SU1575944A3 - Способ получени пептидов - Google Patents

Способ получени пептидов Download PDF

Info

Publication number
SU1575944A3
SU1575944A3 SU864027688A SU4027688A SU1575944A3 SU 1575944 A3 SU1575944 A3 SU 1575944A3 SU 864027688 A SU864027688 A SU 864027688A SU 4027688 A SU4027688 A SU 4027688A SU 1575944 A3 SU1575944 A3 SU 1575944A3
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
gln
leu
ala
arg
ser
Prior art date
Application number
SU864027688A
Other languages
English (en)
Inventor
Эдуард Фредерик Ривьер Жан
Валкер Вэйл Вили (Младший)
Шписс Иохим
Original Assignee
Дзе Салк Институт Фор Биолоджикал Стадиз (Фирма)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Дзе Салк Институт Фор Биолоджикал Стадиз (Фирма) filed Critical Дзе Салк Институт Фор Биолоджикал Стадиз (Фирма)
Application granted granted Critical
Publication of SU1575944A3 publication Critical patent/SU1575944A3/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/60—Growth hormone-releasing factor [GH-RF], i.e. somatoliberin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10—Organic substances
    • A23K20/142—Amino acids; Derivatives thereof
    • A23K20/147—Polymeric derivatives, e.g. peptides or proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S930/00—Peptide or protein sequence
    • Y10S930/01—Peptide or protein sequence
    • Y10S930/12—Growth hormone, growth factor other than t-cell or b-cell growth factor, and growth hormone releasing factor; related peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

ИЗОБРЕТЕНИЕ КАСАЕТСЯ ПЕПТИДОВ, В ЧАСТНОСТИ ПОЛУЧЕНИЯ СОЕДИНЕНИЙ ОБЩЕЙ Ф-ЛЫ HR1-ALA-ASP-ALA-JLE-PHE-THR-ASN-SER-TYR-ARG-LYS-VAL-LEU-GLY-GLN-LEU-SER-ALA-ARG-LYS-LEU-GLN-ASP-JLE-R27-SER-ARG-GLN-GLN-GLY-NH2, ГДЕ R1=TYR ИЛИ HIS+ R27 - NLE, MET, ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В МЕДИЦИНЕ КАК РОСТИМУЛИРУЮЩИЕ СРЕДСТВА. ЦЕЛЬ - СОЗДАНИЕ НОВЫХ БОЛЕЕ АКТИВНЫХ И МАЛОТОКСИЧНЫХ ВЕЩЕСТВ УКАЗАННОГО КЛАССА. СИНТЕЗ ПЕПТИДА ВЕДУТ СВЯЗЫВАНИЕМ C-КОНЕЧНОЙ АМИНОКИСЛОТЫ - ГЛИЦИНА С ЗАЩИЩЕННОЙ NH2-ГРУППОЙ С ПОЛИМЕРОМ-НОСИТЕЛЕМ - СМОЛОЙ МВНА В СООТНОШЕНИИ 2 ММОЛЬ АМИНОКИСЛОТЫ НА 1Г СМОЛЫ В СРЕДЕ МЕТИЛЕНХЛОРИДА ИЛИ ДИМЕТИЛФОРМАМИДА, ИЛИ ИХ СМЕСИ. ЗАТЕМ ПРОВОДЯТ ПОСТЕПЕННОЕ НАРАЩИВАНИЕ ПЕПТИДНОЙ ЦЕПИ В СООТВЕТСТВИИ С ЦЕЛЕВЫМ ПЕПТИДОМ ДО ОБРАЗОВАНИЯ ПЕПТИДИЛПОЛИМЕРА Ф-ЛЫ X-R1(X1 ИЛИ X4)-ALA-JLE-PHE-THR(X3)-ASN(X5)-SER(X3)-TYR(X4)-ARG(X1)-LYS(X1)-VAL-LEU-GLY-GLN(X5)-LEU-SER(X3)-ALA-ARG(X1)-LYS(X6)-LEU-LEU-GLN(X5)-ASP(X2)-JLE-R27-SER(X3)-ARG(X1)-GLN(X*05)-GLN(X5)-GLY-X7, ГДЕ R1 И R27 УКАЗАНЫ ВЫШЕ
X-ВОС
X1-ТОЗИЛ
X2-OBZL
X3-БЕНЗИЛ
X4-ДИХЛОРБЕНЗИЛ
X÷КСАНТИЛ
X6-2-ХЛОРБЕНЗИЛОКСИКАРБОНИЛ
X7-СМОЛА-НОСИТЕЛЬ МВНА. ДАЛЕЕ ПРОВОДЯТ ДЕБЛОКИРОВАНИЕ ПЕПТИДИЛ ПОЛИМЕРА И ОТЩЕПЛЕНИЕ ПЕПТИДА С ПОМОЩЬЮ HF СОВМЕСТНО С АКЦЕПТОРОМ-АНИЗОЛОМ ИЛИ МЕТИЛЭТИЛСУЛЬФИДОМ, ИЛИ ИХ СМЕСЬЮ, ПРИ 0-(-20)°С С ПОСЛЕДУЮЩИМ РАСТВОРЕНИЕМ В УКСУСНОЙ КИСЛОТЕ И ОЧИСТКОЙ. 1 ТАБЛ.

Description

Изобретение относитс  к способу получени  пептидов - аналогов hp GRF человека, новых биологически активных соединений, которые могут найти применение в медицине.
Цель изобретени  - способ получени  новых пептидов-аналогов hp GRF человека, малотоксичных, обладающих б9лее высокой ростостимулирующей активностью .
Сокращени , используемые в описании:
DCC-N,N - дициклогексилкарбодиимид; HOBt - 1-гидроксибензтриазол; ONp - п-нитрофенил; Вое - третбутилоксикарбонил; Tos - 4-толуолсульфонил; 2C1-Z - 2-хлорбензилоксикарбонил;
DCB - 2,6-дихлорбензил; OBzl - сложный бензиловый эфир,
см
Пример 1. Синтез Nle2TJ--hp , GRF/1-32/-NH 9 имеющего формулу
11-Tyr-Ala-Asp-Ala-Tle-Phe-Thr-Asn- Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu- t Ser-Ala-ArR-Lysr-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile- Nle Ser-Ar.f5-Gln-Gln-Gly-NH2, осуществл ют ступенчато, использу  пептидный синтезатор Бекман-990, на смоле хлоргидрата МВНА, такой, например как jg зау, используют смесь 50% диметилфорМеОН0 ,5 ,
CHjCl (дважды) 0,5
Таким образом, от 1 до 2 ммоль Вос-защищенной аминокислоты в хлористом метилене используют на грамм смолы в сочетании с одним эквивалентом 1,0 М DCC1 в хлористом метилене в течение 2 ч. Когда Boc-Arg (TOS) св смола , поставл ема  фирмой Bachem, The, имеюща  диапазон замещени  от 0,1 до 0,5 ммоль/г смолы. Св зывание Boc-Gly к смоле осуществл ют способом, описанным в программах А и В, который используют в ходе всего синтеза, что приводит к замещению примерно 0,35 ммоль глицина на грамм смолы, Все используемые растворители тщательмамида и хлористого метилена. Бензило- вый эфир используют в качестве защитной гидроксильной группы боковой цепи дл  серина и треонина. Пара-нитро- фениловый сложный эфир (ONp) используют дл  активации карбоксильного конца аснатина или глицина, Например,, Boc-Asn.(ONp) св зывают в течение ночи , использу  один эквивалент HOBt
зау, используют смесь 50% диметилфорМеОН0 ,5 ,
CHjCl (дважды) 0,5
Таким образом, от 1 до 2 ммоль Вос-защищенной аминокислоты в хлористом метилене используют на грамм смолы в сочетании с одним эквивалентом 1,0 М DCC1 в хлористом метилене в течение 2 ч. Когда Boc-Arg (TOS) св мамида и хлористого метилена. Бензило- вый эфир используют в качестве защитной гидроксильной группы боковой цепи дл  серина и треонина. Пара-нитро- фениловый сложный эфир (ONp) используют дл  активации карбоксильного конца аснатина или глицина, Например,, Boc-Asn.(ONp) св зывают в течение ночи , использу  один эквивалент HOBt
но обезгажнвают путем продувки инерт- 20 в 50% смеси диметилформамида и хлорис30
ым газом, например гелием или азотом, тобы гарантировать отсутствие кислоода , который может окислить серу осатка метионина, что нежелательно.
После удалени  защиты и нейтрали- 25 зации пептидную цепь ступенчато нара- ивают на смоле. Удаление защиты, нейтрализацию и добавление каждой аминокислоты осуществл ют по сформулированным ниже программам.
Удаление защиты предпочтительнее осуществл ть по программе А. Программа А
Реагент Врем  смешивани э
мин
60% трифторуксус- на  кислота/2% этандитиол 60% трифторуксус- на . кислота/2% этандитиол 1РА/1% этандитиол EtjN (10%) в СН2С12 Me ОН
Et9N (10%) в МеОН (дважды) СН2С17 (дважды)
Св зывание предпочтительнее осуществл ть по программе В Программа В
10
15 0,5 0,5 0,5
0,5 0,5 0,5
35
40
50
Врем  смешивани , мин
50-90 0,5 0,5
15,0 0,5
0
5
5
0
0
5
того метилена, причем в этом случае DCC не добавл ют. Аминогруппу аснатина и глутамина защищают ксантилом, если DCC-св зывание примен ют вместо использовани  активного эфира, 2-хлор- бензилоксикарбонил (2С -Z) используют в качестве защитной группы дл  боковой цепи лизина. Дл  защиты гуанидино- группы аргинина используют тозил5 а карбоксильную группу глицина или аспа- рагина защищают сложным бензиловым эфиром (OBzl)„ йенольную гидроксиль- ную группу тирозина защищают с помо щью 2,6-дихлорбензила (DCB) . В конце синтеза получают следующую композицию;
Х-Туг(X -Ala-Asp(X t)-Ala-Ile-Phe- -Thr(X3)-Asn(Xff)-Ser((X4)- -Аг (X 1 g)-Lys (X,) -Val Leu-Gly-Gln(X )- -Leu-Se r(X3)-Ala-Arg(X ,)-Lys(X/)- ,.., -Leu-Leu-Gln(Xj-)-Asp(X) -Ile-Nle- -Ser(X3)-Arg(X)-Gln(Xs)-Gln(Xs.)- -Gly-X.p где X представл ет собой Вос X 1 - тозил, Х4 - сложный бензиловый эфир (OBzl) s Х3 - бензил Х - дихлор- бензил5 X g - ксантилэ Хй - 2-хлорбенз- илоксикарбонил и X 7 - -NH-поддожка смолы Ксантил может быть частично или полностью удален при обработке трифторуксусной кислотойs используемой дл  удалени  of-аминбзащитной группы о
После св зывани  остатка тирозина со смолой Вое удал ют с помощью 60%-ной трифторуксусной кислоты в СН2С1 г. Дл  расщеплени  и удалени  защиты с оставшегос  защищенного пептида-смолы его обрабатывают 15 5 мл анизола, 0,5 мл метилэтилсульфида и 15 мл фтористого водорода .(HF) на
грамм пептида-смолы при -20е С в течение 1 - 0,5 ч и при 0°С в течение 1 - 0,5 ч. После удалени  HF под высоким вакуумом остаток смолы-пептида промывают поочередно безводным диэти- ловым эфиром и хлороформом, а затем пептид экстрагируют обезгаженным 2 н. раствором уксусной кислоты и выдел ют из смеси фильтрованием.
Отщепленный и лишенный защиты пептид раствор ют в 0,5%-ной уксусной кислоте и подвергают очистке, котора  может включать тонкую гель-фильтрацию на Сефадексе DG-50.
Затем пептид подвергают дальнейшей очистке с помощью препаративной или полупрепаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии. Гильзы дл  Le-500 фирмы Waters associates заполн ют кремнеземом 15-20 мк, поставл емым фирмой Vydac (300A). Градиент ацетонитрила создают с помощью аппарата дл  получени  градиента низкого давлени  фирмы Eldex. Хро- матографические фракции тщательно контролируют с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии и объедин ют только фракции, про вл ющие существенную частоту. Обессоливание очищенных фракций, проверенных на чистоту независимо, осуществл ют, использу  ацетонитрил в 0,1%-ной трифтор- уксусной кислоте. Окончательное элюи- рование осуществл ют из аналитической колонки Vydal Cf (5 мк), использу  смесь буферов А и В. Буфер А представл ет собой 0,1%-ную водную трифтор- уксусную кислоту, буфер В содержит 60 об.% ацетонитрила, 0,1% трифтор- уксусной кислоты, остальное - E-iQ. Дл  изократической смеси, содержащей 58 об,% буфера В, пептид элюируют при 9,2 мл. Центральный срез лиофилизи- руют, чтобы получить нужный пептид, чистота которого составл ет свыше 98%.
Оптическое вращение измер ют на фотоэлектрическом пол риметре, как величину С°П -57,8°±1 (,1%-на  уксусна  кислота, нескорректировано).
Пример 2. Синтез hp GRF аналога D-Tyri }-hp GRF(1-32)-NH2, имеющего формулу H-D-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile- -Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu- -Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu- -Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln- -Gln-Gly-NH , провод т ступенчато, использу  пептидный синтезатор Бек
o
5
0
5
0
ман-990, на смоле МВНА по способу, , описанному в примере 1. Определ ют чистоту пептида с помощью тонкослойной хроматографии и высокоэффективной жидкостной хроматографии при элю- ировании из колонки при 8,6 мл с использованием 60 об.% буфера В. Оптическое вращение измер ют на фотоэлектрическом пол риметре, как величину оП ,4°i1 (,1%-на  уксусна  кислота, нескорректировано). П р и м е р 3. Синтез CD-Met 27J- -hp GRF(1-32)-NH, имеющего формулу H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn- -Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu- -Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile- -H-MeL-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-NH, осуществл ют ступенчато, использу  пептидный синтезатор Бекман-990, на смоле МВНА по способу, описанному в примере 1. Определ ют чистоту пептида с помощью тонкослойной хроматографии и высокоэффективной жидкостной хроматографии при элюировании из колонки при 7,6 мл с использованием 57% буфера В. Оптическое вращение измер ют па фотоэлектрическом пол риметре , как величину fo -54,5°± -1 (,1%-па  уксусна  кислота, нескорректировано ) .
П р и м е р 4. Синтез Gys1J-hp GRF(1-32)-NHi, имеющего формулу H-His- -Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr- r -Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala- -Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser- -Arg-Gln-Gln-Gly-NH-i, осуществл ют ступенчато, использу  пептидный синтезатор Бекман-990, на смоле МВНА по способу, описанному в примере 1. Определ ют чистоту пептида с помощью тонкослойной хроматографии и высокоэффективной жидкостной хроматографии, при элюировании из колонки при 9,0 мл с использованием 54% буфера В. Оптическое вращение измер ют на фотоэлектрическом пол риметре, как величину Ul LQ -58,70i1 (,1%-на  уксусна  кислота, нескорректировано).
Синтез повтор ют, использу  His в качестве последнего остатка, чтобы получить (HisVhp GRF( 1-32)-NH2. Определ ют чистоту пептида при элюиро- вании из колонки при 9,2 мл с использованием 58% буфера В. Оптическое вра- измер ют на фотоэлектрическом пол риметре, как величину -58, (,1%-на  уксусна  кислота , нескорректировано).
0
5
0
5
ПримерЗ. Синтез Gvs1, NleiTj- -hp GRF(1-32)-NHj, имеющего формулу , H-His-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr -Asn- -Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu- 5 -Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile- Nle-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-NH2, осуществл ют ступенчато, использу  пептидный синтезатор Бекман-990, на смоле МВНА по способу, описанному в приме- Ю ре 1. Определ ют чистоту пептида с по- мо;щью тонкослойной хроматографии и высокоэффективной жидкостной хроматографии , при элюировании из колонки при
9,6 мл с использованием 57% буфера В. 15 после инъекции. Содержание гормона
Оптическое вращение измер ют на фотоэлектрическом пол риметре, как величину -59, (,1%-на  уксусна  кислота, нескорректировано).
Синтетические пептиды, полученные в различных примерах, сравнивают с очищенным синтетическим hp GRF(1-40)- -ОН либо с очищенным синтетическим hp GRF (1-40) -Фен-Гли-Ш2 в анализах in vitro, чтобы определить их эффективность как стимул торов выделени  гормона роста. Все эти синтетические аналоги обладают существенной действенностью в стимулировании выделени  гормона- роста.
Анализы in vitro выполн ют с использованием синтетического hp GRF в качестве стандарта при параллельном сравнении с эквимол рными концентраци ми различных синтезированных аналогов . Используют культуры, содержащие клетки питуитарных желез крысы, удаленные за четыре-п ть дней до этого . Культуры, которые считаютс  опти- мальными дл  выделени  гормона роста, используют дл  сравнительного испытани  по общему способу. Инкубирование с испытуемым веществом осуществл ют в течение 3 - 4 ч, Аликвоты культу- ральной среды удал ют и обрабатывают дл  измерени  содержани  в них имму- нореакционного гормона роста (ir GH) известным способом радиоиммуноанализа
Результаты сравнительного испытани  с использованием эквимол рных кон центраций приведены в таблице.
Испытание in vitro синтетических пептидов показывает, что эффективна  концентраци  ЕС измен етс  от 20 до 100 пМ. Сама  низка  эффективна  концентраци  составл ет 3-8 пМ. Максимальна  эффективна  концентраци  дн  hp GRF(1-40)NH.j составл ла 1 нМ
Кроме испытаний in vitro проведены эксперименты in vivo путем введени  синтетического пептида через посто нный катетер свободно передвигающимс  самцам нормальных мышей. Животных предварительно обрабатывают FLA-63 допамингидроксилазным ингибитором, который подавл ет спонтанное выделение , гормона роста,; не вли   на реакцию к экзогенному гормональному выделительному фактору (GRF). Образцы крови берут через тот же самый катетер перед введением, через 5 и 20 мин
0
5
5
0
Q
5
0
5
роста в крови измер ют путем радиоиммуноанализа .
Результаты показывают, что синтетические аналоги  вл ютс  сильными стимул торами выделени  питуитарного гормона роста.
В испытани х in vitro соединение GRF 1 2 несколько слабее , чем соответствующий природный гормон, В испытани х Ln vivo оно про вл ет биологическое действие по высвобождению гормона роста, которое существенно выше действи  соответствующего гормона с незамещенным 32 остатком , а также выше стандарта.
Проведенные испытани  показали, что соединени  по изобретению малотоксичны и про вл ют высокую ростостиму™ лирующую активность.

Claims (1)

  1. Формула изобретени 
    Способ получени  пептидов общей формулы
    HR1-Ala--Asp Ala Ile-Phe-Thr-Astt- -Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-, -Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile- R in-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-NHis где R - Туг, D-Tyr или Hisj
    R 17 - Nle, Met,
    отличающийс  тем, что С-конечную аминокислоту - глицин с защищенной аминогруппой св зывают с полимером-носителем - смолой МВНА в соотношении 2 ммоль аминокислоты на 1 г смолы, в метиленхлориде, или циметил- формамиде, или в их смеси и провод т постепенное наращивание пептидной цепи в соответствии с целевым пептидом до образовани  пептидилполимера общей формулы
    X-R,(X 1 или Х4) -Ala-Asp(Xj-Ala- -Ile-Phe-Thr (X3) -Asn(X f) -Ser (X 3) -Tyr (X4)Arg(X ,)-Lys(X -Val-Leu-Gly-Gln (X)(X3)-Ala-Arg(Xp- -Lys (X«) -Leu-Leu-Gin (Xj) -Asp (X2) -Ile- -Rz7-Ser(X3)-Arg(X)-Gln((X5.)- -Gly(Xp,
    где R1 и К17имеют указанные значени  X - Вое;
    X. т тозил;
    Xj.- OBzl;
    Х3 - бензил;
    Х - дихлорбензил;
    биологическа  активность описываемых пептидов
    Пептид
    tNle77 -hp GRF(1-32)-NH7 Hislj-hp GRF(1-32)-NHt D-Tyr -hp GRA(t-32)-NH2 His I, Nle27J-hp GRF(t-32)-NH4
    Примечание: Относительно hp GRF(1-40)
    Xj- - ксантил;
    Х6 - 2-хлорбензилоксикарбонил;
    Х7 - смола-носитель МВНА, и полученный пептидил-полимер деблокируют и отщепл ют пептид с помощью -HF вместе с акцептором, таким, как анизол, метилэтилсульфид или их смесь при температуре 0-(-20)° С с последующим растворением в уксусной кислоте и очисткой.
    Относительна  действенность in vitro
    3,21(2,02-5,43) 2,15(1,12-4,41) 0,74(0,47-1,14) 3,22(2,12-5,33)
    -Phe-Gln-NH
    г
SU864027688A 1983-01-13 1986-06-23 Способ получени пептидов SU1575944A3 (ru)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US06/457,862 US4529595A (en) 1983-01-13 1983-01-13 GRF Analogs

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU1575944A3 true SU1575944A3 (ru) 1990-06-30

Family

ID=23818361

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU864027688A SU1575944A3 (ru) 1983-01-13 1986-06-23 Способ получени пептидов

Country Status (5)

Country Link
US (1) US4529595A (ru)
CA (1) CA1271898A (ru)
NZ (1) NZ206578A (ru)
SU (1) SU1575944A3 (ru)
ZA (1) ZA839629B (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2646885C1 (ru) * 2017-02-15 2018-03-12 Владимир Николаевич Коваль Олигопептидная композиция

Families Citing this family (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4728726A (en) * 1982-10-04 1988-03-01 The Salk Institute For Biological Studies GRF analogs IIIb
US4732972A (en) * 1983-03-07 1988-03-22 Hoffmann-La Roche Inc. Polypeptides having growth hormone releasing activity
US5416073A (en) * 1983-08-10 1995-05-16 The Adminstrators Of The Tulane Educational Fund Growth hormone-releasing peptides and method of treating animals, therewith
US4617149A (en) * 1983-09-21 1986-10-14 Eli Lilly And Company Growth hormone release factor analogs
US4747825A (en) * 1984-06-29 1988-05-31 Ferring Laboratories, Inc. Apparatus and methodology for pulsed administration of growth promoting agents
FR2567524B1 (fr) * 1984-07-10 1987-11-27 Sanofi Sa Procede de synthese de la somatocrinine en phase liquide et peptides intermediaires
US4649131A (en) * 1984-09-24 1987-03-10 Hoffmann-La Roche Inc. Growth hormone releasing factor analogs
US4622312A (en) * 1984-09-24 1986-11-11 Hoffmann-La Roche Inc. Growth hormone releasing factor analogs
US4734399A (en) * 1985-08-06 1988-03-29 Hoffmann-La Roche Inc. Growth hormone releasing factor analogs
US4689318A (en) * 1985-08-29 1987-08-25 The Salk Institute For Biological Studies GRF analogs
US4710382A (en) * 1985-09-27 1987-12-01 Recker Robert R Treatment for osteoporosis using hGRF(1-40)NH2
US4880778A (en) * 1986-05-12 1989-11-14 Eastman Kodak Company Combinations having synergistic growth hormone releasing activity and methods for use thereof
US4839344A (en) * 1987-06-12 1989-06-13 Eastman Kodak Company Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity
US4801456A (en) * 1987-07-09 1989-01-31 International Minerals & Chemical Corp. Growth hormone-releasing factor analogs
USRE33699E (en) * 1987-07-09 1991-09-24 International Minerals & Chemical Corp. Growth hormone-releasing factor analogs
US4880777A (en) * 1987-09-01 1989-11-14 Eastman Kodak Company Synthetic peptides having growth hormone releasing activity
DE68922602T2 (de) * 1988-01-28 1995-12-07 Polygen Holding Corp Polypeptide mit hormonwachstumsbefreiender wirkung.
DE3906074A1 (de) * 1989-02-27 1990-08-30 Schmid Walter Verfahren zur herstellung einer koerperelektrode
US5756458A (en) * 1989-06-16 1998-05-26 Pharmacia & Upjohn Company Stabilized potent GRF analogs
JPH06500311A (ja) * 1990-06-29 1994-01-13 エフ・ホフマン―ラ　ロシュ　アーゲー ヒスチジン置換されたヒト成長ホルモン放出因子類縁体
DE69108192T2 (de) * 1990-12-10 1995-07-20 Hoffmann La Roche Verfahren zur enzymatischen Herstellung von GRF(1-44)NH2.
WO1992018531A1 (en) * 1991-04-09 1992-10-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Growth hormone releasing factor analogs
US5246920A (en) * 1992-06-15 1993-09-21 University Of South Florida Treatment of hyperprolactinemia
US5811074A (en) * 1992-06-29 1998-09-22 University Of South Florida Method of diagnosing pituitary dependent growth hormone deficiency
CA2435563A1 (en) * 2001-02-02 2002-08-15 Conjuchem Inc. Long lasting growth hormone releasing factor derivatives
CN1688696A (zh) * 2002-09-18 2005-10-26 蒙特利尔大学医疗中心 Ghrh类似物
US20090088380A1 (en) * 2007-07-12 2009-04-02 Pierrette Gaudreau Ghrh analogs and therapeutic uses thereof
CN111700170A (zh) * 2020-05-28 2020-09-25 湖南师范大学 用于改善猪肉品质的饲料添加剂及其应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Хими полимеров./Под ред. Катсо ниса П. М.: Мир, 1977, с. 368. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2646885C1 (ru) * 2017-02-15 2018-03-12 Владимир Николаевич Коваль Олигопептидная композиция

Also Published As

Publication number Publication date
NZ206578A (en) 1987-06-30
US4529595A (en) 1985-07-16
ZA839629B (en) 1984-08-29
CA1271898A (en) 1990-07-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SU1575944A3 (ru) Способ получени пептидов
SU1426455A3 (ru) Способ получени пептидов
FI88402B (fi) Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara grf-analoger
SU1530097A3 (ru) Способ получени пептидов
SU1477248A3 (ru) Способ получени пептидов
HUT62606A (en) Process for producing cyclic vasoactive peptides
IE55361B1 (en) Mammalian pgrf
Rivier et al. Single point D-substituted corticotropin-releasing factor analogs: effects on potency and physicochemical characteristics
EP0117034B1 (en) Grf analogs
KR0138907B1 (ko) 합성 펩티드
EP0363589A2 (en) Somatostatin analogues
PT94553A (pt) Processo para a preparacao de novos analogos ii de peptidos intestinais vasoactivos (vip) e de composicoes farmaceuticas que os contem
CA1243301A (en) Crf and analogs
KR0163033B1 (ko) Grf 유사체 viia
CA1247599A (en) Mammalian pgrf
CA1304193C (en) Grf analogs v
US4703035A (en) Human pancreatic GRF amidated fragments
Caranikas et al. Synthesis and biological activities of substance P antagonists
CA1340964C (en) Crf analogs
Miranda et al. Synthesis of human CCK26-33 and CCK-33 related analogs on 2, 4-DMBHA and TMBHA
AU593973B2 (en) Grf analogs v
CA1304192C (en) Grf analogs vi
CZ3004U1 (cs) Peptidy a farmaceutické prostředky s jejich obsahem
CS276972B6 (en) Peptides, process of their preparation and pharmaceutical containing thereof