SU1468421A3 - Способ получени 6-дезамино-6-гризеоловой кислоты - Google Patents

Abstract

Изобретение касаетс  гетероциклических веществ, в частности получени  6-дезамино-6--гризеоловой кислоты, обладающей способностью ингкбировать действие фосфодиэстеразы циклического аденозин-монофосфата. Цель - создание нового более активного и малотоксичного вещества .указанного класса. Синтез ведут реакцией NaNOj с гризеоло- вой кислотой в кислой среде при температуре от О С до комнатной Б течение ,.о т 16-50 ч. 54%, брутто ф-ла С, H.j N.j 0g 1/ Н О. Новое вещество практически нетоксично и может в лучшей степени, чем те.офеллин, снижать циркул торные церебральные рас- тройства, примен тьс  дл  лечени  осложнений после апоплексии головного мозга и в качестве активаторов метаболизма в мозгу дл  лечен   старческого слабоуми , I табл.

Description

I

Изобретение относитс  к способу получени  6-дезамино-6-гризеоловой кислоты - нового биологически активного соединени , которое может найти применение в медицине.

.Цель изобретени  - способ получени  нового биологически активного соединени , практически нетоксичного и обладающего более высокой активностью в отношении способности ингиби- ровать действие фосфодиэстеразы циклического аденозинмонофосфата.

Пример 1. 6 Дезаминр-6-окси- гризеолова  кислота.

5,81 г гризеоловой кислоты раствор ют при нагревании в 80%-ном (мае./об.) водном растворе уксусной

кислоты, после чего раствор охлаждают до комнатной температуры. Затем добавл ют 960 г нитрита натри . Воздух в сосуде, содержащем указанный раствор, замен ют азотом, сосуд плотно закупоривают и оставл ют сто ть в течение 16 ч. Растворитель удал ют при пониженном давлении, получа  остаток , к которому добавл ют этанол, и затем отгон ют, этот процесс повтор ют до полного исчезновени  запаха уксусной кислоты. Остаток раствор ют в 50 мл воды, рН раствора довод т, до 1,0 концентрированной сол ной кислоты при охлаждении льдом. Раствор оставл ют на 16 ч в холодильнике, а затем осадок собирают фильтрацией и

ю

промывают небольшим количеством поды Осадок затем перекристаллизовывают из водного ацетона, что дает 1,66 г целевого соединени . При конденсировании маточной жидкости получают 2,20 г неочищенных кристаллов. Эти неочищенные кристаллы затем перекристаллизовывают из водного ацетона, чт дает дополнительно 1,2 г целевого соединени  (выход 54%)о

Спектр ультрафиолетового поглощени  () ,нм (6): 247(11800) 270 (3700). ,

Спектр НМР (гексадейтерированный диметилсульфоксид) S , млн д.; 4,50- (Ш, синглет); 4,57 (IK, дублет, I 6,0 Гц)| 5,12 (IH, дублет, I 3,0 Гц); 5,88 (1Н, дублет дублетов , I 3,0 и 6,0 Гц); 6,50 (1К, синглет); 8,17 (ГН,, синглет); 8,38 (IHj синглет).

С 43,29| Н 3,

,26|

%: С 43,19г Н 3,455

Найдено, % N 14,42,

1/2 lUO Вычислено,

N 14,39.

Пример 2, В соответствии с примером 1, использу  вместо уксусной фосфорную кислоту, осуществ- л ют процесс при 40°С в течение 10ч и получают указанное в примере 1 соединение о

Пример 3, По методике примера 1 осуществл ют процесс при О С- в течение 50 ч, получают целевое соединение .

Проведены биологические испытани  6-деэамино-6-гризеоловой кисло . ты.

Токсичность.

Подвергают испытанию гризеоловую кислоту и 6-дезамино-6-гризеоловую кислоту. Подопытные животные - самц крыс штамма Фишер (группы по п ть

крыс дл  каждого опыта).

Испытуемые соединени  назначалис в виде с циничных суточных доз 500 или 100 мг/кг на прот жении четырех дней испытани .

При дозе 50 мг/кг предлагаемое соединение показало смертность 0/5 конце испытани  (т.е. из 5 крыс в . каждой подопытной группе ни одна не умерла), при дозе 100 мг/кг смерт- ность, вызванна  гризеоловой кислотой , была 3/5 (0/5 в первые два дн  и 3/5 после 3 дней), при дозе 200 мг/кг - 4/5, Показатели смертно

30

40

-д

сти при дозе 00 и 200 мг/кг были 0/5 к концу испытани , т.е. смертность отсутствовала. Эти результаты показывают, что предлагаемое соединение практически нетоксично,

Фосфодиэстеразна  (РВЕ) ингибитор- на  активность.

Соединение по изобретению испыты- 0 вают вместе с теофиллином, вз тым дл  сравнени .

Испытание осуществл ют при использовании метода Пихардил Чанга. В качестве источника сАМР PDE использо- 5 валс  неочищенный энзиматический раствор, вз тый из мозга крыс.

В качестве субстрата использовалс  меченый С сАИР, который примен лс  в 0,2 М буферном растворе 0 трис-сол ной кислоты (рН 8,0) в количестве , достаточном дл  получени  конечной концентрации 0,14 мкМ (трис представл ет собой трис-(оксиметил) аминонетан). Раствор субстрата сме- 25 шивалс  с соответствующим количеством испытуемого соединени , растворенного в 2-5 мкл диметилсульфоксида, с 20 мкл раствора змеиного  да и - . 40 мкл неочищенного раствора энзима. Добавл лось достаточное количество трис-сол нокислотного буфера дл  достижени  общего объема 100 мкл. Смесь реагировала при 30°С в течение 20мин, В конце данного периода времени реакционна  смесь обрабатывалась смолой Амберлит (торгова  марка) 1ГР-59, и определ лс  уровень остаточной радиоактивности аденозина в продукте. Эксперимент осуществл лс  при р де уровней концентрации каждого активного соединени , и по этим данным вычисл лись величины 50%-ного ингибировани 

dso).

Эксперимент повтор лс  за исключением того, что вместе сАМР в качестве субстрата примен лс  циклический гуанозинмонофосфат (cGMP). Также;вычисл лась величина I Q против сМР PDE

Величина ингибировани  действи  фосфодиэстеразы циклического адено--.- зинмонофосфата дана в таблице.

5

Известным соединением, используемым дл  сравнени ,  вл етс  теофел- лин, который ингибирует как cAffP PDE так и cGtff PDE и примен етс  дл  данной цели как терапевтическое средст- 30, Наименее эффективное из испытанных соединений по изобретению имеет величину Ijp , котора  примерно на пор док ниже, чем соответствующа  ве личина дл  теофеллина, в то врем  как наиболее эффективное из трех соединений имеет величину примерно на 3-4 пор дка ниже, что указывает на то, что показатели активности со- единений по изоб.ретениго в качестве ингибиторов PDE высокие.

Предлагаемое соединение может использоватьс  в качестве терапевтических агентоЕ против различных цир- кул торпых церебральных расстройств.} таких как осложнени  после апоплексии головного мозга и осложнени  или остаточные  влени  инфаркта головного мозга, и в качестве активаторов метаболизма в мозгу, например, дл  лечени  старческого слабо. ми  или травматического инфаркта мозга. Соединение может вводитьс  орально или неорально (капрюмер, подкожно или внутркг- ЬШ1ечно путем инъекций).

Проведенные испытани  показали, что получаема  описанным способом 6 дезамино-6-гризеолова  кис.пота - практически нетоксичное соединение; при этом оно обладает более высокой способностью в oTHODjeHHH ингибирова

21Ь

ПИЯ действи  фосфоди:5стера- ;-1 1ик;.1н- ческого адеисзинмопофосфата с

5

Ф о р -i у л а и э о б р

Способ получен ..; 6-дезамин -гризеоловой кислоты

4 --:-- v

1 /

Ь1 N

ноос / N { М

ноос-{ он он

о т л и ч а ю щ и и с   тем,, гризёоловлто кислоту формулы

по.двергают Бзаимодействио с нптp. натри  Е кислотнь х услови х при температуре от О С до комнатной .в течение 16-50 ч

Редактор В, Петраш

Техред Л«Сердюкова

Заказ 1218/58 Тираж 352 . Подписное

ВИИИШ-i Государственного комитета по изобретени м и открыти м при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-ЗЗ Раушска  наб., д. 4/5

Корректор ВвРомзненко

Claims (1)

1. Формула и з о б р г. т е н п

   Способ получени.; 6-дезамино-б-гризеоловой кислоты формулы

   « N

   Пб 6

   ;-ч :

   коос

   НООС-Ч^ он

   он

   о т л и ч а ю щ и й с я тем, что гризёоловую кислоту формулы

   'подвергают взаимодействию с нитрате нзтрия в кислотных условиях при тек пературе от 0 С до комнатной в течение 16-50 ч.