg Glu Gin Ser Asp 20 25 30

Asn

<210> 123 <211> 32 <212> PRT <213> 銨縴 <400> 123

Met Gly Phe Leu Lys Phe Ser Pro Phe Leu Val Val Ser lie Leu Leu 15 10 15

Leu Tyr Gin Ala Cys Gly Leu Gin Ala Val Pro Leu Arg Ser Thr Leu 20 25 30 <210> 124 <211> 31 <212> PRT <213> 錄縴 <400> 124

Met Lys Arg lie His Ser Leu Ala Gly lie Leu Leu Val Leu Gly Leu 1 5 10 15 lie Gin Ser Ser Cys Arg Val Leu Met Gin Glu Ala Asp Pro Ser 20 25 30 • 103· 144841-序列表doc

Claims (1)

1. 201026322 七、申請專利範圍： 1. 一種用於保護家禽免於艾美球蟲（Eimeria)感染之球蟲病 疫苗，該疫苗包含重組禽類腺病毒載體，該載體包含啟 動子可操作地連接於包含編碼膜錯定結構域（anchoring domain)之核酸的疏水性信號序列、用於插入開放閱讀框 架（ORF)以使ORF插入該疏水性信號序列框内之多重選 殖位點、聚腺苷酸化信號；及禽類腺病毒基因組。 2. 如請求項1之球蟲病疫苗，其中該相關ORF編碼選自由巨 型艾美球蟲（五iweWa 之截短r56抗原、巨型艾美 球蟲之截短TFP250抗原及巨型艾美球蟲之截短82 kDa抗 原組成之群的抗原。 3. 如請求項1之球蟲病疫苗，其中該多重選殖位點含有編 碼巨型艾美球蟲之截短r56抗原與巨型艾美球蟲之截短 TFP25 0抗原及/或巨型艾美球蟲之截短82 kDa抗原組合的 ORF。 4. 如請求項1之球蟲病疫苗，其中該禽類腺病毒基因組係 選自由 FAV 1、FAV 2、FAV 3、FAV 4、FAV 5、FAV 6、 FAV 7、FAV 8、FAV 9、FAV 10、FAV 11A FAV 12 之基 因組組成之群。 5. 如請求項1之球蟲病疫苗，其中該禽類腺病毒基因組為 FAV 8基因組。 6. 如請求項1之球蟲病疫苗，其中該重組禽類腺病毒載體 進一步包含一個裂解序列緊鄰用於插入該相關ORF之選 殖位點上游，其中該載體之表現產物產生可溶性產物。 144841.doc 201026322 7. 如請求項2之球蟲病疫苗，其中該核酸編碼選自由以下 組成之群的抗原： a) 包含SEQ ID NO: 13中所示全長r56序列之核苷酸 70-1035的序列，但不編碼SEQ ID NO:2中所示完整r56蛋 白序列的裁短R56 ; b) 編碼由 SEQ ID NO:2 之胺基酸 24-345 或 SEQ ID NO:2 之胺基酸24-345之片段組成的截短R56片段的截短r56 ; c) 包含SEQ ID NO:16中所示全長TFP25〇序列之核苦酸 6448-7083的序列，但不編碼SEQ ID N〇:4中所示完整 φ TFP250蛋白序列的截短TFP250 ;及 d) 由SEQ ID ΝΟ:16之核苷酸6448-7083之核酸序列組成 的截短TFP250。 8. —種用於保s蔓豕禽免於艾美球蟲感染之球蟲病疫苗、，兮_ 疫苗包含重組禽類腺病毒載體，該載體包含啟動子可操 作地連接於包含編碼膜錨定結構域之核酸的疏水性作號 序列、及插入該疏水性信號序列框内的碥碼由SEQ id NO:2之胺基酸24-345或SEQ ID NO:2之胺基酸24_345之 ❹ 片段組成的截短r56之核酸、聚腺苷酸化信號；及禽類腺 病毒基因組。 9. 一種用於保護家禽免於艾美球蟲感染之球蟲病疫苗，該 疫苗包含重組禽類腺病毒載體，該載體包含啟動子可操 作地連接於包含編碼膜錨定結構域之核酸的疏水性彳古號 序列、及插入該疏水性信號序列框内的編竭由SEQ ID NO:l6之核苷酸6448-7083之核酸序列組成的截短TFp 144841.doc 201026322 250之核酸、聚腺苷酸化信號；及禽類腺病毒基因組。 1〇· —種用於保護家禽免於艾美球蟲感染之球蟲病疫苗，該 疫苗包含重組禽類腺病毒載體，該載體包含啟動子可操 作地連接於包含編碼膜錨定結構域之核酸的疏水性信號 序列、及插入該疏水性信號序列框内的編碼巨型艾美球 蟲之截短82 kDa抗原的核酸、聚腺苷酸化信號；及禽類 腺病毒基因組。 11. 一種多價球蟲病疫苗製劑’其包含如請求項7之球蟲病 疫苗及 包含下列重組禽類腺病毒載體之球蟲病疫苗，該載體 包含啟動子可操作地連接於包含編碼膜錨定結構域之核 酸的疏水性信號序列、及插入該疏水性信號序列框内的 編碼由SEQ ID NO: 16之核苷酸6448-7083之核酸序列組 成的截短TFP250之核酸、聚腺苷酸化信號；及禽類腺病 毒基因組；及/或 包含下列重組禽類腺病毒載體之球蟲病疫苗，該載體 包含啟動子可操作地連接於包含編碼膜錨定結構域之核 酸的疏水性信號序列、及插入該疏水性信號序列框内的 編碼巨型艾美球蟲之戴短82 kDa抗原的核酸、聚腺苷酸 化信號；及禽類腺病毒基因組。 12. 如吻求項11之多價球蟲病疫苗製劑，其進一步包含選自 由以下組成之群的免疫原：馬立克病病毒（Marek,s Dlsease Vlrus，MDV)、新城雞瘟病毒（Newcastle Disease virus ’ NDV)、傳染性支氣管炎病毒（IBV)、雞貧企病毒 144841.doc 201026322 (CAV)、傳染性法氏囊病（bursal disease)病毒（IBDV)、禽 流感（AI)、呼腸孤病毒（Reo virus)、禽類逆轉錄病毒 (Retro virus)、禽（Fowl)腺病毒、火雞鼻氣管炎病毒、沙 氏桿菌屬（Salmonella spp.)及大腸桿菌（E. coli)。 13. —種使個體免疫以免於柔嫩艾美球蟲（五iene/icz)、 巨型艾美球蟲、堆型艾美球蟲acervw/z.wa)、毒 害艾美球蟲（五/所eria necairix)、早熟艾美球蟲（五imerk praecox)、和緩艾美球蟲（心·阳·出）或布氏艾美球蟲 卜㈣以⑴感染的方法，其包含向該個體投與如 請求項1之疫苗的步驟。 14. 如請求項13之方法，其中該投藥引發之免疫力與以包含 全長r56或全長TFP 250抗原或全長82 kDa抗原之FAV載 體使該個體免疫時所見之免疫力相比增強。 15. 如吻求項13之方法，其中該個體為選自由以下組成之群 的禽類.雞、火雞、鶴、鴨、矮雞咖⑽⑽）、鶴鶴及嫣 子0 16.如請求項15之方法， 17·如請求項16之方法 chickens) 〇 其中該禽類為雞。 ’其中該等雞為成年肉雞（br〇iler 3求項13之方去，其中該投藥包含以該疫苗嘴麗該個 體，在食物中儀食該個體該疫苗，及提供該疫苗於該個 體之飲料供應中。 + :提供雞群針對柔嫩艾美球蟲、巨型艾美球蟲、堆型 球蟲、毒害艾美球蟲、早熟艾美球蟲、和緩艾美球 144841.doc 201026322 蟲或布氏艾美球蟲之保護性免疫力的組合疫苗接種療 法’其包含向該個體投與如請求項之1之疫苗且向該雞 群投與CoxAbic®之步驟。 20. 如清求項19之組合疫苗接種療法，其中向種母雞 (breeder hens)投與該CoxAbic®以賦予孵出之小雞免疫力 且向孵出後第一天及稍晚的小雞及該群體之成年肉母雞 (broiler hens)投與該如請求項1之疫苗。 21. —種包含禽類腺病毒基因組之重組禽類腺病毒載體，該 載體包含異源啟動子、異源疏水性信號序列、多重選殖 位點及聚腺苷酸化序列’其中該啟動子及該疏水性信號 序列位於多重選殖位點之上游，其中相關〇RF插入該多 重選殖位點中將產生能夠在該啟動子控制下且於該信號 序列框内表現該相關ORF之表現載體。 22. 如請求項2 1之重組禽類腺病毒載體，其中該疏水性信號 序列包含一個裂解位點以允許該相關ORF之表現產物自 其表現之宿主細胞分泌。 23. 如請求項21之重組禽類腺病毒載體，其中該信號序列不 含裂解位點，由此導致該相關ORF之融合表現產物的表 現錯定於該宿主細胞之細胞表面上。 24. —種重組禽類腺病毒載體，其包含啟動子可操作地連接 於包含編碼膜錨定結構域之核酸的疏水性信號序列、用 於插入相關ORF以使相關0RF插入該疏水性信號序列框 内之多重選殖位點、聚腺苷酸化信號；及禽類腺病毒基 因組。 144841.doc 201026322 25. 如請求項24之重組禽類腺病毒載體，其進一步包含一個 裂解序列緊鄰用於插入該相關ORF之該選殖位點上游， 其中該載體之表現產物產生可溶性ORF產物。 26. —種重組禽類腺病毒載體’其包含啟動子可操作地連接 於： a) 疏水性分泌信號序列及裂解位點，或包含編碼膜錯 定結構域之核酸的信號序列， b) 編碼巨型艾美球蟲之截短r5 6蛋白之核酸， c) 聚腺苷酸化信號及 d) 禽類腺病毒基因組。 27. —種重組禽類腺病毒載體’其包含啟動子可操作地連接 於： a) 疏水性分泌信號序列及裂解位點，或包含編碼棋錯 定結構域之核酸的信號序列， b) 編碼巨型艾美球蟲之截短TFP250蛋白之核酸， c) 聚腺苷酸化信號及 d) 禽類腺病毒基因組。 28. —種重組禽類腺病毒載體’其包含啟動子可操作地連接 於： a) 疏水性分泌信號序列及裂解位點，或包含編瑪膜錯 定結構域之核酸的信號序列， b) 編碼巨型艾美球蟲之截短82 kDa蛋白之核酸， c) 聚腺苷酸化信號及 d) 禽類腺病毒基因組。 144841.doc 201026322 29. 如請求項26之重組禽類腺病毒載體，其中該編碼截短r56 之核酸包含SEQ ID NO: 14中所示全長r56序列之核苷酸 70-1035的序列，但不編碼8丑〇10 1^0:2中所示之完整156 蛋白序列。 30. 如請求項26之重組禽類腺病毒載體，其中該編碼截短r56 之核酸編碼由SEQ ID NO:2之胺基酸24-345或SEQ ID NO :2之胺基酸24-345之片段組成的截短R56片段。 3 1.如請求項26之重組禽類腺病毒載體，其中該編碼截短 TFP250之核酸包含SEQ ID NO:16中所示全長TFP250序 列之核苷酸6448-7083的序列，但不編碼SEQ ID NO: 4中 所示之完整TFP250蛋白序列。 3 2.如請求項26之重組禽類腺病毒載體，其中該編碼截短r56 之核酸編碼由SEQ ID NO:4之胺基酸2150-2361組成的截 短r56片段。 3 3.如請求項27之重組禽類腺病毒載體，其中該編碼截短 TFP250之核酸包含SEQ ID NO:16中所示全長TFP250序 列之核苷酸6444-7083的序列，但不編碼SEQ ID NO: 4中 所示之完整TFP250蛋白序列。 34.如請求項27之重組禽類腺病毒載體，其中該編碼截短 TFP250之核酸編碼由SEQ ID NO:4之胺基酸2149-2361組 成的截短TFP250片段。 3 5.如請求項26之重組禽類腺病毒載體，其中該分泌信號序 列係選自由雞γ干擾素、豬γ干擾素及人類流感H1N2之分 泌信號序列組成之群。 144841.doc 201026322 3 6.如請求項26之重組禽類腺病毒載體，其中該膜錨定信號 序列係選自由禽流感HA抗原之分泌信號序列組成之群。 3 7. —種疫苗，其包含如請求項26之重組禽類腺病毒載體。 3 8. —種引發禽類群體免疫反應的方法，其包含向該群體投 與如請求項38之疫苗。 3 9.—種禽類群體接種疫苗對抗球蟲病之方法，其包含投與 包含如請求項24之重组禽類腺病毒載體之疫苗，其中投 與該疫苗與投與包含全長r56或全長TFP250之疫苗相比 引發提高的免疫反應。 40. —種分離的細胞，其包含如請求項24之重組禽類腺病毒 載體。 41. 一種醫藥調配物，其包含如請求項24之重組禽類腺病毒 載體及適當賦形劑。 144841.doc