SK281599B6 - Lipozómová kompozícia obsahujúca selegilín, farmaceutický prípravok obsahujúci lipozómovú kompozíciu a spôsob jej prípravy - Google Patents

Abstract

Lipozómová kompozícia obsahuje ako účinnú zložku (-)-N-alfa-dimetyl-N-(2-propinylfenyletylamín), teda selegilín alebo jeho soľ. Kompozícia obsahuje 0,1 až 40 % hmotn. selegilínu a/alebo jeho soľ, 2 až 40 % hmotn. lipidu, výhodne fosfolipidu, až 10 % hmotn. cholesterolu, až 20 % hmotn. alkoholu, až 25 % hmotn. glykolu, až 3 % hmotn. antioxidantov, až 3 % hmotn. konzervačného činidla, až 2 % hmotn. činidla ovplyvňujúceho viskozitu, až 30 % hmotn. cyklodextrínu alebo cyklodextrínového derivátu a 30 až 90 % hmotn. vody. Farmaceutické prípravky obsahujú lipozómové kompozície, zvyčajné plnivá a riedidlá a ďalšie pomocné prostriedky, výhodne vo forme na orálne, parenterálne alebo transdermálne podávanie, na liečenie Alzheimerovej, Parkinsonovej choroby, depresií, mŕtvicových stavov, pohybových ťažkostí a myelitis.ŕ

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka lipozómových kompozícií, obsahujúcich ako účinnú zložku selegilín, t. j. (-)-[N-a-dimetyl-(2-propinylfenyletylamín)] a/alebo jeho zodpovedajúcu soľ. Vynález sa ďalej týka farmaceutických prípravkov, ktoré ju obsahujú a spôsobu ich prípravy.

Doterajší stav techniky

K dnešnému dňu je známy veľký počet lipozómových prípravkov i spôsobov ich prípravy.

Takéto kompozície sú v skutočnosti sústavami na prepravu liekov (DDS, „drug delivery systems“), ako to opísali Gregoriadis a spol., Receptor mediated targeting of drugs, Plénum Press, New York, 243 - 266, 1980. Obsahujú účinnú zložku v stave podobnom zakapsulovaniu, a to v jednej či viacerých lamelámych membránach obsahujúcich lipidy, teda v lipozómoch. Dobrú absorpciu a biodispozíciu účinnej zložky či účinných zložiek možno ovplyvniť okrem ďalších možností okrem iného kompozíciou a spôsobom prípravy lipozómov, takže tie potom môžu prepraviť účinnú zložku do špecifickej oblasti. V lipozómových kompozíciách je účinná zložka vložená do jednej či viacetých lipidných lamiel a tie potom slúžia tiež ako nosič účinnej zložky.

Multilamelárne lipidné vehikula (MLV) pripravil a opísal ako prvý Bangham a spol., J. Mol. Biol. 13, 238 - 252 (1965). Ak sa zakapsulujú biologicky účinné látky do malých, unilamelámych lipidných mechúrikov, potom látky rozpustné vo vode možno zakapsulovať len s malou účinnosťou v dôsledku malého objemu vody, zakapsulovávanej do SUV (small unilamellar lipid vehicles), pozri US patentový spis 4 089801.

Unilameláme lipidné mechúriky sa pripravujú inými postupmi, napríklad injikovaním etanolu, pozri Batzri, S. a Kord, E. D., Biochem. Biophys. Acta 298, 1015 - 1019 (1973) alebo éteru, pozri Deamer, D. a Bangham, A.D., Biochem. Biophys. Acta 443, 629 - 634 (1976) a to tak, že sa roztok lipidných látok v organickom rozpúšťadle injikuje rýchlo do pufŕovaného roztoku, čím sa spontánne vytvoria unilameláme lipozómy. Postup je rýchly a všeobecne použiteľný, ale zvyčajným výsledkom je zriedený lipozómový prípravok s malou účinnosťou s prihliadnutím na zakapsulovanie.

Unilameláme lipozómy sa môžu tiež tvoriť spôsobom spočívajúcom v odstránení detergentu, pozri Weder H. G. a Zumbuehl, O., Liposome Technology, vydavateľ Gregoriadis, G., CRC Press Inc., Boca Raton, Florida, zv. 1, Ch 7, str. 79 - 107 (1984); v priebehu tohto postupu sa lipidy a ďalšie látky rozpustia spolu s detergentmi a detergenty sa ďalej odstránia dialýzou.

Multilamelárne lipozómové zakapsulovanie sa vykonáva podľa US patentového spisu 4 234 871 (Papahadjopoulos), tzv. technikou reverzného fázového odparenia (REV) a podľa US patentového spisu 4 016 100 (Suzuk) lyofilizovaním vodno-lipidnej disperzie lipidov a biologicky účinnej látky.

Vo zverejnenom patentovom spise WO 93/20 934 sa opisuje príprava stálej vodnej lipozómovej suspenzie, ktorú možno skladovať 6 mesiacov za teploty 40 °C.

V priebehu prípravy uvedených lipozómových kompozícií sa dispergovanie lipidov a vodnej fázy vykonáva stykom reakčných zložiek na inertnom pevnom materiáli, najviac na sklenených drobných guľôčkach, pozri US patentový spis 4 485 054.

Podľa US patentového spisu 4 761 288, na ktorý sa tu úmyselne odvoláva, sa pripravuje multifázový systém na zlepšenie absorpcie biologicky účinnej látky s malou rozpustnosťou vo vode s tým, že obsahuje účinnú zložku vo forme presýteného roztoku, v pevnej forme a zakapsulovanú v multilamelámych lipidných mechúrikoch. Mechúriky, roztok i pevná forma biologicky účinnej látky sa dispergujú v hydrokoloidnom géli. Hydrokoloidný gél sa pripraví použitím postupu na prípravu multilamelámych lipidných mechúrikov, ako sa to opisuje v US patentovom spise 4 485 054, na ktorý sa tu dôrazne upozorňuje. Takže lipozómové kompozície sa pripravujú i v tom prípade, že účinná zložka je tu vo vyšších koncentráciách, aké by bolo možné očakávať na základe jej rozpustnosti vo vode a/alebo lipo-rozpustnosti.

V US patentovom spise 4 937 078 sa opisujú lipozómové kompozície lokálne používaných anestetík i so zložkami analgeticky účinnými. Zistilo sa totiž, že lokálne použité účinné zložky sú účinnejšie v lipozómovo zakapsulovanom stave v porovnaní s bežnými kompozíciami, ako sú masti, krémy či kvapalné prípravky. Tvorba lipozómového prípravku samotného je opísaná v US patentovom spise 4 485 054 a 4 761 288.

Príprava všetkých lipozómových kompozícii bola smerovaná na aktívne zložky s malou rozpustnosťou vo vode, predovšetkým so zreteľom na zvýšenie ich absorbovateľnosti i miestnej koncentrácie a/alebo predpisovanej absorpcie.

Podstata vynálezu

Vynález sa týka prípravy lipozómových prípravkov zo selegilínu alebo jeho solí, ktoré sú dobre rozpustné vo vode a rozpúšťadlách v množstve 1 g na 3 ml vody, 5 ml chloroformu alebo 3 ml metanolu; ďalej sa týka ich orálnych, parenterálnych alebo lokálnych terapeutických aplikácií, prípadne v transdermálnych kompozíciách s kontrolovaným uvoľňovaním účinnej zložky.

Selegilín je známy farmaceutický prípravok, veľmi obchodne rozšírený ako Jumex, deprenyl, Eldepryl alebo L-deprenyl s tým, že sa vyznačuje vysokou účinnosťou, napríklad pri liečení tuberkulózy alebo imúnnych moduláciách, pozri Dow A., The Deprenyl Story, Toronto, Stoddart (1990); Inhibitors of Monoamine Oxidase, vyd. Szelenyi, I. Verlag Birkhäuser, Basel, Boston, Berlín, str. 237 - 358 (1993). Jedným z jeho dôležitých účinkov je antidepresívny a psychostimulujúci účinok, ako i MAO-inhibujúci účinok, presnejšie povedané selektívny MAO-B inhibujúci účinok. Co sa prípravy týka, je známych niekoľko postupov prípravy, pozri napríklad Maď. patentové spisy 151 090, 154 655 a 187 775. L-Deprenyl bol schválený FDA v r. 1989 ako činidlo na liečenie Parkinsonovej choroby.

Lipozómová kompozícia podľa tohto vynálezu obsahuje výhodne 0,1 až 40 % hmotn. selegilinu, t. j. (-)-[N-a-dimetyl-N-(2- propinylfcnyletylamínu)] a/alebo jeho soli, 2 až 40 % hmotn. lipidov, výhodne fosfolipidov, až 10 % hmotn. cholesterolu, až 20 % hmotn. alkoholu, až 25 % hmotn. glykolu, až 3 % hmotn. antioxidancie, až 3 % hmotn. konzervačnej látky, až 2 % hmotn. činidla ovplyvňujúceho viskozitu, až 50 % hmotn. cyklodextrínu alebo cyklodextrínového derivátu a 30 až 90 % hmotn. vody.

Lipozómová kompozícia podľa tohto vynálezu obsahuje výhodne 0,1 až 20, výhodnejšie 0,1 až 10 % hmotn. selegilínu a/alebo jeho soli a najmenej 10 % hmotn. z tohto množstva uni- a/alebo multilamelámych lipidných mechúrikov s tým, že zvyšné množstvo potrebné do 100 % hmotn.

SK 281599 Β6 formou voľného stavu alebo nasýteného roztoku. Lipozómová kompozícia podľa tohto vynálezu obsahuje ako lipidnú zložku výhodne fosfolipid, výhodne fosfatidylcholín a/alebo lizofosfatidylcholín, a/alebo fosfatidylserín, a/alebo fosfatidyletanolamín či fosfatidylinozitol, z alkoholu výhodne etylalkohol alebo izopropylalkohol, z glykolov výhodne propylénglykol alebo polyetylénglykol, ďalej ako antioxidačné činidlo výhodne tokoferol alebo butylhydroxyanizol, ako konzervačné činidlo výhodne germabén (Intemational Špeciality Product, Viedeň, Rakúsko). Ako činidlo ovplyvňujúce viskozitu sa použije výhodne uhľovodík alebo derivát celulózy, výhodne potom carbopol (Carbomer, Goodrich, Cleveland), ďalej z cyklodextrínov a/alebo ich derivátov výhodne α-, B- alebo γ-cyklodextrín, vo vode rozpustný cyklodextrínový polymér, metylovaný, hydroxypropylovaný alebo sukcinylmetylovaný cyklodextrínový derivát, či akákoľvek zmes prechádzajúcich.

Príprava podľa tohto vynálezu môže obsahovať lipozómovú kompozíciu - ak je to žiaduce - spolu s plnivom, riedidlom čí pomocnými činidlami, ako sa tieto zvyčajne používajú. Podávať sa môžu výhodne orálne, parenterálne alebo intradermálne s tým, že pri príprave transdermálneho prípravku sa môže lipozómová kompozícia nanášať na povrch nosiča, výhodne formou masti, filmu či náplasti.

Lipozómová kompozícia sa môže pripravovať, ako sa to opisuje v US patentovom spise 4 485 054 a 4 761 288, totiž oddestilovaním organického rozpúšťadla zo zmesi, obsahujúcej lipo-rozpustné zložky v organickom rozpúšťadle s tým, že takáto zmes obsahuje najmenej jednu lipidnú zložku a selegilín, ktoré sa rozmiešajú do vodného roztoku zložiek rozpustných vo vode. Z organických rozpúšťadiel sa používa výhodne chloroform a metylalkohol.

Lipozómová kompozície podľa tohto vynálezu sa môžu výhodne použiť pri liečení chorôb Alzheimerovej a Parkinsonovej, pri depresiách, mŕtviciach, pohybových bolestiach a myelitis.

Lipozómové kompozície samotné obsahujú účinnú zložku v multifázovom, unilamelámom a/alebo multilamelámom mechúriku, a to vo voľnom stave alebo vo forme zodpovedajúceho sýteného roztoku, t. j. teda v multifázovom lipozómovom systéme na prípravu lieku. Takto pripravený lipozómový systém je stabilný a je možné ho ľubovoľne riediť vodou. Reologické rysy možno pozmeňovať zo zriedeného kvapalného stavu až do formy želatíny.

Z farmakologického hľadiska sa predpokladá, že sme mali v úmysle pripraviť lipozómové kompozície s obsahom selegilínu, ktoré predstavujú sústavu na kontrolované uvoľňovanie účinného lieku, a tým sa umožňuje podávanie presných dávok pri transdermálnom ošetrovaní, i za cenu „raz týždenne“. Spôsob podávania účinných dávok je závislý okrem ďalších faktorov od choroby, ktorá sa má liečiť (choroba Alzheimerova či Parkinsonova, depresia, mŕtvica, pohybové bolesti či myelitis), od stavu jej závažnosti, od stavu pacienta vôbec, atď.

Farmakologické a farmakokinetické testovanie lipozómových kompozícií bolo vykonávané na albínoch morčiat s hmotnosťou 300 až 350 g (Charless - River rod, SPF, t. j. špecifická kvalita zbavená patogénov, SPF), a to lokálnou aplikáciou s použitím skupiniek troch zvieratiek zvolených náhodne.

Druhá fáza pokusov bola vykonávaná na prasiatkach s hmotnosťou 20 až 22 kg tak, že tri zvieratká dostali jednu dávku jedného z prípravkov. Zvieratká boli uchovávané oddelene v klietkach s podlahou z odpadového dreva, za priemernej teploty 23 °C, boli kŕmené celkom zhodne a tiež zhodne zásobované vodou.

Z testovaných kompozícií boli použité produkty z príkladov 1,2,3 a 6.

Lipozómové prípravky deprenylu boli nanášané na srsti zbavený zadoček morčaťa alebo kožu na krku prasiatka na povrch 1,5 na 1,5 cm², resp. 3 na 3 cm² v tom - ktorom prípade. Po niekoľkominútovom zaschnutí bol napojený Tegaderm (výrobok 3M, USA). Na kontrolu prasiatkam boli podávané tabletky so selegilínom orálne raz denne.

Počas vyhodnocovania bola meraná MAO-inhibícia v krvi, mozgu, pečeni i črevách, ďalej potom v krvi koncentrácie účinnej zložky a zodpovedajúcich metabolitov. Sledovalo sa hromadenie účinnej zložky a zodpovedajúcich metabolitov v rôznych orgánoch prasiatok (krv, mozog, srdce, pečeň, obličky, pľúca a slezina), po podaní selegilín-lipozómov, značených izotopom ³H, a to postupom detekcie rádioaktivity.

Vzorky krvi na stanovenie sérovej koncentrácie boli odobrané pred podávaním lieku a potom za 6, 24,48, 72,96, 120,144 a 168 hodín po podaní lieku. Zmeralo sa množstvo selegilínu a jeho metabolitov a ďalej aktivita MAO-B v krvných doštičkách.

Tagedermové náplasti boli odstránené za 6 hodín a zistili sa (extrakciou do alkoholu) zvyšné, teda neabsorbované množstvá selegilínu.

Po skončení pokusov bola rovnako stanovená MAO-aktivita z izolovaného mozgu, pečene a čriev usmrtených zvieratiek. Stanovením aktivity enzýmov MAO-A a MAO-B bola tiež zistená selektivita enzýmového inhibovania.

Kombinované koncentrácie deprenylu a jeho metabolitov boli zmerané a zistené v krvi a izolovaných orgánoch; mozgu, pľúcach, slezine, pečeni, srdci, žalúdku, tenkom i hrubom čreve, ako aj v obličkách usmrtených zvierat, a na povrchu kože v miestach, kde došlo k ošetreniu pomocou lipozómov. Vzorky krvi boli odoberané v stanovených intervaloch z Canthu (očného kútika) morčiat alebo z hlavnej žily na krku prasiatka.

Po siedmom dni boli morčatá usmrtené a bezprostredne. hneď bola potom odobraná krv ako vzorka priamo zo srdca. V prípade prasiatok boli vzorky krvi odobrané, ako to bolo práve opísané, pred usmrtením.

Odobrané telové orgány boli zmerané a homogenizované s použitím štvornásobného objemového podielu roztoku (fyziologického) chloridu sodného. Alikvótne podiely 3 na 5 μΐ boli odpipetované do skúmaviek s obsahom 2 ml Solíme 350 a 0,5 ml izopropylalkoholu. So vzorkami sa naďalej postupovalo, ako to bolo opísané v prípade vzoriek krvi.

Rádioaktivita orgánov bola zmeraná kvapalným scintilačným počítačom s tým, že získané údaje zodpovedajú celkovému množstvu deprenylu a jeho metabolitov.

Množstvo lieku, ktoiý zostal v parafíne alebo na Tegaderme, bolo rovnako zistené rádioaktívnou technikou.

Špecifická rádioaktivita bola zistená z alikvótnych vzoriek pôvodných lipozómových kompozícií, ktoré boli použité na prepočet hodnôt vo vzťahu k orgánom a tkanivám.

MAO-aktivita mozgu bola rovnako stanovená postupom podľa Wirtmana a Axelroda, Biochem. Pharmacol. 12, 1414 - 1419 (1963) a obsah proteínov v homogenizátoch postupom podľa Lowryho a spol. J. Biol. Chem. 193, 265 -275(1951).

MAO-aktivita krvných doštičiek bola zistená postupom podľa Willberga a Orelanda, Med. Biol. 54, 137 - 144 (1976).

Koncentrácia selegilínu a iných z jeho metabolitov, ako je amfetamín, metamfetamín a desmetyl-selegilín, bola stanovená plynovou chromatografiou.

SK 281599 Β6

Biologicko-farmakologické výsledky sú zachytené a opísané na nasledujúcich obrázkoch.

Obr. 1 a 2: Údaje o hladinách v krvi hlavného metabolitu selegilínu, teda metamfetamínu po podaní selegilín - lipozómovej kompozície transdermálne raz.

Pri použití lipozómovej kompozície v podstate unilamelámej s distribúciou menších mechúrikov podľa príkladu 6 je absorpcia i metabolizmus veľmi rýchly a hladina v krvi, zodpovedajúca dávke, bola zmeraná za 24 hodín (obr. 1).

Pri použití hlavne multilamelámych lipozómov, patriacich do rozsahu distribúcie väčších čiastočiek (príklady 1 až 3) je výsledkom pomalá a oneskorujúca sa hladina komponentov s nižším počtom lamiel, čo zaisťuje relatívne vysokú krvnú hladinu po 72 hodinách a multilamelárna kompozícia zaisťuje merateľnú krvnú hladinu i po 168 hodinách (obr. 2).

V prípade tej istej kompozície možno rovnako konštatovať, že kompozícia spojená s rýchlou absorpciou, je spojená so stálym MAO-inhibovaním, zatiaľ čo pomalé absorbovanie vyústi v pomerne rýchle inhibovanie v krvi (obr. 3 a 4). Podobné údaje boli zistené meraním v mozgu (obr. 5 a 6)·

Podobné krvné hladiny boli zmerané v rádioaktívnych testoch na morčatách (nezmenený selegilín a spolu s ním zodpovedajúce metabolity, pozri obr. 7). V prípade lipozómov možno zmerať pomalú absorpciu podstatnej úrovne v orgánoch, navzdory poklesu hladiny v krvi po 168 hodinách, ale v mozgu je to dôležité so zreteľom na účinok, tak v pečeni, ktorá má dôležitú úlohu v metabolizme, ako i v lipofílných orgánoch (obr. 8 a tabuľka 1). Tieto orgány môžu slúžiť ako skladisko, uvoľňujúce neskôr účinnú zložku. Črevné orgány obsahujú pomerne menšie množstvo látky, čo podporuje údaje o inhibovani a nedostatok MAO-A-inhibovaní (pozri obr. 5). Obr. 9 (pozri tabuľka 1) porovnáva hladiny, zmerané v orgánoch s množstvom zlúčenín, ktoré sa nahromadili v koži. Možno ľahko zistiť, že hoci podstatné množstvá nad 10 ng/g možno zmerať v orgánoch, čo prevyšuje doteraz známe ľudské dáta post mortem (prerušovaná čiara na obr.), sú tu stále významné podiely ako zásoby v koži, zaisťujúce dodávanie účinnej zložky ešte dlhá čas. Odlišujúce sa dávkovania, 10 a 140 mg spôsobujú podstatne vyššie rozdiely v krvi (asi desaťnásobok) ako v mozgu (iba dvoj- až trojnásobok, pozri obr. 7 a 8).

Z výsledkov možno odvodiť tieto ďalej opísané výhody lipozómových kompozícií s obsahom selegilínu:

Účinná zložka sa vyhne gastrointestinálnemu traktu, čím prispeje k významnému poklesu inhibovania MAO-A enzýmu, tam koncentrovanému a hrá dôležitú úlohu pri metabolizme tyramínu, pretože sa nestretáva s účinnou zložkou.

Pri inom spôsobe podávania okrem orálneho (teda intravenózne, intramuskuláme, očnými kvapkami, nosným sprejom, inhaláciami atď.) sa vyhne účinná zložka vrátniku, a tým prvýkrát minie metabolizmus. Takže spôsobí vyššiu hladinu selegilínu a zníži hladinu metabolizmu, pričom sa zníži inhibovanie MAO-A. Je menej pravdepodobné, že dôjde k javu, označovanému ako „cheese effect“. Vyššie dávky možno použiť bez bočných účinkov a možno sa vyhnúť napríklad antidepresívnym indikáciám. Metabolizmus sa stlmí a spôsobuje nespavosť s tým, že nižšie hladiny môžu znížiť účinky vedľajších vplyvov.

Pokiaľ sa podáva transdermálne, potom koža uskladní množstvo účinnej zložky, ktorá je nutná na neprerušovanú absorpciu tak, aby sa tým obmedzovala vlastná funkcia.

Absorpcia lipozómovej kompozície (v závislosti od prípravku) trvá asi 1 minútu až 20 minút, čím je akékoľvek zrýchlenie alebo prekrytie náplasťou (Tegaderm) nadbytočné, nános nemožno zmyť, ale neprekáža pri umývaní a nie je potrebné obávať sa odstránenia ani v bezvedomí. Zmenou formy prípravku (teda kompozície alebo veľkosti čiastočiek) možno dosiahnuť optimálne oneskorenie (deň, týždeň alebo niekoľko týždňov). Zmenením pomeru zakapsulovanej zložky a voľnej účinnej zložky možno stanoviť stály pomer ingredient : metabolit, ktorý je optimálny so zreteľom k neuroprotektívnym a neurohojacim účinkom.

Vynález je ďalej doložený príkladmi, ktoré rozsah vynálezu nijako neobmedzujú.

Prehľad obrázkov na výkresoch

Obr. 1: Priemer hladiny metamfetamínu v plazme (± SD, n = 3) prasiec po orálnom alebo transdermálnom podaní (-)-deprenylu (CHL-10).

Obr. 2: Priemer hladiny metamfetamínu v plazme (± SD, n = 3) prasiec po transdermálnom podaní lipozómovej kompozície, obsahujúcej (-)-deprenyl.

Obr. 3: Inhibovanie MAO-B krvných doštičiek po transdermálnom podaní lipozómovej kompozície (CHL-10) a orálnom podaní bežných tabletiek.

Obr. 4: Inhibovanie MAO-B krvných doštičiek 168 hodín po transdermálnom podaní multilamelámej lipozómovej kompozície.

Obr. 5: Inhibovanie MAO v mozgu, pečeni a tenkom čreve 168 hodín po transdermálnom podaní CHL-2 lipozómovej kompozície.

Obr. 6: Inhibovanie MAO v mozgu a pečeni 168 hodín po podaní transdermálnej lipozómovej kompozície.

Obr. 7: Koncentrácia sér po prepočte z rádioaktivity (nezmenená látka a metabolit) po transdermálnom podaní rôznych dávok kompozície CHL-2.

Obr. 8: Koncentrácia rádioaktívnych zložiek (selegilín a metabolity) 168 hodín po transdermálnom podaní kompozície CHL-2.

Obr. 9: Rádioaktivita rôznych orgánov morčiat a týchto v miestach podania 168 hodín po transdermálnom podaní kompozície CHL-2.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklady 1 až 6

Príprava lipozómových deprenylových kompozícií

Príklad 1

V guľatej banke sa rozpustí 20 g Phospholiponu 90-G (nenasýtený fosfolipid) a 10 g hydrochloridu selegilínu v 20 ml zmesi chloroformu a metylalkoholu (2 : 1) za teploty 40 °C, k roztoku sa pridá 100 g malých sklenených guľôčok a rozpúšťadlá sa oddestilujú vo vákuu na rotačnej odparke. V priebehu tohto postupu sa na stenách sklenenej nádoby vytvorí film, práve tak na povrchu sklenených guľôčok, potom sa vnesie 70 g zmesi etylalkoholu a vody (1 : 3), vyhriatej na 40 °C a obsah nádoby sa dobre pretrasie, načo sa ďalej pretriasa za strednej rýchlosti 200 otáčok za minútu 30 minút pri 35 °C. Ďalej sa sklenené guľôčky odfiltrujú na filtri Bíichnerovej nálevky a filtrát sa nechá stáť hodinu za teploty miestnosti, aby sa tým umožnila tvorba lipozómového systému. To sa potvrdí zistením na mikroskope. Celková hmotnosť tohto lipozómového produktu (CH-L-1) je 100 g.

SK 281599 Β6

Lipozómovú štruktúru možno potvrdiť mikroskopickým zistením a zmeraním distribúcie veľkosti čiastočiek.

Príklad 2

Kompozícia so selegilínom, lipozómová, sa pripraví, ako je opísané v príklade 1, s tým rozdielom, že sa ako fosfolipid použije látka Phospholipon 90-H. Získa sa tak 100 g produktu (CH-L-2) a jeho lipozómovú štruktúru možno dokázať na mikroskope a zmeraním distribúcie veľkosti čiastočiek.

Príklad 3

Opäť sa postupuje ako v príklade 1, ale s tým rozdielom, že sa použije fosfolipid v množstve zmenšenom o 1 g a 1 g cholesterolu sa rozpustí spolu v zmesi organických rozpúšťadiel. Získaný produkt je označený (CH-L-3).

Príklad 4

Postupuje sa ako v príklade 1 s tým rozdielom, že sa použije 20 g selegilínu a 30 g fosfolipidu. Ukáže sa, že 118 g produktu je lipozómová kompozícia, a to tak testovaním pod mikroskopom, ako i meraním distribúcie veľkosti čiastočiek.

Príklad 5

Postupuje sa ako v príklade 2, ale s použitím 30 g selegilínu, 40 g fosfolipidu a 40 ml zmesi chloroformu a metylalkoholu. Ako produkt sa získa 135 g lipozómovej kompozície (podľa zistenia pod mikroskopom i meraním distribúcie veľkostí čiastočiek).

Príklad 6

Postupuje sa ako v príklade 1 s tým rozdielom, že sa použije 16 g Phospholiponu 90-H, 4 g cholesterolu, 10 g hydrochloridu selegilínu, 50 g destilovanej vody a 5 g propylénglykolu, potriasanie: rýchlosť 250 otáčok za minútu.

Získaný produkt (CH-L-10) je lipozómová kompozícia podľa zistenia pod mikroskopom i meraním distribúcie veľkosti čiastočiek. Priemerná veľkosť čiastočiek je menšia v porovnaní s produktmi podľa príkladov 1 až 5.

Tabuľka 1

Podiel rádioaktivity v rôznych orgánoch (v pgeq/g tkaniva) morčaťa týždeň po podaní 140 mg lipozómovo upraveného ³H deprenylu (obsah 14 mg deprenylu, približne 42 mg/kg). Prvé údaje, podčiarknuté, sú výsledky merania za 24 hodín, do strednej hodnoty započítané nie sú

Orgfet	Zimran* iMk»ktMt· CHL-1 CHL-2 CHL-3
hodnotu	atM 8.0. hodnota	md 8D. hodnote	*ed 8.D.
nwug	0098	0410	0.188
	0.123	0ΑΜ0.0» 0.217	0.238 0.100 03»	0.259 0.094
	0.0N	0.090	0273
ptteu	2 370	0160	0.285
	0.292	C.22O 0.0450,4«	0.2710.105 1.015	0399 0.378
	0.198	0.167	0.407
Ma	3.572	0485	0.44T
	0.180	01750021 0.855	0.550 0.308 2.074	0.967 0.841
	0101	0239	0.401
teaztoa		0830	0.307
	D.1M	0189 0.379	0395 0.220 0.707	0.915 0.217
	¢.181	0.OO8 0.178	0.770

Claims (10)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Lipozómová kompozícia, vyznačujúca sa t ý m , že obsahuje ako účinnú zložku (-)-N-a-dimetyl-N-(2-propinylfenylctylamín), teda selegilín a/alebo jeho soľ.
2. 2. Lipozómová kompozícia podľa nároku 1, vyznačujúca sa tým, že obsahuje

   0,1 až 40 % hmotn. selegilínu, teda (-)-N-a-dimetyl-N-(2-propinylfenyletylamínu) a/alebo jeho soli,

   2 až 40 % hmotn. lipidov, výhodne fosfolipidov, až 10 % hmotn. cholesterolu, až 20 % hmotn. niektorého alkoholu, až 25 % hmotn. glykolu, až 3 % hmotn. antioxidantov, až 3 % hmotn. konzervačného činidla, až 2 % hmotn. činidla, ovplyvňujúceho viskozitu, až 50 % cyklodextrínu alebo cyklodextrínových derivátov a 30 až 90 % hmotn. vody.
3. 3. Kompozícia podľa nárokov 1 a 2, vyznačujúca sa t ý m , že obsahuje hmotnostné 0,1 až 20 %, výhodne 0,1 až 10 % selegilínu a/alebo jeho zodpovedajúcej soli.
4. 4. Kompozícia podľa nárokov 1 a 2, vyznačujúca sa tým, že obsahuje hmotnostné najmenej 10 % selegilínu a/alebo zodpovedajúcej soli v uni- alebo multilamelámom nosiči a ďalej ďalší podiel selegilínu až hmotnostné do 100 % v roztoku alebo v pevnej forme.
5. 5. Kompozícia podľa nároku 2, vyznačujúca sa t ý m , že obsahuje ako lipid fosfolipid, výhodne fosfatidylcholín a/alebo lizofosfatidylcholín, a/alebo fosfatidylserín, a/alebo fosfatidyletanolamín, a/alebo fosfatidylinozitol.
6. 6. Kompozícia podľa nároku 2, vyznačujúca sa t ý m , že obsahuje ako alkohol výhodne etylalkohol alebo izopropylalkohol, ako glykol výhodne propylénglykol alebo polyetylénglykol, ako antioxidačnú zložku výhodne tokoferol alebo butylhydroxyanizol ako konzervačné činidlo výhodne germaben a ako činidlo ovplyvňujúce viskozitu výhodne varbapol.
7. 7. Kompozícia podľa nároku 2, vyznačuj úca sa t ý m , že obsahuje ako cyklodextrín a/alebo cyklodextrínový derivát výhodne α-, B- alebo γ-cyklodextrín, ďalej cyklodextrínový polymér, rozpustný vo vode, ďalej ešte metylovaný, hydroxypropylovaný alebo sukcinylmetylovaný derivát alebo akúkoľvek ich zmes.
8. 8. Farmaceutický prípravok, vyznačujúci sa t ý m , že obsahuje lipozómovú kompozíciu podľa nárokov 1 alebo 2 a - ak je to žiaduce, zvyčajné riedidlo či plnivo a ďalšie pomocné činidlá, výhodne na orálne, parenterálne či transdermálne podávanie.
9. 9. Spôsob prípravy lipozómovej kompozície podľa nároku 1, obsahujúcich selegilín a/alebo zodpovedajúcu

   SK 281599 Β6 soľ, vyznačujúci sa tým, že sa oddestiluje organické rozpúšťadlo zo zmesi organických rozpúšťadiel, obsahujúcich lipo-rozpustné zložky, majúce najmenej jednu lipidnú zložku medzi nimi, ďalej selegilín, načo sa spojí ten istý podiel s vodným roztokom vo vode nerozpustných zložiek podľa nároku 2, a to za miešania.
10. 10. Spôsob podľa nároku 9, vyznačujúci sa t ý m , že sa ako organické rozpúšťadlo použije zmes chloroformu a metylalkoholu.