TR201807851T1 - Polietilen piperazin türevleriyle hiyalüronidaz konjügatının hazırlanma metodu ve elde edilen konjügatın uygulanması. - Google Patents
Polietilen piperazin türevleriyle hiyalüronidaz konjügatının hazırlanma metodu ve elde edilen konjügatın uygulanması. Download PDFInfo
- Publication number
- TR201807851T1 TR201807851T1 TR2018/07851T TR201807851T TR201807851T1 TR 201807851 T1 TR201807851 T1 TR 201807851T1 TR 2018/07851 T TR2018/07851 T TR 2018/07851T TR 201807851 T TR201807851 T TR 201807851T TR 201807851 T1 TR201807851 T1 TR 201807851T1
- Authority
- TR
- Turkey
- Prior art keywords
- conjugation
- ethylene piperazine
- carried out
- feature
- piperazine
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 111
- 108010003272 Hyaluronate lyase Proteins 0.000 title claims abstract description 37
- 102000001974 Hyaluronidases Human genes 0.000 title claims abstract description 28
- 229960002773 hyaluronidase Drugs 0.000 title claims abstract description 28
- -1 polyethylene piperazine Polymers 0.000 title description 20
- 229940066771 systemic antihistamines piperazine derivative Drugs 0.000 title description 6
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 claims abstract description 65
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims abstract description 52
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 46
- IMNIMPAHZVJRPE-UHFFFAOYSA-N triethylenediamine Chemical compound C1CN2CCN1CC2 IMNIMPAHZVJRPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 39
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 35
- 150000001204 N-oxides Chemical class 0.000 claims abstract description 28
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 claims abstract description 25
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 claims abstract description 21
- 239000002674 ointment Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000000829 suppository Substances 0.000 claims abstract description 9
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 claims abstract description 7
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 239000008278 cosmetic cream Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims abstract description 3
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 39
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 claims description 39
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 38
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims description 38
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims description 38
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 claims description 21
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 claims description 20
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 19
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 18
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 16
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 11
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 11
- 238000006698 hydrazinolysis reaction Methods 0.000 claims description 10
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 9
- 239000008213 purified water Substances 0.000 claims description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 7
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims description 7
- 150000001350 alkyl halides Chemical class 0.000 claims description 6
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 claims description 5
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 5
- 150000005215 alkyl ethers Chemical class 0.000 claims description 4
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 4
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 abstract description 36
- 108010010263 Longidaza Proteins 0.000 abstract description 29
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 abstract description 14
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 abstract description 14
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 14
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 abstract description 14
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 12
- 239000003509 long acting drug Substances 0.000 abstract description 3
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 abstract description 2
- 229940079919 digestives enzyme preparation Drugs 0.000 abstract description 2
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 37
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 32
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 20
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 18
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 15
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 12
- 125000000815 N-oxide group Chemical group 0.000 description 11
- GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N Piperazine Chemical compound C1CNCCN1 GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 10
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 9
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 9
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 8
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 8
- 238000011161 development Methods 0.000 description 7
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 7
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 229920005617 polyoxidonium Polymers 0.000 description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 6
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 5
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 5
- NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N (2s)-2,6-diaminohexanoic acid;(2s)-2-hydroxybutanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ATHHXGZTWNVVOU-UHFFFAOYSA-N N-methylformamide Chemical compound CNC=O ATHHXGZTWNVVOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- OMBRFUXPXNIUCZ-UHFFFAOYSA-N dioxidonitrogen(1+) Chemical compound O=[N+]=O OMBRFUXPXNIUCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- WBJINCZRORDGAQ-UHFFFAOYSA-N ethyl formate Chemical compound CCOC=O WBJINCZRORDGAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N hydrazine monohydrate Substances O.NN IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 3
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 3
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 3
- KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N dihydromaleimide Natural products O=C1CCC(=O)N1 KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 3
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Substances N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 description 2
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 description 2
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000000113 differential scanning calorimetry Methods 0.000 description 2
- 238000001938 differential scanning calorimetry curve Methods 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 description 2
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 2
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 2
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 2
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 2
- 229960002317 succinimide Drugs 0.000 description 2
- 239000013076 target substance Substances 0.000 description 2
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 239000004594 Masterbatch (MB) Substances 0.000 description 1
- 238000006725 Meisenheimer rearrangement reaction Methods 0.000 description 1
- CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N Ozone Chemical compound [O-][O+]=O CBENFWSGALASAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091006006 PEGylated Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 229940096437 Protein S Drugs 0.000 description 1
- 102000029301 Protein S Human genes 0.000 description 1
- 108010066124 Protein S Proteins 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002225 anti-radical effect Effects 0.000 description 1
- 230000002155 anti-virotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000035 biogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 238000010538 cationic polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000004927 clay Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 1
- 238000005868 electrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- UMXYJWSQJORGEM-UHFFFAOYSA-N ethene;piperazine Chemical compound C=C.C1CNCCN1 UMXYJWSQJORGEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 239000010438 granite Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 150000002432 hydroperoxides Chemical class 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000012731 long-acting form Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 1
- 150000004885 piperazines Chemical class 0.000 description 1
- 125000004193 piperazinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 239000006215 rectal suppository Substances 0.000 description 1
- 229940100618 rectal suppository Drugs 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000010008 shearing Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 235000020354 squash Nutrition 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005979 thermal decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/74—Synthetic polymeric materials
- A61K31/785—Polymers containing nitrogen
- A61K31/787—Polymers containing nitrogen containing heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/47—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2), e.g. cellulases, lactases
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/58—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. poly[meth]acrylate, polyacrylamide, polystyrene, polyvinylpyrrolidone, polyvinylalcohol or polystyrene sulfonic acid resin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/02—Suppositories; Bougies; Bases therefor; Ovules
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F26/00—Homopolymers and copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and at least one being terminated by a single or double bond to nitrogen or by a heterocyclic ring containing nitrogen
- C08F26/06—Homopolymers and copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and at least one being terminated by a single or double bond to nitrogen or by a heterocyclic ring containing nitrogen by a heterocyclic ring containing nitrogen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F8/00—Chemical modification by after-treatment
- C08F8/02—Alkylation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
- C08F8/00—Chemical modification by after-treatment
- C08F8/06—Oxidation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2121/00—Preparations for use in therapy
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Macromolecular Compounds Obtained By Forming Nitrogen-Containing Linkages In General (AREA)
Abstract
Mevcut buluş immobilize enzim preparasyonlarının elde edilmesine, özellikle de enzimin bir polimer taşıyıcı ile özellikle aktif konjügatının hazırlanışı ve uygulanması ile ilgilidir. Bahsedilen konjügat Longidaza ilacının özelliklerini taşır ve bağ doku hiperplazisini inhibe eder ve anti-inflamatuvar etki gösterir ve aynı zamanda stabil, aktif ve uzun süre etkili ilaçların bir supozituvar, merhem, enjeksiyon veya kozmetik krem biçiminde üretilmesinde ve veterinerlik ilaçlarının yapımında kullanılabilir. Bu metot hiyalüronidazın karbodiimit veya azit metodu kullanılarak bir suda çözünen kopolimerle konjügasyonundan oluşur. Konjügasyon N-oksit 1,4-etilen piperazin, (N-karboksimetil)-1,4-etilen piperazin veya bunun hidraziti ve aşağıdaki genel formüle göre 1,4-etilen piperazin kopolimerinin kullanımıyla gerçekleştirilmekte olup,burada n ifadesi toplam hücre sayısının %40'ı ila %90'ı arasındadır; m ifadesi toplam hücre sayısının %3'ü ila %40'ı arasındadır; n + m + l = %100'dür.
Description
TARIFNAME
POLIETILEN PIPERAZIN TÜREVLERIYLE HIYALÜRONIDAZ KONJÜGATININ
HAZIRLANMA METODU VE ELDE EDILEN KONJÜGATIN UYGULANMASI
Mevcut bulus immobilize enzim preparasyonlarinin elde
edilmesi için teknolojilerin gelistirilmesi ile ilgilidir.
Stabil, aktif ve güvenli uygulama saglayan uzun etkili ilaç
preparatlari (ilaçlar) üretmek için, endüstrinin çesitli
dallarinda, özellikle ilaç endüstrisinde yaygin olarak
kullanilabilir.
Fizyolojik. bir çözelti içinde protein ya da diger doga
bilesiklerinin en etkili stabilizasyon yöntemi, yüksek
moleküler tasiyicilara dayanan kimyasal konjugasyondan olusur
Duncan R., PEGylated Protein Drugs: Basic Science and Clinical
Applications. Ed.: Birkhausert Basel 2009; Harris J.M, Chess
RB. Effect of pegylation on pharmaceuticals. //Nat Rev Drug
Discov, 2003, 2(3), p.214.
Tibbi proteinlerin bir polimer tasiyici ile kovalent
baglanmasi, protein moleküllerinin manifold konformasyon
stabilitesini ve bunlarin proteaz ve spesifik inhibitörlere
olan direncini artirir ve bu da bunlara dayali olarak
mikromoleküler` biyoaktif uzun etkili ilaçlarin yaratilmasini
mümkün kilar [Nekrasov A.V., Puchkova N.G., Immunology
(Immunologiya), 2006; 27(2), p.l].
Mevcut bilgiye göre, protein ve protein olmayan bilesikler
ile konjugelerin hazirlanmasi için kullanilan çok sayida
polimer tasiyici vardir. En bilinenleri, tibbi preparatlar
olarak kullanilan polietilen glikol (PEG) bazli konjugatlardir
(Conjugaty interferona), Patent RU 2180595. Burg Y, Hilger B.,
Josel H.-P., Patent RU 2232163; Kurochkin S.N., Parkansky
A.A., Patent RU 2298560].
Suda çözünen polimer heterosiklik aminler bilinmekte olup,
örnek olarak N-oksit poli-l,4-etilen piperazin türevleri
verilebilir. Polimer aminler Özellikleri ve konjügasyon için
bir polimer tasiyici olarak uygulanabilirlikleri bakimindan
essizdir. N-oksit 1,4-etilen piperazin ve (N-karboksimetil)-
l,4-etilenpiperazin halojenür (Polioksidonyum) kopolimeri
toksik degildir. Antiradikal ve detoksifikasyon özellikleri
tasir ve N-oksit gruplarindan dolayi biyolojik olarak
parçalanabilirdir. Bu kopolimerin tip uygulamalarinda
kullanimina izin verilir ve bir bagisikligi düzenleyici
adjuvan veya polimer tasiyici olarak kullanilir [Nekrasov
A.V., Puchkova N.G., Ivanova A.S. Derivatives of poly-l,4-
ethylene piperazin having immune-modilating, antivirus,
antibacterial activities. Patent RU 2073031]. Bu, polimer
tasiyicilarin kolay ulasilmasi kolay ve basit üretim
teknolojilerinin, belirtilen tüm gereksinimlere uygunlugunun
ve temelleri üzerine çesitli konjugasyon islemlerinin
gelistirilmesi yönlerini acil ve önemli hale getirmektedir.
bir çözücü ve bir oksitleyici içeren ve normal kosullar
altinda atomik oksijen üretebilen bir sulu çözelti içinde
poli-l,4-etilen piperazinin oksidasyonunu tarif etmektedir.
Tamami suyla elektrolizden kaynaklanan organik ve inorganik
peroksitler ve hidroperoksitlerin, oksijenlenmis haloasitlerin
tuzlarinin, ozon ve oksijenin oksitleyici olarak kullanimi
uygundur.
Asidik bir vehikül olarak, örnegin kuvvetli asetik asit su
çözeltisi kullanilabilir.
Poli-l,4-etilen piperazin (PEP) ile asetik asit (AA) sulu
çözeltisinin. ve hidrojen peroksitin (HP) asagidaki gibi bir
moleküler oranda karistirilmasiyla oksidasyonun
gerçeklestirilmesi makuldür: PEP:AA:HP = l:O.45:O.7.
Oksidasyon islemi, polimerin tamami çözünene kadar heterojen
bir ortamda gerçeklesir. Ardindan, elde edilen N-oksit poli-
l,4-etilen piperazin ortamda bir alkilleyici ajan mevcutken
alkilasyona tabi tutulur. Bu islem sulu ortamda
gerçeklestirilir. Bir polimer zincirinde bir üçüncül nitrojen
atomu ile kovalent olarak baglanan maddelerin bir alkilleyici
ajan olarak, örnegin 30 ila 100 °C arasinda bir sicaklik
araliginda, örnegin haloasitler veya bunlarin siklik veya
asiklik yapidaki eterlerinin kullanilmasi tavsiye edilir.
Alkilleyici madde olarak bromo-asetik asit esterinin
kullanilmasi tercih edilir.
Alkilasyon prosesinde elde edilen N-oksit poli-1,4-etilen
piperazin ve (N-karboksietil)-1,4-etilen piperazin bromür (C-
PNO) kopolimer çözeltisi, örnegin ultrafiltrasyon ile
temizlenmesinin ardindan, yüksek moleküler suda çözünen
biyojenik bilesiklerin, özellikle biyolojik olarak aktif
maddelerin konjügatlari veya komplekslerinin daha fazla
sentezi için kullanilabilir.
yayinlanmistir), eritropoietinin aktivitesine sahip
glikoprotein konjugatini ve üretim yöntemini tarif eder.
Bahsedilen yöntem, polietilen piperazin'in N-okside
oksidasyonunu ve elde edilen kopolimer N-oksit poli-1,4-etilen
piperazin ve (N-karboksimetil) -1,4-etilen piperazin bromür
ile bromo-asetik asit ile alkilasyonunu ve elde edilen
kopolimerin temizlenmesini içerir. Eritropoietin ile kopolimer
konjugasyonu, karbodiimid veya hidrazid yöntemiyle
gerçeklestirilir.
Istemlerde belirtilen bulusa en yakin bulus olan bulus RU
2112542 sayili patent belgesinde tarif edilmektedir
(10.06.1998'de yayinlanmistir). Bu patent, bag dokularinin
patolojik durumunun tedavisi için hiyalüronidaz enziminin
konjugatini içeren ilaca iliskindir. Bu patent, hiyalüronidaz
enziminin yüksek moleküler tasiyici - N-oksit poli-1,4-etilen
piperazin› ve (N-karboksietil)-1,4-eti1en› piperazin› bromür U
ile hiyalüronidaz enziminin bir konjügatinin elde edilmesine
yönelik bir metodu tarif etmekte olup, burada moleküler
) olup, asagidaki genel formüle uygundur:
1 cu conun
burada R hiyalüronidaz enzimi; n = 300-700 birim sayisi, q =
0.2-O.4 alkillesmis birimlerin sayisi; 2 = O.4-0.8
oksijenlesmis birimlerin sayisidir. Bu durumda, sigir seminal
bezlerinden ayrilan hiyalüronidaz, ilaçta enzim olarak
kullanilabilir. Bu metot, bir azit metodu veya aktive edilmis
süksinimid eterlerin bir metodu kullanilarak polioksidonyum
ile hiyalüronidazin konjugasyonundan olusur. Azid metodu
kullanildiginda konjugat iki asamada elde edilir: Ilk asamada
Polioksidonyum hidrazit Polioksidonyumdan elde edilir ve
ikinci asamada konjugat, Polioksidonyum azitin bir enzim ile
kenetlenmesi seklinde bir tepkime yoluylar elde edilir.
Aktiflestirilmis eterler metodu kullanildiginda, ilk olarak
bir Polioksidonyum süksinimit eter elde edilir ve daha sonra
bir enzim ile konjuge edilir. Konjuge ilaç Longidaza olarak
adlandirilmistir. N-oksit poli-l,4-etilen piperazin ve (N-
karboksietil)-l,4-etilen piperazin bromürün kopolimerinin elde
edilmesi için metot, bu patentte tarif edilmemistir.
Ilaç pazarinda Longidaza ilacinin özelliklerine sahip olan
preparatlar için büyük talep bulundugundan dolayi, ekonomik ve
çevresel sartlar, bazi dezavantajlari ortadan kaldirmak ve
üretkenlikte artis saglamak amaciyla üretimde kullanilan
sürecin iyilestirilmesini gerektirmistir.
Yukarida belirtilen tüm patentler, kopolimer yapisindaki
moleküler birimlerin dagilimini veya buna dayali olarak elde
edilen konjugeyi tarif etmez.
Yapilan çalismalar, moleküler birimlerin kopolimer yapida
dagitiminin, üretilen konjügenin özellikleri üzerinde, yani
konjügasyon derecesi, hedef ürün çiktisi ve konjüge edilen
preparasyonlarin stabilitesi üzerinde etkisinin bulundugunu
göstermistir.
Mevcut bulusun amaci, hiyalüronidaz enziminin, N-oksit poli-
l,4-etilen piperazin ve (N-karboksimetil)-l,4-etilen piperazin
bromürün kopolimerini içeren bir polimer tasiyici ile bir
konjügatinin elde edilmesi için bir metodun gelistirilmesini
içermekte olup, ayni zamanda bag doku hiperplazisini
inhibisyon ve anti-inflamatuvar etki özelliklerine sahiptir,
bag dokularin patolojik durumunun gelismis özelliklerle ve
arttirilmis metot verimiyle tedavisine uygundur.
Verilen görev, hiyalüronidaz enziminin, N-oksit l,4-etilen
piperazin ve (N-karboksimetil)-l,4-etilen piperazin halojenür
içeren bir kopolimerle aktif konjügatinin, konjügasyon için
karbodiimit veya azit metodu, temizleme ve spreyle dondurarak
kurutma yoluyla elde edilmesi için bir` metotla çözülebilir.
Konjugasyon, N-oksit l,4-etilen piperazin, (N-karboksimetil)-
l,4-etilen piperazin veya bunun hidrazid türevi ve asagidaki
genel formül I'e göre l,4-etilen piperazinin bir kopolimeri
olan suda çözünebilir kopolimer kullanimiyla
gerçeklestirilmekte olup:
burada n ifadesi toplam birim sayisinin %40'i ila %90'i
arasindadir;
m ifadesi toplam birim sayisinin %3'ü ila %40'1 arasindadir;
n + m + l = %lOO'dür,
ortamda üre mevcutken normal kosullar altinda atomik oksijen
üretebilen bir oksitleyici ajan vasitasiyla oksidasyon adimi
kullanilarak, düsük haloalkan asit veya bunun alkil eteri
vasitasiyla alkilasyon yoluyla ve azit metodunda hidrazinoliz
yoluyla poli-l,4-etilen piperazinden elde edilir.
Üre oksidasyon adiminda, su dahil olmak üzere toplam tepkime
besleme hacmi basina agirlikça %1 ila 10 miktarinda, tercihen
Konjugasyon, sigir seminal bezlerinden alinan hiyalüronidaz
kullanimi ile gerçeklestirilir.
Temizleme, 1 ila 30 kDa arasinda degisen partiküllerin alt
siniri ile yari saydam kaset üzerinde aritilmis su ile
yikanarak gerçeklestirilir.
Kullanilan kopolimer, moleküler yapidaki birimleri
düzensiz durumda olan ve herhangi bir düzen ve kombinasyon
halinde olabilen rastgele bir polimerdir.
Fonksiyonel gruplarin dagilim profili, konjugasyon
tepkimesindeki polimer tasiyici reaktivitesinin yani sira, bu
kopolimere dayali olan kopolimer ve konjugatlarin
stabilitesini de etkiler.
Çesitli yöntemler kullanilarak türetilen ve benzer aktif
gruplarla (N-oksit ve karboksil gruplari) ayni miktara sahip
olan kopolimer konjügasyon tepkimesinde mutlak olarak farkli
reaktivite gösterir. Bunun nedeni, karboksil gruplarinin
sterik sebeplerden dolayi ulasilmasi zor olabilmesi ve/veya N-
oksit gruplari geride kaldigi zaman aktive edilememesidir.
Düsük reaktif karboksil gruplarina sahip bir polimer
tasiyicinin kullanimi, konjugasyon verimi ve kapsaminin önemli
ölçüde azalmasina yol açar, türetilmis konjugatlarin moleküler
agirlik dagilimini kötülestirir. Mevcut bulusa kadar
heterosiklik N-oksit polimer tasiyici gerekli sayida reaktif
gruba (karboksil veya hidrazid olanlar) sahip olmamis olup; bu
durum, karbodiimid veya hidrazid konjügasyön metodu
kullanilarak enzimli hiyalüronidaz ile yüksek derecede
konjugasyonun güvenilir* bir sekilde elde edilmesinir imkansiz
kilmistir. Mevcut bulusta istemlerde belirtilen üretim
yöntemleri, toptan bir ölçekte bile %90'dan az olmayan düzeyde
bir konjugasyon derecesine sahip olan hiyalüronidaz
preparasyonlarinin elde edilmesini saglar.
Sadece N-oksit gruplarini içeren kopolimer molekülünün
büyük bölümlerinin bulunmasi polimer molekülünü kirilgan
(duyarli) hale getirir. Stabilite çalismasi, bu tür polimer
moleküllerine dayanan konjugatlarin zamanla bozulmaya
ugradigini göstermistir. N-oksit gruplarinin düzensiz dagilimi
olan bir polimer tasiyicinin bozulma hizi sabit degildir ve
bozulma depolamanin ilk aylari sirasinda oldukça hizli bir
sekilde gerçeklesir. Bunun tersine, N-oksit gruplarinin
homojen dagilimi olan polimer tasiyici Çok daha kararlidir,
bozunma orani daha az ve sabittir. Polimer tasiyici içindeki
N-oksit gruplarinin dagiliminin konjügat stabilitesi ve
homojenligi ayni zamanda konjügasyon için kopolimer üretimi
metodunun kosullarina da baglidir (bkz. Tablo 1 ve Tablo 2).
Hiyalüronidaz konjügelerinin üretimi için metotla ilgili
olarak istemlerde belirtilen bulus, önceden belirlenen nicel
verilere sahip olmanin yani sira (bir polimer içindeki çesitli
birimlerin miktari) birimlerin gereken dagilimina da sahip
olan ve bu sayede hem polimer tasiyicinin özelliklerinin hem
de bunun bazi üzerinde bir enzimle bir konjügesinin
özelliklerinin nitel olarak degistirildigi sekilde üretimi
Mevcut bulus, eszamanli olarak bag doku hiperplazisini
inhibe etme ve anti-inflamatuvar etki gösterme özelliklerine
sahip olan ve hiyalüronidaz (sigir seminal bezlerinden alinan
bir terapötik enzinû ve genel formül I'e göre suda çözünen
kopolimerin bir konjügatini temsil eden güvenli, yüksek
verimlilikli ve stabil tibbi preparasyon (ilaç) üretilmesini
mümkün kilar.
Azid konjügasyon yönteminde halojenik asidin alkil eteri
kullanilarak alkilasyon gerçeklestirilir ve alkilasyon adimi
ve hidrazinoliz birlestirilir. Hiyalüronidaz ile konjügasyon,
0 ila 25 °C arasinda degisen sicakliklarda azit metodu ile
gerçeklestirilir.
Temizleme, oksidasyon, alkilasyon ve hidrazinoliz ve ayni
zamanda konjügasyon adimlarinin tamamlanmasinin ardindan, yari
saydam kaset üzerinde aritilmis su ile üç katli adim› adim
yikama ile (1 ila 30 kDa arasinda degisen partiküllerin alt
siniri ile) gerçeklestirilir.
Konjügasyon, zincirinde %3 jjji 20 oraninda hidrazit gruplari
içeren Genel Formül I'in suda çözünen kopolimeri kullanilarak
gerçeklestirilir.
Karbodiimid konjügasyon metodunda, poli-l,4-etilen
piperazin. ilk olarak alkile edilir* ve ardindan sulu ortamda
oksidasyona tabi tutulur. Bu islemde alkilasyon, haloalkan
asit kullanilarak gerçeklestirilir.
Karbodiimid metodunda temizleme, kopolimer elde etme ve
konjügasyon asamalarini tamamladiktan sonra yari saydam
kasetler üzerinde saflastirilmis suyla (1 ila 30 kDa arasinda
degisen parçaciklarin alt siniri ile) yikanarak kademeli
olarak yapilir.
Konjügasyon, zincirinde %25'e kadar karboksil gruplari içeren
genel formül I'in N-oksit poli-l,4-etilen piperazininin suda
çözünen kopolimeri kullanilarak gerçeklestirilir ve tepkimede
rol oynayan kopolimerden %3 ila 50 oraninda bir miktarda
herhangi bir suda çözünen karbodiimit kullanimi saglanir.
Mevcut bulusun konusu ayrica bag doku hiperplazisini inhibe
edici ve anti-inflamatuvar etki özellikleri tasiyan ve
istemlerde belirtilen netotlardan herhangi biri ile üretilen
bir aktif konjügat içerik maddesi olup, bir supozituvar,
merhem, enjeksiyon veya kozmetik krem, örnegin veterinerlik
için ilaçlar arasindan seçilen bir uygulama biçimine sahip bir
ilaç ajaninin hazirlanisi içindir.
Asagida, 10 Örnekte ayrintili olarak tarif edilen. ve Tablo
l'de sunulan belirli özelliklere sahip olan Longidaza'nin
üretim konjügasyonunun azid ve karbodiimid metotlarinin
kullanimi ile istemlerde belirtilen metodun ayrintili
açiklamasi verilmistir.
Polimer tasiyicinin ve hiyalüronidaz konjugatlari
üretiminin istemlerde belirtilen teknolojisinin kosullari
altinda, bulundugu üzere, kopolimer yapisinda fonksiyonel
birimlerin arzu edilen dagilimi meydana gelmekte olup; burada,
polimer tasiyici ve bunun bazi üzerindeki konjugatlari uzun
süreli depolama sürecinde dirençli hale gelir. Bahsedilen
sonuç, polietilen piperazin oksidasyonunun, ayristirma
kosullari altinda, üre ekleyerek reaksiyonunun
gerçeklestirilmesiyle elde edilir. Bu durumda, polietilen
piperazinin kovalent olmayan moleküller arasi baglari imha
olur, tepkimeler bir miselin bilesimi içindeki moleküller
yerine ayri polimer molekülleri içerir, fonksiyonel gruplarin
polimer zinciri boyunca istenen homojen dagilimi saglanir,
enzim aktivitesi artar (%30 ila 65 oraninda, bkz. Tablo 1),
konjügasyon derecesi ve hedef ürün verimi artar (%15 ila 20
oraninda) ve hiyalüronidaz konjügatin stabilitesi artar. 1 yil
içinde 2 ila 8 °C sicaklikta saklanan Longidaza
preparatlarinin enzim aktivitesi üre kullanimiyla elde edilen
örnekler için %4 ila 6, üre kullanilmadan %24 ila %27 oraninda
azalmistir (Tablo 1, Örnek 4 ve Örnek 9).
Konjügat asagidaki iki yöntemle üretilir:
azid konjügasyon yöntemi kullanarak hiyalüronidaz konjügat
üretim yöntemi; ve
karbodiimit konjügasyon yöntemi kullanarak hiyalüronidaz
konjügat üretim yöntemi.
Tüm üretim yöntemleri için bir besleme stogu olarak 20 ila 60
kDa moleküler agirlikli poli-l,4-etilen piperazin (PEP)
kullanilmistir.
PEP, önceden belirlenmis molekül agirligina ve yapisina sahip
olan, monodispers yüksek moleküllü bilesiklerin etkili bir
sentez metodu olan katyonik polimerizasyondan kaynaklanir.
l. Azit konjügasyon metodu kullanilarak konjügatin üretim
metodu.
Bu üretim metodu, sürecin temel asamalarindan, yani üre,
alkilasyon, hidrazinoliz varliginda oksidasyon, azid metodu
kullanilarak konjugasyonun yürütülmesinden olusur,
Poli-l,4-etilen piperazinin oksidasyonu, su ile kaplanmis
bir reaksiyon kabinda 12 ila 24 saat boyunca 45 ila 55 °C'lik
bir sicaklikta üre varliginda hidrojen peroksit vasitasiyla
asidik bir ortamda gerçeklestirilir. Daha sonra, reaksiyon
beslemesi seyreltilir, 0.45 nm'lik bir gözenek boyutuna sahip
olan bir filtreleme elemani ile donatilmis bir kartus
filtresinde filtrelenir, 5 kDa'lik bir parçacik kesme alt
sinirina sahip olan kasetlere sahip bir ultrafiltrasyon
ünitesinde diafiltrasyondan geçirilir ve 0.22 nm gözenek
büyüklügüne sahip olan bir filtre elemani ile donatilmis bir
kartus filtresi içinden filtrelenir. Daha sonra, ortaya çikan
ürün kurutulur ve düzenleyici belge gerekliliklerine uygunluk
açisindan test edilir ve depolama için teslim edilir.
Ikinci adimda, N-oksit poli-l,4-etilen piperazin,
haloalkan asidin eteri vasitasiyla bir su-organik çözelti (su
ve N-metil formamit karisimi) içinde, 35 ila 50 °C'lik. bir
sicaklik araliginda 4 ila 6 saatlik karistirma ile
alkilasyondan geçirilir ve ardindan polietilen piperazinin
alkil türevinin hidrazinolizi, 2 ila 8 °C sicakliklarda
hidrazin hidrat kullanilarak isleme yoluyla gerçeklestirilir.
Tepkime beslemesi, 0.45 nm'lik bir gözenek boyutuna sahip olan
bir filtreleme elemani ile donatilmis bir kartus filtresinde
filtreden geçirilir, daha sonra, 10 kDa'lik parçaciklarin
kesim sinirini asan kasetlere sahip bir ultrafiltrasyon
ünitesinde temizlemeye maruz birakilir (hidrazin hidratin
yüzdesi %0.00l'i asmaz), daha sonra besleme, bir kartus
filtresinde filtrelemeye tabi tutulur ve cam siselerde yeniden
yapilandirilir. Son olarak, düzenleyici belgenin
gerekliliklerine uygunluk açisindan test edilir ve depolama
için gönderilir.
Üçüncü ve sonuncu adimda, hiyalüronidazin, zincirinde
oksit polietilen piperazinin hidrazit bilesigi ile konjügasyon
prosesi azit metodu kullanilarak, pH = 0-l'de sodyuni nitrit
ile isleme tabi tutularak ve ardindan azit türevinin
hiyalüronidaz ile iç ortam sicakliginda 18 ila 22 saat boyunca
konjügasyonu yoluyla gerçeklestirilir. Hiyalüronidaz konjügati
filtrelenir, bir ultrafiltrasyon ünitesinde (5 kDa'lik
parçaciklarin alt siniri olan kasetler) filtre ile sterilize
edilir ve spreyle dondurularak kurutulur (liyofilize edilir).
Sonuçlar Tablo 1'de gösterilmistir (Örnek 1-3).
Istemlerde belirtilen, alkilasyon, oksidasyon (üre
eklenmeden), hidrazinoliz, azit metodu ile konjügasyon ve
temizleme adimlarini içeren üretim metodu kullanilarak bir
Longidaza numunesi elde edilir. Bu numune testinin sonuçlari
Tablo 1'de sunulmaktadir (Örnek 4). Karsilastirmali çalismalar
üre ilavesinin enziHi aktivitesini, konjügasyon derecesini ve
hedef 'ürünün 'verimini ve konjugat stabilitesini arttirdigini
göstermektedir (Tablo 1).
Elde edilen dondurularak kurutulmus (liyofilize edilmis)
ürün, cam siselerde yeniden olusturulmakta ve
Longidaza®'ninkine benzer bir aktiviteye sahip olan bir aktif
konjugat bileseni halinde depolanmak üzere gönderilmektedir.
Ayrica, elde edilen aktif farmasötik bilesen, sivi veya
dondurularak kurutulmus enjekte edilebilir dozaj formunun
üretimi için kullanilir. Bu baglamda, çözelti, 1 ml çözelti
içinde enzim aktivitesinin olmasini
saglamak için seyreltilir ve tamamlanmis dozaj formu için
düzenleyici belgenin gerekliliklerine uygunluk açisindan tüm
parametrelerde test edilir. Bundan sonra çözelti dondurularak
kurutulabilir (liyofilize tibbi preparat) veya kurutulmadan,
sivi tibbi preparasyon paketlenir, etiketlenir ve bitmis dozaj
formu için düzenleyici belgede belirtilen sartlara uygunluk
için tüm parametrelerde test edilir.
Mevcut bulusun istemlerinde belirtilen karbodiimit metodu
organik çözücüler ve zararli maddeler kullanilmadan proses
performansini mümkün kilar ve son ürünün, yani polietilen
piperazin türevleriyle hiyalüronidaz konjügatinin elde
edilmesini, gelistirmeyi ve stabiliteyi mümkün kilar.
2. Karbodiimit konjügasyon metodu kullanilarak Longidaza
üretim metodu.
Sirali üretim prosesi, alkilasyon, üre varliginda
oksidasyon, karbodiimid metodu kullanilarak konjugasyonun
gerçeklestirilmesi gibi temel adimlardan olusur.
Önceden belirlenmis özelliklere sahip bir poli-1,4-etilen
piperazin kullanilmakta olup (bkz. yukarida), sulu ortamda
bromo-asetik asit ile 40 ila 95 °C arasinda bir sicaklikta
alkillenir ve agirlik orani sirasiyla (85: 15) - (70: 30)
seklindedir. Besleme, 3 saat boyunca 50 ila 70 °C'lik bir
sicaklikta karistirilir, daha sonra tepkime kütlesine üre,
asetik asit ve azot peroksit eklenir ve ardindan elde edilen
karisim, 18 ila 22 saat boyunca sürekli olarak karistirilir.
Daha sonra, oksidasyon isleminin tamamlanmasi amonyak testi
(Örnek 1'e benzer sekilde) yardimiyla kontrol edilir. Tepkime
kütlesi, 0.45 nm'lik bir gözenek boyutuna sahip olan bir
filtreleme elemani ile donatilmis bir kartus filtresinde
filtrelenir. Polimer, 5 kDa'lik parçaciklarin alt siniri olan
bir ultrafiltrasyon ünitesinde %0.001'den daha az olmayan bir
nitrojen peroksit içerigine kadar (nitrojen peroksit içerik
testi) yikayarak temizlenir. Çözelti %10-15'e konsantre
edilir, polimerdeki karboksil gruplarinin içerigi %6'dan az
olmamalidir. Hiyalüronidazin hesaplanan miktari reaksiyon
ortamina sokulurken karistirilir` ve ortani pH'i 4.8 degerine
getirilir.
Karistirmaya devam edilirken, suda çözünen karbodiimit
eklenir ve bu sirada suda çözünen karbodiimit içeriginin,
eklenen hiyalüronidazin %25 ila 50'si kadar olmasi saglanir
(protein olarak ifade edilir). Tepkime beslemesi, 1 ila 1.5
saat boyunca 0 ila 25 °C arasinda bir sicaklikta tutulur ve
daha sonra, konjügasyon derecesinin %95'ten daha az olmamasi
için kontrol edilir. Olumlu bir sonuç durumunda, tepkime
beslemesi saflastirilmis su ile yikanir, pH = 6.8 ila 7.0
arasinda alkali hale getirilir ve AP-l5 derin yatakli filtre
ile donatilmis disk filtrede filtrelenir. Ön filtrelemeden
sonra, toplam su miktarinin 1 kg kuru madde basina en az 200
litre olmasini saglamak için bir Pellicon kasetindeki
aritilmis su ile yikanarak tepkime beslemesinin temizligine
devam edilir. Daha sonra, Longidaza® aktivitesine sahip olan
çözelti bileseni konsantre edilir, 0.22 nm'lik bir gözenek
büyüklügüne sahip olan ve bir sivi içerik maddesi halinde cam
siselerde yeniden olusturulmus bir filtre membrani ile
donatilmis bir kartus filtresinde steril olarak filtreden
geçirilir. Elde edilen steril masterbatch, bu durumda, kuru
halde Longidaza® preparasyonuna benzer aktiviteye sahip olan
bir bilesen elde edilerek dondurularak kurutulmus steril
olabilir. Daha sonra, düzenleyici belgenin gerekliliklerine
uygunluk kontrol edilir ve son ürün olarak depolama için
gönderilir. Içerik maddeleri test sonuçlari Tablo 1'de
gösterilmistir (Örnek 6 ila 8).
Istemlerde belirtilen, alkilasyon, oksidasyon (üre
eklenmeden), karbodiimit metoduyla konjügasyon ve temizleme
prosedürü adimlarini içeren üretim metodu kullanilarak
Longidaza numunesi elde edilmis olup, bunun test sonuçlari
Tablo 1'de sunulmustur (Örnek 9). Longidaza üretimi
durumundaki ile ayni sekilde, azit konjügasyon metodu
kullanilarak, üre eklenmesi enzim aktivitesini, konjügasyon
derecesinir ve hedef' ürün verimini ve konjügat stabilitesini
Hyaluronidaz konjugatin steril çözeltisi, hedeflenen amaç
için kullanilir. Elde edilen aktif farmasötik bilesen sivi
veya dondurularak kurutulmus enjekte edilebilir dozaj
formlarinin hazirlanisi için kullanilir. Bu dikkate alinarak,
bu çözelti seyreltilerek 1 ml çözelti içinde enzim
aktivitesinin olmasi saglanir ve cam
siselerde yeniden yapilandirilir ve dondurularak kurutulabilir
(liyofilize tibbi preparat) veya kurutulmadan, sivi tibbi
preparasyon paketlenir, etiketlenir ve bitmis dozaj formu için
düzenleyici belgede belirtilen sartlara uygunluk için tüm
parametrelerde test edilir.
Hiyalüronidazin polietilen piperazin türevleriyle
konjügasyonu prosesinde, proses safsizliklarini gidermek üzere
l ila 30 kDa parçacikli kasetler üzerinde ultrafiltrasyon
temizleme yapilmistir. Yikama islemi, alkilasyon ve oksidasyon
adimlarinin tamamlanmasiyla birlikte ve üretim sürecinin
sonunda yapilir. istemlerde belirtilen karbodiimit konjügasyon
metodu yalnizca sulu ortamda gerçeklestirilir.
Bu nedenle, istemlerde belirtilen metodun özü, azit ve
karbodiimid metotlarina göre suda çözünür PEP türevleri
formunda yeni bir sinifin bir polimer tasiyicisi üzerinde
immobilize edilmis bilesiklerin üretim teknolojisinde yeni bir
yaklasimdan olusur. Kopolimer, konjügasyon sürecinde,
hiyalüronidaz aktivitesini, konjügasyon derecesini, Longidaza
aktivitesine sahip preparasyon verimini ve depolamadaki
stabilitesini önemli ölçüde arttiran üre varliginda PEP'den
kimyasal modifikasyon ile elde edilir.
Hiyalüronidaz konjugatinin polietilen piperazin türevleri ile
üretim sonuçlarinin analizi Tablo 1'de sunulmus olup (Örnek 1
ila 10), hedef ürünün veriminin yüksek oldugunu gösterir. Bu
durumda, karbodiimid yönteminin kullanimi ile islem, daha
yüksek bir konjugasyon ve son ürün aktivitesi saglar ve islem,
sadece sulu ortamda gerçeklestirilir.
Polietilen piperazin türevleri ile hiyalüronidaz
konjügatlarinin üretimine yönelik olarak gelistirilmis
metotlarin özgün adimi, bu is profilinde sürekli/kesintisiz
proseslerin olmayisiyla ve N-oksit polietilen piperazin
üretiminin üre kullanilarak gerçeklestirilmesiyle
dogrulanmistir. Endüstriyel ortamda karbodiimid metodu azid
metodundan daha çok tercih edilir. Çesitli uygulamalarin
bilesiklerinin uzun süre etkili biçimlerinin üretimine yönelik
olarak gelistirilen metotlarin uygulanmasi Longidaza®
preparasyonunun aktivitesinden daha yüksek aktiviteye sahip
olan bir yeni preparasyonun üretimini gelistirir.
N-oksit 1,4-etilen piperazin, (N-karboksimetil)-1,4-
etilen piperazin ve 1,4-etilen piperazin kopolimerlerini
ayristirma çalismalari, pH degeri 9'u geçmeyen sulu ortamda 70
°C'nin üzerinde olmayan bir sicaklikta ayristirmanin yalnizca
N-oksit birimleri üzerinde gerçeklestigini göstermistir. N-
oksitlerin termal ayrismasi Meisenheimer yeniden düzenlemesi
vasitasiyla devam eder.
/ I 2 /N C H2R /N OCH2R / +
Çesitli birimlerin homojen dagilimina sahip olan
kopolimer, tek bir tipten olusan büyük parçalara sahip
olmamalidir. Böylece, N-oksit birimleri içeriginin %50 ve daha
fazla olmasi ve polimer zinciri boyunca bunlarin homojen
sekilde dagitilmasiyla, kopolimer yalnizca 1,4-etilen
piperazinin (birim I) ornatilmamis birimlerinden olusan büyük
porsiyonlara sahip olmamalidir. Bunun isiginda, kopolimer
zinciri boyunca N-oksit gruplarini içeren birimlerin
dagiliminin homojenliginin niteliksel ve nicel olarak
degerlendirilmesi için bir* metot gelistirilmistiru Bu Inetot,
kopolimer kontrollü ayristirma ve ardindan elde edilen
fragmanlarin fizikokimyasal olarak analizinden olusur.
Oksidasyon prosesinde üre kullanimiyla birlikte, ayristirma
ürünlerinin tek tip birimler içeren düsük moleküler› polimer
içermedigi bulunmustur:
burada 1 = 3 ve üzeridir.
Bu maddenin kopolimer ayrisim ürünlerindeki mevcudiyeti,
baslangiç kopolimerindeki N-oksit birimlerinin dagiliminin
önemli ölçüde homojen olmadiginin göstergesidir.
111114 serisinin kopolimerini bozunma metodunu kullanarak
analiz ederken, asagidaki madde ekstrakte edilmistir:
burada 1 = 4 ila 6'dir.
Bu maddenin bilesiminin nicel ve nitel analizinin
tamamlanmasi üzerine, incelenen kopolimerdeki N-oksit
gruplarinin nitel ve nicel profili üzerinde yargiya
varilabilir. Bununla birlikte, gelistirilen ölçüm. prosedürü
zaman alicidir (bir kopolimerin N-oksit gruplarinin
bozunmasinin izlenmesi 5 hafta sürer) ve maddenin büyük
miktarinin incelenmesi gerekir. Bu durum göz önünde
bulundurularak, birimlerin dagilim homojenliginin hizli bir
sekilde degerlendirilmesi için nitel bir metot tasarlanmistir.
DSC (Diferansiyel taramali kalorimetre) yöntemini
kullanarak çesitli kopolimer numunelerinin analiziyle, bu tip
polimerlerin, isiyla serbest birakma ile yaklasik 160 °C'lik
bir sicaklikta kuvvetli sekilde bozuldugu gösterilmistir. Bu
sayede üre ile birlikte veya üre olmadan üretilen numunelerin
ayrismasinin çesitli pik okzoterm. biçimleri eklenmistir. Bu
nedenle, benzer nicel parametrelere sahip olan, yani benzer
moleküler agirlik, moleküler agirlik dagilimi, oksidasyon
adiminda üre kullanilarak ve üre eklenmeden üretilen karboksil
ve N-oksit gruplari sayisi parametrelerine sahip olan iki
numune incelenmistir. Bu durumda, bir polimer tasiyici
üzerinde elde edilen konjügatlar stabil olmus ve baska bir
tasiyici üzerinde elde edilenler stabil olmamistir.
Polimerlerin DSC egrileri Sekil 1 ve 2'de gösterilmektedir.
DSC egrileri (Sekil 1 ve 2) 150 ila 170 °C'lik bir sicaklik
araligi dahilinde pik yogunluklarin oraninda önemli fark
göstermektedir. Elde edilen sonuçlar polimer yapisi (birim
dagilim profili) ve bunun termal stabilitesi arasindaki
iliskiyi gösterir. Elde edilen sonuçlar diger tasiyicilarin
analiziyle dogrulanmistir ve bunlar, polimer tasiyicilarin
numunelerinin, bir polimer tasiyicinin moleküllerinin
fonksiyonel gruplarinin düzenlenmesinden kaynakli olarak
farkli stabilitelerinden dolayi ayristirilabilme olasiligini
gösterir.
Asagida Tablo 1'de biriken ve Örnek 1-3 ve 6-8'de
sunulan özel parametreler verilmistir. Tablo 1 ayrica toptan
ölçekli serilerin sonuçlarini da sunmaktadir (Örnek 5 ve Örnek
). Örnek 4 ve 9, üre varliginda üretini yönteminin
avantajlarini dogrulayan verileri içerir.
Azit konjügasyon metodu kullanilarak, polietilen piperazin
türevleriyle hiyalüronidaz konjügatinin üretim metodu.
50 kDa moleküler agirlikli 200 gram poli-l,4-etilen piperazin
parçaciklari önceden dogranmis ve saf su ile dört kez
yikanarak temizlenmistir. Parçaciklar 50 ml asetik asit, 140
ml su içinde %30 hidrojen peroksit çözeltisi karisimi içinde,
ortamda 50 gram üre mevcutken oksitlenmistir. Su, PEP
içeriginin agirlikça %15 olacagi sekilde, yani reaksiyon
ortaminin hacmi 1.5 litre olacak sekilde eklenir. Tepkime
beslemesi 50 °C'ye kadar isitilmis, sürekli olarak
karistirilmis ve 24 saat boyunca saklanmistir. Oksidasyonun
tamamlanmasi, amonyak testi yardimiyla kontrol edilmistir. Bu
test asagidakilerden olusur: 1 ml tepkime beslemesine 10 ml
tutulduktan sonra çözeltide bulaniklik olmamasi halinde
pozitif bir sonuç olarak ele alinir. Pozitif sonuç olmasi
durumunda, tepkime beslemesi seyreltilir, 0.45 nm gözenek
boyutu olan bir filtreleme elemaniyla donatilmis olan bir
kartus filtre içinden filtrelenir, temizlenir ve alt parçacik
kesme limiti 5 kDa olan kasetleri bulunan bir ultrafiltrasyon
biriminde konsantre edilir ve 0.22 nm gözenek boyutu olan bir
filtreleme elemaniyla donatilmis olan bir kartus filtre içinde
filtrelenir. Daha sonra, dondurularak kurutulur ve 204 gram N-
oksit poli-1,4-etilen piperazin liyofilizat biçiminde elde
edilir ve bu da düzenleyici belgenin gerekliliklerine uygunluk
kontrol edilir ve depolama için gönderilir.
Elde edilen N-oksit poli-l,4-etilen piperazin 1,500 ml
damitilmis su içinde çözündürülür ve 6,000 ml N-metil formamit
eklenir. Elde edilen çözeltiye 275 ml bromoalkan eter eklenir
ve sürekli olarak karistirilarak 35-50 °C'lik sicakliklarda 4
ila 6 saat boyunca kalmasi saglanir. Ardindan tepkime kütlesi
2-8 °C'ye sogutulur, karistirilir, 250 ml hidrazin hidrat
eklenir. Tepkime beslemesi saflastirilmis su ile 10 kez
seyreltilir, 0.45 nm gözenek boyutlu. bir filtreleme elemani
olan bir kartus filtre içinden filtrelenir ve Pellicon
kasetler (parçacik kesme alt limiti lO kDa) üzerinde yikanarak
temizlenir ve eser miktarda hidrazin hidrat içerigi kalir
(%0.00l'den az). Ayrica, tepkime beslemesi %lO-lZ'ye konsantre
edilir (hedef maddeye göre), steril filtrelenir ve cam
Viyaller içinde yeniden yapilandirilir. 2,200 ml N-oksit poli-
l,4-etilen piperazin hidrazit türevi çözeltisi elde edilir ve
bu da düzenleyici belgenin gerekliliklerine uyum bakimindan
incelenir ve saklama için gönderilir.
Önceki asamada elde edilen çözelti 2 ila 6 °C'ye sogutulur
ve karistirilip sogutulduktan sonra hidroklorik asit eklenerek
pH = O-l'e getirilir. Daha sonra karistirmaya ve sogutmaya
devam edilerek, 360 gram sodyum nitrit ile parti halinde
eklenir ve tepkime kütlesi 1.5 saat beklemeye birakilir.
Bundan sonra, tepkime ortami nem içermeyen kül ile pH = 6.8 -
7'ye getirilir ve 10 °C'yi asmayan bir sicaklikta, %lO'luk
çözelti karistirilirken, 65 gram hiyalüronidaz preparasyonu
(proteinin %70'i) eklenir. Tepkime beslemesi 1.5 saat
karistirilmaya devam edilir ve daha sonra konjugasyon
derecesini kontrol etmek için bir numune alinir. Konjügasyon
derecesi kontrolünde pozitif bir sonuç alinmasi durumunda
(%70'ten fazla), tepkime kütlesi bir derin yatak filtreli bir
disk filtre içinde filtrelenir ve 5 kDa'lik bir alt parçacik
kesme limitine sahip kasetleri olan bir ultrafiltrasyon
biriminde 50 litre saf su içinde yikanir. Çözelti konsantre
edilir, steril filtrelenir ve steril cam viyallerin içine
doldurulur (sivi içerik maddesi). Steril çözelti ayrica
dondurularak kurutulur ve steril cam viyallerin içinde
paketlenir (dondurularak kurutulmus içerik maddesi). 231 gram
içerik maddesi %86 verimle elde edilir. Elde edilen konjugat
bileseninin test sonuçlari Tablo l'de sunulmustur (Örnek 1).
Elde edilen içerik maddesi, bilinen "3,000 IU vajinal ve
rektal supozituvar biçiminde Longidaza preparasyonu" ile özdes
bir aktivite türüne sahip olan bir nihai tibbi ürünün
hazirlanisinda kullanilir.
Prosedür, Örnek l'dekine benzer olmakla birlikte, bundan
farkli olarak 40 kDa'lik bir moleküler agirliga sahip olan 200
g miktarinda dogranmis ve saflastirilmis PEP kullanilir ve
oksidasyon adiminda 60 gram üre kullanilir. 227 gram içerik
maddesi, liyofilizat biçimindeki bilinen Longidaza
preparasyonunun aktivitesiyle özdes aktivite türüyle %84
verimle elde edilmistir. Analiz sonuçlari Tablo 1, Örnek 2'de
sunulmustur.
Elde edilen içerik maddesi harici kullanim için 1000 IU krem
ve merhemlerin hazirlanisinda kullanilmistir.
Prosedür, Örnek l'dekine benzer olmakla birlikte, bundan
farkli olarak 55 kDa'lik bir moleküler agirliga sahip olan 200
g miktarinda dogranmis ve saflastirilmis PEP kullanilir ve
oksidasyon adiminda. 80 grani üre kullanilir. 235 gram. içerik
maddesi, liyofilizat biçimindeki bilinen Longidaza
preparasyonunun aktivitesiyle özdes aktivite türüyle %87
verimle elde edilmistir. Analiz sonuçlari Tablo 1, Örnek 3'te
sunulmustur.
Bu içerik maddesi enjekte edilebilir dozaj biçiminin
hazirlanisinda kullanilir.
Prosedür Örnek l'inkine benzer olup, bundan farkli olarak
oksidasyon adiminda üre eklenmez. 215 grami bulan elde edilen
içerik maddesinin liyofilizat biçiminde Longidaza® aktivitesi
olup, %74 verime sahiptir. Longidaza® testinin sonuçlari Tablo
1, Örnek 4'te verilmistir.
Bilinen ilaç "Longidaza"nin aktivitesiyle özdes aktiviteye
sahip olan içerik maddesi enjekte edilebilir dozaj biçiminin
hazirlanisinda kullanilir.
Prosedür, Örnek 1'dekine benzer olmakla birlikte, bundan
farkli olarak. 45 kDa'lik bir inoleküler agirliga sahip olan
4.000 g miktarinda dogranmis ve saflastirilmis PEP kullanilir
ve oksidasyon adiminda 2.000 gram üre kullanilir. 4.700 gram
içerik maddesi, liyofilizat biçimindeki bilinen Longidaza®
preparasyonunun aktivitesiyle özdes aktivite türüyle %87
verimle elde edilmistir. Test sonuçlari Tablo 1'de (Örnek 5)
sunulmustur.
Üretilen içerik maddesinin gerekli miktarinin supozituvar,
merhem veya krem bazli olarak tamamlanmasiyla birlikte aktif
bileseni içeren supozituvarlar, kremler ve merhemler elde
edilmistir. Bu, ayrica enjekte edilebilir dozaj biçiminin
hazirlanisinda da kullanilmistir.
Karbodiimit konjügasyon metodu kullanilan metot.
kDa Hmleküler kütleli 200 gram Hdktarinda poli-1,4-etilen
piperazin, 58 gram bromo-asetik asit içeren 1.2 litre kaynayan
su çözeltisine eklenmis ve 70 °C sicaklikta. 3 saat boyunca
isitilmaya devam edilmis ve bu sirada bahsedilen çözelti
sürekli olarak karistirilmistir. Daha sonra, tepkime kütlesine
40 ml asetik asit, 140 ml %30 su-azot peroksit çözeltisi, 50
gram üre eklenmis ve bunlarin tamami 38-42 °C sicaklikta 18
ila 20 saat boyunca karistirilmistir. Ayrica, oksidasyon
durumunun tamamlanmasi amonyak testi yardimiyla kontrol
edilmistir› (bu test yukarida. tarif edilmistir). Pozitif bir
sonuç alinmasi durumunda, tepkime beslemesi %1 ila 2
konsantrasyona seyreltilmis ve 0.45 nm gözenek boyutuna sahip
olan bir filtreleme elemaniyla donatilmis olan bir kartus
filtre içinde filtrelenmis, 5 kDa'ya esit bir alt parçacik
kesme limitine sahip olan bir Pellicon kaset üzerinde
saflastirilmis su ile yikanmistir. Yikama› isleminde, çözelti
düsük moleküler agirlikli organik asitlerin eser miktarinin
uzaklastirilmasi amaciyla tam temizleme için pH = 11,0 - ll.5
degerine getirilmistir. Çözelti temizlemesi azot peroksit
içerigi %0.00l'in altina düsene kadar (azot. peroksit testi)
devam ettirilmis ve çözelti hedef maddenin %lû'una kadar
konsantre edilmistir. Elde edilen çözelti hidroklorik asitle
pH = 4.8-4.9'a asitlestirilmis ve ardindan 50 gram
hiyalüronidaz eklenmistir. pH degeri ayarlamaya tabi tutulmus
olup; 4.8 ila 4.9'a getirilmesi gerekir. Tepkime beslemesi
karistirilarak, 210 ml su içinde 2.1 gram N-(3-
dimetilaminopropil)-N'-etil karbodiimit hidroklorür içeren bir
çözelti 1.5 ila 2 saat boyunca eklenmistir. Konjügasyon
tepkimesi 2 ila 25 °C sicaklikta gerçeklestirilmistir.
Yogunlastirici ajan çözeltisinin son kisminin eklenmesinin
ardindan, tepkime kütlesi beklemeye birakilmis, önceden
ayarlanmis bir sicaklikta 30 dakika boyunca karistirilmis ve
konjügasyon derecesini belirlemek üzere bir numune alinmistir.
Pozitif bir sonuç alinmasi durumunda, konjügasyon derecesi en
az %90 olmalidir, tepkime kütlesi 18 ila 20 saat boyunca
beklemeye birakilir, nemsiz kül ile pH = 6.8 ila 7.0 degerine
getirilerek alkalin hale getirilir, yikanir ve AP-15 tipi bir
derin yatakli filtre biçimindeki bir filtreleme malzemesi ile
bir disk filtre içinde filtrelenir. Daha sonra tepkime kütlesi
bir ultrafiltrasyon biriminde, 5 kDa'ya esdeger bir parçacik
kesme alt limiti olan bir Pellicon kaseti üzerinde
saflastirilmis su ile temizlenir. Temizlenen çözelti %8 ila
lO'luk bir içerige konsantre edilir ve 0.22 nm'lik bir gözenek
boyu olan bir filtreleme elemaniyla donatilmis olan bir kartus
filtre içinde filtrelenir. Elde edilen polietilen piperazin
türevleriyle hiyalüronidaz konjügat çözeltisi, bir mililitre
çözeltide 3,000 IU enzim aktivitesi içeren bir konsantrasyona
seyreltilebilir ve son olarak enjekte edilebilir bir dozaj
biçimi (sivi biçimde) elde edilebilir veya dondurularak
kurutulabilir (liyofilize biçimde). Dondurarak kurutma
durumunda, bilinen bir Longidaza® preparasyonundaki %97'lik
verim aktivitesi ile özdes bir aktivitesi olan 261 gram
bilesen elde edilir. Test sonuçlari Tablo 1'de (Örnek 6)
sunulmustur.
Üretilen içerik maddesinin gerekli miktarinin supozituvar
bazli olarak tamamlanmasiyla birlikte supozituvarlar elde
edilmistir.
Prosedür, Örnek 6'dakine benzer olmakla birlikte, bundan
farkli olarak 38 kDa'lik bir moleküler agirliga sahip olan 200
g miktarinda dogranmis ve saflastirilmis PEP kullanilir ve
oksidasyon adiminda. 60 grani üre kullanilir. 265 gram içerik
maddesi, liyofilizat biçimindeki bilinen Longidaza
preparasyonunun aktivitesiyle özdes aktivite türüyle %98
verimle elde edilmistir. Test sonuçlari Tablo 1'de (Örnek 7)
sunulmustur.
Bu içerik maddesi bir merhem hazirlamak için kullanilir.
Prosedür, Örnek 6'dakine benzer olmakla birlikte, bundan
farkli olarak 26 kDa'lik bir moleküler agirliga sahip olan 200
g miktarinda dogranmis ve saflastirilmis PEP kullanilir ve
oksidasyon adiminda 7O grani üre kullaniliru 264 gram içerik
maddesi, liyofilizat biçimindeki bilinen Longidaza
preparasyonunun aktivitesiyle özdes aktivite türüyle %98
verimle elde edilmistir. Test sonuçlari Tablo 1'de (Örnek 8)
sunulmustur.
Bu içerik maddesi enjekte edilebilir dozaj biçiminin
hazirlanisinda kullanilir.
Prosedür, Örnek 6'dakine benzer olmakla birlikte, bundan
farkli olarak 26 kDa'lik bir moleküler agirliga sahip olan 200
g miktarinda dogranmis ve saflastirilmis PEP kullanilir ve
oksidasyon adiminda üre eklenmez. 217 gram içerik maddesi,
liyofilizat biçimindeki bilinen Longidaza preparasyonunun
aktivitesiyle özdes aktivite türüyle %82 verimle elde
edilmistir. Test sonuçlari Tablo 1'de (Örnek 9) sunulmustur.
Bu içerik maddesi Longidaza içeren enjekte edilebilir dozaj
biçiminin hazirlanisinda kullanilir.
Prosedür, Örnek 6'dakine benzer olmakla birlikte, bundan
farkli olarak. 36 kDa'lik bir inoleküler agirliga sahip olan
4.000 g miktarinda dogranmis ve saflastirilmis PEP kullanilir
ve oksidasyon adiminda 1.500 gram üre eklenir. 5.130 gram
içerik maddesi, liyofilizat biçimindeki bilinen Longidaza
preparasyonunun aktivitesiyle özdes aktivite türüyle %95
verimle elde edilmistir. Test sonuçlari Tablo 1'de (Örnek lO)
sunulmustur.
Üretilen içerik maddesinin gerekli miktarinin supozituvar,
merhem veya krem bazli olarak tamamlanmasiyla birlikte aktif
bileseni içeren supozituvarlar, kremler ve merhemler elde
edilmistir. Bu, ayrica enjekte edilebilir dozaj biçiminin
hazirlanisinda da kullanilmistir.
Istemlerde belirtilen kesintisiz karbodiimit metodu prosesten
organik çözücülerin hariç tutulmasini, prosesin
basitlestirilmesini, kalitenin arttirilmasini ve hedef ürün
veriminin arttirilmasini, yüksek konjügasyon derecesi
degerinin saglanmasini, Longidaza® stabilitesinin
arttirilmasini (dondurularak kurutulmus ve sivi formda),
isleme ve saklama prosesi sirasinda çesitli çevresel etkilere
maruz kalma kosullari altinda mümkün kilar.
Istemlerde belirtilen metotlar uzun süre etkili
konjügatlarin üretim proseslerinin, heterosiklik alifatik
amino polimer N-oksitlerin suda çözünen türevleri biçimindeki
bilesiklerin yeni tasiyici sinifina dayali olarak
gelistirilmesini saglamakta olup, bunlar zincirlerinde azit
veya karboksil gruplari içerir ve bilesiminde aktif amin
gruplari içeren stabil olmayan protein veya diger yapidaki
bilesikler içerir. Bu metot, tibbi preparasyonlar pazarinda
büyük talep gören uzun süre etkili tibbi preparasyonlarin
farmasötik üretiminin saglanmasinda büyük pratik öneme
sahiptir ve veteriner tibbi ürünlerin hazirlanisinda
kullanilabilir. Perspektif olarak, gelistirilen prosesler
ülkenin genel olarak ulusal ekonomisinin çesitli
sektörlerindeki birçok problemin çözümünde yaygin olarak
kullanilabilir.
Tablo 1. Örnek 1 ila lO'da türetilen N-oksit 1,4-etilen
piperazin ve (N-karboksimetil)-l,4-etilen piperazin halojenür
kopolimerinin hiyalüronidaz konjügat serisinin analitik
izlenmesinin sonuçlari.
wmacogmxwncm mm mm v @w m5 m Mmzmo
umangsîmogzm pm om w «mm mom m xmzmo
EmnHmE `Ewux @x `v Huumß
Qmanmxysuamongm pm mm m HNN mmm m Mmzmo
Hmagoîmxmncm î mw nm m3 @3 v xmzmo
HEGGEEG g @m m 5” 8& m mmzmo
Eomuwa ::mum vw vw m mam ?010. N xmZmo
HMHHMEÃHNOQSm ww mm_ w NHN HNN H Müzmo
w umHH @E\DH
HEHpwHD m . mEamNm w w + ammpa>apxm umHH @Ebu
co>mmumamua .HEHum> :o Uçammua>apxm EHNcm cmUCHUum `Hmwua>auxm
Hnuau cana >mmoancox EHNcm :açmamaoamn &amcm suouma Eaumub
EmQHmE `Ewax 0& v Huumß
umHCû>Hmxmncm Nm mm «N MMH mha m Mmzmo
C'de saklama.
2 ila 8 °
Tablo 2. Üre kullanilarak (Örnek 3 ve Örnek 8) ve üre
kullanilmadan (Örnek 9) üretilen Longidaza'nin "hücresiz
protein" (Protein S) parametresi basina uzun vadeli saklama
sirasinda stabilite çalismasi
Hücresiz protein, %
metodu sirasinda
(üresiz)
Claims (15)
1. Karbodiimit veya azit konjügasyon metodu, temizleme ve spreyle dondurarak kurutma kullanilarak, hiyalüronidaz enziminin, N-oksit 1,4-etilen piperazin ve (N-karboksimetil)- l,4-etilen piperazin halojenür içeren kopolimerle aktif konjügatinin hazirlanmasi için bir metot olup, özelligi; konjugasyonun, N-oksit l,4-etilen piperazin, (N- karboksimetil)-l,4-etilen piperazin veya bunun hidrazidi ve asagidaki genel formüle göre l,4-etilen piperazinin bir kopolimeri olan suda çözünebilir kopolimer kullanimiyla gerçeklestirilmesi: burada n ifadesinin toplam birim. sayisinin 64O'i ila 690'1 arasinda olmasi; m ifadesinin toplani birini sayisinin %3'ü ila %40'1 arasinda olmasi; n + m + l = %100 olmasi, poli-l,4-etilen piperazinden, oksidasyon, alkilasyon yoluyla elde edilmesi ve azit hidrazinoliz metodu durumunda, içerisinde oksidasyonun, normal kosullar altinda, ortamda üre mevcutken oksijen üretebilen oksitleyici ajan vasitasiyla gerçeklestirilmesi. ve alkilasyonun. düsük haloalkan asit veya bunun alkil eteri vasitasiyla gerçeklestirilmesi ile karakterize edilir.
2. Istem 1'e göre metot olup, özelligi; oksidasyon adiminin, su dahil olmak üzere tepkime beslemesinin toplam kütlesi basina agirlikça %1 ila 10, tercihen agirlikça %3 ila 6 oraninda üre eklenerek gerçeklestirilmesi ile karakterize
3. Istem l'e göre metot olup, özelligi; konjugasyonun hayvanlarin seminal bezlerinden alinan hiyalüronidaz kullanimiyla gerçeklestirilmesi ile karakterize edilir.
4. Istem l'e göre metot olup, özelligi; adim adim temizlemenin, 1 ila 30 kDa araliginda degisen alt parçacik kesme limiti olan yari saydam kasetler üzerinde saflastirilmis su kullanilarak yikama yoluyla gerçeklestirilmesi ile karakterize edilir.
5. Azit konjügasyon metodu, temizleme, konsantre etme ve seyreltme veya spreyle dondurarak kurutma kullanilarak, hiyalüronidaz enziminin, N-oksit 1,4-etilen piperazin ve (N- karboksimetil)-l,4-etilen piperazin halojenür içeren bir kopolimerle aktif konjügatinin hazirlanmasi için bir metot olup, özelligi; konjugasyonun, N-oksit 1,4-etilen piperazin, (N-karboksimetil)-l,4-etilen piperazin hidrazidi ve asagidaki genel formüle göre l,4-etilen piperazinin bir kopolimeri olan suda çözünebilir kopolimer kullanimiyla gerçeklestirilmesi: burada n ifadesinin toplani birim. sayisinin %40'i ila %90'1 arasinda olmasi; m ifadesinin toplam birim sayisinin %3'ü ila %20'si arasinda olmasi; n + m + 1 = %100 olmasi, poli-l,4-etilen piperazinden, oksidasyon, alkilasyon yoluyla elde edilmesi ve azit hidrazinoliz metodu durumunda, içerisinde oksidasyonun, normal kosullar altinda, ortamda üre mevcutken oksijen üretebilen oksitleyici ajan vasitasiyla gerçeklestirilmesi ve alkilasyonun haloalkan asidin alkil eteri vasitasiyla gerçeklestirilmesi, içerisinde alkilasyon durumunun ve hidrazinolizin birlestirilmesi ile karakterize edilmesidir.
6. Istem 5'e göre metot olup, özelligi; oksidasyon durumunun, su dahil olmak üzere tepkime beslemesinin toplam kütlesi basina agirlikça %1 ila 10, tercihen agirlikça %3 ila 6 oraninda üre eklenerek gerçeklestirilmesi ile karakterize
7. Istem 5'e göre metot olup, özelligi; temizleme, oksidasyon, alkilasyon ve hidrazinoliz ve ayni zamanda konjügasyon adimlarinin tamamlanmasinin ardindan, yari saydam kasetler üzerinde aritilmis su ile üç katli adim adim yikamayla (1 ila 30 kDa arasinda degisen partiküllerin alt siniri ile) gerçeklestirilmesi ile karakterize edilir.
8. Istem 5'e göre metot olup, özelligi; konjugasyonun, zincirinde %3 ila 20 oraninda hidrazit gruplari içeren N-oksit poli-l,4-etilen piperazinin suda çözünen kopolimeri kullanilarak gerçeklestirilmesi ile karakterize edilir.
9. Istem 5'e göre metot olup, özelligi; hiyalüronidaz ile konjügasyonun, 0 ila 25 °C arasinda degisen sicakliklarda azit metodu kullanilarak gerçeklestirilmesi ile karakterize edilir.
10. Karbodiimit konjügasyon metodu, temizleme, seyreltme ve konsantre etme veya spreyle dondurarak kurutma kullanilarak, hiyalüronidaz enziminin, N-oksit 1,4-etilen piperazin ve (N- karboksimetil)-l,4-etilen piperazin halojenür içeren kopolimerle aktif konjügatinin hazirlanmasi için bir metot olup, özelligi; konjugasyonun, N-oksit 1,4-etilen piperazin, (N-karboksimetil)-l,4-etilen piperazin ve asagidaki genel formüle göre 1,4-etilen piperazinin bir kopolimeri olan suda çözünebilir kopolimer kullanimiyla gerçeklestirilmesi: burada n ifadesinin toplam. birim. sayisinin %40'i ila %90'1 arasinda olmasi; m ifadesinin toplani birini sayisinin %3'ü ila %40'i arasinda olmasi; n + m + 1 = %100 olmasi, sulu ortamda alkilasyon ve oksidasyon yoluyla poli-l,4-etilen piperazinden elde edilmesi, içerisinde oksidasyonun, normal kosullar altinda, ortamda üre mevcutken atomik oksijen üretebilen oksitleyici ajan vasitasiyla gerçeklestirilmesi ve alkilasyonun haloalkan asit kullanilarak gerçeklestirilmesi ile karakterize edilir.
11. Istem lO'a göre metot olup, özelligi; oksidasyon adiminin, su dahil olmak üzere tepkime beslemesinin toplam kütlesi basina agirlikça %1 ila 10, tercihen agirlikça %3 ila 6 oraninda üre eklenerek gerçeklestirilmesi ile karakterize
12. Istem lû'a göre metot olup, özelligi; temizlemenin, kopolimer elde etme ve konjügasyon asamalarini tamamladiktan sonra yari saydam kasetler 'üzerinde saflastirilmis suyla (1 ila 30 kDa arasinda degisen parçaciklarin alt siniri ile) yikanarak adim adim yapilmasi ile karakterize edilir.
13. Istem lû'a göre metot olup, özelligi; prosesin, zincirlerinde %25'e kadar karboksil gruplari içeren N-oksit poli-l,4-etilen piperazinin suda çözünen kopolimerlerinin kullanilmasi yoluyla gerçeklestirilmesi ile karakterize
14. Istem lo'da tarif edilene göre üretim metodu olup, özelligi; konjügasyon adiminin, tepkime süresince üretilen proteinin agirlikçar %3 ila 50'sine kadar olan herhangi bir suda çözünen karbodiimitlerin kullanilmasi yoluyla gerçeklestirilmesi ile karakterize edilir.
15. Tibbi bir preparasyon olup, özelligi; eszamanli olarak bag doku hiperplazisini inhibe etme ve anti-inflamatuvar etki gösterme özelliklerini tasimasi, istem ]_ ila l4'ten herhangi birinde tarif edilen bu metot kullanilarak bir supozituvar, merhem, enjeksiyon veya kozmetik krem biçiminde üretilmesidir.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015152036A RU2616528C1 (ru) | 2015-12-04 | 2015-12-04 | Способ получения конъюгата гиалуронидазы с производными полиэтиленпиперазина и применение полученного конъюгата |
| PCT/RU2016/000755 WO2017095264A1 (ru) | 2015-12-04 | 2016-11-09 | Способ получения конъюгата гиалуронидазы с производными полиэтиленпиперазина и применение полученного конъюгата |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TR201807851T1 true TR201807851T1 (tr) | 2018-06-21 |
Family
ID=58642685
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TR2018/07851T TR201807851T1 (tr) | 2015-12-04 | 2016-11-09 | Polietilen piperazin türevleriyle hiyalüronidaz konjügatının hazırlanma metodu ve elde edilen konjügatın uygulanması. |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US11364283B2 (tr) |
| EP (1) | EP3384917B1 (tr) |
| JP (1) | JP6683827B2 (tr) |
| KR (2) | KR20200131355A (tr) |
| CN (1) | CN108697732B (tr) |
| AR (1) | AR108562A1 (tr) |
| CA (1) | CA3007389C (tr) |
| EA (1) | EA030139B1 (tr) |
| GE (1) | GEP20207131B (tr) |
| HK (1) | HK1259290A1 (tr) |
| HU (1) | HUE056845T2 (tr) |
| LT (1) | LT3384917T (tr) |
| MD (1) | MD4637C1 (tr) |
| RS (1) | RS62659B1 (tr) |
| RU (1) | RU2616528C1 (tr) |
| SI (1) | SI3384917T1 (tr) |
| TR (1) | TR201807851T1 (tr) |
| UA (1) | UA121425C2 (tr) |
| WO (1) | WO2017095264A1 (tr) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2019006398A2 (en) * | 2017-06-29 | 2019-01-03 | University Of Washington | MONOMERS OF N-OXIDE AND ECTOIN, POLYMERS, COMPOSITIONS THEREOF, AND RELATED METHODS |
| RU2737271C2 (ru) * | 2018-06-27 | 2020-11-26 | ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ "НПО Петровакс Фарм" | Сополимеры ди-N-оксидов поли-1,4-этиленпиперазина и способы их получения |
| CN111978404A (zh) * | 2020-08-11 | 2020-11-24 | 西北大学 | 基于Halo-tag特异性脱卤反应的蛋白质一步定向固定化方法 |
| KR102481458B1 (ko) | 2021-12-15 | 2022-12-27 | 홍재혁 | 문신기구 |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2801723B2 (ja) * | 1990-01-26 | 1998-09-21 | 花王株式会社 | 新規ベタイン及びそれを含有する分散剤 |
| RU2073031C1 (ru) * | 1990-08-06 | 1997-02-10 | Некрасов Аркадий Васильевич | Производные поли-1,4-этиленпиперазина, обладающие иммуномодулирующей, противовирусной и антибактериальной активностями |
| DK0789586T3 (da) | 1993-09-10 | 2001-10-15 | Petrovax Inc | Forbindelser til forebyggelse og behandling af infektioner forårsaget af involdsorm |
| RU2112542C1 (ru) * | 1997-02-28 | 1998-06-10 | Аркадий Васильевич Некрасов | Препарат для лечения патологических состояний соединительной ткани |
| RU2185388C2 (ru) * | 2000-06-28 | 2002-07-20 | Карапутадзе Темури Мусаевич | Способ получения поли-1,4-этиленпиперазина и его производных |
| KR20160052812A (ko) * | 2008-04-14 | 2016-05-12 | 할로자임, 아이엔씨 | 히알루로난 관련 질환 및 상태 치료용 변형된 히알루로니다제 및 그 용도 |
| RU2417097C2 (ru) * | 2008-04-24 | 2011-04-27 | Валерия Леонидовна Багирова | Фармацевтическая композиция, содержащая гиалуронидазу и липосомы для наружного применения |
| RU2428991C9 (ru) * | 2010-06-24 | 2011-12-27 | ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ "НПО Петровакс Фарм" | Сополимеры гетероцепных алифатических поли-n-оксидов, вакцинирующие и лекарственные средства на их основе |
| RU2556378C2 (ru) * | 2013-07-11 | 2015-07-10 | ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ "НПО Петровакс Фарм" | Конъюгат гликопротеина, обладающего активностью эритропоэтина, с производными n-оксида поли-1,4-этиленпиперазина (варианты), фармацевтическая композиция и способ получения конъюгата |
-
2015
- 2015-12-04 RU RU2015152036A patent/RU2616528C1/ru active
-
2016
- 2016-11-09 CN CN201680080636.9A patent/CN108697732B/zh active Active
- 2016-11-09 MD MDA20180043A patent/MD4637C1/ro active IP Right Grant
- 2016-11-09 US US15/781,170 patent/US11364283B2/en active Active
- 2016-11-09 GE GEAP201614813A patent/GEP20207131B/en unknown
- 2016-11-09 CA CA3007389A patent/CA3007389C/en active Active
- 2016-11-09 RS RS20211493A patent/RS62659B1/sr unknown
- 2016-11-09 KR KR1020207032981A patent/KR20200131355A/ko active Application Filing
- 2016-11-09 LT LTEPPCT/RU2016/000755T patent/LT3384917T/lt unknown
- 2016-11-09 WO PCT/RU2016/000755 patent/WO2017095264A1/ru active Application Filing
- 2016-11-09 UA UAA201806828A patent/UA121425C2/uk unknown
- 2016-11-09 JP JP2018548639A patent/JP6683827B2/ja active Active
- 2016-11-09 HU HUE16871127A patent/HUE056845T2/hu unknown
- 2016-11-09 KR KR1020187019040A patent/KR102358980B1/ko active IP Right Grant
- 2016-11-09 SI SI201631417T patent/SI3384917T1/sl unknown
- 2016-11-09 EP EP16871127.3A patent/EP3384917B1/en active Active
- 2016-11-09 TR TR2018/07851T patent/TR201807851T1/tr unknown
- 2016-11-28 EA EA201650048A patent/EA030139B1/ru unknown
- 2016-12-01 AR ARP160103691A patent/AR108562A1/es unknown
-
2019
- 2019-01-30 HK HK19101651.7A patent/HK1259290A1/zh unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA3007389A1 (en) | 2017-06-08 |
| EP3384917A1 (en) | 2018-10-10 |
| KR20200131355A (ko) | 2020-11-23 |
| CN108697732A (zh) | 2018-10-23 |
| LT3384917T (lt) | 2021-11-25 |
| KR20180090339A (ko) | 2018-08-10 |
| EP3384917B1 (en) | 2021-09-15 |
| HUE056845T2 (hu) | 2022-03-28 |
| EP3384917A4 (en) | 2019-09-04 |
| KR102358980B1 (ko) | 2022-02-08 |
| JP2019501217A (ja) | 2019-01-17 |
| AR108562A1 (es) | 2018-09-05 |
| US20180344815A1 (en) | 2018-12-06 |
| HK1259290A1 (zh) | 2019-11-29 |
| RU2616528C1 (ru) | 2017-04-17 |
| GEP20207131B (en) | 2020-07-10 |
| UA121425C2 (uk) | 2020-05-25 |
| US11364283B2 (en) | 2022-06-21 |
| CA3007389C (en) | 2021-01-12 |
| WO2017095264A1 (ru) | 2017-06-08 |
| JP6683827B2 (ja) | 2020-04-22 |
| CN108697732B (zh) | 2021-02-26 |
| MD4637B1 (ro) | 2019-06-30 |
| EA030139B1 (ru) | 2018-06-29 |
| RS62659B1 (sr) | 2021-12-31 |
| MD4637C1 (ro) | 2020-01-31 |
| SI3384917T1 (sl) | 2022-01-31 |
| MD20180043A2 (ro) | 2018-11-30 |
| EA201650048A1 (ru) | 2017-06-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2558847C9 (ru) | Стерилизация биоразлагаемых гидрогелей | |
| TR201807851T1 (tr) | Polietilen piperazin türevleriyle hiyalüronidaz konjügatının hazırlanma metodu ve elde edilen konjügatın uygulanması. | |
| Ryan et al. | Self-assembled amino acids and dipeptides as noncovalent hydrogels for tissue engineering | |
| Zhang et al. | PEG-grafted chitosan nanoparticles as an injectable carrier for sustained protein release | |
| Zhao et al. | Self-assembled pH-responsive hydrogels composed of the RATEA16 peptide | |
| BG61520B2 (bg) | Биоразграждащ се полимер и метод за получаването му | |
| JP2019501217A5 (tr) | ||
| JPH05507497A (ja) | 成長ホルモン結晶及びこのようなｇｈ―結晶の製造方法 | |
| KR100554156B1 (ko) | 쿠커비투릴 유도체가 응집되어 형성된 나노 입자, 그 나노입자에 약물이 담지된 약제학적 조성물, 및 이들의 제조방법 | |
| Heydari et al. | Preparation and characterization of zwitterionic poly (β‐cyclodextrin‐co‐guanidinocitrate) hydrogels for ciprofloxacin controlled release | |
| Wang et al. | Mussel-mimetic self-healing polyaspartamide derivative gel via boron-catechol interactions | |
| Xu et al. | Facile construction of nanofibers as a functional template for surface boron coordination reaction | |
| Gao et al. | Thiolated human serum albumin cross-linked dextran hydrogels as a macroscale delivery system | |
| Lu et al. | Novel amphiphilic ternary polysaccharide derivates chitosan‐g‐PCL‐b‐MPEG: Synthesis, characterization, and aggregation in aqueous solution | |
| WO2019213833A1 (zh) | 一种具有抗菌作用的生物基材料及用途 | |
| JPH11228837A (ja) | 絹蛋白質／コラーゲン複合体およびその製造方法 | |
| EP3569641A1 (en) | Phosphorus containing oligomers and polymers | |
| Neuse et al. | Water‐soluble polyamides as potential drug carriers, II. Amine‐functionalized poly (α, β‐d, l‐aspartamide) derivatives | |
| CN113248595B (zh) | 一种蛋白质长期保存的方法 | |
| Mitra et al. | Exploring the dual role of α, ω-di-carboxylic acids in the preparation of collagen based biomaterial | |
| RU2185388C2 (ru) | Способ получения поли-1,4-этиленпиперазина и его производных | |
| CN116041728A (zh) | 一种邻苯二酚修饰的丝蛋白及其制备方法和用途 | |
| VandenBerg et al. | Dynamic‐Covalent Crosslinking of Benzenetricarboxamide–Phenylboronate Conjugates | |
| CN114672008A (zh) | 一种含肉桂醛的活性氧响应聚酯及其制备方法 | |
| Zengin | Enzymatic degradation of self-assembled peptide nanofiber gels |