TW200522963A - Process for the preparation of tubulin inhibitors - Google Patents

Description

200522963 玖、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於一種製備三唑并嘧啶二羧酸鹽之方法， 其中三唑并嘧啶二羧酸鹽係用以治療癌症之微管蛋白抑制 劑。 【先前技術】 在該項技藝中，仍需要用於癌症療法之細胞毒性藥 劑。特別是，我們需要可抑制或治療腫瘤生長的細胞毒性 藥劑，其具有類似紫杉醇（paclitaxel )之效用，並能干擾 微小管形成的過程。因此，在該項技藝中需要一種能加速 微管蛋白（tubulin)聚合、並使集結的微小管（microtubule) 穩定的藥劑。 抗微小管藥物是抗癌劑中的一個主要分類（Ro win sky， ΕΚ., and Tolcher, A.W. A n t i m i c r o t u b u 1 e agents. In: V.T. Devita， Jr., S · Heilman, and S. A. Rosenberg (eds.)， Cancer Principles and Practice, Ed. 6， p p. 43 1 -452. Philadelphia: Lippincott Williams and Wilkins，200 1 ) o 抗微小管藥物的作用是干擾細胞微小管（特別是有絲分裂 的紡錘體）的功能；正常紡錘體功能受到阻擾，會使細胞 走向細胞凋亡。 許多腫瘤天生具有抗藥性（如直腸癌）或在多次治療 後變得具有抗藥性，其原因至少有部分是因爲位於癌細胞 膜上的藥物轉運子表現會將藥物泵出細胞，因而減低其效 用(Gottesman, M. M. Mechanisms of cancer drug 200522963 resistance. Annu. Rev. Med., 53: 6 1 5-627, 2002 ) ° 在這些 轉運子中’最爲人所知的是P -醣蛋白。因此，我們需要一 種新藥劑，其具有類似紫杉類藥物（tax ane )作用於微小 管聚合之效用，且非P-醣蛋白或其他這類幫浦之受體，而 能克服患者對紫杉類藥物的抗藥性成因。 其有利者，係提供新型化合物，該化合物可提供一種 藉由投予具有類似紫杉醇抗癌活性的化合物，而在晡乳類 動物身上治療或抑制細胞增生、贅瘤生長和惡性腫瘤生長 的方法。其又有利者，係提供新型化合物，該化合物可提 供一種治療或抑制有多重抗藥性（multiple drug resistance， MDR)表現或因MDR而產生抗藥性之癌腫瘤生長的方法。 其又有利者，係提供新型化合物，該化合物可提供一種在 先天或後天對化療藥劑（特別是抗有絲分裂劑）具有抗藥 性的哺乳類動物身上治療或抑制癌腫瘤生長的方法。 因此，在新型臨床候選化合物硏究進行的同時，也有 被選出之臨床候選化合物的新型及改良製備方法硏究。 在WO 02/025 63 A2中所描述者，係具有下列結構式 之三唑并嘧啶

在癌症療法的用途，特別是作爲微小管劑的用途。先 前在美國專利案號 5,593,996、5,756,509、5,948,783、 5,981,534' 5,612,345' 5,994,360' 6,020,338' 5,985,883 > 200522963 5,854,252、5,808,066 > 5,8 1 7,663 > 5,95 5,25 2、5,965,5 6 1 > 5,986,153、5，750,766、6,117,876、6，297,251 和國際公報 案號 WO 98/46607、WO 98/46608、WO 99/48893、WO 99/4 1 255、EPO 8345 1 3A2、EPO 782997A2、EPO 550 1 1 3B1、

FR 27 843 8 1 A1 、 EPO 989 1 30 A1 、 WO 98/4 1 496 、 WO 94/20501 、 EPO 945453A1 、 EPO 562615A1 、 EPO 77065 和 EPO 5 626 1 5B1中所描述者，係上述三唑并嘧啶之製備方 法，及其在農業上作爲殺黴劑之用途。

在共審理案件 Docket No· AM101270 (申請案號 60/5〇5,544，於2〇03年9月24日提出申請）中所描述者， 係具有下列結構式之6-[(經取代）苯基]-三唑并嘧啶化合物 R1

之系列化合物，其爲微小管抑制劑，並可用以治療癌症。 通常來說，在實驗室可運作的方法無法用於大規模的 製備。特別是已報告之5，7 -二氯-6 -(經取代-苯基）-[1，2，4 ] 三唑并[l，5-a]嘧啶的合成，其係經由1-胺基-2,3,5-三唑將 2-(經取代-苯基）-丙二酸二乙基酯環化而製備出來，在us 6，117,876有所描述，並進一步於EP 0 770 615 A1和EP 0 770 615 B1有所描述，其中6-(經取代-苯基）-[1，2,4]三唑并 [l，5-a]嘧啶-5,7-二醇形成，並與三氯一氧化磷反應而氯 化’得出5，7 -二氯-6 -(經取代-苯基）-[1，2，4 ]三唑并[1，5 - a ] 嚼啶。其所描述知系列步驟或可於小試管中以小規模完 200522963 成，但於1 30°c加入氯化劑三氯一氧化磷，且隨後以蒸餾方 式移除乙醇的做法不易在大規模製備做到。由於所得產物 爲不易純化的油’上述方法進一步受限在小規模的合成 US 5,986，135 和 US 6，1 1 7,876 描述了一 種製備[5-氯 -6-(經取代-苯基）412,4]三唑并n，5_a]嘧啶_7 基]-((15)-2，2,2 -三氟-i -甲基-乙基胺之方法，其係經 (S)-2,2,2-三氟-1-甲基-乙基胺將5,7_二氯_6_(經取代-苯 基）-[1，2,4]三唑并[l，5_a]嘧啶予以胺化。然而，這種方法 不全然令人滿意，因爲它會產生油質中間體，這種缺乏實 用的純化方法之中間體是在製備5,7-二氯-6-(經取代-苯 基）-[1，2,4]三唑并[l，5_a]嘧啶時，進一步與（S)-2,2,2-三氟 -1 -甲基-乙基胺接續反應而形成的。 我們顯然需要提供一種製備6 -[(經取代）苯基]—三唑 并嘧啶化合物之新方法，其可克服先前技藝方法的缺點。 特別是需要一種製備純化晶狀體6 -[(經取代）苯基]-三唑并 嘧啶化合物之方法。 我們進一步需要提供一種相較於前述技藝中所描述 之方法能於該項技藝中表現出顯著進步的新方法。 基於三唑并嘧啶化合物於癌症療法之用途的觀點，我 們需要發展製備這類化合物之更簡單溫和的方法。 【發明內容】 發明槪述 本發明提供一種製備具有結構式（I)之6-[(經取代）苯 基]-三唑并嘧啶二羧酸鹽及其水合鹽的方法 -9- 200522963

其中： R1 爲 CF3 或 C2F5 ; R2爲Η或CrCs烷基； η爲整數2、3或4; X爲C1或Br ; R3和R4係各自獨立爲11或CrCs烷基；或 R3和R4在選擇性與其各自所連接之氮原子共同形成一 具有1-2個氮原子及0-1個氧原子或0-1個硫原子之4至6 員飽和雜環時，係選擇性經R5所取代； R5爲Ci-Cs烷基； 其中虛線爲一選擇性鍵結； 其方法包括： a.將下式之丙二酸酯

(其中R6和R7係獨立爲CrG烷基）與3-胺基-1，2,4-三唑在三烷基胺鹼存在的情況下反應，並於約 1 3 0- 1 70°C加熱約1至6小時，冷卻至約130°C，以甲 200522963 苯稀釋，冷卻至約20°C至約30°C，且加入至少2當量 之鹼金屬氫氧化物（MOH )水溶液，並將下式之二金屬 鹽加以分離

b.將該二金屬鹽以鹵化劑POX3(其中X爲Br或C1)予 以鹵化，以得出下式之經鹵化產物

c.將該經鹵化產物與下式之胺 R2

NH2 在質子溶劑中，於從約20°C至約30°C反應，以得出下 式之胺產物

d.將鹼金屬氫化物與胺基醇HO_(CH2)n-NR3R4在四氫呋喃 中，於約10至40 °C反應約30分鐘，加入該胺產物，並 -11- 200522963 加熱至約5 5 - 6 〇 °c約1 2至2 0小時，以得出6 -[(經取代） 苯基]-三唑幷嘧啶產物

e ·將6 -[(經取代）苯基卜三唑并嘧啶產物在水中與下式之 二羧酸反應

HO

OH (其中虛線爲一選擇性鍵結），並加入一選自三級丁基 甲基醚、乙酸乙酯和甲苯之溶劑，以得出6 -[(經取代） 苯基]-三唑幷嘧啶二羧酸鹽，爲固體

f·將 6-[(經取代）苯基]-三唑并嘧啶二羧酸鹽自水中結 晶，並收集6-[(經取代）苯基]-三唑并嘧啶二羧酸鹽； g·將6-[(經取代）苯基]-三唑并嘧啶二羧酸鹽乾燥，而形成 無水6 -[(經取代）苯基]-三唑幷嘧啶二羧酸鹽；並 -12- 200522963 h .以水處理無水 6 -[(經取代）苯基]-三唑并嘧啶二羧酸 鹽，以得出式（I)之6-[(經取代）苯基]-三唑并嘧啶二羧酸 鹽，爲水合鹽

(I) 〇 特佳者爲一種製備式（II)之6-[(經取代）苯基]-三唑并 嘧啶二羧酸鹽及其水合鹽的方法

其中· R1 爲 CF3 或 C2F5 ; R2爲Η或CrCs烷基； η爲整數2、3或4; X 爲 C1 ; R3和R4係各自獨立爲Η或Ci-C3烷基； 其中虛線爲一選擇性鍵結； 其方法包括： a.將下式之丙二酸酯 -13- 200522963

(其中R6和R7係獨立爲烷基）與3-胺基-1，2,4-三唑以約 1 : 1之莫耳比率，在三丁基胺存在的情況下 反應，並於約1 3 0 - 1 7 0 °C加熱約1至6小時’冷卻至約 1 3 0 °C，以甲苯稀釋，冷卻至約 2 0 - 3 0 °C，，且加入至 少2當量之氫氧化鈉水溶液，並將下式之二鈉鹽加以分 離

b·將該二鈉鹽以鹵化劑ρ〇χ3 (其中X爲C1 )加熱至回流 溫度約1 6小時而予以鹵化，以得出下式之經鹵化產物

c·將該經鹵化產物與胺

R2 (S) Νη2 在質子溶劑中，於從約2 0 °C至約3 0 °C反應約 1 8 - 2 4小 時’以得出下式之胺產物 -14- 200522963 R1

d·將鹼金屬氫化物與胺基醇HO-(CH2)n-NR3R4在四氫呋喃 中，於約20-3 0°C反應約30分鐘，加入該胺產物，並於 約5 5 - 6 0 °C加熱約1 4 - 1 6小時，以得出6 -[(經取代）苯基]- 三唑并嘧啶產物

e·將 6-[(經取代）苯基卜三唑并嘧啶產物在水中與下式之 二羧酸反應 0 Η(Λ^γ0Η 〇 (其中虛線爲一選擇性鍵結），並加入三級丁基甲基 醚’以得出6-[(經取代）苯基]-三唑并嘧啶二羧酸鹽，爲 固體 R1 R3

-15- 200522963 f ·將 6 -[(經取代）苯基]-三唑并嘧啶二羧酸鹽自水中結 晶，並收集6-[(經取代）苯基]-三唑幷嘧啶二羧酸鹽； g·將6-[(經取代）苯基]-三唑并嘧啶二羧酸鹽乾燥，而形成 無水6-[(經取代）苯基]-三唑并嘧啶二羧酸鹽；並 h ·在飽和水大氣中，以水處理無水6 -[(經取代）苯基]-三唑 并嘧啶二羧酸鹽，以得出式（II)之6-[(經取代）苯基]-三 唑并嘧啶二羧酸鹽，爲水合鹽 R1 R3

本發明之特別具體例包含一種製備並純化式（A)之[5_ 氯-6-(2,4,6-三氟-苯基）-[1，2,4]三唑并[l，5-a]嘧卩定-7-基]-((15)-2，2,2-三氟-1-甲基-乙基）-胺的琥珀酸鹽之可行 並有效的方法，特別是其二水合形式（B)。

在進一步更佳具體例中，R3和R4各自獨立爲Η或 Q-C3烷基。 在又一較佳具體例中，R3爲Η ,且R4爲甲基。 由本發明之方法所製備之化合物可含有—$胃^ Μ -16- 200522963 子，且某些本發明之化合物可含有一或多個不對稱中心， 而因此產生立體異構物，如鏡像異構物和非鏡像異構物。 本發明之立體異構物係根據Cahn-Ingold-Prelog系統來命 名，雖則式（I)中未顯示其立體化學，本發明包括所有個體 可能之立體異構物，以及外消旋混合物和其他R和S立體 異構物（比例性混合物（scalemic mixtures)，其爲不等量之 鏡像異構物的混合物）之混合物及其醫藥可接受鹽。包括 在本發明範圍內者，係具有對掌中心之通式（I)化合物的（/?) 和（M異構物及其外消旋鹽。本發明涵括該化合物之所有立 體異構物，包括獨立於其他立體異構物者、或與其他立體 異構物以任一比例混合者，因此包括，舉例而言，鏡像異 構物之外消旋混合物，以及異構物之非鏡像異構混合物。 任一化合物之絕對構型可由習知之X光結晶學來決定。 定義 詞語「烷基」意爲具有1至4個碳原子之直鏈或支鏈 烷基，較佳爲具有1至3個碳原子者。

鹵化劑意爲溴化劑或氯化劑POX3，其中X爲Br或 C1，較佳爲三溴一氧化磷或三氯一氧化磷。 質子溶劑包括如溶劑N，N-二甲基甲醯胺。 驗金屬氫化物包括氫化鋰、氫化鉀或氫化鈉。 詞語「鹼金屬氫氧化物」包括氫氧化鉀或氫氧化鈉， 較佳爲約5 0 %氫氧化鈉水溶液。 三烷基胺鹼包括三丁基胺和三丙基胺。 -17- 200522963 ο

其中虛線爲一選擇性鍵結。二羧酸之範例包括琥珀酸 和反丁烯二酸。 詞語「水合鹽」意爲式（I)或（II)之二羧酸鹽與水連結， 其至多可連結5莫耳水或所有莫耳綣連部分（即2.5莫 耳），較佳爲連結2莫耳水成二水合鹽。 本發明之詳細描述 在一如流程圖I所描述之製備6-[(三經取代）苯基]三 唑并嘧啶化合物的新方法中，係將2-(2,4,6-三氟-苯基）-丙 二酸二酯1與3 -胺基-1，2，4 -三唑以約1 : 1之莫耳比率在三 烷基胺鹼（較佳爲三丁基胺）存在的情況下，於約130°C 至約170°C (較佳爲約150°C )之溫度範圍內反應約1至6 小時（較佳爲約2至約3小時之範圍內）的時間。將冷卻 至約130°C之反應混合物溶於甲苯，並以至少2當量之鹼 金屬氫氧化物（較佳爲氫氧化鈉溶液，更佳爲約50%氫氧 化鈉之水溶液）加以處理，其係於約1 (TC至5 0 °C (較佳爲 於約20°C至約30°C，較佳爲約25°C )之溫度範圍內攪拌 約1至3小時，而形成一固體。將所得固體過濾，以甲苯 清洗並於約 80 °C真空乾燥，以得出 6-(2,4,6 -三氟苯 基）-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶- 5.7-二醇之二鈉鹽2,其爲定 量產率，高效液相層析（HPLC )得出>95 %之純度。 在上述方法之第二步驟中，於約20至約60分鐘的時 間（較佳爲約30分鐘）內’在經分離之6-(2，4,6 -三氟苯 200522963 . 基）-[1，2,4]三唑并[l，5-a]嘧啶- 5.7 -二醇之二鈉鹽2中加入 鹵化劑（較佳爲溴化劑或氯化劑Ρ〇χ3,其中X爲Br或C1 ; 較佳爲三溴一氧化磷或三氯一氧化磷），其比率爲2-8毫 升/克之6-(2，4,6-三氟苯基）412,4]三唑并[l，5-a]嘧啶- 5.7-二醇二鈉鹽，之後加熱至回流溫度約8至約24小時（較佳 爲約1 6小時）。揮發物經蒸餾移除而成殘餘物，其與甲苯 蒸餾至少兩次，以得出殘餘物。將殘餘物溶解於選自乙酸 乙酯、二氯甲烷或甲苯之溶劑，並倒入水中，同時溫度維 持在約5-15°C之間。將溶劑分離，以水清洗，並以硫酸鈉 鲁 乾燥。揮發物經蒸餾移除而成殘餘物，將其溶解於異丙醇， 且揮發物再次經蒸顧移除而成殘餘物。將殘餘物溶解於異 丙醇，並加熱至約4 0至8 2 °C (較佳爲約6 0 °C )，過濾， 在約一小時內冷卻至約0 °C，再持續冷卻約2小時，產物 經過濾收集，並進一步於約4 5 °C乾燥，以得出5，7 -二鹵 -6-(2,4,6-三氟苯基）-[1，2,4]三唑并[1，5-&]-嘧啶3，以高效 液相層析（HPLC)顯示具有>95 %之純度。較佳者爲，當以 三氯一氧化磷爲鹵化劑時，係形成5,7-二氯- 6- (2，4，6 -三氟 ® 苯基）-[1，2,4]三唑并[l，5-a]-嘧啶。 在上述方法之第三步驟中，在溶於質子溶劑（較佳爲 無水N，N-二甲基甲醯胺（DMF))之5,7-二鹵-6-(2,4,6-三氟 苯基）-[1，2,4]三唑并[l，5-a]-嘧啶3溶液（其中5,7-二鹵 -6-(2,4,6-三氟苯基）-[1，2,4]三唑并[1，51]-嘧啶對0厘？之 比率爲約3-10毫升DMF/克，較佳爲4-5毫升/克）中加入 胺R^HNH: 4 (其中R1和R2如前述定義），其中5,7_ -19- 200522963 二鹵_6_(2,4,6-三氟苯基）-[1，2,4]三唑并[1，5-&]-嘧啶3對 R 1 R 2 C Η Ν Η 2 4之莫耳比率係於約1 : 2 - 1 : 3之範圍（較佳 爲1 : 2.5 )，之後於約20-30 °C攪拌約24至48小時（較 佳爲約24小時）。將反應混合物倒入約10-20 °C的冷水中， 其中D M F對水之體積比率爲約1 : 1至1 : 5 (較佳爲約1 : 3 )。之後再攪拌約3 0分鐘，產物經過濾收集，以水清洗， 並溶解於異丙醇，在約一小時內冷卻至約0°C，再攪拌約 一小時，過濾收集並乾燥，以得出胺5。較佳者，係將溶 於無水N，N-二甲基甲醯胺（DMF )之5,7-二氯-6-(2,4,6- # 三氟苯基）-[1，2,4]三唑并[l，5-a]-嘧啶以較佳之胺 (5)-2,2,2-三氟-1-甲基-乙基胺於約 20-30它處理約24小 時，將反應混合物慢慢加入冷水中，形成沉澱之固體產物。 將該固體產物過濾，以水清洗並乾燥，以得出粗製產物。 粗製產物係從異丙醇（IPA )和水之混合物結晶，以得出 82%產率、並具有 98%HPLC純度及>99%鏡像異構物超量 (enantiomeric excess )之產物。 在上述方法之第四步驟中，在懸浮於無水四氫呋喃之 ® 鹼金屬氫化物（爲溶於礦物油之60%溶液，較佳爲氫化鈉） 懸浮液中於約10至約40°C (較佳爲於環境溫度）在約30 分鐘內逐滴加入胺基醇HO-(CH2)n-NR3R46,其中四氫呋喃 對胺基醇的比率爲約6.5毫升THF/克胺基醇。在約1〇至 約30分鐘內加入溶於四氫呋喃之胺5溶液，其中THF對 胺之比率爲約1毫升THF/克。將混合物加熱至約55-60 °C 約12至約2 0小時（較佳爲約16小時），之後冷卻至約 -20- 200522963 〇-6°C。在反應混合物中加入約5至約15t：的水（較佳爲約 1 〇°C的水），其比例爲約1 〇毫升的水對1克的胺。揮發物 經蒸餾移除而成殘餘物，殘餘物以選自三級丁基甲基醚 (TB ME )、乙酸乙酯和甲苯之溶劑萃取，將水相分離。將 一竣酸（約6 · 6當量’較佳爲琥珀酸）加入分離之水溶液 中，並在該水溶液中進一步加入選自三丁基甲基醚 (TBME )、乙酸乙酯和甲苯之溶劑，混合物冷卻至約〇°C 至約l〇°C (較佳爲約3°C )。固體沉澱經過濾收集，以冷 水清洗，之後較佳爲以TBME清洗，並將固體沉澱溶解於 馨 約6 5 °C至約8 0 °C的水中，並自水中結晶，1 〇毫升水/克固 體沉殿’以得出6 -[(經取代）苯基三唑并嘧啶7 ,爲醫藥 可接受二竣酸鹽（較佳爲琥珀酸鹽）。當6-[(經取代）苯基]_ 二唑并嘧啶7之醫藥可接受二羧酸鹽（較佳爲琥珀酸鹽， 更佳爲爲無水鹽）以（80- 100% )水相對溼度之飽和大氣加 以處理’則形成6 -[(經取代）苯基]_三唑并嘧啶]之水合鹽 (特別是二水合鹽）。 流程圖I _ -21- 200522963

1)1.05當量 150 °C,2h

2)甲苯/2當量NaOH

1) 3當量 HO-(CH2)n-NR3R4 6 NaH/THF

hn^^nh/1 當量 BU3N

HO

OH 0 60°C,22h 3)H2Q 2)二羧酸 /TBME 65。〇80。(；

較佳者，係將[5-氯-6-(2,4,6-三氟-苯基）-[l，2,4]三唑 并[l，5-a]嘧啶-7-基]-((lS)-2,2,2-三氟-1-甲基-乙基）-胺與 3-甲基胺基-丙-1-醇在鹼金屬氫化物氫化鈉（NaH)存在的 情況下，於四氫呋喃（THF )中偶合，形成{5-氯- 6-[2,6-二氟-4-(3-甲基胺基-丙氧基）-苯基]-[1，2,4]三唑并[l，5-a] 嘧啶-7-基}-((15)-2,2,2-三氟-1-甲基-乙基）-胺。 在一典型實驗中，在懸浮於THF之氫化鈉（NaH)懸 浮液中於環境溫度逐滴加入3 -甲基胺基-丙-1 -醇，混合物 攪拌約30分鐘。慢慢加入溶於THF之[5-氯-6-(2，4,6-三氟 -苯基）-[1，2,4]三唑并[l，5-a]嘧啶-7-基卜（（lS)-2,2,2-三氟 -1-甲基-乙基）-胺溶液，將混合物加熱至約60 °C，並攪拌約 -22- 200522963

20小時，之後冷卻至〇°C。逐滴加入水，同時溫度維持在 約10±3°C。THF經蒸餾移除而成殘餘物，殘餘物以三級丁 基甲基醚（TB ME )萃取，並於水相中加入二羧酸，特別是 琥珀酸（6.6當量），其後加入TBME。混合物冷卻至約 3 ±3 °C，將所得沉澱固體產物過濾，以冷水和TB ME清洗。 將濕固體於約65 °C至約80°C溶解於水，並予以結晶，以得 出78%產率、並具有>99%HPLC純度及及>99%鏡像異構物 超量之純化合物，其於約35 °C至約40 °C真空乾燥，得出無 水鹽，其經飽和水大氣處理而得出水合鹽。 其可選擇者，在{5-氯-6-[2,6-二氟-4-(3-甲基胺基-丙 氧基）苯基]-[1，2,4]三唑并[l，5-a]嘧啶-7-基}-((lS)-2,2,2-三氟-1-甲基-乙基）-胺與琥珀酸之鹽形成中，反丁烯二酸可 選擇性取代琥珀酸而形成反丁烯二酸鹽。 【實施方式】 下列實施例係用以描繪本發明之某些具體例，但不應 解釋爲限制本發明之範圍。 實施例1 6-(2,4,6-三氟苯基）-[1，2,4]三唑并[1，5-&]嘧啶-5.7-二醇之 二鈉鹽 將2-(2,4,6-三氟-苯基）-丙二酸二乙基酯（400克，1.38 莫耳）、3-胺基-1，2，4-三唑（122克，1.45莫耳）和三丁 基胺（255克，1.38莫耳）之混合物加熱至約150°C，並攪 拌約2小時。將混合物冷卻至約1 3 0 °C，並移除加熱源。 之後於30分鐘內加入甲苯（1 600毫升），混合物冷卻至 -23- 200522963 室溫，並於約1 5分鐘內加入氣氧化鈉溶液（5 0 % ’ 2 2 0克， 2.76莫耳）。將混合物於約20 °C至約30 °C攪拌約1小時。 將固體過濾，以甲苯（2x600毫升）清洗並於80 °C 710毫米 录柱乾燥40小時’以得出白色固體（470克’ 105%’ > 9 5 % Η P L C區域純度），其可直接用於下一步驟。 實施例2 5,7-二氯-6-(2,4,6-三氟苯基）-[1，2,4]三唑并[1，51卜嘧啶 在三氯一氧化磷（1900毫升）中，於約30分鐘內分 次加入6-(2,4,6 -三氟苯基）-Π，2,4]三哗并[l，5-a]赠D定- 5.7-二醇之二鈉鹽（470克，1.38莫耳），混合物加熱至回流 溫度約1 6小時。溶劑經蒸餾移除而成殘餘物’殘餘物與甲 苯（ 2x500毫升）蒸餾，之後將殘餘物溶解於乙酸乙酯（1〇〇〇 毫升）’所得混合物倒入水（3 0 0 0克）中’问時溫度維持 在5-15°C之間。分離有機相，合倂之有機相以水（i〇〇〇毫 升）清洗並以Na2S〇4乾燥。在多數溶劑經蒸餾移除後’加 入IP A ( 2x5 00毫升）並持續蒸餾而成殘餘物。將殘餘物溶 解於IP A( 2350毫升）並加熱至約60 °C，混合物於50-60 °C 過濾，濾、液於約1小時內冷卻至約0 °c，並再攪拌約2小 時。將固體過濾，於45 °C /10毫米汞柱乾燥24小時’以得 出黃褐色固體（ 243克，57%，96%HPLC區域純度）。 實施例3 [5-氯-6-(2,4,6-三氟-苯基）-[1，2,4]三唑并[1，5-3]嘧啶-7 基]-((15)-2，2，2-三氟-卜甲基-乙基）_胺 200522963 在溶於無水DMF( 1000毫升）之5,7-三氟苯基）-[1，2,4]三唑并[l，5-a]-嘧啶（200 ^ 溶液中加入（以-2,2,2_三氟-1-甲基-乙基胺（ 莫耳），溶液於約20°C至約30°C攪拌24小 合物於30分鐘內慢慢加入冷水（3000毫升 於10-2(TC攪拌30分鐘。將固體產物過濾S 毫升）清洗，粗製產物在50°C溶解於IP A ( 於30分鐘內加入水（2000毫升），以使產 物於1小時內冷卻至〇°C，並於該溫度攪拌 體過濾，於65°C /10毫米汞柱乾燥20小時， 固體（204克，82%，98%HPLC區域純度及 實施例4 5-氯 _6-{2,6-二氟-4-[3-(甲基胺基） 基}-心[(115)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基][1，2,4] 嘧啶-7-胺琥珀酸鹽二水合物 於約20-3 0 °C，在懸浮於無水THF ( 750 (40.9克，1.02莫耳，溶於油中之60 %溶液 於30分鐘內逐滴加入3-甲基胺基-丙-1-醇（ 莫耳），將混合物攪拌3 0分鐘。之後於1 5 入溶於THF( 150毫升）之[5-氯-6-(2，4,6-三氟 三唑并[l，5-a]嘧啶-7基]-((15)-2，2,2-三氟-胺（1 5 0克，〇 . 3 7 9莫耳）溶液，混合物加熱 16小時，之後冷卻至0-6 °C。逐滴加入冷水（ 同時溫度維持在10±3°C。THE經蒸餾移除· 二氯-6-(2,4,6· £，0.627 莫耳） 177 克，1.57 時。將反應混 )中，混合物 ϊέ 以水（2x500 1 000毫升）， 物沉澱。混合 1小時。將固 以得出淡黃色 9 9 % e e ) 〇 丙氧基]苯 三唑并[l，5-a] 毫升）之NaH )懸浮液中， :1 15 克，1.21 分鐘內慢慢加 -苯基）-[1，2,4] 1-甲基-乙基）-至6 0 °C並攪拌 1 500毫升）， ，反應混合物 200522963 以三丁基甲基醚（TBME，2x1000毫升）萃取’並於分離 之水相中分次加入琥珀酸（2 9 6克，2 · 5 1莫耳），其後加 入Τ Β Μ E ( 1 〇 〇 〇毫升）。混合物冷卻至3 ±3 °c並攪拌1小 時，將粗製固體產物過濾，以冷水（150毫升）和TBME (2x400毫升）清洗。將濕固體在約75 °C溶解於水（2000 毫升），溶液於60-70°C過濾，於1小時內冷卻至〇°C ’並 在該溫度攪拌1小時。將固體過濾，並於3 5 °C /1 〇毫米汞 柱乾燥20小時，以得出無水形式之白色固體（175克，80%， >99%HPLC區域純度及99%ee )。將一小部分之無水化合 物於約20°C至約30°C置於相對溼度爲80%-100%之乾燥盤 24小時，其吸收5.8重量％之水後停止。該二水合物於約 2 0°C至約30°C及5%-100%相對溼度爲穩定狀態。1HNMR (CDC13)： δ 10.2 (bs, 1H), 8.26 (s, 1H), 6.80 (d, 2H, J = 25 10.5 Hz), 5.79 (m, 1H), 4.13 (t, 2H, 7= 6.3 Hz), 3.03 (t, 2H, 7= 7.2 Hz), 2.57 (s, 3H), 2.35 (s, 4H), 2.07 (m, 2H), 1.27 (d, 7 = 6.0, 3H). 【圖式簡單說明】 ΛττΤ llll 川、 -26-

Claims (1)

1. 200522963 十、申請專利範圍： 1 · 一種製備具有結構式（I)之6 -[(經取代）苯基]-三唑并嘴 D定二羧酸鹽及其水合鹽之方法

   其中： Rl 爲 CF3 或 C2F5 ; R2爲Η或烷基； n爲整數2、3或4 ; X爲C1或Br ; R3和R4係各自獨立爲Η或Ci-Cs烷基；或 R3和R4在選擇性與其各自所連接之氮原子共同形成 一具有1-2個氮原子及〇-1個氧原子或0-1個硫原子之 4至6員飽和雜環時，係選擇性經R5所取代； 鲁 R5爲CrCs烷基； 其中虛線爲一選擇性鍵結； 其方法包括： a•將下式之丙二酸酯

   -27- 200522963 (其中R6和R7係獨立爲Cl-C3烷基）與3 -胺基 -1，2,4-三嗤在三烷基胺鹼存在的情況下反應，並於 約1 3 0 - 1 7 0 °C加熱約1至6小時，冷卻至約1 3 0 °C， 以曱苯稀釋，冷卻至約2 〇它至約3 〇 〇c，且加入至少 2當量之鹼金屬氫氧化物（m〇H)水溶液，並將下 式之二金屬鹽加以分離

   b.將該二金屬鹽以鹵化劑P〇X3(其中X爲Br或C1) 予以鹵化，以得出下式之經鹵化產物

   將該經鹵化產物與下式之胺

   在質子溶劑中，於從約2 0 °C至約3 0 °C反應，以得出 下式之胺產物

   -28- 200522963 d.將鹼金屬氫化物與胺基醇HO-(CH2)n-NR3R4在四氫 呋喃中，於約10至40 °C反應約30分鐘，加入該胺 產物，並加熱至約5 5 - 6 0 °C約1 2至2 0小時，以得出 6-[(經取代）苯基]-三唑并嘧啶產物

   e ·將6 -[(經取代）苯基]-三哩并嘧n定產物在水中與下式 之二羧酸反應 〇 hcA^Y〇h (其中虛線爲一選擇性鍵結），並加入一選自三級 丁基甲基醚、乙酸乙酯和甲苯之溶劑，以得出6-[(經 取代）苯基]-三唑并嘧啶二羧酸鹽，爲固體

   f.將6 -[(經取代）苯基μ三唑并嘧啶二羧酸鹽自水中結 晶’並收集6-[(經取代）苯基]_三唑并嘧啶二羧酸鹽； -29- 200522963 g ·將6 -[(經取代）苯基]-三唑并嘧啶二羧酸鹽乾燥，而 形成無水6-[(經取代）苯基]-三唑并嘧啶二羧酸鹽； 並 h ·以水處理無水6 -[(經取代）苯基]-三唑并嘧啶二羧酸 鹽，以得出式（I)之6 -[(經取代）苯基]-三〇坐并嘧啶二 羧酸鹽，爲水合鹽

   (I) 2 ·如申請專利範圍第1鱺邀方法，其中三烷基胺鹼係選自 三丁基胺和三丙基胺。 3 ·如申請專利範圍第1或2項之方法，其中丙二酸酯對 3-胺基-1，2,4-三唑之莫耳比率爲約1 : 1。 4 ·如申請專利範圍第1至3項中任一項之方法，其中鹼金 屬氫氧化物爲氫氧化鈉。 5 ·如申請專利範圍第4項之方法，其中鹼金屬氫氧化物氫 氧化鈉爲約5 0 %之水溶液。 6 ·如申請專利範圍第1至5項中任一項之方法，其中鹵化 劑爲三氯一氧化磷或三溴一氧化磷。 7 ·如申請專利範圍第6項之方法，其中鹵化劑爲三氯一氧 化磷。 8 ·如申請專利範圍第1至7項中任一項之方法，其中二羧 酸爲琥珀酸或反丁烯二酸。 -30- 200522963 9 .如申請專利範圍第8項之方法，其中二羧酸爲琥珀酸。 1 〇 .如申請專利範圍第1至9項中任一項之方法，其中質子 溶劑爲N，N-二甲基甲醯胺。 1 1 .如申請專利範圍第1至1 〇項中任一項之方法，其中R3 和R4係各自獨立爲《[或Ci-Cs烷基。 1 2 .如申請專利範圍第1 1項之方法，其中R3爲Η，且R4 爲甲基。

   1 3 .如申請專利範圍第1至1 2項中任一項之方法，其中步 驟a之加熱係於約1 50 °C進行約2至3小時。 1 4 .如申請專利範圍第1至1 3中任一項之方法，其中步驟 b之鹵化劑係加熱至回流溫度約8至24小時。 1 5 .如申請專利範圍第1 4項之方法，其係加熱至於回流溫 度約1 6小時。 1 6 .如申請專利範圍第1至1 5項中任一項之方法，其中步 驟d之加熱爲約1 6小時。

   1 7 .如申請專利範圍第1至1 6項中任一項之方法，其中R 1 爲CF3，且R2爲甲基。 1 8 .如申請專利範圍第1至1 7項中任一項之方法，其中步 驟c之胺具有（S)構型 R1 R2X^NH2 -31- 1 9 .如申請專利範圍第1至1 8項中任一項之方法，其中步 2 驟e之溶劑爲三丁基甲基醚。 200522963 t 2 〇 .如申請專利範圍第1至1 9項中任一項之方法，其中步 驟h中以水處理係以飽和水大氣處理。 21 . —種製備式（II)之6-[(經取代）苯基]-三唑并嘧啶二羧酸 鹽及其水合鹽的方法

   其中： R1 爲 CF3 或 C2F5 ; R2爲Η或Ci-Cs烷基； η爲整數2、3或4 ; X 爲 C1 ; R3和R4係各自獨立爲Η或C^-Cs烷基； 其中虛線爲一選擇性鍵結； 其方法包括： · a.將下式之丙二酸酯

   (其中R6和R7係獨立爲C1-C3院基）與3 -胺基 -1，2,4-三唑以約 1 : 1之莫耳比率，在三丁基胺存 在的情況下反應，並於約1 50 °C加熱約1至6小時， -32 - 200522963 冷卻至約1 3 0 °c，以甲苯稀釋，冷卻至約2 0 C至約 3 〇 °C，旦加入至少2當量之氫氧化鈉水溶液’並將 下式之二鈉鹽加以分離

   F b.將該二鈉鹽以鹵化劑P〇X3 (其中x爲cl)加熱至 回流溫度約16小時而予以鹵化’以得出下式之經歯 Φ 化產物

   將該經鹵化產物與下式之胺 R1 Λ R2 (SrNH2 在質子溶劑中，於從約2〇°C至約3〇t反應約 24-48 小時，以得出下式之胺產物 R1

   d·將驗金屬氫化物與胺基醇HO-(CH2)n-NR3R4在四氫 呋喃中，於環境溫度反應約3 0分鐘，加入該胺產物 -33- 200522963 ，並加熱至約 5 5 - 6 0 °C約 1 2 - 2 0小時’以得出 6 -[( 經取代）苯基]-三唑并嘧啶產物

   e.將6-[(經取代）苯基]-三唑并嘧啶產物在水中與下式 之二羧酸反應

   (其中虛線爲一選擇性鍵結），並加入三級丁基甲基 醚，以得出6-[(經取代）苯基]-三唑并嘧啶二羧酸鹽

   f.將6-[(經取代）苯基]-三唑并嘧啶二羧酸鹽自水中結 晶，並收集6-[(經取代）苯基]-三唑并嘧啶二竣酸鹽 g·將6-[(經取代）苯基]-三哩并嚼陡二竣酸鹽乾燥，而 形成無水6-[(經取代）苯基卜三唑并嘧啶二竣酸鹽； 並 h ·在飽和水大氣中，以水處理該6 -[(經取代）苯基]_三 -34- 200522963 6-[(經取代）苯 唑并嘧啶二羧酸鹽，以得出式（II)之 基]-三唑并嘧啶二羧酸鹽，爲水合鹽

   2 2 .如申請專利範圍第1至2 0項中任一項之 出 方法，其係產 23 .如申請專利範圍第1至20項中任一項之 出 方法，其係產 cf3 Η OT^0H B 2H20 24 .如申請專利範圍第2 1項之方法，其係產丨 ^xVy°〇^n'ch3 Η 2 5 .如申請專利範圍第2 1項之方法，其係產 -35- 200522963

   2 6.如申請專利範圍第1至22項中任一項之方法，其中步 驟C中經鹵化產物對胺之莫耳比率爲約1 : 2至約1 : 3。

   -36- 200522963 七、指定代表圖： (一） 本案指定代表圖為：無。 (二) 本代表圖之元件代表符號簡單說明: 本發明無指定代表圖 八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：·