JPH09506619A

JPH09506619A - Ｈｉｖプロテアーゼ阻害剤

Info

Publication number: JPH09506619A
Application number: JP7516855A
Authority: JP
Inventors: ハフ，ジヨエル・アール; バツカ，ジヨーゼフ・ピイ; ドーシー，ブルース・デイー
Original assignee: メルクエンドカンパニーインコーポレーテッド
Priority date: 1993-12-15
Filing date: 1994-12-12
Publication date: 1997-06-30
Anticipated expiration: 2015-01-17
Also published as: NZ278201A; WO1995016688A1; BR9408305A; CZ158696A3; EP0734387A4; EP0734387B1; CA2178760C; PL314984A1; AU1433195A; KR100234863B1; DE69430385T2; ES2174921T3; AU692509B2; HUT74681A; CN1046727C; BG100643A; US5646148A; CA2178760A1; HU9601649D0; JP3000564B2

Abstract

(57)【要約】式（Ｉ）

Description

【発明の詳細な説明】発明の名称ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤本発明は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）によってコードされるプロテアーゼを阻害する化合物またはその医薬的に許容可能な塩に係わり、このような物質はＨＩＶ感染の予防及び治療、並びにＨＩＶ感染の結果としての後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）の治療に有益である。本発明はまた、上記化合物を含有する医薬組成物、並びに本発明の化合物及び他の薬剤をＡＩＤＳ及びＨＩＶウイルス感染の治療に用いる方法にも係わる。発明の背景ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）と呼称されるレトロウイルスは、進行性免疫系破壊（後天性免疫不全症候群；ＡＩＤＳ）並びに中枢及び末梢神経系の変性を含めた複合疾患の病因物質である。このウイルスは以前は、ＬＡＶ、ＨＴＬＶ− IIIまたはＡＲＶとして知られていた。レトロウイルス複製の通常の一特徴に、ウイルスによってコードされるプロテアーゼが前駆体ポリタンパク質に大幅な翻訳後プロセッシングを施し、それによってウイルスの構成（ａｓｓｅｍｂｌｙ）及び機能に必要な成熟ウイルスタンパク質が生じることが有る。上記プロセッシングを阻止することによって、通常は感染性であるウイルスの発生が防止される。例えば、Ｎ．Ｅ．Ｋｏｈｌ等，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８５，ｐ．４６８６，１９８８は、ＨＩＶによってコードされるプロテアーゼを遺伝学的に不活性化すると未熟な非感染性ウイルス粒子が発生することを証明した。このような結果は、ＨＩＶプロテアーゼの阻害がＡＩＤＳを治療し、またＨＩＶ感染を予防または治療する有効な一方法であることを示している。ＨＩＶのヌクレオチド配列は、１個の読み取り枠内にｐｏｌ遺伝子が存在することを示している（Ｌ．Ｒａｔｎｅｒ等，Ｎａｔｕｒｅ３１３，ｐ．２７７，１９８５）。アミノ酸配列の相同性から、ｐｏｌ配列が逆転写酵素、エンドヌクレアーゼ及びＨＩＶプロテアーゼをコードすることが証明されている（Ｈ．Ｔｏｈ等，ＥＭＢＯＪ．４，ｐ．１２６７，１９８５；Ｍ．Ｄ．Ｐｏｗｅｒ等，Ｓｃｉｅｎｃｅ２３１，ｐ．１５６７，１９８６；Ｌ．Ｈ．Ｐｅａｒｌ等，Ｎａｔｕｒｅ３２９，ｐ．３５１，１９８７）。本発明者は、本発明の化合物がＨＩＶプロテアーゼの阻害剤であることを実証する。発明の概要本明細書中に規定したとおりの式Ｉの化合物は、化合物としても、医薬的に許容可能な塩としても、また医薬組成物成分としても、他の抗ウイルス薬、免疫調節因子、抗生物質またはワクチンと組み合わせて、または組み合わせずにＨＩＶプロテアーゼの阻害、ＨＩＶ感染の予防、ＨＩＶ感染の治療、及びＡＩＤＳの治療に有用である。ＡＩＤＳを治療する方法、ＨＩＶ感染を予防する方法、及びＨＩＶ感染を治療する方法も開示する。本明細書中に現われ得る幾つかの略号は次のとおりである。略号保護基ＢＯｃ（Ｂｏｃ）：ｔ−ブチルオキシカルボニルＣＢＺ（Ｃｂｚ）：ベンジルオキシカルボニル（カルボベンゾキシ）ＴＢＳ（ＴＢＤＭＳ）：ｔ−ブチルジメチルシリル活性化基ＨＢＴ（ＨＯＢＴまたはＨＯＢｔ）：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物カップリング試薬ＢＯＰ試薬：ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートＢＯＰ−Ｃｌ：ビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィン酸塩化物ＥＤＣ：１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩その他（ＢＯＣ）₂Ｏ（ＢＯＣ₂Ｏ）：二炭酸ジ−ｔ−ブチルｎ−Ｂｕ₄Ｎ⁺Ｆ^-：フッ化テトラブチルアンモニウムｎＢｕＬｉ（ｎ−Ｂｕｌｉ）：ｎ−ブチルリチウムＤＭＦ：ジメチルホルムアミドＥｔ₃Ｎ：トリエチルアミンＥｔＯＡｃ：酢酸エチルＴＦＡ：トリフルオロ酢酸ＤＭＡＰ：ジメチルアミノピリジンＤＭＥ：ジメトキシエタンＬＤＡ：リチウムジイソプロピルアミドＴＨＦ：テトラヒドロフラン発明の詳細な説明及び好ましい具体例本発明は、式Ｉの化合物、式Ｉの化合物同士の組み合わせ、または式Ｉの化合物の医薬的に許容可能な塩に係わり、かつＨＩＶプロテアーゼの阻害、ＨＩＶ感染の予防または治療、及びＨＩＶ感染の結果としての後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）の治療に係わる。式Ｉの化合物は次のように規定される。即ち、式Ｉ〔式中は安定な８〜１０員二環複素環であり、そのいずれの環も飽和または不飽和であり得、この複素環は炭素原子と、Ｎ、Ｓ及びＯの中から選択された１〜３個のヘテロ原子とから成り、かつ置換されていないか、またはＯＨ、ハロ、Ｃ_1〜4アルキル、オキソで置換されており、ただしその際はでない〕を有する化合物またはその医薬的に許容可能な塩である。本発明の一具体例に、が安定な８〜１０員二環複素環であり、そのいずれの環も飽和または不飽和であり得、この複素環は炭素原子と、Ｎ及びＯの中から選択された２個のヘテロ原子とから成り、前記ヘテロ原子は別々の環に存在する式Ｉの化合物またはその医薬的に許容可能な塩が有る。第二の具体例は、がに限定され、その際ＸはＯまたはＳである式Ｉの化合物またはその医薬的に許容可能な塩である。第三の具体例は、がに限定される式Ｉの化合物またはその医薬的に許容可能な塩である。本発明の更に別の具体例に、Ｎ−（２（Ｒ）−ヒドロキシ−１（Ｓ）−インダニル）−２（Ｒ）−フェニルメチル−４（Ｓ）−ヒドロキシ−５−（１−（４− （３−フロ［２，３−ｂ］ピリジルメチル）−２（Ｓ）−Ｎ′-（ｔ−ブチルカルボキサミド）−ピペラジニル））ペンタンアミドである化合物Ａまたはその医薬的に許容可能な塩が有る。本発明の化合物はキラル中心を有し、ラセミ化合物、ラセミ混合物、及び個々のジアステレオマーまたは鏡像異性体として生成し、その際いずれの異性体形態も本発明に包含される。ラセミ混合物は５０：５０その他の比率の立体異性体混合物を含む。たは式Ｉ中に２個以上存在する場合、その定義は個々に独立であるものとする。また、置換基及び／または可変部の組み合わせは安定な化合物をもたらすもののみが許容され得る。本明細書中で特に断らずに用いた“アルキル”という語は、特定数の炭素原子を有する分枝鎖状と直鎖状との両方の飽和脂肪族炭化水素基を包含するものとする（Ｍｅはメチル、Ｅｔはエチル、Ｐｒはプロピル、Ｂｕはブチル）。本明細書中に用いた“ハロ”という語はフッ素、塩素、臭素及びヨウ素を意味する。（水もしくは油に溶解または分散可能な生成物の形態の）式Ｉの化合物の医薬的に許容可能な塩には、例えば無機または有機の酸または塩基から形成される通常の無毒塩または第四アンモニウム塩が含まれる。上記酸付加塩の例には、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、二塩酸塩、二リン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グルタミン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３− フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩及びウンデカン酸塩が含まれる。塩基性塩には、アンモニウム塩、ナトリウム塩及びカリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウム塩及びマグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミンなどの有機塩基との塩、及びアルギニン、リシン等のアミノ酸との塩などが含まれる。塩基性窒素保有基を、塩化、臭化及びヨウ化メチル、エチル、プロピル及びブチルなどの低級アルキルハロゲン化物；硫酸ジメチル、ジエチル、ジブチル及びジアミル等の硫酸ジアルキル；塩化、臭化及びヨウ化デシル、ラウリル、ミリスチル及びステアリルなどの長鎖ハロゲン化物；臭化ベンジル及びフェネチルなどのアラルキルハロゲン化物その他のような物質で四級化することも可能である。医薬的に許容可能な塩には硫酸塩エタノレート（ｅｔｈａｎｏｌａｔｅ）及び硫酸塩なども有る。本発明の新規な化合物の製造図式Ｉ及びIIを次に示す。これらの図式の特定化合物への適用を、実施例において特定的に説明する。本発明の化合物の製造に用いるアミド結合形成は典型的には、ジシクロヘキシルカルボジイミドや１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドなどの試薬を用いるカルボジイミド法によって行なう。アミドまたはペプチド結合を形成する他の方法に、酸塩化物、アジド、混合無水物または活性エステルを経る合成経路が非限定的に含まれる。典型的には溶液相アミド結合形成を行なうが、従来のメリフィールド法による固相合成を替わりに行なってもよい。１種以上の保護基の添加及び除去も通常の操作である。基礎的な合成技術についての関連情報はヨーロッパ特許（ＥＰＯ）第０３３７７１４号及び同第０５４１１６８号にも開示されている。式Ｉの化合物を製造する一方法を製造図式Ｉに示す。ジヒドロ−５（Ｓ）−（ｔ−ブチルジメチルシリルオキシメチル）−３（２Ｈ）−フラノン（図式Ｉ中の化合物１）は市販のジヒドロ−５（Ｓ）−（ヒドロキシメチル）−２（３Ｈ）− フラノンから、当業者に公知の標準的方法で製造する。化合物１をアルキル化して化合物２とした後、ラクトン２の保護基をＨＦ水溶液で除去して化合物３を得る。３のアルコール基を、トリエチルアミン、ジエチルイソプロピルアミンまたは２，６−ルチジンなどの立体障害アミン塩基の存在下に、スルホニルクロリドまたは（好ましくは）トリフルオロメタンスルホン酸無水物などのスルホン酸無水物で処理することによって、メシレート（ｍｅｓｙｌａｔｅ）、トシレート（ｔｏｓｙｌａｔｅ）またはトリフレート（ｔｒｉｆｌａｔｅ）などの離脱基に変換することにより活性化して、化合物４などの化合物を得る。化合物４の離脱基をＤＭＦやキシレンといった溶媒中で４− （１，１−ジメチルエトキシカルボニルアミノ）−ピペラジン−２（Ｓ）−カルボキサミドなどのアミン５によって置換して、６などの化合物を生成させる。トリフルオロメタンスルホニルオキシ基は、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンでの処理によりイソプロパノールまたは塩化メチレンなどの溶媒中で室温でアミンによって置換し得る。化合物６を水酸化リチウムまたはナトリウム水溶液で加水分解し、得られたヒドロキシ酸７を保護されたヒドロキシ酸８に変換する。ヒドロキシル基を、ｔ− ブチルジメチルシリルやｔ−ブチルジフェニルシリルといった標準的なシリル保護基で好ましく保護する。次に、保護したヒドロキシ酸８を所望のＲ¹²アミンに結合させて化合物９とし、シリル保護基をフッ化物イオンで除去して化合物１０に到達する。好ましい一方法では、１１を強塩基の存在下に反応させることによってエポキシド１２を合成する。強塩基は、例えばヘキサン、ペンタン、シクロヘキサン等を含めた環式または非環式炭化水素などの不活性無水有機溶媒中で金属を保有する塩基でなければならない。適当な強塩基には、ＬｉＮ［（ＣＨ₃）₃Ｓｉ］₂、ＫＮ［（ＣＨ₃）₃Ｓｉ］₂、ＮａＮ［（ＣＨ₃）₃Ｓｉ］₂、ｎ−ブチルリチウム（ｎ−ＢｕＬｉ）、ｓ−ＢｕＬｉ、ｔ−ＢｕＬｉ、カリウムｔ− ブトキシド、リチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）、リチウムイソプロピルシクロヘキシルアミド、リチウムピロリジド、リチウムテトラメチルピペリジド、フェニルリチウム、イソプロピルマグネシウム塩化物、イソブチルマグネシウム塩化物、及び当業者に公知である他の類似の強塩基が含まれる。好ましい強塩基はｎ−ＢｕＬｉ、ｓ−ＢｕＬｉ、ＬｉＮ［（ＣＨ₃）₃Ｓｉ］₂及びＬＤＡであり、ｎ−ＢｕＬｉ及びＬｉＮ［（ＣＨ₃）₃Ｓｉ］₂が最も好ましい。好ましくは、１モル当量の１１に対して約１〜２モル当量の強塩基を用いる。化合物１２をＮ−ｔ−ブチル−４−（１，１−ジメチルエトキシカルボニルアミノ）ピペラジン−２（Ｓ）−カルボキサミド（５）と反応させることによって化合物１３を製造する。好ましくは、エポキシド１２１モル当量当たり約１〜３モル当量のアミン５を用い、その際Ｖ：IVのモル当量比を約１．０５：１とすることが好ましい。上記反応は、例えばトルエンなどの炭化水素、ジエチルエーテルなどのエーテル、メタノール、エタノールもしくはイソプロパノールといったアルコール、アセトニトリルなどのニトリル、及び酢酸エチルなどのエステル、またはこれらの組み合わせなど、任意の適当溶媒中で生起させ得、その際好ましいのはアルコールで、イソプロパノールが最も好ましい。反応の温度は周囲温度から、用いる溶媒の還流温度までの範囲に維持し得るが、好ましくは例えば８０〜９０ ℃の昇温下、最も好ましくは約８３〜８５℃の温度で反応を生起させる。活性グリシドールは、例えばＪ．Ｋｌｕｎｄｅｒ等，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５４，ｐｐ．１２９５−１３０４，１９８９及びそこに引用された参考文献に記載されているような、当業者に公知の方法で製造し得る。１１のようなアミド化合物は適当な出発物質を用いれば、例えば実施例１０に述べる操作など、当業者に公知の標準的操作に従って製造することができる。本発明の実施において適当である場合、窒素保護基などの保護基を用い得る。例えば、２−ｔ−ブチルカルボキサミドピペラジンの４位の窒素を、ＢＯＣ、ＣＢＺ、ベンジル、４−メトキシベンジル、２，４−ジメトキシベンジル、トリフルオロアセトアミド、トリアルキルシリル、または当業者に公知の他の基などの基で保護し得る。式１５〔式中Ｐは−ＢＯＣや−ＣＢＺといった窒素保護基である〕の化合物も製造図式Ｉに示した方法に従い、好ましくは図式Ｉ中のラクトン４の５−トリフルオロメタンスルホニルオキシメチル類似体を用いて製造できる。式１６の化合物は、１５中の窒素保護基を当業者に良く知られた方法で、例えばＣＢＺ基であれば接触水素化を用い、ＢＯＣ基であればＣＨ₂Ｃｌ₂などの溶媒中での約０℃におけるトリメチルシリルトリフレート及び２，６−ルチジンでの処理か、またはイソプロパノール中での６ＮＨＣｌでの処理を用いて除去した後に得られる化合物１４から様々な経路を経て取得し得る。化合物１４の４位のピペラジニル窒素は室温においてＥｔ₃Ｎの存在下にＤＭＦなどの溶媒中で、式Ｒ¹−Ｘ〔式中ＸはＣｌ、ＢまたはＩ〕の化合物でアルキル化し得る。この操作のための技術は当業者に良く知られている。本発明の化合物は、後出の実施例３の表にも示してある。本発明の化合物は、抗ウイルス性化合物の製造、及び該化合物に関するスクリーニングアッセイの実施に有用である。例えば、本発明の化合物は、より強力な抗ウイルス性化合物のための優れたスクリーニング手段である酵素突然変異体の単離に有用である。そのうえ、本発明の化合物は、他の抗ウイルス薬のＨＩＶプロテアーゼへの結合部位を例えば拮抗阻害によって確認または決定するのにも有用である。即ち、本発明の化合物はこれらの用途のために販売されるべき商品である。本発明の化合物は、ＨＩＶプロテアーゼの阻害、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染の予防や治療、及び前記感染の結果としてのＡＩＤＳなどの病態の治療に有用である。ＡＩＤＳの治療またはＨＩＶ感染の予防もしくは治療は、ＨＩＶ感染の様々な状態、即ち症候性と無症候性との両方のＡＩＤＳ及びＡＲＣ（ＡＩＤＳ関連複合症）、並びにＨＩＶに対する実際の、または潜在的な暴露の治療を非限定的に含むと定義される。例えば、本発明の化合物は、輸血、臓器移植、体液の交換、咬創、針が刺さる事故、または手術中の患者血液への暴露などにより過去にＨＩＶに暴露されたかもしれない時のＨＩＶ感染治療に有用である。上記のような用途のために、本発明の化合物は通常の無毒でかつ医薬的に許容可能なキャリヤ、アジュバント及び賦形剤を含有する投与単位製剤の形態で経口的に、（皮下注射、静脈内、筋肉内、胸骨内注射または注入技術を含め）非経口的に、吸入噴霧（ｉｎｈａｌａｔｉｏｎｓｐｒａｙ）によって、または直腸から投与し得る。即ち本発明は、ＨＩＶ感染及びＡＩＤＳを治療する方法、並びにＨＩＶ感染及びＡＩＤＳの治療用の医薬組成物も提供する。本発明による治療方法は、上記のような治療を必要とする患者に医薬用キャリヤと治療有効量の本発明の化合物またはその医薬的に許容可能な塩とを含有する医薬組成物を投与することを含む。上記医薬組成物は、経口投与可能な懸濁液剤もしくは錠剤；鼻内噴霧剤；例えば滅菌注射用水性もしくは油性懸濁液剤として用いる滅菌注射用製剤；または坐剤の形態とし得る。懸濁液剤として経口投与する場合は上記組成物を、製剤の分野で良く知られた技術に従って調製し、その際組成物には増量のための微晶質セルロースと、懸濁化剤としてのアルギン酸またはアルギン酸ナトリウムと、増粘剤としてのメチルセルロースと、当業者に公知の甘味料／着香料とを含有させ得る。速放出性錠剤としての上記組成物には微晶質セルロース、リン酸二カルシウム、澱粉、ステアリン酸マグネシウム及びラクトース、並びに／または当業者に公知の他の賦形剤、結合剤、増量剤、崩壊剤、稀釈剤及び滑沢剤を含有させ得る。鼻内噴霧もしくは吸入によって投与する場合の上記組成物は製剤の分野で良く知られた技術に従って調製し、この場合の組成物は、ベンジルアルコールまたは他の適当な防腐剤、生物利用性を高める吸収促進剤、フッ化炭素及び／または当業者に公知の他の可溶化剤もしくは分散剤を用いて食塩液溶液として調製し得る。注射用溶液剤または懸濁液剤は、マンニトール、１，３−ブタンジオール、水、リンゲル液または等張塩化ナトリウム溶液などの、無毒でかつ非経口的に許容可能である適当な稀釈剤もしくは溶媒か、または合成モノもしくはジグリセリド及びオレイン酸などの脂肪酸を含めた滅菌無刺激性不揮発油などの適当な分散もしくは湿潤及び懸濁化剤を用いて公知技術に従い調製し得る。坐剤の形態で直腸内投与する場合の上記組成物は、薬物をココアバター、合成グリセリドエステルまたはポリエチレングリコールといった、常温で固体であるが直腸窩内では液化及び／または溶解して薬物を放出する適当な非刺激性賦形剤と混合することにより調製し得る。先に挙げた状態の治療または予防に有用である投与レベルは１日当たり約０．０２ｇから５．０または１０．０ｇであり、経口投与の場合はその２〜５倍である。例えば、本発明の化合物を１日に１〜４回、体重１ｋｇ当たり１．０〜５０ｍｇの量で投与すればＨＩＶ感染を有効に治療できる。好ましい一処方では、各患者に６時間毎に１００〜４００ｍｇの量を経口投与する。しかし、任意の特定患者のための特定の投与レベル及び投与頻度は様々であり得、用いる特定化合物の活性、該化合物の代謝安定性及び作用の持続性、年齢、体重、全身の健康状態、性別、食餌、投与の方式及び時期、排泄速度、薬物配合、特定状態の重篤度、並びに被投与者（ｈｏｓｔ）が受けている治療を含めた様々な要因に左右されると理解される。本発明は、ＨＩＶプロテアーゼ阻害性化合物と、ＡＩＤＳの治療に有用である１種以上の薬剤との組み合わせも提供する。例えば、本発明の化合物は有効量の、当業者に公知のＡＩＤＳ抗ウイルス薬、免疫調節因子、抗感染薬またはワクチンと組み合わせて暴露前及び／または暴露後の時期に有効に投与し得る。本発明の化合物とＡＩＤＳ抗ウイルス薬、免疫調節因子、抗感染薬またはワクチンとの組み合わせの範囲は上記表に列挙した薬剤に限定されず、原則としてＡＩＤＳの治療に有用ないかなる医薬組成物との組み合わせも包含すると理解されよう。表Ｃの幾つかの化合物は次のとおりである。化合物Ｂは６−クロロ−４−（Ｓ）−シクロプロピル−３，４−ジヒドロ−４−（（２−ピリジル）エチニル）キナゾリン−２（１Ｈ）−オンである。化合物Ｃは（−）６−クロロ−４−（Ｓ） −トリフルオロメチル−１，２−ジヒドロ−４（Ｈ）−３，１−ベンズオキサジン−２−オンである。ネビラピンは１１−シクロプロピル−５，１１−ジヒドロ −４−メチル−６Ｈ−ジピリド［３，２−ｂ：２′，３′−ｅ］［１，４］ジアゼピン−６−オンである。化合物Ｂ及びＣの合成は、そのために本明細書に参考として含めるヨーロッパ特許第０，５６９，０８３号の方法によって行なう。ネビラピンは、いずれも本明細書に参考として含めるＪ．Ｍ．Ｋｌｕｎｄｅｒ等，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３５，ｐ．１８８７，１９９２；Ｋ．Ｄ．Ｈａｒｇｒａｖｅ等，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３４，ｐ．２２３１，１９９１；Ｋ．Ａ．Ｃｏｈｅｎ等，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６６，ｐ．１４６７０，１９９１によって合成する。好ましい組み合わせでは、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤と非ヌクレオシド系ＨＩＶ逆転写酵素阻害剤とを同時にかまたは交互に治療に用いる。任意に用いられる組み合わせの第三の構成要素に、ＡＺＴ、ｄｄＣまたはｄｄＩといったヌクレオシド系のＨＩＶ逆転写酵素阻害剤が有る。好ましいＨＩＶプロテアーゼ阻害剤は化合物Ａである。非ヌクレオシド系ＨＩＶ逆転写酵素阻害剤のうちで好ましいものには、化合物Ｂ、化合物Ｃまたはｎｅｖｉｒａｐｉｎｅが含まれる。このような組み合わせは、ＨＩＶ伝播を抑えるよう相乗的に作用し得る。好ましい組み合わせには、（１）化合物Ａと、非ヌクレオシド系ＨＩＶ逆転写酵素阻害剤のうちで好ましいもの、及び場合によってはＡＺＴまたはｄｄＩまたはｄｄＣとの組み合わせ、並びに（２）化合物Ａと、ＡＺＴ、ｄｄＩ及びｄｄＣのうちのいずれかとの組み合わせが含まれる。微生物が発現したＨＩＶプロテアーゼの阻害に関するアッセイ大腸菌において発現されたＨＩＶプロテアーゼのペプチド基質［Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−（β−ナフチル）Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ−Ｖａｌ；反応開始時点で０．５ｍｇ／ｍｌ］に対する反応の阻害試験をｐＨ５．５の５０ｍＭ酢酸ナトリウム中で３０℃で１時間行なった。１．０μｌのＤＭＳＯ中に様々な濃度で存在させた阻害剤を２５μｌのペプチド水溶液に添加した。ｐＨ５．５の０．１３３Ｍ酢酸ナトリウム及び０．１％ウシ血清アルブミンの溶液中に０．３３ｎＭのプロテアーゼ（０．１１ｎｇ）を加えたものを１５μｌ添加することによって反応を開始させた。１６０μｌの５％リン酸で反応を停止させた。反応生成物をＨＰＬＣ（ＶＹＤＡＣ高空隙５ｃｍ長Ｃ₁₈逆相カラム；アセトニトリル勾配；０．１％リン酸）によって分離した。生成物のピーク高さから反応の阻害の程度を確認した。互いに独立に合成された複数の生成物のＨＰＬＣによって定量基準が判明し、生成物組成が確認された。化合物Ａは約０．２７ｎＭのＩＣ₅₀値を示した。細胞拡散アッセイ細胞培養物中でのＨＩＶ拡散の阻害を、Ｊ．Ｈ．Ｎｕｎｂｅｒｇ等，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．６５，ｐ．４８８７，１９９１に従って測定した。このアッセイでは、ＭＴ−４Ｔリンパ球様細胞をＨＩＶ−１（特に断わらないかぎり野生型）に、所定の接種材料を用いて感染させ、培養物を２４時間インキュベートした。この時点では、間接免疫蛍光法によれば１％以下の細胞しか陽性でなかった。次に、細胞を十分に洗浄し、９６ウェル培養皿内に分配した。阻害剤の段階的２倍稀釈物をウェルに添加して更に３日間培養を継続した。感染後４日目、対照培養物中の細胞は１００％感染した。ＨＩＶ−１ｐ２４集積はウイルス拡散と直接相関した。細胞培養物における阻害濃度を単位ｎｍｏｌ／ｌの、感染の伝播を少なくとも９５％低減する阻害剤濃度即ちＣＩＣ₉₅として定義した。化合物ＡのＣＩＣ₉₅は２５ｎＭである。ウイルス伝播の抑制Ａ．ＨＩＶ感染ＭＴ−４細胞懸濁液の製造第０日に、濃度２５０，０００個／ｍｌのＭＴ細胞をＨＩＶ−１保存株IIIｂの１：１，０００稀釈物（最終ｐ２４濃度１２５ｐｇ／ｍｌ；第１日に１％以下、第４日に２５〜１００％の感染細胞を得るのに十分な濃度）に感染させた。細胞の感染及び増殖は、ＲＰＭＩ１６４０（ＷｈｉｔｔａｋｅｒＢｉｏＰｒｏｄｕｃｔｓ）、１０％不活化ウシ胎児血清、４ｍＭグルタミン（ＧｉｂｃｏＬａｂｓ）及び１：１００ペニシリン−ストレプトマイシン（ＧｉｂｃｏＬａｂｓ）から成る培地中で実現させた。混合物を５％ＣＯ₂雰囲気下に３７℃で一晩インキュベートした。Ｂ．阻害剤での処理対の組み合わせ（ｐａｉｒｗｉｓｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ）のナノモル範囲の濃度のマトリックスを製造した。第１日に、阻害剤の１２５μｌアリコートを９６ウェルマイクロタイター細胞培養プレート内の等量のＨＩＶ感染ＭＴ− ４細胞（５０，０００個／ウェル）に添加した。５％ＣＯ₂雰囲気下に３７℃でのインキュベーションを３日間継続した。Ｃ．ウイルス伝播の測定マルチチャンネルピペッターを用いて沈降細胞を再懸濁させ、１２５μｌを収穫して別のマイクロタイタープレート内に移した。上清をＨＩＶｐ２４抗原に関してアッセイした。ＨＩＶｐ２４抗原の濃度を、次に説明するエンザイムイムノアッセイによって測定した。測定するべきｐ２４抗原のアリコートを、ＨＩＶ核抗原に特異的なモノクローナル抗体で被覆したマイクロウエルに添加した。この時点で、及び後続する他の適当ステップにおいてマイクロウェルを洗浄した。次に、ビオチニル化したＨＩＶ特異的抗体を添加し、続いて複合ストレプトアビジン−セイヨウワサビペルオキシダーゼを添加した。添加した過酸化水素とテトラメチルベンジジン基質とから発色反応が生起する。色の強さはＨＩＶｐ２４抗原の濃度に比例する。相乗性もしくは向上した阻害性の計算相乗性が存在すれば、阻害剤の対の組み合わせは個々の阻害剤単独の阻害に比較して、または個々の阻害剤の阻害を単に総合したものに比較して著しく向上したウイルス伝播阻害を示すはずである。データは次のように処理した。Ｅｌｉｏｎ等，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２０８，ｐ．４７７，１９５４に従って小数阻害濃度比（ＦＩＣ）を計算した。最大の相乗作用に対応するＦＩＣの最小和を様々な対の組み合わせに関して決定した。数値が小さいほど相乗作用は大きい。実施例１Ｎ−（２（Ｒ）−ヒドロキシ−１（Ｓ）−インダニル）−２（Ｒ）−フェニルメチル−４（Ｓ）−（ヒドロキシ）−５−（１−（２（Ｓ）−Ｎ−（ｔ−ブチル− カルボキサミド）−ピペラジニル））−ペンタンアミド即ち化合物１４の製造ステップ１：ジヒドロ−５（Ｓ）−（（ｔ−ブチルジフェニルシリル）−オキシメチル）−３（Ｒ）−フェニルメチル−３（２Ｈ）−フラノンの製造 −７８℃において、１０ｍｌのＴＨＦ中の０．５５ｍｌ（３．９ｍｍｏｌ）のジイソプロピルアミンに１．５５ｍｌのｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中に２．５Ｍ）を添加することによって、リチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）の溶液を製造した。３０分後、ジヒドロ−５−（Ｓ）−（（ｔ−ブチルジフェニルシリル） −オキシメチル）−３（２Ｈ）−フラノン（１．３８ｇ；３．８９ｍｍｏｌ）を５ｍｌのＴＨＦに溶解させた溶液を添加した。更に３０分間攪拌後、臭化ベンジル（０．６８ｇ；３．９ｍｍｏｌ）を添加し、攪拌を３時間継続し、その後１０％クエン酸水溶液の添加によって反応を停止させた。溶液を酢酸エチル（２×５０ｍｌ）で抽出し、これをブラインで逆洗し、脱水し、濾過し、かつ濃縮して油を得た。生成物をクロマトグラフィー（ＳｉＯ₂；２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製して標記化合物を得た。ステップ２：ジヒドロ−５（Ｓ）−（ヒドロキシメチル）−３（Ｒ）−フェニルメチル−３（２Ｈ）−フラノンの製造４０ｍｌのアセトニトリル中の５．２６ｇのジヒドロ−５（Ｓ）−（（ｔ−ブチルジフェニルシリル）オキシメチル）−３（Ｒ）−フェニルメチル−３（２Ｈ）−フラノンに１．３４ｍｌの４９％ＨＦ水溶液を添加した。室温で１８時間経過後、反応混合物を濃縮乾固し、残留物を水（５０ｍｌ）と酢酸エチル（５０ｍｌ）とに分配した。有機層をブラインで洗浄し、脱水し、濾過し、かつ濃縮して生成物を黄褐色の固体（ｍｐ６９〜７２℃）として得た。ステップ３：ジヒドロ−５（Ｓ）−（（トリフルオロメタンスルホニル）−オキシメチル）−３（Ｒ）−フェニルメチル−３（２Ｈ）−フラノンの製造１８．４ｇ（８９．２ｍｍｏｌ）のジヒドロ−５（Ｓ）−（ヒドロキシメチル）−３（Ｒ）−フェニルメチル−３（２Ｈ）−フラノンを３５０ｍｌの塩化メチレンに溶解させた溶液を０℃に冷却し、これに１３．５１ｍｌ（１１５．９８ｍｍｏｌ）の２，６−ルチジンを添加し、次いで１６．５１ｍｌ（９８．１ｍｍｏｌ）のトリフルオロメタンスルホン酸無水物を滴下し加えた。０℃で１．５時間経過後、反応混合物を３００ｍｌの氷−ブライン混合物中へ注ぎ、０．５時間撹拌した。次に、水性層を塩化メチレン（３×１５０ｍｌ）で抽出し、有機層を１０％ＨＣｌ（２×７５ｍｌ）、飽和ＮａＨＣＯ₃（１００ｍｌ）、水（１００ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水し、濾過し、かつ濃縮して固体残留物を得た。フラッシュカラムクロマトグラフィー（１２０×１５０ｍｍカラム；ヘキサン：ＥｔＯＡｃの溶離勾配４：１から３：１）により精製して標記化合物を得た（ｍｐ５３〜５４℃）。ステップ４：４−（１，１−ジメチルエトキシカルボニルアミノ）−１−（フェニルメチルカルボニルアミノ）−ピペラジン−２Ｓ−カルボン酸の製造２（Ｓ）−ピペラジン−カルボン酸を出発物質として用い、Ｃ．Ｆ．Ｂｉｇｇｅ，Ｓ．Ｊ．Ｈａｙｓ，Ｐ．Ｍ．Ｎｏｖａｋ，Ｊ．Ｔ．Ｄｒｕｍｍｏｎｄ，Ｇ．Ｊｏｈｎｓｏｎ及びＴ．Ｐ．Ｂｏｂｏｖｓｋｉ，ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．３０，ｐ．５１９３，１９８９の操作に従って標記化合物を製造した。（Ｅ．Ｆｅｌｄｅｒ，Ｓ．Ｍａｆｆｅｉ，Ｓ．Ｐｉｅｔｒａ及びＤ．Ｐｉｔｒｅ，Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ１１７，ｐ．８８８，１９６０参照）。ステップ５：Ｎ−ｔ−ブチル−４−（１，１−ジメチルエトキシカルボニルアミノ）−１−（フェニルメチルカルボニルアミノ）ピペラジン− ２（Ｓ）−カルボキサミドの製造９．９０ｇ（２７．１６ｍｍｏｌ）のステップ４の生成物を７５ｍｌのＤＭＦに溶解させた溶液を０℃に冷却し、これに５．７３ｇ（２９．８８ｍｍｏｌ）のＥＤＣ、４．０３ｇ（２９．８８ｍｍｏｌ）のＨＯＢｔ、３．１４ｍｌ（２９．８８ｍｍｏｌ）のｔ−ブチルアミン、及び最後に４．１６ｍｌ（２９．８８ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを添加した。反応混合物を１８時間攪拌し、その体積を濃縮によって半分にした。次に、混合物を６００ｍｌのＥｔＯＡｃで稀釈し、１０％ＨＣｌ（２×７５ｍｌ）、飽和ＮａＨＣＯ₃（１×７５ｍｌ）、水（３×７５ｍｌ）及びブライン（１×５０ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水し、かつ濃縮して固体を得た。この固体をＥｔＯＡｃ：ヘキサン（１：２）で粉砕し、かつ濾過して標記化合物を白色の固体（ｍｐ１３４〜１３５℃）として得た。ステップ６：Ｎ−ｔ−ブチル−４−（１，１−ジメチルエトキシカルボニルアミノ）ピペラジン−２（Ｓ）−カルボキサミドの製造１．２０ｇ（２．８６ｍｍｏｌ）のＮ−ｔ−ブチル−４−（１，１−ジメチルエトキシカルボニルアミノ）−１−（フェニルメチルカルボニルアミノ）ピペラジン−２（Ｓ）−カルボキサミド及び１．１ｇ（０．０８６ｍｍｏｌ）の１０％Ｐｄ／Ｃに１５ｍｌのメタノールを添加した。容器に水素を充填し、反応混合物を２時間攪拌し、セライトで濾過し、エタノールで洗浄した。溶媒を真空下に除去して標記化合物を泡として得た。¹ ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ₃）δ：６．６５（ｂｒ，１Ｈ）、４．１０（ｍ，１Ｈ）、３．８１（ｂｒ，１Ｈ）、３．２１（ｄｄ，Ｊ＝１８及び７Ｈｚ，１Ｈ）、３．０２〜２．７０（ｍ，４Ｈ）、２．１０〜２．０（ｂｒ，１Ｈ）、１．５０（ｓ，９Ｈ）、１．４１（ｓ，９Ｈ）。ステップ７：ジヒドロ−５（Ｓ）−（４−（１，１−ジメチルエトキシカルボニルアミノ））−２（Ｓ）−Ｎ−（ｔ−ブチルカルボキサミド） −ピペラジニル）メチル）−３（Ｒ）−フェニルメチル−３（２Ｈ）−フラノンの製造２２．４０ｇ（０．０６６２ｍｏｌ）のジヒドロ−５（Ｓ）−（（トリフルオロメタンスルホニル）オキシメチル）−３（Ｒ）−フェニルメチル−３（２Ｈ） −フラノン（ステップ３で製造）及び１８．０ｇ（０．０６３ｍｏｌ）のＮ−ｔ −ブチル−４−（１，１−ジメチルエトキシカルボニルアミノ）ピペラジン−２（Ｓ）−カルボキサミドを１８０ｍｌのイソプロパノールに溶解させた溶液に１１．５３ｍｌ（０．０６６２ｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを添加した。２．５時間後、更に１．２ｇのジヒドロ−５（Ｓ）−（（トリフルオロメタンスルホニル）オキシメチル）−３（Ｒ）−フェニルメチル−３（２Ｈ） −フラノンを添加した。３．５時間後に薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）によって反応完結を認め、濃縮して粘稠な油を得た。ＥｔＯＡｃ：ヘキサン（１：２；２００ｍｌ）で粉砕すると白色の固体が生じ、これを濾過して捨てた。油をフラッシュカラムクロマトグラフィー（１２０×１５０ｍｍカラム；ＥｔＯＡｃ：ヘキサンの溶離勾配は１：１、２：１、３：１から全量ＥｔＯＡｃまで）により精製して標記化合物を得た。¹ ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ₃）δ：７．３４〜７．１７（ｍ，５Ｈ）、６．３１（ｂｒｓ，１Ｈ）、４．３８（ｂｒｍ，１Ｈ）、３．９６〜３．９２（ｍ，１Ｈ）、３．７９（ｂｒｍ，１Ｈ）、３．１６（ｄｄ，Ｊ＝１３．６及び４．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．０８〜２．９９（ｍ，３Ｈ）、２．９０〜２．８２（ｍ，１Ｈ）、２．８０（ｄｄ，Ｊ＝１３．５及び８．９Ｈｚ，１Ｈ）、２．７８（ｍ，１Ｈ）、２．６７〜２．６１（ｍ，１Ｈ）、２．５８〜２．４９（ｍ，１Ｈ）、２．３８〜２．３２（ｍ，１Ｈ）、２．３２〜２．０４（ｍ，１Ｈ）、１．９９〜１．９２（ｍ，１Ｈ）、１．４５（ｓ，９Ｈ）、１．２９（ｓ，９Ｈ）。ステップ８：２（Ｒ）−フェニルメチル−４（Ｓ）−（ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−（１−（４−（１，１−ジメチルエトキシカルボニルアミノ）））−２（Ｓ）−Ｎ−（ｔ−ブチルカルボキサミド）−ピペラジニル））−ペンタンアミドの製造２５．５０ｇ（５２．５０ｍｍｏｌ）のジヒドロ−５（Ｓ）−（４−（１，１ −ジメチルエトキシカルボニルアミノ））−２（Ｓ）−Ｎ−（ｔ−ブチルカルボキサミド）−ピペラジニル）メチル）−３（Ｒ）−フェニルメチル−３（２Ｈ） −フラノンを１２０ｍｌのＤＭＥに溶解させた溶液を０℃に冷却し、これに６０ｍｌの水と１．５１２ｇ（６３．０１ｍｍｏｌ）の水酸化リチウムとから成る溶液を添加した。０．５時間後、１０％ＨＣｌをｐＨ６となるまで添加して反応を停止させ、溶液を真空下に濃縮した。残留物を５０ｍｌの水に溶解させ、ＥｔＯＡｃ（４×７５ｍｌ）で抽出し、有機層を水（１×２０ｍｌ）、ブライン（１ ×２０ｍｌ）で洗浄した。水性層をＥｔＯＡｃ（２×７５ｍｌ）で逆抽出し、一つに合わせた有機層をＭｇＳＯ₄で脱水し、かつ濃縮して黄色の固体を得た。この粗生成物を１００ｍｌのＤＭＦに溶解させ、これに１７．８７ｇ（０．２６２ｍｏｌ）のイミダゾールを添加し、０℃に冷却し、その後３１．５０ｇ（０．２１ｍｏｌ）のｔ−ブチルジメチルシリル塩化物を添加した。これを０℃で１時間攪拌し、その後室温に加温した。２０時間後、１０ｍｌのメタノールを添加して反応を停止させ、濃縮によって体積を半分にした。１００ｍｌのｐＨ７緩衝水を添加し、水性層をＥｔＯＡｃ（４×１００ｍｌ）で抽出し、一つに合わせた有機層を１０％ＨＣｌ（２×５０ｍｌ）、水（３×７５ｍｌ）及びブライン（１×５０ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水し、かつ濃縮して標記化合物を得た。この物質を直接次のステップに用いた。ステップ９：Ｎ−（２（Ｒ）−ヒドロキシ−１（Ｓ）−インダニル）−２（Ｒ）−フェニルメチル−４（Ｓ）−（ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−（１−（４−（１，１−ジメチルエトキシカルボニルアミノ）））−２（Ｓ）−Ｎ−（ｔ−ブチルカルボキサミド） −ピペラジニル））−ペンタンアミドの製造ステップ６で得られた粗物質２７．０ｇ（０．０４４６ｍｏｌ）を１８０ｍｌのＤＭＦに溶解させた溶液を０℃に冷却し、これに８．９８ｇ（０．０４６８ｍｏｌ）のＥＤＣ、６．３２ｇ（０．０４６８ｍｏｌ）のＨＯＢｔ及び７．３１ｇ（０．０４９ｍｏｌ）のアミノヒドロキシインダンを添加した。トリエチルアミン（６．５２ｍｌ；０．０４６８ｍｏｌ）を添加し、反応混合物を０℃で２時間、室温で１６時間攪拌し、５００ｍｌのＥｔＯＡｃで稀釈することにより反応を停止させた。有機層を１０％ＨＣｌ（２×１００ｍｌ）、飽和ＮａＨＣＯ₃ （１×１００ｍｌ）、水（３×１５０ｍｌ）、ブライン（１×７５ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水し、かつ濃縮して標記化合物を白色の泡として得た。¹ ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ₃）δ：７．４〜７．１７（ｍ，９Ｈ）、６．５１（ｂｒｓ，１Ｈ）、５．７９（ｂｒｓ，１Ｈ）、５．２３（ｍ，１Ｈ）、４．２３（ｂｒｓ，１Ｈ）、４．０６（ｍ，１Ｈ）、３．９６〜３．８４（ｍ，２Ｈ）、３．０７〜２．７８（ｍ，８Ｈ）、３．６５（ｄｄ，Ｊ＝９．６及び４．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．５６〜２．４４（ｍ，２Ｈ）、２．２９（ｄｄ，Ｊ＝１２．０及び４．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．１７〜２．０９（ｍ，１Ｈ）、１．７９（ｂｒｓ，１Ｈ）、１．４４（ｓ，９Ｈ）、１．３５（ｓ，９Ｈ）、１．１０（ｓ，１Ｈ）、０．８４（ｓ，９Ｈ）、０．１２（ｓ，３Ｈ）、０．０８（ｓ，３Ｈ）。ステップ１０：Ｎ−（２（Ｒ）−ヒドロキシ−１（Ｓ）−インダニル）−（２Ｒ）−フェニルメチル−４（Ｓ）−（ヒドロキシ）−５−（１ −（４−（１，１−ジメチルエトキシカルボニルアミノ））） −２（Ｓ）−Ｎ−（ｔ−ブチルカルボキサミド）−ピペラジニル））−ペンタンアミドの製造３２．２０ｇ（０．０４３７ｍｏｌ）のＮ−（２（Ｒ）−ヒドロキシ−１（Ｓ）−インダニル）−２（Ｒ）−フェニルメチル−４（Ｓ）−（ｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−５−（１−（４−（１，１−ジメチルエトキシカルボニルアミノ）））−２（Ｓ）−Ｎ−（ｔ−ブチルカルボキサミド）−ピペラジニル）） −ペンタンアミドに４３７ｍｌ（０．４３７ｍｏｌ）のテトラブチルアンモニウムフッ化物（１．０ＭＴＨＦ溶液；Ａｌｄｒｉｃｈ）を添加した。反応混合物を１８時間攪拌し、その後２００ｍｌに濃縮し、かつ７００ｍｌのＥｔＯＡｃで稀釈した。これを水（２×１００ｍｌ）、ブライン（１×５０ｍｌ）で洗浄し、水性層をＥｔＯＡｃ（２×２００ｍｌ）で逆抽出した。一つに合わせた有機層をＭｇＳＯ₄で脱水し、かつ濃縮して油を得た。フラッシュカラムクロマトグラフィー［１２０×１５０ｍｍカラム；ＣＨ₂Ｃｌ₂：ＣＨＣｌ₃ （ＮＨ₃で飽和）：メタノールの溶離勾配はメタノールを１％から１．５％、２％まで増量］により精製して、標記化合物を白色の泡として得た。¹ ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ₃）δ：７．３１〜７．１１（ｍ，９Ｈ）、６．４１（ｂｒｓ，１Ｈ）、６．２３（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）、５．２５（ｄｄ，Ｊ＝８．６及び４．７Ｈｚ，１Ｈ）、４．２１（ｍ，１Ｈ）、３．８３〜３．８２（ｍ，２Ｈ）、３．７８〜３．６１（ｍ，２Ｈ）、３．２２〜３．１９（ｍ，２Ｈ）、３．０３〜２．７８（ｍ，８Ｈ）、２．６２〜２．５８（ｍ，１Ｈ）、２．４１〜２．３５（ｍ，２Ｈ）、２．０４〜２．０２（ｍ，１Ｈ）、１．５７〜１．５０（ｍ，１Ｈ）、１．４５（ｓ，９Ｈ）、１．３２（ｓ，９Ｈ）。ステップ１１：Ｎ−（２（Ｒ）−ヒドロキシ−１（Ｓ）−インダニル）−２（Ｒ）−フェニルメチル−４（Ｓ）−（ヒドロキシ）−５−（１ −（２（Ｓ）−Ｎ−（ｔ−ブチルカルボキサミド）−ピペラジニル））−ペンタンアミド即ち化合物１４の製造２１．１５ｇ（０．０３４ｍｏｌ）のＮ−（２（Ｒ）−ヒドロキシ−１（Ｓ） −インダニル）−（２Ｒ）−フェニルメチル−４（Ｓ）−（ヒドロキシ）−５− （１−（４−（１，１−ジメチルエトキシカルボニルアミノ）））−２（Ｓ）− Ｎ−（ｔ−ブチルカルボキサミド）−ピペラジニル））−ペンタンアミドを３５０ｍｌの塩化メチレンに溶解させた溶液を０℃に冷却し、これに２２．４３ｍｌ（０．２０４ｍｏｌ）の２，６−ルチジン、次いで３２．８５ｍｌ（０．１７０ｍｏｌ）のトリメチルシリルトリフレートを５分掛けて添加した。０．５時間後、１０％ＨＣｌ（８０ｍｌ）で反応を停止させ、これを０．５時間攪拌した。前記のように攪拌したものに１００ｍｌの飽和ＮａＨＣＯ₃、次いで固体ＮａＨＣＯ₃をｐＨ８となるまで添加した。次に、水性層をＥｔＯＡｃ（４×１００ｍｌ）で抽出し、一つに合わせた有機層を水（１×５０ｍｌ）、ブライン（１×７５ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水し、濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィー（１２０×１５０ｍｍカラム；ＣＨ₂Ｃｌ₂：ＣＨＣｌ₃（ＮＨ₃で飽和）：ＭｅＯＨの溶離勾配はメタノールを２％から３％、４％、５％、６％、１０％まで増量）で精製した。その結果、標記化合物を白色の泡として得た。¹ ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ₃）δ：７．５３（ｓ，１Ｈ）、７．２９〜７．０９（ｍ，９Ｈ）、６．５２（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．２４（ｄｄ，Ｊ＝８．２及び４．９Ｈｚ，１Ｈ）、４．２３（ｄｄ，Ｊ＝４．７及び４．０３Ｈｚ，１Ｈ）、４．２５〜４．００（ｂｒｓ，１Ｈ）、３．８３〜３．８１（ｍ，１Ｈ）、３．０３〜２．８８（ｍ，４Ｈ）、２．８２〜２．７３（ｍ，７Ｈ）、２．５０〜１．６０（ｂｒｓ，２Ｈ）、２．４５（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．３２〜２．２９（ｍ，１Ｈ）、１．９８（ｍ，１Ｈ）、１．５１（ｍ，１Ｈ）、１．３３（ｓ，９Ｈ）。実施例２Ｎ−（２（Ｒ）−ヒドロキシ−１（Ｒ）−インダニル）− ２（Ｒ）−フェニルメチル−４（Ｒ）−ヒドロキシ−５−（１−（４−（３−フロ［２，３−ｂ］ピリジルメチル）−２（Ｒ）−Ｎ′−（ｔ−ブチルカルボキサミド）−ピペラジニル））−ペンタンアミドの製造ステップ１：フロ［２，３−ｂ］ピリジン−２，５−ジカルボン酸の製造公知（Ｈ．Ｒ．Ｓｎｙｄｅｒ及びＦ．Ｆ．Ｅｂｅｔｉｎｏ，Ｊ．Ｈｅｔ．Ｃｈｅｍ．３，ｐｐ．２０２−２０５，１９６６）のフロ［２，３−ｂ］ピリジン− ２，５−ジカルボン酸ジエチル（１．２２ｇ；４．９２３ｍｍｏｌ）を１０ｍｌの９５％エタノールに溶解させた溶液に、水酸化カリウム（０．６６ｇ；１１．８１ｍｍｏｌ）を１０ｍｌの水に溶解させた溶液を添加した。反応混合物を３時間８０℃に加温し、室温に冷却して濾過した。ビスカリウム塩を水に溶解させ、１０％ＨＣｌでｐＨ２に酸性化した。沈澱物を濾別し、真空乾燥して８５０ｍｇの白色の固体を得た。¹ ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ；（ＣＤ₃）₂ＳＯ）δ：８．９８（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ）、８．７６（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．６９（ｓ，１Ｈ）、４．２５（ｂｒｓ，３Ｈ）。ステップ２：フロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボン酸の製造Ａｒ下に、フロ［２，３−ｂ］ピリジン−２，５−ジカルボン酸（０．３６ｇ；１．４８４ｍｍｏｌ）を３ｍｌのキノリン中に懸濁させた懸濁液にＣｕ粉末（１８０ｍｇ；２．８２ｍｍｏｌ）を添加し、これを１．５時間２１０℃に加温した。反応混合物を室温に冷却し、５０ｍｌの塩化メチレンで稀釈し、セライトで濾過した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ₃（２×４０ｍｌ）で抽出し、３ＮＨＣｌでｐＨ３に酸性化し、かつ濾過して８０ｍｇの黄褐色の固体を得た。水性層をエーテル／メタノール（８５／１５；３×５０ｍｌ）で抽出し、ブライン（１×１０ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水し、濾過し、かつ濃縮して更に３５ｍｇの生成物を得た。¹ ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ；ＣＤ₃ＯＤ）δ：８．８９（ｓ，１Ｈ）、８．６７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．９７（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．０１（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）。ステップ３：フロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボン酸メチルの製造フロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボン酸（３．０ｇ；１８．４０ｍｍｏｌ）を４０ｍｌのメタノールに溶解させた溶液に１６０ｍｌのクロロホルム、次いでトリメチルシリルジアゾメタン（４２ｍｌ；１０％ヘキサン溶液）をゆっくり添加した。０．５時間後、４滴の氷酢酸を添加し、反応混合物を濃縮した。それによって３．２０ｇのオフホワイトの固体を得た。¹ ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ₃）δ：９．０２（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、８．６０（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．７９（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．８７（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．９８（ｓ，３Ｈ）。ステップ４：５−ヒドロキシメチルフロ［２，３−ｂ］ピリジンの製造フロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−カルボン酸メチル（３．２０ｇ；１８．０８ｍｍｏｌ）を９０ｍｌのＴＨＦに溶解させた溶液を火炎乾燥した５００ｍｌ容の丸底フラスコに入れて０℃に冷却した。これにジイソブチルアルミニウム水素化物（４６ｍｌ；４６．１ｍｍｏｌ；１Ｍヘキサン溶液）を１０分掛けて添加し、冷却浴を除去した。４時間後、反応混合物を０℃に冷却し、ロシェル塩（１００ｍｌ）でゆっくり反応を停止させた。更に１８時間経過後、層を分離し、水性層を酢酸エチル（４×４０ｍｌ）で抽出した。一つに合わせた有機層をブライン（１×２０ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水し、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー［４０×１５０ｍｍカラム；ＣＨ₂Ｃｌ₂：ＮＨ₃飽和ＣＨ₂ Ｃｌ₂：ＭｅＯＨの溶離勾配は６０：３９：１．０（１０００ｍｌ）から６０：３８：２（１０００ｍｌ）、６０：３７：３（１０００ｍｌ）、６０：３６：４（１０００ｍｌ）まで］で精製した。その結果、２．１６ｇの白色の固体を得た。¹ ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ₃）δ：８．１９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．９２（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．６４（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．６９（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、４．７８（ｄ，Ｊ＝３．８Ｈｚ，２Ｈ）、４．６９（ｂｒｓ，１Ｈ）。ステツプ５：３−クロロメチルフロ［２，３−ｂ］ピリジン塩酸塩の製造５−ヒドロキシメチルフロ［２，３−ｂ］ピリジンを９ｍｌの塩化メチレンに溶解させた溶液を０℃に冷却し、これに塩化チオニル（４．２３ｍｌ；５７．９９ｍｍｏｌ）を添加した。氷浴を除去し、１時間後反応混合物を濃縮して２．８６ｇのオフホワイトの固体を得た。¹ ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ₃）δ：８．４０（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、８．１３（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．８０（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、６．８６（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、４．７４（ｓ，２Ｈ）。ステップ６：Ｎ−（２（Ｒ）−ヒドロキシ−１（Ｓ）−インダニル）−２（Ｒ）−フェニルメチル−４（Ｓ）−ヒドロキシ−５−（１−（４− （３−フロ［２，３−ｂ］−ピリジルメチル）−２（Ｓ）−Ｎ′ −（ｔ−ブチルカルボキサミド）−ピペラジニル））−ペンタンアミドの製造アルゴン下に、Ｎ−（２（Ｒ）−ヒドロキシ−１（Ｓ）−インダニル）−２（Ｒ）−フェニルメチル−４（Ｓ）−ヒドロキシ−５−（２（Ｓ）−Ｎ′−（ｔ− ブチルカルボキサミド）−ピペラジニル））ペンタンアミド（６．５０ｇ；１２．４８ｍｍｏｌ）を１２ｍｌのジメチルホルムアミドに溶解させた溶液に３− クロロメチルフロ［２，３−ｂ］ピリジン塩酸塩（２．８０ｇ；１３．７２ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（５．２１ｍｌ；３７．４４ｍｍｏｌ）を添加した。１８時間後、反応混合物を４００ｍｌの酢酸エチルで稀釈し、飽和ＮａＨＣＯ₃（１×２５ｍｌ）、水（５×２０ｍｌ）及びブライン（１×２５ｍｌ）で洗浄した。溶液をＭｇＳＯ₄で脱水し、濾過し、かつ濃縮して油を得た。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー［６０×１５０ｍｍカラム；ＣＨ₂Ｃｌ₂：ＮＨ₃ 飽和ＣＨ₂Ｃｌ₂：ＭｅＯＨの溶離勾配は６０：３９：１．０（１０００ｍｌ）から６０：３８：２（１５００ｍｌ）、６０：３７：３（１５００ｍｌ）、６０：３６：４（１５００ｍｌ）まで］で精製した。得られた泡を酢酸エチルで粉砕し、所望の生成物を濾別し、かつ６５℃で一晩高真空下に乾燥して、５．３０ｇの白色の結晶質固体を得た。カラムクロマトグラフィーから得られた混合画分を一つに合わせて再精製することにより、更に追加の生成物を得ることができた。ｍｐ１８３．５〜１８４．５℃。¹ ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ₃）δ：８．２５（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．８５（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．７５（ｓ，１Ｈ）、７．７３（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．３２〜７．１０（ｍ，９Ｈ）、６．７５（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ）、５．９５（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ）、５．２７（ｄｄ，Ｊ＝８．５及び４．８Ｈｚ，１Ｈ）、４．２７〜４．２６（ｍ，１Ｈ）、４．１２（ｂｒｓ，１Ｈ）、３．８９〜３．８３（ｍ，１Ｈ）、３．５１（ｓ，２Ｈ）、３．２９（ｄｄ，Ｊ＝１７．５及び４．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．１６（ｄｄ，Ｊ＝３．６６及び３．４８Ｈｚ，１Ｈ）、３．１５（ｄｄ，Ｊ＝６．６及び５．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．９４〜２．５０（ｍ，１１Ｈ）、２．３６〜２．３４（ｍ，１Ｈ）、１．６６（ｓ，１Ｈ）、１．６２〜１．４７（ｍ，１Ｈ）、１．３５（ｓ，９Ｈ）。Ｃ₃₈Ｈ₄₇Ｎ₅Ｏ₅の元素分析計算値：Ｃ６９．８１；Ｈ７．２５；Ｎ１０．７１実測値：Ｃ６９．４６；Ｈ７．２２；Ｎ１０．６９実施例３実施例２に述べたのと実質的に同じ操作を行ない、ただし実施例２で用いたＮ −（２（Ｒ）−ヒドロキシ−１（Ｓ）−インダニル）−２（Ｒ）−フェニルメチル−４（Ｓ）−ヒドロキシ−５−（１−（２（Ｓ）−Ｎ′−（ｔ−ブチルカルボキサミド）−ピペラジニル））−ペンタンアミド［下記化合物（ｉ）］を、実施例２のステップ６で用いたアルキル化剤に替えて下記のアルキル化剤（ｉｉ）で処理して、次の式（ｉｉｉ）によって規定した化合物を製造した。実施例４アミド１の製造（−）−シス−１−アミノインダン−２−オール（８８４ｇ；５．９３ｍｏｌ）を１７．８ｌの乾燥ＴＨＦ（ＫＦ＝５５ｍｇ／ｍｌ；ＫＦは水分に関するカールフィッシャー滴定の意）及びトリエチルアミン（８６８ｍｌ；６．２２ｍｏｌ）に溶解させた溶液を、熱電対プローブと、機械的攪拌機と、窒素導入アダプターと、通気装置とを具備した５０ｌ容の丸底フラスコに入れ、１５℃に冷却した。次に、３−フェニルプロピオニル塩化物（１０００ｇ；５．９３ｍｏｌ）を７５分掛けて添加し、その間内部温度を氷水冷却バッチで１４〜２４℃に維持した。上記添加後、混合物を１８〜２０℃で３０分間熟成させ、ＨＰＬＣ分析で（−）−シス−１−アミノインダン−２−オールの消失を調べた。反応の進行は高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）分析によって監視する。２５ｃｍＤｕｐｏｎｔＣ８−ＲＸカラム、６０：４０のアセトニトリル／１０ｍＭ（ＫＨ₂ＰＯ₄／Ｋ₂ＨＰＯ₄）、１．０ｍｌ／分、注入量＝２０ｍｌ、検出＝２００ｎｍ、試料調製＝５００倍稀釈。およその保持時間は保持時間（分）同定６．３シス−アミノインダノールである。反応混合物をｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム（２４１ｇ；０．９６ｍｏｌ；０．１６当量）で処理し、１０分間攪拌した（１ｍｌ試料を等量の水で稀釈した後の混合物のｐＨは４．３〜４．６）。次に、２−メトキシプロペン（１．２７ｌ；１３．２４ｍｏｌ；２．２当量）を添加し、反応混合物を２時間３８〜４０℃に加熱した。反応混合物を２０℃に冷却し、酢酸エチル（１２ｌ）とＮａＨＣＯ₃の５％水溶液（１０ｌ）とで分配した。混合物を撹拌し、層を分離した。酢酸エチル抽出物をＮａＨＣＯ₃の５％水溶液（１０ｌ）及び水（４ｌ）で洗浄した。酢酸エチル抽出物を常圧蒸留で脱水し、溶媒をシクロヘキサンに切り替えた（溶媒総量約３０ｌ）。蒸留及び（酢酸エチル抽出物の２０体積％への）濃縮後、高温のシクロヘキサン溶液を２５℃までゆっくり冷まして結晶を生成させた。得られたスラリーを更に１０℃に冷却し、１時間熟成させた。生成物を濾別し、湿潤ケークを冷シクロヘキサン（１０℃；２×８００ｍｌ）で洗浄した。洗浄済みのケークを４０℃において真空乾燥（Ｈｇ柱２６″）して、１．６５ｋｇのアセトニド１（８６．４％；ＨＰＬＣによれば面積９８％）を得た。¹ ＨＮＭＲ（３００．１３ＭＨｚ；ＣＤＣｌ₃；主要回転異性体）δ：７．３６〜７．１４（ｍ，９Ｈ）、５．０３（ｄ，Ｊ＝４．４，１Ｈ）、４．６６（ｍ，１Ｈ）、３．１５（ｍ，２Ｈ）、３．０６（ｂｒｓ，２Ｈ）、２．９７（ｍ，２Ｈ）、１．６２（ｓ，３Ｈ）、１．３７（ｓ，３Ｈ）。¹³ ＣＮＭＲ（７５．５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ₃；主要回転異性体）δ_c：１６８．８、１４０．９、１４０．８、１４０．６、１２８．６、１２８．５、１２８．４、１２７．１、１２６．３、１２５．８、１２４．１、９６．５、７８．６、６５．９、３８．４、３６．２、３１．９、２６．５、２４．１。Ｃ₂₁Ｈ₂₃ＮＯ₂の元素分析計算値：Ｃ７８．４７；Ｈ７．２１；Ｎ４．３６実測値：Ｃ７８．６５；Ｈ７．２４；Ｎ４．４０実施例５エポキシド３の製造アセトニド１（１０００ｇ；３．１１ｍｏｌ）及び（Ｓ）−グリシジルトシレート２（８５３ｇ；３．７４ｍｏｌ；１．２当量）を１５．６ｌのＴＨＦ（ＫＦ＝２２ｍｇ／ｍｌ）に溶解させた溶液を、熱電対と、機械的攪拌機と、添加漏斗と、窒素導入アダプターとを具備した５０ｌ容の四首丸底フラスコに入れ、真空−窒素パージによって３回ガス抜きし、−５６℃に冷却した。次に、リチウムヘキサメチルジシラジド（ＬｉＮ［（ＣＨ３）３Ｓｉ］２；２．６ｌ；１．３８Ｍ；１．１５当量）を２時間掛けて添加し、その間内部温度を−５０〜−４５℃に維持した。反応混合物を−４５〜−４０℃で１時間攪拌し、その後１時間掛けて −２５℃まで加温した。混合物を−２５〜−２２℃で４時間（または出発物質のアセトニドが３．０面積％となるまで）攪拌した。反応の進行はＨＰＬＣ分析によって監視する。２５ｃｍ×４．６ｍｍＺｏｒｂａｘシリカカラム、ヘキサン中の２０％酢酸エチル、２．０ｍｌ／分、注入量＝２０ｍｌ、検出＝２５４ｎｍ、試料調製＝１００倍稀釈。およその保持時間は保持時間（分）同定５．５アミド１６．５グリシジルトシレート２１３．５エポキシド３である。反応混合物を、−１５℃において脱イオン水（６．７ｌ）で反応停止させ、酢酸エチル（１０ｌ）と分配した。混合物を攪拌し、層を分離した。酢酸エチル抽出物をＮａＨＣＯ₃の１％水溶液（５ｌ）と飽和ＮａＣｌ（０．５ｌ）との混合物で洗浄した。酢酸エチル抽出物（２８．３ｌ）を真空蒸留（Ｈｇ柱２８″）によって濃縮し、酢酸エチルを更に添加して溶媒を完全に酢酸エチルに切り替えた（最終容量＝１１．７ｌ）。酢酸エチル濃縮物の溶媒を更にＭｅＯＨに切り替えて結晶を生成させ、これを濃縮して最終量を３．２ｌとした。残留する酢酸エチル溶媒を、１０ｌのメタノールを装填し、１０ｌの留出物を回収することによって除去した。得られたスラリーを２２℃で１時間攪拌し、その後５℃に冷却し、０．５時間熟成させた。生成物を濾別し、湿潤ケークを冷メタノール（２×２５０ｍｌ）で洗浄した。洗浄済みのケークを２５℃で真空乾燥（Ｈｇ柱２６″）して、７２７ｇのエポキシド３（６１．２％；ＨＰＬＣによれば主要エポキシドが９８．７面積％）を得た。¹³ ＣＮＭＲ（３００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ₃）δ：１７１．１、１４０．６、１４０．５、１３９．６、１２９．６、１２８．８、１２８．２、１２７．２、１２６．８、１２５．６、１２４．１、９６．８、７９．２、６５．８、５０．０、４８．０、４４．８、３９．２、３７．４、３６．２、２６．６、２４．１。実施例６最終中間体６の製造２（Ｓ）−ｔ−ブチルカルボキサミド−４−Ｎ−Ｂｏｃ−ピペラジン４（１９５０ｇ；６．８３ｍｏｌ；＞９９．５％ｅｅ）（ｅｅ＝鏡像異性体過剰）及びエポキシド３（２４５６ｇ；４Ｓ／Ｒエポキシドの９７．５：２．５混合物；６．５１ｍｏｌ）をイソプロパノール（２−プロパノール；１８．６ｌ）に加えたスラリーを、機械的攪拌機と、還流冷却器と、蒸気浴と、テフロン被覆熱電対と、窒素導入装置とを具備した７２ｌ容の四首丸底フラスコに入れ、加熱還流させた（内部温度は８４〜８５℃とした）。４０分後、均質な溶液が得られた。混合物を還流温度で２８時間加熱した。還流中の内部温度は８４〜８５℃とした。反応の進行はＨＰＬＣ分析によって監視した。２５ｃｍＤｕｐｏｎｔＣ８−ＲＸカラム、６０：４０のアセトニトリル／１０ｍＭ（ＫＨ₂ＰＯ₄／Ｋ₂ＨＰＯ₄）、１．０ｍｌ／分、検出＝２２０ｎｍ、試料調製＝２μｌの反応混合物をアセトニトリルで１ｍｌに稀釈。およその保持時間は保持時間（分）同定６．３ピペラジン４８．９エポキシド３１５．２結合生成物５であった。２８時間後、残存するエポキシド３及び結合生成物５は（ＨＰＬＣによれば）それぞれ１．５面積％及び９１〜９３面積％であった。混合物を０〜５℃に冷却して２０．９ｌの６ＮＨＣｌを添加し、その際温度は１５℃より低く維持した。添加完了後、混合物を２２℃に加温した。この時点でガス（イソブチレン）の発生が認められる。混合物を２０〜２２℃で６時間熟成させた。反応の進行はＨＰＬＣ分析によって監視した。条件は先に述べたのと同じにした。およその保持時間は保持時間（分）同定７．０シス−アミノインダノール１１．９最終中間体６１５．１結合生成物５であった。混合物を０℃に冷却し、７．５ｌの５０％ＮａＯＨをゆっくり添加して混合物のｐＨを１１．６に調節し、前記添加の間温度は２５℃より低く維持した。混合物を酢酸エチル（４０ｌ）と水（３ｌ）とで分配した。混合物を攪拌し、層を分離した。有機相（６０ｌ）を減圧濃縮（Ｈｇ柱２９″）し、その溶媒をＤＭＦに切り替え、濃縮して最終量１０．５ｌとした（ＫＦ＝１．８ｍｇ／ｍｌ）。酢酸エチル中の６のＨＰＬＣアッセイ収量は８６．５％であった。ＤＭＦ中の最終中間体化合物６を、これ以上精製せずにそのまま次のステップに用いた。単離した６の¹³ＣＮＭＲ（７５．４ＭＨｚ；ＣＤＣｌ₃）δ：１７５．２、１７０．５、１４０．８、１４０．５、１３９．９、１２９．１、１２８．５、１２７．９、１２６．８、１２６．５、１２５．２、１２４．２、７３．０、６６．０、６４．８、６２．２、５７．５、４９．５、４７．９、４６．４、４５．３、３９．６、３９．３、３８．２、２８．９。実施例７ピラジン−２−ｔ−ブチルカルボキサミド９ 2-ピラジンカルボン酸(8) 3.35kg(27mol) 塩化オキサリル 3.46kg(27.2mol) t-ブチルアミン(KF=460μg/ml) 9.361(89mol) EtOAc(KF=56μg/ml) 271 DMF 120ml 1-プロパノール 301 カルボン酸８を２７ｌのＥｔＯＡｃ及び１２０ｍｌのＤＭＦ中に懸濁させた懸濁液を、Ｎ₂下で機械的攪拌を行なう７２ｌ容の三首フラスコに入れ、２℃に冷却した。温度を５〜８℃に維持しながら塩化オキサリルを添加した。上記添加は５時間後に完了した。発熱するこの添加の間、ＣＯ及びＣＯ₂が発生した。生成したＨＣｌは主に溶液中に残存した。恐らくはピラジン酸塩化物のＨＣｌ塩である沈澱物が存在した。反応混合物の無水試料をｔ−ブチルアミンで反応停止させることにより、酸塩化物生成のアッセイを行なった。完了時、残存する酸８は０．７％未満であった。酸塩化物生成に関するアッセイは重要であり、なぜなら未完の反応はビス−ｔ −ブチルオキサミド不純物の生成を招くからである。反応はＨＰＬＣによって監視し得る。２５ｃｍＤｕｐｏｎｔＺｏｒｂａｘＲＸＣ８カラム、流量１ｍｌ／分、２５０ｎｍで検出、Ｈ₃ＰＯ₄の０．１％水溶液対ＣＨ₃ＣＮの溶離勾配は３０分で９８：２から５０：５０まで線形、保持時間は酸８＝１０．７分、アミド９＝２８．１分。反応混合物を５℃で１時間熟成させた。得られたスラリーを０℃に冷却し、ｔ −ブチルアミンを、内部温度が２０℃より低く維持されるような速度で添加した。反応がきわめて発熱性であったため、上記添加には６時間を要した。発生したｔ−ブチルアンモニウム塩酸塩の僅かな部分を、毛羽状の白色固体として反応混合物から拭い取った。混合物を１８℃で更に３０分間熟成させた。沈澱したアンモニウム塩を濾別した。濾過ケークを１２ｌのＥｔＯＡｃで洗浄した。一つに合わせた有機相を６１の３％ＮａＨＣＯ₃及び２×２ｌのＮａＣｌ飽和水溶液で洗浄した。有機相を２００ｇのＤａｒｃｏＧ６０炭素で処理し、ＳｏｌｋａＦｌｏｋで濾過し、ケークを４ｌのＥｔＯＡｃで洗浄した。炭素処理によって、生成物の紫色が有効に除去された。９のＥｔＯＡｃ溶液を１０ｍバールにおいて、元の体積の２５％にまで濃縮した。３０ｌの１−プロパノールを添加し、最終量２０ｌとなるまで蒸留を継続した。この時点で、ＥｔＯＡｃは¹ＨＮＭＲでの検出限界を下回った（１％未満）。この溶媒変更時の内部温度は３０℃ より低かった。３の１−プロパノール／ＥｔＯＡｃ溶液は大気圧下で数日間安定に還流した。アリコートの蒸発によってｍｐ８７〜８８℃の黄褐色の固体を得た。¹³ ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ₃；ｐｐｍ）１６１．８、１４６．８、１４５．０、１４３．８、１４２．１、５１．０、２８．５。実施例８ｒａｃ−２−ｔ−ブチル−カルボキサミド−ピペラジン１０物質ピラジン-2-t-ブチルカルボキサミド９ 2.4kg(13.4mol) (1-プロパノール溶液として121) 20％ Pd(OH)₂/C 16重量％水 144g ピラジン−２−ｔ−ブチルカルボキサミド９／１−プロパノール溶液を５ガロン容のオートクレーブに入れた。触媒を添加し、混合物を温度６５℃及びＨ₂圧４０ｐｓｉ（３ａｔｍ）の下で水素化した。２４時間後、反応混合物は理論量の水素を取り込み、ＧＣ結果は９が１％未満になったことを示した。混合物を冷却し、Ｎ₂でパージし、触媒をＳｏｌｋａＦｌｏｋでの濾過によって除去した。触媒は加温した１−プロパノール２ｌで洗浄した。濾過ケークの洗浄に加温した１−プロパノールを用いると濾過をより良好に行なえ、濾過ケーク上に存在する生成物の損失を低減できる。反応はＧＣによって監視した。３０ｍＭｅｇａｂｏｒｅカラム、１０℃／分で１００℃から１６０℃に昇温し、この温度を５分間維持後１０℃／分で２５０ ℃に昇温、保持時間は９＝７．０分、１０＝９．４分。反応の監視は、溶媒としてＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ（５０：５０）、展開剤としてニンヒドリンを用いるＴＬＣによっても可能であった。アリコートの蒸発により、アミド化及び水素化の収量が８８％であること、及び１０の濃度は１３３ｇ／ｌであることが明らかとなった。アリコートの蒸発によって１０を、ｍｐ１５０〜１５１℃の白色の固体として得た。¹³ ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ；Ｄ₂Ｏ；ｐｐｍ）：１７３．５、５９．８、５２．０、４８．７、４５．０、４４．８、２８．７。実施例９（Ｓ）−２−ｔ−ブチル−カルボキサミド−ピペラジンビス（Ｓ）−樟脳スルホン酸塩（Ｓ）−１１物質 rac-2-t-ブチル-カルボキサミド-ピペラジン10 4.10kg(22.12mol) (1-プロパノール溶液として；溶媒25.5kg) (S)-(+)-10-樟脳スルホン酸 10.0kg(43.2mol) 1-プロパノール 121 アセトニトリル 391 水 2.41 アミン１０の１−プロパノール溶液を、付属のバッチ濃縮器を具備した１００ｌ容のフラスコに入れた。溶液を１０ｍバール及び２５℃より低温で濃縮して、その体積を約１２ｌとした。この時点で溶液から生成物が沈澱したが、混合物を５０℃に加熱すると再び溶解した。均質アリコートの分析により、１０の濃度は３４１ｇ／ｌであることが判明した。濃度はＨＰＬＣによって測定した。２５ｃｍＤｕｐｏｎｔＺｏｒｂａｘＲＸＣ８カラム、流量１．５ｍｌ／分、２１０ｎｍで検出、アイソクラチックなＣＨ₃ＣＮ／０．１％Ｈ₃ＰＯ₄水溶液（９８／２）。１０の保持時間は２．５分。アセトニトリル（３９ｌ）及び水（２．４ｌ）を添加して、褐色がかった透明な溶液を得た。ＫＦ滴定による含水量測定及び¹ＨＮＭＲ積分によるＣＨ₃ＣＮ／１−プロパノール比は、ＣＨ₃ＣＮ／１−プロパノール／Ｈ₂Ｏ比が２６／８／１．６であることを示した。溶液中の濃度は７２．２ｇ／ｌであった。２０℃において、４部分に分けた（Ｓ）−１０−樟脳スルホン酸を３０分掛けて装填した。ＣＳＡ添加後、温度は４０℃に上昇した。数分後、白色の粘稠な生成物が沈澱した。白色のスラリーを７６℃に加熱して固体を総て溶解させ、得られた褐色がかった溶液を８時間掛けて２１℃に冷却した。６２℃で生成物が沈澱した。この生成物を２１℃において、熟成させずに濾別し、濾過ケークをＣＨ₃ＣＮ／１−プロパノール／Ｈ₂Ｏの２６／８／１．６溶媒混合物５ｌで洗浄した。これを真空オーブンにおいてＮ₂放出下に３５℃で乾燥して、５．６ｋｇ（３９％）の１１を、ｍｐ２８８〜２９０℃（分解を伴う）の白色の結晶質固体として得た。［α］_D ²⁵＝１８．９°（ｃ＝０．３７，Ｈ₂Ｏ）。¹³ ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ；Ｄ₂Ｏ；ｐｐｍ）：２２２．０、１６４．０、５９．３、５４．９、５３．３、４９．０、４８．１、４３．６、４３．５、４３．１、４０．６、４０．４、２８．５、２７．２、２５．４、１９．９、１９．８。この物質のｅｅは、次のキラルＨＰＬＣアッセイによれば９５％であった。１１のアリコート（３３ｍｇ）を４ｍｌのＥｔＯＨ及び１ｍｌのＥｔ₃Ｎ中に懸濁させた。Ｂｏｃ₂Ｏ（１１ｍｇ）を添加し、反応混合物を１時間熟成させた。溶媒を真空下に完全に除去し、残留物を約１ｍｌのＥｔＯＡｃに溶解させ、これをＳｉＯ₂を装填したパスツールピペットで、溶離液としてＥｔＯＡｃを用いて濾過した。蒸発させた生成物画分をヘキサンに、約１ｍｇ／ｍｌで再溶解させた。ヘキサン／ＩＰＡ（９７：３）溶媒系を流量１ｍｌ／分で用い、２２８ｎｍで検出するＤａｉｃｅｌＣｈｉｒａｃｅｌｌＡＳカラムで鏡像異性体を分離した。その際保持時間はＳ対掌体＝７．４分、Ｒ対掌体＝９．７分であった。実施例１０塩１１から得られる（Ｓ）−２−ｔ−ブチルカルボキサミド−４−ｔ−ブトキシカルボニル−ピペラジン４物質 (S)-2-t-ブチル-カルボキサミド-ピペラジンビス(S)-(+)-CSA塩11，95％ ee 5.54kg(8.53mol) ジ-t-ブチル二炭酸塩 1.86kg(8.53mol) Et₃N 5.951(42.6mol) EtOH(正200プルーフ) 551 EtOAc 21 添加漏斗を具備した１００ｌ容の三首フラスコに収容した（Ｓ）−ＣＳＡ塩１１にＮ₂下にＥｔＯＨを添加し、次いで２５℃においてトリエチルアミンを添加した。Ｅｔ₃Ｎを添加すると直ちに固体は溶解した。Ｂｏｃ₂ＯをＥｔＯＡｃに溶解させて添加漏斗に装填した。Ｂｏｃ₂ＯのＥｔＯＡｃ溶液を、温度を２５℃より低く維持するような速度で添加した。この添加に３時間掛かった。Ｂｏｃ₂Ｏ溶液の添加完了後１時間、反応混合物を熟成させた。反応はＨＰＬＣによって監視し得る。２５ｃｍＤｕｐｏｎｔＺｏｒｂａｘＲＸＣ８カラム、流量１ｍｌ／分、２２８ｎｍで検出、アイソクラチックなＣＨ₃ＣＮ／０．１ＭＫＨ₂ＰＯ₄水溶液（５０／５０）（ＮａＯＨでｐＨ＝６．８に調節した）。４の保持時間は７．２分。先のステップと同じ系を用いてキラルアッセイを行なった。反応の監視は、溶媒として１００％ＥｔＯＡｃを用いるＴＬＣによっても可能であった。（Ｒ_f＝０．７）。次に、溶液を１０ｍバール真空下にバッチ型濃縮器において２０℃より低い内部温度で濃縮して、その体積を約１０ｌとした。２０ｌのＥｔＯＡｃ中へゆっくり放出し、かつ再び約１０ｌに濃縮することによって溶媒の切り替えを完了した。反応混合物を洗浄して、６０ｌのＥｔＯＡｃを収容した抽出器に入れた。有機相を、１６ｌの５％Ｎａ₂ＣＯ₃水溶液、２×１０ｌの脱イオン水及び２×６ｌの塩化ナトリウム飽和水溶液で洗浄した。一つに合わせた水性洗液を２０ｌのＥｔＯＡｃで逆抽出し、有機相を２×３ｌの水及び２×４ｌの塩化ナトリウム飽和水溶液で洗浄した。一つに合わせたＥｔＯＡｃ抽出物を１００ｌ容のバッチ型濃縮器において、２０℃より低い内部温度で１０ｍバール真空下に濃縮して、その体積を約８ｌとした。約２０ｌのシクロヘキサン中へゆっくり放出し、かつ再び約８ｌに濃縮することによって溶媒をシクロヘキサンに切り替えた。スラリーに５ｌのシクロヘキサン及び２８０ｍｌのＥｔＯＡｃを添加し、混合物を加熱還流すると全成分が溶解した。溶液を冷却し、５８℃において結晶種（１０ｇ）を添加した。スラリーを４時間で２２℃に冷却し、２２ ℃で１時間熟成後生成物を濾別した。濾過ケークを１．８ｌのシクロヘキサンで洗浄し、真空オーブンにおいてＮ₂放出下に３５℃で乾燥して、１．８７ｋｇ（７７％；ＨＰＬＣによれば＞９９．９面積％；Ｒ異性体は検出レベル未満）の４を黄褐色がかった粉末として得た。［α］_D ²⁵＝２２．００°（ｃ＝０．２０，ＭｅＯＨ）。ｍｐ１０７℃。¹³ ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ；ＣＤＣｌ₃；ｐｐｍ）：１７０．１、１５４．５、７９．８、５８．７、５０．６、４６．６、４３．６、４３．４、２８．６、２８．３。ここまで本発明の原理を、理解を助けるための実施例と共に教示してきたが、本発明の実施には、以下の請求の範囲各項の記載を逸脱しないあらゆる通常の変更、適応または変形、及び本発明の均等物が含まれると理解される。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ)，ＡＭ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ，ＦＩ，ＧＥ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＧ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＺ (72)発明者バツカ，ジヨーゼフ・ピイアメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 07065、ローウエイ、イースト・リンカーン・アベニユー・126 (72)発明者ドーシー，ブルース・デイーアメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 07065、ローウエイ、イースト・リンカーン・アベニユー・126

Claims

【特許請求の範囲】１．式〔式中は安定な８〜１０員二環複素環であり、そのいずれの環も飽和または不飽和であり得、この複素環は炭素原子と、Ｎ、Ｓ及びＯの中から選択された１〜３個のヘテロ原子とから成り、かつ置換されていないか、またはＯＨ、ハロ、Ｃ_1〜4低級アルキル、オキソで置換されており、ただしその際はでない〕の化合物またはその医薬的に許容可能な塩。２．が安定な８〜１０員二環複素環であり、そのいずれの環も飽和または不飽和であり得、この複素環は炭素原子と、Ｎ及びＯの中から選択された２個のヘテロ原子とから成り、前記ヘテロ原子は別々の環に存在することを特徴とする請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容可能な塩。３．がであり、その際ＸはＯまたはＳであることを特徴とする請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容可能な塩。４．がに限定されることを特徴とする請求項２に記載の化合物またはその医薬的に許容可能な塩。５．Ｎ−（２（Ｒ）−ヒドロキシ−１（Ｓ）−インダニル）−２（Ｒ）−フェニルメチル−４（Ｓ）−ヒドロキシ−５−（１−（４−（３−フロ［２，３−ｂ］ピリジルメチル）−２（Ｓ）−Ｎ′−（ｔ−ブチルカルボキサミド）−ピペラジニル））ペンタンアミドと呼称されるであることを特徴とする請求項４に記載の化合物またはその医薬的に許容可能な塩。６．請求項１から５のいずれか１項に記載の化合物と、医薬的に許容可能なキャリヤとを含有する医薬組成物。７．ＡＩＤＳの治療、ＨＩＶ感染の予防、ＨＩＶ感染の治療、またはＨＩＶプロテアーゼの阻害に用いる、請求項１から５のいずれか１項に記載の化合物を含有する医薬組成物。８．請求項５に記載の化合物と、化合物Ｂ及び化合物Ｃ並びにネビラピンの中から選択されたＨＩＶ逆転写酵素の非ヌクレオシド類似体阻害剤と、場合によってはＡＺＴまたはｄｄＩまたはｄｄＣいずれかとから成る化合物の組み合わせ。９．請求項５に記載の化合物と、ＡＺＴまたはｄｄＩまたはｄｄＣいずれかとから成る化合物の組み合わせ。