SK282900B6

SK282900B6 - Benzamidová zlúčenina, spôsob jej prípravy, farmaceutická kompozícia s jej obsahom a jej použitie

Info

Publication number: SK282900B6
Application number: SK1325-97A
Authority: SK
Inventors: William David Flitter; William A. Garland; Allan L. Wilcox; Richard E. Paylor
Original assignee: Centaur Pharmaceuticals, Inc.
Priority date: 1995-04-03
Filing date: 1996-04-03
Publication date: 2003-01-09
Also published as: CA2215166A1; DE69613567T2; CZ309897A3; AU721045B2; IS1919B; NZ306204A; EA199700287A1; KR100429120B1; DK0819113T3; CN1073552C; NO318441B1; PL184121B1; JPH11501319A; BG63384B1; DZ2012A1; MX9707596A; EP0819113B1; GR3036466T3; TR199701114T1; BG101929A

Abstract

Opisujú sa zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde význam jednotlivých substituentov je uvedený v opise. Opísaná je i farmaceutická kompozícia, ktorá ako účinnú látku obsahuje uvedenú zlúčeninu. Benzamidy sa používajú pri výrobe liečiv na liečenie ochorení, pri ktorých dochádza k progresívnej strate funkcie centrálnej nervovej sústavy, ako je Parkinsonova choroba alebo Alzheimerova choroba.ŕ

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka benzamidovej zlúčeniny, spôsobu jej prípravy, farmaceutickej kompozície s jej obsahom a jej použitia.

Doterajší stav techniky

Neurodegeneratívne ochorenia je širší termín, do ktorého patrí súbor vážnych ochorení nervovej sústavy vrátane Parkinsonovej choroby, amyotrofickej laterálnej sklerózy (ALS, „Lou Gehrig's Disease“), roztrúsená skleróza, Huntingtonova choroba, Alzheimerova choroba, diabetická retinopatia, demencia, makuláma degenerácia a podobne. Pre tieto ochorenia je charakteristické postupné, ale nevratné zhoršovanie pacientovho stavu v závislosti od času. Mechanizmy a príčiny týchto chorôb sa stávajú v súčasnom období lepšie zrozumiteľnými a boli navrhnuté početné spôsoby ich liečenia. Jedna z takýchto neurodegeneratívnych chorôb, Parkinsonova choroba, je spojená s abnormálnym úbytkom dopamínu v určitých oblastiach mozgu.

Sumarizáciu súčasného stavu techniky, pokiaľ sa týka pochopenia mechanizmu Parkinsonovej choroby, uskutočnili Marsden, C. D. v „Review Article-Parkinson's Disease“, Lancet (12. apríl 1990) str. 948 až 952 a Calne, D. B. v „Treatmcnt of Parkinson's Disease“, NEJM (30. september 1993), 329: str. 1021 až 1027. Ako sa uvádza v tomto odkaze, nedostatok dopamínu bol identifikovaný ako kľúčová vlastnosť Parkinsonovej choroby a deštrukcia dopaminenergickej nigrostriatálnej cesty okrem úbytku dopamínu u pacientov trpiacich Parkinsonovou chorobou.

Rýchly vývoj parkinsonovských príznakov u malej populácie narkomanov San Jose v Kalifornii bol spôsobený stopovými množstvami nečistôt v doma vyrábaných drogách. Následný výskum na zvieracích modeloch vrátane opíc ukázal, že príčinou parkinsonovských príznakov u týchto narkomanov bol l-metyl-4-fenyl-1,2,5,6-tetrahydropyridín (MPTP), čo je uvedené v publikácii J. W. Langston a kol., „Chronic Parkinsonism in Human Due to a Product of Meperidine-Analog Synthesis“, Science (25. február 1983) 219: 979 až 980. Tieto prvé zistenia a početné ďalšie štúdie ukázali, že táto látka stimuluje tvorbu látok, ktoré vyvolávajú Parkinsonovu chorobu, čo je ďalej uvedené podrobne v Heikkila, R. E. a kol., „Dopaminergic Neurotoxicity of l-metyl-4-phenyl-l,2,5,6-Tetrahydropyridine in Mice“, Science (29. jún 1984) 224: 1451 až 1453, Bums, R. S. a kol., v „A Primáte Model of Parkin-sonism...“, Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1983, 80: 4546 až 4550, Singer, T. P. a kol., „Biochemical Events in the Development of Parkinsonism...“, J. Neurochem. (1987), 1 - 8, a Gerlach, M. a kol., „MPTP Mechanism of Neurotoxicity and the Implications for Parkinson's Disease“, European Joumal of Pharmacology (1991), 208: 273 až 286. Tieto odkazy a ďalšie opísané štúdie pomáhajú vysvetliť mechanizmus, ako podávanie MPTP zvieratám vytvára príčinu ťažkostí charakteristických pre Parkinsonovu chorobu. Tieto testy jasne ukazujú, že MPTP bol príčinou príznakov Parkinsonovej choroby, ktoré sa vyvinuli u ľudí, ktorí užívali nezákonne drogy a ďalej ukazujú, že podobné chemické príčiny boli nájdené pri iných primátoch i pri ďalších testovaných zvieratách, ktorým sa priamo podával MPTP. Autori ďalej uvádzajú, že podávanie MPTP vyvoláva u testovaných jedincov výrazne zníženie koncentrácie dopamínu.

Tieto zistenia viedli k vývoju testu pre účinné látky pri liečení neurodegeneratívnych ochorení spojených s dopaminom, ako je napríklad Parkinsonova choroba, v tomto teste sa podáva pokusným zvieratám v určitom množstve MPTP, aby došlo k určitému pomernému poklesu ich koncentrácie dopamínu. Testované zlúčeniny sa pri tomto teste rozlišujú podľa toho, či sú pri podaní ošetreným zvieratám schopné zabrániť poklesu koncentrácie dopamínu u testovaných zvierat. Rozsah koncentrácií dopamínu, na ktorom sa pritom hodnota udržuje, je meradlom na posúdenie zlúčeniny z hľadiska účinnosti na spomalenie alebo zabránenie priebehu neurodegeneratívnych chorôb, napríklad Parkinsonovej choroby.

Ďalším testom na účinnosť látky pri liečení neurodegeneratívnych chorôb spojených s dopamínom je skúška, pri ktorej sa do corpus striatum testovaných zvierat injekčné podá neurotoxín 6-hydroxydopamín. Táto látka znižuje hladinu dopamínu a je mimoriadne vhodná na vytvorenie modelu pre tieto testy. Testované látky sa pri ňom podávajú pokusným zvieratám takým spôsobom, aby sa zistilo, či sú schopné zastaviť alebo znížiť pokles hladiny dopamínu. Opäť sa účinnosť látky posudzuje podľa schopnosti udržať určité hladiny dopamínu.

Funkcia mitochondrií je ďalším znakom, ktorý je spojený s mnohými neurodegeneratívnymi chorobami, ako je ALS, Huntingtonova choroba, Alzheimerova choroba, cerebelárna degenerácia a starnutie samotné (Beal, M. D. v „Mitochondrial Dysfunction and Oxydativc Damage in Neurodegenerative Diseases“, R. G. Landes Publications Austin. TX. 1995 at, napríklad str. 53 až 61 a str. 73 až 99). Mitochondriálne poškodenie je mechanizmus, ktorým MPTP znižuje koncentráciu dopamínu v striate (Mizuno, Y., Mori, H., Kondo, T. v „Potential of Neuro-protective Therapy in Parkinson's Disease“, CNS Drugs (1994), 1: 46 až 46).

Z toho, čo bolo uvedené, vyplýva, že činidlo, ktoré chráni pred mitochpondriálnou dysfunkciou spôsobenou MPTP, by mohlo byť užitočné pri liečení ochorení centrálneho nervového systému, pri ktorých je príčinou mitochondriálna dysfunkcia.

Na stanovenie účinnosti látok pri liečení ďalších neurodegenerativnych ochorení sú tiež dostupné modelové experimenty. Tak napríklad účinnosť zlúčenín proti Alzheimerovej chorobe sa dá stanoviť testovaním bunkovej kultúry. Dva z týchto testov sú založené na tom, že sa pri zlúčeninách hodnotí schopnosť chrániť proti amyloidu β(25-35) alebo proti glutamátom indukovanej strate nervových buniek a uskutočňuje sa na bunkovej kultúre nervových astrocytov hippocampu embryí krýs. V inom teste sa zlúčeniny hodnotili podľa schopnosti vyvolať v amyloide β(1-40) vznik beta vrstvy. Zlúčeniny, ktoré majú tento účinok, sa dajú považovať za potencionálne vhodné na liečenie Alzheimerovej choroby.

Napriek tomu, že sú známe ďalšie benzamidové zlúčeniny, ich užitočnosť na uvedený účel spočívala doteraz vo všeobecnosti v tom, že boli medziproduktmi pri chemických syntézach alebo sa používali v oblastiach, ktoré nesúvisia s týmto vynálezom. Nepatrné zmeny v štruktúre majú za následok veľké zmeny v účinnosti a v toxicite. Väčšina benzamidových zlúčenín má pri náhodnom testovaní v uvedenom zmysle malú alebo nulovú aktivitu. Napriek tomu však boli opísané pri niektorých štruktúrne odlišných benzamidoch uvedené biologické aktivity. Ide o tieto publikácie:

El Tayar a kol., „Interaction of Neuroleptic Drugs with Rat Striatal D-l and D-2 Dopamine Receptors: a Quantitative Structure - Affinity Relationships Study“, Eur. J. Med. Chem. (1988), 23: 173 až 182, Monkovič a kol., „Potential Non-Dopaminergic Gastro-intestinal Prokinetic Agents in the Šerieš of Substituted Benzamides“ Eur. J. Med. Chem.

(1989), 24: 233 až 240, Banasik a kol., „Specific Inhibitors of Poly(ADP-ribosyl)-transferase and Mono(ADP-ribosyl)transferase“, J. Biol. Chem. (1992) 267: 1569 až 1575, Bishop a kol., „Synthesis and in vitro Evaluation of 2,3-dimetoxy-5-(fluoroalkyl)-substituted Benzamides: High-Affinity Ligands for CNS Dopamine D₂ Receptors“, J. Med. Chem. (1991), 34:1612 až 1624, Hogberg a kol., „Potential Antipsychotic Agents. 9. Synthesis and Stereoselective Dopamine D-2 Receptor Blockade of a Potent Class of Substituted (R)-N-/benzyl-2-pyrrolidinyl)metyl/benzamides. Relations to Toher Side Chain Congeners“, J. Med. Chem. (1991), 34: 948 až 955, Katopodis a kol., „Novel Substrates and Inhibitors of Peptidylglycine α-Amidating Monooxygenase“, Biochemistry (1990), 299: 4541 až 4548, a Rainnie a kol., „Adenosine Inhibition of Mesopontine Cholinergic Neurons: Implications for EEG Arousaľ“, Science (1994), 263: 689 až 690.

Iné benzamid obsahujúce farmaceutické kompozície a ich použitie na liečenie alebo prevenciu neurodegeneratívnych chorôb sú opísané v US 5 472 983.

Podstata vynálezu

Boli objavené farmaceutické kompozície založené na benzamide, ktoré majú účinnosť proti neurodegeneratívnym chorobám. Tieto kompozície obsahujú ako účinnú zložku vo farmaceutický prijateľnom nosiči jednu alebo viac látok zo skupiny zahrnujúcej acetamidobenzamidovú, aminobenzamidovú alebo nitrobenzamidovú zlúčeninu všeobecného vzorca (I)

(R), conhr' (I), v ktorom

R' je nasýtený alkyl s troma až piatimi atómami uhlíka, každé R je nezávislé a znamená -NH-CO-CH₃, -NO₂ alebo -NH₂ a n je 1 alebo 2 s nasledujúcimi podmienkami:

1. ak n jc 1 a R je -NO₂ v polohe 4, R' nesmie byť lerc.butyl, butyl alebo propyl,

2. ak n je 1 a R je -NO₂ v polohe 2, R' nesmie byť butyl alebo propyl a

3. ak n je 2 a R' je /erc.butyl a obidva substituenty R sú -NO₂, nesmú byť tieto R skupiny v polohe 3 a 5.

Nosičom je výhodne orálny nosič, ale môže sa tiež použiť injekčný nosič. Tieto farmaceutické kompozície môžu byť v práškovej forme, ale skôr sa predpokladá jednotková dávkovacia forma.

Vo výhodnom uskutočnení farmaceutické kompozície obsahujú jednu alebo viac acetamidobenzamidových zlúčenín všeobecného vzorca (II). Tieto kompozície majú účinnosť proti Parkinsonovej chorobe, čo bolo potvrdené ich schopnosťou zabrániť zníženiu hladín dopamínu vyvolanému MPTP a 6-hydroxydopamínom.

(Π)

Vo všeobecnom vzorci (II):

R' znamená lineárny, rozvetvený alebo cyklický nasýtený alkyl s 3 až 5 atómami uhlíka a n je 1 alebo 2.

Niektoré z benzamidových zlúčenín, používané v tu uvedených kompozíciách, sú známymi zlúčeninami, zatiaľ čo iné sú nové. Tieto nové zlúčeniny ako niektoré ďalšie nové nitrobenzamidy a amidobenzamidy, ktoré sú využiteľné ako chemické medziprodukty pri príprave účinných látok, predstavujú tiež súčasť tohto vynálezu.

Tieto acetamidobenzamidy všeobecného vzorca (II), v ktorých

R' znamená lineárny, rozvetvený alebo cyklický nasýtený alkyl s 3 až 5 atómami uhlíka a n je 1 alebo 2, ale s podmienkou, že ak n je 1 a R' je n-butyl alebo n-propyl, acetamidoskupina nesmie byť v polohe 2 a ďalej s podmienkou, že ak n je 1, acetamidoskupina nesmie byť v polohe 3, a ďalej s podmienkou, že ak n je 2, acetamidoskupina nesmie byť v polohách 3 a 5, predstavujú samy osebe súčasť vynálezu.

Nasledujúce nitro- a aminobenzamidy sú ako zlúčeniny tiež súčasťou tohto vynálezu: N-terc-amyl-4-nitrobenzamid (CPI1O33), N-l,2-dimetylpropylnitrobenzamid (CPI1085), N-n-butyl-3-nitrobenzamid (CPI1135), N-n-pentyl-4-nitrobenzamid (CP11040), N-2-metylbutyl-4-nitrobenzamid (CPI1146), N-n-butyl-3,5-dinitrobenzamid (CPI1147), N-metylcyklopropyl-4-nitrobenzamid (CPI1164), N-n-butyl-2-nitrobenzamid (CPIU73), N-n-pentyl-2-nitrobenzamid (CPI1174) a N-metylcyklopropyl-4-aminobenzamid ((CPI1240). („CPI...“ čísla, ktoré sú uvedené za názvom každej zlúčeniny a ktoré sa v celom tomto opise používajú, predstavujú vlastné identifikačné čísla prihlasovateľa. Používajú sa tu preto, aby sa zjednodušila prezentácia údajov v príkladoch.)

Ďalej sa vynález týka použitia benzamidovej zlúčeniny podľa vynálezu na výrobu farmaceutického prípravku na liečenie pacienta, ktorý trpí neurodegeneratívnym ochorením, a to predovšetkým takým, ktoré je spojené s účinkami dopamínu. Pacientovi sa podáva účinné množstvo jedného alebo viacerých farmaceutických prostriedkov so zložením podľa tu opísaných kompozícií.

Ďalším aspektom vynálezu je použitie benzamidovej zlúčeniny podľa vynálezu na výrobu farmaceutického prípravku na liečenie pacienta trpiaceho ťažkosťami, pre ktoré je charakteristická progresívna strata funkcie centrálnej nervovej sústavy. Pacientovi sa podáva účinné množstvo jedného alebo viacerých farmaceutických kompozícií práve opísaných.

Podľa najvýznamnejšieho aspektu vynález rieši použitie benzamidovej zlúčeniny podľa vynálezu na výrobu farmaceutického prípravku na liečenie pacienta, ktorý- trpí progresívnou stratou funkcie centrálnej nervovej sústavy, spojenej s Parkinsonovou chorobou formou podávania (výhodne orálne) účinného množstva jednej alebo viacerých farmaceutických kompozícií tu opísaných, pacientovi s progresívnou stratou funkcie nervovej sústavy.

Podľa ďalšieho aspektu vynálezu sa rieši použitie benzamidovej zlúčeniny podľa vynálezu na výrobu farmaceutického prípravku na liečenie pacienta, ktorý trpí ťažkosťami charakterizovanými progresívnou stratou funkcie ner vovej sústavy v dôsledku mitochondriálnej dysfunkcie tak, že sa pacientovi so stratou funkcie centrálnej nervovej sústavy podáva jedno alebo viac farmaceutických kompozícií, ktoré sú tu opísané.

Podľa ďalšieho aspektu tohto vynálezu sa rieši spôsob prípravy zlúčenín všeobecných vzorcov (I) a (II). Tieto spôsoby vo všeobecnosti spočívajú v kondenzácii alkylamínu s 3 až 5 atómami uhlíka s mono- alebo dinitrobenzoylhalogenidom, ktorý má konfiguráciu nitroskupiny zodpovedajúcej nitro-, amino- alebo acetamidosubstituentov, ktorá sa požaduje pri konečných zlúčeninách, prípadne následnej redukcii nitroskupín a prípadne následnej konverzii aminobenzamidov na acetamidobenzamidy reakciou s acetylhalogenidom.

Podrobný opis vynálezu

Benzamidy

V tomto vynáleze sa využívajú určité acetamidobenzamidy, aminobenzamidy a nitrobenzamidy ako farmaceutické činidlá. Acetamidobenzamidy sú špecifikované všeobecným vzorcom (I), kde R je acetamidoskupina a všeobecným vzorcom (II). V týchto vzorcoch znamená R' nasýtený alkyl s 3 až 5 atómami uhlíka a n je 1 alebo 2.

Acetamidoskupina (alebo skupiny) môže byť umiestnená na kruhu ľubovoľne. Výhodné uskutočnenie je také, keď n je 1 a acetamidoskupina je v polohe 2, 3 alebo 4 a ak n je 2 a acetamidoskupiny sú v polohách 2 a 3, 2 a 4, 2 a 5, 2 a 6, 3 a 4 alebo 3 a 5.

Pokiaľ ide o alkylsubstituenty, R' pri výhodných uskutočneniach je alkyl, ktorý nemá vodík na alfa uhlíku, teda uhlík s väzbami k dusíku, ktorý je súčasťou kruhu. Príklady takýchto výhodných R' skupín sú terc.butyl a terc.amyl.

Acetamidobenzamidy všeobecného vzorca (I), ktoré sú predovšetkým zaujímavé, sú: N-terc.butyl-4-acetamidobenzamid (CPI1189), N-izo-propyl-4-acetamidobenzamid (CPI1232), N-terc.amyl-4-acetamidobenzamid (CPI1233), N-terc.butyl-3-acetamidobenzamid (CPI1234) a N-metylcyklopropyl-4-acetamidobenzamid (CPI 1241).

N-terc.Butyl-4-acetamidobenzamid (CPI1189) je najvýhodnejším acetamidobenzamidom.

Medzi týmito zlúčeninami acetamidobenzamidového typu je mnoho nových zlúčenín. Konkrétne ide o acetamidobenzamidy všeobecného vzorca (I) (ak R je acctamido) a všeobecného vzorca (II), kde n je 1 alebo 2 a R' je nasýtený alkyl s 3 až 5 atómami uhlíka pod podmienkou, že ak n je 1 a R' je n-butyl alebo n-propyl, acetamidoskupina nesmie byť v polohe 2, a ďalej pod podmienkou, že ak n je 1, acetamidoskupina nesmie byť v polohe 3, a ďalej pod podmienkou, že ak n je 2, acetamidoskupina nesmie byť v polohách 3 a 5. Opäť je potrebné považovať päť citovaných acetamidov za výhodné, pričom CPI1198 je najvýhodnejší.

Aminobenzamidy a nitrobenzamidy, ktoré sa používajú podľa vynálezu ako účinné látky, sú špecifikované všeobecným vzorcom (I), kde R je aminoskupina alebo nitroskupina. V týchto vzorcoch R' je nasýtený alkyl s 3 až 5 atómami uhlíka a n je 1 alebo 2, pričom platia tie isté údaje o výhodnosti substituentov a ich polôh, na ktoré sa odkazovalo pri acetamidobenzamidoch a ďalej pod podmienkami, že:

1. ak n je 1 a R je -NO₂ v polohe 4, R' nesmie byť terc.butyl, butyl alebo propyl,

2. ak n je 1 a R je -NO₂ v polohe 2, R' nesmie byť butyl alebo propyl a

3. ak n je 2 a R' je terc.butyl a obidva substituenty R sú -NO₂, nesmú byť tieto R skupiny v polohe 3 a 5.

Amidobenzamidy a nitrobenzamidy všeobecného vzorca (1), ktoré sú predovšetkým zaujímavé z hľadiska účinnosti, sú tieto: N-izo-propyl-4-nitrobenzamid (CPI 1026), N-terc.butyl-3-nitrobenzamid (CPI1034), N-terc.butyl-2-nitrobenzamid (CPI 1035), N-n-butyl-4-nitrobenzamid (CPI 1045), N-n-propyl-4-nitrobenzamid (CPI 1047), N-terc.butyl-3,5-dinitrobenzamid (CPI1049), N-l-metylpropyl-4-nitrobenzamid (CPI 1084), N-terc.butyl-4-aminobenzamid (CPI 1160), N-terc.butyl-3-aminobenzamid (CPI1248).

Medzi týmito aminobenzamidmi a nitrobenzamidmi sú nové zlúčeniny a v rozsahu vynálezu existujú ešte ďalšie nové zlúčeniny, ktoré slúžia ako medziprodukty na prípravu týchto látok a opísaných acetamidobenzamidov. Konkrétne ide o tieto nové aminobenzamidy a nitrobenzamidy: N-terc.amyl-4-nitrobenzamid (CPI 1033), N-1,2-dimetylpropyl-4-nitrobenzainid (CPI 1085), N-n-butyl-3-nitrobenzamid (CPI1135), N-n-pentyl-4-nitrobenzamid (CPI 1140), N-2-metyl-butyl-4-nitrobenzamid (CPI1146), N-n-butyl-3,5-dinitrobenzamid (CPI1147), N-metyl-cyklopropyl-4-nitrobenzamid (CPI1164), N-n-butyl-2-nitrobenzamid (CPI 1173), N-n-pentyl-2-nitrobenzamid (CPI 1174) a N-metylcyklopropyl-4-aminobenzamid (CPI 1240).

Ak benzamidové zlúčeniny obsahujú aminoskupinu, ako je to napríklad v prípade CPI1240, môže byť aminoskupina prítomná samotná alebo v podobe adičnej soli. V podobe soli je aminoskupina protónovaná na formu katiónu v kombinácii s farmaceutický prijateľným aniónom, ako chloridovým, bromidovým, jodidovým, hydroxylovým, nitrátovým, sulfonátovým, metylsulfonátovým, acetátovým, tartrátovým, oxalátovým, sukcinátovým alebo palmoátovým. Pokiaľ sa tu uvádzajú aminobenzamidy, rozumie sa pochopiteľne tento výraz tak, že môže ísť tiež o ich soli.

US patent číslo 5 472 983, citovaný skôr, uvádza niekoľko benzamidov použiteľných pri liečení neurodegeneratívnych ochorení založených na ich ochrannom pôsobení v MPTP myšacom modeli Parkinsonovej choroby. N-terc Butyl-4-acetamidobenzamid (CPI 1189) podľa tohto vynálezu je in vivo biotransformačným produktom jedného z týchto benzamidov (N-terc.butyl-4-nitrobenzamidu (CPI 1020)), ktorý bol nájdený v krvi krýs a myší, ktorým sa (CPI1020) podával orálne. Táto zlúčenina sa tvorí v organizme redukciou nitroderivátu (CPI1020) na aminoderivát (CPI1160) s následnou acetyláciou aminoskupiny.

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu, ktorých príkladom je CPI1189, sú oveľa účinnejšie ako CPI1020 (približne lOx účinnejšie) pri ochrane myší proti úbytku dopamínu v corpus striatum, indukovanú s. c. ošetrením MPTP. Vzhľadom na štrukturálnu podobnosť molekúl, ako je acetaminofén, ktorý obsahuje acetaminoskupinu, by mali byť i bezpečnejšie ako CPI 1020, pretože by sa nemali v tele metabolizovať na hydroxylamíny (ako by boli Ames pozitívne) ani by nemali mať za následok vznik metabolitov, pri ktorých by hrozilo kardiovaskulárne a/alebo anorektické pôsobenie.

Zloženie farmaceutických prostriedkov

Benzamidové zlúčeniny všeobecného vzorca (1) a (II), ktoré boli uvedené, sa formulujú do farmaceutických kompozícií, vhodných na orálne alebo iné vhodné aplikácie, na príklad parenterálne podávanie injekciami alebo intravenózne.

Vo farmaceutických kompozíciách je výhodné používať ako účinné zlúčeniny N-terc.butyl-4-acetamidobenzamid (CPL1189), N-terc.butyl-3-acctamidobenzamid (CPI1234), N-terc.amyl-4-acetamidobenzamid (CPI1233), N-terc.butyl-4-aminobenzamid (CPI1160), N-terc.butyl-3-nitrobenzamid(CPI1034) a N-terc.butyl-3-aminobenzamid (CPI1248), pričom CPI1189 je v tomto okamihu najvýhodnejší.

Kompozícia na orálne podávanie môže mať formu kvapalných roztokov alebo suspenzií, alebo hrubých práškov. Je pochopiteľne obvyklej šie používať kompozície vo forme jednotkovej dávky, aby sa dosiahlo presné dávkovanie. Typickou jednotkovou dávkovou formou je ampula naplnená presne odmeraným obsahom alebo injekčná striekačka s kvapalným roztokom alebo pilulky, tablety, kapsuly a podobne, v prípade pevných prostriedkov. V takýchto kompozíciách je zvyčajne benzamidová zlúčenina minoritnou zložkou (0,1 až asi 50 % hmotnostných alebo výhodne 1 až asi 40 % hmotnostných), pričom môže byť prítomné premenlivé množstvo rôznych nosičov a výrobných prísad na uľahčenie spracovania do požadovanej dávkovacej formy. Kvapalná látka môže obsahovať vhodné vodné alebo nevodné nosiče a pufre, suspendované v roztoku a ďalej dispergačné činidlá, farbivá, príchuti a podobne.

Pevná forma môže obsahovať napríklad akúkoľvek z nasledujúcich ingredicncií alebo zlúčenín podobného charakteru: spájadlo, ako je mikrokryštalická celulóza, guma, tragant alebo želatína, excipient, ako je škrob alebo laktóza, dezintegračné činidlo, ako je kyselina alginová, primogel alebo obilný škrob, mazivo, ako je stearát horečnatý, klznú prísadu, ako je koloidný oxid kremičitý, sladidlo, ako sacharózu alebo sacharín, alebo ochucovadlo, ako je výťažok z mäty, metylsalicylát alebo pomarančová príchuť.

V prípade injekčných kompozícií ide vo všeobecnosti o roztoky založené na fyziologickom roztoku na injekcie alebo fosfátom pufrovanom slanom roztoku, alebo o ďalšie injekčné nosiče, ktoré sú v odbore dobre známe. Opäť je tu zvyčajne účinný benzamid minoritnou zložkou, väčšinou v koncentrácii asi 0,05 až 10 % hmotnostných, pričom zvyšok tvorí injektovateľný nosný roztok a podobne. Kvapalnými materiálmi môžu byť pravé roztoky alebo suspenzie.

Tieto zložky kompozícií na orálne alebo injekčné podávanie sú iba reprezentatívne. Práve tak sa môžu použiť metódy a postupy, ktoré sú uvedené v časti 8 v „Remington's Pharmaceutical Sciences“, 17th Edition, 1985, Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania, ktoré sa týmto pridávajú k opisu formou odkazu.

Zlúčeniny podľa vynálezu sa môžu tiež podávať vo forme, ktorá pomaly vydáva účinnú látku. Opis reprezentatívnych materiálov tohto typu sa dá nájsť v publikácii „Remington’s Pharmaceutical Sciences“ citovanej skôr.

Liečené choroby a liečebný režim

Choroby, ktoré sa dajú liečiť farmaceutickými prostriedkami s obsahom benzamidu, sa vo všeobecnosti dajú označiť ako neurodegeneratívne choroby. Patria medzi ne také, ktoré charakterizuje protrahované mierne poškodzovanie centrálnej nervovej sústavy a gradujúca progresívna strata funkcií centrálnej nervovej sústavy. Medzi tieto ochorenia patrí Parkinsonova choroba, amyotropná laterálna skleróza, (ALS, „Lou Gehrig's Disease“), roztrúsená skleróza, Huntingtonova choroba, Alzheimerova choroba, diabetická retinopatia, demencia, makulárna degenerácia a podobne. Každá z týchto chorôb je charakterizovaná progre sívnou stratou funkcie centrálnej nervovej sústavy. Benzamidová zlúčenina, obsahujúca farmaceutické kompozície podľa vynálezu, ak sa podáva orálne alebo injekčné, ako napríklad intravenózne, môže spomaliť alebo oddialiť a dokonca v určitom rozsahu vrátiť pokles funkcií centrálnej nervovej sústavy.

Veľkosť injekčných dávok pri liečení týchto chorôb sa pohybuje v rozmedzí asi 0,1 mg/kg/hod. až aspoň 10 mg/kg/hod. počas od asi 1 do asi 120 hodín a predovšetkým 24 až 96 hodín. Na dosiahnutie vhodných úrovní sa môže tiež podať prvá dávka od asi 0,1 mg na kilogram do asi 10 mg na kilogram alebo i väčšia. Celková maximálna denná dávka sa neočakáva väčšia ako asi 2 g/deň pre 40 až 80 kg ťažkého pacienta (človeka).

Pretože sa pri liečení týchto chorôb podávanie dávok zvyčajne predĺži na čas presahujúci mnoho mesiacov alebo i rokov, je výhodnejšie pre pacientovo pohodlie a znášanlivosť, aby išlo o podávanie orálne. Pri orálnom podávaní je zvyčajné podávať jednu až päť, predovšetkým dve až štyri a najčastejšie tri orálne dávky denne. Použitím tohto dávkovacieho predpisu sa dosiahne možnosť použiť jednu dávku asi 1 až 20 mg/kg benzamidu, s výhodným dávkovaním od 1 do asi 10 mg/kg a predovšetkým asi 1 až 5 mg/kg.

Pochopiteľne, benzénová zlúčenina sa môže podávať ako samostatná účinná látka a môže sa podávať v kombinácii s inými činidlami vrátane iných účinných benzamidových zlúčenín.

Spôsoby prípravy zlúčenín

Benzamidové zlúčeniny podľa tohto vynálezu sa môžu pripraviť z bežne dostupných východiskových látok a ľahko uskutočniteľnými reakciami.

Jedným zo všeobecných spôsobov prípravy týchto zlúčenín, ktorý je ďalej ilustrovaný s terc.butylamínom, ale môže sa použiť pre akýkoľvek alkylamín. Táto metóda spočíva v nasledujúcich reakciách:

(X)

COX + NH,C(CS,), (HOl).

COHHC ( CH,),

III kde X je halogén, ako napríklad I, Br, F alebo Cl. (B) (11¾).

IV

CONHCtCHjJj (C)

III

H,

IV

COC1CH,

C(C3,h

V

V stupni (A) sa tvoria N-terc.butyl nitrobenzénamidy (III). Táto reakcia by sa mala uskutočňovať pri teplotách pod 10 °C.

Tento stupeň (A) predstavuje výrobu benzamidov všeobecného vzorca (III), ktoré patria do rozsahu zlúčenín podľa vynálezu, kde R je -NO₂.

V stupni (B) sa podrobujú benzamidy všeobecného vzorca (III) redukcii nitroskupiny alebo oboch nitroskupin.

To sa vo všeobecnosti uskutočňuje redukčným činidlom, ako je hydrazín a vhodný katalyzátor, ako je heterogénna platina, oxohydrid železitý, paládiový alebo niklový katalyzátor, zvyčajne na nosiči alebo plyn s obsahom vodíka a katalyzátor.

Tento stupeň (B) končí vznikom benzamidov IV, čo sú zlúčeniny podľa vynálezu, v ktorých R je -NH₂-.

V stupni (C) sa konvertujú aminobenzamidy IV na acetamidobenzamidy V reakciou s acetylhalogenidom, ako napríklad s acetylchloridom. Táto reakcia sa uskutočňuje v prítomnosti slabej zásady pri nízkej teplote, ako je -20 °C až +20 °C. Vznikajú zlúčeniny podľa vynálezu, v ktorých R je acetamidoskupina.

Modifikáciou schémy syntézy sa môže prísť k ďalším spôsobom prípravy zlúčenín podľa vynálezu. Príklady týchto alternatívnych ciest sú uvedené pri použití CPI1189 ako reprezentatívnej zlúčeniny. Pomocou tejto alternatívnej metódy sa dajú pripraviť i iné zlúčeniny, ak sa vychádza z vhodných východiskových látok, ako je 2- alebo 3-aminoalebo nitrobenzonitril, alebo 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4-, alebo 3,5-di-amino-, alebo dinitrobenzonitrilov a vhodných alkoholov (alternatívna cesta 1), alebo podobne substituovaných toluénových zlúčenín a vhodných alkylamínov (alternatívna cesta 3).

Alternatívna cesta 1

Táto cesta sa začína acetyláciou, napríklad 4-aminobenzonitrilu (A) na zlúčeninu (B) pomocou štandardných postupov. Kyslá hydrolýza terc.butanolu v prítomnosti 4-acetamidobenzonitrilu (B), je príkladom syntézy CPI1189 touto cestou:

/C 1^ CH,

HjO* HjC

I

H

Alternatívna cesta 2

Acetyláciou, s použitím štandardných spôsobov, sa dá lacno z východiskových lacných materiálov PABA (C) vyrobiť kyselina 4-acetamidobenzoová (D). Konverziou (D) na chlorid kyseliny (E) pomocou bežných metód (napríklad SOC1₂) a následnou amidáciou pomocou zvyčajných spôsobov, ako sú tie, ktoré boli doteraz opísané v predchádzajúcom texte, sa vyrobí CPI1189 z lacných surovín.

C o E

Alternatívna cesta 3

Ďalším spôsobom prípravy zlúčenín podľa vynálezu je postup, ktorý začína acetyláciou, ktorá sa uskutočňuje zvyčajnými metódami, napríklad paratoluidínov (F) na 4-acetamidotoluén (G). Syntetický medziprodukt (G) sa dá previesť na 4-acetamidobenzoovú kyselinu (D) pomocou bežných oxidačných činidiel (KMnO₄) a potom previesť na CPI1189, ako je naznačené v alternatívnej ceste 2.

F G D

Príklady uskutočnenia vynálezu

Vynález, bude ďalej opísaný pomocou nasledujúcich príkladov. Účelom týchto príkladov je iba ilustrovať niekoľko výhodných uskutočnení podľa vynálezu, ale nie sú mienené ako obmedzujúce rozsah vynálezu, ktorý je definovaný iba v pripojených patentových nárokoch. Príklady 1 až 19 demonštrujú prípravu acetamidobenzamidov, a zároveň nitro- a amidobenzamid, čo je príklad benzamidových zlúčenín, ktoré sa používajú v zmesiach a spôsoboch podľa tohto vynálezu. Príklady 20 až 24 demonštrujú prípravu farmaceutických prostriedkov založených na týchto zlúčeninách. Potom sa uvádzajú výsledky biologických testov, ktoré ilustrujú účinnosť zlúčenín podľa vynálezu.

Príklad 1

Príprava N-terc.butyl-4-aminobenzamidu (CPI1160)

Terc.butylamín (14,6 g, 0,200 mol) sa zmiešal v etylacetáte (150 ml, čistený premývaním 5 % roztokom uhličitanu sodného, nasýteným roztokom chloridu sodného, sušený nad bezvodým síranom horečnatým, a filtrovaný cez jemný filtračný papier) a ochladený na teplotu 5 °C na ľadovom kúpeli. 4-Nitro-benzoylchlorid (18,6 g, 0,100 mol) v čistenom etylacetáte (75 ml) sa potom po kvapkách pridal k tomuto roztoku, pričom teplota sa udržiavala pod 10 °C. Po pridaní celého množstva roztoku benzoylchloridu sa ľadový kúpeľ odstránil a reakčná zmes sa ešte miešala počas 4 hodín. Potom sa prefiltrovala na Biichnerovom lieviku, filtrát sa ešte trikrát premyl 5 % HC1, jedenkrát nasýteným roztokom chloridu sodného, vysušil sa nad bezvodým síranom horečnatým, prefiltroval cez jemný filtračný papier a rozpúšťadlo sa odstripovalo, pričom sa ako zvyšok získal biely kryštalický produkt. Produkt sa sušil vo vákuovej peci pri tlaku 24 mm a teplote 45 °C počas 14 hodín. Výsledkom postupu bolo 17,13 g kryštálov N-terc.butyl-4-nitrobenzamidu (CPI1020) (77 % výťažok), teplota topenia 162 až 163 °C. Protónová nukleárna magnetická rezonancia (89,55 MHz v CDC1₃) ukazuje absorbanciu pri 8,257 ppm (d, 8,8 Hz, 2H, 3,5-aryl H), 7,878 ppm (d, 8,8 Hz, 2H, 2,6-aryl H), 6,097 ppm (bs, 1H, N-H), 1,500 ppm (s, 9H, terc.butyl H).

Potom sa pridalo k CPI1020 (5 g, 22,5 mmol) v 95 % etanolu pri teplote 55 °C paládium (75 mg, 5 %) na uhlíkovom nosiči. Po kvapkách sa ďalej pridal roztok hydrazínu (1,2 ml) v 95 % etanolu (10 ml) a pridal sa ďalší podiel Pd/C (75 mg). Reakčná zmes sa refluxovala počas 3 hodín, pridal sa ďalší hydrazín (0,5 g) v 95 % etanole (5 ml) a reakčná zmes sa refluxovala počas ďalšej jednej hodiny. Potom sa prefiltrovala na Biichnerovom lieviku a podiel rozpúšťadla sa znížil vákuovým odparením a zmes sa extrahovala dichlórmetánom. Spojené extrakty sa sušili nad síranom horečnatým a rozpúšťadlo sa odparilo. Zvyšok predstavoval 3,9 g N-terc.butyl-4-aminobenzamidu (CPI1160) (90 % výťažok), teplota topenia 125 až 127 °C, 90 MHz protónová nukleárna magnetická rezonancia (v CDC1₃) ukazuje absorbanciu pri 7,290 ppm (2H, d, 8,8 Hz, 2,6 aryl H), 6,368 ppm (2H, d, 8,8 Hz, 3,5 aryl H), 5,54 ppm (1H, bs, NHC=O), 3,727 ppm (2H, bs, aryl-NH₂), 1,186 ppm (9H, s, terc.butyl H).

Príklad 2

Príprava N-terc.butyl-4-acetamidobenzamidu (CPI1189)

K zmesi CPI 1160 (1,0 g, 5,2 mmol), trietylamínu (0,58 g, 5,7 mmol) a etylacetátu sa po kvapkách pridal pri teplote 3 °C pridal acetylchlorid (0,45 g, 5,7 mmol v etylacetáte (25 ml) takou rýchlosťou, aby sa teplota udržala pod 10 °C. Reakčná zmes sa potom nechala zahriať na laboratórnu teplotu, miešala sa počas jednej hodiny a premyla sa 5 % HC1. Rekryštalizácia z acetónu poskytla 1,08 g N-terc.butyl-4-acetamidobenzamidu (CPI 1189) (89 % výťažok, teplota topenia 119 až 121 °C). Protónová nukleárna magnetická rezonancia pri 90 MHz (v DMSO-d₆) ukazuje absorbanciu pri 9,726 ppm (1H, bs, N-H), 7,715 ppm (4H, dd, 4,4 Hz, aryl H), 7,295 ppm (1H, bs, NH), 2,844 ppm (3H, s, CH₃CO), 1,448 ppm (9H, s, terc.butyl H).

Príklad 3

Príprava NPP-terc.butyl-3-nitrobenzamidu (CPI1034), N-terc.butyl-3-aminobenzamidu (CPI1248) a N-terc.butyl-3-acetamidobenzamidu (CPI1234)

Amidačný postup podľa príkladu 1 sa zopakoval s použitím 3-nitrobenzoylchloridu namiesto pôvodného 4-nitrobenzoylchloridu. Tým sa získal N-terc.butyl-3-nitrobenzamid (CPI1034) v 90 % výťažku, teplota topenia 123 až 125 °C. Protónová nukleárna magnetická rezonancia pri (v CDC1₃) ukázala absorbancie pri 8,517 ppm (2-aryl H, s, 1H), 8,337 ppm (4-aryl H, d, 8,8 Hz, 1H), 8,121 ppm (6-aryl H, d, 6,4 Hz, 1H), 7,618 ppm (5-aryl H, m, 1H), 6,032 ppm (N-H, bs, 1H), 1,484 ppm (terc.butyl H, s, 9H).

Oxochloridom železitým katalyzovanú redukciu hydrazinom sa získa N-terc.butyl-3-aminobenzamid (CPI1248) v 53 % výťažku. Teplota topenia 118 až 120 °C. Protónová nukleárna magnetická rezonancia (v CDC1₃) ukazuje absorbancie pri 7,088 ppm (4-6 aryl H, m, 3H), 6,794 ppm (2-aryl H, s, 1H), 5,902 ppm (N-H, bs, 1H), 3,145 ppm (aryl N-H, bs, 2H), 1,458 ppm (terc.butyl H, s, 9H).

Acetyláciou CPI1248, ako je opísaná v príklade 2, sa získa N-terc.butyl-3-acetamidobenzamid (CPI1234) v 70 % výťažku, teplota topenia 194 až 195 °C. Protónová nukleárna magnetická rezonancia pri (v CDC1₃) ukazuje absorbancie pri 7,778 ppm (4-6 aryl H, m, 3H), 7,392 ppm (2-aryl H, s, 1H), 6,08 ppm (N-H, bsm, 1H), 2,174 ppm (acetyl CH₃, s, 9H), 1,500 ppm (terc.butyl H, s, 9H).

Príklad 4

Príprava N-terc.butyl-2-nitrobenzamidu (CPI1O35) a N-terc.butyl-2-acetamidobenzamidu

Spôsob podľa príkladu 3 sa opakuje s použitím 2-nitrobenzoylchloridu v amidačnotn stupni. Tým sa získa N-terc.butyl-2-nitrobenzamid (CPI 1035).

Redukciou nitrobenzamidu hydrazinom sa získa N-terc. butyi-2-aminobenzamid.

Acetyláciou aminobenzamidu sa získa N-terc.butyl-2-acetamidobenzamid.

Príklad 5

Príprava N-izo-propyl-4-nitrobenzamidu (CPI 1026) a N-propyl-4-acetatnidobenzamidu (CPI1232)

Spôsob podľa príkladu 3 sa opakuje s použitím 4-nitrobenzoylchloridu a izopropylamínu v amidačnom stupni. Tým sa získa N-izo-propyl-4-nitrobenzamid (CPI 1026).

Redukciou nitrobenzamidu hydrazinom sa získa N-propyl-4-aminobenzamid.

Acetyláciou aminobenzamidu sa získa N-izopropyl-4-acetamidobenzamid (CPI 1232).

Príklad 6

Príprava N-terc.amyl-4-nitrobenzamidu (CPI1033) a N-terc.amyl-4-acetamidobenzamidu (CPI 1233)

Spôsob podľa príkladu 3 sa opakuje s použitím 4-nitrobenzoylchloridu v amidačnom stupni. Tým sa získa N-terc.amyl-4-nitrobenzamid (CPI 1033).

Redukciou nitrobenzamidu hydrazinom sa získa N-terc.amyl-4-aminobenzamid.

Acetyláciou aminobenzamidu sa získa N-terc.amyl-4-acetamidobenzamid (CPI1233).

Príklad 7

Príprava N-izobutyl-4-nitrobenzamidu

Spôsob podľa príkladu 3 sa opakuje s použitím 4-nitrobenzoylchloridu a izobutylamínu v amidačnom stupni. Tým sa získa N-izobutyl-4-nitrobenzamid (CPI 1044).

Redukciou nitrobenzamidu hydrazinom sa získa N-izobutyl-4-aminobenzamid.

Acetyláciou aminobenzamidu sa získa N-izobutyl-4-acetamidobenzamid.

Príklad 8

Príprava N-n-butyl-4-nitrobenzamidu (CPI1045) a N-n-butyl-4-acetamidobenzamidu

Spôsob podľa príkladu 3 sa opakuje s použitím 4-nitrobenzoylchloridu a n-butylamínu v amidačnom stupni. Tým sa získa N-n-butyl-4-nitrobenzamid (CPI 1045).

Redukciou nitrobenzamidu hydrazinom sa získa N-n-butyl-4-aminobenzamid.

Acetyláciou aminobenzamidu sa získa N-n-butyl-4-acetamidobenzamid.

Príklad 9

Príprava N-n-propyl-4-nitrobenzamidu (CPI 1047) a N-n-propyl-4-acetamidobenzamidu

Spôsob podľa príkladu 3 sa opakuje s použitím 4-nitrobenzoyichloridu a n-propylamínu v amidačnom stupni. Tým sa získa N-n-propyl-4-nitrobenzamid (CPI1047).

Redukciou nitrobenzamidu hydrazinom sa získa N-n-propyl-4-aminobenzamid.

Acetyláciou aminobenzamidu sa získa N-n-propyl-4-acetamidobenzamid.

Príklad 10

Príprava N-l,2-dimetylpropyl-4-nitrobenzamidu (CPI1085) a N-1,2-dimetylpropyl-4-acetamidobenzamidu

Spôsob podľa príkladu 3 sa opakuje s použitím 4-nitrobenzoylchloridu a 1,2-dimetylpropylamínu v amidačnom stupni. Tým sa získa N-l,2-diraetylpropyl-4-nitrobenzamid (CPI1O85).

Redukciou nitrobenzamidu hydrazínom sa získa N-1,2-dimetylpropyl-4-aminobenzamid.

Acetyláciou aminobenzamidu sa získa N-l,2-dimetylpropyl-4-acetamidobenzamid.

Príklad 11

Príprava N-n-pentyl-4-nitrobenzamidu (CPI 1040) a N-n-pentyl-4-acetamidobenzamidu

Spôsob podľa príkladu 3 sa opakuje s použitím 4-nitrobenzoylchloridu a n-pentylamínu v amidačnom stupni. Tým sa získa N-n-pentyl-4-nitrobenzamid (CPI1040).

Redukciou nitrobenzamidu hydrazínom sa získa N-n-pentyl-4-aminobenzamid.

Acetyláciou aminobenzamidu sa získa N-n-pentyl-4-acetamidobenzamid.

Príklad 12

Príprava N-2-metylbutyl-4-nitrobenzamidu (CPI1146) a N-2-metyl-butyl-4-acetamidobenzamidu

Spôsob podľa príkladu 3 sa opakuje s použitím 4-nitrobenzoylchloridu a 2-metylbutylamínu v amidačnom stupni. Tým sa získa N-2-metylbutyl-4-nitrobenzamid (CPI1146).

Redukciou nitrobenzamidu hydrazínom sa získa N-2-metylbutyl-4-aminobenzamid.

Acetyláciou aminobenzamidu sa získa Ν-2-metylbutyl-4-acetamidobenzamid.

Príklad 13

Príprava N-n-pentyl-2-nitrobenzamidu (CPI1174) a N-n-pentyl -2-acetamidobenzamidu

Spôsob podľa príkladu 3 sa opakuje s použitím 2-nitrobenzoylchloridu a n-pentylamínu v amidačnom stupni. Tým sa získa N-n-pentyl-2-nitrobenzamid (CPI 1174).

Redukciou nitrobenzamidu hydrazínom sa získa N-n-pentyl-2-aminobenzamid.

Acetyláciou aminobenzamidu sa získa N-n-pentyl-2-acetamidobenzamid.

Príklad 14

Príprava N-terc.butyl-2,3-diacetamidobenzamidu

Spôsob podľa príkladu 3 sa opakuje s použitím 2,3-dinitrobenzoylchloridu v amidačnom stupni. Tým sa získa N-terc.butyl-2,3-dinitrobenzamid.

Redukciou nitrobenzamidu hydrazínom sa získa N-terc.butyl-2,3-diaminobenzamid.

Acetyláciou aminobenzamidu sa získa N-terc.butyl-2,3-diacetamidobenzamid.

Príklad 15

Príprava N-terc.amyl-2,4-diacetamidobenzamidu

Spôsob podľa príkladu 3 sa zopakoval s použitím 2,4-dinitrobenzoylchloridu a terc.amylamínu v amidačnom stupni. Tým sa získa N-terc.amyl-2,4-dinitrobenzamid.

Redukciou nitrobenzamidu hydrazínom sa získa N-terc.amyl-2,4-diaminobenzamid.

Acetyláciou aminobenzamidu sa získa N-terc.amyl-2,4-diacetamidobenzamid.

Príklad 16

Príprava N-terc.butyl-2,5-diacetamidobenzamidu

Spôsob podľa príkladu 3 sa zopakoval s použitím 2,5-dinitrobenzoylchloridu v amidačnom stupni. Tým sa získa N-terc.-butyl-2,5-dinitrobenzamid.

Redukciou nitrobenzamidu hydrazínom sa získa N-terc.butyl-2,5-diaminobenzamid.

Acetyláciou aminobenzamidu sa získa N-terc.butyI-2,5-diacetamidobenzamid.

Príklad 17

Príprava N-terc.butj'l-2,6-diacetamidobenzamidu

Spôsob podľa príkladu 3 sa zopakoval s použitím 2,6-dinitrobenzoylchloridu v amidačnom stupni. Tým sa získa N-terc.butyl-2,6-dinitrobenzamid.

Redukciou nitrobenzamidu hydrazínom sa získa Nterc.butyl-2,6-diaminobenzamid.

Acetyláciou aminobenzamidu sa získa N-terc.butyl-2,6-diacetamidobenzamid.

Príklad 18

Príprava N-terc.butyl-3,4-diacetamidobenzamidu

Spôsob podľa príkladu 3 sa zopakoval s použitím 3,4-dinitrobenzoylchloridu v amidačnom stupni. Tým sa získa N-terc.butyl-3,4-dinitrobenzamid.

Redukciou nitrobenzamidu hydrazínom sa získa N-terc.butyl-3,4-diaminobenzamid.

Acetyláciou aminobenzamidu sa získa N-terc.butyl-3,4-diacetamidobenzamid.

Príklad 19

Príprava N-terc.butyl-3,5-diacetamidobenzamidu

Spôsob podľa príkladu 3 sa zopakoval s použitím 3,5-dinitrobenzoylchloridu v amidačnom stupni. Tým sa získa N-terc.butyl-3,5-dinitrobenzamid.

Redukciou nitrobenzamidu hydrazínom sa získa N-terc.butyl-3,5-diaminobenzamid.

Acetyláciou aminobenzamidu sa získa N-terc.butyl-3,5-diacetamidobenzamid.

Príprava farmaceutických prostriedkov

Príklad 20

Zlúčenina podľa príkladu 1 sa zmieša vo forme suchého prášku so suchým želatínovým spojivom v približne hmotnostnom pomere 1 : 2. K tejto zmesi sa pridá malé množstvo stearátu horečnatého ako mazadla. Zmes sa vytvaruje v tabletovacom lise do 240 až 270 miligramových tabliet (v každej tablete je obsiahnutých 80 až 90 miligramov účinného benzamidu). Ak sa tieto tablety podávajú pacientovi trpiacemu neurodegeneratívnou poruchou spojenou s dopamínom denne, 2-krát denne alebo 3-krát denne, môže prísť k spomaleniu rozvoja pacientovho ochorenia.

Príklad 21

Zlúčenina podľa príkladu 2 sa vo forme suchého prášku zmieša so škrobovým spojivom v približnom pomere 1 : 1 hmotnostné. Zmes sa plní do 250 miligramových kapsúl (1 kapsula obsahuje 125 mg účinného benzamidu). Ak sa tieto kapsuly podávajú pacientovi trpiacemu neurodegeneratívnou poruchou spojenou s dopamínom denne, 2-krát denne alebo 3-krát denne, môže prísť k spomaleniu rozvoja pacientovho ochorenia.

Príklad 22

Zlúčenina podľa príkladu 3 sa rozmieša v osladenom ochutenom vodnom roztoku na koncentráciu približne 50 mg/ml. Ak sa 5 ml dávky podávajú pacientovi trpiacemu neurodegeneratívnou chorobou spojenou s dopamínom denne, 2-krát denne alebo 3-krát denne, môže prísť k zlepšeniu pacientovho stavu.

Príklad 23

Zlúčenina podľa príkladu 14 sa vo forme suchého prášku zmieša so suchým želatínovým nosičom v približne hmotnostnom pomere 1 : 2. Ako mazadlo sa pridá malé množstvo stearátu horečnatého. Zmes sa tvaruje do 450 až 900 miligramových tabliet (v jednej tablete je obsiahnutých 150 až 300 mg účinného benzamidu) v tabletovacom lise. Ak sa tieto tablety podávajú pacientovi trpiacemu neurodegeneratívnou chorobou spojenou s dopamínom denne, 2-krát denne alebo 3-krát denne, môže prísť k zlepšeniu pacientovho stavu.

Príklad 24

Zlúčenina podľa príkladu 14 sa rozpustí v pufrovanej sterilnej soľanke s koncentráciou vhodnou na injekčné roztoky, pričom koncentrácia zlúčeniny podľa príkladu 14 je asi 5 mg/ml. Ak sa tieto tablety podávajú pacientovi trpiacemu neurodegeneratívnym ochorením, ako je Parkinsonova choroba, denne, 2-krát denne alebo 3-krát denne, môže prísť k zlepšeniu pacientovho stavu.

Ak sa to požaduje, môže sa v týchto formuláciách použiť ktorákoľvek zo zlúčenín všeobecného vzorca (I) a ktorákoľvek z týchto formulácií sa môže podávať akýmkoľvek z týchto spôsobov tak, aby sa liečili neurodegeneratívne ochorenia uvedené v tomto opise.

Metódy modelovania Parkinsonovej choroby Testy úbytku dopamínu (MPTP Model)

Myš C57BL/6J sa predbežne ošetrila buď vehikulom (1 % mctylcelulóza) alebo účinnou látkou (p. o.) 30 minút pred MPTP. MPTP sa rozpustilo vo fyziologickom roztoku (0,9 %) a podalo subkutánne ako jedna dávka 15 mg voľnej zásady/kilogram telesnej hmotnosti, aby sa znížila koncentrácia dopamínu v corpus striatum na asi 0,5 nanomólov/mg proteínu. Skupinám myší (n = 8 až 10 v skupine) sa podalo jednak vehikulum + fyziologický roztok, a ďalej vehikulum + MPTP alebo liečivo + MPTP. Po 72 hodinách po podaní MPTP sa myši usmrtili a ich corpus striatum sa podrobilo homogenizácii v 0,4 N kyseliny peroxochlorovodikovej, homogenizát sa odstredil a koncentrácia dopamínu v supematante sa stanovila vysokoúčinnou kvapalinovou chromatografiou s elektrochemickou detekciou (HPLC/ED). Supematanty sa pred analýzou skladovali pri teplote -90 °C,

Podávané účinné látky sa kombinovali s metylcelulózou a homogenizovali sa vo vode na účely dávkovania. Dávkovací pomer sa pohyboval od 10 do 50 mg/kg pre CPI1160, CP11896 a CPI1234 a od 50 do 100 mg/kg pre CP11020.

Výsledky reprezentatívnych experimentov sú uvedené v tabuľkách 1 a 2. Výsledky v tabuľke 1 ukazujú, že kompozície podľa vynálezu, reprezentované látkami CPIU60, CPI1189 a CP01234, boli účinné pri prevencii zníženia dopamínu spôsobeného podaním MPTP.

Tabuľka 1

Účinnosť CPI1189, CPI1160 a CPI1234 pri dávkach 30 mg/kg pri 15 mg/kg MPTP modeli

Zlúčenina	Dopamín/ng proteínu ŕ S.E.M.	% kontroly bez MPTP
netylcelulóza	0,72 t 0,05	54,1
CPI1160	1,25 t 0,05	93,9
CPI1234	1,02 i 0,05	76,7
netylcelulóza	0,56 i 0,07	36,4
CPII189	1,37 ± 0,14	89,7

Na účely porovnania boli uskutočnené rovnaké testy s kompozíciami na báze CPI1020, veľmi podobné benzamidovej zlúčenine. Výsledky sú uvedené v tabuľke 2. Pri 50 mg/kg CPI1189 poskytuje úplnú ochranu pred neurotoxickým vplyvom MPTP (105 % kontroly), zatiaľ čo CPI1020 nebola účinná (56 % kontroly).

Tabuľka 2

Porovnanie účinnosti CPI1189 a CPI1020 pri 50 mg/kg pri mg/kg MPTP modeli

Zlúčenina	Dopanín (ns/mg) Test. zlúč.	i S.B.M. étandard*	% ochrany
CFI1020	0,58 i 0,14	1,035 ± 0,099	56
CPI11S9	1,57 ± 0,21	1,536 ± 0,178	105

* porovnávací pokus so saaotnou netylcslulózou

Tento testovací postup sa zopakoval s ďalšími látkami podľa vynálezu. Výsledky týchto testov sú uvedené v tabuľke 3, pričom schopnosť ochrany majú i iné benzamidy podľa vynálezu.

Tabuľka 3

Ochranná účinnosť benzamidov pri MPTP modelovom teste zníženia úrovne dopamínu

Testovaná slúčenina	t ochrany
1160	94
1232	70
1233	40
1234	77
1241	40

Testy dlhodobej ochrannej účinnosti

Na stanovenie dlhodobého účinku zlúčenín podľa vynálezu na znižovanie dopamínu boli uskutočnené ďalšie testy. Postupom podľa všeobecného testu opísaného skôr bola ošetrená myš C57BL/6J jednak samotným vehikulom a ďalej testovanou zlúčeninou MPTP, pričom následne sa analyzovala po 3 alebo 14 dňoch od dávkovania. Výsledky sú uvedené v tabuľke 4.

Tabuľka 4

Účinnosť CP11189 pri MPTP modeli - vplyv času uplynutého od ošetrenia na koncentráciu dopamínu v corpus striatum rozomletej CPI1189 (veľkosť častíc > 106 μ) sa ráno v deň uskutočňovania pokusu pripravila 1 % metylcelulózová suspenzia. Pri teste CPI1189 sa podávala orálne v dávkach s objemom 0,0005 ml/g pomocou ihly s veľkosťou 3,0 x 18. Zvieratá sa uspali a chirurgicky sa im intrastriatálnou injekciou (iba z pravej strany) podal 6-hydroxydopamín alebo fyziologický roztok. Zvieratá sa po jednom týždni po podaní 6-hydroxydopamínu usmrtili.

Ihneď po usmrtení sa zvieratám odobralo tkanivo z corpus striatum a podrobilo analýze HPLC/EC na obsah proteínu pomocou bicinchoninického testu, ktorého výsledky sú uvedené v tabuľke 5.

Tabuľka 5

Výsledky testu ako % kontroly pre samotné pravé corpus striatum, do ktorého sa podala injekciou dávka 6-hydroxydopamínu

ošetrenie	% kontroly
Metylcelulóza/6-hydroxydopamin 100 ag/k? CPH189/6-hydroxydopamín 50 ag/kg CPI1189/6-hydroxydopaLjnín	69,67 ± 7,65 77,61 ± 13,5 72,82 ± 8,32

Ošetrenia	1 v porovnaní s netylcelulózovou alebo soíankovou kontrolou
Metylcelulóza/MPTP (3 dni)	67,5
CPI1189/MPTP (3 dni)	100
Metylcalulúzft/MPTP (14 dní)	75,8
CPI1189/MPTP (14 dni)	96,7

Tieto výsledky uvedených experimentov ukazujú, že CPI1189 je schopná ochrániť proti MPTP indukovanému úbytku dopamínu pri zvieratách tak počas 3 dní od podania MPTP, ako i počas 14 dní po podaní MPTP. To ukazuje, že CPI1189 má ochranný účinok lepší ako transientný účinok na dopamínový metabolizmus.

Testy úbytku dopamínu (6-hydroxydopamínový model)

Bola testovaná zlúčenina CPI1189 s cieľom zistiť jej schopnosti chrániť proti 6-hydroxydopamínom indukovanému poškodeniu. Tento široko uznávaný model Parkinsonovej choroby, pri ktorom sa predpokladá, že 6-hydroxydopamin má toxické účinky, ktoré spočívajú vo vyvolaní oxidačného stresu. 6-Hydroxydopamín sa v rozsiahlej miere používal už od šesťdesiatych rokov ako neurotoxín. Pretože 6-hydroxydopamín primárne pôsobí na katecholamincrgické neuróny, bol prednostne používaný pri experimentálnych štúdiách Parkinsonovej choroby. Táto látka sa už v rozsiahlej miere používala ako liečivo unilaterálnych lézii v nigrostriatálnom systéme. Pokusné zvieratá, ktorým sa tento toxín podával, prejavujú biochemické alterácia a alterácie v spôsobe správania, ktoré sa dajú merať a testovať tým farmakologicky závažnosť lézii a tým stanoviť účinok prípadného liečebného postupu.

Stanovovala sa reakcia na ochrannú dávku CPI1189, ktorá sa podávala pokusnému zvieraťu s indukovaným poškodením 6-hydroxydopamínom nigrostriatálneho systému.

Použili sa aklimatizované samce krýs plemena Spraque Dawley vo veku 55 až 122 dní. Pre ranný experiment sa pripravil 6-hydroxydopamín (Research Biochemicals Incorporated) v 0,9 roztoku NaCl obsahujúcom prísadu 0,1 mg/ml kyseliny askorbovej.

Výsledky týchto experimentov ukazujú, že CPI1189 je schopná chrániť pred 6-hydroxydopamínom indukovaným úbytkom dopamínu.

Testy účinnosti proti Alzheimerovej chorobe - Testuje sa účinok bcnzamidov na tvorbu Αβ(1-40) β-pokrytých vrstiev:

Detekcia agregácie amyloidov v roztoku pomocou Thioflavin T fluorescenčného spektra

Na zistenie aktivity zlúčenín ako prostriedkov na liečenie Alzheimerovej choroby bolo vyvinutých niekoľko testov. Jeden z týchto testov je založený na pozorovaní, ktoré ukázalo, že u pacientov trpiacich Alzheimerovou chorobou sa prejavujú nezvyčajné úrovne agregácie amyloidov.

Thioflavin T (ThT) rýchle asociuje s β zvrásnenými vrstvami, predovšetkým v agregovaných vláknach syntetickej Αβ(1-40), pričom prejavuje nové excitačné maximum pri 440 nm a zvýšenú emisiu pri 490 nm. Podľa tohto princípu môžu mať terapeutický účinok tie látky, ktoré sú schopné oddialiť alebo zvrátiť toto zhlukovanie.

Pokusy sa uskutočňovali na 96 doštičkách s priehlbinami a fluorescenčné zmeny sa hodnotili pomocou vyhodnocovacieho zariadenia CytoFluor II. Do každej priehlbiny sa umiestnilo 95 μ ThT (3 μΐ) pripravenej v PBS (pH 6,0), 2 μΐ NRT (10 μΐ) pripravený v 0,05 % metylcelulózy v PVS (pH 6) a 23 μΐ Αβ(1-40) (3 pg) pripravenej z destilovanej vody. Meranie fluorescencie sa začalo po pridaní Αβ(1 -40) a pokračovalo počas 4 hodín, pri ktorých sa dosiahla agregácia vrstvy, percentuálny rozsah ochrany P pokrytej vrstvy sa vyhodnotil z relatívnej hodnoty fluorescencie v porovnaní s agregáciou v prítomnosti a pri absencii testovanej zlúčeniny. Výsledky sú uvedené v nasledujúcej tabuľke 6.

Tabuľka 6

Benzamidová aktivita proti Alzheimerovej chorobe

Zlúčenina	t ochrany
1189	48,3 t 10,1
1033	31,7 ± 3,5
1026	14,4 t 14,4

Vplyv benzamidov na ochranu proti amyloidu β(25-35) alebo glutamátom indukovanú stratu meranú na bunkovej kultúre neurónov/astrocytov z hippocampu embryí krýs

Na stanovenie aktivity proti Alzheimerovej chorobe sa uskutočnili ďalšie testy. Embryám plemena krýs Spraque Dawley vo veku 18 dní sa odobrali tkanivá hippocampu a tieto tkanivá sa potom disociovali triturovaním na účely prípravy kultúry neurónových astrocytov. Bunky (3 x 10⁵) sa umiestnili na 35 mm poly-D-lyzínom potiahnuté doštičky obsahujúce Eaglovu minimálnu živnú pôdu doplnenú 10 % fetálneho hovädzieho séra. Po 3 až 5 hodinách sa pôvodná pôda odstránila a nahradila jedným mililitrom čerstvej pôdy. Kultúry sa udržiavali pri teplote 37 °C na vzduchu s obsahom 5 % oxidu uhličitého a s vlhkosťou 95 %.

Podmienky pre Αβ(25-35) indukované neurónové testy toxicity 35 Pm Αβ(25-35) rozpustené v destilovanej vode sa pridalo k bunkám (7 DIV) v prítomnosti alebo bez prítomnosti 10 pm benzamidu pripraveného v 1 % metylcelulóze počas 96 hodín.

Podmienky pre glutamátora indukované testy neuronálnej toxicity: počas 48 hodín sa pridával glutamát k bunkám (9 DIV) v prítomnosti alebo bez prítomnosti benzamidu.

Prežitie nervových buniek je vyjadrené ako percento morfologicky živých neurónov po 48- alebo 96-hodinovom ošetrovaní v porovnaní s celkovým počtom neurónov pred ošetrovaním, v rovnakej vopred označenej oblasti bunkovej kultúry (tri oblasti na jednu kultúru (n = 6)). Výsledky sú uvedené v tabuľke 7, kde sú vyjadrené ako priemer ± S. E. M. a porovnané s kontrolou.

Tabuľka 7

Účinnosť benzamidov pri teste straty nervových buniek

Zlúčenina t ochrany λβ (25-35)

B ochrany glutan&t

123323

12349

124110

113516

11408

114650

117336

124023

1026

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Benzamidová zlúčenina všeobecného vzorca (I) (R).

CONHť

R'je nasýtený alkyl s 3 až 5 atómami uhlíka, každé R je nezávislé a znamená -NHCOCH₃, -NO₂ alebo

-NH_Z anjel alebo 2 s nasledujúcimi podmienkami, že

1. ak n je 1 a R je -NO₂ v polohe 4, R' nesmie byť terc-butyl, izobutyl alebo propyl,
2. ak n je 1 a R je -NO₂ v polohe 2, R' nesmie byť izobutyl alebo propyl a
3. ak n je 2 a R' je terc-butyl a obidva substituenty R sú -NO₂, nesmú byť tieto R skupiny v polohách 3 a 5,
4. ak n je 1, R je -NHCOCH₃ a R' je n-butyl alebo n-propyl, potom R nesmie byť v polohe 2,
5. ak n je 1 a R je -NHCOCH₃, R nesmie byť v polohe 3,
6. ak n je 2 a R je -NHCOCH₃, skupiny R nesmú byť v polohách 3 a 5.

2. Zlúčenina podľa nároku 1, kde R znamená -NHCOCH₃, R'je nasýtený alkyl s 3 až 5 atómami uhlíka a n je 1 alebo 2 s nasledujúcimi podmienkami, že

1. aknjelaR'je n-butyl alebo n-propyl, potom R nesmie byť v polohe 2,

2. ak n je 1, R nesmie byť v polohe 3,

3. ak n je 2, skupiny R nesmú byť v polohách 3 a 5.

3. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je N-/erc-butyl-4-acetamidobenzamid.

4. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je N-izopropyl-4-acetamidobenzamid.

5. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je N-terc-amyl-4-acetamidobenzamid.

6. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je N-metylcyklopropyl-4-acetamidobenzamid.
7. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je nitro- alebo amino-benzamidová zlúčenina vybraná zo skupiny zahrnujúcej N-/erc-amyl-4-nitrobenzamid, N-l,2-dimetylpropylnitrobenzamid, N-n-butyl-3-nitrobenzamid, N-n-pentyl-4-nitrobcnzamid, N-2-metylbutyl-4-nitrobenzamid, N-n-butyl-3,5-dinitrobenzamid, N-metylcyklopropyl-4-nitrobenzamid, N-n-butyl-2-nitro-benzamid, N-n-pentyl-2-nitrobenzamid a N-metylcyklopropyl-4-aminobenzamid.
8. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je N-terc-amyl-4-nitrobenzamid.
9. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je N-l,2-dimetylpropylnitrobenzamid.
10. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je N-n-butyl-3-nitrobenzamid.
11. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je N-n-pentyl-4-nitrobenzamid.
12. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je Ν-2-metylbutyl-4-nitrobenzamid.
13. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je N-n-butyl-3,5-dinitrobenzamid.
14. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je N-metylcyklopropyl-4-nitrobenzamid.
15. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je N-n-butyl-2-nitrobenzamid.
16. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je N-n-pentyl-2-nitrobenzamid.
17. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je N-metylcyklopropyl-4-aminobenzamid.
18. Spôsob prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, kde R znamená -NHCOCH₃, R’ je nasýtený alkyl s 3 až 5 atómami uhlíka a n je 1 alebo 2, v y z n ä í u j ú c i sa tým, že zahrnuje nasledujúce stupne:

a) kondenzáciu nasýteného alkylamínu s 3 až 5 atómami uhlíka s nitrobenzoylhalogenidom všeobecného vzorca v ktorom (i), ®-COX’ v ktorom n je 1 alebo 2 a X je halogén, ako je I, Br, F alebo Cl, čím sa získa

b) redukciu NO₂ skupín v (III) na NH₂ skupiny a

c) acetyláciu NH₂ na NHCOCH₃ skupiny.
19. Spôsob prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, kde R znamená -NO₂, R' je nasýtený alkyl s 3 až 5 atómami uhlíka a n je 1 alebo 2, vyznačujúci sa tým, že zahrnuje nasledujúce stupne: kondenzáciu nasýteného alkylamínu s 3 až 5 atómami uhlíka s nitrobenzoylhalogenidom všeobecného vzorca v ktorom n je 1 alebo 2 a X je halogén, ako je I, Br, F alebo Cl, čím sa získa
20. Spôsob prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, kde R znamená -NH₂, R' je nasýtený alkyl s 3 až 5 atómami uhlíka a n je 1 alebo 2, vyznačujúci sa tým, že zahrnuje nasledujúce stupne:

a) kondenzáciu nasýteného alkylamínu s 3 až 5 atómami uhlíka s nitrobenzoylhalogenidom všeobecného vzorca @-COX , v ktorom nje 1 alebo 2 a X je halogén, ako je 1, Br, F alebo Cl, čím sa získa onhr* (III),

b) redukciu NO₂ skupín v (III) na NH₂ skupiny.
21. Farmaceutická kompozícia, vyznačujúca sa t ý m , že obsahuje benzamidovú zlúčeninu podľa nároku 1 vo farmaceutický prijateľnom nosiči.
22. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 21, v y značujúca sa tým, že benzamidovou zlúčeninou je acetamidobenzamid všeobecného vzorca (NHCOCHj)

CONHR* v ktorom

R' znamená nasýtený alkyl s 3 až 5 atómami uhlíka a nje 1 alebo 2.
23. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 22, v y značujúca sa tým, že n je 1.
24. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 22, v y značujúca sa tým, že R'je ŕerc-butyl.
25. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 22, v y značujúca sa tým, že R'je /erc-amyl.
26. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 22, v y značujúca sa tým, že benzamidovou zlúčeninou je N-ferc-butyl-4-acetamidobenzamid.
27. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 22, v y značujúca sa tým, že benzamidovou zlúčeninou je N-izopropyl-4-acetamidobenzamid.
28. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 22, v y značujúca sa tým, že benzamidovou zlúčeninou je N-/erc-amyl-4-acetamidobenzamid.
29. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 22, v y značujúca sa tým, že benzamidovou zlúčeninou je N-terc-butyl-3-acetamidobenzamid.
30. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 22, v y značujúca sa tým, že benzamidovou zlúčeninou je N-metylcyklopropyl-4-acetamidobenzamid.
31. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 21, v y značujúca sa tým, že R'je nasýtený alkyl s 3 až 5 atómami uhlíka, každé R je nezávislé a znamená -NO₂alebo -NH₂ a n je 1 alebo 2 s nasledujúcimi podmienkami, že

1. ak n je 1 a R je -NO₂ v polohe 4, R' nesmie byť íerc-butyl, izobutyl alebo propyl,

2. ak n je 1 a R je -NO₂ v polohe 2, R' nesmie byť izobutyl alebo propyl a

3. ak n je 2 a R' je terc-butyl a obidva substituenty R sú -NO₂, nesmú byť tieto R skupiny v polohách 3 a 5.
32. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 31, v y značujúca sa tým, že R znamená -NH₂.
33. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 31, v y značujúca sa tým, že R znamená -NO₂.
34. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 31, v y značujúca sa tým, že benzamidovou zlúčeninou je N-izopropyl-4-nitrobenzamid.
35. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 31, v y značujúca sa tým, že benzamidovou zlúčeninou je N-íerc-butyl-3-nitrobenzamid.
36. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 31, v y značujúca sa tým, že benzamidovou zlúčeninou je N-/erc-butyl-2-nitrobenzamid.
37. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 31, v y značujúca sa tým, že benzamnidovou zlúčeninou je N-n-butyl-4-nitrobenzamid.
38. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 31, v y značujúca sa tým, že benzamidovou zlúčeninou je N-n-propyl-4-nitrobenzamid.
39. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 31, v y značujúca sa tým, že benzamidovou zlúčeninou je N-íerc-butyl-3,5-di-nitrobenzamid.
40. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 31, v y značujúca sa tým, že benzamidovou zlúčeninou je N-1 -metylpropyl-4-nitrobenzamid.
41. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 31, v y značujúca sa tým, že benzamidovou zlúčeninou je N-Zerc-butyl-4-aminobenzamid.
42. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 31, v y značujúca sa tým, že benzamidovou zlúčeninou jc N-terc-butyl-3-aminobenzamid.
43. Farmaceutická kompozícia podľa nároku 21, v y značujúca sa tým, že je v orálnej forme.