SU1630617A3 - Способ получени фруктозилдисахаридов - Google Patents
Способ получени фруктозилдисахаридов Download PDFInfo
- Publication number
- SU1630617A3 SU1630617A3 SU843757905A SU3757905A SU1630617A3 SU 1630617 A3 SU1630617 A3 SU 1630617A3 SU 843757905 A SU843757905 A SU 843757905A SU 3757905 A SU3757905 A SU 3757905A SU 1630617 A3 SU1630617 A3 SU 1630617A3
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- enzyme
- sucrose
- aldose
- preparation
- reaction
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H5/00—Compounds containing saccharide radicals in which the hetero bonds to oxygen have been replaced by the same number of hetero bonds to halogen, nitrogen, sulfur, selenium, or tellurium
- C07H5/02—Compounds containing saccharide radicals in which the hetero bonds to oxygen have been replaced by the same number of hetero bonds to halogen, nitrogen, sulfur, selenium, or tellurium to halogen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
- C07D407/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings
- C07D407/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1048—Glycosyltransferases (2.4)
- C12N9/1051—Hexosyltransferases (2.4.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/12—Disaccharides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/18—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of a glycosyl transferase, e.g. alpha-, beta- or gamma-cyclodextrins
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/832—Bacillus
- Y10S435/839—Bacillus subtilis
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Adhesives Or Adhesive Processes (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Physical Or Chemical Processes And Apparatus (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к микробиологическому синтезу веществ, касаетс способа получени фруктозилдиса- харидов, пригодных в качестве сахаристых веществ в пищевой промышленности , специфически известных как TGF. Получаемые фруктозилдисахариды представл ют собой промежуточный продукт дл использовани при получении сукралозы (ранее известной как TGS). Цель изобретени - повышение качества целевого продукта. Способ предусматривает проведение реакции альдозы с сахарозой или рафинозой в присутствии фруктозилтрансферазы, продуцируемой Bacillus subtilis NCIB № 11871, 11872 или 11873, имеющей Km дл дахарозы по меньшей мере 0,1 М в отсутствие акцептора альдозы, котора не образует значительных количеств левана, осаждаемого спиртом из донора фруктозы в отсутствие акцептора альдозы, стабильной к действию поверхностно-активных веществ, котора обладает оптимальной активностью при 30°С, к активной в течение по меньшей мере 20 мин при температуре до 45°С. Предлагаемый фермент не про вл ет инвертазной активности что благопри тно вли ет на качественные- характеристики целевого продукта , а также не ускор ет реакцию диспропорционировани , т.е0 не превращает олигосахариды с малой молекул рной массой в леван с высокой молекул рной массой, 1 з.п. ф-лы, -1 табл. из OS со о С5
Description
Изобретение относитс к микробиологическому синтезу веществ, касаетс способа получени фруктозилдиса- харидов, пригодных в качестве сахаристых веществ в пищевой промышленности , специфически известных как TGF (получаемые фруктозилдисахариды iпредставл ют собой промежуточный продукт дл использовани при получении сукралозы, ранее известной как TGS),
Цель изобретени - повышение качества целевого продукта.
Изобретение предусматривает получение фруктозилдисахаридов общей формулы проведением реакции альдозы общей формулы
см
А
-0
ОН-/У,он
(D
НО ОН
где А - водород или группа CHgX;
X ,.водород, алифатическа или 10 «, ароматическа карбоксигруппа или алкоксигруппа или арил- алкоксигруппа,
с сахарозой или рафинозой в присутствии фруктозилтрансферазы, продуцируе- 15 мой Bacillus subtilis NCIB № 11871, 11872 или 11873, характеризующейс Km дл сахарозы по крайней мере 0,1 М в отсутствие акцептора альдозы, не образующей значительных количеств 20 осаждаемого спиртом полисахарида-, левана из донора фруктозы в отсутствие акцептора альдозы, и стабильной к действию поверхностно-активных веществ, имеющей оптимальную актив- 25 ность при , активной не менее 20 мин при 45°С. Используемый фермент не про вл ет инвертазной активности , что благопри тно вли ет на качественные характеристики целевого 30 продукта. Km дл фруктозилтрансферазы , полученной из В.subtilis NCIB 11871, составл ет 0,2 М дл сахарозы в отсутствие акцептора, в отличие от известного, Km которого равна 35 0,02 М.
Используема фруктозилтрансфера- за не ускор ет реакцию диспропорцио- нировани , т.е. не превращает оли- госахариды с малой молекул рной мае- 40 сой в леван с высокой молекул рной массой.
Источником фруктозы дл реакции может быть любой олиго- или дисаха- рид,. содержащий, предпочтительно, 45 незамещенное й-фруктозильное кольцо , присоединенное к аномерному углероду альдозы св зью (), как
в сахарозе (В-В-фруктозил-оН)-глюко- пиранозид) , рафинозе ((-0-галак- 50 топиранозил- (I - -ь- 6) -O-of-D-глюкопи- ранозил(1 - -,2)-|Ъ-В-фруктофурано- зид) или с.тахиозе. „ -Реакцию между донором и акцептором фруктозы провод т при рН 5,4- 6,0 и 30°С, оптимальных значени х дл действи фермента, который, предпочтительно , используют иммобилизованным на нерастворимой подложке.
Продуцируемые фруктозилтрансфера- зой штаммы В.subtilis по классическим тестам отвечают требовани м идентификации видов. В.subtilis NCIB 11871 вл етс лактозоотрицательным, показывающим различное продуцирование кислоты и ксилозы. В.subtilis NCIB
11872также вл етс лактозоотрицательным и дает отрицательные резуль - таты с D-маннозой, мелибиозой и трега- лозой в реакции ONPG. В.subtilis NCIB
11873 вл етс лактозоположительным и дает отрицательные результаты с D-маннозой и инулином
Пример 1. Получение 6-ацета- та сахарозы,
а) Получение фермента. |Ъ-Фруктозил- трансферазу получают при культивировании Bacillus subtilis, штамм NCIB 11871. Фермент индуцируют сахарозой в процессе роста клеток во встр хиваемых колбах (емкость 250 мл, 4 колбы), содержащих минимальную сахарозную среду (100 мл на колбу). Культуру инкубируют до последней экспонентной фазы микроорганизмов, встр хивани при , затем содержимое четырех колб объедин ют и культуральную среду отдел ют от клеток путем центрифугировани (5000 g в течение 15 мин), 20-30% общего количества фермента остаетс в ассоциации с клетками. Полученную надосадочную жидкость довод т до 65% насыщени путем до- бавлени твердого сульфата аммони и оставл ют сто ть в течение 45 мин при . В результате этого в осадок выпадает основное количество нежелательной инвертазы и других белковых составл ющих, а больша часть фермента остаетс в растворе. Затем образец повторно центрифугируют (20000 g в течение 30 мин) и выгружают осадок, содержащий инвертаэу. Добавл ют еще сульфат аммони в раствор дл доведени его до 95% насыщени и оставл ют сто ть еще на 45 мин при 0°С, Образуетс второй осадок, в основном фруктозилтрансфераза, которую собирают центрифугированием (40000 g в течение 45 мин) и повторно раствор ют в 12 мл 50 мМ осфатного буфера, рН 6,0. Результатом двух осаждений и растворени торого осадка вл етс очистка и концентраци фермента, така , что с омощью электрофореза с полиакрил- амидным гелем обнаружена только ода полоса белка. Оставшийс сульат аммони удал ют из системы полуени фермента путем диализа (0°С в ечение 4 ч) в присутствии 50 мМ фосатного буфера.
Подвергнутый диализу фермент ис-- следуют перед и после добавлени n-оксиртутьбензоата, который подавл ет инвертазу, но не оказывает действи на фруктозилтрансферазу. Обычно этим способом определ ют, что препараты фруктозилтрансферазы свободны от инвертазы. Содержание протеинов в препаратах оценивают примерно 0,45 мг/мл путем определени абсорб- ции белков при длине волны 280 нм. Черный пигмент часто присутствует даже в очищенных ферментных препаратах , Но он не оказывает вли ни на их активность.
б) Получение 6-ацетата сахарозы 6-Ацетат глюкозы (80 г высушивают в вакууме до посто нного веса) и гранулированную сахарозу (160 г) раствор ют при комнатной температуре в 100 мл буферного раствора Макилвайна при рН 5,4 и развод т до 600 мл (т.е. 40 мас.% деионизов анной водой. Этот раствор затем профильтровывают и добавл ют 28 мл раствора фермента. Реакционную смесь инкубируют при 30ЙС. отбирают через определенные временные интервалы образцы до тех пор, пока по данным ЖХВД не устанавливают, что 6-ацетат сахарозы больше не образуетс и достигнута максимальна концентраци 6-ацетата сахарозы 120 г/л. Фермент удал ют фильтрованием реакционной смеси через колонку с ДЭАЭ целлюлозой, котора адсорбирует фермент. Другим способом его можно было денатурировать путем нагревани при 65°С в течение 1 ч. Удаление фермента важно, так как он может способствовать медленному гидролизу 6-ацетата сахарозы и высвобожать фруктозу.
Затем продукт выдел ют с помощью препаративной ЖХВД и получают 6-ацетат сахарозы по меньшей мере 65% истоты при общем выходе 50%. Начальна скорость реакции ферментации составл ет 244,5 мг 6-ацетата сахарозы на 1 мг фермента в час. Выход на стадии ферментации составил 58% в расчете на расход 6-ацетата глюкозы или 48% в расчете на образовавшийс 6-ацетат сахарозы.
Пример 2. Получение 6-де- оксисахарозы.
Выделение, очистка и кристаллизаци . 6-Деокси-О-глюкозу (D-хиново- зу, 20 г) и сахарозу подвергают реакции , аналогичной реакции, описанной в примере 1, и получают смесь 6-де- оксисахарозы, D-хиновозы, сахарозы
и глюкозы, общий объем 140 мл. 6-Де- оксисахарозу отдел ют от смеси с помощью препаративной ЖХВД, использу колонку с обратной фазой waters prepak 500-C1.8 и воду в качестве
5 элгаента. Наблюдаетс удивитель но большое различие во времени удер- жани 6-деоксисахарозы и времени «удержани других компонентов смеси. D-хиновоза, сахароза и D-глюкоза
0 элюированы через 4-9 мин после введени , а 6-деоксисахароза только через 29 мин (высота максимального пика ) ,-Длительное врем выделени позвол ет выделить большое количество
5 вещества за инъекцию, чем было бы возможно в другом случае. Элюат, содержащий 6-деоксисахарозу, выпаривают досуха при пониженном давлении (температура бани ) и получают
0 прозрачный сироп (16,7 г, 42%), который кристаллизуетс при комнатной температуре..Продукт рекристалли- зуют из этанола и он имел т,пл, 180- 181°C,X;L +57,6° (с 2,5, вода).
5 Масс-спектр, т/е: 293 (М -СНуК)) . С-ЯМР-спектр (DgO раствор, относительно молекул рного ДСС при Ом.д.: Атом углерода Химический сдвиг
м.д.
0 ,32
1 94,70
3 3 5
5 4f 3 2 4
6f Р 6
0
84,01 79,04 77,74 76,73 74,93 73,95 71,09 65,02 63,77 19,36
Пример 3. Повтор ют процедуру , описанную в примере 1, но вместо 6-ацетата на стадии б используют б-бензоат г люкозы. Получают анало- гичный результат.
1 Пример 4. Способ, описанный в примере 1, модифицируют, использу фермент, полученный при культивировании штамма Марбург 168, штамм NCIB 11872 или 11873 на стадии б. Реакци проходит таким же образок, но с меньшей скоростью.
Пример 5. Иммобилизаци и очистка фруктозилтрансферазы штамма NCIR 11871 с использованием ионообменной ДЭАЭ целлюлозы и получение ксил- сахарозы.1
Ионообменную ДЭДЭ целлюлозу (DE52) интенсивно промывают 50 мМ буфером Макилвайна рН 5,4 и затем забуферен- ным субстратом (сахароза-ксилоза 2:1, 40 мас,%, общие сахара). После фильт-4 ровани почти досуха через воронку Бюхнера ДЭАЭ целлюлозу (10 г) смешивают с 8 мл препарата фруктозилтрансферазы , полученной при культивировании B.subtilis, как в приме- , 2 ре 1, в течение 15 мин при 306С при перемешивании. Полученную смесь ДЭАЭ (Целлюлозы и фермента загружают в 110-миллшштровую колонку с вод ной рубашкой (19x1 см и поддерживают при 2 30°С с помощью термоциркул тора Черчилла . ДЭАЭ целлюлозе дают стечь под действием собственной т жести и эти стоки собирают. Субстрат закачивают вверх по колонке со скоростью 3 1,0 мл/ч, использу насос Ватсона- Марлоу, элюат-собирают через определенные промежутки времени и исследуют на активность фруктозилтрансферазы . Также определ ют поглощение 3 на длине золны 280 нм (F ngp)« Дл исследовани 0,1 мл жидкого образца или О,1 г иммобилизованного фермента (на DE 52) инкубируют с 2 мл субстрата при 30 С в течение 4 ч.
Использу субстрат ксилоза-саха - роза дл приготовлени ксилсахарозы, концентрацию и активность истощенного раствора, оставшегос после за- 45 вершени процедуры иммобилизации, сравнивают с концентрацией и активностью первоначального ферментного препарата. Обнаружено, что 68,5% первоначально присутствовавшего фермента tg в клеточном экстракте было иммобилизовано вместе с 83% первоначапьно присутствовавшего белка. Иммобилизо-- ванный фермент имеет первоначальную активность 80,2% от активности экви- - валентного количества свободного ферт мента; активность обоих препаратов соответственно равна 0,38 г ксилсахарозы / г иммобилизованного фермен0
с п 5 0 5
0
5 tg -
та в час и 0,865 г ксилсахарозы/ мл экстракта фермента з час.
Иммобилизованный фермент (10 г) непрерывно подают в колонку при 30°С в течение 2 нед при посто нном рН элюата, микробиологическое заражение исключено. В течение первых трех дней небольшие количества белка и фермента десорбировались (примерно 24% первоначально адсорбированного белка и 2,3% первоначально адсорбированного фермента). Активность иммобилизованного фермента падает с временем полураспада 95 ч, и имеетс обратна зависимость между степенью конверсии субстратов в продукты и скоростью течени по колонке. При самой малой скорости потока, 0,086 объемах колонки без насадки (экв. ) и 80% конверсии в ксшт- сахарозу получают элюат, содержащий 2) г/л ксилсахарозы. Этот выход выше , чем выходы, полученные в периодических реакци х, веро тно потому, что кинетика течени со структурным дром колонки способствует образованию ксилсахарозы, так как продукты непрерывно выгружают из колонки и, таким образом, они не аккумулируютс и не вызывают замедление реакции, В целом в процессе этих операций 20-25 г ксилсахарозы образуютс в состо нии, из которого легко получить чистую ксилсахарозу.
В противоположность первоначально использованному растворимому ферменту иммобилизованный фермент вызвал образование в процессе реакции побочных продуктов. Образовалось незначительное количество фруктозы - меньше, чем образуетс с помощью первоначального экстракта фермента, использованного дл иммобилизации, веро тно потому, что инвертаза, котора загр зн ет экстракт, только частично адсорбирована DE 52. В элюате после иммобилизованного фермента были обнаружены некоторые второстепенные соединени , которые были элюирова- ны на последней стадии КХЕДсо временем удерживани 13 и 20 мин, хот их не обнаруживали при анализе продуктов реакций с растворимыми фермента- ми. Веро тно это олигосахариды, об- разевавшиес из обычных реагентов с помощью фермента. Предположительно, что удерживание молекул реагента иммобилизованным ферментом увеличивает
врем их контакта с ферментом таким образом, что существует возможность полимеризации.
Так как содержание ксилозы в субстрате составл ет 133 г/л, то максимально возможна концентраци ксил- сахарозы составл ет 266 г/л. Максиальна концентраци при 0,086 экв./ч- составл ет 80% от этой величины, т.е. JQ 210 г/л, а расчетные данные на основании расхода ксилазы во врем реакции составл ют 69,5%. Выход выше, чем в периодических реакци х, так как природа процесса течение со струк- 15 турным дром такова, что она обусловливает посто нный отток продукта, и так как продукт относительно непол рный по сравнению с субстратом и поэтому избирательно отводитс от поло- 20 жительно зар женной иммобилизирующей подложки, то оба эти эффекта способствуют образованию ксилсахарозы.
Этот же способ используют дл поучени 6-ацетата сахарозы из 6-аце- 25 тата глюкозы, 6-0-метилсахарозы из 6-0-метилглюкозы и 6-0-бензилсахаро- зы из 6-0-бензилглюкозы.
Фермент, полученный по способу, описанному в примере 1, (0,1 мл) сме- -jQ ивают с 2 мл 40%-ного (мае./об.) f раствора сахарозы и ксилозы (1:1), забуференного при рН 5,5 при 30°С. аличие ксилсахарозы определ ют с по- мощью ЖХВД. Образование левана опре- ,5 дел ют визуально. Ниже приведены результаты сравнени действи различных ферментов,
Эти ферменты по изобретению преобразуют по меньшей мере в 10 раз до больше ксилсахарозы чем фермент, полученный с помощью штамма Марбур- га, и по меньшей мере в 100 раз больше в случае использовани фермента , полученного с помощью штамма NCIB J1871. Причем значительно меньше идет конкурирующее образование левана .
Использование рафинозы в качестве донора.
Пример 6. Образование ксилсахарозы .
РафиНозу и сахарозу раствор ют в буфере Макилвайна (рН 5,4) и инкубируют с фруктезилтрансферазой из примера 1 при 30°С до момента, когда анализ ph/c показал, что больше не образуютс ксилсахароза и мелибиоза (примерно 100 ч .Затем фермент де50
55
натурируют путем нагревани ( или в альтернативе его можно удал ть путем адсорбции в ДЭАЭ целлюлозу). Измер ют как количества ксилозы и рафинозы при общей концентрации сахара 30 мас.%, так и абсолютную концентрацию Сахаров, при отношении рафино- за: ксилоза 2:1 (мае./мае.). Наибольшие концентрации ксилсахарозы, полученные tв ходе этих экспериментов, составл ют 9,5 г/100 мл при концентрации субстрата 65 г/100 мл. Затем ксилсахароэу изолируют посредством препаратного hp/c, представл ющего собой последний пик, подлежащий элюи рованию, с временем выдерживани 15,5 мин (ксилоза около 3 мин, рафи- ноза и мелибиоза примерно по 7 минут кажда ).
Пример 7. Образование 6-де- оксисукрозы.
Осуществл ют реакцию рафинозы и 6-деоксиглюкозы, как было описано, использу отношение рафиноза: 6-де- оксиглюкоза 2:1 и общую концентрацию сахара 30%. По истечении времени инкубации примерно 40 ч получают 4 г 6-деоксисахарозы на 100 мл субстрата .
Результаты исследований по примерам 1-7 приведены в таблице,
Claims (1)
1. Способ получени фруктозилди- сахаридов общей формулы , .-
АСНоОН
НОЧ ( СН2ОН
но он но он
- (I)
где А - водород или группа СН@Х, X - водород, алифатическа или
ароматическа карбоксигруппа, или алкоксигруппа, или арил- алкоксигруппа
путем проведени реакции альдозы общей формулы
А
V-О
. он-/
но он 1Д) I
1116
где А имеет указанное значение, определенное дл формулы (II), с сахарозой или рафинозой в присутствии фермента гликозилтрансферирующего дей стви , продуцируемого Bacillus subti- lis при оптимальных услови х действи фермента, отличающийс тем, что, с целью повышени качества целевого продукта, в качеств е фермен- та гликозилтрансферирующего действи используют фруктозилтрансфераэу, продуцируемую Bacillus subtilis NCIB № 11871, 11872 или 1 1873, имеющую Km дл сахарозы по меньшей мере О,1 М в отсутствие акцептора альдозы, не образующей значительных количеств осаждаемого спиртом левана из донора фруктозы в отсутствие акцептора альдозы, и стабильную к действию по- верхностно-активных веществ, имеющую оптимальную активность при температуре 30°С, активную не менее 20 и мин при температуре до 45°С,
712
2, Способ по п. 1 , о т л и ч a tout и и с тем, что используют иммобилизованный фермент.
Ксилсахароза , г/мл фермента в час
Образование левана
8,6 О
2,9 Заметно
1,4 +
0,08 ++
0,19 ++
- 0,87 ++
Priority Applications (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| LV920525A LV5135A3 (lv) | 1983-06-21 | 1992-12-29 | Fruktozildisaharidu iegusanas panemiens |
| LTRP675A LT2149B (lt) | 1983-06-21 | 1993-06-22 | Fruktozildisacharidu gavimo budas |
| MD94-0114A MD127C2 (ru) | 1983-06-21 | 1994-03-23 | Способ получения фруктозилдисахаридов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB838316790A GB8316790D0 (en) | 1983-06-21 | 1983-06-21 | Chemical process |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1630617A3 true SU1630617A3 (ru) | 1991-02-23 |
Family
ID=10544535
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU843757905A SU1630617A3 (ru) | 1983-06-21 | 1984-06-20 | Способ получени фруктозилдисахаридов |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4617269A (ru) |
| EP (1) | EP0130054B1 (ru) |
| JP (1) | JPH0777559B2 (ru) |
| KR (1) | KR850000434A (ru) |
| AT (1) | ATE50774T1 (ru) |
| AU (1) | AU578418B2 (ru) |
| CA (1) | CA1225348A (ru) |
| DE (1) | DE3481514D1 (ru) |
| DK (1) | DK172955B1 (ru) |
| ES (1) | ES8603577A1 (ru) |
| FI (1) | FI85160C (ru) |
| GB (2) | GB8316790D0 (ru) |
| IE (1) | IE58153B1 (ru) |
| IL (1) | IL72176A (ru) |
| MX (1) | MX7714E (ru) |
| NO (1) | NO162080C (ru) |
| NZ (1) | NZ208606A (ru) |
| PH (1) | PH20732A (ru) |
| PT (1) | PT78770B (ru) |
| SU (1) | SU1630617A3 (ru) |
| ZA (1) | ZA844655B (ru) |
Families Citing this family (27)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE451849B (sv) * | 1985-12-11 | 1987-11-02 | Svenska Sockerfabriks Ab | Sett att syntetisera glykosidiska bindningar samt anvendning av pa detta sett erhallna produkter |
| GB8622345D0 (en) * | 1986-09-17 | 1986-10-22 | Tate & Lyle Plc | Sucrose derivatives |
| NL8701616A (nl) * | 1987-07-09 | 1989-02-01 | Stamicarbon | Fructosyltransferase en bereiding van fructose-oligomeren daarmee. |
| FR2629985B1 (fr) * | 1988-04-14 | 1994-01-21 | Roussel Uclaf | Application comme produits sucrants faiblement caloriques d'oligosaccharides fructosyles et les aliments, produits dietetiques et boissons les renfermant |
| US5874261A (en) * | 1988-09-02 | 1999-02-23 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Method for the purification of glycosyltransferases |
| US5476924A (en) * | 1989-01-27 | 1995-12-19 | Duke University | Protecting group for acetals and methods of using the same in the activation of saccharides |
| US4980463A (en) * | 1989-07-18 | 1990-12-25 | Noramco, Inc. | Sucrose-6-ester chlorination |
| US5215905A (en) * | 1989-12-29 | 1993-06-01 | Miwon Co., Ltd. | Immobilization of fructosyltransferase on a basic, porous anion-exchange resin |
| KR0161531B1 (ko) * | 1990-03-08 | 1998-11-16 | 하야시바라 겐 | 락토수크로오스 고함유 분말의 제조방법과 그 분말의 용도 |
| BR9106345A (pt) | 1990-04-16 | 1993-04-20 | Univ Pennsylvania | Composicoes de sacarideos,processos e aparelhos para sua sintese |
| WO1991016449A1 (en) * | 1990-04-16 | 1991-10-31 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Saccharide compositions, methods and apparatus for their synthesis |
| US6518051B1 (en) | 1991-04-11 | 2003-02-11 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Saccharide compositions, methods and apparatus for their synthesis |
| US5334524A (en) * | 1992-05-18 | 1994-08-02 | Solvay Enzymes, Inc. | Process for producing levan sucrase using Bacillus licheniformis |
| JPH07274990A (ja) * | 1994-04-15 | 1995-10-24 | Mitsubishi Kasei Eng Co | 環状イヌロオリゴ糖の精製方法 |
| AU759465B2 (en) * | 1998-05-05 | 2003-04-17 | Mcneil Specialty Products Company Division Of Mcneil-Ppc, Inc. | Functional sugar polymers from inexpensive sugar sources and apparatus for preparing same |
| MX2007013689A (es) * | 2005-05-04 | 2009-02-17 | Pharmed Medicare Pvt Ltd | Generacion de oxicloruro de fosforo como subproducto de pentacloruro de fosforo y dmf y su uso en una reaccion de cloracion al convertirse en reactivo vilsmeier-haack. |
| GB2441917A (en) * | 2005-06-01 | 2008-03-19 | Pharmed Medicare Pvt Ltd | Method for purification of chlorinated sucrose derivatives by solvent extraction |
| JP2009508518A (ja) * | 2005-09-22 | 2009-03-05 | ファームド メディケア プライヴェート リミテッド | 全細胞生体触媒によりスクロース−６−アセテートを生成する方法 |
| US20070100139A1 (en) * | 2005-10-31 | 2007-05-03 | Healthy Brands, Llc | Methods for chlorinating sucrose-6-ester |
| CN100418976C (zh) | 2006-04-03 | 2008-09-17 | 广州科宏食品添加物有限公司 | 一种三氯蔗糖的制备方法 |
| CA2650219A1 (en) * | 2006-04-27 | 2007-11-08 | V.B. Medicare Pvt. Ltd. | Continuous neutralizer mixer reactor and a continuous process for quenching chlorination reaction mixture in production of chlorinated sucrose |
| CN100420697C (zh) * | 2006-08-30 | 2008-09-24 | 河北苏科瑞科技有限公司 | 一种制备蔗糖-6-有机酸酯的方法 |
| US20080300392A1 (en) * | 2007-06-04 | 2008-12-04 | Polymed Therapeutics, Inc. | Novel chlorination process for preparing sucralose |
| US20080300401A1 (en) * | 2007-06-04 | 2008-12-04 | Polymed Therapeutics, Inc. | Novel chlorination process for preparing sucralose |
| CN101812095B (zh) * | 2010-04-30 | 2012-06-27 | 苏州浩波科技股份有限公司 | 三氯蔗糖的制备方法 |
| US8884004B2 (en) | 2011-09-02 | 2014-11-11 | Divi's Laboratories, Ltd. | Process for the preparation of sucralose |
| CN106554345B (zh) * | 2015-09-29 | 2018-11-30 | 杭州杜易科技有限公司 | 一种五氯化磷氯化副产物的回收和利用的方法 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS55118369A (en) * | 1979-03-06 | 1980-09-11 | Hayashibara Biochem Lab Inc | Method of making beverage and food |
| US4309505A (en) * | 1980-05-19 | 1982-01-05 | Cpc International Inc. | Process for the production of fructose transferase enzyme |
| EP0043649B1 (en) * | 1980-07-08 | 1984-09-12 | TATE & LYLE PUBLIC LIMITED COMPANY | Process for the preparation of 4, 1',6'-trichloro-4,1',6'-trideoxygalactosucrose (tgs) |
| JPS57166981A (en) * | 1981-04-08 | 1982-10-14 | Meiji Seika Kaisha Ltd | Novel fructosyl transferase and its preparation |
-
1983
- 1983-06-21 GB GB838316790A patent/GB8316790D0/en active Pending
-
1984
- 1984-06-18 DK DK198402977A patent/DK172955B1/da not_active IP Right Cessation
- 1984-06-20 FI FI842513A patent/FI85160C/fi not_active IP Right Cessation
- 1984-06-20 SU SU843757905A patent/SU1630617A3/ru active
- 1984-06-20 PT PT78770A patent/PT78770B/pt active IP Right Revival
- 1984-06-20 ES ES533607A patent/ES8603577A1/es not_active Expired
- 1984-06-20 AU AU29577/84A patent/AU578418B2/en not_active Expired
- 1984-06-20 CA CA000457025A patent/CA1225348A/en not_active Expired
- 1984-06-20 IE IE155184A patent/IE58153B1/en not_active IP Right Cessation
- 1984-06-20 ZA ZA844655A patent/ZA844655B/xx unknown
- 1984-06-21 MX MX8411186U patent/MX7714E/es unknown
- 1984-06-21 EP EP84304206A patent/EP0130054B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1984-06-21 JP JP59128395A patent/JPH0777559B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1984-06-21 US US06/622,853 patent/US4617269A/en not_active Expired - Lifetime
- 1984-06-21 NO NO842496A patent/NO162080C/no unknown
- 1984-06-21 AT AT84304206T patent/ATE50774T1/de not_active IP Right Cessation
- 1984-06-21 IL IL72176A patent/IL72176A/xx not_active IP Right Cessation
- 1984-06-21 DE DE8484304206T patent/DE3481514D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1984-06-21 KR KR1019840003492A patent/KR850000434A/ko not_active Application Discontinuation
- 1984-06-21 PH PH30866A patent/PH20732A/en unknown
- 1984-06-21 NZ NZ208606A patent/NZ208606A/en unknown
- 1984-06-21 GB GB08415877A patent/GB2145080B/en not_active Expired
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Hestrin and Avigad. J. Biochem, 1958. 69, p. 388-398. Патент GB № 2046757, кл. С 08 В 37/00, опублик. 1980 * |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SU1630617A3 (ru) | Способ получени фруктозилдисахаридов | |
| FI82836B (fi) | Ny tetraklorraffinos och dess anvaendning vid framstaellning av sucralos. | |
| EP0714905B1 (en) | Process for producing trehalose derivatives | |
| JPS5818070B2 (ja) | 安定化されたグルコ−ゼイソメラ−ゼ酵素濃縮物及びその製法 | |
| KR20080052639A (ko) | 전세포 생체촉매반응에 의한 수크로스-6-아세테이트제조방법 | |
| JPS5820598B2 (ja) | 蔗糖からフラクト−スポリマ−および高フラクト−スシラツプの製造方法 | |
| Haynie et al. | Enzyme-catalyzed organic synthesis of sucrose and trehalose with in situ regeneration of UDP-Glucose | |
| JPS6013677B2 (ja) | シュクロ−スの酵素的トランスフルクトシレ−ション法 | |
| Genghof et al. | Preparation and use of α-maltosyl fluoride as a substrate by beta amylase | |
| EP0188047B1 (en) | Process for preparing fructo-oligosaccharose | |
| EP0542292B1 (en) | Method for producing 3'-phosphoadenosine 5'-phosphosulfate | |
| SU469266A3 (ru) | Способ плучени 7-амино-дезацетоксицефалоспорановой кислоты | |
| US5811539A (en) | Process for isolating and purifying nucleotide-activated sugars from biological sources | |
| US6562600B1 (en) | Production of cyclic alternan tetrasaccharides from oligosaccharide substrates | |
| KR20010025078A (ko) | 불수용성 α-1,4-글루칸을 제조하는 방법 | |
| JP3080771B2 (ja) | ジヌクレオシドポリリン酸又はその誘導体の製造方法 | |
| KR0131134B1 (ko) | 고수율, 고순도 이소말토 올리고당의 제조방법 | |
| Klein | Some properties of the hexokinase of Pseudomonas putrefaciens | |
| KR960003644B1 (ko) | 이소말토올리고당의 제조방법 | |
| JP4011496B2 (ja) | Ｌ−グルコースの製造方法 | |
| Slddiqui et al. | Isolation and characterization of oligosaccharides from honey. Part II. Trisaccharides | |
| Stoppok et al. | The Production of 3-Keto-Derivatives of Disaccharides | |
| JPS62126990A (ja) | セドヘプツロ−スの製造法 | |
| White et al. | The synthesis of 7-(adenosine-5′-pyrophosphoryl)-d-sedoheptulose by an enzyme system from the green alga Chlorella pyrenoidosa | |
| JPH10248560A (ja) | 固定化酵素及びトレハロースの製造方法 |