SU1426455A3 - Способ получени пептидов - Google Patents

Способ получени пептидов Download PDF

Info

Publication number
SU1426455A3
SU1426455A3 SU843750475A SU3750475A SU1426455A3 SU 1426455 A3 SU1426455 A3 SU 1426455A3 SU 843750475 A SU843750475 A SU 843750475A SU 3750475 A SU3750475 A SU 3750475A SU 1426455 A3 SU1426455 A3 SU 1426455A3
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
gln
leu
ser
ala
arg
Prior art date
Application number
SU843750475A
Other languages
English (en)
Inventor
Эдуард Фредерик Ривье Жан
Шпис Йоахим
Уолкер Вейл Вили
Original Assignee
Дзе Салк Институт Фор Биолоджикал Стадиз (Фирма)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Дзе Салк Институт Фор Биолоджикал Стадиз (Фирма) filed Critical Дзе Салк Институт Фор Биолоджикал Стадиз (Фирма)
Application granted granted Critical
Publication of SU1426455A3 publication Critical patent/SU1426455A3/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/06—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/60—Growth hormone-releasing factor [GH-RF], i.e. somatoliberin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
    • Y10S530/843—Digestive system
    • Y10S530/845—Pancreas
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S930/00—Peptide or protein sequence
    • Y10S930/01—Peptide or protein sequence
    • Y10S930/12—Growth hormone, growth factor other than t-cell or b-cell growth factor, and growth hormone releasing factor; related peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • External Artificial Organs (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Chemical And Physical Treatments For Wood And The Like (AREA)
  • Machine Tool Sensing Apparatuses (AREA)
  • Adhesives Or Adhesive Processes (AREA)
  • Prostheses (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Изобретение касаетс  производства синтетических пептидов, в частности получени  соединений общей формулы Н.ТуГ-А1a-Asp-Alа-IIe-Phe-Thr-Asn- -Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-DAla-Gln- -Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp- -Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-Q, где Q NH,; или Glu-Ser-Asn-Gln-Glu-Arg- -Gly NH , которые могут быть использованы в медицине. Цель- - создание новых укороченных пептидов с низкой токсичностью, способных стимулировать выделение гормона роста. Их синтез ведут реакцией трет-бутилокси- карбонил-Gly с п-метилбензгидриламингидрохлоридной смолой с последующим удалением защитной группы и дальнейшим наращиванием пептидной цепи в соответствии с аминокислотной последовательностью , отвечающей указанной формуле. Затем от полученной пептидной смолы общей формулы X ,Tyr(Xj)- -А1а-Азр(Хз)-А1а-11е-РЬе-ТЬг(Х4)- -Asn(Xi)-Ser(X4)-Tyr(Xi)-Arg(X)- -Lys(X)-Val-Leu-DAla-Gln(Xs)-Leu- -Ser(X4)-Ala-Arg(X4)-Lys(X,)-Leu- -Leu-Gln(X5)-Asp(X3)-Ile-Met-Ser(X4)- -Arg(Xg)-Gln(Xj)-Gln(X5)-Gly-W, где W Xg или -Glu(Xj)-Ser(X)-Asn(Xj- -Gln(Xp-Glu(X5)-Arg(Xj)-Gly-Xg ; X, - тpeт-бyтилoкcикapбoнилj X - 2,6-дихлорбензил; Хз - бензиловый зфиpj X - бензил; X5 - ксантил; X,- толуолсульфоНИЛ; -, - дихлорбензил- оксикарбонил; X g - остаток п-метил- бензгидриламиногидрохлоридной смолы, отщепл ют трет-бутилоксикарбонильную группу обработкой СН jCOOH в среде хлористого метилена. Далее провод т деблокирование и отщепление полимерной смолы с помощью обработки продукта HF в присутствии амизола. Новые пептиды по активности близки к человеческому гормональному вьщелитель- ному фактору (1-44)NH, но более до- ступны, т.к. могут быть получены синтетическим путем. 1 табл. а «о сл с и 1С в5 4 СП СЛ

Description

11
Изобретение относитс  к способу получени  пептидов .- новых биологически активных соединений, которые могут найти применение в медицине.
Цель изобретени  - способ получени  новых синтетических укороченных пептидов, малотоксичных соединений, обладающих способностью стимулироват выделение гормона роста.
Пример 1. Синтез пептида (D-Ала) - человеческий панкреатический гормональный выделительный фактор (1-39)-NH2, имеющего формулу
H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn -Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-DAla-Gln-Se -Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile -Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Ser-Asn -Gln-Glu-Arg-Gly-NH
осуществл ют ступенчатым образом, ис пользу  пептидный синтезатор Бек- ман 990, на параметилбензгидриламин- гидрохлоридной смоле, такой, какую поставл ет фирма Bachem. Inc., имеюще пределы замещени  примерно 0,1- 0,5 млмоль/г смолы. Св зывание трет- -бутилоксикарбонил-Gly с 2 г смолы осуществл ют общим способом, в схемах А и В, которые используют во всем синтезе, и это дает замещение примерно 0,35 млмоль СЛу на грамм смолы. Все используемые растворители тщательно обезгаживают путем продувки инертным газом, например гелием или азотом, чтобы гарантировать отсутствие кислорода, который может нежелательно окислить серу остатка Met.
После сн ти  защиты и нейтрализа- ции пептидную .цепь выстраивают ступенька за ступенькой на смоле. Сн тие защиты, нейтргшизацию и добавление ка сдой аминокислоты осуществл ют в соответствии со способом по схемам А и В.
Сн тие защиты предпочтительно осуществл ть согласно схеме А.
Реагент
60% трифторуксусной
кислоты / 2% этандитиола
60% трифторуксусной
кислоты / 2% этандитиола
Изопентанол / 1% этадитиола
Триэтиламин (10%) в
МеОН
Триэтиламин (10%) в
CHjCl
МоОН (дважды)
(дважды)
Св зьшание предпочтительно осуществл ть согласно схеме В:
Реагент
Врем  смешивани , мин
5
0 5
5
0 5
0
5
N,N -Дициклогексилкарбодиимид- Трет-бутилоксикарбонил-аминокислота50-90
МеОН (дважды)0,5
(дважды)0,5 (3 моль/л) в
CHjCli ,15,0 .
-CHiClj0,5
МеОН0,5
(дважды)0,5
От одного до двух млмолей аминокислоты , защищенной трет-бутилокси- карбонидом, в хлористом метилене используют на грамм смолы в сочетании с одним эквивалентом 1,0 мол рного 30 N,N -дициклогексилкарбодиимида в хлористом метилене в течение двух часов, При св зывании трет-бутилоксикарбо- нил-Arg (толуолсульфонил) используют смесь 50% диметилформамида и хлористого метилена..Бензиловый эфир используют в качестве гидроксильной защитной группы боковой цепи дл  Ser и Thr. Паранитрофениловый сложный эфир используют дл  активации карбоксильного конца Asn или Gin, и, например , трет-бу,тилоксикарбонил-Азп (па- ра-нитрофениловый эфир) св зывают в течение ночи, использу  один эквивалент бутилового спирта в 50%-ной смеси диметилформамида и хлористого метилена, причем в этом случае добавл ют дициклогексилкарбонид. Аминогруппу Asn или Glu защищают ксанти- лом, если вместо способа активного эфира используют дициклогексилкарбо- нильное св зывание. Дихлорбензилокси- карбонил используют в качестве защитной группы дл  боковой цепи Lys. Толуолсульфонил используют дл  защиты гуандиновой группы Arg, а карбоксильную группу Gly или Asp защищают бензилом. Фенольную гидроксильную группу Tgr защищают 2,6-дихлорбензи- лом. В конце синтеза получают пептид
следующего состава X ,-Туг(X2)-Лla- -Asp(X,,)-Ala-I e-Phe-Thr(X4)-Asp(X)- .-Ser(X4)-Tyr(X7)-Arg(X)-Lys(X,)- I -Val-Leu-DAla-Glu(X5)-Leu-Ser(X4)- -Ala-Arg(Xj)-Ly5(X,)-Leu-Leu-Gln(Xj)- Asp(X )-lle-Met-Ser(XO-Arg(XJ- Gln(Xp-Gln(X5)-Gly-Glu(Xз)-Ser()- -Asn(Xi)-Gln(XJ)-Gly(Xp-Arg(X)- -Gly(Xj),
где XT - трет-бутилоксикарбонил, 2,6-дихлорбензил, Xj - бензиповьй эфир, X 4 - бензил, Xj - ксантил, Х - толуолсульфоиил, Х, - дихлорбензилок- сикарбонил, Xj - NH-смол ной носи тель. Ксантил может быть частично или полностью удален обработкой три- фторуксусной кислотой, используемой дл  удалени  (/-аминозащитной группы.
10
15
фракций, независимо проверенных на чистоту, осуществл ют с помощью гр диента GHjCN в 0,1%-ной трифторукс ной кислоте. Центральный срез зате лиофилизирутот, получают 107 млг це левого пептида, чистота которого о ло 100%. Величина оптического вращ ни  чистого пептида rf D -56,3. Пример 2. GHHTCS пептида D-Aлa J- человеческий панкреатический гормональный вьвделительный фактор (1-32)-NH2, имеющего формул
H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn- -Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-D-Ala-Gln -Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Leu- -Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-6ly-N
осуществл ют ступенчатым образом,
После св зывани  со смолой послед-20 пользу  пептидный синтезатор Бекмай 990, на параметилбензгидрилами новой смоле по примеру 1. Получают 96,5% пептида 96,5%-ной чистоты пр использовании тонкостенной хромато
него остатка Туг, трет-бутилоксикарбонил удал ют 60%-ной трифторуксус- ной кислотой в -j и получают 3,4 г зап1 1щенной пептидной смолы. Дл  отщиплени  защитных групп.с остального защищенного пептида-смолы, его обрабатывают 1,5 мл анизола, 0,5 мл метилэтилсульфида и 15 мл фтористого водорода на грамм пептида-смолы при -20 С в течение получаса и при в течение получаса. После удалени  фтористого водорода под высоким вакуумом остаток смолы-пептида промывают попеременно сухим диэтиловым эфиром и хлороформом, а затем пептид экст- рагирук т обезгаженным 2 н.водным раствором уксусной кислоты и отдел ют от смолы фильтрованием.
ОтщепленньБ и лишенный защиты пептид затем раствор ют в 0,5%-ной уксусной кислоте и подвергают его очистке, котора  может включать тонкую гель-фильтрацию на Сефадексе G-50. Получают около 1,62 г пептида.
Затем пептид подвергают дальнейшей очистке с помощью препаративной или полупрепаративной высокоэффективной жидкостной хроматографией. Кассетную установку Water Associates prep. h. G-500 заполн ют на 17 микрон Gfg кремнезом, поставл емым фирмой Vudas ЗООА. Градиент CHjGN в ТЕАР создают с помощью градиентног о маркера низкого давлени  Eldex. Хромато- графические фракции тщательно отбирают с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии и собирают только фракции, обладак цие значительной чистотой. Обессоливание очищенных
фракций, независимо проверенных на чистоту, осуществл ют с помощью градиента GHjCN в 0,1%-ной трифторуксус- ной кислоте. Центральный срез затем лиофилизирутот, получают 107 млг целевого пептида, чистота которого около 100%. Величина оптического вращени  чистого пептида rf D -56,3. Пример 2. GHHTCS пептида D-Aлa J- человеческий панкреатический гормональный вьвделительный фактор (1-32)-NH2, имеющего формулу
H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn- -Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-D-Ala-Gln -Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Leu- -Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-6ly-NHj,
осуществл ют ступенчатым образом, использу  пептидный синтезатор Бекмай 990, на параметилбензгидрилами- новой смоле по примеру 1. Получают 96,5% пептида 96,5%-ной чистоты при использовании тонкостенной хроматографим и высокоэффективной жидкостной хроматографии. Величина оптического вращени  составл ет fo/jD -57,9°.
Пример 3. Gинтeз фрагмента
человеческого панкреатического гормонального выделительного фактора, т.е. человеческого панк15еатического гормонального выделительного фактора (1- 32)-МН г, формулы
H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn- -Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln- -Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln- -Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-NH,
осуществл ют ступенчатым образом, использу  пептидный синтезатор Бек- ман 990, на параметилбензгидриламино- вой смоле по примеру 1. Этот аналог признан по существу чистым при использовании тонкослойной хроматографии и высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Пример Д. Gинтeз фрагмента человеческого панкреатического гормо- нального выделительного фактора, т.е. человеческого панкреатического гормонального вьщелительного фактора (1- 39)-NH j, имеющего формулу
-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn- -Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu- -Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Glu-Asp-Ile- -Met-Ser-Arg-Glu-Glu-Gly-Glu-Ser-Asn- -Gln-Gly-Arg-Gly-NH,
осуществл ют ступенчатым образом, использу  пептидный синтезатор Бек- ман 990, на параметилбензгидриламино вой смоле по примеру 1. Пептид признан по существу чистым при использовании тонкослойной хроматографии и высокоэффективной жидкостной хроматографии .
Пример 5. Синтез пептида D-Ала - человеческий панкреатический гормональный выделительный фак- т.ор (1-39)-NH2, имеющего формулу
H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ale-Phe-Thr-Asn- -Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-D-Ala-Gln- -Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln- -Sep-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly- -Glu-Ser-Asn-Gln-Gly-Arg-Gly-NH, осуществл ют ступенчатым образом, использу  пептидный синтезатор Бек- ман 990, на параметилбензгидрилами- новой смоле по примеру 1, Пептид признан по существу чистым при использовании тонкослойной хроматографии и высокоэффективной жидкостной хроматографии . Проведены биологические испытани  полученных соединений.
Дл  определени  эффективности различных синтетических пептидов при стимул ции выделени  гормона провод т анализы in vitro, использу  в качестве стандарта синтетический человеческий панкреатический гормональный выделительный фактор
Кроме испытаний in vitro на секрецию гормона роста, проводили также эксперименты in vivo путем введени  синтетического пептида через вживленный катетер в свободно бегающих нормальных самцов крыс, Ж 1вотных предварительно обрабатывают FL А-63, ингибитором допаминовой гидроксилазы, который подавл ет спонтанную секрецию гормона роста, не вли   на реакцию к экзогенному гормональному выде (hpGRF(1-40)OH, поскольку он  вл ет- ..елъному фактору. Образцы крови бес  эквивалентом нативного пептида) при параллельном сравнении с эквимо- л рными концентраци ми природного hpGRF(1-44)КНт и различных других
40
синтезированных аналогов.
Используют культуры, которые включают клетки -гипофиза крысы, удаленного за четыре или п ть дней до этого . Культуры, которые считаютс  оптимальными дл  выделени  гормона рос- 45 та, используют дл  сравнительного испытани . Инкубирование испытываемого вещества осуществл ют в течение 3-4 ч, после чего берут аликвоты культураль- ной среды и обрабатывают, чтобы измерить содержание в них иммунрреакци- онного гормона роста хорошо известным способом, радиоиммуноанализа.
Результаты сравнительных испытаний в виде протокола приведены в таблице.
В таблице дан уровень гормона роста в образцах клеточных культур методом радиоиммунного анализа.
рут через этот же катетер непосредственно перед инъекцией и через 5 и 20 мин после HeeJ уровни гормона роста в крови измер ют с помощью радиоиммуноанализа . Результаты показывают, что синтетические пептиды, полученные предлагаемым способом,  вл ютс  мощными стимул торами секреции питуи- тарного гормона роста и сравнимы по активности с природными гормональными вьщелительными факторами.
Таким образом, проведенные испытани  показали, что соединени , полученные предлагаемым способом,  вл ютс  малотоксичными биологически активными соединени ми, способствующими секреции гормона роста, по активнос- 55 ти они близки человеческому гормональному вьделительному фактору (1-44)Ш5, но доступнее его, поскольку содержат в своей цепи меньшее число аминокислотных остатков (32 и 39)
50
5
0
5
0
При проведении испытаний используют клетки типа PAP/GRF, Культурна  среда: 2% FCS + 5 DEX(/5-PI) + Среда инкубировани : 0,1% бис-(тр1тетил- силил)-ацетамид f аскорбинова  кис- лота/HDMe;(термин FCS означает эмбриональную тел чью сьгооротку DEX - дексаметазонj термин РАР означает крысиную переднюю долю гипофиза и показывает, что при испытании использовали первичные культуры клеток передней доли гипофиза крысы),
Испытани  in vitro этих синтетических пептидов показьгоают, что эффективна  концентраци , дающа  50%- ный эффект (, измен етс  от 20 до 100-пикомол рной, а сама  низка  эффективна  концентраци  составл ет 3-8 пмоль в литре. Максимальна  эффективна  концентраци  дл  человечес кого панкреатического гормонального выделительного фактора была примерно 1-наномол рной.
Кроме испытаний in vitro на секрецию гормона роста, проводили также эксперименты in vivo путем введени  синтетического пептида через вживленный катетер в свободно бегающих нормальных самцов крыс, Ж 1вотных предварительно обрабатывают FL А-63, ингибитором допаминовой гидроксилазы, который подавл ет спонтанную секрецию гормона роста, не вли   на реакцию к экзогенному гормональному выде ..елъному фактору. Образцы крови бе ..елъному фактору. Образцы крови берут через этот же катетер непосредственно перед инъекцией и через 5 и 20 мин после HeeJ уровни гормона роста в крови измер ют с помощью радиоиммуноанализа . Результаты показывают, что синтетические пептиды, полученные предлагаемым способом,  вл ютс  мощными стимул торами секреции питуи- тарного гормона роста и сравнимы по активности с природными гормональными вьщелительными факторами.
Таким образом, проведенные испытани  показали, что соединени , полученные предлагаемым способом,  вл ютс  малотоксичными биологически активными соединени ми, способствующими секреции гормона роста, по активнос- ти они близки человеческому гормональному вьделительному фактору (1-44)Ш5, но доступнее его, поскольку содержат в своей цепи меньшее число аминокислотных остатков (32 и 39)
и могут быть получены синтетическим путем.

Claims (1)

  1. Формула изобретени 
    Способ получени  пептидов общей формулы I
    H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn- -Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-nAla-Gln- -Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp -Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-Q,
    I
    где Q - NH -i или Glu-Ser-Asn-Gln-Glu-Arg-Gly-NHj ,
    отличающийс  тем, что тpeт-бy ГилoкcикapбoншI-Gly ввод т во взаимодействие с параметилбензгид- риламингидрохлоридной смолой, уда--: л ют защитную группу и затем провод т постепенное наращивание пептидной цепи в соответствии с аминокислотной последовательностью, отвечающей соединению общей формулы I, и от. полученной пептидной смолы общей формулы II
    X, Туг(Xj)-Ala-Asp(Х)-Ala-Ile-Phe- -Thr(X4)-Asn(Xj)-Ser(X)-Tyr(X2)- -Arg(X)-Lys(X7)-Val-Leu-DAla-Gln(Xj)- -Leu-Ser(X4)-Ala-Arg(Xt)-Lys(X7)- -Leu-Leu-Gln(Xj)-Asp(X3)-Ile-Met- -Ser(X4)-Airg(X)-Gln(Xj)-Gln(Xp- -Gly-W,
    где W - Xg или -Glu(X3)-Ser(X)- -Asn(Xj)-Gln(Xy)-Glu(X p- -Arg(Xt)-Gly Xj, X,- трет-бутилоксилкарбонил; Xj- 2,6-дихлорбензил; Xj- бензиловый эфир; бензил; Xj- ксантил Х -толуолсульфонил, Х,- дихлорбензилоксикарбонил; Xg- остаток параметилбензгидриламингидрохлоридной смолы отщепл ют трет-бутилоксикарбонильную группу обработкой трифторуксусной кислотой в хлористом метилене и за- тем провод т деблокирование и отщепление полимерной смолы обработкой полученного продукта фтористым водородом в присутствии анизола.
SU843750475A 1982-10-04 1984-06-01 Способ получени пептидов SU1426455A3 (ru)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US06/432,663 US4563352A (en) 1982-10-04 1982-10-04 Human pancreatic GRF

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU1426455A3 true SU1426455A3 (ru) 1988-09-23

Family

ID=23717095

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU843750475A SU1426455A3 (ru) 1982-10-04 1984-06-01 Способ получени пептидов

Country Status (25)

Country Link
US (1) US4563352A (ru)
EP (1) EP0105759B1 (ru)
JP (1) JPS59501951A (ru)
KR (1) KR900006712B1 (ru)
AT (1) ATE24919T1 (ru)
AU (1) AU566180B2 (ru)
CA (1) CA1243016A (ru)
DE (1) DE3369144D1 (ru)
DK (1) DK269284D0 (ru)
ES (1) ES8606399A1 (ru)
FI (1) FI83660C (ru)
GR (1) GR79698B (ru)
HU (1) HU191263B (ru)
IE (1) IE56175B1 (ru)
IL (1) IL69897A (ru)
MX (1) MX7701E (ru)
NO (1) NO167866C (ru)
NZ (1) NZ205745A (ru)
PH (1) PH20333A (ru)
PT (1) PT77453B (ru)
RO (1) RO91186B (ru)
SU (1) SU1426455A3 (ru)
WO (1) WO1984001379A1 (ru)
YU (1) YU45575B (ru)
ZA (1) ZA837208B (ru)

Families Citing this family (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4728726A (en) * 1982-10-04 1988-03-01 The Salk Institute For Biological Studies GRF analogs IIIb
US4703035A (en) * 1982-10-04 1987-10-27 The Salk Institute For Biological Studies Human pancreatic GRF amidated fragments
US4581168A (en) * 1983-02-21 1986-04-08 Sanofi Synthesis of hpGRF (Somatocrinin) in liquid phase and intermediate peptides
ZA844380B (en) * 1983-07-05 1985-01-30 Salk Inst For Biological Studi Dna encoding a grf precursor
AU575843B2 (en) * 1983-08-10 1988-08-11 The Administrators Of The Tulane Eductional Fund Growth hormone releasing peptides
US4617149A (en) * 1983-09-21 1986-10-14 Eli Lilly And Company Growth hormone release factor analogs
US4528190A (en) * 1983-10-25 1985-07-09 The Salk Institute For Biological Studies GRF Analogs IV
FR2567524B1 (fr) * 1984-07-10 1987-11-27 Sanofi Sa Procede de synthese de la somatocrinine en phase liquide et peptides intermediaires
US4649131A (en) * 1984-09-24 1987-03-10 Hoffmann-La Roche Inc. Growth hormone releasing factor analogs
EP0189673B1 (en) * 1984-12-24 1990-09-26 Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited Stable growth hormone releasing factor preparation
US4734399A (en) * 1985-08-06 1988-03-29 Hoffmann-La Roche Inc. Growth hormone releasing factor analogs
US4880778A (en) * 1986-05-12 1989-11-14 Eastman Kodak Company Combinations having synergistic growth hormone releasing activity and methods for use thereof
FR2599038B1 (fr) * 1986-05-26 1990-06-29 Sanofi Sa Procede de preparation de nonacosapeptides et peptides intermediaires
IL84758A (en) * 1987-01-13 1992-03-29 Salk Inst For Biological Studi Peptides stimulating the release of pituitary growth hormone in fish and amphibians,and pharmaceutical compositions containing them
US4839344A (en) * 1987-06-12 1989-06-13 Eastman Kodak Company Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity
USRE33699E (en) * 1987-07-09 1991-09-24 International Minerals & Chemical Corp. Growth hormone-releasing factor analogs
US4801456A (en) * 1987-07-09 1989-01-31 International Minerals & Chemical Corp. Growth hormone-releasing factor analogs
US4880777A (en) * 1987-09-01 1989-11-14 Eastman Kodak Company Synthetic peptides having growth hormone releasing activity
DE68922602T2 (de) * 1988-01-28 1995-12-07 Polygen Holding Corp Polypeptide mit hormonwachstumsbefreiender wirkung.
US5043322A (en) * 1988-07-22 1991-08-27 The Salk Institute For Biological Studies Cyclic GRF analogs
US5153175A (en) * 1989-05-25 1992-10-06 University Of Tennesee Research Corporation Method of inducing sleep with GHRH complementary peptide compositions
US5756458A (en) * 1989-06-16 1998-05-26 Pharmacia & Upjohn Company Stabilized potent GRF analogs
ZA914983B (en) * 1990-06-29 1992-03-25 Hoffmann La Roche His-grf-analogs
DK0490249T3 (da) * 1990-12-10 1995-05-29 Hoffmann La Roche Fremgangsmåde til enzymatisk fremstilling af GRF(1-44)-NH2
WO1992018531A1 (en) * 1991-04-09 1992-10-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Growth hormone releasing factor analogs
US5246920A (en) * 1992-06-15 1993-09-21 University Of South Florida Treatment of hyperprolactinemia
US5811074A (en) * 1992-06-29 1998-09-22 University Of South Florida Method of diagnosing pituitary dependent growth hormone deficiency
US5631225A (en) * 1994-10-13 1997-05-20 Novo Nordisk A/S Pharmaceutical formulation
EP0880969A1 (en) * 1997-05-28 1998-12-02 Applied Research Systems ARS Holdings N.V. Pharmaceutical compositions of peptides having low solubility in physiological medium
EP0922446A1 (en) * 1997-12-03 1999-06-16 Applied Research Systems Ars Holding N.V. Solution-phase site-specific preparation of GRF-PEG conjugates
JP2004520395A (ja) * 2001-02-02 2004-07-08 コンジュケム，インコーポレーテッド 長期持続性成長ホルモン放出因子誘導体
KR20050071498A (ko) * 2002-09-18 2005-07-07 상트르 오스피딸리에 드 루니버시떼 드 몬트리알 성장 호르몬 방출 호르몬 유사체
US20090088380A1 (en) * 2007-07-12 2009-04-02 Pierrette Gaudreau Ghrh analogs and therapeutic uses thereof
CN107936090B (zh) * 2017-12-08 2021-09-24 陕西慧康生物科技有限责任公司 一种低成本合成ARK-Cu的方法

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3904753A (en) * 1970-02-20 1975-09-09 Research Corp Clinically active bovine growth hormone fraction
US3664925A (en) * 1970-02-20 1972-05-23 Martin Sonenberg Clinically active bovine growth hormone fraction
US3853833A (en) * 1971-04-27 1974-12-10 Hormone Res Foundation Synthetic human growth-promoting and lactogenic hormones and method of producing same
US4056520A (en) * 1972-03-31 1977-11-01 Research Corporation Clinically active bovine growth hormone fraction
PH14681A (en) * 1977-11-30 1981-11-10 Pfizer Phenylglycinamides useful in the treatment of ischaemic heart disease

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Хими полипептидов. / Под ред. П.Катсо ниса. - М.: Мир, 1977, с.368. *

Also Published As

Publication number Publication date
HU191263B (en) 1987-01-28
EP0105759A2 (en) 1984-04-18
AU566180B2 (en) 1987-10-08
KR850003417A (ko) 1985-06-17
FI83660B (fi) 1991-04-30
ATE24919T1 (de) 1987-01-15
EP0105759B1 (en) 1987-01-14
PT77453A (en) 1983-11-01
MX7701E (es) 1990-09-20
IL69897A (en) 1986-12-31
FI842166A (fi) 1984-05-30
WO1984001379A1 (en) 1984-04-12
ES8606399A1 (es) 1986-04-16
US4563352A (en) 1986-01-07
EP0105759A3 (en) 1985-05-08
DK269284A (da) 1984-05-30
AU2126983A (en) 1984-04-24
IL69897A0 (en) 1984-01-31
PH20333A (en) 1986-12-02
FI83660C (fi) 1991-08-12
YU200083A (en) 1986-06-30
NO167866C (no) 1991-12-18
RO91186B (ro) 1987-07-31
RO91186A (ro) 1987-07-30
NO167866B (no) 1991-09-09
YU45575B (sh) 1992-07-20
CA1243016A (en) 1988-10-11
NO842148L (no) 1984-05-30
ES526201A0 (es) 1986-04-16
FI842166A0 (fi) 1984-05-30
GR79698B (ru) 1984-10-31
PT77453B (en) 1986-02-26
ZA837208B (en) 1984-05-30
NZ205745A (en) 1987-07-31
KR900006712B1 (ko) 1990-09-17
IE56175B1 (en) 1991-05-08
DE3369144D1 (en) 1987-02-19
JPS59501951A (ja) 1984-11-22
IE832333L (en) 1984-04-04
DK269284D0 (da) 1984-05-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SU1426455A3 (ru) Способ получени пептидов
SU1575944A3 (ru) Способ получени пептидов
SU1530097A3 (ru) Способ получени пептидов
SU1435157A3 (ru) Способ получени пептидов
SU849998A3 (ru) Способ получени циклических пептидов
SU1477248A3 (ru) Способ получени пептидов
Maerki et al. Total solid-phase synthesis of porcine gut gastrin releasing peptide (GRP), a mammalian bombesin
US4211693A (en) Peptides with para-substituted phenylalanine
AU598507B2 (en) Peptides with vasorelaxant, natriuretic and diuretic effects, a process for their preparation, agents containing them, and their use
JPH085916B2 (ja) 新規カルシトニン誘導体
EP0365779A2 (en) Cyclic GRF-analogs II
CASARETTO et al. Shortened insulin with enhanced in vitro potency
US4537716A (en) Des-serine2 or des-glycine2 -leucine22 calcitonin
WEITZEL et al. Structure and Activity of Insulin, XIV. Further Studies on the Three-Step-Increase in Activity Due to the Aromatic Amino Acids B24-26 (-Phe-Phe-Tyr-)
Chu et al. The A14 position of insulin tolerates considerable structural alterations with modest effects on the biological behavior of the hormone
SU1531857A3 (ru) Способ получени пептидов
US4703106A (en) Novel polypeptide and process for producing the same
SCHWARTZ et al. [12‐ASPARAGINE‐B] HUMAN INSULIN: An Analogue with Modification in the Hydrophobic Core of Insulin
CA1304193C (en) Grf analogs v
EP0307860B1 (en) Cyclic GRF-analogs
Miranda et al. Synthesis of human CCK26-33 and CCK-33 related analogs on 2, 4-DMBHA and TMBHA
FI105816B (fi) Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten peptidien valmistamiseksi
Ogawa et al. Synthesis and biological evaluation of a modified insulin incorporating the COOH-terminal hexapeptide (“D-region”) of insulin-like growth factor II
US4105652A (en) Synthesis of human β-endorphin
US4460576A (en) Peptide and hormone agent containing the same as effective ingredient