TW200932229A - Quinoline derivatives 057 - Google Patents

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200932229 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 發明領域 5 ❹ 10 15 ❹ 本發明係有關於喳啉衍生物、其製法、其在治療上之 用途，含其之藥學組成物及用於製備藥學組成物之方法。 【先前技 發明背景 P2X7受體（先前稱為P2Z受體），其係為配體·門控 (ligand-gated)離子通道，存在於多種細胞類型上，已知這 些細胞大部份涉及炎性/免疫病程。更明確地，這些細胞為 巨嗤細胞、肥大細胞及淋巴細胞(丁及則。該P2X7受體藉細 胞外核苷酸’特別為腺苷三磷酸，而發生之活化作用可導 致介百素-1石（IL-ly3)釋放及巨細胞形成（巨噬細胞/小神經 膠質細胞）、去粒化作用（肥大細胞)及增生(Τ細胞）與細胞;周 亡及L-選擇素(selectin)脫落（淋巴細胞）。ρ2Χ7受體亦位於抗 原提呈細胞(APC)、角質細胞、唾液腺泡細胞（腮腺細胞）、 肝細胞及腎小球環間膜細胞上。較佳製備能有效作為可用 以治療炎性、免疫或心血管疾病、及該P2X7受體可在其中 起作用之病因之P2X7受體拮抗劑的化合物。 可作為P2X7受體拮抗劑的藥物之一重要性質為其具有 高效力。而且，此等藥物亦較佳具有可進一步增強藥物有 效性之良好選擇性及藥物動力性。作為一實例，此等藥物 最好對人類趟阿哥哥（ether-a-go-go)關聯性基因（j^rg)編 碼之鉀通道顯示低活性。關於這方面，活體外抗hERG結合 20 200932229 性之低活性表示活體内低活性。 自 W02003/080579、W02004/106305、W02005/009968 及W02006/059945得悉含喳啉基之P2X7拮抗劑。現在已非 可預期地發現通常涵蓋在WO 2004/106305中所述之化合物 種類内之一化合物具有有利的藥學性質。例如除了具有高 效力外’本發明該化合物顯示抗hERG結合性之很低活性， 因此可增強其作為藥物之合適性。 t發明内容3 發明概要 根據本發明，因此係提供式(I)化合物

或其藥學上可接受鹽。 應瞭解本發明該化合物可以呈溶劑化（例如水合）形式 乂及非冷劑化形式存在。亦應瞭解本發明涵蓋所有此等溶 劑化形式。 本發明該化合物具有高Ρ2χ7拮抗騎性。此外，其對 ϋϋ阿哥哥％聯性基因（hERG)編碼之_通道具很低活 眭，因此就安全界限而言很有利。 亥式(I)化合物之藥學上可接受鹽包括但不限於酸加 200932229 成鹽，諸如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、反丁烯 一酸鹽'順丁烯二酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、草酸鹽、 甲績酸鹽或對_甲苯磺酸鹽。 本發明该化合物於其喻嘻咬基環之第3位置（亦即於 -NHCH2CH2〇H取代基所直接連接之碳原子）包含一對掌性 中心。在本發明中，如藉the cahn_Ingold prelog系統所指定 或如在下式(I)結構巾所示，於本對掌性巾心、之立體化學構 型為(S)。

10 ❹ 15 為了避免疑惑，本發明該⑻立體異構物可以與(R)立體 異構物呈混合物形式存在。例如該⑻立體異構物可以與該 (R)立體異構物呈1 : 1混合物形式存在。 在-實施例中，本發明提供光學上純的式⑴化合物。 就本專利說明書㈣，該料“料上純的”餘據鏡像異 構物過量㈣而定義，自錢鏡像異構物縣量與這些存在 量之總數的差異W分比表示）可計算該出麟異構物 過量。為_起見，含95%_鏡像異構物及5%另一鏡像異 構物之製劑具有90%之鏡像異構物過量[亦即 (95-5)/(95+5)χ_。根據本發明之光學上純的化合物具有 5 200932229 至少90%之e.e.。在本發明之一實施例中，光學上純的化合 物具有至少95%之e.e.。在本發明之另一實施例中，光學上 純的化合物具有至少98%之e.e.。 如藉ACD Labs(Toronto, Canada)之IUPAC命名套裝軟 5 體所規定，該式（I)化合物之化學名稱為6-氣-N-[(l-羥環庚 基）甲基]-2-{(3S)-3-[(2-羥乙基）胺基]-吡咯啶-l-基}喳啉-5-羧醯胺。 在本發明一實施例中，係提供一種化合物，其係為： 6-氯-N-[(l-羥環庚基）曱基]-2-{(3S)-3-[(2-羥乙基）胺基]-吡 10 咯啶-l-基}喳啉-5-羧醯胺或其藥學上可接受鹽。 在本發明一實施例中，係提供一種化合物，其係為： 6-氣-N-[(l-羥環庚基）曱基]-2-{(3S)-3-[(2-羥乙基）胺基]-吡 洛°定-1-基}唆琳-5-叛酿胺水合物。 本發明進一步提供一種用於製備如上文定義之式（I)化 15 合物或其藥學上可接受鹽之方法，其包括： (a)在還原胺化條件下，使式(II)化合物

與式(III)化合物 (II)， 200932229

H (III) 其中PG代表保護基團（例如曱矽烷基保護基團， 甲矽烷基、第三-丁基二甲基甲矽烷基；苄醚， 對-曱氧基苄基、3.4-二甲ϋ 爷甚l #地 團’諸如三 5 3,4-二甲氧基f基；及酯保護基團 郭二乙基 諸如苄基、 &團’諸如 _ 10 乙酸酯及苯甲酸酯）， 進行反應並可選擇性形成該化合物之藥學上可接受越。 可在合適還原劑，諸如氰基硼氫化鈉、三乙醯氧基硼 氫化鈉或硼氫化鈉存在下，在極性有機溶劑（諸如甲醇、乙 醇、二氣甲烷或Ν-甲基吡咯啶單獨或與乙酸一起）中進行兮 (11)及(ΠΙ)之反應。最好於自（TC至100°C範圍内之溫度下， 例如於25°c下進行該反應。 式(III)化合物係市售、在文獻中係已知或可藉熟悉本項 技藝者使用已知技術而製成。 式(π)化合物之製法如圖解1所述。 15

圖解1 於室溫下在二氣曱烷中，藉以草醯氯及二甲基甲醯胺 處置而使2,6-二氣喳啉_5-羧酸(贾02004/106305)轉化成對 應醯氯。然後添加該醯氣至1-(胺基甲基)-氣庚醇(V)(W.C. Vincek, C.S. Aldrich, R.T. Borchardt and G.L. Grunewald, J. 7 20 200932229

Med· Chem.，1981，21(1)，7-12)在二氯甲烷中之溶液内以轉 化成酿胺(VI)。然後在碳酸鉀存在下，在回流乙腈中使醯胺 (VI)與（S)-3-胺基吡啶(viI)(Alfa Aesar，99% ee)反應以得到 胺(II)。 5 熟悉本項技藝者應瞭解在本發明該等方法中，在該等 起始試劑或中間產物化合物中之特定官能基，諸如羥基、 羧基或胺基需要經保護基團保護。因此，式(I)化合物之製 法可包括於一特定階段下經一或多種保護基團保護及/或 移除該一或多種保護基團。官能基之該保護作用及脫除保 10 護作用描述在以下參考文獻中：‘Protective Groups in Organic Synthesis’，第 2版，T.W. Greene and P.G.M. Wuts， Wiley-Interscience (1991)及 ‘Protecting Groups5, P.J. Kocienski，Georg Thieme Verlag (1994)。可使用習知方法使 上述之式(I)化合物轉化成藥學上可接受鹽。 15 本發明該化合物具有有益效力、選擇性及藥物動力學 性質。例如本發明該化合物對人類醚阿哥哥關聯性基因 (hERG)編碼之钟通道具低親和力。關於這方面，與該經 hERG編碼之鉀通道交互作用且因此藉K+外排物而恢復負 細胞電位之藥物可延長QT間期，因而導致後天性長QT症候 20 群（1^1')[1^.(^.8&叩1^116也，（^11311§，]^.丑.€111^*311，：\11\

Keating，Cell 1995, 81，299-307;及K. Finlayson等人，Eur_ J.

Pharm. 2004, 500, 129-142]。因此，其會誘發潛在致命性心 律不整，亦即多型性心室頻脈(torsade de points)(TdP)[W. Haferkamp等人，Eur. Heart J. 2000，21，1216-1331]。若非計 200932229 5 ❹ 10 15 ❹ 20 劃用於心血管用途，對心通道且特別為該hERG通道無影響 之新化學實體因此可得到改良的安全特性，因此其治療及 調節效用優於具有QT延長作用之藥物。Kiss等人(Assay Drug Dev_ Technol· 2003, 1，127-135)描述評估化合物抑制離 子通道活性，諸如hERG之能力的方法。Springthorpe and Strandlund (WO 2005037052)描述評估化合物結合ικΓ钟 (hERG)之能力的方法。 如藉藥物動力學參數所測定，根據本發明之該化合物 亦顯示合適的口服生物可用率。本發明該化合物亦顯示低 血漿蛋白質結合性。本發明該化合物在活體外攝脂解作用 篩中亦顯示低活性。 本發明該化合物或其藥學上可接受鹽可有效地用以治 療以下病症： 1.呼吸道：氣道之阻塞性疾病，其包括：氣喘，其包 括支氣管、過敏性、内因性、外因性、運動誘發性、藥物 誘發性（其包括阿斯匹靈（aspirin)及NSAID誘發性)及塵埃誘 發性氣喘，其等兼具間歇性及持續性且全部具嚴重性、及 氣道過度反應性之其它病因；慢性阻塞性肺病（COPD);支 氣管炎，其包括感染性及嗜伊紅性支氣管炎；肺氣腫；支 氣管擴張症；纖維囊泡症；肉狀瘤病；農民肺及相關疾病； 過敏性肺炎；肺纖維變性’其包括隱原性纖維性肺泡炎、 特發性間質性肺炎、抗腫瘤治療物併發之纖維變性、及慢 性感染，其包括結核病與麴菌病及其它真菌感染；肺移植 之併發症；肺血管分佈之金管炎性及血栓性病症、及肺動 9 200932229 脈血壓過高·’止咳活性，其包括與氣道之炎性及分泌病症 有關之慢性咳嗷、及醫生疏失所造成之咳嗷；急性及慢性 鼻炎’其包括藥物性鼻炎、及血管運動性鼻炎；常年性及季 節性過敏性鼻炎，其包括神經性鼻炎(花粉熱）；鼻息肉病； 5 急性病毒感染，其包括普通感冒、及由呼吸道合胞病毒、流 行性感冒、冠狀病毒(其包括SARS)及腺病毒所引起之感染； 2.骨及關節：與，例如先天髖發育不全原發性及繼發 性骨關節炎/骨關節病有關或包括其等之關節炎；頸及腰脊 椎炎、及下背部及頸部痛；類風濕性關節炎及史提爾氏症 10 (StiU’s disease);血清反應陰性的脊椎關節疾病，其包括僵 直性脊椎炎、牛皮癬性關節炎、反應性關節炎及未分化型 脊椎關節疾病；敗血性關節炎及其它感染關聯性關節病與 骨疾’諸如結核病’其包括波特氏症(Potts’disease)及龐塞 氏症候群(Poncet’s syndrome);急性及慢性晶體誘發性滑膜 15 炎’其包括尿酸鹽型痛風、焦磷酸鈣沈積症、鈣磷灰石關 聯性腱、黏液囊及滑膜炎症；貝賽特氏症（Behcet，s disease);原發性及繼發性索格偷氏症候群（Sjogren，s syndrome);全身性硬化症及局限性硬皮病；全身性紅斑性 狼瘡、混合型結締組織病、及未分化型結締組織病；炎性 20 肌病’其包括皮肌炎及多肌炎；風濕性多肌痛；幼年型關 節炎，其包括任何關節分佈之自發性炎性關節炎及相關症 候群、與風濕熱及其全身性併發症；血管炎，其包括巨細 胞動脈炎、南安氏動脈炎(Takayasu’s arteritis)、邱-史特勞 斯（Churg-Strauss)症候群、結節性多動脈炎、微細多動脈 200932229 炎、及與病毒感染、過敏性反應、冷凝球蛋白、及異常蛋 白質（paraprotein)有關之血管病；下背痛；家族性地中海 熱、莫可-威爾斯氏症候群(Muckle-Wells syndrome)、及家 族性愛爾蘭熱(Familial Hibernian Fever)、菊地氏症(Kikuchi 5 ❹ 10 15 20 disease);藥物誘發型關節痛、腱炎、及肌病； 3·由於損傷[例如運動損傷]或疾病引起之肌與骨的疼 痛及結締組織重修復：關節炎(例如類風濕性關節炎、骨關 Ip炎、痛風或晶體性關節病）、其它關節病（諸如椎間盤變性 或顳骨與下頜的關節變性）、骨重修復病（諸如骨疏鬆病、潘 吉德氏症(Paget’s disease)或骨壞死）、多軟骨炎、硬皮病、 混合型結締組織病症、脊椎關節病或牙周病（諸如牙周炎）； 4.皮膚：牛皮癖、異位性皮膚炎、接觸性皮膚炎或其 匕濕療性皮膚病、及遲發型過敏反應；植物性_及光照性皮 膚炎；皮脂漏皮膚炎、疱疹性皮膚炎、扁平苔癖、硬化萎 縮性苔癣、壞疽性膿皮病、皮膚肉狀瘤、盤狀紅斑性狼瘡、 天疱瘡、類天疱瘡、大泡性表皮鬆懈、蓴麻疹、血管性水 腫、血管炎、毒物性紅斑、皮膚嗜伊紅白球增多簇圓禿、 雄性型禿頭〜史威特氏症候群⑺^^化^”士^^广韋伯-克 里斯琴(Weber-Christian)症候群、多形紅斑；感染性及非感 染性蜂窩組織炎；脂層炎；皮膚淋巴瘤、非黑色瘤皮膚癌 及其匕發月不全的病灶；藥物誘發型病症，其包括固定型 藥疹； 5·眼睛：瞼炎；結膜炎，其包括常年及春季過敏性結 膜炎；虹膜炎；前及後葡萄膜炎；脈絡膜炎；自體免疫； 11 200932229 會危及網膜之退化性或炎性病症；眼炎，其包括交感性眼 - 炎；肉狀瘤病；感染症，其包括病毒、真菌、及細菌感染； 6.胃腸道：舌炎、齦炎、牙周炎；食道炎，其包括回 流；嗜伊紅型胃腸炎、著色性蓴麻疹、克隆氏症(Crohn’s 5 disease)、結腸炎，其包括潰瘍性結腸炎、直腸炎、肛門搔 癢；腹疾、大腸激躁症、及可具有遠離腸之作用的食物關 聯性過敏(例如偏頭痛、鼻炎或濕疹）； 7·腹部的疾病：肝炎，其包括自體免疫、酒精性及病 毒性肝炎；肝纖維變性及肝硬化；膽囊炎；急性及慢性胰 Ο 10 臟炎； 8·生殖泌尿疾病：腎炎，其包括間質性及腎絲球腎炎； 腎病症候群；膀胱炎，其包括急性與慢性（間質性)膀胱炎及 . 哈納氏潰瘍（Hunner’s ulcer);急性及慢性尿道炎、攝護腺 炎、副睪炎、卵巢炎及輸卵管炎；女陰陰道炎；佩洛尼氏 ’ 15 症(Peyronie’s disease);男性及女性勃起機能障礙； 9. 同種異體移植物排斥：例如腎、心臟、肝、肺、骨 趙、皮膚或角膜移植後或輸血後之急性與慢性同種異體移 ® 植物排斥；或慢性移植物對抗宿主疾病； 10. CNS :阿滋海默氏症(Alzheimer’s disease)及其它癡 20 呆症，其包括CJD及nvCJD ;澱粉樣變性病；多發性硬化及 其它髓鞘脫失症候群；大腦動脈粥瘤硬化及血管炎；顳動 脈炎；重肌無力症；急性與慢性痛（不論是中樞或末梢源之 急性、間歇性或持續性痛），其包括内臟痛、頭痛、偏頭痛、 三又神經痛、非典型臉部痛、關節及骨痛、癌及腫瘤侵襲 12 200932229 引起的疼痛、神經病痛症候群，其包括糖尿病、疱疹後、 及HIV-關聯性神經病變；神經肉狀瘤病：惡性、感染性或 自體免疫病程之中樞及末梢神經系統併發症； 5 ❹ 10 15 20 11 ·其它自體免疫及過敏性病症，其包括橋本氏甲狀腺 炎（Hashimoto’s thyroiditis)、格雷夫司氏症（Graves, disease)、愛迪生氏症(Addis〇n，s disease)、糖尿病、自發性 血小板減性紫斑症、嗜伊紅性肌膜炎、高-IgE症候群、抗 麟脂症候群； 12·其它具有炎性或免疫組元之病症；其包括後天性免 疫缺乏症候群(AIDS)、麻瘋、西澤萊(Sezary)症候群、及副 癌症候群； 13. 心血管疾病：動脈粥瘤硬化，其可影響冠狀及末梢 循環；心包炎；心肌炎，炎性及自體免疫心肌病，其包括 心肌肉狀瘤；缺血性再灌注損傷；心内膜炎、心瓣炎、及 主動脈炎’其包括感染性(例如梅毒性）主動脈炎；血管炎； 近侧及末梢靜脈之病症，其包括靜脈炎及血栓形成，其包 括深靜脈血栓形成與靜脈曲張併發症； 14. 腫瘤學：一般癌症之治療，該等一般癌症包括攝護 腺瘤、乳瘤、肺瘤、卵巢瘤、胰瘤、腸瘤、結腸瘤、胃瘤、 皮膚瘤、腦瘤及危及骨髓(其包括白血病）及淋巴增生之惡性 腫瘤’諸如霍吉金氏及非霍吉金氏淋巴瘤（Hodgkin’s and non-Hodgkin’s lymphoma);其包括轉移性疾病及腫瘤復 發、與副癌症候群之預防及治療；及 15. 胃腸道：腹疾、直腸炎、嗜伊紅性胃腸炎、著色性 13 200932229 10 15 20 氏症、潰瘍性結腸炎、微細結腸炎、不定型 大腸激躁症、大腸激躁症候群、非炎症性腹填、 離腸之作用的食物_性過敏，例如偏頭痛、鼻炎 合物 本發明另一方面係提供如 藥學上可接受鹽在製備用於治二：式⑴化合物或其就本專利說明書而言，除==。 療，，亦包括“預防，，。該等名定，該名詞“治 地經推斷。 ’、及治療上”應該相應 本發明另一方面係提佴 上文定義的式⑴化合物或其藥學炎〜 藥學上可接受鹽在製文定義之式⑴化合物或其 用途。 /〇療類風濕性關節炎之藥物的 病之如上文《_=提則於治純喘紐性阻塞性肺 本發明另-方面係姻c上可接受鹽。 藥學上可接受鹽在數傷用料療=式⑴化合物或其 藥物的用途。 蜃虱喘或忮性阻塞性肺病之 本發明另一方面係提供學上可接受鹽。 ’、上文疋義之式(I)化合物或其

14 200932229 藥學上可較鹽在製㈣鼓祕腸减克隆氏症之 藥物的用途。 本發明亦提供一種治療類風濕性關節炎之方法，其包 5 10 15 ❹ 20 括對患者投與治療上有效量之如上文定義的式⑴化合物或 其藥學上可接受鹽。 本發明亦提供-種治療阻塞性氣道疾病（例如氣喘或 COPD)之方法，其包括對患者投與治療上有效量之如上文 疋義之式(I)化合物或其藥學上可接受鹽。 本發明亦提供—種治療炎症性腸病或克隆氏症之方 法’其包括對患者投與治療上有效量之如上文定義的式⑴ 化合物或其藥學上可接受鹽。 為了使用本發明化合物或其藥學上可接受鹽以治療性 處置溫血動物，諸如人類，通常根據標㈣學實務將該成 份調配成藥學組成物。 因此，本發明另-方面係提供一種藥學組成物，其包 含式(I)化合物或其藥學上可接受鹽（活性成份)、及藥學上可 接受佐劑、稀釋劑或載劑。本發明又另—方面係提供—種 製備該組成物之方法，其包括混合活性成分與藥學上可接 受佐劑、稀釋劑或載劑。根據投藥方式，該藥學組成物可， 例如包含自0.05至99w%(重量％)，諸如自〇 〇5至8〇w%，例 如自0.10至70w%，諸如自〇1〇至5〇1^%活性成份所有重， %係以總組成物為基準計。 可以以適用於該病症（其較佳，藉例如局部（諸如用於肺 及/或氣道或皮膚）、口服、直腸或非經腸投藥而進行汐療） 15 200932229 之標準方式投與本發明該等藥學組成物。就這些目的而 言，可藉本項技藝中已知之方法而將本發明該等化合物調 配成以下形式：例如氣溶膠、乾散劑調配物、錠劑、膠囊、 糖漿、散劑、顆粒、水性或油性溶液或懸浮液、（脂質）乳液、 5可分散散劑、栓劑、軟膏、乳劑、滴劑及無菌注射水性或 油性溶液或懸浮液。 本發明之合適藥學組成物為適於以單位劑型口服之組 成物，例如含有介於(Π毫克與丨克間之活性成份的錠劑或 膠囊。 10 在另一方面中，本發明之藥學組成物為適於靜脈内、皮 下或肌内注射之組成物。各患者可接受例如⑽丨毫克公斤“ 至1〇〇毫克公斤_丨，例如在(U毫克公斤-丨至20毫克公斤]範圍内 之本發明該化合物的靜脈内、皮下或肌内注射劑量該組 成物之投與頻率絲日丨至4次。可藉團式注射而提供該靜 脈内、皮下及肌内劑量。或者，可在一般時間内藉連續輸 注而提供該靜脈内劑量。或者，各患者可接受約等於每日 非經腸劑量之每日口服劑量，該組成物之投與頻率為每幻 至4次。 本發明進-步係有關於合併治療物，其巾係與具有另 2〇 -治療劑或藥劑群之合併製劑同時或相繼投與本發明化合 物或其藥學上可接受鹽、或含本發明化合物之藥學組成: 或調配物以治療上述病症中之一或多種。 更詳細地’ a炎症性疾病，諸如(但不限於)類風濕性關 郎炎、骨關卽炎、氣喘、過敏性鼻炎、慢性阻塞性肺病 200932229 (COPD)、牛皮癬、及炎症性腸病之治療而言，本發明該等 化合物可以與下述藥劑併用。 可抑制氧化氮施體之環氧合酶(CINOD);腎上腺促糖 皮質激素（不論藉局部、口服、肌内、靜脈内或關節内方式 5 而投藥）；阿美蘇嗓呤（methotrexate);雷夫米揀 (leflunomide);經基氣°奎(hydroxychloroquine) ; d-青徽胺； 金諾芬(auranofin)或其它非經腸或口服金製劑；止痛劑；雙 酯瑞因（diacerein);關節内治療物，諸如透明質酸衍生物； 及營養補充物，諸如葡萄糖胺。 10 本發明又進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可 接受鹽與細胞激素或具有細胞激素機能之促效劑或拮抗劑 (其包括可在細胞激素傳訊路徑上作用之藥劑，諸如s〇cs 系統之調節劑）’其包括〇：_、yg·、及7 _干擾素；似騰島素 生長因子I型（IGF-1)之組合。 15 本發明又進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可 接受鹽與具有趨化激素受體機能之調節劑的組合，該調節 劑為，諸如以下之拮抗劑：CCR1、CCR2、CCR2A、CCR2B、 CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR8、CCR9、CCR10 及CCR11 (就C-C族而言）；CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4 20 &CXCR5(就C-X-C族而言）及CX3CR1(就C-X3_C族而言）。 本發明又進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可 接受鹽與基質金屬蛋白酶(MMP)之抑制劑的組合，該等 MMP為基質溶素(stromeiysin)、膠原酶、明膠酶、以及聚蛋 白多膽酶(aggrecanase);特別為膠原酶_1(MMP-1)、膠原酶 17 200932229 -2(MMP-8)、膠原酶-3(MmP-13)、基質溶素_1(]^]^-3)、基 質溶素-2(MMP-10)、及基質溶素_3(MMP-11)與MMP-12其 包括諸如脫氧土黴素(doxycycline)。 本發明又進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可 5 接夂鹽與下述之組合：白三烯素生物合成抑制劑、5-脂肪 氧合酶(5-LO)抑制劑或5-脂肪氧合酶活化蛋白質（FLAP)拮 抗劑’諸如齊留通(zileuton)、ABT-76卜芬留通(fenleuton)、 替波札琳(tepoxalin)、Abbott-79175、Abbott-85761)、N-(5- 經取代)-°g吩-2-烧基續醯胺、2,6-二-第三-丁基盼腙、甲氧 10 基四氫°底喃（諸如Zeneca ZD-2138)、化合物SB-210661、經 吨咬基取代之2-氰基萘化合物（諸如L-739,010)、2-氰基喳啉 化合物（諸如L-746,530)、或巧丨b朶或啥琳化合物，諸如 MK-591、MK-886、及BAYxl〇〇5。 本發明進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可接 15 受鹽與適於選自以下所組成之群組之白三烯素(LT)、B4、 LTC4、LTD4、及LTE4的受體拮抗劑之組合：啡嘍畊-3-ls， 諸如L-651，392 ;甲脒基化合物，諸如CGS-25019C ;苯并噚 拉敏(benzoxalamine)，諸如翁塔唑拉(ontaz〇iast);苯羧醯亞 胺醯胺，諸如BIIL 284/260 ;及化合物，諸如札非留卡 20 (zafirlukast)、阿魯卡（ablukast)、蒙特魯卡（montelukast)、 普倫魯卡（pranlukast)、波魯卡（veriukast)(MK-679)、 RG-12525、Ro-245913、依拉魯卡(iraiukast)(CGP 45715A)、 及 BAYx7195 〇 本發明又進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可 200932229 接受鹽與以下抑制劑之組合：磷酸二酯酶(PDE)抑制劑，諸 如甲基黃嗓吟素’其包括茶驗及胺基非林(aminophyilinej ; 選擇性PDE同功酶抑制劑，其包括PDE4抑制劑、變異體 PDE4D之抑制劑或PDE5之抑制劑。 5 ❹ 10 15 ❹ 20 本發明進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可接 受鹽與組織胺1型受體拮抗劑之組合，該拮抗劑為，諸如西 替利畊(cetirizine)、羅拉塔啶(l〇ratadine)、迪斯羅拉塔咬 (desloratadine)、飛索芬那咬（fexofenadine)、阿克利伐亭 (acrivastine)、特芬那咬（terfenadine)、阿司咪 〇坐 (astemizole)、阿吉拉斯亭（azelastine)、左卡巴斯亭 (levocabastine)、氯芬拉胺（chlorpheniramine)、異丙口井 (promethazine)、赛克利讲（cyclizine)或米卓斯亭 (mizolastine);該組合可口服、局部或非經腸投與。 本發明亦進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可 接受鹽與質子泵抑制劑（諸如奥美拉唾(omeprazole))或胃保 護性組織胺2型受體拮抗劑之組合。 本發明進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可接 受鹽與組織胺4型受體之拮抗劑的組合。 本發明又進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可 接受鹽與α -1/α -2腎上腺素能受體促效劑血管緊縮擬交感 神經藥劑之組合’該擬交感神經藥劑為，諸如丙基海西尊 (propylhexedrine)、苯基腎上腺素(phenylephrine)、苯基丙 醇胺、麻育素(ephedrine)、擬麻黃素、拿法唾琳(naphazoline) 鹽酸鹽、奥昔美唾琳（OXymetaz〇iine)鹽酸鹽、四氫唾啦 19 200932229 (tetrahydrozoline)鹽酸鹽、赛嘻唾嘛（Xyi〇metaz〇ijne)鹽酸 鹽、曲馬唾啉(tramazoline)鹽酸鹽或乙基正腎上腺素鹽酸鹽。 本發明又進一步係0有關於本發明化合物或其藥學上 可接受鹽與抗膽素激導性藥劑之組合’該抗膽素激導性藥 5 劑包括毒蕈鹼受體（Ml，M2及M3)拮抗劑，諸如阿托品 (atropine) 海歐辛（hyoscine)、葡萄糖0比β各酿 (glycopyrrolate)、異丙托漠銨（ipratr〇piurn bromide)、嘆托 >臭録(tiotropium bromide)、氧托漠銨(〇xitropium bromide)、 匹倫吉品(pirenzepine)或特能吉品(teienzepine)。 10 本發明又進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可 接受鹽與下述召-腎上腺素能受體促效劑（其包括召受體亞 型1-4)之組合.諸如異丙去曱腎上腺素(jSOprenaiine)、沙布 塔莫（salbutamol)、福莫特羅（form〇ter〇i)、沙美特羅 (salmeterol)、特布塔林（terbutaline)、歐西普那林 15 (orciprenaline)、必妥特羅(bitolterol)甲磺酸鹽、或吡布特羅 (pirbuterol)或其對掌性鏡像異構物。 本發明進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可接 受鹽與色酮’諸如色甘酸二納（sodium cromoglycate)或奈多 羅米（nedocromil)鈉之組合。 2〇 本發明又進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可 接受鹽與下述腎上腺促糖皮質激素之組合：諸如氟尼索里 德（flunisolide)、安西諾隆(triamcinolone)縮丙酮化物、貝克 羅美松（beclomethasone)二丙酸鹽、布地松耐德 (budesonide)、氟替卡松（fluticasone)丙酸鹽、賽里松耐德 200932229 (ciclesonide)或莫美塔松(mometasone)糠酸鹽。 本發明進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可接 受鹽與可調節核激素受體(諸如PPAR)之組合。 本發明又進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可 5 接受鹽與免疫球蛋白（Ig)或Ig製劑或可調節Ig機能之拮抗劑 或抗體’諸如抗-IgE(例如歐馬達里朱麻(omaiizumab))的組合。 本發明進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可接 受鹽與另一種全身性或局部性投與之消炎劑，諸如沙利竇 邁(thalidomide)或其衍生物、類視黃酸(retin〇id)、二經基葱 10 紛(dithranol)或約泊三醇(caicip〇tri〇i)的組合。 本發明又進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可 接受鹽與下述藥劑之組合：胺基柳酸酯及磺胺吡啶，諸如 舒沙拉〇井(sulfasalazine)、美沙拉卩井(mesalazine)、巴沙拉吉 德(balsalazide)、及歐沙拉α丼(〇isaiazine);及免疫調節劑， 15 諸如硫嘌呤；與皮質類固醇，諸如布地松耐德之組合。 本發明進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可接 受鹽與下述藥劑之組合：抗細菌劑’諸如青黴素衍生物、 四環素、大環内S旨、/3-内酿胺、氟π备琳酮、甲石肖啥 (metronidazole)、吸入性胺基糖苷；抗病毒劑，其包括無環 20 鳥苷（acycl〇vir)、方西可威（famcici〇vir)、貝拉可威 (valaciclovir)、剛西可威（ganciclovir)、西度福威 (cidofovir)。金剛烷胺（amantadine)、雷門拔咬 (rimantadine)、雷巴威林（ribavirin)、札那瑪威（zanamavir) 及歐色塔瑪威(oseltamavir);蛋白酶抑制劑，諸如英第納比 21 200932229 (indinavir)、内飛納比（nelfinavir)、雷托納比(rit〇navir)、及 _ 沙喳納比(saquinavir);核苷逆轉錄酶抑制劑，諸如去声肌 苷（didanosine)、拉美芙旋（lamivudine)、史泰舍鍵 (stavudine) ' 札西他賓（zalcitabine)或齊多芙鍵 5 (zidovudine);或非核苷逆轉錄酶抑制劑，諸如内維^ (nevirapine)或依發偷滋（efavirenz)。 本發明又進一步係有關於本發明化合物或藥學上可接 受鹽與下述藥劑之組合：心血管藥劑，諸如鈣通道阻斷劑、 谷-腎上腺素能受體阻斷劑、血管緊縮素轉化酶(ACE)抑制 〇 10 劑、血管緊縮素_2受體拮抗劑；降脂劑’諸如司他汀（statin) 或纖維酸鹽衍生物；也細胞形態之調節劑，諸如己嗣可可 鹼(pentoxyfylline);溶血栓劑或抗凝血劑，諸如血小板凝聚 抑制劑。 _ 本發明進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可接 15 受鹽與下述藥劑之組合：CNS藥劑，諸如抗抑變劑（諸如舍 曲林（sertraline))、抗帕金森氏症之藥物（諸如迪普雷尼 (deprenyl) ; L-多巴（dopa);羅匹尼羅(r〇pinir〇le);普拉派唑 〇 (pramipexole); MAOB抑制劑，諸如色里幾（selegine)及拉沙 幾琳(rasagiline) ; comp抑制劑，諸如塔斯莫(tasmar) ; A 2 20 抑制劑；多巴胺再吸收抑制劑；NMDA拮抗劑；菸鹼促效 劑；多巴胺促效劑或神經元氧化氮合成酶抑制劑）或抗愛滋 海默氏症之藥物’諸如道佩吉（d〇nepezil)、利伐替敏 (rivastigmine)、四氫胺基吖啶(tacrine)、c〇X 2抑制劑、丙 戊茶鹼(propentofylline)或美雀方納特(metrif〇nate)。 22 200932229 本發明又進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可 接受鹽與下述用於治療急性或慢性痛之藥劑的組合：諸如 中樞性或末梢性作用之止痛劑（例如鴉片樣物質或其衍生 物）、卡巴 π丫呼（carbamazepine)、苯妥因（phenytoin)、丙基 5 成酸鈉（s〇dium valproate)、阿米替啉(amitryptiline)或其它抗 抑鬱劑群、帕西塔莫(paracetam〇1)或非類固酵消炎劑。 本發明進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可接 受鹽與非經腸或局部性投與之局部止痛劑，諸如利諾卡因 (lignocaine)或其衍生物之組合。 10 本發明化合物或其藥學上可接受鹽亦可與抗骨疏鬆病 之藥劑’其包括激素藥劑，諸如拉羅西芬(ral〇xjfene)或雙 膦酸鹽’諸如阿能卓特(alendronat；e) —起使用。 本發明又進一步係有關於本發明化合物或其藥學上可 接受鹽與下述藥劑之組合：⑴類胰蛋白酶抑制劑；（ii)血小 15 板活化因子(PAF)拮抗劑；（iii)介百素轉化酶(ICE)抑制劑； (iv)IMPDH抑制劑；（v)黏連分子抑制劑，其包括VLA-4拮抗 劑，（vi)組織蛋白酶(cathepsin) ; (νϋ)激酶抑制劑，諸如酪 胺酸激酶之抑制劑（諸如Btk、Itk、Jak3或MAP，例如吉替 尼(Gefitinib)或依瑪替尼(Imatinib)甲磺酸鹽）、絲胺酸/蘇胺 20 酸激酶(諸*ΜΑΡ激酶之抑制劑，諸如p38 ' JNK、蛋白質激 酶A、B或C、或IKK)、或涉及細胞循環調節之激酶(諸如週 期素依存性激酶）；（viii)葡萄糖_6_磷酸脫氫酶抑制劑；（^) 激肽-B1或激肽-B2-受體拮抗劑；（X)抗痛風劑，例如秋水仙 鹼(colchicine);(叫黃°票吟氧化酶抑制劑，例如異嗓呤醇； 23 200932229 (xii)尿酸促排劑，例如普羅本西德（pr〇benecid) '磺吡酮 (sulfinpyrazone)或苯溴瑪酮(benzbromarone) ; (xiii)生長激 素促分泌素；（xiv)轉形生長因子(TGFy5) ; (xv)血小板衍生 之生長因子(PDGF) ; (xvi)纖維組織母細胞生長因子，例如 5 驗性纖維組織母細胞生長因子（bFGF) ; (xvii)辣椒驗 (capsaicin)乳劑；（xviii)心動促速素(tachykinin)NK1 或 NK3 受體结抗劑’堵如NKP-608C、SB-233412(特内坦(talnetant)) 或D-4418 ; (xix)彈性蛋白酶抑制劑，諸如υτ-77或 ZD-0892 ; (XX)誘發性氧化I合成酶(iNOS)抑制劑；（xxi)在 10 TH2細胞上表現之化學誘質受體-同源性分子（諸如crtH2 拮抗劑）；（xxii)P38之抑制劑；（xxiii)調節類鐸(T〇u_like)受 體(TLR)之機能的藥劑；（χχίν)調節另一嗓吟能受體之活性 的藥劑；或(xxv)轉錄因子活化作用之抑制劑，諸如NFkB、 API 或 STATS。 15 本發明化合物或其藥學上可接受鹽亦可以與用於治療 癌之現有治療劑併用，例如合適藥劑包括： (i)如用於醫藥腫瘤學中之抗增生/抗腫瘤發生之藥物或其 組成物’諸如烷化劑（例如順鉑cis_platin)、卡鉑 (carboplatin)、環磷醯胺、氮芥、美發能(melphalan)、苯丁 20 酸氮芥(chlorambucil)、白消安(busulphan)或亞硝基脲）；抗 代謝產物劑（例如抗葉酸素，諸如似氟嘧啶5_氟尿嘧啶或替 加氟(tegafur)、拉替雀西(raititrexed)、阿美蘇嗓吟、阿拉伯 糖胞苷（cytosine arabinoside)、經基脈、傑西塔賓 (gemcitabine)或太平洋紫杉醇(paclitaxei));抗腫瘤抗生素 200932229 (例如蔥環類抗生素（anthracycline)，諸如亞德利亞黴素 (adriamycin)、布雷黴素(bleomycin)、小紅莓（doxorubicin)、 道諾黴素（daunomycin)、泛艾黴素（epirubicin)、泛達黴素 (idarubicin)、絲製黴素（mitomycin)-C、放線菌素 5 (dactinomycin)或光神黴素(mithramycin);抗有絲分裂劑(例 如長春花生物驗（vinca alkaloid)，諸如長春新驗 (vincristine)、長春花驗(vinblastine)、長春地辛(vindesine) 或溫諾賓（vinorelbine)、或紫杉酌·（taxoid)或划癌易 (taxotere);或拓樸異構酶抑制劑（例如表鬼臼素素 10 (epipodophyllotoxin)，諸如鬼臼乙叉甙（etoposide)、鬼臼噻 吩苷(teniposide)、安吖咬(amsacrine)、拓樸替肯(topotecan) 或喜樹驗(camptothecin)); (ii)細胞生長抑制劑，諸如抗雌激素（例如泰莫西芬 (tamoxifen)、托米芬（toremifene)、拉羅西芬、卓羅西芬 15 (droloxifene)或破西芬(iodoxyfene))、雌激素受體下調劑（例 Λ 如夫貝斯尊（fulvestrant)、抗雄激素（例如必卡醯胺 w (bicalutamide)、氟他醯胺(flutamide)、尼魯特醯胺(nilutamide) 或氯經烯孕酮(cyproterone)乙酸鹽）、LHRH拮抗劑或LHRH 促效劑（例如戈舍瑞林(goserelin)、亮普瑞林(leuprorelin)或 20 布舍瑞林(buserelin)、黃體内泌素(progestogen)(例如甲地孕 酮（megestrol)乙酸鹽、芳香酶抑制劑（例如阿那斯唾 (anastrozole)、雷托嗤(letrozole)、帕拉唾(vorazole)或依美 斯坦(exemestane))或5 α -還原酶之抑制劑，諸如4-氮類固醇 化合物（finasteride); 25 200932229 ㈣可抑制癌細胞胞侵襲之藥劑(例如金屬蛋白酶抑， - 例如瑪麗瑪斯特(marimastat)、或尿激_襞素原活化劑受 體機能之抑制劑）； Μ生長因子機能之抑制劑’例如：生長因子抗體(例如抗 5 ‘b2抗體曲妥朱單(trastuzumab)、或抗-erbb 1抗體塞突西 單(咖咖呵⑶5])、法呢基(farnesyl)轉移酶抑制劑、絡胺 酸激酶抑制劑或絲胺酸/蘇胺酸激酶抑制劑、表皮生長因子 族之抑制劑(例如EGFR族酪胺酸激酶抑制劑，諸如(孓氯 氟本基)-7-甲乳基-6-(3-嗎淋丙氧基)唆嗤琳_4_胺（吉飛替 ❹ 1〇尼，AZD1839)、士(3_乙炔基苯基Η，'雙(2-甲氧基乙氧基） 喹唑啉-4-胺(俄羅替尼(erlotinib)，〇SI_774)或6丙烯醯胺基 ΪΗ3-氣-4-敦苯基）-7-(3-嗎琳丙氧基）嗜β坐琳_4_胺（ci 1033))、血小板衍生之生長因子族的抑制劑、或肝細胞生長 因子族之抑制劑； . 15 (ν)抗血管生成劑，諸如可抑制血管内皮生長因子之作用的 藥劑（例如抗血管内皮細胞生長因子抗體貝戈西朱單 (bevacizumab)、揭示在WO 97/22596、WO 97/30035、WO ❹ 97/32856或WO 98/13354中之化合物）、或可藉另一機制而 作用之化合物（如里諾米德(linomide)、整合素機能之 20 抑制劑 '或血·管生成抑制素(angiostatin)); (vi) 血管損害劑’諸如康布雷司他汀(combretastatin)A4、或 揭示在WO 99/02166、WO 00/40529、WO 00/41669、WO 01/92224、WO 02/04434或 WO 02/08213 中之化合物； (vii) 用於反訊息治療法之藥劑，例如可針對上述標靶之藥 26 200932229 劑，諸如ISIS 2503、抗-ras反訊息藥劑； (viii) 用於基因療法之藥劑，例如可取代異常基因，諸如異 常p53或異常BRCA1或BRCA2之方法、GDEPT(基因定向之 酶前藥治療法）方法，諸如使用胞核嘧啶去胺酶、胸腺核苷 5 激酶或細菌硝基還原酶之方法、及增加患者對化學療法或 放射療法之耐受性的方法，諸如多重抗藥性基因療法；或 (ix) 用於免疫療法之藥劑，例如可增加患者腫瘤細胞之免疫 原性的方法，諸如以細胞激素，諸如介百素2、介百素4或 Ο 粒性細胞-巨噬細胞集落刺激因子以進行轉移感染之方 10 法' 可降低T-細胞缺乏應性之方法、使用經轉移感染之免 疫細胞’諸如經細胞激素轉移感染之樹枝狀細胞的方法、 - 使用經細胞激素轉移感染之腫瘤細胞株的方法及使用抗遺 傳型抗體之方法。 C貧施方式3 15 較佳實施例之詳細說明 Φ 本發明現在藉參考以下闞明性實例而進一步解釋。在 該實例中’係於300或400MHz之質子頻率下，在Varian Unity 分光計上測定NMR光譜。在Agilent 1100 MSD G1946D分光 計或Hewlett Packard HP1100 MSD G1946A分光計上測定 20 MS光譜。使用 Waters Symmetry®或Xterra®柱以0.1 %水性三 氟乙酸：乙腈、0.1%氨水：乙腈或〇.1〇/。乙酸銨：乙腈作為 稀釋劑進行製備性HPLC分離。在CEM Discover單一模式 微波器内進行微波反應。化合物及中間產物係藉ACD Labs(T〇ront〇, Canada)提供之IUPAC命名套裝軟體而命名。 27 200932229 資例1 6-氣-iV·丨(1-幾環庚基）甲基1-2-((35)-3-丨(2-幾己基)胺基卜呢 咯啶-l-基}喳啉-5-羧醢胺 a)2,6-二氣-N-((l-羥環庚基）甲基)喳琳_5_叛酸联

於室溫在氮氣下分3份以2小時一滴滴添加二甲基甲酿 胺（0.13毫升）及草酿氯（36.2毫升）至2,6-二氣喳琳·5_幾酸 (40.0克）在二氣甲烷（600毫升）中之攪拌溶液内 (W02004/106305，實例76，步驟b)。然後於室溫下搜拌該 10 混合物，費時18小時。真空濃縮該混合物，添加二氣甲燒 (400毫升）並於0°C下以15分鐘一滴滴添加該混合物至ι_(胺 基甲基）環庚醇鹽酸鹽（32.7克）及三乙胺（69.1毫升）在二氣 曱烷(600 毫升）中之溶液内（\^(：.乂0^^1<:，0：.8.入1(^(：11，11.丁· Borchardt and G.L. Grunewald, J- Med. Chem., 1981, 21(1), 15 7-12)。攪拌該混合物，費時1小時，然後添加水(400毫升）。 在真空下過濾該混合物並連續以水(2x400毫升）、乙腈(400 毫升)及二乙醚(400毫升）清洗固體，然後真空乾燥以得到如 無色固體之副標題產物（59.0克）。 m/z 367 (M+H, 100%)。 20 1H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8.24 (1H, d)、7.99 (1H, d)、 200932229 7.70 (1H，d)、7.47 (1H，d)、6.52-6.42 (1H，m)、3.59 (2H，d)、 1.87-1.44 (12H，m)。 胺基吡咯啶小基】-6_氣鼻【(1_缠環庚基）甲基】· 喳啉-5-羧醮胺

於82°C在氮氣氛下’在攪拌下加熱2,6_二氣_N_((i-羥環 庚基）甲基)峻啉_5_羧醯胺（100克）、碳酸鉀⑻克）、（S)-3-胺 基0比咯α定(Alfa Aesar，99% ee)(41毫升)及乙腈（1升）之混合 物’費時8小時。然後使該混合物冷却至室溫，倒入水(3.3 升）中並攪拌該混合物，費時1小時，然後過濾並經水(2x300 毫升）、乙腈(200毫升)清洗，然後真空乾燥以得到如淺黃色 固體(94.0克)之副標題產物。 m/z 417 (M+H，100%)。 e 5 10 15 ❹ 1H NMR (300 MHz，CDC13) δ 7.88 (1H，d)、7.58 (1H，d)、 7.36 (1H，d)、6·69 (1H，d)、6.64 (1H，t)、3.86-3.68 (3H，m)、 3.67-3.58 (1H，m)、3_53 (2H，d)、3.36-3.27 (1H, m)、2.52-2.33 (1H，m)、2.30-2.16 (1H，m)、1.94-1.18 (13H，m)。 (：)2-{(3幻-3·丨(2-{丨第三-丁基(二甲基）甲矽烷基】氧基}乙基) 胺基】吡咯啶-1-基}-6-氣-ΛΜ(1-羥環庚基）甲基】唛啉-5·羧 醢胺 29 200932229 HO、

O^/NH

使2-[(3*S)-3-胺基e比洛咬-1-基]-6-氣春[⑴經環庚基）曱 基]-喳啉-5-羧醯胺（17.6克）懸浮在二氣甲烷(3〇〇毫升）中並 在氮氣份下添加分子篩（17.6克）’在攪拌下以5分鐘一滴滴 5 添加取1，1·二甲基乙基)_二曱基甲矽烷基]-氧基]乙醛(7.2毫 升）並於室溫下攪拌該混合物’費時6小時。以一份添加三 乙醯氧基硼氫化鈉（17·9克)並再於室溫下攪拌該混合物，費 時17小時，然後添加水（1〇毫升），並於室溫下攪拌該混合 物，費時30分鐘，在氧化矽上真空濃縮並藉驟層柱式層析 10 法（si〇2，使用 1 : 2 : 97-1 : 8 : 91 7Μ ΝΗ3在甲醇：甲醇： 二氣曱烧中之溶液作為梯度溶析）而純化以得到如無色固 體（16.0克)之副標題產物。藉驟層柱式層析法(si〇2,使用i : 2 : 97-1 : 8 : 91 7MNH3在甲醇：曱醇：二氣甲烷中之溶液 作為梯度溶析）而再純化不純溶離份以得到第二批副標題 15 產物(2.8克）。 m/z 575 (M+H, 100%)。 1H NMR (300 MHz, DMS0) δ 8.40 (1H, t)、7.77 (1H, d)、 7.53-7.39 (2H, m)、6.91 (1H，d)、4.17 (1H，s)、3.78_3 00 (9H， 200932229 m) ^ 2.64 (2H, t) ^ 2.14-2.00 (iH, m) ^ 1.83-1.72 (lH, m) > 1.70-1.26 (12H, m)、0.81 (9H，d)、0·00 (6H, s)。 d)6-氣-7V_丨(1-羥環庚基）甲基】_2_{(3iS)_3_丨(2_羥乙基)胺基】 吡咯啶-l-基}喳啉-5-羧醢胺

在可維持在30°C以下之内溫下，以10分鐘—滴滴添加 氣化氫(50毫升，在二噚烷中4M)至2-{(3S)-3-[(2-{[第三_丁 基（一甲基）甲石夕烧基]氧基}乙基）胺基]β比嘻咬_ι_基卜6氯 -Λ4(1_羥環庚基）曱基]喳啉-5-羧醯胺(26.0克）在四氫呋喃 10 U25毫升）中之溶液内。於室溫下攪拌該混合物。費時2 5小 時，然後真空濃縮。使粗產物再溶於MeOH(30毫升）中並藉 層析法(Si02 ’使用1 : 4 : 95-1 : 1〇 : 89 7M NH3在甲醇·甲 酵.一氣甲烧中之溶液作為梯度溶析）而純化。真空浪縮純 溶離份(20.1克），然後在乙腈：甲醇(99 :卜40〇毫升納體 15 積）内漿化18小時，然後過濾並經乙腈（30毫升）清洗。真* 乾燥該固體以得到如無色固體（18·5克)之標題化合物。

熔點= 138-140°C m/z 461 (M+H，100%)。 1H NMR (400 MHz，DMSO) 8·44 (1H，t)、7·81 (1H，d)、7 52 31 200932229 (1H，d)、7.48 (1H，d)、6.94 (1H, d)、3.73-3.27 (9H，m)、2.63 (2H，td)、2.15-2.05 (1H，m)、1.86-1.77 (1H, m)、1.73-1.31 (12H，m)。 實例2 5 6-氯-iV-丨(1-羥環庚基）甲基卜2-{(35>3·丨(2-羥乙基)胺基】-吡 咯啶-l-基}喳啉-5-羧醢胺水合物

Bruker Avance 400MHz或Bruker DPX250 250MHz分光計上 10 測定NMR光譜。 a) l-[(三甲基甲矽烷基)氧基】環庚烷甲腈

將環庚酮（1001.0克）及碘化鋅（10.0克）裝入反應容器 内。以5等份裝入三甲基甲矽烷基氰化物（1311毫升)並維持 溫度於20°C至25°C下，且攪拌該反應混合物，費時2小時以 15 得到如淺黃色油（2049.0克)之標題化合物。 NMR 5CDci3 1.91-1.82 (2H, m)' 1.75-1.64 (2H, m) ' 1.53-1.26 (8H, m)、0.00 (9H, s) e b) l-(胲基甲基)環庚酵 將1-[(三甲基甲矽烷基)氧基]環庚烷甲腈(737.5克)在四 20 氫呋喃（738毫升）中之溶液裝入含1莫耳濃度氫化鋁鋰在四 32 200932229 5 10 15 ❹ 20 氫呋喃（4980毫升）中之溶液及四氩呋喃（369毫升）之容器内 並維持溫度於55°C至60。(：下。裝入四氫呋喃（738毫升）並於 60至65。(：下攪拌該反應混合物，費時3小時。使該反應混合 物冷却到10至15°C並添加水（193毫升）、預混氫氧化鈉溶液 [水(389毫升）、氫氧化鈉(69克)]、四氫吱喃（738毫升）及水 (193毫升)並維持溫度於15°C至25°C下。攪拌該混合物，費 時70分鐘並過濾。以四氫π夫喃（1476毫升）清洗遽餅共兩次。 合併濾液及洗液並添加入反應容器内，且於65。〇至70°〇下 濃縮至約1480毫升。將該混合物冷却到15°C至25°C並移至 含有四氫呋喃（369毫升）之容器内以得到在四氫吱喃（1613 毫升）中呈無色溶液之標題化合物(381克）。 'H NMR 5cdci3 4.61 (2H, s) > 2.44 (2H,s)' 1.63-1.15 (12H m) ° c)l-(胺基甲基)環庚酵鹽酸盥 將乙醯氣(264毫升)及四氫呋喃（191毫升)震入含有2_丙 醇（1143毫升）之容器内並維持溫度於⑺七至^^下。添加 1-(胺基曱基）環庚醇(381克）在四氫呋喃（1613毫升）中之溶 液及四氫呋喃（381毫升）並維持溫度於忉七至^^下授摔 該反應混合物，費時50分鐘並過濾。以預混四氫呋喃/2_丙 醇[四氫呋喃（267毫升）、2-丙醇（114毫升μ、及四氣咬喃 (1905毫升)清洗濾餅。於40°C下乾燥該濾餅，費時23小時以 得到如無色固體(464克)之標題化合物。 NMR SCD30D 4.97 (3H，s)、2.91 (2H，S)、U(M 48 (12H，叫。 d)2,6-二氣-N_((l-羥環庚基）甲基)喳啉_5_竣篇胺 ’ 將亞硫醯氯(249毫升)及曱笨(276毫升)裝入含有26 33 200932229 氣喳啉-5-羧酸(276.0克）及甲苯(2760毫升）之容器内。於80 °(：至85°(：下攪拌該反應混合物，費時3小時。於30°C至40°C 下將該反應混合物濃縮至約1380毫升。添加甲苯(2760毫升) 並於30°C至40°C下將該混合物濃縮至約1380毫升。添加甲 5 苯（828毫升）並於〇°c至10°C下添加該所形成溶液及甲苯 (276毫升）入含有1-(胺基甲基)環庚醇鹽酸鹽(205克）、三乙 胺(491毫升）及甲苯（1930毫升）之反應容器内。於0°C至5°C 下攪拌該反應混合物，費時1小時，然後於20°C至25°C下攪 拌2小時。添加水(2200毫升)並攪拌該混合物，費時40分鐘 1〇 且過濾。以水（1100毫升）清洗濾餅共兩次，然後以曱苯（1380 毫升）、水（1100毫升)及甲苯（1380毫升）清洗。於40°C下乾燥 該濾餅’費時41小時以得到如近純白色固體(375.76克)之標 題化合物。1H NMR δΟΜ50 8.65 (1H，t )、8.24 (1H，d)、8.01 (，1H，d)、7.89 (1H，d)、7.72 (lH，d )、4.27 (1H，s)、3.36 15 (2H，d)、1.74-1.32 (12H, m)。 e)2-丨(35)-3-胺基吡咯啶-1-基】·6-氯-7V-[(1-羥環庚基）甲基】_ 喳啉-5-羧醯胺 將（S)-3-胺基吡咯啶(96毫升）及乙腈（300毫升）裝入含 有2,6-二氣-N-((l-羥環庚基）甲基）喳啉_5·羧醯胺（3〇〇 〇 20 克）、碳酸鉀（249·0克）及乙腈（2400毫升）之容器内。在回流 下加熱該反應混合物’費時20小時。於20。(：至25°C下添加 水(6900毫升）。攪拌該混合物，費時95分鐘並過濾。以水 (1200毫升)及乙腈（1200毫升）清洗濾餅。於4〇它下乾燥該濾 餅，費時48小時以得到如黃色固體(283克)之標題化合物。 200932229 *H NMR 5dms〇 8.45 (1H, t) ' 7.82 (lH,d) ' 7.56-7.46 (2H, m)、6.95 (1H, d)、4.21 (1H，s)、3.7卜3.48 (4H，m)、3.36-3.23 (3H，m)、2.15-2.06 (1H，m)、1.83-1.32 (13H，m)。 f)2-{(35>3-【(2-{[第三丁基(二甲基）甲矽燒】氧基基)玻 5 基】咕咯啶小基}-6-氯-ΛΜ(1-幾環庚基)甲基】令琳·5-羧致胺 於15。(：至25。(：下添加[[(U-二甲基乙基）_二曱基甲矽 烷基]-氧基]乙醛（66.3g)及四氫0夫鳴（150毫升）入含有 2-[(3S)-3_胺基吡咯啶-1-基]-6-氯-N-[(l-經環庚基）甲基]-峻 ® 啉-5-缓醯胺（158.7克）、硫酸鎂（75.0克）、三乙酿氧基硼氫化 10 鈉（175.5克)及四氫呋喃（1350毫升)之容器内。攪拌該反應混 合物，費時20小時並添加預混碳酸氫鈉溶液[水(730毫升）、 ' 碳酸氫鈉(72.2克)]。添加混合型庚烷(150毫升)並攪拌該混 合物，費時90分鐘，並分離各層。將有機層再裝入具有預 混碳酸氫鈉溶液[水(730.3毫升）、碳酸氫鈉(72.2克)]之容器 15 内且攪拌30分鐘，然後分離各該層。以水(750毫升）清洗該 有機層並再裝入反應容器内。添加四氫呋喃（1500毫升)並於 ❹ 40°C至45°C下將該混合物濃縮至約1500毫升。添加四氫咬 喃（1500毫升）並於40°C至45°C下將該混合物濃縮至約1500 毫升並過濾。以四氫呋喃（150毫升)清洗濾餅且合併濾液及 20 洗液並添加入反應容器内。添加庚烷（1500毫升)並於4(TC至 50°C下將該混合物濃縮至約1500毫升。添加庚烷（1500毫升) 並於4(TC至50°C下將該混合物濃縮至約1500毫升。使該混 合物冷却到15°C至20°C，攪拌75分鐘並過濾。以庚烷(300 毫升）清洗該濾餅並在濾器上乾燥以得到如淺黃色固體 35 200932229 (182.8克)之粗製標題化合物。 — 添加該粗製標題產物（170克)至含有甲醇（17〇毫升)及2_ 丙醇(510毫升)之反應容器内。將該混合物溫熱到4〇°c至45 °C並攪拌40分鐘。使該混合物冷却到18°C至23。(：並攪拌2.5 5 小時。使該混合物冷却到〇至5°C，授拌1小時並過遽。以預 混甲醇/2-丙醇[甲醇(85毫升）、2-丙醇(255毫升)]清洗該濾餅並 於40°C下乾燥以得到如近純白色固體(124克)之標題化合物。 *H NMR 6Dmso 8.40 (1H, t) ' 7.77 (1H, d) > 7.53-7.39 (2H, m) ' 6.91 (1H, d)' 4.17 (1H, s)' 3.78-3.00 (9H, m)' 2.64 (2H, ® 10 t)、2.14-2.00 (1H，m)、1.83-1.72 (1H, m)、1.70-1.26 (12H, m)、0.81 (9H, d)、0.00 (6H，s)。 氯-Λ「-【(1-羥環庚基）甲基】羥乙基)胺基】_ 吡咯啶-l-基}喳啉-5-羧醯胺水合物 於20°C至30。(：下，添加預混鹽酸溶液[eHCi(5i6.〇克）、 15 水(4813毫升）]入含有2_{(3S)_3_[(2_{[第三丁基（二甲基）甲 矽烷基]氧基}乙基）胺基]吨咯啶_1_基}_6_氣羥環庚 基）甲基]喳啉-5·羧醯胺（525.0克）及甲苯(5250毫升）之反應 〇 容器内。於25°C至30°C下攪拌該反應混合物，費時2〇小時 並過滤。以水(525毫升）清洗濾餅。合併濾液及洗液並分離 20 各層。以曱苯(2625毫升）清洗水性層，並裝入反應容器内。 於25 C至30°C下添加預混碳酸氫鉀溶液[水（18〇3毫升）、碳 酸氫鉀（601.3克）]及正-丁醇(525〇毫升）並攪拌所形成混合 物，費時67分鐘。分離各該相並以正_丁醇(2625毫升）萃取 該水性相。合併該等合併丁醇相並經水(26〇〇 〇毫升）清洗共 36 200932229 4次。於此時，使該丁醇溶液與得自具相同規模之反應的丁 醇洛液合併。過渡該溶液並以正-丁醇（1〇5〇毫升）清洗滤 餅。合併濾液及洗液並於4(TC至50°c下濃縮至約9.5公升。 添加正-丁醇（1050毫升）並於4〇 °C至5(rc下濃縮至約9 5 5 升。添加正-丁醇（105〇毫升）並於40。(：至50X：下濃縮至約 10.5升。添加正-丁醇（1〇5〇毫升）並於4〇°c至5〇艺下濃縮至 約10.5升。添加正-丁醇（1〇5〇毫升）並於4〇。〇至5〇<^下濃縮 至約10.5升。於40°C至5(TC下將該混合物濃縮至約5.3升。 於40 C至50 C下維持該混合物，費時61小時並於至5〇 10 °C下添加混合型庚烷(5250毫升）。於4〇。(：至5(TC下攪拌該混 合物，費時60分鐘，於20至25°C下攪拌92分鐘並過濾。以 預混庚烷及正-丁醇[庚烷(2100毫升）、正·丁醇(21〇〇毫升）] 清洗遽餅。於40°C下乾燥該濾餅，費時3〇小時，於6〇。〇下 乾燥24小時，於65°C下乾燥19小時並於80°C下乾燥9小時以 15 得到如近純白色固體(524.4克)之標題化合物。 *H NMR 5dms〇 8.44 (1H, t)' 7.81 (1H, d)' 7.52 (1H, d) > 7.48 (1H，d)、6.94 (1H，d)、3.73-3.27 (9H，m)、2.63 (2H, td)、 2.15-2.05 (1H, m)' 1.86-1.77 (1H, m) > 1.73-1.31 (12H, m) ° 為了獲得一致的水合形式，如下進一步處理所獲得該 2〇 2-{(3*S)-3-[(2-{[第三-丁基(二甲基）甲矽烷基]氧基丨乙基)胺 基]吡咯啶-1-基}-6-氣-Λ4(1-羥環庚基）曱基]喳啉羧醯 胺。將6-氯-ΑΓ-[(1-羥環庚基）曱基]_2-{(3S)-3-[(2-羥乙基)胺 基]比D各n定-1-基}°奎琳-5-敌醢胺(40克，lwt)、曱笨(7.0體 積，280毫升）及水（11.2毫升，7_0當量）裝入赫史特合金 37 200932229 (hastelloy)容器内並將該等内容物加熱到“至刈^，然後於 - 該溫度下攪拌2 2小時。接著以1小時使該混合物冷却到丨8至 23°C，然後再於“至^乞下使其熟化丨小時，接著在氮氣流 及真空下過濾，費時6分鐘。以甲苯(80毫升，2〇體積)及水 5 (3.2毫升，〇.8體積)之混合物清洗遽餅並於氮氣流下在濾器 上乾燥30分鐘，然後移除。離析如淺黃色固體(46·7克，117% 回收率）之產物。於18至23。(：在真空下乾燥一部份濕材料 (35.2克）。費時72小時以得到30.2克標題化合物（ι〇〇%回收 率，按比例）。 Θ 10 蕖理分析 Ρ2Χ7檢定 已知特定化合物，諸如笨甲醯苯曱醯基腺苔三磷酸鹽 (bbATP)為可影響細胞膜内之細孔形成的Ρ2χ7受體之促效 劑（Drug Development Research (1996)，37(3). ρ·126)。因 15 此’當在漠化乙鍵（其係為螢光DNA探查劑）存在下使用 bbATP活化該受體時，可發現細胞内〇ΝΑ結合性溴化乙錠 之螢光增加。該螢光之增加可作為P2X7受體活化作用之量 度，因此可定量一化合物對該P2X7受體之影響。 使用此種方法，可測試本發明該化合物對於該Ρ2χ7受 2〇 體之拮抗劑活性。因此，在96井平底微量滴定盤内進行該 試驗’其中各該井裝填250微升試驗溶液，該試驗溶液包含 200微升具有含10_4M溴化乙錠之THP-1細胞懸浮液(2.5X1 〇6 個細胞/毫升）、25微升含l〇-5M bbATP之高鉀緩衝劑溶液， 及25微升含濃度典型上自30μΜ至Ο.ΟΟΙμΜ之試驗化合物的 38 200932229 5 ❹ 10 15 ❹ 20 高鉀緩衝劑溶液。以塑膠薄片覆蓋該盤並於3rc下培育H、 時。然後在Perkin-Elmer•螢光平板讀數器内於激發光譜52〇 奈米、發射光譜595奈米、縫隙寬度：Εχ15奈米，Em2〇奈 米下進行該盤之讀數。為了進行比較，分別在該試驗中使 用bbATP(其係為P2&受體促效劑）及5_磷酸吡咯醛（其係為 (P2X7文體拮抗劑)作為對照物。自所獲得之讀數計算ye% 值，本數值為使該bbATP促效劑活性減少5〇。/。所需之該試驗 化合物濃度之負對數。 hERG結合f驗鋥庠 根據W02005/037052中所述之程度進行hERG檢定。以 濾器清洗形式，藉放射性配體3,7-雙[2-(4-硝基[3,5-3H]苯基） 乙基]-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烧對可表現hERG之HEK(人 類胚胎腎）細胞膜的競爭結合性而測定化合物對藉該人類 醚阿哥哥關聯性基因（hERG)而編碼之離子通道亞單位的親 和力（pIC50)。 使用具有該等試驗化合物，InM最終濃度之放射性配 體3,7-雙[2-(4-石肖基[3,5-3H]苯基）乙基]-3,7-二氮雜雙環 [3.3.1]壬烷、及檢定緩衝劑（l〇mMHEPES、130mMNaCl、 5mM KC卜 ImM EGTA、0.8mM MgCl2，pH 7.4)之連續稀 釋液’於室溫下培育膜，費時3小時。該檢定係在i%(v/v) 二甲基亞颯存在下，在200微升之最終體積内進行。藉在 ΙΟμΜ阿司咪唑（astemizole)存在下，測定3,7-雙[2-(4-硝基 [3,5-3H]苯基）乙基]-3,7-二氮雜雙環[3·3·1]壬烷之結合性而 測定非專一結合性。在本培育期間，係將GF/B濾板浸在塗 39 200932229 覆溶液（0.3%(v/v)聚乙二亞胺及〇 2%(w/v)BSA)中。培育 - 後，使用Tomtec採集器在經預塗之GF/B濾板上採集檢定板。 測定該pIQo，該之定義為使3,7_雙[2_(4硝基 [3’5-3Η]苯基）乙基]-3,7-二氮雜雙環[3 3 1；|壬烷結合性減少 5 50%所需之該化合物濃度之負對數。一“低於，，之數值表示於 所述濃度下之小於50%抑制作用，其係為所測試之最高濃度。 Ρ2Χτ检定及hERG結合f驗和年夕峄平 本發明該化合物顯示很高Ρ2χ7拮抗劑活性，其pIC5〇數 值為8.4。而且，該化合物顯示特別低的hERG活性，於所測 ® 10 試之最高濃度下，抑制作用低於50%。表1表示本發明該化 合物及WO 2004/106305(實例29、36、44及50)中所例示之 比較化合物的P2X7 pICso值及hERG pIC5〇值。 - 表1 實例編號 P2X7 pIC5〇 Γ hERG pIC5〇 P2X7 : hERG 比率 1 8.4 <4 >20,000 29 WO 2004/106305 7.2 4.5 502 36 WO 2004/106305 8.2 5.1 1258 44 WO 2004/106305 7.9 4.9 1000 50 WO 2004/106305 7.5 4.9 398 根據本發明之該化合物可顯示於5nM或更低之濃度下 的P2X7 IQ。值。而且，其活性並不足以顯示於ι〇〇μΜ濃度 下之hERG的IC50。因此’本發明該化合物之P2X7 : hERG 親和力的比率大於20,000。WO 2004/106305之實例29、36、 44及50的該等比較化合物分別於32μΜ、8μΜ、3μΜ及13μΜ 之濃度下顯示hERG IC50且需要63ηΜ、6ηΜ、13ηΜ及32ηΜ 40 200932229 之濃度才能顯示P2X7IC50。因此，其等之MX? : hERG親和力 比率分別恰好為502、1258、1〇〇〇及398。

生艟可率-大盧.PK 5 10 15 藥物動力學參數及概念係用於DMPK中以描述化合物 在人體内之演化。化合物之分佈及排泄係以血漿濃度-時間 分析圖表示。藉合適給藥、取樣及分析，可測定主要參數(清 除率、體積、半衰期、生體可用率等)。 試驗化合物典型上係以在DMA中之3毫克/公斤（1毫升/ 公斤）之劑量以靜脈給藥之方法對雄性史泊格多利大鼠 (Sprague Dawley rat)之右側尾靜脈投藥。以在0.5%羥丙基 甲基纖維素(HPMC，w/v)/0.1°/〇 Tween 80(v/v)之水溶液之5 毫克/公斤（2毫升/公斤）的劑量以口服方式對大鼠投藥。IV 投藥後，在第2、4、8、15、30、60、120、180、300、420、 720及1440分鐘時自該左側尾靜脈採集血液試樣(2〇〇微升） 並於 口服後，在第 0、20、40、60、120、180、300、420、 720及1440分鐘時採集血液試樣(2〇〇微升）。藉離心法而製備 血漿。 為了測定試驗化合物之血漿含量，添加5〇微升甲酵至 50微升各該試驗試樣内，並添加4〇微升甲醇至5〇微升整份 之含10微升用以產生校準線及qCs之具有真實標準之尖峰 的對照血漿内。最後，添加100微升含化學上類似之内標準 的甲醇至各試樣、標準及QC以得到2〇〇微升之最終體積。 然後徹底混合所有血漿試樣並置於_2〇。〇下，費時至少w、 時’接著進行離心處理。合適的選擇性1靈敏性方法業經 20 200932229 將錐電壓及碰撞能量最佳化而產生後，藉HPLC-MSMS而分 析所形成上澄清液。 在WinNonLin®中使用非分室分析以自濃度時 1導出藥物動力學參數。使用以下方程式 CP0 Dose丨v/AUCIV*Dosep〇以計算生體可用率。 根據本發明之該化合物顯示以下藥物動力學資料：大 鼠口服(P〇)生體可用率=14% 解作用竇驗兹年 藉可表示磷脂質在原發性大鼠肝細胞中之蓄積之活體 © 10外螢光檢&法而測定化合物誘發嶙脂解作用之效果評估。 藉2-階段膠原梅消化法而自漢威斯塔出⑽戰㈣大鼠離析 肝細胞。然後在經膠原塗覆之96井平皿上之威廉氏E培養基 . (William’s e medium)内接種該等肝細胞。使該等細胞黏著}.. 小時，然後以250微克.毫升-1膠原在Hepat〇zyme細胞培養 . 15 基内之溶液取代該等培養基。

然後以欲在第24小時經改變之該培養基培養細胞，費 時48小時。離析後第48小時，將該培養基改換成經勞㈣ Q 脂N-(6_四甲基玫瑰紅硫胺甲醯基)]，2_二軟脂醯基•甘油 -3-磷酸乙醇胺（DHPE_TRITC)(5微克毫升’補充之 2〇 。於此時，以在具有〇.4%二甲基亞颯之最終濃 度的連續稀釋液中之濃度範圍添加試驗化合物至該等肝細胞。 再培育該等細胞，費時24小時，然後藉添加含核染劑 Hoechst 33342之鱗酸鹽緩衝鹽液(pBS)(最終濃度2州及聚 曱搭溶液(最終濃度4%)而固定該等細胞。於室溫下維持該 42 200932229 等平皿，費時30分鐘，然後在PBS溶液中經清洗3次。 5 Ο 10

15 G 20 接著使用自動化顯微鏡平台（GE In Cell Analyser 3000) 獲得該等肝細胞之影像。然後使用影像分析演算法以評估 細胞存活率及在活肝細胞内之該DHPE-TRITC標記之蓄 積。然後將使用試驗化合物所觀測之定量性蓄積歸一化至0 至1之系列，其中〇代表僅接觸媒劑之細胞中所觀測之蓄 積’而1代表接觸1〇μΜ阿米達酮（amiodarone)之細胞。報告 對於該試驗化合物之劑量反應（其中細胞存活率>50%)的最 大蓄積’因為於該劑量下可觀測該最大蓄積。亦報告導致 >50%細胞毒性之最低劑量。各該細胞中之毒性被認為是密 集性點狀形態之核標記的變化。 已知可發現磷脂解作用之該濃度與碟脂解作用之活體 内發生率呈逆相關性(David K Monteith，Ryan E Morgan & Bartley Halstead (2006) uIn vitro assays and biomarkers for drug-induced phospholipidosis”. Expert Opinion on Drug

Metabolism & Toxicology, vol.2 (5)，pp687-696)。 本發明該化合物於71μΜ之最高蓄積濃度下顯示0.9之 最高蓄積（相對於1 ΟμΜ阿米達酮對照物）。而且，其顯示 198μΜ之最低毒性濃度。相較之下，w〇2004A06305之實 例44於8μΜ之最高蓄積濃度下顯示0.6之最高蓄積及23μΜ 之最低毒性濃度。 血漿蛋白質結合性之潘丨定 於37°C下藉在人類血漿與水性緩衝劑間之化合物的平 衡滲析並藉HPLC-MS/MS而測定該化合物在該血漿與緩衝 43 200932229 劑内之濃度而測定血漿蛋白質結合程度。 - 藉經水沖洗，繼而浸泡在滲析緩衝劑内費時至少丨小時 而製備滲析細胞(載留分子量5_)。該渗析緩衝劑為等渗緩 衝鹽液_.4)。製飢5mM濃度之化合物在二甲基亞礙中 5 之儲備溶液。 以10微升DMSO對各毫升血漿之比率添加該化合物之 儲備DMSO溶液至該血漿。其可得到1%1)厘8〇在血漿中之 溶液，其中各化合物之濃度為5μΜ。 然後製備滲析細胞，且該細胞之一半裝填75〇微升滲透 © 1〇緩衝劑而該細胞之另一半裝填750微升化合物之血漿溶 液。一旦製成時，將該等細胞密封並於37。(1：下置於培養器 箱内。然後旋轉這些細胞，費時至少4小時以使其平衡。 _ 平衡後，移除500微升該等緩衝劑試樣並連同1〇〇微升 .· 血漿(在6倍稀釋血漿中之試樣）添加至hplc小玻瓶内，且移 . 15 除1 〇〇微升該等血漿試樣並連同500微升滲析緩衝劑（在6件 稀釋血漿中之試樣）添加至HPLC小玻瓶内。

然後使用HPLC-MS/MS分析該等試樣。藉按順序注射 H 濃度為 0.013μΜ、0·05μΜ、0.25μΜ 及 1.25μΜ 之具有 6 倍稀 釋血漿之該等儲備溶液的稀釋液，繼而先後注射該緩衝劑 20 試樣及血漿試樣而獲得4點校準曲線。 計算 使用 MassLynx 第 4.1 版軟體（由 Waters/Micromass創造） 以測定化合物在該等試樣中之濃度，該軟體可自動預柯校 準曲線並以内插法計算化合物在該等分析物中之濃度。使 44 200932229 用下述方程式自所測定濃度測定血漿蛋白質結合性，其係 以血漿中該化合物結合百分率（結合％)表示： ^^〇/O = 1〇〇_10〇f 1.05(6* 血漿濃度-1.2* 緩衝劑濃度） )

'〇σ L1.05(6 *血漿濃度-1.2 *緩衝劑濃度)+1.2 *緩衝劑濃度J 本發明該化合物顯示7 0 %之人類血漿蛋白質結合性 5 (結合％)。 L圖式簡單說明3 (無） ❹ 【主要元件符號說明】 (無）

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Claims (1)

1. 200932229 七、申請專利範圍： 1. 一種式⑴化合物

   或其藥學上可接受鹽。 5 2. —種藥學組成物，其包含如申請專利範圍第1項之式(I) 化合物或其藥學上可接受鹽、及藥學上可接受佐劑、稀 釋劑或載劑。 3. —種用於製備如申請專利範圍第2項之藥學組成物的方 法，其包括混合申請專利範圍第1項之式(I)化合物或其 10 藥學上可接受鹽、與藥學上可接受佐劑、稀釋劑或載劑。

   4. 一種如申請專利範圍第1項之式（I)化合物或其藥學上可 接受鹽，其係用於治療。 5. —種如申請專利範圍第1項之式（I)化合物或其藥學上可 接受鹽在製備用於治療類風濕性關節炎之藥物的用途。 15 6. —種如申請專利範圍第1項之式(I)化合物或其藥學上可 接受鹽在製備用於治療炎症性腸病或克隆氏症之藥物 的用途。 7. —種製備如申請專利範圍第1項之式(I)化合物的方法， 其包括在還原胺化條件下，使式(II)化合物 46 200932229

   與式(III)化合物 ο

   PGO. A. (III) H 其中PG代表保護基團， 進行反應並可選擇性形成該化合物之藥學上可接受鹽。

   47 200932229 四、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：第（ ）圖。（無) (二) 本代表圖之元件符號簡單說明：

   五、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：·

   ⑴ 2