NO167866B - Syntetisk peptid og preparat for tilfoersel i dyr for produksjonsfremmende formaal. - Google Patents
Syntetisk peptid og preparat for tilfoersel i dyr for produksjonsfremmende formaal. Download PDFInfo
- Publication number
- NO167866B NO167866B NO84842148A NO842148A NO167866B NO 167866 B NO167866 B NO 167866B NO 84842148 A NO84842148 A NO 84842148A NO 842148 A NO842148 A NO 842148A NO 167866 B NO167866 B NO 167866B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- ala
- leu
- gln
- ser
- arg
- Prior art date
Links
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims abstract description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 3
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 title description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 73
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 23
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 11
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims abstract description 9
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 claims abstract description 8
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 24
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 abstract description 8
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 abstract description 8
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 abstract description 4
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 abstract description 3
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 abstract description 3
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 abstract description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 abstract description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical group C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 abstract 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 abstract 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 43
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 41
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 41
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 29
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 26
- -1 o-nitrophenoxyacetyl Chemical group 0.000 description 20
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 description 19
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 19
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 19
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 description 14
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 12
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 12
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 9
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 9
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 8
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 8
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 6
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 4
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 4
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 4
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 4
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 4
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 description 3
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 3
- WXEHBUMAEPOYKP-UHFFFAOYSA-N methylsulfanylethane Chemical compound CCSC WXEHBUMAEPOYKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 3
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 description 3
- 230000036515 potency Effects 0.000 description 3
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 3
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 125000005076 adamantyloxycarbonyl group Chemical group C12(CC3CC(CC(C1)C3)C2)OC(=O)* 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 2
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 2
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 2
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 2
- 125000002795 guanidino group Chemical group C(N)(=N)N* 0.000 description 2
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 108010036509 somatotropin releasing factor 40 Proteins 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 125000001412 tetrahydropyranyl group Chemical group 0.000 description 2
- WBIIPXYJAMICNU-AWEZNQCLSA-N (2s)-5-[amino-[(4-methylphenyl)sulfonylamino]methylidene]azaniumyl-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]pentanoate Chemical compound CC1=CC=C(S(=O)(=O)NC(N)=NCCC[C@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)C=C1 WBIIPXYJAMICNU-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- NXJOFTRBTBDSHB-UHFFFAOYSA-N (4-methyl-1,4-diazepane-1-carbothioyl)sulfanyl 4-methyl-1,4-diazepane-1-carbodithioate Chemical compound C1CN(C)CCCN1C(=S)SSC(=S)N1CCN(C)CCC1 NXJOFTRBTBDSHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DHBXNPKRAUYBTH-UHFFFAOYSA-N 1,1-ethanedithiol Chemical compound CC(S)S DHBXNPKRAUYBTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000006847 BOC protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 125000000030 D-alanine group Chemical group [H]N([H])[C@](C([H])([H])[H])(C(=O)[*])[H] 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940122439 Hydroxylase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- SITWEMZOJNKJCH-UHFFFAOYSA-N L-alanine-L-arginine Natural products CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCNC(N)=N SITWEMZOJNKJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FYYSQDHBALBGHX-YFKPBYRVSA-N N(alpha)-t-butoxycarbonyl-L-asparagine Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O FYYSQDHBALBGHX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- NSTPXGARCQOSAU-VIFPVBQESA-N N-formyl-L-phenylalanine Chemical compound O=CN[C@H](C(=O)O)CC1=CC=CC=C1 NSTPXGARCQOSAU-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010031037 Pituitary Hormone-Releasing Hormones Proteins 0.000 description 1
- 102000005726 Pituitary Hormone-Releasing Hormones Human genes 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 1
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940022663 acetate Drugs 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001370 alpha-amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000005915 ammonolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004873 anchoring Methods 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940050390 benzoate Drugs 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- 125000002668 chloroacetyl group Chemical group ClCC(=O)* 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 229940001468 citrate Drugs 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- XYWDPYKBIRQXQS-UHFFFAOYSA-N di-isopropyl sulphide Natural products CC(C)SC(C)C XYWDPYKBIRQXQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UNXNGGMLCSMSLH-UHFFFAOYSA-N dihydrogen phosphate;triethylazanium Chemical compound OP(O)(O)=O.CCN(CC)CC UNXNGGMLCSMSLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 125000003754 ethoxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC)* 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 1
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 1
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000000960 hypophysis hormone Substances 0.000 description 1
- 239000002303 hypothalamus releasing factor Substances 0.000 description 1
- 230000037189 immune system physiology Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000005928 isopropyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(OC(*)=O)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229940049920 malate Drugs 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N malic acid Chemical compound OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000002184 metal Chemical class 0.000 description 1
- 229910052751 metal Chemical class 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 238000005897 peptide coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003170 phenylsulfonyl group Chemical group C1(=CC=CC=C1)S(=O)(=O)* 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 125000001557 phthalyl group Chemical group C(=O)(O)C1=C(C(=O)*)C=CC=C1 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 229920006122 polyamide resin Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000003488 releasing hormone Substances 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 238000011894 semi-preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- WGWPRVFKDLAUQJ-MITYVQBRSA-N sermorelin Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(N)=O)C1=CC=C(O)C=C1 WGWPRVFKDLAUQJ-MITYVQBRSA-N 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 1
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 229940086735 succinate Drugs 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005147 toluenesulfonyl group Chemical group C=1(C(=CC=CC1)S(=O)(=O)*)C 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 125000004044 trifluoroacetyl group Chemical group FC(C(=O)*)(F)F 0.000 description 1
- PQDJYEQOELDLCP-UHFFFAOYSA-N trimethylsilane Chemical group C[SiH](C)C PQDJYEQOELDLCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N urethane group Chemical group NC(=O)OCC JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/06—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/60—Growth hormone-releasing factor [GH-RF], i.e. somatoliberin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/843—Digestive system
- Y10S530/845—Pancreas
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/12—Growth hormone, growth factor other than t-cell or b-cell growth factor, and growth hormone releasing factor; related peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- External Artificial Organs (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Prostheses (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Chemical And Physical Treatments For Wood And The Like (AREA)
- Machine Tool Sensing Apparatuses (AREA)
- Adhesives Or Adhesive Processes (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse vedrører et syntetisk peptid, og det særegne ved peptidet er at det har formelen: H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-D-Ala-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Ser-Asn-Gln-Glu-Arg-Gly-R40"Y'
hvori R4Q er Ala eller des-R^, og Y betyr karboksyl-delen av aminosyre-resten ved c-enden og er radikalet -COOH eller -CONH2, eller et biologisk aktivt fragment derav, eller et ikke-giftig salt derav, idet hvilke som helst av restene 28 - 40 i sekvensen som begynner ved C-enden kan utelates.
Oppfinnelsen vedrører også et preparat for å stimulere frigivelse av GH for produksjonsfremmende formål i dyr, og det særegne ved preparatet i henhold til oppfinnelsen er at det inneholder en effektiv mengde av det nevnte peptid og en tålbar flytende eller fast bærer derfor.
Disse og andre trekk ved oppfinnelsen fremgår av patent-kravene.
Foreliggende oppfinnelse vedrører peptider som fremmer frigivelse av veksthormon av hypofyse-kjertelen.
Fysiologer har lenge kjent til at hypothalamus kontrollerer alle de sekretoriske funksjoner av adenohypofysen med hypothalamus som fremstiller spesielle polypeptider som initierer sekresjonen av hvert hypofyse-hormon. En inhibe-rende faktor var tidligere karakterisert i form av somato-statin som inhiberer sekresjonen av veksthormon (GH) .
En tilsvarende hypothalamisk frigivende faktor for hypofyse-
GH var lenge ettersøkt, og i 1982 ble det isolert et polypeptid fra en ekstrakt fra en human pankreatisk tumor, renset, karakterisert, syntetisert og testet og som fremmer frigivelsen av GH av hypofysen. Formelen av dette 40-rest peptid er som følger: H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Ser-Asn-Gln-Glu-Arg-Gly-Ala-OH. Peptidet refereres til i det følgende som hpGRF (for human pankreatisk tumor GH frigivende faktor). En 44-rest amidert versjon av dette peptid ble isolert fra en annen tumor som inkluderte Arg-Ala-Arg-Leu ved C-enden.
Det er funnet at syntetiske peptid-analoger av hpGRF med D-Ala substituert for glycin-resten i 15-stillingen har full egen biologisk aktivitet og øket motstand mot enzymatisk nedbrytning i kroppen, slik at varigheten av den biologiske påvirkning forlenges. Videre er det overraskende funnet at to fragmenter av hpGRF som henholdsvis inkluderer de 29 N-terminale rester eller de 32 N-terminale rester, med C-enden amidert, viser biologisk potens tilsvarende som for det native 40-rest peptid. Oppfinnelsen tilveiebringer således syntetiske hpGRF-fragmenter med 32 rester eller mindre som er amidert ved C-enden, og som inkluderer den N-terminale peptid-sekvens og tilstrekkelig ytterligere rester til å fremvise biologisk potens.
Preparater i samsvar med oppfinnelsen inkluderer slike analoger av hpGRF eller biologisk aktive amiderte fragmenter derav, eller et ikke-giftig salt av de nevnte, dispergert i en tålbar flytende eller fast bærer. Slike preparater kan. anvendes for tilførsel til dyr for produksjonsfremmende formål innenfor f.eks. kjøtt- eller melkeproduksjon.
Nomenklaturen anvendt for å definere peptidene er den som angis av Schroder & Lubke, "The Peptides", Academic Press
(1965), hvor i samsvar med konvensjonell fremstilling.amino-gruppen ved N-enden vises til venstre og karboksyl-gruppen ved C-enden til høyre. Hvor aminosyre-resten har isomere former er det L-formen av aminosyren som er representert med mindre annet uttrykkelig er angitt. Oppfinnelsen tilveiebringer også syntetiske hpGRF-peptider med følgende formel: H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-D-Ala-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-NH2 eller et ikke-giftig salt derav, idet hvilke som helst av restene 28 - 32, særlig 30-32, i sekvensen som begynner ved C-enden kan utelates.
Peptidene syntetiseres ved hjelp av en passende metode, som f.eks. ved utelukkende fast-fase-teknikk, ved delvis fast-fase-teknikk, ved fragment-kondensering, ved klassiske oppløsningskoblinger eller ved anvendelse av nylig utviklet rekombinant DNA-teknikk for fragmentene inneholdende bare L-isomer-rester. F.eks. er teknikken med utelukkende fast-fase-syntese angitt i læreboken "Solid-Phase Peptide Synthesis", Stewart & Young, Freeman & Co., San Fransisco, 1969, og er eksemplifisert ved læren i U.S. patentskrift 4 105 603 (8. august 1978) til Vale et al. Fragment-kondensa-sjonsmetoden for syntese er eksemplifisert i U.S. patentskrift 3 972 859 (3. august 1976). Andre tilgjengelige synteser er eksemplifisert i U.S patentskrift 3 842 067
(15. oktober 1974) og U.S. patentskrift 3 862 925 (28. januar 1975).
Syntese ved bruk av rekombinant DNA-teknikk, for oppfinnelsens formål, skal forstås å inkludere den passende anvendelse av et strukturelt gen som koder for den ønskede form av hpGRF-fragment. Det syntetiske hpGRF-fragment kan oppnås ved å transformere en mikro-organisme under anvendelse av en ekspresjons-vektor som inkluderer en promoter og operator sammen med sådant strukturelt gen og bevirker at denne transformerte mikro-organisme uttrykker hpGRF-fragmentet. Et ikke-humant dyr kan også anvendes for å fremstille hpGRF-fragmentet ved gen-dyrking under anvendelse av et slikt strukturelt gen, og de generelle metoder er angitt i U.S. patentskrift 4 276 282 (30. juni 1981), eller ved å anvende mikro-injeksjon av fostere som beskrevet i WO83/01783 publisert 26. mai 1983 og WO82/04443 publisert 23. desember 1982. Det syntetiske hpGRF-fragment kan også fremstilles direkte i dyret som skal gis akselerert vekst ved de metoder som er beskrevet i de to nevnte WO-publikasjoner.
Felles for kjemiske eller koblings-synteser er beskyttelsen av de labile sidekjedegrupper av de forskjellige aminosyre-deler med passende beskyttende grupper som vil forhindre en kjemisk reaksjon fra å foregå ved dette stedet inntil gruppen endelig fjernes. Det er også vanligvis vanlig med beskyttelse av en a-amino-gruppe på en aminosyre eller et fragment mens denne del reagerer ved karboksylgruppen, etterfulgt av den selektive fjernelse av den a-amino beskyttende gruppe for å tillate at etterfølgende reaksjon kan foregå ved dette sted. Følgelig er det som et trinn i syntesen vanlig at en mellom-produktforbindelse fremstilles som inkluderer hver av aminosyre-restene lokalisert i sin ønskede sekvens i peptid-kjeden med sidekjedebeskyttende grupper knyttet til de passende rester.
For fremstilling av de nevnte peptider kan det anvendes tilsvarende mellomproduktforbindelser med formelen: X^Tyr (X2) -Ala-Asp (X3) -Ala-Ile-Phe-Thr (X4) -Asn (X5) - Ser(X<4>)-Tyr(X<2>)-Arg(X<6>)-Lys(X<7>)-Val-Leu-R15-Gln(X<5>)-Leu-Ser(X<4>)-Ala-Arg(X<6>)-Lys(X<7>)-Leu-Leu-Gln(X<5>)-Asp(X<3>)-Ile-Met-Ser(X<4>)-Arg(X<6>)-Gin(X<5>)-Gin(X<5>)-Gly-Glu(X<3>)-Ser (X4) -Asn (X5) -Gin (X5 ) -Glu (X3) -Arg (X6) -Gly-R4()-X8
(eller sekvenser passende forkortet ved C-enden), hvori er enten hydrogen eller en a-amino beskyttende gruppe.
De a-amino beskyttende grupper som omfattes av X<1> er dem som er kjent å være nyttige ved den trinnvise syntese av polypeptider. Blant klassene av a-amino beskyttende grupper som dekkes av X<1> er (1) acyl-type beskyttende grupper som formyl, trifluoracetyl, phtalyl, toluensylfonyl (Tos), benzen-sulfonyl, nitrofenolsulfenyl, tritylsulfenyl, o-nitrofenoksy-acetyl, kloracetyl, acetyl og t-klorbutyryl; (2) aromatiske uretan-type beskyttende grupper som benzyloksykarbonyl (Z) og substituert Z som f.eks. p-klorbenzyloksykarbonyl, p-nitro-benzyloksykarbonyl, p-brombenzyloksykarbonyl, p-metoksy-benzyloksykarbonyl; (3) alifatisk uretan beskyttende grupper som t-butyloksykarbonyl (BOC), diisopropylmetyloksykarbonyl, isopropyloksykarbonyl, etoksykarbonyl, allyloksykarbonyl; (4) cykloalkyl-uretan-type beskyttende grupper som cyklopentyl-oksykarbonyl, adamantyloksykarbonyl og cykloheksyloksy-karbonyl; (5) tiouretan-type beskyttende grupper som f.eks. fenyltiokarbonyl; (6) alkyl-type beskyttende grupper som f.eks. trifenylmetyl (trityl), benzyl; (7) trialkylsilan-grupper som trimetylsilan. Den foretrukne a-amino beskyttende gruppe er BOC.
X2 er en beskyttende gruppe for den fenoliske hydroksyl-gruppe i Tyr valgt fra gruppen bestående av tetrahydropyranyl, tert-butyl, trityl, Bzl, CBZ, 4Br-CBZ og 2,6-diklorbenzyl (DCB).
Den foretrukne beskyttende gruppe er 2,6-diklorbenzyl. X 2 kan være hydrogen som betyr at det ikke er noen beskyttende gruppe på hydroksyl-gruppen.
X3 er hydrogen eller en ester-dannende beskyttende gruppe for karboksyl-gruppen i Asp eller Glu og er valgt fra gruppen bestående av benzyl (OBzl), 2,6-diklorbenzyl, metyl og etyl.
X<4> er en beskyttende gruppe for hydroksyl-gruppen i Thr eller Ser og velges fra gruppen bestående av acetyl, benzoyl, tert-butyl, trityl, tetrahydropyranyl, Bzl, 2,6-diklorbenzyl og CBZ. Den foretrukne beskyttende gruppe er Bzl. X <4>kan være hydrogen som betyr at det ikke er noen beskyttende gruppe på hydroksyl-gruppen.
X 5er hydrogen eller en beskyttende gruppe for sidekjede-aminogruppen i Asn eller Gin og er foretrukket xantyl (Xan) .
X^ er.en beskyttende gruppe for guanidino-gruppen i Arg valgt fra gruppen bestående av nitro, Tos, CBZ, adamantyloksykarbonyl and BOC, eller er hydrogen.
X<7> er hydrogen eller en beskyttende gruppe for sidekjede-aminosubstituenten i Lys. Illustrerende for passende side-kjedeaminobeskyttende grupper er 2-klorbenzyloksykarbonyl (2C1-Z) Tos, t-amyloksykarbonyl og BOC.
Met kan eventuelt være beskyttet mot oksygen, men er foretrukket ubeskyttet.
Seleksjonen av en sidekjede-aminobeskyttende gruppe er ikke kritisk med unntagelse av at den ikke må være en gruppe som ikke fjernes under avbeskyttelsen av a-amino-gruppene under syntesen. Følgelig bør den a-aminobeskyttende gruppe og den sidekjede-aminobeskyttende gruppe ikke være den samme.
X<8> kan være en beskyttende gruppe for den C-terminale karboksylgruppe, f.eks. den ester-dannende gruppe X-*, eller en forankringsbinding anvendt ved fast-fase-syntese for tilknytning til en fast harpiksbærer, eller er des-X<8>, hvori resten ved C-enden har en karboksyl-del som er Y. Når en fast harpiksbærer anvendes kan denne ha formelen: -0-CH2~harpiksbærer, -0-CH2-benzyl-polyamid-harpiksbærer, -NH-benzhydrylamin (BHA) harpiksbærer og -NH-parametyl-benzhydrylamin (MBHA) harpiksbærer. Polyamid-polymeren kan fåes i handelen og drøftes detaljert i Bioorganic Chemistry 8, 351-370 (1979), hvor en foretrukket versjon derav drøftes i forbindelse med syntesen illustrert i figur 6. Når denne anvendes kan de sidekjedebeskyttende grupper først avspaltes ved hjelp av behandling med hydrogenfluorid (HF), og deretter kan peptidet avspaltes fra harpiksen som amidet ved ammono-lyse. Når det usubstituerte amid ønskes, foretrekkes bruk av BHA- eller MBHA-harpiks p.g.a. at avspaltningen direkte gir amidet.
I formelen for mellomproduktforbindelsen er minst én av X-gruppene en beskyttende gruppe eller X<8> inkluderer en harpiksbærer.
Ved selektering av en spesiell sidekjedebeskyttende gruppe som anvendes ved syntese av peptidene, følges følgende regler: (a) den beskyttende gruppe må bibeholde sine beskyttende egenskaper og ikke avspaltes under koblingsbetin-gelsene, (b) den beskyttende gruppe bør være stabil overfor reagenset og, med unntagelse av Xan, bør den være stabil under reaksjonsbetingelsene som velges for fjernelse av den a-aminobeskyttende gruppe i hvert trinn av syntesen, og (c) den sidekjedebeskyttende gruppe må kunne fjernes etter fullført syntese inneholdende den ønskede aminosyre-sekvens, under reaksjonsbetingelser som ikke vil endre peptid-kjeden.
Peptidene fremstilles foretrukket under anvendelse av fast-fase-syntese, som f.eks. beskrevet av Merrifield, J. Am. Chem. Soc, 85, side 2149 (1963), selv om andre ekvivalente kjemiske synteser som er kjent på området også kan anvendes som tidligere nevnt. Fast-fase-syntese begynnes fra C-enden av peptidet ved kobling av en beskyttet a-aminosyre til en passende harpiks. Et slikt utgangsmateriale for 40-rest peptidet kan fremstilles ved å knytte a-aminobeskyttet Ala ved hjelp av en ester-binding til en klormetylert harpiks eller en hydroksymetyl-harpiks, eller ved en amid-binding til en BHA-harpiks eller MBHA-harpiks. BHA- og MBHA-harpiksbærere kan fåes i handelen og anvendes generelt bare når det ønskede polypeptid som syntetiseres har et usubstituert amid ved
C-enden.
Ala, beskyttet med BOC, kan kobles til den klormetylerte harpiks i henhold til metoden til Monahan og Gilon, Biopolymer 12, ss. 2513-19, 197 3. Etter koblingen av BOC-Ala til harpiks-bæreren fjernes den a-aminobeskyttende gruppe, f.eks. ved å anvende trifluor-eddiksyre (TFA) i metylen-klorid, TFA alene eller HCl i dioksan. Avbeskyttelsen gjennomføres ved en temperatur mellom 0°C og romtemperatur. Andre standard spaltningsreagenser og betingelser for fjernelse av spesifikke a-aminobeskyttende grupper kan anvendes som beskrevet i Schroder & Lubke, "The Peptides", 1, ss. 72-74 (Academic Press 1965) .
Etter fjernelse av den a-aminobeskyttende gruppe for Phe blir de resterende a-amino- og sidekjede-beskyttede aminosyrer koblet trinnvis i den ønskede rekkefølge til å gi mellomproduktforbindelsen definert i det foregående, eller som et alternativ til å addere hver aminosyre separat ved syntesen, kan noen av dem kobles til hverandre før tilsetningen til fast-fase-reaktoren. Seleksjonen av et passende koblingsmiddel er innenfor vanlig fagkunnskap for den fagkyndige. Spesielt egnet som et koblingsmiddel er N,N<1->dicykloheksyl-karbodiimid (DCCI).
De aktiverende reagenser som anvendes ved fast-fase-syntesen av peptidene er vel kjent innen peptid-området. Eksempler på passende aktiverende reagenser er karbodiimidene, som N,N'-diisopropyl-karbodiimid, N-etyl-,N'-(3-dimetylaminopropyl)-karbodiimid. Andre aktiverende reagenser og deres bruk ved peptid-kobling er beskrevet av Schroder & Lubke supra, i kap. III og av Kappor, J. Phar. Sei., 59, ss.. 1-27 (1970).
Hver beskyttet aminosyre eller aminosyre-sekvens innføres i fast-fase-reaktoren i et overskudd på omtrent 4 ganger eller mer, og koblingen kan gjennomføres i et medium av dimetyl-formamid (DMF): CH2C12 (1:1) eller i DMF eller CH2C12 alene. I tilfeller hvor ufullstendig kobling forekommer, gjentas koblingsprosedyren før fjernelse av den a-aminobeskyttende gruppe før koblingen av den neste aminosyre. Det heldige resulat av koblingsreaksjonen i hvert trinn av syntesen styres ved hjelp av ninhydrin-reaksjonen som beskrevet av E. Kaiser et al., Anal. Biochem. 34, 595 (1970). Koblings-reaks j onene kan gjennomføres automatisk, f.eks. på en Beckman 990 Automatic Synthesizer, under anvendese av et program som rapportert i Rivier et al., Biopolymers, 1978, 17, ss. 1927-1938.
Etter at den ønskede aminosyre-sekvens er fullført kan mellomprodukt-peptidet fjernes fra harpiksbæreren ved behandling med et reagens som f.eks. flytende hydrogenfluorid, som ikke bare spalter peptidet fra harpiksen, men
. også avspalter alle resterende sidekjedebeskyttende grupper X2, X3, X4, X5, X<6> og X<7>, forankringsbindingen X<8> og den a-aminobeskyttende gruppe X<1> til å gi peptidet i form av den fri syre. P.g.a. at Met er tilstede i sekvensen blir den BOC-beskyttende gruppe foretrukket først spaltet under anvendelse av trifluoreddiksyre (TFA)/etanditiol før spaltning av
peptidet fra harpiksen med HF for å hindre mulig S-alkyle-ring. Når HF anvendes for spaltning, inkluderes anisol og metyletyl-sulfid i reaksjonsholderen for nøytralisering.
Det følgende eksempel angir den foretrukne metode for syntetisering av hpGRF med hjelp av fast-fase-teknikken. Det vil selvfølgelig forstås at syntese av et tilsvarende kortere peptid-fragment gjennomføres på samme måte ved enkel elimine-ring av det nødvendige antall aminosyrer ved den ene eller den annen ende av kjeden. Det antas imidlertid på det nåværende tidspunkt at biologisk aktive fragmenter bør inneholde den indikerte sekvens ved N-enden.
EKSEMPEL I
Syntese av D-Ala15 -hpGRF(1-40)-NH2 med formel: H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-D-Ala-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Ser-Asn-Gln-Glu-Arg-Gly-Ala-NH2
gjennomføres på trinnvis måte under anvendelse av en Beckman 990 Peptide Synthesizer på en MBHA hydroklorid-harpiks, f.eks. den som kan fåes fra Bachem, Inc. med et substitu-sjonsområde på omtrent 0,1 til 0,5 mmol/g harpiks. Kobling av BOC-Ala til harpiksen gjennomføres ved den generelle metode angitt i det følgende i skjemaer A og B som anvendes gjennom hele syntesen, og dette resulterer i substitusjon av omtrent 0,35 mmol Ala pr. gram harpiks. Alle løsningsmidler som
anvendes avgasses omhyggelig ved spyling med en inert gass, f.eks. helium eller nitrogen, for å sikre fravær, av oksygen som uønsket kunne oksydere svovelet i Met-resten.
Etter avblokkering og nøytralisering bygges peptid-kjeden trinnvis på harpiksen. Avblokkering, nøytralisering og addisjon av hver aminosyre gjennomføres generelt i samsvar med metoden angitt detaljert i U.S. patentskrift 4 292 313 (Vale et al.).
Avblokkering gjennomføres foretrukket i samsvar med skjema A som følger:
Koblingene gjennomføres foretrukket som angitt i skjema B som følger:
Kort sagt anvendes ett til to m-mol BOC-beskyttede aminosyrer i metylen-klorid pr. gram harpiks, pluss en ekvivalent av 1.0 molar DCCI i metylen-klorid i to timer. Når BOC-Arg(TOS) kobles, anvendes en blanding av 50% DMF og metylen-klorid. Bzl-eter anvendes som den hydroksyl-sidekjede-beskyttende gruppe for Ser og'Thr. P-nitrofenyl-esteren(ONp) anvendes for å aktivere karboksyl-enden av Asn eller Gin, og f.eks. kobles BOC-Asn(ONp) over natten under anvendelse av en ekvivalent HOBt i en 50% blanding av DMF og metylen-klorid, og i dette tilfellet tilsettes ikke noe DCC. Amido-gruppen i Asn eller Gin beskyttes med Xan når DCC-kobling anvendes i stedet for den aktive ester-metode. 2C1-Z anvendes som den beskyttende gruppe for Lys-sidekjeden. Tos anvendes for å beskytte guanidino-gruppen i Arg, og Glu eller Asp karboksyl-gruppe beskyttes som OBzl. Den fenoliske hydroksyl-gruppe i Tyr beskyttes med DCB. Ved slutten av syntesen oppnås følgende sammensetning: X<1->Tyr(X<2>)-Ala-Asp(X<3>)-Ala-Ile-Phe-Thr(X<4>)-Asn(X<5>)-Ser(X<4>)-Tyr(X<2>)-Arg(X<6>)-Lys(X<7>)-Val-Leu-D-Ala-Gln(X<5>)-Leu-Ser(X4)-Ala-Arg(X6)-Lys(X7)-Leu-Leu-Gln(X5) -Asp (X3) - Ile-Met-Ser(X<4>)-Arg(X<6>)-Gin(X<5>)-Gin(X<5>)-Gly-Glu(X<3>)-Ser(X<5>)-Asn(X<3>)-Gin(X<5>)-Glu(X<3>)-Arg(X<5>)-Gly-Ala-X<8>,
12 3 4
hvori X er BOC, X er DCB, X er benzyl-ester, X er Bzl,
c. c. n Q
X er Xan, X er Tos, X er "Cl-Z og X er -NH-harpiksbærer. Xan kan være blitt delvis eller fullstendig fjernet med TFA-behandling anvendt for avblokkering av den o(-amino-beskyttende gruppe.
Etter at den endelige Tyr-rest er blitt koblet til harpiksen fjernes BOC med 60% TFA i CH2C12. For å spalte og avbeskytte den resterende beskyttede peptid-harpiks behandles denne med 1,5 ml anisol, 0,5 ml metyletylsulfid og 15 ml HF pr. gram peptid-harpiks ved -20°C i en halv time og ved 0°c i en halv time. Etter fjernelse av HF under høyt våkum vaskes harpiks-peptidresten alternativt med tørr dietyleter og kloroform, og peptidet ekstraheres så med avgasset 2N vandig eddiksyre og separeres fra harpiksen ved filtrering.
Det spaltede og avbeskyttede peptid oppløses så i 0-5% eddiksyre og underkastes rensing som kan inkludere filtrering med "Sephadex G-50" fin gel.
Peptidet blir så ytterligere renset ved preparativ eller halv-preparativ HPLC som beskrevet i Rivier et al., Peptides, Structure and Biological Function, (1979) ss. 125-128 og Marki et al., J.Am.Chem.Soc. 103, 3178 (1981). Oppsummert fylles patroner som er tilpasset Waters Associates prep LC-500 med 15 til C18 Silica fra Vydac (300 Å). En gradient av CH3CN i TEAP utvikles ved hjelp av en Eldex lavtrykks-gradientinn-retning som beskrevet i Rivier, J., J. Liq. Chromatography 1, 343-367 (1978). De kromatografiske fraksjoner overvåkes nøy-aktig med HPLC, og bare de fraksjoner som viser vesentlig renhet oppsamles. Avsalting av de rensede fraksjoner som uav-hengig kontrolleres for renhet oppnås under anvendelse av en gradient av CH3CN i 0, 1% TFA. Senter-fraksjonen blir så frysetørket til å gi det ønskede peptid med renhet som kan være over 98%.
Syntesen gjentas under anvendelse av en klormetylert harpiks for å danne jb-Ala<1> J-hpGRF(1-40)-OH under anvendelse av metoder som generelt beskrevet i Rivier, J., J.Amer.Chem. Soc, 96, 2986-2992 (1974).
EKSEMPEL II
Syntese av jp-Ala15j-hpGRF(1-32)-NH2.med formel: H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-D-Ala-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-NH2
gjennomføres på trinnvis måte under anvendelse av en Beckman 990 Peptide Synthesizer på en MBHA-harpiks på den måte som er beskrevet i Eksempel I. Peptidet anses å være hovedsakelig rent under anvendelse av TLC og HPLC.
EKSEMPEL III
Syntese av |p-Ala15 J-hpGRF (1-27) -NH2 med formel: H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-D-Ala-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-NH2 . gjennomføres på trinnvis måte under anvendelse av en Beckman 990 Peptide Synthesizer på en MBHA-harpiks på den måte som er beskrevet i Eksempel I. Peptidet anses å være hovedsakelig rent under anvendlese av TLC og HPLC.
Eksempel IV
Syntese av et hpGRF-fragment, d.v.s. hpGRF(1-32)-NH2 med formel: H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-NH2
gjennomføres på trinnvis måte under anvendelse av en Beckman 990 Peptide Synthesizer på en MBHA-harpiks på den måte som er beskrevet i Eksempel I. Denne analog anses å være hovedsakelig ren ved anvendelse av TLC og HPLC.
EKSEMPEL V
Syntese av et hpGRF-fragment, d.v.s. hpGRF(1-27)-NH2 med formel: H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-NH2
gjennomføres på trinnvis måte under anvendelse av en Beckman 990 Peptide Synthesizer på en MBHA-harpiks på den måte som er beskrevet i Eksempel I. Peptidet anses å være hovedsakelig rent under anvendelse av TLC og HPLC.
EKSEMPEL VI
Syntese av et hpGRF-fragment, d.v.s. hpGRF(1-3 9)-NH2 med formel: H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Ser-Asn-Gln-Glu-Arg-Gly-NH2
gjennomføres på en trinnvis måte under anvendelse av en Beckman 990 Peptide Synthesizer på en MBHA-harpiks på den
måte som er beskrevet i Eksempel I. Peptidet anses å være hovedsakelig rent under anvendelse av TLC og HPLC.
EKSEMPEL VII
Syntese av jo-Ala15 -hpGRF(1-39)-NH2 med formel: H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-D-Ala-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Ser-Asn-Gln-Glu-Arg-Gly-NH2
gjennomføres på en trinnvis måte under anvendelse av en Beckman 990 Peptide Synthesizer på en MBHA-harpiks på den
måte som er beskrevet i Eksempel I. Peptidet anses å være hovedsakelig rent under anvendelse av TLC og HPLC.
EKSEMPEL VIII
Syntese av et hpGRF-fragment, d.v.s. hpGRF(1-29)-NH2 med formel: H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-NH2
gjennomføres på en trinnvis måte under anvendelse av en Beckman 990 Peptide Synthesizer på en MBHA-harpiks på den
måte som er beskrevet i Eksempel I. Peptidet anses å være hovedsakelig rent under anvendelse av TLC og HPLC.
Syntesen gjentas under anvendelse av en klormetylert harpiks for å frembringe det samme peptid i fri syreform som generelt indikert i det foregående.
EKSEMPEL IX
Syntese av et hpGRF-fragment, d.v.s. hpGRF(l-28) med formel: H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-NH2 gjennomføres på en trinnvis måte under anvendelse av en Beckman 990 Peptide Synthesizer på en MBHA-harpiks på.den måte som er beskrevet i Eksempel I. Peptidet anses å være hovedsakelig rent under anvendelse av TLC og HPLC.
Syntesen gjentas under anvendelse av en klormetylert harpiks for å frembringe det samme peptid i fri syreform som generelt indikert i Eksempel I.
De to syntetiske peptider fremstilt i Eksempel I sammenlignes med renset nativt hpGRF ved in vitro forsøk og finnes å fremvise lignende potenser for sekresjon av GH og lignende tilhørende aktiviteter.
For å bestemme effektiviteten av de forskjellige syntetiske peptider til å fremme frigivelse av veksthormon, gjennomføres in vitro forsøk under anvendelse av syntetisk hpGRF(1-40)-0H som en standard (p.g.a at det er ekvivalenten av det native peptid) i side-ved-side sammenligning med ekvimolare konsentrasjoner av de forskjellige andre analoger og fragmenter som ble syntetisert. Kulturer anvendes som inkluderer celler av rotte-hypofysekjertler som er fjernet omtrent fire til fem døgn tidligere. Kulturer som er betraktet optimale for sekresjon av veksthormon anvendes for den komparative testing, på den generelle måte som er beskrevet i Vale et al., Endocrinology, 91, 562-575 (1972). Inkubasjon med den substans som skal testes gjennomføres i tre til fire timer, og delporsjoner av dyrkningsmediet fjernes og behandles for å måle deres innhold av immunoreaktivt GH(ir GH) ved hjelp av en vel-karakterisert radioimmunoassay.
Resultatene av denne komparative testing for ekvimolare konsentrasjoner er vist i tabell I.
In vitro testing av disse syntetiske peptider viser at EC50 varierer fra 20 til 100 picomolar, og den laveste effektive konsentrasjonen er 3 til 8 picomolar. Den maksimale effektive konsentrasjonen for hpGRF(1-40)-NH2 var omtrent 1 nanomolar.
I tillegg til in vitro testene for sekresjon av veksthormon ble det også gjennomført in vivo forsøk ved injisering av det syntetiske peptid gjennom et innført kateter i frittløpende normale hannrotter. Dyrene forhåndsbehandles med FLA-63, en dopamin-hydroksylase-inhibitor som undertrykker spontan GH-sekresjon uten å påvirke responsen for eksogent GRF. Blod-prøver gjennom det samme kateter umiddelbart før og 5 og 20 min. etter injeksjoner. GH-speil i blodet måles ved hjelp av radioimmunoassay. Resultatene viser at syntetisk hpGRF(l-40)-NH2 og andre analoger er kraftige stimulatorer for sekresjon av hypofyse GH. Doseringer mellom omtrent 40 nanogram og omtrent 25 mikrogram pr. kg kroppsvekt ble funnet å være effektive.
Ytterligere testing viser at de syntetiske hpGRF-analoger som syntetisert i Eksempel I, II, III, og VII fremviser den fulle egenbiologiske aktivitet av hpGRF(1-40)-OH.
Økt GH-sekresjon og derav medfølgende økning i vekst bør kunne oppnås i dyr med normale GH-speil. Videre bør tilførsel av hpGRF-peptider endre kroppsfettinnhold og modifisere andre GH-avhengige metaboliske, immunologiske og utviklings-prosesser som kan være nyttige ved oppdrett av kommersielle
dyr som kyllinger, griser, kveg og sauer for å påskynde veksten og øke forholdet mellom oppnådd protein og fett.
For tilførsel av syntetiske hpGRF-peptider til kommersielle og andre dyr for å øke veksten og redusere fettinnholdet kan en renhet så lav som 5% eller endog så lav som 0,1% være brukbar.
Syntetiske hpGRF-peptider eller ikke-giftige salter derav, kombinert med en tålbar bærer til å danne et preparat, kan tilføres dyr, enten intravenøst, subkutant, intramuskulært, intranasalt eller endog oralt (når effektive koblere eller bærere utvikles).
Disse peptider tilføres ofte i form av farmasøytisk tålbare, ikke-giftige salter, som syre-addisjonssalter eller metall-komplekser, f.eks. med sink, jern eller lignende (som betraktes som salter for oppfinnelsens formål). Illustrerende for slike syre-addisjonssalter er hydrokloridet, hydrobromi-det, sulfatet, fosfatet, maleinatet, acetatet, sitratet, benzoatet, suksinatet, malatet, askorbatet, tartratet og lignende.
Claims (3)
1. Syntetisk peptid,
karakterisert ved at det har formelen: H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-D-Ala-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-lle-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Ser-Asn-Gln-Glu-Arg-Gly- R40"Y'
hvori R40 er Ala eller des-R4Q. og Y betyr karboksyl-delen av aminosyre-resten ved C-enden og er radikalet -COOH eller - CONH2, eller et biologisk aktivt fragment derav, eller et ikke-giftig salt derav, idet hvilke som helst av restene 28 - 40 i sekvensen som begynner ved C-enden kan utelates.
2. Syntetisk peptid,
karakterisert ved at det er definert ved formelen: H-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-D-Ala-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile- Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-NH2
eller.et ikke-giftig salt derav, idet hvilke som helst av restene 28 - 32, særlig 30-32, i sekvensen som begynner ved C-enden kan utelates.
3. Preparat for å stimulere frigivelse av GH for produk-sjons fremmende formål i dyr,
karakterisert ved at det inneholder en effektiv mengde av det nevnte peptid og en tålbar flytende eller fast bærer derfor.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/432,663 US4563352A (en) | 1982-10-04 | 1982-10-04 | Human pancreatic GRF |
| PCT/US1983/001564 WO1984001379A1 (en) | 1982-10-04 | 1983-10-03 | Human pancreatic grf |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO842148L NO842148L (no) | 1984-05-30 |
| NO167866B true NO167866B (no) | 1991-09-09 |
| NO167866C NO167866C (no) | 1991-12-18 |
Family
ID=23717095
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO84842148A NO167866C (no) | 1982-10-04 | 1984-05-30 | Syntetisk peptid og preparat for tilfoersel i dyr for produksjonsfremmende formaal. |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4563352A (no) |
| EP (1) | EP0105759B1 (no) |
| JP (1) | JPS59501951A (no) |
| KR (1) | KR900006712B1 (no) |
| AT (1) | ATE24919T1 (no) |
| AU (1) | AU566180B2 (no) |
| CA (1) | CA1243016A (no) |
| DE (1) | DE3369144D1 (no) |
| DK (1) | DK269284D0 (no) |
| ES (1) | ES8606399A1 (no) |
| FI (1) | FI83660C (no) |
| GR (1) | GR79698B (no) |
| HU (1) | HU191263B (no) |
| IE (1) | IE56175B1 (no) |
| IL (1) | IL69897A (no) |
| MX (1) | MX7701E (no) |
| NO (1) | NO167866C (no) |
| NZ (1) | NZ205745A (no) |
| PH (1) | PH20333A (no) |
| PT (1) | PT77453B (no) |
| RO (1) | RO91186B (no) |
| SU (1) | SU1426455A3 (no) |
| WO (1) | WO1984001379A1 (no) |
| YU (1) | YU45575B (no) |
| ZA (1) | ZA837208B (no) |
Families Citing this family (34)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4703035A (en) * | 1982-10-04 | 1987-10-27 | The Salk Institute For Biological Studies | Human pancreatic GRF amidated fragments |
| US4728726A (en) * | 1982-10-04 | 1988-03-01 | The Salk Institute For Biological Studies | GRF analogs IIIb |
| US4581168A (en) * | 1983-02-21 | 1986-04-08 | Sanofi | Synthesis of hpGRF (Somatocrinin) in liquid phase and intermediate peptides |
| ZA844380B (en) * | 1983-07-05 | 1985-01-30 | Salk Inst For Biological Studi | Dna encoding a grf precursor |
| AU575843B2 (en) * | 1983-08-10 | 1988-08-11 | The Administrators Of The Tulane Eductional Fund | Growth hormone releasing peptides |
| US4617149A (en) * | 1983-09-21 | 1986-10-14 | Eli Lilly And Company | Growth hormone release factor analogs |
| US4528190A (en) * | 1983-10-25 | 1985-07-09 | The Salk Institute For Biological Studies | GRF Analogs IV |
| FR2567524B1 (fr) * | 1984-07-10 | 1987-11-27 | Sanofi Sa | Procede de synthese de la somatocrinine en phase liquide et peptides intermediaires |
| US4649131A (en) * | 1984-09-24 | 1987-03-10 | Hoffmann-La Roche Inc. | Growth hormone releasing factor analogs |
| DE3579911D1 (de) * | 1984-12-24 | 1990-10-31 | Sumitomo Pharma | Stabiles grf-praeparat. |
| US4734399A (en) * | 1985-08-06 | 1988-03-29 | Hoffmann-La Roche Inc. | Growth hormone releasing factor analogs |
| US4880778A (en) * | 1986-05-12 | 1989-11-14 | Eastman Kodak Company | Combinations having synergistic growth hormone releasing activity and methods for use thereof |
| FR2599038B1 (fr) * | 1986-05-26 | 1990-06-29 | Sanofi Sa | Procede de preparation de nonacosapeptides et peptides intermediaires |
| IL84758A (en) * | 1987-01-13 | 1992-03-29 | Salk Inst For Biological Studi | Peptides stimulating the release of pituitary growth hormone in fish and amphibians,and pharmaceutical compositions containing them |
| US4839344A (en) * | 1987-06-12 | 1989-06-13 | Eastman Kodak Company | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
| USRE33699E (en) * | 1987-07-09 | 1991-09-24 | International Minerals & Chemical Corp. | Growth hormone-releasing factor analogs |
| US4801456A (en) * | 1987-07-09 | 1989-01-31 | International Minerals & Chemical Corp. | Growth hormone-releasing factor analogs |
| US4880777A (en) * | 1987-09-01 | 1989-11-14 | Eastman Kodak Company | Synthetic peptides having growth hormone releasing activity |
| EP0400051B1 (en) * | 1988-01-28 | 1995-05-10 | Polygen Holding Corporation | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
| US5043322A (en) * | 1988-07-22 | 1991-08-27 | The Salk Institute For Biological Studies | Cyclic GRF analogs |
| US5153175A (en) * | 1989-05-25 | 1992-10-06 | University Of Tennesee Research Corporation | Method of inducing sleep with GHRH complementary peptide compositions |
| US5756458A (en) * | 1989-06-16 | 1998-05-26 | Pharmacia & Upjohn Company | Stabilized potent GRF analogs |
| CA2085362A1 (en) * | 1990-06-29 | 1991-12-30 | Arthur M. Felix | Histidine substituted growth hormone releasing factor analogs |
| ATE119916T1 (de) * | 1990-12-10 | 1995-04-15 | Hoffmann La Roche | Verfahren zur enzymatischen herstellung von grf(1-44)nh2. |
| JPH05507939A (ja) * | 1991-04-09 | 1993-11-11 | エフ・ホフマン―ラ ロシユ アーゲー | 成長ホルモン放出因子の類似体 |
| US5246920A (en) * | 1992-06-15 | 1993-09-21 | University Of South Florida | Treatment of hyperprolactinemia |
| US5811074A (en) * | 1992-06-29 | 1998-09-22 | University Of South Florida | Method of diagnosing pituitary dependent growth hormone deficiency |
| US5631225A (en) * | 1994-10-13 | 1997-05-20 | Novo Nordisk A/S | Pharmaceutical formulation |
| EP0880969A1 (en) * | 1997-05-28 | 1998-12-02 | Applied Research Systems ARS Holdings N.V. | Pharmaceutical compositions of peptides having low solubility in physiological medium |
| EP0922446A1 (en) * | 1997-12-03 | 1999-06-16 | Applied Research Systems Ars Holding N.V. | Solution-phase site-specific preparation of GRF-PEG conjugates |
| EP1355941A2 (en) * | 2001-02-02 | 2003-10-29 | ConjuChem, Inc. | Long lasting growth hormone releasing factor derivatives |
| NZ539218A (en) * | 2002-09-18 | 2008-03-28 | Univ Montreal Ct Hospitalier Chum | Synthetic GHRH analogues of 29 amino acids or more |
| WO2009009727A2 (en) * | 2007-07-12 | 2009-01-15 | Akela Pharma Srl | Ghrh analogs and therapeutic uses thereof |
| CN107936090B (zh) * | 2017-12-08 | 2021-09-24 | 陕西慧康生物科技有限责任公司 | 一种低成本合成ARK-Cu的方法 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3664925A (en) * | 1970-02-20 | 1972-05-23 | Martin Sonenberg | Clinically active bovine growth hormone fraction |
| US3904753A (en) * | 1970-02-20 | 1975-09-09 | Research Corp | Clinically active bovine growth hormone fraction |
| US3853833A (en) * | 1971-04-27 | 1974-12-10 | Hormone Res Foundation | Synthetic human growth-promoting and lactogenic hormones and method of producing same |
| US4056520A (en) * | 1972-03-31 | 1977-11-01 | Research Corporation | Clinically active bovine growth hormone fraction |
| PH14681A (en) * | 1977-11-30 | 1981-11-10 | Pfizer | Phenylglycinamides useful in the treatment of ischaemic heart disease |
-
1982
- 1982-10-04 US US06/432,663 patent/US4563352A/en not_active Expired - Lifetime
-
1983
- 1983-09-26 NZ NZ205745A patent/NZ205745A/en unknown
- 1983-09-27 ZA ZA837208A patent/ZA837208B/xx unknown
- 1983-10-03 AU AU21269/83A patent/AU566180B2/en not_active Expired
- 1983-10-03 ES ES526201A patent/ES8606399A1/es not_active Expired
- 1983-10-03 GR GR72605A patent/GR79698B/el unknown
- 1983-10-03 HU HU8497A patent/HU191263B/hu unknown
- 1983-10-03 JP JP83503459A patent/JPS59501951A/ja active Pending
- 1983-10-03 PH PH29648A patent/PH20333A/en unknown
- 1983-10-03 IE IE2333/83A patent/IE56175B1/en not_active IP Right Cessation
- 1983-10-03 WO PCT/US1983/001564 patent/WO1984001379A1/en active IP Right Grant
- 1983-10-04 EP EP83306008A patent/EP0105759B1/en not_active Expired
- 1983-10-04 IL IL69897A patent/IL69897A/xx not_active IP Right Cessation
- 1983-10-04 CA CA000438354A patent/CA1243016A/en not_active Expired
- 1983-10-04 YU YU200083A patent/YU45575B/sh unknown
- 1983-10-04 DE DE8383306008T patent/DE3369144D1/de not_active Expired
- 1983-10-04 PT PT77453A patent/PT77453B/pt not_active IP Right Cessation
- 1983-10-04 AT AT83306008T patent/ATE24919T1/de not_active IP Right Cessation
- 1983-10-04 MX MX831019U patent/MX7701E/es unknown
- 1983-10-26 KR KR1019830005067A patent/KR900006712B1/ko not_active IP Right Cessation
-
1984
- 1984-05-30 FI FI842166A patent/FI83660C/fi not_active IP Right Cessation
- 1984-05-30 DK DK269284A patent/DK269284D0/da not_active Application Discontinuation
- 1984-05-30 NO NO84842148A patent/NO167866C/no not_active IP Right Cessation
- 1984-06-01 RO RO114739A patent/RO91186B/ro unknown
- 1984-06-01 SU SU843750475A patent/SU1426455A3/ru active
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO167866B (no) | Syntetisk peptid og preparat for tilfoersel i dyr for produksjonsfremmende formaal. | |
| FI88402B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara grf-analoger | |
| FI92210B (fi) | Menetelmä farmaseuttisesti käyttökelpoisten GRF-analogien valmistamiseksi | |
| US4529595A (en) | GRF Analogs | |
| US4626523A (en) | GRF analogs II | |
| FI87080C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av grf-analoger | |
| US4595676A (en) | Rat hypothalamic GRF | |
| FI91074B (fi) | Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen rengasrakenteen sisältävän GRF-analogin valmistamiseksi | |
| US5262519A (en) | GRF analogs XI | |
| US4784987A (en) | GRF analogs VI | |
| US4728726A (en) | GRF analogs IIIb | |
| US5002931A (en) | GRF analogs VII | |
| US5098995A (en) | GRF Analogs VIIA | |
| US4703035A (en) | Human pancreatic GRF amidated fragments | |
| US4843064A (en) | GRF analogs V | |
| CA1304192C (en) | Grf analogs vi |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MK1K | Patent expired |
Free format text: EXPIRED IN OCTOBER 2003 |