SK75796A3 - Hiv protease inhibitors, pharmaceutical compositions containing them and their use - Google Patents

Hiv protease inhibitors, pharmaceutical compositions containing them and their use Download PDF

Info

Publication number
SK75796A3
SK75796A3 SK757-96A SK75796A SK75796A3 SK 75796 A3 SK75796 A3 SK 75796A3 SK 75796 A SK75796 A SK 75796A SK 75796 A3 SK75796 A3 SK 75796A3
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
formula
compound
hiv
mixture
solution
Prior art date
Application number
SK757-96A
Other languages
English (en)
Inventor
Joel R Huff
Joseph P Vacca
Bruce D Dorsey
Original Assignee
Merck & Co Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Merck & Co Inc filed Critical Merck & Co Inc
Publication of SK75796A3 publication Critical patent/SK75796A3/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/04—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/77—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D307/78—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans
    • C07D307/79—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D307/81—Radicals substituted by nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/06—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D495/04—Ortho-condensed systems

Description

Inhibítory HIV-proteázy, farmaceutické prostriedky s ich obsahom a ich použitie
Oblasť techniky
Vynález sa týka inhibítorov HIV-proteázy, ktoré spôsobujú inhibíciu proteázy, pre ktorú je kódom vírus ľudskej imunodeficiencie, HIV. Vynález sa taktiež týka farmaceutický prijateľných solí týchto látok, ktoré je možné použiť na prevenciu a liečenie infekcie HIV a na liečenie výsledného syndrómu získanej imunodeficiencie, AIDS. Vynález sa týka aj farmaceutických prostriedkov s obsahom uvedených látok.
Doterajší stav techniky
Retrovírus, spôsobujúci u ľudí deficienciu imunitného systému, HIV, je príčinou komplexných ochorení, pri ktorých dochádza k progresívnej deštrukcii celého imunitného systému a k vzniku syndrómu AIDS, spojeného s degeneráciou centrálneho a periférneho nervového systému. Vírus bol skôr označovaný tiež LAV, HTLV-III alebo ARV. Spoločnou vlastnosťou replikácie retrovírov je rozsiahle posttranslačné spracovanie prekurzorových polyproteínov proteázou, pre ktorú je vírus kódom, za vzniku vírusových bielkovín, nevyhnutných pre funkciu vírusu. Pri inhibícii tohto postupu dochádza k blokovaniu produkcie úplného infekčného vírusu. Napríklad v publikácii Kohl N. E. a ďalší, Proc. Natl. Acad. Sci., 85, 4686, 1988 sa poukazuje, že pri genetickej inaktivácii proteázy, pre ktorú je kódom HIV, dochádza k produkcii nezrelých, neinfekčných častíc vírusu. Tieto výsledky dokazujú, že inhibícia proteázy HIV predstavuje sľubný postup v prípade liečenia AIDS a pri prevencii a liečení infekcie HIV.
Z nukleotidovej sekvencie HIV je zrejmé, že v jednom z otvorených čítacích rámcov sa nachádza gén pol, ako bolo op ísane v pub 11IccLcii ^^alneir L#. a ďa.lsi, ^Jalujce , , 277 ,
1985. Homológia reťazca aminokyselín dokazuje, že sekvencia génu pol je kódovým reťazcom pre reverznú transkripxázu, endonukleázu a proteázu HIV, ako bolo opísané v publikáciách Toh, H. a ďalší, EMBO J., 4, 1267, 1985, Power M. D. a ďalší, Science, 231, 1567, 1986, Pearl L. H. a ďalší, Náture 329, 351, 1987.
V priebehu prihlášky budú použité niektoré skratky, ktoré sú ďalej vysvetlené:
Ochranné skupiny:
BOC (Boe)
CBZ (Cbz) terc.butyloxykarbonyl benzyloxykarbonyl (kaŕbobenzoxyskupina)
TBS (TBDMS) terc.butyldimetylsilyl
Aktivačná skupina:
HBT (HOBT alebo HOBt) 1-hydroxybenzotriazólhydrát
Väzbové činidlá:
BOP benzotriazol-l-yloxytris(dimetylamino)fosfóniumhexafluórfosfát
BOP-C1 bis(2-oxo-3-oxazolidinyl)fosfínchlorid
EDC l-etyl-3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimidhydrochlorid
Iné látky:
(BOC)20, (B0C20) n-Bu4N+F~ nBuLi (n-Buli) DMF di-terc.-butyldikarbonát tetrabutylamóniumfluorid n-butyllítium dimetylformamid
Et3N EtOAc trietylamín etylacetát
TFA kyselina trifluóroctová
DMAP dimetylaminopyridín
DME dimetoxyetán
LDA lítiumdiizopropylamid
.·. THF tetrahydrofurán
Podstata vynálezu
Podstatu vynálezu tvoria inhibítory HIV proteázy, ktoré je možné použiť na inhibíciu HIV-proteázy, na prevenciu a liečenie infekcie HIV a na liečenie AIDS. Zlúčeniny je možné použiť ako také, vo forme farmaceutický prijateľných solí a ako zložky farmaceutických prostriedkov, prípadne v kombinácii s ďalšími protivírusovými látkami, imunomodulátormi, antibiotikami alebo vakcínami.
Podstatu vynálezu teda tvoria inhibítory HIV-proteázy všeobecného vzorca I
alebo farmaceutický prijatelné soli týchto látok, v ktorých
znamená
kde X znamená atóm kyslíka alebo síry.
V jednom z možných uskutočnení sa vynález týka inhibítorov HlV-proteázy všeobecného vzorca I, v ktorých
a farmaceutický prijateľných solí týchto látok.
Ďalšie uskutočnenie vynálezu predstavuje výhodná zlúčenina vzorca A
(A)
N-(2(R)-hydroxy-1(S)-indanyl)-2(R)-fenylmetyl-4(S)-hydroxy-
5-(1-(4-(3-furo[2,3-b]pyridylmetyl)-2(S)-N’-(terc.butylkarboxamido)piperazinyl))pentánamid a jej soli, prijateľné z farmaceutického hľadiska.
Zlúčeniny podľa vynálezu obsahujú stredy chirality a môžu sa vyskytovať ako racemáty, racemické zmesi a jednotlivé diastereoméry alebo enantioméry, pričom všetky tieto izomérne formy sú do rozsahu vynálezu zahrnuté. Racemické zmesi zahrnujú zmesi stereoizomérov v pomere 50:50 aj v akýchkoľvek iných pomeroch.
V prípade, že sa ktorákoľvek zo skupín, napríklad
vyskytuje v molekule účinnej látky všeobecného vzorca I viackrát než raz, je význam tejto skupiny pri každom ďalšom výskyte nezávislý na význame pri ostatných výskytoch. Kombinácie substituentov a/alebo skupín sú však prípustné len v prípade, že pri použití týchto kombinácií vznikajú stále výsledné látky.
V priebehu prihlášky znamená pojem alkyl nasýtený alifatický uhľovodíkový zvyšok s priamym alebo rozvetveným reťazcom s uvedeným počtom uhlíkových atómov, Me = metyl, Et = etyl, Pr = propyl, Bu = butyl. Atómom halogénu môže byť atóm fluóru, chlóru, brómu alebo jódu.
Farmaceutický prijateľné soli zlúčenín všeobecného vzorca I vo forme produktov, rozpustných alebo dispergovatelných vo vode alebo v oleji, zahrnujú bežné netoxické soli alebo kvartérne amóniové soli. Tieto soli môžu byť vytvorené napríklad s anorganickými alebo organickými kyselinami alebo bázami. Ako príklady adičných soli s kyselinami je možné uviesť acetáty, adipáty, algináty, aspartáty, benzoáty, benzénsulfonáty, hydrogénsulfáty, butyráty, citráty, soli kyseliny gáfrovej alebo gafrosulfónovej, cyklopentánpropionáty, diglukonáty, dihydrochloridy, difosfáty, dodecylsulfáty, etánsulfonáty, fumaráty, glukohéptanoáty, glutamáty, glycerofosfáty, hemisulfáty, heptanoáty, hexanoáty, hydrochloridy, hydrobromidy, hydrojodidy, 2-hydroxyetánsulfonáty, laktáty, maleáty, metánsulfonáty, 2-naftalénsulfonáty, nikotináty, nitráty, oxaláty, pamoáty, pektináty, persírany, 3-fenylpropionáty, fosfáty, pikráty, pivaláty, propionáty, jantarany, vínany, tiokyanáty, tosyláty a undekanoáty. Soli s bázami zahrnujú amónne soli, soli s alkalickými kovmi, ako sodné soli a draselné soli, soli s kovmi alkalických zemín, ako vápenaté a horečnaté soli, soli s organickými bázami, napríklad s dicyklohexylamínom alebo N-metyl-D-glukamínom a tiež soli s aminokyselinami, napríklad s arginínom alebo lyzínom. Bázické skupiny, ktoré obsahujú dusík, môžu byť tiež kvarternizované napríklad nižšími alkylhalogenidmi, ako metyl-, etyl-, propyl- a butylchloridy, -bromidy a -jodidy, dialkylsulfáty, ako dimetyl-, dietyl-, dibutyl- a diamylsul fáty, halogenidy s dlhým reťazcom, ako decyl-, lauryl-, myristyl- a stearylchloridy, -bromidy a -jodidy, aralkylhalogenidy, ako benzyl- a fenetylbromidy a podobne. Ďalšie farmaceutický prijateľné soli sú sulfáty etanolátov a sulfáty.;
Ďalej budú uvedené reakčné schémy I a II na výrobu nových zlúčenín podľa vynálezu. V nasledujúcich príkladoch potom budú uvedené aplikácie postupov podľa týchto schém na jednotlivé zlúčeniny.
Amidové väzby, pri ktorých sa vytvárajú zlúčeniny podľa vynálezu sa typicky uskutočnia karbodiimidovým postupom, napríklad za použitia dicyklohexylkarbodiimidu alebo l-etyl3-(3-dimetylaminopropyl)karbodiimidu. Ďalšie postupy na tvorbu amidovej alebo peptidovej väzby zahrnujú niektoré syntetické postupy cez chlorid kyseliny, azid, zmesný anhydrid alebo aktivovaný ester. Typicky sa tieto reakcie vykonávajú v roztoku, je však možné ich uskutočniť aj v tuhej fáze, napríklad podľa Merrifielda. Adícia a odstránenie jednej alebo väčšieho počtu ochranných skupín patrí taktiež k bežným postupom.
Ďalšie informácie o bežných syntetických postupoch je možné nájsť v EP 337 714 a EP 541 168.
V schéme I je uvedený postup, pri ktorom sa pripraví dihydro-5(S)-(terc.butyldimetylsilyloxymetyl)-3(2H)-furanón, zlúčenina 1 bežnými postupmi z bežne dodávaného dihydro5(S)-(hydroxymetyl)-2(3H)-furanónu. Po alkylácii zlúčeniny 1 na zlúčeninu 2 sa ochranná skupina z laktónu vzorca 2 odstráni vodným roztokom HF za vzniku zlúčeniny 3.
Alkoholová skupina zlúčeniny 3 sa aktivuje premenou na odštiepiteľnú skupinu, ako mesylát, tosylát alebo triflát tak, že sa na alkohol pôsobí sulfonylchloridom alebo s výhodou anhydridom kyseliny sulfónovej, napríklad trifluórmetánsulfónová v prítomnosti bázy typu amínu, ako trietylamínu, dietylizopropylamínu alebo 2,6-lutidínu za vzniku zlúčeniny vzorca 4. Odštiepiteľná skupina tejto látky sa nahradí aminom vzorca 5, napríklad 4-(1,1-dimetyletoxykarbonylamino)piperazín-2(S)-karboxamidom v rozpúšťadle, napríklad DMF alebo xyléne za vzniku zlúčeniny vzorca 6. Trifluórmetánsulfonyloxyskupinu je možné nahradiť amínom pri teplote miestnosti v rozpúšťadle, napríklad v izopropanole alebo metylénchloride pôsobením N,N-diizopropyletylamínu.
Zlúčenina vzorca 6 sa hydrolyzuje vodným roztokom hydroxidu lítneho alebo sodného a výsledná hydroxykyselina vzorca 7 sa premení na chránenú hydroxykyselinu vzorca 8. Na ochranu hydroxylovej skupiny sa bežne používa silylová skupina, napríklad terc.-butyldimetylsilyl alebo terc.butyldifenylsilyl.
Chránená hydroxykyselina vzorca 8 sa potom naviaže na požadovaný R^2_amfn za vzniku zlúčeniny 9, silylová ochranná skupina sa odstráni fluoridom, čím vznikne výsledný produkt vzorca 10.
Schéma I
(CF3SO2-)2O
4£
R = CH3SO2
R = CF3SO2
LiQH
DME
Δ, xylén·
Schéma I - pokračovanie
CO2H 'CONH-I7
..MeOH | I
1. T^iCI
β
ČONH -|H2N-R12
EDC/HOBt
H
N-R12
S
Boe n-BU4NF
H
N-R12
Schéma II
Jedným z výhodných postupov je syntéza epoxidov vzorca 12 reakciou zlúčeniny vzorca 11 v prítomnosti silnej bázy. Táto silná báza musí byť báza s obsahom kovu a použije sa v inertnom bezvodom organickom rozpúšťadle, napríklad v cyklickom alebo acyklickom uhľovodíku vrátane hexánu, pentánu, cyklohexánu a podobne. Z vhodných silných báz je možné uviesť LiN((CH3)3Si)2, KH((CH3)3Si)2, NaH((CH3)3Si)2, n-butyllítium (n-BuLi), s-BuLi, t-BuLi, terc.butoxid draselný, lítiumdiizopropylamid LDA, lítiumizopropylcyklohexylamid, lítiumpyrolidid, lítiumtetrametylpiperidid, fenyllítium, izopropylmagnéziumchlorid, izobutylmagnéziumchlorid a ďalšie známe podobné silné bázy. Z výhodných silných báza je možné uviesť n-BuLi, s-BuLi, LiN((CH3)3Si)2. Na jeden molárny ekvivalent zlúčeniny vzorca 11 sa s výhodou použijú 1 až 2 molárne ekvivalenty silnej bázy.
Zlúčeninu vzorca 13 je možné získať reakciou zlúčeniny vzorca 12 s N-terc.butyl-4-(1,l-dimetyletoxykarbonylamino)piperazín-2(S)-karboxamidom vzorca 5. S výhodou sa sa použijú jedna až tri molárne ekvivalenty amínu vzorca 5 na jeden molárny ekvivalent epoxidu vzorca 12, pričom veľmi výhodné je použiť 1,05:1 molárnych ekvivalentov V:IV.
Reakciu je možné uskutočniť v akomkoľvek vhodnom rozpúšťadle, napríklad uhľovodíku, ako v toluéne, v éteri, ako dietyléteri, v alkoholoch, ako v metanole, etanole alebo izopropanole, v nitrile, ako v acetonitrile alebo v esteri, ako v etylacetáte alebo v zmesi týchto rozpúšťadiel, výhodnými rozpúšťadlami sú alkoholy a z nich zvlášť izopropanol.
Reakčnú teplotu je možné voliť od teploty miestnosti až do teploty varu použitého rozpúšťadla pod spätným chladičom, s výhodou sa však reakcia vykonáva pri vyššej teplote, napríklad v rozmedzí 80 až 90, s výhodou 83 až 85 “C.
Aktivované glycidoly. je možné pripraviť známym spôsobom, napríklad podľa publikácie J. Klunder a ďalší, J. Org. Chem., 1989, 54, 1295 až 1304 a podľa citácií, ktoré sú v tejto publikácii uvedené.
Amidy, napríklad vzorca 11 je možné pripraviť bežnými postupmi, napríklad spôsobom, ktorý bude ďalej opísaný v príklade 10, za použitia príslušných východiskových látok.
Ochranné skupiny, napríklad na atóme dusíka, je možné použiť v prípade potreby. Napríklad je možné chrániť atóm dusíka v polohe 4 v 2-terc.butylkarboxamidpiperazíne, napríklad skupinou BOC, CBZ, benzylovou, 4-metoxybenzylovou,
2,4-dimetoxybenzylovou, trifluóracetamidovou, trialkylsilylovou alebo inou známou skupinou.
Zlúčeniny všeobecného vzorca 15
ČONH-|~ v ktorých P znamená ochrannú skupinu na dusíkovom atóme, napríklad -BOC alebo -CBZ, je taktiež možné pripraviť spôsobom podľa schémy I, s výhodou za použitia 5-trifluórmetánsulfonyloxymetylového analógu laktónu vzorca 4.
Zlúčeniny vzorca 16
ČONH-| je možné získať celým radom postupov zo zlúčenín všeobecného vzorca 14
ktoré je možné pripraviť po odstránení ochrannej skupiny na atóme dusíka v zlúčenine vzorca 15 za použitia známych postupov, napríklad katalytickej hydrogenácie na odstránenie skupiny CBZ alebo pôsobením trimetylsilyltriflátu a 2,
6-lutidínu pri teplote približne 0 °C v rozpúšťadle, ako metylénchloride alebo pôsobením 6 M roztoku HC1 v izopropanole na odstránenie skupiny BOC.
Atóm dusíka v polohe 4 piperazynylovej skupiny v zlúčenine vzorca 14 je nožné alkylovať pôsobením zlúčeniny všeobecného vzorca R^-X v rozpúšťadle, napríklad DMF v pritom?nosti Et^N pri teplote miestnosti, v zlúčénine znamená symbol X atóm chlóru, brómu alebo jódu. Postup sa vykonáva známym spôsobom.
Zlúčeniny podľa vynálezu sú jednotlivo uvedené tiež v tabuľke, pripojenej k nasledujúcemu príkladu 3.
Zlúčeniny podľa vynálezu je možné použiť k radovému vyšetreniu účinnosti protivírusových látok, na izoláciu mutantov enzýmov, ktoré je možné využiť na vyhľadávanie účinnejších protivírusových látok a okrem toho na určenie väzbových miest ďalších protivírusových látok na HlV-proteázu, napríklad kompetitívnou inhibíciou.
Zlúčeniny podľa vynálezu je možné použiť na inhibíciu HlV-proteázy a tým aj na prevenciu alebo na liečenie infekcie vírusom HIV a na liečenie následných patologických stavov, napríklad syndrómu AIDS. Liečenie AIDS alebo prevencia alebo liečenie infekcie HIV zahrnuje ošetrenie širokej škály stavov, ktoré sú dôsledkom tejto infekcie. Ide najmä o syndróm AIDS, ARC, ktorý je príbuzný predchádzajúcemu syndrómu, a to dosiaľ bez príznakov aj po vzniku príznakov, okrem toho
- 13 ide tiež o prípady, pri ktorých došlo k expozícii vírusu HIV alebo je na túto expozíciu vážne podozrenie. Môže ísť napríklad o stavy po transfúzii krvi, transplantácii orgánov, výmenu telesných tekutín, o pohryznutie človekom o náhodné poranenie špičkou injekčnej ihly alebo o expozícii krvi chorého v priebehu chirurgického zákroku.
Na uvedený účel je možné podávať zlúčeniny podľa vynálezu perorálne, parenterálne, vrátane podkožného, vnútrožilového, vnútrosvalového a intrasternálneho podania vo forme injekcie alebo infúzie, o podanie inhaláciou alebo rektálne podanie, pričom liekové formy môžu obsahovať bežné netoxické, z farmaceutického hľadiska prijateľné nosiče, pomocné látky a nosné prostredia.
Farmaceutické prostriedky môžu mať formu suspenzií alebo tabliet na perorálne podanie, sprejov do nosa, sterilných injekčných prostriedkov, napríklad roztokov alebo suspenzií vo vode alebo v oleji alebo formu čapíkov.
V prípade suspenzií na perorálne podanie sa tieto prostriedky pripravujú známym spôsobom a môžu obsahovať mikrokryštalickú celulózu na zväčšenie objemu, alginovú kyselinu alebo alginát sodný, ako činidlo, napomáhajúce vzniku suspenzie, metylcelulózu na zvýšenie viskozity a okrem toho ešte ďalšie látky, napríklad sladidlá a látky na úpravu chuti. Tablety, z ktorých sa účinná látka uvoľňuje okamžite, môžu obsahovať mikrokryštalickú celulózu, hydrogénfosforečnan vápenatý, škrob, stearan horečnatý, laktózu a/alebo ďalšie nosiče, spojivá, dezintegračné činidlá, riedidlá a klzné látky, tak ako sú v danej oblasti bežne používané.
Na podanie vo forme aerosolov do nosa alebo inhaláciou sa farmaceutické prostriedky taktiež pripravujú známymi postupmi . Môže ísť o roztoky vo fyziologickom roztoku chloridu sodného, obsahujúce benzylalkohol alebo iné vhodné konzervačné činidlá, látky, podporujúce vstrebávanie na zvýšenie biologickej dostupnosti, fluorované uhľovodíky a/alebo iné solubilizačné alebo dispergačné činidlá.
Injekčné roztoky alebo suspenzie môžu obsahovať bežné netoxické, na parenterálne podanie vhodné riedidlá alebo rozpúšťadlá, ako sú manitol, 1,3-butándiol, voda, Ringerov roztok alebo izotonický roztok chloridu sodného alebo tiež dispergačné činidlo, zmáčadlá a suspenzné činidlo, napríklad sterilné fixované oleje vrátane syntetických mono- alebo diglyceridov a mastné kyseliny vrátane kyseliny olejovej.
V prípade rektálneho podania vo forme čapíkov je možné farmaceutické prostriedky pripraviť zmiešaním účinnej látky s vhodným nedráždivým základom, napríklad s kakaovým maslom, syntetickými glyceridmi alebo polyetylénglykolmi, ktoré sa nachádzajú v tuhom stave pri bežných teplotách, sú však kvapalné a/alebo sa rozpúšťajú v konečníku za súčasného uvoľnenia účinnej látky.
Na liečenie alebo na prevenciu vyššie uvedených stavov sa používajú dávky 0,02 až 5,0 alebo 10,0 g denne, pričom pri perorálnom podaní sa používajú dávky 2x až 5 x vyššie. Napríklad je možné infekciu HIV účinne liečiť podaním 1,0 až 50 mg účinnej látky/kg telesnej hmotnosti 1 až 4 x denne. Pri výhodnom spôsobe podávania sa perorálne podávajú dávky 100 až 400 mg každých 6 hodín perorálne. Je zrejmé, že špecifické dávky a frekvencie ich podania budú u každého chorého rôzne a budú závisieť na celom rade faktorov vrátane účinnosti použitej látky, jej metabolickej stálosti a dĺžke jej účinku a tiež na veku chorého, jeho hmotnosti, zdravotnom stave, pohlaví, spôsobu stravovania, spôsobe podania, rýchlosti vylučovania, na použitej kombinácii použitých látok a tiež na závažnosti liečenej choroby.
Nové látky podľa vynálezu je tiež možné kombinovať s ďalšími látkami, ktoré sa taktiež používajú na liečenie vyššie uvedených chorôb, najmä syndróme AIDS. Je napríklad možné podávať zlúčeniny podľa vynálezu po vystavení infekcii vírusom, avšak tiež pred predpokladaným vystavením tejto infekcii v kombinácii s protivírusovými látkami, imunomodulátormi, látkami proti pôvodcom rôznych infekcií alebo s vakcínami, napríklad s prostriedkami, ktoré sú uvedené v nasledujúcej tabuľke C.
Tabuľka C
Protivírusové látky
zlúčenina výrobca indikácia
AL-721 Ethigen (Los Angeles, CA) ARC, PGL, HlV pozitivita, AIDS
rekombinantný ľudský interferón beta Triton Biosciences (Almeda, CA) AIDS, Kaposiho sarkóm, ARC
Acemannan Carrington Labs (Irving, TX) ARC (viď aj imunomodulátory)
Cytovene Syntex (Palo Alto, CA) CMV, ohrozujúci zrak
Ganciclovir Syntex periférny retinitis CMV
d4T (didehydrodeoxytimidín) Bristol-Myers (New York, NY) AIDS, ARC
ddl (dideoxyinozín) (Bristol-Myers (New York, NY) AIDS, ARC
EL10 Elán Corp. PLC (Gainesville, GA) infekcia HIV (viď. aj imunomodulátory)
Fosfonomravčan sodný Astra Pharm. Products, Inc. (Vestborought, MA) CMV retinitis, infekcia HIV, iné CMV infekcie
Dideoxycytidín ddC Hoffman-La Roche (Nutley, NJ) AIDS, ARC
Novapren
Peptid T oktapeptid
Zidovudin, AZT
Novaferon Labs, Inc. (Akron, OH) Diapren, Inc. (Roseville, MN, dodávateľ) Peninsula Labs (Belmont, CA)
Burroughs Vellcome (Rsch. Triangle Park, NC) inhibítor HIV
Ansamycin LM 427 dextransulfát
Virazol
Ribavirin
Alfa- Irrterf eron
Adria Laboratories (Dublin, OH), Erbamont (Stamford, CT)
Ueno Fine Chem.
Ind. Lxd. (Osaka, Japonsko)
Viratek/INC (Costa Mesa, CA)
Burroughs
Vellcome (Rsch. Triangle
Park, NC)
AIDS pokročilá AIDS,
ARC, pediatrická AIDS, Kaposiho sarkóm, infekcia HIV bez príznakov miernejší priebeh HIV, neurologické príznaky, kombinovaná liečba
ARC
AIDS, ARC, HIV pozitívny, bez príznakov
HIV pozitívny bez príznakov, LAS, ARC
Kaposiho sarkóm, HIV v kombinácii s retrovírusom
Acyclovir
Burroughs
Vellcome protilátky, neutralizujúce pH-labilný alfa-acerantný interferón v imunoadsorpčnom stĺpci
B
Advanced Biotherapy Concepts (Rockville, MD)
AIDS, ARC, HIV pozitívny bez príznakov, kombinácia s AZT
AIDS, ARC
Nevirapin
Imunomodulátory
AS-101
Bropirimin
Merck (Rahway, NJ)
Merck (Rahway, NJ)
Boehringer
Ingelheim
AIDS, ARC, HIV pozitívny bez príznakov, aj v kombinácii s AZT
AIDS, ARC, HIV pozitívny bez príznakov, aj v kombinácii s . AZT
AIDS, ARC, HIV pozitívny bez príznakov, aj v kombinácii s AZT
Vyeth-Ayerst Labs. (Philadelphia, PA)
Upj ohn (Kalamazoo, MI)
AIDS
AIDS v pokročilom stave
Acemannan
CL 246 738
EL 10
Gamma Interferón
Faktor stimulujúci kolónie granulocytov makrofágov
Faktor stimulujúci kolónie granulocytov makrofágov
Faktor stimulujúci kolónie granulocytov makrofágov
Imunostimulačné častice jadra HIV
IL-2
Carrington Labs, Inc. (Irving, TX)
Američan Cyanamid (Pearl River, NY) Lederle Labs (Vayne, NJ)
Elán Corp. PLC (Gainesville, GA)
Genentech (S. San Francisco, CA)
Genetics Inštitúte (Cambridge, MA) Sandoz (East Hanover, NJ)
Hoechst-Roussel (Somerville, NJ) Immunex (Seattle, Va)
Schering-Plough (Madison, NJ)
Rorer (Ft. Vashington, PA)
Cetus
Emeryville, CA
AIDS, ARC (viď. aj protivírusové látky
AIDS, Kaposiho sarkóm infekcia HIV (viď aj protivírusové látky)
ARC v kombinácii s w/TNF (faktor nekrózy nádorov)
AIDS
AIDS
AIDS
AIDS v kombinácii w/AZT, seropozitívny HIV
AIDS, v kombinácii s AZT
IL-2 Interleukín-2 Hoffman-La Roche (Nutley, NJ) Immunex, Seattle, VA AIDS, ARC, HIV v kombinácii s AZT
Vnútrožilový imunoglobulín (ľudský) Cutter Biological (Berkeley, CA) AIDS v pediatrii v kombinácii s AZT
IMREG-1 Imreg (New Orleans, LA) AIDS, Kaposiho sarkóm, ARC, PGL
IMREG-2 Imreg (New Orleans, LA) AIDS, Kaposiho sarkóm, ARC, PGL
Imunotiol (dietylditiokarbamát Merieux Inštitúte (Miami, FL) AIDS, ARC
Alfa-2 interferón Schering Plough (Madison, NJ) Kaposiho sarkóm, spolu s AZT, AIDS
Metionín-enkefalín TNI Pharmaceutical ' (Chicago, IL) AIDS, ARC
MTP-PE (muramyltripeptid) Ciba-Geigy Corp. (Summint, NJ) Kaposiho sarkóm
faktor stimulujúci kolónie granulocytov Amgen (Thousand Oaks, CA) AIDS, v kombinácii s AZT
rCD4 (rekombinantný rozpustný ľudský CD4) Genentech (S. San Francisco, CA) AIDS, ARC
rekombinantný rozpustný ľudský CD4 Biogen (Cambridge, MA) AIDS, ARC
Interferón alfa 2a Hoffman-La Roche (Nutley, NJ) Kaposiho sarkóm, AIDS, ARC, v kombinácii s AZT
SK a F106528 rozpustný T4 SmithKline a French Laboratories (Philadelphia, PA) HIV infekcia
Tymopentín Immunobiology Research Inštitúte (Annandale, NJ) HIV infekcia
faktor nekrózy nádorov, TNF Genentech (S, San Francisco, CA) ARC, v kombinácii s w/gamma interferónom
Antiinfekčné látky
Clindamycín s Primaquínom Upj ohn (Kalamazoo, MI) PCP
Fluconazole Pfizer (New York, NY) kryptokoková meningitis, kandidiáza
nystatikové pastilky Squibb Corp. (Princeton, NJ) prevencia orálnej kandidiázy
Ornidyl Eflornithine Merrell Dow (Cincinnati, OH) PCP
Pentamidín izotionate (IM a IV) LyphoMed (Rosemont, IL) PCP liečenie
Trimetoprim LyphoMed Rosemont, IL antibakteriálna látka
Trimetiprim/sulfa LyphoMed Rosemont, IL antibakteriálna látka
Piritrexim Burroughs Vellcome (Rsch. Triangle Park, NC) PCP liečenie
pentamidínizotionát na inhaláciu Fisons Corporation (Bedford, MA) PCP profylaxia
Spiramycín Rhône-Poulenc Pharmaceuticals (Princeton, NJ) krýptosporidiálna hnačka
Intraconazol R51211 (Jansen Pharm. (Piscataway, NJ) histoplazmóza, krýptokoková meningitis
Trimetrexat Varner-Lambert PCP
Iné látky
rekombinantný ľudský erytropoetín Ortho. Pharm. Corp. (Raritan, NJ) ťažká anémia pri liečbe AZT
Megestrolacetát Bristol-Myers (New York, NY) liečenie anorexie pri AIDS
celková enterálna výživa Norwich Eaton Pharmaceuticals (Norwich, NY) hnačka a malabsorpčný syndróm, spojené s AIDS
Je zrejmé, že možné kombinácie zlúčenín podľa vynálezu s protivírusovými látkami proti AIDS, imunomodulátormi, antiinfekčnými látkami alebo vakcínami nie sú vyčerpané látkami z vyššie uvedenej tabuľky, avšak zahrnujú v princípe kombináciu s akoukoľvek látkou, ktorá je pri liečení AIDS nejakým spôsobom užitočná a môže stav zlepšiť.
Niektoré zlúčeniny z vyššie uvedenej tabuľky sú nasledujúce: zlúčenina B je 6-chlór4-(S)-cyklopropyl-3,4-dihydro-
4-(2-pyridyl)etinyl)chinazolin-2(1H)-on, zlúčenina C je (-)-
6-chlór-4-(S)-trichlórmetyl-l,2-dihydro-4(H)-3,1-benzoxazin2-on, nevirapin je ll-cyklopropyl-5,ll-dihydro-4-metyl-6Hdihydro[3,2-b:2’,3’-e][1,4]diazepin-6-on. Zlúčeniny B a C je možné pripraviť podľa EP 569 083. Nevirapin je možné pripraviť podľa publikácií Klunder J. M. a ďalší, J. Med. Chem., 35, 1887, 1992, Hargrave K. D. a ďalší, J. Med. Chem., 34, 2231, 1991, Cohen K. A. a ďalší, J. Biol. Chem., 266, 14670, 1991.
Výhodnými kombináciami sú najmä prípady, kedy sa súčasne alebo striedavo podáva inhibítor proteázy HIV a inhibítor reverznej transkriptázy HIV nenukleozidóvej povahy. Prípadnou treťou zložkou v kombinácii môže byť nukleozidový inhibítor reverznej transkriptázy HIV, ako AZT, ddC alebo ddl. Výhodným inhibítorom proteázy HIV je zlúčenina A. Výhodné nenukleozidové inhibítory reverznej transkriptázy HIV zahrnujú zlúčeninu B, zlúčeninu C alebo nevirapin. Vyššie uvedené kombinácie môžu mať synergné účinky na obmedzenie rozšírenia HIV. Výhodnými kombináciami sú najmä 1) zlúčenina A a výhodný nenukleozidový inhibítor reveznej transkriptázy HIV a prípadne ešte AZT alebo ddl alebo ddC alebo 2) zlúčenina A a ktorákoľvek zo zlúčenín AZT alebo ddl alebo ddC.
Skúška na inhibíciu proteázy HIV a jej expresie v mikroorganizmoch
Inhibičné skúšky s proteázou, ktorej expresia bola dosiahnutá v Escherichia coli, boli vykonané za použitia peptidového substrátu Val-Ser-Gln-Asn-(β-naftyl)Ala-Pro-Ile-Val v koncentrácii 0,5 mg/ml na začiatku reakcie. Skúška bola vykonaná v 50 mM octane sodnom s pH 5,5 pri teplote 30 °C po dobu 1 hodiny.
K 25 mikrolitrom roztoku peptidu vo vode boli pridané rôzne koncentrácie inhibítorov v 1,0 mikrolitri DMSO. Reakcia bola začatá pridaním 15 mikrolitrov 0,33 nM roztoku proteázy /0,11 ng) v roztoku v 0,133 M octane sodnom s pH 5, 5 s 0,1 % sérového albumínu hovädzieho dobytka. Reakcia bola ukončená pridaním 160 mikrolitrov 5% kyseliny fosforečnej. Produkty reakcie boli od seba oddelené pomocou HPLC (VYDAC, 5 cm C-18 v reverznej fáze, gradient acetonitrilu, 0,1% kyselina fosforečná). Rozsah inhibície sa stanoví z vrcholov pre jednotlivé produkty. HPLC potvrdila predpokladané zloženie produktov. Hodnoty IC^q pre zlúčeninu A je približne 0,27 nM.
Skúška na šírenie v bunkovom materiáli
Inhibicia rozšírenia HIV v bunkovej kultúre bola meraná podľa publikácie Nunberg. J. H. a ďalší, J. Virol., 65, 4887, 1991. Pri tejto skúške boli lymfoidné bunky MT-4 infikované HIV-1 (išlo o divoký typ, ak nie je vyslovene uvedené inak) za použitia vopred stanoveného množstva a kultúry potom boli inkubované 24 hodín. Po tejto dobe bolo menej než 1 % alebo najviac 1 % buniek pozitívnych pri nepriamej imunofluorescenčnej skúške. Bunkový materiál bol potom dôkladne premytý a rozdelený do jednotlivých vyhĺbení platne s 96 vyhĺbeniami. Do jednotlivých vyhĺbení potom bolo pridané rádovo, vždy dvojnásobné riedenie inhibítora a kultúry boli pestované ešte 3 dni. 4 dni po infekcii bolo 100 % buniek v kontrolných kultúrach infikovaných. Nahromadenie p24 vírusu HIV-1 bolo priamo úmerné rozšíreniu vírusu. Inhibičná koncentrácia bola stanovená ako tá koncentrácia inhibítora v nanomoloch/liter, ktorá znížila šírenie infekcie o aspoň 95 %, táto koncentrácia sa uvádza ako ClCg^. Hodnota ClCg^ pre zlúčeninu A je 25 nM.
Inhibícia šírenia vírusu
A. Príprava suspenzie buniek MT-4, infikovaných HIV
Bunky MT boli infikované v nultom dni v koncentrácii 250000/ml za použitia zásobného kmeňa Illb vírusu HIV-1 v riedení 1:1000 (konečné množstvo 125 pg p24/ml, dostatočné pre menej než 1 % infikovaných buniek v dni 1 a 25 až 100 % v dni 4). Infikovaný bunkový materiál bol pestovaný v prostredí RPMI 1640 (Vhittaker BioProducts), s 10 % inaktivovaného fetálneho séra hovädzieho dobytka, 4 mM glutamínu (Gibco Labs) a 1:100 penicilín-streptomycín (Gibco Labs).
Bunkový materiál bol v tejto zmesi inkubovaný cez noc pri teplote 37 °C v atmosfére s obsahom 5 % C02.
B. Pridanie inhibítorov
Bola pripravená séria párových kombinácii koncentrácii v nanomolárnej oblasti. V dni 1 bolo pridaných 125 mikrolitrov roztoku inhibítorov k rovnakému objemu buniek MT-4, infikovaných HIV pri počte 50 000 buniek v jednom vyhĺbení mikrotitračnej platne s 96 vyíbeniami. Inkubácia trvala 3 dni pri teplote 37 eC v atmosfére s obsahom 5 % Co2-
C. Meranie šírenia vírusu
Pri použití viackanálovej pipety bol usadený bunkový materiál znova uvedený do suspenzie a 125 mikrolitrov materiálu bolo prenesených na oddelenú mikrotitračnú platňu. Potom bol supernatant skúmaný na prítomnosť antigénu p24 HIV.
Koncentrácia uvedeného antigénu bola meraná imunologickou skúškou za použitia enzýmu. Podiely antigénu p24, ktorý mal byť meraný, boli pridané do vyhĺbení mikrotitračnej platne, vybavenej povlakom monoklonálnej protilátky, špecifickej pre antigén jadra HIV. Potom boli vyhĺbenia premyté. Potom bola pridaná biotinylovaná protilátka, špecifická proti HIV a potom konjugát streptavidínu a peroxidáxy z chrenu.
V dôsledku pridania peroxidu vodíka a prítomnosti tetrametylbenzidínového substrátu sa vytvorí farebná reakcia. Intenzita tejto reakcie je úmerná koncentrácii antigénu p24 HIV. .
Vypočítanie stupňa synergie alebo zvýšenia inhibície
V prípade, že dôjde k synergii, je možné dokázať vyššiu inhibíciu pre párové kombinácie s obsahom inhibítorov v porovnaní s použitím jednotlivých inhibítorov alebo v porovnaní s len aditívnym účinkom týchto inhibítorov.
Údaje boli spracované tak, že inhibičné koncentrácie pre jednotlivé frakcie, FIC, boli vypočítané podľa publikácie Elion a ďalší, J. Biol. Chem., 208, 477, 1954. Najmenší súčet FICS, ktorý znamená maximálnu synergiu sa potom určí pre rôzne párové kombinácie. Čím nižší je získaný výsledok, tým vyššia je synergia.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1
Príprava N-(2(R)-hydroxy-1(S)-indanyl)-2(R)-fenylmetyl-4(S)(hydroxy)-5-(l-(2(S)-terc.butylkarboxamido)piperazinyl)pentánamidu, zlúčeniny 14
Stupeň 1: Príprava dihydro-5(S)-((terc.butyldifenylsilyl)oxymetyl)-3(R)-fénylmetyl-3(2H)-furanónu
Roztok lítiumdiizopropylamidu, LDA, sa získa tak, že sa pridá 1,55 ml 2,5 M roztoku n-BuLi v hexáne k 0,55 ml, 3,9 mmol diizopropylamínu v 10 ml THF pri teplote -78 ’C. Po 30 minútach sa pridá roztok 1,38 g, 3,89 mmol dihydro-4(S)((terc.butyldifenylsilyl)oxymetyl)-3(2H)-furanónu v 5 ml THF. Po ďalších 30 minútach miešania sa pridá ešte 0,68 g,
3,9 mmol benzylbromidu a zmes sa mieša ešte 3 hodiny, po tejto dobe sa reakcia zastaví pridaním 10% vodného roztoku kyseliny citrónovej. Roztok sa extrahuje 2 x 50 ml etylacetátu, extrakt sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného, vysuší sa, prefiltruje a odparí na olej. Tento produkt sa čistí chromatografiou na oxide kremičitom za použitia 20% etylacetátu, čím sa získa výsledný produkt.
Stupeň 2: Príprava dihydro-5(S)-(hydroxymetyl)-3(R)-fenyl* metyl-3(2H)-furanónu
K 5,26 g dihydro-5(S)-((terc.butyldifenylsilyl)oxymetyl)-3(R)-fenylmetyl-3(2H)-furanónu v 40 ml acetonitrilu sa pridá 1,34 ml 49% vodného roztoku HF. Po 18 hodinách pri teplote miestnosti sa reakčná zmes odparí do sucha a odparok sa delí medzi 50 ml vody a 50 ml etylacetátu. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného, vysuší sa, prefiltruje a odparí do sucha, čím sa získa výsledný produkt ako špinavobiela tuhá látka s teplotou topenia 69 až 72 C. .
Stupeň 3: Príprava dihydro-5(S)-((trifluórmetánsulfonyl)oxyr metyl)-3(R)-fenylmetyl-3(2H)-furanónu ' K roztoku 18,4 g, 89,2 mmol dihydro-5(S)-(hydroxymetyl)3(R)-fenylmetyl-3(2H)-furanónu v 350 ml metylénchloridu, ochladeného na 0 eC sa pridá 13,51 ml, 115,98 mmol 2,6lutidínu a potom sa po kvapkách pridá 16,51 ml, 98,1 mmol anhydridu kyseliny trifluórmetánsulfónovej. Zmes sa nechá
1,5 hodiny stáť pri teplote 0 ’C a potom sa vleje do 300 ml zmesi ladu a nasýteného roztoku chloridu sodného a vzniknutá zmes sa mieša ešte pol hodiny. Potom sa vodná vrstva extrahuje 3 x 150 ml metylénchloridu, organická vrstva sa premyje 2 x 75 ml 10% HC1, 100 ml nasýteného hydrogénuhličitanu sodného a 100 ml vody, vysuší sa síranom horečnatým, prefiltruje sa a odparí na tuhý odparok. Tento odparok sa čistí rýchlou , chromatografiou na stĺpci 120 x 150 mm, na elúciu sa použije gradient hexánov a etylacetátov v pomere 4:1 až 3:1, čím sa získa produkt s teplotou topenia 53 až 54 °C.
Stupeň 4: Príprava kyseliny 4-(1,1-dimetyletoxykarbonylamino)-1-(fenylmetylkarbonylamino)piperazín-2Skarboxylovej
Výsledná látka sa pripraví podľa publikácie Bigge C.
F. , Hays S. J. , Novák P. M. , Drummond J. T., Johnson G., Bohovskí T. P., Tetrahedron Lett., 1989, 30, 5193, pričom sa , vychádza z kyseliny 2(S)-piperazínkarboxylovej podľa publikácie Felder E., Maffei S., Pietra S., Pitre D., Helv. Chim. Acta, 1960, 117, 888.
Stupeň 5: Príprava N-terc.butyl-4-(1,l-dimetyletoxykarbonylamino)-1-(fenylmetylkarbonylamino)piperazín-2Skarboxamidu
K 9,90 g, 27,16 mmol zo stupňa 4 v roztoku v 75 ml DMF, ochladenému na 0 °C sa pridá 5,73 g, 29,88 mmol EDC, 4,03 g, 29,88 mmol HOBT, 3,14 ml, 29,88 mmol terc. buty.lamínu a nakoniec 4,16 ml, 29,88 mmol trietylamínu. Reakčná zmes sa mieša 8 hodín a potom sa odparí na polovicu svojho objemu. Potom „ sa zmes zriedi 600 ml etylacetátu a postupne sa premyje x 75 ml 10% HC1, 1 x 75 ml nasýteného roztoku hydrogén« uhličitanu sodného, 3 x 75 ml vody a 50 ml nasýteného rozto- ku chloridu sodného, vysuší sa síranom .horečnatým a odparí do sucha. Odparok sa rozotrie so zmesou etylacetátu a hexánu v pomere 1:2 a vzniknutý roztok sa prefiltruje, čím sa získa výsledný produkt ako biela tuhá látka s teplotou topenia 134 až 135 C.
Stupeň 6: Príprava N-terc.butyl-4-(1,l-dimetyletoxykarbonylamino)piperazín-2S-karboxamidu
K 1,20 g, 2,86 mmol N-terc.butyl-4-(1,l-dimetyletoxy- kar bonylamino)-1-(fenylmetylkarbonylamino)piperazín-2S-karboxamidu a 1,1 g, 0,086 mmol 10% paládia na aktívnom uhlí sa pridá 15 ml metanolu. Do nádoby sa privádza vodík a zmes sa mieša ešte 2 hodiny, potom sa prefiltruje cez vrstvu celitu a premyje sa etanolom. Rozpúšťadlo sa odparí vo vákuu, čím sa získa produkt vo forme peny.
ΪΗ NMR (300 MHz, CDCI3) δ 6.65 (br, 1H), 4.10 (m, 1H), 3.S1 (br, 1H), 3.21 (dd, J=18 a. 7 Hz, 1H), 3.02-2.70 (m, 4H), 2.10-2.0 (br, 1H), 1.50 (s, 9H), 1.41(s, 9H).
Stupeň 7: Príprava dihydro-5(S)-(4-(1,l-dimetyletoxykarbonylamino))-2(S)-(N-terc.butylkarboxamido)piperazinyl)metyl)-3(R)-fenylmetyl-3(2H))-furanónu
K roztoku 22,40 g, 0,0662 mol dihydro-5(S)-((trifluór metánsulfonyl)-oxymetyl)-3(R)-fenylmetyl-3(2H)-furanónu zo stupňa 3 a 18,0 g, 0,63 mol N-terc.butyl-4-(1,l-dimetyletoxykarbonylamino)piperazín-2S-karboxamidu, rozpusteného v 180 ml izopropanolu sa pridá 11,53 ml, 0,0662 mol N,N-diizopropyletylamínu. Po 2,5 hodinách sa pridá ešte 1,2 g dihyd-ro-5(S)-((trifluórmetánsulfonyl)-oxymetyl)-3(R)-fenylmetyl3(2H)-furanónu. Podľa chromatografie na tenkej vrstve je reakcia skončená po 3,5 hodinách a potom sa odparí na hustý olej. Tento olej sa rozotrie s 200 ml zmesi etylacetátu a hexánu v pomere 1:2, čím vznikne biela tuhá látka, ktorá sa odfiltruje a odloží. Olej sa čistí rýchlou chromatografiou na stĺpci s rozmermi 120 x 150 mm pri elúcii gradientom etylacetátu a hexánov v pomere 1:1, 2:1 až 3:1 a nakoniec etylacetátom, čím sa získa výsledný produkt.
1H NMR (400 MHz, CDC13) δ 7.34-7.17 (m, 5H), 6.31 (br s, 1H), 4.38 (br m, 1H), 3.96-3.92 (m, 1H), 3.79 (br m, 1H), 3.16 (dd, J=13.6 and 4.4 Hz, 1H), 3.08-2.99 (m, 3H), 2.90-2.82 (m, 1H), 2.80 (dd, J=13.5 and 8.9 Hz, 1H), 2.78 (m, 1H), 2.67-2.61 (m, 1H), 2.58-2.49 (m, 1H), 2.38-2.32 (m, 1H), 2.32-2.04 (m, 1H), 1.99-1.92 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.29 (s, 9H).
Stupeň 8: Príprava 2(R)-fenylmetyl-4(S)-(terc.butyldimetylsilyloxy)-5-(1-(4-(1,l-dimetyletoxykarbonylamino)))-2(S)-(N-terc.butylkarboxamido)piperazinyl))pentánamidu
K 25,50 g, 52,50 mmol dihydro-5(S)-(4-(1,l-dimetyletoxy-karbonylamino))-2(S)-(N-terc.butylkarboxamido)piperazinyl)metyl)-3(R)-fenylmetyl-3(2H))-furanónu, rozpustenému v 120 ml DME s teplotou 0 °C sa pridá roztok 60 ml vody a 1,512 g, 63,0í mmol hydroxidu lítneho. Po pol hodine sa reakcia zastaví pridaním 10% HC1 do pH 6 a roztok sa odparí vo vákuu. Odparok sa rozpustí v 50 ml vody a roztok sa extrahuje 4 x 75 ml etylacetátu, organický podiel sa premyje 20 ml vody a 20 ml nasýteného roztoku chloridu sodného. Vodná vrstva sa spätne extrahuje 2 x 75 ml etylacetátu, organické extrakty sa spoja, vysušia síranom horečnatým a odparia na žltú tuhú látku. Tento surový produkt sa rozpustí v 100 ml DMF, pridá sa 17,87 g, 0,262 mol imidazolu, zmes sa ochladí na 0 °C a pridá sa 31,50 g, 0,21 mol terc.butyldimetylsilylchloridu. Potom sa zmes ešte 1 hodinu mieša pri teplote 0 °C, potom sa nechá otepliť na teplotu miestnosti. Po 20 hodinách sa k reakčnej zmesi pridá 10 ml metanolu a zmes sa odparí na polovicu svojho objemu. Potom sa pridá ešte 100 ml vody s pufrom s pH 7 a vodná vrstva sa extrahuje 4 x 100 ml etylacetátu, organické podiely sa spoja, premyjú sa 2 x 50 ml 10% HC1, 3 x 75 ml vody a 50 ml nasýteného roztoku chloridu sodného, vysušia sa síranom horečnatým a odparia sa, čím sa získa výsledný produkt, ktorý sa priamo použije v nasledujúcom stupni.
Stupeň 9: Príprava N-(2(R)-hydroxy-1(S)-indanyl)-2(R)-fenylmetyl-4(S)-(terc.butyldimetylsilyloxy)-5-(1-(4(1,l-dimetyletoxykarbonylamino)))-2(S)-(N-terc.butylkarboxamido)piperazinyl))pentánamidu
K 27,0 g, 0,0446 mol surového materiálu zo stupňa 6, rozpusteného v 180 ml DMF s teplotou 0 °C sa pridá 8,98 g, 0,0468 mol EDC, 6,32 g, 0,0468 mol HOBT a 7,31 g, 0,049 mol aminohydroxyindánu. Potom sa pridá ešte 6,52 ml, 0,0468 mol trietylamínu, reakčná zmes sa 2 hodiny mieša pri teplote 0 °C a potom ešte 16 hodín pri teplote miestnosti, potom sa reakcia zastaví pridaním 500 ml etylacetátu. Organická vrst va sa premyje 2 x 100 ml 10% HC1, 100 ml nasýteného roztoku hydrogénuhličitanu sodného, 3 x 150 ml vody a 75 ml nasýteného roztoku chloridu sodného, vysuší sa síranom horečnatým a odparí sa, čím sa získa výsledný produkt vo forme bielej peny 1H NMR (400 MHz, CDC13) δ 7.4-7.17 (m, 9H), 6.51 (br s, 1H), 5.79 (br s, 1H), 5.23 (m, 1H), 4.23 (br s, 1H), 4.06 (m, 1H), 3.96-3.84 (m, 2H), 3.07-2.78 (m, 8H), 3.65 (dd, J=9.6 a 4.1 Hz, 1H), 2.56-2.44 (m, 2H), 2.29 (dd, J=12.0 a 4.5 Hz, 1H), 2.17-2.09 (m, 1H), 1.79 (br s, 1H), 1.44 (s, 9H), 1.35 (s, 9H), 1.10 (s, 1H), 0.84 (s, 9H), 0.12 (s, 3H), 0.08 (s, 3H).
Stupeň 10: Príprava N-(2(R)-hydroxy-1(S)-indanyl)-2(R)fenylmetyl-4(S)-(hydroxy)-5-(1-(4-(1,1-dimetyletoxykarbonylamino)))-2(S)-(N-terc.butylkarboxamido)piperazinyl))pentánamidu
K 32,20 g, 0,0437 mol N-(2(R)-hydroxy-1(S)-indanyl)-2(R)-fenylmetyl-4(S)-(terc.-butyldimetylsilyloxy)-5-(1-(4(1,l-dimetyletoxykarbonylamino)))-2(S)-(N-terc.-butylkarboxamido)piperazinyl))pentánamidu sa pridá 437 ml, 0,437 mol tetrabutylamóniumfluoridu vo forme 1,0 M roztoku v THF (Aldrich). reakčná zmes sa mieša 18 hodín, potom sa odparí na objem 200 ml a zriedi sa 700 ml etylacetátu. Vzniknutá zmes sa premyje 2 x 100 ml vody a 50 ml nasýteného roztoku chloridu sodného, vodná vrstva sa spätne extrahuje 2 x 200 ml etylacetátu. Organické vrstvy sa spoja, vysušia sa síranom horečnatým a odparia sa na olej, ktorý sa čistí chromatografiou na stĺpci s rozmerom 120 x 150 mm pri elúcii gradientom metylénchloridu, chloroformu nasýteného amoniakom a metanolu, v ktorom sa podiel metanolu zvyšuje z 1 % na 1,5 % a potom až na 2 %, čím sa získa produkt ako biela pena. 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7.31-7.11 (m, 9H), 6.41 (br s, 1H), 6.23 (d, J=8.6 Hz, 1H), 5.25 (dd, J=8.6 a 4.7 Hz, 1H), 4.21 (m, 1H), 3.83-
3.82 (m, 2H), 3.78-3.61 (m, 2H), 3.22-3.19 (m, 2H), 3.03-2.78 (m, 8H), 2.62-2.58 (m, 1H), 2.41-2.35 (m, 2H), 2.04-2.02 (m, 1H), 1.57-1.50 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.32 (s, 9H).
Stupeň 11: Príprava N-(2(R)-hydroxy-1(S)-indanyl)-2(R)fenylmetyl-4(S)-(hydroxy)-5-(1-(2(S)-N-(terc.butylkarboxamido)piperazinyl))pentánamidu, zlúčenina 14
K 21,15 g, 0,034 mol N-(2(R)-hydroxy-1(S)-indanyl)-2(R)fenylmetyl-4(S)-(hydroxy)-5-(1-(4-(1,1-dimetyletoxykarbonylamino)))-2(S)-(N-terc.butylkarboxamido)piperazinyl))-pentánamidu, rozpusteného v 350 ml metylénchloridu a ochladeného na 0 °C sa pridá 22,43 ml, 0,204 mol 2,6-lutidínu a potom 32,85 ml, 0,170 mol trimetylsilyltriflátu v priebehu 5 minút. Po pol hodine sa reakcia zastaví pridaním 80 ml 10% HC1 a zmes sa ešte pol hodiny mieša. Potom sa k zmesi pridá 100 ml nasýteného roztoku hydrogénuhličitanu sodného a potom ešte tuhý hydrogénuhličitan sodný až do pH 8. Potom sa vodná vrstva extrahuje 4 x 100 ml etylacetátu, organické vrstvy sa spoja, premyjú sa 50 ml vody a 75 ml nasýteného roztoku chloridu sodného, vysušia sa síranom horečnatým a odparia sa. Odparok sa čistí chromatografiou na stĺpci s rozmerom 120 x 150 mm, elúcia sa vykonáva za použitia gradientu metylénchloridu, chloroformu, nasýteného amoniakom a metanolu, v ktorom sa podiel metanolu pomaly zvyšuje z 2 % na 3 %, 4 %, 5 %, 6 % až 10 %. Týmto spôsobom sa získa výsledný produkt vo forme bielej peny.
1H NMR (400 MHz, CDC13) δ 7.53 (s, 1H), 7.29-7.09 (m, 9H), 6.52 (d, J=8.3 Hz, 1H), 5.24 (dd, J=8.2 a 4.9 Hz, 1H), 4.23 (dd, J=4.7 a 4.03 Hz, 1H), 4.25-4.00 (br s, 1H), 3.83-3.81 (m, 1H), 3.03-2.88 (m, 4H), 2.82-2.73 (m, 7H), 2.50-1.60 (br s, 2H), 2.45 (d, J=6.2 Hz, 2H),
2.32-2.29 (m, 1H), 1.98 (m, 1H), 1.51 (m, 1H), 1.33 (s, 9H).
Príklad 2
Príprava N-(2(R)-hydroxy-1(S)-indanyl)-2(R)-fenylmetyl-4(R)(hydroxy)-5-(1-(4-(3-furo[2,3 — b]pyridylmetyl)-2(R)-N-(terc.butylkarboxamido)piperazinyl))pentánamidu
Stupeň 1:
Príprava kyseliny furo[2,3-b]pyridín-2,5-dikarboxylovej
OH
K roztoku 1,22 g, 4,923 mmol dietylfuro[2,3-b]pyridín-
2,5-dikarboxylátu, známeho z publikácie Snyder H. R., Ebetino F. F,, J. Het. Chem., 3, 202 až 205, 1966 v 10 ml 95% etanolu sa pridá roztok 0,66 g, 11,81 mmol hydroxidu draselného, rozpusteného v 10 ml vody. Reakčná zmes sa 3 hodiny zohrieva na teplotu 80 °C, potom sa ochladí na teplotu miestnosti a prefiltruje sa. Soľ sa rozpustí vo vode a roztok sa okyslí 10% HC1 až na pH 2. Vzniknutá zrazenina sa odfiltruje a suší vo vákuu, čím sa získa 850 mg bielej tuhej látky.
1H NMR (400 MHz, (CD3)2SO) δ 8.98 (d, J=2.2 Hz, 1H), 8.76 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 4.25 (br s, 3H).
Stupeň 2: Príprava kyseliny furo[2,3-b]pyridín-5-karboxylovej
OH
K suspenzii 0,36 g, 1,484 mmol kyseliny furo[2,3-b]pyridín-2,5-dikarboxylovej v 3 ml chinolínu sa pod argónom pridá 180 mg, 2,82 mmol práškovej medi a zmes sa zohrieva
1,5 hodiny na 210 C. Reakčná zmes sa ochladí na teplotu miestnosti a zriedi sa 50 ml metylénchlôridu a potom sa prefiltruje cez celir. Organická vrstva sa extrahuje 2 x 40 ml nasýteného roztoku uhličitanu sodného, okysli sa 3 M HC1 až na pH 3 a potom sa prefiltruje, čím sa získa 80 mg špinavobielej tuhej látky. Vodná vrstva sa extrahuje 3 x 50 ml zmesi éteru a metanolu v pomere 85:15, premyje sa 10 ml nasýteného roztoku chloridu sodného, vysuší sa síranom horečnatým, prefiltruje sa a odparí, čím sa získa 35 mg produktu.
1H NMR (400 MHz, (CD3OD) δ 8.89 (s, 1H), 8.67 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.97 (d, J=2.5 Hz, 1H), 7.01 (d, J=2.4 Hz, 1H).
Stupeň 3: Príprava metylfuro[2,3-b]pyridín-5-karboxylátu
OCH3
K 3,0 g, 18,40 mmol kyseliny furo[2,3-b]pyridín-5-karbóxylovej, rozpustenej v 40 ml metanolu sa pridá 160 ml chloroformu a potom ešte 42 ml 10% roztoku v hexánoch pomaly po jednotlivých podieloch. Po pol hodene sa pridajú ešte štyri kvapky ľadovej kyseliny octovej a reakčná zmes sa odparí a získa sa 3,20 g špinavobielej tuhej látky.
1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 9.02 (d, J=2.0 Hz. 1H), 8.60 (d. J=2.0 Hz. 1H), 7.79 (d, J=2.5 Hz. 1H), 6.87 (d, J=2.5 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H).
Stupeň 4: Príprava 5-hydroxymetylfuro[2,3-b]pyridínu
Do banky s okrúhlym dnom s objemom 500 ml, vysušenej plameňom sa vloží 3,20 g, 18,08 mmol metylfuro[2,3-b]pyridín-5-karboxylátu, rozpusteného v 90 ml THF s teplotou 0 ‘C. K roztoku sa pridá 46 ml, 1 M roztoku diizobutylalumíniumhydridu v hexánoch (46,1 mmol) v priebehu 10 minút a potom sa chladiaca kúpeľ odstráni. Po 4 hodinách sa reakčná zmes ochladí na 0 °C a pomaly sa pridá 100 ml roztoku vínanu sodnodraselného. Po ďalších 18 hodinách sa vrstvy oddelia a vodná vrstva sa extrahuje 4 x 40 ml etylacetátu. Organické vrstvy .'sa spoja, premyjú sa 20 ml nasýteného roztoku chloridu sodného, vysušia sa síranom horečnatým, prefiltrujú sa a odparia. Odparok sa čistí rýchlou chromatografiou na stĺpci s rozmerom 40 x 150 mm pri elúcii gradientom 1000 ml zmesi metylénchloridu, metylénchloridu nasýteného amoniakom a metanolu, 1000 ml tej istej zmesi s pomerom 60:38:2, 1000 ml tej istej zmesi s pomerom 60:37:3 a 1000 ml tej istej zmesi v pomere 60:36:4. Týmto spôsobom sa získa 2,16 g bielej tuhej látky.
1H NMR (400 MHz, CDC13) δ 8.19 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.92 (d, >2.0 Hz, 1H), 7.64 (d, >2.5 Hz, 1H), 6.69 (d, >2.4 Hz, 1H), 4.78 (d, J=3.8 Hz, 2H), 4.69 (br s, 1H).
Stupeň 5: Príprava 3-chlórmetylfuro[2,3-b Jpyridínhydrorchloridu
HCI
K roztoku 5-hydroxymetylfuro[2,3-b]pyridínu v 9 ml metylénchloridu, ochladenému na 0 “C sa pridá 4,23 ml, 57,99 mmol tionylchloridu. Ľadový kúpeľ sa odstráni a po jednej hodine sa reakčná zmes odparí, čím sa získa 2,86 g, špinavobielej tuhej látky.
1H NMR (400 MHz, CDC13) δ 8.40 (d, >2.0 Hz, 1H), 8.13 (d, >2.2 Hz, 1H), 7.80 (d, >2.4 Hz, 1H), 6.86 (d, >2.4 Hz, 1H), 4.74 (s, 2H).
Stupeň 6: Príprava N-(2(R)-hydroxy-1(S)-indanyl)-2(R)-fenylmetyl-4(S)-hydroxy-5-(1-(4-(3-furo[2,3-b]pyridylmetyl)-2(S)-N-(terc.butylkarboxamido)piperazinyl))pentánamidu
K roztoku 6,50 g, 12,48 mmol N-(2(R)-hydroxy-1(S)-indanyl) -2(R)-fenylmetyl-4(S)-hydroxy-5-(2(S)-N’-(terc.butylkarboxamido) piperazinyl))pentánamidu, rozpusteného v 12 ml dimetylformamidu sa pod argónom pridá 2,80 g, 13,72 mmol 3chlórmetylfuro[2,3-b]pyridínhydrochloridu a 5,21 ml, 37,44 mmol trietylamínu. Po 18 hodinách sa reakčná zmes zriedi 400 ml etylacetátu a premyje sa 25 ml nasýteného roztoku hydrogénuhličitanu sodného, 5 x 20 ml vody a 25 ml nasýteného roztoku chloridu sodného. Roztok sa vysuší síranom horečnatým, prefiltruje sa a odparí na olej. Tento olej sa čistí rýchlou chromatografiou na stĺpci s rozmerom 60 x 150 mm, elúcia sa vykonáva gradientom, pti ktorom sa najskôr použije 1000 ml zmesi metylénchloridu, metylénchloridu nasýteného amoniakom a metanolu v pomere 60:39:1, potom 1500 ml tej istej zmesi v pomere 60:38:2, 1500 ml tej istej zmesi v pomere 60:37:3 a nakoniec 1500 ml tej istej zmesi v pomere 60: 36:4. Výsledná pena sa rozotrie s etylacetátom, výsledný produkt sa odfiltruje a suší cez noc vo vysokom vákuu pri teplote 65 “C, čím sa získa 5,30 g bielej kryštalickej látky. Zmesné frakcie zo stĺpca je možné spojiť a prečistiť, čím sa získajú ďalšie podiely produktu s teplotou topenia
183,5 až 184,5 ’C.
1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8.25 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.85 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.73 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.32-7.10 (m, 9H), 6.75 (d, J=2.4 Hz, 1H), 5.95 (d, J=8.6 Hz, 1H), 5.27 (dd, J=8.5, a. 4.8 Hz, 1H), 4.27-4.26 (m, 1H), 4.12 (br s, 1H), 3.89-3.83 (m, 1H), 3.51 (s, 2H), 3.29 (dd, J=17.5 a 4.0 Hz, 1H), 3.16 (dd, J=3.66 a 3.48 Hz, 1H), 3.15 (dd, J=6.6 a 5.1 Hz, 1H), 2.94-2.50 (m, 11H), 2.36-2.34 (m, 1H), 1.66 (s, 1H), 1.62-1.47 (m, 1H), 1.35 (s, 9H).
Analýza pre C38H47N5O5 vypočítané C 69,81, H 7,25, N 10,71 % nájdené C 69,46, H 7,22, N 10,69 %.
P r í k 1 a d 3
Použitím v podstate toho istého postupu ako v príklade 2, avšak v prípade, že sa na N-(2(R)-hydroxy-1(S)-indanyl)-2(R)-fenylmetyl-4(S)-hydroxy-5-(1-(2(R)-N’-(terc.-butylkarboxamido)piperazinyl))pentánamid, použitý ako zlúčenina i) pôsobí ďalej uvedeným alkylačným činidlom ii) namiesto alkylačného činidla, použitého v stupni 6, je možné pripraviť produkty, definované vzorcom iii).
iii
Cl
Príklad 4
Príprava amidu vzorca 1 nh2
Roztok 884 g, 5,93 mol (-)-cis-l-aminoindan-2-olu v 17,8 1 bezvodého THF (KF = 55 mg/ml, ide o Karí Fisherovu titráciu na vodu) a 868 ml, 6,22 mol tietylamínu sa vloží do banky s okrúhlym dnom s objemom 50 litrov, vybavenej termočlánkom, mechanickým miešadlom, prívodom pre dusík a prebublávacím zariadením a ochladí sa na 15 “C. Potom sa v priebehu 75 minút pridáva 1000 g, 5,93 mol 3-fenylpropionylchlorídu, pričom sa vnútorná teplota zmesi udržuje na hodnote 14 až 24 °C pomocou chladiaceho kúpeľa so zmesou ľadu a vody. Po skončenom pridávaní sa zmes nechá 30 minút stáť pri teplote 18 až 20 ’C, pomocou HPLC sa súčasne sleduje vymiznutie (-)-cis-l-aminoindan-2-olu.
Priebeh reakcie sa sleduje pomocou HPLC: stĺpec Dupont C8-RX s výškou 25 cm, acetonitril a 10 mM zmesi hydrogénfosforečnanu a dihydrogénfosforečnanu draselného v pomere 60: 40, rýchlosť prietoku 1 ml za minútu, vstrekový objem 20 ml, detekcia pri 200 nm, vzorka sa 500 x riedi. Približná doba retencie cis-aminoindanolu je 6,3 minút.
Reakčná zmes sa potom spracuje pridaním 241 g, 0,96 mol, 0,16 ekvivalentu pyridínium-p-toluénsulfonátu, mieša sa 10 minút, pH zmesi po zriedení 1 ml vzorky rovnakým objemom vody je v rozmedzí 4,3 až 4,6. Potom sa pridá 1,27 litrov, 13,24 mol, 2,2 ekvivalentu 2-metoxypropénu a reakčná zmes sa zohrieva 2 hodiny na teplotu 38 až 40 ’C. Potom sa reakčná zmes ochladí na 20 C a delí sa medzi 12 litrov etylacetátu a 10 litrov 5% vodného roztoku hydrogénuhličitanu sodného. Zmes sa premieša a vrstvy sa oddelia. Etylacetátový extrakt sa premyje 10 litrami 5% vodného roztoku hydrogénuhličitanu sodného a 4 litrami vody. Etylacetátový extrakt sa vysuší destiláciou za atmosférického tlaku a rozpúšťadlo sa nahradí cyklohexánom v objeme približne 30 litrov. Na konci destilácie a zahustení (20 % objemových extrakčného objemu etylacetátu) sa horúci cyklohexánový roztok nechá pomaly ochladiť na 25 °C na začatie kryštalizácie produktu. Výsledná suspenzia sa ochladí až na 10 °C a pri tejto teplote sa nechá 1 hodinu stáť. Produkt sa oddelí filtráciou a vlhký filtračný koláč sa premyje 2 x 800 ml cyklohexánu s teplotou 10 °C.
Premytý filtračný koláč sa vysuší vo vákuu pri tlaku 3 kPa pri teplote 40 °C, čím sa vo výťažku 86,4 % získa 1,65 kg acetonidu vzorca 1, plocha pod krivkou pri HPLC je 98 %.
*-H-NMR (300,13 MHz , CDC13 , hlavný rotamér) : δ 7.36-7.14 (m, 9 H),
5.03 (d, J=4.4, 1 H), 4.66 (m, 1 H) 3.15 (m, 2 H), 3.06 (br s, 2 H), 2.97 (m, 2 H), 1.62 (s, 3 H), 1.37 (s, 3 H);
13C-NMR (75,5 MHz, CDCI3, hlavný rotamér): δο 168.8, 140.9,
140.8, 140.6, 128.6, 128.5, 128.4,
65.9, 38.4, 36.2, 31.9, 26.5,
Analýza pre C21H23N02 vypočítané C 78,47, H 7,21, nájdené C 78,65, H 7,24,
127.1, 126.3, 125.8, 124.1, 96.5, 78.6,
N 4,36 %
N 4,40 %.
Príklad 5
Príprava epoxidu vzorca 3
Roztok 1000 g, 3,11 mol acetonidu vzorca 1 a 853 g, 3,74 mol, 1,2 ekvivalentu 2(S)-glycidyltosylátu v 15,6 1 THF (KF = 22 mg/ml) sa vloží do banky s okrúhlym dnom s objemom 50 litrov so štyrmi hrdlami, vybavenej termočlánkom, mechanickým miešadlom, pridávacím lievikom s prívodom pre dusík, zmes sa zbaví plynov trojitým prepláchnutím dusíkom vo vákuu a potom sa ochladí na -56 °C. Potom sa v priebehu 2 hodín pridá 2,6 litrov, 1,38 M roztoku lítiumhexametyldisilazidu (1,15 ekvivalentov) v priebehu 2 hodín a súčasne sa vnútorná teplota udržuje v rozmedzí -50 až -45 °C. Reakčná zmes sa hodinu mieša pri teplote -45 až -40 °C a potom sa v priebehu jednej hodiny nechá otepliť na -25 “C. Potom sa zmes mieša 4 hodiny pri teplote -25 až -22 °C alebo tak dlho, až plocha pre východiskový acetonid je len 3,0 %.
Priebeh reakcie sa sleduje pomocou HPLC za použitia stĺpca Zorbax Silica s rozmermi 25 cm x 4,6 cm, 20% etylacetátu v hexáne, pri rýchlosti prietoku 2,0 ml/min, vstrekovaný objem je 20 ml, detekcia sa vykonáva pri 254 nm, vzorka sa riedi 100 x. Doby retencie sú uvádzané v nasledujúcej tabuľke .
doba retencie (min) zlúčenina
5.5
6.5
13,5 amid vzorca 1 glycidyltosylát vzorca 2 epoxid vzorca 3
K reakčnej zmesi sa pridá pri teplote -15 °C celkom 6, 7 litrov deionizovanej vody a potom sa pridá ešte 10 litrov etylacetátu na rozdelenie zmesi na dve fázy. Zmes sa premieša a vrstvy sa od seba oddelia. Etylacetátov extrakt sa premyje zmesou 5 litrov 1% vodného hydrogénuhličitanu sodného a 0,5 litrami nasýteného chloridu sodného. 28,3 litrov etylacetátového extraktu sa odparí destiláciou pri tlaku približne 3 kPa a pridá sa ďalší etylacetát na výmenu rozpúšťadla za etylacetát, konečný objem roztoku je 11,7 litrov. Etylacetátový koncentrát sa spracuje nahradením rozpúšťadla metanolom tak, aby došlo ku kryštalizácii produktu a súčasne sa zmes zahustí na konečný objem 3,2 litrami. Zvyšný etylacetát sa odstráni tak, že sa pridá 10 litrov metanolu a oddestiluje sa 10 litrov rozpúšťadla. Výsledná suspenzia sa mieša 1 hodinu pri teplote 22 ’C, potom sa ochladí na teplotu 5 °C a pri tejto teplote sa nechá ešte pol hodiny stáť. Produkt sa oddelí filtráciou a vlhký filtračný koláč sa premyje 2 x 250 ml chladného metanolu. Potom sa filtračný koláč suší vo vákuu pri tlaku približne 3 kPa pri teplote 25 °C, čím sa vo výťažku 61,2 % získa 727 g epoxidu vzorca 3, plocha pod krivkou pri HPLC pre tento hlavný produkt je 98, 7 %.
13C NMR (300 MHz, CDCI3) δ 171.1, 140.6,140.5, 139.6, 129.6,
128.8, 128.2, 127.2, 126.8, 125.6, 124.1, 96.8, 79.2, 65.8, 50.0, 48.0,
44.8,39.2,37.4,36.2,26.6,24.1.
Príkladó
Príprava výsledného produktu vzorca 6
Suspenzia 1950 g, 6,83 mol 2(S)-terc-butylkarboxamid-4N-Boc-piperazínu vzorca 4 s prebytkom enantioméru vyšším než
99,5 % a 2456 g, 6,51 mol epoxidu vzorca 3, vo forme zmesi foriem 4S/4R . v pomere 97,5:2,5 v 18,6 litroch izopropanolu sa vloží do banky s okrúhlym dnom s objemom 72 litrov so štyrmi hrdlami, vybavenej mechanickým miešadlom, spätným chladičom a parným kúpeľom, okrem toho ešte termočlánkom s teflónovým povlakom a prívodom pre dusík. Zmes sa zohrieva na teplotu varu pod spätným chladičom, vnútorná teplota zmesi je 84 až 85 °C. Po 40 minútach sa získa homogénnym roztok. Zmes sa zohrieva 28 hodín na teplotu varu pod spätným chladičom.
Vnútorná teplota v priebehu varu pod spätným chladičom bola 84 až 85 “C. Priebeh reakcie sa sleduje pomocou HPLC za použitia stĺpca Dupont C8-RX s výškou 25 cm za použitia zmesi a 10 mM zmesi hydrogénfosforečnanu a dihydrogénfosforečnanu draselného 60:40, rýchlosť prietoku 1 ml/min, detekcia pri 220 nm, objem vzorky 2 mikrolitre, vzorka sa riedi na 1 ml acetonitrilom. Doby retencie sú uvedené v nasledujúcej tabuľke.
doba retencie (min) zlúčenina
4.8 piperazín vzorca 4
8.9 epoxid vzorca 3
15,2 produkt vzorca 5
Po 28 hodinách bola plocha pre zvyšný epoxid vzorca 3
1,5 % a plocha pre produkt vzorca 5 pri analýze pomocou HPLC bola 91 až 93 %. Zmes bola ochladená na 0 až 5 °C a po pridaní 20,9 litrov 6 M HC1 bola teplota udržovaná pod 15 °C. Po skončenom pridávaní bola zmes zohriata na 22 °C. Potom bolo možné pozorovať vývoj plynu (izobutylén). Potom bola zmes ponechaná 6 hodín pri teplote 20 až 22 °C.
Priebeh reakcie bol sledovaný pomocou analýzy HPLC za rovnakých podmienok ako je uvedené vyššie. Doby retencie sú uvedené v nasledujúcej tabuľke:
doba retencie (min) zlúčenina
7;0 cis-aminoindažol
11,9 produkt vzorca 6
15,1 produkt vzorca 5
Zmes sa pomaly ochladí na 0 °C a pomaly sa pridá 7,5 litrov 50% NaOH na úpravu pH zmesi na 11,6, v priebehu pridávania sa teplota udržuje na hodnote nižšej než 25 °C.
Potom sa zmes delí medzi 40 litrov etylacetátu a 3 litre vody. Zmes sa premieša a vrstvy sa oddelia. 60 litrov organickej fázy sa odparí za zníženého tlaku 4 kPa a rozpúšťadlo sa nahradí DMF a zmes sa odparí na konečný objem 10,5 litrov, KF = 1,8 mg/ml. Plocha pre produkt 6 v etylacetáte pri analýze HPLC je 86,5 %. produkt vzorca 6 v DMF sa priamo použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho čistenia. NMR-spektrum pre izolovaný produkt vzorca 6:
13c NMR (75.4 MHz, CDC13) δ 175.2, 170.5, 140.8, 140.5, 139.9,
129.1, 128.5, 127.9, 126.8, 126.5, 125.2, 124.2, 73.0, 66.0, 64.8, 62.2, 57.5, 49.5, 47.9, 46.4, 45.3, 39.6, 39.3, 38.2, 28.9.
Príklad 7
Pyrazín-2-terc.butylkarboxamid vzorca 9
CONHt-Bu kyselina 2-pyrazínkarboxylová vzorca 8 oxalylchlorid
3,35 kg, 27 mol
3,46 kg, 27,2 mol (9) terc.butylamín, KF = 460 μΙ/ml etylacetát, KF 56 μΙ/ml
DMF
1-propanol
9,36 1, 89 mol
1
120 ml
1
Karboxylová kyselina vzorca 8 sa uvedie do suspenzie v 27 litroch etylacetátu a 120 ml DMF v nádobe s objemom 72 litrov s tromi hrdlami s mechanickým miešadlom a pod dusíkom a suspenzia sa ochladí na teplotu 2 °C. Pridá sa oxalylchlorid a súčasne sa teplota udržuje v rozmedzí 5 až 8 °C.
Pridávanie je skončené po 5 hodinách. V priebehu exotermického pridávania sa uvoľní oxid uhoľnatý a uhličitý. Vytvorená HC1 prevažne zostáva v roztoku. Malé množstvo vytvorenej zrazeniny je pravdepodobne hydrochlorid chloridu pyrazínovej kyseliny. Skúška na tvorbu chloridu kyseliny bola uskutočnená zmiešaním bezvodej vzorky zmesi s terc.butylamínom. Po skončení reakcie zvýšilo menej než 0, 7 % kyseliny vzorca 8.
Skúška na ukončenie tvorby chloridu kyseliny je dôležitá vzhľadom na to, že neukončená reakcia vedie k tvorbe bis-terc.butyloxamidu ako nežiaducej nečistoty.
Priebeh reakcie je možné sledovať pomocou HPLC za použitia stĺpca Dupont Zorbax RXC8 pri prietoku 1 ml/min a pri detekcii pri 250 nm. Použije sa lineárny gradient od 98 % 0, 1% vodnej kyseliny fosforečnej a 2 % metylkyanidu až do 50 % kyseliny a 50 % metylkyanidu v priebehu 30 minút. Doba retencie je 10,7 minút pre kyselinu vzorca 8 a 28,1 minút pre amid vzorca 9.
Reakčná zmes sa nechá stáť 1 hodinu pri teplote 5 °C. Výsledná suspenzia sa ochladí na 0 °C a potom sa pridáva terc.butylamín tak, aby vnútorná teplota zmesi v priebehu pridávania zostala pod 20 °C.
Pridávanie trvá 6 hodín vzhľadom na to, že reakcia je veľmi exotermická. Malý podiel vzniknutého terc.-butylamóniumhydrochloridu sa z reakcie vylúči ako vločkovitá biela tuhá látka.
Zmes sa nechá stáť ešte 30 minút pri teplote 18 °C.
Vyzrážané amónne soli sa odfiltrujú a filtračný koláč sa premyje 12 litrami etylacetátu. Organické fázy sa spoja, premyjú sa 6 litrami 3% hydrogénuhličitanu sodného a 2x2 litrami nasýteného vodného roztoku chloridu sodného. K organickej fázy sa pridá 200 g aktívneho uhlia Darco G60 a zmes sa prefiltruje cez Solka Flok a filtračný koláč sa premyje 4 litrami etylacetátu.
Aktívne uhlie účinne zbaví výsledný produkt prímesí purpurového farbiva.
Etylacetátov roztok zlúčeniny vzorca 9 sa zahustí pri tlaku 1 kPa na 25 % pôvodného objemu. Pridá sa 30 litrov 1-propanolu a v destilácii sa pokračuje až do konečného objemu reakčnej zmesi 20 litrov.
V tomto okamžiku je množstvo etylacetátu už pod hranicou detekcie pri ^H-NMR, to znamená menej než 1 %. Vnútorná teplota zmesi pri výmene rozpúšťadiel bola nižšia než 30 °C. Roztok zlúčeniny vzorca 3 v zmesi 1-propanolu a etylacetátu bol pri vare pod spätným chladičom za atmosférického tlaku stály po dobu niekoľkých dní.
Odparením podielu reakčnej zmesi sa získa špinavobiela tuhá látka s teplotou topenia 87 až 88 °C.
Príklad 8
Racemický 2-terc.-butylkarboxamidpiperazín vzorca 10
(9)
H2/Pd(OH)2
CONHt-Bu
CONHt-Bu
Materiály
2,4 kg, 13,4 mol pyrazín-2-terc.butylkarboxamidu vzorca 9 v 12 litroch 1-propanolu a 144 g 20% paládia na aktívnom uhlí so 16 % hmotnostnými vody.
Roztok pyrazín-2-terc.-butylkarboxamidu vzorca 9 v 1 propanole sa uloží do autoklávu s objemom približne 15 1. Pridá sa katalyzátor a zmes sa hydrogenuje pri tlaku 0,3 MPa a teplote 65 ’C v atmosfére vodíka.
Po 24 hodinách došlo k spotrebovaniu teoretického množstva vodíka a plynovou chromatografiou bolo možné dokázať menej než 1 % pôvodného množstva zlúčeniny vzorca 9. Zmes bola ochladená, premytá dusíkom a katalyzátor bol odstránený filtráciou cez Folka Floc. Katalyzátor sa potom premyje 2 litrami teplého 1-propanolu.
Bolo zistené, že použitie teplého 1-propanolu v priebehu premývania filtračného koláča zlepší výsledok filtrácie a zníži straty produktu vo filtračnom koláči.
Reakcia sa sleduje plynovou chromatografiou na stĺpci Megabore, 30 m, pri teplote 100 až 160 °C pri gradiente 10 ’C/min pri udržovaní teploty po dobu 5 minút, potom sa teplota zvyšuje po 10 °C/min až na 250 ’C. Doba retencie je 7, 0 minút pre zlúčeninu vzorca 9 a 9,4 minút pre zlúčeninu vzorca 10. Reakciu je tiež možné sledovať pomocou PLC za použitia zmesi etylacetátu a metanolu ako rozpúšťadla a ninhydrínu ako detekčného činidla.
Odparením podielu zmesi je možné dokázať, že výťažok amidácie a hydrogenácie je 88 % a koncentrácia zlúčeniny vzorca 10 je 133 g/1.
Odparením podielu sa získa produkt vzorca 10 ako biela tuhá látka s teplotou topenia 150 až 151 ’C.
13c NMR (75 MHz. D20, ppm) 173.5, 59.8, 52.0, 48.7,45.0, 44.8, 28.7.
Príklad 9 (S)-2-terc.butylkarboxamidpiperazín-bis(S)-gafrosulfonát vzorca 11
(+)-CSA
Bu (10) (11) materiály rac.2-terc.butylkarboxamidpiperazín vzorca 10 v 1-propanole kyselina (S)-(+)-10-gafrosulfónová
1-propanol acetonitril voda množstvo
4,10 kg, 22,12 mol v 25,5 kg rozpúšťadla
10,0 kg, 43,2 mol
1
1
2,4 1
Roztok amínu vzorca 10 v 1-propanole sa vloží do banky s objemom 100 1 s koncentračným zariadením. Roztok sa zahustí pri tlaku 1 kPa a teplote nižšej než 25 °C na objem približne 12 litrov.
Dôjde k vyzrážaniu produktu z roztoku, avšak po zahriatí na 50 °C sa materiál znova rozpustí.
Analýzou homogénneho podielu zmesi je možné dokázať obsah zlúčeniny vzorca 10 celkom 341 g/1. Koncentrácia sa stanoví pomocou HPLC za použitia stĺpca Dupont Zorbax RXC8 s dĺžkou 25 cm, rýchlosť prietoku 1,5 ml/min, detekcia pri 210 nm, izokratická zmes metylkyanidu a 0,1% vodného roztoku kyseliny fosforečnej 98:2. Doba retencie zlúčeniny vzorca 10 je 2,5 minút.
Potom sa pridá 39 litrov acetonitrilu a 2,4 litrov vody, čím vznikne číry svetlohnedý roztok.
Po stanovaní obsahu vody a titrácii KF a pomeru metylkyanidu a 1-propanolu pomocou ^H-NMR je možné dokázať, že pomer metylkyanidu, 1-propanolu a vody je 26:8:1,6. Obsah zlúčeniny v roztoku bol 72,2 g/1.
Kyselina (S)-10-gafrosulfónová bola pridaná v priebehu 30 minút pri teplote 20 eC v 4 podieloch. Po pridaní sa zvýšila teplota zmesi na 40 “C. Po niekoľkých minútach sa vytvorila masívna zrazenina. Biela suspenzia bola zohrievaná na teplotu 76 ’C na rozpustenie všetkého tuhého podielu a svetlohnedý roztok bol potom v priebehu 8 hodín pomaly ochladený až na teplotu 21 °C.
Produkt sa vyzrážal pri teplote 62 C a bol odfiltrovaný pri teplote 21 eC, filtračný koláč bol premytý 5 litrami zmesi metylkyanidu, 1-propanolu a vody v pomere 26:8:1,6. Produkt bol sušený pri teplote 35 “C vo vákuu pod dusíkom, vo výťažku 39 % bolo získaných 5,6 kg zlúčeniny vzorca Ϊ1 vo forme bielej kryštalickej tuhej látky s teplotou topenia 288 až 290 °C za rozkladu.
[a]D 25 = 18,0°, (c = 0,37, voda).
13c NMR (75 MHz, DýO, ppm) 222.0, 164.0, 59.3, 54.9, 53.3, 49.0, 48.1,
Prebytok enantioméru v produkte bol 95 % podlá výsledkov chirálnej HPLC: podiel 33 mg produktu vzorca 11 bol uvedený do suspenzie v 4 ml etanolu a 1 ml trietylamínu. Potom bolo pridaných 11 mg B0C2O a reakčná zmes bola ponechaná 1 hodinu, potom bolo rozpúšťadlo úplne odparené vo vákuu, odparok bo rozpustený približne v 1 ml etylacetátu a prefiltrovaný cez Pasteúrovu pipetu s oxidom kremičitým za použitia etylacetátu ako elučného činidla. Frakcie s obsahom produktu boli odparené a produkt bol znova rozpustený v hexánoch v množstve približne 1 mg/ml. Enantioméry boli oddelené na stĺpci Daicel Chiracell AS za použitia zmesi hexánu a IPA 97:3 pri rýchlosti prietoku 1 ml/min a pri detekcii pri 228 nm. Doba retencie pre S-antipod je 7,4 minút a pre R-antipod je 9,7 minút.
Príklad 10
Príprava (S)-2-terc.butylkarboxamid-4-terc.butoxykarbonylpiperazinu vzorca 4 zo soli vzorca 11
N CONHt-Bu N
H H
N H (4)
Bu (11) materiály (S)- 2-terc.butylkarboxamidpiperazínbis(S)-(+)-gafrosulfonát vzorca 11, 95% ee (enantiomérna čistota) di-terc.butyldikarbonát trietylamín čistý EtOH (200 proof) etylacetát množstvo
5,54 kg, 8,53 mol
1,86 kg, 8,53 mol
5,95 1, 42,6 mol
1
1
K soli vzorca 11 v banke s objemom 100 litrov s tromi hrdlami, vybavenej pridávacim lievikom sa pod dusíkom pridá pri teplote 25 °C etanol a potom trietylamín. Tuhý podiel sa po pridaní trietylamínu dobre rozpustí. Potom sa B0C2O rozpustí v etylacetáte a pridáva sa lievikom tak rýchlo, aby teplota zmesi bola nižšia než 25 °C. Pridávanie trvá 3 hodiny. Potom sa reakčná zmes nechá ešte 1 hodinu stáť.
Priebeh reakcie je možné sledovať pomocou HPLC pri použití stĺpca Dupont Zorbax RXC8 s výškou 25 cm, rýchlosť prietoku 1 ml/minútu, detekcia sa vykonáva pri 228 nm a použije sa izokratická zmes metylkyanidu a 0,1 M roztok dihydrogénfosforečnanu draselného v pomere 50:50 po úprave pH hydroxidom sodným na 6,8. Doba retencie produktu vzorca 4 je
7,2 minút. Chirálna skúška bola vykonaná za použitia toho istého systému. Reakciu je možné sledovať tiež za použitia TLC a 100% etylacetátu ako rozpúšťadla, = 0,7.
Potom sa roztok odparí na objem približne 10 litrov pri vnútornej teplote nižšej než 20 “C za použitia koncentračného zariadenia pri tlaku 1 kPa. Výmena rozpúšťadiel bola uskutočnená tak, že zmes bola velmi pomaly vliata do 20 litrov etylacetátu a potom bola znova odparená až na objem 10 litrov. Potom bola reakčná zmes premytá v extrakčnom zariadení za použitia 60 litrov etylacetátu. Organické fázy boli premyté 16 litrami 5% vodného roztoku uhličitanu sodného, 2 x 10 litrami deionizovanej vody a potom 2 x 6 litrami nasýteného vodného roztoku chloridu sodného. Vodné fázy, použité na premývanie boli spätne extrahované 20 litrami etylacetátu, organická fáza potom bola premytá 2x3 litrami vody a 2 x 4 litrami nasýteného vodného roztoku chloridu sodného. Etylacetátové extrakty boli po spojení odparené pri tlaku 1 kPa a pri vnútornej teplote zmesi nižšej než 20 °C v koncentračnom zariadení s objemom 100 1 až približne na litrov. Výmena rozpúšťadiel za cyklohexán sa uskutoční tak, že sa koncentrovaný roztok pomaly vleje do približne 20 litrov cyklohexánu a vzniknutá zmes sa znova odparí až na objem približne 8 litrov. K suspenzii sa pridá 5 litrov cyklohexánu a 280 ml etylacetátu a zmes sa varí pod spätným chladičom, čím dôjde k rozpusteniu všetkého tuhého podielu. Roztok sa ochladí a pri teplote 58 °C sa pridá 10 g kryštálov výsledného produktu. Potom sa suspenzia v priebehu 4 hodín ochladí až na 22 °C a po 1 hodine státia pri uvedenej teplote sa výsledný produkt oddelí filtráciou. Filtračný koláč sa premyje 1,8 litrami cyklohexánu a potom sa suší vo vákuu pri teplote 35 C pod prúdom dusíka, čím sa vo výťažku 77 % získa 1,87 kg výsledného produktu 4 vo forme špinavobieleho prášku. Plocha pod krivkou pri HPLC je väčšia než
99,9 %, množstvo R-izoméru je pod hranicou detekcie.
[a]D 25 =22,0°, (c = 0,20, metanol), teplota topenia 107 °C. 13c NMR (75 MHz, CDC13, ppm) 170.1, 154.5, 79.8, 58.7, 50.6, 46.6, 43.6,43.4,28.6, 28.3.
Vynález bol vysvetlený v priebehu prihlášky a v jednotlivých príkladoch uskutočnenia na niektorých výhodných uskutočneniach, je však zrejmé, že do rozsahu vynálezu je možné zahrnúť tiež všetky bežné variácie alebo modifikácie, neodchyľujúce sa od zmyslu vynálezu.

Claims (10)

1. Zlúčenina všeobecného vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľné soli, kde ♦· kde X znamená atóm kyslíka alebo síry.
2. Zlúčenina podľa nároku 1, kde znamená a farmaceutický prijateľných solí týchto látok.
3. Zlúčenina podía nároku 1, vzorca 'r
N-(2(R)-hydroxy-1(S)-indanyl)-2(R)-fenylmetyl-4(S)-hydroxy-
5-(1- (4-(3-furo[2,3-b]pyridylmetyl)-2(S)-N’-(terc.butylkarboxamido)piperazinyl))pentánamid a jej soli, prijateľné z farmaceutického hľadiska.
4. Zlúčenina podľa nároku 1, vzorca alebo jej farmaceutický prijateľné soli.
5. Farmaceutický prostriedok, vyznačuj úci sa t ý m, že ako účinnú zložku obsahuje inhibítor proteázy HIV podľa niektorého z nárokov 1 až 4, spolu s farmaceutický prijateľným nosičom.
6. Použitie zlúčeniny všeobecného vzorca I podlá nároku 1 až 4, na výrobu farmaceutického prostriedku na liečenie AIDS.
7. Použitie zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa nároku 1 až 4, na výrobu farmaceutického prostriedku na prevenciu a liečenie infekcie HIV.
A
8. Použitie zlúčeniny všeobecného vzorca I podľa nároku ,w 1 až 4, na výrobu farmaceutického prostriedku na na inhibíciu HlV-proteázy.
9. Kombinovaný preparát, vyznačujúci sa tým, že obsahuje inhibítor HlV-proteázy podľa nároku 3 a nenukleozidový inhibítor HlV-reverznej -transkriptázy, zvolený zo zlúčeniny B, zlúčeniny C a nevirapinu a prípadne AZT, ddl alebo ddC.
10. Kombinovaný preparát podľa nároku 10, v y z n a č u j ú c i sa t ý m, že obsahuje inhibítor HIV proteázy podľa nároku 3 a AZT, ddl alebo ddC.
SK757-96A 1993-12-15 1994-12-12 Hiv protease inhibitors, pharmaceutical compositions containing them and their use SK75796A3 (en)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US16801393A 1993-12-15 1993-12-15
US17047593A 1993-12-20 1993-12-20
PCT/US1994/014187 WO1995016688A1 (en) 1993-12-15 1994-12-12 Hiv protease inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SK75796A3 true SK75796A3 (en) 1997-05-07

Family

ID=26863718

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK757-96A SK75796A3 (en) 1993-12-15 1994-12-12 Hiv protease inhibitors, pharmaceutical compositions containing them and their use

Country Status (19)

Country Link
US (2) US5646148A (sk)
EP (1) EP0734387B1 (sk)
JP (1) JP3000564B2 (sk)
KR (1) KR100234863B1 (sk)
CN (1) CN1046727C (sk)
AT (1) ATE215952T1 (sk)
AU (1) AU692509B2 (sk)
BG (1) BG62093B1 (sk)
BR (1) BR9408305A (sk)
CA (1) CA2178760C (sk)
CZ (1) CZ288312B6 (sk)
DE (1) DE69430385T2 (sk)
ES (1) ES2174921T3 (sk)
FI (1) FI962488A (sk)
HU (1) HUT74681A (sk)
NZ (1) NZ278201A (sk)
PL (1) PL314984A1 (sk)
SK (1) SK75796A3 (sk)
WO (1) WO1995016688A1 (sk)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE299707T1 (de) 1995-11-13 2005-08-15 Vitaleech Bioscience N V Antivirale isolate von blutegeln
MY126358A (en) * 1996-03-22 2006-09-29 Glaxo Group Ltd Compositions comprising vx478 and a water soluble tocopherol derivative such as vitamin e-tpgs
TW438799B (en) * 1997-05-29 2001-06-07 Merck & Co Inc HIV protease inhibitor
CO4940492A1 (es) * 1997-05-29 2000-07-24 Merck & Co Inc Inhibidor de proteasa de vih
CO4970782A1 (es) * 1997-11-13 2000-11-07 Merck & Co Inc Terapia combinada para el tratamiento del sida
US6180634B1 (en) 1997-11-13 2001-01-30 Merck & Co., Inc. Combination therapy for the treatment of AIDS
US6251906B1 (en) 1998-05-15 2001-06-26 Abbott Laboratories Retroviral protease inhibiting compounds
FR2780649B1 (fr) 1998-07-06 2001-03-09 Univ Paris Vii Denis Diderot Derives de la piperazine pour l'inhibition de la replication du virus de l'immunodeficience humaine
GB2341385A (en) 1998-09-14 2000-03-15 Merck & Co Inc Recovery of iodide from chemical process waste water
US6440946B1 (en) * 1999-02-25 2002-08-27 Takeda Chemical Industries, Ltd. Multiple-agents-binding compound, production and use thereof
US6589962B1 (en) 1999-07-20 2003-07-08 Merck & Co., Inc. Alpha-hydroxy-gamma-[[(carbocyclic-or heterocyclic-substituted)amino]carbonyl]alkanamide derivatives and uses thereof
US6642237B1 (en) 1999-11-24 2003-11-04 Merck & Co., Inc. Gamma-hydroxy-2-(fluoroalkylaminocarbonyl)-1-piperazinepentanamides and uses thereof
US6482952B2 (en) 2000-06-20 2002-11-19 Merck & Co., Inc. Process for preparing acetonides
US7049146B2 (en) 2000-11-14 2006-05-23 Facet Analytical Services And Technology, Llc Calibration standards, methods, and kits for water determination
US7122376B2 (en) * 2001-11-01 2006-10-17 Facet Analytical Services And Technology, Llc Calibration standards, methods, and kits for water determination
US20040131504A1 (en) * 2002-09-17 2004-07-08 Landers James P. Remote temperature sensing of small volume and related apparatus thereof
GB0720503D0 (en) * 2007-10-22 2007-11-28 Angeletti P Ist Richerche Bio New compound
US20130115237A1 (en) 2010-06-09 2013-05-09 Vaccine Technologies, Incorporated Therapeutic immunization in hiv infected subjects to augment antiretroviral treatment
CN108178764A (zh) * 2018-01-09 2018-06-19 天津科技大学 呋喃并[2,3-b]吡啶类化合物及无金属催化的合成方法

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL89900A0 (en) * 1988-04-12 1989-12-15 Merck & Co Inc Hiv protease inhibitors useful for the treatment of aids and pharmaceutical compositions containing them
WO1993008184A1 (en) * 1991-10-23 1993-04-29 Merck & Co., Inc. Hiv protease inhibitors
EP0541168B1 (en) * 1991-11-08 1998-03-11 Merck & Co. Inc. HIV protease inhibitors useful for the treatment of aids
US5413999A (en) * 1991-11-08 1995-05-09 Merck & Co., Inc. HIV protease inhibitors useful for the treatment of AIDS
SI9420017B (sl) * 1993-03-31 2003-12-31 Merck & Co. Inc. Inhibitorji proteaze hiv-a v farmacevtskih kombinacijah za zdravljenje aids-a

Also Published As

Publication number Publication date
NZ278201A (en) 1998-01-26
WO1995016688A1 (en) 1995-06-22
BR9408305A (pt) 1997-08-26
CZ158696A3 (en) 1996-11-13
EP0734387A4 (en) 1997-03-05
EP0734387B1 (en) 2002-04-10
CA2178760C (en) 2000-08-01
PL314984A1 (en) 1996-09-30
AU1433195A (en) 1995-07-03
KR100234863B1 (ko) 1999-12-15
DE69430385T2 (de) 2002-11-07
ES2174921T3 (es) 2002-11-16
AU692509B2 (en) 1998-06-11
HUT74681A (en) 1997-01-28
CN1046727C (zh) 1999-11-24
JPH09506619A (ja) 1997-06-30
BG100643A (bg) 1997-02-28
US5646148A (en) 1997-07-08
CA2178760A1 (en) 1995-06-22
HU9601649D0 (en) 1996-08-28
JP3000564B2 (ja) 2000-01-17
DE69430385D1 (de) 2002-05-16
CZ288312B6 (en) 2001-05-16
FI962488A0 (fi) 1996-06-14
EP0734387A1 (en) 1996-10-02
FI962488A (fi) 1996-06-14
US5807841A (en) 1998-09-15
CN1142827A (zh) 1997-02-12
BG62093B1 (bg) 1999-02-26
ATE215952T1 (de) 2002-04-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SK75796A3 (en) Hiv protease inhibitors, pharmaceutical compositions containing them and their use
EP1467970B1 (en) Hydroxynaphthyridinone carboxamides useful as hiv integrase inhibitors
SK279471B6 (sk) Kompozícia zlúčenín, farmaceutické prostriedky s i
AU676563B2 (en) HIV protease inhibitors useful for the treatment of AIDS
CA3154386A1 (en) Bifunctional molecules containing an e3 ubiquitine ligase binding moiety linked to a bcl6 targeting moiety
JP4982482B2 (ja) Ｈｉｖインテグラ−ゼ阻害剤
KR20100116206A (ko) Ｈｓｐ90 저해제로서의 옥심 유도체
SK137899A3 (en) 4,4-disubstituted-3,4-dihydro-2(1h)-quinazolinones useful as hiv reverse transcriptase inhibitors
US20230158157A1 (en) Potent and selective degraders of alk
US20120142752A1 (en) Hiv protease inhibitors
US5650412A (en) HIV protease inhibitors useful for the treatment of AIDS
WO1994026749A1 (en) Hiv protease inhibitors
WO2022212531A1 (en) Pyridopyrimidinone compounds
RU2137768C1 (ru) Ингибиторы hiv протеазы