SU468408A3 - Способ разделени стереоизомерных смесей - Google Patents

Description

где положени  1,2 и 4,5 насыщены или по крайней мере в одном из указаииых положений имеетс  двойна  св зь ,

R алкил нормального или изостроени , содержащий 1-10, предпочтительно 1-6, атомов углерода;

Х - водород или фтор, если Х водород , и Х - фтор, если радикал Х„водород или фтор;

2L - гвдроксильна  группа, котора  может быть превращена в сложноэфирную

группу,

на их стереоизомерные компоненты, образующиес  вследствие пространственной ориенташш заместителей у атома углерода в 2 - положении диоксаланового кольца, заключающийс  в том, что смесь стереоизомеров указанной формулы подвергают фильтрованию через гель, в результате чего происходит разделение компонентов с различными удерживающим объемами, а затем осуществл ют извлечение каждого из этих компонентов.

Фильтрование можно осуществл ть чэрез гели различного типа. Одним типом таких материалов  вл 5отс  оксипропилиро ванные сщитые декстрановые гели типа f Сефадекс LH, на пример Сефадекс

LH - 2О с мол.в. 1ОО-4ООО, дающие хорощее фракционирование. Другой тип полезных гелей представл ет собой сополимеры винилацетата с мол.в. до -vlOOO, а именно Меркогель® типа . Гели используют в виде равновесной системы с подход щим растворителем. В качес - ве элюирующего средства можно примен т галогенированные углеводороды, простые : или сложные эфиры или их смеси, причем наилучшие результаты получают при применении хлороформа, дихлорметана, дихлорэтана , тетрагидрофурана, диоксана и этил1 ацетата. В результате достигают вполне удовлетворительног о отделени  ст ёотЁзомера А от стереоизомера В, причем смесь изомеров А и В можно также с успехом отдел ть от побочных продуктов, образующихс  при синтезе стероидов.

В приведенной формуле гвдроксильна  группа в положении 21 может быть этерифицирована жирной кислотой. Така  жирна  кислота может в своей структуре иметь углеводородную цепь нормального или изостроени  и предпочтительно содержит 1-12 атомов углерода. В качестве примера подход щей кислоты можно назвать уксусную, пропноновую и так далее илн гетероциклическую карбоновую кислоту

Стероиды указанной формулы в виде циклических ацеталей можно синтезировать известным способом: взаимодействием 16, 17-диоксистероидов с альдегидом в присутствии кислого катализатора, например хлорной кислоты, rt-толуолсульфокислоты, хлористоводородной кислоты и тому подобное , в среде диоксана или другого подхо- . д щего растворител . В результате реакции получают смесь стереоизомеров А и В с од инаковыми молекул рными весами и практически одинаковой растворимостью, причем эти стереоизомеры, как было найдено , с больщим трудом поддаютс  раздеI лению обычными способами разделени  стереоизомеров, например перекристалли- зацией.

Дл  гель-фильтрации примен ют колонку длиной 85 см с внутренним диаметром 2,5 см при скорости потока 1 мл/ мин. Удерживающие объемы, приведенные в примерах, получены при применении хлороформа в качестве элюирую 1его средства .

При фильтрации через геЛь на колонке неочищенного продукта более легко отдел ютс  побочные продукты от смеси изомеров , чем изомеры друг от друга, так как в первом случае имеет место боль- ща  разница в удерживающих объемах. Найдено также, что растворимость неочищенного продукта, а также растворимость очищенной изомерной смеси понижаетс , в то врем , как повыщаетс  степень разделени  по мере уменьшени  пол рности растворителей. Это особенно про вл етс  у производных, замещенных короткой боковой непью у атома углеро да в положении 2 диоксоланрвого коль ца. Поэтому при хроматографическом разделении, описанном в примерах, рекоме1Щуетс  сначала отдел ть смесь изомеров от побочных продуктов, содержащихс  в неочищенном продукте, с по мощью немного более nofinpHoro растворител , а затем - изомеры друг от друга с помощью растворител , обладающего меньщей пол рностью. Можно использовать всю мощность колонки и в каждом процессе отдел ть побочные продукты от значительных количеств неочищенного продукта или возможное частичное использование мощности колонки вследствие ограниченной растворимости смеси изомеров в растворител х с меньщей пол рностью может быть компенсировано пов торной хроматографией .на колонке, проводимой через относительно короткий промежуток времени без удалени  ранее загруженной смеси из колонки. I С помошью растворителей, которые  вл ютс  высокоактивными при предварительном разделении, таких как дихлор метан, дихлорэтан, тетрагидрофуран и этилацетат, вполне удовлетворительно раздел ют изомеры в то врем , как хлороформ и диоксан дают лучшие результаты дл  изомеров, с трудом поддающихс  разделению. Во всех примерах молокул рш.ю веса определ ют посредством масс -спектросл-.ко ПИИ, а во всех исследовани х  дерно-магнитного резонанса в качестве внутреннего эталона примен ют тетраметилсилан. Температуру плавлени  определ ют с помощью микроскопа Рейхерта дл  определени  тем ператур плавлени . Пример. 160( , 17d - {2йодород-2-метил )метиле1ЩИОкси-9-фторпрегнадиен-1 ,4-диол-11 Э , 21 дион-3,2О К раствору 112,0 мг свежеотогнанног паральдегида и О,2 мл хлорной кислоты в 75 мл хорошо очи1не1П10го и высушешгого диоксана добавл ют по част м 500,0 Ml триамцилона в течение 40 мин . Р еакцио}Н(ую смесь перемешива ют еще 5,5 час при комнатной темпера- , туре, после чего ее разбавл ют 20О мл дихлорметана. Раствор промывают дважды раствором бикарбоната натри  и трижды водой, а затем высушивают. Растворители упаривают под вакуумом, остаток обрабатывают эфигроы и осаждают петролейньгм эфиром. Высушенный неочищенный продукт (533,0 мг) хроматографируют на колонке, заполненной оксипропилированным сшитым декстрановым гелем Сефадекс® L.H-20 (мол.в. 1004000 ), с применением дихлорметана в качестве элюирующего растворител . Полу чают 431,7 мг (81%) чистой смеси изомеров , т.пл. примерно 207-222°С; и 5 +107,20° (с 0,3, ); .| МОЛ.В. 420 (теоретический 42О,5).1 Смесь изомеров (338,2 мг) хромато-л графируют на колонке, заполненной гелем Сефадекс® LH-2O, с применением хлоро-, форма в качестве, элюирующего средства. / Получают два разных изомера (Л и В) 1ба , 17а - (2-водс од -2-мeтил)мeтилeндиoкc -9-фторпрегнадиен-1 , 4-диол-11 , 21-диона -3,2О. Выход изомера А 123,4 мг (37%); Т.ПЛ.217-2190С; &7,4°(,3, СН С1 ); МОЛ.В. 420 (теоретический 420,5); удерживающий объем 920-990 мл.. Выход .изомера В 194,7 мг (58%|j т.пл. 224-2280С; ,8О (,3, ).; МОЛ.В. 42О (теоретический 420,5); удерживающий объем 1О2О-110Омл Чистоту изомеров А и В (98%) устанавливают по ЯМР - спектроскопии, изуча  сиг-нал дл  18.-СН , расположенный при (S 1,00 млн.д,(СДС1 ) дл  А и при 6 0,92 млн.д.(СДСЦ) дл  В. Аналогичные результаты по разделению изомеров получают с применением гел  иа сополимера винилацетата (Меркогель® OH-HVA 2000, мол.в, до 1ООО), а также с использованием (кроме хлороформа и дихлорметана, дихлорэтана, этилацетата, тётч рагидрофурана и диоксана в качестве элк ирующих средств на обоих типах гелей. Примеры 2-15. Аналогично методике , описанной в примере 1, синтезируют смеси различных изомеров, и по методике разделени , описанной там же, получают изомеры, приведенные в табл. 1. Иссле довани  ЯМР провод т в среде СДС1 , если не указана друга  среда.

in о r

CO о ООН

о о

г- CD

со 05

DD

СО

cQ : 03

со

to

СО N 05 Си

о о

со

ф

)

гНН

гсо

Tt со

о о 05 hirToT со о + +

; cQ

DO

CQ

:а 3

и о

о

I

1° gi

Ф

а

И

СО

О)

11

Пример 16. Расшеплеиие 16i 17oi -(2-водород-2-метил)метилендиокси11- окси-214бензофуран-2- .карбонилокси) Э-цфторпрегнадиеи-. ,4.-диопа-3,2О на изомеры.

Раствор 60 мг чистой смеси изомеров 16ri , 17Я -(2 -водород-2-метил)метилендиокси- .9-фторпрегнадиен-1,4-диол-ИД 21-.диоиа-3,2О в 2 мл сухого пиридина добавл ют к 72,2 мг хлорангщь рида бензофурам-2-карбоновой кислоты, растворенной в 1 мл сухого диоксана. Реакционную смесь вьщерживают при комнатной температуре в течение ночи, большую часть растворителей упаривают под вакуумом и остаток выливают в 3%-1Ш1й раствор хлористого аммони . Полученный осадок отдел ют центрифугированием и раствор ют в 1ОО мл хлороформа. Хлоро форме1ппз1й раствор промывают однократно 5% -ным раствором карбоната натри  и три раза водой, высушивают над сульфатом магни  и упаривают под вакуумом. Остаток хроматографируют на геле Сефадекс 40 ijH-20 с применением хлороформа в качестве элюеита. Получают два разных изомера (А и В) 16(( ,17С1 (2 -водород-2 -метил)метиле1щиокси-11-окон-21- (бензофуран-2 -карбонилокси ) 9-фторпрегнадиен-1,4-диона-3,20.

Выход изомера А 28,1 мг (35%), т.пл. 250-256°С; dl 158,9О

12.

|{osO, 3, СН Cl); мол.в. 564 (теорети- |

ческий 564,6), удерживающий объем 27090 мл.

Выход изомера В 24,2 мг (ЗО%),

т.пл. 247-250°С; +168,3 . (,2, ); мол.в. 564 (теоретический 564,6); удерживающий объем 300-60 мл.

QЧистоту изомеров А и В (98%) устанавливают с помощью ЯМР-спектроскопии по изучению сигнала дл  18-СН„, расположенного при 5 -1,О6 млн.д ССДС )

гО

дл  А и при б 1,03 млн.д. (СДС1 ) дл  В,

I

Лналогичньге результаты по разделению

изомеров получают с применением гел  Меркогель® OR-RV А 2000, а также с использованием (кроме хлороформа) дигхлорметана , дихлорэтана, этилацетата, тетратидрофурана и диоксана в качестве растворителей дл  элюировани  на гел х обоих типов,

5Примеры 17-27. Получают раз

личные 21-эфиры изомерных смесей, полученных по методике, описанной в примерах 1-15, способом, oпиcaнны в приме- ре 16. Изомеры, полученные с примене-

1нием таких способов очистки и раздел& ни , указаны в табл.2. Исследовани  по I изучению ЯМР-спектра провод т в среде СДС1 .

О

17

I Хлораш идр1щы, примениемые дл  эте-г рификации, обозначены в табл.2 следующим образом: ХИК-хлорангидрид никотиновой кислоты, ХУК-хлора1ггидрид уксус-. ной кислоты, ХБК - хлорангидрид бенз: фуран-2-карбоновой кислоты, XEiK - хлорангидрид валериановой кислоты,

Предмет изобретени 

Claims (5)

1. Снособ разделени  стереоизомерных смесей стероидов обшей формулы ,,

СИГ2

сн

где наложени  i,2 или 4,5 насыщены или но крайней мере в одном из указанных двух ноложений имеетс  двойна  св зь;

X - водород или фтор, если X - водоX -фтор, если X

водород или

род, J фтор;

18

И - гидроксильна  группа, котора  мо- I жет быть превращена в сложноэфирную группу;

R - алкил с углеводородной цепью 5 нормального или изостроени , содержащей 1-10 атомов углерода,

на их стереоизомерные компоненты, образующиес  вследствие пространственной ориентации заместителей у атома 0 углерода в 2 I -положении диоксаланового кольца, отличающийс  тем, что смесь стереоизомеров указанной форг мулы подвергают фильтрованию через ель, в результате чего происходит раздей ление компонентов с различными удержи- I ваюин1ми объемами, а затем осуществл ют извлечение каждого из этих компонентов,

2. Способ по п. 1, отличающий0 с   тем, что фильтрование провод т через гель из сшитого декстрана.

3.Способ по п. 2, отличаю111 и и с   тем, что фильтрование ocyirecTвл ют через гель марки Се4|адекс

5 И-20.

4.Способ по п. 1, отличаю - ш и и с   тем, что фильтрование провод т через гель из сополимера винилаце0

тата,

5.Способ по п.4, о т л и ч а и и с   тем, что фильтрование осуществл ют через гель марки Меркогель 8) 35 OR -HVA.