CZ309897A3

CZ309897A3 - Benzenamidy pro léčení neurodegenerativních onemocnění

Info

Publication number: CZ309897A3
Application number: CZ973098A
Authority: CZ
Inventors: William D. Flitter; William A. Garland; Allan L. Wilcox; Richard E. Paylor
Original assignee: Centaur Pharmaceuticals, Inc.
Priority date: 1995-04-03
Filing date: 1996-04-03
Publication date: 1998-12-16
Also published as: CO4700431A1; EE9700235A; DE69613567D1; AU721045B2; JP3479658B2; PL184121B1; TW381073B; YU21096A; CN1073552C; IS1919B; EP0819113B1; EE03437B1; ATE202552T1; GR3036466T3; IL117629A; EA002031B1; DZ2012A1; HUP9801759A2; KR100429120B1; HRP960156B1

Description

(57) Anotace:

Popsány jsou farmaceutické kompozice obsahující jako účinnou složku sloučeninu vzorce

1, kde R je nasycený alkyl se třemi až pěti uhlíkovými atomy, každé R je nezávislé a znamená -NHCOCH3, -NO2 nebo -NH₂ a n je 1 nebo

2. Některé z těchto sloučenin jsou nové. Je také popsán způsob jejich přípravy a jejich použití při výrobě léčiv pro léčení nemocí, při kterých dochází k progresivní ztrátě funkce centrální nervové soustavy, jako je Parkinsonova nenoc nebo Alzheimerova nemoc.

• · · · · · • ·

Benzenamidy pro

3ϋ léčení neurodegenerativních onemocnění

Oblast techniky

Vynález se týká benzamidových sloučenin, farmaceutických kompozic obsahujících tyto sloučeniny a jejich přípravy a použití k léčení nebo ochraně proti neurodegenerativním onemocněním.

Dosavadní stav techniky

Neurodegenerativní onemocnění je širší termín, do něhož patří soubor vážných onemocnění nervové soustavy včetně Parkinsonovy nemoci, amyotrofické laterální sklerózy (ALS, Lou Gehrig's disease), roztroušená skleróza, Huntingtonova nemoc, Alzheimerova nemoc, diabetická retinopatie, demence, makulární degenerace apod. Pro tyto nemoci je charakteristické postupné^ale nevratné zhoršování pacientova stavu v závislosti na čase. Mechanismy a příčiny těchto nemocí se stávají v současné době lépe srozumitelnými a byly navrženy četné způsoby jejich léčení. Jedna z takových neurodegenerativních nemocí, Parkinsonova nemoc, je spojena s abnormálním úbytkem dopaminu v určitých oblastech mozku.

Sumarizace současného stavu techniky, co se týče pochopení mechanismu Parkinsonovy nemoci, byla provedena Marsdenem, C.D. v Review Article-Parkinson's Disease Lancet (April 21.1990) str. 948 až 952 a Calne, D.B. v Treatment of Parkinson's Disease NEJM (Sept. 30.1993) 329: str. 1021 až 1027. Jak se uvádí v tomto odkazu, nedostatek dopaminu byl identifikován jako klíčová vlastnost Parkino^ovy nemoci a destrukce dopaminergické nigrostriatální cesty vedle úbytku dopaminu u pacientů trpících Parkinsonovou nemocí.

Rychlý vývoj parkinsonovských příznaků u malé populace • · ·· · · · ·· ···« • · ·· · ···· _ η _ ·· ·········· ·· · · * ··· ···· · ·· ··· ·· ·· narkomanů San Jose v Kalifornii byl způsoben stopovými množstvími toxických nečistot v doma vyráběných drogách. Následný výzkum na zvířecích modelech, včetně opic, ukázal, že příčinou parkinsonovských příznaků u těchto narkomanů byl l-methyl-4-fenyl-l,2,5,6-tetrahydropyridin (MPTP), což je uvedeno v publikaci J.W. Langston et al., Chronic Parkinsonism in Humans Due to a Product of Meperidine-Analog Synthesis Science (February 25.1983) 219:979 až 980. Tato první zjištění a četné další studie ukázaly, že tato látka stimuluje tvorbu látek, které vyvolávají Parkinsonovu nemoc, což je dále uvedeno podrobně v Heikkila, R.E., et al., Dopaminergic Neurotoxicity of l-methyl-4-phenyl-l,2,5,6Tetrahydropyridine in Mice Science (June 29, 1984) 224:1451 až 1453, Burns, R.S., et al., v A Primáte Model of Parkinsonism... Proč.Nati.Acad.Sci USA (1983) 80:4546 až 4550, Singer, T.P.., et al., Biochemical Events in the Development of Parkinsonism... J. Neurochem. (1987) 1-8, a Gerlach, M. et al., MPTP Mechanisms of Neurotoxicity a the Implications for Parkinson's Disease European Journal of Pharmacology (1991) 208:273 až 286. Tyto odkazy a další popsané studie pomáhají vysvětlit mechanismus₍ jak podávání MPTP zvířatům vytváří příčinu potíží charakteristických pro Parkinsonovu nemoc. Tyto testy jasně ukazují, že MPTP byl příčinou příznaků Parkinsonovy nemoci, které se vyvinuly u lidí, kteří užívali nezákonně drogy a dále ukazují, že podobné chemické příčiny byl^, nalezeny u jiných primátů i u dalších testovaných zvířat, kterým byl přímo podáván MPTP. Autoři dále uvádějí, že podávání MPTP vyvolává u testovaných jedinců výrazné snížení koncentrace dopaminu.

Tato zjištění vedla k vývoji testu pro účinné látky při léčení neurodegenerativních onemocnění spojených s dopaminemj jako je například Parkinsonova nemoc. V tomto testu se podává pokusným zvířatům v určitém množství MPTP, aby došlo k určitému poměrnému poklesu jejich koncentrace • · · · dopaminu. Testované sloučeniny se pak při tomto testu rozlišují podle toho,zda jsou při podání ošetřeným zvířatům schopny zabránit poklesu koncentrace dopaminu u testovaných zvířat. Rozsah koncentrací dopaminu, na kterém se při tom hodnota udržuje, je měřítkem pro posouzení sloučeniny z hlediska účinnosti pro zpomalení nebo zabránění průběhu neurodegenerativní nemoci, např. Parkinsonově nemoci.

Dalším testem na účinnost látky při léčení neurodegenerativních nemocí spojených s dopaminem je zkouška, při které se do striata testovaných zvířat injekčně podá neurotoxin 6-hydroxydopamin. Tato látka snižuje hladinu dopaminu a je mimořádně vhodná pro vytvoření modelu pro tyto testy. Testované látky se při něm podávají pokusným zvířatům takovým způsobem, aby se zjistilo, zda jsou schopny zastavit nebo snížit pokles hladiny dopaminu. Opět se účinnost látky posuzuje podle schopnosti udržet určité hladiny dopaminu.

Funkce mitochondrií je dalším znakem, který je spojen s mnoha neurodegenerativními nemocemi, jako je ALS,

Huntingtonova nemoc, Alzheimerova nemoc, cerebelární degenerace a stárnutí jako takové (Beal, M.D. v Mitochondrial ť*

Dysfunction and Oxydative Damage in Neurodegenerataive Diseases, R.G. Landes Publications Austin. TX. 1995 at, např. str. 53 až 61 a 73 až 99). Mitochondriální poškození je mechanismem, ^kterým MPTP snižuje koncentrace dopaminu v striatu (Mizuno, Y., Moři, Η., Kondo, T. v Potential of Neuroprotective Therapy in Parkinson's Disease CNS Drugs (1994) 1:45-46).

bylo shora uvedeno_tvyplývá, že činidlo, mitochondriální dysfunkcí způsobenou MPTP,

Z toho,co které chrání před

Ϋ a· by mohl být užitečný' při léčení nemocí centrálního nervového systému, u kterých je příčinou mitochondriální dysfunkce.

·· ···· · · • · · · ·

Pro stanovení účinnosti látek při léčení dalších neurodegenerativních onemocnění jsou také dostupné modelové experimenty. Tak například účinnost sloučenin proti Alzheimerově nemoci se dá stanovit testováním buněčné kultury. Dva z těchto testů jsou založeny na tom, že se u sloučenin hodnotí schopnost chránit proti amyloidu β (25-35)! nebo proti glutamátem indukované ztrátě nervovích buněk a provádí se^buněčné kultuře nervových astrocytů hyppocampu krysích embrijí. V jiném testu jsou sloučeniny hodnoceny podle schopnosti vyvolat v amyloidu β(1—40) vznik beta vrstvy. Sloučeniny, které mají tento účinek se dají považovat za potencionálně vhodné pro léčení Alzheimerovy nemoci.

Přestože jsou známy další benzamidové sloučeniny, jejich užitečnost pro shora uvedený účel spočíval^dosud obecně pouze v tom, že byly meziprodukty při chemických syntézách^nebo byly používány v oblastech, které nesouvisejí s tímto vynálezem. Nepatrné změny ve struktuře mají za následek velké změny v účinnosti a toxicitě. Většina benzamidových sloučenin má při namátkovém testování ve shora uvedeném smyslu malou nebo nulovou aktivitu. Nicméně byly popsány u některých strukturně odlišných benzamidů zmíněné biologické aktivity. Jde o tyto publikace:

El Tayar et al., Interaction of neuroleptic drugs with rat striatal D-l and D-2 dopamine receptors: a quantitative structure - affinity relationship study Eur.J.Med.Chem. (1988) 23:173-182,

Monkovič et al., gastrointestinal prokinetic substituted benzamides Eur.J

Potential non-dopaminergic agents in the series of

Med.Chem. (1989) 24:233-240,

Banasik et al. Specific inhibitors of póly(ADP-ribosyl)transferase and mono(ADP-ribosyl) transferase J.Biol Chem. (1992) 267:1569-1575,

Bishop et al., Synthesis and in vitro evaluation of 2.3-dimethoxy-5-(fluoroalkyl)-substituted benzamides:

high-affinity ligands for CNS dopamine D₂ receptors J.Med. Chem. (1991) 34:1612-1624,

Hogberg et al., Potential antipsychotic agents.9. Synthesis and stereoselective dopamine D-2 receptor blockade of a potent class of substituted (R)-N-/benzyl-2-pyrrolidinyl)methyl/ benzamides. Relations to toher side Chain congeners J.Med.Chem. (1991) 34:948-955,

Katopodis et al., Novel substrates and inhibitors of peptidylglycine α-amidating monooxygenase Biochemistry (1990)299:4541-4548, a

Rainnie et al., Adenosine inhibition of mesopontine cholinergic neurons: implications for EEG arousal Science (1994) 263:689-690.

Jiné benzamid obsahující farmaceutické kompozice a jejich použití k léčení nebo prevenci neurodegenerativních nemocí jsou popsány v US 5 472 983.

Podstata vynálezu

Byly objeveny farmaceutické kompozice založené na benzamidu, které mají účinnosti proti neurodegenerativním chorobám. Tyto kompozice obsahují jako účinnou složku ve farmaceuticky přijatelném nosiči jednu nebo více látek ze skupiny zahrnující acetamidobenzamidovou, aminobenzamidovou nebo nitrobenzamidovou sloučeninu obecného vzorce I.

• · · ·

9 • · · · • · · · • ·

(R)« ^-CONHR' (i) , ve kterém:

R' je nasycený alkyl se třemi až pěti uhlíkovými atomy, každé R je nezávislé a znamená-NH-CO-CH₃, NO₂ nebo -NH₂ a n je 1 nebo 2 s následujícími podmínkami:

1) jestliže n je 1 a R je -NO₂ v poloze 4, R' nesmí být terc.butyl, butyl nebo propyl,

2) jestliže n je 1 a R je -NO₂ v poloze 2, R' nesmí být butyl nebo propyl a

3) jestliže n je 2 a R' je terc.butyl a oba substituenty R jsou -N0₂, nesmí být tyto R skupiny v poloze 3 a 5.

Nosičem je výhodně orální nosič, ale lze též použít injekční nosič. Tyto farmaceutické kompozice mohou být v práškové formě ale spíše se předpokládá jednotková dávkovači forma.

Ve výhodném provedení farmaceutické kompozice obsahují jednu nebo více acetamidobenzamidových sloučenin vzorce II. Tyto kompozice vykazují účinnost proti Parkinsonově nemoci, což bylo potvrzeno jejich schopností zabránit snížení hladin dopaminu vyvolanému MPTP a 6-hydroxydopaminem.

onhr'

·· ··· · • ·

» · • ftft ve vzorci 2:

R' je rovný , větvený nebo cyklický nasycený alkyl se 3-5 uhlíkovými atomy a n je 1 nebo 2.

Některé z benzamidových sloučenin, používané ve zde uvedených kompozicích, jsou známými sloučeninami, zatímco jiné jsou nové. Tyto nové sloučeniny stejně jako některé další nové nitrobenzamidy a aminobenzamidy, které jsou užitečné jako chemické meziprodukty při přípravě účinných látek, představují také součást tohoto vynálezu.

Tyto acetaminobenzamidy vzorce 2, ve kterých R' je rovný , větvený nebo cyklický nasycený alkyl se 3-5 uhlíkovými atomy a n je 1 nebo 2 ale pod podmínkou, že, pokud n je 1 a R' je n-butyl nebo n-propyl, acetamidoskupina nesmí být v poloze 2 a dále pod podmínkou, že když n je 1, acetamidoskupina nesmí být v poloze 3 a dále pod podmínkou, že když n je 2, acetamidoskupina nesmí být v polohách 3 a 5, představují jako takové součást vynálezu.

Následující nitro-a aminobenzamidy jsou jako sloučeniny také součástí tohoto vynálezu:

N-terc.amyl-4-nitrobenzamid (CPI1033), N-l,2-dimethylpropy1nitrobenzamid (CPI1085), N-n-butyl-3-nitrobenzamid (CPI1135), N-n-pentyl-4-nitrobenzamid (CPI1040), N-2-methylbutyl-4nitrobenzamid (CPI1146), N-n-butyl-3,5-dinitrobenzamid (CPI1147), N-methylcyklopropyl-4-nitrobenzamid (CPI1164), N-n-butyl-2-nitrobenzamid (CPI1173), N-n-pentyl-2-nitrobenzamid (CPI1174) a N-methylcyklopropyl-4-aminobenzamid (CPI1240). (CPI...čísla, která jsou uvedena za názvem každé sloučeniny a která jsou v průběhu celého tohoto popisu používána, představují vlastní indentifikační čísla přihlašovatele. Jsou zde použita proto, aby se zjednodušila • ·· · ·· • · · · » · · · · · · • φ · · · · · · · • · · · · ······· • · · · · · · · ···· · ·· ··· ·· ·· prezentace dat v příkladech.)

Podle dalšího aspektu vynálezu se řeší způsob léčení pacienta, který trpí neurodegenerativním onemocněním, a to zejména takovou, která je spojena s účinky dopaminu. Tento způsob zahrnuje podávání efektivního množství jednoho nebo více farmaceutických prostředků o složení podle zde popsaných kompozic.

Dalším aspektem vynálezu je způsob léčení pacienta, trpícího potížemi, pro které je charakteristická progresivní ztráta funkce centrální nervové soustavy. Tento způsob spočívá v podávání účinného množství jedné nebo více farmaceutických kompozic právě popsaných.

Podle nejvýznamnějšího aspektu vynálezu se řeší způsob léčení pacienta, který trpí progresivní ztrátou funkce centrální nervové soustavy, spojené s Parkinsonovou nemocí.

Tento způsob spočívá v podávání (výhodně orálně) účinného množství jedné nebo více farmaceutických kompozic zde 4 _x popsaných, pacientoyj^s progresivní ztrátou funkce nervove soustavy.

Podle dalšího aspektu vynálezu se řeší způsob léčení pacienta, který trpí potížemi, charakterizovanými progresivní ztrátou funkce nervové soustavy v důsledku mitochondriální dysfunkce. Tento způsob spočívá v tom, že se pacientovi se ztrátou funkce centrální nervové soustavy, podává jedno nebo více farmaceutických kompozic, které jsou zde popsány.

Podle dalšího aspektu tohoto vynálezu se řeší způsob přípravy sloučením vzorců I a II. Tyto způsoby obecně spočívají v kondenzaci alkylaminu o 3 až 5 uhlíkových atomech s mono- nebo dinitrobenzoylhalogenidem, který má konfiguraci nitroskupiny odpovídající nitro, amino nebo acetamido ·· aaaa aa a aaaa aaaa a a a a · a a a · a a * a a a a aaaa a a a aaa aaa aaaa a aa ··· aa ♦· substituentů, která se požaduje u konečných sloučenin, popřípadě následné redukci nitroskupin a popřípadě následné přeměně aminobenzamidů na acetamidobenzamidy reakcí s acetylhalogenidem.

Podrobný popis vynálezu

Benzamidy

V tomto vynálezu se využívají určité acetamidobenzamidy, aminobenzamidy a nitrobenzamidy jako aktivní farmaceutická činidla. Acetamidobenzamidy jsou specifikovány vzorcem I, kde R je acetamidoskupina a vzorcem II. V těchto vzorcích znamená R' nasycený alkyl se 3 až 5 uhlíkovými atomy a n je 1 nebo 2.

Acetamidoskupina (nebo skupina kruhu libovolně. Výhodné provedení je acetamidoskupina je v poloze 2, 3 nebo acetamidoskupiny jsou v polohách 2 a 3, a 4, nebo 3 a 5.

může být umístěna na takové, kdy n je 1 a 4 a jestliže n je 2 a 2a4, 2a5, 2a 6, 3

Pokud jde o alkylsubstituenty, R' u výhodných provedení je alkyl, který nemá vodík na alfa uhlíku, tedy uhlík s vazbami k dusíku, jenž je součástí kruhu. Příklady takovýchto výhodných R' skupin jsou terc.butyl a terc.amyl.

Acetamidobenzamidy vzorce I, zajímavé, jsou:

které jsou zejména

N-terc.butyl-4-acetamidobenzamid (CPI1189), N-propyl-4-acetamidobenzamid (CPI1232), N-terc.amyl-4-acetamidobenzamid (CPI1233),

N-terc.butyl-3-acetamidobenzamid (CPI1234) a N-methyl-cyklopropyl-4-acetamidobenzamid (CPI1241).

0000

000 0

N-terc.butyl-4-acetamidobenzamid (CPI1189) je nej výhodněj ším acetamidobenzamidem.

Mezi těmito sloučeninami acetamidobenzamidového typu je mnoho nových sloučenin. Konkrétně se jedná o acetamidobenzamidy vzorce I (pokud R je acetamido) a vzorce II kde n je 1 nebo 2 a R' je nasycený alkyl o 3 až 5 uhlíkových atomech pod podmínkou, že, pokud nje 1 a R' je n-butyl nebo n-propyl, acetamídoskupina nesmí být v poloze 2 a dále pod podmínkou, že když n je 1, acetamídoskupina nesmí být v poloze 3 a dále pod podmínkou, že když n je 2, acetamídoskupina nesmí být v polohách 3 a 5. Opět je třeba považovat pět shora citovaných acetamidobenzamidů za výhodné, přičemž CPI1189je nejvýhodnější.

Aminobenzamidy a nitrobenzamidy, které jsou používány podle vynálezu jako aktivní látky, jsou specifikovány vzorcem I, kde R je amino nebo nitroskupina. V těchto vzorcích R' je nasycený alkyl o 3 až 5 uhlíkových atomech a n je 1 nebo 2, přičemž platí tytéž údaje o výhodnosti substituentů a jejich poloh, na které bylo odkazováno u acetamidobenzamidů a dále pod podmínkami, že

1) jestliže n je 1 a R' je -NO₂ v poloze 4, R nesmí být terc.butyl, butyl nebo propyl,

2) jestliže n je 1 a R' je N0₂v poloze 2, R' nesmí být butyl nebo propyl a

Amidobenzamidy a nitrobenzamidy vzorce I, které jsou zejména zajímavé z hlediska účinnosti, jsou tyto:

N-propyl-4-nitrobenzamid (CPI1026)

N-terc.butyl-3-nitrobenzamid (CPI1034)

000000 · · 0 00 00 ffff · ffff ffff ffff·· • ff 00 0 0000

0 00 0 0 0 000« 0 0 0 000 00 0 0000 0 00 000 00 0·

N-terc.butyl-2-nitrobenzamid (CPI1035)

N-n-butyl-4-nitrobenzamid (CPI1045)

N-n-propyl-4-nitrobenzamid (CPI1047)

N-terc.butyl-3,5-dinitrobenzamid (CPI1049)

N-l-methylpropyl-4-nitrobenzamid (CPI1084)

N-terc.butyl-4-aminobenzamid (CPI1160)

N-terc.butyl-3-aminobenzamid (CPI1248)

Mezi těmito aminobenzamidy a nitrobenzamidy jsou nové sloučeniny a v rozsahu vynálezu existují další nové sloučeniny, které slouží jako meziprodukty pro přípravu těchto látek a shora popsaných acetamidobenzamidů. Konkrétně jde o tyto nové amidobenzamidy a nitrobenzamidy:

N-terc.amyl-4-nitrobenzamid (CPI1033)

N-l,2-dimethylpropyl-4-nitrobenzamid (CPI1085) N-n-butyl-3-nitrobenzamid (CPI1135) N-n-pentyl-4-nitrobenzamid (CPI1140) N-2-methyl-butyl-4-nitrobenzamid (CPI1146) N-n-butyl-3,5-dinitrobenzamid (CPI1147) N-methyl-cyklopropyl-4-nitrobenzamid (CPI1164) N-n-butyl-2-nitrobenzamid (CPI1173) N-n-pentyl-2-nitrobenzamid (CPI174) a N-methyl-cyklopropyl-4-aminobenzamid (CPI1240)

Pokud benzamidové sloučeniny obsahují aminoskupinu, jako je tomu např. v případě CPI1240, může být aminoskupina přítomna jako taková nebo v podobě adiční soli. V podobě soli je aminoskupina protonována na formu kationtů farmaceuticky přijatelným aniontem, jako bromidovým, jodidovým hydroxylovým, nitrátovým, sulfonátovým, methylsulfonátovým, acetátovým, tartrátovým, oxalátovým, sukcinátovým nebo palmoátovým. Pokud se uvádějí tuto aminobenzamidy, rozumí se pochopitelně tento výraz tak, že může jít také o jejich soli.

v kombinaci s chloridovým, ·····« · · * ·· ·» • · · · · ·· · » · · • * · · · 9 9 44

4 4 9 9 9 4 4444 4 · ··· · · ·

4444 4 44 444 44 49

US patent č. 5472983, citovaný shora, uvádí několik benzamidů použitelných při léčení neurodegenerativních nemocí založeném na jejich ochranném působení v MPTP myším modelu Parkinsonovy nemoci. N-terc.butyl-4-acetamidobenzamid (CPI1189) podle tohoto vynálezu je in vivo biotransformačním produktem jednoho z těchto benzamidů (N-terc.butyl-4-nitrobenzamidu (CPI1020)), který byl nalezen v krvi krys a myší, kterým byl (CPI1020) podáván orálně. Tato sloučenina se tvoří v organismu redukcí nitroderivátu (CPI1020), na aminoderivát (CPI1160) s následnou acetylaci aminoskupiny.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu, jejichž příkladem je CPI1189, jsou mnohem účinnější než CPI1020 (přibližně lOx účinnější) při ochraně myší proti úbytku dopaminu ve striatu, indukovanou s.c. ošetřením MPTP. Vzhledem k strukturální podobnosti molekul jako je acetaminofen, který obsahuje acetamidoskupinu, by měly být i bezpečnější než CPI1020, protože by se neměly v těle metabolizovat na hydroxylaminy (jako by byly Ames positivní) ani by neměly mít za následek vznik metabolitů, u kterých by hrozilo kardiovaskulární a/nebo anorektické působení.

Složení farmaceutických prostředků

Benzamidové sloučeniny vzorců I a II, které byly zmíněny shora, se formulují do farmaceutických kompozic, vhodných pro orální či jiné vhodné aplikace např. parenterální podávání injekcemi nebo intravenózní.

Ve farmaceutických kompozicích je výhodné používat jako účinné sloučeniny N-terc.butyl-4-acetamidobenzamid (CPI1189), N-terc.butyl-3-acetamidobenzamid (CPI1234), N-terc.amyl-4-acetamidobenzamid (CPI1233), N-terc.butyl-4·« ··· ·

·· · · • · · · aminobenzamid (CPI1160), N-terc.butyl-3-nitrobenzamid (CPI1034) a N-terc.butyl-3-aminobenzamid (CPI1248), přičemž CPI1189 je v tomto okamžiku nejvýhodnější.

Kompozice pro orální podávání může mít formu kapalných roztoků nebo suspenzí nebo hrubých prášků. Je pochopitelně obvyklejší používat kompozice ve formě jednotkové dávky aby se dosáhlo přesného dávkování. Typickou jednotkovou dávkovou formou je ampule naplněná přesně změřeným obsahem nebo injekční stříkačka s kapalným roztokem nebo pilulky, tablety, kapsle apod. v případě pevných prostředků. V takových kompozicích je obvykle benzamidová sloučenina minoritní složkou (0,1 až řekněme 50 % hmotnostních nebo výhodně 1 až asi 40 % hmotnostních) přičemž může být přítomno proměnlivé množství různých nosičů a výrobních přísad pro usnadnění zpracování do požadované dávkovači formy. Kapalná forma může obsahovat vhodné vodné nebo nevodné nosiče a pufry, suspendované v roztoku a dále dispergační činidla, barviva, příchutě apod.

Pevná forma může obsahovat např. jakýkoli z následujících ingredientů nebo sloučenin podobného charakteru: pojivo jako je mikrokrystalická celulóza, guma, tragacanth nebo želatinu, excipient jako je škrob nebo laktoza, dezintegrační činidlo jako je kyselina alginová, primogel nebo obilný škrob mazadlo jako je stearát hořečnatý, kluznou přísadu jako je koloidní oxid křemičitý, sladidlo jako sacharozu nebo sacharin nebo ochucovadlo jako je mátový výtažek, methylsalicylát nebo pomerančovou příchuť.

V případě injekčních kompozic se jedná obecně o roztoky založené na fyziologickém roztoku pro injekce nebo fosfátem pufrovaném slaném roztoku nebo o další injekční nosiče, které jsou v oboru dobře známy. Opět je zde obvykle účinný benzaraid minoritní složkou, většinou v koncentraci asi

- 14 999*99 9 · 9 ·· 9 9

9 9 · · ·· 9 · * 9

9 9 · · 9 · 9 · • 9 9 9 9 « 9 9999 9

9 999 999 • 999 9 99 99« 99 ·9

0,05 až 10 % hmotnostních přičemž zbytek tvoří injektovatelný nosný roztok apod. Kapalné materiály mohou být pravé roztoky nebo supense.

Tyto komponenty kompozic orální nebo injekční podávání jsou pouze reprezentativní. Zrovna tak je možno použít technik a postupů, které jsou uvedeny v části 8 v Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th edition, 1985, Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania, které se tímto přidávají k popisu formou odkazu.

Sloučeniny podle vynálezu lze také podávat ve formě, která pomalu vydává účinnou látku. Popis reprezentativních materiálů tohoto typu lze nanést ve shora citované publikaci Remington's Pharmaceutical Sciences.

Léčené nemoci a léčebny režim

Nemoci, které lze léčit farmaceutickými prostředky s obsahem benzamidu lze označit obecně jako neurodegenerativní nemoci. Patří mezi ně takové, které charakterizuje protrahované mírné poškozování centrální nervové soustavy a gradující progresivní ztráta funkcí centrální nervové soustavy. Mezi tyto nemoci patří Parkinsonova nemoc, amyotropní laterální skleróza (ALS, lou Gehrigs disease), roztroušená skleróza, Huntingtonova nemoc, Alzheimerova nemoc, diabetická retinopatie, demence, makulární degenerace apod. Každá z těchto chorob je charakterizována progresivní ztrátou funkce centrální nervové soustavy. Benzamidová sloučenina, obsahující farmaceutické kompozice podle vynálezu, pokud je podána orálně nebo injekčně jako např. intravenózně, může zpomalit nebo odložit a snad dokonce v určitém rozsahu zvrátit pokles funkcí centrální nervové soustavy.

·· · » · · • ·

- 15 • · · ·· « » · · ♦ · · · · · · · • · · · · · · · · · · • « · · · · ·

Velikost injekčních dávek při léčení těchto chorob se pohybuje v rozmezí asi 0,1 mg/kg/hodina až alespoň 10 mg/kg/hodina po dobu od asi 1 do asi 120 hodin a zejména 24 až 96 hodin. Pro dosažení vhodných úrovní se může také podat první dávka od asi 0,1 mg na kilogram do asi 10 mg na kilogram nebo i větší. Celková maximální dávka se neočekává větší než asi 2 g/den pro 40 až 80 kg těžkého pacienta (člověka).

Jelikož se při léčení těchto chorob podávání dávek obvykle protáhne na dobu přesahující mnoho měsíců nebo i let, je výhodnější pro pacientovo pohodlí a snášitelnost, aby se jednalo o podávání orální. Při orálním podávání je obvyklé podávat jednu až pět, zejména dvě až čtyři a nejběžněji tři orální dávky denně. Použitím tohoto dávkovacího předpisu se dosáhne možnosti použít jednu dávku asi 1 až 20 mg/kg benzamidu, s výhodným dávkováním od 1 do asi 10 mg/kg a zejména asi 1 až asi 5 mg/kg.

Pochopitelně lze podávat benzenovou sloučeninu jako samostatnou aktivní látku a lze ji podávat v kombinaci s jinými činidly, včetně jiných účinných benzamidových sloučenin.

Způsoby přípravy sloučenin

Benzamidové sloučeniny podle tohoto vynálezu je možno připravit z obecně dostupných výchozích látek a snadno proveditelnými reakcemi.

Jednou z obecných cest přípravy těchto sloučenin, která je dále ilustrována s terč.butylaminem, ale je možno ji použít pro jakýkoli alkylamin. Tato metoda spočívá v následujících reakcích:

·· ···· ·« • ·

9 ·

• · • ·

- 16 (A) (N0,)_a

NH,C(CH₃)₃ kde X je halogen j ako např. I, (B)

H,

III (NH,), <Oh^c

IV (C) • * • · • · ···« · ·· · · • · 9 9

9 99

9 9 9

9 9

99 (NO,) „

I

III

Br, F nebo Cl.

ONHC(CH₃) '3> 3

IV

COC1CH, (NHCOCHjJfl <2>- CQNHC(CHj)₃

Ve stupni (A) se tvoří N-terč.butyl nitrobenzenamidy (III). Tato reakce by měla být prováděna při teplotách pod 10°C.

Tento stupeň (A) představuje výrobu benzamidů III, které patří do rozsahu sloučenin podle vynálezu, kde R je -no₂.

Ve stupni (B) se podrobují benzamidy III redukci nitroskupiny nebo obou nitroskupin. To se obecně provádí • · · » · • · • · « ·

- 17 • ·· 4# ·· · · « ft • · · ·♦ • * ·*·· · • · · · ··· ·4 ·· redukčním činidlem jako je hydrazin a vhodný katalyzátor, jako je heterogenní platina, oxohydroxid železitý, paladiový nebo niklový katalyzátor, obvykle na nosiči nebo plyn s obsahem vodíku a katalyzátor.

Tento stupeň (B) končí vznikem benzamidů IV, což jsou sloučeniny podle vynálezu, v nichž R je NH₂.

Ve stupni (C) se se převádějí aminobenzamidy dohromady IV na acetamidobenzamidy V reakcí s acetylhalogenidem jako např. s acetylchloridem. Tato reakce se provádí za přítomnosti slabé báze při nízké teplotě jako je -20°C až + 20°C. Vznikají sloučeniny podle vynálezu v nichž R je acetamidoskupina.

Obměnou schématu syntézy se může dojít k dalším cestám přípravy sloučenin podle vynálezu. Příklady těchto alternativních cest jsou uvedeny u použití CPI1189 jako reprezentativní sloučeniny. Pomocí této alternativní metody se dají připravit i jiné sloučeniny, pokud se vychází z vhodných výchozích látek, jako je 2- nebo 3- amino- nebo nitrobenzonitril nebo 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- nebo 3,5diamino- nebo dinitro- benzonitrilů a vhodných alkoholů

(alternativní	cesta	1) nebo	podobně	substituovaných
toluenových cesta 3).	sloučenin	a vhodných	alkylaminů	(alternativní
Alternativní	cesta 1
Tato	cesta	začíná	acetylací, např.

4-aminobenzonitrilu (A) na sloučeninu (B) pomocí standardních postupů. Kyselá hydrolýza terč.butanolu v přítomnosti 4-acetamidobenzonitrilu (B), je příkladem syntézy CPI1189 touto cestou:

φ φ φφφφ φ φ φ φ • · φ · φ φ φ φ

- 18 φφφφ φ

.......— y

HaO’

HoC

Ν'

I

Η

Alternativní cesta 2

Acetylací, s použitím standardních způsobů, se dá levně z výchozích levných materiálů PABA (C) vyrobit kyselina 4-acetamidobenzoová (D). Konverzí (D) na chlorid kyseliny (E) pomocí obvyklých metod (např. SOCI-) a následnou amidací pomocí obvyklých způsobů, jako jsou ty, které byly popsány v předešlém textu, se vyrobí CPI1189 z levných surovin.

CPITJS9

Alternativní cesta 3

Dalším způsobem pro přípravu sloučenin podle vynálezu je postup, který začíná acetylací, která se provádí obvyklými metodami, např. paratoluidinů (F) na 4-acetamidotoluen (G). Syntetický meziprodukt (G) se dá převést na 4-acetamidobenzoovou kyselinu (D) pomocí běžných oxidačních činidel (KMnO₄) a poté přeměnit na CPI1189 jak je naznačeno v alternativní cestě 2.

• · • ·

Η Η

F G D

Příklady

Vynález bude dále popsán pomocí následujících příkladů. Tyto příklady mají za účel pouze ilustrovat několik výhodných provedení podle vynálezu, ale nejsou míněny jako omezující pro rozsah vynálezu, který je definován pouze v připojených patentových nárocích. Příklady 1 až 19 demonstrují přípravu acetamidobenzamidů, a zároveň nitro- a amidobenzamidů, což je příklad benzamidových sloučenin, které jsou používány ve směsích a způsobech podle tohoto vynálezu. Příklady 20 až 24 demonstrují přípravu farmaceutických prostředků založených na těchto sloučeninách. Poté se uvádějí výsledky biologických testů, které ilustrují účinnost sloučenin podle vynálezu.

Příklad 1

Příprava N-terc.butyl-4-aminobenzamldu (CPI1160)

Terč.butyl amin (14,6 g, 0,200 molu) byl míchán v ethylacetátu (150 ml, čištěný promýváním 5% roztokem nasyceným roztokem chloridu sodného, síranem hořečnatým, a filtrovaný přes jemný filtrační papír) a ochlazen na 5°C na ledové lázni.4-nitrobenzoylchlorid (18,6 g, 0,100 molu) v čištěném ethylacetátu (75 ml) byl poté po kapkách přidáván k tomuto uhličitanu sodného, sušený nad bezvodým • · · · roztoku přičemž teplota byla udržována pod 10°C. Po přidání veškerého množství roztoku benzoylchloridu byla ledová lázeň odstraněna a reakční směs byla ještě míchána 4 hodiny. Poté byla zfiltrována na Búchnerově nálevce, filtrát byl třikrát promyt 5% HCI, jednou nasyceným roztokem chloridu sodného, vysušen na bezvodým síranem hořečnatým, zfiltrován přes jemný filtrační papír, a rozpouštědlo bylo odstripováno, načež zbytkem byl bílý krystalický produkt. Produkt byl sušen ve vakuové peci při 24 mm a 45°C po dobu 14 hodin. Výsledkem postupu bylo 17,13 g krystalů N-terc.butyl-4-nitrobenzamidu (CPI1020) (77 % výtěžek) t.t 162 až 163 °C. Protonová nukleární magnetická resonance (89,55 MHz v CDC1₃) ukazuje absorpci při 8,257 ppm (d, 8,8 Hz, 2H, 3,5-aryl Η), 7,878 ppm

(d,	8,8 Hz,	2H,	2,6-aryl	H), 6,097	ppm	(bs, 1H,	N-H) ,	1.500
ppm	(s, 9H,	terč	.butyl H)	•
	Poté	bylo	přidáno	k CPI1020	(5	gr, 22,5	mmol)	v 95%

ethanolu při 55°C paládium (75 mg, 5 %) na uhlíkovém nosiči. Po kapkách byl dále přidán roztok hydrazinu (1,2 ml) v 95% ethanolu (10 ml) a byl přidán další podíl Pd/C (75 mg). Reakční směs byla refluxována 3 hodiny, byl přidán hydrazin (0,5 g) v 95% ethanolu (5 ml) a reakční směs byla refluxována další hodinu. Poté byla zfiltrována na Búchnerově nálevce, a podíl rozpouštědla byl snížen vakuovým odpařením a směs byla extrahována dichlormethanem. Spojené extrakty byly sušeny nad síranem hořečnatým a rozpouštědlo bylo odpařeno. Zbytek představoval 3,90 g N-terc.butyl-4-aminobenzamidu CPI1160 (90% výtěžek) t.t 125 až 127°C, 90 MHz protonová nukleární magnetická resonance (v CDC1₃) ukazuje absorbanci při 7,290 ppm ((2H, d, 8,8 Hz, 2,6 aryl Η), 6,368 ppm (2H, d, 8,8 Hz, 3,5 aryl Η), 5,45 ppm (1 H, bs, NHC=O), 3,727 ppm (2H, bs, aryl-NH₂), 1,186 ppm (9H, s, t-butyl H).

• · • ·

- 21 • ·

Příklad 2

Příprava N-terc.butyl-4-acetamidobenzamidu CPI1189

K směsi CPI1160 (1,0 g, 5,2 mmol) triethylaminu (0,58 g, 5,7 mmol) a ethylacetátu byl po kapkách přidán při 3°C takovou rychlostí, aby se teplota udržela pod 10°C, acetylchlorid (0,45 g, 5,7 mmol) ethylacetátu (25 ml). Reakční směs se pak nechala ohřát na pokojovou teplotu, byla míchána jednu hodinu a promyta 5% HCI. Rekrystalizace z acetonu poskytla 1,08 g N-terc.butyl-4-acetamidobenzamidu (CPI1189) (89% výtěžek, teplota tání 119 až 121°C. Protonová nukleární magnetická rezonance při 90 MHz (v DMSO-d6) ukazuje absorbance při 9,726 ppm (IH, bs, N-H), 7,715 ppm (4H, dd, 4,4 Hz, aryl Η), 7,295 ppm (1 H, bs, NH), 2,844 ppm (3H, s, CH₃CO), 1,448 ppm (9H, s, t-butyl H).

Příklad 3

Příprava NPP-terc.butyl-3-nltrobenzamidu (CPI1034)

N-terc.butyl-3-aminobenzamidu (CPI1248) a

N-terc butyl-3-acetamidobenzamidu (CPI1234)

Amidační postup podle Příkladu 1 byl zopakován z použitím 3-nitrobenzoylchloridu místo původního 4-nitrobenzoylchloridu. Tím byl získán N-terc.butyl-3-nitrobenzamid (CPI1034) v 90% výtěžku, teplota tání 123 až 125°C. Protonová nukleární magnetická rezonance (v CDC1₃) ukázala absorbance při 8,517 ppm (2-aryl H, s, IH), 8,337 ppm (4-aryl H, d, 8,8 Hz, IH), 8,121 ppm (6-aryl H, d, 6,4 Hz, IH), 7,618 pp, (5-aryl H, m, IH), 6,032 ppm (N-H, bs, IH), 1,484 ppm (t.butyl H, s, 9 H).

Oxochloridem železitým katalyzovanou redukcí • β • · hydrazinem se získá N-terc.butyl-3-aminobenzamid (CPI1248) v 53% výtěžku. Teplota tání 118 až 120°C. Protonová nukleární magnetická rezonance (v CDC1₃) ukazuje absorbance při 7,088 ppm (4-6 aryl H, m, 3 H), 6,794 ppm (2-aryl H, s, 1H), 5,902 ppm (N-H, bs, 1H), 3,145 ppm (aryl N-H, bs, 2H), 1,458 ppm (t-butyl H, s, 9 H).

Acetylací CPI1248 jak je popsána v Příkladu 2 se získá N-terc.butyl-3-acetamidobenzamid (CPI1234) v 70% výtěžku, teplota tání 194 až 195°C. Protonová nukleární magnetická

rezonance (v	cdci₃)	ukazuje	absorbance	při 7,778	ppm
(4-6-aryl H, m,	3 H),	7.392 ppm	(2-aryl H,	s, 1H), 6,08	ppm
(N-H, bs, 1H),	2,174	ppm (acetyl CH₃, s,	9 H), 1,500	ppm
(t-butyl Η, s,	9 H) .

Příklad 4

Příprava N-terc.butyl-2-nitrobenzamidu (CPI1035) a

N-terc.butyl-2-acetamidobenzamidu

Způsob podle Příkladu 3 se opakuje s použitím 2-nitrobenzoylchloridu v amidačním stupni. Tím se získá N-terc.butyl-2-nitrobenzamid (CPI1035).

Redukcí nitrobenzamidu hydrazinem se získá N-terc.butyl-2-aminobenzamid.

Acetylací aminobenzamidu se získá N-terc.butyl-2acetamidobenzamid.

Příklad 5

Příprava N-propyl-4-nitrobenzamidu (CPI1026) a

N-propyl-4-acetamidobenzamidu (CPI1232)

Způsob podle příkladu 3 se opakuje s použitím 4-nitrobenzoylchloridu a isopropylaminu v amidačním stupni.

• · · * • · · · • · · · • · · · « · • · · • >0 ··

- 23 - .· :

• · · · ·

Tím se získá N-propyl-4-nitrobenzamid (CPI1026).

Redukcí nitrobenzamidu hydrazinem se získá N-propyl-4-aminobenzamid.

Acetylací aminobenzamidů se získá N-propyl-4acetamidobenzamid (CPI1232).

Příklad 6

Příprava N-terc.amyl-4-nitrobenzamidu (CPI1033) a

N-terc.amyl-4-acetamidobenzamidu (CPI1233)

Způsob podle příkladu 3 se opakuje s použitím 4-nitrobenzoylchloridu v amidačním stupni. Tím se získá N-terc.amyl-4-nitrobenzamid (CPI1033).

Redukcí nitrobenzamidu hydrazinem se získá N-terc.amyl-4-aminobenzamid.

Acetylací aminobenzamidů se získá N-terc.amyl-4acetamidobenzamid (CPI1233).

Příklad 7

Příprava N-isobutyl-4-acetamidobenzamidu

Způsob podle Příkladu 3 se opakuje s použitím 4-nitrobenzoylchloridu a isobutylaminu v amidačním stupni. Tím se získá N-isobutyl-4-nitrobenzamid (CPI1044).

Redukcí nitrobenzamidu hydrazinem se získá N-isobutyl-4-aminobenzamid.

Acetylací aminobenzamidů se získá N-isobutyl-4-

• · 0 0 • 0

-acetamidobenzamid.

Příklad 8

Příprava N-n-butyl-4-nitrobenzamidu (CPI1045) a

N-n-butyl-4-acetamidobenzamidu

Způsob podle příkladu 3 se opakuje s použitím 4-nitrobenzoylchloridu a n-butylaminu v amidačním stupni. Tím se získá N-n-butyl-4-nitrobenzamid (CPI1045).

Redukcí nitrobenzamidu hydrazinem se získá N-n-butyl-4-aminobenzamid.

Acetylací aminobenzamidu se získá N-n-butyl-4acetamidobenzamid.

Příklad 9

Příprava N-n-propyl-4-nitrobenzamidu (CPI1047) a

N-n-propyl-4-acetamidobenzamidu

Způsob podle příkladu 3 se opakuje s použitím 4-nitrobenzoylchloridu a n-propylaminu v amidačním stupni. Tím se získám N-n-propyl-4-nitrobenzamid (CPI1047).

Redukcí nitrobenzamidu hydrazinem se získá N-n-propyl-4-aminobenzamid.

Acetylací aminobenzamidu acetamidobenzamid.

se získá N-n-propyl-4• * · · ♦ · ·· • · · • · ·♦

Příklad 10

Příprava N-l,2-dimethylpropvl-4-nitrobenzamidu (CPI1085) a

N-l,2-dimethylpropyl-4-acetamidobenzamidu

Způsob podle Příkladu 3 se opakuje s použitím 4-nitrobenzoyl chloridu a 1,2-dimethylpropylaminu v amidačním stupni. Tím se získá 1,2-dimethylpropyl-4-nitrobenzamid (CPI1085).

Redukcí nitrobenzamidu hydrazinem se získá N-l,2-dimethylpropyl-4-aminobenzamid.

Acetylací aminobenzamidu se získá N-l,2-dimethylpropyl-4-acetamidobenzamid.

Příklad 11

Příprava N-n-pentyl-4-nitrobenzamldu (CPI1040) a

N-n-pentyl-4-acetamidobenzamidu

Způsob podle Příkladu 3 se opakuje s použitím 4-nitrobenzoylchloridu a n-pentylaminu v amidačním stupni. Tím se získá N-n-pentyl-4-nitrobenzamid (CPI1040).

Redukcí nitrobenzamidu hydrazinem se získá N-n-pentyl-4-aminobenzamid.

Acetylací aminobenzamidu se získá N-n-pentyl-4acetamidobenzamid.

• 9 • · · ·

Příklad 12

Příprava N-2-methylbutyl-4-nitrobenzamidu (CPI1146) a

N-2-methylbutyl-4-acetamidobenzamidu

Způsob podle příkladu 3 se opakuje s použitím 4-nitrobenzoylchloridu a 2-methylbutylaminu v amidačním stupni. Tím se získá N-2-methylbutyl-4-nitrobenzamid (CPI1146).

Redukcí nitrobenzamidu hydrazinem se získá N-2-methylbuty1-4-aminobenzamid.

Acetylací aminobenzamidu se získá N-2-methylbutyl-4acetamidobenzamid.

Příklad 13

Příprava N-n-pentyl-2-nitrobenzamidu (CPI1174) a

N-n-pentyl-2-acetamidobenzamidu

Způsob podle příkladu 3 se opakuje s použitím 2-nitrobenzoylchloridu a n-pentylaminu v amidačním stupni. Tím se získá N-n-pentyl-2-nitrobenzamid (CPI1174).

Redukcí nitrobenzamidu hydrazinem se získá N-n-pentyl-2-aminobenzamid.

Acetylací aminobenzamidu se získá N-n-pentyl-2acetamidobenzamid.

• ·

Příklad 14

Příprava N-terc.butyl-2,3-diacetamidobenzamidu

Způsob podle příkladu 3 se opakuje s použitím

2,3-dinitrobenzoylchloridu v amidačním stupni. Tím se získá N-terc.butyl-2,3-dinitrobenzamid.

Redukcí nitrobenzamidu hydrazinem se získá N-terc.butyl-2,3-diaminobenzamid.

Acetylací aminobenzamidu se získá N-terč.butyl-2,3-acetamidobenzamid.

Příklad 15

Příprava N-terc.amyl-4-diacetamidobenzamidu

Způsob podle příkladu 3 byl zopakován s použitím

2,4-dinitrobenzoylchloridu a terc.amylaminu v amidačním stupni. Tím se získá N-terc.amyl-2,4-dinitrobenzamidu.

Redukcí nitrobenzamidu hydrazinem se získá N-terc.amyl-2,4-diaminobenzamid.

Acetylací aminobenzamidu se získá N-terc.amyl-2,4-diacetamidobenzamid.

Příklad 16

Příprava N-terc.butyl-2,5-diacetamidobenzamidu

9«

9 9 9

9 99

9 9 9 ·

9 9 • 9 9 9

Způsob podle příkladu 3 byl zopakován s použitím

2,5-dinitrobenzoylchloridu v amidačním stupni. Tím se získá N-terc.butyl-2,5-dinitrobenzamid.

Redukcí nitrobenzamidu hydrazinem se získá N-terc.butyl-2,5-diaminobenzamid.

Acetylaci aminobenzamidu se získá N-terc.butyl-2,5-diacetamidobenzamid.

Příklad 17

Příprava N-terc.butyl-2,6-diacetamidobenzamidu

Způsob podle příkladu 3 byl zopakován s použitím

2,6-dinitrobenzoylchloridu v amidačním stupni. Tím se získá N-terc.butyl-2,6-dinitrobenzamid.

Redukcí nitrobenzamidu hydrazinem se získá N-terc.butyl-2,6-diaminobenzamid.

Acetylaci aminobenzamidu se získá N-terc.butyl-2,6-diacetamidobenzamid.

Příklad 18

Příprava N-terc.butyl-3,4-diacetamidobenzamidu

Způsob podle příkladu 3 byl zopakován s použitím 3,4-dinitrobenzoylchloridu v amidačním stupni. Tím se získá N-terc.butyl-3,4-dinitrobenzamid.

Redukcí nitrobenzamidu hydrazinem se získá

99 ► · 9 9

Κ 9 99

9 9 · ·

9 9

9 ·♦ • 9 ·»·· *9 9

získá

N-terc.butyl-3,4-diaminobenzamid.

Acetylací aminobenzamidu se

N-terc.butyl-3,4-diacetamidobenzamid.

Příklad 19

Příprava N-terc.butyl-3,5-diacetamidobenzamidu

Způsob podle příkladu 3 byl zopakován s použitím 3,5-dinitrobenzoylchloridu v amidačním stupni. Tím se získá N-terc.butyl-3,5-dinitrobenzamid.

Redukcí nitrobenzamidu hydrazinem se získá N-terc.butyl-3,5-diaminobenzamid.

Acetylací aminobenzamidu se získá N-terč.butyl-3,5-diacetamidobenzamid.

Příprava farmaceutických prostředků

Příklad 20

Sloučenina podle příkladu 1 se smísí ve formě suchého prášku se suchým želatinovým pojivém v přibližném hmotnostním poměru 1:2. K této směsi se přidá malé množství stearátu hořečnatého jako mazadla. Směs se vytvaruje v tabletovém lisu do 240 až 270 miligramových tablet (v každé tabletě je obsaženo 80 až 90 miligramů účinného benzamidu). Pokud jsou tyto tablety podávány pacientovi trpícímu neurodegenerativní poruchou spojenou s dopaminem denně, 2krát denně nebo 3krát denně může dojít ke zpomalení rozvoje pacientovi nemoci.

• ··· t · « · · ♦ ♦ * ·

9 9 9 9

- 30 99 • 9 9 9

9 99

999 9 9

9 9

99

Příklad 21

Sloučenina podle Příkladu 2 se ve formě suchého prášku smísí se škrobovým pojivém v přibližném poměru 1:1 hmotnostně. Směs se plní do 250 miligramových kapslí (1 kapsle 125 mg účinného benzamidu). Jestliže se tyto kapsle podávají pacientovi trpícímu neurodegenerativní poruchou spojenou s dopaminem denně, 2krát denně nebo 3krát denně může dojít ke zpomalení rozvoje pacientovi nemoci.

Příklad 22

Sloučenina ochuceném vodném Jestliže se 5 neurodegenerativní 2krát denně nebo pacientova stavu.

podle příkladu 3 se rozmíchá v oslazeném roztoku na koncentraci zhruba 50 mg/ml. ml dávky podávají pacientovi trpícímu chorobou spojenou s dopaminem denně, 3krát denně, může dojít ke zlepšení

Příklad 23

Sloučenina podle nároku 4 se ve formě suchého prášku smísí se suchým želatinovým nosičem v přibližném poměru 1:2 hmotnostně. Jako mazadlo se přidá malé množství stearátu hořečnatého. Směs se tvaruje do 450 až 900 miligramových tablet (v jedné tabletě je obsaženo 150-300 mg účinného benzamidu) v tabletovém lisu. Jestliže se tyto tablety podávají pacientovi trpícímu neurodegenerativní chorobou spojenou s dopaminem denně, 2krát denně nebo 3krát denně, může dojít ke zlepšení pacientova stavu.

«· ···· ·· 4 ·· 99

9 9 9 9 99 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 99

- 31 -	• · · · · ·*····· 9 9 9 9 9 9 9 9 99··9 99 999 99 9 9
	Příklad 24
Sloučenina	podle příkladu 14 se	rozpustí v pufrované
sterilní solance	o koncentraci vhodné	pro injekční roztoky,

přičemž koncentrace sloučeniny podle Příkladu 14 je zhruba 5 mg/ml. Jestliže se tyto tablety podávají pacientovi trpícímu neurodegenerativní chorobou jako je Parkinsonova nemoc denně, 2krát denně nebo 3krát denně, může dojít ke zlepšení pacientova stavu.

Pokud je .to žádoucí může být v těchto formulacích použita kterákoli ze sloučenin vzorce I a kterákoli z těchto formulací se může podávat jakýmkoli z těchto způsobů tak, aby se léčily neurodegenerativní nemoci zmíněné v tomto popisu.

Metody modelování Parkinsonovy nemoci

Testy úbytku dopaminu (MPTP Model)

Myš C57BL/6J byla předběžně ošetřena bud vehikulem (1% methylceluloza) nebo účinnou látkou (p.o.) 30 minut před MPTP. MPTP bylo rozpuštěno v fyziologickém roztoku (0,9 %) a podáno subkutánně jako jedna dávka 15 mg volné báze/kilogram tělesné hmotnosti aby se snížila koncentrace dopaminu ve striatu na asi 0,5 nanomolů/mg proteinu. Skupinám myší (n = 8 až 10 ve skupině) bylo podáno jednak vehikulum + fyziologický roztok, a dále vehikulum + MPTP nebo léčivo + MPTP. Po 72 hodinách od podání MPTP byly myši usmrceny a jejich striatum bylo podrobeno homogenizaci v 0,4 N kyselině peroxochlorovodíkové, homogenizát byl odstředěn a koncentrace dopaminu v supernatantu byla stanovena vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií s elektrochemickou detekcí (HPLC/ED). Supernatanty byly před analýzou skladovány při teplotě -90°C.

·· ···· ·· 99 • 9 9 9

9 99

999 9 9

9 9

99 ♦ · ·

• ·

- 32 Podávané účinné látky byly kombinovány s methylcelulozou a byly homogenizovány ve vodě za účelem dávkování. Dávkovači poměr se pohyboval od 10 do 50 mg/kg pro CPI1160, CPI11896 a CPI1234 a od 50 do 100 mg/kg pro CPI1020.

Výsledky reprezentativních experimentů jsou uvedeny v tabulkách 1 a 2. Výsledky v tabulce 1 ukazují, že kompozice podle vynálezu, reprezentované látkami CPI1160, CPI1189 a CPI1234 byly účinné při prevenci snížení dopaminu způsobeného podání MPTP.

Tabulka 1: účinnost CPI1189, 1160 a 1234 při dávkách 30 mg/kg u 15 mg/kg MPTP modelu.

% kontroly bez MPTP

Sloučenina Dopamin/mq proteinu

	± S.E.M.
methylceluloza	0,72±0,05	54,1
CPI1160	l,25±0,05	93,9
CPI1234	l,02±0,05	76,7
methylceluloza	0,56±0,07	36,4
CPI1189	l,37±0,14	89,7

Pro srovnávací účely byly provedeny stejné testy s kompozicemi na bázi CPI1020, velmi podobné benzamidové sloučeniny. Výsledky jsou uvedeny v Tabulce 2. Při 50 mg/kg CPI1189 poskytuje úplnou ochranu před neurotoxickým vlivem MPTP (105 % kontroly) zatímco CPI1020 nebyla účinná (56 % kontroly).

·· ····

9 99 » · · 9

9 99

999 9 9

9 9

99

*

- 33 Tabulka 2: srovnání účinnosti CPI1189 a CPI1020 při 50 mg/kg u 15 mg/kg MPTP modelu.

Sloučenina Dopamin (nm/mq) i S.E.M._% ochrany

Test, slouč._standard *

CPI1020 0,58±0,14 l,035±0,099 56

CPI1189 l,57±0,ll l,536±0,178 105 * srovnávací pokus se samotnou methylcelulozou

Tento testovací postup byl zopakován s dalšími látkami podle vynálezu. Výsledky těchto testů jsou uvedeny v tabulce 3, že schopnost ochrany vykazují i jiné benzamidy podle vynálezu:

Tabulka 3: protektivní účinnost benzamidů při MPTP modelového testu snížení úrovně dopaminu

Testovaná sloučenina_% ochrany

1160 94

1232 70

1233 40

1234 77

1241 40 ·· 0000

• ♦· 00 *0 0 · · 0

0 0 0 0

0 000 0 0

0 0 *

0 0 0 0 00

Testy dlouhodobé ochranné účinnosti

Pro stanovení dlouhodobého účinku sloučenin podle vynálezu na snižování dopaminu byly provedeny další testy. Postupem podle obecného testu popsaného shora byla ošetřena myš C57BL/6J jednak samotným vehikulem a dále testovanou sloučeninou MPTP načež byla analyzována po 3 nebo 14 dnech od dávkování. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 4.

Tabulka 4: účinnost CPI1189 u MPTP modelu vliv doby uplynulé od ošetření na koncentrace dopaminu striatu:

Ošetření_% oproti methylcelulozové nebo solankové kontrole

Methylceluloza/MPTP (3 dny)	67,5
CPI1189/MPTP (3 dny)	100
Methylceluloza /MPTP (14 dní)	75,8
CPI1189 /MPTP (14 dní)	96,7

Tyto výsledky uvedených experimentů ukazují, že CPI1189 je schopna ochránit proti MPTP indukovanému úbytku dopaminu u zvířat jak po dobu 3 dnů od podání MPTP tak i po dobu 14 dnů po podání MPTP. To ukazuje, že CPI1189 má ochranný účinek lepší než transientní účinek na dopaminový metabolismus.

Testy úbytku dopaminu (6-hydroxydopaminovv model)

Byla testována sloučenina CPI1189, za účelem zjištění její schopnosti chránit proti 6-hydroxydopaminem indukovanému poškození. Tento široce uznávaný model Parkinsonovy nemoci, při kterém se předpokládá, že 6-hydroxydopamin má toxické účinky, které spočívají ve vyvolání oxidačního stresu.

·«···· · · · · · • · 9 9 99 9 4 9 9

4 4 4 4 4 4 44

9 4 4 4 4 4 944 4 4

4 4 9 4 4 9 4

9 9 4 9 94 4 9 4 44

6-hydroxydopamin se používal extenzívně už od 60tých let jako neurotoxin. Jelikož 6-hydroxydopamin primárně působí na katecholaminergické neurony, byl přednostně používán při experimentálním studiu Parkinsonovy nemoci. Tato látka byla už velmi široce používána jako léčivo unilaterálních lézi v nigrostriatálním systému. Pokusná zvířata, kterým se tento toxin podával, projevují biochemické alterace a alterace ve způsobu chování, které se dají měřit a testovat tím farmakologicky závažnost lézi a tím stanovit účinek případného léčebného postupu.

Byla stanovována odezva na ochrannou dávku CPI1189, která byla podána pokusnému zvířeti s indukovaným poškozením 6-hydroxydopaminem nigrostriatálního systému.

Byly použiti aklimatizovaní krysí samci plemena Sprague Dawley, staří 55-120 dní. Pro ranní experiment byl připraven 6-hydroxydopamin (Research Biochemicals Incorporated) v 0,9% roztoku NaCl obsahujícím přísadu 0,1 mg/ml kyseliny askorbové.

Z rozemleté CPI1189 (velikost částic > 106 μ) byla ráno v den provádění experimentu připravena 1% methylcelulozová suspenze. Při testu CPI1189 byla podávána orálně v dávkách o objemu 0,0005 ml/g pomocí jehly o velikosti 3,0 x 18. Zvířata byla uspána a chirurgicky jim byl intrastriatální injekcí (pouze z pravé strany) podán 6-hydroxydopamin a nebo fyziologický roztok. Zvířata byla po jednom týdnu od podání 6-hydroxydopaminu usmrcena.

Ihned po usmrcení byla zvířatům odebrána striatální tkáň a podrobena analýze HPLC/EC na obsah proteinu pomocí bicinchoninického testu, jehož výsledky jsou uvedeny v tabulce 5.

·· ·+··

• ·

Tabulka 5: Výsledky testu jako % kontroly pro samotné pravé striatum, do něhož byla podána injekcí dávka 6-hydroxydopaminu.

Ošetření_% kontroly

Methylceluloza/6-hydroxydopamin 100 mg/kg CPI1189/6-hydroxydopamin

69,6717,65

77,61113,5 mg/kg CPI1189 /6-hydroxydopamin 72,8218,32

Výsledky těchto experimentů ukazují, že CPI1189 je schopná chránit před 6-hydroxydopaminem indukovaným úbytkem dopaminu.

Testy účinnosti proti Alzheimerově chorobě

Testuje se účinek benzamidů na tvorbu Αβ(1-40) β-pokrytých vrstev:

Detekce agregace amyloidů v roztoku pomocí Thioflavin T fluorescenčního spektra

Pro zjištění aktivity sloučenin jako prostředků pro léčení Alzheimerovy nemoci bylo vyvinuto několik testů. Jeden z těchto testů je založen na pozorování, které ukázalo, že u pacientů, trpících Alzheimerovou nemocí se projevují neobvyklé úrovně agregace amyloidů.

Thioflavin T (ThT) rychle asociuje s β zvrásněnými vrstvami, zejména v agregovaných vláknech syntetické Αβ (1-40), přičemž projevuje nové excitační maximum při 440 nm a zvýšenou emisi při 490 nm. Podle tohoto principu mohou mít terapeutický účinek ty látky, které jsou schopny odložit nebo zvrátit toto shlukování.

Experimenty byly prováděny na 96 destičkách s prohlubněmi s a fluorescenční změny byly hodnoceny pomocí ·· **»· ·· φ φ ♦ · · φ φ φ · φ φ φφφ • φ φ φ φφφφ φ φ φ φφ φφ • · φ φ • φφφ φφφφ φ φ φ φ φ φ φ φ vyhodnocovacího zařízení CytoFluor II. Do každé prohlubně bylo umístěno 95 μΐ ThT (3μιη) připravené v PBS (Ph 6,0), 2 μΐ NRT (10 μιη) připravený v 0,05 % methylcelulozy v PVS (Ph6) a μΐ Αβ (1-40) (3 μg) připravené z destilované vody. Měření fluorescence bylo zahájeno po přidání Αβ (1-40) a pokračovalo po dobu 4 hodin, při kterých se dosáhlo agregace vrstvy. Procenta ochrany β pokryté vrstvy byla vyhodnocena z relativní hodnoty fluorescence oproti agregaci v přítomnosti a při absenci testované sloučeniny. Výsledky jsou uvedeny v následující tabulce 6.

Tabulka 6: benzamidová aktivita proti Alzheimerově chorobě

Sloučenina	% ochranv
1189	48,3±10,l
1033	31,7±3,5
1026	14,4±14,4

Vliv benzamidů na ochranu proti amyloidu β (25-35) nebo
qlutamátem indukovanou ztrátu měřenou na	buněčné kultuře
neuronů/astrocytů z hippocampu krysích embryí

Pro stanovení aktivity vůči Alzheimerově chorobě byly prováděny další testy. Embryím plemena krys Sprague Dawley v 18 denním stáří byly odebrány tkáně hyppocampu a tyto tkáně byly pak disociovány triturací za účelem přípravy kultury neuronových astrocytů. Buňky (3xl0⁵) byly umístěny na 35 mm poly-D-lysinem povlečené destičky obsahující Eaglovu minimální živnou půdu doplněnou 10 % fetálního hovězího séra. Po 3-5 hodinách byla původní půda odstraněna a nahrazena jedním ml čerstvé půdy. Kultury byly udržovány při 37°C ve vzduchu s obsahem 5 % oxidu uhličitého a s vlhkostí 95 %.

• O ···· Μ 0 00 00

0 0 0 0 ·· ·«··

0 ··· 0 0 00 ^{u w} 00 · · 0 0·0

0000 0 00 000 00 00

Podmínky pro Αβ(25-35) indukované neuronové testy toxicity: 35μπι Αβ(25-35) rozpuštěné v destilované vodě bylo přidáno k buňkám (7 DIV) za přítomnosti nebo bez přítomnosti

100 μιη benzamidu připraveného v 1% methylceluloze po dobu 96 hodin.

Podmínky pro glutamátem indukované testy neuronální toxicity: po dobu 48 hodin byl přidáván glutamát k buňkách (9 DIV) za přítomnosti nebo bez přítomnosti benzamidu.

Přežití nervových buněk je vyjádřeno jako procento morfologicky živých neuronů po 48 nebo 96 hodinovém ošetřování ve z srovnání celkového počtu neuronů před ošetřováním, ve stejné předem označené oblasti buněčné kultury ( tři oblasti na jednu kulturu (n=6). Výsledky jsou uvedeny v tabulce 7, kde jsou vyjádřena jako průměr ± S.E.M. a porovnání s kontrolou.

Tabulka 7: účinnost benzamidů při testu ztráty nervových buněk.

Sloučenina_% ochrany_%ochrany

Αβ (25-35)_glutamát

1233	23
1234	9
1241	10
1135	16
1140	8
1146	50
1173	36
1240	23
1026

ΦΦ «φφφ

Claims

PATENTOVÉ

NÁROKY φφ φφφ φφφφ φ

Ρ/ φφ φφ φ φ φ φ φ φ «φ « φφφ φ φ φ φ φ φφ φφ

1. Farmaceutická kompozice obsahující benzamidovou sloučeninu vzorce (R)„ ó·

CONHR' ve kterém

R je nasycený alkyl se třemi až pěti uhlíkovými atomy, každé R je nezávislé a znamená -NHCOCHg, -NO₂ nebo -NH₂ a n je 1 nebo 2 s následujícími podmínkami:

1) jestliže n je 1 a R je -NO₂ v poloze 4, R' nesmí být terč.butyl, butyl nebo propyl,
2) jestliže n je 1 a R je NO₂ v poloze 2, R' nesmí být butyl nebo propyl a

3) jestliže nje2a R' je terc.butyl a oba substituenty R jsou -NO₂, nesmí být tyto R skupiny v polohách 3a 5 ve farmaceuticky přijatelném nosiči.

2. Farmaceutická kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že benzamidovou sloučeninou je acetamidobenzamid vzorce

3N3R v němž R' je nasycený alkyl o 3 až 5 uhlíkových atomech a n je 1 nebo 2.

* • ·

3. Farmaceutická kompozice podle nároku 2, vyznačující se tím, že n je 1.

4. Farmaceutická kompozice podle nároku 3, vyznačující se tím, že R je terč.butyl.

5. Farmaceutická kompozice podle nároku 3, vyznačující se tím, že R' je terc.amyl.

6. Farmaceutická kompozice podle nároku 3, vyznačující se tím, že benzamidovou sloučeninou je N-terc.butyl-acetamidobenzamid (CPI1189).

7. Farmaceutická kompozice podle nároku 3, vyznačující se tím, že benzamidovou sloučeninou je N-propyl-4-acetamidobenzamid (CPI1232).

8. Farmaceutická kompozice podle nároku 3, vyznačující se tím, že benzamidovou sloučeninou je N-terc.amyl-acetamidobenzamid (CPI1233).

9. Farmaceutická kompozice podle nároku 3, vyznačující se tím, že benzamidovou sloučeninou je N-terc.butyl-3-acetamidobenzamid (CPI1234).

10. Farmaceutická kompozice podle nároku 3, vyznačující se tím, že benzamidovou sloučeninou je N-methyl-cyklopropyl-4-acetamidobenzamid (CPI1241).

11. Farmaceutická kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, že R' je nasycený alkyl se třemi až pěti uhlíkovými atomy, každé R je nezávislé a znamená -N0₂ nebo -NH₂ a n je 1 nebo 2 s následujícími podmínkami: 1) jestliže n je 1 a R je -NO₂ v poloze 4, R' nesmí být terč.butyl, • toto to • · • · • to • to • « »· · butyl nebo propyl, 2) jestliže n je 1 a R je NO₂ v poloze 2, R' nesmí být butyl nebo propyl a 3) jestliže n je 2 a R' je terč.butyl a oba substituenty R jsou -N0₂, nesmí být tyto R skupiny v polohách 3 a 5.

12. Farmaceutická kompozice podle nároku 11, vyznačující se tím, že R je NH₂. 13. Farmaceutická kompozice podle nároku 11, vyznačující se tím, že R je N0₂. 14. Farmaceutická kompozice podle nároku 11, vyznačující se tím, že benzamidovou sloučeninou je N-propyl-4-nitrobenzamid (CPI1026). 15. Farmaceutická kompozice podle nároku 11, vyznačující se tím, že benzamidovou sloučeninou je N-terc.butyl-3-nitrobenzamid (CPI1034).

16. Farmaceutická kompozice podle nároku 11, vyznačující se tím, že benzamidovou sloučeninou je N-terc.bUtyl-2-nitrobenzamid (CPI1035).

17. Farmaceutická kompozice podle nároku 11, vyznačující se tím, že benzamidovou sloučeninou je N-n-butyl-4-nitrobenzamid (CPI1045).

18. Farmaceutická kompozice podle nároku 11, vyznačující se tím, že benzamidovou sloučeninou je N-n-propyl-4-nitrobenzamid (CPI1047). 19. Farmaceutická kompozice podle nároku 11, vyznačující se tím, že benzamidovou sloučeninou je N-terc.buty1-3,5 dinitrobenzamid (CPI1049).

• 9 · ·

9 9 9 9 • · · · • 9 · 9 9 9 ·· • · · 9 9 9 • · 9 · _ 42 - * · ··· · · · · ···· · ·· ·

20. Farmaceutická kompozice podle nároku 11, vyznačující se tím, že benzamidovou sloučeninou je N-l-methylpropyl-4-nitrobenzamid (CPI1084).

21. Farmaceutická kompozice podle nároku 11, vyznačující se tím, že benzamidovou sloučeninou je N-terc.butyl-4-aminobenzamid (CPI1160).

22. Farmaceutická kompozice podle nároku 11, vyznačující se tím, že benzamidovou sloučeninou je N-terc.butyl-3-aminobenzamid (CPI1248).

23. Farmaceutická kompozice podle nároku 11, vyznačující se tím, že nosičem je orální nosič.

24. Farmaceutická kompozice podle nároku 11, vyznačující se tím, že nosičem je injektovatelný nosič.

25. Acetamidobenzamidová sloučenina vzorce

R' je nasycený alkyl se třemi až pěti uhlíkovými atomy a n je 1 nebo 2 s následujícími podmínkami: 1) jestliže n je 1 a R' je n-butyl nebo n-propyl, tak acetamidoskupina nesmí být v poloze 2, 2) jestliže n je 1 acetamidoskupina nesmí být v poloze 3 3) jestliže n je 2 acetamidoskupina nesmí být v polohách 3 a 5.

26. N-terc.butyl-acetamidobenzamid (CPI1189).

• · • · • · · · • · · ·

27. N-propyl-acetamidobenzamid (CPI1232).

28. N-terc.amyl-4-acetamidobenzamid (CPI1233).

29. N-terc.butyl-3-acetamidobenzamid (CPI1234).

30. N-methyl-cyklopropyl-4-acetamidobenzamid (CPI1241)

31. Nitro nebo aminobenzamidová sloučenina vybraná ze skupiny zahrnující: N-terc.amyl-4-nitrobenzamid (CPI1033), N-l,2-dimethylpropylnitrobenzamid (CPI1085), N-n-butyl3-nitrobenzamid (CPI1135), N-n-pentyl-4-nitrobenzamid (CPI1040), N-2-methylbutyl-4-nitrobenzamid (CPI1146),

N-n-butyl-3,5-dinitrobenzamid (CPI1147), N-methylcyklopropyl- 4-nitrobenzamid (CPI1164), N-n-butyl-2-nitrobenzamid (CPI1173), N-n-pentyl-2-nitro- benzamid (CPI1174) a N-methylcyklopropyl-4-aminobenzamid (CPI1240).

32. N-terc.amyl-4-nitrobenzamid (CPI1033)

33. N-l,2-dimethylpropylnitrobenzamid (CPI1085)

34. N-n-butyl-3-nitrobenzamid (CPI1135)

35. N-n-pentyl-4-nitrobenzamid (CPI1040)

36. N-2-methylbutyl-4-nitrobenzamid (CPI1146)

37. N-n-butyl-3,5-dinitrobenzamid (CPI1147)

38. N-methylcyklo-propyl-4-nitrobenzamid (CPI1164)

39. N-n-butyl-2-nitrobenzamid (CPI1173)

40. N-n-pentyl-2-nitro-benzamid (CPI1174)

41. N-methylcyklopropyl-4-aminobenzamid (CPI1240)

42. Způsob léčení pacienta trpícího neurodegenerativní chorobou zahrnující podávání účinného množství farmaceutické kompozice podle nároku 1 až 24.

43. Způsob podle nároku 42, ve kterém neurodegenerativní chorobou je onemocnění spojené s progresivní ztrátou funkce centrální nervové soustavy.

44. Způsob podle nároku 42, ve kterém neurodegenerativní onemocnění spojené s dopaminem.

45. Způsob podle nároku 44, ve kterém onemocněním, spojeným s dopaminem je Parkinsonova nemoc.

46. Způsob podle nároku 42, ve kterém neurodegenerativním onemocněním je Alzheimerova nemoc.

47. Způsob podle nároku 42, ve kterém neurodegenerativním onemocněním je takové onemocnění, se kterým se spojena ztráta funkce centrální nervové soustavy v důsledku mitochondriální dysfunkce.

48. Způsob podle nároku 42, ve kterém uvedený způsob podávání je orální.

49. Způsob podle nároku 42, ve kterém uvedený způsob podávání je parenterální.

50. Způsob podle nároku 49, se provádí intravenózní infuzí.

ve kterém způsob podávání

- 45 9 9 9 9

I ftft ( » · · ·

51. Způsob přípravy benzamidu vzorce (NHCGCHjÁ

I —CONHR' ve kterém R' je nasycený alkyl s 3 až 5 uhlíkovými atomy a n je 1 nebo 2, zahrnující následující stupně:

a) kondenzaci nasyceného alkylaminu o 3 až 5 uhlíkových atomech s nitrobenzoylhalogenidem vzorce:

ve kterém n je 1 nebo 2a x je halogen jako je I, Br, F nebo Cl, čímž se získá i

-CCNHH’

b) redukci N0₂ skupin v (III) na NH₂ skupiny a

c) acetylací NH₂ na NHCOCH^ skupiny.

- 46 52. Způsob přípravy nitrobenzamidu !

ve kterém R' je nasycený alkyl s 3 až 5 uhlíkovými atomy a n je 1 nebo 2, zahrnující následující stupně:

kondenzaci nasyceného alkylaminu o 3 až 5 uhlíkových atomech s nitrobenzoylhalogenidem obecného vzorce es ve kterém n je 1 nebo 2 a X je halogen jako I, Br, F nebo Cl, čímž se získá:

(SO^Jn /qX—CCNHr' • · • <

• ·

- 47 ·· ····

53. Způsob přípravy aminobenzamidu vzorce ve kterém R' je nasycený alkyl o 3 až 5 uhlíkových atomech a n je 1 nebo 2, zahrnující následující stupně

(NCX)_n ve kterém n je 1 nebo 2a x je halogen jako je I, Br, F nebo Cl, čímž se získá

b) redukci NO₂ skupin v (III) na NH₂ skupiny.

54. Benzamidová sloučenina vzorce:

(R).

CONHR' ·· ·· • · · 9

9 9 99

99 9 · · • · · ·· ···· ve kterém:

R' je nasycený alkyl se třemi až pěti uhlíkovými atomy, každé R je nezávislé a znamená -NHCOCH₃, -N0₂ nebo -NH₂ a n je 1 nebo 2 s následujícími podmínkami:

1) jestliže n je 1 a R je -N0₂ ^v P^{oloze 4}/ ^R nesmí být terč.butyl, butyl nebo propyl,

2) jestliže n je 1 a R je N0₂ v poloze 2, R' nesmí být butyl nebo propyl a

3) jestliže n je 2 a R' je terč.butyl a oba substituenty R jsou -NO₂, nesmí být tyto R skupiny v polohách 3 a 5pro použití při léčení.

55. Sloučenina podle nároku 54, kde léčenou chorobou je neurodegenerativní onemocnění.

56. Sloučenina podle nároku 55, kde neurodegenerativním onemocněním je Parkinsonova nemoc. 57. Sloučenina podle nároku 55, kde neurodegenerativním onemocněním je Alzheimerova nemoc.

58. Použití benzamidové sloučeniny vzorce:

(R)n ve kterém

R je nasycený alkyl se třemi až pěti uhlíkovými atomy, každé R je nezávislé a znamená -NHCOCH^, -N0₂ nebo -NH₂ a n je 1 nebo 2 s následujícími podmínkami:

1) jestliže n je 1 a R je -N0₂ v poloze 4, R' nesmí být terč.butyl, butyl nebo propyl, ·· ····

2) jestliže n je 1 a R je N0₂ v poloze 2, R' nesmí být butyl nebo propyl a

3) jestliže n je 2 a R' je terc.butyl a oba substituenty R jsou -N0₂, nesmí být tyto R skupiny v polohách 3 a 5 při výrobě formulace pro terapeutické ošetřování.

59. Použití podle nároku 58, ve kterém terapeutickým ošetřováním je léčení neurodegenerativního onemocnění.

60. Použití podle nároku 59, kde neurodegenerativním onemocněním je Parkinsonova nemoc.

61. Použití podle nároku 59, kde neurodegenerativním onemocněním je Alzheimerova nemoc.

62. Benzamidová sloučenina vzorce:

CONE-ť kde R je nasycený alkyl o 3 až 5 uhlíkových atomech a n je 1 nebo 2 pro použití při terapeutickém ošetřování.

63. Použití podle nároku 62, ve kterém terapeutickým ošetřováním je léčení neurodegenerativního onemocnění.

64. Použití podle nároku 63, kde neurodegenerativním onemocněním je Parkinsonova nemoc.

65. Použití podle nároku 63, kde neurodegenerativním onemocněním je Alzheimerova nemoc.

4 4

66. Použití benzamidové sloučeniny vzorce

CONHR?

4 4

4 · 4

4 4 4

4 4 4 kde R' je nasycený alkyl o 3 až 5 uhlíkových atomech a n je 1 nebo 2 pro použití při terapeutickém ošetřování.

67. Použití podle nároku 66, ve kterém terapeutickým ošetřováním je léčení neurodegenerativního onemocnění.

68. Použití podle nároku 67, kde neurodegenerativním onemocněním je Parkinsonova nemoc.

69. Použití podle nároku 67, kde neurodegenerativním onemocněním je Alzheimerova nemoc.

70. Acetamidobenzamidová sloučenina podle nároku 25 pro použití při terapeutickém ošetřování.

71. Sloučenina podle nároku 70, kde terapeutickým ošetřováním je léčení neurodegenerativního onemocnění.

72. Sloučenina podle nároku 71, kde neurodegenerativním onemocněním je Parkinsonova nemoc.

73. Sloučenina podle nároku 71, kde neurodegenerativním onemocněním je Alzheimerova nemoc.

74. Použití acetamidobenzamidové sloučeniny podle nároku 25 při výrobě formulace pro terapeutické ošetřování.

75. Použití podle nároku 74, kde terapeutickým

9 99 9 • · · 9 9

9 9

9 99 9 9 ošetřováním je léčení neurodegenerativního onemocnění.

76. Použití podle nároku 72, kde neurodegenerativním onemocněním je Parkinsonova nemoc.

77. Použití podle nároku 72, kde neurodegenerativním onemocněním je Alzheimerova nemoc.

78. N-terc.butyl-4-acetamidobenzamid (CPI1189) pro použití při terapeutickém ošetřování.

79. N-terc.butyl-4-acetamidobenzamid (CPI1189) pro použití při léčení neurodegenerativního onemocnění.

80. N-terc.butyl-4-acetamidobenzamid (CPI1189) pro použití při léčení Parkinsonovy nemoci.

81. N-terc.butyl-4-acetamidobenzamid (CPI1189) pro použití při léčení Alzheimerovy nemoci.

82. Použití N-terc.butyl-4-acetamidobenzamidu (CPI1189) pro výrobu směsi pro terapeutické ošetřování.

83. Použití podle nároku 82, kde terapeutické ošetřování je léčení neurodegenerativního onemocnění.

84. Použití podle nároku 83, kde neurodegenerativním onemocněním je Parkinsonova nemoc.

85. Použití podle nároku 83, kde neurodegenerativním onemocněním je Alzheimerova nemoc.

86. Sloučenina vybraná ze skupiny, zahrnující: N-propyl-4-nitrobenzamid (CPI1026)

N-terc.butyl-3-nitrobenzamid (CPI1034) ·· «· fl * · « « · · · • · · · « • · « • fl « · ·· ·4·«

N-terc.butyl-2-nitrobenzamid (CPI1035) N-n-butyl-4-nitrobenzamid (CPI1045) N-n-propyl-4-nitrobenzamid (CPI1047)

N-terc.butyl-3,5-dinitrobenzamid (CPI1049) N-l-methylpropyl-4-nitrobenzamid (CPI1084) N-terc.butyl-4-aminobenzamid (CPI1160) N-terc.butyl-3-aminobenzamid (CPI1248) pro použití při terapeutickém ošetřování.

87. Sloučenina podle terapeutickým ošetřováním je onemocnění.

nároku 86, přičemž léčení neurodegenerativního

88. Sloučenina podle nároku 87, přičemž neurodegenerativním onemocněním je Parkinsonova nemoc.

89. Sloučenina podle nároku 87, přičemž neurodegenerativním onemocněním je Alzheimerova nemoc.

90. Použití sloučeniny vybrané ze skupiny zahrnující: N-propyl-4-nitrobenzamid (CPI1026)

N-terc.butyl-3-nitrobenzamid (CPI1034)

N-terc.butyl-3,5-dinitrobenzamid (CPI1049) N-l-methylpropyl-4-nitrobenzamid (CPI1084)

N-terc.butyl-4-aminobenzamid (CPI1160)

N-terc.butyl-3-aminobenzamid (CPI1248)

91. Použití podle nároku 90, kde terapeutickým ošetřováním je léčení neurodegenerativního onemocnění.

92. Použití podle nároku 91, kde neurodegenerativním onemocněním je Parkinsonova nemoc.