SK281382B6 - Spôsob prípravy monoesterov alifatických, nasýtených alebo nenasýtených, s nerozvetveným alebo rozvetveným reťazcom, c2 až c24 monokarboxylových kyselín a alkoholov s viacerými hydroxylovými skupinami - Google Patents

Spôsob prípravy monoesterov alifatických, nasýtených alebo nenasýtených, s nerozvetveným alebo rozvetveným reťazcom, c2 až c24 monokarboxylových kyselín a alkoholov s viacerými hydroxylovými skupinami Download PDF

Info

Publication number
SK281382B6
SK281382B6 SK1740-98A SK174098A SK281382B6 SK 281382 B6 SK281382 B6 SK 281382B6 SK 174098 A SK174098 A SK 174098A SK 281382 B6 SK281382 B6 SK 281382B6
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
hydroxyl groups
potato
mmol
alcohols
saturated
Prior art date
Application number
SK1740-98A
Other languages
English (en)
Other versions
SK174098A3 (en
Inventor
Christine Davies
Alasdair Robin Macrae
Original Assignee
Unilever Nv
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Unilever Nv filed Critical Unilever Nv
Publication of SK174098A3 publication Critical patent/SK174098A3/sk
Publication of SK281382B6 publication Critical patent/SK281382B6/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6436—Fatty acid esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/02—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
    • C12P7/04—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group acyclic
    • C12P7/18—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group acyclic polyhydric
    • C12P7/20—Glycerol
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/62—Carboxylic acid esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6436—Fatty acid esters
    • C12P7/6445—Glycerides
    • C12P7/6454—Glycerides by esterification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6436—Fatty acid esters
    • C12P7/6445—Glycerides
    • C12P7/6472—Glycerides containing polyunsaturated fatty acid [PUFA] residues, i.e. having two or more double bonds in their backbone

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

Alifatické, nasýtené alebo nenasýtené, s nerozvetveným alebo rozvetveným reťazcom C2 - C24 monokarboxylové kyseliny a alkoholy s viacerými alkoholovými skupinami, najmä glycerol, selektívne reagujú na monoestery za prítomnosti enzýmu, ktorý má aktivitu zemiakovej lipidovej acylhydrolázy. Spôsob sa môže použiť aj na zvyšovanie kvality technických monoglyceridov, ktoré obsahujú voľné mastné kyseliny.ŕ

Description

Oblasť techniky
Vynález sa týka spôsobu prípravy monoesterov alifatických, nasýtených alebo nenasýtených, s nerozvetveným alebo rozvetveným reťazcom, monokarboxylových kyselín s 2 až 24 atómami uhlíka s alkoholmi, ktoré majú viac hydroxylových skupín za prítomnosti acylhydrolázy.
Ak pri esterifikácii bude v styku karboxylová kyselina a polyól, vytvorí sa zmes obsahujúca celkom esterifikovaný polyól a polyóly esterifikované čiastočne do rôzneho stupňa: monoestery, diestery a podobne.
Doteraz bolo veľmi ťažké selektívne pripraviť monoestery z polyólov, v ktorých boli na esterifikáciu prístupné viaceré hydroxylové skupiny.
Doterajší stav techniky
V minulosti sa uskutočnilo veľa výskumov s cieľom vyvinúť vyhovujúci spôsob na selektívnu prípravu monoesterov polyólov. Skúmali sa možnosti prípravy s enzymatickou katalýzou aj spôsoby bez enzymatickej katalýzy. Prehľad rôznych prístupov riešenia tohto problému s použitím enzymaticky katalyzovaných procesov podáva U. T. Bomscheuer v „Enzýme and Microbial Technology” £7, 578 až 586 (1995).
V špecifikácii európskeho patentu EP-B-0 215 038 (Novo Industry A/S) sa uvádza príklad spôsobu prípravy s použitím enzýmov s esterázovou aktivitou, ako sú lipázy alebo esterázy. V uvedenom patente sa spôsob prípravy monoglyceridov opisuje tak, že sa najprv blokujú prvé dve hydroxylové skupiny glycerolu ich premenou na ketál alebo na acetál, ako je napríklad izopropylidénglycerol, alebo glyceroldietylketál. Tento ketál alebo acetál sa potom nechá reagovať s karboxylovou kyselinou alebo s kyslým esterom karboxylovej kyseliny za prítomnosti esterázy. Acetálová alebo ketálová ochranná skupina sa z esteru potom odstráni kyslou katalýzou za vzniku monoglyceridu. Tento spôsob prípravy je však veľmi ťažkopádny v tom, že najprv treba chemickou reakciou blokovať prvé dve susedné hydroxylové skupiny glycerolovej molekuly a nakoniec, v poslednom kroku, ochranné skupiny potom zasa odstrániť.
Jestvuje preto stále požiadavka na jednoduchý enzymatický spôsob prípravy monoesterov mastných kyselín s polyalkoholmi, ktorý by bol ekonomicky zaujímavý čo sa týka ceny enzýmu a ktorý by viedol k vysokým výťažkom monoglyceridu a čo najmenším možným obsahom diesterov alebo vyšších esterov.
V zemiakových hľuzách sa zistila skupina vzájomne veľmi podobných glykoproteínov, známa ako patatín, ktorá jc významná pre lipidovú acylhydrolázovú aktivitu. Lipidová acylhydrolázová aktivita je známa iba pre jej aktivitu pri katalýze deacylácie (hydrolýzy) v prírode sa nachádzajúcich lipidov, napríklad monoglyceridov, diglyceridov a fosfolipidov (Biochem. J. 121. (3), 379 až 390 (1971)). Použitie lipidovej acylhydrolázy na prípravu voskových esterov z monokarboxylových kyselín s dlhými reťazcami a monalkoholov s dlhými reťazcami bolo zverejnené (S. Dennis a T. Galliard, Phytochemistry £3. 2469 až 2473 (1974)). Je prekvapivé, že sa doteraz nikdy neuvažovalo alebo sa nenavrhla obdobná syntéza polyólových monoesterov, ako sú napríklad monoglyceridy.
Podstata vynálezu
Zistilo sa, že lipidová acylhydroláza nachádzajúca sa inter alia v zemiakových hľuzách je veľmi vhodná na enzymatickú prípravu monoesterov alifatických karboxylových kyselín s alkoholmi s viacerými hydroxylovými skupinami. Uvedený enzým je dostupný vo vhodných množstvách, pretože sa môže ľahko získať zo surovín, ktorých je dostatok. Hoci zemiakové hľuzy majú najvyššie obsahy uvedeného enzýmu, menšie množstvá možno zisťovať tiež v ďalších častiach zemiakových rastlín. Uvedený enzým možno tiež získať využitím spôsobov genetického inžinierstva.
Preto sa tento vynález vzťahuje na spôsob prípravy monoesterov alifatických, nasýtených alebo nenasýtených, s nerozvetveným alebo rozvetveným reťazcom C2 až C24 monokarboxylových kyselín a alkoholov s viacerými hydroxylovými skupinami za prítomnosti enzýmu, pričom uvedený enzým je zemiaková lipidová acylhydroláza, čo znamená, že uvedenú hydrolázu možno ziskať zo zemiakov, alebo je s ňou identická z hľadiska substrátovej špecifickosti. Uvedená enzýmová selektivita umožňuje katalýzu vzniku monoglyceridov. Tvoria sa tiež vyššie estery, ale iba vo veľmi malých množstvách.
Výhodne sa používajú alifatické nasýtené, s nerozvetveným reťazcom, monokarboxylové kyseliny, ktoré majú od 6 do 22 uhlíkových atómov.
Alkohol s viacerými hydroxylovými skupinami sa vyberie výhodne zo skupiny, ktorá zahŕňa alkoholy s dvoma hydroxylovými skupinami, ako je napríklad etylénglykol, propylénglykol, dipropylénglykol, s troma hydroxylovými skupinami, ako je napríklad glycerol, so štyrmi hydroxylovými skupinami, ako je diglycerol, s piatimi hydroxylovými skupinami, so šiestimi hydroxylovými skupinami, ako sú napríklad alkoholické cukry a iné cukry, alkylétery cukrov, ako sú napríklad alkylglykozidy, a ich zmesi. Výhodné je použitie glycerolu, diglycerolu a Ci - C18 alkylglykozidov, ako je napríklad etylglykozid.
Podľa tohto vynálezu sa lipidová acylhydroláza môže použiť vo forme proteínového extraktu zo zemiakových hľúz; extrakt sa môže obohatiť. Špecifický acylhydrolázový extrakt zo zemiakov je známy ako patatín. Proteínový extrakt sa môže získať tiež z lístkov zemiakov. Uvedený proteín sa môže získať tiež s využitím spôsobov genetického inžinierstva. Gény kódujúce patatín boli už úspešne klonované. Preto je možná fermentatívna príprava patatínu s vysokým výťažkom, ak sa použijú geneticky modifikované kvasinky alebo plesne.
Celkový obsah vody v reakčnej zmesi sa výhodne udržiava pod 10 % (hmotnostné), výhodnejšie na úrovni 0,01 až 5 % (hmotnostné). Podľa výhodnej možnosti sa reakciou vznikajúca voda odstraňuje. Možno to dosiahnuť ktorýmkoľvek spôsobom známym v danej oblasti, ako je odparovanie alebo vákuové odparovanie.
Reakčná teplota je medzi 10 °C a 90 °C, výhodne medzi 25 °Ca55 °C.
Spôsob podľa tohto vynálezu je tiež vhodný na zlepšovanie technickej čistoty monoglyceridov, ktoré obsahujú voľné mastné kyseliny. Preto ďalším uskutočnením tohto vynálezu je spôsob dcacidifikácic (odkyselinovania) surového monoglyceridu, zahŕňajúci reakciu monoglyceridu za prítomnosti glycerolu a katalytického množstva zemiakovej lipidovej acylhydrolázy v obdobných podmienkach, ako sa opisuje.
Podľa tohto vynálezu sa uvedený enzým môže účinne použiť v imobilizovanej forme, napríklad zachytený na časticiach kremeliny.
Prehľad obrázkov na výkresoch
Obr. 1 znázorňuje zvyšovanie obsahu acylglycerolu pri enzymatickej esterifíkácii alkoholu s viacerými hydroxylovými skupinami s karboxylovou kyselinou. MG znamená monoglycerid, DG znamená diglycerid. Teplota pri esterifikácii bola 40 °C, obsah vody bol 3,3 % (hmotnostné).
Obr. 2 znázorňuje zvyšovanie obsahu acylglycerolu pri enzymatickej esterifíkácii alkoholu s viacerými hydroxylovými skupinami s karboxylovou kyselinou, s použitím a bez použitia vákua. MG znamená monoglycerid, DG znamená diglycerid.
Vynález sa ďalej objasňuje pomocou ďalej uvedených príkladov.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1
Príprava zemiakového proteínového extraktu
Zemiakové hľuzy (varieta Šante) (1,8 kg) sa umyli, ošúpali a pokrájali na hranolčeky, ktoré sa ihneď vložili do 0,01 %-ného roztoku (hmotnostné) hydrogensiričitanu sodného, obsahujúceho 10 % (hmotnostných) polyvinylpolypyrolidónu (PVPP) (od firmy Sigma Chemical Co.). Po oddelení vodnej zmesi a PVPP sa zemiakové hranolčeky vložili do plastových vreciek a zmrazili na -18 °C.
Alikvotná časť zemiakových hranolčekov (1,6 kg) sa potom nechala rozmraziť a homogenizovať v miesiči typu podľa Waringa pri 4 °C 1 minútu s 1,5 dm3 tlmivého roztoku fosforečnanu sodného (100 mM . dm'3, pH 7,0), ktorý obsahoval 0,02 % (hmotnostné) hydrogensiričitanu sodného a 1 % (hmotnostné) PVPP. Homogénna zmes sa filtrovala cez tri vrstvy mušelínu; filtrát sa odstredil pri 8000 g počas 30 minút. Supematant sa dialyzoval cez noc pri 4 °C proti 10 dm3 dcionizovanej vody. Výsledná dialyzovaná zmes sa odstredila pri 18 000 g počas 1 hodiny a supematant sa zmrazil do šupiniek a vymrazil, až sa objem znížil približne na 100 ml. Po rozmrazení sa koncentrovaný roztok odstredil pri 18 000 g počas 1 hodiny, supematant sa vymrazením vysušil, až sa získal prášok (7,2 g) obsahujúci okolo 50 % (hmotnostných) proteínu.
Príklad 2
Syntéza monoglyceridu z kyseliny olejovej
Zmesi, ktoré obsahovali kyselinu olejovú (90 %-ná od firmy Aldrich Chemical Co.) (1,41 g, 5 mmolov), glycerol (Pricerine™ 9098, od spoločnosti Unichema Intemational) (0,56 g, 6,1 mmolov), proteínový extrakt zo zemiakov (100 mg) a rôzne množstvá vody (0 až 70 μΐ) sa miešala v uzavretých skúmavkách pri rôznych teplotách (40 až 60 °C). Z reakčných zmesi sa periodicky odoberali vzorky na analýzu plynovou chromatografiou (GC) a TLC.
Typická konverzná krivka reakcie prebiehajúcej pri 40 °C je znázornená na obr. 1. Hlavné produkty reakcií boli monoglyceridy (MG) s iba nízkou úrovňou obsahov diglyceridov (DG). Hodnotenie konečného produktu TLC ukázalo, že nevznikli žiadne triglyceridy. V tabuľke 1 sa uvádzajú zloženia produktov, ktoré vznikli po 72 hodinách reakcie pri rôznych teplotách a s použitím rôzneho množstva vody. V tabuľke sa tiež uvádzajú počiatočné rýchlosti reakcie vypočítané z konverzných kriviek. Reakčné rýchlosti sú vyjadrené ako mikromoly produktu za minútu a na gram extraktu. Na výťažok konečného produktu mal prídavok vody pri 40 °C iba malý vplyv, ale spôsobil miernu stimuláciu počiatočnej rýchlosti reakcie. Zvyšovaním reakčnej teploty sa zvyšovala aj počiatočná rýchlosť reakcie. Naj väčšia konverzia sa zaznamenala s 3,3 %-ami vody (hmotnostne) pri 50 °C. Pri 60 °C bola síce počiatočná reakčná rýchlosť vyššia, ale celková konverzia bola nižšia, čo umožňuje predpokladať, že v priebehu reakcie pri vyšších teplotách nastáva inaktivácia enzýmu. Pri 50 °C a 3,3 % vody sa konvertovalo 75 % olejovej kyseliny na acylglycerolovú zmes obsahujúcu 96 molových % MG a 4 molových %DG.
V zmesi bez extraktu zo zemiakov bola rýchlosť vzniku acylglycerolu veľmi nízka (< 0,01 pmol . min 1 na gram extraktu pri 60 °C).
Príklad 3
Syntéza monooleátu s použitím vákua na zvýšenie výťažku
Zmes kyseliny olejovej (1,5 g, 5,32 mmolov), glycerolu (0,57 g, 6,2 mmolov), vody (70 μΐ) a zemiakového proteínového extraktu (100 mg) sa miešala pri 50 °C vo vákuu (< 50 mbarov), ktoré sa dosahovalo pomocou olejovej vývevy a jeho použitie malo za cieľ odstraňovať vodu z reakčnej zmesi. Na porovnávanie sa vykonala podobná reakcia v rovnakých podmienkach, ale bez použitia vákua. Z reakčných zmesí sa periodicky odoberali vzorky na analýzu pomocou GC. Konverzné krivky sa uvádzajú na obr. 2. V reakčných zmesiach pri skúškach s použitím vákua po 72 hodinách vzniklo 4,43 mmolov MG a 0,10 mmolu DG. Dosiahla sa 87 %-ná konverzia kyseliny olejovej na acylglyceroly. V porovnávacej reakčnej zmesi bez použitia vákua po 72 hodinách vzniklo 3,51 mmolov MG a 0,14 mmolu DG. Konečná konverzia kyseliny olejovej na acylglyceroly bola 71 %.
Príklad 4
Syntéza monoglyceridov z rôznych mastných kyselín
Zmes mastnej kyseliny (5,1 mmolov), glycerolu (6,K mmolov), vody (70 μΐ) a zemiakového proteínového extraktu (50 mg) sa miešala pri rôznych teplotách v uzavrel tých skúmavkách. Po 6 hodinách sa pomocou GC analyzavali vzniknuté produkty. V tab. 2 sa uvádzajú výťažky monoglyceridov a diglyceridov z rôznych nasýtených a nenasýtených mastných kyselín. Ak sa použili mastné kyseliny, s dlhými reťazcami, bolo nevyhnutné použiť vysokú reakčnú teplotu (70 °C), aby reaktanty boli v tekutom stave. Dosiahli sa nižšie výťažky MG, pravdepodobne pre inaktiváciu proteínového katalyzátora pri vyšších reakčných teplotách.
Príklad 5
Príprava imobilizovaného enzýmu
Zemiakový proteínový extrakt (500 mg) sa rozpustil v 1,5 ml fosforečnanového tlmivého roztoku (pH 7,0, 10 mM . dm'3). K roztoku proteínu sa pridala kyselinou premytá a kalcinovaná kremelina (1,0 g) (Celíte™ od Manvile Corporation). Po zmiešaní sa získala hustá pasta. Pasta sa sušila cez noc pri teplote miestnosti vo vákuovej sušiarni, čím sa získal prášok imobilizovaného enzýmu.
Príklad 6
Syntéza monoglyceridov s použitím práškovitého imobilizovaného enzýmu
Zmes kyseliny olejovej (1,42 g, 5,04 mmolov), glycerolu (0,57 g, 6,2 mmolov), vody (70 μΐ) a prášku imobilizovaného enzýmu sa miešala v uzavretých skúmavkách pri °C počas 48 hodín. Analýzou reakčných produktov pomocou GC sa zistila prítomnosť 3,31 mmolov monooleátu a 0,24 mmolov dioleátu. Práškovitý imoblizovaný enzým sa ukázal ako účinný katalyzátor pre syntézu MG.
Tabuľka I
Vplyv teploty a množstva pridanej vody na syntézu monoglyceridu a diglyceridu
Reakčná teplota Množstvo pridanej vody Počiatočná rýchlosť reakcie Produkty vytvorené po 72 hodinách
(C) (μΐ) (%, hmotu.) pmoly.min',.g'1 extraktu MG (mmoly) DG (mmoly)
40 0 0 36,4 2.34 0,09
25 1,2 39,5 2,28 0,16
50 2,4 44,2 2,42 0,21
70 3,3 42,5 2,34 0,21
50 70 3,3 64,8 3,51 0,14
60 70 3,3 110,5 2,93 0,09
70 70 3,3 - 0,48 nestanovené
Príklad 7
Syntéza monoesterov diolu a kyseliny olejovej
Zmesi kyseliny olejovej (7,05 g, 25 mmolov), diolu (od Aldrich Chemical Co.) (25 mmolov), vody (350 μΐ) a zemiakového proteínového extraktu (500 mg) sa miešali 6 hodín pri 30 °C v uzavretých skúmavkách. Výsledné reakčné zmesi sa analyzovali pomocou GC. Výsledky sa uvádzajú v tabuľke III a ukazujú, že monoestery tvorili hlavný reakčný produkt a že vznikol iba malý podiel diesterov.
Tabuľka II
Syntéza monoglyceridu a diglyceridu z rôznych mastných
Mastná kyselina ako reaktant Reakčná teplota Vytvorené produkty po 6 hodinách reakcie
kyselina (°C) MG (mmoly) DG(mmoly)
kaprylová (10:0) 50 1,40 0,02
laurová(12 :0) 50 1,65 0,05
myristová(14 :0) 60 3,13 0,04
palmitová(16:0) 70 0,91 0,02
stearová(18 : 0) 70 0,17 nestanovené
olejová (18:1) 50 1,50 0,04
linolová(18 : 2) 50 1,59 0,03
linolénová (18 : 3) 50 2,53 0,03
Tabuľka III
Syntéza esterov diolu a kyseliny olejovej
Diolový reaktant Vytvorený produkt
monoester (mmoly) diester (mmoly)
etylénglykol 6,94 0,33
propán-l,3-diol 9,74 0,10
Príklad 11
Syntéza esterov diglycerolu a kyseliny olejovej
Zmes kyseliny olejovej (1,45 g, 5,14 mmolov), diglycerolu (od firmy Unichema Intemational, zmes 92 % diglycerolov, 4 % glycerolu, 4 % iných polyolov) (0,9 g), vody (70 μΐ) a zemiakového proteínového extraktu (100 mg) sa miešala pri 50 °C a vákuu (< 50 mbarov), s použitím olejovej vývevy. Po 48 hodinách sa reakcia zastavila a produkty sa analyzovali pomocou GC. Hlavné reakčné produkty boli monoestery diglycerolu (2,60 mmolov). Vznikli aj menšie množstvá diesterov diglycerolu (0,56 mmolov) a MG (0,18 mmolov).
Príklad 9
Syntéza monoesterov propándiolu a kyseliny kaprylovej
Zmesi kyseliny kaprylovej (od firmy Fluka) (0,85 g, 5 mmolov) a buď propán-1,2-diolu alebo propán-1,3-diolu (od firmy Aldrich Chemical Co.) (0,38 g, 5 mmolov), vody (70 μΐ) a zemiakového proteínového extraktu (100 mg) sa miešali pri 35 °C v uzatvorených skúmavkách počas 24 ho dín. Reakčné produkty sa analyzovali pomocou GC. V prípade násady propán-1,2-diolu sa vytvorilo 0,28 mmolov monoesterov kyseliny kaprylovej a pri použití propán-1,3-diolu sa pripravilo 1,02 mmolov monoesteru. V reakčných produktoch sa zistili iba nízke hladiny obsahov diesterov.
Priklad 10
Syntéza esterov diglycerolu a kaprylovej kyseliny
Zmes kaprylovej kyseliny (0,86 g, 5 mmolov), diglycerolu (0,82 g), vody (70 μΐ) a zemiakového proteínového extraktu (100 mg) sa miešala pri 35 °C v uzatvorených skúmavkách počas 8 hodín. Analýza výslednej zmesi pomocou GC preukázala, že hlavnými reakčnými produktmi boli monoestery kaprylovej kyseliny a diglycerolu (1,72 mmolov). V reakčných produktoch boli prítomné tiež menšie množstvá diesterov (0,24 mmolov) a monoglyceridov (0,11 mmolov).
Príklad 11
Syntéza etylglukozidmonokaprylátu
Zmes kaprylovej kyseliny (0,86 g, 5 mmolov), etylglukozidu (od firmy Unichema Intemational, výrobok obsahoval a 80 % etylglukozidov, 7 % glukózy a 10 % diglukozidov) (1,04 g), vody (70 μΐ) a zemiakového proteínového extraktu (100 mg) sa miešala pri 35 °C v uzavretých skúmavkách počas 72 hodín. Analýzy výslednej reakčnej zmesi pomocou GC poukázali na to, že vzniklo 0,21 mmolov etylglukozidmonokaprylátu. Zistili sa iba stopové množstvá etylglukozidu a diesterov.
Príklad 12
Syntéza esterov sorbitolu
Zmes kaprylovej kyseliny (0,86 g, 5 mmolov), sorbitolu (od firmy Aldrich Chemical Co.) (0,91 g, 5 mmolov), íerc-butanolu (500 μΐ), vody (70 μΐ) sa miešala pri 35 °C v uzatvorených skúmavkách počas 72 hodín. Analýza výslednej reakčnej zmesi poukázala na to, že vznikli sorbitolmonokaprylát (0,12 mmolov) a sorbitoldikaprylát (0,04 mmolov).

Claims (11)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Spôsob prípravy monoesterov alifatických, nasýtených alebo nenasýtených, s nerozvetveným alebo rozvetveným reťazcom, C2 až C24 monokarboxylových kyselín a alkoholov s viacerými hydroxylovými skupinami za prítomnosti enzýmu, vyznačujúci sa tým, že enzýmom je zemiaková lipidová acylhydroláza.
  2. 2. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa t ý m , žc sa použije alifatická, nasýtená C6 až C22 monokarboxylová kyselina s nerozvetveným reťazcom.
  3. 3. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa t ý m , že alkohol s viacerými hydroxylovými skupinami sa vyberie zo skupiny, ktorá zahŕňa alkoholy s dvoma hydroxylovými skupinami, s troma hydroxylovými skupinami, so štyrmi hydroxylovými skupinami, s piatimi hydroxylovými skupinami, so šiestimi hydroxylovými skupinami, cukry, alkylétery cukrov a ich zmesi.
  4. 4. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa t ý m , že alkohol s viacerými hydroxylovými skupinami je glycerol alebo diglycerol.
  5. 5. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa t ý m , že alkohol s viacerými hydroxylovými skupinami je C! až Cis alkylglykozid.
  6. 6. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa t ý m , že zemiaková lipidová acylhydroláza je patatín.
    SK 281382 Β6
  7. 7. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa t ý m , že zemiaková lipidová hydroláza je proteínový extrakt izolovaný z hľúz zemiakov.
  8. 8. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa t ý m , že lipidová acylhydroláza sa získa fermentáciou s použitím geneticky upravenej kvasinky alebo plesne.
  9. 9. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa t ý m , že celkový obsah vody v reakčnej zmesi je nižší ako 10 % (hmotnostných).
  10. 10. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa t ý m , že reakčná teplota je od 10 °C do 90 °C.
  11. 11. Spôsob odstránenia mastných kyselín zo surového roztoku monoglyceridu, vyznačujúci sa t ý m , že sa roztok obsahujúci monoglycerid nechá reagovať za prítomnosti glycerolu a katalytického množstva patatinu pri teplote od 25 °C do 50 °C.
SK1740-98A 1996-06-18 1997-05-30 Spôsob prípravy monoesterov alifatických, nasýtených alebo nenasýtených, s nerozvetveným alebo rozvetveným reťazcom, c2 až c24 monokarboxylových kyselín a alkoholov s viacerými hydroxylovými skupinami SK281382B6 (sk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP96304502 1996-06-18
PCT/EP1997/002959 WO1997048817A1 (en) 1996-06-18 1997-05-30 Enzymatic esterification process

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK174098A3 SK174098A3 (en) 1999-07-12
SK281382B6 true SK281382B6 (sk) 2001-03-12

Family

ID=8224982

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK1740-98A SK281382B6 (sk) 1996-06-18 1997-05-30 Spôsob prípravy monoesterov alifatických, nasýtených alebo nenasýtených, s nerozvetveným alebo rozvetveným reťazcom, c2 až c24 monokarboxylových kyselín a alkoholov s viacerými hydroxylovými skupinami

Country Status (15)

Country Link
US (2) US6274357B1 (sk)
EP (1) EP0906445B1 (sk)
JP (1) JP3186774B2 (sk)
AU (1) AU707978B2 (sk)
CA (1) CA2258614C (sk)
CZ (1) CZ289151B6 (sk)
DE (1) DE69720442T2 (sk)
DK (1) DK0906445T3 (sk)
ES (1) ES2196340T3 (sk)
HU (1) HU224835B1 (sk)
PL (1) PL186296B1 (sk)
SK (1) SK281382B6 (sk)
TR (1) TR199802655T2 (sk)
WO (1) WO1997048817A1 (sk)
ZA (1) ZA975201B (sk)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19962204A1 (de) * 1999-12-22 2001-07-05 Cognis Deutschland Gmbh Enzym-katalysierte Modifizierung von Substanzen in biologischen Gemischen
ES2167205A1 (es) * 2000-01-27 2002-05-01 Univ Madrid Complutense Procedimiento para la obtencion selectiva de productos de reaccion de acidos grasos naturales con diglicerina empleando lipasas inmovilizadas como catalizador.
DE10308504A1 (de) * 2003-02-26 2004-09-09 Basf Ag Enzymatische Herstellung von (Meth)acrylsäureestern
DE102010029499A1 (de) 2010-05-31 2011-12-01 Evonik Goldschmidt Gmbh Polyolpartialester zur Anwendung in Kosmetik
DE102010022064A1 (de) 2010-05-31 2011-12-01 Beiersdorf Ag Deodorant- oder Antitranspirantzubereitung mit Polyolpartialester
CA2823222C (en) 2010-06-18 2019-07-16 Butamax(Tm) Advanced Biofuels Llc Extraction solvents derived from oil for alcohol removal in extractive fermentation
US9040263B2 (en) 2010-07-28 2015-05-26 Butamax Advanced Biofuels Llc Production of alcohol esters and in situ product removal during alcohol fermentation
CN106083577B (zh) * 2016-06-14 2018-09-28 广州嘉德乐生化科技有限公司 一种丙二醇脂肪酸酯的制备方法和应用
US20210108345A1 (en) * 2019-10-14 2021-04-15 Hobbs Bonded Fibers Na, Llc Batting pieces for paper piecing projects and related methods

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5270188A (en) * 1985-02-06 1993-12-14 Amano Pharmaceutical Co., Ltd. Preparation of glycerides having a high content of monglycerides with a lipase from Penicillium cyclopium ATCC 34613
DK157308C (da) * 1985-02-27 1990-05-07 Novo Nordisk As Fremgangsmaade til fremstilling af acetal- eller ketalestere af polyoler eller monoestere af mono- eller disaccharider eller monoglycerider
US5191071A (en) * 1987-08-21 1993-03-02 Novo Nordisk A/S Monoesters of glycosides and a process for enzymatic preparation thereof
EP0407959A3 (en) * 1989-07-11 1992-01-02 Lion Corporation Process for producing polyol fatty acid monoesters
UA27966C2 (uk) * 1993-03-12 2000-10-16 Монсанто Компані Спосіб зменшення кількості комах, що поїдають рослини та спосіб отримання генетично трансформованих, стійких до ураження комахами рослин

Also Published As

Publication number Publication date
HUP9903464A2 (hu) 2000-02-28
CA2258614C (en) 2005-08-23
AU3256097A (en) 1998-01-07
US6274357B1 (en) 2001-08-14
SK174098A3 (en) 1999-07-12
JP3186774B2 (ja) 2001-07-11
US20010044140A1 (en) 2001-11-22
ES2196340T3 (es) 2003-12-16
PL186296B1 (pl) 2003-12-31
DE69720442T2 (de) 2003-12-24
ZA975201B (en) 1998-12-14
CA2258614A1 (en) 1997-12-24
AU707978B2 (en) 1999-07-22
DK0906445T3 (da) 2003-07-14
PL330751A1 (en) 1999-05-24
EP0906445B1 (en) 2003-04-02
EP0906445A1 (en) 1999-04-07
DE69720442D1 (de) 2003-05-08
WO1997048817A1 (en) 1997-12-24
US6613551B2 (en) 2003-09-02
HUP9903464A3 (en) 2000-10-30
JP2000503859A (ja) 2000-04-04
CZ289151B6 (cs) 2001-11-14
HU224835B1 (en) 2006-03-28
CZ421198A3 (cs) 1999-05-12
TR199802655T2 (xx) 1999-03-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Björkling et al. A highly selective enzyme-catalysed esterification of simple glucosides
EP0560408B1 (en) Enantio- and regioselective syntheses of organic compounds using enol esters as irreversible transacylation reagents
EP0191217B2 (en) Process for producing glycerides in the presence of lipases
KR970011305B1 (ko) 글리코시드의 에스테르 및 그의 효소적 제조방법
Charlemagne et al. Enzymatic synthesis of polyglycerol-fatty acid esters in a solvent-free system
Osterberg et al. Lipase catalyzed transesterification of unsaturated lipids in a microemulsion
SK281382B6 (sk) Spôsob prípravy monoesterov alifatických, nasýtených alebo nenasýtených, s nerozvetveným alebo rozvetveným reťazcom, c2 až c24 monokarboxylových kyselín a alkoholov s viacerými hydroxylovými skupinami
JP5997479B2 (ja) 酵素法による糖脂肪酸エステルの合成方法
Ziegler et al. Chemoenzymatic synthesis of enantiomerically pure alkene 1, 2-diols and glycosides thereof
Macrae et al. Application of potato lipid acyl hydrolase for the synthesis of monoacylglycerols
Millqvist‐Fureby et al. Regioselective synthesis of ethoxylated glycoside esters using β‐glucosidase in supersaturated solutions and lipases in organic solvents
Divakar Enzymatic transformation
JP3370670B2 (ja) α−グルコシド及びα−グルコシドエステルの酵素的製造方法並びにこのようにして得られた生成物の使用
EP0571421B1 (en) Enzymatic reverse hydrolysis of hydrophilic substrates - preparation of amphiphilic compounds
Nakano et al. Esterification of glycosides with glycerol and trimethylolpropane moieties by Candida cylidracea lipase
US10557159B2 (en) Method of converting RB to RD by using cutinase under stepwise changing temperatures
JP3125809B2 (ja) 糖脂質の製造法
US6150543A (en) Enzymatic preparation of regioselective fatty acid esters of ascorbic acid
Nakano et al. Esterification of glycosides by a mono-and diacylglycerol lipase from Penicillium camembertii and comparison of the products with Candida cylindracea lipase
EP0945516B1 (en) Process for the selective preparation of partially acylated derivatives of monosaccharides and polyols
Yasutake et al. Synthesis of glyceroyl β-N-acetyllactosaminide and its derivatives through a condensation reaction by cellulase
JP4644433B2 (ja) 新規なｄ−アロース脂肪酸エステルの製造方法
JPH07163382A (ja) ジグリセリン−１−エステルの製造方法
JP5358802B2 (ja) 新規な希少糖脂肪酸ジエステルの製造方法
JPH05112592A (ja) 糖類の脂肪酸モノエステルの製造方法

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of maintenance fees

Effective date: 20100530