TW200416223A

TW200416223A - Method of modifying surface of material

Info

Publication number: TW200416223A
Application number: TW092132699A
Authority: TW
Inventors: Kazuyuki Miyazawa; Osamu Shirota; Yousuke Toujo; Taketoshi Kanda; Aya Ohkubo; Masayoshi Wada
Original assignee: Shiseido Co Ltd
Priority date: 2002-11-25
Filing date: 2003-11-21
Publication date: 2004-09-01
Also published as: US20100285252A1; US7560023B2; TW201008954A; TWI331627B; EP1577360A1; CN1717464A; KR20050083752A; EP1577360A4; US20060060533A1; KR101095400B1; EP1577360B1; KR20110008341A; WO2004048492A1; EP2700445B1; EP2700445A1; CN100480351C; KR101051674B1; US8673151B2

Description

200416223 玖、發明說明： [發明所屬之技術領域] Π ··請求範圍第1項〜第7項之發明] 本發明係關於材料之表面改質方法。本發明之改質方法可應用：高分子、陶竟、金屬、纖維等之各式各樣的材料，而可容易地提供具有優異活體適性及親水性之表面的原料及成形品，例如，於作為醫用材料、化粧品配方原料、色譜分析用填充劑等甚有用…於構件的改質亦甚有用。 …專之 [2 ··請求範圍第8項〜第1 〇項之發明] 本發明係關於在粉體表面有磷醯膽鹼基的改質粉體及其製造方法。本發明之改質粉體在活體適性、保濕性優異，作為化粧品、醫用原料、色譜分析用填充劑等甚有用。 [3 ·晴求範圍第11項〜第15項之發明] 本發明係關於色譜分析用填充劑。更詳細言之，係關於磷醯膽鹼基直接化學鍵結於載體表面的色譜分析用填充劑。 [4 :請求範圍第16項〜第19項之發明] 本發明係關於以具有親水性基之聚合物塗覆之接液構件。更詳細言之，係關於對主要為分析裝置用配管等之接液構件的表面以具有填酿膽驗基之聚合物做強固的塗覆之接液構件。 [5 :請求範圍第19項〜第25項之發明] 本發明係關於過濾材料。更詳細言之，係關於磷醯膽 7 200416223 驗基直接化學鍵結於過濾材載體表面的過濾材料。 [先前技術] Π :請求範圍第1項〜第7項之發明] 具有磷醯膽鹼基之聚合物於作為活體適性高分子之應用正被檢討著，以此聚合物被覆於各種基劑上之活體適性材料一直在開發著。例如’在日本專利文獻1 _丨中，曾揭示出：將以2•甲基@烯醞基氧乙基磷醯膽鹼之均聚物及共聚物所被覆的粉末作為化粧品用粉末利用而改善保濕性及皮膚密合性的化粧品。又’於曰本專利文獻丨_2及1-3中，曾揭示出：以具有碟酿膽驗基之聚合物被覆的醫療用材料與分離劑。上述材料’主要為係使具有羥基之丙烯酸系單體與2-氣1，3,2-二噁正膦氧化物反應，再進一步使用三甲胺作成為4級銨，藉此，合成出具有磷醯膽鹼構造之單體，然後利用該單體聚合所得之聚合物將材料表面被覆（有關聚合物之製造方法，可參照曰本專利文獻1-4及1-5)。於曰本專利文獻1-4中，係製造2_曱基丙烯醯基氧乙基S醯膽鹼與甲基丙烯酸酯的共聚物，於日本專利文獻卜中，則製造2-曱基丙烯醯基氧乙基磷醯膽鹼的均聚物。曰本專利文獻1-1 特開平7-118123號公報日本專利文獻1-2 特開2000-279512號公報曰本專利文獻1_3 特開2002-98676號公報曰本專利文獻1-4 特開平9-3132號公報 200416223 、專利文獻1-5 特開平10-298240號公報一而於以具有磷醯膽驗基之聚合物將素材被覆對表弋地：改貝的方法中’依於材料的形狀，欲將表面全體有 :皮覆有其困難。又，由於被覆之聚合物會自材料表面由:丄於耐久性方面會有問題。再者，由於對材料表面藉 ϋ進行被覆，會有不符藉由鄉膽鹼基賦予活體適 '的目的而失去作為材料本身所要求的基本性質的情形。又’用於被覆的聚合物之上述製造方法，須在嚴密的 7條件下進行，製程繁雜也是問題。再者，依於聚合條二致之於被覆聚合物所鍵結之磷醯膽鹼基的安定性也有問題。本毛月者等，針對上述觀點，就使用碟酿膽驗基對各種材料表面進行改質的方法不斷努力研究之結果，發現到 :不採用以具㈣醯膽驗基之聚合物對材料表面進行被覆的方法，而是使含有磷酿膽驗基之化合物與具有胺基之材，反應，則藉由在材料表面之鍵結形成反應，能以簡便且局通用性之方式製得在材料表面直接具有磷酿膽驗基並具有優異的活體適性及親水性之材料。本發明於焉得以完成〇另一方面，亦發現：即使是同為藉由聚合物對材料表面進行被覆之表面改質方法，若於使用特定的聚合物進行塗覆後再應用上述本發明的方法，則相較於僅是藉由親水性聚合物的繞鑄之物理性之被覆的傳統之方法，本發明的方法可充分地確保於材料表面之磷醯膽鹼基的耐久性。可 200416223 =τ=(如金屬、塑膠、玻璃等之基板與… 本性質二!料)，、一邊維持著材料所要求的基活體⑨n 了 =發明之方法來極容易地賦予親水性與 =適性，可有效地利用於作為分離分析裝置等之材料。本發明於焉得以完成。 [2 :請求範圍第8項〜第1〇項之發明] 、以具有磷酿膽驗基之聚合物作為活體適性高分子—直被檢討著，以此聚合物被覆〇饭復於各種基材所作成的活體材料一直在開發中。心J 士於日本專利文獻2]中，揭示有：將以h甲基丙烯醯基氧乙基磷醯膽驗之均聚物及共聚物所被覆的粉末作為化粧品用粉末利用而改善保濕性及皮膚密著性的化粧品° 於日本專利文獻2-2及2-3中，曾揭示出：以具有磷醯膽鹼基之聚合物被覆的醫療用材料與分離劑。上述材料’主要為：使具有羥基之丙浠酸系單體與2_ 氯-1，3,2-一噁正膦_2_氧化物反應，再進一步使用三曱胺作成為4級銨，藉此’合成出具有磷醯膽鹼構造之單體，然後利用該單體聚合所得之聚合物將材料表面被覆（有關聚合物之製造方法，可參照日本專利文獻2_4及2_5)。於曰本專利文獻2_4中，係製造2_甲基丙烯醯基氧乙基鱗酿膽驗與曱基丙烯酸酯的共聚物，於日本專利文獻2_ 5中’則製造2-甲基丙烯醯基氧乙基磷醯膽鹼的均聚物。曰本專利文獻2-1 特開平7-118123號公報 200416223 曰本專利文獻2-2 特開2000-279512號公報曰本專利文獻2-3 特開2002-98676號公報曰本專利文獻2-4 特開平9-3132號公報曰本專利文獻2-5 特開平1〇_298240號公報然而，於以具有磷醯膽鹼基之聚合物進行被覆對表面進行改質的方法中，依於材料的形狀，欲將表面全體有;= 地被覆有其困難。X，由於被覆之聚合物會自粉末剥離政於耐久性方面會有問題。再者，由於對粉末表面藉由聚i 物進行被覆，會不符藉由磷醯膽鹼基賦予活體適性的目= 而失去作為粉末本身所要求的基本性質的情形。、又，用於被覆的聚合物之上述製造方法，須在嚴密的無水條件下進行，製程繁雜也是問題。再者，依於聚合條件所致之於被覆聚合物所鍵結之磷醯膽鹼基的安定性I右問題。有本發明者等，基於上述觀點，對具有磷醯膽鹼基之各種材料不斷努力研究之結果’發現到：不採用以聚合物對粉體表面進行被覆的方法，而是使含有磷醯膽鹼基之化合物與具有與此化合物可反應的官能基的粉體反應，則藉2 在粉體表面之鍵結形成反應，能以簡便且高通用性之^式製得在粉體表面直接具有鱗醯膽驗基之改質粉體。本發明於焉得以完成。 [3 :請求範圍第n項〜第15項之發明] 以具有磷醯膽鹼基之聚合物用於作為活體適性高分子一直被檢討著。且，以此聚合物被覆於各種基材上所成之 200416223 活體適性材料也一直在開發中。例如’於日本專利文獻3_丨中記載著以具有磷醯膽鹼基之聚合物被覆之醫療用材料。又，於日本專利文獻3_2 中揭不有以具有磷醯膽鹼基之聚合物被覆之分離劑。上述材料’主要為：使具有羥基之丙烯酸系單體與2_ 氯-1，3,2-二噁正膦_2_氧化物反應，再進一步使用三甲胺作成為4級銨，藉此，合成出具有磷醯膽鹼構造之單體，然後利用該單體聚合所得之聚合物將材料表面進行被覆（有關聚合物之製造方法，可參照日本專利文獻3_3及3_4)。於日本專利文獻3-3巾，係製造2_甲基丙稀酿基氧乙基碟酿膽驗與甲基丙烯酸酯的共聚物，於日本專利文獻3_ 4中’則製造2.甲基㈣醯基氧乙基磷酿膽驗的均聚物。肽等IS:面，於用以將蛋白質、較蛋白質分子量小之多 =之活體試㈣由尺寸大小排除㈣行分離之GFC用填 ==，有甚多的市售品存在。此㈣用填充劑中有：' 1 ;父聯的親水性高分子為載體之填充劑。 ‘、，、載體之填充劑、與以石夕膠作以經交聯之親水性高分用之銘ΛΑ 于作為載體之填充劑，其可適用之移動相的pH範圍寬 ^ Λ « ^ ^ ^ ^ 通用性兩。然而，以高分子作為載體之填充劑，相較於丁由於细孔# μ ^ ^ 、夕膠作為載體之填充劑，① 、、·、田孔t的控制困難，故難對於使用於高速液體色譜“理_板數、且② 較差、且會因移動相& )時之尚壓條件的強度 «口移動相溶劑致粒性良好的色譜圖。 /脹，故多無法得到再現 12 200416223 、夕膠作為載體之填充劑，其問題點在，之對於㈣載體表面之吸附。因此，為了抑制分二試二 =蛋白質與多肽之對於⑦膠之吸附，市售著使用石夕膠（表面藉由非解離性的親水性做修飾）的填充劑。例如，作為矽膠GFC用管柱，有昭和電工（股）之 Shodex pR0TEIN Kw 8〇3(商品名）市售。此石夕膠系管柱，依型錄說明’係適用於分子量由數千參"〇〇萬的程度之蛋白質之分析的GFC型管柱。

又，亦有YMC公司之YMC_Pack m〇1(商品名）市售著 ^亦屬謂系的GFC用管柱，由於係使具有二醇構造的 p此基與矽膠載體以化學鍵結所成，故可適用於分子量一萬至數十萬的蛋白質之分離。曰本專利文獻3-1 特開2000-279512號公報曰本專利文獻3-2 特開2002-98676號公報曰本專利文獻3-3 特開平9-3132號公報曰本專利文獻3_4 特開平10-298240號公報

本發明以提供嶄新的色譜分析用填充劑為目的。若以本發明之色譜分析用填充劑使用於GFC用管柱中，不僅蛋白質、多肽的吸附極少且可發揮高分離能力。 [4 :請求範圍第1 6項〜第19項之發明] 以防止蛋白質吸附為目的的分析裝置配管等之接液構件為以一般的親水性基塗覆者。例如，於日本專利文獻‘ 1中記載之毛細管管柱，係以乙烯化合物於内壁面形成高分子膜，藉此，使蛋白質不易吸附，而可達成高分離度且 13 416223 4-2 ^之分析並有較長使用壽命。又，於日本專利文獻的’言己載著可容易地進行蛋白質之除去且使用壽命長 /水毛細管管柱，其係於矽基材的毛細管的内壁瓊脂糖共價鍵砝荽％ L 吕幻門土面有瓊、鍵…者。藉此，可在分離效率不致變差之前提下再現性良好的蛋白質之分離，且使用壽命亦可延長。白新’於日本專利文獻4·3巾，提出用以控制血液中的蛋 :與血小板之附著、吸附的臨床檢查用器具器材，並具揭不出在其表面以乙烯醇等之親水性高分子塗覆的塑膠製之聚丙烯錐形管。古八方面以具有磷醯膽鹼基之聚合物作為活體適性 = 皮檢討著’並正開發著以此聚合物塗佈於各種 ί材之活體適性材料。例如，於曰本專利文獻4-4及曰本專利文獻4-5中，姐甲揭不者以具有磷醯膽鹼基之聚合物塗覆之醫療用材料與分離劑。此等，係先合成具有鱗酿膽驗構造之早體，使其聚合得到聚合物，以其對表面進行被覆塗合物的製造方法’於日本專利文獻4_ 6中’係製造《2’甲基丙稀酿基氧乙基雜膽驗與甲基丙稀酸醋的共聚物；於日本專利文獻Η中，係製造成2_甲基丙烯醯基氧乙基磷醯膽鹼的均聚物。曰本專利文獻4-2 曰本專利文獻4-3 曰本專利文獻4-4 曰本專利文獻4-5 曰本專利文獻1 4寺開平5-288716號公報特開平6-288984號公報特開昭62-169052號公報特開2000-279512號公報特開2002-98676號公報 14 200416223 曰本專利文獻4-6 特開平9-3132號公報曰本專利文獻4_7 特開平10-298240號公報本發明之目的，在於提供以具有親水性基塗覆之接液冓件，係對刀析裝置用之配管等的表面以遠較僅藉由親水性聚合物以澆鑄方式作物理性被覆之接液構件更為強固地乂親水性聚合物塗覆之接液構件。而I，該親水性基為防止蛋白貝吸附效果鬲的磷醯膽鹼基，為可提供再現性良好且高回收率之蛋白分析的接液構件者。又，由習知技術可發現，先製得具有磷醯膽鹼基之聚 :物再藉由此聚合物對接液構件進行被覆而對表面進行改 :的方法中，t因於接液構件的形狀而難以將内壁面全體有效地或均一地被覆。性合2 ?於經被覆之聚合物會自材料表面剝離，故耐久門豸#一方面’具有磷醯膽鹼基之單體的製造須 ==水條件下進行，製程繁雜也是問題。再者，隨美條件的不同，有時鍵結於被覆聚合物鹼基的安定性也會有問題。本發明，以上述输？i水嶙醯膽驗基的安定性亦優==不須繁雜的製程且由具有鱗酿膽驗基之單體：：法來製造。亦即’並非將内壁面，而3/ 斤聚合之聚合物被覆於接液構件基之聚合物:行極ΓΓ二：壁面，使用含有烧氧甲㈣膽驗基之化合物鍵結，而將：=覆後，使其與含有磷醯所作成之接液構件。再：碟酿膽鹼基導入其表面，如此，本發明之接液構件，可不挑選 15 200416223 材質，而可對由金屬、塑膠、圾壙專之材質所構成之接液構件具有通用性而利用。 [5 :請求範圍第19項〜第25項之發明] 隨著使用分離膜之分離製程產業之進步，其❹_ 亦日益增廣，涵蓋著半導體工業中之超純水的製造、食品 ^業中之黴菌類之去除、化學工業中之油與乳液的分離、樂品工業中之生理活性物質的濃縮、分離、精製等之多元的用途。尤八疋近年來，生化領域之蛋白等之分離、精製，隨 =生化產業的興盛其重要性也曰益增加，具有更高分離效率、更優異之耐久性的膜日益受到殷切的要求。 “蛋白貝的刀離方法，可大別區分為藉由沈澱之分離、藉由吸附之分離、在溶液中之分離等；於藉由吸附之分離中可舉出各種色譜分析法，在溶液中之分離可舉出：凝膠過濾、電泳、液相分配法、膜分離法等方法，丨中尤以膜分離法眾所周知為可快速而簡便地將蛋白質分離的方法。、膜分離法通常係依分離對象物質的大小之順序而分類

為1精密過滤'法、超攄法、透析法、電透析法、逆渗透法、氣體分離法。1定羞 /六德TTTD Λ P ^ 八疋義，依據IupAC係定為··精密過濾（簡稱MF) ·可阻擔較〇· j # m大的粒子或高分子之製程；超濾（UF) ·可阻擋〇丨# m〜2nm之範圍的粒子或高分子之製程；奈米過渡（NF)··可阻擔較2nm小的的粒子或高分子之製程；逆滲透（R0) ·· #由加壓使溶劑朝渗透廢I之反方向移動之製程。 200416223 傳統之過濾材料於分離之時蛋白質與油脂等會吸附於膜表面，導致過濾材之分離特性，尤其是膜透過流速降低，是其問題（參照非專利文獻υ 又奴著为離對象物質之變小，過濾材的精度會愈為重要，然而，傳統的分離膜因膜的區分特性等而有其限度，要進行大小比例接近的蛋白質彼此間的分離是極為困難的。另一方面，具有磷醯膽鹼基之聚合物於活體適性高分子之用途一直被檢討著。並且，以此種聚合物被覆於各種基材所作成的活體適性材料也一直在開發中。於曰本專利文獻5-1中，可製得2_甲基丙烯醯氧乙基磷醯膽鹼與甲基丙烯酸酯的共聚物；於日本專利文獻5_2 中’可製得2-甲基丙烯醯氧乙基磷醯膽鹼的均聚物。於曰本專利文獻5-3中，記載著以具有磷醯膽鹼基之聚合物被覆之醫療用材料。於曰本專利文獻5-4中，揭示著以具有磷醯膽鹼基之聚合物進行被覆之分離劑。上述之材料，主要係使具有羥基之丙烯酸系單體與2一氣-1，3,2-二噁正膦_2_氧化物反應，再進一步使用三曱胺作成為4級銨，藉此，合成出具有磷醯膽鹼構造之單體，然後利用該單體聚合所得之聚合物將材料表面進行被覆（有關聚合物之製造方法，可參照日本專利文獻5_丨及5_2)。依據此方法，由於僅是使具有磷醯膽鹼構造的聚合物在表面作物理性的被覆，故被膜的均一性與财久性難以說 17 200416223 是達到理想。又，欲使區分特性提高，過濾材以具有控制於奈米級的均一孔為佳。於無機材料中之作為具有控制於奈米級的均一孔之材料，周知者為在酸性浴中嚴密地控制陽極氧化條件，對鋁進行陽極氧化所得之多孔性氧化鋁。依據非專利文獻5-2之報告指出：以硫酸、草酸、磷酉文作為酸性電解浴，依據酸的種類而控制陽極氧化電壓，則可开y成具有5〜500nm的範圍之均一孔的氧化鋁之構造物 _ 如此般之以抑制蛋白質之吸附於過濾材為目的之各種研究，迄今雖一直在進行著，惟，過濾材的材質、孔徑等有/、限制，可於廣範圍用途中使用的過濾材則迄未開發出來0 曰本專利文獻5-1 曰本專利文獻5-2 曰本專利文獻5-3 曰本專利文獻5-4 非專利文獻5-1

将開平9-3132號公報特開平10-298240號公報特開2000-279512號公報特開2002-98676號公報中垣正幸監修，膜處理術體系上卷富士技術系統259頁非專利文獻5-2 益田秀樹，化學與教育卷第8號（1999年）520頁本發明係以提供嶄新的過濾材料為目的。又，本發係揭示可抑制蛋白質吸附的過濾材之製造方法。本發明 18 200416223 過濾材料，於抗體、酵素用過、清心# 寻之刀冑，農、％，以及血液透析用過4材4之廣範圍的活體物f的過濾方面甚為有用。依據本發明’可提供蛋白質鱼g : 材料。貧曰貝”夕肪的吸附極少的過濾 [發明内容] Π :請求範圍第丨項〜第7項之發明] 亦即，本發明提供一種材料之表面改質方法，在於，係對具有胺基之材料，含私夕备儿…4 體（藉由甘油磷醯膽二) 應所得者）之化合物進行處理，來將以下式 (1 — 1 )

r2 1 2、3 /刀別獨立表示之碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基’ n=2〜4)所示之磷醯膽鹼基導入到該又，本發明係提供一種上述傲表 4刊竹之表面改皙，直特徵在於，上述式（1-1)為下述式（1_ 、 / ’、 (1 一 2) }

再者，本發明提供一種材料之 , / 衣面改質方法，直特徵在於，係由：將胺基導入到材料八 4之步驟、與隨後之對該材 19 200416223 料以含有醛體（藉由# , 两甘油磷醯膽鹼之氧化裂解反應所得者）之化合物進行處理之 <步驟所構成，使以下式（1 -1)所示之磷醯膽穴爹具入到該材料表面。

(R1、R2、h分別獨立表示之碳原子數卜6之直鏈或支鍵烧基，n=2〜4)。 X 迷的材料之表面改質方法中，上述式 (1-1)為下述式（丨_2)。 (1一 2)

再者，本發明提供一種材料之表面改質方法， ;於*係對材料表面以含有燒氧甲石夕烧基之聚合物進行覆，然後使下式(1-3)及/或(1_4)之含有構醯膽物精由還隸胺基減應或^反應來鍵結，使 2)所示之磷醯膽鹼基導入到該材料表面；卜式丨 C1 2) Π cr 1 + 20 200416223 (1-3)

-OH

—-OH —T (卜)2 0 1 · Ό——P=0

I 〇 (p)2 h3c—ψ—ch3 ch3 秦 21 200416223 (1-4) :r=o -ο J、 (了 h2)2 ο

I

Ό—P=D Ο

H3C—H-~：CH3 ch3 又，本發明提供之上述的材料之表面改質方法中，該含有烷氧甲矽烷基之聚合物係由下式（1-5)的單體與式（Ιό)〜（1-8)中至少 1 種的單體進行共聚所得之聚合物； 22 200416223

Ri

(R^為氫或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，R2為碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，η為1〜6的數） (1-6}

(h為氫或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，η為1〜6 的數；-0-亦可為-ΝΗ) 23 200416223 (1-7)

(h為氫或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，η為1〜6 的數；-〇_亦可為-ΝΗ) (1 — 8)

CH2 ) / n NH2 (I為氫或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，η為1〜6 的數；-0-亦可為-ΝΗ)。再者，本發明提供一種材料之表面改質方法，其特徵 24 200416223 在於i係對於材料的表面以下式（1·5)的單體與（曱基）丙浠酉文系單體之共聚物進行塗覆，然後使其與含有磷醯膽鹼基之化合物鍵結，將以下式（M)所示之磷醯膽鹼基導入該材料表面；

(Ri為氫或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，r2為碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，η為1〜6的數） (1 - 1 } 、

(Ri、反2、R3分別獨立表示碳原子數1〜6之直鏈或支鍵炫》基’ n == 2〜4)。 [2 :請求範圍第8項〜第1 〇項之發明] 25 200416223 亦即’本發明提供在粉體表面直接具有以下述式（2-1) 所不之磷醯膽鹼基的改質粉體。 (2 — 1)

又’本發明提供上述改質粉體之製造方法，其係藉由將含有藉由甘油磷醯膽鹼的氧化裂解反應所得之醛體的化合物加成至具有胺基的粉體。

再者，本發明提供一種改質粉體之製造方法，其係用以製造上述改質粉體；係由··將胺基導入粉體表面之步驟、將合有駿體（藉由甘油磷醯膽鹼之氧化裂解反應所得者）之化合物加成至該粉體之步驟所構成。 [3 ·請求範圍第11項〜第15項之發明] 亦即，本發明提供一種色譜分析用填充劑，其特徵在於’以下式（3-1)所示之磷醯膽鹼基為直接化學鍵結於載

體表面者。 (S — 1 ) 〇

°" I 又，本發明提供之上述色譜分析用填充劑，係使胺基直接導入到載體表面，然後使含有醛體（藉由甘油磷醯膽鹼之氧化裂解反應所得者）之化合物與該胺基進行反應所製得 26 200416223 再者，本發明提供之上述色譜體為球狀多孔質矽膠。、充劑中，該載处巴睛分析用填充劑中，多孔質矽膠的平均粒徑為丨〜·心。 _ 再者，本發明提供狀多？丨晳切臌μ, 疋已。曰刀析用填充劑中，該球狀户孔質矽膠的細孔之平均粒徑為10〜500埃。 [4:請求範圍第16項〜第19項之發明] 、八：即：本發明提供_種接液構件，其特徵在於，係在

以3烷氧甲矽烷基之聚合物塗覆於表面之配管導入以下式（4-1)所示之磷醯膽鹼基。 ί 4 一1 ) Ο 本發月提供之上述接液構件，係使下式（4-2)及/或

(4_3)之含有錢膽驗基之化合物，和以含有烧氧甲石夕烧基之聚合物塗覆於表面之接液構件結合者。 27 200416223

再者，本發明提供之上述接液構件中，該含有烷氧甲矽烷基之聚合物，係由下式（4-4)之單體、與式（4-5)〜(4-7) 中至少1種單體進行共聚所得； 28 200416223 (4 一4)

(h為氫或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，R2為碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，η為1〜6的數）籲 (4一5)

0

NCO

(I為氫或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，η為1〜6 的數；-0-亦可為-ΝΗ-)

29 -6 -6 數’df;可為-NH-} 為氫或碳原子數賴基， _____ 7

6 的數為氧或碳原子數i〜6之直鏈或支鏈烷基，η為 ’亦可為 _ΝΗ_)。又，管本發明提供之上述接液構件係分離分析裝置用配 Γ S · 〇月求範圍第19項〜第2 5項之發明] 下亦即’本發明提供一種過濾材料，其特徵在於，係以式（54)所示之磷醯膽鹼基直接與過濾材載體表面做化學鍵結者。 5 — 1) ο ο f 1 Γ οπρIο 十 :: 又’提供之過濾材料，係使胺基直接導入到過濾材載體表面’然後使含有醛體（藉由甘油磷醯膽鹼之氧化裂解反應所得者）之化合物與該胺基進行反應所製得。再者’本發明提供之過濾、材料中，該過渡材載體係以在表面具有羥基之無機材料所構成的過濾材料。 30 200416223 再者，本發明提供之 <過遽、材料中，該過濾材載體係硼矽酸玻璃纖維過濾材。再去 | ’本發明提供之過濾材料中，該過濾材載體係以鋁在酸性注電解液中進行陽極氧化所得，於過遽材面具有垂直且均_的細孔者。再者本發明提供之過據材料中，該過遽材載體係以氧化銘的基體作為鑄模進行轉印而製造者。

[實施方式J 茲就本發明加以詳述如下。 [請求範圍第1項〜第7項之發明] 藉由本發明的方法對表面進行處理之材料並無限定。為由例如高分子、陶竟或金屬所作成之各種：枓。較佳之可處理之高分子材料有樹脂成形品、纖維制σ臈丨材、布、不織布、粉體等，為利用來作為最終二展中間加工品或原料等者，其形狀並無限定。由陶竟 Ρ作成的材料亦同。較佳之可處理者為陶竟或金屬加工、陶瓷或金屬粉體。。未存在有胺方法將胺基導欲處理之材料的表面必須有胺基之存在土的材料，可用公知的方法或今後所開發的入。胺基為一級胺或二級胺。作為胺基導入的方法，可列舉如下： h藉由電漿處理的表面反應將胺基導入基導入材料表面器中，將反應容。接著藉由輝光在氮氣環境氣氛下藉由低溫電漿將胺具'體而言，係將材料容納在電漿反應容器内以真空泵抽成真空之後，將氮氣導入 31 200416223 放電將胺基導入材料表面。較佳者為將胺基導入到例如：氟樹脂、各種金屬（不鏽鋼、鈦合金、鋁、鐵等）、陶瓷、碳系材料、各種聚合物（胺基甲酸酯、聚碳酸酯、聚醯亞胺、丙烯酸系、乙烯系、多醣類、聚烷矽氧烷）、有機-無機複合系材料、各種無機物（雲母、滑石粉、高嶺土、氧化鋁、二氧化鈦、氧化鋅、氧化鐵、各種無機顏料）等之材料。依據本方法，不須對材料表面以聚合物等之物質進行被覆而複合化，而可得到胺基直接鍵結於材料表面所成的材料。因而，除了將磷醯膽鹼基導入之外並不會損及材料鲁本身所具有的機能。 2·藉由電漿聚合將胺基導入藉由電漿使材料表面產生自由基。接著以單體處理使其進行聚合將胺基導入。例如，將聚乳酸薄膜收容於電漿反應谷器内，使谷器内成為真空後，藉由放電使自由基在薄膜表面上產生。接著’將薄膜自容器取出，浸潰到經氮軋置換之稀丙胺的THF(四氫呋喃）溶液中，進行接枝聚合 ^ · 用來處理材料之單體，可使用胺系單體。所謂之胺系早體，並不限定於烯丙胺，只要是具有胺基及可聚合之乙烯基、丙烯酸基等的反應部位即可。胺基亦可藉由丁氧基幾基、苄基氧羰基等保護。又’即使是非胺系單體，例如具有環氧基般之可藉由與二胺的反應而輕易導入胺基之官能基的單體亦可。有關電漿處理之文獻示如下述： 32 200416223 1. M. Muller, C. oehr

Plasma aminofunctionalisation of PVDF microfiltration membranes: comparison of the in plasma modification with a agrafting method using ESC A and an amino-selective fluorescent probe

Surface and Coating Technology 1 16-1 19 (1999) 802- 807

2. Lidija Tusek，Mirko Nitshke，Carsten Werner，Karin Stana-Kleinschek，Volker Ribitsch

Surface Characterization of NH3 plasma treated polyamide 6 foils Collids and Surface A: Physicochem. Eng. Aspects 195 (2001) 81-95 3. Fabienne Poncin-Epaillard， Jean-Claude Brosse， Thierry Falher

Reactivity of surface groups formed onto a plasma treated poly(propylene) film

Macromol. Chem. Phys. 200. 989-996 (1999) 3·藉由表面改質劑將胺基導入使用具有胺基之烷氧基矽烷、氣矽烷、矽氨烷等之表面改質劑，對含有矽烷醇之粉體、二氧化鈦粉體等之表面進行處理。例如，藉由具有1級胺基之3-胺基丙基三甲氧基矽烷對二氧化矽粉體進行處理將胺基導入。具體而言，係將二氧化矽浸潰到水-2-丙醇混合液中，添加3-胺基丙基三甲氧 33 200416223 基矽烷後，加熱到1 00。(3進行反應6小時。於冷卻到室溫後，將二氧化矽以甲醇洗淨，進行乾燥，得到胺基直接導入到一氧化矽表面之粉體。作為本方法中較佳之施行處理的材料，於二氧化矽之外，尚可舉出玻璃、氧化鋁、滑石、黏土、鋁、鐵、雲母、瀝青、二氧化鈦、氧化辞、氧化鐵等之成形品及粉體。依據本方法，對材料表面不須以聚合物等之物質被覆施行複合化而可得到胺基與材料表面的官能基直接鍵結之材料。因而，除了導入磷醯膽鹼基之外並無損於材料本身 _ 所具有的機能。 4·藉由聚矽氧烷氣相處理將胺基導入（參照特公平^ 54379號公報、特公平1_5438〇號公報、特公平ι_5438ι 號公報）對粉體表面，先以1，3,5,7-四甲基環四矽氧烷處理，再使導入於表面之Si-H基與具有胺基之單體反應，得到經胺基化的表面。例如，將雲母與1，3,5,7·四曱基環四矽氧烧放入乾燥器中，以吸引器進行脫氣。於80。〇下進行16 _ 小時反應後，取出雲母，於12〇°C下進行乾燥。將得到之雲母分散於乙醇中，加入烯丙胺，接著添加氣化鉑酸的乙醇溶液，於60°C下進行攪拌2小時。於反應終了後，進行過濾、乙醇洗淨、減壓乾燥，得到胺基化雲母。作為較佳之以本法可處理的粉體，可舉出：氟樹脂、各種金屬（不鑛鋼、鈦合金、鋁、鐵等）、陶瓷、碳系材料、各種聚合物（胺基曱酸酯、聚碳酸酯、聚醯亞胺、丙烯酸系、乙稀系、 34 200416223 多醣類、聚烷基矽氧烷）、有機-無機複合系材料、各種無機物（雲母、滑石、高嶺土、氧化鋁、二氧化鈦、氧化鋅、氧化鐵、各種無機顏料）等之粉體。本法中所用之單體，可使用胺系單體。所謂胺系單體 ’並不限於烯丙胺，只要是具有胺基及可聚合之乙烯基、丙烯酸基等的反應部位即可。胺基亦可藉由丁氧羰基、苄氧羰基等保護。

又，即使非胺系單體，亦可為具有環氧基般之可藉由與二胺之反應簡單地導入胺基的官能基之單體。對上述般導入了胺基之材料，藉由以甘油磷醯膽鹼之氧化裂解反應所得之醛體或水合物進行還原性胺基化反應 ’可使磷醯膽鹼基直接地加成至材料表面。具體而言，係將材料浸潰到曱醇中，加入磷脂基甘油醛（phosphatidyl glyceroaidehyde)，於室溫下放置 6 小時。然後，於（TCT添加氰硼酸鈉，加熱攪拌一夜，將磷醯膽鹼基加成至胺基上。將粉體以甲醇洗淨後，乾燥之，可得到在表面直接具有磷醯膽鹼基的表面改質材料。反應溶劑，於甲醇之外，乙肖、2-丙醇等質子性溶劑亦可使用，惟，使用甲醇的場合之導入率有較高的傾向。用3胺基丙基二甲氧基石夕烧導入鱗酿膽驗基（簡稱為 P C基）的方法之機構如下述·· 步驟

—OH r： OH OH 二氧化矽表面之胺基丙基化（通常的方法）】 100¾ 4h 〇 l^Sr

JFA/^O 35 200416223

步驟2【pc夕道 v l <導入 i*-SI—〇L v°：

m〇H

NsCNaHj R.T,

本發明之表面改質方法之磷醯膽鹼基入的里可谷易地調整，可用以對各種材料是其甚大的優點。的導的表入率高、導面作改質， :本發明之方法中，藉由甘油磷醯膽鹼的氧 :斤…體的化合物，係使公知的甘油碟酿膽 :知的方法進行裂解所得，故為極簡單之步驟。此反二 j對1，2-二醇，以過蛾酸鹽、職酸鹽進行氧化，藉二 :結打開，而可得到2種的酸體，於本法的場合係“ :酿膽驗料W。反應，通f在水中或含有水的有機遂 Θ中進行。反應溫度為0°c〜室溫。搭體在水中經過平衡及 j亦會有形成水合物的情形，但對後續之與胺的反應沒有衫響。再就下述之含有磷醯膽鹼基之單官能的醛體之調製機構，示如下述：

36 200416223 具有胺基之材料並無特別限定。只要在㈣的表面⑽ 情況需要’於複雜形狀之材料時亦在材料的内部表面）有可和藉由甘油磷醯膽鹼的翁儿列切=& 乳化裂解反應所得之醛體進行反應的胺基皆可。使藉由甘油璘醯膦給夕备儿列。驗之乳化裂解反應所得之醛體（或水合物）和鍵結到材料表面的脸其田的fe基進仃還原性胺基化反應，可藉由使兩者在溶劑中進并與士々進仃攪拌谷易地進行。此反應係使兩者共存於水或醇類中（亦可、、曰人楚― u 了心a入第二成分的有機溶劑），於形成亞胺後’將其藉由還原劑還原而得至"級胺。作為還原劑，以氰硼酸納等溫和性的還原劑為佳，_，只要在磷醯膽鹼為安定之下，洗成社… 亦了使用其他的還原劑。反應通常係於〇度至室溫之間進行，依需要，亦可進行加熱。藉由上述的方法，可簡單地製得含有任意量的親水性碟醯膽驗基的材料。上述說明’係、針對式（1_2)的磷醯膽驗基的方法，而含有I式（1 1)之3有碟酿膽驗基之材料’亦可與上述相同的作法而製得。具有通式（M)之填醯膽驗基之化合物，可由公知的化合物用公知的方法，藉由與合成具有式〇_2)的磷醯膽鹼基之化合物的相同之反應來製造。式(1_2)為式㈣的最佳之形態，為^〜為甲基^的情形。一山於本5兒明書中’通式（卜1)中之Ri、R2、R3分別獨立表不碳原子冑1〜6(而以1〜3為佳）之直鏈或支鏈院基，n=2〜4 。在此直鏈或支鏈烷基上亦可具有其他的取代基，例如，更佳者為具有羥基之直鏈或支鏈烷基。 37 200416223 又，材料為合成聚合物的場合，作為該親水部亦可含有羧基、羥基、丨級〜3級胺基、磺酸基、磷酸基、聚氧化乙稀基、銨基、醯胺、羧基甜菜鹼、糖類等，可經由此等之種類及含有量，對材料的機能加以設計。再者，作為其疏水部，可含有：碳原子數2〜22的直鏈或支鏈烷基、膽固醇等m基’含有油稀基等之㈣和鍵之烧基，以苯％、奈枝、嵌二萘為代表之烴系芳香族毗啶環味嗤、噻唾、_等之雜環系芳香族、全氣烧基、聚烧基石夕氧烧等之疏水基’可依材料的用途進行選擇及設計。由合成聚合物所構成的材料之疏水基的鍵結形態可為藉由酯醚、醯胺、胺基甲酸s旨、尿素鍵直接與聚合物主鍵鍵結 ’亦可隔著間隔物（spacer)間接與主鍵鍵結。作為間隔物的種類，可舉出：親水性的聚氧化乙稀、疏水性的聚氧化丙稀、直鏈狀烧基（碳原子數2〜22)等。又

左田肘存在材料表面之胺基的一部份藉由磷醯用鹼基修飾，其餘部分以其他的官能基修飾，可設計出可每揮新：機能之改質材料。對導入材料之胺基藉由元素分* 等疋1 ’只使用欲進行附加的量來製造含有路體（藉由甘^ 磷醯膽鹼之氧化裂解反應所得者）之化合物。而且，可對残餘的胺基加成任意的官能基。此方法，可通盤地適用於全部的粉體。經藉由本發明之改質方法進行表面改質之材料，為活體適性及親水性優異的材料及成形品。作為於材料表面直接具有活體適性之磷醯膽鹼基的材料，可應用於化粧品、 38 醫用材料（人工内臟、、塗料等之廣泛的用途中…)、色譜分析用填充劑本發明之其他的形態定的聚合物塗層之場合的改丄1改質方法中應用特對材料進行被覆進行表面改質=法本：明之藉由聚合物聚合物的洗鑄之物理性被覆的=方：僅是藉由親水性確保材料表面的覆的傳、，先之方法相比較，可充分改質之較佳的材基的耐久性。可藉由此形態進行加心:::有—為::厚r材…^ 可在維持著材料所要求的基本性方法，法極容肖地賦^親水㈣4 ^本發明的方為分離分析^ r 而可有效地利用於作 π刀離刀析裝置、其配管、例如，作W、 -構件荨之材料之改質方法。八作為下4之材料的改質方法甚為有用，其為刀析裝置用配管、配瞢、查妓开m、 ·吕連接構件、取樣針、試樣混合用管佳測器單元等之與試驗液接觸的材料’尤其較其配:奪私Ms、NMR的連接配管與電泳裝置的毛細 /之材料的改質。鐵氟龍（註冊商標）管、鐵氣謝爾 )官、聚，樹脂管、熔融二氧化石夕管等之材料。含有貌氧f石夕燒基之聚合物，只要是可對材料進行塗二即可，並無特別限定。於經塗覆的材料之表面上藉由烷氧矽烷的交聯反應可形成強固的被膜。例如，以在(曰甲：丙烯I與（甲基）丙婦酸燒醋等之（子基）丙稀酸系單體中經烷乳甲矽烷基取代的公知者或今後所開發的單體為佳。具體而言’將由下述式（1_5)之含有貌氧f我基之（甲基）丙、婦 39 200416223 酸系单體所聚合的聚合物溶解到溶劑Φ m u w τ對材料表面進行處理，藉由一般的方法進行交聯而塗覆。

(R!為氫或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，&為碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，^為i〜6的數）用以塗覆材料之含有烷氧甲矽烷基之聚合物，欲導入以下述式（1-1)、尤以式（1_2)所示之磷醯膽鹼基，必須要具有可和含有磷醯膽鹼基之化合物進行反應而被導入的適當的反應性基。較佳的反應性基為胺基。胺基為一級胺或二、、及胺可用A知的方法或今後開發的方法將胺基導入。最冰且車又佳的方法為使用具有胺基的胺系單體、可產生胺基之異氰酸酯基或具有環氧基之單體進行共聚物所成之聚合物。 200416223 (X -1)

6之直鍵或支 (Ri、I、I分別獨立表示碳原子數鏈燒基，n=2〜4) .(1 — 2 ) ^

Ο II

Ο" I 又，即使非與胺系單體所得之共聚物，亦可為例如藉由具有環氧基、異氰酸酯基般之可藉曰 ⑽植A* j糟由與—胺的反應來簡早導入胺基的官能基之單體、盥含有 ^ 3有烷虱甲矽烷基之聚合物所共聚而成的聚合物。又’亦可藉由電衆聚合’將含有烷氧甲矽烷基之聚合物浸潰於經氮取代之烯丙胺# THF(四氫肤喃）溶液中，進行接枝聚合來將胺基導入。用以進行共聚之單體，以下述式（1_6)〜（1 J)的單體、與丙烯酸或甲基丙烯酸等之（甲基）丙稀酸系單體為佳。式 (1-6)〜（1_8)中之酯鍵中之（c〇〇)亦可為醯胺鍵（c〇nh)。又’式（1-8)之胺基亦可藉由任意的保護基保護。例如 ’可藉由丁氧羰基或苄氧羰基保護。於胺基受到保護的場 & /員進行去除保遵（於丁氧魏基的場合用三氟醋酸處理，於节氧羰基的場合則在氫氣環境氣氛下進行鈀觸媒處理）之 .nwl— ¢3- 200416223 後，再導入磷醯膽鹼基（PC基）。 (1 — 6 )

(K為氫或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，η為1〜6 的數。-0-亦可為-ΝΗ-。） (1-7)

Ri (心為氫或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烧基，η為1〜6 的數。-0-亦可為-ΝΗ·。）

42 200416223 (1 〜8 )

的凝（Rl為虱或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，11為1〜6 ° 亦可為-NH-。）处又，用以進行共聚的單體，除了上述之具有鍵結性月匕的m 邑 ^ ^ 體之外，因應於材料的材質，就用以塗覆之含有 “ 甲夕燒基之聚合物與材料的親和性考量，以的蕈U Κ 1于具他、體進订共聚為佳。例如材料的材質為聚丙烯的場合，為了提高與飽和烴類的親和性，宜與甲基丙烯酸丁酯進行共聚；材料為聚矽氧烷系材料的場合，宜與聚二甲基矽氧烷甲基丙烯酸酯進行共聚；材料為鐵氟龍（註冊商標）的場合，宜與全氟烷基單體進行共聚，藉此，可使效果提高。對於導入之胺基，使得含有磷醯膽鹼基之化合物（較佳者為甘油磷醢膽鹼以氧化裂解反應所得之醛體或水合物）進行還原性胺基化反應，可將磷醯膽鹼基導入。較佳的含有磷醯膽鹼基之化合物為下式（I-3)之二醇及/或下式4)之醛體，以縮合反應及/或還原性胺基化反應而韃結到胺其上 43 200416223 又，只要最後可使含有磷醯膽鹼基之化合物與胺基鍵結，則自導入胺基起至鍵結為止採取何種反應途徑皆可。 (1 一 3 ) 200416223 1^4) Ο ο (〒Η2)

I ο Ο·~ρ=〇 H3C· ΟI 〇η2 Η^- 2 CH3 GH3 藉由甘油磷醯膽鹼之氧化裂解反應所得之駿體，係使 A矣的甘油嶙醯膽驗基藉由公知的方法進行氧化裂解者，為極簡單的步驟。此反應，係使1，2·二醇以碘酸或過碘酸鹽進行氧化將鍵打開而製得2個醛體，於本法的場合，係生成磷醯膽鹼醛與甲醛。反應係在通：有機溶劑中進行。反應溫度中：3有水之 /5雍芈衡廿么士度至至溫。醛體在水中經反應千衡亦會有生成水合物的反應沒有影響。兹就人 V ’ I，對後續之與胺的錄就含有磷醯膽鹼基機構表示如下·· 心早S月b暴醛之调製 45 200416223 m

藉由甘油磷醯膽鹼的氧化裂解反應所得之水合物及/或醛體和用以對材料進行塗覆的聚合物之胺基進行鍵結的還 _ 原性胺基化反應，可容易地藉由將兩者在溶劑中攪拌而進行。此反應，係使兩者共存於水或醇中（亦可混合入第三成分的有機溶劑），使其形成亞胺後，使其藉由還原劑還原，製得2級胺。作為還原劑，以氰硼酸鈉等之溫和性的還原劑為佳，惟，只要是磷醯膽鹼可以安定之下，亦可使用其他的還原劑。反應通常係於0度至室溫下進行，依需要亦可施以加熱。具體而言，係將材料浸潰於甲醇中，添加磷脂基甘油籲醛，於室溫下放置6小時。接著，於下添加氰硼酸鈉 ’進行一夜之加熱攪拌，使磷醯膽鹼基加成至胺基上。反應溶劑除甲醇以外，水、乙醇、2_丙醇等之質子性溶劑亦使用准使用甲醇的場合，碗醯膽驗基的加成率有較高的傾向。精由上述的方法，可簡單地製得將任意量的親水性的麟酿膽驗基導入兑志子八具表面的材料。以下就更具體的方法加以 46 200416223 記述：改質方法1 -1 : 合成具有以上述式（1-5)的單體1(以下稱為單體丨）、與上返式（1-6)的 ........一 —/ ·— 乂 μ刀叼丹聚物。反應溶劑只要為與單體丨及2不反應而可將2種單體溶解者皆可，並無特別限定。可列舉例如：甲苯、丙_、醋酸乙酯、己烷、醚、四氫呋喃、二噁烷、二甲基甲醯胺、二甲亞硼、二氣甲烷、氣仿之1種或至少2種的混合溶劑。聚合起始劑只要是自由基系起始劑皆可，並無特別限定。可列舉例如：過氧化苯醯等之過氧化物、偶氮雙異丁腈、2,2’-偶氮雙（異醋酸）二甲酯等之偶氮系化合物。又，除了使用聚合起始劑之外，亦可藉由放射線照射等進行聚合。由於最終會發生交聯反應，故共聚物的平均分子量並無特別限制。進行共聚之單體，亦可因應於與材料的親和性而加入上述2種以外者。 <改質方法1-1-1> 以單體1與單體2作為必要的單體合成出共聚物，使其延展附著於各種基板（材料：例如，各種形態的金屬、塑膠、陶瓷、玻璃等)上。再者’將殘存之異氰酸酯、與上述式（1-3)之含有鱗醯膽驗基之化合物（以下，簡稱& pci)，藉由胺基甲酸醋鍵結，導入上述式（Μ)的磷醯膽驗基（以下，簡稱為PC基）。發生聚合物之交聯反應的時機，可依簡便性考量’於P…入前或導入後皆可。若藉由水進：處理則交聯反應可快速地進行，而將皮膜放置著的情形下 200416223 則會逐漸進行。 <改質方法1-1-2> a成出以單體1與單體2為必要成分之共聚物，使其 k展附著於各種基板（材料）上。再將此以水或驗性水溶液進行處理，藉此將異氰酸酯分解轉變成胺。將此胺基、與上述式（1-2)之含有磷醯膽鹼基之化合物（以下，簡稱為 PC2) ’藉由還原性胺基化反應鍵結而導入PC基。或者，將上述聚合物以乙二胺進行處理而導入胺基，之後，藉由還原性胺基化反應亦可與上述式（1_2)之含有磷醯膽鹼基之鲁化合物鍵結。时合成出具有以單體丨與上述式（1_7)的單體（以下，簡稱為早體3)為必要成分之共聚物。反應溶劑只要為與單體1 及3不反應而可將2種單體溶解者皆可，並無特別限定。可列舉例如·田贫酽、—·甲本、丙酮、甲醇、乙醇、2-丙醇、醋酸乙己烷醚、四氫呋喃、二噁烷、二曱基甲醯胺、二甲氣曱烷、氣仿之1種或至少2種的混合溶劑。聚 a起始劑只要Λ 疋目由基系起始劑皆可，並無特別限定。可舉例如：過氧化笨醯等之過氧化物、偶氮雙、估2 ’虱雙(異醋酸)二甲酯等之偶氮系化合物。又，除了用聚σ起始劑之外’亦可藉由放射線照二由於最終會發生交進仃“。別限制。進行ir 共㈣的平均分子量並無特加入上述2箱單體’亦可因應於與材料的親和性而牙董外者。 48 200416223 將以單體i與單體3作為必要成分之共聚物延展附著於各種材料（基板）的表面上。再對其使用以氨水溶液或乙二胺為代表之在分子内有2個以上的胺基之化合物進行處理，藉此將環氧基轉變成胺基。接著，使pc2藉由還原性胺基化反應進行鍵結而導入PC基。改質方法1-3 合成出具有以上述式（1_8)之單體（以下，簡稱為單體 4)或其胺基經由丁氧幾基或$氧幾基保言蔓者作為必要成分的：聚物。反應溶劑只要為與單體…不反應而可將2 _ 種早體溶解者皆可，並無特別限^。可列舉例如：甲笨、丙酮f醇、乙醇、2·丙醇、醋酸乙酯、環己烷、醚、四氫呋喃、二嗯烧、二甲基甲酿胺、二甲亞楓、二氣甲烧、乳仿之1種或至少2種的混合溶劑。聚合起始劑只要是自由基系起始劑皆可’並無特別限定。可列舉例如：過氧化苯醯等之過氧化物、偶氮雙異丁腈、2,2，-偶氮雙(異醋酸）二甲醋等之偶氮系化合物。又，除了使用聚合起始劑之外，亦可藉由放射線照射等進行聚合。由於最終會發生交聯鲁反應，故共聚物的平均分子量並無特別限制。進仃共聚之單體’亦可因應於與材料的親和性而加入上述2種以外者。將以單體1與單體4作為必要的單體之共聚物延展附著於各種基板（材料）的表面上。接著，使PC2藉由還原性胺基化反應進行鍵結而導入pc基。於胺基受到保護的場合’須於進行去保護(於丁氧幾基的場合用三氟醋酸處理， 49 200416223 氫氣環境氣氛下進行鈀觸媒處理）之於节氧羰基的場合則在後再導入PC基。改質方法1-4 a成出具有以單體！與(甲基)丙烯酸共聚物。反應溶劑只要為與單！成刀纪，、早體1及（甲基）丙烯酸不反肩而可將2種單體溶解者皆可，並…、特別限定。可列舉例如 :甲苯、丙酮、甲醇、乙醇四氮肤喃、二口亞炫、-田甘》心沉一甲基甲醯胺、二甲亞碾 , 旰G和2-丙醇、醋酸乙酯、環己炫

乳甲炫、氯仿之1種或至少2種的混合溶劑。聚合起始, 只要是自由基系起始劑皆可，並無特別限定。可列舉例女 :過氧化苯醯等之過氧化物、偶氮雙異丁腈、2,2，_偶氮雙異醋酸)二甲醋等之偶氮系化合物…除了使用聚合起無劑之外，亦可藉由放射線照射等進行聚合。由於最終會潑生交聯反應，故共聚物的平均分子量並無特別限制。進行共聚之單體’亦可因應於與材料的親和性而加人上述2

以外者。將具有以單體丨與（甲基）丙烯酸作為必要成分之共聚物延展附著於各種基板（材料）上。對此等材料，使用二環己基碳化二亞胺、卜一二甲基胺基丙基）-3-乙基碳化二亞胺等為代表之碳化二亞胺系偶合劑、或碳化二咪唑偶合劑等，使pc基鍵結上去。或者，使共聚物中之羧基藉由氯亞硫醯作成為氣氧化物之後，或轉變成以N-羥基琥珀醯亞胺為代表之活性酯之後，與具有PC基的醇反應，而將pc基鍵結上去。 [2 ·請求範圍第8項〜第1 〇項之發明] 50 200416223 本發明之粉體係以下述的方法製造。又，所謂「在粉體表面直接具有磷醯膽鹼基」者，係指磷醯膽鹼基在粉體表面藉由化學性的鍵結而導入，並不包含以具有礙醯膽驗基之聚合物被覆而將磷醯膽鹼基導入的粉體。本發明之改質粉體係藉由下述的步驟製造。若於粉體表面已經具有胺基，而不須導入更多的胺基之場合，步驟 1可省略。

步驟1 ·對任思的粉體’以公知的方法或今後開發的方法導入胺基。胺基係直接導入到粉體表面。所謂之「直接」，意味著不包含以具有胺基之聚合物被覆的方法。胺基為一級胺或二級胺。步驟2:對具有胺基之粉體，藉由以甘油磷醯膽鹼氧化裂解反應所得之醛體或水合物進行還原性胺基化反 ’使磷醯膽鹼基直接加成至粉體表面。使用之粉體並無特別限制。通常係指平均粒徑 • 〇 1 10 // m的程度之物體。作為具體的粉體，可列舉例

:無機粉末（例如，滑石、高嶺土、雲母、絹雲母、白雲, :金雲母、合成雲母、紅雲母、黑雲母、蛭石、碳酸鎂碳酸約、料銘、⑦酸鋇、㈣約、㈣鎭、㈣錯、酉夂金屬鹽、鎂、二氧化矽、沸石、硫酸鋇、燒成硫酸鈣() 用）斛酉夂！弓、氟構灰石、經基填灰石、陶竟粉末、金> (例^肉五寇酸鋅、肉豆謹酸約、肉豆謹酸銘）、氮d 氧化西等，有機粉末（例如：聚醯胺樹脂粉末（尼龍^ 末）聚乙烯粉末、聚甲基丙烯酸甲_粉末、苯并鳥糞胺; 51 2UU416223 脂粉末、聚四氟化乙相彈性體粉末、纖維；；=聚甲基石夕質倍半°惡貌粉末、二氧化鈦、氧化辞等；秦末等)；無機白色顏料(例如： “、、機紅色系顏料（例如：氧化鐵（氧化鐵紅)、鈦酸鐵等);無機褐色系 (: );無機黃色系顏料（例& •廿〃 *化鐵專系顏料（例如：黑氧介雜 “、、機黑色鐵、低價氧化鈦等）；無機紫色车如：猛紫、始紫等）；無機綠色系顏料（例如：氧化鉻虱乳化鉻、鈦酸㈣）；無機藍色系顏料（例如主、普魯士藍等）；珍珠顏料（例如：氧化鈦被覆之雲母、二化鈦被覆之氯氧化鉍、氧仆飪姑爱々、典r 々虱化鈦被覆之滑石、著色氧化鈦被覆之云母、氯氧化鉍、魚鱗落等）；金屬粉末顏料(例如.鋁粉、銅粉等）；錯、鋇或紹色殿等之有機顏料(例如：紅色 201號、紅色2G2號、紅色綱號、紅色2()5號、紅色 220號、紅色226號、紅色⑽號、紅色彻號、撥色 203號、橙色204號、黃色2〇5號、黃色4〇1號、及 404號等之有機顏料，紅色3號、紅色1〇4號、紅色波、紅色227號、紅色23〇號、紅色4〇1號、紅色5〇5號、橙色205號、黃色4號、黃色5號、黃色2〇2號、黃2 203號、綠色3號及藍色i號等天然色素（例如· 素、/3 -胡蘿蔔素）等。 ^ 作為對此等粉體導入胺基之公知的方法（步驟丨）可兴下述者： + 1·藉由電漿處理的表面反應將胺基導入在氮氣環境氣氛下藉由低溫電漿將胺基導入粉體表 52 200416223 。具體而言，係將粉體收容在電漿反應容器中，將反應容器内以真空泵抽成真空之後，將氮氣導入。接著藉由輝光放電將胺基導入粉體表面。此方法亦可適用於粉體以外的材料。例如可適用於氟樹脂、各種金屬（不鏽鋼、鈦合金、鋁、鐵等）、陶瓷、碳系材料、各種聚合物（胺基曱酸酯、聚碳酸酯、聚醯亞胺、丙烯酸系、乙烯系、多醣類、聚烷基矽氧烷）、有機-無機複合系材料、各種無機物（雲母、滑石、高嶺土、氧化鋁、二氧化鈦、氧化鋅、氧化鐵、各種無機顏料）等之材料。經電漿處理之材料亦可機械性地加以粉化。有關電漿處理之文獻示如下述： 1. M. Muller, C. oehr

Plasma aminofunctionalisation of PVDF microfiltration membranes:comparison of the in plasma modification with a agrafting method using ESCA and an amino-selective fluorescent probe 807

Surface and Coating Technology 1 16-1 19 (1999) 802-

Surface Characterization of NH3 plasma treated polyamide 6 foils Collids and Surface A: Physicochem. Eng. Aspects 195 (2001) 81-95 3. F abienne Poncin-Epaillard, Jean-Claude Brosse, Thierry Falher 53 200416223

Reactivity of surface groups formed onto a plasma treated poly(propylene) film

Macromol. Chem. Phys. 200. 989-996 (1999) 2·藉由表面改質劑將胺基導入使用具有胺基之烷氧基矽烷、氣矽烷、矽氨烷等之表面改質劑，對含有矽烷醇之粉體、二氧化鈦粉體等之表面進行處理。例如，藉由具有1級胺基之3-胺基丙基三甲氧基石夕烧對二氧化矽粉體進行處理將胺基導入。具體而言，係將二修氧化矽浸潰到水-2-丙醇混合液中，添加3-胺基丙基三甲氧基矽烷後，加熱到1〇〇。(：進行反應6小時。於冷卻到室溫後，將二氧化矽以甲醇洗淨，進行乾燥，得到胺基直接導入到二氧化矽表面之粉體。作為本方法中較佳之施行處理的粉體，於二氧化矽之外，尚可舉出玻璃、氧化鋁、滑石、黏土、鋁、鐵、雲母、瀝青、二氧化鈦、氧化鋅、氧化鐵等之粉體。 3·藉由矽_氣相處理將胺基導入（參照特公平ι_54379 # 號公報、特公平1-543 80號公報、特公平1-54381號公報）對粉體表面，先以1，3,5,7-四甲基環四矽氧烷處理，再使導入於表面之Si_H基與具有胺基之單體反應，得到經胺基化的表面。例如，將雲母與1，3,5,7-四曱基環四石夕氧烧放入乾燥器中，以吸引器進行脫氣。於8〇°c下進行16 小時反應後，取出雲母，於120°C下進行乾燥。將得到之雲母分散於乙醇中，加入烯丙胺，接著添加氣化鉑酸的乙 54 200416223 醇溶液，於60°C下進行攪拌2小時。於反應終了後，進行過濾、乙醇洗淨、減壓乾燥，得到胺基化雲母。作為較佳之以本法可處理的粉體，可舉出：氟樹脂、各種金屬（不鏽鋼、鈦合金、鋁、鐵等）、陶瓷、碳系材料、各種聚合物（胺基甲酸酯、聚碳酸酯、聚醯亞胺、丙烯酸系、乙烯系、多醣類、聚烷基矽氧烷）、有機-無機複合系材料、各種無機物（雲母、滑石、高嶺土、氧化鋁、二氧化鈦、氧化辞、氧化鐵、各種無機顏料）等之粉體。本法中所用之單體，可使用胺系單體。所謂胺系單體 _ ，並不限於烯丙胺，只要是具有胺基及可聚合之乙烯基、丙稀酸基等的反應部位即可。胺基亦可藉由丁氧羰基、〒氧羰基等保護。又’即使非胺系單體，亦可為具有環氧基般之可藉由與二胺之反應簡單地導入胺基的官能基之單體。其次，就對於經胺基化之粉體表面導入磷醯膽鹼基的方法（步驟2)表示如下：將粉體浸潰於甲醇中，添加磷脂基甘油醛，於室溫下❿ 放置6小時。接著，於〇°C下添加氰硼酸鈉，進行一夜之加熱攪拌，使磷醯膽鹼基加成至胺基上。將粉體以甲醇洗淨後，加以乾燥，可得到在表面直接具有磷醯膽鹼基的粉體。反應溶劑除曱醇以外，只要是水、乙醇、2-丙醇等之質子性溶劑亦可使用，惟，使用甲醇的場合，磷醯膽鹼基的導入率有較高的傾向。表面改質劑使用3_胺基丙基三甲氧基矽烷導入磷醯膽 55 200416223 鹼基（簡稱為PC)的方法之機構如下述·· 步驟1【二氧化矽表面之胺基丙基化（通常的方法）】

tu^-Si一OH > / . 〇Me 100°C 4h '減一〇H ，叫-- 丨丨-戶卜 OH MeO· IPA/HaO ΐι«ϋ 一〇步驟2【PC之導入 ι»%ΐ

"V »rSi—Ο

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m〇H H. 〇 ☆Si—〇 p一瞧 Si μ 0 14仏卜〆〜〇|。〜f / ·6 如上述說明般地調製成具有胺基m 了藉油碗醯膽驗之氧化裂解反應所得之㈣或水合物之間的還原性胺，化反應’製得磷㈣驗基直接加成至㈣表面之粉體，精此’可容易地製得本發明之改質粉體。本發明之製造方法’麟醯膽驗基的導入率高，且可用於各種粉體的表面之修飾，是其重要的優點。於本發明之方法中，藉由甘油填酿膽驗之氧化裂解反應所得之含㈣體的化合物，係使公知的甘油璘醯膽驗基藉由公知的方法進行氧化㈣者，為極簡單的步驟。此反應’係使丨，2·二醇以㈣或過破酸鹽進行氧化將鍵打開而製得2健體，於本法的場合，係生成磷醯膽驗酸與甲酸。反應係在通常的水中或含有水之有機溶劑溫度為〇度至室溫。酸體在水中經反應平衡亦會有生成: 合物的情形’‘准，對後續之與胺的反應沒有影響。兹就含有侧驗基之單官能基的路之調製機構表示如下：’ 56 200416223

具有胺基之粉體並無特別限定。於粉體之表面（依情況而要：於多孔質之粉體的内部表面)有可和藉由甘油磷醯膽驗的氧化裂解反應所得之醛體進行反應的胺基皆可。

使藉由甘油磷醯膽鹼之氧化裂解反應所得之醛體（或-合物)和鍵結到粉體的胺基進行還原性胺基化反應，可藉，使兩者在溶财_來輕易進行。此反應係使兩者溶^ 分散於水或醇類中（亦可混合人第三成分的有機溶劑），戈形成亞胺後，將其藉由還原劑還原而得到2級胺。作為原劑，以氰硼酸鈉等溫和性的還原劑為佳，惟，只要心酿膽驗為安定之下’亦可使用其他的還原劑。反應通常, 於〇，至室溫之間進行，依需要，亦可進行加熱。'

猎由上述之製造方法，W简留i I a + , 法了間早地製得含有任意量的D 水性磷醯膽鹼基的材料。又，的书 J 1寸馬合成聚合物的場合，作為該親水部，亦可含有羧基、丞1級〜3級胺基、肩酸基、磷酸基、聚氧化乙烯基、基、醯胺、緩基甜菜齡、糖類等，可經由此等之種類未齡 f ^ ^ 开里，對材料的機能加以設計。再者，作為其疏水部，各有·石厌原子數2〜2: 57 200416223 的直鏈或支鏈烷基、膽固醇等之環狀烷基，含有油稀基等之不飽和鍵之烷基，以苯環、萘環、嵌二萘為代表之烴系芳香族，毗啶環、咪唑、噻唑、吲哚等之雜環系芳香族、全氟烷基、聚烷基矽氧烷等之疏水基，可依材料的用途進订選擇及設計。由合成聚合物所構成的材料之疏水基的鍵結形態，可為藉由酯、醚、醯胺、胺基甲酸酯、尿素鍵直接與聚合物主鏈鍵結，亦可隔著間隔物（spacer)間接與主鏈鍵結。作為間隔物的種類，可舉出：親水性的聚氧化乙烯 &水性的聚氧化丙浠、直鏈狀烧基（碳原子數2〜22)等。又，經由將存在材料表面之胺基的一部份藉由磷醯膽鹼基修飾，其餘部分以其他的官能基修飾，可設計出可發揮新的機能之改質材料。對導入材料之胺基藉由元素分析等疋置，只使用欲進行附加的量來製造含有醛體（藉由甘油磷醯膽鹼之氧化裂解反應所得者）之化合物。而且，可對殘餘的胺基加成任意的官能基。此方法，可通盤地適用於全部的粉體。本發明之改質粉體，為親水性及保濕性優異之粉體。作為具有活體適性的粉體，可應用於化粧品、醫用材料、色譜分析用填充劑、塗料等之廣泛的用途。 [3:請求範圍第u項〜第15項之發明] 於本發明之色譜分析用填充劑中，所謂之磷醯膽鹼基直接化學性地鍵結於栽體表面者，係指磷醢膽驗基藉由化學性的鍵結狀態而導入載體表面，並不包含藉由以具有磷醯膽驗基之聚合物進行被覆而導人磷醯膽驗基的載體。 58 200416223 本發明t色譜分析用填充劑可藉由下㉝的步驟而製造。若於載體表面已經具有胺基，而不須導入更多的胺基之場合，步驟1可省略。步驟對任意的載體，以公知的方法或今後開發的方法導入胺基。胺基係直接導入到載體表面。所謂之「直接」’意味著不包含以具有胺基之聚合物被覆的方法。胺基為一級胺或二級胺。步驟2:對具有胺基之载體，以甘油麟酿膽驗之氧化裂解反應所得之㈣或水合物進行還原性胺基化反應嶙醯膽驗基直接加成至載體表面。本發明中所使用之載體有：二氧化石夕、石夕膠、活性哮、彿石、氧化鋁、黏土礦物等之無機質多孔質物、多孔； :有：高分子樹脂。載體以粉體為佳。較佳者為球形或碎 W形夕孔質矽膠。球狀多孔質矽膠的平均粒徑宜為㈣’而以WO" m為佳；球狀多孔㈣膠的細2 = 边徑宜為10〜500埃，而以80〜300埃為佳；比： 5〇〜8。，，而以1〇〇〜_m2/g為佳。表面積宜為作為對此等載體導入胺基之公知的方出下述者： ^鄉1)，可舉 h藉由電漿處理的表面反應將胺基導入在虱氣環境氣氛下藉由低溫電漿將胺基。具體品一 $八戰體表面賤而S，係將作為載體之粉體收容在電喈，將反摩宠哭+ 士电眾反應容器中著夢由栗抽成真空之後，將氮氣導入。接輝光放電將胺基導入粉體表面。經電衆产至之載體 59 200416223 亦可機械性地加以粉化。有關電漿處理之文獻示如下述： 1. M. Muller, C. oehr

Plasma aminofunctionalisation of PVDF microfiltration membranes:comparison of the in plasma modification with a agrafting method using ESCA and an amino-selective fluorescent probe

Surface and Coating Technology 1 16-1 19 (1999) 802- 807

2. Lidija Tusek，Mirko Nitshke，Carsten Werner，Karin Stana-Kleinschek5 Volker Ribitsch

Surface Characterization of NH3 plasma treated polyamide 6 foils Collids and Surface A: Physicochem. Eng. Aspects 195 (2001) 81-95 3. Fabienne Poncin-Epaillard， Jean-Claude Brosse，

Thierry Falher

Reactivity of surface groups formed onto a plasma treated poly(propylene) film

Macromol. Chem. Phys. 200. 989-996 (1999) 2.藉由表面改質劑將胺基導入使用具有胺基之烷氧基矽烷、氯矽烷、矽氨烷等之表面改質劑，對含有矽烷醇之粉體、二氧化鈦粉體等之載體表面進行處理。例如，藉由具有1級胺基之3 -胺基丙基三甲氧基石夕烧對矽膠粉體進行處理將胺基導入。具體而言，係將矽膠浸 60 200416223 潰到水冬丙醇混合液中，添加3-胺基丙基三甲氧基矽烷後，加熱到100。(：進行反應6小時。於冷卻到室溫後，將二乳化石夕以甲醇洗淨，進行乾燥，得到胺基直接導人到二氧化矽表面之粉體。作為本方法中較佳之施行處理的載體，於石夕膠之外’尚可舉出玻璃、氧化銘、滑石、霉占土、銘、鐵、雲母、瀝青、二氧化鈦、氧化鋅、氧化鐵等之粉體。其次，就對經胺基化之載體表面導入磷醯膽鹼基之方法（步驟2 )表示如下：將載體浸潰於甲醇中，添加磷脂基甘油醛，於室溫下放置6小時。接著’於〇下添加氰硼酸鈉，進行一夜之加熱擾拌，使磷醢膽鹼基加成至胺基上。將載體以甲醇洗淨後’加以乾燥’可得到在表面直接具有磷醯膽鹼基的載體。反應溶劑除甲醇以外，亦可使用水、乙醇、2-丙醇等之質子性溶劑，惟，使用曱醇的場合，磷醯膽鹼基的導入率有較向的傾向。

表面改質劑使用3_胺基丙基三曱氧基矽烷導入磷醯膽驗基（簡稱為PC)的方法之機構如下述：步驟1【二氧化矽表面之胺基丙基化（通常的方法）】 0H 〇版 100¾ 4h ΜΗ 枷为卜OH + ^ ：SL ···…

-OH

IPA/I^O 步驟2【PC之導入】

Si—

MeOH V-o· 〇 ” 61 200416223 如上述說明般地調製成具有胺基之載體，藉由和甘油磷醯膽鹼之氧化裂解反應所得之醛體或水合物之間的還原性胺基化反應，製得磷醯膽鹼基直接加成至載體表面之載體，藉此，可容易地製得本發明之管柱填充劑。本發明之色譜分析用填充劑之製造方法，磷醯膽鹼基的導入率高，且可用於各種載體的表面之改質，是其重要的優點。於上述之製造方法中，藉由甘油磷醯膽鹼之氧化裂解反應所得之含有醛體的化合物，係使公知的甘油磷醯膽鹼基藉由公知的方法進行氧化裂解者，為極簡單的步驟。此反應’係冑1，2-二醇以碘酸或過碘酸鹽進行氧化將鍵打開而製得2健體，於本法的場合，係生成磷酿膽驗搭盥甲盤。反應係在通常的水中或含有水之有機溶 :、應溫度為0度至宮、、田。歉· M ,丄展至至/皿輕體在水中經反應平衡亦合右水合物的情形，惟，對後續 θ 了俊、，之與胺的反應沒有影變—μ 含有磷醯膽鹼基之單官处苴从Μ °錄就土之早Β月匕基的醛之調製機構一 ΟΗ ·邪卜·

NaJ〇4

具有胺基之載體，於 ^ ^ ^ 、戰1體表面（依情況ν.Λ 之載體的内部表面)有兄而要，於多孔質甘油鱗酿膽驗的氧化裂解反 62 200416223 應所得之搭體進行反應的胺基皆可。載體㈣膠為佳。用以使藉由甘油磷醢膽鹼之氧化裂解反應所得之醛體（或水合物）和載體的胺基進行鍵結之還原性胺基化反應，可藉由使兩者在溶劑中進行授拌容易地進行。此反應係使兩者溶解或分散於水或醇類中（亦可混合第三成分的有機溶劑 )，於形成亞胺後，將其藉由還原劑還原而得到2級胺。作為還原劑，以氰蝴酸納等溫和性的還原劑為佳，惟，只要在磷醯膽驗為安定之下，亦可使用其他的還原劑。反應通常係於0度至室溫之間進行，依需要，亦可進行加熱。藉由上述之製造方法，可簡單地製得含有任意量的親水性填酿膽驗基的載體。又，於載體為合成聚合物的場合，作為其親水部，可含有羧基、羥基、i級~3級胺基、磺酸基、磷酸基、聚氧化乙稀基、銨基、酿胺、幾基甜菜驗、糖類等，經由此等之種類及含有量，可就載體的機能加以設計。再者，作為其疏水部，可含有：碳原子數2〜Μ 的直鏈或支鏈烷基、膽固醇等之環狀烷基，含有油烯基等之不飽和鍵之烧基，以苯環、禁環、嵌二萘為代表之二系芳香族，Μ咬環、味哇、暖唾、_等之雜環系芳香族，純烧基、聚烧基梦氧炫等之疏水基，可依粉體的用途進行選擇及設計。由合成聚合物所構成的粉體之疏水基的鍵結形態’可為藉由醋、喊、酿胺、胺基甲酸醋、尿素鍵直接與聚合物主鏈鍵結，亦可隔著間隔物間接與主鏈鍵姓。作為間隔物的種類，可舉出：親水性的聚氧化乙稀、:水性的聚氧化丙烯、直鏈狀烷基（碳原子數2〜22)等。爪7 63 200416223 又，經由將存在於載體表面之胺基的一部份藉由磷醯膽鹼基修飾，其餘部分以其他的官能基修飾，可設計出可發揮新的機能之改質粉體。對導入載體之胺基藉由元素分析等定量，則可僅使用欲加成的量來製造出含有醛體（藉2 甘油磷醯膽鹼之氧化裂解反應所得者）之化合物。而且，。對殘餘的官能基加成上任意的官能基。本發明之色譜分析用填充劑，為在抑制蛋白質與多肽之吸附方面優異的管柱填充劑。目而，可適用於利用、蛋白質及多肽的分子量差之分離模式（GFC模式）。再者，藉由鱗酿膽驗基所具有之雙電荷，不僅可利用對於试料之分子量的差異、亦為基於試料所帶有的微弱的電荷的差異之更高的分離能力之管柱填充劑。如此般地導入具有雙電荷之官能基以抑制蛋白f的吸附者並I前例，可說是I新類型的GFC用填充劑。藉由具有此電荷 ’不只可對蛋白質與多肽以分子量的差異而分離，亦可藉由改變移動相& pH變化來控制蛋白質與多_的相w 用之強度。因而’經由移動相的pH之最適化，可保持所需之蛋白質與多肽。由於GFC模式可在不使蛋白質或酵素失去活性其等分離、精製，故可期待在未知活體試料療用途方面，本發明之管柱填充劑可發揮高度分離能力、醫療本發明之色譜分㈣填充#1，具體而t 附極少的高分離能力之管柱填充劑，例如二體…蛋白質之分離、或使蛋白質自經姨蛋白酶消化 64 2UU416223 所得之試料中所含有的多狀的分離方面甚優異。 [4 ·明求範圍第16項〜第j 9項之發明] 本毛明中所明之接液構件係指與液體相接觸的構件。例二為分離或分析裝置用的配管、配管連接構件、取樣針式料此合用官形瓶、偵測器單元等之與試驗液接觸的構 •於此等接液構件中，試驗液之接觸部分的表面可用含 Μ氧甲㈣基之聚合物進行塗覆。於配管、配管連接構件取樣針、試料混合用管形瓶、债測器單元等之與試驗液接觸的構件中，只要對與試驗液接觸之該内面進行塗覆_ "尤以HPLC、MS、NMR之連接配管、電泳裝置的毛細管配管等為具體的較佳之形態。口本發明之接液構件的材質與形狀並無特別限定。例如 ϋ為由金屬、塑膠、陶究等之各種材料所構成的接液構件〇士匕鐵氣龍（註冊商標）管、鐵氟謝爾（Tefzel)管、聚二醚酮 B熔融一氧化矽官等之分離分析裝置用配管為本發明之較佳的形態。參各有烷氧甲矽烷基之聚合物，只要是可對材料進行塗覆即可’並無特別限定。於經塗覆的材料之表面上藉由烷乳石夕烧的交聯反應可形成強固的被膜。例&，w在（甲基），稀酸與（甲基）丙稀酸烧酯等之（甲基）丙稀酸系單體中經烷 &甲夕烷基取代的公知者或今後所開發的單體為佳。具體 :言’將由下述式(4_4)之含有烷氧甲矽烷基之(甲基)丙烯二或（甲基）丙稀醯胺系單體所聚合的聚合物溶解到溶劑 65 416223 中對接液構件表面進行處理益 .A- ^ m 处王藉由一般的方法進仃父聯而塗覆。 4 :― 4:):

Ri CHz η (Rl為氫或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，R2為碳原子數1〜6之直鏈或支鏈垸基，4 i〜6的數）用以塗覆接液構件之含有燒氧甲石夕院基之聚合物，欲導以下述式（4-1 )所不之碟酿膽驗基，必須要具有可和含有磷酿膽鹼基之化合物進行反應而被導入的適當的反應性土伞乂佳的反應性基為胺基。胺基為一級胺或二級胺。可 :A知的方法或今後開發的方法將胺基導入。帛簡便佳的方法為使用具有胺基的胺系單體、可產生胺基酸醋基c基之單體進行共聚物所成之聚合物。

又：：使非與胺系單體所得之共聚物，亦可為例一-有¥氧基般之可藉由與二胺的反應來簡I導入 “b基之單體、與含有烷氧甲矽烷基之聚合物所共聚 66 200416223 的聚合物。又，藉由電漿聚合，將由含有烷氧甲矽烷基之聚合物所塗覆的接液構件浸潰於經氮取代之烯丙胺的THF(四氫呋喃）溶液中’進行接枝聚合，亦可將胺基導入。用以進行共聚之單體，以下述式（4_5)〜（4_7)的單體、 /、丙烯酸或甲基丙烯酸等之（甲基）丙烯酸系單體為佳。式 )之酯鍵中之（COO)亦可為醯胺鍵（CONH)。

NCO

(R 发 /- 1 氧或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烧基，η為1 的數；-〇介π & 亦可為-NH-) (4 〜6)

w 為氧或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，i 的數；、Ο ★ 、亦可為-NH-) 67

ZUU410ZZJ

Ri

(Ri為氫或碳原子數的數；-Ο-亦 6之直鏈或支鏈烷基可為-ΝΗ-)。 η為1〜6

能基的單體=行=之單體，除了上述之具有鍵結㈣覆之含有燒氧甲二: = 液構件的材f ’就用” ±〜夕烷基之聚合物與接液構件的親和性考s ’使付其他的單體進行共聚為佳。例如接液構件的材質: t丙烯的場合’為了提高與飽和烴類之聚丙稀的親和性: ^與甲基_时料行共聚；材料為㈣氧w材料的 %合’宜與聚二甲基_氧烧f基丙稀酸醋進行共聚；材料為鐵氟龍(註冊商標)的場合，宜與全氟烷基單體進行共聚

對於導入之胺基，使得含有磷醯膽鹼基之化合物（較佳者為甘油磷醯膽鹼以氧化裂解反應所得之醛體或水合物）進行還原性胺基化反應，可將磷醯膽鹼基導入。較佳的含有磷醯膽鹼基之化合物為下式（4-2)之二醇及/或下式（4_3)之酸體，以縮合反應及/或還原性胺基化反應而鍵結到胺基上又，只要最後可使含有磷醯膽鹼基之化合物與胺基鍵 68 200416223 結，自導入胺基起至鍵結為止採取何種反應途徑皆可 (4 一 2 ) -OH -0 r2 CHj Ο h3c- _"_mi" Ο ❿ CHi 丨2 ，ch3 CH3 4-3) Ό- —O (ch2 Ί 01 I o J (ch2 :0 f2 H3C—N-—CH3 ch3 藉由甘油磷醯膽鹼之氧化裂解反應所得之醛體，係使公知的甘油填醯膽驗基藉由公知的方法進行氧化裂解者，為極簡單的步驟。此反應，係使1，2-二醇以碘酸或過碘酸 69 200416223 鹽進行氧化將鍵打開而製得2個醛體，於本法的場合，係生成Θ醯膽驗酸與曱酸。反應係在通常的水中或含有水、 ”,幻中進行。反應溫度為〇度至室溫。酸體在水中經反應平衡亦會有生成水合物的情形，惟，對後續之與胺的反應乂有影響。茲就含有磷醯膽鹼基之單官能基的醛之調

精由甘油磷醯膽鹼的氧化裂解反應所得之水合物及/或搭體和用以對材料進行塗覆的聚合物之胺基進行鍵結的還原性胺基化反應，可容易地藉由將兩者在溶劑中進行而進行。此反應，係使兩者共存於水或醇中（亦可混合入第二成分的有機溶劑），使其形成醯亞胺後，使其藉由還原劑還原’製# 2級胺。作為還原劑，以氰硼酸納等之溫和性的還原劑為佳，惟，只要是磷醯膽鹼可以安定之下，亦可使用其他的還原劑。反應通常係力〇度至室溫下進行，依需要亦可施以加熱。具體而言，係將接液構件浸潰於甲醇中，添加磷脂基甘油酸，於室溫下放置6小時。接著，於Ot下添加氰硼 70 200416223 酸納，進行_ 一仪之加熱攪拌，使磷醯膽鹼基加成至胺基。反應溶劑除甲醇 τ私以外，亦可使用水、乙醇、2-丙醇質子性溶劑，复中之 "r 使用甲醇的場合，磷醯膽鹼基的加成率有較高的傾向。猎由上述的方法，可簡單地製得將任意量的親水性的磷醯膽鹼基導、— 表面的接液構件。以下就更具體的方法以記述：製造方法4 -1 : 口成/、有以上述式（4_4)的單體丨（以下稱為單體1)、與上述式（4·5)的單體（以下稱為單冑2)作為必要成分的共聚物反應洛副只要為與單體i及2不反應而可將2種單體 /合解者白可，並無特別限定。可列舉例如：甲苯、丙酮、酉曰S夂乙自曰、己烷、_、四氫呋喃、二噁烷、二甲基甲醯胺、一甲亞楓、二氣甲烷、氣仿之1種或至少、2種的混合溶 :。聚合起始劑只要是自由基系起始劑皆T，並無特別限疋了列舉例如·過氧化苯醯等之過氧化物、偶氮雙異丁腈、2,2、偶氮雙（異醋酸）二甲酯等之偶氮系化合物。又，除了使用聚合起始劑之外，亦可藉由放射線照射等進行聚合。由於最終會發生交聯反應，故共聚物的平均分子量並 ”、、特別限制。進行共聚之單體，亦可因應於與材料的親和性而加入上述2種以外者。 <製造方法以單體1與單體2作為必要的單體合成出共聚物，使其延展附著於接液構件上。再者，將殘存之異氰酸酯、與 71 200416223 上述式（4_2)之含有磷醯膽鹼基之化合物（以下，簡稱為 Pc丨）’藉由胺基甲酸酯鍵導入上述式（心丨）的磷醯膽鹼基（以下’簡稱為PC基）。發生聚合物之交聯反應的時機，可依簡便性考量，於PC基導入前或導入後皆可。若藉由水進行處理則交聯反應可快速地進行，而將皮膜放置著的情形下則會逐漸進行。 <製造方法4-1-2〉以單體1與單體2作為必要的單體合成出共聚物，使其延展附著於接液構件之表面上。再將此經由水或鹼性水鲁溶液進行處理，藉此將異氰酸酯分解轉變成胺。將此胺基、與上述式（4-2)之含有磷醯膽鹼基之化合物（以下，簡稱為 PC2) ’藉由還原性胺基化反應鍵結而導入PC基。製造方法4-2 合成出具有以單體1與上述式（4_6)的單體（以下，簡稱為單體3)作為必要成分之共聚物。反應溶劑只要為與單體 1及3不反應而可將2種單體溶解者皆可，並無特別限定。可列舉例如：曱苯、丙酮、甲醇、乙醇、2_丙醇、醋酸修乙S曰、環己烷、醚、四氫咲喃、二噁烷、二甲基曱醯胺、一甲亞楓、二氣甲烷、氣仿之！種或至少2種的混合溶劑。聚合起始劑只要是自由基系起始劑皆可，並無特別限定。可列舉例如··過氧化苯醯等之過氧化物、偶氮雙異丁腈、2,2、偶氮雙（異醋酸）二曱酯等之偶氮系化合物。人，除了使用聚合起始劑之外，亦可藉由放射線照射等進行聚人。由於最終會發生交聯反應，故共聚物的平均分旦、里並無 72 ZUU^flOZZJ 特別限制。進行共聚之單體上述2種之外者。亦可因應於與材料的親和性而加入以單體1與單體3作為必要的單體之共聚物，使其延展附著於接液構件的表面上。再對其使用以4水溶㈣乙 -胺為代表之在分子时2個以上的胺基之化合物進行處理，藉此將環氧基轉變成胺基。接著，使pc2藉由還原性胺基化反應進行鍵結而導入PC基。

製造方法4-3

合成出具有以上述式（4·7)之單體（以下，簡稱為單體 4)作為必要成分的共聚物。反應溶劑只要為與單體i及(甲幻丙烯酸不反應而可將2種單體溶解者皆可，並無特別限 :。可列舉例如：f苯、丙酮、曱醇、乙醇、2_丙醇、醋酉文乙S曰、環己烷、醚、四氫呋喃、二噁烷、二甲基甲醯胺一甲亞楓 '二氣甲烷、氯仿之1種或至少2種的混合溶劑。聚合起始劑只要是自由基系起始劑皆可，並無特別2 疋。可列舉例如：過氧化苯醯等之過氧化物、偶氮雙異丁腈、2,2’-偶氮雙（異醋酸）二甲酯等之偶氮系化合物。又，除了使用聚合起始劑之外，亦可藉由放射線照射等進行聚合。由於最終會發生交聯反應，故共聚物的平均分子量並無特別限制。進行共聚之單體，亦可因應於與接液構件的材質的親和性而加入上述2種以外者。將以單體丨與單體 4或5作為必要的單體之共聚物延展附著於接液構件的表面上。對此等接液構件，使用以二環己基碳化二亞胺、 73 200416223 (3 二甲基胺基丙基）-3 -乙基基碳化二亞胺為代表之石厌化^一亞胺系偶合劑、碳化二1^米σ坐偶合劑等，使P C1鍵結上’導入PC基。 [5 :請求範圍第19項〜第25項之發明] 於本發明之過濾材料中，所謂之磷醯膽鹼基直接化學性鍵結於過濾材載體表面者，係指磷醯膽鹼基藉由化學性的鍵結狀態而導入載體表面，並不包含以具有磷醯膽鹼基之聚合物進行被覆而導入磷醯膽鹼基的過濾材載體。本發明之過濾材料可藉由下述的步驟而製造。若於過鲁渡材載體表面已經具有胺基，而不須導入更多的胺基之場合，步驟1可省略。步驟1 :對任意的載體，以公知的方法或今後開發的方法導入胺基。胺基係直接導入到過濾材載體表面。所謂之「直接」，意味著不包含以具有胺基之聚合物被覆的方法。胺基為一級胺或二級胺。步驟2:對具有胺基之載體，藉由以甘油磷醯膽鹼之氧化裂解反應所得之盤體或水合物進行還隸胺基化反應 · ’使磷醯膽鹼基直接加成至過濾材載體表面。本毛明中所使用之載體有·二氧化石夕、沸石、石朋石夕酸玻璃、氧化鋁、黏土礦物等之無機質多孔質物、多孔質之有機高分子樹脂。作為對此等載體導入胺基的公知之方法（步驟1 )，可舉出下述者·· I藉由電漿處理的表面反應將胺基導入 74 200416223 在氮氣環境氣氛下藉由低溫電漿將胺基導入載體表面。具體而言，係將作為載體之粉體收容在電漿反應容器中，將反應容器内以真空泵抽成真空之後，將氮氣導入。接著藉由輝光放電可將胺基導入粉體表面。經電漿處理之載體亦可機械性地加以粉化。有關電漿處理之文獻示如下述 1. M. Muller, C. oehr

Surface and Coating Technology 1 16-1 19 (1999) 802- 807 2. Lidija Tusek，Mirko Nitshke，Carsten Werner, Karin Stana-Kleinschek, Volker Ribitsch

Surface Characterization of NH3 plasma treated polyamide 6 foils Collids and Surface A: Physicochem. Eng.

Aspects 195 (2001) 81-95 3. Fabienne Poncin-Epaillard， Jean-Claude Brosse，

Thierry Falher

Reactivity of surface groups formed onto a plasma treated poly(propylene) film

Macromol. Chem. Phys. 200. 989-996 (1999) 2.藉由表面改質劑將胺基導入 75 200416223 使用具有胺基之烧氧基矽烧、氣矽烷、矽氨烧等之表面改質劑’對含有•基之過渡材載體表面進行處理。例如，藉由具有1級胺基之3-胺基丙基三甲氧基石夕烧對石夕膠粉體進行處理將胺基導入。具體而言，係將硼石夕酸玻璃纖維濾紙浸潰到水與2-丙醇之混合液中，添加3_胺基丙基三甲氧基矽烷後，加熱到10(TC進行反應6小時。於冷卻到室溫後，將硼矽酸玻璃纖維濾紙以甲醇洗淨，進行乾燥，得到胺基直接導入到二氧化矽表面之過濾材料。作為本方法中較佳之施行處理的載體，於硼矽酸玻璃之外，尚可舉出二氧化矽、沸石、氧化鋁、黏土礦物等之無機多孔質物、多孔質之有機高分子樹脂等。其-人，就對經胺基化之載體表面導入磷醯膽鹼法（步驟2)表示如下：〜材載體浸潰於甲醇中，添加仙基甘油駿， =下放置6小時°接著’力〇°c下添加氰硼酸鋼，这仪之加熱攪拌，使磷醯膽鹼基加成至胺基上。將過醇洗淨後，加以乾燥，可得到在表面直接具; 、s & 土的過濾材載體。反應溶劑除甲醇以外，只要是醇2丙醇等之質子性溶劑亦可使用的場合，碟酿膽驗基的導入率有較高的傾向。使用甲表面改質劑使用3_胺基三驗基(簡稱為％的方法之機構如下：夕— 步驟 1 < 二^ % —虱化矽表面之胺基丙基化（通常的方法> 76 200416223

—Si—"C>H

、 —Si—OH —―弋、5h. ". M&〇 2~prop*nol4* water

步驟2<磷醯膽鹼基之導入>

如上述說明般地調製成具有胺基之過濾材載體，藉由和甘油磷醯膽鹼之氧化裂解反應所得之醛體或水合物之間的還原性胺基化反應，製得磷醯膽鹼基直接加成至過濾材載體表面之過濾材載體，藉此，可容易地製得本發明之過濾材料，且可用於各種過濾材載體的表面之改質，是其重要的優點。於上述之製造方法中，藉由甘油磷醯膽鹼之氧化裂解反應所得之含有醛體的化合物，係使公知的甘油磷醯膽鹼基藉由公知的方法進行氧化裂解者，為極簡單的步驟。此 _ 反應，係使1，2-二醇以碘酸或過碘酸鹽進行氧化將鍵打開而製得2個醛體，於本法的場合，係生成磷醯膽鹼醛與甲醛。反應係在通常的水中或含有水之有機溶劑中進行。反應溫度為0度至室溫。醛體在水中經反應平衡亦會有生成水合物的情形，惟，對後續之與胺的反應沒有影響。茲就含有磷醯膽鹼基之單官能基的醛之調製機構表示如下： 77 200416223

〃有胺基之過;慮材載體，依情況需要於多孔質之過滤材載體的内邛表面有可和藉由甘油磷醯膽鹼的氧化裂解反應所得之醛體進行反應的胺基即可。用以使藉由甘油磷醯膽驗之氧化裂解反應所得之酸體或水合物）和鍵結到過濾'材載體的胺基進行還原性胺基化反

應’可藉由使兩者在溶财進㈣拌容易地進行。此反應係使兩者溶解或分散於水或醇類中（亦可混合人第三成分的有機溶劑），於形成亞胺後’將其藉由還原劑還原而得到2 級胺。作為還原劑，以氰硼酸鈉等溫和性的還原劑為佳，惟，只要在磷醯膽驗為安定之下，亦可使用其他的還原劑。反應通常㈣0度至室溫之間進行，依需要，亦可進行加熱。藉由上述之製造方法，可簡單地製得含有任意量的親水性磷醯膽鹼基的過濾材載體。本發明之過遽材料’具體而言，作為蛋白質及多肽的吸附極少的高分離能力之過濾、材料，例如於人體血清中的血球、企漿之分離、或分子量不同的蛋白質混合液之區分 78 200416223 方面甚優異。再者，作為本發明中之過滹妯哉雜愿材載體，可藉由使鋁在酸性、或鹼性電解液中進行陽極氧介虱化而侍到，藉由使用以在過濾材面具有垂直且均一的細孔徑(直進細孔)的陽極氧化多孔性氧化鋁基體作為鑄模而進行轉印製造所得之過濾材料’可利用&過滅材料的細孔徑之高度均一性，提供能使分子量不同之蛋白質精密地區分的過濾材料。 ^ 實施例以下，舉出實施例就本發明更詳細地加以說明。本發明並非僅限定於下述實施例中。導入之磷醯膽鹼基可經由 FT-IR及元素分析加以確認進行定量。 (合成例1)含有麟醯膽驗基之酸體使L-α-甘油填醯膽驗（450mg)溶解於蒸餾水i5mi中 ’於冰水浴中進行冷卻。添加過碘酸鈉（75〇ing)，進行2小時攪拌。再添加乙二醇（15〇mg)進行1晚的攪拌。對反應液進行減壓濃縮、減壓乾燥，使用曱醇進行目標物之萃取。構造式及NMR波譜示如圖1。 [1 :請求範圍第1項〜第7項之發明] (實施例1-1)藉由磷醯膽鹼基改質之矽膠將平均粒徑5/zm的矽膠（細孔徑80人）10g分散於水 (l5ml)-2-丙醇（15ml)中，添加3-胺基丙基三甲氧基矽烷 (5g)後，加熱至100°C進行反應6小時。於冷卻至室溫後 ’將矽膠過濾、洗淨、減壓乾燥，得到導入有胺基之二氧化矽。此二氧化矽之穿透型FT-IR波譜示如圖2。 79 200416223 將此矽膠分散於曱醇100ml中，與由合成例1所得之化合物10g混合，於室溫下進行攪拌6小時。接著，使此混合液在冰浴中進行冷卻，添加氰三氫硼酸鈉3g，於室溫下攪拌一晚後，將矽膠過濾，以甲醇洗淨，進行減壓乾燥 ’得到目的物之在表面直接具有碟醯膽驗基的；5夕膠。此矽膠之FT-IR波譜示如圖3。由圖3’在1250cm 附近出現有源自鱗酸基的波峰，可知在粉體表面導入有磷醯膽鹼基。又’粉體之元素分析值如下所示：表 1-1 ---- * ▲ ^—________ C Η Ν 3-胺基丙基三曱氧基 7. 27 2. 05 2. 49 實施例1之改質粉體丄值 10 • 76 2. 05 3. 80 計算值 1——___ 11 • 30 3. 56 由上述兀素分析值可知：於實施例1-1的改質粉體中，磷醯膽鹼基係大致定量地導入到矽膠表面。藉由本發明的方法所改質之粉體，即使長時間保存於 _等之極性溶劑中，磷醯膽鹼基亦可安定地保持在粉體，面’有此等之優異的效果。相對於此，m甲基丙烯醯 :乙基磷醯膽鹼的均聚物及共聚物所被覆的二氧化矽，被的聚ϋ物會自粉體表面溶出，磷醯膽鹼基無法安定地鍵 80 200416223 、口於粕體上。又，由於二氧化矽表面以聚合物被覆著，故一乳化矽表面的原本的性質會因聚合物本身的性質而改變〇 (實施例1-2)藉由磷醯膽鹼基改質之义異丙基丙烯醯胺-丙烯酸共聚物粒子於水200ml中，溶解入十二烷硫酸鈉（2〇mg)、N_異丙基丙稀酿胺（2.7g)、丙烯酸（172mg)、甲撐雙丙烯醯胺 (121mg) ’於氮氣環境氣氛7〇它下進行攪拌％分鐘後，添加聚合起始劑（過硫酸鉀9 2mg)，進行4小時的攪拌。使得到的粒子（實施例丨_2的先驅體）在水中藉由透析進行精製’再進行凍結乾燥。再將此粒子（700mg)分散到四氫呋喃 (30ml)-二甲基甲醯胺（1〇1111)中，在室溫下添加二環己基碳化二亞胺（800mg)、羥基苯并三嗪（5〇〇mg)、2,2，-(乙撐二氧 )雙（乙胺）（1.14 g)之四氫呋喃（10 ml)·二甲基甲醯胺（5〇mi)溶液’進行一夜的攪拌。使粒子在水中進行透析，並進行;東結乾燥。再將其分散到甲醇（70ml)中，添加合成例1之化合物lg，於室溫下進行攪拌6小時後，使此混合液在冰浴中進行冷卻，再添加氰三氫硼酸鈉2.8g，在室溫下進行一晚的攪拌。使得到的粒子在水中進行透析，製得作為目的物之在粒子表面直接具有磷醯膽鹼基的N-異丙基丙烯醯胺 -丙烯酸共聚物粒子（620mg)。 (實施例1-3)藉由磷醯膽鹼基改質之N-異丙基丙烯醯胺-丙烯酸共聚物粒子於水200ml中，溶解入十二烷硫酸鈉（20mg)、N-異丙 81 200416223 基丙烯醯胺（2.4g)、丙烯酸（382mg)、甲撐雙丙烯醯胺 (121mg)，於氮氣環境氣氛7〇艽下進行攪拌3〇分鐘後，添加聚合起始劑（過硫酸鉀9e2mg)，進行4小時的攪拌。使得到的粒子（實施例1-3的先驅體）在水中藉由透析進行精製，再進行凍結乾燥。再將此粒子（700mg)分散到四氳呋喃 (30ml)-二曱基甲醯胺（1〇1111)中，在室溫下添加二環己基碳化二亞胺（800mg)、羥基苯并三嗪（5〇〇mg)、2,2，_(乙撐二氧 )雙（乙胺）（i_i4g)之四氫呋喃（10ml)_二甲基甲醯胺（5〇ml)溶液，進行一夜的攪拌。使粒子在水中進行透析，並進行凍 _ 結乾燥。再將其分散到甲醇（7〇ml)中，添加合成例丨之化合物1.2g，於室溫下進行攪拌6小時後，使此混合液在冰浴中進行冷卻，再添加氰三氫硼酸鈉3g，在室溫下進行一晚的攪拌。使得到的粒子在水中進行透析，製得作為目的物之在粒子表面直接具有磷醯膽鹼基的义異丙基丙烯醯胺 -丙烯酸共聚物粒子（650mg)。然後，將實施例1-2及1-3所得之各粒子2mg分散到牛血清白蛋白（BSA)之2-(N-嗎啉）乙烷磺酸緩衝液5mm〇1 _ 溶液（pH5)2ml中，經放置一晚後，藉由離心分離將粒子去除’對上澄液之BSA》農度猎由UV吸收（λ =280nm)進行定量。結果示如圖4。無磷醯膽鹼基之實施例1-2先驅體及實施例1-3先驅體，會吸附多量的BSA，而加成了磷醯膽鹼之實施例i 及1-3可看到其吸附量減少。又，磷醯膽鹼基之導入率高的實施例1 -3，則更有效地阻礙了 BSA的吸附。因而，藉 82 200416223 由本發明之改質方法，材料所具有的性質有效地得到改變 (實施例1-4)藉由磷醯膽鹼基改質之鐵板將lcm X 1cm、厚lnim的鐵板浸潰到水（20ml)-丙醇 (20ml)中，添加3_胺基丙基三甲氧基矽烷（5g)後，過熱至 100 C進行反應6小時。將鐵板以水妥為洗淨，再浸潰到磷醯膽鹼的醛體（3〇〇mg)之甲醇（5〇ml)溶液中，放置5小時後於〇 C下添加氰氫爛酸鈉1 〇〇mg，以甲醇洗淨，得到作為目的物之經由磷醯膽鹼基修飾之鐵板。就實施例1 -4的鐵板與未改質鐵板的蛋白質吸附量加以比車乂。將上述2種鐵板浸潰到人體血清白蛋白之磷酸緩衝溶液（G.2%)1Gml中’放置2週。將鐵板以⑽緩衝液輕粒洗滌，對其表面以原子力顯微鏡進行觀察，可對蛋白吸 =量加以比較。對於以璘酿膽驗基改質之鐵板，蛋白不附著，而未改質鐵板，則可看到附著的情形。 (實施例1-5)藉由磷醯膽鹼基改質的布 *將木棉布（3CmX3cm)放置於電聚反應容器中，於真人氮氣。藉由輝光放電將胺基導人到表面之後其次潰於甲醇（20ml)中，、、天4 r半_么於〜… 膽鹼基_(30〇mg)， ;至/皿下放置6小時，再於〇艺下添 nm要A 添加虱氣硼酸鈉（ioomg) 行將所得之木棉布以水妥為洗淨，進 v、:、传到作為目的物之經由嶙酿_ ^ ^ ^ m ^ ^ ^ M醯膽鹼基修飾的布。此布與改質别的布料相比較，其觸，此。平α性有大幅的提昇 83 200416223 (實施例1-6)經由磷醯膽鹼基改質之石墨將石墨（2cm X 2cm、厚1mm)放置於電漿反應容器中，於真空下導入氮氣。藉由輝光放電將胺基導入到表面之後，將其浸潰於甲醇（2〇ml)中，添加磷醯膽鹼基的醛體 P〇(hng)’於室溫下放置6小時，再於代下添加氰氯蝴酸鈉（lOOmg)，於室溫下放置一晚。將所得之石墨以水妥為洗淨，進行乾燥，得到作為目的物之經由磷醯膽鹼基修飾的石墨0 就實施例1-6之石墨與未改質石墨的蛋白質吸附量加以比較。將域2種石墨浸潰到人體血清白蛋白之鱗酸緩衝溶液（0.2%)10ml巾，放置2週。將石墨以鱗酸緩衝液輕転洗滌，對其表面以原子力顯微鏡進行觀察，可對蛋白吸 :量加以比較。對於以磷醯膽鹼基修飾之石墨，蛋白不附著，而未改質石墨，則可看到附著的情形。上述實施例之結果顯示出：藉由本發明的方法改質之材料於必㈣活體適性之活體埋耗器f醫療用途上極為有用。其次，纟有下述特冑的材料之表面改質方法的實施例加以記述。所述改質方法# · 貝乃/¾:你·對材料表面以含有烷氧曱矽燒基之聚合物進行塗霜，缺你 ,..^ 玉復然後，使式（1-3)及/或式（1_4)之含有磷醯膽鹼基之化合物兹士、甚m t 物藉由還原性胺基化反應或縮合反應進行鍵結，將式（1-2)所牌*七* *么 W所代表之磷醯膽鹼基導入該材料表面。 (實施例1-7) 84 200416223 將市售之單體U5g)、單體2(n=2)(5g)、曱基丙烯酸丁酯（5g)溶解到四氫呋喃（1〇〇ml)中，在氮氣環境氣氛下進行脫氣30分鐘。使溫度昇高至7〇。〇，添加偶氮雙異丁腈 (5mg)，進行4小時聚合。使反應液延展附著於聚乙烯板 (2cm X 2cm、厚imm)上，充分使其乾燥。接著調製含有 pCl(lg)、二乙胺（lg)之二甲基甲醯胺〇〇〇mi)，將此聚乙烯板於室溫下浸潰5小時。然後，將聚乙烯板以曱醇、丙酮洗淨’得到作為目的物之經PC基修飾之聚乙烯材料。又 ’為使1乙烯板上之交聯反應充分地進行，亦可於水處理後再度進行乾燥。 (實施例1-8) 以與實施例1 -7的聚合物之相同的做法，使反應液充分地延展附著於聚丙烯板（2Cm X 2cm、厚1mm)上，乾燥後’將其浸潰到含有三乙胺之水溶液中1小時，進行交聯反應’並使異氰酸酯轉變成胺。接著，將此聚丙烯板浸潰到曱醇中，添加PC2(lg)，於室溫下放置5小時，然後，於冰浴中添加氰硼酸鈉（〇.5g)，於室溫下放置12小時。將此基板以甲醇洗淨，得到作為目的物之經PC基修飾之聚丙浠材料。 (實施例1-9) 將市售之單體l(5g)、單體3(n=l)(l5g)、甲基丙烯酸經基乙酯（5g)、三甲銨丙烯酸乙酯（ig)溶解到乙醇（2〇〇mi) 中’在氮氣環境氣氛下進行脫氣30分鐘。使溫度昇高至 70 C，添加偶氮雙異丁腈（5mg)，進行4小時聚合。使反應 85 200416223 液延展附著於鈦板（2cm X 2cm、厚lmm)上，充分使其乾燥。接著使此基板進行交聯，並於氨水溶液中於5 〇下進行處理5小時以使環氧基轉變為胺基。將其以甲醇洗淨，再浸潰於甲醇中，添加PC2(ig)，於室溫下放置5小時後，於冰浴中添加氰硼酸鈉（0e5g)，於室溫下放置12小時。將此基板洗淨，得到作為目的物之經PC基修飾之鈦材料 (實施例1-10)

將市售之單體l(5g)、單體4(n=2)(5g)、甲基丙烯酸甲酯（10g)、二甲基聚矽氧烷甲基丙烯酸酯（3g)溶解到乙醇 (100ml)-己烷（5〇ml)中，在氮氣環境氣氛下進行脫氣3〇分鐘。使溫度昇高至7(rc，添加偶氮雙異丁腈（5mg)，進行4 小時聚合。使反應液延展附著於矽板（2cm X 2cm、厚 1mm)上，充分使其乾燥。接著，使此矽板在水中室溫下處理1小時使其進行交聯。使其乾燥，將其浸潰到甲醇中，添加PC2(lg)，在室溫下放£ 5小時後，於冰浴中添加氰硼：鈉(0.5g)，於室溫下放置12小時。將基板以曱醇洗淨，得到作為目的物之經PC基修飾之矽材料。 (實施例1 -1 1) 將市售之單體1(5g)、軍體2(n=2)(5g)、甲基丙稀酸醋⑽溶解到四氫呋喃（1⑽ml)中，在氮氣環境氣氛下達脫氣30分鐘。使溫度昇高至贼，添加偶氮雙異了 (5mg)’進行4小時聚合。將反應液以氣仿稀釋後，將其入表面改質對象的管子（鐵氟龍（註冊商標）管）中。將管子 86 200416223 -端的終點加以密封，自另一端的終點藉由減壓，時的時間將溶劑除去。然後，調製含有pci⑽ ⑽之二甲基甲醯胺(10〇1111)’用該該溶液以每分鐘速度對該管子進行5小時的通液。然後，以甲醇、丙^ =進得到作為目的物…C基作内面修飾之：目。為使内面之交聯反應充分地進行，亦可以通液後再度藉由減壓進行乾燥。丁又：使用材質不同之鐵氟謝爾管、聚二醚酮樹脂管、熔融二氧化；管亦可得至|办之配管。 π 了侍到-全冋樣地經PC基作内面修飾 (實施例1-12) 將實鉍例1-11之聚合物同樣以氣仿稀釋後，將其封入表面改貝對象之官子（鐵氟謝爾管）中。將管子封管，自另一端之終點藉由減麼，以數小時的時間將溶劑除去。以含有二乙胺之水溶液以每分鐘icm的速度進行5 小時之通液使其進行交餘聯反應，並將異氰酸酯轉變成胺。接者，對此配管以含有ΡΓ9η ^ m ^ (lg)之甲醇（l〇〇ml)於室溫下進行5小時之通液之後，再以含有_鈉(〇.抝之甲醇 (100ml)於冰溫下進行通液，於室溫下進行W、時之封入放置。然後，將管内以甲醇洗淨，得到作為目的物之内面以P C基修飾的配管。又，使用材質不同之鐵备赴^ 鐵鼠龍（注冊商標）管、聚二醚酮樹脂管、熔融二氧切管亦可得到完全同樣地經pc基作内面修飾之配管。 87 200416223 (實施例1-13) . 將市售之單體l(5g)、單體3(n=l)(l5g)、曱基丙烯酸經基乙醋（5g)、三甲基銨丙烯酸乙酯（lg)溶解到乙醇 (200ml)中，在氮氣環境氣氛下進行脫氣3〇分鐘。使溫度幵咼至70 C，添加偶氮雙異丁腈（5mg)，進行4小時聚合將反應液以氣仿稀釋後，將其封入表面改質對象的管子（聚二鱗_樹脂管）中。將管子一端之終點封管，自另一端之終點藉由減壓，以數小時的時間將溶劑除去。接著，於 °C下以氨水溶液進行通液5小時以使此配管内面進行交聯馨，將環氧基轉變為胺基。對其以甲醇進行通液，再於室溫下以含有PC2(lg)之甲醇（i〇〇mi)進行5小時之通液之後，再以含有氰硼酸鈉（〇.5g)之甲醇（i〇0mi)於冰溫下進行通液，於至溫下進行12小時之封入放置。然後，將管内以甲醇洗淨，得到作為目的物之内面經pc基修飾的配管材。又’使用材質不同之鐵氟龍（註冊商標）管、鐵氟謝爾官、溶融二氧化矽管亦可得到完全同樣地經PC基作内面改質之配管。 _ (實施例1 -14 ) 將市售之單體l(5g)、單體4(n=2)(2g)、甲基丙烯酸曱醋（10g)、二甲基聚矽氧烷甲基丙烯酸酯（3g)溶解到乙醇 (100ml)-己烷（5〇mi)中，在氮氣環境氣氛下進行脫氣3〇分釦。使溫度昇高至70°C，添加偶氮雙異丁腈（5mg)，進行4 小時聚合。將反應液以氣仿稀釋後，將其封入表面改質對象的管子（熔融二氧化矽管）中。將管子一端之終點封管， 88 200416223 自另/端之終點藉由減壓，以數小時的時間將溶劑除去。接著’在室溫下以水進行通& 5小時以使此配管内面進行交聯。將士其乾燥，以含有PC2(lg)之甲醇於室溫下進行通液5小时之後，再以含有氰硼酸鈉（〇 5g)之甲醇（i〇〇ml)於冰溫下進行通液，於室溫下進行12 ]、時之封入放置。然後，將管内以甲醇洗淨，得到作為目的物之内面經pc基修_的配管材。又，使用材質不同之鐵氟龍（註冊商標）管、鐵氟謝爾管、聚二醚_樹脂管亦可得到完全同樣地經pC基作内面修倚之配管。 [2·喷求範圍第8項〜第1〇項之發明] (實施例2-1)含有磷醯膽鹼基之矽膠將平均粒徑5//m的矽膠（孔徑8〇A)1〇g分散於水 (15ml)—2-丙醇（15ml)，添加3_胺基丙基三曱氧基矽烷（5幻後，加熱至10(TC進行反應6小時。於冷卻到室溫後，將矽膠過濾、洗淨，進行減壓乾燥，得到導入胺基之矽膠。此矽膠之穿透型FT-IR波譜示如圖5。將此矽膠分散到甲醇100ml中，與由合成例i所得之化合物10g混合，於室溫下攪拌6小時。接著將此混合液在冰浴中冷卻，添加氰三氫硼酸鈉3 g，在室溫下攪拌一晚後，將矽膠過濾、洗淨，進行減壓乾燥，得到作為目的物之在表面上直接具有磷酸膽鹼基之矽膠l〇6g。此秒膠之 FT_IR波譜圖示如圓6。由圖6,在1250cm-1附近出現有源自磷酸基的波峰， 89

一氧化石夕I ®的原本的性質會因聚合物本身的性質而改變〇 (實施例2-2)含有磷醯膽鹼基之N_異丙基丙烯醯胺_ 丙稀酸共聚物粒子於水200ml中，溶解入十二烷硫酸鈉（2〇1^)、N_異丙基丙烯醯胺（2.7g)、丙烯酸（172mg)、甲撐雙丙烯醯胺 200416223 (12lmg)，於氮氣環境氣氛7〇〇c下進行攪拌3〇分鐘後，添加聚合起始劑（過硫酸鉀9.2mg)，進行4小時的攪拌。使得到的粒子（實施例2-2的先驅體）在水中藉由透析進行精製，再進行凍結乾燥。再將此粒子（7〇〇mg)分散到四氫呋喃 (30ml)-二甲基甲醯胺（丨0ml)中，在室溫下添加二環己基碳化二亞胺（800mg)、羥基苯并三嗪（500mg)、2,2，-(乙撐二氧 )雙（乙胺）（1.14g)之四氫呋喃（i〇mi)·二甲基甲醯胺（5〇ml)溶液，進行一夜的攪拌。使粒子在水中進行透析，並進行凍結乾燥。再將其分散到甲醇（70ml)中，添加合成例1之化合物lg，於室溫下進行攪拌6小時後，使此混合液在冰浴中進行冷卻，再添加氰三氫硼酸鈉2 8g，在室溫下進行一晚的授拌。使得到的粒子在水中進行透析，製得作為目的物之在粒子表面直接具有磷醯膽鹼基的冰異丙基丙烯醯胺 -丙烯酸共聚物粒子（620mg)。 (實施例2-3)含有磷醯膽鹼基之N_異丙基丙烯醯胺_ 丙稀酸共聚物粒子於水200ml中，溶解入十二烷硫酸鈉（2〇mg)、N_異丙基丙烯醯胺（2.4g)、丙烯酸（382mg)、甲撐雙丙烯醯胺 (121mg)，於氮氣環境氣氛7〇〇c下進行攪拌％分鐘後，添加聚合起始劑（過硫酸鉀9.2mg)，進行4小時的授拌。使得到的粒子（實施例2-3的先驅體）在水中藉由透析進行精製，再進行凍結乾燥。再將此粒子（7〇〇mg)分散到四氫呋喃 (30ml)-二甲基甲醯胺〇〇ml)中，在室溫下添加二環己基碳化二亞胺（80〇mg)、羥基苯并三嗪（5〇〇mg)、22,（乙撐二氧 200416223 )雙（乙胺）（1.14g)之四氫肤喃（1〇ml)_二甲基甲醯胺（5〇ml)溶液，進行一夜的攪拌。使粒子在水中進行透析，並進行凍結乾燥。再將其分散到甲醇（7〇mi)中，添加合成例1之化合物1.2g，於室溫下進行攪拌6小時後，使此混合液在冰浴中進行冷卻，再添加氰三氫硼酸鈉3g，在室溫下進行一晚的攪拌。使得到的粒子在水中進行透析，製得作為目的物之含有磷醯膽鹼基的N-異丙基丙烯醯胺-丙烯酸共聚物粒子（650mg)。然後’將實施例2-2及2-3所得之各粒子2mg分散到 _ 牛血清白蛋白（BSA)之2_(N-嗎啉）乙烷磺酸緩衝液5mm〇1 溶液（pH5)2ml中，經放置一晚後，藉由離心分離將粒子去除’對上澄液之BSA濃度藉由UV吸收（又=280nm)進行定量。結果示如圖7。無磷醯膽鹼基之實施例2-2先驅體及實施例2-3先驅體’會吸附多量的BSA，而加成了磷醯膽鹼之實施例2_2 及2-3可看到其吸附量減少。又，磷醯膽鹼基之導入率高的實施例2-3，則更有效地阻礙了 BSA的吸附。 _ [3 :請求範圍第11項〜第15項之發明] (實施例3-1)色譜分析用填充劑鍵結有磷醯膽鹼基之矽膠載體之調製（細孔徑3〇〇人）將平均粒徑5 // m、平均細孔徑300A的多孔性石夕膠 i〇g分散到水（15ml)-2-丙醇（15ml)中，添加3-胺基丙基三甲氧基矽烷（5g)後，加熱至10CTC進行反應6小時。冷卻至室溫後，將矽膠過濾、洗淨，進行減壓乾燥，得到導入 92 200416223 有胺基丙基之矽膠。此矽膠之反射型FT-IR波譜示如圖8 〇將此導入有胺基丙基之矽膠分散到甲醇1 〇〇ml中，與由合成例1所得之化合物丨〇g混合，於室溫下進行攪拌6 小時。接著，使此混合液在冰浴中進行冷卻，添加氰氫硼酸納3g，於室溫下攪拌一晚後，將矽膠過濾，以曱醇洗淨 ’進行減壓乾燥，得到目的物之在表面直接具有磷醯膽鹼基的石夕膠l〇.3g。此矽膠之反射型FT-IR波譜示如圖9。又，藉由上述步驟得到的粉體之元素分析值如示於表表3-1 C /% N /% 導入有胺基丙基之矽膠 3 • 24 1 • 36 實施例1中得到之導入有磷醯膽鹼基之矽膠 5 • 49 1 • 49 碟醢膽驗基與胺基丙基全部進行反應時之理論值 9 • 13 2 • 04 由上述元素分析值，可知於實施例3-1的粉體中，碟醯膽鹼基被導入到矽膠表面。並得知實際與磷醯膽鹼基反應之胺基為全體的胺基之約38%。然後’將實施例3 -1之色譜分析用填充劑藉由填漿法填充到内徑4.6mm、長250mm的不鏽鋼管柱中。使用對 93 200416223 50mmol/L磷酸緩衝液（由Na2HP04& ΚΗ2Ρ〇4所調製）加入 500mmol/L的氯化鈉所成之移動相，以流速〇 lml/分、管柱爐内溫度40 C下，進行人體血清試料（將康希拉N(製品名）以生理食鹽水稀釋成二倍）之蛋白質的分離。檢測係於 UV280nm下進行。結果示如圖1〇。 (比較例3-1) 然後，以市售品之原來的狀態使用市售之色譜分析用管柱（YMC-Pack Diol 300，YMC(股）製）進行人體血清試料（將康希拉N(製品名）以生理食鹽水稀釋成二倍）之蛋白質的分離。比較例中所舉出之管柱，係與實施例丨所述之管柱為相同的内徑與長度。此處之說明，填充劑係在多孔性矽膠的表面化結著具有^醇構造的官能&之以大小來排㊉之模式用的充劑。平均細孔徑為300A，平均粒徑為，適合於實施例3-i户斤述之填充劑作比較。根據說明，係適用於子量1萬至數十萬的蛋白質之分離。YMC Pack m〇i，

於係使用非解離性的：醇作為親水性基，故與本發明之充劑相異者在於不具有帶有電荷的官能基。因而，可認幾乎沒有與蛋白質間之離子相互作用。與實施例3_1同樣地’使用對5Gmmol/L磷酸緩衝浴由Na2HP〇4及kh2P〇4所調製）加入μ—的氯化納, 成之移目，以流速（).lml/分、管柱爐内溫度机下，；行人體血清試料（將康希拉N(製品名）以生理食鹽水稀釋力 D之蛋白質的分離。檢測係於UV28〇nm下進行。以 94 200416223 示如圖10。於便用桊發明之色譜分析用填昇兄W之色谱圖（圖1 ，除了可分離人體血清中之主要臼貝之球蛋白盥白蛋白之外，亦可分離轉鐵球蛋白 ^ 贫白疋重要的特徵。波峰的歸屬係使用經離析之各蛋白質的市售品而進行。於使用傳統的色譜分析用填充劑的場合^°9)，與轉鐵球蛋白的分離不完全。盆馬其原因經確認得知係在於經

離析之市售品之各蛋白質的溶出時間為相同之故。球蛋白與轉鐵球蛋白的分子量分別約為69，_肖75，咖可說甚為接近。以傳統的GFC用管柱並無法將如同白蛋白與轉鐵球蛋白般的分子量相近的試料加以分離。可知：本發明之色譜分析用填充劑’不僅蛋白質的吸附極少，1由於具有源自於磷酿膽驗基所具有的雙電荷之與蛋白質間的微弱之離子性相互作用’故對於分子量相近的蛋白質亦可基於等電點或疏水性的差異而加以分離。亦卩卩，可知：本發明之色譜分析用填充劑，於GFC模式中，不僅可由分子量之相

異來將試料分離，亦可經由蛋白質所具有的等電點或疏水性的差異將試料分離。 (實施例3-2)色譜分析用填充劑鍵結有磷醯膽鹼基之矽膠載體之調製（細孔徑i2〇a) 用平均粒徑為5// m、平均細孔徑為12〇人的多孔性矽膠，藉由與實施例1同樣的處理，調製成鍵結有磷醯膽鹼基之矽膠載體。將其填充到與實施例3-1同樣的管柱中。使用對50mmol/L磷酸緩衝液（由仏2册〇4及KH2p〇4 95 4U)223 所調製）加入500mmol/L的氯化鈉所成之移動相以流速〇.2ml/分二管柱爐内溫纟赋下，進行氧化錄素之經由蛋白酶/肖化所生成的狀之分離。檢測係於UVMOnm下進行。結果示如圖12。氧化鐵紅素之胰蛋白酶消化的順序示如下述。將 8.8mg的氧化鐵紅素結晶（市售品）溶解到2〇mm〇i/L(pH8 3) 的磷酸緩衝液（由Ν^ΗΡ〇4及KH2p〇4所調製）中。另一方面將騰蛋白酶結晶（市售品）溶解到5mmol/L(pH5.0)的磷酸緩衝液（由NaWPO4及ΚΗ2Ρ〇4所調製）中。使氧化鐵紅鲁素的構酸緩衝液360 // 1在熱水浴中加熱至95。〇，進行i 小日守的熱變性。然後，對胰蛋白酶溶液施以3〇〇〇rpm、i 5 分鐘之離心分離，將沈澱分離。取得離心分離後的試料之上澄液360 #1，對其添加前述之胰蛋白酶溶液8〇，於 35 °C下進行5小時的培養得到胰蛋白酶消化物。然後，以孔徑0·2 // m的過濾器將消化物過濾，作為試樣。由使用本發明之色譜分析用填充劑之色譜圖（圖1丨）可知藉由以氧化鐵紅素之胰蛋白酶消化所生成的多肽處於分 _ 離狀態。 [4 :請求範圍第16項〜第19項之發明] (實施例4-1) 將市售之單體l(5g，n=3)、單體2(5g，n=2)、甲基丙烯酸丁酯（5g)溶解到四氫呋喃（1〇〇ml)中，在氮氣環境氣氛下進行脫氣30分鐘。使溫度昇高至70°C，添加偶氮雙異丁腈（5mg)，進行4小時聚合。將反應液以氯仿稀釋後，將 96 :_山内面被覆對象之管子(鐵氟龍(註冊商標)管)中。將管的：二之終點封管，自另一端之終點藉由減壓，以數小時 r將溶劑除去。然後’調製成含冑PC1⑽、三乙胺 :之，甲基甲酿胺⑽ml)，用該溶液以每分鐘一速又對官子進行5小時的通液。然後， …、俊，以甲醇、丙酮對管子 =進行通液，得到作為目的物之、經PC基作内面修飾之配使内面之交聯反應充分地進行，亦可以水進行通液傻再度藉由減壓進行乾燥。又，使用材質不同之鐵氟謝爾管、聚二醚酮樹脂管、溶融一氧化石夕管亦可得到完全 J 70王U樣地經PC基作内面修飾之配管。 (實施例4-2) 將實施例4] <聚合物同樣以氣仿稀釋後，將其封入内：破覆對象之管子(鐵敗謝爾管)中。將管子一端之終點、e自另$之、點藉由減壓，以數小時的時間將溶劑除去。以含有三乙胺之水溶液 | ，從M母分鐘1cm的速度進行5 小時之通液使其進行交聯反庫廿 m 並將異fl酸酯轉變成胺。接著，對此配管以含有PC2fiP、夕田； (g)之甲醇（100ml)於室溫下進行 5小時之通液之後，苒7人士 & s有氰蝴酸納（〇.5g)之甲醇 u〇〇ml)於冰溫下進行通液’於室溫下進行12小時之封入放置。然後，將管内以甲醇咮、、备 „ / 夂 τ醉冼淨，得到作為目的物之内面以PC基修飾的配管。又，使用材質不同之鐵i龍(註冊商標)管、聚二㈣樹脂管、炼融二氧切管亦可得到完全同樣地經pc基作 97 200416223 内面修飾之配管。 (實施例4-3) 將市售之單體l(5g、n=3)、單體2(15g、n=l)、曱基丙烯酸羥基乙酯（5g)、三甲銨丙烯酸乙酯（lg)溶解到乙醇 (200ml)中，在氮氣環境氣氛下進行脫氣30分鐘。使溫度昇鬲至70 C ’添加偶氮雙異丁腈（5mg)，進行4小時聚合。將反應液以氣仿稀釋後，將其封入内面被覆對象之管子（聚二醚酮樹脂管）中。將管子一端之終點封管，自另一端之終點藉由減壓，以數小時的時間將溶劑除去。接著，於5〇 · C下以氨水溶液進行通液5小時，以使此配管内面進行交聯’將環氧基轉變為胺基。對其以甲醇進行通液，再於室 /凰下以含有PC2(lg)之甲醇（i〇〇mi)進行5小時之通液之後 ’再以含有氰删酸鈉（〇」g)之曱醇（i〇〇mi)於冰溫下進行通液，於室溫下進行12小時之封入放置。然後，將管内以甲醇洗淨，得到作為目的物之内面經修飾的配管材。又，使用材質不同之鐵氟龍（註冊商標）管、鐵氟謝爾管、熔融二氧化矽管亦可得到完全同樣地經PC基作内面 _ 修飾之配管。 (實施例4-4) 將市售之單體l(5g、n=3)、單體4(2g、n=2)、甲基丙烯酸甲S旨（lGg)、二甲基聚♦氧烧甲基丙烯酸醋（⑻溶解到乙醇（1〇〇ml)·己院（50ml)中，在氮氣環境氣氛下進行脫氣 30分鐘。使溫度昇高至7(rc，添加偶氮雙異丁膳㈣），進行4小時聚合。將反應液以氣仿稀釋後，將其封入内面 98 200416223 被覆對象之管子（熔融二氧化矽管）中。將管子一端之終點封官，自另一端之終點藉由減壓，以數小時的時間將溶劑除去。接著，於50°C下以水進行通液5小時以使此配管内面進行交聯。將其乾燥，再於室溫下以含有pC2(lg)之甲醇（100ml)進行5小時之通液之後，再以含有氰硼酸鈉 (0.5g)之甲醇（l〇〇mi)於冰溫下進行通液，於室溫下進行小時之封入放置。然後，將管内以甲醇洗淨，得到作為目的物之内面經PC基修飾的配管材。又’使用材質不同之鐵氟龍（註冊商標）管、鐵氟謝爾 _ 管、聚二醚酮樹脂管亦可得到完全同樣地經PC基作内面修飾之配管。 [5 ·請求範圍第19項〜第25項之發明] (實施例5-1)硼矽酸玻璃纖維過濾材料 (鍵結有填醯膽驗基之硼矽酸玻璃纖維過濾材載體之調製）將15g的離子交換水、i5g的2-丙烷、ig的3-胺基丙基二曱氧基石夕烧置入1 OOmL錐形燒瓶中加以混合。對其添鲁加5片日本瓦特曼（股）製硼矽酸玻璃纖維過濾材（玻璃纖維滤紙級GF/F)，加熱至100X：進行5小時之回流煮沸。冷卻到室溫後，將過濾材過濾、洗淨，進行減壓乾燥，得到直接導入胺基丙基之硼矽酸玻璃纖維過據材。然後’將直接導入胺基丙基之蝴石夕酸玻璃纖維過渡材放入100ml的甲醇中，與由合成例i所得之化合物ig混合，於室溫下靜置5小時。接著，將此化合液於冰浴中冷 99 200416223 卻，添加氰氫硼酸鈉〇.3g，於室溫下進行—夜攪拌後，將過濾材過濾，以甲醇洗淨，進行減壓乾燥，得到作為目的物之在表面上直接具有磷醯膽鹼基之硼矽酸玻璃纖維過濾材。 (比較實驗）將10mg的牛血清白蛋白（BSA)溶解到1〇〇mL的磷酸缓衝液（料卡拉生化公司冑PBS㈣丨丨錠輯到蒸館水中’將全量作成為lOOmL者。PH7.4〜7·5)中作為bsa溶液。分別取BSA溶液2.0g放入3支聚丙烯製的3〇mL試樣管# 中’於其中1支試樣管中放入實施例5]中所調製的侧矽酸玻璃纖維過濾材（經PC處理之過濾材），於另丨支試樣管中放入未處理之硼矽酸玻璃纖維過濾材（未處理之過濾材）做浸潰。於室溫（25。〇下放置24小時，以L()wry法分別自 3支試樣管採取BSA溶液’使該BSA溶液發色，藉由吸光度分析就過濾材上之BSA吸附量進行定量。其結果示如「表5-1」。 '

100 200416223 璃纖維過濾材，與未處理品相比較，BSA吸附量較為減少〇 (實施例5-2) 除了將實施例5-1的硼矽酸玻璃纖維過濾材變更為日本瓦特曼公司製之氧化鋁製膜過濾器（an〇p〇rEtm孔徑〇·〇2 # m、直徑25mm)之外，係以同樣的方法製造氧化鋁製過濾材料。 (製造例5 _ 1)陽極氧化氧化鋁之製造

將99.99%的鋁板浸潰於丙酮中i日進行脫脂，經電解研磨後，於0.5mol/L的草酸浴中，在16°C4〇v下進行陽極氧化5小時。於陽極氧化完成後，浸潰到氧化鉻_磷酸水溶液中15小時，將形成於鋁表面的氧化鋁層暫時除去，再度於0.W/L的草酸浴中，在阶術下進行陽極氧化 b小時。然後，經由在氯化汞（11)的飽和溶液中浸潰數小時將銘完全溶解’ II由離子銑裝置將氧化紹底部的保護層去除，製作成具有約60nm的細孔之多孔質氧化鋁。

(實施例5-3)陽極氧化氧化鋁製過濾材料除了將實施例5-1之硼♦酸玻璃纖維過極氧化氧㈣過瀘、材15 X 3Gmm之外 ^柄制、生> y Γ係以同樣的方法表W成經陽極氧化之鋁製過濾材料。產上之可利用性依據本發明之改質方法，可對將磷醯膦私Α1丄播X m ^ A間便的方法塒《膽驗基女疋地導入到材料表φ 途之材料可容易&具體的用十了合易地導入最適置的碟醯膽膽鹼基，而可容易地 101 200416223 進行適於用途之改質，為重，活體適性及親水性高分子/面經改質之材料方原料、色譜分析用填充:二：用為醫用材料、化粧品配等之構件之改質亦甚有用。且於分離分析裝置覆：發:=: =、、，即使於使用㈣的聚合物塗地導入材料中。尤其璘酿膽驗基安定 ^面的分析裝置或分離裝置_ =液接觸析。又，可抑制而可進行再現性優異之蛋白分提高。由於不論内之蛋白變性，蛋白回收率亦可行交聯，故塗：的；之材料的種類’塗覆之聚合物均會進覆後藉由高分子反靡 , 由於係於聚合物塗適量的磷醯胪鹼心入磷醯膽鹼基，故可容易地將最士膽鹼基導入到各種接液構件的表面。卷明之改質粉體，為在粉體表面安定地I右鹼基之粉體，、壬舻嚅k 衣®女疋地具有磷醯膽成分、管柱M \ ^濕性高，故可用於化粧品配方範圍。 ^析用填充劑、醫療用微粒子之各種應用本發明之_ ;生士、、+ 膽驗基導入至粉體表面：途所需最適量的麟酿，是重要^ 容易地對改質粉體進行設計 <里脊的優點。白質發明，可提供一種即使帶有微弱的電荷，對蛋 ^之吸附仍極少之色譜分析用填充劑。本I月之色譜分析用填充劑的特徵在於，具有不僅可 102 200416223 由，子里之差異來將試料分離，亦可經由具有的等電點或疏水性的差里夕肽所力。 0差異將试枓分離之優異的分離能尤其在GFC模式中尤具有優異的分離特性。依據本發明，在各種材質的接液構件的表面定地將親水性的鱗酿膽驗基導入各種材質的接 ^ 面。尤其’將磷醯膽鹼基導入至與試驗液接觸之内面的分析裝置或分離裝置用配管與分析裝置用各種器材可防止蛋白質之吸附，而可進行再現性優異之蛋白八析。又，可抑制分析裝置内之蛋白變性，蛋白；

提高。 J J 本發明之接液構件，由於不論改質之材料的種類，塗覆之聚合物會進行交聯，故塗覆的耐久性優異。再者，由於係於聚合物塗覆後藉由高分子反應而導入麟酿膽驗基，故可容易地將最適量的磷醯膽鹼基導入到各種接液構件表面。本發明提供蛋白質與多肽的吸附極少的過濾材料。本發明之過濾材料，於抗體、酵素等的分離、濃縮，與血液透析、血液過濾等之血液淨化、分析等之廣範圍的活體物質之過濾甚為有用。【圖式簡單說明】 (一）圖式部分圖1為合成例1的構造式及NMR波譜。圖2為實施例1-1之導入有胺基的矽膠之FT-IR波譜 103 200416223 圖3為實施例l-i之改質矽膠之ft_ir波譜。圖4為表示BSA吸附量之圖。圖5為實施例2-1之導入有胺基的矽膠之ft_ir波譜〇

Ώ 6為實她例2·1之含有鱗醯膽驗基之石夕膠之FT_IR 波譜。圖7為表示BSA吸附量之圖。圖8為實施例3·1之導入有胺基丙基的矽膠之FT_IR φ 波譜。

圖9為實施例3-1之含有磷醯膽鹼基之矽膠之FT_IR 波譜。圖1 〇為使用本發明之色譜分析用填充劑進行人血清蛋白質之分離的液體色譜分析之色譜圖。圖11為使用傳統的色譜分析用填充劑進行人血清蛋白質之分離的液體色譜分析之色譜圖。圖12為使用本發明之色譜分析用填充劑進行氧化血紅鲁素的胰蛋白酶消化物之分離的液體色譜分析之色譜圖。 (二）元件代表符號 (無） 104

Claims

200416223 拾、申請專利範菌·· I —種材料之表面改質方 1 — 1)

胺基之材料，以含有與'、、特徵在於，係對具有應所得者）之化合物 :彳油鱗酿膽驗之氧化裂解反 °—卜〇~^CH2j cr n 1 (Ri、R2、R3分別獨立表示之碳原子支鏈烷基，n=2〜f t ^ # 、之直鏈或 )所不之磷醯膽鹼基導入到該材料表面。 2·如申請專利範圍第丨 ._ . 貝 < 材枓之表面改質方法，甘中，該式（1-1)為下式（1_2)β 貝方去，其 (1 一 2 )

3. 於，係由：將種材料之表面改質方法，其特徵在胺基導入材料之步驟、與隨後對該材料以含有油磷酿膽鹼之氧化裂解反應所得者)之化合物(糟由甘驟所構成，來將以下式（1 - 1) Τ处理之步 105 200416223 (1 〜l)

呢哪丞守八到該材料矣而 :，如申請專利範圍第3項之材料之表面… 中’ 5亥式（^1)為下式（1-2)。八 Cl 〜2) Π 一广cr + 5. 一種材料之表面改質方法，其特徵在於，係將材料表面以含有烧氧甲㈣基之聚合物進行塗覆，然後使下式 (1-3)及/或（1-4)之含有磷醯膽鹼基之化合物藉由還原性胺基化反應或縮合反應做鍵結，來將以下式（1_2)所示之磷醯膽驗基導入到該材料表面。 ,C1 一 2.). 〇 II , CT I 106 200416223 (1 一 3) r—OH —OH —O J (CH2 o 200416223 1 — 4 ) :〇 -0 I 1 ch2 | )2 1 0 1 〇 I 1 ， >2 — 1 -ch3 1 ch3

6.如申請專利範圍第5項之材料之表面改質方法，其中，該含有烷氧甲矽烷基之聚合物係由下式（1_5)的單體與式（1-6)〜（1_8)中至少1種的單體進行共聚所得之聚合物； 108 200416223 (1 — 5) Ri

(h為氫或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，R2為碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，η為1〜6的數） (1 — 6)

0 I η ch2 I NCO (I為氫或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，η為1〜6 的數；-0-亦可為-ΝΗ) 109 200416223

(h為氫或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，η為1〜6 的數；-0-亦可為-ΝΗ) (1-8)

νη2 (Ri為氫或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，η為1〜6 的數；-0-亦可為-ΝΗ)。 7. —種材料之表面改質方法，其特徵在於，係對材料 110 的表面以進行塗覆以下式（1 下式（1-5)的單體與（甲基）丙浠酸系單體之共聚物 ’然後與含有磷醯膽鹼基之化合物做鍵結，來將 1)所示之磷醯膽鹼基導入該材料表面； Ri

(R1為氫或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，r2為碳原子激· 1 妖i〜6之直鏈或支鏈烷基，η為1〜6的數） (1 〜1) ，

cr r3 (ri、R2、Rs分別獨立表示碳原子數1〜6之直鏈或支鏈垸基，n=2〜4)。一種改質粉體，其特徵在於，係在粉體表面直接具有以下式（2-1) 111 200416223 (2 - 1) Ο Π I 〇 - I 所示之磷醯膽鹼基者。 9· 一種改質粉體之製造方法，係用以製造申請專利範圍第8項之改質粉體；其特徵在於，係將含有醛體（藉由甘油磷醯膽鹼的氧化裂解反應所得者）的化合物加成至具有胺基的粉體。 I 〇· —種改質粉體之製造方法，係用以製造申請專利範圍第8項之改質粉體；其特徵在於，係由：將胺基導入粉體表面之步驟、與隨後將含有醛體（藉由甘油磷醯膽鹼之氧化裂解反應所得者）之化合物加成至該粉體之步驟所構成〇 II · 一種色譜分析用填充劑，其特徵在於，係以下式 (3-1) (3 ~ 1) 〇 · II I 〇- ! 所不之構酿膽驗基直接化學鍵結於載體表面者。 12·如申請專利範圍第11項之色譜分析用填充劑，係將胺基直接導入到載體表面，然後使含有醛體（藉由甘油磷醯膽鹼之氧化裂解反應所得者）之化合物與該胺基進行反應所製得。 112 200416223 1 3 ·如申請專利範圍第11或笛·1 1 次第12項之色譜分析用填充劑，其中，該載體為球狀多孔質石夕膠。 H·如中請專利範圍第13項之色譜分析㈣充劑，其中，該球狀多孔質矽膠的平均粒徑為1〜2〇〇 " m。 15.如申請專利範圍第U或第14項之色譜分析用填充劑，其中，該球狀多孔質石夕膠的細孔之平均粒徑為 10〜500埃0

16. —種接液構件，其特徵在於，係對於表面塗憑含有烧f4lf)烷基之聚合物之接液構件導入以下式(4-1)

所示之磷醯膽鹼基。係使下式 17_如申請專利範圍第16項之接液構件 (4-2)及/或（4-3)

113 200416223

之含有磷醯膽鹼基之化合物來和表面塗覆著含有烷氧甲石夕烧基之聚合物之接液構件做鍵結者。中該含有貌氧甲石夕烷基之聚合物體 114 200416223 與式（4_5)〜(4-7)中至少1種單體進行共聚所得之聚合物； (4 — 4;) Ri 丄 Ο

0 1、 CHa )

f η OR2

(Ri為氫或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，R2為碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，η為1〜6的數） (4-5) Ri

NCO (1^為氫或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，η為1〜6 的數；-0-亦可為-ΝΗ-)

115 ‘0200416223 (4 一 6 )

η :0 (1^為氫或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，η為1 的數；-0-亦可為-ΝΗ-) (4-7)

(h為氫或碳原子數1〜6之直鏈或支鏈烷基，η為1〜6 的數；-0-亦可為-ΝΗ-)。 19. 如申請專利範圍第16、17或第18項之接液構件，其中，該接液構件係分離分析裝置用配管。 20. —種過濾材料，其特徵在於，係以下式（5-1) (5-1) Ο 11 \ dr i 所示之碌醯膽驗基直接化學鍵結於過渡材載體表面所 116 200416223 得者。 21 接導八膽鹼之得者。 1 .. ^ ^ ^ 何料，係將胺基直 !=Γ 後使含有駿體(藉由甘油填酿氧化裂解反應所得者)之化合物與該胺基進行反應所中 22·如申請專利範圍第該過渡材載體係以表面 20或第21項之過濾材料，其具有羥基之無機材料所構成者 23·如中請專利範圍第22項之過渡材料，纟中，該過濾材載體係硼矽酸玻璃纖維過濾材。 24·如中請專利範圍第22項之過據材料，其中，該過遽材載體隸在酸性電解液中經陽極氧化所得之於過渡材面具有垂直且均一的細孔者。 25. -種過濾材料’其特徵在於，其過濾材載體係以氧化鋁的基體作為鑄模所轉印而製造者。

拾壹、圖式：如次頁 117